hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
患児由来羊膜の口唇口蓋裂治療への応用

筆者は口唇口蓋裂患児において自身の羊膜をその治療に応用することを検討している。本研究は健常児由来の羊膜をコントロールとし、口唇口蓋裂患児の羊膜の性質に相違がない(少ない)ことの確認を目的とした。本研究期間内では、患児由来の羊膜は一個体分のみ入手可能であった。同時期に採取した健常児由来羊膜とともに、形態学的観察を行ったが相違点はなかった。また羊膜に乾燥処理を施し、ハイパードライ羊膜の作成を行い、物理的・生物学的性質の比較を行った。引っ張り試験における差も認めないと考えられるが、検体数不足のため統計学的処理には至っていない。今後検体数を確保しながら、物性試験・生理活性試験を継続する予定である。筆者は口唇口蓋裂患者において、患児本人の羊膜をその治療に応用することを検討している。本研究では、自家組織の応用というメリットを最大限に活用するため、健常児と口唇口蓋裂患者の羊膜および羊膜由来細胞の性質に相違がない(少ない)ことを確認し、患児本人由来の羊膜を治療へ応用することの実効性を検証することを目的とした。本研究期間内では、口唇口蓋裂患児由来の羊膜は一個体分のみ入手可能であった。同時期に採取した健常児由来羊膜とともに、入手した羊膜を辺縁部と胎盤部に分別したのち、形態学的観察のため保存するとともに、乾燥処理を施してハイパードライ羊膜の作成を行った。健常児の羊膜および、それを用いて作成したハイパードライ羊膜をコントロールとしてその形態的・物理的性質について比較を行った。形態学的観察上では、羊膜の各部位で患児・健常児由来の羊膜間で明らかな相違点は認められなかった。乾燥羊膜の物性試験を行ったところ、引っ張り試験でも両者で同様な引っ張り強度が認められた。また、両者由来の羊膜間葉系細胞におけるEGF,PDGFの発現も確認したところ両者の差は少ないと思われたが、検体数が不十分なため統計学的処理には至っていない。今後検体数を確保しながら、透過試験などの物性試験を追加するとともに、両者由来の間葉系細胞の生物学的性質に関する検討を継続する予定である。現時点では,当施設内のみでは十分な数の患児由来羊膜の入手は容易でない可能性があるため、今後、当院のみならず、連携各施設で羊膜の入手が可能となるような体制作りが必要と考えられ、その対応をすすめている.筆者は口唇口蓋裂患児において自身の羊膜をその治療に応用することを検討している。28年度が最終年度であるため、記入しない。口腔外科学28年度が最終年度であるため、記入しない。
神経線維腫症I型患者由来細胞の分子遺伝学的解析

神経線維腫症1型(NF1)の日本人家系における分子遺伝学的特徴を明らかにすることを目的として、以下の研究を行った。当科外来にて、従来の基準で神経線維腫症(NF)と診断されていた95例を対象とした。まず、これらの症状を臨床的に再検討して分類し、米国国立保健研究所(NIH)のNF1の診断基準を満たす53例を抽出した。このうち、研究に協力の得られた10家系の患者および家族43人の採血を行い培養細胞株を作成して、培養リンパ球からDNAを調整した。同時に、対照として健康男女各30人から採血、作成した培養細胞からDNAを調整した。Collinsらの報告したDNAの塩基配列よりエクソン28から33Primerを作成、精製し、患者の遺伝子異常をPCR法により検索したが、健常人との差異はなかった。次に、NF1遺伝子のプローブとして市販されているP5、B3AをATCCより購入。また、Collinsから提供を受けた5個のプローブのうち、AE25とFB5Dを用いてNF1遺伝子の3′端側に対する検索をサザンブロット法にて行ったが、これにおいても健常人との差異は見られなかった。今後は、5′端側の残りの3個のプローブについてもサザンブロット法の検索を行い、NF1のcDNA全長を解析すると共に、制限酵素を変えて切断するなどして遺伝子異常の有無を更に調べる予定である。また、PCR法による塩基置換の検索についてであるが、微小な塩基置換の検出には、塩基の配列差異による構造変化を利用したPCR-SSCP法が有力であるとの報告が近年なされてきた。このため、遺伝子変異のhot pointとされているエクソン31を中心にこの方法で塩基置換の有無をもう一度検索する予定としている。
集団的細胞運動を制御するJRABの構造変化の階層的解析-情報から生体に至るまで-

