hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
スポーツ発達心理学の構築に向けた基礎的研究

このような結果は,仮説を支持するものと考えられた.ただし,運動部活動や日常生活での悩みは心理社会的発達課題の達成および心理的競技能力の発達と負の関連を示すものもみられ,さらなる検討の必要性も示された.次に,運動部活動や日常生活での危機経験,心理社会的発達課題の達成,心理的競技能力の発達の関連の内容を発達段階間で比較したところ,関連の内容には発達段階間で異なる部分があることが明らかとなった.このことは,スポーツ選手の心理的問題については,発達差を考慮し発達段階ごとの分析が必要な場合があることを示しており,そのような分析による知識の集積を目指す「スポーツ発達心理学」の構築可能性や必要性が確認された.本研究の目的は,スポーツ選手のパーソナリティや心理的競技能力の発達の特徴,およびこれらの発達に影響する経験を発達段階(中学期・高校期・大学期)ごとに明らかにし,スポーツ発達心理学の構築に向けた基礎的知見を集積することである.パーソナリティについては自我発達に着目し,前年度までに,スポーツ選手の自我発達に危機経験(運動部活動や日常生活で迷ったり悩んだり,努力したりする経験)が関連することやスポーツ選手の自我発達に関連する危機経験は発達段階で異なることを明らかにしてきた.これらの知見を踏まえ,本年度は,スポーツ選手が運動部活動や日常生活において遭遇する「危機経験」は「心理社会的発達課題の達成」に寄与し,それゆえスポーツ選手の「自我発達」や「心理的競技能力の発達」が促進されるという仮説を構築し検討した.まず,青年期までの心理社会的発達課題として,基本的信頼感の獲得,勤勉性の獲得,心理的離乳,性役割の内面化,アイデンティティの確立,親密性の獲得を取り上げ,これらの達成度を測定する尺度を予備調査を通して確定した.その後,中学男子スポーツ選手を対象者として,これらの心理社会的発達課題の達成度,運動部活動や日常生活における危機経験,自我発達,そして心理的競技能力を調査し,相互の関連を検討した.その結果,要因間の関連が示された.しかし,これらの関連には正(仮説を支持する関連)および負(仮説を支持しない関連)の両方の関連が混在していたため,仮説についてはさらなる検討が必要であることが示唆された.本研究の目的は,スポーツ選手のパーソナリティおよび心理的競技能力の発達の様相を発達段階ごとに明らかにすることである.研究期間の半分が終了した現時点で,パーソナリティ発達の様相については発達段階ごとの特徴を明らかにできでおり,研究目的の半分が達成されている.そのため,本研究は概して順調に進展していると判断される.25年度が最終年度であるため、記入しない。本研究の目的は,スポーツ選手のパーソナリティおよび心理的競技能力の発達の特徴やこれらの発達に影響する経験を発達段階ごとに明らかにすることである.現時点で,パーソナリティ発達の特徴およびパーソナリティ発達に影響する経験については中学期,高校期,大学期の3つの発達段階ごとに検討できている.心理的競技能力の発達の特徴および心理的競技能力の発達に影響する経験に関しては,中学期については検討できている.
接着性根管充填用シーラーに適した根管治療システムの開発

まず,レジン系シーラーと象牙質非接着性シーラーとの根管封鎖性の比較を行い,レジン系シーラーであるMetaSEAL^<TM>は高い根管封鎖性を示すことが分かった.そこで,MetaSEAL^<TM>を用いて根管形成のテーパーおよび根管充填方法を変化させた場合の,根管封鎖性の比較を行った.結果,根管内シーラー占有量を減少させると,高い根管封鎖性が得られることが分かった.最後に,破折抵抗試験を行った.その結果,根管形成のテーパーや根管充填方法の違いは,破折抵抗に影響を及ぼさないことが分かった.以上より,レジン系シーラーのうち,MetaSEAL^<TM>は,根管内シーラー占有率が低ければ良好な封鎖性を示すが,歯根破折には影響しないことが明らかとなった.まず,レジン系シーラーと象牙質非接着性シーラーとの根管封鎖性の比較を行い,レジン系シーラーであるMetaSEAL^<TM>は高い根管封鎖性を示すことが分かった.そこで,MetaSEAL^<TM>を用いて根管形成のテーパーおよび根管充填方法を変化させた場合の,根管封鎖性の比較を行った.結果,根管内シーラー占有量を減少させると,高い根管封鎖性が得られることが分かった.最後に,破折抵抗試験を行った.その結果,根管形成のテーパーや根管充填方法の違いは,破折抵抗に影響を及ぼさないことが分かった.以上より,レジン系シーラーのうち,MetaSEAL^<TM>は,根管内シーラー占有率が低ければ良好な封鎖性を示すが,歯根破折には影響しないことが明らかとなった.本年度はまず予備実験として、本研究で使用する予定であるレジン系シーラー(スーパーボンド根充シーラー・Epiphanyシーラー・MetaSEAL)と従来型シーラーとの封鎖性に関する比較検討を行った。スタンダードテクニックにて形成された根管に対し、各種シーラーを用いて根管充填を行った結果、レジン系シーラーの中でも4-METAを基材としたMetaSEALの封鎖性は他のシーラーと比較して有意に高いことがわかった。また、レジン系シーラーの封鎖性には象牙細管の開口およびレジンタグの形成が必須である。そのため、より効果的に象牙細管の開口を得られる洗浄方法を見出すための実験を行った。実験結果からは、EDTAおよび次亜塩素酸ナトリウムの効果的な洗浄時間が得られた。以上の結果を用いて、本実験を行うための準備および実験を行った。.06テーパーで形成された根管に対して、レジン系シーラー(MetaSEAL)および従来型シーラー(Canals N)を用い、さらに、通常用いられている.02テーパーのGPポイントおよび. 06テーパーのGPポイントをそれぞれ用いた際の根管充填封鎖性を比較する実験を行い、結果を得た。次年度は、まず実験結果の統計解析を行う。さらに、各被験歯に対し破折抵抗試験を行い、最終的には、根管封鎖および破折抵抗の両側面から検討して最も臨床に適した根管形成方法および、根管充填方法について明らかにする予定である。まず前年度行った実験の結果解析を行った..06テーパーに形成された根管に対し,.06テーパーの根管充填材料を用いることでコロナルリーケージは減少すると仮定したが,通常用いる.02テーパーの根管充填材料にて根管充填を行った群との間には有意差は認めなかった.また,.10テーパーに根管形成後.02テーパーの根管充填材料にてシングルポイント充填を行った群では他群と比較して有意に低い根管封鎖性を示した.これは,根管充填時に根管内を占めるシーラー量が影響すると考え,各被験歯に占めるシーラー量について画像解析を行った.結果,根管内を占めるシーラー量が増えると,根管封鎖性は低下するととが分かった,また,シーラーの象牙質接着性と根管内シーラー量では,根管内シーラー量の方が根管封鎖性により強く影響することが分かった.次に,各被験歯に対して破折抵抗試験を行った.根管形成のテーパーが大きいほど破折抵抗は悪くなると仮定して実験を行ったが,本実験条件における根管形成のテーパーや根管充填方法の違いは破折抵抗に影響を及ぼさないことが分かった.以上より,根管封鎖および破折抵抗の両側面から検討した最も臨床に適した根管形成方法および根管充填方法としては,レジン系シーラーを用いて,根管内シーラー占有量をできる限り少なくするような方法で根管充填することが必要であると結論した.しかしながら,レジン系シーラーは除去が困難であるという問題点も指摘されている.臨床応用に際しては,症例によって使用するシーラーや根管充填方法を使い分けることも重要であると考えている.
カウンターフィットドラッグのグローバル化とその対策に関する研究

