hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
肝細胞核内因子(HNF4α)の分子病理学的解析

HNF-4α(hepatocyte nuclear factor-4α)は内胚葉形成や肝細胞の分化に重要な転写因子である。HNF-4αには2種のアイソフォーム(P1,P2)があり、組織特異的に発現する。本研究では2種類のHNF-4αアイソフォームを識別できる抗体を用いてヒト肺癌と肝細胞癌を免疫組織学的に検討した。肺腺癌の大半は転写因子TTF-1を発現するが、TTF-1陰性肺腺癌はHNF4α陽性でP2アイソフォームを発現し、その多くは粘液産生性であった。肝細胞癌では組織学的分化度の低下に伴ってP2の発現率が高くなり、P2の発現は術後早期の再発を推測する指標となりうる。HNF-4α(hepatoqyte nucler factor-4α)は核内受容体の一つで、内胚葉形成や肝細胞の分化に重要な転写因子である。一方、TTF-1(thyroid transcription factor-1)は核内転写因子であり、甲状腺や肺などに発現し、肺癌にも高発現することから病理診断に利用されている。しかし、TTF-1陰性肺癌の検討は少ない。今年度はTTF-1陰性肺腺癌の免疫組織化学的検討を行い、HNF4αと粕液形質の発現を比較検討した。肺腺癌262例をWHO分類(2004)に準じて組織分類し、異なったアイソフォームを認識する抗HNF4α抗体と、TTF-1、粘液形質のMUC5ACとMUC2(それぞれ胃粘膜上皮、腸粘膜上皮に発現)に対する抗体を用いて免疫染色を施行した。また、TTF-1陽性例、陰性例の凍結組織からmRNAを抽出し、RT-PCRを施行した。本研究は、肺腺癌がTTF-1陽性・HNF4α陰性群とTTF-1陰性・HNF4α陽性群に大別されることを明らかにした。肺腺癌が2つの転写因子と胃型粘液形質の発現の有無によって2分されることを見出した。なお、現在、肝癌およびEBV関連胃癌におけるHNF4αの発現を検討中である。HNF-4α(hepatocyte nucler factor-4α)は核内受容体の一つで、内胚葉形成や肝細胞の分化に重要な転写因子である。両者を識別できる抗体を用いて昨年は肺癌におけるHNF4αアイソフォームの発現を検討した。本年度はヒト肝細胞癌におけるHNF-4αアイソフォームの発現を免疫組織学的に検討し、臨床病理学的因子と比較した。外科的に切除された肝細胞癌54例について、抗HNF4α抗体(P1,P2)を用いて免疫染色を行い、P2陽性率と組織学的分化度、門脈侵襲、肝内転移、TNM分類について比較検討し、統計解析を行った。また予後についても経過追跡を行い、生存解析を行った。ヒト肝細胞癌54例(高分化型15例、中分化型30例、低分化型9例)について免疫染色を行ったところ、全例P1陽性であったため、P2陽性率と組織学的分化度、門脈侵襲、肝内転移、TNM分類について比較検討した。その結果、P2の発現は分化度が低いほど高率になる傾向がみられた(高分化型27%、中分化型50%、低分化型100%)。門脈侵襲のある症例のP2陽性率(90%)は、門脈侵襲のない症例(43%)に比較して有意に高かった。またTNM stage III/IV症例のP2陽性率(73%)は、TNM stage I/II症例(38%)に比較して有意に高かった。生存率についてはP2陽性群とP2陰性群の間で有意差は認められなかったが、切除2年後の無再発生存率はP2陽性群がP2陰性群に比して有意に低かった。以上、本年度の研究によって、肝細胞癌では組織学的分化度の低下に伴ってP2の発現率が上昇すること、さらにP2の発現が門脈侵襲やTNM分類にも関係するため術後早期の再発を推測する有用な指標となりうることを示した。われわれは2種類のHNF-4αアイソフォーム(P1, P2)を識別できる3種類の抗体(P1を特異的に認識、P2特異的に認識、P1+P2のいずれをも認識)を用いて昨年度はヒト肝細胞癌におけるHNF-4αアイソフォームの発現を免疫組織学的に検討して臨床病理学的因子と比較し,肝細胞癌では組織学的分化度の低下に伴ってP2の発現率が上昇すること、さらにP2の発現が門脈侵襲やTNM分類にも関係するため術後早期の再発を推測する有用な指標となりうることを示した。

以前にわれわれは胃がんにおけるHNF-4αアイソフォームの発現を免疫組織学的に検討し、粘液形質による分類との比較を行ったが、今年度はEBV (Epstein-Barr Virus)関連胃癌におけるHNF-4αの発現を検討した。EBER-1 in situ hybridizationで腫瘍細胞核内に陽性を示した胃癌18例(172例中10.5%)を対象とした。Human Gastric Mucin、MUC5AC、MUC6、MUC2、CD10を粘液形質の判定に用い、HNF-4αの発現と比較した。その結果、早期胃癌10例の検討では、胃型4/10、胃腸型0/10、分類不能型6/10、P1陰性10/10、P2陽性10/10であり、進行胃癌8例では、胃型4/8、胃腸型1/8、腸型0/8、分類不能型3/8、P1陰性5/8、P2陽性8/8であった。以上の結果から、EBV関連、ことに早期胃がんは分類不能型、胃型の粘液形質を呈し、P1陰性であることから、EBV関連胃癌の発生墓地とHNF-4αアイソフォームとの関連が示唆された。昨年は肺癌におけるHNF4αアイソフォームの発現を検討し、粘液産生タイプの腺癌に高発現すること、また、このタイプには肺癌に特異的とされるTTF-1の発現が欠如することを示し、HNF4αと粘液形質との関連を明らかにした。今年度は肝癌のHNF4αアイソフォームの発現と臨床病理学的諸因子との関連を見出した。HNF4αと癌との関係に関するこれらの成果は臨床病理学的に有用であり、研究は順調に進展していると判断される。24年度が最終年度であるため、記入しない。HNF4αに関する癌の研究はP1,P2アイソフォームを識別できる抗体を用いることで、大きく発展している。HNF4αは内胚葉形成や肝細胞の分化に重要な転写因子であり、消化管、肝、腎組織に発現し、癌においても特徴的な発現をみせる。本研究では肺癌、肝癌について組織型や臨床因子との関連を明らかにしており、これから胃癌についても検討予定である。今後は肺癌で明らかになったように、他の遺伝子との関連、相互作用などの理解を深める研究が重要と思われる。
終脳特異的細胞接着分子テレンセファリンによる樹状突起フィロポディア形成の分子機構

