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ドイツ近現代文学における「聖書詩学」の系譜

ドイツ近現代文学の展開を「聖書詩学」の系譜として辿った。その際に、修辞学の観点から「予型論」的な比喩形象、即ち時代を越えた形象の呼応に注目し、同じ形象の発現を通時的に辿る形で跡づけていった。比喩形相の呼応は、作家・詩人の目的論的な意識(本研究はこれを「神義論的思考」と名付けた)によって導かれるが、「世俗化された」現代の宗教批判においても、生の意味の追求として同じ意識が働いている。本研究では、知識社会学を援用し、そのような意識が生まれて形作られる過程を「詩的主体」の確立として系譜的に跡づけた。その際、文体論的に作品の語り手人称に注目し、「詩的『私』」の発語形成として追求した。本研究は最終的に「聖書詩学」の系譜を叙述することを目指している。そのために、宗教的修辞の展開(「予型論」の系譜)と叙述の目的論的意識(「神義論」の変遷)という二つの主題を縦糸と横糸とし、両者を織り上げる「詩的(文学的)主体」の形成を追求し、これを「詩的人称」の発現としてを跡づけていく途を採る。昨年度は、この「詩的主体の形成」という新しい考察の軸を据え、その変遷の姿へ接近を計る道筋として、まずは知識社会学的な方法に習熟し、本研究へ適用する仕方について考察を深めるべく努めた。本年度もこれを継続し、従来の文学史理解の枠組みを批判的に読み直し、問題性を押さえつつ、新たな枠組みを提起する可能性を探ったが、具体例を丹念に収集していく作業に重点を置いた。加えて、本年度は、本研究が掲げる「聖書詩学」の下図を描くべく、修辞や文体における主体形成のあり方を軸として、まずは「詩的主体の形成」の強靱さと「二人称的発語」との関係を文体的に闡明することに努めた。「詩的主体」の「一人称的」言辞が現実に対して「二人称的」に関わる、その仕方を問うために、具体例を広くドイツ文学を越えた地域・時代にも求め、表現・修辞の二人称性を系譜的に跡づけようとした。その際に、F・シュタンツェルの物語論やB・ゾルク等の「詩的〈私〉Lyrisches Ich」論など現代の文学理論をも参照し、「詩的人称」の発現における「詩的主体の形成」の問題を捉え直そうとした。これらの目的のために、夏期休暇中に、B・ガィェック教授とのこれまでの交友関係によって、支援が期待できるレーゲンスブルク大学の図書館を中心に、関連する資料の収集にあたった。本年は文学作品をも収集の対象にしたが、R・シュレーダーなど普通の(ことに日本における)ドイツ近現代文学の記述に載らない詩篇や、エッセイなどに主に目配りをして収集しを行った。そのために、宗教的修辞の展開(「予型論」の系譜)と叙述の目的論的意識(「神義論」の変遷)という二つの主題を縦糸と横糸とし、両者を織り上げる「詩的(文学的)主体」の形成を追し、これを「詩的人称」の発現としてを跡づけていく途を採る。本年度は、この「詩的主体の形成」という新しい考察の軸を据え、その変遷の姿へ接近を計る道筋として、まずは知識社会学的な方法に習熟し、本研究へ適用する仕方について考察を深めるべく努めた。バーガー/ルックマン『現実の社会的構成』などに示される観点から、従来の文学史理解の枠組みを批判的に読み直し、問題性を押さえつつ、新たな枠組みを提起する可能性を探った。社会が世俗化を深めていく中で、宗教的言説やその批判の中で自己を形成していく主体のあり方を追求するために、現実を客観的なものと主観的なものとの交錯と捉え、個々の作品成立や文書記述の状況に立ち戻って、具体例を丹念に収集し、少しずつ全体像を組み上げていく作業を開始した。そのために、夏期休暇中に、ベルンハルト・ガィェック教授とのこれまでの交友関係によって支援が期待できるレーゲンスブルク大学の図書館を中心に、資料収集にあたった。本年はことに、ヨハン・ヘールマンやフィリップ・ニコライなど普通の(ことに日本における)ドイツ近現代文学の史的記述に載らない讃美歌や、説教講話などをも収集し、文学作品と同列において、その意義を尋ねた。平成25年度までは、本研究が掲げる「聖書詩学」の下図を描くべく、修辞や文体における主体形成のあり方を中心軸として、まずは「詩的主体の形成」の強靱さの度合いと、「二人称的発語」との関係を文体的に明らかにすることに努めた。

平成26年度も、引き続き、「詩的(文学的)主体」の「一人称的」言辞が自然や社会の現実に対して「二人称的」に関わっていく、その仕方を問うために、具体例を広く、日本やイギリスなどドイツ文学を越えた地域・時代にも求め、表現・修辞の「二人称性」を系譜的に跡づけようとした。とりわけ、「語り手」の多様性を秩序づけた物語論やナラティブ理論を参考にしつつ、抒情詩における「詩的一人称」の多様性を秩序づけた「詩的〈私〉Lyrisches Ich」論など現代の文学理論を考察の中心に据え、「詩的人称」の発現における「詩的主体の形成」の問題を捉え直そうとした。これらの目的のために、夏期休暇中に、ベルンハルト・ガィェック教授とのこれまでの交友関係によって、支援が期待できるレーゲンスブルク大学の図書館を中心に、関連する資料の収集にあたった。本年は、キリスト教と関連の深い現代詩人に注目し、特にクリスティーネ・ラヴァンの詩作品や散文を収集した。本研究は最終的に「聖書詩学」の系譜を叙述することを目指している。そのために、宗教的修辞(「予型論」)の展開、と創作の目的論的意識(「神義論」)の変遷という二つの主題を縦糸と横糸とし、両者を織り上げる「詩的(文学的)主体」の形成を追求し、これを「詩的人称」の発現として跡づける途をたどってきた。平成26年度までは、本研究が掲げる「聖書詩学」の下図を描くべく、修辞や文体における主体形成のあり方を中心軸として、まずは「詩的主体」の強靱さと「二人称的発語」との関係を文体的に明らかにすることに努めた。「予型論」的形象の蒐集と秩序づけ、またそこに「神義論」的動機が果たす意義についての検討が作業の中心をなした。平成27年度は、平成26年度に引き続き、以上の営みを統一的に秩序づけるために、「詩的主体」の「一人称的」言辞が自然や社会の現実に対して「二人称的」に関わっていく、その仕方を跡づけることに努めた。抒情詩における「詩的一人称」の多様性を考察した「詩的〈私〉Lyrisches Ich」論など現代の文学理論をおもに参照した。そのうえで、「詩的人称」の発現の仕方に示される「詩的主体」の問題について、「二人称の詩学」と題して執筆した。この論文とJ・G・ハーマンの思想の要約を公表することをもって、本年度のまとめとした。「聖書詩学」の視野の及びうる範囲は広く、こうしたドイツ語圏を中心とした作業の際に、身近な日本の詩や思想の系譜にも同じ志向を見出すことになり、「詩の自覚」の問題や、近現代における「聖書詩学」の系譜の叙述をも、作業に含めた。この方面でもいくつか成果を公にしたが、それらをも含めて研究全体を再構成できたと思われる。夏期休暇中には、交友関係にあるベルンハルト・ガイェック教授と、これまでの経過について意見を交換した。これを踏まえて最終的に書物の形にまとめることを目指している。ドイツ近現代文学の展開を「聖書詩学」の系譜として辿った。その際に、修辞学の観点から「予型論」的な比喩形象、即ち時代を越えた形象の呼応に注目し、同じ形象の発現を通時的に辿る形で跡づけていった。比喩形相の呼応は、作家・詩人の目的論的な意識(本研究はこれを「神義論的思考」と名付けた)によって導かれるが、「世俗化された」現代の宗教批判においても、生の意味の追求として同じ意識が働いている。本研究では、知識社会学を援用し、そのような意識が生まれて形作られる過程を「詩的主体」の確立として系譜的に跡づけた。その際、文体論的に作品の語り手人称に注目し、「詩的『私』」の発語形成として追求した。本研究は「詩的主体の形成」という新たな軸をたてて、社会と時代の広い裾野を展望した上で、傑出した主体としての詩人・作家の存立を問い直し、その生成過程を見定めることを目指している。これを修辞の問題として取り上げ、物語理論の「語り手Erzaehler」研究や「詩的〈私〉lyrisches Ich」研究の方法に則り、「詩的主体」が「詩的人称」として発現する姿を問おうとしている。
メタボリックシンドロームの予防を目指した、胎児インクレチン分泌機構の解明