本研究では、カウンターフィットドラッグ(偽造薬)について、グローバル化の現状を発展途上国(カンボジア)側から検証した。その結果、先進国と発展途上国における偽造ターゲットは同じだが、実際の偽造薬の発生は、具体的製品、地域とも当該国の流通状況を反映していた。また、発展途上国では、品質不良医薬品の蔓延が非常に深刻であり、製造・流通環境の改善が喫緊であることが明示された。先進国のカウンターフィットドラッグ蔓延の引き金となったED治療薬や感染症治療薬が発展途上国においてもカウンターフィットのターゲットになっている事を必須医薬品と比較して検証した。【方法】対象国・地域:カンボジア王国、プノンペン(PP.交易の中心)及びスバイリエン(SV.越国境で流入点)対象医薬品:シルデナフィル製剤、クラリスロマイシン(CAM)、コトリモキサゾール(ST合剤)サンプリング法:販売店のランダム化(PP)、違法店舗は全数。SVでは通りがかった全店舗。試験法:観察試験、真正性調査(出所起源調査及び合法性調査)、品質試験、規制調査【結果】1・サンプリング:先進国でカウンターフィットが蔓延しているブロックバスターのバイアグラ、リピトール、タミフルは、カンボジアでは異なった。バイアグラは金満家向け限定的流通であり、後二者はカンボジアでは流通していなかった。そこで、シルデナフィルは後発品も対象とし、また、インフルエンザ治療薬でもあるCAMを対象とした。シルデナフィル44サンプル(うちバイアグラ2サンプル)、CAM48サンプル、ST合剤91サンプルを収集した。2.真正性調査:回答率はいまだ10%であるが、偽造品と指摘されたものはない。3.品質試験:シルデナフィル後発品39サンプルのうち9サンプル(23.1%)が含量試験及び含量均一性試験に不合格、特にKamagraの不合格率が高く(5/8)、含有量も50%に満たなかった。CAM, ST合剤の含量試験は各5%、9%が不合格、溶出試験では少なくとも19%、10%が不合格だった。ST合剤の溶出試験不合格品はPP収集品に多かった。以上より1)途上国では流通医薬品が先進国とは異なるため、偽造品は必ずしも共通しない。2)低品質ものが高率に出回っている。【目的】先進国でカウンターフィット薬蔓延の引き金となったブロックバスターED治療薬や感染症治療薬が、発展途上国においてもカウンターフィットのターゲットになっているか、グローバル化を検証する。【方法】対象国・地域:カンボジア王国、プノンペン(PP:首都、交易の中心)及びバタンバン(BT:タイと国境を接する)。対象医薬品:シルデナフィル製剤(SI)、クラリスロマイシン(CAM)、コトリモキサゾール(ST合剤、コントロール)サンプリング:販売店のランダム化(PP)、違法店舗は全数。BTでは発見した全店舗。試験法:観察試験、真正性調査(出所起源調査及び合法性調査)、品質試験、規制調査時期:2011年6月【結果】流通実態:サンプリング:バイアグラはPPでのみ販売され、4サンプルのみ入手した。ジェネリックはPP及びBTで27サンプル入手。バイアグラの価格は$11.50±3.02でありジェネリック$0.46±0.12より25倍も高価。また、98店舗でサンプル収集したうち、シルデナフィルは19店舗から31サンプル収集、CAMは34店舗から50サンプル、ST64店舗から72サンプル収集した。真正性:延べ39社のうち14社(35.9%)から回答を得たが、偽造品は検出されていない。品質:シルデナフィル29サンプルのうち1サンプルのみ溶出試験に不適合。2010に高い不適合を示した不良Kamagraが姿を消していた(Kamagaraの登録抹消)。CAMは少なくとも4/31(8%)、ST合剤は20/66(30.3%)が品質不適合、特に溶出試験でそれぞれ3/33(9.1%)、10/68(14.7%)と不適合品が多い。SIはサンプリング地域(PP,スヴェイリアン(2010),BT)により品質不良品の出現割合に差がなかった。以上より1)カンボジアではバイアグラの流通が極めて限られており、偽造品も出現していない。CAMの流通も限られており、偽造医薬品は検出されなかった。2)一方、正規品でありながら品質不良品特に溶出試験不適合が高い割合で出現した。【目的】先進国で生活習慣病治療薬のカウンターフィットが出現しており、発展途上国においてもターゲットかを検証し、グローバルな問題の広がりを見る。【方法】サンプリング:2012年6月カンボジア王国、プノンペン(PP:首都)及びカンダール(KA)、カンポンスプ(KS)、タケオ(TA)各州にて、ランダム抽出した販売店(PP)と国道沿いの全店舗(KA, KS, TA)からラベプラゾール(Pariet)及びアムロジピンを収集。外観、真正性、品質、規制を調査。不良原因調査:2010ー2011

