hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
シンクロトロン放射光蛍光X線分析による美術,考古学試料の2次元非破壊分析

最終年度はこれまで不十分であった状態分析に重点を置いて研究を進め、以下の成果が得られ美術考古学試料の新しい分析法として確立できた。a)古代鉄器の腐食相の状態分析弥生時代のものと推定される腐食した鉄刀について、鉄の2次元状態分析を行った。試料は中心部に反射率の高い金属鉄の地相があり、周辺部は赤褐色のさび相が発達している。またその外縁部には黒色のやや反射率の高い相が帯状に広がっている。それぞれの部分について、鉄の吸収端スペクトルを測定した結果、黒色の酸化相は四三酸化鉄(磁鉄鉱Fe_3O_4)の様な2価と3価の鉄を含むもの、赤褐色の酸化相の部分は酸化第二鉄または針鉄鉱(FeOOH)であることがわかった。さらに選択励起蛍光X線分析により、状態別の2次元イメ-ジを得、鉄器の鉄地相とさび相の分布状態をイメ-ジとしてとらえることができた。このような分析は放射光蛍光X線分析で始めて可能になったものである。b)天目茶碗の油滴の状態分析中国福建省建窯の窯跡からプラマ-教授が1935年に採集した油滴文様のある天目茶碗の破片について研究を行った。本研究は建窯で焼造された曜変天目茶碗の研究の一貫として行ったもので、油滴の実体と成因を明らかにすることを目的とした。油滴の部分は周囲の地の部分に比べて鉄が濃縮しており、鉄のK吸収端スペクトルにより両者の状態を比較した。標準試料との比較により、油滴の部分のスペクトルの吸収端エネルギ-はFe_2O_3に類似し、また地の部分のスペクトルのエネルギ-はFe_3O_4に近く、前者の方が含まれる鉄はより高い酸化的状態にあることがわかった。油滴の成因として焼成時に於ける内部からの気泡の発泡によるという説が有力であるが、今回の結果は内部から酸素などの酸化性のガスが発生し、周囲に比べて鉄が酸化されたと考えると妥当である。蛍光X線分析は高エネルギー物理学研究所、放射光実験施設BL4Aに於て、単色光を用いたSSDを検出器とするエネルギー分散法によって行った。2次元分析は、4象限スリットで数百ミクロンに紋ったビームをXZステージ上のサンプルの照射し、ステージを数百ミクロンステップでXZ方向に移動させ、各点の蛍光X線強度を測定し、パソコンにより濃度分布を2次元のイメージとしてカラーグラフィック表示した。今年度で以下の成果が得られたので、今後は実試料へさらに応用を試みる。(1)放射光蛍光X線分析の非破壊高感度多元素同時定量性という長所を生かして、試料の産地、交易経路、制作年代などの推定のもとになる指標元素の定量法を開発した。岡山県とエジプトで発掘された遺物124種について分析を行い、結果をアルカリ石灰ガラスと釉薬の試料についてZr/Rb-Sr/Rb比としてグラフにプロットした所、5つのクラスターの形成が見られ、原産地との相関を示した。(2)考古学試料の2次元イメージング分析法を確立した。本法により、試料の美術的模様と元素分布の対応が可能となった。イメージングを行った主な試料は、九谷焼きの皿、エジプト出土のエナメルガラス(12,3世紀)、エジプト18王朝のコアガラス、プトレマイオス朝のモザイクガラスである。いずれも、高感度(ppmレベル)で高分解能(100μ)の元素別2次元濃度分布が測定できた。(3)X線吸収端のケミカルシフトを利用して、顔料、彩釉陶器の釉薬などに含まれる、有色金属元素の状態分析法の開発を行った。実試料として複数の原子価をとりうるFe,Cu,Mnによって異なった色に着色された古代ガラスを選び、X線吸収端スペクトルを測定した所、試料中の金属の原子価と着色の間に良い対応関係が見られた。本法により、原料産地や、焼成温度などの推定に有益な知見を得ることができるであろう。申請者らは昨年度より、放射光を使った蛍光X線分析法による美術的考古学試料の分析について基礎的研究を行い、放射光を使った蛍光X線分析法が、美術考古学試料の一つの理想的な分析法となりうることを示した。本年度は、これまでに開発した分析法を活かし実試料への応用を試みた。昨年度の研究費により製作した広領域(5×10cm^2)をイメージング可能な大型試料用XZステージと、カラービデオカメラによる試料のモニターシステムにより、容易に2次元イメージングを行うことが可能となったため、本年度からは考古学試料の2次元イメージングによる元素分析をルーチン化することができ、以下の資料について分析を行って成果を得た。(1)中国六朝時代の俑を試料とし、鉛、鉄、ガリウム、ルビジウムについて2次元イメージングを行った。試料の素材の土には、鉄とルビジウムが多いこと、表面の白色の被膜部には鉛が含まれていないこと、赤色の着色は鉛丹によるものであることなどが明らかになった。(2)本法を7世紀末の富士見台遺跡から発掘された精錬さいの鉄化合物の分析に応用し、鉄、チタンとバナジウムについてイメージングを行った。分析の結果鉄とチタンの分布はほぼ等しく、両者はウルボスピネルとして共存していることがわかった。また試料中のバナジウムの濃度は低値であったが、一部の箇所に偏析が見られた。

(3)中国前漢末期の時代の星雲鏡についてイメージングを行なった結果、ヒ素と鉛に特徴的な分布が見られ、製作技法についての情報を得ることができた。最終年度はこれまで不十分であった状態分析に重点を置いて研究を進め、以下の成果が得られ美術考古学試料の新しい分析法として確立できた。a)古代鉄器の腐食相の状態分析弥生時代のものと推定される腐食した鉄刀について、鉄の2次元状態分析を行った。試料は中心部に反射率の高い金属鉄の地相があり、周辺部は赤褐色のさび相が発達している。またその外縁部には黒色のやや反射率の高い相が帯状に広がっている。それぞれの部分について、鉄の吸収端スペクトルを測定した結果、黒色の酸化相は四三酸化鉄(磁鉄鉱Fe_3O_4)の様な2価と3価の鉄を含むもの、赤褐色の酸化相の部分は酸化第二鉄または針鉄鉱(FeOOH)であることがわかった。さらに選択励起蛍光X線分析により、状態別の2次元イメ-ジを得、鉄器の鉄地相とさび相の分布状態をイメ-ジとしてとらえることができた。このような分析は放射光蛍光X線分析で始めて可能になったものである。b)天目茶碗の油滴の状態分析中国福建省建窯の窯跡からプラマ-教授が1935年に採集した油滴文様のある天目茶碗の破片について研究を行った。本研究は建窯で焼造された曜変天目茶碗の研究の一貫として行ったもので、油滴の実体と成因を明らかにすることを目的とした。油滴の部分は周囲の地の部分に比べて鉄が濃縮しており、鉄のK吸収端スペクトルにより両者の状態を比較した。標準試料との比較により、油滴の部分のスペクトルの吸収端エネルギ-はFe_2O_3に類似し、また地の部分のスペクトルのエネルギ-はFe_3O_4に近く、前者の方が含まれる鉄はより高い酸化的状態にあることがわかった。油滴の成因として焼成時に於ける内部からの気泡の発泡によるという説が有力であるが、今回の結果は内部から酸素などの酸化性のガスが発生し、周囲に比べて鉄が酸化されたと考えると妥当である。
マルチフィジクス強連成解析による昆虫規範型MEMS飛行体の開発

