hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
便潜血検査用検体を用いた大腸癌新規スクリーニング法の開発

目的:大腸癌の主要なスクリーニング法に便中の血液を検出する便潜血検査があるが、早期癌での感度が低い、偽陽性を生じるなどの問題があり、感度、特異度ともにより優れた検査法の確立が望まれる。そこで便検体を用いたDNAテスト(TWIST1メチル化検出)による大腸癌スクリーニング法の確立を試みた。大腸癌患者の便よりDNAを抽出しTWIST1メチル化レベルを測定したところTWIST1メチル化陽性であったのは9/ 49例(18%)であった。この結果から便DNA検査による大腸癌スクリーニングの有用性が示唆された。我が国において大腸癌死亡数は年々増加している。2015年における癌患者数推計では、大腸癌患者数が癌患者の中で最も多くなることが予想されており、その対策は急務である。「がん対策基本法」に基づき2011年までのがん対策の基本方向を定めた「がん対策推進基本計画」では全体目標の1つとして「10年以内に75歳未満のがん死亡率の20%減少」を掲げている。また数値目標の1つとして「3年以内に50%以上の癌検診率向上」を目指している(※平成17年度における大腸癌検診率は18.9%)。このような背景もあり、大腸癌の一次スクリーニングである便潜血検査件数は今後増加することが見込まれる。しかしながら便潜血検査には以下の問題点が指摘されている。1)早期癌における感度が低い(便潜血検査の感度は進行大腸癌では70%前後、早期大腸癌では35%前後に過ぎず、特に早期癌においては感度が低い)。2)偽陽性率が高い(一次検診の便潜血検査が陽性であったため二次検診を受診した33万人のうち32万人が大腸癌を認めなかった(偽陽性)という報告4からも分かるように、便潜血検査は偽陽性率が非常に高い)。以上の問題点から、より精度の高い大腸癌一次スクリーニング法を開発する必要性が考えられた。今回我々は、正常大腸粘膜に比べ、大腸癌において高度メチル化を認める遺伝子を発見した。本遺伝子のメチル化のレベルは大腸粘膜では平均9.4%(n=218)であったのに対し、大腸癌では平均57.4%(n=341)であった(P<0.0001)。この知見により、便中に含まれる大腸癌細胞を回収し、マーカー遺伝子メチル化を調べることで、大腸癌スクリーニングに応用できる可能性がある。我が国において大腸がん死亡数は年々増加している。2015年における癌患者数推計では、大腸がん患者数が癌患者の中で最も多くなることが予想されており、その対策は急務である。大腸がんの一次スクリーニングである便潜血検査件数は今後増加することが見込まれるが便潜血検査には以下の問題点が指摘されている。1)早期がんにおける感度が低い(便潜血検査の感度は進行大腸がんでは70%前後、早期大腸がんでは35%前後に過ぎず、特に早期がんにおいては感度が低い)。2)偽陽性率が高い(一次検診の便潜血検査が陽性であったため二次検診を受診した33万人のうち32万人が大腸がんを認めなかった(偽陽性)という報告からも分かるように、便潜血検査は偽陽性率が非常に高い)。以上の問題点から、より精度の高い大腸がん一次スクリーニング法を開発する必要性が考えられたため本研究を行うに至った。平成22年度の研究実績の概要は以下の通りである。(1)DNAチップによる網羅的解析を行い、大腸がんに特異的なメチル化遺伝子(候補)を発見した。(3)それらの候補遺伝子の中から、正常大腸粘膜に比べ、大腸癌において高度メチル化を認める遺伝子を発見した。しかも単一遺伝子解析により両者を区別することが可能であった。(2)安価に解析可能なPCRベースの解析法を開発した。また自動化解析を念頭においたパイロシークエンスや質量分析機による解析法も確立した。(2)便検体を使用して大腸腫瘍スクリーニング検査の予備試験を行った。1早期がんにおける感度が低い(便潜血検査の感度は進行大腸がんでは70%前後、早期大腸がんでは35%前後に過ぎず、特に早期がんにおいては感度が低い)。

2偽陽性率が高い(一次検診の便潜血検査が陽性であったため二次検診を受診した33万人のうち32万人が大腸がんを認めなかった(偽陽性)という報告からも分かるように、便潜血検査は偽陽性率が非常に高い)。以上の問題点から、より精度の高い大腸がん一次スクリーニング法を開発する必要性が考えられたため本研究を行うに至った。平成23年度の研究実績の概要は以下の通りである。便検体を使用して便DNAテストによる大腸腫瘍スクリーニング検査の前向き試験を行った。具体的には大腸癌症例のべ90検体、健常人ボランティア20検体、その他は前立腺癌や卵巣癌の直接浸潤、GIST、良性腫瘍など8検体の便検体を収集した。大腸粘膜上皮細胞を便中から抽出した後COBRA法によりTwist1のメチル化解析を行った。解析の終わった49症例中9症例でTwist1遺伝子のメチル化が確認されており、感度は約20%と便潜血と大差ない結果であったが、健常人の検体では検出されず、特異度は100%であった。現在の測定系では検査感度が20%と低いため、今後は高感度メチル化検出法を開発する必要がある。
グリオーマにおける単球遊走因子の遺伝子発現とその調節機構

悪性グリオーマに対する免疫療法が期待される中で脳腫瘍に対する免疫反応が改めて認識されている。悪性グリオーマ局所にはマクロファージを中心とした単核球浸潤が著明であり、悪性グリオーマに対する免疫反応と考えられる。私達はグリオーマ局所へのマクロファージの浸潤機序を明かにする過程でグリオーマ細胞由来の単球遊走因子(Monocyte chemoattractant-1:MCP-1)を分離精製し、その生化学的構造、DNA sequenceについても明かにしてきた。今回、私達はMCP-1に対するモノクローナル抗体、MCP-1 cDNAを用いて、human glioma cell linesおよび手術摘出グリオーマ組織におけるMCP-1のmRNA及び蛋白の発現について検討した。その結果、11 human glioma cell linesのうち6 cell linesで、また8例の悪性グリオーマの手術摘出組織のすべてでノーザンブロット法にてMCP-1 mRNAの発現が認められた。しかし症例によってMCP-1の発現にheterogeneityが認められた。グリオーマ局所にマクロファージが多く浸潤している組織でMCP-1の発現が多い傾向が見られた。更にin situ hybridyzation法にてもグリオーマ細胞に存在していることを確認した。正常脳組織ではMCP-1の蛋白あるいはmRNAの発現はなく、組織中のグリオーマ細胞でも大型で異型性の強い細胞にMCP-1の発現が多い傾向が見られた。以上のことから、悪性グリオーマ細胞からMCP-1が産生されて腫瘍局所のマクロファージの浸潤を来していることを明らかにした。
大脳皮質脳梁形成及び関連するmidline gliaに関する分子生物学的研究

