hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
プロポフォールによるアディポネクチン分泌低下の機序とインスリン抵抗性への関与

脂肪細胞から分泌されるホルモンであるアディポネクチンに対する静脈麻酔薬プロポフォールの作用機序を検討した。培養脂肪細胞とラットを用いた実験でプロポフォールがアディポネクチン分泌を抑制することが確認された。さらにその抑制機序を検討し、プロポフォールの麻酔作用機序であるGABA受容体活性化を介することなく、直接脂肪細胞のJNKリン酸化を促進することによりアディポネクチン分泌を抑制することを明らかにした。プロポフォールのアディポネクチンの分泌動態への関与について検討した。培養脂肪細胞3T3L1において、プロポフォール100μM、200μMの添加では培養液中アディポネクチン濃度が有意に低下しており、またPCR法で測定したアディポネクチンmRNAの発現も有意に低下していた。このことからプロポフォールはアディポネクチンの発現及び分泌を抑制すると考えられた。次にプロポフォール添加2時間後の脂肪細胞内の伝達シグナル(ERK,JNK,p-38)のリン酸化をウエスタンブロティング法を用いて測定したところ、非添加群と比較して有意にリン酸化が促進していた。またプロポフォール添加による培養液中のアディポネクチン濃度低下は、ERK,p-38の拮抗薬の前投与では抑制されなかったのに対して、JNKの拮抗薬の前投与では抑制された。したがってプロポフォールは脂肪細胞内の抑制系伝達シグナルであるERK,JNK,P-38のいずれも作用を促進させるが、このなかでJNKのリン酸化がアディポネクチン分泌抑制に強く関与していると考えられた。次に受容体の関与について検討した。プロポフォールは主にGABA受容体を介して麻酔作用を発現するが、GABA受容体拮抗薬ビククリン添加では、プロポフォールにょるアディポネクチン分泌低下は抑制されなかった。したがって、脂肪細胞においてはGABA受容体を介していないと考えられた。アディポネクチンはその分泌低下により、骨格筋、肝臓、脂肪における糖取り込みを低下させるインスリン抵抗性を惹起させると報告されている。また手術中には血糖値は上昇しやすく、高血糖は種々の合併症を誘発すると報告されている。今回の研究により、全身麻酔薬プロポフォールがアディポネクチン分泌を抑制することが示され、このことが術中高血糖の一因となっている可能性がある。今後術中高血糖の病態解明へとつながる重要性を持っていると考えられる。前年度までの研究において、白色脂肪細胞(3T3-L1)およびラットを用いた実験系でプロポフォールが濃度依存性にアディポネクチン分泌を抑制することが判明していた。プロポフォール投与により、脂肪細胞内ERK1/2,JNK,p-38はいずれもリン酸化が促進されていたが、拮抗薬を前投与するとJNK拮抗薬によって、プロポフォールのアディポネクチン分泌抑制効果は拮抗された。またGABA受容体拮抗薬ビククリンの前投与ではこの作用は抑制されなかった。これらのことから、プロポフォールはGABA受容体を介することなく、JNKリン酸化を促進することで脂肪細胞からのアディポネクチン分泌を抑制していることが明らかとなった。次に、プロポフォールのアディポネクチン分泌低下を介したインスリン抵抗性への関与を検討した。アディポネクチンは骨格筋、肝臓、脂肪細胞内のAMPキナーゼを活性化することでインスリンによる糖取り込みを促進することが報告されている。プロポフォール投与による脂肪細胞内AMPキナーゼのリン酸化をウエスタンブロッティング法にて測定した所、プロポフォール50、100μM添加により、AMPキナーゼのリン酸化は抑制された。この作用がアディポネクチン発現抑制によって生じた作用なのかを検討するために、in vivoでラットを用いた実験を施行した。ラットにプロポフォール30mg腹腔内投与し4時間後に肝臓及び骨格筋を採取した。プロポフォール投与量は以前の実験において血中アディポネクチン濃度が低下した量を選択した。肝臓及び骨格筋のAMPキナーゼリン酸化をウエスタンブロッティング法で測定した所、コントロールと比較して有意な変化は示さなかった。このことから、プロポフォールによるAMPキナーゼの活性化抑制効果は、アディポネクチンを介さずプロポフォールによる直接作用である可能性が考えられた。これまでの研究成果で、白色脂肪細胞(3T3-L1)およびラットを用いた実験系において、プロポフォールが濃度依存性にアディポネクチン分泌を抑制することが確認された。プロポフォール投与により、脂肪細胞内ERK1/2, JNK, p-38はいずれもリン酸化が促進されていたが、拮抗薬を前投与するとJNK拮抗薬によって、プロポフォールのアディポネクチン分泌抑制効果は拮抗された。さらに、プロポフォールのアディポネクチン分泌低下を介したインスリン抵抗性への関与も検討し、プロポフォールがAMPキナーゼのリン酸化を抑制することを確認した。

しかし、この作用はアディポネクチンを介さずプロポフォールによる直接作用である可能性が考えられたため、現在その機序について検討中である。以上の、アディポネクチンに関する研究に加え、24年度はアディポネクチンと同様に肥満に関連した生体内物質であるオレキシンの作用についても検討を行った。アディポネクチンと同様にオレキシンは体温調節にも関与するが、体温と麻酔からの覚醒に影響を与える可能性について検討を行い、オレキシンが体温調節のみでなく麻酔からの覚醒状況にも関与していることを確認した。当初の計画の通り、ウエスタンブロティング法により脂肪細胞内伝達シグナル(ERK,JNK,p-38)のリン酸化も測定し、それがプロポフォールで促進されることを確認し、その作用がGABA受容体拮抗薬ビククリンで抑制されないことから、この機序にはGABA受容体が関与していないことを見いだした。また、プロポフォールのインスリン抵抗性発現機序へのアディポネクチンの関与についても検討することができ、当初の目的をおおむね達成できたと判断する。24年度が最終年度であるため、記入しない。昨年度開始したin vivoでのラットを用いたプロポフォールの血中アディポネクチン濃度低下機序に関する研究を継続する。これまでの結果をまとめ、論文作成を進める。
複合アニオンによる触媒活性制御

本研究では、表面反応をシミュレートするために、周期境界条件を用いたユニットセル内での計算(スラブモデル)を実施する。電子状態計算や構造最適化には平面波基底の密度汎関数法を用い、遷移状態探索にはNudged Elastic Band法やDimer法を用いる。軌道相互作用の解析には平面波展開された波動関数を局在基底の波動関数に射影したうえで結晶軌道のOverlap Population(COOPまたはCOHP)の解析を行う。この手法により、バンドを分割して結合性を評価することが可能になる本研究では、表面反応をシミュレートするために、周期境界条件を用いたユニットセル内での計算(スラブモデル)を実施する。この手法により、バンドを分割して結合性を評価することが可能になる
細胞治療を導入した移植後免疫寛容誘導法の開発に向けた基礎的実験

