hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
宿主植物由来の菌根菌成長促進物質の解明

菌根菌は植物に感染し,養水分吸収を促進させて樹体成長を旺盛にさせるだけでなく,病害抵抗性を付与させ,果実品質などにも好影響を与えることが知られている.この菌の利用により新しい栽培法の構築ができると言われているが,その人工培養が困難であるため共生メカニズムは未だ解明されていない.本研究では菌根菌の宿主であるイネ科植物バヒアグラスを対象として,共生菌に対して直接作用する活性物質・共生関係の鍵となる分子を明らかとすることを目的として研究を展開した.宿主植物であるバヒアグラスの根を抽出し,VA菌根菌の菌糸成長を指標として分離を行い,糖質,フラボノイド(ユーパリチン),複数のペプチド類に活性を見出した.しかしながら,単離したペプチド類は微量であり活性の詳細な評価には至らなかった.活性の解析を目的として,ペプチド類の合成を行いロイシン,イソロイシン,プロリン,トリプトファン,フェニルアラニンを組み合わせ複数のペプチド類を合成した.現在までに各100mg程度の合成に成功している.特に,ロイシン,プロリン,トリプトファンを組み合わせたものは対照区と比較して5倍以上の活性を示した.同時に菌糸の成長を阻害する物質も見出している.これまでに短時間での大量合成法の確立に成功しており,今後はフィールドでの感染実験と宿主植物の成長を指標とした試験を実施する予定である.また,活性部位についても知見が得られたため,リンカーを用いて樹脂と結合することでアフィニティークロマトが可能となる.これにより,成長促進に関わる高分子を効率的に収集することを計画している.本研究の達成により,共生に関わる分子を明らかと出来ると考えている.菌根菌は植物に感染し,養水分吸収を促進させて樹体成長を旺盛にさせるだけでなく,病害抵抗性を付与させ,果実品質などにも好影響を与えることが知られている.この菌の利用により新しい栽培法の構築ができると言われているが,その人工培養が困難であるため共生メカニズムは未だ解明されていない.本研究では菌根菌の宿主であるイネ科植物バヒアグラスを対象として,共生菌に対して直接作用する活性物質・共生関係の鍵となる分子を明らかとすることを目的として研究を展開した.宿主植物であるバヒアグラスの根を抽出し,VA菌根菌の菌糸成長を指標として分離を行い,糖質,フラボノイド(ユーパリチン),複数のペプチド類に活性を見出した.しかしながら,単離したペプチド類は微量であり活性の詳細な評価には至らなかった.活性の解析を目的として,ペプチド類の合成を行いロイシン,イソロイシン,プロリン,トリプトファン,フェニルアラニンを組み合わせ複数のペプチド類を合成した.現在までに各100mg程度の合成に成功している.特に,ロイシン,プロリン,トリプトファンを組み合わせたものは対照区と比較して5倍以上の活性を示した.同時に菌糸の成長を阻害する物質も見出している.これまでに短時間での大量合成法の確立に成功しており,今後はフィールドでの感染実験と宿主植物の成長を指標とした試験を実施する予定である.また,活性部位についても知見が得られたため,リンカーを用いて樹脂と結合することでアフィニティークロマトが可能となる.これにより,成長促進に関わる高分子を効率的に収集することを計画している.本研究の達成により,共生に関わる分子を明らかと出来ると考えている.
相互適応可能な実世界インタラクションのための計算モデル・システムの構築

21世紀情報社会では、情報が量的に爆発するとともに質的な複雑さも増大し、人間と情報システムとの間に存在する様々なレベルのギャップが「デジタル・デバイドの普遍化」を招いている。本研究では、人間と情報システムとの自然なコミュニケーションによってこのギャップを解消することを目的とし、「息の合った」、「間合いの取れた」ヒューマン/マシン・インタラクションを実現するための計算モデルおよび、実世界インタラクションシステムの開発を行った。ソフトウェア・情報機器の多機能化、高機能化に伴い、情報システムの複雑性が爆発的に増大し、「デジタル・デバイドの普遍化」を招いている。こうした問題を克服し、老若男女すべての人々にとって、安心・快適な情報環境を構築するには、人間と情報システムとの間に存在する様々なレベルのギャップを、相互適応可能なマルチモーダル・インタラクションによって解消することが必要である。本研究は、インタラクションの動的側面に焦点を当て、「息の合った」、「間合いの取れた」ヒューマン/マシン・インタラクションを実現するための理論研究から実世界で機能するシステムの開発までを研究範囲とし、(1)複雑、多様なマルチモーダル・インタラクションを表現するためのハイブリッド・ダイナミカルシステムに関する理論研究、(2)人間同士の動的インタラクションの高精度マルチモーダル計測・分析、(3)ハイブリッド・ダイナミカルシステムに基づく相互適応可能なインタラクション機構の開発、(4)実世界インタラクションシステムの開発を目指している。本研究は、インタラクションの動的側面に焦点を当て、「息の合った」、「間合いの取れた」ヒューマン/マシン・インタラクションを実現するための計算モデルおよび、それに基づいた実世界インタラクションシステムの開発を行うことで、「相互適応可能なリアルタイム・インタラクション」の実現を目指す。上記の研究目的を達成するために、平成18年度は以下の研究を実施した。1.動的インタラクションのためのハイブリッド・コンピューティング・モデルの構築:物理的現象記述に適した力学系モデルとして線形システム理論、人間の動的な心的・知的活動の記述に適した情報系モデルとして時間区間論理を統合した、ハイブリッド・コンピューティングに関する理論モデルを構築した。2.個人差に対応した微妙な表情の分析・認識手法の開発:表情を生み出す顔の各部位(目、口など)の動きを、1で構築したモデルを用いて表現することによって、各部位間の運動開始・終了タイミングを抽出し、このタイミング構造を各人の個性に応じて分析することによって、作り笑いと自然な笑いが区別できること確認した。3.マルチメディア信号におけるメディア間のタイミング構造モデルの構築:異なるメディア信号間に存在する変化パターンの時間的相互依存性(マルチメディア・タイミング構造)を表現するための計算モデルを構築した。4.発語内行為に注目したインタラクション・アーカイブの構築:音声対話に現れる「間合い」の変化が顕著に現れる例として漫才を取り上げ、その対話コーパスを作成した。発話区間の切り出しだけでなく、個々の発話の「行為」(質問・陳述等)を記録しており、発話目的による間合いの変化を精密に分析可能となった。さらに、実世界における人物の行動を知るための基礎センシング技術として、下記の研究を行った。5.逐次型人物移動追跡の高精度化6.時系列フィルタと顔識別器の統合による頑健な3次元人物追跡本研究は、インタラクションの動的側面に焦点を当て、「息の合った」、「間合いの取れた」ヒューマン/マシン・インタラクションを実現するための計算モデルおよび、それに基づいた実世界インタラクションシステムの開発を目的としており、平成19年度は以下の研究を実施した。1.能動的な働きかけと反応観察による人の内部状態推定:システムが人に対してproactiveに働きかけ(提示タイミングの変更など)を行い、それに対する反応(視線・姿勢の変化など)を観察することで、能動的に心的状態を推定する枠組み(Mind Probing)を提案し、予備実験によってその有効性を示した。2.インタラクティブな情報提示システムのための非装着・非拘束な視線推定:複数台のカメラで観測した頭部画像から高精度に(約5°の精度)視線方向を計測する手法を開発した。3.Active AppearanceModelの動的選択に基づく不特定人物の顔追跡:類似した特徴を持つ顔クラスタを学習・選択することで、不特定のユーザに対して顔向きや視線を高精度で推定する手法を開発した。4.落語の役柄交替における視覚的「間合い」の解析:話者が1人であるにもかかわらず複数の役柄間での円滑な話者交替を表現している落語に着目し、分析を行った結果、落語における頭部動作のタイミングは、二者間会話における発話タイミングと類似した構造を持つという知見が得られた。5.視覚刺激提示による伝送遅延状況下での円滑な遠隔対話の実現:テレビ会議などの遠隔対話においては、伝送遅延によって自然な話者交替の実現が困難となる。そこで、上記4で得られた知見を利用し、人工的に生成した映像刺激(Visual Filler)を話者に提示することで、話者交替の間合いのずれを補間する新たな手法を提案した。

