hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
新しい神経細胞死モデルの提唱とその研究

ラットの一側海馬CA_<3-4>に選択的に神経細胞死をおこすモデルを提唱したが、当該年度はその基礎となる脳血流、糖代謝を研究した。当初計画した通り、IAP及び2-DGを用いて行った。経時的な変化をみており、外頸動脈よりのカテーテルを抜去してから、0、30、60、120分後にそれぞれIAP及び2-DGにつき検討した。0及び30分後では、一側半球全体にわたる脳血流の低下及び糖代謝の低下があったが、120分後では一側海馬に脳血流、糖代謝低下が限局してしまう。基底核、皮質は、処置なしコントロールと差がなくなってしまった。これが、神経細胞死の原因と考えられるが、逆に、血流、糖代謝の上昇がみられる時期が存在する可能性があり、240分、6時間後について現在行っている。なお、ストレス蛋白については処置後1日後で検討しているが、ABC法でHSP72はみれれていない。引き続き、これも2日後の検体で研究を行っている。なお、上記一部は、昨年のNeuroscience Meeting (San Diego)にて報告した。
発光ダイオードを用いた長日性花卉の開花促進システムの開発

長日性花卉に白色光あるいは赤色光で長日処理しても開花が促進されない。この反応は、長日性のモデル植物であるシロイヌナズナにおいて遠赤色光受容体遺伝子PHYAのはたらきであることが示されている。そこで本研究では、人工光で栽培可能なモデル植物ではなく、太陽光の下で育てなければならない長日性花卉(シュッコンカスミソウ)を用いて、発光ダイオード(LED)による長日処理が開花を促進するかどうか調べた。その結果、開花は赤色光で促進されず遠赤色光で促進されたので、遠赤色光LEDはシュッコンカスミソウの長日処理光源として実用性が高いとみられた。遠赤色光による開花促進はPHYAの下流ではたらく花成早化遺伝子CONSTANSによって起こることが示されている。そこで、平成20年度には、昼/夜の温度としてシュッコンカスミソウの適温域(25/20°C)を設けて、花芽形成と開花を実用的なレベルまで促進する遠赤色光の強さと照射時間を調べた。比較対照として、赤色光と青色光のLEDを用いた。また、遠赤色光による開光促進には、CONSTANSのシグナルがSOC1を介してはたらく経路が機能していると示唆された。さらに、シュッコンカスミソウを人工気象器内で栽培し、白色光を8時間照射した後、遠赤色光を8時間照射して、CONSTANSと、その下流で機能して開花を促進するFLOWERING LOCUSTの相同遺伝子を単離し、塩基配列を確定した。以上の成果をまとめて研究発表し、論文、著書として著した。長日性花卉に長日処理を行う場合、白色あるいは赤色の光源を用いても花芽形成と開花が促進されない。この反応は、長日性のモデル植物であるシロイヌナズナにおいて遠赤色光受容体遺伝子PHYAのはたらきであることが明らかにされている。そこで本研究では、人工光のみで栽培可能なモデル植物ではなく、日中は太陽光の下で育てなければならない長日性花卉において、発光ダイオードを用いた長日処理が開花を促進するかどうか検討し、花芽形成関連遺伝子の発現を解析した。研究材料には、長日性花卉で、これまで研究代表者らが研究実績を積み重ねてきたシュッコンカスミソウを供試した。昼/夜の温度として、シュッコンカスミソウの適温域(25/20°C)を設けて、花芽形成と開花を実用的なレベルまで促進する遠赤色光の強さおよび照射時間を調べた。比較対照として赤色光の発光ダイオードを用いた。また、遠赤色光を照射して花芽が形成されるときに作用する遠赤色光受容体関連遺伝子の発現について解析した。その結果、シュッコンカスミソウの開花は赤色光による長日処理で促進されなかったが、遠赤色光による長日処理で促進された。遠赤色光による長日処理にはある程度強いレベルの照射照度が必要であることと、照射の時間が長いほど、期間が長いほど開花が促進された。このような反応はハウス栽培された他の長日性花卉でも証明されたので、遠赤色光発光ダイオードは長日性花卉の長日処理光源として実用性が高いものとみられた。遠赤色光による開花促進にはPHYA遺伝子の下流ではたらく花成早化遺伝子COの活性が高まることによって起こることが証明された。これらの研究成果は雑誌論文や学会発表などを通して公表した。
浸液透光セラミックス成形体評価手法の最適化と定量化及び従来法との相関

浸液透光法はセラミックス成形体の新しく強力な構造評価法である。この方法は、成形体を適切な浸液により透明化し、その内部全体の構造を光学顕微鏡で観察するものである。他に類例のない特徴は、試料全体を一度に調べられることから、破壊源等の成形体中に極微量しか存在しない構造を容易に検出できることである。本研究では、観察された映像が、実際の構造を反映していることを調べることを目的に、本方法の定量化の検討を行った。対象は、ポリスチレン球形粒子を混入した粉体成形体を加熱することにより作製し、内部に既知寸法および濃度の気孔を含ませたアルミナ及び窒化珪素粉体とした。得られた成果の概要を次に記す。成形体中で観察された気孔の特質は、添加したポリスチレン粒子の特質と一致した。これは本評価手法により、成形体中の気孔の形状、寸法および存在濃度の正確な評価が可能なことを示すものである。正確な観察が可能な試料厚さは、気孔寸法の減少に伴い薄くなり、粒子径の減少とともに増加する。例えば、平均粒径0.2μmのアルミナ成形体中では、直径40μmの気孔については、厚み0.5mm程度までは、定量的な評価が可能である。浸液と、粉体粒子の相対屈折率を増すと、映像のコントラストが増加し、微細な気孔の観察が正確に行える。しかし、同時に試料の透明化が損なわれるため、観察可能な試料厚みは減少する。異なる位置に存在する気孔が、観察方向から見て重なる場合、光学顕微鏡の焦点位置をそれぞれの気孔位置に合わせることにより、互いに影響なく分離して観察された。同様の結果は、窒化珪素およひジルコニア粉体成形体についても得られた。本研究はセラミックス成形体構造の評価用として近年我々が開発した浸液透光法の最適化および定量化を行うとともに、従来の評価法との相関の確立を目的として行われたもので、人工的に導入された気孔を含む成形体試料について次の検討を行った。(1)鮮明な映像を得るための諸条件の確定。(2)映像情報と成形体構造の関係の定量化。(3)本方法と従来の定量的欠陥評価法である水銀圧入法気孔径分布評価法やSEM観察との比較検討平成6年度には計画どおり種々の寸法の人工的な球形欠陥を含むアルミナ成形体についての検討を行い、次のことを明きらかにした。(1)アルミナ粒子の平均粒径と共に試料の透明化に要する浸液の屈折率は変化し、一般に平均粒径が可視光線の波長に比べて著しく小さい粉体では透明化および評価が容易である。(2)顕微鏡画像は試料の厚みや粒径の増加、ならびに欠陥寸法の減少とともに不鮮明となるが、試料厚み0.1mm程度では、すべての試料において直径10μmの気孔が評価可能である。(3)表面付近の球形気孔は試料調製時に損傷を受け、観察不可能となるが、その領域の深さは気孔の半径程度である。それ以外の領域では、人工気孔の寸法の予測値と観察値は非常によく一致したことから、本方法では気孔の正確な寸法が評価可能であることが明きらかとなった。(4)従来の代表的な気孔評価法である水銀圧入法やSEMでは、巨大欠陥の検出・評価は極めて困難であることから、本方法の有効性が再確認された。

