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加齢および慢性炎症による細胞障害が誘導するＤアミノ酸発現の解明

生体内に存在しないと考えられてきたが、近年その様々な生理的機能が注目されているDアミノ酸、特にDアスパラギン酸の耳鼻咽喉科領域における発現について検討した。口蓋扁桃、中耳真珠腫、鼻ポリープ、声帯ポリープなど慢性炎症が関わる病変部位にDアスパラギン酸の発現を認め、発現量と年齢にも相関関係を認めた。口蓋扁桃や中耳真珠腫では病態により発現パターンが異なる物もあり、病態の発生機序にD-アスパラギン酸が関与している可能性も示唆された。昨年度は口蓋扁桃のD-アミノ酸発現を免疫染色にて解析し、加齢と共に発現量が増えることを明らかにした。またIgA腎症患者の口蓋扁桃の比較によりステロイドパルス前後でのD-アミノ酸発現に差はなくアラキドン酸カスケードの下流にあるプロスタグランジンやロイコトリエン、またストレスや紫外線などの刺激で活性化されるNF-κBとは関連が低いことが明らかとなった。本年度は口蓋扁桃のみならず、その他の耳鼻咽喉科領域の臓器・組織にも着目し真珠腫、鼻ポリープ、声帯ポリープ、顎下腺などの免疫組織化学染色を行いD-アミノ酸発現の解析を行った。真珠腫については先天性真珠腫と後天性(2次性)真珠腫における発現の差異を解析した。その結果、先天性真珠腫では真珠腫の上皮(角化層)にD-Asp免疫反応を認め、後天性真珠腫症例では間質内に強い免疫反応を認めた。コレステリン周囲にも淡い免疫反応を認めた。また角化層上皮や間質管腔内にも反応を認めた。特に高齢者症例においては主に間質に免疫反応を認め、骨(硝子化部位)にも反応が認められた。以上よりD-アミノ酸発現と宿主の老化現象との関連は低く、炎症の程度や罹患期間との関連が強いことが示唆された。また、角化層の最表層部において免疫反応が最も強くなる症例が多いということも、炎症の程度や活動期間とD-アミノ酸発現量・発現パターンが関連していることを示唆させる結果であった。鼻ポリープについては好酸球性副鼻腔炎と非好酸球性副鼻腔炎における発現の差異を解析し、その生成や臨床的特徴を解明する一助となりえるかどうかを検討中である。顎下腺についてはIgG4関連硬化性疾患に着目し、IgG4とD-アミノ酸の関連性や、繊維化の指標であるペリオスチンとD-アミノ酸との関連性を検討中である。生体内には存在しないと考えられてきた遊離型D-アミノ酸およびD-アミノ酸含有タンパク質、特に組織の機能の分化と成熟に関連し老化や加齢による活性酸素や慢性炎症などのストレスの影響により生じると考えられるD-アスパラギン酸について、耳鼻咽喉科領域の様々な疾患における発現様式とその機能的役割を主に免疫組織学的に評価し解析することを目的とする研究である。本年度は手術加療にて摘出した口蓋扁桃に対しD-Asp特異抗体による免疫組織化学染色をおこない、D-アミノ酸発現部位や発現量の解析を年齢・疾患別に行った。小児の睡眠時無呼吸症候群、慢性扁桃炎症例ではD-アミノ酸はほとんど認められず、高齢のIgA腎症症例に多く発現していることを明らかにした。また慢性扁桃炎症例はリンパ濾胞に、IgA腎症症例は濾胞周囲の間質組織や管腔内に、強い免疫反応を認める傾向があった。さらに、D-アミノ酸発現量と年齢に有意な相関関係を認めた。次にD-アミノ酸発現の機序とステロイドの影響を検討するためにIgA腎症症例をステロイドパルス前、ステロイドパルス後に分け、各々に免疫組織化学染色を施行した。その結果、ステロイドパルス前後では特にD-アミノ酸発現量、発現パターンに有意な差は認められず、アラキドン酸カスケードの下流にあるプロスタグランジンやロイコトリエン、またストレスや紫外線などの刺激で活性化されるNF-κBとは関連が低いことが示唆された。本研究では、生体内に存在しないとされており加齢や慢性炎症などのストレスの影響により生じると考えられる代表的なD-アミノ酸であるD-アスパラギン酸について、耳鼻咽喉科領域の様々な疾患や組織における発現様式を免疫組織化学染色にて評価した。口蓋扁桃においてはリンパ濾胞、間質組織及び管腔内にD-アミノ酸発現を認め、その発現量は年齢と有意な相関関係を認めた。また、ステロイドパルス前後のIgA腎症症例の口蓋扁桃を比較ではD-アミノ酸の発現パターンに差異が認められないこと、およびグルココルチコイドレセプターの発現部位とD-アミノ酸の発現部位は一致しないことを明らかにし、D-アミノ酸発現はアラキドン酸カスケードやNF-κBとの関連が低い可能性が示唆された。また、D-アミノ酸発現量とIgA腎症の重症度にも相関が低いことも明らかにし、口蓋扁桃におけるD-アミノ酸発現は炎症による刺激以外の機序が関与している可能性が示唆された。

真珠腫におけるD-アミノ酸発現パターンは年齢により異なり、若年者では主に角質層やdebris、高齢者では上皮下の間質に多く発言が認められることが明らかとなり、真珠腫におけるD-アミノ酸は加齢変化や炎症性刺激以外の機序が関与している可能性が考えられた。慢性副鼻腔炎における鼻粘膜の繊毛上皮下にもD-アミノ酸の強い発現が認められた。声帯ポリープの重層扁平上皮内にもD-アミノ酸の発現がびまん性に認められた。以上より、D-アミノ酸は耳鼻咽喉科領域の様々な疾患や組織中にも発現を認め、炎症や加齢による刺激に影響を受ける部位に発現を認めることが多いが、それ以外にも何らかの発現機序があることも示唆され、その機能的役割のさらなる解明が疾患動態の解明にも繋がる可能性が示唆された。耳鼻咽喉科各組織、臓器の免疫組織化学染色はおおむね順調に進展している。さらに症例数を重ねることが重要であるが検体数は充分数確保できる見込みであり、また染色方法も確立した。口蓋扁桃における免疫組織化学染色による解析は予定以上に進行しているが、口蓋扁桃以外の耳鼻咽喉科領域の組織については今後の課題である。各組織の免疫組織化学染色の結果をまとめ、考察を加える事により今後の課題や検討項目を明らかにする事が重要である。また、免疫組織化学以外でも、加齢やストレス等によるDNA障害の程度とD-アミノ酸との関連性を評価する指標を検索することも必要である。口蓋扁桃以外の耳鼻咽喉科領域の組織、例えば声帯ポリープ、鼻ポリープ、真珠腫などに対し免疫組織化学染色を行う。また、D-アスパラギン酸以外にもD-セリンやD-アスパラギン酸オキシダーゼについても免疫組織化学染色を行う。さらにウエスタンブロッティング法を施行しD-アミノ酸発現量を定量的に評価する旅費や謝金として割り当てた額を一切使用しなかったためその分が次年度使用額となった。積極的に学会に参加し意見交換やディスカッションをおこない自身の研究にフィードバックする。また、計画では購入する予定であった電気泳動パッケージやアポトーシス検出キットなどがまだ未購入のため次年度は物品費が増えることが予想される。免疫組織化学染色を行うための物品費、ウエスタンブロッティング法を行うための物品費、研究成果を学会にて発表するための旅費などに使用する予定である。
走査型ナノピペットプローブ顕微鏡を用いたアトリットル堆積量制御法の開発

