hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
伊達政宗が奨励した「食べられる庭」をモデルとした学校ビオトープの構築

以上の研究成果は、論文・学会発表等の形で公表を行い、東日本大震災後に学校の教育現場に求められている「環境教育・食教育・防災教育をドッキングさせたESD」の新たなモデルを提示することができた。仙台藩主・伊達政宗公(1567-1636)は、自給自足が可能な地域づくりを推進するために武家屋敷に多様な樹木を植栽することを奨励し、杜の都・仙台の礎を築いた。本研究では、1政宗公が推奨した「食べられる庭」をテーマとした自給的な暮らしの知恵を取り入れた学校ビオトープを構築し、2環境教育・食農教育・防災教育をドッキングさせたESDの実践を行い、3震災からの復興・発展を支える人材育成モデルを提示した。データ収集および分析、環境教育・食教育・防災教育の実践、ビオトープモデルの構築など、当初予定していたスケジュールどおり順調に研究が進展している。最終年度にあたる平成28年度は、以下の2点に焦点を絞って研究を進めていく。(1)宮城教育大学キャンパス内に設置した「食べられる庭」を活用して、環境教育・食教育・防災教育をドッキングさせたプログラムの実践を行う。さらに受講生へのアンケート調査を実施し、プログラムの評価を行う。(2)研究成果を総括し、「食べられる庭」をテーマとした学校ビオトープの普及、ESDプログラムの提案、持続可能な地域づくり(ネットワーク化)に取り組む。環境教育今後は、以下の2点に焦点を絞って研究を進めていく。(1)前年度に引き続き、宮城教育大学青葉山キャンパスに“学校ビオトープモデル"としての「食べられる庭」を構築する。ビオトープの維持・管理を行いながら、宮城教育大学の学部学生を対象にした環境教育・防災教育・食教育を中心としたESD(持続発展教育)を展開する。授業実践後は受講者へのアンケート調査を行い、「食べられる庭」を復元した学校ビオトープの評価・検討を行う。(2)研究成果を総括する形で、「杜の都」の再興(=持続可能な地域づくり)」に求められる基本的な考え方や技術指針をガイドラインとしてとりまとめる。また、仙台市環境局などと連携して、「食べられる庭」をテーマにした学校ビオトープの普及とネットワーク化に取り組む。人件費が当初の予定よりも少なく済んだため。歴史資料の収集・整理が順調に進展し、人件費が当初の予定よりも少なくすんだため。最終年度にあたるため、成果還元を目的とした学会発表の旅費として使用する。次年度以降はビオトープの構築および維持・管理により多くの人件費が必要となるため、そこで次年度使用額を使用したい。
アクチン標的型海洋産マクロリドの活性発現機構

本研究では海洋生物から得られたマクロリド化合物の作用メカニズム解明に取り組み、活性が強くユニークな低分子化合物を将来的に医薬品や研究ツールへと展開させていくための基盤を作ることを目指した。新規に単離された2種の生物活性マクロリドについて、1)構造決定、2)標的分子の同定、3)分子構造レベルでの作用機序の解明を行った。2種の新規化合物のうち22員環マクロリドは、絶対立体配置の決定に向けた結晶化に進展が見られ、結晶化に適した類縁体へと誘導することができた。誘導体の結晶化による絶対立体構造の決定と、アクチンと天然物の共結晶化は今後の課題としたい。一方、18員環マクロリドについては、標的タンパク質の同定と標的分子との結合様式の解明に成功した。本研究では、詳細な生物活性評価と既知化合物との活性プロファイルの比較を利用し、このマクロリドが既存のカルシウムポンプ阻害剤とは全く異なる炭素骨格を持っているにも関わらず、小胞体膜上カルシウムイオンポンプを強力に阻害することを明らかにした。さらに、東京大学分子細胞生物学研究所の豊島近教授との共同研究により、筋小胞体膜上カルシウムイオンポンプと18員環マクロリド配糖体(もしくはそのアグリコン)との共結晶化に成功し、X線結晶構造解析によりその結合様式を明らかにした。また細胞レベルでの生物活性を評価し、この18員環マクロリドがヒトがん細胞に対して小胞体ストレスを誘導することも分かった。現在、新しい作用機序で働く抗がん剤候補として、小胞体ストレスを誘導する低分子が注目されている。本研究で小胞体ストレスを誘導するマクロリドの作用機序が分子構造レベルで解明されたことにより、カルシウムポンプを標的とした新規の医薬シードや研究用阻害剤、化学プローブといった有用化合物の創出に貢献できるものと期待される。26年度が最終年度であるため、記入しない。目的:海洋生物から単離された新しいマクロリドの詳細な生物活性および作用機序の解明1.アクチン脱重合マクロリドの結晶化誘導体の合成現在、アクチンと本化合物の共結晶の作製に取り組み、Spring-8での測定を行う計画である。また、この新規マクロリドは未だ立体構造が決まっていないため、マクロリド単体での結晶化も試みている。実験の結果、マクロリド配糖体の糖部位の修飾により結晶性が大幅に上がることが明らかになった2.海洋産マクロリドの作用機序の解明作用機序が未解明であった海洋産マクロリドについて、1)本化合物が小胞体ストレスを誘導すること、2)小胞体膜上のカルシウムイオンポンプであるSERCAの阻害剤であること、を見出した。現在は、豊島近教授(東京大学)の協力を得て本化合物とSERCA1aの共結晶作製に取り組んでおり、今後その結合様式を明らかにしていく予定である。がん細胞に対する活性プロファイルを基にして、我々の化合物ががん細胞に対して小胞体ストレスを誘導することが明らかになった。そこで本化合物の局在観察のための蛍光プローブを合成した。小胞体に赤色蛍光タンパク質であるmCherryを過剰発現させたHeLa細胞を用い、顕微鏡観察を行った結果、蛍光プローブと小胞体の局在は一致した。後の実験でこの蛍光プローブは標的分子に結合しないことが判明したため、現在はこのプローブは使用していない。上記のがん細胞活性試験のプロファイルにより、タンプシガルギンと相同性があることが分かった。タプシガルギンの標的タンパク質であるSERCA(小胞体のカルシウムポンプ)に対する活性を調べた結果、本化合物はSERCA1a, 2aに対して、強い阻害活性を示すことが明らかになった。本マクロリドは、SERCAへの結合部位がタプシガルギンと異なる可能性が高く、生命科学分野の新たな研究試薬となることが期待される。

