hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
脳微小循環に関わる神経－グリア－血管相互作用におけるアストロサイトの役割の解明

アストロサイトまたはニューロンだけに光感受性蛋白チャネルロドプシン2を発現したマウスに光刺激を加えたところ、いずれも強度依存的に脳血流が増大した。さらに、薬理学的実験から、それぞれ独立した血流調節機序を有していることが示された。大脳皮質拡延性抑制(CSD)発生時には著しい軟膜動脈と穿通動脈の収縮と拡張、毛細血管内赤血球速度の低下、頻回発生時には穿通動脈拡張と赤血球速度の増加が繰り返された。田村変法による中大脳動脈一時閉塞に伴う脳虚血時にCSDが発生すると梗塞巣の形成・拡大に関与する可能性が認められた。家族性片麻痺性片頭痛2型モデルマウスではCSD感受性が高く、CSDからの回復が遅延した。脳内では神経・グリア細胞・血管はneurovascular unit(NVU)を形成し、相互に連絡を取り合っている。グリア細胞の1種アストロサイトは毛細血管を覆っており、脳微小循環に多大な影響を及ぼす。NVUにおけるアストロサイトの役割、病態時の状態を解明するため、光感受性タンパクであるチャネルロドプシン(ChR2)をアストロサイトに特異的に発現させたマウス大脳に光を照射し、アストロサイトに脱分極を生じさせると広範な脳血流の上昇が認められることを見いだした。ウレタン麻酔下で左頭頂骨を露出し、頭骨上からレーザースペックル法を用いて脳血流動態を解析した。経頭蓋もしくは頭骨を除去し脳表に直接、青色光(波長488 nm)を照射したところ、照射部位より広範囲にて迅速な血流増加反応が繰り返し惹起された。次に、BaCl2、4-アミノピリジン、インドメタシン、テトロドトキシン)をそれぞれ硬膜下に滴下し、光刺激に対する脳血流変化率をコントロール群(生理食塩水)と比較したところ、電位依存性および内向き整流カリウムチャネルがアストロサイト賦活による血流上昇の機序に関与していることが明らかになった。さらに、神経およびグリア細胞の一過性興奮が周囲に伝播する反応である大脳皮質拡延性抑制(CSD)誘発時の血流調節機序を検討するため、共焦点レーザー顕微鏡、二光子顕微鏡を用いて脳表の軟膜動脈、実質内穿通動脈の口径変化を経時的に計測した。その結果、初回CSD通過時には軟膜動脈・穿通動脈ともに著しい収縮および軽い拡張反応が続き、頻回通過時には収縮反応はほとんど認められなくなるとともに、穿通動脈の著しい拡張反応が繰り返された。同時に記録したレーザードップラー血流計によるCSD通過時の血流増加反応には穿通動脈の拡張作用が深く関与していることが明らかになった。NVUにおけるアストロサイトの役割、病態時の状態を解明するため、光感受性タンパクの1種であるチャネルロドプシン2(ChR2)をアストロサイトだけに特異的に発現させたマウス大脳に光を照射して脱分極を生じさせると、広範な脳血流の増加を来すことを見いだした。ウレタン麻酔下で左頭頂骨を露出し、青色レーザー光(波長488nm)を照射したところ、照射部位より広範囲で迅速な脳血流増加反応が繰り返し惹起された。次に、頭頂骨の一部を除去し、脳表に直接照射した場合の脳血流動態を観察し、各種阻害剤を脳表に滴下後の脳血流反応と比較することにより、そのメカニズムの解明を試みた。さらに、ChR2をニューロンに発現させたマウスにおいて同様の実験を行い、アストロサイトおよびニューロン賦活に伴い、異なるメカニズムを介して血流増加反応が惹起されることを明らかになった。さらに、神経およびグリア細胞の一過性興奮が周囲に伝播する反応である大脳皮質拡延性抑制(CSD)誘発時の脳血流調節機序を検討するため、二光子顕微鏡、高速度カメラ共焦点レーザー顕微鏡を用いて脳実質内穿通動脈口径、毛細血管内赤血球速度を計測した。初回CSD通過時には著しい穿通動脈収縮と毛細血管内赤血球速度の低下、頻回CSD通過時には動脈拡張と毛細血管内赤血球速度の増加が繰り返されることが明らかになった。一方、アストロサイトのNa-K-pumpノックアウトマウスにおけるCSD感受性および反応性を検討したところ、CSD誘発閾値が低下し、CSDからの回復が遅延するが、脳血流反応には影響しないことが明らかになった。光照射によってアストロサイトおよびニューロンのみを特異的に刺激することにより、異なるメカニズムを介して脳血流が増加することを明らかにした。国内外で学会発表を行い、アストロサイト刺激時の反応に関してはScentific Reportsに掲載された。更に、ニューロン刺激時の反応の関して専門誌に投稿する論文を作成中である。CSD誘発時の穿通動脈口径の経時的変化についてはJournal of Cerebral Blood Flow and Metabolismに掲載された。毛細血管内赤血球速度の変化に関して国内外で学会発表を行い、現在論文作成中である。さらに、アストロサイトのNa-K-pumpノックアウトマウスにおけるCSD感受性および反応性に関しては国内学会にて発表を行った。脳内では、神経細胞・グリア細胞・毛細血管が相互に連絡を持ち、neurovascular unit (NVU)を形成している。すなわち、神経細胞やグリア細胞の活動が局所微小血流に影響を及ぼしている。