収集クラリスロマイシン(CAM)、コトリモキサゾール(ST合剤)の品質不良原因調査。【結果】流通実態: Parietはプノンペン及び隣接地でのみ流通し11サンプル。アムロジピンは79サンプル、計90サンプル収集した。うち卸から8サンプル、薬局、デポA及びデポBで82サンプル、違法店舗はなかった。真正性: 20製造者のうち7社25サンプルの真正性を確認。品質:Parietはすべて日本からの輸入品で、外観、表示、錠剤、被包に異常なく、含量均一性及び定量試験結果も良好だった。アムロジピンはインドA社製4サンプル中1サンプルが、同一製品と比較し安価で、含量も70%と不足していた。真正性追及の必要がある。また、含量均一性試験不適合6サンプル(7.7%)のうち5サンプルはインドB社製。すべて真正品で定量試験には適合、原末の均一性や秤量精度が疑われた。含量均一試験不適合品は専ら郡部で流通していた(p<0.05)。卸以外は、店舗種に関係なく品質不良品が検出され、価格は適合品、不良品で同じ。生活習慣病治療薬は偽造医薬品よりも後発品の品質不良が深刻。CAMの溶出性不適合(19.4%)の原因は崩壊性が悪いためであり、ST(16.2%)は硬度の高さ、多量の滑沢剤、高温多湿の影響が示唆された。2010、2011とカンボジアの首都プノンペン、ベトナム国境、タイ国境でブロックバスターの流通状況と、真正性や品質を調査した。バイアグラの流通量が少なくカウンターフィット薬も出回っていない。カウンターフィット薬が出るのは頻用薬であることを示す結果であった。タミフルはカンボジアで流通がないことから、クラリスロマイシンに変更して調査し、偽造医薬品の蔓延はないが、品質不良品が著しいことを見出した。STも同様だった。24年度が最終年度であるため、記入しない。2012もカンボジアにおいて、先進国でカウンターフィット薬が出現している生活習慣病薬をインディケータとして、カウンターフィット薬の出現を見る。対象はカンボジアで頻用される降圧薬を取り上げる。さらに必須医薬品の第三世代セファム系抗生物質によっても検証する。シアヌークビルは薬局数が少ないことから、首都及びその近郊でのサンプリング調査を行う。
計算機援用の高度化による都市雨水制御の研究

岩佐は、従来より開発をすすめてきた市街地の雨水流失の平面2次元水理学的モデルの高度化をすすめ、都市内流出・洪水氾濫の解析モデルの開発と適用を行った。更に、綾とともに、下水放流先河川の河川水質について、一般曲線座標系を用いた水理・水質モデルにより解析し、処理水放流流量、放流先河川の流況等と河川水質の関係を明らかにした。未石は、降雨の水質について雨滴による汚染ガスの吸収を非定常拡散式を解くことにより明らかにした。また、都市雨水の計算機による実時間制御をはかるため、降雨観測点の最適空間配置法、浸水被害期待値の評価法、排水ポンプ制御効果等を明らかにした。市川は、東大球場における流出過程の計算機制御による連続自動観測を行い、透水性舗装内の水分移動の解析モデルの開発・検証・パラメ-タ同定を行い、「集水管付き透水性舗装」の水収支を明らかにした。虫明は、都市内の水循環をシステム的に捉え、支配要素を自然系と人工系に大別しモデル化した。さらに、システム要素が果す役割についてのマクロ的検討を行うとともに、都市河川の流況に及ぼす上水道供給量と下水道整備の影響を明らかにした。竹内は、相川流域試験地の降雨・流量・水質資料を整理・解析し、降雨による河川水質の変動特性、洪水流流出時の各種水質成分のケモグラフ等を明らかにするとともに、雨水と水質の流出過程について明らかにした。盛岡は、観測・実験により微量化学物質の物理・化学的特性と流出特性、物質洗い出し量と雨水流出特性およびその地域特性を明らかにした。さらに、微量化学物質の水経由の輸送モデルの開発・適用を行った。八木は、合流式下水道のポンプ制御についてファジィ理論の適用を行いモデル化、検証した。その結果、現行の操作方式が排除重視型であることを明らかにするとともに、操作ル-ルの更新により、下水管の貯留機能を利用して、河川水位や汚濁制御が可能なことを示した。(1)フックの形状と定着効果については、定着剛性が、フックの角度、余長に多少影響さけるのみで、鉄筋の降伏点以前に滑り破壊を起こしたものは154体中一体である。また、鉄骨が入ることによる悪影響はなく、主筋に掛けてあれば、内側折曲げでも外側折曲げでも定着効果は同等である。(2)スラブ付きはりにおいて、スラブが圧縮側となる場合、また、フック折曲げ角度は135°、90°で、耐力、変形能力とも差異はない。また、スラブが引張側となる場合、主筋座、屈止めとしてのあばら筋は、フック無しのU字形でも十分効果的である。(3)主筋をスラブ内に追い込んでも、その曲げ耐力は一般化累加強度式による理論値まで上昇し、変形能力は梁幹部内にのみ配筋したものと変りない。(4)L字形帯筋をもつ柱でも、従来型、閉鎖型帯筋のものと、耐力、エネルギー吸収能力において大きな差異は認められない。(5)小さい曲げ耐力の鉄骨継手を有するはりの鉄筋による補強については、鉄骨継手部の耐力不足の120140%の主筋を補強筋として添えれば、耐力、変形能力ともに回復する。また、応力伝達は、伝達に必要な支圧力に見合うあばら筋を、継手部に密に配することにより達成できる。(6)小さいせん断耐力の継手を有する柱の場合は、コンクリートのせん断耐力に余裕がある場合、その余裕分のパンチングシヤにより、鉄骨継手のせん断耐力の不足分を伝達しうる。(7)柱はり接合部では、接合部パネルに帯筋を配さなくても、鉄骨パネルを補強することにより、耐力、変形能力とも、回復させることができる。(8)耐震壁の壁筋については、壁筋を直接、周辺骨組に定着させない配筋を行っても、ボルトによる応力伝達が可能である。以上のことが判明した。