神経回路の形成機構、特に前脳内での回路形成機構を分子レベルにて解明することを目的とし、以下の二つのテーマで実験を行った。(1)大脳皮質内、特に左右の半球間を結ぶ交連線維(脳梁)の形成機構に関わる分子の検索。(2)下等動物にて交連線維形成の鍵とされる、いわゆるmidline gliaの前脳交連線維形成に及ぼす役割を哺乳動物にて検討。本報告では特にテーマ(1)に関する結果について記す。具体的な実験としては、脳梁欠損マウスであるI/LnJマウスをモデルとし、このマウスにて変異した因子が脳梁欠損の原因に関連していることを仮定し、この特異的に変異している因子に対する抗体の作成を試みた。すなわち、I/LnJマウスに、正常マウスの前脳膜ホモジネイトを免疫し、このI/LnJマウスより脾臓を取り出し、ミエローマP3U1細胞と細胞融合させハイブリドーマを約600クローン作成した(変異因子は正常マウスとI/LnJマウスとで構造が一部異なる、もしくはI/LnJマウスで欠損していることを仮定すると、I/LnJマウスはこの因子を異物と認識し、抗体を産生しうるものと考えられる)。これらのクローンより、正常マウス蛋白質に反応する抗体を産生するクローンをドットブロット法にて選定した。最終的に4クローンを抗体産生ハイブリドーマとして同定した。正常マウスおよびI/LnJマウス神経組織に対するウエスタンブロット法による検討では、抗体の認識するバンドの強弱も含めたパターンは異なるものの、正常マウス由来のレーンにのみ存在する特異的なバンドは観察されなかった。現在この結果に関しさらに検討を行っている。
銀河間衝突と銀河中心核の活性化

銀河間衝突が銀河中心核の核活動、特にセイファ-ト現象やクエサ-と深く係わっているのではないかとの仮説は1985年に出され、最近大きな関心を呼んでいる。衝突に依って相棒銀河から剥ぎ取られたガスが銀河中心核へと隆り積もり、爆発的星の形成を引き起こし、ブラック・ホ-ルへガスを供給して中心核を活性化する、と言うのである。銀河間衝突で形成されたことがはっきりしているリング状銀河について、セロトロロ天文台で得たCCD撮像分光デ-タを本研究費で購入したワ-クステ-ションを用いて解析を行い、現在までに以下の結果を得た。1.約40個のリング状銀河の中心核は輝線や強いバルマ-吸収線を示しており,星形成等の激しい核活動が起こっている事を見いだした。2.輝線を示す銀河の大部分はライナ-(LINER)やスタ-・バ-スト型であり,セイファ-ト2型はわずか3個、1型は新たには1個も発見出来なかった。3.また、多くのリング状銀河がIRAS赤外線源であることもつきとめた。4.以上の事より、リング状銀河では予想通りの形成は極めて活発ではあるが、セイファ-ト1型が少なかったことより、銀河間衝突がブラック・ホ-ルへガスを供給して銀河中心核を活性化する、とのシナリオを検証するには至らなかった。5.その理由として、リング状銀河を形成する衝突は銀河ディスクを垂直につっきるタイプなので、ガナを中心核へ落し難しくなっているとも考えられるが、その割にはスタ-・バ-スト型が多いことからそう単純でもなさそうである。6.リングを持った楕円銀河であるHoagーtype銀河ではバルマ-吸収線が強く、10億年以内に激しい星の形成があったと思われる。なお、平成4年7月にもう一度セロトロロ天文台で観測できる事となったため、この問題をより一層突き詰めたいものである。銀河間衝突が銀河中心核の核活動、特にセイファ-ト現象やクエサ-と深く係わっているのではないかとの仮説が1985年に出されて以来、最近益々大きな関心を呼んでいる。衝突によって相棒銀河から剥ぎ取られたガスや星が銀河中心核へと降り積もってゆき、そこで爆発的な星の形成が起こったり、ブラック・ホ-ルへガスを供給して銀河中心核を活性化する、というのである。本研究費でSUNワ-クステ-ションを購入し、米国立天文台から提供されたIRAFソフトをインスト-ルしてデ-タ解析の体制を整備した。銀河間衝突で形成された事が極めてはっきりしている「リング状銀河」について、米国立セロトロロ・インタ-アメリカン天文台で得られたCCD撮像、分光観測のデ-タを解析したところ、現在までに以下の結果が得られた。1.約60個のリング状銀河のスペクトルを撮像デ-タから抜き出すことが出来た。2.多くの銀河中心核は輝線スペクトルや強いバルマ-吸収線を示しており、星形成等の激しい核活動が起こっている事を見いだした。3.現在、それらをセイファ-ト1型、2型、ライナ-(LINER)、スタ-・バ-スト型等に分類しているところである。4.また、多くのリング状銀河がIRAS赤外線源であることもつきとめ、赤方偏移の測定を待って、赤外線光度関数を求めるところである。

衝突によって相棒銀河から剥ぎ取られたガスが銀河中心核へと降り積もってゆき、そこで爆発的な星の形成を起したり、ブラック・ホ-ルへガスを供給して銀河中心核を活性化する、というのである。銀河間衝突で形成された事が極めてはっきりしている「リング状銀河」について、米国立セロトロロ・インタ-アメリカン天文台で得たCCD撮像、分光観測のデ-タを本研究費で購入したSUNワ-クステ-ションを用いて解析を行い、現在までに以下の結果を得た。1.約40個のリング状銀河の中心核は輝線や強いバルマ-吸収線を示しており、星形成等の激しい核活動が起こっている事を見いだした。2.輝線を示す銀河の大部分はライナ-(LINER)やスタ-・バ-スト型であり、セイファ-ト2型はわずか3個、1型は新たには1個も発見出来なかった。3.また、多くのリング状銀河がIRAS赤外線源であることもつきとめた。4.以上の事より、リング状銀河では予想通り星の形成は極めて活発ではあるが、セイファ-ト1型が少なかったことより、銀河間衝突がブラック・ホ-ルへガスを供給して銀河中心核を活性化する、とのシナリオを検証するには至らなかった。5.その理由として、リング状銀河を形成する衝突は銀河ディスクを垂直につっきるタイプなので、ガスを中心核へ落し難くなっているとも考えられるが、その割にはスタ-・バ-スト型が多いことからそう単純でもなさそうである。平成4年7月にもう一度セロトロロ天文台で観測できる事となったため、これらの点をより突き詰めたいものである。
看護職者の患者指導スキルの実態調査及びスキル向上に向けた定量的評価ツールの開発

