hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
スペクトル幾何学

1. (2n-1)次元球面空間形Γ\S^<2n-1>でスピン構造を持つものを考える。これらのクラスのなかでDirac作用素で等スペクトルをもつが距離同型でない対については、C.Bar社は基本群がメタ巡回群であるようなクラスでそのような例を構成している。レンズ空間でDirac等スペクトルを持つかどうかをC.BarによるDirac作用素のスペクトルに附随したPoincare級数をもちいて調べたくさんの具体例を得た。たとえば3つの17次元のレンズ空間L_1=L(23:1,5,2,10,4,20,8,16,11)、L_2=L(23:1,5,2,10,4,20,8,17,11)、L_3=L(23:1,5,2,10,4,20,17,16,11)はDirac等スペクトルである。これらの例についてp-微分形式の空間に作用するラプラシアンのスペクトルの同固有値問題を考えた。たとえばL_1とL_2はO-isospectralであるが1-isospectralでない等の結果を得た。2.球面上の関数に作用するラプラシアンのスペクトラルゼータ関数をCarletti and Monti BragadinはHurewitzゼータ関数の無限和としての公式を与えた。この結果を球面上のp-微分形式上に作用するラプラシアンのスペクトラルゼータ関数の場合にも同様の公式を得ることができた。更に奇数次元の場合このスペクトラルゼータ関数が負の整数においてゼロになることを示した。また階数1の対称空間で球面、実射影空間以外の空間に対する関数に作用するラプラシアンのスペクトラルゼータ関数についてもHurewitzゼータ関数の無限和で表す公式を得た。また極における留数を求めた。3.無限グラフのグリーン核と熱核の一般的な評価を与え,具体的な無限正則グラフのグリーン核のシャープな評価を与えた。スピン構造を持つコンパクト連結リーマン多様体上のDirac作用素に対する等スペクトル問題を考え新たな進展を得た。(2n-1)次元球面空間形Γ\S^<2n-1>でスピン構造を持つものを考える。これらのクラスのなかでDirac作用素で等スペクトルをもつが距離同型でない対を構成する問題を考えた。C.Barは基本群がメタ巡回群であるようなクラスでそのような例を構成している。qを11以上の素数、q_0=(q-1)/2、L_0(q,n)をレンズ空間{L{q:p_1,p_2,・・・,p_n)|p_i≠±p_j(mod q)(i≠j)}の距離同型類とする。このとき(q-6)次元のレンズ空間の族L_0(q_1q_0-2))に属するレンズ空間達はラプラス作用素で等スペクトルであるが距離同型でない例となっていた。これらのクラスのレンズ空間でDirac等スペクトルを持つかどうかをC.BarによるDirac作用素のスペクトルに附随したPoincare級数をもちいて調べた。q<30のとき3つの17次元のレンズ空間L(23:1,5,2,10,4,20,8,16,11)、L(23:1,5,2,10,4,20,8,17,11)、L(23:1,5,2,10,4,20,17,16,11)はDirac等スペクトルであることが分かっている。

本年度の進展の結果23以上で103以下の素数であるqのなかでq≡3(mod 4)を満たすものにたいしL_0(q,q_0-2)に属するレンズ空間でDirac等スペクトルであって距離同型でないものが存在することをみつけた。またq≡1(mod 4)なるqにたいしてはDirac等スペクトルをもつレンズ空間の例は見つけられなかった。これより次のような予想をたててその解決に努めている。qを23以上の素数でq≡3(mod 4)を満たすときL_0(q,q_0-2)のなかにはDirac等スペクトルで距離同型でない対が存在する。1.(2n-1)次元球面空間形Γ\S^<2n-1>でスピン構造を持つものを考える。これらのクラスのなかでDirac作用素で等スペクトルをもつが距離同型でない対については、C.Barは基本群がメタ巡回群であるようなクラスでそのような例を構成している。qを11以上の素数、qo=(q-1)\2、ιLo(q,n)をレンズ空間{L(q:p1,p2,・・・,Pn)|pi〓±pj(mod q)(i≠j)}の距離同型類とする。このとき(q-6)次元のレンズ空間の族Lo(q,qo-2))に属するレンズ空間達はラプラス作用素で等スペクトルであるが距離同型でない例となっていた。これらのクラスのレンズ空間でDirac等スペクトルを持つかどうかをC.BarによるDirac作用素のスペクトルに附随したPoincare級数をもちいて調べたくさんの具体例をえていた。たとえば3つの17次元のレンズ空間L_1=L(23:1,5,2,10,4,20,8,16,11)、L_2=L(23:1,5,2,10,4,20,8,17,11)、L_3=L(23:1,5,2,10,4,20,17,16,11)はDirac等スペクトルである。これらの例についてp-微分形式の空間に作用するラプラシアンのスペクトルの同固有値問題を考えた。たとえばL_1とL_2は0-isospectralであるが1-isospectralでない等の結果を得た。2.球面上の関数に作用するラプラシアンのスペクトラルゼータ関数をCarletti and Monti BragadinはHure-witzゼータ関数の無限和としての公式を得た。この結果を球面上のp-微分形式上に作用するラプラシアンのスペクトラルゼータ関数の場合にも同様の公式を得ることができた。また階数1の対称空間で球面、実射影空間以外の空間に対する関数に作用するラプラシアンのスペクトラルゼータ関数についてもHurewitzゼータ関数の無限和で表す公式を得た。
哺乳動物ミトコンドリアＤＮＡの塩基修飾の解明～その生物学的意義の理解にむけて