そのメカニズムを解明するため、光感受性タンパクの1種であるチャネルロドプシン2(ChR2)を神経細胞あるいはグリア細胞(アストロサイト)に特異的に発現させた遺伝子改変マウスを用い、光照射によって神経細胞あるいはアストロサイトのみを刺激した際の血流の変化を計測した。どちらの場合も強度依存的に血流が増大し、その閾値は同程度であったこと、神経細胞のみを刺激した方が刺激中心部の血流増加が著しく、周辺部における血流変化は減衰していたこと、薬理学的実験結果から、神経細胞刺激による血流変化には細胞へのナトリウムイオン流入やグルタミン酸受容体が関与し、アストロサイト刺激による血流変化には細胞からのカリウムイオン流出や細胞間ギャップジャンクションが関与していることが明らかになった。一方、神経およびグリア細胞の一過性興奮とそれに続く持続的抑制が周囲に伝播する反応である大脳皮質性拡延性抑制(CSD)あるいは脳虚血時に発生する拡延性脱分極(SD)が大脳皮質の微小血流に及ぼす作用について検討した。初回CSD発生時には著しい穿通動脈収縮と毛細血管内赤血球速度の低下、頻回発生時には穿通動脈拡張と赤血球速度の増加が繰り返された。中大脳動脈一時閉塞に伴う脳虚血時にSDが発生しなかった場合は梗塞巣が形成されず、発生した場合には同様な血流変化が観察され、発生回数に応じて梗塞領域が増大する傾向が認められた。さらに、アストロサイトのNa-K-pumpノックアウトマウスではCSD感受性が亢進しており、CSDからの回復が遅延することが明らかになった。光照射によってアストロサイトおよびニューロンのみを特異的に刺激した際の微小血流変化特性を明らかにした。国内外で学会発表を行い、アストロサイト刺激による血流変化についてはScientific Reportsに掲載された。ニューロン刺激による血流変化特性とアストロサイト刺激との差異および薬理的手法によるメカニズムの検討を進め、専門誌への投稿を計画中である。CSD誘発時の穿通動脈口径の経時的変化についてはJournal of Cerebral Blood Flow and Metabolismに掲載された。毛細血管内赤血球速度の経時的変化については現在論文を作成中である。さらに、Na-K-pumpノックアウトマウスにおけるCSD感受性および反応性に関して論文を作成し、専門誌に投稿した。アストロサイトあるいはニューロンだけに光感受性タンパクの1種であるチャネルロドプシン2を発現したマウスを用い、光照射によって刺激を加えたところ、いずれの場合も強度依存的に脳血流が増大し、その閾値は同程度であった。さらに、薬理学的実験から、ニューロン刺激による血流変化には細胞へのナトリウムイオンの流入、グルタミン酸受容体が関与し、アストロサイト刺激による血流変化には細胞からのカリウムイオンの流出、細胞間ギャップジャンクションが関与していることを明らかにした。一方、ニューロンおよびグリア細胞の一過性興奮とそれに続く持続的抑制が周囲に伝播する反応である大脳皮質拡延性抑制(CSD)あるいは脳虚血時に発生する拡延性脱分極(SD)が大脳皮質の微小血流に及ぼす作用について検討した。初回CSD発生時には著しい軟膜動脈と穿通動脈収縮と拡張、毛細血管内赤血球速度の低下、頻回発生時には穿通動脈拡張と赤血球速度の増加が繰り返されたことから、CSD発生時の局所脳血流には穿通動脈の挙動が重要であり、実質内では動脈の変化に先んじて毛細血管内赤血球速度が増大することがわかった。
結び目の多項式不変量と3次元多様体の位相不変量の研究

結び目や絡み目、3次元多様体の幾何学的な情報を多項式不変量を用いて、解析することに興味を抱いて研究を行ってきた。とくにここ2年程は、結び目の幾何学的な位相不変量である結び目解消数とJones多項式との関係について研究を行ってきた。その結果、Jones多項式によって、結び目解消数を評価(詳しくは、結び目解消数が1かどうかを判定)することが出来るという事実を証明した。しかしながら、他の不変量、とくにskein多項式やKauffman多項式が結び目解消数を評価するかどうかは、まだよく分かっていないというのが現状であった。また、結び目解消数として、H(m)型結び目解消数を考えた場合、n=2のとき、Jones多項式+Conway多項式で結び目解消数を評価できるという結果も得ていたが、nが一般の場合には、まだよく分かっていないという状況であった。本研究においては、これらの不明な点を解明しようというのが主な目標であったが、その結果、いくつかの事柄が明らかになった。まず、結び目解消数と同様に定義される絡み目解消数に対して、skein多項式がその評価に利用できることが示せた。例えば、2成分の絡み目の絡み目解消数が1のものは、2つのタイプに分けられるが、そのうちの一方について、skein多項式のある係数多項式が有用であるという定理を示すことが出来た。さらに、H(m)型結び目解消数について、nころのとき、結び目解消数と他の不変量(△型結び目解消数、4次元種類など)との関係式を導くことが出来、応用として他の不変量の決定に利用できる結果が示せた。しかしながら、Kauffman多項式と結び目解消数との関係はいまだ謎のままであるので、そのあたりが今後の研究課題としてあげられるだろう。
順天府档案に見る清代の「行政訴訟」―巴県档案との比較を中心に

主に計画通りに研究を進めている。昨年度の調査に加えて、『順天府档案』以外の档案史料を調査収集することを計画しました。本申請研究では主に『順天府档案』を利用するが、それを相対化するためにほかの地方档案、とりわけ河北省档案館所蔵の『獲鹿県档案』を収集する目的で中国河北省石家庄市の河北省档案館を訪問して調査収集するほか、中国の上海図書館と北京大学図書館をも訪れた。ほかに、順天府档案の白黒写真で確認できなかったものを確かめるために、中国第一歴史档案館も訪問した。昨年度に続いて、京都大学が購入した順天府档案のマイクロフィルムの焼き付けをし、計2766枚の写真をもとに順天府档案の解読を行い、青苗会・郷約をはじめとする社会末端組織とその世話役の役割と権能について研究をし、論考および学会発表を準備している。本来予定した「今年度においては、公務執行にかかわる郷保の役割に重点を置き、郷保の言動に対する不満を持ち、郷保の罷免を求める行政訴訟の有無を中心に調査収集した資料を解読する」という計画の達成がほぼできている。上記の焼き付けと会読に関連して、研究に必要な人名・地名・官職などの固有名詞を集めパソコンに入力し、初歩的なデータベースの作成に向けてデータの入力作業を行った。また、その成果の一つとして、順天府档案をはじめ、地方志などの資料をも取り入れ、これまでもっとも詳細な清代宝テイ県知県の人名録を作成して公表した。なお、2018においては、国際学会での発表は1回、学術講演3回を行った。ほかに、研究論文1、書評1、資料1を執筆し公刊させた。主な理由は以下の2点をあげることができる。1)これまでの経験を踏まえながら、当初の計画について合理的に考えていたこと2)計画の実施に際して、資金・時間を合理的に配分したこと3)資料調査、特に海外で資料調査をする際に、必要な現地情報を収集したうえ、現地の研究者の協力を求めていたこと1)これまで十分に調査収集できなかったものについて、執筆予定論文の必要に応じて追加的な調査収集を行う。現時点では第一歴史档案館(北京市)と河北省档案館(石家庄市)などを予定している。2)引き続き『順天府档案』のマイクロフィルムから、必要部分の焼き付けをする3)档案資料解読・研究を行い、とりわけ地方末端組織の維持に必要な財政措置、およびその組織がかかわっていた税金徴収の問題に重点を置き調査収集した資料を解読する。4)行政訴訟に関する清代法制度の研究を行い、必要に応じて次の科学研究費の申請を準備する主に計画通りに研究を進めている。申請者は近年、これまでになかった「行政訴訟」という視角を用いて前近代中国の専制支配を研究し、「通常持つ専制支配像には馴染みにくい」訴訟類型=行政訴訟への注意を喚起することを通して、いわゆる前近代中国の「専制国家像」の再検討に努めた。こうした研究の延長線上にある本研究の目的は、『順天府档案』を基礎史料として利用し、華北の地方行政に焦点を当て、他地域とも比較をして、前近代中国における専制支配のあり方、または支配者に対する民衆の期待、および民衆に対する支配者の期待を究明し、それをもって前近代中国ないし現代中国の国家統治のあり方を再認識する、ということにある。平成29年度においては、交付申請の実施計画で予定する、1『順天府档案』に必要な部分、5リール焼付けをしたこと、2国立国会図書館、国立公文書館、中国第一歴史档案館をはじめとする図書館や資料館に赴き、関連資料の調査収集を行ったことのほか、上記1の資料を含めて、これまで収集した巴県档案などの档案を、郷保の役割、郷保の選出またはその選出にかかわる在地勢力の要望、および郷保の人選をめぐる異なる在地勢力間の対立、とそれにかかわる行政訴訟の様態を中心に解読作業を行った。なお、平成29年度においては、国際学会を含めて学会での発表は2回、学術講演3回を行った。ほかに、研究論文を3本執筆したが、そのうちの2本はすでに公刊された。1これまでの経験を踏まえながら、当初の計画について合理的に考えていたこと2資料調査、特に海外で資料調査をする際に、必要な現地情報を収集したうえ、現地の研究者の協力を求めていたこと主に計画通りに研究を進めている。

