hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
高齢者の心身機能低下予防に関連する生活・社会的要因に関する研究

平成4年6月に大阪府I市に在住する60歳以上のすべての者16,394人を対象として調査を実施し、16,155人(98.5%)から回答を得た。この中で、「健康であり、たいした病気や障害がなく、日常生活を普通に行っている者」は8,967人いた。これらの健康老人を対象として平成7年12月31日までフォロアップ調査を実施した。その結果、転出296人、死亡349人、把握できた入院・入所16人であった。この間に保健福祉サービスの利用にいたった要援護者は72人であった。転出者については、死亡や身体状況の情報を得ることができなかったため、転出者を除く8,671人を対象として以下の分析を行った。この間の心身機能が低下した者を死亡者、入院・入所者、保健福祉サービス利用者とした。このような心身機能低下者は427人であった。心身機能低下に影響する要因を検討するために、従属変数を心身機能低下の有無とし、独立変数を性別、年齢、前年の健診受診の有無、生きがいの有無、ボランティア活動参加の有無、主観的健康観の有無、受診状況の有無、配偶者の有無、仕事の有無としたロジスティック回帰分析を行った。分析の結果、心身機能の低下リスクについての有意であった変数およびそのオッズ比については、男性に対し女性0.44、前年に健診を受診した者で0.61、生きがいがない者で1.53、主観的に健康と判断している者で0.62、医療機関に受診中の者1.27、配偶者がいる者0.36、仕事をしている者0.60であった。これらの結果から、健康な高齢者が、身体機能の低下にいたらないためには、健診を受診する、生きがいをもつ、主観的に健康と感じれる状況とする、配偶者とできる限りともに生活できるようにする、仕事をすることが重要であり、年齢要因で規定されていないいないことが明らかになった。つまり、高齢者が自立した生き方を獲得し、自立した生活を継続していくことと、健康診査を利用した健康管理が心身機能低下の予防に結びつくことが示唆された。大阪府の中でも人口動態が比較的安定した状況で推移しているA市に在住する60歳以上のすべての者について、すでに高齢者の健康状態と生活実態を明らかにするための実態調査を平成4年6月に実施し16,394人の中で16,155人の者について調査を終了している。平成6年度においてこれらの者について追跡調査を行うために、パソコンを使ってデータベースを構築した。また、これらの者の中の寝たきり度判定基準(厚生省)がJランク(健康老人)の者についての調査に先立ち、要介護の痴呆症であった328人について訪問調査を行い調査方法についての予備的な検討を行った。高齢者の身体・精神状況の変動は大きく、断面的調査のみでは十分でないことが明らかになった。平成4年6月の調査時に寝たきり度判定基準(厚生省)がJランク(健康老人)であった者8,663人について調査を行うにあたって、A市福祉事務所の協力を得て調査員154人に対して研修会を2月に実施すべく準備していたところであるが、この阪神・淡路大震災による災害救助法に基づく指定市となり実施できなかった。この震災による高齢者の心身状況の変化が懸念されるところとなっている。

しかしながら、当初計画した内容の追跡調査を行うための準備を行うことができた。またパイロットスタディとして要介護の痴呆症状をもつ高齢者の調査を行ない、高齢者の心身レベルの評価の安定性についての知見がえられたので、これらの結果を踏まえて、次年度に平成4年6月時にJランク(健康老人)であった者8,663人の追跡調査を準備しているところである。平成4年6月に大阪府I市に在住する60歳以上のすべての者16,394人を対象として調査を実施し、16,155人(98.5%)から回答を得た。この中で、「健康であり、たいした病気や障害がなく、日常生活を普通に行っている者」は8,967人いた。これらの健康老人を対象として平成7年12月31日までフォロアップ調査を実施した。その結果、転出296人、死亡349人、把握できた入院・入所16人であった。この間に保健福祉サービスの利用にいたった要援護者は72人であった。転出者については、死亡や身体状況の情報を得ることができなかったため、転出者を除く8,671人を対象として以下の分析を行った。この間の心身機能が低下した者を死亡者、入院・入所者、保健福祉サービス利用者とした。このような心身機能低下者は427人であった。心身機能低下に影響する要因を検討するために、従属変数を心身機能低下の有無とし、独立変数を性別、年齢、前年の健診受診の有無、生きがいの有無、ボランティア活動参加の有無、主観的健康観の有無、受診状況の有無、配偶者の有無、仕事の有無としたロジスティック回帰分析を行った。分析の結果、心身機能の低下リスクについての有意であった変数およびそのオッズ比は、女0.44、前年に健診を受診した者0.61、生きがいがない者1.53、主観的に健康と判断している者0.62、医療機間に受診中の者1.27、配偶者がいる者0.36、仕事をしている者0.60であった。これらの結果から、健康な高齢者が、身体機能の低下にいたらないためには、健診を受診する、生きがいをもつ、主観的に健康と感じれる状況とする、配偶者とできる限りともに生活できるようにする、仕事をすることが重要であることが明らかになった。つまり、高齢者が自立した生き方を獲得し、自立した生活を継続していくことと、健康診査を利用した健康管理が心身機能低下の予防に結びつくことが示唆された。
GPCR転写ネットワーク制御と骨再生を目指したRNA核酸医療への挑戦