本研究で小胞体ストレスを誘導するマクロリドの作用機序が分子構造レベルで解明されたことにより、カルシウムポンプを標的とした新規の医薬シードや研究用阻害剤、化学プローブといった有用化合物の創出に貢献できるものと期待される。26年度が最終年度であるため、記入しない。本研究は海洋産マクロリド化合物の作用機序の解明を目指している。この中で、アクチンとの共結晶化は現在検討中であるが、同時に化合物の誘導化を平行して進めており、課題解決の糸口をつかむことができた。また、本研究の過程で我々の発見した海洋産マクロリドががん細胞に対して小胞体ストレスを引き起こすこと、標的タンパク質を同定し、共結晶の作製まで進展していることなど順調に結果が出ていることを挙げる。今後は、マクロリドのシグナル伝達経路への影響・化合物と標的分子の分子ー分子相互作用に着目して研究を推進する予定である。現在までの成果により、標的分子が明らかになっている。また、分子ー分子の相互作用に重要な共結晶の作製に既に取り組んでおり、良好な結果を得ている(未発表データ)。これは、本研究における律速段階を越えたことを意味する。さらに、本化合物のシグナル伝達経路への影響を評価した結果をまとめて、論文として成果を出す予定である。具体的には、マクロリドと標的タンパク質の共結晶を構造解析し、その結合様式・活性に重要な化学構造を明らかにする。これにより、医薬シード・研究ツールとして本化合物を用いる研究基盤を確立することができると考えている。
血管成熟化を制御する新規因子・アベリンの機能解析

我々のこれまでの研究により、apelinが新生血管の径を制御する血管成熟化因子であることが明らかになっている(H.Kidoya,et al.EMBO J.2008)。そこで、引き続きapelinの臨床応用を目的として、その分子機構の解明、およびその臨床応用への可能性の検討を行った。1、癌治療への応用について、apelinを用いた腫瘍血管正常化療法の検討を行った。腫瘍血管ではapelinの受容体であるAPJの発現が亢進しており、apelinを作用させることによって、腫瘍中の血管の形態的な成熟化が誘導できた。これらの成熟した血管は、血管透過性や物質浸潤性などの機能の点においても正常化しており、近年提唱されている腫瘍血管の正常化による抗腫瘍効果が得られることが確認できた。さらに、活性化樹状細胞の投与による免疫療法の効果を著しく高めることが示された。今後は、臨床応用を目指して具体的な治療方法の開発を行う予定である。2、これまでに、血管再生医療への応用を目的として、虚血性疾患に対するapelin遺伝子導入の治療効果について検討を行ってきた。その結果、下肢虚血マウスモデルでは、apelin遺伝子と血管新生因子であるVEGF遺伝子の同時投与により、血管新生および成熟化が効率よく誘導され、血流量の改善と壊死の抑制が確認された。さらに、apelinは血管透過性の亢進を抑制し、これまでの治療法では副作用として問題となっていた浮腫の発生を防ぐことが明らかになった。現在は臨床応用へ向けて、より効果的な投与法の開発についての検討を行っている。我々のこれまでの研究により、apelinが新生血管の径を制御する血管成熟化因子であることが明らかになっている(H. Kidoya, et. al. EMBO J.2008)。1、腫瘍血管新生に対するapelinの効果を検討するため、腫瘍血管でのapelinおよびその受容体であるAPJの発現を解析したところ、高レベルの発現が確認された。この結果から、apelinを標的とした治療法は腫瘍の血管に特異的に働くと予想され、副作用が少ないと期待される。実際にapelinを導入した腫瘍においては、血管の成熟化が認められており、機能的であることも明らかとなった。今後は、具体的な治療方法の開発を行う予定である。2、血管再生医療への応用を目的として、虚血時の血管におけるapelinの役割について検討したところ、apelinの非存在下(apelin遺伝子欠損マウス)においては虚血肢の著しい壊死が進行し、apelinの重要性が確認された。また、虚血部位の血管ではapelin受容体であるAPJの発現亢進も認められた。そこで、虚血性疾患に対するapelin遺伝子導入の治療効果を検討するため、下肢虚血マウスモデルを用いた解析を行った。その結果、apelin遺伝子と血管新生因子であるVEGF遺伝子の同時投与により、血管新生および成熟化が効率よく誘導され、血流量の改善と壊死の抑制が確認された。現在は臨床応用へ向けて、副作用の有無の確認と、より効果的な投与法の開発について検討している。
多職種連携による知的障がい者家族の親亡き後に関する包括的な支援構築の実践研究

本研究は,知的障がいのある子どもの親が抱く最大の不安である「親亡き後の不安」に着目し,家族が主体的に将来のプランニングを行うことを狙いにした心理教育プログラム(山田,2018)の修正および実践,その効果検討を行う。これまでの支援は,専門家が「本人・家族に提言,支援を提供する」というトップダウン型であったが,本研究はインタビュー調査を取り入れて本人・家族の立場から望まれている支援をボトムアップの形式で検討する。その際,心理の専門家を中心に司法・福祉領域と多職種連携をすることで,知的障がい者家族の「親亡き後の問題」について包括的な支援を構築することを狙いとしている。
視覚の空間情報の認知と視線運動の発現における前頭眼野と補足眼野領域の役割分担

視覚情報は網膜から受動的に取り込まれるだけでなく、種々の眼球運動システムが感覚入力に依存して使い分けられることにより能動的に取り込まれる。視覚の空間情報の再現と視線運動の発現における前頭眼野の役割を理解するため本年度は、ゆっくり動く視覚対象の追跡に必要な情報が、サル前頭眼野にどのように再現されるかを調べた。このような視覚対象の追跡には滑動性眼球運動と輻輳運動が必須であるが、両者はそれぞれ異なるシステムとして、使われる視覚入力も脳内経路も異なると報告されている。しかしいずれも視覚情報を連続的に適切に取り込むため視覚対象像を中心窩に保持し続けるという共通の機能が要求される。例えば自分自身が動くときには前庭入力と干渉して視線(空間内眼球)運動を行い、視覚の遅い反応時間は、視覚対象の運動予測により補正される。このような共通機能のため両眼球運動情報は脳内で統合されることが必要であると考え、日本サル前頭眼野後部領域の滑動性眼球運動ニューロンの応答特性を調べた。これらニューロンの視標速度に対する応答を調べると、すでに視覚の反応時間が予測的に補正されていることが明らかになった。さらに、視標を奥行き方向に動かすことによる輻輳運動にも応答するかどうかを調べたところ、大多数(66%)は滑動性眼球運動と輻輳運動の両者に応答した。滑動性眼球運動のみに応答したのは25%で、残り9%は輻輳運動のみに応答した。大多数のニューロンの発射は輻輳速度にほぼ比例して変化した。さらに奥行き方向の視標速度に応答するニューロンも記録され、前庭刺激を加えることにより、前額面での視線速度にも、奥行き方向の直線加速度にも応答した。以上の結果は前頭眼野後部領域が滑動性眼球運動と輻輳運動の両者に共通の神経機構を備え、3次元空間のあらゆる方向の視標運動の追跡のための視線運動信号がこの領域に再現されていることを示唆する。
植民地時代の朝鮮仏教に対する日本仏教の影響-釈迦降誕節・花祭り・仏教民俗学-