本研究を本格的に開始する前段階として、数名の正期産児・早産児の臍帯血や、正常成人の血液検体を用いて、マルチプレックスアッセイを繰り返し行い、アッセイの正確性・再現性を確かめた。早産児約60例と、(対照群となる)正期産児約60例から同意を得て、臍帯血や生後4-7日、生後2週間、修正満期の頃の児血の検体を収集した。また、先天性消化管閉鎖の児6例からも臍帯血や児血の検体を収集した。当該年度に出生した早産児は、例年よりもSmall for gestational age (SGA)児が多く、ほぼ同数の早産SGA児と早産AGA(Appropriate for gestational age)児から検体が収集できている。マルチプレックスアッセイキットを用いて、まずは臍帯血中のインクレチン濃度や他の消化管ホルモン濃度の測定を開始している。現時点で、早産SGA児・早産AGA児・正期産SGA児・正期産AGA児それぞれ約15例の解析を終え、現在結果を検討中である。先天性消化管閉鎖症例の臍帯血中インクレチン濃度や他の消化管ホルモン濃度も解析を進めている。当初の予定通りの症例数・検体数が集まっており、マルチプレックスアッセイも順調に進んでいる。今後はさらに症例数を増やして検体を集めていくとともに、生後1歳半の検体も集めていく予定である。マルチプレックスアッセイを継続して進めていき、各群の結果を解析していく。解析結果の考察を深め、さらなる研究課題へ取り組んでいく。
イオン・電子同時時計数法による分子の解離過程の研究

1.同時計数率が大きいと期待される高エネルギー前方散乱電子と生成イオンとの同時計数実験が行えるように、二段式の電子エネルギー分析器を用いる計測システムを完成させた。このシステムの性能評価をかねて、Ar、Krの微小散乱角励起分断面積の測定を行い、精度のよい結果を得た。この結果は双極子近似やBorn近似と比較でき、このシステムで生成イオンとの同時測定を行った場合、光イオン化の場合と対応する結果を得ることが期待できることがわかった。2.100eV以下の低エネルギー電子衝突の場合には電子が広い散乱角度範囲に散乱されるため、同時計数率が小さくなることが予想される。このため電子エネルギー分析器の射出面上にマイクロ・チャンネル・プレートをおき、電子の射出面上の位置とエネルギーを対応させることにより、時間分解されたエネルギー分析法を確立する必要があり、本年度の設備備品費でポジション・コンピューターを購入した。本年度組み立てられた計測システムによる予備実験の結果、エネルギー分析器内のバックグラウンド電子を減らすことが重要であることがわかり、そのための分析器の改造、最適化についての基本方針を確立した。3.飛行時間測定法によるイオン分析を光イオン化を用いて実験し、分析器の捕集効率の決定、および光電子との同時測定等、今後の測定の基本技術を確立した。
夏目漱石「文学」概念の可能性－－科学・美術・比較文学的視点から

◇平成23年度は、(1)「科学」(2)「美術」を中心に、比較文学における先行研究の成果を参照しつつ、漱石自身や同時代における国内外の科学論・芸術論などを以下の手順により検証した。(1)「虞美人草」(明治四十年)を中心に、科学的客観性が近代社会の価値観に影響を与える中で、作中に描写された倫理観について検討し、またこうした内容を表現する上で、造形芸術との相互関係から抽出された美文的文体が選択されたことの意義を考え、活字論文として投稿した。また漱石の「文学論ノート」の精読を行い、漱石の科学観について検討した。東北大学図書館漱石文庫所蔵の漱石手沢本の書き入れ調査を基本とし、同時代ヨーロッパの科学観の把握や社会観に関わる文献調査を行った。具体的にはM.Nordau"Degeneration"、G.Allen"The Colour-Sense"など「文学論ノート」に散見される文献を中心とした。さらに受入研究者である慶應義塾大学・松村友視教授の専門的指導のもと、「近代文学における科学」をテーマとする同教授の博士課程演習に参加、同時代主要作品における科学観との比較検討を行った。(2)「三四郎」(明治四十一年)を中心に、造形芸術的な手法を言語表現に反映させる「断面的文学」の表現が、長編小説においてどのように作用するかを検討し、また作中で「美術」的要素を相対化するものとして取り入れられている「科学」的要素の意義について考察した。また、東北大学図書館漱石文庫所蔵の漱石手沢本の書き入れ調査を行い、漱石が「三四郎」構想に用いたと考えられる美術関連書の調査を行った。具体的にはJ.Ruskin"Modern Painters"全6巻の書き入れについて詳細に調査および記録を行った。◇以上の内容を元に、博士学位論文の内容をさらに再検証・発展させた著書原稿の準備を行い、また合わせて出版社(株式会社青簡舎)と内容、目次案、ページ数、刊行時期などについて、具体的な打ち合わせを開始した.東日本大震災の影響で、東北大学図書館での調査を予定より遅く開始したが、想定されたよりも書き入れの量が少ないことが判明し、調査結果としては予定通りとなった。また「三四郎」に関する研究成果についても、「虞美人草」同様、活字論文として査読審査に付することが望ましかったが、口頭発表などで概要を把握できたため、研究課題は概ね順調に進展していると評価できる。今後は、研究成果を公的に発表することを主眼とし、出来るだけまとまった内容の活字論文を作成することを目指したい。また同時代日本における外国文学の流入状況、翻訳・翻案文学の状況を視野に入れ、「文学」と「科学」「美術」の関連を、漱石作品の枠組みを超えたより広い視野で捉えなおすことを目標とする。
マックス・レーガー歌曲の統辞論的研究

