hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
就職困難学生の自己肯定感と保護者の認識、およびトライアル育成に関する調査・研究

本研究の目的は、次の2つである。(1)就職活動に困難を抱えている学生の意欲・態度等を、保護者への研修・指導を通して、改善・回復させ、就職活動、正規雇用化を促進すること、及び(2)学生のキャリア発達にあたり「家族を基軸としたキャリア形成支援学」の必要性を提唱することである。そして、2018年度は、特に(1)の目的を達成するための取り組みを行った。具体的には、1アンケート項目の作成、2保護者向け研修プログラムの作成に着手した。1アンケート項目の作成:学生本人の就職活動と自己肯定感との関係性に関すること、及び保護者自身の自己肯定感と学生(子)の自己肯定感の関係性に関するアンケート項目を作成した。内容としては、学生(子)には現状の自己肯定感を測定するもの、就業認識に関すること、就職活動量(応募社数)、志望業界、志望職種、入社予定企業の選定条件、大学入学時の入試経路、学業成績(GPA)、保護者への研修実施前後での意欲・行動変容など、保護者には自己肯定感への認識、自分自身(保護者)の自己肯定感の程度、子どもの自己肯定感に対する評価、自己肯定感を育成するために実施したことなどを取りあげた。2保護者向け研修プログラムの作成:現在の就職活動の進め方、フロー(保護者世代の就職活動との違い)、学生と社会人の評価基準の違い、就職活動で成功・失敗する学生の特長的課題、家庭で支援・育成してほしいことなどを研修プログラム化した。今後は、学生(子)へのアンケートの実施、保護者への研修、及びアンケートを実施し、自己肯定感と就職活動との関係性、保護者への研修受講の成果などを検証していく。2018年度は、1自己肯定感と就職活動に関する学生、及び保護者へのアンケート調査項目の作成、2就職活動を理解し、学生(子)の自己肯定感を高めるための保護者向け研修会のプログラムの作成が重点内容である。いずれも、今後の運用のなかで若干の訂正はあると思われるが、実態調査のための準備はおおむね整った。2019年度は、保護者向けの研修実施、及び研修前後での学生(子)に対するアンケートの実施・分析に移る。保護者への研修の効果が実証されれば、保護者だけではなく、大学、就労支援機関等でも活用してもらえるツールを開発することができる。さらに、心理学、キャリア教育による分野横断的研究として、「家族を基軸としたキャリア形成支援学」の必要性を提唱していく。なお、自己肯定感と就職活動との関係性に対し、大手人材サービス企業との連携・協力により、数千人規模のアンケート結果の分析を予定している。これにより、より精度の高い調査結果が得られることが期待できる。直接経費のうち、「人件費・謝金」の未使用が生じたことが主な理由である。本件研究企画当初は、事前にもアンケート調査を予定していたが、研修実施を基軸として、その前後でアンケート調査を実施することとした。
情動が青年の友人関係に及ぼす影響

本研究では、青年が持つ感情特性が友人関係にどのような影響を与えているのかについて検討した。一連の研究から(1)曖昧な友人関係場面の解釈を求める調査において、解釈に影響を及ぼす感情特性は、肯定的感情特性よりもむしろ否定的感情特性であること、(2)また場面を解釈する際、否定的感情特性が低い場合、青年は友人に対して自ら状況を変えることが可能な積極的な解釈をすること、また逆に否定的感情特性が高い場合、被害的で主体性のない解釈をすることが示された。このことから感情特性が場面の解釈に大きく影響を与え、特に否定的な感情を持つ青年は、友人関係で生じた出来事を被害的に捉える傾向があり、友人関係の維持を困難にする可能性が示唆された。1.大学生の友人関係、特に友人関係上でどのような問題を抱えているのかについて情報を得るために大学生3名に面接調査を実施した。その結果、大学生は互いにあまり干渉しない関係を築いていること、また問題としては友達との価値観の相違や異性との関係が主にあげられた。2.友人関係上で生じる問題とその解決方法について情報を得るために中学生149名、高校生118名、大学生125名を対象に自由記述式質問紙調査を行った。調査内容は、友人関係上の悩み・トラブル、およびその時生じる感情、その問題の解決方法を具体的に記述するものであった。その結果、中学、高校生では悪口や仲間はずれなど、友人から裏切られる場面の記述が多く、大学生では相手の行動に不満を抱く場面の記述が多く見られた。また解決方法として中学生では放っておく、何もできないなど、解決策が見つけ出せない記述が多く見られたが、大学生では話し合いが最も多かった。さらにこの調査においては中学生、高校生に対しては友人に対して抱く感情として「怒りを感じるとき」と「不安を感じるとき」と限定した上でその感情の生じる場面について記述を求め、友人関係上での情動がどのような場面で生じるのかを検討した。これら一連の調査をもとに、友人関係上で生じやすい問題場面をいくつか絞った上で、今後の調査で使用する査定道具の開発へとつなげていく。1.中学生から高校生に対して昨年度実施した自由記述式調査から、青年が友人関係上で引き起こされやすい葛藤場面を選定した。この場面選定は、今後の調査における感情解釈図版の作成のもととなる。その結果、青年が抱く友人との葛藤場面として「友だちの自分勝手な行動に困る」、「グループでのやり取りで自分だけが入れない」、「友だちと意見が合わない」、「嫌なことを何度も計われる」、「自分の友だちの悪口を計われる」の5つを設定した。2.上記の場面に対して、その具体的な解決方法について情報を得るために中学生(2名)、高校生(2名)、大学生(4名)、および中学校教師(2名)に面接を実施した。3. 2の面接結果、および昨年度実施した自由記述式調査の結果をもとに解決方法について検討した。その結果、解決方法としては消極策として「諦める」、「我慢する」、積極策として「話し合う」、「注意する」、消極的でも積極的でもない策として「気にしない」、「時間が解決する」が抽出された。これらの結果をもとに場面ごとに解決策を表す項目を具体的に作成した。今後は設定した場面を再度検討し、場面図版、解決方法項目を決定する。その後その場面から生じる感情、場面の解釈、解決方法について関連を検討する。本年度は、青年が持つ感情特性が友人関係で生じる場面の解釈にどのように影響するのかについて、質問紙調査をもとに検討した。対象者は大学生105名で、調査内容は個人の感情特性を測定(個別情動尺度第4版(Izard et al,1993)を使用)した上で、任意に設定した友人関係場面についてその解釈を自由に記述し、さらにその場面を見て生じた感情を多面的感情状態尺度短縮版(寺崎・古賀・岸本,1991)にて測定するものであった。その際友人関係場面としては昨年度までの調査で検討した場面設定を再度検討し、6場面を選定した。その結果、a.大学生は日常的に肯定的な感情を抱いて生活していること、b.場面の解釈に影響を及ぼす感情特性は、肯定的感情よりもむしろ否定的感情であること、c.感情特性はクラスタ分析により3タイプ(低否定的感情群、肯定否定的感情群、高否定的感情群)に分類され、低否定的感情群は場面解釈として、友人に対して主体的で自ら状況を変えることが可能な積極的な解釈をすること、高否定的感情群では被害的で主体性のない解釈をすること、肯定否定感情群では主体的ではあるが積極性はなく、また被害的ではないという低否定的感情群と高否定的感情群の中庸な解釈をすることが示された。

