hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
機能性材料としての応用を指向した新規Preyssler型タングステートの合成

Preyssler型リンタングステート(Phosphotungstate: PTA)と呼ばれるリン(P)とタングステン(W)の複合酸化物分子([P5W30O110M(n+)](15-n)-, Mは内包金属(Na, Ca, Bi,希土類))において、骨格元素および内包金属の種類を変えた新規化合物の合成と、工業的にも使われるKeggin型PTAを越える触媒活性、伝導性およびウイルス染色能力を持つ新しいPTA無機材料をPreyssler型PTAを用いて開発することが本研究の目的です。初年度である平成30年度は、この化合物に関する新しい2種類の化合物の合成および構造解析に取り組みました。(1)分子の中心にNaが1つ入った新しい化合物([P5W30O110Na]14-)の合成および構造解析(単結晶構造解析、高分解能質量分析、赤外分光、元素分析、31P NMR、183W NMR)に成功しました。(2)骨格のWの一部をMoに置換した化合物([P5W30-xMoxO110Na]14-)の合成および質量分析および赤外分光を用いた構造解析に成功しました。更に、Biを内包した化合物([P5W30O110Bi]12-)からKを2つ内包した化合物([P5W30O110K2]13-)への変換の際に副生する化合物が、Biが2つの1欠損ケギン型PTA([Bi(PW11O39)2]11-)であることを単結晶構造解析、質量分析、赤外分光、元素分析、31P NMRおよび183W NMRなどの分析を用いて証明することに成功しました。([P5W30O110Bi]12-)の分子構造が反応溶液中で1部分解していることを見出しました。2種類の新しい分子の合成および構造解析に成功している。(1)分子の中心にNaが1つ入った新しい化合物([P5W30O110Na]14-)を見出しました。これまでは、Naが入った化合物は知られていたがNaが中心に入ったものは計算科学では構造が予想されていましたが、これまでにその存在は証明されていませんでした。我々が見出した新しい合成手法を用いることでこの化合物が合成できることを証明した意義は大きいです。(2)骨格のWの一部をMoに複数個置換した化合物([P5W30-xMoxO110Na]14-)が合成できることを始めて証明しました。これまでに骨格のWを他の遷移金属に複数個置換した例は報告はないので、世界初の合成例です。それに加えて、Biを内包した化合物([P5W30O110Bi]12-)からKを2つ内包した化合物([P5W30O110K2]13-)への変換の際に複製する化合物が、Biが2つの1欠損ケギン型PTA([Bi(PW11O39)2]11-)であることを証明しました。Biが2つの2つの1欠損ケギン型PTAとサンドイッチ化合物を作ることはこれまでに知られていないことで、ポリオキソメタレートの構造基礎化学においての意義も大きいです。平成31年度は、平成30年度の成功を更に発展させて更に新しい化合物の合成を目指します。まずは、2種類の金属が内包した化合物の合成を目指します。また、骨格金属にMo以外の異なる遷移金属の置換を目指します。更に、研究計画に基づき、熱安定性の高いPreyssler型PTA([P5W30O110K2]13-)の対カチオンの一部をプロトンにした部分酸型材料(A13-xHx[P5W30O110K2])の不均一系酸触媒および固体プロトン伝導性材料としての性能を検討しKeggin型部分酸型材料を置き換えることが可能なのかを検討します。

更に、Biを内包した化合物([P5W30O110Bi]12-)からKを2つ内包した化合物([P5W30O110K2]13-)への変換の際に副生する化合物が、Biが2つの1欠損ケギン型PTA([Bi(PW11O39)2]11-)であることを単結晶構造解析、質量分析、赤外分光、元素分析、31P NMRおよび183W NMRなどの分析を用いて証明することに成功しました。([P5W30O110Bi]12-)の分子構造が反応溶液中で1部分解していることを見出しました。2種類の新しい分子の合成および構造解析に成功している。(1)分子の中心にNaが1つ入った新しい化合物([P5W30O110Na]14-)を見出しました。これまでは、Naが入った化合物は知られていたがNaが中心に入ったものは計算科学では構造が予想されていましたが、これまでにその存在は証明されていませんでした。我々が見出した新しい合成手法を用いることでこの化合物が合成できることを証明した意義は大きいです。(2)骨格のWの一部をMoに複数個置換した化合物([P5W30-xMoxO110Na]14-)が合成できることを始めて証明しました。これまでに骨格のWを他の遷移金属に複数個置換した例は報告はないので、世界初の合成例です。それに加えて、Biを内包した化合物([P5W30O110Bi]12-)からKを2つ内包した化合物([P5W30O110K2]13-)への変換の際に複製する化合物が、Biが2つの1欠損ケギン型PTA([Bi(PW11O39)2]11-)であることを証明しました。Biが2つの2つの1欠損ケギン型PTAとサンドイッチ化合物を作ることはこれまでに知られていないことで、ポリオキソメタレートの構造基礎化学においての意義も大きいです。平成31年度は、平成30年度の成功を更に発展させて更に新しい化合物の合成を目指します。まずは、2種類の金属が内包した化合物の合成を目指します。また、骨格金属にMo以外の異なる遷移金属の置換を目指します。更に、研究計画に基づき、熱安定性の高いPreyssler型PTA([P5W30O110K2]13-)の対カチオンの一部をプロトンにした部分酸型材料(A13-xHx[P5W30O110K2])の不均一系酸触媒および固体プロトン伝導性材料としての性能を検討しKeggin型部分酸型材料を置き換えることが可能なのかを検討します。
有用遺伝子の導入による育種菌を用いた基質多成分系の処理に関する研究