1)2017年度の研究を基にした英文論文作成。2017年に日本音楽学会第68回全国大会で行なった研究発表をもとに、マックス・レーガーのふたつの歌曲《Friede》(opp. 79c-4と76-25)の比較および統辞論的研究を進め、研究結果を英文論文にまとめる作業を行なった。2018年度中に完成させる予定であったが、産休・育休に入ったため、論文の完成は2019年に持ち越すこととなった。2)2019年10月18日20日に蘇州で開催される国際音楽学会アジア支部大会へ参加するための研究および研究発表の応募。これまでの研究の結果、レーガーの複数の歌曲に「ひとつないし複数のモチーフを楽曲全体に拡張させる手法」が見られることが明らかとなった。現在の時点でこの手法はレーガーの「ミュンヘン時代(1901-1910)」の作品に顕著に見られるが、これがミュンヘン時代の特徴なのか、それともレーガーの歌曲全体に見られる特徴なのかを決定づけるには、さらに多くの歌曲を分析する必要がある。その分析の核となるのが、歌曲集《Schlichte Weisen》(op.76)全60曲の研究であろう。この歌曲集は、リヒャルト・シュトラウスの影響を多大に受けて作曲されたものである。レーガーは《Schlichte Weisen》作曲の前に1899年から1904年にかけてシュトラウスの作品を集中的に研究し、シュトラウスがすでに作曲した13編の詩に自らも作曲を試みた。したがって《Schlichte Weisen》全曲の分析に入る前に、この13の歌曲をシュトラウスのそれと比較分析し、シュトラウスの影響を具体的に明らかにすると同時に、それぞれの作品を統辞論的に分析することにより、レーガー独自の作曲技法もあぶり出していきたい。現在の時点では、《Leise Lieder》(op.48-2)にとりわけ興味深い作曲技法を発見することができた。この分析の成果は、2019年10月に蘇州で開催される国際音楽学会アジア支部大会で発表することが決まっている。研究実績の概要にも記した通り、2018年7月10日2019年3月31日まで産休・育休に入っていたことにより、その期間はほとんど研究を進めることができなかったため。当初、本研究ではレーガーの歌曲全曲を網羅的に分析し、その作曲技法を明らかにすることを目的としていたが、現在の時点でそれはかなり厳しい状況である。その理由としては、統辞論的分析は、詩と音楽のあらゆる要素の関係性を分析するため、1曲の分析にある程度の時間を必要とすることが挙げられる。したがって、今後は少なくとも歌曲集《Schlichte Weisen》(op.76)全60曲の分析を完結させることを目標とする。この歌曲集は1904年から1912年にかけて作曲されていることから、分析を通じてこの期間におけるレーガーの作曲技法の特徴とその変遷を明らかにすることは可能である。さらにこの作曲期間にレーガーの「ミュンヘン時代」も重なっていることから、独自の作曲技法を模索した「ミュンヘン時代」の特徴も明らかにできると考えている。2016年度は、レーガー作品全般における特徴とされている「ユーモア」が、具体的にどのような方法で歌曲に現れているのかを、クリスティアン・モルゲンシュテルンの詩をテクストとして用いている歌曲全8作品の分析を通して明らかにすることを試みた。その結果、〈追懐の旋律に〉(作品51-8)から1音楽要素のみによる「グロテスクな」ユーモア、〈上品な契約〉(作品62-16)から2韻律と拍節の関係を通してのユーモアというふたつの特筆すべき作曲法が明らかとなった。とりわけ1は、テクストにユーモアが無くても音楽にユーモアを持たせている点が注目に値する。また、レーガー歌曲の録音資料制作も実績としてあげたい。1の曲は1945年の録音が一つのみ、2の曲は録音が存在しないため、勤務校の学生と協力しこの2曲の録音を行なった。2のそれは世界で初めての録音資料となった。【具体的な活動の記録】2016年8月1930日:ドイツのマックス・レーガー研究所へ赴き、レーガーの歌曲とユーモアに関する資料収集および研究所所長や職員との意見交換を行った。10月6日:鹿児島国際大学大学院国際文化研究科第4回公開研究会「芸術における『表現』」にて研究発表「マックス・レーガーにみるユーモアの表現」を行うとともにレーガー歌曲のコンサートを企画。コンサートでは、勤務校の大学院生8名に1曲ずつ計8曲のレーガー歌曲の独唱を依頼。なお、研究発表内容は、公開研究会報告書として製本し、2017年3月に発行。2016年11月12日:日本音楽学会第67回全国大会にて研究発表。発表タイトルは「マックス・レーガーの歌曲における諧謔性」。この研究発表の一部は、『鹿児島国際大学国際文化学部論集』第17巻、第4号に掲載。タイトル「マックス・レーガー歌曲の統辞論的研究ー韻律と拍節の関係にみるユーモアー」(p. 245-252)、2017年3月発行。2016年度に予定していたモルゲンシュテルンの詩をテクストとする作品全8曲を分析し、そのうち2曲から特筆すべき特徴を見つけることができた。また、その成果について、研究会や学会で発表し、研究報告書および論文を書き上げた。加えて、研究会に付随して企画したコンサートを通じて、レーガー歌曲の魅力を一般にも広く紹介することができた。

