hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
一酸化炭素を介した骨組織細胞間ネットワークの解明

本研究では骨組織における一酸化炭素の役割を調べる目的で破骨細胞特異的な一酸化炭素産生酵素・ヘムオキシゲナーゼの遺伝子破壊動物を作成した。その結果、作出したマウスは破骨細胞分化に異常は見られないものの、正常動物では観察されない異所性の骨形成が観察されたことから、一酸化炭素は骨リモデリングの制御分子として機能していると考えられた。一酸化炭素はヘムオキシゲナーゼ-1(HO-1)によって産生され、破骨細胞においても炎症刺激によってHO-1の著しい発現増加が観察される事から、破骨細胞が産生したCO分子が、骨組織構成細胞の骨代謝制御因子の遺伝子発現を制御している可能性が考えられた。そこで本研究では、破骨細胞内HO-1と、CO分子を介した機能的関連の証明と骨組織細胞における役割の解明という極めて独創的な仮説の証明を試みている。今年度はCathepsin K-Creマウス系統とfloxed HO-1マウス系統の交配により、破骨細胞特異的HO-1遺伝子破壊マウスの樹立に成功した。予備的な骨組織解析の結果、このマウスでは骨量増加が観察され、これは骨組織でのCOの重要性を示唆すると考えられた。これはCOが骨代謝を制御する事を生体レベルで示唆するものと考えられ、引き続き詳細な解析を行なう予定である。また一方で、COによってアロステリック阻害を受けるアミノ酸代謝酵素・CBSの条件付き遺伝子破壊マウス系統の樹立を試みた。まず始めに、ジーンターゲティング法を用いた遺伝子改変システムの構築を行なった。野生型ES細胞を一定期間培養し、アグリゲーション法によるキメラマウス作出を試みたところ、ES細胞由来のキメラマウスが得られた。そこでCBS遺伝子標的ベクターの構築を行い、ES細胞に遺伝子導入することで、相同組換え体ESクローンの取得に成功した。現在、キメラマウスの作出を進めているところである。一酸化炭素産生酵素であるヘムオキシゲナーゼは骨組織においてマクロファージ系の骨吸収細胞である破骨細胞ではHO-1が、また間葉系幹細胞から分化する骨細胞ではHO-2が高発現している。これらの細胞から放出されたCO分子が骨代謝を制御しているか否かについて解明する目的で、生体骨組織におけるHO高次機能の解明を試みている。これまでにCre/loxPシステムを用いた破骨細胞特異的HO-1ノックアウトマウスを作成し、その骨組織を解析したところ、皮質骨の一部分において異常な骨形成亢進が認められたため、現在そのメカニズムを解析中である。また、骨細胞内のHO-2機能を明らかにする目的で、floxed HO-2マウスと骨細胞特異的Creリコンビナーゼ発現マウスの作出を試み、両系統の樹立に成功した。このうち、骨細胞特異的Creリコンビナーゼ発現マウスとして樹立したDmp1-T2A-Cre系統は、2A配列を用いる事でDmp1遺伝子とCre遺伝子の両方を含むバイシストロン性mRNAを発現するノックインマウスとして樹立した事で、この試みにより、従来のCreトランスジェニックマウスやCre或いはIRES-Creノックインマウスで問題となっていた発現特異性の低下や内在遺伝子欠損による異常、Cre遺伝子の発現低下を回避し、Creリコンビナーゼを骨細胞種特異的に高発現する極めて理想的なCre発現マウスとして樹立する事に成功した。現在これらの系統を交配し、骨細胞特異的なヘムオキシゲナーゼ遺伝子破壊マウスの樹立を行なっている。DNAやヒストンのメチル化はエピゲノム制御機構の一つであり、そのメチル基(-CH3)源はメチオニン代謝経路によって供給される。一方、メチオニン代謝酵素CBS(シスタチオニンβシンターゼ)欠損は、ホモシスチン尿症とよばれるアミノ酸代謝異常を引き起こし、高身長・四肢指伸長・漏斗胸などの骨組織異常を呈するが、これらの発症メカニズムは不明である。最近の研究によって生体内で産生されるガス状メディエーターである一酸化炭素分子がCBSの活性を抑制する事が秋課かとなってきた。一酸化炭素はヘムオキシゲナーゼ(HO-1およびHO-2)によって産生され、骨組織ではマクロファージ系の骨吸収細胞である破骨細胞でヘムオキシゲナーゼ1(HO-1)が高発現している。また間葉系幹細胞から分化する骨細胞ではヘムオキシゲナーゼ2(HO-2)が高発現している事から、これらの細胞が産生したCO分子が、骨組織を構成する各種細胞内のCBSにはたらきかけることで、骨代謝制御因子の遺伝子発現を制御している可能性が考えられた。そこで本研究では、骨組織におけるHOとCBS間のCO分子を介した機能的関連の証明と骨組織細胞における役割の解明という極めて独創的な仮説の成体レベルにおける証明を試みている。今年度はこれらの破骨細胞特異的にHO-1遺伝子を破壊した動物の解析を継続するとともに、骨細胞特異的HO-2遺伝子破壊動物の樹立を行なうため、骨細胞特異的に遺伝子破壊を行なうことが可能な遺伝子改変動物の樹立を新たに行なった。23年度において樹立に成功した遺伝子改変マウスの解析で、研究開始当初の予想を超えるドラスティックな表現型が観察された。

この結果は、現在までに報告されていない未知の細胞種間相互作用の存在を示唆するものであり、本研究課題における大きな進展であると考える。25年度が最終年度であるため、記入しない。初年度は破骨細胞特異的にHO-1遺伝子を破壊した遺伝子改変動物において、異常な骨形成の亢進が起こる事を発見した。今年度は新たに骨細胞特異的に遺伝子破壊が可能なDmp1-T2A-Creノックインマウス系統および条件付きHO-2遺伝子破壊マウス系統の樹立に成功した。このうちDmp1-T2A-Creマウス系統は、2A配列を用いる事で、従来のCreトランスジェニックマウスやCreノックインマウスで問題となっていた発現特異性の低下や内在遺伝子欠損を回避し、Creリコンビナーゼを細胞種特異的に高発現する極めて理想的なCre発現マウスとして樹立する事に成功した。今後は昨年度までに樹立した破骨細胞特異的HO-1ノックアウトマウスのより詳細な解析を行なうことで、骨組織でのCOの役割について解明を試みる。また、条件付きCBSノックアウトマウスの樹立を進め、骨組織を構成する細胞種での特異的機能の解析を行なう。樹立したCmp1-T2A-Creノックインマウスと条件付きHO-2遺伝子破壊マウスを交配することで、骨細胞特異的HO-2遺伝子破壊マウスの樹立を試みる。これまでに作出した破骨細胞特異的HO-1遺伝子破壊マウスとの表現型を比較する事で、骨組織におけるHOの高次機能を明確にする。さらに、これら遺伝子破壊マウスにおいて異常が起こる分子メカニズムの解明を試みる。
イノシトールリン脂質代謝により変動する細胞内リン酸化シグナルの時空間解析

