hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
心筋梗塞の一次予防を目指した遺伝子リスク診断システムの開発

公的データベースを用いて血管壁因子(高血圧・動脈硬化・血管攣縮・動脈瘤など)、血液因子(凝固線溶系、血小板機能など)、代謝因子(糖尿病・高脂血症・高ホモシステイン血症など)、神経因子(循環・血圧調節、内分泌機能など)を中心として包括的・総合的に心筋梗塞発症との関連が推定される138遺伝子を抜粋し、それらの遺伝子に存在する多型群の中で遺伝子発現またはタンパク質の構造・機能変化が推定される164多型を選択した。研究参加施設(岐阜県立3病院、弘前大学病院と関連病院)の協力により、患者対照集団3,483例(心筋梗塞1,192例、対照2,291例)のDNAサンプルおよび臨床データを収集した。これらのサンプルについて164多型(合計571,212多型)のタイピングを行った。これらの多型についてカイ2乗検定による関連解析スクリーニングを行い、P<0.05を呈したものについてさらにロジスティック回帰分析(年齢、性別、body mass index、喫煙頻度および高血圧・糖尿病・高脂血症の罹患頻度で補正)およびステップワイズ変数増加法により関連解析を行った。最終的に心筋梗塞発症に強く関連する(P<0.001)多型を4個確定し、この4個の多型の組み合わせにより、最大オッズ比が8.02(最小オッズ比は1)となることを見出した。またこれらの多型以外に、心筋梗塞発症と有意に関連する(P<0.05)多型を10個同定した。これらの14多型に年齢・性別および喫煙・高血圧・糖尿病・高脂血症などの冠動脈疾患危険因子を組み合わせた心筋梗塞のオーダーメイド予防システムを開発した(心筋梗塞の遺伝的リスク検出法:特願2006-025514)。本研究は三重大学医学部および共同研究施設の倫理委員会の承認を得ており、対象者から書面でインフォームドコンセントを得ている。研究代表者は、平成15年9月1日に三重大学生命科学研究支援センターヒト機能ゲノミクス部門教授に就任したため、本実績報告書には三重大学生命科学研究支援センター着任後の平成15年9月から平成16年3月までの研究実績について記載する。研究参加施設である岐阜県立3病院(県立岐阜病院、県立多治見病院、県立下呂温泉病院)および弘前大学病院とその関連病院(横浜総合病院、黎明郷病院)でDNAサンプルおよび臨床背景データの収集を行った。本研究は、財団法人岐阜県国際バイオ研究所、県立岐阜病院、県立多治見病院、県立下呂温泉病院、弘前大学医学部および三重大学医学部の倫理委員会の承認を得ており、対象者からは書面でインフォームドコンセントを得た後に採血を行った。平成15年9月から平成16年3月までの7ヶ月間に新たに1,724サンプルを収集し、既に保有していたサンプルと合わせ、総数3,718サンプルを収集した。さらに各症例について、年齢、性別、BMI、従来の冠動脈疾患危険因子(喫煙、高血圧、糖尿病、高脂血症、高尿酸血症)、冠動脈造影所見など詳細な臨床背景データを入力したデータベースを構築した。多型解析に関しては、心筋梗塞発症との関連が推定される候補遺伝子群から抜粋した140多型の中で日本人において多型が認められた124多型に関し、1,300例について解析を行った。既に解析済みの多型データと合わせ、総数175,200多型のデータベースを構築した。平成16年度は、DNAサンプルおよび臨床背景データの収集およびデータベース化を継続すると共に、臨床背景データおよび多型データを用いて関連解析を行い、心筋梗塞発症と有意に関連するゲノム多型を確定していく予定である。

研究参加施設である岐阜県立3病院(県立岐阜病院、県立多治見病院、県立下呂温泉病院)および弘前大学病院とその関連病院(黎明郷リハビリテーション病院)でDNAサンプルおよび臨床背景データの収集を行った。本研究は、三重大学医学部、財団法人岐阜県国際バイオ研究所、県立岐阜病院、県立多治見病院、県立下呂温泉病院、弘前大学医学部の倫理委員会の承認を得ており、対象者からは書面でインフォームドコンセントを得た後に採血を行った。平成16年度は1,300サンプル収集し、既に保有していたサンプルと合わせ、総数5,000サンプルを収集した。さらに各症例について、年齢、性別、BMI、従来の冠動脈疾患危険因子(喫煙、高血圧、糖尿病、高脂血症、高尿酸血症)、冠動脈造影所見など詳細な臨床背景データを入力したデータベースを構築した。多型解析に関しては、心筋梗塞発症との関連が推定される候補遺伝子群から抜粋した140多型を3,400例について解析した。既に解析済みの多型データと合わせ5,000例についての解析を完了し、総数700,000多型のデータベースを構築した。これらの多型情報と臨床情報による関連解析を行い、心筋梗塞発症と関連する多型を数個確定し、現在さらに詳細な解析を行っている。平成17年度は、DNAサンプルおよび臨床背景データの収集およびデータベース化を継続すると共に、できるだけ多くの候補遺伝子多型の解析を行う。さらに臨床背景データおよび多型データを用いて関連解析を行い、心筋梗塞発症に強く関連するゲノム多型を確定し、リスク診断システムを開発する予定である。公的データベースを用いて血管壁因子(高血圧・動脈硬化・血管攣縮・動脈瘤など)、血液因子(凝固線溶系、血小板機能など)、代謝因子(糖尿病・高脂血症・高ホモシステイン血症など)、神経因子(循環・血圧調節、内分泌機能など)を中心として包括的・総合的に心筋梗塞発症との関連が推定される138遺伝子を抜粋し、それらの遺伝子に存在する多型群の中で遺伝子発現またはタンパク質の構造・機能変化が推定される164多型を選択した。研究参加施設(岐阜県立3病院、弘前大学病院と関連病院)の協力により、患者対照集団3,483例(心筋梗塞1,192例、対照2,291例)のDNAサンプルおよび臨床データを収集した。これらのサンプルについて164多型(合計571,212多型)のタイピングを行った。これらの多型についてカイ2乗検定による関連解析スクリーニングを行い、P<0.05を呈したものについてさらにロジスティック回帰分析(年齢、性別、body mass index、喫煙頻度および高血圧・糖尿病・高脂血症の罹患頻度で補正)およびステップワイズ変数増加法により関連解析を行った。最終的に心筋梗塞発症に強く関連する(P<0.001)多型を4個確定し、この4個の多型の組み合わせにより、最大オッズ比が8.02(最小オッズ比は1)となることを見出した。またこれらの多型以外に、心筋梗塞発症と有意に関連する(P<0.05)多型を10個同定した。これらの14多型に年齢・性別および従来の冠動脈疾患危険因子を組み合わせた心筋梗塞のオーダーメイド予防システムを開発した(心筋梗塞の遺伝的リスク検出法:特願2006-025514)。本研究は三重大学医学部および共同研究施設の倫理委員会の承認を得ており、対象者から書面でインフォームドコンセントを得ている。
DMBA誘発舌癌における各種腫瘍マ-カ-に関する血清学的組識化学的研究

