hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
2次元場に固定された配向分子の反応

4.理論班では、低温の氷中での化学反応は水分子の回転の抑制された条件で進む点に注目してプロトンの移動が本質的な働きをすることを予想し、特定の条件の下で氷中のCO分子が水分子と酸化還元反応を起こして一連のC1化合物を生成する機構を題材として、まず基底状態における反応経路を探索した。
エンドサイトーシスに関わるG蛋白質Rab5のシグナルによる活性制御機構の解明

低分子量G蛋白質であるRab5は、細胞膜からの小胞の出芽,初期エンドソームへ向けての輸送、融合といったエンドサイトーシス過程全般において、その活性化が必須である分子である。これまでのRab5に関する研究は、主に恒常的な栄養分の取り込み過程あるいは初期エンドソームの融合過程について進められているが、細胞膜からの小胞の陥入、特に刺激に応じた受容体のinternalizationに関する研究はほとんど行われていない。私はこれまでに新規Rab5結合因子としてRINファミリー(RIN1,2,3)を同定し,Rab5のグアニンヌクレオチド交換因子として機能すること、及び活性化型Rab5とも結合することを報告してきた。さらに、RINが細胞内で初期エンドソームへ輸送される過程の小胞に局在すること、細胞内で四量体構造を形成することを明らかにした。また、RINが細胞膜からの小胞の出芽を制御する因子;Amphiphysin IIと相互作用することを示した。本年度は以上をふまえて実験を行い,以下の知見を得た。1)RINファミリーのC末に存在するRAドメインに結合するRas蛋白質群を探索し,RIN1には様々なRas様蛋白質の活性化体が、RIN2にはN-Rasの活性化体が結合すること、またRIN3には用いたどのRas様蛋白質も結合しないことを示した。2)N-Rasが関与するシグナルであるTNF-α刺激時のJNKの活性化状態をRIN2のRNAi法によるノックダウン細胞で検討した。結果、RIN2のRNAi細胞では、コントロール細胞に比べ、活性化は起こるものの早い段階で収束する現象が観察された。以上の結果は、受容体刺激によるシグナル伝達と脱感作のメカニズムを有機的に結びつける、極めて先駆的な研究の発端となりうる。低分子量G蛋白質であるRab5は、細胞膜からの小胞の出芽、初期エンドソームへ向けての輸送、融合といったエンドサイトーシス過程全般においてその活性化が必須である分子である。これまでのRab5に関する研究は、主に恒常的な栄養分の取り込み過程あるいは初期エンドソームの融合過程について進められているが、細胞膜からの小胞の陥入、とくに刺激に応じた受容体のinternalizationに関する研究はほとんど行なわれていない。私はこれまでに新規Rab5結合因子RIN2を同定し、Rab5のグアニンヌクレオチド交換因子として機能すること、および活性化型Rab5とも結合することを報告してきた。また、細胞内でホモ四量体を形成すること、さらに細胞膜からの小胞の出芽を制御する因子;Amphiphysin IIと相互作角することを明らかにしてきた。本年度は以上をふまえて実験を行い、以下に示す知見を得た。1)培養細胞においてRIN2が小胞上に局在することを示した。また、この小胞にRab5は局在するが、EEA-1は存在しないことから、初期エンドソームヘ輸送される過程の小胞であることが示された。2)Amphiphysin IIは細胞質内に一様に分布するが、RIN2と共発現することによりRIN2小胞上にその存在が認められた。現在は受容体刺激により、これら局在に変化が生じるか検討するとともに、RIN2のRAドメインおよびSH2ドメインに結合する蛋白質の探索を行なっている。
非銅系高温超伝導酸化物系における電気伝導度・ホール効果スペクトルの研究

銅を含まない酸化物でありながら高い超伝導転移温度(Tc_<max>=32K)をもつ超伝導酸化物Ba_1-xKxBiO_3系の、未だ十分に理解されていない半導体-超伝導体転移のメカニズム、キャリアの伝導メカニズム、電子状態や電子構造を明らかにすることを目的として、1.広い組成範囲(半導体超伝導体)での良質な単結晶の合成と、2.広い組成域での電気伝導度、ホール効果、光吸収、磁化率、光伝導度と光伝導度磁気効果の測定、解析と考察を行い、以下の成果を得た。1.Ba_1-xKxBiO_3系単結晶の合成を、電気化学合成法によりさまざまな条件下で行い、半導体相から超伝導相にわたる広い組成範囲でカリウム欠損の少ない単結晶を得た。雰囲気(湿度)により結晶組成を低X側へと大きく変えられることを見い出すなど、合成に関する新たな知見も得られた。これはより広い組成範囲での物性測定を可能にしたと同時に、この方法は制御性に優れているので超伝導体/半導体構造をもつ結晶成長型素子の試作へも研究を展開した。2.超伝導相のBa_1-xKxBiO_3(x=0.4)単結晶によるホール効果の詳細な解析から、超伝導相の伝導電子-フォノン相互作用におけるLOフォノンの重要性を示した(論文投稿中)。電気化学合成により始めて合成が可能になった半導体相Ba_1-xKxBiO_3(x<0.3)の単結晶を用いて、ホール効果のx-依存性、温度依存性がはじめて測定された(論文準備中)。低温でのキャリアは正孔であるが、その有効質量が極めて大きいことがわかった。xの増加とともに半導体相でも電子が伝導に寄与しはじめ、超伝導相へとつながることがわかった。半導体相Ba_1-xKxBiO_3の単結晶を用いて、光伝導を始めて観測したが、フォトキャリアの易動度は極めて小さく測定できなかった。フォノン周波数、XPSの解析よりBaBiO_3が42%の共有結合性をもつことを示し、CDW電子状態に対して再考の必要性を再確認した。銅を含まない酸化物でありながら高い超伝導転移温度(T_<Cmax>≒32K)をもつ超伝導性酸化物Ba_<1-x>K_xBiO_3系を対象に、その広い組成域(半導体超伝導体)で、光吸収、ホール効果と、超伝導分野では新しい手法である半導体相における光伝導度と光伝導ホール効果の測定を行うことにより、光遷移の起源、伝導担体の種類と伝導機構を明らかにし、未だ十分に理解されていない本系の電子状態、電子構造を明らかにすることを目的とした。今年度に行った研究を、以下、研究実施計画に沿って記す。1.広い組成範囲での良質なBa_<1-x>K_xBiO_3系単結晶の合成を目的として、電気化学合成法による合成をさまざまな条件下で行い、半導体相から超伝導相にわたる広い組成範囲でカリウム欠損の少ない単結晶を得た。雰囲気(湿度)により結晶組成を低X側へと大きく変えられることを新たに見いだすなど、合成に関する新たな知見も得られた。これはより広い組成範囲での物性測定を可能にすると同時に、この方法は制御性に優れているので超伝導体/半導体構造をもつ結晶成長型素子の試作へと研究を展開している。

