hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
生体肝移植後の思春期のこどものセルフケア能力拡大のための看護実践ガイドライン開発

本研究の最終目標は、生体肝移植後の思春期のこどものセルフケア能力拡大のための看護実践ガイドライン開発である。平成30年度は、平成29年度より開始しているPhaseI:インタビュー調査の中間評価と見直し、PhaseII以降の計画の見直し、知見の収集を行った。具体的内容は以下の通り。【PhaseI:インタビュー調査の中間評価と見直し】と【PhaseII以降の計画の見直し】: 1例目のインタビューデータ(平成29年度実施)の分析とインタビュー方法を再考したものに対してコンサルテーションを受けた結果、学習と方法の見直しが必要なことが分かり、そこから始めた。その結果、インタビューデータから、肝移植後の思春期のこどもが行っているセルフケアや看護実践、課題に関する、具体的かつ包括的なデータを取り出せると考えた。また、インタビュー対象を国内で臓器移植を中核的に行っている複数施設(5施設程度予定)の移植コーディネーター及び必要時他医療職者とし、同意が得られた方々にメンバーチェッキングをして頂くことで、今ある臨床状況をできる限り網羅した妥当性の高い結果を得られると考えた。以上より、当初実施計画では、PhaseIは単施設においてガイドライン原案作成に必要なデータ収集をし、PhaseIIにおいて多方面の専門家からコンサルテーションを受けてガイドライン案を作成する計画にしていたが、PhaseIにPhaseIIの目的も含められると判断した。これらの検討結果を再度コンサルタントに説明し、次のインタビューへ進める状況を整えた。平成30年度は、2例目以降の対象者に内諾を得る手続きに入るところで終了した。【知見の収集】:国内外の学会参加を行い、臓器移植、思春期のこどもへの介入、ガイドライン活用の実際と課題、研究方法に関する、国内外の最新の知見を発表や意見交換から得た。それらを研究の遂行に反映させた。当初実施計画では、平成30年度は、ガイドライン案作成まで行う予定であった。しかしながら、1例目のインタビューデータ(平成29年度実施)の分析と方法を再考したものに対してコンサルテーションを受けた結果、学習と方法の見直しが必要なことが分かった。緻密な研究の遂行のために、学習(文献や学会、研究会での学習)と方法の見直しに時間をかけた。現時点では、1例のインタビューデータとその分析結果、次Phase以降の計画までが研究成果である。本テーマに関する先行研究について、個別の事例報告はあるものの、統合された研究成果として発表されたものがないという点で学術的価値のある成果を出す過程にあると考えているが、上述の通り、当初実施計画より遅れているため、「(3)やや遅れている。」とした。平成31年度は、本科研の最終目標へと到達できるように、以下の年次計画で遂行する。平成31年4月から平成31年8月:現在遂行中のインタビュー調査について、データ収集と分析を交互に行う。最終的な分析結果に対して、メンバーチェッキングとコンサルテーションを受ける。平成31年9月から平成31年11月:上記の結果と先行研究から得た知見を統合させて、ガイドライン案の作成を行う。ガイドライン案作成までの過程と結果を研究成果として公開するために、論文執筆ならびに学会発表の申請をすすめる。研究成果公開で得られていくガイドライン案に対するコメントも、個人情報に十分に留意しながら、以下に続くガイドライン案の再構築に反映させていくようにする。平成31年12月から平成32年3月:ガイドライン案の試行および評価、再構築を行う。通年:文献や学会、研究会での学習や意見交換を行い、研究の遂行に反映させる。本研究の最終目標は生体肝移植後の思春期のこどものセルフケア能力拡大のための看護実践ガイドライン開発である。初年度にあたる平成29年度は、国内で小児肝移植を含めた臓器移植を中核的に行う施設の小児外科医ならびに移植コーディネーターに、3年間の科研を遂行する上でコンサルテーションを受けることの承諾を得ることから始めた。上述の小児外科医ならびに移植コーディネーターの承諾を得、直属の上司1名を加えた3名よりコンサルテーションを受けながら、研究計画の立案を行い、今年度は介入の方向性ならびに介入ポイントの明確化を行うことを目的としたインタビュー調査(以下、PhaseI:インタビュー調査とする)を行うこととした。所属施設の倫理委員会の審査を受け、倫理審査承認後より、国内で小児肝移植を中核的に行っている移植コーディネーターを対象としたPhaseI:インタビュー調査を開始している(平成29年度は1例実施済み、平成30年度に4例追加予定)。このPhaseI:インタビュー調査については、個別の事例報告はあるものの、研究結果として公表されているものはなく、学術的意義があると考えている。また、国内学会ならびに国際学会に参加し、思春期のこどものセルフケアや移植に関する知識、意思決定や自己管理、移行等の関連概念に関する知識、ガイドライン作成や評価に関する知識を深めるとともに、最新の知見を得ることができた。さらに、学会における意見交換から、本研究の展望についての示唆も得ることができた。個別の事例報告はあるものの、統合された研究成果として公表されているものがないという点で、学術的価値のある研究を開始できていると考えている。

その結果、インタビューデータから、肝移植後の思春期のこどもが行っているセルフケアや看護実践、課題に関する、具体的かつ包括的なデータを取り出せると考えた。また、インタビュー対象を国内で臓器移植を中核的に行っている複数施設(5施設程度予定)の移植コーディネーター及び必要時他医療職者とし、同意が得られた方々にメンバーチェッキングをして頂くことで、今ある臨床状況をできる限り網羅した妥当性の高い結果を得られると考えた。以上より、当初実施計画では、PhaseIは単施設においてガイドライン原案作成に必要なデータ収集をし、PhaseIIにおいて多方面の専門家からコンサルテーションを受けてガイドライン案を作成する計画にしていたが、PhaseIにPhaseIIの目的も含められると判断した。これらの検討結果を再度コンサルタントに説明し、次のインタビューへ進める状況を整えた。平成30年度は、2例目以降の対象者に内諾を得る手続きに入るところで終了した。【知見の収集】:国内外の学会参加を行い、臓器移植、思春期のこどもへの介入、ガイドライン活用の実際と課題、研究方法に関する、国内外の最新の知見を発表や意見交換から得た。それらを研究の遂行に反映させた。当初実施計画では、平成30年度は、ガイドライン案作成まで行う予定であった。しかしながら、1例目のインタビューデータ(平成29年度実施)の分析と方法を再考したものに対してコンサルテーションを受けた結果、学習と方法の見直しが必要なことが分かった。緻密な研究の遂行のために、学習(文献や学会、研究会での学習)と方法の見直しに時間をかけた。現時点では、1例のインタビューデータとその分析結果、次Phase以降の計画までが研究成果である。本テーマに関する先行研究について、個別の事例報告はあるものの、統合された研究成果として発表されたものがないという点で学術的価値のある成果を出す過程にあると考えているが、上述の通り、当初実施計画より遅れているため、「(3)やや遅れている。」とした。現在進行中のPhaseI:インタビュー調査を遂行するとともに、PhaseIIの研究計画の検討に入る。平成31年度は、本科研の最終目標へと到達できるように、以下の年次計画で遂行する。平成31年4月から平成31年8月:現在遂行中のインタビュー調査について、データ収集と分析を交互に行う。最終的な分析結果に対して、メンバーチェッキングとコンサルテーションを受ける。平成31年9月から平成31年11月:上記の結果と先行研究から得た知見を統合させて、ガイドライン案の作成を行う。ガイドライン案作成までの過程と結果を研究成果として公開するために、論文執筆ならびに学会発表の申請をすすめる。
トーションフリーランク1のアーベル群