昨年度に続いて、京都大学が購入した順天府档案のマイクロフィルムの焼き付けをし、計2766枚の写真をもとに順天府档案の解読を行い、青苗会・郷約をはじめとする社会末端組織とその世話役の役割と権能について研究をし、論考および学会発表を準備している。本来予定した「今年度においては、公務執行にかかわる郷保の役割に重点を置き、郷保の言動に対する不満を持ち、郷保の罷免を求める行政訴訟の有無を中心に調査収集した資料を解読する」という計画の達成がほぼできている。上記の焼き付けと会読に関連して、研究に必要な人名・地名・官職などの固有名詞を集めパソコンに入力し、初歩的なデータベースの作成に向けてデータの入力作業を行った。また、その成果の一つとして、順天府档案をはじめ、地方志などの資料をも取り入れ、これまでもっとも詳細な清代宝テイ県知県の人名録を作成して公表した。なお、2018においては、国際学会での発表は1回、学術講演3回を行った。ほかに、研究論文1、書評1、資料1を執筆し公刊させた。主な理由は以下の2点をあげることができる。1)これまでの経験を踏まえながら、当初の計画について合理的に考えていたこと2)計画の実施に際して、資金・時間を合理的に配分したこと3)資料調査、特に海外で資料調査をする際に、必要な現地情報を収集したうえ、現地の研究者の協力を求めていたことまずは、平成30年度においては、平成29年度の調査をもとに『順天府档案』以外の档案史料、とりわけ『獲鹿県档案』と『巴県档案』を調査し、『順天府档案』との比較研究を行うことを予定している。なお、前年度に引き続き、『順天府档案』のマイクロフィルムから、必要部分を焼き付けをする。上記の作業をもとに、档案資料解読・研究を進める。次には、档案資料の解読・研究をするとともに、研究に必要な人名・地名・官職などの固有名詞を集めパソコンに入力し、初歩的なデータベースの作成に向けてデータの入力作業を行う。1)これまで十分に調査収集できなかったものについて、執筆予定論文の必要に応じて追加的な調査収集を行う。現時点では第一歴史档案館(北京市)と河北省档案館(石家庄市)などを予定している。2)引き続き『順天府档案』のマイクロフィルムから、必要部分の焼き付けをする3)档案資料解読・研究を行い、とりわけ地方末端組織の維持に必要な財政措置、およびその組織がかかわっていた税金徴収の問題に重点を置き調査収集した資料を解読する。4)行政訴訟に関する清代法制度の研究を行い、必要に応じて次の科学研究費の申請を準備する【次年度使用額が生じた理由】1本来、京都大学が所蔵している「順天府档案」の焼き付け対象を確認するための時間が予想以上にかかったことによって、十分な焼き付けができなかったこと。2上記1のことにより、資料整理のための人件費の発生がなかった。3海外現地調査(中国)の際に、先方の事情により、複写したい資料(『本朝則例類編』)の閲覧ができたものの、写真撮影ができなかったこと。【今年度の使用計画】」1「順天府档案」の焼き付けを継続的に行うこと。2そのための人件費を使用すること。3日本国内と海外現地調査で引き続き資料の調査収集を行うこと。【次年度使用額が生じた理由】(1)海外学術調査ならびに国際学会の参加に際して、必要旅費の一部が主催者負担となったため、本来予定した費用の一部を使用しなかったこと。(2)河北省档案館において、獲鹿県档案の閲覧ができたものの、写真撮影ができなかったため、資料費の一部を使用しなかったこと。【今年度の使用計画】(1)京都大学が所蔵する「順天府档案」を研究の進捗に応じて焼き付けを継続的に行う場合の費用に充てること。(2)日本国内と海外現地調査で引き続き資料の調査収集を行うこと。
数論的ゼータ関数の諸性質の相関性について

