hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
等質空間の部分多様体とグラスマン幾何学

Jを6次元球面S^6上の、ケイリー数の積により定まる、概複素構造とする.Jを保存する等長変換全体のなす群は例外型コンパクトリー群G_2である.6次元球面の接空間のp次元部分空間全体のなすグラスマン束にはG_2が自然に作用する.この作用による軌道の一つをνとする.6次元球面のp次元部分多様体で、接空間がνに含まれるものをν部分多様体という.J不変部分多様体、全実部分多様体、CR部分多様体等は適当なνに対するν部分多様体である.νに対してν部分多様体が存在するかどうかについて、p=2のときは全てのνに対してν部分多様体が存在することが容易にわかり、p=3の場合の場合には、グラスマン束の軌道空間は実斜影平面と同一視できるが、コンパクトなν部分多様体が存在するνは実斜影平面上の一つの直線上にかぎることが示せた.p=4の場合は未解決.軌道νに対してν部分多様体を豊富に見いだすことに関して、G_2は同型を除いてただ一つのU(2)と同型な部分群をもつが、その軌道は全て4次元CR部分多様体であることを示した.また4次元CR部分多様体に対する位相的な条件についても研究した.J正則曲線上の、第1または第2法束方向の管が、あるνに対するν部分多様体となるようなものについて研究し、残る一つの場合を除いて分類を行った.3次元CR部分多様体がG_2合同であるための条件を与えた.その結果を用いて、関川の構成した例の一般化の特徴付けを与えた.4次元CR部分多様体についてもG_2合同であるための条件は得られている.Jを6次元球面S^6上の、ケイリー数の積により定まる、概複素構造とする.Jを保存する等長変換全体のなす群は例外型コンパクトリー群G_2である.6次元球面の接空間のp次元部分空間全体のなすグラスマン束にはG_2が自然に作用する.この作用による軌道の一つをνとする.6次元球面のp次元部分多様体で、接空間がνに含まれるものをν部分多様体という.J不変部分多様体、全実部分多様体、CR部分多様体等は適当なνに対するν部分多様体である.νに対してν部分多様体が存在するかどうかについて、p=2のときは全てのνに対してν部分多様体が存在することが容易にわかり、p=3の場合の場合には、グラスマン束の軌道空間は実斜影平面と同一視できるが、コンパクトなν部分多様体が存在するνは実斜影平面上の一つの直線上にかぎることが示せた.p=4の場合は未解決.軌道νに対してν部分多様体を豊富に見いだすことに関して、G_2は同型を除いてただ一つのU(2)と同型な部分群をもつが、その軌道は全て4次元CR部分多様体であることを示した.また4次元CR部分多様体に対する位相的な条件についても研究した.J正則曲線上の、第1または第2法束方向の管が、あるνに対するν部分多様体となるようなものについて研究し、残る一つの場合を除いて分類を行った.3次元CR部分多様体がG_2合同であるための条件を与えた.その結果を用いて、関川の構成した例の一般化の特徴付けを与えた.4次元CR部分多様体についてもG_2合同であるための条件は得られている.○σをコンパクトリー群Gの自己同型、Kをσにより固定される元全体のなす閉部分群とする.このとき写像g→gσ(g^<-1>)は、G/KからGへの埋め込みを引き起こす(カルタン埋め込み).我々は以前、Gが単純でσの位数が3以下の場合について、・カルタン埋め込みが極小埋め込みになるもの・極小埋め込みであるものについては、さらにそれが安定であるものを決定した.本件研究費を用いて、さらにGが単純でσが位数4の内部自己同型の場合について同様の問題を解決した.○6次元球面上には、ケイリー数の乗法を用いて概複素構造が定義される.この構造を保つ群G_2で不変なグラスマン幾何学(部分多様体の族)として・全実部分多様体の族・CR部分多様体の族がある.6次元球面の3次元CR部分多様体の典型的な例として、SU(2)の作用に軌道として得られるもの、関川による例を一般化した例等が知られていた.間下-橋本は、以前得ていた3次元CR部分多様体のG_2剛性定理の応用として、関川型の3次元CR部分多様体の特徴付けを与えた.2次元正則部分多様体上の管の中には3次元全実部分多様体になるものがあることが江尻により知られていたが、これをCR部分多様体についても調べた.この中で、江尻により発見された定曲率の全実部分多様体の興味深い性質が見いだされた.6次元球面は等質空間としてS^6=G_2/SU(3)と表される.6次元球面内の部分多様体についてグラスマン幾何学の観点から研究を行った.S^6の接空間の3次元部分空間全体のなすグラスマン束にはリー群G_2が自然に作用し,軌道の全体は自然に実斜影平面と同一視される.S^6の3次元部分多様体でその各点における接空間が上記の軌道の一つに含まれるものを考える.この様な部分多様体の例として,全実部分多様体やCR部分多様体がある.

実斜影平面のどの点に対応する軌道に対して,上記の性質を持つコンパクトな部分多様体が存在するかを決定した.(4次元部分多様体についても同様の問題が考えられるが未解決)S^6内の3次元全実部分多様体,3次元CR部分多様体,4次元CR部分多様体等が二つ与えれたとき,それらがいつG_2の作用のもとで合同になるかを判定する条件を求めた.そこでは,これらの部分多様体に対して自然に群G_2への(局所的)持ち上げが存在することを用いた.部分的多様体の大域的な性質の研究のためには,この持ち上げを部分多様体上の束から写像として考える必要があるが,このような考察によりCR部分多様体の位相的な制約についての結果も得られた.我々は3次元及び4次元CR部分多様対の例を豊富に得ているが,CR部分多様体の構成を,上記の持ち上げから考える方法もある.この持ち上げが満たすべき条件を,3次元CR部分多様対の場合について求めた.Jを6次元球面S^6上の、ケイリー数の積により定まる、概複素構造とする.Jを保存する等長変換全体のなす群は例外型コンパクトリー群G_2である.6次元球面の接空間のp次元部分空間全体のなすグラスマン束にはG_2が自然に作用する.この作用による軌道の一つをνとする.6次元球面のp次元部分多様体で、接空間がνに含まれるものをν部分多様体という.J不変部分多様体、全実部分多様体、CR部分多様体等は適当なνに対するν部分多様体である.νに対してν部分多様体が存在するかどうかについて、p=2のときは全てのνに対してν部分多様体が存在することが容易にわかり、p=3の場合の場合には、グラスマン束の軌道空間は実斜影平面と同一視できるが、コンパクトなν部分多様体が存在するνは実斜影平面上の一つの直線上にかぎることが示せた.p=4の場合は未解決.軌道νに対してν部分多様体を豊富に見いだすことに関して、G_2は同型を除いてただ一つのU(2)と同型な部分群をもつが、その軌道は全て4次元CR部分多様体であることを示した.また4次元CR部分多様体に対する位相的な条件についても研究した.J正則曲線上の、第1または第2法束方向の管が、あろνに対するν部分多様体となるようなものについて研究し、残る一つの場合を除いて分類を行った.3次元CR部分多様体がG_2合同であるための条件を与えた.その結果を用いて、関川の構成した例の一般化の特徴付けを与えた.4次元CR部分多様体についてもG_2合同であるための条件は得られている.
内部空間が変化する環境応答性ハイブリッドナノコンテナの合成