樹状突起フィロポディアは発達期の神経細胞に多く見られるダイナミックな構造であり、スパインの前駆体と考えられている。しかしながらその形成・機構、スパインへの移行過程さらにはシナプス可塑性における役割などについてはほとんどわかっていない。テレンセファリン(TLCN)は免疫グロブリンスーパーファミリーに属する細胞接着分子であり、哺乳類終脳の神経細胞(特にスパインを持った神経細胞)に特異的に発現している。これまでに私たちは、TLCNの終脳特異的転写調節機構、樹状突起選択的局在機構などを解明してきた。また昨年度までの本特定領域研究で、TLCNが樹状突起フィロポディア形成を司る重要分子であるという新知見を得た。本年度はTLCNの細胞内領域に結合し、その樹状突起フィロポディア形成機能を担うシグナル伝達分子の探索を、酵母two-hybridスクリーニングにより行った。その結果、ERMファミリーアクチン結合蛋白質群(Ezrin/Radixin/Moesin)がTLCN細胞内領域の膜近傍アミノ酸配列に結合することを発見した。TLCNとERMファミリー分子の結合は、表面プラズモン共鳴法による蛋白質直接相互作用の反応速度論的解析、TLCN誘導発現N2a細胞の免疫染色による共局在解析及び免疫沈降法による複合体形成解析によって確認された。また、活性化型リン酸化ERM蛋白質が海馬初代培養神経細胞の樹状突起フィロポディアに局在することを見出した。さらに、海馬神経細胞に恒常的活性型Ezrinを強制発現させると樹状突起フィロポディア数の増加が、逆にsiRNAによってERM蛋白質発現を抑制すると樹状突起フィロポディア数の減少が観察された。以上の結果から、発達期の神経細胞における樹状突起フィロポディアの形成は、TLCNとERM蛋白質の相互作用によって調節されていると考えられる。しかしながらその形成・維持機構、スパインへの移行過程さらにはシナプス可塑性における役割についてはほとんどわかっていない。テレンセファリン(TLCN)は免疫グロブリンスーパーファミリーに属する細胞接着分子であり、哺乳類の終脳神経細胞(特にスパインを持った神経細胞)に特異的に発現している(Neuron,1994)。これまでに私たちは、TLCNの終脳特異的転写調節機構(Cereb.Cortex,2007)、樹状突起選択的局在機構(J.Neurosci.,2005)などを解明してきた。また昨年度までの本特定領域研究において、TLCNが樹状突起フィロポディア形成を司る重要分子であるという新知見を得ていた(J.Neurosci.,2006)。
単球由来多能性細胞移植による組織修復・再生療法の実用化に向けた検討

1)疾患モデルを用いたMOMC細胞移植による組織再生療法の確立ラットの脳虚血,皮弁モデルを用いて同系MOMC移植による効果を検討した。ラット左中大脳動脈基部を1時間閉塞させた脳梗塞モデルでは,発症1週間後に経頭蓋的にMOMCを移植すると,対照のマクロファージまたは培養液のみを移植した群に比べてその後の神経学的機能評価で有意な改善を示した。一方,基部以外の血行を遮断した皮弁を作成した皮弁モデルでは,同系MOMC移植により,マクロファージ,線維芽細胞,培養液のみの移植に比べて生着面積が広かった。組織学的検討では,いずれのモデルでもMOMC移植群でのみ顕著な血管新生がみられた。GFP遺伝子導入同系ラット由来MOMCの移植実験により、移植したMOMCが血管腔に取り込まれ、血管内皮へと分化することを証明した。2)細胞植に用いるヒトMOMCの至適培条件の確立末梢血単球からMOMCへの分化にはα5β1インテグリンを介したフィプロネクチンとの結合と血小板由来の液性因子の両者が必須であることを明らかとした。候補分子解析から活性化に伴って血小板から放出されるSDF-1をMOMC分化誘導因子として同定したが、同時にTGF-βやPDGFなど分化抑制因子も存在することを明らかにした。従来の末梢血単球に血清+血小板を加える培養条件の代わりに、自己血漿にSDF-1のみを添加した培地で末梢血単球を培養することでMOMC分化誘導の最適化が可能であった。この培養系を用いることで大量の自己MOMCの調整が可能で、それらin vitroで増幅したMOMCを用いた再生医療の実現が可能となった。1)疾患モデルを用いたMOMC細胞移植による組織再生療法の確立ラットの脳虚血,皮弁モデルを用いて同系MOMC移植による効果を検討している。今後,GFP遺伝子導入同系ラット由来のMOMCを移植することで,MOMCの他分化能を検討する予定である。2)細胞移植に用いるヒトMOMCの至適培養条件の確立末梢血単球からMOMCへの分化にはα5β1インテグリンを介したフィブロネクチンとの結合と血小板由来の液性因子の両者が必須であることを明らかとした。本年度は,血小板からMOMC分化誘導因子の放出を促す条件をスクリーニングし,トロンビン刺激での8時間放置が至適であることを見出した。今後,この条件で作成された培養上清中のMOMC分化誘導因子を網羅的な蛋白解析により同定する予定である。3)難治性皮膚潰瘍に対する臨床試験本年度は準備期間として,先端医科学研究所,内科,形成外科,皮膚科,輸血細胞治療部による研究連絡チームを立ち上げ,臨床試験プロトコールを作成中である。本研究では,申請者が発見したCD14^+CD45^+CD34^+I型コラーゲン^+のフェノタイプを持つ末梢血単球由来の多能性細胞(monocyte-derived multipotent cell ; MOMC)を臓器再生のための細胞移植療法に用いるために必要な基礎研究を推進している。

ラット左中大脳動脈基部を1時間閉塞させた脳梗塞モデルでは,発症1週間後に経頭蓋的にMOMCを移植すると,対照のマクロファージまたは培養液のみを移植した群に比べてその後の神経学的機能評価で有意な改善を示した。一方,基部以外の血行を遮断した皮弁を作成した皮弁モデルでは,同系MOMC移植により,マクロファージ,線維芽細胞,培養液のみの移植に比べて生着面積が広かった。組織学的検討では,いずれのモデルでもMOMC移植群でのみ顕著な血管新生がみられた。GFP遺伝子導入同系ラット由来MOMCの移植実験により、移植したMOMCが血管腔に取り込まれ、血管内皮へと分化することを証明した。2)細胞移植に用いるヒトMOMCの至適培養条件の確立末梢血単球からMOMCへの分化にはα5β1インテグリンを介したフィブロネクチンとの結合と血小板由来の液性因子の両者が必須であることを明らかとした。候補分子解析から活性化に伴って血小板から放出されるSDF-1をMOMC分化誘導因子として同定したが、同時にTGF-βやPDGFなど分化抑制因子も存在することを明らかにした。従来の末梢血単球に血清+血小板を加える培養条件の代わりに、自己血漿にSDF-1のみを添加した培地で末梢血単球を培養することでMOMC分化誘導の最適化が可能であった。この培養系を用いることで大量の自己MOMCの調整が可能で、それらin vitorで増幅したMOMCを用いた再生医療の実現が可能となった。
NMR,X-RayおよびCSI-MSによる生体分子の溶液動態の解析

