hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ビジネス・ニュ-フロンティア開発としての企業の地域戦略に関する研究

1960年代から70年代にかけての「公害問題」に表れているように、否定的表現をすれば「搾取・収奪の対象しての地域」であったと言えるかもしれない。だが、近年になって、企業と地域社会との関わり方に新しい展開がみられるようになって来ている。「コミュニティ・リレ-ションズ(CR)」や「企業市民(Corporate Citizen)]という概念は、企業と地域社会の統合・同時的発展を目指すものへと転換してきている証左であろう。企業が地域に与える影響としては、以下のような諸点があげられよう。(1)雇用(2)産業構造(3)階層構造(4)行財政(5)政治(6)住民生活および生活環境(7)自然環境(用水、土地、空気など)本年度においては、以上の諸点のうち、(2)産業構造、(3)階層構造、(6)住民生活および生活環境(「企業の地域戦略と組織間関係」、「地方都市開発と環境保全に関する一考察」、「支配構造と企業の性格ー地域と企業の新しい関係を求めてー」など)について、いくつかの新たな知見を得ることができた。
ヘテロ五員環拡張型新規骨格分子で構成された有機伝導物質の創製

新規な骨格構造を有する電子供与体および電子受容体を分子設計し、合成し、これらを成分分子とする新しいタイプの分子性導体を開発し、伝導挙動や伝導効果を解明する目的で本研究を行い以下の研究実績を挙げた。1.無水チオコハク酸に対して2分子の1,3-ジチオール-2-チオン誘導体を段階的に反応させて得られる生成物をDDQやクロラニルで脱水素したり、脱エステルしたりして、1-6の新規拡張共役型電子供与体を合成することに成功した。2.16はいずれも安定なラジカルカチオンとジカチオンを与えた。1は強い電子供与体で空気中、やや不安定であったが、26は安定で、TCNQ錯体はいずれも高伝導性であった。中でも[4][TCNQ]錯体の電導度は加圧成形試料かかわらずσ_<RT>=16Scm^<-1>であり、室温から248Kまでの温度領域で金属的挙動を示した。また、248から82Kまでの領域では半導体であったが、活性化エネルギー(Ea=0.023eV)は非常に小さかった。3.2,3-ビス(4-ヒドロキシフェニール)シクロプロペノンにチエニルおよびセレニエニルマロノニトリルを作用させて得られる[1.5.3]キナレン誘導体を酸化して、それぞれ7および8を合成した。4.7と8のTTFおよびTTT錯体は高電導性であった。[8][TTF]および[8][TTT]錯体はそれぞれ単結晶状態でσ_<RT>=420 Scm^<-1>および450 Scm^<-1>の電導度を示し、それぞれ室温から182Kおよび80Kまでの温度領域で金属的挙動を示した。[7][TTF]と[7][TTT]錯体も単結晶状態では金属的性質を示すと予想された。7と8のラジカルアニオン塩も比較的高電導性であった。これらのCT錯体はTCNQやDCNQIに属さない電子受容体で構成される分子性金属の最初の例である。
プテリジン補酵素による神経伝達物質モノアミン生成のcontrol機構