研究題目1「Steuding予想」については、2個の実係数ゼータ関数の同時普遍性、3個のゼータ関数間の同時普遍性を得ることに成功した。題目2「零点虚部をパラメーターとしたRiemann zeta関数z(s)の値分布」に関しては、dが1未満の正数である場合、z(s+idg)が零点虚部gの変動に伴い、普遍性を示すことを証明した。最後に、題目3「同時普遍性の算術パラメーター化」については、Dirichlet指標の変動に伴うDirichlet L関数の同時普遍性定理、ならびに実指標への制限を証明することに成功した(名越弘文氏との共同研究)。研究実施計画において5つの目標を立てたが、本年度は目的1「Steudeing予想の解決」達成に向けて大きな進展が見られた。一昨年に確立した2つの保型L関数間の同時普遍性の証明法(定符号正密度法)を拡張し、(i)「実係数を持つ数論的ゼータ関数2個間の同時普遍性」を名越弘文氏(群馬大学)との共同研究により証明した。その後、手法を更に改良し、(ii)「複素係数を持つ数論的ゼータ関数2個間の同時普遍性」を証明することに成功した。特に(ii)は、ある自然な条件の下でSteuding予想が成立することを指示している。一方、定符号正密度法を別方向に拡張することにより、3個のゼータ関数間、具体的には(iii)「リーマンゼータ関数と2個の保型L関数間の同時普遍性」を得ることに証明した。これは目的4「Steuding予想の多重化」に向けた第一歩である。年度後半からは目的3「Steuding予想の算術化」に向けた取り組みを名越氏と共同で行っている。2006年に私と名越氏は実Dirichlet指標χ_dの変動に伴いL関数L(s,χ_d)は普遍性を持つことを証明している。同結果を拡張し,(iv)「複数個のDirichlet L関数の指標の変動に伴う同時普遍性」、および(v)「実指標に制限した場合の、複数個のDirichlet L関数の同時普遍性」を証明することに成功した。昨年9月、リトアニアで開催された研究集会において結果(iii)について報告した。また、結果(i)(iv)(v)について現在共著論文を執筆中である。本年度前半は研究実施計画に掲げた5つの目標のうち,目標3「Steuding予想の算術化」に関する名越弘文氏(群馬大学)との共同研究が進んだ.申請者が確立した同時普遍性の証明法(定符号正密度法)を利用することで,(i)2つの指標付保型L関数L(s,f_1,χ_d),L(s,f_2,χ_d)の実指標χ_dの変動に伴う同時普遍性(ii) 2つのRankin-Selberg L関数L(s,f_1*g), L(s,f_2*g)$の保型形式gの変動に伴う同時普遍性を証明することに成功した.年度後半はこれらの結果と昨年度得た結果に関する論文執筆に主に取り組んだ.一方,昨年度から継続して取り組んでいた目標4「Steuding予想の多重化」については,今年度末,L.Pankowski氏(Adam Mickiewicz University ), Y. Lee氏(Incheon National University)らにより定符号正密度法と全く異なる手法を用いてほぼ完全な形で証明された.そのため,残念ながら目標4に関する研究は断念せざるを得ない状況となった.代わりの目標として多重佐藤-Tate予想の簡略化ともいえる「保型形式の係数符号の独立性」に取り組み始めたところである.本年度前半は,研究実施計画に掲げた5つの目標のうち,目標1「Steuding予想の解決」について名越弘文氏との共同研究が進展した.前年度に報告したように,Steuding予想自体はY.Lee氏,L. Pankowski氏,中村隆氏らの共同研究によりすでに解決されているが,彼らの手法は私が数年前に確立した定符号正密度法を用いないものであった.私と名越氏は定符号正密度法を用いて実係数のゼータ関数についてSteuding予想が成り立つことを証明した。この結果についての論文を雑誌「Acta Mathematica Hungarica」に投稿している。また、本年度後半は目標2「数論的ゼータ関数の零点分布から対応する多重ゼータ関数の値分布を調査する」についての研究が大きく進展した。申請者は数年前にゼータ関数ζ(s)(sは複素変数)を零点の虚部γ分だけ垂直方向に平行移動したζ(s+iγ)について,γを変動させることで任意の正則関数を一様近似できる「普遍性」が成り立つことを証明した。この結果を拡張し,1以下の正の実数δに対し,ζ(s+iδγ)についても同様の結果が成り立つことを証明した.この結果については平成28年9月にリトアニアで開催される研究集会「Theにおいて報告する予定である.研究題目1「Steuding予想」については、2個の実係数ゼータ関数の同時普遍性、3個のゼータ関数間の同時普遍性を得ることに成功した。

最後に、題目3「同時普遍性の算術パラメーター化」については、Dirichlet指標の変動に伴うDirichlet L関数の同時普遍性定理、ならびに実指標への制限を証明することに成功した(名越弘文氏との共同研究)。昨年度は目標1「Steuding予想の解決」をほぼ達成し,今年度は目標3「Steuding予想の算術化」に関する研究がかなり進んだ.その一方で目標4「Steuding予想の多重化」が第3者により達成されてしまった.目標2,5についてはまだ手付かずである.全体としてみると,研究計画の遂行はやや遅れていると言わざるを得ない状況である.解析的整数論目標2「Euler-Zagier和の値分布」,5「値分布,零点分布の独立性と係数の直行性の関連」に関する研究は進める一方で,目標4に代る新たな目標として「保型形式のフーリエ係数の符号分布の独立性」に取り組む予定である。保型形式のフーリエ係数の符号と実Dirichlet指標との類似点,相違点がE.Kowalski, K. Soundarajanら多くの数学者により研究されている.特に弱多重佐藤-Tate予想とも言える「異なる保型形式の係数符号の独立性」を確立することができれば,定符号正密度法を用いた多重Steuding予想の解決が可能となるだろう.研究実施計画に挙げた目的15のうち、25年度内の目的1については翌年度内達成の目処がついた。また、26年度の目的について、3については、名越氏との共同研究の体制が固まり、4については研究手段がほぼ確立したといえる状況である。他方25年度の目的2については、ほぼ手つかずに終わった。このように、目的への取り組み順序に変更はあったものの、全体として研究は順調に進んでいると考えている。2,3月に開催予定のセミナーに参加するため,交通費を多めに見積もっていたのですが,予定が合わないため,いくつかのセミナーへの参加を見送りました.そのため,未使用額として9,571円が残りました.単独の研究として目的4、名越氏との共同研究として目的3に並行して取り組む。年度区班からは目的2に向けて先鞭をつけたいと考えている。また、今年度は発表活動を積極的に行いたい。7ー8月にドイツで開催される研究集会ELAZにおいては結果(ii)について、9月の日本数学会秋季総合分科会においては結果(iv),(v)についての報告を行う予定である。また、結果(ii)(iii)についての単著論文、(i)(iv)(v)についての共著論文を年度内に仕上げ投稿する予定である。消耗品の購入に当てたいと思います.科研費の使用期限までに物品の購入を立て続けに行いました。使用可能残額の更新が間に合わず、未使用額として3708円が残りました。消耗品の購入に当てたいと思います。
内的モデルの理論と巨大基数

本研究では、内的モデルの理論、巨大基数、強制法の理論、連続体の基数不変量等の集合論の分野及びそれらの関係と純粋数学の他分野への応用についての研究を行った。研究の概略は以下のとおりである。1.内的モデルの極大性の種々の性質と初等的埋め込みについての研究。例えば、ある基数に対して、集合論のユニヴァースV上でJonsson性質が成り立つときに、どのような条件のもとで核モデルK上でその性質が成り立つのか調べた。2.無限時間テューリング機械についての研究。特に、λをインプット0を用いた計算のアウトプットであるwritable順序数の上限とし、γをインプット0を用いて停止した計算の長さの上限とすると、λ=γであることを示した。3.ZFCモデル上のコーエン実数の集合は空集合か痩せていない集合に限ることを証明した。4.連続体の基数不変量の、非可算基数の組合せ論的性質への影響についての研究。特に、測度の加法性を仮定すると、任意のCohen代数に対してMartinの公理MAが成り立つことを示した。一方、c【greater than or equal】N_2、零イデアルの被覆と*という組合せ論的原理が同時に成り立つことは無矛盾であることも証明した。6.自然数集合上の置換群Sym(ω)の任意のmaximal cofinitary部分群の大きさが、最小の痩せていない実数集合の濃度以上になることを証明した。7.ShelahとSpinasの結果を完全にするために、c=N_2を仮定すると、可算無限体上のGross空間が存在するという定理を得た。平成10年度は、強制法(forcing)の理論と実数集合の組合せ論的性質の関係およびその応用について中心に研究を行なった。1. Generic realの集合Cohen forcingやrandom forcingといったgeneric realを付け加える古典的な強制法によって、実数集合上のσ-idealと可測制の概念が関係づけられる。idealによってforcingのgeneric realの集合の大きさがどのように変化するかという問題について、JudahとShelahはrandom realの集合が空でない零集合になり得ることを示している。このことについて、cohen realの集合の場合は空集合かやせていない集合に限ることを証明した。この結果は他の関連する結果と共に論文“How Smali Can The Sets of Generics Be?"で発表の予定である。3. cohen拡大における組合せ論の原理S.Fuchinoによって得られたcohen拡大を保つ公理について、ある基数不変量はZFCで必ず小さくなるという結果と、別のある基数不変量は大きくなることが無矛盾であることを示した。これらの研究結果はS.FuchinoとL.Soukupとの共者論文として発表の予定である。平成11年度は、基数不変量と反復強制法の理論の関係及びその代数学への応用についての研究を行った。特に、cを連続体の濃度とすれば、c=N_2という仮設に焦点を絞った。1.連続体の基数不変量の、非可算基数の組合せ論的性質への影響。特に、測度の加法制を仮定すると、任意のCohen代数に対してMartinの公理MAが成り立つことを示した。一方、c【greater than or equal】N_2、零イデアルの被覆と〓という組合せ論的原理が同時に成り立つことは無矛盾であることも証明した。「零」を「痩」に置き換えた同様の無矛盾性は、渕野、ShelahとSoukupの関連した最近の研究によって得られた。2.Gross空間の組合せ論。Kを可算体、EをK上の非可算次元のベクトル空間とし、φ:E^2→Kを対称的双一次形式とする。任意の無限次元の部分空間U【less thanor equal】