本研究では、ナノピペット(先端に100nm程度の開口を有する毛細管)を用いて液中環境下における基板表面上への物質のナノスケール堆積加工法の開発に取り組んだ。液中環境下における微小量物質の堆積や滴下は、工業的分野のみならず、生物学的分野においても重要な技術であり、その発展が望まれている。従来、液中環境における基板表面上への物質の堆積加工は、液中での物質の拡散により、堆積加工の範囲はマイクロメートルスケール以下に微細化することが困難であった。そこで本研究では、ナノピペットをプローブとして用いる液中環境下で動作可能な走査型プローブ顕微鏡(Scanning Probe Microscope: SPM)を開発し、開発したナノピペットプローブSPMを用いて液中環境下での堆積加工を試みた。本研究のSPMは周波数変調原子間力顕微鏡(Frequency modulation Atomic ForceMicroscope: FM-AFM)の機構を採用し、ナノピペットプローブの振動検出には音叉型水晶振動子(Tuning Fork Quartz Crystal Resonator: TF-QCR)を応用したセンサを開発した。TF-QCRを用いることにより、小型でシンプルな構成でありながら、液中環境下においても高感度でプローブと試料表面との接触を検出することを可能とした。FM-AFMの機構を用いて、プローブ先端と基板表面間距離を制御し物質を堆積することによって、液中環境下においても物質を拡散無くナノスケールで堆積することを可能にした。さらに液中環境下において物質の堆積加工を行うことによって加工が安定して行われ、堆積量の安定化を実現した。これらの研究成果は論文投稿され、2編が学術論文として掲載および掲載決定されている。また、これらの研究成果は国際会議において1件、国内会議において2件、学会発表が行われた。
海難非常時の保命用電源を主目標とした「海水電池」の開発の可能性に関する基礎的研究

1.初年度に当補助金により購入したハイブリッドデ-タ-レコ-ダにより直列接続とした場合や負荷抵抗を接続した場合の測定へと順調に研究を進めていったが、得られる電圧がやや高過ぎる事、直列接続での電圧の上昇の仕方に疑問がある事、更に負荷抵抗を接続した場合の電圧の下り方が(当初は非常に喜んだものの)僅か過ぎる事と言った幾つかの疑念を感じた為、夏になって他の測定機による測定値と比較したところかなりの差があることが判明した。この為、まずその原因を解明すべくメ-カ-に問い合わせたり、技術者に来てもらったりしながら検討を重ねたが原因は判明せずいたずらに時が過ぎ、最終的に判明した事は測定地点が10KWのラジオ送信塔から数百メ-トルしか離れていなかった為に測定回路に誘導が有った為であった様で、11月に絶縁トランスを挿入すると共に測定点を約7Km程遠くする事によりようやく解決した。2.再測定の結果、まずアルミニウムを陰極とした場合、銅に於る約0.35〔V〕から白金に於る約0.67〔V〕迄の電圧を得た。この程度では実用化の可能性は成否相半ばするものと考えられたが、マグネシュウムを陰極とした場合には、銅に於る約1.31〔V〕から白金に於る約1.54〔V〕までの充分に実用化が期待できる電圧が得られた。3.次に、アルミニュ-ムを陰極として銅とステンレス夫々を陽極とする装置を苫小牧に運んで低海水温下(5°C程度)で測定した場合にも海水電池の内部抵抗はいずれも1〔Ω/m^2〕以下と期待通りかなり低く、マグネシュウムを陰極とした場合には250〔W/陽極100m^2〕程度の電力は獲得出来るものと考えられる、かなり期待の持てる結果を得た。4.酷く時間を空費した為研究が進まず本格的な研究報告書を纏めるに至っていないが平成2年度の予算が下り次第自己の研究費を投入して火急的速やかに本研究を完成させ、研究報告書を発行する予定である。1.・・Mg、Al、・・、Cr、Fe、・・、Ni、・・、Cu、Ag、Pt、Auと言うイオン化系列を考え、且つ、薄板状のマグネシュームが入手出来なかった事とアルミニュームの方が断然身近な材料であることから、アルミニュームを陰極材料とし、銅、銀、白金、金の夫々を陽極材料として、海水電池を形成せしめ、その夫々について本年度当補助金により購入したハイブリッドデーターレコーダーを用いて数時間に亘って起電力を測定した結果、安定値として、銅←→アルミニュームに於いて約0.42〔V〕、銀←→アルミニュームに於いて約0.83〔V〕、金及び白金←→アルミニュームに於いて約1.02〔V〕になる電圧を得た。これは、白金についてはコスト的に実用化の可能性は期待できないものの、銀、金については安価な材料へのメッキにより充分に実用化が期待できる値であると考えられる。2.鉄を主材としたクロムやニッケルとの合金であるステンレス鋼については、各主成分のイオン化系列上の位置から言ってもアルミニュームを陰極材料とする限りに於いては所詮さしたる期待は出来ないものと考えていた為、当初は捨置いていたのであるが(実際にも個々の材料については0.10.2〔V〕程度しか発生しない)、試みにSUS304(18ー8ステンレス)について測定してみたところ予想に反して約0.95〔V〕と言う、銀の場合を遙かに上回る高い起電力を発生し我々を驚かせた。これは、充分に実用化が期待できる値であると共に、コスト的にも非常に有利なものである事と相俟って、一転して現在では本研究の実用化に向かって非常に大きな期待を掛けるものとなっている。3.次年度はこのステンレスとアルミニュームの組合わせについて実際に負荷を掛けた状態で、獲得される電力量を測定すると共に、装置を北海道に運んで低海水温の下での測定も行うことにしている。

3.次に、アルミニュ-ムを陰極として銅とステンレス夫々を陽極とする装置を苫小牧に運んで低海水温下(5°C程度)で測定した場合にも海水電池の内部抵抗はいずれも1〔Ω/m^2〕以下と期待通りかなり低く、マグネシュウムを陰極とした場合には250〔W/陽極100m^2〕程度の電力は獲得出来るものと考えられる、かなり期待の持てる結果を得た。4.酷く時間を空費した為研究が進まず本格的な研究報告書を纏めるに至っていないが平成2年度の予算が下り次第自己の研究費を投入して火急的速やかに本研究を完成させ、研究報告書を発行する予定である。
松島湾および北上川下流域における完新世の海水準変動

