hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
一細胞レベルの四次元全脳活動マッピングによる精神疾患病態の新規解析法の確立

精神疾患などに関わる脳機能の変調は、病態の進行や薬物治療に伴って経時的にその状況が変化すると考えられる。そのため、複数時間枠における脳全体の活動を同一個体内で比較し、脳機能の経時変化に関わる細胞レベルの活動変化を捉えることは、精神疾患の病態や薬物治療の機序の理解に繋がると期待できる。本年度は、新規神経活動レポーターマウスの開発と、細胞レベルの機能的ネットワーク解析法の確立に向けた検討により、以下の成果を得た。c-fosプロモーターに加えてエンハンサー配列を付加することにより、ウイルスベクターを用いたin vivo遺伝子導入条件下において環境刺激に応答して発現するレポーター蛍光タンパク質の蛍光強度が上昇する傾向が認められ、遺伝子発現効率の向上に利用できる可能性を見出した。また、c-fosプロモーター制御下に蛍光タンパク質やテトラサイクリン制御性トランス活性化因子tTAなどを発現する遺伝子発現系を構築し、活動依存的な標識の時間分解能を制御するために、タンパク質分解配列の付加によるtTA発現制御の適切な条件を確立した。多くの場合、tTAのN末端に融合タンパク質を付加するとtTAの転写活性化能が著しく低下するが、融合方法の改変により、転写活性化能を維持しつつtTAの発現量を制御でき、時間分解能を調節できる可能性を見出した。細胞レベルの機能的ネットワーク解析については、現在利用可能な神経活動レポーターマウスに社会的敗北ストレス等の環境刺激を与えた後の全脳画像を全脳イメージング装置FASTにより取得し、解析法の検証に必要な画像データを得た。本データを用いて、励起光の照射ムラの補正など、多色解析時に必要となる画像前処理方法を確立した。これらを用いた新規レポーターマウスや解析法の構築により、脳全体の細胞レベルの活動の時間変化を捉える新しい脳機能解析手法の開発に繋がると期待できる。30年度が最終年度であるため、記入しない。精神疾患の病態機序や治療薬の効果機序には不明な点が残されており、それらを理解するためには、病態の進行や薬物治療に伴って経時的に変化する脳活動パターンを細胞レベルの精細さで捉え、症状や治療効果に関わる細胞や神経ネットワークを特定することが有効であると考えられる。そのため、これまでに細胞レベルの精細さで実験動物の脳全体を観察する顕微鏡イメージング技術を開発してきた。本年度の研究では、脳全体における個々の細胞の活動と空間分布、その時間的な変化の解析を可能にするために、研究計画書に基づいて神経細胞の機能的・経時的な多色ラベル法の開発に取り組み、以下の成果を得た。神経細胞の機能的・経時的な多色ラベル法の開発遺伝子改変マウスやウイルスベクターに使用するための遺伝子配列として、活動依存的な神経細胞の標識を複数回行うことができ、さらに標識した時間枠ごとに細胞を色分けして識別できる遺伝子配列を作製し、その機能評価を実施した。配列作製では、神経活動に伴い転写促進される最初期遺伝子c-fosのプロモーター制御下に緑色蛍光蛋白質と、Cre組換え酵素やテトラサイクリン制御性トランス活性化因子tTAまたはrtTAなど複数種の遺伝子発現制御系を発現する配列と、各遺伝子発現制御系に応じて異なる色の蛍光蛋白質を発現する遺伝子配列の2種類の作製を完了した。培養細胞を用いた検討ではCre組換え酵素やtTA依存的な多色標識に成功したので、マウス脳内での標識効率を検討するために、これら遺伝子を搭載したレンチウイルスベクターを作製し、検討を進めている。現時点では、マウス前頭前皮質への局所注入において、標識された細胞数がCreやtTAの間で異なるという結果が得られており、再現性を確認した上で必要に応じてタンパク質分解配列の付加などにより各遺伝子発現制御系の標識効率を同程度に制御する必要性があると考えている。複数種類の遺伝子発現制御系を介した細胞の標識効率を均一化する必要が生じたものの、これらはタンパク質分解配列の付加などにより改善が期待できる。研究目標を達成するための遺伝子配列の作製はほぼ完了し、ウイルスベクターを用いたマウス脳内での機能評価も進んでいることから、おおむね順調に進展していると考えられる。

本データを用いて、励起光の照射ムラの補正など、多色解析時に必要となる画像前処理方法を確立した。これらを用いた新規レポーターマウスや解析法の構築により、脳全体の細胞レベルの活動の時間変化を捉える新しい脳機能解析手法の開発に繋がると期待できる。複数の遺伝子発現制御系を介した細胞の標識効率を同程度に制御するため、時間分解能の異なる複数種のタンパク質分解配列の効果を検討し、最適な標識効率となるものを決定する。これにより、活動した神経細胞を任意の時期に複数回標識可能な遺伝子改変マウスの作製を試みる。また、次年度は細胞レベルの活動変化の解析法の確立に向け、過去の研究で得たマウス全脳画像データを用いて画像処理や分析手法の検討を進める。30年度が最終年度であるため、記入しない。
高齢者における主観的QOL規定因子の解明

高齢化社会が進む日本において高齢者自身の主観的幸福感や生きがいといった入生の質(QOL)に関する研究は極めて重要である。我々はWHOQOL-OLD日本語版を用いて高齢者の主観的QOLを調査し、高齢者のQOLに関係している社会背景因子ならびに性格5因子を解明することを試みた。【方法】首都圏在住の70歳以上の高齢者109名(平均76.3歳、男性58名、女性51名)を対象にQOLを調査し、社会背景因子と性格5因子との関係を検討した。QOLの評価にはWHOQOL-OLDを用いた。QOLは6下位領域(感覚能力、威厳、過去・現在・未来の活動、社会参加、死と死にいくこと、他者との親密さ)毎に得点化される(5点満点)。性格5因子(神経症傾向、外向性、開放性、調和性、誠実性)はNEO-FFIを用いて評価した。社会背景因子として、同居家族の有無、学歴、就労状況、経済状況、家族関係、主観的健康観、罹病状況、嗜好品を調査した。【結果】QOLの平均得点は3.4点でいずれの領域でも男女差は認めなかった。「感覚能力」「威厳」のQOLが高く「死と死にいくこと」「他者との親密さ」のQOLが低かった。重回帰分析によるQOLと社会背景因子との関係は、QOLは「家族関係が良好であること」と正相関を示した(男性R^2=O.48,β=0.57,p<.001,女性R^2=0.44,β=0.41,p<.05)。QOLと性格5因子の関係は、男性において外向性と誠実性がQOLと正相関を示し(R^2=0.37,外向性β<0.34,誠実性β=0.25,p<.05)、女性において神経症傾向がQOLと負相関を示した(R^2=0,49,β=-0,49,p<.01)高いQOLと関連する男性の性格は、健康長寿の性格特性と一致しており、健康長寿に発展する可能性がある。一方、女性では抑うつ対策がQOL向上に寄与する可能性がある。クラスター解析によりQOLを3型(全般良好型、高感覚型、低感覚型)に、性格を2型(神経症傾向の低い成熟型、神経症傾向の高い未熟型)に分類した。成熟型は未熟型に比べて有意にQOLが高かった。成熟型には全般良好型が、未熟型には低感覚型が多かった。低感覚型は老化への適応不全ととらえることができ、高齢期のQOL向上には老化に対する適応能力も重要な要素と考えられた。高齢者のQOLのデータを得るため東京に在住する65歳以上の男女150人に対しサンプルの設定を行った。