これまで、研究代表者は、Rabファミリー低分子量G蛋白質の標的蛋白質として見出されたJRABという1分子の構造変化が時空間的なアクチン細胞骨格の制御を生み出しており、その結果として効率の良いバランスのとれた細胞集団の動き(集団的細胞運動)が可能になることを証明してきた。本研究では、その時、その場所で、JRABが構造をいかにして変化させ、維持しているのか、さらには、どのような機序でJRABが構造特異的な機能を発現しうるのかを生化学とバイオインフォマティクスを組み合わせた手法を用いて分子レベルでの検証を行い、その結果を基に細胞生物学、ライブイメージング、コンピュータビジョンやバイオメカニクス等の異分野融合による学際的アプローチで明らかにしつつある。また、本研究中にCRISPR-Cas9システムによるゲノム編集で内因性のJRABをJRAB構造変異体(JRABΔCC; open form、JRABΔCT; closed form)に置換したマウスを作製し、解析することによってJRABの構造変化の重要性を個体レベルでも証明することを目指している。集団的細胞運動は、組織・器官の形成や創傷治癒の過程において認められる現象であり、さらに、がんの転移の際にも用いられる運動様式であることから、その制御機構の解明は、生理的および病理的に非常に重要な課題と考えられる。JRABは、N末端のLIMドメインとC末端のcoiled-coil(CC)ドメインの分子内結合によりclosed formをとり、Rab13がJRABのC末端と結合することで分子内結合が解除されてopen formをとるようになる。さらに、JRABは、open formとclosed formで細胞辺縁でのラッフルの形成やストレスファイバーの形成といった各々異なるアクチン細胞骨格制御を示す。本年度は、open formのJRABにおけるLIMドメインの機能解析を中心に進め、open formのJRABと別のアクチン結合蛋白質との相互作用と協調してLIMドメインがラッフルの形成やアクチン線維の束化の解除等のアクチン細胞骨格制御に関与していることを明らかにした。また、その作用機序については、これまでと同様に生化学とバイオインフォマティクスを組み合わせたアプローチで解析を展開し、その実態を証明しつつある。本年度はJRABのLIMドメインの詳細な解析により、open formのJRABの作用機序を証明することができた。次年度は、同様にしてclosed formのJRABが引き起こすアクチン線維の束化を基盤にした力学的変化がいかにして調節されているのかを明らかにする。また、遅れているJRABの構造変異体のノックインマウスの解析も進めていくとともに、各ノックインマウスと胃癌や大腸癌の疾患モデルマウスを掛け合わせてあらたな系統を樹立し、癌の進行とJRABの構造変化の関連性を検証する。これまで、研究代表者は、効率の良いバランスのとれた細胞集団の動き(集団的細胞運動)には、その時の状況や細胞集団内での場所に応じて臨機応変に起こるJRABの構造変化が重要であることを明らかにしてきた。本研究では、まず、その時、その場所で、JRABが構造をいかにして変化させ、維持しているのか、どのようなシグナルがその誘引となるのかを明らかにし、JRABの構造変換機構の時空間的な理解を目指す。次に、これまでの細胞レベルでの解析を個体レベルにまで発展させる。そのために、ゲノム編集技術を用いて内在性のJRABをJRABの構造変異体(JRABΔCC:常にopen form, JRABΔCT:常にclosed form)に置換したマウスを作製し、JRABの構造変化の生体内での生理的意義を明らかにする。また、これまでに研究代表者はJRABがアクチン線維と直接結合することやopen formのJRABのみがアクチニン-1/-4およびフィラミンといった複数のアクチン結合蛋白質と特異的に相互作用することを見出しており、いずれもJRABの異なる領域に結合することを生化学的に示している。そこで、本研究では、アクチン線維やJRAB結合蛋白質群とJRABの複合体構造モデリングを行い、得られた情報をもとにJRABの構造変化に伴って起こる蛋白質間相互作用の役割を細胞レベルで検証するとともに上記のようにゲノム編集技術を用いて蛋白質間相互作用を失ったマウスを作製して解析することで個体レベルにおいてもその重要性を明らかにすることを試みる。集団的細胞運動は、胎生期の組織・器官形成や創傷治癒の過程だけでなく、がん転移の際にも広く認められる現象である。したがって、その制御機構を理解することは、生物学的および生理学的に重要であるだけでなく、発生異常の病態解明およびがん転移機構の解明につながる可能性が高く、医学への貢献が多いに期待される。これまでに、CRISPR-Cas9システムによるゲノム編集を行って内因性のJRABをJRABの構造変異体(JRABΔCC;open form、JRABΔCT; closed form)に置換したノックインマウスの作製に成功し、解析に用いるHomoマウスも準備できている。また、JRABの構造変換機構の解析のため、生化学とバイオインフォマティクスを組み合わせたアプローチで得られた成果を基にJRABのN末端とC末端のリコンビナント蛋白質の複合体の結晶化を目指し、すでに、量・精度いずれの面においても結晶化解析に十分に耐え得るサンプルの調製に成功している。さらに、フィラミンやアクチニンとの相互作用に必要なドメインを欠損させたJRAB変異体を発現した細胞株を作製し、細胞レベルでの影響を調べており、各々の相互作用が担っているアクチン細胞骨格制御とその役割を明らかにしつつある。

これまで、研究代表者は、Rabファミリー低分子量G蛋白質の標的蛋白質として見出されたJRABという1分子の構造変化が時空間的なアクチン細胞骨格の制御を生み出しており、その結果として効率の良いバランスのとれた細胞集団の動き(集団的細胞運動)が可能になることを証明してきた。本研究では、その時、その場所で、JRABが構造をいかにして変化させ、維持しているのか、さらには、どのような機序でJRABが構造特異的な機能を発現しうるのかを生化学とバイオインフォマティクスを組み合わせた手法を用いて分子レベルでの検証を行い、その結果を基に細胞生物学、ライブイメージング、コンピュータビジョンやバイオメカニクス等の異分野融合による学際的アプローチで明らかにしつつある。また、本研究中にCRISPR-Cas9システムによるゲノム編集で内因性のJRABをJRAB構造変異体(JRABΔCC; open form、JRABΔCT; closed form)に置換したマウスを作製し、解析することによってJRABの構造変化の重要性を個体レベルでも証明することを目指している。集団的細胞運動は、組織・器官の形成や創傷治癒の過程において認められる現象であり、さらに、がんの転移の際にも用いられる運動様式であることから、その制御機構の解明は、生理的および病理的に非常に重要な課題と考えられる。JRABは、N末端のLIMドメインとC末端のcoiled-coil(CC)ドメインの分子内結合によりclosed formをとり、Rab13がJRABのC末端と結合することで分子内結合が解除されてopen formをとるようになる。さらに、JRABは、open formとclosed formで細胞辺縁でのラッフルの形成やストレスファイバーの形成といった各々異なるアクチン細胞骨格制御を示す。本年度は、open formのJRABにおけるLIMドメインの機能解析を中心に進め、open formのJRABと別のアクチン結合蛋白質との相互作用と協調してLIMドメインがラッフルの形成やアクチン線維の束化の解除等のアクチン細胞骨格制御に関与していることを明らかにした。また、その作用機序については、これまでと同様に生化学とバイオインフォマティクスを組み合わせたアプローチで解析を展開し、その実態を証明しつつある。今後は、作製したJRABの構造変異体のノックインマウスの解析を進めていく。JRABの構造解析においては、open formのJRABに特異的に結合するフィラミンのJRAB結合部位との共結晶化も進め、フィラミンのJRABの構造変換における役割を明らかにしていく。また、30年度の計画として挙げていた(1)細胞集団先頭部でJRABの構造変化を引き起こすシグナルの同定、(2)JRABの構造変化に伴う蛋白質間相互作用の役割の解明についても順次進めていく。本年度はJRABのLIMドメインの詳細な解析により、open formのJRABの作用機序を証明することができた。次年度は、同様にしてclosed formのJRABが引き起こすアクチン線維の束化を基盤にした力学的変化がいかにして調節されているのかを明らかにする。
癌細胞の生物学的修飾に関する研究

(研究目的)癌細胞に何らかの生物学的修飾を加えることによって腫瘍原性を低下ないし消失させることが可能と思われる。かかる意図で1)異物抗原の賦与、その他生物学的修飾による腫瘍原性の低下、消失の試みを行なう。また2)既在の腫瘍関連抗原TAAの抗原化をはかり、これを用いての特異的免疫療法を試みる。(研究計画・方法)1)腫瘍原性の低下・消失のために、【◯!1】異種性のウイルス感染、細菌DNA挿入による異物抗原の人工的賦与、【◯!2】突然変異原物質ないしDNAメチル化阻害剤、【◯!3】培養条件など増殖環境への適応と選択、【◯!4】細胞遺伝学的修飾などの試みを行う。2)TAAの抗原化のために、ウイルス、細胞融合、化学物質、酵素、レクチン、補体などによる修飾を試みる。(研究成績)1)腫瘍原性の低下・消失:マウス白血病ウイルスの持続感染したラット癌細胞が腫瘍原性を失うことに端を発したT癌細胞の異物化崗は、その後、マウスの癌細胞、ヌードマウスに増殖するヒト癌細胞に非腫瘍原性ウイルスを持続感染させることによっても観察された。これらは感染ウイルスの抗原に対する強い宿主反応による免疫学的現象であることが明らかにされた。また、腫瘍原性を失わせるような強い異物抗原の出現はDNAメチル化阻害による上遺伝的変化、培養環境への適応と選択によっても観察された。細胞融合による腫瘍原性の低下は融合するパートナー細胞の組織適合抗原が表現されることを介した免疫学的拒絶による場合と癌遺伝子の発現の抑制による細胞遺伝学的機序による場合とが明らかになった。2)TAAの抗原化:腫瘍原性を失った癌細胞では獲得した異物抗原が、化学物質、レクチン、補体による修飾ではそれらが補助抗原になって、TAAの抗原化がおこること、また、融合細胞ではパートナー細胞が産生させるサイトカインがTAAに対する反応性を高めることが明らかになった。
シリコンナノ粒子を分散させた炭素系新規半導体薄膜の創製と応用

