hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ADLibシステムの改良による抗体エンジニアリング

ニワトリB細胞由来DT40細胞を使ったモノクローナル抗体作製技術であるADLibシステムの高機能化を下記の2つのアプローチから行った。1.機能性タンパク質融合抗体の作製前年度に開発したDT40細胞の抗体遺伝子のFc領域を迅速、簡単に改変することができるシステム(Cre-Inシステム)を利用して多機能性抗体の作製を行った。はじめに、Cre-Inシステムに対応した細胞株(Cre-In株、昨年度作製)からがん細胞のマーカーでもあるヒト上皮成長因子受容体(EGFR)に対する抗体を生産する細胞を獲得した。次に、Cre-Inシステムで蛍光タンパク質などの機能性タンパク質を融合した抗体を作製し、実用的に使用できること示した。また、機能性タンパク質を融合した抗体の精製法を検討し、効率的な精製方法を決定した。本研究の成果により、ADLibシステムで作製したモノクローナル抗体をCre-Inシステムを用いて簡単に加工できることを証明し、DT40細胞を抗体生産のツールとして利用することの優位性を示した。2. ADLib抗体の完全ヒト化ヒト染色体導入DT40細胞株を用いてV(D)J組換えによる抗体遺伝子の多様化について実験的検証を行った。前年度の研究で、DT40細胞内のヒト染色体では、抗体遺伝子の多様化を司るV(D)J組換えが作動可能な段階にあることが明らかとなった。そこで、V(D)J組換えに必須のタンパク質であるRAG1とRAG2を利用し、人為的に組換えを誘導するシステムの構築を検討した。しかし、ヒト染色体上でV(D)J組換えを引き起こすことはできなかった。そのため、現在は、1)遺伝子ターゲッティング法によるニワトリ抗体遺伝子のヒト化と、2)V(D)J組換え済みのヒト染色体をDT40細胞に移植する方法の2つのアプローチからADLib抗体の完全ヒト化に向けた実験を行っている。(抄録なし)ニワトリB細胞由来DT40細胞を使ったモノクローナル抗体作成技術であるADLibシステムの高機能化を下記の2つのアプローチから行った。1、多機能性抗体迅速作製系の開発Cre/loxPシステムを利用しDT40細胞の抗体遺伝子定常領域を迅速、簡単に改変することができるシステム(Cre-Inシステム)の開発に成功した。はじめにニワトリ抗体遺伝子定常部のイントロンにloxP配列を挿入した株を作製した。この株では、後にドナー配列がCreリコンビナーゼ依存的に10xPサイトに挿入された場合にのみ細胞が生き残るように工夫が施されている。その後、この細胞株を用いてADLibシステムでがん細胞のマーカーでもあるヒト上皮成長因子受容体(EGFR)に対する抗体を生産する細胞を獲i得した。次に、Cre-Inシステムを用いて、定常領域をマウスIgG遺伝子に置換した細胞株を獲得した。また、同様の方法で蛍光タンパク質をC末端側に融合した抗体の作製も行った。これらの抗体はELISAやフローサイトメーター、免疫染色などの実験に用いることができた。2、ヒト染色体導入DT40細胞を用いたADLib抗体軽鎖の完全ヒト化システムの検証ヒト染色体導入DT40細胞株を用いてV(D)J組換えによる抗体遺伝子の多様化について実験的検証を行った。その結果、DT40細胞内のヒト抗体遺伝子座ではV(D)J組換えや遺伝子変換に必須の転写が活発に起きていた。次に、V(D)J組換えに必須のRAG1、RAG2を細胞内で一過的に発現し、V(D)J組換えの誘導を試みた。その結果、プラスミドを使ったレポーター系ではV(D)J組換えを誘導できることがわかった。しかしながら、染色体上の抗体遺伝子でV(D)J組換えを誘導することはできなかった。そのため、現在は、1)遺伝子ターゲッティング法によるニワトリ抗体遺伝子のヒト化と、2)V(D)J組換え済みのヒト

染色体をDT40細胞に移植する方法の2つのアプローチからADLib抗体の完全ヒト化に向けた実験を行っている。多機能性抗体迅速作製系については計画以上に進展しており、想像以上に興味深い実験データが蓄積している。一方で、ADLibシステムの完全ヒト化では期待通りの結果が得られず、現在新たな方法で研究を進めている。多機能性抗体迅速作製系については、開発したCre-Inシステムを利用し引き続き新しい抗体を作製する。ADLibシステムの完全ヒト化については、染色体上の抗体遺伝子でV(D)J組換えを誘導することはできなかった。そこで、今後は以下2つのアプローチから実験を進める。1、RAG1・RAG2の一過的発現ではなく、薬剤によって発現を制御できる株を構築した上で、V(D)J組換えの誘導を行う。2、遺伝子変換によるヒト抗体遺伝子の多様化に期待し、V(D)J組換え済みのヒト染色体をDT40細胞に導入する実験を検討する。(抄録なし)
体外式心肺補助と低体温による脳蘇生の基礎的研究

本研究の目的は,膜型人工肺と部分体外循環による体外式心肺補助(extracorporeal lung and heart assist,ECLHA)と軽度低体温併用による心肺脳蘇生法の有用性を,心肺停止動物モデル(イヌ)で実証することである。まず,コンピュータによる体温の自動制御装置と生体情報の記録装置を作成した。本装置は,生体情報を1分間隔で記録保存でき,体温を0.3°Cの変動範囲に調節できた。脳の温度と,頚静脈血温度,大槽温度,肺動脈血温度はよく相関することが分かった。直腸温度は脳温度と相関するが,低体温の時には下痢と粘液性便(心停止後)のため正確に脳温度を反映しなかった。以上の結果から本研究では簡便性と安全性の点から脳温度のモニターとして肺動脈血温度の測定が最適と判断した。ECLHAではヘパリンの持続投与のため出血する。ヘパリン投与量を減らすため,ヘパリン共有結合の人工肺と回路を試作しヤギでECLHAを実施した。その結果,ヘパリン投与量を従来の半分に減らし,全血活性凝固時間が正常上限の130秒でも安全に長期ECLHAが可能であった。低体温も出血傾向を助長するから,長期の軽度低体温(33°C)時の血液凝固・血小板機能をイヌで調べた。その結果,低体温48時間の時点から血小板凝集能が抑制されたが,24時間では血小板凝集能及び血小板数には影響ないことが分かった。心停止モデルの条件を一定にするため,極力麻酔から覚醒した状態で,空気呼吸かつ常温下に電気的に心室細動を誘発して15分間の心停止を作成した。覚醒状態のイヌで心室細動を誘発すると,高度の交感神経興奮状態と血液過凝固状態を生じるため,本心停止モデルでは心停止誘発前にヘパリンの全身投与が不可欠であった。以上の予備的研究後に,15匹の雑種成犬で心室細動を誘発し15分間の心停止モデルを作成した。心停止のイヌを,常温ECLHA群(n=8)と,低体温ECLHA群(33°C,20時間,n=7)に分けて蘇生し,96時間経過を観察して,心臓と脳の組織学的変化,生存率,神経学的欠損スコア(neurologic deficit score,NDS)を両群で比較検討した。心筋梗塞部の重量は,常温ECLHA群14.5±3.5g,低体温ECLHA群4.2±1.3g,脳の組織検査では,常温ECLHA群の海馬CA1領域の錐体細胞の高度の変性脱落を生じたけれども,低体温ECLHA群の錐体細胞はほぼ正常で,低体温ECLHA群は常温ECLHA群に比べ,脳と心臓の保護ならびに回復に有効であった。両群の救命率(常温ECLHA群:8例中2例生存,低体温ECLHA:7例中6例生存)とNDS(常温ECLHA群:生存例2例とも昏睡状態の60.5±4.9%,低体温ECLHA群:29.8±2.5%)にも有意の差を認め,軽度低体温併用のECLHAは心肺脳蘇生に最も有効な方法である。

