hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
変形性関節症軟骨細胞の細胞周期制御とアポトーシスに関する研究

イヌ実験的変形性関節症(OA)モデルおよびOA患者の人工膝関節置換術時に採取した変性軟骨組織の検討から、1)OA軟骨の変性・破壊過程に軟骨細胞のアポトーシスが関与すること、2)関節液及び軟骨組織中に多量の一酸化窒素(NO)あるいはその代謝産物が検出されること、3)OA軟骨の組織学的スコアとDNA断片化をきたしたTUNEL染色陽性軟骨細胞率が有為に正の相関を示すこと、4)特にOAの初期病変においてはニトロチロシン(NT)陽性細胞率とOAスコアが有為に相関する結果から、OA軟骨の破壊過程でNOにより誘導される軟骨細胞が深く関与することが示唆された。このNOによる細胞障害後に軟骨細胞のアポトーシスへ至るシグナル伝達経路を調べる目的でヒトOA軟骨に対するCaspase-3,-9に対する免疫染色で検討したところ、それぞれOAスコア、TUNEL陽性細胞率、NT陽性細胞率と強い正の相関関係を示した。このことから、NOによる軟骨細胞障害はミトコンドリアにおけるBcl-2、Bax等のアポトーシス関連蛋白の均衡を崩し、チトクロームCの遊離、Caspase-9の活性化を誘導し、アポトーシスの実行部隊であるCaspase-3の活性化を導くものと考えられた。一方、モノヨード酢酸を膝関節内に投与することにより作成したラットOAモデルに抗酸化剤PDTCを連日3週間筋肉内投与を行い、NOの抑制効果および軟骨破壊の防止効果を検討したが、コントロール群と比較して有為な改善は認められなかった。今後は軟骨細胞のアポトーシスを制御するためにCaspase阻害剤の検討もなされるべきであると考える。本年度は変形性関節症(OA)軟骨における軟骨細胞のアポトーシス誘導に一酸化窒素(NO)が関与することの証明に主眼を置いた。ビーグル犬の膝関節前十字靭帯切離による実験的OAモデルを作成し、術後8週、16週で軟骨破壊の程度を光顕観察した。時間が経過するほど種々の程度の早期OA変化をきたしており、その組織グレードはDNA断片化を認識するTUNEL法陽性細胞の出現率と相関を示した。次に人工開節置換術時に採取したヒトOA軟骨において、行った組織化学においても、アポトーシス細胞と組織グレードはやはり相関関係を示し、透過型電子顕微鏡による観察においても典型的なアポトーシス像が確認された。以上より軟骨細胞のアポトーシスがOA軟骨破壊に関与していることが強く示唆された。OA患者から許可を得て採取した関節液中NO量は、血清中のNO量より有為に高値を示し、関節炎局所におけるNO産生の亢進が示唆された。次に、in situ hybridization法により、炎症時に誘導される誘導型NO合成酵素のmRNAをOA軟骨細胞が発現していることを確認した。さらに、NOの反応生成物であるperoxyn itriteが組織中の蛋白をニトロ化して生ずるnitrotyrosineに対する免疫染色では、特にOAの初期から早期にかけてOA組織グレードと強い相関を示しており、軟骨細胞死におけるNOの役割が裏付けられた。同時に採取した骨軟骨棘における、軟骨細胞分化の過程においても、肥大軟骨細胞は一部アポトーシスに陥っており、同様の手法によりこの過程にNOが関与することを証明した。
インスリン低血糖負荷による新生仔豚での脳内エネルギー代謝に関する研究

本研究では、未熟児新生児医療において頻繁に経験される低血糖が、病態生理学的に脳組織におけるredox stateひいては脳エネルギー状態に如何に影響するかについて検討するために、新生仔豚を対象として低血糖負荷を行ない、連続波長近赤外線分光測定装置(fsNIRS)測定と^<31>P-MRSによりPCr、ATP、PiならびにpHiを同時測定し検討した。この研究より得られた成績は以下の通りである。(2)脳組織内総Hb量は低血糖状態では前値に比して有意に増加した。(3)PCr/Pはインスリンの投与時には低血糖出現前値より有意に減少した。またグルコース投与によってcytochrome c oxidaseの酸化型はその前値まで回復したが、PCr/Piは投与後30分経過しても前値まで回復しなかった。以上の結果よりcytochrome coxidase酸化型の低下は、低血糖に随伴する低血圧による脳血流量の低下や、細胞内の微細構造を維持するために必要なATPというエネルギーが枯渇してcytochrome c oxidaseのサブユニットに歪みが生じ、電子の流れが障害されたためと考えられるが、今後の更なる研究が必要である。本研究により、低血糖におけるfsNIRSの測定による脳内エネルギー代謝測定の臨床的意義が明確化され、新生時期の低血糖による脳障害の予防、管理および治療の指標の確立に期待が持たれる。生後24時間以内の新生仔豚を3頭を対象とし、人工換気を行ないラピッドインスリン投与により低血糖負荷を行なった。NIR測定は、IMUC-7000(大塚電子社製)を使用し、頭蓋骨上より620-900nmの連続スペクトルを測定する。そして、インスリン投与開始前そして、インスリン投与開始後15分ごとにHbO2/Hb、酸素飽和度(SO2)、脳血液量(CBV)、cytochrome c oxidase(CCO)のredox stateをインスリン投与後240分まで測定した。同時に^<31>P-MRSの測定は、頭皮を剥離し頭蓋骨を露出し、直径3cmの表面コイルを固定し、^<31>P-MRスペクトロメーター(大塚電子社製BEM250/80 2.0Tesla)で測定した。この結果、(1)低血糖に陥るとSO2とCVBは増加し、これは低血糖での細動脈の拡張による脳血流量の増加によると考えられた。(2)低血糖負荷によりPCr/Piが低下する時、CCOの酸化率の低下を認め、両者に正の相関係数を認めた。またグルコース投与によりSO2は約10分で前値まで回復したが、さらに遅れてccoの酸化率とPCr/Piの回復を認めた。低血糖負荷により、脳組織内の電子伝達系への還元当量の供給が減少したにもかかわらず、CCOの酸化率の低下を認めた理由としては、脳細胞内のATPの枯渇による細胞内の微細構造を維持するのに必要なエネルギー低下のためCCOのsubunitに歪が生じ、電子の流れがsubunit間で滞ったためと考えられるが、今後の検討が必要である。(1)CCOの酸化型は血糖値が30mg/dl以下になると5例中3例で僅かに(約5%)増加したが、血糖値がさらに低下し10mg/dl以下になると全例において減少した。(2)CBVとSbO2は低血糖中は前値に比して有意に増加した液量の増加によると考えられた。(3)低血糖負荷により、PCr/Piが1.2以下ではPCr/PiとCCOの酸化型との間に有意な正の相関が認められた。しかし低血糖負荷のCCOの酸化型の減少の程度は低酸素負荷時に認められた減少率よりも軽度であった。(4)PCr/PiとCCOの酸化型はグルコースの投与時には低血糖前の値より有意に減少した。またグルコース投与によってCCOの酸化型は前値まで回復したが、PCr/Piはグルコース投与30分後でも前値まで回復しなかった。

