hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
乳児の言語発生とマイクロ・スリップの関係

マイクロ・スリップとは日常的な行為の遂行過程に観察できる手の微小な動きである.本年度は成人を対象にマイクロ・スリップの出現を規定するさまざまな条件について分析した.と同時に少数の乳児を対象にマイクロ・スリップを予備的に観察した.観察1:環境の視覚的複雑性の影響について:5×4の格子のあるトレイ上に,目標の達成に必要とされる材料のみがある「単純条件」と不必要な材料も置かれている「複雑条件」という二条件で観察した.課題は「紙コップに2杯のコーヒーを入れる.一方にはクリームと砂糖を,他方にはクリームのみを入れる」ことであった.課題遂行するための平均所要時間には両群間に差がなかったが,課題を達成するまでに観察されたマイクロ・スリップ数には差があった視覚的に複雑な環境の方がマイクロ・スリップが多いことが示唆された。観察11:行為の反復の効果:行為の繰り返しという条件を検討した.観察1の複雑条件と同様な課題条件下で3回続けて「コーヒーを2杯入れる」ことを求めた.第一試行の出現数は5.6回,第二試行では,2.0回,第三試行では,1.8回だった.分散分析では出現回数に有意な効果を認めた。予備的観察:乳児にマイクロ・スリップは観察できるかを、1992年5月生まれの1歳児と1991年9月生まれの2歳児の観察から検討した。結果は1歳児からマイクロ・スリップを観察できる.乳児のマイクロ・スリップは成人の単純条件とほぼ同じ頻度で出現し,その種類及び形態もほぼ同様であった.マイクロ・スリップは「発達しない現象」である可能性があることが示唆された。
極小未熟児を対象としたECMO(体外循環による呼吸補助)の研究

未熟児の呼吸不全に対する治療は,人工呼吸管理,肺サ-ファクタント投与等により,著しく進歩したが,体重1000g以下,在胎30週未満の超未熟児は,他の未熟児に比べ今なお高い死亡率を呈し,その多くは肺の未熟に起因する所が多い。又,従来の治療法では生存し得たとしてもいわゆるimtact survivalは少く,多くの障害を残しているのが現状である。我々は,この分野では従来不可能とされてきた,体外循環による呼吸補助の問題点の分析とその可能性を追求し本研究を行った。従来のECMOの問題点を分析し,(1)回路充填量を従来の1/5程度に減少させる必要があること,そのために(2)新らたな方式を導入する必要があること,さらに(3)瞬間的な血液量の動揺を極力抑えた流量の制御,等を検討した。ヘパリンコントロ-ルの問題は今回除外した。回路充填量を小さくするための方法として,シリコンファイバ-人工肺のガス還流部に,酸素運搬能の良いフルオゾ-ル人工血液を還流させ,液ー液方式で2段構えで酸素を運搬させる「Twoーstaged Oxygenation法」を考察した。「TwoーStaged Oxygenation」とすることによって,ガス交換に加え,熱交換も一次的に行うことが可能になり,ECMO回路から熱交換器の分だけ充填量が減少可能となっただけでなく,熱交換器が無い分だけ回路が単純化し,システム全体の小型化,充填量の減少に役立った。具体的な値としては,流量30ml/分の超未熟児用ECMOの回路の充填量が,約30mlで可能となった。動物実験にて従来の方式と比較検討した結果,フルオゾ-ル人工血液の流量を対血流比で20倍とすることにより,酸素,炭酸ガス共充分に運搬され,温度の維持も容易であることが判明した。今後,この「TwoーStaged Oxygenation法」はヘパリンコ-ティング等の導入も含め臨床応用される可能性が充分あると考えられる。体重1kg以下,在胎30週未満の極小未熟児は,従来の呼吸,全身管理では今なお高い死亡率を呈し,又,慢性の呼吸不全として後遺症を残す率が高いいことから,肺が正常な機能を発揮するまでの間,体外循環により肺の機能を代行する意義がある.問題は従来のECMOでは,体外循環そのものが,極小未熟児にとって過大な侵襲であり,単に成人のシステムを小型化すること以上の問題解決を必要とすると考えられることであった.我々は,体外循環を基本的に考え直し,1)従来の膜型肺を可及的に小型化する,2)ガス交換のみでなく熱交換機能も同じ肺のみで可能な構造とする,

(ガス交換のファイバーで熱交換も行う),3)その為に,人工血液等による外循環を加え,2段階潅流方式を基本的な構造とする.等を計画した,さらに4)非ヘパリン化も加え,これらの具体化を図った.今年度は,1)の小型化,小流量超小型ポンプの開発を主に行い,流量30200ml/分,流量の安定化,脱血不良に対する安全装置等ほぼ完成に至った.又,超小型の0.3m^2の膜型肺,人工血液,回路等の設計,購入,組立てを行った. 2),3)の熱交換,2段階潅流方式のガス交換能,動物実験における成果は未だ数値Dataとしては出るに至っていない.定性的な効果,印象としては,極小未熟児でも耐えられ様な,低流量,流量安定した体外循環が可能で,ガス交換,熱交換も得られる事が可能であるという段階まで進行した.この間,小児科領域では以前として,極小未熟児の呼吸不全は問題であり従来の方法では,多少死亡率は改善しているものの,本質的に問題の症例があることが指摘されており,呼吸管理及び,サーファクタント等による治療以上の新しい治療が必要であることは明日になりつつある.本年度は機械が整い,組立完了した段階であるので,今後本格的な実験にとりくむ予定である.体重1kg以下、在胎30周未満のいわゆる極小未熟児は、肺も未熟であり呼吸不全による死亡率が高い。従来の呼吸、全身管理では本質的に未熟な自己の肺にたよっているため今なお高い死亡率を呈し、うまく成長しても慢性の呼吸不全として後遺症を残す率が高い。自己の肺が成長し正常な機能を営めるまでの間、自己肺によらず肺の機能を代行することが出来れば理想的であると考え、種々のECOM(体外循環による呼吸補助)の方法が考えられた。しかし従来の方法では、体外循環そのものが極小未熟児にとって過大な侵襲であり、単に成人のシステムの小型化では根本的な問題解決にならないと考え、今回の研究となった。我々は、体外循環の方式を基本的に考え直し、1)充慎血液量を可及的に小型とし、未熟児の循環血液量(約80ml以下)に比べても充分少量で可能とする事、2)小型にする為に、ガス交換を行う模型肺(ファイバー)にて熱交換も行う、3)これらの為に、人工肺を2個使用した2段階潅流方式を考え、本研究にてこれらの具体化を試みた。今年度は、1)小型小流量用の制御装置の付いたローラーポンプの開発と実験、2)小型模型肺を使用しての実験を行った。ローラーポンプは回路充慎量を少なくする為にローラーヘッド部のみ患児のすぐ側へ置く形とし、流量制御部は離れた位置で操作可能としたが、流量制御、安全装置等一応確認された。模型肺による、ガス交換能、熱交換能は現在検討中であるが、基本的には本方式で目的のガス、熱交換が行え、2段階方式が可能であるとの印象を得た。問題点は、模型肺自体を市販の最小のもの(0.3m^2)よりもさらに小型化する必要がある事、小型化する方がより目的にかなう事が解ったが、模型肺自体を作る事は新らたな多くの問題があり、今後の課題であると思われた事である。前年度までに、想定した基本システムである、2段階潅流方式にのっとり、これに見合う体外循環装置の作製を一応完成させることが出来た。対象としている極小未熟児は、体重が1000g以下で、循環血液量は80100mlであるため、体外循環の条件として、(1)充填量を成人に当てはめて算出した値である約40ml以下を設定した。このため、1ー1回路を短くするために、Roller Head部を保育器内部に設置出来る様分離型とし、操作は外部で行える様にした。1ー2ガス交換のための人工肺は、入手可能なもので、人工血液にてFluid-Fluid型として使える微小孔の無いシリコンファイバ-製0.3m^2人工肺、充填量20ml(泉工医科工業社製)とし、全体で約30mlの充填量で流量30100ml/分の体外循環を可能とした。次に(2)熱交換であるが、経験的に未熟児の体外循環は、放置すればすぐに体温が低下し、全身状態へ重篤な影響を与える。このため2ー1人工肺をFluid-Fluid型とし、外部に人工血液を使用、酸素化と同時に熱交換器としての機能を持たせた。これにより、2ー2熱交換器は不要となり、充填量は上記の通り少量で可能となり、回路は単純なものになった。以上、基本的なシステムはほぼ想定通りとなった。
在宅医療の推進及び介護負担感軽減のための方策の検討