本研究は、看護師の患者指導スキルの実態把握および、指導スキルに関する定量的評価ツール作成のための基礎資料を得ることを目的とした。看護師の指導スキルを現職小学校教員の指導スキルとの比較において分析した結果、看護師の指導では「説明」の割合が高いこと、説得効果を高めるとされる「身近な話題」「激励」が多いこと等がうかがえた。また、新規に作成した評価表を用いて4名の看護師の指導場面を評価し、評価表の信頼性を検討した結果、看護師1名を除きα係数0.910.94の高い信頼性が得られた。評価項目間の相関より、患者の思考を促す発問を多く取り入れたり、患者の発言を受容して指導に活かしたりすることで、患者の主体的な参加状況が高まり、教育効果が高まることが示唆された。以上より、看護師の指導スキルの特徴および説得効果を高める指導スキルの特徴が把握できたとともに、指導スキル向上のために活用出来る新規の評価ツール作成のための基礎資料が得られた。《研究の概要と目的》本研究の目的は、看護師の患者指導スキルの実態を、看護学教育に従事する高等学校教諭の指導スキルとの比較において明らかにすること及び、看護師の患者指導スキルを教育学分野における教授スキル分析の視点を取り入れ定量的に分析し、指導スキルの新規の定量的評価ツール開発への基礎資料を得ることである。本年度の計画は、現職看護師による模擬患者指導の実施及び、看護師の指導スキルの定量的分析と分析結果の看護学教育に携わる教員による評価結果との照合である。《結果》対象者はA市内の病院に勤務する看護師4名、模擬患者としてはB大学看護学専攻学生69名。評価者としてB大学看護学専攻教員11名である。模擬患者指導は1回約30分間として2回実施し、1回目の実施後には指導実施看護師と看護学教育に携わる大学教員、病院の教育担当看護部職員が参加してフリートーキングを行い、改善点についてのディスカッションを実施した。各回の指導場面をVTR撮影した。評価の視点としては、心理学領域および教育学領域での知見を参考に研究者が独自に作成したスキルアップチェックシートを用いた。評価は、大学教員が各自VTRを再生して実施した。評価項目の信頼性を検討するため、クロンバックのα係数を算出した。看護師1名の1回目を除き、α係数は0.810.94となり高い信頼性が得られた。看護師1名の1回目については、3項目を除外することでα係数の上昇が認められた。これら3項目の内容を精査したところ、類似した質問項目となっており、評価者によって判定基準が曖昧であるためより定量的な質問標記が必要であると判断された。《今後の課題》今後はより精選した評価表を用いて評価し、行動解析装置を用いた定量的分析を加え対応を検討することで評価ツールとしての精度を向上させる。《研究の概要と目的》本研究の目的は、1.看護師の患者指導スキルの実態を、教育を専門とする現職教員の指導スキルとの比較において明らかにすること、2.看護師の患者指導スキルを、教育学分野における教授スキル分析の視点を取り入れ定量的に分析し、指導スキルの新規の定量的評価ツール開発への基礎資料を得ることである。本年度の計画は、昨年度に引き続き、指導スキルの新規の評価表の精度の分析と、現職看護師による模擬患者指導場面の評価および解析、現職教員による模擬患者指導の実施および指導スキルの解析であった。《結果》看護師の模擬患者指導場面について、評価表による評価と行動コーディングシステムを用いた解析結果との相関分析を実施した。評価結果と解析結果の複数項目間に有意な正または負の相関が認められたことから、新規の評価表を用いた評価は実際の指導スキルを反映していることが確認された。また、評価結果では、「説得力」と「積極的態度」「患者の顔を見て話す」「身振り手振りを用いていた」「発言しやすい雰囲気」「受容的態度」等、複数項目間にr=0.760.99(p<0.01)の有意な強い正の相関が認められ、説得効果を高める非言語的要因についての示唆が得られた。現職教員の指導スキルについては、計画を変更し小学校教員の実際の授業場面を撮影した。対象は教員4名で4回の授業場面の撮影を行った。《今後の課題》今後は、看護師および教員の指導スキルを言語的・非言語的行動の視点からより詳細に解析して看護師と教員の指導スキルを定量的に比較し、看護師の指導スキルの実態および、より説得力の高い指導の概要について検討する必要がある。

《研究の概要と目的》本研究の目的は、1.看護師の患者指導スキルの実態を、教育を専門とする現職の教員の指導スキルとの比較において明らかにすること、2.看護師の患者指導スキルを、教育学分野における教授スキル分析の視点を取り入れ定量的に分析し、指導スキルの新規の定量的評価ツール開発への基礎資料を得ることである。本年度の計画は、現職教員による模擬患者指導の実施および指導スキルの解析および、看護師の指導スキルの特徴に関する分析、成果報告であった。《結果》現職教員の指導スキルについては、計画を変更し小学校教員の実際の授業場面を撮影・分析した。教員の授業場面における発言内容では、「説明」の平均出現率が最も多く、20.2%であった。説得効果を高めるとされる「身近な話題」(0.5%)は看護師(14.8%)に比して有意に少なかった(p<0.05)。対象者の思考を促し、自発性を高めるとされる「発問」は、平均出現率での差は見られなかったが、平均出現回数では教員の方が有意に多かった(p<0.05)。対象者の発言では、非指名応答、自発発言、感嘆・つぶやきの3項目において、教員が看護師に比べ出現率・回数ともに有意に多かった(p<0.05)。以上の結果より、対象者のより主体的参加を促し、行動変容へとつなげるための工夫として、発問を多く取り入れることが考えられ、指導スキル向上のための示唆が得られた。《成果報告》本研究の結果の一部は、第31回日本看護科学学会で発表した。
ラット大量肝切除後肝不全の発症機序の検討