癌の末期患者や痴呆症などの認知的欠損がみられる患者は調査対象とはしなかった。すべての対象者に各医療機関から調査説明とインフォームドコンセントを行い、調査協力への同意を文書にて得た。調査は原則として面接調査とした。一部、事前に調査に関する十分な説明を対面にて行い、協力の承諾を文書にて得た上で、自己記入式の調査票については自宅にて記入後、郵送で回収する方法がとられた。QOL調査票は、(1)BREF-WHOQOL26(26問)(以下WHOQOL26)(2)WHOQOL-OLDフィールド調査票日本語版(33問)(以下WHOQOL-OLD)(3)WHO高齢であることに対する意識と態度調査票(38問)(European Attitudes to Aging Questionnaire,以下EAAQ)(4)調査対象者の社会背景因子に関する調査票(22問)の4種類とした。WHOQOL26値は3.64±0.50と1999年に若年者に行われた調査に比較して優位に高かった。下位項目として心身の状況を表す項目や集中力、生きる力を示す項目、あるいは人間関係や友人の支えなどを示す項目の満足度が高かった。WHOQOL-OLDでは知覚・感覚の充実、自己決断力において高い点数を示した。QOL値が高かった社会的背景因子として男性、フルタイム就労者、高収入、配偶者ありなどであった。興味があることに、死ぬことの心配の評価に対しては子供・孫ありの人々に強い不安感が見られ、近親者の存在が死を心配させていることが窺われた。生化学を含めた医学的調査についてはまだ分析・継続中である。【目的と方法】今年度は、双生児の主観的QOL調査と性格調査をおこない、QOLに関連する性格プロフィールの検討および卵性の影響を検討した。主観的QOLの評価にはWHO-Bref調査票(26問)を、性格の評価にはNEO-FFI調査票(60問)を用いた。アンケート調査はすべて郵送でおこなった。約750組の双生児にアンケート調査用紙を郵送し、138名から回答を得た。【結果】回答者の内訳は、双生児ペアが44組(88名)、双生児のうち片方(1人)のみが50名であった。44組の双生児のうち一卵性29組、二卵性15組であった。データ欠損値のため無効となった回答が1組(一卵性)あり、最終的に136名を有効回答者とした。QOL平均値(標準偏差)は3.4(0.6)で性別と卵性による有意差はなかった。NEO-FFIでは、神経症傾向(N)、外向性(E)、開放性(O)、調和性(A)、誠実性(C)の5要素の平均値(標準偏差)はそれぞれ、Nが25.1(5.2)、Eが21.8(6.4)、Oが22.5(3.5)、Aが16.6(5.7)、Cが20.5(5.0)であった。性別と卵性による有意差はなかった。双生児ペア43組に限定してペア間で(1)QOL平均値、(2)4領域(身体的領域、心理的領域、社会的関係、環境)毎のQOL値、(3)性格の5要素をそれぞれ比較したが、いずれも有意差はなかった。性格の5要素(N、E、O、A、C)の中でQOL平均値に影響を与える因子を検討するためにステップワイズ回帰分析を行った結果、NとEが有意な寄与因子として検出された(N;相関係数(r)=0.54,標準回帰係数(β)=0.384,E;r=-0.519,β=-0.346,R^2=0.387,p<0.01)。対象を双生児ペアに限定すると、この傾向はより強調された(N;r=0.573,β=0.411,E;r=-0.521,β=-0.299,R^2=0.391,P<0.01)。
東南アジア諸国の社会福祉政策 -国民統合の視点から-