このことから感情特性が場面の解釈に大きく影響を与えていることが明らかにされ、特に否定的な感情を持つ青年は、友人関係で生じた出来事を被害的に捉える傾向があり、友人関係の維持を困難にする可能性が示唆された。
三感融合型複合現実空間の構成法に関する研究

現実と仮想を実時間で融合・提示する「複合現実感」に関して,主たる「視覚」に「聴覚」「触覚」も加えた「三感融合型複合現実空間」の構築法を研究した.具体的には,現実世界で発した音刺激が複合現実空間に及ぼす影響,現実空間に重畳される仮想物体のCG像と音像の幾何学的整合性,複合現実型視覚刺激と聴覚刺激が触印象に与える影響に関して研究実験を行い,実際に稼動するシステムでその有効性や仮説を検証した.現実と仮想を実時間で融合・提示する「複合現実感」に関して,主たる「視覚」に「聴覚」「触覚」も加えた「三感融合型複合現実空間」の構築法を研究した.具体的には,現実世界で発した音刺激が複合現実空間に及ぼす影響,現実空間に重畳される仮想物体のCG像と音像の幾何学的整合性,複合現実型視覚刺激と聴覚刺激が触印象に与える影響に関して研究実験を行い,実際に稼動するシステムでその有効性や仮説を検証した.現実世界と仮想世界を実時間で融合・提示する「複合現実感(Mixed Reality ;: MR)」に関して,主たる「視覚」に「聴覚」「触覚」も加えた「三感融合型」のMR空間を考える.本研究では,(a)現実世界で発した音刺激がMR空間に及ぼす影響とその精度,(b)現実空間に重畳される仮想物体のCG像と音像の幾何学的整合性,(c)触知できる実物体に仮想映像を重畳表示した場合の視覚・触覚の補完機能,に焦点を当てたMR空間構成法を研究し,具体的に稼動するシステムで実証する.初年度の平成17年度は,以下の研究を行い,対外発表を行った.・三感融合型の意義を確認するテストベッドとしての「MRアトラクション」を想定し,それに適した描画法,仮想と現実の幾何学的整合法を整備した.・聴覚の導入に当たり,自作の3次元音場システムを開発し,視覚のMRシステムとの連結を達成した.ここで,高臨場感あふれる3次元音場空間を生成するために,予め用意した複数の頭部伝達関数の中から,体験者の頭部形状に最も適したものを効率的に選択する方法を,視覚が支援する方式で実現した.・現実空間の音刺激を複合現実空間に反映させる機能は,複数のマイクロホンアレーをHMDに取付けて方向推定する方式で実現した,視覚シンボルを融合した実験で,その検出精度を評価した.・上記の音刺激検出の精度を向上させるため,従来のCSP法を改良したWeighted CSP法を提案し,雑音や残響に頑健な音刺激検出システムを開発した.また検出した音刺激に対して,音センサを用いて高品質に抽出するシステムについても検討を行った.・触覚に関しては,触知できる実物体の上に正確にCG映像を重畳表示できる位置合わせ精度を向上する方法を検討した.また,次年度以降の本格的な実験に先だって,硬化樹脂等で生成する各種物体の幾何形状モデリングを行った.現実世界と仮想世界を実時間で融合・表示する「複合現実感(Mixed Reality ; MR)」は,近年急速な進歩を遂げているが,これまでの取り組みは視覚的な融合だけに留まっていた.新しい情報提示法としてさらに発展させるために,本申請研究では,「視覚」に「聴覚」「触覚」も加えた「三感融合型」の複合現実感を考える.本研究では,以下の3点に焦点を当てたMR空間構成法を研究し,具体的に稼動するシステムで実証する.(1)現実世界で発した音刺激がMR空間に及ぼす影響とその精度(2)現実空間に重畳される仮想オブジェクトのCG像と音像の幾何学的整合性(3)触知できる実物体に仮想映像を重畳表示した場合の視覚・触覚の補完機能18年度は,以下の5つの研究項目にわけて課題の考察を進めた.(a)現実世界で発した音イベントの検出とMR空間に及ぼす影響の解析前年度行った音イベントの検出処理をさらに推し進め,音響部品を体験者数まで増設した.(b)現実空間に重畳される仮想オブジェクトのCG像と音像の幾何学的整合性音像とCG映像の位置を様々に変化させ,音像の位置とCG映像の位置のずれが気にならないか実験・評価した.(c)触知できる実物体に仮想映像を重畳表示した場合の視覚・触覚の補完機構同じ形状で表面粗さの異なる硬化樹脂製のオブジェクトに対して,粗さの異なるテクスチャのCG映像を重骨し,触覚が視覚に誘導されるか比較実験を行った.(d)上記を確認・検証するための複合現実感実験システムの整備前年度に実施した音イベントの検出の結果を反映し,視覚と聴覚を融合したMR融合空間の実装を進めた.(e)研究成果を活かした体験システムの試作(d)のシステムを利用し,複数人体験可能なMRアトラクション「Watch the Birdie!」を構築した.VR学会第11回大会,インタラクション2007で展示発表し,多数の体験者から好評を得た.現実世界と仮想世界を実時間で融合・表示する「複合現実感(Mixed Reality;MR)」は,近年急速な進歩を遂げているが,これまでの取り組みは視覚的な融合だけに留まっていた.新しい情報提示法としてさらに発展させるために,本研究では,「視覚」に「聴覚」「触覚」も加えた「三感融合型」の複合現実感を考える.本研究では,以下の3点に焦点を当てたMR空間構成法を研究し,具体的に稼動するシステムで実証する.(1)現実世界で発した音刺激がMR空間に及ぼす影響とその精度(2)現実空間に重畳される仮想オブジェクトのCG像と音像の幾何学的整合性

