hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
血管内皮リパーゼによる血清HDLコレステロール値の制御と生活習慣の関連性の検討

高比重リポ蛋白コレステロール(HDL-C)は、動脈硬化の進展に対して防御的に作用する。血管内皮リパーゼ(EL)は血清HDL値の規定因子である。本研究では、ヒト血中のEL濃度と血清HDL値との関係を検討した。ヒト血清EL濃度は血清HDL-C値と有意な逆相関関係を示したが、血清LDL-C濃度や中性脂肪濃度とは関連がなかった。ピタバスタチンは血清HDL-C値を増加させ、血清EL濃度を減少させた。また、ヒト血中EL活性は血清HDL-C値と有意な逆相関関係を示した。さらに、冠動脈疾患患者や喫煙者では、血清EL活性が上昇していた。一方、生活習慣病にみられる低HDL血症モデル動物でELを阻害することによりHDL値が上昇した。以上より、ヒトでもELが血清HDL-C値の規定因子であり、ELを阻害することによりHDL上昇が期待できる事が示された。高TG血症に伴う低HDL血症におけるELの役割Paloxamer407は、リポ蛋白リパーゼおよび肝性リパーゼの強力な阻害剤であり、マウスに投与すると、ヒトのIV型高脂血症類似の高中性脂肪血症・高レムナント血症を呈するとともに低HDL血症を合併する。EL欠損マウス(ELKO)および野生型マウス(WT)にP-407 0.5g/kgを腹腔内投与し、高TG主体の高レムナント血症・高脂血症を作製し血清脂質の解析を行った。ELの欠損による低HDL血症の程度を比較検討したところ、WTに比してELKOでは負荷前からHDLが70%上昇するとともに、HDL粒子が大型化していた。また、LDLは軽度増加していたが、VLDLには変化がなかった。これらのマウスにP407を単回投与することによりTGが増加し著しい高中性脂肪血症が惹起されたが、その程度は両群間で差がなかった。P407投与により両群ともHDLは減少したが、ELKOではWTに比してHDLが79%高値で、HDL粒子が大型化していた。すなわち、高TG血症に合併する低HDL血症がELの不活性化により改善することが示唆された。血管内皮リパーゼ(Endothelial lipase ; EL)はホスホリパーゼA1活性を有し、HDL中のリン脂質を選択的に分解してHDL代謝を促進する。マウスでELを不活性化すると、血清HDL-C値が上昇する。本研究ではヒト血清中のEL濃度と活性と血清HDL-C濃度との関係を明らかにするとともに冠動脈疾患とその危険因子におけるELの役割を検討した。ヒト血清EL濃度と血清HDL-C値との関係を検討したところ、EL濃度は血清HDL-C値と有意な逆相関関係を示したが、血清LDL-C濃度や中性脂肪濃度とは関連がなかった。また、高脂血症治療薬であるピタバスタチンは血清HDL-C値を10-12%増加させるが、ピタバスタチンは血清EL濃度を減少させることが明らかとなった。また、ELは血清中で酵素的に切断不活性化されることが知られている。そこで活性型ELと血清HDL-C値との関係を検討するために、血清を抗EL抗体で免疫沈降した後に、その活性を蛍光標識した合成リン脂質Bis-BODIPY FL C11-PCを基質として測定する系を開発した。ヒト血中EL活性と血清HDL-C値との関係を検討したところ、EL濃度は血清HDL-C値と有意な逆相関関係を示したが、血清LDL-C濃度や中性脂肪濃度とは関連がなかった。さらに、冠動脈疾患患者では、非冠動脈疾患患者と比較して、血清HDL-C値が低値であるとともに、血清EL活性が上昇していた。また、喫煙習慣は血清EL活性を上昇させるとともに、血清HDL-C値を低下させた。以上より、ELが血清HDL-C値の規定因子であり、スタチンのHDL上昇作用にELが関与することが明らかとなった。また、ELは冠動脈疾患の発症に対して血清HDL-Cを介して関与するのみならず、直接的な促進作用をすることが示された。しかし、HDLの制御機構は十分に明らにされておらず、HDL値に影響を及ぼす病態とその機序は十分に解明されていない。血管内皮リパーゼ(Endothelial lipase ; EL)は血清HDL値の主要な規定因子である。

本研究は、ヒト血中のEL濃度とEL活性を測定し、血清HDL値との関係を明らかにすること、また遺伝的背景、肥満、喫煙、運動などの生活習慣におけるHDL値とELとの関係を解析することを目指している。本年度は、前年度より継続してヒト血中肌活性と血清HDL-C値との関係をさらに症例を増やして検討した。EL活性は血清HDL-C値と有意な逆相関関係を示したが、血清LDI-C濃度や中性脂肪濃度とは関連がなかった。さらに、冠動脈疾患患者は、非冠動脈疾患患者と比較して血清EL活性が上昇しているとともに血清HDI-C値が低値であった。また、喫煙患者では血清EL活性が上昇し、血清HDL-C値が低値であった。さらに血清EL活性はフラミンガムリスクスコアと正の相関を示した。したがって、ELが血清HDL-C値の規定因子であり、冠動脈疾患の発症に関与することが示された。肥満・糖尿病モデルマウス(db/dbマウス)におけるEL発現分布を調べたところ、野生型マウスと比較して肝臓におけるELの発現が約5倍増加していた。一方、脂肪組織における発現量は、野生型マウス、db/dbマウスともに極めて少なかった。アデノウイルスベクターを用いて肝臓にELを強発現させると、肝臓の腫大と脂肪肝の増悪と、血中のTG、遊離脂肪酸やHDLの減少が認められた。以上のことから、メタボリック症候群の動物モデルにおいては、ELの肝臓における発現が増加すると、過食や肥満により増加した血清脂質の血中からのクリアランスが促進され、結果的に脂肪肝が増悪することが判明した。
FasとSR-PSOX/CXCL16による感染免疫調節機構の解析