八木は、合流式下水道のポンプ制御についてファジィ理論の適用を行いモデル化、検証した。その結果、現行の操作方式が排除重視型であることを明らかにするとともに、操作ル-ルの更新により、下水管の貯留機能を利用して、河川水位や汚濁制御が可能なことを示した。岩佐は、水理・水文・水質現象の統合について検討した。さらに、綾とともに、下水処理場からの放流水の河川水質に及ぼす影響を詳細に検討することを目的として、一般曲線座標系を用いた平面2次元の流れと水質混合の数学モデルを構築し、現地河川に適用することにより観測結果と計算値を比較し、モデルの妥当性を検証した。末石・盛岡は、都市域では降雨観測点が少なく雨水の実時間計算機制御が有効に適用できないことより、寝屋川流域を対象に日降雨・時間降雨の空間的偏差を最小化する条件で観測点の空間配置を求める方式を作った。さらに、降雨そのものの水質をとりあげ、雨滴による汚染ガスの吸収について、非定常拡散式を用いた検討を行った。市川は、基盤からの蒸発量の推定モデルを提案し、東大球場における連続観測データを用いて、蒸発量の同定を行った。モデルの構築に当たっては、6種類のライシメータによる実測値を利用したが、平均蒸発量はライシメータによる実測値と極めて高い相関を有し、「集水管付き透水性舗装」の水収支を説明し得ることがわかった。竹内は、相川流域試験地の流量・降雨・水質データの整理・解析を行った。山林を中心にした土地利用に加えて農地、宅地、温泉などの活動に伴なう河川水質の変動特性、洪水流出時のchemograph等を各水質成分に着目して整理している。虫明は、都市雨水排除を支配する要素を自然系と人工系の2つに大別し、本年度は、都市域における雨水排水系の諸要素を自然・人工両面からシステム的に捉え、石神井川流域について、それぞれのシステム要素が果す役割についてマクロ的検討を行った。八木は、合流式下水道ポンプ場におけるポンプ操作方式をファジイ理論によってモデル化し、検証した。さらに現行操作方式が排除重視型であることを明らかにするとともに、下水管の貯留機能を利用しながら河川水位の調節や汚濁制御も可能な制御法も可能なことを示した。岩佐は、計算機の利用により、水理・水文、水質を統合的に取り扱う際の概念の明確化に努めた。更に、綾とともに、下水放流先河川の河川水質について、昨年度開発したモデルを用いて水理・水質解析を進め、放流処理水量、放流先河川の流況等と河川水質の関係について明らかにした。末石は、大気汚染と雨水水質制御を統合するため、今年度は特に実時間制御の実用化を重点的に行った。すなわち、浸水被害の期待値の増減を降雨パタ-ンの発生確立にもとずき評価するリハァレンス戦略法を確立した。この結果、最適戦略探索法を併用することにより、排水ポンプ制御効果を改善できることが実収された。市川は、ドメイレ理論を用いて、不飽和浸透流の水分量と負圧の関係を決定するモデルを作成し、透水性舗装内の水の動きの解析モデルの開発・検証・パラメ-タ同定を行った。この結果より、集水管付き透水性舗装システムの評価が可能となった。竹内は、昨年度に引き続き、相川流域試験地の流量・降雨・水資デ-タの観測・整理・解析を行った。土地利用の変化、温泉活動等に伴う河川水質の変動特性を明らかにするとともに、洪水流出時のケモグラフ等を各種水質指標について明らかにした。虫明は、都市の水循環をシステム的に捉えモデル化した。
リンパ管新生因子を標的としたワクチン療法による癌リンパ節転移予防・治療法の開発

マウスのリンパ節転移モデルを用いて、リンパ管新生因子VEGF-C由来のペプチドがワクチンとして有効であるかどうかについて検討した。具体的には、マウスのリンパ管新生因子VEGF-Cのアミノ酸配列からモチーフ検索(NIH,BIMAS,HLA-binding prediction)によりH-2Kb(マウスMHC class I)に結合すると考えられるペプチド配列10種を決定しペプチドを合成した。H-2Kb-transfectedRMA-S(Tap-deficient cell line)細胞を用いて合成ペプチドのH-2Kbへの結合能を確認した。B6C3F1マウスにワクチンとしてVEGF-C由来の合成ペプチド(10種)およびIFAを2回皮下投与したのち、リンパ節転移形成細胞株OV2944-HM-1細胞(RT-PCRにてVEGF-Cの発現を確認)を移植し、3週間後に移植腫瘍の増殖およびリンパ節転移巣形成について解析した。その結果、VEGF-C由来合成ペプチドのうち1種が、マウスでの移植腫瘍の増殖には影響しないでリンパ節転移形成を抑制する傾向にあった。現在、結果の再現性を検討するとともに、ペプチドワクチンの移植腫瘍、リンパ節転移巣に対する組織学的影響(特に、腫瘍周囲のリンパ管新生の程度)に関して解析を進めている。また、ペプチドワクチンのマウス免疫系への影響、特に、ワクチンを投与されたマウスからペプチド、あるいは、移植腫瘍を特異的に認識するT細胞を分離できるかどうかについて検討している。
局所ドラッグデリバリーシステムによる歯周治療薬の開発

歯周治療薬に適した抗菌化学療法剤を選択するために、各種化学療法剤の歯周病関連菌に対する嫌気状態での最小発育阻止濃度、最小殺菌濃度を測定した。歯周病関連菌としてはP.gingivalis,A.actinomycetemcomitans,P.intermediaを用いた。化学治療剤としてはテトラサイクリン系、マクロライド系、リンコサミド系、キノロン系およびメトロニダゾールを用いた。その結果、P.gingivalisおよびP.intermediaに対してはテトラサイクリン系、マクロライド系が優れた抗菌力を示し、キノロン系がそれらに次ぐ抗菌力を示した。また、A.actinomycetemcomitansに対してはキノロン系が特に優れた抗菌力を有していた。歯周ポケットに薬剤を投与することに適した薬剤搬送システムとして、生体消失性を示す非水ゲル注入剤の調製を試み、動物モデルにおいて有用性を検討した。尚、モデル薬物には水溶性の塩酸ミノサイクリンを用いた。また、アルカリ域にて溶解するメタアクリル酸コポリマーS基剤として非水ゲルについて検討した。その結果、拡散係数が小さく、分解速度が遅い基剤を用いることにより、持続性の向上が可能であると考えられた。そこで、乳酸・グリコール酸共重合体(PLGA)を基剤とした非水ゲルを調製したところ、持続性の向上が認められた。以上より、本非水ゲルシステムは基剤の種類により持続期間の調整が可能であり、その持続期間はPLGA非水ゲルでは一週間以上になるものと考えられた。開発LDDSの効果を検討するために、NDAプローブを用いた歯周病関連菌の微量検出法の開発に取り組んだ。検出細菌としてP.gingivalisを用い、P.gingivalis種特異性の非常に高いプローブを選択した。培養したP.gingivalisよりDNAを抽出し、これをテンプレートとしてPolymerase Chain Reaction(PCR)法により増幅後、標識化したプローブを用いてハイブリダイゼーションを行いP.gingivalisの検出系を確立した。
メタ認知と社会行動の発達にもとづく自己制御