本研究では、廃水処理の高度化を図る方法の一つとして、多機能な菌を育種しこれを利用した処理系の構築を最終的な目的としている。本年度では育種した菌の遺伝子的および生物活性的安定性を計ることを目的として育種菌を包括固定をおこない、その効果について次の結果を得た。1.前年度で脱ハロゲン化酵素遺伝子を導入した遺伝子組換え大腸菌を作成したが、導入した遺伝子の構造を見直しさらに最適化を試みて構築したプラスミドpETDEXaにより大腸菌BL21(DE3)pLysS中で、その酵素活性は3.5U/mgから12.5U/mgに向上した。発現条件について検討した結果、誘導物質はIPTG、22°Cで12時間の培養をおこなった場合に最大活性を得ることができた。2.寒天およびポリアクリルアミドを担体として、組換え大腸菌を包括固定化したところ、固定化操作の前後で活性は大きく失われたものの、固定化菌体の生物活性の時間的減少は緩やかであり、生物活性の安定化に対して固定化法はその効果が認められた。3.固定化担体からの遺伝子組換え大腸菌の漏出が認められた。その廃水処理への利用については固定化を行った場合においても、漏出防止の手段を講じる必要が示唆された。本年度では育種した菌の遺伝子的および生物活性安定性を計ることを目的として育種菌を包括固定をおこない、その効果について次の結果を得た。1.脱ハロゲン化酵素遺伝子を導入した遺伝子組換え大腸菌を作成し、脱ハロゲン化酵素の発現条件について検討した結果、誘導物質がモノハロ酢酸、なかでもクロロ酢酸、ブロモ酢酸の場合に特に大量に発現していた。2.誘導物質としてのクロロ酢酸存在下において、遺伝子組換え大腸菌の実験開始直後の脱ハロゲン化酵素活性は非常に高かったが、時間が経過するにつれてその酵素活性は低下し、同時に組換え遺伝子も消失していった。これは誘導物質が分解され失われたこと、酵素の設計図である遺伝子が失われたことによるものと考えられた。3.寒天およびポリアクリルアミドを担体として上記組換え大腸菌を包括固定化したところ、固定化操作の前後で活性は大きく失われたものの、固定化菌体の生物活性の時間的減少は緩やかであり、生物活性の安定化に対して固定化法はその効果が認められた。4.固定化担体からの遺伝子組換え大腸菌の漏出が認められた。
セリア安定化アルミナ・ジルコニアインプラントの開発

歯科用インプラント材料として現在最も広く使用される材料はチタンであり、審美性とアレルギーの問題が懸念されている。そこで我々は新たなインプラント材料としてセリア安定化ジルコニア/アルミナ・ナノ複合(Ce-TZP/Al2O3)に着目した。Ce-TZP/Al2O3は、イットリア系ジルコニアと比較して、口腔内のような水熱環境下でも劣化しない優れた特性を有する。本研究の目的はCe-TZP/Al2O3インプラントフィクスチャーの開発である。我々はフッ化水素酸処理したCe-TZP/Al2O3が骨芽細胞様細胞(MC3T3-E1)の分化を促進し、ラットの大腿骨へ埋入したインプラント体と骨との結合を確認した。歯科用インプラント材料として現在最も広く用いられている材料はチタンであり、審美性の問題とアレルギーの問題が懸念されている。Ce-TZP/Al2O3(セリア安定化ジルコニア/アルミナ・ナノ複合体)は、現在歯科で使用されているイットリア系ジルコニアと比較して約2倍の強靭性と、口腔内のような水熱環境下でも劣化しない優れた特性を有する。すでに我々は表面にフッ化水素酸処理を施したCe-TZP/Al2O3が骨芽細胞様細胞(MC3T3-E1)の分化を促進する結果を得ている(論文投稿中)。本研究は骨芽細胞分化促進のメカニズムを明らかにし、Ce-TZP/Al2O3の各種細胞に対する影響と動物実験によりCe-TZP/Al2O3の骨結合能を生体力学的に評価する。平成27年度はin Vitroでの研究でフッ化水素酸処理後の表面解析を行った。ジルコニアの結晶構造は、温度により相転移を起こし、構造が変化する。室温では、単斜晶となり、1170°Cで正方晶、2370°Cで立方晶となる。正方晶から立方晶に変化する際に、体積が約4%収縮する。フッ化水素酸処理により、ジルコニアの結晶構造に変化がみられるかどうかを、XRD(X線回折)で観察し、フッ化水素酸処理後の結晶性・配向性の評価を行った。その結果、Ce-TZP/Al2O3は、フッ化水素酸処理を行う前と後とでは、処理後の方が処理前よりも正方晶の割合が高く、単斜晶が減少した。よって、Ce-TZP/Al2O3がフッ化水素酸処理を行った場合でも、安定した結晶構造であり、強度に関しては、問題ないことが示唆された。今後の研究では、1動物実験(ラット大腿骨にミニインプラント埋入し4週間後のPush-in Test計測。)2骨芽細胞の分化促進のメカニズム解析(RT-PCR,マイクロアレイによる網羅的遺伝子解析3適切なインプラント形状の模索(破断試験、有限要素解析による加重疲労試験)を行う予定である。XRDに関しては、機器の使用と解析方法が高度で、時間がかかってしまった。1フッ化水素酸処理後の表面解析ジルコニアの結晶構造は、温度により相転移を起こし、構造が変化する。Ce-TZP/Al2O3のシリンダー状の機械研磨試料片(直径1mm、長さ2mm)を55%フッ化水素酸水溶液にて酸処理し[以下Zr(55%)]、コントロールとして同形状の機械研磨チタンを67%硫酸水溶液で酸処理し[以下Ti]、ミニインプラントとして使用した。8週齢SDラットをイソフルラン吸入下で大腿骨関節骨頭から10mm下に各試料片を骨内に埋入、縫合し、2,4週間後にpush-in testを行い、骨と試料片の結合力を、試料片に加える力にて評価した。2,4週間後の骨とミニインプラントの結合は、Zr(55%)がTiと比較して、強い結果となった。また、ミニインプラント埋入4週間後の骨をマイクロCTにて観察、Zr(55%)と骨の結合を確認した。

現在までの研究では、ラット大腿骨にミニインプラントを埋入し2週間後のPush-in Testを行ったが、長期的予後のミニインプラントと骨との結合力を評価する上で、4週間後の実験を行う必要がある。また、インプラント形状を決めた後、インプラントを製作、動物実験を行い、インプラント形状の適正確認を行う予定である。28年度が最終年度であるため、記入しない。歯科補綴学28年度が最終年度であるため、記入しない。
植物病原糸状菌の宿主選択的病原性の分子機構

Alternaria属糸状菌には、病原製の決定因子として宿主特異的毒素を生産する7種の重要植物病原菌が存在する。本研究では、これら病原菌の病原性(毒素生産性)遺伝子の検索を中心に、以下の研究を行った。1.遺伝子タギングによる病原性関連遺伝子の単離Alternaria病原菌のうちナシ黒斑病菌(the Japanese pear pathotype of A.alternata、宿主特異的AK毒素生産菌)を用いて、その毒素生産性(病原性)に関与する遺伝子の単離を試みた。形質転換ベクターDNAの挿入変異によって、AK毒素生産性を欠損した変異株2株を分離した。そのうち1株の染色体DNAを解析し、ベクターDNAの挿入領域を同定するとともに、挿入領域の近傍配列を回収した。回収した配列をプローブとして、野生株の染色体DNAライブラリーからその領域を含むクローンを単離した。さらに、単離した領域のAK毒素生産性における役割を明らかにするために、遺伝子置換ベクターを構築し、野生株を形質転換した。形質転換体の種々の性質を調査したところ、毒素生産性が著しく低下しているだけでなく、菌糸生育、胞子形成、メラニン生産性などの低下も認められた。したがって、単離した遺伝子が直接毒素生産に関与するものではないと考えたが、その変異が種々の形質に影響することからその遺伝子機能の特殊性が示唆された。2.宿主特異的毒素を生産するAlternaria属病原菌の系統関係宿主特異的毒素を生産する7種のAlternaria属病原菌の遺伝的類縁関係を、リボソームRNA遺伝子のRFLP分析とその塩基配列の比較に基づき調査した。その結果、すべての病原菌が基準株として用いた非病原性のA.alternataと全く区別できないことが明らかとなり、これら病原菌を同一種A.alternataとして位置づけられることを分子系統学的に示した。
栄養教育の実証モデル開発に関する研究

