hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
顕著な生理活性を有するフラノセンブラン類の合成研究

軟体サンゴPseudopterogorgia sp.からはフラン単位を環内に有するビカロライドA、ピンナチンAやピンナチンJ等が単離されている。これらの構造上の特徴としてγ-ブテノリド単位と1,2位にあるanti-及びsyn-ホモアリルアルコール単位があげられる。本研究では、環状フルフリルエーテルの分子内[2,3]Wittig転位反応によるanti-及びsyn-ホモアリルアルコール単位の立体選択的合成法を確立した。すなわち、(5E)-5,15-ジメチル-3,16-ジオキサビシクロ[11.2.1]ヘキサデカ-1(15),5,13-トリエンをsec-ブチルリチウムで処理すると、ant-ホモアリルアルコールである(2R^*,3R^*)-3-イソプロペニル-12-メチル-13-オキサビシクロ[8.2.1]トリデカ-1(12),10-ジエン-2-オールを90%deで与えた。一方、幾何異性体である(5Z)-環状フルフリルエーテルをsec-ブチルリチウムとともに処理すると、synの(2R^*,3S^*)-体が90%deで得られた。さらに、環状フルフリルエーテルの不斉Wittig転位の開発にも成功した。ピンナチンAのキラル合成研究も検討した。本研究では、鈴木クロスカップリングを用いることでシクロプロピルフラン部分のジアステレオ選択的な構築法を確立した。すなわち、光学活性シクロプロピルボロン酸とブロモフロ酸エステルとの鈴木クロスカップリングにより、対応する(1R,2R,2'S)-5-[2-(1,4-ジオキサスピロ[4.5]デカン-2'-イル)-2-メチルシクロプロピル]-3-メチル-2-フランカルボン酸メチルエステルを合成した。次いでビピンナチンJの合成研究にも着手した。本研究では、Stilleクロスカップリングを用いることで(Z)型のビニルフラン部分の選択的な構築法及びγ-ブテノリドを有するプロキアルケンのキラル合成法を確立した。すなわち、(Z)-ブロモアルケンとトリブチルスタニルフランとのクロスカップリングにより望む立体化学を有する(S, Z)-1-(5-t-ブチルジメチルシロキシメチル-4-メチル-2-フリル)-2-メチル-4,5-O-(p-メトキシベンジリデンジオキシ)-1-ペンテンを合成した。一方、官能基化されたアレニルアルコールをRu触媒下で一酸化炭素の挿入反応に付すことにより(S,1E,5Z,9E)-1-ブロモ-11-t-ブチルジフェニルシロキシ-4-ヒドロキシ-2,10-ジメチルウンデカ-1,5,9,-トリエン-6-カルボン酸ラクトンに誘導することに成功した。

大西洋からカリブ海まで広く分布する軟体サンゴPseudopterogoria sp.からはセンブラン、シュードプテラン及びゲルソラン等の炭素骨格を有する生理活性ジテルペン類が数多く見いだされている。これらジテルペンにはフラン単位を環内に有するビピンナチンJ、カロライドAやピンナチンA等が単離されている。これらの構造上の特徴としてγブテノライド単位と1,2位にあるanti-及びsyn-ホモアリルアルコール単位があげられる。本研究では、環状フルフリルエーテルの分子内[2,3]Wittig転位反応によるanti-及びsyn-ホモアリルアルコール単位の立体選択的合成法を確立した。すなわち、5-ブロモ-3-メチル-2-フランカルボン酸メチルエステルと6-シアノヘキシルジンクブロミドより7工程で調製した(5E)-5,15-ジメチル-3,16-ジオキサビシクロ[11.2.1]ヘキサデカ-1(15),5,13-トリエンをsec-ブチルリチウムで処理すると、anti-ホモアリルアルコールである(2R^*,3R^*)-3-イソプロペニル-12-メチル-13-オキサビシクロ[8.2.1]トリデカ-1(12),10-ジエン-2-オールを90%d.e.で与えた。一方、上記と同様に調製した(5Z)-環状フルフリルエーテルをtert-ブチルリチウムとともに処理すると、syn-ホモアリルアルコールである(2R^*,3S^*)-体が88%d.e.で得られた。さらに、(5E)-環状フルフリルエーテルの不斉Wittig転位を検討したところ、キラル配位子としてビス(オキサゾリン)を用いたときに中程度(48%e.e.)の不斉収率が観察された。以上のように、オレフィンの幾何異性を制御することにより環状フラノジテルペン類の1,2位のanti-及びsyn-ホモアリルアルコール単位をジアステレオ選択的に構築できることが判明した。ピンナチンAは1998年に八方サンゴPseudopterogorgiabipinnataより単離された13員環を持つゲルソラン型ジテルペンで、腎臓、卵巣及び肺等のガン細胞に対して強い細胞毒性を有する。本化合物は新規なシクロプロピルフラン単位を有すること、並びに顕著な生理作用を示すことから、その合成法の確立と生理作用との構造活性相関に興味が持たれる。本合成においては、シクロプロパン環,γ-ブテノリド並びにsyn-ホモアリルアルコール単位の立体選択的構築が課題となる。前年度の知見を基に環状フルフリルエーテルのWittig転位を経由するピンナチンAのキラル合成を検討する。本研究では、クロスカップリングを用いることでシクロプロピルフラン部分のジアステレオ選択的な構築法を確立した。すなわち、(R)-2,3-シクロヘキシリデングリセルアルデヒドより2工程で得られる(S, E)-2-(1-ヨードプロペン-2-イル)-1,4-ジオキサスピロ[4.5]デカンと3-メチル-2-メトキシカルボニル-5-フランボロン酸エステルとの鈴木クロスカップリングにより、(S,E)-5-{2-(1,4-ジオキサスピロ[4.5]デカ-2-イル)-1-プロペン-1-イル}-3-メチル-2-フランカルボン酸メチルエステルを調製し、このもののSimmons-Smith反応によるシクロプロパン化により目的とする5-{2-(1,4-ジオキサスピロ[4.5]
下垂体とホルモン産生細胞の発生分化における転写因子PROP1とPRX2の機能解析

