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大学教育としての哲学教育。その理念と実践。

4年間の目標は以下の4点にあった。1.哲学教育の授業内容の開発、2.哲学専門教育のシステム構築とその実践、3.哲学教育における評価基準及びそのアウトカムの研究、4.研究分担者が行う個別研究と哲学教育の理念との関係について明らかにすること。1.については(1)学部における哲学教育において習得されるべき用語の確立、(2)それに基づいた哲学検定試験の実施、(3)講義記録の検討として展開された。これらの研究を通して現状における哲学教育の貧困化を如何にして克服すべきかという方向性を明らかにすることができた。2.については大学院教育において(1)哲学綜合語学教育の推進し、(2)「身体の哲学」のもとに精神医学と認知運動療法についての実践的研究の導入した。哲学研究者の二方向的養成、つまり、専門的哲学研究者として外国語で討論可能な能力を獲得すること、および他分野における実践知探究のコーディネーターとして応用可能な知識と能力を身につけること、この二方向にむけた専門教育の基礎を得た。3.については本研究においてもっとも困難の多い点であることが明らかになった。哲学教育の評価基準は上記1.および2.の確立と大学における哲学教育のおかれている社会的状況への依存度が大きく、この依存性は個々の教員の哲学教育の具体層にも浸透しており、今後の課題となる。4.については、(1)独、仏、米の哲学者へのインタビューをとおして日本における哲学教育の歪みとともに、研究分担者の研究態度の見直しと再確認をとおして哲学教育理念の再評価を行った。(2)その結果は各研究分担者の業績に表れている。教師が変わらなければ教育は変わらないのである。(3)「身体の哲学」は独自な展開を見せ、認知運動療法が大きな哲学的意義をもつことを明らかにした。(1)哲学教育の充実と達成度測定の研究。学生の質の変化に関する調査、哲学検定試験の試行的実施、ビデオ収録による授業内容の相互検討、講義記録の相互検討。(2)社会的事業との関連づけに関する研究。<人間の生き方における肉体と魂のかたちについての経験科学的アプローチ>の開始。学生が課題をもって酪農、農作業、精神障害施設における実習を行うための準備作業。(3)多分野の研究を統合する研究者の養成(哲学教育の専門家の養成)。平成16年度から「精神医学概論」を開講する。社会福祉との関連づけがこのプロジェクトの射程に入ってきた。(4)諸外国との哲学教育レヴェルでの交流。平成15年度から大学院生を対象に「哲学綜合語学教育」として、独大学での演習に添った演習を開くことにした。各国の現況インタビューをドイツ(ヘンリッヒ、ヤニッヒを含めて7名)とフランス(マリオンを含めて5名)について実施した。1.哲学教育の充実と達成度測定の研究。哲学検定試験を実施するとともに、大学における哲学科の学生として四年間で習得すべき哲学基本用語の内の三分の一を「用語集(1)」として完成させた。また、講義記録の作成と相互の検討を行った。2.社会的事業との関連づけに関する研究。<人間の生き方における肉体と魂のかたちについての経験科学的アプローチ>に関しては、酪農経験者との交流、および、「社会福祉法人浦河べてるの家」との交流を通して、肉体と魂とがそれぞれに際立つことになる経験における人間尊重のかたちを哲学教育の場に活かす方法を追求した。3.多分野の研究を統合する研究者の養成(哲学教育の専門家の養成)。身体の哲学部門として、精神医学を中心に哲学と経験科学の統合を視野に収めながら、多くの分野の研究成果・研究推進をコーディネートできる人材の教育を試みている。4.諸外国との哲学教育レヴェルでの交流。「哲学綜合語学教育」として、独大学での演習に添った演習を行った。

また、フランスにおける実情を調査し、来年度にはフランスから研究者を招き、演習を実践する。さらに、昨年度行った各国研究者への哲学教育に関するインタビューを書物として纏めるための準備作業に入っている。1.哲学教育の充実と達成度測定の研究。昨年度からの継続課題として実行した。哲学検定試験を年間2回実施するとともに、大学における哲学科の学生として四年間で習得すべき哲学基本用語の内の三分の一を「用語集(2)」として完成させた。また、講義記録の作成と集約を行った。2.社会的事業との関連づけに関する研究。今年度は「心神喪失等の状態で重大な他害行為を行った者の医療及び観察等に関する法律」を取り上げ、「精神病で入院するとはどのようなことか?」という講演会を開き、哲学教育との関連を考察した。3.多分野の研究を統合する研究者の養成(哲学教育の専門家の養成)。これも昨年度から大学院の正規科目のなかで「身体の哲学」として取り上げ、精神医学、認知身体療法などを中心に哲学と経験科学の統合を視野に収めながら、統合的能力をもった研究者の養成への試行を続けている。4.諸外国との哲学教育レヴェルでの交流。これも継続課題である。「哲学綜合語学教育」はその3年目として正規科目の中で続行した。その成果の一部としてドイツに留学生を送った。また、フランスから研究者を招聘し、フランス語によるデカルト哲学演習を行った。5.高校教員との共同研究として大学における哲学教育、また大学教育一般についての意見交換を行い、高校側から見た大学教育の問題点を解明しつつある。本年度はこれまでの研究成果を報告書にとりまとめる作業が中心になった。哲学検定試験については今年度は1回実施し、これまでの試験結果をまとめ所見を報告書に掲載した。大学における哲学科の学生として四年間で習得すべき哲学基本用語150項目のうち最後の三分の一を「用語集(3)」として完成させた。哲学綜合語学教育を継続し、次年度からは大学院の正規科目とすることになった。今年度は「べてるの家」訪問と水谷修氏による「病みゆく子供たち」という講演を行い、とりわけても成長過程における精神障害と教育との関連について考察し、卒業論文のもつ役割の一つとして社会参入への準備としての自己診断と自己の再構築という面のあることを見出した。本研究の一部門として「身体の哲学」という課題を継続して取り上げ、精神医学、認知運動療法などを中心に哲学と経験科学の統合を視野に収めながら、統合的能力をもった研究者の養成への試行を続けている。その一環として特に今年度は大久保病院において認知運動療法の実際を学ぶとともに「身体の哲学」と題するシンポジウムを開催した。
ヒトグリオーマ細胞の化学療法剤耐性機構におけるAktキナーゼ系の関与の解明