超高齢化社会を迎え、入院患者も増加し、入院でカバーできる病床は限界となっている。そのような状況で、在宅医療、在宅介護の重要性はますます高まっている。介護負担も増しており、負担感を軽減するために、余暇活動の重要性が示唆され、また手厚い介護サポート体制も必要であると考えられた。高齢者総合的機能評価を行い、多職種で情報を効率よく共有することで、入院中から退院時に向けての問題点の対策などを早期に行うことができ効果的であると考えられた。超高齢化社会を迎え、入院患者も増加し、その後の療養先も転院待ちとなったり、入院でカバーできる病床は限界となっている。しかし、在宅医療の現場でも、患者の状態が悪くなると、すぐ急性期病院に入院となったり、人生の最期を在宅で迎える方が、なかなか増えていないのが現状である。また、「終末期医療に関する調査等検討会報告書」においては、終末期を自宅以外で療養したいと希望された方は、「家族への介護などの負担が大きいから」が8割以上を占めていた。患者自身の希望を叶えるようにするためにも、介護負担の軽減は重要であり、介護者の負担感、健康状態の調査、入院回数を減らす(在宅医療の推進)等、介護負担の軽減に関する方策の調査を当院倫理委員会の承認を得て行っている。3年計画の初年度であり、外来通院中の患者に付き添う介護者100人程度に、介護負担感、健康状態の調査を行い、在宅での介護負担を軽減するための方策を検討中である。主評価指標は、EQ-5D、GDS15等を用いた。うつ、QOLに関して興味、不安感、希望、満足感、活気、移動の程度、身の回りの管理、痛み、不快感、普段の活動などを、対象患者の背景については年齢、性、在宅医療を受けていた期間、基礎疾患(脳血管疾患、虚血性心疾患、認知症、癌、整形外科的疾患、褥瘡等)、薬剤の種類、薬剤数、ADL、介護認定状況、デイサービス、ヘルパー等在宅サービス状況、服薬状況などを、介護者についてもさらに、生活習慣病、睡眠、余暇活動などについての調査も行っている。データ収集の継続及び解析により高齢者臨床に大きく貢献すると考えられる。外来通院中の患者に付き添う介護者100人程度に、介護負担感、健康状態の調査を行い、介護認定状況、在宅サービス状況、服薬状況、睡眠、余暇活動などの評価を行い、在宅での介護負担を軽減するための方策の検討を開始できている。3年計画の初年度であり、研究の目的の達成度としてはおおむね順調に進展していると考えられる。しかし、在宅医療の現場でも、患者の状態が悪くなると、すぐに急性期病院へ入院となったり、人生の最期を在宅で迎える方が増えていないのが現状である。患者自身の希望を叶えるようにするためにも、介護負担の軽減は重要であり、介護者の介護負担感、健康状態の調査を行い、在宅医療を推進し、入院回数を減らし、介護負担を軽減するための方策を調査している。当院倫理委員会の承認を得て行っている。3年計画の中間年度であり、介護が必要とされる患者の介護者100人程度に、介護負担感、健康状態の調査を行い、在宅での介護負担を軽減するための方策を検討した。うつ、QOLに関して興味、不安感、希望、満足感、移動の程度、身の回りの管理、痛み、不快感、普段の活動などを、対象患者の背景については基礎疾患(脳血管疾患、虚血性心疾患、認知症、癌、整形外科的疾患、褥瘡等)、薬剤の種類、薬剤数、ADL、介護認定状況、デイサービスやヘルパー等の在宅サービス状況、服薬状況などを、介護者についてもさらに、生活習慣病、睡眠、余暇活動などについての調査も行った。調査、検討の結果、余暇活動の重要性が示唆され、また手厚い介護サポート体制も必要であると考えられた。介護者自身のQOL向上のためにも、休養期間や他にサポートできる所がないか、常に相談できる環境整備が求められる。介護が必要とされる患者の介護者100人程度に、介護負担感、健康状態の調査を行い、介護認定状況、在宅サービス状況、服薬状況、睡眠、余暇活動などの評価を行い、在宅での介護負担を軽減するための方策の検討を行うことができている。3年計画の中間年度であり、研究の目的の達成度としてはおおむね順調に進展していると考えられる。