他に類例のない特徴は、試料全体を一度に調べられることから、破壊源等の成形体中に極微量しか存在しない構造を容易に検出できることである。本研究では、観察された映像が、実際の構造を反映していることを調べることを目的に、本方法の定量化の検討を行った。対象は、ポリスチレン球形粒子を混入した粉体成形体を加熱することにより作製し、内部に既知寸法および濃度の気孔を含ませたアルミナ及び窒化珪素粉体とした。得られた成果の概要を次に記す。成形体中で観察された気孔の特質は、添加したポリスチレン粒子の特質と一致した。これは本評価手法により、成形体中の気孔の形状、寸法および存在濃度の正確な評価が可能なことを示すものである。正確な観察が可能な試料厚さは、気孔寸法の減少に伴い薄くなり、粒子径の減少とともに増加する。例えば、平均粒径0.2μmのアルミナ成形体中では、直径40μmの気孔については、厚み0.5mm程度までは、定量的な評価が可能である。浸液と、粉体粒子の相対屈折率を増すと、映像のコントラストが増加し、微細な気孔の観察が正確に行える。しかし、同時に試料の透明化が損なわれるため、観察可能な試料厚みは減少する。異なる位置に存在する気孔が、観察方向から見て重なる場合、光学顕微鏡の焦点位置をそれぞれの気孔位置に合わせることにより、互いに影響なく分離して観察された。同様の結果は、窒化珪素およびジルコニア粉体成形体についても得られた。
マウス生殖細胞の高次生物機能を具現するRNA情報発現ネットワークの研究

当研究室で得られた雄性生殖細胞に高発現する2つの新規RNA結合タンパク質の機能を探る研究を行った。精巣中での発現細胞特異性を今回樹立したモノクローナル抗体を使って検討したところ、減数分裂後の生殖細胞にのみ発現し、round spermatidでは核に局在していたが、elongate spermatidになると細胞質へ移行していた。さらにelongate spermatidでの細胞質内では精子の尾部形成部位に斑点状に分布していた。また、Mrp1とアクチン結合タンパク質との相互作用を検討したところ、特異的相互作用が見られた。さらに、Mrp1の特異的結合配列をin vitro SELEX法で調べたところ、GU_<2-3>AGに配列特異的に結合した。この配列はアクチンダイナミクスに関連するmRNA中に存在していることがデータベース検索でわかった。これら一連の実験から、Mrp1は精子形成の最終期、spermiogenesisの形態形成に関わるアクチンに結合し、アクチン代謝に関連するmRNAを係留する機能を持つことが推定される。CPEB2が減数分裂後の雄性生殖細胞の細胞質に特異的に発現しpoly(U)に特異的に結合した。また、既知の配列のさらに上流に未同定の領域があることがわかり、全長をクローン化して配列を決定する事が出来た。また、CPEBファミリーの新しい遺伝子CPEB3を同定した。可溶化したCPEB3のRNA結合ドメイン部分を大腸菌で発現させることが出来たので、in vitro SELEX法で特異的結合するRNAオリゴマー(50-mer)を得た。この配列中から特異的に結合するRNA領域を抽出しているところである。CPEB3とCPEB2はRNA結合領域で96%以上のアミノ酸配列の相同性を示すので、これら二つのタンパク質は共通のRNA結合配列を持つと予想している。
セミインタクト細胞を駆使した細胞ストレス応答ネットワークの定量的可視化解析

本研究では、細胞膜を透過性にした「セミインタクト細胞」に、ストレスにさらされた細胞から調製した細胞質を導入し、ストレス負荷時に翻訳が活性化される転写因子ATF4の発現の可視化・再構成を行い、ストレス依存的な翻訳制御の分子機構を明らかにすることを目的とした。先ず、1)ATF4mRNAを恒常的に発現する細胞株の樹立した。2)生細胞におけるATF4-GFPのストレス応答反応の可視化した。CHO-ATF4細胞に小胞体ストレス(タプシガルジン、DTT処理など)や酸化ストレスを負荷することにより、ATF4-GFPがストレス依存的に翻訳され、核内に移行することを確認した。この細胞株のATF4mRNA量はストレス負荷時、ストレスのない場合においても殆ど変化していないことをRT-PcRやノーザンプロットにより確認した。3)セミインタクト細胞を用いたストレス依存的ATF4-GFPの翻訳制御の可視化・再構成系の構築した。CHO-ATF4細胞をセミインタクト細胞処理し、小胞体ストレス(タプシガルジンやDTT等)を負荷したCHO細胞(WT)より調製した細胞質を添加し、ATF4-GFPの翻訳制御の再構成を試みた。その結果、ストレス負荷細胞質依存的にATF4-GFPが翻訳され、かつそれが核内に効率よく輸送されることを確認できた。ATF4-GFPは分子量約70kDaでの転写因子であり、例え発現したとしてもセミインタクト細胞の穴より細胞外へ拡散してゆくことが危惧されていたが、非常に効率よく核に移行することより、本再構成アッセイ系が翻訳制御の可視化再構成系として十分使用できること、また、セミインタクト細胞内では転写因子のような核移行する分子は何らかの方法で(恐らく微小管依存的に)核にターゲットできることが明らかとなった。これらの結果より、各種ストレス依存的な翻訳制御ネットワークの可視化解析を行う準備ができた。
ブピバカインの鏡像異性体に関する研究

