hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
尿路悪性腫瘍の浸潤、転移において細胞外基質の果たす役割について

ラミニンとIV型コラーゲンは、ともに基底膜を構成する非コラーゲン性およびコラーゲン性糖蛋白である。IV型コラーゲンは、分子量約30万で、3本のα鎖が、3重螺旋構造を形成しており、コラーゲン分子のN末端で4分子が、C末端で、2分子が重合して、網目状のnet workを形成する。特に、4分子が重合した部位は、7S-collagen domainと呼ばれ、分子どうしが多くのS-S結合を有し、種々の蛋白分解酵素に対して安定であることが解ってきている。近年、悪性腫瘍の浸潤、転移の過程において、種々の細細胞外基質が重要な役割を果たすことが明らかになってきた。著者らは既に、腎細胞癌および前立腺癌患者における血清ラミニン濃度が高く、転移巣を有する群においてこの傾向が著しいこと、膀胱癌患者においては、転移巣を有する群においてのみこの値が高いこと等を報告し、血清ラミニン濃度が、悪性腫瘍の転移あるいは臨床経過の指標として利用しうることを示した。今回は、ラミニンと同様に基底膜を構成する細胞外基質であるIV型コラーゲンのN末端に相当する7S-domainの尿路悪性腫瘍患者血清中における濃度を測定し、血清ラミニン濃度とともに転移の有無や臨床経過に強い相関があるのではないかという考えの下に、臨床的検討を加えその結果を報告する。血清ラミニン濃度が、腎細胞癌、前立腺癌および転移巣を有する膀胱癌において各々1,66±0,57U/ml、1,60±0,28U/ml、1,94±0,38U/mlと高値を示したのに対し(正常コントロール群:1,35±0,19U/ml)、血清IV型コラーゲンの7S-domain濃度は、各々5,19±3,48U/ml、3,84±1,63U/ml、4,39±1,03U/ml、(正常コントロール群:4,21±0,76U/ml)といずれの腫瘍患者群においても有意の上昇が認められた。悪性腫瘍の浸潤および転移の過程において認められる細胞底膜の破壊の結果として、血清ラミニン濃度が高値を示すのであれば、これと並行して、同様に基底膜を構成するIV型コラーゲン7S-domainの血清濃度も上昇することが予想されたが、両者の間には統計学的に相関は認められなかった。血清IV型コラーゲン7S-domain濃度は、血清ラミニン濃度ろ異なり、転移あるいは臨床経過の指標とはなりにくいとかんがえられる。腎癌、膀胱癌及び前立腺癌患者の血清ラミニン濃度は転移巣を有する例で有さない例に比較し高値を示した。又、各悪性腫瘍患者群とも進行性病変を有する例では血清ラミニン濃度の経時的な上昇傾向が認められた。酵素抗体法は、腎癌、前立腺癌組織には豊富なラミニンの局在が認められたが、膀胱癌組織はラミニン分布に乏しかった。ラミニンと同様に基底膜を構成する細胞外基質であるIV型コラ-

ゲンのN末端に相当する7Sdomainの血清中における濃度を測定し、血清ラミニン濃度と比較してその臨床的意義を検討した。血清IV型コラ-ゲン,7Sdomain濃度の測定には日本DPS社の開発したcollagenIV7Sキットを用い、RIA,2抗体法にて測定し、同じ検体における血清ラミニン濃度(ヘキスト社製、ラミニンRIAキット使用)との比較、検討を行なった。その結果、血清ラミニン濃度が腎癌、前立腺癌及び転移巣を有する膀胱癌患者において高値を示したのに対し、血清IV型コラ-ゲン7Sdomain濃度はいずれの腫瘍患者群においても有意な上昇が認められなかった。転移巣を有する群についても統計学的に有意な高値は見出せなかった。ラミニンとIV型コラ-ゲンはともに、基底膜を構成する成分である。悪性腫瘍の浸潤に伴う基底膜破壊の結果として血清ラミニン濃度が高値を示すのであれば、これと並行して血清IV型コラ-ゲン7Sdomainも上昇することが予想されたが、両者の変動の間には隔たりがあることが明らかになった。尿路悪性腫瘍患者における血清ラミニン濃度の上昇は、基底膜破壊の結果起こる現象ではなく、腫瘍組織が能動的にラミニンを分泌する結果である可能性が高いと考えられた。今後さらに症例数を加え、検討を続ける予定である。症例数を増やし、さらに血清ラミニンP1およびIV型コラ-ゲン7Sdomain濃度について検討したが、IV型コラ-ゲン7S domainはいずれの腫瘍患者群においても上昇は認められず、また転移巣の有無による有意差も見出されなかった。一方、血清ラミニン濃度は、既に報告したように、腎癌および前立腺癌患者において高値を示し、移転巣を有する群ではさらに有意に上昇する傾向が見出せた。全体としてニュ-トロ-ル群と有意差の認められなかった膀胱癌患者群においても、転移巣を有する群では高値を示した。酵素抗体法を用いて、各腫瘍組織に対してラミニンおよびIV型コラ-ゲン染色を行った結果、血清ラミニン濃度の上昇していた腎癌および前立腺癌の組織は、腫瘍細胞塊を包む形でラミニンが豊富に依存していたが、血清ラミニン濃度の上昇しない膀胱癌組織においては、ラミニンの局在は血管壁に限局していた。同様に酵素抗体法によるIV型コラ-ゲン染色を施行し、IV型コラ-ゲンの局在について検討したところ、血清中濃度についてはラミニンと異なる傾向を示したにもかかわらず、その染色所見はラミニンと同様のものであった。以上より、血清ラミニン濃度は、特定の腫瘍が能動的にラミニンを分泌する結果であり、腫瘍の存在,転移巣の有無,臨床経過等の指標になり得ると考えられたが、IV型コラ-ゲンに関しては、こうした意義付けが難しいと判断された。染色態度が同様であるのにかかわらず、ラミニンとIV型コラ-ゲンの血清濃度の変化に隔たりがある理由については不明確であり、今後の重要な課題であると考えている。ラミニンとIV型コラーゲンは、ともに基底膜を構成する非コラーゲン性およびコラーゲン性糖蛋白である。IV型コラーゲンは、分子量約30万で、3本のα鎖が、3重螺旋構造を形成しており、コラーゲン分子のN末端で4分子が、C末端で、2分子が重合して、網目状のnet workを形成する。特に、4分子が重合した部位は、7S-collagen domainと呼ばれ、分子どうしが多くのS-S結合を有し、種々の蛋白分解酵素に対して安定であることが解ってきている。近年、悪性腫瘍の浸潤、転移の過程において、種々の細細胞外基質が重要な役割を果たすことが明らかになってきた。
高齢化社会に関する事実認識と老後生活観

