hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ゲノム、プロテオーム解析による後天性真珠腫シグナル伝達ネットワークの解明

これまで多数の研究が行われてきたにもかかわらず、後天性真珠腫の発症原因は未だ明確にされておらず、依然として根本的治療は外科的治療のみである。真珠腫は腫瘍ではないが新生物に類似した臨床的特徴を示す。これまでの報告から、真珠腫は細胞過剰増殖へとバランスが変化し、浸潤・骨溶解作用が増強された、制御不能な細胞増殖の一例であると考えられている。細胞増殖の調整不全には、細胞内部のゲノム異常やエピジェネティックな変化や外部刺激が関与していると考えられ、この反応には細胞内外の様々なシグナル伝達カスケードが関与すると考えられる。本年度は、Notchシグナル伝達経路に着目し、リアルタイムPCRを用いて中耳真珠腫におけるNotchシグナル関連遺伝子の発現解析を行った。その結果、中耳真珠腫上皮は正常外耳道上皮に比べて、有意にNOTCH1の発現低下を認め、その標的遺伝子であるHES1の発現低下傾向も認めた。しかしながら、中耳真珠腫上皮、および正常外耳道上皮において、免疫染色にてNotch1の発現を確認したところ、いずれの上皮においても強い発現が認められた。ただし、1検体あたりから採取できるサンプルが非常に小さいため、十分な免疫染色サンプルを確保することができず、免疫染色によるNotchシグナル関連分子の発現については、今後の検討課題としたい。また、中耳真珠腫上皮、および正常外耳道上皮において、免疫染色にてEGFRの発現を確認したところ、いずれの上皮においても一定の発現が認められた。手術検体から得られた真珠腫上皮の凍結標本から、microRNA、mRNA、タンパク質の発現をバイオインフォマティクスアプローチによって解析を行い、同定された分子群が真珠腫の発生・増殖にいかに関与するかを検討する予定である。手術検体から得られた真珠腫上皮の標本から、microRNA、mRNA、タンパク質の発現をバイオインフォマティクスアプローチによって解析を行い、同定された分子群が真珠腫の発生・増殖にいかに関与するかを検討する予定である。論文投稿の準備に際して予定していた英文校正が、当初の想定より安価であったため。海外学会参加旅費が、ほぼ想定額であったが、多少少額であったため。30年度も海外学会及び国内学会に複数件参加する予定であり、参加費と旅費に多くを充てる予定である。また、研究成果発表に向けての英文校正も予定している。学会参加のための旅費に追加する予定である。
金属錯体に対するC-O, C-S結合の切断付加反応を応用する合成法

グルタル酸無水物とO価ニッケル錯体の反応においては,グルタル酸無水物のC-O結合が切断されてニッケルを環構造の一員として含有する6員環シクロステル錯体が生成する.この6員環シクロエステル錯体はジホスフインの配位により環収縮反応を起こし,キラル中心を有する5員環錯体へと交換される.この5員環錯体は一酸化炭素との反応により3-メチルコハク酸無水物に交換される.従って,原料のグルタル酸無水物をニッケル錯体を用いることにより3-メチルコハク酸無水物に変換することができる.ニッケル錯体に(S,S)-CHIRAPHOSなどのキラルジホスフィンを配位させた場合には,ニッケル錯体上で起こる環収縮反応と共に5員環錯体上に不斉が誘導される.誘導される不斉は,速度論的に誘導されるものと,熱力学的に誘導されるものでは逆の立体配置を有する.すなわち,まず最初に速度論的に生成し易いエナチオマーが生成し,これが一次反応速度式に従う速度で逆の立体配置を有するエナンチオマーへと交換される.この変換反応はCPK分子模型を用いることにより合理的に説明される.一方,チオエステル等のC-S結合を有する化合物は,低原子価錯体存在下にC-S結合切断反応を起こし,この反応を応用して新しい合成反応を組立てることが可能であった.グルタル酸無水物とO価ニッケル錯体の反応においては,グルタル酸無水物のC-O結合が切断されてニッケルを環構造の一員として含有する6員環シクロステル錯体が生成する.この6員環シクロエステル錯体はジホスフインの配位により環収縮反応を起こし,キラル中心を有する5員環錯体へと交換される.この5員環錯体は一酸化炭素との反応により3-メチルコハク酸無水物に交換される.従って,原料のグルタル酸無水物をニッケル錯体を用いることにより3-メチルコハク酸無水物に変換することができる.ニッケル錯体に(S,S)-CHIRAPHOSなどのキラルジホスフィンを配位させた場合には,ニッケル錯体上で起こる環収縮反応と共に5員環錯体上に不斉が誘導される.誘導される不斉は,速度論的に誘導されるものと,熱力学的に誘導されるものでは逆の立体配置を有する.すなわち,まず最初に速度論的に生成し易いエナチオマーが生成し,これが一次反応速度式に従う速度で逆の立体配置を有するエナンチオマーへと交換される.この変換反応はCPK分子模型を用いることにより合理的に説明される.一方,チオエステル等のC-S結合を有する化合物は,低原子価錯体存在下にC-S結合切断反応を起こし,この反応を応用して新しい合成反応を組立てることが可能であった.
古代国家渤海と日本の交流に関する考古学的調査-環日本海における日本道関係遺跡の調査-