平成7年度購入の設備備品および消耗品を利用し、ホール効果および半導体相における光伝導度とその磁気効果の測定を行うための測定系を整備した。超伝導相のBa_<1-x>K_xBiO_3単結晶を用いて電気伝導度、ホール効果の測定を行った。良質の単結晶による実験で電気伝導の本質が観測できるようになり、詳細な解析から伝導電子-フォノン相互作用についてのより深い知見が得られた。電気化学合成法により始めて合成が可能になった半導体相Ba_<1-x>K_xBiO_3の単結晶を用いて、Ba_<1-x>K_xBiO_3で光伝導を始めて観測した。磁気効果、分光を含む詳細な研究は次年度に行う。銅を含まない酸化物でありながら高い超伝導転移温度(Tcmax=32K)をもつ超伝導酸化物Ba_1-xKxBiO_3系の、未だ十分に理解されていない半導体-超伝導体転移のメカニズム、キャリアの伝導メカニズム、電子状態や電子構造を明らかにすることを目的として、1.広い組成範囲(半導体超伝導体)での良質な単結晶の合成と、2.広い組成域での電気伝導度、ホール効果、光吸収、磁化率、光伝導度と光伝導磁気効果の測定、解析と考察を行い、以下の成果を得た。1.Ba_1-xKxBiO_3系単結晶の合成を、電気化学合成法によりさまざまな条件下で行い、半導体相から超伝導相にわたる広い組成範囲でカリウム欠損の少ない単結晶を得た。雰囲気(湿度)により結晶組成を低X側へと大きく変えられることを見い出すなど、合成に関する新たな知見も得られた。これはより広い組成範囲での物性測定を可能にしたと同時に、この方法は制御性に優れているので超伝導体/半導体構造をもつ結晶成長型素子の試作へも研究を展開した。2.超伝導相のBa_1-xKxBiO_3(x=0.4)単結晶によるホール効果の詳細な解析から、超伝導相の伝導電子-フォノン相互作用におけるLOフォノンの重要性を示した(論文投稿中)。電気化学合成により始めて合成が可能になった半導体相Ba_1xKxBiO_3(x<0.3)の単結晶を用いて、ホール効果のx-依存性、温度依存性がはじめて測定された(論文準備中)。低温でのキャリアは正孔であるが、その有効質量が極めて大きいことがわかった。xの増加とともに半導体相でも電子が伝導に寄与しはじめ、超伝導相へとつながることがわかった。半導体相Ba_1-xKxBiO_3の単結晶を用いて、光伝導を始めて観測したが、フォトキャリアの易動度は極めて小さく測定できなかった。フォノン周波数、XPSの解析よりBaBiO_3が42%の共有結合性をもつことを示し、CDW電子状態に対して再考の必要性を再確認した。
膵臓外分泌機構におけるトリプシノーゲンの糖鎖認識の意義

ウシトリプシノーゲン(BPTG)やウシトリプシン(BPT)が糖鎖に対する特異的な結合性を有し、特定の単糖によってBPTGの活性化が抑制されることを発見した。糖との複合体のX線結晶構造解析により合計3か所の糖結合候補部位を見出した。GalN構造を含む糖、次いでManにより活性化抑制が認められ、GalN, GalNAcはBPTGに結合して抑制効果を示すことがわかった。pH 5.5では、野生型に比べ、W216AとY28A変異体のα-Man,α-L-Fucに対する結合性が低下し、pH 7.5においてはW216A変異体でα-GalNAc,α-Manに対する結合性が野生型よりも低下した。本研究室ではウシトリプシノーゲン(BPTG)ならびにウシ・ブタトリプシン(BPT・PPT)が糖鎖に対する特異的な結合性を有することと、特定の単糖との結合によってBPTGの活性化が抑制されることを発見した。さらにBPTGまたはBPTと糖との複合体のX線結晶構造解析により、合計3か所の糖結合候補部位を見出した。本研究では生理的条件下で機能する主要な糖認識部位を明らかにした。種々の糖とのプレインキュベーションによる活性化抑制効果の解析からGalNならびにGalNAcはプロ酵素BPTGに作用して活性化抑制を示すと考えられた。そこで野生型ヒトトリプシノーゲン(recHPTG)および各糖結合候補部位の主要アミノ酸を置換した3種類の変異型の発現ベクターを作製し、無細胞タンパク質発現系により各タンパク質を調製した。チモーゲン顆粒内のpHであるpH 5.5と、十二指腸内のpH 7.5の2条件下において、糖ビオチニルポリマー(BP)プローブとの結合性を解析したところ、BPTGとHPTGにおける糖特異性の差も明確になったので、Man, Fuc, GalNAcについて調べた。pH 5.5では、α-Man-BP、α-L-Fuc-BPに対する結合性がW216AとY28A変異体において、野生型とR122Aよりも低下した。また、pH 7.5においてα-GalNAc-BPとα-Man-BPに対する結合性が、W216A変異体において野生型と他の2つの変異体よりもやや低下した。以上の結果から、W216、Y28がα-Man、α-L-Fuc結合部位に含まれる可能性が高いことが明らかになった。ウシ膵トリプシノーゲン(BPTG)のトリプシン(BPT)による活性化反応におけるメチルα-GalNAcの抑制効果から、その分子機構と生物学的機能を研究した。1.BPTGと糖複合体の結晶解析から示唆された3か所の候補部位をそれぞれ、ヒトトリプシノーゲン(HPTG)上でアミノ酸置換した変異型recHPTGを無細胞発現系により調製した。各変異体酵素について、チモーゲン顆粒内のpH 5.5と十二指腸内のpH 7.5の条件下で、種々の糖-ビオチニルポリマープローブとの結合性を解析し,糖の種類およびpHに依存して、各候補部位がそれぞれ糖結合活性に関与することを見出した。2.細胞内におけるチモーゲン顆粒へのプロ酵素選別送達と分泌過程への糖結合性の関与を調べるため、HEK293細胞に野生型または変異体recHPTG発現ベクターを導入し発現させた。その結果いずれも培地へ定常的に微量分泌され、構成性分泌の可能性が考えられた。調節性顆粒分泌による影響を調べるには膵臓由来細胞を使用する必要性が示唆された。分泌顆粒からBPTGに対する糖タンパク質リガンドを精製したところ、顆粒膜画分・内容物画分から最多量成分のα-アミラーゼのみ同定され、微量成分の同定は困難であった。3.単離したブタ膵外分泌顆粒がトリプシンにより分解される過程を510 nmにおける濁度で追跡した結果、特定の糖質共存による分解遅延効果が認められ、特異糖が膵外分泌顆粒のトリプシンによる分解抵抗性を高めることが示された。すなわち糖特異的相互作用が膵炎抑制に寄与する可能性が考えられる。分子上糖結合部位の同定、ならびに酵素がもつ糖認識により、分泌顆粒のトリプシン抵抗性が増強する効果を検出することができた。膵外分泌顆粒内での酵素間の糖鎖を介する相互作用が示唆された。実験系のさらなる検討と糖結合性を欠失する変異体の活用により、外分泌過程を駆動する糖鎖認識の重要性を解明できると期待された。生物化学25-26年度にはBPTGのX線結晶解析から示された3か所の糖結合部位候補の内、どの部位が生体内で実際に働く部位かを同定することを目標としている。