グリオーマにおけるAktキナーゼの化学療法耐性への関与を検討する目的で培養細胞株U87MGにAktとestrogen receptorのキメラ蛋白を導入し、4-hydroxy tamoxifen(4HT)処理によるAkt活性誘導可能な細胞を作成した。Akt活性亢進に伴い化学療法剤処理後のG2期細胞周期停止は抑制された一方、集落形成能の増加も認めた。したがって、Akt活性亢進はグリオーマ細胞の化学療法剤による細胞周期停止を抑制しながら同剤に対する感受性を低下させることが示された。そこで、分子シャペロンの一種である90 kD heat shock protein (hsp90)は、Akt蛋白の安定化に関与することが示されているため、hsp90阻害剤geldanamycin (GA)、GA誘導体17-AAG(米国で臨床試験中)および構造の異なるhsp90阻害剤radicicolのグリオーマ細胞に対する効果を検討した。これらのhsp90阻害剤は低濃度で化学療法剤の細胞毒性を増強した。その作用機序については未だ詳細は不明であるがAktの活性化抑制によるものであることを示唆する知見を得た。一方、グリオーマに対する化学療法増感作用のあるスタウリスポリン誘導体UCN-01の効果発現機序にはG2チェックポイント阻害とAkt阻害の2つの可能性があったが、U87MG細胞を用いた実験から、UCN-01が化学療法剤の増強効果を示す最小濃度においてはG2チェックポイント蛋白のリン酸化抑制は認められたもの、Aktリン酸化抑制は認められず、UCN-01による化学療法剤増強効果の機序はChk1(G2チェックポイント上流の主要キナーゼ)阻害によるものとの結論を得た。本検討結果はAkt系以外にもG2チェックポイント機構が化学療法増感法開発のための標的として有力であることを示唆している。近年DNA障害後の細胞周期制御に対するAktの関与についても基礎的な研究成果が報告されているため、Akt活性がDNAアルキル化剤のグリオーマ細胞に対する細胞毒性に影響を与えるかを検討した。Akt活性を誘導可能な実験系を確立する目的で、ヒトグリオーマ細胞株U87MGに活性型Aktとestrogen receptor (ER)のfusion protein (AktER)をレトロウィルスベクターにより導入した細胞(U87MG-AktER-M(+))を作成した。U87MG-AktER-M(+)細胞は4-hydroxy tamoxifen (4HT)処理によりAkt活性の亢進が誘導されたが、これに伴いDNAアルキル化後のG2/Marrestは抑制された一方、集落形成能の増加も認めた。一方、分子シャペロンの一種である90kD heat Shock protein (hsp90)は、Akt蛋白の安定化に関与することが示されているため、hsp90阻害剤geldanamycin (GA)のグリオーマ細胞に対する効果を検討した。GA単剤処理では2-3nMの濃度でU87MG細胞の集落形成能は明らかに低化したが、DNAアルキル化剤処理後の細胞においてはGA単剤では毒性を示さない濃度(0.5-1nM)で化学療法剤の細胞毒性が増強された。ただし、GA処理はDNAアルキル化剤による細胞周期停止に影響を与えず、また、GAがDNAアルキル化剤増強効果を現す濃度、および単剤で細胞毒性を示す濃度でもAkt蛋白量は影響を受けなかった。したがって、GAによるグリオーマの化学療法剤感受性増強効果はAkt阻害によるものではないと考えられた。(上記内容は現在論文投稿中)

化学療法耐性に対するAktキナーゼの関与についての基礎的な研究成果が報告されているため、Akt活性の調節を介した化学療法増感法の可能性を検討した。Akt活性を誘導可能な実験系を確立する目的で、ヒトグリオーマ細胞株U87MGに活性型Aktとestrogen receptor(ER)のfusion protein(AktER)をレトロウィルスベクターにより導入した細胞(U87MG-AktER-M(+))を作成した。U87MG-AktER-M(+)細胞は4-hydroxy tamoxifen(4HT)処理によりAkt活性の亢進が誘導されたが、これに伴いDNAアルキル化後のG2/Marrestは抑制された一方、集落形成能の増加も認めた。したがって、Akt活性亢進はグリオーマ細胞の化学療法剤による細胞周期停止を抑制しながら同剤に対する感受性を低下させることが示された。一方、分子シャペロンの一種である90kD heat shock protein(hsp90)は、Akt蛋白の安定化に関与することが示されているため、hsp90阻害剤geldanamycin(GA)のグリオーマ細胞に対する効果を検討した。GAは単独では毒性を示さない濃度(0.5-1nM)で化学療法剤の細胞毒性を増強した。ただし、GA処理はDNAアルキル化剤による細胞周期停止に影響を与えず、また、GAがDNAアルキル化剤増強効果を現す濃度、および単剤で細胞毒性を示す濃度でもAkt蛋白量は影響を受けなかった。したがって、GAによるグリオーマの化学療法剤感受性増強効果はAkt阻害によるものではないと考えられた。以上の効果は構造の異なるもう一つのhsp90阻害剤radicicolでも認められたため、非特異的な効果では無く、hsp90阻害に基づく効果であると確認出来た。分子シャペロンの一種である90kD heat shock protein (hsp90)は、Akt蛋白の安定化に関与することが示されているため、hsp90阻害剤geldanamycin (GA)、GA誘導体17-AAG(米国で臨床試験中)および構造の異なるhsp90阻害剤radicico1のグリオーマ細胞に対する効果を検討した。GAは低濃度(0.5-1nM)で化学療法剤の細胞毒性を増強したが、GA処理はDNAアルキル化剤による細胞周期停止に影響を与えず、また、GAがDNAアルキル化剤増強効果を現す濃度ではAkt蛋白量は影響を受けなかった。Hsp90阻害剤による化学療法剤増強効果の機序については未だ詳細は不明であるが、hsp90阻害剤がNFKB系を抑制していることを示唆する知見が得られ、本検討内容は現在論文投稿中である。スタウリスポリン誘導体UCN-01のグリオーマに対する化学療法増感の機序にはG2チェックポイント阻害とAkt阻害の2つの可能性があったためUCN-01の作用機序の詳細な検討を計画した。同剤がDNAアルキル化剤の増強効果を示す最小濃度においてはG2チェックポイント蛋白のリン酸化抑制は認められたもの、Aktリン酸化
CHMPファミリーによる多胞性エンドソーム物質選別機構の研究