平成8年度はスイフン河流域のスタロリエチェンスカヤ遺跡の測量調査と一部の試掘調査を行ない、ついでシニェリニコボ山城の測量と城壁部分のトレンチ調査を行なった。前者は予想以上に現地が荒廃し、特に瓦の出土が最上層で確認されたことは我々の期待を裏切るものであり、調査を早々に切り上げて、シニェリニコボ山城の調査に移った。ここはスイフン河に面した急峻な断崖上にある山城で、夏の調査では全体の規模の把握に努めるとともに、石垣部分のトレンチ調査を実施し、石垣の構造を確認することをめざした。その結果、この城が、当初は靺鞨人によって使用されていたが、後になって渤海人によって使用された状況を確認した。平成9年度はシニェリニコボ山城の平面測量と城門部分の発掘を行い、あわせて前記のトレンチ部の発掘をおこなった。城門は石垣を食違い式にして構築したものであることを明らかにした。平成10年度は沿海州の最南端にあるクラスキノ土城を発掘した。ここは、渤海の使者が日本に向けて船出した遺跡であるとする意見がある。いわゆる日本道に関連した遺跡である。今年度は城壁部分のトレンチ調査と東門の構造把握のための調査とを実施した。今年度の成果としては、城壁がかなり後世になってから修復されていることを明らかにしたことが大きい。東門では甕城部分の構造をある程度明らかにしたが、なお今後の調査を必要とするであろう。1スタロリエチェンスコイエ土城はスイフン河に面した沖積地に立地している。日本側はロシアの研究者による発掘地点の測量と南側土手の地形測量を行なった。南側土手は全長約180m、高さ2.5mで、中央から東寄りの内外両壁面が共に二段に築成されていることを確認した。また土塁の西端は鍵の手状に南側に曲がり、城内への通路を形成していたように見える。これに対応する側の土塁がスイフン河の浸食によって崩壊はなはだしいので、早急な対応が必要であろうと思われた。なお土塁の外には堀があったと思わせる窪みも認められた。ロシア側の発掘区では上・中・下の三層に分かれた文化層が確認された。このうち上層からまとまって瓦片や礫群が発見されたが、発掘区域が小さいためその詳細は不明である。2シニュウスカヤ土城はスイフン河に面した断崖上にある高地性の土城である。日本側は全体の形状測量と石垣付近の発掘、ロシア側はかつての試掘坑の拡張を行なった。残存状況の良い部分の石垣を清掃・測量し、その背後を発掘した。その結果石垣の背後は靺鞨系土器片や骨角器、焼土や炭などを多く含んだ土壌によって固められていたことが認められた。またロシア隊の発掘でも靺鞨系土器が発見されている。このほか初期の渤海系土器も発見された。このことはこの遺跡の成立やその後の経緯について種々のことを想定させるきわめて重要な事実であって、今後この遺跡を集中的に調査する必要があることを認識させた。3クラスキーノ土城及び日本道関連遺跡まず、ロシア側が調査したクラスキーノ土城の調査状況を見学した。ついで日本道関連遺跡の踏査を実施したが、国境に近接しているため、地上調査は充分には行なえなかった。4調査期間の最後に現地研究者との研究集会を行い、大きな成果を挙げた。平成9年度の調査は、まず5月に田村と大野が事前の調査地視察及び打ち合わせをシニェリニコヴォ1山城とクラスキーノ土城で行った。その結果により、9月にシニェリニコヴォ1山城の発掘調査及び測量調査を実施した。この山城は、昨年に調査を行い、山城の時期が、極めて類例の少ない靺鞨末期から渤海初期であり、また大規模な石塁を有することが判明した。

今年度の調査の目的は、第一に昨年も調査された石塁の構造をさらに明らかにすること、第二に新たに門部分に発掘区を設けて、門の構造を明らかにすること、第三に山城内部の測量を実施することであった。石塁の構造については、昨年の試掘調査で、外側の石塁と内側の土塁による二重構造であることがわかっていた。また土塁の下から広範囲に及ぶ焼土層が検出され、土塁等の防御施設が構築される前に山城内で火災があったことを確認できた。この焼土層範囲がさらに広がるかをを調査したが、明確な拡がりは確認できなかった。今年度の新たな発見は、この焼土層の下から、靺鞨期に属する小規模な土塁が発見されたことであり、この時期の土塁の発見された例はなく、非常に貴重であると言える。また、完全な石塁・土塁のの断面図を作成することができた。門は石塁が前後に入れ違うことにより、内部への進入口となっている。発掘調査により、門部分石塁の下部または基礎部分を検出することができた。現存状態は良好ではなかったが、門部分の遺構の平面的な配置を明らかにした。測量は、山城内を1m単位の等高線で記録した。また遺跡南側を巡る石塁の範囲を完全に把握することができた。山城の外側は断崖となっている部分が多く、今年度の機材では完全な測量は不可能であった。急峻な地形に立地するこの山城を研究していくためには、遺跡周辺の測量を完全に行うことが必要であり、今後は未測量部分をいかに図化しているかが課題である。11月には、イブリエフ氏・ゲルマン氏を日本へ招聘し、石川県・福井県の渤海関連遺跡の踏査・研究を行い、また奈良国立埋蔵文化財研究所、東京における北方ユーラシア学会において渤海関連の研究活動・研究発表を行った。平成10年度は本研究の最終年度である。本年度は沿海州の最南端にあるクラスキノ土城を発掘した。ここは渤海の使者が日本に向けて船出した遺跡であるとする意見がある。いわゆる日本道に関連した遺跡である。昨年春,まだ草が芽吹いていない時期に中国との国境付近を踏査した経験によって,ますますクラスキノ王城が日本道に関係した重要な遺跡であることを確認した。その際,クラスキノ土城の城内も詳しく踏査し,城内の各所に礎石らしきものが散在していることも確認した,この踏査結果に基づき,城内東南部を発掘調査の対象地域として選定した。発掘調査は城壁部分のトレンチ調査(第1地点)と東門(第2地点)の構造把握のための調査とを実施した。第1地点では新旧二つの石壁の存在を確認した。旧石壁は当初の城壁本体を飾るものであって,赤褐色頁岩の節理面を巧みに利用したものであるが,新石壁はかなり後世になってから.河原石を使用して積んだだけの簡単なものであった。両者の間にはかなりの時間差があるものと思われる。なお第1地点の城内部分で建物の基礎と思われるような石組遺構が発見されたが,この部分の詳細は次年度以降に持ち越された。東門では要城部分の構造を明らかにすることを目的として発掘が行なわれた。甕城外壁の構造は芯を土塁とし,外面は川原石を積み上げたものであることなど,甕城全体の構造の解明も次年度以降の調査にのこされた。本年は発掘開始直後に大雨にあい,作業が予定どおり進まなかったことを付記する。
生命政策ー医学医療の公共性と医療倫理の再構築