そこで各部位の中心となるアミノ酸(Tyr, Arg, Trp)をHPTG上でそれぞれAlaに変異させた3種類の変異体トリプシノーゲンを作成し、糖結合活性への個々の部位の寄与を評価した。しかしどの変異体についても,Man, GalNAc、Fuc全てに対する糖結合活性の完全な失活には至らなかったことから、糖結合活性部位は分子上に1か所だけではなく、複数の部位が機能することが示唆されたので、ダブルおよびトリプル変異体を作成し検証を進めている。この解析によりトリプシノーゲン上の糖結合部位の同定は終了する。一方、細胞レベルでのチモーゲン顆粒への選別、輸送、膵液への分泌に対する糖鎖認識の寄与を同定するため、哺乳類細胞(HEK293)にrecHPTGを発現するベクターを導入する実験を既に行い、野生型で発現を確認した。次に糖結合性を欠失したトリプシノーゲン変異体を細胞に発現させ、細胞内局在の比較へと進める段階にあるので、予定以上に進行していると評価した。本研究課題は、糖によるトリプシノーゲン活性化抑制の分子機構と、糖結合性の酵素分泌機構における役割を解明することを目的としている。これらの研究に必要な野生型と変異体酵素の発現ベクターを既に作成し、ヒト由来細胞を用いて、タグを付けての野生型酵素の発現が可能であることを確認したので、当初の計画通りに実験を進め、糖結合性を欠失したトリプシノーゲン変異体をHEK293およびヒト膵腺房細胞株に発現させ、細胞内局在の解析を行う。チモーゲン顆粒内への選別送達、輸送と膵液中への分泌における糖結合性の寄与を同定する予定である。
走査トンネル顕微鏡による芳香族分子の単一分子直接観察

当研究課題では、走査トンネル顕微鏡(STM)による芳香族化合物の単一分子観察を行い、分子軌道の形やエネルギーなど、分子のもつ個性がSTM像にどのように反映されるかを直接的に明かにすることを目的とした。レーザー照射によるトンネル電流の変移を検知することで、通常のトポグラフ像では、区別のつかないような、微妙な分子吸着状態における表面電子状態の違いを顕著に反映した単一分子像が得られることを見いだした。特に、吸着構造と電子状態の違いが、どのように光STM像に反映されるかについて、詳細に調べた。測定方法は光変調法に加えて、表面の局所状態密度を調べるために、バイアス変調法の開発を行い、光変調像とバイアス変調像の比較から、表面光起電力の局所状態密度効果と光励起キャリアの効果の分離を行った。対象とした分子は構造とHOMO-LUMOギャップが大きく異なる亜鉛クタロシアニンとコロネンを選び、基板としてシリコン単結晶(100)面の2×1再構成表面を用いた。亜鉛フタロシアニンはバイアス変調像のコントラストが強く、フェルミ準位付近に大きな状態密度を持つので、光変調像は主に表面起電力により生ずる。これに対して、コロネン分子はバイアス変調像のコントラストが小さく、状態密度が小さいので、光変調像は励起キャリアの直接的なトンネリングの影響が強く現れ、コロネン分子像のコントラストの原因となっていることを見いだした。また、このコロネン分子の光変調像のコントラストは、吸着構造と強く関係していることも明かになった。以上のように、亜鉛フタロシアニンとコロネン分子について走査トンネル顕微鏡を用いて芳香族分子の単一分子直接観察を行った。さらに光変調法やバイアス変調法を駆使して、分子の吸着構造、電子状態と画像との関係を明らかにした。当研究課題では、走査トンネル顕微鏡(STM)による芳香族化合物の単一分子観察を行い、分子軌道の形やエネルギーとSTM像の関係を直接的に明かにすることにある。有機分子として、分子の形とHOMO-LUMOギャップが大きく異なる亜鉛フタロシアニンとコロネンを選び、基板としてシリコン単結晶(100)面の2×1再構成表面を用いた。亜鉛フタロシアニンの分子像は下地のシリコン原子のダイマーのパイ軌道との重なりに強く依存することを見いだした。コロネン分子と亜鉛フタロシアニン分子は、普通のSTM像では共に明るい像として観察される。ところが、レーザー光照射下におけるトンネル電流を検知することで、分子吸着状態における表面準位をより顕著に反映したSTM像が得られることを見いだした。コロネン分子はHOMO-LUMO間の準位の開きが大きく、基板であるシリコン単結晶のバンドギャップより大きなギャップをもつ吸着電子状態を形成する。この場合、吸着分子軌道は、吸着構造により、シリコンのバンドギャップレーザー光により励起されたキャリアは分子軌道の影響を受けない。これに対して、亜鉛フタロシアニン分子は、HOMO-LUMO間のギャップが小さく、常に励起キャリアの再結合サイトとして働くことが判った。以上の結果は、光照射STMにより、分子のもつ軌道エネルギーの違いを画像化できることを示している。この手法は本研究計画の目的である、分子軌道の実空間における直接的観察をより進んだ方法で実現したといえる。よって平成8年度はこの光STM法を中心に据えて、研究を進める計画である。平成7年度の研究において、レーザー光照射によるトンネル電流の変位を検知することで、分子吸着状態における表面準位をより顕著に反映した単一分子像が得られることを見いだした。平成8年度は吸着構造と電子状態の違いが、どのように光STM像に反映されるかについて、詳細に調べた。

測定方法は平成7年度に開発した光変調法に加えて、表面の局所状態密度を調べるために、バイアス変調法の開発を行い、光変調像とバイアス変調像の比較から、表面光起電力の局所状態密度効果と光励起キャリアの効果の分離を行った。対象とした分子は形とHOMO-LUMOギャップが大きく異なる亜鉛フタロシアニンとコロネンを選び、基板としてシリコン単結晶(100)面の2×1再構成表面を用いた。亜鉛フタロシアニンはバイアス変調像のコントラストが強く、フェルミ面付近に大きな状態密度を持つので、光変調像は表面起電力により生ずる。これに対して、コロネン分子はバイアス変調像のコントラストが小さく、状態密度が小さいので、光変調像は励起キャリアの直接的なトンネリングの影響が強く現れ、コロネン分子像のコントラストの原因となっていることを見いだした。また、このコロネン分子の光変調像のコントラストは、吸着構造と強く関係していることも明かになった。以上のように、亜鉛フタロシアニンとコロネン分子について走査トンネル顕微鏡を用いて芳香族分子の単一分子直接観察を行った。さらに光変調法やバイアス変調法を駆使して、分子の吸着構造、電子状態と画像の関係を明らかにした。
母児接点におけるオキシトシナーゼの生理的意義解明