本研究は、インタラクションの動的側面に焦点を当て、「息の合った」、「間合いの取れた」ヒューマン/マシン・インタラクションを実現するための計算モデルおよび、それに基づいた実世界インタラクションシステムの開発を目的としでおり、平成20年度は以下の研究を実施した。1.口唇動作と音声のタイミング構造に基づく話者検出:人の発話における口唇動作と音声変化との間に存在する時間的構造(タイミング構造)をモデル化し、単一のカメラとマイクを入力とする場合でも高精度な話者検出が可能な手法を開発した。2.対話相手の心的状態を顕在化する働きかけとその効果の分析:.昨年度に提案したMind Probingは、システムが人に対してproactiveに働きかけを行い、それに対する反応を観察することで、能動的に心的状態を推定する枠組みである。この具体的設計を行うために人間同士の対話を分析した結果、顔向けを伴う働きかけが、相手の同意と不同意の場合の応答タイミングを顕著に変化させるという知見を得た。3. Hybrid Dynamical System対による「間の合った」対話のモデル化:昨年度までに提案したHybrid Dynamical System(以下HDS)を発話生成システムとして用い、これらHDS対の結合による対話モデルを構築した。このとき、一方のHDSが他方のHDSに同調するパラメータを導入することで、人間同士の対話における発話長分布を近似できることを確認した。4.対話の時間的構造に着目した聞き上手な留守番電話の設計:対話の導入部や中間部といった各フェーズでの応答を変化させることで、ユーザの発話を引き出すような聞き上手な対話システムの設計を行った。具体的状況として留守番電話の応答を想定した被験者実験を行い、ユーザのメッセージの残しやすさが改善されることを確認した。本研究は、インタラクションの動的側面に焦点を当て、「息の合った」、「間合いの取れた」ヒューマン/マシン・インタラクションを実現するための計算モデルおよび、それに基づいた実世界インタラクションシステムの開発を目的としており、平成21年度は以下の研究を実施した。1. Gaze Probing(動的イベント提示に基づく注視オブジェクト推定):ユーザがディスプレイ上に提示された複数のコンテンツを閲覧する状況において、各コンテンツに特徴的な動きをデザインとして組み込み、その動きと眼球運動との同期関係に基づいて注視コンテンツを推定する手法を開発した。2.提示情報切り替えに対する眼球運動の反応遅延に基づいた興味推定:システムがディスプレイ上の提示情報を動的に切り替え、その時の視線移動の遅れ時間に基づいて、興味対象を高い精度で推定できることを示した。3.ユーザの潜在的興味を顕在化させるインタラクション機能の実現:ユーザの視線移動に同期させてディスプレイ上に表示されたエージェントの眼球を移動させることによって、表示コンテンツに対するユーザの潜在的な興味を顕在化させることのできるインターフェイスを開発した。
物質と重力のダイナミクスに基づく蒸発するブラックホールの場の理論的定式化

1)シュワルツシルトブラックホール真空解に対して、量子効果がどの程度変更を与えるのかを一般的に調べた。具体的には、conformal matterを考え、4次元Weylアノマリーの効果を取り入れ、シュワルツシルト解に対する摂動解を構成した。すると、シュワルツシルト半径近傍の構造は、境界条件に大きく依存し、ホライズンを構成するにはfine tuningが必要であることがわかった。これは、typicalな球対称静的解はホライズンを持たないことを示しており、いかにホライズンが特異なものであるかを表している。2)ブラックホールも究極的には一種の量子多体系だと考えられる。そこで、2つ目の手法では、時間依存した外場中の量子多体系を考え、そのユニタリー時間発展を記述する新しい経路積分表示を開発した。それは熱力学的状態空間における経路積分であり、そこにはエントロピーとそれに正準共役な運動量の有効作用が現れる。外場の時間変化が遅い場合、その経路積分にその運動量の並進対称性が現れ、量子論レベルでエントロピー保存則が得られる。この対称性はネーター保存量としてのブラックホールエントロピーを導く対称性と同じ形をしている。3)我々がこれまで構成してきた、蒸発するブラックホールのself-consistentなモデルに基づくものである。そのモデルは、球対称崩壊物質は、ホライズンも特異点も持たない高密度なコンパクトな星なり、蒸発することを示している。本年度は、多数の球対称シェルの時間発展を、WKB近似とS波近似を使って半古典的アインシュタイン方程式を解き、実際にそのような星に近づいていくことを示した。これは、時間依存した重力崩壊過程を、蒸発のback reactionも含めて、定量的に解析したものであり、これまでに得られた内部解をより確かなものにする。量子力学におけるブラックホールの正体、その内部の解明に対し、上記の本年度の3つの成果は相補的で今後の研究に対し効果的なものだと期待できる。1つ目の「シュワルツシルト解からの摂動的球対称静的時空のシュワルツシルト半径近傍の構造が一般に量子効果に大きく依存する」は、重力崩壊からの形成過程は考慮されていないが、数学的にかなり一般的な解析になっている。その意味で、今後の研究を進める際の、1つの基準になりうる成果である。しかも、この研究は当初は予定していなかった海外研究者との共同研究であり、それがこのような普遍的な結果を導けたのは研究課題に大きく貢献していると言える。2つ目の熱力学的経路積分の定式化は、以前はthermal pure stateを用いたものだったが、今回はマイクロカノニカル的なエネルギーシェルへのprojected stateを利用した。そのおかげで、定式化はとてもシンプルになり、かつ、位相部分が適切な形になった。そして、仮定も明確になったため、数値的実験もしやすくなった。この定式化は、今後、具体的な物性系への応用のみならず、ブラックホールの量子モデルの研究にも活用できると期待できる。3つ目の成果では、これまで定常状態に近い状態の計量だけが得られていたのに対し、完全に時間に依存した計量の解析を実行できた。このおかげで、どのように量子的ブラックホールが形成され、そしてそれがどれくらい時間的に安定なのかがわかった。この成果は未だに論文としてまとまっていないが、最も直接的に蒸発するブラックホールを理解するのに貢献する成果だと言える。1)蒸発するブラックホールに入った物体を、massless scalar場のs波の励起状態として扱い、その時間発展をWKB近似で解析する。それにより、leadingの振る舞いではどのように、蒸発と共に情報が戻ってくるのかを理解したい。また、同じ枠組みでブラックホールエントロピーを微視的に数え上げる。2)熱浴中の定常ブラックホールは1つの幾何学的配位だけで有限のエントロピーが得られる。では、幾何学的に熱力学第二法則はどれくらい満たされているだろうか?重要な点は、エントロピー生成が時々刻々と正でなければならないことである。この性質を満たす新しい“ホライズン"の定式化を行い、この幾何学的エントロピーの性質を明らかにしたい。

