hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ヒト腸内細菌叢における遺伝子水平転移を介した共同体ゲノム進化機構の解明

3,036株の進化疫学解析に本プログラムを適用することで、HIV-1Cの地理的拡散とそれに伴う薬剤耐性形質の獲得経緯を明らかにすることに成功した。現在、共同研究者とともに本成果を論文として投稿する準備を進めている。本研究では、当初の計画として遺伝子配列データそれのみで分子系統樹を推測し、系統樹比較に基づき遺伝子水平転移の網羅的推測を行うことでヒト腸内細菌叢におけるゲノム機能進化機構を解明できると考えていた。しかし、研究初年度よりOlivierGascuel博士(パスツール研究所)との共同研究を進める中で、ゲノム単位でのマクロな機能進化とその背景にある遺伝子単位でのミクロな水平転移との関係をより深く理解するためには、ゲノム機能という形質が細菌叢全体でどのように進化してきたように「見える」のかを解明することが重要であるとの着想に至った。新たな目標達成のためには、数千種(株)からなる巨大系統樹において高速・頑健な祖先形質復元を行い、さらに同系統樹上での複雑な形質進化シナリオを可視化するための手法を新たに開発する必要があった。そのうえで、本年度の成果として確立された手法では、系統樹上の各ノードにおいて確率的に予測された形質状態についてその予測精度を統計的に評価するBrier scoreを導入することで、従来手法に比べより頑健な祖先形質復元が可能となった。また、推測された祖先形質状態を系統樹上で集約し、それらがどのように遷移してきたのか(=形質進化シナリオ)を分かりやすく可視化するためのプロトコルも発案した。これらの手法を「PASTML」プログラムとして実装し、同プログラムを大規模HIV-1C由来データ解析に実践したところ、world-wideなHIV-1C株の地理的拡散とそれに伴う薬剤耐性変異獲得経緯が明らかとなった。以上の成果はヒト腸内細菌叢由来データの解析にも即座に有用であると期待できる。共同研究者との論文執筆作業も進んでおり、研究計画は順調に進展していると判断する。本研究では、ヒト腸内細菌叢特有のゲノム機能(ゲノム形質)の進化シナリオをメタゲノミクス解析由来データのphylodynamics解析に基づき推測するというアプローチに着目し、推測されたゲノム形質進化と個々の機能遺伝子の水平転移との照らし合わせを行うことで、遺伝子水平転移というミクロな事象が細菌叢全体のゲノム機能進化というマクロな事象にどのように影響したのかを解明することを目的としてきた。このために最も必要とされたものが大規模系統樹における頑健かつ高速な祖先形質復元を可能にする手法であり、海外研究機関との共同研究のもと、様々なデータ解析環境に適用可能なオープンソースプログラム「PASTML」を開発した(1)。同プログラムをヒト腸内細菌叢由来メタゲノムデータに基づく大規模系統解析に適用し、腸内細菌叢ゲノム形質の進化シナリオを推測するまでには至らなかったが、本研究はPASTMLプログラムの更なる機能開発と並行して今後も引き続き行う予定である。メタゲノミクス由来データを含む
マルチタイムスケール海洋地殻生産モデルの研究

世界の中央海嶺が生み出す海洋地殻は多様な構造を示す.従来,この多様性は場所ごとの違い=空間変動として捉えられてきたが,最近では海洋地殻生産プロセスの時間変動が注目を集めている.本研究では,海洋地殻生産プロセスの時間変動は,それぞれ異なる要因に基づく異なる時間スケールの変動の重ね合わせであるとの仮説に立ち,3つの時間スケールの変動を海底観測によって捉え,変動の要因を考察し,マルチタイムスケール海洋地殻生産モデルを構築することを目的とする.そのため,モーリシャスの地球物理研究者と共同で中央インド洋海嶺中部における観測を実施し,両国の若手研究者の相互滞在を含め,共同で解析に取り組む.世界の中央海嶺が生み出す海洋地殻は多様な構造を示す.従来,この多様性は場所ごとの違い=空間変動として捉えられてきたが,最近では海洋地殻生産プロセスの時間変動が注目を集めている.本研究では,海洋地殻生産プロセスの時間変動は,それぞれ異なる要因に基づく異なる時間スケールの変動の重ね合わせであるとの仮説に立ち,3つの時間スケールの変動を海底観測によって捉え,変動の要因を考察し,マルチタイムスケール海洋地殻生産モデルを構築することを目的とする.そのため,モーリシャスの地球物理研究者と共同で中央インド洋海嶺中部における観測を実施し,両国の若手研究者の相互滞在を含め,共同で解析に取り組む.
日本語韻律指導のための教師用指導書の開発

従来の音声教育実践研究には,指導前後の発音成績等を比べた量的研究は多いが,教師と学習者の行動を質的に分析した研究はあまりない。本研究では,教師用韻律指導書の開発と改良を目的に据え,学習者・教師・観察者の内省報告をもとに彼らの行動を分析し,「モデル音の是非」「評価の食い違いと評価箇所のズレ」「誤用指摘方法の使い分け」「教師の正誤判断のタイミング」「発音に対する教師評価」等の観点から,教師に求められる知識および指導技術について考察した。2007年9月より韓国の大学校で日本語を教えている教師の協力が得られたため,正規授業の中で教科書『1日10分の発音練習』(くろしお出版)を用いた発音指導を行った際,考えたことをダイアリに記録してもらい,週ごとに提出してもらった。また,シラバスおよびカリキュラムの策定において本研究者が助言者となり,初級(1年生),中級(2年生),上級(4年生)それぞれのレディネスに合わせた形で,指導項目をどのように組み合わせるのが効果的であるかを,メールを通じて議論した。その結果を踏まえ,初級では「ヤマ(文イントネーション)とリズム」,中級では「ヤマとアクセントと句末イントネーション」,上級では「ヤマと規則的アクセント」を中心に課を選定し,授業を行った。上級の「規則的アクセント」とは,数量詞や接辞,複合名詞のような,2形態素が結合して1語になる際のアクセント核の位置が規則的に予測できるもののことである。学習者の発音に関しては,コース前後に採取したものを,現在分析中である。また,教師の意図が学習者にどのように伝わっているかを分析するため,学生にも授業における内省をメールで報告してもらった。また,コース指導によりどのように意識が変容するかを調査するため,属性調査を行った。以上のデータ,特に本研究者と授業担当者の間でやり取りされたメール内容を分析し,教師が教室で発音指導を行う際に必要とされることを踏まえた教師用指導書のひながたを現在執筆中である。平成20年度はその指導書を授業担当者に試用してもらい,フィードバックを受ける予定である。2007年度における文献研究,教科書分析,および韓国の大学校での日本語韻律指導実践における授業担当教師とのメールを通じての議論をもとに,『1日10分の発音練習』(くろしお出版)の教師用指導書のひながたを執筆した。このときの学習者の発音の誤用分析,および学習者の内省報告の量的・質的分析結果に関しては,2件の学会発表を行い,『日本語教育の過去・現在・未来』(水谷修監修,凡人社),および『広島大学日本語教育研究』19号に論文として発表した。また,2008年6月9月に,広島大学の留学生6名に,1回30分×週2回程度(計17回)の韻律指導を行った結果についてもまとめた。ここでは,本研究者がそれぞれの課・節の教師用指導書を書き,日本語講師の経験のある博士課程の大学院生1名に,教師として指導を行わせ,指導書に関してフィードバックを受けた。本研究者による実践ではなく,他の教師による指導の観察というかたちをとったのは,教材作成者ではない,教材使用者である教師が指導時に何を考え,行動したかを明らかにするためである。韻律指導に特化した音声学的知識の,何がどこまで必要とされるのかを再検討する意図もあった。授業の様子はビデオ録画し,教師には,毎回の授業後,準備段階や指導中の内省をメールで報告させた。学習者や観察者にも,授業時の内省等をメールで報告させた。この,学習者,教師,観察者の三者の内省報告を分析し,「モデル音を与えることの是非」「評価の食い違いと評価箇所のズレの問題」「誤用指摘方法の使い分け」「教師の正誤判断や解答を与えるタイミング」「学習者の発音に好する教師評価」という5つの観点から考察したものを,『日本語教育』142号に論文として発表した。
配偶体型自家不和合性における花柱内での花粉識別の分子機構