これらの結果より、CCO酸化型の低下は、細胞内の微細構造を維持するためのATPのエネルギーの枯渇によりCCOのサブユニットに歪みが生じ、電子の流れが障害されたためと考えられるが、今後の研究が必要である。
留学生に対するIT系国家資格対策に特化したE-learningシステムの開発

1研究目的本研究の目標は、言語的・コンピュータ環境的な理由からE-learningの利用が非常に低いことが分かっている留学生対して(小宮研究課題番号20906038,19906069)、E-learningの利用促進を推し進め、E-learningの有効性を検証・証明することである。2研究方法留学生に対し、授業と連動する形で、学内のみであるが、PCサイトでのE-learningの利用を促し、事実上の必須として利用させた。これにより、E-learningを利用するという動機付けはできた。実際の利用状況を見ているとページ遷移をすることを面倒と感じているようで、途中から、一部のコンテンツをPDFとして画面に張り付けたが、むしろそのような形態の方が、多くの学生にとって利用しやすいようだった。今後は、これらのデータの解析が必要になる、3研究成果最大の成果は、実際に国家資格(ITパスポート)の合格者が出たことである。対象留学生は25人で、そのうち3人が合格した。割合としては、非常に低いものであるが、受験をしなかった学生もCBT形式のテストではあるが、平成24年4月15日前後にテストに申し込んでおり、例年と比較すると意識付けとしての効果も見られた。これらに関しても、定量的な解析を平成24年度の前半に終了する予定である。また、1ページに多くのコンテンツを載せることが、効果があることが分かった,これは、コンテンツやシステムの作りこみがあまり必要ではなく、できるだけ少ない手続きで、多くの情報を学生に対して提供できることを意味しており、教員の負担の軽減につながる。
動脈硬化発症におけるCDMファミリー分子の役割とその制御機構

アテローム性動脈硬化発症の原因とされる泡沫細胞の形成過程において、「マクロピノサイトーシス」経路を介してLDLを蓄積することが知られている。しなしながら、その詳細なメカニズムは明らかではない。本研究は、泡沫細胞形成過程におけるRac活性化分子DOCK1/2/5の役割を理解することを目的とした。今回の解析により、DOCK1/2/5がマクロピノサイトーシス形成機構に関与していることを見出し、泡沫細胞形成に関わることが示唆された。アテローム性動脈硬化発症の原因である泡沫細胞は、マクロファージが変性LDLを取り込む「スカベンジャー受容体」経路と、Native LDLを取り込む「マクロピノサイトーシス」経路によって形成される。これまで変性LDL取り込み経路は盛んに研究されてきたが、Native LDLによる泡沫細胞化のメカニズムについては未だ明らかではなかった。マクロファージにはCDMファミリー分子であるDOCK1/DOCK2/DOCK5が発現していることは既に確認済みであり、初年度はそれらのTriple Knockout (TKO)マウスを作製したのち骨髄よりマクロファージを分化培養して、細胞生物学的及び生化学的な評価を行った。1)野生型とTKOマクロファージにおいて、M-CSF刺激の下、マクロピノサイトーシス作用によるdextran-FITCの細胞取り込み量の差異を検討した結果、TKOでは顕著に減少していた。2)マクロピノサイトーシス経路によるnative LDLの取り込み量の差異を検討した所、TKOマクロファージにおいては顕著に減少していた。さらに、DOCK1/2/5阻害剤であるCPYPPを用いて検討した所、同じく取り込み能が顕著に減少していた。3)蛍光標識したAcLDLの取り込み能を野生型とTKOマクロファージにおいて比較検討した所、その機能は変化無いことが確かめられた。以上より、マクロファージにおけるマクロピノサイトーシスによる外部液性因子の取り込みにはCDMファミリー分子が重要であり、マクロピノサイトーシス経路を介した泡沫細胞化にCDMファミリー分子が関与することが示唆された。マクロファージにおいて、Rac活性化分子DOCK1、DOCK2、DOCK5が発現していることは既に確認済みであり、初年度はそれらのTriple Knockout(LysMcre D1lox/lox D2KO D5KO; TKO)マウスを作成したのち骨髄よりマクロファージを分化培養して、細胞生物学的及び生化学的な評価を行った。その結果、dextran-FITCやNative LDLの細胞取り込み量ではTKOにおいて顕著に減少した。また、DOCK1/2/5阻害剤であるCPYPPを用いて検討したところ、同じく取り込み能が顕著に減少した。このことより、DOCK1/2/5がマクロピノサイトーシス形成に関与していることを見出した。今年度はマウス個体内での動脈硬化発症に対するDOCK1/2/5の評価を行うことを目的とし、高脂血症のモデル動物として広く用いられるApoE knockout(ApoE-/-)マウスとTKOを交配することとした。ApoE-/-TKOは5つの遺伝子組み換えを行うため目的のマウスを得るまでに時間がかかるため、まずはApoE-/-を含むSingle Knockoutマウスで比較検討を行った。高コレステロール食を長期投与(17週)した後、大動脈に形成された粥状プラーク形成を観察した。その結果、ApoE-/-, ApoE-/- LysMcre D1lox/lox, ApoE-/-D2KO, ApoE-/-D5KO間において、プラーク形成度及び血中におけるTriglyceride量を測定したが、有意な差は見られなかった。現在、ApoE-/-TKOを得ることが出来たため、ApoE-/-TKOにおける高コレステロール食の長期投与を行っておりその観察を予定している。初年度に計画していた、TKOから骨髄マクロファージを分化培養しての細胞生物学的および生化学的解析は順調に進行しており、予定通りである。病態医化学研究は順調に進行しており、多くの成果が得られている。次年度は最終年度であり、この成果をさらに発展させ、CDMファミリー分子の動脈硬化メカニズムへの新たな関与を示したい。
汽水湖および淡水湖における水環境要素の動態特性と閉鎖性水域内の生態系モデルの開発