本年度は、多数の球対称シェルの時間発展を、WKB近似とS波近似を使って半古典的アインシュタイン方程式を解き、実際にそのような星に近づいていくことを示した。これは、時間依存した重力崩壊過程を、蒸発のback reactionも含めて、定量的に解析したものであり、これまでに得られた内部解をより確かなものにする。量子力学におけるブラックホールの正体、その内部の解明に対し、上記の本年度の3つの成果は相補的で今後の研究に対し効果的なものだと期待できる。1つ目の「シュワルツシルト解からの摂動的球対称静的時空のシュワルツシルト半径近傍の構造が一般に量子効果に大きく依存する」は、重力崩壊からの形成過程は考慮されていないが、数学的にかなり一般的な解析になっている。その意味で、今後の研究を進める際の、1つの基準になりうる成果である。しかも、この研究は当初は予定していなかった海外研究者との共同研究であり、それがこのような普遍的な結果を導けたのは研究課題に大きく貢献していると言える。2つ目の熱力学的経路積分の定式化は、以前はthermal pure stateを用いたものだったが、今回はマイクロカノニカル的なエネルギーシェルへのprojected stateを利用した。そのおかげで、定式化はとてもシンプルになり、かつ、位相部分が適切な形になった。そして、仮定も明確になったため、数値的実験もしやすくなった。この定式化は、今後、具体的な物性系への応用のみならず、ブラックホールの量子モデルの研究にも活用できると期待できる。3つ目の成果では、これまで定常状態に近い状態の計量だけが得られていたのに対し、完全に時間に依存した計量の解析を実行できた。このおかげで、どのように量子的ブラックホールが形成され、そしてそれがどれくらい時間的に安定なのかがわかった。この成果は未だに論文としてまとまっていないが、最も直接的に蒸発するブラックホールを理解するのに貢献する成果だと言える。1)蒸発するブラックホールに入った物体を、massless scalar場のs波の励起状態として扱い、その時間発展をWKB近似で解析する。それにより、leadingの振る舞いではどのように、蒸発と共に情報が戻ってくるのかを理解したい。また、同じ枠組みでブラックホールエントロピーを微視的に数え上げる。2)熱浴中の定常ブラックホールは1つの幾何学的配位だけで有限のエントロピーが得られる。では、幾何学的に熱力学第二法則はどれくらい満たされているだろうか?重要な点は、エントロピー生成が時々刻々と正でなければならないことである。この性質を満たす新しい“ホライズン"の定式化を行い、この幾何学的エントロピーの性質を明らかにしたい。予定していた海外研究機関への滞在を、この課題の研究進行度合いと受け入れ側の予定が合わなかったために、来年度に見送った。その海外出張費用に充てる予定である。
読字障害の視覚効率の評価及び援助プログラムの開発

本研究は,学習障害を中心とした発達障害児の読み能力に焦点を当て,その改善を図るための評価ツールおよび援助プログラムを開発することを目的として実施された。研究内容は3つから構成され,第一が,読みにおける眼球運動を測定する簡易型の眼球運動評価ツールの標準化,第二が,簡易型眼球運動評価ツール(DEM)の妥当性の検証,第三が読み能力の学年推移と影響因の検討,および読み障害児に対してのプログラムの開発と,その有効性の検証であった。本研究は,学習障害を中心とした発達障害児の読み能力に関連する視覚の問題に焦点を当て,その改善を図るための評価ツールおよび援助プログラムを開発することを目的としている。本年度は、読み能力と視覚効率に関する実態調査を小学校2年児童を対象に実施し、これまでに調査した3、4、5年生児童のデータとあわせて評価点換算表の作成を行った。[方法]対象児:小学校2学年児童85名(男子42名、女子43名)2)読み能力:標準読書能力診断テストA型(低学年用):評価項目は「読字力」「語彙力」「文法力」「読解・鑑賞力」の4項目であった。[結果の概要]2年生児童のDEMの結果は、これまでに調査した3、4、5年生児童に比較して、最も低いものであった。このことは課題遂行時間だけでなく、課題遂行上のエラーにおいても共通しており、学年の推移とともに眼球運動が向上することが推測された。また、これらの結果に基づいて標準得点換算表を作成した。読みに困難を示した2年生児童(読み能力診断検査において総得点が-1SDより低いとされた児童)は18名存在した。これらの低得点児童とその他の児童のDEMについて比較したところ、読みの低得点群は、有意にDEM得点が低いことが確認された。このことは読み能力検査の「読字力」「語彙力」「文法力」「読解・鑑賞力」の各評価項目においても共通して認められ、2年生の段階では、読み能力全体に、眼球運動の問題が影響すると推測される。高学年では、速読能力にのみ眼球運動との関係が認められたことから考えると、読み学習の初期段階ほど眼球運動の影響が大きいと考えられた。本年度は、読み能力と視覚効率について、簡易型眼球運動検査(DEM)と瞳孔-角膜反射法に基づく赤外線照射型のVisagraphIIを小学校4年児童を対象に実施し、読み困難と眼球運動についてFixation、Regression、及びRate with comprehensionから分析した。[方法]対象児:小学校5学年児童41名(男子22名、女子19名)2)読み能力:読み能力診断テストC型:評価項目は「速読」「読解」「読字」「単語」であった。[結果の概要]読みテストの「速読」における低得点群(n=12)児童を対象に分析した。分析に際してFixationの時間的・空間的要素であるDurationとSpanの項目を加えたところ、12名の内6名において眼球運動の問題が認められた。その内訳は、RegressionとSpanとDurationに問題がある児童が1名、RegressionとSpanに問題がある児童が2名、Durationに問題がある児童が3名であった。これまでの研究では、読みの速さを向上させるため、停留回数を減少させることが有効である(山本、1935)ことから、Spanに焦点が当てられたトレーニングが行われてきた。しかし、本研究では停留時間が長いことで読みに困難を示すと考えられる児童が存在したことから、読みの効率を改善する上でSpanだけでなく、Durationについても検討する必要性が示唆された。本研究では,小学校4学年児童の読み能力,書字表出能力及び眼球運動に関する調査を行い,すでに他学年において行った読み能力,書字表出能力及び眼球運動の調査結果と合わせて,小学校2学年から5学年までの推移を検討した。その結果、眼球運動については、2年生の横読みスコアの平均ADJタイムは59.3(SD=11.3)、3年生50.8(9.3)、4年生41.6(8.5)、5年生38.4(7.7)であった。また、測定時に見られたエラー数の平均は、2年生が11.8(SD=4.6)、3年生6.2(6.9)、4年生4.1(3.6)、5年生2.6(3.0)であった。これらの結果から、学年が上がるとともに眼球運動の速さと正確さは向上することが示された。2年生から4年生までは学年間で有意な差が認められたが、4年生と5年生の間には有意な差が認められなかった。このことは読みにおける眼球運動が小学生児童期を通して向上し、また高学年においてほぼプラトーに達するのではないかと考えられる。

