hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
構造景観の客観的定量化と景観評価の重回帰分析

本年度は、昨年度に提案した景観定量化の指標を説明変量に用いて、アンケート評価を目的変量とする重回帰分析を行った。山と街並の二種類の背景に8種類の橋梁を組み合わせた計16枚の図案を用意して、被験者42人に図案の美しさを5段階で評価する形式のアンケートを行った。アンケートは一度に同一背景の8枚の図案を見せ,2種類の背景に対して2回に分けて行った.各図案からは背景と橋梁の輪郭線をそれぞれ抽出し、昨年度提案した方法に従って、標準偏差、正データ率、傾き、ばらつきの4つの数値指標をそれぞれ算出した。アンケートによる評価点を目的変量とし,4つの数値指標を説明変量として,各個人及び被験者全員の平均値に対して重回帰分析を行った.この際,ステップワイズ法を用いて,統計的に有意な最良回帰式を調べた.また、4つの指標からステップワイズ法で説明度が高い指標を選別し,山と街並のそれぞれの背景について,各個人ごとの評価点と被験者42人の評価点の平均値を対象とした回帰分析も行ってみた.本研究で用いた景観の定量化指標4つのうち,1つか2つは,アンケート調査で得られる個人または集団の景観に対する評価と統計的に有意な相関が認められることが分かった.特定の個人に有意となる指標が,背景によって同一でも,異なっても,同一背景という条件のなかでは,評価点をある程度予測することができるという可能性を示せた.但し,有意な相関を示す指標は個人によってまちまちであるため,全ての個人に共通して有意な相関を示す定量化指標というものは,今回の調査では見つかっていない.逆に言うと,価値観にばらつきのある個人や集団の景観に対する好みを予測するには,特定の1つや2つの指標を扱うだけでは不十分だということかも知れない.本年度は、景観設計例の図案から輪郭線を抽出し、スペクトル解析を用いて定量化する手法を提案した。まず、ある特定の視点からある特定の大きさの二次元矩形枠に投影された橋梁などの主要構造物と山やビル群などの背景のみの単純な線画から抽出される輪郭線に対して、次の二つの方法でスペクトル解析し、それぞれについてパワースペクトルを求めることにした。・手法a:背景と構造物とをそれぞれ1本ずつの輪郭線で表す。構造物の輪郭線をマザーウェーブレットと見なして、背景の輪郭線と畳み込み積分して得られるウェーブレット関数のパワースペクトルを求める。・手法b:背景は1本の輪郭線で表し、構造物を上側輪郭線,下側輪郭線,中間部輪郭線の3本の輪郭線で表す。構造物の3本の輪郭線を1本ずつマザーウェーブレットと見なして背景の輪郭線とそれぞれ畳み込み積分して得た3つのウェーブレット関数を足し合わせて合成した波形のパワースペクトルを求める。手法a,手法bのウェーブレット関数波形の周波数分布や、背景の輪郭線と構造物の輪郭線との相似性といった「図形の特徴」を単なる数値で表すために、次のような4つの指標を提案した。1)ウェーブレット関数Wの波立ちの標準偏差を表す指標。2)Wの正負の割合を表す指標。3)Wのパワースペクトルを両対数プロットした曲線の回帰直線の傾きを表す指標。4)その回帰直線に対するパワースペクトルの標準偏差を表す指標。山またはビル群の背景に異なる橋梁を配した図案に対して、これらの指標を算出し、図案の図形的特徴が指標の数値に反映されることを確認した。アンケートによる評価点を目的変量とし,4つの数値指標を説明変量として,各個人及び被験者全員の平均値に対して重回帰分析を行った.この際,ステップワイズ法を用いて,統計的に有意な最良回帰式を調べた.また、4つの指標からステップワイズ法で説明度が高い指標を選別し,山と街並のそれぞれの背景について,各個人ごとの評価点と被験者42人の評価点の平均値を対象とした回帰分析も行ってみた.本研究で用いた景観の定量化指標4つのうち,1つか2つは,アンケート調査で得られる個人または集団の景観に対する評価と統計的に有意な相関が認められることが分かった.特定の個人に有意となる指標が,背景によって同一でも,異なっても,同一背景という条件のなかでは,評価点をある程度予測することができるという可能性を示せた.但し,有意な相関を示す指標は個人によってまちまちであるため,全ての個人に共通して有意な相関を示す定量化指標というものは,今回の調査では見つかっていない.逆に言うと,価値観にばらつきのある個人や集団の景観に対する好みを予測するには,特定の1つや2つの指標を扱うだけでは不十分だということかも知れない.
顎関節症進行のメカニズムに関する研究

1.うさぎ顎関節症モデルにおける組織変化時の酵素活性の観察うさぎ顎関節症モデルを用いて、基質分解酵素の発現を観察した。うさぎ関節円板の牽引により発生する顎関節の破壊時には、マトリックスメタロプロテアーゼ(MMP)やアグリカナーゼ(ADAMTS)などの発現がみられた。この発現は破壊が進行する期間を通じて認められ、牽引を解除することにより発生する修復の境界時期においても認められた。うさぎの顎関節においては、破壊と修復の期間を通して基質分解酵素の発現がみられるものと考えられた。また、下顎頭軟骨層においてはI型ならびにII型コラーゲンの発現が認められ、破壊の進行によりその比率に変化がみられた。2.臨床材料の検討外科療法が適応となった顎関節症患者からインフォームドコンセントを得て採取した滑液や線維性癒着組織の組織学的あるいは生化学的分析を行った。顎関節症が進行して画像所見にて変形性関節症変化が強く認められる症例では高頻度にMMPやADAMTSの発現が認められた。整形外科領域からは、軟骨の破壊時にADAMTSの発現によりプロテオグリカンが選択的に破壊されてからMMPが発現し、コラーゲンとプロテオグリカンの両者が破壊されると報告されている。しかし、我々が行った顎関節での研究ではADAMTSとMMPが同時に発現することが認められた。したがって、顎関節症における組織変化や破壊の進行度は整形外科領域の関節症と比べると軽度であると考えられた。また、鏡視下手術によって得られた関節腔における線維性癒着は細胞成分が豊富であり、関節円板穿孔症例では骨化や軟骨変性を伴うものが認められた。これらは術前のMRIで特徴的なものも含まれた。1.うさぎ顎関節症モデルにおける組織変化時の酵素活性の観察うさぎ顎関節症モデルを用いて組織標本の作製を行っている。うさぎ関節円板の牽引により発生する顎関節の破壊と、牽引を解除することにより発生する修復の境界時期に重要な役割を果たす酵素の解明を行っている。特に、軟骨基質を構成するコラーゲンとプロテオグリカンそれぞれについて蛋白分解酵素活性の観察を行っている。使用抗体は、マトリックスメタロプロテナーゼ(MMP)、アグリカナーゼ(ADAMTS)、骨の新生時に発現するBMP群、ならびにI型あるいはII型コラーゲンに対する抗体である。2.臨床材料の検討金沢大学医学部附属病院歯科口腔外科を受診し、治療を行った顎関節症採取した上関節腔滑液あるいは手術材料に対して免疫染色や生化学的分析を行っている。特に生化学的分析では、MMPとADAMTS、骨の新生時に発現するBMP群並びに骨、軟骨の主要な構成成分であるI型あるいはII型コラーゲンに対する抗体を用いて分析を行っている。軟骨の破壊では、ADAMTSの発現によりプロテオグリカンが選択的に破壊されてからMMPが発現してコラーゲンとプロテオグリカンの両者が破壊されることが知られているが、顎関節の破壊ではMMPとADAMTSが同時に発現することが認められた。そこで、この理由をさらに検討してゆく所存である。また同時に、顎関節症患者の画像所見より得られた下顎頭の運動様式を分類し、生化学的分析より解明された顎関節滑液中の蛋白分解酵素活性との相関の検討も併せて行っている。1.うさぎ顎関節症モデルにおける組織変化時の酵素活性の観察うさぎ顎関節症モデルを用いて組織標本の作製を継続して行っている。軟骨基質を構成するII型コラーゲンとプロテオグリカンそれぞれについて蛋白分解酵素活性の観察を行っている。マトリックスメタロプロテナーゼ(MMP)、アグリカナーゼ(ADAMTS)、骨の新生時に発現するBMP群、ならびにI型あるいはII型コラーゲンに対する抗体を用いて免疫染色を行った結果の集計を行っている。

