hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
骨髄間質細胞由来因子による神経再生の解析

このように、骨髄間質細胞は複数の神経再生因子を分泌しており、これらが協調的に作用して損傷脊髄の再生に関与していることがわかった。脊髄損傷は、我が国に約10万人の患者がいるものの有効な治療法ははい。われわれは、骨髄間質細胞移植がラットおよびヒトの脊髄損傷に対して安全かつ有効であることを報告してきた。本研究で、骨髄間質細胞自体を移植しなくてもその培養上清の投与で脊髄損傷ラットの神経再生および行動の回復を促進させることがわかった。また、骨髄間質細胞は複数の神経再生因子を分泌し、これらの因子が協調して神経再生に携わっていると考えられた。当初の予想通り、神経再生能を有する因子の精製に多大な時間と労力を要している。大量のサンプルを処理する方法が見つかり、今後は効率よく研究が進むものと考えている。これまで得られたデータの蓄積を利用することにより、今後は効率よく研究が進むものと考えている。細胞生物学神経再生因子の精製を優先的に進めたため、使用予定であった抗体やリコンビナントタンパク質の購入費が次年度にずれ込んだ。神経再生因子の精製を行う上で、使用カラムの種類が減り、また劣化によるカラムの補填が少なくて済んだため。精製により得られた神経再生因子の生化学的な解析を順次行っていく予定である。神経再生因子の精製の効率化のためのカラム購入や因子の生化学的性質の解析のために用いる予定である。
新奇Ｇサイクルの起動制御に関わる構造生物学的解析

平成24年度の本新学術領域研究では、既知タイプとは異なる新奇低分子量G蛋白質群、すなわち、従来の刺激依存性GDP-GTP交換によるコンホメーション転換には依らないGTP結合待機型G蛋白質(Arfファミリーに属するArl8、RasファミリーのDi-Rasなど)について、生化学、分子生物学、細胞生物学的な解析を進めると共に、その一部については構造学的な考察及び解析も加えた。1.リソソームに局在するArl8が、後期エンドソームに加えてリソソームとファゴソームの融合に必須の役割を果たすことを解明した。さらに、線虫を用いた遺伝学的解析から、Arl8と協調して機能する因子として、酵母で液胞の融合を制御するHOPS複合体の構成因子Vps39、41を同定した。2.H-、K-Rasなどの代表的なRasとは異なり、Di-Rasはその大部分がSmgGDSとヘテロ二量体を形成して細胞質の可溶性画分に存在すること、また、Di-Rasの有するGTP/GDP結合親和性は、SmgGDSとの複合体形成によって顕著に低下することを見出した。GTP結合型Di-Rasは、RapのGEFとして先に同定されたEpac2aのRAドメインに結合し、Epac2aを細胞膜に局在化させた。さらに、東大・院薬の清水敏之教授との共同研究から、X線小角散乱の解析結果(DAMMINモデル)に基づくDi-RasとSmgGDSの複合体の予測構造を取得した。3.低分子量G蛋白質Rac1において、野生型のDi-Rasが示すような著しく速いGDP解離活性をもつヒトの変異体を見出し、Rasで見られようなGTPアーゼ活性の低下に依らない活性型点変異が、腫瘍形成に介在することを解明した。24年度が最終年度であるため、記入しない。本新学術領域研究の初年度においては、既知タイプとは異なるG蛋白質群、すなわち、1)従来の刺激依存性GDP-GTP交換によるコンホメーション転換型とは異なるGTP結合待機型G蛋白質(申請者らが先に同定したArfファミリーに属するArl8、RasファミリーのDi-Rasなど)、2)低分子量Gドメインに加えて別の機能領域も有するユニークな構造のマルチ・ドメイン型G蛋白質(ArfファミリーのArl13b、RabファミリーのEFCAB4Bなど)について生化学、分子生物学、細胞生物学的な検討を加え、以下の知見を得た。1.線虫Arl8欠失変異体を用いた解析から、Arl8は、後期エンドソームに加えてファゴソームとリソソームの融合に必須の役割を果たすこと、さらにArl8b欠失マウスの解析から、Arl8bを欠くマウスは膵外分泌細胞の分泌小胞の局在が異常となる表現型を見出した。2.Di-Rasは、出生後の神経組織に特異的に発現するが、smg-GDSとヘテロ二量体を形成して細胞質画分にも存在することを見出した。また、GTP結合型において、Di-RasはRapのGEFとして先に同定されたEpac2aのRAドメインに結合し、細胞膜にEpac2aを局在化させることを見出した。3.N末端側のArfドメインに加えて、Coiled-coil及びPro-rich配列を有するユニークなG蛋白質Arl13bは、繊毛に限局して繊毛内物質輸送系に介在する。このArl13の繊毛局在性は、ゴルジ体でのN末端側パルミトイル化修飾とC末端側に存在するRVEP配列に依存した繊毛標的化によることを見出した。4.C末端側のRabドメインに加えて、EF-hand及びCoiled-coil配列を有するユニークなG蛋白質EFCAB4B(a型)は、細胞内Ca^<2+>上昇に応答して核近傍のリサインクリングエンドソームへ集積し、炎症性サイトカイン産生に関与することを見出した。

3.低分子量G蛋白質Rac1において、野生型のDi-Rasが示すような著しく速いGDP解離活性をもつヒトの変異体を見出し、Rasで見られようなGTPアーゼ活性の低下に依らない活性型点変異が、腫瘍形成に介在することを解明した。24年度が最終年度であるため、記入しない。本研究の解析対象である低分子量G蛋白質ARL-8やDi-Rasに関して、それらの新しい機能を見出した点は大きな進展である。この知見は、リソソームとファゴソームの融合制御の分子メカニズムや神経分泌の理解に役立つと考えられる。また、RVxPモチーフがゴルジ体以降で選別輸送シグナルとして機能する可能性を見出したが、この知見は繊毛への輸送機構の解明に貢献すると考えられる。低分子量G蛋白質ARL-8に関して、その活性制御因子を含めた結合分子に関する知見は少なく、それらの同定が今後の重要な課題の一つである。RVxPモチーフによる選別輸送機構を解明するためには、RVxPモチーフを認識する因子の同定が重要であり、アフィニティーカラムや共沈降実験などにより、その同定を目指す。さらに、G蛋白質単量体や相互作用因子との複合体に関わる構造学的な解析を進める。
選択的水素結合を用いたブロック型超分子の調製とその凝集構造