ブピバカインは長時間作用性で、知覚神経遮断作用が強く運動神経遮断作用が弱いという特徴を有する局所麻酔薬である。しかし、ほかの局所麻酔薬に比べて心臓に対する毒性が強い。そのため、ブピバカインを誤って血管内へ注入すると心停止を起こし、蘇生が困難であると指摘されている。ところでブピバカインは、S-ブピバカインとR-ブピバカインとのラセミ体である。これまでの動物実験の結果によると、R-ブピバカインの毒性がS-ブピバカインより著明に強いことが判っている。類似の構造を有するs-ロピバカインが、同様の理由から欧米で市販され、日本においても治験中であるが、ブピバカイン・ラセミ体に比べて運動神経遮断作用が弱いため筋弛緩効果が不十分との意見が多い。しかし、S-ブピバカインとS-ロピバカインを直接比較した実験はない。研究代表者らは、これにR-ブピバカインを加えて、アメリカザリガニの神経軸索を用いて活動電位の抑制効果および細胞内局所麻酔薬濃度を比較し、S-ブピバカインとs-ロピバカインの効果を比較した。アメリカザリガニの腹部神経索に微小ガラス電極を刺入して、低頻度(0.1Hz)または高頻度(5Hz)の域値上刺激を用いて刺激し、1mM,pH7.0のS-ロピバカイン、S-ブピバカイン、またはR-ブピバカインのどれか1つを15分間潅流投与したところ、低頻度刺激では3つの局所麻酔薬で差がなかったが、高頻度刺激では、活動電位、活動電位のdV/dt max,dV/dt minのいずれもが、S-ロピバカインよりS-ブピバカインで有意に大きく抑制された。R-ブピバカインは両者の中間に位置した。研究代表者らが開発した細胞内局所麻酔薬濃度測定用微小ガラス電極をザリガニの軸索に刺入し、低頻度または高頻度で刺激しながら、3つの局所麻酔薬の中の1つを15分間潅流投与したあとに細胞内濃度を測定したところ、低頻度刺激でも高頻度刺激でも、いずれの平均値も0.20.3mMの範囲内にあり、3群間に有意差はなかった。高頻度刺激のもとでS-ブピバカインまたはS-ロピバカインを投与して、神経細胞内濃度が同じレベルに達しても、麻酔作用はS-ブピバカインのほうがS-ロピバカインより強いことが明らかになった。市販のブピバカインは、鏡像異性体Rectus(right)とSinister(left or levo)の混合物(ラセミ体)である。本研究課題は、R-ブピバカインとS-ブピバカインの効果と毒性を比較することを目的とした。1.R-ブピバカインとS-ブピバカインのそれぞれを入手するため、イギリスChiroscience社と交渉を繰り返し、平成9年3月1日に秘密保持契約を結び、それぞれの薬物を入手した。2.アメリカザリガニ腹部神経索の細胞内ブピバカイン濃度を測定するため、ガラス微小電極を作製した。

絶縁性のガラス管を引き伸ばしてマイクロピペットを作り、表面をシリコン化し、ピペット先端を鋭利に研磨して神経細胞に刺しやすくした。ピペット内に少量のイオン交換剤、細胞内類似溶液などを充填した。これらの電極と各種濃度のブピバカイン溶液を用いて校正曲線を作成した。感度、安定度を測定しながら改善を繰り返し、ほぼ満足できる細胞内ブピバカイン濃度測定用微小電極を作ることができた。次年度は、この微小電極を用いて、同濃度のR-またはS-ブピバカインを神経細胞外へ投与したとき、細胞内濃度に違いが生じるかどうかを検討する予定である。3.アメリカザリガニの腹部神経索を取り出し、desheathしたあとチャンバーに固定し、ザリガニ用リンゲル液で潅流した。マイクロマニピュレータを用いて膜電位測定用の微小電極を軸索に刺し、0.2Hz,0.2msec,閾値の1.5倍の強さで刺激を与えながら活動電位を測定した。ラセミ体ブピバカインの効果を、活動電位の微分値の抑制の程度をもって評価した。次年度は、R-ブピバカインとS-ブピバカインで抑制の速度ならびに程度に違いがあるかどうかを比較する予定である。市販のブピバカインは、ブピバカインの鏡像異性体であるS-ブピバカインとR-ブピバカイン混合物である。現在治験中のロピバカインはS-ロピバカインである。ロピバカインはブピバカインと類似しているといわれているが、ロピバカインとS-ブピバカインを比較した研究はない。本研究は、ロピバカインと、S-ブピバカイン、およびR-ブピバカインの効果をアメリカザリガニの軸索を用いて比較した。1)活動電位の抑制に関する比較:アメリカザリガニの腹部神経索を取り出し、desheathしたあとチャンバーに固定し、ザリガニ用リンゲル・ハラベルド液で潅流した。微少ガラス電極を軸索へ刺入し、低頻度(0.1Hz)または高頻度(5Hz)の闘値上刺激を用いて刺激し、活動電位、活動電位のdV/dt max,dV/dt minを連続記録した。1mM,pH7.0のロピバカイン,S-ブピバカイン,またはR-ブピバカインのどれかを15分間潅流投与した。低頻度刺激では、3つの薬物で差はなかったが、高頻度刺激では、活動電位,dV/dt max,dV/dt minは、いずれもロピバカインよりもS-ロピバカインで有意に大きく抑制された。R-ブピバカインは両者の中間に位置した。2)細胞内局所麻酔薬濃度の比較:研究代表者らが開発した細胞内局所麻酔薬濃度測定用微小ガラス電極を、ザリガニの軸索へ刺入し、低頻度または高頻度で刺激しながら、3つの薬物の中の1つを15分間潅流投与したあとの細胞内濃度を測定した。細胞内濃度は、いずれの平均値も0.20.3mMの範囲にあり、低頻度刺激でも高頻度刺激でも、3群間に有意差はなかった。S-ブピバカインは、高頻度刺激のとき、ロピバカインと同じ細胞内濃度で、ロピバカインより強い麻酔作用を示すことが明らかになった。より高等なラットの坐骨神経の複合活動電位で、同様の結果が得られるか調査中である。
歯からのDNA型分析