先行研究よりGPCRクラスC受容体の一つであるGLP-1受容体が骨芽細胞上に発現し、BMP-2によりその発現量が上昇することなどが報告されているが詳細は不明である。そこでGPCRクラスBのひとつであるLP-1が骨芽細胞に与える影響を詳細に検討する目的で、次世代シークエンサーによるRNA seqを行い、網羅的な発現遺伝子/転写解析を行った。マウス前骨芽細胞MC3T3-E1を標準培地、BMP-2添加培地およびGLP-1添加培地にて、72時間培養した後、RNAを抽出し、次世代シークエンサー(Hi Seq 2500illlumina社)を用いてRNA seqを行った。シークエンス(paired-end、read長: 4000万)の結果得られたデータからFPKM (Fragments per kilobase of exonmodel per millionmapped reads)値を算出し、既知および未知遺伝子と転写産物についてそれぞれ発現量の比較検討を行った。本解析にはToPHat、Bowtie2、Genedata Expressionistを用いた。同定された遺伝子は約32000個で、BMP2添加で発現量が2倍以上に上昇した遺伝子は約6000個、またGLP-1添加で発現量が2倍以上に上昇した遺伝子は約4000個であった。BMP-2およびGLP-1添加に共通して増加した遺伝子は約2500個で、そのうち新規の遺伝子は約1000個であった。一方、同定された転写産物は約70000個で、BMP-2添加において発現量が2倍以上に上昇した転写産物は約22000個、GLP-1添加において発現量が2倍以上に上昇した転写産物は約19000個であった。またBMP-2およびGLP-1添加に共通して2倍以上上昇した転写産物は約12000個であり、新規の転写産物は約9000個であった。骨代謝制御に関わるGPCR遺伝子転写制御ネットワークを解明し、骨再生遺伝子治療を開発することが本研究の目的である。当該年度では、マウス前骨芽細胞MC3T3-E1を標準培地、BMP-2添加培地およびGPCRアゴニスト(GLP-1など)添加培地にて72時間培養した後、RNAを抽出し、次世代シークエンサー(Hi Seq 2500, Illumina社)を用いてRNA seqを行った。シークエンス(read長: 4000万)の結果からFPKM値を算出し、既知および未知遺伝子と転写産物についてそれぞれ発現量の比較検討を行った。本解析にはToPHat、Bowtie2およびGenedata Expressionistを用いた。RNA seqの結果、同定された遺伝子は約32000個で、BMP2添加により発現量が2倍以上に上昇した遺伝子は約6000個、GLP-1添加により発現量が2倍以上に上昇した遺伝子は約4000個であった。BMP-2およびGLP-1添加に共通して増加した転写産物は約12000個であり、新規の転写産物は約9000個であった。当該年度はGPCRシグナルに関連した骨・糖代謝相互作用に着目して網羅的転写解析を行ったが、骨、糖代謝以外の多くの代謝経路に影響を与えている可能性があり、non-codingを含めた未知の転写産物が関与している可能性が示唆された。RNAseqの結果、各種GPCRアゴニストの影響を受けて発現が上昇する新規の遺伝子や転写産物がある程度同定できたため。そこで今回GLP-1が骨芽細胞に与える影響を詳細に検討する目的で、次世代シークエンサーによるRNA seqを行い、網羅的な発現遺伝子/転写解析を行った。マウス前骨芽細胞MC3T3-E1を標準培地、BMP-2添加培地およびGLP-1添加培地にて、72時間培養した後、RNAを抽出し、次世代シークエンサー(Hi Seq 2500, Illumina社)を用いてRNA seqを行った。シークエンス(paired-end、read長: 4000万)の結果得られたデータからFPKM (Fragments per kilo base of exon model per millionmapped reads)値を算出し、既知および未知遺伝子と転写産物についてそれぞれ発現量の比較検討を行った。一方、同定された転写産物は約70000個で、BMP-

2添加において発現量が2倍以上に上昇した転写産物は約22000個、GLP-1添加において発現量が2倍以上に上昇した転写産物は約19000個であった。またBMP-2およびGLP-1添加に共通して2倍以上上昇した転写産物は約12000個であり、新規の転写産物は約9000個であった。RNA seqにより網羅的転写産物の解析中であるが、標的となりえる新規骨再生誘導転写産物特定にはいたっていないため。先行研究よりGPCRクラスC受容体の一つであるGLP-1受容体が骨芽細胞上に発現し、BMP-2によりその発現量が上昇することなどが報告されているが詳細は不明である。そこでGPCRクラスBのひとつであるLP-1が骨芽細胞に与える影響を詳細に検討する目的で、次世代シークエンサーによるRNA seqを行い、網羅的な発現遺伝子/転写解析を行った。マウス前骨芽細胞MC3T3-E1を標準培地、BMP-2添加培地およびGLP-1添加培地にて、72時間培養した後、RNAを抽出し、次世代シークエンサー(Hi Seq 2500illlumina社)を用いてRNA seqを行った。シークエンス(paired-end、read長: 4000万)の結果得られたデータからFPKM (Fragments per kilobase of exonmodel per millionmapped reads)値を算出し、既知および未知遺伝子と転写産物についてそれぞれ発現量の比較検討を行った。本解析にはToPHat、Bowtie2、Genedata Expressionistを用いた。同定された遺伝子は約32000個で、BMP2添加で発現量が2倍以上に上昇した遺伝子は約6000個、またGLP-1添加で発現量が2倍以上に上昇した遺伝子は約4000個であった。BMP-2およびGLP-1添加に共通して増加した遺伝子は約2500個で、そのうち新規の遺伝子は約1000個であった。一方、同定された転写産物は約70000個で、BMP-2添加において発現量が2倍以上に上昇した転写産物は約22000個、GLP-1添加において発現量が2倍以上に上昇した転写産物は約19000個であった。これまでのデータをもとに、GO解析、クラスタリング解析等を継続していく予定である。今後GLP-1以外のGPCRについてもRNA seqを行い網羅的転写産物解析を行うとともに、新規骨再生誘導転写産物(機能未知も含む)の特定を目指す予定である。これまでの結果をもとに、さらにin vitroの実験を継続し詳細な解析を行っていく必要があるため。研究進行度が予定より遅れており、次年度以降に当初予定していた実験を継続予定である。このため使用額が予定より少なく次年度に繰り越されている、。細胞培養実験およびシークエンスにかかる消耗品、データマイニングに必要なHDDなどの経費を見込んでいる。
アカデミックＣａｎ－Ｄｏグリッドに基づく日本語教材モデルの設計

