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明治前期の長野県中信地方の集落神社の再編過程

(2)知見をあげると、まず、上記文書間に記載内容に異同があり、特定町村の「神名記」「草稿」等との間にも同様のことがあるようである。次に、町村による集落神社の属性(諸変数)の偏り、例えば社格、社号や祭神、境内神社の存在形態、境内規模と所有形態尾度においての偏りがあることが発見される。そこからいくつかの変数の組合せによる分布を示せば、それらが興味深い問題を発見させるようである。次年度はこれらの露頭を手がかりとして課題を掘り下げて行きたい。研究課題の第2年度(平成2年度)には下記の事を行った。1,初年度に続いて長野県庁所蔵の「神社明細帳」とその関連関書を長野県中信地方,東筑摩,西筑摩(現,木曽),南安曇,北安曇の諸郡にわたって閲覧し,複写し補足した。「境内末社以下取調」(明治11年),「無格社員数薄」(明治11年),「信濃國神社,遥拝所,招魂社明細帳」(明治13年),「信濃國遥拝所,祖霊社明細帳」(明治12年),「南北安曇郡寺院明細帳」,「信濃國西筑摩郡寺院明細帳」,「寺院明細帳東筑摩郡役所」(各明治12年)などがその一部である。2,もう一つの作業は集落神社のデ-タベ-ス作成である。前年度に引き続いて,個別の神社を,整理番号,所在地,社格,社号,祭神,成立事情とその後の経緯,境内規模,所有形態,主な建造物,氏子数(信徒数),財産等を項目として,作成を一応終了したが,なお,多く補正する必要がある。例えば,同一の祭神が様々に当て字されて紛らわしいので,「日本書紀」等を手がかりとして片仮名に改める必要がある。そのうえ複数の祭神をまつる合殿や,新たに合祭・合祀される(?)境内末社の祭神をいかに取り扱ったらよいか。摂社・末社を如何に位置づけるか。この様な問題を残しながらも,デ-タベ-スを作成した。3,寺院については,それらと政府,県,市町村,集落との関係を神社のそれと比較する必要を痛感したので,これを取り上げることにした。これもデ-タベ-ス化が進行中である。4,集落内の諸神社と諸神祠その他の諸祭祀組織と村落構造との関連の観察は,木曽郡楢川村平沢でおこない,その一部を「楢川村の資料からみた御先祖」という主題で報告する予定である。5,明治前期の集落神社について作成したデ-タベ-スを操作して,これを補正する。その上に,どの様な発見がなされるかは,平成3(最終)年度の課題である。今日の地域は「都市化社会」「混住化社会」などと呼ばれ,地域社会と呼ぶことをためらうほどの激変を続けている。これはまさに危機であり,この様な時期にこそ「原点」を確めることが必要である。それには,今日にとって直接の過去を顧みる必要がある。このために表記の課題を設けた。そして、1,明治前期の中信地方の集落神社の全ての存在形態,例えば社号,所在地,創建由来,社格,祭神,例祭日,祭祀組織,社有戝産,その他を確めること。2,明治期に神社と神祠その他に分けられ,後者は集落内の適地に集められ,社格をもつ神社の摂・末社とされるなど,いわゆる再編成がなされたのであるが,それらは明治直前にいかなる存在形態をもち,いかに位置づけられ,どのように分布していたかを,可能なかぎり確めること。3,中信地方では明治前期に既に近隣数か村ごとに合併し新行政村の行政区への編成がなされたが,この行政区はそれぞれの成立の前史を見ると,親郷である藩制村,新田村である藩制村,枝郷である組,その他などに分けることができるが,それぞれと集落神社の存在形態がいかに関連するかを確めることなどを中心に調査を進めた。このために,まず,「明治十二年神社明細帳」をとりあげ,長野県中信地方の明治12年(1869)から昭和21年(1946)までの集落神社の動向についての多数の変数からなるデ-タ・ベ-スを作成した。
金属的伝導性無機化合物におけるアニオンの役割と化学結合

(A)バナジウムカルコゲナイドの研究(1)赤外線集中炉単結晶育成装置を利用して、化学輸送法により、バナジウムカルコゲナイドV_3X_4,V_5X_8(X=S,Se)の大型良質単結晶の育成を試みた。化学輸送法による輸送剤としては、TeCl_4,I_2,HCl,Cl_2などを試みた。その結果、I_2が輸送剤として最も適当であり、例えばV_5S_8では5×5×1mm程度の単結晶を得ることができた。(2)この結晶を用いて、高磁場化における磁化過程の研究を行い、50Tまでに磁場による2つの相転移を確認し、その解析を行い、論文投稿中である。(3)また、これらの物質について核磁気共鳴の実験を行いつつある。CaRuO_3,SrRuO_3ともにペロブスカイト型構造をとり、両者とも金属的性質を示す。しかしながら、前者は低温まで常磁性であり、後者は約150Kで強磁性体となる。これらの固溶体を合成し物性の検討を行った。その中で最も特徴のある結果は、熱膨張の変化である。CaRuO_3においては、10Kより室温までデバイ関数で完全にフィッティングできた。ところが、強磁性体となるSrRuO_3では、強磁性転度温度Tc以下で"インバー"効果を示し、ほとんど一定値となる。酸化物でこのような"インバー"効果が示されたのは初めてであり、電子相関の観点からも重要な発見である。Phys.Rev.に論文を発表した。(A)バナジウムカルコゲナイドの研究(1)本科学研究費で購入した赤外線集中炉単結晶育成装置を利用して、化学輸送法により、バナジウムカルコゲナイドV_3X_4,V_5X_8 (X=S, Se)の大型良質単結晶の育成を試みた。化学輸送法による輸送剤としては、TeCl_4, I_2, HCl, Cl_2などを試みた。(2)この結晶を用いて、高磁場化における磁化過程の研究を行い、50Tまでに磁場による2つの相転移を確認し、その解析を行い、現在論文投稿中である。CaRuO_3, SrRuO_3ともにペロブスカイト型構造をとり、両者とも金属的性質を示す。ところが、強磁性体となるSrRuO_3では、強磁性転度温度T_C以下で“インバー"効果を示し、ほとんど一定値となる。酸化物でこのような“インバー"効果が示されたのは初めてであり、電子相関の観点からも重要な発見である。現在、論文を投稿中である。1.バナジウムカルコゲナイドの研究(1)本科学研究費で購入した赤外線集中炉単結晶育成装置を利用して、化学輸送法により、バナジウムカルコゲナイドV_3X_4,V_5X_8(X=S,Se)の大型良質単結晶の育成を試みた。