本研究最終年度は教育介入の評価の段階に入ったので、以下のように整理をしているが、調査実施が平成8年の11月であったため、集計、整理に時間を要している。〈方法〉食教育介入の方法を以下の視点より分類して評価した。1)地域性による差(千葉県・和歌山県)2)学校給食実施の有無(実施校22、未実施校12)3)教育方法(学級指導、給食時、特別活動、保健学習)4)教育内容(テーブルマット、組絵、ペ-プサート、料理絵を用いたカフェテリア方式による食品選択)これらの条件をパターン分類して1年から3年間、教育介入を実施し本年度評価を実施した。評価の対象は児童、その父母、教師で、アンケート方式による意識調査、体位状態を把握し行動の変容を評価した。〈結果〉現在までに明らかにされた結果では、体位、体格には直接的な影響は見られなかった。給食の有無による食物摂取は牛乳、野菜の摂取が未実施校い少ないことが明らかにされた。教育介入の内容と方法により、児童の食意識にわずかながら変化がみとめられ、とくに教育内容が斬新で児童の興味をそそるものでは、教室自体に活気がみられ、知識や意識に喚起に効果がみられた。方法は担任と栄養士のTTによる方法よりも効果があった。父母の行動は教職に対する意識は高まったものの、父母の食意識には変化はない。教師の食教育に対する意識は、保健学習、給食指導の役割と意識は高く、養教との連携、必要性に意識が高いが、実施となると方法、時間、内容などに対する不安感がある。学校における栄養教育介入による給食の効果を検討するにあたり、平成6年度は健康状態、栄養に関する意識、給食に対する父母、児童の意識等について、現状の把握と問題点の発見、教育介入の方法、教材の選択等に必要な情報を得るための各種調査を実施した。現状の把握に用いた調査内容は、(1)心身の健康状況:体位、体格、血清脂質、不定愁訴、生活リズム(2)生活・食行動:児童の生活行動、児童の給食に関する意識、日常の食行動、栄養に関する意識と認識(3)父母の食行動:父母の給食に関する意識、日常の食事に対する意識、子ども達の健康に関する関心(4)教師の栄養教育に関する意識:教師の栄養教育に対する考え方、給食に対する認識異常について八日市場市の10学校の4年生を対象に調査を実施した。結果は以下の通り。(1)児童の健康状態については、慢性疾患の危険因子である肥満や高脂血症の出現率が高く、日常の生活・食生活に関する指導の必要性が緊急である現状が明らかになった。不定愁訴の出現やたちくらみ、貧血、だるい、頭痛、目の疲れなどに経験のあるものが多く、睡眠時間が遅い、朝の起床等が要因となっているようである。(2)父母の食意識については、子どもの健康を食欲で観察する意識があるもの、肥満や好き嫌いを気にするものが多く見られた。学校給食に対する期待は栄養の知識、栄養上のバランス、好き嫌いの矯正、望ましい食習慣の構築が、学校教育に期待されている。栄養教育の介入にあたって、児童、地域の持つ問題の焦点が把握できたので、教育の方法、内容を検討しつつ栄養教育の実施、その評価について検討を加える予定である。1、学校における栄養教育の介入にあたり、教育介入前の10校の調査により具体的な課題として、児童の給食に関する意識の向上、栄養に関する知識、意識の向上が必然であること、また、父母の学校給食に対する期待は、好き嫌いの矯正、望ましい食習慣、栄養の知識などに寄せられていることが明らかになった。したがって、本年度は10校の学校を教育の介入方法によって4つに分類し、教育の介入を図った。(1)給食時に学校栄養士による週一回の教育の実施、2校。(2)学級担任による指導、随時、3校。(3)栄養士と教師によるTT授業一学期に2回2校。(4)教育介入なし3校。教育内容は「栄養素と食べ物」「おやつのとり方」についてそれぞれの方法で教育を実施した。教育介入一年後に再度調査を実施し一回目の評価を観察した。その結果(1)栄養士の介入学校では教育の介入のなかった学校に比べ、給食の好き嫌いへの対応、食事と病気と関係についての意識、食べたいおやつへの関心などに有意な差をもって行動の変容がみられた。(2)栄養の知識については食品群とその栄養素の働きについて、介入群に正解が多く正しい栄養の知識の普及に果たした教育の介入の効果が明らかになった。2、給食実施校と実実施校の比較については和歌山県で実施することにした。本年度は千葉県と同じ調査を実施し、教育介入前の状況の把握を行った。(1)給食実実施校:串本町小学校数12校、対象児童数309名(内4年生176名)(2)給食実施校:古座町5校児童数68名古座川町3校児童数11名すさみ町4校児童数73名現状については現在集計中である。平成8年度はこれらの学校に栄養教育の介入を図り、千葉県との地域性、給食の実施の有無による意識、行動の違い、教育介入の効果について調査を実施する予定である。3、教育介入に使用した教育教材(1)テーブルマット、(2)エプロンシアター(3)組絵(4)栄養スポット本研究最終年度は教育介入の評価の段階に入ったので、以下のように整理をしているが、調査実施が平成8年の11月であったため、集計、整理に時間を要している。〈方法〉