(1)本年度は、開発主義経済における福祉政策という観点から見て、(1)労働者階級を支持基盤とする政党の不在にも関わらず、労働者も含めた下層への分配が行われた、(2)経済成長と経済的富の分配が同時に行われてきた、という二点のユニークな特徴を持つマレーシアの福祉政策拡大過程を中心的課題として取り上げた。(2)同国において国家による分配政策が本格化したのは、「新経済政策」と称される経済開発政策が策定された1970年以降である。既存研究では、「新経済政策」の策定によりマレー人への排他的な分配が制度化され、また、1971年の憲法改正によって成立した政治体制下では非マレー人による異議申し立ての機会が奪われた、とされている。もっともマレー人が多数を占める農村開発や、教育の分野においてマレー人に対して差別的な分配がなされたことは確かだが、この時期に、特定のエスニック集団を対象としない社会保障や公的扶助が拡充していったことも明らかである。(3)そこで本研究は、「マレー人に対して差別的な分配」をもたらすために「非マレー人による異議申し立ての機会」を奪ったとされる1971年憲法改正に関し、分配に関する議論に焦点を当て、国会議事録、新聞報道およびインタビューから分析した。(4)その結果、同改正が非マレー人に対し、政府によるマレー人に対する積極的優遇措置が不公正であると異議申し立てをする権利を明確に保障するものであった、という知見が得られた。(5)この知見をまとめたものを、2004年8月3-5日にマレーシアのクアラルンプールで開催されたThe 4th International Malaysian Studies Conferenceにおいて発表した。また、同発表に加筆・修正したものを『国際関係論研究』へ投稿し、採用が決定している(1)本年度は、理論研究として、政治発展理論の基礎的文献を批判的に検討した。その結果、イギリスやフランスをケースとした政治発展のモデルが、(1)比較的長期にわたる権利拡大過程の結果としての民主主義制度を前提としている、(2)階級利益を民主化、権利拡大の主要な原動力としている、(3)民主化への胎動が始まる時期までに、行政によって将来時点での国民国家の範囲がある程度決定されている、といった特徴のために、東南アジア諸国の政治発展の理解に適さない点が明らかになった。一方、東南アジア諸国特有の政治発展を概念化したものとして「開発独裁」概念を検討したが、同概念は、憲法に明らかにされている権利・義務関係といった点に明確に存在する、東南アジア諸国間の差異をまったく無視している点が明らかになった。(2)また、東南アジア諸国のうち特にリベラルな制度をもつマレーシアとシンガポールを中心に社会政策にかかわる諸制度を整理した。その結果、同二国の社会福祉制度(たとえば基金制度)、労働政策が類似しており、それらがともに英領時代の遺産であることが明らかになった。また、社会権の規定についてもやはり憲法制定時における本国の影響が指摘されており、植民地期の制度が、現在の社会福祉制度に与えている影響について検討する必要があると考えている。(3)最後に、マレーシアに焦点を絞り、再分配政策を決定する政治的要因を特定した。その結果、当初の研究計画では「国民統合の手段」として再分配政策が形成される、としていたが、実態は、民族間の再分配のみならず階級間での再分配が行われており、1990年前後からは、むしろ後者が重視されるようになったことが明らかになった。そのため、「国民統合」と再分配の関係について、再検討が必要であると考えている。なお、(3)に明らかにした所見は論文にまとめ、現在投稿準備中である。(1)本年度は、東南アジア諸国のうち、タイ、インドネシア、マレーシア、シンガポールの四ヵ国についてデータ収集を行った。その結果、各国の福祉政策について、(1)1990年代に民主化の潮流の中で、国民皆保険が成立したタイ、(2)政治体制の支持基盤である公務員と軍に対して福祉政策が集中したインドネシア、(3)国民全てを対象とする基金制度を柱としつつ、開発政策の文脈で広範な公的扶助と社会保障が行われているマレーシア、(4)基金制度を柱とするリベラルな福祉政策を持つシンガポール、という特徴が明らかになった。(2)上記四ヵ国のうち、マレーシアは特に、既存研究に対する興味深い逸脱を示している。まず同国は、(1)開発主義経済は再分配政策を度外視する、という従来の経済開発理論から逸脱している。また、福祉国家理論のうち、(2)左派や労働運動の拡大過程で再分配政策が拡充していく、とする権力資源論も、労働組合や左派政党の顕著な弱さから見れば、明らかに適用不可能である。さらに(3)福祉政策を政党の支持基盤安定化の手段と見做す民主主義競争の理論は、同国の政党が特定の階級を支持基盤としないにもかかわらず、労働者に対する社会保障が充実していることから、説得的な説明ではない。(3)マレーシアの福祉政策拡大過程は、同国の政治体制の特徴から説明できる。他の開発主義国家と同様、マレーシアも社会グループによる過度の政治化を抑制してきた。しかし一方で、これらのいずれも完全に非政治化せずに、可能な限りあらゆるグループを政治的決定過程に参加させてきた。その結果、多様な社会グループから政治的決定に対する合意を得る代わりに福祉政策を実施する、という形で、特定のグループに限定されない再分配政策が形成されたと考えられる。特にインドネシア、タイと比べると、同国の政治体制の安定化は顕著であり、社会福祉政策が政治統合に果たしてきた機能を検証する意義がある。

(1)本年度は、開発主義経済における福祉政策という観点から見て、(1)労働者階級を支持基盤とする政党の不在にも関わらず、労働者も含めた下層への分配が行われた、(2)経済成長と経済的富の分配が同時に行われてきた、という二点のユニークな特徴を持つマレーシアの福祉政策拡大過程を中心的課題として取り上げた。(2)同国において国家による分配政策が本格化したのは、「新経済政策」と称される経済開発政策が策定された1970年以降である。既存研究では、「新経済政策」の策定によりマレー人への排他的な分配が制度化され、また、1971年の憲法改正によって成立した政治体制下では非マレー人による異議申し立ての機会が奪われた、とされている。もっともマレー人が多数を占める農村開発や、教育の分野においてマレー人に対して差別的な分配がなされたことは確かだが、この時期に、特定のエスニック集団を対象としない社会保障や公的扶助が拡充していったことも明らかである。(3)そこで本研究は、「マレー人に対して差別的な分配」をもたらすために「非マレー人による異議申し立ての機会」を奪ったとされる1971年憲法改正に関し、分配に関する議論に焦点を当て、国会議事録、新聞報道およびインタビューから分析した。(4)その結果、同改正が非マレー人に対し、政府によるマレー人に対する積極的優遇措置が不公正であると異議申し立てをする権利を明確に保障するものであった、という知見が得られた。(5)この知見をまとめたものを、2004年8月3-5日にマレーシアのクアラルンプールで開催されたThe 4th International Malaysian Studies Conferenceにおいて発表した。また、同発表に加筆・修正したものを『国際関係論研究』へ投稿し、採用が決定している
トニ・モリスンの９．１１以降の作品における外傷的記憶の「証言」と「情動操作」