環境(温度)に応答し内部が変化するミセルから,ナノコンテナの合成を目指し,シーケンシャルリビングカチオン重合により,環境応答性セグメントと親水性セグメント(光架橋基を含む)からなるジブロックコポリマーを合成した。このジブロックコポリマーは,熱環境に応答し親水性から疎水性へと変化するセグメントA,水に溶解する親水性セグメントBからなる。Bのセグメントには,光架橋性ユニットを予め導入しておき細工を施した。合成方法は,エステル存在下でのリビングカチオン重合を利用したが,検討を進めていく途中で,メタルフリーリビング重合を見出したため,先に本方法を速報として論文誌に公表した。このようにして得られた種々のジブロックコポリマー水溶液(0.01wt%)を加熱したところ,組織体を形成した。これは,LCST型のセグメントが熱環境に応答し疎水化したためであると考えられる。この状態からまた低温にすると,組織体が見られず,単にポリマーが水に溶解した状態であった。この組織はミセルであり,このミセルの臨界ミセル濃度と温度を染料可溶化法によって求め,その臨界濃度と温度以上に系を保ち,パーコレーション濃度以上で光照射しミセル外郭を架橋した。得られた組織体は,ナノオーダーのコンテナであり,粒径は架橋前のミセルと同程度大きさ(50nm100nm)を有していた。また形状は温度にほとんど依存せず,粒径は重合度が低いほど小さかった。本コンテナは,低温で内部を空洞化(親水化)できた。温度可変NMRより,コンテナの動的状態を確認し,真球コンテナであることを確認した。このコンテナに銀イオンや金イオンを加え,内部で還元したところ,コンテナにそのまま還元された金属がナノオーダーで残存したため,ハイブリッドナノコンテナの合成に成功したことが確認できた。
マルグリット・ユルスナールにおけるユマニスムの現代的意義の研究

本研究は、20世紀フランス文学を代表する作家の一人マルグリット・ユルスナールの現代性を明らかにするために、彼女の作品と思想を裏打ちするユマニスム(人文主義)の複雑な様相を記述することを目的とするものである。歴史の学識によって培われた、現代の社会や文学に見られる歪められた人間性への鋭い批判精神が、ユルスナール作品の現代的意義を生み出していると考えられるのだが、ユマニスムという概念が変容・失墜を被ることになった第二次世界大戦前後の文学史的・思想史的文脈にその作品を据え直すことで、従来の「古典的作家」というステレオタイプを乗り越えたユルスナール像を捉えようと試みる。
心筋分化誘導に関連するlncRNAの探索と解析

Long non-coding RNA (lncRNA)は細胞内で様々な制御を行っており、マウス心臓の発生にも関与して。一方でヒトの心臓発生にlncRNAの関与は不明な点が多い。そこで我々はヒトiPS細胞を用いて心筋細胞への分化誘導を行い、経時的に回収したRNAを用いてRNA-seq解析を行った。この結果、lncRNA EVX1ASを同定した。EVX1ASはiPS細胞に過剰発現させると、心筋関連遺伝子の発現量が増加することから、何らかの機能を持って心筋分化誘導効率を増加させていると予想される。しかしながら、その機能は未だ不明な点が多く、今後も解析を続けていく必要がある。今年度はiPS細胞から心筋細胞への安定した誘導法とlong non codingRNAs (lncRNAs)の解析方法を確立した。心筋細胞への分化誘導法は二次元培養にて各種サイトカインを時期特異的に添加し誘導した(Masumoto H., Sci Rep., 4: 6716. 2014)。誘導したサンプルは経時的に回収し、total RNA抽出して各ステージの心筋分化誘導関連因子にてqPCRによる解析を行った。この結果、iPSCから中胚葉系(T, MESP1)、心筋前駆細胞(NKX2-5, GATA4)、心筋細胞(cTnI, alpha MHC)への遺伝子発現変化を確認できた。これらのRNAのうち、特に初期ステージのRNAを用いて更にRNA-seq解析を行った。この結果、マウスでは報告があるもののヒトでは機能が不明な新たなlncRNAが一過性に強発現していることが明らかとなった。中胚葉誘導期から心筋細胞分化初期に最も強い変化を起こし、心筋細胞成熟過程においては速やかにその発現を減じるものという選択基準を持ってRNA-seqの結果を検討した。いくつかの候補の中でもHox gene clusterに存在しMESP1と同様の局在を示す遺伝子のアンチセンスであるlncRNAの動態が最も選択基準に合致した。取得された全長は、これまでの報告と異なったことから、RACE法による全長を再取得しおよそ3.4 kbpの配列解析に成功した。機能解析においては、siRNAによる当該lncRNAのknock downと、overexpressionによる心筋分化誘導における影響を検討するための準備を整え、そのメカニズム解析としてRNA pull downによる複合体形成タンパク解析を行うための基盤構築を行った。前述のとおり、遺伝子発現抑制系の構築に苦難している。そこでTet-On3GシステムのshRNA lenti virus vectorにて特定の時期のみに遺伝子発現抑制を可能とするシステムを新たに構築する予定である。これ以外は概ね順調に進展しており、様々な評価系を構築しつつある。昨年度は特定した心筋分化誘導時に特異的に発現するLong non-coding RNA (lncRNA)に結合するタンパク質の解析を中心におこなった。最初に決定した全長配列を参考に鋳型をPCRにて作製し、5'の直上にT7プロモーターを付与した。この鋳型をPCRにて大量に増幅させた後、T7RNAポリメラーゼとBiotinラベルしたウリジンとその他核酸を添加し、目的Biotin-lncRNAも大量に合成できた。合成したBiotin-lncRNAのアガロースゲル電気泳動をしたところ、単一のバンドで目的サイズ付近に存在していたことから、Biotin-lncRNA合成は成功したと考えられる。このBiotin-lncRNAにiPS細胞から心筋細胞へ分化誘導過程のタンパク質と混合することで、このBiotin-lncRNAと結合するタンパク質を決定することにした。誘導はlncRNAの発現がピークに達する誘導日を用いた。この際、ネガティブコントロールとして、目的配列と逆配列のBiotin-lncRNAも合成し、これを利用した。これらのタンパク質はBiotin-RNAと反応させたのち、Streptavidin magnetic beadsにて濃縮した。濃縮したタンパク質溶液はSDS-PAGEによって分離し、複数の大きさによってゲルを回収し、これらのゲルをそれぞれLC-MS/MS解析にて解析し、心筋分化誘導時にこのlncRNAと特異的に結合する候補タンパク質を絞り込んだ。発現抑制モデルの作製には苦慮しており、引き続きlentivirus系にて行っていく。本系の確立はlncRNAの重要性の評価にも繋がるため、樹立していきたい。またこれらの系と誘導系における遺伝発現変化を評価することで本lncRNAと関連した下流シグナルの解析も可能になる。心筋分化誘導時に特異的に発現するlncRNAの特定とそれに結合するタンパク質の特定は予定通り進んでいる。これらのタンパク質の心筋分化誘導時における機能解析を今年度に行い、各研究会等にて報告していく予定である。一方でiPS細胞への恒常的な遺伝子抑制モデル作製には苦慮しており、導入効率が以前低いままである。現在はこちらの系は一旦停止し、機能タンパク質解析に重点を置いている。昨年度までに報告した内容をもとに、Biotin化Uridineを用いたlncRNAを作製し、心筋分化誘導中のiPS細胞タンパク質と反応させた。さらに、Streptavidin magnetic beadsを用いて、RNAータンパク質の複合体をRNA pull downした。RNA pull downされたタンパク質はSDS-PAGEにて分離し、MS解析にて各分画に含まれるタンパク質を同定した。この結果、複数のRNA結合タンパク質が含まれていた。次にこれらのうち、心筋分化に関連すると報告されている3つのタンパク質の抗体を用いて、再度RNA pull downしたタンパク質にてWBを試みた。しかしながら、これらのタンパク質は全て陰性であり、非特異的にRNAに結合したタンパク質を選択した可能性が高い。