閉鎖性水域における水環境要素の動態特性の把握とその変動予測を目的として,現地観測,水理模型実験ならびに数理モデルの構築を行った.1)汽水湖の現地観測と数値実験湖山池において水質・微気象観測を実施し,湖底付近のDOの低下・上昇を成層度に関する水理パラメータであるウェダバーン数を用いて定量的に評価した。また,生物調査も合わせて行い,植物プランクトン優占種の季節的消長から湖山池の水環境を評価するとともに,植物プランクトンの増殖に関わる環境因子を抽出した.さらに,カオス工学の分野で開発された予測手法であるLocal Approximation法を用いてDOの短期予測を行い,その有効性を示した.つぎに,東郷池を対象に吹送流と塩分輸送に関する3次元解析モデルを構築し,風速によって海水の進入形態や水域の成層化に違いが生じることが示した.2)閉鎖水域の生態系モデル・水質予測モデルの構築有明海沿岸低平水田地帯のクリークを対象に,窒素・リンの水質動態の予測を目的とした生態系モデルを構築し,GAによるモデルパラメータの最適化手法を開発した.また,閉鎖性海域の水質動態モデルとして,有明海を対象にマルチコンパートメントモデルを用いた有機スズの動態モデルを構築し,流入負荷量の逆推定手法を開発した.さらに,潮汐流の卓越する閉鎖性海域の濁り環境の予測モデルを構築した.モデリングには二次元単層モデルを使用し,流れによる底泥の巻き上げや濁りの沈降を組み込んだ.3)植生を有する密度流現象の水理模型実験水草の水面占有率が閉鎖性密度成層水域における吹送流の乱流構造に及ぼす影響について検討した.乱流エネルギー収支の鉛直構造は,水草の占有率の増加に伴い,水草のない場合のそれに比べて,とくに水面と密度界面近傍で差異が顕著になることを明らかにした.閉鎖性水域における水環境要素の動態特性の把握とその変動予測を目的として,現地観測,水理模型実験ならびに数理モデルの構築を行った.1)汽水湖の現地観測と数値実験湖山池において水質・微気象観測を実施し,湖底付近のDOの低下・上昇を成層度に関する水理パラメータであるウェダバーン数を用いて定量的に評価した。また,生物調査も合わせて行い,植物プランクトン優占種の季節的消長から湖山池の水環境を評価するとともに,植物プランクトンの増殖に関わる環境因子を抽出した.さらに,カオス工学の分野で開発された予測手法であるLocal Approximation法を用いてDOの短期予測を行い,その有効性を示した.つぎに,東郷池を対象に吹送流と塩分輸送に関する3次元解析モデルを構築し,風速によって海水の進入形態や水域の成層化に違いが生じることが示した.2)閉鎖水域の生態系モデル・水質予測モデルの構築有明海沿岸低平水田地帯のクリークを対象に,窒素・リンの水質動態の予測を目的とした生態系モデルを構築し,GAによるモデルパラメータの最適化手法を開発した.また,閉鎖性海域の水質動態モデルとして,有明海を対象にマルチコンパートメントモデルを用いた有機スズの動態モデルを構築し,流入負荷量の逆推定手法を開発した.さらに,潮汐流の卓越する閉鎖性海域の濁り環境の予測モデルを構築した.モデリングには二次元単層モデルを使用し,流れによる底泥の巻き上げや濁りの沈降を組み込んだ.3)植生を有する密度流現象の水理模型実験水草の水面占有率が閉鎖性密度成層水域における吹送流の乱流構造に及ぼす影響について検討した.乱流エネルギー収支の鉛直構造は,水草の占有率の増加に伴い,水草のない場合のそれに比べて,とくに水面と密度界面近傍で差異が顕著になることを明らかにした.本年度では,閉鎖性水域における水環境要素の動態特性の把握とその変動予測を目的として,湖沼での現地観測,室内による水理実験ならびに生態系モデルの構築を行った.1)鳥取県湖山池での現地観測平成15年6月11月に,湖山池最深部において水質調査,微気象観ならびに植物プランクトン調査を実施した.その結果,78月では水温日成層が形成され,1011月では塩分差に起因する密度成層が発達し,湖底付近で貧酸素化・無酸素化が生じた.湖底付近では,DOはウェダバーン数と良好な負の相関を示し,ウェダバーン数が3を超えるとDOが低下することが明らかになった.また、TN, TP,クロロフィルaの値はいずれも8月にピークを示し,この時期に藍藻類のサヤユレモ属の異常増殖によりアオコが発生した.さらに,植物プランクトンの属別割合から求めた多様性指数により水質汚濁の程度を評価した結果,8月と10月の水環境が最も悪化していた.2)生態系モデルの構築有明海沿岸低平水田地帯のクリークにおける夏期の水質動態の予測を目的として,硝酸態,亜硝酸態,アンモニア態,有機態の各態窒素,無機態リン,有機態リンを指標とした生態系モデルを構築した.既往の文献と対象地区の水質の実測データから現況の水質動態を再現可能なモデルパラメータを推定し,文献等から推定できないパラメータは,遺伝的アルゴリズムによって水質変動の再現誤差が最小となるように最適値探索を行った.その結果,得られた生態系モデルによりクリークで観測された夏期灌漑期における水質観測値を良好に再現することができた.3)室内水理実験水草の水面占有率が閉鎖性密度成層水域における吹送流の乱流構造に及ぼす影響について検討した.

乱流エネルギー収支の鉛直構造は,水草の占有率の増加にともない,水草のない場合のそれに比べて,とくに水面および密度界面近傍で差異が顕著になることを明らかにした.閉鎖性水域における水環境要素の動態特性の把握とその変動予測を目的として,現地観測,水理模型実験ならびに数理モデルの構築を行った.1)汽水湖の現地観測と数値実験湖山池最深部において水質調査,微気象観ならびに生物調査を行った.植物プランクトン優占種の季節的消長の観点から湖山池の水環境について検討した結果,植物プランクトンの増殖に関わる環境因子を抽出し,とくに藍藻類とTN, TP,クロロフィルaとの有意な関係を見出した.また,カオス工学の分野で開発された予測手法であるLocal Approximation法を用いてDOの短期予測を行い,その有効性を示した.つぎに,東郷池を対象に吹送流と塩分輸送に関する3次元解析モデルを構築し,風速によって海水の進入形態や水域の成層化に違いが生じることが示した.2)有明海の数値実験有明海北部を対象に,船底防汚塗料等を起源とする有機スズ(TBT)の環境動態と運命を数値シミュレーションによって検討した.まず,非定常平衡の仮定の下,表面ミクロ層,水,浮泥層,底質,以上の4個のコンパートメントからなるマルチコンパートメントモデルを構築した.次に,有明海北部の水中及び底泥中のTBT濃度の実測値からTBT負荷量の逆推定を行った.逆推定には遺伝的アルゴリズムを用いた.さらに,船底防汚塗料が現時点で全く使用されなくなったとする簡単なシナリオの下でTBT濃度の将来予測を行った.本モデルは,その簡単なモデル構造にもかかわらず,TBTの環境動態や運命の推定さらにTBT汚染の将来予測に有効であることが示された.3)水理模型実験水草の水面占有率が閉鎖性密度成層水域における吹送流の乱流構造に及ぼす影響について検討した.乱流エネルギー収支の鉛直構造は,水草の占有率の増加にともない,水草のない場合のそれに比べて,とくに水面および密度界面近傍で差異が顕著になることを明らかにした.閉鎖性水域における水環境要素の動態特性の把握とその変動予測を目的として,現地観測,水理模型実験ならびに数理モデルの構築を行った.1)汽水湖の水環境評価と水質の動態予測モデルの開発湖山池において水質調査,微気象観ならびに生物調査を行い,植物プランクトン優占種の季節的消長の観点から湖山池の水環境について検討した.また,成16年度に開発したLocal Approximation法を用いてDOの短期予測手法にWaveletを用いたノイズ処理技術を導入し,DOの予測精度の向上を図るとともに,DOの動態特性について検討した.さらに,ニューラルネットワークモデルを用いたDOならびにクロロフィルaの動態予測モデルを構築した.東郷池においては,水環境の定期的な多点調査を実施し,プランクトン種と栄養塩類の季節的な変動特性ならびに空間分布特性について検討した.2)閉鎖水域を対象とした水質予測モデルの構築まず,低平水田地帯内のクリークを対象に,NO_X-N,NH_4-N,Org-N,PO_4-P,Org-Pの水質動態の予測を目的とした生態系モデルを構築し,実測値を用いたモデルパラメータの最適化手法を開発した.また,閉鎖性海域の水質動態モデルとして,有明海の有機スズを対象にマルチコンパートメントモデルを用いた物質動態モデルを構築し,流入負荷量の逆推定手法を開発した.さらに,潮汐流の卓越する閉鎖性海域の濁り環境の予測モデルを構築した.
感受性遺伝子NKX2-3の基礎・臨床的解析による炎症性腸疾患の病態解明と臨床応用

