hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
マッピングを活用した計測推定制御支援システム創出に関する研究

本研究は,先に開発した声道音響管マッピングインタフェースが,多次元のパラメータを効率的に制御したり,音声信号から声道形状を逆推定できたりする特長を発想の原点として,その深化と共に,マップに基づく効率的なモノの制御,計測できる出力信号からの原因としての入力信号(状態)の推定などへの応用を目指すものである。本年度は,子音を含む音声からのマッピングインタフェースを用いた声道形状逆推定の研究を継続し,子音の種類や被験者を増やし,マップ上の軌跡や声道形状について検討比較した。同じ検査語でも,被験者によりマップ上の軌跡の推移経路が異なり,例えば口唇部の開きの違いなどが観察された。また,子音/g/の発話に向けた調音動作について推定された声道形状では,舌背部分に相当する位置に声道断面積の減少が観察され,先行研究での結果に合致することが確認されている。すなわち,マッピングインタフェースが理にかなった推定結果を出力し,口腔内の形状把握支援に有効であることが確認されている。母音に対する声道断面積の推定結果の妥当性については,文献による報告との比較を継続的に進めているが,これらと合わせ,本インタフェースの汎用性が示唆される結果を得ている。その他,Virtual Reality環境でのコントローラーとしての視線インタフェース開発,高倍率ズーム対応のネットワークカメラが利用できるAugmented Reality環境の構築と長距離マーカ利用,OpenCVを用いた複数のアルゴリズムによる頑健な物体追跡の実現など,空間把握用各種マップ構築活用に向けた要素技術の開発研究を実施した。子音を含んだ音声についての声道形状逆推定結果の検討が進んでおり,検査語の種類や話者の違いによる逆推定軌跡のマップ上パターンの違いが観測され,音響管としての形状の変化が推測できるようになっている。また,計測に活用できる視線システム,物体追跡システムなどの個々の要素の開発も進んでいるため。音声からの声道形状逆推定の研究では,使用するマップのバリエーションを検討し,現在の男性を想定したマップのみならず女性を想定したマップの可能性有効性についても検討する。また,実音声からの逆推定の軌跡と合成音声に基づく軌跡との間には現状では違いが見られるが,軌跡を類似させることで合成音声の質向上に結びつく可能性がある。軌跡の生成という観点から合成音の生成モデルの改良を検討する。個々に開発を進めているシステムについては,観測データの状態等を表現できる有益なマップの構築を目指す。本年度は,「(A)声道形状マッピングインタフェースを基盤とした音声合成及び声道形状逆推定の深化」を大テーマとして,「(1)マッピングインタフェースによる声道・音声の相互変換計測及び有用性検証(2)子音を考慮したマップ構成の研究」を中心に取り組んだ。具体的には,逆推定に利用可能なマップ領域の拡張機構を実現し,より多様な声道形状も扱える環境を構築した。また,得られた逆推定の結果のパターンについて,被験者の特徴の評価などを行った。更に,子音を含んだ音声についての声道形状逆推定についても検討を行い,逆推定された声道形状に関するマップ上の軌跡(パターン)を評価した。有声無声の子音の違いや,後続の母音環境の違いにより軌跡が異なり,語頭母音から子音へ向けて調音運動が移行する際に,その子音に後続する母音の影響が既に表れていることを示唆する結果などが得られている。これは,音声生成における軌道計画の特性を反映したものと考えられ,今後,種々の条件下での軌跡(パターン)の評価が期待される。このように,本来多次元のパラメータをマップ上で表現できる効用の一端が確認できた。これらの他,基盤となる音声合成システムのパラメータの設定が容易となるシステム開発なども実施し,関連するパラメータを容易に設定,また変更する枠組みの基盤を実現している。計画書では,『声道形状の逆推定結果の妥当性や形状のバリエーション評価を進め,1次元信号である音声信号と多次元パラメータである声道形状との関係を,特にマップ上の軌跡について評価検討する。』予定としていたが,上記の実績の概要のように,逆推定に利用可能なマップ領域の拡張機構の実現,被験者の特徴の評価,子音を含んだ音声のマップ上の軌跡検討が行なわれており,ほぼ計画通りに進んでいるため。

母音に対する声道断面積の推定結果の妥当性については,文献による報告との比較を継続的に進めているが,これらと合わせ,本インタフェースの汎用性が示唆される結果を得ている。その他,Virtual Reality環境でのコントローラーとしての視線インタフェース開発,高倍率ズーム対応のネットワークカメラが利用できるAugmented Reality環境の構築と長距離マーカ利用,OpenCVを用いた複数のアルゴリズムによる頑健な物体追跡の実現など,空間把握用各種マップ構築活用に向けた要素技術の開発研究を実施した。子音を含んだ音声についての声道形状逆推定結果の検討が進んでおり,検査語の種類や話者の違いによる逆推定軌跡のマップ上パターンの違いが観測され,音響管としての形状の変化が推測できるようになっている。また,計測に活用できる視線システム,物体追跡システムなどの個々の要素の開発も進んでいるため。子音を含んだ音声の逆推定の研究等を継続するが,実音声を用いた実験ではノイズの影響で,軌跡の開始点や終了点などの見い出しが困難な点もあるので,合成音声に基づいてシミュレーションを実施するなど検討する。また,応用展開として,体の姿勢全体ではモーションキャプチャ装置,手指の動きでは,ARマーカ等の活用,視線や瞬き状態については既開発の視線システムを改変して,それぞれ多次元のパラメータの値を取得できる環境を構築し,データ収集や分析を検討している。また環境構築には,研究室で進行中のOpenCV画像処理ライブラリやARマーカの応用研究の技術や成果も活用して研究を実施する。音声からの声道形状逆推定の研究では,使用するマップのバリエーションを検討し,現在の男性を想定したマップのみならず女性を想定したマップの可能性有効性についても検討する。また,実音声からの逆推定の軌跡と合成音声に基づく軌跡との間には現状では違いが見られるが,軌跡を類似させることで合成音声の質向上に結びつく可能性がある。軌跡の生成という観点から合成音の生成モデルの改良を検討する。個々に開発を進めているシステムについては,観測データの状態等を表現できる有益なマップの構築を目指す。多少の増減はあるが各費目ほぼ配当額に近い執行額となっており,次年使用額は小額である。信号検出センサについては適合性などを確認しながら段階的に購入を進めていることもあり,一括購入としなかった分差額が生じた。最近の信号検出センサのバリエーションは年々と増加傾向にあるので,それを見極めながら次年度使用額を活用して購入する。配当額に近い執行額となっており,次年度使用額は小額である。比較的に近い都市で学会が開催されたこともあり,旅費の支出が予定額を下回ったことが,差額が生じた主な理由である。次年度は,主に論文発表のための掲載料や出張費の一部として使用予定である。
健康関連QOLに着目した、新たな肺がん葉切除術前後のがんリハビリテーションの開発