平成29年度は、研究報告、分担執筆した書籍の校正、論文執筆、現地調査、及びアウトリーチ活動として市民講座の講師を行った。研究報告は、6月18日に中京大学で開催された日本女性学会大会の個人研究発表にて、「痛みへの愛着の可能性ー愛する他者を喪失するという文脈から」という題目で行った。映画『愛しい人が眠るまで』(1991)に描かれる女性の欲望を、フロイトの精神分析理論を用いて分析し、欲望の規範化の作用について論じた。学会報告の際に得た指摘を踏まえ、いくつかの類似する題材の映画の分析を通じて、欲望の規範化作用について検討した論文を執筆した。現在、投稿先を検討中である。フェミニズムや女性学について研究を担ってきた研究者へのインタビュー集『ジェンダー研究を継承する』の出版に向けて校正を重ね、人文書院から10月に刊行された。(なお、これは一橋大学の佐藤文香教授と伊藤るり教授を中心とする「先端課題研究14ジェンダー研究の過去・現在・未来ー女性学・ジェンダー研究のパイオニアに対する聞き取り調査を中心に」というプロジェクトに属するものである。)現地調査は、3月6日から3月19日にアメリカ合衆国に出張した。カリフォルニア大学図書館やニューヨーク公立図書館等で調査し、モリスンの作品に関連する資料や、フェミニズム運動に関する資料の入手等を行った。市民講座は、6月7日に練馬区立男女共同参画センターえーるにて、「施策から考える“求められる"女性・LGBTの姿」という題目で、近年の自治体による性的少数者や女性に関連する施策が直面する課題について解説等を行った。29年度が最終年度であるため、記入しない。2015年度は、研究報告、論文執筆、現地調査および市民講座の講師を行った。研究報告は、2015年9月6日に東京女子大学で開催された、国際ジェンダー学会大会の個人発表において、「ジュディス・バトラー『生のあやうさ』「暴力、喪、政治」における「メランコリー」」という題目で発表を行った。9.11直後のアメリカにおける情動とフェミニズムの関係を分析した理論について論じた。論文執筆は、トニ・モリスンの「レシタティフ」(1983)について、障碍をもつ人物の身体の表象とグロテスク性の関係を検討した論文、「留め置かれる彼女たちの身体ー「レシタティフ」における「グロテスク」のイメジャリと障碍をもつ身体」を、『ジェンダー&セクシュアリティ』に投稿した。現地調査は、2015年6月26日7月7日に、アメリカ合衆国に出張した。NYCプライドパレード、ナショナル9/11メモリアル&ミュージアム、アフリカン・アメリカン歴史博物館等を訪問した。主に、9.11以降のジェンダーやフェミニズムに関係する運動の様子と、合衆国史におけるアフリカ系アメリカ人の表象を調査した。また、2016年3月3日3月15日に、ポルトガルに出張し、現地のフェミニズム団体やLGBT支援団体等を訪問した。昨今のヨーロッパにおけるテロリズムやイスラーム教徒に関連する状況を鑑み、合衆国を分析する際に参照することを目的として、主に移民や女性に関する現状を調査した。市民講座は、2016年3月25日に国立市公民館で、国立市の男女平等参画推進事業の一環として、「セクシュアル・「マイノリティ」とはだれかー子どもの性の“あいまいさ"と大人ができること」という題目で行った。最近の自治体によるセクシュアル・マイノリティに関係する施策の背景になる問題系や、それらの施策が直面する課題について解説を行った。H27年度の計画は、作品分析に用いる理論の整理及び近年の表象の潮流の把握分析であった。理論については、国際ジェンダー学会にて報告した。また、アメリカへの調査によって関連資料を順調に収集している。表象については、文学だけでなく映画やテレビ番組等へと対象を拡大し動向を追っている。加えて、9.11以前のモリスン作品の分析を行い論文を執筆した。さらに、アメリカの相対化を目的としてポルトガルで調査を実施した。この調査で得られた情報は今後、作品分析等において有益な参照項となることが見込まれる。平成28年度は、研究報告、論文執筆、現地調査、及びアウトリーチ活動として市民講座の講師を行った。研究報告は、6月19日に明治学院大学で開催された日本女性学会大会の個人研究発表にて、「あなた/だれかに曝されつづけるわたしージュディス・バトラーによる身体の曝されに関する議論における「他者」」という題目で行った。バトラーが9.11直後のアメリカ合衆国の状況を分析した『生のあやうさ』「暴力、喪、政治」のレトリックを、承認に関する理論や、トニ・モリスンの『スーラ』、ソフォクレスの『アンティゴネー』等を用いて批判的に検討した。論文執筆は、口頭報告の際に得た指摘等を踏まえ、「「喪失」からはじめるーJ.バトラー『生のあやうさ』「暴力、喪、政治」における倫理の端緒」を『女性学』に投稿し、刊行された。「暴力、喪、政治」の議論で想定される主体像を、ダグラス・クリンプの「喪と闘争性」と比較し、9.11直後とエイズ危機の時代の間の社会の状況や運動の担い手の差異に注目しながら、『スーラ』や『アンティゴネー』を用いて批判した。現地調査は、8月26日から9月4日にアメリカ合衆国に出張した。ニューヨーク公立図書館等で調査し、モリスンの作品に関連する資料や、ニューヨークで活動したフェミニズムや女性運動に関する資料の入手等を行った。

市民講座は、6月22日に練馬区立男女共同参画センターえーるにて、「性的“マイノリティ"と性の“ふつう"」という題目で、性に関する規範や近年の施策が直面する課題について解説等を行った。平成28年度の計画は、作品を分析する際に用いる政治や社会の状況とそれを分析する理論の収集と整理及び、作品分析であった。理論については、日本女性学会で報告し、その後学会誌へと投稿し刊行された。政治や社会の状況については、アメリカ合衆国への出張で、モリスンの作品に関連する資料の一部を収集できた。作品分析については、9.11以前に出版された著作を用いて、9.11以降の社会的な状況に関する理論の批判を行った。作品と理論のこのような接続は当初予定していたものではないが、9.11以前の作品が9.11以降に読まれることを鑑みて、9.11をめぐって作品の可能性を広げる意義があると考えられることから、概ね順調と考えられる。平成29年度は、研究報告、分担執筆した書籍の校正、論文執筆、現地調査、及びアウトリーチ活動として市民講座の講師を行った。研究報告は、6月18日に中京大学で開催された日本女性学会大会の個人研究発表にて、「痛みへの愛着の可能性ー愛する他者を喪失するという文脈から」という題目で行った。映画『愛しい人が眠るまで』(1991)に描かれる女性の欲望を、フロイトの精神分析理論を用いて分析し、欲望の規範化の作用について論じた。学会報告の際に得た指摘を踏まえ、いくつかの類似する題材の映画の分析を通じて、欲望の規範化作用について検討した論文を執筆した。現在、投稿先を検討中である。フェミニズムや女性学について研究を担ってきた研究者へのインタビュー集『ジェンダー研究を継承する』の出版に向けて校正を重ね、人文書院から10月に刊行された。(なお、これは一橋大学の佐藤文香教授と伊藤るり教授を中心とする「先端課題研究14ジェンダー研究の過去・現在・未来ー女性学・ジェンダー研究のパイオニアに対する聞き取り調査を中心に」というプロジェクトに属するものである。)現地調査は、3月6日から3月19日にアメリカ合衆国に出張した。カリフォルニア大学図書館やニューヨーク公立図書館等で調査し、モリスンの作品に関連する資料や、フェミニズム運動に関する資料の入手等を行った。市民講座は、6月7日に練馬区立男女共同参画センターえーるにて、「施策から考える“求められる"女性・LGBTの姿」という題目で、近年の自治体による性的少数者や女性に関連する施策が直面する課題について解説等を行った。引き続き、近年の女性や移民などマイノリティの排除包摂に関する理論の整理と、モリスン及び同時代作家の作品の分析を行う。それに際して、次の二点が当初の計画より強調されることが見込まれる。一点目は、9.11をめぐる問題はそれ以前から存在した問題が顕在化したものであると分析されることを踏まえ、9.11以降の作品に加えて9.11以前のモリスン作品の分析も中心的な分析対象とすることである。二点目は、昨今の移民やテロリズムをめぐる状況を鑑み、合衆国を相対化することを目的としてヨーロッパや日本に関する研究や作品も扱うことである。なお、これらの点は当初より計画に含まれていたものであり大幅な変更ではない。
機能性酸化物における格子欠陥の電子顕微鏡による動的観察