本年は昨年度の「リューベック事件」についての執筆の結果明らかになってきた、19世紀のドイツ医師会の成立と、生理学の学的成立の問題を中心に研究を進めた。特に、近代医学の制度的確立の問題は、実に18世紀後半から始まった「臨床医学」の確立への努力に内在した治療のコンセプトの対立、「自然治癒説」と「人工治癒説」の対立のひとつの解決の方向を示しているが、その解決において、治療のコンセプトの歪曲化が生じたのではないか。近代医学は19世紀半ば以後「実験医学」の方向をとり、人間の自然科学的理解を前提し、「病気」を自然科学的に理解し、そのメカニズムから「治療法」を確立する道を歩んできた。このことによって、「実験対象」としての人間もまた「対象動物」と同等の扱いを受け、その結果として「人体実験」の正当化が行われ、悲劇的な「リューベック事件」を迎えることになった。この背後に「近代医学」と「自然療法」の対立があり、前者が後者を駆逐するプロセスでもあり、職業として「近代医学」が確立することになる。そこに、「医学の危機」という近代医学と自然療法の相克という事態が生まれていた。この相克はまさに「近代医学」が職業としての危機にあるという経済的な問題とともに、コンセプトそのものの危機でもあり、今日の「医療倫理」の方向が生まれてきた。本年度は、第1に、ドイツの医療制度改革に関して資料的に追跡した。それによってその外郭を理解することを中心にして資料分析を行っている。第2に、その議論の背景として、第2に、医学史的な歴史的な諸問題にかかわる資料の収集を心がけた。この点では、とりわけ、コピー、PDFファイル、マイクロフィルムなどでの収集となった。第3に、理論的な基礎研究として、ヘーゲルの法哲学に関する資料を収集しつつ、学生との研究会を4月から始め、次年度もまた続ける予定である。上述のような研究の方向に基づき、本年度は、歴史的問題として、医療倫理の核に座る「人体実験」問題を「リューベック事件」の資料の分析を行いながら、検討した。この問題に関しては、日本ではまだきちんとした分析がなされていないし、欧米でも、最近ドイツで報告がなされているだけである。この問題に関しては、私は、「リューベックの<死の舞踏>-ユーリウス・モーゼスとドイツにおける「人体実験」」と題して論文を執筆した。その際、この事件の問題となったBCG問題は、現在の問題でもあり、WHO、日本の感染症研究所、ドイッのローベルト・コッホ研究所、そしてフランスのパスツール研究所のホームページを定期的に検索し、それによって現状を確認しながら資料収集に努め、執筆した。また研究報告として、第1に、この問題の現実的な意味をいわゆる「生活習慣病」問題と現代社会の問題として捉え、報告した。この報告に関しては、次年度は、報告原稿に基づき、論文化するつもりである。「ドイツ医療制度改革」にかんする資料の解読を行った。またドイツの「医療制度改革」の方向性についての分析は研究発表を行うつもりである。本年度は、第1に、「医学医療の公共性」問題をとくに「リューベック事件」に焦点を当てながら「人体実験」が近代医学において果たす役割を解明しながら、当時のドイツにおける医学の資格制度をめぐる争いの中で、「公共性」を担保するものは何であるかを探った。特に今日の日本で「地域医療」が問題となっていることを視野に入れながら、近代医学の在り方を問題にした。第2に、医療倫理の基礎概念の「人格」概念を解明するために、ヘーゲルの議論を参考にする。そのため、現在のヘーゲル法哲学に関係する資料を収集した。第3に、日本の地域医療の現状をとらえるために、資料収集と問題点を解明することを行った。なお、第1点にかんしては、とりわけPUBMEDによる検索をはじめ、本による資料ばかりではなく、むしろ、論文レベルの資料の収集を主とした。加えて、当該問題に詳しい研究所の資料も検索した。ドイツのコッホ研究所、フランスのパスツール研究所、ドイツのフリードリヒ・エーベルトシュティフツング、日本の感染症研究所などの資料を検索にかけ、入手できるものはインターネットを通じて入手した。第2点にかんしては、学生諸君と「ヘーゲル法哲学」の自主ゼミを行い、議論の分析を心がけた。また現在の研究水準を確認する作業を行った。特に第1部「抽象法」における「人格」と「所有」を市民社会の中で歴史的社会的にとらえる方向で読解を勧めている。また、地域医療にかんしては、この間に本で発表された<ガイドライン>の分析を行いながら、現在進行中のドイツの医療制度改革と比較している。

この背後に「近代医学」と「自然療法」の対立があり、前者が後者を駆逐するプロセスでもあり、職業として「近代医学」が確立することになる。そこに、「医学の危機」という近代医学と自然療法の相克という事態が生まれていた。この相克はまさに「近代医学」が職業としての危機にあるという経済的な問題とともに、コンセプトそのものの危機でもあり、今日の「医療倫理」の方向が生まれてきた。
中東欧ポーランド、ブルガリア国のEU参加への過程-民営化と外国直接投資の役割

年間を通じての成果第1初年度は文献による研究を主体とし、日本、欧州の学会に参加し発表と討議を通じて対象国であるブルガリアを始め中東欧の移行経済諸国へのヨーロッパの資本・技術に依る進出状況を把握した。第2研究の進捗に伴い、移行経済国のEU参加の過程という観点を強く意識し、開発経済学の重要な課題として格差のある諸国が経済統合によって先進国グループに包括されていく課程を検討した。第3輸出入を始め企業体そのものの総合的な移転の経過を辿る。受け入れ国側は脆弱な経済・社会構造のため支配・被支配の関係も発生するが同時に国際間の分業の効率的な展開も看取できた。これらは現地での各関係機関との討議、実情調査を継続により把握できた。以下要点として:第1に、外国直接投資(FDI)につき国連UNCTADを訪れ(07/9/11-9/16),世界的なFDIの動向、先進国側の方針とくに多国籍企業に関する投資国と受入国双方の対応の変遷などの課題に関し学んだ。また自分の調査実績に基ずく相互の意見交換によって大いに益するところがあった。第2に、対象国ブルガリアでのEU加盟後の変貌、最近時の経済・社会実情を調査、特にFDIの流入の実績と展望をchamber of commerceほか関係する諸機関から聴取した。加盟直後と10カ月目ででは関係諸機関が慎重論に転向した。西側資本の強大さがFDIの流入により実感されたと言える。第3に、EUへの同時加盟を果たしたルーマニアへのFDIの実情、工業全体の発展経路などを両国間を比較対比することにより、優劣の視点ではなく相違点を把握した。第4に、将来展望としてブルガリアはまだ社会的改革、政治的改革など課題を残しているので、高い成長を続けうるか否か不明、今後も多大の努力が要求される。ルーマニアは金融制度の整備、政治的安定などを図りFDIの流入に一段と努力が必要である。1学会への参加。この研究に不可欠な欧州の学会に参加した(1)2006・5フランスアラスの学会「第3世界」(2)同年9月イギリスブライトンでの学会「比較経済欧州学会」ではブルガリアの経済回復とEU加盟につき、(3)同年11月フランスパリ学会「日仏経済学会」EUとEUとでEUとアジアの経済統合につき発表し中東欧とフランスの専門家と数多くの意見交換を行った。日本では6月「比較経済体制学会」10月「国際開発学会」11月「EUインスチツート」の日欧合同シンポに参加した。外国直接投資(FDI)の経済統合でのde factoな役割。中東欧地域のなかでブルガリア国の研究者が日本には僅少であること、経済統合に関しては日本の「百家争鳴」の会が言うように不可避的に長期研究の蓄積不足であること等を学ばされた。2専門家からの専門知識の提供。学会参加の都度、フランスで東欧出身の専門家の人々、イギリスでのChatham House、EBRD,ウィーンWIIWの東欧専門の上級エコノミストとまた京神戸大の専門家と意見交換を行った。3ブルガリア国現地調査。EU加盟を2007年1月に実現した同国の現地調査をFDIの実情を軸にして実施した。(1)調査・討議項目を提出し短時日に相当数(15機関35人、出張報告に添付)を訪問し討議し、実情、政策、問題点などにつき広汎な調査を行った。(2)予定アンケート項目の内容を協議し関係機関がインターネットで配布する約束