(2)この結晶を用いて、高磁場化における磁化過程の研究を行い、50Tまでに磁場による2つの相転移を確認し、その解析を行い、現在論文投稿中である。(3)また、これらの物質について核磁気共鳴の実験を行いつつある。CaRuO_3,SrRuO_3ともにペロブスカイト型構造をとり、両者とも金属的性質を示す。しかしながら、前者は低温まで常磁性であり、後者は約150Kで強磁性体となる。これらの固溶体を合成し物性の検討を行った。その中で最も特徴のある結果は、熱膨張の変化である。CaRuO_3においては、10Kより室温までデバイ関数で完全にフィッティングできた。ところが、強磁性体となるSrRuO_3では、強磁性転度温度Tc以下で“インバー"効果を示し、ほとんど一定値となる。酸化物でこのような“インバー"効果が示されたきは初めてであり、電子相関の観点からも重要な発見である。この研究はPhys.Rev.Bに掲載ずみである。なお、これらの物質の^<17>Oの核磁気共鳴を行い、興味ある結果を得た。現在、論文投稿中である。(A)バナジウムカルコゲナイドの研究(1)本科学研究費で購入した赤外線集中炉単結晶育成装置を利用して、化学輸送法により、バナジウムカルコゲナイドV_3X_4,V_5X_8(X=S,Se)の大型良質単結晶の育成を試みた。化学輸送法による輸送剤としては、TeCl_4I_2,HCl,Cl_2などを試みた。その結果、I_2が輸送剤として最も適当であり、例えばV_5S_8では5×5×1mm程度の単結晶を得ることができた。(2)この結晶を用いて、高磁場化における磁化過程の研究を行い、50Tまでに磁場による2つの相転移を確認し、その解析を行い、論文投稿中である。CaRuO_3においては、10Kより室温までデバイ関数で完全にフィッテイングできた。ところが、強磁性体となるSrRuO_3では、強磁性転度温度T_c以下で"インバー"効果を示し、ほとんど一定値となる。酸化物でこのような"インバー"効果が示されたのは初めてであり、電子相関の観点からも重要な発見である。Phys.Rev.に論文を発表した。
フローサイトメトリーによる膠原病患者抗血管内皮細胞抗体の対応抗原の同定と機能解析

膠原病患者において抗血管内皮細胞抗体が出現することは知られていたが、膜表面抗原を特異的に分離、同定することは困難であった。今回我々は血管内皮細胞由来の自己抗原を特異的に分離同定する方法であるSARFを開発した。SARFにより全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、大動脈炎症候群患者血清を用いて新規膜型自己抗原を同定した(FLRT2, EphB2, ICAM-1, Pkなど)。これらの新規膜型自己抗原は新たな診断マーカーとして有用である可能性とともに、膠原病における血管病変形成機序の解明、特異的治療法の開発につながる可能性がある。抗血管内皮細胞抗体(anti-endothelial cell antibody,以下AECA)は、血管内皮細胞表面に結合する自己抗体であり、それらが全身性エリテマトーデス(以下SLE)、血管炎症候群、強皮症患者血中に存在することが報告されている。AECAが実際の体内で細胞に結合し病変を形成するのであれば、その対応抗原は細胞表面に局在するはずであるが。現在までのところ膜表面に存在するAECAの対応抗原の報告は少ない。細胞表面に存在するAECAの対応抗原の同定は膠原病における血管病変の形成機序の解明、治療への応用に寄与すると考えられる。本研究では、フローサイトメトリーとレトロウィルスベクターによる発現システムを用いて、細胞表面に存在するAECAの対応抗原を分離、同定する方法を樹立することを目的とした。3.全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、高安動脈炎患者由来血清を用いてAECA対応抗原を発現している細胞クローンも樹立されており、現在対応遺伝子を同定中である。膠原病患者血清より、強い抗血管内皮細胞抗体(AECA)活性を持つ血清をスクリーニングし、それらの自己抗原同定を行った。今年度は特に疾患標識マーカーが存在しない高安動脈炎の自己抗体同定を重点的に行った。AECA活性を持つ膠原病患者IgGで染色後、抗血管内皮細胞の対応抗原を発現する細胞をFACSにてソーティング後クローニングを行った。クローニング後、血管内皮細胞由来の自己抗原を同定しその機能解析も行った。AECA活性は、SLE(systemic lupus erythematosus;全身性エリテマトーデス)、関節リウマチ、高安動脈炎で特に高率に認められた。初回の検討では、SLE患者由来のIgGを用いたソーティングにより、2つの異なるクローンを単離した。両クローン共に、FLRT2のcDNA挿入を認めた。HUVECはFLRT2を恒常的に発現しており、ソーティングを行ったAECA IgGはFLRT2を移入した細胞に選択的に結合した。以上よりAECAの新規対応自己抗原としてFLRT2を同定した。抗FLRT2抗体はSLEにおけるAECAの20.5%を占めており、主要なエピトープはunique regionに存在していた。抗FLRT2抗体価は血清中の補体価と負の相関を示し、さらに抗FLRT2抗体はFLRT2発現細胞に対して補体依存性の細胞傷害性を示した。これらの結果は今年度に論文として出版された。抗FLRT2抗体の同定により、AECAの対応抗原には多様性があると考えられ、異なる疾患や病態において更なる対応抗原の同定を試みた。その結果、溶血性貧血を呈したSLE患者からはPk抗原を、関節リウマチ患者血清からはICAM1(intercellular adhesion molecule 1)をそれぞれ対応抗原として同定した。これらの結果も今年度に論文として出版された。抗血管内皮細胞抗体が実際にin vivoで病的抗体として作用するかどうかは、細胞膜表面に結合しうるかどうか(=対応抗原が膜表面に出ているかどうか)に大きく依存すると考えられる。従来の方法では、細胞表面に発現されている分子を選択的に分離、同定することは不可能であった。我々は、血管内皮細胞由来の新規膜型自己抗原を特異的に分離、同定するSARF法(Serological identification system for autoantigens using a retroviral vector and flow cytometry)を開発し、全身性エリテマトーデス、関節リウマチより複数の新規膜型自己抗原を同定した(Shirai et al. Clin Dev Immunol. 2013)。なかでも抗FLRT2抗体は全身性エリテマトーデス患者の10.2%に発現されており、補体依存性に血管内皮細胞を傷害することが示された(Shirai et al. Arthritis Res Ther. 2012)。また、SARF法を用いて急性壊死性脳症を合併した全身性エリテマトーデスの患者血清より新規膜型自己抗原EphB2を分離、同定し、急性壊死性脳症に自己免疫機序が関与する可能性を提唱した(Shirai et.al. J Neuroinflammatioin. 2013)。今年度は高安動脈炎患者由来抗血管内皮細胞の対応抗原の同定を試みた。