本研究では、まず、既存の研究と研究代表者のこれまでの研究を踏まえて、高齢化社会に関する諸事項のうちで新聞やテレビなどのマスメディアを通じて多くの人が接したことがあると思われる16の情報項目からなる簡便な知識テストである「高齢化社会クイズ」と、老後生活に対する自信度と不安度を測定するための「老後生活観尺度」を独自に作成し、それらを盛り込んだ質問票を作成した。そして、それらを徳島県内の某国立大学の学生、某国立医療技術短期大学学生、行政機関の職員、某町健康づくり推進員、母親大会参加者、高齢者大会参加者、社会福祉大会参加者、女性講座参加者など、18歳から84歳までの男女900人を対象に集団面接を実施した。その結果、「高齢化社会クイズ」に関しては、各質問項目の正確率は5.8%から59.4%までと低く、多くの人々が高齢化社会に関する事実を誤認していることがわかった。10%未満は1項目であったが、10%台が4項目、20%台が2項目、30%台が5項目、40%台が1項目であり、50%台は3項目にすぎなかった。不正解の場合に特徴的なことは、いわゆる問題とされていることを事実よりも過大に、いいかえれば、より否定的に認識しており、肯定的イメージが付与されることに関しては逆に過小に認識していることである。そして、それらが常識、通念として人々の中に浸透しており、高齢化社会に関するステレオタイプになっているということができよう。正解数は0から16(満点)まで分布するが、16問がすべて正解した人は1人、12問正確も1人にすぎず、全体の平均は4.92であった。分散共分散分析の結果、性による差は認められなかったが、学歴と年齢による差が認められた。このクイズ得点と老後生活観との関連を検討した結果、ステレオタイプ的認識の程度が低い(クイズ得点の高い)人ほど、自らの老後生活に自信を持っていることが明らかになった。
先天異常形質出現についての動物モデルを用いた分子遺伝学的研究

ヒトのXO個体であるターナー症候群とXOマウスではその表現型に大きな違いが見られる。この違いは、X染色体上の遺伝子の発現様式の違いに起因する可能性がある。本研究は、ヒトTurner症候群と関連が深いと考えられている遺伝子、ZFXおよびRPS4XのマウスホモローグZfxおよびRps4について、XOマウス及びXXマウス間でノーザンブロット法を用いてmRNA量の比較をおこない、転写レベルでの発現様式を知ることを目的としたものである。当教室で樹立、維持しているXOマウスコロニー(Jcl:ICR由来)のXXマウス肝臓より、oligo-d(T)セルロースを用いmRNAを精製した。このmRNAを用い、RT-PCR法によりZfxおよびRps4の遺伝子断片を増幅し、これをpUC118に組み込んで組み換えDNAを作成し、大腸菌DH5αを用いてクローニングを行った。クローニングした遺伝子断片については塩基配列を決定して目的遺伝子断片であることを確認した。この遺伝子断片をrandom priming法により^<32>Pでラベルしてノーザンブロッティングのプローブとした。現在、ノーザンブロッティングによるmRNAの定量を行っている最中であり、未だ最終的な結果を得る段階にはきていない。XOおよびXXマウスの肝臓、腎臓および脾臓から、AGPC法によりtotal RNAを精製した。これらのRNAをホルムアルデヒド変性化で電気泳動後、ナイロンメンブレンに転写した。このメンブレンに対し上記のプローブを用いてハイブリダイゼーションを行い、オートラジオグラフィーによりシグナルの検出を行っている。シグナルの定量はX線フィルムの像をスキャナーで取り込み、MacintoshIIおよびNIH Imageを用い画像解析により行っており、厳密な比較ができると考えられる。
サイトカイン、接着分子の情報伝達制御

平野は、IL-6サイトカインファミリーの共通の受容体であるgp130の点変異により関節リウマチ様の自己免疫疾患が自然発症することを明らかにした。さらにアダプター分子Gab2がマスト細胞の分化に必須であることを明らかにした。吉村はSOCS1がLPSによるマクロファージの活性化を抑制しTLRのシグナルを制御することや、SOCS1-/-樹状細胞は活性化されており自己抗体産生に寄与することを見い出した。SOCS3がマクロファージにおいてII-6/gp130のシグナルを抑制する働きがあることを示した。滝はIFN-α/β、リンパ球、炎症にそれぞれ依存的な遺伝子群を同定した。またIFN-α/β、リンパ球のそれぞれに依存的な二つの独立した異常が皮膚炎症の原因となっていることをしめした。高津はCD38刺激はB-2細胞にBtk, PI3キナーゼ,PLC-gamma依存的にNF-κBの活性化と胚細胞型C-gamma1の転写促進をすることを示した。IL-5は活性化B細胞にAIDとBlimp-1の発現を増強させ、クラススイッチ変換と抗体産生細胞への最終分化を惹起する。さらにLnkが造血幹細胞の増殖を負の調節因子であることを明らかにした。竹田はアダプター分子TIRAPが、TLR2,TLR4を介したMyD88依存性のシグナルに必須であることを明らかにした。TLRのシグナルに関与し、IFN-βプロモーターの活性化を誘導する新たなアダプター分子TRIFを同定した。熊之郷は、CD100欠損マウスがヒトの多発性硬化症のモデルとして知られる実験的自己免疫性脳脊髄炎の発症に対して抵抗性であることを示した。T細胞に発現するCD100が樹状細胞の活性化及び成熟化を促進する事によりT細胞の活性化に寄与している事を明らかにした。樹状細胞に発現するセマフォリン分子Sema4Aを新たに同定し、Sema4AがT細胞の活性化及び分化に関与している事、Sema4Aの受容体がTim-2である事を明らかにした。宮坂は、リンパ球ホーミングを媒介する血管HEV(high endothelial venule)において数種のケモカイン結合分子を同定し、それぞれがいずれもユニークなケモカイン結合能を持ち、リンパ球移動に関与することを明らかにした。SLC, IP-10などのケモカインは特定の糖鎖構造、すなわちGIcAβ1/IdoAα-1-3GaINAc(4,6-O-disulfate)に結合し、さらにこの構造にはホーミング関連分子であるL-セレクチン、CD44も結合することを明らかにした。BLCがHEV内腔に発現してHEVが媒介するB細胞移動(ホーミング)に重要な関与をすることを初めて明らかにした。平野はGp130のSHP2結合サイトの点突然変異を導入した変異gp130を発現しているノッインマウス(平成11年度に作製)が、加齢とともに自己免疫性の関節炎を自然発症することを明らかにした。この関節炎は発症マウスの脾臓細胞を正常マウスに移入することにより発症させることが可能であることが明らかとなった。樹状細胞、T細胞に異常を認めており、なぜサイトカインのシグナル異常により、自己免疫疾患が発症するかを解明する非常に良いモデルになりうる。瀧は転写因子IRF-2欠損マウスに自然発症する炎症性皮膚疾の原因遺伝子の同定を目指しており、本年は、1数個の優性なBALB遺伝子が、IRF-2欠損マウスの皮膚炎の発症を抑制していることを明かにした。吉村はリウマチや慢性炎症性大腸疾患などの炎症性疾患でCIS3がJAK/STAT経路の抑制を介して炎症の終結をもたらす重要な役割を果たしていることを明らかにした。高津は、Lnkはシグナル伝達の抑制分子として働くアダプター蛋白質ファミリーの一員であることを明らかにした。またIL-5/CD38のシグナル伝達に必須である、Btk会合分子としてBAM11を単離同定するとともに、Btkがpro-Bからpre-B細胞への分化に必須であることを明らかにした。竹田はTLR9遺伝子欠損マウスを作製し、TLR9が、細菌に特有の非メチル化CpGモチーフを含むDNA(CpG DNA)の認識に必須であることを明らかにした。熊ノ郷はリンパ球セマフォリン分子CD100が神経系や腎臓においてはplexinB-1を、免疫系においてはCD72をレセプターとして用いていることを明かにした。さらに、CD100刺激がリンパ球上のレセプターであるCD72のネガティブシグナルを解除することにより免疫反応を増強することを示した。平野はGp130のSHP2結合サイトに点突然変異を導入した変異gp130を発現しているノックインマウスに自然発症する慢性関節リウマチ様自己免疫疾患の免疫学的異常を明らかにした。とくに、胸腺と抹消におけるセルフトレランスの維持が低下していることを明らかにした。胸腺やTリンパ球におけるシグナル異常を明らかにすることで、自己免疫疾患の発症機構を明らかにする基礎を築いた。吉村はサイトカイン制御分子SOCSファミリーのうちSOCS3/CIS3の発現が炎症性腸疾患やリューマチ患部で亢進していることを見いだした。また、SOCS-3アデノウイルスを自己免疫性関節炎モデルに投与したところ劇的な改善効果があることを明らかにした。SOCS3は抗炎症性遺伝子として作用することを明かにした。