本研究は、肺がん葉切除術前後の健康関連生活の質(QOL)が変化する要因を分析し、がんリハビリテーションが肺がん葉切除術後の身体機能や健康関連QOLに及ぼす効果を検討した。研究参加者は胸腔鏡下肺葉切除術が施行され、術後12週間の縦断調査が可能でった36名とした。結果、身体機能、健康関連QOLは術後1週後に有意な低下を認めたが、術後4週後から術後12週後にかけて、身体機能、健康関連QOLは有意に改善した。しかしながら、呼吸機能と健康関連QOLは術前よりも有意に低下していた。これらの結果から、身体能力を維持・向上させるだけでは健康関連QOL対策としては不十分であることが示唆された。現在、我が国における死亡原因の第1位は「がん」であり、年々増加傾向にある。そのため、周術期における適切な介入が望まれているが、早期退院のため、術後の運動耐容能や健康関連QOLなどを長期的視点で検証した報告は少ない。そこで肺がん患者の胸腔鏡下手術(以下VATS)前から術後6ヵ月間の運動耐容能と健康関連QOLなどを測定し、長期的に経過を観察する取り組みを開始した。その結果、術後1ヶ月において、健康関連QOLの身体機能などの低下がみられ、6分間歩行距離も低下することが示唆された。一方、精神機能においては有意な低下は認められなかった。またその後においても、1部の症例に、術前までの回復が困難である症例がいることがわかった。VATSは侵襲が少ないため、早期退院が慣例となっている。しかし、対象によって長期的なケアが必要となる場合があることが示唆された。近年のがん医療は診断や治療技術の進歩によってがん生存率が向上し、加えて高齢者の身体機能低下等も問題視されていることから、生命予後や術後合併症などのいわゆる医学上重要な指標だけでなく、運動耐容能や健康関連QOL等についても十分議論する必要がある(Cavalheri V, 2013)。現在、肺がんの胸腔鏡下肺葉切除術を実施した患者の術前術後をフォローしており、運動耐容能や健康関連QOL等を継時的に測定し、長期的な経過観察を実施している。その結果、運動耐容能は術後一定の低下を認めるものの改善傾向を認めるが、健康関連QOLについては、改善する者と改善しない者が存在することが見られるようになった。一方で、改善しない者に対しては新たな介入方法が必要あり、今後も長期的な検証の必要が示唆された。目的は、肺がん葉切除術前後の研究参加者の身体・心理・社会的背景を総合的かつ客観的に検証し、健康関連QOLが変化する要因を解明すること、長期的な在宅指導プログラム開発のための足掛かりとなることである。これにより、肺がん葉切除後のがんリハビリテーション、在宅指導作成の一助になるための基礎研究である。平成26年度は、肺がん葉切除術後の患者は、健康関連QOLが低下することが明らかとなった。さらに治療過程で受けた身体的・心理的なダメージに加え、術前からの運動能力がすでに低下していることも明らかとなった。平成27年度は、平成26年度から継続している健康関連QOLの変化を縦断的に観察し、身体機能と健康関連QOLの変化のミスマッチが明らかとなった。具体的には、高齢肺がん患者の運動機能は術後1ヶ月足らずで回復させることが可能であったが、健康関連QOLは術前の状況まで回復するのに3か月以上を要することが明らかとなった。このことから、高齢肺がん患者に対して、運動能力を維持・向上させるだけでは健康関連QOL対策としては不十分であることが示唆された。慢性閉塞性肺疾患患者などにおいて、生命予後や健康関連QOLの改善のために身体活動に着目した指導が注目されており、本研究でも、在宅指導において身体活動指導を含む術後指導が健康関連QOLの早期回復を促す可能性が示唆された。そのため、健康関連QOLの早期回復を目的とするためには、身体活動を意識したセルフマネジメントを含む指導が重要である可能性が示唆される。平成26年度の計画は、肺がん肺葉切除術による健康関連QOL等の変化を明らかにし、客観的基準を持って、その要因を検証することである。おおむね、必要データを取得し、その解析を実施しているところである。対象者数は予定数を確保しているが、介入の方法を検証することが喫緊の課題である。医歯薬学今後の研究推進方策として、研究協力者と十分な協議を行い、現在の連携をもって推進していく。平成27年度は、現在進行中の解析を行いつつ、プログラム開発を実施していく。なお、対象が予定より満たない場合は、近隣の施設および研究協力可能施設にリクルート範囲を拡大する。平成25年度の計画は、肺がん葉切除術による健康関連QOLの変化とその要因を客観的基準で明らかにすることである。

概ね、必要データを取得している。しかし、対象者数が当初の予定よりも若干少ないことで、多変量解析などを用いて詳細な分析ができなかった点が課題としてあげられる。平成26年度の必要備品や英語論文校閲費用等の計上をしておらず、次年度使用額が生じている。今後の研究の推進方策として、さらに施設の研究協力者と十分な議論を重ね、現在の連携をもって推進していく。26年度は、25年度の計画を継続し、対象を増やしていくとともに、在宅プログラムの開発を検討していく。なお、対象が予定より満たない場合は、近隣の施設にリクルート範囲を拡大する。平成27年度における必要備品並びに研究旅費等に使用する予定である。研究協力者との協議の結果、体組成計を計上しておらず、次年度使用額が生じている。26年度における必要備品ならびに研究旅費などに使用する予定である。
抗酸化性フェノール関連化合物による酸化還元感受性転写因子の活性化制御機構を探る