食教育介入の方法を以下の視点より分類して評価した。1)地域性による差(千葉県・和歌山県)2)学校給食実施の有無(実施校22、未実施校12)3)教育方法(学級指導、給食時、特別活動、保健学習)4)教育内容(テーブルマット、組絵、ペ-プサート、料理絵を用いたカフェテリア方式による食品選択)これらの条件をパターン分類して1年から3年間、教育介入を実施し本年度評価を実施した。評価の対象は児童、その父母、教師で、アンケート方式による意識調査、体位状態を把握し行動の変容を評価した。〈結果〉現在までに明らかにされた結果では、体位、体格には直接的な影響は見られなかった。給食の有無による食物摂取は牛乳、野菜の摂取が未実施校い少ないことが明らかにされた。教育介入の内容と方法により、児童の食意識にわずかながら変化がみとめられ、とくに教育内容が斬新で児童の興味をそそるものでは、教室自体に活気がみられ、知識や意識に喚起に効果がみられた。方法は担任と栄養士のTTによる方法よりも効果があった。父母の行動は教職に対する意識は高まったものの、父母の食意識には変化はない。教師の食教育に対する意識は、保健学習、給食指導の役割と意識は高く、養教との連携、必要性に意識が高いが、実施となると方法、時間、内容などに対する不安感がある。
肥満関連分子の同定と新しい肥満治療法の開発

肥満原因遺伝子として単離、同定されたレプチンは、脂肪組織より分泌され、主に視床下部に作用して強力な摂食抑制とエネルギー消費亢進をもたらす体重増加抑制ホルモンとして知られている。血中レプチン濃度と体脂肪量は正の相関関係にあり、レプチンは体重の増減(エネルギー状態の変化)により変動する生殖や免疫をはじめとする種々の生理機能の調節に関与することが明らかにされている。レプチンの多彩な生理作用を生体において解析する目的で、我々はこれまでに肝臓においてレプチンを過剰発現させることにより肥満者と同程度の血中レプチン濃度を有するレプチン過剰発現トランスジェニックマウスを作製した。このマウスでは全身の脂肪組織が消失する程の痩せを呈する一方、インスリン感受性の亢進および糖代謝の亢進が認められた。そこでこのマウスを用いて種々の糖尿病におけるレプチンの抗糖尿病薬としての有用性を検討し、1)肥満を伴う2型糖尿病における減量との併用療法、2)インスリン分泌低下型糖尿病におけるインスリンとの併用療法、3)脂肪萎縮性糖尿病における単独投与におけるレプチンの有用性を示してきた。特に脂肪萎縮性糖尿病モデルマウスを用いた検討では脂肪萎縮性糖尿病のインスリン抵抗性発症における低レプチン血症の関与が示唆され、レプチン単独投与により糖、脂質代謝異常の著明な改善が得られた。そこで我々は、京都大学「医の倫理委員会」承認の下、ヒト脂肪萎縮性糖尿病症例に対するレプチン補償治療を試みた。すなわち全身性脂肪萎縮性糖尿病の2症例(後天性12歳女児、糖尿病歴2年;先天性29歳男性、糖尿病歴17年)を対象とし、生理的血中濃度に相当する用量の組み換えレプチン1日2回皮下投与を開始した。レプチン投与により両症例の血糖値およびHbAlcは著しい改善を示し、従来使用中の抗糖尿病薬も中止した。高脂血症および脂肪肝の改善も認められた。これまでのところ明らかな副作用は認められず、脂肪萎縮性糖尿病のレプチン補償治療は有効かつ安全であることが明かとなった。
鉄鋼精錬プロセスにおける音響学的診断による浴内粒子分散挙動の予測のための基礎研究

溶銑予備処理工程におけるインジェクション法では,不活性ガスとともに脱硫剤などの粒子群を吹き込むが,溶銑との濡れ性は悪いため,吹き込まれた粒子はガスと溶銑の界面を貫通し溶銑内に侵入する際に気体を纏ってしまい,それによる浮力が浴内での分散を阻害してしまう.溶銑は不透明であることから,浴内での粒子群の分散挙動を直接観察によって評価することはできない.本研究では,浴内に投入される粒子がガスと溶銑の界面を貫通する際に形成する気柱(キャビティと呼ぶ)が分裂・崩壊するときに発する放射音に着目し,その音響特性から粒子の浴内分散挙動を音響学的に診断する手法の開発を目指している.本年度は,所定の高さから自由落下する単一の球体が水没した際にその背後に形成するキャビティの崩壊と,それに伴って発生する放射音を捉えるために,高速度カメラと水中マイクをマイクロ秒オーダで同期計測する技術の構築を行った.さらに,そこで構築した実験技術(計測手法)に基づいて,数種類の侵入速度で水没する球体がその背後に形成するキャビティと,その崩壊によって放射される音の音圧スペクトルについて試行的に計測することに成功した.この試行実験の結果より,放射音はキャビティ崩壊時と一致することが確認された.本年度で構築した技術を基に,次年度以降,水没球が形成するキャビティの時々刻々の変化と,放射音の音圧スペクトルの関係性について,その発生メカニズムに踏み込んで検討したいと考えている.放射音の測定には,室内音による影響だけでなく,容器壁での反射音による影響等,様々な外乱を軽減できるよう実験装置を構成しなくてはならず,この点で時間を要した.さらに,球体が水没した後,キャビティが崩壊するまでの時間は数ミリ秒であることから,カメラとマイクの同期にも試行錯誤が必要であった.しかしながら,本年度構築した本実験装置および手法によって,キャビティの崩壊とそれによる放射音をマイクロ秒のオーダで同期計測することができ,実験装置としてはほぼ完成したものと考えている.この実験装置を用いて,種々な速度で水没する球体が形成するキャビティとその崩壊による放射音について同期計測に成功し,キャビティ崩壊時に非常に大きな音圧を発していることが確認できた.水没球が形成するキャビティの時々刻々の変化と放射音の音圧スペクトルの詳細な関係性については,次年度以降,検討したいと考えている.今年度は,水没球が形成するキャビティ形状とその崩壊による放射音の関係について詳細に検討する予定である.そのために,球体の水面への侵入速度の変更や,表面性状(濡れの良し悪し)の変更といったパラメータを種々に変更することにより,系統立てた実験データを取得するつもりである.キャビティ形状と放射音の音圧スペクトルの相関が明らかとなれば,溶銑予備処理工程における粒子群の浴内分散挙動を非接触・非視認で音響学的に把握するための基礎技術となりうると期待している.溶銑予備処理工程におけるインジェクション法では,不活性ガスとともに脱硫剤などの粒子群を吹き込むが,溶銑との濡れ性は悪いため,吹き込まれた粒子はガスと溶銑の界面を貫通し溶銑内に侵入する際に気体を纏ってしまい,それによる浮力が浴内での分散を阻害してしまう.溶銑は不透明であることから,浴内での粒子群の分散挙動を直接観察によって評価することはできない.本研究では,浴内に投入される粒子がガスと溶銑の界面を貫通する際に形成する気柱(キャビティと呼ぶ)が分裂・崩壊するときに発する放射音に着目し,その音響特性から粒子の浴内分散挙動を音響学的に診断する手法の開発を目指している.本年度は,所定の高さから自由落下する単一の球体が水没した際にその背後に形成するキャビティの崩壊と,それに伴って発生する放射音を捉えるために,高速度カメラと水中マイクをマイクロ秒オーダで同期計測する技術の構築を行った.さらに,そこで構築した実験技術(計測手法)に基づいて,数種類の侵入速度で水没する球体がその背後に形成するキャビティと,その崩壊によって放射される音の音圧スペクトルについて試行的に計測することに成功した.この試行実験の結果より,放射音はキャビティ崩壊時と一致することが確認された.本年度で構築した技術を基に,次年度以降,水没球が形成するキャビティの時々刻々の変化と,放射音の音圧スペクトルの関係性について,その発生メカニズムに踏み込んで検討したいと考えている.放射音の測定には,室内音による影響だけでなく,容器壁での反射音による影響等,様々な外乱を軽減できるよう実験装置を構成しなくてはならず,この点で時間を要した.さらに,球体が水没した後,キャビティが崩壊するまでの時間は数ミリ秒であることから,カメラとマイクの同期にも試行錯誤が必要であった.しかしながら,本年度構築した本実験装置および手法によって,キャビティの崩壊とそれによる放射音をマイクロ秒のオーダで同期計測することができ,実験装置としてはほぼ完成したものと考えている.この実験装置を用いて,種々な速度で水没する球体が形成するキャビティとその崩壊による放射音について同期計測に成功し,キャビティ崩壊時に非常に大きな音圧を発していることが確認できた.水没球が形成するキャビティの時々刻々の変化と放射音の音圧スペクトルの詳細な関係性については,次年度以降,検討したいと考えている.今年度は,水没球が形成するキャビティ形状とその崩壊による放射音の関係について詳細に検討する予定である.