本研究は,日本の大学等の高等教育機関で学ぶ日本語学習者が必要な日本語およびアカデミック・スキルを,can-do statementによる能力記述文により提示し,その能力記述の目標を達成するための学習項目と教材を関連づけたコンテンツ「アカデミックCan-doグリッド」の構築を目指すものである。これは,能力記述とそれに対応した教育コンテンツが複合的につながった,実用性の高い教材モデルとなる。さらにこれは,第二言語としての日本語教育のみならず,第一言語としてのアカデミック日本語教育,すなわち日本人大学生へのアカデミック日本語教育にも大きく貢献できるものである。本研究は日本の高等教育機関で学ぶ日本語学習者に必要な日本語およびアカデミック・スキルを,実証的データを基に作成したCan-do Statementにより提示し,その能力記述の目標を達成するための教材と関連づけた「アカデミックCan-Doグリッド」の構築を目指すものである。この研究により,アカデミック場面で求められるスキルとそれに対応した学習教材が複合的につながった,きわめて汎用性と実用性の高い教育コンテンツを提供することが可能になる。平成25年度は,日本の高等教育機関において必要な,いわゆるアカデミック・ジャパニーズおよびアカデミック・スキルの調査・分析のための基礎研究として以下のことを行った。1)アカデミック・ジャパニーズについての先行研究調査:これまでの日本語教育におけるCan-Do Statement研究,アカデミック・ジャパニーズ研究の先行研究,および日本の大学での初年次教育における先行研究をもとに,高等教育機関で求められる能力とは何かを分析した。さらに,日本語教育の分野を対象にこれまでに作成されたアカデミック・スキルに関する教材を分析し,アカデミック・ジャパニーズ分野において必要な能力とその育成のための教育方法について研究を進めた。2)実際のデータに基づいたアカデミック・ジャパニーズ・スキル研究:実際の大学の授業において課題達成の際にどのようなスキルが必要であるかを探るため,日本国内の大学における演習授業で発表された留学生(日本語学習者)と日本人学生のレジュメを分析し,その結果からアカデミックな場面における日本語教育にどのような教育・支援が必要かを分析した。これらの調査・研究結果から,今後はアカデミックな場面において必要とされる能力とその育成に必要な教育および教材の開発を進めていく予定である。平成26年度は,平成25年度に行ったアカデミック・ジャパニーズについての先行研究調査およびアカデミック・スキルの調査・分析のための基礎研究をもとにして、(1)アカデミック・ジャパニーズとは何かを先行研究を踏まえて明らかにし、(2) (1)に照らして現行のアカデミック・ジャパニーズ教材の特性を分析した。その結果、以下のことが明らかになったー母語話者用、母語話者/上級留学生共用の教材の多くは、社会で必要とされる能力(例えば問題解決能力、論理的思考)等の育成を目指した大学初年次教育用教材であるものが多い一報方、留学生用中上級教材では、読む・書くの日本語技能指導が主であり、日本語力がまだ不十分で、知識や問題解決能力なども未熟である学部留学生や研究生に適した教材がほとんどないことが明らかになった。これにより、今後の教材開発への示唆を得ることができた。最終年度である平成27年度は、これまでの研究結果をもとに、アカデミック場面で必要な日本語力育成のための教育コンテンツの試作を行う。本研究は日本の高等教育機関で学ぶ日本語学習者に必要な日本語およびアカデミック・スキルを,実証的データを基に作成したCan-do-Statementにより提示し,その能力記述の目標を達成するための教材と関連づけた「アカデミックCan-Doグリッド」の構築を目指すものである。これまでに、(1)アカデミック・ジャパニーズとは何かを先行研究を踏まえて明らかにし(平成25年度)、(2) (1)に照らして現行のアカデミック・ジャパニーズ教材の特性を分析した(平成26年度)結果、今後の教材開発への示唆を得ることができた。平成27年度は、これらの研究成果を論文にまとめるとともに、これまでの研究結果をもとに、アカデミック場面で必要な日本語力育成のための教育コンテンツの試作版の制作を行った。平成28年度は、その試作版の完成に向けて研究を進めて行く。平成27年度は、これまでの研究成果を論文としてまとめたことに加え、教材の試作を進めることができた。本研究は日本の高等教育機関で学ぶ日本語学習者に必要な日本語およびアカデミック・スキルを実証的データを基に作成したCan-do Statementにより提示し、その能力記述の目標を達成するための教材と関連付けた「アカデミックCan-doグリッド」の構築を目指すものである。この研究により、日本の大学で学ぶ留学生と日本人学生がアカデミック場面で求められるスキルとそれに対応した学習教材が複合的につながった、きわめて汎用性と実用性の高い教育コンテンツを提供することが可能になる。

これまでに、(1)アカデミック・ジャパニーズとは何かを先行研究を分析して明らかにし(平成25年度)、(2)(1)に照らして現行のアカデミック・ジャパニーズ教材の特性を分析し、その成果を日本語教育学会で発表した(平成26年度)。さらに、(3)研究論文にまとめるとともに(平成27年度)、それらの研究成果をもとに、アカデミック場面で必要な日本語力育成のための新たな教材の試作版を完成させた(平成28年度)。この教材は、「21世紀型スキル」と呼ばれる今後の大学教育で求められる能力と、言語能力を高めることをねらいとして作られており、日本語を学ぶ留学生のみならず、日本語母語話者の大学生の初年次教育におけるアカデミック・スキルの育成にも汎用性のあるものとなっている。その実践研究の成果を翌年度(平成29年度)の日本語教育学会で発表する予定である。本研究は,日本の大学等の高等教育機関で学ぶ日本語学習者が必要な日本語およびアカデミック・スキルを,can-do statementによる能力記述文により提示し,その能力記述の目標を達成するための学習項目と教材を関連づけたコンテンツ「アカデミックCan-doグリッド」の構築を目指すものである。これは,能力記述とそれに対応した教育コンテンツが複合的につながった,実用性の高い教材モデルとなる。さらにこれは,第二言語としての日本語教育のみならず,第一言語としてのアカデミック日本語教育,すなわち日本人大学生へのアカデミック日本語教育にも大きく貢献できるものである。平成26年度(2年目)は,アカデミック場面で必要な日本語力育成のための教育コンテンツ制作に向けての調査・研究を行うことを目的にしており,その成果が得られたことから。平成28年度は、これまでの研究成果をもとに教材を試作し、申請者らが担当する日本語コースでの試用結果をもとに教材の試作版の完成を目指す。日本語教育平成27年度(3年目)は、これまでの研究成果をもとに、教材を試作し、申請者らが担当する日本語コースでの試用結果をもとに教育効果を検証する。その結果を踏まえて教材の見直しを行い,最終的には教材のモデルを完成させ,アカデミックCan-doグリッド構築に向けての教材コンテンツを整備する。平成25年度(1年目)は,アカデミック・ジャパニーズ・スキルの調査・分析のための基礎研究を行うことを目的にしており,そのための基礎データの分析は順調に進んでいることから。研究を進展させていった結果、その成果物である教材の作成内容と手順を、当初予定していたものから一部変更し、より完成度の高いものにすることにしたため。当初の計画では,アカデミック場面において必要な能力の観察データ収集のために,留学生のアカデミック場面における言語行動調査も予定しておりそのための謝金および機材購入のための予算を計上していたが,研究を進めていく過程で再度検討する必要があり,平成26年度中は実施しなかったため。また、研究発表した学会が申請者らの近隣で開催されるものが多く、旅費の支出も予定より少なく済んだため。
モデル動物による好酸球性中耳炎の内耳病態解明

好酸球性中耳炎は1992年に「気管支喘息患者に合併する難治性中耳炎」として初めて報告された。本疾患の問題点は従来の抵抗性であること、また中耳炎でありながら不可逆的な内耳性難聴を引き起こす点である。好酸球性中耳炎患者のおよそ半数に内耳性難聴の合併を認め、6%が重度難聴(聾)に至ることがわかっている。内耳性難聴が従来の慢性中耳炎の10倍もの速度で進行するとする報告もある。これらは患者のQOLを著しく阻害する重大な問題である。「中耳の炎症がどのように内耳性難聴を進行させるのか」を解明するため、好酸球性中耳炎モデル動物の内耳標本を用いて好酸球性炎症に関わる種々の因子の役割をについて研究を行う。
持続時間の異なる激運動とそのトレーニングに対する中枢直流電気刺激の効果