イノシトールリン脂質シグナルは、細胞増殖、アポトーシス、細胞骨格制御、小胞輸送など多彩な生命現象に関与する。しかし、それらのシグナルの調節は、複雑なためその全容の解明は困難となっている。そこで我々は、タンパク質リン酸化に着目し、イノシトールリン脂質シグナルで変動するタンパク質リン酸化を、網羅的に解析することで、複雑なイノシトールリン脂質シグナルを全体として明らかにすることを提案した。リン酸化シグナルとそのシグナルが担う生理機能の関係を半自動的にスコアリングするシステムの開発を行った。細胞は、外界からの情報に従って、伸長と収縮という2つの動作を時空間的に協調(極性化)させることで、特定方向への運動を制御している。申請者はこの細胞運動シグナルの全体像を、プロテオミクス手法を用いて明らかにすることを目的している。この極性形成はイノシトールリン脂質シグナルを介し、RhoファミリーGタンパク質を調節することによって調節されている。本年度はイノシトールリン脂質シグナル解析に使用するイノシトールリン脂質変動細胞の作製、およびそれぞれの細胞におけるリン酸化シグナルの変動を、リン酸化プロテオミクスの手法を用いた解析を行った。リン酸化シグナルの変動は階層型クラスタリングにより分類し、どのタンパク質がどのイノシトールリン脂質で変動するか明らかにすることを試みた。この結果、非常に多くの分子が、膨大な変動パターン取ることが明らかになった。この結果は網羅的情報から細胞運動に必須なシグナルを抽出するシステムが必要であることを示していた。そこでまずプロテオミクスの情報を整理するためのデータベースの作製を行った。このデータベースには、リン酸化の変動および、変動のあった分子の情報(アミノ酸配列、ドメイン構造、機能、相互作用分子)をSwiss-Prpt,PFAMからデータを抽出、付記し、web上で参照できるシステムとした。次に非特異的なリン酸化シグナルを除去するために、リン酸化シグナルを限定するためのシグナル伝達地図の構築を行った。これは、イノシトールリン脂質の下流で働く分子(例Rho)の相互作用プロテオミクス解析を行うことで構築した。この成果の一部は次項で示す学会にて発表を行った。現在この相互作用地図を鋳型にリン酸化シグナル伝達経路を再構築する作業を行っている。この作業が終了し次第FRETを利用した空間制御メカニズムの解析に進む予定である。タンパク質リン酸化に着目し、イノシトールリン脂質シグナルで変動するタンパク質リン酸化を、網羅的に解析することで、複雑なイノシトールリン脂質シグナルを全体として明らかにすることを提案した。しかしリン酸化プロテオミクスで同定されるリン酸化サイトは膨大な数にのぼり、アーティフィシャルなサイトも多分に含まれる。そこでイノシトールリン脂質シグナルに関係するリン酸化の変動を正確に抽出する目的で、リン酸化シグナルとそのシグナルが担う生理機能の関係を半自動的にスコアリングするシステムの開発を行った。システムは、シグナル伝達経路が詳細に調べられている上皮増殖因子(EGF)シグナルを例に、リガンド依存的に入力されるシグナル伝達経路の予測ができるよう構築した。(1)薬剤依存的なリン酸化サイトの抽出.HeLa細胞のEGF刺激におけるリン酸化プロテオミクス解析を行った。それぞれのリン酸化サイトは、GeneOntrogyの情報をアサインし、機能と局在の分布を調べた。ン酸化の経時的変動パターンは、相関をとりクラスタリングし、9パターンに分類した。(2)リン酸化モチーフからリン酸化酵素の予測.リン酸化モチーフとリン酸化されるタンパク質の機能に相関があるかをGene Ontrogyとリン酸化モチーフでクラスタリングすることで調べた。(3)リン酸化シグナル伝達地図の構築と、経路ごとの生理機能予測.リン酸化モチーフから関連するキナーゼの予測法を既存のデータベース情報(Phosphosite plus, PhosphoELM)をもとに開発した。予測されるキナーゼと基質タンパク質の情報と相互作用実験の結果に加え、リン酸化タンパク質に相互作用するタンパク質を、タンパク質間相互作用データベース(STRING, BioGRID)から抽出し、増殖因子シグナルのシグナル伝達地図を構築した。
細胞の不老不死と腫瘍遺伝子による試験管内発がんの関連

哺乳類の個体から分離した初期細胞とそれを継代培養してえられる不死化株の中から、がん遺伝子を含むDNAを感染したときにいろいろとちがった"試験管内発がん"特性を示す細胞株を分離し、がん化の多段階説の検証と新しいがん遺伝子の分離に役立てたい。1.ゴールデンハムスター:胎児由来の初期細胞は不死化していないが、rasとmycの混合感染でがん化をおこす。その際15番目の染色体を1本欠くものががん化を起こしやすい。不死化株で増殖速度の早いものは、がん化感受性が高くras単独感染でも容易にがん化した。増殖速度のおそい不死化株は、rasとmycの混合感染でもがん化しなくなった。2.マウス:BALB/c系統の胎児由来の細胞は容易に不死化し、ras単独でわずかにがん化し、mycを混合するとがん化率が激増した。3.不死化関連の遺伝子:myc遺伝子の転写はシクロヘキシミド投与で大きく活性化され、その転写RNAの失活も阻害されるため、転写RNA量が2けたも激増する。ヒトのIL-2受容体のcDNAを感染したマウス細胞の表面に、ヒトIL-2受容体を恒常的に発現している株をつくるのに成功した。このような受容体の恒常的発現はヒト成人性T細胞白血病の特性であるが、この人工的につくった細胞はIL-2なしには自律的増殖能を示さなかった。細胞のがん化のためには、少くともあと1つの要因が必要である。4.ショウジョウバエの遺伝子由来のがん:劣性脳腫瘍遺伝子のホモ接合幼虫の脳は100%腫瘍化している。このときの腫瘍細胞は外見は正常であるが、成虫ハエの腹腔という異所に移植すると、1代で染色体の異常が多発し、継代を続けるとレトロウィルス様粒子の異常発現と、そのプロトウィルス遺伝子の増巾がおこった。
活性種変換生長を伴う新規タンデム型精密重合系の開発

