hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
アジアにおける市場経済の諸類型とその形成・発展に関する研究

本研究の課題は、アジアの市場経済の多様性に着目して、それを類型的に考察しようとするものであった。アジア各国は、歴史、国家体制、民族性、文化、宗教、社会慣習、価値観、行動様式等が各国によって異なる複合社会の様態を見せている。そのため、アジアにおける市場経済化の過程は、個人主義の下に旧来の社会がもつ共同体的要素を分解しながら社会の均質化や形式的な「自由と平等」を実現した欧米型の市場経済化の過程とはかなり異なり、そこで形成された市場経済も欧米型とは異なる類型的な把握が不可欠である。本研究は、以上のような観点から、アジアの市場経済化にともなう諸問題を検討した。まず第一に、アジアの市場経済の形成過程や類型化を考える上で必要となる理論的・方法論的検討をおこなった。ここで検討した論点は、(1)グローバリゼーションが経済組織に及ぼす影響、(2)市場経済と社会主義の融合としての社会主義市場経済の理論、(3)アジア型金融システムと欧米型金融システムの差異、(4)中国の社会主義市場経済と企業システムの関連、(5)東アジア市場経済化の分析における独自の方法論の要請、である。第二に、アジアの市場経済の特徴を類型論の観点からマクロ的に実証分析を行った。ここで検討した論点は、(1)世界経済とアジアの市場経済化の関連、(2)アジアと欧米との結節点としての香港からみたアジアの貿易構造の特徴、(3)欧米とは異なるアジア型のセーフティネットの形成、(4)アジア各国に浸透する華人ネットワークの意義、である。第三に、アジアの市場経済化と企業の関わりを実態調査によってミクロ的に分析した。ここで検討した論点は、(1)中国・台湾における日系現地企業の経営実態と市場経済化の関連、(2)社会主義と中国の国有企業システム改革の関連、である。今年度の研究は、各人がそれぞれの役割分担に基づいて研究を進める一方で、全体研究会を通じてアジアにおける市場経済化に関連して共通認識を形成するよう試みた。その中で、メンバーが従前より研究を続け既に一定程度の共通見解を持つ中国の市場経済化に関して現地の専門家にレビューを受けた。まず、上海社会科学院では経済研究所副所長の王貽志氏にレビューを受け、そこでは市場経済化に果たす企業家の役割、企業内における党と経営者の問題等について議論した。さらに、広州市経済研究所では院長の丘傳英氏他からレビューを受けたが、そこでの論点は中国の市場経済化に関連して政府ないしは国家の果たす役割、経済成長の典型的なパターン、日本の高度経済成長との比較等であった。こうしたレビューの中で、市場経済はそれを支える非市場的な制度がなければ成り立ち得ないのではないかという、メンバーに共通した認識が中国の市場経済化に関しても適応可能であり、それを軸に中国の市場経済の類型化が可能であるとの感触を得ることが出来た。また、研究会では、現代の開発経済論が捉える途上国の市場経済の理論に関しても批判的に検討した。その中で、非市場経済的なシステムを解体することが市場経済化につながるとする新古典派に対して、開発経済論の中でも、原洋之助氏らの議論は非市場システムの存在を工業化の重要な要素として捉える点でここでの認識に近いものがあることが確認できた。来年度は、メンバーの役割分担に応じて個別研究をさらに進める一方、ある程度成果が得られつつある中国の市場経済とその類型化に関して全体研究によって集中的に分析を進めることが予定されている。今年度の研究は、各人がそれぞれの役割分担に基づいて研究を進める一方で、全体研究会を通じてアジアにおける市場経済化に関連して、諸説を批判的に検討しながら共通理解を形成するように試みた。まず、全体研究会では、アジアの市場経済化に関連して、比較制度分析によるアジア経済論を批判的に検討した。

比較制度分析は制度学派の流れを汲むものであり、主流派の新古典派経済学とは市場経済の理解が異なる。新古典派が市場経済を万能なものとして捉え、国家の役割を排除する市場原理主義的な傾向を持つのに対し、比較制度分析では、民間部門のコーディネーションを促進する国家の役割を認める市場拡張的見解を打ち出している。全体研究会では、この見解を取り上げ、アジア経済の分析にとっての有効性について議論した。制度の役割を重要視する点ではここでの認識に近いものがあり、アジア経済の分析に関しても新古典派経済学よりも有効性が高いと考えられるが、新古典派経済学的な効率性基準を脱し切れていない点に限界があるように思われた。昨年度に引き続き中国の市場経済化に関連して、現地専門家との意見交換を行った。まず、メンバーが中国北京を訪れ、国家計画委員会経済研究所副所長の胡春力氏から市場経済化と国家の役割や国有企業の民営化に関してレビューを受け、さらに中国社会科学院経済研究所で朱紹文日本市場経済研究センター理事長等と社会主義市場経済の理論等に関して意見交換を行った。総じて中国における市場経済の進展は、新古典派経済学の浸透をその背景としてもっている。そのため、一方において効率性が重視され、旧来からアジア経済に存在した共同体がもつ公平性の原則が軽視されているようである。社会主義市場経済の理論は、この公平性を市場経済の中にいかに取り込むかということになると思われる。今年度は、研究グループ全体のテーマをアジアの金融制度に設定し、特に1997年以来のアジア金融危機との関連を研究した。ここで問題となったのは、アジア金融危機の中でしばしば主張されるようになってきた欧米とアジアの金融システムの違いである。すなわち、欧米がarm's length systemであるのに対して、アジアはrelationship-based systemであるという点である。この議論はわかりやすいが、arm's length systemではcommon law概念が根付いている必要があるのに対し、アジアではそれが欠けるためにrelationship-basedsystemによるという主張には、必ずしも同意できないというのがこの研究会の結論であった。海外研究者との交流では、台湾の中国文化大学、台湾政治大学、中山大学を訪れて現地研究者と意見交換を行った。その主な内容は、台湾がアジア金融危機の影響をあまり受けなかったのはなぜかということであったが、台湾がハイテク産業を主体とする産業構造に転換してきたことと、産業の主体が中小企業にあったことが大きかったのではないかという結論であった。さらに、今年度は各人個別のテーマに関して研究の中間報告を行い、報告書に向けてそれを集約する議論を行った。その結果、報告書の構成を(1)方法・理論、(2)マクロ・金融、(3)実態調査、の三部とすることを決めた。(1)の方法・理論では、市場経済の諸類型、制度と文化、社会主義市場経済の条件なとをテーマとする。(2)のマクロ・金融ではアジアの貿易と投資の構造、アジア型セイフティネット、華人ネットワークなどを取り上げる。(3)の実態調査では、中国・台湾・韓国の現地企業や日系企業の経営実態と市場経済との関連を分析する。
アンジオテンシンIV受容体可溶成分の高感度測定系構築と臨床的有用性の評価