細胞内小胞輸送において、エンドソームを経由しリソソーム内腔で機能する、あるいは分解される物質は、エンドソームの多胞化に伴い、その内部小胞に選択的に取り込まれる。エンドソーム膜上の選別装置として3つのESCRT(endosomal sorting complex required for transport)が順次エンドソームに動員されるモデルが提唱されている。ヒトに6グループ10種存在するCHMP(charged multivesicular body protein)ファミリーは、ESCRT-IIIの構成因子あるいは関連因子として機能している。本年度は、11番目の新規CHMPファミリーとしてCHMP7の機能解析を行い、以下のことを報告した。1.CHMP7は他のCHMPファミリーに比べ約240アミノ酸長いが、CHMP6と相同性の高いSnf7領域をC末端側にもつ。CHMP7は、CHMP6と同様、CHMP4bと結合したがEAP20とは結合しなかった。2.HeLa細胞に過剰発現させたFLAGタグ付CHMP7は、細胞質全体と核周囲に斑点状に局在するが、緑色蛍光タンパク質(GFP)と融合させたCHMP4bとの共発現により核周囲に集積し、一部共局在した。3.CHMP7のGFP融合タンパク質を強制発現させた細胞では、エンドサイトーシスさせた蛍光標識EGFの消失が観察されないことから、リソソーム分解経路が破綻していると考えられた。また、CHMP4bはAlix(ALG-2 interacting Protein X)とBro1領域を介して結合するが、Bro1領域とタンパク質チロシン・ホスファターゼ領域を有するm-PTPがCHMP4bと結合することを報告した。タンパク質のチロシンリン酸化・脱リン酸化によりエンドソーム膜での物質選別が制御されている可能性が考えられる。エンドソームは細胞膜及びゴルジ体から輸送された物質の選別を担う。リソソーム内腔へ輸送される物質はエンドソームにおいてその内部小胞に選択的に取り込まれる。CHMPファミリーはヒトにおいて10種報告されているタンパク質群であり、その多くがエンドソームの内部小胞形成時に動員されるが、その分子基盤及び機能の詳細は不明である。本年度はCHMPファミリーの相互作用タンパク質の結合特異性に着目し、以下のことを見出した。CHMPファミリータンパク質間の相同性の高い領域をカルボキシル末端側に有し、さらにアミノ末端側にユニークな領域が存在する新規タンパク質をデータベースから同定し(CHMP7と命名)、そのカルボキシル末端にCHMP4が特異的に相互作用することを酵母Two-Hybrid法により見出した。動物細胞発現系を用いCHMP4bとCHMP7の結合を確認した。また、両タンパク質は動物細胞内で共局在していた。カルパイン7がMIT(microtubule interacting and trafficking)領域を持つことからヒトCHMPファミリーとの相互作用を網羅的に解析したところ、CHMP1A、CHMP1B及びCHMP4cとの結合が確認された。また、カルパイン7の緑色蛍光タンパク質との融合タンパク質はHeLa細胞において一部エンドソーム様の局在を示し、エンドサイトーシスさせた蛍光ラベルしたEGFと共局在した。カルパイン7はCHMPとの結合を介してエンドソーム膜に動員されている可能性がある。Ca^<2+>結合タンパク質ALG-2がCHMP4bの過剰発現によって形成される奇形エンドソームに局在することを報告した。ALG-2はAlix、TSG101など複数のエンドソーム関連因子と相互作用することから、Ca^<2+>依存的アダプタータンパク質としてエンドソーム膜上で機能している可能性が考えられた。
筋萎縮性側索硬化症(ALS)の遺伝子発現プロファイリングによる病態関連分子の同定

筋萎縮性側索硬化症(ALS)は運動ニューロンの系統選択的神経細胞死をきたす疾患であり、その分子機構については未だ明らかでない。これまで我々はALSの脊髄前角病変における遺伝子発現の変化を分子インデックス法を用いてプロファイリング化し、ALSにおける神経変性の分子病態を反映していると考えられる発現変化を示した遺伝子群について検討してきた。今年度は、これらの中、2つの新規遺伝子(FI39AおよびFI58G)の完全長cDNAの取得に成功し、各組織の発現分布あるいは細胞内局在などについて検討した。FI39A cDNAは全長約4.4kb、ORFより予測される838残基のアミノ酸配列のN末側にユビキチン系に関与するRingfinger/IBRmotif、その前後にbipartite nuclear localization signal(NLS)を有していた。ノーザンブロット解析では各臓器にubiquitousに発現していた。ISHでは、mRNAの発現はALS脊髄前角運動ニューロンを始めとする神経細胞およびグリアに見られた。FI39AをGFP融合蛋白としてCOS7に強制発現させたところ、ERもしくはゴルジ装置と推定されるperinuclearな局在をとっていた。FI58G cDNAは全長約1.8kbで、219アミノ酸残基からなるORFを有していた。既知の蛋白にhomologyは持たないが、内部に核移行シグナル(NLS)が存在し、培養細胞内では核内に局在する蛋白であった。ノーザンブロット解析では中枢神経および心筋・骨格筋に多く発現していた。今後これらの新規遺伝子/蛋白がALSの病態形成メカニズムにいかに関与するかについて更なる検討が必要である。筋萎縮性側索硬化症(ALS)は運動ニューロンの系統選択的細胞死萎来す疾患であり,その分子機構については未だ明らかでない.我々はALS病変に特異的な遺伝子発現の変化を横断的,且つ包括的に把握することによって疾患の分子病態を解明することを目的とし,分子インデックス法を用いてALS脊髄前角の病変組織における全遺伝子発現プロファイルを作成した.各プロファイル毎に正常対照との比較検討を行い,ALS特異的あるいはALSで発現が著減しているcDNAを84個選択した.これら全てをクローン化した後塩基配列を決定し,データベース上で検索した結果,正常脳ではみられずALS前角の遺伝子発現プロファイルで特異的にみられたcDNAは46個,正常対照前角の遺伝子発現プロファイル由来のcDNAは38個であった.また既知の遺伝子に一致したcDNAはALS特異的が24個,正常対照特異的が16個の合計旬個あり,また既知のヒトESTに一致したcDNAはALS特異的が9個,正常対照特異的が16個の合計25個あった.これら以外の19個は未知cDNAであった.さらに84個のcDNAの中現在までに13個についてALS6例と対照4列の脊髄前角を用いてノーザンプロット分析,ATAC-PCR,あるいは定量RT-PCRによる定量的スクリーニングを終了した.その結果,各cDNAの正常対照に対するALSでの発現比は0.1-10であり,これらの発現変化がALSの病変脊髄前角における神経変性の分子病態を反映している可能性が示唆された.未知の遺伝子については,神経細胞特異的で前角運動ニューロンでの発現が確認されかつALS脊髄前角で発現が1/10に著しく低下している約4kbのcDNAを含め,現在5個のcDNAを選択し,ノーザンブロット分析により神経系組織および一般臓器における発現分布を検討するとともに,脊髄前角組織由来のmRNAから作成したcDNAを基にRACE法,あるいはライブラリースクリーニングによって完全長cDNAの取得を試みている.筋萎縮性側索硬化症(ALS)は運動ニューロンの系統選択的神経細胞死をきたす疾患であり、その分子機構については未だ明らかでない。