1.波食窪か雲形浸食か.当地域では波食窪等についていたマガキ穿孔貝の穴は冬期の隣脱現象で削剥され,海成の証拠と同時に時代を示す資料を失なう.鳴瀬町潜ケ浦は戦後干拓された所で典型的な雲形浸食を示す波食窪でありマガキがまだ付着している.このことから雲形浸食の形をしていても,それが点々と100m以上つづけば,古汀線で考えられる.雲形浸食では波食状地形は10数mもつづかないから.2.海生貝を産出する貝塚の調査から次の3点が明らかになった.(1)松島湾周辺を除き,早期末貝塚のみが海生貝からなり,時代を件に汽水種にかわる.(2)アカニシを除き内湾性潮間帯種を主とする.ハイガイは早期から産出する. (3)前期から晩期に海生種が産出しなくなる理由として,土砂の生産が海の侵入を止めたといわれているが,干潟の広がる環境に洪水がしばしば流入し河道を変えることで自然堤防が形成され潟や沼ができ海棲種が生息不能になったとも考えられる.3.相対的海水準変化曲線.柴田町槻木周辺の貝塚の貝は早期木海生種から汽水種に変化している.この地域内海浸は早期末に限られている.貝塚近くにお金の波食窪等点々と3Kmにわたって波生窪がつづいている.このことは早期末の海水準が6mであったことを示している.宮戸島里浜の沖積層の-1.5mの深さから晩期に相当する泥炭層が発見されている.このことは晩期の海水準が-1.5mより低かったことを示している.以上のことから相対的海水準変化曲線を得た.4.早期末・晩期の古地理図.貝塚の分布とその高さ等から早期末と晩期の2枚の古地理図を得た.5.海抜2-3mの低地の研究ではそれより高い海水準は不明である.旧波食窪は縄文高水準を支持している.1.波食窪か雲形浸食か.当地域では波食窪等についていたマガキ穿孔貝の穴は冬期の隣脱現象で削剥され,海成の証拠と同時に時代を示す資料を失なう.鳴瀬町潜ケ浦は戦後干拓された所で典型的な雲形浸食を示す波食窪でありマガキがまだ付着している.このことから雲形浸食の形をしていても,それが点々と100m以上つづけば,古汀線で考えられる.雲形浸食では波食状地形は10数mもつづかないから.2.海生貝を産出する貝塚の調査から次の3点が明らかになった.(1)松島湾周辺を除き,早期末貝塚のみが海生貝からなり,時代を件に汽水種にかわる.(2)アカニシを除き内湾性潮間帯種を主とする.ハイガイは早期から産出する. (3)前期から晩期に海生種が産出しなくなる理由として,土砂の生産が海の侵入を止めたといわれているが,干潟の広がる環境に洪水がしばしば流入し河道を変えることで自然堤防が形成され潟や沼ができ海棲種が生息不能になったとも考えられる.3.相対的海水準変化曲線.柴田町槻木周辺の貝塚の貝は早期木海生種から汽水種に変化している.この地域内海浸は早期末に限られている.貝塚近くにお金の波食窪等点々と3Kmにわたって波生窪がつづいている.このことは早期末の海水準が6mであったことを示している.宮戸島里浜の沖積層の-1.5mの深さから晩期に相当する泥炭層が発見されている.このことは晩期の海水準が-1.5mより低かったことを示している.以上のことから相対的海水準変化曲線を得た.4.早期末・晩期の古地理図.貝塚の分布とその高さ等から早期末と晩期の2枚の古地理図を得た.5.海抜2-3mの低地の研究ではそれより高い海水準は不明である.旧波食窪は縄文高水準を支持している.北上川そいに海進がどこまで及んだか、その後の変化を知るため、波食窪を主とする旧海岸地形、貝塚の分布とその性格を主として調査した。1.波食窪とその類似地形が広く分布している為、次の2点が問題になった。(1)一つは日本海地域や、その南では波食窪に二枚貝やフジツボ、穿孔貝の穴が保存されるが、当地域では冬季の鱗脱でそれらは失われ、波食窪類似地形と区別できないことである、三陸海岸を2度ほど調査したが、この地域は古期岩類で固いためか、波食窪の発達は悪く、穿孔貝の跡も発見できなかった。(2)この地域の第三系凝灰岩には波食窪に似た、雲形浸食(宇留野)がある。例えば、山形盆地の山寺の同質岩にも波食窪類似の地形がある。海抜mの高さに、1万年前後の海岸を示す波食窪が分布しようもない。雪形浸食と波食窪を区別することは困難である。宮戸島北端の波食窪はこの地域での唯一の波食窪にカキの付着している所である。ここは雲形浸食の特徴をそなえているので、カキが付着してなければ波食窪といいきれない。そこで柴田町槻木でみられるように波食窪状地形が等高に並ぶ所は海食とした。

2.考古学の文献では珍品を列擧するため、汽水の貝塚に僅か海棲の貝が産出しても、それらを汽水の貝と等価で記述するので、必ず原典か貝塚を一々調査しないと環境をきめれない。3.日本では一般に縄文前期が海進の全盛期であるが、ここでは早期が全盛期とされているが、この地域の唯一の早期の【^(14)C】年代は他地域の前期の値を示している。早期と前期の【^(14)C】年代の測定を依頼している。4.1と2が解決されるので調査の季節までに23枚の古地理図を描くことが可能となる。
モノサイト走化性活性化因子MCP-1による破骨細胞形成制御機構の解析

私は既に、モノサイト特異的走化性活性化因子として同定されたMCP-1が、骨芽細胞より産生され、破骨細胞前駆細胞の骨局所への集積を促進させる可能性を示唆する知見を得ていた。またごく最近、同因子がヒトモノサイトにおいてもMac-1の発現を促進し、IL-1、IL-6の分泌を増加させる等、走化性活性以外の新たな機能を有する事が明かとなった。破骨細胞前駆細胞がmocyte lineage由来とする報告もあり、破骨細胞の形成において同因子が何らかの影響を与える可能性が考えられた。そこで、spleen由来単核細胞とstoromal細胞とのco-culture系を用い、TRAP陽性多核の破骨細胞様細胞の形成におけるMCP-1の作用を検討したところ、MCP-1が破骨細胞様細胞の形成を有意に促進する知見を得た。即ち、6-8周令のBALB/Cマウスの脾細胞から密度勾配遠心法により単球/リンパ球画分を採取し、この細胞群とmouse storomal細胞であるPA-6とをco-cultureし、TRAP陽性で多核の破骨細胞様細胞を形成させた。さらに、この培養系にリコンビナントMCP-1を添加し、同細胞の形成に与える影響を検討した。その結果、リコンビナントMCP-1は1,25(OH)_2D_3破骨細胞様細胞の形成促進作用を相乗的に促進し、この作用は濃度依存的であった。また、同因子単独添加においては、破骨細胞様細胞の形成に影響は認められなかった。さらに、この促進作用は坑MCP-1抗体の添加により完全に抑制された。以上の結果は、モノサイト特異的走化性活性化因子として同定されたMCP-1が、骨形態調節機構においても機能的役割を演じている可能性を示唆するものであり、同因子の新たな機能を明らかにするものと考えられる。
サブナノ白金クラスターを生み出す膨張化炭素繊維－燃料電池用電極と抗癌剤への展開