細胞小器官ミトコンドリアは別の独自のゲノム、ミトコンドリアDNA(mtDNA)を持つ。mtDNAに生じた塩基置換や部分欠失、コピー数低下といった異常がミトコンドリア病の原因となったり、様々な疾患に関与している。それ故、mtDNA異常が関わる疾患を分子レベルで把握し、新しい治療法を創出していくためにmtDNAのふるまいをよりよく理解していくことが重要である。哺乳動物細胞において核DNAの構成塩基の1つであるシトシンのメチル化はエピジェネティックな遺伝子発現制御において重要な役割を果たしており、初期発生や細胞の分化状態の維持に必須である。一方で、mtDNAのメチル化の研究は大きくたち遅れていたが、mtDNAはメチル化されているという報告が近年相次いでなされ、ミトコンドリア研究のhot topicsの1つとなっている。しかしながら、これらの報告の中には互いに異なる内容のデータを示しているが見受けられ、さらにはmtDNAはメチル化を受けていないと提唱する報告もあり、非常に混迷した状況が続いている。mtDNAがメチル化修飾を受けるか否かはmtDNAの適切な維持や遺伝子発現を考える上で重要かつ根源的な生物学の課題であり、その異常がミトコンドリア病をはじめとした疾患に関連する可能性も秘めている。そこで我々はバイサルファイトシーケンシング、メチル化シトシン感受性酵素、核酸質量分析という解析手法を駆使して、マウス組織、胚性幹細胞培養株のmtDNAの徹底的な解析を行った。これらの解析からmtDNAにはユニバーサルに生理的役割を持つようなレベルでの5-メチルシトシンは認められないことを示唆する結果を得た。加えて、正確なメチル化解析を困難にするmtDNAに特有の問題点を観察した。これらの成果によってシトシンメチル化修飾についてのmtDNAの真の姿の一端を明らかにしつつあるのではと考えている。我々はバイサルファイトシーケンシング法、メチル化シトシン感受性酵素McrBCによる切断アッセイ法、定量的核酸質量分析法という、3つの異なる原理に基づいた5-メチルシトシン(5mC)検出方法を用いて、正常マウスの肝臓と脳、そして野生型ES細胞株のmtDNAを徹底的に解析した。バイサルファイトシーケンシング法では有意に5mCは検出されず、5mCが特異的に存在するmtDNA内の領域や配列特異性が特定されなかった。そして、McrBCによってmtDNAは分解されかったことから、mtDNAに5mCは存在していない、あるいはたとえ存在していたとしても非常に微量であることが分かった。さらに、高純度に精製したmtDNAを質量分析法で解析したところ、やはり5mCはほとんど検出されなかったが、定量的には未修飾のシトシンに対しておよそ0.4%というごく微量ではあるが5mCが検出された。3つの実験の結果を総合的に解釈して、ここまでの研究で解析したサンプル(マウス組織、ES培養細胞株)においては、mtDNAがメチル化修飾を受けていない、あるいは、少なくとも生物学的役割を果たすようなレベルで5mCは存在していないと結論し報告した。ここまでの結果から、質量分析で検出した5mCに生理的意味があるのかという点が本研究における次の論点であると考え至った。そして質量分析で検出した極微量の5mCがmtDNA複製の過程で取り込まれているという新しい可能性を想起し、この事象を検討する実験を遂行している。また、5mCが環状DNA(mtDNAは環状DNA)に対するmtDNA結合タンパク質の結合力やDNAのトポロジーを変化させる特性に影響を与えるかどうかを検討している。(1)前項目で提示した正常mtDNA複製における5mCの取り込みの可能性についての定量的な検討を進めて結論を得たいと考えている。(2)前項目で論じたように、DNAメチル化修飾というものは通常の組織や通常条件で培養した細胞のmtDNAに対しては機能していないとみなしてよいと考えることができる。しかしながら、核DNAをメチル化するDNAメチル化酵素が一部ミトコンドリアにも局在することを示唆する報告がされており、mtDNAの転写や複製を短期間急激に不活性化させるような状態が必要なときにmtDNAが酵素的に有意にメチル化される可能性は否定できない。そこで、特殊な条件下や特殊な状況の細胞等を用いてmtDNAメチル化の有無の解析を進めていく予定である。そして、mtDNAがメチル化されるような事象をとらえることができたら、その生理的意義や機能を追求していく予定である。(3)加えて、mtDNA維持機構という課題をより大きな視点からとらえた実験も行いたいと考えている。細胞小器官ミトコンドリアは独自のゲノム、ミトコンドリアDNA(mtDNA)を持つ。哺乳動物mtDNAは約16キロ塩基対で環状構造をとり、一細胞に数百から数千コピー存在する。mtDNAの正常な機能発現はエネルギー産生や代謝に必須であり、mtDNAに生じる塩基置換変異やコピー数低下などの異常はミトコンドリア病をはじめとする様々な疾患に関与している。哺乳動物細胞において核ゲノムDNAの構成塩基の一つであるシトシンのメチル化はエピジェネティックな遺伝子発現制御において重要な役割を果たしている。一方で、mtDNAのメチル化の研究は核DNAのそれに比べ大きくたち遅れていたが、最近、mtDNAはメチル化されているという報告が相次いでなされ、また、DNAメチル化酵素が核だけでなくミトコンドリアにも存在することを示唆する報告もされている。しかしながら一方ではmtDNAはメチル化を受けていないとする報告もあり、mtDNAがメチル化を受けているのかはいまだに結論が出ていない状況である。

mtDNAがメチル化修飾を受けるか否かはmtDNAのコピー数維持や遺伝子発現メカニズムを考える上で極めて重要な生物学的課題であり、さらにはその異常が疾患に関連する可能性も秘めている。そこで、mtDNAのメチル化修飾の有無を明らかにするため、mtDNAをできるだけ高純度に精製する方法を確立し、バイサルファイトシーケンシング法、メチル化シトシン特異的制限酵素、核酸質量分析という検出原理の異なる3種類の解析方法を駆使してこれまでにない徹底的なmtDNAの解析を行った。これらの解析結果から、マウス組織やES細胞のmtDNAにおいては、生理的役割を持つようなレベルでの5-メチルシトシンは認められないことを示唆する結果を得た。我々は正常マウスの肝臓と脳、そしてE14 ES細胞のmtDNAを徹底的に解析した。まず、これらの材料からミトコンドリアを高純度に調製する方法を確立し、ミトコンドリアに含まれる核酸を精製した。そして、mtDNAをバイサルファイトシーケンシングにより解析した。加えて、バイサルファイトシーケンシングにおいては、PCRで合成したmtDNAをネガティブコントロールとして用いることで、より正確な結果を得られるように解析の系を工夫した。そして、次世代シーケンサーを用いて解析を行ったところ、mtDNA内の特定の領域に5-メチルシトシンが存在しているようなことはないということを強く示唆する結果を得た。次に、メチル化シトシン特異的制限酵素によって切断されるかどうかを基準としたmtDNA切断アッセイの系をミトコンドリア核酸を用いて確立し、mtDNAをサザンハイブリダイゼーションで検出することで切断を評価したところ、mtDNAは有意に切断されなかった。さらに、できる限り高純度に精製したマウス組織由来のmtDNAを全分解して核酸質量分析を行ったところ、未修飾のシトシンに対して5-メチルシトシンはわずか0.4%程度と見積もられる結果を得た。これらの結果を総合的に解釈して、mtDNAの特定の位置に5-メチルシトシンが存在しているようなことはなく、また、たとえ仮にメチル化が起きていたとしても、mtDNA内の5-メチルシトシンの存在量は非常に低レベルであると結論した。これらの結果から、少なくとも解析を行った組織や細胞のmtDNAに関しては、生理的役割を持つようなレベルでの5-メチルシトシンは認められないことを示唆することができた。細胞小器官ミトコンドリアは別の独自のゲノム、ミトコンドリアDNA(mtDNA)を持つ。mtDNAに生じた塩基置換や部分欠失、コピー数低下といった異常がミトコンドリア病の原因となったり、様々な疾患に関与している。それ故、mtDNA異常が関わる疾患を分子レベルで把握し、新しい治療法を創出していくためにmtDNAのふるまいをよりよく理解していくことが重要である。哺乳動物細胞において核DNAの構成塩基の1つであるシトシンのメチル化はエピジェネティックな遺伝子発現制御において重要な役割を果たしており、初期発生や細胞の分化状態の維持に必須である。
出芽酵母を用いたＰａｒｋｉｎーＰＩＮＫ１誘導型マイトファジーの分子機構の解明