Eに対して、直交補空間U^⊥の次元がdim(E)より小さいとき、(E,φ)をGross空間と呼ぶ。ShelahとSpinasは、c=N_2かつ有限体上のGross空間が存在しないことの無矛盾性を示し、Shelahは、c=N_3かつ可算体上のGross空間が存在しないことの無矛盾性を証明した。一方、こうした結果を完全にするために、c=N_2を仮定すると、可算無限体上のGross空間が存在するという定理を得た。3.完全集合公理とc=N_2oいくつかの適当な公理を仮定するとc=N_2が成り立つという、Godelの不完全な論法を修正した。そのGodelの公理の一つを分析することによって次の完全集合公理PSPに関する結果を得た。濃度がκ以上であり、実数部分集合族Γに属する任意の集合に対して、完全部分集合が存在することを、PSP(κ,Γ)が成り立つという。G_<N1>を濃度がN_1以下である開集合族の共通部分の族とし、δをdominating numberとすると、PSP(N_1,G_<N1>)とδ【greater than or equal】N_2が同値となる。
繰り返し荷重を受ける鋼板応力集中部の強度評価に関する理論的検討

本研究により得られた知見は次のようにまとめられる。まず、応力集中部である切欠きを持つ部材に対し様々な大きさの過大荷重による塑性履歴を与えた後、疲労試験を行い、塑性履歴により疲労強度が明確に影響を受けることが確認された。しかもそれは同じ塑性履歴の大きさでは応力集中の度合いが大きい程疲労強度の向上は明確であり、また応力集中が同じでは塑性履歴が極端に大きくない程度であるならば、塑性履歴が大きさとともに疲労強度が向上するが、極端に大きくなると逆に疲労強度が低下することが明らかになった。さらに疲労強度の向上が主として疲労破壊の第一段階である疲労き裂発生寿命に影響していることが疲労き裂進展の観測により示された。次にこの現象が塑性履歴により発生する残留応力であることを解析的に示し定量的に解明する弾塑性解析を行った。応力集中部に発生する非常に大きい変形を扱うために、大変形の影響を正確に考慮した弾塑性解析を行った。塑性理論としてはJ2流れ理論と等方、移動硬化を同時に含む複合硬化則を用いた。数値解析の方法としては有限要素法を用いた。実験に対応した条件で解析を行い、塑性履歴により応力集中部に発生する残留応力の様子を求めた。これによれば、等方硬化を仮定すると、先の実験の結果をほぼ説明できることが明らかになった。しかも仮定の範囲内では実験で与えた程度の繰り返し荷重による残留応力の消失は認められず、これもまた実験結果を支持するものである。塑性履歴による残留応力の発生は塑性変形によりおこる応力集中部の不適合ひずみによるものであることも示された。以上、過大荷重により応力集中部に生じる塑性履歴と疲労強度の関係は、残留応力を考えることにより従来の破壊力学の疲労強度への応用と基本的に同じアプロ-チが可能であることが示され、その工学的意味は大きいと思われる。今年度の研究で得られた知見はつぎの通りである。実験解析として応力集中部(切り欠き)を持つ試験片に対し種々の塑性履歴をあらかじめ与え、疲労試験を行なったところ、塑性履歴の比較的小さい試験片に対しては疲労強度は明確な向上を示した。その一方で、より大きな塑性履歴に対しては、いったん向上した疲労強度が低下するという現象がみられた。塑性履歴は、主として疲労亀裂発生寿命に大きく影響しており、亀裂進展寿命にはほとんど関係していないことが明らになった。次に、実験結果の解析的説明を行なうために応力集中部での応力分布状態を弾塑性解析によって求めた。全体としての平均のひずみが小さいものであっても応力集中部では大きく変形しており微小変形にもとづく解析は不適当であるため、大変形弾塑性解析を行なうものとした。弾塑性理論としては、弾性に増分形弾性、塑性にJ2関連流れ理論を用いた。ひずみ硬化則としては、等方硬化、移動硬化をともにとりいれた複合硬化則を用いた。境界値問題に対する数値解法としては有限要素法によった。疲労実験で対象とした塑性履歴をあたえ、それにより応力集中部に発生する残留応力の分布を求めたところ、圧縮残留応力は塑性履歴が大きくなると消失していく傾向が明らかになった。これは疲労実験の結果と非常によく対応するものであった。残留応力は塑性履歴の大きさに最も敏感であるといえるが鋼材のひずみ硬化特性にも依存しており、強い移動硬化を仮定した場合には、除荷においても塑性変形が起こることが認められた。ここで用いた仮定の範囲では、疲労試験程度の繰り返し荷重をあたえても残留応力の消失は認められなかった。