本研究では、グラファイトやカーボンナノチューブなどの炭素材料よりも表面に含酸素官能基を多く含む膨張化炭素繊維ExCFsを利用してサブナノサイズの金属クラスターを生成可能なデンドロンを固定化し、そこにPtイオンを配位させた後、還元処理を施すことでサブナノ白金クラスターを炭素繊維上に固定する方法の確立を行った。具体的には、金属イオンの配位サイトに富むが熱分解しやすいPAMAMと、剛直な芳香環により耐熱性が高いDPAをExCFs上に固定化した。さらにその耐熱性調査とクラスターの粒子径評価、電極評価を行った。芳香環デンドリマーDPAの系で単分散かつサブナノサイズのPtクラスターが多く確認出来た。本研究の初年度の大目的は、ナノ粒子よりも小さなサブナノ白金クラスターを生み出すデンドロンの炭素繊維上への固定化技術の手法を開発することとした。効果的にサブナノ径の白金を炭素繊維上に固定化するために、白金イオンを窒素系デンドロンに錯化固定化し、続けてそれを還元処理することで[(サブナノPt@デンドロン)@膨張化炭素]を調整する方法を採用した。このためには、まず、膨張化炭素繊維上のカルボン酸基の数を増やす必要があった。炭素繊維上の官能基を増やすために多様な酸化還元処理を試みた結果、80°C以下の濃硫酸と過酸化水素による酸化処理が最も効果的であることを見出した。また、炭素繊維を有機反応に用いる場合、溶媒選定が重要になる。炭素素材反応場としての芳香族性イオン液体について検討した。官能基を増やした膨張化炭素繊維上に配位性デンドロンを固定化は、炭素繊維上のカルボン酸基を経由してアミノ基を導入後、アクリル酸メチルとのマイケル付加反応に次ぐそのメチルエステル基の加水分解を行い、生成したカルボン酸基にエチレンジアミンを反応させる操作を1世代として、これを繰り返して第4世代型の金属配位性デンドロンを炭素繊維上に形成させた。原料の酸化処理後の膨張化炭素繊維の水分散液は、酸性官能基のためにpH4.3程度の酸性を示す。一方、第4世代型デンドロンを目指して調整した炭素繊維の水分散液は、多数のアミノ基により、pH 8程度の弱塩基性を示すことを確認した。デンドロン修飾炭素繊維にPt(II)イオンを添加後、NaBH4などの還元剤で白金金属の固定化を試みた。この還元処理後のEDX, XPSなどのスペクトル分析から白金粒子の形成を確認した。しかし、TEM観察からはサブナノ粒子よりも、ナノサイズの粒子が多く炭素繊維上に存在していることを確認した。現在、燃料電池の酸素電極としての評価を開始したところである。伝導性のナノ炭素繊維上に1nm以下のサブナノ金属クラスターを安定に担持するために、配位性デンドロンを共有結合で炭素繊維に結合させた。炭素繊維として官能基を意図的に増やした膨張化炭素繊維を用い、デンドロンは窒素配位性の第四世代PAMAM(発散法)と第二世代DPA(収束法)の二種を選択した。炭素繊維上の有機化合物としてのデンドロンの存在は、TG測定から加熱に伴う質量減少として未修飾炭素繊維のそれと比較することから明確な差として観察した。このDendron@炭素繊維の水懸濁液に白金イオン(IV)の添加により錯化させ、NaBH4で還元処理を行うことで白金金属を炭素上に固定化した。また、同時に、炭素繊維を懸濁させる媒体の開発としてに親和性が高いとされるイオン液体の開発を行った。(Pt@Dendron)@炭素繊維の白金4f軌道の結合エネルギーをXPS分析から評価した。DPAとPAMAMの双方のデンドロンを固定化した炭素繊維は、共に、Pt(II)の473, 76 eVはなく、Pt(0)の71, 74eVの結合エネルギーのピークを与えた。白金金属に還元されていることを確認した。さらに、膨張化炭素繊維上の収束法DPAデンドロンに固定化されている白金粒子のサイズをTEM観察から評価したところ、第二世代DPA修飾炭素繊維上に1 nm付近のクラスターが50%以上存在していて、それが単分散に近い状態であった。これに対して発散法で導入した第四世代PAMAMを持つ炭素繊維上の白金粒子のサイズは、1nm以下から2.3nmまで幅広く多分散状態であった。収束法か発散法による差なのか、デンドロン骨格の構造の差に基づくものなのか、今後の検討が必要である。デンドロンを一切修飾していない炭素繊維上で得た白金粒子は自己会合し、40nm近くの巨大な白金粒子の島となっていた。配位性デンドロンの修飾効果を明確にした。当初、研究期間内で明らかにすることとして次の三点を計画していた。

(1)膨張化炭素繊維ExCFsへのアミン系PAMAMデンドロン配位子の固定化と、サブナノ白金クラスター生成条件の最適化ー世代数、還元条件とクラスターサイズの関係を明確にする。(2)「デンドロン@炭素繊維」電極を用いたサブナノ白金クラスターを何度も作成できるシステムのための電気還元条件、電極作成条件、白金クラスター交換配位子選定を確立する。(3)燃料電池の電極触媒の高性能化ー酸素濃縮と耐水性のフッ素化デンドロンの最適化。初年度の取組で、1.膨張化炭素繊維上の官能基を増やす化学処理方法を確立した、2.その官能基を経由して窒素配位性デンドロンを固定化する方法を定めた、3.膨張化炭素繊維上のデンドロンに白金粒子を固定化できた。但し、サブナノサイズよりも大きなナノ粒子の形成が多く認められた。現在、燃料電池の酸素燃焼電極としての評価を開始したところである。これらのことを判断すると、おおむね計画通りに展開していると判断している。有機化学膨張化炭素繊維上のデンドロンに白金粒子を固定化できたが、サブナノサイズよりも大きなナノ粒子の形成が多く認められた。本研究の目的は、ナノ粒子の白金ではなくサブナノ粒子の白金を固定化した膨張化炭素繊維の燃料電池電極としての評価である。このためデンドロンに錯化した白金イオンの還元条件を詳細に探索したり、デンドロンの世代数の影響を検討することを早急に実施する。その上で、デンドロン未修飾の炭素繊維上への白金固定化実験などもコントロール実験用として調整する。燃料電池の酸素還元触媒では、ナノサイズ以上の大きさの二元系触媒が良く使用されている。本研究では、白金粒子の大きさを量子サイズ効果まで小さくし、特異粒子Hot Particleなどによる予想外の活性を調査する取り組みである。また可能であれば、デンドロンの最終世代の端にフッ化炭素鎖を多点導入し、燃料電池電極における酸素濃縮効果と撥水問題を同時に解決することへも展開したい。具体的には、フッ化炭素鎖を、デンドロンに多点導入した[白金@デンドロン]@炭素繊維を用いる。その触媒をNafion膜で固定化し、電極として、2の酸素濃縮効果と撥水問題を同時に解決する視点から評価する。1の視点で、窒素中でサイクリックボルタンメトリーから白金の有効表面積を、酸素還元反応の活性評価は回転電極法から、電位パルス試験から耐久性試験を評価する。平成26年度は、備品として凍結乾燥装置70万円と合成用試薬など85万円、人件費として72万円、海外旅費40万円を計上していた。初年度に研究を開始したところ、新たに購入する測定装置を活用する頻度よりも、校費からも転用できる有機合成の活動が中心であった。2年目には、サブナノ白金クラスターを固定化した炭素繊維の電極材料としての評価を使用するために蛍光装置の光学セルや顕微鏡の使用などの当初予定することが出来なかった経費が必要になると判断した。このため、初年度の経費を次年度に回するように、購入を計画していた凍結乾燥装置については年度途中で他研究者から借用したり、海外出張は次年度の5月(フランス)に実施することにした。初年度で不足分は、研究室の校費を使用している。炭素素材の購入費が当初よりも高額になることが判り、原料となる炭素素材の購入費に活用する。
上皿天秤を用いたCasimin効果の精密検証