昆虫飛行はマルチフィジクス強連成を巧みに利用して,1mmスケールの微小化を達成している.ゆえに昆虫飛行を規範とすることにより,超小型飛行体の実現が期待されている.しかし,マルチフィジクス強連成の複雑さと加工技術の制限から,1mmスケールの微小化は実現されていない.そこで本研究では,マルチフィジクス強連成解法を開発し,それを用いて,MEMS(Micro Electro-Mechanical System)の2.5次元構造がマルチフィジクス強連成に基づく昆虫飛行機能を持つように設計し,それを実際にMEMSプロセス(リソグラフィとエッチングによる微細加工)で作成することにより,1mmスケールの昆虫規範型MEMS飛行体を実現する.本年度においては,以下の研究成果を得た:(1)流体-構造強連成解析を用いて,翼ピッチング運動が自動化されるように設計した.1mmスケールの翼において,基部の板バネによる共振により,アクチュエータの微小変位80μmが約20倍に増幅されて,ストローク角が72°に達し,昆虫の体重を支えるのに十分な揚力が発生した.共振を伴う流体-構造強連成解析に対して,計算規模が十分かどうか確認した.(2)1mmスケールの羽ばたき機構の中空構造が微小ひずみ大回転することにより,実際の圧電バイモルフ型アクチュエータの出力変位100μmから大きなストローク角90°が得られた.ここで製造可能性を考慮しながら,非線形構造解析により解を探索した.(3)構造-電界強連成解析により検討するため,羽ばたき機構の非線形構造解析と圧電バイモルフの圧電-逆圧電強連成解析の強連成解法を開発した.翼の共振と羽ばたき機構を2重に用いるMEMS飛行体の詳細設計のために,その構造解析を流体構造連成解析に拡張する予定である.(4)(2)に基づき,MEMSプロセスによる試作と静的駆動試験を実施した.研究実績の概要に示すように,当初の計画をおおむね順調に達成して,(1)(3)の研究実績をあげることができ,さらに次年度以降の計画に含まれていた(4)の研究実績をあげることができたから.本研究では,1.階層的分解アプローチに基づく強連成解法を開発し,2.昆虫規範型MEMS飛行体の強連成解析を行い,その詳細設計を行い,3.MEMSプロセスを開発し,それを用いて,昆虫規範型MEMS飛行体を作成し,4.昆虫規範型MEMS飛行体の性能評価を行う.当初の計画以上に進展しているので,この流れを早めるとともに,各項目の質と量を増やして,その研究規模を拡大する.昆虫飛行はマルチフィジクス強連成を巧みに利用して,1mmスケールの微小化を達成している.ゆえに昆虫飛行を規範とすることにより,超小型飛行体の実現が期待されている.しかし,マルチフィジクス強連成の複雑さと加工技術の制限から,1mmスケールの微小化は実現されていない.そこで本研究では,マルチフィジクス強連成解法を開発し,それを用いて,MEMS(Micro Electro-Mechanical System)の2.5次元構造がマルチフィジクス強連成に基づく昆虫飛行機能を持つように設計し,それを実際にMEMSプロセス(リソグラフィとエッチングによる微細加工)で作成することにより,1mmスケールの昆虫規範型MEMS飛行体を実現する.本年度においては,階層的分解アプローチにより,昆虫規範型MEMS飛行体の設計に必要な構造-流体-電界強連成解法を開発した:(1)階層的分解アプローチに従い,構造-流体-電界強連成現象を系統的に計算単位まで分解し,適材適所にブロックガウスザイデル法やプロジェクション解法といった連成アルゴリズムを適用した.(2)計算力学的資源を再利用して,(1)をプログラム化した.(3)計算の大規模化のために,構造計算部分を新たに並列化することで,プロジェクション解法の完全並列化を行った.(4)本強連成解析プログラムを検証するために,代表的な流体構造連成のベンチマーク問題のひとつである流路中に設置された柔軟弁を流体構造電界連成問題に拡張して適用し,妥当な解析結果を得た.さらに次年度行う予定であった以下の研究実績も得た:(5)マイクロトランスミッションの3次元有限要素モデルを作成し,応力解析に基づく寸法最適化を行い,さらにその試作も行った.(6)(5)に基づき,ポリマーマイクロマシニングのためのマスク設計法につながる指針を明らかにすることができた.研究実績の概要に示すように,当初の計画をおおむね順調に達成して,(1)(4)の研究実績をあげることができ,さらに次年度以降の計画に含まれていた(5)と(6)の研究実績をあげることができたから.昆虫飛行はマルチフィジクス強連成を巧みに利用して,1mmスケールの微小化を達成している.ゆえに昆虫飛行を規範とすることにより,超小型飛行体の実現が期待されている.しかし,マルチフィジクス強連成の複雑さと加工技術の制限から,1mmスケールの微小化は実現されていない.そこで本研究では,マルチフィジクス強連成解法を開発し,それを用いて,MEMS(Micro Electro-Mechanical System)の2.5次元構造がマルチフィジクス強連成に基づく昆虫飛行機能を持つように設計し,それを実際にMEMSプロセス(リソグラフィとエッチングによる微細加工)で作成することにより,1mmスケールの昆虫規範型MEMS飛行体を実現する.本年度においては,以下の研究成果を得た:

