hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ショック時における自律神経および内分泌系の中枢調節機構

来年度の課題としては,各種ショック時において脳環流を行ないTRHやアミノ酸の変化を神経伝達物質あるいは神経調節物質としての側面からとらえ脳の役割を明らかにしたい.今年度は、昨年度中に確立したpushーpullカニューレによる脳還流法を用いて、ラット出血性ショックモデルにおける脳内TRHの経時的変化を測定することを第1の目標にかかげ、これを達成することができた。結果は既に論文として発表した(Brain Research,474,399ー402,1988)。本論文の内容の概要は下記のとおりである。[方法]実験の数日前にラットの第四脳室にガイド針を挿入し、さらに前日に大腿動脈にカニュレーションを行った。pushーpull cannulaを用いて意識下ラットの第四脳室に人工脳脊髄液を還流し20分毎に還流液を採取しTRHの測定に供した。同時に動脈より全血の30%を約2分間で脱血した前後の血圧および心拍数の変化を測定した。さらに別のラットを用いて第四脳室に正常ウサギ血清あるいはTRH抗血清を前投与した後同様の脱血をおこない血圧および心拍数の変化を比較した。[結果]コントロールの動物においては160分間の還流時間中、還流液中のTRHの濃度は一定であったが、全血の30%を脱血した動物では脱血直後に有意に上昇した。コントロールの動物においては正常ウサギ血清あるいはTRH抗血清の脳室内投与後3時間血圧および心拍数の有意な変化はなかった。しかし出血後の血圧はTRH抗血清を投与した動物の方が正常ウサギ血清を投与した動物に比べて有意に低くまた低下が長時間持続した。正常ウサギ血清を投与した動物において出血直後に見られた心拍数上昇傾向はTRH抗血清を投与した動物で抑制されたが有意差はなかった。これらの結果から意識下ラットにおいて出血後の心血管系の中枢性調節に脳内TRHが関与していることが示唆された。現在微小透析プローグを用いて脳内のいくつかの部位を還流し、出血性ショック時のTRHの遊離部位を同定しようと試みている。
個人内の認知過程を考慮した評定者効果のモデリング

本研究の目的は、多様な評定者効果を統一的に表現する数理モデルを提案し、その性能を評価すること、また提案モデルを使用した実際の分析例を提示することである。本年度は,主にDiffusion IRTモデルを用いて一対比較形式のデータを分析する方法論(Thurstonian Diffusion IRTモデル)について研究を行った。当初の研究目標であった「多様な評定者効果を統一的に表現する」ことについて,あらゆる効果を同時に単一のモデルで表現することは困難であると判断し,寛大化・厳格化傾向や中心化傾向などの系統的なバイアスを生じる評定者効果についてこれを抑制するという方向性でも考察を進めている。従来のリッカート法での質問ではこのような系統的バイアスを抑制することが難しく,それらのバイアスの個人差を表すパラメータをモデルに投入することで分離を図ってきた。一方で一対比較・多肢選択などの回答形式を導入することにより,系統的バイアス自体を抑制することができる。そのため,一対比較・多肢選択形式を用いることで文脈効果及び順序効果などの評定者効果にフォーカスしたモデルの構築が可能になると考えている。本研究の成果の一部は国際学会にて発表し,またこの研究に基づいた論文は現在査読中である。また,LBA IRTモデルとThurstonian Diffusion IRTモデルを組み合わせ,多肢選択について反応時間を用いた認知モデルを現在検討中である。これにより,従来よりも各項目から得られる情報量が増加し,結果として必要な項目数が減少することが期待される。平成30年度時点ではモデルを完成させ,計算速度の改善など実用化に向けた改良を行う予定であった。しかし現時点ではモデルが完成しておらず,また収集したデータの量も効果の検証には十分ではないことから,進捗としてはやや遅れていると判断する。(1)前年度に引き続きLBA IRTモデルとThurstonian Diffusion IRTモデルを組み合わせたモデルの検討を進める。段階評定に対して本モデルを適用する事により,通常の一対比較の項目(二択)よりも各項目から得られる情報量が増加し,結果として必要な項目数が減少することが期待される。(2)これをMLBAモデルなどと組み合わせることで,系統的なバイアスを抑制しながら文脈効果・順序効果を表現・分離することが可能なモデルを構築する。当初は「すべての評定者効果を単一のモデル内で表現する」ことを目指していたが,推定の負荷が高くなりすぎてしまい実用的ではなくなると考えられるなどの理由から,一部の評定者効果は項目形式を変更するなどの方法で抑制することを考えている。(3)以上の結果をまとめ,今年度中に博士論文を執筆する。本年度は、Linear Ballistic Accumulationモデル(LBA)に基づく項目反応モデルについての考察を中心に行った。モデルの構築にあたり,追加の情報を用いることを考える上で、最もコストを抑えて得ることができる情報として(CBT形式の場合は)反応時間を使用することが考えられる。LBAは反応時間と項目反応を同時に分析対象とすることが可能なモデルの代表の一つであるが、このモデルは通常項目側のみのパラメータを持つものであるため、このままでは評定者効果をパラメータとして組み込むことが難しい。一方で、LBA同様に反応時間と項目反応を同時に分析対象とすることが可能なモデルとしてDiffusionモデル(DM)がある。DMは先行研究で項目反応理論への拡張が提案されているものの、多肢選択への応用が難しい。本年度の研究では先行研究の考え方を応用し、LBAをDMと同様の形で項目反応理論の枠組みに組み込むモデルを提案した。DMを項目反応理論に拡張した先行研究では、各パラメータ(drift rate及びboundary)のそれぞれを評定者及び項目の項に分解して組み込んでいる。そこで、同様のパラメータ設定をLBAにて表現した上で、このモデルと従来のDMモデルを比較した結果、推定値は従来モデルと非常に高い相関を示した一方で、推定までの収束回数(MCMCアルゴリズムによる)も従来モデルより少なく抑えられることが明らかとなった。これにより、項目反応と反応時間を同時に利用する多肢選択モデルのパラメータとして評定者効果を表現することが可能となる。本研究の成果の一部を国内学会及び国際学会で発表し、またこの発表に基づいた論文が現在査読中である。平成29年度は,様々な分野における意思決定モデルのレビューを行い,評定者効果を統一的に表現するモデルの構築を行う予定であった。これについて,反応時間を用いて評定者効果の一部を表現し,かつ多肢選択に適用することができるモデルの基礎を提案した論文が現在査読中である。しかし,多様な評定者効果の多くをモデルに組み込むことはできておらず,またモデルの実証研究を行うための大規模データの整備を十分に進めることができていないことから,現在までに進捗としてはやや遅れていると判断する。