(3)調査成果は5月ベルギーでの学会6月の比較経済体制学会で発表、福祉大学の経済論集への掲載を予定するがイ)工業化、外国直接投資(FDI)の伸びはゆるい。ロ)経常収支の赤字幅増加はFDIでカバーしているが懸念もあるハ)カレンシーボード制適用の継続は経済的、政治的に肯定されるニ)今後、財政等改革課題は続出する。4共同研究者、和田正武教授と随時、協議を行い、近く共同執筆の予定。(同教授の現地調査は他の予算で実施)第1に、外国直接投資(FDI)につき国連UNCTADを訪れ(07/9/11-9/16),世界的なFDIの動向、先進国間の方針とくに多国籍企業に関する投資国、受入国双方の対応の変遷など極めて多くの課題に関し学んだ。また自分の調査実績に基ずく相互意見交換によって大いに益するところがあった。中東欧専門家からは新規加盟国のブルガリア、ルーマニアに対するFDIの流れおよびすでに過剰にFDIが流入しているセクターに関する実状(例。ブルガリアでの金融セクターは95パーセントの銀行に西側の資本が流入)についUNCTADの客観的見解が理解できた。資料は極めて専門性の高いものを収集できた。第2に、対象国ブルガリアでのEU加盟後の変貌、最近時の経済・社会実情を調査、特にFDIの流入の実績と展望をchamber of commerce, agency of investmentほか関係する諸機関から聴取した。加盟直後と10カ月目で大きく異なる点は関係諸機関がブルガリアの総合的経済力の実の姿に直面したためか慎重論が目立つ。(例。ユーロー適用国への期待は2013年か以降)。理由として加盟に伴ってインフレも流入したからとしているが、物価高だけでなく、西側資本の強大さがFDIの流入により顕在化しているためといえる。第3に、対象国として東欧でEUへの同時加盟を果たしたルーマニアへのFDIの実情、工業全体の発展経路、などを両国間を比較対比することにより、その優劣の視点ではなく相違点について明確に把握するように試みた。第4に、将来展望としてブルガリアはまだ社会的改革、政治的改革など大きな課題を残しているので、このまま高い成長を続けうるか否か不明、今後も多大の努力が要求される。ルーマニアはブルガリアに対比して工業化に優位があるが金融制度の整備、政治的安定などを図りFDIの流入に一段と努力を重ねる要がある。
法医中毒学における血液中薬物スクリーニングのためのマトリックス除去法の検討

・研究目的:救急医療、法医学、警察などで広く用いられている簡易薬物スクリーニングキットは、血液を試料とした場合、そのままでは正しく結果を表示することができない。そこで、血液の前処理方法として、除タンパクフィルタを用いた方法を開発する。また、LC/MS分析を行い、除タンパクフィルタのイオン化抑制効果の検証を行う。・研究方法:睡眠薬の一種であるニトラゼバムを添加したウマ溶血を、除タンパクフィルタ(VARIAN社製、Captiva ND^<Lipids>)に通した後、アキュサインBZO(関東化学社製、薬物スクリーニングキットの一種)に滴下し、結果を判定できるかどうか目視で確認する。血清及び溶血に薬物(ニトラゼバム、オキサゾラム及びトリアゾラム)を添加、アセトニトリルを加えた後、フィルタを通したものと通さないものとをLC/MSで分析し、結果を比較する。・研究結果:上記フィルタにウマ溶血を添加したところ、目詰まりをおこし、ろ液を得ることが出来なかった。また、薬物添加血清を上記フィルタに通したものと通していないものとをLC/MSで分析したところ、今回添加した薬物ではピークの大きさに違いはほとんどなく、脂質(m/z 184)のピークの低減も見られなかった。上記フィルタ(ポアサイズ0.2μm)では目詰まりがおきたため、ポアサイズがより大きい限外ろ過フィルタ(ミリポア社製、アミコンウルトラ、分画分子量10kDa)を用いることとした。その結果、透明なろ液を得ることができ、回収率は7割程度であった。このろ液をアキュサインに滴下したところ、結果の判定が可能であった。各薬物の検出下限値、フィルタへの吸着性等を検証する必要があるが、血液をフィルタに少量(0.5mL程度)添加し、短時間(1分程度)遠心するだけで薬物スクリーニングキットに適用させることができる本方法は、殺人事件等の現場において有用であると考えられる。
人文―自然の相互作用を考慮した空間的都市シミュレーションモデルの構築

平成19年度は,空間的都市シミュレーションモデルの構築のため,大都市圏都市の成長に関する分析および都市地理シミュレーションにおける近隣効果の影響モデルと空間スケールの研究を重点的に推進した.(1)大都市圏都市の成長に関する分析のため,東京,名古屋,京都,大阪および神戸大都市圏のフィルード・ワーク調査,および地図・人口・経済・工業・商業等関連資料の収集を行った.都市構造と都市形態の両方から,東京大都市圏都市の成長に関するダイナミクス分析を行った.(2)都市地理シミュレーションにおける近隣効果の影響モデルの構築を理論的および実証的に検討した.都市の動態における近隣効果の安定性は,東京大都市圏を事例としてチェックした.その結果,1つの土地利用分類の成長パターンに対する近隣効果が特定の期間に相対的な安定性を保つことが解明された.さらに近隣効果の特徴を把握するため,東京,名古屋と大阪の3つの大都市圏における土地利用変化の近隣効果の比較を行った.3つの大都市圏における近隣効果は活発な土地利用分類により異なるが,構造的に類似することが分かった.(3)都市形態と景観の視点から東京大都市圏の都市成長を分析し,モデル化と予測を行った.(4)地理シミュレーションモデルのスケールは,横浜市を事例として検討した.都市の動態は,セルオートマタにおけるサイズの違いによって異なる空間プロセスを示した.空間プロセスの違いは,空間スケールが影響していることが明らかになった.平成19年度は,空間的都市シミュレーションモデルの構築のため,大都市圏都市の成長に関する分析および都市地理シミュレーションにおける近隣効果の影響モデルと空間スケールの研究を重点的に推進した.(1)大都市圏都市の成長に関する分析のため,東京,名古屋,京都,大阪および神戸大都市圏のフィルード・ワーク調査,および地図・人口・経済・工業・商業等関連資料の収集を行った.都市構造と都市形態の両方から,東京大都市圏都市の成長に関するダイナミクス分析を行った.(2)都市地理シミュレーションにおける近隣効果の影響モデルの構築を理論的および実証的に検討した.都市の動態における近隣効果の安定性は,東京大都市圏を事例としてチェックした.その結果,1つの土地利用分類の成長パターンに対する近隣効果が特定の期間に相対的な安定性を保つことが解明された.さらに近隣効果の特徴を把握するため,東京,名古屋と大阪の3つの大都市圏における土地利用変化の近隣効果の比較を行った.3つの大都市圏における近隣効果は活発な土地利用分類により異なるが,構造的に類似することが分かった.(3)都市形態と景観の視点から東京大都市圏の都市成長を分析し,モデル化と予測を行った.(4)地理シミュレーションモデルのスケールは,横浜市を事例として検討した.都市の動態は,セルオートマタにおけるサイズの違いによって異なる空間プロセスを示した.空間プロセスの違いは,空間スケールが影響していることが明らかになった.
憲法学における「コミットメント」の比較法的考察