量子常誘電体であるチタン酸ストロンチウムは低次元化,基盤による歪み,カチオン置換などの手法により強誘電性が発現することがよく知られている.多結晶体では粒界において,点欠陥や転位などの格子欠陥が高密度に導入される.したがって,粒界近傍の領域でも同様に強誘電性が発現する可能性があり,電子物性の制御に重要な役割を果たす.本研究では,双結晶法を用いて制御された粒界を人工的に作製し,その原子・電子構造を電子顕微鏡で直接観察することにより,粒界近傍での強誘電性について検討した.電子回折法により観察したところ,所望の10°の小傾角粒界が熱拡散接合によって作製できていることを確認した.原子分解能を有する走査透過型電子顕微鏡法により二種類の転位コアが周期的に配列されていることが明らかとなった.幾何位相解析法を用いて局所的な歪みを検討したところ,10%程度の大きな歪みが転位周辺に導入されていることが分かる.さらに,この領域での電子エネルギー損失分光から,転位コア周辺では酸素空孔の導入により,一部のチタンが還元されていることが分かった.局所的な原子変位を現在解析しており,これらの解析手法を組み合わせることによって,粒界の強誘電性について今後検討する.27年度が最終年度であるため、記入しない。27年度が最終年度であるため、記入しない。
細胞外マトリックス各成分から再構成した超分子構造体

コラーゲンタンパク質ファミリーに共通するコラーゲンらせん構造がコラーゲンに共通する性質・機能にどのように関係するか。多様なコラーゲンタンパク質分子の違いはこれまで非コラーゲンらせんドメインに焦点があてられてきたが、コラーゲンらせん構造そのものに分子種による特異性があるのか、あるとしたら、どのような構造に由来するのか。これらの問題の解明に生体組織(ウシレンズカプセル、ヒト胎盤、ウシ角膜など)からIV型コラーゲンおよびV型コラーゲンの単離し、単離したコラーゲンを種々の温度、pH、イオン濃度などの下に置き、超構造の再生に必要な条件を検討した。さらに再構成された超構造の特徴を解明した。ウシレンズカプセルから抽出したIV型コラーゲンを2Mグアニジン塩酸プラス10mMジチオスレイトール(DTT)中、4°C、あるいは、リン酸緩衝液,pH7.3,に0.15M NaClを加え、4°Cあるいは28°Cにてゲルが形成された。ゲルは網目状構造を示し、分岐間の平均距離は15nmで、マウス膵臓の基底膜構造の網目構造と類似していた。V型コラーゲンをリン酸緩衝液、pH7.4,中で形成された会合体を電顕にて観察し、α3(V)を含むV型コラーゲン亜型も67nmの横紋構造を有し、横紋周期より細い線維を形成しうることが判明した。これらの結果を以下の仮説にまとめた。I型コラーゲン、IV型コラーゲン、V型コラーゲン中のコラーゲンらせんドメインが有する構造的・機能的特徴で共通性なことはコラーゲンらせんは低温で水和が大で、37°Cなど温度をあげるとサイドバイサイドに並んで会合する。IV型コラーゲンらせんにはらせんの乱れがあるため、らせんに折れ曲がりがあるため、会合体構造は網目構造になり、I型コラーゲン、V型コラーゲンの会合体は線維状になる。
高度情報化社会における取引の種類、消費者の類型に応じた消費者法制についての研究

「デジタル・コンテンツ供給契約の一定の側面に関する欧州議会及び理事会指令提案」(デジタル・コンテンツ指令提案)についてひきつづき、資料を収集し、主に適合性と救済についての研究を行っている。米国の、アメリカ法律協会(American Law Institute、以下、ALI)によって現在作成途中である消費者契約法リステイトメント(Restatement of the Law, Consumer Contracts )の2017年4月時点における草案を巡る議論についての研究を行った。研究成果としては、米国消費者契約法リステイトメント草案とソフトウェア契約を巡る約款に関する議論について」という論文を執筆した。論文においては、草案作成にあたり参考にされたソフトウェア契約に関連する裁判例の判旨、草案作成の背景となるレポーターが採用した実証的アプローチ(empirical approach)、消費者契約法リステイトメントの草案の主要な規定について紹介すると共に、契約の成立、契約条項の採用に関連する第2次契約法リステイトメント、コンピュータ情報契約に関連して起草された米国におけるコンピュータ情報取引法(UCITA(Uniform Computer Information Transaction Act))、ALIソフトウェア契約法原則(Principles of the Law of Software Contracts)について比較検討を行った。シュリンクラップ契約を巡る法的問題が提示する標準書式契約における契約の成立、標準書式契約条項の採用、標準書式契約の変更、非良心性による強制不可能な条項等の議論は日本における定型約款についての問題に示唆を与える点において重要である。「デジタル・コンテンツ供給契約の一定の側面に関する欧州議会及び理事会指令提案」(デジタル・コンテンツ指令提案)についての資料の収集、米国の、アメリカ法律協会(American Law Institute、以下、ALI)によって現在作成途中である消費者契約法リステイトメントについての資料収集、論文執筆を同時並行して行った。デジタルコンテンツ供給契約の研究において重要なEU法についての資料収集、研究を前倒しで開始することにしたため、このテーマについての論文執筆のための準備も進んでいる。デジタルコンテンツ供給契約の研究において重要なEU法についての資料収集、研究に加え、デジタル・コンテンツ供給契約についての規定を最初に導入した英国の2015年消費者権利法米国におけるUCC第2編、コンピュータ情報契約に関連して起草されたコンピュータ情報取引法、ALIソフトウェア契約法原則(Principles of the Law of Software Contracts)について比較検討していきたい。高度情報化社会において、物品、役務、情報、デジタル情報等さまざまな目的物が取引され、その周りを【情報のフロー】が取り巻いている状況において、【多層化した取引の目的物】を踏まえつつ、その取引主体である、高齢者、幼児などを含む「生身の人間としての」消費者の類型【多層化した消費者の類型】に応じた規制のありかたについて、消費者が十分な情報を与えられ、自主的に選択でき、トラブルの際には救済される法制度の統一的、首尾一貫した一般原理を提言しつつ、個別の事例に対応していけるシステムを構築することが本研究のめざす目的である。本研究の趣旨に鑑み、脆弱な消費者を含む消費者法性のありかたという観点からは、消費者契約法のありかた、消費者に向けた広告規制のありかた、米国における非良心性の判断の分析なども今後考察の対象としていきたい。高度情報化社会において、物品、役務、情報、デジタル情報等さまざまな目的物が取引され、その周りを【情報のフロー】が取り巻いている状況において、【多層化した取引の目的物】を踏まえつつ、その取引主体である、高齢者、幼児などを含む「生身の人間としての」消費者の類型