本研究課題において、世界的に患者数が増加し続けている炎症性腸疾患(潰瘍性大腸炎やクローン病)の疾患感受性遺伝子Nkx2.3の遺伝子機能を明らかにし、新規治療法開発へ繋がるような研究を目標とした。2017年度に、Nkx2.3遺伝子領域をencodeするNkx2.3 BAC cloneを過剰発現させたNkx2.3 transgenic mice (Nkx2.3 Tg)を用い、代表的なマウス腸炎モデルであるDSS(デキストラン硫酸ナトリウム)腸炎を誘導した。2018年度もこのマウスを用いDSS腸炎を誘導し、Nkx2.3 Tgマウスがコントロールマウスより重症化することが確認できた。よってNkx2.3の過剰状態は腸管炎症のリスク因子となりうるという仮説が立てられた。次に細胞株を用い、Nkx2.3発現ベクターをトランスフェクションにて過剰発現させ、接着分子やサイトカインの発現を評価した。Nkx2.3を過剰発現した細胞株では、コントロールと比べE-selectinやVCAM1やIL-8が発現亢進していた。MAdCAM1に関してはNKX2.3が転写因子としてMAdCAM1のプロモーター領域と結合しMAdCAM1の転写活性を上げることを示唆する論文があるが、我々の実験系ではNkx2.3の過剰発現によりMAdCAM1が発現亢進すると結論することはできなかった。しかしながらE-selectinやVCAM1やIL-8の発現が上昇していたことから、炎症性腸疾患の病態においてNKX2.3は炎症を惹起する分子の1つで、活性を阻害することで将来的な新規治療法につながる可能性があることが示唆された。本研究では、潰瘍性大腸炎やクローン病の疾患感受性遺伝子であるNkx2.3の遺伝子機能を明らかにし、それを基に臨床への応用を目指すことである。Nkx2.3のリスクアレルをもつ患者ではNkx2.3の発現が亢進すると報告されているため、Nkx2.3の高発現が炎症性腸疾患のリスク因子となるのではと想定している。そこでプロモーター領域を含むマウスNkx2.3遺伝子領域をencodeするNkx2.3 BAC cloneを過剰発現させたNkx2.3 transgenic mice (Nkx2.3 Tg)を作製した。そのうち3系統の樹立および繁殖が可能であった。この中で一番Nkx2.3の発現の高いマウスを同定する為realtime PCRでNkx2.3遺伝子のコピー数を推定した。Western blottingも行い蛋白レベルで一番発現が高いと思われる1系統に絞り、繁殖を行い、代表的なマウス腸炎モデルであるDSS(デキストラン硫酸ナトリウム)腸炎を誘導した。DSS腸炎は、マウスのstrainや飼育環境等により、重症度が変化することが言われているが、当大学の実験施設では安定して腸炎誘導が確立できた。Nkx2.3が過剰発現していないwild type (control)マウスとNkx2.3 Tgマウスの腸炎重症度を比較するとNkx2.3 Tgがやや重症化していた。またマウスより腸管や脾臓等を摘出し、蛍光顕微鏡、共焦点顕微鏡にてNkx2.3の臓器ごとの発現を調べた。腸管や脾臓には比較的強く発現しており、またDSS腸炎誘導後は発現の亢進を認めた。realtime PCRでもNkx2.3の発現は蛋白レベルとほぼ同様で、脾臓や腸管で高発現であることが確認できた。安定して炎症の起こる腸炎モデルを確立し、またRNAレベルや蛋白レベルでの実験を行うために必要な、realtime PCR用のプライマーや良質な抗体も見つけることができ、進捗状況はおおむね順調に進展していると考えている。

平成30年度以降は、確立した腸炎モデルを活用し、腸炎誘導後に発現亢進してくる遺伝子群の同定を進めていきたい。腸炎モデルでは、まだnが十分でなく今後反復しデータ強くする必要がある。またマウスや細胞株など種々のマテリアルを活用し、転写因子としてのNkx2.3の機能をRNAレベル、蛋白レベルで解析を進めていく予定である。平成29年度は、現在研究室にある古い試薬やキットを優先的に用い節約を行ったため次年度使用額が生じたが、今後多数回に渡り多量に消費する予定の試薬の使用量を、メーカー推奨量より減らしても十分workすることが確認できた。平成30年度以降においては、高額なキット等の購入が必要となる予定である。またこれらの実験で軌道に乗るとさらに多くの消耗品が必要になると考えている。
産業廃棄物のコンクリートへの再利用に関する研究