本年度は、憲法学におけるコミットメントの意義・本質の究明に努めた。憲法においてコミットメントの意義が問題となるのは、多様な意見や世界観の対立する中で人々が共生する必要があるからである。今日、人々の様々な意見の対立を前に、憲法におけるコミットメントの重要性はますます高まっている。コミットメントは一般に、経済学の分野では、個人がある目標を達成するために未来のある時点での選択肢をそれ以前の時点で限定する戦略的行為と理解されている。但し、憲法におけるコミットメントに、経済学におけるコミットメント理論を直接あてはめることはできない。コミットする主体、コミットメントの対象(内容)、コミットメントを達成するための外的機構の三点が、憲法におけるコミットメントに独自の問題である。たとえば、コミットする主体を具体的個人と設定するかあるいは抽象的国民全体と設定するかが、いわゆる「過去の手による支配」の問題として議論されている。また、コミットメントの対象は憲法上の価値なのか手続きなのかという問題が、討議民主主義の議論として展開されている、コミットメントを達成するための外的機構については、「司法審査の民主的正統性」の問題や「憲法改正」の問題が、コミットメントをよりよく達成する制度がいかなるものかという観点から論じられている。以上のような研究成果を基に、特にアメリカ憲法学における「自己統治(self-government)」の問題を中心として、論文「自己統治とコミットメント」を執筆した。この論文で、コミットメントの多岐にわたる問題圏の中で憲法の基礎理論にとって最も本質的と思われる側面を取り出し、作品化することによって、アメリカ・ドイツ・フランスの三国において近年なぜ憲法学におけるコミットメントが共通して同時代的に問題とされているかについての法理論的理由を明らかにすることができた。本年度は,第一に,本研究の問題視角である「コミットメント」という概念の意味論上の考察を深めた。その過程で,本研究の問題視角が前提とする,「通約不能性」という概念とそれが示す問題状況とを明らかにする,「憲法学における通約不能性の意義」(『法学』第66巻第3号,2002年8月)を公刊した。第二に,第一の作業と並行して,「コミットメント」という問題視角から,アメリカ憲法学,フランス憲法学,ドイツ憲法学それぞれの基礎理論の検討を進めた。アメリカ憲法学については,主として,「法による社会の細分化の理論」と形容し得る一連の理論と,国家行為の憲法適合性審査に関する判例法上の「絶対主義アプローチと比較衡量アプローチ」とを,検討の対象とした。フランス憲法学については,いわゆる「非法の領域の理論」と,憲法適合性審査機関としての憲法院の創設によって生じた国民主権論並びに法治主義理論の変容とを,検討の対象とした。ドイツ憲法学については,いわゆる「法的に自由な領域」に関する議論並びに60年代の基本価値論争に伴い生じてきた新たな多元主義理論を,検討の対象とした。第一,第二の作業を通じて,現代のアメリカ憲法学,フランス憲法学,ドイツ憲法学に共通して存在する「憲法におけるコミットメント」という問題を考察するための基礎理論上の土俵を設定することに努めた。
カテーテル人工弁留置後弁周囲逆流の診断精度向上とデバイス-ホスト連関に関する研究

人工弁周囲逆流の重症度診断における、大動脈造影のプロトコルはオランダの研究所との議論の結果、一旦の完成をみた。Tateishi H et al. Circ J. 2018Jun 25;82(7):1943-1950.人工弁周囲逆流のビデオデンシトメトリー解析による重症度と心臓超音波検査上での重症度の相関は確認され、すでに論文報告している。Tateishi H et al. Circ J. 2018Aug 24;82(9):2317-2325.人工弁周囲逆流の重症度診断における、大動脈造影のプロトコルはオランダの研究所との議論の結果、一旦の完成をみた。人工弁周囲逆流のビデオデンシトメトリー解析による重症度と心臓超音波検査上での重症度の相関は確認され、すでに論文報告している。今後は最終段階である人工弁周囲逆流の解剖学的、手技的予測因子の検出に努める。術前のCTによる詳細な解剖学的評価、術中の心臓超音波、大動脈造影による人工弁周囲逆流の評価、また、大動脈圧、左心室内圧の同時圧記録による血行動態評価を行った結果を用いて、人工弁周囲逆流のより正確な診断、予測因子を検出し、予後への影響を検討する。1.心エコー上のPVL、大動脈造影上におけるビデオデンシトメトリーによるPVLの重症度診断、両者とも事前に診断法を作成し、再現性を確認後に全例解析を行った。2.1の二つの診断法の重症度ごとの対応関係の評価を終え、現在までに当院でTAVIが施行された全例において、3.各モダリティで評価された重症度が予後に与える影響の評価を行った。心臓超音波検査上のPVL、大動脈造影上におけるビデオデンシトメトリーによるPVLの重症度診断と、その両者の関係を評価し、学会発表、論文作成を終えている。これまでの症例に対して多変量解析を行い、4.患者・解剖学的背景、手技的背景からPVL予測因子を抽出する。最終的に5.術前術後のMSCTから人工弁とaortic rootのdevice-host interactionを評価し、PVLの予測シミュレーションを行う。30年度は主に学会発表、論文報告に使用する予定。本年度に予定していた学会参加の旅費が予想していた以上に費用を抑えられたため、未使用額が生じた。この未使用額については令和元年度に行う、新たな論文投稿に使用する予定である。
至適肝容積を超えた過大肝再生誘導における肝再生機構および肝幹・前駆細胞の機能解析