DMBA誘発ハムスタ-舌癌を用いて放射線照射に伴うポリアミン変動とセフアランチンの影響を検討した。癌組織ではプトレシン、カダベリン、スペルミジンの有意な増加を認めた。X線照射により舌癌中のポリアミン量は大幅な減少を示した。セフアランチン投与時に、舌癌中のポリアミン量は対照癌動物との差は認められず、セフアランチンの抗腫瘍作用は認められなかった。X線照射とセフアランチン投与を併用した場合、X線照射による腫瘍組織中のポリアミン減少は増強された。DMBA塗布、アクチノマイシンD単独投与においてヒスチヂン脱炭酸酵素およびオルニチン脱炭酸酵素の活性誘導は軽度であったが、DMBA塗布とアクチノマイシンD投与の併用はヒスチヂン脱炭酸酵素の活性を著しく増加させた。ついで放射線照射に伴うTPAの動態について検討した。ハムスタ-における血中TPA値は癌発生に伴い増加する傾向にあったが、照射後の動態は一定の傾向を示さなかった。TPA・B1抗体とPKKー1は舌癌組織、正常舌上皮の両検体でケラチンサブユニットNo.18(45kd)を認識し、TPA・B1抗体は増殖活性の高い部分やより分化度の低い癌組織においてPKKー1陽性細胞に一致した局在を示した。放射線照射によって生じた癌胞巣壊死組織には両者は陰性であった。従ってTPA・B1抗体は扁平上皮癌の放射線効果をあらわす血清学的なマ-カ-であるとともに、同一抗体単独あるいは抗Brdu抗体との併用による免疫組織化学染色法においても放射線照射後の病理組織変化を知る上で極めて有用な方法と考えられた。DMBA誘発ハムスタ-舌癌の発癌過程および、発生した腫瘍に対する放射線照射における細胞骨格の変化を免疫組織化学的に検討した結果、正常舌上皮においてTotal Keratinは、重層扁平上皮全層にわたり、均一な染色性を示し、TPAおよびモノクロナ-ル抗サイトケラチンPKK-1は基底細胞層にのみ陽性を示した。癌組織において、Total Keratinは、胞巣内で、分化度に応じてモザイク状の染色パタ-ンを示し、胞巣全体で陽性強陽性であったのに対し、TPA、PKK-1はいずれも癌組織中の増殖能の強い部分で強染を示し、他の部位では総じて弱染非染であった。放射線照射の影響に関して、Total Keratinにおいては、染色パタ-ンの変化はみられなかったが、TPA、PKK-1は照射効果の現れた部位で染色度が低下する傾向が認められた。TPAとPKK-1との染色パタ-ンが極めて類似しているため、両者が同一であるか否かを現在検討中である。血清中TPA値は、正常群、発癌群、発癌照射群の各群の間で有意差は認められなかった。一方放射線照射後舌腫瘍中のポリアミン量は、大幅な減少を示した。セファランチン投与のみでは舌癌中のポリアミン量は対照癌動物との差は認められず、従ってセファランチンの抗腫瘍作用は認められなかった。放射線照射とセファランチン投与を併用した場合、放射線照射による腫瘍組織中のポリアミン減少作用は増強された。DMBA塗布、あるいはアクチノマイシンの生成酵素であるヒスチジン脱炭酸酵素およびオルニチン脱炭酸酵素の活性誘導は軽度であった。なお血清中ポリアミン量の変動については測定中である。ゴ-ルデンハムスタ-を用い以下の3群に分け、実験を行った。1群ではエ-テル麻酔下で舌左側縁中1/3を歯科用クレンザ-で数回擦過、ただちにDMBAの1%アセトン溶液約0.2ml塗布した。2群ではアクチノマイシンDを1.0mg/Kgを腹腔内注射した。3群ではDMBA塗布直後にアクチノマイシンDを投与した。

これらの処置後4および6時間後舌を摘出、HDC、ODC活性の測定を行った。DMBA塗布後4および6時間後におけるヒスタミンおよびプトレシン生成酵素であるHDC、ODC活性はともにわずかな増加を認めた。またアクチノマイシンD投与によりDMBA塗布同様に両者はわずかな活性の増加が認められた。一方DMBA塗布後ただちにアクチノマイシンDを投与した場合、HDC活性は著明な増加を示したが、ODC活性はDMBA塗布時と同様のレベルにとどまった。次いで腫瘍形成時の放射線照射、アクチノマイシン投与の効果についてはさらに検討中である。ハムスタ-における血中TPA値は癌発生に伴い増加する傾向にあったが、照射後の動態は一定の傾向を示さなかった。血中ポリアミンについてはさらに検討中である。TPA・B1抗体とPKKー1はともに舌癌組織、正常舌上皮の両検体でケラチンサブユニットNo.18(45kd)を認識した。また免疫組織染色においてTPA・B1抗体は増殖活性の高い部位やより分化の低い癌組織においてPKKー1陽性細胞に一致した局在を示した。放射線照射による癌病巣壊死組織においてTPA・B1抗体抗BrdU抗体ともに陰性であった。
クリティカル・リーディングのための英語教授法開発