瀧は、転写因子IRF-2を欠損する炎症性皮膚疾患を自然発症するモデルマウスを使用して、IRF-2はT細胞以外の細胞に必要であることをしめした。すなわち、CD8+T細胞は発症に必須であるが、IRF-2は、T細胞ではなく皮膚細胞で機能していると考えられる。高津はIL-5とCD38依存性のIgHクラススイッチ組み替えにNF-kBとSTAT5の活性化が必須であること、IL-5Rα鎖の細胞膜ドメインのカルボキシ末端がIgHクラススイッチ組み替えに必須であること、さらにアダプター分子、LnkはLin-c-Kit+Sca1+は造血前駆細胞の増殖を負に制御していることを明らかにした。竹田はTLR7が抗ウィルス薬として臨床応用されている合成化合物の認識に必須であることや、TLRを介したシグナルが、自然免疫系の活性化だけでなく、獲得免疫系の活性(Th1/Th2反応のバランス)を制御していることを明らかにした。熊ノ郷は膜型のセマフォリン分子であるCD100がリンパ球の活性化により細胞表面上でproteolyticに切断を受け分泌型の分子として機能する事、自己免疫疾患モデルマウスであるMRL/lPrマウスの血清中における自己抗体価の上昇と一致して分泌型のCD100が上昇する事、更に分泌型のCD100を過剰に産生するtransgenicマウスでは免疫応答が亢進している事より分泌型のCD100が実際の生体の免疫応答において機能することを明らかにした。宮坂は、L-,P-セレクチンはGlcAβ1/IdoAα1-3GalNAc(4,6-O-disulfate)の繰り返し構造を硫酸基依存的に認識することを明らかにした。セレクチンの糖鎖構造には特定のケモカイン、すなわちSLC, IP-10,SDF-1βなどが結合し、この結合も糖鎖構造の硫酸基に依存的であった。以上の結果は、セレクチン、ケモカインの間のクロストークを媒介するものとしてグリコサミノグリカン(GAG)鎖が重要であることを明らかにしたものである。平野は、IL-6サイトカインファミリーの共通の受容体であるgp130の点変異により関節リウマチ様の自己免疫疾患が自然発症することを明らかにした。さらにアダプター分子Gab2がマスト細胞の分化に必須であることを明らかにした。吉村はSOCS1がLPSによるマクロファージの活性化を抑制しTLRのシグナルを制御することや、SOCS1-/-樹状細胞は活性化されており自己抗体産生に寄与することを見い出した。SOCS3がマクロファージにおいてII-6/gp130のシグナルを抑制する働きがあることを示した。滝はIFN-α/β、リンパ球、炎症にそれぞれ依存的な遺伝子群を同定した。またIFN-α/β、リンパ球のそれぞれに依存的な二つの独立した異常が皮膚炎症の原因となっていることをしめした。高津はCD38刺激はB-2細胞にBtk, PI3キナーゼ,PLC-gamma依存的にNF-κBの活性化と胚細胞型C-gamma1の転写促進をすることを示した。IL-5は活性化B細胞にAIDとBlimp-1の発現を増強させ、クラススイッチ変換と抗体産生細胞への最終分化を惹起する。さらにLnkが造血幹細胞の増殖を負の調節因子であることを明らかにした。竹田はアダプター分子TIRAPが、TLR2,TLR4を介したMyD88依存性のシグナルに必須であることを明らかにした。
ショウジョウバエを用いたyki mRNAのドット形成の分子機構と生体内の機能解析