メタンおよびシリコン源にモノメチルシラン、ジメチルシランなどの有機ケイ素化合物を用いた高周波プラズマ化学気相成長法により、球状微粒子を含む炭素系薄膜の作製を行った。モノメチルシランの場合、球状微粒子の主成分はシリコンであることがわかった。パルス化基板バイアスまたはモノメチルシランの間欠供給を用いることにより、微粒子の生成と成長を制御できることがわかった。また、希釈ガスの種類、成膜圧力、基板温度によっても微粒子サイズおよび密度が変化することを示した。本研究の全体構想は、ワイドギャップ半導体であるダイヤモンドライクカーボン(DLC)薄膜中にSiナノ粒子を分散させた新規3次元ナノ構造を開発し、これを用いた電流注入による次世代の環境調和型光デバイスを創製することである。DLC膜はsp^3結合炭素を主成分とする機械的強度および化学的安定性に優れた非晶質炭素膜であり、最大4eV程度のバンドギャップエネルギーをもつ半導体材料である。また、Siナノ粒子は量子サイズ効果により、近赤外から青色まで波長を変えて室温で発光させることができる。本研究では、プラズマ化学気相成長法を用いて、Siナノ粒子の粒径を精度よく制御することにより発光波長の精密制御を行い、ナノ粒子を炭素薄膜中に集積化しその発光特性を明らかにすることを目的とする。本研究は、(1)Si微粒子のサイズおよび構造制御法の開発、(2)Si微粒子のカーボン薄膜への分散技術の開発、および(3)Si微粒子を分散させた光機能性炭素系薄膜の発光特性の評価-からなる。平成21年度は研究課題(1)、(2)を中心に研究を実施した。微粒子含有薄膜の形成には、有機シランおよびメタンを用いた。電子線回折によって微粒子の一部は結晶化していることがわかった。また、基板パルスバイアスまたは原料ガスのパルス供給により、微粒子のサイズと密度の制御が可能であることを見出した。一方、微粒子の発生は気相中で起こるものの、薄膜上で形成時間と共にそのサイズが大きくなり、薄膜中へ埋め込まれることがわかった。その他、水素導入、圧力、基板温度によって微粒子のサイズや密度が変化し、これらのパラメータを制御することによっても微粒子の生成を制御することが可能であることを示した。本研究により、無害な半導体材料を利用した次世代光デバイスを創出するための新規プロセス技術を開拓することができた。本研究の全体構想は、ワイドギャップ半導体であるダイヤモンドライクカーボン(DLC)薄膜中にシリコン(Si)ナノ粒子を分散させた新規3次元ナノ構造を開発し、これを用いた電流注入による次世代の環境調和型光デバイスを創製することである。DLCはsp^3結合炭素を主成分とする機械的強度および化学的安定性に優れた非晶質炭素膜であり、最大4eV程度のバンドギャップをもつ半導体材料である。本研究では、発光波長の精密制御のためにプラズマ化学気相成長法を用いて粒径が精度よく制御されたSiナノ粒子をカーボン薄膜中に高密度に集積化し、その発光特性を明らかにすることを目的とする。平成22年度は研究課題(1)、(2)を中心に実施し、(3)についても研究に着手した。微粒子含有薄膜の作製には、モノメチルシランなどの有機シランおよびメタン、希釈ガスにはアルゴンまたは水素を用いた。有機シランを導入したときおよび基板負バイアスを印加したときのみ球状微粒子が形成されることを確認した。微粒子のサイズ、密度の成膜パラメータ依存性について詳細に調べた結果、以下のことがわかった。成膜圧力または基板温度の増加に伴い微粒子サイズが減少し、粒径分布が狭くなる。成膜圧力を増加させたり、希釈ガスにアルゴンを用いることで、微粒子密度は増加する。また、バイアス印加時間などの基板バイアスパラメータにより粒径および微粒子密度が制御可能であることを見出した。本研究により、無害な半導体材料を利用した次世代型光デバイスを創出するための新規プロセス技術に関する重要な知見を得た。

本研究は、(1)Si微粒子のサイズおよび構造制御法の開発、(2)Si微粒子のカーボン薄膜への分散技術の開発、および(3)炭素系薄膜の電気・光学特性の評価-からなる。平成23年度は研究課題(1)、(2)を中心に実施し、(3)についても評価を実施した。微粒子含有薄膜の作製には、モノメチルシランなどの有機シランおよびメタン、希釈ガスにはアルゴンを用いた。有機シランを導入したときおよび基板負バイアスを印加したときのみ球状微粒子が形成されることを確認している。微粒子のサイズ、密度の成膜パラメーター依存性について詳細に調べた結果、以下のことがわかった。基板負バイアスをパルス化することにより微粒子サイズが減少するが密度も減少する。そこで、有機シランを連続供給から間欠供給に変更した結果、微粒子サイズが大幅に減少することがわかった。さらには、間欠供給の周波数やデューティー比によりサイズおよび密度が制御可能であることを見出した。また、DLC膜への不純物添加により電気抵抗率を変化させることに成功した。本研究により、無害な半導体材料を利用した次世代型光デバイスを創出するための新規プロセス技術に関する重要な知見を得た。
スナネズミにおける若齢肝硬変の病理発生に関する研究