配偶体型自家不和合性を示すバラ科のリンゴは,不和合性関与タンパクとして花柱中に発現するS-RNaseが知られている。これまでの我々の免疫電子顕微鏡観察研究結果から,リンゴS-RNaseは花粉管の花柱への進入を感知した花柱細胞から細胞外の花粉管誘導マトリックスに分泌され進入花粉のS遺伝子型に関係なく花粉管内に取り込まれることが明らかになっている。本研究課題では,自家不和合性の分子機構の1つの仮定として,S-RNaseのRNase活性が自家花粉内でのみ作用し他家花粉内では不活性になると考えた。そこで花粉管内に入ったS-RNaseが花粉タンパク等との,相互作用によりRNase活性に変化が起こるかどうかを物質問相互作用観察とS-RNase活性試験により検討した。[材料・方法及び結果]2.リンゴ風船状蕾の花柱から従来法によりS-RNaseは,DE52,CM52,ハイドロキシアパタイトのオープンカラム,FPLCにより精製された3.花粉から塩化セシウム法により全RNAを調製した。4.RNase活性は,トルーラ酵母RNA・花粉RNAを基質として各種RNAと反応させ,酵素分解された酸可溶性RNAの260nmにおける吸光度で測定した。Se-RNaseは,両RNAに対してRNaseAよりも明確に低い比活性を示した。5.精製したS-RNase(Se)をカラムマトリックス(HiTrap)に結合させアフィニティカラムを作製し,花粉タンパクからのS-RNaseとの相互作用タンパクの検索を行った。6.アフィニティクロマトグラフィで得られた花粉由来結合タンパクのS-RNaseのRNase活性に対する影響を調べたところ,花粉のS遺伝子型に関わらず顕著な変化は観測されなかった。7.表面プラズモン共鳴減少を利用するBiacore2000にリガンドとしてSe-RNaseを結合させ,自家及び他家花粉(SD及びGD)粗タンパクとの相互作用を観察したところ,他家花粉タンパクは自家花粉のそれに較べて圧倒的に大きな結合定数を与えた。[結論]リンゴS-RNaseは,S遺伝子支配の花粉タンパクとの相互作用で自他の識別をしている可能性を示した。リンゴにおける配偶体型自家不和合性の分子機構解明を目的とした。ナス科やバラ科では、花柱においてRNase活性を持つS-RNaseの発現がこの現象に必須であり、花柱と花粉のS遺伝子型の一致により花粉管の伸長が抑制され自他の花粉の識別が行われている。in vitroの生物検定においてS-RNaseは、花粉管伸長を抑制することから自家と他家の花粉管内では進入したS-RNaseの活性が異なって制御されていると考えられる。そこで以下に示す方法を用いてS-RNaseとの相互作用タンパクの同定を目標に研究を行った結果を報告する。方法;1)リンゴ花柱(品種SD)由来の精製したS-RNase及び抗リンゴS-RNase抗体を用いたHPLCカラムを調製し、自家と他家の発芽花粉管及び花柱の抽出粗タンパク画分からそれぞれS-RNaseとの相互作用タンパクの検索のためのアフィニテイクロマトグラフィーを行った。2)リンゴ品種SDから2種類の精製したS-

RNaseのRNase活性に与える、花粉及び花柱抽出物の影響をリンゴ花柱RNA及びトウルーラ酵母由来RNAを基質として調べた。3)in vitroの生物検定において培地に花粉或いは花柱抽出物を添加した場合の花粉管伸長に対する影響の観察した。結果;1)花粉抽出物からは、親和性を示す30,38,66,90KDのタンパクが花粉のS遺伝子型に関わらず検出され、花柱タンパクについても同様に行い30,36,50KDのタンパクが検出された。これらはカラムからの流出条件がS遺伝子型により異なった。したがって、S遺伝子支配タンパクの可能性も考えられる。これらタンパクのS-RNaseに対する直接的作用及びN末端アミノ酸配列解析については、現在のところ引き続き検討中である。2)天然の基質と考えられるリンゴ花粉RNAに対するS-RNaseの活性は、トウルーラ酵母由来RNAの場合と較べて大きな相違はなく、比活性はより低かった。3)花粉あるいは花柱抽出物を加えても伸長への影響は見られなかったが、花粉及び花柱抽出物の両方を加えると伸長の低下が観察された。しかし、どのような物質によるのかは、まだ不明である。従って、花粉管の伸長停止が、S-RNaseだけの関与かどうかは検討することが必要ある。配偶体型自家不和合性を示すバラ科のリンゴは、不和合性関与タンパクとして花柱中に発現するS-RNaseが知られている。これまでの我々の免疫電子顕微鏡観察研究結果から、リンゴS-RNaseは花粉管の花柱への進入を感知した花柱細胞から細胞外の花粉管誘導マトリックスに分泌され進入花粉のS遺伝子型に関係なく花粉管内に取り込まれることが明らかになっている。本研究課題では、自家不和合性の分子機構の1つの仮定として、S-RNaseのRNase活性が自家花粉内でのみ作用し他家花粉内では不活性になると考えた。そこで、花粉管内に入ったS-RNaseが花粉タンパク等との相互作用によりRNase活性に変化が起こるかどうかを物質間相互作用観察とS-RNase活性試験により検討した。[材料・方法及び結果]2.リンゴ風船状蕾の花柱から従来法によりS-RNaseは、DE52,CM52,ハイドロキシアパタイトのオープンカラム,FPLCにより精製された。3.花粉から塩化セシウム法により全RNAを調製した。4.RNase活性は、トルーラ酵母RNA・花粉RNAを基質として各種RNAと反応させ、酵素分解された酸可溶性RNAの260nmにおける吸光度で測定した。Se-RNaseは、両RNAに対してRNase Aよりも明確に低い比活性を示した。5.精製したS-RNase(Se)をカラムマトリックス(HiTrap)に結合させアフィニテイカラムを作製し、花粉タンパクからのS-RNaseとの相互作用タンパクの検索を行った。6.アフィニテイクロマトグラフィーで得られた花粉由来結合タンパクのS-
神経メディエーターを介して作用発現する高次サポニンの探索とメカニズム解析