また、「終末期医療に関する調査等検討会報告書」においては、終末期を自宅以外で療養したいと希望された方は、「家族への介護などの負担が大きいから」が8割以上を占めていた。患者自身の希望を叶えるようにするためにも、介護負担の軽減は重要であり、介護者の介護負担感、健康状態の調査を行い、在宅医療を推進し、入院回数を減らし、介護負担を軽減するための方策を調査している。最終年度であり、入院患者が退院し、在宅に戻る時に、少しでも在院日数短縮、再入院の減少、患者や家族のQOL向上、介護負担を軽減するための方策として、高齢者総合的機能評価(CGA)について評価した。CGAでは次の項目を評価した。構成要素であるADLは二つあり、それぞれ基本的ADL(食事、排泄、更衣、入浴など)、もう少し高度なIADLである手段的ADL(電話の使い方、買い物、食事の支度、家事、洗濯、移動・外出、服薬の管理、金銭の管理)、認知機能、抑うつ、介護環境、経済状態などである。認知機能はMMSE、抑うつはGDS-15で評価した。CGAを評価し、CGAカンファランスを実施することにより、多職種で情報を効率よく共有でき、入院中から退院時に向けての問題点の対策などを早期に行うことができた。患者さんやご家族の疑問を解決したり相談にのることが、多職種で円滑にできるようになり、在院日数も短縮した。入院前の状況から、入院の経緯、入院後の加療、退院に向けてなど、全体的に共有する必要性があると考えられた。超高齢化社会を迎え、入院患者も増加し、入院でカバーできる病床は限界となっている。そのような状況で、在宅医療、在宅介護の重要性はますます高まっている。介護負担も増しており、負担感を軽減するために、余暇活動の重要性が示唆され、また手厚い介護サポート体制も必要であると考えられた。高齢者総合的機能評価を行い、多職種で情報を効率よく共有することで、入院中から退院時に向けての問題点の対策などを早期に行うことができ効果的であると考えられた。平成28年度はデータ収集が終了し、解析を行うことである。在宅医療を受けている患者の家族100人程度に施行した、介護負担感についての調査結果の解析を行う。介護負担感に関連する因子の同定を行い、その結果を踏まえ、フィードバックする。例えば、余暇活動時間を増やすようにする等。在宅医療を受けている高齢者に関して、在宅死及び病院死群、在宅治療及び入院治療群に分け、在宅死に関与する因子の検討、合わせて在宅での治療に関与する因子の検討を行う。平成29年度は、解析結果に基づくフィードバックを行い、再評価することである。介護が必要とされる患者の家族に施行した、介護負担感についての調査結果のフィードバックを行う。介護負担感に関連する、介護者自身の余暇活動や、手厚い介護サポート体制に関するフィードバックを行い、効果を検証する。老年医学
バーサ戯曲の文献学的、ならびにパフォーマンス的研究 ～バーサを訳して上演する～

バーサ作のサンスクリット戯曲の特徴を翻訳研究として考察するなかで、バーサ戯曲の独創性と魅力はその短編性とナラティヴの相対化にあると理解される。それは見る側、演じる側の想像力に訴え、解釈の大いなる自由をゆだねる。そして、実際に、『打ち砕かれた腿』を脚本化するプロセスでその醍醐味を体験的に確認できた。最終的には、演出家シャンカル・ヴェーンカテーシュワランとの共同作業により、実験的なヴォイス・パフォーマンス『百と一の子守唄』としてインドで上演して好評を博した。1.6月交付快定後演出家シヤンカル・ヴェーンカテーシュワラン氏に協力要請、快諾を得る。2.バーサ関係文献収集の開始3.インド・フールドワーク(平成22年11月23日12月6日)*シャンカル氏(トゥリチュール)と集中的な意見交換の結果、戯曲候補としては短編『打ち砕かれた腿』『カルナの任務』そして長編『潅頂式』に絞る。*上演経費の制約により、複数の登場人物がいるこれらめ戯曲へ「一人芝居」などの演出工夫が不可欠であること、またインド人役者の招聘も一人の場合のみ可能であることも確認*招聘候補の一人であるクーリーヤーッタム役者Sooraj氏を訪ね、メイクなしでの演目『カイラーサ山を持ち上げる』を観劇。すばらしい表現力に驚く。*ケーララ大(トリヴァンドラム)写本図書館を訪問、バーサ戯曲写本オリジナルを閲覧。*バーサ戯曲のTSS刊本全巻のフォトコピーを依頼し、大部分を入手。(未入手分は後日郵送を依頼)*演出家マネークシヨウ(ボンベイ)を訪ね、演出アイデアの助言を得る。4.まつもと市民芸術館との話し合い簑島祐二支配人と数回にわたり、上演に関しての協力・提携を打診した。その結果、2012年9月最終週に小ホールにての一般公演に関して基本的に全面的協力を取り付ける。ただし、芸術館レジデントとの提携の可能性やホール予約などは新年度になり、芸術館のスケジュールが決定後に改めて話し合うことになった。(1)上演作品候補の『ウールバンガ』『カルナの任務』を中心に、翻訳作業、文献研究を進めた。新たに2種のバーサ新英訳(K.P.A Menon訳1996ならびにAndrew Skilton訳2009)も入手した。(2)まつもと市民芸術館簑島祐二支配人より平成23年度をもって支配人を辞した旨の連絡があり、芸術館との提携、協力は白紙に戻った。(3)インド・フィールドワーク(平成24年3月15日31日)*ケーララ大学(トリヴァンドラム)写本図書館再訪、バーサ関係写本閲覧。*演出家シャンカル・ヴェンカーテシュワラン氏(トリシュール)と集中的な意見交換。以下の諸点を確認した。(i)上演演目を『ウールバンガ』と最終決定(ii)具体的な演出アイデアに関しての協議の結果、主役を盲目の王妃ガーンダーリーとし、その視線によって『ウールバンガ』を語らせる一人芝居とする。(iii)演技派女優マンダーキニー・ゴースワーミを採用(iv)本務との関係で、上演は、平成24年9月最終週、インド(リヴァンドラム/バンガロール)とする。(v)演出は、シンプルな現代解釈とし、したがってBGMも現代音楽とし、特にエリック・サティー的なメロディーが演出家のリクエストである。音楽担当の船津恵美子氏が舞台上でキーボード演奏をする。(vi)脚本化と同時進行的に稽古は開始、音合わせは9月の訪印。それまでは密なコミュニケーションにより、脚本、リハの映像、作曲ピースの録音資料などを頻繁に交換し、進捗状況を確認しつつ双方で上演作業を進める。(1)最終年度の最大の課題は、研究目的「バーサを訳して上演する」における「上演する」の実現であった。2012年3月に訪印し、研究協力者である演出家シャンカル・ヴェーンカテーシュワラン氏との集中的な協議の結果、上演するバーサ戯曲を『打ち砕かれた腿』("Urubhanga")とし、上演時期を2012年9月、上演場所をインド、ケーララ州トリシュール市とし、演技派インド人女優マンダーキニー・ゴースワーミ氏による一人芝居と決め、脚本化の作業を進めた。(2)バーサ劇翻訳研究の課題の一つは、現代演劇人が惹かれるバーサ劇の革新性、独創性の分析であったので、脚本化の過程においては原作『打ち砕かれた腿』のバーサ的特異性を抽出し、おそらくは、サンスクリット劇初の試みのヴォイスパフォーマンスとしてのモノドラマ『百と一の子守歌』("101 Lullabies")を共同創作した。