1.フライアッシュの有効利用に関する成果セメントの凝結時間はフライアッシュ混入により遅延する傾向にありその値は養生温度と混入量によって異なるがおおむね5%10%程度遅延する。また、フライアッシュ混入により自己収縮量を30%45%程度も低減できることを示した。2.コンクリート廃棄物の有効利用に関する成果<再生骨材の品質>:建築構造物のコンクリート廃材を再利用するための骨材破砕法によって再生骨材の品質(比重,吸水率等)に相違を生じる。原コンクリートの強度が高い程再生骨材の破砕強度も高くなる。<再生コンクリートの品質改善>:再生骨材の品質を改善する[加熱すりもみ法]は消費エネルギー,と経費がかかる。再生加工処理の低品質骨材を用いて、比較的品質の高い再生コンクリートを製造するためにはフレッシュコンクリートの真空脱気処理法、アクリル系ポリマーによる骨材表面のコーティング処理法が効果が認められた。3.各種産業廃棄物の有効利用に関する成果<瓦廃材の利用>:気泡モルタルへの利用は衝撃抵抗値と熱伝導特性の改善に寄与し有効性が認められた。また、衝撃抵抗評価には「油粘土」の衝撃前後のへこみ量を測定する「相対粘土径法」が有意である。<熔解ダストの利用>:熔解ダスト粉体を混入したコンクリートは凝結遅延作用による初期強度の発現が遅れる傾向にあるものの、混入量(5%)で20%程度の強度改善効果が期待できる。<掘削汚泥の利用>汚泥焼成骨材は吸水率が高く(20%)、骨材破砕値も約(53%)と高いので普通コンクリートには使用できない。しかし気泡軽量モルタルに用いることにより断熱性に富んだ内装材として強度改善次第で期待できる。1.産業廃棄物としてのフライアッシュの利用に関する実験結果1)フライアッシユ混入ペーストの凝結特性:フライアッシュ混合比3水準:0,20,40%、養生温度3水準:5,20,30゚Cの試験条件下でフライアッシュ混入量の増加に伴い始発時間と終結時間共20-80min遅延し、温度条件によっても凝結時間に大きな差が生じ20゚Cを基準に5゚Cでは始発で約180min、終結で400min遅延し、30゚Cの場合は始発で約80min、終結で140min短縮する。以上フライアッシュ混入量や養生時間により凝結性状が変化する貴重な特性が把握できたのでコンクリートへの適用を考える上で有用である。2)フライアッシュ混入モルタルとコンクリートの自己収縮特性:配合条件9水準について試験を行った。結果、単位セメント量が大なるにつれて自己収縮量は増大する。フライアッシュ混入量の増加に伴い収縮量を30%50%も低減できることが分かった。なお、計測には埋め込みゲージKM-100Bの使用がが凝結時から硬化後までの長時間にわたり安定した計測ができる。2.各種産業廃棄物のモルタルへの利用に関する実験結果1)骨材試験:廃材種別は(1)コンクリートパイル廃材(2)タイル廃材、(3)瓦廃材、(4)溶融スラグ廃材、(5)研磨汚泥廃材の5種類とした。骨材試験の結果はコンクリートパイル廃材、タイル廃材、瓦廃の3種類は原材料の破砕した後のふるい分けなど骨材精製過程に於いて大変手間がかかり、骨材精製法の検討が必要と思われる。溶融スラグ廃材は1500゚Cの高温処理されたものであり安定している。研磨汚泥廃材は骨材として精製する過程において臭気、発熱があり考慮が必要。2)流動性試験:W/C3水準、S/C3水準のモルタルについてフロー試験を行った。

フロー値はW/Cが大なるにつれ、骨材粒径が大なるにつれ大となるが木曽川骨材に比べ溶融スラグ骨材はほぼ等しくなった。コンクリートパイル廃材、タイル廃材、瓦廃の3種類は原材料の破砕による微粉体のためフロー値は低下した。強度試験の結果は川砂モルタルに比べW/C=40%の場合はほぼ等しい値を示したがW/C=50,55%では20%35%の減少が見られた。産業廃棄物のコンクリートへの適用は多種多様であるが、本研究では東海地域の特性を生かした、フライアッシュ、生コンクリートスラッジ、タイル、瓦、コンクリート構造物のコンクリート廃材や開削汚泥などの廃棄物を研究の対象としたコンクリートへの利用上の問題点を解明する基礎的研究として、そのコンクリートの(1)ワーカビリティ(2)コンシステンシー条件の解明と硬化後の特性(3)コンクリートの強度・ヤング係数(4)鉄筋の付着形状(5)乾燥収縮(6)耐久性としての中性化(7)鉄筋の腐食特性などについて基礎情報を得ようとした。具体的には、(1)フライアッシュの混入モルタルやコンクリートの電気抵抗特性による凝結時間と、水和反応と自己収縮反応開始との対応把握試験、簡易自己収縮測定試験法の実験的検討を行った。その結果、煉瓦、タイル、瓦、コンクリート廃材の混入率によっては、コンクリートの耐久性上、強度の極端な低下を招く境界が存在した。この比率は、ワーカビリティ、コンシステンシー条件により変化するが、その品質を維持するために再生骨材の品質向上がどうすれば図れるのかについて検討を行なってきた。試験体による強度試験によってさまざまなケースでのデータの蓄積ができた。今後はこのデータを分析し、最良のコンクリート廃材の利用について検討したい。1.コンクリート廃棄物の有効利用に関する成果○再生骨材の品質:建築構造物のコンクリート廃材を再利用するための骨材破砕法によって再生骨材の品質(比重,吸水率等)に相違を生じる。原コンクリートの強度が高い程再生骨材の破砕強度も高くなる。○再生コンクリートの品質改善:再生骨材の品質を改善する「加熱すりもみ法」は消費エネルギー、経費がかかる。再生加工処理の低品質骨材を用いて、比較的品質の高い再生コンクリートを製造するためにはフレッシュコンクリートの真空脱気処理法、アクリル系ポリマーによる骨材表面のコーティング処理法が効果が認められた。2.各種産業廃棄物の有効利用に関する成果○瓦廃材の利用気泡モルタルへの利用は衝撃抵抗値と熱伝導特性の改善に寄与し有効性が認められた。また、衝撃抵抗評価には「油粘土」の衝撃前後のへこみ量を測定する「相対粘土径法」が有意である。○熔解ダストの利用熔解ダスト粉体を混入したコンクリートは凝結遅延作用による初期強度の発現が遅れる傾向にあるものの、混入量(5%)で20%程度の強度改善効果が期待できる。○掘削汚泥の利用汚泥焼成骨材は吸水率が高く(20%)、骨材破砕値も約(53%)と高いので普通コンクリートには使用できない。しかし気泡軽量モルタルに用いることにより断熱性に富んだ内装材として強度改善次第で期待できる。
ステロイドホルモンとその受容体による摂食制御神経ネットワークの三次元構築の解明