コレステロール添加(0.2%1%)飼料により長期飼育したスナネズミにおける肝病変について病理組織学的に観察し,特に肝線維化と関連の深いとされる伊東細胞の変化を観察した。0.2%以上添加群では,投与開始後から血清コレステロール値の顕著な上昇がみられ,0.5%以上添加群では最高約1,000mg/dlに達した。コレステロール投与群の肝臓は灰白色を呈して腫大し,多結節状を呈した。病理組織学的には,早期からコレステロール蓄積を伴う肝細胞の腫大,類洞の狭窄を示し,長期投与によりzone3肝細胞の脂肪変性が強まり,限局性脂肪壊死が観察された.この領域では,α-SMA陽性の伊東細胞の集族,線維成分による網工形成がみられ,投与継続とともに伊東細胞の増殖とともに好銀・コラーゲン線維は増生・伸長し,Glisson鞘周囲から伸長してきた線維と接合した.0.2%群では,再生結節はみられなかったが,0.51%群ではzone1および2に異型肝細胞増殖巣が発現して結節性に増性し,類洞の虚脱とともに再生結節間の線維成分は次第に密度を増し,再生結節を取り巻く薄い間質帯が形成されて肝硬変像を示した。このような肝硬変形成過程において,強い脂肪変性領域では,伊東細胞のα-SMA陽性化,樹状突起の伸長,周囲Disse腔内に細網あるいは膠原線維の放出がみられた。一部では伊東細胞の集族・増殖巣も散見されたが,その数は線維の増加・器質化に伴い減少した。以上のように,高コレステロール食投与スナネズミでは,高コレステロール血症とともに,早期に脂肪肝を呈し,肝細胞が強度の脂肪変性あるいは脂肪壊死を示す領域において,α-SMA陽性伊東細胞により細網・膠原線維が合成・放出され,長期投与により肝線維症あるいは肝硬変が形成された。TUM系雄512週齢のスナネズミ52匹にコレステロール0.5%または1%と,コール酸0.2%,オリーブ油5%を添加した固形飼料を25週連日自由摂取させたところ,投与開始翌週からスナネズミの体重は上昇し,89週をピークに減少し,15週からは死亡例も多くみられた。一方,肝重量は増加しコントロールの34倍にまで腫大した。血清コレステロール値は投与開始後1週から顕著に増加し,1000mg/dl以上の例も多く,最高2100mg/dlを示した。組織学的所見では投与2週齢で肝にコレステロールエステル蓄積が認められ,投与810週では高度の脂肪肝となった。またグリソン鞘および中心静脈周囲,一部小葉内に軽度の好細網線維の増生がみられた。同時期に電顕像では,広い細胞質に大型の脂肪空胞を有し,リン脂質および粗面小胞体に富んだ伊東細胞を認めた。投与1315週では細胞質を富有するやや異型の肝細胞の結節状増殖巣がみられ,核は増殖細胞核抗原(PCNA)陽性を示した。さらに膠原線維や好銀細網線維の密な増生を伴い,伊東細胞の脂肪空胞は消失し,微細線維放出像を認めた。投与1020週では,PCNA強陽性を示す異型肝細胞増殖巣が大型化して偽小葉が形成された。電顕像では細線維の増加とともにしばしば伊東細胞集合像を認めた。生存限界の投与25週では偽小葉はさらに明瞭となった。以上の所見から,コレステロール投与スナネズミでは,脂肪肝から肝硬変に至る経過で増生した伊東細胞の機能が,線維芽細胞と同様のコラーゲン線維合成能へと変化して,肝硬変の進展に寄与することが示唆された。

コンベンショナル環境で飼育したスナネズミ(TUM系,10週齢,雄)にコレステロール(0.2%),コール酸(0.04%),オリーブ油(1.0%)を添加した固形資料(CE2;オリエンタル酵母)を連日与えたところ,体重は投与約10週までは上昇したが,以降は飼料摂取量の緩やかな減少とともに変化がなかった。血清コレステロール値は投与20週で最高値(450mg/dl)を示したものの,その前後では170350mg/dl以内にとどまった。肝の腫大は軽度であったが投与期間中黄色灰白色を呈し,投与10週で中心静脈周囲に限局性脂肪変異が発現した。この脂肪化域のほぼ中心に投与20週で,細胞質に乏しくα-SMA陽性の星型細胞の増殖巣を認めた。電顕では中心静脈周囲での伊東細胞の突起の伸長像,微細線放出像を認め,類洞内にはKupffer細胞も多く認めた。これらの細胞増殖巣は投与30週ではやや拡大し,一部は空胞化,細胞質はMassonトリクロム染色(MTC)で淡青染,α-SMA強陽性を示し,微細好銀細網線維が介在していた。電顕ではコラーゲン線維を放出する伊東細胞が多数認められ,多量の線維が細胞周囲に集積していた。投与40週では,肝組織の一部が横隔膜に癒着し,増植細胞巣の空洞化はさらに広汎におよび,門脈枝に接して境界明瞭な壊死巣が多数発現したが,α-SMA抗原の分布はび漫性であった。この段階では,壊死巣はMTCで濃青染され,壊死巣を囲む好銀線維が認められた。投与50週では空胞化は肝全域におよび,白色結節性壊死巣数個をみとめ,壊死組織周囲ではコラーゲン線維の伸長が認められた。以上のように,コレステロール投与スナネズミにおける肝線維化は中心静脈周囲から起こり,その進展には伊東細胞が主に関与しており,線維芽細胞の役割はそれほど大きくないと思われた。またKupffer細胞増生後に伊東細胞の増生をみたことから,伊東細胞の反応はKupffer細胞からのTGF-β1放出に対応するものである可能性が示唆された。
スポーツ競技場面における選手の心理的ストレス測定

研究の目的は、スポーツ活動にともなう選手の心理的なストレス反応を測る指標を選定・改良することと、これを用いて急性あるいは慢性的なストレス反応の特性を探ることである。スポーツ活動に適応するとして選定した指標は指尖容積脈波(PTG)と唾液中コルチコステロン(SC)である。PTGからは脈波波高変動係数(CV_<WH>)と脈拍間隔変動係数(CV_<P-P>)を算出し、CV_<P-P>と心電図R-R間隔との関係を確認した上で、それぞれ交感神経活動と副交感神経活動を推測する指標とした。これらの指標に複数の血液中ストレスホルモンや各種心理テストを加え、3つのストレスフル状況を設定して選手のストレス反応を測定した。第1に、2つのストレス課題(暗算、ショック映像)を一般学生に与え、急性のストレス反応を心理テスト(SAI、SSRS-res)、PTG、血中ホルモン、SCにより測定した。その結果、不安などの情動変化とCV_<WH>、血中副腎皮質ホルモン、SCの変化に関係が認められた。第2に、リーグ戦期間中の選手の慢性的ストレス反応を、POMS、PTG、SCにより追跡した。その結果、高い緊張や怒りの持続やリラックス状態への変化に、主にCV_<WH>が同調するような変化パターンを示した。また、情動変化や日常・競技ストレッサーの高さとSCにも関係が認められた。第3に、試合前の選手の急性的ストレス反応を、SCにより測定した。その結果、プレイの調子がよくなかった選手の多くは、SC量が上昇していた。一連の実験から、スポーツ活動にともなう選手のストレス反応は、情動反応、自律反応、内分泌反応のどれにおいても個人差が大きいとみられた。指尖容積脈波と唾液中コルチコステロンは、簡易な測定ながら、これらの変化や個人差をうまくとらえており、測定技術の改良をさらに進めれば、スポーツ選手のための有望なストレス指標になりうると示唆された。スポーツ活動に係わる心理的ストレスの特性を分析するため、初年度は選手のパフォーマンスに影響する一過性のストレス反応に注目し、スポーツ活動の場に対応する測定方法の選定とその改良を試みた。特に心理的ストレスが強いといわれる試合前を想定すると、フィールドで簡便に測定でき、測定による心理的負担を最小限に抑える方法が求められた。そこで、生理的指標として指尖脈波、生化学的指標として唾液中のコルチコステロンなどのいわゆるストレスホルモンを採用し、これらにより選手のストレス反応を評価するシステムを構築した。選手を対象とした測定に先立ち、各指標の信頼性と妥当性を検討するために統制されたストレス課題を与えた基礎実験を行った。すなわち、一般学生に心理的ストレス課題(暗算あるいはストレス映像)を与え、その前後において心理テスト、指尖脈波、心拍反応、コルチコステロン他各種ホルモン濃度(静脈血中および唾液中)を測定した。その結果、多少の遅れ時間は推測されるものの、血中と唾液中のホルモン動態はよく相関することが確認された。また、ホルモン濃度と指尖脈波に認められる交感神経系の興奮レベルおよび心理テストから推測される状態不安スコアとの間に関係が認められた。個人差はあるものの、その特徴を把握すれば、唾液中のストレスホルモンがその時の心理状態を推測する指標に、指尖脈波は心理状態の変化を確認しその場でフィードバックする指標になりえると思われた。基礎実験の結果を受け、次に実際のスポーツ選手に対し2段階の実験(上記ストレス課題および競技ストレス場面)を設定し、主に指尖脈波と唾液中コルチコステロンによりストレス反応を推測することとした。現在、複数のスポーツ種目の選手を対象に、これらの測定およびデータ処理を進めているところである。