心停止のイヌを,常温ECLHA群(n=8)と,低体温ECLHA群(33°C,20時間,n=7)に分けて蘇生し,96時間経過を観察して,心臓と脳の組織学的変化,生存率,神経学的欠損スコア(neurologic deficit score,NDS)を両群で比較検討した。心筋梗塞部の重量は,常温ECLHA群14.5±3.5g,低体温ECLHA群4.2±1.3g,脳の組織検査では,常温ECLHA群の海馬CA1領域の錐体細胞の高度の変性脱落を生じたけれども,低体温ECLHA群の錐体細胞はほぼ正常で,低体温ECLHA群は常温ECLHA群に比べ,脳と心臓の保護ならびに回復に有効であった。両群の救命率(常温ECLHA群:8例中2例生存,低体温ECLHA:7例中6例生存)とNDS(常温ECLHA群:生存例2例とも昏睡状態の60.5±4.9%,低体温ECLHA群:29.8±2.5%)にも有意の差を認め,軽度低体温併用のECLHAは心肺脳蘇生に最も有効な方法である。目的:軽度低体温併用の体外式心肺補助(extracorporeal lung and heart assist,ECLHA)の蘇生効果を心停止モデル動物で評価した。方法:犬(n=14)を常温,浅麻酔,空気呼吸の状態で電気的に心室細動を誘発して15分間心停止とした。その後低体温群(33°C,7匹)と常温群(37.5°C,7匹)に分け,頸静脈から脱血し,頸動脈へ送血するV-AバイパスECLHAを24時間実施した。ヘパリン結合の膜型人工肺と体外循環回路を用い,activated coagulation timeを120秒前後に維持した。低体温群はECLHAスタート直後に低体温を導入し,蘇生開始後20時間低体温を維持した。自己心による血行動態維持が可能となればECLHAを離脱した。さらにその後72h時間観察した。死亡率,catecholamine使用量,気管内チューブ抜管までの時間,神経学的障害点数(NDS,%),壊死心筋重量等を両群で比較検討した。結果:死亡率は常温群57%,低体温群14%(P<0.01)であった。Catecholamineの使用量は常温群で低体温群より有意に多かった(P<0.05)。心筋壊死部重量は常温群14.5g,低体温群4.2gであった。抜管するまでの時間は常温群で長かった。NDSは常温群60.5%(n=2),低体温群29.8%(n=6)であった。常温群では救命例が少なくNDSの厳密な比較は困難であったけれども,低体温群の救命例では,後肢の運動障害で立てないだけで,意識はあり経口摂取もでき正常の犬と変わりないほどに回復し,昏睡状態の常温群と比べ明らかに中枢神経系ならび全身状態は良好であった。結論:15分間の心停止動物をECLHAと軽度低体温で蘇生すると,常温のECLHAと比べ救命率が高く神経学的後遺症は少なかった。本研究の目的は,膜型人工肺と部分体外循環による体外式心肺補助(extracorporeal lung and heart assist,ECLHA)と軽度低体温併用による心肺脳蘇生法の有用性を,心肺停止動物モデル(イヌ)で実証することである。心停止モデルの条件を一定にするため,極力麻酔から覚醒した状態で,空気呼吸かつ常温下に電気的に心室細動を誘発して15分間の心停止を作成した。覚醒状態のイヌで心室細動を誘発すると,高度の交感神経興奮状態と血液過凝固状態を生じるため,本心停止モデルでは心停止誘発前にヘパリンの全身投与が不可欠であった。以上の予備的研究後に,15匹の雑種成犬で心室細動を誘発し15分間の心停止モデルを作成した。
極長鎖脂肪酸の産生及び代謝機構と代謝異常による病態の解明