摂食制御に深く関わる神経細胞が多数存在する視床下部の中において、特に外側野領域には摂食調節に関わる中心的な役割を有するorexinニューロンが存在し、様々な神経とネットワークを構成しつつ、機能発現が行われている。このorexinニューロンの発現、分布、密度等に関する性差について、多重標識蛍光免疫組織化学法を用いて、共焦点レーザー走査型顕微鏡によって検索したところ、orexinニューロンはラットの雌に比べ、雄において有意に細胞数、分布密度、線維の分布密度などが高い状態であることが明らかとなった。一方、雌のorexinニューロンの分布様式は、卵巣を摘出することによって雄のような分布・発現様式にシフトすることも明らかとなった。このことは、orexin発現には性ホルモン、特にエストロゲンが深く関わっている可能性が高いことを意味するものと解釈することが出来る。しかしながら、orexinニューロンにはエストロゲン受容体の発現が、現在のところ認められず、エストロゲンの直接的な制御を受ける何らかの他のニューロンを介して、orexinニューロンが間接的にエストロゲンによって調節される可能性が示唆されつつある。その他のニューロンの候補として、同じ視床下部に存在し、エストロゲン受容体が発現し、orexinにも投射する、NPYニューロンが考えられる。そこで、NPYニューロンのorexinニューロンへの投射について、ラットの雄、雌、卵巣摘出群の3群における分布密度を計測したところ、NPYも雌に比べ雄の方が有意に分布密度が高いことが観察され、さらに卵巣摘出群において、分布密度が雄型にシフトすることが観察された。このような現象がNPYニューロンだけの現象であるか、あるいはorexinに投射するPOMCニューロンやGALP(galanin like peptide)ニューロンでも観察されるのか、さらに詳細な観察を引き続き行っている。各種ステロイドホルモン受容体に対する抗体及び摂食関連神経細胞固有の神経ペプチドに対する抗体を用いて二重免疫組織化学染色を行い、これらの共存関係について検索し、ステロイドホルモンのネットワークへの関与を検索した。摂食関連ニューロンとして知られるNPYニューロン、POMCニューロン、CRHニューロンなどにglucocorticoid receptor (GR)が共存することが確認されたが、摂食制御に大きな関連性を持つorexinニューロンにはGRや性ホルモンであるエストロゲン受容体(ER)の発現は認められないことが明らかとなった。従って、orexinニューロンに対するステロイドホルモンの影響は、この神経細胞に投射する、NPYニューロンやPOMCニューロンのステロイドへの反応が二次的に投射する結果起こる可能性が強く示唆された。また、orexinニューロンへのNPYニューロンの投射に性差が存在する可能性が示唆されることから雌雄のラットにおける投射線維の数やシナプスの形状について電子顕微鏡を用いた検索を加えて、観察を行っている。一方、老化に伴うネットワークの変化を検索する目的で、老齢ラットにおける摂食関連神経ペプチドの発現を免疫組織化学的に検索し、その変化について検索を進めている。老化に伴い、多くの関連神経ペプチドの発現低下が観察されることから、老化時の摂食制御への神経的な関連性が強く示唆されつつある。摂食制御に深く関連する視床下部外側野領域を中心に存在するorexinニューロンの性差と性ホルモンの影響について研究を展開している。Orexinニューロンそのものには少なくともエストロゲン受容体は発現しないことを確認しているが、実際にorexinニューロンの発現、分布について蛍光免疫組織化学法を用いて、共焦点レーザ走査顕微鏡で観察すると、明らかに雄において雌よりも有意に発現し、神経線維を広く投射展開している様子が明らかとなってきた。

一方、雌ラットにおいて卵巣を摘出し、エストロゲンの分泌を遮断すると、orexinニューロンの分布、発現は雄型の方向へシフトする様子が観察され、orexinニューロンにおけるorexinの発現には性ホルモン、特にエストロゲンが強く影響している可能性が示唆されつつある。このことは何らかの他のニューロンを介して間接的にorexinニューロンにエストロゲンが関与する可能性を意味するが、その一つの候補としてorexinニューロンに投射するNPYニューロンが考えられる。NPYニューロンにはエストロゲン受容体が発現しており、またNPY発現の明らかな性差が示唆されている。現在、この両者のニューロンの相互作用を組織化学的、三次元組織構築学的に解析する一方、orexin受容体の分布と性差についても検索を開始し、受容体レベルでの反応性を検索している。一方、摂食制御に関与する神経細胞には末梢の脂肪細胞からのleptinの制御が深く関与する。このleptinの神経細胞への影響を調べる目的で、leptin受容体の視床下部領域における発現について免疫組織化学的に、また蛍光免疫染色法を用い、共焦点レーザ走査顕微鏡を用いて観察することにより、leptin受容体の分布の三次元的構築の試みを行っている。摂食制御に深く関わる神経細胞が多数存在する視床下部の中において、特に外側野領域には摂食調節に関わる中心的な役割を有するorexinニューロンが存在し、様々な神経とネットワークを構成しつつ、機能発現が行われている。このorexinニューロンの発現、分布、密度等に関する性差について、多重標識蛍光免疫組織化学法を用いて、共焦点レーザー走査型顕微鏡によって検索したところ、orexinニューロンはラットの雌に比べ、雄において有意に細胞数、分布密度、線維の分布密度などが高い状態であることが明らかとなった。一方、雌のorexinニューロンの分布様式は、卵巣を摘出することによって雄のような分布・発現様式にシフトすることも明らかとなった。このことは、orexin発現には性ホルモン、特にエストロゲンが深く関わっている可能性が高いことを意味するものと解釈することが出来る。しかしながら、orexinニューロンにはエストロゲン受容体の発現が、現在のところ認められず、エストロゲンの直接的な制御を受ける何らかの他のニューロンを介して、orexinニューロンが間接的にエストロゲンによって調節される可能性が示唆されつつある。その他のニューロンの候補として、同じ視床下部に存在し、エストロゲン受容体が発現し、orexinにも投射する、NPYニューロンが考えられる。そこで、NPYニューロンのorexinニューロンへの投射について、ラットの雄、雌、卵巣摘出群の3群における分布密度を計測したところ、NPYも雌に比べ雄の方が有意に分布密度が高いことが観察され、さらに卵巣摘出群において、分布密度が雄型にシフトすることが観察された。このような現象がNPYニューロンだけの現象であるか、あるいはorexinに投射するPOMCニューロンやGALP (galanin like peptide)
酸素フガシティーを精密に制御した、鉄珪酸塩の超高圧相平衡実験