(1)スカベンジャー受容体活性と膜結合型ケモカイン活性を示すSR-PSOX/CXCL16がグラム陽性および陰性菌の結合と貪食を媒介することを明らかにした。また、SR-PSOX/CXCL16のケモカイン活性を中和する抗SR-PSOX mAbが、ヒト樹状細胞によるバクテリアの貪食を抑制することを示した。SR-PSOX/CXCL16はそのケモカインドメインを介して、樹状細胞を含む抗原提示細胞によるバクテリア等の病原体の取り込みを媒介すると同時に、NKT細胞やT細胞の抗原提示細胞への遊送を媒介することが明らかとなった。(2)EAE(実験的自己免疫性脳脊髄膜炎)はヒト多発性硬化症のモデルであり、自己反応性Th1 T細胞が誘導する自己免疫疾患である。MOGペプチドを免役することによってEAEを発症させる際に、中和能を持つ抗マウスSR-PSOX mAbを投与した結果、EAEの発症が阻止できた。初回免疫直後のIFN-γ産生阻害、それに引き続くMOGペプチド特異的T細胞の誘導が阻害されていた。さらに、MOG特異的活性化T細胞をマウスに移植することによって発症させるtransferEAEも抗SR-PSOX mAbの投与で阻止できた。SR-PSOX/CXCL16は初期免疫の確立と活性化T細胞の神経組織への遊送という二つの異なった段階でEAEの発症に深く関わることが示された。
地域文化を「いのち」「こころ」の教育に活かすための基礎的研究

今日、「いのち」の教育や「こころ」の教育の必要性が指摘されているが、そうした教育を学校で行う際に、政教分離の原則に反するとして、また特定の価値観の教え込み(indoctrination)に当たるとして批判されることが多かった。こうした教育を、地域文化、特に伝統的な文化を教材として取り上げることで無用の軋轢を避ける、あるいは軽減することができるのではないかと考えられる。こうした問題意識から本研究では、以下の3つを行った。(1)地域文化を「いのち」「こころ」の教育に活かすヒントとなる実践事例を集めて、その特徴を分析した。(2)そうした多くの実践が他の実践との関係に言及することなく行われているために、実践例についての情報や理論の蓄積がなされていない現状を確認した。(3)理論と実践例を分類し整理するための基準あるいは視点を析出することを試みた。近年、「いのち」「こころ」の教育を「徳の教育」として見直す動向があるが、本研究は、そうした動向に対して、伝統文化に限らず、より広く地域の自然や観光資源、産業や特産品、そして郷土の人物等を具体的な教材とすることで抽象的な「徳の教育」を具体化する(可視化する)可能性を提示することができた。本研究では、これまで各地の学校で行われてきた地域文化を「いのち」「こころ」の教育に活かすための研究、教育実践例について、その実践例について資料収集および聞き取り調査を行い、その結果の分析類型化してデータベース化する。そのことにより、教材研究等の研究を行う人たちの利用に供することができるようにすることを目的とする。その目的を達成するために、まず開始年度である本年度は、文部科学省において、同省が行っている道徳教育推進のための事業(「児童生徒の心に響く道徳教育推進事業-命を大切にする心をはぐくむ教育の推進に関する研究-」「豊かな心を育てる地域推進事業」「高・中学校「人間としての在り方生き方」教育の実践研究」、「伝統・文化等教材開発事業」)の対象学校についての情報収集をおこなった。調査結果については、パソコン上にデータベース化し、それを精査して、地域文化を「いのち」「こころ」の教育に活かす研究実践をしている事例についてピックアップし、特色ある教育を行っている学校に対して聞き取り調査を行った。2月には兵庫県篠山私立大山小学校研究発表会、兵庫・生と死を考える会研究会(聖トマス大学)から、3月には「遍路文化を活かした地域人間力の育成」プロジェクト(鳴門教育大学)、「おせっ隊」実践(香川教育文化研究所、香川大)からの聞き取り調査を行った。聞き取り調査を行った成果の一部については、平成22年度『大正大学教職課程年報』に論文として発表した。その目的を達成するために、今年度は前年度と引き続き、文部科学省において同省が行っている道徳教育推進のための事業(「児童生徒の心に響く道徳教育推進事業一命を大切にする心をはぐくむ教育の推進に関する研究-」「豊かな心を育てる地域推進事業」「高・中学校「人間としての在り方生き方」教育の実践研究」、「伝統・文化等教材開発事業」)の対象学校についての情報収集をおこなった。成果発表の研究会に参加および聞き取り調査を行ったのは、埼玉県鴻巣市立笠原小学校、山梨県甲斐市立双葉東小学校、名護市立久辺中学校、糸満市立高嶺小学校、石垣市八重山教育事務所、沖縄県立八重山商工高等学校、宮古島市立砂川中学校、宮古島市立久松小学校、金武市立金武中学校、全国学校飼育動物研究大会、広島市立安佐北中学校・高等学校、豊島区立朝日小学校、北区立谷端小学校、鳴門教育大学(教員養成モデルカリキュラム研究協議会)、大阪教育大附属池田小学校など。聞き取り調査を行った成果の一部については、『宗教研究』84(2)に論文として発表した。

その目的を達成するために、今年度は前年度と引き続き、文部科学省において同省が行っている道徳教育推進のための事業(「児童生徒の心に響く道徳教育推進事業-命を大切にする心をはぐくむ教育の推進に関する研究-」「豊かな心を育てる地域推進事業」「高・中学校「人間としての在り方生き方」教育の実践研究」、「伝統・文化等教材開発事業」)の対象学校についての情報収集をおこなった。成果発表の研究会に参加および聞き取り調査を行ったのは、宮城県仙台市立七北田小学校(地域共生科)、大河原町立大河原小学校、宮城教育大学附属小学校、長野県伊那市立伊奈小学校等であった。2012年2月には、子どもといのちの教育研究会と共催で学術研究発表大会を開催した。調査データのデータベース構築作業を進めるとともに、研究成果に基づいた論文を掲載した報告書作成した。
吸着膜相転移をスイッチとして協同的に膜厚転移が起こる泡膜の新しい安定化メカニズム