当初の予定通り、レーガーが同一の詩に2度作曲した唯一の作品である作品79c-4と作品76-25を比較分析した。その結果、1901年版にはフレーズ末に一貫して同一の音高線の操作が見られ、1905年版では第1詩節の第13詩行で用いた7つのリズムモティーフをそれ以降のテクストに対しても様々な組み合わせで用いていることが明らかとなった。以上のことから、レーガーはふたつの「Friede」において、それぞれの核となる音楽要素は異なるものの、共に「ひとつのモティーフとそのヴァリエーションで歌唱声部を構成する手法」を用いていると言える。前年度分析した〈上品な契約〉(作品62-16)にもこの手法が見られたことから、この手法はこれらの3曲を作曲した「ミュンヘン時代(1901-1910年)」特有のレーガーの作風であると推測できる。【具体的な活動の記録】2017年7月16日:勤務校のオープンキャンパスにてレーガー歌曲のミニコンサートを開催。レーガーの独唱曲と重唱曲計7曲を大学院生が演奏。7月16日9月29日:鹿児島国際大学ミュージアムとの合同企画として『孤高の作曲家マックス・レーガーとユーモア展』を開催。アクティヴラーニングの一環として、展示パネルの作成には学部生を関わらせた。8月319月7日:ドイツのマックス・レーガー研究所へ赴き、前年度の研究成果やアジア初のレーガー展の報告、職員との意見交換、本研究に関する資料の収集を行った。10月29日:日本音楽学会第68回全国大会にて研究発表。タイトルは「マックス・レーガー歌曲の統辞論的研究ーふたつの《Friede》op.79c-4とop.76-25の比較分析を通してー」。この研究内容については現在論文を執筆中。11月18日:モーツァルティアン・フェラインの例会において招待講演。タイトルは「W.A.モーツァルトとM.レーガーにみるユーモアの共通性」。フッゲンベルガーのテクストに対するふたつの歌曲を比較分析することにより、共通点と相違点を明らかにすることができただけでなく、前年度の研究成果とも関連する「ひとつのモティーフとそのヴァリエーションで歌唱声部を構成する手法」を明らかにし、学会で発表することができた。また、アジアで初めてのレーガー展の開催、レーガー歌曲のミニコンサート、レーガー作品に関する招待講演を通し、レーガーや彼の作品について広く一般にも紹介することができた。1)2017年度の研究を基にした英文論文作成。2017年に日本音楽学会第68回全国大会で行なった研究発表をもとに、マックス・レーガーのふたつの歌曲《Friede》(opp. 79c-4と76-25)の比較および統辞論的研究を進め、研究結果を英文論文にまとめる作業を行なった。2018年度中に完成させる予定であったが、産休・育休に入ったため、論文の完成は2019年に持ち越すこととなった。2)2019年10月18日20日に蘇州で開催される国際音楽学会アジア支部大会へ参加するための研究および研究発表の応募。これまでの研究の結果、レーガーの複数の歌曲に「ひとつないし複数のモチーフを楽曲全体に拡張させる手法」が見られることが明らかとなった。
高強度ＵＡＣＳの創出と熱応力緩和型ＣＦＲＰ／金属ハイブリッド材への応用

本研究は,従来の連続スリット型一方向チョップドストランド(UACS))炭素繊維強化樹脂(CFRP)積層板より,さらに高強度・高剛性及び成形時に高流動性を有する2種類の新規不連続スリット型UACS積層板の設計を提案し,その作製方法を確立した.続いて,実験およびマルチスケール数値解析を用い,その引張強度特性及び損傷進展メカニズムを明らかにした.実験と数値解析の両面から高強度・高剛性及び成形時に高流動性を有するUACS積層板の開発に関する多くの重要を得た。さらに、UACS/Alハイブリッド材についての研究を行い,スリット角がハイブリッド材の熱残留応力及び引張強度に与える影響を明らかにした.本研究は,従来の連続スリット型一方向チョップドストランド(UACS))炭素繊維強化樹脂(CFRP)積層板より,さらに高強度・高剛性及び成形時に高流動性を有する2種類の新規不連続スリット型UACS積層板の設計を提案し,その作製方法を確立した.続いて,実験およびマルチスケール数値解析を用い,その引張強度特性及び損傷進展メカニズムを明らかにした.実験と数値解析の両面から高強度・高剛性及び成形時に高流動性を有するUACS積層板の開発に関する多くの重要を得た。さらに、UACS/Alハイブリッド材についての研究を行い,スリット角がハイブリッド材の熱残留応力及び引張強度に与える影響を明らかにした.本研究は、一方向連続炭素繊維強化プラスチック(CFRP)のプリプレグに繊維方向と±θ角を成す互い違いの切り込みを導入した一方向に配列したチョップドストランド(Unidirectionally Arrayed Chopped Stands (UACS[±θ]と呼ぶ(図2))成形材を新しく提案し、高強度、高剛性及び流動性に優れたUACS[±θ]の設計指針を確立すると共に、更にこれを利用した熱残留応力緩和に優れたCFRP/金属ハイブリッド材を開発することを目的とする。最初の年度において、計画の通りに、UACS[±θ]の一方向積層板の力学特性や熱膨張係数などについての数値解析研究、UACS[±θ]の一方向積層板の作製試験と内部構造解析試験、UACS[±θ]の一方向積層板の引張試験と熱膨張係数を測定する試験を行った。その結果、以下の知見が得られた。1)切り込み角θがUACS積層板の剛性、強度および熱膨張特性に大きな影響を与えている。10度程度の切り込みの方で総合的によい剛性、強度および熱膨張特性が得られる。2)連続切り込みより、互いに違い不連続切り込みθのUACSが高い強度を示した。3)互いに違い不連続切り込み[±θ]のUACSが切り込みθのUACSより高い力学特性を示した。4)切り込み角θのUACSとアルミで積層したCFRP1金属ハイブリッド積層板の作製試験により、UACS/金属は切り込みのないCFRP/金属に比べ、熱残留応力が軽減していた。以上の実験結果を元に、現在数値解析モデルの作成や各種UACSの力学特性と3次元微視構造との関係の解明についての研究を進めている。本研究は、一方向連続炭素繊維強化プラスチック(CFRP)のプリプレグに繊維方向と±θ角を成す互い違いの切り込みを導入した一方向に配列したチョップドストランド(Unidirectionally Arrayed Chopped Stands (UACS[±θ]と呼ぶ(図2))成形材を新しく提案し、高強度、高剛性及び流動性に優れたUACS[±θ]の設計指針を確立すると共に、更にこれを利用した熱残留応力緩和に優れたCFRP/金属ハイブリッド材を開発することを目的とする。H23年度において、計画の通りに、UACS[±θ]の一方向積層板の力学特性や熱膨張係数などについての数値解析研究、UACS[±θ]の一方向積層板の作製試験と内部構造解析試験、UACS[±θ]/Alハイブリッド積層板の引張試験と熱膨張係数を測定する試験を行った。1)切り込み角θがUACS積層板の剛性、強度に大きな影響を与えている。11度程度の切り込みの方で総合的によい剛性と強度が得られた。2)連続切り込みより、本研究で提案した互いに違い不連続切り込みθのUACS及びバイアングル[±θ]が高い強度を示した。互いに違い不連続バイアングル切り込み[±θ]のUACSが最高の力学特性を示した。3)切り込み角θのUACSとアルミで積層したCFRP/金属ハイブリッド積層板の作製試験により、UACS/金属は切り込みのないCFRP/金属に比べ、熱残留応力が軽減された。4)マルチスケール手法による3次元微視構造解析を行い、各種UACS擬似等方性積層板の損傷メカニズムを調べた。その結果により、0度層及び隣接する±45度層の切込が積層板の強度に強く影響し、その他の層の切り込みは影響しないことを明らかにした。平成25年度において、以下のような数値解析と実験研究を行いました。1)マルチスケール解析モデルに界面接合要素や積層板の損傷則を導入し、3種類のUACS積層板の損傷進展解析を行い、各種積層板の破壊メカニズムを調べた。解析結果が前年度の実験結果と一致した破壊メカニズムを示し、本研究が提案した新規の2種類UACS積層板が優れた力学特性を有することを明らかにした。2)3種類のUACSの試験片サイズによる試験結果への影響の実験を行った。試験片幅が25mmより小さいとき、強度が低下し、25mmより広くなると、強度が一定値になっていることを明らかにした。その原因はUACSのマイクロ構造による幅方向層間剥離の進展への影響によるものである。