そこで現在、新たなタンパク質の選択も進めている。またBiotinとStreptavidinの結合力は高いことが報告されているが非特異的な結合も多いことが報告されているため、RNA pull downには適していない。そこで新たなRNA pull down法として、Flagを付与したRNA分子を用いることで低バックグラウンドな解析が可能となるため、こちらも引き続き検討したい。近年、lncRNAの新たなアプローチとして、lncRNAから翻訳される機能性ペプチドの解析が注目を浴びている。これはlncRNAから翻訳される100前後のアミノ酸ペプチドで、骨格筋にてlncRNA由来の機能性ペプチドが作用することで筋再生に関与することが報告されている(Matsumoto et al. Nature 2017)。我々のlncRNAも本報告と同様の配列が13 peptides存在していることから同様のメカニズムにて心筋分化誘導に関与している可能性がある。今後はこれらの視点も踏まえて研究を進めていく。Long non-coding RNA (lncRNA)は細胞内で様々な制御を行っており、マウス心臓の発生にも関与して。一方でヒトの心臓発生にlncRNAの関与は不明な点が多い。そこで我々はヒトiPS細胞を用いて心筋細胞への分化誘導を行い、経時的に回収したRNAを用いてRNA-seq解析を行った。この結果、lncRNA EVX1ASを同定した。EVX1ASはiPS細胞に過剰発現させると、心筋関連遺伝子の発現量が増加することから、何らかの機能を持って心筋分化誘導効率を増加させていると予想される。しかしながら、その機能は未だ不明な点が多く、今後も解析を続けていく必要がある。これまでとは異なる新しいlncRNAが一過性に強発現している因子がヒトiPS細胞を用いた系にて特定できた。当初の予定通りの進行具合であり、来期以降も同様の進行速度にて解析を進めていきたい。本年度はshRNA Lenti virus vectorを用いた遺伝子発現抑制系を構築する。さらに本lncRNAと結合するタンパク質の特定をImmunoprecipitation(IP)の系を応用したBiotin RNA-IPの系にて特定する。IP後、SDS-PAGEにて泳動し、MS解析にて、本lncRNAと結合するタンパク質を特定していく。特定したタンパク質は免疫染色等で評価し、その局在と機能について解析していく。また、これらの結果は積極的に国内外の学会にて発表をしていく。今後はLCーMS/MS解析にて特定した候補タンパク質を評価する系としてウェスタンブロッティングの抗体の最適化を試みている。
共有資源のヘゲモニーをめぐる環境社会学的研究