現在、発表の準備中である。2.臨床材料の検討金沢大学医学部附属病院歯科口腔外科を受診し、治療を行った顎関節症採取した上関節腔滑液あるいは手術材料に対して免疫染色や生化学的分析を行っている。特に生化学的分析では、MMPとADAMTS、骨の新生時に発現するBMP群並びに骨、軟骨の主要な構成成分であるI型あるいはII型コラーゲンに対する抗体を用いて分析を行っている。軟骨の破壊では、ADAMTSの発現によりプロテオグリカンが選択的に破壊されてからMMPが発現してコラーゲンとプロテオグリカンの両者が破壊されることが知られているが、顎関節の破壊ではMMPとADAMTSが同時に発現することが認められた。この原因を検討している。これとは別に、顎関節症患者の画像所見より得られた下顎頭の運動様式を分類している。特に関節鏡視下手術を施行した症例から得られた臨床材料の生化学的分析や滑膜細胞の培養より解明された顎関節滑液中の蛋白分解酵素活性が術後の滑走運動の回復とどのように相関するかの検討を行っている。1.うさぎ顎関節症モデルにおける組織変化時の酵素活性の観察うさぎ顎関節症モデルの組織標本を用いて,蛋白分解酵素の発現を継続して観察してきた。うさぎ関節円板の牽引によって発生する顎関節の破壊には,既存の分解酵素であるマトリックスメタロプロテナーゼやアグリカナーゼが発現していることを確認した。現在,各病期におけるこれら分解酵素の発現の割合について検討を行っている。同時にI型あるいはII型コラーゲンの発現がどのように関与しているのかも併せて検討を行っている。現在,発表の準備中である。2.臨床材料の検討外科療法が適応となった顎関節症患者からインフォームドコンセントを得て採取した滑液や線維性癒着組織の組織学的あるいは生化学的分析を行い,発表を行ってきた。臨床症状やMRI所見などから得られる変形性顎関節症の進行に伴い基質分解酵素の発現頻度が高くなることは,既に論文等で報告してきたが関節鏡視下に採取した癒着組織は,細胞成分が豊富で,かつ病変の進行に伴い骨化や軟骨変性がみられることを新たに発見した。この癒着組織より採取した細胞は培養が可能であることから,PCR法などの生化学的手法を応用して,これら蛋白分解酵素の発現の有無を検索している。今後の研究によって蛋白分解酵素が癒着組織の細胞からか,滑膜細胞からか,あるいは軟骨細胞からか,あるいはこれらの組み合わせから発現しているのか解明できば顎関節組織の破壊を理解する上での新しい発見になると考え,継続して研究を行っている。
ヒト・パルボウイルスB19の病因論に関する研究

小児伝染性紅斑の原因ウイルスとして知られているヒト・パルボウイルス(HPV/B19)は、近年、非免疫性胎児水腫や慢性関節リウマチなどの他の重篤な疾患との因果関係が指摘されている。しかし、HPV/B19感染の診断法が充分に確立していないため、疾患との関係を見定めるのは困難であった。我々は今までに、HPV/B19ウイルス粒子を抗原とするELISA法、抗HPV/B19モノクローナル抗体を用いたウエスタン法、PCR法を用いたHPV/B19DNAの検出法を確立してきた。本研究では、まず、HPV/B19に対する抗体の検出をより簡便に行なうために、GSTとHPV/B19 VP-1との組換え融合蛋白を抗原とするELISAシステムを開発した。そのシステムを用いて、急性関節炎69例の血清中の抗HPV/B19IgM抗体を調べたところ、9例(13%)が陽性であった。これは、健康人391名で抗HPV/B19IgM抗体陽性者が2名(0.5%)であることに比べ、有意に高い値であった。また、この方法で調べた健康人のIgG抗体陽性率は94/382(25%)で、今まで発表されている結果と一致した。急性関節炎で抗HPV/B19IgM抗体陽性であった9例のうち5例から、PCR法で血清中にHPV/B19DNAを検出した。この5例のうち3例は2年以上関節炎が持続し、慢性関節リウマチと診断された。69例の急性関節炎の中にはHPV/B19の感染が陰性で慢性関節リウマチと診断された例もある。従って、慢性関節リウマチの少なくとも一部はHPV/B19感染が疾患の発症と相関しており、HPV/B19の持続感染があることが判明した。
消化管上皮幹細胞の起源と幹細胞制御におけるNotchシグナル経路の役割