実験に即したひずみ硬化特性を考えることにより塑性履歴と疲労強度との関係はより明確になるものと考えられる。今年度は、塑性履歴の疲労寿命への影響についてその支配要因を明確にし、より定量的な評価を行なう予定である。前年度の成果により、超過荷重が切欠き部材の疲労強度に影響を与えるのは、塑性履歴による残留応力が原因であることがほぼ確かめられた。今年度の研究により得られた知見は次のようにまとめられる。塑性履歴による切欠き部材の疲労強度をより定量的にかつ詳細に検討するためにいくつかの追加実験を行った。それによると塑性履歴が極端に大きくない程度で応力集中が同程度であれば、応力集中の大きい方が、塑性履歴の影響がやや大きいことが明らかになった。次に理論的な面としては、有限変形弾塑性理論による、数値解析をおこない、塑性履歴にとどまらず、除荷後の疲労試験で与える程度の繰り返し荷重での残留応力の変化についてより詳細な検討をおこなった。ここで、応力集中部に生じるひずみは非常に大きいので、有限変形の理論、また有限変形下の弾塑性理構成方程式の理論的な検討から見直すものとした。この場合の有限変形の影響が構造工学の場合とは異なり、絶対的な変位の大きさや、ひずみの大きさによりもたらされるものではなく、いわゆる接線剛性と応力の相対的な大きさとの関連で論じられなければならないことを明らかにした。このことは、土木工学の分野では必ずしも広く認識されていなかったことである。数値解析に有限要素法を用いることにより、繰り返し荷重と残留応力の関係について数値的に詳細な検討を行ったが、残留応力の明確な変化は、見られなかった。このことにより、もし一般に広く認められるように、残留応力が時間とともに減少するならば、それは繰り返し荷重が直接的な原因ではなく、材料の時間依存性など、むしろ材料学的な性質によるものであることが示唆された。したがって、材料の時間依存的挙動を解析に取り入れることが今後のこの種の研究の重要なひとつの方向である事が明らかになった。
実用文書からみる日本語の史的展開―中世から近代―

本年度は、実用文書を資料に、和化漢文と漢文訓読系文体の史的展開を研究した。成果は大きく(1)近代、(2)前近代にわけられる。(1)近代戦前、伝統を脱却し口語体判決を書いた裁判官たちの試行錯誤を追い、実用文書において漢文訓読系文体から口語体への脱却がどのように実現されたのかを分析した。その結果、口語体では当事者の主張の直接引用、裁判所から当事者への直接語りかけの形式等、現行(現代)の文体以上に読み手を強く意識したスタイルが用いられていることが明らかになった。一方で、文末形は旧来の「ナリ」「タリ」体を単純に「だ」「である」体に置き換えたり、文語を逐語訳的に口語に置き換えるなど、伝統のスタイルを大きくは脱していない面もみられた。こうした口語化の試みは様々な困難を伴ったが、そのひとつは口語による自由な表現の追求が「卑俗」「冗漫」に陥ることなく、漢文訓読系文体の「威厳」「洗練」をどのように維持するかという点にあったこともわかってきた。以上により、古来日本の公文書をなす主要な文体であった漢文訓読体が、近代末に口語体へと変移した実態を、主に言語と思想の観点で具体的に示すことができた。(2)前近代前近代の和化漢文資料(主に訴訟関係文書)を調査し、文法と語彙の観点から分析・記述を行った。第一に、和化漢文の文体成立を考えるうえで特に重要とみられる文法現象の実態を記述した。それらの文法現象には、個別性の強いものと、一般化したものとが混在しているが、本研究では、その混在の実態こそ「和化」の反映としてともに重要視し分析を行っている。そして、一般化した文法現象については、その規則を分析した。第二に、同じく和化漢文の文体成立を考えるうえで重要とみられる古文書語彙を収集し、意味を記述し、その意味に歴史的変化がみられるものについては変化を考察した。上記「(1)近代」については、成果の一部を論文等のかたちで公表することができた。「(2)前近代」については、変体漢文の文法現象と語彙に関して多角的に考察し、一部について結論を得られたので、論文等のかたちで公表予定である。前年度の「和化漢文」に関する成果を論文として公表するとともに、継続して文法と語彙の両面からその分析に取り組む。あわせて、和化漢文を成立させた社会的背景(階層・学問・交流等)についても周辺分野の成果を基礎として考察する。「仮名文書」の研究に着手し、当時の口語、特に庶民語について考察する。特に仮名で書かれた漢語に着目し、書き言葉であった漢語が、どのように庶民の口語として定着したのかを分析する。また、意味が未解明の仮名書き語について意味を明らかにしたい。近代について、植民地期の日本関係資料により口語化の実態と思想についての研究を深化させる。また、近代国内外で執筆された日本語教科書を新たに資料とし当時の口語と漢文訓読体について調査する。以上の研究により、近代と前近代との断絶と連続性について考察したい。

あわせて、和化漢文を成立させた社会的背景(階層・学問・交流等)についても周辺分野の成果を基礎として考察する。「仮名文書」の研究に着手し、当時の口語、特に庶民語について考察する。特に仮名で書かれた漢語に着目し、書き言葉であった漢語が、どのように庶民の口語として定着したのかを分析する。また、意味が未解明の仮名書き語について意味を明らかにしたい。近代について、植民地期の日本関係資料により口語化の実態と思想についての研究を深化させる。また、近代国内外で執筆された日本語教科書を新たに資料とし当時の口語と漢文訓読体について調査する。以上の研究により、近代と前近代との断絶と連続性について考察したい。本年度中に公表することをめざしていた論文の公表を次年度に見送ったため、人件費・謝金をその校閲・翻訳に使用する予定である。本年度は、学内およびインターネット上の無料の資料を活用できたため、資料収集費が予定より少なかったが、次年度は新たに予定している植民地期資料・近代日本語教科書をはじめ、実用文書資料収集のための物品費・旅費・複写費として活用する予定である。
細胞内物流システム制御におけるカルシウム依存性アダプター蛋白質ＡＬＧー２の役割