まず、最大トーション部分群がトーションコンプリートとなる一般のアーベル群Gについて、Gのすべての部分群は準純粋包をもつことを証明した。するとGの各部分群には極大準純粋包があることがわかる。このときの極大準純粋包はすべて同型であることも証明できた。さらにこの結果をトーション群に応用すると、トーションコンプリート群においては、各部分群はその部分群を含む極小な直和因子をもち、この極小な直和因子はまたトーションコンプリートになることが証明できた。上記の結果を一般のアーベル群に応用すると、最大トーション部分群がトーションコンプリートとなる一般のアーベル群はADE分解群となる。トーションフリーランク1のアーベル群に上記の結果を適用すると、次のような結果を得たことになる。即ち、トーションフリーランク1のADE分解群は、その最大トーション部分群とこの群の高度行列によって決まる、という結果を得たことになる。「最大トーション部分群がトーションコンプリートとなるトーションフリーランク1の群は、その最大トーション部分群とこの群の高度行列によって決まる。」というメーギビンの結果は上記の結果の系になる。また、p群に存在する基部分群の概念を一般のアーベル群に拡張することができた。それを混合基部分群と名付け、その研究をスタートした。まず、p群における基部分群はすべて同型だが、一般のアーベル群における混合基部分群は必ずしもすべてが同型とならない反例を見つけた。さらに、トーションフリーランク1のアーベル群にはタイプが最小なT高部分群が必ず存在する。この結果を使って、すべてのT高部分群が同型となるトーションフリーランク1のアーベル群を決定できた。一般のアーベル群Gにおいて、最大トーション部分群Tが必ずただ1つ存在する。A∩T=0となる部分群Aの中で極大な部分群をT高部分群という。T高部分群の存在はZornの補題で保証されている。そこで、「T高部分群がすべて同型となる群Gを決定せよ」という問題がある。本研究の出発点はこの問題にある。そこで本研究では、群Gのトーションフリーランクが1のときを考察した。その結果次のような成果を得た。(1)トーソンフリーランク1の群Gにおいて、T高部分群の中に必ずタイプが最低となるT高部分群が存在する。(2)(1)の結果を用いて、T高部分群がすべて同型となるトーションフリーランク1の群Gを決定した。また、トーション群における基部分群の概念を一般のアーベル群Gに紘張した。アーベル群Gにおけるそのような部分群を混合基部分群と名付ける。すると一般のアーベル群Gにおいて、必ずしもすべての混合基部分群は同型とならない。その例を構成した。次年度は一般のアーベル群における混合基部分群とp基部分群の関係について調べる。また純粋包・準純粋包をもつ部分群の研究に、この混合基部分群の概念が導入できないかを調べる予定である。純粋包・準純粋包をもつ部分群の研究においては、アーベル群Gの最大トーション部分群Tが、トーションコンプリート群であるとき、すべての部分群が準純粋包をもたないか、という問題も次年度の課題となることがわかった。本年度に目標とした研究は大部分達成された。

上記の結果を一般のアーベル群に応用すると、最大トーション部分群がトーションコンプリートとなる一般のアーベル群はADE分解群となる。トーションフリーランク1のアーベル群に上記の結果を適用すると、次のような結果を得たことになる。即ち、トーションフリーランク1のADE分解群は、その最大トーション部分群とこの群の高度行列によって決まる、という結果を得たことになる。「最大トーション部分群がトーションコンプリートとなるトーションフリーランク1の群は、その最大トーション部分群とこの群の高度行列によって決まる。」というメーギビンの結果は上記の結果の系になる。また、p群に存在する基部分群の概念を一般のアーベル群に拡張することができた。それを混合基部分群と名付け、その研究をスタートした。まず、p群における基部分群はすべて同型だが、一般のアーベル群における混合基部分群は必ずしもすべてが同型とならない反例を見つけた。
カルシトニン遺伝子関連ペプチドによる低血圧麻酔の臨床応用のための実験的検討

CGRPは生体内物質で,その心血管作用は血管拡張、血圧低下、心拍数の増加などが知られていた。また、CGRPは最強の血管拡張物質であるとの報告が出されて以来、心血管系の研究が精力的に行われた。しかし、ペントバルビタールまたは無麻酔動物や正常健常人へのCGRPの静脈内投与は血圧低下に伴う反射性頻脈を惹起し、血管拡張にもかかわらず、血圧低下と心拍数の増加は臨床使用をためらう要因であった。今回の研究では、ペントバルビタール麻酔犬ではCGRP投与は血圧低下に反射性頻脈を伴ったが、ハロタン麻酔犬では用量依存性に血圧は低下したが、心拍数の増加は惹起されなかった。また、心拍出量も保持されることが窺われた。これらの結果から、ハロタン、イソフルラン、セボフルランなどの吸入麻酔中の術中異常高血圧の治療に使用できる可能性が示唆された。ハロタン麻酔下でのCGRPによる低血圧麻酔の血行動態では、降圧機序は体血管抵抗の低下であった。低血圧中に反射性頻脈や低血圧終了後に反跳性高血圧は惹起されなかった。心拍出量と心収縮力は保持され、肺血管系への影響が少ないことが窺われた。また、臓器血流に関して、平均動脈圧60mmHgの低血圧中でも腎臓、肝臓、膵臓での内蔵臓器の血流は保持されることが窺われた。これらの結果から、CGRPによる低血圧麻酔の臨床使用の可能性が示唆された。新しい血管拡張薬、CGRPの臨床応用は、低血圧麻酔や周術期の循環制御に利用でき、麻酔科領域の患者管理の飛躍的発展につながると考えられる。平成4年度研究課題:カルシトニン遺伝子関連ペプチド(CGRP)の血行動態に及ぼす影響方法:雑種成犬を用いペントバルビタールで気管内挿管し,ハロセン麻酔で維持し人工呼吸器で調節呼吸とした。CGRPは0.4μg・kg^<-1>(L群),4μg・kg^<-1>(M群),40μg・kg^<-1>(H群)を60分間で投与した3群である。測定時間は対照値(S_1),投与30分(S_2),投与60分(S_3),投与終了30分(S_4)投与終了60分(S_5)で各種血行動態を測定記録した。測定値は平均値±標準偏差で示し,検定はANOVAとDunnett's testを用い,P<0.05を有意とした。結果:平均動脈圧は用量依存性に低下した。M群,H群では投与中有意に低下した。特にH群ではS_2(52±7mmHg),S_3(60±7mmHg)で有意に低下した。心拍数はL群でS_5(P<0.01),M群でS_4(P<0.05),S_5(P<0.01)H群でS_2(P<0.01)で有意に低下した。心係数はL群とM群では投与中有意に増加したが,H群では変動しなかった。中心静脈圧,平均肺動脈圧は3群で大きく変動しなかった。体血管抵抗は用量依存性に低下した。L群ではS_2,S_3で,M群ではS_2,S_3,S_4で,H群ではS_2,S_3,S_4,S_5で有意に低下した。肺血管抵抗は3群で変動しなかった。左室dp/dt maxはL群では投与中有意に増大した。M群では変動しなかった。H群では軽度低下したが有意の変動でなかった。結語: 1MACのハロセン麻酔下の雑種成犬にCGRPを持続投与し、血行動態を検討した。