私たちはこれまで高血圧や糖尿病に関係する新しいタンパク質としてDNA遺伝子チップを用いた網羅的な解析から、高血圧に関係するレニン-アンジオテンシン系と糖尿病に関係するインスリンの両方に関係するたんぱく質アンジオテンシンIV受容体を抽出し、その血液濃度の測定法を開発しました.今回はその精度を上げるためにモノクローナル抗体を用いた方法に取り組み、大幅に感度の改善した次世代型測定方法を開発しました。生活習慣病の診療に役立つことが期待されます。これまで申請者らは腎生検組織を用いた網羅的発現遺伝子解析により、高血圧/糖尿病に特有な発現変動を示す遺伝子としてアンジオテンシンIV受容体(AT4)を抽出、想定される可溶成分(sAT4)に対してポリクローナル抗体による感度0.01nmol/mlレベルの測定系を確立しました。臨床症例652例の血漿濃度の測定では、陽性群で有意にBMIが低値であり、かつ有意にアンジオテンシンIが低値であるとの成績が得られ、生物学的な解釈としても整合性のある成績と考えられました。しかしながら感度については、血漿での陽性率が14.3%と必ずしも高くありません。そこでモノクローナル抗体による高感度測定系を確立することにより臨床上大変有意義なバイオマーカーとなることが強く期待され、これを構築し臨床症例で評価することを目的としました。このため、抗原タンパク質(標準物質)としての人工合成遺伝子を作製し、発現細胞により培養調製し、次にマウスを免疫しハイブリドーマを作製、クローニングしモノクローナル抗体を精製、高感度ヒトsAT4 ELISAキットを構築する実験系を計画しました。初年度にあたりまずは、抗原タンパク質の人工合成遺伝子の作製、発現細胞による培養調製まで進めました。この経過で、培養調製した細胞において発現ベクターの構築によるCHO細胞における発現を確認しましたが、十分な収量が得らなかったため、リコンビナントタンパクによるモノクローナル抗体の作成に切り替え、これによるモノクローナル抗体作成のためのマウスの免疫を開始しました。今後得られる抗体群と既に作成済みのポリクローナル群との組み合わせにより高感度測定系の構築を進めて参ります。このため、まず抗原タンパク質(標準物質)としての人工合成遺伝子を作製し、発現細胞により培養調製し、次にマウスを免疫しハイブリドーマを作製、クローニングしモノクローナル抗体を精製、高感度ヒトsAT4 ELISAキットを構築する実験系を計画しました。初年度の平成25年度には、人工合成遺伝子の作製、培養調製まで進め、発現ベクターの構築によるCHO細胞での発現を確認しましたが、収量が不十分であり、リコンビナントタンパクによるモノクローナル抗体作成に切り替えました。平成26年度には、マウスの免疫、脾臓、リンパ節とX63との細胞融合を行い、上清によるスクリーニングを進め、clone:48A3、55A2、57A2、62A2、77A1を選択、サンドイッチELISA法による組み合わせ試験の結果、固相化側に62A2, 77A1を用い、標識側に48A3-Fab'を用いるものが最適と考えられこれを各2キット作成しました。本年度の平成27年度には、まず、固相化側として62A2, 77A1のいずれがより感度が高いかを決定し、キットを一定数量産し臨床検体での各種病態における意義を解析します。初年度の平成25年度には、人工合成遺伝子の作製、培養調製まで進め、て発現ベクターの構築によるCHO細胞での発現を確認しましたが、収量が十分であり、リコンビナントタンパクによるモノクローナル抗体作成に切り替えました。

マウスの免疫、脾臓、リンパ節とX63との細胞融合を行い、上清によるスクリーニングを進め、clone: 46A1, 48A3, 55A2, 57A2, 62A2, 77A1を選択、サンドイッチELISA法による組み合わせ試験を複数ステップで実施し徐々に選別した結果、固相化側に77A1、標識側に46A1-Fab'を用いる組み合わせが最適と考えられ最終決定としました。その後、各種の測定条件の適正化を進め、再現性等のチェックを実施しています。引き続き臨床検体で測定し各種病態における意義を解析します。私たちはこれまで高血圧や糖尿病に関係する新しいタンパク質としてDNA遺伝子チップを用いた網羅的な解析から、高血圧に関係するレニン-アンジオテンシン系と糖尿病に関係するインスリンの両方に関係するたんぱく質アンジオテンシンIV受容体を抽出し、その血液濃度の測定法を開発しました.今回はその精度を上げるためにモノクローナル抗体を用いた方法に取り組み、大幅に感度の改善した次世代型測定方法を開発しました。生活習慣病の診療に役立つことが期待されます。研究計画の全体的な過程としては、抗原タンパク質(標準物質)の人工合成遺伝子を作製し、発現細胞により培養調製し、マウスを免疫し抗体価上昇後ハイブリドーマを作製、クローニングしモノクローナル抗体を精製、高感度ヒトsAT4 ELISAキットを構築し、臨床症例で測定・評価するという概要です。初年度である平成25年度は諸方法を試みた上で、人工合成遺伝子によるタンパク質の合成は困難であると判断し、平成26年度はただちにリコンビナントタンパクを入手し、ハイブリドーマ作製の過程に進み、HRP標識したFab'部位の抗体を作製、適正な測定諸条件、再現性などを検討し、高感度と期待されるヒトsAT4 ELISAキットの作成に至りました。以上より達成度として、おおむね順調に進展していると自己評価いたします。医歯薬学高感度と期待されるヒトsAT4 ELISAキットの作成に至りましたので、これを用い、臨床症例での測定を実施し、まず、私どもが以前の計画で作成しましたポリクローナル式キットと測定結果を比較検討します。そして既知のRA系マーカーやインスリン抵抗性マーカーとの関係を解析し、各種疾患の発症・進展における関係を解析します。これにより、臨床上有用な新規バイオマーカーの確立を目指します。現時点では諸方法を試みた上で、人工合成遺伝子によるタンパク質の合成は困難であると判断し、ただちにリコンビナントタンパクを入手し、ハイブリドーマ作製の過程に進んでおります。以上より達成度として、おおむね順調に進展していると自己評価いたしたく存じます。初年度の進行状況を踏まえ、今後当初の計画に沿って、免疫したマウスの抗体価上昇後、脾臓・リンパ節から、ハイブリドーマを作製、スクリーニングし、適当数をクローニング、培養後上清からモノクローナル抗体を精製します。
複素フィンスラー幾何学における調和写像論の構築