(1)流体-構造強連成解析を用いて,翼ピッチング運動が自動化されるように設計した.1mmスケールの翼において,基部の板バネによる共振により,アクチュエータの微小変位80μmが約20倍に増幅されて,ストローク角が72°に達し,昆虫の体重を支えるのに十分な揚力が発生した.共振を伴う流体-構造強連成解析に対して,計算規模が十分かどうか確認した.(2)1mmスケールの羽ばたき機構の中空構造が微小ひずみ大回転することにより,実際の圧電バイモルフ型アクチュエータの出力変位100μmから大きなストローク角90°が得られた.ここで製造可能性を考慮しながら,非線形構造解析により解を探索した.(3)構造-電界強連成解析により検討するため,羽ばたき機構の非線形構造解析と圧電バイモルフの圧電-逆圧電強連成解析の強連成解法を開発した.翼の共振と羽ばたき機構を2重に用いるMEMS飛行体の詳細設計のために,その構造解析を流体構造連成解析に拡張する予定である.(4)(2)に基づき,MEMSプロセスによる試作と静的駆動試験を実施した.研究実績の概要に示すように,当初の計画をおおむね順調に達成して,(1)(3)の研究実績をあげることができ,さらに次年度以降の計画に含まれていた(4)の研究実績をあげることができたから.本研究では,1.階層的分解アプローチに基づく強連成解法を開発し,2.昆虫規範型MEMS飛行体の強連成解析を行い,その詳細設計を行い,3.MEMSプロセスを開発し,それを用いて,昆虫規範型MEMS飛行体を作成し,4.昆虫規範型MEMS飛行体の性能評価を行う.当初の計画以上に進展しているので,この流れを早めるとともに,各項目の質と量を増やして,その研究規模を拡大する.本研究では,1.階層的分解アプローチに基づく強連成解法を開発し,2.昆虫規範型MEMS飛行体の強連成解析を行い,その詳細設計を行い,3.MEMSプロセスを開発し,それを用いて,昆虫規範型MEMS飛行体を作成し,4.昆虫規範型MEMS飛行体の性能評価を行う.当初の計画以上に進展しているので,この流れを早めるとともに,各項目の質と量を増やして,その研究規模を拡大する.
遺伝子の細胞核内配置制御機構とその組換えタンパク質高効率産生細胞構築への応用

遺伝子組換えタンパク質を高効率に生産する動物細胞の構築を目指し,核内のゲノム動態やゲノム編集技術について検討した。結果として,脂肪細胞への分化誘導に伴い発現する遺伝子の核内配置は大きく変化しないこと,ヘミメチル化DNA結合タンパク質UHRF1の過剰発現は核の形態異常を導くこと,葉酸欠乏はDNA低メチル化を介してDNA損傷を導くこと,CRISPR/Cas9システムにより,特定の巨大ゲノム領域を欠失できること,ゼブラフィッシュ細胞の核内複製動態の基本データなどを示した。遺伝子発現制御において,核内配置の重要性とともにエピジェネティクな要因が重要であることは明らかで,本年度はエピジェネティック修飾のうちDNAメチル化に関与するタンパク質を例に,発現ベクターの構築,細胞,大腸菌での発現とその性質を検討した。ヘミメチル化DNA結合タンパク質UHRF1について,野生型のmouse UHRF1 (mUhrf1)とhuman UHRF1 (hUHRF1)に加え,アミノ酸置換体のそれぞれのcDNAを,HaloTagコード配列の3'側に挿入した発現ベクターをそれぞれ構築した。それぞれの発現ベクターをm5S細胞に導入後UHRF1を発現させ,核内局在を確認した結果,野生型ではS期中期にセントロメア周辺ヘテロクロマチン領域に局在したが,低メチル化処理細胞ではどの時期でも局在し,低メチル化によるこの領域の爆発的転写を支持するクロマチン構造の変化をとらえることができた。さらに染色体の安定性を調べるために,UHRF1-HaloTag融合タンパク質発現ベクター(pFN21A UHRF1-HT)をベースに,さらに転写活性の弱いプロモーター下でUHRF1-HaloTag融合タンパク質を発現できるベクター(pFN22K UHRF1-HT)を構築して発現させ,UHRF1が発現している細胞では核の形態異常が観察され,発現レベルが高い程異常な核を持つ細胞の割合が高くなることを明らかにした。一方で,これらを大腸菌で発現できるプロモーターを持つpFN18A HaloTag T7FlexiベクターにcDNAを乗せ換え,構築したベクターで大腸菌をトランスフォーメーションし,UHRF1の発現誘導を行って,精製したUHRF1を用いてヘミメチル化DNAとの結合能を比較し,変異体との結合能の明らかな差を確認でき,機能を持つタンパク質が発現できることを示した。動物細胞によるタンパク生産効率高揚の本研究の着目点は,導入遺伝子をユークロマチン領域に配置させ,転写が盛んな領域に遺伝子を組込むことである。転写不活性なヘテロクロマチン領域をユークロマチン化することで遺伝子発現が爆発的に上昇することをセントロメア周辺ヘテロクロマチン領域について見出し,核全体のユークロマチン化を達成できれば高価で複雑な遺伝子配置制御系を用いなくても高発現細胞を容易に取得できると考えた。一方,ゲノム領域のヘテロクロマチン化にはDNAの高メチル化が鍵であり,逆にエピジェネティック制御で低メチル化状態にできれば通常の遺伝子導入法でも遺伝子発現効率の高い細胞の効率的取得が期待できる。まず,細胞をアザシチジン(5azadC)処理するとヘテロクロマチン領域のユークロマチン化が起こることを各種細胞で確認した。ヘテロクロマチンのユークロマチン化は5azadC処理後二回のS期を経てエピジェネティック修飾がユークロマチン型に変化して起こり,転写活性化されるゲノム領域にはヒストンH3.3が先立って集積することを見出している。一方で,低メチル化処理後二回のS期を経てDNAが損傷することを見出した。これはDNAメチル化維持酵素のノックダウンでも同様であり,DNA低メチル化がDNA損傷の原因であるという重要な知見を確認した。遺伝子発現の配置制御による転写効率の高揚という本研究の主課題に加えてエピジェネティック制御異常によるDNA損傷の誘導という課題はメチル化基質の供給不足がDNA損傷を誘導するという概念を導くため,本研究の副次的成果としてこの機構についても研究を進めた。その結果,DNA低メチル化処理後1回目のS期で生じたヘミメチル化DNAを認識するタンパク質UHRF1が結合したままゲノムから解離できないことが損傷の原因であること,また葉酸欠乏でもDNA損傷が誘導されることを見出した。◎遺伝子発現と核内配置の関係について:遺伝子が発現することで核内配置を変えるかどうかを脂肪細胞の分化に伴って発現が誘導される遺伝子について解析した。すなわち,脂肪前駆細胞マウス3T3-L1細胞が脂肪細胞に分化する過程で発現が上昇する遺伝子をモデルとした。分化誘導過程で経時的に細胞からRNAを抽出し、RT-PCRによりPPAR-γ、Adiponectin遺伝子の発現状態を解析した結果,各遺伝子とも発現が上昇していた。次に、これらの遺伝子の転写活性と核内配置の因果関係を明らかにするために、DNA-FISHを行った結果、Adiponectin、PPAR-γ遺伝子領域ともに核内配置に変化は見られなかった。また、ハウスキーピング遺伝子であるγ-actinは、分化の過程で常に核の内側に局在する傾向にある一方で、Adiponectin、PPAR-γ両遺伝子は、決まった局在性を示すことは無かった。◎遺伝子発現における核マトリックスの役割:

ストレス誘導できるHSP70遺伝子について転写誘導の前後におけるHSP70遺伝子と核マトリックスの相互作用について検討した。すなわち,HSP70遺伝子ゲノム中に存在するMAR配列やその他の部分の転写誘導前後における核マトリックス画分への局在の有無を詳細に検討した。その結果,HSP70遺伝子ゲノムのMAR以外の推定ループ構造部分は転写誘導開始直後から,核マトリックス画分に存在するようになり,遺伝子発現における核マトリックスの重要性を支持する結果となった。◎核内の空間配置を制御できる因子の検索と配置技術の開発:核内の空間配置を制御する技術の1つとして核膜に配置する方法を検討している。核膜に局在するラミンとGFPさらにはLacIとの融合タンパク質を作成し, LacIのLacオペレーター配列への結合を介して間接的に核膜に配置することを試みるが進んでいない。動物細胞によるタンパク生産効率を上げるための本研究の着目点は,導入遺伝子をユークロマチン領域に配置させ,ユークロマチン領域の中でも転写が盛んな領域に遺伝子を組込むことである。一方,ゲノム領域のヘテロクロマチン化にはDNAの高メチル化が鍵であり,逆にエピジェネティック制御で低メチル化状態にできれば通常の遺伝子導入法でも遺伝子発現効率の高い細胞の効率的取得が期待できる。この研究過程でDNA低メチル化がDNA損傷の原因であるという重要な知見を確認し,遺伝子発現の配置制御による転写効率の高揚という本研究の主課題に加えてエピジェネティック制御異常によるDNA損傷の誘導という課題を本研究の副次的成果として研究を進めた。また,新たにゼブラフィッシュの系の導入を考え,細胞レベルの情報など,基本データを集めた。まず,特定のゲノム領域を操作する方法としてゲノムの特定配列を認識して欠失させることができるCRISPR/Cas9システムの導入を検討した。ES細胞において高い効率で数kbから500kbの領域を特異的に欠失させることに成功した。DNA低メチル化に伴うDNA損傷の誘導については,新たに葉酸欠乏条件下で低メチル化が起こっていることをバイサルファイト法で確認し,「栄養因子の欠乏→ゲノムDNAの低メチル化→DNA損傷の誘導」という「食品栄養成分とエピジェネティクス」という研究領域の創出につながる基盤データを得ることができた。ゼブラフィッシュ由来培養細胞を用いて,細胞周期や核内複製動態と染色体上の複製部位の関係,複製フォーク速度を蛍光顕微鏡下に可視化・イメージングした結果,複製部位の核内配置は,哺乳類細胞に類似した5つのパターン分け(IV)ができるが,核全体に均一に観察されるパターンIIが60%以上という特徴を示した。複製フォークの進行速度はヒト細胞と同等であった。分子細胞生物学核内の空間配置の制御については,発現べクターの構築や細胞への遺伝子導入,遺伝子発現の検出など,予定通り進行していないものの,当初の計画とは異なるが,遺伝子発現制御におけるエピジェネティクス制御
特発性肺線維症・肺癌に共通する機能性RNA分子ネットワークの探索

間質性肺炎の中で、特発性肺線維症は最も頻度の高い疾患である。しかしながら、現在においても、その原因の詳細は不明である。肺胞上皮細胞に生じた様々な障害に対する過剰な修復により、肺の異常な線維化が亢進し、肺のコンプライアンス低下のために拘束性障害が起こるとされている。肺の線維化の課程において、Transforming growth factor betaの刺激により、肺上皮細胞は、上皮間葉転換を誘発し、線維芽細胞や筋線維芽細胞への形質転換する事が知られている。特発性肺線維症の予後は極めて不良であり、診断時からの平均余命は5年とされている。予後不良の原因の一つが、肺癌の合併である。事実、特発性肺線維症は肺癌の合併率が高い事が報告されている。これらの事実は、肺線維症と肺癌には、共通する分子メカニズムが存在する事を示唆している。ヒトゲノム中には蛋白をコードしないRNA分子が多数存在し、実際に転写されている事が判明した。その中で、僅か19塩基22塩基の1本鎖RNA分子は、マイクロRNAと呼ばれる。1種類のマイクロRNAは、配列依存的に数百数千種の機能性RNAの発現を制御している事から、細胞内ではマイクロRNA-機能性RNAの極めて複雑な分子ネットワークが形成されている。マイクロRNAの発現異常は、細胞内の機能性RNA分子ネットワークの破綻を引き起こし、ヒト疾患の発症・進展に関わる。実際、癌を含むヒト疾患において、マイクロRNAの発現異常が相次いで報告されている。本研究では、特発性肺線維症および肺癌組織において、共通して発現異常を認めるマイクロRNA(miR-29-family)に着目し、その機能解析と、マイクロRNAが制御する分子ネットワークの探索を行った。両疾患に関与するマイクロRNAの起点としたネットワークの解析は、肺癌合併特発性肺線維症の分子メカニズムの解明に繋がると考える。呼吸器疾患の臨床において、肺癌合併特発性肺線維症の予後は極めて不良であり、現在においても、本疾患の有効な治療法は存在しない。肺線維症の経過観察中に肺癌を発症する症例が、少なからず存在する事から、両疾患に共通する分子経路が存在する事が示唆される。肺線維症を合併した肺癌の治療は限定されており、早期発見、新規治療開発に繋がる両者の病態解明が望まれている。我々は肺癌の癌抑制性マイクロRNAの中に細胞外マトリックスに関連する遺伝子群を制御するマイクロRNAがあることを明らかにした。さらにこれらの癌抑制性マイクロRNAは肺線維症においても発現が抑制されており、線維化から癌化への移行に関わる病態解明の糸口となりうるものと考えた。研究では、特発性肺線維症・肺癌臨床検体を用いて、マイクロRNAの発現解析及び疾患特異的に活性化している分子経路を検証した。また、マイクロRNA導入細胞の網羅的な発現解析、データベースの活用、臨床検体の発現情報を組み合わせる事で、マイクロRNAが制御する蛋白コード遺伝子、分子経路の探索を行った。肺癌合併肺線維症の臨床検体において、miR-29の発現が抑制されていることを明らかにした。miR-29は癌抑制性マイクロRNAであり、細胞外マトリックス分子であるLOXL2やSERPINH2を抑制しており、肺癌、肺線維症の双方の病態において関連している可能性を見出した。今後は肺癌における癌抑制性マイクロRNAと肺癌合併肺線維症におけるマイクロRNA発現プロファイルを元に、特発性肺線維症・肺癌に共通する機能性RNAを探索し、両者の病態に関わる分子経路を明らかにするべく研究を継続している。肺癌合併肺線維症の臨床検体の収集に難渋している。今後もより積極的な症例集積を行い、次世代シークエンサーを用いて、「全ゲノム・肺癌合併特発性肺線維症マイクロRNA発現プロファイル」を作成することを目標とする。