CGRPの降圧機序は体血管抵抗の低下で、降圧作用は用量依存性であった。また、血圧低下に対し反射性頻脈は惹起されず、圧受容体反射の抑制が示唆された。これらの結果から、平成5年度に予定されたCGRPによる低血圧麻酔は可能と思われた。平成5年度研究課題:カルシトニン遺伝子関連ペプチド(CGRP)による低血圧麻酔の血行動態に及ぼす影響【方法】雑種成犬を用いペントバルビタール麻酔下で気管内挿管し、0.87%ハロセン・酸素(1MAC)で維持し人工呼吸器で調節呼吸とした。各種カテーテル挿入後、血行動態パラメータを測定した。測定項目は、平均動脈圧(MAP)、心拍数(HR)、心係数(CI)、一回拍出係数(SVI)、中心静脈圧(CVP)、平均肺動脈圧(MPAP)、肺動脈楔入圧(PCWP)、体血管抵抗(SVR)、肺血管抵抗(PVR)、左室dp/dtmaxについて行った。実験群は0.001%CGRP溶液により平均動脈圧60mmHgに維持した10例である。測定時間は実験準備終了後、血行動態が安定した時点を対照値(S_1)とし、低血圧30分(S_2)、低血圧60分(S_3、低血圧終了10分(S_4)、低血圧終了30分(S_5)の5回行った。測定値は平均値±標準偏差で示し、統計学的検定はANOVAとDunnett's testを用い、P<0.05を有意とした。【結語】1MACハロセン麻酔下の雑種成犬でのCGRPによる低血圧麻酔の降圧機序は体血管抵抗の低下が主因であった。しかし、低血圧中にも反射性頻脈は出現せず、心拍出量や心収縮力は保持され、肺血管系への影響は少ないことが窺われた。これらの結果から、CGRPによる手血圧麻酔の臨床使用の可能性が示唆された。平成6年度研究課題:カルシトニン遺伝子関連ペプチド(CGRP)による臓器血流に及ぼす影響【対象および方法】対象は雑種成犬を用い、麻酔はペントバルビタール静注後、気管内挿管し、0.87%ハロタン・酸素(1MAC)で維持し、人工呼吸器で調節呼吸とした。大腿動・静脈にカテーテルを挿入し、動脈圧と輸液路に使用した。また、肺動脈カテーテル、左室カテーテルにより肺動脈圧、心拍出量、左室dp/dt maxなどの各種計測を行った。臓器血流は腎臓、肝臓、膵臓、筋肉の各臓器で行い、水素クリアランス法による組織血流計を用い測定した。輸液は生理食塩水を用い、7ml・kg^<-1>・h^<-1>とした。実験群は対照群(C群,n=8,非低血圧麻酔例)と0.001%CGRP溶液により平均動脈圧60mmHgに60分間調節維持したCGRP低血圧麻酔群(CGRP群、n=10)の2群とした。測定時間は実験操作終了後、血行動態が安定した時点を対照値とし、低血圧30分、60分、低血圧終了30分の4回行った。測定値は平均値±標準偏差で示し、統計学的検定は群内ではtwo-wayANOVAとDunnett's test、群間ではStudent's unpaired t testをそれぞれ用い、P<0.05で有意とした。【結果】対照群では腎、肝、膵、筋肉の各血流は経過中大きく変動しなかった。CGRP群では、腎血流は対照値93ml・min^<-1>・100g^<-1>から低血圧30分、60分、低血圧終了30分で87ml・min^<-1>・100g^<-1>と軽度低下した。肝血流は対照値64ml・min^<-1>・100g^<-1>から低血圧中60ml・min^<-1>・100g^<-1>と低下傾向を示したが、低血圧終了後には対照値より増加した。膵血流量は変化しなかった。筋血流量は対照値13ml・min^<-1>・100g^<-1>から低血圧30分で9ml・min^<-1>・100g^<-1>と低下した。【結語】
大規模時系列データの統計的学習と環境エネルギー問題への適用