フローサイトメトリーにより、高安動脈炎患者血清中にも54.5%の頻度で抗血管内皮細胞抗体が存在することを見いだした。またこれら高安動脈炎患者血清U10-4, G10-43を用いて、SARF法によりその対応抗原(膜蛋白A,膜蛋白B)を同定した。前者は線溶系蛋白受容体であり、後者は脂質受容体であった。これらの膜蛋白が高安動脈炎の新規自己抗原として同定され、今後高安動脈炎における有用な診断マーカーあるいは病態解明の重要な手がかりになる可能性がある。膠原病学細胞表面に局在するAECAの対応抗原を特異的に分離、同定する系、SARF法の樹立に成功した。SARF法を用いて膠原病患者のAECAの対応抗原の分離、同定に成功した。SARF法を用いてさらなるAECAの対応抗原の分離同定を試みる。また、それらの生物学的意義について追及する。(1)抗FLRT2抗体による血管内皮細胞機能の解析FLRT2はその構造から接着分子、シグナル伝達分子として機能することが示唆されている。抗FLRT2抗体の病変形成における役割を明らかにするために、抗FLRT2抗体を用いて血管内皮細胞と共培養することにより血管内皮細胞機能(炎症性分子の発現、細胞死、血管新生)についての実験を行う。血管内皮細胞には上述のHUVEC、腎糸球体内皮細胞、肺微小血管内皮細胞、皮膚微小血管内皮細胞を用いる。(2)膠原病患者由来AECAを用いた新規膜型自己抗原のクローニング今回確立したSARFを用いて膠原病患者における新たな膜型自己抗原の同定を試みる。特に今年度得られた成果から高安動脈炎における抗血管内皮細胞抗体活性が強いことが注目された。当教室は活動性のある高安動脈炎の血清をすでに複数有しているためこれらを用いて高安動脈炎における新規膜型自己抗原の同定を行う。臨床検体の入手状況から一部の実験を次年度に繰り越すことにしたため実験試薬購入今年度は新規自己抗原同定システムの開発が当初の予定以上に順調に進んだため、それを用いて新たな自己抗原の同定に力点を置いた。そのため、当初予定していた、同定した自己抗原の機能解析は次年度より行うこととなったため繰越金が出来た。翌年度より実施する機能解析の系を樹立し、細胞死、血管新生などの細胞機能における自己抗原、自己抗体の意義を解析するために必要な経費として、平成25年度請求額と合わせて使用する予定である。
江戸語・東京語におけるコミュニケーション類型の研究

本研究では、日本語コミュニケーションの史的変遷を究極の課題として、夏目漱石の小説作品を主たる対象にして、コミュニケーション類型の分類と、ストラテジーを中心にした談話分析を行った。その成果を小川栄一『漱石作品を資料とする談話分析漱石の文学理論に裏付けられたコミュニケーション類型の考察』(平成29年4月A4版163ページ)に著した。その結論を述べると、漱石作品における談話の特徴は「不完全なコミュニケーション」であり、これは漱石が『文学論』(1907)で述べる「F+f」理論を具体化したものであり、これによって、ユーモアのみならず、人間の心理的な葛藤など、多彩なf(情緒)を生み出している。本研究は、日本語コミュニケーション(=談話)の近世から近代へかけての変遷の究明を目的としている。今年度は近代の日本語資料として夏目漱石の小説を取り上げて、「うそ」の会話に関する考察を行った。その成果を拙稿「夏目漱石作品における「うそ」の談話分析」(『武蔵大学人文学会雑誌』第45巻第3・4号平成26年3月)によって公表した。以下、その概要を述べる。夏目漱石は登場人物に頻りに「うそ」を吐かせている。やや意外であるが、漱石は「うそ」を駆使する作家である。漱石が「うそ」を多用する背景に道徳重視の姿勢があるが、それは道徳的な規範意識に基づくものではない。漱石は道徳を情緒の一種として捉えていて、道徳に反する「うそ」を文学における感情表現の一手段としている。特に『坊つちやん』など初期の作品では「うそ」が社会の規範や正義に対峙するものとして扱われているが、これは道徳に反する怒りの情緒を描き出そうとするものである。漱石の「うそ」の表現は次第に進化する。「うそ」には道徳との背反から人間の複雑な心理が発生する面白さもあって、読者にも「うそ」を吐く人物に同調することによって強い興奮やスリルが生ずる。『虞美人草』の小野が藤尾に吐いた「うそ」や、『こころ』の先生がKに対して言った策略のことば、『明暗』の延子における夫の真実を探りだそうとする「うそ」などがその例である。また、社会学の知見によると、「うそ」とは自己と役割(社会における役割、男女の役割など)との一致から発生するものである。それが不一致の人間には「うそ」が吐けない。このように「うそ」を吐けるかどうかによって、自分自身と自分の役割との関係において描く上できわめて有効である。『行人』のお直が二郎に行った翻弄という「技巧」は女性役割の遂行から生ずるものと理解できる。結論として、「うそ」の活用は漱石の卓越した技量ということができる。日本語コミュニケーション(=談話)の歴史的変遷を究明する手始めとして、江戸時代後期の洒落本資料として山東京伝作・画『傾城買四十八手』(寛政2年<1790>刊)を取り上げて、会話のストラテジーについて考察を行った。その成果は拙稿「洒落本における会話のストラテジー山東京伝『傾城買四十八手』を資料にしてー」(『武蔵大学人文学会雑誌』第44巻第4号平成25年3月)において発表した。その内容について述べよう。遊廓における男女の会話では、沈黙や「じらし」のストラテジーによって、スムーズな会話の進行が阻害されている。これはやや特殊な会話のあり方ということができる。なぜなら、遊廓における男女の会話は「遊び」を旨とするものであって、情報伝達を主眼とする通常の会話とは大いに異なるものと理解されるからである。『傾城買四十八手』において特徴的なのは、相手からの質問にまともに答えない「はぐらかし」、相手のいうことを信用しない「うそ」追及などで、これらを「じらし」のストラテジーと一括する。「じらし」のストラテジーは、会話における協調を前提とするグライスの公準(ポール・グライス『論理と会話』1989)に適合しないもので、会話の展開を阻害することが共通する。そもそも遊廓とは「遊び」の世界である。遊廓における男女の会話も基本的には「遊び」を旨とするもので、情報伝達を主眼とする通常の会話である必要はない。むしろ、沈黙や「じらし」のストラテジーによって、スムーズな会話が阻害される。これはやや特殊な会話のあり方であって、遊廓における男女の会話の特徴とみなされる。ここではスムーズな会話の流れに支障があっても、互いの愛情を獲得できればそれでよい。そのためにもあえて「じらし」のストラテジーが用いられているのであり、これが遊廓における会話の特徴と結論づけることができる。本研究では、日本語コミュニケーション(談話)の近世から近代にかけての変遷の究明を目的としている。その成果を論文「夏目漱石の小説作品における「訛り」についてー森田草平『文章道と漱石先生』を手がかりにしてー」(『武蔵大学人文学会雑誌』第46巻第3・4号平成27年3月)に公表した。漱石作品の会話には当時の東京語が用いられているが、漱石の弟子の一人森田草平『文章道と漱石先生』(大正8年<1919>)にも指摘されているとおり、当時の標準的な語彙・語法と異なるものがある。たとえば、(1)音訛に関するもの:「まぼしい」「くすぼる」「さみしい」「どうれで」、(2)複合語に関するもの:「よこたて」