本研究は、免疫抑制効果を持つ新しいmonocyte由来細胞を用いたcell therapyを、臓器移植後免疫抑制療法に応用することを目的として、Regensburg大学外科、Kiel大学外科と共同で行った。本細胞の特性を、マウスを用いて詳細に解析した結果、本細胞が従来から知られていたものと異なる新しいmacrophageでありin vivoで抗炎症効果を示すことが判明した。その抗炎症効果に調節製T細胞の関与が示唆され、この細胞が炎症反応時に調節製T細胞を誘導し効果を発揮することが示唆された(Brem-Exner BG, et. al.Joumal of Immunology,2008)。脾臓、骨髄、抹消血から得られた本細胞を、マウスアロ心移植後にレシピエントに投与するとグラフト生着延長効果を認めるがその効果はドナー由来細胞でもっとも強かった。しかし、細胞単独投与でグラフト拒絶を長期に抑制するいわゆる免疫寛容は誘導されなかった。さらに、抗原性の高い小腸移植モデルにこの細胞治療の応用を試みたが、ラットアロ小腸移植モデルでレシピエントの生存期間延長効果は認められなかった。これらの知見から、タクロリムス、サイクロスポリンなどの免疫抑制剤との併用治療の重要性が考えられた。Kiel大学では本細胞の投与を併用する新しい免疫抑制療法を臨床腎移植に応用した。我々が得たマウスやラットを用いたpre-clinicalのデータを、Kiel大学で行われた腎移植におけるclinical dataと比較検討し、現在共同で報告している(Hutchinson J, et. al. American Journal of Transplantation,submitted)。本実験では、免疫抑制作用を持つ単球由来細胞を実質臓器移植後の免疫抑制療法に応用することを目的とした。まずラット実験系を用いて免疫抑制作用を持つ新しい単球由来細胞を培養した。リンパ球混合培養でこの細胞がリンパ球を貪食する効果があることを確認した。さらにこの細胞の小腸移植モデルへのin vivoでの応用の可能性を検討した。ラットアロ小腸移植を行い術後に5×10^6個の免疫抑制性単球由来細胞を経静脈的に全身投与し、レシピエントラットの生存期間を検言した。しかし抗原性の高い小腸移植グラフトに対する拒絶反応は細胞の単回投与のみでは制御困難であり、in vitroでの本細胞の免疫抑制作用のメカニズムの解明は必要と考えられた。本細胞はリンパ球混合培養において、免疫寛容の維持に重要な調節性Tリンパ球を誘導することが判明している。そこでより効率よく調節性Tリンパ球を誘導することを目的とし、ドイツRegensburg大学と共同で、本細胞とリンパ球の混合培養系において、抗原刺激の有無が調節性Tリンパ球の誘導に与える影響をFACSを用いた解析で評価-した。OVA peptideを抗原刺激に利用し、この蛋白に対するT cell receptor geneを特異的にtransgenicした、transgenic mouse(DO11,1O, OT2)由来のリンパ球をresponderに用いて本細胞とともに混合培養を行い、調節性Tリンパ球の誘導の差異をFACSを用いて解析を試みた。現在実験を継続中であり、今後本細胞による調節性Tリンパ球の誘導のメカニズムを解析するとともに、より効率よく調節性Tリンパ球を誘導する至適環境、条件を検討して、より強力な免疫抑制効果が得られるプロトコールを再度in vivo実験系に適応していく予定である。
非侵襲的脳機能測定法を用いた脳室周囲白質軟化症における認知・発達メカニズムの解明

これまでの研究から、非嚢胞性脳室周囲白質軟化症では、高次脳機能障害を呈することが報告されている。本研究は、71名の早産児を対象とし、近赤外分光法を用いて音声誘発脳反応を調べた。早産児は音韻・抑揚刺激に対するヘモグロビン(Hb)変化パターンが正期産児と異なり、また、音韻・抑揚の処理で大脳半球の優位性を示さなかった。修正週数が進むと非典型的なHb変化パターンは減少し、抑揚刺激に対して正期産児同様に右大脳半球優位な脳活動を示した。本研究は、早産児の音韻・抑揚刺激に対する脳活動は正期産児と異なるが、分娩予定日までに発達し、正期産児と同等になることを示した。これまでに音声刺激に対する特定の脳領域の脳反応について研究を進めてきた。近年、非侵襲的脳機能計測技術の発展に伴い、脳領域の機能的結合が評価されるようになってきた。今年度は、正期産児における単語中の音韻・韻律に対する脳領域の機能的結合を、近赤外分光法を用いて、血行動態指標により検討した。当院で出生した日齢7以下の正期産児を対象とした。刺激として、単語レベルの音韻対比と抑揚対比の2条件の合成音声を用いた。ベース音声を提示した後に、比較刺激として各2条件を提示し、側頭・前頭部におけるヘモグロビン(Hb)の変化量を光トポグラフィ装置ETGー4000を用いて計測した。そして、左側頭部内・右側頭部内・前頭部内での領域内の機能的結合と、左側頭部と右側頭部と前頭部間での領域間の機能的結合を解析した。【結果】在胎37週以降に出生した正期産児19名が対象となった。平均出生週数は39.1週、平均出生体重は3037.2g、検査時日齢は2から7日であった。左側頭部内と右側頭部内と前頭部内では、相関係数はそれぞれ0.52、0.55、0.57で、機能的結合に有意差を認めなかった。左側頭部と前頭部、右側頭部と前頭部、左側頭部と右側頭部では、相関係数はそれぞれ0.37、0.38、0.39で、機能的結合に有意差を認めなかった。正期産児において、音韻・抑揚刺激に対する機能的結合は、領域内と領域間のいずれにおいても認められたが、領域内で有意に多い結合がみられた。日齢7以下の正期産児では、効率的な機能的結合は行われていない可能性が示唆された。本研究成果の発展は、脳室周囲白質軟化症のメカニズムを明らかにできる可能性がある。これまでに単語中の音韻・韻律に対する脳反応についての研究を進めてきたが、話者特性については検討していなかった。今年度は、近赤外分光法を用いて、正期産児と早期産児における母親声と非母親声に対する脳反応の変化を血行動態指標により検討した。当院で出生した正期産児と早期産児を対象とした。刺激として、母親声と非母親声による乳児への語りかけ音声を提示し、側頭・前頭部におけるヘモグロビン(Hb)の変化量および最大・最小のHb反応潜時を光トポグラフィ装置ETG-4000を用いて計測した。正期産児は15名が対象となった。平均出生週数は39.3週、平均出生体重は3088g、検査時日齢は2から7日であった。母親声と非母親声で異なるHb反応の時系列変化が認められた。母親声では、初期にHb減少があり潜時20秒辺りで最大反応ピークが認められたが、非母親声では初期のHb減少はなく最大反応潜時も乳児によって8ー20秒と分散が大きかった。母親声に対する最小反応潜時と最大反応潜時において、非母親声より母親声で、有意に大きいHb反応が右前頭前野前部で認められた。早期産児は14名が対象となった。平均出生週数は31.9週、平均出生体重は1529g、検査時日齢は9から56日であった。母親声と非母親声で共に、最大反応潜時は乳児によって分散が大きく、特定の時系列変化は認められなかった。ただし、母親声では、刺激開始6秒後に左前頭前野前部と左側頭部に有意に大きいHb反応が認められた。正期産児では、母親声で特定のHb時系列変化が認められたが、早期産児では、母親声と非母親声で有意な差を認めなかった。また、早期産児においては、母親声に特異的な脳反応部位が正期産児と異なった。本研究の結果より、話者特性と母子愛着に関する脳機能の発達が示唆された。本研究の発展は、脳室周囲白質軟化症のメカニズムを明らかにできる可能性がある。これまでに、正期産児における単語中の音韻・韻律に対する脳領域の機能的結合について研究を進めてきた。今年度は、正期産児における母親声に対する脳領域の機能的結合について、近赤外分光法を用いて検討した。刺激として、児の母親による朗読音声(母親声)と未知の女性による朗読音声(非母親声)を提示した。