複素多様体の従来の研究においては,内積として定義されるエルミート計量やケーラー計量が用いられ,成功をおさめてきた.しかし,多変数複素関数論や正則ベクトル束などの研究においては,ノルム構造として定義される複素フィンスラー計量の方が,より本質的な役割を果たすと期待される.本研究の目的は,コンパクト複素多様体に対するHartshorneの予想の微分幾何的証明を目標に,閉リーマン面から複素フィンスラー計量をもつコンパクト複素多様体への調和写像の研究を軸に,複素フィンスラー幾何学における調和写像論を構築することである.本年度の研究成果は次の通りである.1.研究代表者・西川は,閉リーマン面から複素フィンスラー多様体への可微分写像に対してエネルギー汎関数を定義し,その臨界写像として調和写像を定義した.これらの定義を,自然な形で任意次元の複素フィンスラー多様体間の可微分写像に対して拡張することに成功した.2.上記の結果や本萌芽研究でえられたこれまでの研究成果,また実および複素フィンスラー多様体間の調和写像に関する最近の研究成果についての総合報告を「Harmonic maps of Finsler manifolds」としてまとめた.2008年度夏にルーマニア科学協会から出版される学術書「Topics in Differential Geometry」の1章として収録される予定である.複素多様体の従来の研究においては,内積として定義されるエルミート計量やケーラー計量が用いられ,成功をおさめてきた.しかし,多変数複素関数論や正則ベクトル束などの研究においては,ノルム構造として定義される複素フィンスラー計量の方が,より本質的な役割を果たすと期待される.本研究の目的は,コンパクト複素多様体に対するHartshorneの予想の微分幾何的証明を目標に,閉リーマン面から複素フィンスラー計量をもつコンパクト複素多様体への調和写像の研究を軸に,複素フィンスラー幾何学における調和写像論を構築することである.この目的に沿って,今年度は次のような研究を行った.1.閉リーマン面から複素フィンスラー多様体への微分可能な写像に対して,その微分の複素化は,接ベクトル束の正則および反正則部分束への分解に応じて,4つの部分に分解される.研究代表者・西川は,咋年までの研究において,この分解のうち,リーマン面の反正則接ベクトル束を複素フィンスラー多様体の正則接ベクトル束へ移す部分の複素フィンスラー計量によるノルムを用いてエネルギー汎関数を定義し,第1変分公式と第2変分公式を求めた.これらの公式を求める際にあらわれた弱ケーラー条件の幾何学的意味を研究する過程で,リーマン面の正則接ベクトル束を複素フィンスラー多様体の正則接ベクトル束へ移す部分のノルムから定義される汎関数も同時に考え,これらを対としてエネルギー汎関数を考察する必要性が明らかになった.2.このようなエネルギー汎関数の臨界点としてえられる写像の微分可能性に関して,研究分担者・立川は,一般に非線形項が解の1階微分の2次式であるような非線形汎関数で,非線形項の係数がVMO関数であり,かつ非線形項がCaratheodory関数であるものに対して,その弱解の部分正則性(ヘルダー連続性をもつ部分の特徴づけ)を証明した.複素多様体の従来の研究においては,内積として定義されるエルミート計量やケーラー計量が用いられ,成功をおさめてきた.しかし,多変数複素関数論や正則ベクトル束などの研究においては,ノルム構造として定義される複素フィンスラー計量の方が,より本質的な役割を果たすと期待される.本研究の目的は,コンパクト複素多様体に対するHartshorneの予想の微分幾何的証明を目標に,閉リーマン面から複素フィンスラー計量をもつコンパクト複素多様体への調和写像の研究を軸に,複素フィンスラー幾何学における調和写像論を構築することである.この目的に沿って,今年度は次のような研究を行った.1.研究代表者・西川は,閉リーマン面から複素フィンスラー多様体への可微分写像に対して,リーマン面の反正則接ベクトル束を複素フィンスラー多様体の正則接ベクトル束に写す部分と,反正則接ベクトル束に写す部分を対としてエネルギー汎関数を定義し,第1変分公式を求めた.2.豊富な正則接ベクトル束をもつコンパクト複素多様体の第2ベッチ数が1であるという事実が,Hartshorne予想の証明において重要な役割を果たす.この事実を,複素フィンスラー多様体のカテゴリーで証明する試みをDragomir氏と開始した.3.面積および長さという微分のL_1ノルムを最小化する問題を,微分のL_2ノルムを最小化することに置き換える試みは、測地線およびプラトー問題の意味での極小曲画の存在を証明する有効な手段である.研究分担者・山田は,この手段を特異点を持つ極小部分集合の存在証明に一般化した.複素多様体の従来の研究においては,内積として定義されるエルミート計量やケーラー計量が用いられ,成功をおさめてきた.しかし,多変数複素関数論や正則ベクトル束などの研究においては,ノルム構造として定義される複素フィンスラー計量の方が,より本質的な役割を果たすと期待される.本研究の目的は,コンパクト複素多様体に対するHartshorneの予想の微分幾何的証明を目標に,閉リーマン面から複素フィンスラー計量をもつコンパクト複素多様体への調和写像の研究を軸に,複素フィンスラー幾何学における調和写像論を構築することである.本年度の研究成果は次の通りである.1.研究代表者・西川は,閉リーマン面から複素フィンスラー多様体への可微分写像に対してエネルギー汎関数を定義し,その臨界写像として調和写像を定義した.これらの定義を,自然な形で任意次元の複素フィンスラー多様体間の可微分写像に対して拡張することに成功した.2.上記の結果や本萌芽研究でえられた

これまでの研究成果,また実および複素フィンスラー多様体間の調和写像に関する最近の研究成果についての総合報告を「Harmonic maps of Finsler manifolds」としてまとめた.2008年度夏にルーマニア科学協会から出版される学術書「Topics in Differential Geometry」の1章として収録される予定である.
EFLとしての日本語母語話者の歯摩擦音のintelligibility