戦前の東アジアにおける社会・文化・国際情勢等に対する再検討が問われる昨今、特に当研究では、植民地朝鮮の仏教と日本との関わりに焦点を絞り、そこから判る諸問題の有り様を明らかにするのが狙いである。なかでも、内鮮一体や東亜連盟体具現のために常に街頭・広場・群衆の前に動員された釈迦降誕節には、総督府と朝鮮人との接点がありありと思い浮かぶ。ところがよく見ればそれは、伊藤博文からなる明治の帝国憲法上で位置づけられた日本仏教の精神そのもので、朝鮮人とのあいだでみられた接点も本当は`東亜'からみれば僅かな部分にすぎず、東亜という全体から日本仏教、つまり釈迦降誕節の花祭りを考えなければならない。東亜構築のための精神的な一軸としてなぜ釈迦降誕節が選ばれたのかは、キリスト教文明の欧米を強く意識した外在的な理由もあろうが、仏教が東亜の精神的な脊髄であり続けてきたという内在的な理由もある。この両理由から、釈迦降誕節の花祭りはまず日本で、明治から大正にわたり、諸形式が規定され統一された。それから朝鮮では大正から昭和にかけて花祭りが波及され今日に至るわけだが、その痕跡は意外と今の時代まで残っていて、現在の韓国の仏教、つまり初八日儀礼の重要な部分をなしている。終戦とともに日本における花祭りが急激に冷めた事実とは裏腹に、なぜ韓国には花祭りの要素が多く残ったのかは、文化の連続非連続理論から推論することができる。それで韓国や日本において、釈迦降誕節の浴仏・提燈行列・花徽章・畳み込み式燃灯・式典行事・花祭りの歌等の調査に臨んだわけだが、戦前の思想的形骸が依然として日本や韓国の仏教儀礼の形の上に残されているのは、今に限らず、今後の東アジア研究のための重要な布石になれたと思う。戦前の東アジアにおける社会・文化・国際情勢等に対する再検討が問われる昨今、特に当研究では、植民地朝鮮の仏教と日本との関わりに焦点を絞り、そこから判る諸問題の有り様を明らかにするのが狙いなのである。なかでも、内鮮一体や東亜連盟体具現のために常に街頭・広場・群衆の前に追い出された釈迦降誕節には、総督府と朝鮮人との接点がありありと思い浮かぶ。東亜構築のための精神的な一軸としてなぜ釈迦降誕節が選ばれたのかは、キリスト文明の欧米を強く意識した外在的な理由もあるだろうが、仏教が東亜の精神的な柱であり続けてきたという内在的な理由も十分ある。それから朝鮮では大正から昭和にかけて花祭りが波及され今日に至るわけだが、その痕跡は意外と色ごく残っていて、現在の韓国の仏教、つまり初八日儀礼の重要な部分をなしているほどである。終戦とともに日本における花祭りが急激に冷めた事実とは裏腹に、なぜ韓国には花祭りの要素がこれほど多く残っているのかには謎も多い。その謎を解くべく、今の韓国の寺寺を訪問し聞き書きに臨んだ。聞き書きは、釈迦降誕節における浴仏・提燈行列・花徽章・畳み込み式燃灯・式典行事・花祭りの歌等が中心だったが、今後の調査も引き続き予定している。
リンパ腫形成パスウェイにおける新規協調遺伝子の機能的探索と分子標的としての意義

リンパ造血器腫瘍ではゲノム異常、遺伝子変異が多数報告されてきたが、各病型について、染色対転座以外のゲノム異常の頻度は低く多様である。本研究は、支持細胞、サイトカインの存在下にて、マウス正常成熟B細胞に複数の遺伝子を導入し、腫瘍化に関与する遺伝子群について機能的に評価する系を確立した。今後は、本実験系を用いて分子標的を見いだすためのスクリーニングに利用したい。本研究の目的は(1)染色体転座関連遺伝子を用いた腫瘍化機能を調べる安定な系を確立すること、(2)染色体転座関連遺伝子と協調して腫瘍化に働く新たな遺伝子の探索並びにその分子機構を解明すること、(3)責任遺伝子の治療の分子標的としての意義を評価、検討することである。これまでにフィーダーと増殖因子を用いてプロB細胞に複数の転座関連遺伝子(Bcl2、Myc、Ccnd1)を導入することに成功し、増殖因子非依存性の細胞増殖が得られることを報告したが、蛍光色素をマーカーに複数の遺伝子を導入し、いろいろな遺伝子の組み合わせが導入された細胞分画を同定することが可能となり、かつ、機能的にも3つの組み合わせ(Bcl2、Myc、Ccnd1)は、増殖能のみならず、マウス個体を約30-50日で死に至らしめることを確認した。本方法は短期間に遺伝子導入細胞を確認し、選択することができ、その細胞動態を見る上できわめて有用な方法である。特に、マウス個体内での細胞動態の把握には有用であり、どの組み合わせの遺伝子導入群が変化していくのかを追跡できるため、各遺伝子の組み合わせの造腫瘍能を見る上で大変有用な系である。多くの悪性リンパ腫は分化したB細胞の腫瘍であるので、正常末梢B細胞を用いて、腫瘍化を検討する実験系の確立も試みた。具体的にはマウス脾臓細胞よりB220陽性細胞を精製し、フィーダー細胞としてNIH3/CD40L/Baff3細胞上にてIL4存在下で4日間培養しさらにIL21存在下で2日間培養することで胚中心B細胞(iGCB)を産生することができる。この培養の間に、Myc、Bcl2を導入し、マウスに導入するとGCB型表現系を持つ大細胞型末梢性B細胞リンパ腫(DLBCL)を形成することができた。同様に、マウス胎児肝細胞からT細胞を誘導する系も同様にMyc、Bcl2、Ccnd1遺伝子を導入することでCD4+の末梢性T細胞リンパ腫を作成することができた。今回確立できた系は、試験管内で遺伝子導入し正常細胞を腫瘍化することができた点で大きな意義がある。本研究の目的は(1)染色体転座関連遺伝子を用いて腫瘍化機能を調べる安定な系を確立すること、(2)染色体転座関連遺伝子と協調して腫瘍化に働く新たな遺伝子の探索並びにその分子機構を解明すること、(3)責任遺伝子の治療の分子標的としての意義を評価し、(4)染色体転座関連遺伝子以外のがん関連遺伝子についても協調機能を検討することである。我々はこれまでにフィーダーと増殖因子を用いてプロB細胞に複数の転座関連遺伝子(Bcl2、Myc、Ccnd1)を導入することに成功し、増殖因子非依存性の細胞増殖が得られることを報告した。複数の蛍光色素をマーカーに複数の遺伝子を導入し、いろいろな遺伝子の組み合わせが導入された細胞分画を同定することが可能であることを実験的に証明できた。本実験系で、機能的にも3つの組み合わせ(Bcl2、Myc、Ccnd1)は、増殖能のみならず、マウス個体を約30-50日で死に至らしめることを確認した。本方法では、マウス個体内で、どの組み合わせの遺伝子導入細胞群が変化していくのかが追跡でき、各遺伝子の組み合わせの造腫瘍能を見ることができる。次の課題として、分化させた正常末梢B細胞を用いて、腫瘍化を検討する実験系の確立を試みた。具体的には、マウス脾臓細胞よりフィーダー細胞上でIL4存在下ついでIL21存在下で培養することで胚中心B細胞に分化させ、その間に、複数の遺伝子を導入するものである。これまでに、Myc、Bcl2を導入し、マウスに導入するとGCB型表現系を持つ大細胞型末梢性B細胞リンパ腫を形成させることができた。この実験系により、全ゲノムシークエンス法などにより見いだされた遺伝子群の腫瘍化能について検討するための基盤が整った。本研究をさらに進展させるため、転座関連遺伝子以外の腫瘍化に協調して働く可能性のある遺伝子の組み合わせを用いて検討する予定である。現在、これらのゲノム異常が見出されても真に意味のある異常であるかを簡便に評価する系はなく、それらがどのように腫瘍化に関わるかについてはトランスジェニックやノックアウトマウス以外にはよい方法は確立されていない。