極長鎖脂肪酸の産生に関わる脂肪酸伸長サイクルでは,ELOVL1-7,KAR,HACD1-4,TERによって4つの反応が触媒される。本研究ではHACD遺伝子のノックアウトマウスあるいはノックアウト細胞を用いてミオパチーの分子機構,HACD1-4の基質特異性の違いを解明した。ELOVLの変異マウスや生化学的な解析によって,ELOVLの基質特異性,KARによる活性調節機構を解明した。皮膚バリア形成に重要な極長鎖脂質アシルセラミドの産生に関与する脂肪酸オメガ水酸化酵素CYP4F22を同定し,魚鱗癬発症の分子機構を解明した。TERの脂肪酸伸長以外の新たな機能を明らかにした。極長鎖脂肪酸は炭素数20を超える脂肪酸の総称である。極長鎖脂肪酸の生体内量は少ないものの,長鎖脂肪酸(炭素数11ー20)では代替することのできない重要な生理機能を有している。極長鎖脂肪酸は小胞体における脂肪酸伸長サイクルによって産生される。このサイクルでは,脂肪酸はアシルCoAの状態で,縮合,還元,脱水,還元の4ステップにより,1サイクルあたり炭素数を2ずつ伸長される。各反応は異なった酵素により触媒され,哺乳類ではELOVL1-7(縮合),KAR(還元),HACD1-4(脱水),TER(還元)がそれぞれの反応を担う。本研究では脂肪酸伸長酵素群による極長鎖脂肪酸産生の分子機構と酵素間の相互調節機構を明らかにするために,精製したELOVL6とKARを用いて生化学的な解析を行った。その結果,ELOVL6はKARによって活性が増強されること,ELOVL6活性増強にはKAR活性に依存したものと依存しないものの2つの機構が存在することが明らかになった。脂肪酸伸長サイクルの最終反応を触媒するTERには,極長鎖脂肪酸伸長以外にも,スフィンゴシン1-リン酸の代謝過程で働くという別の役割があることを明らかにした。極長鎖脂肪酸はスフィンゴ脂質の構成成分として用いられ,スフィンゴシン1-リン酸代謝はスフィンゴ脂質分解経路である。このようにTERはスフィンゴ脂質の合成と分解の両方に関わる重要な因子であることが明らかになった。脂肪酸伸長酵素群は真核生物で保存されており,担子菌(キノコ)にも存在する。これまで,キノコからの胞子の射出の分子メカニズム及び射出に関わる酵素には不明な点が多かったが,我々はHACD1-4の担子菌ホモログであるPhs1が胞子の射出に関わることを明らかにした。極長鎖脂肪酸(炭素数20を超える脂肪酸)は,生体内量は少ないものの,主要な脂肪酸である長鎖脂肪酸では代替できない特異的な機能を持つ。極長鎖脂肪酸の中でも飽和あるいは一価不飽和のものは殆どがスフィンゴ脂質に組み込まれる。表皮において炭素数30-36の極長鎖脂肪酸はスフィンゴ脂質骨格のセラミドに組み込まれたのち,オメガ水酸化を受けてアシルセラミドへと変換する。表皮は外界の物質に対するバリアを形成しており,アシルセラミドは表皮バリア機能に極めて重要である。そのため,アシルセラミド不全は皮膚疾患魚鱗癬を引き起こす。これまでアシルセラミドの産生経路,産生遺伝子については殆ど不明であったが,我々は本研究においてシトクロームP450の1つであるCYP4F22がアシルセラミド産生での極長鎖脂肪酸のオメガ水酸化を触媒する酵素であること,CYP4F22変異を持つ魚鱗癬患者ではアシルセラミド産生が不全となっていることを明らかにした。セラミドの産生はセラミド合成酵素によって触媒される。これまで,セラミド産生の調節機構については殆ど不明であったが,我々は本研究においてセラミド合成酵素がリン酸化によって正に制御されていることを見出した。このうち,極長鎖セラミド産生を担うセラミド合成酵素CERS2が最も強い活性調節を受けていた。さらに我々は,極長鎖スフィンゴ脂質が脳の中でもミエリンにおいて多く存在することを明らかにした。極長鎖脂肪酸産生に関わる3-ヒドロキシアシルCoA脱水素酵素として,哺乳類には4種類のアイソザイム(HACD1-4)が存在する。このうち,HACD1は筋肉組織特異的に発現している。本研究において我々はHacd1ノックアウトマウスの解析を行い,Hacd1遺伝子欠損によって筋芽細胞の融合過程が損なわれ,筋肉の発達異常,筋力低下を伴うミオパチー症状を示すことを明らかにした。アシルセラミド産生におけるCYP4F22の詳細な解析を行い,国際的に評価の高い雑誌(Proc. Natl. Acad. Sci. USA)での公表に成功した。アシルセラミド産生の最後のステップであるオメガ水酸化極長鎖セラミドとリノール酸とのエステル結合形成に関してもPNPLA1が関わることを見出し,学術論文での公表に向けて準備を行っている。また,セラミド産生を触媒するセラミド合成酵素のリン酸化による制御機構,脳における極長鎖セラミドの分布についても解明することに成功し,論文として公表した。さらに,Hacd1ノックアウトマウスの解析を行い,ミオパチー発症の分子メカニズムを明らかにした。ヒト培養細胞を用いたHACD遺伝子欠損は,各HACDのシングル欠損細胞と最も活性が高いHACD1とHACD2の二重欠損細胞の作成が完了した。極長鎖脂肪酸の他の組織での役割解明については継続して探索を行っているが,脳ミエリンにおける2-ヒドロキシ極長鎖スフィンゴ脂質(ガラクトシルセラミド)の神経機能における役割について手がかりを得ている。飽和及び一価不飽和極長鎖脂肪酸はスフィンゴ脂質へ代謝される。極長鎖脂肪酸の産生に関わる3-ヒドロキシアシルCoA脱水酵素HACD

1-4の基質特異性について,HACD1-4を単独あるいは多重に欠損した細胞を用いた解析を行なった。その結果,HACD1,2が飽和,一価不飽和,多価不飽和脂肪酸のいずれに対しても高い活性を示すこと,多価不飽和脂肪酸の伸長に対してはHACD2がHACD1よりも高い活性を示すことを明らかにした。一方,HACD3とHACD4には高い活性が認められなかった。これらの結果から,HACDの基質特異性の違いが明らかになった。また,スフィンゴ脂質の長鎖塩基成分の取り込みにアシルCoA合成酵素が関与することを明らかにした。炭素数が30以上にまで伸長した極長鎖脂肪酸は表皮において皮膚バリア形成に重要なアシルセラミドへ代謝される。本年度はアシルセラミド産生の最終ステップを触媒する酵素としてPNPLA1を同定した。PNPLA1は皮膚疾患である先天性魚鱗癬の原因遺伝子であるが,その発症がアシルセラミド産生不全に起因することも明らかにした。脂肪族アルデヒドデヒドロゲナーゼALDH3A2は皮膚・神経疾患であるシェーグレン・ラルソン症候群の原因遺伝子であり,皮膚では魚鱗癬症状を発症する。神経系では極長鎖脂肪酸含有2-ヒドロキシガラクトシルセラミド代謝異常が原因であることを見出した。2-ヒドロキシ脂肪酸は2-ヒドロキシガラクトシルセラミドの構成成分であるが,2-ヒドロキシ脂肪酸の代謝に小胞体におけるアルファ酸化が関与することを見出した。本年度,Aldh3a2ノックアウトマウスの解析を行い,神経症状として運動機能,社会性テスト,記憶テストで異常を示すこと,皮膚では表皮の基底層においてケラチノサイトの増殖異常,酸化ストレス亢進が見られることを明らかにした。皮膚バリア形成に必須な極長鎖脂肪酸含有脂質(アシルセラミド)産生においてこれまで長い間不明であった最終ステップを触媒する酵素としてPNPLA1を同定して詳細な解析を行うことで,国際的に評価の高い雑誌(Nature Communications)での公表に成功した。この解析によってアシルセラミド産生の分子機構の全容が明らかとなり,皮膚バリア形成のメカニズム解明に大きな寄与をした。ヒト培養細胞を用いたHACD遺伝子単独あるいは多重欠損により,これまで不明であったそれぞれのHACDアイソザイムの基質特異性の違いが解明され,学術論文での公表に向けて準備を行っている。シェーグレン・ラルソン症候群の原因遺伝子Aldh3a2のノックアウトマウスの解析では,皮膚,神経系両方の表現型の解析を終え,病態の分子メカニズムに迫る結果を得ている。皮膚に関する結果は既に論文として公表し,神経系の解析に関しては論文での公表に向けて準備を行っている。脂肪酸伸長サイクルの第三段階を触媒するHACD1の変異は先天性ミオパチーを引き起こす。本研究では先天性ミオパチーモデルマウス(Hacd1ノックアウトマウス)の解析を行い,疾患発症の原因がHACD1の基質(3-ヒドロキシアシルCoA)の蓄積ではなく,生成物である極長鎖脂肪酸の産生不全であることを示唆した。
近代日本の植民地における商工業者ネットワークの歴史地理学的研究

本研究計画は、近代日本のいわゆる外地における商工業者ネットワークが産業化による経済空間の再編に対して果たした役割を分析する。具体的には、明治30年代昭和10年代の売薬業の発展と、業者達の関東州と朝鮮半島への進出をとりあげ、内地における地場産業としての売薬業の発展と外地への進出状況、そして内地の医薬品産業集積地が外地を含めた医薬品業者ネットワーク上で果たした役割を検証する。また、得られた知見を他国の事例と比較し、後発産業化国のモデルとして位置付ける。
バレーボールにおける「ボールを持たない動き」の習得を意図した授業モデルの確立