光トポグラフィ装置ETG-4000を用いて、大脳皮質の左右側頭部12CHと前頭部22CHで酸素化ヘモグロビン濃度(oxy-Hb)変化を計測し、有意な脳反応を示す脳領域を調べた。さらに、有意な脳反応を示す脳領域について、位相同期性を用いて機能的結合を検討した。対象となった正期産児は37名、平均在胎週数39週2日、平均出生体重3084g、平均検査時日齢4.6日であった。母親声においては、刺激提示後36秒程度で左右側頭部と前頭部のoxy-Hbが有意に下降したが、非母親声においては有意なoxy-Hb変化を持つCHはほとんど認められなかった。母親声では、非母親声に比べて有意に強い脳反応が背側前頭前野のCHで認められたため、当該CHと他の脳部位との機能的結合を調べた。その結果、母親声での背側前頭前野と左聴覚野近傍の機能的結合は非母親声に比して有意に減少し、背側前頭前野と背外側前頭前野の機能的結合は有意に増加した。正期産児では、母親声において、非母親声と比べて背側前頭前野で有意に大きい脳反応を認めた。さらに、母親声においてのみ脳領域で複雑な機能的結合が存在することが示唆された。本研究の発展は、脳室周囲白質軟化症における認知・発達メカニズムの解明を明らかにできる可能性がある。これまでの研究から、非嚢胞性脳室周囲白質軟化症では、高次脳機能障害を呈することが報告されている。本研究は、71名の早産児を対象とし、近赤外分光法を用いて音声誘発脳反応を調べた。早産児は音韻・抑揚刺激に対するヘモグロビン(Hb)変化パターンが正期産児と異なり、また、音韻・抑揚の処理で大脳半球の優位性を示さなかった。修正週数が進むと非典型的なHb変化パターンは減少し、抑揚刺激に対して正期産児同様に右大脳半球優位な脳活動を示した。本研究は、早産児の音韻・抑揚刺激に対する脳活動は正期産児と異なるが、分娩予定日までに発達し、正期産児と同等になることを示した。胎児・新生児医学新生児の音韻・抑揚に対する特定の脳領域の脳反応については、正期産児と早期産児についての解析が順調に進み、論文を投稿中である。さらに脳領域の機能的結合についての解析もおおむね順調に進展している。また、新生児の母親声と非母親声に対する脳反応の研究も進められている。正期産児、早期産児共に、解析がおおむね順調に進んでおり、来年度さらに研究を発展させることが出来る。新生児の音韻・抑揚に対する脳反応については、正期産児と早期産児についての解析が、おおむね順調に進んでおり、来年度に論文発表を計画している。また、新生児の音韻・抑揚以外の音声刺激に対する脳反応について、母親声と非母親声を用いて、新生児の脳反応の研究が進められている。正期産児、早期産児共に、解析がおおむね順調に進んでおり、来年度に研究を発展させることができる。本研究は順調に進展しており、現在の研究を継続していくことが、成果の発展へと結びつく。今後の研究計画としては、大きく3つの目標があり、1)NIRSを用いた言語の抑揚・音韻に対する脳反応を比較するための早期産児とPVLにおけるデータの解析の継続、2)平成25年度でデータが得られた、脳領域の機能的結合の解析と母親声と非母親声に対する脳反応の解析を進めること、3)PVLモデルの作成と解析である。1)平成25年度で正期産児と早期産児における言語の抑揚・音韻に対する脳反応の解析が進んだため、論文発表をする。また引き続きPVLの脳反応の解析も続けていく。2)早期産児について、母親声と非母親声についての解析と脳領域の機能的結合についての解析を進め、それぞれの脳反応について発達を調べる。そして、PVLの脳反応と比較することで、脳機能障害のメカニズムを探る。3)NIRSで得られた知見を、細胞や組織レベルで評価するため、PVLモデルの作成を進める。
プロアクティブ型プログラム変更支援環境