そのために,球体の水面への侵入速度の変更や,表面性状(濡れの良し悪し)の変更といったパラメータを種々に変更することにより,系統立てた実験データを取得するつもりである.キャビティ形状と放射音の音圧スペクトルの相関が明らかとなれば,溶銑予備処理工程における粒子群の浴内分散挙動を非接触・非視認で音響学的に把握するための基礎技術となりうると期待している.初年度の実験では,水没球が形成するキャビティとその崩壊時に発せられる放射音を同期計測するための技術を確立することを目的としていたため,高速度カメラとしては既存のものを用いた.今年度は、その確立技術を基に,よりフレームレートの高い高速度カメラを購入し,実験を行いたいと考えている.そのために,昨年度の繰越金と今年度分の予算を合わせて,高速度カメラの購入を考えている.
家族性パーキンソン病の原因遺伝子パーキン遺伝子の変異及び機能解析-Lewy小体形成の分子機構の解明-

パーキンソン病はアルツハイマー病に次いで頻度の高い神経変性疾患であり、その殆どは遺伝性のない孤発型である。その病態解明に単一遺伝子異常に伴う遺伝性パーキンソン病からのアプローチが最も有効な戦略であると考えており、本課題では、家族性若年性パーキンソン病の原因遺伝子であるパーキン遺伝子を中心に、その機能解析および変異解析を行っている。更に新規原因遺伝子としてPINK1,DJ-1が単離され、遺伝子産物間の相互作用が注目されている。しかしながら、依然として不明遺伝子変異群が約40%と少なからず存在することが分かった。PINK1については、我々も独自に単離・同定に成功しAnn Neurolに発表した。また新しい欠失タイプの変異型が存在することもNuerologyに発表した。遺伝子変異解析を行いつつ新規原因遺伝子単離を目指して連鎖解析を開始した。一方、遺伝子産物の機能解析については、parkin蛋白をアンチセンスストランドでknock downすることに成功し、loss-of-function効果の標的分子としてドパミンキノン体が有力であることを突き止めた。更にそのドパミンキノン体による細胞死は,正常α-シヌクレインにより保護されたが、変異型α-シヌクレインでは細胞抑制阻止作用を認めなかった。更にparkinの結合分子として14-3-3ηを同定した。14-3-3ηがparkinと結合するとparkinのリガーゼ活性が抑制された。興味深いことにこの抑制効果は、正常α-シヌクレインが存在すると減弱された。分子生物学的手法でも生化学的手法でもSNCAとPARK2の遺伝子産物が共通カスケードを形成していることが分かった。現在、SNCAとparkinのダブルノックアウトマウスを作製に成功しており、行動・組織化学的検討を開始した。パーキン遺伝子の解析修了家系は,503家系(589症例)(劣性遺伝127,優性遺伝94,若年孤発型146,不明136).変異内容はエクソンの欠失66,挿入2,点変異20,複合ヘテロ変異41,ヘミ変異36家系,合計32.8%で陽性であった.更にパーキン遺伝子変異陰性の家系について連鎖解析を行っている.機能についてはユビキチンリガーゼであることがわかっており,基質の蓄積が細胞死を惹起させることが推定される.Loss-of-function型変異効果が疾患発生に関わっているため,アデノウィルスベクターに全長のアンチセンスパーキンを構築し,パーキン蛋白をノックダウンさせた.アデノウィルスのtiterに依存して,ドパミン神経細胞様であるSH-SY5Y細胞にアポトーシスが誘導された.またアンチセンスパーキンにセンスα-シヌクレインを感染させるとアンチセンスパーキンによる細胞死は抑制された.パーキン遺伝子変異よる若年性パーキンソン病ではLewy小体が一般に観察されない.一方,Lewy小体の形成にドパミンキノン体とα-シヌクレインの複合体が関わっているとする報告があることより,ドパミンキノン体に注目して検討した.キノン体の変わりにドーパ・ドパミンクロムを測定したところ,パーキンアンチセシスでは内在性SH-SY5Y細胞と比較して数倍もキノン体が増加しており,α-シヌクレインの発現量を増やしてやるとキノン体の発生量は低下した現在α-シヌクレインの過剰発現が細胞死に直結する報告があるが,一方で発現が少量である時も細胞死が促進されたことになる.すなわちα-シヌクレインにはdual functionが存在し,ドパミンキノン体を介した細胞死に対して抑制的に作用していることがわかった.本研究では,α-シヌクレインとパーキンがキノン体を介して細胞死を抑制していると推定された.パーキン遺伝子の変異解析は総計1000例に及ぶ大型研究になった.