本研究は,バレーボールの学習指導において戦術学習を中核とした授業モデルを確立することで,状況に応じた適切な動きを自ら創り出すことを目的とする。これまで戦術学習の授業モデルとして様々な種目が取り上げられているが,バレーボールについて具体的に検証されたものはほとんど見当たらない。バレーボールはサッカーやバスケットボール等のように,直接的な身体接触を伴わない種目であるため,「ゲーム中にボールを奪い合うためにボールを追う動き」がゲーム自体には存在しない。このようなゲーム特性があるため,戦術学習としてバレーボールを取り上げるには,難しい面があるのではないだろうか。何より,選手自身がボールを保持する時間を全くもてず,ボールに接触することだけでゲーム遂行されるという点が難しいのである。本研究は,この事実に着目し,バレーボール学習において生徒がゲーム中にボール操作しないときにも意図をもって動けること(これをプレイアブルという)を目指しており,その指導法を究明することで状況に応じた適切な運動能力を効果的に高められるのではないかと考えた。研究の成果1、各学年段階における効果的な指導の在り方を明らかにできたこと(1)役割意識を高めるためのローテーションのさせ方、スイッチプレーの取り入れ方の工夫(2)ゲーム中の的確な状況判断を促す効果的な指導法の開発「ストップ・ザ・ゲーム(Stop the game),フリーズ・リプレイ(Freeze-replay)」の有効活用2、生徒自身が「プレイアブル」であることを意識できる指導の在り方を明らかにできたことゲーム中の状況を的確につかみ,自分や仲間の動き方を追究するためには,ボールに触れていないときの意図のある動き(プレイアブルな動き)」を追究の視点としていくことは有効である。それをもとに単位時間における指導の在り方を明らかにできた。3、運動適性が不十分な生徒に対する指導・援助の在り方を具体的にできたこと生徒に「意図ある連携」を意識させるには,以下のことが大切である。・動くきっかけを分かりやすく示すこと・視野を広くもつためのポジショニングを教えること・仲間に,タイミングのよい声かけを瞬時にさせること。
フランスの「エスニック化」と旧植民地出身女性移住者の社会編入―日常性の抵抗戦術

女性移住者の社会的・経済的地位は、1「アフリカ人」・「黒人」認識のズレ、2政府・社会による「女性移住者=労働者」という位置づけ、3社会編入支援の枠組みにより変容しつつある。1980年代以降「身近なサービス」推進のため、職業訓練と社会的支援をセットにした失業者の社会編入が進んでいる。女性移住者団体はこうした事業体とも連携する。つまり、移民統合・失業者支援という両者の目的が交差する対象に位置づけられる。公共空間においてはフランス社会側による「アフリカ人」、女性移住者らによる「黒人」という二つの表象が地位を措定している。彼女たちが自らを「黒人」と呼ぶのは「白人」集団との相互作用の場においてである。前年度から調査を行ってきたパリ市内の女性移住者団体の活動について、引き続き聞き取り調査を継続した。その際、とくに、移住女性が出身国において現地の女性市民団体と連携して行う活動に焦点を当てた。具体的には、パリ市内の複数の女性移住者団体が参加するネットワークの関係者に聞き取りを行い、このネットワークが送出国の女性移住者団体と協力してどのような活動を行い、そこで果たす役割を分析した。聞き取りから、今年度は当該ネットワークが、4月の世界マラリア・デーに合わせて、セネガルの女性市民団体が企画したキャンペーン活動に協力するため、現地に赴くことが分かった。そこで許可を得てこのキャンペーン活動に同行して参与観察を行うとともに、関係者への聞き取りを行った。セネガル側の女性団体は、より大きな国際NGOの関係者である女性が新たに立ち上げた市民団体である。この女性団体の目的は、セネガルの首都ダカールおよび農村において、ローカルなレベルで対面的な取り組みを行うことから、貧困世帯の女性を支援することである。このローカル市民団体に対し、パリの移住女性ネットワークは、1キャンペーン運営と資金集めのノウハウの提供し、2フランスで研修生を募集し、移民第二世代の若者が親の出身社会で活動する機会としている。このような送出国・受入国の国境を越えた活動により、移住女性が行為者として主体形成するため、送出国と定住先の間でみずからの役割をどのように位置づけているかを分析した。今年度は文献調査を進めつつ、現地調査のためパリ市内にある女性移住者の市民団体と連絡をとり、今後のプロジェクトについて打ち合わせを行った。まずDe Certeauによる日常的実践における「戦略」と「戦術」の概念について、理論的な整理を行った。受入社会の規範を共有せず、社会的に排除された移民は、その社会において支配的な論理を駆使し、独自の場や空間を占めることで自らの地位を確立することはできない。セルトーが〈戦略〉と呼ぶこうした権力主体の論理や空間に対して、弱者の〈戦術〉は「非ー場所non-lieu」的で、時間に依存する。弱者は、自分にとっての「よその」土地において「日常的実践pratiques quotidiennes」を展開する中で、たえず警戒し、利になる機会をすばやく捉える〈戦術〉に頼るしかない。〈戦術〉は自分に固有のものではない権力の論理や力を弱者が日常的実践により利用し、横領する「策略ruse」、「仕方、てだてart」である。また、調査に向けて準備を行った。これまで調査を続けてきた移住女性団体に加え、複数団体によるネットワークの活動に対象を広げるため、代表者に連絡をとった。本研究費によらないフランス滞在の機会に聞き取りを行ったところ、調査先団体メンバーの西アフリカの出身国におけるプロジェクトが進行していることが分かった。そのうちセネガルにおいて、現地の女性団体との協力による「マラリア撲滅キャンペーン」が2013年4月末に行われることが分かったため、キャンペーンに同行して、参与観察と聞き取りを含めた現地調査を実施することにした。メールによる連絡交換に加え、勤務先の研修引率のためのフランス滞在中に打ち合わせを行うことができたため、今年度中は本研究費による渡航調査を行わず、2013年4月のセネガル渡航に備えて研究費を繰り越すことにした。前年度に発表した単著により、フランスの都市政策・移民政策が行う普遍的な失業・貧困対策に依拠しつつ、地域の「黒人女性」による連帯と生活の利便性のために利用し国家や主流の言説とは異なる独自の地位を創発する〈戦術〉について明らかにできた。本年度は、こうした西アフリカ出身移住女性の連帯と、国境を越えて受入国・送出国の女性の地位交渉との相互作用を明らかにすることを中心課題とした。現地調査を行いつつ最新の研究動向を把握するため、フランスパリ市において長期出張を実施した。フランスの移住女性団体は、フランスでの定住促進から、送出国の女性組織との連携へと活動の争点を移しつつある。マイノリティ女性による移住、貧困などの課題に対する協同・連帯型組織についての研究は、特にフランス・スイスを中心に発展している。他方で女性による連帯型組織はヨーロッパ、アフリカ、西アジア、ラテンアメリカ等で広がっている。