本研究では、開発者や保守者が過去に行ったプログラムのソースコードの編集操作の履歴から、将来のプログラム保守に役立つ情報を提示する2つの手法を提案した。一つは、過去のプログラム変更を開発者や保守者の方針に応じて自動的に検出・集約する手法である。もう一つは、連続する2つの編集操作間に存在する依存関係を形式的に表現する編集操作グラフを用いて、特定のクラスメンバの作成に関係する編集操作だけを抽出・再演する編集操作スライシング手法である。これらの手法を組みこんだツールをそれぞれ試作し、統合開発環境に組みこむことで、プログラム変更に対する有用性を示した。本研究では、開発者や保守者が過去に行ったプログラムのソースコードの編集操作をすべて記録し、その編集操作履歴から将来のソフトウェア保守に役立つ情報を抽出する手法を確立する。平成25年度は、主に3つの研究を実施した。1.複数の開発者が行った編集操作を細粒度で合成できるように、編集操作の依存関係を再検討した。具体的には、従来から提案している編集操作グラフ(OpG)の節点の粒度をクラスメンバから、編集操作およびそれらの集合に変更した。これにより、開発者の知りたい情報や開発状況に対して、より柔軟な過去の編集操作の追跡性が実現できた。2.現在記録している編集操作は、開発者が過去のプログラム変更を理解するためには細かすぎる。そこで、編集操作からソースコードの変化を検出した上で、それらの変化を集約するアルゴリズムを提案した。これにより、開発者は断片化されたコード変更ではなく、より抽象度の高いプログラム変更が把握しやすくなる。3.プログラム変更をナビゲートするツール群の構築を目指して、リファクタリング、デバッグ支援、ソーシャルコーディングにおける編集操作の活用を検討した。この結果、過去の編集操作をリファクタリング機会の検出やバグ検出に応用できることを確認した。また、編集操作の類似性などを検出し、GitHUBのようなソーシャルコーディングサイトで提供するサービスの可能性も見いだした。本研究では、開発者や保守者が過去に行ったプログラムのソースコードの編集操作をすべて記録し、その編集操作履歴から将来のプログラム保守に役立つ情報を抽出する手法を確立する。平成24年度は、主に2つの研究を実施した。1.従来研究において開発した、編集操作記録ツール(OperationRecorder)の記録機能を改良した。このツールは、統合開発環境EclipseのJavaエディタ上でプログラマが行ったソースコードの編集操作を細粒度で記録できる。しかしながら、編集操作の記録はJavaエディタ上のファイルに基づき管理されており、ファイル名の変更などを正確に追従できない。そこで、Javaエディタ上で行われたものだけを記録するでなく、リソースの変更操作(ファイルの削除,移動,ファイル名の変更)や取り消し(undo/redo)操作を記録できるようにツールを拡張した。リソースの変更や取り消し操作を記録することで、編集操作の再演時において編集操作が正確に追従できるようになったことを確認した。2.記録した編集操作を効率的に活用するための内部表現として、編集操作グラフの改良を行った。従来の編集操作グラフでは、それぞれの編集操作の適用前後のソースコードのスナップショットに対して、クラスメンバを節点として、それらの節点間の編集に関する依存関係を表す辺が定義していた。しかしながら、単独のスナップショット内に存在する依存関係を組み込んだり、複数の開発者が行った編集操作を合成したりすることを考えると、このような依存関係に基づき特定される影響範囲は必要以上に大きくなる。そこで,グラフ表現の節点をクラスメンバから編集操作に変更し、編集操作間の依存関係を形式的に定義することで、より追跡性の高い編集操作グラフの考案した。同時に、このグラフ表現を編集操作記録ツールに組み込む作業を完了させた。平成26年度は、主に3つの研究を実施した。1.現在記録している編集操作は、開発者が過去のソースコード変更を理解するためには細かすぎる。評価実験を行うことで、自動的に検出したプログラム変更が、実際に開発者が実施したタスクとどの程度一致するのかを示した。結果として、編集操作間の時間間隔に基づく集約が比較的有効であること分かった。2.平成25年度から継続して、編集履歴のスライシング手法とその活用を検討した。さらに、スライシングを自動で行うツールの改良を行い、実際の開発において記録した編集履歴からスライスを抽出する実験を行った。抽出したスライスを分析した結果、開発者が特定のプログラム要素を理解する際に、調査すべき空間を削減できることを確認した。3.編集操作の依存関係を再検討した。具体的には、複数の開発者が行った編集操作を細粒度で合成できるように、従来から提案している編集操作グラフの節点の粒度をクラスメンバから編集操作に変更し、それらの間の依存関係を検出するアルゴリズムを考案および実装した。依存関係をたどることで編集操作のさまざまなスライスを抽出することが可能となった。これにより、編集操作を部分的に自動集約できる可能性を示すことに成功した。

平成27年度は、Javaプログラムにおける特定のクラスメンバが構築される過程だけを再生可能な編集操作スライシングツールを用いて、プログラム変更理解作業に対する効果を評価する実験を行った。具体的には、平成26年度の研究において、実際のソフトウェア開発時に記録した編集操作履歴データの一部に欠陥があることが判明した。このため、評価実験に先立ち、編集操作履歴から再生されたコード間の矛盾を自動的に検出するツールを構築し、データの補正を行った。その上で、Javaプログラムの作成において、特定のクラスメンバの構築が非連続に行われている事実を示し、編集操作スライシングにより変更理解作業の軽減が可能であることを立証した。本研究では、開発者や保守者が過去に行ったプログラムのソースコードの編集操作の履歴から、将来のプログラム保守に役立つ情報を提示する2つの手法を提案した。一つは、過去のプログラム変更を開発者や保守者の方針に応じて自動的に検出・集約する手法である。もう一つは、連続する2つの編集操作間に存在する依存関係を形式的に表現する編集操作グラフを用いて、特定のクラスメンバの作成に関係する編集操作だけを抽出・再演する編集操作スライシング手法である。これらの手法を組みこんだツールをそれぞれ試作し、統合開発環境に組みこむことで、プログラム変更に対する有用性を示した。交付申請書によると、平成26年度には編集操作を活用したプログラム変更支援ツールプラットフォームの構築とプログラム変更支援ツールの開発である。編集操作を記録するツールの全面的改訂を行い、現在ソースコードの公開に向けて準備を進めている。プログラム変更支援ツールとしては、研究実績の概要の(1)に示した、プログラム変更の理解支援ツールにおけるツールを構築し、それを用いて評価実験を行った。この研究成果を情報処理学会論文誌に投稿し採録された。また、連携研究者との共同作業により、編集操作をリファクタリングする変更支援ツールを開発し、その成果をSANER2015で発表した。クラウド環境を利用した変更操作の収集に関しては概念の提案だけで、まだ実装が完了してしないものの、ツールプラットフォームの構築とプログラム変更支援ツールの開発に成功しており、当初の目的はおおむね達成している。また、研究成果の発表も順調に実施した。以上より、研究はおおむね順調に進展しているといえる。ソフトウェア工学開発したツールプラットフォームやツールに関するソースコードを公開し、新たな変更支援ツールの構築に努める。さらに、研究実績の概要の(2)に示した研究成果を論文にまとめる。現在、実験データの分析を行っており、平成27年前半での論文投稿を目指す。平成25年度の予定は、編集操作を活用したプログラム変更支援ツールの構築やそのようなツールの開発を支援するプラットフォームの構築である。
死後出版小説の問題点と編集の正当性-プルーストの場合