シャボン玉の膜は、薄い水溶液膜の両側にそれぞれ界面活性剤が吸着してできている。専門的にはこのシャボン玉膜を泡膜と呼ぶ。泡膜は熱力学的には不安定で最終的には壊れてしまうが、例えば、界面活性剤の親水基が帯電していると、水溶液膜を挟んで電荷を帯びた吸着膜が反発しあうことによって、泡膜は長時間安定になる。本研究では、陽イオン界面活性剤の吸着膜に同程度の長さのアルカン分子を加えて混合吸着膜を作り、この混合吸着膜が二次元液体から二次元固体状態に相転移にすることを利用して、泡膜の安定性を不連続に切り替えることのできる新規な材料を開発した。本年度は,この申請課題で最も重要な研究装置である薄膜圧バランス測定装置の作成を行った.初めに耐圧容器,ならびにその中に設置する水溶液薄膜を保持するための多孔質ガラスホルダーを設計し,これらを九州大学付属工場で自作した.また,耐圧容器内の圧力を任意に設定できるようにシリンジポンプを作成し,これに薄膜とセル内部の圧力差を測定できるように,高精度差圧計と圧力インジケータを接続して,目的の装置を完成させた.現在は,この装置を使って既に論文で公表されている臭化テトラデシルトリメチルアンモニウム水溶液の薄膜の分離圧を測定し,我々の装置で得られる分離圧の値と比較検討しながら細部の調整を行っているところである.平成27年度は、昨年度に作成した薄膜圧バランス測定装置をテトラデカンと臭化ヘキサデシルトリメチルアンモニウムの空気ー水界面混合単分子膜で安定化された泡膜に適用し、分離圧ー膜厚曲線を測定した。特に界面活性剤濃度を一定にし温度を変化させる実験において、分離圧が低い領域では混合単分子膜の相転移温度と等しい温度で泡膜の膜厚転移が起こるのに対し、分離圧が高い領域では、単分子膜の相転移温度よりも低い温度で膜厚転移が起こることが明らかになった。これは分離圧が高い状態では、吸着膜直下に形成される電気二重層の構造が、単分子膜のそれとは大きく異なっていることを示唆している。このような推察は、従来の泡膜の研究においても指摘されていたが、今回、吸着膜相転移という現象をプローブとして用いることで、泡膜中では電気二重層の構造変化が確かに起こるということを実験的に示すことができたことには大変な意義があると考えられる。本課題のもともと計画は、1年目に分離圧測定装置を作成し、2年目に分離圧測定、また装置の作成と並行しながら混合単分子膜の電気二重層の構造を全反射XAFS測定で明らかにし、3年目に成果をまとめて論文誌に投稿の予定であった。1,2年目の進行状況は概ねこの通りであったが、研究実績概要に述べたように、吸着膜相転移が泡膜の膜厚転移に及ぼす効果の研究は、更に泡膜中と単分子膜状態での電気二重層構造の違いに関する有益な知見をもたらし得ることが明らかになった。そこで当初の計画を少し変更し、3年目にも上で述べた推察を裏付けるための実験を論文執筆に加えて行いたいと考えている。界面活性剤の吸着膜には、三次元の気体、液体、固体に対応する三つの膜状態、気体膜、膨張膜、凝縮膜が存在する。一般に、イオン性界面活性剤は、親水基間に働く静電反発のため通常は凝縮膜を形成しないとされている。本研究では、陽イオン界面活性剤の吸着膜に界面活性剤と同程度の鎖長のアルカンを混合する手法により、室温付近で、炭化水素鎖間のファンデルワールス相互作用によって凝縮膜形成が誘起される新規な吸着膜相転移を創出するとともに、これを(1)泡沫、(2)乳化系の安定性の制御に応用した。(1)の実験では、四級アンモニウム塩型の陽イオン界面活性剤に直鎖アルカンを添加した吸着膜を用いて、泡沫の安定性を評価するモデル系「泡膜」をシェルドコらの方法にならって作成し、膨張膜から凝縮膜への相転移が陽イオン界面活性剤対イオンの界面への吸着を促進して、電気二重層を圧縮し、泡膜を不連続に薄く(不安定化)することを明らかにした。(2)の研究では、アルカンー水界面の陽イオン界面活性剤吸着膜も気液界面吸着膜と同様の相転移を示す事をまず示し、凝縮膜形成温度の前後でエマルションの時間的な安定性が大きくことなるという大変興味深い知見を得ることができた。また、より実用的な乳化系へもこの研究成果が応用できることを示すために、補助界面活性剤としてイオン性界面活性剤とともに配合されることの多い長鎖アルカノールも、陽イオン界面活性剤と混合凝縮膜を作ることができることを明らかにした。

初年度は当初の計画では,研究実績の概要に示した装置の作成に加え,我々が今回の研究の対象としているテトラデカン蒸気存在下での臭化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム水溶液薄膜の分離圧測定までを行う予定であったが,この研究を進める上で必要となる位相変調エリプソメーターが故障し,その修理と再調整に2カ月程度の時間を要したため,若干の遅れを生じた.ただし,その遅れはそれほど大きくなく27年度に十分取り戻せる程度であること,また,27年度からスタートする予定であった水溶液表面での全反射XAFS測定を前倒しして行い,研究期間全体としては予定通りの成果を上げられるように努めたため,その影響は少ないと判断し,区分(2)の評価とした.研究実績の概要、進捗状況の項目で述べたように、3年目はこれまでの成果を論文にまとめ、その他計画書に記載した情報発信を行っていく一方、より詳細に分離圧を制御しながら泡膜の膜厚転移が起こる温度を決定し、この情報をもとに電気二重層の構造が単分子膜の状態から、泡膜が薄くなるにつれてどのように変化していくのか定量的に明らかにする実験を行いたいと考えている。界面科学平成27年度は前年度に間に合わなかった臭化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム水溶液薄膜の分離圧測定を急ぎ行うと同時に,本来の27年度の研究計画である水溶液表面での全反射XAFS測定を予定通り進める.既に高エネルギー加速器研究機構の27年度のビームタイムを確保しているので研究の遂行には大きな問題は生じないと思われる.当該年度に,本研究の遂行に重要な機器の一つである位相変調型エリプソメーターが故障し,やむなく前倒し支払い請求をして修理を行ったが,その際,機器販売・開発元が外国(ニュージーランド)の企業であったため,為替などの変動によって,支払い額がギリギリまで確定できず,最終的に9024円の余りが生じた.次年度使用額は少額であるので,27年度の受け入れ額と合わせ,適切に使用する.
GaAs(111)面上高対称性量子ドットの自己形成に関する研究