(3)触知できる実物体に仮想映像を重畳表示した場合の視覚・触覚の補完機能.19年度は,以下の4つの研究項目に分けて課題の考察を進めた.(a)現実世界で発した音イベントの検出とMR空間に及ぼす影響の解析前年度までに行った音イベントの検出処理をさらに推し進め,音源の識別や音量,音の連続再生時間をMR空間への入力として利用する方法について検討した。(b)現実空間に重畳される仮想オブジェクトのCG像と音像の幾何学的整合性視聴覚併用型複合現実空間での仮想物体による実音の反射と遮音を実現した.(c)触知できる実物体に仮想映像を重畳表示した場合の視覚・触覚の補完機構前年度に引き続き,同じ形状で表面粗さの異なる硬化樹脂製のオブジェクトに対して,粗さの異なるテクスチャのCG映像を重畳し,触覚が視覚に誘導されるか,またオブジェクトへの触れ方によってその結果が変わるか実験した.(d)上記を確認・検証するための複合現実感実験システムの整備前年度までに構築した視聴覚併用複合現実感システムをUIST2007,ISMAR2007で展示発表し好評を得た.その後,同システムに(a)(b)の機能を追加している.現実世界と仮想世界を実時間で融合・表示する「複合現実感(Mixed Reality; MR)」は,近年急速な進歩を遂げているが,これまでの取り組みは視覚的な融合だけに留まっていた.新しい情報提示法としてさらに発展させるために,本研究では,「視覚」に「聴覚」「触覚」も加えた「三感融合型」の複合現実感を考える.本研究では,以下の3点に焦点を当てたMR空間構成法を研究し,具体的に稼動するシステムで実証する.1.現実世界で発した音刺激がMR空間に及ぼす影響とその精度2.現実空間に重畳される仮想オブジェクトのCG像と音像の幾何学的整合性3.触知できる実物体に仮想映像を重畳表示した場合の視覚・触力覚の補完機能20年度は,以下の3つの研究項目を推進した.(a) MRにおける視聴覚融合の集大成として,19年度までに構築したシステムを,現実空間の音と仮想空間の音を反射や遮音を考慮して混在させるシステムへと拡張した.(b)また,MR空間における視覚と触力覚の補完機能を確認する新たな対象として,実物体に重心の異なるCGモデルを重畳描画する系統的な実験を行い,重心知覚が視覚に引きずられることを確認した.また同実験の一部を,インタラクション2009で展示し,インタラクティブ発表賞を受賞した.(c) 19年度に引き続き,聴覚・触覚を積極的に導入したMRアトラクションを開発した.このMRアトラクションは,特に(a)の技術を積極的に利用したものであり,第13回日本バーチャルリアリティ学会大会に技術展示し,学術奨励賞を受賞した.
ニューラルネットワークを用いた航空機揚力面の動荷重同定

ニューラルネットワークを用いて、飛行荷重より生じる実測できる物理量に基づいて飛行荷重を同定する方法の確立は本研究の最終的な目的である。研究計画としては、平成9年度、実験と応用面での段階に入り、実際の飛行機を対象に、荷重同定を行う予定であったが、実験に使わせる飛行機がなかったので、ニューラルネットワークの荷重同定への応用についてさらに深く検討することにした。揚力面を片持ちばりとモデル化し、揚力面に働く空力荷重を、多集中荷重、移動荷重、円錐曲線分布荷重、放物線分布荷重とモデリングした四種類の荷重同定問題を行った。学習データは、理論計算で作成し、改善された逆伝播アルゴリズムをNN(ニューラルネットワーク)の学習則とした。学習則に含まれている各パラメターよりNN学習の収束生に与える影響について詳しく検討した。局部探索法で、学習パラメターの割合適切な組み合わせを探し出した。学習の収束性、そして、荷重同定の精度に影響する要素がいくつかある。中には、NNの形態、学習パターンの質と量、学習則とそのアプローチ、学習則に含まれる学習定数の組み合わせ等が主である。もし、学習則の組み合わせが不適切であれば、学習が発散する可能性がある。逆に、最適な組み合わせが探せば、収束が著しく速くなる。荷重同定を行う時、これらの要素を十分検討した上で決めることより、NNを荷重同定へ有効に応用できる。今後、実験に使わせる飛行機があれば、実機の揚力面を対象として、地上校正試験よりNNの学習データを得て、NNに学習させ、飛行試験を通じて、揚力面の歪みと変位を実測し、実測した歪みを、学習の収束して終了したNNに入力して、荷重同定を行う研究をしたい。この二年間の研究成果に関して、内外関連する学術誌に3編の論文が掲載され、国際会議で2編の論文を発表した。ニューラルネットワークを用いて、飛行荷重より生じる実測できる物理量(たとえば歪み、変位など)に基づいて飛行荷重を同定する方法の確立は本研究の最終的な目的である。この目的に達するために、平成8年度には、第一ステップとして、まずニューラルネットワークの荷重同定への適用性について調べた。ニューラルネットワークの学習データは理論計算で作成した。揚力面を片持ばりとモデル化し、揚力面に働く空力荷重を分布荷重とモデリングした。分布荷重の圧力中心を変化させるように多数の「荷重-歪み」より構成された学習サンプルを作成した。分布荷重より片持ちばりの下表面の10箇所(断面)に生じる歪みを求めた。そして、歪みをNN(ニューラルネットワーク)の入力情報とし、荷重をNNの教師信号(期待の出力値)とし、NNに繰り返して、学習させる。NNの出力の実際値と教師信号(期待の出力値)の誤差がすべて5%に納めた時点で、学習を終了した。学習データに含まれていない「荷重-歪み』より構成された検査サンプルを作成する。それらの歪みだけ、学習を収束して終了したNNに入力し、荷重同定を行った。学習を収束して終了したNNは迅速に荷重を同定することができた。そして、NNより同定した荷重と理論計算で作成した検査サンプルに含まれた荷重の値と比較した結果、95%の出力は理論値との誤差は8%より低い。そこで、ニューラルネットワークを揚力面の荷重同定へ適用できることが実証された。
ペルー南部の民間医療の現場をめぐる包括的研究:クスコにおけるクランデリスモの諸相