我々はCSI-MSやNMR法を用いて水素結合を中心とする弱い分子間力で結合する化合物の溶液動態構造解析を研究している。種々のステロイド化合物を用いてNMRにおいて溶液中の自己拡散係数(D)1次元測定とCSI-MSにより、溶液中でNarcissistic(自己会合)の解析をした。単結晶X線構造解析(固体状態)とCSI-MS(弱い相互作用を観測できる)の結果から(1)強い水素結合をもつグループ(2)弱い水素結合をもつグループ(3)水素結合無しの3つにグループ分けできた。しかし、D測定からは、水素結合の数が多いほどDの値が小さくなると言う予想に反し、水酸基の数にかかわらずある種の規則性に従って水素結合をするものと、しないものとで二極化するという非常に興味深い結果が得られた。次に、異なる分子間での相互作用について、コール酸の包接・タンパク質一薬物間の相互作用の観測および^<19>F NMRによるタンペク質-薬物間の相互作用の観測においても、Dでの評価の可能性について検討し好結果を得た。さらに、2次元拡散測定(DOSY)法で異性体の混合試料や、分子量の類似する混合物も、Dの差によってスペクトル分離ができた。また、ビスグアニジノベンゼンー安息香酸(1:1,1:2,1:3,1:4の複合体)のDは、安息香酸の比率が大きくなるほどDは小さくなる(分子体積が増加する)ことが判明した。CSI-MSを測定したところ、混合比から見積もられる分子量に相当するピークが観察された。今後は、本複合体を用いて異種核間相互作用の観測に立体的な構造解析法の一手法として、最近その有効性が注目されている固体NMR測定に取り組む予定である。ここで確立したD測定法をイオン液体[bmim]Brに適用し、非常に興味ある結果を得ることができた。分子間に働く相互作用の観測のため、NMRにおいて溶液中の自己拡散係数測定を相互作用のない化合物で行い、検量線を作成した。高分子の分子量の評価で、分子量と拡散係数による検量線が用いられた例はあるが、低分子の評価に使った例はない。また、CSI-MSは相互作用を観測するのに非常に優れた方法であるので本研究にも適用した。また、固体構造解析として単結晶X線解析を用いた。最初にNarcissistic(自己会合)の観測として、ステロイド分子を例に取り、CSI-MS、自己拡散係数、単結晶X線構造解析を用いて溶液中での会合状態の解析を行った。溶液状態で測定を行なうNMRに加えて、弱い相互作用も観測できるCSI-MSによる評価とX線解析からの固体情報を比較することで、ステロイド分子の溶液中の様子について考察した。(論文1)さらに拡散測定によるDOSYを利用した水素結合の評価についても良好な結果を得ることができた。(論文作成中)次に、異なる分子間での相互作用の解析について、コール酸の包接・タンパク質-薬物間の相互作用の観測・^<19>FNMRによるタンパク質-薬物間の相互作用の観測について、拡散係数での評価の可能性について検討した。タンパク質-薬物間の相互作用については、Saturation transfer difference NOE(STD)法やNOE pumping法がすでに報告されているが、実際に活性が知られているヒト血清アルブミン(Human serum albumin, HSA)を用いていくつかの化合物について測定し良好の結果を得た。(論文2)さらにフッ素を含む薬物に対して^<19>F観測により^<19>F-^1HのNOEの2次元測定(HOESY)・自己拡散係数による評価を行い、含フッ素化合物についての^<19>FNMRの有用性を示した。

(論文3)前報(Tetrahedron,60,2004,3487-3492)で5種類のステロイドを単結晶X線解析、CSI-MS、自己拡散測定(BPP-STE)し、Narcissistic(自己会合)を報告した。更に相互作用のない化合物での検量線と比較し、定性的に水素結合の影響を観測した。今回は12種にステロイド化合物を増やし、単結晶X線解析(固体状態)とCSI-MS(弱い相互作用を観測できる)の結果から分子構造と水素結合の相関パターンを(1)強い水素結合をもつグループ(2)弱い水素結合をもつグループ(3)水素結合無しの3つにグループわけできた。しかし自己拡散測定からは、水素結合の数が多いほど自己拡散係数が小さくなるという予想に反して、水酸基の数にかかわらずある法則に従って拡散係数が低下することが証明できた。この結果は、水素結合をするものとしないものとで二極化するという非常に興味深いものと言える。またステロイド以外の水素結合などによる連鎖構造の有無の評価法として、本法が有効であることも分かった。(論文1)次に異種分子間相互作用観測の為に、同程度分子量の混合溶液(グルコース、ベンゾフェノン、デカン酸メチル)の解析を2次元拡散測定(DOSY)法で行い好結果を得た。分子量同程度のステロイド化合物(エストロンとエストラジオール)のDOSY測定でも、みごとに分離することが分かったので、更に検討中である。(未発表)塩基と酸(有機酸・無機酸)とで様々な複合体を形成する。ビスグアニジノベンゼン-安息香酸と1:11:4の複合体を合成し、単結晶X線解析、CSI-MS及び自己拡散測定により、化学量論比に正確に従う複合体形成を見いだした。(論文2)既存のLA600をECA600に改造し高速固体NMR測定が可能となったので、これらの複合体について溶液・固体NMR両面から分子間相互作用を検討中である。以前からコールドスプレー質量分析(CSI-MS)やNMR法を用いて水素結合を中心とする、弱い分子間力で結合する化合物の溶液動態構造解析を研究してきた。溶液中における分子間に働く相互作用の観測のために、NMRにおける自己拡散係数(D)測定が非常に有効であることを種々のステロイド化合物を用いて証明した。水素結合をしない化合物とする化合物で1次元D測定{BPP-STE (bipolar pulse pair stimulated echo)}法でDの値を求めた結果、明らかに違った検量線が得られた。また、混合物のD測定法として注目されている2次元D測定(Diffusion Ordered Spectroscopy : DOSY)法を、同程度分子量の混合溶液(グルコース、ベンゾフェノン、デカン酸メチル)の解析に用いて好結果を得た。分子量差2のステロイド化合物(エストロンとエストラジオール)や異性体であるネロールとゲラニオールの混合試料も、Dの差によってDOSYによりスペクトル分離ができた。また、ビスグアニジノベンゼンー安息香酸から1:1,1:2,1:3,1:4の複合体を合成し、単結晶X線構造解析、CSI-MS、およびD測定を行った。CSI-MSでは、混合比から見積もられる分子量に相当するピークが観察された。
アニメのゲーム化による物語構造と受容反応の分析に基づくリテラシー教授の実証的研究