異種ポリマーの末端を非共有結合で結びつけると、共有結合で結び付けられた「ブロック共重合体」には見られない、外場環境に依存した「可逆的会合解離可能」な新たな分子構築ができると考えられる。我々はこの分子構築の結果できる分子集合体を「ブロック型超分子」と名づけ、このコンセプトを実現すべく実験を行った。具体的には2種類のポリマー末端を水素結合でつなぎ合わせることによって「ブロック型超分子」の調製を目指した。まず前年度に開発した「ヌクレオチド末端を有するポリマー合成法(Biomacromolecules 2005,6,2328-2333.)」をヒドロキシル基末端ポリマーに適用し、2種類の相補的オリゴヌクレオチド末端ポリマーを合成した。具体的には末端に3つのチミジンユニットを持ったポリ(4-トリメチルシリルスチレン)(PTMSS-T3)と末端に3つのデオキシアデノシンユニットを持ったポリスチレン(PS-A3)を合成した。末端導入率は^1H NMRで決定し、ほぼ定量的に導入されていることを確認した。これらのポリマーを1:1でブレンドして溶液中での挙動を^1H NMRを用いて観察したところ、2つのポリマー末端間で水素結合が生じていることを示すイミドプロトンピークの低磁場シフトが観測できた。一方、溶媒キャストフィルムの電子顕微鏡観察によって、ラメラ状のナノ相分離構造が確認できた。またX線測定でもナノ相分離構造形成に由来する回折ピークが見られた。ゆえにバルクにおいてブロック型超分子を形成させることに成功した。さらに上記のブレンドに水素結合阻害分子(低分子量)を投与したところ、溶液中の^1H NMR測定においてイミドプロトンピークが高磁場側へシフトし、水素結合の阻害が確認された。バルクにおいてもX線散乱によってナノ相分離構造の消失が確認されたことから、阻害分子を加えることでブロック型超分子の形成を阻害できることが分かった。これらの成果をまとめて論文・学会(高分子学会、アメリカ化学会)で発表した。複合ポリマーの研究が注目を浴びて久しいが、その一つとして異種ポリマーを共有結合でつないだ「ブロック共重合体」に関する研究が挙げられる。一方、近年では非共有結合(たとえば水素結合)を用いて「超分子」を形成させる研究に大きな関心が寄せられている。そこで異種ポリマー末端間を水素結合で結びつけることができれば超分子の性質を有したブロック共重合体(ブロック型超分子)が調製できると考えられる。ゆえにブロック型超分子調製の第一歩として、会合能の高いヌクレオチド末端を有するポリマーの簡便な合成法の開発を行った。さらには末端に複数のヌクレオチドを導入し、そのポリマーの凝集構造観察を行った。具体的には最も実用化されている人工DNA合成法Phosphoramidite法を応用し、分子量1万程度の単分散なヒドロキシル基末端ポリスチレンを原料として末端にThymidineが5個ついたポリマーを合成した。これについて溶媒キャストを行い、透過型電子顕微鏡と小角X線散乱を用いて構造観察を行った。その結果体積分率が0.21程度で11.4nmのドメイン面間隔をもったシリンダー構造を形成していることが確認された。このように人工DNA合成法を応用し、非常に有用なヌクレオチド末端ポリマー合成法の開発に成功した。引き続き、上記において開発した合成手法を用いで、異種ホモポリマー末端に相補的なヌクレオチド(チミジンとデオキシアデノシン)を導入し、それらをブレンドすることによってブロック型超分子の調製とそのナノ構造形成に成功した。さらに水素結合阻害因子を加えることでナノ構造形成を阻害することもできた。これらの成果をまとめて論文を投稿した。
電子カルテ非構造化データからの薬剤性有害事象検出手法の開発

胸部CTレポートの自然言語解析により、2014年に初めて胸部CT検査で間質性肺炎を指摘された467症例を抽出した。対象患者に対して、2012年から2014年に施行された胸部CT、胸部Xp、KL-6、SP-Dを抽出し、間質性肺炎陽性、陰性の判定を行った。胸部CTを優先に、補助診断として胸部Xp、KL-6、SP-Dを用いて、間質性肺炎の最後に陰性が証明された日(Pre Date)、最初に陽性が証明された日(Start Date)を求めた。2012年から2014年に薬剤治療が施行された患者を抽出し、437症例が検査データと紐づけがされた。薬剤投与日と間質性肺炎発症日から起因の道程を行った。Pre DateとStart Dateの間に薬剤が投与されているのは287症例であった。起因薬剤の同定を目的として、PMDAの添付文書で間質性肺炎の副作用が記載されている薬剤で絞り込んだところ、139症例が対象として挙げられた。症例数の多かった薬剤は、カロナールが402例中31例(8%)、バクトラミン配合錠が301例中23例(8%)、セレコックスが301例中17例(8%)であった。発症頻度が高かったのは、オレンシアが5例中2例、イレッサが6例中2例、コルベットが3例中1例であった。より正確な評価を行うためには症例数を増やす必要があったが、薬剤性有害事象による間質性肺炎の発症率を網羅的に求めることが可能であった。また、PMDAの起因薬剤リストから外れたもの148症例については、これまで報告していない薬剤による間質性肺炎の可能性が考えられ、症例ごとの検討が必要と考えられた。今年度は、放射線レポートのキーワードでどの程度疾患をとらえることができるかを、腫瘍のレポートで検証を行った。対象は胸部CT所見を研究とし、肺がん、乳がん、食道がんのレポートの検出を行った。肺がん所見の特徴語(陽性尤度比、陰性尤度比)は、原発性(460、0.54)、辺縁不整(210、0.79)、胸膜陥入像(130、0.87)、肺がん(37、0.27)などであった。肺がんは感度0.78、特異乳がん所見の特徴語は原発性(310、0.69)、皮膚(250、0.75)、乳腺(47、0.54)、濃染(34、0.67)などで感度0.83、特異度0.95であった。感度1となるカットオフ値は0.007で、感度1、特異度0.41であった。食道がん所見の特徴語は反回神経領域(220、0.78)、全周性(180、0.82)、食道癌(80、0.20)、食道(17、0.33)などで感度0.75、特異度0.92であった。感度1となるカットオフ値は0.58で、感度1、特異度0.95であった。胸部CT所見のデータから間質性肺炎を検出する精度は、感度0.89、特異度0.99で間質性肺炎ほどの検出率は得られなかった。その理由として、間質性肺炎ほど明確な特徴語がないことが考えらえた。一方、感度を1とする形でカットオフ値を求めると、特異度はある程度の値が求められたので、がんレポートの見落とし防止を目的として利用は可能と考えられた。今年度は、間質性肺炎については、有害事象の検出に胸部単純レントゲン、KL-6、SP-Dの補助診断の活用方法の再検討を行った。カルテレビューとの比較では、ゲフィチニブが本法が6.0%、カルテレビューが4.1%、メトトレキサートがそれぞれ2.3%、1%、テガフール/ギメラシル/オテラシルカリウムが1.4%、0.8%、テガフール/ウラシルが0.7%、0.5%と良好な結果が得られた。今年度は、間質性肺炎については、有害事象の検出に胸部単純レントゲン、KL-6、SP-Dの補助診断の活用方法の再検討を行い、それによって得られた有害事象の発生率に対して、カルテレビューで評価を行った。次に、放射線レポートの自然言語解析として、キーワードの出現頻度でどの程度、判別を行うか、別の疾患で検証をしたほうが良いとの結論に至り、この検証を行っていた。このため、網羅的解析の検証が少し遅れている状況である。薬剤性間質性肺炎の網羅的検出を行うため、以下の手法を考えた。胸部CT、Xp所見から既報の方法で間質性肺炎を検出し、血液検査のKL-6、SP-Dは正常上限値を超える場合を陽性と捉えた。間質性肺炎が最後に陰性が確認された日付(Pre Date)と、初めて陽性が確認された日付(Start Date)と胸部CTで間質性肺炎が確定診断された日付(Post Date)と薬剤投与日の関係から薬剤性間質性肺炎の検出を行うこととした。CT陽性患者100人抽出したところ、Pre Dateは42名で検出され、その内訳はCTが36人、Xpが3人、KL-6が2人、SP-Dが3人であった。