オキシトシンの作用は産生や受容体のみならず、分解によっても制御されている。Placental leucine aminopeptidase (P-LAP)は胎盤及び妊婦血中に豊富に存在するオキシトシナーゼの本体であり、母児接点である胎盤でのP-LAP発現調節が子宮収縮に重要であると考えられている。本研究では、絨毛細胞におけるP-LAPの転写制御機構解明を主たる目的とした。絨毛細胞モデルとして用いたBeWo細胞において、-297+49の領域がP-LAPの転写に重要であり、この領域には4ケ所の蛋白結合領域が存在するが、中でも-214-183bpの領域が最も転写活性を高めている事を解明した。この領域には転写因子AP-2α、AP-2γが結合し、P-LAP転写に機能的にも重要であることを突きとめた。更にこの領域にはIkarosという転写因子が結合しAP-2と協調的に転写活性を上昇させていることを発見したが、Ikaosはこれまでリンパ球の分化因子としての報告しかなく、絨毛細胞における機能は世界で最初の報告である。絨毛羊膜炎を代表とする胎盤局所の炎症は早産の主たる原因である。ゲノムクローニングによって得られたP-LAP遺伝子の上流域に炎症性サイトカインの応答領域が存在した事から、同部位を介したオキシトシナーゼの抑制が相対的なオキシトシンの活性上昇につながり、子宮収縮を引き起こすと仮説をたてた。予想に反し、BeWo細胞において、炎症性サイトカインIL-1βはP-LAP活性、蛋白発現とも増加させた。また、このP-LAPの蛋白増加はmRNAの誘導を伴っていたが、この転写促進には新たな蛋白の合成を必要とし、予想されたサイトカイン応答領域を介したものではなかった。絨毛羊膜炎を伴ったヒト胎盤のP-LAP免疫染色において、炎症細胞の浸潤の著しい部位にP-LAP染色は強かった。また、P-LAPの胎盤微細構造における局在を電子顕微鏡を用いて検討し、合胞体細胞の微絨毛に存在する事を明らかにできた。Placental leucine aminopeptidase(P-LAP)は妊娠中のオキシトシナーゼの本体である。我々は既にこのゲノムクローニングに成功しているが、本年度には主に絨毛細胞におけるP-LAPの転写制御因子の同定を行った。更に、この領域には絨毛性ゴナドトロピンや胎盤性ラクトーゲンの遺伝子発現において重要であることが報告されている転写因子AP-2α、AP-2γが結合し、変異導入実験により、P-LAP転写に機能的にも重要であることを突きとめた。更に、この領域にはIkarosという転写因子が結合しAP-2と協調的に転写括性を上昇させていることを発見したが、Ikarosはこれまでリンパ球の分化因子としての報告しかなく、絨毛細胞において転写に関与していたことは世界で最初の報告である。また、P-LAPは分化した絨毛細胞に発現することを我々は既に免疫染色で報告しているが、このことより絨毛細胞の分化刺激剤として知られるcAMPを絨毛細胞に添加したところ、P-LAPの発現が亢進することをウェスタンブロット法、及びRT-PCRによって見い出している。

同時にP-LAPの類縁酵素であるAPAが絨毛細胞においてプロゲステロン刺激により発現を増加させることも、RNase protection法、FACS解析によって認めている。次年度に向け、羊膜由来細胞のWISHにおいて、P-LAPが発現していることを、蛋白、遺伝子、転写レベルで確認している。Placental leucine aminopeptidase(P-LAP)は妊娠中のオキシトシナーゼの本体であり、胎児胎盤系におけるオキシトシナーゼの病態への関与について引き続き研究を行った。絨毛羊膜炎を代表とする胎盤局所の炎症は早産の主たる原因と考えられている。サイトカインを介して誘導されたプロスタグランジンによる子宮収縮がその一つの病因であるが、オキシトシン拮抗剤による早産治療の報告もあることからオキシトシンの関与も示唆されている。我々のゲノムクローニングによって得られたP-LAP遺伝子の上流域に炎症性サイトカインの応答領域が複数存在した事から、同部位を介したオキシトシナーゼの抑制が相対的なオキシトシンの活性上昇につながり、子宮収縮を引き起こすと仮説をたて検討を行った。予想に反し、絨毛細胞モデルとして用いたBeWo細胞において、炎症性サイトカインIL-1βはP-LAP活性、蛋白発現とも増加させた。また、このP-LAPの蛋白増加は新たな蛋白の合成を介したmRNAの誘導を伴っていた。転写活性の検討において、P-LAPのmRNAの誘導は、予想されたサイトカイン応答領域を介したものではなかった。絨毛羊膜炎を伴ったヒト胎盤のP-LAP免疫染色において、炎症細胞の浸潤の著しい部位にP-LAP染色は強く、実際の胎盤局所でもサイトカインを介したP-LAPの誘導が起こっている事が示唆された。また、本年にはP-LAPの胎盤微細構造における局在を電子顕微鏡を用いて検討し、合胞体細胞の微絨毛に存在する事を明らかにできた。P-LAPの類縁酵素であるAPAについても合胞体細胞の微絨毛に局在する事が判明した。
薬物依存症における再発リスクの評価および介入にかかわる心理学的研究