本研究は、マウス正常成熟B細胞にレトロウイルスベクターを用いて複数の遺伝子導入を行い、腫瘍化パスウェイを評価する系を確立し、真に腫瘍化に関与するゲノム異常を機能的に単離、解析することを目的とした。その方法として、正常B細胞を試験管内で遺伝子導入し、腫瘍化することを試みた。Feeder、サイトカインの存在下にて、マウス正常成熟B細胞に染色体転座関連遺伝子であるBCL2、MYC、CCND1遺伝子を導入することで、試験管内においてマウス正常成熟B細胞を腫瘍化することに成功した。この実験系を用いて、全ゲノムシークェンス法などにより見いたされている候補遺伝子を対象に複数の遺伝子の協調的作用を明らかにした。具体的には、論文報告のあったMyc, CCND3T283A, E47V557Eの3遺伝子だけでは腫瘍化できなかったが、さらにAkt, TCL1Aを用いることによって、短期間に遺伝子導入細胞を移植したマウスを腫瘍死させることができたので、これらの遺伝子群は協調的に腫瘍化機能を持っていることが証明できた。また、同時に、正常マウス成熟B細胞に複数遺伝子を導入してin vivoでも腫瘍化能を検討したところ、これまで指摘されていたTCL1A遺伝子やMEF2A遺伝子を腫瘍化に関与する機能的な遺伝子として見いだすことができた。今後は、これらの系を用いて分子標的を見いだすためのスクリーニングに利用したい。26年度が最終年度であるため、記入しない。血液腫瘍学426年度が最終年度であるため、記入しない。正常細胞に複数遺伝子を導入し腫瘍化に成功している。しかも、B細胞系のみならず、丁細胞系においても腫瘍化に成功しているので、実験系の確立としては当初の計画以上に進展している。強調する遺伝子の探索としては、まず、多くのゲノムシークエンスの結果から明らかになった遺伝子を対象に導入することを試みている。これらの主要な遺伝子の発現ベクターについてはほぼ作成し終えており、順次検討しつつあるので、順当に進んでいると評価している。当研究計画では、転座関連遺伝子を用いて正常細胞を再現性よく腫瘍化できるかどうかが大きな問題であったが、3つの代表的なB細胞悪性リンパ腫転座関連遺伝子Myc, Bcl2, Ccnd1を用いて、まず、プロB細胞の腫瘍化に成功した。これを発展させて、遺伝子スクリーニング法として、Ccnd1を取り除いて、B細胞リンパ腫細胞株から作成した遺伝子発現ライブラリーを導入し、フィーダーなし、サイトカインなしの状態で細胞増殖を検討すると、増殖細胞が得られた。その遺伝子はCCND3あるいは活性型NRASであった。両遺伝子は確認実験でも繰り返し、試験管内やマウス個体内で腫瘍化能を示した。培養条件下は腫瘍にとってin vivoよりも生育条件が厳しいので、in vivoスクリーニングを行ったところ、時間はかかったもののTCL1Aが繰り返し単離できたので、TCL1AのMyc, Bcl-2との協調作用が明らかとなった。今年度は、より実際のB細胞悪性リンパ腫に近づけるため、in vitroで成熟B細胞に分化させたものに遺伝子を導入し、腫瘍化させることができるかどうかを検討した。B細胞の分化は、フィーダー細胞としてNIH3/CD40L/Baff3細胞上で、IL4存在下にて4日間培養しさらにIL21存在下で2日間培養することで胚中心B細胞を得た。この系では、MycとBcl2のみでマウス個体内で末梢型B細胞の表現型を持った未分化大細胞型B細胞リンパ腫(DLBCL)を再現性よく作ることができた。実際の患者検体で認められるダブルヒットリンパ腫を再現できたことになる。
カルシウムイオンと細胞機能

細胞情報の増幅伝達系においてカルシウムイオン(【Ca^(2+)】)が重要な役割を果している。ある一群の細胞刺激に際して、イノシトールリン脂質(PI)が分解され、ジグリセロール(DG)イノシトール三リン酸(【IP_3】)の産生が誘起される。DGはセカンドメッセンジャーとしてプロティンキナーゼCを活性化し、同じく【IP_3】は【Ca^(2+)】の動員を促進して【Ca^(2+)】受容蛋白質を活性化する。最近、【Ca^(2+)】による細胞機能調節の解明においてこれらの【Ca^(2+)】受容蛋白質や【Ca^(2+)】調節蛋白質の作用機構の解明の重要性が急速に増大している。本総括班では60および61年度にわたって【Ca^(2+)】受容蛋白質や【Ca^(2+)】調節蛋白質の作用機構と高次細胞機能調節における役割について総合研究を実施している。その結果、細胞刺激に対応したPIの分解によるセカンドメッセンジャーの産生、ことにホスホリパーゼCの活性調節にGTP結合性蛋白質が必須不可欠であることを見出した。GTP結合性蛋白質が【IP_3】による【Ca^(2+)】動員にも関与していることを示唆しており、今後の重要課題の一つとなっている。一方、情報の増幅伝達に作動するプロティンキナーゼCのクローニングに成功した結果、この酵素が数種の異った遺伝情報から発現されていることを見出し、細胞応答の多様性に重要な意義を持つ可能性が高まっている。【Ca^(2+)】依存性プロテアーゼについてもクローニングに成功し、他の【Ca^(2+)】受容性蛋白質との関連等、生理意義の解明の基盤を得ることができた。カルモジュリンやフラグミン等の【Ca^(2+)】受容蛋白質とその結合性蛋白質の動態と意義についても多くの知見が得られつつある。現在、これらの知見に立脚して高次細胞機能調節の総合的解析に着手している。ことに、数多くの阻害剤や活性化剤の開発研究を行っており、その成果が期待される。本班ではこれら個別領域の優れた研究を維持結集し、有機的な共同研究体制をとりつつ総合研究をさらに推進したい。
統語的あいまい文の理解を決定する韻律的要因一日・中比較研究