本研究の目的は、日本語母語話者の英語の発音をEnglish as a Lingua Franca(ELF)の枠組みで捉え、そのintelligibility(明瞭性)を検証するために、Lingua Franca Core (LFC)の項目のうち「日本語母語話者が困難を感じる」とされる歯摩擦音(thの発音)について、(1)日本語母語話者の代替音素のintelligibilityについて、アジア圏の英語話者がどれだけ許容するかを調査し、(2) ELFとして歯摩擦音のintelligibilityを維持するための日本語母語話者への適切な発音指導とはどのようなものかを明らかにすることである。
森林に降下した放射性セシウムの林内および林木内での動態解析

福島第一原子力発電所から放出された放射性物質が降下沈着した地域の森林において,スギなどの林木の幹材に含まれる放射性セシウムの動態を調べている。昨年度までに調査林分を設置し,伐倒した複数本のスギに含まれる放射性セシウムの樹体内分布を調べるとともに,木部内の放射性セシウムの少なくとも一部が水溶態であり,送風乾燥器で木片を乾燥させると水分の移動とともに放射能の分布が変化するを明らかにし,木部内の位置による移動の違方性について調べてきた。平成30年度においては,さらに実験の繰り返し数を増やして,乾燥に伴う放射能分布の変化の確認をおこなうと供に,丸太の自然乾燥を模した実験によってをおこない,水分の移動とともなう幹材内の放射性セシウムの移動量を定量的に示すことができた。伐採してから木材として利用するまでの間に放射能分布が変化することを意味しており,汚染地域の木材利用を検討する上での重大な知見である。実験に適当な材料(汚染した林木)の入手に手間取り,実験の繰り返し数を増やすために当初の予定より時間がかかってしまったが,再現性のある結果が得られたので今年度の実験をさらに進捗させる予定である。室内実験を優先させたため後回しになった林内での調査を今後推進し,実際的な幹材内での放射性物質の移動や,放射能低減策を検討していくとともに,学会発表や投稿論文によって成果を公表していく。福島第一原子力発電所から放出された放射性物質が降下沈着した地域の複数の森林において,スギなどの林木の幹材に含まれる放射性セシウムを継続的に測定している。伐倒して部位別に測定したスギにおいては,樹冠の高い林内よりも林縁の林木のほうが幹材にまで移行した放射性セシウムが多い傾向が見られた。個体全体の葉量と幹材内に検出される放射性セシウム量に相関があるとする仮説を指示する結果である。葉(針葉)について解析すると,2011年の事故当時に着生していた葉にはまだ高濃度の放射性セシウムが沈着しているが,2011年以前に展開した葉が陰樹冠には多く着生しているものの,陽樹冠ではほとんど落葉している傾向が見出された。落葉・落枝にともなう林冠から林床への二次降下がいつまで生じるかを予測する上で重要な知見といえよう。また伐採後,玉切りした幹材内でも,野外に静置しておいた間に放射性セシウムが移動していることを示唆する結果が得られた。伐倒後の処理によっては幹材内の放射性セシウムを任意に移動させ,用材とする部位の放射能を低減できる可能性を示している。幹材中の放射性セシウムの存在様態を明らかにし,どのような条件で移動しうるのかを実験的に調べていく予定である。ハンドドリルを用いて非破壊的に幹材片を採取して放射能を計測する調査を,2013年と同じ個体について実施した。幹材内の放射性セシウム量には大きな個体差があるが,同じ個体を用いることにより,この2年間の幹材内の移行を明らかにすることができる。当初予定していた温室内での移行実験は成果を得るに至らなかったが,本課題開始前から調査地としていた林分での継続調査とともに,別の林分での調査も行ない,様々な林況での調査を実施した。昨年度の調査林分とは別のスギ人工林に新たな調査地を設け,スギを複数本伐倒した。葉(針葉)や高さ別の幹の樹皮と辺材,心材に含まれる放射性セシウムを測定した。また採取した幹の一部を用いて木部内の放射性セシウムの存在形態を実験的に調べた。木部を機械的に圧縮して搾り出された水分には放射性セシウムが含まれており,木部内の放射性セシウムが少なからず可溶態で存在していることが示された。さらに幹丸太を送風乾燥器で乾燥すると,切口方向への水分の移動に伴って放射性セシウムの分布が変化することや,切口を被覆して水分の移動方向を規制した実験により,とくに軸方向に放射性セシウムが移動しやすいことなどが明らかになってきた。伐倒調査によって幹材の放射能を計測する際に,切口からの乾燥に伴なう放射能の変化に留意すべきであることを意味する。幹材の自然乾燥法として,伐倒後すぐに枝を切らずに林床にしばらく置いておくことで葉からの蒸散により幹材の水を徐々に減らす「葉枯らし」があるが,葉枯らしによって放射性セシウムも枝葉に移動し幹材内の放射能を低減できないかの実証実験も開始した。供試木以外は伐倒せず日照の少ない林内での「葉枯らし」になったためか,伐倒4ヶ月後の測定では放射能の低減効果は見出せなかった。次年度以降も継続的に測定をおこない,幹材の乾燥経過や,水分の移動と放射能分布の変化を明らかにする予定である。当初計画していた林内の放射線源分布の調査は,予定していた装置の変更もあって,中断している。一方で木部内の水分の移動に伴って放射性セシウムも部分的には移動しうることを実験的に示すことに成功した。さらにその成果を林地での応用を念頭においた調査も開始した。