N・モーリヤックが発見し出版したプルーストの小説『失われた時を求めて』第六巻『消え去ったアルベルチーヌ』のタイプ原稿は、氏が主張するように「最終決定稿」ではなく、当初は雑誌「レーズーヴル。リーブル」用の抜粋であったということの傍証として、件のタイプ原稿では削除された、ヴェネチアで展開される「忘却」の掛替のない重要性を考察した。それをパリ第III大学での講演と二篇の論文で表した。主要テーマである「忘却」は、話者の<私>の恋人であるアルベルチーヌが事故死してから話者の内的世界で生じる心的現象である。話者は第1段階、第2段階(以上パリにて)、第3段階(最終段階、ヴェネチアにて)と分けて物語を進めて.いる。しかし問題なのは、第2段階(アルベルチーヌの友人アンドレとの第二回目の会話-同性愛関係を告白-が発端)の時期である。プルーストは『失われた時』全般をつうじて物語の時間にかんする表現を明示することは少ないが、この「忘却」の段階にかんしても同様である。筆者はいくつかの叙述から、第2段階は第1段階の物語がまさに進行している期間に起きたと推論した。とすれば、作者はなぜこの時期の「忘却」現象を第1、第2段階と分別したのであろうか。そこで「忘却」の最終段階で語られる話者の心的現象から、その基準ともなり得るテーマを敢えて4つ抽出した(むろん、相互に交錯するテーマである以上、厳密にいえば4つに峻別可能かどうか問題であるが)。1.愛した存在の(イマージュにおける)蘇生不可能性。2.その存在を愛した<私>の死。新たな<私>の誕生。3.愛の完全なる終焉。4.無関心の完成。これらのテーマをプルーストの初期の作品から第六巻まで逆照射して、各時期の作品における表現の特徴を検証した。また第1段階では、2,3,4のテーマが全容ではなく、その前兆ともいうべき形で表現されている。しかし第2段階のエピソードはその内実が暖昧である。話者はアンドレの告白の真実を聞いても動転しなかった。つまりアルベルチーヌへの愛が終焉しつつあり、無関心が完成しつつあると強調したかったから、第2段階と設定したかもしれない。ただしプルーストが生き延びていれば、第2段階と明示しなかった可能性が大いにある。23年度は、科研費による研究年度と早稲田・パリ大学交換研究員制度による10月からのパリ滞在が重なった。事務手続き上は非常に煩雑になったが、パリ滞在のメリットも非常に大きい。第一に、パリではナタリー・モーリャック氏が主宰するゼミナールに参加して、多くの研究者と意見交換する機会となった。また同氏と京大教授の吉川氏が共同主催したプルーストのマニュスクリ(手帖、タイプ原稿、清書原稿等)にかんする大々的なシンポジュムがあり(今日の著名なプルースト研究者のほとんどが参加)、多大なる刺戟を受けたことはコトバに表せないくらいであった。また所属するパリ第3大学で2度講演をおこなったが、自らの考えを整理して発表し、質問時間とその後の会合で研究者からの質問に答えているうちに、筆者の考えとは異なる考えも可能なのだと今さらながら再発見して、とりわけ研究テーマである「忘却」にかんしてもう少し幅広い視点を持つべきだと認識を新たにした。「失われた時を求めて」の第6巻を刊行・翻訳をする場合、どの資料に基づくべきかは、すぐさま答えらえない課題であった。モーリアック氏の「短縮判」は筆者の仮設からしても採用できないが、といって清書原稿とタイプ原稿のどちらを選ぶべきは、編者の判断は小説のコンテクストに鑑みて、やはり(未完小説とはいえ)、どちらのテキストも尊重し、物語の流れを尊重して読者にわかり易いエディションを編むべきだとの考えを披露した。パリ滞在は、「プルーストと西洋美術」研究のうえで、大いに利点を発揮した。大まかに分けて、プルーストが興味をしめしたルネッサンス絵画、フランドル・オランダ絵画、印象派絵画はヨーロッパ中の美術館・教会に散在するからである。24年度の半年間は、早稲田大学とパリ大学交換研究員としてパリに滞在して研究を遂行していた時期と重なる。23年度末(24年3月)にパリ第3大学で"L'oubli dansl'oeuvre de Paroust etsa vie"と題して2時間にわたって講演をおこなった。その際、質疑応答時間が1時間あり、会場からさまざまな質問・意見がでた。『失われた時を求めて』の第六巻で繰り広げられる「忘却」の諸段階の分析と、とりわけ筆者の仮説であるヴェネチア滞在における最終段階での「忘却」テーマの4つクライテリアのうちのla

mort du moiとプルーストが「忘却」のテーマを発見した証左として筆者があげた1914年10月のアーン宛書簡にかんすることであった。前者の問題:たしかにlamort du moiはいくつも文脈でみられる概念であるが、こと「忘却」にかんしては14年5月のアゴスティネリの死後導入され、19年出版の『花咲く乙女のかげに』の『忘却』のテーマを展開する文脈なかで理論概念として開陳された。後者の問題:アゴスティネリの死後、公刊されているあらゆるプルーストの書簡を調査したが、14年10月のアーン宛で鮮明に「忘却」のテーマ発見を示唆している。それはもちろん既存の物語に「アルベルチーヌ」を創造・導入したことと軌を一にしている。筆者の「忘却」にかする発表は、間接的にN.モーリアックの仮説に反論する論拠であるから、それを支持する研究者からは「立場が違う」と質問等はでなかった。筆者はこの講演会形式の発表を変え、24年12月発行の早稲田大学政治経済学部の「教養諸学研究」第132・33合併号に"L'oubli dansl'oeuvre de Paroust etsa vie"と題して発表した。死後出版小説は数多くの課題をふくんでいる。これからも取組んでいくつもりである。「失われた時を求めて」の第6巻「消え去ったアルベルチーヌ」だけでなく全巻でプルーストが展開する美術批評はあまりにも幅広く、さらに書簡集を含めて言及した美術家の作品はより幅広い。そのすべてとはいわないが、これらの美術家の作品をになんとか接したいと考えていたが、今年度は時間的に余裕がなかった。とりわけジオットー壁画があるパードヴァ市のスクロベーニ礼拝堂は保護のため、正味20分しか許されなかった。24年度が最終年度であるため、記入しない。まず第一に、第6巻の「消え去ったアルベルチーヌ」を編集または翻訳する場合、どのような編集が理想なのか、筆者はまだ明確な視点を有していない。ただ目下の課題は、3月23日のパリ第3大学でおこなった講演の際の質疑応答を整理して、論文として発表することである。また「プルーストと西洋美術」にかんする研究は、パリ滞在の利点を活かして、24年度も続行するつもりである。ウイーンの美術史博物館、ニューヨークのさまざまな美術館にも行き、プルーストが作品や書簡集で展開した美術批評の視点の本質をいくつかのレヴェルで整理し、把握するのが課題である。作品の舞台であるヴェネチアの再訪も視野に入れている。
損傷を有するRC部材の修復後の性能評価に関する実験ならびに解析的研究