拡大肝切除を予定する胆道癌症例に対する門脈塞栓術は術前の減黄の有無にかかわらず肝再生が誘導され安全に施行できる手技であることを報告した。(Hepatogastroenterology. 61: 908-15, 2014)門脈塞栓術後の肝再生に関与する因子の検討では予定残肝容積、血清ALP値、血清CRP値が独立した因子として抽出され、胆管炎の有無が有意な肝再生抑制状態であることが示唆され、マウス胆管炎モデルにおける門脈結紮後の肝再生では非結紮葉の再生遅延が確認され、胆管炎モデルにおいて肝星細胞の活性化と類洞内皮障害、さらには肝幹・前駆細胞の機能解析などを行っている。脳死肝移植が行われるようになったが脳死移植症例数が少ない状況の中、生体肝移植が広く施行されている。しかしながら、容量不足にともなうドナーの不適合や肝移植後のsmall-for-sizeによる肝不全などが問題となっている。また、進行胆道癌などの根治切除を目的に拡大肝葉切除などの大量肝切除が必要な症例において、門脈塞栓術を行っても十分な残肝容積が確保ない症例がある。このような肝容積の不足にともなう手術適応の限界を解決する手段の一つとしての再生限界を超えた過大肝再生誘導に着目した。胆道癌に対する拡大肝葉切除後の肝再生の検討では、肝切除後に残肝は急速に再生増大するが、肝不全症例では肝再生の程度は遅延しており、また肝細胞機能障害、肝浮腫の指標としての肝CT値を測定すると、術後高ビリルビン血症および肝不全症例では有意にCT値の低下を認めていた。また、門脈塞栓術後の肝再生に伴う各種サイトカインの変動を検討すると、血清VEGFは塞栓術後5、7日目に有意に上昇しており、またTGF-betaは術後漸増し10、14日目で有意に上昇していた。7日目の血清VEGFが術後の非塞栓肝容積増加量と有意の相関を認めた。また、非塞栓肝容積増加量および増加率は、塞栓した肝容積、容積率と有意の相関を示した。VEGFおよびTGF-betaは門脈塞栓術後に有意な上昇を示し、肝再生促進とその制御において重要な役割を果たしていると考えられた。また塞栓した肝容積の多寡、肝予備能検査が非塞栓肝容積の増加に関連しており、個々の症例における肝再生予測と肝切除までの至適待機期間に有用な情報を提供できる可能性が示唆された。これらの結果をもとに、現在、ラットに甲状腺ホルモン投与およびVEGF投与による再生限界を超えた過大肝再生誘導ラットを作成し、その機序を検討している。大量肝切除を予定した症例に対する門脈塞栓術後の肝再生に関する臨床的検討を行った結果、黄疸肝症例では減黄の有無に関わらず肝再生が誘導され、拡大肝切除を予定する胆道癌症例に対する門脈塞栓術は黄疸の有無にかかわらず安全に施行できる手技であることを報告した(Hepatogastroenterology. 61: 908-15, 2014)。さらに門脈塞栓術後の肝再生に関与する因子の検討では、単変量解析において予定残肝容積、全肝容積、血清ALP値、血清γGTP値、血清CRP値が残り、さらに術前IL-6値、術前ヒアルロン酸値が有意な因子として抽出された。多変量解析では予定残肝容積、全肝容積の他、血清ALP値、血清CRP値が独立した因子として抽出された。特に門脈塞栓術前の3日以内の胆管炎の有無(急性胆管炎・胆嚢炎診療ガイドライン:TG13に準拠した定義による)は有意な肝再生抑制状態であることが示唆された。マウス胆管内にlipopolysaccharide(LPS)を注入して胆管炎モデルを作成したのちに70%領域の門脈結紮を行い、その後の肝再生についての検討を施行している。胆管炎モデルでは門脈結紮後の結紮葉の縮小が正常肝モデルと比較して遅延しているとともに、非結紮葉の再生遅延が確認されている。以前報告したマウス胆管結紮モデル(J Surg Res. 162: 46-53, 2010)では、肝星細胞の活性化と類洞内皮障害が肝阻血再灌流障害に関与していることを報告しており、胆管炎モデルにおいてエンドセリン1および肝星細胞の活性化の有無、さらには過大肝再生に関与するメカニズムを探索するために、肝幹・前駆細胞の機能解析などを免疫組織染色および細胞内シグナル伝達の観点から検索を行っている。

肝胆膵外科臨床検体による肝葉切除とのサイトカイン変動と肝再生および門脈塞栓術後の各種液性因子から見た肝再生促進機能の解明についての検討を終了し、ターゲット蛋白およびターゲット遺伝子についての解析を終了し、今後、in vivoの系において、各種ターゲット蛋白の解析を行う予定となっている。ラットに甲状腺ホルモンおよびVEGFを投与することで、再生限界を超えた過大肝再生誘導ラットを作成し、その機序を検討する。肝再生の程度を肝重量により測定、さらにBrdUの取り込みとPCNAを用いた免疫染色法によりDNA合成能を解析するとともにKi67による免疫染色法によりcell cycleを検討する。過大肝再生においては、細胞合成とアポトーシスのバランスが重要と考えられ、アポトーシスアッセイを行い、過大肝再生時のアポトーシスの程度を定量化する。過大肝再生誘導のメカニズムを解明するため、肝再生因子であるIL-6、HGF、TNFαなどのサイトカインをreal time PCR法およびELISA法により検出する。また、肝再生抑制因子であるTGFβ、activinなどのTGFβsuper familyの発現を同様に検討する。過大肝再生における転写因子活性を検討するため、NFkB、AP-1、STATfamily,SMADfamilyなどの転写因子の活性化とDNA結合能についてEMSA(Electropholesis Mobility Sift Assay)を用いて定量化すると共に、転写因子の局在証明のため、核分画および細胞質分画におけるwestern blotを施行する。マルチプレックス分析システム(Bio-PlexTMサスペンションアレイシステム)を用いてリン酸化シグナルの網羅的解析を行い、過大肝再生時におけるシグナル伝達の詳細を検討する。Bio-Plexはターゲットとなるタンパク質をビーズ表面に結合させた特異的モノクローナル抗体と反応させて、短時間に多数のサンプル測定を行うシステムで効率的なシグナル解析が可能となると考えている。
カタユウレイボヤメチル化DNA結合タンパク質MBD2/3と相互作用する因子の同定