福島第一原子力発電所から放出された放射性物質が降下沈着した地域の森林において,スギなどの林木の幹材に含まれる放射性セシウムの動態を調べている。昨年度までに調査林分を設置し,伐倒した複数本のスギに含まれる放射性セシウムの樹体内分布を調べるとともに,木部内の放射性セシウムの少なくとも一部が水溶態であり,送風乾燥器で木片を乾燥させると水分の移動とともに放射能の分布が変化することを実験的に明らかにしてきた。平成29年度には,実験・解析の繰り返し数を増やし,水分の移動に伴う放射性セシウムの移動パターンの定量的な分析をおこない,水溶態の比率や,木部内の位置による移動の違方性についての解析をおこなった。また,丸太の自然乾燥を模した実験をおこない,やはり水分の移動とともに幹材内の放射性セシウムが移動することを明らかにした。伐採してから木材として利用するまでの間に放射能分布が変化することを意味しており,汚染地域の木材利用を検討する上での重大な知見である。当初計画していた林内の放射線源分布の調査は,予定した装置の変更もあって,中断したままである。一方で木部内の水分の移動に伴って放射性セシウムが移動いすることを実験的に示すことに成功しているので,さらにその成果を汚染地域での森林利用への応用を念頭においた調査を発展させている。昨年度までに調査林分を設置し,伐倒した複数本のスギに含まれる放射性セシウムの樹体内分布を調べるとともに,木部内の放射性セシウムの少なくとも一部が水溶態であり,送風乾燥器で木片を乾燥させると水分の移動とともに放射能の分布が変化するを明らかにし,木部内の位置による移動の違方性について調べてきた。平成30年度においては,さらに実験の繰り返し数を増やして,乾燥に伴う放射能分布の変化の確認をおこなうと供に,丸太の自然乾燥を模した実験によってをおこない,水分の移動とともなう幹材内の放射性セシウムの移動量を定量的に示すことができた。実験に適当な材料(汚染した林木)の入手に手間取り,実験の繰り返し数を増やすために当初の予定より時間がかかってしまったが,再現性のある結果が得られたので今年度の実験をさらに進捗させる予定である。調査林分での調査を継続するとともに,幹材内への移行,とくに伐採後の樹体内での移動に着目した操作実験をおこない,幹材内の放射性セシウムの低減方法を検討する。実地調査は当初計画どおりに継続するが,木部内の水分の移動に伴なう放射性セシウムの移動について定量的な実験研究を重点的に進めるとともに,現実的な幹材内の放射性セシウムの低減方法を検討する。計画どおりの実地調査を継続するが,木部内の水分の移動に伴う放射性セシウムの移動について定量的な実験研究を重点的に進めるとともに,現実的な幹材内の放射性セシウムの低減方法を検討していく。室内実験を優先させたため後回しになった林内での調査を今後推進し,実際的な幹材内での放射性物質の移動や,放射能低減策を検討していくとともに,学会発表や投稿論文によって成果を公表していく。林内の放射線源分布を調査するための装置の購入を申請時に検討していたが,装置に変更があったため,初年度の購入を見合わせ,他の調査を先に進めた。林内の放射線源分布調査を計画していたが,装置の変更が初年度にわかったため,別の調査方法を検討していたが,木部内の放射性セシウムの存在形態の解明の調査に進展が見られたため,その研究と応用法の検討を先に進めた。
軟骨細胞外基質パールカンの椎体・椎間板形成における分子機構の解明

ヘパラン硫酸プロテオグリカンであるパールカンは、長管骨成長板における軟骨形成において必須の機能を担うことが、その欠損マウスとヒト遺伝性疾患の解析より明らかとなっていた。しかしパールカンの脊椎と椎間板発生における機能は不明であったため、今回この機能解析を行った。パールカンが欠損したマウスでは、脊椎が曲がる側彎変形を呈した。組織学的検討より、椎体成長板肥大軟骨細胞層の発達遅延と層状構造消失を認めた。さらに、椎間板形成も遅延していた。以上より、パールカンは、椎体と椎間板の発達にも重要な機能を担うと考えた。本研究の目的は、パールカンの脊椎及び椎間板の発生機序への重要性を示すことである。本研究では、2つの課題を検討している。胎生早期の体節形成のシグナル制御の異常と胎生後期の骨化シグナルの異常である。パールカンノックアウトマウスは、約40%がE10.5日頃に死亡し、残りは周産期に死亡する2峰性の致死性を呈する。パールカンの機能欠損による椎体の異常にも2つの大きな原因の存在を検討する必要がある。早期致死の発症機構は未だ解明されておらず、パールカンの神経管並びに体節の分化への作用に着目して検討する予定である。胎生後期の骨化シグナルの異常については、申請者がパールカンの長管骨における内軟骨性骨化での役割を検討してきた手法を用いて、その脊椎における役割について解明する予定である。平成19年度は胎生後期の骨化シグナルの異常についての解析を進めた。胎生16.5日のパールカンノックアウトマウスの脊椎は、野生型と比べ顕著な側彎変形を呈していた。組織学的には、この時期野生型では椎間板形成が完了しているところ、パールカンノックアウトマウスではそれが低形成で加えて偏心性であった。胎生早期の体節形成シグナル制御におけるパールカンの関与については、今年度は充分なサンプルが得られなかったため、次年度にこれを実施する予定である。次年度はさらに、パールカンノックアウトマウスの脊椎における内軟骨性骨化の異常についても、軟骨及び椎間板形成過程におけるFGFシグナルや血管進入に焦点を絞り解析を継続していく予定にしている。本研究の目的はパールカンの脊椎形成における作用機序の検討である。パールカンは軟骨発生に必須の分子である。ヒトでのパールカン遺伝子欠損病として周産期致死性の軟骨異形成症(DDSH)と、良性の経過をとる軟骨異栄養性筋強直症(SJS)が報告されている。その機能完全欠損に起因するDDSHと、機能部分欠損によるSJSの双方において、脊椎は長管骨に比べて変形が強い。これはパールカンの椎体形成における重要性を示す。しかし、パールカンの脊椎における発現については、出生後の牛の脊椎における報告が認められるものの(Histochem Cell Biol, 118, 269-280, 2002)、発生段階の報告は認められない。また、脊椎の発生段階における作用機序についての報告もない。椎体の形成過程は、長管骨の内軟骨性骨化と同様のプロセスをたどることが知られている。平成20年度は、研究代表者がパールカンの長管骨における内軟骨性骨化での役割を検討してきた方法を用いて、その脊椎における役割について解明を試みた。胎生16.5日の野生型マウスの脊椎において、パールカンは、長管骨の内軟骨性骨化の際と同様に、肥大軟骨細胞層にて細胞周囲に強く発現を認めた。また、パールカン欠損マウスの脊椎は、野生型マウスと比べ、著明な側彎変形を示した。脊索の残存を示唆する所見は、野生型もパールカン欠損マウスも認められなかったが、椎間板の髄核がパールカン欠損により低形成かつ偏在化していた。椎体形成も、野生型で認められる肥大軟骨の石灰化が、パールカン欠損マウスにおいては減少し、軟骨配列も乱れていた。椎間板形成には、制御された分子生物学機序に加え、軟骨細胞の秩序だった配列により生まれる均等な力学的負荷も重要な因子である。以上より、ヒトにおけるパールカンの機能異常による脊椎変化は、このような複合要因により発症することが示唆された。
転移性骨腫瘍に対するアクリジンオレンジ血管内投与の効果の検討