抗糖尿病作用,抗炎症作用,強壮作用が伝承されている生薬について,種々の薬理試験を実施し,活性のあった生薬からサポニン成分の単離と構造解明を行うとともに,一部のサポニンについてはサポニン構造と薬理活性の相関を明らかにし,作用機序の解析を実施した.ニガウリ(Momordica charantia,果実)の抗糖尿病作用成分について研究を実施し,その過程で5種の新規cucurbitan型トリテルペンおよび10種の新規サポニンの化学構造を明らかにした.ブラジル産ロベイラ(Solanaum lycocarpum,果実)から主ステロイドアルカロイドサポニンに胃粘膜保護作用および糖負荷後の血糖値上昇抑制作用を見出し,その作用機序に関する知見を得た.タイ産ヤシ(Borassus flabellifera,花部)および主要成分dioscinに血糖値上昇抑制作用を見出すとともに6種の新規スピロスタン型ステロイドサポニンの絶対配置を含めた化学構造を明らかにした.エジプト産コロシント(Citrullus colocynthis,果実)の潟下成分および抗アレルギー成分としてcucurbitacin Eおよびその配糖体を明らかにするとともに,2種の新規cucurbitan型トリテルペンサポニンを明らかにした.人参花から得られたginsenoside類の新規機能性について検討するとともに17種の新規ダンマラン型トリテルペンサポニンを単離・構造決定した.デイジーフラワー(Bellis perennis,花部)や茶花(Camellia sinensis,花部)からperennisaponin類やfloratheasaponin類,chakasaponin類の構造を明らかにするともに,それらに脂質吸収抑制作用などを明らかにした.また,それらの作用機序として,膵リパーゼ阻害活性や胃排出能抑制作用が関与していることを明らかにした.抗糖尿病作用,抗炎症作用,強壮作用が伝承されている生薬について,種々の薬理試験を実施し,活性のあった生薬からサポニン成分の単離と構造解明を行うとともに,一部のサポニンについてはサポニン構造と薬理活性の相関を明らかにし,作用機序の解析を実施した.ニガウリ(Momordica charantia,果実)の抗糖尿病作用成分について研究を実施し,その過程で5種の新規cucurbitan型トリテルペンおよび10種の新規サポニンの化学構造を明らかにした.ブラジル産ロベイラ(Solanaum lycocarpum,果実)から主ステロイドアルカロイドサポニンに胃粘膜保護作用および糖負荷後の血糖値上昇抑制作用を見出し,その作用機序に関する知見を得た.タイ産ヤシ(Borassus flabellifera,花部)および主要成分dioscinに血糖値上昇抑制作用を見出すとともに6種の新規スピロスタン型ステロイドサポニンの絶対配置を含めた化学構造を明らかにした.エジプト産コロシント(Citrullus colocynthis,果実)の潟下成分および抗アレルギー成分としてcucurbitacin Eおよびその配糖体を明らかにするとともに,2種の新規cucurbitan型トリテルペンサポニンを明らかにした.人参花から得られたginsenoside類の新規機能性について検討するとともに17種の新規ダンマラン型トリテルペンサポニンを単離・構造決定した.デイジーフラワー(Bellis perennis,花部)や茶花(Camellia sinensis,花部)からperennisaponin類やfloratheasaponin類,chakasaponin類の構造を明らかにするともに,それらに脂質吸収抑制作用などを明らかにした.また,それらの作用機序として,膵リパーゼ阻害活性や胃排出能抑制作用が関与していることを明らかにした.抗糖尿病作用,抗炎症作用,強壮作用が伝承されている生薬について,種々の薬理試験を実施し,以下に述べる生薬からサポニン成分の単離と構造解明を行うとともに,活性発現の必須構造の解明などサポニン構造と薬理活性の相関を明らかにし,一部のサポニンについては作用機序の解析を実施した.タイ産ヤシ(Borassus flabellifera,花部)および主要成分dioscinに血糖値上昇抑制作用を見出すとともに6種の新規スピロスタン型ステロイドサポニンの絶対配置を含めた化学構造を明らかにした.エジプト産コロシント(Citrullus colocynthis,果実)の瀉下成分および抗アレルギー成分としてcucurbitacin Eおよびその配糖体を明らかにするとともに,2種の新規cucurbitan型トリテルペンサポニンの化学構造を明らかにした.ニガウリ(Momordica charantia,果実,葉)の抗糖尿病作用成分について研究を実施し,その過程で8種の新規cucurbitan型トリテルペンおよび配糖体の化学構造を明らかにした.ブラジル産ロベイラ(Solanaum lycocarpum,果実)からステロイドアルカロイドサポニンに胃粘膜保護作用および糖負荷後の血糖値上昇抑制作用を見出し,その作用機序に関する知見を得た.チャ(Camellia sinensis,種子,葉)から14種の新規オレアネン型トリテルペンサポニンの化学構造を明らかにするとともに,好塩基球由来細胞RBL-2H3の脱顆粒抑制活性を見出すなど,平成18年度の当初計画をほぼ達成したものと考える.平成19年度は,昨年度に引き続きインド,スリランカ,エジプト,ブラジルなどの植物資源ライブラリーの中から有望なサポニン生薬の選別を行うと同時に,昨年度までの研究で,有望な素材と考えられた素材から新規トリテルペンサポニン成分の単離と構造解明を行うとともに生活習慣病予防作用について実施した.