本研究は、日本の中等教育段階の英語学習者を対象にしたクリティカル・リーディングの英語教授法の開発研究である。クリティカル・リーディングのための枠組み構築と、枠組みを使用した指導事例の作成を行った。クリティカル・リーディングの枠組みは、テクストの書き手、読み手、その他の読み手の視点から、テクストで使用されている表現や情報を根拠に解釈したり、社会文化的コンテクストと関係づけて解釈するためのキー・クエスチョンで構成されている。この枠組みは教師の発問づくりに役立てられるよう作成したものであるが、学習者が自ら読みの観点や問いを作って主体的に読み進めるために役立てられることも示唆された。本研究の目的はクリティカル・リーディングの教授法を開発し、英語教材を開発するための示唆を得ることである。3年計画の1年目にあたる平成25年度は、既に作成済みのクリティカル・リーディングのための「発問チェックリスト」を、年間を通して高等学校英語科教諭2名に使用してもらい、ディスカッションや授業観察を通して、共にリストやそれを使用した授業の問題点や可能性を探った。さらに多くの意見を得るために、6月に中部地区英語教育学会で「発問チェックリスト」に関する口頭発表を行った。また、12月には、中部地区英語教育学会長野地区研究会で講演を行い、クリティカル・リーディングを異文化理解の視点から議論した。平成26年3月には、渡英し、研究協力者とクリティカル・リーディング研究に関する海外の動向について話し合った。研究協力者や様々な研究者から得られた主な知見は、クリティカル・リーディングの「発問チェックリスト」は教師だけでなく、生徒自身も使用できるものだということである。教師からの発問に誘導されて批判的に読むのではなく、リストを使うことで生徒自身が主体的に発問を考えられるようになるのではないかとの意見を多方面から得ることができた。また、どのように読めば批判的に読めたことになるかという評価規準を考える上でも参考になるとの意見も得られた。生徒の主体的な批判読みを促せるような指導や、生徒にもわかる「発問チェックリスト」の在り方を考える上で参考になる意見を得られた。本研究の目的は、クリティカル・リーディングの教材開発のための示唆を得るために、英語リーディング教材を使用して、学習者にテキストを批判的に読ませるための教授法を開発することである。研究期間は3年間である。日本国内でのクリティカル・リーディングの研究は、大学生以上の英語学習者を対象としたものが多く、大学入学以前の学習者を対象としたものはほとんどないのが現状である。本研究では、日本の中等教育の英語の授業で活用可能なクリティカル・リーディングの教授法を開発する。研究の2年目にあたる平成26年度は、中部地区英語教育学会山梨大会で、英語の授業で文化を扱う際の問題点と可能性について口頭発表を行った。英語の教科書で扱われる文化に関するテクストをクリティカル・リーディングの授業でどのように使用するべきかについて示唆を得ることができた。口頭発表の内容は中部地区英語教育学会の研究紀要に論文として掲載された。平成25年度に行う予定であった、英語版のクリティカル・リーディングのための「発問チェックリスト」の修正も行った。修正したリストに関して、British Association for Applied Linguistics (BAAL)の国際会議でポスター発表を行い、リストの表記内容の不明瞭な点について指摘を受けた。参加者からの助言等を参考に、更なるリストの修正とリストの日本語版リストの作成も行った。3年計画の最終年度にあたる平成27年度は次の4点を行った。(1)既に作成済みの「クリティカル・リーディングのための発問チェックリスト」を「クリティカル・リーディングの枠組み」と変更し、この枠組みを、テクストの「書き手」、「読者としての自分」、「その他の読み手」の3つの視点から、テクストを根拠に解釈する「テクスト的解釈」と社会・文化的背景とテクストを関連づける「社会文化的解釈」の2通りの解釈を促すキー・クエスチョンで構成した。(2)この枠組みを基に中学校英語検定教科書のリーディング教材の発問を作り、信州大学教育学部附属長野中学校教育研究会のワークショップと長野県英語教育研修会全県大会の講演会でクリティカル・リーディングの理論と発問づくりの方法について説明した。(3)さらに、中学校の現職英語教員2名にクリティカル・リーディングの枠組みを使用してリーディングの授業を行ってもらったところ、テクストの内容理解にとどまらない、行間を読む行為や書き手と生徒自身の文化的、歴史的背景について考えながらテクストで使用されている表現を吟味する生徒の姿が見られた。その一方で、英単語の意味や文法の理解に困難を抱える生徒は、批判的に読むという行為に至るまでに時間がかかり、適宜、丁寧な支援が必要であることもわかった。(4)その他に、British Association for Applied Linguisticsの研究大会で口頭発表を行い、国内外の研究者と研究成果を共有した。

この枠組みは教師の発問づくりに役立てられるよう作成したものであるが、学習者が自ら読みの観点や問いを作って主体的に読み進めるために役立てられることも示唆された。平成25年度に行えなかった「発問チェックリスト」の修正を平成26年度は行うことができた。当初の予定通り、本研究の中間発表を国内及び国外の研究大会で行うことはできたが、クリティカル・リーディングの実践に関するデータを収集することはできなかった。理由として、中間発表や論文執筆、文献検索に多くの時間をかけたことがあげられる。平成27年度の計画は研究成果のまとめと報告のみであったが、実践に関するデータの収集を10月頃まで行う予定である。言語学・外国語教育当初、高等学校の教員と生徒のみを本研究の対象としていたが、中学校にまで対象を広げ、本研究に関心を持ち、無理なく参加することができる協力者が得られるよう努める。そのために、本研究に関するワークショップや口頭発表を研究会や本研究者が勤務する大学の附属学校園で行う。また、研究協力者にとって負担とならないよう、収集するデータの種類を、授業の録画ビデオと研究協力者へのインタビュー、生徒のパフォーマンス収集のみに限定する。当初の実施計画では平成25年度中に「発問チェックリスト」の修正を行う予定であったが、年度途中の10月に研究者の所属機関が変わったことで、予定通りのペースで研究を進めることが困難となった。研究環境を再度整えるのに時間がかかり、また、国内の研究協力者と物理的な距離ができたことで、予定していたスケジュールで会うことが難しくなった。しかし、26年度は研究環境も整い、研究協力者との会合も無理のないスケジュールで行うことができるため、昨年度の遅れは取り戻すことが可能である。平成26年度前半に「発問チェックリスト」を修正し、後半は研究協力者に修正したリストを使用してクリティカル・リーディングの授業を行ってもらう。研究協力者の授業を観察したり、インタビューを行うことで、具体的な指導方法や手順の在り方を検討する。また、生徒に対してはアンケート調査を行い、クリティカル・リーディングの授業に関する意見を収集する。研究成果の中間発表として、9月にイギリスで開催されるBritish Association for Applied Linguistics (BAAL)の国際会議でポスター発表を行い、海外の研究者や教育者から研究内容や成果についてフィードバックを得る。日本では、中部地区英語教育学会、全国英語教育学会、日英・英語教育学会のいずれかの研究大会で口頭発表を行う計画である。
職業と家族とパーソナリティについての長期追跡調査の日米比較分析