がんの骨転移はADLを大きく低下させるため、進行を予防するために骨吸収抑制剤を一般に用いるが、完全に進行を抑えることは難しい。アクリジンオレンジは弱塩基性の蛍光色素であり、アクリジンオレンジを取り込んだ細胞に放射線などを加えると、細胞をアポトーシスに導く。アクリジンオレンジはがんに特異的な親和性を有していることが判っており、血管内投与された骨肉腫モデルマウスの肺転移を抑制することが報告されている。このようにアクリジンオレンジを血管内投与することで、転移病変を縮小させる効果が期待できるが、骨転移に対する効果はまだ検討されていない。さらに、骨吸収抑制剤との併用効果に関しては、全く調べられていない。
きわめて高頻度に直腸肛門奇形を示す、 新規モデルマウスを用いた鎖肛発生過程の解明

新規樹立直腸肛門奇形100%発症マウス(Sd Skt/+ Skt doublemutant mouse)を用いることにより、鎖肛の発生過程を解析し鎖肛発症のメカニズムを解明することをこの研究の目的とした。胎生11.5-12.5日の本マウスにおいてcloacalplate背側の短縮がおきると同時に背側の間葉組織の肥厚がおきていることが分かった。また形態異常を示している部位でのSktの発現を確認できた。この結果から本マウスにおける鎖肛発生過程での形態的異常とその時期が判明した。我々が新たに作製樹立した直腸肛門奇形100%発症マウズ(Sd Skt/+Skt double mutant mouse)を用いることにより、鎖肛の発生過程を解析し鎖肛発症のメカニズムを解明することをこの研究の目的としている。この結果から、本マウスにおける、鎖肛発生過程での形態的異常とその時期が判明した。また形態異常を示しているcloacal plate背側周囲で4)Sktの発現は、鎖肛発生にcloacal plate背側の短縮と間葉組織の肥厚が関与している可能性を示している。次に、鎖肛発症のメカニズムに関与する分子を明らかにする目的で、当該時期、.同部位周辺の組織から抽出したDNAをDNAマイクロアレイにて解析しているところである。その結果をもとに候補遺伝子の絞り込みを行う予定である。我々が新たに作製樹立した直腸肛門奇形100%発症マウス(Sd Skt/+ Skt double mutant mouse)を用いることにより、鎖肛の発生過程を解析し鎖肛発症のメカニズムを解明することをこの研究の目的としている。また形態異常を示しているcloacal plate背側周囲でのSktの発現は、鎖肛発生にcloacal plate背側の短縮と間葉組織の肥厚が関与している可能性を示している。次に、鎖肛発症のメカニズムに関与する分子を明らかにする目的で、当該時期、同部位周辺の組織から抽出したDNAをDNAマイクロアレイにて解析した結果、Hoxa13とHoxd13の発現上昇とCdx2の発現低下がみとめられた。その3つの遺伝子発現についてリアルタイムPCRとin situ hybridizationで発現・局在を解析しているところである。In situ hybridization法では、Hoxd13は胎生9.5日に後腸内胚葉背側に発現、胎生10.5日に生殖結節で発現上昇していた。一方Cdx2は胎生9.5日にcloacal plate周辺組織で発現低下していた。この結果から本マウスの鎖肛発症メカニズムにHoxa13とHoxd13、Cdx2の発現変動が関与していることが示唆された。当初の目的である、「鎖肛発生に関与する可能性を有する分子の発現、局在を解析し直腸肛門奇形発生の分子機構を明らかにする。」のうち、可能性のある分子に行き着きつつあるため。24年度が最終年度であるため、記入しない。前述の3つの遺伝子(Hoxa13とHoxd13、Cdx2)の発現・局在の解析を進めるとともに、その3つの遺伝子とSd遺伝子ならびにSk遺伝子を含めたシグナル経路の解析を行いたいと考えている。
冬季スポーツの教育プログラムに関する共同研究