1)デイジーフラワー(Bellis perennis,花部)や茶花(Camellia sinensis,花部)からperemisaponin類やnoratheasaponin類,chakasaponin類の構造を明らかにするともに,それらに小腸内輸送能元進,中性脂質吸収抑制作用を明らかにした.また,それらの作用機序として,リパーゼ阻害活性や胃排出能抑制作用が関与していることが明らかとなった.2)人参花部のエキスや主要サポニンginsenoside Rdに胃粘膜保護作用を見出すとともに,新規noralginsenoside類の化学構造を明らかにした.その他,ロボフルーツからはlyconoside類の化学構造を明らかにした.さらに,糖尿病に有効と伝承されている人参の主要サポニン類やアグリコンなどについて,3T3-Ll細胞を用いてPPARγ様の分化促進作用等について検討した.また,floratheasaponin類やchakasaponin類などの薬理作用の作用メカニズムの解析を試みるなど,平成19年度の当初計画をほぼ達成したものと考える.
ミヤコグサ根粒菌ゲノムの多様性・可塑性の解析に基づく共生システム分子基盤の解明

ミヤコグサと共生する根粒菌の菌株間の差異に注目し、共生アイランドの構造上の相違と機能上の相違の相関、アイランド外のゲノム領域の共生における意義を調べるために、以下の実験を行った。1)ミヤコグサ根粒菌の菌株比較:4種の宿主を用いて、国内外でミヤコグサと近縁種の根粒から単離された15菌株について、共生アイランドに特異的な構造と宿主域を検定した。国内の6株はどれもTypeIIIタンパク質分泌装置、ニュージーランドや北米の9株はいずれもTypeIV装置の遺伝子群を持つと見積もられた。国内の6株はいずれもL.japonicusともL.corniculatusとも共生したが,ミヤコグサ近縁種Lotus pedunculatusには根粒を形成しても共生不能で、木本のマメ科植物ギンネムLeucaena leucocephalaには根粒形成しなかった。一方、ニュージーランドと北米で単離の9株はいずれもL.pedunculatusとL.leucocephalaに根粒を形成したが、両者に共生可能なものは4株で、残り5株は窒素固定不能であった。分泌系との関連は現在検証中である。2)共生アイランド水平移動モデル化に向けたリコンビナーゼ系の開発:インテグラーゼ・ファミリーに属する配列特異的なリコンビナーゼの標的配列(FRTやRS)をsingle-crossoverによりゲノムに組込む方法を確立した。3)ミヤコグサに早期老化根粒を形成するインゲン根粒菌の異種相補実験:インゲン根粒菌株Rhizobiumetli CE3株は、M.lotiと同じNod因子を産生し、ミヤコグサと不完全な共生を行う。整列化コスミドクローンとその派生物を個々別々に導入した結果、R.etliとミヤコグサの共生を部分的に高めるクローンを13得てきた。アセチレン還元法によりニトロゲナーゼ活性測定を行った結果、コスミド非導入株では感染2週間後にほぼ活性を失うのに対し、これらクローン導入株ではより窒素固定活性が長期にわたり保持されていた。さらに、共生能の向上は根粒数の持続的増加による量的なものと根粒数の変わらぬ質的なものの2種に分別された。個別責任遺伝子の同定と効果の加算性を検討しつつある。
幼児の仲間関係に影響を及ぼす親の諸要因に関する研究

幼児の仲間関係に影響を及ぼす親の諸要因を明らかにする為に、幼稚園へ通っている4歳以上の幼児を持つ両親へ研究への参加を求め、214名の母親と186名の父親から協力が得られた。仲間関係に影響する社会的行動(向社会的行動、攻撃的行動、引っ込み思案行動、情緒性、不安傾向/散漫性)については先生に評価してもらった。ソシオメトリー指名法は、親の反対によって中止された。親の養育態度は、権威的、権威主義的、許容的養育態度とその下位因子を因子分析によって抽出し、社会的行動との関係を見た。母親の権威主義的養育態度は、向社会的行動や自己主張と負の相関が見られ、父親の権威主義的養育態度は幼児の暴力/破壊的行動と正の相関が認められた。母親の権威主義的養育態度に影響を及ぼす要因としては、幼児の落ち着きのなさ、未熟な行動、頑固さといった性格が影響し、自分の不安・うつ的性格や暗い性格(感情的、不安定、不満ぽい、嫉妬深い、神経質等)も権威主義的養育態度を規定する要因であった。又、権威主義的養育態度を示す母親は、家族を喧嘩の多い、感情的でストレスのある家庭として見ていた。又、夫婦関係においても言い争いが多く、問題を無視・回避するといった態度が見られた。権威的養育態度を示す母親は、家族を調和のとれた理想的家族と見ており、夫婦関係においても相互に援助しあっている関係として捉えていた。このような母親の養育態度は、幼児の友好的性格や自分の明るい性格が影響していた。父親に関しても同様な傾向が見られた。又、両親の父母の養育態度の影響に関して見ると、父母が権威主義的養育態度であれば両親も権威主義的養育態度を示し、父母が権威的養育態度だった場合は、両親も権威的養育態度を示した。即ち、子どもに示す親の行動・態度は、親から娘、息子へと受け継がれ、彼らが親になった時、又同じ行動様式をとる事が明らかにされた。幼児の仲間関係に影響を及ぼす親の諸要因を検討する事を目的として研究を進めた。本年度は、データ収集が予定されていた。予備調査として、仲間関係に関する幼児への面接と親への質問紙収集を行った。しかし、一幼稚園の親から、幼児へ仲間関係について面接する事に対し反対があった。そのため、幼児への面接はこの研究から除外された。これに伴い、その幼稚園の親からの質問紙も途中で中止した。現在は、他の幼稚園でデータを収集中である。収集状況が思わしくなく、9年度も引き続きデータを収集する予定である。この予備調査では、大規模な幼稚園であったため、一部の質問紙は約190のデータが収集された。従って、予備的にデータ分析を行った。この分析に使用したデータは、幼稚園での子どもの行動評価(先生記入)、母親の養育態度、行動、信条、家族関係、夫婦関係に関する質問であった。まず、母親の養育態度に関しては因子分析を行った。その結果、第一因子として、権威主義的な養育スタイル(統制:高、温かさ:低)、第二因子として、権威的な養育スタイル(統制:高、温かさ:高)、第三因子として許容な養育スタイル(統制:低、温かさ:高)が抽出された。権威主義的な養育スタイルは、幼稚園での向社会的行動や仲間に対する親しみやすさと正の相関を示し、従来の研究とは異なる結果を示した。さらに、母親の権威主義的な養育スタイルと夫婦関係や家族の機能との関連を検討したところ、家族の機能の「喧嘩とストレス」因子と関連があった。