当初の研究目標であった「多様な評定者効果を統一的に表現する」ことについて,あらゆる効果を同時に単一のモデルで表現することは困難であると判断し,寛大化・厳格化傾向や中心化傾向などの系統的なバイアスを生じる評定者効果についてこれを抑制するという方向性でも考察を進めている。従来のリッカート法での質問ではこのような系統的バイアスを抑制することが難しく,それらのバイアスの個人差を表すパラメータをモデルに投入することで分離を図ってきた。一方で一対比較・多肢選択などの回答形式を導入することにより,系統的バイアス自体を抑制することができる。そのため,一対比較・多肢選択形式を用いることで文脈効果及び順序効果などの評定者効果にフォーカスしたモデルの構築が可能になると考えている。本研究の成果の一部は国際学会にて発表し,またこの研究に基づいた論文は現在査読中である。また,LBA IRTモデルとThurstonian Diffusion IRTモデルを組み合わせ,多肢選択について反応時間を用いた認知モデルを現在検討中である。これにより,従来よりも各項目から得られる情報量が増加し,結果として必要な項目数が減少することが期待される。平成30年度時点ではモデルを完成させ,計算速度の改善など実用化に向けた改良を行う予定であった。しかし現時点ではモデルが完成しておらず,また収集したデータの量も効果の検証には十分ではないことから,進捗としてはやや遅れていると判断する。Linear Ballistic Accumulationについて,各選択肢の指向が他選択肢の影響を受けて変化するモデルについてすでに関連研究が出てきているため,今後は現在まだ組み込むことができていない「評定の順序」等に関係するものを中心にモデル式における表現方法を考案していく予定である。同時に,モデルが複雑になることで推定にかかる時間が増大することが予想されるため,これを解決する手段として変分ベイズなどの簡便な方法について理論的検討を行い適用可能性を探ることが必要である。加えて,提案モデルの性能を評価するための実証研究のデータ整備のために,オンライン実験を予定しており,こちらのフレームワークも作成する予定である。(1)前年度に引き続きLBA IRTモデルとThurstonian Diffusion IRTモデルを組み合わせたモデルの検討を進める。段階評定に対して本モデルを適用する事により,通常の一対比較の項目(二択)よりも各項目から得られる情報量が増加し,結果として必要な項目数が減少することが期待される。(2)これをMLBAモデルなどと組み合わせることで,系統的なバイアスを抑制しながら文脈効果・順序効果を表現・分離することが可能なモデルを構築する。当初は「すべての評定者効果を単一のモデル内で表現する」ことを目指していたが,推定の負荷が高くなりすぎてしまい実用的ではなくなると考えられるなどの理由から,一部の評定者効果は項目形式を変更するなどの方法で抑制することを考えている。(3)以上の結果をまとめ,今年度中に博士論文を執筆する。
船舶の衝突・座礁を防ぐ安全教育の開発

海運会社での調査から、海上交通の状況認識と、それに対する対応が問題であることが確認された。眠気の緩和について十分なデータが得られなかった。操船シミュレータ実験から操船者の状況認識について経験差の特徴を明らかにした。これを基に安全教育プログラムを開発した。それはシミュレータにて操船させ、各自の操船結果および状況認識結果を提示し互いに意見交換をさせるものであった。これにより他者の状況認識内容や状況への対応を学習することになる。研修参加者からは従前と異なる有効な研修であるとの評価を得た。眠気緩和について目的を達成できなかったが、新たな海上交通における安全教育プログラム手法を明らかにすることができた。本研究は、これまでに得た操船者に関する知見をベースに、安全運航達成のために、眠気を緩和したうえで、海上交通における安全教育プログラム手法を明らかにするものである。平成27年度においては、船社におけるヒアリング調査を実施し、実態調査項目の策定、他産業における取組みに関する継続的情報収集、船舶操縦中の眠気を緩和する簡単な作業についての検討を計画した。船社におけるヒアリング調査では、外航船社2社、内航船社2社について実施した。また神戸大学大学院海事科学研究科附属海事研究センター海事安全管理部門が開催したワークショップにて外航船社1社、海事コンサルタント、陸上産業における取り組み事例について情報収集を行った。その結果、各海運会社における安全教育や安全管理活動にはそれぞれ特徴があった。一つ目として、新入社員研修の段階において自己の作業管理技術について説明し、技能獲得方法を操船シミュレータを用いて指導する研修があった。次に新入社員にリソース・マネジメントに関する座学を行い、そのご操船シミュレータを用いて指導する研修があった。これらについてはその後継続的に研修が行われるとのことであった。また運航船舶に担当者が乗船し実態調査から得られた要変更事項を社内で共有しフィードバックを行う方法もあった。以上のような結果を基に検討した結果、当初検討していた7つの実態調査項目をベースとしながら、特に運航中の他船に関する状況認識と座礁防止に関わる船舶の位置確認について実態を調査する必要性があると考えられた。当初計画していた船社におけるヒアリング調査は対象企業の変更はあったが実施し、実態調査項目の策定選定検討を行うことができた。一方で船舶操縦中の眠気を緩和する簡単な作業についての検討については神戸大学大学院海事科学研究科が所有する大型操船シミュレータ棟の耐震工事のために実験方法の検討に留まり、予備実験を行うことができなかった。本研究は、これまでに得た乗船者に関する知見をベースに、安全運航達成のために、眠気を緩和したうえで、海上交通における安全教育プログラム手法を明らかにしようとするものである。平成28年度においては便乗調査、安全教育プログラムの検討、船社との眠気の緩和作業と安全教育プログラム実施に関する調整を行うことであった。便乗調査については船社との調整がつかず当年度において実施することができなかったが、学内で行われた研修ならびに船社における研修に参加し、操船シミュレータにて船舶を運航中に調査を行った。