本研究の目的は、ラテンアメリカで実践されている民間医の一種であるクランデリスモが、ペルー部のアンデス高地に位置するクスコという都市においてどのように機能しているのかを明らかにする一方で、クランデリスモを通して人々が作り上げる社会関係を描き出し、これらを通してクスコという都市が現在どのように創り上げられ存在しているのかを明らかにすることにある。本年度は、7月から9月にクスコ県クスコ市で現地調査を行った。前年度の調査に引き続きクランデリスモに関わる諸アクターに聞き聖り調査を行いつつ、特にクランデーロとその客の間でやり取りされる会話と、経済活動、特に貨幣に注目した観察を行った。クランデーロは客の要望に応え、占いや治療儀礼を行う。それに対して客は、お金を渡す。これは資本主義経済に則った行為であるが、この二者間では贈与的意味合いを持つことが確認された。共に、アンデス山岳信仰の神格であるアプとの関係の中で、彼らは私利私欲を禁じる語りをし、その信仰を共有しつつの二者間の行為である。また客層もあらゆる社会階層の人々であり、信仰や観念の共有の仕方は一通りではないことも明らかになりつつある。他方で、クランデーロはクスコ都市部の人々だけでなく、クスコという観光都市の環境の下、外国人観光客とも多くの繋がりを持つ。クスコの都市において出会うこともあれば、クランデーロ自身が海外へ赴くことも明らかになった。以上より、クランデリスモは資本主義経済における貨幣経済にその基礎を置きつつ、アンデスの山岳信仰、もしくはより大きなカテゴリーとしての観念が共有されたものである。そしてクランデーロとその客の関係は、贈与経済と市場経済のグラデーションの中に位置づけられることが明確となった。これらのことは、クスコという都市の状況を具現化していると考えられる。本研究の目的は、ラテンアメリカで実践されている民間医療の一種であるクランデリスモが、ペルーのクスコという都市においてどのように機能しているのかを明らかにする一方で、クランデリスモを通して人々が作り上げる社会関係を描き出し、クスコという都市が現在どのように創り上げられ存在しているのかを明らかにすることにある。本年度の前半(4月9月)では、理論的枠組みの構築と、現地におけるフィールド調査の枠組みや調査法自体の文献研究を行い、後半(10月3月)には現地調査を行った。前半は、クランデリスモを社会的現象として考察する土台として、人々のネットワークや社会圏について研究した。特に拡大パーソナルネットワークや弱い紐帯といった概念を用いたクランデリスモ研究に対する可能性を見出した。そしてこれらの考えから、調査対象の範疇を明確にした。また人々の生活世界におけるネットワークという視点から、都市を考察する理論的枠組みとしての現象学を研究した。ハイデガーやレルフのような考え方から、そしてギデンズが指摘するように、「環境として都市を見るのではなく、都市そのものを問う」という知見を明確にした上で、クスコという都市を、クランデリスモという現象から考察できる可能性を明らかにした。後半の現地調査では、クスコの都市部において民間医療に対する認識をランダムに聞き取った。そこでは、各家庭において実践されている民間医療とその知識の一端が判明した。しかし人々が用いる植物に対する発言から、「われわれ」と「かれら」の間には「薬草」に対する認識に差があることが明らかになった。他方、クランデリスモの諸アクターとなる人々に聞き取りを行うことにより、彼らがクランデリスモに対してある一定の共通の知識(認識)を有すること、それがクスコという場所に根ざしているということが明らかとなった。また、先行研究において報告されていない近代医療をつかさどる、病院とクランデーロとのつながり、その病院における「伝統医療」というセクションの存在、それと政府との関係が判明した。本年度はクスコにおいて、聞き取りと参与観察を中心とした現地調査を行った。聞き取りの対象は、クランデーロ、クランデーロの客、呪物を売る店の主人、店に来る人々、店に呪物や薬草を卸しに来る人々という、クランデリスモの諸アクターであった。この聞き取りを通じ、空間的には店を中心とした、個々のアクターからは店の主人を中心とした繋がりが明らかになった。これらのことから、クランデリスモという現象がどのような人々の繋がりでクスコの都市で成立しているのか、また都市部だけで完結したものではなくより広範な繋がりの中で成立していることが明らかとなった。そこからクランデリスモは閉じたものではなく、開かれたもの、そして拡大していく可能性を有しているものとして立ち現れることが垣間見られる。一方、クスコ都市部でクランデーロとして働いているものたちの中には、クランデーロで有名なQ村出身者がかなり多く存在し、出稼ぎとして働きに来ている。彼らは主に儀礼で「病」を治療し、宗教的な様相を呈している。彼らの知識は父から子へ、子から孫へと家族内での伝承の形をとっており、クスコ都市部の多くの人々からその力を認められている。他方で、儀礼も行うが薬草や油など自然産品を用いて治療を行うクランデーロも存在し、Q村出身者と距離を置くことでクランデーロとしての差異化を図っている。

人々が一口に「クランデーロ」と言っても「クランデーロ」の認識は統一されておらず、都市の多様性を表しているようでもある。また、かつてクランデーロと近代医療の医者との間での衝突が存在したことが聞き取り調査から判明した。文献資料としてはほとんど存在していないものの、彼らの談話から当時の様子を伺い知ることができ、現在の状況がどのように醸成されてきたか、またそこには都市と近代という現代にまで続く問題系が存在していたことが明らかとなりつつある。本研究の目的は、ラテンアメリカで実践されている民間医の一種であるクランデリスモが、ペルー部のアンデス高地に位置するクスコという都市においてどのように機能しているのかを明らかにする一方で、クランデリスモを通して人々が作り上げる社会関係を描き出し、これらを通してクスコという都市が現在どのように創り上げられ存在しているのかを明らかにすることにある。本年度は、7月から9月にクスコ県クスコ市で現地調査を行った。前年度の調査に引き続きクランデリスモに関わる諸アクターに聞き聖り調査を行いつつ、特にクランデーロとその客の間でやり取りされる会話と、経済活動、特に貨幣に注目した観察を行った。クランデーロは客の要望に応え、占いや治療儀礼を行う。それに対して客は、お金を渡す。これは資本主義経済に則った行為であるが、この二者間では贈与的意味合いを持つことが確認された。共に、アンデス山岳信仰の神格であるアプとの関係の中で、彼らは私利私欲を禁じる語りをし、その信仰を共有しつつの二者間の行為である。また客層もあらゆる社会階層の人々であり、信仰や観念の共有の仕方は一通りではないことも明らかになりつつある。他方で、クランデーロはクスコ都市部の人々だけでなく、クスコという観光都市の環境の下、外国人観光客とも多くの繋がりを持つ。クスコの都市において出会うこともあれば、クランデーロ自身が海外へ赴くことも明らかになった。以上より、クランデリスモは資本主義経済における貨幣経済にその基礎を置きつつ、アンデスの山岳信仰、もしくはより大きなカテゴリーとしての観念が共有されたものである。そしてクランデーロとその客の関係は、贈与経済と市場経済のグラデーションの中に位置づけられることが明確となった。これらのことは、クスコという都市の状況を具現化していると考えられる。
口腔扁平苔癬から分離したケラチノサイト,浸潤リンパ球における細胞内情報伝達-ケラチノサイトのサイトカイン産生の亢進並びにリンパ球の病巣への集積に関する生化学的検討