(1)アルコール依存症者の再飲酒リスクを測定する尺度を開発・標準化した。またアルコール依存症患者に依存症重症度を評価する構造化面接の適応を図った。(2)薬物再使用リスクを測定する尺度の法務機関版を作成した。また依存症重症度を評価する構造化面接を薬物事犯受刑者に実施し、依存症入院患者と比較した。(3)開発した評価系についてワークショップやホームページを通じ、普及活動を行った。また評価系を再飲酒抑制候補薬効果研究および再発予防プログラム評価研究等の介入研究に導入を図った。刺激薬物と並び重要な依存性薬物のひとつである、アルコールに対する再飲酒リスクを多次元的に測定するアルコール再飲酒リスク評価尺度(Alcohol Relapse Risk Scale : ARRS)を開発し、今まで連携体制を構築してきたアルコール依存症治療施設の入院・通院患者200名を対象に実施した。併せてアルコールヘの渇望感、抑うつ(CES-D)・現在の飲酒状況・1ヶ月後の再飲酒の有無など、他変数についても測定を行った。統計解析の結果、おおむね十分な信頼性と妥当性を確保する値を得、標準化を終了、英文論文を執筆した。<アルコール依存者への嗜癖重症度指標(ASI-J)の適応>共同研究機関である久里浜アルコールセンター主導により実施・収集済みであるアルコール依存患者のASI-Jデータ350名分を整理、基本統計量や予後との関連を中心に統計解析を行い、日本のアルコール依存患者の実態を明らかにするとともに、ASI-Jがアルコール依存患者にも適応可能であることを確認した。<法務機関との連携構築と予備的調査の施行>静岡刑務所(静岡)、法務省矯正局、法務省保護局(以上東京)など、薬物依存者とかかわる重要機関の一つである法務機関との信頼関係・連携体制を構築し、当該研究者が開発した尺度の薬物事犯者への応用に向けて、打ち合わせや予備的な調査を行った。刺激薬物の再使用リスクを多次元的に測定するSRRSを、矯正施設に入所する薬物乱用者に適用するために項目表現を修正・追加したC-SRRSを開発し、連携体制を構築した法務省矯正局の主導で、刑務所に入所する薬物乱用者500名を対象に調査を実施した。統計解析の結果、再使用リスクの内的構造を明らかにし、尺度の十分な信頼性を確認した。C-SRRSは薬物事犯者に対して実施が予定されている矯正プログラムの効果を測定するための正式な尺度として採用される運びとなった。標準化の際には薬物依存患者のみを対象とするに留まっていたASI-Jを、薬物事犯者に対して適用可能であるかどうか確認するため静岡刑務所の協力を得て刑務所内に入所する覚せい剤取締法違反者55名に対し実施、薬物依存患者との比較を行いその特色をまとめ、英文論文として発表した。<依存症評価系の普及活動>依存症評価システムの様々な現場への普及を目指し、(1)昨年度に解析が終了したASI-Jのアルコール依存患者への適用を示した研究を英文論文としてまとめ、発表した。(2)依存症問題関連学会にて、依存症臨床現場で勤務するスタッフを対象にASI-J入門のワークショップを実施した。(3)保護観察対象となった薬物事犯者への処遇を評価するプログラムにC-SRRSを導入すべく、法務省保護局と協力関係を築き、研究の打ち合わせを行った。〈法務機関による介入研究における尺度応用〉連携関係を構築した法務省保護局主導により、薬物事犯・保護観察対象者に対する介入プログラムの効果を、昨年度開発した刺激薬物再使用リスク評価尺度法務版(C-SRRS)により測定する介入実験を行った。結果、プログラム実施群・通常介入群共に、介入前後で再発リスクスコアが減少していた。〈薬効評価介入研究における尺度応用〉研究協力者である池田和隆が動物実験によって得た知見であるイフェンプロジルを中心とするGIRK阻害機能薬の薬物渇望感抑制効果について探索的に検討するため、国立神経・精神医療センター武蔵病院に通院するアルコール依存症患者を対象に、開発したアルコール再飲酒リスク評価尺度(ARRS)を用いた継続調査を行った。結果、GIRK阻害機能薬の服用が60日後の断酒率を上昇させる傾向が見出された。研究で得られた知見について海外学会発表を行い、英文短報としてまとめた。またGIRK機能阻害薬の薬理効果をARRS等を用いてより詳細に検討するために、松沢病院のアルコール依存症外来との協力関係を構築し、ブラインド・アセスメントを用いたコントロール介入研究を計画した。関係機関への倫理申請も承認され、現在調査を開始しているところである。〈依存症評価系の普及活動〉依存症評価システムの更なる普及を目指し、(1)依存症関連問題学会で、依存症臨床現場で勤務するスタッフを対象にASI-Jの実施と現場での活用をテーマとするワークショップを実施した。(2)矯正局からの要望を受け、府中刑務所の調査官に継続的にASI-Jのトレーニングを実施した。(3)当該国の依存症研究者の求めに応じ、ARRSフランス語版、SRRS中国語版を作成した。
廃棄物リサイクルによる藻場・干潟再生技術の開発

各種代替材からの主要な溶出成分であるカルシウムの溶出の挙動を整理でき、それを元にいくつかの影響評価のシミュレーションモデルの枠組みが完成した。地盤圧入方式の干潟造成がコスト面を考えても実用可能性が十分あることもわかった。さらに、アサリの浮遊幼生の着底数、稚貝の成長速度、死亡率に及ぼす影響、周辺の付着微生物への影響、アマモの栄養株の活着、発芽への影響を把握した。長期間にわたる海水浸透流のもとでの再生材料の反応・変化過程を完全混合実験によって明らかにするため、再生材料を粉砕して海水と混合した完全混合実験により、再生材料と海水との基本的な反応過程を調査した。ここでは、鉄鋼-脱炭スラグ、鉄鋼-脱リンスラグ、溶融スラグ、石炭灰造粒物、クリンカアッシュについて実験を行い、各金属の溶出量の変化や最大溶出量を求めた。一部の対象物でpHが最大12.8まで上昇しMg(OH)_2の析出による白濁が生じたが、接触液量が100ml/gの接触水量でpH上昇、析出は見られなくなり安定した。また、実海域やカラム試験の準備を完了し、開始した。また、再生材料から溶出・流出する物質をカラム実験によって明らかにするための数値シミュレーションの構築を行った。ここでは流動のモデル実験のデータ等で、作成したモデルの検証を行った。再生材料の物性変化、およびそれに伴う地盤の力学的安定性への影響を明らかにする検討では、硬度などを測定する新規の方法を確立したと共に、淡渫粘度圧入工法についての検討を行なった。加えて、溶出もしくは流出した物質が藻場・干潟ならびに周辺の生態系に与える影響を解析する試験では、対象とするアマモやアサリの浮遊幼生を用いた生物影響評価試験を行い、一部の対象物で良い活着性、着底性の傾向を得た。実海域やカラム試験において、溶出物が周辺微生物に及ぼす影響をPCR-DGGE法を用いた微生物群集構造解析による生態系影響評価試験によって評価する方法も検討し、予備実験を完了した。生成量が多いことから、実際の一般廃棄物溶融スラグ、火力発電所の主灰、飛灰、灰を固化させた石炭灰造粒物、製鋼スラグ2種(脱リン、脱炭)、高炉スラグを原料に固化させたスラグ固化物を対象としている。溶出挙動について、室内試験(連続バッチ溶出試験)および実海域のでエージング試験により調査した結果、通常の粒子径の場合では、アルカリ溶出の収束は内部拡散律速となり816週の時間を要することがわかり、溶出能の高い製鋼スラグは表層0.1mm程度しか反応しないが、空隙の多い固化物は数mmまで反応し、通常粒子のCa溶出可能量は製鋼スラグを上回ることがわかった。また周辺微生物に及ぼす影響をPCR-DGGE法を用いた微生物群集構造解析による生態系影響評価試験により調べた結果、産業副産物の種類によっては設置後23週間の試験期間において周辺土壌の微生物叢に移行の見られるものがあった。アマモの着底については、脱炭、脱リンスラグと浚渫土を混合した人工代替砂で活着力が強く、人工代替砂において、脱炭、脱リンスラグが引き抜き抵抗値とアマモの成長に影響を与え、脱炭、脱リンスラグの利用がアマモ場土壌として可能であることが示唆された。製鋼スラグマウンド施工時の周辺海域への環境影響評価を行うことを目的とした数値シミュレーションモデルも構築した。その結果、現地施工時における製鋼スラグからのCa溶出量および製鋼スラグ施工量に対する周辺海域のpH上昇の影響を明らかに出来た。造成方法に関する検討では、再生材料の物性変化、およびそれに伴う地盤の力学的安定性への影響を明らかにする検討では、干潟造成後に浚渫土を覆砂層の下部に圧入する方式による干潟造成方法に関する検討を行い、圧密沈下で低下した地盤高を回復したり、一旦造成した干潟を使用しながら浚渫土を内部に圧入して拡幅するなどの新たな干潟の整備方法が実用的に成立しうることを明らかにした。藻場・干潟における鉄鋼スラグ、石炭灰造粒物などの代替材料の溶出・流出現象を予測し、それらの環境影響評価を実施するために求めた個々の再生材料の溶出能と速度から数値シミュレーションモデルを構築、再生材料の投入に伴うpH、Ca濃度、Mg析出等の非定常計算から各緒量の時間空間的な変化プロセスを検証できた.また、実際の施工方法の開発として地盤内圧入方式による人工干潟造成技術を実験的に検討した結果、1/25スケールの模型土層実験では、圧入管の先端付近を水平に撹乱し、圧入パイプの地表面周辺に一定の重量を持つ隆起抑制板を設置することで1箇所の圧入孔から約200m^2の浚渫土の圧入が可能になることがわかった。