本研究では、炭素ー硫黄結合および炭素ーハロゲン結合などの単一の共有結合種を非選択的かつ可逆的に活性化可能な反応条件を探索し、異なる活性種を経て1本の高分子鎖を形成する新規な重合反応の実現を目的とした。炭素ー硫黄結合を有するRAFT試薬存在下、ラジカル発生剤によるRAFT重合とルイス酸によるリビングカチオン重合を同時に行うタンデム型活性種相互変換重合を見いだした。また、炭素ーハロゲン結合を用いた活性種変換型アニオン/ラジカル重合系の開発にも成功した。本研究では、炭素-硫黄結合および炭素-ハロゲン結合などの単一の共有結合種を非選択的かつ可逆的に活性化可能な反応条件を探索し、異なる活性種を経て1本の高分子鎖を形成する新規な重合反応の実現を目的としている。当該年度は、特に以下の点に注力して検討を行った。1.炭素-硫黄結合の活性化によるタンデム型カチオン/ラジカル重合系の開発カチオン重合性モノマーとして種々のビニルエーテル、ラジカル重合性モノマーとして(メタ)アクリル酸エステルを用い、炭素-硫黄結合を有するRAFT試薬存在下、ラジカル発生剤によるRAFT重合とルイス酸によるリビングカチオン重合を同時に行うタンデム型活性種相互変換重合を検討した。ここで、ラジカル発生剤とルイス酸の種類や濃度、RAFT試薬を適切に設計することで、反応条件によってはタンデム重合が進行することが明らかとなった。とくに、トリチオカーボネート型RAFT試薬を用い、ルイス酸として亜鉛やアルミニウムなどレドックス活性のないものを用いることが重要であった。2.生成ポリマー解析と反応解析上記の重合系について、反応解析による各モノマーの消費速度と生成するポリマーの分子量解析によるリビング性評価や^<13>CuNMRによる生成ポリマー中のモノマーユニットの連鎖構造解析などから、タンデム型の重合機構を詳細に検証した。これにより、本重合によって、性質の全く異なるモノマーからなるマルチブロック共重合体が生成していることが明らかとなりつつある。今後、実用物性についても評価し、新規重合概念として有用性を判断する。本研究では、炭素ー硫黄結合および炭素ーハロゲン結合などの単一の共有結合種を非選択的かつ可逆的に活性化可能な反応条件を探索し、異なる活性種を経て1本の高分子鎖を形成する新規な重合反応の実現を目的とし、特に以下の点に注力して検討を行った。1.炭素ー硫黄結合の活性化によるタンデム型カチオン/ラジカル重合系の開発前年に引き続き、カチオン重合性モノマーとして種々のビニルエーテル、ラジカル重合性モノマーとして(メタ)アクリル酸エステルを用い、炭素ー硫黄結合を有するRAFT試薬存在下、ラジカル発生剤によるRAFT重合とルイス酸によるリビングカチオン重合を同時に行うタンデム型活性種相互変換重合を検討した。種々のラジカル発生剤やルイス酸触媒などを検討し、より効率的なタンデム型リビング重合の反応条件を探索し、カチオンとラジカルの活性種を経て1本の高分子鎖を形成する新規な特殊構造高分子の実現した。また、様々なモノマーの組み合わせを検討することで一般性の確立に近づいた。2.炭素ーハロゲン結合を用いた活性種変換型アニオン/ラジカル重合系の開発ドーマント種を介することで、リビングアニオン重合からラジカル重合へ変換可能であることを明らかとした。また、ラジカル重合からアニオン重合への変換の可能性についても評価した。3.生成ポリマー解析と反応解析上記の重合系について、反応解析による各モノマーの消費速度と生成するポリマーの分子量解析によるリビング性評価や13C NMRによる生成ポリマー中のモノマーユニットの連鎖構造解析を行った。とくに、タンデム型カチオン/ラジカル重合活性種変換型の重合機構を明らかにした。本研究では、炭素ー硫黄結合および炭素ーハロゲン結合などの単一の共有結合種を非選択的かつ可逆的に活性化可能な反応条件を探索し、異なる活性種を経て1本の高分子鎖を形成する新規な重合反応の実現を目的としている。3.生成ポリマー解析と反応

解析上記の重合系について、反応解析による各モノマーの消費速度と生成するポリマーの分子量解析によるリビング性評価や13C NMRによる生成ポリマー中のモノマーユニットの連鎖構造解析などから、タンデム型/活性種変換型の重合機構を明らかにした。現在のこところモノマー種は限られているが、炭素-硫黄結合の異なる刺激による可逆的な活性化を実現することで、従来の活性種による分類を超えたタンデム型活性種相互変換重合が進行することが明らかとなったため。25年度が最終年度であるため、記入しない。炭素ー硫黄結合の活性化によるタンデム型カチオン/ラジカル重合系において、ポリマー合成実験の再検討が必要となり、構造解析に係る消耗品の購入時期が翌年度に繰り越された。しかし、新たに本研究において、炭素ーハロゲン結合を用いた活性種変換型アニオン/ラジカル重合系が開発でき、当初の予定とは違う新しい展開もできている。ルイス酸やラジカル発生剤、RAFT試薬を設計することで、モノマー適応範囲の拡大を検討する。また、本重合によって期待される性質の全く異なるモノマーからなるランダムおよびマルチブロック共重合体など、得られるポリマーについて詳細な解析を行うとともに、実用物性についても評価し、新規重合概念として有用性を判断する。さらに、プロトンなどのカチオン源によるRAFT型カチオン重合についても検討を行い、金属フリーでの可逆的活性種変換を伴った生長反応についても検討を行う。今後は、前年度までに明らかとなった炭素ー硫黄結合をドーマント種として用いたタンデム型リビングカチオン/ラジカル重合について、詳細な解析を行うとともに適応一般性の評価を継続しておこなう。さらに、本重合によって期待される性質の全く異なるモノマーからなるランダムおよびマルチブロック共重合体など、得られるポリマーについて詳細な解析を行うとともに、実用物性についても評価する。さらに、カチオンとラジカル重合以外の重合系の組合せについても検討を行い、新規重合概念として有用性を判断する。
Ullrich病におけるVI型コラーゲン欠損に関する病理学的及び遺伝子学的研究