アフリカツメガエルの消化管では、変態期に甲状腺ホルモン(TH)の作用により、幼生型上皮細胞のほとんどが除去されるが、一部は成体型上皮幹細胞へと脱分化し、増殖・分化を経て成体型上皮を形成する。本研究により、この消化管再構築においてTHによりNotch経路が活性化することがわかった。また、Notch経路を阻害すると、Notch応答遺伝子に加え、上皮幹細胞マーカーであるLGR5の発現も抑制された。さらに、本経路の阻害により、吸収細胞への分化の抑制と分泌細胞への分化の促進がみられたことから。これらの結果より、Notchシグナルは消化管再構築に重要な役割を担っていることが示唆された。アフリカツメガエル幼生の消化管を構成する上皮細胞は、甲状腺ホルモンが高まる変態期にそのほとんどが除去されるが、一部が脱分化して成体型上皮幹細胞となる。本研究では、この消化管再構築に関して、(A)成体型上皮幹細胞の起源、(B)幹細胞制御におけるNotchシグナル経路の役割を明らかにすることを目的としている。A.幹細胞を標識するために、(i)Creドライバー、(ii)CreレスポンダーのTgラインの確立を目指している。(i)では、成体型幹細胞特異的に発現する遺伝子のゲノム上流の単離を行った。これまでにROR2のゲノム上流約3Kbを単離し、Tg用のDNAコンストラクトを作製した。Hairy1のゲノム上流の単離も進行中である。(ii)では、Creの作用によりRFPを発現するTgラインの確立を目指して、CAGプロモーターおよびEF1aプロモーターを用いたコンストラクトを作製した。B. Aの原理を応用し、Notch経路に関与する遺伝子の過剰発現系を構築中である。転写因子Su(H)の変異体(機能阻害)、Notch-ICD(機能亢進)の遺伝子をそれぞ製し、Creレスポンダーとしてそれぞれコンストラクトを作製した。Creドライバーとしては、Dox誘導によりユビキタスにCreを発現するコンストラクトを作製した。本研究により幹細胞の起源と幹細胞制御におけるNotchシグナルの新たな役割を解明することができれば、幹細胞研究の分野でたいへん意義深いものとなる。また、両生類研究において新たな技術を提供することができる。アフリカツメガエル幼生の消化管を構成する上皮細胞は、甲状腺ホルモンの血中濃度が高まる変態期にそのほとんどが除去されるが、一部が脱分化して成体型上皮幹細胞となる。A.幹細胞を標識するために、(i)Creドライバー、(ii)Creレスポンダーのトランスジェニック(Tg)ラインの確立を目指している。今年度はHairy1のゲノム上流約5Kbを単離し、Tg用のDNAコンストラクトを作製した。(ii)では、Creの作用により赤色蛍光タンパク質dsRedを発現するTgラインの確立を目指して、CMVプロモーターおよびXeXプロモーターを用いたコンストラクトを作製した。これらのコンストラクトを用い、F0 Tg個体を徐々に得つつある。また、Tg作製時にCre mRNAを共注入し、dsRedが発現するようになることも確認した。転写因子Su(H)の変異体(機能阻害)、Notch-ICD(機能亢進)の遺伝子を、Creレスポンダーとしてそれぞれコンストラクトを作製した。Creドライバーとしては、Dox誘導によりユビキタスにCreを発現するコンストラクトを作製し、F0 Tg個体を得た。このTg個体はすでに亜成体であり、性成熟後にF1 Tgを得られるか確認予定である。その他、NotchのリガンドであるJag1、Jag2、DLL1、DLL2の小腸における発現変動を解析したところ、いずれも変態最盛期に発現のピークを迎えることがわかった。A.予定幹細胞を標識するために、(i)Creドライバー、(ii)Creレスポンダーのトランスジェニック(Tg)ラインの確立を目指している。(i)では、成体型幹細胞特異的に発現する遺伝子のゲノム上流が、細胞特異的なプロモーター活性があるかどうかを確かめるために、単離した上流領域にEGFPなどのレポーター遺伝子をドライブさせてTg作製を行った。レポーター遺伝子が消化管のどの細胞で発現するかを、得られたF0個体を用いて解析中である。幹細胞特異的な遺伝子として、Hairy1およびRor2を選択し、前者は上流5kb、後者は上流1kbからイントロン1の4kbを含む領域を使用した。(ii)では、Creの作用により赤色蛍光タンパク質dsRedを発現するTgラインの確立を目指している。

昨年得られたF0個体が近々成熟するので、F1個体が得られるかを調べる予定である。B.変態最盛期に活性化するNotchシグナルをγセクレターゼ阻害剤投与により阻害したところ、Notch応答遺伝子であるHairy1とHairy1bの発現上昇が抑制されることを見出した。さらに、成体型上皮幹細胞のマーカー遺伝子であるLGR5の発現も抑制されることがわかった。本研究により幹細胞の起源と幹細胞制御におけるNotchシグナルの新たな役割を解明することができれば、幹細胞研究の分野でたいへん意義深いものとなる。また、両生類研究において新たな技術を提供することができる。当初の目的では、(A)ではCreレスポンダーTgラインの確立、CreドライバーTgの作製、(B)ではCreドライバーのTgラインの確立を前提として、プロモーター特異性の解析および幹細胞の起源の探索、Notchシグナル経路の機能解析にそれぞれ進むはずであったが、達成できていない。理由としては、主として以下のことが挙げられる。(1)昨年度までの遅れがそのまま影響している。(2)昨年度使用したRor2上流3kbの領域に明確なプロモーター活性が見られなかったため、ゲノムクローニングからやり直した。これまでの遅れを取り戻すために、今年度はTg作製(特に(A-i)のCreドライバーおよびプロモーターの細胞特異性の解析)に注力し、F0個体を得ることができたが、プロモーター活性の解析が完了していない。アフリカツメガエル幼生の消化管を構成する上皮細胞は、甲状腺ホルモンの血中濃度が高まる変態期にそのほとんどが除去されるが、一部は脱分化して成体型上皮幹細胞となる。本研究では、この消化管再構築に関して、(A)成体型上皮幹細胞の起源、(B)幹細胞制御におけるNotchシグナル経路の役割を明らかにすることを目的とした。A.予定幹細胞を標識するために、(i)Creドライバー、(ii)Creレスポンダーのトランスジェニック(Tg)ラインの確立を目指している。(i)では、成体型幹細胞特異的に発現する遺伝子のゲノム上流やイントロンに細胞特異的なプロモーター活性があることを期待し、単離した当該領域にEGFPなどのレポーター遺伝子をドライブさせてTg作製を行った。レポーター遺伝子が消化管のどの細胞で発現するかを、得られたF0個体を用いて解析中である。幹細胞特異的な遺伝子として、Hairy1及びRor2を選択し、前者は上流5kb、後者は上流1kbからイントロン1の4kbを含む領域を使用した。(ii)では、Creの作用により赤色蛍光タンパク質dsRedを発現するTgラインの確立を目指している。しかし、これまでに得られたF0個体では生殖細胞にDNAが導入されておらず、F1個体を得ることができなかった。B.変態最盛期にNotchシグナルに関わる遺伝子(リガンド、受容体、応答遺伝子)の発現が甲状腺ホルモンにより高まることを見出した。この時期にNotchシグナルを阻害したところ、応答遺伝子であるHairy1とHairy 1bの発現上昇が抑制された。
非協力・利己的マルチエージェント系のための制御エージェント設計