2017年度の内閣府の調査によると、小中高生の7割以上がネットゲームをしており、比率は年々高まっているという。厚生労働省研究班の12年度の推計によると、ネット依存症の疑いがある中高生は全国に約52万人に上る。子どもを夢中にさせるゲームがもつ魅力を、物語の面から明かにしようとしたのが本研究の目的であった。そのため、ゲームを描いた超人気TVアニメを検討材料に取り上げた。「ポケットモンスター」「遊☆戯☆王」「カードファイト!!ヴァンガード」「ソードアート・オンライン」である。また、ゲームそのものが持つ物語については、「ファイナルファンタジ-」シリーズの検討を行った。アニメのゲーム化という実態をテクストの構造分析を通して明らかにする。それによって映像として自立した物語の文法と言語芸術として自立した児童文学の語りのあり様を比較することが可能となり、今日の子どもの物語環境の内実と享受の枠組みを明らかにできると考え研究を進めてきた。視聴者は、ゲーム化されたアニメ番組にどのような物語を期待するのか。ゲームを物語の主要な要素とする番組を取り上げ、物語文脈で解説するゲームのガイドブックのような、メタ・フィクション的物語構造をアニメ番組に見出し、<物語>として享受しているのではないかとの仮説をテクストの構造分析と受け手の反応調査を通して、実証しようとする研究である。事前調査としてのアニメ番組視聴アンケートと、PAC分析(Personal Attitude Construct,信州大学内藤哲雄開発)のソフトの活用、具体的には、番組視聴後に行うカードの記入、マトリックス表の作成、調査者によるデンドログラムの作成とそれを使用した個別の面談によるサンプル調査を、関西の3大学で実施した。小学生、中学生、高校生に実施する為の改善策を検討中である。本研究の「研究の目標」は、「1マルチモーダルな兒層の物語環境」を明かにすることである。そのため「2アニメ番組のゲーム化」、マルチモーダルテクストの中でもゲームをアニメ化したテレビ番組を研究対象としている。アニメのゲーム化の実態をテクストの構造分析を通して解明しようとしている。今日の児童の物語環境の内実と、物語を享受する枠組み自体の変質の実態の一端を明かにしようとするものである。「研究実施計画」は、「1物語の構造分析を通してアニメのゲーム化による変質をあきらかにする」ため、「ポケットモンスター」「遊☆戯☆王」「カードファイター!!ヴァンガード」を取り上げ分析した。また、「2受容者の反応サンプル調査を平行しておこない、物語としての仕掛けを解明する一助とする」ことを目指し、大学生を対象に調査を行い、PAC分析を試みた。ただし、個人情報に関わるため、義務教育の学校の許可を得ることが困難となり研究計画の見直しをおこなった。その結果、「深夜アニメ」にまで研究対象を広げ、ライトノベルやゲームを原作とする作品を取り上げる。(1)物語がゲーム内で展開するもの1「ソードアート・オンライン」(2)物語が時間の反復構造を持つもの1「シュタインズ・ゲート」2「魔法少女まどか☆マギカ」(1)は、登場人物がゲームの物語世界に閉じ込められていることを意識している番組である。(2)は、ゲームの物語構造の特徴をアニメ化したと考えられる番組である。これらの番組を分析することによって、当初の「研究の目標」である、今日の児童の物語環境の内実と、物語を享受する枠組み自体の変質の実態の一端を、一層解明できるのではないかと考えている。1 26年度に実施した、大学生に対して行ったサンプル調査、記入アンケートと個別インタビューのPAC分析の実施しと文章化。大学生のサンプル調査を実施して、PAC分析が有効な技法であることは判明した。しかし、深く個人情報に関わるため、義務教育において学校の許可を得ることが困難であることが判明した。そのため研究計画の見直しをおこない、大学生のサンプル調査のみとすることにした。2ゲーム化されたアニメ番組の分析と文章化による公表。商品が物語の内容に直結する番組と、ゲームが物語に直接登場する2種類の番組を分析し、文章化した。(1)登場人物が、物語の中でカードゲームをする番組1「遊☆戯☆王」1998年4月1998年10月テレビ朝日系放映「遊☆戯☆王デュエルモンスタース」2000年4月2004年9月テレビ東京系放映担当羽田潤2「カードファイト!!ヴァンガード」2011年1月4日テレビ東京系等放映担当松山雅子(2)登場人物が、ゲームソフトの物語のなかで活躍する番組「ポケットモンスター」1997年4月1日テレビ東京系全国ネット放映担当畠山本研究の「研究目的」は、マルチモーダルな児童の物語環境」を明かにすることである。平成27年度は、そのためゲーム理論に関わって基礎から勉強するとともに、ゲームをアニメ化したTV番組を検討してきた。今日の児童の物語環境の内実と、物語を享受する枠組みの変質の実態の一部を明かにした。「研究実施計画」は、27年度に一部変更を余儀なくされたが、TVアニメ「ソードアート・オンライン」とライトノベル『ソードアート・オンライン1アインクラッド』物語構造の補完関係、RPG「ファイナルファンタジー」のゲームとしての変遷に絞りこむことで、ほぼ目的に沿って達成されつつある。1 26年度の実施した大学生に対するサンプル調査で、個人情報に深くかかわることが判明したこと。2小中学生の調査が協力者の転勤等で実施困難になったこと。3ゲーム理論に本格的に取り組まなければならないことが判明したこと。このほかに、共同研究者が全国学会の開催を引き受け、超多忙になったことも理由に挙げられる。