カタユウレイボヤのMBD2/3遺伝子は、初期発生胚において特に高いレベルで発現していた。初期発生におけるMBD2/3遺伝子の機能を阻害すると強い初期発生異常がみられ、DNAメチル化とメチル化DNA結合タンパク質による遺伝子発現制御が初期胚発生に必須であることが示唆された。次に、カタユウレイボヤ全ゲノム上でMBD2/3が結合している領域を同定した。MBD2/3はgenebodyメチル化領域に局在し、100以上の遺伝子の発現制御を行っている可能性が示された。DNAメチル化の異常は、がん、精神神経疾患や生活習慣病など多数の病気の原因として注目されている。近年、網羅的手法により、DNAメチル化は"gene body"つまり遺伝子の転写領域部分に集中して付加されていることが明らかにされた。この現象は、植物、無脊椎動物、脊椎動物に広く見られる進化的に保存された機構であり、重要な未知の機能を担っている可能性がある。本研究は、非常に明確なgenebodyメチル化パターンをもつカタユウレイボヤをモデル生物に、gene bodyメチル化の生物学的役割を明らかにすることを目的にしている。メチル化DNAに結合するメチル化結合タンパク質ciMBD2/3に注目し、ciMBD2/3がgenebodyメチル化に結合し遺伝子発現制御をしている可能性を検討する。ciMBD2/3が結合するゲノム領域と、相互作用する因子を決定することが本研究の最終目標である。本年度は、ciMBD2/3の抗体作製を主に行った。カタユウレイボヤタンパク質の抗体は、市販、または分与で入手できるものがないため、新規に抗体を作製する必要があった。具体的には、ciMBD2/3のcDNAを組み換えタンパク質発現ベクターにクローニングし、大腸菌でタンパク質を発現させた。組み換えタンパク質に付加されているHis tagを用いて、ニッケルカラムでciMBD2/3タンパク質の精製を行った。現在、ポリクロナル抗体受託サービスを使ってウサギ2羽でのポリクロナル抗体作製を行っている。来年度は、この抗体を用いて、ciMBD2/3が結合するゲノム領域をクロマチン免疫沈降法で決定し、またciMBD2/3と相互作用する因子を共免疫沈降法で同定する計画である。近年、DNAメチル化はactiveな遺伝子の"gene body"つまり転写領域部分に集中して付加されていることが明らかにされた。本研究は、非常に明確なgenebodyメチル化パターンをもつカタユウレイボヤをモデル生物に、gene bodyメチル化の生物学的役割を明らかにすることを目的とした。特に、カタユウレイボヤゲノムに唯一存在するメチル化DNAに結合するタンパク質ciMBD2/3に注目し解析を行った。はじめに、ciMBD2/3遺伝子が機能している組織・発生ステージを調べるために、詳細な発現解析を行った。ciMBD2/3遺伝子は初期発生胚において特に高いレベルで発現していた。そこで、相補的なモルフォリノオリゴによるノックダウン実験を行い、初期発生におけるciMBD2/3遺伝子の機能を阻害したところ、強い初期発生異常をひきおこした。ciMBD2/3がさかんに細胞分裂を行う初期発生において必須であり、DNAメチル化とメチル化DNA結合タンパク質による遺伝子発現制御が初期胚発生に関わっている可能性が示唆された。次に、作成したciMBD2/3抗体を用いてクロマチン免疫沈降法を行い、soLiDによる網羅的シークエンシングによって、カタユウレイボヤ全ゲノム上でciMBD2/3が結合している領域を同定した。ciMBD2/3はgenebodyメチル化領域に局在し、100以上の遺伝子の発現制御を行っている可能性が示された。
異なる起電性細胞膜プロトンセンサー間の相互作用とプロトンシグナリング機能単位

破骨細胞にはCa-sensing機構が備わっており、細胞外Caが上昇すると骨吸収機能は抑制される。このCa-sensing応答におけるプロトンセンサーのモーダルシフトについて、細胞膜に発現する起電性プロトン(H^+)センサーである電位依存性H^<+>チャネルと空胞型H^<+->ATPase(V-ATPase)の動作条件・メカニズムを検討した。細胞外Ca濃度を1-40mMの範囲で増加させると、H^+チャネル、V-ArPase電流とも可逆的に減少した。Ca刺激は膜容量も減少させ、水溶性色素の細胞内取り込みを増強したことからendocytosisを促進することが明らかになった。V-ATPaseの特異的ブロッカーであるbafilomycinを投与したり、PI3kinaseインヒビター(wortmanninなど)でV-ATPaseの細胞膜へのリクルートメントを阻害するとCaによるendocytosisは抑制された。V-ATPase電流と膜容量変動の定量的検討から、endocytosis/exocytosisによるV-ATPaseのturnoverは静止状態でも常時生じており、Caは細胞膜V-ATPaseのinternalizationを促進し酸分泌を抑制すると推測した(投稿中)。一方H^+チャネル電流はBafilomycin存在下でもCaで減少し、エンドサイトーシスを介さないV-ArPaseとは独立した抑制機構が示唆された。H^+動態のシミュレーションモデルではピペット溶液のバッファー濃度が十分高いと細胞質バルク溶液内でpH勾配は殆ど発生せず、酸分泌時のpH勾配の変化は細胞膜近傍でのみ生じると推定された。この他、培養破骨細胞に酸感受性の陽イオンチャネル(HCN)を同定し、細胞外酸性化で電流量が増加することを確認した。これらの結果の一部は米国および日本骨代謝学会などで発表した。(1)V-ATPase電流のリアルタイム定量的解析:マウスマクロファージ細胞株(RAW264)より分化させた破骨細胞にホールセルクランプを行い培養条件によるV-ATPase電流密度の違いを検討した。ガラス,コラーゲンコートで有意差は無く,プラスチックで高い傾向があった。また初代培養マウス破骨細胞との間にも有意差は無く,細胞膜V-ATPaseの機能評価の系として有用であることを確認した。(2)内因性pHバッファ存在下でのH^+センシング応答の検討:穿孔パッチ法をH^+チャネルを高密度で発現するマイクログリアに適用し,塩化アンモニウムの除去や乳酸負荷による細胞内アシドーシスに対するチャネル応答が内因性pH bufferの元でも起こる事を実証した。H^+チャネル活性の時間経過は細胞膜を介するpH勾配(ΔpH)変動の時間経過とよく一致した。低濃度の乳酸ではΔpH変化は少ないが,長時間暴露によって電流振幅・活性化速度が増強し,その過程にPKCが関与することが明らかになった。(3)H^+チャネルとV-ATPaseのH^+センシング応答と両者の相互作用:H^+チャネルとV-ATPaseを共発現する破骨細胞で,酸刺激に応答する両者のH^+電流を測定した。同一条件下での定量評価は初めての試みであり,ΔpHと電位に対するH^+チャネルとV-ATPasの働き方の違いが明らかになった。今後両者の相互作用の検討を進める予定である。(4)単一細胞から放出されるH^+の定量とH^+動態のシミュレーションモデルの作成:multi-compartmentモデルを作成し,細胞サイズやΔpHの異なる条件で得られた実測データと照合した。Fitの良い場合と悪い場合があり,後者について更にパラメータを加えて改良中である。成果の一部は論文(Pflugers Archiv.,2008),骨代謝学会,米国生物物理学会,生理学会で発表した。
蛋白質検出のための糖鎖ライブラリーの構築と糖鎖アレイの作成技術