真核生物では異常ミトコンドリアをマイトファジーで選択的に除去する仕組みがあり,哺乳動物ではパーキンソン病の原因遺伝子産物のParkinとPINK1がこの仕組みに関わる。Parkin-PINK1が存在しない出芽酵母細胞内で,PINK1をミトコンドリア外膜に人為的に局在化させたところ,サイトゾルに発現させたParkinはPINK1のキナーゼ活性依存的にミトコンドリア外膜にリクルートされ,動物細胞と同様に,リン酸化,ユビキチン化をされた。したがって,Parkin-PINK1を人為的に発現させた出芽酵母はParkin-PINK1系の機能解析を行うことができるよい実験系になると考えられる。すなわちミトコンドリアが正常に機能している場合はPINK1はサイトゾルで分解され,Parkinはサイトゾルに局在するが,ミトコンドリア機能が低下して膜電位が減少すると,PINK1はミトコンドリア外膜に局在し,Parkinがミトコンドリアにリクルートされる。出芽酵母にはParkin-PINK1が存在しないので,哺乳動物Parkin-PINK1を人為的に発現させることにより,PINK1によるParkinのミトコンドリアへのリクルート,リン酸化,ユビキチン化等に必要な最小限のシステムを解明できると考えた。出芽酵母で恒常的にPINK1をミトコンドリア外膜に局在化させた(Om45との融合タンパク質として発現させた)ところ,膜電位の有無と関係なく,サイトゾルに発現したPink1がミトコンドリアにリクルートされた。このリクルートにはPINK1のキナーゼ活性が必要であった。さらにミトコンドリアにリクルートされたParkinの一部は,哺乳動物細胞の場合と同様,PINK1依存的にリン酸化とユビキチン化が起こることを確認した。したがって,出芽酵母内でPINK1とParkinの機能の一部を再構成することに成功した。さらに,PINK1とParkinの共発現は,哺乳動物細胞におけるマイトファジーが起こるかわりに,酵母の増殖阻害を引き起こし,特に呼吸培地での増殖阻害はPINK1のキナーゼ活性に依存していた。このことから,Parkin-PINK1を人為的に発現させた出芽酵母はParkin-PINK1系の機能解析(Parkin-PINK1以外に必要な因子の検索を行うなど)験を行うことができるよい実験系になると考えられる。ガラクトースによる発現誘導型プロモーター(GAL1プロモーター)を用いて,酵母細胞内でOM45-PINK1(PINK1に酵母外膜挿入シグナルを付加した融合タンパク質)の発現を誘導できる株を作製した。OM45-PINK1は,予想通り,ミトコンドリア外膜に安定に局在した。OM45-PINK1の発現自体が酵母の増殖にやや阻害効果を示し,ミトコンドリアの形態異常(凝集)と前駆体の若干の蓄積(おそらくミトコンドリア外膜のトランスロケータTOM40複合体の機能阻害が生じている)を引き起こした。以上の効果はPINK1のキナーゼ活性に依存しなかった(キナーゼ活性の欠失変異体でも同様の効果が観察された)。OM45-PINK1を発現せずにParkinを発現すると,Parkinはサイトゾルに一様に分布した。OM45-PINK1発現時にParkinを共発現すると,Parkinはミトコンドリアに局在し,この局在はPINK1のキナーゼ活性に依存した。またOM45-PINK1とParkinを共発現すると,酵母細胞の増殖は著しく阻害され,この阻害はPINK1のキナーゼ活性に依存した。しかし前駆体の蓄積やミトコンドリアの凝集はParkinの共発現の有無により大きく変わらなかった。以上の結果は,哺乳動物におけるPINK1によるParkinのミトコンドリアへのリクルートがこの二つの因子だけで,かつPINK1のリン酸化に依存して酵母細胞でも再現できることを示しており,PINK1-Parkinの機能を解析する上で有用な系であることが明らかになった。今後は,なぜPINK1-Parkinの共発現が酵母細胞の増殖を強く阻害するのかを解明する必要がある。当初の目的であった,酵母細胞内でOM45-PINK1とParkinを共発現することで,ParkinをPINK1のキナーゼ活性依存的にミトコンドリアへリクルートする系を確立すること,それに伴う基本的なキャラクタリゼーション(細胞増殖,ミトコンドリア形態,膜電位,前駆体の蓄積など)を行うことができた。酵母細胞にはPINK1,Parkinが存在しないので,逆にPINK1によるParkinのミトコンドリアへのリクルートがPINK1以外の因子を必要としないことを証明できたことになる。

一方でなぜ酵母細胞内でPINK1がParkinをミトコンドリアにリクルートすると細胞増殖が強く阻害されるかについては大きな謎である。この解決が今後の課題となる。PINK1によるParkinのミトコンドリアへのリクルートがPINK1のキナーゼ活性に依存することを見いだしたが,PINK1の自己リン酸化,ParkinのPINK1依存性リン酸化などは確認できていない。Phos-tagを用いてこれらのリン酸化を確認することが重要である。また,OM45-PINK1とそのキナーゼ活性欠損体を発現したときのミトコンドリアタンパク質のリン酸化パターンの変化を調べることで,PINK1,Parkin以外のPINK1によるリン酸化のターゲットを検索したい。哺乳動物細胞では、Parkinによるユビキチン化のターゲットのひとつとしてMfn1とMfn2が同定されている。そこで、Mfnの酵母ホモログであるFzo1がParkinによるユビキチン化のターゲットとなっているかを検討する。またOM45-PINK1とそのE3活性欠損体を発現したときのミトコンドリアタンパク質のユビキチン化パターンの変化を調べる(プロテアソームを阻害しておく)ことで,PINK1によるユビキチン化のターゲットを検索する。なぜPINK1-Parkinの共発現が酵母細胞の増殖を強く阻害するのかを解明するために,可能性の一つであるFe-Sクラスター合成関係経路の阻害が起こっているかどうかを検討する。経費については,主として試薬類とプラスチック器具の購入に充てる。すなわち試薬はPCR酵素,制限酵素,DNA精製キット,DNAシーケンスキットおよびオリゴDNA等の分子生物学実験に使用する試薬類,Yeast Extractなど酵母培養試薬類,SDS-PAGEやイムノブロッティングのためのゲル,PVDFメンブレン,2次抗体などの生化学実験に使用する試薬類である。プラスチック器具は,培養用の滅菌シャーレ,滅菌チューブのほか,培養用ディスポーザブルピペット,マイクロピペット用チップ,エッペンドルフチューブ,PCR用チューブとプレート,ろ過滅菌ユニットなどである。また「その他」として,成果発信のための論文投稿料も必要である。
放射性核種をトレーサーとした超微小粒子及び微小粒子の物質交換に関する測定装置開発