本研究は、下垂体前葉のホルモン産生細胞の分化・形成に関与することが予測される転写因子Prop1及びPrx2の転写調節メカニズムに関するものである。これまでに、Prop1とPrx2の転写調節メカニズムを明らかにすることを目的に、株化細胞を用いたレポーターアッセイを用いて、そのプロモーター領域の同定を目指してきた。その結果Prop1に関しては、Prop1転写開始点上流約3kbが細胞特異的なプロモーター活性を示すことと、この領域のプロモーター活性に転写因子SOX2が作用することを明らかにしてきた。SOX2は多数の組織で未分化細胞のマーカーとして知られている因子である。また、SOX2の作用が見られた領域内に、SOX2の結合する領域があることをEMSAにより明らかにした。しかしながら、その詳細までを明らかにするに至らなかった。一方でPrx2に関しては、同族のPrx1と共にその転写制御メカニズムの解明を進めてきた。これまでにPrx1,Prx2はNIH3T3とTtT/GFの二つの株化細胞で発現していることをRealtimePCR明らかにし、両因子のプロモーター解析をこれら二つの株化細胞を用いて行ってきた。その結果、NIH3T3において促進的な転写活性を示す領域をPrx1,2共に上流域に見出した。しかし、これらの領域はTtT/GFでは顕著な転写活性を示さなかったことから、細胞間で異なる制御メカニズムか存在することが考えられる。残念ながら、この細胞間で異なるメカニズムについてや、NIH3T3において転写活性を示す領域のさらなる詳細について、及びTtT/GFにおいて転写活性を示す領域については明らかにすることが出来なかった。従って、今年度における進捗は少なく、本研究を論文レベルに昇華できる状態には至らなかった。脳の直下に位置する下垂体組織は、様々な生体調節に関わるホルモンを合成・分泌している。下垂体形成過程において、多数の転写因子の時間的・空間的な発現が重要な役割を果たしており、また、それらの多くは細胞系譜決定後のホルモン産生にも機能している。この下垂体形成における転写因子の複雑なネットワークの中で、我々が特に注目しているのがPROP1とPRX2である。本研究の目的は、PROP1及びPRX2の機能解析と発現調節機構の解析である。本年度の研究で、株化細胞におけるレポーターアッセイを用いた実験から、Prop1転写開始点上流約3kbが細胞特異的なプロモーター活性を示すこと、この領域のプロモーター活性にSOX2が作用すること、Prop1第1イントロン領域がヘテロなミニマムプロモーターの転写活性を促進することを明らかにした。また、同様の方法で、Prx2第1イントロン領域の一部が、Prx2発現を促進方向に制御していることを明らかにした。今後、これらの領域を用いて、下垂体での発現に必要な領域の特定を目指す。また機能解析については、共同研究として、マイクロアレイを用いた網羅的方法で二つの解析を行っている。一つは、標的因子の抗体を用いた免疫沈降法とマイクロアレイを組み合わせたchIP-on-chipである。もう一つは、iPS細胞に標的因子を過剰発現させ、マイクロアレイの結果から、そのターゲット因子を探索するという解析である。現在両方の結果が得られており、詳細な分析を行っている。脳の直下に位置する下垂体組織は、様々な生体調節に関わるホルモンを合成・分泌する重要な内分泌機関である。下垂体の形成過程において、多数の転写因子の時間的・空間的な発現が重要な役割を果たしており、また、それらの多くは細胞系譜決定後のホルモン産生にも機能している。さらに23年度からはPRX2の同族であるPRX1も下垂体において発現していることを見出し、私はこれら三つの遺伝子の発現調節機構の解析を中心に研究を進めている。これまでに、Prop1遺伝子上流域及びイントロン1に細胞特異的な転写活性を示す領域が存在することと、上流域に対して未分化マーカーであるSOX2が作用すること等を明らかにしてきた。さらに本年度の研究から、SOX2がProp1上流配列に直接結合することと、新たにProp1遺伝子制御に関与することが考えられる因子を、複数候補に挙げられる結果が得られた。また、Prx1,2の発現調節機構の解析では、2種のPrx1,2発現細胞を見出し、細胞間によって発現調節領域が異なることと、促進的に発現を制御する領域を同定した。現在、上流域の詳細な解析を行うとともに、さらなる制御領域を3Cアッセイにより解析中である。今後、同定した領域から制御因子を探索していく。さらに共同研究では、機能解析として、Prx1,2の発現細胞におけるノックダウンによる影響をマイクロアレイによって解析している。また、PRX1,2それぞれを特異的に認識する抗体が作製され、現在胎児期から成体を通し、全身での発現を詳細に解析している。このようにPrx1,2に関して、発現調節機構・機能・組織局在のそれぞれの解析を行っており、これらの結果を統合し、下垂体におけるPrx1,2のさらなる解析に繋げて行く。

その結果Prop1に関しては、Prop1転写開始点上流約3kbが細胞特異的なプロモーター活性を示すことと、この領域のプロモーター活性に転写因子SOX2が作用することを明らかにしてきた。SOX2は多数の組織で未分化細胞のマーカーとして知られている因子である。また、SOX2の作用が見られた領域内に、SOX2の結合する領域があることをEMSAにより明らかにした。しかしながら、その詳細までを明らかにするに至らなかった。一方でPrx2に関しては、同族のPrx1と共にその転写制御メカニズムの解明を進めてきた。これまでにPrx1,Prx2はNIH3T3とTtT/GFの二つの株化細胞で発現していることをRealtimePCR明らかにし、両因子のプロモーター解析をこれら二つの株化細胞を用いて行ってきた。その結果、NIH3T3において促進的な転写活性を示す領域をPrx1,2共に上流域に見出した。しかし、これらの領域はTtT/GFでは顕著な転写活性を示さなかったことから、細胞間で異なる制御メカニズムか存在することが考えられる。残念ながら、この細胞間で異なるメカニズムについてや、NIH3T3において転写活性を示す領域のさらなる詳細について、及びTtT/GFにおいて転写活性を示す領域については明らかにすることが出来なかった。従って、今年度における進捗は少なく、本研究を論文レベルに昇華できる状態には至らなかった。主たる実験手法であるレポーターアッセイに必要な、TtT/GF細胞への遺伝子導入条件の検討に予想外の時間がかかってしまったため。現在この問題は解決されており、さらなる実験を急いでいる。Prop1発現調節機構に関してはおおむね必要なデータがそろい、論文作成を急いでいる。Prx1,2の発現調節機構に関して、これまでに同定した制御配列から、予想される発現調節因子及び制御カスケードを同定していく。この際、前述した共同研究として行っている、マイクロアレイ解析と局在解析の結果が有用な参考データとなることが期待される。
リンパ球ホーミング媒介血管HEVを標的とした自己免疫反応の制御