本研究では,損傷を被った構造物の安全性を数値解析的に評価可能な解析ツールの開発を主眼として,RC部材の初回載荷実験ならびに補修後の載荷実験を行うことで,補修後の部材の挙動を実験的に明らかにすると共に,新たな解析手法の提案・開発を行うことで,実験で確認された挙動の再現が可能となった。さらに,補修・補強後の部材の性能が予測可能な解析ツールの開発を目指して,柱部材の載荷実験を行うと共に,今後の数値解析で必要な構成モデルの開発を行った。本研究では,損傷を被った構造物の修復後の性能評価が可能な数値解析技術の確立を主眼とし,また損傷制御方法を模索している。そこで,補修・補強前後の鉄筋コンクリート部材の力学挙動に関する基礎的な実験データを取得すること,および開発を進める解析モデルの妥当性を評価するために必要な実験データを取得することを目的に,以下の実験を行った。・せん断破壊した鉄筋コンクリートはりの補修後の性能評価に関する実験・アラミド繊維シートによるせん断補強効果の確認に関する実験・曲げ破壊した鉄筋コンクリートはりの断面修復後の性能評価に関する実験・鉄筋-コンクリート間の付着を制御したRCはり部材の曲げ挙動の評価に関する実験・一定軸力下で繰り返し曲げを受ける鉄筋コンクリート柱部材の力学特性ならびに損傷評価に関する実験上記の実験データはいずれも基礎的なものであるが,解析ツールの構築方法の検討ならびにその検証に対しては,非常に有益となる。現状の解析モデルでは,せん断破壊した鉄筋コンクリートはり部材のひび割れ注入補修後の力学的挙動を妥当な精度で予測可能であることが確認された。また,上記の実験結果により,解析モデルの開発に当たっては,断面修復を行った部材の終局挙動の場合,断面修復部と既存コンクリートの境界面で破壊が進行すること,繰り返し曲げ載荷を受ける鉄筋コンクリート柱部材の終局挙動では,鉄筋のはらみ出しが顕著となることから,その実挙動を数値解析においても適切に表現する必要があることなどが確認された。これまで,損傷を被った既設構造物や修復後の構造物の性能照査は,載荷実験が中心的な役割を担ってきた。しかしながら,修復事例の増大が確実視される中で,毎回載荷実験を行うことは現実的ではなく,非線形数値解析による性能予測手法の確立が必要と考えられる。そこで本研究では,既設構造物の長寿命化・リニューアル化に対する適切な技術判断を行うために必要な情報を提供することが可能な非線形解析技術の開発を目的とした。本年度では,これまで実験的研究により得られた知見に基づき,初期載荷に導入された損傷やひび割れ注入後のコンクリートの挙動を材料レベルから考慮可能な解析モデルの開発を行った。構築した解析モデルを用いて,過去の実験の数値シミュレーションを行った結果,せん断破壊したRCはり部材に対して,ひび割れ注入補修を施したRCはり部材の挙動を妥当な精度で予測可能であることが確認された。上記の研究では,ひび割れが導入されたコンクリート材料の補修後の挙動評価を主たる目的に構成則の開発を進めているが,鋼板巻きたて等による補強部材の挙動を精度良く評価するためには,ポアソン効果を考慮したコンクリートの構成モデルが必要とされる。これまで,塑性理論に基づいた構成則は数多く提案されているものの,本研究で提案するような直交異方性モデルを使用してポアソン効果が考慮できる構成モデルは,構造解析に適用されるまでには至っていない。そこで本研究では,直交異方性モデルを使用したポアソン効果が考慮可能な構成モデルの開発を行った。現時点では,完成までには至っていないものの,無筋コンクリートの一軸圧縮挙動を妥当な精度で予測可能な状況にまで至っている。
神経制御物質の探索とその作用の解析

本研究班の研究成果は大きく2つに分けられる.すなわち,神経制御物質の生理機能に対する作用の研究とニューロンの成長及び形態変化に及ぼす作用の研究とである.主な研究実績は以下のとおりである.(1)鎮痛ペプチド,キョートルフィンの生合成経路としてチロジンとアルギニンとからATP-Mgcl2依存性に生成される経路と,前駆タンパクのプロセシングによる経路の2つが証明された.また,一方,キョートルフィンレセプターはラット脳内に同定され,さらにG:タンパクを介し,アデニレートシクラーゼ,ホスホリパーゼレと連関するなどの情報伝達機構が明らかになった.(3)睡眼は複数の内因性睡眼物質の相互作用によって動的に調節されていることが明らかとなった.(4)睡眼物質は一方で,オピオイド性鎮痛作用を生じ,その機構に脳幹部からのエンケファリン遊離作用機構が関与することが明らかにされた.(5)精製ムスカリン受容体とGiとの共役が証明されるとともに, Giによるアデニレートシクラーゼ抑制の機構が明らかにされた.(6)脳スライス標本における新しい素量解析法が確立され,薬物作用のシナプス前後の局在を知る糸口が見いだされた.(7)脳の発生過程で変動するdrebr.nのクローニングガなされた.(9)NGF合成がカテコールアミンにより促進されることが見いだされた.(10)交感神経と平骨筋との間のくっつきに関わる物質が抽出された.(11)小脳から28KDのビタミンD依存性Ce2+結合蛋白質の一次構造が決定された.以上の様に,神経制御物質は,それぞれ特有の神経生理機能を制御し,またあるいは,神経間の形態変化及び成長,生存に重要な役割りを担っていることが明らかになった.本研究班の研究成果は大きく2つに分けられる.すなわち,神経制御物質の生理機能に対する作用の研究とニューロンの成長及び形態変化に及ぼす作用の研究とである.主な研究実績は以下のとおりである.(1)鎮痛ペプチド,キョートルフィンの生合成経路としてチロジンとアルギニンとからATP-Mgcl2依存性に生成される経路と,前駆タンパクのプロセシングによる経路の2つが証明された.また,一方,キョートルフィンレセプターはラット脳内に同定され,さらにG:タンパクを介し,アデニレートシクラーゼ,ホスホリパーゼレと連関するなどの情報伝達機構が明らかになった.(3)睡眼は複数の内因性睡眼物質の相互作用によって動的に調節されていることが明らかとなった.(4)睡眼物質は一方で,オピオイド性鎮痛作用を生じ,その機構に脳幹部からのエンケファリン遊離作用機構が関与することが明らかにされた.(5)精製ムスカリン受容体とGiとの共役が証明されるとともに, Giによるアデニレートシクラーゼ抑制の機構が明らかにされた.(6)脳スライス標本における新しい素量解析法が確立され,薬物作用のシナプス前後の局在を知る糸口が見いだされた.(7)脳の発生過程で変動するdrebr.nのクローニングガなされた.(9)NGF合成がカテコールアミンにより促進されることが見いだされた.(10)交感神経と平骨筋との間のくっつきに関わる物質が抽出された.(11)小脳から28KDのビタミンD依存性Ce2+結合蛋白質の一次構造が決定された.以上の様に,神経制御物質は,それぞれ特有の神経生理機能を制御し,またあるいは,神経間の形態変化及び成長,生存に重要な役割りを担っていることが明らかになった.
植物の小胞体ストレス応答における脂質シグナリングとGタンパク質による制御機構