その結果、他船に関する状況認識と座礁防止にかかわる船舶の位置確認は重要であることは認識されていた。しかしながら用いる言葉は同じであっても、各自の操船経験年数や操船経験船舶の大きさといった航海経験によって、タイミングや内容に違いがあるように観察された。状況認識は「見張り」という言葉の中の一部として重要と認識しながらも、状況認識の内容や認識された状況への対応方法は異なった。これらに対して現場においては「引き出しの数を多く持つこと」という言葉で検討することの重要性を表現しており、安全教育の一つのポイントであると考えられた。また「当たり前のことを、馬鹿にせず、ちゃんと行う」という言葉で研修が行われていたが、これについては並行する心理学的知見の調査としては、なぜ当たり前のことを実行に移せないのかを理解する必要性を指摘する研究もあり、これも安全教育のポイントになるであろうと推察された。眠気の緩和作業については、多くの船社では前方注視を指導しているために別作業に対しての理解を得ることができなかった。これについては普段の運航中に行われている作業が眠気を緩和している可能性を学術的にデータで示さなければ現場の理解を得ることができず、引き続き実験を継続してデータを蓄積する必要があると考えられた。当初計画していた便乗調査が船社の都合と研究者の都合が合わず実施できなかったことは、計画の遅延を予測させた。しかしながら、操船シミュレータを用いた学内での研修や船社の協力を得て調査を行った。また当該船社が所有する操船船シミュレータ研修に参加し調査させていただくことができた。その結果、便乗調査と同等のデータを収集することができたと考える。このデータを用いて安全教育プログラム内容を検討した。しかし船社との議論の進捗に遅れがあり安全教育プログラム案が完成していないことに問題があるが、ある程度の合意には至っていると評価する。このため来年度の研究においてプログラムの試行実施は可能であると考えている。一方で眠気緩和のための作業に関しては、実際の運航現場における指導内容と祖語があるために安全教育プログラムに含めることは断念せざるを得ない。しかしながら眠気緩和が望まれれていることは先行研究や現場でのヒアリングにおいて明らかであるため、引き続き学術的研究を進める意義がある。したがって船社の安全教育プログラムには含めることはできないが、学生の協力を得て研究を進めることとした。以上から、研究成果を基に来年度において具体的な安全教育プログラムの試みが可能となったと考え、上述の評価とした。

本研究は、これまでに得た操船者に関する知見をベースに、安全運航達成のために、眠気を緩和したうえで、海上交通における安全教育プログラム手法を明らかにするものであった。海運会社における安全教育や安全管理活動調査から、座学と操船シミュレータを用いて指導する研修や、担当者が乗船し危険につながる事項を社内で共有する方法があった。操船シミュレータ研修の観察調査から、操船者の航海経験によって状況認識の内容や認識された状況への対応が異なった。現場では「引き出しの数を多く持つこと」という言葉で経験の重要性を説いていた。また「当たり前のことを、馬鹿にせず、ちゃんと行う」という言葉で各作業の重要性が説かれていたが、文献調査では、なぜ当たり前のことを実行に移せないのかを理解する必要性を指摘する研究があった。眠気の緩和作業については、船社から別作業に対しての理解を得ることができなかった。平成29年度においては、まず眠気緩和に関する実験を行ったが、船社の担当者を納得させるデータを得ることができなかった。次に得られた知見を下に安全教育プログラムを作成した。具体的には、まず操船シミュレータを用い研修参加者が個別に全く同じ操船シナリオで操船をする。そこでは予め決めておいた数回のタイミングで状況認識に関する用紙に記入させヒアリングを行う。次に研修参加者を集め、状況認識に関する用紙ならびに操船シミュレータ結果を提示し互いに結果を見ながら意見交換をさせる。これにより研修参加者は経験により異なる状況認識の内容や認識された状況への対応を学習することになり、また各作業について重要性を学ぶことになる。3回の試行し、研修参加者からは従前と異なる有効な研修であるとの高評価を得た。本研究では眠気緩和について目的を達成できなかったが、新たな海上交通における安全教育プログラム手法を明らかにすることができた。海運会社での調査から、海上交通の状況認識と、それに対する対応が問題であることが確認された。眠気の緩和について十分なデータが得られなかった。操船シミュレータ実験から操船者の状況認識について経験差の特徴を明らかにした。これを基に安全教育プログラムを開発した。それはシミュレータにて操船させ、各自の操船結果および状況認識結果を提示し互いに意見交換をさせるものであった。これにより他者の状況認識内容や状況への対応を学習することになる。研修参加者からは従前と異なる有効な研修であるとの評価を得た。眠気緩和について目的を達成できなかったが、新たな海上交通における安全教育プログラム手法を明らかにすることができた。平成28年度については、他産業における取組みに関する継続的情報収集を行いながら、便乗調査、便乗調査結果の検討と安全教育プログラムの検討、船社との眠気の緩和作業と安全教育プログラム実施に関る調整が計画されている。
アピオスイソフラボン類の機能性とそれに関与する糖鎖の微細構造

アピオスにおけるイソフラボン組成について検討するとともに、アピオスの有効な利用方法についても検索した。現在までのところそのほとんどが廃棄されている茎部においてイソフラボン組成が塊茎部とは異なり、さらに抗酸化活性が高いという大変興味深い結果が得られた。したがって、今後は茎部も塊茎部同様に有効利用することが期待された。アピオスの利用法としてパンへの利用を検討したところ、発酵工程で配糖体からアグリコンへの変換が認められた。アグリコンが配糖体に比べ体内への吸収効率が優れているとされることから、アピオスをパンへ利用することは、効率的な吸収に寄与できる利用法の一つであると考えられた。マメ科植物であるアピオス(Apios americana Medik)から、新規イソフラボンであるGenistein-7-O-genitiobiosideを新たに見出した。一般に通常の食生活では、ダイズおよびその加工品以外でイソフラボン類を摂取することは困難であるとされることから、アピオスをイソフラボン類の新たな摂取源として展開するための基盤を確立することを目的とした。