今年度は、これらの中、2つの新規遺伝子(FI39AおよびFI58G)の完全長cDNAの取得に成功し、各組織の発現分布あるいは細胞内局在などについて検討した。FI39A cDNAは全長4.4kb、ORFより予測される838残基のアミノ酸配列のN末側にユビキチン系に関与するRingfinger/IBRmotif、その前後にbipartite nuclear localization signal(NLS)を有していた。ノーザンブロット解析では各臓器にubiquitousに発現していた。ISHでは、mRNAの発現はALS脊髄前角運動ニューロンを始めとする神経細胞およびグリアに見られた。FI39AをGEP融合蛋白としてCOS7に強制発現させたところ、ERもしくはゴルジ装置と推定されるperinuclearな局在をとっていた。FI58G cDNAは全長約1.8kbで、219アミノ酸残基からなるORFを有していた。既知の蛋白にhomologyは持たないが、内部に核移行シグナル(NLS)が存在し、培養細胞内では核内に局在する蛋白であった。ノーザンブロット解析では中枢神経および心筋・骨格筋に多く発現していた。今後これらの新規遺伝子/蛋白がALSの病態形成メカニズムにいかに関与するかについて更なる検討が必要である。
Ewing肉腫、PNETにおける転写因子EWS-Fli1の標的遺伝子の同定と解析

Ewimg肉腫(ES)とその類縁腫瘍PNETは、悪性骨軟部腫瘍の中で最も予後不良の腫瘍であるが、その90%以上に染色体転座t(11:22)がみられ、その転座の結果、異常な融合遺伝子EWS-Fli1が生じる。EWS-Fli1は強力な転写因子として働き、正常線維芽細胞をtransformする活性を有するため、ES/PNETのがん化の原因そのものと考えられている。これまでに我々は、アンチセンスオリゴを用いてEWS-Fli1の発現を抑制することで、ES/PNET細胞の増殖が抑制され、その際細胞は細胞周期のG1期に停止することを明らかにした。そこで、アンチセンスオリゴ処理前後のES/PNET細胞よりmRNAおよび蛋白質を抽出し、細胞周期関連因子の発現変化を調べると、G1-S期移行に関わるCyclin D1、Cyclin E、p21およびp27の発現が大きく変化しており、アンチセンスオリゴによる増殖抑制の原因の一つと考えられた。このうちp21遺伝子のプロモーター領域をluciferaseにつないだreporterconstructを作成し、ES/PNET細胞にこのreporter constructを導入したところ、reporter遺伝子活性は抑制されていた。ここでアンチセンスオリゴ処理を行うとreporter遺伝子活性が誘導された。また、プロモーター領域内でのEWS-Fli1の結合部位を検索した結果、EWS-Fli1は直接p21プロモーターに結合し、その活性を抑制した。p21発現を誘導する薬剤Na Butylateを作用させると、ES/PNET細胞でのp21発現が濃度依存性に誘導され、細胞の増殖も抑制された。従って、p21はEWS-Fli1の直接の標的遺伝子であり、ES/PNETの増殖に大きく関与していること、ES/PNETの遺伝子治療のターゲットとして有用である可能性が示された。(1)EWS-Fli1遺伝子をクローニングし、発現ベクターに組み込んで、正常線維芽細胞に導入した。この細胞をヌードマウスに移植したところ、造腫瘍性が確認された。この腫瘍から細胞株を樹立し、生物学的性質の解析を行った。(2)ES/PNET細胞をEWS-Fli1に対するantisense oligonucleotideで処理すると増殖が阻害される。そこで、antisense oligonucleotide処理前後のES/PNET細胞よりmRNAを抽出し、probeを作成し、cDNA microarrayにより遺伝子発現の変化を調べた。その結果、EWS-Fli1の下流で発現変化を受けているいくつかの遺伝子が判明した。これらの遺伝子は、EWS-Fli1の標的遺伝子である可能性が高いと考えられ、現在解析を進めている。
可視光誘起による電子伝達回路を内包したゲルの創成と人工光合成ゲルの試み

本研究では、平成21年度では平成20年度に引き続き人工光合成システムの実現を目指し、ゲルの三次元網目を利用して、可視光誘起による電子伝達回路を持つ組織構造を構築し、可視光照射により水から水素と酸素を発生するゲルを設計した。システムの構築に当たり、電子伝達回路の水素発生側および酸素発生側のゲルシステムをそれぞれ構築し、人工光合成システムの実現に向け、反応の各過程の円滑化をはかった。(1)水素発生ゲルシステムの構築電子伝達回路に必要な光増感部位および水素発生触媒をゲル内に構築し、従来の低分子溶液よりも効率的に水素を生成することが分かった。これより、光増感部位と水素発生触媒がゲル内で水素生成反応に効率的に電子を伝達する環境があることが分かった。これより、ゲル内に他の構成要素を組織的に組み込むことで、人工光合成ゲルシステムの実現が可能であることが期待される。(2)酸素発生ゲルシステムの構築ゲル内に酸素発生触媒を組込み、可視光照射により酸素が生成した。ゲル内において十分な酸素生成を示し、組み込んだ電子伝達回路が円滑に進行していることが分かった。さらに、ゲルを構成するナノ粒子および高分子の構造解析から、安定な分散状態を形成していることが分かった。(3)水素発生ゲルシステムの温度制御ゲルの主鎖網目に温度応答性高分子を用いることで、温度の違いにより網目が光反応に及ぼす効果を検証した。(4)水素発生ナノゲルシステムの構築階層的なゲルシステムの構築に向けて、自己組織化による高次構造形成が可能なナノゲル微粒子を用い、ナノマテリアルによる新たなナノインテグレーションを提唱した。本研究では、ゲルの三次元網目を利用して、可視光誘起による電子伝達回路を持つ組織構造を構築し、可視光照射により水から水素と酸素を発生する人工光合成システムの実現を大目標とする。19年度では、光エネルギー変換システムの完全内包型高分子ゲルの創成に向けて、ゲルの三次元網目を利用して可視光誘起による電子伝達回路を持つ組織構造を構築し、可視光照射により水から水素と酸素を発生する人工光合成システムの実現をねらった。(1)水素発生ゲルシステムの構築電子伝達回路に必要な光増感部位および水素発生触媒をゲル内に構築し、従来の低分子溶液の水素精製よりもより効率的に水素を生成することが分かった。(1)および(2)電の子伝達回路において、各構成要素がゲル内で高効率に機能する条件を探索し、組織的に高分子を導入することで、人工光合成ゲルの創成が実現可能と考えられる。20年度では19年度に引き続き、光エネルギー変換システムの完全内包型高分子ゲルの創成に向けて、ゲルの三次元網目を利用して可視光誘起による電子伝達回路を持つ組織構造を構築し、可視光照射により水から水素と酸素を発生する人工光合成システムの実現をねらった。(1)および(2)の電子伝達回路において、各構成要素がゲル内で高効率に機能する条件を探索し、高分子を組織的に導入することで、人工光合成ゲルの創成が実現可能と考えられる。