従来、大量肝切除後には末梢循環障害より肝細胞のネクローシスが生じ肝不全に至ると考えられてきたが、我々は主として肝細胞のアポトーシスが肝不全発症に関与してると報告してきた。今回は、肝不全発症の機序をcDNAマイクロアレイを用いて検討し、さらに遺伝子治療モデルを作製、アポトーシスの制御が肝不全の治療となるか検討した。【対象と方法】ラット95%肝切除モデル(致死的肝不全群)、90%肝切除モデル(再生群)を作成し、残肝を経時的に採取、RNAを抽出し、RIKEN mouse20K cDNAmicroarrayを用いて、mRNA発現を比較検討した。さらに、アポトーシス抑制遺伝子であるBCL-2をCre-loxP系アデノウイルスをベクターとして尾静脈より静注し肝細胞に導入後3日後に95%肝切除を行ない導入群、非導入群で、残肝の肝細胞のアポトーシスの比較および生存率の比較を行った。【結果】1)90%群では肝切除後24時間でcyclinE、cyclinGの高発現を認めた。増殖因子では、肝切除後1時間、3時間でHBEGFの高値を認めた。一方、95%群は90%群と比較しアポトーシス関連因子ではFas、caspase8の肝切除後1時間からの高発現を、細胞周期制御因子ではp21の肝切除後1時間からの高発現を認めた。2)BCL-2の導入についてベクター注入3日後の肝組織をみると、BCL-2が導入された肝細胞、コントロールとしてB-ガラクトシダーゼを導入した肝細胞とも、約35%前後の導入率であった。TUNEL染色では、肝細胞のapoptotic indexはBcl-2導入群では0で、有意にアポトーシスは抑制されていた。しかし,生存曲線では若干の延長のみであった。【結語】95%群では、p21の高発現による肝再生の遅延に加え、肝再生に向かうよりも早期に、Fasを介する系を中心とするapoptosisが起こり始め、肝不全に向かっていると考えられた。さらに、Bcl-2を遺伝子導入した効果としてアポトーシスの抑制を認めたが、肝不全の回避にはいたらなかった。過大肝切除後肝不全の改善にはアポトーシスの抑制のみならず、肝再生を促すさらなる要素の付加が必要と思われた。今回は遺伝子治療モデルを作製し、アポトーシスの制御が肝不全の治療となるか検討した。【対象と方法】DA系雄性ラットを用いて、許容量の90%(以下90%群)と過大量の95%(以下95%群)肝切除を行い、90%群は全例生存するのに対し95%群は全例96時間以内に死亡することを確認した後、アポトーシス抑制遺伝子であるBCL-2をCre-loxP系アデノウィルスをベクターとして尾静脈より静注し肝細胞に導入後3日後に95%肝切除を行ない導入群、非導入群で、残肝の肝細胞のアポトーシスの比較および生存率の比較を行った。

アポトーシスの検索はTUNEL法を、アポトーシス抑制遺伝子(Bcl-X)発現の有無はWestern blot法を用いた。【結果】1)BCL-2の導入についてベクター注入3日後の肝組織をみると、BCL-2が導入された肝細胞、コントロールとしてB-ガラクトシダーゼを導入した肝細胞とも、約35%前後の導入率であった。2)TUNEL染色では、肝細胞のapoptotic indexはBcl-2導入群では0で陽性細胞を全く認めず、有意にアポトーシスは抑制されていた。3)術後経時的に測定したGOT,GPTの値はBcl-2導入群で有意に低値であった。4)しかし,生存曲線では若干の延長のみでありp=0.051で有意差は認められなかった。【結語】ラット大量肝不全モデルにおいて、Bcl-2を遺伝子導入した効果としてアポトーシスの抑制を認めたが、肝不全の回避にはいたらなかった。過大肝切除後肝不全の改善にはアポトーシスの抑制のみならず、肝再生を促すさらなる要素の付加が必要と思われた。従来、大量肝切除後には末梢循環障害より肝細胞のネクローシスが生じ肝不全に至ると考えられてきたが、我々は主として肝細胞めアポトーシスが肝不全発症に関与してると報告してきた。今回は、肝不全発症の機序をcDNAマイクロアレイを用いて検討し、さらに遺伝子治療モデルを作製、アポトーシスの制御が肝不全の治療となるか検討した。【対象と方法】ラット95%肝切除モデル(致死的肝不全群)、90%肝切除モデル(再生群)を作成し、残肝を経時的に採取、RNAを抽出し、RIKEN mouse20K cDNAmicroarrayを用いて、mRNA発現を比較検討した。さらに、アポトーシス抑制遺伝子であるBCL-2をCre-loxP系アデノウイルスをベクターとして尾静脈より静注し肝細胞に導入後3日後に95%肝切除を行ない導入群、非導入群で、残肝の肝細胞のアポトーシスの比較および生存率の比較を行った。【結果】1)90%群では肝切除後24時間でcyclinE、cyclinGの高発現を認めた。増殖因子では、肝切除後1時間、3時間でHBEGFの高値を認めた。一方、95%群は90%群と比較しアポトーシス関連因子ではFas、caspase8の肝切除後1時間からの高発現を、細胞周期制御因子ではp21の肝切除後1時間からの高発現を認あた。2)BCL-2の導入についてベクター注入3日後の肝組織をみると、BCL-2が導入された肝細胞、コントロールとしてB-ガラクトシダーゼを導入した肝細胞とも、約35%前後の導入率であった。TUNEL染色では、肝細胞のapoptotic indexはBcl-2導入群では0で、有意にアポトーシスは抑制されていた。しかし,生存曲線では若干の延長のみであった。【結語】95%群では、p21の高発現による肝再生の遅延に加え、肝再生に向かうよりも早期に、Fasを介する系を中心とするapoptosisが起こり始め、肝不全に向かっていると考えられた。さらに、Bcl-2を遺伝子導入した効果としてアポトーシスの抑制を認めたが、肝不全の回避にはいたらなかった。
腎細胞癌におけるMN/CA鎗抗原ペプチドを用いた特異的癌ワクチン療法の検討