(3)原作『打ち砕かれた腿』は、扱うエピソードそのものは『マハーバーラタ』から採るものの、主題は通常の解釈では悪玉ドゥルヨーダナを悲劇の主人公とし、父王と母ガーンダーリー、側室、創作した息子を登場させ、善と悪を逆転させるとともに、新鮮な解釈を可能とする余地を創出していると理解した。その委ねられた解釈の一つのとして、悲運の母ガーンダーリーの絶望、呪詛、救済の物語と、原作を解釈し、モノドラマということで原作でも少ないガーンダーリーの台詞を極限まで押さえ、船津恵美子のキーボードによる音楽との即興的コラボとした。(4)2012年9月22日、トリシュール市ケーララ州立サンギート・ナータック・アカデミー・スタジオにて一般公開の形で上演し、好評を博した。観客数約150名。制作:船津和幸、演出:S.ヴェーンカテーシュワラン、出演:M.ゴースワーミー、音楽:船津恵美子。なお、上演記録としての映像をDVD版で制作中である。上演戯曲を『ウールバンガ(打ち砕かれた腿)』と決定したため、翻訳作業、文献研究は着実に進めているが、上演で全面的な協力を期待していたまつもと市民芸術館の支配人が異動となり、松本公演を断念せざるをえなくなった。演出家ヴェーンカテーシュワラン氏との頻繁な意見交換の結果、インド人女優の一人芝居としてインド上演と変更したため、すべての構想が振り出しに戻ったためである。24年度が最終年度であるため、記入しない。(1)かなりタイトな時間的制約、経費的制約のもとで、平成24年9月のインド上演が最優先事項である。(i)『ウールバンガ』翻訳に準拠しつつ、ガーンダーリー一人芝居仕様の脚本(英語版)をヴェーンカテーシュワラン氏との共同制作で完成させる。(ii)同時進行的にインドではマンダーキニー氏との稽古(8月からトリシュールにおいて本格的リハ入り)(iii)音楽担当船津恵美子氏は、『ウールバンガ』の情景をイメージして、作曲ピースを書きためる。9月頭には渡印、リハに合流し、確定していく。(2)上記、インド上演のプロセスと成果を踏まえ、翻訳、脚本を含む総合的な論文化は、平成24年度末までに完了させる予定である。
2次元マイクロ凹面鏡アレイとケーラー照明による単一細胞2次元アレイ操作技術の開発

平成30年度は,2次元アレイ凹面鏡とマイクロ囲い構造を組み合わせたチップの製作方法の開発を目標とした.これまでマイクロ囲い構造の製作には半導体プロセス(リソグラフィとドライエッチング)を用いてきたが,広く応用展開するには,研究者自身がテーブルトップで必要な数だけチップを製作できればたいへん効率的である。したがって,なるべく簡便に製作可能な方法の確立を目指した。具体的には,当初予定していたSi基板を用いて,電子線レジストZEP520にEBリソグラフィにより形成した直径数マイクロメートル程度のアレイ状の円形開口のエッチングマスクパターンを用いて,XeF2気相エッチング装置でSi基板の等方性エッチングを行い,数10マイクロメートルの半球形状のマイクロ凹面鏡を形成する方法の代わりに,よりシンプルに製作できる方法を採用した.具体的には,レーザー露光装置によりフォトレジストで2次元アレイマイクロ凹面鏡とマイクロ囲い構造を組み合わせた構造を形成し,その後Niメッキでモールドを製作し,これを基に樹脂へとパターン転写した.その後,金属薄膜をコーティングして反射率を向上させた.この樹脂への転写プロセスは机上で簡単に実施できる方法である.また,この方法では,凹面鏡の形状を球面以外の面とすることも容易であり,集光特性の制御に有利である.実際に,2種類の凹面の鏡を製作し,集光特性の違いを確認している.このチップをケーラー照明下におき,凹面鏡の集光特性を確認し,酵母懸濁液中で複数の酵母細胞を焦点位置に捕獲している兆候を捉えることができた.今年度は,レーザーリソグラフィ装置でフォトレジスト上に直接描画することで半球形状のマイクロ凹面鏡構造を形成した後,メッキにより凹面鏡製作のためのNiモールドを製作した.これを用いて樹脂に転写して球面鏡などのマイクロ凹面鏡を形成した.直径50100マイクロメートルのマイクロ凹面鏡を金属顕微鏡のケーラー照明下で観察したマイクロ凹面鏡の様子は,凹面上部(基板表面),焦点位置,凹面底部で特徴をもって観測された.集光点とみられる位置では,異なる形状の凹面鏡でそれぞれの特徴を示した集光スポットを観察することができ,本手法で製作した凹面構造が,マイクロ凹面鏡としての集光機能を有することがわかった.また,本マイクロ凹面鏡構造表面にAl薄膜を蒸着及びスパッタプロセスにより成膜し,樹脂表面よりも反射率を向上できることも確認した.XeF2気相エッチングではエッチング面の粗さが大きいが,本手法ではより平滑な凹面鏡表面が得られており,集光効率が改善されている.マイクロ凹面鏡の製作及び形状制御については,本研究の計画の通りの成果が概ね得られたと考えられる.令和元年度は,単一細胞2次元アレイトラップチップの製作技術と液体定在波による収集方法の融合に関する研究を予定している.細胞の収集・単一捕獲・アレイ状操作の連続プロセスの実証を目標とする。捕獲した細胞を垂直振動により運動させ,振動数や振幅と集光パワー等に最適条件の実現可能な解を総合的に探索する.石英ビーズ等で原理実験を行った後,酵母を用いて実際の使用環境における検証を行う予定である.単一細胞操作は,創薬・医療分野や細胞の機能の解析への応用では重要な要素技術となる。これまでに,マイクロピラーアレイ構造のマイクロ囲いを開発し,大腸菌や酵母の単一細胞分離及びサイズ分離に成功した.この単一細胞分離構造にマイクロ凹面鏡を組み合わせれば,光でトラップする細胞操作機能も加えることが期待できると考えている.そこで29年度の研究では,XeF2気相エッチングによるSiマイクロ凹面鏡の製作を行った.実験にはSi(100)基板を用いた。電子線レジストZEP520にEBリソグラフィにより形成した直径5マイクロメートル以下のアレイ状の円形開口のエッチングマスクパターンを用いて,自作のXeF2気相エッチング装置でSi基板の等方性エッチングを行い,直径40マイクロメートルの半球形状のマイクロ凹面鏡を形成した.金属顕微鏡のケーラー照明下で観察したマイクロ凹面鏡の様子は,凹面上部(基板表面),焦点位置,凹面底部で特徴をもって観測された.集光点とみられる位置では,表面や底面とは明らかに異なる集光スポットを観察することができ,本手法で製作したSi凹面構造が,マイクロ凹面鏡としての集光機能を有することがわかった.また,本マイクロ凹面鏡構造表面にAl薄膜をスパッタにより成膜し,Si基板表面よりも反射率を向上させることを確認した.XeF2気相エッチングではエッチング面の粗さが大きいが,平滑化プロセスについても検討を行っている.また,2段階エッチングによる凹面形状の制御を行い,本手法により放物面形状の製作が可能であることであることもわかった.さらなる集光効率の向上ができれば,生物学的な分析研究にも応用可能になると考えらえる.今年度は,自作のXeF2気相エッチング装置でSi基板の等方性エッチングを行い,半球形状のマイクロ凹面鏡を形成した.直径40マイクロメートルのマイクロ凹面鏡を金属顕微鏡のケーラー照明下で観察したマイクロ凹面鏡の様子は,凹面上部(基板表面),焦点位置,凹面底部で特徴をもって観測された.集光点とみられる位置では,表面や底面とは明らかに異なる集光スポットを観察することができ,本手法で製作したSi凹面構造が,マイクロ凹面鏡としての集光機能を有することがわかった.また,本マイクロ凹面鏡構造表面にAl薄膜をスパッタにより成膜し,Si基板表面よりも反射率を向上させることも確認した.