本年度は研究の具体的な技術の基礎の確立すると同時に,国内外において研究議論,成果発表を活発に行った.より具体的には,主に大規模時系列データのための統計的学習と特徴自動抽出に関する研究を中心に取り組んだ.以下は具体的な提案手法である.(a)大規模時系列データのための特徴自動抽出:大規模センサネットワーク上における特徴的パターンの自動抽出手法の確立.(b)時系列イベントシーケンスの時間的な推移の解析とリアルタイムパターン解析:様々な時系列イベントおよび活動のパターンを非線形モデルで表現し,将来の動向を予測するアルゴリズムを提案.(c)大規模非線形テンソルのための高速モデル学習:大規模な非線形モデルを対象とし,重要な情報やパターン発見のための統計的モデルを確立.提案技術は,国内外において,その有用性と汎用性を非常に高く評価され,データマイニング,データベースの分野における最も著名な国際会議であるWWW, SIGKDD, SIGMODおよび,ICDM, PKDD等で多数採録された.これらの成果は先駆的かつ実用的であり,データマイニング分野において国際的に高い評価を受けており,国内外における招待講演3件を行った.さらに,上記の研究内容を含め,本年度は積極的に外部組織との共同研究も行った.具体的には,海外渡航制度を利用し,共同研究者であるChristos Faloutsos教授(カーネギーメロン大学)の元へ訪問及び短期滞在を行った.これらの共同研究において,大規模時系列データの解析のための基礎技術基盤を確立した.26年度が最終年度であるため、記入しない。26年度が最終年度であるため、記入しない。本年度は主に,研究の基礎理論の確立を目指すと同時に,国内外での研究議論,発表を活発に行った.より具体的には,研究課題の基盤技術として,主に大規模時系列データのための特徴自動抽出に関する研究を中心に取り組んだ.本研究では,様々なパターンを含む複雑な大規模時系列シーケンスが与えられたときに,その時系列データの中から自動的に重要な特徴を発見し,それらの情報を統計的に要約,表現するための基盤技術を確立した.より具体的には,提案手法は, (a)大規模時系列データの中から類似した部分シーケンスのパターンを抽出し, (b)計算量は入力データのサイズに対して線形である.さらに最も重要な点として, (c)提案手法はパラメータに依存しない.すなわち,事前情報の付与およびパラメータのチューニングを行なうことなく,大規模シーケンスの重要パターンの発見と特徴抽出を自動的に行なうことができる.提案技術は,国内外において,その有用性と汎用性を非常に高く評価され,情報処理学会論文誌への採録や,データベースの分野における最も著名な国際会議であるACM SIGMOD2014へ採録が決定している.これらの成果は先駆的かつ実用的であり,データマイニング分野において国際的に高い評価を受けている.さらに,上記の研究内容を含め,本年度は積極的に外部組織との共同研究も行った.具体的には,海外渡航制度を利用し,共同研究者であるChristos Faloutsos教授(カーネギーメロン大学)の元へ訪問及び短期滞在を行った.これらの共同研究において,大規模時系列データの解析のための基礎技術基盤を確立し,その成果は情報処理学会論文誌,電気情報通信学会論文誌, The 17th Pacific-Asia Conference on Knowledge Discovery and Data Mining (PAKDD)において採録された.本年度は研究の具体的な技術の基礎の確立すると同時に,国内外において研究議論,成果発表を活発に行った.より具体的には,主に大規模時系列データのための統計的学習と特徴自動抽出に関する研究を中心に取り組んだ.以下は具体的な提案手法である.(a)大規模時系列データのための特徴自動抽出:大規模センサネットワーク上における特徴的パターンの自動抽出手法の確立.(b)時系列イベントシーケンスの時間的な推移の解析とリアルタイムパターン解析:様々な時系列イベントおよび活動のパターンを非線形モデルで表現し,将来の動向を予測するアルゴリズムを提案.(c)大規模非線形テンソルのための高速モデル学習:大規模な非線形モデルを対象とし,重要な情報やパターン発見のための統計的モデルを確立.提案技術は,国内外において,その有用性と汎用性を非常に高く評価され,データマイニング,データベースの分野における最も著名な国際会議であるWWW, SIGKDD, SIGMODおよび,ICDM, PKDD等で多数採録された.これらの成果は先駆的かつ実用的であり,データマイニング分野において国際的に高い評価を受けており,国内外における招待講演3件を行った.さらに,上記の研究内容を含め,本年度は積極的に外部組織との共同研究も行った.具体的には,海外渡航制度を利用し,共同研究者であるChristos Faloutsos教授(カーネギーメロン大学)の元へ訪問及び短期滞在を行った.これらの共同研究において,大規模時系列データの解析のための基礎技術基盤を確立した.26年度が最終年度であるため、記入しない。研究計画において,初年度の目標は大規模時系列データマイニングのための基礎理論の確立,および,国内外における研究議論と発表を活発に行うことであったが,これら関して,順調に取り組むことができた.初年度同様,今後はさらに大規模時系列データのための基盤技術の確立を目指す.今後の研究では,より実用面を重視していく予定である,より具体的には,初年度において確立した時系列データの特徴抽出技術を発展させ,今後は,将来の時系列パターンの予測問題や,より複雑な振る舞いをする時系列データに対するパターンの表現技術を確立していく.
自律神経学的アプローチによるメタボリックシンドロームの発症機序解明と治療法の開発

本研究は、メタボリックシンドロームの発症機序における自律神経機能の役割について検討し、自律神経学的見地から本症候群に対する新たなる予防法、治療法を考案することを目的とした。前年度に、(1)器質的自律神経機能障害を有する患者では健常者に比し血中アディポネクチン濃度が低下傾向にあり、健常者に認められる男女差が消失していたこと、さらに(2)これらの患者における血中アディポネクチン濃度と自律神経障害度には強い負の相関を認めること、を確認したことから、本年度はアディポネクチンの分泌と自律神経の関係を証明し、自律神経学的見地からメタボリック症候群の治療法を考案することを目標とした。(結果)1.自律神経障害モデルラットにおいて、器質的自律神経機能障害を有する患者と同様、低アディポネクチン血症が確認された。この結果は、器質的自律神経機能障害を有する患者にみられる低アディポネクチン血症は、自律神経の障害自体によるものであることを示唆する。ただし、本年度の研究ではこの病態を改善させる自律神経学的手法を考案するには至らなかった。2.組織学的手法を用い、脂肪組織での自律神経の役割について検討したが、新たな知見を見出すことはできなかった。しかし、本検討は後にcryptogenic sensory polyneuropathy患者の診断確定に自律神経の組織学的解析が有用であることを発見する一助となった(論文3)。3.また、アディポネクチンの分泌機構と自律神経機能の関係について検討し、自律神経学的見地からメダボリックシンドロームに対する治療法を考案しようとした本年度の研究は、髄液中のHDLコレステロールのリモデリングに血清アミロイドA蛋白が関与することを証明した研究(論文1)、脂質に高い親和性をもつヒトトランスサイレチンのトランスジェニックラットを作製・解析した研究(論文2)、にもつながった。本研究は、メタボリックシンドロームの発症機序における自律神経機能の役割について検討するとともに、自律神経学的見地から本症候群に対する新たなる予防法、治療法を考案することを目的とするものである。平成17年度はまず、インスリン抵抗性や他の動脈硬化危険因子を持たない器質的自律神経機能障害を有する患者20名について、血中のレニン、アンギオテンシン、インスリンやアディポネクチン値を測定し、健常者のデータと比較検討するとともに、これらのデータと自律神経障害度との相関について検討した。検討の結果、器質的自律神経機能障害を有する患者においては、健常者に比し血中アディポネクチン濃度が低下傾向にあり(p=0.0514)、健常者に認められる男女差(男性:女性=1:1.9)が消失していた。さらに、これらの患者における血中アディポネクチン濃度と自律神経障害度には比較的強い負の相関を認めた(r=-0.64)。これらの結果は、メタボリックシンドロームの発症に関連の深いアディポネクチンの分泌・制御機構に自律神経機能が大きく関与している可能性を示唆するものである。今後は、交感神経を特異的、可逆的に障害する6-hydroxydopamineを投与し、作製した自律神経障害モデルラットを用い、アディポネクチンの分泌・制御機構と自律神経機能の関係についてさらなる研究を行うとともに、組織学的手法により脂肪組織と自律神経との関係についても検討し、メタボリックシンドロームの発症機序における自律神経機能の役割について、より詳細に解明していく予定である。さらに、研究の最終段階として、in vitroでの治療実験(培養脂肪細胞にカテコールアミンやその関連物質、及びその他の各種自律神経薬を作用させ、アディポネクチンの分泌を高めることができるか検討する)も予定している。
膵癌における各種分子標的の発現と分子標的治療物質に対する感受性に関する研究