我々はUllrich病におけるcollagen VI欠損を世界で初めて明らかにしたが、本症の病態を明らかにするため、細胞外マトリックス及び筋膜の構成成分に対する各種モノクローナル抗体を用いて免疫組織化学的に検索した。その結果、collagen VI欠損を伴うUllrich病において筋膜上のNG2 proteoglycanの発現低下が明らかになった。Ullrich病の皮膚においてはfibronectin受容体の発現が著明に低下してたがNG2 proteoglycanの発現は対照と差がなかった。これはcollagen VI欠損の影響が組織によって異っており、組織により異る臨床症状の一因である可能性があり、現在詳細に検討中である。Ullrich病1例の遺伝子解析にて、collagen VIα2遺伝子のframeshift mutationが認められ、その下流にストップコドンが出現していることが判明したが、現在他の症例の遺伝子解析を続行中である。電子顕微鏡学的にも検索を進め、Ullrich病骨格筋の毛細血管の形態異常を報告し、本症の筋再生あるいは成熟障害の一因となることを明らかにした。遺伝子解析の無駄を省くためcollagen VIα1、α2、α3の3つの遺伝子のうち、どの遺伝子に異常があるのかをスクリーニングするためchain specificなモノクローナル抗体を用いたウエスタンブロテイングを行った。症例により残余collagen VIの量と分子量が異ることが明らかになり、今後症例を増やして遺伝子解析の結果と蛋白解析の結果を詳細に比較検討する必要がある。またUllrich病の培養細胞を用いた治療実験も現在進行中である。Ullrich病の病態を明らかにするため、細胞外マトリックス及び筋膜の構成成分に対する各種モノクローナル抗体、さらに筋再生関連蛋白に対するモノクローナル抗体を用いて免疫組織化学的に検索した。その結果、collagen IVの発現は他疾患に比べUllrich病の2症例で増強していた。一方collagen VIの発現は他疾患では結合織の増殖に伴い増強していたが、Ullrich病の2症例においては結合織の増殖が著明であるにもかかわらず、全く染色されなかった。生検皮膚や培養皮膚線維芽細胞においても、collagen VIはUllrich病特異的に欠損していた。さらにUllrich病においては再生線維のマーカとされているdesminやNCAMは強く発現していたが、developmentalmyosin heavy chainの発現は弱くneonatal myosin heavy chainは他疾患に比べてより小径の筋線維のみに発現が限局していた。Ullrich病の電子顕微鏡所見で筋形質膜は過伸展し、襞状に変化している部位が存在した。また、基底膜の肥厚、増殖が認められた。さらにUllrich病の皮膚および培養線維芽細胞においてfibronectin受容体の発現が著明に低下していることを明らかにした。これはcollagen VIの欠損が細胞接着にも影響を及ぼすことを患者の標本で証明した初めてのものであり、現在詳細に検討中である。Ullrich病一例の遺伝子解析にて、collagen VIα2遺伝子のframeshift mutationが認められ、その下流にストップコドンが出現していることが判明したが、第二例目ではcollagen VIα1遺伝子およびcollagen VIα2遺伝子は正常であり、現在collagen VIα3遺伝子の解析を続行中である。我々はUllrich病におけるcollagen VI欠損を世界で初めて明らかにしたが、本症の病態を明らかにするため、細胞外マトリックスおよび筋膜の構成成分に対する各種モノクローム抗体を用いて免疫組織化学的に検索した。その結果、collagen VI欠損を伴うUllrich病において筋膜上のNG2 preteoglycanの発現低下が明らかになった。Ullrich病の皮膚においてはfibronectin受容体の発現が著明に低下していたがNG2 Preteoglycanの発現は対照と差がなかった。

これはcollagen VI欠損の影響が組織によって異なっており、組織により異なる臨床症状の一因である可能性があり、現在詳細に検討中である。Ullrich病1例の遺伝子解析にて、collagen VIα2遺伝子のframeshift mutationが認められ、その下流にストップコドンが出現していることが判明したが、現在他の症例の遺伝子解析を続行中である。電子顕微鏡学的にも検索を進め、Ullrich病骨格筋の毛細血管の形態異常を報告し、本症の筋再生あるいは成熟障害の一因となることを明らかにした。遺伝子解析の無駄を省くためcollagen Viarufa1、α2、α3の3つの遺伝子のうち、どの遺伝子に異常があるのかをスクリーニングするためchain specificなモノクローナル抗体を用いたウエスタンブロッティングを行った。症例により残余collagen VIの量と分子量が異なることが明らかになり、今後症例を増やして遺伝子解析の結果と蛋白解析の結果を詳細に比較検討する必要がある。また、Ullrich病の培養細胞を用いた治験実験も現在進行中である。
MHD平衡解の分岐遷移過程に現れる電流シートの構造安定性

磁気閉じ込め核融合炉心や太陽コロナのような高磁気レイノルズ数、低プラズマβにあるプラズマシステムにおいては、短時間に大規模なエネルギーが突然解放される現象がしばしば観測される。本研究においてはこうした突発的なエネルギー解放現象をMHD平衡解の遷移過程として捉えた上で、この遷移過程に現れる電流シートの安定性と平衡遷移過程との関係を数値シミュレーションをもとに調べた。特に、太陽フレアを念頭におき、太陽コロナ磁気ループ不安定性の結果として形成される電流シートの安定性を詳しく調べた。その結果、磁気レイノルズ数の平方根に比例して電流シートのアスペクト比A(=長さ/幅)は増加するが、Aが10^2に達すると、電流シートはテアリング不安定性に対して不安定になることが明らかにされた。その結果、電流シートの中に複数のX点(磁気中性点)が出現し、磁気島が形成されるフェーズと、磁気島が電流シートに沿って排出されるフェーズが交互に現れることが分かった。電流シートの不安定性の成長率は電流シート形成の原因である磁気ループ不安定の成長率よりも大きい。それ故、電流シートの不安定化はシステムの不安定化を促進し、不安定性は指数関数よりも早く爆発的に成長することが明らかにされた。こうした爆発的不安定は磁気レイノルズ数が10^4よりも小さな時には生じないことから、高温プラズマに特徴的な現象であると考えられる。上記の数値シミュレーションの結果は、太陽フレアにおけるX線観測結果と非常によい形状的一致を示しており、太陽フレアの重要な物理機構を捉えていると思われる。また、これらの結果はトカマクの鋸歯状振動に関するKadmtsevのスケーリングが高磁気レイノルズ数領域では成り立たないことを示唆するものである。
知識基盤社会における「型の教育」探求のための総合的データ構築