これより、光増感部位と水素発生触媒がゲル内で水素生成反応に効率的に電子を伝達する環境があることが分かった。これより、ゲル内に他の構成要素を組織的に組み込むことで、人工光合成ゲルシステムの実現が可能であることが期待される。(2)酸素発生ゲルシステムの構築ゲル内に酸素発生触媒を組込み、可視光照射により酸素が生成した。ゲル内において十分な酸素生成を示し、組み込んだ電子伝達回路が円滑に進行していることが分かった。さらに、ゲルを構成するナノ粒子および高分子の構造解析から、安定な分散状態を形成していることが分かった。(3)水素発生ゲルシステムの温度制御ゲルの主鎖網目に温度応答性高分子を用いることで、温度の違いにより網目が光反応に及ぼす効果を検証した。(4)水素発生ナノゲルシステムの構築階層的なゲルシステムの構築に向けて、自己組織化による高次構造形成が可能なナノゲル微粒子を用い、ナノマテリアルによる新たなナノインテグレーションを提唱した。
核スピン濃度と分析を制御した半導体超構造の作製と評価

電子の電荷のみならずスピンまでも有効利用することが注目されているが、本課題では更に一歩踏み込んで核スピンの濃度と分布までを制御した半導体構造の作製を行った。半導体元素は一般的に^<29>Si,^<73>Ge,^<71>Ga,^<75>As等の核スピンを有する同位体と、^<28>Si,^<74>Ge等の核スピンを有しない同位体が一定の比率で混合した組成をもつが、本課題では分離された^<73>Ge(スピンあり)をロシアから入手し、帯精製法により不純物を取り除いた後、アモルファ^<73>Ge薄膜を作製した。電子磁気共鳴(ESR)によるスピン物理の評価では、^<73>Ge膜中では不対電子と核スピン間の超微細構造相互作用が非常に強く、通常の不対電子欠陥によるg=2.0016のピークが消滅している。これは超微細構造により1本のピークが10本に分かれて強度が大幅に落ちているためと考え、それらを見出すための高感度・高解像度測定を現在続けている。又、^<29>Si(スピンあり)と^<28>Si,^<30>Si(スピンなし)を利用した核スピンの濃度と分布が制御された超構造を作製するために、その原料となる^<30>Siをロシアから入手した。Si同位体材料を精製するためのフロートゾーン型の結晶成長装置は現在注文済みであるため、来年度からはSiの精製に着手する。
修復象牙質形成過程におけるオステオポンチンの機能の解明

本年度では、修復象牙質形成過程におけるオステオポンチン(OPN)の役割を解明することを目的として、野生型マウスおよびOpn遺伝子欠損マウスを用いた窩洞形成実験系を利用し、組織学的解析を行った。野生型およびOpn遺伝子欠損マウスにおいて、術後1日では、窩洞直下の象牙芽細胞に変性像が認められ、ネスチン陽性反応が消失していたが、一方、髄床底側の象牙芽細胞はネスチン陽性反応を維持していた。術後3日には、新たに分化したと思われる象牙芽細胞がネスチン陽性を示し、歯髄・象牙質界面に配列していた。野生型マウスでは、窩洞直下の歯髄細胞にOpnを強く発現する細胞が認められ、石灰化前線にOPN陽性反応が認められた。術後14日では、髄角部に修復象牙質形成が、髄床底側に反応象牙質形成が認められ、新たに分化した象牙芽細胞にDspp, col1a1の発現、DSPP, I型コラーゲン,インテグリンαvβ3陽性反応が認められた。一方、Opn遺伝子欠損マウスでは、術後14日において、髄角部で修復象牙質形成が阻害されており、新たに分化した象牙芽細胞に、Dspp, DSP,インテグリンαvβ3の発現が認められるものの、I型コラーゲン、col1a1の発現が認められなかった。以上より、歯の窩洞形成後の歯髄治癒過程において、石灰化前線へのOPNの沈着が、新たに分化した象牙芽細胞様細胞のI型コラーゲン形成、すなわち修復象牙質形成に必須の因子であることが明らかになった。歯髄再生療法の開発を目指す上で重要な科学的基盤となるのが歯髄の生物学的特性の理解であるが、上記の成果は歯の損傷後の修復象牙質形成機構の解明に大きく寄与するものである。26年度が最終年度であるため、記入しない。
エレクトロポレーションを活用したイメージングマウスの作製法