歯の各組織のうち、主として歯髄についてDNAを抽出し、PCR法を応用してシングルローカスD1S80座位ならびにHLAクラスII抗原遺伝子DQα座位を増幅し、それらの多型について検討した。【試料】歯科診療時に採取した新鮮歯髄、ならびに123年間室内保存の抜去歯から採取した陳旧歯髄を用いた。DIS80型では30例、HLADQα型では140例について検討した。【結果・考察】歯髄から得られたDNAは、低分子化している場合が多かった。D1S80型のallele sizeは約300800bpと比較的大であるので、歯髄DNAからの型判定はやや困難であり、また目的以外のバンドが多数認められた。そこでPCR条件を各種検討した結果、温度条件を変えたところ、多少エキストラバンドが減少する傾向が認められた。現在は、PCR増幅する際の鋳型DNAの濃度、プライマー、DNAポリメラーゼなどの至適濃度について、より詳細に検討中である。HLADQα型のallele sizeは242/239bpであり、低分子化した歯髄DNAからのHLADQα型判定は容易であった。しかし、検査時に非特異的反応が生じる場合が認められたが、鋳型DNA量を減らすことによって良好な成績が得られた。歯髄140例についてHLADQα型検査を行った結果、対立遺伝子の出現頻度は3型が48.2%、1.3型17.5%、1.2型14.3%、4型12.1%、1.1型7.5%および2型0.4%であった。また遺伝子型は、21type中16typeが出現し、その出現頻度は1.3-3型が31例(22.1%)と最も多く、ついで3-3型28例(20.0%)、1.2-3型24例(17.1%)の順であった。また、23年間保存した陳旧試料からもHLADQα型判定は十分に可能であったことから、法医鑑定には非常に有効な検査法と考えられる。
マイクロバブル発生装置を付加させた浄水蛇口の製作及び洗浄効果の検証

研究目的これまでの奨励研究課題でマイクロバブル高速衝突噴流が有機物洗浄に効果があること、シャワーノズルにマイクロバブルを混入させることで人体等の表面洗浄にも有効であることが確認できた。本年度は現在普及している浄水機能付き蛇口に、マイクロバブルを付加させることで、浄水器を通した水は飲料に、マイクロバブルを通した水は洗剤等をできるだけ使用せず、食器及び野菜等の洗浄に使える、一体型の蛇口を開発できないかとの着想が申請課題の背景である。研究では限られたスペースの中にマイクロバブル発生装置を組み込ませ、洗浄効果を発揮することができるかをさぐるのが目的である。研究方法マイクロバブル発生装置を水道蛇口内に組み込めるように小型改良して製作をする。発生させたマイクロバブル水を空気流量・水流量を変化させた上でこれまで洗浄効果を測定する。具体的には、色付き汚物を塗布しておき、汚染明度・彩度の変化を、マイクロスコープレンズを取り付けた高解像度ディジタルカメラにより一定時間間隔で撮影し、塗布変化速度等を画像解析により検出する。研究成果水道蛇口内に組み込める小型改良した発生装置を作成した。実験において洗浄効果は確認できた。ただこれまでの研究と違い、水流量が少ないため、小流量の場合マイクロバブルの発生が確認できない範囲があった。今後の課題として小流量でも発生可能な装置の開発が必要である。
カラーハードコピー画像の変退色安定度評価技術に関する研究

カラーハードコピー画像の変退色安定度評価技術について、カラーゼログラフ及びジアゾマイクロフィルム画像を対象に変退色安定度評価に関する研究を行ない、カラーハードコピー画像の変退色に対する安定性を定量的に評価する方法を確立した。市販のコピー機(4機種)によって作成されたカラーゼログラフィ画像のシアン、マゼンタ、イエロー、中世灰色各カラーパッチに対して強制光退色試験を行った。画像の光退色試験での照射光源は、画像の実用面を考慮して太陽光、白色蛍光ランプを中心に、キセノンランプと水銀ランプを加えた。処理試験後の画像の変退色度は、各試料の処理前後の三刺激値を測定し、その値から算出したL^*a^*b^*表色系の色差値で表示し、さらに色差の内容を色相差、彩度差、明度差に分解した表示し、変退色を退色と変色とに区別して定量表示した。現時点に於て、カラーゼログラフは、画像構成の素材と画像形成手法の関係で原画の忠実な色再現はむつかしい。試験した画像は、すべて光照射によって光退色を示した。変退色の度合いやその内容は、画像を形成するトナー(色材、結合剤など)に依存し、また光源の種類で異なる。本研究でカラーゼログラフの画像安定性が定量評価された。また、本研究の特色であるCIELAB表色系の色差表示によるカラー画像の変退色評価がカラーハードコピー画像にも適用できることが明らかになった。ジアゾマイクロフィルム画像の安定性評価についても、国産及び外国産フィルム対象に同様の光退色試験を行った。この場合は画像の濃度減少率にも重点を置いた。評価結果として、シアゾ画像は、紫外線をカットした光源で照射した場合は色差も濃度減少率も低く、マイクロリーダーの光源類では比較的安定であると考えられた。カラーゼログラフィー画像の色再現性と変退色安定性について研究し,色彩的な色度表示による画像の安定度評価技術について検討した.カラーゼログラフィー画像は,マクベスの色票をオリジナルとして,市販のカラー複写機(富士ゼロックス8600,リコー極楽鳥5000,キャノンカラーTおよびレーザーコピアー1)4種を用いて原寸大のコピーを撮り,色票中からシアン(C),マゼンタ(M),イエロー(Y)の三原色および白-黒間の中性灰色のそれぞれのカラーパッチをつくり試料とした.変退色試験は光強制退色試験としてキセノンウエザーメータによる退色,白色蛍光灯および太陽光照射による退色試験を行った.試料カラーパッチの色再現性および変退色安定度の評価は各試料の処理前後の三白刺激値を測定しLab表死しろ系の色度座標と色差値の計算から立体座標上の点の移動および色差値の変化から行った.さらに変退色の状況を色差値の状況を色差値の内容を,色相差,彩度差,明度差にそれぞれ分解して表示することにより,変色と退色とに区別して定量的に評価できることを明らかにした.現在の時点において,電子写真方式によるカラーゼログラフィー画像は色再現性に乏しく,とくに中性灰色の再現が困難である.この原因はトナーの粒状性と分布,紙への融着と重曹効果に問題がある.キャノンのレーザーコピー方式はひの点で外の複写機より優れた再現性を示した.カラー画像の安定性は主としてカラートナーの種類やトナー構成顔料に依存する.三原色トナーのC, M, Y,それぞれの変退色特性があり,同じ原色でもめ-か-によって特性が著しく異なるのは成分顔料の違いと含有する結合剤の影響と考えられる. CIELAB表色系の色差による変退色評価はカラー画像の安定度評価に於て従来の濃度変化による評価より優れた定量的評価方法であることを明らかにした.カラーハードコピー画像の変退色安定度評価技術について、カラーゼログラフ及びジアゾマイクロフィルム画像を対象に変退色安定度評価に関する研究を行ない、カラーハードコピー画像の変退色に対する安定性を定量的に評価する方法を確立した。