発光の微細構造分裂幅の小さい量子ドットを実現する事を目的に、液滴エピタキシー法を用いたGaAs(111) A面上の高対称量子ドット自己形成に関する研究を行った。液滴形成条件、結晶化条件、アニール条件の最適化により、密度・サイズ・形状の制御技術を確立した。作製した量子ドットの発光特性を顕微分光法により調べた所、対称性の向上により、ほぼすべての量子ドットで、極めて小さい微細構造分裂幅が実現されている事が明らかとなった。本年度は、初めにGaAs(111)A面上に於けるガリウム液滴形成過程の解明、及び、その最適化を行った。反射型高速電子線回折によるその場観察、及び、原子間力顕微鏡による表面観察の結果、同表面上では従来の(100)表面と異なり、液滴がガリウム照射と同時に形成される事が分かった。これにより、量子ドット形成の際に、量子ドット下部の濡れ層形成を抑制でき、さらに、液滴のサイズ・密度の緻密な制御を実現できる事が明らかになった。また、単一量子ドット分光を実現するために、低密度・低サイズの量子ドット形成条件の最適化を行い、基板温度400°C程度で、僅か0.05原子層程度のガリウム照射により、低密度・小サイズのガリウム液滴を再現性よく形成できる事が分かった。続いて上記で作製した液滴の砒素照射による量子ドットへの結晶化の実験を行った。(111)A表面では、ガリウムの表面拡散長が非常に短いため、低強度の砒素照射でも、量子ドット形状が実現できる事が分かった。一方で、液滴サイズが大きい場合、髭状結晶が形成され、それにより、キャップ層の品質が大きく低下してしまう事も明らかとなった。この問題を解決するため、キャップ層成長前に、500°C程度の砒素中アニール過程を導入する手法を開発した。アニールにより、髭状の部分が崩れて、台形状の量子ドットに形状が変化する事が分かった。一方で、量子ドットの面内サイズには大きなサイズ変化は生じず、自己抑制的な機構が働いている事が示唆された。以上のように、(111)A面上でサイズ・密度・形状を高度に制御した量子ドットの作製を達成した。また、液滴エピタキシー法を用いた他の研究も推進し、いくつかの副次的成果が得られた。本年度は、(111)A基板上の量子ドット作製条件最適化をさらに進めるとともに、その光学特性の探索を行った。これまでガリウム液滴の結晶化温度は、200度に固定していたが、この温度を上昇させる事により、結晶化後のナノ構造の形状が大きく変化する事を見いだした。200度から300度の低温で結晶化すると、半球状六角形の量子ドットが形成されるが、400度以上の高い温度で結晶化すると、非常にきれいな正三角形の量子ドットが形成される事が分かった。これは、(111)表面上に存在する二種類にステップの特性が異なることによる。低温ではガリウムの拡散長が十分長く無いため、どちらのステップでも結晶成長が起こって、六角形になるのに対して、高温の結晶化では、一方のステップ端での成長は殆ど起こらずガリウム原子がもう一方のステップ端に移動して結晶化するため、最終的に等価な3つのステップで囲まれた三角形状の量子ドットが形成される。光学特性に関しては、初めにマクロ的な測定を行ったところ、多数のピークを持つ発光特性が観察された。これは、量子ドットの高さが原子層単位で異なる量子ドットの集団が形成されている事によることが、理論計算結果との比較により分かった。続いて、単一量子ドットの分光測定により、微細構造分裂幅の評価を行った。従来の(100)表面上に形成した量子ドット異なり、(111)A面上の量子ドットでは、面内対称性が大幅に改善された事により、すべての波長範囲で極めて小さい分裂幅となっている事が確認された。また、結晶品質の向上により、極めて強い発光が得られる事も明らかとなった。これらの量子ドットを用いた、もつれあい光子対の発生に関しては、実験を開始して、予備的な知見を得た。また、副次的な成果として、液滴エピタキシー法を用いて、レーザー電流注入発振、量子細線形成などを達成した。
小児の上肢運動機能障害に対する複合的治療法の開発に向けた基礎的研究

小児の上肢運動機能障害に対して、CI療法(constraint-induced movement therapy)、ボツリヌス毒素治療、本邦で開発されたロボットリハビリテーション機器、神経筋電気刺激装置などの治療法を用いて小児の上肢の運動機能障害への治療介入をおこない治療効果を検討する。上肢運動機能への治療効果を検証のために客観的な評価法の開発、体格の小さな小児へのロボット機器の装着方法の開発も合わせて行う。神経可塑性が高い小児期において効果的な方法を検討することで、成人を含む幅広い脳障害で生じた痙性麻痺へ対する効果的な治療法への開発の発展が期待される。
小児睡眠呼吸障害診断ガイドライン作成のための研究

小児の睡眠呼吸障害(SDB)は、その身体成長・発育への悪影響が明白であるにもかかわらず、その病態の特殊性、検査上の困難さにより、治療の根拠となる診断基準が世界的にも確立されていない。小児SDBにおける、臨床診断ガイドライン作成は急務である。本研究で示された小児SDBの診断基準、重症度判定基準、有病率、簡易装置・問診票のスクリーニング精度は小児SDBの臨床診断の指針となるものと考える。本年度は大津市と川崎市にて2回の班会議をもち、当研究についての報告を行った。(1)小児OSAS患者につき、OSA-18を用いた各問診項目の妥当性、OSASのスクリーニングのためのカットオフ値の検討を行った。その結果、各問診項目はおおむね妥当であり、カットオフ値を50点程度とすればスクリーニングにも利用できる可能性が高い事が明らかとなった。(2)小児睡眠時無呼吸症候群の疑いの患者15人に対し全員、視診上にて口腔内の口蓋扁桃の大きさ、軟口蓋の位置について分類化し、かつ鼻咽頭ファイバー、X-P(セファログラム)にて咽頭扁桃(アデノイド)の大きさも分類化した。これら15人の小児に対し、咽頭の形態分類後、すべて夜間ポリソムノグラフィー(olysomnography : PSG)検査(自然睡眠下)を行った。PSG検査後、無呼吸低呼吸指数(Apnea hypopnea Index : AHI)が1以上にて明らかに口蓋扁桃、アデノイドが肥大している患児(患者15人がすべてAHI>1)に対し手術治療(Adenotonsillectomy)をすすめ、両親の同意を得られた患児(15人中13人)にたいしては手術治療を行った。術後3カ月後に自然睡眠下にて夜間PSG検査を行った。小児の睡眠時無呼吸症候群の患児の咽頭形態の分布や術前・術後のAHIにかんしての改善度と咽頭形態がどのように相関しているか解析継続中である。(3)小児の睡眠時無呼吸症候群においては、とくに診断について日本はもとより、世界においてもまだ混沌としている。小児はPSG検査を行うのが成人よりもかなり手技上やいろいろな面において手間がかかる関係上、すべての小児の睡眠時無呼吸症候群疑いに対してPSG検査を行うということは現状では極めて難しい。よって小児睡眠時無呼吸症候群疑いの小児に対して簡易スクリーニングの重要性も増すものであり、ビデオ記録やいびき音録音、パルスオキシメーターなどスクリーニング検査にたいして文献的に調査し、それらを学会発表(昨年の日本睡眠学会のシンポジウム)した。1小児睡眠呼吸障害の疫学調査滋賀県草津市のT小学校1、2年生194名を対象に小児の睡眠時無呼吸症候群と有病率に関する調査を実施した。測定項目は、携帯型睡眠ポリグラフ装置によるRDI値と、分担研究者(岡靖哲)作成の児童睡眠チェックリストおよび、小児睡眠時無呼吸症候群用Quality of Life質問票(OSA-18日本語版)を行った。その結果、児童睡眠チェックリストからは、「いつもないし時々いびきをかく」は12.9%、「無呼吸の疑われる頻度」は2.6%、「授業中の眠気」は3.1%であった。質問票OSA-18は平均28.4点(1865点)であった。RDIが1未満52.9%、12未満23.5%、13未満13.5%、34未満が4.7%、4以上は5.2%であった。2睡眠呼吸障害診断のための、ビデオ撮影の有用性に関する研究ホームビデオは近年、家庭に広く普及しており、小児睡眠呼吸障害に対するスクリーニング検査が有用との報告はあるが、確固たるエビデンスが存在しない。そこで、本年度は小児OSAS疑い症例に対して終夜睡眠ポリグラフ(n-PSG)と同時にビデオ撮影を行い、PSGパラメータとの相関を検討した。ビデオ撮影から得られた観察得点は、同時記録されたPSGにおける呼吸障害関連指標との間に有意な相関関係が認めた。今後、ビデオ撮影を小児睡眠呼吸障害のスクリーニングとして用いるためには、観察方法をより明確にし、症例数を増やし、前向き研究を行う必要があると考える。3小児におけるスクリーニング装置の精度評価在宅検査34例(記録不良3例)、検査室でのPSG同時検査28例(記録不良4例)を実施した。スクリーニング装置(PMP300e)と睡眠ポリグラフ装置における総睡眠時間、1時間当たりの無呼吸低呼吸指数、1時間当たりの3%酸素飽和度低下回数(ODI3)の相関係数は、それぞれ0.89、0.88、0.58であった。ODI3の相関係数は低く、酸素飽和度測定単独でのスクリーニングは困難であると考えた。スクリーニング装置内蔵の加速度センサーを用いて睡眠中の体動を測定し、総睡眠時間をある程度推測可能であった。本装置(PMP300e)は、小児睡眠呼吸障害スクリーニングに有用と考える。本年度の研究1として小児睡眠呼吸障害の有病率調査を実施した。滋賀県内の幼稚園児全211名(3-6歳)に睡眠にアンケート、同意の得られた67名に、1)耳鼻科診察