本研究では、研究代表者らが開発したエレクトロポレーションによる遺伝子破壊マウス作製法を基盤として、遺伝子発現やタンパク質を可視化したイメージングマウスをハイスループットに作製する手法の確立を行った。具体的には、第三世代のゲノム編集CRISPR/Cas9システムのコンポーネントである、Cas9タンパク、crRNA、tracrRNAを、外来遺伝子(蛍光タンパク質)ドナーである一本鎖DNAと共に受精卵に導入することで、標的遺伝子の発現を可視化するレポーターマウスを作製した。この手法を活用することで、より簡便かつ高効率に遺伝子発現レポーターマウスの作製を行えるようになった。遺伝子発現やタンパク質を可視化したマウス(イメージングマウス)は、細胞分化状態やタンパク質分子の役割を個体レベルで解析する上で重要なツールであり、発生生物学のみならず幅広く生命科学分野で活用されている。しかしながら、目的遺伝子座に蛍光タンパク質などの外来遺伝子を組み込んだマウスを作製するには、高度な技術と作製時間を必要としている。本研究では、申請者らが開発したエレクトロポレーションによる遺伝子破壊マウス作製法を基盤として、遺伝子発現やタンパク質を可視化したイメージングマウスをハイスループットに作製する手法の確立を行う。本年度の研究は、受精卵に効率的にDNAを導入することに注力した。より効率的に導入するためにエレクトロポレーションの条件や、受精卵の前処理法の検討を行った。EGFP発現プラスミドをエレクトロポレーションにより受精卵に導入して、EGFP蛍光タンパク質の発現強度で導入効率を評価した。また、エレクトロポレーションや前処理が胚の生存率に与える影響を評価して、高導入率かつ高生存率となる条件を検討した。ある程度の効率で遺伝子導入が確認できたが、より高導入率を目指して引き続き条件検討を行っている。次年度も引き続き条件等を行い、高導入率が達成された後に、ゲノム編集技術と組み合わせて活用することで目的遺伝子座へのレポーター挿入の研究を行い、簡便かつハイスループットなイメージングマウス作製法を確立する。ある程度の効率で遺伝子導入が確認できたが、より高導入率を目指して引き続き条件検討を行うため。昨年度の研究において、エレクトロポレーション法では、2本鎖DNAの受精卵導入が困難であること、外来遺伝子ドナーとしては一本鎖DNAが望ましいという結果を得た。そこで本年度は、一本鎖DNAとゲノム編集システムを受精卵に共導入して外来遺伝子のゲノムへの挿入を行った。具体的には、蛍光タンパク質遺伝子の一本鎖DNAを、目的遺伝子座へ導入してレポーターマウスを作製した。3遺伝子座へ異なる蛍光タンパク質レポーター(EGFP, mCherry)の導入に成功した。いずれのレポーター遺伝子も設計どおり導入されており、塩基欠失などは認められなかった。また、レポーター遺伝子の発現は、標的とした遺伝子発現と一致しており遺伝子発現レポーターとして発生生物学研究に用いることができる。引き続きエレクトロポレーション条件等の検討を行い、高導入率が達成された後に、ゲノム編集技術と組み合わせて活用することで目的遺伝子座へのレポーター挿入の研究を行い、簡便かつハイスループットなイメージングマウス作製法を確立する。発生生物学本年度中にエレクトロポレーションによるDNA導入条件の最適化を達成して、イメージングマウス作製法の確立に向け研究をスタートする予定だった。本年度、ある程度の効率で遺伝子導入が確認できたが、より高導入率を目指して引き続き条件検討を行う方針をとった。その結果、イメージングマウス作製のために必要な、ゲノム編集関連試薬などの購入を次年度行うこととした。イメージングマウス作製法のため、マウスの購入や、ゲノム編集関連試薬などの購入を行う。
民主化と文民官僚 : タイ・フィリピンの比較を中心として

本年は昨年に引き続き、タイにおける現地調査及び、法制定過程における一次資料、及び同過程においてなされた議論の動向を調査し、博士論文の中核たる実証部分に関するエヴィデンスを揃えることができた。三月には、タイの民主化において重要な要素を占める国外圧力の代表格であるIMFのアーカイブを調査し議論を支える証拠を収集すると同時に、博士論文の理論部分の構築についてニューヨーク大学のファカルティと相談する機会を得た。定期的に、指導教員の指導を受けながら、論文執筆の準備を進めている最中である。昨年度に対し、本年度殊に力を入れたのは、次の二点である。第一が、タイの先行研究、及び二次文献を中心に収集、読み深めていたのに対し、今年度は一次資料(選挙データ、及び選挙管理委員会の報告書、改正法令)を収集、及び読み込むことに重点を置いた。これにより、実証部分の具体的な論的根拠となる資料の大枠を押さえることができたと感じている。第二が、年度の後半から力を入れてきた、タイの地域研究にとらわれずより比較的な視座で、博士論文がどのような理論的貢献、理論修正を行うことができるかという点について検討を深めたことである。2012年9月からJASSO留学生交流支援制度(長期派遣)により留学する予定のNew York Universityは経済学的理論を用いた研究で著名な大学である。東京大学の指導教員の指導に沿いながら、本大学教員に博士論文の理論部分を中心にアドバイスをもらうことで、博士論文を提出したい。大学院博士課程2年目から3年目で予定していたフィールド調査は概ね終えることができたので、博士論文の実証部分のエヴィデンスがおおかた整えることができた。これまでの実証研究をもとに、本年9月からJASSOの長期派遣の給付奨学金制度を利用して、New York Universityで理論研究を中心に学び、博士論文の理論部分を書き上げる予定である。実証部分を論理的に、かつ比較可能な議論としてまとめあげられるような理論を形成することで、博士論文の射的範囲を広げると共に、理論的に洗練した研究にしていきたい。民主化後に生じる改革の停滞は、改革への抵抗による改革の不成功、或いは改革内容の形骸化といったものだけではない。改革が定着する間もなく、次から次へと改革が繰り返されるという事態、それが1992年以降のタイが直面する選挙制度改革である。なぜ、タイではこのように選挙制度改革が相次ぎ、選挙方法が定まらないのか。研究では、タイにおける1992年から1911年に生じた度重なる下院議会選挙の制度改正について、選挙改正を求める不満層の目的と改正による選挙結果に着目して執筆する予定である。2010年度は、第一に1991年憲法、1997年憲法、2007年憲法に記載されている選挙制度についての要点整理である。日本国憲法とは異なり、タイ王国では憲法において選挙制度について詳細に規定が書かれている。したがって、憲法を分析する事で、中選挙区制度から、小選挙区比例代表制度への変更、更に中選挙区比例代表制度への変更について、変更内容の検討を行った。なお、2011年2月11日に上下両院合同会議で可決された、中選挙区比例代表制度から小選挙区比例代表制度への変更を定める憲法改正案については、現在、詳細内容を収集中である。また、選挙データを含む一次資料の収集、及び先行研究の収集を行った。1990年代以降の最近の資料を国内で収集することは難しいため、2010年11月末から12月初めにかけて、そして2011年2月に二回、バンコク、チュラロンコーン大学図書館及び国立図書館にて資料収集を行った。タイでは選挙制度改革が頻繁であるため、個々の改革を分析する選挙研究に留まりがちであり、なぜ改革が定着することなく、更なる改革を招くのかを説明する研究がない。したがって、当該研究はその穴を埋めるものであり、この研究は、なぜタイでは民主化が容易に定着しないのかという課題に応えることができるだろう。

大学院博士課程2年目から3年目で予定していたフィールド調査は概ね終えることができたので、博士論文の実証部分のエヴィデンスがおおかた整えることができた。これまでの実証研究をもとに、本年9月からJASSOの長期派遣の給付奨学金制度を利用して、New York Universityで理論研究を中心に学び、博士論文の理論部分を書き上げる予定である。実証部分を論理的に、かつ比較可能な議論としてまとめあげられるような理論を形成することで、博士論文の射的範囲を広げると共に、理論的に洗練した研究にしていきたい。
高精細な病理診断と遺伝子解析を組み合わせた分類困難な脳腫瘍の層別化