又、母親は、子どもに対して、競争心や奨励するような態度を示す傾向が見られ、夫婦間の問題も喧嘩による解決方法をとるといった極めて過激的な母親像を示した。現在収集中のデータからも同じ傾向がでるかどうか興味のあるところである。これらの結果は、1996年の日本発達心理学会、ISSBDで発表し、1997年の日本発達心理学会、SRCD等の学会でも発表する予定である。本研究は仲間関係に影響を及ぼす要因として親や家族に焦点をあて、その構造を明らかにすることを目的としてデータを収集した。データ分析の一部、母親の養育スタイルと子どもの社会的行動(攻撃性、向社会的行動、情緒性、消極性)との関係は分析が完了した。ここでは母親の養育スタイルと幼児の攻撃的行動との関係を報告する。養育スタイル項目(62項目)は因子分析を行い、第1因子として権威主義的養育スタイル(統制:高、応答性:低)が抽出された。即ち、子どもに対して受容力は低く、統制力が強い母親像である。この養育スタイルは子どもの攻撃的行動とは負の相関を示した。第2因子として権威的養育スタイル(統制:高、応答性:高)が抽出された。この権威主義的な養育スタイルの下位因子「言語的説明」(しつけや行動について子どもにことばで説明する)、は子どもの攻撃的行動の下位因子「犠牲的」と正の相関を示した。即ち、この養育スタイルの母親の子どもは友達からいじめられやすいという結果である。今日、いじめが社会的な問題となっているが、それらは幼児期の親の育て方と関連していることが本研究で明らかになった。子どもに対して温かく、子どもとは気楽につき合うような養育スタイルと仲間から意地悪されると臆病になったりそこから逃げ出すといった子どもの行動と関連していた。又、親密な関係を持った養育スタイルと(一緒に遊んだり冗談を言い合ったり、悩んでいる事があれば話すよう子どもに促す)、意地悪する仲間に対して攻撃的ではなく言葉で立ち向かうといった行動をとる一方で、仲間をいじめることを考えるといった子どもの行動と関係が見られた。未分析のデータから、このような母子関係の背後にどのような家族関係や夫婦関係、性格特徴などが見られるのかその構造を明らかにしていきたい。これらの成果は発達心理学会、米国児童心理学会、国際行動発達学会で発表した。
地方都市における犯罪発生場面の生態学的心理学による調査研究

盛岡市と周辺町村を対象とし、犯罪発生場面を物的・人的環境との動的関係から調査し、その発生抑制条件を明らかにした。そのことから地方における犯罪防止対策の基礎データを分析し、今後の研究の手がかりを提供した。本年度は具体的には以下について実施した。(1)GISによる犯罪分析窃盗犯とその地理的環境要因との関連分析を継続して行い、利用形態別の建物の割合と面積に基づいてクラスタ分析を行い、町丁目ごとに特徴を把握することが可能となった。その結果、対象地域は繁華街地域、繁華街・住宅混在地域・住宅中心地域に分類され、犯罪手口との関連が明らかとなった。これまで市町村(区)単位、交番管轄単位で分析されていたが、本研究によりさらに詳細な分析が可能となるだけでなく、防犯の面でも地域特性に応じた対策の検討が可能となった。(2)防犯意識向上のための地域安全マップ作製の効果に関する調査地域安全マップの効果は被害防止能力、コミュニケーション能力、地域への愛着心、非行防止能力の向上がある。それぞれの尺度を作成し、岩手県内農村部の一小学校児童を対象に調査を実施した。地域住民を含む地域安全活動に児童が参加し、実施前・後・3ヶ月後の能力の変化を調査し、安全活動の関与の効果について明らかにした。まとめとして、地方における犯罪発生は都市およびその周辺部においては罪種とその地域の建物利用形態との関係により発生の態様が異なり、農村部においては地域住民の安全対策への関与により犯罪発生・抑制に差異が出ることが確認され、今後、地方における犯罪防止はそれぞれの地域特性に応じたきめ細かい施策が必要とされる。3年間に渡る本研究はその基礎的な資料を提供するものである。今年度は、1.平成1416年の認知犯罪データの整備、2.物的環境データの整備、3.人的・社会的環境データの整備を柱として研究を進めてきた。(1)犯罪基本データベース(DB)の構築平成14年の犯罪基本DBの確認作業とともに、平成15年の犯罪基本データをDBに登録した。認知犯罪データのうち、発生場所が特定できないものを除き、S管内455件、E管内265件、M管内589件の犯罪基本データを登録した。平成14・15年に次ぎ、現時点では平成16年の犯罪基本データの個別確認作業・登録作業中で、次年度の時間的推移の分析のための準備を進めている。(2)GISによる犯罪解析(1)犯罪発生密度の推移平成14・15年の犯罪基本データをもとに、犯罪発生密度を作成した。解析結果から、乗物盗を除き、ほぼ全罪種における犯罪密度の変化が小さかった。乗物盗については、駐輪場の区画等の整理が平成15年の自転車盗の減少につながっており、その発生密度が大きく変化した。(2)対象領域内に発生した犯罪の罪種とその街区の建物の利用形態との関係対象領域の各街区における犯罪の罪種および周辺建物の利用形態についてクラスター分析を行い、商業地域で粗暴犯・乗物盗・万引き・置引きが多いなど、罪種と建物の利用形態との関係を見ることができた。【学会発表】佐藤敦・細江達郎・長澤秀利・Prima Oky Dicky A.・細越久美子2005 GISによる犯罪派生場面の基礎的研究(1)犯罪集中地区の検出の試み日本犯罪心理学会第43回大会長澤秀利・細江達郎・Prima Oky Dicky A.・佐藤敦・細越久美子2005 GISによる犯罪発生場面の基礎的研究(2)物理的環境要因と犯罪発生との関連日本犯罪心理学会第43回大会長澤秀利・細江達郎・Prima Oky Dicky A.・細越久美子2005 GISによる犯罪発生場面の基礎的分析日本心理学会第69回大会(1)GISによる犯罪分析平成18年度には、犯罪とその地理的環境要因との関連分析を試みた。ここで、建物密度をもとに、対象領域を幾つかのケースに区分し、ケースごとのクラスタを分類した。クラスタ分析によって得られたデンドログラムから、対象領域の繁華街型区域を抽出できた。なお、犯罪発生データに基づく分析と地理的環境データに基づく分析の結果が一致したことから、犯罪発生と地理的環境との間に関連があることが証明された。(2)地域防犯活動および防犯意識に関する調査滝沢村内の小学生に対する集合調査を行ない、校区ごとの安全状況(登下校の形式、地域住民との接触・交流、見知らぬ人に声を掛けられた経験等)を調査した。また、滝沢村の全小学校、盛岡西警察署、岩手県教育委員会等の関係者に、不審者の出現状況・登下校時の児童の状況や地域安全活動の取り組み状況等について聴き取りを行なった。その結果、(1)この1年ほどの間に、特に県央・県南において見守り活動を実施、(2)ほとんどは地域住民(父母会、老人クラブ等)との連携で実施、(3)自律行動が増える小学校高学年の危険が高い、(4)見守り活動の維持・継続が困難、(5)見守り活動は危険の程度よりも地域の凝集性によって促進される、等が指摘される。(3)高校生の自転車利用状況と盗難被害状況に関する調査盛岡地区の高等学校25校を対象に、自転車利用状況、盗難被害状況等の把握を試みた(有効回答率は78.6%(1965部))。分析の結果、高校生の自転車利用率が高く、同時に通学時における自転車利用率も高いことが確認された。