Pre DateとStart Dateの間に薬剤投与開始日がある薬剤を間質性肺炎の起因となった薬剤の可能性を考え、薬剤性間質性肺炎の検出を行った。これは既報の血液検査でとらえられる有害事象(肝機能障害など)と同様の手法であったが、血液検査に比較して検査頻度が少なく、Pre DateとStart Dateの期間が開くことが多く、多くの薬剤が候補として捉えられた。そこで、起因となる薬剤の絞り込みが必要となった。薬剤性間質性肺炎の原因薬候補リストはPMDAの添付文書データを用いることとた。PMDAのWebページから添付文書情報を副作用「間質性肺炎」、対象を警告とし薬剤の抽出を行い、抽出された527薬剤をダンロードし、当院の薬剤情報と紐づけを行った。2014年以降初めてCT陽性になる患者467人を抽出し、Predateからstartdateに投与されている薬剤を抽出したところ、287人が薬剤を抽出されており、現在、上記の薬剤リストで絞り込みを行い、その検出精度の検証を行っている。間質性肺炎の網羅的検出手法を検討してきたが、血液検査で検出される有害事象に比し、検査回数の少なさから有害事象の候補薬の絞り込みに時間を要している。胸部CTレポートの自然言語解析により、2014年に初めて胸部CT検査で間質性肺炎を指摘された467症例を抽出した。対象患者に対して、2012年から2014年に施行された胸部CT、胸部Xp、KL-6、SP-Dを抽出し、間質性肺炎陽性、陰性の判定を行った。胸部CTを優先に、補助診断として胸部Xp、KL-6、SP-Dを用いて、間質性肺炎の最後に陰性が証明された日(Pre Date)、最初に陽性が証明された日(Start Date)を求めた。2012年から2014年に薬剤治療が施行された患者を抽出し、437症例が検査データと紐づけがされた。薬剤投与日と間質性肺炎発症日から起因の道程を行った。Pre DateとStart Dateの間に薬剤が投与されているのは287症例であった。起因薬剤の同定を目的として、PMDAの添付文書で間質性肺炎の副作用が記載されている薬剤で絞り込んだところ、139症例が対象として挙げられた。症例数の多かった薬剤は、カロナールが402例中31例(8%)、バクトラミン配合錠が301例中23例(8%)、セレコックスが301例中17例(8%)であった。発症頻度が高かったのは、オレンシアが5例中2例、イレッサが6例中2例、コルベットが3例中1例であった。より正確な評価を行うためには症例数を増やす必要があったが、薬剤性有害事象による間質性肺炎の発症率を網羅的に求めることが可能であった。また、PMDAの起因薬剤リストから外れたもの148症例については、これまで報告していない薬剤による間質性肺炎の可能性が考えられ、症例ごとの検討が必要と考えられた。今年度は薬剤性間質性肺炎の網羅的解析手法についての検証を行う。1胸部CT検査、胸部X線検査は、先行研究で用いた間質性肺炎検出ロジックに従い、0/1の判定を行う。KL-6、SP-Dは、標準値により0/1の判定をつける。検査項目ごとに0→1があれば、Upのレコードとして、1→0があればDownのレコードとして記録する。胸部CT検査で初めて1となった日付を間質性肺炎の診断確定日とする。診断確定日より過去にさかのぼり、それぞれの検査のUpのレコードがあった場合はUpのレコードの0の日付をPre Date、1のレコードをStart Date、胸部CT検査での診断確定日をPost Dateとしてレコードを作成する。、また診断確定日より日付を進めて検索を行い、胸部CT検査で最後に1となった日付を最終間質性肺炎診断日とする。さらに日付を進め、それぞれの検査でDownとなるレコードがあればDownのレコードを作成する。Up、Downで与えられる日付と薬剤投与期間との関係から、薬剤性間質性肺炎の検出を行う。2胸部CT検査で初めて1となった日付に投与されている薬剤を検出する。
Ｃａｂｅｚａの核内区画局在へのクロマチンリモデリング因子の機能とＡＬＳ発症機構