適切な診断と正確な予後予測は病理診断に課せられた大きな使命である。しかし、脳腫瘍においては今なお診断困難な症例が少なくない。すべての脳腫瘍の患者さんが最適な治療を受けられるようにするために、病理医の努力の余地はまだ十分に残されている。今回の申請では分類困難あるいは希少な脳腫瘍に光を当てて、膨大な累積脳腫瘍検体から該当例を抽出し、そこに分子遺伝学的プロファイリングを加えて腫瘍概念の輪郭や生物学的特徴を明らかにしていく。
高品質T型量子細線レーザー構造におけるレーザー発振とその起源

MBEへき開再成長および成長中断アニール法を用いて、超平坦界面をもち、1本の細線の断面寸法が14nmx6nmで、20周期T型GaAs細線レーザー試料に対し、自動走印システムを用いてのPL空間スキャン測定を中心とした基礎分光と、励起強度依存発光測定、レーザー発振測定、シャックリー法とハッキ・パオリ法による利得の測定を行った。さらに、細線の断面寸法は同じで、周期だけを1周期に減らした単一細線レーザー試料に対して同様の計測を行い、n型に変調ドープを行ったドープ単一量子細線構造にゲートを付けてキャリア濃度を制御するFET型の構造についても詳細な空間スキャン測定を行った。PL空間スキャン測定により、PL線幅が1-1.5meVであるような高品質の量子細線構造の領域のほかにPL幅が若干広い部分や局在状態を形成している部分が存在していることがわかり、高品質の領域を選別して詳細な物理測定を進めることが出来た。PLE測定の結果も、クーロン相互作用を含めた詳細な理論計算と比較した議論が出来るようになり、1次元自由励起子や1次元連続吸収帯の同定が明確になった。ラインシェイプが初めて観測された。PL励起強度依存性測定からは、励起子分子や電子正孔プラズマの生成が見出された。レーザー発振スペクトルと比較し、レーザー発振の起源が、従来指摘された励起子によるものではなく、クーロン相互作用の影響を強く受けた電子正孔プラズマによるものであることがわかった。MBEへき開再成長および成長中断アニール法を用いて、超平坦界面をもち、1本の細線の断面寸法が14nmx6nmで、20周期T型GaAs細線レーザー試料を作製した。この試料に対し、PLスペクトル測定、PL励起(PLE)スペクトル測定、PL空間スキャン測定、PL励起強度依存性測定などの基礎分光と、光励起発振スペクトル測定、入力-レーザー出力特性などのレーザー発振特性の測定を行った。PLスペクトル測定により、PL線幅が従来のものに比べて約一桁ほど小さい1-1.5meVであるような高品質の構造となっていることが確かめられた。PLE測定により、量子細線からのPLはストークスシフトが0.5meVと小さく、1次元自由励起子によるものであることが確かめられた。また、10年以上前から理論的に予測されていながら観測がなされていなかった、1次元連続吸収帯特有のラインシェイプが初めて観測された。PL空間スキャン測定からは、このような高品質の構造が、0.5mmのレーザー共振器全体に渡って実現されていることが確かめられた。また、これをレーザー発振スペクトルと比較したところ、レーザー発振の起源が、従来指摘された励起子によるものではなく、クーロン相互作用の影響を強く受けた電子正孔プラズマによるものであることがわかってきた。さらに、細線の断面寸法は同じで、周期だけを1周期に減らした単一細線レーザー試料を作製し、その1次元基底状態からの発振の観測に世界ではじめて成功した。上記の、20周期レーザーで得られた結果をより高いスペクトル精度で調べる研究が進行中である。さらに、n型に変調ドープを行ったドープ単一量子細線構造にゲートを付けてキャリア濃度を制御するFET型の構造を作製した。そのPLスペクトル測定を行い、上記のレーザー発振メカニズムに関与する1次元キャリアの多体効果を明らかにしつつある。MBEへき開再成長および成長中断アニール法を用いて、超平坦界面をもち、1本の細線の断面寸法が14nmx6nmで、20周期T型GaAs細線レーザー試料に対し、今年度作製を行った新自動システムを用いてのPL空間スキャン測定を中心とした基礎分光と、シャックリー法とハッキ・パオリ法による利得の測定を行った。

さらに、細線の断面寸法は同じで、周期だけを1周期に減らした単一細線レーザー試料、n型に変調ドープを行ったドープ単量子細線構造にゲートを付けてキャリア濃度を制御するFET型の構造についても詳細な空間スキャン測定を行った。新たなPL空間スキャン測定により、PL線幅が1-1.5meVであるような高品質の量子細線構造の領域のほかにPL幅が若干広い部分や局在状態を形成している部分が存在していることがわかり、高品質の領域を選別して詳細な物理測定を進めることが出来た。PLE測定の結果も、クーロン相互作用を含めた詳細な理論計算と比較した議論が出来るようになり、1次元自由励起子や1次元連続吸収帯の同定が明確になった。ラインシェイプが初めて観測された。PL励起強度依存性測定からは、励起子分子や電子正孔プラズマの生成が見出された。レーザー発振スペクトルと比較し、レーザー発振の起源が、従来指摘された励起子によるものではなく、クーロン相互作用の影響を強く受けた電子正孔プラズマによるものであることがわかってきた。将来の電流注入型の量子細線レーザーの作製の足がかりとして、試料構造の設計、テスト試料の作製なども行った。
中東地域におけるH5N1鳥インフルエンザウイルス新型株早期検出とパンデミック阻止