本研究では、特発性肺線維症および肺癌組織において、共通して発現異常を認めるマイクロRNA(miR-29-family)に着目し、その機能解析と、マイクロRNAが制御する分子ネットワークの探索を行った。両疾患に関与するマイクロRNAの起点としたネットワークの解析は、肺癌合併特発性肺線維症の分子メカニズムの解明に繋がると考える。肺癌合併肺線維症の組織検体による次世代シーケンサーによる解析から、これまで知られていないマイクロRNAが探索できる可能性が高い。肺癌、肺線維病変部位で発現変動するマイクロRNAについて、機能解析を施行して、「疾患抑制型マイクロRNA」「疾患促進型マイクロRNA」に機能分類する。マイクロRNA発現プロファイルから、肺癌組織・肺線維症組織で発現の亢進・抑制が認められたマイクロRNAに着目し、これらマイクロRNAを順次細胞株に核酸導入して、細胞の増殖・遊走・浸潤・アポトーシス誘導能を指標とした機能解析を施行する。また、これらマイクロRNAの発現機構について、TGF-βによる刺激が影響しているか、検討を行う。マイクロRNAを起点とした機能性RNAネットワークの探索から、本疾患に特異的な分子経路を見出す。本疾患に特異的な分子標的を見出し、in vitro/in vivoの解析から、治療戦略について検討する。最近の研究から、ECMの異常な蓄積は線維化の促進のみならず、EMT(上皮間葉転移)や癌細胞の転移に重要な役割を担っている事が明らかとなってきており、本疾患の治療の標的である。そこで、機能性RNAネットワークの中から、ECM、コラーゲン合成経路、インテグリン・シグナルに着目し、研究を進める事とする。試薬、消耗品について他の研究と共通して使用していたため。今後、機能解析を含めた試薬、消耗品の購入、解析のために使用する予定。
確率制御問題の計算量とアルゴリズムに関する理論研究と数理ファイナンスへの応用

数理ファイナンスでのアメリカンオプションに対する最適権利行使問題が確率制御問題での最適停止問題として扱われることはよく知られており、とりわけ、(ジャンプを持つ)幾何学的ブラウン運動に対する最適停止問題は活発に研究されている。本研究では、特に、離散時間の確率過程に対する最適停止問題を考え、通常の最適停止問題のいろいろな変形した問題を定式化し、その解法についての研究を行った。1パラメータ(1次元時間変数)確率過程に対する最適停止問題はよく知られているが、ここでは2パラメータ(2次元時間変数)確率過程に対する最適停止問題を考え、そのいろいろな変形した問題について考察を行った。(1) 2パラメータ多変量最適停止問題について2パラメータ確率過程を成分とするN次元確率ベクトルの関数を利得関数とする最適停止問題を定式化し、最適停止時刻の存在の証明を与え、最適停止時刻の構成法を与えた。また、Chow,Y.S.らによって導入されたmonotone ruleの下での最適停止時刻についての考察を行った。さらに、(2) 2パラメータ協力型最適停止問題について2パラメータ確率過程を成分とするN次元確率ベクトルの関数を利得関数とする最適停止問題であるが、関数が内積である場合((1)の特別な場合)について、最適停止時刻の存在の証明、構成法についての考察、具体的な確率分布に従う場合についての考察を行った。(3) Hilbert空間値2パラメータ確率過程に対する最適停止問題についてHilbert空間に値をとる2パラメータ確率過程に対する最適停止問題に対する最適停止時刻の存在の証明を与えた。有限個の確率空間、状態空間等の直積で定義される確率空間、状態空間で定義されるマルコフ決定過程を取り上げた。定常、離散時間、割引型、無限期間、一般の状態空間、政策をマルコフ政策に制限した場合について最適値関数の計算量についての研究を行った。マルコフ決定過程の一般理論より、ある仮定の下では、最適値関数はベルマン方程式を満たし、又、逐次近似法により構成されることはよく知られたことである。本研究では、推移確率、利得関数、割引率、精度の4項目の組をインスタンス、インスタンスのクラスを問題、現時刻の確率過程の状態、次の時刻の確率過程の状態、アクションの3項目の組を質問とする計算モデルを設定した。そして、逐次近似法と関連させ、精度を決めたとき、supノルムによって評価したとき最適値関数との誤差がその精度以下となる区分的に定数となる関数が存在する場合に、そのアルゴリズムは正しいと定義し、また、オラクルとそのアルゴリズムによって実行される演算数の和でアルゴリズムの計算量を定義した。そこで、推移確率と利得関数がリプシッツ条件を満たし消失状態を持たない場合、マルコフ決定過程でよく知られているmixing条件を満たす場合、推移確率と利得関数がリプシッツ条件とmixing条件を満たし、消失状態を持つ場合に分け、それぞれの条件下で、その問題に対する正しいすべてのアルゴリズムに対して質問の最小値のオーダー評価(上界と下界)を得た。また、ファイナンスでのアメリカンオプションに対する最適権利行使問題が、確率制御問題での最適停止問題として扱われることはよく知られたことであるが、確率過程が離散時間の場合について、確率空間の行列表現を用いることによって最適停止問題を線形計画問題に帰着させて計算量の評価について考察した。
自己抗体が精神疾患に与える影響の検討