ALG-2の新規相互作用因子を新たに同定し、生化学的、細胞生物学的および構造生物学的解析を行い、(1)CHERPは核スペックルに集積しているが、生細胞蛍光イメージングによりALG-2がカルシウム刺激に応答して核スペックルに動員され、CHERP、ALG-2ともにIP3R1前駆体mRNAの選択的スプライシングに関与していること、(2)小胞体ーゴルジ体間の輸送小胞COPIIの被覆を構成する蛋白質Sec31AがもつALG-2結合モチーフ2型の結合部位がポケット3であり、1型モチーフの結合部位とは異なること、(3)ESCRTタンパク質VPS37B,VPS37CおよびIST1と結合することを明らかにした。(1)ALG-2の相互作用因子であるPLSCR3が細胞外に分泌される仕組みについて解析した結果、エクソソームと称される膜小胞に含まれた状態で分泌されることが判明した。ALG-2結合部位の変異体でも分泌され、分泌に対してALG-2は直接には関与していないと思われる。一方、パルミトイル化阻害剤添加によっても分泌は抑制されたが、PLSCR3のパルミトイル化部位のCysをAlaにアミノ酸置換した変異体は分泌が顕著に減少したことより、PLSCR3の脂質修飾が細胞外分泌に影響を及ぼすことも判明した。(2)ALG-2結合モチーフには少なくとも2種類あり、I型については結晶構造により既に分子認識機構を解明していた。しかし、II型についてPLSCR3由来ペプチドとの共結晶化は不成功であったが、結合部位のシミュレーションおよび変異体解析より、結合部位を推定した。また、Sec31A由来ペプチドとの共結晶化に成功し、構造の一端を解明することができ、I型とは異なる部位に結合することが判明した。今後は詳細な変異体解析が必要である。(3)ALG-2と相互作用する新規タンパク質としてPATL1を同定した。PATL1は細胞質においてmRNAの分解、翻訳抑制を行うことが知られており、P-bodyという非膜性の構造物を形成するが、それぞれの特異抗体を調製することにより、ALG-2も一部が細胞質顆粒P-bodyに斑点状に存在することを蛍光顕微鏡観察による細胞内局在解析により明らかにした。(4)ALG-2と相互作用する新規タンパク質として候補としてCHERPを見出したが、真の相互作用因子かどうか、また、生理機能について詳細な解析が必要である。(1)ALG-2結合モチーフには少なくとも2種類あり、I型については結晶構造により既に分子認識機構を解明していた。II型についてSec31A由来ペプチドとの共結晶化に成功し、I型とは異なる部位に結合することが判明した。また、変異体解析によりALG-2のどの残基が結合に重要であるかを明らかにした。さらに、8残基結合配列の系統的なアミノ酸置換体との定量的結合解析を行い、モチーフの精査を行った。精密化したモチーフを用いて新規相互作用因子を探索する方法の有効性について今後調査する価値が出てきた(2)ALG-2と相互作用する新規タンパク質のCHERPは恒常的にリン酸化されており、Ser/Argに富むSRタンパク質ファミリーに属すことを明らかにした。ALG-2の細胞内局在は、細胞質ではSec31Aと結合するため、初期分泌経路である小胞体(ER)からゴルジ体輸送に関わっているCOPII小胞が出芽するER exit siteに斑点状に観察されるが、核内では核質に均一に観察される。生細胞蛍光イメージング解析をしたところ、核内のCa2+を上昇させたとき、ALG-2は核内にスペックル状に濃縮されること、CHERPやSF3A2と共局在することが判明した。SC35やSF3A2はスプライシングに関与する因子であるため、CHERPおよびALG-2のスプライシング制御への影響が想定された。そこで、小胞体膜に存在するカルシウムイオンチャネルであるイノシトール3リン酸受容体のひとつIP3R1のpre-mRNAは選択的にスプライシングされることが報告されていたため、CHERPおよびALG-2の発現をRNA干渉により抑制効果を調べた。その結果、発現抑制によりエクソンが挿入されるバリアントが出現した。さらに、CHERPは転写活性状態のRNA polymerase複合体に相互作用していることも明らかとなった。(3)新規ALG-2相互作用因子としてESCRTシステムで機能するIST1とVPS37を見出した。(1)ALG-2の相互作用因子であるPLSCR3が細胞外にエクソソームと称される膜小胞に含まれた状態で分泌される仕組みを明らかにした。この分泌はセラミド合成阻害剤やパルミトイル化阻害剤添加によって抑制された。エンドソーム選別輸送複合体(ESCRT)の機能を阻害するVPS4Bの優勢機能抑制変異体の過剰発現により細胞外分泌が抑制され、多胞性エンドソームに蓄積した。

PLSCR3は多胞性エンドソームが形質膜と融合し、その内部小胞が細胞外に放出されて分泌されると思われる。ALG-2結合部位の欠損変異体でも分泌されることより、ALG-2のPLSCR3への結合が直接分泌に作用する可能性は低い。2)ALG-2結合モチーフには少なくとも2種類あり、I型については結晶構造により既に分子認識機構を解明していた。II型についてPLSCR3由来ペプチドとの共結晶化は不成功であったが、結合部位のシミュレーションおよび変異体解析より、結合部位を推定した。また、Sec31A由来ペプチドとの共結晶化に成功し、構造の一端を解明することができ、I型とは異なる部位に結合することが判明した。今後は詳細な変異体解析が必要である。(3)ALG-2と相互作用する新規タンパク質としてPATL1ならびにCHERPを同定した。PATL1は細胞質においてmRNAの分解、翻訳抑制を行うことが知られており、P-bodyという非膜性の構造物を形成するが、それぞれの特異抗体を調製することにより、ALG-2も一部がP-bodyに斑点状に存在することを蛍光顕微鏡観察による細胞内局在解析により明らかにした。CHERPはSer/Argに富むSRタンパク質ファミリーに属すこと、核内でSC35やSF3A2と同様に核スペックルとして存在することが判明し、pre-mRNAのスプライシングに関与していることが示唆された。さらに、新規ALG-2相互作用因子としてESCRTシステムで機能するIST1とVPS37を見出した。構造生物学的研究においては、年度内にALG-2とSec31Aペプチド複合体の結晶構造を完全解明する予定であった。当初、共結晶が得られなかったが、タンパク質の精製条件ならびにペプチドの残基数を変えることにより結晶化に成功した。データ取得が遅れたため、構造の精密化が遅れ、さらに変異体解析などに遅れが生じているが、共結晶が得られたことは非常に大きな成果である。新規相互作用タンパク質探索についてはおおむね順調に進展しており、PATL1に関して論文発表を行うことができた。25年度が最終年度であるため、記入しない。構造生物学的研究においては、年度内に結晶構造を完全解明する予定であったが、当初、共結晶化に失敗したがタンパク質の精製条件ならびにペプチドの残基数を変えることにより結晶化に成功した。新規相互作用タンパク質探索についてはおおむね順調に進展している。ALG-2の新規相互作用因子候補が他にも見つかり、真の相互作用因子であることの証明ならびに、結合モチーフの同定、細胞内局在や生理機能解析を行う必要がある。生理機能解析以外は従前の方法により遂行可能であるが、機能に関しては個々のタンパク質に関するこれまでの情報をもとに推測を行うとともに、過剰発現、発現抑制に伴う細胞形態、接着性、増殖などを指標に解析する必要がある。
大型連続組織切片の三次元構築による顔面軟組織解剖の解明