研究交流により、これらの研究者と女性組織による、国境を越えたネットワーク形成が進んでいることが分かった。他方で、移住女性が連携を深める、西アフリカ農村部の女性による連帯活動の位相を把握するため、現地調査を行った。先行研究が稀少なマリでは、2000年代以降、女性が担うシアバター生産の組織化の動きが発展し、各地で協同組合が結成されるようになっている。ところが2012年の政治的混乱以降、経済的・技術的支援を経たれたため、組織運営は停滞を余儀なくされている。それでも収入増により、組合員女性と子どもの生活条件は改善が進んだことが分かった。また組合活動をつうじた村落政治組織との交渉、農村・都市部の女性による交流活性化など、女性の地位は政治・経済・社会の各方面において変容しつつあることが明らかになった。以上のように、移民受入社会および送出社会の双方において、地位向上に向けて女性が自発的に行う連帯活動の位相を明らかにした。社会学毎年、現地調査を行って参与観察を続け、聞き取りを蓄積してきている。とくに今年度は、フランスだけではなく、移民女性の出身地のひとつ、セネガルにおいて、現地の女性による市民団体との連携行動についてデータを得ることができた。これまでに蓄積してきた聞き取りが、研究の発展に結びついてきていると考えられる。文献調査はおおむね順調に進んでいるが、本年度の計画のうち2つめの「エスニック化」の諸相については、十分な文献が収集できなかったため、引き続き来年度に調査を進める。また調査については、予備調査を行う予定だったが、他の手段により渡航機会を確保できたため、次年度に本格的な参与観察を行う機会を設けることができた。これまでのフランスを中心とする調査を継続するとともに、今年度、セネガルとの国境を超えた活動を把握することができたので、引き続き、送出国側の調査を行う必要がある。フランス旧植民地の女性による活動について、包括的なデータを得るため、今年度は、マリ共和国における女性市民団体に焦点をあてることが効果的だと考えられる。これにより、国境を越えた移住女性と途上国女性のネットワーク、主体形成に、さらに焦点を絞って分析することができるはずである。2013年度は、前年度からの文献調査を継続しつつ、現地調査を実施していく。移住女性は、受入社会が外部から「エスニック化」により付与する「アフリカ人」という表象に対して、「黒人」という認識により連携し、対抗する。他方で、出身地西アフリカの女性団体との連携により、出身社会と受入社会双方の〈間〉で機会をうかがいながら、マラリア予防や識字運動といった〈日常的実践〉を展開する。以上の理論をもとに、フランスの移住女性団体ネットワークと西アフリカの女性団体との連携について聞き取りと参与観察を行う。2013年度には移住女性と連携する西アフリカ・セネガルの女性団体についても調査する。マラリア撲滅キャンペーンにおける参与観察と聞き取りを行い、移住女性の団体との連携がどのようにして実現したのかを明らかにする。
キラルエポキシアルコ-ルの分子内環化反応を利用するシクロペンタンマクロリドの合成

アリルシラン1より出発し,Sharpless不斉エポキシ化,Lewis酸触媒下の酸化反応,アセトニド化,オゾノリシスに続く塩基触媒下のエピメリ化といった4段階操作で置換シクロペンタン化合物2をエナンチオ選択的に合成する方法を考察し,その一般性および合成化学的有用性について検討した.その結果,まず一般性に関しては,1にあらかじめ存在する置換基R^1,R^2の位置,立体化学に関係なく,いずれの場合も高い光学純度(>90%ee)で置換シクロペンタン化合物が得られ,本置換シクロペンタン構築法が幅広い一般性を持ったキラル合成法となり得ることがわかった.また,その合成化学的有用性に関しては,13員環マクロリド構造を持ち,抗ウィルス活性や抗腫瘍活性など多様な生物活性を示すことから合成化学的にも薬理学的にも興味が持たれるブレフェルヂン類抗生物質の合成によって示した.すなわち,上述の方法で合成した2(R^1=H,R^2=OBnあるいはR^1=R^2=H)より側鎖伸長,マクロラクトン化を行うことにより,(+)ーブレフェルヂンA(3)ならびに(+)ーブレフェルヂンC(4)のエナンチオ制御合成を達成し,ブレフェルヂン類抗生物質の新規キラル合成ル-トを開発することが出来た.アリルシラン1より出発し,Sharpless不斉エポキシ化,Lewis酸触媒下の酸化反応,アセトニド化,オゾノリシスに続く塩基触媒下のエピメリ化といった4段階操作で置換シクロペンタン化合物2をエナンチオ選択的に合成する方法を考察し,その一般性および合成化学的有用性について検討した.その結果,まず一般性に関しては,1にあらかじめ存在する置換基R^1,R^2の位置,立体化学に関係なく,いずれの場合も高い光学純度(>90%ee)で置換シクロペンタン化合物が得られ,本置換シクロペンタン構築法が幅広い一般性を持ったキラル合成法となり得ることがわかった.また,その合成化学的有用性に関しては,13員環マクロリド構造を持ち,抗ウィルス活性や抗腫瘍活性など多様な生物活性を示すことから合成化学的にも薬理学的にも興味が持たれるブレフェルヂン類抗生物質の合成によって示した.すなわち,上述の方法で合成した2(R^1=H,R^2=OBnあるいはR^1=R^2=H)より側鎖伸長,マクロラクトン化を行うことにより,(+)ーブレフェルヂンA(3)ならびに(+)ーブレフェルヂンC(4)のエナンチオ制御合成を達成し,ブレフェルヂン類抗生物質の新規キラル合成ル-トを開発することが出来た.研究計画に従い、キラルエポキシアルコ-ル単位を開始官能基(initiating functionality)とするLewis酸触媒下の環化反応とそれを利用するbrefeldin類抗生物質の合成を検討した。まず、1よりアリルアルコ-ル体2に導き、これよりSharpless不斉エポキシ化反応を行い環化前駆体3を合成した。ここで環化反応を種々の条件した検討した結果、Lewis酸としてSnCI_4を用い塩化メチレン中-78°Cで反応させると瞬時に環化が進行し4が二種の立体異性体の混合物(4:1)として良好な収率で生成することを見出した。4はアセトニド化、オゾノリンス、エピ化すると単一のトランス体5に変換出来た。この段階で5の光学純度はNaBH_4環元後MTPAエステルに誘導し、^1HNMRより90%ee以上であると決定できた。続いてアルデヒド体5より7に導き、これよりbrefeldin c(10)の合成を行った。すなわち、7より8を経て側鎖部を順次導入し9となし、これを光延法によるマクロラクトン化後脱保護を行いbrefeldin C(10)の合成に成功した。現在、本手法の適用を拡大する目的でbrefeldin A(11)の合成を検討中である。JAOIKA平成元年度において開発した置換シクロペンタン化合物のキラル合成手法の一般性を調べる目的で,3種のアリルアルコ-ル1aーcに対して式1に示す検討を行った.その結果,出発物質1のアルコキシ置換基の位置および立体配置に関係なく,いずれの場合も光学的に高純度(〉90%ee)のシクロペンタン化合物4が得られることがわかり,本法が置換シクロペンタン化合物のキラル合成手法として幅広い適用性を持つことが証明出来た.続いて,本シクロペンタン構築法を利用するマクロリド抗生物質(+)ーbrefeldin A(8)の合成検討を行った.その結果,Rー(ー)ーエピクロロヒドリン(5)より出発する8のエナンチオ制御合成ル-トの開発に成功し,本法の有用性を示すことが出来た.平成元年度および2年度において、幅広い一般性を持つ置換シクロペンタン化合物のキラル合成法を開発し,それを利用するブレフェルヂン類シクロペンタンマクロリド抗生物質の合成に成功した.平成3年度においては,さらに本法の有用性を示す目的で,合成化学的にも薬理学的にも興味が持たれるhybridialactoneおよびecklonialactone Aの合成を検討した.まず,ラセミのエピクロロヒドリンより出発し,アセチリドの付加,還元,Sharpless不斉エポキシ化反応等を経てエポキシアリルシラン体に導き,上述の置換シクロペンタン構築法を適用し1,2,4ー三置換シクロペンタン誘導体を得た.