深刻化する東アジアからの越境大気汚染の中でも、エアロゾルが植物や人間の健康に与える影響はまだ十分に解明されていない。大気に含まれる様々な物質が地表面に運ばれる過程は、主に降雨による湿性沈着と降雨によらない乾性沈着に大別される。乾性沈着過程は湿性沈着よりも複雑であるが、その超微小粒子に関するデータはほとんどない。本研究は、ラドン壊変生成物をトレーサーとした超微小粒子の乾性沈着フラックスを測定する装置の開発を行った。本研究では、大気環境中における超微小粒子及び微小粒子の大気-陸域の物質交換を解明するための手法として、ラドン(Rn-222)・トロン(Rn-220)壊変生成物をトレーサーとした超微小粒子及び微小粒子の大気-陸域の物質交換に関する測定装置を開発することを目的とする。この測定手法は簡易渦相関(REA)法であり、風速の鉛直成分の上向きと下向きに分けてそれぞれ流量を一定にしてサンプリングする方法に基づいている。これまで得られた研究成果を以下にまとめる。1)放射性エアロゾルの発生・測定システムの構築:ラドン・トロン壊変生成物の測定法の検討やREA法システムの評価を行うため、放医研ラドンチェンバー(約25m^3)を用いてラドン壊変生成物付着エアロゾルの発生・測定システムの構築を行った。ラドンチェンバー内では温度、湿度、ラドン濃度を一定に保つことができ、一般的に見られるラドン壊変生成物の粒径範囲(50-300nm)のエアロゾルを発生させることができる。また、トロン壊変生成物に関しては、放医研が開発したトロンチェンバー(150L)を用いて、トロン壊変生成物付着エアロゾルの発生・測定システムの構築を行った。2)ラドン・トロン壊変生成物測定法の検討:ラドン・トロン壊変生成物の捕集材としてガラス繊維フィルターを用いた。ラドン・トロン壊変生成物付着エアロゾルを連続かつ安定に発生することができた。ラドン壊変生成物濃度の測定精度は捕集流量に依存したが、相対湿度、ラドン濃度、エアロゾルの粒径及び個数濃度に関してはほとんど影響しない(約20%以下)ことが確認された。当該年度では、簡易渦集積(REA)法による測定装置の構築を行った。REA法は、風速の鉛直成分の符号に付随して高速動作電磁バルブでOn-off動作制御を行い、サンプルの捕集、分析を行う。開発装置は、センサー部、サンプリング部、計測部、演算部から構成されている。センサー部では、風速の鉛直成分を三次元超音波風速計により測定する。サンプリング部では、対象物質は超微小粒子であるためメタルワーヤースクリーンを用いる。捕集時間とサンプリング流量をそれぞれ30分と15L/minとし、サンプリングは手動で行う。ここで、本研究でのサンプリング条件では理論的には50%透過率の粒径は4.3nmで、1nmの粒子の捕集効率は99%である。また、トレーサーとしてラドン(Rn-222)壊変生成物を用いるため、計測部ではラドン壊変生成物からのアルファ線をZnS(Ag)シンチレーションカウンタにより計数する。ここで、アルファ線の計数を1分間隔で60分間行う。演算部では0.1m/sの閾値を設定し、風速の鉛直成分が閾値より大きい場合は風が上向き、それより小さい場合は下向きとし、二方電磁バブルに信号を送りそれぞれの方向に対するサンプルを捕集した。フィールドによる動作チェックでは、風速の鉛直成分の符号に付随したサンプリングを行うことが可能であることを確認し、フラックスの計算に用いる測定値(風の上下方向におけるエアロゾル濃度差や鉛直風速の標準偏差等)を得ることができた。ここで、気象条件によっては大気中ラドン壊変生成物濃度が検出下限値以下になり、今後の課題として測定精度に寄与する捕集量やスクリーンのブランク値等についてさらなる検討が必要であった。粒径が数nmの大気エアロゾル粒子の乾性沈着に関する知見はほとんどないため、本研究では超微小粒子の大気-陸域の物質交換に関する環境動態解析に必要なデータの取得が可能になり、その研究成果は大気科学や環境科学に重要な知見を提供することができる。
自己組織化ナノテクスチャを利用した低摩擦潤滑システムの創成

機械システムの可動部では摩擦損失を低減させるために潤滑油が用いられている。潤滑油は、主成分である基油と少量の添加剤から成る。潤滑油が摩擦損失を低減させるのは、摩擦面に潤滑膜を形成させて金属面同士の直接接触を妨げるためである。潤滑膜には、基油が流体力学的に作用して形成させる流体膜と、添加剤が金属表面に優先的に吸着して自発的に形成させる自己組織化膜がある。本研究では、自己組織化膜によるnmオーダーの凹凸(自己組織化ナノテクスチャ)と基油との相互作用を潤滑機能として応用した低摩擦な潤滑システムの創成を目的としている。研究初年度である本年度では、当初の予定に従って、高精度膜厚分布計測システムを構築した。同システムでは、鋼球とガラス平板の点接触面を対象にライン分光像を取得して膜厚プロファイルを得る従来の計測法に、鋼球と平板を純転がりにて転がり接触させて、連続的に膜厚プロファイルを取得することで、膜厚の高精度かつ空間分布としての計測を可能とした。本手法では、転がり運動をともなうため、転がり接触による自己組織化膜の形成過程をin-situにてモニタすることができる。本年度の後半では、代表的な添加剤として直鎖脂肪酸のステアリン酸、基油としてヘキサデカンを用いて、自己組織化膜の形成過程を調べた。その結果、転がり接触を繰り返し加え続けることで自己組織化膜の膜厚が増大する様子を観察することができた。その膜の成長過程は、空間的に均一な変化ではなく、空間分布があることを明らかにした。実験装置の開発を完了して、添加剤が形成する自己組織化膜を対象とした膜厚分布計測に着手した。これにより、本研究は概ね順調に進展していると判断する。自己組織化膜の膜厚分布計測システムの開発が完了したことから、自己組織化膜の凹凸形状や形状変化(膜の成長過程)に対する添加剤成分の影響を調査する。また、自己組織化膜と基油との相互作用による潤滑効果についても併せて調査する。
毛髪真菌症における真菌感染様式と毛器官細胞動態の研究