口腔扁平苔癬(OLP)の発症機序と病態を検討し、以下の結果を得た。1)口腔粘膜ケラチノサイト(KC)はGM-CSF、IL-6、TNF-α、IL-1β等のサイトカインを産生し、特にOLPに罹患した粘膜から得たKC(OLP-KC)はこれらのサイトカインを多量に産生した。2)OLP-KCから産生されたサイトカインにより、末梢血の単核球(PBMC)の走化能は亢進し、血管内皮細胞間を通過するPBMCの数が増加した。3)PBMCは、OLP-KCから産生されたサイトカインにより活性化され、PKC活性の上昇、IP_3および[Ca^<2+>]iレベルの上昇、蛋白チロシンリン酸化の亢進が観察された。4)PBMCの活性化と共に、細胞膜上にCD11a.CD11b.CD18等のβ_2インテグリンが強く発現され、これと共に、OLP-KCからのサイトカインにより、血管内皮細胞のVCAM-1、ELAM-1の発現が亢進した。PBMCの内皮細胞間の通過能の亢進は、これらの接着因子の発現の上昇によるものであった。5)KCのサイトカイン産生亢進に関わる外的刺激因子の検討より、LPSおよび温熱が刺激因子として働くことが想定された。すなわち、金属イオンではKCのサイトカイン産生は亢進しなかったが、E.coli由来のLPS、温熱(42°C、10分間)、および熱ショック蛋白(HSP68kDa)ペプタイドによりサイトカイン産生は亢進した。6)KCのサイトカイン産生亢進には、PKCの活性化、蛋白チロシンリン酸化と共にNF_<-κ>Bの活性化が関わっていた。7)LPSによるKCの活性化はCD14を介するのではなく(CD14はKCには発現されていなかった)、CD59を介していた。以上の結果から、OLPの発症機序として、KCからのサイトカイン産生が亢進し、産生されたサイトカインによりPBMCおよび内皮細胞が活性化され接着因子の発現が上昇する。その結果、PBMCの走化能が亢進し、濃度勾配的に上皮下にPBMCが浸潤するものと想定された。KCからのサイトカイン産生亢進は外的因子が考えられ、その1つにLPSとか、温熱が考えられた。今後、さらに詳しくKCのサイトカイン産生刺激因子を追求する必要があり、それと共に、浸潤したPBMCの役割を解明することが必要である。口腔扁平苔癬に罹患した粘膜上皮細胞(OLP-KC)は正常歯肉より分離した上皮細胞よりも多量のサイトカインを産生し、両KCをLSPの存在下で培養すると、より多量のGM-CSF、IL-

6およびTNF-αが産生された。KCの培養上清で末梢血単核球(PBMC)を処理すると、OLP-KCの培養上清ではより強く、血管内皮細胞間隙の通過能(migration)が亢進し、migrationには、CD11a、CD11b、あるいはCD18等の接着因子が深く関わっていることが明らかとなった。さらに、KCの培養上清は、PBMCのこれら接着因子の発現は亢進せしめなかったものの、血管内皮細胞のICAM-1の発現を亢進させた。KCの培養上清によるmigrationの亢進機序をさらに解明するべく、さらに追求してみると、PBMCにおけるPKC活性、IP_3および[Ca^<2+>]iレベルはKCの特にOLP-KCの培養上清で上昇し、52kDa、70kDa、102kDaの蛋白のチロシン残基のリン酸化が亢進した。加えて、KCの培養上清処理によるPBMCのmigration亢進は、ゲニシュタイン、H-7、ワルトマニン、TMB-8あるいはExoenzyme3等の各阻害剤で阻止された。これらの結果より、口腔扁平苔癬では罹患部の上皮細胞から単核球の遊走を促すサイトカインが産生され、単核球は接着因子を介して細胞内シグナルを高め局所に遊走することが推定される。患部の上皮細胞のサイトカイン産生を高める因子として、細菌の菌体内毒素とか、他の外的因子の関与が考えられた。現在までの研究で未だ不十分な点は、上皮細胞のサイトカイン産生亢進の機序と、単核球の遊走における細胞内シグナル伝達の詳細である。これらについては、現在、検討中で、成果が得られつつあるところである。口腔扁平苔癬に罹患した粘膜上皮細胞(OLP-KC)および末梢血単核球(PBMC)を用いて、本疾患におけるリンパ球の病巣への集積機序を解明するべく検討し、以下の結果を得た。1.OLP-KCは、サイトカイン産生能が亢進しており、GM-CSF、IL-6、TNF-α、IL-1β等のサイトカインを多量に産生した。2.OLP-KCのサイトカイン産生はLPSによって、濃度依存的に増強し、熱ショックペプタイド、さらには温熱によっても上昇した。3.OLP-KCの培養上清でPBMCを処理すると、PBMCの血管内皮細胞間隙の通過能は強く亢進し、正常の粘膜上皮細胞の培養上清との間に大きな差が認められた。調べてみると、このmigrationには、培養上清中のIL-1β、GM-CSFおよびTNF-αが関わっていた。4.PBMCのmigrationには、PBMCのCD11a、CD11b、CD18およびCD49dの発現が、さらには内皮細胞ICAM-1、VCAM-1およびE-セレクチンの発現が関わっていた。5.PBMCをOLP-KCの培養上清で処理すると、蛋白チロシンリン酸化が亢進し、PI-3キナーゼ、さらにはPKCが強く活性化され、Rho蛋白の活性化も認められた。しかしながら、FAKの活性化は観察されなかった。6.OLP-KCの培養上清によるPBMCのmigrationの亢進は、ゲニステイン、H-7、ワルトマニン、ExoenzymeC3、およびTMB-8で処理することにより、ほぼ完全に阻害された。これらの結果をもとに、一部については論文を作成し、さらには一部については作成中である。得られた結果からすると、口腔粘膜上皮細胞が外的刺激により、サイトカインが亢進することが推定されることより、現在、ケラチノサイトのサイトカイン亢進機序、さらにはmigrationの亢進したリンパ球のアクチンフィラメントに関して検討中である。
オルガネラ様共生体に輸送される宿主動物由来タンパク質の機能解析