劣性遺伝形式で若年発症では約50%に頻度が及ぶことが分かった.更に海外でも報告されているヘテロ接合体でも発症することが確認され,ホモ接合体と比較すると発症年齢が高齢化する傾向を認めた.欠失のbreak pointも明らかにでき,特にエクソン1の欠失範囲がhead-to-headで遺伝子が向かい合わせに存在しているGlup遺伝子を含むことが判明した.従来エクソン1の欠失の報告は存在したが,隣接している遺伝子を含むか否かは不明であった.今回検討でそのことが明らかにされ,Glup遺伝子を含んでも表現型に相違はないことが確認された.一方,パーキン遺伝子変異陰性例が約50%存在するが,連鎖解析より我が国にもPARK6,PARK7に連鎖する可能性の高い家系が存在することが明らかにされた.その結果,海外グループに先を越されたが,最初に報告されたグループとは独立してPARK6の原因遺伝子PINK1を同定できた.パーキン遺伝子変異に次いで頻度が高いことが明らかにされ,その頻度は約7%であることが分かった.PARK7については現在のところ変異例は存在せず,海外データも1%と低く,我が国でも稀であることが推定された.これら研究成果は論文として既に報告している.パーキン蛋白の機能解析については基質候補について検討し,その一つであるPDCD-2,LMO4について解析をした.特にPDCD-2は,ヒト変異陽性例の剖検脳で蓄積を認めた.興味あることに,この蓄積は孤発型パーキンソン病でも認めた.孤発型パーキンソン病で認めたことに関しては,パーキン蛋白が変性の過程でニトロ化を受け,二次的に酵素活性を低下させたことが推定された.従来通り,基質候補の検討だけでは,真のパーキン蛋白の神経変性への関与は明らかにすることは困難を極めることが予想されたため,In vitro系でパーキン遺伝子の発現をノックダウンさせることで機能解析を行い,ドーパ・ドパミンキノンがパーキン遺伝子のノックダウン後に増加し,その増加と並行して細胞死が誘導されることが明らかにされた.更に正常α-シヌクレインをパーキンがノックダウンされた細胞系に発現させると,誘導された細胞死が抑制された.家族性パーキンソン病の遺伝子群が共通機序を形成していることが分かった.
アドレノメデュリンのSNPと腎障害の進展に関する研究

1)同意が得られ、糖尿病や心疾患などの合併症を有さず、血圧のコントロールが比較的マッチし、腎生検で診断され、発症から5年以上経過したIgA腎症患者のうち、49例を対象とした。また、IgA腎症以外の慢性糸球体腎炎患者40例、健常人36例をコントロールとした。2)アドレノメデュリン濃度をRIA (IRMA)にて測定した。5)ABI PRISM 7700Seequence Detection Systemを用いて、TaqMan MGBプローブを、プライマーとTaqDNAポリメラーゼとともにPCRを行い、VICとFAMの蛍光強度により、タイピングを行った。6)今回検討した49例において、アドレノメデュリン遺伝子上の2箇所のSNP (JSNP ID ; IMS-JST016211,IMS-JST016212)出現頻度は、IgA腎症患者でそれぞれ10.2%,2.0%、アドレノメデュリン受容体遺伝子上のSNP (IMS-JST092608)の出現頻度は、IgA腎症患者で2.0%であり、各々のSNPの出現頻度は非IgA腎症や健常人と有意差は認めなかった。血漿中アドレノメデュリン値との関連では、IMS-JST092608のSNPの出現との関連は認められなかったが、IMS-JST016211およびIMS-JST016212のSNPに関しては、wild typeがhomoの患者に対して、mutant typeがhomoの患者では高値を示した。また、血清クレアチニン値、尿蛋白量においてもmutant typeのhomoで高値を示した。1)腎生検で診断され、発症から5年以上経過したIgA腎症患者のうち、今回は、同意が得られ、糖尿病や心疾患などの合併症を有さず、血圧のコントロールが比較的マッチした17例を対象とした。2)血中総アドレノメデュリンおよび活性型である成熟型アドレノメデュリン濃度をRIA(IRMA)にて測定した。4)アドレノメデュリンのエクソン部分の6箇所のSNPを含むようにプライマーを設計した。5)ABI PRISM 7700Seequence Detection Systemを用いて、TaqManプローブを、設計したプライマーとTaqDNAポリメラーゼとともにPCRを行い、FAMの蛍光強度により、タイピングを行った。6)血漿中総アドレノメデュリンおよび成熟型アドレノメデュリン値はそれぞれ16.8±1.4、2.9±0.6fmol/mlであり、クレアチニンクリアランスと負の相関(P<0.05)を示した。光顕組織上の重松分類による組織障害の指標との比較では、血漿中総アドレノメデュリンおよび成熟型アドレノメデュリンともに、急性障害(G)および進行度(S)の指標との間には、一定の傾向は認められなかった。7)今回検討した17例において、アドレノメデュリンのエクソン部分の6箇所のSNPの保有者は調べた範囲でいなかった。今回は、比較的腎機能障害の軽い症例を検討したが、今後透析患者を含めた腎不全となった症例のSNPの出現頻度を調べるべきと考えられた。1)同意が得られ、糖尿病や心疾患などの合併症を有さず、血圧のコントロールが比較的マッチした腎生検で診断され、発症から5年以上経過したIgA腎症患者のうち、49例を対象とした。2)血中総アドレノメデュリンおよび活性型である成熟型アドレノメデュリン濃度をRIA (IRMA)にて測定した。4)既に日本人での出現頻度が検討されているSNPのうち、アドレノメデュリンに関連すると考えられる2箇所のSNP(Celera RefSNP ID ; hCV11583583およびhVC215752)を含むプライマーを使用した。(昨年使用したものとは異なる。)5)ABIPRISM 7700Seequence Detection Systemを用いて、TaqMan MGBプローブを、プライマーとTaqDNAポリメラーゼとともにPCRを行い、VICとFAMの蛍光強度により、タイピングを行った。6)今回検討した49例において、アドレノメデュリンに関連すると考えられた2箇所のSNPのSNP(hCV11583583およびhVC215752)の出現頻度は、IgA腎症患者でそれぞれ14.7%、40.7%であったが、各々のSNPの出現に関連性は認められなかった。血漿中総アドレノメデュリンおよび成熟型アドレノメデュリン値との関連では、hCV11583583のSNPの出現との関連は認められなかったが、hVC215752のSNPに関しては、wild typeがhomoの患者ではそれぞれ14.6±0.9、2.0±0.2fmol/mlであったのに対して、mutant typeがhomoの患者ではそれぞれ17.4±1.6、3.0±0.6fmol/mlと有意に高値を示した。また、血清クレアチニン値、尿蛋白量においてもmutant typeのhomoで有意に高値を示した。5)ABI PRISM 7700