本報告は、カラー画像の変退色安定性を写真濃度減少率及びL^*a^*^<b*>表色系の色差値の測定から定量的に評価する技術をジアゾフィルム画像の強制光退色安定性の評価に応用した研究の結果に関するものである。研究に用いたジアゾ画像は、4種の未露光の市販マイクロフィルムを光学ウエッジ及びマイクロフィルムテストチャートに密着して露光し、自製のアンモニウム現像器で現像して得たものである。画像は、ブルーブラック(BB)と黒(BL)の2種で、最高濃度はどちらも1.78、最低濃度は0.04であった。現像温度は6080°C、現像時間は20秒の範囲内で、それぞれのフィルムに対する最適条件を求めた。光退色に用いた光源は、分光エネルギー分布の異なった、水銀ランプ、白色蛍光ランプ及び退色防止用(紫外線カット)白色蛍光ランプを用いた。照射時間は、光源の種類と退色速度とを考慮して48270時間とした。照射環境は、通常の室内で温度1825°C、相対湿度5075%の範囲であった。画像安定性は、処理前後の画像の写真濃度(ビジュアル濃度)及びL^*a^*^<b*>表色系の色差値を算出して評価した。評価結果として、BB、BLいずれの画像も明らかな退色性を示した。退色率は、短波長(紫外)光で著るしく、また濃度-退色率曲線から高濃度部より低濃度側で大きい。光照射で画像の特性曲線(コントラスト)が変化し、また相反則不軌が認められた。即ち、白色蛍光ランプによる退色が著るしい。退色率はフィルムの種類に依存するが、色差値は大きくてもその内容は明度差が大部分で、変退色では退色が主で変色度は小さい。このことは分光透過率曲線の変化からも明らかである。これらの評価結果からジアゾマイクロフィルム画像の光照射に対する画像安定性に関する定量的データを得るとともに本研究課題に共通した画像安定度評価技術がジアゾ画像にも適用できることを明らかにした。
革新的高耐摩耗鉄鋼材料の開発を目指した析出強化型表面セラミックス層の創製

窒化処理によって鉄鋼材料表層にナノ析出物を分散させたセラミック層を形成させるため,純Feおよび種々の元素を少量添加したFe-M2元合金にガス窒化を施し,試料表面に生成する化合物層の相構成,成長速度および硬度を調べた.その結果,表層のγ'中では試料内部ほど硬度が増加し,フェライト部で急激に硬度が減少することが明らかとなった.一方,CrやAlを添加すると拡散層硬度は顕著に増加する一方で,化合物層硬度はそれほど変化せず,化合物層と拡散層硬度の差が減少することが分かった.このことは微細なCrやAl窒化物はα相を析出強化する一方で化合物層に対しての析出強化能は小さいことを示唆している.窒化処理によって鉄鋼材料表層にナノ析出物を分散させたセラミック層を形成させるため,純Feおよび種々の元素を少量添加したFe-M2元合金にガス窒化を施し,試料表面に生成する化合物層の相構成,成長速度および硬度を調べた.その結果,表層のγ'中では試料内部ほど硬度が増加し,フェライト部で急激に硬度が減少することが明らかとなった.一方,CrやAlを添加すると拡散層硬度は顕著に増加する一方で,化合物層硬度はそれほど変化せず,化合物層と拡散層硬度の差が減少することが分かった.このことは微細なCrやAl窒化物はα相を析出強化する一方で化合物層に対しての析出強化能は小さいことを示唆している.本年度は、窒化処理した鉄合金の表層に生成する窒化物層の強度および成長速度に及ぼす微細窒化物の影響を調べるため、高純度純Feおよび1mass%のMn, Si, Cr, Al, Ti, VおよびMoを添加したFe-M 2元合金に570°CのNH3 -H2混合ガス中で種々の時間ガス窒化を施し,試料表面に生成する化合物層の相構成、成長速度および硬度を調べた。X線解析およびEBSD測定により,純鉄では試料表面にε-Fe3Nが,その内部にγ′-Fe4Nが生成し,化合物層は保持時間の平方根に比例して厚くなることが確認された.一方,Si,Alの添加により,ε相が薄くなり化合物層は主にγ′で構成されることが明らかとなった.また,Alを除く全ての元素の添加により化合物層厚さは増加することが分かった.ナノインデンテーション法を用いて、純鉄の窒化材における化合物層の硬度分布を測定したところ,γ′相中では試料内部ほど硬度が増加し,フェライト部で急激に硬度が減少することが明らかとなった。一方、CrやAlを添加すると拡散層硬度は顕著に増加する一方で、化合物層硬度はそれほど変化せず、化合物層と拡散層硬度の差が減少することを見出した。このことは、微細なCrやAl窒化物は拡散層を析出強化する一方で化合物層に対しての析出強化能は小さいことを意味している.
大型水生植物にほる植物プランクトンの増殖抑制効果に関する実験的研究

異常増殖した植物プランクトンの増殖抑制対策として、大型水生植物が代謝した生理活性物質を用いた方法がある。この生理活性物質は生物由来の物質であるため、実際に使用した場合でも生態系への影響はほとんどないことが予期される。そこで本研究では、生理活性物質を用いた植物プランクトン増殖抑制方法の基礎的検討として、大型水生植物よりメタノールを用いた生理活性物質の抽出を行い、得られた抽出物について極性及び分子量に基づいた分画操作を施した。また、生理活性物質の生態系への残留の可能性評価するため、増殖抑制効果を示したフラクションの生分解性も検討した。本研究では、大型水生植物としてオオカナダモ、ハゴロモモ、ホザキノフサを用い、植物プランクトンは緑藻類Selenastrum capricornutum、藍藻類Microcystis aeruginosaを使用した。15EA04:ハゴロモモ及びホザキノフサモのメタノール抽出はS.capricornutum及びM.aeruginosaの増殖を抑制したが、オオカナダモの抽出物はM.aeruginosaに対してのみ増殖抑制効果を示した。さらに、抽出物を極性及び分子量に基づいて分画した結果、各大型水生植物の分子量1000以下である最も極性の高いフラクションが植物プランクトンに対する増殖抑制効果を示した。一方、ホザキノフサ抽出物の極性の低いフラクションもM.aeruginosaに対してのみ増殖抑制効果を示した。また、増殖抑制効果を示した極性の高いフラクションの生分解性の検討によって、植物プランクトンの増殖を抑制する物質は、微生物に対して易分解性の物質であることが明らかとなった。
HEGS-DD法を用いた牧草アポミクシス遺伝子の精密マッピングとクローニング