今回は,主に珪酸塩スピネルγ-Fe_2SiO_4のウィスタイトFe_xOとスティショバイトSiO_2への分解について研究が行われた.まず最初,鉄かんらん石α-Fe_2SiO_4のみを出発物質として1470Kと1670Kで相平衡実験を行った.この場合,14GPaから19GPaの広い範囲でγ-Fe_2SiO_4+Fe_xO+SiO_2(+Fe)と言う相律に反する3(4)相共存領域が見られた.これは,加熱中に試料室の発生圧力が低下したためであると考えられる.そこで,加熱による圧力低下が小さな,大容量での高圧発生に取り組んだ.その結果,Blow-outの割合は増加したが,従来より4倍以上大きな体積に22GPa発生することに成功した.また,出発物質(α-Fe_2SiO_4と5%のFe_xO+Feの酸素フガシティー緩衝剤)には反応が十分進行するように触媒としてB_2O_3を5%混合した.そして,いままでは金属ヒーターをそのまま試料カプセルとして用いていたが,B_2O_3触媒がヒーターを侵食する可能性があるので,今回の実験では試料はFeカプセル中に入れ,FeカプセルはMgOでTaヒーターと絶縁した.この改良の結果,分解反応は良く進行することが分かった.実験はこのように当初の予定委より複雑かつ困難になったので,未だ十分な結果はでていないが,現在進行中である.この研究と平行して,緩衝剤となるFe_xOのxの決定も1070K,7GPaの条件で試みた.McCammon(1993)はこの条件ではxの最大値は0.97と報告しているが,今回の結果では0.98となった.これから,温度圧力範囲を変えて実験して行く予定である.今回は,主に珪酸塩スピネルγ-Fe_2SiO_4のウィスタイトFe_xOとスティショバイトSiO_2への分解について研究が行われた.まず最初,鉄かんらん石α-Fe_2SiO_4のみを出発物質として1470Kと1670Kで相平衡実験を行った.この場合,14GPaから19GPaの広い範囲でγ-Fe_2SiO_4+Fe_xO+SiO_2(+Fe)と言う相律に反する3(4)相共存領域が見られた.これは,加熱中に試料室の発生圧力が低下したためであると考えられる.そこで,加熱による圧力低下が小さな,大容量での高圧発生に取り組んだ.その結果,Blow-outの割合は増加したが,従来より4倍以上大きな体積に22GPa発生することに成功した.また,出発物質(α-Fe_2SiO_4と5%のFe_xO+Feの酸素フガシティー緩衝剤)には反応が十分進行するように触媒としてB_2O_3を5%混合した.そして,いままでは金属ヒーターをそのまま試料カプセルとして用いていたが,B_2O_3触媒がヒーターを侵食する可能性があるので,今回の実験では試料はFeカプセル中に入れ,FeカプセルはMgOでTaヒーターと絶縁した.この改良の結果,分解反応は良く進行することが分かった.実験はこのように当初の予定委より複雑かつ困難になったので,未だ十分な結果はでていないが,現在進行中である.この研究と平行して,緩衝剤となるFe_xOのxの決定も1070K,7GPaの条件で試みた.McCammon(1993)はこの条件ではxの最大値は0.97と報告しているが,今回の結果では0.98となった.これから,温度圧力範囲を変えて実験して行く予定である.
血管病変の成因究明を指向した血管内皮細胞の特性と機能に関する総合的研究

重点研究「血管内皮平滑筋」の本計画研究班は主として血管内皮細胞の培養実験系を駆使して血管内皮細胞の諸機能の発現機序を詳細に調べ、血管内皮細胞の機能障害と血管病変との関連を究明することを目的として研究を行い,最終的には研究成果の臨床への応用を目指す。初年度は具体的には以下の諸問題につき研究を行った。(1)血管内皮細胞はin vivoにおいては血行力学的環境下にある。その環境をin vitroでフロ-チャンバ-を用いて再現し,拍動ずり応力が血管内皮細胞の形態と機能発現に与える影響,更には血行力学的刺激が内皮細胞並びに中膜平滑筋細胞へのシグナル伝達に,与える影響について詳細に検討した。(藤原,吉田,安藤,曽我部)(2)血管内皮細胞のもつ互いに矛盾した抗血栓性/血栓性に関与する諸因子の相互関係について詳細に検討し,抗血栓療法,抗動脈硬化療法への道で探った。(沼野,丸山)(3)血小板,白血球,リンパ球など血球細胞と血管内皮細胞との相互作用について主として細胞間接着分子を中心に検討を行った。(宮坂,室田)(4)過酸化脂質や活性酸素,プロテア-ゼ等による血管内皮細胞障害のメカニズムを調べ血管攣縮や動脈硬化の成因を探った。(住吉)(5)血管新生のメカニズムを調べ,血管新生を制御する物質の探索を行い網膜症や腎症,固形ガン発育を予防する道を探った。(林,君石,市川)(6)血管内皮細胞と平滑筋細胞の相互作用について主としてエンドセリン,EDRFを中心に詳細に検討した。(三井)(7)血管内皮細胞の選択的物質透過の分子メカニズムの研究を行った。(高野)(8)血管内皮細胞の細胞膜の機能について詳細に検討した。(竹下,工藤,上田,成宮)(9)血管内皮細胞と細胞外基質の相互作用メカニズムについて詳細に検討した。(北川,松田,山本)重点研究「血管内皮平滑筋」の本計画研究班は主として血管内皮細胞の培養実験系を駆使して血管内皮細胞の諸機能の発現機序を詳細に調べ、血管内皮細胞の機能障害と血管病変との関連を究明することを目的として研究を行い,最終的には研究成果の臨床への応用を目指す。(北川,松田,山本)
揮発性麻酔薬の神経細胞のフリーラジカルに対する作用の解明