アピオスにおける新規イソフラボンについて明らかにしてきたが、イソフラボン類の吸収にも多糖類が関与することが報告されている。したがって、イソフラボンの機能性について検索するうえで、多糖類についても詳細な構造について検討しながら、その多糖類の微細構造との関連性についても見ていく必要があると思われる。しかしながら、アピオスにおいては、食物繊維を含む多糖類糖鎖の微細構造は明らかではない。そこで、糖鎖微細構造の差異が、生理機能にも及ぼす影響について理解するために、食物繊維を含む多糖類糖鎖の微細構造の詳細を明らかにすることとした。微細構造の詳細については現在検討中である。一方で、アピオスの収穫および貯蔵の際、塊茎切り口から乳白色の液体が染み出すことが経験的に知られている。それは時間とともに黒ずんでくるため、外観を悪くする要因の一つになっている。また、粘性を持つことから、調理・加工においては、作業効率を悪くしている。したがって、乳白色の液体について生産性および利用価値の向上のためにも十分な理解が必要である。同様の現象はサツマイモにおいても見られ、その乳白色の液体はヤラピンという糖脂質の一種であるとされている。そこで、アピオス抽出物についても検討したところ、様々な機能性が期待できる糖脂質の存在を明らかになった。マメ科植物であるアピオス(Apios Americana Medik)から、新規イソフラボンであるGenistein-7-O-genitiobiosideを新たに見出した。一般に通常の食生活では、大豆およびその加工品以外でイソフラボン類を摂取することは困難であるとされることから、アピオスをイソフラボンの新たな摂取源として展開するための基盤を確立することを目的とした。アピオスのイソフラボン類の吸収には多糖類が関与することが報告されていることから、イソフラボン類の機能性について検索するうえで、多糖類についても詳細な構造など検討しながら、吸収に関与する多糖類の微細構造についても見ていく必要があると思われる。しかしながら、アピオスにおいては、食物繊維を含む多糖類の微細構造については明らかではない。そこで、糖鎖微細構造の詳細を明らかにすることとした。詳細については現在も引き続き検討中である。一方で、アピオスを販売する際、通常、食用となる塊茎部と塊茎部の間にある茎部は除去し、廃棄されており、それが加工、販売において大変な時間と労力を要することが知られている。その茎部についてはイソフラボンを含め、十分な検討がされていないことから、本年度は茎部についても塊茎部のイソフラボンについて分析したところ、塊茎部とは異なる溶出パターンであることが確認された。さらに抗酸化活性についても検討したところ、塊茎部に比べ茎部で高いという大変興味深い結果が得られた。したがって、茎部も塊茎部同様に有効利用することが期待された。食品中のイソフラボンは主として配糖体として存在し、唾液、小腸粘膜の酵素あるいは腸内細菌の作用により産生されるβ-グルコシダーゼによりアグリコンに加水分解されることで腸管から体内に吸収される。しかしながら、腸内細菌の働きには個人差があるため、より効果的に摂取するにはアグリコンとしての摂取が望ましいと考えた。そこで調理加工における配糖体への変換について検索したところ、茹でや蒸すといった利用法よりも、製パンの素材として利用することでアグリコンへの変換が顕著であることが認められた。一方で、アピオスを販売する際、通常、食用となる塊茎部と塊茎部の間にある茎部は除去し、廃棄されており、それが加工、販売において大変な時間と労力を要する。そこで茎部のイソフラボンについても調査したところ、塊茎部とは異なるイソフラボンの溶出パターンであることが確認された。さらに抗酸化活性についても検討したところ、塊茎部に比べ茎部で高い活性を示すという大変興味深い結果が得られた。したがって、茎部も塊茎部同様に加工品の素材として有効利用することが望ましいことが示唆された。

アピオスにおけるイソフラボン組成について検討するとともに、アピオスの有効な利用方法についても検索した。現在までのところそのほとんどが廃棄されている茎部においてイソフラボン組成が塊茎部とは異なり、さらに抗酸化活性が高いという大変興味深い結果が得られた。したがって、今後は茎部も塊茎部同様に有効利用することが期待された。アピオスの利用法としてパンへの利用を検討したところ、発酵工程で配糖体からアグリコンへの変換が認められた。アグリコンが配糖体に比べ体内への吸収効率が優れているとされることから、アピオスをパンへ利用することは、効率的な吸収に寄与できる利用法の一つであると考えられた。今年度までの結果から、まだ十分にアピオスにおける食物繊維の特徴は明らかにできていないことから、引き続き検討していくことが必要であると考えられるが、新たに茎部における機能性について見出された大変興味深い結果となったことから、おおむね順調に進展していると考えられる。複合領域今年度までの結果をされに発展させ、アピオスに含まれるイソフラボン類のより効果的な摂取方法について検討し、アピオスがイソフラボンの摂取源となりうることを明らかにする。今年度は、通常廃棄されている茎部の利用法についても検討したところ、塊茎部よりも抗酸化活性が顕著に高いことが明らかとなったことから、それらも併せて今後進めていく必要があると感じられた。さらに、イソフラボン類の吸収には多糖類が関与していることから、食物繊維を含む多糖類糖鎖の微細構造を解析したうえで、消化作用による微細構造の変化についても解析し、イソフラボン類との相互作用について明らかにしていきたい。今年度までの結果からは、まだ十分にアピオスにおける食物繊維の特徴は明らかにできていない。したがって引き続き、アピオスの食物繊維について検討していくことが必要であると思われることから、やや遅れていると考えられる。今年度までの結果をさらに発展させ、アピオスに含まれるイソフラボン類のより効果的な摂取方法について検討し、アピオスがイソフラボン類の摂取源になりうることを明らかにする。また、実験操作の過程で新たな有効成分について見出された際は、それらについてもイソフラボン類同様に機能性も含め明らかにしていく。食物としての摂取した場合の可能性を考慮した機能性の展開を試みることとした。イソフラボン類の吸収に多糖類が関与することから、食物繊維を含む多糖類糖鎖の微細構造を解析したうえで、消化作用による微細構造の変化について解析し、イソフラボン類との相互作用について明らかにすることで、消化作用が抗酸化作用に及ぼす影響についての基礎的な知見を得る。消耗品の一部が割引等で購入費用が抑えられたため残額が437円発生した。次年度の消耗品費として使用予定
選択的リグニン分解性担子菌の脂質代謝関連酵素遺伝子の機能解析