1 29年度には、研究分担者と26年度のゲーム世界の受容について、27年度のゲーム世界の物語について、28年度のゲームそのものの物語とアニメ化されたゲーム世界について各自の研究成果を検討し、問題点や未検討の部分の確認を行った。そのうえで、下記のようにそれぞれの分担テーマにそって論文としてまとめる作業を行った。2義務教育の児童、生徒を対象とする調査が、当初の計画から大幅に変更を余儀なくされたため、大学生のサンプル調査のPAC分析を行い有効であることは確認できたが、論文化には至っていない。大学生の本調査をふまえて、今後も引き続いて考察を行い、研究報告書への収録を予定している。(担当松山)3ゲーム世界を描いたTVアニメの検討は、まず、「ポケットモンスター」始めた。ゲーム「ポケットモンスター」を楽しんだ世代が、成長し熱中したのがライトノベルとしてMMORPGの世界を描き、シリーズ化を果たしたライトノベル『ソードアート・オンライン』である。その物語構造に見られるゲーム的な特色を検討し、論文化した。続いて、深夜アニメとして放送された「ソードアート・オンライン」の検討を行い論文化した。「ソードアート・オンライン」は、TVアニメ「ポケットモンスター」を見て育った世代が、熱狂的に支持し、後にゲームも発売された番組である。(担当畠山兆子「ライトノベルに描かれたMMORPGー」「TVアニメ「ソードアート・オンライン」」)4ゲームそのものがもつ物語については、RPG「ファイナルファンタジー」シリーズの1と15の圧倒的な画面のアニメ映画を思わせるリアルさを踏まえて、アバターがより現実味をおび、複雑な人間心理を追求する物語を内包することを明らかにした。ゲームの物語は伝承文学の英雄物語を基本に構成されている事を、論文で明らかにした。(担当、羽田潤「コンピュータゲームの物語構造」)2017年度の内閣府の調査によると、小中高生の7割以上がネットゲームをしており、比率は年々高まっているという。厚生労働省研究班の12年度の推計によると、ネット依存症の疑いがある中高生は全国に約52万人に上る。子どもを夢中にさせるゲームがもつ魅力を、物語の面から明かにしようとしたのが本研究の目的であった。そのため、ゲームを描いた超人気TVアニメを検討材料に取り上げた。「ポケットモンスター」「遊☆戯☆王」「カードファイト!!ヴァンガード」「ソードアート・オンライン」である。また、ゲームそのものが持つ物語については、「ファイナルファンタジ-」シリーズの検討を行った。4月、1週間に放映されていた全てのアニメ縁組の調査を行い、その中からゲームに関わる番組を抽出、視聴。また、これまで放映されていた番組のうち、ゲームに関わる内容を持つ番組のリストを作成し収集、視聴。調査で取り上げる番組を選定。候補作品として、「ポケットモンスター」(1997年現在)
グリーンビルディングの実現のためのＬＣＡと数値解析を援用した最適設計手法の開発

設計初期段階におけるグリーンビルディングデザインのリファレンスとなるモデルを提供する設計手法の構築を目的とし、遺伝的アルゴリズム(GA)による最適化手法と計算流体力学(CFD)・ビルディングエネルギーシミュレーション(BES)による建築物の環境性能の定量的な評価手法の融合によって、建築物の存続期間の環境性能変化を考慮する上での最適な外観デザインの導出を試みた。具体的な研究方法と内容は以下に述べる。まず、風環境及び省エネ効果、各々の環境性能を最適にするデザインの導出手法を別建てにする。i)風通しを考慮した建築物の幾何学的な形状の最適設計手法を作成した。最適化手法としてはGAを用い、設計変数(建築物の形態や向き及び敷地内での配置)の変化による風通しの良否をCFDにより定量的に評価した。ii)同じく、GAを用いて省エネ指向の設計案の最適化を行った。最適化の目的である環境性能としてはエネルギー消費量を採用し、BESを用いた数値解析によって外観デザイン(建築物の幾何学的な形状及びエンベロープデザイン(外壁レイヤーの構成や窓の面積やガラスの種類))の変更に伴うエネルギー消費量変化を評価した。iii) i)とii)で構築した要素技術の融合により、複数の環境性能の相互作用やトレードオフの考慮可能な多目的最適化を行い、グリーンビルディングの実現のためのリファレンスとなる外観デザインを導出した。27年度が最終年度であるため、記入しない。設計初期段階におけるグリーンビルディングデザインのリファレンスとなるモデルを提供する設計手法の構築を目的とし、遺伝的アルゴリズム(GA)による最適化手法と計算流体力学(CFD)・ビルディングエネルギーシミュレーション(BES)による建築物の環境性能の定量的な評価手法の融合によって、建築物の存続期間の環境性能変化を考慮する上での最適な外観デザインの導出を試みる。具体的な研究方法と内容として下記を予定する。i)風通しを考慮した建築物の幾何学的な形状の最適設計手法を作成する。最適化手法としてはGAを用い、設計変数(建築物の形態や向き及び敷地内での配置)の変化による風通しの良否をCFDにより定量的に評価する。ii)同じく、GAを用いて省エネ指向の設計案の最適化を行う。最適化の目的である環境性能としてはエネルギー消費量を採用し、BESを用いた数値解析によって外観デザイン(建築物の幾何学的な形状及びエンベロープデザイン(外壁レイヤーの構成や窓の面積やガラスの種類))の変更に伴うエネルギー消費量変化を評価する。iii) i)とii)で構築した要素技術の融合により、複数の環境性能の相互作用やトレードオフの考慮可能な多目的最適化を行い、グリーンビルディングの実現のためのリファレンスとなる外観デザインを導出する。iv)次に、i)とii)で採用された環境性能を、建築物の生涯を考慮して評価するための手段を構築する。建築物の長寿命化に伴って今後の加速する気候変動に対応した建築物性能の評価にあたっては、将来の標準気象データ整備が必須である。手段としては、大気循環モデルによる解析結果を活用し、領域気象モデルを用いた数値解析によって、関東地方の近未来の気候予測を行う。都市構造変化の将来シナリオから都市温暖化の影響も考慮する。その解析結果から、気候変動を考慮した建築物の長期的な環境性能の評価のための将来の標準気象データを作成する。v) iii)で構築された手法を用いたファサードの最適設計プロセスにiv)で作成された将来の標準気象データを導入する。これによりiii)の結果である最適設計案の環境性能が現在と将来の気候でどの程度変化するか試算する。

まず、風環境及び省エネ効果、各々の環境性能を最適にするデザインの導出手法を別建てにする。i)風通しを考慮した建築物の幾何学的な形状の最適設計手法を作成した。最適化手法としてはGAを用い、設計変数(建築物の形態や向き及び敷地内での配置)の変化による風通しの良否をCFDにより定量的に評価した。ii)同じく、GAを用いて省エネ指向の設計案の最適化を行った。最適化の目的である環境性能としてはエネルギー消費量を採用し、BESを用いた数値解析によって外観デザイン(建築物の幾何学的な形状及びエンベロープデザイン(外壁レイヤーの構成や窓の面積やガラスの種類))の変更に伴うエネルギー消費量変化を評価した。iii) i)とii)で構築した要素技術の融合により、複数の環境性能の相互作用やトレードオフの考慮可能な多目的最適化を行い、グリーンビルディングの実現のためのリファレンスとなる外観デザインを導出した。2年目の研究が計画通り進展しており、その成果として国内学会発表論文1本、海外発表論文2本、また雑誌論文も1本が掲載されている。おおむね順調に進展していると考えられる。27年度が最終年度であるため、記入しない。これまで構築した風通しを考慮した建築物の幾何学的な形状の最適設計手法とBESを用いた数値解析によって外観デザイン手法の連成作業を行う予定である。1年目の研究が12月から始まったということで、まだ成果として現時点で掲載された論文はない。しかし、4ヶ月間の研究をまとめ、国内学会発表論文1本、海外発表論文1本をすでに投稿しており、雑誌論文も1本査読中である。風通しを考慮した建築物の幾何学的な形状の最適設計手法についてはある程度まとまっていろと考えられ、これからはBESを用いた数値解析によって外観デザイン(建築物の幾何学的な形状及びエンベロープデザイン(外壁レイヤーの構成や窓の面積やガラスの種類)の変更に従うエネルギー消費量の変化について評価を行う予定である。
タンパク質工学とゼブラフィッシュ受精卵を利用したアデニン置換技術の開発