モルモット有毛部実験白癬の病巣は初め炎症所見を示し,脱毛したが,21日目には改善し,以後,発毛して治癒した。組織学的に,感染菌要素は初め表皮角層に,続いて毛孔から毛皮質角化帯まで到達し,また,表皮および毛漏斗上皮は著明な角化亢進を示し,付近の真皮には小円形細胞浸潤を認めた。21日目までに大部分の毛器官は退行し,菌要素は毛とともに体外へ脱落した。BrdU染色によるS期細胞数の割合は,表皮では真菌感染後に著明に増加して治癒の段階まで亢進するが,毛器官では21日目前に一時的に亢進するものの,直後に低下した。経過を通じて,真皮の細胞浸潤は真皮上層に限られた。組織所見からは,この白癬モデルの自然治癒の機序に,従来説のような表皮ターンオーバー亢進現象のみでなく,成長期毛器官が一斉に退行することも重要であるとみられた。BrdU染色の所見から,真菌の表皮角層への感染により表皮細胞の増殖亢進が生じ,また,毛器官角化帯進入により毛母細胞の一時的増殖亢進と続く増殖停止が起こされることが理解された。表皮の変化には,表皮直下の細胞浸潤の影響も考えられたが,毛母や毛球周囲には細胞浸潤は乏しく,角化帯に進入している真菌の放出する何らかの因子が毛母の細胞動態に影響していると思われた。形態学的に各種白癬菌によるヒト毛器官の白癬(Arch Dermatol Res 283 : 233, 1991)と比較すると,毛皮質角化帯までの菌の進入や毛球周囲に細胞浸潤を認めないことなどは同様であった。白癬菌の増殖態度や組織障害性が同様と仮定すると,モルモット体毛とヒト毛髪における毛器官の構造上の相異,それは単なる毛球の大きさや深さの相異かもしれない,あるいは毛球部における細胞動態の相異,さらには毛周期の相異などにより,前者では菌進入により毛球の退縮が惹起されるが,後者ではなかなか起こらないものと推測された。組織学的に,感染菌要素は初め表皮角層に,続いて毛孔から毛皮質角化帯まで到達し,また,表皮および毛漏斗上皮は著名な角化亢進を示し、付近の真皮には小円形細胞浸潤を認めた。21日目までに大部分の毛器官は退行し,菌要素は毛とともに体外に脱落した。BrdU染色によるS期細胞数の割合は,表皮では真菌感染後に著名に増加して治癒の段階まで亢進するが,毛器官では21日目前に一時的に亢進するものの,直後に低下した。

BrdU染色の所見から,真菌の表皮角層への感染により表皮細胞の増殖亢進が生じ,また,毛器官角化帯侵入により毛母細胞の一時的増殖亢進と続く増殖停止が起こされることが理解された。表皮の変化には,表皮直下の細胞浸潤の影響も考えられたが,毛母や毛球周囲には細胞浸潤は乏しく,角化帯に侵入している真菌の放出する何らかの因子が毛母の細胞動態に影響していると思われた。モルモット有毛部実験白癬の病巣は初め炎症所見を示し,脱毛したが,21日目には改善し,以後,発毛して治癒した。組織学的に,感染菌要素は初め表皮角層に,続いて毛孔から毛皮質角化帯までに到達し,また,表皮および毛漏斗上皮は著名な角化亢進を示し,付近の真皮には小円形細胞浸潤を認めた。21日目までに大部分の毛器官は退行し,菌要素は毛とともに対外へ脱落した。BrdU染色によるS期細胞数の割合は,表皮では真菌感染後に著名に増加して治癒の段階まで亢進するが,毛器官では21日目前に一時的に亢進するものの,直後に低下した。経過を通じて,真皮の細胞浸潤は真皮上層に限られた。組織所見からは,この白癬モデルの自然治癒の機序に,従来説のような表皮ターンオーバー亢進現象のみでなく,成長期毛器官が一斉に退行することも重要であるとみられた。形態学的に各種白癬菌によるヒト毛器官の白癬(Arch Dermatol Res 283:233,1991)と比較すると,毛皮質角化帯までの菌の侵入や毛球周囲に細胞浸潤を認めないことなどは同様であった。白癬菌の増殖態度や組織障害性が同様と仮定すると,モルモット体毛とヒト毛髪における毛器官の構造上の相異,それは単なる毛球の大きさや深さの相異かもしれない,あるいは毛球部における細胞動態の相異,さらには毛周期の相異などにより,前者では菌侵入により毛球の退縮が惹起されるが,後者ではなかなか起こらないものと推測された。
各種歯周病原細菌内毒素の歯肉および領域リンパ節への侵入に関する免疫組織学的研究

歯周炎関連細菌として知られるActinobacillus actinomycetemcomitansとPorphyromonas gingivalisのリポ多糖(LPS)による歯周組織破壊を病理組織学的に検索した。すなわちラットの歯肉溝に24時間ごとに30分間各細菌のLPSを滴下した。そして1、3、7、10、15日滴下後にラットを屠殺し、病理組織学的に観察した。またマウス腹腔マクロファジ-によるinterleukin-1 β(IL-1β)の産生誘導を、in vitroで検索した。その結果、両LPSともに腹腔マクロファージからのIL-1 βの産生を誘導したが、Actinobacillus actinomycetemcomitans由来LPSによる誘導はPorphyromonas gingivalisのそれより強かった。また各LPS滴下群においてはともにPBS滴下群よりも強い炎症が接合上皮ならびに上皮下結合組織に観察され、それは経日的に拡大していた。とくにActinobacillus actinomycetemcomitans由来LPSはPorphyromonas gingivalisのそれより強い傾向があった。これらの結果から、Actinobacillus actinomycetemcomitans由来LPSはPorphyromonas gingivalisよりも強い免疫学的活性を有し、これが歯周組織破壊になんらかの影響をおよぼしている可能性が示唆された。そして接合上皮と結合組織の変性や壊死が歯肉と歯根との結合を破壊し、これを繰り返すことで歯周ポケットが形成されるシステムが推測された。歯周病原性細菌のうちとくに注目されている、Actinobacillus actinomycetemcomitansおよびPorphyromonasgingivalis由来の内毒素を、温Phenol-water法にて抽出し、さらにpronaseおよびnuclease処理して精製した。これをラット歯肉溝に24時間毎に1時間連続的に滴下し、接合上皮ならびに歯肉結合組織の病理組織学的変化を経時的に観察した。また精製Escherichia coli由来内毒素を対照として使用した。その結果、以下のような所見が得られた。まず1回滴下後には、3群ともに若干の炎症性細胞浸潤を結合上皮内あるいは上皮直下結合組織に認めるのみであった。この炎症性細胞浸潤は徐々に増加してはいたが、急速な拡大は観察されなかった。そしてA.actinomycetemcomitansならびにE.coli内毒素滴下群において、3回滴下後から上皮脚の結合組織への延長が認められた。この根尖側への上皮脚の延長は経時的に長くなっていた。さらに10回滴下後では、とくにA.actinomycetemcomitans滴下群において上皮脚部の細胞の壊死ならびに離断が生じ、あたかも歯周ポケットの形成を思わせる所見が得られた。これに対してP.gingivalis由来の内毒素滴下群では、炎症性細胞浸潤に関しては前述の2群と類似していたが、上皮脚の延長や破壊は顕著でなかった。以上の結果より、A.actinomycetemcomitans由来の内毒素はP.gingivalis由来内毒素よりも接合上皮細胞に対して破壊的に働くことが推測された。今後は超微形態的所見も加えて、細菌内毒素による歯周組織破壊の機序を追及する予定である。またマウス腹腔マクロファージによるinterleukin-1 β(IL-1 β)の産生誘導を、in vitroで検索した。