本研究は,互いに非協力的で利己的に振る舞うエージェントからなるシステムにおいて,全体の目的をエージェント集団との相互作用を通じて実現する「制御エージェント」の設計法の確立を目的とする.補助金配分を通して利己的エージェント集団と相互作用する制御エージェントをモデル化し,目標状態の安定化条件について調べる.次に,目標状態の代わりにシステム管理者の目的関数が与えられるとし,それを最適化するための制御エージェントの利得関数と行動の更新規則の設計を行う.さらに,これらの結果を工学的問題に応用する.本研究は,互いに非協力的で利己的に振る舞うエージェントからなるシステムにおいて,全体の目的をエージェント集団との相互作用を通じて実現する「制御エージェント」の設計法の確立を目的とする.補助金配分を通して利己的エージェント集団と相互作用する制御エージェントをモデル化し,目標状態の安定化条件について調べる.次に,目標状態の代わりにシステム管理者の目的関数が与えられるとし,それを最適化するための制御エージェントの利得関数と行動の更新規則の設計を行う.さらに,これらの結果を工学的問題に応用する.
選択型翻訳による言語横断検索の実現

本研究では、選択型翻訳とよぶ新しいターム翻訳の方式を提案するとともに、それを実行する効率的なアルゴリズムを開発した。さらに、この方法の日英ターム翻訳への適用において、7種類の拡張機構を実現し、翻訳の性能向上を図った。実現した方式を英語ウィキペディアに対する日英横断見出し語検索に適用し、実験により、その有効性と既存の機械翻訳を上回る性能を確認した。本研究では、選択型翻訳と名付ける、複合語の新しい翻訳方式を確立し、これを利用して、有限の索引リストを持つ情報源に対する効率的な言語横断検索法を実現することに取り組んでいる。本年度は、以下のことを行った。(1)複合語を対象とした選択型翻訳のアルゴリズムを定め、これを実行するプログラムを作成した。このアルゴリズムは、対訳辞書を利用した訳語候補生成と索引リストとの照合を、動的計画法を用いて漸進的に行うアルゴリズムである。索引リストとの最適照合の部分は今後の改良が必要であるが、英語ウィキペィアの全見出し語を索引リストとした日英翻訳の場合でも、実用的な速度で実行できる見通しを得た。(2)先に作成済みの選択型トランスリタレーションシステムを、上記の選択型翻訳に、拡張カタカナ語辞書として組み込む方法を定め、プログラムとして実現した。これにより、本研究で作成すべきシステムの骨格がほぼ定まった。このプログラムをベースとしたデモシステムを作成し、英語ウィキペディアの記事(見出し語)を日本語で引くことができることを確認した。(3)科学技術用語辞典(書籍)から日英対訳を拾い、暫定的なテストセットを作成した。適切なテストセットの作成は、予想より難しく、今後、再検討が必要であることがわかった。(4)上記のテストセットを用いて、システムの動作を確認する実験を行った.この結果、選択型翻訳で使用する対訳辞書の網羅性に問題があることが判明した。本年度でシステムの骨格はほぼ定まったので、次年度以降は、システムの実験的評価と問題点の解決に取り組む予定である。ウェブ上の百科事典『ウィキペディア』には、多くの言語の版がある。本研究では、その中で最大の『英語ウィキペディア(EnWiki)』を、日本語で引くことができるシステムを作成した。システムの中核は、日本語タームの英訳機構である。選択型翻訳(Non-Productive Machine Translation)と名付けた機構は、要素合成法で英訳候補を生成した後、ターゲットリストと呼ぶ大規模な訳語候補リストに含まれる候補のみを出力する。このターゲットリストに、EnWikiの見出し語リスト(590万件)を用いることにより、EnWikiを引くことができる訳語が得られる。通常、日本語タームとその英訳には、構成要素間に対応関係がある。このため、要素合成法で利用する対訳辞書が完全であり、かつ、訳語がEnWikiの見出し語に存在すれば、上記の方法で必ず正しい訳語を得ることができる。しかし、実際のターム翻訳には、カタカナ表記による音訳、表記ゆれ、翻訳のゆれなどの現象が見られ、利用可能な対訳辞書は、これらの現象を十分にはカバーしない。この問題を解決するために、本研究では、選択型翻訳に7つの拡張機構を導入し、辞書の不備を補い、システムの能力を向上させた。本年度は、特に、これらの拡張機構について研究した。システムの評価のために、3種類のテストセット(合計11,070件)を編纂した。評価実験により、いずれのテストセットに対しても、70%以上の日本語タームに対し、正しい訳語を出力できることを確認した。拡張機構の導入による性能の向上は9.4-20.4%であり、大きな効果があることがわかった。さらに、本システムの性能は、ウェブの翻訳サービスや市販翻訳ソフトを凌駕していることも確認した。
階層的配位空間の化学