我々が同定した未知の機構により小胞体画分へ分画されるmRNAの1つであるyorkie mRNAが、自身の3'非翻訳領域の二次構造依存的に、小胞体に隣接するP-bodiesと呼ばれる翻訳抑制に関わるタンパク質とRNAの複合体に集積することを明らかにした。更に、このP-bodies集積に必要な配列を除去したmRNAをショウジョウバエ複眼で発現させると、組織の過形成することを示し、この配列が生体内においても翻訳抑制において重要な役割を担うことを明らかにした。これまでyorkieの制御の研究は、タンパク質の化学修飾に関してがほとんどであったが、それと同等の影響を示す新たな制御機構を明らかにした。ショウジョウバエ培養細胞におけるRNA可視化システムを用いて、がん遺伝子であるyorkie (yki)遺伝子の転写産物の細胞内局在に必要な配列の同定を行った。yki mRNAの3'非翻訳領域(untranslated region: UTR)には、ステム・ループ(stem loop:SL)と呼ばれる二次構造が二つ存在する。そのうちの3'末端側のSL(SL2)に塩基置換変異を導入しSL形成を阻害するとyki mRNAの細胞内局在が失われることから、yki mRNAの細胞内局在化におけるSL2の重要性が明らかとなった。更に、SL2への変異導入により、合成されるykiタンパク質量が野生型yki mRNAを鋳型にしたときより増加するがmRNAの量は変化しなかった。培養細胞においてyki mRNAは、P-bodiesと呼ばれるmRNAの分解や翻訳阻害に関与する細胞内顆粒と共局在することから、SL2はyki mRNAの細胞内局在及び翻訳量の調節にも関与していることが示唆された。更に、SL2の生体内における機能を解析するために遺伝子導入ショウジョウバエを樹立した(yki ΔSL2)。ykiタンパク質の活性は、Hippo経路を介したリン酸化により負に制御される。活性型ykiは細胞増殖を誘導し、一方増殖していない細胞ではリン酸化され不活性化されている。ショウジョウバエの複眼において、野生型ykiを過剰発現しても目立った表現型は確認されないが、リン酸化部位に塩基置換を導入した活性型ykiを過剰発現すると複眼において過形成が起こる。yki ΔSL2を過剰発現させたところ複眼の過形成が観察され、yki mRNAの細胞内局在化の分子メカニズム及び生物学的意義の一端を明らかにした。ショウジョウバエの培養細胞(S2-DRSC)における可視化システムを用いて、がん遺伝子であるyki mRNAの局在を観察したところ、小胞体に隣接し点状のシグナル(foci)が見られた。これらfociの形成には、yki mRNAの3'非翻訳領域(UTR)が必須であることを昨年度までに明らかにしていた。そこで当該年度では、更に重要な配列の絞り込みを行なった。yki 3'UTRの二次構造を調べたところ、2つのステムループ構造(SL1とSL2)が予想された。mRNAの細胞内局在にステムループが重要な役割を果たす例が示されていたため、どちらのステムループが重要かを調べたところ、SL2がfoci形成に必要且つ十分であることが明らかとなった。更に、SL2のステムの構造、ループのピリミジン塩基が重要であることも併せて示した。また、SL2内にmRNAの分解に関わる因子の結合配列を見つけたため、その配列のyki mRNAの安定性における役割を調べた。その結果、その配列依存的にyki mRNAが分解されることを明らかにした。yki mRNAのfoci形成に必要且つ十分な配列を同定したため、その配列に結合するタンパク質の同定を試みた。ストレプトアビジンに結合するRNAタグにyki 3'UTRを連結したRNAを合成した。この合成RNAとストレプトアビジンビーズを用い、S2-DRSCから調整したタンパク質抽出液中からyki 3'UTRに結合するタンパク質を単離、質量分析器により同定した。その結果、Upf1、DDP1、CG6701を含めた13種のタンパク質が同定された。当初計画していた「yki mRNAのfoci形成に必要十分なシス配列の同定」「シス配列に結合するタンパク質の同定」を終えることが出来た。更に、foci形成に必要として同定した配列及び構造は、mRNAの安定性も制御することを明らかに出来た。以上のように、当初予定した計画以上に進展している。前年度までにyki mRNAの細胞内局在に必要十分なRNA領域(SL2)及びその領域に結合が予想された候補タンパク質を13種同定した。そこで当該年度では、SL2の生物学的重要性及び、SL2結合候補タンパク質のyki mRNAの細胞内局在に与える影響に関して解析した。SL2の生物学的重要性を検討するために、SL2を除いたyki mRNA (ΔSL2)を過剰発現するショウジョウバエ系統を作製した。通常、野生型Ykiタンパク質過剰発現では形態異常は観察されないが、ΔSL2を複眼で過剰発現した結果、発現されるタンパク質は野生型にも関わらず、非常に重篤な過形成が見られた。更に、前年度までに、SL2内にyki mRNAの分解に関わる配列があること、これとは独立してyki mRNAの細胞内局在を制御する配列及び構造があることを見出しており、それぞれの生体での機能を調べるために、それぞれの配列に塩基置換を導入した変異yki mRNAを複眼で過剰発現させた。その結果、弱いながらも過形成が観察された。

これらのハエのyki mRNA及びタンパク質の量を調べたところ、mRNAの分解に関わる配列に変異を導入したyki mRNAは予想通り分解を免れていた。一方興味深いことにyki mRNAの細胞内局在に関わる配列に変異を導入したものでは、yki mRNAの合成量は通常通りであるが、Ykiタンパク質の合成量が10倍以上増加していた。また培養細胞を用いた解析から、yki mRNAがSL2依存的に翻訳抑制の場であるP-bodiesに集積することも明らかにしており、以上の結果より、yki mRNAはSL2を介してRNAの分解と翻訳抑制を受けることを明らかにした。これらの成果は学術論文として発表した。また、SL2結合候補タンパク質13種をノックダウンした結果、局在に異常を示すものが5種得られた。我々が同定した未知の機構により小胞体画分へ分画されるmRNAの1つであるyorkie mRNAが、自身の3'非翻訳領域の二次構造依存的に、小胞体に隣接するP-bodiesと呼ばれる翻訳抑制に関わるタンパク質とRNAの複合体に集積することを明らかにした。更に、このP-bodies集積に必要な配列を除去したmRNAをショウジョウバエ複眼で発現させると、組織の過形成することを示し、この配列が生体内においても翻訳抑制において重要な役割を担うことを明らかにした。これまでyorkieの制御の研究は、タンパク質の化学修飾に関してがほとんどであったが、それと同等の影響を示す新たな制御機構を明らかにした。平成26年度に計画していた「yki mRNAの欠失コンストラクトを用いた細胞内局在の解析」、「細胞内局在とykiタンパク質の合成量及び標的遺伝子の転写量の関係性に関する解析」は終了した。更に平成27年度に予定していた計画のうち「yki mRNAの細胞内局在を制御するシス配列の同定」は終了し、そのシス配列に結合するトランス因子の同定を進めている。また平成28年度に予定していた「yki mRNAの細胞内局在を制御するシス配列の生体内における機能解析」に必要な遺伝子導入ショウジョウバエも樹立し、複眼での機能解析を行っている。以上のように、当初予定していた計画より大幅に進んでいる。当初の予定通り、昨年度に得られたyki 3'UTRに結合するであろう因子の解析を進める。RNAi法で培養細胞においてノックダウンし、yki mRNAのfoci形成に対する影響を調べる。また、タグ融合タンパク質、特異的抗体を用い、それぞれのタンパク質の細胞内局在を調べ、P-bodiesや小胞体と共局在するかを調べる。更に、ルシフェラーゼにyki 3'UTRを連結し、同定したタンパク質をノックダウンした際の翻訳への影響を調べる。mRNAの細胞内局在yki mRNAの細胞内局在に重要なSL2に結合するタンパク質の同定を目指す。平成27年度に予定していた「シス配列に結合するトランス因子複合体のRNAタグを用いた精製及び同定」を予定通り進める。同定したタンパク質に関しては、培養細胞においてRNAi法によりノックダウンした際に、yki mRNAの細胞内局在が影響されるかどうかを確認する。
排尿の中枢性統合機構に関する臨床および基礎的研究