日米のポスト産業化期の人々の生活と、社会意識の変化を追う長期追跡パネル・データを解析し、2つの社会に共通する傾向と、文化的差異を見出した。日本社会は1980年前後から2000年代中ごろまで、社会構造、家族構造、職業構造ではおおよそ安定した状態にあった。そのため、この時代を生きた人びとにみられる社会意識の変容は、原則的には個人の加齢による変化を主要因とするものであった。しかしそうした安定性を前提としたうえで、いくつかの重要な価値変動の経過も観察された。現代日本社会における社会階層とパーソナリティの関連の研究は重要である。そこで、日米比較という視点で、過去30年の日本人のライフコースを論じる。その方法は自らが実施収集した社会調査データを、比較対照のアメリカにおける社会調査データと比較するというものである。比較の結果については、国内外で積極的に発表し、知見を同分野の学術研究の進展に役立てる。本年度は、2006年度に実査収集した日本における面接調査データを整理して、全情報を数値入力した。この作業は、1995年に実施されたアメリカ調査との比較可能性を確保する形で進められた。この数値データは、19791982年実施の第一波面接調査のデータと統合されて、時系列分析が可能なデータセットとして完成し、研究分担者に配られた。現在、共分散構造方程式モデルなどを適用して分析の過程にある。これらを実施する過程では、2007年8月にアメリカ国立衛生研究所のスクーラー博士と、今後の日米比較研究の打ち合わせを行っている。9月には、日本の調査プロジェクトの回収結果と基礎的な分析結果をもとに、日本家族社会学会大会において2本の報告を行っている。2007年11月には、先行研究の成果や理論枠組みについて検討を加えた専門書、『階層化する社会意識職業とパーソナリティの計量社会学』を吉川徹編著で市販刊行した。そこには研究分担者である直井道子、岩渕亜希子のほか、直井優、松本かおり、長松奈美江、米田幸弘による8本の研究論文を収録している。2008年1月には、研究協力者である大学院生田靡裕祐が共同研究をさらに進めるために、アメリカ国立衛生研究所に滞在して計量分析を行っている。また2008年2月にはアメリカのハワイ大学日本研究センターと、カナダのブリティッシュ・コロンビア大学日本研究センターの招きにより、日米比較分析の結果を報告している。日本社会において28年のインターバルをもって実施された長期追跡パネル調査のデータを、整理し分析を進めていった。分析は(1)職業と家族とパーソナリティの関係性の日米の比較、(2)日本人のものの考え方の変化の把握という2つの方向性をもってなされた。(1)については、年度前半で比較可能なデータセットと分析モデルを作成した。そのうえでアメリカの比較データの分析に携わってきたメリーランド州立大学のSchooler教授と共同で、共分散構造方程式モデルを用いた分析を行なった。その結果、アメリカのデータで明らかにされている、職業条件とパーソナリティの交互作用効果が日本においてもほぼ同様の形で見出されることが明らかになった。(2)については、男性と女性という別々のサブサンプルを用いて、記述的な分析を数多く重ね、全体の傾向の把握に努めた。具体的には福祉、幸福、職業意識、価値観などについてその人生全体における変化が明らかになった。年度中盤以降には、分析結果をまとめ学会発表や論文投稿、およびその準備作業を行なった。すでにその成果の一部は、アメリカ老年学会、Anthropology Japan in Japan学会での英文報告、日本社会学会、数理社会学会での報告、北海道大学、東北大学などでのシンポジウムで公開している。その結果、同じ分野の専門家からレビューやコメントを受け、研究の細かな方針を調整することができた。分析技法の習得や、研究交流のため国内外の学会参加や資料収集にも努めている。このほか現在投稿中のもの、投稿の準備段階にあるものなども数多い。また、関連する研究を一般書としても刊行した。本年度は、当初の計画どおりに日米比較データの分析を進め、その研究成果を順次報告、公開した。第一に計画していた学会発表にかんしては、国内学会2回、国際学会1回の計3回を行なっている。第二に計画していた刊行物としては、全370ページの報告書冊子を作成した。ここには調査の経過と、学説の整理、基礎分析、応用分析などの一連の成果がまとめられている。これはpdfファイルでウェブ上に公開されている。ウェブ公開と並行して、調査対象者や研究者など200件については冊子体を送付した。なお、この報告書は本科学研究費補助金研究に先行して平成16年度から実施されていた「職業と家族とパーソナリティについての同一パネル長期追跡調査」の研究成果報告を兼ねたものとなっている。現在、この報告書をベースに、本研究の成果を一般書籍として刊行すべく、準備を進めている。第三に学術論文業績としては、協力研究者によって本データを用いた学術論文が計2本発表されている。

この他に博士学位論文3本において、本調査データに基づいた研究が展開されている。第四点目としては、調査データのWEB上での公開を進めた。まずアメリカの共同研究先から公開の許諾を得て、日米比較分析が可能なかたちの公開用のデータセットの作成を完了した。そして2010年1月に日本語版、英語版のデータの供用を開始している。こうした一連の研究により、日米のライフコースの違いや同質性、日本型福祉社会の実態、仕事にかんする価値観変容などが明らかになっている。現時点で研究計画はほぼ達成された状態にあるが、投稿中の論文も複数存在しており、次年度には学会発表の予定もある。これらを順調に進めていくことが、来年度以降の目標となる。研究の最終年度にあたる本年度は、日米で過去40年の時間をかけて実施してきた長期追跡パネル調査のデータを比較分析し、その知見をまとめた。具体的には以下の成果を挙げることができた。第一に、シンポジウムや講演、コラム執筆などの機会に、本研究で得られた日米比較データが、大阪大学人間科学研究科に設置されている社会調査データアーカイブSRDQにおいて、英語版、日本語版ともに公開されていることを広く伝え、データの二次的な利用の促進に努めた。第二に、自らの研究グループのメンバーによる分析結果の報告に務めた。2010年8月に開催されたアメリカ社会学会では、日米比較分析の主要な部分にかんして計量モデルを用いた学会報告を行なった。2010年5月には関西社会学会において、1つのセッションを専有して4本の報告を行ない、中高年期の生活と意識の関係についての知見に焦点を絞った成果報告をした。この他に数理社会学会大会においては、パネル調査における意識項目の利用の妥当性についての調査方法論にかかわる報告を行なった。第三に、この研究計画とその前の研究計画の過去6年間の研究の集大成として、計量社会学の専門書を市販刊行すべく準備を行なった。残念ながら年度内の刊行は叶わなかったが、研究会を重ねて、各自の執筆分担を明確にし、原稿を作成した。あわせて出版社との折衝を行ない、2011年9月に書籍を刊行することを内定させた。第四に、日米比較研究のアメリカ側の共同研究先であるメリーランド大学のスクーラー教授との間で、研究レビューや成果についての意見交換を行ない、今後の研究設計と分析計画を立てた。
生活習慣病形成におけるリンパ管システム破綻の役割の解明