本研究の目的は、リンパ節へのリンパ球ホーミングを媒介する血管である高内皮細静脈(high endothelial venule;HEV)の生成・維持機構を明らかにし、最終的には、局所リンパ節におけるHEVの人工的な誘導法、破壊法を確立するとともに、HEVを標的とした自己に対する免疫反応制御の方法を新たに考案するための資とすることである。本研究により次の結果が得られた。(1)HEVの発生時に選択的に発現する転写因子Xを同定した。遺伝子ノックアウトマウスは生下時に授乳障害のためにすぐに死亡するため、本因子の機能解析には使えず、ヘテロマウスのリンパ節を正常個体の皮下、腎被膜下に移植することにより機能解析中である。強制発現実験にて他遺伝子の発現を制御できるかについても検討中である。(2)HEV細胞膜上に発現する分子nepmucinの機能を阻害すると、in vitroでのリンパ球の内皮細胞下面へのtransmigrationが阻害された。しかし、nepmucin KOマウスにおいてはリンパ球トラフィキングの異常は見られなかった。また、膜貫通型のHEV発現分子PV-1がin vitroではリンパ球transmigrationを媒介することから、nepmucin KOマウスにおいてPV-1の機能を阻害したが、HEVにおけるリンパ球transmigrationは阻害されなかった。これらの分子以外にさらに重要なtransmigration担当分子がある可能性が高い。(3)HEV内皮細胞の抗原提示能について解析した。その結果、HEV内皮細胞はMHCクラスIの発現は高いが、MHCクラスII発現は低く、一部のコスティミュラトリー分子しか発現していなかった。最抗原ペプチドとしてOVA由来ペプチド、インディケーターT細胞はOT-1を用いて解析したが、HEVではMHCクラスIを介した抗原提示能やクロスドレッシング能は見られなかった。以上の結果から、HEVの生成・維持に関与する可能性のある転写因子Xが同定されたが、その機能は明らかではない。また、HEVにおけるリンパ球transmigrationを制御する分子の候補は挙がってきたものの最終同定には至らなかった。最後に、HEV自身には有意な抗原提示能はないものと考えられる。HEVを標的とした免疫制御のための資となる結果が得られた。免疫反応には二次リンパ組織、特に局所リンパ節の働きが不可欠であり、リンパ節で機能するリンパ球は殆どすべてHEV(高内皮細静脈)とよばれる血管を介して血管系から動員される。従って、HEVを随意に誘導、消滅させることができれば、局所リンパ節における免疫反応の人工的制御が可能になる。本研究では、このHEVの生成、維持機構を分子レベルで明らかにし、局所リンパ節におけるHEVの人工的な誘導法、破壊法を確立するとともに、HEVのリンパ球機能制御における役割を詳細に明らかにし、HEVを標的とした自己に対する免疫反応制御の方法を新たに考案することを目的とする。本年度は、まずHEVの発生を規定する転写因子の同定を試み、胎仔期HEVに選択的に発現する遺伝子Aを同定した。この遺伝子は胎仔期の一定期間のみ発現するが、生後発現が消失し、免疫反応などによりHEVの新生が見られる時期にも誘導されない。この遺伝子を破壊したノックアウトマウスは生後すぐに死亡するために(原因不明)、この転写因子により制御される可能性のある遺伝子の同定が遅れているが、予備的な結果ではHEVに特異的に発現する複数の遺伝子の発現に影響を与えている可能性がある。また、HEV内皮細胞が死細胞を取り込む能力が高いことを見つけ、現在、その分子機序と意義について検討を進めている。オートファジーの可能性については、遺伝子発現解析を行ったところ、関連分子の発現がきわめて低いことから、HEV内皮細胞がオートファジーによって取り込んだ死細胞を処理している可能性は低いと考えられる。死細胞取り込みの機序についてはHEV内皮細胞表面に存在する分子がホスファチジルセリンレセプターとして機能することを明らかにした。この分子のノックアウトマウスでは自己免疫疾患が自然発症することから、今後、この分子の生物学的意義についてさらに明らかにしていく予定である。

その結果、HEV内皮細胞はMHCクラスIの発現は高いが、MHCクラスII発現は低く、一部のコスティミュラトリー分子しか発現していなかった。最抗原ペプチドとしてOVA由来ペプチド、インディケーターT細胞はOT-1を用いて解析したが、HEVではMHCクラスIを介した抗原提示能やクロスドレッシング能は見られなかった。以上の結果から、HEVの生成・維持に関与する可能性のある転写因子Xが同定されたが、その機能は明らかではない。また、HEVにおけるリンパ球transmigrationを制御する分子の候補は挙がってきたものの最終同定には至らなかった。最後に、HEV自身には有意な抗原提示能はないものと考えられる。HEVを標的とした免疫制御のための資となる結果が得られた。
哺乳類生体鼓膜の力学的機能性評価

現在、耳鼻科においては、中耳炎、真珠腫等により失われた鼓膜の再建が課題となっている。しかし、鼓膜は機械的複合構造体であり、従って鼓膜自体の機能的・構造的な力学特性を調べ、変形から破壊に至るメカニズムを解明し普遍化しなければ、良好な臨床結果を得ることが困難である。以上の観点から、本研究では鼓膜の破壊過程やその際の構造的・力学的作用について、豚生体鼓膜を用いた圧力負荷破断試験などを行い、鼓膜の機能的・構造的力学特性を調査した。航空機への搭乗やスキューバ・ダイブ等、比較的変化の緩やかな外圧を長時間受ける場合を想定した圧力クリープ試験では、介達性鼓膜破断が時間依存型の発生形態をとることが示された。また、中耳腔の未発達による嚥下効果や鼻すすり等を想定した繰り返し陰圧負荷試験(圧力疲労試験)においては、生体鼓膜には繰り返し圧負荷に対して耐久限が存在し、強度劣化の度合いには限界があること、従って疲労圧による劣化は鼓膜の構造的な破壊が原因であるとの結果が得られた。別に行った調査では、圧力負荷時の鼓膜に生じる歪分布が特異な部位に集中すること、その部位が介達性破断の集中発生する部位に一致することが確認され、先に行った幾何学的簡易シミュレーションの結果と一致した。ちなみに陽圧時においては鼓膜は歪を均等化する線維構造を有していることが確認されており、これらのことから鼓膜の線維構造、特に円周報告線維の走行は、陽圧対応型の後天的要因によるものと思われた。
パピヨン・ルフェーブル症候群のセリンプロテアーゼ活性化障害及び角化亢進要因の検討