本課題では動物とヒトを対象とした比較認知科学的アプローチを用いて、内的・外的過程であるメタ認知・社会行動にもとづく自己制御とその思春期発達の神経基盤を明らかにすることを目的とした。その結果、社会性の行動基盤としての脳内ネットワークの解明、メタ認知の動物実験プラットフォームの構築、言語的アプローチによる自己認知メカニズム、因果推論や対人コミュニケーションの神経メカニズム等を明らかにすることが出来た。当該年度において、自己・他者に関する言語をもちいたメタ認知の神経機構の解明をめざし、機能的磁気共鳴画像法(functional magnetic resonance imaging;以下fMRIと略記)を用いた実験をおこなった。具体的には、自己・他者のメタ認知に重大な障害をもつとされる、成人の自閉症スペクトラム障害(Autism spectrum disorder;以下ASDと略記)当事者と健常被験者に対し、新しい言語性の自己/他者参照課題を考案した。この課題は、たとえば「あなたはあなたのことを賢い人だと思う」のような文を提示し、特定の人物の視点から、ある人物の性格に関する評価をさせるもので、視点と(評価の)対象を自己または他者に変化させることで、問題文の構文を保持しつつ、言語を用いた高次の自己/他者参照処理を評価できる。当該年度までに、各群15名ずつのfMRIデータ収集をおこない、予備的な解析をおこなったところ、自己・他者認知に関わる脳領域とされる大脳正中面の領域、および左側頭頭頂部において、ASD群において有意な信号低下を観察した。この結果は、成人のASD当事者において、これらの領域が視点に応じた複雑な自己/他者参照をおこなう際に機能が低下していることが、社会コミュニケーション障害の一因となっている可能性を示唆している。このfMRI研究をさらに発展させるため、fMRI環境での視線方向計測装置、および脳波計のセットアップをおこない、多角的な脳機能・行動計測環境を整備した。また、AO2萩原/岡ノ谷との共同研究で、自己/他者の声の認知に関わる実験の準備をすすめ、声の基本周波数やフォルマント構造を操作する実験環境を準備した。橋本は自閉症スペクトラム障害(以下ASDと略記)を対象として、自己・他者参照処理について、自己と他者の視点の切り替えに伴う脳活動の変化が、ASDと健常者では異なる脳領域を発見した。酒井はヴァーチャル・リアリティ装置(SRシステム)を使用し、因果関係の推論と認知が非日常的な経験によってどのように影響を被るのかを探る研究を理研の藤井チームと実施した。藤井はネットワーク間構造から社会的認知メカニズムを明らかにすること、さらにネットワーク構造間に相互依存性があることを示した。萩原は具体的には、「自分の声」の識別に関して、第3フォルマント以上の高い周波数帯域において、自分の声が他人の声よりも識別しやすいことを明らかにした。岡ノ谷はノイズ音を回避するよう歌を修正する学習行動(ノイズ回避学習)を利用した実験により、間隙の時間長の可塑性が成鳥で示された。また、行動修正能は発達段階で異なることを示した。福田は統合失調症において、左側頭部の脳賦活は陽性陰性症状評価尺度the Positive and Negative Syndrome Scale (PANSS)で評価した不統合症状と負の相関を、右下前頭部の脳賦活はPANSSの陰性症状や不統合症状および罹病期間と負の相関があることを示した。岡ノ谷は、ジュウシマツのノイズ音を回避するよう歌を修正する行動に関して実験を終え、歌学習には行動のばらつきが重要な役割を果たすことを示した。酒井は、因果関係判断の認知神経メカニズムを探る研究を中心に推進し、判断アルゴリズムの解明に欠かせない時間軸に沿った脳活動情報を得た。萩原はリアルタイムに音声を変調するシステムを開発し、自分の声に意図していない変化が起きた場合に、その変化を埋め合わせるように発声を制御することが明らかになった(補償現象)。また、声の高さと音色はそれぞれ独立したメカニズムによって認知・制御されている可能性を見出した。福田は、うつ病と双極性障害について、J Psychiatr Res 57:74, 2014と同じ検査法を用いた検討を行った。その結果、大うつ病性障害と双極性障害のいずれにおいても、会話による脳機能の全体的な賦活は左半球の背外側前頭前野から前頭極にかけて低下を示し、また発話相による賦活は前頭極で低下を示した。大うつ病性障害群においては、全体的な賦活がGAF得点と正の相関を、双極性障害群においては発話相による賦活が発症年齢と負の相関を示した。藤井は、ニホンザルの複数個体が餌を取り合う、社会的エサ取り課題実行中の大脳皮質全体からの神経活動記録を行い、神経活動が、相手の社会的地位をどれくらい弁別しているかを明らかにする神経活動デコーダーを作成した。その結果、具体的な運動準備開始以前の時間帯から、相手の社会的地位の弁別を行う神経活動が、運動野、頭頂葉を中心として見つけた。藤井はECoG電極を用いてMMN課題中の神経活動を記録し解析を行った。今回の実験によりマカクサルとマーモセットの両者にミスマッチ刺激に対応したミスマッチ活動(MMA)が確認できた。MMAは聴覚野周辺だけでなく、補足運動野、前頭前野周辺でも観察され、ヒト精神疾患のバイオマーカーとしてそのメカニズムと意味の解明を引き続き行う。