「はかまはおり」「しぜんてんねん」「命のほしい」、(3)清濁・促音に関するもの:「しけじけ」「ちょっきり結び」「じれったい」等である。これらは当時の東京語の一部であり、漱石以外の作品・資料等にも類例があり、森田のいう漱石の「訛り」や「癖」ではない。このほか、(1)助詞・助動詞等の音訛:1助詞「は」がアとなるもの、2助詞連続「とは」がタアとなるもの、3「という」がテーとなるもの、4動詞の語尾「る」に終助詞「わ」のついた「るわ」がラーとなるもの、5「ですわ」がデサーとなるもの、6「ますわ」がマサーとなるもの、7「なんぞは」が変化したナンザ・ナンザー、8副詞等の語末のリがシとなるもの、(2)助詞・助動詞:1動詞の連用形について命令を表す「ねえ」、2丁寧を表す「がす」、3丁寧を表す「げす」、(3)語彙:1自称代名詞「わっし」、「わっち」、2自称代名詞「こちとら」、3感動詞の「べらぼう」、4「がんがらがん」など、東京語特有の語彙・語法がある。漱石作品において東京語を多用する理由は、登場人物を活写するための漱石の意図的な使用と見なすことができる。平成27年度における研究の成果を論文「漱石作品における伝聞表現について」(『武蔵大学人文学部雑誌』第47巻第3・4号平成28年3月)に発表した。その内容を以下に紹介する。そもそも、現代と比較してメディアが未発達であった当時において、人々は情報の取得をうわさや世間話など伝聞に多く依存していたと考えられる。伝聞表現は江戸語・東京語におけるコミュニケーションのあり方を考える上で重要な意義をもつといえよう。それのみならず、夏目漱石の小説作品には実に多くの伝聞表現が用いられており、漱石文学の特質の一つとなっている。たとえば、「伝聞そうだ」、「という話」、「うわさ」、「評判」、「の話」、「(言う・話す・語る・聞く)ところによると」などの語句が数多く用いられている。伝聞表現の意義について考察すると、漱石の著書『文学論』(1907)に述べられた文学理論(文学的内容の形式を(F+f)と捉えるもの)に基づくものと理解される。Fとは焦点的印象又は観念、fとはFに付着する情緒を意味する。伝聞表現はそもそも曖昧であるが、曖昧とは漱石理論でいえばFが集合的な性格をもっていて、内部にさまざまな段階の差違を含んで一定しないことである。漱石によれば、Fは不断に変化するが、特に正反対のF ́に推移する場合において最も強烈な刺激が発生するという。このことはオールポート・ポストマンの提唱した「うわさの公式」(デマの流布量は当事者に対する問題の重要さと、その証拠の曖昧さとの積に比例する)(『デマの心理学』1946)に基づいて解釈することが可能である。流布量の大きいデマは、その曖昧さ故に、漱石のいうf(心理的効果)が強い。漱石は、伝聞表現の曖昧さに伴う心理的効果(f)を期待して、伝聞表現を巧みに利用したものと理解される。平成27年度の研究計画として夏目漱石小説作品を資料とした研究が進展し、その成果を論文「漱石作品における伝聞表現について」(『武蔵大学人文学部雑誌』第47巻第3・4号平成28年3月)に発表している。本年度の成果は2点ある。一つは単著論文「漱石作品における「翻弄の発言」」(『武蔵大学人文学会雑誌』第48巻2号2017年3
モビリティ・マネジメントにおけるバス交通サービスと居住者の空間特性に関する研究

本研究では、公共交通の利用頻度の高い人や・これから利用したいと考える人は、自宅とバス停までの距離やバスの運行本数と関係することが明らかとなった。加えて、居住開始時期や就業地とも大きく関係する。若年層ほど公共交通の利用頻度が高いが、これは、所得の減少とライフスタイルの変化に起因するものといえる。公共交通の状況を伝えるためにはマップの作成と配布が重要なツールであるが、世代に応じたカスタマイズが求められる。1.本研究(モビリティ・マネジメントにおけるバス交通サービスと居住者の空間特性に関する研究)は、(1)自動車の利用からバス交通に転換しようとする個人は、どのような特徴を持つ地域に居住しているか、空間的な分布を解明すること、および(2)居住者の周辺におけるバス交通のサービス環境との関係を明らかにすることを目的としている。2.研究期間の初年度にあたる平成21年度は、京都府宇治地域において公共交通マップの配布とアンケートの回収を行った。宇治市内の4,300世帯に公共交通マップとアンケート用紙を配布し、651通の有効回答が得られた。本研究の意義とこれまでのモビリティ・マネジメントにおける地理学的な課題を経済地理学会のフロンティアセッションにて発表した。また、既存の統計から交通行動を把握する手法の試論としてじんもんこん2009に公表した。京都市西京区洛西地区におけるモビリティ・マネジメントについては、平成21年度注に複数事業者の交通情報を統一した路線図やダイヤ調整が実施されたため、研究対象地域を変更して実施する予定である。3.京都府宇治市内の調査結果については回収したアンケート結果を(1)バス停に近い・バスの本数が多い場所、(2)バス停に近い・バスの本数が少ない場所、(3)バス停から遠い所・最寄りのバス停の本数は多い場所、(4)バス停から遠い・最寄りのバス停の本数は少ない場所に区分し、交通行動の変化における地域的な差異を明らかにする。その結果を最終年度に公表できるようにしたい。くわえて、アンケート調査に継続して参加する意志のある人には、再度交通行動の変化を調査するアンケートを実施し、モビリティ・マネジメントの継続的な効果を検討する。2.研究期間の2年度にあたる平成22年度は、昨年度に京都府宇治地域において行った公共交通マップの配布とアンケートの分析・検討をすすめた。その結果の一部は、第五回日本モビリティ・マネジメント会議や日本地理学会・持続可能な交通システム研究グループ例会にて発表した。公共交通の利用頻度が高い居住者はバスの運行本数やバス停からの居住地にくわえ、居住開始時期や就業地と大きく関係する。また、若年層ほど公共交通の利用頻度が高いが、これは、所得の減少とライフスタイルの変化による自動車の保有率の低下に起因するものと推察される。京都市西京区洛西地区におけるモビリティ・マネジメントについては、平成21年度注に複数事業者の交通情報を統一した路線図やダイヤ調整が実施されたため、研究対象地域と対象者を変更した。京都市内に位置する平安女学院大学の学生全員を対象に平日・休日の交通行動の調査を行い、居住地と公共交通の利用に関して検討した。その結果、京都市右京区や伏見区、滋賀県内の居住者ほど自動車の利用率が高い点が明らかとなった。これは、公共交通が相対的に不便なためであり、それに対して面接法によって公共交通の転換を促した。自宅と最寄り駅が平坦な居住者は自転車による転換の意志がみられたが、丘陵地の居住者は難色を示し、地形的な要因を検討する点が示唆された。以上をふまえて、モビリティ・マネジメントの継続的な効果を検討する。
気流中の火炎形成方法と希薄混合気燃焼のアクティブ制御に関する研究