Seequence Detection Systemを用いて、TaqMan MGBプローブを、プライマーとTaqDNAポリメラーゼとともにPCRを行い、VICとFAMの蛍光強度により、タイピングを行った。6)今回検討した49例において、アドレノメデュリン遺伝子上の2箇所のSNP (JSNP ID ; IMS-JST016211,IMS-JST016212)出現頻度は、IgA腎症患者でそれぞれ10.2%,2.0%、アドレノメデュリン受容体遺伝子上のSNP (IMS-JST092608)の出現頻度は、IgA腎症患者で2.0%であり、各々のSNPの出現頻度は非IgA腎症や健常人と有意差は認めなかった。血漿中アドレノメデュリン値との関連では、IMS-JST092608のSNPの出現との関連は認められなかったが、IMS-JST016211およびIMS-JST016212のSNPに関しては、wild typeがhomoの患者に対して、mutant typeがhomoの患者では高値を示した。また、血清クレアチニン値、尿蛋白量においてもmutant typeのhomoで高値を示した。
RNAiを利用した複数のウイロイド感染を制御する新規防御戦略の開発

(1)ウイロイド特異的RNAサイレンシングを利用したウイロイド抵抗性戦略の構築;ジャガイモやせいもウイロイド(PSTVd)特異的small RNAsの大規模塩基配列分析結果に基づき、PSTVdの一鎖の下部中央保存領域から生成するPSTVd特異的small RNA(srPSTVd257a)を選定し、その人工ヘアピン遺伝子を人工合成して、アグロバクテリウム法でタバコ(N. benthamiana)を形質転換した。昨年度までに、得られた複数のT2系統は多量のsrPSTVdを生成することがわかったので、PSTVdをチャレンジ接種して抵抗性の有無を分析した。その結果、CarMV-35Sプロモーターで発現させた#24及び#25系統がPSTVdの感染増殖を阻害することが明らかになった。次に、ホップ綾化ウイロイド(HpSVd)とトマト退緑萎縮ウイロイド(TCDVd)を同様にチャレンジ接種して抵抗性の有無を分析した結果、どちらにも抵抗性を示さなかった。HpSVdとTCDVdはsrPSTVd257aと2箇所以上のミスマッチがあり、これが抵抗性を示さない要因と考えられた。(2)ウイロイド特異的RNAサイレンシングが宿主植物に及ぼす副作用の解析;ウイロイド配列に由来するヘアピンRNAを植物細胞内で発現させると副作用で植物にウイロイド感染と類似の病的症状が誘導される可能性が指摘されている(Wang et al 2004)。特別研究員の受け入れ研究者グループの研究において、ウイロイド感染で宿主のジベレリン生合成系のgibberellin β-hydroxylase遺伝子と機能未知のZigA遺伝子の発現量が低下することが明らかになったので、昨年に引き続き、両遺伝子に由来するヘアピンRNA配列を構築し、アグロバクテリウム法でN. benthamianaを形質転換し、複数の形質転換体系等を選抜・育成することに成功した。ほぼ当初の計画通りに研究を完了した。ウイロイド感染で誘導されるウイロイド特異的small RNAのホットスポット領域に由来するヘアピンRNA(srPSTVd257a)を発現させることで人為的にウイロイド抵抗性付与できる可能性を明らかにすることができたことは予想を上回る成果であった。一方、この形質転換系統は2塩基のミスマッチを有する別種ウイロイド(TCDVd)には効果が認められず、マルチ抵抗性付与は達成できなかった。本研究の結果、RNAサイレンシングを利用して植物にウイロイド抵抗性を付与することが可能なことが示された。一方、ウイロイド感染で誘導されるウイロイドを標的とするRNAサイレンシングは副作用として宿主遺伝子発現に悪影響を及ぼし、病原性発現に至る可能性が指摘されている(Navarro et al, 2012)。本研究の結果、ウイロイドの全長配列ではなく、ウイロイド特異的small RNAホットスポット領域を用いても抵抗性付与が可能なことが示されたことから、今後、宿主の特定の遺伝子発現に悪影響を与えないウイロイド特異的small RNAを選抜し、よりウイロイド感染阻止効果が高く且つ宿主植物への負担の少ない手法の開発につなげてゆきたい。(1)ウイロイド特異的RNAサイレンシングによるウイロイド特異的small RNAs生成機構の解析;受入れ研究者が2010年度までに実施したウイロイド(PSTVd、HpSVd)感染で誘導されるRNAサイレンシングで生じるウイロイド特異的small RNAsの大規模塩基配列の分析結果に基づき、ウイロイド特異的RNAサイレンシングの標的部位を選定した。その塩基配列情報から複数のウイロイドに効果的な人工遺伝子配列(ヘアピン構造を有するPSTVdやHpSVd配列)をデザイン、人工合成して、アグロバクテリウム法でタバコ(Nicotiana benthamiana)を形質転換する実験に着手した。(2)ウイロイド特異的RNAサイレンシングを利用したウイロイド抵抗性戦略の構築;上記で選定した配列の有効性を迅速に検討するために、選定配列をアグロインフィルトレーション法で一過的に宿主植物(Nicotiana benthamiana)に発現させ、その後、その植物にウイロイドをチャレンジ接種し、感染阻止効果を検定する評価系を確立した。(3)ウイロイド特異的RNAサイレンシングが宿主植物に及ぼす副作用の解析;ウイロイド配列に由来する人工ヘアピンRNAを植物細胞内で発現させると副作用で植物にウイロイド感染と類似の病的症状が誘導される可能性が指摘されている。実際に、上記(1)の実験で、ウイロイド由来配列を形質転換したトマトとタバコ(N.benthamiana)では、形質転換後の育成中に矮化症状が通常より多発することが観察されている。また、受入れ研究者の最新の研究データから、ウイロイド感染で宿主のジベレリン合成系遺伝子の発現量が低下する可能性が示唆されているので、ウイロイド感染で悪影響を受ける可能性のある遺伝子の分離とクローニングを開始し、複数の候補遺伝子のクローニングと塩基配列解析に成功した。(1)ウイロイド特異的RNAサイレンシングによるウイロイド特異的small RNAs生成機構の解析;ジャガイモやせいもウイロイド(PSTVd)特異的small RNAsの大規模塩基配列分析結果に基づき、PSTVdの一鎖の下部中央保存領域から生成するPSTVd特異的small RNA(srPSTVd257a)を選定し、その人工ヘアピン遺伝子を人工合成して、アグロバクテリウム法でタバコ(N.benthamiana)を形質転換した。