本研究は、リンパ管の生活習慣病への関与を明らかにするため検討を行った。肥満2型糖尿病モデルマウスの膵臓ではリンパ管が増生しており、膵島においてVEGF-Cの発現が上昇していた。In vitroでの検討では、IL-1βやTNF-αにより膵α・β細胞でのVEGF-Cの発現が誘導された。以上より、糖尿病、肥満で発現が上昇する炎症性サイトカインが膵島でのVEGF-Cの発現を誘導し、膵リンパ管の増生をもたらすことが示唆された。本研究では、動脈、静脈に次ぐ第3の脈管系に位置づけられながら、未だその生理学的・病的意義が十分に確立していない「リンパ管システム」に焦点をあて、「リンパ管の機能異常が生活習慣病形成に寄与する」との仮説のもと研究を進めている。これまで、リンパ管内皮細胞に発現しているVEGFR-3(VEGF-C受容体)の変異マウスでは皮下リンパ管が減少し脂肪細胞の過剰蓄積を認めることが示されるなど、リンパ管と生活習慣病結びつける報告が散見される。そこで、平成23年度の研究課題として、肥満や糖尿病モデルマウスにおけるリンパ管の発達に関して検討を行った。モデルマウスとして肥満2型糖尿病モデルであるob/obマウス、db/dbマウス、KKAyマウス、1型糖尿病モデルとしてAkitaマウス(Ins2 Akita)を使用した。マウス膵臓の新鮮凍結切片を作成しリンパ管内皮細胞のマーカーである抗LYVE-1抗体を用いて検討したところ、ob/obマウス、KKAyマウス、AkitaマウスではWTに比べてリンパ管が多く、db/dbマウスでは少なかった。膵島との関連ではob/obマウス、KKAyマウスにおいて特に肥大した縢島の周辺にリンパ管を認めた。この結果は肥満や糖尿病に伴って膵臓におけるリンパ管の発達が明らかに変化することを示している。これらの結果を踏まえ、リンパ管形成異常が代謝性疾患の病態にどのように関わるかを現在検討中である。その手法として、VEGF-C発現抑性作用を有することが近年報告されているCOX2阻害剤やVEGF-C、FoxC2遺伝子ノックアウトマウス等のリンパ管新生に異常を来たすマウスを利用しながら、肥満、糖、脂質代謝やさらには動脈硬化の発症・進展機序にも焦点をあてて研究を進めている。また動脈硬化モデルマウスにおけるリンパ管機能の解析として現在、粥状動脈硬化促進性アポEノックアウトマウス及び野生型マウスに高コレステロール餌を負荷し、粥腫におけるリンパ管の数や分布を検討している。さらにヒトリンパ管内皮細胞機能に対するアディポサイトカインの効果に関しても検討を進めている。本研究では、未だその生理学的・病的意義が確立していない「リンパ管システム」に焦点をあて、「リンパ管の機能異常が生活習慣病形成に寄与する」との仮説のもと研究を進めている。まず、肥満2型糖尿病モデル(ob/ob、db/db、KKAyマウス)、1型糖尿病モデル(Akitaマウス)を用いて免疫染色を行ったところ、いずれのモデルマウスでも膵リンパ管が増生していた。このことは、肥満や糖尿病に伴って膵リンパ管の発達が変化することを示している。特に肥大膵島周辺にリンパ管が密着しており、膵島からの何らかの因子がリンパ管新生を促していることが示唆された。そこで、強力なリンパ管新生因子であるVEGF-Cの発現をリアルタイムPCRで解析したところ、ob/obマウス、高脂肪餌負荷マウスの膵島ではそれぞれ10.4倍、2.7倍に発現が上昇していた。免疫染色および、培養細胞を用いたRT-PCRでは、膵α、β細胞ともにVEGF-Cを発現しており、さらに、その発現はIL-1βやTNFαで誘導され、NF-κB阻害剤により抑制された。このことから、糖尿病、肥満で発現が上昇するTNFαやIL-1βが膵α、β細胞でのVEGF-Cの発現を誘導し、膵リンパ管の増生をもたらすことが示唆された。また、膵α、β細胞におけるVEGF受容体の発現を解析したところ、両者においてVEGF-C受容体であるVEGFR-3の発現を認め、膵内分泌細胞において、VEGF-Cがオートクラインに働く可能性が考えられた。さらに、動脈硬化巣においても、VEGF-Cが高発現していることやリンパ管が単球/マクロファージの排出に関与するという報告がある。そこで、野生型マウスおよび、高コレステロール餌負荷アポE欠損マウスにおいて血管壁でのリンパ管網を免疫染色により検討したが、正常大動脈壁ではリンパ管は極めて少なく、粥腫においてもその増生はみられなかった。まず、肥満や糖尿病モデルマウスにおけるリンパ管の発達に関して検討を行った。