指尖容積脈波と唾液中コルチコステロンは、簡易な測定ながら、これらの変化や個人差をうまくとらえており、測定技術の改良をさらに進めれば、スポーツ選手のための有望なストレス指標になりうると示唆された。本研究の目的は、スポーツ活動にともなう一過性あるいは長期継続的な心理的ストレス反応を、自律反応、内分泌反応、情動プロフィール調査によりとらえ、スポーツ活動の障害となる心理的ストレスの特性を探ること、現状でスポーツ活動を対象とするには問題が多いストレス反応の測定方法を再検討することである。基礎実験において、一般的なストレス課題に対する反応が認められた唾液中コルチコステロンと指尖容積脈波を主な指標に、心理的ストレスの変化が大きいとされるリーグ戦期間、合宿期間、試合前における選手個人の動態を追跡した。被験者はバスケットボールやソフトテニスの大学生選手であった。その結果、リーグ戦期間中および合宿中の気分(心理テストによる評価)は、様々なストレッサーのもとに変化したとみられ、その中で緊張、抑うつ、怒りなどの情動変化と、脈波波高変動係数および唾液中コルチコステロン濃度の変化とに関係が認められた。このことは、繰り返される競技関連の心理的ストレスが、日常の交感神経緊張を高めたり、下垂体-副腎皮質系のホルモン分泌を亢進させていることを示唆している。次に、一過性のストレス反応では、試合前の唾液中コルチコステロン濃度が上昇する者が認められた。また、ストレス刺激や自律訓練(AT)によって、指尖容積脈波は時間差なく変化したが、波高変動係数とピーク間隔変動係数の表れ方に個人間差異が認められた。このことはストレッサーなど刺激の違いや対処行動により、自律神経活動に個人差が生じることを示唆している。一連の実験により、唾液中ホルモンと指尖容積脈波は、スポーツ活動にうまく適応するストレス反応評価尺度になりうると判断された。今後、より高精度の処理、測定上の制限、分析時間やコストなどを改善すれば、活動者自身が心理的ストレスを判定するためのチェックシステムとして応用できるものと期待される。
再灌流性肺血管障害における顆粒白血球の病的役割とその防制方法に関する研究

心臓、肺臓、腎臓、肝臓などでは、再灌流に起因すると思われる臓器血管障害が発生し問題となっている。我々は再灌流時に発生する活性酸素とこれによる顆粒白血球付着が、再灌流性肺血管障害の原因ではないかと考えている。そこで、(1)正常のもの、(2)左肺動脈を24時間閉塞したのち再灌流させたもの、(3)あらかじめsuperoxide dismutase(SOD)を投与したのち2時間左肺動脈を閉塞し再灌流させたものの3群において、肺微小血管への顆粒白血球付着と肺微小血管からの血漿蛋白侵出とを観察録画し画像解析した。これによると、正常肺では肺微小血管への白血球や付着や血漿蛋白の侵出は見られないが、再灌流肺では肺毛細血管を中心に顆粒白血球が付着し、これより下流の肺細静脈から血漿蛋白が侵出した。さらに、再灌流に伴う顆粒白血球の付着と血漿蛋白の侵出はSODの前投与により阻止された。これらの成績より、再灌流性血管障害は再灌流時に発生する活性酸素で傷害された肺微小血管のうち最も血流速度の遅い肺毛細血管に顆粒白血球が付着し、この付着顆粒白血球より産生放出されるロイコトリエンが下流の肺細静脈を傷害することによって発生するものと考えられた。
ＧＡＢＡ機能に着目した統合失調症の認知機能障害の病態解明と神経生理学的指標の確立

本研究では、(1)発症早期統合失調症におけるGABA機能と認知機能障害の関連、(2)統合失調症におけるGABA機能の進行性変化、を検討した。GABA機能は2連発経頭蓋磁気刺激で評価した。結果は、(1)発症早期統合失調症においてGABA性皮質抑制の減弱は作動記憶障害と相関し、(2)GABA性皮質抑制は発症早期群、慢性期群で障害され、グルタミン酸機能を反映する皮質内促通は慢性期群のみで障害された。本研究では、統合失調症におけるGABA機能障害と認知機能障害の関連およびGABA機能の進行性変化が示唆され、これら知見は認知機能障害に対するGABA神経系に関連した早期治療の開発につながる可能性を持つ。本研究では、統合失調症におけるGABA機能障害と認知機能障害の関連およびその進行性変化を明らかにすることを目指し、健常群、発症早期統合失調症群、慢性期統合失調症群を対象に、(1)神経生理学的手法によるGABA機能の評価と認知機能障害との関連、(2)GABA機能障害の進行性変化、を検討した。平成25年度は統合失調症におけるGABA機能障害の進行性変化を明らかにするため、健常群、発症早期統合失調症群、慢性期統合失調症群を対象に横断的検討をすすめた。前年度と同様に2連発経頭蓋磁気刺激を用い、GABA性皮質抑制は統合失調症発症早期群、慢性期群でともに障害されるが、グルタミン酸機能を反映する皮質内促通は慢性期群のみで障害され、皮質内促通は罹病期間と有意に相関した。これらの結果は統合失調症においてGABA神経系は発症早期から障害され、病期の進行とともにグルタミン酸神経系も障害されることを示唆し、関連成果を11th World Congress of Biological Psychiatry、第8回日本統合失調症学会で発表した。本研究では、統合失調症におけるGABA機能障害と認知機能障害の関連およびその進行性変化が示唆され、これら知見は統合失調症の認知機能障害に対するGABA神経系に関連した早期治療の開発につながる可能性を持つ。本研究では、GABA機能障害に着目し、統合失調症における認知機能障害の神経生理学的機序とGABA機能障害及び認知機能障害の進行性の変化を明らかにすることを目指し、健常群、発症早期統合失調症群、慢性期統合失調症群を対象に、(1)神経生理学的手法によるGABA機能の評価、(2)GABA機能障害と認知機能障害の関連、(3)GABA機能障害と認知機能障害の進行性の変化、を検討する。さらに、統合失調症におけるGABA機能障害と認知機能障害の進行性変化を明らかにするため、健常群、発症早期統合失調症群、慢性期統合失調症群を対象にした横断的検討をすすめている。2連発経頭蓋磁気刺激を用いて発症早期統合失調症におけるGABA機能障害と認知機能障害の関連を明らかにし、学会および論文発表することができた。平成25年度は統合失調症におけるGABA機能障害と認知機能障害の進行性変化の検討を重点的にすすめたい。具体的には、健常群、発症早期統合失調症群、慢性期統合失調症群を対象にした横断的検討と発症早期群の縦断的検討を行う予定である。平成24年度は神経生理学的手法として2連発経頭蓋磁気刺激を用いてGABA機能を評価したが、平成25年度にはガンマ帯域活動やプレパルス抑制などの神経生理学的手法を導入し、GABA-グルタミン酸機能を包括的に評価したい。
新規作用機序の抗生物質開発を目的としたゴードスポリン耐性化機構の解明