【多層化した消費者の類型】に応じた規制のありかたについて、消費者が十分な情報を与えられ、自主的に選択でき、トラブルの際には救済される法制度の統一的、首尾一貫した一般原理を提言しつつ、個別の事例に対応していけるシステムを構築することが本研究のめざす目的である。本研究の趣旨に鑑み、脆弱な消費者を含む消費者法性のありかたという観点からは、消費者契約法のありかた、消費者に向けた広告規制のありかた、米国における非良心性の判断の分析なども今後考察の対象としていきたい。書籍の購入などのために使用予定であったが、一度資料を見直してから、次年度に改めて書籍の購入計画を立てることとした。
細胞のがん化に関与するエンドサイトーシス機構の構造的基盤

エンドサイトーシスは真核細胞が細胞外から外部の物質を細胞内に取り込む仕組みの1つであり、細胞表面受容体の内在化など、様々な基本生命現象を担うが、近年、細胞のがん化にも深く関与しているという知見が蓄積してきている。本研究課題では、特にがん化に関与するエンドサイトーシス関連タンパク質に着目して構造機能解析を行った。その結果、クラスリン依存性エンドサイトーシスの最初のステップであるクラスリン重合過程を担うSGIP1やFCHo1タンパク質による、がん化に深く関与するEps15タンパク質の認識機構の解明に成功した。今回の研究により、細胞のがん化とエンドサイトーシスの関係の理解が進展すると考えられる。エンドサイトーシスは,真核細胞が細胞外から外部の物質を細胞内に取り込む基本的な仕組みの一つであり,体細胞における栄養摂取,シナプスにおけるシナプス小胞のリサイクリング,細胞表面受容体の内在化など,様々な基本生命現象を担っている.最近,エンドサイトーシス関連タンパク質が,細胞のがん化に深く関与しているという知見が蓄積してきているが,そのメカニズムには不明な点も多い.本研究は,特に細胞のがん化と関わりの深いエンドサイトーシス関連タンパク質の構造機能解析を行い,エンドサイトーシスによる細胞のがん化への関与のメカニズムの一端を解明することを目的とする.今年度は,クラスリン依存性エンドサイトーシスの最初のステップであるクラスリン凝集過程に関与すると考えられる,SGIP1とFCHo1の二種類のタンパク質のμhomology domain(μHD)の発現精製と結晶化を行った.その結果,SGIP1のμHDについて,実験室系のX線発生装置で約A分解能の回折点を与える単結晶を得た.これにより,今後のμHD単独の構造決定に道筋を付けるとともに,がん化と関連の深いEps15やintersectinなどのタンパク質との複合体の構造決定のための試料調製が順調に進んでいることを確認できた.さらに,Eps15のSGIP1結合領域の約260残基の領域を発現精製し,SGIP1のμHDとの解離定数をBiacoreを用いて決定したところ,解離定数はサブμMオーダーであり,両タンパク質は,比較的強く結合することが判明した.また,大腸菌の発現系を用いて,がん化に関与するエンドサイトーシス関連タンパク質であるPTRFの全長タンパク質の発現精製にも成功したが,結晶化に十分な量を得ることは出来なかった.エンドサイトーシスは,真核細胞が細胞外から外部の物質を細胞内に取り込む基本的な仕組みの一つであり,体細胞における栄養摂取,シナプスにおけるシナプス小胞のリサイクリング,細胞表面受容体の内在化など,様々な基本生命現象を担っている.最近,エンドサイトーシス関連タンパク質が,細胞のがん化に深く関与しているという知見が蓄積してきているが,そのメカニズムには不明な点も多い.本研究は,特に細胞のがん化と関わりの深いエンドサイトーシス関連タンパク質の構造機能解析を行い,エンドサイトーシスによる細胞のがん化への関与のメカニズムの一端を解明することを目的とする.今年度は,クラスリン依存性エンドサイトーシスに関与するタンパク質であるSGIP1について,そのμhomology domain (μHD)の結晶化条件の改善と構造解析を行い,SAD法と分子置換法を用いて2つの異なる空間群での構造決定に成功した.またSGIP1のμHDに結合し,がん化と関連の深い他のエンドサイトーシス関連タンパク質であるEps15について,μHDに対する結合能を保持する10残基の領域を2箇所同定することに成功した.さらにこれらの領域に対応するペプチドとμHDの複合体の結晶構造解析を行い,分子置換法により構造決定に成功した.さらに,複合体の立体構造に基づいてEps15に結合できないμHD変異体を2種類作製し,実際にこれらの変異体がEps15に結合しないことを確認し,複合体の立体構造がSGIP1とμHDの生理的結合状態を反映したものであることを確認した.これらの結果により,SGIP1によるEps15認識機構の一端を解明した.他のがん化に関与するエンドサイトーシス関連タンパク質の結晶化には成功しなかった.エンドサイトーシスは、真核細胞が細胞外から外部の物質を細胞内に取り込む基本的な仕組みの一つであり、細胞表面受容体の内在化など、様々な基本生命現象を担う。エンドサイトーシスは細胞のがん化にも関与するが、その機構には不明な点も多い。本研究は、細胞のがん化と関わりの深いエンドサイトーシス関連タンパク質の構造機能解析を行い、エンドサイトーシスによる細胞のがん化への関与機構の解明を目的とする。昨年度はエンドサイトーシスのうちクラスリン依存性エンドサイトーシスに関与するタンパク質であるSGIP1について、そのμhomology domain (μHD)単独および、細胞のがん化と深く関連するエンドサイトーシス関連タンパク質であるEps15の約10残基からなるμHD結合領域との複合体の構造決定に成功した。