多孔性配位高分子(Porous Coordination Polymer: PCP)の造りだすナノ空間を階層的に集積化させ、あらゆる細孔機能を統合した「階層的配位空間」の学理創成を目的として研究を行った。特に分子の分離・変換・輸送機能をテーマに、PCPの合成および細孔内空間での新現象の開拓、そしてナノから巨視的スケールに渡るPCPの階層的集積化法を確立し、新しい空間の学問領域を開拓した。結果、PCPの階層的細孔構造を精緻にデザインすることによって、一般的に極めて難しいとされるガス種の分離や変換を達成するPCPの合成に成功した。さらに、高分子素材との複合化手法を開発しPCPの階層的集積化への道筋を開き、PCPを基盤とする新しい分離膜の開発に成功した。1.究極分離細孔(1)室温常圧分離一酸化炭素/窒素の効率的分離を可能にする材料を発見した。極めて困難な分離を可能としたPCPでは、COが取り込まれることによって、さらに多くのCOを次々に細孔内部へ呼び込むまったく新しいメカニズムに基づくことを明らかにした。この結果は、Science誌にて発表した(Science, 2014, 343, 167)。また、同様の構造を有するPCPは水吸着に伴い、特異な構造変化を示す事を見つけた。(2)同位体分離吸着においてH20とD20の間で、顕著な差を示すPCPを発見している。この現象においては、柔軟な構造を有するPCPが与えるナノ空間における水のクラスター形成が示唆された(論文投稿中)。2.物質変換細孔(1)異性化制御に基づく物質変換細孔ビニルアルコール-アセトアルデヒドの平衡を、細孔内部で大きく偏らせることでポリビニルアルコールの直接合成に挑む。実際の合成に先立ち、計算化学的手法による検討を行った。ルイス酸点として働く配位不飽和金属サイトと水素結合サイトを細孔表面に適切に配置することで、目的とする平衡を制御できる可能性を見いだした。(2)動的金属クラスターとの複合化による物質変換細孔サブナノ金属クラスターの効率的合成を可能とする新規PCPの合成に挑戦した。この過程において、従来法では不可能であった活性サイトを導入する手法を開拓できた(論文投稿準備中)。3.異方的物質輸送細孔(1)炭素材料との複合化による空間の階層化異種材料との複合化による異方的空間の構築を目指し、PCP結晶と炭素材料との複合化による空間の階層化を試みている。その第1ステップとしてグラフェンオキサイドからなる球状構造体の合成に成功した(論文投稿済み)。1.究極分離細孔(1)水の特異な吸着状態を明らかにするため、赤外分光法を用いて1次元ナノ空間に閉じ込められた吸着水分子の凝集状態を調べた。その結果、吸着水分子はPCP骨格構造に元々存在する水分子を巻き込んで水素結合ネットワークを作る事がわかった。また、テラヘルツ分光法を用いて吸着水分子の脱着カイネティクスを調べたところ、1次元拡散モデルに良く従うことがわかった。またそこから求められる活性化エネルギーはバルク水の水素結合エネルギーと同等であり、吸着水分子が水素結合ネットワークを断ち切りながら1次元細孔から抜けていくことがわかった。2.物質変換細孔(1)異性化制御に基づく物質変換細孔ビニルアルコールーアセトアルデヒドの平衡を、細孔内部で大きく偏らせることでポリビニルアルコールの直接合成に挑む。ルイス酸点および水素結合サイトを空間的に適切に配置するためのフレームワークおよび配位子設計を行った。この過程において、3次元多孔性錯体の2次元シート構造への剥離現象を見いだした。この現象を利用することで2次元シート構造への選択的金属イオン集積を実現した。その第1ステップとしてグラフェンオキサイドからなる球状構造体の合成に成功し、学術論文発表を行った(Nature Communications, 2014)。(2)階層的構造における構造変化と物質移動多孔性配位高分子(PCP)の中には、温度や溶媒、ゲスト分子などの変化により動的にその結晶構造を変化させるものがある。この構造転移現象のメカニズム解明は、異方的物質輸送細孔を実現するためにきわめて重要である。本年度は、この転移現象のメカニズムを解明すべく、超高分解能・超高速原子間力顕微鏡(AFM)を用いてPCP結晶表面構造の実空間・実時間観察をおこなった。詳細に実験条件を探索した結果、ある条件において原子レベルの鮮明な結晶表面像が得られ、結晶-結晶相転移を実時間観測する上で十分な解像度を得ることに成功した。1.究極分離細孔(1)多孔性配位高分子(PCP)内への水の特異な吸着状態を明らかにするため、赤外分光法を用いてPCPの1次元ナノ空間に閉じ込められた配位水分子の水素結合状態を調べた。その結果、配位水は「PCP骨格構造を安定化させる」、「後から入ってきたゲスト水の吸着の役割を担う」等の重要な役割を果たしていることを明らかにした。赤外分光法で得られる吸収スペクトルを詳しく解析することにより、分子の吸着状態や吸着過程、エネルギー散逸過程等を明らかにできる事を実証した。

2.物質変換細孔(1)異性化制御に基づく物質変換細孔ビニルアルコール-アセトアルデヒドの平衡を、細孔内部で大きく偏らせることでポリビニルアルコールの直接合成に挑戦している。前年度までにルイス酸点および水素結合サイトを空間的に適切に配置するためのフレームワークおよび配位子設計を完了し、実際にそれらが細孔内で規則的に配列したPCPを得ることに成功した。3.異方的物質輸送細孔(1) 3次元から2次元シートへの異方的構造変換ある一次元細孔を持つPCPが特殊な環境下で異方的に大きく変形することを発見した。この変形は一次元細孔の軸方向から起こり、可逆的であることから、本現象を利用すれば一次元細孔の内部に蠕動運動を引き起こし、異方的なゲスト輸送が達成できる可能性がある。現在、その最適条件を探索中である。(2)階層的構造における構造変化と物質移動PCPの構造転移現象がどのようなプロセスで進行するのか、メカニズムには未だ謎が多い。この機構解明は、異方的物質輸送細孔を実現するためにきわめて重要である。本年度は昨年度に引き続き、超高分解能高速原子間力顕微鏡(AFM)を用いてPCP結晶表面構造の実空間・実時間観察をおこなった。AFM観察を続けながらゲスト置換を試み、様々な条件を探索した結果、原子レベルの高解像度で構造変化前後の結晶表面の観察に成功した。(3)中空有機金属錯体のフィルム化による物質分離膜PCPを柔軟なフィルムへと成形加工することで、異方的に物質を透過させる膜材料の合成に挑戦した。PCPは結晶性であるがために柔軟なメンブレンへと成形加工ができないという問題点を抱えている。そこで、PCPの最小構造単位である単孔性中空有機金属錯体(MOP)に着目し、MOPと汎用高分子を複合化することで非常に柔軟なメンブレンの合成に成功した。現在、本メンブレンの物質(ガス)分離性能を評価中である。3つの具体的目標(「分離」「変換」「輸送」)達成に向けて順調に進展している。「究極分離細孔」については、PCP内部に吸着された水分子がさらなる水分子の導入を助けるという、これまで全く知られていなかったメカニズムについて明らかにすることができた。「物質変換細孔」については目的を達成し得るPCPのデザインに手間取ったものの、その合成を完了し、今後の飛躍的な進展が期待できる。「異方的物質輸送細孔」は、これまで多角的に検討を重ねていた幾つかのテーマについて興味深い実験成果が得られた。高分子化学や超分子、自己集合といった材料化学分野との融合により、新しい物質分離膜の創出などにも繋がる進展が見られた。(1)水同位体を分離することのできる究極分離細孔を目指して、ある多孔性配位高分子(PCP)内への水の特異な吸着状態を調査した。昨年度に引き続き赤外分光法を用いてPCPの1次元ナノ空間に閉じ込められた配位水分子の水素結合状態を調べた。赤外吸収スペクトルの温度依存性を詳しく解析することにより、吸着水分子のエネルギー散逸過程を明らかにできる事を実証した。この手法は他の様々なPCPにも応用できると期待される。また、本手法は未だ明らかにされていない吸着過程の速度論的研究にも展開できる重要な進展である。
比喩的な指導言語による感覚の共有と「わざ」の学びモデルの構築