著者らは以前、自動酸化し難い構造の抗酸化性フェノール関連化合物が抗酸化作用を介して炎症性サイトカイン発現を抑制することを発見した。この結果はラジカル化し難いフェノール関連化合物が多くの酸化還元感受性転写因子の転写調節作用を持つことを示唆した。今回の研究ではcinnamates (β-phenyl acrylates)と(meth)acrylates関連化合物のようなα,β-不飽和カルボニル化合物のtrans-cinnamates 3種, acrylates 2種, methacrylates 3種と歯科材料で使用されているα,β-不飽和エステルモノマー6種を使用してその細胞毒性、アレルギー作用、抗癌作用、炎症促進作用および抗炎症作用を含む様々な正および負の調節作用を試験した。Cinnamaldehydeおよびacrylatesは、Michael reaction acceptorsとして作用するそれらの顕著な能力のために、抗炎症性および炎症誘発性の両方の性質を示した。Methyl cinnamateは、細胞毒性および炎症誘発活性がより少ない強力な抗炎症活性を示し、この化合物が歯周病および関連する全身性疾患の治療に有用であり得ることを示唆した。また、α,β-不飽和エステルモノマーのうちn-butyl acrylate (nBA)とEGDMAは強力な向炎症活性を示した。nBA、EGDMAとTEGDMAはマウスマクロファージ細胞株RAW264.7細胞のhemeoxygenase 1遺伝子発現を高めた。今回の研究は、heme oxygenase 1発現を通して、α,β-不飽和カルボニル化合物やα,β-不飽和エステルモノマーの転写因子活性化抑制作用を含む抗炎症作用はラジカル捕捉活性と関連した求電子剤/抗酸化剤応答エレメント転写系の効力の増強を来し生物系における化学的発癌を耐性に導く可能性が示唆された。今年度の研究では、低細胞傷害性で自動酸化し難い抗酸化性フェノール関連化合物を探査し、それらが生理活性物質発現を調節できるか調査することであった。過去の研究実績より、細胞刺激物誘導性の生理活性物質の抑制効果を示す抗酸化性フェノール関連化合物の至適濃度はある程度予想がついたので基礎実験を大幅に割愛でき、予定していた化合物の約半数は調査することができた。また、一部の化合物では化合物同志の複合効果を試験することも可能となり転写因子調節にどのような影響をもつのかも考察しつつあることから概して順調な進捗状況であると考える。また、一部の化合物では化合物同志の複合効果を試験することも可能となり転写因子調節にどのような影響をもつのかも考察しつつある。また、定量的構造活性相関からも転写因子調節作用が示唆されることから概して順調な進捗状況であると考える。Eugenol関連化合物は、癌、炎症状態、2型糖尿病、心血管疾患、神経変性疾患および歯周病などのフリーラジカル媒介疾患を緩和するのに有効な抗酸化物質である。それらはその性質と濃度に応じてフリーラジカルスカベンジャーまたはジェネレーターとして作用する。一方、酸化還元感受性転写因子はラジカルの酸化的攻撃により活性化され、炎症やアポトーシス、発癌に関与する。今回の研究では抗酸化性フェノール関連化合物として二量体型biphenol、curcumin、bis-eugenol、magnolol、honokiol、単量体型eugenol、iso eugenolを使用した。また、ポリエンカロチノイドとしてβ-carotene、lycopeneを使用し試験した。マウスマクロファージ細胞株RAW264.7細胞を用いた細胞傷害性試験ではこれらの化合物は細胞傷害性を示さなかった。これらの化合物は高濃度で炎症促進活性を有し、低濃度でLPS刺激の向炎症性生理活性物質産生や転写因子活性化を抑制する抗炎症作用を有していた。定量的構造活性相関をもとにした検討ではeugenolおよびその関連化合物の二量体は、大きな抗酸化活性および高い求電子性を示すことが判明した。また、活性酸素と反応性が極めて高いTri-n-butyl boraneを用いた試験やhemeoxygenase 1発現を通して、カロチノイドや抗酸化性フェノール関連化合物の転写因子活性化抑制作用を含む抗炎症作用はラジカル捕捉活性と関連した求電子剤/抗酸化剤応答エレメント転写系の効力の増強に起因する可能性が示唆された。また、酸化還元に強く関与する化合物や遺伝子発現を通して抗酸化性フェノール関連化合物の抗炎症作用の仕組みが解明されつつある。

著者らは以前、自動酸化し難い構造の抗酸化性フェノール関連化合物が抗酸化作用を介して炎症性サイトカイン発現を抑制することを発見した。この結果はラジカル化し難いフェノール関連化合物が多くの酸化還元感受性転写因子の転写調節作用を持つことを示唆した。今回の研究ではcinnamates (β-phenyl acrylates)と(meth)acrylates関連化合物のようなα,β-不飽和カルボニル化合物のtrans-cinnamates 3種, acrylates 2種, methacrylates 3種と歯科材料で使用されているα,β-不飽和エステルモノマー6種を使用してその細胞毒性、アレルギー作用、抗癌作用、炎症促進作用および抗炎症作用を含む様々な正および負の調節作用を試験した。Cinnamaldehydeおよびacrylatesは、Michael reaction acceptorsとして作用するそれらの顕著な能力のために、抗炎症性および炎症誘発性の両方の性質を示した。Methyl cinnamateは、細胞毒性および炎症誘発活性がより少ない強力な抗炎症活性を示し、この化合物が歯周病および関連する全身性疾患の治療に有用であり得ることを示唆した。また、α,β-不飽和エステルモノマーのうちn-butyl acrylate (nBA)とEGDMAは強力な向炎症活性を示した。nBA、EGDMAとTEGDMAはマウスマクロファージ細胞株RAW264.7細胞のhemeoxygenase 1遺伝子発現を高めた。今回の研究は、heme oxygenase 1発現を通して、α,β-不飽和カルボニル化合物やα,β-不飽和エステルモノマーの転写因子活性化抑制作用を含む抗炎症作用はラジカル捕捉活性と関連した求電子剤/抗酸化剤応答エレメント転写系の効力の増強を来し生物系における化学的発癌を耐性に導く可能性が示唆された。平成27年度の研究達成度は概ね達成をしていると考えることから、引き続きRAW264.7細胞などを使用して抗酸化性フェノール関連化合物の細胞刺激物誘導性の生理活性物質発現におよぼす調節作用を検討する。また、細胞核蛋白質を回収し細胞刺激物誘導性の酸化還元感受性転写因子活性化におよぼすこれらの化合物の調節作用の検討を始める。さらにこれらの抗酸化性フェノール関連化合物による抗酸化作用の程度を1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH)ラジカル吸収試験を指標に評価する。一方、植物性や工業製品成分中のフェノール関連化合物だけでなく、今まで抗酸化性が謳われていたビタミンを構成するフェノール関連化合物にも新たなる活性の存在が示唆された。自動酸化しにくい構造のフェノール関連化合物はいわゆるフェノール作用によって抗酸化性と抗炎症性を発揮できることから、多くの天然抗酸化性フェノール関連化合物の医薬品への応用を検討することにはさらなる興味がある。
ヒト血液脳関門機能診断を可能とするエキソソームバイオマーカー確立への挑戦