今年度は昨年度に引き続いて、アイルランド農村における私有地・共有地での公衆アクセスをめぐる、データの収集につとめた。年度前半は、アイルランドの主要なレクリエーション諸地域においてそのアクセス管理の傾向を探った。その結果、土地所有者・共有者(主に農民)以外の人々による土地へのアクセスは、極めてローカルで私的な人間関係を媒介にして管理されており、それは地元民による利用のみならず、アクセスをより広く公衆に開く場合にも同様であることを発見した。そして、そこでは地元のレクリエーションクラブが主要な役割を果たすことも判明した。しかし、ウォーキングのような、地域外からのアクセス者が多い場合には撹乱的要素が強く、それはしばしば対立的状況も生み出してきた。したがって年度後半より、このようなウォーキングによる公衆アクセスをめぐる問題が顕著になっている、スライゴーおよびりートリム県北部の丘陵地帯において、アクセスをめぐるミクロな社会的状況について集中的に調査した。その結果見えてきたのは、外部からの撹乱的要素の下で、個別ケースごとに当該所有者および地元レクリエーション者の間で、私的なもの・地域的なもの・公的な(あるいは法的な)ものについての境界線が絶えず交渉・形成されていく過程であり、それと政府や全国団体による固定的なアクセス政策・要求とのずれである。その一方で、国レベル・地域レベル共に、私的な社会関係に重きをおいた環境管理が重視されており、それを縛るものとして公あるいは法の概念が語られるということも発見した。これがアイルランドにおける「アクセスの権利」という法的概念の背景と思われ、同じようにインフォーマルな状況をベースにしているものの、ムラ組織などの集合的な場を中心に環境管理を行ってきた日本との差異であるといえよう。今後はこの調査により得た知見を幅広く公表していく予定である。今年度は、これまで滋賀県高島市勝野地区においておこなってきた井戸水利用をめぐる調査についての成果発表を重点的におこなった。関西社会学会における報告では、これまで研究蓄積のほとんどなかった井戸水利用をめぐる地域の環境史に焦点を当て、井戸水利用者への聞き取りやさまざまな文書資料の分析を通じて、昭和初期以降の地域社会生活において井戸水の利用が有してきた、公共上水道とは異なる多層的な意味の束を解きほぐした。これに加えて、そのような多層的な意味が、例えば上水道の敷設や河川改修のような生活の近代化や外部からの開発に対して、障害や抵抗となるのではなく、むしろそれらと両立、あるいはそれらに従属しながら、今日まで継続されてきたという歴史も明らかにした。また、その後の環境社会学会における報告では、このような成果による知見をさらに一歩すすめたかたちで、地域社会におけるローカルな環境実践を、近代に対するオルタナティブとしてみるのではなく、むしろより場当たり的でフラジャイルなものとして捉えることの有効性と現実性を指摘した。現在、これらの報告にもとづいたかたちで、新たな論文を執筆中である。また、近年日本では農村地域における自然資源に対し、都市住民がアクセスする機会が増加してきている。このような状況を踏まえ、外部により開かれた形の「コモンズ」の管理のあり方についての研究も進めてきている。これに際して、日本の状況を適切に論じるため、比較対照として、都市住民による農村の自然資源に対する法的アクセス権の可否が近年大きな問題になっているアイルランドを訪問し、現在アクセス権の成立を目指して活動している全国団体の発端となった、あるコモンズをめぐる紛争についての資料収集を進めた。今後は、アイルランドにおける長期調査をおこなってさらなるデータ収集に努めるとともに、現在までこのようなアクセス権要求がない日本との比較軸の発展に努めたいと考えている。今年度前半は、これまでのコモンズと公衆のアクセス権についての国内・海外の文献を整理して主要な論点を絞るとともに、日本で入手可能なアイルランドの新聞資料の収集やアイルランド語の基礎知識獲得等の、新たな海外長期調査に向けた下準備をおこなった。今年度後半からは、アイルランドのダブリン大学トリニティカレッジ社会学部に客員研究者として在籍し、アイルランド農村における私有地・共有地での公衆アクセスをめぐる、先行研究資料や農業新聞記事、また現在全国的アクセス論争の中心にいるステークホルダー諸団体による言説の収集につとめた。現在アイルランドにおいては、主に都市民によるウォーキングのための農村アクセスが、公衆への法的アクセス権付与の可否などをめぐる全国論争の中心的な焦点になっている。しかし、研究を進めていく中で、地域住民が主体となった、全国論争と一線を画す、あるいは微妙に関係しながらの、農村アクセスをめぐるパートナーシップ形成、また農村地域の地元ウォーキングクラブの存在や、農民がその主要参与者を占めるようなレクリエーションアクセス(これは主に釣りとハンティングである)、といった新たなポイントが浮かび上がり、都市レクリエーション者と農民の対立というシンプルな図式のみでは捕らえきれないような農村アクセスの位相があることを発見した。このような視点は、普遍的なアクセスのための法的権利という論議とは別の、個別的で時にインフォーマルに生成してくるアクセスをめぐる解決方法であり、現在日本においてなされているレクリエーションアクセスをめぐる社会関係と類似する点がある。今後はこの個別的な活動と普遍的・全国的な諸団体の運動の関係に焦点を当て、後者の存在しない日本の状況との比較を通じて、私有地アクセスを含めた広義のコモンズ管理をめぐる国際比較の視点を発展させていきたいと考える。

その結果、土地所有者・共有者(主に農民)以外の人々による土地へのアクセスは、極めてローカルで私的な人間関係を媒介にして管理されており、それは地元民による利用のみならず、アクセスをより広く公衆に開く場合にも同様であることを発見した。そして、そこでは地元のレクリエーションクラブが主要な役割を果たすことも判明した。しかし、ウォーキングのような、地域外からのアクセス者が多い場合には撹乱的要素が強く、それはしばしば対立的状況も生み出してきた。したがって年度後半より、このようなウォーキングによる公衆アクセスをめぐる問題が顕著になっている、スライゴーおよびりートリム県北部の丘陵地帯において、アクセスをめぐるミクロな社会的状況について集中的に調査した。その結果見えてきたのは、外部からの撹乱的要素の下で、個別ケースごとに当該所有者および地元レクリエーション者の間で、私的なもの・地域的なもの・公的な(あるいは法的な)ものについての境界線が絶えず交渉・形成されていく過程であり、それと政府や全国団体による固定的なアクセス政策・要求とのずれである。その一方で、国レベル・地域レベル共に、私的な社会関係に重きをおいた環境管理が重視されており、それを縛るものとして公あるいは法の概念が語られるということも発見した。これがアイルランドにおける「アクセスの権利」という法的概念の背景と思われ、同じようにインフォーマルな状況をベースにしているものの、ムラ組織などの集合的な場を中心に環境管理を行ってきた日本との差異であるといえよう。今後はこの調査により得た知見を幅広く公表していく予定である。
大動脈弁温存基部再建における大動脈弁開閉動態の解析―心臓内視鏡による検討―

自己肺動脈弁移植術における基部拡大モデルおよび弁開閉状態の検討(方法)静止モデル:雑種成犬を用いた。全身麻酔下に開胸し、心臓・大血管を一塊として摘出した。上行大動脈を大動脈基部根部まで十分に剥離した。全てのバルサルバ洞を切除し、左右冠動脈をボタン状に切り抜いた。次に、右室流出路より肺動脈分岐部まで肺動脈弁を含め摘出した。その摘出した自己肺動脈グラフトを大動脈弁輪に逢着した。自己肺動脈グラフトのSinotubular junctionの内外に針糸をかけ、その糸を水平に牽引できる様にして基部拡大モデルを作製した。自己肺動脈グラフトに生理食塩水を50mmHgの圧にて還流した。牽引する重量・方向を変更し、それぞれの条件下に内視鏡を用い、弁接合状態を観察した。心拍動モデル:静止モデルと同様の方法にて自己肺動脈弁を移植した。その後、透明な人工栄養液であるTyrode液を36°Cに加温・酸素化し、自己肺動脈および左心房に還流し、心拍動モデルを作製した。肺動脈に内視鏡を挿入し、心拍動状態における大動脈弁位に移植された肺動脈弁の開閉動態をハイスピードビデオ(250 frames/second)に記録した。同時に心電図・大動脈圧・左室圧・左房圧をそれぞれ記録した。また、静止モデルと同様の方法にて基部拡大モデルを作製し、心拍動状態における肺動脈弁の接合状態を観察した。(結果)静止モデル:Sinotubular junctionを拡大させることにより、大動脈弁位に移植された肺動脈弁の中心部での接合不全を認めた。その接合不全の程度は、Sinotubular junctionの拡大程度に比例して増加した。また、その接合不全は、特に交連部の拡大程度と強く関連していることが示唆された。心拍動モデル:移植された肺動脈弁は、正常の大動脈弁とほぼ同様な開閉動態を示した。また、基部拡大モデルでは、静止モデルと同様の結果が得られた。(方法)静止モデル:雑種成犬を用いた。大動脈を切開し、左室流出路の水平断面に針糸を内腔より外側に刺出する。その糸を鉛の重りにて水平に牽引し、大動脈基部拡大モデルを作製し、大動脈を生理食塩水にて50mmHgの圧にて還流した。大動脈および心尖部より内視鏡を挿入し、ビデオテープに大動脈弁接合状態を記録した。鉛の重量または牽引する方向の条件を変化させ、それぞれの条件下における、左室流出路・大動脈弁輪・Sinotubular junction(STJ)、それぞれの径を測定した。心拍動モデル:静止モデルと同様の方法にて行ったが、心臓・大血管の摘出前に大動脈に心筋保護液(グルコース、インシュリン、カリウム液)を注入し、心停止を得た後、摘出した。摘出後、大動脈基部拡大モデルを作製し、そのモデルに対し臨床で行われている自己弁温存大動脈基部再建術式である、Reimplantation法(Ri群)またはRemodeling法(Rm群)を行った。その後、36°Cに加温、酸素化したTyrode液を大動脈・左房に潅流し、心拍動モデルを作製した。上行大動脈に内視鏡を挿入し、心拍動状態における大動脈弁開閉動態をハイスピードビデオ(250frames/second)に記録した。また、同時に心電図・大動脈圧・左室圧・左房圧をそれぞれ記録した。(結果)静止モデル:STJを拡大させることにより、大動脈弁の中心部での接合不全を認めた。その接合不全の程度は、STJの拡大程度に比例して増悪した。心拍動モデル:Rm群の大動脈弁開閉動態は、ほぼ正常と考えられたのに対し、Ri群では、大動脈弁尖の彎曲が開口から閉鎖まで認められた。また、Ri群においては、大動脈弁の有効弁口面積の制限が確認された。