肥満2型糖尿病モデルとしてob/obマウス、db/dbマウス、KKAyマウス、1型糖尿病モデルとしてAkitaマウスを使用した。各モデルマウスにおける膵リンパ管網を、リンパ管内皮細胞のマーカーである抗LYVE-1抗体を用いた免疫染色にて検討したところ、1型のみならず、肥満2型糖尿病モデルマウスの膵臓でもリンパ管が増生していた。この結果は、肥満や糖尿病に伴って膵臓におけるリンパ管の発達が明らかに変化することを示している。特に肥大した膵島の周辺にリンパ管が密着して存在しており、膵島から何らかの因子が、リンパ管新生を促進していることが示唆された。そこで、強力なリンパ管新生促進因子であるVEGF-Cに着目して検討を進めた。単離膵島におけるVEGF-Cの発現をリアルタイムPCRにて解析したところ、ob/obマウスでは野生型に比較してVEGF-Cの発現が約10倍に上昇していた。免疫染色および培養細胞を用いたRT-PCRによる検討では、VEGF-Cは膵α細胞、膵β細胞の両者で発現を認めた。培養膵α細胞、膵β細胞、単離膵島を用いたin vitroの検討において、IL-1βやTNF-αといった、糖尿病や肥満と関連する炎症性因子によりVEGF-C mRNAの発現が誘導され、この発現誘導はNF-κB阻害剤により抑制された。このことより、糖尿病、肥満状態で発現が上昇するTNFαやIL-1βが膵α細胞、膵β細胞でのVEGF-Cの発現を誘導し、膵リンパ管の増生を促していることが示唆された。平成23年度の計画では(1)肥満・糖尿病モデルマウスにおける脂肪、膵臓におけるリンパ管の評価、(2)動脈硬化モデルにおけるリンパ機能の解析、(3)アディポサイトカインによるリンパ管内皮細胞機能変化の解析を目標に掲げた。(1)に関してほぼ結果を揃えることができた。(2)に関しては動脈硬化モデルマウスであるApoEマウスの交配が予定より遅れ解析が遅れたが、交配に関する問題は解決しており漸次進めている。(3)に関しては現在基礎検討としてヒトリンパ管内皮細胞に対するVEGF-Cの効果に関して検討しており、終了後にアディポサイトカインの効果を観察してゆく予定である。25年度が最終年度であるため、記入しない。平成24年度の計画では、1肥満・糖尿病モデルマウスにおける脂肪、膵臓におけるリンパ管の評価、機能解析、2動脈硬化モデルにおけるリンパ機能の解析、3アディポサイトカインによるリンパ管内皮細胞機能変化の解析を目標に掲げた。1に関しては糖尿病・肥満におけるリンパ管の変化、そのメカニズムに関して結果が揃ってきている。2に関しては動脈硬化モデルマウスであるアポE欠損マウスに高コレステロール負荷を行い、粥状動脈硬化巣を作製しており、近日中に解析結果が得られる予定である。3に関しては糖尿病状態での膵リンパ管の増生に膵島でのVEGF-Cの発現亢進が関与していることが示唆されたため、TNFα、レプチン、アディポネクチンのVEGF-C発現亢進を介したリンパ管新生調節機構を解析した。今後は、これらのアディポサイトカインのリンパ管内皮細胞への直接作用も検討していく予定である。平成23年度の結果により、肥満や糖尿病に伴ってリンパ管の発達に変化が生じることが明らかとなった。そこで平成24年度には、リンパ管の発達変化と肥満、糖、脂質代謝、動脈硬化との直接的な因果関係を探るため、リンパ管形成異常モデルにおける脂肪・膵β細胞機能や動脈硬化に関して解析を予定している。
自然風に近い乱流構造が再現できる"風の数値シミュレーター"の開発研究

本研究の目的は、地表面粗度や大気安定度の変化に対応でき、且つより自然風に近い変動流入風を作成できる"風の数値シミュレーター"の開発である。これは大気乱流境界層の性質を表す乱流統計量の空間分布のほかに、大気乱流境界層に含まれている瞬間的な乱流構造も再現できるものである。本年度では以下の研究を行った。1.異なる地表面粗度に対応する乱流境界層のシミュレーション前年度では、一様ラフネスブロック配置とランダム配置の2種類のラフネスブロック状態を考え、ラフネスブロックの配置状態やラフネス密度による乱流境界層の性質の変化を調べていたが、今年度では、前年度の結果を踏まえて、異なる地表面粗度をもつ乱流境界層のシミュレーションを行った。実験結果と比較することにより、シミュレーションで得られた変動流入風の性質と妥当性を示した。2.二次元丘陵地まわりの乱流特性に関する研究本研究の応用として、得られた変動流入風を用い、二次元丘陵地まわりの流れのシミュレーションを行った。二次元丘陵地まわりの乱流構造に与える変動流入の影響や地表面粗度の役割を研究するとともに、工学的に重要である風の増速率への地表面粗度の影響を示した。本年度で以下の研究を行った。1.異なる地表面粗度に対応する乱流境界層のシミュレーション異なる地表面粗度に対して乱流境界層を生成する際、その地表面粗度に対応したラフネスブロックを計算領域に入れて、Lundの準周期条件を用いて空間的に発達する乱流境界層をシミュレーションした。一様ラフネスブロック配置とランダム配置という2種類のラフネスブロック状態を考え、ラフネスブロックの配置状態やラフネス密度による乱流境界層の性質の変化を調べている。また、数値シミュレーションの結果を検証するために風洞実験を行い、乱流境界層の統計量を計測した。2."風の数値シミュレーター"を開発するためのデータの取得熱の効果も含まれた乱流境界層の風洞実験を実施し、安定・不安定の大気乱流境界層の乱流構造を把握し、乱流強度などの統計量を計測した。都市部を想定した地表面としてラフネスを配置した平板上の風洞実験を行った。外部からの熱的擾乱とラフネスブロックによる機械的擾乱を組み合わせることにより、それぞれの効果のバランスについて検討している。得られた結果をモデル化し、"風の数値シミュレーター"に入れ込む。
分子間相互作用と高分子のダイナミックスのカップリング

分子認識における高分子効果は、古くから生化学や酵素化学において興味が持たれているが、人工的に合成された分子系でこれが詳細に検討されたことはほとんどない。われわれは、高分子や低分子でもうまくデザインされた系では、分子認識に伴うコンフォーメーションエネルギーの変化が大きくなりうることで、分子認識の駆動力となるのではないかという観点から研究を進めた。ポルフィリンを分子認識サイトとして用い、これに、外部環境によって相転移をすることが知られている高分子ゲルを結合させたゲルレセプターの合成を行った。ゲルとしては、N-isopropylacrylamideゲルを用い、ポルフィリンは、メソ位のフェニル基からアルキル鎖を介してビニル基をもつ誘導体を合成した。これらを架橋剤や、他のモノマーと共重合させることで、ゲルレセプターの合成を行った。分子認識の重要な指標である結合定数を評価するためには、吸収スペクトルを精密にはかる必要があり、そのためには、ゲルのかたまりを合成するよりも、ミクロゲルのコロイド分散液を合成した方が良いことが分かり、上記の共重合反応を撹拌しながら行い、ミクロゲルレセプターの合成も行った。これらのゲルレセプターが、分子認識のための疎水空間を有していることは、いろいろなアルキルピリジンの結合定数を測定することによって確認した。さらに、このミクロゲルレセプターは、アルブミンなどのタンパク質を認識し、この駆動力としては、タンパク質表面のイミダゾール基とポルフィリンの亜鉛との配位に加えて、タンパク質のもつ電荷とゲルの電荷との静電相互作用が協同的に働くことが分かり、タンパク質認識の新しいレセプターとなりうることを示した。最近、われわれは、タンパク質の機能を超えるような人工レセプター分子の開発に取り組んでいる。これまでの研究で、カルボキシレート基を多数表面にもつ分子は、生理活性を有する疎水カチオンやオリゴペプチドを特異的に認識し取り込むことを報告してきた。この人工レセプターでは、静電相互作用と疎水相互作用の協同的作用によって、レセプターの初期コンフォーメーションを不安定化し、そのことにより高い親和性が発現するものであるというメカニズムを提唱している。本研究では、人工レセプターに親水性を与える補助基としてアニオン性のカルボキシレート基ではなく中性のポリエチレンオキシドを導入した人工レセプターを合成し、親水性補助基の違いによる分子認識機能への効果を検討したので報告する。ポルフィリン亜鉛錯体にポリエチレンオキシドを導入した水溶性レセプター1-4を合成した。これらの人工レセプターのアルキルピリジンに対する水溶液中における結合定数を紫外可視分光法により求めた。レセプター1は、4-アルキルピリジンのアルキル鎖長がのびるとともに、結合の自由エネルギーが直線的に増大し、1つのメチレンあたりの自由エネルギー増は3.5kJ mol^<-1>となった。この値は、ポリエチレンオキシドを導入したほかの人工レセプター2-4の0.5-2.2kJ mol^<-1>や、カルボキシレート基をもつレセプターの示す1.5kJ mol^<-1>よりも大きい値となった。この値は、アルカン類の有機溶媒から水への相間移動の自由エネルギー変化3.2kJ mol^<-1>と同等であり、理想的な疎水相互作用が発現していると結論した。
天然より得られた抗腫瘍物質の作用機序解析と実験病態モデルでの評価