本研究では、脳毛細血管内皮細胞から分泌されるエキソソームが、その細胞機能を予測するツールとなるか、検証をおこなった。正常血液脳関門モデルおよびコリン欠乏血液脳関門障害モデルから分泌されるエキソソームを単離し、そこに内包されるmRNA量を解析したところ、それぞれのエキソソームは由来細胞のmRNA発現プロファイルを反映していることが明らかとなった。したがって、ヒト脳毛細血管内皮細胞内の遺伝子発現量情報を内包するエキソソームを解析することにより、血液脳関門機能の状態を把握できる可能性があると考えられる。本研究は、ヒト不死化脳毛細血管内皮細胞(HBMEC/ciβ)から分泌されるエキソソームを単離し、そこに内包される遺伝子発現情報から、細胞内の遺伝子発現量や機能を予測することを目的としている。この目的達成のため、まずエキソソーム単離条件の確立およびエキソソーム内遺伝子発現情報の解析をおこなった。これまでに汎用されているエキソソーム単離法として、遠心法がある。本法を用いるためには大量の培養上清が必要であることから、HBMEC/ciβを100-mm dish 10枚を、エキソソーム除去培地を用いて培養した。この上清を回収して、まず500 g、10分、4°Cで遠心し、その後3,000 g、10分、4°Cおよび10,000 g、30分、4°Cの遠心をおこなった。続いて、120,000 g、70分、4°Cの遠心をおこない、この沈殿をPhosphate-buffered saline (PBS) (-)で洗浄し、再度120,000 g、70分、4°Cの遠心をおこなった。この沈殿をPBS(-)で懸濁し、エキソソーム画分とした。エキソソーム単離の検証のため、上記画分を4% Paraformaldehyde (PFA)で固定し、2%リンタングステン酸でネガティブ染色をおこなったのちに、電界放射型透過電子顕微鏡にて解析した。その結果、直径50-70 nmの球状の像が観察され、これは一般にエキソソームとされる形状と一致すると考えられた。次に、エキソソーム画分からtotal RNAを抽出してcDNAを合成し、HBMEC/ciβに発現するmRNAの発現解析をRT-PCRによりおこなった。その結果、代表的な血液脳関門トランスポーターであるglucosetransporter 1および密着結合タンパク質であるclaudin-5のmRNA発現が検出できた。以上より、上記遠心法によりHBMEC/ciβからエキソソームが単離できること、またエキソソームから親細胞内の遺伝子発現情報が得られる可能性があることが、明らかとなった。本研究は、ヒト不死化脳毛細血管内皮細胞(HBMEC/ciβ)から分泌されるエキソソーム(Ex)に内包される遺伝子発現情報を解析することにより、細胞内の遺伝子発現量や機能を予測しうる可能性を明らかとすることを目的としている。本年度は、血液脳関門異常時において脳血管内皮細胞からのEx分泌やそこに内包される遺伝子発現情報が変動するか明らかとするため、コリン欠乏HBMEC/ciβによる病態血液脳関門モデルを構築して解析をおこなった。コリン取り込みトランスポーター阻害剤であるヘミコリニウム-3添加により、コリン欠乏HBMEC/ciβを作成し、バリア機能の解析をおこなった。その結果、正常HBMEC/ciβと比べ、コリン欠乏HBMEC/ciβのNaフルオレセイン透過性は1.5±0.2倍上昇し、これと一致して接着結合を担うVE-cadherinのmRNAおよびタンパク質発現量も低下していた。そこで、コリン欠乏および正常HBMEC/ciβからEx画分を回収し、その分泌量、形状および遺伝子発現情報を解析した。その結果、コリン欠乏HBMEC/ciβにおいてもExの分泌は認められ、正常HBMEC/ciβ由来のものと比べても、その形状に大きな変化は認められなかった。しかし、Ex内遺伝子発現情報を解析したところ、コリン欠乏HBMEC/ciβ由来ExにおけるVE-cadherin mRNA量は、正常HBMEC/ciβ由来のものと比べ低下しており、細胞を用いた解析結果と同様の傾向が認められた。以上より、脳毛細血管内皮細胞から分泌されるExにはその細胞内の遺伝子発現量情報が内包されていること。また、Exに内包される発現量情報は細胞の状態を反映しうるものであることが明らかとなった。したがって、脳毛細血管内皮細胞から分泌されるExを解析することにより、血液脳関門機能の状態を把握できる可能性があると考えられる。平成26年度は主にエキソソーム単離法の条件の確立およびその最適化を進め、目処をつけることができた。さらに、エキソソームから遺伝子発現情報を抽出できることも明らかとした。

したがって、来年度の研究を推進する基盤は概ね整ったと考えられる。以上のことから、現在までの達成度を(2)おおむね順調に進展していると判断している。薬学平成27年度は、主に、エキソソームに内包される遺伝子発現情報の詳細を明らかとし、さらにHBMEC/ciβ内の遺伝子発現状態がエキソソーム内に反映されるか検討をおこなう。これまでにエキソソーム内にはmiRNAやmRNAなど種々のRNAが含有されていると考えられているが、それらの発現プロファイルが親細胞の発現プロファイルと一致するか明らかとなっていない。そこで、分化用培地または未分化培地で培養したHBMEC/ciβからそれぞれエキソソームを単離し、それらに含まれるmiRNAおよびmRNA発現プロファイルをマイクロアレイにより網羅的に解析することにより、エキソソームに内包される遺伝子発現情報の詳細を明らかとする。また、同時に親細胞におけるmiRNAおよびmRNA発現プロファイルの網羅的解析をおこない、エキソソーム内のmiRNA・mRNA発現プロファイルとの比較解析をおこなう。これまでに我々は、分化用培地と未分化培地で培養したHBMEC/ciβの間で多くの遺伝子発現量に差異が認められることを明らかとしてきた。まずこれら遺伝子(例えば、matrix metalloproteinase 1など)を用いて、両細胞由来のエキソソーム間にも同様の差異が認められるか解析をおこなう。次に、P糖タンパク質やBreast cancer resistance proteinなど薬物動態関連遺伝子を対象とした検討を進め、さらには分化用培地と未分化培地で培養した両細胞間におけるこれらの機能レベルが、エキソソーム内で反映されうるか、検討を進める。一方、HBMEC/ciβ由来エキソソームの臨床応用に向けては、これを単離する手法を開発する必要がある。これまでに組織特異的エキソソームの単離には、抗体を用いた単離法が有望とされている。そこでHBMEC/ciβ由来エキソソームのプロテオミクス解析にも取り組み、上記マイクロアレイ解析と照合することで、HBMEC/ciβ由来エキソソーム特異的抗原の候補を見出したい。
長距離交流送電用高温超電導ケーブルの設計指針・開発基盤の確立

温室効果ガス排出量の大幅削減が求められており、再生可能エネルギーの導入拡大が急務となっている。本研究の目的は『国内の再生可能エネルギーの中で最もポテンシャルの高い洋上風力の導入拡大の鍵を握る、大容量・低損失交流送電のための長距離型交流用高温超電導ケーブルの実現』である。交流用高温超電導ケーブルの長距離化を達成するために、高温超電導ケーブルの高効率送電技術を開発し、それに基づく長距離交流用高温超電導ケーブルの設計指針・開発基盤の確立を目指す。そして、実規模の洋上風力用高温超電導ケーブルを設計・解析し、長距離交流用高温超電導送電ケーブルの有効性を検証して、実用化に向けた課題を明確にする。
将棋棋士の指し手案出における思考の神経メカニズムとその個性