我々が作成したカテプシンCノックアウトマウスでは、パピヨン・ルフェーブル症候群(PLS)でみられるような掌蹠の角化が確認されなかった。そこで、PLSにおける過角化が、掌蹠のほか、肘頭、膝蓋などの被刺激部に限局していることに着目し、過角化の発症には何らかの物理的刺激が誘因になっていると考えた。ノックアウト、野生型マウスを用い、各々にTPA塗布群と非刺激群に分け(計4群)、表皮角化の差を検討。ノックアウトマウスのTPA塗布群では、野生型のTPA塗布群に比し、著明な過角化及び表皮肥厚が組織学的に確認された。これらより、PLSにおける過角化は、外的刺激などが誘引となり生じることが示唆された。カテプシンCが原因遺伝子であるパピヨン・ルフェーブル症候群での過角化の機序は不明である。今回、その過角化が掌蹠、肘頭、膝蓋などの被刺激部であること、さらに本症の中でもごく軽微な皮膚症状を呈する症例も報告されていることに着目している。本研究の目的は、カテプシンCの欠損に外的刺激が加わることにより、過角化が引き起こされることを明らかにすることにある。本年は、1)培養表皮細胞での角化異常の確認:我々は本症患者の一人から表皮細胞を培養し形態を確認しているが、特に目立った異常は確認されていない。培養表皮細胞に角化を誘導し、その後カテプシンC、カリクレイン5や8をくわえることにより、細胞の結合が変化するかを確認。患者培養細胞株でも同様の実験を行い、正常との比較も行った。また、肉眼的な観察では小さな変化を見ることができない可能性もあるので、処理後にウエスタンブロットを行い、デスモグレイン1やコルネオデスモシンの分解の有無を生化学的に解析する。2)カテプシンC抑制表皮細胞を用いたin vitroでの角化異常の解析:不死化ヒト表皮角化細胞株であるHaCaT細胞に、カテプシンCのshRNAをトランスフェクションし、プラスミドの薬剤耐性遺伝子を利用したセレクションによりカテプシンCを抑制したstable cell lineを作成する。培地中に、表皮を過角化させるフォルボールエステルのTPAを加え、カテプシンCを抑制細胞と抑制していない細胞間で、細胞形態に差が生じるかを顕微鏡で観察。さらに、それらを回収してRNAや蛋白を抽出。角化マーカーであるインボルクリンやケラチン10の発現が、カテプシンC抑制細胞で増加しているかをリアルタイムRT-PCRやウェスタンブロットで確認する作業を継続中である。パピヨン・ルフェーブル症候群は掌蹠角化、易感染性、歯周囲炎、を特徴とする稀な常染色体性劣性遺伝病であり、その原因は多種のセリンプロテアーゼの活性化を担うカテプシンCの欠損である。この酵素カテプシンCは、好中球やマクロファージに多く存在し、エステラーゼやグランザイムといったセリンプロテアーゼを活性化するので、本酵素が欠損するバピヨン・ルフェーブル症候群で、易感染性が生ずることは簡単に理解できる。しかし、本症に見られる掌蹠角化の発症機構を解明した内外の報告はない。そこで、申請者はパピヨン・ルフェーブル症候群にみられる過角化が、掌蹠や肘頭、膝蓋などの被刺激部であることに注目。さらに、パピヨン・ルフェーブル症候群の中でも、ごく軽微な皮膚症状を呈する症例も報告されていることから、カテプシンCの欠損に外的刺激が加わることにより、過角化の亢進が引き起こされると着想した。本年は、パピヨン・ルフェーブル症候群の遺伝子解析とリコンビナント蛋白作成:我々は、新たに数家系のパピヨン・ルフェーブル症候群を経験しており、それらの患者のDNAからカテプシンC遺伝子を増幅して遺伝子変異を確認した。その結果、新しいミスセンス、ノンセンス、スプライスサイト変異を同定し得た。また、末梢白血球から抽出をした蛋白を用いて、酵素活性の測定も行った。その結果、患者由来のカテプシンCリコンビナントでは活性の低下がみられることを確認し得た。カテプシンCによるカリクレイセリンプロテアーゼの活性化の確認:カテプシンCが実際にカリクレイン5,8を活性化することを確認する実験も行った。カリクレイン5,8が認識する部位をもつ短いペプチドを合成。次にパピヨン・ルフェーブル症候群と健常人の表皮細胞の抽出液に加え、その合成ペプチドの切断を指標に、カリクレイン5、8の活性の差を実施し、現在のところその活性の確認中である。過去の報告では、カテプシンCノックアウトマウスは、パピヨン・ルフェーブル症候群でみられるような掌蹠角化を発症しない。

我々はカテプシンCノックアウトマウスを作製し、皮膚病変についてを検討。ノックアウ群と野生型群のマウスの前肢及び後肢を臨床的、および組織学的に検討。臨床的にもノックアウトマウスにおける掌蹠の角化は確認されず、組織学的にも野生型との相違は認めなかった。そこで、パピヨン・ルフェーブル症候群における過角化が、掌蹠のほか、肘頭、膝蓋などの被刺激部に限局していることに着目し、過角化の発症には、何らかの物理的刺激が誘因になっていると考えた。カテプシンCノックアウトマウス、野生型マウスを用いて、各々に刺激群と被刺激群に分け(計4群)、各群で表皮角化の程度に差が生じるかを検討した。表皮を角化させることが知られるTPAをマウスの掌蹠、及び背部の皮膚に塗布。試薬塗布後、24時間、48時間、72時間、7日後の皮膚を採取し、各グループ間で表皮の過角化の程度に差がみられるかを組織学的に検討した。野生型マウスの被刺激群においても軽度の過角化はみられたものの、カテプシンCノックアウトマウスの被刺激群では、著明な過角化及び表皮肥厚が組織学的に確認された。これらの結果より、パピヨン・ルフェーブル症候群における過角化などの皮膚変化は、外的刺激などが誘引となり生じ、そのため皮膚症状が被刺激部である掌蹠や肘頭、膝蓋に限局していることが示唆された。医師薬学カテプシンCが原因遺伝子であるパピヨン・ルフェーブル症候群での過角化の機序は不明で、今回、その過角化が掌蹠、肘頭、膝蓋などの被刺激部であること、さらに本症の中でもごく軽微な皮膚症状を呈する症例も報告されていることに着目した。本研究の目的は、カテプシンCの欠損に外的刺激が加わることにより、過角化が引き起こされることを明らかにすることにある。本年は、培養表皮細胞での角化異常の確認、カテプシンC抑制表皮細胞を用いたin vitroでの角化異常の解析が計画通り進行した。カテプシンCが原因遺伝子であるパピヨン・ルフェーブル症候群での過角化の機序は不明である。今回、その過角化が掌蹠、肘頭、膝蓋などの被刺激部であること、さらに本症の中でもごく軽微な皮膚症状を呈する症例も報告されていることに着目した。今年度は、パピヨン・ルフェーブル症候群の遺伝子解析とリコンビナント蛋白作成、カテプシンCによるカリクレイセリンプロテアーゼ(KLK)の活性化の確認が計画通り進行した。1)ノックアウトマウスでの角化異常の解析:カテプシンCのノックアウトマウスが作成されて、好中球でのセリンプロテアーゼの活性が障害され、好中球の機能異常は報告されている。しかし明らかな掌蹠角化の報告はない。そこで、既に作成したノックアウトマウスを用い前肢や後肢を詳しく観察し、組織学的、電顕的に検討する。また、他のカテプシンがカテプシンCの作用を代償している可能性から、それらの抑制剤やsiRNAをノックアウトマウスの培養表皮細胞に投与し、細胞の状態を観察する。さらに、それらの抑制剤をノックアウトマウスにIn vivoで投与し、表現型の変化を観察する。2)過角化を亢進させる引き金として、皮膚への外的刺激が関わっていることの証明:これまで、掌蹠角化症について、過角化が何故掌蹠などに限局するのかという根本的な点について具体的に研究はなされていない。
CELIV解析による有機系太陽電池の電荷輸送メカニズムの解明および性能向上