2)鼻腔通気度検査3)咽頭部レントゲン撮影4)携帯型睡眠検査を行った。その結果、無呼吸低呼吸指数(total AHI)の平均は1.8±2.7/hrであった。全呼吸イベント570回のうち中枢性無呼吸が58%を占めており、中枢性を除いた閉塞性無呼吸低呼吸指数(OAHI)の平均は0.8±2.2/hrであった。習慣性いびきの有無で補正した睡眠呼吸障害(SDB)の有病率は、OAHIが1以上を基準とした場合14.6%、OAHIが5以上を基準とした場合2.2%であった。OAHI1以上の群では1未満の群に比し、口蓋扁桃肥大度、アデノイド(A/N比)が有意に高値であった。鼻腔抵抗値には有意差は認められなかった。研究2として、小児睡眠呼吸障害を無拘束評価できる多点感圧センサシートの開発を行なった。サイズを約半分としセンサ数を2倍としたことで、臥床接地面積が狭い小児でも詳細な呼吸記録ができ、寝姿をビデオのように可視化可能となった。また陥没呼吸を認識する解析ロジックを組み合わせたことで、終夜睡眠ポリグラフィー(PSG)との相関値をr=0.91まで上昇させることができ、臨床応用可能なレベルに達した。現状での検査感度0.86、特異度0.65である。研究3として監視下PSGでの観察記録より,睡眠中の症候の定量化(得点化)を試み,その有用性について検討した。対象は小児SDB診断目的にPSG検査を施行した3歳12歳の55例である。PSGの際に観察される項目につき,Sivanらの文献を参考にスコアリングを行い合計得点を観察得点とした。観察得点とPSGパラメータ等の相関,観察得点によるAHI診断精度,AHIの予測要因につき解析した。その結果、観察得点とAHI,酸素飽和度低下指数,最低酸素飽和度との間に相関がみられ,観察得点によるAHI診断精度は80%以上であった。また,観察得点の中で、いびきの頻度と酸素飽和度低下指数がAHIの主な予測要因になることが明らかとなった。
膜輸送障害に基づくアミノ酸代謝異常症の病因解析に関する研究

1.研究目的:リジンの分解酵素活性が正常な高リジン血症の同胞例について高リジン血症の成因がリジンの細胞内輸送障害と推定し、患者とコントロールの培養皮膚線維芽細胞を用いてリジンの取り込み代謝動態を検討した。次にリジンおよびロイシンの取り込み代謝動態では、ロイシンを用いた場合、患者とコントロールの差は認められなかった。しかしリジンを用いての実験ではいわゆる低生理的基質濃度下においてコントロール群と比較して患者では明らかな活性低下を認めた。一方リジンの高濃度基質下では患者とコントロールの差は認められなかった。4.結論:以上の実験結果から本症の成因はリジンのミトコンドリア内へのactive transportの障害によることが示唆された。
探求の共同体を応用した小学校英語担当教員用オンライン研修コースの開発と実践

本研究では以下の4点を明らかにすることを目的としている。1)オンライン教員研修を開発・実践するにあたり、オンライン・コースのカリキュラムをデザインする上で理解していないといけないことは何か。2)オンライン教員研修に参加する現役教師は小学校外国語活動・外国語について、どの程度の基礎知識や指導法を知っているのか。3)オンライン教員研修の概念的枠組みを「探求共同体」(Community of Inquiry)と定め、オンライン研修を開発するが、研修に参加する教員間に探求共同体は成立するか。4)オンライン教員研修に参加することで、小学校外国語活動・外国語の基礎知識や指導法を学ぶことができるか。この4点を明らかにするために、ADDIEモデルに従ってプランを作成し本研究を進めている。平成30年度は、第一ステージであるA (Analyze)で、2点を実施した。1平成30年度上半期の間に、東紀州地域の小学校を訪問して小学校・児童・教員の実態をアンケートや質問紙を用いて調査した。調査の結果は、三重大学紀要で発表した。2三重県東紀州地域の小学校・児童・教員の実態に適したフォニックスのカリキュラム・デザインをするため、申請者がフォニックスの指導に定評があるMPI研究所の研修を受け、カリキュラム・デザインができる研修(mpi指導者養成セミナー初級・中級・上級)を履修した。さらに第二ステージであるD (Design)では、上記の調査で得た情報をもとに、東紀州地域の小学校・児童・教員の実態に適したオンライン教員研修のカリキュラムのデザインを開始した。このステージについては、平成31年春も継続中である。上記に記載通り、本研究はADDIEモデルに従ってプランを作成しており、平成30年度は第一、第二ステージである、AとDのステージを実施することができた。現在、第三ステージであるD (Development)を開始する一方で、第一、第二ステージも一部継続している。第一ステージであるA(Analyze)のカリキュラム・デザインは想定以上に奥が深く、平成31年度も追加の研修を受講している。追加の研修で得た知識やアイディアは、すぐに第二ステージであるD (Design)に反映させている。平成31年度は、第三ステージであるD(Development)と第四ステージのI (Implement)を実施することを計画している。具体的には、前段階で選択・配置された研修内容をインターネットで配信できるようにデジタル化し、学習支援ソフトMoodleで管理することである。また、オンライン研修のパイロット版に参加してくれる三重大学教職大学院の学生の募集を行う一方で、オンライン研修に参加してくれる東紀州地域の小学校の教員の声掛けを開始することである。さらに平成31年夏には第四ステージのI (Implement)であるオンライン研修を実施する。平成32年度は、最後のステージであるE (Evaluation)でオンライン研修を評価し、各種学会で発表することを目標とする。