近年、脳神経科学の進展に伴って身体運動と脳の可塑的変化の関係についても理解が深まりつつある。特に、非侵襲的な脳や脊髄刺激方法の開発によって、身体運動のパフォーマンスを可塑的に変化させる事が可能であると考えられている。本申請研究課題では、運動強度と持続時間によって規定される様々なペダリング運動のパフォーマンスが、経頭蓋的直流電気刺激(tDCS)と経脊髄的直流電気刺激(tsDCS)によってどの様な修飾を受けるか、ならびにtDCSもしくはtsDCSを加えたトレーニング効果について検討し、脳と脊髄の持つ潜在的な可能性と運動パフォーマンス向上の関係の一端を明らかにすることが目的である。
核内レセプターによる生体機能調節機構の解明に関する研究

申請者は、代表的核内レセプターであるグルココルチコイドレセプター(GR)の分子生物学的研究を過去10年間にわたり継続し、その転写調節における意義を明らかにしつつある。そこで、これまでの研究で得られた成果と技術を基盤に、GRをモデルとして核内レセプターによる生体機能調節機構を明らかにすることを目的とした。1.GR遺伝子破壊細胞を作成しGR標的遺伝子を同定するとともにその機能を明らかにしたRNAiを用いてGRをノックダウンする系、Cre-loxシステムを用いたアデノウイルスによるGR発現系を立ち上げ、すでにいくつかの細胞で動作を確認した。GR標的遺伝子発現を確認したとともに、各組織におけるグルココルチコイドの作用機構を解明した。2.GR遺伝子破壊マウスを用いてGRとその標的遺伝子の生理機能に与える作用を明らかにしたG.Schutz博士(ドイツ癌研究センター)との共同研究により、GR遺伝子破壊マウスを各種条件下で飼育後屠殺し、各組織よりRNAを抽出後DNAチップなどを用いてGR標的遺伝子の発現プロフィールを解析した。3.グルココルチコイドによる組織特異的遺伝子発現調節機構を明らかにした合成グルココルチコイドであるコルチバゾールCVZを用いて、GRのリガンド結合領域の機能的多様性を実証した。また、AF-1転写活性化領域に作用する共役因子のレパートリーはCVZ結合GRとDEX結合GRでは明らかに異なり、リガンドによる組織特異的グルココルチコイド応答性遺伝子発現機構が明らかにされた。質量分析法を用いたプロテオーム解析やクロマチン免疫沈降法などを用いてより詳細な分子機構を解明した。核内レセプターとしてグルココルチコイドレセプター(GR)をモデルに用い、その生体機能調節における意義を究明した。1)GR機能の選択的発現に関する研究ミネラルコルチコイドレセプター(MR)との対比により、GRのリガンド結合領域C末端に受容体選択性を想定する領域が存在することが明らかになった。また、コルチバゾールはGRに選択的リガンドであることを明らかにした。また、胆汁酸ウルソデオキシコール酸がやはりGR選択的リガンドであり、しかも、転写活性化作用に比して抑制作用を誘導するものであることを明らかにした(J.Biol.Chem.に2報)。これらのリガンドはGRを介した生体機能の発現に際してよい材料であり、今後の研究に使用される予定である。2)GR下流の遺伝子発現の解析DNAチップを用いてGR下流の遺伝子発現を各臓器で解析した。臓器特異的パターンが確認され、GR機能の臓器特異的発現のメカニズムの解明に進展している。3)GR遺伝子破壊細胞を用いた実験F9細胞でGR遺伝子を破壊する試みを行っている。いくつかの株でDNAチップによりGR下流の遺伝子発現パターンを解析した結果、野生型とは大きく異なっていた。2)の結果とあわせてGRによる各遺伝子の発現調節機構を検討中である。そこで、これまでの研究で得られた成果と技術を基盤に、新たに発生工学的手法をもとりいれ、GRをモデルとして核内レセプターによる生体機能調節機構を以下の4つの柱から明らかにすることを目的とする。1.GR遺伝子破壊細胞を作成しGR標的遺伝子を同定するとともにその機能を明らかにする2.GR遺伝子破壊マウスを用いてGRとその標的遺伝子の生理機能に与える作用を明らかにする3.GR標的遺伝子の発現調節機構と生体機能調節における意義を明らかにする4.グルココルチコイドによる組織特異的遺伝子発現調節機構を明らかにする1.GR遺伝子破壊細胞を作成しGR標的遺伝子を同定するとともにその機能を明らかにするRNAiを用いてGRをノックダウンする系を立ち上げ、すでにいくつかの細胞で動いている。今後、標的遺伝子発現を確認する。

2.GR遺伝子破壊マウスを用いてGRとその標的遺伝子の生理機能に与える作用を明らかにするG.Schutz博士(ドイツ癌研究センター)との共同研究により、GR遺伝子破壊マウスを各種条件下で飼育後屠殺し、各組織よりRNAを抽出後DNAチップなどを用いたGR標的遺伝子の発現プロフィールを解析中である。3.グルココルチコイドによる組織特異的遺伝子発現調節機構を明らかにする合成グルココルチコイドであるコルチバゾールCVZを用いて、GRのリガンド結合領域の機能的多様性を実証した。また、AF-1転写活性化領域に作用する共役因子のレパートリーはCVZ結合GRとDEX結合GRでは明らかに異なり、リガンドによる組織特異的グルココルチコイド応答性遺伝子発現機構が明らかにされた。今後、クロマチン免疫沈降法などを用いてより詳細な分子機構を解明する。申請者は、代表的核内レセプターであるグルココルチコイドレセプター(GR)の分子生物学的研究を過去10年間にわたり継続し、その転写調節における意義を明らかにしつつある。そこで、これまでの研究で得られた成果と技術を基盤に、GRをモデルとして核内レセプターによる生体機能調節機構を明らかにすることを目的とした。1.GR遺伝子破壊細胞を作成しGR標的遺伝子を同定するとともにその機能を明らかにしたRNAiを用いてGRをノックダウンする系、Cre-loxシステムを用いたアデノウイルスによるGR発現系を立ち上げ、すでにいくつかの細胞で動作を確認した。GR標的遺伝子発現を確認したとともに、各組織におけるグルココルチコイドの作用機構を解明した。2.GR遺伝子破壊マウスを用いてGRとその標的遺伝子の生理機能に与える作用を明らかにしたG.Schutz博士(ドイツ癌研究センター)との共同研究により、GR遺伝子破壊マウスを各種条件下で飼育後屠殺し、各組織よりRNAを抽出後DNAチップなどを用いてGR標的遺伝子の発現プロフィールを解析した。3.グルココルチコイドによる組織特異的遺伝子発現調節機構を明らかにした合成グルココルチコイドであるコルチバゾールCVZを用いて、GRのリガンド結合領域の機能的多様性を実証した。質量分析法を用いたプロテオーム解析やクロマチン免疫沈降法などを用いてより詳細な分子機構を解明した。
日本の現代音楽形成におけるH.カウエルとの相互受容