人知が極端に高度化した現代知識社会において、「型」の模倣によって人間の身体に蓄積される「知」はいかなる可能性を持ちうるか。これを歴史的に検討するための史資料の蒐集が本研究の目的である。注目したのは江戸時代である。それは、この時代が、近代に先駆けて知識社会への転換が進み、人為・人知による自然環境の開発と身体という内なる自然の羈束とが進行した時代だったからである。この時代は知識社会の萌芽期でありながら、しかしその知は常に自然との折り合いにさし戻され自然から大きくは遊離しなかったことが明らかになってきた。本研究では、知識社会に生きる我々がこのことから得られる示唆を読み解くための史資料を広く蒐集した。本年度も、昨年度に引き続き、研究の基礎になる史資料の蒐集に努めた。明治初期からおおむね昭和戦前期までの時期について、学校教育の著しい拡大が達成されるなかで、学校教育の質・量両面に亘る躍進の後景に退いて見つけにくくなりつつも、なおその機能を失うことのなかった「型の教育」の実相を探るための史資料である。具体的には、民俗学的な視点からの子どもの遊びや集団活動に関する研究・調査、子どもの生活・職人の仕事の様子を被写体とした写真・絵画、および職人・芸人などを対象としたその個人史の聞き取りなどの史資料が中心である。併せて、昨年度蒐集が十分でなかったと思われる、江戸時代の思想史・教育史関係の資料や教科書(往来物)、絵本、年中行事に関する資料なども蒐集した。蒐集した史資料は、書籍として刊行されたもの(原史料の覆刻、影印なども含めて)が主である。また、そうした歴史的資料以外に、身体や模倣について理論的な考察を行っている近年の身体論関係の研究なども蒐集した。なお、民俗学的な子ども・若者研究の視点を広げる目的で、沖縄の子ども・若者習俗や教育・文化に関わる史資料を把握するため、琉球大学附属図書館などでの史料調査も行った。上記の方法によって蒐集した史資料はいずれも、庶民生活のさまざまな場面に現れ出た「型の教育」のありさまを文章や画像を通して窺うことのできるものである。データ(史資料)の蒐集・整理を主目的とする本研究においては、こうした蒐集作業は、最も土台となるものである。本年度は、江戸時代の土木工事、農業技術改良、出版、育児思想など、江戸時代の「自然」観を探るための史資料の蒐集とその整理・分類を中心的に行った。本研究が取り上げる対象は「型の教育」であり、それは一定の身体的動作の模倣とそのくりかえしによる芸能的ないし職業的な技の体得と精神的鍛錬である。従って、本研究の目的を改めて言い直せば、身体という人間の内なる「自然」に対する働きかけに重点を置く「型の教育」と、「知識」(遍ねく伝達可能なように客観化され、かつ記号化された認識内容)の獲得とその操作や活用に重点を置く教育との比較対象を行い、後者の方向に益々傾斜しつつある現代社会の教育において、前者がどのような可能性を持ちうるのかを歴史的に検討するための史資料を蒐集・整理することであった。しかし、この身体という「内なる自然」に対する働きかけの特質は、同時に、「外なる自然」、すなわち我々を取り巻く環境としての自然に対する働きかけのありようと統一的に把握するのでなければ、的確な理解には到り得ないということが、昨年度までの研究を通じて次第に痛感されるようになってきた。そのため、今年度の研究においては、現代社会(=知識基盤社会、消費社会)へ向けて時代を繰り下がって資料の蒐集と分析を図るのではなく、本研究の出発点であった江戸時代に改めて立ち戻り、その「自然」観を探るための史資料の蒐集・整理を行うこととした。江戸時代は、地震、津波、火山噴火、冷害、疫病などの自然災害が相次ぐとともに、前期には自然開発が大規模に行われ、中期以降は農業技術の改良が進み、その普及を出版事業が支えるなど、「自然」と人間との関わりが多様に展開された時代だからである。本研究の最終年度の研究としては、最終到達目標に到っていないが、本研究の最も土台となる史資料を、新たな視点から蒐集・整理することができた。平成23年度は、研究実施計画において、以下のように予定していた。

すなわち、1.江戸時代における「型の教育」に関わる思想、慣行や実態を知るための史料を蒐集する、2.江戸時代の学問論・芸道論・道徳論における「型の教育」の主張を摘出する、3.江戸時代の育児書と農書から子ども観、発達観(成長観)、教育観を摘出する、4.随筆・風俗見聞録・文芸作品などにもとづきながら、身体の訓練のありさまを摘出する、5.絵画に描かれた「型の教育」のありさまを摘出する、である。これにに基づき、本年度の研究活動の重点として、江戸時代における「型の教育」の事実や思想を考えるための史資料を蒐集した。蒐集した史資料は具体的には、江戸時代の育児書、幕末・明治初期来日外国人の見聞録、江戸文化・風俗研究書などである。また、当初は今年度に予定していなかった明治期以降の資料の蒐集も行い、写真による庶民生活記録、職人生活に関する聞き書きなどを蒐集した。蒐集の方法は、影印の史料、および活字化されて刊行された図書を探索・購入した、東北大図書館や島根市立図書館などを訪問して蒐集した、などである。上記方法によって蒐集した史資料はいずれも、庶民生活のさまざまな場面に現れ出た「型の教育」のありさまを文章や画像を通して窺うことのできるものである。データ(史資料)の蒐集・整理を主目的とする本研究においては、こうした蒐集作業は、最も土台となるものである。購入予定の書籍が品切れであったことや、研究補助者と監督者との時間的調整がうまくいかなかったため雇い入れができず、このため蒐集資料整理の作業が遅れていることが、大きな理由である。江戸時代の育児書については、史料としての意義を考えて、影印本で出版されているものを入手したが、くずし字の読解にやや時間をとられていることが、遅れの原因と考えている。東洋文庫の『子育ての書』など翻刻資料を参照して、読解のスピードを上げたい。「型の教育」と「知の教育」との相剋と相補の関係性を歴史的に見渡す見取り図作成のための思想史的・口承的・視覚的なデータを分類・整理する。具体的には「型の教育」の思想の盛り込まれた江戸時代の学問論・芸道論・道徳論・農書・随筆・風俗見聞録・文芸作品など、および日本の知識社会化の動向とそれに合わせて変容しつつある「能力」観を読み取るための資料などを中心に蒐集する。江戸時代以来、日本社会は、非常に広い意味での「知識社会化」を幾度か経、そのたびごとに社会的に必要とされる知識は多量化・高度化してきたと言えるが、そのたびごとに「知の教育」と「型の教育」とがその位置関係をどのように変化させてきたのかを読み取れるよう、蒐集した史資料の整理・分類を行う。最後に、蒐集・整理・分類したデータの紹介と現代における「型の教育」の意義を考えるための視点、今後の課題などを取りまとめて、成果を発表する。平成24年度は、1.前年度十分に遂行できなかったこととして、江戸時代の育児思想の特質を際だたせるための比較対象として江戸時代の農書を蒐集整理することが挙げられるので、このことをまず進める。また、当初から平成24年度の作業として予定していた、2.職人の仕事ぶりとそこに現れる「型」を描いた史資料、特に図像を多く含むものを蒐集し、3.明治初期からおおむね昭和戦前期までの時期について、学校教育が著しく普及・拡大するなかで、「型の教育」が子どもの遊びや集団活動の中でどのように機能していたのかを探るための民俗慣行資料を蒐集する、という史資料蒐集作業を中心的に行う。さらに、それらの史資料を簡便に検索できるようにするためのデジタル化の作業を行う。平成25年度については、1.以上の作業の成果に基づいて、「型の教育」と「知の教育」との相剋と相補の関係性を見渡す見取り図作成のため、思想史的・口承的・視覚的なデータを蒐集・分類・整理した上で、検索可能なデータベースとするとともに、2.以上の作業過程、および蒐集・整理・分類したデータの紹介と現代における「型の教育」の意義を考えるための視点、今後の課題などを取りまとめて、成果を報告する。
肝免疫細胞における核内受容体LXRの機能解析