自転車盗難被害経験者は2割程度で、そのう、警察へ届け出た者の割合は約半数に留まった。主な理由は、「面倒だから」、「どうせ見つからないと思ったから」で、自転車盗に対する被害意識がやや低いことが確認された。【学会発表】1.竹高敦史,伊藤久祥,Dicky A. Prima Oky,伊藤憲三,GISによる犯罪とその地理的環境要因との関連分析に関する検討,情報処理学会第69全国大会,2007.2.佐藤敦・細江達郎・細越久美子・長澤秀利・Prima Oky Dicky A.、GISによる犯罪発生場面の基礎的研究(3)-犯罪集中地区の検出の試み-、犯罪心理学会第44大会、2006.3.長澤秀利・細江達郎・細越久美子・Prima Oky Dicky A.、GISによる犯罪発生場面の基礎的研究(4)-環境要因と犯罪発生との関連を中心に-、犯罪心理学会第44大会、2006.盛岡市と周辺町村を対象とし、犯罪発生場面を物的・人的環境との動的関係から調査し、その発生抑制条件を明らかにした。そのことから地方における犯罪防止対策の基礎データを分析し、今後の研究の手がかりを提供した。本年度は具体的には以下について実施した。(1)GISによる犯罪分析窃盗犯とその地理的環境要因との関連分析を継続して行い、利用形態別の建物の割合と面積に基づいてクラスタ分析を行い、町丁目ごとに特徴を把握することが可能となった。その結果、対象地域は繁華街地域、繁華街・住宅混在地域・住宅中心地域に分類され、犯罪手口との関連が明らかとなった。これまで市町村(区)単位、交番管轄単位で分析されていたが、本研究によりさらに詳細な分析が可能となるだけでなく、防犯の面でも地域特性に応じた対策の検討が可能となった。(2)防犯意識向上のための地域安全マップ作製の効果に関する調査地域安全マップの効果は被害防止能力、コミュニケーション能力、地域への愛着心、非行防止能力の向上がある。それぞれの尺度を作成し、岩手県内農村部の一小学校児童を対象に調査を実施した。地域住民を含む地域安全活動に児童が参加し、実施前・後・3ヶ月後の能力の変化を調査し、安全活動の関与の効果について明らかにした。まとめとして、地方における犯罪発生は都市およびその周辺部においては罪種とその地域の建物利用形態との関係により発生の態様が異なり、農村部においては地域住民の安全対策への関与により犯罪発生・抑制に差異が出ることが確認され、今後、地方における犯罪防止はそれぞれの地域特性に応じたきめ細かい施策が必要とされる。3年間に渡る本研究はその基礎的な資料を提供するものである。
可視光応答性を有するボール型チタニアナノバスケットの合成とそれを用いる光触媒反応

種々の条件で合成したHyCOM-TiO_2を合成し、溶媒やカップリング剤の種類を変更してバスケット構造の構築を検討したが細孔を有するボール型のナノバスケットは構築されなかった。HyCOM-TiO_2の多くが球状のような微粒子ではなく、ある程度の厚みを有した六角板状の構造であるため、バスケット構造の構築が困難であることが原因であると考えられる。焼成処理によって表面Rh種の状態を制御した高活性なRh^<3+>/TiO_2を用い、可視光照射下において本課題の反応の一つであるニトロベンゼンの光触媒的還元反応を行った。2-プロパノール溶媒を用いてこの反応を行ったところ、反応の進行が確認され、65%の選択率でアミノベンゼンを得ることに成功した。これは可視光照射下において金属イオン修飾TiO_2光触媒系を用いて還元的有機合成を行った初めての例である。また、この反応系はTiO_2をベースにした可視光応答型光触媒による還元反応であるため、既存の反応系への応用や他反応系との様々な組み合わせが期待できる。金属イオン修飾TiO_2を用いたアルコールの選択酸化反応において、さらなる反応性の向上のために反応系における基質(ベンジルアルコールとその酸化生成物)の吸着特性の解析を行った。その結果、基質の酸化速度はTiO_2上への吸着量に依存することを見出した。金属イオン修飾TiO_2を用いた本反応系において基質の酸化速度は吸着量によって決定され、アルコールとアルデヒドの吸着量の差が、アルデヒド生成の高い選択性に寄与していることが明らかになった。これらの結果は、TiO_2ベースの光触媒を用いるアルコールの選択酸化反応系において、今後の触媒設計指針に大きく貢献すると考えられる。総括すると、HyCOM-TiO_2を用いたバスケット構造の構築には至らなかったが、金属イオン修飾物の制御や、ソルボサーマル法によって合成した新規可視光応答型光触媒により、当初の計画以上の反応の多様性を得るとともに、今後の可視光応答型光触媒の発展が期待される結果を得た。(抄録なし)触媒合成において、当研究室で開発したHyCOM法を用いて酸化チタン(TiO2)を合成し、温度や保持時間を調整してTiO2の物性を精密に設計した。これらのTiO2微粒子は各種キャラクタリゼーションによって物性を解析した。溶媒の種類、pH、温度、カップリング剤の種類、方法などを変更し、ボール型チタニアナノバスケットの構築条件を検討した。また、HyCOM法を用いたTiO2合成を行う中で、既存のグリコサーマル法を用いることで新規可視光応答型光触媒(ニオブ酸スズ)の合成に成功した。これは、当初計画していなかった新たな発見である。新規な光触媒的有機合成反応においては、まず可視光照射下でアルコールからアルデヒドへの選択酸化反応を行った。様々な金属イオンをTiO2に修飾した光触媒を用いて、ベンズアルデヒドの選択酸化生成を行ったところ、以前に発見した高活性なロジウムイオンの他に、パラジウムイオン、ルテニウムイオンを修飾したTiO2も高い活性を示すことを新たに見出した。ルテニウムイオン修飾TiO2に関しては、これまでの他の光触媒とは異なる新たな反応挙動を示し、学術的にも非常に興味深い期待以上の結果が得られた。また、ロジウムイオン修飾TiO2では、用いるTiO2の種類を変更し、この反応系における特性を解析した。さらに、用いるアルコールの種類を拡大し実験を行ったところ、ほとんどのアルコールにおいて90%を超える高い収率を示した。当研究室で開発したHyCOM法(有機溶媒中におけるナノ結晶酸化物の合成法)を用いて酸化チタン(TiO_2)を合成した。このTiO_2微粒子を用いて、溶媒の種類、pH、温度、カップリング剤の種類、方法などを変更し、ボール型チタニアナノバスケットの合成を試みた。現在までに検討した合成条件においては、バスケット構造は構築されないことが判明した。また、還元反応と酸化反応を同時に行う特異反応系の検討の第一段階として、金属イオン修飾TiO_2微粒子を用いて、可視光照射下における酸化反応(ベンジルアルコールからベンズアルデヒドへの酸化)と還元反応(ニトロベンゼンからアミノベンゼンへの還元)を個別に行った。その結果、酸化反応においては、選択率90%以上の高い活性が得られたが、還元反応においては選択率が50%程度だった。そこで、前年度の研究過程において新たに発見した可視光応答型光触媒:ニオブ酸スズを用いて、この還元反応を行ったところ、99%を超える極めて高い選択性を示した。これらの結果から、金属イオン修飾TiO_2とニオブ酸スズを複合する事で、本研究課題の目標反応への新たなアプローチの可能性が示唆された。また、金属イオンを修飾したTiO_2粉末において、これまでの研究で高い活性を示しているロジウムイオン修飾TiO_2を、空気雰囲気下で焼成処理を行うことによりさらに活性が向上する事を見出した。350°Cのまでの温度領域では活性の向上が見られたが、350°C以上の温度領域では活性の減少が見られた。この結果は、金属イオン修飾による可視光応答性(可視光吸収特性)を、さらに性能向上させることが十分に可能である事を示唆している。