主に次の項目に関して実験を計画し、実行した。(1)三量体Gタンパク質複合体サブユニットの一つGβタンパク質(AGB1)の細胞内局在を明らかにする目的で、ProAGB1:AGB1-Venusを発現するシロイヌナズナの形質転換植物体を構築し、そのスクリーニングを行なった。我々の先行研究により、AGB1を欠失した変異植物体は小胞体ストレスに対し脆弱になることが明らかになっている。この表現系を指標に、AGB1の機能を相補しつつ蛍光シグナルが検出可能な植物体を単離することに成功した。このagb1-3 ProAGB1:AGB1-Venusを用いて、細胞内局在を調べたところ、細胞膜にシグナルを検出した。予備実験によれば、細胞膜に加えて、小胞体に一致するシグナルも検出した。今後は確立した植物体を用いて、通常状態の細胞内局在を明らかにするとともに、小胞体ストレス条件下でのGβサブユニットの動向についてリアルタイムで観察することにより、Gβサブユニットの小胞体ストレス応答における役割を明らかにする。(2)生化学的手法によりGβサブユニットのin planta相互作用因子の同定を試みた。上記(1)で確立したAGB1-Venusを発現する植物体を寒天培地で2週間生育した後、芽生えを破砕し全タンパク質を抽出した。それを用いてGFP抗体によるプルダウンアッセイを行い、共沈降するタンパク質の同定を試みた。様々な条件検討を行なった結果、GFP抗体と共沈降するタンパク質の同定に成功した。現在、同定したタンパク質の解析を行うとともに、その再現性に関して追試実験を行なっている。さらに、酵母のツーハイブリッド実験及びBiFC法により相互作用の確認を行う予定である。平成29年度は主に下記2点に関して進捗があった。(1)ProAGB1:AGB1-Venusを発現するシロイヌナズナの形質転換体の構築に成功し、スクリーニングにより、蛍光タンパク質を融合したGβサブユニットが、本来の機能を維持することを明らかにした。構築した植物体を用いて、細胞内局在のリアルタイム観察を開始した。(2)(1)で構築した植物体を用いて、プルダウンアッセイを行い、相互作用因子の候補となる複数のタンパク質の同定に成功した。これらの結果より、現在までのところ当初の計画に沿って順調に進展していると判断する。上述の項目(1)に関して、まずはじめに通常状態でのGβサブユニットの細胞内局在を明らかにする。その後、小胞体ストレス条件下での細胞内局在を顕微鏡観察により明らかにする。上述の項目(2)に関しては、現在、候補となる相互作用因子の同定に成功しているため、それらについて個々の解析を始める。また、実験結果の再現性を確認するため、別の手法を用いて相互作用を立証する。具体的には出芽酵母を用いたツーハイブリッド実験とBiFC法の準備に着手している。さらに、現在の候補因子をもとに、三量体Gタンパク質が小胞体ストレス応答にどのように機能するのか、その分子メカニズムに関して具体的な仮説を立て、その検証を行う。平成28年度は主に次の3項目に関して実験を計画し、実行した。(1)シロイヌナズナ野生型及び既知の小胞体ストレス応答に必須な因子を欠失した変異植物体を用いて、小胞体ストレス処理前後の主要脂質分子種のプロファイリングを行った。具体的には、出芽後2週間の芽生えをツニカマイシンで24時間処理した植物体を用いて、脂質各種(MGDG, DGDG, PC, PE, PG, PI )の処理前後でのプロファイリングを行った。その結果、ある変異植物体においては、野生型とは異なる脂質プロファイリングを示すことを明らかにした。今後は、現在の結果の再現性を確認するとともに、その違いを分子レベルで明らかにする。(2)逆遺伝学的手法により、脂質合成酵素を欠失した植物体の小胞体ストレス耐性を調べた。まず、はじめに脂質合成酵素各種を単独で欠失した植物体を取得するため、T-DNA挿入形質転換植物の単離を行い、複数のラインにおいて成功した。確立したホモ接合体を低濃度のツニカマイシンで2週間処理し、小胞体ストレス耐性を、野生型のそれと比較した。その結果、小胞体ストレスに対して著しく脆弱になる変異植物体を見出した。2年時以降は、これらの変異植物体に注目して解析を進めるとともに引き続き、T-DNA挿入形質転換植物の単離を行う。本年度はさらに、(3)シロイヌナズナ根において、小胞体ストレス応答が可視化可能な植物体を構築し、その組織特異性を記述し、論文にまとめた(Front. Plant Sci. 8:144 DOI: 10.3389/fpls.2017.00144)。平成28年度は次の2項目に関して実験を計画していた。(1)シロイヌナズナ野生型及び既知の小胞体ストレス応答に必須な因子を欠失した変異植物体を用いて、小胞体ストレス処理前後の主要脂質分子種のプロファイリングを行うことにより、既知の因子と脂質シグナリングとの関与を明らかにする。(2)逆遺伝学的手法により、脂質合成酵素を欠失した植物体の小胞体ストレス耐性を記述する。(1)に関して、実際に野生型及び複数の変異植物体を用いて主要脂質分種のプロファイリングを行い、野生型とは異なるプロファイリングを示す変異植物体を見出すことに成功した。(2)においては、まずは複数のT-DNA挿入形質転換植物の単離に成功するとともに、それらのホモ接合植物体を用いて、小胞体ストレス耐性を調べた。

これらのことから、現在までのところ当初の計画に沿って、本研究は順調に進展していると判断する。主に次の項目に関して実験を計画し、実行した。(1)三量体Gタンパク質複合体サブユニットの一つGβタンパク質(AGB1)の細胞内局在を明らかにする目的で、ProAGB1:AGB1-Venusを発現するシロイヌナズナの形質転換植物体を構築し、そのスクリーニングを行なった。我々の先行研究により、AGB1を欠失した変異植物体は小胞体ストレスに対し脆弱になることが明らかになっている。この表現系を指標に、AGB1の機能を相補しつつ蛍光シグナルが検出可能な植物体を単離することに成功した。このagb1-3 ProAGB1:AGB1-Venusを用いて、細胞内局在を調べたところ、細胞膜にシグナルを検出した。予備実験によれば、細胞膜に加えて、小胞体に一致するシグナルも検出した。今後は確立した植物体を用いて、通常状態の細胞内局在を明らかにするとともに、小胞体ストレス条件下でのGβサブユニットの動向についてリアルタイムで観察することにより、Gβサブユニットの小胞体ストレス応答における役割を明らかにする。(2)生化学的手法によりGβサブユニットのin planta相互作用因子の同定を試みた。上記(1)で確立したAGB1-Venusを発現する植物体を寒天培地で2週間生育した後、芽生えを破砕し全タンパク質を抽出した。それを用いてGFP抗体によるプルダウンアッセイを行い、共沈降するタンパク質の同定を試みた。様々な条件検討を行なった結果、GFP抗体と共沈降するタンパク質の同定に成功した。現在、同定したタンパク質の解析を行うとともに、その再現性に関して追試実験を行なっている。さらに、酵母のツーハイブリッド実験及びBiFC法により相互作用の確認を行う予定である。平成29年度は主に下記2点に関して進捗があった。(1)ProAGB1:AGB1-Venusを発現するシロイヌナズナの形質転換体の構築に成功し、スクリーニングにより、蛍光タンパク質を融合したGβサブユニットが、本来の機能を維持することを明らかにした。構築した植物体を用いて、細胞内局在のリアルタイム観察を開始した。(2)(1)で構築した植物体を用いて、プルダウンアッセイを行い、相互作用因子の候補となる複数のタンパク質の同定に成功した。これらの結果より、現在までのところ当初の計画に沿って順調に進展していると判断する。上述の項目(1)(2)に関しては、初年度に得られた結果の再現性を確認するとともに、得られた実験結果を考察し、その結果を説明するための検証実験の計画及び実行へと進めて行く。平成29年度は、(1)(2)に加え、当初の計画に沿って、シロイヌナズナの、三量体Gタンパク質サブユニットの一つであるGβの、ストレス応答時の役割を明らかにする。はじめに、ストレス応答時のGβの細胞内局在の詳細を明らかにし、さらに生化学的手法によりGβサブユニットのin planta相互作用因子を同定することを目指す。具体的には細胞内局在の観察結果と合わせ、用いる植物体のステージや組織を決定し、Venusタンパク質を融合したAGB1の相互因子を、GFP抗体を用いたプルダウンアッセイにより共沈降し、共沈降したタンパク質の同定を行う。
現職教員及びスクールカウンセラーに対し効果的なカウンセリング訓練法の開発的研究