農業害虫として名高いアブラムシは、体腔内に「菌細胞(bacteriocyte)」と呼ばれる特殊な細胞群を持ち、この細胞質中に、2億年にわたり受継いで来たオルガネラ様共生細菌「ブフネラ(Buchnera aphidicola, Gammaproteobacteria)」を多数収納している。アブラムシとブフネラは、単独では生存できない絶対的相利共生関係にあり、多細胞生物内における細菌の「オルガネラ化」を理解するための絶好のモデルである。また、同様の共生系は、アブラムシやそれに近縁な害虫グループの生存に必須である一方、周辺環境中の他の生物には存在しないため、環境負荷の低い新規防除法開発の標的としても有望である。本研究計画では、アブラムシが細菌から水平転移により獲得した遺伝子の産物や、ブフネラの分裂面にリング状の構造を形成するアブラムシ由来タンパク質など、菌細胞内共生系において枢要な役割を果たしていると目される機能未知タンパク質に対する選択的阻害剤を探索し、これらを用いて各タンパク質の機能解析を試みた。平成25年度は、前年度に引続き、化合物アレイ法により得られた複数の阻害剤候補化合物のアブラムシ生体への投与実験を進め、このうち1種類の化合物について、アブラムシ-ブフネラ間共生系を撹乱する、きわめて興味深い効果を見出した。これは、標的タンパク質の具体的機能を示唆するものであり、防除剤開発の基盤データとしても重要である。また、本年度はアブラムシゲノム上の細菌由来水平転移遺伝子から菌細胞特異的にタンパク質が合成され、ブフネラ細胞へ輸送されているとの知見を投稿論文にまとめた。これは、当該遺伝子が、オルガネラ祖先由来の核ゲノム遺伝子群と同等の地位を得ていることを示すもので、生物学に大きなインパクトを与える、きわめて重要な発見である。25年度が最終年度であるため、記入しない。農業害虫として名高いアブラムシは、体腔内に「菌細胞(bacteriocyte)」と呼ばれる特殊な細胞群を持ち、この細胞質中に、共生細菌ブフネラ(Buchnera aphidicola, Gammaproteobacteria)を多数収納している。ブフネラは、約2億年にわたり、アブラムシの親から子へと垂直感染のみによって受継がれており、その過程で多くの遺伝子を失っているため、アブラムシの外で増殖することはできない。一方でアブラムシは、餌である植物師管液に乏しい栄養分の供給をブフネラに依存しており、ブフネラなしでは生存できない。すなわち、アブラムシとブフネラは、両者を合わせてはじめてひとつの生物としてふるまうことのできる複合体を形成していると言え、多細胞生物による、オルガネラ様共生体の獲得機構を理解するための絶好のモデルである。また、同様な菌細胞内共生系は、アブラムシやそれに近縁な害虫グループの生存に必須である一方、周辺環境中の他の生物には存在しないため、環境負荷が低く、かつ効果的な新規害虫防除法の標的としても有望である。本研究計画では、菌細胞内共生系において枢要な役割を果たしていると目される機能未知タンパク質の選択的阻害剤を、新規ケミカルバイオロジー的手法を駆使して探索し、これらを用いて各タンパク質の機能を明らかにする。平成24年度は、化合物アレイ法により得られた複数の阻害剤候補化合物のアブラムシ生体への投与実験を進め、このうち1種類の化合物について、共生系に対するきわめて興味深い効果を見出した。上記阻害剤候補化合物の投与により、アブラムシ-ブフネラ共生系の崩壊を示唆する効果が見出されており、標的タンパク質の機能解明に直結することはもちろん、将来の防除剤開発の基盤データとしても重要な成果と言える。このように本研究計画は目的を達成しつつあり、おおむね順調に進展していると判断される。

前年度から引続き、アブラムシ生体へのタンパク質機能阻害剤候補化合物の投与実験を進める。投与により効果の現れた化合物については、プルダウンアッセイなどにより、標的タンパク質への結合特異性の検証を行う。また、アブラムシでは有効性が低いとされるが、RNA干渉法による標的遺伝子のノックダウンも試みる。これらにより、アブラムシの菌細胞内共生系において枢要な役割を果たしていると目される機能未知タンパク質の機能を明らかにし、菌細胞内共生系の存立基盤の解明をめざす。また、この解析過程で得られるアブラムシの生育阻害・殺傷効果に関するデータは、安全で効果的な新規防除剤開発の基盤情報としてデータベース化する。25年度が最終年度であるため、記入しない。
メラノーマとリンパ管のinteraction-転移促進因子は産生されるのか?-