開発用パソコンが想定以上に高額であったのと、初めての科研で「何を購入すべきか?何を他の教員等から借りるべきか?」の判断が難しかったため、次年度使用額が生じた。まだ、研究課題の情報収集が不十分なため、情報収集のために研修に参加する参加費や旅費に充当する予定である。
制御性T細胞に着目した新規乾癬マウスモデルの作製と治療応用

乾癬は代表的な皮膚の炎症性角化症で、本邦では人口の約0.1%が罹患する頻度の高い疾患である。CD4+Tリンパ球サブセットであるTh17細胞による免疫応答が病態形成に重要である。これまで乾癬の発症や増悪において制御性T細胞(Treg)の関与が示唆されているが、詳細は不明である。本研究では、新規マウスモデルを用いて乾癬におけるTregの役割を明らかにする。まず、免疫応答がTh17に傾いたノックアウトマウスを作製し、皮膚炎の性状を解析する。また、同マウスにイミキモドを塗布することで乾癬を誘発し、対照群と比較する。これらの乾癬マウスモデルにTreg細胞療法ならびに既存の治療実験を行い、効果を評価する。
新規大腸発がん再構成モデルを用いた炎症による発がん促進機構の解析

申請者は、腸管上皮細胞の発癌過程を再現できるモデルを確立した。腸管上皮細胞にpLKO.1ベクター、shp53、shAPCを導入し、炎症細胞と共培養させた。その後、2週間培養維持しマウス皮下に移植した。その結果、pLKO.1およびshp53を導入した腸管細胞は炎症の有無に関わらず皮下で増殖しなかった。しかし、shAPC導入腸管細胞は皮下で増殖した。炎症による発癌機構を解析するため、網羅的遺伝子発現解析を行ったところ、CHI3L1が発現していた。以上の結果から、短期間の炎症細胞との共培養はAPCの遺伝子変異と協調的に働き、皮下増殖能を獲得させることが明らかとなった。炎症が発癌要因の一つであることは、疫学および実験モデルで示されている一方で、炎症と大腸発癌をつなぐ詳細な分子機構にはいまだ不明な点が多い。申請者はこれまでに、正常の腸管上皮細胞の遺伝学的な発癌過程を簡便かつ短期間で再現できる培養モデルを確立した。まず、shRNAの導入による遺伝子発現の変化が環境因子である炎症と協調し、発癌過程を促進するかを調べた。腸管上皮細胞にpLKO.1(ベクター対照)、shp53、shAPCを導入し、活性化炎症細胞(腹腔内浸出細胞)と3時間共培養させた。その後、炎症細胞を取り除き、さらに約2週間培養維持しマウス皮下に移植した。しかしながら、shAPCを導入した腸管細胞は皮下で増殖し、炎症細胞と共培養したshAPC導入腸管細胞は、炎症の処理をしていない群と比較して腫瘍径の増大が見られた。炎症による発癌過程の促進機構を解析するため、網羅的遺伝子発現解析を行った結果、本来炎症細胞から分泌され、炎症を惹起する作用を持つタンパクであるChitinase-3-like protein 1 (CHI3L1)が、炎症との協調作用によって得られた腫瘍細胞において発現していた。また、同定した遺伝子を標的とした薬剤のスクリーニング系を作製するために、本研究で得られた腫瘍を用いて、スクリーニングに適した培養条件を検討した。その結果、腫瘍細胞は低接着プレートを用いた足場非依存条件下で数週間生き続けることが明らかとなった。今後、標的となる遺伝子を決定するとともに、薬剤スクリーニング系を用いて遺伝学的異常と薬剤感受性の関連を調べていく予定である。大腸発癌のリスク要因には,肥満に随伴する慢性炎症や炎症性腸疾患がある.加えて,ヒト疫学調査によると非ステロイド性抗炎症剤の投与は,大腸発癌を抑制すると報告されている。このように、炎症は大腸発癌の要因と推測されるが,発癌に直接繋がる具体的な分子機構に関してはいまだに不明な状況にある。申請者は正常マウスから摘出した腸管上皮細胞を用いて,簡便かつ短期間内に腸管上皮オルガノイドを形成する3D培養モデルを確立した。本年度は、種々のshRNAの導入等によって遺伝子変化を賦与させた腸管上皮細胞の発癌性を検討した.特に炎症細胞を存在させた際に,如何なる遺伝子変化を有する腸管上皮細胞が癌化に向かうのかを検討した.導入した遺伝子変化は,shp53、shAPCおよびpLKO.1(ベクター対照)であった.炎症細胞は,止血用ゼラチンスポンジ(10×5×3mm)を正常C57BL/6マウス腹腔内に移入後5日目の浸出細胞を回収して使用した.遺伝子変化を導入した腸管上皮細胞単独もしくは,これら腸管上皮細胞と炎症細胞を3時間共培養させた。炎症細胞刺激の後,いずれの細胞も約2週間にわたり維持培養した後にマウス皮下に移植して腫瘍増殖(発癌)の有無を検討した。その結果、shp53およびpLKO.1を導入した腸管細胞は,炎症細胞刺激の有無に関わらず皮下増殖しなかった.しかしながら、shAPCを導入した腸管細胞では,それ単独で皮下増殖した.さらに、shAPC腸管細胞を炎症細胞と共培養すると、腫瘍増殖が有意に促進された.平成24年度の研究実施計画に則り,計画実験を遂行し概ね終了することができた.すなわち,炎症刺激により発癌に至る遺伝子変化(APC遺伝子)を決定した.加えてp53遺伝子変化のみでは発癌に至らないことも見出した.さらにp16Ink4a、SMAD4、PTEN,K-Ras,Fbwx7の各遺伝子発現を変化させても発癌しないことを確かめた.