本研究では平成元年度より統語的あいまい文を素材として用い、音声分析および音声合成を用いた知覚実験を通じて、日本語および中国語の統語境界を明示する最も重要な韻律的要因を解明してきたが、これまでの研究成果をもとに、今年度は次のような研究を推進した。1.外国語として日本語を学ぶ中国人学習者の日本語の発話の音声分析を行い、統語講造と韻律的特徴の対応を孝察した。その結果、中国人学習者の日本語の発話については、統語境界での基本周数の立て直しの有無やその程度についてかなり不自然な部分が多いことがわかった。このような事実をふまえて、中国人学習者向けの日本語の韻律表記法の試案を検討し、その内容を学術雑誌等において発表した。2.統語構造を明示するにあたり、なぜ日本語では基本周波数の立て直しが主に使われ、中国語あるいは英語などでは音節の引き伸ばしといったタイミングの特徴が使われるのかという問題を、主として音声分析結果をもとい検討した。その結果、日本語特有のいわゆるモーラリズムの存在が、大きな統語単位の終末での音節の引き伸ばしなどタイミングの特徴の使用を妨げているのではないかという結論に達した。なお、この研究を行うにあたり、英語の韻律体系についても音声分析結果をもとに考察した。3.近畿方言にみられるいわゆる低起式アクセントの動態について、主に音声分析により考察を加えた。その結果、低起式アクセントを持つ語句の直前に深い統語境界がある場合、その語句の基本周波数が相対的に高く保たれることがわかった。4.主に今年度の研究成果を中心に過去4年間の研究成果をまとめ、成果報告書を刊行した。
社会科学からみた民族及び民族問題ーオーストロ・マルクス主義を中心に

(1)本研究は、現代における民族及び民族問題を社会科学の見地から考究することを当面の課題として設定している。具体的には、旧ソ連・東欧諸国がナショナリズムの波に飲み込まれている状況の中で、マルクス主義における民族問題の取り扱いの再検討を目指した。(2)この課題を果たすために、洋書・和書の購入、北海道大学、東京大学等の付属図書館、学部図書それに国会図書館を中心に、不十分とはいえ文献資料の収集に努めた。また、1992年度社会思想史学会における、民族問題をテーマとした共通論題に積極的に参加した。その他少人数の個別研究会で研究交流を深めた。(3)研究成果としては、「オットー・バウアーの民族概念ーマルクス主義民族理論の反省」(『金沢大学教養部論集』30-2、1993年)を発表し、問題に取り組む上での足掛りを築いた。民族問題に関する各論者の対応は、民族概念の捉え方を基礎としている。この論文では、民族をブルジヨワ的範疇とし、民族の接近、融合、同化の将来を展望したレーニンの考えが、いかに旧ソ連における民族政策の誤まりに結びつき(ブレジネフ時代の新ソビエト人の形成努力)、民族問題を「マルクス主義のアキレス腱」とするに至ったかを明かにし、これとは反対に民族の実り豊かな将来的発展を展望したバウアーの所論の再評価を提唱した。(4)現在研究課題を一応完遂するために、「オットー・バウアーと民族問題」という論文を作成中であり、この論文と前記論文をベースに『民族問題の思想的系譜』(仮題、梓出版社)という著作をこの10月に刊行する予定である。今回の科学研究費補助金の助成は、本成果の形成にまことに役立ったと言える。
ヒト肝臓におけるバリン代謝の調節:肝硬変による代謝異常のメカニズム

本研究では、ヒト肝臓のクエン酸合成酵素活性とミトコンドリアDNA量を測定し、それらに対する肝硬変の影響を検討し、昨年度に明らかにしたバリン代謝系の酵素活性に対する肝硬変の影響と合わせて考察した。ヒト肝臓は、名古屋大学医学部附属病院において行われた肝臓外科手術の際に得られた標品を用いた。ヒト肝臓のクエン酸合成酵素活性は、正常肝で4.50±0.4(mean±SE for 10 livers)units/g肝臓、肝硬変で4.77units/g肝臓であり、両者に差は認められなかった。ミトコンドリアDNA量は、正常肝で2078±489 arbitrary units(for 7 livers)、肝硬変で2184±256 arbitrary units(for 11 livers)であり、これらの値にも両者間に差は認められなかった。これらの結果より、肝硬変は肝臓中のミトコンドリアの個数には影響を及ぼさないことが強く示唆される。これまでに、肝硬変はバリン代謝の律速酵素である分岐鎖α-ケト酸脱水素酵素複合体活性、およびクロトナーゼと3-ヒドロキシイソ酪酸-CoA加水分解酵素(バリン代謝系の中間代謝物であり細胞毒性のあるメタクリリル-CoAを分解する酵素群)の活性を低下することを明らかにしたが、これらの肝硬変の影響は、肝ミトコンドリア全体の機能低下作用の1つではなく、バリン代謝系酵素に特異的な影響であることが考えられる。細胞内におけるメタクリリル-CoAの蓄積は、細胞障害を引き起こすことが明らかにされているので、本研究の所見は、肝硬変によるクロトナーゼと3-ヒドロキシイソ酪酸-CoA加水分解酵素の活性低下が肝硬変の発生もしくはその後の障害と関連する可能性を示唆するものである。
患者由来乳癌転移細胞の樹立および個別化転移モデルマウスの作製

申請研究では、患者個別乳癌の転移モデルマウスを作製し、癌転移の分子機構を解明し、癌転移治療に役立てるため、10症例の患者乳癌をNOGマウスに移植した。後6か月観察し、症例2のみ直径1cm程度の癌塊に増殖した。しかしながら、新たなNOGマウスに継代したところ増殖が停止した。他の9症例に関しては、移植後より癌の増殖が観察されなかった。従来よりER+乳癌の免疫不全マウスへの生着率は極めて低いことが報告されている。今後は、エストロゲンを投与するとともに、乳腺管腔内への癌細胞の注入法などの移植系の改善が必要である。申請者らのグループでは、弱転移性の乳癌細胞株が癌内線維芽細胞と共に、免疫不全マウスに移植されると、癌内線維芽細胞との相互作用により、高転移性の乳癌細胞に変化することを見出している。転移能亢進に関与する分子メカニズムも解析中である。申請研究では、患者より手術により摘出された乳癌細胞においても、乳癌細胞株で見られた結果が再現されるか否かを検討予定である。昨年度は、6例の乳癌患者より切除された癌塊を高度免疫不全NOD/Shi-scid,IL-2RγKOマウス(以下NOGマウス)に移植した。このうち1例のマウスで癌の増殖が観察された。今後は、癌内線維芽細胞と患者由来乳癌細胞との共移植を試み、癌細胞における転移能の亢進が観察されるか否かを検討する。癌転移は癌患者の死亡率の90%に起因するが、転移発症の予見や有効な治療は困難である。癌転移の分子機構も未だ明らかでない。また実験室内で転移性癌細胞を作り出すことも容易ではない。最近申請者の研究グループは、非転移性の培養乳癌細胞株と癌内線維芽細胞(Carcinoma-associated fibroblasts; CAFs)をマウスに共移植することにより、癌塊内でこの癌細胞をCAFsにより教育し、転移性癌細胞株を樹立することに成功した(未発表)。研究をさらに発展させる為に、申請者は、手術後に摘出される患者由来乳癌組織断片をCAFsとマウスに共移植し、移植された乳癌細胞を抽出することにより、患者由来転移性乳癌細胞を樹立することを目指した。10例の手術後に摘出された患者乳癌塊を高度免疫不全NOGマウスに皮下移植し、最長1年間癌塊の成長を観察した。10例中一例のみで成長を示したが、新しいNOGマウスへの継代は困難であった。以上の結果より、乳癌を使用したpatient-derived xenogaft (PDX)modelの作製およびそのラインの樹立は極めて低頻度に成功することが示唆された。研究をさらに発展させる為に、申請者は、手術後に摘出される患者由来乳癌組織断片をCAFsとマウスに共移植し、移植された乳癌細胞を抽出することにより、患者由来転移性乳癌細胞を樹立する予定である。この細胞を使用し、癌転移に関連した遺伝子シグナルネットワークを解明し、患者個別化乳癌の転移モデルマウスも作製し癌転移治療に役立てることを目的とした。予定通り10例の乳癌患者より提出された癌塊をNOGマウスに皮下移植することに成功した。しかしながら、その移植生着率および増殖率は極めて低値であった。腫瘍生物学予定通り10例の乳癌患者より提出された癌塊をNOGマウスに皮下移植することに成功した。しかしながら、癌の増殖が10例中9例にて観察されなかった。今後はエストロゲンペレットを同時に移植して癌の増殖が改善されるか否かを検討する予定である。ヒト乳癌組織を高度免疫不全NOGマウスに移植したが、癌の生着率および増殖率が、他のグループよりの報告と比較して、若干低いことが危惧された。NOGマウスに移植された患者乳癌の増殖速度が予想以上に遅く、移植後のマウスの観察を6か月以上延長した故。今後は、エストロゲンペレットをマウスに同時に移植することにより、癌の生着率および増殖率の改善を試みる。本年度に使用しなかった分のマウスを次年度に繰越し利用する。