本研究は、イネ科牧草ギニアグラスを実験材料とし、HEGS-AFLPとHEGS-DD法を用いてアポミクシス遺伝子のクローニングとそのマッピングを行ったものである。その成果、(1)アポミクシス遺伝子を4つ捕捉でき、異なる塩基配列長をもつ同じASG-1遺伝子ファミリーであることが明らかになった。(2)ASG-1を用いてイネ遺伝子組換え植物を効率的に作出でき、結実しないイネを作出した。(3)有性生殖とアポミクシス系統との交配で作ったF1集団を利用してアポミクシス遺伝子の精密マップを作製した。本研究はギニアグラスの条件的アポミクシス系統と有性生殖系統を用いて交配によるF1またはF2集団を作り、HEGS-AFLP法を利用してアポミクシス遺伝子の精密マッピングをすると同時に、これらの材料を用いてHEGS-DD法によるアポミクシス関連遺伝子のクローニングを行うことを目的としたものである。初年度に計画とおり、ギニアグラスの植物を株分け・栽培して後に石油ストーブを入れたビニールハウス内に移して開花させている。その間、まず、交配親系統となる6系統について葉からそれぞれDNAを抽出してHEGS-AFLP法を用いて384のプライマー組合せから得られた6系統のDNA多型より6系統の類縁関係の系統樹を作成した。それによって最も遠縁の両親を選ぶことができた。また。ギニアグラスの交配方法について温湯除雄、プラスチックバッグ、ピンセット除雄法を検討して最終的に最も効率的かつ簡便な方法を見つけることができた。いま交配実験を行っているところである。一方、HEGS-DD法を用いてアポミクシス遺伝子のクローニング実験について、まず、液体窒素につぼみを入れてドライアイスの上で子房を切り出してさらに子房からトータルRNAの抽出実験を試みた。確立された一連の実験ステップで効率よくRNAを抽出できた。次はcDNAの合成とcDNAライブラリーを作成してHEGS-DD法によるアポミクシス遺伝子のクローニング実験を進める予定。遺伝子組換え実験では、ASG-1遺伝子がイネに導入されていることも確認できた。2年目は計画とおり、ギニアグラスの植物を株分け・栽培してビニールハウスで開花させている。その間、交配親系統となる6系統を利用して最も遠縁の両親を選び、プラスチックバッグ法を用いて交配を行い、夏と冬の両シーズンにてそれぞれ雑種種子を得ることができた。これらの種子を使って発芽実験を行い、発芽率等をチェックした上で、播種する。HEGS-AFLP法に適用する予定である。一方、HEGS-DD法を用いてアポミクシス遺伝子のクローニング実験について、まず、液体窒素を用いた子房の切り出し法を確立した。それを使ってアポスポリー性胚嚢始原細胞出現時期、その前後の時期の子房を、子房長を指標として切り出し、それぞれの時期から数千個の子房を切り出した。続いてこれらの子房からトータルRNAとmRNAを抽出してcDNAに合成した。ただし、HEGS-DD法に適用するには、cDNAの量はまだ足りない。さらに子房を切り出してmRNAを大量に抽出する。本研究はイネ科牧草ギニアグラスの条件的アポミクシス系統と有性生殖系統を用いて有性生殖系統は父親に、アポミクシス系統は母親にして交配に上るF1またはF2集団を作り、HEGS-AFLP法を用いてアポミクシス遺伝子の精密マッビンクを行うと同時に、これらの材料を用いてHEGS-DD法によるアポミクシス関連遺伝子のクローニングとその機能解析を行うことを目的としたのである。本年度は、1)まず、アポミクシス現象が現れるステージのつぼみとその前後のステージのつぼみや小花をサンプリングして、RNA抽出、cDNA合成、cDNAライブラリーを作製した。さらにHEGS-DD法を用いてそれぞれのステージに特異的に発現する遺伝子をクローニングした。中にアポミクシス現象が現れるステージに特異的に発現する遺伝子群が見つかった。次年度にかけて順次にその機能解析を行う。2)有性生殖系統とアポミクシス系統との交配によるF1集団を作って、それらの生殖様式を透明法で観察してアポミクシス率を推定した。F1集団を用いてF2集団を作ると同時に、F1集団を使ってHEGS-AFLP法を利用したマッピングを行っている。そのほか、アポミクシス特異的遺伝子(ASG-1)を用いて、イネに遺伝子導入実験を行い、遺伝子組換えイネも作出し、中に雄性不稔性をもつ植物体が見つかった。これからさらにそれらの機能を解析する予定。

また、その結果を受けて、元の植物であるギニアグラスの雄性不稔性を観察した結果、遺伝子導入によって花粉不稔性が組換え植物に遺伝しているのではないかと推測された。今年度は3年目にあたったが、研究代表者が職場の異動によって、実験の方は心配したが、いまの職場の理解があってほとんど支障がなく、進めることができた。本研究はイネ科牧草ギニアグラスの条件的アポミクシス系統と有性生殖系統を用いて、有性生殖系統は父親として、アポミクシス系統は母親として交配によるF1またはF2集団を作って、HEGS-AFLP手法を使ってアポミクシス遺伝子の精密マッピングを行うことにしている。それと同時に、これらの材料を用いてHEGS-DD手法を使って、アポミクシス関連遺伝子のクローニングを行うこととそれらの機能解析を行うことを目的としたものである。本年度は最終年度にあたる。まず、1)アポミクシス現象が現れたステージをもってサンプリングした蕾から、さらに中にある子房を摘出して、そこからRNA抽出してcDNA合成、cDNAライブラリーを作成した。これでできたライブラリーは花粉などの組織の影響を受けないので、アポミクシスに密に関連するものが取れる可能性が高くなった。そこからHEGS-DD手法を使ってアポミクシス特異的な遺伝子群が単離できた。それらを塩基解析した結果、ASG-1遺伝子と同じ配列をもつ長さが異なる遺伝子であることが分かった。いま、それらの遺伝子を使って遺伝子導入実験やin situなどを通じてそれらの機能解析を行っている。また、2)F1集団を作ったのでそれらを使ってHEGS-AFLP手法をもって遺伝子マッピングを行った。その結果、アポミクシス遺伝子のマッピングがほぼ完成した。近い将来、それを使ってアポミクシス遺伝子の同定実験やASG-1遺伝子群との関連についての解析を行う予定。
NPPV管理下の筋萎縮性側索硬化症療養者における終末期の特徴と緩和ケア