臨床研究としては,脳血管障害患者の排尿に関する自覚症状および下部尿路機能障害と,CTおよびMRIで評価した脳内病変部位との関係を検討し,以下の結論に至った.(1)大きな両側性病変例に尿失禁の頻度が高い.(2)小さな梗塞(lacuna)が多発する多発性小窩状態にも切迫性尿失禁が多い.(3)前頭葉や内包後脚あるいは大脳基底核に病変が及んでいる例に過活動性膀胱が多く,切迫性尿失禁の頻度が高い.(4)前頭葉や内包後脚病変例は過活動性で不全尿道が多い(50-55%).(5)被殻病変例は過活動性膀胱で正常尿道が多い(60-63%).(6)尿失禁の程度は基底核に限局した病変例より前頭葉や内包後脚の病変例が強い.(7)脳幹部(橋)背側に両側性に病変を有する例に低活動性膀胱で排尿困難が多い(3/3例).(8)脳幹部でも一側性や腹側の病変例は,正常膀胱(3/7例)あるいは過活動性膀胱が多い(3/7例).実験的研究としては,脳幹部排尿中枢による内尿道括約筋支配について検討を行った.除脳イヌとネコで,橋排尿中枢の電気刺激により膀胱収縮と外尿道括約筋弛緩が誘発されることを確認した後,pancurinium bromide lmg/kg i.v.し,外尿道括約筋の活動の影響を除いた状態で内尿道括約筋の内圧反応を観察した.イヌもネコも,1-3秒間の電気刺激(0.2msc,50Hz,10-50μA)で膀胱収縮にともない内尿道括約筋部内圧は下降した.下腹神経と交感神経幹の切断を行うと,内尿道括約筋部内圧は減弱し電気刺激による圧下降巾も小さくなったが,phenylephrine 0.1mg/kgi.v.で内尿道括約筋を収縮させると,電気刺激による内圧下降は顕著になった.この内圧下降反応は,骨盤神経切断により消失した.橋排尿中枢は膀胱と外尿道括約筋の活動だけでなく,内尿道括約筋の活動をも調節しており,内括約筋弛緩は下腹神経と骨盤神経の両方を経由する経路によりもたらされることが分かった.臨床研究としては,脳血管障害患者の排尿に関する自覚症状および下部尿路機能障害と,CTおよびMRIで評価した脳内病変部位との関係を検討し,以下の結論に至った.(1)大きな両側性病変例に尿失禁の頻度が高い.(2)小さな梗塞(lacuna)が多発する多発性小窩状態にも切迫性尿失禁が多い.(3)前頭葉や内包後脚あるいは大脳基底核に病変が及んでいる例に過活動性膀胱が多く,切迫性尿失禁の頻度が高い.(4)前頭葉や内包後脚病変例は過活動性で不全尿道が多い(50-55%).(5)被殻病変例は過活動性膀胱で正常尿道が多い(60-63%).(6)尿失禁の程度は基底核に限局した病変例より前頭葉や内包後脚の病変例が強い.(7)脳幹部(橋)背側に両側性に病変を有する例に低活動性膀胱で排尿困難が多い(3/3例).(8)脳幹部でも一側性や腹側の病変例は,正常膀胱(3/7例)あるいは過活動性膀胱が多い(3/7例).実験的研究としては,脳幹部排尿中枢による内尿道括約筋支配について検討を行った.除脳イヌとネコで,橋排尿中枢の電気刺激により膀胱収縮と外尿道括約筋弛緩が誘発されることを確認した後,pancurinium bromide lmg/kg i.v.し,外尿道括約筋の活動の影響を除いた状態で内尿道括約筋の内圧反応を観察した.イヌもネコも,1-3秒間の電気刺激(0.2msc,50Hz,10-50μA)で膀胱収縮にともない内尿道括約筋部内圧は下降した.下腹神経と交感神経幹の切断を行うと,内尿道括約筋部内圧は減弱し電気刺激による圧下降巾も小さくなったが,phenylephrine 0.1mg/kgi.v.で内尿道括約筋を収縮させると,電気刺激による内圧下降は顕著になった.この内圧下降反応は,骨盤神経切断により消失した.橋排尿中枢は膀胱と外尿道括約筋の活動だけでなく,内尿道括約筋の活動をも調節しており,内括約筋弛緩は下腹神経と骨盤神経の両方を経由する経路によりもたらされることが分かった.臨床的研究としては,脳血管障害後遺症患者135名を対象に排尿障害について検討した結果,86%の患者は何等かの排尿障害を自覚し,47%に尿路感染があった.日常生活動作(ADL)が悪いほど排尿障害や尿路感染が多く,尿路感染の有無は残尿量と相関していた.別の脳血管障者患者75名での検討では,痴呆が無い患者では79%が排尿自立だったのに対し,痴呆患者の排尿自立は40%で,40%はオムツ排尿,20%は留置カテ-テルであった.過去3年間に排尿機能検査を行った63名の脳血管障害患者では,正常膀胱15名,過活動性膀胱38名,低活動性

膀胱10名で,排尿筋無抑制収縮例は60%であった.排尿筋無抑制収縮は,前頭葉病変例の67%,大脳基底核病変例の67%,視床病変例の60%,内包に病変が及ぶ例の92%に認められた.尿道機能正常例は,大脳基底核病変例で53%であったが,前頭葉病変例では36%だった.不全尿道例は,大脳基底核病変例や視床病変例ではそれぞれ22%,18%であったが,前頭葉や内包病変例では43%,40%と多かった。基礎的研究では,HRPを用いた神経解剖学的検討と,脳幹部微小電気刺激法を用いた電気生理学的研究を行った.ネコで排尿抑制部位である青斑下核にHRPとWGAーHRPを注入したところ,青斑下核は主に前頭回,直回,後S状回内側部,帯状回,前シルビウス回,視床下部の外側野,傍室核,中脳中心灰白質,中脳,橋,延髄の網様体,小脳内側核,脊髄中間灰白質などからの入力を受けると同時に各部位に出力しており,脊髄前索と対側の側索を下行して仙髄中間外側核とOnuf核にも投射していることが分かった.除脳イヌで橋排島中枢の微小電気刺激行ったところ,刺激の強さに応じて,排尿反射経路全体の興奮による持続の長い膀胱収縮も,排島反射経路の遠心路の興奮が主体である持続の短い膀胱収縮も,自由に誘発できた.排島反射の実験に有用なモデルと考えられる.臨床的研究としては,脳血管障害患者でMRI検査で脳幹部に病変のある27例を,脳幹部単独病変6例と他病変合併21例に分け,脳幹部に病変がなかった67例を対照とし,排尿症状と下部尿路機能検査成績を比較検討した.脳幹部単独例の症状は頻尿50%,尿失禁33%,排尿困難88%,他病変合併例は頻尿57%,尿失禁29%,排尿困難81%で排尿困難のが多かったが,脳幹部正常例は頻尿67%,尿失禁61%,排尿困難45%と頻尿や尿失禁が多かった.下部尿路機能は,脳幹部単独例と他病変合併例では低活動性膀胱が50%と38%であったが,脳幹部正常例では低活動性膀胱は15%で,60%が過活動性膀胱だった.病変が橋背側部の両側にある例は低活動性膀胱を示したが,片側病変例は正常機能を示した.また,橋腹側に病変がある例では過活動性膀胱が多かった.以上の臨床成績は,吻側部橋背外側領域に排尿中枢があり,その腹側や腹外部に排尿抑制領域があるいう動物実験結果を裏付けるものである.実験的研究として,ネコで吻側橋網様核にcarbachol,noradrenaline GABA,enkephlinを100mM微量注入し下部尿路機能に及ぼす各薬剤の効果を検討した.carbacholは膀胱と外尿道括約筋の両方の活動を抑制した.noradrenalineとGABAは膀胱容量を減少させたが,enkephalinでは有意な変化がなかった.一方,イヌで中枢性筋弦緩剤inaperisone(0.11.0mg/kg)を静注すると,膀胱収縮圧や残尿量は変化しなかったが膀胱容量が増加し,律動性等容性膀胱収縮の出現が抑制された.ネコで,inaperisoneの橋での作用部位を検討したところ,青斑下核への注入により膀胱容量が増加した.また,橋排尿中枢を電気刺激すると,膀胱の状態に関わらずに内尿道括約筋の弛緩が誘発された.橋排尿中枢は,これまで報告してきたように膀胱と外尿道括約筋の協調運動を調節するだけではなく,内尿道括約筋の活郎をも調節していることが分かった.臨床研究としては,脳血管障害患者の排尿に関する自覚症状および下部尿路機能障害と、CTおよびMRIで評価した脳内病変部位との関係を検討し,以下の結論に至った。(1)大きな両側性病変例に尿失禁の頻度が高い。(2)小さな梗塞(lacuna)が多発する多発性小窩状態にも切迫性尿失禁が多い。3)前頭葉や内包後脚あるいは大脳基底核に病変が及んでいる例に過活動性膀胱が多く、切迫性尿失禁の頻度が高い。(4)前頭葉や内包後脚病変例は過活動性で不全尿道が多い(50-55%)。(5)被殻病変例は過活動膀胱で正常尿道が多い(60-63%)。(6)尿失禁の程度は基底核に限局した病変例より前頭葉や内包後脚の病変例が強い。
d及びf電子を含む系の原子の磁気状態とX線分光の理論