マルチスケール解析の結果も同様なメカニズムを示した。従って、UACS積層板を構造材として利用されるとき、その形状上の最小サイズが25mmより大きいことが望ましい。3)ホットプレスによるUACS積層板の作製を行い、静的曲げ試験及び曲げ疲労試験を行った。静的試験では、3種類のUACSが連続繊維複合材料の84%以上の曲げ強度を保持しており、バイアングルUACSが連続繊維複合材料の約90%の強度を有し、一番高い強度を示した。曲げ破壊は圧縮面から始めていることも明らかにした。曲げ疲労試験では、連続繊維複合材料の曲げ疲労(10の6乗)強度はその静的曲げ強度の約80%であることに達し、3種類のUACS積層板は大きな差がなく、それぞれの静的曲げ強度の約65%である。また、疲労破壊は静的曲げ試験と異なり、荷重が小さい場合では、疲労破壊が試験片の引張り側の面から始めており、荷重が大きい場合では、疲労破壊は静的曲げ試験と同様に上面の圧縮面からはじめていることを明らかにした。4)4年間での研究成果を学会及び国際誌に発表した。発表した論文の一部をまとめて1冊の成果報告書を作成した。平成24年度において、本研究が提案した2種類のUACSと従来のUACSの強度及び破壊様式に及ぼす3次元微視構造の影響について、以下のような数値解析と実験研究を行いました。1)マルチスケール数値解析モデルを用い、切りこみを表す複雑なマイクロ構造と積層板の巨視的な構造のハイブリッドモデルを構築し、3種類UACS積層板の3次元応力解析を行い、切り込み角度、切り込みパタンー及びアスペクト比等による積層板の力学特性への影響を調べた。その結果、切込による単層板の剛性への影響が小さいこと、バイアングル切込UACSの単層板の剛性が一番大きいことが明らかにし、その結果を学会及び国際誌に発表した。2)3種類のUACSの流動性実験を行った。その結果、3種類UACSが共によい流動性を示しているが、バイアングル切込UACSが一番よい流動性を示した。流動性が複雑形状の構造を成形するために欠かせない条件である。3)ホットプレスによるUACS積層板の作製を行った。前年度まではUACS積層板の成形がオートクレブを利用したが、低コストを目指すため、ホットプレスによる成形を試み、より低コストの成形プロセスの確立に一歩前進した。4)UACSを利用した高強度、低熱残留応力、高流動性のハイブリッド材CFRP/アルミ合金の作製研究において、切込角によるCFRP/アルミ合金の熱残留応力への影響が複雑な非線形性を示し、切込角が10°30°間において熱残留応力が比較的に小さいことを明らかにした。昨年3月に東北地方大地震・津波の災害が発生しまして、当初研究費の使用の多い実験を控えて研究を行ってきましたが、その後は回復しまして、おおむね順調に計画通りに進展しています。25年度が最終年度であるため、記入しない。概ね計画通りに進展している。
骨伝導聴覚刺激による脳波応用意思伝達システムの基礎的研究

重症な神経筋疾患・上位頸随損傷者の新たな意思伝達支援システムの構築を最終目標とし,支援技術領域での脳波応用(BCI)ではこれまで用いられていない骨伝導音刺激による事象関連電位P300成分に注目した.骨伝導音の弁別選択で得られるP300成分を導出し,最適な刺激条件の検討から新たな支援システム開発の可能性について検討した.日常生活音を阻害することなく骨伝導音呈示による脳波応用支援システム構築の可能性が確認できた.重症な神経筋疾患・上位頸随損傷者の新たな意思伝達支援システムの構築を最終目標とし,支援技術領域での脳波応用(BCI)ではこれまで用いられていない骨伝導音刺激による事象関連電位P300成分に注目した.骨伝導音の弁別選択で得られるP300成分を導出し,最適な刺激条件の検討から新たな支援システム開発の可能性について検討した.日常生活音を阻害することなく骨伝導音呈示による脳波応用支援システム構築の可能性が確認できた.本研究は,重度神経疾患者(児)・高位頸髄損傷者の脳波応用(sEEG)による意思伝達支援システムの開発を目的としている.聴覚刺激の選択的注意で誘発される事象関連電位P300(P300 ERPs)をデバイス制御コマンドとして活用する意思伝達支援システム(Brain-Computer Interface: BCI)の構築に主眼を置いている.特に,従来からのP300RRPs誘発に用いられている二種類の純音を気導聴覚刺激としてランダム呈示する方法ではなく,片側乳様突起部からの骨伝導聴覚刺激によって誘発する点を特長とする.初年H19年度は,1.BCI開発用多チャンネル脳波計測システムの整備と記録・解析システムの構築,2.骨伝導聴覚刺激システムの構築.誘発最適条件の検討と刺激音の調音,3.刺激提示に同期した波形パラメータ抽出システムの構築と刺激条件の検討,4.刺激条件提示による事象関連電位のオフライン・データ分析,5.抽出波形の誘発精度の検証と効率化条件の明確化,の5つの項目について研究を進めた.気導と骨導聴覚刺激における刺激音の周波数を変化させ,導出した信号振幅について検討した.短音・純音の片側からの気導・骨導聴覚刺激呈示で,ともに目的P300ERPsの導出が可能であった.気導聴覚刺激では,1kHz2.5kHzでより明確な振幅が得られる傾向が確認された.骨導聴覚刺激では,500Hzと2.5kHzで振幅が大きく,1kHz2kHzでは振幅が小さい傾向にあった.こうした検討から,呈示聴覚刺激が気導と骨導で,周波数によってそれぞれに異なる特性があることが示唆された.次年度は,さらに協力の得られる被験者を加え,骨伝導刺激によるP300ERPs誘発の再現性のあるた導出条件を検証しながら,骨伝導聴覚刺激によるP300ERPsを活用したBCI開発のための基礎的研究を進める。本研究は,重度神経疾患者(児)・高位頸髄損傷者の脳波応用(sEEG)による意思伝達支援システムの開発を目的としている.聴覚刺激の選択的注意で誘発される事象関連電位P300成分をデバイス制御コマンドとして活用する意思伝達支援システム(BCI)の構築に主眼を置いている.特に,従来からのP300誘発に用いられている二種類の純音を気導聴覚刺激としてランダム呈示する方法ではなく,片側乳様突起部からの骨伝導聴覚刺激によって誘発する点を特長とする.H19年度までに整備してきたBCI開発用多チャンネル脳波計測システムを用い,H20年度は,安定した目的P300誘発の最適条件と刺激音の呈示条件の明確化に主眼を置き,健常者を対象として実験実施して検討を進めた.骨伝導刺激条件によるP300導出では,標的刺激2000Hz・20%頻度においてFz-303ms, Cz-309ms, Pz-307msの平均した最大振幅が確認できた.また,ベースライン法による目的P300の振幅値は,Fz-10.6μV, Cz-8.8μV,Pz-9.0μVの平均振幅値が得られた.同様に,気導刺激でもFz-292ms, Cz-296ms, Pz-301msが得られており,骨伝導による誘発条件においても十分な目的P300が得られることが確認できた.音刺激の種類としては,立ち上がりと下がりを設けたトーンバーストが最も弁別しやすい傾向にあった.骨伝導音刺激のパラメータを変化させた基礎的実験では,音圧レベルで50から60dB(SPL),周波数では700Hz, 1.5kHz, 2.0kHz,持続時間は50から100msの条件で最も安定した最大振幅値が得られる傾向にあった.最終年度(H21)は,さらに協力の得られる被験者を加え,骨伝導刺激による事象関連電位P300の再現性のある導出条件を検証し,骨伝導聴覚刺激によるBCI開発のための基礎的研究を進める.本研究は,重症な神経筋疾患・高位頸随損傷者の意思伝達支援を目的とし,脳波応用技術(brain-computer interface : BCI)領域ではこれまで応用されていない骨伝導音刺激による事象関連電位P300成分に注目した.骨伝導音の弁別選択で得られるP300成分を導出し,最適な刺激条件の検討から新たなBCI開発の可能性について検討してきた.