アメリカ前衛音楽のパイオニアである作曲家ヘンリー・カウエルは日本文化から大きく影響を受けている。本研究ではカウエルと日本の関わりについて解明するため、カウエル資料を所蔵するニューヨーク公立図書館とワシントン米議会図書館を中心に調査を行った。その成果は国内外の学会および総括的な実技演奏会において発表した。「カウエルが出会った日本そしてカウエルが日本にもたらしたもの」をテーマに現代音楽の潮流に新たな視点を加えることができた。平成26年度にはカウエル関連の資料閲覧・収集のため2回の渡米調査を行った。1回目(平成26年9月)のニューヨーク公立図書館での調査では203Boxという膨大な量のカウエル・コレクションの中から、来日した際の資料(多様な個人的資料およびロックフェラー財団へのレポートを含む)や自筆譜(尺八のための「Universal Flute」を含む)等を入手。カウエル研究家であるジュリアード音楽院教授のJ.サックス氏へインタビューも実施。2回目(平成27年23月)のワシントン米議会図書館では、カウエル自筆譜を調査。中でも菅野衣川の委嘱による最初期の作品「Creation Dawn(27曲)」の楽譜を入手できたことは非常に大きな成果であった。カウエルの楽譜には出版されていないものも多く、初のトーンクラスター作品「Adventures in Harmony」や初の内部奏法作品「The Sword of Oblivion」などの貴重な自筆譜を確認できたことは本研究にとって大きなステップとなった。国内では日本から入手可能な文献、楽譜、音源資料を調査、検証。特に「Ongaku」の音源、「箏コンチェルト第2番」の楽譜は重要であった。菅野衣川に関する論文も入手。研究の成果としては相模女子大学紀要に論文「ヘンリー・カウエルの箏コンチェルト第2番創出の経緯」を発表。箏奏者唯是震一氏へのインタビュー調査を活かすことができた。ニューヨーク公立図書館で入手した資料から最新と思われる情報も提供した。さらに今後の実施計画に対して、College Music Society International Conference(平成27年6月シュトックホルム/ヘルシンキ)の発表審査を通過。平成28年度に行う実技発表(東京オペラシティ・リサイタルホールでの演奏会)の準備も始めている。平成27年度にはカウエル関連の資料閲覧・収集・調査のため2回の渡米調査を行った。1回目(平成27年9月)のニューヨーク公立図書館での調査では、昨年度に引き続き203Boxという膨大な量なカウエル・コレクションの中から「日本との関係」に焦点を絞り、書簡類、写真類などを調査することができた。今回はカウエル・コレクションの著作権を管理しているThe David & Sylvia Teitelbaum Fundに事前に承諾を得ることにより、研究のための撮影をスムーズに行うことができた。2回目(平成28年3月)のサンフランシスコ訪問では、スタンフォード大学図書館での資料調査およびサンフランシスコとメンロパークでの実地調査を行うことができた。カウエルが生まれ育ったサンフランシスコ周辺の土地風土そのものを感じ取ることも主眼に置いており、生家があったメンロパークおよび幼少期にアジア人移民と交流を持った市内の地域を実地調査できたことは、本研究者にとって非常に意義深かった。さらに当時の日系人居留区の地理/歴史的な変容の概要をカウエルの成育時に合わせて把握することができた。2回の渡米による資料調査、実地調査は順調に進んだ。ニューヨーク公立図書館のカウエル・コレクションの全てを網羅できたわけではないが(特に音源資料は末調査)「日本との関係」に関する資料はおおむね調査できた。サンフランシスコにおける実地調査はカウエルの成育地を実際に目の当たりにすることができ、今後の研究に向けて大いなる刺激となった。国際学会における発表では昨年度の調査で入手した「Creation Dawn」の楽譜をもとに発表することができ、参加者からもカウエルの新しい側面を発見できたと好評であった。本研究最終年度の平成28年度には主に研究の成果を発表する機会を設けた。平成28年6月には日本音楽表現学会において「ヘンリー・カウエルと日本の関係性」と題した口頭発表を行い、前年度のニューヨークとサンフランシスコでの調査で得た一次資料をもとに、カウエルと日本の関係性の概要を演奏を交えて紹介した。7月に英国で開催されたInternational Society for Music Educationにおいては「Multicultural and Unique Educational Upbringing that Made Henry Cowell a Pioneer ofAmerican Avant-Garde」と題したポスター発表を行い、幼いころから日本人らと関わったカウエルの多文化性と特異な教育的背景が後の前衛性に影響を与えたのではないかとする考察をまとめた。研究の集大成として11月に東京オペラシティにおいて実技発表(演奏会)「大竹紀子企画コンサート:ヘンリー・カウエルが出会った日本」を行い、菅野衣川から依頼された最初期ピアノ作品「創造の夜明け」、西洋人初の尺八作品「ユニヴァーサル・フルート」(演奏:藤原道山)、雅楽から発想を得た「ハーモニカ・コンチェルト」(演奏:和谷泰扶)、唯是震一のために書いた「箏コンチェルト第2番」(演奏:後藤幹子)を解説を交え披露した。平成29年3月にはニューヨーク公立図書館にて未発表の貴重な録音媒体などを調査した。研究期間全体を通して、研究目的に挙げた「カウエルがカリフォルニアで出会った日本」および「日本的作品」についてはほぼ全体像を解明することができた。アメリカ前衛音楽における日本文化の重要性の一潮流を探求したことに本研究の意義があり、20世紀の日本音楽について考察する上でも新しい視点を加えることができた。