XeF2気相エッチングではエッチング面の粗さが大きいが,平滑化プロセスについても実験を行っている.また,2段階エッチングによる凹面形状の制御を行い,本手法により放物面形状の製作が可能であることであることもわかった.現在,集光効率の改善を検討・実施中であり,粒子の捕獲には現時点では未実施であるものの,マイクロ凹面鏡の製作及び形状制御については,本研究の計画の通りの成果が概ね得られたと考えられる.平成30年度は,2次元アレイ凹面鏡とマイクロ囲い構造を組み合わせたチップの製作方法の開発を目標とした.これまでマイクロ囲い構造の製作には半導体プロセス(リソグラフィとドライエッチング)を用いてきたが,広く応用展開するには,研究者自身がテーブルトップで必要な数だけチップを製作できればたいへん効率的である。したがって,なるべく簡便に製作可能な方法の確立を目指した。具体的には,当初予定していたSi基板を用いて,電子線レジストZEP520にEBリソグラフィにより形成した直径数マイクロメートル程度のアレイ状の円形開口のエッチングマスクパターンを用いて,XeF2気相エッチング装置でSi基板の等方性エッチングを行い,数10マイクロメートルの半球形状のマイクロ凹面鏡を形成する方法の代わりに,よりシンプルに製作できる方法を採用した.具体的には,レーザー露光装置によりフォトレジストで2次元アレイマイクロ凹面鏡とマイクロ囲い構造を組み合わせた構造を形成し,その後Niメッキでモールドを製作し,これを基に樹脂へとパターン転写した.その後,金属薄膜をコーティングして反射率を向上させた.この樹脂への転写プロセスは机上で簡単に実施できる方法である.また,この方法では,凹面鏡の形状を球面以外の面とすることも容易であり,集光特性の制御に有利である.実際に,2種類の凹面の鏡を製作し,集光特性の違いを確認している.このチップをケーラー照明下におき,凹面鏡の集光特性を確認し,酵母懸濁液中で複数の酵母細胞を焦点位置に捕獲している兆候を捉えることができた.今年度は,レーザーリソグラフィ装置でフォトレジスト上に直接描画することで半球形状のマイクロ凹面鏡構造を形成した後,メッキにより凹面鏡製作のためのNiモールドを製作した.これを用いて樹脂に転写して球面鏡などのマイクロ凹面鏡を形成した.直径50100マイクロメートルのマイクロ凹面鏡を金属顕微鏡のケーラー照明下で観察したマイクロ凹面鏡の様子は,凹面上部(基板表面),焦点位置,凹面底部で特徴をもって観測された.集光点とみられる位置では,異なる形状の凹面鏡でそれぞれの特徴を示した集光スポットを観察することができ,本手法で製作した凹面構造が,マイクロ凹面鏡としての集光機能を有することがわかった.また,本マイクロ凹面鏡構造表面にAl薄膜を蒸着及びスパッタプロセスにより成膜し,樹脂表面よりも反射率を向上できることも確認した.XeF2気相エッチングではエッチング面の粗さが大きいが,本手法ではより平滑な凹面鏡表面が得られており,集光効率が改善されている.マイクロ凹面鏡の製作及び形状制御については,本研究の計画の通りの成果が概ね得られたと考えられる.30年度に予定している2次元アレイ凹面鏡とマイクロ囲い構造を組み合わせたチップの製作方法の開発については,上記手法とマイクロ囲いアレイを用いたサイズ毎の単一細胞分離の融合を目標とし,メッキとレプリカ製作による量産化手法について検討する.
インフルエンザパンデミック時の抗ウイルス薬と抗生物質の使用に関する流域リスク管理

抗ウイルス剤、特に抗インフルエンザウイルス剤のタミフルは、日本政府の主導の下、全世界の生産量の9割近い量を日本が備蓄しており、同薬に対する耐性ウイルスの蔓延による治療の妨害についても近年関心が高まっている。また、もともと生物生理活性を有する抗ウイルス剤が、パンデミック時に、短期間に大量に環境へ放出された場合、水生生物への影響が懸念されるとともに、環境への主要経路である下水道における生物処理へ影響を及ぼし、抗ウイルス剤の環境への排出量増加だけではなく、ウイルスを含む病原性微生物の蔓延が懸念される。本研究の目的は、パンデミック時における抗ウイルス剤および同時使用が予想される抗生物質の環境への影響について評価するとともに、人や水生生物への影響が確認される場合、下水処理場などの既存施設等による対策を提案するものである。平成23年度(2011年4月から9月)は、以下の検討を行った。バッチ試験の結果、浄水処理で行われている凝集、凝固、沈殿、砂ろ過、塩素消毒工程では、抗インフルエンザウイルス剤の除去はできず、浄水処理で推奨されている紫外線照射(4080mJ/cm2)においても抗インフルエンザ薬の除去はできなかった。一方、オゾン処理については、パンデミック時に想定される浄水原水中の抗インフルエンザウイルス剤(タミフル主成分のOP、その分解産物のOC、他の抗インフルエンザ薬であるアマンタジン(AMN))の濃度に対し、1.2mg/Lのオゾン注入量により、90%以上の除去が達成できることが示された。さらに、粉末活性炭を用いた凝集・凝固についても検討を行った。その結果、浄水処理で一般的に投入されている粉末活性炭量(50mg/L以上)により、前述のパンデミック時に想定される浄水原水中の抗インフルエンザ薬が効果的に除去されることが確認された。固着酸化チタンによる光触媒分解法の検討として、TiO2をガラス表面へ固着する方法について検討を行った。本研究の目的は、パンデミック時における抗ウイルス剤および抗生物質の水環境への流出による影響評価と、ヒトの健康や生態系へのリスクを低減し、かつ水道事業の安全性を確保するために有効な既存の水処理方法の解明である。平成21年度は、環境中に極微量に存在する抗ウイルス剤(タミフル代謝物(OC)やアマンタジン(AMT))や抗生物質の分析法を改良するとともに、各国の環境中で存在が確認されつつある他の抗ウイルス剤(rimantadine)についても分析方法の検討を行った。確立した方法を用い、2009年11月から2010年3月までの間に、京都府および滋賀県内の下水処理場においてOCとAMTの存在実態調査を実施した。調査の結果、下水処理場の流入下水からOCが140460ng/L、AMTが184538ng/L検出され、一次処理(沈澱処理、除去率はそれぞれ2.18.5%、6.717%)や二次処理(生物処理、2037%、<20%)では十分に除去できないことが分かった。一方、二次処理後にオゾン処理を行っている下水処理場では、これらの成分について90%以上の除去率が確認された。このことから、インフルエンザ流行期に懸念される抗ウイルス剤の水環境中での蔓延に対し、オゾン処理が有効であることが確認された。さらに、本年度はOCとAMTの水環境中における存在実態についても調査を行った。本研究により、世界で初めてOCとAMNの下水処理過程における挙動と除去能が確認され、今後これらの成分の環境への排出量の予測が可能になるであろう。さらに、今後、これらの抗ウイルス剤の水生生物への毒性との比較から、インフルエンザ流行期における水生生物への影響についても理解し、その影響を軽減するための対策立案に有効であろう。抗ウイルス剤、特に抗インフルエンザウイルス剤のタミフルは、日本政府の主導の下、全世界の生産量の9割近い量を日本が備蓄している。タミフルの服用による若年層の異常行動が新聞等でとりざたされているが、同時に同薬に対する耐性ウイルスの蔓延による治療の妨害についても近年関心が高まっている。また、もともと生物生理活性を有する抗ウイルス剤が、近い将来発生が予想されているパンデミック時に、短期間に大量に環境へ放出された場合、水生生物への影響が懸念されるとともに、環境への主要経路である下水道における生物処理へ影響を及ぼし、抗ウイルス剤の環境への排出量増加だけではなく、ウイルスを含む病原性微生物の蔓延が懸念される。平成22年度は、下水および河川水中の抗ウイルス剤と抗生物質の分析方法を確立した。確立した方法を用い、規模の異なる下水処理場と河川における抗ウイルス剤と抗生物質の存在実態の把握、生分解および吸着特性、高度処理(オゾンや促進酸化処理)の有効性について検討を行った。今後、光分解など他の処理方式についても検討を進めるとともに、調査対象流域に高度処理等の有効的な処理方式を導入した際、パンデミック時に流域への抗ウイルス剤や抗生物質の負荷量をどのように低減できるかについて、定量的な評価を行う。