また、静止モデルと同様の方法にて基部拡大モデルを作製し、心拍動状態における肺動脈弁の接合状態を観察した。(結果)静止モデル:Sinotubular junctionを拡大させることにより、大動脈弁位に移植された肺動脈弁の中心部での接合不全を認めた。その接合不全の程度は、Sinotubular junctionの拡大程度に比例して増加した。また、その接合不全は、特に交連部の拡大程度と強く関連していることが示唆された。心拍動モデル:移植された肺動脈弁は、正常の大動脈弁とほぼ同様な開閉動態を示した。また、基部拡大モデルでは、静止モデルと同様の結果が得られた。
時空間的不均一性を考慮した混合体モデルの開発による廃棄物地盤の力学性状の評価

本研究は,廃棄物を繊維材料と粒状材料により構成された繊維-粒子複合材料と捉え,(1)均質化理論を応用した構成モデルの構築(2)統計的手法による時系列劣化評価モデルの開発(3)確率論を適用した空間的不均一性評価方法の導入を行うことで,時空間的な不均一性が卓越する廃棄物地盤の力学的性質の評価を行うものである.今年度は,複合則を用いた構成モデルの構築,及びその埋立廃棄物への適用に関する検討を主に行った.具体的には,粒状材料内での繊維材料の変形挙動を実験的に明らかにし,繊維材料による補強メカニズムを考察すると共に,均質化理論をベースとした構成モデルのを構築した.繊維材料の変形挙動に関する実験結果より,繊維材料の変形挙動は,引張挙動と引き抜け挙動からなる弾完全塑性的な挙動を示すことを明らかにした.さらに,繊維材料が引張挙動を示す際には,繊維材料と粒状材料のひずみエネルギー増分が等価となるように,複合材料内部に発生する応力が分担されていることを検証した.以上の実験結果より,繊維材料と粒状材料のひずみエネルギー増分の等価性を仮定することにより導出される応力分担テンソルを導入して,繊維材料と粒状材料の特性を均質化する構成モデルを提案した.本モデルでは,微視的な特性から巨視的な特性を表現する際に,確率分布関数により繊維配向角分布を導入するものとし,さらに繊維配向角分布と関連付けて繊維材料の引張挙動と引き抜け挙動を区別する手法を開発した.本モデルを埋立廃棄物へ適用することを目的として,廃棄物そのものを使用した大型引張試験装置を開発し,それによって繊維廃材の引張剛性・界面粘着力・界面摩擦角を同定する方法を提案した.最後に,構成モデルを廃棄物に適用し,その有用性を検証した.翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。産業廃棄物の不法投棄等の崩壊や処分場跡地の高度利用に目を向けた長期的な視点での廃棄物問題の解決を考える上で,廃棄物地盤の力学的性質の解明やその評価法の提示が強く求められている.本研究では,(1)複合則を用いた構成モデルの構築(2)統計的手法による時系列劣化評価モデルの開発(3)確率論を適用した空間的不均一性評価方法の導入により,時空間的な不均一性を考慮した廃棄物の力学モデルを開発することを目的としている.今年度は,主に(1)複合則を用いた構成モデルの構築に関する検討を行った.廃棄物を繊維材料と粒状材料により構成された繊維-粒子複合材料と捉えることで複合則の適用を試みた.その中で,(A)繊維材料の粒状材料内での挙動(B)繊維材料の配向角度の影響(C)構成材料の応力・ひずみ挙動の関連性が明らかでないことが特に大きな課題であった.そのため,2種類の一面せん断試験,(a)アクリル板で作製した一面せん断試験装置を用いて繊維材料の挙動を視覚的に把握する可視化実験,(b)ひずみゲージにより繊維材料のひずみの発達傾向を把握する定量化実験を実施した.結果より,繊維材料の粒状材料内での挙動は,せん断初期には引張変形を示し,繊維材料と粒状材料の界面摩擦強度を超える応力域では引き抜け挙動を示すような弾完全塑性的な挙動を示すことを明らかにした.繊維配向角度の影響については,主に引き抜け挙動時に表れることを明らかにし,繊維配向角度を確率分布で近似し,構成モデルに組み込むことを決定した.さらに繊維材料と構成材料のひずみエネルギー増分を一定と仮定することで適切な構成モデルが構築できることを考察した.以上の検討結果を元に,軸対称条件を想定した繊維-粒子複合材料の構成モデルを構築し,その妥当性を確認した.本研究は,廃棄物を繊維材料と粒状材料により構成された繊維-粒子複合材料と捉え,(1)均質化理論を応用した構成モデルの構築(2)統計的手法による時系列劣化評価モデルの開発(3)確率論を適用した空間的不均一性評価方法の導入を行うことで,時空間的な不均一性が卓越する廃棄物地盤の力学的性質の評価を行うものである.今年度は,複合則を用いた構成モデルの構築,及びその埋立廃棄物への適用に関する検討を主に行った.具体的には,粒状材料内での繊維材料の変形挙動を実験的に明らかにし,繊維材料による補強メカニズムを考察すると共に,均質化理論をベースとした構成モデルのを構築した.繊維材料の変形挙動に関する実験結果より,繊維材料の変形挙動は,引張挙動と引き抜け挙動からなる弾完全塑性的な挙動を示すことを明らかにした.さらに,繊維材料が引張挙動を示す際には,繊維材料と粒状材料のひずみエネルギー増分が等価となるように,複合材料内部に発生する応力が分担されていることを検証した.以上の実験結果より,繊維材料と粒状材料のひずみエネルギー増分の等価性を仮定することにより導出される応力分担テンソルを導入して,繊維材料と粒状材料の特性を均質化する構成モデルを提案した.本モデルでは,微視的な特性から巨視的な特性を表現する際に,確率分布関数により繊維配向角分布を導入するものとし,さらに繊維配向角分布と関連付けて繊維材料の引張挙動と引き抜け挙動を区別する手法を開発した.本モデルを埋立廃棄物へ適用することを目的として,廃棄物そのものを使用した大型引張試験装置を開発し,それによって繊維廃材の引張剛性・界面粘着力・界面摩擦角を同定する方法を提案した.