本研究は、遠心加速度場において、密度差に基づく火炎の対流運動および旋回流中の火炎流動を利用することにより、また、火炎核の形成時期を調節することによって燃焼初期における火災核分布が全燃焼に及ぼす影響について、天然ガスを燃料とする希薄燃焼火花点火機関を対象として単筒実験機関を用いて検討した基礎研究である。火炎発生をアクティブに制御できるのは、点火の時期だけであるが、スワールとマッチするさまざまの点火時期が考えられる。多重点火によって制御される燃焼過程では、単点火のMBT時の熱発生率曲線に対して、遅延点火しても後続火炎の形成によって燃焼の改善が見られることを示している。この事は、点火時期遅延によるNO_X低減策が性能劣化を抑えて可能となることを示唆している。このような観点からメタンを燃料として詳細な検討を行い、以下の結論を得た。(1)希薄燃焼火炎では、電極保炎を避ければ、スワールによる火炎の対流運動を利用して広範な熱発生率制御が可能となる。(2)多重点火、多点点火の時期の制御により初期火炎分布を変えて熱発生率を大きく変化できる。(3)点火時期遅延によるNO_X低減を図っても、多重火炎による燃焼改善は機関効率の低下を制御することが可能である。(4)流動条件や火炎速度の変化を考慮して初期火炎分布の形成を図れば最適制御が可能である。(5)火炎分離による燃焼制御によって燃焼最高圧力の増加を抑え、サイクル仕事過程の改善が可能な場合がある。(6)多点、多重の点火時期制御によって機関の負荷状態に対して燃焼過程をアクティブに制御することが可能である。火花点火機関のアクティブ燃焼制御を目標に、従来の制御できる因子が点火時期だけである固定された点火源からの火炎発生とは異なり、固定点火源であっても、点火源特性を可変とした制御因子を残したプラズマジェットやト-チ点火のの検討を行うと同時に、エンジンの運転状態に対してもっと広く、積極的な制御を行うことのできる方式として提案する、多重、多点点火方式について単筒実験機関を用いて検討した。スワール場での点火された火炎は対流運動によって周方向及び半径方向へ移動するので、燃焼室周辺部で点火しても火炎の外周壁接触は遅れ、熱損失が大きく触れることにはならない。希薄域での燃焼であるため、点火電極形状を適当に選べば、発生火炎は電極に保炎されることなく下流へ離脱する。したがって間欠的に火花放電をくり返せば火炎塊列をつくることが可能である。また、エネルギー制御によって、高エネルギー放電を行うと同時に点火間隔を短くすれば、大火炎塊の発生によって保炎の可能性もある。このような観点から多重放電回路を用いて、燃焼室を回転させる剛体渦装置によって基礎的試験を行い火炎塊列の制御による燃焼制御が可能なことを明らかにし、実機スワール場への適用を試みた。燃焼可視化用のピストンとシリンダカバーを装着した外部駆動単筒実験機関に吸気管燃料噴射方式と吸気弁開閉制御により、単圧縮燃焼試験を行った。高速度写真観測と熱発生率変化の計測によって、(1)火炎塊列の形成が壁面運動のある基礎試験の場合と同様に認められ、スワールを利用した周辺多重点火によ、火炎塊列を形成出来ること、(2)火炎塊列の間隔が短かすぎると単一火炎となるが同時に保炎作用も現れ易くなるが、間隔を適当に変えれば、燃焼室周辺の多点から発生したような挙動になるので火炎塊列の形成時期制御によって熱発生率を幅広く制御できることが分かった。スワールを利用した多重点火方式は複数火炎の形成と対流運動による初期燃焼のアクティブ制御を可能にするものと考えられるが、実現のために解決すべき課題は多い。今年度は、単筒実験機関を用いて、点火時期を遅延させると同時に後発火炎を形成して初期燃焼遅れを回復し、有効仕事の減少を抑える手法を確立するため、初期点火時期変更、後続点火時期変更、燃料濃度変更によって機関性能まっぷを作成した。

後発火炎の形成は、熱発生率増加を促進し、平均有効圧力を増加するが、同時に燃焼最高圧力の増加を通じてNOxの増加につながる。しかし、初期点火を遅らせることによって最高圧力を抑え、平均有効圧力を下げずにNOx低減が可能な領域の存在を明らかにした。初期点火時期の遅延は大幅なNOx低下につながるが、後発火炎の形成によってはさほど増加しないことが分かった。以上の結果から、第一点火時期とそれに続く後発点火時期を制御することによって出力を下げることなくNOx低減が可能なこと、燃焼供給制御も併せると広範な運転範囲で高効率、低NOxの最適制御が可能なことを実験的に明らかにした。また、この方式での後発火炎による燃焼促進では、最高燃焼圧力、燃焼最高温度ともに増加することにはならないため、ノッキングの発生が希薄域でも十分抑えられることが分かった。複数火炎塊の発達とそれらの合体過程、偏平燃焼室での円筒状火炎伝播過程がすべて断熱的である。という仮定と、火炎広がりの工学的観測から得られる火炎速度の情報をもとにしたシミュレーションによって後発火炎による燃焼回復過程が明らかになった。本研究は、遠心加速度場において、密度差に基づく火炎の対流運動および旋回流中の火炎流動を利用することにより、また、火炎核の形成時期を調節することによって燃焼初期における火炎核分布が全燃焼に及ぼす影響について、天然ガスを燃料とする希薄燃焼火花点火機関を対象として単筒実験機関を用いて検討した基礎研究である。火炎発生をアクティブに制御できるのは、点火の時期だけであるが、スワールとマッチするさまざまの点火時期が考えられる。多重点火によって制御される燃焼過程では、単点火のMBT時の熱発生率曲線に対して、遅延点火しても後続火炎の形成によって燃焼の改善が見られることを示している。この事は、点火時期遅延によるNOx低減策が性能劣化を抑えて可能となることを示唆している。このような観点からメタンを燃料として詳細な検討を行い、以下の結論を得た。(1)希薄燃焼火炎では、電極保炎を避ければ、スワールによる火炎の対流運動を利用して広範な熱発生率制御が可能となる。(2)多重点火、多点点火の時期の制御により初期火炎分布を変えて熱発生率を大きく変化できる。(3)点火時期遅延によるNOx低減を図っても、多重火炎による燃焼改善は機関効率の低下を仰制することが可能である。(4)流動条件や火炎速度の変化を考慮して初期火炎分布の形成を図れば最適制御が可能である。(5)火炎分離による燃焼制御によって燃焼最高圧力の増加を抑え、サイクル仕事過程の改善が可能な場合がある。(6)多点、多重の点火時期制御によって機関の負荷状態に対して燃焼過程をアクティブに制御することが可能である。
妊娠中の飲酒予防のためのテーラーメイドなリーフレットの利用度と教育効果