読み能力との関係では、低学年は読み理解力と眼球運動との間に関係が認められたが、高学年では速読力と眼球運動の間に相関が認められた。このことは、低学年ほど目の動きの正確さと速さが、正確な読み理解に影響をおよぼし、高学年では読み理解というよりも速読能力に影響すると推測された。併せて読みに困難が見られた児童を1名選定して,困難さを生じる要因を探り,その要因に対応した指導プログラムを開発するとともに,指導プログラムの有効性を検証した。
オクスフォード版『ジェイムズ・シャーリー全集』収録喜劇の現代校訂本を完成させる

本研究は、オクスフォード大学出版局が編集発行するThe Complete Works of James Shirleyに収録される喜劇The Brothers(1641)の校訂本の完成を目的としている。平成21年以来、当喜劇の編集者として研究と出版準備を続け、「作品本文の編纂」はすでに終了している。平成29年度からは、当該作品の「イントロダクション」の完成を目標に据えて研究を継続している。平成30年度は、29年度に続き、当喜劇の印刷・出版に関する考察を改めて進展させた。書誌学および書物史の観点から、1653年に出版された古版本研究を中心課題に据え、ESTCやDEEPといったデータベースを駆使しつつ、本作の印刷を請け負った印刷所の特定(現在は「推測」のみ)や、各ページの印刷技術に特化した議論、さらに出版者であったRobinsonやMoseleyたちの当時の活動状況のリサーチを加速させて行った。他に取り組んでいる仕事とのバランスが思うように取れず、休暇中に充分な研究時間が取れなかった。平成31/令和元年度は、引き続き本喜劇の本文に付加する「注釈」の執筆と、作品理解を傍証的に補完する意味で設けられる「巻末付録」の完成を目指して取り組む。「注釈」は現代校訂本を利用する現代の読者に向けて、初期近代の難解な語句やフレーズの意味を解説することが大きな役割となる。17世紀半ばというやや古めかしいオリジナルな英語を読み解くには、現代英語で置き換えるとどんな言い回しになるかなど、スペリングや語彙、文法の細かい説明が必要不可欠となる。そのためには、英語世界でもっとも権威のあるOxford English Dictionaryの使用が欠かせない。近年では、これがデータベース化されており、慶應義塾の図書館ではこれが利用可能なため、これを最大限活用しつつ正確な語句の意味を分かりやすい現代英語に置き換えて掲載する。また芝居という作品の性質上、登場人物の心の動きや発話の正確な意味、また舞台上での役者の位置取りを示す「ト書き」についての説明や、シャーリーの他の作品との類似や相違なども示唆する。「巻末付録」は、本作の一層の理解に資する情報をオリジナルのまま提供し、「イントロダクション」で議論した内容を補足するために歴史的文書や記述をそのまま掲載するものである。いくつか例を挙げると、本作が収録されたSix New Plays(1653)には、当時の有名な貴族Thomas Stanleyへの献辞が付されており、これには本作の背後にある重要な歴史的意味がある。そのため当該戯曲の「本文」では無いものの、付録に収録して現代の読者に提供したいと思っている。また本作には、1646年刊行のPoemsに掲載された箇所との重複箇所もあるため、Poemsの古版本から当該箇所をオリジナルなまま付録に収める予定である。本研究は、OUPが編集発行するThe Complete Works of James Shirleyに収録予定の喜劇The Brothers(1641)の校訂本の完成を目的としている。平成29年度からは、当該作品の「イントロダクション」の完成を目標に据え、最終的な締め切りである平成31年度末を目標としている。平成29年度は、当喜劇の印刷・出版に関する考察を改めて進展させた。書誌学および書物史の観点から、1653年に出版された古版本研究を中心課題に据え、ESTCやDEEPといったデータベースを駆使しつつ、本作の印刷を請け負った印刷所の特定(現在は「推測」のみ)や、各ページの印刷技術に特化した議論、さらに出版者であったRobinsonやMoseleyたちの当時の活動状況のリサーチを行った。また同時代の他の劇作家(シェイクスピアやトマス・キッド)の戯曲への考察も深め、論文をまとめた。またこの時代の上演史として、R.BaileyのStaging the Old Faith: Queen Henrietta Maria and the Theatre of Caroline England (2006)などを参考にしつつ、同時代人(例えばSamuel Pepysなど)の日記等、同時代以降の様々な歴史記述をひとつひとつ探索した。シャーリーという劇作家と彼の作品群全体の批評の歴史については、最近優れた論文集が出た。B.Ravelhoferが編集したJames Shirley and Early Modern Theatre (2016)がそれで、13人の研究者による優れた論考が収められており、これも活用した。夏の期間に思うように時間が取れず、英国での実地調査に出掛けられなかったこと。