本研究ではカウエルと日本の関わりについて解明するため、カウエル資料を所蔵するニューヨーク公立図書館とワシントン米議会図書館を中心に調査を行った。その成果は国内外の学会および総括的な実技演奏会において発表した。「カウエルが出会った日本そしてカウエルが日本にもたらしたもの」をテーマに現代音楽の潮流に新たな視点を加えることができた。2回の渡米による資料調査は順調に進んだ。特にワシントン米議会図書館における自筆譜調査では必要な資料は全て入手できた。しかし、ニューヨーク公立図書館における調査では時間的制約と資料数の多さから、かなりの量を取りこぼした。再度の調査が必要である。日本における資料収集は順調に進んだ。論文執筆および今後の発表の準備も計画通り行うことができた。本助成事業の最終年度では基本的にこれまでの調査の成果を発表することにより、準備を通した考察、発表に基づいたフィードバックを得て、さらなる研究への発展課題としたい。学会発表としては平成28年6月の日本音楽表現学会、7月のInternational Society for Music Educationにおける発表を予定している。集大成として11月20日に東京オペラシティ・リサイタルホールにおいてカウエルの「日本的」作品を演奏し、演奏実践を通した考察を深めたい。現代音楽、ピアノ演奏カウエル研究家サックス氏へのインタビューにより、イエール大学、コロンビア大学、ニュースクール等において当初計画していた調査は必要ないことが判明したため、今後はニューヨークおよびサンフランシスコでの調査に焦点を置きたい。平成27年度はニューヨーク公立図書館での再調査、サンフランシスコでのカウエルの出生地およびスタンフォード大学での調査、シュトックホルム/ヘルシンキで行われるCollege Music Society International Conferenceでの発表のため、計3回の海外渡航を予定している。平成28年度には実技発表(演奏会)、国内外の学会での発表を計画している。特に演奏会は「カウエルが出会った日本」と題して邦楽器も含めたカウエルの“日本的作品"を紹介する、現代/伝統両方の日本音楽にとって有意義な実技発表の場としたい。主に、2回目の渡米調査が3月に行われたため、年度内の算出に間に合わなかった理由による。主に、2回目の渡米調査が2月から3月にかけて行われたため、年度内の算出に間に合わなかった理由による。次年度に予定している1回の海外渡航(国際学会発表)、文献・資料購入、実技発表(演奏会)に合わせて上記を算出する。次年度に予定している3回の渡航調査と合わせて上記を算出する。
戦後英文学と文化、社会、労働の関係の研究――レイモンド・ウィリアムズを中心に

20世紀英文学と文化との関係を、文化、社会、労働といった観点から検討し、時代の変化への反応としての文学と文化の一側面を明らかにした。とくに、D・H・ロレンス、クリストファー・コードウェル、リチャード・ホガート、レイモンド・ウィリアムズといった作家、批評家の仕事に焦点をあてた。ウィリアムズの、これまでにあまり論じられることがなかった_Second Generation_や_Loyalties_といった小説を論じた。ニューレフト初期において重要な_Universities and Left Review_等の記事の分析にも取り組み、キーワードから現代社会を批評するという試みで共著の本を出版した。平成24年度は、前年度に引き続き、レイモンド・ウィリアムズの文学と文学論が、いかに同時代の政治的・社会的な動きと関連したものだったかを明らかにするべく研究を進めた。具体的には、ニューレフト運動形成の重要な中心となった雑誌_Universities and Left Review_誌の記事を精査し、同時代における政治的イデオロギーとそれへの「文化」の反応を、ウィリアムズやリチャード・ホガートら、ニューレフトに繋がる文学者、文学研究者の論考、発言を軸に分析し、さらにそれにドリス・レッシングの短篇の読解を交えて論じるという試みを、夏に開催されたテクスト研究学会のシンポジアムで企画を自ら立て、そこで発表をおこなった。また、これまでほとんど研究されてこなかったレイモンド・ウィリアムズの小説の分析研究をさらに進め、初期ウェールズ三部作の二作目をなす_Second Generation_を仔細に分析し、それを、同時期に書かれた影響力の甚大な著作_The Long Revolution_と絡めつつ論じるという発表を、ウェールズのスウォンジー大学の研究者たちと共催した国際シンポジアム"Long Revolutions in Wales and Japan: RaymondWilliams in Transit III"でおこない、当地の研究者たちとの討議を通して、さらなる今後の研究のヒントや契機を掴むことができた。この研究の成果は当該年度末の3月に刊行されたプロシーディングズにおいて出版した。また、上記研究に関連する資料の調査研究を3月にイギリスでおこない、進めている研究の裏付けとなる論文や記事等を確認し、今後の研究展開に資するテクストを検討することができた。20世紀英文学の流れのなかで、とくに第二次世界大戦後の文学と批評、文学と文化とのかかわりを、文化と社会、労働といった鍵概念から再考する試みを3箇年にわたっておこなってきた。最終年度となった平成25年度においては、これまでの期間に研究してきた内容の、とりわけ基礎的な土台をなす部分を公にすることができた。そのひとつが、当研究における分析の中心に位置する作家・批評家レイモンド・ウィリアムズの諸作品の精読に依拠しつつ、ひろく文化と社会との関係とそれにかかわる諸問題を、ウィリアムズの『キーワード辞典』に倣いつつ現代社会とアクチュアルにつながる議論としてキーワード別に論じた『文化と社会を読む批評キーワード辞典』(研究社)を共著で出版したことである。また、レイモンド・ウィリアムズの批評的な文章のうち、これまでに日本語としてほとんど紹介されていない論文やエッセイを翻訳するという作業にも数年をかけて取り組んできたが、これらをまとめて『共通文化にむけて文化研究I』(みすず書房)として共訳で出版した。ここでまとめられたウィリアムズの論考は、ウィリアムズについての研究のみならず、彼が重要な役割をはたしたブリティッシュ・ニューレフトの研究においても、20世紀英文学を再検討し、新たな系譜を描き出す試みにおいても、文学と文化研究の問題含みの境界を問い直し、新自由主義や労働の問題など、社会の全般的な諸問題と文学との関係を論じる試みにおいても不可欠な文献である。とくに、これまでに日本では紹介されておらず、近年のポストコロニアル研究やデヴォリューションをめぐる問題などで注目されるウェールズについてのウィリアムズの論考を私の担当で訳したが、こうした論考を日本語で紹介できることの意義は極めて大きいと言える。平成23年度は、イギリスの20世紀における文学と文化を、主に労働を中心とした社会的な視点から分析するための土台をなす文献の研究、資料調査、そしてそれらに基づいた研究発表を行った。レイモンド・ウィリアムズを中心としたニューレフトの文化論・社会論は、時代的には1950年代から60年代にかけてに関して論じられることが多いが、モダニティをめぐる論点との関連性が重要であるとの考えから、1920年代から第二次大戦後にいたる文学と文化の言説の中でニューレフトを再考する試みとして、クリストファー・コードウェルとD・H・ロレンスに着目してウィリアムズらの議論を検討する研究に取り組み、これは6月の日本ロレンス協会のシンポジウムにおいて発表した。また、ニューレフトを論じる際には、20世紀におけるナショナリズムと、イギリスのみならずアメリカ等の社会的な諸問題との関係においても、その歴史的意味を検討する必要がある。