本研究は,リグニン分解性担子菌の一種であるCeriporiopsis subvermisporaが有するユニークな選択的リグニン分解機構を分子レベルで解明することを目指し,本機構への関与が強く示唆される脂質代謝関連酵素遺伝子の機能解析を目的とした.今年度は,これまでにC.subvermisporaから単離した脂肪酸不飽和化酵素,脂肪酸合成酵素,アセチル-CoAカルボキシル基転移酵素,長鎖脂肪酸活性化酵素をコードする遺伝子について,さまざまな培養条件下での転写解析をおこなった.その結果,リグニンフラグメントの一種を培地に添加すると,とくに脂肪酸不飽和化酵素遺伝子の転写誘導が顕著となることが分かった.それに加えて,他の脂質代謝関連酵素遺伝子のうち,数種類の転写が誘導されることも明らかとなった.実際,リグニンフラグメント添加時には菌体成長,リグニン分解酵素活性,そして,長鎖不飽和脂肪酸の産生量が促進される.これらの現象と今回の酵素遺伝子の転写誘導は選択的リグニン分解のプレーヤーである脂質代謝物の生合成系の促進と密接に関係していると考えられ,極めて興味深い.さらに,単一の刺激で複数の脂質代謝関連酵素遺伝子の転写が誘導されるという今回の結果については,複数の遺伝子の転写を同調的に誘導させる何らかの転写制御因子の関与が予想される.一方,長鎖脂肪酸活性化酵素については大腸菌での高発現および精製に成功した.本研究は,リグニン分解性担子菌の一種であるCeriporiopsis subvermisporaが有するユニークな選択的リグニン分解機構を分子レベルで解明することを目指し,本機構への関与が強く示唆される脂質代謝関連酵素遺伝子の機能解析を目的としている.今年度は,これまでに完全長cDNAを取得している脂肪酸不飽和化酵素遺伝子に加えて,脂肪酸合成酵素,アセチル-CoAカルボキシル基転移酵素,長鎖脂肪酸活性化酵素をコードする遺伝子(cDNA)を新たにクローニングし,様々な培養条件におけるこれら酵素遺伝子の転写解析を行った.その結果,培養温度を低温にすると,特に脂肪酸不飽和化酵素遺伝子の転写誘導が顕著であることが分かった.この現象は,様々な微生物種に見られる細胞膜の流動性保持のための応答によるものと示唆される.また,リグニンフラグメントの一種を培地に添加すると,これら脂質代謝関連酵素遺伝子の内,数種類の転写が誘導されることも明らかとなった.実際,リグニンフラグメント添加時には菌体成長,リグニン分解酵素活性,そして,長鎖不飽和脂肪酸の産生量が促進される.これらの現象と今回の酵素遺伝子の転写誘導は選択的リグニン分解のプレーヤーである脂質代謝物の生合成系の促進と密接に関係していると考えられ,極めて興味深い.さらに,単一の刺激で複数の脂質代謝関連酵素遺伝子の転写が誘導されるという今回の結果については,複数の遺伝子の転写を同調的に誘導させる何らかの転写制御因子の関与が予想される.一方,長鎖脂肪酸活性化酵素については大腸菌での高発現及び精製に成功した.本研究は,リグニン分解性担子菌の一種であるCeriporiopsis subvermisporaが有するユニークな選択的リグニン分解機構を分子レベルで解明することを目指し,本機構への関与が強く示唆される脂質代謝関連酵素遺伝子の機能解析を目的とした.今年度は,これまでにC.subvermisporaから単離した脂肪酸不飽和化酵素,脂肪酸合成酵素,アセチル-CoAカルボキシル基転移酵素,長鎖脂肪酸活性化酵素をコードする遺伝子について,さまざまな培養条件下での転写解析をおこなった.その結果,リグニンフラグメントの一種を培地に添加すると,とくに脂肪酸不飽和化酵素遺伝子の転写誘導が顕著となることが分かった.それに加えて,他の脂質代謝関連酵素遺伝子のうち,数種類の転写が誘導されることも明らかとなった.実際,リグニンフラグメント添加時には菌体成長,リグニン分解酵素活性,そして,長鎖不飽和脂肪酸の産生量が促進される.これらの現象と今回の酵素遺伝子の転写誘導は選択的リグニン分解のプレーヤーである脂質代謝物の生合成系の促進と密接に関係していると考えられ,極めて興味深い.さらに,単一の刺激で複数の脂質代謝関連酵素遺伝子の転写が誘導されるという今回の結果については,複数の遺伝子の転写を同調的に誘導させる何らかの転写制御因子の関与が予想される.一方,長鎖脂肪酸活性化酵素については大腸菌での高発現および精製に成功した.
電子ネットワーク上における集団感情とバイアスに関する総合的検討

今年度は前年度の研究で課題となっていた,問題解決者が知覚する集団に対するポジティブ/ネガティブな感情の表出による認知プロセスへの影響に関する検討を行った.具体的には,林(2014)の仮想集団実験パラダイムを用いて,協同問題解決場面のグループメンバーが課題遂行時にポジティブ/ネガティブな感情の表出をエージェントを用いて操作し,協同問題解決がどのように影響するのかを検討した.実験では,先行研究で明らかにしてきた集団内の異論を唱える少数派のメンバーによって作り出させる葛藤に着目し,集団感情の種類によって思考バイアスがどのように変わるのかを検討した.その結果,集団内の各メンバーがポジティブな感情が表出する発言の頻度が増大するほど,異論を唱える少数派のメンバーに対する視点取得の頻度も多くなることが明らかになった.この分析を加えた研究の成果は,米国の認知科学の雑誌論文である,Cognitive Scienceに研究の成果が掲載された(Hayashi(2018), The power of a "Maverick" in collaborativeproblem solving: An experimental investigation of individual perspectivetaking withina group, Cognitive Science, 42,69-104.前年度の検討を通じて,問題となっていた点に関する検討を行うことができた.またこれらの検討を通じて,最終年度に計画している葛藤解決のための対話のデザインに向けてどのような指標に着目すべきかについての新たな示唆も得られた.今後は,最終年度の計画としてあった葛藤解決のためのユニバーサルな対話のデザインとは何かを探るための検討を行う.ここまでは,集団内でのダイナミックスが生じる場面での検討が中心であったが,個別の事例の分析からは,他者認知や対人レベルでの詳細なコミュニケーションのプロセスに関する検討も必要であることが示唆されている.そこで,次年度はより集団を形成するミクロな単位である対人レベルにおける葛藤解決時に行うコミュニケーションも視野に入れながら,検討を行って行く予定である.