岡ノ谷はジュウシマツ成長後の若鳥の再実験をおこない、その解析結果から、若鳥では成鳥にはない動的な再配線が生じる可能性を示した。ラットのメタ認知に関して、メタ認知的行動を示さない個体でも、課題のチャンスレベルを下げればメタ認知的行動を示すことを明らかにした。メラトニン合成能を持たないマウスはそれを持つマウスより求愛発声が複雑であることを示した。橋本は自閉スペクトラム症を対象とした自己制御の行動研究をおこない、自閉スペクトラム当事者において記憶のコントロール(意図的抑制)が低下している結果を得た。彼らが開発したメタ認知課題は、自己・他者メタ認知機能が発達途中の思春期児童や、後期思春期・初期成人期を含む精神疾患当事者に対する応用が期待できる。福田らはうつ病において抑うつ症状とは関連しない体性感覚刺激の処理に遅延があることを明らかにした。それが刺激に対しての随意的な注意という自己制御によっても改善を認めないが、不安状態により影響を受けていることを示すと考えられた。本課題では動物とヒトを対象とした比較認知科学的アプローチを用いて、内的・外的過程であるメタ認知・社会行動にもとづく自己制御とその思春期発達の神経基盤を明らかにすることを目的とした。その結果、社会性の行動基盤としての脳内ネットワークの解明、メタ認知の動物実験プラットフォームの構築、言語的アプローチによる自己認知メカニズム、因果推論や対人コミュニケーションの神経メカニズム等を明らかにすることが出来た。藤井: 23年度に準備を行った個体間社会的認知機能の解明のための脳活動神経活動記録を開始した。社会文脈理解メカニズム解明に関する課題デザインをA03と始めた。萩原:ヒトが「自分の顔」及び「自分の声」を処理している際の神経基盤を多電極脳波計測し、皮質電流密度推定を開始した。その結果、「声」の認識がメタ認知・自己像の形成に少なからず影響を及ぼす可能性を示唆していた。酒井:言語的コンテクストの影響を探る実験を発展させる課題をデザインし、コミュニケーション相手との親疎に応じて行為を記憶する際の視点が異なること,課題遂行中の注意配分と視点の取り方に相関が見られることなどを明らかにした。岡ノ谷:1)ジュウシマツの遅延・変換聴覚フィードバックかさえずりにおよぼす効果を、個体発達過程において検討し、この可塑性は大脳-基底核連関に依る可能性が高いことが分かった。2)齧歯類のメタ認知能力を検出するため、レバー押し課題を行わせ自己の行動履歴に関する行動バイアスを見つけた。福田:会話を行っている最中の脳機能をNIRSを用いて統合失調症について行ったところ、陰性症状が右前頭部や左側頭部の脳賦活と関連していた。これらのことから、NIRSを用いて会話における脳機能を検討することで対人場面における自己制御を検討することができ、その脳賦活が性格傾向や陰性症状と関連することが明らかにできた。橋本:他者の視点からみた、自己・他者のイメージを想像する能力は、通常の対人コミュニケーションを円滑におこなう上で重要と考えられるが、今回開発した自己・他者参照課題により、発達障害のひとつであるASDにおいて、この機能をつかさどる脳システムの異常がみられることを示唆している。
ヒヨドリバナ属有性型・無性型におけるLRR型耐病性遺伝子の文子進化

有性生殖の機能については、有害突然変異を効率よく排除するためであるという対有害変異説と、病原体のすばやい進化に対抗するためであるという対病原体説(赤の女王説)が有力視されているが、いずれについても十分な検証は行われていない。本研究の目的は、対病原体説を検証する実験系としてもっとも有力なヒヨドリバナ-ジェミニウイルス系を用い、宿主であるヒヨドリバナの耐病性遺伝子の変異や分子進化を有性型集団と無性型集団の間で比較することにある。ヒヨドリバナ-ジェミニウイルス系では、有性型集団より無性型集団においてウイルス感染頻度が高いこと、ウイルス感染は宿主の適応度を大きく下げること、有性型集団に感染したウイルスではアミノ産置換数が多いことがすでにわかっている。対病原体説が正しければ、有性型集団では耐病性遺伝子の変異性が高く、そのためにウイルス感染率が低いと予測される。近年急速に研究が進んだNBS-LRR型植物耐病性遺伝子に着目し、5'側の保存的な配列を利用してPCRプライマーを設計し、既知の配列と相同性のあるヒヨドリバナの配列を得ることができた。このプライマーを用いて、有性型と無性型の遺伝的変異性の比較を行った。その結果、1個体が持つ遺伝子の多様性を比べると、意外にも無性型は有性型より多様な遺伝子を持っていた。この事実は、無性型では協調進化が起きにくく、そのため適応進化速度が遅いことを示唆する。上記の比較は、5'側の保存的な配列に関するものである。病原体のタンパク質と相互作用する領域は進化速度の速い3'側にある。仮説のさらなる検証のためには、この領域の変異を有性型と無性型で比較する必要がある。本研究は、ヒヨドリバナ属植物の有性型・無性型においてLRR型耐病性遺伝子の遺伝的変異の大きさと分子進化のパターンを比較し、有性生殖は病原体に対抗進化するうえで有利であるという「赤の女王」仮説を検証することを目的としている。病原体の感染を特異的に認識する植物のリセプターの遺伝子は1993年にはじめて単離され、その後6年間にロイシン・リッチ・リピート(LRR)をもつタンパク質ファミリーがウイルス・菌・線虫の感染を認識し、下流の防御系を誘導することが解明された。このLRR型耐病性遺伝子の既知の配列から、保存的領域を同定してプライマーを設計し、ヒヨドリバナ属植物の有性型・無性型それぞれ6個体からホモロガスあるいはパラロガスな領域を増幅することができた。PCR産物をクローニングし,1個体につき5クローンの配列を決定し、2×6×5=総計60個の配列情報を得た。1個体から得られた5クローンの配列間には、ほとんどの場合において塩基置換が認められたことから、1個体内には相当数のパラロガス遺伝子があると考えられる。そこで、1個体から得られた5クローンの配列間の平均遺伝子置換数を求め、有性型・無性型間で比較したところ、意外にも無性型(8.8個)の方が、有性型(5.1個)よりも平均遺伝子置換数が多かった。この事実は、2倍体である有性型よりも、倍数体である無性型の方が、ゲノム全体での突然変異率が大きいためではないかと考えられる。この結果は、「赤の女王」仮説を支持するものではないが、これまで盲点となっていた倍数体の効果が無視できないものであることを示すユニークなものである。「赤の女王」仮説の検証を進めるためには、今後は、病原体の蛋白質と相互作用する領域と考えられる3'側のLRR領域の配列をRT-PCRで決定し、配列の比較を行う必要がある。