最後に,構成モデルを廃棄物に適用し,その有用性を検証した.研究計画書に記載した順序からの変更が少しあったものの,内容的には計画通りに進んでいると考えている.特に,本評価手法の主幹を担う構成モデルの構築が完成したことは,今後の研究の進展を図る上でも重要な成果となった.翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。今後は,(2)統計的手法による時系列劣化評価モデルの開発(3)確率論を適用した空間的不均一性評価方法の導入を行っていく予定である.時系列劣化特性に関しては,繊維材料の劣化特性と複合材料の力学特性の関連性を実験的に明らかにする.さらに時間の概念を統計的に表せる確率過程を援用することで時系列劣化評価手法の開発を行い,本構成モデルへ導入する.空間的不均一性に関しては,実スケールで考えた際の繊維含有率の不均一性に着目する.繊維材料の含有率が地盤内で大きくばらつく場合に地盤の変形性や安定性に及ぼす影響を実験的・解析的に把握する.さらに本評価モデルの廃棄物地盤への適用性を確認する.翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。九州大学地盤工学研究室HP
ヒトiPS由来の網膜神経節細胞およびMuller細胞を用いた網膜・視神経の再生

視神経は(網膜神経節細胞の軸索)にはさまざまな疾患があり重篤な視力障害を起こすが、再生医療研究は殆ど行われていない。我々は初めて、ヒトやマウスのiPS細胞、ES細胞から、機能をもつ長い軸索を有する網膜神経節細胞を自己分化誘導させ、その純化にも成功した。さらに、これらの幹細胞からMuller細胞の作製にも成功した。網膜神経節細胞の軸索伸長や経路探索には、Muller細胞等のグリア細胞が関与していると思われ、既に軸索成長の促進を確認し、ケミカルメディエーターの検索を開始した。本研究では、これらの細胞技術を用いて、動物への移植実験を含め、視神経の再生医療の可能性を探求することを目的とする。
規則型複合ペロブスカイト酸化物における構造相転移と磁性

規則型複合ペロブスカイト酸化物磁性体の興味深い構造と磁性との関連に注目して研究を進めている。この系のなかで最も単純な構造をもつ立方晶の反強磁性体Ba_2NIWO_6についてすでに単結晶作成に成功し物性の測定が進められている。本課題研究においては前記Ba_2NIWO_6と比較対照すべき物質である正方晶Sr_2NIWO_6の単結晶作成とその磁性の測定が目的であった。Sr_2NIWO_6の単結晶作成はBa_2NIWO_6に比較してかなり困難であったが、フローティング・ゾーン法により十分な大きさの単結晶が、知る限りでは世界で初めて得られた。この結晶を用いてSQUIDによる精密磁化測定を行い,Ba_2NIWO_6との比較データが得られた。磁気的転移温度はほとんど同一であるにも関わらず、明瞭な相違点が見いだされている。また日本原子力研究所改造3号炉において中性子非弾性散乱実験を11月に実施し、磁気励起スペクトルの観測を単結晶の主要な軸方向について行い、その分散関係を得た。詳細な解析は現在進めているところであるが、この系の構造の大きな特徴であるきわめて長距離に隔てられている磁性イオン間の超交換相互作用について新しい知見が得られるであろう。
磁性ナノ微粒子を用いた乱流抵抗低減法とそのメカニズムの解明