本研究は,4年間の研究期間を通して,「わざ」の習得を目指す領域において,比喩的な指導言語としての「わざ言語」を介して感覚が共有される過程の分析を行った。その結果、以下の3点を明らかにした。第一に、わざが習得されるメカニズム、特に比喩表現や暗黙知がもつ意義である。第二に、わざの伝承における「感覚」がもつ機能と役割である。第三に、「わざ」の習得過程における学習者及び指導者双方の変化である。以上の成果に基づき、教育理論・実践の双方における新たな学びのモデルを提示した。本年度は、主としてわざ言語を通したわざの習得過程に関する内外の文献調査と行うとともに、これまでの研究成果を整理し、次年度より具体的に実施する各領域の卓越者へのインタビューの理論的準備に充てた。研究代表者の生田は当該科研の開始にあたって、コロンビア大学(2012.5.1923)及びモントリオール大学(2012.5.2326)において資料の収集を実施し、以下の3つの口頭発表において研究成果を公表した。すなわち、(1)日本体育学会体育哲学専門領域シンポジウムII(東海大学湘南キャンパス2012.8.24)、(2)日本学術会議・心理学・教育学委員会「身心教育を中心とした質保証のあり方検討分科会」(日本学術会議2012.9.24)、そして(3)上智大学公開研究会・教育イノベーション「大学における"身体知"の再構築」(2012.11.6)である。口頭発表に加えて生田は、次年度に予定しているインタビューの準備として、(1)歌舞伎役者の中村時蔵氏と「わざの継承をめぐる親子対談」の計画についての打ち合わせ(2013.1.26国立劇場)を実施し、また(2)金箔職人の野口康・琢郎親子の工房を訪れて(2013.11.30箔屋ギャラリー)当該研究の対象者としての適切性について吟味した。さらに、連携協力者であると同時に研究対象者でもある彫刻家の中原篤徳氏のアトリエにおいても次年度の理論的準備として、モデルを前にしての彫刻実践とそこで行き交う「ことば」に焦点をあてた研究会を実施し(2012.2.3)、研究者間で次年度の研究の可能性について検討した。上記の今年度の活動はすべて申請書に記した「研究計画」に沿ったものであり、次年度の研究計画を実施する上で有効な活動であった。本年度は、インタビュー調査の一つとして、昨年度より計画してきた、中村時蔵氏、中村梅枝氏、中村萬太郎氏を講師として迎えて親子対談及び、親子間における「わざ」の伝承をテーマとした研究会を実施した(2013年6月7日)。また、今年度までの全体の研究成果を総括したものとして、研究会の概要、イタリア国際セミナー及び各報告者からの論文、イタリアでの調査概要をまとめた年次報告書を刊行した。2014年度は科研の3年目にあたり、国外での訪問調査活動及び資料収集を行うとともに最終年度へ向けて理論的枠組みの精査を行った。研究会活動として、2014年6月に第4回研究会を実施し、日本の伝統芸能の一つである「香道」に関する議論を行った。9月には第5回研究会として早稲田に新しく開設された「手でみる美術館」を訪問し、「触る」「見る」といった感覚を通しての学びについて知見を得た。さらに同月の第6回研究会では「わざ」と「ことば」との関連性に関する理論として、大村の「教材」論、ランガーの「シンボル」論を精査した。3月の第7回研究会では、「感覚」に関する理論枠組みの一つとしてE.パノフスキーのイコノロジー論について議論を行った。代表者である生田は、調査活動として、2015年3月にイタリアでの訪問調査活動を行った。オメロ美術館(アンコーナ)、アンテロス美術館(ボローニャ)、盲人協会(ローマ)等の各施設において、「見る」「触る」「知る」に関する議論及びワークショップを実施し、身体性と言語の関係性に関する知見を得た。また分担者である北村は、エキスパート・ジュニアスポーツ指導者5名を対象とし、小学生スポーツ選手にわざ言語を通して「暗黙知」をどのように伝えようとしているのか、またそれはどのような意図や考え(メンタルモデル)によって形成されているのか、練習場面で用いる指導言語の観察およびインタビュー調査により明らかにした。成果発表活動としては、日本教師学学会等において成果を発表した。平成27年度は科研の最終年度であり、調査活動の最終的な行程を行うとともに、調査結果の分析及び成果発表を行った。また、4年間の科研における研究活動の総括として、最終報告書の作成と発行を行った。研究代表者である生田は、主として研究成果発表活動を行った。2015年8月には田園調布学園大学のシンポジウムに登壇し、2016年1月には公益法人前川財団主催のシンポジウムでメインの報告を実施した。また同3月には、大阪府の藍野大学にて招待講演を行い、奈良学園大学において開催された日本教師学学会第17回大会で研究分担者の北村勝朗と連名発表を行った。研究分担者である北村は、教育情報学研究に論考を発表し、日本スポーツ心理学会において、成果発表となる学会発表を行った。また、年度末には、本科研全体の最終的な成果をまとめた報告書を製作した。報告書では、科研内で実施した研究会及び個々の調査結果を収録した。

具体的には、平成26年度に実施したイタリアのボローニャ市、アンコーナ市、ローマ市での調査結果、舞踊、触察絵画、脳、点字絵本の教育実践の分析結果、及び「省察的実践力」「ことばの教育」「インクルーシブ教育」における人間の「学び」「知」「感覚」に関する分析結果を収録した。以上の活動成果から、科研全体の研究成果として、「わざ言語」を介して「感覚」が共有される過程の分析を行い、その効果と意義とを示した。特に「人間の知の形成における「感覚」とは何か」という根本的な問いを通して、「わざ」の伝承における「感覚の共有」が単なる「形の共有」を超えた「型の共有」をもたらすことを示した。結果として、省察的実践力を高めうる、更新と創造性を包含する過程として「わざ」の学びモデルを示した。本研究は,4年間の研究期間を通して,「わざ」の習得を目指す領域において,比喩的な指導言語としての「わざ言語」を介して感覚が共有される過程の分析を行った。その結果、以下の3点を明らかにした。第一に、わざが習得されるメカニズム、特に比喩表現や暗黙知がもつ意義である。第二に、わざの伝承における「感覚」がもつ機能と役割である。第三に、「わざ」の習得過程における学習者及び指導者双方の変化である。以上の成果に基づき、教育理論・実践の双方における新たな学びのモデルを提示した。最終年度に向けて、調査、資料収集、データ分析、理論準備等を予定通り進めることが出来ている。また、国外での調査も実施し、国際的な協力関係を構築することもできた。27年度が最終年度であるため、記入しない。教育哲学今年度は最終年度となるため、本科研の全体を通した研究報告書の刊行を予定している。そのため、これまでに調査の結果を分析し、蓄積してきた成果に基づく理論構築と提言、及びモデル提示にむけた議論を具体化させていく。代表者と分担者、そして連携協力者及び研究協力者との密な打ち合わせの結果、共通理解ができでおり、研究は順調に進展している。代表者と分担者、そして連携協力者及び研究協力者との密な打ち合わせの結果、共通理解ができており、研究は順調に進展している。国際セミナーの実施等、異文化横断的な視点からも研究が展開している。最終研究報告書を刊行する予算確保のため。次年度は、申請書の計画に沿って、(1)スポーツ領域、(2)日本伝統芸能領域、(3)西洋芸術領域の各領域における卓越者へのインタビューを開始し、わざ言語体験の分析を実施する。次年度は、申請書の計画に沿って、1スポーツ領域、2日本伝統芸能領域、3西洋美術領域の各領域における卓越者へのインタビューを継続し、わざ言語と感覚の共有を通しての学びの関係について分析をしていく。最終的な研究報告書の印刷・製本代として使用する。次年度は卓越者へのインタビューなど実践的な調査活動が中心となるために、研究費は主として旅費や謝金として執行する予定である。次年度のインタビューにかかる必要経費として、次年度へ繰り越しをした。次年度は卓越者へのインタビューなど実践的な調査活動を継続するために、前年度からの繰越金と合わせて、研究費は主として旅費や謝金として執行する予定である。
エリスロポエチンの細胞増殖、蛋白合成作用とその細胞内情報伝達系に関する研究