硫酸化糖鎖は、糖蛋白質、糖脂質、あるいは、グリコサミノグリカンとよばれる巨大なクラスター分子として細胞表層に広く存在し、細胞接着、情報伝達、分子認識等に深く関与している。又、これらの硫酸化糖鎖は、細菌やウィルス感染の標的分子としても知られている。しかし、硫酸化糖鎖の構造とレクチンやウィルス由来蛋白質、例えば、HIV(エイズウィルス)の膜蛋白質(gp120)との結合相互作用は、必ずしも十分に研究がなされていない。そこで本研究では、(1)硫酸基の数と位置を精密に制御した硫酸化糖鎖の合成とスモールライブラリーの構築、(2)合成硫酸化糖鎖を用いた糖鎖アレイ化技術の確立と本糖鎖アレイを用いたレクチンやウィルス性膜蛋白質との相互作用解析を行うことを目的として研究を開始した。HIVウィルスの膜表面に存在するgp120という蛋白質は、天然糖脂質であるスルファチド(-SO_3-3Gal-Cer;Galはガラクトースを、Cerはセラミドを、硫酸基は-SO_3を示す。)と特異的に結合することが知られている。本年度は、N-アセチルガラクトサミン(GalNAc)、あるいは、N-アセチルラクトサミン(LacNAc:Galb1-4GlcNAc)の各糖水酸基に対して、特異的に硫酸基を導入したさまざまな硫酸化糖のライブラリーの構築とセンサーへの応用について検討した。今年度は、わずか4ヶ月余の期間であるため、高感度センサーに利用し得る糖鎖アレイ用の分子設計を行った。具体的には、gp120などのウィルス性膜蛋白質と特異的に結合可能なさまざまな硫酸化糖について、これをアレイ化できる分子を設計した。まず、共通のリンカーとして、末端にアミノ基、あるいは、それの前駆体であるアジド基を有し適当な長さのアルキル鎖を有する、N-アセチルラクトサミン、N-アセチルガラクトサミンを選択し、これらの3位、4位、6位、3,6位、4,6位などに硫酸基を1つないし2つ導入した化合物をターゲットとした。また、これらの硫酸化糖誘導体の効率的な合成ストラテジーについて検討し、合成に時間を要するN-アセチルラクトサミン誘導体の鍵中間体の合成を進めている。
分岐分析の手法を用いたジュラ紀-白亜紀アンモノイド類の系統解析

平成16年度は昨年度から引き続き白亜紀のアンモノイド類について,特に下部白亜系から中部白亜系の化石試料に基づく解析を継続して行った.博物館試料,先行研究における試料,また一昨年度から昨年度における野外調査により得られた試料を用いて走査型電子顕微鏡による内部殻体構造の詳細な観察を行い,得られた結果をデータマトリックス化しコンピュータソフトウェア"PAUP"を用いて系統解析を行った.その際にはこれまでに得られた中部上部白亜系のアンモノイド類のデータも用いて,白亜系全体のアンモノイド類の系統を解析した.また,今年度は白亜紀アンモノイド類の初期殻における第一,第二縫合線のデータも併せて文献よりコンパイルし,新たにデータマトリックスに加えた.その結果,従来単系統性が疑問視されてきた白亜紀アンモナイト亜目の数超科について多系統性を示唆する系統樹が得られ,白亜紀のアンモナイト類が多系統であることが新たに明らかになった.これらの成果は2004年9月16日から19日までアメリカ合衆国のアーカンソー州で開催された第6回国際頭足類学会においてポスター発表した.また,同学会のプロシーディングスに投稿予定であり現在準備中である.また,2005年2月19日から3月3日まで,宮城県東部歌津-志津川地域における本邦中部三畳系から白亜系における地質調査を併せて行い,系統解析の際の外群として使用可能なCeratite類アンモナイトHollanditesを得た.ジュラ系についてはいくつかの化石試料が得られたものの,保存状態が不良のため,微細構造の観察には適さないことが分かった,これらの試料は今後も引き続き使用予定である.本年度は,研究に必要な化石試料を得るために2003年7月,アメリカ合衆国モンタナ州,サウスダコタ州の上部白亜系において地質調査を行い,重要な分類群であるアンキロセラス亜目に属するスカファイテス類化石,アカントセラス超科に属するプラセンチセラス類化石数種を得た.また,カリフォルニア州における下部白亜系の地質調査も行い,アンモナイト亜目デスモセラス超科に属する多数の化石試料とフィロセラス亜目に属する数種の化石試料を得た.また2003年9月には北海道上部白亜系の地質調査を行い,多数のアンモナイト亜目に属する化石試料を得た.これらの化石試料を用いて,電子顕微鏡下で内部構造の詳細な観察,記載を行った.その結果,アンモナイト類の初期殻体における盲管の形状,連室体管の初期発生における位置変化,隔壁襟の初期発生における変化,Prosiphonの長さと形状,Accessory threadsの有無,肩側殻におけるFree periostarcal edgeの形状,Wrinkle layerの形状,隔壁間隔の長短の9つの初期発生形質が,高次分類群間で安定しており,分岐分析に利用できることがわかった.この成果は2003年にJournal of Paleontology誌に共著者と共に発表した.また,上記の9つの形質用いて分岐分析を行った結果,従来のデスモセラス超科に当たるクレード内にハプロセラス超科に属するアコネセラスが含まれ,両者が非常に近縁であることがわかった.また50%多数合意樹による解析結果を見ると,従来単系統群とされてきたフィロセラス亜目のハイポフィロセラス属アンモナイトとフィロパキセラス属アンモナイトがそれぞれ別のクレードに別れて属し,フィロセラス亜目は単純な単系統類ではないことが新たに示唆された.これらの結果は2003年8月日本進化学会福岡大会において発表を行った.平成16年度は昨年度から引き続き白亜紀のアンモノイド類について,特に下部白亜系から中部白亜系の化石試料に基づく解析を継続して行った.博物館試料,先行研究における試料,また一昨年度から昨年度における野外調査により得られた試料を用いて走査型電子顕微鏡による内部殻体構造の詳細な観察を行い,得られた結果をデータマトリックス化しコンピュータソフトウェア"PAUP"を用いて系統解析を行った.その際にはこれまでに得られた中部上部白亜系のアンモノイド類のデータも用いて,白亜系全体のアンモノイド類の系統を解析した.また,今年度は白亜紀アンモノイド類の初期殻における第一,第二縫合線のデータも併せて文献よりコンパイルし,新たにデータマトリックスに加えた.その結果,従来単系統性が疑問視されてきた白亜紀アンモナイト亜目の数超科について多系統性を示唆する系統樹が得られ,白亜紀のアンモナイト類が多系統であることが新たに明らかになった.これらの成果は2004年9月16日から19日までアメリカ合衆国のアーカンソー州で開催された第6回国際頭足類学会においてポスター発表した.また,同学会のプロシーディングスに投稿予定であり現在準備中である.また,2005年2月19日から3月3日まで,宮城県東部歌津-志津川地域における本邦中部三畳系から白亜系における地質調査を併せて行い,系統解析の際の外群として使用可能なCeratite類アンモナイトHollanditesを得た.ジュラ系についてはいくつかの化石試料が得られたものの,保存状態が不良のため,微細構造の観察には適さないことが分かった,これらの試料は今後も引き続き使用予定である.