平成30年度は、本喜劇の本文に付加する「注釈」の執筆と、作品理解を傍証的に補完する意味で設けられる「巻末付録」の完成を目指して取り組む。「注釈」は現代校訂本を利用する現代の読者に向けて、初期近代の難解な語句やフレーズの意味を解説することが大きな役割となる。17世紀半ばというやや古めかしいオリジナルな英語を読み解くには、現代英語で置き換えるとどんな言い回しになるかなど、スペリングや語彙、文法の細かい説明が必要不可欠となる。そのためには、英語世界でもっとも権威のあるOxford English Dictionaryの使用が欠かせない。近年では、これがデータベース化されており、慶應義塾の図書館ではこれが利用可能なため、これを最大限活用しつつ正確な語句の意味を分かりやすい現代英語に置き換えて掲載する。また芝居という作品の性質上、登場人物の心の動きや発話の正確な意味、また舞台上での役者の位置取りを示す「ト書き」についての説明や、シャーリーの他の作品との類似や相違なども示唆する。「巻末付録」は、本作の一層の理解に資する情報をオリジナルのまま提供し、「イントロダクション」で議論した内容を補足するために歴史的文書や記述をそのまま掲載するものである。いくつか例を挙げると、本作が収録されたSix New Plays(1653)には、当時の有名な貴族Thomas Stanleyへの献辞が付されており、これには本作の背後にある重要な歴史的意味がある。そのため当該戯曲の「本文」では無いものの、付録に収録して現代の読者に提供したいと思っている。また本作には、1646年刊行のPoemsに掲載された箇所との重複箇所もあるため、Poemsの古版本から当該箇所をオリジナルなまま付録に収める予定である。平成31/令和元年度は、引き続き本喜劇の本文に付加する「注釈」の執筆と、作品理解を傍証的に補完する意味で設けられる「巻末付録」の完成を目指して取り組む。
神経疾患におけるRNAグアニン四重鎖複合体凝集機構の解明と創薬研究

これまで、グアニン四重鎖構造認識単鎖可変領域フラグメント(BG4-scFv)を用いて生細胞のグアニン四重鎖構造の可視化に成功した。このグアニン四重鎖認識scFvにFLAGタグを付加し哺乳類発現プラスミドでマウス神経芽細胞腫Neuro-2aに発現させたところ、細胞核内にDNA上のグアニン四重鎖として微小な粒子が観察され、さらに細胞質にはRNAグアニン四重鎖構造/蛋白質複合体である比較的大きな顆粒が観察された。これらは、DNaseやRNase処置によりそれぞれ消失することを確認できた。また、グアニン四重鎖構造の細胞内動態を生細胞観察するためにEGFPを付加したが、構造変化が起こりグアニン四重鎖構造を正確に認識することができなかった。そのため、6残基のアミノ酸Cys-Cys-Pro-Gly-Cys-Cys配列のテトラシステイン(TC)モチーフを挿入し、TCモチーフと結合し緑色蛍光を発するFlAsHを用いたところ、生細胞のグアニン四重鎖構造可視化に成功した。さらに、BG4-scFvによるマウス脳組織由来免疫沈降物に対して次世代RNAシーケンサーとLC-MS/MSショットガン解析を行い、マウス脳内のグアニン四重鎖構造/蛋白質複合体の構成成分を同定した。それら複合体には、これまでに報告がない新規グアニン四重鎖形成mRNA及び結合蛋白質が数種含まれていた。BG4-scFvを用いることで、グアニン四重鎖の細胞内局在や構成成分を明らかにできた。グアニン四重鎖構造(G-Quadruplex; G4構造)は、グアニンが豊富な配列領域で、1本鎖DNAもしくはRNAが形成する特殊な高次構造の1つである。近年のゲノムワイドな解析により、特定の遺伝子の転写・翻訳において生理的に重要な役割を果たすことが示唆されている。病態においては、特定のDNAグアニンリッチ配列異常反復伸長から形成されるRNA-G4構造が数種のRNA結合タンパク質と凝集体を形成し、ALS/FTDやFXTAS等遺伝性神経変性疾患の病態に関与することが示唆されている。本研究の目的は未だ明らかにされていないRNA-G4構造/タンパク質複合体の神経細胞における動態と構成成分を解析することにより、G4構造が関与するALS/FTDやFXTAS等遺伝性神経変性疾患におけるRNA-G4構造/タンパク質の異常凝集機構を解明することである。本年度はファージディスプレイ法により得られたG4構造認識単鎖可変領域フラグメントsingle chainFv (G4-scFv)にテトラシステインモチーフを挿入した哺乳類発現プラスミドを作製し、FlAsHを用いて生細胞のG4構造可視化に成功した。また、G4-scFvを利用して免疫沈降を行い、マウス脳組織におけるRNA-G4構造/タンパク質複合体のRNA構成成分をRNA-seqで同定した。生細胞でのG4構造可視化に成功したのは世界初の成果である。また、RNA-G4構造/タンパク質複合体のRNA構成成分には既知分子だけでなく新規分子も含まれていた。これらの分子の細胞内における役割を解析することで、G4構造が関与する神経疾患における病態解明に寄与する可能性がある。今後、人為的にグアニン四重鎖を酸化することで、マウス脳神経にどのような影響を及ぼすか検討する。今年度は、グアニン四重鎖の細胞内局在や構成成分を網羅的に明らかにできた。さらに、そのリストの蛋白質のひとつにおいてグアニン四重鎖との結合が確認できた。このグアニン四重鎖認識scFvにFLAGタグを付加し哺乳類発現プラスミドでマウス神経芽細胞腫Neuro-

2aに発現させたところ、細胞核内にDNA上のグアニン四重鎖として微小な粒子が観察され、さらに細胞質にはRNAグアニン四重鎖構造/蛋白質複合体である比較的大きな顆粒が観察された。これらは、DNaseやRNase処置によりそれぞれ消失することを確認できた。また、グアニン四重鎖構造の細胞内動態を生細胞観察するためにEGFPを付加したが、構造変化が起こりグアニン四重鎖構造を正確に認識することができなかった。そのため、6残基のアミノ酸Cys-Cys-Pro-Gly-Cys-Cys配列のテトラシステイン(TC)モチーフを挿入し、TCモチーフと結合し緑色蛍光を発するFlAsHを用いたところ、生細胞のグアニン四重鎖構造可視化に成功した。さらに、BG4-scFvによるマウス脳組織由来免疫沈降物に対して次世代RNAシーケンサーとLC-MS/MSショットガン解析を行い、マウス脳内のグアニン四重鎖構造/蛋白質複合体の構成成分を同定した。それら複合体には、これまでに報告がない新規グアニン四重鎖形成mRNA及び結合蛋白質が数種含まれていた。BG4-scFvを用いることで、グアニン四重鎖の細胞内局在や構成成分を明らかにできた。1) G4-scFvを利用して免疫沈降を行い、マウス脳組織におけるRNA-G4構造/タンパク質複合体のタンパク質構成成分をLC/MS/MSで同定する。グアニン四重鎖と神経細胞障害との関与について検討することができる準備ができた。リストアップされたRNAグアニン四重鎖構造/蛋白質複合体の構成成分と脳神経における病態との関与を詳細に検討していく。研究の実施が予想よりも低コストで可能であったため、次年度使用額が生じた。概ね研究が順調に進んでおり、消耗品費が少額で済んだため。次段階の実験における研究費として使用する。次年度の実験計画は今年度よりも実験コストがかかることが予想される。よって、今年度生じた次年度使用額は次年度で使用する。
高性能サーメット系漸変溶射皮膜の製法と強化処理に関する基礎研究