初産の妊婦計33名を対象に、半構造化グループインタビューを4回実施し、飲酒予防リーフレットに関するフィードバックを得た。科学的に説得力のある情報が好まれ、色彩やオブジェクトの多用は不評であった。イラストは多くの媒体で見飽きているため、胎児性アルコール症候群の患児の写真やグラフは、妊婦に強い印象を与えた。妊婦は飲酒の影響について関心をもち、学ぶ意欲があるため、視覚的アピールよりも情報の質を重視していた。対象者の意見を反映させた妊娠中の飲酒予防リーフレットを作成することを目的に、市町村保健センターが開催する母親学級参加者と大手調査会社のモニターを対象に、半構造化グループインタビューを4回実施した。参加者(計33名)は全員初産で、25-29歳が51%、30-34歳が42%を占めた。二つ折のドラフトリーフレットに対する意見から、表紙は、妊婦が手に取り、開いてみようと思うよう、視覚的な魅力が必要であることがわかった。そこで、改訂版リーフレットの表題は、赤字のゴシック体から、ピンク色の丸みを帯びたポップなフォントに変更した。一方、見開きに載せる情報は、科学的に説得力のあるものが好まれた。視覚的に惹き付けようとして、カラフルにし過ぎたり、イラストなどのオブジェクトを多く入れすぎると、ごちゃごちゃした印象を受け、内容に集中できない、情報の重要性が薄まってしまうと不評であった。また、イラストはさまざまな媒体で見飽きており、写真やグラフなどリアルな情報に対する評価が高かった。精緻化見込みモデルで示されるように、対象者がトピックに興味があり、学ぶ素地がある場合は、媒体の見かけではなく、内容を重視する傾向がみられた。イラストや色はふんだんに用いると視覚的アピールは増すと思われるが、そのようなアプローチは周辺的な要素を重視する周辺的ルート処理の場合に有効であり、今回の対象者のように、情報の内容を重視する中心的ルート処理の場合には、エビデンスを整然と提示する方法が支持された。文字は大きければ大きいほど見やすく、色彩やイラストは多ければ多いほど喜ばれるなどの思い込みにしたがって媒体を作成する場合が多いが、対象者の特性によって受け入れられやすい教材のあり方は異なるため、作成にあたっては対象者のフィードバックやプレテストが必須である。最終年度は改訂版リーフレットの教育効果を介入研究により検討する。質的研究手法を用いて、対象者の意見を反映させた妊娠中の飲酒予防リーフレットを作成することを目的とした。市町村保健センターが開催する母親学級参加者と大手調査会社のモニターを対象に、半構造化グループインタビューを4回実施し、計33名の初妊婦が参加した。25-29歳が51%、30-34歳が42%を占めた。二つ折のドラフトリーフレットに対するフィードバックに基づき、4回改訂をおこない、グループインタビュー中の挙手や評価票の記入により、量的な評価もおこなった。表紙は、妊婦が手に取り、開いてみようと思うよう、視覚的な魅力が必要であるが、見開きに載せる情報は科学的に説得力のあるものが好まれた。妊婦は、飲酒の影響について関心をもち、学ぶ意欲があるため、視覚的に惹き付けようとして、カラフルにし過ぎたり、イラストなどのオブジェクトを多く入れすぎると、ごちゃごちゃした印象を受け、内容に集中できない、情報の重要性が薄まってしまうと不評であった。イラストや色はふんだんに用いると視覚的アピールは増すと思われるが、そのようなアプローチは周辺的な要素を重視する周辺的ルート処理の場合に有効であり、今回の対象者のような情報の内容を重視する中心的ルート処理の場合には、エビデンスを整然と提示する方法が支持された。
電磁式水平連続鋳造プロセスの開発

鋳型を使用する鋳造に伴う表面欠陥の除去を目的として,鋳型を用いない新しい電磁式水平連続鋳造法を提案した.この鋳造法は溶融金属に直接,直流電流と直流磁束を作用させて,溶融金属を重力に抗して浮揚させ,鋳型を使用しないで鋳造するものである.したがって,アルミニウムの分野で採用され始めている従来の電磁鋳造法と比較すると,固定費および運転費が大幅に減少する.鋼の連続鋳造を想定して,密度が大きく熱伝導率の小さい低融点合金(Bi-Sn-Zn合金)により連続鋳造実験を行い,安定鋳造の条件を明らかにした.一方,電磁流体力学に基づいて,溶解金属浮揚部の安定性解析を行い,実験によって得られた操作条件が理論安定領域に入っていることを確認した.また,本鋳造法により,丸棒のみならず薄板の鋳造も可能であることを明らかにした.さらに,アルミニウムの連続鋳造を試み,鋳造可能であることを示した.以下,本研究で得られた重要な研究実績を述べる.1)鋳造可能な丸棒の最大径は, 2〓γ/pgで与えられる.γ:表面張力, p:密度, g:重力加速度である.2)浮揚溶融部の長さlと半径aに関する安定操作限界は, l<〓2aである.3)鋳造可能な薄板の形状と浮揚溶融部長さの関係を導出した.4)アルミニウムの鋳造においては,溶融部の酸化被膜が安定化に作用し,溶融部長の拡大が可能と考えられる.今後,種々の金属に適用し,本プロセスの特性を把握することが望まれる.鋳型を使用する鋳造に伴う表面欠陥の除去を目的として,鋳型を用いない新しい電磁式水平連続鋳造法を提案した.この鋳造法は溶融金属に直接,直流電流と直流磁束を作用させて,溶融金属を重力に抗して浮揚させ,鋳型を使用しないで鋳造するものである.したがって,アルミニウムの分野で採用され始めている従来の電磁鋳造法と比較すると,固定費および運転費が大幅に減少する.鋼の連続鋳造を想定して,密度が大きく熱伝導率の小さい低融点合金(Bi-Sn-Zn合金)により連続鋳造実験を行い,安定鋳造の条件を明らかにした.一方,電磁流体力学に基づいて,溶解金属浮揚部の安定性解析を行い,実験によって得られた操作条件が理論安定領域に入っていることを確認した.また,本鋳造法により,丸棒のみならず薄板の鋳造も可能であることを明らかにした.さらに,アルミニウムの連続鋳造を試み,鋳造可能であることを示した.以下,本研究で得られた重要な研究実績を述べる.1)鋳造可能な丸棒の最大径は, 2〓γ/pgで与えられる.γ:表面張力, p:密度, g:重力加速度である.2)浮揚溶融部の長さlと半径aに関する安定操作限界は, l<〓2aである.3)鋳造可能な薄板の形状と浮揚溶融部長さの関係を導出した.4)アルミニウムの鋳造においては,溶融部の酸化被膜が安定化に作用し,溶融部長の拡大が可能と考えられる.今後,種々の金属に適用し,本プロセスの特性を把握することが望まれる.本研究では、金属、特に鋼の連続鋳造の鋳型部で生成される表面欠陥の一掃を指向して、鋳型を使用しない連続鋳造法の開発とそのプロセスの諸特性の把握を行った。具体的には、鋼の連続鋳造を想定して、密度が大きく熱伝導率の小さい低融点合金(Bi-Sn-Zn合金)により連続鋳造実験を行い、安定鋳造の条件を明らかにした。一方、電磁流体力学に基づいて、溶融金属浮揚部の安定性解析を行い、実験によって得られた操作条件が理論安定領域に入っていることを確認した。また、本鋳造法により、丸棒のみならず薄板の鋳造も可能であることが明らかとなった。研究結果の一部は日本鉄鋼協会電磁気冶金部会にて発表(資料番号-4-5)済みであり。また日本鉄鋼協会第113回講演大会(昭和62年4月2日)にて発表を予定している。以下、当初の研究計画に従って研究実績を述べる。1)電磁式水平連続鋳造システムの磁場分布の改善を施した。2)電磁流体力学に基づいて、本鋳造法の安定解析とシミュレーションを行った。3)安定解析結果に基づいて、安定鋳造のための操作条件の許容範囲を明らかにした。4)3)の結果に基づいて、高融点金属の鋳造条件を定めた。なお、高融点金属を用いる実験は準備不足により実行できなかった。5)本鋳造システムに高周波磁界を印加し、溶融金属部の浮揚と安定性を増大させることについて検討した。
抑制性T細胞抗源レセプター遺伝子の単離・構造解析と機能