本研究では,磁性ナノ微粒子を含む磁気機能性流体の流れのメカニズムを解明することを目的として,新しい乱流抵抗低減法の確立を目指している.同時に,磁場環境下における磁気機能性流体の熱流動メカニズムについて調査を行っている.1.遷移域における磁性流体の流れのメカニズムの解明:遷移域における磁性流体の管内圧力損失の計測を行った結果,磁場印加によりレイノルズ数が約2200において,圧力損失が30.2%低減し,磁場印加による乱流抵抗低減が確認された.また,磁場強度の増加に伴い,乱流遷移域は高レイノルズ数側へ遷移することが確認できた.2.乱流域における磁気粘弾性流体の流れのメカニズムの解明:粘弾性流体に磁性ナノ微粒子を添加し,外部磁場を印加することで磁気粘弾性流体の流動を含む能動的に制御した新しい乱流抵抗低減法の確立を目指している.本年度は,磁性ナノ微粒子を磁気粘弾性流体の動的レオロジー計測を行うため,高磁場印加型レオメータを新たに試作し,本流体の動的レオロジー計測を行った.その結果,磁場下において貯蔵弾性率(弾性的性質)が増加し,新しい乱流抵抗低減法の可能性を見出した.同時に,四要素モデルに基づく理論解析を行い,磁性体が高分子構造に影響を与えることで貯蔵弾性率が増加することを明らかにした.3.磁気機能性流体の熱流動メカニズムの解明:外部磁場下では,磁気機能性流体に磁気体積力が作用し,流体が沸騰した場合,非磁性の気相に磁気浮力が作用し,管内は乱流状態になる.本年度は,実験的アプローチにより外部磁場の印加により単相流および二相流において磁気機能性流体の熱輸送能力が飛躍的に向上することが分かった.また,Hybrid LBMを用いた解析的アプローチにより,単相流において,磁場印加により循環流が形成されること,また気液二相流では磁気排除効果に起因して沸騰が促進されることを明らかにした。本研究では,磁性ナノ微粒子を含む磁気機能性流体のメカニズムを解明することを目的として,新しい乱流抵抗低減法の確立を目指している.同時に,磁場環境下における磁気機能性流体の熱流動メカニズムについて調査を行っている.(1)層流域における磁性流体の流れのメカニズムの解明:層流域における磁性流体の管内圧力損失の計測を行った結果,磁場印加により管内圧力損失が増加することが分かった.この理由を検証するため,Lattice Boltzmann Method(LBM)により,二次元管内流動数値解析を行い,磁性微粒子の回転運動に起因する見かけ粘度の増加が管内圧力損失増加に寄与することが判明した.(2)乱流域における磁気粘弾性流体の流れのメカニズムの解明:粘弾性流体に磁性ナノ微粒子を添加し,外部磁場を印加することで磁気粘弾性流体の流動を能動的に制御した新しい乱流抵抗低減法の確立を目指している.平成23年度は,磁性ナノ微粒子を含む磁気粘弾性流体の動的レオロジー計測を行うため,磁場印加型レオメータを試作し,本流体の動的レオロジー計測を行った.その結果,磁場下において貯蔵弾性率が増加し,これは乱流抵抗低減に寄与する流体の弾性が増加したことを意味し,新しい乱流抵抗低減法の可能性を見出した.(3)磁気機能性流体の熱流動メカニズムの解明:外部磁場下では,磁気機能性流体に磁気体積力が作用し,流体が沸騰した場合,非磁性の気相には磁気浮力が作用し,管内は乱流状態となる.平成23年度の成果として,実験的アプローチにより外部磁場の印加により単相流および二相流において磁気機能性流体の熱輸送能力が飛躍的に向上することが分かった.また,この理由を検証するために,解析手法としてLBMを用いて磁性流体の単相熱輸送現象について二次元解析を行った結果,磁場印加により加熱部において循環流が形成されることが分かった.本研究では,磁性ナノ微粒子を含む磁気機能性流体の流れのメカニズムを解明することを目的として,新しい乱流抵抗低減法の確立を目指している.同時に,磁場環境下における磁気機能性流体の熱流動メカニズムについて調査を行っている.1.遷移域における磁性流体の流れのメカニズムの解明:遷移域における磁性流体の管内圧力損失の計測を行った結果,磁場印加によりレイノルズ数が約2200において,圧力損失が30.2%低減し,磁場印加による乱流抵抗低減が確認された.また,磁場強度の増加に伴い,乱流遷移域は高レイノルズ数側へ遷移することが確認できた.2.乱流域における磁気粘弾性流体の流れのメカニズムの解明:粘弾性流体に磁性ナノ微粒子を添加し,外部磁場を印加することで磁気粘弾性流体の流動を含む能動的に制御した新しい乱流抵抗低減法の確立を目指している.本年度は,磁性ナノ微粒子を磁気粘弾性流体の動的レオロジー計測を行うため,高磁場印加型レオメータを新たに試作し,本流体の動的レオロジー計測を行った.その結果,磁場下において貯蔵弾性率(弾性的性質)が増加し,新しい乱流抵抗低減法の可能性を見出した.同時に,四要素モデルに基づく理論解析を行い,磁性体が高分子構造に影響を与えることで貯蔵弾性率が増加することを明らかにした.3.磁気機能性流体の熱流動メカニズムの解明:外部磁場下では,磁気機能性流体に磁気体積力が作用し,流体が沸騰した場合,非磁性の気相に磁気浮力が作用し,管内は乱流状態になる.本年度は,実験的アプローチにより外部磁場の印加により単相流および二相流において磁気機能性流体の熱輸送能力が飛躍的に向上することが分かった.

また,Hybrid LBMを用いた解析的アプローチにより,単相流において,磁場印加により循環流が形成されること,また気液二相流では磁気排除効果に起因して沸騰が促進されることを明らかにした。研究課題に対して,磁性ナノ微粒子単体では乱流抵抗低減を示さないことが明らかになったが,磁性ナノ微粒子を粘弾性流体に添加することで,その貯蔵弾性率が外部磁場により変化することを明らかにした.これは新しい乱流抵抗低減法の可能性を示すことから,おおむね順調に研究は進展している.層流域における磁性流体の流れのメカニズムを解明するため,Shliomisの理論を考慮した三次元管内流動解析をLBMを用いて解析を行う.また,磁場印加による磁気粘弾性流体のレオロジー特性の変化について理論的に考察するため,ネットワーク理論に基づく磁性ナノ微粒子の高分子繊維への影響について調査を行う.また,乱流域での磁気粘弾性流体の流れのメカニズムを解明するため,本流体が磁場制御円管内を循環する装置の試作を行う.同時に,三次元管内流動解析をLBMを用いて行う.磁気機能流体の熱流動メカニズムを解明するために,LBMによる管内気液二相流熱流動解析に取り組む.高計算コストおよび格子密度の増加に対応するためGraphics Processor Unitsを用いた大規模並列計算に取り組む.
家畜モデル動物を用いた量的経済形質原因遺伝子同定のためのゲノムシフト戦略の確立