真空のエネルギーを直接観測する手段として上皿天秤を用いたカシミール効果の精密検証を行うため、測定装置の製作を進め予備的な実験を行った。第1により精度の良い金属平行極板の製作のための技術開発を進めた。前年度に石英基板の上に金蒸着をほどこすことによって金属極板の製作を行ったが、表面を詳細に検査すると高さ数ミクロンのクラスタが存在することがわかった。このクラスタは、(1)金蒸着を行う前に石英基板上に異物が残っていた,(2)金蒸着の際に金のクラスタが石英基板上に付着した,等の理由が考えられ対策の検討が行われた。まず石英板の洗浄法についての検討が行われ超伝導加速空洞の洗浄に用いられるMSR法を用いた試験を行い、シリコン基板に対しては有効であることが確認された。また金蒸着の際にクアスタが付着しないような条件についても検討が進められた。さらに金蒸着を行わずに金属基板を製作する方法としてスパッタリングやメッキ法などの方法をとることが考えられた。第2に2枚の平行極板間の絶対距離を測定する方法として白色光の干渉を用いる方法を試験した。2枚の極板間に白色光を入射し、透過して出てくる光を分光して干渉を測定することによって数10ミクロンの距離を50+1メートル程度の精度で測定できることを確認した。この絶対距離の測定法と前年度に製作したレーザ測距による変位測定法を組み合わせて実験に十分な距離測定が可能であることを得た。精密上皿天秤を利用した実験装置の設計・製作と、未知媒介粒子に関する考察を行った。本実験では2枚の平面金属極板を平行に保ちながら極板間距離をマイクロメートル程度にまで近付けその間に働く力を極板間距離の関数として測定する。そのため完壁な金属平面を得る必要があり光学用鏡面基板に金蒸着したものを用いることとした。鏡面基板は石英を研磨したもので平面精度60nm以下、粗さ1nm以下の満足できる平面が得られた。一方金蒸着に関してはテストの結果、蒸着面に直径数nmの金クラスタが付着してしまうことがわかった。これでは2枚の極板を十分に近付けることができない。そこで金蒸着を超高真空下で行い金クラスタの付着を防ぐことを検討し試験している。又2枚の極板を平行に保ち、かつ間隔を知るためには、極板間距離を正確に測定する必要がある。相対的な変位はレーザー干渉を利用した変位計で10nmまで測定できる。干渉を利用しているので再現性・直線性はレーザーの波長安定性だけで決まり10^<-6>の精度が得られる。しかし距離の絶対値を知るためには零点を知る必要がある。一方、石英板上の金蒸着面は衝撃に極めて弱い。そこで石英板に段差を作り金蒸着面を保護しつつ2枚の極板を密着させる方法を考え出した。極板を動かす装置は粗動にマイクロメータを微動にピエゾ素子を用いたものを設計・製作している。現在測定系の振動が最大の問題と考えられるが測定系全体を防振台の上に設置することで解決を図る。カシミール効果の理論予言と測定結果のずれから到達距離がマイクロメートル程度の力を探す試みに関してその感度を見積もった。その結果力を媒介する粒子の質量が10^<-3>1evの領域で既存の実験の10^3程度の感度が得られることがわかった。平成4年度に制作した実験装置の改良と、データ収集プログラムの開発及び測定系の振動の評価を行った。本実験では2枚の平面金属板をマイクロメートル程度まで近づけること及び精密上皿天秤を用いることから、測定系の振動と空気の対流を極力減らさなければならない。平成4年度に試作した装置では粗動用の手動マイクロメータを動かす度に装置全体が振動し空気対流も起きるので、安定かつ系統的な測定が困難であった。

そこで今年度は粗動に移動レンジ15mm、分解能250nmの電動アクチュエータを使うように改良した。これにより測定系全体をコンピュータで遠隔操作できるようになり、不必要な振動・空気対流が防げるようになるとともに系統的な測定が可能となった。さらに振動を抑制するために装置全体を空気バネ式の卓上防振台の上に設置した。またクリーンルームと2重の風防を設置し空気対流と埃の影響を除去できるようにした。この測定系の振動を今年度開発したデータ収集プログラムを使って測定した。十分に離した2枚の金属極板間距離の時間変動を測定した結果、振動は50nm以下に抑えられることがわかった。また金属板間の絶対距離については金蒸着面の脇にシリコンでコートしたアルミニウムを金より厚く蒸着し、そのアルミニウムの部分を接触させることで零点を出すようにした。さらに金とアルミニウムの蒸着面の高さを正確にマッピングしその情報を反映することで、絶対距離の精度をより上げる方法を考案した。現在このマッピングの結果を待って測定を開始する予定である。
ドーパミン神経系の疼痛制御機構による口腔領域の神経障害性疼痛の緩和