有性生殖の機能については、有害突然変異を効率よく排除するためであるという対有害変異説と、病原体のすばやい進化に対抗するためであるという対病原体説(赤の女王説)が有力視されているが、いずれについても十分な検証は行われていない。本研究の目的は、対病原体説を検証する実験系としてもっとも有力なヒヨドリバナージェミニウイルス系を用い、宿主であるヒヨドリバナの耐病性遺伝子の変異や分子進化を有性型集団と無性型集団の間で比較することにある。ヒヨドリバナージェミニウイルス系では、有性型集団より無性型集団においてウイルス感染頻度が高いこと、ウイルス感染は宿主の適応度を大きく下げること、有性型集団に感染したウイルスではアミノ酸置換数が多いことがすでにわかっている。対病原体説が正しければ、有性型集団では耐病性遺伝子の変異性が高く、そのためにウイルス感染率が低いと予測される。近年急速に研究が進んだNBS-LRR型植物耐病性遺伝子に着目し、5'側の保存的な配列を利用してPCRプライマーを設計し、既知の配列と相同性のあるヒヨドリバナの配列を得ることができた。このプライマーを用いて、有性型と無性型の遺伝的変異性の比較を行った。その結果、意外にも有性型と無性型の間に有意差はなかった。この事実は、無性型においてもおそらく中立的な変異が有性型と同様の率で起きていることを示唆する。上記の比較は、5'側の保存的な配列に関するものである。病原体のタンパク質と相互作用する領域は進化速度の速い3'側にある。仮説のさらなる検証のためには、この領域の変異を有性型と無性型で比較する必要がある。
細胞内異常タンパク質の蓄積機構

試験管内で線維化したαシヌクレインを野生型マウスの黒質、線条体、嗅内野に接種し、接種後1ヶ月後に脳を固定して、免疫組織染色し、リン酸化αシヌクレイン病変の広がりを調べた。その結果、接種した部位によって全く異なる異常αシヌクレイン病変の出現と広がりを観察した。黒質に接種したマウスでは黒質、扁桃体、線条体の一部の神経細胞に病変が観察されたのに対し、線条体に接種したマウスでは大脳皮質の広い範囲と扁桃体、黒質の神経細胞に病変が観察された。また嗅内野に接種したマウスではその周辺、および扁桃体や海馬に病変がみられた。以上の結果は、異常αシヌクレインが神経回路を介して広がったことを強く示唆する。26年度が最終年度であるため、記入しない。今年度は、アルツハイマー病(AD)に蓄積するタウについて、3Rタウ特異抗体(RD3)、4Rタウ特異抗体(RD4)、新規4Rタウ特異抗体(anti-4R)等を用いてタウの翻訳後修飾、構造についての検討を行った。様々な認知症患者脳に蓄積するタウの解析を行った際、ADに蓄積するタウに対するRD4の反応性が、他の疾患(CBDやPSP)に比べて弱いことに気がついた。以前の蛋白化学解析において、RD4抗体のエピトープ内のN279(279番目のアスパラギン)に脱アミド化を検出していたことから、脱アミド化と抗体の反応性を検討した結果、N279の脱アミド化により、RD4の反応性が消失することが判明した。これをさらに確認するため、アスパラギン酸に置換した合成ペプチドを免疫して抗体を作製した。得られた抗体はN279の脱アミド化に関係なく、4Rタウを特異的に認識し、ADに蓄積するタウに対しても強い反応性が確認された。この結果から、ADに蓄積する4Rタウは、N279が高度に脱アミド化を起こしていること、CBDやPSPなどの4Rタウだけが蓄積する疾患においては、N279の脱アミド化の程度は低いことが示唆された。さらにADに蓄積するタウをプロテアーゼ処理し、プロテアーゼに対する抵抗性と感受性から、線維化しているタウの中心構造を解析した結果、ADでは、3Rタウと4Rタウが、その微小管結合領域を介してアンチパラレルのアミロイド様構造を形成していることが示唆された。患者脳に蓄積する異常タンパク質の解析として、今年度はAD、CBD、PSP患者脳に蓄積するタウの解析を行い、疾患により構造の異なるタウがシードとなり、その特徴的病理を形成していることが示唆された。レビー小体型認知症(DLB)や多系統萎縮症(MSA)患者に出現する病理構造物の主要構成成分であるαシヌクレインについても同様の解析が可能であり、現在生化学的な違いについて解析を行っている。FTLD/ALSに蓄積する異常TDP-43について、シード導入培養細胞モデルを用いて、その異常構造が新しい異常タンパク質にも受け継がれることを証明した。そこで、タウ、αシヌクレインについても、この実験と同じように、正常タウ、αシヌクレインを発現させた培養細胞内に患者脳由来の異常タンパク質を凝集シードとして導入し、蓄積がおこるかどうか、その異常構造は導入したシードと同じ構造をとるかなどについて、免疫組織染色、イムノブロットなどで解析を進める。また、ワクチン療法や異常リン酸化部位に対する抗体療法について、線維化αシヌクレイン接種マウスを用いてその効果を検討する。投与後、血中において抗原に対する抗体価の上昇がみられるか、マウスの症状の改善や異常タンパク質の広がり、蓄積の減少がみられるか、などについて検討する。
in vivo RNA Imaging Toward Mapping the Dynamics of Gene Expression in the Plastic Brain