がん細胞の特性を利用して探索系を工夫し、天然から薬剤耐性克服物質、IL-6阻害物質、TRAIL活性増強物質を探索し、単離した活性物質を評価すると共に、すでに発見された物質の誘導体を合成しそれらの活性を評価した。2.IL-6活性阻害物質:生薬のセンソから単離した20,21S-epoxy-resibufogenin-formate(ERBF)のアセチル化体(ERBA)に顕著なIL-6依存性増殖MH-60細胞の増殖阻害を認めた。ERBAはIL-6受容体に結合してIL-6を阻害する競合的拮抗であった。放線菌由来IL-6活性阻害物質MadindolineAはgp-130に結合してIL-6の活性を阻害する特異的な作用を示す。この構造活性相関を調べたところ活性にはfuloindoline骨格に結合しているS配位の水酸基、メチレン基でR配位結合したdiketocyclopenteneの存在が必須であることが示された。誘導体C-18化合物はMadindolineAより強いIL-6阻害活性を示し、colon26誘発癌性悪液質マウスモデルにおいても顕著な悪液質改善作用が認められた。3.TRAIL増強物質の探索:ヒトT成人白血病細胞を用いてタイ産のBlumeabasamiferaよりmethyldihydroquercetin(MDQ)を単離した。アポトーシス誘導はAnnexin/PI染色にて確認した。本物質を添加するとPro-caspase-8の減少、caspase-9および-3のcleavageの増強が認められた。MDQとTRAILの併用はミトコンドリアの膜電位を低下させた。一方、BCL-2, BCL-xL, XIAP, c-IAP, survivine, Bak, Baxに変化はなかった。デスレセプターであるTRAIL-R2の発現がほぼ倍増していることがわかった。この事からアポトーシス増強のメカニズムはMDQによるデスレセプター発現増強によると思われる。がん細胞の特性を利用して探索系を工夫し、天然物から新規物質を発見しそれらの活性評価ならびに分子標的との関わりを調べた。マレーシアの植物(主としてKopcia属)からビンクリスチンあるいはドキソルビシン耐性細胞に対する効果を10倍強26倍増強する物質を5種単離した。これら化合物はAspidofractinine型に属するインドールアルカロイド化合物であった。一方これらとは別に30種類の物質を単離してその活性を調べたところ、9種類に活性が認められた。現在さらに詳細に検討している。さらに、イソプレノイド化合物43種を合成した。このなかで、No. N-5228はP-gpを発現しているKB/VJ-300細胞(VCRに対して約91倍耐性)に対して25μMの濃度でVCRに対する感受性を25倍高めた。また、DXRに対する感受性を感受性細胞と同等のレベルまで回復させた。N-5228はin vivoでも耐性克服作用を示す(T/C=40%)。N-5228はP-gpに結合し、KBおよびP388細胞の薬剤耐性を克服するものと考えられる。生薬センソより新規なIL-6阻害物質20S,21'-epoxy-resibufogenin-formate(ERBF)を単離した。ERBFはsubmaximalな増殖を示す1ng/mlのIL-2でのIL-2依存CTLL-2細胞、1ng/mlのIL-3依存Baf3細胞の増殖を阻害せず、2U/mlのTNFによるL929細胞の増殖抑制を阻害しなかった。さらにIL-4(10ng/ml)刺激によるU-937細胞表面でのFcεRII発現や20ng/mlのIL-8によるヒト好中球遊走、NGF刺激によるPC-12細胞の神経様細胞への分化も阻害しなかった。これに対し、ERBFはIL-6刺激によるPC-12細胞の神経様細胞への分化や、骨芽細胞と骨髄細胞の共培養による破骨細胞新生を用量依存的に抑制した(5μM以上の濃度)。また、Schild plot解析よりpA2は5.87±0.76、r=0.98であった。これらの結果よりERBFの阻害作用はIL-6特異的であり、競合拮抗的であること、さらにERFはIL-6とIL-6受容体の結合を阻害することがreceptor binding assayにより明らかとなった。今後、ヒトのモデルとなる実験系を用いて評価したい。がん細胞の特性を利用して探索系を工夫し、天然物から新規物質を発見しそれらの活性評価ならびに分子標的との関わりを調べる目的で研究を行った。マレーシアの植物からVCR耐性細胞に対する効果を5倍強35倍増強する物質を6種単離した。このなかで、No.C330とC264はP-gpを発現しているP388細胞(VCRに対して約10倍耐性)に対して25μMの濃度でVCRに対する感受性を25倍高めた。C330はin vivoでもVCR耐性克服作用を示す(T/C=50%)。C330はP-gpに結合し、P388細胞の薬剤耐性を克服するものと考えられる。Interleukin-6(IL-6)は生体の恒常性に関与する多機能性