内殻から外殻への電子遷移を伴うX線吸収の磁気円二色性(MCD)スペクトルの積分強度と、強磁性体中の原子のスピン・軌道磁気モーメントを結びつける総和則を用いて、磁性遷移金属多層膜の軌道磁気モーメント(以下M_0と略)がバルクのそれより大きくなることが指摘されている。この研究では、PdとCuマトリックス中に種々のCo原子超構造を仮定した系に対し、d軌道内の電子間多重極相互作用を考慮したタイトバインディング模型をハートレー・フォック近似で取り扱うことにより、Co原子のM_0の原子環境依存性を理論的に調べた。強磁性を仮定する限り、Pdマトリックス中では、Pdの大きい格子定数を反映して、CoのM_0はバルクのそれに比べ2倍程度大きくなるが、最近接位置に至るCo,Pd原子の数にあまり依存しない。これに対し、Cuマトリックス中では、Co-Cu間の3d軌道の有効混成が、Co-Co間のそれに比べてかなり小さいため、Coの最近接位置をCu原子で囲まれた場合、CoのM_0はスピンモーメント同程度にまで大きくなり得ることを示した。次に、LaMnO_3におけるMn 3d軌道の反強敵起動秩序と、Mn L_<2,3>吸収線二色性の関係を、多重極相互作用と結晶場を考慮した1イオン模型に基づき理論的に調べた。最近、Mn K吸収を利用した共鳴X線散乱が、この系の軌道秩序の直接観測法として注目を集めるを一方、この方法が、Mnの周りの酵素を含めたMnO_6クラスターの変形を観測しているに過ぎないという指摘がある。この研究は、X線吸収スペクトルに現れる多重項構造が、軌道秩序の種類を特定する上で「指紋」としての役割を果たしえることを示した。内殻から外殻への電子遷移を伴うX線吸収の磁気円二色性(MCD)スペクトルの積分強度と、強磁性体中の原子のスピン・軌道磁気モーメントを結びつける総和則の存在は、今日よく知られている。しかし、この総和則は、ある方向に磁化が存在する強磁性体或いはフェリ磁性体にしか適用できないので、反強磁性体には全く無力である。この研究では、外殻majority spin状態が完全に占有されている原子磁気モーメントを持つ磁性体において、反強磁性体も含めて、等方的(isotropic)吸収スペクトルの内殻スピン・軌道相互作用による分岐比と原子の軌道磁気モーメントの大きさとの間に成立する関係式を導いた。次に、Duda達によって測定された強磁性Fe,Co,Niの2p内殻しきい値近傍での共鳴X線発光におけるMCDスペクトルと、3d軌道電子占有の関係を理論的に調べることを通じて、この分光法のMCDの特徴を検討した。Duda達は、X線発光MCDが、入射光のエネルギーを(A)2p_<3/2>しきい値,(B)2p_<3/2>と2P_<1/2>の中間、(C)2P_<1/2>しきい値、(D)それ以上のエネルギー-の4つ場合で大きく異なることを示し、これがX線吸収のMCDと大きく異なることを明かにした。この研究では、2p内殻と3d外殻間の電子の双極子遷移とコスター・クローニヒ崩壊2P_<3/2>3d^<n+1>→2P_<1/2>3d^nε_dを考慮することにより、上記4つのケースの発光スペクトルとMCDスペクトルが矛盾なく説明される事を示した。

内殻から外殻への電子遷移を伴うX線吸収の磁気円二色性(MCD)スペクトルの積分強度と、強磁性体中の原子のスピン・軌道磁気モーメントを結びつける総和則を用いて、磁性遷移金属多層膜の軌道磁気モーメント(以下M_0と略)がバルクのそれより大きくなることが指摘されている。この研究では、PdとCuマトリックス中に種々のCo原子超構造を仮定した系に対し、d軌道内の電子間多重極相互作用を考慮したタイトバインデング模型をハートレー・フォック近似で取り扱うことにより、Co原子のM_0の原子環境依存性を理論的に調べた。強磁性を仮定する限り、Pdマトリックス中では、Pdの大きい格子定数を反映して、CoのM_0はバルクのそれに比べ2倍程度大きくなるが、最近接位置に来るCo,Pd原子の数にあまり依存しない。これに対し、Cuマトリックス中では、Co-Cu間の3d軌道の有効混成が、Co-Co間のそれに比べてかなり小さいため、Coの最近接位置をCu原子で囲まれた場合、CoのM_0はスピンモーメント同程度にまで大きくなり得ることを示した。次に、LaMnO_3におけるMn3d軌道の反強的軌道秩序と、MnL_<2,3>吸収線二色性の関係を、多重極相互作用と結晶場を考慮した1イオン模型に基づき理論的に調べた。最近、Mn K吸収を利用した共鳴X線散乱が、この系の軌道秩序の直接観測法として注目を集める一方、この方法が、Mnの周りの酸素を含めたMnO_6クラスターの変形を観測しているに過ぎないという指摘がある。この研究は、X線吸収スペクトルに現れる多重項構造が、軌道秩序の種類を特定する上で「指紋」としての役割を果たし得ることを示した。
Mind Time Machineの構築とシステムの主観的時間生成の解析

多様で多重に入力を受け付ける人工システムの中でどのようなシステム固有の時間から発生しうるか、その定量化とともに、発生する時間を構成論的に解明することを目的とする。特に、ここでは結合したビデオフィードバック・システムを実際に構築し、そのシステムが生成する時間構造を解析する。
デ-タベ-スを含む高分子のCarbon-13NMR知的情報処理システム