ヒト顔面の頬部全体、全層組織を切れ目のない組織切片像で観察することができた。本研究により以下のことが新たに判明した。(1)顔面皮下には独立した連続性のある浅筋膜は存在しない。ただし表情筋の浅層部は筋束がまばらになり線維成分が優位な構造をなすため、浅筋膜に同等とみなしうる。(2)顔面脂肪は浅層、深層の2層に分け、前者がいわゆる皮下脂肪、後者が表情筋の筋間脂肪とみなすことができる。さらに深層脂肪は顔面神経の走行帯に沿って亜分類可能である。(3)表情筋は口裂を形成する深層が最も基準となり、その上に順次重なる全4層で構築されている。以上の知見は顔面の発生過程や機能構造上の整合性をも説明する。平成23年度に引き続き御遺体より採取した顔面軟組織の大型薄層切片の採取、染色を行った。その方法は計画通りであり、資料をパラフィン固定したのちミクロトームで厚さ5μで切り、特注フィルムトランスファー法で移し取るという方法である。その後、染色をアザン染色、ヘマトキシリン・エオジン染色にて行い、画像は高解像度スキャナーで取り込んでデータとして蓄積した。24年度は御遺体1体の顔面半側のデータ収集が8割程度実施できた。これら切片作成、染色、取り込み作業と並行して、24年度後半からは画像三次元化構築へ向けたコンピューター処理を試行錯誤しながら実践を試みた。ところがこの段階で2つの困難に行き当たった。それは、実際に三次元化する初期段階で各画像の位置合わせに手間取ること、1枚当たりの画像サイズが比較的大きい(約3040メガバイト)ため、枚数が増えるにつれ処理速度が低下し、最終的にソフトがフリーズしてしまうこと、であった。この問題を打開するため、本研究に適したコンピューター環境が必要と考え、24年度後半の研究予算を控えめに制限し次年度へ繰り越すことで、次年度初頭に画像処理用ワークステーションの購入を計画している。なお、全体の画像三次元化は未完成ではあるが、多数の二次元画像を入手したことで新たな解剖学的知見が徐々に得られている。その中には臨床的に有用な新たな概念へつながるものがあり、24年度内に2つの国際学会で発表の機会を得た。第11回日韓形成外科学会と第1回アジア臨床解剖学会である。特に後者は今までの私の研究内容を知る国内の解剖学者からの要請を受けての国際シンポジウムでの発表であった。最終年度(平成25年度)は前半期で標本作製を終了し、後半期で画像処理に専念した。ただし、専用PCソフトを用いての画像三次元構築については、当初の予定通り順調には実践できず、研究期間内に完遂できなかった。問題点は各切片の色やスライス厚のばらつき、微妙な位置ずれであり、出来上がった画像はスムーズさにやや欠けていた.これについてはデータ処理法の問題であるので、さかのぼって適宜修正し、より精度の高い再構築は可能と思われ、今後も作業を継続していく所存である。全期間を通じて得られた研究結果は、二次元画像をもとにする知見ではあるが、以下のことが列挙される。1顔面の表情筋の層構造について言及できた。それは過去に提唱された層分類の概念を覆し、整然と分かりやすい新分類の提唱へとつながった。2顔面に複雑に存在する脂肪を層による分類として提唱できた。その際、各脂肪の局在性は顔面神経と三叉神経などの知覚神経の分布様式に密接に関係するという論理性が確立できた。3表情筋の皮筋としての性質(すなわち皮膚に停止するという性質)に着目し、どの筋が皮膚のどの部分に停止するかなどの詳細を解明できた。4臨床との関係においては、フェイスリフト手術などで取り沙汰される浅筋膜(SMASという)の新解釈を提唱することが出来た。これらの結果については関連する形成外科学系の学会や解剖学系の学会にて発表し、評価を得られたものと思う。なお、大きさ20×5cmの組織切片をフィルムトランスファー法で採取し、1枚の継ぎ目のない標本として作製、観察する手法についても高い評価を得た。本法のさらなる応用の可能性も示唆された。23年度は御遺体(男性1体)から顔面軟組織を全層で採取し、アルコールによる脱脂、脱水処理後パラフィン包埋して標本を作製した。ミクロトームの試料台に乗せるには大きさの制限があり、この第1標本は特に注目部位である頬部下顎を中心に作成した。そのため、前額、前頭部は割愛される形となった。予定通り5μの厚さで連続切片を作製した。

この際、川本氏考案の粘着フィルム(A4判)を切片の大きさに合わせて短冊状に切り、1枚のフィルムから最大数の切片が得られるように工夫した。切片が移し取られたフィルムはH-E染色用とアザン染色用に交互に取り分け、アルミ製の枠(自作品)に両端を貼って保存した(1枠に8枚貼れた)。ある程度切片が貯まったところで各染色を行った。5リットルの染色液が入るアルミ製の箱を準備し、5枠を一まとめにして1日2サイクル(すなわち計10枠)を行った。1年間でアザン染色35枠(切片としては280枚)、H-E染色25枠(200枚)を作製した。染色後はA4判のアクリル板に資料を貼っていき、約1週間ほど乾燥させた後、スキャナーで取り込み、画像データ(jpeg)として保存した。まだ第1標本全体を連続切片化しえていないので画像データの三次元構築は行っていない。しかし、得られた二次元画像の一部を用いて本研究内容の一部報告ともいえる学会発表(第16回日本顔学会大会、演題名:"Zygomatic line"その成因と形態学的分析)を行った。23年度の研究実施経験から、フィルムトランスファー法は切片のずれや分断がなく、大きな組織切片標本を作製するには実際に著しく有効であることが判明した。難を言えば、大きな切片(約20cm)であるために試料台の微妙な傾きで切片が部分的にかすれたり、厚くなったりすることが時々起こるが、正確な操作と慣れにより克服できる可能性が高いと考えている。実施検体数としては当初の計画よりやや遅れており、24年度末の時点で2個体目(御遺体として2体目)に取り掛かっている予定であったが、現在1個体目の最後の部分を作業中という段階である。遅れている理由には、次の二つがあり、第1点は薄層切片が連続で必ずしも正確に採取できない、すなわち厚さが微妙にずれたり、辺縁が欠けたりして随所にミクロトームの調整作業が入ってしまうこと、第2点として染色の精度に若干のばらつきが出てしまうこと、が挙げられる。また、上記(研究実績の概要)で示した通り、予定の画像処理が進んでいないことも遅れの原因である。1体目は23年度内に終えている予定であったが、薄層切片作成に思いのほか時間がかかり、年度内に1体目を終了できなかった。操作は手動であり、ミクロトームの調子(滑り具合)に作業スピードが左右されたり、刃の交換や滑走面の研磨といったメンテナンスが頻回に必要であった。このため、以後の染色と画像スキャンが遅れてしまった。しかし、この1年間で機械操作や切片をうまく採取するコツにはだいぶ慣れた感がある。次年度はもう少しスピードアップして進めていけるものと考えている。残りの資料作成(切片、染色)を早めに完遂し、次年度前半で2個体分を終了しておきたい。ミクロトームの問題に関しては解剖学講座所有の別のミクロトーム(電動式)に変更する予定である。また、もし今後も進展が遅れるようであれば、研究対象とする範囲を顔面の一部に限定して行うことも視野に入れる。たとえば顔面全体ではなく、頬部、眼周囲、口裂周囲などと範囲を抑えれば、ミクロトームのブレの問題も自ずと軽減し、作業効率はアップするものと考えられる。ただし、本研究ではフィルムトランスファー法を用いて大型切片採取を行うことが独創性の所以にて、切片の大きさには可能な限りこだわってみたい。このようしてに切片作成、染色を完了させた後は、画像処理に専念する。遅くとも25年度910月にはこのような態勢に移行し、本研究の最終目的である三次元化を目指す。