その結果、両LPSともに腹腔マクロファージからのIL-1 βの産生を誘導したが、Actinobacillus actinomycetemcomitans由来LPSによる誘導はPorphyromonas gingivalisのそれより強かった。また各LPS滴下群においてはともにPBS滴下群よりも強い炎症が接合上皮ならびに上皮下結合組織に観察され、それは経日的に拡大していた。とくにActinobacillus actinomycetemcomitans由来LPSはPorphyromonas gingivalisよりも強い傾向があった。これらの結果から、Actinobacillus actinomycetemcomitans由来LPSはPorhyromonas gingivalisよりも強い免疫学的活性を有し、これが歯周組織破壊になんらかの影響をおよぼしている可能性が示唆された。そして接合上皮と結合組織の変性や懐死が歯肉と歯根との結合を破壊し、これを繰り返すことで歯周ポケットが形成されるシステムが推測された。
潜在記憶と自動的ステレオタイピング―認知社会心理学的アプローチ

3種類の顔の表情(嬉しい/悲しい/どちらでもない)を潜在的に呈示することにより、調査対象者のムード、好感度、再認にどのような影響を与えるかどうかを検討する。また、好意度と再認において、再度呈示された時に、顔の表情が異なっていた場合どのように違いがあるのかも明らかにしたい。これらの結果を比較することにより、感情が潜在的にプライミングされた記憶と顕在記憶を別々に影響を及ぼすメカニズムを解明できることが予想される。さらに、日本人とアメリカ人の調査結果を比較し、顔の表情と記憶の測度(好感度,再認)との相互の関連を詳しく見た。調査対象者として、のべ日本人計437名;アメリカ人34名に対して調査を行った結果、以下のことがわかった。日本人の結果では、(1)前に見たことがある顔をより好きであると判断し、単純接触仮説が顔の認知でも検証された。(2)呈示された顔の表情によって、人間の感情状態を変化させることが、特に悲しそうな顔の表情呈示で大きく見られた。(3)顔の表情の呈示で、100%同じ表情を見せた場合より、20%他の表情を混合させた場合のほうが、より感情の変化をもたらすことがわかった。(4)悲しい表情よりも、うれしい表情の顔のほうが、より好感度が高いことが検証された。(5)悲しい表情とうれしい表情の顔では、再認においては差が見られなかった。日本人、アメリカ人の結果の比較においては、ともに悲しい表情が、特に抑うつのムードを有意に増加させたが、嬉しい表情は有意な変化をもたらさなかった。日本人、アメリカ人とも、嬉しい顔の表情を有意により好きだと評定し、悲しい顔の表情を有意により嫌いであると評定したが、表情の違いによる再認記憶への影響は見られなかった。以上、日本人とアメリカ人では、顔の表情では、嬉しいよりも悲しい顔の表情の方が、ムードの変化に大きく影響を与えることが明らかにされた。また、顔の表情が、再認ではなく好意度のみに影響を及ぼしたことから、好意と再認のメカニズムは少なくとも一部は、異なったものであることが示唆された。1.目的顔の感情の違いによる表情(楽しい表情/悲しい表情/どちらでもない表情)を呈示することにより、調査対象者の(a)感情状態、(b)好き嫌いの判断、(c)再認(記憶)の判断、それぞれにどのような影響を及ぼすかをみた。さらに、再度の呈示する場合に。顔の表情を変えた場合、好き嫌いの判断と再認の判断において、なんらかの違いがみられるかどうかを検討する。2.方法調査対象者:実験1は、都内私立大学大学生、女性137名。実験2は、都内3つの異なる大学の大学生、男性57名;女性59名。授業内で、実験を質問紙法にて行った。調査内容:調査内容は、大きく以下4つの課題に分けられる。(1)顔の写真の呈示課題:顔の写真の呈示した。その際,各実験とも対象者を3つの群に分けた。実験1:(1)100%うれしい顔の表情群(2)100%悲しい顔の表情群、(3)100%コントロール群。

実験2:(1)80%うれしい顔と20%悲しい顔の混合群、(2)80%悲しい顔と20%うれしい顔の混合群、(3)80%普通の顔と、20%うれしい顔と悲しい顔の表情の混合群。(2)7点尺度の感情状態(ポジティブかネガティブか)を識別する尺度。(3)好き嫌い判断、7点尺度。(4)再認識判断、7点尺度。3.結果は以下にまとめられる。(1)前に見たことがある顔をより好きであると判断し、単純接触仮説が顔の認知でも検証された。(2)呈示された顔の表情によって、人間の感情状態を変化させることが、特に悲しそうな顔の表情呈示で大きく見られた。(3)顔の表情の呈示で、100%同じ表情を見せた場合より、20%他の表情を混合させた場合のほうが、より感情の変化をもたらすことがわかった。(4)悲しい表情よりも、うれしい表情の顔のほうが、より好感度が高いことが検証された。(5)悲しい表情とうれしい表情の顔では、再認においては差が見られなかった。1.目的3種類の顔の表情(嬉しい/悲しい/どちらでもない)を潜在的に呈示することにより、調査対象者のムード、好感度、再認にどのような影響を与えるかどうかを検討する。さらに、好意度と再認において、再度呈示された時に、顔の表情が異なっていた場合どのように違いがあるのかも明らかにしたい。特に、日本人とアメリカ人に同じ調査を行い、顔の表情と記憶の測度(好感度,再認)との相互の関連を詳しく見たい。2.方法潜在的な感情操作のため、調査対象者を(嬉しい/悲しい/どちらでもない顔3つの表情)の呈示群に分け、(1)ダミー課題(顔の特徴についての判断課題)、(2)ムード測定を行った。さらに新たな顔写真を同数追加したものを併せて呈示し、それぞれの顔写真について(3)好感度、(4)再認度を測った。調査対象者:日本人調査は、大学生137名(女性のみ)。アメリカ人調査では、大学生36名(男性14名;女性22名)。調査課題:調査対象者を3群に分け、以下の写真を10枚呈示。(a)嬉しい表情80%と悲しい表情20%の群、(b)悲しい表情80%と嬉しい表情20%の群、(c)どちらでもない表情80%と嬉しいと悲しい表情を20%の群である。3.結果と考察日本人、アメリカ人ともに悲しい表情が、特に抑うつのムードを有意に増加させたが、嬉しい表情は有意な変化をもたらさなかった。日本人、アメリカ人とも、嬉しい顔の表情を有意により好きだと評定し、悲しい顔の表情を有意により嫌いであると評定したが、表情の違いによる再認記憶への影響は見られなかった。以上、日本人とアメリカ人では、顔の表情では、嬉しいよりも悲しい顔の表情の方が、ムードの変化に大きく影響を与えることが明らかにされた。また、顔の表情が、再認ではなく好意度のみに影響を及ぼしたことから、好意と再認のメカニズムは少なくとも一部は、異なったものであることが示唆された。1.目的テレビコマーシャルは、それぞれの国において、その国独特の文化の違いを反映するように作られている。そして、各国のテレビで実際に流れているコマーシャルに対する好感度の違いは、それぞれの国の文化で異なる特性によって予測可能であると思われる。したがって、コマーシャルに対する個人の好き嫌いが、文化に特有の特性と関連していることを検証することが本研究の目的である。2.方法
高移動度ミクロン長π共役ポリマー半導体デバイス創成に向けた新規プロセス技術の開発