精神症状が先行する又は精神症状のみを認める抗NMDA受容体脳炎が多く報告され、精神疾患の病態に抗NMDA受容体抗体の関与が示唆される。平成28-30年度、当院または他院を受診した統合失調症、気分障害、てんかん、広汎性発達障害患者などの患者190例の髄液、血清または両方で、HEK297T細胞を用いcell based assay法で抗体検査を行った。統合失調症、双極性障害が当初疑われた患者7例で抗体陽性となった。これら患者は、精神疾患として向精神薬にて当初加療されたが無効で、経過中に脳波異常、髄液の軽度細胞、蛋白上昇、構音障害を認め、抗体陽性にて、抗NMDA受容体抗体脳炎と診断変更され、免疫療法(ステロイドパルス療法、血漿交換療法、免疫グロブリン大量療法、リツキシマブによる抗腫瘍療法)にて、完全又は部分寛解を認めた。精神症状をBPRSにて評価し、抗体価と精神症状に相関を認めた。気分障害と当初診断された62名の患者で、抗体陽性4例と陰性58例の臨床的な特徴を比較したところ、視覚異常、聴覚過敏などの視覚異常や、脳波での徐波、カタトニア、構音障害などが鑑別の指標となる可能性が示唆された。統合失調症患者の中枢神経系の異常は、発症以前しかも胎生期の神経発達障害にあるという仮説があり、神経発達障害仮説と呼ばれる。神経の形態変化は、神経遊走、神経突起、シナプス、樹状突起の変化がある。我々は基礎的検討で、ラット大脳皮質プライマリーカルチャーニューロンに、患者の抗NMDA受容体抗体で処置し、神経突起伸長、中心体消失遅延(神経遊走障害)、樹状突起形成が障害され、抗体除去しても不可逆であった。抗NMDA受容体抗体脳炎は抗体除去により予後良好であるが時に重篤となる。精神疾患や妊娠期の胎児にの場合、抗体に長期神経細胞が暴露され神経発達に影響を及ぼす可能性があり、精神疾患の免疫療法の可能性が示唆された。本年度は予定されていた、臨床的検討と基礎的検討をそれぞれ行った。臨床的検討では、当院、他院に受診した精神疾患患者のうち、研究に同意され、希望される患者さんに、抗NMDAR抗体検査を行った。統合失調症患者22例、広汎性発達障害2例、気分障害2例、その他8例の計34例の患者が含まれるが、抗体陽性患者は含まれていなかった。LennoxらのLancet Psychiatryでの2017年の報告では228例の初発統合失調症患者のうち7例(3%)で陽性との報告がみられている。その他の報告では1%程度との報告もみられている。今回、我々が検査した統合失調症患者22例のうち初発もしくは再燃で、症状が激しい時期の検体は、3例のみであることが、陽性患者が今回おられなかった理由と考えている。倫理委員会で、他院より検体を検査することができるようにプロトコールの修正を行ったので、引き続き、患者さんのリクルートを他院にも広げていくことができるようになった。症例数を増やしていくことで、精神疾患の発症や症状の経過に、抗NMDAR抗体の与える影響の検討を、引き続き続けていく。基礎実験は、ラット大脳皮質初代培養細胞に患者抗NMDAR抗体を処置したところ、神経突起の伸長が障害された。また、神経遊走の際に必要となる中心体は神経の発達に応じて、プライマリーカルチャーニューロンでは消失していく。中心体の消失が患者抗NMDAR抗体を処置したところ遅延した。このことから、抗NMDAR抗体は神経発達に影響を与えることが推測された。こちらもさらに検討を進めていく。陽性患者は発見できなかったものの、検査については安定して順調に結果が出ており、また、検体数も順調に増えていっており、このままの研究を継続していくことで、臨床的検討は順調に進んでいくと思われる。基礎的検討も、プライマリーカルチャーニューロンの結果は順調かつ予想通りでており、手技も確立されているため、このままの研究を続けていく。本年度も予定されていた、臨床的検討と基礎的検討をそれぞれ行った。臨床的検討では、症例数は疾患の認知度の普及と検査技術の安定により、昨年の34例より大幅に増え、当院又は共同研究施設を受診した112名(精神科診断:統合失調症圏38例、気分障害圏44例、てんかん7例、その他23例)に検査を行った。初診時の精神科診断は、統合失調症圏1例、気分障害圏2例、解離性障害1例で抗NMDAR抗体陽性(髄液)であった。4例とも向精神病薬治療は無効であった。抗炎症療法、抗免疫療法を施行し、3例で抗NMDAR抗体は陰性化し、完全または部分寛解した。卵巣腫瘍を伴う1例は、腫瘍摘出、抗炎症療法、抗免疫療法を行ったが、症状は改善せず、抗体価も強陽性であった。陽性例に対しては、抗体価の定量も今年度より合わせて行っている。Gresa-Arribasら(2014)によると、神経症状の重症度と抗体価に正の相関があることが報告されているが、精神症状と抗体価にも正の相関があることが推測された。検体数をさらに増やし、精神疾患の発症や症状の経過に、抗NMDAR抗体の与える影響の検討を、引き続き続けていく。また、cell based assayのみで確認できていた反応をウエスタンブロットにて行うことで抗原抗体反応の特異性をさらに確認することができた。

基礎実験は、ラット大脳皮質初代培養細胞に患者抗NMDAR抗体を処置したところ、昨年度報告した、神経突起の伸長の障害と、神経遊走の際に必要となる中心体の消退の遅延に加え、樹状突起の枝分かれの減少、太さの減少が観察された。神経の発達の初期だけでなく中期においても、抗NMDAR抗体は神経発達に影響を与えることが推測された。こちらは最終年にはシナプス形成に与える影響を調べ、in vivo動物モデルへの検討を進めていく。検体数も疾患の認知度が、抗NMDAR脳炎について扱った映画「8年越しの花嫁」の公開やテレビ報道により上がっていることもあり、順調に増えている。そのためもあり、今年度は、陽性患者を4例発見することができ、検査技術の安定により、抗体価の定量も合わせて行うことができるようになった。抗体の陰転化と治療予後の関係を示すことで、抗炎症療法、免疫療法の根拠を固めることができた。過去に収集したサンプルも同意を得て、検査をすることも始めており、このままの研究を継続していくことで、臨床的検討は順調に進んでいくと思われる。基礎的検討も、プライマリーカルチャーニューロンの結果は順調かつ予想通りでており、手技も確立されているため、このままの研究を続けていく。精神症状が先行する又は精神症状のみを認める抗NMDA受容体脳炎が多く報告され、精神疾患の病態に抗NMDA受容体抗体の関与が示唆される。平成28-30年度、当院または他院を受診した統合失調症、気分障害、てんかん、広汎性発達障害患者などの患者190例の髄液、血清または両方で、HEK297T細胞を用いcell based assay法で抗体検査を行った。統合失調症、双極性障害が当初疑われた患者7例で抗体陽性となった。これら患者は、精神疾患として向精神薬にて当初加療されたが無効で、経過中に脳波異常、髄液の軽度細胞、蛋白上昇、構音障害を認め、抗体陽性にて、抗NMDA受容体抗体脳炎と診断変更され、免疫療法(ステロイドパルス療法、血漿交換療法、免疫グロブリン大量療法、リツキシマブによる抗腫瘍療法)にて、完全又は部分寛解を認めた。精神症状をBPRSにて評価し、抗体価と精神症状に相関を認めた。気分障害と当初診断された62名の患者で、抗体陽性4例と陰性58例の臨床的な特徴を比較したところ、視覚異常、聴覚過敏などの視覚異常や、脳波での徐波、カタトニア、構音障害などが鑑別の指標となる可能性が示唆された。統合失調症患者の中枢神経系の異常は、発症以前しかも胎生期の神経発達障害にあるという仮説があり、神経発達障害仮説と呼ばれる。神経の形態変化は、神経遊走、神経突起、シナプス、樹状突起の変化がある。我々は基礎的検討で、ラット大脳皮質プライマリーカルチャーニューロンに、患者の抗NMDA受容体抗体で処置し、神経突起伸長、中心体消失遅延(神経遊走障害)、樹状突起形成が障害され、抗体除去しても不可逆であった。抗NMDA受容体抗体脳炎は抗体除去により予後良好であるが時に重篤となる。精神疾患や妊娠期の胎児にの場合、抗体に長期神経細胞が暴露され神経発達に影響を及ぼす可能性があり、精神疾患の免疫療法の可能性が示唆された。臨床的検討については、ホームページなどを使用し、宣伝していくことで、検体数を増やしていくことで、陽性患者を発見していくことをつづけていく。また、修士の大学院生が加わることとなったので、検査の回数も増やすことができるようになる。
土壌―植物系における超微量元素吸収のダイナミクス