前年度までに、ショウジョウバエのlncRNAの一つであるhsrωがヒトALSの原因遺伝子FUSのショウジョウバエホモログdFUSに遺伝学的にまた物理的に相互作用することを明らかにした。またhsrωのノックダウン系統を用いた解析から、hsrωがdFUS mRNAレベルを制御すると共に、dFUSタンパク質の核・細胞質局在のバランスを調節することを明らかにした。平成29年度は、それまでの研究を発展させて、遺伝学実験と生化学的解析を組み合わせることにより、ヒトFUSをショウジョウバエの複眼原基で発現させると、ヒトFUSは可溶性分画に存在し、その結果細胞毒性を示して、赤色色素の消失を伴う成虫複眼形態異常を誘導することを明らかにした。このショウジョウバエでhsrωlncRNAをノックダウンすると、この複眼形態異常がレスキューされることを見出した。hsrωノックダウンにより、dFUS mRNAレベルが低下した。また面白いことに、hsrωノックダウンが可溶性のヒトFUSを減少させ、またそれと同時に不溶性のヒトFUS-LAMP1凝集体形成を促進することを見出した。hsrωノックダウンによりもたらされるこれらの現象が、結果的に細胞毒性を示す可溶性のヒトFUS量を減少させ、複眼形態異常をレスキューしたと考えられる。さらに詳細な解析を進めることにより、細胞質のFUS-LAMP1凝集体は、プロテアソーム、オートファジー、リソソームのいずれによる分解も受けず、細胞質内の安全な貯蔵物として隔離されて存在することを見出した。この発見は細胞質のFUS凝集体形成へのLAMP1の新しい機能を示したものとして学術的意義がある。またこれらの研究は、FUSタンパク質の異常が関与する様々な神経変性疾患の理解に役立つと共に、ALSやFTLDなどの新規治療標的候補を提示したものとしても意義がある。29年度が最終年度であるため、記入しない。ALS原因遺伝子FUSの遺伝子産物は通常核内に局在するが、ALS患者の下位運動ニューロンでは細胞質内に凝集体として存在することが知られている。このFUSを含む凝集体形成機構の研究からRNA代謝制御の欠陥がALSの病態に重要な役割を果たしていることが示唆されつつある。またALSの約5%が家族性であり、残りの95%が孤発性であることから、何らかのエピジェネティック制御が運動神経変性をもたらすことも示唆されている。これまでにショウジョウバエのlong non-coding (lnc) RNA, hsrωがいくつかのhnRNPsの核内局在に重要な役割を果たしていることを明らかにしてきた。興味深いことに、いくつかのhnRNPsはhsrωと共にω-specklesと呼ばれる核内構造体を形成し、ALS原因遺伝子FUSのショウジョウバエホモログCabezaが、このω-specklesの構成因子であることも明らかにしている。これまでにいくつかのショウジョウバエALSモデルが報告されているが、lncRNAに関連した研究はまだ行われていない。FUSの細胞内局在変化はALSの理解に重要であり、これへのlncRNAの関与が明らかになると、ALS治療の新規標的候補としても意義が大きい。このような観点から、hsrωノックダウンショウジョウバエはALS病態解析の新しいトゥールとなると期待できる。おもしろいことに、実際にhsrωをノックダウンするとCabezaの細胞内局在変化を引き起こすことを見出しつつある。ALS病態へのlncRNA, hsrωの果す役割について研究するために、神経特異的なGAL4ドライバー系統(elav-GAL4系統)を用いて、神経特異的hsrωノックダウン系統と神経特異的hsrω過剰発現系統を作製した。このノックダウン系統と過剰発現系統それぞれの成虫脳から全RNAを抽出し、特異的なプライマーを用いた定量的RT-PCRを行い、hsrωが実際にノックダウンされていることと過剰発現されていることをそれぞれ確認した。現在この神経特異的hsrωノックダウン系統と過剰発現系統の成虫を用いたクライミングアッセイや幼虫を用いたcrawlingアッセイによる運動能力の検定と、神経・筋接合部のシナプス形態の観察を行いつつある。これら一連の解析により、lncRNA, hsrωの発現レベルの違いがショウジョウバエの運動能力に影響を与えることを明らかにする。またこれらの系統の神経系でのCabezaの細胞内局在について抗Cabeza抗体を用いた免疫染色法により解析し、野生型ショウジョウバエでの細胞内局在と変化があるか調べつつある。このように本研究は順調に進展しつつある。筋萎縮性側索硬化症(ALS)原因遺伝子FUSの遺伝子産物は通常核内に局在するが、ALS患者の下位運動ニューロンでは細胞質内に凝集体として存在する。このFUSを含む凝集体形成機構の研究からRNA代謝制御の欠陥がALSの病態に重要な役割を果たしていることが示唆されている。これまでにショウジョウバエのlong non-coding (lnc)RNAの一つであるhsrωがいくつかのhnRNPsの核内局在に重要な役割を果たしていることを明らかにしてきた。いくつかのhnRNPsはhsrωと共にω-specklesと呼ばれる核内構造体を形成し、ALS原因遺伝子FUSのショウジョウバエホモログCabezaが、このω-specklesの構成因子であることも明らかにしてきた。

FUSの細胞内局在変化はALSの理解に重要であり、これへのlncRNAの関与が明らかになると、ALS治療の新規標的候補としても意義が大きく、hsrωノックダウンショウジョウバエはALS病態解析の新しいツールになると期待できる。hsrωを全神経あるいは運動神経特異的にノックダウンすると神経・筋接合部のシナプス長の短縮やブートン数の減少、運動能力の低下や寿命の短縮など、Cabezaノックダウンショウジョウバエと類似の表現型を示すことが明らかになった。またCabezaとhsrωが物理的に相互作用し、hsrωノックダウンショウジョウバエでは、本来核内に局在するCabezaが細胞質へと局在変化することを見出した。これらの結果は、学術論文にまとめて査読性のある国際学術雑誌Experimental Neurologyに発表した。ALS病態へのlncRNA hsrωの果す役割について研究するために、全神経特異的なGAL4ドライバー系統(elav-GAL4系統)と運動神経特異的なGAL4ドライバー系統(D42-GAL4系統)を用いて、hsrωをノックダウンした。これらのノックダウン系統の成虫を用いたクライミングアッセイや幼虫を用いたcrawlingアッセイによる運動能力の検定と、神経・筋接合部のシナプス形態の観察を行なった。これら一連の解析により、lncRNA hsrωの発現レベルの違いがショウジョウバエの運動能力や神経・筋接合部のシナプス形態に影響を与えることが明らかになった。またこれらの系統の神経系でのCabezaの細胞内局在について抗Cabeza抗体を用いた免疫染色法により解析した結果、野生型ショウジョウバエではCabezaが核内に局在するのに対し、hsrωノックダウン系統では、Cabezaが細胞質局在へと変化することがわかった。またRNA免疫沈降法(RIP解析)により、Cabezaとhsrωが複合体を形成していることを明らかにした。このように本研究は現在まで順調に進展しつつある。前年度までに、ショウジョウバエのlncRNAの一つであるhsrωがヒトALSの原因遺伝子FUSのショウジョウバエホモログdFUSに遺伝学的にまた物理的に相互作用することを明らかにした。またhsrωのノックダウン系統を用いた解析から、hsrωがdFUS mRNAレベルを制御すると共に、dFUSタンパク質の核・細胞質局在のバランスを調節することを明らかにした。平成29年度は、それまでの研究を発展させて、遺伝学実験と生化学的解析を組み合わせることにより、ヒトFUSをショウジョウバエの複眼原基で発現させると、ヒトFUSは可溶性分画に存在し、その結果細胞毒性を示して、赤色色素の消失を伴う成虫複眼形態異常を誘導することを明らかにした。このショウジョウバエでhsrωlncRNAをノックダウンすると、この複眼形態異常がレスキューされることを見出した。hsrωノックダウンにより、dFUS mRNAレベルが低下した。また面白いことに、hsrωノックダウンが可溶性のヒトFUSを減少させ、またそれと同時に不溶性のヒトFUS-LAMP
クロコウジカビ酸性プロテアーゼAのX線結晶構造解析