Liver X receptor (LXR)は体内でコレステロール代謝調節センサーとして働く一方、免疫細胞において炎症抑制作用を有することが知られている。本研究では、LXRが高発現及び機能する主要臓器である肝臓に着目し、肝臓に常在する免疫細胞におけるLXRの機能を解析した。野生型に対し、LXR欠損マウスでは肝臓総免疫細胞数が増加した。高炎症誘導能を有する骨髄由来マクロファージが増加しており、リポ多糖などへの感受性が増強した。一方、ナチュラルキラーT細胞は減少し、サイトカイン産生能を消失した。以上の知見より、LXRは肝常在免疫細胞の分布及び機能において重要な役割を担う可能性が示唆された。核内受容体LXRは体内でコレステロール恒常性を維持する転写因子であるが、近年マクロファージにおいて抗炎症因子として機能することが知られている。LXRは肝臓で高発現しているが、肝臓に恒常的に存在する免疫細胞での機能はまだ明らかではない。本研究では、肝臓免疫細胞におけるLXRの機能と脂質代謝との関連を調べるため、本年度は以下の検討を行った。1、野生型、LXRα欠損、LXRβ欠損、LXRα/β欠損マウスの肝臓から非実質細胞をコラゲナーゼ消化及びパーコール分離によって単離し、細胞数とKupffer細胞、NK細胞、NKT細胞などの分布を比較したところ、LXRα/β欠損において全免疫細胞数が他の群と比べ明らかに増加しており、各免疫細胞の発現分布についても変化が認められた。2、単離培養した野生型またはLXRα/β欠損マウス由来の肝臓免疫細胞をLPSまたはCpGで刺激したところ、LXRα/β欠損マウスにおいてLPS及びCpGによる炎症性サイトカイン産生量が野生型と比較し増加していた。3、野生型及びLXRα欠損マウスに通常食または高コレステロール食を付加したところ、高コレステロール食付加2週間においてLXRα欠損マウスの肝臓免疫細胞は他群と比べ約10倍増加し、その大半が活性化マクロファージであった。高コレステロール食付加2週間では、野生型及びLXRα欠損マウスともに血中コレステロール濃度の上昇は認められなかったが、LXRα欠損マウスでのみ肝臓中へのコレステロールの蓄積及び肝臓免疫細胞内への明らかなコレステロールの蓄積が観察された。本年度の結果から、肝臓においてLXR欠損マウスを用いた検討によって野生型マウスとの免疫細胞分布の相違、炎症反応に対する免疫細胞群の応答性の相違が観察されたことから、LXRは肝臓免疫細胞の機能及び維持に関与している可能性が示唆された。本研究では肝臓免疫細胞における核内受容体LXRの新規機能を見出すことである。初年度の検討から、LXR欠損マウスの肝臓を用いた検討によって野生型マウスとの免疫細胞分布の相違、リポ多糖(LPS)、CpG-DNA誘導性炎症反応に対する免疫細胞群の応答性の相違を見出すことが出来た。今年度は、LXR欠損マウスの肝臓においてCD1d拘束性インバリアントナチュラルキラーT(iNKT)細胞が有意に減少していたことに着目し、以下の検討を行った。1、単離培養した野生型またはLXR欠損マウス由来の肝臓免疫細胞をNKT細胞の特異的リガンドであるα-ガラクトシルセラミド(α-GalCer)で刺激しサイトカイン産生能をリアルタイムPCRまたはELISA法を用いて評価したところ、IL-4, IFNγなどの発現誘導が完全に消失した。2、野生型及びLXRα欠損マウスに通常食または高脂肪及びコレステロール食を4週間付加したところ、LXRα欠損マウスにおいて血中コレステロール値、トランスアミラーゼ値及び肝臓における炎症性マクロファージ(Kupffer細胞)数は顕著に増加しているにも関わらず、iNKT細胞は有意に減少していた。また、肝臓免疫細胞を単離し、遺伝子発現解析を行ったところ、TNF, IL-12などの炎症性サイトカイン発現が増加した一方でIL-4の発現減少が認められた。以上の検討から、LXRは肝臓においてiNKT細胞の分布及び機能維持に重要な働きを担う可能性が示唆された。最終年度は、昨年度までの検討によりLXRα/βダブル欠損マウスまたは西洋食付加により慢性肝障害を有したLXRα欠損マウスの肝臓で認められた、CD11b陽性Kupffer細胞/マクロファージの増加またはナチュラルキラーT (natural killer T, NKT)細胞の減少による影響を個体レベルで詳細に検証するため、リポ多糖(lipopolysaccaride, LPS)またはNKT細胞の選択的リガンドであるα-ガラクトシルセラミド(α-galactosylceramide, α-GalCer)刺激によるin vivo急性炎症モデルの解析を実施した。1.野生型またはLXRα/βダブル欠損マウスにLPSを投与したところ、野生型と比較し顕著な血中トランスアミナーゼ値及びTNF-αやIFN-γなどの炎症性サイトカイン産生の増加を認めた。一方、α-GalCer刺激に対しては耐性を示した。2.野生型またはLXRα欠損マウスに西洋食を4週間摂餌後、LPSを投与したところ、LXRα欠損マウスは顕著なサイトカイン産生または血中トランスアミナーゼ値の増加を認め、早期に死亡した。α-GalCerまたはNKT細胞活性化を介して急性肝炎を誘導するコンカナバリンA刺激に対しては耐性を示した。以上の知見は前年度までに得られていた、肝免疫細胞組成変化、マウス肝免疫細胞の初代培養系を用いたin vitroの結果と一致した。