本研究の目的は、NPPV管理下でTPPVへの移行を望まないALS療養者の終末期における経過と療養状況の特徴を明らかにし、NPPV管理下の終末期ALS療養者に対する緩和ケアのあり方について提言すること。方法は、病棟看護師や訪問看護師を対象とした面接調査、病院死に関する診療録調査、専門看護師への調査などを実施し、多様な角度から、死亡状況を把握した。結果、NPPVは死亡時まで装着されており苦痛は大きいことや、文献調査から研究的取り組みはあまりなされていないことが明らかとなった。意思決定支援を含むNPPV離脱(terminal withdrawing)についてのガイドラインの学際的整備が必要である。27年度(初年度)は、非侵襲的陽圧換気療法(NPPV)での管理下で、かつ気管切開下の人工呼吸療法(TPPV)への移行を希望せずに死亡した筋萎縮性側索硬化症(ALS)療養者の終末期の状況把握に関する2つの調査を実施した。調査1では、診療録のレトロスペクティブスタディを行った。対象は、A病院で過去3年以内にNPPV療法下で死亡したALS患者4名であり、調査内容は、入院から死亡までの経過と死亡する1か月前から死亡までの状況について調査した。医療用麻薬の使用や看護による苦痛緩和がはかられていたが、死亡までNPPV療法を最大限に使用し延命を行っていた状況であった。そのため、終末期におけるNPPVの離脱に関するガイドラインの整備が必要であることが示唆された。調査2は、調査1の患者のケアに携わった8名の看護師を対象にして、該当患者が亡くなる1か月前から死亡までにいだいた思いについての面接調査を行った。4コアカテゴリ【ケアの困難】【患者・家族が抱える苦悩・苦痛への共感】【苦痛のない有意義な時間への願望】【NPPVを装着したALS患者への複雑な思い】が抽出された。看護師は患者の苦痛を緩和するにも緩和できない中で、苦痛の共感や緩和への願望、複雑な思いを抱きながら看護に携わっていた。NPPV療法下の終末期における苦痛緩和のあり方と緩和技術の向上、ケアする看護師への支援が重要であることが示唆された。また対象となった看護師のうち1名は管理者であり、スタッフナースとは異質な内容が得られたため、別にして分析を行った。また、同時並行で、非がん疾患の代表でもある心不全の終末期に関する文献調査については、文献検索を行った。ASVという鼻マスク型の呼吸療法のみならず、終末期に関する文献は非常に少ない。2つの調査(診療録閲覧調査および看護師への面接調査)については、データ収集、および分析は終了した。データは多彩な内容であるため、分析が非常に困難であった。分析の再検討および精度をさらにあげて、論文として公表することを引き続き行っていく。非侵襲的呼吸療法(NIV)で終末期を迎える患者への緩和ケア検討のために、平成29年度に実施した調査は以下のとおりである。1NIVで初期治療を受けた緊急入院患者の転帰に関する調査:1病院のある3年間で、緊急入院したALS在宅療養者で、転院となった患者の退院までの経過を分析した。転院した8名の患者全員が初期治療で24時間NIV療法が施行された。その後の呼吸管理では、2名が気管切開、3名がTPPV(気管切開下人工呼吸療法)、3名が24時間NIVのまま転院となった。入院期間は平均77日間であり、療養場所と医療処置の意思決定と転院先受け入れに時間を要していたことが明らかとなった。ALSの緩和ケアでは、急速な病状進行により、急性の呼吸不全をいつ発症するかがわからない状況を考慮し、患者と家族に対する早期からの医療処置および療養場所における意思決定支援が重要であることが示唆された。2NIV管理下での緩和ケア検討のための文献調査:前年度から引き続き、NIV管理下でTPPVを希望しないALS療養者の終末期の緩和処置方法やケアの動向や現状を明らかにするために、国内外の文献検討を行った。その結果、NIV管理下の終末期ケアについては、循環器疾患、呼吸器疾患をはじめ、ALSにおいても、ほとんど注目がされていない状況が明らかとなった。一方、イギリスのホスピスのWebでは、NIV療法の維持困難時、あるいは本人の希望によるNIVを離脱するための多職種によるプロトコールが公開されていた。NIVの導入の際に、終末期の緩和ケアを含めて説明を行うこと、また維持困難期の緩和ケアの開発が必要であることが示唆された。3NIVで死亡した患者のケア経験を有する看護師を対象にした調査:今年度から、NIV療法の緩和ケアの状況について、認定看護師や専門看護師を対象にした面接調査を開始した。継続中である。対象者確保ならびに、研究者と対象者との時間があわず、専門家会議開催の設定ができなかったため、面接調査実施に切り替えた。現在、3名の看護師を対象とした面接調査を実施し、7名のケースについて分析中である。また初年度に実施した調査結果は、学会発表は行うことができたが、その論文化を現在、行っている。最終年度は、非侵襲的人工呼吸療法(NPPV)管理下で、気管切開下の人工呼吸器装着を望まない筋萎縮性側索硬化症療養者の終末期における緩和ケアを検討するため1文献検討と2面接調査を実施した。1文献検討では、呼吸不全に対してNPPVを受けて最後を迎えたALS療養者に関する文献検討、および肺実質には問題のない非がん疾患であるALSと慢性心不全を対象にして文献検討による比較を行った。

結果、ALSも心不全においても、NPPVの有効性を示す研究が多く、NPPVが限界がきた際の緩和ケアに関する論文はほとんどみられなかった。やがてくるNPPVの限界に対して、気管切開下の人工呼吸療法を望まぬ患者への緩和ケアの開発が必要である。2面接調査では、認定看護師あるいは専門看護師の資格を有し、NPPVで最後を迎えた患者のケア経験を有する看護師を対象にして、呼吸不全に対しNPPVを行う多様な疾患(心疾患、呼吸器疾患、神経難病)10例における死亡時の状況や看護師の考えなどについて面接調査を実施した。経験事例はみな病院死であった。NPPVは、呼吸不全に対する標準的な治療という位置づけで導入されていた。終末期の苦痛状況は、疾患の違い、年齢、医療機関の種類、急性か慢性呼吸不全かによって、違いが生じていることが明らかになった。ケアの困難さは、身体的苦痛の緩和、セデーションのかけ方、痰の吸引時における呼吸困難と血圧低下の管理、見通しの不確かさによる生命維持かQOLかの方針決定の難しさ、介護力により左右される患者の生命の長さ、家族教育、緩和ケアに対する医師との考え方の相違などがあげられた。NPPV患者に対するさまざまジレンマが明らかとなった。臨床現場におけるアドバンスケアプラニングのあり方(意思決定支援)と学際的チームアプローチの普及、倫理教育および非がん疾患の緩和ケアの発展が求められる。本研究の目的は、NPPV管理下でTPPVへの移行を望まないALS療養者の終末期における経過と療養状況の特徴を明らかにし、NPPV管理下の終末期ALS療養者に対する緩和ケアのあり方について提言すること。方法は、病棟看護師や訪問看護師を対象とした面接調査、病院死に関する診療録調査、専門看護師への調査などを実施し、多様な角度から、死亡状況を把握した。結果、NPPVは死亡時まで装着されており苦痛は大きいことや、文献調査から研究的取り組みはあまりなされていないことが明らかとなった。意思決定支援を含むNPPV離脱(terminal withdrawing)についてのガイドラインの学際的整備が必要である。今後は、論文執筆のための時間をどのように確保するかが検討課題である。次年度は、新たな面接調査を企画しているため、その遂行に向けて準備をすすめていく。現在進行中の面接調査のデータ分析、ならびに、対象者確保に努める。研究者が柔軟に面接調査日を設定できるよう、大学の夏季休業期間等に設定し、対象者の都合に極力努めるようにする。また、論文執筆のためのまとまった時間を確保することが課題である。神経難病・在宅看護学学内業務があり、参加予定をしていた学術集会参加の出張を取りやめにしたこと。また、3月中に論文を英文翻訳の業者に依頼する予定でいた。しかし、自分で翻訳を行うことにしたため、ネイティブによる英文校正費を次年度に持ち越しをして経費を執行することへと計画を変更したこと。仕事の都合により、調査のための出張がかなわなかったこと、および遠方の対象候補者にアクセスができなかったことがあげられる。そのため、面接調査実施が効率よくすすまないことによる調査旅費、謝金の経費を次年度に回すことになった。
光学活性ジイミナトコバルト錯体を触媒とする不斉1,4-還元反応の展開