小脳における内部モデル獲得の性質に基づいて、熟練者の直観的な思考における小脳の役割とそのメカニズムを明らかにすることを目的にしている。小脳の代表的な機能は運動の学習と制御である。運動学習では最初、練習を通して制御対象である手足などのメンタルモデルが大脳皮質内に形成される。メンタルモデルができると当初はそれを使って運動制御を行うが、ある段階で小脳がメンタルモデルを学習し、小脳内に内部モデルが獲得される。小脳での情報処理は無意識的で素早いため、熟練者は無意識的に素早く運動を行うことができる。無意識的で素早い処理の対象が運動でなく思考であれば、それは直観的な思考を実現する。小脳が直観的な思考を実現させる際に、大脳のどの領域から情報の入力を得て、また大脳のどの領域に出力を送っているのかを明らかにするために、将棋高段者に被験者としての研究協力を依頼し、将棋パズルである詰将棋を用いた思考実験を行った。詰将棋の問題を素早く直観的に解けた時には小脳に活動が観察されたが、同時に頭頂葉の楔前部や大脳基底核の線条体にも活動が観察された。脳活動の時間的な特性は小脳と楔前部や線条体では大きく異なっており、小脳は思考中に持続的な活動を示したのに対し、楔前部や線条体は思考の前半部分で活動を示した。一方、楔前部や線条体が活動を示さない時は小脳も活動を示さず、被験者は制限時間内に詰将棋を解くことが出来なかった。この結果から、楔前部や線条体からの情報を受けて小脳が直観的な思考を実現しているのだと思われる。一方、小脳がどこに情報を出力しているかについての知見を得ることはできなかった。当初の計画では、安静時脳活動を解析することで小脳と大脳の機能的結合を明らかにする予定であった。安静時脳活動を解析する際には、小脳と大脳のそれぞれの領野が関連しているかをある程度絞り込んでおく必要があり、そのために詰将棋を用いた思考課題の実験を行った。実験を行った結果、楔前部や線条体が小脳に情報を入力している可能性が得られた。安静時脳活動の解析では脳の領野間の相関を調べるのが一般的であるため情報が流れる方向を推定することは難しい。一方、課題を用いた実験では課題提示のタイミングに合わせてBOLD信号の持続時間などを評価することで領野間の活動の時間的な関係を調べることができ、情報の方向を推定できる。そのため、この寄り道的な実験を行ったことは有意義であったと考えている。安静時脳活動の実験については、これまでに12人の将棋高段者を対象にして実施している。二年目は被験者数を増やし、当初の予定通りに小脳と大脳の領域間の機能的結合を評価する予定である。

そのため、この寄り道的な実験を行ったことは有意義であったと考えている。安静時脳活動の実験については、これまでに12人の将棋高段者を対象にして実施している。二年目は被験者数を増やし、当初の予定通りに小脳と大脳の領域間の機能的結合を評価する予定である。当初予定していた安静時脳活動の計測実験を行う前に、予備的な実験として詰将棋を用いた思考実験を行ったが、そのデータ解析に予想以上に時間がかかってしまい、当初予定していた数の実験を行えなかった。予備実験の解析が終わったので、次年度は予定通りの数の実験を行う予定である。
丹沢山地におけるブナ林の衰退と小地形・小気候の関係

丹沢山地の標高1,000m以上に分布するブナ林の衰退状況を把握し、その要因について地形学的、気候学的に明らかにすることを目的に調査した。調査は現地踏査、植生調査および1960年代から現在までの空中写真の判読である。調査対象地域はおもに丹沢山地の畔ケ丸-大室山-蛭ケ岳-丹沢山-塔ノ岳の主稜線部である。調査の結果、おもに西向き・南向き斜面でブナの枯損・枯死が多く、風の通り道となる鞍部でも顕著であった。この西向き・南向き斜面には主稜線部でササ草原が多いことが判読され、この周辺においてもブナの枯損・枯死が多くみられた。冬季の踏査では、ブナの枯損・枯死がまとまってみられる場所や西向き・南向きのササ草原で相対的に積雪量が少ない、または積雪がほとんどないことが明らかになった。空中写真により1960年代から現在までのブナ林周辺の植生変化を判読すると、かつてはブナ林であったと推測される落葉広葉樹林が西向き・南向き斜面で減少し、ササ草原が拡大していることが明らかとなった。丹沢山地玄倉川流域の主稜線部では、現在でも崩壊地が多く分布し、崩壊地の谷頭はササ草原になっていることが多かった。このような崩壊地の谷頭でブナの枯損・枯死がみられる。崩壊地の谷頭では風が集まるため相対的に強風になることが多かった。丹沢山地の風向分布は、冬季は季節風由来の西風が多く、ササ草原上の偏形樹も西風を示していた。夏季は南風が卓越していた。現在、主稜線部でブナが立ち枯れている南西向き斜面と健全なブナ林が広がる北東向き斜面において年間の気温をデータロガーによって観測中である。現地踏査では、ブナハバチによるブナの葉の食害が5月を中心に多く見られ、この食害が西向き・南向きの風衝地側で多いことが認められた。食害に遭っているブナでも風上側の北または東側のブナの葉は健全である。
脳磁図(MEG)を用いた視覚情報処理過程の検討(臨床応用への基礎的検討)

われわれは意味情報処理過程を非侵襲的に測定することを目的にこれまで事象関連電位(ERP)を用いて研究を行ってきた。本研究では左半球の側頭部、頭頂部並びに後頭部を含む関心領域を設定し、ERPおよび事象関連磁場(ERF)を測定した。被験者は北海道大学の学生並びに大学院生5名(男性4、女性1)で、年齢は21才から24才であり、全員右利きであった。ERP並びにERFの誘発には語彙判断パラダイムを用い、警告刺激、プライム刺激、ターゲット刺激の順で視覚より呈示した。プライム刺激とターゲット刺激は漢字2文字からなる単語および偽単語(ターゲットのみ)であった。プライム刺激とターゲット刺激の関係により同音異義語条件、意味関連条件、意味非関連条件、偽単語条件の4条件からなる単語対を提示し、ターゲットの偽単語に対しボタン押しをさせた。ERPはデジタル脳波計を用いサンプリング周波数500Hz,TC2.Os、HFF30Hzで測定し、オフラインで加算平均した。ERFは19chの脳磁図計を用いてサンプリング周波数500Hzで測定し、オフラインでHFF30Hzを通して加算平均した。なお、ERFでは偽単語条件は加算回数の関係から解析より除外した。電流双極子はGoodness of Fitが90%以上、磁場分布の相関係数が95%以上のものを採用した。推定された電流双極子を脳MRI上に重畳した。5名中4名で側頭頭頂後頭結合部およびその周辺に電流双極子が推定された。条件間で推定位置に明確な差は認めなかった。この結果はこの領域が単語処理に関連していることを示唆している。平成8年度は以下の実験を行った。対象健常な20歳代の大学生6名。方法刺激:漢字2文字からなる熟語(および偽熟語)を用いた単語対を刺激として用いた。単語対は、同音異義語条件(戦場-洗浄)、意味関連条件(教師-生徒)、意味非関連条件(惑星-井戸)、非単語条件(竜巻-電松)の4条件からなっていた。刺激はパーソナルコンピュータを用い、ビデオプロジェクターより磁気シールド内に投影し、黒色背景上に呈示した。警告刺激(**)を白色で1500ms間呈示し、警告刺激消失800ms後にプライムとターゲットを呈示した。プライムとターゲットのSOAは800msとし、ターゲット消失1000ms後に継ぎの警告刺激を呈示した。プライムおよびターゲットは白色で呈示し、持続時間は各々100msとした。課題:課題は語彙判断課題であり、被験者はターゲットが単語か非単語かを判断し、できるだけ速く右の指示でボタン押しをするように要求された。記録および処理:MEGは多チャンネル磁束計を用いて、左後頭後側頭部で計測した。オンラインで加算し、計測終了後非単語条件を除く各刺激条件毎にオフラインでカットオフ周波数40msの低息通過フィルターをかけた。結語例数が少ないこともあり、左後頭後側頭部からの各刺激条件における誘発磁界について一定の傾向は得られていない。次年度も引き続き実験を進め、各刺激条件で得られた電流双極子をMRI上に重畳しその時系列的、空間位置的違いを明らかにする。われわれは意味情報処理過程を非侵襲的に測定することを目的にこれまで事象関連電位(ERP);N400を用いて研究を行ってきた。本研究では左半球の側頭部、頭頂部並びに後頭部を含む関心領域を設定し、ERPおよび事象関連磁場を測定しその領域におけるN400の発生源を検討した。