昨年度は、抑制性T細胞ハイブリドーマに特異的な遺伝子の一つを単離することができた。本年度は、研究遂行の結果、以下の成果を得た。1)抑制性T細胞ハイブリドーマの1つに特異的に発見される遺伝子の一次構造を解析し、全DNA塩基配列を決定できた。DNA塩基配列から推定されるアミノ酸配列から、単離した遺伝子は、リーダー配列から始まり、免疫グロブリン可変領域との相同配列、膜貫入部、細胞質内部位を有する膜蛋白質をコードすると推定できた。2)単離した遺伝子が、細胞内で膜蛋白質発現に寄与していることを再確認するため、hybridization-selected cell freetranslationassayを行なった。その結果、転写されたmRNAが、分子量約25000ダルトンの分子をコードすることが判明した。3)1),2)と並行して、抑制性T細胞ハイブリドーマに表現される細胞膜分子のうち、抗原結合分子を同定し、膜上で他分子と分子複合体を形成する可能性の有無を検討したところ、ホモダイマー分子か分子量近似の分子とのヘテロダイマー分子として挙動している可能性を示唆する結果を得た。単離した抑制性T細胞ハイブリドーマ特異的遺伝子は、その一次構造解析から、免疫グロブリン多重遺伝子族に含まれる可能性が高いと推定できるが、その場合、遺伝子再構成を伴わない免疫グロブリン可変領域に相当する領域の単独発現か、あるいは、免疫グロブリン多重遺伝子の中でも独自の発現様式をとるユニークな遺伝子群に属するかのどちらかと思われる。単離した遺伝子が抗原結合分子をコードするか否かについては、確定した結果を得ていないが、発現特異性から、結合分子か、抗原分子と同調した遺伝子発現を有する産物をコードしている可能性が高い。
肝硬変、肝細胞癌患者の胸・腹水生成に関わるVPF/VEGFの検討とその治療応用

肝硬変(LC)、特発性細菌性腹膜炎(SBP)合併LC、肝細胞癌(HCC)及び他の癌患者より採取した胸・腹水中のVPF/VEGF値を、VEGF165を定量的に測定するサンドウイッチEIA法(QuantikineTM, R&D Systems)により測定した。その結果、HCC(特にステージIV)患者の胸・腹水中のVEGF値は対照とした癌性腹膜炎を合併している他の癌患者の胸・腹水には及ばないもののLC患者のそれより有意に高値であった。LC4例で経過中SBPを合併したが合併時腹水中VEGFは癌性腹膜炎同様高値を示した。LC,HCC及び他の癌患者より胸・腹水40mlを採取し遠心分離により細胞成分を得、RT-PCR法によりVEGFmRNA,AFPmRNAを検索した。その結果他の癌による癌性腹膜炎やHCC患者腹水中にVEGFmRNA陽性を認めたが、LC患者腹水ではVEGFmRNAは陰性であった。なお上述のSBP合併LCの腹水中VEGFmRNAは当初陰性であったが合併時には陽性に転じた。腹水中のHCC細胞を検出するためAFPmRNAを検討したところHCC患者腹水中にのみ陽性例がみられた。これらの結果からLC患者の腹水生成にVPF/VEGFの関与は少ないと考えられるが、SBP合併の際やHCC患者とくに進展例での腹水生成機序にはVPF/VEGFすなわち血管透過性の亢進の作用が関わっている可能性が示唆された。これまでHCC患者の胸・腹水生成機序はLC同様、主として門脈圧亢進によるものと考えられていたが、HCC進展例ではVPF/VEGFが積極的に関与していることを明らかにした。SBP合併LCやHCC進展例における難治性腹水の治療に抗VPF/VEGF抗体や血管新生阻害剤などが有用であるかは、今後の課題と考えられる。肝硬変、肝癌及び他の癌患者より胸・腹水40mlを採取し遠心分離により細胞成分を得、RT-PCR法によりVEGFmRNAを検索した。その結果他の癌による癌性腹膜炎や肝癌患者腹水中VEGFmRNA陽性を認めたが、肝硬変患者腹水ではVEGFmRNAは陰性であった。なお2例の肝硬変患者が特発性細菌性腹膜炎を合併した際には腹水中VEGF値は高値を示し、VEGFmRNAは陽性に転じた。これらの結果から肝硬変患者の腹水生成にVPF/VEGFの関与は少ないと考えられるが、肝癌患者とくに進展例での腹水生成機序にはVPF/VEGFすなわち血管透過性の亢進の作用が関わっている可能性が示唆された。すなわち、これまで肝癌患者の胸・腹水生成機序は肝硬変同様、主として門脈圧亢進によるものと考えられていたが、肝癌ではむしろVPFN/VEGFが積極的に関与していることが示唆された。今後さらに胸・腹水中のVPF/NEGF産生細胞が肝癌細胞か他の細胞かを明らかにし、肝癌における難治性腹水の治療に抗VPF/VEGF抗体や血管新生阻害剤などが有用であるかを実験動物を用いて検討していきたい。
大気圧走査電子顕微鏡を用いた肺胞上皮におけるサーファクタント関連蛋白イメージング