本研究では、超微量元素および微量元素の吸収要因を明らかにする目的で、これらの元素の存在形態と栽培した植物中の濃度について調査・検討を行った。植物中の元素濃度は、測定元素の殆どでチンゲンサイが水稲よりも高く、特に希土類元素では10倍以上となった。また、植物体の元素濃度と土壌中の濃度比(移行係数)が高い元素は、Mo, Rb, Cd, Sr, Tl, Cs,低い元素は希土類元素やTh, U, Zr, Hfなどであることが分かった。植物中の元素濃度を支配する要因としては、全含量よりも交換性成分のほうが強く作用する元素が多いことが分かった(Rb, Y, Nb, Ba,希土類元素, U)。しかし、元素吸収は、形態別の元素濃度だけでは説明がつかない場合が殆どであり、他元素との相互作用や実際に土壌溶液に溶けた成分を考慮する必要があると考えられた。本年度は、全国各地から採取した土壌についてその超微量元素含量(HNO_3/HClO_4/HF分解)とその存在形態について検討を行った。供試した土壌は、土壌のタイプが異なるが元素組成が比較的似ている宮城県からの5土壌と、元素組成が大きく異なると予想された全国各地からの6土壌の合計11土壌である。検討した存在形態は、酸可溶(0.1NHNO_3可溶)成分および交換態(1M NH_4NO_3抽出)成分である。測定には高分解能ICP-MSを用いた。各元素の土壌全量対する酸可溶割合を検討したところ、酸可溶割合が高い元素は、Y,La,Ce,Pr,Nd,Sm,Gd,Tb,Dy,Ho,Er,Tm,Yb,Luの希土類元素、およびCd,Uであり、これらは概ね10%程度が酸可溶であった。逆に低い元素は、Zr,Nb,Ag,Thなどであり、これらの可溶割合は1%かそれ以下であった。各元素の土壌全量に対する交換態の割合を検討したところ、交換態の割合が高い元素は、SrとBaで10%程度が交換態であった。また、Rb,Cd,Cd,Tlでその割合は1%5%程度であり、アルカリ金属およびアルカリ土類金属は交換態の割合が高かった。NbおよびThは交換態の割合が低く、0.001%以下であった。
中枢ヒスタミン神経系を中心としたレプチンによる摂食抑制機構の解明

味覚末梢神経である鼓索神経を味覚によって刺激したときのヒスタミン遊離について,麻酔下のマイクロダイアリシス法を用いて検討した.その結果,視床下部のヒスタミンは味質特異的というよりはむしろ鼓索神経の電気生理学的な興奮に比例して遊離されることを見いだし,研究成果をBrain Research誌(vol.964,51-55)に発表した.また無麻酔・非拘束のラットを用いたマイクロダイアリシス法によって摂食行動中にはヒスタミン遊離が上昇することも確認し,研究成果については現在投稿準備中である.これらの研究により,ヒスタミン神経系は摂食・味覚の両者の情報伝達を担っており,脳内においてこれらの情報を統合し行動へと反映させている可能性が示された.また,摂食を増加させるとともに覚醒を促すペプチドであるオレキシン投与によりヒスタミン遊離が上昇するという前年度の成果(Neuroscience Letters誌,323,89-92)を踏まえ,ナルコレプシー治療薬であるモダフィニルがヒスタミン遊離に及ぼす影響について検討した.その結果,モダフィニル腹腔内・脳室内投与によって視床下部のヒスタミン遊離は上昇するが,ヒスタミン神経の細胞体にモダフィニルを直接投与してもヒスタミン遊離には影響がないことを示し,成果をNeuroscienceLetters誌に発表した(vol.339,143-146).これら一連の研究により,ヒスタミン神経系は摂食及び睡眠覚醒といった生理機能の調節の一部を担っていることが明らかとなった.味覚末梢神経である鼓索神経を味覚によって刺激したときのヒスタミン遊離について,麻酔下のマイクロダイアリシス法を用いて検討した.その結果,視床下部のヒスタミンは味質特異的というよりはむしろ鼓索神経の電気生理学的な興奮に比例して遊離されることを見いだし,研究成果をBrain Research誌(vol.964,51-55)に発表した.また無麻酔・非拘束のラットを用いたマイクロダイアリシス法によって摂食行動中にはヒスタミン遊離が上昇することも確認し,研究成果については現在投稿準備中である.これらの研究により,ヒスタミン神経系は摂食・味覚の両者の情報伝達を担っており,脳内においてこれらの情報を統合し行動へと反映させている可能性が示された.また,摂食を増加させるとともに覚醒を促すペプチドであるオレキシン投与によりヒスタミン遊離が上昇するという前年度の成果(Neuroscience Letters誌,323,89-92)を踏まえ,ナルコレプシー治療薬であるモダフィニルがヒスタミン遊離に及ぼす影響について検討した.その結果,モダフィニル腹腔内・脳室内投与によって視床下部のヒスタミン遊離は上昇するが,ヒスタミン神経の細胞体にモダフィニルを直接投与してもヒスタミン遊離には影響がないことを示し,成果をNeuroscienceLetters誌に発表した(vol.339,143-146).これら一連の研究により,ヒスタミン神経系は摂食及び睡眠覚醒といった生理機能の調節の一部を担っていることが明らかとなった.
南戯「劉希必金釵記」の文字学・方言学などによる総合的研究