パラダイムはプライム刺激とターゲット刺激の関係により同音異議語条件、意味関連条件、意味非関連条件、偽単語条件の4条件からなる単語対を提示し、ターゲットの偽単語に対しボタン押しをさせた。ERPはデジタル脳波計を用い、サンプリング周波数500Hz、TC2.Os、HFF30Hzで測定し加算平均した。事象関連磁場は19chのMEGを用いて、サンプリング周波数512Hz、HFF30Hzで測定し加算平均した。なお、MEGでは偽単語条件は加算回数の関係より解析から除外した。電流双極子はGoodness of Fitが90%以上、磁場分布の相関係数が95%以上のものを採用した。脳MRIを撮像し、推定された電流双極子をMRI上に重畳した。5名中2名で各条件ともに電流双極子が側頭頭頂後頭結合部(上側頭回近傍)に推定された。今回設定した関心領域においては各条件ともに側頭頭頂後頭結合部およびその周辺に電流双極子が推定された。条件間で推定位置には明確な差は認めなかった。少数例ではあるがこの関心領域においてはN400の発生源の一つが側頭頭頂後頭結合部付近に存在する可能性が示唆された。ERPデータを考え合わせると意味情報処理に関連した領域であると考えられる。
核磁気共鳴を用いたシャジクモ節間細胞による局所麻酔薬の取込み

興奮性植物細胞であるシャジクモ節間細胞は活動電位を有する。この細胞の原形質膜に及ぼす局所麻酔薬の作用を電気生理学的に検討したところ、活動電位の再分極過程の延長と静止電位における膜の脱分極が認められた。こうした局所麻酔薬の作用機序を解明する方法として、核磁気共鳴を用いてこの節間細胞による局所麻酔薬リドカインの取り込みを検討した。確かにリドカインは取り込まれ、主に細胞壁を含めた原形質膜に取り込まれると推測された。しかもそれらとの結合はかなり強いものと考えられた。このことは静止膜電位は局所麻酔薬をwash out後、もどっていくがコンダクタンスは元に容易にもどらないことと関与していると考えられた。また、反応早期に細胞の内部へも分布した。細胞外液のpHに依存してその取り込みは増加したが、Ca濃度0.3mMに対しては減少しなかった。また、細胞の原形質膜を脱分極させ時に自動的に活動電位を発生させることが多い条件下、10mM KC L存在下では増加しなかった。このことより、その取り込みは非荷電型が優位と考えられしかも膜系に局在しやすいと推測された。低温下で細胞外液のpHが低い場合はその取り込みは減少しなかった。この解釈としても、膜系に局在しやすい非荷電型の減少が推測された。リドカインの誘導体QX-314はリドカインと同様に原形質膜を脱分極させた。このことはその作用に荷電型が否定できないことを意味する。一方、同細胞の興奮の初期過程の解析を行なうと、活動電位の立ち上がりの初期にKチャンネルが開口することが示唆された。また、この過程に流れる電流成分を調べるとBa^<2+>によって抑制を受ける成分があると考えられた。これらの成果については今後電流成分の解析との関連や他の局所麻酔薬との比較で検討し発表したい。シャジクモ節間細胞による局所麻酔薬リドカインの取込みを核磁気共鳴法を用いて検討した。当初の研究実施計画では電気刺激装置を用いて、この細胞を興奮させ、その興奮の頻度によりその取込みがどう影響されるかを検討することになっていたが、刺激装置を用いた実験回路が完成していない。というのもこの細胞が実験測定時間内に何回刺激ないし自発的に興奮したかを確認する方法が確立していないからである。そのため、まずこの細胞の原形質膜の脱分極を起こし時には自動的に活動電位を発生させる細胞外液条件、即ち10mMKClを含むリドカイン溶液での取込みを検討した。その他の実験条件としては、25°C、30分間の1mMリドカイン溶液とした。この反応時間においては、KCl非存在下と比べ、有意な取込みの増加は認められず逆に低下傾向が認められた。この場合、脱分極それ自体による取込みへの影響を考えなければならない。勿論、自動的な活動電位の発生による取込みを検討したことになるが、その発生頻度を測定していないためその頻度による直接的な取込みへの言及は困難と考えられた。この結果の解釈としては、細胞が脱分極を起こし活動電位が頻発し原形質膜の性状が変化した場合と、それ程の脱分極を起こすことなしに単に細胞が興奮した場合とではその取込みが違う可能性があることが考えられた。そこで原形質膜の脱分極を起こさない濃度で局所麻酔薬との拮抗作用が他の細胞で報告されているCaイオンについて検討した。細胞外液条件としてはCa濃度0.3mMを含む