1.非ペプシン型酸性プロテアーゼであるクロコウジカビ酸性プロテアーゼAの立体構造を決定した。この立体構造モデルは軽鎖39残基の内1-33、重鎖173残基の内3-173、116個の水分子及び5個の硫安分子を含んでいる。そのうち7残基のアミノ酸側鎖については2状態の構造をとっていることが観測された。分解能1.4Aまでの回折強度データを用いた精密化の結果、R=20.4%,FreeR=23.1%,rms(bond)=0.008A,rms(angle)=1.634degであった。2.本酵素はペプシン型酵素とは全く異なる2次構造モチーフを持つことが明らかとなった。分子の外形は三日月型でペプシン型酵素と類似しているものの、ペプシン型酵素がN端ドメインとC端ドメインに別れているのに対して、本酵素はそのようなドメイン構造をもっていない。またペプシン型酵素に見られるα-ヘリックスは全く存在しない。本酵素の構造は2枚の大きなβシートが平行に重なりあうことによって構築されており、従来に見られない構造モチーフを持っている。以上のことから酸性プロテアーゼとしての機能を保持するためには、必ずしもペプシン型酵素の2次構造モチーフを持つ必要はないということが明らかとなった。3.立体構造をもとに酵素表面の疎水性の度合いを調べた結果、三日月型の内側表面は疎水性に富んでおり、ペプシン型酵素と同様にこの部位が活性部位を形成していることが予想された。今後は静電ポテンシャルの計算を行うことにより、活性部位について、ペプシン型酵素との精密な比較を行いたい。4.ペプチドライブラリ法によりP1部位の基質特異性について調べた結果、チロシン、フェニルアラニン、メチオニン、ヒスチジンを持つものが良好な基質となることがわかった。今後は他の部位についても実験を行い、それらの結果を総合して阻害剤の設計を行いたい。
重い電子系／絶縁体人工超格子による２次元近藤格子系の創製

本研究では希土類棚化物ReB6(Re: Ce, Sm)の薄膜作製を分子線エピタキシー法を用いて行った.CeB6ではc軸配向膜を得られた.また薄膜試料においても近藤効果による電気抵抗率の極大と反強四重極秩序を観測できた.SmB6ではc軸方向に加えて部分的に面内配向性も持った薄膜を得られた.電気抵抗率の温度依存性において高温では絶縁体的に振る舞い,極低温で一定値に近づく振る舞いを観測できた.これはバルク単結晶の振る舞いを定性的に再現する.また,バンド絶縁体であるSrB6とSmB6が交互に積層した人工超格子の作製に成功した.本研究では今までに報告がない重い電子系/絶縁体の人工超格子の作製を目指すものである.申請者はそのターゲットとして重い電子化合物CeB_6と,同じ結晶構造を持つ近藤絶縁体SmB_6を選んだ.研究プロジェクトの初年度である平成24年度は成膜装置の立ち上げとCeB_6およびSmB_6のエピタキシャル膜の成膜法を模索した.成膜は分子線エピタキシー法を用いることとし,装置の立ち上げを行った.最終的に成膜時の真空度10^<-7>Pa台,蒸着速度12A/minでの安定した蒸着を行える性能を得ることに成功した.これには他に類を見ない,高温Kセルによる安定的なBの蒸着法を確立できたことが大きい.高融点低蒸気圧のBに対しては通常は電子ビーム蒸着が用いられ,Kセルによる加熱蒸着の例は少ない.しかしながら本研究で目指すような超高真空下での極めて低い蒸着レートでの安定した蒸着にはKセルによる穏やかで安定してる蒸着方法が有利である.そこで申請者は1900°C程度まで昇温できる高温Kセルを組み合わせて,昇華による蒸着法を確立した.これにより,前述のような低い蒸着レートでも再現性良く,安定した成膜を行うことに成功した.このようなた立ち上げに成功した装置を用いて,CeB_6およびSmB_6の薄膜作成を行い,c軸配向膜を得ることに成功した.c軸配向性は表面での反射高速電子線回折で観測されたパターンとX線回折により確かめられた.また,電気抵抗測定からCeB_6が近藤効果を示すこと,SmB6が絶縁体的なふるまいを示すことを確認し,得られたc軸配向膜でもバルク単結晶の性質を再現できていることが確認できた.多極子秩序を示す重い電子系物質CeB6の薄膜作製を分子線エピタキシー(MBE)法で行った.得られた膜についてx線回折と反射高速電子線回折(RHEED)による構造評価を行い,c軸方向の方位は揃っているが,面内の配向性は悪いこと,基板であるMgOの(100)方向に対してCeB6の(100)方向が優先的に配向したグレインと(110)方向が優先的に配向したグレインがあることを明らかにした.また原子間力顕微鏡(AFM)による直接観測とRHEEDの結果から表面平坦性は比較的良好であることが分かった.近藤絶縁体であるSmB6についても同様にMBE法による薄膜育成を試み,CeB6と同程度の膜を得た.CeB6, SmB6について低温・高磁場下での電気抵抗率測定を試みた.CeB6については近藤効果に伴う抵抗率の極大を確認した.また電気抵抗に現れる折れ曲がりが磁場の増大と共に高温側にシフトしていく特徴的な振る舞いから,薄膜においても四重極秩序が表れているのを確認した.SmB6については,抵抗率の変化は小さいものの,バルクと同様に降温とともに抵抗率が増大する,近藤絶縁体に特徴的な振る舞いを観測できた.また,3 K以下で抵抗率の温度依存性がなくなる振る舞いについても,バルク単結晶と同様に観測できた.MBE法によってバンド絶縁体であるSrB6の薄膜作製を試みた.X線回折とRHEEDによる構造評価より,c軸方向の方位は揃っているが面内の方位は揃っていない,c軸配向膜であることが確認できた.またAFMとRHEEDによる評価から表面平坦性は良好であることを明らかにできた.製膜時の基板温度を1000°Cまで昇温できるよう基板ヒータの改造を行った.MB6薄膜の成膜に用いる基板にはMgO (100)を用いている.MgO基板を1000°Cにて1224時間アニールすることにより,基板表面の原子を再配列させ,より平坦な平面を得ることに成功した.またSmB6薄膜の蒸着時の基板温度を1000°Cにすることと合わせて,c軸方向だけではなく面内の配向性を持った膜を得ることに成功した.しかしながら面内で未配向な成分も残留しており,膜質の一層の改善が求められる.同様の手法で同じ結晶構造を持つSrB6薄膜の成膜にも成功した.SrB6薄膜に関しても同様にc軸には完全に配向しているが,面内に配向した成分と未配向成分を同時に持った膜が得られた.SrをBに対して化学量論比より10%程度以上多めに蒸着すると面内配向しなくなることが明らかになった.SrとBの比を化学量論比通りに蒸着した膜では電気抵抗率の温度依存性は低温で急激に増大し,絶縁体的な振る舞いを示すが,Srを増やすと低温における抵抗の増大が急激に抑えられることが明らかになった.