中等度までの活性酸素の増加は心筋や脳の虚血耐性をもたらす。イソフルレン(Iso)は神経細胞の虚血耐性を生じ、脊髄保護作用はantioxidantによって阻害されることが報告された。Isoが神経系の活性酸素を増加させることが推測されるが、この点は実証されていない。昨年度までは、ラット大脳皮質グリアーニューロン混合培養を用いて、ニューロンと思われる細胞について、superoxideレベルの増加を解析した。この培養系では、グリアが40%程度を占め、選択した細胞の中にグリアが混在する可能性が取り除けない。今年度は無血清培地を用いた培養法に変更し、ほとんどがニューロンとなる大脳皮質ニューロンの一次培養系を確立し、実験を行った。胎児ラット大脳皮質から細胞を単離し、neurobasal mediumに添加剤としてB-27を加えた無血清培地を用いて培養7日後に実験を行った。Dihydroethidiumを室温で45分間培養細胞に添加した。この色素はsuperoxide anionと反応してethidiumを生成し、これがDNAと結合して安定した蛍光を発する。ニューロンと考えられる細胞の蛍光輝度の変化を2分毎に測定した。Isoは50%有効濃度の1.65倍および2.3倍の濃度において、蛍光輝度を対照群より有意に増加させた。この効果はミトコンドリアATP感受性Kチャネル阻害薬と考えられる5-hydroxy decanoic acid(5-HD)によって阻害された。以上から、Isoはニューロンのsuperoxide anion生成を増加させると考えられた。5-HDによって阻害されたことから、この効果はATP感受性Kチャネルの活性化によることが考えられる。しかし、5-HDは同チャネル阻害作用のほかにミトコンドリア電子伝達系に対する作用もあり、この系の変化が活性酸素増加に関与した可能性も考えられる。平成17年度はラット大脳皮質一次培養細胞におけるイソフルレンによるフリーラジカルの変動を細胞内蛍光強度の経時的変化として測定でするため、予備的実験として非障害条件下、酸素濃度21%でフリーラジカル種と反応する蛍光プローブを培地に添加し細胞内蛍光強度を測定した。superoxide anionの測定にはdihydroethidium(Hey)を使用した。イソフルランを還流液中に投与した群では対照群よりsuperoxide anionは増加し、ミトコンドリアATP感受性KチャネルであるGlibenclamideを添加液中に添加した群ではフリーラジカルは対照群に比較して減少する傾向が見られた。Glibenclamideを還流液中に添加しておくとイソフルレンによるフリーラジカルの増加は抑制された。以上のことより、イソフルレンはフリーラジカルの増加をもたらすが、ミトコンドリアATP感受性Kチャネルがフリーラジカルの発生に関与している可能性があることがわかった。本実験を行う中で明らかになった問題点は、測定中にピントがずれやすく測定領域の蛍光輝度が経時的に変化してしまうこと、データ量が多いため、実際に測定に要する時間以上にデータ解析に時間を要することである。これらの解決のため簡易型のピント固定器を導入し、データ解析についてはソフトウェアのバージョンを上げることで省力化を図れるものと考えている。また今年度中にイソフルレンのフリーラジカル増加作用に細胞内カルシウムの変動が関与するかどうかを測定するための機器の整備を行った。平成18年度は、他のフリーラジカル種に対する測定を行い、虚血条件でのイソフルレン投与が虚血耐性を惹起できるかをフリーラジカル種の変動と関連付けて測定する予定である。さらにイソフルレンによるフリーラジカル変動のメカニズムを細胞内カルシウム濃度の変化という点から明らかにする。
政党マニフェストの時系列データ構築と政策位置の推定

本研究は、政党マニフェストを時系列に収集・テキスト化することにより、様々なコーディング方法を用いて政党の政策位置を推定することを試みるものである。政党マニフェストは、政党の政策やイデオロギー的な立ち位置を知る上で重要な資料となる。本研究は、過去の政党マニフェストのテキストをデータベース化することにより、ヒューマン・コーディングとコンピュータ・コーディングの両面から発展的な分析を行うことを目指す。本研究の目的は、政党の選挙公約、ならびに政党マニフェストを時系列に収集し、各種コーディング技法を用いながら、各政党の政策位置を推定することである。日本における選挙公約研究は、これまで選挙公報を中心に候補者単位で蓄積されてきたが、政党単位の選挙公約は体系的、かつ通時的には収集されてこなかった。本研究は、政治学において高い資料的価値を持つ政党の選挙公約を収集し、近年急速に発展を遂げているコンピュータによるコーディング技術を応用して政党の政策位置を推定する。従来ヒューマン・コーディングを中心になされてきた政党マニフェストの研究を、計量テキスト分析を用いたコンピュータ・コーディングのもとで発展させることが本研究の狙いとなる。本年度は、過去の政党マニフェストを収集し、データベースを作成した。1996年衆院選から2013年参院選までの12の国政選挙を対象とし、延べ138個の政党マニフェストを収集した。収集したマニフェストには、全てIDを付し、電子化されたPDF版と一体的にデータベース管理できるシステムを構築した。また、テキスト化できる政党マニフェストについては、テキスト版も合わせてデータベース化した。今後は、光学文字認識ソフトを使い、残りの政党マニフェストについてもテキスト化を進める予定である。本年度は、来年度以降に採用する政党位置推定のコンピュータ・コーディング技法の検討も進めた。国会議事録データベースを利用して、首相の所信表明、施政方針演説や各党党首の代表質問のテキストから、各党の位置を推定することを試み、共同研究の成果を海外の学会で報告した。また、政党システム変化を測定する際に用いられる変易性(volatility)の指標を精緻化することを試みた論稿をワーキングペーパーとして刊行した。2014年度の研究実績の概要は以下の3点にまとめられる。(1)まず、政党の政策位置推定の準備を進めるため、政党マニフェストのコーディング手法に関する専門家のベルギー・ブリュッセル自由大学のRegis Dandoy氏を訪ね、本研究課題において採用するコーディング方法の妥当性と信頼性について意見交換を行った。Dandoy氏は、政党マニフェストのコーディング手法に関する研究をもとに博士号を取得されており、本研究が採用するコーディング手法の検討を重ねる上で、有益な示唆を得た。Dandoy氏は、2014年5月に実施されたベルギー総選挙において、各政党のマニフェストを、辞書的アプローチに基づくコンピュータ・コーディングにより、政策分野ごとの傾向を数値化するプログラムを組んでいた。これらの実践的取り組みを実地で観察することができたのみならず、辞書的アプローチの可能性と限界について理解を深めることができた。(2)次に、2013年度に収集した画像ファイルとして保存されている政党マニフェストをテキストデータ化し、計量テキスト解析により政党の政策位置を推定する準備を進めた。RAを雇用し、光学式文字認識(OCR)ソフトを用いて、収集した政党マニフェストをテキストデータ化する作業を進めた。光学式文字認識(OCR)ソフトの誤変換によるバグ取りを引き続き進める必要がある。(3)以上の2点の準備作業を踏まえて、テキストデータから政党位置を推定する手法の検討を重ねた。上述の辞書的アプローチに加えて、比較マニフェストデータ(CMP)プロジェクトの政策分類に従ってヒューマン・コーディングにより分類された教師データをもとに、機会学習アプローチによるコーディングを検討している。2015年度の研究実績の概要は以下の3点にまとめられる。(1)まず、収集を終えている政党マニフェストの電子化を進めた。光学式文字認識(OCR)ソフトの誤変換が認められた際にはバグ取りを行った。(2)次に、計量テキスト分析による政党位置を推定する方法について検討を重ねた。とりわけ、ヒューマン・コーディングによる教師データをもとにしたsupervised methodによる計量テキスト分析を適用する可能性とその限界について検討した。(3)WordfishのRコードを用いて政党位置の推定を進めた。また、Wordfishによる政治アクターの位置推定の試みとして、国会議事録をもとにした分析を進め、イタリア・ミラノ大学のLuigi Curini准教授と共著論文を執筆した。論文原稿は、国際的学術誌に投稿することを準備中である。平成27年度の研究実施計画であった、ヒューマン・コーディングを用いた計量テキスト分析の可能性について十分に検討できた。また、電子化した政党マニフェストのテキストをもとに、wordfishを用いた分析を進めることができた。以上の理由により、おおむね順調に進展していると判断した。本研究の目的は、政党の選挙公約、ならびに政党マニフェストを時系列に収集し、各種コーディング技法を用いながら、各政党の政策位置を推定することであった。