われわれは腎細胞癌の90%に発現している癌関連抗原MN/CA9のHLA-A24拘束性9mer抗原ペプチドを合成し、腫瘍ワクチンとしての有用性についてBALB/cマウス腎癌モデルを用いて抗原特異的なCTL誘導を報告してきた。また、これらペプチドを用いた特異的免疫療法の有用性に関して、腎細胞癌担癌患者のリンパ球を用いたMN/CA9抗原ペプチドの抗原特異的CTLの誘導能について検討したところ、ペプチド刺激したHLA-A2402陽性患者の自己樹状細胞を用いることで、抗原特異的なCTL前駆細胞の誘導が可能であった。これらのpre-clinicalな結果に基づいて、平成14年7月より、高度進行・再発性腎細胞癌患者を対象として、MN/CA9 p219-227,p288-296,p323-331の3種のペプチドを用いた癌ワクチン療法の第I相試験を開始した。今回の目的は第一にこれらペプチドワクチンの安全性であるが、宿主のMN/CA9抗原陽性腫瘍に対する免疫原性についても検討した。これまでのところ、6名が本試験を終了したが、ほとんどの症例でワクチン接種部の局所反応は見られるものの、grade II以上の重篤な有害事象はなく、3種のペプチドワクチンは安全であると思われる。患者末梢血を用いた免疫反応性の検討では、ワクチン6回投与後より2種類のペプチドに特異的なCTL前駆細胞が検出され、一部の患者ではペプチドに対するIgG抗体の誘導も認められた。これらの結果から基本的に少なくとも2種類のペプチドワクチンは、抗原特異的な免疫反応を惹起し、臨床的にその効果が期待される。今後、これらの抗原ペプチドを改変することで、その抗原性・親和性を増加させ、より強い特異的免疫反応を誘導するべく研究中である。我々は腎細胞癌の90%に発現している癌関連抗原洲/CA9の抗原ペプチドを合成し、腫瘍ワクチンとしての有用性についてマウス腎癌モデルを用いて報告してきた。今回、これらペプチドを用いた腎細胞癌に対する特異的免疫療法の有用性に関して、腎癌腎細胞癌担癌患者リンパ球を用いてMN抗原ペプチドの抗原特異的CTLの誘導能について検討した。【方法】HLA-A2402陽性腎癌担癌患者で原発巣がMN/CA9抗原陽性の症例を対象とした。末梢血由来単核球を分離し、GM-CSF, IL-4環境下で樹状細胞に分化させ、MN/CA9 p219-227,p288-296,p323-331の3種のペプチドでパルスした樹状細胞で患者リンパ球を刺激し、抗原ペプチド特異的反応性を有するCTL前駆細胞誘導の有無について、テトラマー法およびELISA法を用いて検討した。【考察】自己樹状細胞とMN抗原ペプチドを用いることで、MN抗原特異的なCTL前駆細胞の誘導が可能と思われた。今後、これらの抗原ペプチドを用いた特異的免疫療法の臨休応用が期待される。われわれは腎細胞癌の90%に発現している癌関連抗原MN/CA9のHLA-A24拘束性9mer抗原ペプチドを合成し、腫瘍ワクチンとしての有用性についてBALB/cマウス腎癌モデルを用いて特異的CTL誘導を報告した。また、これらペプチドを用いた特異的免疫療法の有用性に関して、腎細胞癌担癌患者リンパ球を用いたMN/CA9抗原ペプチドの抗原特異的CTLの誘導能については、ペプチド刺激したHLA-A2402陽性患者の自己樹状細胞を用いることで、抗原特異的なCTL前駆細胞の誘導が可能であった。

これらの結果に基づいて、平成14年7月より、高度進行腎細胞癌患者を対象として、MN/CA9 P219-227,P288-296,P323-331の3種のペプチドを用いた癌ワクチン療法の第I相試験を開始した。今回の目的は第一にこれらペプチドワクチンの安全性であるが、宿主に対する免疫原性についても検討した。これまでのところ、6名が本試験を終了したが、grade II以上の重篤な有害事象はなく、3種のペプチドワクチンは安全であると思われる。患者末梢血を用いた免疫反応性の検討では、ワクチン6回投与後より2種類のペプチドに特異的なCTL前駆細胞が検出され、一部の患者ではペプチドに対するIgG抗体の誘導も認められた。これらの結果から基本的に少なくとも2種類のペプチドワクチンは、抗原特異的な免疫反応を惹起し、臨床的に期待される。今後、これらの抗原ペプチドを改変することで、その抗原性・親和性を増加させ、より強い特異的免疫反応を誘導するべく研究中である。
頂点代数上の加群の拡張

非退化偶格子に付随する頂点代数の部分代数上の弱加群について研究を継続して進めた.格子が正定値である場合には,付随する頂点代数はC2余有限な頂点作用素代数となる.この場合には小さな位数の自己同型に対する不変部分代数の表現はヅーの理論を用いてこれまで詳しく調べられてきた.特に既約加群は分類されており,また全ての加群が完全可約であることが分かっている.格子が正定値でない場合にも,付随する頂点代数の部分代数は,自己同型群や,よい性質をもつ頂点代数の構成の観点から重要な対象である.しかし,格子が正定値でない場合には,付随する頂点代数は頂点作用素代数にならない.また,自分自身が通常の加群ではなく,弱加群になっていることから,必然的に弱加群を扱う必要がでてくる.しかし,弱加群は下に有界な次数付き空間であるとは限らないため,ヅーの理論を用いることが出来ない.このため,これまで弱加群を調べる手法がなく,弱加群がどうなっているかは全く分かっていなかった.したがって不変部分代数の表現論は,その重要性にもかかわらず長い間未解明であった.筆者は,非退化偶格子に付随する頂点代数と.格子の各元の符号を反転させる位数2の自己同型から得られる頂点代数の自己同型に対して,その自己同型による不変部分代数の弱加群について調べた.特に既約弱加群を分類した.この分類結果から,既約弱加群は,もとの格子に付随する頂点代数の既約弱加群,またはtwisted既約弱加群の部分加群に同型になることが分かった.これは昨年の,格子のランクが1の場合の筆者自身による結果の拡張になっている.非退化偶格子に付随する頂点代数の不変部分代数の既約弱加群の分類が完了するとともに,弱加群を調べる方法が十分に開発されたため.このまま継続して,頂点代数の弱加群の性質を調べていく.非退化偶格子に付随する頂点代数の部分代数上の弱加群について研究を継続して進めた.格子が正定値である場合には,付随する頂点代数はC2余有限な頂点作用素代数となる.この場合には小さな位数の自己同型に対する不変部分代数の表現はヅーの理論を用いてこれまで詳しく調べられてきた.特に既約加群は分類されており,また全ての加群が完全可約であることが分かっている.格子が正定値でない場合にも,付随する頂点代数の部分代数は,自己同型群や,よい性質をもつ頂点代数の構成の観点から重要な対象である.しかし,格子が正定値でない場合には,付随する頂点代数は頂点作用素代数にならない.また,自分自身が通常の加群ではなく,弱加群になっていることから,必然的に弱加群を扱う必要がでてくる.しかし,弱加群は下に有界な次数付き空間であるとは限らないため,ヅーの理論を用いることが出来ない.このため,これまで弱加群を調べる手法がなく,弱加群がどうなっているかは全く分かっていなかった.したがって不変部分代数の表現論は,その重要性にもかかわらず長い間未解明であった.筆者は,非退化偶格子に付随する頂点代数と.格子の各元の符号を反転させる位数2の自己同型から得られる頂点代数の自己同型に対して,その自己同型による不変部分代数の弱加群について調べた.特に既約弱加群を分類した.この分類結果から,既約弱加群は,もとの格子に付随する頂点代数の既約弱加群,またはtwisted既約弱加群の部分加群に同型になることが分かった.これは昨年の,格子のランクが1の場合の筆者自身による結果の拡張になっている.非退化偶格子に付随する頂点代数の不変部分代数の既約弱加群の分類が完了するとともに,弱加群を調べる方法が十分に開発されたため.このまま継続して,頂点代数の弱加群の性質を調べていく.国内出張を計画していたが,日程的に無理だと最終的に判断し,出張をとりやめた.そのため次年度使用額が生じた.この次年度使用額は別の国内出張に用いる予定である.
マルチスライス形ヘリカルＸ線ＣＴ装置の教育用模擬システムの開発と学生実験への導入