本機構のBCIシステムで生活支援機器を効率的に制御する上では,目的とする安定したP300成分の特徴抽出をオンライン波形処理上で実現することが極めて重要となる.目的とするP300成分の頂点振幅が十分に大きく,波形導出の再現性と潜時揺らぎの少ない刺激呈示条件を明確にする必要がある.そこで弁別課題となる聴覚刺激音の音圧レベル,刺激周波数,持続時間などの刺激音の特徴パラメータを骨伝導音と気導音で変化させた導出実験を行い,相互の最適刺激条件をP300成分の頂点振幅値のから実験により検証した.超磁歪型ヘッドホンを用いた両側頭骨部からの骨伝導音課題では,音圧レベル条件については約50dB程度の呈示が良好なP300導出に適していた.刺激周波数条件では,標的刺激2000Hzで頂点振幅値が増大する傾向にあっが,他の標的刺激周波数の変化ではいずれの条件でも明確な頂点振幅値の差は認めなかった.トーンバースト音の持続時間の検討では100msec程度の持続時間が最適であろうと考えられた.以上の検討から,気導による日常生活音を阻害することなく骨伝導音呈示でP300成分導出が可能であることが確認できた.今後,現時点でも明確な解明が成されていないヒトでの骨伝導音の伝達特性を十分に加味し,骨伝導音刺激による新たなBCIシステムの構築に向け,P300成分を効率的に特徴抽出できる算出アルゴリズム設計による支援システムの構築を更に進めることが課題となった.
種々のホスト化合物を電子移動制御場として用いる新規な陽極酸化反応の開発

系中に二種類以上の基質が存在する場合、通常、それらの有機電極反応はより酸化(還元)電位の低い基質の酸化(還元)から開始される。しかしながら、これとは逆に、より高い電位の基質の選択的な酸化(還元)を伴い進行する電極反応はこれまで殆ど知られていない。また、二つの基質同士の電位が極めて接近する場合においても、望みの基質の酸化(還元)を選択的に行うことはかなり困難である。本研究では、適切な反応場を提供し得る化合物(例えば、シクロデキストリン(CD)などの包接化合物)を用いることにより、望みの基質の選択的な酸化(還元)を可能にする新規な手法の開発を試みた。以下に、本年度の研究成果の概略を記す。(1)シクロデキストリン-インドール-アルコール共存系の電解酸化を行い、二分子のイクドールがメチレンで架橋したジインドリルメタン誘導体が得られることを見出した。マクロ電解及びサイクリックボルタンメトリーの結果から、この反応では、電位の低いイクドール(1)がCDに包接されることにより、その電極による酸化が抑制され、通常とは逆に、より電位の高いアルコールの酸化が優先して起こることを明らかにした。(2)CD存在下において種々のメディエーターによる1の間接電解酸化について検討を行い、1(0.6-0.8Vvs.Ag/AgCl)よりも高い酸化電位を持つBr(1.0V)がメディエーターとして働き、1が対応する酸化生成物であるオキシインドール(2)に効率良く変換されることを明らかにした。本陽極酸化反応は、1の間接電解酸化が可能であることを示したはじめての例であり、合成化学的にも極めて有用と考える。
都市空間の熱環境のＬＣＥ評価に関する研究

都市空間の熱環境緩和に有効な地表面被覆特性のあり方と、こうした地表面被覆による実際の環境影響の低減効果について空調負荷軽減等の面から評価を試みた。具体的には、熊本市中心市街地を対象として移動気象観測を実施し、高分解能衛星情報による地表面被覆及び周辺状態と比較し、異なる年度の比較をした。この結果を用いて街区建物の簡易空調負荷計算を行い、熱環境の違いによる空調負荷への影響を検討した。また、街区中心部の建物に設置した総合気象観測機器と電力消費記録装置による計測結果をもとに解析した。加えて、気象台の長期観測気温データを用いて都市温度の構造的変化について統計的に解析した。都市内空間の熱環境緩和に適する地表面被覆について、現実の市街地を対象として観測・調査を実施し、同時に効果的な被覆について熱(温度等)及び水(湿度等)の挙動特性の評価を行うことを目的とし、これまで市街地の暑熱環境の調査を実施し要因分析を行い、都市気候緩和が期待される地表面被覆の温度特性評価実験を行ってきた。本研究では、これを発展させて都市内空間の熱環境緩和に有効な地表面被覆の具体的な特性の在り方について明示し、また、こうした地表面被覆による環境影響の低減効果について空調負荷軽減等の面から評価を試みる。具体的には、(1)都市内空間の暑熱環境調査、(2)都市地表面の被覆材料の温度特性評価、1都市空間の熱環境の実態調査と周辺状況解析と両者の関連付けに基づく検討、2都市地表面の被覆材料の熱(温度)及び水(湿度、蒸発、凝結)特性の評価を行う。(1)では周辺状況の検討のための高分解能の衛星リモートセンシング解析を実施し、精度良い分類を行い、信頼できる精度の確保を目指す。(2)では既往研究・報告等の方法と比較検討しながら実験することにより信頼できる結果を目指し、特に被覆材の材質及び形状が熱及び水の挙動に与える影響について詳細に検討する。最終的に、都市内空間の熱環境実態調査の解析結果と、有効な被覆材料とを関連付けて、都市気候緩和効果を試算する。以上の計画のもと、初年度は熊本市中心市街地の熱環境を評価するため、移動観測による簡易気象観測を実施し、この結果を昨年度の観測結果とともに、KONOS画像を参照して把握した都市地表面状態と比較した。また、同街区の中心部で気象観測を行った。これらの結果を使って熱環境と空調負荷との関係について解析し考察した。更に観測結果を使って空調負荷計算を試みた。次年度は引き続き気象観測を実施しデータの蓄積を行った。都市内空間の熱環境緩和に適する地表面被覆について、現実の市街地を対象として観測・調査を実施し検討すると同時に、効果的な被覆について熱(温度等)及び水(湿度等)の挙動特性の評価を行うことを目的とし、これまで市街地の暑熱環境の調査を実施し要因分析を行い、同時に都市気候緩和が期待される地表面被覆の温度特性評価実験を行ってきた。本研究では更に発展させて都市内空間の熱環境緩和に有効な地表面被覆の具体的な特性の在り方について明示し、また、こうした地表面被覆による環境影響の低減効果について空調負荷軽減等の面から評価を試みる。具体的には、(1)都市内空間の暑熱環境調査と、(2)都市地表面の被覆材料の温度特性評価を行い、1都市空間の熱環境の実態調査と周辺状況解析と両者の関連付けに基づく検討と、2都市地表面の被覆材料の熱(温度)及び水(湿度、蒸発、凝結)特性の評価を行う。初年度と次年度はこれらを並行して実施する。最終年度は、都市内空間の熱環境実態調査の解析結果と、有効な被覆材料とを関連付けて、都市気候緩和効果を試算する。以上の計画のもと初年度は、熊本市中心市街地の熱環境を評価するため、平成24年夏から秋に掛けて移動観測による簡易気象観測を実施し、この結果を昨年度の観測結果とともに、KONOS画像を参照して把握した都市地表面状態と比較した。