またDNA合成関連酵素thymidylate synthase(TS)を膵癌11例で免疫染色、mRNA定量、ELISAで測定解析を行い、TSの免疫染色における陽性核数とmRNAの測定結果が相関すること、また細胞増殖指標MIB-1とTSの免疫染色での発現が相関することが判明した。現在、腫瘍増殖とTS発現について癌抑制遺伝子p53、Smad4、アポトーシス阻害遺伝子BCL-2の膵癌99例の顕微鏡画像解析データを併せて検討中である。上記のMIB-1、TSなど核内抗原の免疫染色顕微鏡画像解析には設備備品として購入したデジタルカメラと画像解析ソフトImage-Pro Plusを使用した。その画像解析手順については、マクロ化による簡便化を図った。それに関して、本学で発明審査を受け職務発明とされた。MIB-1の画像解析と免疫染色プロトコールについては、第29回生理学技術研究会(H19年2月、岡崎市)で発表を行なった。またSmad4遺伝子の膵癌における変異とnonsense-mediatedmRNA decayについて名古屋大学総合技術研究会(H19年3月)で発表を行なった。現在、膵癌以外の悪性腫瘍において標的療法の有効性が報告されている分子標的であるHER-1、HER-2、c-Kit、について膵癌91症例の免疫染色(免染)を行なった。また、癌抑制遺伝子:TGFβ1、Smad4、細胞増殖の指標としてのki-67アポトーシス遺伝子:Baxについても同様に免染を行った。その発現を臨床病理学的に解析し、化学療法、放射線療法、外科的手術と併せて、リンパ節転移、生存率への影響を多面的に解析した。その結果、浸潤性膵管癌においてチロシンキナーゼレセプターc-KitとTGFβ1の発現がともに陽性であるグループは、ともに陰性であるグループと比較して生存率が有意に高く、また化学療法の効果にもその発現の有無が大きく関係することが判明し、仁尾義則(前任の研究代表者)他が、論文に発表した(Anticancer Res.25(5)3523-9,2005)。さらに、5-FUの代謝に関係するpyrimidine代謝酵素TP、DPD、OPRTについても免染で蛋白発現を検討した。そのうち20症例のパラフィン切片からDTP法によりTP,DPD,OPRTのmRNAの発現量を調べた。その結果、DPD発現(-)例、OPRT発現(+)例において術後化学療法が有効であることが判明し、現在、国際学術雑誌へ投稿する準備中である。またHER-1、HER-2を膵癌20症例についてFISHを行い、細胞増殖指標ki-67の免染の発現と併せて各遺伝子の増幅について考察をすすめている。FISHは陽性、陰性の違いが免染に比較して画像上明確である。またki-67は免染だが、核内抗原であるので陽性細胞のカウントがしやすい。そこで今回備品として設置した画像解析、計測ソフトウェアーImage-pro-plusを用いて機械的に陽性細胞をカウントし、病巣に占める割合を自動計算することを検討中である。また、FISHついては遺伝子座の増幅を画像解析装置でやはり自動的にカウントする。このように免染とFISHの計測結果を同時に画像上で解析することで抗体療法の適応検査についてあらたな知見がえられると予想している。その画像解析手順についてはマクロ化を行い簡便化を図った。MIB-1の画像解析と免疫染色プロトコールについては、第29回生理学技術研究会(H19年2月岡崎市)で発表を行なった。
転位バイアス因子の理論的解明