過去の文献ではSrB6はバンド絶縁体か半金属化について議論なされてきた.本研究からSrB6はバンド絶縁体であるがSrのドープにより半金属的な振る舞いを示していると考えられる.格子定数が比較的近いMgO (100)基板を用い,かつ蒸着時の基板温度を1000°Cにすることで面間と一部面内配向性を持ったSmB6薄膜並びにSrB6薄膜を得られた.また,最適な蒸着レートの比率は化学量論比通りSm(Sr):B=1:6であることを明らかにした.得られたSmB6薄膜について低温までの電気抵抗率測定を行った.電気抵抗率は降温と共に増大し,5 K以下の低温で一定値を示す.これはバルク単結晶で報告されているものと同様の振る舞いであるが,室温と低温での抵抗率の比はバル告単結晶では数百を超すものが報告されているのに対して薄膜では数倍程度に留まった.SrB6の電気抵抗率測定からこの物質は絶縁体的な伝導を示すことを明らかにした.SmB6とSmB6の人工超格子を作製できれば,SmB6層(トポロジカル絶縁体層)を通常の絶縁体の間に閉じ込め,トポロジカル絶縁体層の厚みを制御することが可能となる.実際にSmB6層とSrB6層の積層構造を5回持つ人工超格子の作製を行った.得られた膜について断面を走査型電子顕微鏡(SEM)で観測することによりSrB6層とSmB6層が交互に積層していることが明瞭に識別できた.SEM画像からSmB6層の厚みはユニットセル24個分程度であることが明らかになった.この人工超格子の抵抗測定を行ったところ,4 K以下で抵抗率が一定値を示す振舞いが観察された.更にSmB6層の厚みを薄くした人工超格子の作製と低温までの測定が必要と考えられる.本研究では希土類棚化物ReB6(Re: Ce, Sm)の薄膜作製を分子線エピタキシー法を用いて行った.CeB6ではc軸配向膜を得られた.また薄膜試料においても近藤効果による電気抵抗率の極大と反強四重極秩序を観測できた.SmB6ではc軸方向に加えて部分的に面内配向性も持った薄膜を得られた.電気抵抗率の温度依存性において高温では絶縁体的に振る舞い,極低温で一定値に近づく振る舞いを観測できた.これはバルク単結晶の振る舞いを定性的に再現する.また,バンド絶縁体であるSrB6とSmB6が交互に積層した人工超格子の作製に成功した.c軸配向性だけではなく面内配向性を持った製膜を行う手法を確立しつつある.また同じ結晶構造をもつSrB6の成膜手法を確立し,かつSrB6がバンド絶縁体であることを明らかにした.これによりCeB6/SrB6やSmB6/SrB6の人工超格子を製膜し,重い電子系/絶縁体あるいはトポロジカル絶縁体/バンド絶縁体人工超格子の成膜を行う準備を整えた.27年度が最終年度であるため、記入しない。固体物理製膜条件を改善し,面内未配向成分を減らす.またCeB6/SrB6やSmB6/SrB6の人工超格子を製膜し,CeB6層(重い電子層)を薄くしていき,重い電子の2次元閉じ込めによる電子状態の変化について,電気抵抗率測定などから明らかにする.トポロジカル絶縁体層の厚みを薄くしていき,界面金属状態間の混成が起きるようになれば絶縁的に振る舞うことが知られている.SmB6層を薄くしていき,絶縁体的な振る舞いが表れればトポロジカル絶縁体であることの証明となる.SmB6層の厚みの異なる人工超格子についてそれぞれの電気抵抗率を測定し,薄い極限で絶縁的になるかどうかについて明らかにする.分子線エピタキシー装置の立ち上げに成功し,当初の予定通り加熱蒸着によるBの蒸着法を確立できた.CeB_6,SmB_6についてもc軸配向の成膜に成功し,バルク単結晶の性質を再現できることが明らかに出来た.
固有ジョセフソン多重接合における協力的巨視的量子効果の研究