乳癌塊の増殖が遅かっため、線維芽細胞との一部の移植実験を先送りした。エストロゲンペレットを使用することにより、乳癌塊の増殖を早め、線維芽細胞との移植実験を計画している。
「天領」の学問・文化・思想構造に関する研究

江戸時代に「天領」があった地域(例えば、現在の福島県域や岐阜県域・長野県域など)には、代官所役人と関係を持った住民の子孫が存在し、彼らの元には江戸期に刊行された「書物」が所蔵されている。その「書物」の多様性・先端性は、かつて代官所周辺で展開した「知」のありようを正確に物語る。地域文化をリードしたその広義の「学問者」たちは文化の中心地である江戸に直結する代官所の役人ともども「書物」に依拠した文芸や思想などの文化面での最前線を形成していた。本研究は、2007年7月刊行の拙著『江戸の転勤族-代官所手代の世界-』(平凡社)において明らかにした、江戸時代における「天領」(幕府の中・下級実務官僚である郡代・代官による直轄支配地、郡代領・代官領の総称)の学問と文化の構造とその展開についての学説を、多角的に再検証し、より確実なものにすることを目的とした研究である。研究を進めるにあたっては、学問・思想形成の基礎をなす諸種「書物」の入手と享受の実態への検証を端緒にし、代官所とその周辺に住む広義の「学問者」の「知」の構造を思想史的に考察することを目的とする。本研究は、2007年7月刊行の拙著『江戸の転勤族-代官所手代の世界-』(平凡社選書)において明らかにした、江戸時代における「天領」(幕府の中・下級実務官僚である郡代・代官による直轄支配地、郡代領・代官領の総称)の学問と文化の構造とその展開についての学説を、多角的に再検証し、より確実なものにすることを目的とした研究である。そして、研究を進めるにあたっては、学問・思想形成の基盤をなす諸種「書物」の入手と享受の実態への検証を端緒にし、代官所とその周辺に住む広義の「学問者」の「知」の構造を思想史的に考察することを目的とする。本年度の研究の課題としたのは、(1)代官所に関わる出版物・文献・史料の把握、(2)地域文化に果たす地方役所の役割の東アジア圏内での比較、をめぐる基礎的調査である。史料の所在確認とその閲覧さらには今後の調査の可能性の確認を目的として赴いた場所の主なものは、福島県北部地域(陸奥代官所周辺地域)と韓国全州市(韓国における地方出版の中心地)である。その調査を通じて、学問・思想形成の基礎をなす諸種「書物」の入手と享受の実態への検証のみちすじを展望することが可能となった。あわせて、代官所・地方官衙とその周辺に住む広義の「学問者」の「知」の多面的な構造を思想史的に考察する際の視点を「出版」行為に即して獲得することができた。本年度の研究の課題としたのは、(1)代官所に関わる出版物・文献・史料の把握をめぐる基礎的調査であり、(2)研究成果の公表である。史料の所在確認とその閲覧、さらには今後の調査の可能性の確認を目的として赴いた場所の主なものは、福島県伊達市・桑折町(陸奥代官所所在地)を中心とした福島県北部地域である。その調査を通じて、学問・思想形成の基礎をなす諸種「書物」の入手と享受の実態への検証の道筋を展望することが可能となった。また、研究成果の一端を『狂歌陸奥百歌撰』(東北文化資料叢書第五集)という資料集で発表した本研究が主たる課題としたのは、(1)代官所に関わる出版物・文献・史料の把握をめぐる基礎的調査であり、(2)研究成果の公表である。史料の所在確認とその閲覧、さらには今後の調査の可能性の確認を目的として赴いた主な場所は、福島県伊達市・桑折町(陸奥代官所所在地)を中心とした福島県北部地域であり、南会津地域や中越地域にも調査地点を拡大した。そこでの調査を通じて、学問・思想形成の基礎をなす諸種「書物」の入手と享受の実態への検証の道筋を展望することが可能となった。

あわせて、代官所とその周辺に住む広義の「学問者(文化人)」の「知」の多面的な構造を思想史的に考察する際の視点を「出版」行為に即して獲得することができた。その出版分野のうちで本研究が重視するのは「狂歌」である。というのも、狂歌(特に19世紀の狂歌)は、江戸との繋がりを有する地域の知識人がこぞって制作したものであり、日・中の古典さらには地域的な景物、日常的の些事に至るテーマを幅広くかつ「典拠」をもとに詠んだ。その際の典拠となったのが江戸を中心に生産された「書物」であり、狂歌は書物に支えられ詠まれた。さらには浮世絵などの出版物も参照に供された。代官所所在地に代表される地方の拠点地域にあっては、そうした多様な出版物を幅広く利用する文化人の存在が諸種の資料から裏付けられた。こうした本課題の研究成果の一部は、出版をテーマとした「書物出版と社会変容」研究会において報告を行い、論文は国際浮世絵学会の機関誌に掲載された。本研究が主たる課題としたのは、(1)「天領」(代官支配地域)に関わる出版物・文献・史料の把握をめぐる基礎的調査であり、(2)研究成果の公表である。史料の所在確認とその閲覧、さらには今後の調査の可能性の確認を目的として赴いた主な場所は、小諸市(代官所所在地)を中心とした長野県中部地域、上越地域(上越市直江津)、中越地域(小千谷市)である。当該地点での調査を通じて、「天領」における学問・思想形成の基礎をなす諸種「書物」の入手と享受の実態への検証の道筋を展望することが可能となった。その出版分野のうちで本研究が重視したのは「狂歌」である。代官所所在地に代表される地方の拠点地域にあっては、上記の多様な出版物を幅広く利用する文化人が存在したことが諸種の資料から裏付けられた。こうした本課題の研究成果の一部は、出版をテーマとした「書物出版と社会変容」研究会において報告を行い、『伊南村史』通史編には本研究の成果が掲載された。また、上越地域における調査については新潟日報・上越タイムス等で報道された。
リボソームの100S?70S変換―定常期における蛋白合成制御機構の研究―