得られた複数のT2系統は多量のsrPSTVdを生成すること、srPSTVdがPSTVdの複製と関連する可能性を明らかにした。(2)ウイロイド特異的RNAサイレンシングを利用したウイロイド抵抗性戦略め構築;PSTVdのほぼ全長RNA、上記のsrPSTVd257aを高発現するN.benthamianaを育成し、PSTVdをチャレンジ接種した。両系統共、PSTVd感染を有意に阻害し、RNAiを利用してウイロイド抵抗性作物を作出する可能性が示唆された。さらに、ホップ矮化ウイロイド(HpSVd)とカンキツエクソコーティスウイロイド(CEVd)に対する抵抗性を分析している。(3)ウイロイド特異的RNAサイレンシングが宿主植物に及ぼす副作用の解析;ウイロイド配列に由来するヘアピンRNAを植物細胞内で発現させると副作用で植物にウイロイド感染と類似の病的症状が誘導される可能性が指摘されている。実際に、ウイロイド由来配列を形質転換したN.benthamianaでは、形質転換後の育成中に矮化症状をはじめ、様々な生育以上が多発することが観察された。ウイロイド感染で宿主のジベレリン生合成系遺伝子の発現量が低下することが明らかになったので、gibberellinβ-hydroxylase遺伝子に由来するヘアピンRNA配列を構築し、形質転換植物の作成を開始した。(1)ウイロイド特異的RNAサイレンシングを利用したウイロイド抵抗性戦略の構築;ジャガイモやせいもウイロイド(PSTVd)特異的small RNAsの大規模塩基配列分析結果に基づき、PSTVdの一鎖の下部中央保存領域から生成するPSTVd特異的small RNA(srPSTVd257a)を選定し、その人工ヘアピン遺伝子を人工合成して、アグロバクテリウム法でタバコ(N. benthamiana)を形質転換した。昨年度までに、得られた複数のT2系統は多量のsrPSTVdを生成することがわかったので、PSTVdをチャレンジ接種して抵抗性の有無を分析した。その結果、CarMV-35Sプロモーターで発現させた#24及び#25系統がPSTVdの感染増殖を阻害することが明らかになった。次に、ホップ綾化ウイロイド(HpSVd)とトマト退緑萎縮ウイロイド(TCDVd)を同様にチャレンジ接種して抵抗性の有無を分析した結果、どちらにも抵抗性を示さなかった。HpSVdとTCDVdはsrPSTVd257aと2箇所以上のミスマッチがあり、これが抵抗性を示さない要因と考えられた。(2)ウイロイド特異的RNAサイレンシングが宿主植物に及ぼす副作用の解析;ウイロイド配列に由来するヘアピンRNAを植物細胞内で発現させると副作用で植物にウイロイド感染と類似の病的症状が誘導される可能性が指摘されている(Wang et al 2004)。
培養によらない真菌解析法による腟常在真菌叢の変化と腟炎発症病理の解析

本研究は、膣の真菌叢を常在菌・病原菌を網羅的にかつ客観的に検査診断することを目的とし、分子生物学的手法と培養法・グラム染色を用いて真菌数や菌種の同定、膣炎の診断を行った。また、カンジダ膣炎で上昇するサイトカインの検索を行った。また、マンノース結合レクチンの遺伝子多型解析を行った。サンプルは市中の婦人科クリニックに膣炎症状にて来院し、インフォームドコンセントが得られた患者36名より膣洗浄液を採取し検体とした。採取時にcandida膣炎の疑いが濃いものは生標本によりカンジダの有無を観察した。本研究は臨床研究として福島県立医科大学倫理委員会の審査を受け実施した。DNAを用いた真菌数は真菌のITS2領域をターゲットにしreal-time PCR法を用いて定量した。真菌培養はクロモアガーカンジダ培地を用いた。臨床診断で36名中カンジダ膣炎疑い有は21名で真菌数は未検出5.2×10^6copies/μl。培養陽性は15名で、同定された菌種はCandida albicansとCandida glabrataだった。カンジダ膣炎疑い無は13名で真菌数は未検出3.6×10^5copies/μl。培養陽性は2名で、同定された菌種はCandida albicansだった。臨床診断でカンジダ膣炎疑い無で培養陽性の2名は膣炎症状有だが性器ヘルペスの既往・パートナーのクラミジア感染がある等のため臨床診断はカンジダ膣炎疑い無となった。菌数と真菌培養の関係は10^3copies/μl以上で全検体培養陽性となった。真菌数と培養コロニー数では相関はみられなっかた。また、培養陰性で真菌数が10^110^2copies/μlの4検体のリアルタイムpcr産物をクローニングし、BLASTのデーターベースとの相同性にて同定を行った。結果は3検体よりCandidaalbicans、1検体よりCandidaalblcansとMalassezia globosaが検出された。臨床症状と真菌数、培養結果からcandida膣炎は10^3copies/μl以上の真菌数がありCandida albicansが主な起因菌で少数Candida glabrataがみられた。また、10^2copies/μl以下は常在菌の可能性がありCandida albicansが主な菌叢であった。臨床診断とは22.2%の不一致があった。膣洗浄液を用いてIL-1-β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12p70、IF-γ、GM-CSF、TNF-αのサイトカインを測定した。36検体をグラム染色結果・真菌数・培養結果より細菌性腔症(BV群)・Candida膣炎(C群)・BV群+C群・その他(NON群)の4群に分類しサイトカインの結果をそれぞれの群で比較し有意差検定を行った。結果はC群とNON群の比較でIF-γ、GM-CSF、で有意差が見られた。また、C+BV群とNON群の比較でIF-γで有意差がみられた。マンノース結合レクチンの遺伝子多型解析ではA/A型が63.9%、A/B型が30.6%、B/B型が5.6%だった。

結果は3検体よりCandidaalbicans、1検体よりCandidaalblcansとMalassezia globosaが検出された。臨床症状と真菌数、培養結果からcandida膣炎は10^3copies/μl以上の真菌数がありCandida albicansが主な起因菌で少数Candida glabrataがみられた。また、10^2copies/μl以下は常在菌の可能性がありCandida albicansが主な菌叢であった。臨床診断とは22.2%の不一致があった。膣洗浄液を用いてIL-1-β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12p70、IF-γ、GM-CSF、TNF-αのサイトカインを測定した。36検体をグラム染色結果・真菌数・培養結果より細菌性腔症(BV群)・Candida膣炎(C群)・BV群+C群・その他(NON群)の4群に分類しサイトカインの結果をそれぞれの群で比較し有意差検定を行った。結果はC群とNON群の比較でIF-γ、GM-CSF、で有意差が見られた。また、C+BV群とNON群の比較でIF-γで有意差がみられた。マンノース結合レクチンの遺伝子多型解析ではA/A型が63.9%、A/B型が30.6%、B/B型が5.6%だった。