電子掲示板やSNS(Social Network Service)の普及に伴い,ネットワーク上で不特定多数の相手との意見交換が即時的かつ容易に行えるようになってきた.そこでは,異なる考えや価値観を持つ相手と触れ合う機会ができるが,一方では,意見の対立や葛藤も生じやすく,ネガティブな側面もある.本研究では,電子ネットワーク上の集団内の人間同士による葛藤の本質に迫るため,実証的なアプローチによる検討を行う.特にここでは,1.集団内で作り出される「集団感情」に着目し,それが葛藤にどのように影響するのか,2.またそれを抑制する方法とは何かを検討する.このような中で今年度の目標は,電子ネットワーク上における思考のバイアスや集団感情に関する探索的に検討を行うことであった.そこで,ネットワーク上で複数のメンバーが互いの考えに対して葛藤が生じる規則発見課題を用いて実験室実験を行った.そこでは,実験参加者が葛藤状態を経てどのような思考活動を行っているのかを検討した.その結果,自己-他者,および他者-他者間で作られる信頼構築プロセスが特定のものの見方に固着してしまうバイアス的な思考に影響することが明らかになった.さらに今年度は,電子ネットワーク上における集団感情に関連する要因として,ネットワーク上での口コミの影響に関する検討も行った,ここでは,オンラインショッピングの課題を用いて,負の口コミの提示によってバイアス的な思考が緩和されることが明らかになった.今年度は,電子ネットワーク上の集団感情に関する探索的な検討を行うことが目的であった.そこで,集団感情に関わる要因に関するいくつかの実験的な検討を行い,次年度の仮説検証実験に向けて重要な仮説を導出することができた.前年度までに実施した探索的な検討を通じて,問題解決場面における電子ネットワーク上の他者との意見交換において.メンバーに対して持っているポジティブ/ネガティブな「感情」や「信頼」が葛藤の抑制とバイアス思考を抑制する要因になることが明らかになった.そこで,これらの知見をもとに集団による協同問題解決の実験室実験で利用する対話エージェントを過去の研究成果をもとに開発を行い,実験中にエージェントが仮想的に感情表出を行い,それを実験的に操作して利用できるようにした.また,次年度に予定していた課題中に信頼度の自己/他者評価が行えるインタフェースの構築も行い,課題中に自己/他者の信頼を実験的に操作しながら検討を進めるように実験システムの開発を行った.信頼度の要因を操作した実験の結果では,ネットワーク上でのメンバーが相互にネガティブな信頼を構築する場合には,意見の対立や葛藤が生じた際の思考バイアスを話し合いの中で抑制することは出来ないことが明らかになった.一方で時間とともにポジティブな信頼がグループ内で形成されれば,メンバー内で葛藤が生じていても思考バイアスを緩和し,異なる視点を取得するする活動が発現することが実験室実験を通じて明らかになった.この研究成果は,人工知能学会論文誌(「信頼構築プロセスが協同問題解決の視点取得に及ぼす影響:エージェントを利用した実験的検討」)にて発表した.また,国際会議の研究発表として,ネットワーク上の他者とのジレンマ状況でのインタラクションに関する検討(CogSci2017)やエージェント(ロボット)に対する信頼度に関する調査(HRI2018)も発表した.今年度までに実施する予定であった対話エージェントの開発に加え,グループメンバーのメタ認知を喚起させるインタフェースの検討も行った.また,信頼度に着目した実験も実施し,集団によって発生する葛藤時において思考バイアスを緩和する要因を検討することが出来た.今年度は前年度の研究で課題となっていた,問題解決者が知覚する集団に対するポジティブ/ネガティブな感情の表出による認知プロセスへの影響に関する検討を行った.

具体的には,林(2014)の仮想集団実験パラダイムを用いて,協同問題解決場面のグループメンバーが課題遂行時にポジティブ/ネガティブな感情の表出をエージェントを用いて操作し,協同問題解決がどのように影響するのかを検討した.実験では,先行研究で明らかにしてきた集団内の異論を唱える少数派のメンバーによって作り出させる葛藤に着目し,集団感情の種類によって思考バイアスがどのように変わるのかを検討した.その結果,集団内の各メンバーがポジティブな感情が表出する発言の頻度が増大するほど,異論を唱える少数派のメンバーに対する視点取得の頻度も多くなることが明らかになった.この分析を加えた研究の成果は,米国の認知科学の雑誌論文である,Cognitive Scienceに研究の成果が掲載された(Hayashi(2018), The power of a "Maverick" in collaborativeproblem solving: An experimental investigation of individual perspectivetaking withina group, Cognitive Science, 42,69-104.前年度の検討を通じて,問題となっていた点に関する検討を行うことができた.またこれらの検討を通じて,最終年度に計画している葛藤解決のための対話のデザインに向けてどのような指標に着目すべきかについての新たな示唆も得られた.次年度は,今年度に得られたデータをもとに仮説を立てて対話エージェントを用いた実験を行う予定である.そのための実験システムの構築や実験の実施を進めていきたい.今年度は集団による信頼度構築に着目した検討は進んだものの,集団のポジティブ/ネガティブな感情の表出に関しては成果が出ていない.そこで,今後はグループメンバーによって表出される集団のポジティブ/ネガティブな感情の表出について検討を行う.その際には,これまでの集団による知識創造の先行研究で明らかになってきた集団内の異論を唱える少数派のメンバーによって作り出させる葛藤に着目し,集団感情の種類によって思考バイアスがどのように変わるのかを検討し,研究成果を出していきたい.今後は,最終年度の計画としてあった葛藤解決のためのユニバーサルな対話のデザインとは何かを探るための検討を行う.ここまでは,集団内でのダイナミックスが生じる場面での検討が中心であったが,個別の事例の分析からは,他者認知や対人レベルでの詳細なコミュニケーションのプロセスに関する検討も必要であることが示唆されている.そこで,次年度はより集団を形成するミクロな単位である対人レベルにおける葛藤解決時に行うコミュニケーションも視野に入れながら,検討を行って行く予定である.今年度に予定していた実験は想定していたよりも小規模な内容で実施することができた.