本研究はハ-ドディスクを有するパソコンを利用して高分子のCー13NMRに関する文献デ-タベ-スの他、化学シフトデ-タベ-ス及びスペクトル図デ-タベ-スを作成すると共に、より高度な知的機能として化学シフトからその化合物名を推論するエキスパ-トシステム(ES)も併せて構築し、DBとESを総合利用できるシステムを実用化した。1.文献情報については10MBのマスタ-ファイルPCMRDBにつき、逆転ファイルとRAMディスクの2法により高速検索を試みた。前者は各レコ-ドの見出し行から化合物名、大分類、発行年、雑誌略号、筆頭著者名の5項目を選び効率のよい逆転ファイルを1.2MBで作成し検索時間は数秒であった。後者は各セクタに4行入る濃縮ファイルを作成し、6MBに圧縮後8MBのRAMディスクを用い、BASICコンパイラで全ファイルにつき、1分半で検索することができた。2.数値情報デ-タベ-スとして代表的高分子68種の化学シフトデ-タ500以上を主要デ-タとして関連する情報と共にdBASEIIIを用いてリレ-ショナルデ-タベ-スを作成して検索したほか、化学シフトから化合物名を求める応用プログラムを作成した。3.前項のスペクトル図68個をイメ-ジスキャナ-によりディスクに格納してデ-タベ-ス化し、復元法を改良し画面サイズで原図の全部又は一部の拡大図の何れも見られるようにした。4.前2項と同じデ-タを用い、ル-ル型とフレ-ム型の2種のエキスパ-トシステムを作成した。ル-ル型でも確信度を適当に設定し、ノイズを抑制すれば90%以上の一致がえられるが、極めて類似した試料の判別は困難であった。フレ-ム型ではこの点を改良し、化学シフトのほか強度と肩を入れて候補を絞り、更にシフトの密集の有無や位置と数の情報を用いて類似高分子の判別ができることを示した。本研究は高分子化合物のCarbon-13NMRスペクトルに関する研究を学術情報処理の立場から支援する目的で計画されたもので,個人的研究に必要な情報として文献情報(書誌事項),数値情報(主に化学シフト)および図形情報(NMRスペクトル図)の3種の情報をパソコンのディスクに格納すると共に,通常の検索機能に加えて化学シフトから未知化合物を帰属する知的処理機能を有するシステムの作成を3年間で行なう計画で,本年度は第1年度として記憶容量20MBのハードディスクをもつパソコンを購入し,京都大学型計算機センターで稼働中の高分子のCarbon-13NMRデータベースCNMRPを濃縮してパソコンに移植することと, NMRスペクトル図形のデータベース化の二つを実施した.1)マスターファイルCNMRPの濃縮マスターファイルCNMRPは書誌事項と数値情報が各レコード毎に統合されているが,本研究では両者を分離し,先ず前者を濃縮してパソコンに格納することとし,後者は化学シフト値を再編集してレコード間に亘ってデータの比較を行い易くする目的で来年度行なう予定である.前者については約20個の見出し項目より使用頻度の高い書誌項目7個を選び,レコード数的2000件,容量約10MBのファイルを約1.5MBに濃縮した.2)NMRスペクトル図形のデータベース化NMRスペクトル図形のデータベース化はイメージスキャナーを用いて行なった.B5版半載程度の原図をB5版に拡大して入力した結果スペクトル図の複雑さの程度により若干の差異があるが,平均して1枚当り約10KBでディスクに格納することができた.代表的高分子約45種のスペクトル図68枚を入力した.以上により本年度の目標を概ね達成することができた.本研究は高ぶんしのCarbon-13NMR

スペクトルの研究者に対し、文献情報と化学シフトの帰属情報に加え、NMRスペクトル図形出力も可能な計3種の機能を有する個人データベースをパソコンレベルで作成し、総合的な専門家向の知的情報処理システムの提供を目的とする。発年度は約10MBのマスターファイルにつき書誌事項7項目を抽出し約1.5,Bに濃縮してパソコンPC9801VX4に格納し、次にイメージスキャナーによるNMRスペクトル図形のデータベース化を68図について行ない、IMB以内に圧縮格納した。本年度は化学シフトのリレーショナルデータベース(RDB)の作成と自動帰属に関するエキスパートシステムの構築について研究した。前者についてはパソコン用RDBツールとしてdBASE III PLUSを使用し、ポリオレフィンとビニルポリマーについて化学シフトと帰属情報を表形式にした新らしいファイルからRDBのテーブルを作成した。さらに前述のスペクトル図より得られる化学シフトとその帰属情報を基に新らしいテーブルを編集してRDB化した。前者は精密な帰属情報を得るに適し、後者は代表的な46種のポリマーの主要な化学シフトを利用するものでグローバルな検索に向いている。高分子の研究分野は広いので個人研究用DBとして分野に特化したものが効率のよい面もある。後者についてはパソコン用エキスパートシステムツールとして創元を用い、先ず簡単なシステムとして、前記のスペクトル図の化学シフトの範囲0180ppmを3ppm毎に分けて約60区画とし、これを事象変数として帰属用ツールを46種のポリマーについて作成した。帰属に用いる化学シフトとそれによる帰属の確信度の決定には問題もあり、さらに検討を要することが分かった。またルールベースのみではシステムが硬直となり安いのでフレーム機能についても検討中である。本研究はハ-ドディスクを有するパソコンを利用して高分子のC-13NMRに関する文献情報、数値情報、図形情報のデ-タベ-スを作成すると共に、化学シフトを入力して化合物名を推論するエキスパ-トシステム機能をもつ総合的知的情報処理システムの構築を目的とし、昭和62年度から3年間実施され、最終年度の本年度において下記の成果をあげることができた。1.文献情報については10MBのマスタ-ファイルにつき、逆転ファイルとRAMデイスクの2法により高速検索を試みた。前者については各レコ-ドの見出し行から化合物名、大分類、発行年、雑誌略号及び筆頭著者の5項目につき効率のよい逆転ファイルを1.2MBで作成し、検索時間は数秒であった。後者は各セクタに4行入る濃縮ファイルを作成し、6MBに圧縮後、8MBのRAMデイスクを用い、BASICコンパイラ使用時全ファイルにつき1分半で検索することができた。2.数値情報として化学シフトを中心とし、関連する帰属情報を代表的高分子68種につき、シフト数500以上のリレ-ショナルデ-タベ-ス8作成し、分子構造情報を入力して化学シフトを求めるほか、逆に化学シフトから化合物名を求めることも若干手数を要するが可能性を確かめた。3.スペクトル図形のイメ-ジスキャナ-によるデ-タベ-ス他の復元法を改良し、原図を画面サイズに表示して見易くした。4.前2項と同じデ-タを用い、ル-ル型とフレ-ム型の2種のエキスパ-トシステムを作成した。
西藏自治区-青海省を結ぶ藏族の工芸美術と芸能の文化、その資料と保存に関する研究