Metal-Insulator-Semiconductor (MIS)構造素子の絶縁層界面に蓄積させた電荷取出しに由来した過渡電流から移動度を算出するMIS-CELIV法を用いて、有機薄膜の移動度を評価し、さらに、得られた結果の妥当性や材料適用性を検証することで、本手法の有用性を実証することを目的とした。まず始めにMIS-CELIV法を用いて有機ELの正孔輸送材料であるNPBの正孔移動度とその電界依存性を評価した。これらの解析結果とSCLC測定より求められた値がよく一致することを明らかにするとともに、この一致は解析原理の前提条件や分子配向等の点からみて十分に妥当であることを示した。この結果は、MIS-CELIV解析結果の信憑性の高さを示唆するものだと考えている。次に、注入障壁がMIS-CELIVやSCLC解析に及ぼす影響を比較したところ、MIS-CELIV法は注入障壁による解析の誤り有無を判断できるという利点をもつことを明らかにした。また、百ナノメートル程度のNPB薄膜において妥当な正孔移動度が算出されたことから、本手法は実デバイスと同様の有機薄膜の移動度測定法として有用であることを実証した。以上の結果より、MIS-CELIV法がTOF法やSCLC法にはない利点を有する画期的な測定手法であることを示すことができた。次に、有機材料への適用性を検証するため、有機ELや有機薄膜太陽電池によく用いられているMEH-PPV、P3HT、PC61BMの評価を行ったところ、理想的な過渡電流の観測に成功、正孔や電子移動度の算出が可能であることを実証した。これらの研究成果について現在論文をまとめており、今後投稿予定である。翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。
生体膝関節機能を有する人工膝関節の最適設計・試作・評価システムの開発

人工膝関節の設計指針の確立をめざして,生体膝関節にせまる高機能の人工膝関節を最適設計・試作・評価するためのシステムを構築した.具体的には,生体膝関節の形状計測や形状解析と,その結果に基づく人工膝関節の設計・試作および歩行シミュレータ試験による評価を行った.材料としては,従来材料の超高分子量ポリエチレンと人工軟骨候補材料のPVA(ポリビニルアルコール)ハイドロゲルの双方について試みた.まず,生体切断膝3次元形状の計測データについて曲面解析を行い,歩行時の立脚期と遊脚期で大腿側接触部位の曲率半径が大きく異なることを示し,二円弧デザインを提案した.また,歩行条件下における接触解析により,摩擦条件が過酷となる位相で転がり運動が生じることを示唆するとともに,表面部位のひずみエネルギー低下をめざしたリモデリング形状を提案した.これらの形状案に基づき,パソコン制御方式の数値制御切削加工機を用いて,ポリエチレンやアクリル樹脂の曲面加工を行い,各部品を試作した.試作例としては,円弧・二円弧・球面・リモデリング形状等を試みた.PVAについては,円筒型または円弧/平面型で鋳造試作した.動的性能評価のために,パソコン-油圧制御方式により,歩行時の脛骨軸荷重と屈曲伸展運動に加えて,前後方向力や回旋運動をも模擬できる多機能の関節シミュレータを開発した.歩行条件下における潤滑膜形成を分離度測定や可視化観察,揺動軸トルク・前後力測定により評価した.これらの結果により,形状適合性の向上や軟質材の導入による流体潤滑膜の形成促進や吸着膜潤滑効果,二円弧形状による潤滑膜の回復,リモデリング形状による転がり運動の導入等を確認できた.これらを総括して,多モード適応潤滑機能を付与する設計指針を提案できた.今後,現用人工膝関節の置換の臨床経験を反映しながら,新提案の総合設計を進める予定である.人工膝関節の設計指針の確立をめざして,生体膝関節にせまる高機能の人工膝関節を最適設計・試作・評価するためのシステムを構築した.具体的には,生体膝関節の形状計測や形状解析と,その結果に基づく人工膝関節の設計・試作および歩行シミュレータ試験による評価を行った.材料としては,従来材料の超高分子量ポリエチレンと人工軟骨候補材料のPVA(ポリビニルアルコール)ハイドロゲルの双方について試みた.まず,生体切断膝3次元形状の計測データについて曲面解析を行い,歩行時の立脚期と遊脚期で大腿側接触部位の曲率半径が大きく異なることを示し,二円弧デザインを提案した.また,歩行条件下における接触解析により,摩擦条件が過酷となる位相で転がり運動が生じることを示唆するとともに,表面部位のひずみエネルギー低下をめざしたリモデリング形状を提案した.これらの形状案に基づき,パソコン制御方式の数値制御切削加工機を用いて,ポリエチレンやアクリル樹脂の曲面加工を行い,各部品を試作した.試作例としては,円弧・二円弧・球面・リモデリング形状等を試みた.PVAについては,円筒型または円弧/平面型で鋳造試作した.動的性能評価のために,パソコン-油圧制御方式により,歩行時の脛骨軸荷重と屈曲伸展運動に加えて,前後方向力や回旋運動をも模擬できる多機能の関節シミュレータを開発した.歩行条件下における潤滑膜形成を分離度測定や可視化観察,揺動軸トルク・前後力測定により評価した.これらの結果により,形状適合性の向上や軟質材の導入による流体潤滑膜の形成促進や吸着膜潤滑効果,二円弧形状による潤滑膜の回復,リモデリング形状による転がり運動の導入等を確認できた.これらを総括して,多モード適応潤滑機能を付与する設計指針を提案できた.今後,現用人工膝関節の置換の臨床経験を反映しながら,新提案の総合設計を進める予定である.本研究では,人工関節のかなでも設計指針の確立していない人工膝関節の性能向上をめざすものであり、生体膝関節にせまる機能を有する人工膝関節を設計・試作・評価するためのシステムを開発するものである.まず,生体本来の運動を可能にするために,生体膝大腿部の3次元形状をレーザ変位計により非接触で計測し計算機でデータ処理と曲面解析を行い,歩行時の立脚期と遊脚期で接触部位の曲率半径が大きく異なることを示した.この結果に基づき,二円弧型人工膝関節の設計試作と評価を試みた.すなわち,パソコンに連動した数値制御加工機により円筒型の一円弧デザインと各種の二円弧デザインを試作した.大腿部は,アクリル樹脂で,脛骨側は超高分子量ポリエチレンで試作した.円筒型に関しては,各種のクラウニング条件で作成した.動的性能評価のために,パソコン-油圧制御方式により,歩行時の脛骨軸荷重と屈曲伸展運動に加えて,前後方向力や回旋運動をも模擬できる多機能の関節シミュレータを開発した.まず,各屈曲位における接触面圧力分布を感圧紙を利用して測定し,形状による接触面積の相違を比較した.次に,実際の歩行運動時(今回は脛骨軸荷重と屈曲伸展運動のみを模擬)における人工関節の潤滑膜形成と摩擦特性の評価を行い,形状の評価を行った.また,アクリル樹脂製大腿側にCCDカメラを取り付け,潤滑面の可視化により,潤滑膜形成状態の歩行時の変化を観測した.その結果,一円弧の円筒型が潤滑膜形成が良好で安定していたが,二円弧形状の接続法の工夫により遊脚期における流体膜の回復が促進されることがわかった.今後,さらに最適設計を進める予定である.