本研究課題により、肝免疫恒常性維持にLXRは重要な役割を果たしていること、肝免疫細胞におけるLXRの標的はKupffer細胞/マクロファージとNKT細胞であることが明らかとなり、LXRは炎症のみならず腫瘍免疫やアレルギーなどにおいても重要な役割を担う可能性が示唆された。Liver X receptor (LXR)は体内でコレステロール代謝調節センサーとして働く一方、免疫細胞において炎症抑制作用を有することが知られている。本研究では、LXRが高発現及び機能する主要臓器である肝臓に着目し、肝臓に常在する免疫細胞におけるLXRの機能を解析した。野生型に対し、LXR欠損マウスでは肝臓総免疫細胞数が増加した。高炎症誘導能を有する骨髄由来マクロファージが増加しており、リポ多糖などへの感受性が増強した。一方、ナチュラルキラーT細胞は減少し、サイトカイン産生能を消失した。以上の知見より、LXRは肝常在免疫細胞の分布及び機能において重要な役割を担う可能性が示唆された。昨年度の成果より、LXR欠損マウスの肝臓において減少していたiNKT細胞に着目したところ、LXR欠損免疫細胞においてα-GalCer誘導性サイトカイン産生能が完全に消失している現象が観察された。また、LXRα欠損マウス高脂肪高コレステロール付加実験を実施したところ、脂質代謝異常によってもNKT細胞の分布及び機能は変化することが示され、肝臓のLXRは脂質代謝制御を行うことでKupffer細胞のみならずNKT細胞の機能維持にも重要な役割を担うことが示唆された。NKT細胞におけるLXRの役割についてはこれまで報告は無く、今年度の検討により、新しい知見を見出すことができた。現在α-GalCer投与によるin vivoの検討も進めており、研究計画はおおむね順調に遂行できていると判断した。生化学最終年度はこれまで見出したKupffer細胞(肝マクロファージ)及びiNKT細胞の機能におけるLXRの影響をさらに詳細に調べるため、以下の検討を行う。1、in vitro培養系で観察されたLXR欠損免疫細胞におけるLPSまたはCpG-DNA誘導性サイトカイン産生能の増加について、これらの薬剤をマウスに直接投与しin vivoでの急性肝障害モデルを構築し、野生型との比較を行う。2、LXR欠損iNKT細胞のサイトカイン産生能についてin vivoでの効果を評価するためα-GalCer投与による肝障害モデルを構築し、野生型との比較を行う。3、LXR欠損iNKT細胞のサイトカイン産生能消失効果についての原因を明らかにするため、野生型またはLXR欠損マウスからKupffer細胞(肝マクロファージ)及びNKT細胞を単離し、野生型Kupffer細胞とLXR欠損NKT細胞または逆の組み合わせで共培養を行い、α-GalCer誘導性サイトカイン産生能を評価する。以上の検討により、一定の効果を認める結果が得られた場合、論文作成に着手する。本年度の計画ではマウスにLPSやCpGを投与する急性肝障害または高脂肪及び高コレステロール食付加による慢性肝障害モデルマウスを構築し、LXRリガンドの投与による薬理効果またはLXR欠損マウスへの影響を検討する予定であった。
腎細胞癌における血管新生阻害薬に対する耐性の機序の解明と新規治療の探索

芳香族炭化水素受容体(AhR)の腎細胞癌の浸潤や進展との関連を解析した。AhRの発現は予後不良因子であり、活性化によって上皮間葉転換が促進され、腫瘍の浸潤を促進することを示した。スニチニブ治療後のがん組織を解析した結果、腫瘍血管はほとんど死滅しているものの、細かな腫瘍血管が残存し、その腫瘍血管にはVasohibin-1が発現していることを発見した。またスニチニブの効果に血中のMDSC (myeloid derived suppressor cell)の数が予後不良因子であることを示した。癌の脅威はその浸潤能、転移性再発や治療抵抗にある。進行腎細胞癌の治療は血管新生阻害薬が治療の中心となった。治療開始時には腫瘍縮小効果がみられ治療成績は向上しているが、ほとんどすべての症例で治療中に耐性が生じることが臨床における最大の問題である。ヒトにおける癌の多くは上皮組織に由来し、悪性度進展に伴い、上皮-間充織形質転換に類似した事象が誘導され、高い浸潤性や転移性、場合によっては幹細胞的性質も獲得されると考えられている。我々は腎細胞癌が先進国で増加し、環境汚染と関連していること、喫煙がリスクファクターであることを考え、さらに上皮間葉転換を誘導する可能性から芳香族炭化水素受容体(AhR)が腎細胞癌の浸潤や進展と関連する可能性を考慮し、AhRの発現を腎細胞癌の120例の切除標本を使用して発現を解析した。AhRを活性化するindirubinとTCDDをin vitroで腎細胞癌の細胞株に投与した結果、CYP1A1とCYP1B1を誘導し、さらにマトリックスメタロプロテアーゼ(MMP)の発現誘導を介して細胞の浸潤は増加した。siRNAによってAhRの発現を源弱させると浸潤能は低下した。当初は腎細胞癌におけるAhRの発現を検索する予定で開始した研究であったが、切除検体の発現を検索する過程でAhRの発現が癌だけでなく、腫瘍周囲に浸潤するリンパ球にも発現することを発見した。腎細胞癌のグレードやステージが高い腫瘍においてAhRを発現する腫瘍浸潤リンパ球が多く存在する事を明らかにした。このようにAhRは予後予測因子であり、上皮間葉転換を促進することで腫瘍の浸潤を促進するため、治療標的分子となりうることを示した。癌細胞にのみ発現すると予想されたAhRが腫瘍浸潤リンパ球に発現しているという発見は予想をしていないものであった。さらにこのリンパ球での発現は腫瘍の悪性度が高いことと関連していることがわかった。このことは悪性度の高い癌をAhRの発現を有するリンパ球が認識している可能性を示唆している。しかし、悪性度の高いがんは生存を継続し、浸潤と転移をきたして患者を死に至らしめる訳であるから、おそらく癌を死滅させる能力をAhR発現リンパ球は有していないと考えられる。この推察は現在、腫瘍学で最も注目されているPD-1/PD-L1経路による免疫チェックポイントとの関連も示唆されるので、これからの研究への扉を開いた感がある。腎細胞癌を特徴づける血管新生と浸潤性に着目して、腎細胞癌の浸潤・転移機構の解析とともに分子標的治療抵抗性の分子病理学的解析を中心に研究した。淡明細胞型腎細胞癌ではVHL遺伝子の不活化によるHIF-VEGF分子経路が血管新生と癌細胞増殖に関与しており、転移を有する淡明細胞型腎細胞癌では同経路を阻害するスニチニブなどの血管新生阻害薬であるtyrosine kinase inhibitor (TKI)による分子標的治療が第一選択となっている。TKIは癌細胞自体を標的とするのではなく、がんを栄養する血管を標的にしている。何故、血管内皮細胞を障害するTKIに耐性が生じるかは不明である。我々はスニチニブ治療後のがん組織を解析した結果、腫瘍血管はほとんど死滅しているものの、細かな腫瘍血管が残存し、その腫瘍血管にはVasohibin-1が発現していることを発見した。このことはVEGFによる血管新生をTKIで阻害すると腫瘍の微小環境では血管のリモデリングによりがんは生存し、抵抗性を獲得することを示唆する。この機序においてVasohibin-1が関与することを示した。抵抗性を獲得した腎細胞癌はがん細胞のフェノタイプとして紡錘形に変化し、これまで、上皮ー間葉転換(EMT)が浸潤・転移に関与するだけでなく、治療抵抗性のメカニズムであることを示してきた。EMTをきたす機序について解析し、脂質メディエーターであるリゾホスファチジン酸がArf6を活性化する経路が寄与するという腎細胞癌独自のメカニズムを発見した。Arf6経路の分子の高発現は患者の予後不良因子であり、バイオマーカーとして利用可能であることを示した。TKI治療後の血管のリモデリングを提唱した初めての報告であり、今後の腎細胞癌治療に対してインパクトのある成果であると考えている。腎細胞癌の血管新生に関してはVEGF経路の活性化が機序であることは古くから知られているが、浸潤のメカニズムは不明であった。分子細胞レベルで詳細に解明したことに大きな意義があると考えている。この機序は従来我々が報告してきたEMTと重なることは治療抵抗性とがん幹細胞性とEMTが表裏一体であることを裏付けている。2016年に免疫チェックポイント阻害薬のうちPD-1抗体であるニボルマブの腎細胞癌に対する適応が承認された。PD-1抗体のポジショニングはTKI治療に抵抗性のセカンドライン以降である。