本研究では更に発展させて都市内空間の熱環境緩和に有効な地表面被覆の具体的な特性のあり方について明示し、また、こうした地表面被覆による環境影響の低減効果について空調負荷軽減等の面から評価を試みた。具体的には、(1)都市内空間の暑熱環境調査と、(2)都市地表面の被覆材料の温度特性評価を行い、(3)都市空間の熱環境の実態調査と周辺状況解析と両者の関係づけに基づく検討、(4)都市地表面の被覆材料の熱及び水に関する特性評価を試みた。初年度と次年度に、熊本市中心市街地を解析対象として、移動観測による気象観測を実施し、周辺状況の検討のため高分解能の衛星リモートセンシング解析結果による土地指標面状態と比較するとともに、異なる年の観測結果を比較検討した。次年度と最終年度は、この観測結果を使って、同街区の建物について簡易に空調負荷計算を行い、街区空間の熱環境の違いによる空調負荷への影響について検討した。また、同街区中心部の建物に設置した総合気象観測機器と電力消費記録装置による気象観測データと電力データについて解析を行った。これらに加えて、気象台の長期観測気温データを用いて、我が国の都市温度の構造的変化について統計的解析を行った。工学平成24、25年度計画は、(1)都市内空間の熱環境実態調査と、(2)都市地表面被覆の熱及び水の挙動特性評価を計画した。(1)は実施できたが、(2)については実験を継続しているところである。平成24年度計画は、(1)都市内空間の熱環境実態調査と、(2)都市地表面被覆の熱及び水の挙動特性評価を計画している。(1)は実施できたが、(2)については実験準備の段階であり、当初の計画と照らし合わせるとやや遅れている。研究計画では、初年度と次年度に、(1)都市内空間の暑熱環境調査と、(2)都市地表面の被覆材料の温度特性評価を行い、1都市空間の熱環境の実態調査と周辺状況解析と両者の関連付けに基づく検討と、2都市地表面の被覆材料の熱(温度)及び水(湿度、蒸発、凝結)特性の評価を行う計画であった。最終年度は、(2)の実験を中心に実施し進展させる。並行して2年間の調査結果の解析を進め、最終的に、都市内空間の熱環境実態調査結果と地表面被覆特性評価結果との関連付けと、都市内空間の熱環境緩和に適する地表面被覆の具体的提案を試みる。研究計画では、初年度と次年度に、(1)都市内空間の暑熱環境調査と、(2)都市地表面の被覆材料の温度特性評価を行い、1都市空間の熱環境の実態調査と周辺状況解析と両者の関連付けに基づく検討と、2都市地表面の被覆材料の熱(温度)及び水(湿度、蒸発、凝結)特性の評価を行う計画であったが、(2)の実験について実施がやや遅れているのでこれを進展させる。並行して(1)の調査は引き続き、特に夏から秋にかけて実施する。(1)の1年間の調査結果の解析を進めるとともに、最終年度に向けて(2)の実験結果も関連付け、都市気候緩和効果の試算を試みる。最終的には、都市内空間の熱環境実態調査結果と地表面被覆特性評価結果との関連付けと、都市内空間の熱環境緩和に適する地表面被覆の具体的提案を試みる。国際学会が国内で開催されたことと、当該年度は調査を優先して実施し、実験実施の一部を次年度に繰り越したことなどが主な理由である。国際学会に発表のための旅費と、実験実施に使用する計画である。
生殖幹細胞の維持と分化の制御機構

生殖幹細胞は、これまでにFlow cytometry法においてFSC^<high>,SSC^<low>,E-cadhrin(+)の細胞集団に含まれることを示してきたが、この中には転写因子Oct-3/4の発現の有無により2つの集団が存在する。Oct-3/4(+)の細胞集団は成長・成熟期を通じて幹細胞として存在することが確認されたが、Oct-3/4(-)の細胞集団は精巣の成熟過程の一時期に出現するだけでなく、外来性のGDNFの刺激によっても誘導されるものであり、成長や再生にともない幹細胞の増殖期に出現するものであることを突き止めた。臓器の成長や再生は、組織幹細胞の増殖の過程としてとらえることができ、Oct-3/4(-)の細胞集団は幹細胞の増殖調節にかかわることが明らかとなった(投稿中)。一方、生殖幹細胞は遺伝情報を保持し、次世代へと伝える重要な役割を担っている。この遺伝情報の維持は、生殖幹細胞においてできる限り損傷を回避する必要があるとともに、一定以上の損傷が生じた場合は減数分裂において組み換え修復を行うものと予想される。このような遺伝子損傷の修復因子の一つとしてRad18に着目し、アルキル化剤により遺伝子損傷を誘発したところ、遺伝子損傷に伴い細胞周期が停止し、その後Rad18が幹細胞で翻訳され遺伝子修復にかかわることが示唆された。さらに、修復不能となった細胞はアポトーシスにより除去され、修復あるいは損傷がおこらなかった幹細胞からの組織修復が起こることが示された。Rad18ノックアウトマウスでは、損傷修復が不十分な異常細胞の増殖が認められ、早期に幹細胞が枯渇した精細管が認められるようになることが示された。これは、老化と幹細胞数減少との関連性の解析モデルとして有用である。また、P53ノックアウトマウスとのダブルノックアウトとして、癌化との関連性についても解析を進めている。これまでに生殖幹細胞には、転写因子Oct-3/4の発現の有無により2つの細胞集団に分類されることを明らかにしてきたが、表面マーカーとしてE-cadherinを用いることにより、Oct-3/4(-)の細胞集団は、分化型と未分化型の2つのタイプのc-kitを持ち、分化の過程に一時的に出現することを突き止めた。この集団は、外的には分泌型と膜型の2種類のKit-ligandのどちらと反応するかにより自己保存と分化の運命決定がなされる。つまり、Oct-3/4のON/OFFの内的な制御により分化への運命決定が開始すると考えられる。そこで、現在この2つの集団の遺伝子プロファイルの解析を行っており、分化制御に関わる分子の同定を進めることとしている。一方、遺伝子修復因子の1つであるRad18はこれまでに蛋白質として精母細胞に発現していることが報告されていたが、生殖幹細胞ではmRNAレベルで強く発現していることを突き止めた。Rad18は、遺伝子損傷が生じるとすでに転写されていたmRNAから翻訳制御されて修復に寄与することが知られている。このことは、幹細胞の品質保証にRad18が関わっていることを強く示唆している。このRad18のノックアウトマウスを作製したところ、精母細胞における異常はとくに認められず正常な精子形成を示すことが明らかとなった。しかし、世代を経るにしたがって加齢に伴い幹細胞の欠落した精細管が増加することが明らかとなった。これは、幹細胞における遺伝子損傷が世代とともに蓄積し、幹細胞がアポトーシスにより減少するものと考えられる。これは、加齢減少により組織の萎縮が見られる現象と類似している。つまり、本系は幹細胞の品質保証機構と老化との関連性の解析モデルとして利用可能であると期待されるものである。現在、幹細胞に薬剤等で人為的に遺伝子損傷を起こし、幹細胞数にどのような影響を与えるかについての検証を進めている。
発現プロファイル解析による植物共生菌分泌タンパク質の共生成立における機能の解明