また、もともと生物生理活性を有する抗ウイルス剤が、パンデミック時に、短期間に大量に環境へ放出された場合、水生生物への影響が懸念されるとともに、環境への主要経路である下水道における生物処理へ影響を及ぼし、抗ウイルス剤の環境への排出量増加だけではなく、ウイルスを含む病原性微生物の蔓延が懸念される。本研究の目的は、パンデミック時における抗ウイルス剤および同時使用が予想される抗生物質の環境への影響について評価するとともに、人や水生生物への影響が確認される場合、下水処理場などの既存施設等による対策を提案するものである。平成23年度(2011年4月から9月)は、以下の検討を行った。バッチ試験の結果、浄水処理で行われている凝集、凝固、沈殿、砂ろ過、塩素消毒工程では、抗インフルエンザウイルス剤の除去はできず、浄水処理で推奨されている紫外線照射(4080mJ/cm2)においても抗インフルエンザ薬の除去はできなかった。一方、オゾン処理については、パンデミック時に想定される浄水原水中の抗インフルエンザウイルス剤(タミフル主成分のOP、その分解産物のOC、他の抗インフルエンザ薬であるアマンタジン(AMN))の濃度に対し、1.2mg/Lのオゾン注入量により、90%以上の除去が達成できることが示された。さらに、粉末活性炭を用いた凝集・凝固についても検討を行った。その結果、浄水処理で一般的に投入されている粉末活性炭量(50mg/L以上)により、前述のパンデミック時に想定される浄水原水中の抗インフルエンザ薬が効果的に除去されることが確認された。固着酸化チタンによる光触媒分解法の検討として、TiO2をガラス表面へ固着する方法について検討を行った。
多波長発光有機EL素子の研究

有機ELディスプレイの開発の一環として,多波長発光(白色)有機EL素子について研究を行った。素子の白色化には,(A)ホストに1種類のゲスト分子を添加する方法,(B)異なる発光波長をもつ2種類以上のゲストを共添加する方法,(C)異なる発光波長を示す2つ以上の発光層を積層する方法,が考えられる。この3方法について,有機EL素子を用いる場合と,ガラス基板に蒸着またはスピンコートした単層薄膜を用いる場合の両者について,吸収発光スペクトル測定およびエリプソメトリ測定などを10-300Kの温度範囲で行った。A方法として,緑色発光Ir(ppy)_3をCBPやTPDやポリスチレンに添加したものや,赤色発光PtOEP,青色発光TPDを添加したものを用いた。燐光分子では,燐光以外に短波長側に蛍光を低温で観測した。しかし強度は燐光に比べて弱い。強度を上げるために最低三重項準位T_1のエネルギーの異なるホスト分子を用いた実験を行い,強度の増加を得た。TPDやCBPのような蛍光分子ゲストの場合,燐光を低温で観測しその強度を上げるためにホストの選択に工夫を行った。B方法として,TPDホストにIr(ppy)_3とPtOEPを共添加して調べ,それぞれの強度は,それぞれの濃度比率とホスト材料と温度に強く依存することが明らかになった。量子力学を用いて定量的解析を行い,実験結果を説明することができ緩和発光過程を明らかにした。C方法として,赤色発光層と青色発光層を隣り合うように積層した有機EL素子について調べた。ホストは同一の蛍光分子を用いた。それぞれの発光強度が,ITO電極側近くに赤青いずれの層を積層するかにより,また膜厚により,異なることを観測した。その理由について解析を行った。実験結果に基づいて定量的解析を行うことにより,高効率白色有機EL素子開発への指針が得られた。有機EL素子の発光材料として最近燐光体が注目されている.一重項励起子を発光に用いる蛍光体に比べて,生成の割合がそれより3倍も大きい三重項励起子を発光に用いる燐光体に高い輝度が期待されるからである.しかも,生成された励起子をすべて発光に用いることができる可能性を燐光体が含んでいるからである。有機燐光体として白金イオンが有機錯体の中心にあるPtOEP分子を用い,PtOEP発光層をもつ多層構造有機EL素子の光学特性を調べた.また,イリジウム錯体Ir(ppy)_3を発光層にもつ素子についても調べた。前者については,CBPホスト分子にドープされたPtOEP分子を発光層にもつもの(Pt2素子)と,ホストにドープしないPtOEPのみの発光層のもの(Pt5素子)との2種類の有機EL素子について実験を行った.Pt2およびPt5はPt2:ITO/α-NPD(55nm)/7wt%PtOEP:CBP(33nm)/BCP(10nm)/Alq_3(60nm)/LiF/Al.,Pt5:ITO/α-NPD(60nm)/100%PtOEP(45nm)/BAlq(20nm)/Alq_3(55nm)/LiF/Alの構造をもつ.前者のゲスト-ホスト発光層からのELでは,PtOEP分子の650nmEL発光のみが観測された.