我々はTKI治療後の腎細胞癌組織を検索したところ、がんおよびリンパ球のPDL-1の発現とリンパ球のPD-1の発現が顕著に増強されていることを発見した。PD-1抗体であるニボルマブとCTLA-4抗体であるイピリムマブとの併用がファーストラインの治療薬としてsunitinibよりも有効であることが報告された。しかし、これはIMDCリスク分類においてintermediateとpoorリスク群にのみ観察され、favorable群においてはむしろsunitinibが有効であった。日常の臨床での適応を今後考えるにあたって、ここで問題なのはIMDCリスク分類である。Intermediate群が全体の50%以上を占め、不均一性、つまり予後がばらつく。ファーストラインの治療を始めた際の反応性によりIntermediate群の不均一性を解消できることを示した(論文:Mizuno R et al. Jpn J Clin Oncol, 47(12),1170-1174, 2017)。また、sunitinibの効果にMDSC (myeloid derived suppressor cell)がバイオマーカーであることを示した(論文:Mizuno R et al. Cancer Sci,108(9),1858-1863,2017)。これは分子標的薬治療の予後因子が自然免疫に関わる単球由来の細胞の数であることを明らかにしたと言える。血管新生が腎細胞癌の発癌に強く関連するが、難治性のフェノタイプは炎症に関連することを示した画期的な研究と評価される。芳香族炭化水素受容体(AhR)の腎細胞癌の浸潤や進展との関連を解析した。AhRの発現は予後不良因子であり、活性化によって上皮間葉転換が促進され、腫瘍の浸潤を促進することを示した。スニチニブ治療後のがん組織を解析した結果、腫瘍血管はほとんど死滅しているものの、細かな腫瘍血管が残存し、その腫瘍血管にはVasohibin-1が発現していることを発見した。またスニチニブの効果に血中のMDSC (myeloid derived suppressor cell)の数が予後不良因子であることを示した。癌細胞(seed)は適切な土壌(soil)でのみ転移巣を形成できるという「seed & soil」説が提唱されて以降、癌細胞の増殖にはこれを取り巻く微小環境がきわめて重要であると考えられてきた。癌の間質には線維芽細胞、炎症細胞、免疫担当細胞、血管、リンパ管に加えて結合組織が存在し特徴的な微小環境を構築している。これらを統合的に解析することを継続し、特に血管を着目する予定である。腎細胞癌は早期からHIF-VEGF経路の活性化がみられるが、TKI阻害剤治療により同経路が阻害されると他の分子経路が活性化されることで腫瘍増殖が維持されていると推測される。その機構は主たる作用部位である血管内皮に作用しているはずである。スニチニブ等のTKI阻害剤によりアポトーシスに陥る血管内皮細胞も見られるが、残存した血管周囲を着目し、その特殊性をVASH-1などの新規のマーカーを使用して解析する予定である。転移性腎細胞癌の治療の選択肢に免疫チェックポイント阻害薬であるニボルマブが加わった。今後の治療の展開にバイオマーカーの検索が盛んになると考えられる。がん微小環境での血管リモデリングに加え、免疫細胞のリモデリングの検索が課題であると考え、研究を推進して行く。
健康増進に対する運動、栄養および喫煙への介入の相互作用について

日頃、運動習慣を持たず、かつ、喫煙する若者に対し運動指導および禁煙指導による介入を行い、それぞれの効果および相互作用の有無を検討した。対象は研究代表者の所属する体育大学の学生計7名とした。第1段階として、エルゴメーター運動を12日間行った(1日30分週5日)。次いで、約2週間の休みの後、禁煙18日(第2段階)および第3段階として禁煙に加え、エルゴメーター運動(第1段階同様)を行った。各段階の前後で計5回以下の項目について検査した。項目:心肺機能(肺活量、1秒率、血圧)、体脂肪率、血液検査(コレステロール、GOT・GPT、血糖、血球数、免疫能)、骨密度。第1段階終了後の主な項目の変化率の平均値は、肺活量が1.02倍、骨密度が1.01倍、総コレステロール0.94倍、HDLコレステロール0.93倍などであった。全般的にみて健康増進効果がみられたのは禁煙に完全に成功した1例のみであり、この例では運動により肺活量が1.08倍(3,420ml→3,680ml)、禁煙により1.25倍、運動・禁煙により1.27倍となった。骨密度では、運動により1.08倍(stiffnessが77→80)、禁煙により1倍(効果なし)、運動・禁煙により1.08倍などの効果が認められた。すなわち運動・禁煙両者による検査値変化の過剰分(過剰相対危険度)は、運動、禁煙それぞれによる過剰分の合計にほぼ等しい値を示し、運動・禁煙の肺活量、骨密度に対する効果は相加的であったといえる。