リドカイン溶液では、Ca非存在下と比べてその取込みは低い傾向は認められたが有意ではなかった。少なくとも、この30分間という条件下ではCaイオンは局所麻酔薬の取込みに影響を与えなかった。シャジクモ節間細胞による局所麻酔薬リドカインの取込みを核磁気共鳴法を用いて検討した。実験溶液として1mMリドカイン溶液を細胞外液とした。溶液のpHは約5.8とした。この溶液に同節間細胞を9°C,30分間のincubationを行なったのち、水溶液で充分washし、資料とした。一部の節間細胞はincubation後、切断して細胞内液を得て資料とした。核磁気共鳴スペクトロスコピーはJOELGX-270Spectrometerを用いて得た。^1H-NMRの測定用として外径5mmの試料管を使用した。低温において、室温25°Cと比較して、節間細胞によるリドカインの取込みは低値であったが有意な差は認めなかった。又、細胞内液においては、室温25°Cと比較して、有意な差は認めなかった。節間細胞全体による取込みと細胞内液における取込みの比較では有意な差は認めなかった。低温においては、局所麻酔薬のpKaは少し高くなるとの報告があり、相対的に非荷電型の局所麻酔薬が少なくなり、細胞の生体膜への透過が減り、同細胞による取込みは一定時間では減少すると推察されたが、結果は室温と比べ有意ではなかった。これは低温はpKaばかりではなく細胞の生体膜への影響も考慮すべきと考えられた。又、低温においては局所麻酔作用は増強するとの報告がある。しかし、その場合の局所麻酔薬の取込みを検討した報告ではその取込みの増強はなかったとしている。今回の結果も取込みの増強は認められなかった。以上より、低温でpHが低い条件下でも、節間細胞による取込みは認められ、必ずしも非荷電型の減少による取込みの減少とは解釈できなく、むしろ一つの解釈として、細胞の生体膜に取り込まれた局在した局所麻酔薬の減少が推測され、これは非荷電型の局所麻酔薬の減少との関与が大きいと考えられた。シャジクモ節間細胞における局所麻酔薬QX-314の取込みを検討する目的で、まず電気生理学的手法で同細胞の原形質膜に及ぼす作用を検討した。局所麻酔薬QX-314は局所麻酔薬リドカインの誘導体で荷重型局所麻酔薬である。QX-134はリドカインと同様軽度の原形質膜脱分極作用を認めた。次に細胞に刺激を与え興奮させた場合も、リドカインと同様にこの脱分極作用は増強した。しかし、実験溶液即ち細胞外液のpHをアルカリに変えた場合、リドカインと比べ、この作用は増大しなかった。一方、活動電位に対する影響を調べた。活動電位のピークに与える影響はリドカイン同様あまり顕著でなかった。局所麻酔薬の作用はCaイオン、カルモジュリン、Kチャンネルとの関連性が知られているので、まず同細胞の興奮の初期過程の解析を行なった。刺激を行なって活動電位を発生させた場合、その活動電位の立ち上がりの初期過程にKチャンネルが開口することが示唆された。こうした初期過程に流れる電流成分の解析を行なうと、細胞外液のCaイオンによりその影響をうけることが判明した。即ちこうした電流成分は外向き及び内向き電流成分などに分析できるが、細胞外液のCaイオン濃度を高めると、内向き電流が増大し、逆にCaイオン濃度を低くすると内向き電流が減少し、外向き電流が増大した。この外向き電流の一過程は細胞外液のBaイオンにより抑制を受けた。
腫瘍随伴神経筋疾患の発症機構における自己免疫の役割に関する分子生物学的研究

自己抗体遺伝子の可変領域のsomatic mutationを解析することで、自己抗体産生におけるantigen-drivenの有無を判別することが可能である。本研究では、末梢単核球をB細胞マーカーおよび蛍光標識した自己抗原とで2重染色した後に、フローサイトメーターで自己抗体産生B細胞を検出・回収し、自己反応性B細胞の免疫グロブリン遺伝子の解析を試みた。神経筋接合部障害をきたす腫瘍随伴症候群として、Lambert-Eaton症候群や重症筋無力症(MG)がある。MGでは、後シナプス膜にあるアセチルコリン受容体(AchR)に対する自己抗体が出現する。AchRは複数のサブユニットからなるため、本研究では精神神経ループスの自己抗原であるリボゾームP抗原などを用いて、自己抗体産生B細胞の同定を試みた。免疫グロブリン遺伝子の解析に関しては、全末梢単核球からRNAを抽出した場合、VH1-6のそれぞれに特異的なプライマーと各免疫グロブリンアイソタイプの特異プライマーとを用いてRT-PCR法を行い、VH1-6のCDR3領域を含む全長を増幅し、シークエンスすることが可能であった。しかし、複数の自己抗原を用いて染色実験を行ったが、自己抗体産生B細胞の回収は困難であった。フローサイトメーターの検出感度をあげるために、tyramideラジカルの生成を利用した蛍光シグナル増幅法を用いても、回収は困難であった。自己免疫疾患における自己抗体産生B細胞の頻度は極めて少ないと考えられる。神経系以外の腫瘍により、直接浸潤あるいは転移によらず様々な神経筋障害を生じることがあり、腫瘍随伴症候群と呼ばれる。神経筋接合部の障害として、悪性腫瘍に伴うLambert-Eaton症候群や胸腺腫に伴う重症筋無力症(MG)などがある。MGでは、後シナプス膜にあるアセチルコリン受容体(AchR)に対する自己抗体(抗AchR抗体)が出現する。MGにおける抗AchR抗体の産生機序は不明である。MGの15-30%に胸腺腫が合併し、また胸腺細胞はAchRを発現しうるので、胸腺腫のAchRが免疫源となり(antigen-driven)、抗AchR抗体が産生されるという仮説が提唱されているが、いまだ立証されていない。抗体産生におけるantigen-drivenの有無は、該当する抗体遺伝子の可変領域のsomatic mutationを解析することで判別できるが、本研究の目的は平成12年13年度内に、MGの自己抗体産生におけるantigen-drivenの関与を明らかにすることである。本年度は抗体遺伝子のクロノタイプをCDR3長で検出するための検討を行った。全RNAを抽出し、VH1-6のそれぞれに特異的なプライマーと免疫グロブリンの各アイソタイプに特異的なプライマーとを用いてRT-PCR法を行い、VH1-6のCDR3領域を含む全長を増幅し、シークエンスゲルにて展開することによりクロノタイプを検出することが可能であった。同時にMGの摘出胸腺サンプルの調整も進めており、局所のクロノタイプ検出やAchRの変異検出を行う予定であり、当初の実験計画に変更はない。

免疫グロブリン遺伝子の解析に関しては、全末梢単核球からRNAを抽出した場合、VH1-6のそれぞれに特異的なプライマーと各免疫グロブリンアイソタイプの特異プライマーとを用いてRT-PCR法を行い、VH1-6のCDR3領域を含む全長を増幅し、シークエンスすることが可能であった。しかし、複数の自己抗原を用いて染色実験を行ったが、自己抗体産生B細胞の回収は困難であった。フローサイトメーターの検出感度をあげるために、tyramideラジカルの生成を利用した蛍光シグナル増幅法を用いても、回収は困難であった。自己免疫疾患における自己抗体産生B細胞の頻度は極めて少ないと考えられる。
トランスジェンダーのメンタルヘルスにおける身体・心理・社会の寄与および相互作用