この赤色単色ELに対し,後者のゲスト-ホスト発光方式を用いない素子では650nmPtEOP発光のほかに,570nm,530nmおよび490nmEL発光が観測され,多波長EL発光(白色EL)が見られた.Pt5素子のフォトルミネッセンスやEL過渡時間反応実験から,570-490nm発光は燐光ではなく寿命の短い蛍光であり,Alq_3電子輸送層からの発光であると断定された.これはBAlq正孔阻止層を通り抜けた正孔がAlq_3層にまでしみ込んだために,PtOEP発光に加えたAlq_3発光が起ったものと考えられた.有機EL素子の発光材料として最近注目されている燐光材料を用い、光励起発光を10-300Kの温度範囲にわたって調べた。有機燐光材料をゲストにして種々のホスト材料にドープした薄膜を作り、発光強度の温度変化からゲストーホスト間のエネルギー伝達を明らかにした。燐光材料としてイリジウム錯体Ir(ppy)_3や白金錯体PtOEPを選び、ホストとしてCBP, TPDなどの蛍光材料を選んだ。ホスト分子励起により多波長発光の白色発光が観測された。励起波長により発光強度の温度変化が、ゲスト分子のみならずホスト分子においても異なることが見つけられた。これらの現象は、ホストの最低三重項状態準位がゲストの最低三重項状態準位より高いエネルギー値を取るか否かによって大きく変わる。Ir(ppy)_3とPtOEPを共存させたTPDホストの場合、前者から後者へのエネルギー伝達が起こるが、その逆過程は起こらなかった。燐光分子の最低三重項状態準位が3つの準位から成り立っており、それらの間でphononの放出吸収の緩和と、さらにホストーゲスト間のphonon吸収放出を伴うエネルギー伝達を仮定すると、発光寿命と発光強度の温度変化それぞれについて実験データと一致する計算結果が得られた。有機EL素子に関しては、CBPホスト分子にドープされたPtOEP分子またはIr(ppy)_3を発光層にもつものとの2種類について電荷注入発光(EL)と光励起発光(PL)の実験を行った。α-NPD正孔輸送層からのEL発光がゲスト分子からの発光に加えて観測されたが、CBPホストからの発光は観測されなかった。CBPホストは注入された電子と正孔をゲスト分子に運ぶ役目をし、ホスト自身が励起子を作らないと解釈された。即ち、薄膜でのPLの場合と違ってEL素子ではホストからのエネルギー伝達の割合が少ないと考えられた。蛍光材料燐光材料を用いた白色有機EL素子の研究に取り組んだ。PtOEPを含む各種低分子の光学特性を実験的に調べ,実験データについて理論的解析を行い,発光機構を明らかにした。材料評価には,石英板またはガラス基盤に真空蒸着した薄膜を用いて吸収スペクトルや発光スペクトルや蛍光寿命などの光学的測定を行った。試作した素子は3つのタイプである。1つは透明電極ITO陽極側に近い方に青色発光層,続いて赤色発光層を蒸着するAタイプである。もうひとつは,ITO陽極側に近い方に赤色発光層を付けその隣に青色発光層を蒸着するタイプで,Aタイプとは逆転した蒸着のBタイプである。さらに,赤色発光分子と青色発光分子をひとつのホストにドープする単一発光層を用いるCタイプ素子について研究した。Aタイプ素子では,青色発光が赤色発光の約2倍の強度をもつエレクトロルミネッセンス(EL)が得られ,7V電圧で約2000cd/m^2の輝度を得た。印加電圧や注入電流による色変化は観測されなかったが,3V以下ではスペクトル変化が観測された。Bタイプ素子では,青色発光層と赤色発光層の両者をいろいろな膜厚で調べた。赤色発光層の膜厚が大きいと赤色発光が顕著であり,小さくするにつれて青色発光が増加した。
転写と共役したDNA修復とmRNAスプライシングとの連携の解析

これまでに我々は、in vitroスプライシング反応系を用いたスプライシング後のラリアットイントロンRNA-タンパク質複合体の解析から、イントロンの代謝に関わる因子群の候補中にhPRP19やXab2といった、転写と共役したDNA修復(Transcription coupled DNA repair,TCR)機構に関わる因子群を同定した。また、これらの因子がイントロンの代謝因子hDBR1と会合していることも見いだした。このことは、真核生物の核内におけるスプライシング機構と、転写と共役したDNA修復機構との新たな連携を強く示唆している。しかし、in vitroにおける解析系がないため、TCRの機構についてはほとんど解析されていない。そこで本研究では、転写と共役したin vitroスプライシング反応系に損傷の入った鋳型DNAを用いることで、細胞内でのTCRを模擬したin vitro反応系を構築し、その系を用いたTCR機構の解明を目指した。転写の鋳型として、効率よくスプライシングが起こることが知られているβ-globin,δ-crystallin,Adeno virus MLP各遺伝子の二つのエクソンとその間のイントロンを含む領域をCMV promoterの下流にクローニングした。そしてCMV promoterを付けた形で増幅した断片をin vitroでの共役系の鋳型として用いる際、psolarenを結合させたoligonucleOtideを鋳型に対合させることにより、その部分で転写が停止する系を構築した。これらの鋳型をHeLa細胞核抽出液と混合し、反応を行ったところ、目的の位置で転写を停止させることができた。また、鋳型をビーズ上に固定化して反応を行い、転写、スプライシングが起こることを確認することで、鋳型DNA上に形成された複合体を回収できる系を構築した。これまでに我々は、in vitroスプライシング反応系を用いてスプライシング後のラリアットイントロンRNA複合体の解析から、イントロンの代謝に関わる因子群の候補中にhPRP19やXab2といった、転写と共役したDNA修復(Transcription coupled DNA repair,TCR)機構に関わる因子群を同定した。また、これらの因子がイントロンの代謝因子hDBRIと会合していることも見いだした。これらのことは、真核生物の核内におけるmRNAスプライシング機構と、転写と共役したDNA修復機構との新たな連携を強く示唆していた。そこで本研究では、転写と共役したin vitroスプライシング反応系に損傷の入った鋳型DNAを用いて、細胞内でのTCRを模擬したin vitro反応系を構築することで、TCR機構の解明を目指している。β-globin, δ-crystallin, Adeno virus MLP遺伝子の二つのエクソンとその間のイントロンを含む嶺域をPCR法により増幅し、CMV promoterを持つプラスミドにグローニングした。そしてCMV promoterを付けた形で増幅した断片をin vitroでの共役系の鋳型として用いた。これらの鋳型をHeLa細胞核抽出液と混合し、反応を行ったところ、目的の大きさのmRNA前駆体の転写や、その後のスプライシングによって産生されたmRNAを観察することができた。また、同時にこれらのmRNAを最初からイントロンを除いた形で発現する鋳型も同時に構築し、in vitroでの共役系でmRNAの発現が確認できた。また、より複雑な系での解析を目指し、三つのエクソンとその間の二つのイントロンを含む鋳型を、β-globin,δ-crystallin遺伝子を用いて構築した。
肺塞栓症における新しい診断マーカーの開発