本研究は培養血管平滑筋細胞を用いて、合成ヒトエリスロポエチン(rHuEpo)の細胞増殖作用(DNA合成作用、蛋白合成作用)におよぼす影響、および細胞内遊離カルシウム濃度([Ca^<2+>]i)におよぼす影響を検討し、腎不全患者におけるrHuEpoの血圧上昇作用の機序を検討することが目的である。rHuEpoの血管平滑筋細胞に対する蛋白合成作用、DNA合成能については、rHuEpoは用量依存的に血管平滑筋細胞の蛋白合成能、thymidineの取り込みを増加させ、rHuEpo 50U/lで蛋白合成能、DNA合成能ともにコントロールの比し高値を示した。血管平滑筋細胞におけるエリスロポエチンの受容体の存在の有無についての検討は、^<125>I-rHuEpoを用いたbinding assayを行ったが、エリスロポエチンの受容体の存在を証明できなかった。ヒトにおいて、血管平滑筋細胞と類似の作用を持つ血小板を用いて、rHuEpoの細胞内カルシウム濃度への影響を検討した。対象は維持血液透析患者17名、保存期慢性腎不全患者21名、未治療本態性高血圧症患者21名、正常血圧者24名であった。In vitroでrHuEpo 4,40U/ml添加前後に血小板内遊離カルシウム濃度([Ca^<2+>]i)をQuin2法で測定した。その結果、4群の[Ca^<2+>]iと平均血圧との間に正の相関(r=0.56、p<0.01)を認めた。rHuEpo 4U/ml添加では各群で[Ca^<2+>]iは変化がなかったが、40U/ml添加により維持血液透析患者および保存期慢性腎不全患者の[Ca^<2+>]iは、49±20nM、56±17nMと本態性高血圧群あるいは健常対照群(38±18nM、25±14nM)に比し有意に増加した。また維持血液透析患者群と保存期慢性腎不全患者群の[Ca^<2+>]iの増加量と平均血圧との間に正の相関(r=0.53、p<0.01)を認めた。以上の結果より、エリスロポエチンが血管平滑筋細胞に対して蛋白合成作用、DNA合成作用を有する事、これらのエリスロポエチンの血管平滑筋細胞に対する作用は、細胞内カルシウムの上昇を介することが示唆された。今回の方法では、血管平滑筋細胞にエリスロポエチンレセプターを証明し得なかったが、1996年、Ammarguellatらはrat血管平滑筋において初めてEpoレセプターの存在を証明した。エリスロポエチンによる高血圧症の発症機序を解明するために、培養血管平滑筋細胞をもちいて、合成ヒトエリスロポエチン(rHuEPO)のCell Growth(DNA合成作用、蛋白合成作用)におよぼす影響を検討した。

さらにエリスロポエチン受容体が血管平滑筋細胞に存在するか否かについて検討した。血管平滑筋細胞はラットから分離し実験に供した。実験1)rHuEPOの血管平滑筋細胞に対する蛋白合成作用についての検討rHuEPOを加えたメディウムで血管平滑筋細胞を3日間培養し、その後メディウムをすてよく洗浄した後蛋白量をLowry法で測定した。上表の如く、rHuEPO : 50unit/1で有意にコントロールと比べ、蛋白合成が亢進した。実験2)rHuEPOの血管平滑筋細胞に対する細胞増殖作用(DNA合成能)についての検討rHuEPOを加えたメディウムで血管平滑筋細胞を培養し、さらに^3H-thymidineを加え24時間後取り込まれた^3H-thymidine(Thym Inc)を液体シンチレーションカウンターで測定した。上表に様に、rHuEPO:50unit/1で有意にコントロールと比べ、Thymidineの取り込みが亢進した。実験3)血管平滑筋細胞におけるエリスロポエチンの受容体の存在の有無についての検討^<125>I-rHuEPOを用いたbinding assayを行ったが、エリスロポエチン受容体の存在を証明できていない。1),2)の結果より、rHuEPOは、血管平滑筋細胞に対して細胞増殖作用および蛋白合成能が存在する可能性が示唆されたが、エリスロポエチン受容体の有無についてはさらに検討が必要と考えられた。平成8年度は、血管平滑筋細胞のエリスロポエチン(Epo)レセプターの有無の検討およびリコンビナント・ヒト・エリスロポエチン(rHuEpo)の細胞内カルシウム濃度に及ぼす影響を検討した。^<125>I-rHuEpoを用いて血管平滑筋細胞のreceptor binding assay法を行ったが、Epoレセプターが存在することを証明できなかった。ヒトにおいて、血管平滑筋細胞と類似の特性を有する血小板を用いて基礎時およびin vitroでrHuEpo4,40U/mlを投与後、[Ca^<2+>]iの変化を観察し、遊離細胞内カルシウム濃度([Ca^<2+>]i)を測定した。対象は慢性血液透析患者17名、保存期慢性腎不全患者21名、未治療本態性高血圧症患者21名、正常血圧者24名であった。維持血液透析患者群と保存期腎不全患者群を加えた腎不全群の平均血圧は、対照群に比し有意に高く本態性高血圧群とに差がなかった。基礎時、維持血液透析患者群と保存期慢性腎不全患者群の[Ca^<2+>]iは136±12、137±11nMと、健常対照群121±13nMに比し有意に高かったが、本態性高血圧群163±16nMに比し低値であった。腎不全群単独では[Ca^<2+>]iと平均血圧とに有意な関係はなかったが、4群全体の[Ca^<2+>]iと平均血圧との間に正の相関(r=0.56、p<0.01)を認めた。rHuEpo4U/ml添加後、各群の[Ca^<2+>]iには変化がなかった。40U/mlによりHD群とESRD群の[Ca^<2+>]iは、本態性高血圧群と健常対照群とに比し有意に増加した(49±20、56±17vs.38±18、25±14nM)。また維持血液透析患者群と保存期慢性腎不全患者群の[Ca^<2+>]iの増加量と平均血圧とに正の相関(r=0.53、p<0.01)を認めた。以上の結果より、Epoが細胞内カルシウムを上昇させて血圧を上昇させることが示唆された。今回の方法では血管平滑筋細胞にエリスロポエチン・レセプターを証明できなかったが、1996年Ammarguellatらはrat血管平滑筋において初めてEpoレセプターの存在を証明した。
顎関節円板切除あるいは下顎頭部分的切除を含めた処置後の耳介軟骨移植に関する研究