サイトカインであるが、その過剰産生は癌性悪液質、骨粗鬆症、多発性骨髄腫等の主要因子として知られている。従ってIL-6活性阻害物質はこれら難治性疾患の新たな治療薬となる可能性がある。IL-6活性修飾物質探索の過程において生薬センソより得られた20S,21-epoxy-resibufogenin-3-formate (ERGF)に選択的IL-6阻害活性が認められた事から、その類縁化合物について構造活性相関を検討した。IL-6阻害活性はMH60細胞のIL-6依存性増殖抑制とIL-6非依存性増殖を指標として評価した。IL-6受容体への作用はreceptor binding assayにて評価した。14,15-Epoxy-bufalin (resibufogenin, Rg)は弱いながらIL-6阻害活性を示した。Rg-16-acetate (cinobufagin)、20,21-epoxy-bufalinにはIL-6活性阻害作用は認められなかった。一方、20,21-epoxy-Rgは増殖抑制作用が認められた。ERGFが選択的IL-6阻害作用を示すことから3位esterの誘導体を各種合成しその阻害活性を検討した結果、acetateにもっとも強いIL-6阻害活性のあることが認められた。IL-6阻害活性発現には20,21-及び13,14-位のepoxy基が、さらに、16位のH基が必要であった。3位ester基はIL-6選択性に重要であると思われる。また、20R,21-epoxyは細胞毒性のみが現れることから、IL-6受容体はR, S-配位に高い立体選択性を示すことが推測された。研究目的:がん細胞の特性を利用して探索系を工夫し、天然物から新規物質を発見しそれらの活性評価ならびに分子標的との関わりを調べる目的で研究を行っている。1.薬剤耐性克服物質の探索熱帯植物(マレーシアおよびタイ産)について耐性克服作用を示す物質の探索研究を行い、単離された85物質について薬剤耐性KB細胞で活性をしらべた。その結果、比較的優れた耐性克服作用が認められた物質が9種類であった。これら化合物はインドールアルカロイド化合物であり、vincristine(100ng/ml)に対して3.26倍程度耐性克服作用を示した。Tabernaemontana corymbosaより精製したconodiparine AおよびTabernaemontana divaricataより単離したconodusarineのin vivo (P388)での効果をしらべた結果、両物質共に優れた延命効果が得られ、その作用機序はP-gpに結合してその活性を阻害することが認められた。その他Agaricus blazeiよりユニークなステロイド骨格を持った耐性克服作用を示すAgariblazeisirols A and Bを単離した(Agariblazeisirols A and B)。2.TRAIL増強物質の探索ヒトT成人白血病細胞よりTRAIL/Apo2に低感受性の細胞株(KOB細胞)を用いてスクリーニング系を構築した。熱帯植物から単離された85物質について検討したところ、数種類の物質にTRAIL/Apo2の効果を10倍増強する作用が認められた。
米作単作地帯における巨大地主の展開過程に関する研究

本研究は頚城平野部で明治19年所有地価5万5800円(約180町歩)の大地主山田家の江戸期における成長過程を追求したものである。山田家は天和検地時点では自作上層に位置し、元禄期前後からの小規模かつ断片的な質地集積により、元文期には手作地主に成長した。その後の経過は史料を欠くが、宝暦初期の小規模な酒造業の開始を契機として地主的土地集積を展開し、天明期には14カ村に約280石を所持するに至る。その後も天保初期に至るまでは前の時期から引き続く緩やかな集積を継続していく。その結果所持規模は文化8年460石から天保4年700石へ増大し大地主の規模に達するが、経営的には大地主への準備期として位置づけられる。この間の経営は貸付地経営部門と金融部門とから構成されたが、収入の一部が「貯金」にされ土地集積には投下されない動向がみられ、全経営が地主的成長を目指す方針を採っていない。この経営方針は天保飢饉を契機に変化する。借入金を導入した大量集積が試みられ、安政元年1100石規模になった段階では小作米売却収入が次ぎの新たな土地集積を可能とし、金融部門により全経営の円滑な展開がはかられる体制が確立する。安政期の急激な集積の展開により万延元年には約1600石規模となるが、その後もさらに拡大を続けたと推定される。宝暦天保初期の長期にわたる緩やかな集積および天保以降幕末期の急激な大量集積のいずれの間も、圧倒的多数の農民が零細高持・無高となる徹底した階層分化が進展したことに注目を要するであろう。当初から予定していた旧巨大地主諸家所蔵文書について、特に棚卸などに類する経営関係文書を中心に調査・募集し、若干の整理を行い、巨大地主経営の概略を把握することができた。また併せて新潟県公文書館所蔵史料や新発田市立図書館所蔵新発田藩溝口氏関係文書、新潟県西蒲原群吉田町倉所尚史氏所蔵文書、新潟県中頸城群頸城村教育委員会所蔵山田・平石・白田家文書の調査・募集を行い、平成8年度においても継続調査を行なうことについて了承を得ることができた。調査成果と分析結果の詳細は平成8年度の調査・整理・分析と合わせて、同年度作成の研究報告書にまとめる予定である。平成7年度は米作単作地帯に関する他の研究成果の吸収にも努めた。越後と同様の大地主が生成・展開していた庄内地方については、阿部英樹『近世庄内地主の生成』('94,9月日本経済評論社)の書評を通じて見解を発表(「社会経済史学」'95,9月)した。さらに越後頸城平野部農村社会については、渡辺尚志編『近世米作単作地帯の村落社会』('95,11月岩田書院)の書評を通じて、調査成果の充実をはかる予定である。(「日本歴史」に発表予定)本研究は頚城平野部で明治19年所有地価5万5800円(約180町歩)の大地主山田家の江戸期における成長過程を追求したものである。その後の経過は史料を欠くが、宝麿初期の小規模な酒造業の開始を契機として地主的土地集積を展開し、天明期には14カ村に約280石を所持するに至る。

この間の経営は貸付地経営部門と金融部門とから構成されたが、収入の一部が「貯金」にされ土地集積には投下されない動向がみられ、全経営が地主的成長を目指す方針を採っていない。この経営方針は天保飢饉を契機に変化する。借入金を導入した大量集積が試みられ、安政元年1100石規模になった段階では小作米売却収入が次ぎの新たな土地集積を可能とし、金融部門により全経営の円滑な展開がはかられる体制が確立する。安政期の急激な集積の展開により万延元年には約1600石規模となるが、その後も、さらに拡大を続けたと推定される。宝麿天保初期の長期にわたる緩やかな集積および天保以降幕末期の急激な大量集積のいずれの間も、圧倒的多数の農民が零細高持・無高となる徹底した階層分化が進展したことに注目を要するであろう。