ついでこのものより,1位および2位置換基のヒドロキシメチル基への変換,4位アルコキシ基を足場とするオレフィン形成を順次行い,重要合成前駆体の一つである(R,R)ー3,4ーヒドロキシメチルシクロペンテンを合成出来た.しかしながら,続く分子内エ-テル化を利用する3位ヒドロキシメチル基の選択的保護が非常に困難であり,立体選択的に(1S,2R,3S,4R)ー3ーアセトキシメチルー4ーヒドロキシメチルー1,2ーエポキシシクロペンタンを得ることが出来ず,現在のところ当初の計画に従った両マクロラクトンの合成を達成するまでには到っていない.
多次元脳波データからの知覚・認知・感性類似度情報の抽出

本研究では、これまでの情報技術がその扱いを苦手としている視認性や画像理解度、嗜好や魅力などの感性価値判断など、知覚や感性情報を脳波から抽出し、それを新たな情報処理技術へ展開することを目的とした。脳波、SSVEP、瞳孔径を用いて、ひらめき、視認性、明るさ知覚、顔らしさ知覚などの感性情報抽出に成功した。本研究では、脳波を用いた新たな脳情報デコーディング手法として、多次元脳波データに埋め込まれた視覚刺激群の類似度情報を抽出する手法を構築するものである。本年度は、主観的情報の中でも、表情に関係する感情情報と、画像に関連する理解度を対象に研究を行った。これまで、心理物理実験を始め、脳波やfMRI等の神経科学的手法を用いて、統合的にアプローチし、顔色の処理が刺激呈示後170msに生じ、その処理に左の紡錘状回顔領域が関与することなどを明らかにしてきた。これまでの研究においては、顔色の変化に関しては、なるべく大きな脳反応の変化を検知するために、青色などの不自然な顔色に関する研究を中心に行ってきた。そこで、ヒトの顔色・表情理解の社会的応用を念頭に置くべく、より自然な顔色変化をターゲットとして実験を行い、顔色の調整により、表情の認知がコントロールできることを実験的に示した。また、ヒトがどのように視覚的情報を理解しているかの脳システムの理解と共に、ヒトの理解度を脳活動から抽出する技術の開発を目的として、二値化画像を用いて、脳のあいまい状態の研究をさらに進めて、答えがわかっていたときに答えを見せられたときの脳状態と、答えがわからなかったときに、答えを見せられたときの脳状態を比較して、「気づき」がどのように脳に表象されているかを脳波の周波数解析および信号源解析を用いて調べた。その結果、「気づき」への状態移行が、頭頂後頭におけるベータ帯域の活動と関係していることを明らかにした。本年度は、様々な階層レベルの脳情報を抽出するために、知覚過程を反映した「視認性」をターゲット課題とした視覚実験と脳波実験をそれぞれ実施し、知覚・認知パフォーマンスデータを計測した。まず、「視認性」に関わる重要な能力である有効視野に着目して、行動実験と脳波実験をそれぞれ行った。行動実験として、被験者の有効視野内の時間特性を測るため、ごく短時間で呈示される文字の種類とマーカの位置を応答するよう被験者に教示した。そして、明滅のON/OFFの比率をduty比として、行動実験の提示時間の条件と対応させた明滅条件の刺激を用いて、SSVEPを発生させた。結果として行動実験スコアとSSVEPパワーとの間には有意な相関を確認できた。このように、行動実験スコアとSSVEPパワーとの間には、有効視野内における時間特性が優れている被験者ほど行動実験タスクに対するSSVEPパワーは小さくなる関係が存在していることが分かった。次に、複数物体への注意状態の脳波実験を行った。注意の抽出方法として、点滅刺激によって誘発される脳波成分であるSSVEPを利用した。異なる周波数で明滅する3つの物体が時計回りに回転する刺激を見ている時の被験者の脳波から、被験者が3つのうちのどの2つに注意を向けているかを推定可能であった。これらのことから、SSVEPにより複数の移動対象の注意状態を抽出可能であり、SSVEPによる注意対象の判別が可能であることが示唆された。研究計画通り、脳波による、主観的感性情報の抽出を進めることが出来ており、それに伴う認知実験も同時に進んでいる。本年度は、神経学的な手法から発光知覚に着目し、その脳内処理プロセスを解明することを目的として実験を行った。具体的には、明るさ知覚の変化のみで脳波成分(SSVEP)と瞳孔反応に反映されるかを調査した。物体が発光しているように感じるといった知覚をグレア錯視と呼ばれる明るさ感の増強・発光錯視を使用することで実現し、脳波と瞳孔反応と組み合わせた実験デザインによって低次と高次による処理を比較した。グレア錯視を視覚刺激としたときの脳波計測の結果は、グレア錯視条件では全ての輝度コントラスト条件では同程度の知覚輝度増強が確認できたにも関わらず、SSVEP振幅は高コントラスト条件においてのみ有意に減少したグレア錯視は中央輝度を変化させることによって、知覚カテゴリが白から輝き(発光知覚)へと変化する(Tamura et al., 2016)。つまり、色表現モードの遷移が知覚コントラストの減少を生じさせSSVEPに影響した可能性がある。すなわち、発光知覚といった認知的な要素だけで得られたSSVEPは変調されたものであると考える。また、グレア錯視を見た時の瞳孔はSSVEPで差が見られた最も高い輝度条件でのみコントロールに比べて縮瞳していた。これは前述したような認知的な要素が最も高い輝度条件でのみ生じたといった仮説を支持するものである。瞳孔は明るさ感が増すことによって変化するのではなく、まぶしさや発光知覚といった認知的な要因に対し、より高次な皮質の影響を受けに変調されると考えられる。