生物への影響としては、一つは海底に埋設した代替材表面の細菌叢を調べ、予め形成された付着微生物への影響を微生物のタンパク質量を測定することで求めたところ、通常の藻場海底面を模した中程度の海水接触速度では石炭灰造粒物を除きいずれもコントロールよりも高く、特に脱炭では実験開始28日目では2.8-4.5倍の付着微生物量となった。高速では再生材料間で明確な違いは確認されなかった。もう一つはアサリ稚貝の成長について検討したが、生残した個体の成長は海砂と同レベルであり、20mm程度まで成長した稚貝は生残、成長とも海砂と大差なかった。しかしpH上昇の影響か、着底後の稚貝の生残数は脱リンスラグで海砂の5013%、フェロマンガンスラグで245%であった。さらにアマモへの影響を検討した結果、代替材では脱炭、脱リンスラグの場合で、アマモは天然土壌以上の活着を確認できた。またアマモに影響するような急激なpHの変化、基準以上の土中間隙水中重金属濃度は検出されず、根腐れ等は起こらなかった。発芽試験においては、各スラグで発芽が見られ自律的な再生も可能であることが示された。
カンザス・ポピュリズムの研究

本研究では、アメリカ・ポピュリズムの拠点であったカンザス州中部東端に位置するマリオン郡をケース・スタディの対象として取り上げ、そこにおける金納小作を中心とする無産階級とポピュリズムの関係、メノナイトなどの新来移民集団とポピュリズムの関係、タウンと農村地域の差異とポピュリズムの関りなどについて、現地調査で収集した史料の分析に基づいて究明を行ってきた。その結果、全体として、小作農地域でのポピュリストの集票力は低かったこと、小作のなかでポピュリストとして活発に活動しているものも、むしろ自作地を所有したうえで小作地も賃借しているいわゆる自小作の性格をもっていたこと、メノナイトなど新来移民集団のポピュリストへの支持はむしろ低かったこと、それは彼らが本来保守的体質をもっていただけでなく、共和党など既成政党の働き掛けが影響していたこと、などが明らかになった。さらに、カンザス・ポピュリストの顔の一人であったフランク・ドスターだけでなく、リヨン兄弟などマリオン郡で活躍したポピュリストの背景を探ることによって、農民ではないタウンのポピュリストの存在とその運動参加の契機の一端が明らかになった。彼ら、いわば「スモ-ルタウン・ポピュリスト」がポピュリスト運動に参加した最大の動機は、報告書「スモ-ルタウン・ポピュリストーリヨン・H・リドル(Leon H.Riddle)の日記から-」が明らかにしているように、過剰な土地投機の崩壊によって生じた土地抵当負債の重圧にあった。アメリカの社会運動における無産者の位置づけを行うために、19世紀末ポピュリスト運動の中心地であったカンザス州中部のマリオン郡に焦点を当て、この郡のポピュリスト運動において、無産者である小作農が運動にどのように関わっていたのかを明らかにすべく、現地調査で収集した史料の分析を進めている。マリオン郡はポピュリストが活発だったカンザス州中部のなかでは、その力が最強だった地域の周辺部に位置しているが、金納地代制として有名なスカリ-地主制が存在していたこと、及びロシアからのメンノ-派移住者が郡西部に集中していたことにその特異性があった。ことに、金納小作が多数存在していたことは、無産階層とポピュリストなどの農民運動その他の社会運動との関わりの究明のために、この郡が絶好の対象であることを示している。現在までに収集した史料の分析から、仮説的にではあるが、以下のことが指摘しうる。まず、郡東北部を中心に展開する金納小作地帯では、ポピュリストの得票率が低いことから、小作達は余りポピュリストの訴えに反応しなかった可能性がある。一方でポピュリストの活動家としての名のみえる小作農も存在するが、彼らの多くは、小作地だけでなく自作地を持つ自小作であった。また、マリオン郡南東部や中部のような比較的早く開発が始まり、鉄道の便にも恵まれていた地域ではポピュリストは高い得票率を得ている。これらのことがポピュリストの性格にどのような関係があるのか、今後の考察の課題である。以上、研究の現段階は最終的な結論を出すまでには至っていない。しかし、新たな知見の一部は一般的な形で、『アメリカの歴史』第7章「19世紀末の合衆国社会」に生かされている。

さらに、カンザス・ポピュリストの顔の一人であったフランク・ドスターだけでなく、リヨン兄弟などマリオン郡で活躍したポピュリストの背景を探ることによって、農民ではないタウンのポピュリストの存在とその運動参加の契機の一端が明らかになった。彼ら、いわば「スモ-ルタウン・ポピュリスト」がポピュリスト運動に参加した最大の動機は、報告書「スモ-ルタウン・ポピュリストーリヨン・H・リドル(Leon H.Riddle)の日記から-」が明らかにしているように、過剰な土地投機の崩壊によって生じた土地抵当負債の重圧にあった。
タンパク質単分子配置による分子コンビナート構築原理の確立