研究計画に基づいて、以下の研究を行った。1.100Sリボソームを形成する蛋白質、RMF(ribosome modulation factor)のリボソーム結合位置の決定。昨年度から二価性試薬2-イミノチオレーンを用いて100Sに結合したHis-taggedRMFと架橋されるリボソーム蛋白の同定に取り組み、L2,L13およびS13が架橋されることを見出した。この結果は1.RMFが50Sと30Sのインターフェースにあること、2.ペプチジルセンターがL2とL13の中間の領域にあることからRMFはペプチジルセンター(PTC)に覆い被さっていることを示唆した。この結合位置は100SがPTCの翻訳活性を休止した状態であることとよく符合する。つぎに、RNA修飾試薬DMSを用いてRMFが結合した100Sと、結合しない70Sの修飾をfoot printingによって比較し、PTC領域からL13にかけてRMFによる修飾阻害がおこることを見出した。これは架橋反応の結果とよく一致している。2.cryo電子顕微鏡による100Sの立体構造解析38個の100Sの電顕像から長軸の周りに回転させた平均イメージをとり、100Sが50S・30S・30S・50Sの構造をとることを確定することができた。しかしその後、他の研究機関のcryo電子顕微鏡を操作する共同研究者が事実上実験できない状況に陥ったため、これ以上協力関係を維持できなくなった。そのため最近、京大・理の藤吉好則教授と新たに協力関係を結び、cryo電子顕微鏡による研究を再発足させた。この遅れを取り戻すべく努力したい。
薬物の腫瘍移行性評価システムの開発とそれを利用したターゲティング型抗癌剤設計

抗癌剤の癌病巣移行性を評価することを目的として、担癌家兎下肢を用いて潅流実験系を確立した。V【X_2】腫瘍を家兎下肢大腿筋肉部に移植して癌病巣モデルを作製し、動静脈にカニュレーションを施してsingle-pass法による潅流を行った。本実験系に対し、薬物を矩形に注入し、静脈側に得られるoutflow液中の薬物濃度一時間曲線に対して、クロマトグラフィーのプレート理論を適用しモーメント解析を行うことによって、局所における薬物の分布や消失を示すパラメータを誘導した。また、この実験系を用い、薬物を一定時間潅流後、腫瘍および正常筋肉部を摘出し、組織中薬物量を定量して組織移行性を評価した。このような実験系を確立した後、我々が合成した各種マイトマイシンCプロドラッグをそれぞれに適用し、その移行性と物理化学的性質との関連を検討した。マイトマイシンCを矩形で注入した場合、下肢を1回通過する間はマイトマイシンCは約40%が組織側に移行した。これに対し、マイトマイシンCをデキストランに結合させた高分子化プロドラッグは一回通過の間には殆んど組織側に移行せず、高分子化修飾を施すことによりマイトマイシンCの組織移行性が著しく低下することが明らかとなった。一方、この結合体を連続的に潅流した場合には、結合体は正常筋肉と比較して腫瘍部位に選択的に蓄積することが明らかとなり、腫瘍部位と正常部位の毛細血管壁構造の違いにより、高分子化プロドラッグが速度は遅いものの癌病巣に選択的に作用する可能性があることが示唆された。またこれらの現象において、結合体の分子量や電荷が腫瘍部位移行性に与える影響が明らかとなり、高分子化修飾を利用したターゲティング型抗癌剤の設計のための有用な指針を得ることが出来た。また、マイトマイシンCの低分子脂溶性プロドラッグに関しても、これらの実験系を利用して同様の検討を行った。
オッセオインテグレーション早期獲得を目指した即時・早期荷重プロトコルの開発

骨シンチグラフィにてオッセオインテグレーション獲得前後に荷重を加えた実験系において,「再びインプラント周囲骨代謝回転が賦活されかつ,荷重量によって異なること」「骨代謝回転亢進のピーク値は負荷開始時期により異なり,負荷開始の時期が遅くなると骨代謝活性が上昇する」ことを明らかにした.すなわち,「荷重」のタイミングは「オッセオインテグレーション」獲得過程に依存して,「骨代謝活性」に影響を与えることを核医学的に示唆した.骨シンチグラフィにてオッセオインテグレーション獲得前後に荷重を加えた実験系において,「再びインプラント周囲骨代謝回転が賦活されかつ,荷重量によって異なること」「骨代謝回転亢進のピーク値は負荷開始時期により異なり,負荷開始の時期が遅くなると骨代謝活性が上昇する」ことを明らかにした.すなわち,「荷重」のタイミングは「オッセオインテグレーション」獲得過程に依存して,「骨代謝活性」に影響を与えることを核医学的に示唆した.インプラント治療においては,オッセオインテグレーション獲得までの期間の短縮が重要課題である.従来の即時荷重プロトコルは明確な生物学的なエビデンスが得られておらず,臨床経験主導のもとに進められてきた.一方,Mchanobiology的観点に立脚すれば,メカニカルストレスがインプラント周囲骨細胞の機能および形態を形成・亢進する可能性があるが,即時荷重・早期荷重を加え際にインプラント体と骨の界面で生じている現象に関する研究は,組織学的評価がほとんどである.即時荷重・早期荷重時のインプラント周囲で生じる骨代謝回転を経時的に観察する核医学的手法を用いた骨シンチグラフィが有用である.本研究は,即時荷重・早期荷重下のインプラント体周囲のオッセオインテグレーションの獲得,骨代謝の状況を骨シンチグラフィから経時的,定量的に評価することにより,その生物学的根拠と安全性を明らかにし,インプラント治療に関するトランスレーショナルリサーチとして,即時・早期荷重プロトコルの開発を目的とした.実際には、実験動物へのインプラント体埋入モデルを用い,即時荷重・早期荷重下のインプラント体周囲のオッセオインテグレーションの獲得,骨代謝の状況を骨シンチグラフィから経時的,定量的に測定すること,および,オッセオインテグレーションの獲得過程に,開始時期・大きさを変化させた荷重を行うことにより,オッセオインテグレーション期間を短縮できる荷重条件を検索することを計画した.本年度の研究成果としては,オッセオインテグレーション獲得後に荷重を加えた実験系においては,骨結合したインプラント体へ負荷が加わると,再びインプラント周囲骨代謝回転が賦活され適応により再度下降すること,さらにそれが荷重量・荷重期間によって異なることを明らかになり,オッセオインテグレーションと荷重量・荷重時期には密接な関係があることを示唆された.インプラント治療においては,オッセオインテグレーション獲得までの期間の短縮が重要課題である.従来の即時荷重プロトコルは明確な生物学的なエビデンスが得られておらず,臨床経験主導のもとに進められてきた.本研究は,即時荷重・早期荷重下のインプラント体周囲のオッセオインテグレーションの獲得,骨代謝の状況を骨シンチグラフィから経時的,定量的に評価することにより,その生物学的根拠と安全性を明らかにし,インプラント治療に関するトランスレーショナルリサーチとして,即時・早期荷重プロトコルの開発を目的とした.方法は、実験動物へのインプラント体埋入モデルを用い,即時荷重下のインプラント体周囲のオッセオインテグレーションの獲得,骨代謝の状況を骨シンチグラフィから経時的,定量的に測定することにより,オッセオインテグレーション期間を短縮できる荷重条件を検索した.本年度の研究成果としては, 1.即時荷重負荷に伴い上昇した骨代謝活性は,負荷開始7日後に最大となり、28日後にはほぼベースラインレベルにまで戻った.2.オッセオインテグレーション獲得後の荷重負荷の場合と比較するとピーク時の代謝活性の値は約1. 5倍.となることが示された,その後14日目まで有意に上昇したが21日以降は遅延荷重時と同等のレベルまで低下した.これらのことから,即時荷重時においても遅延荷重時と同様に骨の改造という生体での適応反応が起きること,また,ピーク時での放射活性比が大きな値となったことは,遅延荷重よりもより大きな骨の改造機転が生じる可能性が示唆された.インプラント治療においては,オッセオインテグレーション獲得までの期間の短縮が重要課題である.従来の即時荷重プロトコルは明確な生物学的なエビデンスが得られておらず,臨床経験主導のもとに進められてきた.本研究は,即時荷重・早期荷重下のインプラント体周囲のオッセオインテグレーションの獲得,骨代謝の状況を骨シンチグラフィから経時的,定量的に評価することにより,その生物学的根拠と安全性を明らかにし,インプラント治療に関するトランスレーショナルリサーチとして,即時・早期荷重プロトコルの開発を目的とした.方法は、実験動物へのインプラント体埋入モデルを用い,即時荷重下のインプラント体周囲のオッセオインテグレーションの獲得,骨代謝の状況を骨シンチグラフィから経時的,定量的に測定することにより,オッセオインテグレーション期間を短縮できる荷重条件を検索した.本年度の研究成果としては,1.インプラント埋入後直ちに開始した群,埋入翌日に開始した群,および3日後に開始した3群ともに負荷開始後7日目まで骨代謝活性が大きく上昇し,その後は下降し,負荷7週目に負荷前レベルに戻った.負荷開始後14日目まで,負荷前に対して有意な上昇を示した.また,埋入当日より負荷を開始した群と比較して翌日,3日後負荷開始の群はUptake-ratioの最大値が2倍近く高い値となった.