前年度と同様に、ラットの眼窩下神経を結紮して、神経障害性疼痛モデルを作製した(CCI群)。神経結紮を除く同様の手術を行ったラットを対照群とした(sham群)。神経結紮の14日後に、CCI群にドーパミン(DA)D2受容体拮抗薬haloperidol(CCI+haloperidol)、またはDAD1受容体拮抗薬SCH23390(CCI+SCH23390)、または生理食塩水(CCI+saline)を腹腔内投与した。その20分後に15gのフォンフライ毛で1Hz、5分間機械刺激を与え、2時間後に灌流固定した。脳幹の凍結切片を作製し、c-Fosに対する免疫染色を行い、三叉神経脊髄路核尾側亜核(Vc)に発現するc-Fos免疫陽性細胞数を顕微鏡下で計測した。CCI+haloperidolではCCI+SCH23390とCCI+salineに対して、Vcにおけるc-Fos免疫陽性細胞数が有意に増加した。ラットの眼窩下神経を結紮して、神経障害性疼痛のモデル動物を作製した。眼窩下神経の結紮手術を行う前と行った後に、フォンフライ毛を用いて、ラットの鼻毛部に機械刺激を与え、逃避反応を起こす最小の刺激の強さ(閾値)を測定した。神経結紮前と比較して、神経結紮後に閾値が有意に低下している個体を神経障害性疼痛の一つであるアロディニアを発症していると考え、神経障害性疼痛のモデルラットとして以降の実験に使用した(CCI群)。神経結紮の14日後に、CCI群にドーパミンD2受容体刺激薬quinpiroleあるいは生理食塩水を腹腔内投与(CCI+quin、CCI+saline)し、また神経結紮を除いて同様の手術を行った対照群に生理食塩水を腹腔内投与(sham+saline)し、腹腔内投与を行った20分後に、15gのフォンフライ毛で1Hz、5分間鼻毛部に刺激を与えた。その2時間後に灌流固定した。脳幹の凍結切片を作製し、c-Fosに対する免疫染色を行い、三叉神経脊髄路核尾側亜核(Vc)に発現するc-Fos陽性細胞数を計測した。CCI+quinでは、Vcに発現するc-Fos陽性細胞数が、CCI+salineに対して有意に低下した。CCI+quinとsham+salineではc-Fos陽性細胞数に有意差を認めなかった。また、ドーパミンD1受容体刺激薬SKF38393を使用して同様に実験を行ったが、Vcに発現するc-Fos陽性細胞数に有意な変化は認められなかった。これらの結果から、眼窩下神経を結紮して作製した神経障害性疼痛モデルラットに対して、ドーパミンD2受容体刺激薬を投与すると、機械刺激に対するアロディニアが抑制されることが示唆される。研究代表者は以前に、ラットの眼窩下神経を結紮して神経障害性疼痛のモデル動物を作製した経験があった。また、ラットを灌流固定した後、脳幹の凍結切片を作製し、c-Fosに対する免疫染色を行ったが、これらの実験手技にも研究代表者は習熟していた。しかし、研究計画調書に記載した実験方法を一部変更して実験を実施した。研究代表者所属部局の動物実験委員会に実験計画書を提出した際に、一部実験方法についての再考を求められたことがその理由である。当初の実験計画としては、ラットにペントバルビタールで全身麻酔を行い、脳定位固定装置に固定し、線条体に試薬を投与し、機械刺激を与えることで、その試薬が痛覚に及ぼす影響を調べようとした。しかし、動物実験委員会から全身麻酔に使用する薬剤について再考を求められた。そのため、全身麻酔薬を三種混合麻酔薬(ミダゾラム、メデトミジン、ブトルファノール)に変更した。この中には、鎮痛作用を持つブトルファノールが含まれているため、痛覚に影響を与える可能性がある。そのため、当初計画していた条件での実施が困難と考え、薬剤の投与経路を脳内投与から腹腔内投与に変更した。実験方法に一部変更があったが、得られた結果は当初の研究目的にかなったものであるため、おおむね順調に進行したと考える。

眼窩下神経を結紮して作製した神経障害性疼痛モデルラットに、ドーパミンD1、D2受容体拮抗薬を投与して、15gのフォンフライ毛で鼻毛部に1Hz、5分間の刺激を与える。灌流固定したのち、脳幹の凍結切片を作製し、c-Fosに対する免疫染色を行い、三叉神経脊髄路核尾側亜核に発現するc-Fos陽性細胞数を計測する。正常ラットの結果と比較し、ドーパミン神経系の活動と神経障害性疼痛との関係を検討する。研究計画調書には、ラットを1年間に200匹程度使用する計画であると記載したが、研究の進行状況により、使用したラットの数が少なくなったことが理由として挙げられる。また、使用したラットの数が少なかった事に関連して、使用する試薬等の量も当初計画していたものより少なくなったことも理由として挙げられる。次年度もラットや試薬の購入に直接経費を充てる予定である。また学会参加に伴う旅費等にも充てる予定である。
DNAアプタマーを用いた分析法の開発と臨床分析への適用

本研究では自閉症スペクトラム関連因子として近年注目されているOxytocin (OXT)のアプタマーによる高感度測定法の確立と臨床応用について検討した。SELEX法によりOXT反応性アプタマー候補が得られたため、それらの塩基配列を解析した結果、相同性が高い塩基配列が確認できたことからアプタマーが得られたと考えられた。次に、本研究で使用する予定の臨床検体(ヒト血漿)中のOXTをイムノアッセイにより測定した結果、日本人血中OXTを測定した結果、成人男性では約30 pg/mLであり成人女性では約25 pg/mLであることが判明した。Goldらによって提唱されたSELEX法により、オキシトシンに反応性を示すアプタマーの創製を検討した。SELEX法で用いるライブラリーのDNA長や各種条件などを検討した結果、FluMg-SELEX法によりオキシトシンと反応性を示すアプタマーの候補が得られた。しかし、それらの候補には、多くの塩基配列が混在すると推測されるため、アプタマーとしてオキシトシン測定法に適用することはできない。そこで、得られたアプタマー候補の解読を行った。塩基配列の決定として、はじめにTAクローニング法を用いて約100のクローンからプラスミドを調製した。続いて、得られたプラスミドに含まれる塩基配列を決定し、それらについてホモロジー解析を行った。その結果、数多くの塩基配列が得られたものの、同一の塩基配列も多数存在した。この結果は、オキシトシンに反応性を示すDNA塩基配列(アプタマー)がSELEX法により集約されてきたことを示唆する。今後、オキシトシンの測定に適するDNA塩基配列(アプタマー)の選別やアプタマーとオキシトシンとの親和性評価法に関して検討することが必要であり、準備を進めている。また、アプタマーの選別には、一般的に合成オリゴヌクレオチドが用いられているが、非常に高価であることから安価かつ簡便な評価法の確立も検討する予定である(佐野佳弘)。研究計画にあるように、オキシトシン反応性アプタマーを臨床研究に応用する予定である。そこで、ヒト血漿中オキシトシン値に関しての調査をイムノアッセイにより行っている(佐野佳弘・荒川秀俊)。その結果、SELEX法のひとつであるFluMg-SELEX法によりオキシトシンと反応性を示すアプタマーの候補が得られたため、その解読を行った。アプタマーの塩基配列は、同一の塩基配列や高い相同性が確認されたことからオキシトシンに反応性を示すDNA塩基配列(アプタマー)がSELEX法により集約されてきたことが明らかとなった。そこで今後、アプタマーとオキシトシンとの親和性評価法の検討が必要であり検討を進めている。また、研究計画に示したヒト血漿中オキシトシン値に関しての調査は、イムノアッセイにより検討した結果、有用な結果が得られた。(佐野佳弘・荒川秀俊)。ヒト血漿中オキシトシン値に関しての調査に関しては、計画通りに進行している。オキシトシン反応性アプタマーに関しては、計画の遅れはあるものの順調に進展していると考える。アプタマー創製法SELEX(systematic evolution of ligand by exponential enrichment)法を用いて、オキシトシン反応性アプタマーについて検討した。その結果、オキシトシンと反応性を示すアプタマーの候補が得られた。SELEX法で得られたそれらアプタマー候補DNAをTA法によりクローニングし、約400の塩基配列を解析した結果、同一の塩基配列や高い相同性が多く認められた。これらの結果より、SELEX法が期待通りの成果が得られたと考える。そこでこれらのオキシトシンに反応性を示すと推測されるDNA塩基配列(アプタマー)のオキシトシンに対する親和性評価としてドットブロット解析などのBinding assay検討した結果、オキシトシンと反応性が認められたもののその親和性は低いため、まだ検討していないアプタマー候補DNA配列を基に現在も研究を進めている。アプタマーを用いたオキシトシンの臨床研究を検討するために日本人の血中オキシトシン値の調査を本研究では計画している。近年、オキシトシンの血中濃度の報告が精神科領域を中心に報告されているが日本国外の治験が多い。そこで、我々が臨床研究で用いる予定となる日本人約200人のヒト血漿中オキシトシン値に関してイムノアッセイにより測定した。その結果、日本人の血中に含まれるオキシトシン値が明らかとなった。以上より、現在臨床研究に適応できるアプタマーの探索を進行しており、アプタマーの選別ができ次第、測定法の開発を検討する予定である。また、アプタマーによるオキシトシン測定法構築後、臨床検体の測定を行い、今回決定したイムノアッセイによる血中オキシトシン値との相関を確認する予定である。SELEX法によるオキシトシン反応性アプタマーの創製を検討し、そのアプタマーの候補となるDNA塩基配列をTAクローニングにより決定した。