銅酸化物高温伝導体固有ジョセフソン接合系で観測される巨視的量子効果に対する理論的研究を行った。本研究では、主としてBi系高温超伝導体のc軸輸送で観測される低温での量子論的スイッチング現象に対する多重接合効果が考察された。研究成果として、接合間のキャパシティブ結合により量子トンネル効果が顕著に増大すること、及び、ユニバーサルスイッチングにおける脱出率の異常増大の機構を明らかにしたこと等である。以上の結果は、最近の実験結果と定量的に良い一致を示すものである。銅酸化物超伝導体等の固有ジョセフソン多重接合系の低温領域で観測される巨視的量子トンネル効果(MQT)における多重接合効果を理論的に考察した。本年度は、接合間にキャパシティブ結合が存在する場合を考察した。キャパシティブ結合は、超伝導層の帯電効果に起因する静電相互作用に起源を持つ。ジョセフソン接合系のMQTは、バイアス電流下で0電圧状態から有限電圧状態へスイッチングする場合の臨界電流値の分布に現れる。実験的には、第1ブランチへのスイッチング(ファーストスイッチング)と一様ブランチへのスイッチング(ユニバーサルスイッチング)で、脱出確率の顕著な増大が観測されている。本研究では、ファーストスイッチングの場合、スイッチングしない接合の位相差は、トレースアウトされ質量に繰り込めることを証明した。この場合、繰り込まれた質量は軽くなる。このため、スイッチングする自由度に対する量子効果は増大し、脱出確率の顕著な増大が引き起こされる。脱出確率に対する我々の計算値は、実験値とよい一致を示した。Bi-2212固有ジョセフソン接合系のユニバーサルスイッチングでは、接合数の2乗に比例する巨大な脱出確率が観測されている。本研究では、接合間の結合が比較的弱い系の場合、スイッチングがすべての接合で同時に起きるのではなく、一定のタイムラグを持ち連鎖反応的に生じると接合数の2乗に比例する脱出確率が得られることを示した。この結果は、Bi-2212系固有ジョセフソン接合に対する実験結果を定性的に説明するものである。銅酸化物高温超伝導体等の固有ジョセブソン多重接合で観測される協力的位相ダイナミクスを理論的に考察した。(1)微小接合系の低温で観測される巨視的量子トンネル効果に関しては、接合間にキャパシティブ相互作用とインダクティブ相互作用がある場合の理論的定式化を完成させた。接合間の結合が弱い弱結合領域では、サクセッシブトンネリングが主要なトンネル経路となることを示し、この効果により多重接合系で、エスケープ率が接合数の2乗に比例する異常増大が起きることを明らかにした。この結果は、ドイツのエルランゲン大学のグループの実験結果を説明するものである。また、多重接合系の位相差の量子論的挙動を解明するために、キャパシティブ結合がある少数接合系に対して、シュレーディンガー表示を用いたダイレクトな計算機シミュレーションを行った。このシミュレーションは、固有ジョセフソン多重接合系を量子デバイスに応用するための強力な手段を与えるものである。(2)固有ジョセフソン接合系で、最近、コヒーレントなテラヘルツ波の発振が観測された。本年度の研究では、この現象の解明にも取り組んだ。この系での電磁発振の機構を明らかにするため、位相差のダイナミクスに対する大規模計算機シミュレーションを行った。このシミュレーションにより、電圧状態でのジョセフソン振動が、接合系の幾何学的固有モードと共鳴する場合に強い発振が起きることを示した。さらに、接合内の電磁励起モードと真空中に放出される電磁波の強度分布も明らかにした。
木彫像の樹種識別技術の高度化

日本の木彫像に多く用いられている10種の木材の判別が,非破壊方法である近赤外分光法によって可能であるか検討した。その結果,波長領域830-1150 nmを用いると,木彫像によく用いられているカヤ材が判別でき,波長領域1150-2400 nmを用いると,針葉樹材と広葉樹材が判別できることが確認された。ここで得られた樹種判別モデルを用いて,寺社等に保管されている実際の木彫像の分析を行ったところ,波長領域1150-2400 nmを用いたモデルで針葉樹材と広葉樹材が判別され,実際の木彫像にも適応可能であることが分かった。森林総合研究所および京都大学生存圏研究所の木材標本庫に所蔵されている伐採後の経過年数が異なるスギ材標本,及び,森林総合研究所千代田試験地において伐採後すぐに冷凍保存した木材を試料として,リアルタイムPCR法によって,木材中に残存している葉緑体のrbcL領域のDNAのコピー数を辺・心材別に分析した。DNAの増幅領域の長さを,93bp,185bp,317bpに設定し,それぞれ増幅の可否,コピー数について解析した。その結果,伐採後44年以上経過した材では,317bpの長さの領域は増幅されなかった。185np以下の長さの領域はすべての試料の辺材で増幅されたほか,93bpの領域ではすべての材でDNAの増幅が確認された。辺材では伐採後の経過年数が長くなるとDNAのコピー数が少なくなる傾向が見られたが,心材では残存するDNAのコピー数の試料によるばらつきが大きく,一定の傾向は見られなかった。また,DNA抽出液に含まれるDNAの濃度と残存するコピー数との間には関係があるとはいえなかった。DNA分析を木材の樹種識別に用いる場合,木材中に残存するDNAの量よりも残存するDNAの長さが重要になると考えられ,分析する領域を200bp以下にすると伐採後数百年以上経過した木材でもDNAによる分析が可能であると考えられた。これらの実験と平行して,静岡県河津町南禅寺および長野県長野市正覚院に保管されている木彫像及び木彫像の一部と思われる木材の調査を行い,36体の木材片から近赤外線吸収スペクトルを収集した。また,非破壊での木材の樹種識別であるVOC分析方法を確立するため,木彫像の調査時にVOCの収集も行った。日本の木彫像に多く用いられている10種((針葉樹5種(ヒノキChamaecyparis obtusa、スギCryptomeria japonica、コウヤマキSciadopitys verticillata、アスナロThujopsis dolabrata、カヤTorreya nucifera)、広葉樹5種(トチノキAesculus turbinata、カツラCercidiphyllum japonicum、クスノキCinnamomum camphora、ヤマザクラPrunus jamasakura、ケヤキZelkova serrata))の木材の樹種判別が近赤外分光法で可能であるかを検討した。森林総合研究所が所蔵する木材標本を用いて、波長領域830-2500nmの拡散反射スペクトルを収集し、二次微分スペクトルを用いて主成分分析を行った。波長領域830-1150nmを用いた主成分分析の、第1と第2主成分のスコアプロットでは、奈良から平安時代に製作された一木彫の木彫像に多く用いられているカヤのプロットが他の樹種のプロットと分かれてグループとなることが確認された。波長領域1300-2500nmを用いた場合には、針葉樹のプロットと広葉樹のプロットが分かれることが確認された。このように、分析に使用する波長領域によって判別可能な樹種が異なることが分かった。このモデルを用いて、寺社等に保管されている樹種が確認されている木彫像から得られた近赤外スペクトルの分析を行った結果、針葉樹と広葉樹は明瞭に分離することができたが、一方、カヤは分離されなかった。また、木彫像から放散されるVOCを収集した結果、カヤからはヌシフェラール、クスノキからはカンファーと考えられるピークが検出され、これらの樹種はVOC分析で判別できる可能性が示唆された。日本の木彫像に多く用いられている10樹種(針葉樹5種(カヤ,ヒノキ,スギ,コウヤマキ,アスナロ)),(広葉樹5種(トチノキ,カツラ,クスノキ,ヤマザクラ,ケヤキ))の木材の樹種判別が近赤外分光法を用いて非破壊で可能であるか検討した。森林総合研究所が所蔵する木材標本を用いて,波長領域830-2500nmの拡散反射スペクトルを収集し,二次微分スペクトルを用いて主成分分析を行った。波長領域830-1150 nmを用いた主成分分析の,第1主成分と第2主成分のスコアプロットでは,木彫像によく用いられているカヤ材のプロットが他の樹種のプロットと別れてグループとなった。波長領域1150-2400 nmを用いた場合には,針葉樹材と広葉樹材のプロットが別れることが確認された。ここで得られた樹種判別モデルを用いて,寺社,博物館等へ赴き、現地に保管されている実際の木彫像等34点から472スペクトルを収集し,それをもとに用いられている部材の樹種が判別可能であるかを調べた。