以上から、視覚野の低次で明るさの増強とは異なる神経経路での応答が高次皮質からのフィードバックを反映して変調されたことを示す重要な証拠となりうることが示唆された。研究計画通り、瞳孔径という新たな生理指標も導入して主観的感性情報の抽出を進めることが出来ており、それに伴う認知実験も同時に進んでいる。本研究では、脳波を用いた新たな脳情報デコーディング手法として、多次元脳波データに埋め込まれた視覚刺激群の類似度情報を抽出する手法を構築するものである。顔らしさ認知に着目し、その脳内処理プロセスを解明することを目的として実験を行った。この現象は、パレイドリア現象と呼ばれ、「無意味な模様、風景、物体などが、別の意味のある何かにみえる」というものであり、比較低次な視覚処理で生じていることは議論されていたが、実際にどの視覚処理の段階で生じているかは明らかにされていなかった。そこで、顔らしい物体を見たときの行動と脳活動の関連を調査し、顔らしさ認知がどの視覚処理段階で生じるかを明らかにした。ヒトの顔の視覚処理は3段階に分かれており、初めに物体の識別をおおまかに行う初期の視覚処理が行われ、顔であった場合にその顔のパーツ(目や鼻、口)の処理と輪郭とパーツの配置の処理が行われる。その後に、表情や個人の識別が行われる。この3段階の処理時の活動と実際の認知の結果の関連を調査し、顔らしさの認知が視覚処理の初期段階で既に行われていることを明らかにした。この処理は物体を見てから約100msという早さで行われ、我々が物体を意識する前より既に顔らしさの処理が行われていることが示唆される。この研究の成果は「顔らしさ」という顔の情報と、物体という情報の2つの情報を持つ状態をどのようにヒトが認知し、切り分けるのかというメカニズムの解明の手がかりとなったと考えられる。本研究では、これまでの情報技術がその扱いを苦手としている視認性や画像理解度、嗜好や魅力などの感性価値判断など、知覚や感性情報を脳波から抽出し、それを新たな情報処理技術へ展開することを目的とした。脳波、SSVEP、瞳孔径を用いて、ひらめき、視認性、明るさ知覚、顔らしさ知覚などの感性情報抽出に成功した。研究計画通り、脳波による、主観的感性情報の抽出を進めることが出来ており、それに伴う認知実験も同時に進んでいる。引き続き、実験データを蓄積すると共に、感性価値判断などに対しては、脳波以外の新たな生理指標も導入していく。次年度は、計画通り、画像理解度(画像内容判断)に関する課題に関するデータ収集を勧めていく予定である。29年度が最終年度であるため、記入しない。認知神経科学引き続き、実験データを蓄積すると共に、SSVEPなど新たな生理指標も導入していく。
アトピー性皮膚炎における表皮角化細胞のガレクチン７産生機構とその意義

表皮角化細胞から産生されるGalectin-7 (Gal-7)は、細胞の増殖、分化、アポトーシス、接着といったホメオスタシスに深く関与する。一方、アトピー性皮膚炎(atopic dermatitis: AD)患者の皮膚バリア機能はTh2サイトカインであるIL-4、IL-13により障害されている。本研究ではin vitro/in vivoの両系にて、AD患者における病変部表皮角化細胞のGal-7産生のメカニズムとその意義、さらには治療薬としての可能性について明らかにする。
金融市場分析の計量理論と実証分析

プロジェクトの期間中、平成2年1月と平成3年1月に京都大学と東北大学においてそれぞれ1度づつ研究テ-マのもとに研究分担者以外の関連した計量経済学研究所を多数招き、コンファレンスを開催した。これらコンアァレンスの内容について詳しくは報告書に掲載したプログラムを参照されたい。コンファレンスでは研究テ-マに関連した論文が多数報告され、共通の研究テ-マ及びそれぞれの報告論文の内容を巡って活発に意見交換がなされた。コンファレンスの報告・討論を通じて研究テ-マのより堀り下げた研究に結びついたように思われる。また、プロジェクト参加メンバ-の中で国友直人・田中勝人・和合肇・斯波恒正の各氏は1990年8月にスペインのバルセロナで開催された計量経済学会世界大会に東加しそれぞれの論文を報告する機会があッた。折しも。計量経済学会世界大会の一つの主な話題が金融市場の計量分析を巡る諸問題であったので我々のプロジェクトと問題関心が共通することが多く、我々の研究テ-マについて各国の研究者との有益な意見交換を行う場となった。この研究プロジェクトの当初の主な目的の一つは計量経済の理論分析と日本を中心とする実証分析に携わり、多くの成果を挙げている日本の主な計量経済学の専門家が金融市場の計量分析を共通テ-マとして意見を交換しあい、これまで必ずしも十分でなかった金融市場に関する計量理論と実証分析の研究をより豊かにする事にあった。その意味では報告書に挙げた著書・論文リスト・学会報告リストによっても判るように多くの研究成果があったと言えよう。折しも。本年度は研究テ-マである「金融市場分析の計量理論と実証分析」について分析の基礎となる理論的側面を中心として研究を行った。まず、金融市場において観察される経済デ-タの特質としては非正規性や非定常性が見られるなどこれまでに内外の学会において知られている実証的内容について整理した。その上で特に、(i)時系列的に変動する平均と分散の理論モデル、(ii)連続的に観察される確率過程の統計的推定問題、(iii)条件付請求権(オプション)の理論などの非線型性を扱う統計モデル、などについて理論的検討を加えた。また、次年度以降に行われる予定である本格的な実証分析に向けて計算機を用いた数値実験なども合わせて行った。さらに以上の研究をふまえ1月初旬に京都大学において研究テ-マに関心を持つ研究者を多数招いてコンファレンスを開催した。コンファレンスにおいては上記の問題を中心に、金融市場分析の計量理論について論文の報告と討論が活発に行われた。金融市場の計量分析の理論研究の中で金融市場の計量分析理論についての研究は、時系列アプロ-チによるものと計量モデル・アプロ-チによるものに大別される。金融時系列ではしばしばランダム・ウォ-ク・モデルを用いるが現実のデ-タからこのような統計モデルが適当か否かを調べる問題は単位根の問題と呼ばれている。和合氏はベイズ・アプロ-チからこの問題に対して新たな検定法を提案した。また、田中氏は新たな漸近理論によりこれまで困難な問題として知られていた移動平均部分の単位根問題について見通しのよい結果を与えた。国友はブラック・ショウルズ理論などファイナンスにおけるオプション理論などでよく問題とされるボラティソティ-母数の推定法として新しい方法を提唱した。一方、森棟・佃・程島各氏は計量経済モデルに基づく金融市場分析の計量理論を検討している。森棟・佃・程島の各氏は計量経済モデルの推定検定・予測についての研究結果をもとに金融市場のように構造変化が存在する場合の計量経済モデルの統計的推測理論の研究を行った。次に研究プロジェクトが行った実証研究を取り上げれば、佃氏は日本の資産価格の中でも特に株式収益率について膨大なデ-タ分析を行い、その結果日本の株式収益率の分布について興味深い新しい事実を発見した。斯波・和合両氏は近年のファイナンス理論で有力となっている

ファクタ-モデルをカルマン・フィルタ-を用いて動学的に発展させる統計モデルを提案し、日本の株式収益率デ-タに対して適用した。また、山本氏はマ-ケット・モデルを動学的に拡張し、リスク・プレミアムの変動性についての検証を日本の株式市場のデ-タを用いて行った。これらここに挙げた日本の金融・資本市場についての実証分析は極めてオリジナル性の高いもので、今後の実証分析の基礎になると判断できよう。
代数曲線上の特殊線形系の理論と応用の研究