その結果、多くの候補DNA塩基配列を得た。計画した研究計画通りに進展していると考える。現在得られているオキシトシンアプタマー候補のスクリーニングを行い、臨床検体への応用を検討する。また、計画に示すマイクロチップ電気泳動による定量法、表面プラズモン共鳴(SPR)を用いた測定法(佐野佳弘)、さらにヒト血漿中オキシトシンの測定をOXT反応性アプタマーにより構築する予定である(佐野佳弘・荒川秀俊)。医歯薬学得られているオキシトシン反応性アプタマー候補のDNA塩基配列の中からオキシトシン測定に適するものを選別する。選別されたオキシトシン反応性アプタマーにより測定法の構築を検討する。計画しているマイクロチップ電気泳動による定量法、表面プラズモン共鳴(SPR)を用いた測定法(佐野佳弘)、さらにOXT反応性アプタマーによる臨床応用のためにヒト血漿中オキシトシン値についても調査(佐野佳弘・荒川秀俊)する予定である。研究計画に示したヒト血漿中オキシトシン測定に関連する研究の方が早く進行したため当初計画していたオリゴDNA(アプタマー候補の塩基配列)の発注を次年度に繰り越した。SELEX法によるオキシトシン反応性アプタマーの創製を検討し、そのアプタマーの候補となるDNA塩基配列をTAクローニングにより決定し多くの候補塩基配列を得た。しかし、以下の理由より計画していた予算通りに使用できなかった。1.計画していたオリゴDNA(アプタマー候補の塩基配列)の発注を次年度に繰り越した。2. SELEX法で使用したライブラリーの合成は高額になる予定であったが、ドイツの共同研究者のライブラリーを使用した。マイクロチップ電気泳動に用いるマイクロチップや表面プラズモン共鳴(SPR)に用いるチップなどの消耗品や合成オリゴDNA(アプタマー候補の塩基配列)等、オキシトシンやそのアプタマー関連の研究に研究費予算を使用する予定である。計画していたオリゴDNA(アプタマー候補の塩基配列)の発注を行う。マイクロチップ電気泳動や表面プラズモン共鳴(SPR)を用いた測定法の消耗品費や遺伝子工学関連の研究費、オキシトシン測定法についての研究費に使用する予定である。
中国知識人の挫折と信念ーー蕭乾文学と思想の軌跡をめぐって

毛沢東時代に蕭乾の経験した土地改革、政治運動などを踏まえ、建国後の思想改造運動、文学事象をめぐって、六項目に亘って科研費報告書としてまとめた。〈一〉土地改革の讃歌、〈二〉思想改造の実態、〈三〉身分社会、〈四〉建国後の文学事)、〈五〉新哲学ー「新唯物論」をめぐって、〈六〉蕭乾を振り返って。この研究は、中国知識人の知的精神及び自由な批判精神を継承することであり、これを通じて中国伝統文化の形象及び現代中国学術思想の反省につながるものと信じる。昨年度は、蕭乾自伝資料を翻訳して公表した。この自伝資料は、二〇一二年十月に開かれた蕭乾に関する国際学術シンポジウムの際に来日した蕭乾夫人文潔若氏が持参してくれた。一九五〇年に書かれた蕭乾自伝資料は、実は自己批判文であり、毛沢東時代の思想改造の一環として書かせられたものである。当時、数十万人もの中国知識人は、自己批判文が書かせられたのである。自伝風に書かせられたこの自己批判文は、どこまでが本音であるか疑問が残るが、蕭乾は彼なりの知恵でどうにか切り抜けるかと頭を絞って考えたようにも見受けられる。所々に巧妙な言葉を使って当局の目を盗もうとする。そのあたりの事情は行間から読み取れる。この資料は蕭乾を知る上で第一級の資料であり、中国現代文学、そして現代中国政治を語る上で重要な意義がある。昨年は、筆者により蕭乾自伝資料を翻訳し、「訳者解説」を添えて公表した。中国現代文学の研究が直面している最大の問題の一つは、多くの文献が解禁されていないことである。その意味でこの自伝資料は、中国文学研究に貴重な資料として提供できると思う。そして、懸案の「丸山昇、蕭乾、文潔若往復書簡」については、二〇一四年八月、上海人民出版社より刊行される予定。私もその整理に加わった。私の執筆した「悼念丸山昇先生夫人ー丸山松女史」、及び中国語訳「『地図を持たない旅人・解説』」(丸山昇著、顧偉良訳)の二篇は、『丸山昇、蕭乾、文潔若往復書簡』に収録予定。この往復書簡は、二〇一五年刊行予定の『蕭乾全集』にも収録される予定。全集刊行後、中国文学研究者、慶応大学教授長堀祐造氏と共に「丸山昇、蕭乾、文潔若往復書簡」を日本語訳する予定。尚、昨年度は大江健三郎に関する論文「〈谷間の村〉における地獄の一季節ー『飼育』を読むー」(『弘学大語文』第40号、弘前学院大学国語国文学会編、左9頁ー左20頁)を発表した。二〇一二年十月、弘前学院大学で「現代中国作家の挫折と信念ー蕭乾文学とその時代」を(2012年10月12日)と題する国際学術シンポジウムを行った。その際、蕭乾(しょうけん)夫人文潔若氏を迎え、「蕭乾文学とその時代」と題する講演を行ってもらった。この講演では、1930年代から始まった蕭乾の文学創作及び建国後の政治運動に遭遇した蕭乾の思想状況に触れている。その他に、論稿「『地図を持たない旅人』ー蕭乾と中国作家の運命」(『弘前学院大学文学部紀要第49号』、pp.15-30、2013年3月)を発表した。本論稿は、〈一〉「生産者としての〈作者〉」、〈二〉「建国前夜の文学論争」、〈三〉「祖国へー作家蕭乾の選択」、〈四〉「中国の〈オデッセイ〉ー『地図を持たない旅人』」、〈五〉「蕭乾の批評精神」と五章に分かれている。毛沢東時代における文学状況をめぐって、ソビエトの文学状況及び建国前夜に香港で起きた文芸論争を踏まえながら、翻弄された蕭乾の人生と文学を考察した。蕭乾の思想の根柢には、民主主義に基づき個人の権利を尊重する思想が流れているが、それが政府当局のイデオロギーとは相容れないものである。そのため、中国国内での蕭乾研究は、進まぬ状況にある。一人の男の波乱万丈の人生を描いた『地図を持たない旅人』は、海外では「中国の〈オデッセイ〉」と譬えられている。作品の記述が内包しているダイナミックな構造は、これまでの中国の文学よりほかにない複雑さで、新たな文学の変容を孕んでいる。このなかで、六項目に亘って蕭乾の経験した土地改革、思想改造をめぐって、建国後の文学事象、文芸政策に因む毛沢東の「文芸講話」、及び「新唯物論」に関するマルクス主義者艾思奇の論説を検証した。〈一〉土地改革の参加、〈二〉思想改造の実態、〈三〉身分社会、〈四〉建国後の文学事象(1.文芸政策、2.「文芸講話」の志向性、3.ソビエト文芸理論)、〈五〉新哲学ー「新唯物論」をめぐって、〈六〉蕭乾を振り返って。