1. ProAに発現制御を受ける遺伝子群の機能解析先に、Epichloёfestucaeにおいて宿主植物との共生確立に必須であるZn(II)2Cys6タイプの転写制御因子をコードする遺伝子ProAを同定した。本研究では、E. festucaeにおいて、ProAがどのように宿主植物との共生確立に関わっているかを明らかにするため、野生株およびproA変異株感染サンプルのRNA-seqを実施した。本年度は、さらに、E. festucae野生株の培養時の発現プロファイルデータを得た。E.festucaeゲノム上の9,350遺伝子の発現パターンから、宿主植物感染時に発現が誘導され、proA変異により発現が顕著に抑制される191遺伝子を特定した。それらのうち58遺伝子にコードされるタンパク質は、N末端に分泌シグナルを有していた。これらのうち、25遺伝子は全長が200アミノ酸以下のタンパク質をコードしており、核輸送シグナル配列を有するものも複数見出された。これら25遺伝子のうち10遺伝子について変異株を作成したところ、proA変異株と同様に宿主植物の矮化・枯死を引き起こす変異株が得られた。2. ProAに直接発現制御を受ける遺伝子群の同定ProAタンパク質が、直接結合するプロモーター配列の回収(ChIP)はすでに成功している。そこで、1の解析により同定された分泌タンパク質をコードする遺伝子群について、ChIP-PCR実験を実施したところ、複数の遺伝子群のプロモーター領域が高濃度で検出され、これら遺伝子群がProAタンパク質に直接制御される可能性が示された。しかしながら、次世代シークエンサーを用いた網羅的解析に必要なDNA量が回収できていないため、ChIP法の改善と並行して、本年度は、in vitroで結合反応を行うSELEX法を用い、プロモーター配列の回収を行った。SELEX法に必要なゲノムライブラリーを作成し、ProAタンパク質とタグとなるMBPとの融合タンパク質を用いて、ProA結合性プロモーター配列を回収した。26年度が最終年度であるため、記入しない。1.トランスクリプトーム解析(RNA-seq)の実施エンドファイトE.festucae野生株およびproA変異株感染ライグラス葉鞘より全RNAをそれぞれ2サンプル、計4サンプル調製した。共同研究者Barry Scott博士の協力により、Ambry Genetics社に受託し、次世代シークエンサー(イルミナ社HiSeq2000)を用いて、4サンプルの全塩基配列を決定した。マッピングプログラムBWA (Burrows-Wheeler Aligner)を用いて、得られた全配列をE. festucaeのcDNA配列(9360遺伝子)ヘマッピングした。野生株感染サンプルの総リードのうち、0.6%および0.3%(約92万および41万リード)が既知cDNA配列にマップされた。一方、proA変異株感染サンプルの総リードのうち、3.1%および1.2%(約473万リードおよび152万リード)が既知cDNA配列にマップされた。これらの結果は、これまでに知られていたそれぞれの菌株の宿主内バイオマスと一致した。サンプルごとに各cDNA配列にマップされたリード数を算出し、リスト化・正規化した後、野生株と変異株で比較したところ、約400遺伝子の発現レベルが、変異株において1/2以下に低下していることが明らかとなった。2.クロマチン免疫沈降(ChIP)法を用いたE. festucaeのProAに制御される遺伝子群の解析E. festucaeの全長ProAとHAタグとの融合タンパク(ProA-HA)発現ベクターを構築し、E. festucaeのproA変異株に導入した。得られた形質転換体を宿主ペレニアルライグラスに接種したところ、proA変異株が、宿主植物を枯死させたのに対して、ProA-HA形質転換体は、野生株と同様な感染様式を示した。この結果は、proA変異株において、proAの欠損により失われていた共生能が、形質転換体ではProA-HAタンパクによつて、相補されていることを示し、ProA-HAタンパクが、タグの付加によらず、本来のProAと同様な機能を有することが明らかとなった。そこで、ProA-HA形質転換体を用いて、ProA-HAタンパクとともに結合したDNA断片を抽出した。リアルタイムPCR法により、抽出したDNA断片中に既知ターゲット遺伝子esdCプロモーター配列が高濃度で存在することが明らかとなった。1.トランスクリプトーム解析(RNA-seq)の実施先に, Epichloëfestucaeにおいて宿主植物との共生確立に必須であるZn(II)2Cys6タイプの転写制御因子をコードする遺伝子PROAを同定した。また、これまでに他の糸状菌では、PROA相同遺伝子が有性生殖に必須であることが明らかにされている。本研究でね、E. festucaeにおいて、PROAがどのように宿主植物との共生確立に関わっているかを明らかにするため、昨年度、野生株およびproA変異株感染サンプルのRNA-seqを実施した。本年度は、さらに2つの共生関連変異株(noxAおよびsakA)感染サンプルのRNA-seqデータとの比較解析を行った。その結果、132遺伝子がproA変異株においてのみ顕著に発現レベルが低下していることが明らかになった。また、132遺伝子のうち9遺伝子については、noxuAおよびsakA変異株において野生株と比較してむしろ発現レベルが上昇していた。