照射によって材料は膨張するが、それは転位が優先的に格子間原子を吸収し空孔を結晶中に残す、転位バイアス因子が原因の一つとされている。過去に転位バイアス因子が理論的に評価されているが、観測される膨張率を再現できない。本研究では、その乖離が理論モデルの不正確さが原因であるという仮説を検討した。その結果、正確な記述をしても理論値と実験値の乖離は埋まらないという結果が得られ、膨張の主原因は転位バイアスではないと考えるに至った。理論解析から推定される転位バイアス因子が実験から得られる同値に比較して過大評価されるが、「自己格子間原子(SIA)が刃状転位近傍でそのすべり面に平行なクラウディオンに変化して転位からの捕獲から逃れることを考慮すればその差は解消できるのではないか」という仮説をたてて研究を開始した。昨年度までに、転位近傍でSIA移動を追跡するコードを作成し、上記のような仮説が成立するかどうかの試験を行った。その結果、予想されたようなクラウディオンは発生したが、転位からの捕獲から逃れる効果は非常に小さいことがわかった。これは、クラウディオンが転位バイアス因子を減少させる効果はないという意味であり、もともとの仮説が否定されたことになった。結果は昨年度国際会議で発表した。今年度は、パラメータを変えながら昨年度の結果を検証の行い、仮説が成立しないことを再確認した。また、スウェーデンの研究グループが同じ疑問から研究を行った結果が発表され、同様にSIAの吸収モデルを精密化しても問題が解決しないという結果を得られた。もともと転位バイアス因子は照射スウェリングを説明するために導入された概念であり、実験から得られる転位バイアス因子は、スウェリングの量から推定されたものである。よって今回の結果は、スウェリングの原因を転位バイアス因子に埋め込んだ照射材料理論そのもののが問題であることを示唆している。このような状況から、残りの期間は照射スウェリング理論の再構築に向けた第一歩として合金元素の種類や量によってスウェリングの量が変化する実験結果を説明するための理論づくりを行うこととし、核融合材料の候補材であるタングステンを研究対象に選び、第一原理計算によってスウェリング変化を説明する結果を示すことができた。理論解析から推定される転位バイアス因子が実験から得られる同値に比較して過大評価される問題は以前から指摘されてきており、その乖離を埋める新しい理論作りのための研究を開始した。「経験ポテンシャルによる解析」では計画に沿ってbcc金属(Fe)およびfcc金属(Cu)において転位を含ませた系を構築した。Cuでは系に格子間原子および空孔を入れて刃状転位による吸収のトラジェクトリ観察を行った。またFeでは、転位付近でdumbbellからcrowdionへ変化することを確認し、刃状転位近辺で格子間原子の吸収半径の測定を行った。「第一原理計算」では申請時において刃状転位のひずみを近似的挿入した系を取り扱う予定であったが、さらに難易度を上げて転位そのものを含んだ系を3種類のbcc金属(W, Mo, V)において計算法の工夫により作成することに成功した。ただし、非常に計算の負荷が大きいため、それらの系を利用した格子間原子の安定性や移動については次年度以降に持ち越しとなった。また、上記に新たに作成された系は転位運動の研究などにも応用できるなどの波及効果が期待される。「キネティックモンテカルロ法」では計画に従って応力下での格子欠陥の拡散をシミュレートするコードを開発した。また、このコードをオークリッジ国立研究所のGolubov博士らの拡散方程式の結果から検証した。さらに次年度の予定を繰り上げ、dumbbellからcrowdionへの変化の転位バイアス因子への影響を調査した。その結果、dumbbellからcrowdionへ変化は転位への吸収をわずかに遅らせる可能性はあるが、転位バイアス因子を有意に下げる効果がないことが明らかになった。これは、1990年代に日本の照射材料の研究者らが提唱していたシナリオの反証となり、結果を国際会議(TMS2013)で発表した。理論解析から推定される転位バイアス因子が実験から得られる同値に比較して過大評価されるが、「自己格子間原子(SIA)が刃状転位近傍で捕獲から逃れることを考慮すればその差は解消できるのでないかという仮説をたてて研究を開始した。一昨年度までに転位近傍でSIA移動を追跡するキネティックモンテカルロコードを作成し、上記のような仮説が成立するかどうかの試験を行った。その結果、転位の捕獲から逃れる効果は非常に小さいことがわかった。また、スウェーデンの研究グループから同様の結果が発表され、仮説は否定されたと考えるに至った。よって転位バイアスが照射スウェリングの原因であるという長年信じられてきた定説が疑わしくなり、新たな照射スウェリング理論を構築する必要が出てきた。そこで新たに合金のスウェリングに注目して研究を再開した。昨年度は、W材にReを合金元素として入れるとスウェリングが抑制されるという実験事実を説明するために必要な第一原理計算を開始した。今年度は、第一原理計算結果をまとめ、スウェリングの抑制がWとReの混合ダンベルの回転エネルギーがWのみのダンベルに比較して回転しやすいことを発見し、それがスウェリング抑制の原因のなっているという結果が得られ、査読付の論文として発表した。また、同じ結果をIAEA共催の国際会議で招待講演を行った。また、上記の第一原理計算結果を検証するために、キネティックモンテカルロコードを作成した。

金属材料は照射によってスウェリングが生じる。照射の一次的な効果は原子を弾き出す微視的な現象であるがスウェリングは巨視的な現象であり、その2つの現象の因果関係を結びつけるのは容易ではない。そのメカニズムとして提案されたものの一つが転位バイアス因子である。これは転位が空孔より格子間原子を優先的に吸収することから空孔が結晶中に残留しそれが凝集してキャビティを形成するのでスウェリングが生じるというシナリオである。しかしながら、理論的に求められた転位バイアス因子から期待されるスウェリング率と実測値には大きな乖離があり、その原因を特定することがこの研究の目的であった。我々はこれまでの理論モデルで球状の欠陥として扱われてきた格子間原子を、方向を持つダンベルやクラウディオンとして正確に扱うことでこの問題が解決できると期待し、原子論的なモデリング研究に着手した。しかしながら、このようなモデルでも上記の理論と実験の解離が埋まらず、この仮説は正しくないことが研究期間の前半に明らかとなった。これにより、我々は照射スウェリングの原因がそもそも転位バイアス因子ではないのではないかという疑問を持つに至った。そこで研究機関後半は、当初の計画を変更しタングステンにレニウムを添加するとスウェリングが抑制される現象に注目し、その原子論的なメカニズム解明を試みた。その結果、レニウムを添加すると格子間原子の運動が1次元から3次元に変化することがわかった。3次元運動の格子間原子は1次元運動するそれと比較して空孔との再結合率が高くなるので、この次元の変化がスウェリング抑制に関連している可能性が高いという結論が得られた。この研究は新たに開始された基盤研究C「タングステン合金における照射誘起析出発生メカニズムの解明」で引き続きスウェリング実験データと比較しながら最終的な結論を得る予定である。照射によって材料は膨張するが、それは転位が優先的に格子間原子を吸収し空孔を結晶中に残す、転位バイアス因子が原因の一つとされている。過去に転位バイアス因子が理論的に評価されているが、観測される膨張率を再現できない。本研究では、その乖離が理論モデルの不正確さが原因であるという仮説を検討した。その結果、正確な記述をしても理論値と実験値の乖離は埋まらないという結果が得られ、膨張の主原因は転位バイアスではないと考えるに至った。研究開始時点で立てた仮説が正しくないと1年目で確認され、照射スウェリング理論を第一原理計算から再構築する必要性があることがわかった。2年目からはタングステンの第一原理計算を行い、過去40年間、原因が明らかにされてこなかったWーRe合金のスウェリング抑制効果の原因として新たな仮説を立て、それをほぼ検証することができた。原子力材料モデリング今後は、キネティックモンテカルロ計算の結果をまとめ、国際会議等や査読付論文として発表していく。また、混合ダンベルを扱えるキネティックモンテカルロはあまり他に例がないので、その構築方法などまとめる。
カオス現象とその工学関連性