本支援ではin vivo RNAイメージングで長期記憶形成の分子基盤を明らかにすることを目標にした。その成果として本来不可能であった計測イメージング技術に消光型プローブの導入によって、RNA分子のダイナミクスを生体内の1細胞レベルで観察しまた多細胞での同時計測をする技術が可能になった(NAR,2015)。さらに、神経細胞における転写因子が産物がマイクロRNAに抑制されないための細胞メカニズムを果たす分子経路の存在を明らにした(Front Mol. Neurosci, 2017)。シナプス形成と機能を制御する新しい転写後制御層を開拓した(Nat Neurosci, in press)。本研究は神経回路に局在するmRNAの転写後制御による神経回路形成・可塑性メカニズムを解明することを目的としている。そのために、mRNAターゲット依存的発光ができる蛍光イメージング法およびその応用を基盤技術として開発している。H26年度は、1.内在性RNA追跡する分子量が小さい、s/n比が高い、発光のタイムラグがほとんどない、定量的計測可能な新規蛍光プローブの開発;2.生体脳でのRNA蛍光ライブイメージング法の最適化および定量化、の2点において研究を進めた。2.生体脳でのRNAイメージング法に関しては、生きたマウスの小脳顆粒細胞における28S rRNAおよびU3 snoRNAの検出を試みた。いずれのRNAも発現量が高く、特異的な核内局在パターンを示すので、特異的に検出された結果が得られている。さらに転写阻害剤や抗がん剤処理による28S rRNAの核内アセンブリーのダイナミクスを検証し定量的に評価した結果、細胞株とナイーブな組織内との間で、28S rRNAの制御経路およびRNA fociダイナミクスが異なるデータが得られている。このような結果は生体内におけるRNAイメージングの重要性を示唆している(論文投稿中)。転写制御は、シナプス活動と長期記憶を結び付ける重要な機構である。しかし、ゲノムの発現情報がどのようなダイナミクスで、外部からの刺激に柔軟に応答して学習・記憶を介する神経回路に可塑性をもたらすかについて、その作動機序は未だに解明されていない。本研究では、「in vivo RNAイメージング」の基盤技術を開発し、学習過程でおきる脳内RNAの時空間動態をリアルタイムで定量的・動的に計測することによって、学習とゲノム発現の関連性を明らかにし、長期記憶や脳の可塑性における分子作動機構を解明することを目的としている。2015年度までは、研究者らは生体に害のない点灯型蛍光プローブを導入することで、生きた組織において細胞核内の特定のRNAの動きを可視化することに成功した(Oomoto et al., Nucl Acids Res, 2015)。新しいイメージング法は、目的RNAの濃度によって蛍光の強さが変わるため、生体内で標識したRNAの定量的な評価にも応用できる。in vivoイメージングで初めて示すことができたのは薬剤を投与したときの細胞内でのRNAの動きが生体組織内の細胞と培養された細胞とで異なることの定性的評価である。新しいイメージング手法は、遺伝子操作を必要としない生体内でのRNAの集まりの出現や消失といった「RNA本来の振る舞い」を研究する手法として記憶学習、脳可塑性に伴う応答メカニズムを解明する基盤技術として出来つつある。2015年度では記憶学習に伴う神経回路における遺伝子発現のリアルタイム蛍光イメージングが可能となる基盤技術として、生きた脳組織での内在性RNAの蛍光ラベルおよびリアルタイムイメージングに成功した(Oomoto et al., Nucleic Acids Res, 2015)。本技術の進展によって、「in vivo RNAイメージング」の基盤技術が出来つつある。しかし、学習中におきる遺伝子発現の俯瞰的イメージングに至っていないので最終目標には到達していない。本研究では「in vivo RNAイメージング」の基盤技術を開発し、学習過程で起きる脳内RNA変化をリアルタイムで定量的、動的に計測することによって、「学習ーゲノム」相互作用による長期記憶や脳の可塑性における分子作動機構を解明することも目的としている。そのために、「生きた」脳で「1細胞」でのRNAの振舞を観察するための新規蛍光イメージング手法を開発することが急務である。本研究で、生きたマウス脳内へ無害の点灯型蛍光オリゴプローブを導入することによって、細胞核内における特定のRNAの動きを可視化することに成功し、その成果は英国の科学雑誌Nucleic Acids Researchの2015年10月号に掲載された。新しいイメージング手法は、遺伝子操作を必要としない、生体内におけるRNAの集まりの出現と消失について観察できる利点があり、組織内におけるRNAの挙動と培養細胞における挙動が異なることを見出している。しかし、学習時におきるRNA動態変化の検出実験を行うためには、さらに乗り越えないといけないハードルが残っていた。1. 2光子顕微鏡によるin vivoイメージング;2.低発現遺伝子(1細胞につき数コピー)の検出;3.核内にとどまらず細胞質でのRNAイメージング;4.蛍光シグナルの定量評価が課題として残っていた。過去1年は、この4つのハードルを乗り越えるための実験を実施した。具体的には、2光子顕微鏡によるイメージングの習得、化学修飾によるプローブの細胞内局在の制御、数学者と共同研究による実験データーに基づいたRNA蛍光変化のシミュレーションを実施した。さらに1細胞を対象とするsingle-cell electroporation方法を確立し、その成果をJ Microbiol Methods, 2016に発表した。

本研究は非常に新規性が高く先行研究が少ないため、システムの整備からスタートし、プローブの導入、認識特異性の評価、蛍光ーRNAコピー数の定量評価すべてのステップにおいて、現存の方法論を検討した上で必要に応じて新たな方法を確立する実験を実施してきた。具体的には、modified single-cell electroporation技術を確立し、さらに時間軸による蛍光変化のシニュレーションを共同研究で行った。当初予期していた技術の難関がモチベーションとなった幾つかのプロジェクトが発生して、新たなコンセプトに基づいた蛍光プローブの開発や、プローブ改良のために自然におきる内在性RNA修飾による機能制御を検証するなど研究の幅が広がった。最終年度ではここまで築いた技術の進展を活用し、学習に伴う生体内RNAイメージング実験を実施する。遺伝子発現による神経機能調節は、脳の発達や学習・記憶形成などに必須なメカニズムである。これまでに、脳の記憶関与部位における神経活動に伴って急速に発現量が変化するmRNAやnoncoding RNAが数多く報告されてきた。しかし、従来のRNAライブイメージング法では、組織内の生細胞における目的RNAの可視化が困難であり、RNAが体内でどのように振る舞い、どのように神経機能調節を行うか明らかにできず、「RNA」と「記憶」の間には大きなギャップが存在する。本申請課題で「生きた」脳で「1細胞」でのRNAの振舞を観察することを目指し、「学習」と「ゲノム」の相互作用による長期記憶や脳の可塑性における分子作動機構の解明にチャレンジした。初年度はシステムの整備からスタートし、プローブの導入や認識特異性の評価、蛍光ーRNAコピー数の定量評価などのステップにおいて、模索して様々な実験条件を検討してきた。最終年度ではここまで築いた技術の進展を活用し、2光子蛍光顕微鏡を用いたイメージングでローラーの上でバーチャルリアリティ画面を見ながら運動するマウスの大脳運動野におけるRNA発現変化のイメージングに成功した。この観察にはマウスの脳部を固定し、事前に化学修飾された合成RNA蛍光プローブを導入してある。さらに、イメージング研究から明らかになったRNA化学修飾の重要性に気づかされ、技術改良のヒントとなるベージックなRNA化学修飾のメカニズムを検討した。その結果現在行動学習中のマウス大脳運動野における複数の神経細胞層におけるRNAの蛍光観察に成功し、今後定量解析を進める展開まできた。体外で培養したマウスやヒトの神経細胞におけるRNA輸送顆粒を観察した論文はFron. Mol. Biosci (2017)に掲載された。本支援ではin vivo RNAイメージングで長期記憶形成の分子基盤を明らかにすることを目標にした。その成果として本来不可能であった計測イメージング技術に消光型プローブの導入によって、RNA分子のダイナミクスを生体内の1細胞レベルで観察しまた多細胞での同時計測をする技術が可能になった(NAR,2015)。