また,骨切除法,アライメント決定法,セメントレス固定法等について,最適置換法を検討するとともに,生体膝関節の機構解明も平行的に進めており,将来は人工膝関節の設計にも反映できる.本研究では,人工関節のなかでも設計指針の確立していない人工膝関節の性能向上をめざすものであり,生体膝関節にせまる機能を有する人工膝関節を設計・試作・評価するためのシステムを開発するものである.まず,生体本来の運動を可能にするために,生体膝大腿部の3次元形状をレーザ変位計により非接触で計測し計算機でデータ処理と曲面解析を行い,歩行時の立脚期と遊脚期で接触部位の曲率半径の差異を示すとともに,接触解析により屈曲伸展時の転がり運動の発生を指摘した.これらの結果に基づき,二円孤型人工膝関節の設計試作と評価を試みた.すなわち,パソコンに連動した数値制御加工機により円筒型の一円孤デザインと各種の二円孤デザインを試作した.大腿部は,潤滑面の可視化のためにアクリル樹脂で試作した.動的性能評価のために,パソコン-油圧制御方式により,歩行時の脛骨軸荷重と屈曲伸展運動に加えて,前後方向力や回旋運動をも模擬できる多機能の関節シミュレータを開発した.まず,各屈曲位における接触面圧力分布を感圧紙を利用して測定し,形状による接触面積の相違を比較した.次に,実際の歩行運動時(今回は脛骨軸荷重と屈曲伸展運動のみを模擬)における人工関節の潤滑膜形成と摩擦特性の評価を行い,形状の評価を行った.また,アクリル樹脂製大腿側にCCDカメラを取り付け,潤滑面の可視化により,潤滑膜形成状態の歩行時の変化を観測した.その結果,二円孤形状の接続法の工夫により遊脚期における流体膜の回復の促進や,転がり運動による摩擦の過酷度の緩和を確認できた.今後,さらに最適設計を進める予定である.また,骨折除去,アライメント決定法,セメントレス固定法等について,最適置換法を検討するとともに,生体膝関節の機構解明も平行的に進めており,今後の人工膝関節の設計にも反映できる.人工膝関節の設計指針の確率をめざして、生体膝関節にせまる高機能の人工膝関節を最適設計・試作・評価するためのシステムを構築した.具体的には,生体膝関節の形状計測や形状解析と,その結果に基づく人工膝関節の設計・試作および歩行シミュレータ試験による評価を行った.材料としては,従来材料の超高分子量ポリエチレンと人工軟骨候補材料のPVA(ポリビニルアルコール)ハイドロゲルの双方について試みた.まず、生体切断膝3次元形状の計測データについて曲面解析を行い,歩行時の立脚期と遊脚期で大腿側接触部位の曲率半径が大きく異なることを示し,二円弧デザインを提案した.また,歩行条件下における接触解析により、摩擦条件が過酷となる位相で転がり運動が生じることを示唆するとともに、表面部位のひずみエネルギー低下をめざしたリモデリング形状を提案した.これらの形状案に基づき,パソコン制御方式の数値制御切削加工機を用いて,ポリエチレンやアクリル樹脂の曲面加工を行い,各部品を試作した.試作例としては,円弧・二円弧・球面・リモデリング形状等を試みた.PVAについては,円筒型または円弧/平面型で鋳造試作した.動的性能評価のために,パソコン-油圧制御方式により,歩行時の脛骨軸荷重と屈曲伸展運動に加えて,前後方向力や回旋運動をも模擬できる多機能の関節シミュレータを開発した.歩行条件下における潤滑膜形成を分離度測定や可視化観察,揺動軸トルク・前後力測定により評価した.
コヒーレント光回路のための複素反射係数測定に関する研究

光通信および光計測など、光信号を扱うシステム、特にコヒーレント光回路系においては、反射の大きさとともにその位相を正確に評価する必要がある。本研究の目的は、光波の反射率を位相を含めて簡便に測定する方法を開発することである。本研究では、光方向性結合器を用いて6開口干渉計を形成し、光源と測定試料を接続する2つの開口以外の開口から出力される光電力を測定し、複素反射係数を決定する方法の開発を目指した。まず、通常の光ファイバ型方向性結合器を用いて測定系を構成し、比較的反射率の小さい場合への適用性を検討した。その結果、本反射測定法は反射率の小さい場合にも適用可能であることが明らかになったが、位相まで含めた複素反射係数を測定するためには、完全な偏波保存系で測定系を構成する必要があることがわかった。偏波面保存形光ファイバ方向性結合器を用いて偏波保存系の測定系を構築し、測定法を検討した結果、光ファイバ形で偏波保存系を構成した場合でも、干渉計内に存在する微小な温度分布によって各開口からの光出力電力に揺ぎが発生し、これが原因で反射係数の位相が決定できないことが明らかになった。そこで、測定用干渉計内の温度分布を極力低減するために、小形な平面導波路系で測定系を構成する集積型光反射係数測定器について検討を行い、この構成に必要不可欠な導波路型方向性結合器ならびに基本的な干渉計を製作し、本測定法への適用可能性を検討した。その結果、テーパ状導波路形方向性結合器で集積形干渉測定系が構築可能であるとの見通しを得た。本研究の目的は、光反射率を位相を含めて測定する方法を開発することである。本研究で開発を目指す測定法は、光方向性結合器を用いて6開口の干渉系を形成し、2つの開口に光源と被測定試料を接続し、他の4つの開口に出力される光電力を測定することで、複素反射係数を決定するものである。平成4年度では、反射係数の大きさを測定するための基本的な測定回路を光ファイバ型方向性結合器を用いて構成し、波長1.3μmにおいて実験を行った。被測定試料は、空気中に開放したファイバ端(反射率約4%)、水(同約1.7%)やマッチングオイル(同0.1%以下)などで、比較的反射率の小さい場合への適用性を中心に検討した。測定結果を理論値と対比し検討した結果、本反射測定法が反射率の小さい場合にも適用可能であることが明らかになった。しかし、位相まで含めた複素反射係数を測定するためには、完全な偏波保存系で測定系を構成する必要があることがわかった。今後、測定系を偏波保存系で最構築し、複素反射係数の測定を行う予定である。偏波保存系を構成する方法としては、偏波面保存ファイバを用いた系と、比較的大きな偏波依存性を実現できる導波路系が考えられる。光ファイバ系で基礎的な実験を行い、集積型光反射係数測定器への発展を検討するために、導波路型の干渉系も製作し、これを用いた実験も行う予定である。導波路型の測定系を用いることにより、測定の安定性向上を図ることができると考える。本研究の目的は、光の反射率を位相を含めて簡便に測定する方法を開発することである。

平成4年度において、通常の光ファイバ型方向性結合器を用いて測定系を構成し、比較的反射率の小さい場合への適用性を検討した。その結果、本反射測定法は反射率の小さい場合にも適用可能であることが明らかになったが、位相まで含めた複素反射係数を測定するためには、完全な偏波保存系で測定系を構成する必要があることがわかった。この問題点を解決するために、平成5年度においては、まず偏波面保存形光ファイバ方向性結合器を用いて測定系を再構築し、測定法を検討した。その結果、光ファイバ形で偏波保存系を構成した場合でも、干渉計内に存在する微小な温度分布によって各開口からの光出力電力に揺ぎが発生し、これが原因で反射係数の位相が決定できないことがわかった。そこで、測定用干渉計内の温度分布を極力低減するために、小形な平面導波路系で測定系を構成する集積型光反射係数測定器について検討を行い、この構成に必要不可欠な導波路型方向性結合器ならびに基本的な干渉計を製作し、本測定法へ適用可能であるかを検討した。
がまんしない・意識しない新しい食の統制法の開発