本研究の目的はX線CT装置をレーザー光で模擬した簡便な教育用実験装置と画像再構成システムを構築することである。現在、主流になっている円錐状のビーム(コーンビーム)のX線を用いたマルチスライス形ヘリカルCT装置をレーザー光による模擬CT実験システムを構築し、教育現場の学生実験に導入することである。構築した模擬CT実験システムは光を用いているため、視覚的にわかりやすく、X線CT装置の動作原理の理解を深める一助として、高い教育効果が期待できる。本研究はコーンビームをらせん状に走査する第3世代ヘリカルX線CT装置の模擬システムを開発し、学生実習用の実験システムとして完成させることである。平成27年度の研究計画はコーンビームのレーザー光を円周状に走査するマルチスライス形模擬CT装置システムの構築について検討した。これと平行して、数値ファントム(シミュレーション)による検討を行った。さらに、模擬CT画像を取得するための画像再構成アルゴリズムの検討を行い、アーチファクト(偽像)の影響を詳細に調査した。なお、外部の教育機関の研究分担者は電気工学と光工学の専門家であり、模擬CT装置システムを構築する際、円筒状の2次元検出器が市販されていないため、直線状のフォトダイオードアレーを円周状に走査する光学系・駆動系のシステムについて検討した。また、シングルヘリカル模擬CTシステムにおいてフォトダイオードアレー数の影響を詳細に検討するため、アレー数が16、64、128の検出器のデータ取得を高速に行うシステムを開発し、データ取得時間の短縮化を図った。これはマルチスライス形X線CT装置の多列(16列、64列、128列)を模擬するものであり、本研究のマルチスライス形ヘリカルX線CT装置の模擬装置を構築するのに必要不可欠な開発要素である。これら、平成27年度に得られた知見を国内の諸学会に発表した。シングルヘリカル模擬CTシステムにおいてフォトダイオードアレー数の影響を詳細に検討するため、アレー数が16、64、128の検出器のデータ取得を高速に行うシステムを開発し、データ取得時間の短縮化を図った。本研究はX線コーンビームをらせん状に走査する第3世代マルチスライス形ヘリカルX線CT装置に関して、学生実習用にレーザー光を用いて模擬したX線CT装置システムを開発し、学生実習用実験システムとして完成させることである。平成28年度は第3世代マルチスライス形ヘリカルX線CT装置を模擬するため、平成27年度に構築したマルチスライス形模擬CT装置システムの円周方向の操作をらせん状(ヘリカル)に操作する実験システム開発を進めた。また、コーンビームCTの画像再構成法について検討し、画像再構成システムの開発も進めた。そして、このヘリカル模擬CT装置と平成27年度に構築したコーンビームを用いた模擬CT装置との再構成画像の比較を行った。コーンビームの操作による再構成画像への影響を実験した。さらに、既に構築済みのシングルスライス形模擬CT装置システムによる模擬CT画像の比較検討を行い、測定試料の(ファントム)の形状による影響について検討した。さらに、逐次近似再構成による画像再構成アルゴリズムを検討した。平成28年度に得られた知見を電気学会で発表した。平成27年度に開発した模擬システムを用いて、コーンビームをらせん状に走査するヘリカルX線CT装置のヘリカル模擬装置の開発を進めた。また、画像再構成アルゴリズムを検討し、コーンビームのヘリカル操作による再構成画像への影響について検討した。本研究の目的はX線CT装置をレーザー光で模擬した医療系及び工学系の学生のための簡便な教育用実験装置と画像再構成システムを構築することである。現在、主流になっている円錐状のビーム(コーンビーム)のX線を用いたマルチスライス形ヘリカルCT装置と同様の画像再構成アルゴリズムを用いたレーザー光による模擬CT装置を実現し、医療系及び工学系の教育機関の学生実験に導入することである。教育現場では原理の理解を補助するための簡便な教育用実験装置であること、被曝の影響がないことが重要である。特に、医療系の学生実験に導入するには実機のX線CT装置と同様の実験内容を模擬でき、かつ、高度な表示機能を有する模擬CT装置システムが必要となる。平成29年度は本研究の最終目的である教育現場の学生実験に導入を図るため、ヘリカル模擬CT装置の自動計測と同時に画像再構成システムの表示機能を開発した。X線CT装置は人間の内部を可視化し、様々な角度や方向から可視化することができるとともに、任意面のスキャンや3次元表示などの機能を有している。そこで、本ヘリカル模擬CT装置システムもグラフィック機能を有するシステムに拡張を行った。さらに、実際に学生実験に導入するため、実験項目および実験方法、測定試料(ファントム)の検討を行い、教育用実験資料を作成した。そして、ヘリカル模擬CT装置を用いた試行実験での意見をフィードバックし、本ヘリカル模擬CT装置システムをより充実したシステムとして構築した。