ゴードスポリンは放線菌の生育を阻害する抗生物質である。既存の薬剤と異なる分子を標的とすることが示唆されていたため、ゴードスポリンの作用機構の解明により、新たな抗生物質の開発が可能になると期待されていた。本研究では、ゴードスポリンの作用機構を明らかにすることを目的として研究を行った。ゴードスポリンの標的であると考えられたFfhと、ゴードスポリン耐性型FfhホモログであるGodIについて大腸菌を宿主として組換え蛋白質を調製することに成功した。X線結晶構造解析を目的として結晶化条件のスクリーニングを行い、結果としていくつかの条件で微結晶状のサンプルを得ることができた。それぞれの組換え蛋白質にはヒスチジンタグを付加したため、ニッケルなどの金属を利用したアフィニティー担体に結合することが可能である。このことを利用して、蛋白質精製バッファーにゴードスポリンを添加して、それぞれの蛋白質がゴードスポリンと共精製されるか試験した。その結果、Ffhがゴードスポリンと共精製される一方で、GodIは共精製されなかった。これまでに、godI遺伝子の導入により放線菌がゴードスポリン耐性を獲得することは報告されていたが、ゴードスポリンとSRPの直接の相互作用については知見が得られていなかった。本研究の結果から、ゴードスポリンはSRP蛋白質に直接結合することでその機能を阻害することが示唆された。これまでにSRP蛋白質に直接結合する低分子化合物は知られていない。今後、より詳細にゴードスポリンの作用機構を明らかにすることで、SRPを標的とする新たな抗生物質の開発等が可能になると期待される。精製した蛋白質を結晶化実験に供した。また、前述のようにFfhとゴードスポリンの相互作用が検出されたことから、Ffhーゴードスポリン複合体の結晶化も試みたところ、複数の条件で微結晶状のサンプルが観察された。今後、結晶化条件を最適化することで、結晶構造解析が可能な結晶が調製できると期待される。25年度が最終年度であるため、記入しない。
有機サマリウム(II)錯体の合成と反応性に関する研究

1.ヨウ化サマリウム(II)の新規調整法の開発ヨウ化サマリウム(III)とサマリウム金属がテトラヒドロフラン中で容易に反応し, 2価のサマリウムが生成することを見出した.さらにこの反応の機構を解明するとともに,一電子還元剤として有用なヨウ化サマリウム(II)をヨウ素とサマリウム金属から簡便に調整する方法を確立した.2.カルボニル化合物の新規ヨードメチル化反応サマリウム金属存在下,カルボニル化合物とジヨードメタンを反応させると,ヨードヒドリンが高収率で生成することを見出した.この反応は,カルボニル基にヨードメチル基を求核的に導入する最初の例であり,かつ従来の方法では得難いヨードヒドリンも合成することがてきる点で,合成的利用価値が高いと思われる.3.シクロプロパノール類の合成一方,カルボニル化合物として, α-ハロケトンを用いた場合には,ヨードヒドリンは生成せず,シクロプロパンが得られた.さらに1, 4-ジケトンを用いた場合には,新規な炭素-炭素結合切断反応を伴いながらシクロプロパノール環が生成することがわかった.次にこの反応の機構について検討した結果,中間体としてサマリウムエノラートが存在することが明らかとなった.そこで,この知見に基づいてケトンより一挙にシクロプロパノールを合成する方法について詳細に検討した結果, 5060%で目的物を得ることができた.これらの事実をふまえて,エステル類に2個のメチレンユニットを一挙に導入しながらシクロプロパノールを合成する新しい反応の開発を行った.その結果,エステル類に過剰のジヨードメタン/サマリウム系試剤を反応させると,目的物が2060%の収率で生成することがわかった.1.ヨウ化サマリウム(II)の新規調整法の開発ヨウ化サマリウム(III)とサマリウム金属がテトラヒドロフラン中で容易に反応し, 2価のサマリウムが生成することを見出した.さらにこの反応の機構を解明するとともに,一電子還元剤として有用なヨウ化サマリウム(II)をヨウ素とサマリウム金属から簡便に調整する方法を確立した.2.カルボニル化合物の新規ヨードメチル化反応サマリウム金属存在下,カルボニル化合物とジヨードメタンを反応させると,ヨードヒドリンが高収率で生成することを見出した.この反応は,カルボニル基にヨードメチル基を求核的に導入する最初の例であり,かつ従来の方法では得難いヨードヒドリンも合成することがてきる点で,合成的利用価値が高いと思われる.3.シクロプロパノール類の合成一方,カルボニル化合物として, α-ハロケトンを用いた場合には,ヨードヒドリンは生成せず,シクロプロパンが得られた.さらに1, 4-ジケトンを用いた場合には,新規な炭素-炭素結合切断反応を伴いながらシクロプロパノール環が生成することがわかった.次にこの反応の機構について検討した結果,中間体としてサマリウムエノラートが存在することが明らかとなった.そこで,この知見に基づいてケトンより一挙にシクロプロパノールを合成する方法について詳細に検討した結果, 5060%で目的物を得ることができた.これらの事実をふまえて,エステル類に2個のメチレンユニットを一挙に導入しながらシクロプロパノールを合成する新しい反応の開発を行った.その結果,エステル類に過剰のジヨードメタン/サマリウム系試剤を反応させると,目的物が2060%の収率で生成することがわかった.
出血性ショックモデルラットを用いた魚油脂肪乳剤投与の抗炎症作用の解析