平成24年度の研究実施計画が概ね計画通りに遂行したことより,平成25年度には当初の研究実施計画に則り,炎症細胞による腫瘍増殖促進機構を解析し、炎症発癌の予防・治療標的となる分子候補の探索に移行する.平成24年度の研究は概ね計画通りに進捗し,目的相当の成果を得たことから,平成25年度には当初計上の研究費明細に則り,1)炎症細胞による腫瘍増殖促進の分子機構の解析を進め,2)得られる成果を取り纏めて国際専門雑誌への投稿を行う.次年度の研究費は,当該2項目の遂行に使用する.
20世紀における日本の近代化と教育改革に関する歴史的研究

現在の教育改革論議の歴史的根拠を探ることが、本研究の主要課題であった。2年目は、仮説的に設けた時期区分に従って、その時代時代の教育改革の特徴を捉え、今日につながる教育改革の課題の歴史性を明らかにする作業を行った。3回の研究合宿を行い、以下のような目次による研究報告書を作成した。序章日本近現代教育史研究のために佐藤広美第1章天皇制国家の成立と教育改革1868-1895谷雅泰第2章帝国主義と教育改革1895-1917谷雅泰・佐藤広美第3章総力戦体制と教育改革1917-1945佐藤広美第4章戦後教育改革とその「反動」1945-1955佐藤隆第5章企業社会と教育改革1955-1975佐藤修司第6章新自由主義と教育改革1975-1990高津芳則第7章大競争時代の教育改革1990-2000佐藤隆現在の教育改革論議は、歴史的に構成されてきたものであることを明らかにした。そのときどきの社会構成原理に強く影響を受けながら教育改革が行われたこと、つまり天皇制国家を編成すること、日本国家を帝国主義に再編すること、あるいは新自由主義的社会再編と密接に教育改革が行われたことを分析した。未来の教育改革は、こうした教育改革の力学とその過程で蓄積された教育学的遺産を踏まえて実行されるべきことを結論とした。3回の研究合宿を集中的に行った。日本の「近代化過程と教育改革の関連」を探るために、先ず、時期区分を仮説的に行い、分析担当者を決定し、各自報告を積み重ねた。時期区分は以下の通り。天皇制国家の成立と教育1868-1895谷雅泰帝国主義と教育1895-1917谷雅泰・佐藤広美総力戦体制と教育1919-1945佐藤広美戦後教育改革1945-1955佐藤隆企業社会と教育1955-1975佐藤修司新自由主義と教育1975-1992高津芳則グローバリゼイションと教育改革の現在1992-2000佐藤隆研究代表者から、教育改革を歴史的に分析する方法論について報告を行い、討論を行った。現在の教育改革論の隆盛は、歴史的根拠をもち、また、100年に及ぶ歴史的背景を分析することではじめて、教育改革の現実的で具体的な提言を得ることが可能になる、基本認識を共有した。第1回と2回は、特に、「企業社会と教育」「新自由主義と教育」という現代的課題を探り、「近代化」の到達点の内実を探ることに力点をおく検討を行った。2年目からは、アジアや欧米の教育改革の動向の比較しながら、より具体的な分析を行っていきたい。序章日本近現代教育史研究のために佐藤広美第1章天皇制国家の成立と教育改革1868-1895谷雅泰第2章帝国主義と教育改革1895-1917谷雅泰・佐藤広美第3章総力戦体制と教育改革1917-1945佐藤広美第4章戦後教育改革とその「反動」1945-1955佐藤隆第5章企業社会と教育改革1955-1975佐藤修司第6章新自由主義と教育改革1975-1990

高津芳則第7章大競争時代の教育改革1990-2000佐藤隆現在の教育改革論議は、歴史的に構成されてきたものであることを明らかにした。そのときどきの社会構成原理に強く影響を受けながら教育改革が行われたこと、つまり天皇制国家を編成すること、日本国家を帝国主義に再編すること、あるいは新自由主義的社会再編と密接に教育改革が行われたことを分析した。未来の教育改革は、こうした教育改革の力学とその過程で蓄積された教育学的遺産を踏まえて実行されるべきことを結論とした。
飼養環境下の牛群における複数のマイコトキシンによる共浸潤動態とその影響の解明