その結果,波長領域830-1150 nmを用いたカヤを判別するモデルではカヤ材の検出には成功しなかったが,波長領域1150-2400 nmを用いた針葉樹材と広葉樹材を分離するモデルでは,木彫像から得られたスペクトルを用いた場合でも,針葉樹材と広葉樹材の主成分プロットが分離していることが確認された。これらの結果から,作成後数百年以上の長い期間保管された木彫像においても,近赤外分光法を用いて針葉樹材と広葉樹材を非破壊で判別できる可能性が示唆された。この成果は,制作後長期間外部の環境にさらされ、表面が変色,変質した実際の木彫像では目視で区別がつきにくいカツラ材と針葉樹材の判別に有効であると考えられる。日本の木彫像に多く用いられている10種の木材の判別が,非破壊方法である近赤外分光法によって可能であるか検討した。その結果,波長領域830-1150 nmを用いると,木彫像によく用いられているカヤ材が判別でき,波長領域1150-2400 nmを用いると,針葉樹材と広葉樹材が判別できることが確認された。ここで得られた樹種判別モデルを用いて,寺社等に保管されている実際の木彫像の分析を行ったところ,波長領域1150-2400 nmを用いたモデルで針葉樹材と広葉樹材が判別され,実際の木彫像にも適応可能であることが分かった。本研究課題は、非破壊的な木彫像に用いられる木材の樹種識別の技術の開発、木彫像から得られる可能性のある微量の木材からのDNA分析の可能性の検証、実際に寺社等に保管されている木彫像の調査の3つの部分から構成されている。非破壊的な木材の樹種識別の技術として、近赤外分光分析法、木材から放散されるVOCの収集と分析による方法を検討し、針葉樹と広葉樹の判別、カヤ、クスノキ材の検出の可能性を明らかにでき、最終年度はさらにその精度の向上を目指す段階である。一方、DNA分析についても伐採後400年以上経過したスギ材からのDNA検出に成功し、その量だけでなく、DNAの長さやコピー数を精密に測定する成果があり、すでに論文化されている。実際の木彫像からはすでに800以上の近赤外線スペクトルが得られており、また、数十体の木彫像からVOCが収集され、分析も進んでいる。このように、実験室レベルの実験から得られた成果の有効性を実際の木彫像で検証するシステムも構築されており、研究計画に沿って研究は順調に進展している。27年度が最終年度であるため、記入しない。木材組織学前年度に作成した近赤外分光分析法を用いた非破壊的な木材の樹種判別のために開発した統計モデルが、実際に寺社等に長期間保存された木彫像から得られたスペクトルにどの程度適応できるかを検証する。樹種識別の精度を向上させるために、同一樹種において、統計モデルのスペクトルと木彫像から得られたスペクトルとを比較し、スペクトルが木材の長期間の保管でどのように変化しているかを解析することで、各樹種に特徴的な波長領域を特定し、それぞれの樹種を判別するのに有効な波長領域を確定する。また、10樹種すべてを一度に識別する方法だけでなく、段階的な判別方法についても検討する。また、これまでの結果をカナダのケベックで開催される国際木材加工機械セミナーにおいて発表する。VOCを用いたこれまでの研究では、上記10種のうちのクスノキ、カヤの木材からVOCを収集して、特異的なVOCの成分がGC-MS分析で同定できた。寺社等に保管されている木彫像からもこれらの特異的なVOCが得られるかを検証する。特に、奈良から平安時代の一木彫の木彫像に最も多く用いられているカヤ材で作られた木彫像が検出できるかを検証する。最終的には、上記の非破壊的な方法で得られる結果を相互に比較し、木彫像の樹種の非破壊的な判別方法について検証する。
Gp130からのシグナルによる樹状細胞抗原提示機能の制御機構の解析

1.BMDCは機能的なIL-6受容体を表面発現している。C57BL/6マウス骨髄細胞をGM-CSF存在下に6日間培養したBMDC(未熟BMDC)は機能的IL-6受容体(α鎖とgp130)を発現しIL-6刺激により、転写因子STAT3およびチロシン脱リン酸化酵素SHP-2のチロシンリン酸化を誘導した。2.gp130^<F759/F759>のBMDCにおいてgp130のシグナルはBMDCの成熟を著明に抑制した。gp130^<F759/F759>マウスの未熟BMDCではIL-6刺激によりClass II MHC強陽性の成熟BMDCの分画が減少した。またLPS刺激でも、成熟BMDC分画の誘導は対照より低下していた。IL-6とLPSの共刺激では、gp130^<F759/F759>の成熟BMDC分画はさらに低下した。IL-6による抑制効果はCD40,CD80,CD86の発現誘導においても増強していた。このIL-6によるLPS依存性BMDC成熟阻害効果は、gp130からのSTAT3活性化が遮断されているgp130^<FXXQ/FXXQ>においては観察されなかった。3.p130^<F759/F759>BMDCのLPS刺激によるIL-12産生能は、IL-6により著明に阻害された。4.130^<F759/F759>BMDCの抗原提示能は、抗原負荷時のIL-6処理により著明に阻害された。gp130^<F759/F759>マウスにおいては、抗原提示機能低下が自己免疫疾患発症に関与する可能性が示唆された。今後は、BMDCの誘導する抗腫瘍免疫応答におけるgp130シグナルの役割を明らかにしたい。