ω3脂肪酸は種々の炎症病態において抗炎症作用を示すが、出血性ショックなどの救急救命医療におけるω3脂肪酸の臨床栄養学的意義については検討が不十分であった。本研究では、出血性ショックモデルラットを用いて、ω3脂肪酸を強化した魚油脂肪乳剤を臨床に近い条件下で投与し、その抗炎症効果を解析した。その結果、短時間のω3脂肪酸投与によって肺や腸管の障害が有意に抑制されるとともに、ショック時の循環動態改善効果が認められた。また、EPA由来の各種代謝物の有意な増加も観察され、これら脂質代謝物が循環動態改善や抗炎症作用に関与していることが示された。必須脂肪酸の一種であるオメガ3系列脂肪酸は魚油に豊富に含まれ、種々の炎症病態において抗炎症作用を示すことが既に明らかにされている。一方、救急救命医療において、出血性ショックなどの重症病態におけるオメガ3系列脂肪酸の臨床栄養学的研究は皆無である。本研究では、出血性ショックモデルラットを用いて、オメガ3系列脂肪酸を強化した魚油脂肪乳剤を臨床に近い条件下で投与し、その抗炎症効果をin vivoで多面的に解析し評価することを目的とし、今年度は以下の実績が得られた。(1)出血性ショックモデルラットへの魚油脂肪乳剤投与実験条件の検討と抗炎症作用の評価:麻酔条件や脱血・返血量等を変化させて、肺障害、腸管粘膜障害、腎障害を指標に十分な障害が認められる条件を決定した。続いて、予め一定量の魚油脂肪乳剤を静脈内投与あるいは腹腔内投与したラットに前記の出血性ショックを惹起し、蘇生処理後にバイタルサイン、血液循環動態及び肺障害、腸管粘膜障害、腎障害を測定して抗炎症作用を評価した。その結果、魚油脂肪乳剤を腹腔内投与した群では、臓器障害の軽減が認められた。(2)各種炎症性メディエーター、炎症関連分子の多面的測定:前項(1)の条件で魚油脂肪乳剤を前投与したラット、および対照群として生理食塩水を前投与したラットに出血性ショックを惹起し、随時各種生体試料を採取した。血液、リンパ液、肺、腸管などの生体試料中の炎症性脂質メディエーターを質量分析装置で定量解析した結果、魚油脂肪乳剤投与した出血性ショックモデルラットでは、魚油由来のEPAやDHAが腸管や血液で増加していた。また、遊離アラキドン酸量も特定の臓器で変化が認められた。(1)出血性ショックモデルラットへの魚油脂肪乳剤投与実験条件の検討と抗炎症作用の評価:昨年度の実験において、出血性ショック前に一定量の魚油脂肪乳剤を静脈内投与した場合、明らかな抗ショック作用を観察した。今年度は定圧性(一定の血圧目標を設定)および定量性(一定の脱血量を設定)の二種類の出血性ショックモデルを用いて、さらに詳細な解析を行った。その結果、定圧性の出血性ショック条件では、魚油脂肪乳剤投与により肺障害と腸管障害が有意に抑制された。また、魚油脂肪乳剤投与群ではショック後の血中乳酸値が低下しづらく、一定低血圧を維持するためには脱血率を高く保つ必要があることが分かった。この結果から、同じ低血圧下にあっても魚油脂肪乳剤投与群では心拍出量や組織酸素代謝が高く維持され、このことが出血性ショック軽減化機構の一つであると考えられた。今後、循環病態への効果等を詳細に解析する必要がある。一方、定量性のショック条件については、現在、条件検討中である。(2)各種炎症性メディエーター、炎症関連分子の多面的測定:前項(1)の定圧性ショック条件において、血液、リンパ液、肺、腸管中の炎症性脂質メディエーターを質量分析装置で定量解析した。その結果、魚油脂肪乳剤投与群では、魚油由来のEPAやDHAがショック依存的に腸管や血液で増加していた。(1)出血性ショックモデルラットへの魚油脂肪乳剤投与実験条件の検討と抗炎症作用の評価:昨年度までの実験により、出血性ショック前に一定量の魚油脂肪乳剤を静脈内投与した場合、定圧性(一定の血圧目標を設定)の出血性ショック条件では、魚油脂肪乳剤投与により肺障害と腸管障害が有意に抑制された。今年度は、定量性(一定の脱血量を設定)のショック条件下で検討した結果、やはり腸管障害が有意に抑制された。また、心拍数や末梢組織への酸素供給量等の循環病態の改善効果が認められ、このことが出血性ショック病態の軽減化機能の一つであることが明らかとなった。

(2)各種炎症性メディエーター、炎症関連分子の多面的測定:前項(1)の定圧性ショック条件において、血漿中の炎症性脂質メディエーターを質量分析装置で定量解析した。その結果、魚油脂肪乳剤投与群では、オメガ3系列脂肪酸代謝物であるHETEやHDoHEが有意に増加していることが示された。また、オメガ6系列のアラキドン酸代謝物のショック依存的な増加が、魚油投与群では抑制された。本研究課題開始3年目にあたる本年度の目標として、具体的には以下の実験項目を予定していた:1)出血性ショックモデルラットへの魚油脂肪乳剤投与と抗炎症作用の一般的評価、2)各種炎症性メディエーター、炎症関連分子の多面的測定。このうち項目1)については、ほぼ予定通りに魚油脂肪乳剤投与実験の条件が設定されて実験を行った。その結果、定圧性、及び定量性ショック条件下のいずれの場合においても、短期間の魚油脂肪乳剤投与によって、血中乳酸値、平均動脈血圧、及び心拍数経時変化などの循環系動態指標が有意に改善され、出血性ショックによる末梢組織の低酸素状態が緩和されることが示された。これは初期の実験計画では想定していなかったことであったが、新しい知見でありその機構についても今後解析することとした。また、血漿中の酸化脂肪酸を質量分析で定量した結果、魚油投与群ではオメガ3系脂肪酸代謝物の顕著な増加とオメガ6系代謝物の有意な減少が認められ、これらの血中脂肪酸代謝物の変動が病態の緩和に関与していることが示唆された。以上、当初計画とは異なる実験条件の検討も必要になったが、魚油脂肪乳剤投与の抗炎症効果をin vivoで多面的に解析し評価することを目的とした本課題の達成度としては、魚油の短期間投与が循環系動態の改善効果を示すとの新たな知見も得られており、おおむね順調に進展している。必須脂肪酸の一種であるオメガ3系列脂肪酸は魚油に豊富に含まれ、種々の炎症病態において抗炎症作用を示すことが既に明らかにされている。一方、救急救命医療において、出血性ショックなどの重症病態におけるオメガ3系列脂肪酸の臨床栄養学的研究は未検討であった。本研究では、出血性ショックモデルラットを用いて、オメガ3系列脂肪酸を強化した魚油脂肪乳剤を臨床に近い条件下で投与し、その抗炎症効果を多面的に解析し評価することを目的とし、以下の研究実績が得られた。(1)出血性ショックモデルラットへの魚油脂肪乳剤投与実験条件の検討と抗炎症作用の評価:種々の実験条件を検討した結果、出血性ショックの90分前に一定量の魚油を含む脂肪乳剤(Omegaven)を静脈内投与したラット群では、定量式(体重当たりの脱血量を一定に設定)の出血性ショック条件において、ω6脂肪乳剤(Intralipos)投与群に比べて、肺障害と腸管障害が有意に抑制された。また、平均動脈圧・心拍数・乳酸値・心拍出量が有意に改善された。以上の結果より、ω3系列脂肪酸の投与はショック状態における循環動態改善効果があることが示され、このことが出血性ショック病態の軽減化機能の一つであることが明らかとなった。(2)各種炎症性メディエーター、炎症関連分子の多面的測定:前項(1)の定量式ショック後において、血漿、心臓、肺、肝臓、腸管中の脂質を質量分析装置で定量解析した。その結果、魚油投与群では心臓で遊離型のEPA・DHA、及びそれら脂肪酸を結合したリゾリン脂質の増加が観察された。
C型肝炎患者がインターフェロン療法を完遂するための要因分析と支援に関する研究