1.平成15から18年度の本研究調査の成果:(1).造形と表現文化の調査:1)ヒマラヤ南麓の密教文化圏の調査実施(2003年8/20-9/7)によるインド-シッキム間の仏聖跡、密教文化の基層と現状調査、2)青海省玉樹県-海西藏族自治州の現地調査(2004年7/23-8/14)で造形と表現文化調査実施、第二期調査(2005年7/26-8/20、2006年3/8-/18)):青海省・西寧から西蔵自治区・ラサ間の密教文化圏の現地調査の実施。チベットの表現文化として青海省玉樹・果格、青海省黄南藏族自治州の賽馬祭、六月会の芸能調査、その伝統保存の必要性について報告3)法舞調査(2004年2/4-2/10)古い伝統表現の形態をのこす青海省黄南藏族自治州同仁県ゴマル寺の法舞を調査、古い法舞(チャム)の形態の特徴性を解明。4)学術施設調査実施(2006年3/8-/18):故宮博物院雨花閣、内陣調査と収蔵品調査、北京市内,白塔寺,庸和宮、承徳市チベット仏教寺院の伽藍と収蔵品調査、北京首都博物館の収蔵資料の調査、撮影、2.チベットの文化調査の成果物化:調査による造形および表現領域における特徴的文化をシンポジウム「チベットの芸術と文化」、出版化、資料記録に関して研究分担者、協力者相互の研究交流を実施し相互の研究成果を交流。3.研究実績:研究代表者の服部等作を研究班長、研究分担者の中野照男、奥山直司、笠原浩による本調査の結果、青海(旧アムド地方)から西藏(中央チベット)を結ぶチベット仏教文化が中国・江南、蒙古への伝播ルートに沿った吐蕃時代にさかのぼる歴史・地勢的、および芸術の今日的状況と現地調査を推進出来た。チベット(特に吐蕃帝国時代)が中国に及ぼした造形と表現について図像、文書、工芸製作技法調査の成果をまとめることができた。平成15年度の研究概要:1.ヒマラヤ南麓のチベット美術資料の調査研究:ヒマラヤ南麓の仏蹟の記録調査(8月19日9月7日(21日間)を服部、奥山、白須が実施。本調査はSARSの流行により当初計画をきりかえたもので、仏教の誕生地ルンビニから終焉の地ビクラマシーラ、ならびにチベット仏教圏のシッキム州を網羅した共同研究をすすめ、新たな研究の成果を得た。1)ヒマラヤ南麓圏におけるインド仏教誕生から滅亡、チベット仏教遺跡の調査:ルンビニ、ラージギル、ブッダガヤ、マツゥーラ、サールナート、クシナガラ、ナーランダ、ビクラマシーラなど1)チベット学の展示と研究施設の訪問調査:チベットハウス(ニューデリ)、ルムテック教学研究所(シッキム)等、国立博物館(ニューデリ、パトナ、コルカタ)、考古博物館(マツゥーラ、サールナート)1)チベット仏教・ラマ教寺院の訪問調査:ペマヤンツェ僧院(サンガクチョリン)、ルムテック僧院(ペリン)、エンチェ僧院(ガントク)等2.青海省のチベット文化の調査研究:平成16年度調査地の事前調査と研究交流のため服部が中国、青海省西寧市、青海省黄南藏族自治州、天津市(9月13日21日(9日間))にて共同研究をすすめ、新たな研究の成果を得た。

1)青海省におけるチベット関係の学術機関の訪問調査:青海省黄南藏族自治州吾屯村「タンカ」制作工房、黄南藏族自治州熱貢タンカ芸術資料館、青海省民族学院、青海省民族歌舞劇院、1)チベット仏教・ラマ教寺院の訪問調査:小吾屯寺(黄南藏族自治州吾屯村)、隆務寺(黄南蔵族自治州)、金塔寺(西寧市)等1)美術・考古資料の調査:青海省博物館(西寧市)、熱貢タンカ芸術資料館(黄南藏族自治州)、天津美術学院(天津市)等3.平成15年度の成果:以上の共同研究と調査に加え現地共同研究者での研究交流によりチベット美術工芸と芸能の資料化と保存について研究をすすめることができた。平成16年度の研究実績1.青海省チベット族の有形・無形文化について夏期調査(7/238/14)調査地は、青海省西寧市を起点に玉樹・果格・黄南藏族自治州、ならびに海西蒙古藏族自治州の各州。調査内容は、賽馬祭、芸能(六月会)、装飾工芸の制作工房、民族衣装と天幕生活の習俗である。調査者は、服部、奥山、笠原(研究分担者)に加えて、専門研究者として更〓(青海民族学院)、韓(天津美術学院)、韓(市大博士課程生)が参加し国際共同調査をすすめた。2.有形文化財の調査内容-寺院:(1)玉樹・果格・海南・黄南藏族自治州、海西蒙古族藏族自治州におけるチベット仏教寺院の伽藍配置、荘厳美術(塑像・金属工芸・酥油花・染織工芸・建築装飾・内陣装飾・経典等)ならびに寺院の歴史伝承、記録、収蔵文化財について調査し、多数の資料聞き取りと写真撮影による記録を得た。主な調査寺院/遺構は,結古寺,文成公主廟(玉樹),拉加寺(果格),賽宗寺(海南),楽都-瞿曇寺,同仁県-隆務寺,都乎寺,〓賽日寺,郭麻日寺,吾屯村上/下寺(黄南),並びに海西蒙古族藏族自治州(都蘭王墓群)。(2)寺院の荘厳をささえる工芸美術(金属工芸、仏画、染織工芸>,工房,工匠,ならびに画師の調査上記の各調査地で制作工房を調査し、使用材料、材料-完成品の流通経路、工具、制作品、文化大革命以後の伝統の断絶等について調査および工芸技術について聞き取り調査し多くの知見を得た。3.以上、青海省から西藏自治区における本調査の結果、青海(旧アムド地方)から西藏(中央チベット)を結ぶチベット仏教文化が中国・江南、蒙古への伝播ルートに沿った吐蕃時代にさかのぼる歴史・地勢的、芸術の今日的状況の調査が出来た。また当初ローマ東洋美術館で開催予定とされたTucci仏画コレクション展の調査を予定したが開催が見送られ、今年度調査ができなかった。平成17年度の研究実績1.青海-拉薩にいたるチベットの有形・無形文化に関する夏期調査(平成17年7/268/20)平成17年度1次調査として位置づける本国際共同調査は、服部、奥山(研究分担者)、更〓(青海民族学院)、ならびに韓(市大博士課程生)、および現地研究協力者等の多数の協力のもと、青海省西寧を起点に黄南・果格・玉樹藏族各自治州、四川省徳格経由し西藏自治区の拉薩とその周辺地域、5600kmにおよぶ横断的な行程である。調査目的は、各地の少数民族にかかわる文化、宗教と習俗を総合的、横断的に調査し、静態的な文化領域としてチベットの宗教に関する荘厳美術と工芸美術、および動態的な文化領域として祭祀、芸能(六月会)、牧民習俗の解明にある。その成果は、寺院の荘厳をささえる工芸美術(金属工芸、仏画、染織工芸),工房,工匠,ならびに画師の調査、上記の各調査地(黄南・同仁県、玉樹・アチェ村)で制作工房を調査し、使用材料、材料-完成品の流通経路、工具、制作品、文化大革命以後の伝統の断絶等について工芸技術の調査で多くの知見を得た。2.北京、および近郊地域に残るチベットの芸術・文化に関する冬期調査(平成18年3/8/15)