この研究は、蕭乾の経験した建国後の出来事を通じて、単なる個別の問題としてではなく、歴史的観点から中国知識人の知的精神、及び政治に対する自由批判の精神を継承するものである。中国伝統文化の継承、及び現代中国学術思想の反省につながるものと信じる。その外に、論文「『万延元年のフットボール』を読むー詩的言語及び身体性をめぐって」(『弘学大語文』第41号)に発表した。本論考は、主として「『万延元年のフットボール』を読む上で、幾つかの問題点を提示した。大江健三郎の文学言説は、「内的人間」に興味を示すことなく、人、場所、物を介する身体感覚、及び現実対する誇張表現によって形成され、表現の豊かさを見せている。日本近代文学昨年度の予定としては、「丸山昇、蕭乾、文潔若往復書簡」の翻訳に取り組もうとしたが、この往復書簡は、2014年八月、上海人民出版社より刊行されることが決まったので、その刊行を待ってから日本語訳をしたほうが適切だと判断した。その代りに、二〇一二年十月に本学で開かれた蕭乾国際学術シンポジウムの際に来日した蕭乾夫人文潔若が持参してくれた蕭乾自伝資料の日本語訳に取り組んだわけである。蕭乾自伝資料の入手は、想定外のものであり、意外の収穫であった。ところで、翻訳作業は思ったより難航し、時間がかかった。紆余曲折を経て漸く日本語訳を実現した。現時点では完全版ではないが、蕭乾に関する第一級の資料による日本での公表は、意義が大きい。蕭乾研究課題の成果でもある。尚、この自伝資料に関しては、2015年蕭乾全集刊行後、完全版の形で日本語訳を出したいと考えている。いずれ完全版の形で日本語訳による「丸山昇、蕭乾、文潔若往復書簡」、及び「蕭乾自伝資料」の公表は、日本の学者と中国作家との交流、及び蕭乾研究における意義が大きいものと信じている。昨年は蕭乾自伝資料に関する翻訳作業のため、中国国内の調査研究ができなかったが、今年八月下旬、中国広州で開かれる中国日本文学研究会全国大会にて大江健三郎について研究発表を行った後、北京中央文史館で蕭乾に関する調査研究を行う予定。また蕭乾関係者を訪問、インタビューをする予定。論稿「『地図を持たない旅人』ー蕭乾と中国作家の運命」(『弘前学院大学文学部紀要第49号』、pp.15-30、2013年3月)の中で、毛沢東時代における文学状況をめぐって、ソビエトの文学状況及び建国前夜に香港で起きた文芸論争を踏まえながら、翻弄された蕭乾の人生と文学を考察した。シンポジウムの開催準備などにより、建国初期における革命状況及び文藝創作との影響関係について考察しなかった。次年度において研究調査を含め、五十年代初期における蕭乾の創作状況を考察する予定。今年度は、研究課題「中国知識人の挫折と信念ー蕭乾の思想及び軌跡をめぐって」の中で、〈一〉土地改革の参加、〈二〉思想改造の実態、〈三〉身分社会、〈四〉建国後の文学事象(1.文芸政策、2.「文芸講話」の志向性、3.ソビエト文芸理論、〈五〉新哲学ー「新唯物論」をめぐって。〈六〉蕭乾を振り返って、といった六項目に亘って検証する。建国後の文学事象をめぐっては、言語指向性の角度から、三十年代のソ連の文芸理論、及び中国の代表的なマルクス主義者の打ち出した「新哲学」をめぐって、毛沢東の「文芸講話」との関連性について考察する。毛沢東時代における文学的事象は、ソビエト時代の文学現象を彷彿とさせるものが多かった。厳しい文芸政策のもとで、中国の作家は、激闘たる時代に於いて真実なる人生を以て文学に身を投じ、後世のために貴重な記録を残してくれた。それは中国現代文学における最大の特徴である。建国後の文学的事象は、文芸政策、創作内容、作家の対場にまで実に多岐的問題に亘っている。
ヒューマンコミュニケーションシステムのための感情情報の定量化とその評価

平成6年度は、感情情報のモデル化とその心理学的評価を実施し、ヒューマンインタフェースやコミュニケーションシステムへの実際の応用を考慮した場合の有効性を確認した。まず、各ユニット数が17-19-3-19-17を有する5層のフィードフォワードニューラルネットワークに対して、6基本表情の17次元の表情パラメータを学習データとして入出力層に与え、バックプロパゲーションにより恒等写像学習を行った。この際、表情強度の異なるものも学習データに加え、徐々に強度を強める方向で学習を進めた。この中間層3ユニットの出力空間によって、感情状態を定量的に記述できることになる。また、前半の3層で表情パラメータから感情情報の認識、後半の3層で感情状態から表情お合成が可能となり、この2つのマッピングは互いに逆写像を構成していることが以前に研究で明らかになっている。前半の写像の評価では、学習に用いた各基本表情が無表情を中心に均等に放射状に配置され、理想的な感情空間を構成していることが明らかとなった。また以前報告された心理学分野での3次元の基本感情配置と強い相関を示すことが判った。次に、感情状態を表現する3次元空間を学習基本感情の配置に基づいて均等分割し、その点から合成される表情画像を作製して評価用サンプルとした。これを心理学専攻の学生300名にランダムに配布し、6基本感情のいづれかと判断できるかを回答してもらい、結果を集計した。この画像作製のための原画像として男女2名分を用意した。この分析結果から、各基本表情間はニューラルネットの汎化性能により連続的に印象が変化していることが裏付けられた。また、学習に用いた基本表情よりも、感情状態が強く表出している点が存在し、外捜の効果も実現できていることが判った。この成果は、将来の感情認識が可能なインタフェースシステムへの応用が強く期待できる。