本研究は,我が国の競技スポーツ及び生活スポーツ(生涯スポーツ),社会体育及び学校体育両領域における冬季スポーツの振興を図るための冬季スポーツ教育プログラムを作成することをねらいとしたものである.ノルウェー体育大学との向こう3年間に渡る共同研究としては,特にノルディック種目であるクロスカントリースキー,2年次からはスキーの原点とも言われるテレマークスキーを加えた実践研究を中心に,我が国における主たるウィンタースポーツであるスキーの振興を図るための教育プログラムの研究を進めた.併せて,ノルディック王国と言われるノルウェーの冬季スポーツ振興のための各種経営戦略(スポーツ事業としてのエリアサービス,プログラムサービス,クラブサービス等)及び当該スポーツの医・科学研究に関し,我が国との比較研究を行った.研究成果としては,主にクロスカントリースキー・テレマークスキーの実践研究を通し,スキーの生活スポーツから競技スポーツへ,学校体育から社会体育へスムーズにスライドできる基礎的教育プログラムの作成が可能となったこと,これらの具体的展開のための種々の環境整備に関わるスポーツ事業の経営方向が明確化されたこと,また今後,スポーツ医・科学の側面からアプローチしなければならない多くの課題が見出されたことが挙げられる.平成8年度は、国内研究分担者延べ3名をノルウェーへ派遣し、現地の冬季スポーツ活動の実態並びに冬季スポーツの振興内容に関する調査を実施し、我が国との比較研究において、その相違を明らかにした。地域(社会体育領域)におけるスポーツクラブでの活動をベースに展開されるノルウェーのスポーツ振興と主に学校体育領域において生涯スポーツの基盤形成を図る我が国のスポーツ振興との相違、スポーツライフ獲得に影響を及ぼす、人々を取り巻く種々の環境条件やそれに伴うライフスタイルやライフサイクルの相違、シチズンスポーツとエリートスポーツの関連性に関する相違等、多くの相違点が検出された。これらの相違のもとに展開されているスポーツ活動が、それぞれの国民(運動者)にどのような結果(利益)をもたらしているか、次年度以降の研究課題が明確化されたと言える。また、本年度はノルウェー体育大学より2名の研究者を招聘し、派遣研究者と同様な内容の現地調査研究を実施してもらい、次年度以降の共同研究課題について協議を行った。同時にノルウェーにおける中心的冬季スポーツであるクロスカントリースキーの理論・実技の研修会を開催し、北欧における冬季スポーツの原点に接する機会が得られた。以上の調査研究結果に基づき、本年度については我が国における冬季スポーツ教育の枠組みの基礎的部分の作成が可能になった。我が国のコミュニティスポーツ(社会体育)・スクールスポーツ(学校体育)両領域に於ける、競技スポーツ・生活スポーツとしての冬季スポーツの振興を図る教育プログラムの研究開発が本共同研究の目的である。昨年度は冬季スポーツ発祥の地北欧(ノルウェー)から、今日に至るまでその発展過程を学び、我が国との比較研究を行った。本年度はスキー種目を中心にクロスカントリースキー及びテレマークスキーの実践を含め、スキー指導に関する具体的教育プログラムの作成を試みた。特に、スキー指導におけるクロスカントリースキー、テレマークスキーの位置づけの明確化、生活スポーツとしてのスキーを振興させるための環境の作り方(具体的にはスキー活動の場づくり)、さらに活動内容を多様化させるための教材研究等の具体的研究活動が中心となった。また、冬季オリンピック・パラリンピックが長野で開催される年であることから、生活スポーツからの発展ともなる競技スポーツとしての冬季スポーツの競技力向上を図る具体策の検討並びに障害者を対象とした冬季スポーツの振興も研究協議に含められた。本共同研究の成果は、最終的には次年度以降、ノルウェー体育大学研究者との分担執筆による著書としてまとめる予定であるが、これまでの成果としては、本学学生・教職員。現職教員、一般市民等を対象としたそれぞれの実技授業、セミナー、講習会及び研修会の実施が挙げられる。本研究は,我が国の競技スポーツ及び生活スポーツ(生涯スポーツ),社会体育及び学校体育両領域における冬季スポーツの振興を図るための冬季スポーツ教育プログラムを作成することをねらいとしたものである.ノルウェー体育大学との向こう3年間に渡る共同研究としては,特にノルディック種目であるクロスカントリースキー,2年次からはスキーの原点とも言われるテレマークスキーを加えた実践研究を中心に,我が国における主たるウィンタースポーツであるスキーの振興を図るための教育プログラムの研究を進めた.併せて,ノルディック王国と言われるノルウェーの冬季スポーツ振興のための各種経営戦略(スポーツ事業としてのエリアサービス,プログラムサービス,クラブサービス等)及び当該スポーツの医・科学研究に関し,我が国との比較研究を行った.研究成果としては,主にクロスカントリースキー・テレマークスキーの実践研究を通し,スキーの生活スポーツから競技スポーツへ,学校体育から社会体育へスムーズにスライドできる基礎的教育プログラムの作成が可能となったこと,これらの具体的展開のための種々の環境整備に関わるスポーツ事業の経営方向が明確化されたこと,また今後,スポーツ医・科学の側面からアプローチしなければならない多くの課題が見出されたことが挙げられる.
《感染》という表象の感染拡大に関する研究

エイズは、1免疫不全を引き起こす点で、ヒトの身体レベルにおける自他の区別を無効にする病であり、かつ、2当初は性行為による感染がクローズアップされた点で、《他者》たちとの《つながり》の病であった。「エイズ」は単なる感染症の名称にとどまらず、《他者》による自己の侵犯をめぐる表象である。本研究はエイズから始まる《感染》の表象が、寄生、共生、インターネット、sns、微生物、絆、ともだち、ゾンビなどのイメージに転移することで、突然変異を繰り返し、変奏されるプロセスを考察する。本年度は1980年代半ばから1990年代初頭までの《感染》について分析した。《感染》が医学用語からいわばスピンオフし表象として拡散することになったのは、HIVの感染がエイズという名称で流通するようになった1980年代後半以降であった。1987年には、『現代思想』が臨時増刊号として「AIDSアイデンティティの病い」を特集し、同年、高橋敏夫/柏木博『文化としてのエイズ:身体・メディア・権力』が出版された。翌1988年にはS.ソンタグの『エイズとその隠喩』に刊行された(邦訳は1990年)。フランスでもE.ギベールの『ぼくの命を救ってくれなかった友へ』が1990年に出版された(邦訳は1992年)。免疫不全は自他の境界線を無効にすることから、自己の身体的なアイデンティティがまず問題化した。身体的なレベルへの関心は、エイズの主たる原因の一つとして性行為がクローズアップされたことで、さらに強くなった。HIウイルス感染者の多くは、他者との避妊具をつけない直接的な接合を経験していたからである。また、エイズに倒れた者の多くは、当時の社会においてまだ異端視されていた同性愛者であった。エイズは少なくとも以上の三点からすぐれて《他者性》を含意する病だったのだ。1987年3月26日づけ『朝日新聞』の夕刊には、「エイズ外人の入国拒否、感染広げる危険者に限定予防法最終」というタイトルの記事が掲載されたが、ここではエイズと外国人との結び付けが示唆されている。直接的にはエイズを扱っていないものの、“Etrangers“という《他者性》を中心的なテーマとしたJ.クリステヴァの『外国人ー我らの内なるもの』が出版されたのも、1988年のことだった(邦訳は1990年)。1990年代にはいると、エイズという表象はメディアをいわば免疫不全にし、いわゆるサブカルチャーの領域にまだ浸潤することになる。1980年代の終わり、エイズは感染症の一例であるにとどまらず、他者性の病として表象化されることになった。1990年代に入ると、《感染》はまずサブカルチャーの領域でヒトの他者のイメージとなってあらわれた。1990年代の前半、ほぼ5年間、二つのマンガが並走するかのように連載された。楳図かずお『14歳』と岩明均『寄生獣』である。他者への恐怖は、ヒトの身体を蹂躙し、ヒトの身体を占有する生物のかたちをとる。二つの作品の連載が終了した1995年には瀬名秀明『パラサイト・イヴ』が発表される。この小説では、ヒトに内在しているミトコンドリアが他者となる。『パラサイト・イヴ』は小説として発表された後、1997年には映画化され、1998年にはプレイステーション用のゲームにも変異していく。エイズは、1990年代の前半、医学の領域でも他者性を前景化する。1993年に出版された多田富雄『免疫の意味論』は、生体の自己と非自己の区別を免疫から説明する。免疫とは自分に属さない他者を排除し、自己のアイデンティティを維持する働きであるからだ。その翌年、1994年には藤田紘一郎『笑うカイチュウ寄生虫博士奮闘記』が出版されたが、これをきっかけにして、体内の他者である寄生虫がブームになる。藤田は他者である寄生虫との共存こそが、花粉症などのアレルギー反応を予防すると主張する。HIウイルスが発見された数年後、1986年には「Brain」と呼ばれる最初のコンピュータ・ウイルスが発見された。1990年代にはコンピュータ・ウイルスが蔓延し、次々に新しいウイルス対策ソフトが開発されていった。1995年以降はインターネット接続が容易になり、ウイルスが加速度的に蔓延した。サブカルチャー、医学、テクノロジーにおける《感染》の表象は、1998年に発表された村上龍『共生虫』で合流をはたす。《感染》がウイルスの《感染》ではなく、《感染》の表象であったがゆえに可能になった現象である。本研究は五年後に完遂されることになっているが、研究の初年度にあたる2011年度は、《感染》の表象と言説を分析するために対象となるフィールドを確定し、資料を収集・整理する準備を行った。まず、下記の対象領域に属するテクスト群を時系列で分析した。A)映画(ラース・フォン・トリアー『エピデミック伝染病』、中田秀夫『リング』、ボビー・ファレリー+ピーター・ファレリー『バクテリア・ウォーズ』、ポール・W・S・アンダーソン『バイオハザード』、ダニー・ボイル『28日後...』、瀬々敬久『感染列島』、落合正幸『感染』など)、B)文学(鈴木光司『リング』、瀬名秀明『パラサイト・イヴ』、村上龍『ヒュウガ・ウイルス五分後の世界II』、村上龍『共生虫』、貴志祐介