実験手技が担当確立したとはいっても、処置中には出血死のマウスもある程度あった。合計49匹の成熟雄ICR mouse(下顎頭切除15匹、下顎頭切除後に耳介軟骨移植31匹、顎関節部を開放しもとにもどしたもの3匹)を処置後136日から187日まで飼育し屠殺した。その後両側の顎関節部を取りだし、通法通り組織標本を作製し、組織学的検索、免疫組織化学的検索とした。咬合状態をみると明らかに咬合異常を生じた症例は5例あり、4匹は死亡時に確認したものである。毎日マウスを観察していないため、咬合異常を生じた症例数はさらに数は多いのではないかと推測する。本年度は少なくとも下顎頭の欠損(すなわち咬合高径の減少)は明らかに咬合異常を起しうることを明確に示した。H-E染色による組織学的検査では、下顎頭切除例では、一般の骨折端とほぼ同様に治癒する。耳介軟骨移植例では、下顎運動のため移植軟骨は外側方に移動し、下顎頭欠損部に一致して存在していないことが多い。移植軟骨は耳介軟骨の性質を保有していた。免疫染色ではTransforming growthfactor-βは顎関節関節腔表層細胞は下顎頭、下顎関節窩ともに陽性で、下層の軟骨は一般的に陰性である。移植耳介軟骨細胞も陽性細胞はわずかで、一般的に陰性である。fibroblast growthfactor-2は下顎頭、下顎関節窩いづれも関節腔に近い間葉細胞、より下層の軟骨細胞も陽性であるが、表層に近い細胞群に活性は強い。移植軟骨は陽性のものと陰性のものが混在した。bone morphogeneticproteinは顎関節の関節腔の間葉細胞、軟骨細胞いづれにも陰性であり、移植軟骨は同様に陰性であった。Laminin染色においては、関節腔側にある細胞群も、それより下層の軟骨細胞ともに陰性反応を示した。移植軟骨細胞は一般的には陰性である。平成10年度は実験対象がマウスである点より、まず手術用顕微鏡下における実験手技の確立が必要であった、即ちできるだけ出血を少なくして顎関節にアプローチすること、下顎頭直下で確実に切除できること、移植耳介の位置が術後移動することなく適切に保たれること、の3点で、実験を始めた頃は、多くの死亡例を出したが、後半は非常に少なくなっている。平成11年2月3日現在まで53匹の成熟雄ICR mouse(顎関節切除+耳介軟骨移植32匹、顎関節切除のみ17匹、顎関節を開放してもとにもどしたもの4匹)について、処置後38日より191日まで観察した所、肉眼的に顔面下顎の変形を生じたり、咬合異常を来たしたマウスはいなかった。組織学的にH-E染色として検索した所では、うまく標本上に実験部位が出せなかった例もあったが、うまく処置されたマウスでは最長191日でも十分に耳介軟骨は生存機能し、顎関節硬直を生じておらず、この手術形式は十分に臨床的にも応用可能と考えられた。組織学的には手術による外傷性反応性炎症、炎症の消退とともに軟骨細胞の細胞の活性化を生じ、時には本来の軟骨細胞より増殖している様に観察された部分もあった。合計49匹の成熟雄

ICR mouse(下顎頭切除15匹、下顎頭切除後に耳介軟骨移植31匹、顎関節部を開放しもとにもどしたもの3匹)を処置後136日から187日まで飼育し屠殺した。その後両側の顎関節部を取りだし、通法通り組織標本を作製し、組織学的検索、免疫組織化学的検索とした。咬合状態をみると明らかに咬合異常を生じた症例は5例あり、4匹は死亡時に確認したものである。毎日マウスを観察していないため、咬合異常を生じた症例数はさらに数は多いのではないかと推測する。本年度は少なくとも下顎頭の欠損(すなわち咬合高径の減少)は明らかに咬合異常を起しうることを明確に示した。H-E染色による組織学的検査では、下顎頭切除例では、一般の骨折端とほぼ同様に治癒する。耳介軟骨移植例では、下顎運動のため移植軟骨は外側方に移動し、下顎頭欠損部に一致して存在していないことが多い。移植軟骨は耳介軟骨の性質を保有していた。免疫染色ではTransforming growthfactor-βは顎関節関節腔表層細胞は下顎頭、下顎関節窩ともに陽性で、下層の軟骨は一般的に陰性である。移植耳介軟骨細胞も陽性細胞はわずかで、一般的に陰性である。fibroblast growthfactor-2は下顎頭、顎関節窩いづれも関節腔に近い間葉細胞、より下層の軟骨細胞も陽性であるが、表層に近い細胞群に活性は強い。移植軟骨は陽性のものと陰性のものが混在した。bone morphogeneticproteinは顎関節の関節腔の間葉細胞、軟骨細胞いづれにも陰性であり、移植軟骨は同様に陰性であった。Laminin染色においては、関節腔側にある細胞群も、それより下層の軟骨細胞ともに陰性反応を示した。移植軟骨細胞は一般的には陰性である。
動物の腫瘍における不死化機構に関する研究

近年、小動物臨床においても腫瘍性疾患の増加が大きな問題となっている。本研究の目的は、腫瘍の不死化に関する解析を通して、動物の腫瘍の病態把握および治療に新たな知見を加えることにある。●犬および猫のテロメラーゼ触媒サブユニット(TERT)遺伝子のクローニングとその正常および腫瘍組織における発現テロメラーゼ活性の他、テロメラーゼ構成分子の発現を検討することによって組織および細胞レベルにおけるテロメラーゼの状態を把握することができる。そこでテロメラーゼ触媒サブユニット(TERT)遺伝子の部分クローニングを行い、Motif 2を含む237bpの犬TERT遺伝子の塩基配列を決定した。得られた塩基配列をもとに、培養細胞中でのTERT mRNAの発現をRT-PCR法によって検討したところ、テロメラーゼ活性が検出されない正常線維芽細胞では発現しておらず、高いテロメラーゼ活性が認められる腫瘍細胞株において強く発現しており、TERT遺伝子の発現がテロメラーゼ活性を規定していることが示唆された。また、犬の様々な組織でのテロメラーゼの発現を検討するため、正常組織および腫瘍組織よりRNAを抽出し、TERT mRNAの発現を同様に検討した。TERT mRNAは、ほとんどの腫瘍組織で検出されたが、正常組織においてもリンパ節や胸腺などのリンパ系組織、卵巣、および肝臓などにおいて比較的強い発現が認められた。この研究結果は現在、American Journal of Veterinary Research誌に投稿中である。同様に猫についてもTERT遺伝子の部分クローニングを行い、培養細胞および正常組織での発現の検討を行った。この研究結果は、Journal of Veterinary Medical Science誌65巻5号に掲載されることが決定している。このTERT遺伝子の発現解析は、小動物臨床において新しい腫瘍診断法の開発に有用と考えられた。また今後の研究においては、細胞レベルでのTERT発現解析が重要と考えられた。