『海外異聞』を中心とする漂流記集の成立と展開についての文学的研究-漂流記は文学の一ジャンルたりうるか-

漂流記の大多数は、近世末期に集中して現れる。いわば近世末期、漂流記は文芸の一ジャンルを形成していた。「紀行」でありまた「実録」である「漂流記」の多くは、「読み物」として読み継がれたのである。明治期以降も漂流記物が「読み者」として人気を得たのは、漂流記が文芸の一ジャンルと化していたからにほかならない。漂流記の流布に関しては、蘭学者や好事家のネットワーク・貸本屋の存在などが考えられる。実際の写本総数から見て、漂流記集の形で漂流記が流布したのは全体のおそらく一割程度であろう。ただし、それら特定の「場」に漂流記は集合し、そこから複写される形で流布していった。特定の漂流記が流布する契機をそれら漂流記集が加担した割合は高く、それらを集中的に管理・保存し、全体として流布される役割を「漂流記集」が果たした。当初『海外異聞』がもった積極的な「規範」のみを予測したが、例えば漂流記集の系譜が地域別・時代順という配列を取ることが殆どなかったというようなマイナ-な規範をも『海外異聞』が作り出した気配がある。またそれは漂流記の文芸的価値が資料的価値を上回ったことをも示す。これをもっとも端的に表すのが、明治に入って成された石井研堂の集成であろう。彼の成した数次の漂流記集成は、間違いなくそれらの文学的価値に保証されていたし、彼の集成によって「文学としての漂流記」は、明確に再浮上することとなった。特定の漂流記が人口に膾炙するに至る過程は、考証随筆や実録を思わせる。同一の素材が変化することは写本型文芸の通例であるが、それよりもなお大きな幅で物語化する場合があることは、このジャンルの特性といえる。「聞き書き」である「調書」が一人称の「語り」と化し、さらに「物語」化する過程を具体的に示す事例にはこと欠かない。漂流記を「圏外文学」としてではなく近世後期の文学状況の内に位置づける作業が今後必要となるであろう。
ヒト概日リズムシステム伝達様式の多様性とその加齢変化に関する研究

本研究では,ヒトにおける神経性及び液性概日シグナルの伝達様式の多様性と概日リズム睡眠障害などのリズム同調不全時での内的脱同調の実態を評価することを目的とした.液性シグナル指標として視交叉上核からの直接的な神経投射を受けていないヒト単核球および多核球内におけるhPer1,hPer2,hPer3,Clock, BMAL1,Timeless, Cry1,Cry2,Dec1,Dec2の10種類の時計遺伝子群,及び,内部標準補正用のβ-actinの発現定量法を確立した.測定には特異的ハイブリプローブを用いたReal Time PCR法を用い,遺伝子ごとに内標用プラスミドを作成し発現定量解析を行った.修正型コンスタントルーチン法を用いてリズム特性を評価し,解析には12/24-h compositeもしくはsingle cosine modelを用いた.ヒト末梢循環白血球においても上記の時計遺伝子ループを構成する主要遺伝子群すべての転写発現が認められた.hPer1,hPer2,hPer3では暗期から明期への移行期に転写リズム頂点位相が集中し,Clock転写には有意な慨日変動は認められかった.これらの転写特性は夜行性動物である齧歯類における視交叉上核細胞や末梢細胞での転写特性に近似していた.また,単核球および多核球では末梢循環数や細胞機能リズムのピーク位相が異なるにもかかわらず,両分画細胞ともに各遺伝子位相は同一位相を示した.さらに,単核球および多核球内hPer1転写リズム位相は神経性シグナル指標であるメラトニン分泌リズム位相との間に高い正の相関を示した.すなわち,生物時計からの直接的な神経投射を受けていないヒト末梢単核球もまた生物時計支配下に液性因子を介してリズム同調を受けていること,夜行性昼行性にかかわらず時計遺伝子転写リズム位相は普遍的に保たれていることが示唆された.健常若年被験者及び60代健常被験者管での比較により,生理機能リズム及びSCNからの直接的な神経投射を受けない末梢循環単核球におけるhPer1,hPer2,hPer3転写リズムの同調位相に有意な年齢群間差が生じていなかった.すなわち,少なくとも同調生活条件下における60代までの健常者では液性概日シグナルによる末梢時計の同調能力が若年群と同程度に安定保持されていることが示唆された.非24時間睡眠・覚醒症候群患者におけるフリーラン経過中のメラトニン分泌,深部体温,及びhPer群の転写リズムの解析から,神経性概日シグナル支配下の各種生理機能リズムと液性支配下の末梢時計との間に多様な同調及び脱同調様式が存在する可能性が示唆された.本研究では,ヒトにおける神経性及び液性概日シグナルの伝達様式の多様性と概日リズム睡眠障害などのリズム同調不全時での内的脱同調の実態を評価することを目的とした.液性シグナル指標として視交叉上核からの直接的な神経投射を受けていないヒト単核球および多核球内におけるhPer1,hPer2,hPer3,Clock, BMAL1,Timeless, Cry1,Cry2,Dec1,Dec2の10種類の時計遺伝子群,及び,内部標準補正用のβ-actinの発現定量法を確立した.測定には特異的ハイブリプローブを用いたReal Time PCR法を用い,遺伝子ごとに内標用プラスミドを作成し発現定量解析を行った.修正型コンスタントルーチン法を用いてリズム特性を評価し,解析には12/24-h compositeもしくはsingle cosine modelを用いた.ヒト末梢循環白血球においても上記の時計遺伝子ループを構成する主要遺伝子群すべての転写発現が認められた.hPer1,hPer2,hPer3では暗期から明期への移行期に転写リズム頂点位相が集中し,Clock転写には有意な慨日変動は認められかった.これらの転写特性は夜行性動物である齧歯類における視交叉上核細胞や末梢細胞での転写特性に近似していた.また,単核球および多核球では末梢循環数や細胞機能リズムのピーク位相が異なるにもかかわらず,両分画細胞ともに各遺伝子位相は同一位相を示した.さらに,単核球および多核球内hPer1転写リズム位相は神経性シグナル指標であるメラトニン分泌リズム位相との間に高い正の相関を示した.すなわち,生物時計からの直接的な神経投射を受けていないヒト末梢単核球もまた生物時計支配下に液性因子を介してリズム同調を受けていること,夜行性昼行性にかかわらず時計遺伝子転写リズム位相は普遍的に保たれていることが示唆された.健常若年被験者及び60代健常被験者管での比較により,生理機能リズム及びSCNからの直接的な神経投射を受けない末梢循環単核球におけるhPer1,hPer2,hPer3転写リズムの同調位相に有意な年齢群間差が生じていなかった.すなわち,少なくとも同調生活条件下における60代までの健常者では液性概日シグナルによる末梢時計の同調能力が若年群と同程度に安定保持されていることが示唆された.非24時間睡眠・覚醒症候群患者におけるフリーラン経過中のメラトニン分泌,深部体温,及びhPer群の転写リズムの解析から,神経性概日シグナル支配下の各種生理機能リズムと液性支配下の末梢時計との間に多様な同調及び脱同調様式が存在する可能性が示唆された.ヒト単核球および多核球内を試料として、9種類の時計遺伝子、Per1、2、3、Clock、BMAL1、Timeless、Cry1、2、Casein kinase、及び、内部標準補正用のβ一actin等の数種類のhouse keeping gene発現定量法を確立した。