『天使の囀り』、仙川環『感染』、真梨幸子『孤虫症』、川端裕人『エピデミック』など)、C)マンガ(岩明均『寄生獣』、外薗昌也『エマージング』、筒井哲也『マンホール』、弐瓶勉『バイオメガ』、三部けい『鬼燈の島』、恵広史『BLOODY MONDAY』、佐藤大輔『学園黙示録』など)、D)コンピュータウイルス。これらのテクストでは《感染》という事態がフィクションとして描かれている。事実からフィクションへの《表象》の《感染》を調べるために、下記の二つのフィールドのデータを集めた。E)狭義の《感染》疫病に関する文献(エイズ、鳥インフルエンザなどに関する文字情報と図版)、F)広義の《感染》に関する社会現象(「電波系」、風評など)。その上で、これら六つのフィールドの相互関連を考察するためのマップを作成した。《感染》をモティーフとしたフィクションが20世紀末以後あいついで登場しているという文化現象が、世紀転換期の《私》のどのような在り方を示唆しているのかということについて考察した。この文化現象は欧米でも観察できるが、今年度は研究範囲を日本国内に限定した。《感染》はマンガ、映画、小説、ゲームなどでは、ホラーとして表象され消費されている。2000年以降はインターネットも《感染》経路になる。00年代中葉から、《感染》した人間が他の人間を襲うという、いわゆるゾンビものが主流を占めるようになる。フィクションにおける《感染》の感染拡大の意味を考えるために、この時期の現実社会における《感染》現象も分析した。1《感染》は感染症自体と感染症パニックという二つの領域でパンデミックとなった。ウイルスと言葉が《感染》の媒体となった。22004年頃に登場したソーシャル・ネットワーキング・サービスは《つながり》を可能にした。この《つながり》は、《私》が《私》自身を他者の眼差しのなかで自己構成し、《私》をネットワークの中の得意/特異点にした。3《感染》は、「絆」、「ヴァイラル・マーケティング」、「コンピュータ・ウイルス」などのメタファーにも変異し拡がっていった。《感染》をモティーフとしたフィクション群の分析と現実社会における《感染》の分析から、《私》は感染という《つながり》に恐怖をいだきながら、その一方で魅了されてもいることが分かった。マクロレベルで確認できた《感染》と《私》との関係を、ミクロレベルで確証するために、《感染》を扱ったフィクションの代表作である花沢健吾『アイアムアヒーロー』を内在的に分析した。この作品では、《私》という単位は崩壊し、《感染》した人々つまりゾンビたちによる巨大な《つながり》が生成しつつある様子が描かれるが、このような事態を、特異ではない《私》の一人が観察し体験する。最終年度は、20世紀末から現在までを分析範囲とし、感染の表象が感染拡大する最新の形態を考察することを目的とした。小説、映画、マンガ等のフィクションを素材にして、同時代の集合的な無意識を触知するのが、研究方法である。この時期には実際にエイズ以外のパンデミックが次々に登場するとともに、「感染物」と呼ばれるフィクションが消費された。感染は身体だけでなく、恐怖の言説を媒介として拡大していった。世紀転換期のマンガでは、『蟲師』(1999-2008)や『もやしもん』(2004-2014)のように、ミクロな他者との共生が描かれ、同時期、ヒトの常在菌の有用性を説く啓蒙書もさかんに読まれるようになった。
DNAを連結したRNaseHによるRNAの配列特異的切断

本研究の目的は、DNAを連結した好熱菌RNaseHlを用いてRNAを配列特異的に切断することである。しかし、DNAを好熱菌RNaseHlに連結するためには分子表面にCysを1残基だけ持つ好熱菌RNaseHl変異体を構築する必要がある。ところで好熱菌RNaseHlには13、41、63、149位に4残基のCysが存在する。そこで、まずこれらのCysの酵素活性や安定性に対する役割を明らかにする目的で、これらを全てAlaに置換した。その結果、Cysフリー変異体C13A/C41A/C63A/C149Aの熱安定性も酵素活性も野生型酵素のものより大きく低下することを見いだした。これら4つの変異のうちどれか一つだけをもつ変異体4種類を構築し、その熱安定性や酵素活性を調べることにより、熱安定性の低下はC41AかC149Aの変異によって引き起こされ、酵素活性の低下はC13Aの変異によって引き起こされることを明らかにした。さらに、ペプチドマッピングを行うことにより、酵素の精製中に41位と149位のCys間に自発的にジスルフィド結合が形成されること、菌体内ではこれらのCysは還元状態にあることなどを明らかにした。変異体C13A/C63Aの熱安定性は野生型酵素のものとほぼ同じであったので、41位と149位のCysは改変しないことにした。また、13位のCysについてはAla変異体よりSer変異体の方が高い活性を示したので、Serに置換することにした。DNA連結部位として利用するCysは、計画通り135位のArgをCysに置換することにより導入した。この結果構築された変異体C13S/C63A/R135Cの酵素活性は野生型酵素の10%に低下したが、耐熱性は野生型酵素とほぼ同じであったので、今後はこの変異体を用いてハイブリッド酵素を構築する予定である。