平成28年度以降は第3世代マルチスライス形ヘリカルX線CT装置を模擬するため、平成27年度に構築した模擬CTシステムの円周方向の走査をらせん状(ヘリカル)に走査するシステムの開発を行う。平成29年度は本研究の最終目的である教育現場の学生実験に導入するため、ヘリカル模擬CT装置の自動計測と同時に画像再構成システムの表示機能を開発する。X線CT装置は人間の内部を可視化し、様々な角度や方向から可視化することができるとともに、任意面のスキャンや3次元表示機能などを有している。そこで、本ヘリカル模擬CT装置システムも高度なグラフィック機能を有するシステムに拡張を行う。さらに、実際に学生実験に導入するため、実験項目および実験方法、測定試料(ファントム)の検討を行い、ヘリカル模擬CT装置システムをより充実したシステムとして完成させる。X線診断機器学消費税により端数が生じた。次年度に処理を行う。
宇宙線伝播による銀河磁場の平均構造の研究

実際の銀河の磁場構造を解明できる宇宙線伝播モデルの構築を試みた。宇宙線が銀河磁場により散乱され伝播して行くという描像で、散乱点を格子上に配列し、そこで非等方な散乱をするモデルー「ブラウン運動モデル」や、銀河磁場の非等方性をいれた拡散方程式を解く「拡散モデル」を検討した。ブラウン運動モデルでは、エネルギーの高いもの程、進行方向を保持するという散乱モデルを使えば、散乱点の間隔を実験的に決められることが示された。さらに、この散乱モデルを、磁場の乱れから導く試みも行った。必要なパラメータ空間の中を十分に調べ尽くしてはいないが、磁場の乱れを持ち込むことにより、望ましい散乱をつくれることは示された。また、拡散モデルでは、銀河磁場の非等方性をいれた拡散方程式を、銀河円盤、銀河ハローを持つ境界条件のもとで、完全に解くことができた。銀河円盤、銀河ハローを両方とも持つ解としては初めて得ることができた。解の形が複雑で十分に実験との対応をつけることがまだできていないが、適当な磁場の乱れを用いて字宙線スぺクトルのkneeを再現できることなどを確認している。これらの結果は、私の指導した4編の修士論文にまとめられた。ここに示せば、蜂須賀一也「確率過程を用いた宇宙線伝播モデルの構築」、荒木田英禎「非一様銀河磁場内での宇宙線の伝播」、三浦芳春「Random Walk Modelによる銀河ハローを含む銀河系内宇宙線の伝播」、高橋郁真「銀河系内の磁場乱流による宇宙線の散乱解析」である。4人の内2人は修士課程終了後、総合研究大学院大学の国立天文台へ進学した。これらの学生といっしょに、近々に結果を投稿予定である。宇宙線の伝播を解析することにより、銀河磁場の構造を明らかにすることを目的に、以下の二つの方向からのアプローチを試みて、結果を得ることが出来た。・拡散方程式の拡散係数に磁場の空間不均一性からの寄与をとりいれて、銀河円盤と銀河ハローの二つの部分をもつ銀河での境界条件で方程式を解いた。この解は初めて得られたものである。この結果を利用し、宇宙線エネルギースペクトルの10^<15>eV近辺の折れ曲がりの巾の差から銀河ハローの磁場とそのサイズの間に関係をつけることが出来た。したがって、銀河ハローのサイズを決めればハローでの磁場を推定できる。・磁場による散乱のエネルギー依存性をもつ簡単なモデルを作り、その散乱を受けながら宇宙線が銀河内を伝播していくというRandom Walkを擬した描像のもとで解析を行った。銀河から宇宙線が洩れ出すまでの平均距離を求め、これをLeaky Boxモデルと比較して散乱の平均間隔を決定できる。この二つのアプローチは銀河磁場構造を明らかにしていく上で互いに相補的であり、乱れた磁場による散乱をさらに解析して、銀河磁場構造をより明らかにしていく予定である。これらは私の指導のもとで、それぞれ修士論文「非一様銀河磁場丙での宇宙線伝播」と「Random Walk Modelによる銀河ハローを含む銀河系内宇宙線の伝播」にまとめられ、前者の修士論文作成者は、国立天文台の博士課程に進学した。これらの結果は学術雑誌に投稿予定である。宇宙線が銀河磁場により散乱され伝播して行くという描像で、散乱点を格子上に配列し、そこで非等方な散乱をするモデル-「ブラウンウ運動モデル」や、銀河磁場の非等方性を入れた拡散方程式を解く「拡散モデル」を検討した。

また、拡散モデルでは、銀河磁場の非等方性を入れた拡散方程式を、銀河円盤、銀河ハローを持つ境界条件のもとで、完全に解くことができた。銀河円盤、銀河ハローを両方とも持つ解として初めて得ることができた。解の形が複雑で十分に実験との対応をつけることがまだできていないが、適当な磁場の乱れを用いて宇宙線スペクトルのkneeを再現できることなどを確認している。これらの結果は、私の指導した4編の修士論文にまとめられた。ここに示せば、蜂須賀一也「確率過程を用いた宇宙線伝播モデルの構築」、荒木田英禎「非一様銀河磁場内での宇宙線の伝播」、三浦芳春「Random Walk Modelによる銀河ハローを含む銀河系内宇宙線の伝播」、高橋郁真「銀河系内の磁場乱流による宇宙線の散乱解析」である。4人の内2人は修士課程終了後、総合研究大学院大学の国立天文台へ進学した。これらの学生といっしょに、近々に結果を投稿予定である。
超並列処理のためのオブジェクト指向言語とその処理に関する研究

平成4年度に設計した並列オブジェクト指向言語の実行モデルを改善するとともに,言語処理系の試作とシミュレーション実験を行った。以下に,具体的な内容について整理する。1.実行モデルの改善(1)オブジェクトロードの高速化:ホストから各ノードへのオブジェクトの転送を高速化するため,クラスやインデックスト・オブジェクトのアドレスをすべてのノードで統一し,ブロードキャストすることとした。(2)メソッド起動の高速化:メッセージを受信してからユーザメソッドを起動するまでの時間短縮を目的として,変数宛以外のメッセージセレクタを受信先オブジェクトのメッセージ辞書のアドレスとし,実行時のメソッド探索を不要にした。2.並列プログラミングの支援並列オブジェクト指向のプログラミングの支援を目的として,以下に述べる専用の環境を構築した。(1)コンパイラ:上に述べた実行モデルの改善を達成するための改訂を行った。具体的には,従来動的に決定していたオブジェクトのロードアドレスをコンパイル時に決定し,OSが行っていた実行モジュールの再配置を不要にした。(2)統合プログラミング環境:平成4年度から進めてきた専用プログラミング環境の開発を継続して行った。今年度は,プログラムの編集から実行までを統合的に行える環境を整備した。3.今後の課題言語処理系,OS,シミュレータの改訂がほぼ終了した。今後は,シミュレータを用いて性能評価を行う必要がある。また,より並列プログラムの開発が容易になるよう,イベント履歴に基づくプログラム実行のリプレイなどをサポートした並列デバッガを現在構築中である。
放射線抵抗性癌における遺伝子学的変化とテロメラーゼ活性の関与