2.インプラントへの即時・早期荷重負荷により,インプラント周囲骨の骨代謝回転が一定期間亢進し,その後は一定負荷下であるにも関わらず定常状態に達した.3.インプラント埋入によって生じる骨代謝回転の亢進は,負荷開始の時期が遅くなると骨代謝活性のピーク値が上昇する傾向が見られた.
長期臨床データに基づく接着性セラミック系修復物の寿命要因の分析

本研究の目的はポーセレンラミネートベニア(PLV)修復物の寿命に影響する要因について分析することである。1987年から2015年の間に総計747歯の変色歯にポーセレンラミネートベニア修復を施した。これらの修復物のうち過去28年間で38歯(5%)に事故が認められた。その内訳はう蝕20歯、シェルの亀裂・チッピング11歯、歯質との一体破折3歯、完全剥離2歯、歯内治療2歯であった。また、多くの症例で13mmの歯肉退縮が認められた。ベニアシェルのチッピングや剥離を防止するために定期的な咬合のリスク管理および歯周病やう蝕のリスク管理が必要である。PLV修復は20年以上の長期予後が期待できる。本研究の目的は申請者が過去25年間にレジンラミネートベニア、ポーセレンラミネートベニアおよびCAD/CAMセラミック修復物の接着性セラミック系修復物をそれぞれ5年23年追跡して得られた症例資料を用いて、修復歯の後ろ向き(retrospective )観察を行い、修復物の寿命に影響する3大要因すなわち材料、術式および患者について分析する。それによって各修復法の適応基準やメインテナンスにおける留意点を明らかにし、オールセラミック修復に関わる治療ガイドラインや患者へのインフォームドコンセントに必要な臨床的根拠を示すことである。平成25年度は修復物の経年的な変化を記録したレプリカ模型の変化を3次元形状を測定するために3D光学スキャナー(シロナデンタルシステムズ社)を購入した。ポーセレンラミネートベニア修復物の分析については23年間の修復物の事故症例の集計が終わったところである。結果の一部は論文報告した。本研究の目的は申請者が過去25年間のレジンラミネートベニア、ポーセレンラミネートベニア及びCAD/CAMセラミック系修復物をそれぞれ5年25年追跡して得られた症例保管資料を用いて、修復物の後ろ向き(retrospecitve)観察を行い、修復物の寿命に影響する3大要因すなわち使用材料、術式および患者について分析する。平成26年度はラミネートベニア修復物およびCAD/CAM修復物の追跡調査を続行し、とくにポーセレンラミネートベニア修復物で術後25年経過の症例を得ることができた。これは国内外の臨床報告を見ても最長である。レジンラミネートベニアでは術後10年経過する頃から摩耗や変色が目立つようになり、患者自身も気にするようになっていた。数例でポーセレンラミネートベニアでの再修復が行われた。ポーセレンラミネートベニア修復物に見られた主な事故は部分破折であった。これには対合歯との強い咬合接触によるチッピング、歯面形成において象牙質露出のあった症例で象牙質面・エナメル質面との境に亀裂が入って破折したと思われる症例、支台の歯質が薄くて支持が弱いために破折した症例などが見られた。歯肉退縮はほとんどの症例で見られた。多くは13mmの退縮であったが、そのために再修復となった症例はこれまでにはなく、許容される範囲であった。CAD/CAM用長石系セラミック修復物では大臼歯部のクラウンで対合歯との咬合が強いと思われる症例で破折を観察した。小臼歯部では事故例は観察されなかった。本研究の目的は申請者が過去25年間のレジンラミネートベニア、ポーセレンラミネートベニアおよびCAD/CAM長石系セラミック修復物をそれぞれ525年追跡して得られた症例保管資料を用いて修復物の後ろ向き(retrospective)観察を行い、修復物の寿命に影響する3大要因すなわち使用材料、術式および患者について分析する。それによって各種修復法の適応基準やメインテナンスにおける留意点を明らかにし、オールセラミック修復に関わる治療ガイドラインや患者へのインフォームドコンセントに必要な臨床的根拠を示すことである。最終年度は1987年以降28年間で施したポーセレンラミネートベニア修復747歯(2015年7月末現在)について分析した。これまでのメインテナンス期間中に38歯(5%)に事故が認められた.その内訳はう蝕20歯,シェルの亀裂・チッピング11歯,歯質との一体破折3歯,完全剥離2歯,歯内治療(Per)2歯であった.これらの半数は術後5年以内に発生していた.長期に修復物の機能を維持させるためにはう蝕のリスク管理と定期的な咬み合わせの検査と調整が大切であることが確認された.また,長期に経過すると多くの症例で13mmの歯肉退縮が認められた.しかし,歯肉退縮が理由で再修復された症例は皆無であった.本研究の目的はポーセレンラミネートベニア(PLV)修復物の寿命に影響する要因について分析することである。