本研究は、現職教員及びスクールカウンセラーに対し効果的なカウンセリング訓練法を開発することであった。平成12年度には、カウンセリングの効果的な訓練法について北米の研究を概観し(生徒指導と心の教育)、その訓練法を現職教員及びスクールカウンセラーを目指している大学院生に対して実施し、その効果を検証した(カウンセラーの反応と柔軟性の変化)。それらの結果から、学校現場で求められているカウンセリングとそれ以外のカウンセリングでは、その対象、方法、目標が異なり、訓練法もそれに応じて変える必要があることが明らかとなった。また、学校現場では、長期より短期、自身の変化より問題の解決、カウンセリングよりコンサルテーションが効果的であると考察した。そのため、平成13年度には、学校現場でのカウンセリングに焦点をあて、カウンセリング的対応がもっとも求められている養護教諭の訓練法を開発し、その効果を検証した(養護教諭の共感的理解を高める自己研修法)。次にスクールカウンセラーが配置されている中学校において、その利用方法、生徒や保護者のスクールカウンセラーに対して抱いているイメージ、スクールカウンセラーを利用するにあたっての妨げなどについて調査した(中学生とその保護者の相談に関する意識調査)。その結果、生徒も保護者もカウンセリングやスクールカウンセラーに対しておおむね肯定的なイメージを持っており、現段階では利用していなくても、将来的には利用したいと思っていることがわかった。また特に、他者に対して不信感を抱いている者ほど、スクールカウンセラーに相談したいと思っていることも明らかとなった。今後は、これらの結果を踏まえ、大学院におけるスクールカウンセラーの訓練方法を開発し、その効果を実証していく必要があると思われる。本研究の目的は、現職教員とスクールカウンセラー志望者に対するシステマティックな訓練方法を開発し、その効果を実証することであった。平成12年度は、これまでのスクールカウンセラー制度の現状とその活動についてその問題点を明らかにすることを中心に研究した。これまでの調査研究の結果を分析したところ、スクールカウンセラーの受け入れ体制と受け入れ窓口の担当教員の意識がスクールカウンセラーの活用に大きく影響していることが明らかとなった。同一のカウンセラーが配置されている学校間でも、その体制の違い、管理職の意識、担当教員の意識の違いによって活用方法の異なりが見られた。また、カウンセラー側の態度に関しても、学校内に設置されている相談室で相談を「待っている」ものと、積極的に「出ていく」形の関わりをしているものがあり、それぞれ異なった成果を上げていることが明らかとなった。問題点としては、継続的に同じ学校に勤務しているスクールカウンセラーの場合は、「待っている」対応が効果的であるが、拠点校方式などで、同じ学校には月に2回程度しか勤務できないカウンセラーの場合は、「出ていく」対応をし、しかもカウンセリングよりも教員へのコンサルテーションの方が効果的にであった。本年度のもう一つの目的であった、北米のスクールカウンセラーの訓練方法の視察では、3カ所の大学院を見学することができた。その結果、北米では、現在スクールカウンセラー不足や、スクールカウンセラーが対応する問題の質の違いが生じており、その対応に苦慮していることが明らかとなった。そのための一つの対応策として、これまで教員の資格を有し、教員経験が3年以上あるものがスクールカウンセラーの資格試験をうけることができるという制度が改定された州がいくつかあり、より専門的な臨床心理学、カウンセリング心理学の知識と技術を有したスクールカウンセラーの育成を行うようになった。これは現在の日本の状況と類似しており、北米でもスクールカウンセラーの養成に関する効果的な方法を模索しているところであることが明らかとなった。今後、北米の専門家との共同研究も考慮している。
カスパーゼ阻害剤による網膜色素変性症モデルにおける視細胞アポトーシスの制御

1.50日齢雌Sprague-Dawleyラットに60mg/kg N-methyl-N-nitrosourea(MNU)を単回腹腔内投与し、投与後Caspase-3阻害剤(4000 ng Ac-DEVD-CH0)を各の0時間と10時間に硝子体内、に注入した群(I群)と非注入群(II群)ならびにMNU非投与群(III群)を作製した。MNU投与後24時間にて屠殺した動物につきTUNEL法により視細胞のアポトーシスの比率を比較し、7日後に屠殺したものについては網膜厚ならびに網膜障害率(視細胞層が4層以下の障害網膜長/全網膜長×100)を形態形測により比較した。MNU投与後24時間の網膜におけるTUNEL法によるアポト-シス指数は、II群の網膜辺緑と後極部で各の79.5%と83.7%1であったが、I群では各の59.7%と71.8%にとどまっていた。なおIII群では各の0.5と04であった。MNU投与後7日目では総網膜厚はIII群の網膜辺緑と後極部で各の86μmと131μmであったが、I群では各の71μmと77μmであるのに対し、II群では38μmと75μmであった。また、視細胞厚に限ると、III群では各の45μmと64μmであったが、I群では各の31μmと9μmであるのに対し、II群ではともに2μmであった。また、網膜障害率はII群が98.5%であったのに対し、I群では54.4%にとどまった。2.rd遺伝子を保有するC3Hマウスに2mg Ac-DEVD-CHOを8日齢より隔日に腹腔内投与し、13日齢、17日齢の網膜を非投与群と比較した。13日齢セはAc-DEVD-CH0処置により有意に網膜厚の減少が抑制されたが、17日齢では有意の抑制はみなかった。3.Caspase-3阻害剤は上記モデルに対し部分的に網膜変性抑制能を呈した。1.実験モデルの作製と検索事項50日齢雌Sprague-Dawleyラットに60mg/kg N-methyl-N-nitrosourea(MNU)を単回腹腔内投与し、投与後Caspase-3阻害剤(4000ng Ac-DEVD-CHO)を各の0時間と10時間に硝子体内に注入した群(I群)と非注入群(II群)ならびにMNU非投与群(III群)を作製した。2.MNU投与後24時間の網膜変化TUNEL法によるアポトーシス指数は、II群の網膜辺緑と後極部で各の79.5%と83.7%であったが、I群では各の59.7%と71.8%にとどまっていた。なおIII群では各の0.5と0.4であった。3.MNU投与後7日目の網膜変化