1992年3月1998年11月までに放射線治療を施行した子宮頸癌新鮮例77例(I期-10例、II期-15例、III期-41例、IV期-11例)である。62例は放射線治療単独を、15例は手術後に放射線治療を施行した。放射線単独例は生検癌組織より、手術施行例は摘出標本よりDNAを採取し、正常コントロールは各症例の静脈血から採取したDNAを用いた。我々は3p21、6p21、17p13、18q21の染色体異常(LOH,RER)をマイクロサテライトマーカー法で調べた。p53点突然変異(exon5-exon8)の有無をSSCP法で調べ、HPVの感染の有無をPCR法で調べた。77例の子宮頸癌のGA(genetic alteration)とp53点突然変異、HP VE6感染の発現率を検討した。3p21.6p21.17p13、18q21の異常の発現率はそれぞれ、20.6%(14/68例)、37.9%(25/66例)、33.8%(23/68例)、24.5%(18/73例)で、6p21の異常が最も多く見られた。6pGAが最多であったという結果はMullokandovらの報告と同様であった。その内、RERの発現率は3p21、6p21、17p13、18q21の順に4.4%(3/68例)、1.5%(1/66例)、4.4%(3/68例)、4.1%(3/73例)であった。p53点突然変異、HPV E6感染の発現率は9.1%(7/77例)、34.2%(26/76例)であった。次に病期別に4領域のGA、p53点突然変異、HPV E6感染の発現率を調べた。その結果、17p染色体異常は病期が進行するほど有意に発現率が上昇したが、3p、6p、18qの異常は病期の進展と相関が認められなかった。さらに、4領域のGAが全て観察された52例について4領域中、3領域以上のGAの有無を調べた。I-III期では11.9%(5/42例)であったのに対して、IV期では60%(6/10例)で、有意にIV期において多領域のGAを認めた(P=0.003)。p53点突然変異はI.II期には見られず、進行期ほど発現したが有意差はなかった。HPV感染は病期と相関しなかった。以上のことから子宮頸癌は進展するほど遺伝子の異常が増加し、特に17p染色体異常が病期の進行と相関していた。近い将来、各々の癌に適った遺伝子治療が施行される可能性もあり、17p13.1に局在するp53、あるいはp53以外の癌抑制遺伝子が1つのターゲットになる可能性があると考えられた。しかし、テロメラーゼ活性の亢進、テロメア長の延長は放射線治療抵抗性の症例に多い傾向であったが、安定した検出が困難であった。手技的な問題点も含めて今後検討する必要がある。

さらに、4領域のGAが全て観察された52例について4領域中、3領域以上のGAの有無を調べた。I-III期では11.9%(5/42例)であったのに対して、IV期では60%(6/10例)で、有意にIV期において多領域のGAを認めた(P=0.003)。p53点突然変異はI.II期には見られず、進行期ほど発現したが有意差はなかった。HPV感染は病期と相関しなかった。以上のことから子宮頸癌は進展するほど遺伝子の異常が増加し、特に17p染色体異常が病期の進行と相関していた。近い将来、各々の癌に適った遺伝子治療が施行される可能性もあり、17p13.1に局在するp53、あるいはp53以外の癌抑制遺伝子が1つのターゲットになる可能性があると考えられた。しかし、テロメラーゼ活性の亢進、テロメア長の延長は放射線治療抵抗性の症例に多い傾向であったが、安定した検出が困難であった。手技的な問題点も含めて今後検討する必要がある。<目的>テロメア長の測定には、生検癌組織を分解し、DNAを抽出し、HinfIで切断し、テロメアの繰り返し配列である742merプローブ(Oncor社製)を用いて、サザン解析を行い、テロメア長を測定した。<結果>病期が進むほどテロメアーゼ活性値が高く、テロメア長の延期も認められた。さらにテロメアーゼ活性値とPCNA(proliferating cell nuclear antigen)染色陽性率と相関した。したがって、子宮頸癌のテロメアーゼ活性値を測定することにより、悪性度を予測できる可能性があると考えられた。1992年3月1998年11月までに放射線治療を施行した子宮頸癌新鮮例77例(I期-10例、II期-15例、III期-41例、IV期-11例)である。62例は放射線治療単独を、15例は手術後に放射線治療を施行した。放射線単独例は生検癌組織より、手術施行例は摘出標本よりDNAを採取し、正常コントロールは各症例の静脈血から採取したDNAを用いた。我々は3p21、6p21、17p13、18q21の染色体異常(LOH,RER)をマイクロサテライトマーカー法で調べた。p53点突然変異(exon5-exon8)の有無をSSCP法で調べ、HPV E6の感染の有無をPCR法で調べた。77例の子宮頸癌のGA(genetic alteration)とp53点突然変異、HPVE6感染の発現率を検討した。3p21、6p21、l7pl3、l8q21の異常の発現率はそれぞれ、20.6%(14/68例)、37.9%(25/66例)、33.8%(23/68例)、24.5%(18/73例)で、6p21の異常が最も多く見られた。6pGAが最多であったという結果はMullokandovらの報告(8)と同様であった。その内、RERの発現率は3p21、6p21、l7p13、l8q21の順に4.4%(3/68例)、1.5%(1/66例)、4.4%(3/68例)、4.1%(3/73例)であった。p53点突然変異、HPVE6感染の発現率は9.1%(7/77例)、34.2%(26/76例)であった。次に病期別に4領域のGA、p53点突然変異、HPV E6感染の発現率を調べた。その結果、17p染色体異常は病期が進行するほど有意に発現率が上昇したが、3p、6p、l8qの異常は病期の進展と相関が認められなかった。I-III期では11.9%(5/42例)であったのに対して、IV期では60%(6/0例)で、有意にIV期において多領域のGAを認めた(P=0.003)。p53点突然変異はI、II期には見られず、進行期ほど発現したが有意差はなかった。以上のことから子宮頸癌は進展するほど遺伝子の異常が増加し、特にl7p染色体異常が病期の進行と相関していた。