平成12年度はβ-ケトイミナトコバルト錯体を触媒とする、1,3-ジカルボニル化合物の不斉ボロヒドリド還元反応を発展させた。まず、対称2-アルキル-1,3-ジアリール-1,3-ジケトンの不斉還元反応に適用したところ、2つのカルボニル基のうち1つのカルボニル基のみが還元されたβ-ヒドロキシケトンを高収率かつ高ジアステレオ・高エナンチオ選択的に得ることができた。次に非対称1-アリール-3-アルキル-1,3-ジケトンの不斉還元反応への適用を考え、まずコバルト錯体が存在する場合としない場合でアリールケトンとアルキルケトンの混合物の還元を行った。その結果、水素化ホウ素ナトリウムのみではアルキルケトンが優先的に還元されるのに対し、コバルト錯体が存在するとアリールケトンが優先的に還元されることを見いだした。そこで、非対称1-アリール-3-アルキル-1,3-ジケトンを本不斉還元反応を用いて速度論的光学分割を行ったところ、アリール位に隣接するカルボニル基が選択的に還元されたβ-ヒドロキシケトンが高いレジオ、ジアステレオ及びエナンチオ選択性で得られることがわかった。さらにα-置換-β-ケトエステルの不斉還元反応では、塩基としてtert-ブトキシカリウムを添加することによりエノール化を伴いつつ高立体選択的に不斉還元反応が進行することを見いだした。例えば、3-(2-ナフチル)-3-オキソ-2-メチルプロピオン酸エチルの動力学的速度論的光学分割を伴う不斉還元反応では、収率82%、anti-体選択性94%、anti-体の不斉収率97%eeで対応する生成物を得ることができた。また、本不斉還元反応を用い天然物の中間体の合成も行った。すなわち、記憶促進効果などの有用な生理活性を持つSedamineの合成原料である1-フェニル-2-(2-ピリジル)エタノールを、2-フェナシルピリジンの不斉還元により高い光学収率で得ることに成功した。研究者は、β-ケトイミナトコバルト錯体を触媒とする不斉1,4-ボロヒドリド還元反応の展開を目指し、α,β-不飽和カルボン酸エステルの不斉1,4-還元反応について検討した。その結果、光学活性1,2-ジフェニル-1,2-エチレンジアミンより誘導されるケトイミナトコバルト錯体を触媒とし、カルボン酸エステルとしてイソプロピルエステルを用いることにより種々のβ,β-ジアルキル-α,β-不飽和カルボン酸エステルを定量的かつ高い不斉収率で対応する光学活性飽和エステルに還元することに成功した。今後は、さらに良好な不斉収率を与えるコバルト錯体触媒の開発、さらに広範囲のα,β-不飽和カルボン酸誘導体の不斉1,4還元反応に展開する。さらに、本反応を効率的な光学活性1,3ジアリール-1,3-プロパンジオール類の合成に応用した。光学活性1,3ジアリール-1,3-プロパンジオールとその誘導体は有効な合成方法が少ないため、良好な不斉配位子としての可能性があるにもかかわわらず、不斉反応への応用はあまり行われていない。そのため、不斉ボロヒドリド還元反応による方法は1,3-ジアリール-1,3-プロパンジオール類の有用な合成法になると考えた。種々検討の結果、光学活性1,2-ビス-(2,4,6-トリメチルフェニル)-1,2-エチレンジアミンより誘導されるケトイミナトコバルト錯体を触媒として用いることにより、1,3-ジアリール-1,3-プロパンジオンを定量的かつ高い不斉収率、高いジアステレオ選択性で対応する1,3-ジアリール-1,3-プロパンジオールに還元できることを見出した。本反応は10g以上の基質の還元反応にも容易に適応可能であり、得られた粗生成物を酢酸エチルから再結晶を一回行うことにより、光学的に純粋な1,3-プロパンジオールを得ることができる。

例えば、3-(2-ナフチル)-3-オキソ-2-メチルプロピオン酸エチルの動力学的速度論的光学分割を伴う不斉還元反応では、収率82%、anti-体選択性94%、anti-体の不斉収率97%eeで対応する生成物を得ることができた。また、本不斉還元反応を用い天然物の中間体の合成も行った。すなわち、記憶促進効果などの有用な生理活性を持つSedamineの合成原料である1-フェニル-2-(2-ピリジル)エタノールを、2-フェナシルピリジンの不斉還元により高い光学収率で得ることに成功した。
近代移行期の西国日本における地方都市と商人・流通業者

本研究では、日本近世・近代の地方都市や商人・流通業者にかかわる古文書史料の分析により、地方都市の内部構造と地方都市にかかわる商人・流通業者の商品流通機能・金融機能の変容過程を明らかにする。主な研究対象地域は播磨国西部・摂津国西部(現在の兵庫県南部)であり、江戸・大坂・京都等の中央都市についての研究と比較して、従来研究蓄積が少なかった地方都市やこれにかかわる有力者の分析を進めることで、地域や地方都市の観点から日本近世・近代の社会や経済の変化を捉え直すものである。