本研究では、トランスジェンダーの特にメンタルヘルスに焦点をあて、そこに寄与すると考えられる1身体的特性(生理学的指標を含む)、2心理特性、3社会的状況、の3つを包括的・相補的に検討し、トランスジェンダーの健康に資するエビデンスを提供することを目的としていた。これまでに、すでに収集されたデータ(79名の音声に関する横断研究、75名の心理面の包括的な聴取を行った横断研究、11名の包括的縦断研究のデータ)を用い、そのメンタルヘルスを社会的状況を切り口に含めて再分析を開始した。以前の分析では、身体面・心理面のデータを変数としていたが、解析時のデータの統制のために補足的に収集していたプロフィールの、現在およびこれまでの社会生活上の性別・環境、就労・就学状況、クリニック来院の動機、今後の社会の中での自身の在り方の見通し(戸籍の性別を変更したいか否か、改名をする予定かどうか等))といった社会的状況について因子分析を行い、これにより今まで見えなかった「社会的状況・特性」を含めたトランスジェンダーのメンタルヘルスに寄与する因子を抽出することを試みた。さらに、一つの身体治療の結果に留まらない、広いトランスジェンダーのメンタルヘルスの特性、その要因について明らかにするため、以前「ホルモン投与者とホルモン非投与者の比較」「ホルモン投与中の経時変化」の観点からみていたデータを、「投与者内・非投与者内・全体のバラエティ」「経時変化の個人差」の視点から捉え直すため再分析を行っている。社会的な立場や受容度が心理面に及ぼす影響の重要性も研究計画時に考慮していたが、2018年度には、性別違和による身体治療の一部保険診療適応が認められたり、戸籍の性別変更の要件に性別適合手術が含まれていることについて性同一性障害学会が提言を行うなどの動きがあった。それらを盛り込んだ質的・量的研究の準備を進めている。本研究では、1年目にデータを再分析することで抽出した因子を踏まえつつ、ピアサポートグループ(自助団体)のトランスジェンダーを対象に質的研究を行い、特に社会面の因子についてメンタルヘルスに寄与しうる因子の候補を補うことまでを予定していた。一方で2018年度に性別違和による身体治療の一部保険診療適応が認められたり、戸籍の性別変更の要件に性別適合手術が含まれていることについて性同一性障害学会が提言を行うなどの動きがあった。非常に大きい影響を持っていると予測されるそうした公的制度の変化の状況を踏まえた上での半構造化面接の実施が望ましいと考えられたことから、実際の面接を急ぎ行うのではなく、まずは最新の状況の把握と今後の見通しについて情報収集を行うことを優先した。2018年度の解析で抽出した因子を踏まえつつ、質的研究を行い、特に社会面の因子についてメンタルヘルスに寄与しうる因子の候補を補う。ピアサポートグループへの協力を依頼し、自身のメンタルヘルスについてとこれまでの社会的経験(ライフヒストリー)について、半構造化面接の形式で詳細な聴取を行う。その語りから共通するキーワードを抽出する。「身体」「心理」「社会」の三側面でメンタルヘルスの把握に重要と見込まれる因子の候補を決定する。決定した聴取すべき項目を用い、以前より研究協力体制にあるクリニックにて量的研究を行う。研究内容は主に2つである。1量的データの取得:研究1、2で抽出された因子を聴取。質問紙の実施、身体測定などの、クリニック内で可能な方法を用いる。2生理的指標の追加取得:1を解析後、メンタルヘルスの高値・低値の上位各25%に研究協力者を絞り(15名程度)、唾液の採取を依頼し、テストステロン(代表的な男性ホルモン)濃度の測定を行う。特にホルモン濃度の変動率や、投与後の最高値に着目して変数として用いる。これらの資料を用い、下記の形で解析を行う。A.身体測定指標、質問紙による指標、一部の協力者の生理学的指標(ホルモン濃度の変動率、最高値等)、といった選定した因子が、実際にトランスジェンダーの心の健康を規定していたか、どの因子がより強い寄与率であったかを明らかにする。B.直接メンタルヘルスに寄与していない項目も含め各因子がトランスジェンダーの人生においてどのように繋がっているかを明らかにする。

社会的な立場や受容度が心理面に及ぼす影響の重要性も研究計画時に考慮していたが、2018年度には、性別違和による身体治療の一部保険診療適応が認められたり、戸籍の性別変更の要件に性別適合手術が含まれていることについて性同一性障害学会が提言を行うなどの動きがあった。それらを盛り込んだ質的・量的研究の準備を進めている。本研究では、1年目にデータを再分析することで抽出した因子を踏まえつつ、ピアサポートグループ(自助団体)のトランスジェンダーを対象に質的研究を行い、特に社会面の因子についてメンタルヘルスに寄与しうる因子の候補を補うことまでを予定していた。一方で2018年度に性別違和による身体治療の一部保険診療適応が認められたり、戸籍の性別変更の要件に性別適合手術が含まれていることについて性同一性障害学会が提言を行うなどの動きがあった。非常に大きい影響を持っていると予測されるそうした公的制度の変化の状況を踏まえた上での半構造化面接の実施が望ましいと考えられたことから、実際の面接を急ぎ行うのではなく、まずは最新の状況の把握と今後の見通しについて情報収集を行うことを優先した。2018年度の解析で抽出した因子を踏まえつつ、質的研究を行い、特に社会面の因子についてメンタルヘルスに寄与しうる因子の候補を補う。ピアサポートグループへの協力を依頼し、自身のメンタルヘルスについてとこれまでの社会的経験(ライフヒストリー)について、半構造化面接の形式で詳細な聴取を行う。その語りから共通するキーワードを抽出する。「身体」「心理」「社会」の三側面でメンタルヘルスの把握に重要と見込まれる因子の候補を決定する。決定した聴取すべき項目を用い、以前より研究協力体制にあるクリニックにて量的研究を行う。研究内容は主に2つである。1量的データの取得:研究1、2で抽出された因子を聴取。質問紙の実施、身体測定などの、クリニック内で可能な方法を用いる。2生理的指標の追加取得:1を解析後、メンタルヘルスの高値・低値の上位各25%に研究協力者を絞り(15名程度)、唾液の採取を依頼し、テストステロン(代表的な男性ホルモン)濃度の測定を行う。特にホルモン濃度の変動率や、投与後の最高値に着目して変数として用いる。これらの資料を用い、下記の形で解析を行う。A.身体測定指標、質問紙による指標、一部の協力者の生理学的指標(ホルモン濃度の変動率、最高値等)、といった選定した因子が、実際にトランスジェンダーの心の健康を規定していたか、どの因子がより強い寄与率であったかを明らかにする。B.直接メンタルヘルスに寄与していない項目も含め各因子がトランスジェンダーの人生においてどのように繋がっているかを明らかにする。2018年度実施を遅らせた質的研究の研究参加者への謝金等とする。