HyCOM-TiO_2の多くが球状のような微粒子ではなく、ある程度の厚みを有した六角板状の構造であるため、バスケット構造の構築が困難であることが原因であると考えられる。焼成処理によって表面Rh種の状態を制御した高活性なRh^<3+>/TiO_2を用い、可視光照射下において本課題の反応の一つであるニトロベンゼンの光触媒的還元反応を行った。2-プロパノール溶媒を用いてこの反応を行ったところ、反応の進行が確認され、65%の選択率でアミノベンゼンを得ることに成功した。これは可視光照射下において金属イオン修飾TiO_2光触媒系を用いて還元的有機合成を行った初めての例である。また、この反応系はTiO_2をベースにした可視光応答型光触媒による還元反応であるため、既存の反応系への応用や他反応系との様々な組み合わせが期待できる。金属イオン修飾TiO_2を用いたアルコールの選択酸化反応において、さらなる反応性の向上のために反応系における基質(ベンジルアルコールとその酸化生成物)の吸着特性の解析を行った。その結果、基質の酸化速度はTiO_2上への吸着量に依存することを見出した。金属イオン修飾TiO_2を用いた本反応系において基質の酸化速度は吸着量によって決定され、アルコールとアルデヒドの吸着量の差が、アルデヒド生成の高い選択性に寄与していることが明らかになった。これらの結果は、TiO_2ベースの光触媒を用いるアルコールの選択酸化反応系において、今後の触媒設計指針に大きく貢献すると考えられる。総括すると、HyCOM-TiO_2を用いたバスケット構造の構築には至らなかったが、金属イオン修飾物の制御や、ソルボサーマル法によって合成した新規可視光応答型光触媒により、当初の計画以上の反応の多様性を得るとともに、今後の可視光応答型光触媒の発展が期待される結果を得た。金属イオン修飾TiO2を用いたアルコールからアルデヒドへの選択酸化反応において、期待以上の結果と発見があったため、光触媒的有機合成反応の研究は計画より進行している。そのため触媒合成の進行度が計画と異なっているが、全体の進行度はおおむね計画通り進行している。ボール型チタニアナノバスケットの合成構築が達成されていないため、計画よりやや遅れている。一方、バスケットに可視光応答性を付与するための金属イオン修飾の特性や、それを用いた選択酸化反応においてはTiO_2微粒子を用いて実験を行っており、計画以上に研究が進展していると共に、非常に有用な結果が得られている。そのため、バスケットが構築された後の可視光応答性を付与した実験は、高活性な金属イオンが判明しているため、効率的に進行できると考えられる。触媒合成においては、引き続きボール型チタニアナノバスケットの合成実験を行う。その後、ボール型チタニアナノバスケットの基本性能を調べるため、水中有機物分解と水素生成反応を行った後、可視光応答化のため金属イオンを修飾する。新規光触媒的有機合成反応においては金属イオン修飾TiO2(特にルテニウムとパラジウム)による酸化反応系を詳細に解析しながら、基質の拡張を行う。
ブロモウイルスの増殖に関与するシロイヌナズナ遺伝子のクローニングと機能解析

1.モデル植物のシロイヌナズナに感染する新たなプロモウイルスとしてCassia yellow blotch bromovirusを同定し、さらにcDNAを介した遺伝子操作系を確立した。各種アクセッションにおける感染性を調査し、Spring beauty latent bromovirus (SBLV)と比較した結果、数種において異なる感染性と病徴発現が見られた。2.SBLV感染により激しい病徴を示すS96と無病徴感染を示すCol-0における病徴発現の違いは不完全優性の核内単一遺伝子座によって支配されていることがわかり、その遺伝子座をSSB1と命名した。植物体とプロトプラストにおけるSBLVの感染性には、Col-0とS96の間で顕著な差は見られなかったことから、両アクセッション間における病徴の差異はSBLVの感染性の違いに起因しないことが示された。SSB1遺伝子座は第4染色体上の遺伝子マーカーCAT2とnga1107の間にマッピングされた。また、S96の病徴発現にサリチル酸経路とエチレン経路が関与していることが示唆された。3.シロイヌナズナCol-0に全く感染しないBrome mosaic virus (BMV)は、CPR5遺伝子の機能が失われた変異体において効率よく全身感染する。BMVの感染が野生型Col-0中の少なくとも一細胞での増殖のステップで阻害されていることが示唆された。また、cpr5変異体において恒常的に発現している防御応答関連遺伝子の機能をさらに欠失させた多重変異体を用いた解析から、BMV感染に対する(cpr5変異体の感受性には既知の防御応答経路とは異なる機構が関与していることが強く示唆された。1.ブロモウイルスの一種であるSpring beauty latent virus (SBLV)はシロイヌナズナCol-0の突然変異体2433B中で細胞間移行が遅延し、この遅延は劣性の形質によって支配されていた。これまでに、原因遺伝子座のファインマッピングに向け、2433Bと他のアクセッション(Nd-1)とのF2種子を取得した。2.SBLV増殖の遅延するシロイヌナズナアクセッション(Pla-0)中の原因遺伝子座は複数存在することが示唆されたため、現在、Pla-0とCol-0との交配後、ライン分けを行って、原因遺伝子のマッピングに向けた準備を行っている。3.SBLV感染により激しい病徴を示すS96と無病徴感染を示すCol-0における病徴発現の違いは不完全優性の核内単一遺伝子座によって支配されていることがわかり、その遺伝子座をSSB1と命名した。現在,さらにSSB1のファインマッピングを行っている。4.野生型Col-0と変異体cpr5におけるBrome mosaic virus (BMV)とSBLVの感染性を調査した結果、BMVの感染が野生型Col-0中の少なくとも一細胞での増殖のステップで阻害されていることが示唆された。また、CPR5遺伝子に欠損を持つ他の既報の変異体におけるBMV、SBLVの感染性を調査し、これまでの結果がCpr5遺伝子の変異のみによって起こっていることを確認した。cpr5変異体において恒常的に発現している防御応答関連遺伝子の機能をさらに欠失させたdoubleまたはtriple変異体を用いた解析から、BMV感染に対すcpr5変異体の感受性には既知の防御応答経路とは異なる機構が関与していることが強く示唆された。1.Col-0由来でSBLV感染が遅延する変異株(2433B)が選抜されている。2433Bと他のアクセッション(Nd-1)とのF_2植物を用いた解析から、感染遅延の原因遺伝子座は第4染色体に座乗することが明らかとなった。また、マーカーが整備されているLer/Colの系を利用するため、Lerと2433Bを交配したF_2種子を準備した。