本研究では、リンパ管内皮細胞の産生する液性因子が悪性黒色腫細胞の増殖・遊走性に対してどのような影響を及ぼすのかについて調べた。ヒト新生児真皮由来リンパ管内皮細胞の培養上清(LEC-CM)に含まれる悪性黒色腫細胞遊走刺激因子について検討し、その結果、LEC-CMに含まれるラミニン421が悪性黒色腫細胞の遊走性を刺激していることが示唆された。【目的】リンパ節転移の有無は、メラノーマの重要な予後因子のひとつである。近年、リンパ節転移のメカニズムの解析が癌組織におけるリンパ管新生という観点から進められてきている。本研究では、メラノーマのリンパ節転移成立に及ぼすメラノーマ細胞(MM)とリンパ管内皮細胞(LEC)の相互作用の役割について検討した。特に、LECが産生する液性因子がMMの遊走能にどのような影響を及ぼすのかについて調べた。【方法】MM5種類およびヒト新生児真皮由来リンパ管内皮細胞(LEC)を用いた。LECは細胞表面のCD31とpodoplaninがともに陽性であることを指標にした細胞だが、さらにこの細胞がLECであることを確認するために、LECに特異的なマーカーの発現をRT-PCR法と免疫蛍光抗体法で調べた。次に、LECを牛胎仔血清を含まない培地で培養し24時間後に回収し、LEC培養上清(LEC-CM)とした。同様にして、MMの培養上清(MM-CM)も作成した。細胞増殖能は、WST-8を用いて評価した。DNA合成能は、チミジンアナログのBrdUを取り込ませ、抗BrdU抗体を用いたELISAで定量した。アポトーシスは、アポトーシス実行因子であるカスペース3/7活性をホモジニアスフォーマットを採用した発光検出法により測定した。細胞遊走能はトランスウェルチャンバーを用いて無血清下、6時間のアッセイで評価した。【結果】使用するLECに、血管内皮細胞の混入がないことを確認した。MMはEC-CMでの培養により,細胞が増殖する傾向はみられなかったが、ケモタキシスは有意に誘導された。LECは、MM-CMでの培養により、細胞が増殖する傾向はみられたが、DNA合成能の増加あるいはアポトーシスの抑制はみられなかった。ケモタキシスの増加はみられなかった。【考察】以上の結果からリンパ管内皮細胞が産生する産生する液性因子がメラノーマの遊走能を刺激している可能性が示唆された。今後、この液性因子の同定をすすめていく予定である。【目的】本研究では、メラノーマの重要な予後因子のひとつであるリンパ節転移成立に及ぼすメラノーマ細胞(MM)とリンパ管内皮細胞(LEC)の相互作用について検討する。平成20年度の研究結果から,LECが産生する液性因子がMMの遊走能を刺激している可能性が示唆された。今年度は、この液性因子の同定をすすめた。【方法】LECの培養上清(CM)を濃縮後,限外ろ過により液性因子の分子量を推定し,RT-PCRとウェスタンブロット法より,ラミニンを同定した。さらに,抗ラミニン1抗体による免疫沈降後のCMを用いて,遊走能の変化を観察した。また,ラミニンとともにMMの細胞表面で接着因子としてはたらくインテグリン,CD151の発現をフローサイトメトリーで観察し,それらの発現抑制によるMMの遊走能の変化についても調べた。【結果および考察】LEC-CMのケモタキシス活性は,分子量100kDa以上に認められ,該当する分子としてラミニン,ナイドジェンなどの細胞外マトリックス成分が考えられた。そこで,これらの成分に着目してLEC-CMに含まれるケモタキシス活性を検討した。ナイドジェンはLEC-CM中に存在していたが,LEC-CMからこれを除去しても,MMに対する遊走能は減少せず,ナイドジェンはケモタキシスの本体ではないと判断した。一方,ラミニンについては,RT-PCRとウエスタンブロット解析の結果から,LECはα4,α5,β1、β2、γ1のラミニン鎖を発現していた。さらに,抗ラミニン-1抗体処理LEC-CMは,MMに対するケモタキシス活性が失われていた。また,ラミニン結合性インテグリン,それと複合体を形成するCD151それぞれの発現をsiRNAを利用して抑制したMMのケモタキシスは有意に低下した。以上の結果から,MMはラミニン結合性インテグリンを介してLEC-CM中にあるラミニンに対してケモタキシスを示すと考えられた。【目的】本研究では、メラノーマ(MM)の重要な予後因子のひとつであるリンパ節転移成立に及ぼすMM細胞とリンパ管内皮細胞(LEC)の相互作用について検討してきた。

平成21年度の研究結果より,LECはα4,α5,β1、β2、γ1のラミニン鎖を発現しており,さらに,抗ラミニン-1抗体処理によりラミニンα4β2γ1複合体を除去したLEC培養上清(CM)は,MMに対するケモタキシス活性が失われていることが確認された。このことより,MMはLEC-CM中にあるラミニンα4β2γ1に対してケモタキシスを示すと考えられた。本年度はin vivoでのMMのケモタキシスにおけるラミニンの作用を検証すべく,MM検体の免疫組織化学的染色を行い,リンパ行性転移の有無とラミニンの発現の相関を調べる。【方法】2000年4月から2006年3月までに北海道大学病院形成外科で治療を行った田症例のうち、リンパ節転移のあった症例4例と、リンパ節転移のなかった4例それぞれの原発巣の免疫染色を行った。LECのマーカーには抗ヒトD2-40マウスモノクローナル抗体、ラミニンα4,β1、β2、γ1それぞれに対する抗体は、抗ヒトLAMAラビットモノクローナル抗体,抗ヒトLamininβ1ラットモノクローナル抗体、抗ヒトLAMB2ラビットモノクローデル抗体、抗ヒトLamininγ1ラットモノクローナル抗体を用いた。なお、ネガティブコントロールとして、色素性母斑症例4例にも同様の免疫染色を行った。【結果および考察】MM症例全例の原発巣で、抗D2-40抗体に染色されるリンパ管が存在し、リンパ節転移のあった4例全例の原発巣において、リンパ管にラミニンα4の発現が認められ、リンパ節転移のなかった4例の原発巣にはラミニンα4は認められなかった。ラミニンβ1、β2、γ1は、リンパ節転移の有無による差異は見られなかった。また、色素性母斑内には抗D2-40抗体に染色されるリンパ管の存在を確認できなかった。以上の結果より、MMのリンパ節転移には、ラミニン鎖のうち、特にα4が関与している可能性が示唆された。
慣性核融合ドライバーとしての励起酸素-ヨウ素エネルギー移乗レーザーの研究