繁殖雌牛群における尿中ZEN濃度と繁殖成績との関連性を検証するとともに、血清中抗ミューラー菅ホルモン(AMH)濃度の測定を行い、ZENの内分泌撹乱作用の有無を調べた。その結果、尿中ZEN濃度が有意に高い牛群において、AMH濃度は有意に低い結果となり、ZEN浸潤動態と血清中AMH濃度との関連性が示唆された。さらに、LC/MS/MS法による尿中STC濃度測定法を確立して、ZEN汚染牛群由来尿サンプルの測定を行った。その結果、飼料中STCは経口摂取後にその大部分が肝臓でグルクロン酸胞合されること、及びZEN汚染牛群における飼料中ZENとSTCの共汚染の存在が初めて明らかにされた。これまでに、Fusarium属真菌由来マイコトキシン(MT)で、エストロジェン類似作用を持つことから家畜に繁殖障害などを引き起こす可能性が示唆されるゼアラレノン(ZEN)に着目し、液体クロマトグラフィー質量分析(LC/MS/MS)法を用いた尿中ZEN濃度測定法を確立してその有用性を明らかにしている。本年度は動物やヒトに対して強い毒性を持つアフラトキシンB1生合成の中間物質の1つとして知られ、Aspergillus属真菌などにより産生されるMTであるステリグマトシスチン(STC)に着目し、複数のMTによる共浸潤の有無を検証するための足掛かりとして、1)新たにLC/MS/MS法による尿中STC濃度測定系を確立すること、2)確立した尿中STC濃度測定法を用いて、ZEN汚染牛由来保存尿サンプルの測定を行って、ZENとSTCとの共浸潤動態を検証して将来の臨床応用に向けての基礎データを得ること、以上2点を目的とした。その結果、1)LC/MS/MS法を用いた牛尿中STC濃度測定が可能であること、2)牛尿中に存在するSTCはその大部分がグルクロン酸胞合を受けていること、および3)これまでに報告を行ったZEN汚染牛群において、牛に給与されていたZEN汚染稲ワラはZENと同時にSTCとの共浸潤が存在したこと、など初めて明らかにされた。以上の結果から、今後も飼養環境下の牛群における継続的なMT浸潤動態の検証、特に単独のMTのみならず、複数のMTにおける共浸潤動態についての新規かつ継続的なデータベースの蓄積が必要であり、今後のモニタリング継続と家畜の健康に対するリスクファクターの詳細な評価を行うことが重要であると思われた。これまでに、Fusarium属真菌由来マイコトキシン(MT)で、エストロジェン類似作用を持つことから家畜に繁殖障害を引き起こす可能性が示唆されるゼアラレノン(ZEN)、およびAspergillus属真菌由来MTで、アフラトキシンB1 (AFB1)生合成過程の中間物質であるステリグマトシスチン(STC)に着目し、それらの尿中濃度をモニターすることで飼養環境下の牛群におけるZENとSTCの共浸潤動態やマイコトキシン吸着剤(MA)添加効果を明らかにしている。本年度は黒毛和種繁殖雌牛群における尿中ZEN濃度と繁殖成績との関連性を検証するとともに、卵巣内の胞状卵胞ポピュレーションを反映する血清中抗ミューラー管ホルモン(AMH)濃度の測定を行って、ZEN浸潤による内分泌撹乱作用の有無、および牛群の繁殖性に与える影響の一端を明らかにすることを目的とした。黒毛和種繁殖牛群2群を選定し、分娩後30日に尿および血液のサンプリングを行うとともに、超音波診断装置を用いた生殖器の詳細な観察を行った。尿サンプルはLC/MS/MS法により尿中ZENとその代謝物であるα-ゼアラレノール(ZOL)およびβ-ZOL濃度の測定を行った。さらに血中AMH濃度を測定し、2群間での比較検討を行った。一方、繁殖成績ではZEN濃度が高い牛群において分娩後空胎日数が有意に短い結果となり、低レベルZEN浸潤は繁殖性に直接的な影響を及ぼすものではないことが示唆された。(目的1)牛群における複数のマイコトキシン(MT)による共浸潤動態解明のため、液体クロマトグラフィー質量分析(LC/MS/MS)法による尿中ステリグマトシスチン(STC)測定法を確立し、申請者らの尿中ゼアラレノン(ZEN)濃度のデータベースを基に、ZENとSTCとの共浸潤動態を初めて明らかにして、我が国の飼養環境下におけるMT共浸潤動態検証の足掛かりとする。(理由)これまでにLC/MS/MS法による尿中STC測定法の確立、およびZEN汚染牛群由来保存尿を用いた尿中STC濃度測定を既に終えている。得られた成果は世界牛病学会にて口頭発表するとともに、Toxinsに論文として掲載済みである。さらに、前述したように黒毛和種繁殖雌牛群における尿中ZEN濃度と繁殖成績との関連性を検証するとともに、血清中AMH濃度の測定を行って、ZEN浸潤による牛群の繁殖性に与える影響の一端を明らかにして、その成果の一部は既にReprod Dom Animに論文として掲載済みである。加えて、ZEN汚染牛群由来尿をサンプルとしたガスクロマトグラフィー測定を既に終えており、得られた成果の一部は2016年7月にダブリンで開催される、世界牛病学会にて発表予定である。(目的2)ZEN暴露が生殖能に与える影響を、免疫調節撹乱作用の視点から検証するために、新たにウシ卵管

上皮細胞(BOEC)の体外培養系をモデルとしたZEN添加試験を行い、ZEN暴露によるBOECの生存性や自然免疫調節関連遺伝子の発現動態に対する影響を初めて明らかにする。(理由)これまでにウシ精子とBOECの体外共培養系を用いたZENへの暴露試験を実施し、BOECの炎症性サイトカイン関連遺伝子IL-1βとTNF-α、および抗炎症性サイトカイン関連遺伝子PGEs、IL-10およびTGFーβの発現動態に関する実験成果を得ており、現在はその成果を論文として執筆中である。これまでに、牛飼養環境における複数のマイコトキシン(MT)による共浸潤動態を検証することを目的に、Fusarium属真菌由来MTで、エストロジェン類似作用を持つことから家畜に繁殖障害を引き起こす可能性が示唆されるゼアラレノン(ZEA)とその代謝物(α-ZOL、β-ZOL)、およびAspergillus属真菌由来MTで、アフラトキシンB1生合成過程の中間物質であるステリグマトシスチン(STC)に着目し、LC/MS/MS法による尿中濃度測定法の確立を行なってきた。本年度は黒毛和種繁殖雌牛群における尿中ZEA濃度と繁殖成績との関連性を検証するとともに、血清中AMH濃度の測定を行って、ZEA浸潤による内分泌撹乱作用の有無、および牛群の繁殖性に与える影響の一端を明らかにすることを目的とした。黒毛和種繁殖牛群2群を選定し、分娩後30日に尿および血液のサンプリングを行うとともに、超音波診断装置を用いた生殖器の詳細な観察を行った。尿サンプルはLC/MS/MS法により尿中ZEA、α-ZOL、β-ZOL及びSTC濃度の測定を行った。さらに血中AMH濃度を測定し、2群間での比較検討を行った。その結果、尿中ZEA濃度が有意に高い牛群において、AMH濃度は有意に低い結果となり、ZEA浸潤動態と血清中AMH濃度との関連性が示唆された。一方、繁殖成績ではZEA濃度が高い牛群において分娩後空胎日数が有意に短い結果となり、低レベルZEA浸潤は繁殖性に影響を及ぼす可能性も示唆された。飼養環境下の牛群におけるモニタリングを基盤とした一連の研究により、牛群におけるZEAとSTCとの共浸潤を確認するとともに、卵巣内の胞状卵胞数を反映するAMH濃度との関連性を示したことは、飼料へのMT浸潤が牛の繁殖性に影響する可能性を示唆するものであり、今後データベースの構築とモニタリングの継続が重要であると思われた。繁殖雌牛群における尿中ZEN濃度と繁殖成績との関連性を検証するとともに、血清中抗ミューラー菅ホルモン(AMH)濃度の測定を行い、ZENの内分泌撹乱作用の有無を調べた。その結果、尿中ZEN濃度が有意に高い牛群において、AMH濃度は有意に低い結果となり、ZEN浸潤動態と血清中AMH濃度との関連性が示唆された。さらに、LC/MS/MS法による尿中STC濃度測定法を確立して、ZEN汚染牛群由来尿サンプルの測定を行った。その結果、飼料中STCは経口摂取後にその大部分が肝臓でグルクロン酸胞合されること、及びZEN汚染牛群における飼料中ZENとSTCの共汚染の存在が初めて明らかにされた。(目的1)牛群における複数のマイコトキシン(MT)による共浸潤動態解明のため、液体クロマトグラフィー質量分析(LC/MS/MS)法による尿中ステリグマトシスチン(STC)測定法を確立し、申請者らの尿中ゼアラレノン(ZEN)濃度のデータベースを基に、ZENとSTCとの共浸潤動態を初めて明らかにして、我が国の飼養環境下におけるMT共浸潤動態検証の足掛かりとする。