ニューレフトの論客たちが、資本主義に対する批判をその思想的根拠としていることからして、20世紀における資本のグローバルな拡張と、その裏面にあるとも言えるナショナリズムとが、いかに同時代の文化論に影響を与えていたのかを、ニューレフトのさまざまな論考をテクスト分析すると同時に、ナショナリズムやグローバリズムをめぐる理論的文献を研究することをとおしたニューレフトの文化論の再検討を試みた口頭発表を、11月には日本英文学会関東支部のシンポジウムで発表した。また、上記の発表の基となった考察、発表をとおして得られた知見等を資料的に裏付けるための調査も行ない、成果を得た。レイモンド・ウィリアムズの仕事を、同時代の政治的、社会的、文化的な動きと連関させながら分析するという本研究課題のこれまでの進捗状況をふりかえると、平成23年度はナショナリズムなどの政治的な動向とウィリアムズについての議論を結びつけた研究をおこない、平成24年度の前半では、それをより具体的なテクスト(_Universities and Left Review_誌のような時代背景を如実に反映しているテクスト)の分析と交叉させる試みを発表することができ、さらに平成25年度においても進めていくべき課題を、この方向性の中に見出すこともできた。これに加え、ウィリアムズの小説研究も前に進めることができた。ウェールズでおこなった発表で論じた_Second Generation_は、第二次大戦後のイギリス社会の諸問題、すなわち「階級」「ナショナリズム」「脱植民地化」そして「労働」の問題に深く切り込んだ小説であり、この分析を通して、社会と文学・文学批評がウィリアムズにおいてひじょうに密接に関連し、独自の文化論の礎石となっていることを発表でき、プロシーディングズのかたちで出版できたことで、当初計画していたところまで概ね研究を進めることができているものと考えている。研究課題の中心となるのは第二次大戦後のニューレフトを中心とした文学と文化をめぐる議論の考察であるが、平成23年度の前半には20世紀の前半に係る文化論と社会論を検討しながらそれをニューレフトに関連付ける研究と発表を行なうことができたこと、また年度の後半には、イギリスのニューレフトの言説を、イギリスのみならずアメリカにおけるナショナリズム論との関係から検討し、ひろく19世紀末から現代にまで至る資本主義の変容とグローバル化の進展の中で文学と文化をめぐる議論が持つ意味を検討に附せたこと、そして、予定していた文献の読解、資料調査も計画通りに進捗したこと、以上の3点から、おおむね順調に研究は進んでいると言える。ひとつには、「社会」「文化」「労働」といったようなキーワードを軸に現代イギリスの文化を研究していることから、こうしたキーワードを幅広い意味での文化論というかたちで文字にして出版することを今年度中にめざしている。ふたつには、平成24年度にウェールズでおこなった発表の中心であったウィリアムズの小説についての研究を、より詳しい分析と新しい研究を加えるかたちで論文化することをめざしている。また、これまでの研究で一貫してとりくんできた小説形式の研究とウィリアムズの文学・文化論についての分析を総括したいと考えている。
超高速・超並列光エレクトロニクス

光通信および光記憶の実用化、普及により、光エレクトロニクスは通信・情報処理分野における中核技術のひとつとしての地位を確立した。しかし、21世紀初頭に実現が期待されるデジタル統合サ-ビス網、各種画像情報デ-タベ-ス等の効果的な運用には、光エレクトロニクス技術の一層の飛躍的発展、特に超高速・超並列光エレクトロニクス技術の確立が不可欠であり、またそれに対する期待も大きい。この分野の研究を大学研究者が一致協力して推進するために企画され、平成3年度より開始されることを決定した、重点領域研究「超高速・超並列光エレクトロニクス」の準備を目的として組織されたのが、本総合研究である。上記重点領域研究の採択通知を受けた後、以下のような活動を進めた。*8月:本総合研究(B)の改訂研究計画調書の作成・提出*9月:各分担者へ研究予定内容等の具体的問い合せ*10月9日:第1回主査会議/総括班会議、重点領域研究・研究計画調書作成打ち合せ、運営方針決定*10月末日:研究計画調書作成・提出*12月:重点領域研究ニュ-スレタ-第1号作成・刊行*1月28日:第2回主査会議*1月29日:シンポジウム開催*3月:重点領域研究ニュ-スレタ-第2号作成・刊行予定上記シンポジウムにおいては、研究分担者35名全員が、それぞれのこれまでの研究成果、ならびに今後の研究計画について発表した。極限光デバイスの基礎8件、基本光デバイスの高機能化7件、超高速および超多重光伝送・光ネットワ-ク7件、超並列光演算システム6件、多次元情報画像処理7件の発表に関して種々の意見交換が図られ、来年度からの重点領域研究が充実したものとなるとの確信が得られた。
精神分裂病者の情動表出と情動体験に関する研究