Eps15のこの約10残基の領域を含む約30残基の領域はμHDに100倍以上強く結合する。今年度はこの親和性向上機構の解明のためにまず、μHDに強く結合するEps15の約30残基の領域に対応するフラグメントとμHDの複合体の構造決定を行った。複合体の結晶構造では、Eps15のフラグメント中の既にμHDとの結合様式の判明している約10残基の領域に対応する電子密度は明瞭であったが、それ以外の領域の電子密度は不明瞭であった。したがって親和性の向上がμHD上にEps15の約10残基の領域の外側の領域に対するさらなる結合部位があることによるという可能性は低いと考えられた。さらに変異体解析により、この親和性の向上が遠位の静電相互作用などの既知の機構によるものでもなく新規の非直接的な機構による可能性が高いことを見いだした。またEps15には上記の30残基の領域に対応する一つの強いμHD結合部位と少なくとももう一つの弱い結合部位が存在することを等温滴定カロリメトリーなどの分析手法により見いだした。26年度が最終年度であるため、記入しない。構造生物学、生化学26年度が最終年度であるため、記入しない。本年度は,SGIP1のμHDの結晶化に成功し,今後の構造決定に期待の持てる成果を得ている.また,Eps15とSGIP1が比較的強く結合することを見いだしており,今後結合領域を絞っていくことで,複合体の結晶化に向けた準備が整っていくことも期待できる.一方で,その他の目的タンパク質については,結晶が得られておらず,次年度以降により強力に研究を推進する必要があると考えられる.このようなことから,達成度をやや遅れているとした.本年度は,まずクラスリン依存性エンドサイトーシスに関与するタンパク質であるSGIP1のμHDの構造決定に成功した.またがん化に関与する他のエンドサイトーシス関連タンパク質であるEps15のμHD結合領域を10残基まで絞り込むことに成功した.さらにEps15のμHD結合領域由来の11残基のペプチドとSGIP1のμHDの複合体の結晶構造を決定した.これらの成果によりSGIP1のEps15認識機構の一端を解明した.これは,がん化に関与するエンドサイトーシス関連タンパク質の機能発現機構の理解を進める大きな進展であり,このことから達成度をおおむね順調に進展しているとした.26年度が最終年度であるため、記入しない。今後は,既に得られているSGIP1のμHD単体の構造決定を日指すとともに,Eps15やintersectinのμHDへの結合領域の絞り込みを行い,複合体の結晶化を目指す.また,PTRFやその相同タンパク質の発現精製に関しては,発現条件や発現フラグメントの検討や,他の発現系を試すことにより,結晶化に向く試料の調製を進める.さらに,PACSIN2とcaveolin-1の複合体の構造機能解析に関しては,caveolin-1のフラグメントをMBP融合タンパク質として発現させ,融合タンパク質ごと結晶化用の試料として用いるなどの工夫をして研究を推進する.
末梢神経系発生に関与するパイオニアニューロンの解析

近年申請者がSix1ノックアウトホモマウスの解析を通じて発見・同定した嗅上皮発生初期に出現するパイオニアニューロンは、末梢神経系と中枢神経系が最初につながる場、すなわち上皮の一定の場所から軸索が最初に嗅球にむかって出て行く場を提供するものである。このパイオニアニューロンへの分化を司る遺伝子ネットワークを解明するために、野生型マウスとSix1ノックアウトホモマウスの嗅上皮(鼻プラコード)からRNAを抽出し、アレイ解析を行った。有意に差がある候補遺伝子が、100種類程度見つかり、in situ hybridizationにて、野生型での発現を確認した。そのうち嗅上皮で発現するものについてはホモマウスでの発現を確認し、有意に差があるもの10数種類に絞りこみ、発生関連遺伝子数種について、該遺伝子ノックアウトマウス胚の供与を受け、解析を行った。さらに残りの発生関連遺伝子については、嗅上皮組織培養系を用いて解析した。レチノイン酸依存的に発現が誘導される遺伝子群数種が、ノックアウトホモマウスで発現が有意に上昇していたため、組織培養系で再現できるかどうかについて検証したが、明確な結果は出なかった。培養細胞を用いたリポーターアッセイでは、Six1のリポーター抑制効果は検出されなかった。ニワトリ胚を用いて、鼻プラコード、Epibranchial placodeのパイオニアニューロンの同定を、chick Six1遺伝子発現により同定し、嗅上皮発生後期の、Six1遺伝子の役割を同定し、発表した。前年度申請者がSix1ノックアウトホモマウスの解析を通じて発見・同定した嗅上皮発生初期に出現するパイオニアニューロンは、末梢神経系と中枢神経系が最初につながる場、すなわち上皮の一定の場所から軸索が最初に嗅球にむかって出て行く場を提供するものである。このパイオニアニューロンへの分化を司る遺伝子ネットワークの解明するために、Six^<-/->、野生型マウスの嗅上皮(鼻プラコード)の遺伝子発現を、アレイ解析にて比較する。胎生9.5日、数個体の鼻プラコードから取得したRNAを用いてアレイ解析を行った。スライドグラスからのRNAの取得とアレイ解析はタカラバイオに委託し、野生型とSix1^<-/->で発現に有意な差が観察される遺伝子について、in situ hybridization法で確認しつつある。現在までの知見から8のカテゴリーに分類した。を、野生型とSix^<-/->の胚で行い、Six1の標的遺伝子を同定する。#1.生殖腺発生に関与する遺伝子群#2.レチノイン酸の標的遺伝子群#3.神経移動・軸索伸張に関する遺伝子群#4.ケモカイン遺伝子#5.神経分化に関係する転写因子群#6.Six-Eya-Dach遺伝子ファミリー#7.細胞接着に関係する遺伝子#8.その他の遺伝子群、である。#8.のSocs2について海外の研究室から同遺伝子のノックアウトホモマウスの供与を受けパイオニアニューロンの有無を検索したところ、パイオニアニューロンの存在が確認された。また、#8.のロイシンリッチリピートを有する膜タンパク質については、間葉系に発現するもの、パイオニアニューロンに特異的に発現するものが見つかった。近年申請者がStx1ノックアウトホモマウスの解析を通じて発見・同定した嗅上皮発生初期に出現するパイオニアニューロンは、末梢神経系と中枢神経系が最初につながる場、すなわち上皮の一定の場所から軸索が最初に嗅球にむかって出て行く場を提供するものである。そのうち嗅上皮で発現するものについてはホモマウスでの発現を確認し、有意に差があるもの10数種類に絞りこんだ。そのうち、発生関連遺伝子数種については、海外の共同研究者から、当該遺伝子ノックアウトホモマウスの供与を受け、解析を行った。残りの発生関連遺伝子については、嗅上皮組織培養系を用いて解析中である。