本研究は急激な材質変化を軽減した高性能セラミックス溶射皮膜部材の創製を目的としたもので,溶射皮膜中におけるセラミックスの混合割合を金属素材面より皮膜表面へ連続的に増加させ最表面をセラミックスとする,いわゆるサーメット系漸変溶射皮膜創製のための適正材料の組合せ,溶射方法及び施工条件,さらに溶射後の皮膜の強化処理法について種々検討した.この目的達成に対し,主として(1)実用性能を評価するための摩耗試験機の試作及び評価法の確立, (2)溶射皮膜の熱衝撃性に及ぼす皮膜積層形態の影響, (3)溶射後の強化処理条件の3項目について研究を行った.本研究の結果得られた主な成果を要約すると以下のようである.(1)溶射皮膜の土砂摩耗特性を評価するために摩耗減量曲線の勾配で定義した比摩耗速度を導入した.定常摩耗域における溶射皮膜材の摩耗特性は,両対数グラフ上における比摩耗速度線図の比較により評価可能である.(2)減圧条件下での皮膜は,一般に大気圧下での皮膜よりも,平均気孔率,貫通気孔率,硬度等の点で優れた性質を示す.しかし一定入力溶射条件下では特にセラミックス材料の場合,減圧度を上げることは必ずしも皮膜作成において有効であるとは言えない.(3)溶射皮膜に対する適切なる強化熱処理は,皮膜/素材間の結合強度を向上させるとともに,皮膜のち密化をもたらす点で極めて効果的である.(4)耐熱衝撃性に対する漸変溶射皮膜積層形態として,素材/金属下地層/漸変層/表面セラミックス層が優れていることを実験的に明らかにした.通常の二層皮膜においても,二層間に漸変部を設けることにより,有効的に耐熱衝撃性の向上を図ることが可能である.これらの成果は,サーメット系漸変部溶射皮膜実用化に対し有益なる指針を与えるものと確信する.本研究は急激な材質変化を軽減した高性能セラミックス溶射皮膜部材の創製を目的としたもので,溶射皮膜中におけるセラミックスの混合割合を金属素材面より皮膜表面へ連続的に増加させ最表面をセラミックスとする,いわゆるサーメット系漸変溶射皮膜創製のための適正材料の組合せ,溶射方法及び施工条件,さらに溶射後の皮膜の強化処理法について種々検討した.この目的達成に対し,主として(1)実用性能を評価するための摩耗試験機の試作及び評価法の確立, (2)溶射皮膜の熱衝撃性に及ぼす皮膜積層形態の影響, (3)溶射後の強化処理条件の3項目について研究を行った.本研究の結果得られた主な成果を要約すると以下のようである.(1)溶射皮膜の土砂摩耗特性を評価するために摩耗減量曲線の勾配で定義した比摩耗速度を導入した.定常摩耗域における溶射皮膜材の摩耗特性は,両対数グラフ上における比摩耗速度線図の比較により評価可能である.(2)減圧条件下での皮膜は,一般に大気圧下での皮膜よりも,平均気孔率,貫通気孔率,硬度等の点で優れた性質を示す.しかし一定入力溶射条件下では特にセラミックス材料の場合,減圧度を上げることは必ずしも皮膜作成において有効であるとは言えない.(3)溶射皮膜に対する適切なる強化熱処理は,皮膜/素材間の結合強度を向上させるとともに,皮膜のち密化をもたらす点で極めて効果的である.(4)耐熱衝撃性に対する漸変溶射皮膜積層形態として,素材/金属下地層/漸変層/表面セラミックス層が優れていることを実験的に明らかにした.通常の二層皮膜においても,二層間に漸変部を設けることにより,有効的に耐熱衝撃性の向上を図ることが可能である.これらの成果は,サーメット系漸変部溶射皮膜実用化に対し有益なる指針を与えるものと確信する.本研究は、金属材とセラミ々ク材の混合材料を溶射材に用い、そのセラミック材の混合比を、金属素材面より皮膜表面へ連続的に増加させ、最表面部ではセラミックス本来の性能が発揮できるような溶射皮膜を採り上げて、その適切な材料の組合せ、溶射方法及び施工条件、さらに、溶射皮膜の強化処理法などを検討し、セラミック溶射皮膜適用分野拡大に対する基盤的な資料を提供することを目的としたものである。昭和61年度では、溶射材料の組合せについての検討、サーメット系漸変溶射皮膜形成方法の検討及び得られた溶射皮膜に対する適正な強化処理条件を検討するのに必要な加熱・加圧処理設備の設計・試作を行なった。(1)漸変溶射皮膜形成方法:所定の比率で混合した金属及びセラミック材料を同時に溶射する方法、複数の粉末ホッパより、金属及びセラミック材料を別経路で同一プラズマジェット流に送給する方法、複数の溶射装置を使用する方法などについて、皮膜の積層状態を検討した結果、本研究目的達成には、粉末溶射材送給方法の改善が重要であることが明らかとなった。(2)加熱・加圧処理設備の試作:サーメット系漸変溶射皮膜に対する最適な強化処理条件選定のための基礎資料を得るのに必要な設備として、眞空雰囲気高周波誘導加熱・加圧装置を設計・試作した。(3)溶射皮膜の性能評価等・得られた溶射皮膜の性能を評価するため土砂摩耗試験装置を試作し、その有用性を検討した。また、ち密な溶射皮膜作成を目的として、減圧プラズマジェット溶射装置を設計・試作し、その適正な施工条件を検討した。