有機半導体における移動度の指標である小さな有効質量をもつ集合構造体の実現を目的として、有機半導体分子の一部分を共有結合で連結し、それを並べた、低分子ーポリマーハイブリッド型構造の構築を達成した。このような配列構造において、分子の一部を連結した効果により、これまでに報告されている中でも顕著に小さな有効質量を示すことを見出した。また、これらの半導体の薄膜を作製する新規プロセスの開発も行った。これらの成果は、有機半導体の分子設計指針およびデバイス作製プロセスに新たな知見を与えるものであると考えられる。これまでに報告されているニッケル触媒による熊田ー玉尾カップリング型重縮合反応を活用して、フラスコスケールにおいて高分子量のポリ-3-ヘキシルチオフェンを合成した。得られたポリマーの同定および分子量分布の決定は、核磁気共鳴分光法(NMR)およびサイズ排除クロマトグラフィー(SEC)によって行った。このとき、合成反応に用いるマグネシウム塩基の溶媒を文献に記載されているTHF溶液から、THF/トルエン混合溶媒の溶液とすることで、分子量は比較的小さいものの、重量平均分子量/数平均分子量比のより小さなポリマーが得られることが明らかとなった。合成したポリ-3-ヘキシルチオフェンを用いて、有機電界効果トランジスタを作製した。当研究室ですでに報告しているイオン液体上での圧縮配向法によりポリ-3-ヘキシルチオフェンの薄膜を作製し、偏光顕微鏡で観察することで結晶性のドメインがあることを確認した。これを、フッ素化されたアルキルシランの自己組織化単分子膜で表面処理したシリコン基板にのせ、アセトニトリルにつけ置きすることでイオン液体を洗い流したのち、コンタクト電極として金を真空蒸着することでトランジスタ素子を作製した。作製した素子は、良好なp型トランジスタ特性を示した。この結果は、パイ共役系ポリマーであるポリ-3-ヘキシルチオフェンが、本研究における高分子モチーフとして適当であることを示すものであると言える。パイ共役系ポリマーであるポリ-3-ヘキシルチオフェンを合成し、イオン液体上での圧縮配向法により結晶性のドメインのある薄膜の作製に成功した。これを用いた電界効果トランジスタを作製し、良好なp型トランジスタ特性を示すことを確認した。一方で、基板上での重合ー製膜一体型プロセスの実現には至っていない。前年度のポリ-3-ヘキシルチオフェンをモチーフとしたポリマー半導体の成果をもとに二次元系への展開を図った。二次元共役ポリマー構築を目指して、共役系モノマーユニットの合成およびそのポリマー化の検討を行った。しかしながら、目的とするモノマーの化学的な合成が難しく、加えてポリマー化の最適条件を見出すに至らなかった。また、半導体のバンド伝導モデルにおける移動度の指標に有効質量があり、周期構造中においてこれが小さいことが高移動度材料としての目安となるが、計算化学的手法による検討の結果、有効質量が小さくなる二次元構造モチーフがほとんど見出されないことがわかった。そこで、小さな有効質量をもつ集合構造体の実現を目的として、有機半導体分子の一部分を共有結合で連結し、それを並べた擬似ポリマー型構造の構築へと展開した。種々の分子骨格長や側鎖置換基を有する誘導体を合成し、核磁気共鳴分光法や質量分析法によりその分子構造を同定した。さらに、合成した種々の誘導体の単結晶を作成し、X線結晶構造解析によりそれらの結晶中での集合構造を明らかとした。その結果、いくつかの誘導体において、分子間でπ軌道の重なりを保つ配置での配列がみられ、分子の一部を連結した効果により、小さな有効質量を示すことを見出した。さらに、これらの誘導体を半導体層にもちいた有機電界効果トランジスタやダイオードデバイスを作製し、半導体特性を評価した。これらの成果は、有機半導体の分子設計指針に新たな知見を与えるものであると考えられる。二次元共役ポリマー薄膜形成に向けた検討に着手する.まず,パイ共役骨格に反応性官能基を導入したモノマー分子の合成を行う.その際,二次元的に重合反応を進行させるためプロセス時の薄膜形成に重要な役割をもつと考えられる種々のアルキル置換基をもつ誘導体を合成する.また,重合反応の官能基の数を減らしたモデル分子を用いて,重合反応のフラスコスケールでの検証実験も行う.ここで,プロセス適合性を鑑みて,反応条件の最適化を行う.また,得られた生成物については,反応後のパイ共役の拡張を確認するために,紫外可視吸収スペクトル測定や電気化学測定により,その電子構造について詳細な知見を得る.先に検討した二次元ポリマー合成の反応条件を元にして,基板上ないしは気液界面での二次元共役ポリマー薄膜の形成を検討する.気液界面での二次元共役ポリマー薄膜の形成では,イオン液体表面での単分子膜形成とつづく加熱による重合反応を想定している.