現在、H5N1鳥インフルエンザウイルスは、アジア・中近東地域で鳥類における感染流行域を獲得している。繰り返される感染伝播によって変異が誘導され、H5N1由来パンデミックが発生する可能性が指摘されている。特にエジプトは、2009年以降、全世界の67%のヒト感染例が報告される特異な地域である。そのため、エジプトの家禽で蔓延するH5N1ウイルスの進化動態を詳細に把握すると共にウイルスのヒト適応性獲得の推移やパンデミック化潜在性を先行的に評価することが緊要である。近年、エジプトではH5N1ウイルスに加えてH9N2鳥インフルエンザウイルスが流行していると報告がある。そこで本年度は、エジプトにおける共同研究者であるダマンフール大学のMadiha Ibrahim教授およびEmad Elgendy講師と連携して、現地での鳥インフルエンザウイルスの疫学調査をH5N1ウイルスに限定せずに実施した。その結果、現在エジプトでは致死率が大きく異なる複数のアウトブレイクが養鶏場において続発していることが明らかとなり、エジプトデルタ地帯においてH5N1ウイルスとH9N2ウイルスが広範に同時流行していることが示された。また発育鶏卵にて増殖させたウイルス野外株を対象に、レセプター糖鎖結合特異性鑑別キットを用いてシアロ糖鎖結合特異性をスクリーニング解析した。その結果、多くのH9N2ウイルス野外株においても、両シアロ糖鎖結合親和性を示す結果が得られた。当該データを確認するために、農林水産省の許可を受けて日本に移送済みの臨床ウイルス株を用いてreceptor binding assayを実施したところ、現在エジプトで同時流行するH9N2 G1-B lineageが、共にヒト型シアロ糖鎖結合親和性を高めていることが明らかとなった。特に、HA-Q226L変異はヒト型シアロ糖鎖親和性の獲得に大きく寄与していた。エジプトデルタ地域における鳥インフルエンザウイルスの疫学調査が計画通りに実施された。また、レセプター糖鎖結合特異性鑑別キットを用いて、これまで調査していたH5N1ウイルスに加えてH9N2ウイルスのシアロ糖鎖結合特異性をスクリーニング解析することが可能であることが実証された。次年度(H31年度)は最終年度として、エジプトデルタ地帯においてこれまで実施した鳥インフルエンザの疫学調査結果を踏まえて、H5N1およびH9N2ウイルスが感染伝播の過程でどのようにヒト感染性を獲得してきたのかその進化動態を分子ウイルス学的に解明する。これらの結果を論文として取りまとめて国際誌に投稿することで、エジプトを中心とする中近東地域における鳥インフルエンザウイルスの蔓延状況と進化動態の全容を世界にアラートする。現在、H5N1高病原性鳥インフルエンザウイルスは、エジプトを含むアジア・中近東地域の一部で鳥類における感染流行域を獲得している。繰り返される感染伝播によって変異が誘導され、H5N1ウイルス由来新型パンデミックが発生する可能性が指摘されている。特にエジプトは、2009年以降、全世界の67%のヒト感染事例が報告されている特異な地域である。ヒト感染例の国別の累計においても、2015年にアジア諸国を抜いて全世界で最多となった。本年度は、事業初年度であることから、エジプトにおける共同研究者であるダマンフール大学獣医学部のMadiha S. Ibrahim教授およびAsharaf El Sharaby教授を日本に招へいし、現地における現在のH5N1鳥インフルエンザの発生状況について意見交換するとともに、効率的なサンプリングに向けてサンプリングする地域、動物種および数量を協議した。また、先行研究において、農林水産大臣の許可を受けて日本に移送したH5N1ウイルス臨床サンプル(20112013年にサンプリング)について、RT-PCR法によってウイルス遺伝子の有無をスクリーニング後、陽性サンプルを発育鶏卵に接種することでウイルス分離を試みた。先行研究においてサンプリングしていた臨床サンプルを対象に遺伝子解析とウイルス分離を試み、複数のウイルス株の分離に成功した。本年度は、エジプトにおける共同研究者であるダマンフール大学獣医学部のMadiha S. Ibrahim教授およびAsharaf El Sharaby教授と連携して、現地での鳥インフルエンザウイルスの感染が疑われる家禽のスワブまたは臓器のサンプリングを実施した。また、先行研究において、農林水産大臣の許可を受けて日本に移送したH5N1ウイルス臨床サンプル(20112013年にサンプリング)について、ウイルス分離を進めると同時に、亜型鑑別およびレセプター糖鎖結合親和性の評価を実施した。その結果、一部のウイルス株において、鳥型レセプター糖鎖親和性に加えて、ヒト型レセプター糖鎖親和性を獲得していることが明らかとなった。また、エジプトにおいて、現在、異なる複数の亜型の鳥インフルエンザウイルスが同時流行していることが示された。

エジプトデルタ地域における鳥インフルエンザウイルスのサンプリングを円滑に開始できた。また、先行研究において収集した臨床サンプルを対象にウイルス株の分離を実施し、異なる複数の亜型の鳥インフルエンザウイルスの分離に成功した。また、当該分離ウイルスの性状解析に着手している。現在、H5N1高病原性鳥インフルエンザウイルスは、エジプトを含むアジア・中近東地域の一部で鳥類における感染流行域を獲得している。繰り返される感染伝播によって変異が誘導され、H5N1ウイルス由来新型パンデミックが発生する可能性が指摘されている。特にエジプトは、2009年以降、全世界の67%のヒト感染事例が報告されている特異な地域である。ヒト感染例の国別の累計においても、2015年にアジア諸国を抜いて全世界で最多となった。そのため、エジプトの家禽で蔓延するH5N1ウイルスの進化動態を詳細に把握すると共にウイルスのヒト適応性獲得の推移やパンデミック化潜在性を先行的に評価することが緊要である。本年度は、エジプトにおける共同研究者であるダマンフール大学獣医学部のMadiha S. Ibrahim教授およびEmad M Elgendy講師と連携して、現地での鳥インフルエンザウイルスの疫学調査を実施した。また発育鶏卵にて増殖させたウイルス野外株を対象に、レセプター糖鎖結合特異性鑑別キットを用いてシアロ糖鎖結合特異性をスクリーニング解析した。その結果、多くのウイルス野外株において、両シアロ糖鎖結合親和性を示す結果が得られた。当該データを確認するために、農林水産省の許可を受けて日本に移送済みの臨床ウイルス株を用いてreceptor binding assayを実施したところ、現在エジプトで同時流行するH5N1 clade 2.2.1.2とH9N2 G1-B lineageが、共にヒト型シアロ糖鎖結合親和性を高めていることが明らかとなった。エジプトデルタ地域における鳥インフルエンザウイルスの疫学調査が計画通りに実施された。また、レセプター糖鎖結合特異性鑑別キットを用いて、ウイルスのシアロ糖鎖結合特異性をスクリーニング解析することができた。また分離ウイルスの性状解析も進展している状況にある。現在、H5N1鳥インフルエンザウイルスは、アジア・中近東地域で鳥類における感染流行域を獲得している。繰り返される感染伝播によって変異が誘導され、H5N1由来パンデミックが発生する可能性が指摘されている。特にエジプトは、2009年以降、全世界の67%のヒト感染例が報告される特異な地域である。近年、エジプトではH5N1ウイルスに加えてH9N2鳥インフルエンザウイルスが流行していると報告がある。