二次元の足場としてDNAナノ構造体を利用して、複数種の酵素をナノメートル精度で1分子ずつ数量と配向を精密に制御して配置した反応場を構築した。異なる塩基配列で選択的に共有結合を形成する三種類のアダプターをキシロース還元酵素、キシリトール脱水素酵素そしてキシルロースリン酸化酵素に融合して、DNAナノ構造体上に配置したところ、三段階の酵素反応によるリン酸化キシルロースの生成が増大した。酵素を組み合わせてナノスケールで配置した反応場を構築することにより、多段階の物質変換反応をワンポットで高効率に達成する「分子コンビナート」という新しい化学分野の端緒を開いた。本研究では、二次元もしくは三次元の「足場」としてDNAナノ構造体を利用して、酵素そして酵素機能を補助する受容体を1分子ずつ数量と配向を精密に制御して配置した反応場を構築する。これをもとにして、段階的に進行する化学反応場を構築し、分子コンビナートの構築原理を確立する。段階的に進行する化学反応として、キシロース還元酵素(XR)とキシリトール脱水素酵素(XDH)を用いた。DNAナノ構造体上にこれらの酵素を配置するため、XRと亜鉛フィンガータンパク質アダプターの融合タンパク質zXR、XDHとベーシックロイシンジッパータンパク質GCN4アダプターの融合タンパク質G-XDHをそれぞれ作製した。得られたアダプター融合タンパク質z-XRとG-XDHはそれぞれもとの酵素と同等もしくはそれ以上の活性を示した。DNAナノ構造体はRothemundが開発したDNAオリガミ法により構築した。タンパク質を目的アドレスに配置したDNAナノ構造体は、原子間力顕微鏡(AFM)を用いた一分子観測により同定、収率を評価した。その結果、キシロース還元酵素とアダプターの融合タンパク質z-XRは、期待したアドレスに50%程度しか配置されないことが明らかになった。そこで、設計通りにタンパク質を配置したDNAナノ構造体を高効率で作製するために、(1)チオールアルキル化反応を利用してアダプターとDNAナノ構造体の特定アドレスDNA間に共有結合を形成、および、(2)SNAPタグをアダプターに融合し、タグ基質をDNAナノ構造体に導入、反応させて、安定かつ高収率に目的とするタンパク質をDNAナノ構造体上に配置する方法を検討した。その結果、SNAPタグを融合したモジュール型アダプターは、ほぼ定量的に目的とするDNAナノ構造体の位置にタンパク質を配置することが出来ることがわかった。生体内では細胞膜上において、特定の基質に結合する生体高分子(リセプター)が集積化することが知られており、このリセプターの集積化がシグナル伝達の制御に関わっていることが示唆されている。これまでの研究から、リセプターの集積化によって基質親和性や結合および解離速度が、集積化していない状態のものとは異なることが明らかになってきている。しかし、リセプターをナノメートルの精度で制御して配置することが技術的に困難なため、厳密に数や距離を制御してリセプターを集積化した場合の基質親和性や基質選択性の変化については、実験的な確認が困難だった。DNAオリガミは、DNAが特定の組み合わせで塩基対を形成するという性質を利用して作製されるナノ構造体である。多彩な形状のDNAオリガミを容易に設計・作製することができ、その上に様々な生体高分子を位置特異的に配置することができる。また、RevペプチドとRev Response Element (RRE) RNAの複合体を基本骨格とし、様々な基質に対する蛍光性RNPセンサーが作製可能である。蛍光性RNPセンサーはさらに、RevペプチドのC末端とRNAの3'末端を共有結合化することで、低濃度領域においても用いることができる共有結合化RNP (c-RNP)センサーへと改変できる。これらの技術を応用して、ATP結合性の蛍光性cRNPセンサーをDNAオリガミ上に集積化させ、ATPやその誘導体に対する親和性の変化を評価したところ、集積化したセンサー数の増大に伴って基質親和性が低下するということが明らかになった。加えて、基質親和性の低下は、集積化したセンサーへの基質結合速度定数の減少に主として支配されることがわかった。生体内の代謝反応では、連続する代謝反応に関連する酵素が、空間的に近接した配置を取ることによって、効率よく多段階の代謝反応が進行すると考えられている。さらに、細胞膜上では特定の基質に結合する受容体(リセプター)の集積化がシグナル伝達の制御に関わっていることが示唆されている。DNAオリガミは、DNAが特定の組み合わせで塩基対を形成する性質を利用して作製されるナノ構造体である。従って、酵素やリセプターをナノメートルの精度で、厳密に数や距離を制御した集積体のした場合の基質親和性、基質選択性、反応速度などを実験的に明らかにすることが可能になる。RevペプチドとRev Response Element (RRE) RNAの複合体を基本骨格とし、様々な基質に対するリセプター、蛍光性RNPセンサーが作製できる。さらに、RNPは容易にDNAオリガミ上の特定の位置に配置出来るこれらの方法論を拡張して、基質結合場に触媒基を隣接させることにより、触媒活性を発揮するRNP酵素を作製した。ATP結合性RNPをもとにして作製した、触媒基を有するRNPライブラリーをATP誘導体エステルの加水分解活性を指標としてスクリーニングし、エステル加水分解活性を有するRNP酵素を得た。集積化した状態での受容体の挙動を明らかにするためには、受容体との結合挙動が光学的シグナルによって検出できる蛍光性受容体を用いる必要がある。そのため、蛍光分子ライブラリーを利用して、RNPリセプターを蛍光センサーへと変換する方法論を開発した。

(1)複数種の酵素を配置した多段階変換反応の効率化RNPはDNAオリガミ上に容易に配置できる。この特長を活かすために、基質結合場に触媒基を隣接させることにより、触媒活性を発揮するRNP酵素を作製した。RNPリセプターをもとにして、触媒活性を発揮するRNPを得るためのRNPライブラリーを作製した。基質結合場の近傍に触媒分子を配置することにより、近接効果によって反応が加速される可能性がある。そこで、近接効果を発現できるような三次元構造をもつRNPを獲得するため、「多様な立体構造をもつRNPライブラリー」を構築した。構造多様性を持つATP結合性RNPリセプターのRNAサブユニットライブラリーと、触媒分子を様々な構造モチーフを介してペプチドサブユニットのN末端に導入したペプチドライブラリーを組み合わせて、600種類以上の構造多様性に富んだ「触媒分子導入RNPリセプターライブラリー」を構築した。このRNPライブラリーから、標的反応に対する触媒活性を示すRNPを選択した。簡便かつ迅速に、触媒活性を指標としたRNPのスクリーニングを行うために、加水分解反応により蛍光特性が変化するウンベリフェリルエステルを有するATP誘導体を基質として合成した。この基質を用いて、加水分解活性を指標としたスクリーニングを行った結果、エステル加水分解への触媒活性を示すRNPリセプターを得ることに成功した。(2)受容体と酵素が共同して働く分子コンビナート6種類の蛍光分子のライブラリーをペプチドサブユニットに導入した「蛍光分子修飾ペプチドサブユニットライブラリー」を作製し、ATP結合性RNAサブユニットと複合体形成させてRNPライブラリーを作製した。その中から蛍光強度変化比を指標にしてRNPセンサーを選択した。生体内の代謝反応では、連続する代謝反応に関連する酵素が、空間的に近接した配置を取ることによって、効率よく多段階の代謝反応が進行すると考えられている。しかし、酵素をナノメートルの精度で制御して配置することが技術的に困難なため、厳密に数や距離を制御して酵素や受容体を集積化した場合の基質親和性や基質選択性の変化については、実験的な確認が困難だった。DNAオリガミは、DNAが特定の組み合わせで塩基対を形成するという性質を利用して作製されるナノ構造体であり、その上に様々な生体高分子を位置特異的に配置することができる。本研究では、DNAナノ構造体上に三種類の酵素を配置した人工代謝経路を構築し、受容体と酵素が共同して働く、新しい概念にもとづいた反応場を構築した。(1)複数種の酵素を配置した多段階変換反応の効率化:これまでに開発したSNAPタグを利用した共有結合型アダプターに加えて、HaloタグとCLIPタグを利用した、異なる塩基配列で選択的に共有結合を形成するアダプターを開発した。
「表示的モジュール性」に基づいた英語の統語的不規則性に関する研究