標的遺伝子の転写量測定は、配列特異的な蛍光標識オリゴヌクレオチドをプローブとするReal Time-PCR法を採用し、Roche社LightCycler法及びABI社Taqman法の二種を比較し、データの再現性を確認した上で、後者を標準法とした。初年度である本年度は、健常若年成人7名(平均年齢21歳、1924歳)、健常高齢者3名、アルツハイマー病患者1名を対象として、修正型コンスタントルーチン法を用いて上記時計遺伝子の転写リズム特性を評価した。若年及び高齢群では、睡眠表とアクチグラフにより睡眠・覚醒リズムの規則性を確認した後に7日間の生活統制を行い、睡眠、身体機能スクリーニングに続いて、室内照度、体動、カロリー摂取、放熱環境などのマスキングを厳密に統制した環境下で覚醒直後の08時(平均入眠時刻=00時)から連続28時間にわたり各種概日リズムマーカーを連続測定した。若年被験者の深部体温、メラトニン及びコルチゾール分泌リズム位相及び振幅は正常型を示した。単核球および多核球では末梢循環数や細胞機能リズムのピーク位相が異なるにもかかわらず、両分画細胞ともに各遺伝子位相(acrophase;コサイナー法による)は同一位相を示した。両分画細胞でのhPer1転写リズム位相には相互に正の相関関係が認められた(r=0.803,P<0.03)。さらに、両分画細胞ともにhPer1転写リズムのacrophaseは07-09時に出現し、各被験者での生物時計の位相マーカーであるメラトニン分泌リズム位相との間に高い正の相関が認められた(r=0.939,P<0.01)。これらの知見は、生物時計からの直接的な神経投射を受けていない末梢多核球及び単核球もまた、生物時計支配下に液性因子を介してリズム同調を受けていることを示している。本年度は、配列特異的な蛍光標識オリゴヌクレオチドをブローブとするReal Time PCR法を用いて、ヒト単核球および多核球内におけるhPer1、hPer2、hPer3、Clock、BMAL1、Timeless、Cry1、Cry2、Dec1、Dec2の10種類の時計遺伝子群、及び、内部標準補正用のβ-actinの発現定量解析を進めた。測定に際しては遺伝子ごとに内標用プラスミドを作成し半定量的発現定量解析を行った。初年度に追加して、健常若年成人9名、健常高齢者6名、視交叉上核障害モデルであるアルツハイマー病患者5名を対象として、修正型コンスタントルーチン法を用いて上記の時計遺伝子転写リズム特性を評価した。若年者群及び高齢者群では、睡眠表とアクチグラフにより睡眠・覚醒リズムの規則性を確認した後に7日間の生活統制を行い、睡眠、身体機能スクリーニングに続いて、室内照度、体動、カロリー摂取、放熱環境などのマスキングを厳密に統制した環境下で覚醒直後の08時(平均入眠時刻=00時)から連続28時間にわたり各種概日リズムマーカーを連続測定した。ヒト単核球においても上記の時計遺伝子ループを構成する主要遺伝子群すべての転写発現が認められた。hPer1、hPer2、hPer3、Cry1、Cry2、Dec1、Dec2では明期の前半期に転写リズム頂点位相が集中していた。一方、Clock、BMAL1転写には有意な概日変動は認められなかった。これらの位相特徴は齧歯類視交叉上核細胞や末梢細胞でのデータと近似していた。
糖鎖の多様性を産み出すメカニズム

N-グリコリルノイラミン酸(NeuGc)の発現はCMP-N-アセチルノラミン酸水酸化酵素により律速制御されている。ヒトの水酸化酵素遺伝子には一つのエクソンにあたる92bpの欠失があり、不活性型のタンパク質を作りだしていることが考えられる。NeuGc発現陽性のほ乳動物にあっても、神経系のシアル酸はほとんどがN-アセチルノラミン酸(NeuAc)で、NeuGcは極わずかしか検出されない。さらに脳組織で本酵素のmRNAがノーザン解析でほとんど検出できないことから、転写のレベルで抑制が起きている可能性を示唆している。この可能性を検証し、分子メカニズムを明らかにするために、マウス水酸化酵素遺伝子をクローニングし、13kbのクローンをえた。このクローンは水酸化酵素遺伝子の5'上流6.5kbを含んでおり、この塩基配列を決定した。エクソン1の下流にレポターとしてルシフェラーゼを挿入した組換え体を作成し、シアル酸の28%がNeuGcであるL929細胞に導入した。転写活性は検出できず、1kb断片を使っても、結果は同じであった。L929細胞で行われる主要な転写開始部位を確定する必要がある。糖脂質、糖タンパク質のGalβ1-3GalNAc糖鎖にGlcNAcをβ1-6で転移するβ6GlcNAc酵素はマウスで腎臓の近位尿細管上皮細胞特異的に発現制御を受けている。この酵素の発現が欠損するマウスをコントロールとして、本酵素で糖鎖の修飾を受ける糖タンパク質を同定した。この糖タンパク質はメガリンと呼ばれる分子量400kの糖タンパク質であることをマウス・メガリンのアミノ酸配列に基づいて作製したペプチド抗体で確認した。レクチンカラムでメガリンを精製し、メガリンのretinol binding Proteinに対する結合活性を蛍光相関分光法で測定した。GlcNAcβ1-6分岐を持つメガリンと持たないメガリンで結合活性を比較した。現時点で活性に差は認められない。ヒトのCMP-NeuAc水酸化酵素遺伝子は92bpの一つのエクソンに相当する配列が欠失していることが原因で、酵素活性を発現できず、ヒトの組織ではN-グリコリルノイラミン酸(NeuGc)が発現されない。この欠失により作られる不完全な蛋白質の実体は明らかでなく、これを明らかにするために、N末端、C末端に対するポリクローナル抗体の作成を行っている。92bpの欠失が生じた原因を明らかにするために、チンパンジーの遺伝子で92bpに相当する部分の5'及び3'フランキング領域イントロン塩基配列を解析中である。NeuGc発現に多型を示すマウスの亜種間の交配を行い、それぞれの個体から臓器を採取し、遺伝学的解析を行った。同時に肝臓の酸性糖脂質の構造解析を行い、亜種ではNeuAcを持つGM1,Gdlaが主要酸性糖脂質であることを同定した。雑種第1代ではNeuGcを持つGM1,NeuGcを2モルもつGdlaが主要酸性糖脂質となっている。F1を亜種に戻し交配して得られた個体は、2つタイプに分離し、NeuGc含有糖脂質を発現できない個体はCMP-NeuAc水酸化酵素活性を発現できないことを確認した。このことは、亜種がCMP-NeuAc水酸化酵素発現に関して劣性の遺伝変異を持つことを示している。亜種の変異がヒトの変異に対してどのような関係にあるかあるかを明らかにするために、亜種マウスの水酸化酵素遺伝子に関する解析を行っている。