情動表出に問題を持つ統合失調症者(以下SC)について臨床実践を用いて検討した。以下、交付申請書の研究実施計画(研究13)に対応させ、今年度の実績を報告する。「研究1」長期入院中のSCに対し、心理劇の関わりとSCの自発性・非言語的情動表出との関係を検討した。セッションの評定とセッションの特徴を分析した結果、過去に実体験があるなじみやすい場面、親和性のある場面、過去の大切な思い出を取り扱った場面において他者に了解可能な適切な情動表出が増すことが示された。(日本心理劇学会第9回発表論文集掲載;2003)。現在、発表内容を論文へまとめ、投稿の準備中である(情動の平板化ある統合失調症者の自己表現と自発性を促すテーマおよび場面設定の特徴;投稿準備中)。なお、心理劇における情動表出評定スケールついて前年度の学会発表を修正し投稿、受理された(心理劇研究印刷中;2004)。「研究2」SSTにおけるSCの会話から情動表出のあり方を検討した。その結果、スキルを習得するだけではなく、安心して自己表現できる場をグループが提供し、体験を伴えるロールプレイ場面を行うことにより、非言語情動表出の適切性が増すことが示された(第23回日本心理臨床学会2004:発表予定)。「研究3」SCの就労支援に対する具体的援助を通し、生活の場におけるSCの情動表出および臨床援助のあり方を検討した。その結果、SCの主体性を重視し、等身大の自己認識を促す関わりが情動表出および就労問題への取り組み方に影響を示す事がわかった(第27回九州集団精神療法研究会発表論文集掲載;2004)。実証研究も継続し、VTR視聴場面におけるSCの情動表出・情動体験について情動平板化の程度の違いから比較を行った(統合失調者の情動平板化が情動表出と情動体験に与える影響:心理学研究修正査読中)。また健常者とSCの情緒的な刺激の受け止め方、情動体験のあり方について検討し(第68回日本心理学会;2004発表予定)、SCは否定的情動体験に健常者は肯定的情動体験へ反応しやすいことが示された。「精神分裂病者の情動表出と情動体験に関する研究(心理臨床学研究掲載、2002)」では、健常者(以下NOR)との比較から、精神分裂病者(以下SC)の情動表出は常に乏しくはなく、特定の刺激に対して楽しさを感じ、この刺激に対してNORと表出が変わらないことが示された。今年度は、NORのこれらの情緒刺激に対する情動体験を検討するため、120名の大学生を対象にVTR刺激に対する認知を測定した(「VTR視聴場面における統合失調症者と対象者の情動体験の比較」第67回日本心理学会、2003年発表予定)。その結果、NORとSCの情動体験に違いはみられなかった。次に、SCの情動平板化の程度からみた情動表出・体験について、VTR視聴場面による検討を行なった(「統合失調者の情動平板化が情動表出と情動体験に与える影響」心理学研究、投稿中)。結果より、情動表出にのみ情動平板化の程度が影響し、情動平板化軽度群は重度群よりも「興味」の表出が多かった。これより、情動平板化の違いは、表情筋の動きの差ではなく、事象に対する興味・関心のあり方の違いにあると考えられた。さらに本年度は、臨床場面(対人場面)でのSCの情動表出を検討するため、精神科入院中のSCの方達を対象に、集団心理療法である心理劇を行なうグループを形成する取り組みに力をいれた。これらの活動は、同意の元、VTRにて活動を記録・分析している。この場面を通して、SCが他者とのコミュニケーションを円滑に行いやすくなる関わりや場のあり方について検討する。本年は、評価表の作成を試みた(「個人評価を用いての試みより治療的な関わりを目指して」西日本心理劇学会発表、2003、2月16日)。また、入院中ではない、デイケア通院中の方を対象としたグループ活動も開始している。平成15年度は、これらのグループを継続し、他者の関わりにおけるSCの情動表出と情動体験のあり方、SCの会話における情動調節のあり方について検討を行なう。

その結果、スキルを習得するだけではなく、安心して自己表現できる場をグループが提供し、体験を伴えるロールプレイ場面を行うことにより、非言語情動表出の適切性が増すことが示された(第23回日本心理臨床学会2004:発表予定)。「研究3」SCの就労支援に対する具体的援助を通し、生活の場におけるSCの情動表出および臨床援助のあり方を検討した。その結果、SCの主体性を重視し、等身大の自己認識を促す関わりが情動表出および就労問題への取り組み方に影響を示す事がわかった(第27回九州集団精神療法研究会発表論文集掲載;2004)。実証研究も継続し、VTR視聴場面におけるSCの情動表出・情動体験について情動平板化の程度の違いから比較を行った(統合失調者の情動平板化が情動表出と情動体験に与える影響:心理学研究修正査読中)。また健常者とSCの情緒的な刺激の受け止め方、情動体験のあり方について検討し(第68回日本心理学会;2004発表予定)、SCは否定的情動体験に健常者は肯定的情動体験へ反応しやすいことが示された。
大脳皮質単一神経細胞の発生、分化、回路形成の生体内リアルタイム解析

哺乳類エンブリオ-子宮を一体として母体外で生存させることを可能にする方法として、研究代表者が世界で最初に開発した方法(Suzue,1990)である経胎盤灌流法を応用して、胎仔脳の単一細胞を、蛍光色素等でラベルし、蛍光顕微鏡等で連続観察し、ニューロンの発生分化の過程を詳細に解析する方法の確立を試みた。妊娠中期マウス胎仔を経胎盤灌流法によりin vitroで生存させ、脳室に脂溶性蛍光色素DiI、DiOを微少量注入して脳室壁の細胞を蛍光ラベルしmigrationの様子を観察した。蛍光色素注入後、顕微鏡の対物レンズを皮膚と頭蓋の一部を除去して露出した脳表面に接近させて体表より観察した。色素は、脳室壁に接する少数の細胞やradial fiberを明るく染色した。励起光を数十分間に一回の間隔で、パルス制御式シャッターにより短時間照射して、細胞を観察したところ、単一細胞の脳組織内での移動を長時間継続的に観察することができた。この方法で多数の実験例について分析した結果、蛍光ラベルされた細胞のうちで高度に活発なmigrationを示す細胞の比率は比較的低いことがわかった。このことの一つの原因として、経胎盤灌流法が胎仔ニューロンの移動に関して最適化されていない可能性が考えられたので、経胎盤灌流法で胎仔に与える酸素量、栄養素と栄養因子の種類と量について検討をすすめ、胎仔中枢神経系の状態のin vitroでの維持に関して大幅な改善を実現することができた。このことは、哺乳類胎仔の生存のレベルに関して様々な状態の多様性が存在していること、胎仔の状態の多様性の検出や多様性を与える条件の分析にin vitro経胎盤灌流法が強力な手段であることを意味しており、経胎盤灌流法が、ニューロンの発生分化のみならず、胎児発育遅延の機構に関する研究を含む哺乳類発生学一般の研究の発展に広く貢献し得る可能性を示していると考えられる。研究代表者が、世界に先駆けて開発した母体外(in vitro)での、妊娠後期齧歯類胎仔の生存を可能にする方法、マウス胎仔経胎盤灌流法の応用として、胎仔脳の単一細胞を、蛍光色素(DiI)、green fluorescent protein(GFP)等によりラベルし、蛍光顕微鏡、多光子励起顕微鏡等を用いて連続観察し、ニューロンの発生分化の過程を詳細に解析する方法の確立を試みた。先ず、妊娠中期(胎齢11日目)のマウス胎仔を経胎盤灌流法によりin vitroで生存させ、脳室に脂溶性蛍光色素DiI、DiOを微少量注入して脳室壁の細胞をDiI、DiOで蛍光ラベルし、ニユーロンの発生、migrationの様子を、観察することを試みた。より明瞭な像をえるために、頭部の表皮と骨を除去してカバーグラスで置き換えた。蛍光色素注入の3時間後より、顕微鏡の接眼レンズを脳表面に接近させて、体表より観察、記録する。色素は、脳室壁に接する少数の細胞を明るく染色した。励起光を短時間照射するためのシャッターを用いて、20-30分間間隔で光を照射して、細胞を観察したところ、単一細胞の脳組織内での移動を継続的に長時間観察することができた。今後この方法を、細胞ラベル法観察方法などの点で発展させ、単一細胞の長期間にわたっての挙動、分化の様子を分析することにより、生体内における神経幹細胞の実体や、幹細胞からニューロンが生成する機構、ニューロンの分化の機構についての詳細な知見が得られると期待される。