1.本来連続発振であるCOILを核融合ドライバーに用いるため、マグネティックゲインスイッチによる連続パルス動作を試みた。数値計算コード"Dyna2D"による計算結果によると、COILはエネルギー移乗速度がパルス半値幅を決定し、本スイッチで得られるパルス幅は50μsのオーダーであることが明らかになった。実験の結果、連続発振に対して3.7倍のピークを持つパルス発振を達成した。2.COILのパルス動作を達成するために、ポーラスパイプ型パルス動作SOGを開発し、沃素インジェクターと組み合わせてCOILのパルス動作を試みた。実験の結果、出力4.09J、ピークパワー1.27kWのパルス発振を達成した。この方法ではパルス幅はミリ秒のオーダーで、発振器としては核融合ドライバーとしては使えないことがわかったが、パルス型SOGで生成した高密度励起酸素のエネルギーをMaster oscillatorand poweramplifierの方法で取りだす、Hybrid-COIL増幅器が有効であることを明らかにした。3.パルス動作SOGで作られる高密度の一重項酸素のエネルギーを光解離沃素レーザーの増幅器として利用する方式を提案し理論的検討を行った。水蒸気による失活という問題を避けるため、沃素原子をアルキル沃素の光解離という形で供給するHybrid方式が有効であることを見いだした。理論的検討を行うため、マルチパス増幅器を記述できる計算機コード、"NRX7"を開発した。その結果、口径1m、出力157kJの増幅器が総合効率7.6%で実現可能であることが明らかになった。以上の研究結果より、COILを核融合ドライバーとして利用するという当初の提案に対する妥当性を示した。今後は本研究の成果を基に、Hybrid方式によるパルス型COILによる核融合ドライバーの実現性を証明する研究を行う予定である。1.コイルの製作研究に使用するための、亜音速型コイルを製作し、発振に成功した。現在、パラメータを振り、その発振特性を得ているところである。2.大型装置の製作平均出力でKWまで得られるような大型装置に関しては、真空排気部及び電源部が完成し、超音速ノズル及び励起酸素発生器の設計を終え、現在これらを製作中である。平成9年度には、この大型装置を使っての実験が出来る予定である。3.パルス発生部ノ-ディディック・スイッチによってレーザーの利得を変調し、スッチングを行う装置を設計し、試作を完了した。現在、パラメータを振って、その動作特性の基本部分を取得中である。以上の通り、平成8年度は初年度であり、ゼロからのスタートであったため、その実験装置の製作に追われたが、ほぼ完了し、平成9年度からは様々な研究データを取得して行く予定である。励起酸素-ヨウ素エネルギー移乗型レーザーを慣性核融合として利用するための基礎技術を確立するため、平成8年度製作したレーザー装置(COIL)を用いて実験を行っている。得られた主なる結果は次の通りである。1)超音速型化学酸素-沃素レーザーにおいて,動作コスト削減の観点から、従来使用されていたヘリウムガスに替わり、安価な窒素ガスによる高効率動作を達成した。化学効率23.5%という、窒素ガス動作の超音速COILでは世界最高の値を達成した。2)COILの高圧力、亜音速動作を達成するため、レーザー媒質の化学反応を記述するシミュレーションコードを作成,動作可能な条件の探索を行った。シミュレーション結果に基づき、レーザー共振器内部圧力15Torrという、従来のCOILに比べて5倍以上高い圧力においてレーザー発振を達成した。化学効率はまだ超音速動作に比べてかなり低いが、計算ではほぼ同等の効率を達成できる見通しを得ており、今後動作条件の最適化を進めてゆく。3)レーザー媒質における励起酸素濃度、沃素濃度、未反応の塩素濃度を実時間で計測するモニターシステムを開発した。

上記の化学効率23.5%は、このモニターシステムによって計測したデータから動作パラメータの最適化を行った結果得られたものである。4)新たに考案した安定-不安定型共振器を製作、COILに装着してその効果を確認した。レーザービームの品質を表すM^2値(1に近いほど良い)が、従来型の156から29へ向上した。この結果は理論的に予測したものとよく一致した。5)ゼーマン効果を利用したレーザー出力制御方式を確立した。レーザー出力の安定化では±0.4%、また0%100%の任意波形での出力変調が出来ることを実証した。今後は、この技術をベースに媒質の利得を高速にスイッチし、高ピークパワーのパルス発振を行う。第二年度を終え、初期の目標以上の成果が得られた。平成10年度も引き続き成果を上げるべく実験を行う予定である。化学酸素沃素レーザー(Chemical Oxygen-Iodine Laser:COIL)を慣性核融合として利用するための基礎技術を確立するため、平成8-9年度製作したレーザー装置を用いた実験並びに計算と照合しながら最適条件を追求した。得られた主な結果は次の通りである。1)高圧力亜音速モード動作において、レーザー発振効率を向上するために最適動作条件を追求する実験を行った。その結果、化学効率は20.9%まで向上した。これは,本研究グループが超音速動作で得た記録、23.4%に迫るものであり、高圧亜音速モードの有効性を実証した。2)高圧力亜音速モード動作によって、レーザー媒質1リットルから取り出すことのできるエネルギー、即ちエネルギーは超音速動作の4倍以上、3.1J/lまで向上した。これは、同じ出力を得るためには真空ポンプの能力が1/4で良いことを意味し、真空ポンプがレーザー装置のかなりの部分を占めるCOILにとって、装置の大幅な小型化を可能にする。3)レーザー発振効率向上の理論的な側面として準二次元、レーザー発振シミュレーションコードDyna2Dを開発した。4)不安定共振器の中心部に安定なコアを持つ複合共振器の理論的、実験的研究を行った。二次元FFT、部分コヒーレント電場を用いた共振器解析コードPaC2Dを開発した。実際に製作した共振器を用いてレーザー出力、ビーム品質等の性能を理論計算の結果と比較したところ、非常によい一致を得た。開発したコードは、今後様々な方式の新型共振器の理論的研究に有効なツールとなることを実証した。5) Zeeman利得スイッチ法を小型の亜音速COILに適用し、スイッチング動作の有効性を確認する試験を行った。また、前述のコードDyna2Dはレーザー媒質の時間変化を扱えるように考慮しているため理論的検討による最大のパルスピークが得られる条件を追求した。その結果、平均出力20Wレベルの動作で、約3倍のピーク出力が得られた。
近赤外発光性蛍光プローブを用いた植物の気孔開閉におけるシグナル伝達機構の解明

近赤外蛍光色素は,細胞毒性や生体透過性の観点から有用である.そこで,近赤外蛍光色素にpH検出能と細胞内局在性を付与することで,特定のオルガネラにおけるpH変化を追跡できる近赤外蛍光プローブの開発に取り組んだ.(1)細胞内局在の制御ホスファキサンテン色素(POXs)は,5価リン原子をキサンテン環内に組み込んだ構造的特徴を有する近赤外蛍光色素である.組み込んだ5価リン原子は,π骨格と共役しないP-フェニル基を有するため,これを化学修飾することで,色素の特性に影響を与えずに官能基化することができる.実際に,P-フェニル基にモルフォリン(酸性オルガネラ)やHoechst(細胞核)誘導体を導入したPOXsは,導入した置換基に由来する細胞内局在を示した.(2) pH検出能の付与POXsのキサンテン骨格の9位のアリール基に,ジエチルアミノ基を導入することで,酸性領域において蛍光を発する仕組みを付与した.ホスファローダミンを基本骨格とすることにより,酸性領域(pKa = 4.9)で蛍光を発するpHプローブを,また,強酸性化で色素骨格そのものがプロトン化されるホスファフルオレセインを用いることで,弱酸性領域(pH 4.86.2)のみで特異的に発光するpHプローブを開発した.これらの手法を組み合わせることで,動物培養細胞のエンドソーム内や,植物の根・表皮・花粉管の細胞壁にプローブを局在化させることに成功した.動物の培養細胞実験では,初期エンドソームから後期エンドソームへの成熟に伴いエンドソーム内部のpHが低下する様子を観察することに成功した.現在は,現在は植物細胞におけるpH変化の追跡に取り組んでいる.翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。