・肥満型OLETFラットでの筋肉内脂肪蓄積に関わる第一染色体上のQTLのポジショナルキャンディデートであるPnlip遺伝子について、9.8kbの5'上流隣接領域、13.1kbのエクソン/イントロン領域および3.6kbの3'下流隣接領域をOLETFとF344でダイレクトシーケンスし、多型について解析した。その結果、転写開始点の上流3.4kbの位置に、F344アリルに比べOLETFアリルにおいてサイズが長いVNTR多型が検出された。そこで、当該QTLで、OLETFとは異なるアリルを有することがQTL解析により判明しており、Pnlip遺伝子発現レベルがOLETFに比べ減少しているBNとLETOについても、上記多型部分のシーケンス解析を行った。その結果、OLETFより短くF344と同じサイズであり、Pnlip遺伝子についての発現レベルの増加がOLETF特異的であることに加えて、当該遺伝子のVNTR多型はOLETFに特異的な多型を示すことが明らかになった。Ins1遺伝子では、プロモーター領域に同様なVNTR多型が存在し、それが骨格筋、脂肪組織および膵での発現レベルに影響を及ぼすことで、量的形質である糖尿病発症につながっているらしいとの報告がなされており、今回の発見は興味深いものである。また、当該QTLのゲノム領域内で組み換えが生じている(コンジェニック×F344)×コンジェニックのバッククロス交雑群からの雄選抜個体12匹を用いることで、D1Rat90とD1Rat225の間の2.3cMの領域に当該QTLをファインマッピングした。さらに、上記新規組み換えパックスロス交雑個体を用いることで、ファインマッピングされた当該QTLがPnlip遺伝子のVNTR多型および発現レベルの変化と共分離していることが明らかにされた。これらの結果より、Pnlip遺伝子が筋肉内脂肪蓄積QTLの原因遺伝子であるかもしれないという状況証拠が得られた。・ENU-mutantであるDBF1について、肥満・脂肪蓄積パラメーターである体重、生殖器脂肪量、腎周囲脂肪量および最長筋内脂肪量の解析を行ったところ、生殖器脂肪量および腎周囲脂肪量に対して最長筋内脂肪量が増加しているあるいは減少しているmutantマウスを検出することができ、家畜モデル動物としての有用性を検討する価値があると考えられた。【ファインマッピング】肥満型OLETFラットにおける体重増加および脂肪蓄積は、第1染色体上の約10cMのゲノム領域内に位置する遺伝子が原因となっている。そのQTLゲノム領域のみがOLETF由来の移入ゲノムとなっているコンジェニック系統と、そのコンジェニックのレシピエント系統であるF344との交配によりF1を作製した。さらに、そのF1をコンジェニックと交配することで戻し交雑個体の雄143匹を作製した。その雄戻し交雑個体より単離されたゲノムDNAを用いてQTLゲノム領域の両端に位置するマーカーであるD1Rat166およびD1Rat90のタイピングを行った。その結果、QTLゲノム領域内で組換えを起こしている雄戻し個体の9匹を選抜することができた。次に、選抜された9個体について、経時的な体重測定および35週齢の屠殺時における各体内部位の脂肪量測定を行った。その9個体の体重測定値および脂肪量測定値は、OLETFアリルホモ型であるコンジェニックタイプあるいはOLETFアリル/F344アリルヘテロ型であるF1タイプのいずれかに分離することが判明した。体重については、9個体のうち2個体および7個体がそれぞれコンジェニックタイプおよびF1タイプと同様の表現型を示し、脂肪量については、9個体のうち3個体および6個体がそれぞれコンジェニックタイプおよびF1タイプと同様の表現型を示した。このことは、コンジェニックを用いることにより、その約10cMのゲノム領域内に存在するQTLを単一遺伝子変異として扱い、ファインマッピングを行うことができることを示している。こうして、体重増加および脂肪蓄積に関わる原因遺伝子を単一遺伝子として連鎖解析を行ったところ、体重および脂肪量に影響する遺伝子はD1Rat90より動原体側1.4cMおよび0.7cMに位置するものと推定された。【原因遺伝子の探索】ゲノムシフトアプローチにより3個のポジショナルキャンディデート(Pnlip・Pnliprpl・Pnliprp2遺伝子)が得られた。その結果、腸管からの脂肪吸収に関わるPnlipおよびPnliprp2遺伝子は、コード領域について変異は見られないものの、コントロールに比べOLETFで若齢時の膵における発現レベルが増加および減少しており、有望な候補となると考えられた。【コンジェニック系を用いた分析系】肥満型OLETFラットでの筋肉内脂肪蓄積に関わる、第1染色体上のQTLについて、コンジェニック系統(F344.OLETF(Chr1))を用いたファインマッピング解析を行ったところ、D1Rat225とD1Rat90の間の2.8cMのゲノム領域に当該QTLが存在することが明らかにされた。このゲノム領域をゲノムシフトアプローチにより検索した結果、3個のポジショナルキャンディデート(Pnlip・Pnliprp1・Pnliprp2遺伝子)が得られた。そのうち、腸管からの脂肪吸収に関わるPnlipおよびPnliprp2遺伝子は、コード領域について変異は見られないものの、コントロールのF344およびF344.OLETF(Chr1)に比べOLETFで若齢時離乳直後の膵における発現レベルが増加および減少しており、有望な候補となると考えられた。

Pnlip遺伝子については、4kbの5'上流隣接領域および13.1kbのエクソン/イントロン領域をOLETFとF344でシーケンスし、多型について解析した。その結果、転写開始点の上流3.4kbの位置に、OLETFの方でリピート数が多いVNTR多型が、およびイントロン6上に、OLETFでAC2塩基が欠失している多型とCがGへと置換している多型が検出された。Pnliprp2遺伝子についても、6.4kbの5'上流隣接領域および17.6kbのエクソン/イントロン領域を解析したところ、イントロン7、8、9および11上に、それぞれ、OLETFでTがAへと、TがCへと、GがTへと置換している、およびA1塩基が挿入している多型が検出された。そこで、当該QTLで、OLETFとは異なるアリルを有することがQTL解析により判明しているBNとLETOについても、PnlipおよびPnliprp2遺伝子の発現レベル解析および上記多型部分のシーケンス解析を行った。その結果、両遺伝子についての発現レベルの変化はOLETF特異的であること、Pnlip遺伝子のVNTR多型のみがOLETFに特異的な多型であることが明らかになった。Ins1遺伝子では、プロモーター領域に同様なVNTR多型が存在し、それが骨格筋、脂肪組織および膵での発現レベルに影響を及ぼすことで量的形質である糖尿病発症につながっているらしいとの報告がなされており、今回の発見は興味深い点である。【ENU-mutantを用いた分析系】ENU-mutantであるDBF1について、体重、生殖器脂肪量および腎周囲脂肪量を測定し、最長筋内脂肪量の解析を実行中である。・肥満型OLETFラットでの筋肉内脂肪蓄積に関わる第一染色体上のQTLのポジショナルキャンディデートであるPnlip遺伝子について、9.8kbの5'上流隣接領域、13.1kbのエクソン/イントロン領域および3.6kbの3'下流隣接領域をOLETFとF344でダイレクトシーケンスし、多型について解析した。その結果、転写開始点の上流3.4kbの位置に、F344アリルに比べOLETFアリルにおいてサイズが長いVNTR多型が検出された。そこで、当該QTLで、OLETFとは異なるアリルを有することがQTL解析により判明しており、Pnlip遺伝子発現レベルがOLETFに比べ減少しているBNとLETOについても、上記多型部分のシーケンス解析を行った。その結果、OLETFより短くF344と同じサイズであり、Pnlip遺伝子についての発現レベルの増加がOLETF特異的であることに加えて、当該遺伝子のVNTR多型はOLETFに特異的な多型を示すことが明らかになった。Ins1遺伝子では、プロモーター領域に同様なVNTR多型が存在し、それが骨格筋、脂肪組織および膵での発現レベルに影響を及ぼすことで、量的形質である糖尿病発症につながっているらしいとの報告がなされており、今回の発見は興味深いものである。また、当該QTLのゲノム領域内で組み換えが生じている(コンジェニック×F344)×コンジェニックのバッククロス交雑群からの雄選抜個体12匹を用いることで、D1Rat90とD1Rat225の間の2.3cMの領域に当該QTLをファインマッピングした。