CARS顕微鏡のC-Hモードで肺胞II型上皮細胞を観察すると非常に強いCARSシグナルを発するラメラ体と思われる構造体を観察した。肺胞II型上皮細胞をASEM用のディッシュ上で培養、4%フォルムアルデヒドで固定し、ASEMでABCA3免疫染色の観察を行った。ABCA3は肺胞II型上皮細胞内でCARS顕微鏡での脂質と同様に細胞内に存在していた。今回の検討では、残念ながら肺胞II型上皮細胞のASEM用のディッシュへの固着率が低く、限られた検討しか行えなかった。ようやく、液状コラーゲンを用いたコーティングで固着が安定出来るようになったので、今後、電子顕微鏡所見も含め、さらなる検討をしていく。新生児の肺胞環境の恒常性維持には肺水の除去、間質を含めた水の輸送、サーファクタント分泌など、水の輸送や脂質の輸送・分泌が不可欠である。大気圧下で走査電子顕微観察が可能な大気圧走査電子顕微鏡(ASEM)とCoherent Anti-Stokes Raman Scattering (CAR S)顕微鏡を用いるとサーファクタント関連蛋白の局在や脂質の移動を観察することが可能となる。本研究は、CARS顕微鏡により生きた状態での肺胞上皮および肺胞上皮細胞における脂質の動きをリアルタイムで観察し、ASEMによる肺胞II型上皮細胞でのサーファクタント関連蛋白の観察、CARS顕微鏡での肺胞II型上皮細胞での脂質観察とサーファクタント関連蛋白の検討を行う。肺胞上皮細胞でのサーファクタントを含む脂質の分布変化および開口放出などの動態、サーファクタント蛋白との関連を観察することで、肺胞の恒常性維持の理解を深め、新生児の慢性肺疾患の予防、治療にも大変重要な意味を持つと考える。昨年度の研究は当薬理学教室のCARS顕微鏡を使用し、初代培養した肺胞II型上皮細胞内の脂質観察を引き続き行った。また、大気圧走査電子顕微鏡(ASEM)を用い、肺胞II型上皮細胞のABCA3での免疫染色と電子顕微鏡写真を同時に撮影し、肺胞II型上皮細胞でのABCA3と脂質の局在を検討した。近年の新生児医療では妊娠22-23週の超早産児も成育出来るようになってきた。しかし、超早産児の生存率の上昇に伴い、出生後、未熟な肺でのガス交換、子宮内感染などにより、慢性肺疾患を来たし、児の成長、運動機能、精神運動発達に影響を及ぼす。本研究のASEMおよびCARS顕微鏡を用いた肺胞上皮細胞におけるサーファクタントの開口放出の観察とその制御因子の検索は肺胞の機能維持の理解を深め、新生児の慢性肺疾患の予防、治療にも大変重要な意味を持つと考える。大気圧下で走査電子顕微観察が可能な大気圧走査電子顕微鏡(ASEM)とCoherent Anti-Stokes Raman Scattering (CARS)顕微鏡を用いるとサーファクタント関連蛋白の局在や脂質の移動を観察することが可能となる。昨年度の研究は当薬理学教室のCARS顕微鏡を使用し、初代培養した肺胞II型上皮細胞内の脂質観察を行った。同時に固定後、pro-SPC, SPC, ABCA3などのサーファクタント関連蛋白の免疫染色を行った肺胞II型上皮細胞を観察した。CARS顕微鏡下では肺胞II型上皮細胞内に多くの脂質粒子を観察した。近年の新生児医療では妊娠22ー23週の超早産児も成育出来るようになってきた。新生児の肺胞環境の恒常性維持には排水の除去、間質を含めた水の輸送、サーファクタント分泌など、水の輸送や脂質の輸送・分泌が不可欠である。

大気圧下で走査電子顕微観察が可能な大気圧走査電子顕微鏡(ASEM)とCoherent Anti-Stokes Raman Scattering(CARS)顕微鏡を用いるとサーファクタント関連蛋白の局在や脂質の移動を観察することが可能になる。本研究は、CARS顕微鏡による生きた状態での肺胞上皮及び肺胞上皮細胞における脂質の動きをリアルタイムで観察し、ASEMによる肺胞II型上皮細胞でのサーファクタント関連蛋白の観察、CARS顕微鏡での肺胞II型上皮細胞での脂質観察とサーファクタント関連蛋白の検討を行う。昨年度の研究は引き続き当薬理学教室のCARS顕微鏡を用いて肺胞II型上皮細胞の脂質の移動やサーファクタント関連蛋白であるABCA3の局在について検討を行った。ASEMに関しては培養ディッシュ上で肺胞上皮II型細胞のプライマリカルチャーを生着させることが非常に難しく、ようやく培養条件を確立し、走査電子顕微鏡観察を開始した。近年の医療では妊娠22-23週の超早産児も成育できるようになり、その生存率も格段に改善している。しかし、子宮内感染などの出生前の胎内環境や出生後の未熟肺でのガス交換による肺障害は新生児の慢性肺疾患を来たし、将来の運動機能や神経学的予後に影響する。本研究の肺胞上皮細胞でのサーファクタントを含む脂質の分泌変および開口放出などの動態、サーファクタント蛋白との関連を観察することにより、肺胞の恒常性維持の理解を深め、新生児慢性肺疾患の予防、治療にも重要な意味を持つと考える。新生児学・CARS顕微鏡での肺胞II型上皮細胞での脂質観察とサーファクタント関連蛋白の検討肺胞II型上皮細胞は、マトリゲル(BD science)を含んだ培地上で培養期間により単層または嚢胞(Cyst)を作る。肺胞II型上皮細胞をC-Hモードで観察すると、その組成の90%をリン脂質が占めているサーファクタントは、非常に強いCARSシグナルを発する。本年度の研究では当薬理学教室のCARS顕微鏡はを使用し、引き続き初代培養した肺胞II型上皮細胞内の脂質観察を行い、CARS顕微鏡下で肺胞II型上皮細胞内に多くの脂質粒子を観察した。また、初代培養した肺胞II型上皮細胞を固定し、ASEMを用いたサーファクト関連蛋白であるABCA3の肺胞II型上皮細胞内での局在を観察・解析した。現在、初代培養した肺胞II型上皮細胞をASEM用のシャーレでの固定条件が難しく、検討を続けている。今後、安定した条件を検討し、サーファクタント関連蛋白を含めた微細構造・動態をASEMと光学蛍光顕微鏡により観察し、サーファクタントのパッキング・分泌の制御機構を解明する。・CARS顕微鏡での肺胞II型上皮細胞での脂質観察とサーファクタント関連蛋白の検討肺胞II型上皮細胞は、マトリゲル(BD science)を含んだ培地上で培養期間により単層または嚢胞(Cyst)を作る。本年度の研究では当薬理学教室のCARS顕微鏡はを使用し、初代培養した肺胞II型上皮細胞内の脂質観察を行った。同時に固定後、pro-SPC, SPC, ABCA3などのサーファクタント関連蛋白の免疫染色を行った肺胞II型上皮細胞を観察した。CARS顕微鏡下では肺胞II型上皮細胞内に多くの脂質粒子を観察した。