第五回代数曲線論シンポジウム(徳島大学工学部にて2007年11月24日(土) -11月25日(日))、第六回代数曲線論シンポジウム(神奈川大学工学部にて2008年12月15日(月) - 12月18日(木))を開催し、幅広い情報提供を行った。また神奈川工科大学の米田二良や大阪大学大学院の春井岳との共同研究で平面曲線の最少次数モデルの評価式に関する興味深い結果を得ることに成功した。第五回代数曲線論シンポジウムを関して神奈川工科大学の米田二良、山口大学の加藤崇雄、神奈川大学の本間正明および申請者を組織委員として(申請者が組織委員長を勤める)徳島大学工学部にて2007年11月24日(土)-11月25日(日)の期間で開催した。講演者は鍬田政人(中央大学)、松本隆太郎(東京工業大学)、川北素子(滋賀医科大学)、川口良(大阪大学)、巴山竜来(大阪大学)、太田洋平(大阪大学)、西山賢一(埼玉大学)、北川真也(大阪大学)、塩田徹治(立教大学)で代数曲線論の環論的な意義やヒルベルトスキームやブリル=ネーター理論についての最新の話題、或いは工学的な応用など幅広い話があり大変意義深いものとなった。また申請者は神奈川工科大学の米田二良と共にワイアシュトラス点に関する幾つかの結果を得、また春井岳との共同研究で平面代数曲線の自己同型に関する非常に詳細な結果を得ることにも成功した。また申請者は神奈川工科大学の米田二良と共にワイアシュトラス点に関する幾つかの結果を得、また春井岳との共同研究で平面代数曲線の自己同型に関する非常に詳細な結果を得ることにも成功した.
哺乳類神経組織から単離した細胞の凍結保存法

細胞の凍結保存法はすでに40年ほど前に精子の凍結保存に成功して以来、畜産等の分野では日常的に利用されている。神経細胞の凍結保存は一部の培養細胞株の保存に適用されているが、脳神経組織から単離した新鮮標本を保存する技術はいまだ確立していない。本研究では網膜から単離した細胞を凍結保存する技術を確立し、その細胞を電気生理学的実験に供することを目的とした。深麻酔したネコから剥離した網膜をパパインを含む溶液中に30-40分間インキュベートし、それをピペットに出し入れして無菌的に細胞を単離した。細胞浮遊液に、DMSO(diemthyl suloxide)を8%加え、-80°Cのディープフリーザーに入れ凍結保存した。凍結後数日に加温・解凍したところ、細胞はほぼ凍結前の形態を保っていた。また、双極細胞についてグルタミン酸に対する応答を観察したところ、多くの細胞が急性単離後と同程度の応答性を示した。しかし、グルタミン酸に対する応答性は急性単離後でも標本ごとに大きなばらつきがあり、応答性が見られない標本でもその原因が凍結保存にあるのか、単離時の条件によるのかは明らかにすることが出来なかった。本研究で遭遇した最大の困難は単離時の条件を同一にすることが出来ない点であった。単離に用いるパパインは製造元が異なればその効果が異なることは勿論のこと、同一の製造元の製品でも製品のロットが異なるとその効力にきわめて大きなばらつきがあった。しかも、細胞がうまく単離出来るかどうかは製品の効力とは無関係で、全く予測できなかった。受容体やイオンチャネルは膜タンパク質であるから、タンパク分解酵素を単離に用いることには批判がある。従って、いかに少量の酵素を短時間作用させて細胞を単離するかという点が解決困難な実験方法上の課題として残った。本年度予定していた計画は以下の通りである。1.ネコ網膜神経の単離:深麻酔したネコの眼球を剔出し、剥離した網膜をパパインを含む溶液中でインキュベートし、それをピペットに出し入れして機械的な操作によって細胞を単離する。2.細胞の凍結保存:細胞浮遊液に8%のDMSOを加え、-80°Cのディープフリーザーで凍結させる。3.解凍と培養:さまざまな期間保存した凍結細胞を、37°Cのバスに入れて加温し解凍する。解凍後、新たに培養液を加えCO_2インキュベーター中で培養する。4.イオンチャネルと伝達物質に対する応答の記録:一部の細胞は解凍直後、また他の細胞は培養の後にパッチクランプ法を施して膜のイオン電流を記録し、凍結保存しなかった標本と比較する。5.凍結保存材の比較検討:DMSO以外の凍結保存材を試験し、最良のものを決定する。6.ヒト網膜、神経細胞の凍結保存:以上の技術が確立した後、ヒト由来の細胞について検討する。本年度は、1.ネコ網膜の細胞を単離し、2.DMSO存在下、-80°Cで保存し、3.解凍したネコ双極細胞に、4.パッチクランプ法を適用してイオン電流を測定した。その結果、凍結保存しない細胞と同様に、凍結保存した双極細胞でもグルタミン酸応答が発生することが明らかになった。この結果から、凍結保存によってもグルタミン酸に対する感受性は保存されることが明白となった。従って本課題研究を引き続き遂行する目処がついたので、5.6.の項目についてはこれからさらに検討していく予定である。
Bメソン系におけるCPの破れの現象の研究

当研究の目的は電磁弱統一模型の現象論的解析、およびこの模型では起こり得ないような現象の可能性を調べこの模型の妥当性を吟味することにある。そのために次のような3つのテーマについて研究を行った。1)CPの破れの起源の研究:CPの破れの起源は小林・益川機構によるものか、他の機構なのかは重要な問題である。Bメソン系でCP非対称性は純粋に弱い相互作用だけで決定されることから、CPの破れの起源解明の重要な鍵となってきた。当研究では、CPが最初から破れている小林・益川理論とは対照的なCPが自発的に破れる理論での諸現象を考察し、小林・益川理論の予言と比較した。特にこの模型ではトップクォークの質量は、500GeV程度の軽い質量でよいことや、色々の崩壊モードで差が現れることがわかった。[論文1]2)超粒子を探る研究:超粒子は超対称性理論に現れる粒子である。たいてい質量は1000GeVぐらいと考えられているが、ジーノZ^^と呼ばれているZボソンの相棒の質量はよく分かっていない。νの相棒のν^^が非常に軽い場合があるが、その場合2つの電子と共に2つのν^^を放出する二重ベータ崩壊が考えられている。この崩壊巾はZ^^の質量にのみ依存するため、二重ベータ崩壊の寿命からジーノの質量の下限がえられ、MZ^^>1GeVを得た。[論文2]3)ダイバリオンを探る研究:最近筑波大の岩崎らは格子ゲージ理論の計算により6つのクォークssdduuの束縛状態であるH粒子の質量が核子の質量の2倍より軽いことを示した。当研究ではN_i→N_f+H,N_i→N_f(H)+e^++νの理論計算と実験との比較を行い、M_H>18700GeVをえた。結果としてHが2つに核子の質量より軽い可能性はほとんど排除された。[論文3]当研究の目的は電磁弱統一模型の現象論的解析、およびこの模型では起こり得ないような現象の可能性を調べこの模型の妥当性を吟味することにある。[論文3]