本年度はDNA上の特定のシチジンを脱アミノ化するゲノム編集手法(Target-AID法)のゼブラフィッシュにおける効果検証を行い、その結果をまとめた論文がScientific Reports誌に掲載された。加えて、Target-AID法を改変することにより、アデニン置換技術の新規開発を行った。具体的には、DNA上のシチジンを脱アミノ化するシチジンデアミナーゼ(AID)の活性部位を、RNA上のアデノシンを脱アミノ化するアデノシンデアミナーゼ(ADAR)の活性部位と置換した。この人工酵素をコードするmRNAを、標的DNAを規定するguide RNAと共にゼブラフィッシュ受精卵に導入した。導入した受精卵のゲノムDNAに由来するクローンをシーケンス解析した結果、guide RNAが規定する配列上のアデニンがグアニンに置換されたクローンが数%の頻度で確認された。一方で、DNA上の特定の4塩基のみを置換するというTarget-AIDシステムのDNA編集における特異性を利用し、DNA二本鎖切断を生じずに予測可能な欠失変異を生じさせる新規ゲノム編集手法の開発にも着手した。数種類の改変型Target-AIDの作製とその効果検証を行った。その結果、低頻度ながらguide RNAが規定する標的配列上のアデニンをグアニンに置換する活性を有した改変型Target-AIDを選抜することに成功した。一方で、当研究を進める中で新たに着想した新規ゲノム編集技術の開発にも着手した。引き続き、上記の新規ゲノム編集技術の改良を行う。アデニン置換技術に関してはハーバード大が類似した技術であるadenosine base editor (ABE)を発表したため、予測可能な欠失変異を導入する新規ゲノム編集技術の開発を主に進める方針である。変異の純度を高めるために、使用する酵素の最適化を行う。その後、複数箇所の同時編集効率やoff-target効果の検証を行う。
宇宙機の総合的自律システムの構築とその軌道上実証実験

1.実時間タスクプランニングアルゴリズムの設計論に関する研究宇宙機の自律化の核となるのが,「宇宙機が状況に応じて必要なタスクを判断して実行する」タスクプラニング技術であるが,宇宙機に搭載される計算機のリソースの制約から,タスクプラニングを状況の変化に十分対応できる程度の実時間性を持って行うことは一般に難しいとされており,この計算時間の問題を解決することが宇宙機の自律化のための最も重要な課題の一つであると言える.本研究では,プラニングのための計算時間を状況の変化に対して十分無視できるほど小さくするという従来の実時間の考え方は非現実であるとして,プランの探索に費やす時間を適切に制御することによってなるべく良いプラニング結果を得ることを実時間プラニングと捉える柔軟な実時間の考え方を導入した.そして,そのための探索時間制御アルゴリズムの設計・構築についての汎用的な方法論を導出し,いくつかの現実の具体的な問題に適用することにより,その有効性を確認した.2.宇宙での新規技術実証のための超小型衛星の研究・開発本研究では,研究成果の実証実験を実際の人工衛星において行うことを計画しており,前年度に引き続き超小型衛星の研究開発を行った.2004年度より開発を開始した超小型衛星XI-Vは2005年10月に打ち上げられ,その後約1年経過した2007年3月現在でも,新型太陽電池の軌道上実証などの技術実証実験を継続的に行っている.この実績は,民生品を用いた低コスト・短期間開発の超小型衛星でも,新規宇宙技術の十分長期にわたる軌道上実証実験を実施することができることを示した点で,大きな成果であった.さらに,実際に1.で構築した自律化技術の実験を行うプラットホームとして,より高機能化した次期衛星も平行して開発しており,2008年に予定されている打ち上げ後に軌道上実証事件を行うべく準備を進めている.今年度は研究計画どおり,地上運用局も含めた宇宙機システム全体の自律化及びその軌道上実証実験を実施するにあたって必要となる,基本骨格づくりに重点を置いて研究を行った.超小型人工衛星XI-V(10cm立方,1kg)やPRISM(20cm立方,5kg)の設計・開発を実際に行い,自律プログラムを宇宙機に搭載する際に問題となる様々な点を明らかにし,その上で,次年度以降本格的に構築していく宇宙機自律システムの基本骨格の作成を開始した.具体的な研究成果は以下の通りである.(1)超小型人工衛星(XI-V, PRISM)の研究・開発当研究室で開発を行っている人工衛星XI-VおよびPRISMを利用した,自律プログラムの軌道上実証実験について検討を行った.その結果,計算リソース等の制約により,衛星システムの自律化に対して一般的に要求される機能を実現することは衛星単体では困難であり,このクラスの衛星(nano-satellite, micro-satellite)で自律システムを構築するためには,衛星本体と地上運用システムが強調して動作し双方の欠点を補うことが必要であることを示した.超小型人工衛星の研究・開発成果については,電子情報通信学会論文誌に投稿し掲載された.(2)自律システムの基本骨格の作成研究成果(1)で検討した自律システムについて,基本骨格となる部分の作成を開始した.本システムでは,地上運用側は豊富な計算リソースを生かして,負荷の高い計算を要するプラニング・スケジューリングを担当し,宇宙機側ではリアルタイムで内部情報を扱える利点を生かして,地上側で作成したプランの実行時モニタリングを担当する.平成16年度は,主に宇宙機側の機能であるモニタリング機能について,実際に開発している衛星の製作を行いながらプロトタイプを作成した.本研究は,宇宙機の運用コスト低減やリスク回避能力を高めるための自律システムの構築を行い,超小型衛星を用いた軌道上技術実証実験を行うものである.本年度は以下の項目についての研究を行った.(1)宇宙での新規技術実証のための超小型衛星の研究・開発本研究では,成果の実証実験を実際の人工衛星において行うことを考えており,前年度に引き続き超小型衛星の研究・開発を行った.2004年度より開発を開始した超小型衛星XI-Vは,2005年10月にロシアのロケットにより打ち上げに成功し,2006年3月現在,新型太陽電池の実証などの新規技術実証実験を継続的に行っている.この実績は,民生品を用いた大学による低コスト・短期間開発の超小型衛星でも新規技術の軌道上実証実験を実施することができることを示した点で,大きな成果であったと言える.次年度も超小型衛星の開発を続け,より高機能化した次期衛星PRISMで,本研究の成果となる自律システムの実証試験を搭載する予定である.(2)地上・宇宙機間の協調運用システムの研究計算リソース等の制約により,宇宙機システムの自律化に対して一般的に要求される機能を十分に実現することは宇宙機単体では困難であり,計算負荷の高いプラニング・スケジューリングを地上システムが行い,宇宙機本体は地上側で作成したプランの実行とトラブル時の対応を担当するという,宇宙機・地上間の協調システムが必要である.前年度より検討を続け,地上側でCSP(制約充足問題)ベースのプラニングを行い,宇宙機側ではトラブル時には元のプランに存在する制約の構造を利用したプランの再構成を行うことによって,通常運用時のプラニングや軽微なトラブルの宇宙機側での対処が十分に可能であることを示した.1.実時間タスクプランニングアルゴリズムの設計論に関する研究宇宙機の自律化の核となるのが,「宇宙機が状況に応じて必要なタスクを判断して実行する」