本研究計画はカオス的挙動を示す力学系の数学モデルを,工学系の動作特性に関連して解明することに主要な目的を置いている。研究に用いた手段は,数学的解析,数値計算であり,特に位相空間構造のコンピュータ・ダラフィックスである。研究対象としては広範囲の応用を表す簡単な数学モデルを選択した。研究はポテンシャルの井戸を持つダフィング型強制振動系から着手した。特に,スムースなポテンシャル障壁を持つ系に着目している。これは,例えば荒波の海における船の転覆問題やレーザーによる分子結合の破壊現象などに関連している。さらに,遅延時間を含む位相同期系および電力系統における発電機の安定問題を記述した動揺方程式についても研究した。これらの問題においても,安定性の喪失と脱出現象が主として扱われている。これは,『脱出直前の系はカオス的挙動を示すことが普遍的な現象であるようだ』ということに対する,本研究組織全員の確信に基いている。時間遅れを含む微分方程式の研究を行い,膨大な計算機シミューション結果を要約した分岐ダイヤグラムを作った。ここで得られた成果は数値実験を行った範囲では時間遅れを系においても従来から観測され,良く知られている低次元系に見られる現象と本質的に同じ現象が生起していることである。本成果を纒めた原稿はほゞ完成し適当な学会誌(例えば,アメリカ合衆国物理学会誌)に投稿する予定である。結合した動揺方程式の研究も継続中である。安定動作領域の過渡時間応答に関する描写の結果は引力圏内部においてはカオス構造を示していないこを明らかにした。従って,以前に観測しているフラクタル引力圏境界は適切な問題であるが,大変困難な課題であることが再確認された。その根底にひそむホモクリニック構造を解明する集中的な努力も続け,長時間領域にわたる過渡夾叉軌道をも追跡した。しかし,ホモクリニック構造の存在を確認するところまでには至らなかった。従来明かにされている生成的な分岐現象を概観してより広範囲かつ精巧な分類案を作った。この分類は不確定な結果を伴う分岐という重要な現象を含んでいる。さらに系を不安定にする原因となる鞍型構造が秩序的か,あるいはカオ的かにも着目している。これらの基本的な成果はほゞ完成しており近いうちに投稿可能な段階にいたるだろう。時間遅れをもつ制御系の問題は,時間遅れをもつ常微分方程式,あるいは微分差分方程式で記述される。この代表的な最初の方程式は船のローリングを制御する問題に関連して,ミノルスキー氏によって導かれた。この種の問題は厳密には無限次元の状熊空間内で論じられるべきものであるが,十分大きな有限次元の状熊空間における問題によって近似されうるものと考えられる。本研究では対象とする系の動作が百数十次元の状熊空間における問題として近似されうるだろうと言う仮定のもとで,数値実験を行った。ここでも主要な問題は引理圏境界であり,これは制御系が安定な動作をするための安全圏の境界を意味している。例えば,船がローリングしても転覆するか復元するかの境界である。このような引力圏境界の構造を把握することは重要であるが容易でない。引力圏は一般に空間の次元より一次元低い不安定軌道(根元集合)の安定多様体で表されるが,高次元空間における安定多様体そのものを求めることはほゞ不可能である。そのため,この引力圏境界の根元集合に着目し,高次元空間に対して夾叉軌道法を適用することによって根元集合を求めることに成功した。特に重要な成果は,この根元集合が,パラメータの変化に伴って周期倍分岐を経てカオス状熊に到っていることを突き止めたことである。

従来明かにされている生成的な分岐現象を概観してより広範囲かつ精巧な分類案を作った。この分類は不確定な結果を伴う分岐という重要な現象を含んでいる。さらに系を不安定にする原因となる鞍型構造が秩序的か,あるいはカオ的かにも着目している。これらの基本的な成果はほゞ完成しており近いうちに投稿可能な段階にいたるだろう。時間遅れをもつ制御系の問題は,時間遅れをもつ常微分方程式,あるいは微分差分方程式で記述される。この代表的な最初の方程式は船のローリングを制御する問題に関連して,ミノルスキー氏によって導かれた。この種の問題は厳密には無限次元の状熊空間内で論じられるべきものであるが,十分大きな有限次元の状熊空間における問題によって近似されうるものと考えられる。本研究では対象とする系の動作が百数十次元の状熊空間における問題として近似されうるだろうと言う仮定のもとで,数値実験を行った。ここでも主要な問題は引理圏境界であり,これは制御系が安定な動作をするための安全圏の境界を意味している。例えば,船がローリングしても転覆するか復元するかの境界である。このような引力圏境界の構造を把握することは重要であるが容易でない。引力圏は一般に空間の次元より一次元低い不安定軌道(根元集合)の安定多様体で表されるが,高次元空間における安定多様体そのものを求めることはほゞ不可能である。そのため,この引力圏境界の根元集合に着目し,高次元空間に対して夾叉軌道法を適用することによって根元集合を求めることに成功した。特に重要な成果は,この根元集合が,パラメータの変化に伴って周期倍分岐を経てカオス状熊に到っていることを突き止めたことである。
初期嗅覚回路形成における嗅プラコード由来移動細胞の役割