本研究は,金属材とセラミック材の混合材料を溶射材に用い,そのラセミック材の混合比を,金属素材面より皮膜表面へ連続的に増加させ,最表面部ではセラミックス本来の性能が発揮できるような溶射皮膜を採り上げて,その適切な材料の組合せ,溶料方法及び施工条件,さらに,溶料皮膜の強化処理法などを検討し,セラミックス溶料皮膜の適用分野拡大に対する基盤的な資料を提供することを目的としたものである.昭和62年度では, 61年度に設計・試作した真空雰囲気高周波誘導加熱・加圧装置,湿式土砂摩耗試験測置及び減圧プラズマ溶射装置に加え,新たに二台の粉末送給装置を制御する粉末送給制御装置を試作し,より再現性・信頼性の高い皮膜作製を可能とした.これらの機器類を用いることにより, (1)溶料皮膜の湿式土砂摩耗特性の評価法として,摩耗減量曲線の勾配により定義した比摩耗速度を導入し,定常摩耗域における摩耗特性を両対数グラフ上における比摩耗速度線図の比較により可能とした.同時に摩耗速度,摩耗材寸法の因子を変えることにより,同摩耗現象の支配因子を明らかにした.(2)減圧プラズマ溶料装置により作製した溶料皮膜について,溶料距離比及び減圧度と諸特性との関連を調べた.その結果,一定入力条件では,必ずしも減圧度を上げる程皮膜性能が向上するとは限らず,むしろ適正条件が中間に存在することを明らかにした.(3)漸変溶料皮膜作製法を検討し,作製皮膜の耐摩耗,耐食,耐熱衝撃特性等に及ぼす皮膜形態及び強化処理の影響を総合的に評価した.さらに耐熱衝撃性に及ぼす皮膜層形態をより詳細に調べ,下地金属層と表面セラミック層間に漸変部を有する形態が優れた熱衝撃性を示すこと,さらに減圧条件下での同漸皮膜形態は一層改善された特性を有すること等を実験的に明らかにした.
アジアの人工股関節患者の座式生活におけるQOLデータベースの構築

目的1.国内での調査については、THA患者の健康関連QOLについて、術後10年目は3月末現在で500名以上の調査票を回収済みであり、今後は解析予定である。術後7年目のQOLと患者の属性別に時系列変化を検討するため、自記式調査を郵送で実施した。調査にはEuro QOL-5D (EQ5D)、Oxford hip score(OHS)を用い、個人属性についても情報収集した。分析方法は各尺度について、術前と術後6か月、1年、3年、5年、7年における経年的な尺度の変化を反復測定と多重比較、年齢別3群(65歳未満、65ー74歳、75歳以上)及び原疾患との関連は二元配置分散分析を行った。術後7年の有効回答者は940名だった。EQ5DとOHSは術前と術後3年までは有意に改善したが、術後3年と5年では変化を示さず、術後5年と7年では有意に低下した。EQ5DとOHS共に年齢群におけるQOLの経年的な変化のパターンは同じで、術後期間と年齢との間に交互作用は示さなかった。THAは高齢で手術を受けても患者側からみたアウトカム効果が高いことが明らかになった。一方、変形性股関節症によるTHA患者はOHSの術後評価のバラつきが少なく、大腿骨頭壊死などに比べ身体的QOLがよいことが示された。目的2.韓国でTHA患者に調査を実施後に、両国でのEQ5D、OHS及びライフスタイルを比較した結果、共に座式生活動作がQOLに影響していることが示された。多数例の国内縦断調査と韓国、中国とのQOL調査結果から、THA術後のデータベースを作成し、アジアのライフスタイル特有の問題を特定できた。今後は、これらのライフスタイル上の問題を簡便に検出できる評価尺度の開発が必要と考えられた。目的1のTHA患者の多面的なQOL調査を術後7年の調査を継続し,平成28年2月までに途中で手術を受けた人130名を除いて605名の調査票を回収できた。これまでの解析により,術後7年の結果はEQ5D,WOMAC,OHS共に術前に比べ改善傾向が続いているが,術後5年と比べ大きな変化はないことが示された。座式の生活動作については困難と回答する人が多かった。また,術後10年目の調査は郵送調査を開始し,順次回収を行っている。目的2の台湾での面接調査については,台北医学大学のLin教授と共同研究を進め,台北近郊に住むTHA術後患者への面接調査を実施した。台湾では食事やトイレ,寝室など西洋式のライフスタイルをとる人がほとんどであり,スクワットトイレや床に座った生活,床にマットを敷いて寝るなど座式の生活スタイルをとる人はいなかったため,困難と感じている人はいなかった。また,術後は痛みや歩行障害が改善し,生活状況が改善したと回答する人が多かった。台湾は東アジアに位置するが,日本のような座式のライフスタイルをとるTHA患者や困難を示す人が少ないことが明らかにされた。今後は韓国など他国での調査についても検討する。国内の術後調査は計画通りに術後7年と10年の調査を継続開始できた。また,台湾との国際共同研究についても計画通りに面接調査を行い,成果を国際学会で発表予定である。目的1:多面的なQOL縦断調査については、平成29年1月末までに術後7年の調査票郵送が完了したため、回収完了後に解析予定である。術後10年目の調査については、これまでの縦断調査と同様にOHS、EQ5D等のQOL尺度と座式生活動作、術後満足度を含めた調査票を作成し、平成29年3月から開始した。今後データ収集を順次行い、解析予定である。また、術前調査に有効回答した1536名について、術後1年、3年、5年までのEQ5D itemsリーカートスケールとEQ5D効用値を抽出し、個人属性との関連を明らかにした。分析方法は各変数の経年的な変化をpaired t-testで比較し、属性別の経年変化をrepeated measureANOVAでみた。EQ5D itemsと効用値は術前と術後3年までは有意に改善したが、術後3年と5年では有意差がなかった。また、EQ5D効用値は性別による差はなかったが、年代別では40歳代患者は術前0.57から術後1年で0.91と大きく改善した。原疾患別ではrapidly destructive coxopathy (RDC)は術前0.49から術後5年で0.83と大きく改善した。年齢や疾患により改善パターンが相違を示した。目的2:台湾での調査については、台北医学大学のLin教授と昨年の人工股関節患者の調査結果を検討した。その後、高齢者がより多く、生活上の困難が予測される人工膝関節患者20名を対象に面接調査を行った。質的分析の結果、長時間歩行や関節可動域に限界はあるものの、多くの術後患者が自分で生活の工夫を行っており、困難さは大きく認識してないことが示された。生活スタイルの違いが日本の術後患者と結果の違いになったと思われる。今後は同じ東アジア圏の韓国のTHA患者のQOLと生活様式について調査を実施する。国内の縦断調査は時系列に進行できており、また、台湾での調査は完了することができた。また、次年度に計画している韓国での調査について、分担研究者や韓国の研究者と事前打ち合わせを開始できた。