タスクプラニング技術であるが,宇宙機に搭載される計算機のリソースの制約から,タスクプラニングを状況の変化に十分対応できる程度の実時間性を持って行うことは一般に難しいとされており,この計算時間の問題を解決することが宇宙機の自律化のための最も重要な課題の一つであると言える.本研究では,プラニングのための計算時間を状況の変化に対して十分無視できるほど小さくするという従来の実時間の考え方は非現実であるとして,プランの探索に費やす時間を適切に制御することによってなるべく良いプラニング結果を得ることを実時間プラニングと捉える柔軟な実時間の考え方を導入した.そして,そのための探索時間制御アルゴリズムの設計・構築についての汎用的な方法論を導出し,いくつかの現実の具体的な問題に適用することにより,その有効性を確認した.2.宇宙での新規技術実証のための超小型衛星の研究・開発本研究では,研究成果の実証実験を実際の人工衛星において行うことを計画しており,前年度に引き続き超小型衛星の研究開発を行った.2004年度より開発を開始した超小型衛星XI-Vは2005年10月に打ち上げられ,その後約1年経過した2007年3月現在でも,新型太陽電池の軌道上実証などの技術実証実験を継続的に行っている.この実績は,民生品を用いた低コスト・短期間開発の超小型衛星でも,新規宇宙技術の十分長期にわたる軌道上実証実験を実施することができることを示した点で,大きな成果であった.さらに,実際に1.で構築した自律化技術の実験を行うプラットホームとして,より高機能化した次期衛星も平行して開発しており,2008年に予定されている打ち上げ後に軌道上実証事件を行うべく準備を進めている.
水素結合型プロトン伝導体の相転移とプロトン伝導メカニズムの解明

高温で超プロトン伝導性を示すプロトン伝導体における,プロトン伝導メカニズムに関して,結晶構造の観点から研究を行った.中性子を用いた高温での構造解析の結果,プロトンが伝導する様子を捉えることに成功した.これより,プロトンの伝導経路が明らかとなり,プロトンは隣り合うプロトンの位置を経由しながら2次元的に移動していることが明らかとなった.また,隣り合うプロトンの位置の中間には,準安定位置があり,そこを経由してプロトンが移動していることが明らかとなった.高温で超プロトン伝導性を示すプロトン伝導体における,プロトン伝導メカニズムに関して,結晶構造の観点から研究を行った.中性子を用いた高温での構造解析の結果,プロトンが伝導する様子を捉えることに成功した.これより,プロトンの伝導経路が明らかとなり,プロトンは隣り合うプロトンの位置を経由しながら2次元的に移動していることが明らかとなった.また,隣り合うプロトンの位置の中間には,準安定位置があり,そこを経由してプロトンが移動していることが明らかとなった.本研究はX線及び中性子を用いた構造解析により,プロトン伝導体の伝導メカニズムや相転移を構造的観点から明らかにすることである.平成22年度は実際の実験に向けた準備として,結晶育成や高温環境装置の開発を行った.結晶育成はいくつかの異なる条件(原料試薬の混合比,育成温度)で行い,Rb_3H(SeO_4)_2とRb_3H(SO_4)_2に関しては比較的大きな単結晶の育成に成功した.特にRb_3H(SeO_4)_2に関しては,中性子実験を行うに十分な大きさの単結晶の作成に成功した.作成された単結晶に対しては,X線や中性子を用いて結晶性のチェックを行い,良質な単結晶であることが確認された.今年度はこの試料を用いて,中性子・X線構造解析を行う予定である.結晶育成に関しては,今年度も継続して行っていく.X線実験用の高温環境装置は,試作品によるテストを行い,出力電圧70V程度で300°C程度の温度に到達することが確認された.今年度は,試作品に改良を加えた本装置を作成し,実際の高温実験を行う予定である.本研究の目的は構造的観点からプロトン伝導体中のプロトン伝導メカニズムを明らかにすることである.昨年度の研究により,Rb_3H(SeO_4)_2の良質な大型単結晶育成に成功しており,本年度はこの単結晶を用いた中性子単結晶構造解析を行い,伝導プロトンの直接観察を行った.実験は,日本原子力研究開発機構原科研内の研究用原子炉(JRR-3)に設置してある中性子4軸回折計を用い,超プロトン伝導相転移温度の上下で行った.また,実験に際しては伝導度の同時測定を行い,マクロ物性の変化を確認しながら構造データの収集を行った.相転移に向かう構造の変化を詳細に調べた結果,2つのSeO_4四面体を繋ぐ水素結合の距離が温度の上昇にともない増加することがわかった.超プロトン伝導相においてはSeO_4四面体の1つの頂点酸素が3つの等価な位置を同時に占有する無秩序な状態にあることがわかった.このときSeO_4四面体は非常に歪んだ構造をしており,相転移が自由エネルギー中のエントロピーの項の要請によるものであることを示唆している.原子核密度分布解析を行った結果,構造全体に広がる連続的な密度分布が相転移温度以上で確認された.この密度は負の散乱振幅によることがわかり,プロトンの伝導経路を可視化したものであることがわかった.この経路は3回軸を囲む3つの水素原子位置を結ぶようにネットワークを構築しており,主要なプロトン伝導経路は2次元的であることがわかる.この結果は伝導度の方向依存性の測定結果と一致する.また,隣り合う水素原子位置の間には,小さな密度の山が確認され,プロトンが隣り合う2つの位置を移動する際に,中間位置を経由して移動していることが示唆された.
ハンドマッサージによるリラクセーション効果の科学的実証に関する研究