一方、レチノイン酸依存的に発現が誘導される遺伝子群数種が、ノックアウトホモマウスで発現が有意に上昇していた。培養細胞を用いたリポーターアッセイでは、Six1のリポーター抑制効果は検出されなかった。ニワトリ胚を用いて、鼻プラコード、Epibranchial placodeのパイオニアニューロンの同定を、chick Six1遺伝子発現により同定した。嗅上皮発生後期の、Six1遺伝子の役割を同定し、発表した(Ikeda et al., IntJ Dev Biol, in press)。近年申請者がSix1ノックアウトホモマウスの解析を通じて発見・同定した嗅上皮発生初期に出現するパイオニアニューロンは、末梢神経系と中枢神経系が最初につながる場、すなわち上皮の一定の場所から軸索が最初に嗅球にむかって出て行く場を提供するものである。このパイオニアニューロンへの分化を司る遺伝子ネットワークを解明するために、野生型マウスとSix1ノックアウトホモマウスの嗅上皮(鼻プラコード)からRNAを抽出し、アレイ解析を行った。有意に差がある候補遺伝子が、100種類程度見つかり、in situ hybridizationにて、野生型での発現を確認した。そのうち嗅上皮で発現するものについてはホモマウスでの発現を確認し、有意に差があるもの10数種類に絞りこみ、発生関連遺伝子数種について、該遺伝子ノックアウトマウス胚の供与を受け、解析を行った(前年度まで)。残りの発生関連遺伝子については、Raj Radher博士に手法を習い、嗅上皮組織培養系を用いて解析した。レチノイン酸依存的に発現が誘導される遺伝子群数種が、ノックアウトホモマウスで発現が有意に上昇していたため、組織培養系で再現できるかどうかについて検証したが、明確な結果は出なかった。ニワトリ胚を用いて、鼻プラコード、Epibranchial placodeのパイオニアニューロンの同定を、chick Six1遺伝子発現により同定し、嗅上皮発生後期の、Six1遺伝子の役割を同定し、発表した(Ikeda et.al., Int J Dev Biol)。
エピジェネティクスに着目した統合失調症の病因解明の追及

精神疾患関連遺伝子として見出したSHATIの末梢血中DNAのメチル化率の測定が、精神疾患のマーカーとなる可能性を探ることを目的として行った。メタンフェタミン連投により作成した統合失調症様モデルマウスにおいて脳内および血中Shati遺伝子のメチル化率に有意な減少が確認された。さらに、統合失調症、双極性障害、気分障害の末梢血からDNAを抽出した後、メチル化率を測定したところ、健常者に比べて各精神疾患患者の間では、特定部位のメチル化率の低下が観察された。これらのことより末梢血から採取したDNA中のSHATI遺伝子のメチル化率の解析が精神疾患の診断マーカーとしての有用である可能性が示された。メタンフェタミン連続投与したマウスおよびコントロールマウス脳部位ごとのゲノムDNAを抽出し、各遺伝子におけるメチル化の状態についてエピジェネティックな解析を試みた。さらに、同動物より血液を回収した後、SHATI、PICCOLO、TMEM168の血中におけるメチル化の状態についても検討し、ゲノムのメチル化が、精神疾患においてのバイオマーカーとなり得るかどうかを検討した。メタンフェタミン繰り返し投与により、海馬、側坐核、前頭前皮質において上記の遺伝子の上昇がリアルタイムPCRにより確認された。また血中メチル化状態に変化がある可能性が認められたため、その変化が脳部位ごとのメチル化状態をも反映するかどうか、脳部位ごとのメチル化解析を行い、血中との相関性について検討した。TMEM168については、目的とした脳部位においてはほとんどメチル化がおこっておらず、メタンフェタミン連投マウスとコントロールマウスにおいて変化は確認されなかった。Shatiのメチル化について側坐核においてはメタンフェタミン群ではコントロール群と比較して、Shati転写開始点上流であるCpGアイランド1のDNAメチル化率が減少しており、特定のCpGユニットで有意な減少が確認された。また血中のShatiゲノムのメチル化についても確認したところ側坐核と同様に減少が確認され、興味深いことに側坐核と同様のCpGユニットで有意な減少の確認できた。このことより、血中のメチル化の測定が、脳内のメチル化を反映する可能性が考えられる。さらなる解析が必要であるものの血中DNAメチル化解析による統合失調症診断への応用の可能性が示唆される。さらに、富山大学精神科との共同研究により精神科に通院中の統合失調症患者と健常者においてマウスで変化が認められたShatiのメチル化の変化の検討の準備を開始した。開局薬局でも特定の血液検査の実施が可能となってきており、薬局薬剤師による来局者への受診勧奨の社会的役割が増大しているが、精神疾患の領域については、血液検査等による診断方法が確立しておらず、精神科専門医への受診を勧めることが困難となっている。そこで、精神疾患関連遺伝子として、我々が見出したSHATI/NAT8Lの末梢血中DNAのメチル化率の測定が、精神疾患のマーカーとして利用できるかどうかの可能性を探ることを目的として本研究を行った。前年度までの研究により、マウスを使った実験において、メタンフェタミンを連続投与することにより作成した統合失調症様モデルマウスにおいて脳内のShati遺伝子のメチル化が有意な減少が確認された。また同モデルマウスの血中Shati遺伝子のメチル化も有意な減少が確認された。したがって本年度は臨床血液サンプルを用いて解析を行った。大阪大学および富山大学の倫理委員会の承認および被検者からの同意をそれぞれ得た上で本研究を実施した。統合失調症患者、双極性障害患者、気分障害患者および健常者の末梢血からDNAを抽出した。抽出したDNAをバイサルファイト処理し、PCR法で増幅した後、PyroMarkQ24システムでメチル化率を測定した。測定領域はSHATIの転写開始点上流におけるCpGアイランドを対象として解析を行った。健常者と各精神疾患患者の間では、転写開始点上流1,700番目周辺のCpGユニットにおけるメチル化率の低下が観察された。末梢血から採取したDNAを用いることによるSHATI遺伝子のメチル化率の解析が精神疾患の診断マーカーとしての有用である可能性が示された。神経精神薬理学研究の順番に差異はあるもののほぼ計画どおりに進行している。なかでもマウスの脳内の特定の部位と血中のメチル化の相関性が明らかとなったのは大きな前進であり、その結果をもとに臨床研究に着手することができたのは大いなる前進だと思われる。目的とする遺伝子に対する特異的な抗体は市販されておらず、また作成もあまりうまくいっておらず、血中でのタンパク質解析は見直しの必要が考えられる。またShatiのプロモーター解析について着手し有意な結果を得られているが、その他の遺伝子についても解析を行いたい。臨床研究については本学倫理委員会の承認が得られたので至急開始する予定である。本年度は新しくプロモーターアッセイの系を立ち上げる予定であったがそれがかなわず次年度使用額が生じた。

また倫理委員会の承認がなかなかとおらず臨床研究の開始も少し遅れたのが原因かと考える。また海外学会で報告する予定であったものが都合により渡航できなかったのも原因のひとつと考える。次年度はプロモーターアッセイの立ち上げ等に本年度の繰越金を使用する予定である。また臨床研究のシークエンス解析にも繰越金と来年度予算で充足する予定である。また本年度はカナダで行われる国際学会に参加発表予定である。