われわれは.人工膝関節置換術(TKA)を施行する患者に於いてターニケット使用群,非使用群にわけて血小板及び白血球の活性化,凝集反応の違いの検討を行ってきた。検体はとう骨動脈から動脈血採血及びIVHカテーテルから下大静脈血採血を行い。採血時期は術前,術中(ターニケット使用中),術直後(ターニケッット解除後),術後8時間,24時間行った。in vitro下でアゴニストにより凝集反応を惹起,全血血小板凝集装置を用いて凝集能の経時的変化を見た。その結果,どちらも静脈血側において術後凝集反応促進をみとめ,特にターニケット使用群において術後強い凝集促進を示した。さらに血小板が活性化されたときにおこる血小板放出反応を調べるためにELISA法を用いてβ-トロンボグロブリン(β-TG)や,Platelet factor4(PF4),可溶性CD40Lもあわせて調べたが,これらの値も静脈血側において術後有意に上昇を認め,PF4と可溶性CD40Lはターニケット非使用群に比べ使用群において有意に上昇を認めた。術中ターニケット使用群において動脈側より中心静脈側で血小板及び白血球の活性化の上昇,凝集反応促進がおきていれば,肺循環において凝集塊がトラップされたということを意味し,血栓形成および肺塞栓の発症の可能性を示唆する。われわれはさらに肺梗塞の原因となる好中球血小板凝集塊(Leucocyte-Platelet Conjugate)は白血球と血小板のクロストークによりお互いが活性化され生じる事を証明するためにTKA手術においてターニケット使用による血小板活性及び白血球活性の上昇及びLeucocyte-Platelet Conjugateの上昇を証明した。フローサイトメトリ法を用いてLeucocyte-Platelet Conjugate上の血小板活性を示す細胞(CD14^+CD62P^+cell,CD14^+CD154^+cell),単球活性を示す細胞(CD14^+CD116^+cell,CD14^+CD142^+cell)それぞれについて測定を行い,好中球よりも単球上における有意な活性化を認めた。人工膝関節置換術(TKA)を施行する患者に於いてターニケット使用群、非使用群にわけて血小板及び白血球の活性化,凝集反応の違いを検討した。検体はとう骨動脈から動脈血採血及びIVHカテーテルから下大静脈血採血を行った。採血時期は術前、術中(ターニケット使用中)、術直後(ターニケッット解除後)、術後8時間、24時間行った。in vitro下でアゴニストにより凝集反応を惹起、全血血小板凝集装置を用いて凝集能の経時的変化を見た。その結果、どちらも静脈血側において術後凝集反応促進をみとめ、特にターニケット使用群において術後2.5、8時間後に強い凝集促進を示した。さらに血小板が活性化されたときにおこる血小板放出反応を調べるためにELISA法を用いてβ-トロンボグロブリン(β-TG)や、Platelet factor 4(PF4)、可溶性CD40Lもあわせて調べたが、これらの値も静脈血側において術後2.5、8時間に有意に上昇を認め、PF4と可溶性CD40Lはターニケット非使用群に比べ使用群において有意に上昇を認めた。術中ターニケット使用群において動脈側より中心静脈側で血小板及び白血球の活性化の上昇,凝集反応促進がおきていれば、肺循環において凝集塊がトラップされたということを意味し、血栓形成および肺塞栓の発症の可能性を示唆する。さらに換気血流シンチを術前後ともに行い検討したが、ターニケット使用群、非使用群ともに血流の欠損像を認める所見があったが、とくにターニケット使用群においてその程度は大きなものであった。

われわれはさらに肺梗塞の原因となる好中球血小板凝集塊(Leucocyte-Platelet Conjugate)は白血球と血小板のクロストークによりお互いが活性化され生じる事を証明するためにTKA手術においてターニケット使用による血小板活性及び白血球活性の上昇及びLeucocyte-Platelet Conjugateの上昇を証明した。フローサイトメトリ法を用いてLeucocyte-Platelet Conjugate上の血小板活性を示す細胞(CD14^+CD62P^+cell,CD14^+CD154^+cell),単球活性を示す細胞(CD14^+CD116^+cell,CD14^+CD142^+cell)それぞれについて測定を行い,好中球よりも単球上における有意な活性化を認めた。
社会集団の変容と社会空間の編成

各地各組織の地域社会空間の理論と実態研究を重ねてきて、本年度次のような成果を得た。わが国の社会空間研究の結果、社会空間概念は十分には整理されてこなかったが、ほぼ方法別に、人文主義的概念、構造主義的概念、論理実証主義的操作概念の3つに分けられ、対象別には共同主観による生活世界、権力構造と市民の生活空間、資本が作る建造空間、居住と階級、行動空間、構造的生活空間の6つに分けられる(高津)。デュルケームの社会と空間概念の中の萌芽的理論に系譜の存在と内容が整理(島津・水岡)された。わが国の社会空間分析により、社会空間と行動、認知、帰属空間の強い関係の存在が実証された(川口・原・仙田)。さらに民族性(エスニシティ)とその緊張によって形成されること(杉浦・堂前)、日常行動とくに買物・商業空間の関与(川口・松田)、権力と住民との社会的相互作用による社会空間の形成(水内・堤・・高木)、その論理と構造が解明された。なお協力者を含めて最終的な成果を学界に問うべく1994年度春の日本地理学会にて準シンポジウムを持ち共同発表し、成果を検討して戴く。社会変化と社会空間(高津)、地域社会における社会空間(原)、社会空間としての釜が崎(丹羽)、沖縄市における外国人居住者の社会空間(堂前)、エスニシティと文化・社会空間の形成・変容(杉浦)。総括報告書には次と論文が所収されている。社会空間研究と社会空間概念(高津)、デュルケムの社会空間論(島津)、批判的地理学と空間編成の理論-学説史的反省と将来への展望-(水岡)、活動空間・認知空間・帰属空間からみた郊外住民の生活空間(川口・原・仙田)、エスニシティと文化・社会空間(杉浦)、沖縄市における戦後変化と社会空間(堂前・高津)、我が世誰ぞ常ならん-神戸と闇市-(加藤・水内)、近代化と縁辺地域の空間(堤)、店舗共同化事業と小売商集団の変容-砥波地方の中心集落を事例として-(松田隆典)、衆議院選挙区の歴史的変遷(高木彰彦)。社会集団の変化と社会空間の発見について、理論的な整理を進め、各個別研究の進捗状況と個別の分担研究の中間報告を進めてきた。その結果、3つの分野で次のようなまとめの方向を得ている。1.社会空間の形成には2つの形態がある。一つは主観と、パーセプション、間主観性、などによって形成される社会空間(D.Ley、高津斌彰の口頭発表)と、資本によって生産される社会経済空間(D.Harvey、水岡不二雄)が存在する。それぞれ社会空間形成の種々の要因の発見と課程の検証に大いに役立つ見解である。2.都市の社会空間には、沖縄の都市社会分析の中から、「シマ」社会の広範な形成とその新しい社会空間としての「郷友会」の形成を見つけている。居住地、職業を通じて形成されることを指摘した(堂前:「沖縄の都市形成と都市化」)。わが国における社会空間形成には、出身地、居住地、職業の要素と地域社会との相互作用が一つの要因であることことを示唆している。都市住民の社会空間形成については都心については、大阪釜ケ崎の「寄せ場」・「野宿者」社会の空間形成の実態の発表(丹羽弘一)を依頼し、研究の基礎を固めようとしている。郊外のそれは埼玉県川越市の調査から、住民の意識と生活社会のネットワーク分析が残された課題である(川口)ことが指摘された。本土の都市部における庵美大島出身者による社会空間形成の研究(田島)も進んでいる。3.エスニック集団の社会空間については、理論的な整理を「エスニック・アイデンティティと社会空間」として杉浦が進めており、杉浦の米国西海岸、田島の「英国におけるアラブ人の社会空間」研究として手がけられ、中間発表がなされている。男性中心のコミュニティなど性による社会空間の形成も指摘された。農村については今後の進捗に待つ。研究分担者に加えて、若手の研究協力者も得られ、期待できる分野である。