2.Col-0とPla-0を交配し、そのF_2種子から植物の生長がCol-0並に早く、かつウイルスにかかりにくい形質を持つライン(PC7)が選抜されている。本年度の研究から、SBLV増殖の遅延に関与する原因遺伝子座は複数存在することが示唆された。3.SBLV感染によって激しい病徴を示すアクセッションS96において、この表現型に関与する不完全優性の核内単一遺伝子座SSB1が同定されている。前年度までにSSB1遺伝子座は第4染色体上の遺伝子マーカーCAT2とnga1107の間にマッピングされた。この領域に存在するR遺伝子様遺伝子をgenomic PCRによって単離した。現在、これら遺伝子を導入した形質転換植物をCol-0とS96の間で相互に作製し、当該遺伝子であるかどうかの検証を行っている。これまでにS96の病徴発現にサリチル酸の経路が関与していることが示唆されている。本年度の研究から、エチレン経路を阻害する優性変異etr1-1は逆に病徴を激しくさせることから、エチレン経路は病徴発現を抑制的に制御している可能性があることが示唆された。4.これまでに、シロイヌナズナCol-0に全く感染しないBMVが、CPR5遺伝子の機能が失われた変異体において効率よく全身感染することが明らかとなっている。CPR5遺伝子の機能を解析するため、Col-0からCPR5の全長cDNAクローンをRT-PCRによって取得した。このcDNAを35Sプロモーターの制御下に置き、cpr5-2を形質転換した。現在までのところ形質転換体では、cpr5-2の表現型が相補された。すなわち、トライコームは正常に復帰し、自然病斑は出現せず、またBMVに対する感受性は野生型のCol-0と同様に失った。このことから、BMVに対するシロイヌナズナの抵抗性にCPR5が関与していることが示された。
ヒマラヤ固有種であるウバユリ属植物の種子発芽と種子の貯蔵

・野外での実験秋における種子の成熟期には,C.giganteumの種子は未発達の胚を有しており,胚は,翌年の高温期の夏を経た秋に生長を開始した。播種してから二回目の冬の終わりから春の初めにかけて発根し,雪が解けた春に出芽した。すなわち,種子が散布されてから出芽までには18-19ヶ月の長い期間を要した。・室内での実験野外での実験では,種子散布後,「(秋→冬→春)→夏→秋→冬→春」の2回目の春に子葉が出芽した。しかし,室内の実験では,野外の夏→秋→冬→春を模した25/15°C(120d)→15/5°C(90d)→0°C(90d)→15/5°Cの温度推移を与えることで,胚が生長し,発根して出芽した。すなわち,C.giganteumの種子は秋に結実するにもかかわらず,その後の(秋→冬→春)の温度は,胚成長,発根,出芽に不要であることが示された。夏→秋の温度を与えられて完全に胚が伸長した種子は,その後,90日間の冬の温度を経験させることによって幅広い温度で,高い発根率と出芽率を示した。GA3は,胚の生長に対して効果はなく,したがって,その後の発根と出芽にも効果はなかった。・種子の貯蔵採取直後の種子は,96%の高い発芽率を有していた。-20°Cと0°Cで密封乾燥貯蔵した種子は,貯蔵後450日を経ても80%以上が生存していたが,15°C,20°C,そして室温で貯蔵した種子は450日の貯蔵後には,生存率が20%にまで低下した。1.種子の採取と生育地での温度データロガーの設置:2006年10月下旬にUttaranchal州,ヒマラヤでCardiocrinum giganteum(以下,便宜的にオオウバユリと呼ぶ。)が約10個体生育しているのを確認した。ここで,種子生産量を調査するために10個の果実を採取した。しかしオオウバユリの朔果はまだ青く充分に成熟していなかった。村人に成熟した時期に種子を採取して日本に送るように依頼した。生育地の土壌表面と土中5cmの温度を測定するために,データロガーを設置した。個体当りの朔果数は7.40±1.80,朔果当たりの種子数は535.4±92.6,個体当りの種子生産量は4027±1501,千粒重は11.94±1.44gであった。2.野外での発芽フェノロジー:インドの植物遺伝資源局に許可を得た後,2006年12月中旬に成熟した果実から採取された種子が到着した。種子の到着直後では,胚は十分に大きくなっておらず,胚長は0.78±0.13mm,種子長は6.38±0.24mmあり,胚長は種子長の約12%であった。野外での胚成長の過程を調査するために。2006年12月に種子を育苗箱に埋土した。60日後に種子を堀りあげて胚長を調査したところ,0.94±0.1mmとわずかに生長していた。同じ日に,発根過程を調査するために,不織布に包んだ種子を育苗箱に埋土した。また,出芽の過程を調査するために,植木鉢に種子を約1cmの覆土で播種した。育苗箱および植木鉢の表面の温度をデータロガーで記録している。3.室内での発芽実験:野外での胚成長から出芽までのフェノロジーが,どのような温度条件によって引き起こされるのかを明らかにするために,12月に恒温器を用いて様々な温度条件のもとでシャーレを用いた発芽実験を行っている。播種後から種子が発根するまでには早くとも8ヶ月を必要とすると思われるため,現在定期的に観察して水分の補給を行っている。4.種子の貯蔵実験:オオウバユリを自生地以外の場所で保存することと,積極的な増殖を想定して,種子の貯蔵方法を明らかにする。様々な方法で貯蔵した後,1年経過後の種子の生存率を調査するために,12月に種子をいくつかの方法で貯蔵している。・野外におけるCardiocrinum giganteumの胚成長と発芽フェノロジー2006年12月に野外のフレームハウス内に種子を埋土し,定期的に堀りあげて胚成長と発芽状況を観察した。C.giganteumの種子は種子が散布される時期には未発達の胚を持ち,完全に伸長した胚長の約10%であった。秋に散布された胚は,1回目の冬を経た翌年の秋まで伸長しなかったが,秋に急速に伸長して積雪期の冬までには,完全に伸長した胚長の97.7%にまで達した。すなわち,胚が完全に伸長するまでには,種子の散布から15ケ月を要したことになる。・室内実験での発根,出芽実験室内実験では,胚の生長,発根,子葉の出現(出芽)に必要な温度条件を明らかにするために,恒温器を用いて様々な温度条件を与える発芽実験を行った。