看護技術のひとつとして質の保証されたハンドマッサージが実践されることを最終目標として,健康な大学生及び高齢者を対象として,ハンドマッサージの自律神経活動・循環動態及び気分への影響を検討した。その結果,ハンドマッサージにより,健康な大学生・高齢者共に生理的・心理的にリラクセーションが促され,循環器障害を有する高齢者においてもその安全性が確認できた。また,マッサージ実施者と受け手の良好な人間関係が,リラクセーション効果に影響することが示唆された。健康な大学生を対象とした研究の次の段階として,平成19年度は「健康な高齢者におけるハンドマッサージの自律神経および心理面への影響」を検証した。健康な大学生を対象としたハンドマッサージの生体反応では,自律神経活動(心拍変動及び鼻尖部皮膚表面温度),主観反応(STAI及び感情プロフィール検査),覚醒度とリラックス度(VAS)において生理的・心理的の両側面からリラックスできたことが明らかになり,特に状態不安については著しい効果があった。同様に地域で自立して生活を営んでいる健康な高齢者(平均71.6±7.2歳)においても,生理的・心理的の両側面からリラックスできたことが明らかになった(日本統合医療学会に投稿準備中)。また降圧剤を内服中の人がリラクセーション訓練を治療に加えると,血圧がさらに下がることが明らかにされており,高血圧などの循環器疾患罹患者にリラクセーション訓練を実施する際には医学的注意が必要である。そこで,地域で自立して生活を営んでいる,高血圧と診断され治療中の高齢者(平均72.2±4.5歳)と,先の研究対象である健康な高齢者において,ハンドマッサージの生体反応を比較検討した。その結果,ハンドマッサージ実施前後で血圧値の有意な差はなく,心拍変動の変化も正常範囲内であった。そして生理・心理的の両側面において高血圧罹患者と健康な高齢者の間に有意な差はなかった(日本生理心理学会に投稿準備中)。本研究は将来的には患者や在宅における要介護者への看護ケアのひとつとしてハンドマッサージを実践することを目標としている。今回の健康な高齢者および高血圧罹患者における結果より,ハンドマッサージのリラクセーション効果のみならず,安全性も明らかにすることができたと考えている。平成19年度に実験を終了した「健康高齢者におけるハンドマッサージの自律神経活動および心理面への影響」,および「高齢者におけるハンドマッサージの自律神経活動および心理面への影響-高血圧群と非高血圧群との比較検討-」を学会で発表し,それぞれ論文投稿の準備中である。本研究は将来的には患者や在宅における要介護者への看護ケアのひとつとして,ハンドマッサージをより効果的に実践することを目標としている。血圧などの循環器疾患患者にリラクセーション訓練を実施する際には医学的注意が必要とされている。平成21年度には,より効果的なハンドマッサージの実施方法として,看護実践場面で日常的に実施されている足浴との組合せによる相乗効果を明らかにするため,健康高齢者と対象として〔ハンドマッサージのみ〕〔足浴のみ〕〔足浴中ハンドマッサージ〕のリラクセーション効果を自律神経活動および心理面から比較検討することを予定している。そこで予備実験を必要に応じて繰り返し実施し,実験計画を立案した。併せて,文献検討に基づきデータ解析法の見直しを行った。また,現在実験はすべて山梨大学で実施しているが,被験者の確実な確保のため,研究分担者山崎が所属する園田学園女子大学でも実験を並行して実施できるよう,実験環境の整備を行った。血圧などの循環器疾患患者にリラクセーション訓練を実施する際には医学的注意が必要とされているが,これまでの健康な高齢者および高血圧罹患者における研究結果より,ハンドマッサージのリラクセーション効果のみならず,安全性も明らかにすることができたと考えている。本年度は,より効果的なハンドマッサージの実施方法として,看護実践場面で日常的に実施されている足浴との組合せによる相乗効果を明らかにするため,健康高齢者を対象として〔ハンドマッサージのみ〕〔足浴のみ〕〔足浴中ハンドマッサージ〕のリラクセーション効果を自律神経活動および心理面から比較検討を実施した。予備実験をふまえて立案した実験計画に基づき,対象者13名に実施した。しかし対象者のほとんどが農業を営んでいたため,農繁期を避けての実験実施となり,予定よりもデータ収集に時間がかかりデータの分析が終了したところである。現在学会発表(第30回日本看護科学学会学術集会に発表予定)及び論文作成作業を進行中である。分析結果より,現在〔ハンドマッサージのみ〕と〔足浴のみ〕に比べ,〔足浴中ハンドマッサージ〕の心理的リラクセーション効果は大きいことが明らかにできた。自律神経活動によるリラクセーション効果の評価は,さらに検討を行っている。

また,〔ハンドマッサージのみ〕と〔足浴のみ〕との比較,その結果をふまえての〔足浴中ハンドマッサージ〕のリラクセーション効果についても検討している。
動物卵表層におけるアクチン繊維束の形成機構

環形動物イトミミズの卵表層におけるアクチン繊維束(収縮環)の形成機構を、分裂装置からの情報が必要な表層(極体形成)とそれを必要としない表層(赤道部の溝形成)について解析した。。溝形成が始まる前の赤道部表層ではアクチン繊維が網目状に構成されているが、溝形成が始まるとともにその底に対応した部分ではアクチン繊維がすでに束を形成していた。その周辺では前の時期に比較してアクチン繊維の密度が減少していた。アクチン繊維束はすでに表層に存在していた繊維が再構築することによってつくりだされる構造であると考えられる。一方、表層アクチンネットワークの維持には活性型のrho p21が必要であることがADP-リボシルトランスフェラーゼC3顕微注入の実験から示唆された。即ち、C3を注入すると、発生時期に関わらず表層アクチン繊維はその大部分が消失した。溝形成およびアクチン繊維束形成に対する蛋白質リン酸化酵素の阻害剤の影響を調べた。ML-7(ミオシン軽鎖キナーゼ阻害剤)はいずれの時期にも溝形成のみならずアクチン繊維束形成も阻害したのに対し、HA1004(環状ヌクレオチド依存性プロテインキナーゼ阻害剤)はまったく阻害効果を示さなかった。ところがH-7(C-キナーゼ阻害剤)は溝形成を阻害したが、極体形成そのものにはまったく影響しなかった。このことはイトミミズ卵では分裂装置が関与する場合、アクチン繊維の再構築がC-キナーゼ非依存的に進行することを示している。一方、赤道部での溝形成をもたらす表層アクチン細胞骨格の形成と再構成はC-キナーゼに依存すると考えられる。このことはホルボールエステルPMAによって卵赤道部での表層アクチン再構成が特異的に誘導されたことからも示唆される。。