中国明代宣徳年間抄本「金釵記」は、二つの特徴を持っている。一つは写本の字体が、当時の戯曲小説などの俗文学の出版された刊本の字体に類似していることである。そこで、抄本の原本は福建の建安で出版された元刊本と推測した。二つ目は、通仮字の音声的特徴で、そこから原本「金釵記」は、江西省の吉安で書写されたと推測した。研究の初年度として、中国の現地調査を4か所で行った。これらは、元明時代の戯曲・小説の出版や、抄本「劉希必金釵記」と深く関係している場所である。研究対象の本を見ただけでは分からない、現地の地勢や方言などを実際に見聞して、研究に役立てようという目的である。2009年6月13日から、19日まで広東省の潮州市と、江西省の吉安市に行って調査してきた。広東省の潮州は、抄本「劉希必金釵記」が発掘された地点で、従来報告書は存在したがよくわからなかったので、実際に現地に行ってみて、発掘地点を確認した。しかし、そこがどのような場所であったかということが分かって、非常に収穫となった。その後、江西省の吉安市に向かった。ここは、抄本「劉希必金釵記」が発掘されたときに、同時に「吉安路」と書かれた銅鏡が出土しているからである。様々なことが分かったが、一番大きな成果は、広東省潮州市と江西省吉安市の位置関係を自分で移動して見て、理解することができたことであった。また同じ2009年10月30日から11月7日にかけて、福建省建陽市と江西省弋陽県を調査した。福建省建陽は、元・明時代の戯曲小説の出版の中心地であるが、なかなか交通が不便な所である。建陽では出版した書籍をどのようにして出荷するのか、大消費地である江南地方まで運ぶのか、いろいろな問題が関連していた。当時の出版地の麻沙鎮・書坊鎮を回り、また建陽市から西側の邵武市にぬける道などを通った。書籍を出荷するルートをある程度たどることができて、理解を深めることができた。その後、江西省弋陽県に向かった。明代の初期に崑曲と並んで南戯を代表する弋陽腔が起こった地点である。現地弋陽県の文化局と連絡を取ることができ、現地の古い舞台・戯台のうち、童家台・湾里郷西李村李氏宗祠戯台・芳〓戯台の3か所を見せてもらった。一番古い湾里郷西李村李氏宗祠戯台は、明の宣徳年間にできたものということであった。中国の近世の戯曲小説中の異体字研究の基礎資料として、「『宋元以来俗字譜』補正(2)一『全宋平話三国志』-」(「明治大学教養論集」458号)、「中国近世戯曲小説中の異体字研究(3)一『劉知遠諸宮調』-」(「明治大学教養論集」467号)、「中国近世戯曲小説中の異体字研究(4)-『大唐三蔵取経記』-」(「人文科学論集」57輯)を作成した。これら三本の論文は、『宋元以来俗宇譜』を補正して新しく近世の戯曲小説の作品ごとに異体字を集めて索引を作るという本科研費の計画に即した基礎的成果である。取り上げた『全宋平話三国志』、『劉知遠諸宮調』、『大唐三蔵取経記』などの作品は、南宋から元にかけての作品で、中国の近世文学史上最も重要な初期の作品である。これらの異体字資料をもとに写本である南戯「劉希必金銀記」がどのように成立したかを研究する重要な基礎研究である。この作業を継続して、「中国近世戯曲小説異体字字形字典」を作成するのが、一つの目的である。また私は、南戯の成立の問題を解明する重要な一環として、南戯「劉希必金釵記」を研究している。そのような意味で、明代の初期に江西省・安徽省などの地域で成立したとされる「弋陽腔」(中国の地方演劇の劇種)の歴史は、重要な意味を持つ。この地方戯が、どのように移動したのかということも、南戯「劉希必金釵記」の成立解明にとって重要である。この弋陽腔の後身として「青陽腔」というものがあり、偶然であるが「青陽腔学術研究会」が江西省九江市九江学院大学で開かれたので、参加して論文を発表した。この時現地で「青陽腔」の上演を見学することができ、非常に参考になった。また、現地の研究者と交流して、日本では得難い資料を手にすることができた。

このような成果をもとに、「劉知遠諸宮調と戯曲白兎記と安徽省の青陽腔白兎記の可能性」(「教養論集」462号)を執筆した。初期の弋陽腔の中には、琵琶記などの作品と並んで重要な作品に「白兎記」がある。これは、この白兎記に関して、論じたものである。本年度に行った主な研究活動は以下のとおりである。(1)論文『明代宣徳年間抄本『劉希必金釵記』の流伝について(「中国の演劇・音楽の域内・域外における発展・伝播に関する現地調査と文献研究」第2章)』は、本科研費の目的である宣徳抄本の流伝について、研究結果を出したものである。地理的・歴史的・文献学・方言学などの総合的な観点から、宣徳抄本を流伝について調べた。「金釵記」は、福建の建安で出版された元刊本、その後江西に移り、〓江を南下し、中流域の吉安で書写された。その抄本が、広東との境南嶺山脈を越えて、潮州に来た。最後に潮州の西の隴階山のふもとで副葬品として、埋葬された。このように結論した。(2)学会発表論文「劉文龍(金釵記)与儺戯」は、中国重慶市で開催された国際儺戯学会での発表である。金釵記(劉文龍)は、安徽省池州市では、儺戯の重要な演目として今でも上演されている。本発表は、儺戯と金釵記との関係について考察したものである。(3)論文「重慶市酉陽県の土家族の陽戯について」は、重慶市酉陽県で開催された陽戯に関して、調査した報告である。金釵記が儺戯と関係することとも関連するが、もともと中国演劇の発生の問題として、シャーマニズム柳との関係を、考究していた。重慶市で従来知られていなかった「陽戯」という劇種の儺戯を見ることができたので、この劇種について報告した。(4)論文「汲古閣本白兎記の、曲牌ごとの曲辞異文の所在目録」は、「近世戯曲小説中の異体字研究」の一環で、成化本の白兎記の字を確定するために、それぞれの曲辞ごとに、どのような版に、同じ曲辞があるか目録を作成したものである。成化本の白兎記の異体字を調べるにあったって、どうしても必要な基礎作業である。
超音波診断装置を用いた唾液腺腫瘍の3D血流診断法の確立

唾液腺腫瘍の臨床診断は難しく、診断精度の向上が求められている。我々は、安価で侵襲のない診断方法である、超音波検査の精度向上を目指している。本研究では、超音波診断装置を用いて唾液腺腫瘍の血流を3Dで評価する。まずは3D血流評価の最適条件の検証と手技の確立を行う。そして従来のモードと低流速モードを用いて3D再構築し、血流の分布および流速と病理組織構造との関連性を解明する。さらに各腫瘍の3D血流の特徴を明らかにしパターン化を行い、Bモードと3D血流を合わせた診断アルゴリズムを確立する。