本研究では食べたい欲求をがまんするという従来の意識的な食行動の抑制ではなく、食器という単純な環境要因を操作することで意識せずに食行動の統制を行う新たな方法を試みた。その結果、指定した食器(ワンプレート皿)の使用により、主菜と副菜のバランスが改善される可能性が示唆された。さらに糖尿病患者を対象にした研究では、食器の使用により、使用前に比べ野菜の摂取量が有意に増加した。今回HbA1cやインクレチン分泌量に関する効果は示されず、今後さらなる検討は必要だが、がまんするという心理的負荷なしに望ましい食行動へ変容できる可能性が示唆された。今年度予定していた身体状況の変化による食物に対する潜在的態度の形成および変化については、若干の遅れがみられるものの概ね予定通り進められている。今年度の具体的な検討内容は、参加者の上腕を収縮させる動作が食品に対する接近性を高め、逆に上腕を伸張させる動作が食品に対する回避性を高めることについての検証であった。そこで、予定していた手法に加え、異なる2つの手法を用いて検討したが、それぞれの手法により予測していたような一貫した結果が得られず、また、その原因についての検討に時間がかかり、論文化、および学会発表には至らなかった。以上が、若干の遅れが生じた理由である。一貫した結果が得られなかった理由としては、収縮させる方法により、腕の動かし方の個人差にが大きくなる場合があり、身体の動きと接近性および回避性との間の連合がうまくできなかった可能性が示唆された。つまり、上腕の収縮および伸張動作が明確に区別されるか否かが、重要であると考えられることから、次年度以降は操作レバーを用いて、手前に引く(接近)、または押す(回避)という動作との連動が明確になるような実験手法に切り替え、引き続き検討していく予定である。また次年度より実施予定である食器を用いた検討に使用する食器の選定を行い、予備調査を開始した。今年度は上腕の収縮及び伸張による態度変容について、データの収集を予定していた実験手法に加え、さらに異なる2種類の手法を用いて実施したが、それぞれの手法で一致した結果が得られなかった。しかし、これらのデータを分析することにより、その理由が収縮・伸張させる回数の多さによる疲労や、収縮・伸張といった動きがあいまいとなる場合等の影響が明らかになった。したがって、次年度以降は、その改善策として操作レバーを用いた新たな実験プログラムによる実験を計画し、さらなる基礎データを蓄積し、発表する見込みである。何をどのくらい食べればよいのかという食品の質と量の把握は、栄養学を学んだことのない人にとっては容易ではない。特にどのくらい食べるかといった量の把握は、栄養のバランスを考える上でも体重管理においても重要であり、また空腹等の生理的要因のみならず、食器の大きさといった環境の要因が予想以上に摂食量に与える影響が大きく、また大きな空間にはより多くの食物を盛りつける傾向があることが明らかにされているから、本研究では区切のある皿を用いて食材を空間の大きさに合わせて盛り付ける(食べる)ことを成人(男性4名女性7名平均年齢48.36歳SD:13.12)を対象に検討した。本研究の目的は近年、野菜の摂取量が目標量の350g/日を下回っていることから、単純に大きな空間を指定することで実際に野菜の盛りつけ(摂取)量が増加するかを確認することであった。使用した食材はカット野菜、からあげ、ポテトサラダ、ピラフで、1回目(ベースライン)はこれらの食材を自由に食材を盛りつけてもらい、野菜の盛りつけ位置を一番大きな空間に指定した2回目の条件時との各食材の盛りつけ量を比較した。その結果、予測に反し、野菜の盛りつけ量の有意な増加は示されなかった。これは、今回、より自然な食事場面とするために指定条件において野菜が入っていれば野菜だけでなく他の食材も同じ空間に盛りつけることを可としたことによると考えられた。この条件により、参加者11名のうち10名が野菜とポテトサラダ、または野菜とからあげを大きな空間に盛りつけた。結果、野菜と一緒にポテトサラダと盛りつけた参加者では、野菜とポテトサラダの両方がベースライン時よりも有意に増加していたことから、空間の大きさに応じて盛りつけ量が増加するという先行研究の結果を部分的に支持したと考えられた。さらに組み合わせを工夫することで野菜の摂取量全体を増加させる可能性も示唆された。28年度は、上記の皿を用いた摂食量の変化とともに、身体運動による食物への潜在的態度の変容を検討する予定であったが、この検討のためのプログラムソフトがうまく機能しなかった。また、プログラムを実行するための周辺機器(ジョイスティック)についても、予定していた商品の日本での販売が中止となっており、入手そのものが困難であったこと、さらに並行輸入品での入手であったため、動作確認等のフォロー体制がなく、思った通りの動きをさせるまでに時間がかかってしまったことが、研究が遅れてしまった一番の理由である。また、参加者についても、今年度は学生の授業の空き時間と実験者である私の空き時間との都合が合わず、予定していたスケジュール通りに進まなかった。本研究では食べたい欲求をがまんする意識的な食の抑制ではなく、対象に対する接近回避という身体運動や食器等の環境要因を操作する新たな食の統制法を試みた。まず大学生を対象に上腕の伸縮運動による態度変容の有無を検討した結果、予測に反し有意な態度の変容は示されなかった。その理由として上腕運動の疲労が逆に対象に対する否定的感情(回避)と結びついた可能性が示唆された。