様々な動物種で、嗅プラコード上皮から分化ニューロンマーカーを発現し間葉組織中に移動する細胞群が報告されている。ニワトリ初期胚で嗅プラコード上皮と終脳とをつなぐ移動細胞索を物理的に破壊すると嗅神経路形成が阻害されたことから、初期移動細胞群は嗅神経路形成のガイドポストとして機能する可能性を考えた。この仮説を検証するために、最終分裂細胞を標識するチミジンアナログを用いて初期嗅プラコード由来移動細胞の標識追跡実験を前年度から開始した。嗅プラコード上皮からの細胞移動開始前の2日胚でBrdU標識されたプラコード細胞の多くは6.5日胚で嗅神経と前脳の結合領域近傍に分布するが、3.5日胚のBrdU標識細胞はこの領域の外側部には分布しない。嗅神経路における初期移動細胞が示す特異的な配置は一過性なのか継続するのかを知るために、今年度は、嗅球の糸球体構造が明瞭となる11.5日胚で、チミジンアナログのひとつであるEdUによる早期標識細胞の分布を調べた。EdU検出は化学反応であることから、抗体を用いるBrdU検出に比べ非特異的反応がなく、組織抗原性も保持される。2日胚でEdUを投与し、11.5日胚でEdU標識細胞の分布を調べると、嗅上皮から出た嗅神経小束の合流部位、鼻中隔の嗅神経束および嗅神経束が小束に分散し嗅球との結合を開始する領域にEdU標識細胞の集塊が観察された。その一部は成熟ニューロンマーカーのカルビンジン28を発現していた。後期胚の嗅神経路途上に早期の嗅プラコード由来移動細胞を含む神経節様の構造が確認された。これらは初期移動細胞索の残存構造と考えられ、その配置は初期嗅プラコード由来移動細胞が嗅神経伸長の道標として機能する可能性を示唆する。1.早期に発生し移動する嗅プラコード上皮細胞を発生中期まで標識追跡した結果、嗅神経路途上に神経節様構造を形成することが判明した。特に嗅球近傍の細胞集団は、これを基点として嗅神経が分散し嗅球投射を開始していることから、初期の嗅神経伸長の道標として機能する可能性を示す形態学的証拠として重要である。初期細胞索におけるガイドポスト細胞の特定化はできていないが、少なくとも初期の嗅プラコード由来移動細胞は嗅神経路の特定部位に配置し、嗅神経伸長に関与する可能性が示された。また、初期嗅プラコード由来移動細胞の一部はカルビンジン28陽性ニューロンとして11.5日胚の嗅覚部に定着していた。ニワトリ成体の鼻中隔にはゴナドトロピン放出ホルモン(GnRH)産生ニューロンが分布し、終神経節ニューロンとして区分されているが、その発生過程はわかっていない。今回の結果は、多くの動物種に存在する嗅覚部から嗅球にかけて分布する終神経節ニューロンの起源を示す証拠のひとつになると考えられる。2.神経線維マーカーを発現しない6.5日胚細胞塊は嗅神経と終脳の結合部位近くに観察される。初期細胞索の残存組織であるという仮説は、11.5日胚の嗅神経路途上に初期EdU標識細胞の集塊が確認されたことから、さらに詳細な細胞標識追跡実験を行うことで解明できる可能性が出てきた。3.初期細胞索の役割を調べる実験として計画した細胞表面に発現するポリシアル酸(PSA)の特異的消化酵素投与によるPSA分子機能阻害実験については、初期胚操作における技術的問題から成果は得られていない。(1)嗅プラコード上皮から移動する初期の細胞群は嗅神経伸長の道標となる可能性を示す形態学的証拠から、初期嗅覚路形成における嗅プラコード由来移動細胞の重要性がより明確になった。マウス、ラットでは、電子顕微鏡観察から嗅プラコード上皮からの細胞移動は嗅神経伸長と同時であるとされている。一方、ニワトリ胚では嗅細胞の軸索がいつ伸長するのかについての詳細な報告はなされていない。嗅プラコード上皮からの細胞移動は嗅神経伸長に先立つのか、初期段階の嗅神経伸長について電子顕微鏡レベルによる形態観察を行う。(2)2.5日胚(発生ステージ18)に観察される初期細胞索は嗅上皮と終脳とをつなぐ構造で、発生ステージ14ー16(2日胚)生まれの嗅プラコード上皮細胞の配置を確認しているが、構成する細胞の一部にしかすぎない。初期細胞索におけるガイドポスト細胞の候補を検討する手がかりとして、細胞索を構成する細胞群の発生日時を明らかにする。より早い発生ステージでEdU標識された嗅プラコード上皮細胞は初期細胞索に配置するか、特に終脳との接触部位への配置に着目し検討する。嗅覚器原基の嗅プラコードからは嗅細胞以外に間葉組織中へと移動する細胞が生じる。その一部は視床下部へ移動し生殖機能を司るGnRHニューロンとなる。ニワトリ胚では、嗅神経伸長やGnRHニューロン移動以前に移動細胞がプラコード上皮と終脳間に細胞索を形成することから、初期の嗅プラコード由来移動細胞が嗅覚路形成のガイドポストとして関与する可能性が想定された。この仮説を検証するために、本年度は初期嗅プラコード由来移動細胞の特性と移動動態の観察および初期細胞索の破壊実験を行い、次の結果を得た。1初期嗅プラコード由来移動細胞はポリシアル酸(PSA)、成長関連タンパク質43(GAP43)、HuC/Dを発現するが、それ以外にリーリンを特異的に発現することが判明した。

細胞索の形成は、st15から始まりst17-18に原型ができあがることを確認した。2初期移動が始まる2.5日胚(E2.5、st15-16)の嗅プラコード上皮にGFP発現ベクターをエレクトロポレーションによって導入し、GFP標識細胞を経時的に追跡した。GFP標識細胞は48時間後(E5)には嗅神経と終脳の結合部位に細胞集塊を形成した。この領域をE6で観察すると、GFP標識細胞の分布は内・外側全体にわたっていた。一方、嗅神経伸長開始のE3.5(st21-22)でGFP標識し、E6で嗅神経と終脳の結合部位を調べると、後期GFP標識細胞はGnRHニューロンの移動経路である内側に偏在した。早期嗅プラコード由来移動細胞は嗅神経投射部位に定着し、嗅神経投射のガイドポストとなっている可能性を示唆する。3極細ガラス針を用いてst18細胞索の破壊を行ない、3日後で調べると、嗅神経やGnRHニューロンは終脳には到達せず、間葉組織中に集塊を形成した。嗅プラコード由来細胞索は初期嗅神経伸長やGnRHニューロンの移動に必須であることが判明した。1.嗅プラコード由来移動細胞はリーリンを特異的に発現することが判明したことから、初期の嗅プラコード由来移動細胞はニューロンに分化した細胞であることがよりはっきりとした。リーリンは大脳皮質形成過程のパイオニアニューロンであるカハール・レティウス細胞に発現する分子であり、嗅プラコード由来移動細胞の役割を考える上で有用な知見である。2.E2.5細胞索の破壊実験から、細胞索が嗅神経投射とGnRHニューロンの脳への移動に必須であることが判明し、早期嗅プラコード由来移動細胞の重要性が明らかとなった。細胞索という構造の破壊であるため、最初に嗅プラコードから移動する細胞(パイオニアニューロン)がガイドポスト細胞となるかどうかについては、今後調べる必要がある。3.嗅プラコード由来移動細胞のGFP標識追跡実験から、初期の嗅プラコード由来移動細胞の一部はガイドポスト細胞として嗅神経の投射部位に定着することが示された。このことは、予備実験で得ているE6.5の嗅神経投射部位に観察される神経線維マーカーに染まらない細胞塊との関連性を予測させる。4.E6.5細胞塊の細胞特性を調べる実験は滞っているため、平成29年度は様々な分子マーカーの発現パターンを調べる実験を進めていく。初期の嗅神経がいかにして終脳の嗅球原基と神経結合するか、そのメカニズムについてはよくわかっていない。近年、複数の動物種において、嗅神経伸長に先だって嗅プラコード上皮から分化ニューロンマーカーを発現する細胞が間葉組織中に移動することが報告され、嗅神経路形成の最初の足がかりとして重要である可能性が想定された。ニワトリ2.5日胚では嗅プラコード上皮と終脳間に初期の移動細胞索が観察される。この初期細胞索の物理的破壊は嗅神経の前脳投射および嗅プラコード由来GnRHニューロンの脳内進入を阻害することから、初期嗅神経投射に対する細胞索の重要性が示された。今年度は、初期移動細胞の動態を調べるために、チミジンアナログのブロモデオキシウリジン(BrdU)を用いた細胞標識追跡実験を行った。移動開始前のステージ12(2日胚)にBrdU標識された嗅プラコード細胞はステージ18の細胞索に観察され、早期に発生した嗅プラコード細胞は早期に移動し、初期細胞索の構成要素となることが示された。