インターフェロン(IFN)療法に伴う抑うつ症状は、IFN療法の延期または中断の主たる要因となり、C型慢性肝炎(CHC)の有効治療には、抑うつ症状の検出と管理が重要となる。そこで、IFN療法を受けるCHC患者の抑うつ症状変化の予測要因を検討した。結果、SDS得点上昇者の割合は、治療経過に伴い増加した。また、IFN療法に伴う抑うつ症状の変化を来たしやすい治療前の要因として、疾病重症感、普段の他者とのつきあい、睡眠時間が関係していた。IFN療法は、現在、唯一有効な抗HCV治療薬とされているが、治療に伴う抑うつ症状の発症は-44%と決して少なくない。抑うつ症状は、治療中の患者のQOLを低下させるだけでなく、コンプライアンスの低下や治療中断の主な原因となってきた。最近では、ウイルスクリアランスに達するためのアドヒアランスの重要性やC型肝炎ウイルス(HCV)治療中、ウイルス学的著効に達するために、IFN療法に伴う精神的副作用に高い注意を払うこと、またその同定と治療の必要性が強調されている。精神的副作用と治療効果との関連についても報告されており、IFN療法中の抑うつ症状発症のリスクを特定することは治療の完遂ばかりか、治療効果向上にとっても非常に重要である。従来から、うつ病などの気分障害は多因子疾患と考えられ、環境的要因、生物学的要因、性格特性、遺伝的要因などが様々な程度で発症に関与すると考えられている。IFN療法に伴う抑うつ症状の発症についても、IFNの投与量や投与期間などの治療自体の影響、性別や年齢、飲酒/薬物の使用、うつ病親和性性格傾向、本人および家族の抑うつ状態の既往などが予測因子として明らかにされている。しかし、病気についての理解やサポートなど、社会的側面と抑うつ症状発症の関連については、まだ検討されていない。そこで本研究は、C型慢性肝炎患者のIFN療法に伴う抑うつ症状発症を前向きに評価すること。加えて、IFN治療中の抑うつ症状に関与すると予測される治療前の因子を環境的要因、生物学的要因、性格特性などから多因子的に評価・検討することとした。対象は、IFN療法を開始する患者であり、対象者に研究の主旨、方法を説明し、書面での同意を得た上で、質問紙への回答を求める。本研究は前向きコホート研究(prospective cohort study)であり、治療開始前、開始後3ヶ月の調査を行う予定である。本年度は、質問紙、調査方法の検討および研究フィールドの開拓、依頼等の準備を進めた。本研究の目的は,C型慢性肝炎患者のIFN療法に伴う抑うつ症状発症をプロスペクティブに評価し,かつ治療前予測因子(環境的要因,生物学的要因,性格特性など)との関連を明らかにすることで,インターフェロン療法を完遂・継続するための看護支援および,地域で生活しながら治療継続するためのシステムや周辺環境・資源などのサポートについて検討することである。現在,ベースライン,治療開始後3・6ヶ月における調査を通年で実施している。現在までに調査が終了している,ベースラインデータから得られた結果は以下である。IFN投与前の本研究対象患者は,疾患に対する認識が十分あり,経済状態,仕事や付き合いなどの社会的背景は,日本人の標準的結果とほぼ同様であった。また,IFN投与前に重度抑うつ症状を有する患者はいなかったものの,IFN投与前の抑うつ症状とQOL低下が有意に関連しており,先行研究を支持する結果が得られた。すなわち,無自覚のままに進行するCHCであっても,IFN投与前に抑うつ症状を有する患者は,既に仕事や普段の付き合いなどに不自由さを感じている現状が明らかとなった。IFN投与中の抑うつ症状発症には,投与前の抑うつ症状のみならず,不眠傾向があることや疾患の転帰に強い不安を抱いていることなども挙げられている。更に,肝炎から肝硬変,肝がんに至ることが多いという情報の頒布などの要因も関与すると言われており,今後IFN投与開始後の追跡により検討したいと考えている。C型慢性肝炎(CHC)治療のためのインターフェロン(IFN)療法は、精神的副作用(特に抑うつ症状)を伴いやすく、治療の延期や中断の要因となることがある。有効なCHC治療には、抑うつ症状発症、悪化のリスクを特定することが重要となる。IFN療法に伴う抑うつ症状の変化は、IFNの投与量や投与期間等の治療自体の影響、性別や年齢、飲酒や薬物の使用等が予測要因として明らかにされているが、多因子的な検討は十分には行われていない。そこで、CHC患者のIFN療法に伴う抑うつ症状の変化とその予測要因を明らかにするために前向きコホート研究を行った。IFN療法前(ベースライン)、治療開始3ヵ月後、6ヵ月後のCHC患者の抑うつ症状をSDSを用いて評価した。抑うつ症状を目的変数、ベースラインの年齢、性別、生活習慣、疾病重症感等を説明変数として、多変量ロジスティック回帰分析を行った。結果、CHC患者の抑うつ症状上昇者の割合は、治療経過と共に増加した。

また、治療前の疾病重症感は、抑うつ症状悪化に予防的に影響することが明らかとなり、治療前の疾病イメージや疾病認知が、予期される経過への対処や備えに繋がる可能性のあることが示唆された。また、普段の他者とのつきあいが、治療前に充分にできていないことや治療前の不眠が、抑うつ症状悪化のリスクとなるとの結果が得られた。以上から、IFN療法に伴う抑うつ症状悪化を来たしやすいCHC患者の治療前の特徴が明らかになり、同患者への介入の示唆が得られた。本研究の成果は、学会にて発表を行った。またデータ収集の協力機関である、肝疾患診療連携拠点病院および肝疾患専門医療機関に結果を還元し、同患者への治療前の介入について検討した。