目的1.国内の多面的QOL調査について、術後7年目までの調査結果では期間中の反対側の手術130名と未回収の270名を除いた604名が最終分析対象者となった。身体面、精神面の評価については術後5年目との比較で有意な差は示さず、術後のQOLは維持されていた。術後5年目よりQOLが低下した一部の者については、脳血管疾患などの合併疾患の発症や高齢であることがわかった。術後10年目の調査を今年度末まで継続し、さらなる経過を分析予定である。目的2.韓国とのQOL比較を行うため、ソウル市近郊の2施設で股関節術後患者を対象に、the Oxford hip score(OKS), SF-8,韓国のライフスタイル、満足度について質問紙調査を行った。現地での調査は韓国中央大学のKang教授が分担した。倫理審査は各々の施設で承認を受けた。回収した韓国の術後患者113名について、日本人患者と性および年齢をマッチングし、術後6か月から5年までの111名を比較した。日本(JA)と韓国(KO)との比較については、平均年齢は70.3歳と70.5歳でともに65.8%が女性であった。原疾患はJAは関節炎が多く、KOは骨折が多かった。ライフスタイルについてはKOの方が床座が多かった。OKS、SF-8、床座の生活動作の困難さについては、KOよりJAの方が術後の評価が良かった。一方で脱臼と人工関節の耐久性の不安はJAの方が有意に高かった。この結果は中国との比較においても同様であり、日本人THA患者は術後の不安が高い傾向にあることが再確認された。日本ではこのような患者の不安を軽減する患者指導について検討する必要があると示唆された。国内のQOL調査は術後7年での調査結果の集計は終え、術後10年目の縦断調査を継続中で計画通りに進展している。また、アジアの台湾、韓国とのQOL国際比較については、昨年の台湾での調査・論文発表を終え、今年は韓国でデータ収集と分析を終え、日本との国際比較について論文執筆中である。こちらについても計画通りに進行している。目的1.国内での調査については、THA患者の健康関連QOLについて、術後10年目は3月末現在で500名以上の調査票を回収済みであり、今後は解析予定である。術後7年目のQOLと患者の属性別に時系列変化を検討するため、自記式調査を郵送で実施した。調査にはEuro QOL-5D (EQ5D)、Oxford hip score(OHS)を用い、個人属性についても情報収集した。分析方法は各尺度について、術前と術後6か月、1年、3年、5年、7年における経年的な尺度の変化を反復測定と多重比較、年齢別3群(65歳未満、65ー74歳、75歳以上)及び原疾患との関連は二元配置分散分析を行った。術後7年の有効回答者は940名だった。EQ5DとOHSは術前と術後3年までは有意に改善したが、術後3年と5年では変化を示さず、術後5年と7年では有意に低下した。EQ5DとOHS共に年齢群におけるQOLの経年的な変化のパターンは同じで、術後期間と年齢との間に交互作用は示さなかった。THAは高齢で手術を受けても患者側からみたアウトカム効果が高いことが明らかになった。一方、変形性股関節症によるTHA患者はOHSの術後評価のバラつきが少なく、大腿骨頭壊死などに比べ身体的QOLがよいことが示された。目的2.韓国でTHA患者に調査を実施後に、両国でのEQ5D、OHS及びライフスタイルを比較した結果、共に座式生活動作がQOLに影響していることが示された。
小児急性白血病における細胞傷害性因子の解析と臨床的意義

同種骨髄移植における移植片対白血病(GVL)効果には、細胞傷害性Tリンパ球(CTL)やNK細胞が介在し、これらの細胞上の細胞傷害因子(膜結合型ligand)が、白血病細胞上に発現されている受容体を介してアポトーシスを誘導することで中心的な役割を担っていると考えられる。これまでに種々の細胞傷害因子と受容体が同定され、TNF受容体ファミリーのうちdeath domainを有する受容体とそのligandの関与が想定されているが、実際の白血病においては不明な点が多い。今回は、正常細胞への影響は比較的弱いが、様々な固形癌細胞にアポトーシスを誘導するTRAIL(TNF-related apotosis inducing ligand)に注目し、免疫学的機序による排除が示唆されるPhiladelphia染色体(Ph1)陽性白血病を対象に検討した。TRAIL受容体にはアポトーシスを誘導するR1とR2の他に、細胞内のシグナル伝達ドメインを欠くR3と、アポトーシス抑制シグナル伝達ドメインのみを有するR4があり、R3/4はアポトーシスに抑制的に働く。in vitroで活性型の三量体を形成する遺伝子組み換え型TRAIL添加によるアポトーシス誘導を検討するとともに、各受容体に固有のモノクロナール抗体を用いて白血病細胞での発現を検討した。その結果、12種類のPh1陽性白血病細胞株のうち、5株で強力な、3株で中等度の細胞死誘導が観察され、4株が耐性であった。このTRAIL感受性はR2受容体の発現と強く相関し、耐性株はR2受容体をほとんど発現していなかった。一方、R1およびR3/4受容体は検出されなかった。以上の結果は、TRAILがin vlvoでのPh1陽性白血病の排除に関与している可能性と、TRAILの治療への有用性を強く示唆しており、研究を継続している。難治性小児白血病では、種々の機序で化学療法剤によるアポトーシスが抑制されている。同種骨髄移植は、化学療法耐性白血病に対してもしばしばGVL効果を発揮する。従って、骨髄移植を行わずにGVL様の効果を誘導できれば難治性小児白血病の治療の安全性と成績が大きく向上すると期待される。一方、種々の細胞傷害因子が同定され、Fas-L(ligand)/Fas(受容体)に加えTRAIL(TNF-related apotosisinducing ligand)/TRAIL-受容体系のGVL効果への関与が検討されてきた。そのなかで、death domainを有するDR3受容体のligandとして近年TWEAKが同定され注目されているが、白血病への関与については不明である。そこで本年度の研究では、種々の白血病細胞株でのTWEAK/DR3系の発現をフローサイトメトリーで検討するとともにTWEAKの白血病細胞株への影響を検討した。DR3の発現は、リンパ性白血病細胞株ではstem cell由来のPh1陽性及び11q23転座型細胞株も含めてほとんど認められなかったのに対して、骨髄性白血病細胞株ではひろく認められた。TWEAKの添加では、DR3発現とは無関係にINFとの供培養下も含めて明らかなapoptosisは観察されなかった。しかし、最近TWEAKがDR3のligandである点に関しては否定的な報告もあり、さらに検討を続けている。一方、trans-membrane型のTWEAKの発現を検討したところ、一部の骨髄性白血病細胞株で強い発現を認めた。特に慢性骨髄性白血病急性転化由来株に比べて急性骨髄性白血病由来株で発現が強い傾向を認めた。現在、この白血病細胞上のTWEAKがapoptosisを誘導しうるのかという点も含めて、TWEAK発現の意義について解析を継続している。