この際に,単分子膜形成におけるアルキル置換基の効果を検証する.また,加熱による重合反応については,動的かつ可逆的な化学反応を活用することで熱力学的に安定な化学構造をもった二次元ポリマーからなる均質な薄膜が形成されることが期待される.得られたポリマー薄膜については,X線回折や原子間力顕微鏡観察による構造解析ならびに光電子収量分光法等による電子構造解析を行うとともに,有機電界効果トランジスタ素子を作製しその性能評価を行うことで,π共役が二次元に拡張されていることを検証する.28年度が最終年度であるため、記入しない。有機化学28年度が最終年度であるため、記入しない。
戦間・戦後改革期の裁判官制度の比較法史研究－－キャリアシステムと職権の独立

本研究では、1戦間期において、20世紀段階の政府・司法省主導の裁判官キャリアシステムの構築に伴って、日本とフランスそれぞれ裁判官の職権の独立の実態がどのようなものであったのか、そして、2戦後改革期に、そのような実態に対する総括がどのように行われたのか、あるいは、当該裁判官キャリアシステムに対する、司法権以外の多元的な機関による「法的統制」の可否ないしは有効性がどのように論議されたのか、制度化はどの程度まで行われたのか、312を総括しつつ、そこにどのような日仏の差異と共通性があったのか、を順次検討するものである。平成30年度については、上記123の全体像を念頭に置きながら、1の課題を中心に研究を行った。まず、日本に関しては、裁判官の職権の独立に関わる司法当局、実務裁判官、立法者、さらに法曹界などからの言説を、法律実務系雑誌(雑誌「正義」「法曹公論」「法律時報」など)、刊行物(「司法研究報告書」シリーズ等)から収集・検討を行った。次に、フランスについては、1906年制定のサリアンデクレの廃止(1914年)以降の裁判官人事の実態、具体的には、その法的統制の中心機関である司法官職高等評議会の運用実態、ヴィシー政権時代の親独政権下でのファシズム期の裁判官の職権行使に対する干渉の実態等について、裁判官の職権の独立に対する侵害状況に関する先行研究の収集を行った。特に後者については、近年研究の深化があり、相当な事実が解明されており、本研究にとって大きな示唆を得ることができた。予定していた日仏の1930年代40年代における裁判官の身分保障、職権に対する侵害状況に関する先行研究をある程度収集することができたが、実際の関係史料の収集については遅れている。ただし、これらの先行研究に触れることで、今後の史料収集のための示唆を得ることができた。先行研究の整理を通じて得られた視点により、関連する歴史史料の収集を次年度精力的に行うことによって研究のやや遅れた状況を打開し、少なくとも戦前の状況についてはある程度研究目的に即して進展させていきたいと考えている。今年度については、先行研究の分析に時間が取られ、実際の歴史史料の収集のための出張ができなかったため、当初計画していた出張旅費の消費がなかったためである。
ゲノム解析に伴う大量知識情報処理の研究

重点領域研究「ゲノム解析に伴う大量知識情報処理の研究」はバイオサイエンスとコンピュ-タサイエンスの接点に形成される新しい領域であり、本総合研究ではその準備と調査を行った。活動の中心として、研究打合せ会議を全部で4回開催した。第1回の会合(8月23日)では中心メンバ-6人により研究計画および領域運営の方針について素案を作成した。その議事録は班員全員に配布して意見を聴取した。第2回会合(1月7日)には本研究の分担者全員が参加し、まず重点領域の計画研究予定班員に個々の分担計画を発表してもらい、その後研究の進め方と領域の運営方針を討議した。また、国内のゲノム研究全体を支援し推進するために、広域コンピュ-タネットワ-クを構築することとし、ゲノムネットと名付けることになった。第3回会合(2月8日)にはゲノムネットの予定担当者が集まり、接続計画や役割分担などを協議した。第4回会合(2月18日)では重点領域の事務局のメンバ-で、公開ワ-クショップ、トレ-ニングコ-ス、ニュ-スレタ-、その他の広報活動についての企画を行った。以上の研究打合せ会議の他に、3月4日には重点領域研究の審査会が行われた。また、総合研究A「ヒトゲノムプログラムの推進に関する研究」(代表・松原謙一・大阪大学教授)が主催したゲノム関連ワ-クショップ(9月2728日および12月34日開催)の中で情報解析の必要性についての調査を行い、バイオサイエンス研究者とコンピュ-タサイエンス研究者の間での共同研究の企画を行った。さらに、重点領域研究のニュ-スレタ-の準備号の発行と、国内のゲノム関連研究者の名簿の作成を行った。
歯周組織におけるCGRP受容体サブタイプとその特異的細胞内情報伝達系の解明

既に報告されているCGRPの三次元立体構造をもとに独自にCGRP fragmentsの合成を試みバイオアッセイに供したが、特に注目すべき活性を有したペプチドを開発するという目的は達成できなかった。1)CGRPfragmentsの新規合成およびスクリーニング---ヒトのCGRP_<1-37>, CGRP_<8-37>,CGRP_<19-37>,CGRP_<22-37>,[Cys(Acm)^<2,7>]-CGRPに加えて、CGRP_<1-12>,reverse-CGRP_<1-8>,reverse-CGRP_<1-14>を新規合成した。cAMP産生能などを指標としてスクリーニングを行った結果、CGRP_<8-37>,CGRP_<22-37>,[Cys(Acm)^<2,7>]-CGRPには明らかなagonisticあるいはantagonistic活性があることが判明した。2)生理活性のあるCGRPfragmentsの細胞内情報伝達系に及ぼす影響---骨芽細胞(MG60)においてCGRP_<8-37>には強いantagonistic活性が認められ、CGRP_<1-37>によるcAMP産生などを完全にブロックした。CGRP_<22-37>にも弱いながら同様なantagonistic活性が認められた。また、[Cys(Acm)^<2,7>-CGRPには中程度のantagonistic活性のみならず弱いagonistic活性があった。歯肉線維芽細胞(Gin-1)および上皮細胞(SCC25)においても同様であった。3)生理活性のあるCGRP fragmentsの受容体結合能---蛍光色素で標識したCGRP_<1-37>(FL-CGRP)を用いて結合能の測定した。FL-CGRPは濃度依存性に特異的結合を増加させ、それは非標識CGRP_<8-37>によって競合的に阻害された。しかし、[Cys(Acm)^<2,7>-CGRPによる競合的阻割は明確ではなかった。4)CGRPfragmentsの細胞増殖に及ぼす影響---いずれのfragmentsにおいても有意にMG63細胞増殖に影響を及ぼさなかつたGin-1では、CGRP_<1-37>が弱いながらも有意な増殖促進作用をもつことを確認した。5)CGRPfragmentsのアポトーシスに及ぼす影響---有意なアポトーシス誘導は認められなかった。6)歯周組織におけるCGRP受容体サブタイプの発現状況---anti-CRLRおよびanti-RAMP-I抗体を用いて免疫化学的あるいはウェスタンブロット法により、CGRP受容体サブタイプI発現を蛋白レベルで検出した。本年度は、ペプチドの三次元立体構造に関する情報に基づき、CGRP fragmentsの設計および合成をそれらの生理活性に関する予備実験データと随時付き合わせながら進行させる計画であった。