本研究の目的は、「表示的モジュール性」に基づいて,統語論中心主義の「移動」よりは「対応規則」の方が、英語の例外的構文の特性を適切に記述できることを明らかにすることである。本年度の印刷化された主な研究成果として2つある。1つ目の成果は、English Linguisticsに掲載された"A Note on the Two-Sided Behavior of N after N,"である。本論文は,表示的もモジュール性の観点から、英語の周辺的現象であるN after N構文について、統語的性質と意味的性質を類似的表現である弱量化名詞句や裸複数名詞と比較し,インターフェイスの外側(概念構造)に還元できる意味的な一般性を示すことを明らかにした。具体的には,N after Nは統語的に凍結しているものの、意味的には裸複数名詞と同じ振る舞いをすることを論じた。2つ目は,論文集『言語科学の真髄を求めて中島平三教授還暦記念論文集』に掲載された論文「「Nに次ぐN」構文の統語と意味について-N after N構文との比較を通して」である。本論文は,日本語の「Nに次ぐN」構文の意味的・統語的性質について,英語のN after N構文と比較しながら考察した。主に次の2点を明らかにした。(i)「Nに次ぐN」が意味的にはN after Nと同様に指示性の欠いた不定名詞句である。(ii)「Nに次ぐN」は統語的には関係節のような連体修飾構造をしているものの,意味的には2つの名詞が並列した等位構造を表している。本研究の目的は、「表示的モジュール性」に基づいて、統語論中心主義の「移動」よりは「対応規則」の方が、英語の例外的構文の特性を適切に記述できることを明らかにすることである。本年度の研究成果として、松山はEnglish Linguisticsに"The N after N Construction : A Constructional Idiom,"を公表した。この論文は、car after carwent byのようなN after N表現が示す統語と意味のミスマッチを考察した。松山は、この構文が、統語的に単数であるものの、意味的には複数であるという形式と意味のずれを示すこと明らかにし、このミスマッチを捉えるには「移動」よりは「対応規則」のほうが適切であることを主張した。この論文で提示した例文のいくつかは、Ray Jackendoff教授の"Construction after Construction" (to appear in Natural Language Linguistic Theory)に引用されている。また松山は、英語語法文法学会(2004年度10月23日名古屋大学)のシンポジウムの講師として『N after N表現の文法化とイディオム化』を発表した。本発表では、コーパスを活用しN after N構文に対して通時的・共時的な考察を加えた。通時的には松山は、N after N構文について17世紀から20世紀までのデータを調査し、当該構文の名詞が独立した構成素であることを示す証拠を17・18世紀の文献に発見した。また共時的には、コーパスを活用しNPNのタイプ毎の生産性を調べた。その結果NPNは、生産性が高い「構文的イディオム」と生産性が低い「語彙的イディオム」の2つのタイプがあることが判明した。この研究発表の内容は、2005年11月刊行予定の『文法化-新たな展開-(仮題)』(秋元実治,保坂道雄(編)、英潮社)に公表される予定である。本年度の印刷化された研究成果2つある。1つは、論文「NPNの通時的・共時的考察」(『文法化新たな展開(仮題)』(秋元実治,保坂道雄(編))である。本論文では、コーパスを活用しN after N構文に対して通時的・共時的な考察を加えた。もう1つの研究成果は、"On Productivity and Idiomaticity of NPN Constructions : A Corpus-based Study,"(Studies in English Grammar and Usage Vol.12p.47-62)。本論文は、20世紀のコーパスを活用しNPN構文の生産性を「異なり語数」をもとに調査し、「異なり語数」の高いN after Nが生産的であるということを明らかにした。また松山は、第22回日本英語学会(2005年度11月12九州大学(箱崎キャンパス))のシンポジウム(「普遍文法と言語記述」)の講師として『NPN構文について-N after Nを中心に』を発表した。この発表では、「言語はインターフェイスの外側からの要請を充たす」という極小主義プログラム独自の観点から、英語の周辺的現象を考察し、個別言語の例外的現象も言語の一般性を知る鍵になること示した。とりわけ、N after N構文について、統語的性質と意味的性質を類似構文と比較し、この構文が統語的には個癖性を示すものの、インターフェイスの外側(概念構造)に還元できる意味的な一般性を示すことを明らかにした。

具体的には,N after Nは統語的に凍結しているものの、意味的には裸の不定名詞句と同じ振る舞いをすることを論じた。本研究の目的は、「表示的モジュール性」に基づいて,統語論中心主義の「移動」よりは「対応規則」の方が、英語の例外的構文の特性を適切に記述できることを明らかにすることである。本年度の印刷化された主な研究成果として2つある。1つ目の成果は、English Linguisticsに掲載された"A Note on the Two-Sided Behavior of N after N,"である。本論文は,表示的もモジュール性の観点から、英語の周辺的現象であるN after N構文について、統語的性質と意味的性質を類似的表現である弱量化名詞句や裸複数名詞と比較し,インターフェイスの外側(概念構造)に還元できる意味的な一般性を示すことを明らかにした。具体的には,N after Nは統語的に凍結しているものの、意味的には裸複数名詞と同じ振る舞いをすることを論じた。2つ目は,論文集『言語科学の真髄を求めて中島平三教授還暦記念論文集』に掲載された論文「「Nに次ぐN」構文の統語と意味について-N after N構文との比較を通して」である。本論文は,日本語の「Nに次ぐN」構文の意味的・統語的性質について,英語のN after N構文と比較しながら考察した。主に次の2点を明らかにした。(i)「Nに次ぐN」が意味的にはN after Nと同様に指示性の欠いた不定名詞句である。(ii)「Nに次ぐN」は統語的には関係節のような連体修飾構造をしているものの,意味的には2つの名詞が並列した等位構造を表している。