今後は疲労を生じず態度を変容させる最適な運動とその回数について検討する必要がある。次に一般成人を対象に盛りつけ場所の面積と盛つけ量との関係についていわゆるワンプレート皿を用い、皿の一番大きな場所に野菜を盛りつけるよう指定することで、指定なし時よりも盛りつけ量が多くなるかを検討した。その結果、野菜の盛りつけ量が有意に増加することはなかったが、野菜の摂取が多くなると主菜の量が減り、結果として栄養のバランスが改善される可能性が示唆された。さらに糖尿病患者を対象に同じワンプレート皿を使い同様の検討を行った。その結果、ベースライン時と比較し食器使用中では野菜の摂取量が有意に増加した。今回は食器を配布し携帯電話で食事の様子を撮影してもらい、その写真をもとにメールで後日食事指導する方法であったが、食器を使用しなかった統制群と食器使用群の事前事後の空腹時血糖値を比較したところ、食器使用群で有意に数値が改善していた。地方、特に個人医院においては糖尿病患者に対し管理栄養士が直接指導する機会を確保することは容易ではない。また高齢の患者の場合、食事管理の重要性についての情報や理解が十分でないことも多い。今回糖尿病の長期の血糖コントロールを示すHbA1cやインクレチンの分泌については有意な効果は示されず決して十分とはいえないが、今後IoT技術の駆使に加え、このような単純な環境要因の操作することで地方の高齢患者にも有効な食の統制法の可能性が示唆された。本研究では食べたい欲求をがまんするという従来の意識的な食行動の抑制ではなく、食器という単純な環境要因を操作することで意識せずに食行動の統制を行う新たな方法を試みた。その結果、指定した食器(ワンプレート皿)の使用により、主菜と副菜のバランスが改善される可能性が示唆された。さらに糖尿病患者を対象にした研究では、食器の使用により、使用前に比べ野菜の摂取量が有意に増加した。今回HbA1cやインクレチン分泌量に関する効果は示されず、今後さらなる検討は必要だが、がまんするという心理的負荷なしに望ましい食行動へ変容できる可能性が示唆された。今年度の改善策に従い、再度、新たな実験手法を用いた上腕の収縮および伸張運動を用いた食物に対する潜在的態度の形成および変容についての検討を行う。また食器の使い方についても、今年度の予備調査分ではデータが不足していることから、再度参加者を募り、データを蓄積していく。実験プログラムについては現在も調整中であるが、できるだけ早期に実験に入れるよう準備する。また学内での実験については、学生数が少なく、短期大学であるため授業スケジュールが過密であり、空き時間の少ない本学学生のみを対象とした実験計画ではデータの確保が難しいため、学外での協力を視野にいれた計画に変更する予定である。また、今年度は三重県在住の内科医に協力を依頼している。研究代表者である私自身の担当コマ数も多いため、なかなか三重まで行けず、実施時期が延びてしまっていたが、前期授業が終了する夏期休暇中に三重での食器を用いた介入を開始するため、現在、参加者の募集を行っている。食行動今年度は旅費の使用がなかった。これは、学会発表をすることができなかったためである。また謝金についても執行がなかった。
近世琉球の冠船と琉球王権に関する研究

本年度は、冠船(冊封)が琉球にもたらした諸要素について研究し、それを口頭にて発表するとともに、いくつかの課題については論文等にまとめた。補助金は、以上の研究のための書籍購入費や雑費購入費に充てられた。基礎研究として台湾大学中央図書館に所蔵されている冠船関係史料(「評価方日記」)の分析を行った。この成果は『国立台湾大学図書館典蔵琉球関係史料集成』第5巻(台湾大学、2018年)として刊行され、そのなかの史料解題を執筆した。本研究の特徴のひとつに、中国関係が重視されてきた冠船研究について、薩摩藩(日本)との関係を踏まえて検討することにある。薩摩藩との関わりがみえる研究方法として、首里城における座敷飾りに着目した。より具体的には、首里城南殿とその周辺施設である書院、鎖之間などの殿舎や部屋に飾り付けられた床飾りに、いかなる王府の意図が込められているかを検討した。床飾りのうち、掛け軸に関しては、中国側(冊封使)の接遇と、日本側(薩摩藩役人)の接遇、琉球人のみで行われる儀礼を比較し、そこからみられる傾向と王府の演出の特徴について検討した。この成果は次年度に論文として公表される予定である。また冊封にいたるまでの経緯を、とくに中国側との交渉過程を踏まえて論じた。琉球の最後の国王となる尚泰は、即位から冊封を受けるまでの空白期間が長かった。その要因について、先行研究では、史料不足から十全に理解されているとはいえなかった。そこで、あらたな史料を用いて尚泰の冊封日程の決定に関する王府と清朝側の交渉過程を取りあげた。この研究は、次年度中には論文として公表される予定である。ほかにこれまでの成果を踏まえて、『沖縄県史』図説編(沖縄県教育委員会、2019年)のなかで冠船等に関するページを執筆した。本年度は、国際学会での報告を含め研究の発表を積極的におこなった。また、論文を2本投稿するとともに、『国立台湾大学図書館典藏琉球関係史料集成』第5巻の編集に関わり、史料解題を執筆した。しかし、計画段階では予期していなかった社会貢献活動に関する諸事業が重なり、研究に費やす時間の確保がむずかしくなったため進捗が遅れていると判断した。ただし、史料や先行研究の蒐集や分析の遅れというよりも、論文や発表など公表の準備が遅れているという問題である。研究機関を一年延長することで、公表を進めて行くことができると考えたことから、研究の延長を申請した。研究期間を一年延長したので、本年度は最終年度となる。あらたな史料が確認され、研究内容を変更した部分もあるが、研究目的を解明するためには有効な変更であったと考えている。また、進捗が遅れているため研究成果のすべてを公表はできているわけではないが、当初の研究目的に沿った研究をおおむね進めることができていると思われる。本年度は最終年度にあたるので、これまでの研究をまとめ、発表や論文を通して公表していきたい。具体的には、冠船儀礼における芸能の役割を再考し、そこから冠船と民衆の関わりを検討すること、国王権威が冊封を経てどれほど強化されるのかについて、国王の兄に対する祭祀問題から検討することを目的とする。また、本研究の課題を整理し、次の研究課題に結びつけることを目標としたい。【研究の具体的内容】本研究は、琉球国王の王位継承儀礼の最終段階である「冠船」について、その意義と役割を明らかにすることを通して、琉球王権の実態を解明することを目的としている。2016年度は、次のような研究を実施した。1中国北京における史料調査:北京故宮博物院に所蔵されている徐葆光関係史料「冊封琉球全図」(2点)を閲覧・調査した。当該史料はこれまでほとんど検討がされていない史料で、徐葆光が著す『中山伝信録』の内容を分析するうえで重要な史料である。これまで展覧会などで公開されてきたが、今回の調査ではより間近に史料を閲覧することができた。2冊封関係史料の収集・分析:鹿児島大学附属図書館所蔵『琉球冠船記録』、尚家文書冊封関係史料(那覇市歴史博物館所蔵)、その他近世琉球関係史料を収集した。また、台湾大学図書館所蔵『評価方日記』の資料集刊行にも携わった。3研究発表:沖縄・八重山文化研究会、琉球史料学研究会において計4回の研究発表を行った。【研究活動の意義と重要性】中国では、研究課題に関する史料を調査し、とくに清朝の琉球認識についてあらたな知見を得ることができた。史料収集および研究発表では、冊封および国家儀礼に関する史料を収集し、内容を検討することができた。また、研究発表では、国会儀礼、冊封をテーマとしたものを報告し、本研究の論点を集約した。とくに冊封時に行われる冠船貿易について、薩摩藩への報告内容と実際の取り引き内容に齟齬があることも指摘した。今後、冊封の意義を考えるうえで論点としていきたい。史料調査、研究発表は当初計画からの変更もあったが、計画時以上の成果があった。史料調査を北京故宮博物院での調査を行ったことにより、幅広い問題設定を立てることができた。研究発表についても計画より多い機会を得ることができたことは評価できる。しかしながら、当初計画に挙げていた史料のフルテキスト化が思うように進まなかった点は反省される。