本研究課題に対して, (1)まず動物におけるBH_4の発見とその生合成の研究に関するReviewをかき,その問題点を示した.(2)またラット唾液腺のBH_4量の発生的変化をHPLCで測定し,分泌機能のカテコールアミン関与による交感神経支配の生後成熟過程とBH_4量の相関性を示した.また唾液腺におけるBH_4合成の律速酵素GTP cyclohydrolase活性出現パターンとの相関性を認めた. (3)一方グルカゴン投与ラットの肝臓ではBH_4要求性フェニルアラニン水酸化酵素の活性化と呼応してBH_4生合成酵素であるSPR活性もtransientに活性化されることを見いだし,ホルモンによるBH_4の生成制御の例を見いだした. (4)次いでBH_4生合成経路におけるSPRの作用機構に関する研究を行った.SPRはNADPH-oxidore-ductaseとして知られ, BH_4生合成に必須な酵素である. SPRによるpyruvoyl PH_4のBH_4への還元反応の中間体はC2 ́-keto PH_4であるとされてきた.ところが今回我々は, SPRがcoenzyme非存在下ではC1 ́keto PH_4をC2 ́-keto PH_4に異性化するisomerase活性を有することを発見した.次いでこのisomerase活性がNADPHまたはNADP+添加によって活性化されることを認めた.coenzymeによる活性化機構の解析から, BH_4生合成においてpyruvoyl PH_4がNADPH存在下SPR作用によってBH_4に変換される場合,まずC1 ́keto PH_4が生成された後, coenzyme結合によりSPRのisomerase活性が活性化され, C1 ́keto PH_4をC2 ́-keto PH_4に変換し,続いて第二の還元反応によって, BH_4が生成するという新機構を呈示した.(5)このSPR作用の新機構の観点からBH_4生合成についての最近の問題点をReviewに示した.本研究課題に対して, (1)まず動物におけるBH_4の発見とその生合成の研究に関するReviewをかき,その問題点を示した.(2)またラット唾液腺のBH_4量の発生的変化をHPLCで測定し,分泌機能のカテコールアミン関与による交感神経支配の生後成熟過程とBH_4量の相関性を示した.また唾液腺におけるBH_4合成の律速酵素GTP cyclohydrolase活性出現パターンとの相関性を認めた. (3)一方グルカゴン投与ラットの肝臓ではBH_4要求性フェニルアラニン水酸化酵素の活性化と呼応してBH_4生合成酵素であるSPR活性もtransientに活性化されることを見いだし,ホルモンによるBH_4の生成制御の例を見いだした. (4)次いでBH_4生合成経路におけるSPRの作用機構に関する研究を行った.SPRはNADPH-oxidore-ductaseとして知られ, BH_4生合成に必須な酵素である. SPRによるpyruvoyl PH_4のBH_4への還元反応の中間体はC2 ́-keto PH_4であるとされてきた.ところが今回我々は, SPRがcoenzyme非存在下ではC1 ́keto PH_4をC2 ́-keto PH_4に異性化するisomerase活性を有することを発見した.次いでこのisomerase活性がNADPHまたはNADP+添加によって活性化されることを認めた.coenzymeによる活性化機構の解析から, BH_4生合成においてpyruvoyl PH_4がNADPH存在下SPR作用によってBH_4に変換される場合,まずC1 ́keto PH_4が生成された後, coenzyme結合によりSPRのisomerase活性が活性化され, C1 ́keto PH_4をC2 ́-keto PH_4に変換し,続いて第二の還元反応によって, BH_4が生成するという新機構を呈示した.(5)このSPR作用の新機構の観点からBH_4生合成についての最近の問題点をReviewに示した.プテノジン補酵素テトラヒドロビオプテリン(B【H_4】)はカテコールアミンやインドールアミン等の神経伝達物質の生合成の律速段階となるチロシン-,トリプトファン-水酸化酵素反応のH-donorとして必須な因子である。生体組織中の微量B【H_4】濃度変化はモノアミン生成に関し最も生理的に重要なcontrol機構と考えられている。しかしB【H_4】の生合成全経路やその制御については解明されていない。今回、1、まず動物におけるB【H_4】の発見と生合成系の解明についてReviewを書き、現状の問題点を示した。又2、ラット唾液腺のB【H_4】量の発生的変化をHPLCで測定し、分泌機能の交感神経支配の生後生熟過程とB【H_4】量について相関性を認めた。3、ラットにGlucagonを投与すると、B【H_4】要求性肝フェニルアラニン水酸化酵素と呼応してB【H_4】合成系酵素であるセピアプテリン還元酵素(SPR)がtransientに活性化されることを見いだし、B【H_4】生成のホルモンによる制御の一例として示した。一方、B【H_4】の生合成に関する当面の問題は最終段階のモノケト体のテトラヒドロプテリン(P【H_4】)中間体の構造決定である。B【H_4】合成経路の最初のP【H_4】

中間体はジケト体のプテロイルP【H_4】(P【H_4】-CO-CO-【CH_3】)とされており、Ci-ケトP【H_4】(P【H_4】-CO-CHOH-【CH_3】)又は【C-2】'-ケトP【H_4】(P【H_4】-CHOH-CO-【CH_3】)のモノケト体P【H_4】を経てB【H_4】(P【H_4】-CHOH-CHOH-【CH_3】)に変換されると考えられる。de novoのB【H_4】合成の実験系では多くの場合この両モノケトP【H_4】が検出され、真の中間体がどちらかは未決定である。SPRはPTPと両モノケトP【H_4】をNAbpH還元によっていずれもB【H_4】に変換しこの反応はN-アセチルセロトニン(NAS)で阻害される。今回、4、coenzymeを含まない精製Ci-ケトP【H_4】を用いて、SPRが【C_1】'-ケトP【H_4】を【C_2】'-ケトP【H_4】にするイソメラーゼ活性を有することを発見した。新活性はNAS非感受性である。de novoのB【H_4】合成系でみられる両モノケトP【H_4】はSPRのこの新活性に由来するものと考えられ、複雑であった実験結果の解明によりB【H_4】合成経路の決定に寄与すると思われる。
ギホードマクマホン冷凍機冷却型ヘリウムフリー希釈冷凍機の試作開発

本研究期間(平成10-12年度)においてギホードマクマホン冷凍機冷却型ヘリウムフリー希釈冷凍機の試作開発をおこなった。以下にその成果をあげる。1.ギホードマクマホン冷凍機単体での試験運転を継続的に行い、各温度ステージでの最低到達温度の確認をおこなった。この結果、ガス導入ラインその他の熱輻射よけを適宜施し、改善することにより、最低到達温度3.05Kを連続的に達成し、希釈冷凍機基部の到達温度として十分であることを確認した。2.設計試作したカウンターフロー型熱交換器によるジュールトムソン膨張を取り入れた希釈冷凍機部の真空漏れテストを行い、真空漏れのないことを確認し、製作を完了した。3.ヘリウム3ガスの循環圧力を自動コントロールできるガスハンドリングシステムを設計、製作し、真空漏れテストの終了後、ヘリウム3、ヘリウム4混合ガスを充填し、ガスの循環テストをおこない、循環量などを調べる試験運転を完了した。4.ギホードマクマホン冷凍機と希釈冷凍機部の取り付け、配管をおこない、接合部の真空漏れテストを完了した。5.温度測定用抵抗温度計、各部ヒーターの取り付け、配線をおこなった。6.希釈冷凍機部とガスハンドリング部を結合し冷却テストをおこない、混合ガスの液化テストをおこなっているところである。終了後、すみやかに最終冷却テストをおこなう予定である。本年度はギホードマクマホン(GM)冷凍機冷却型ヘリウムフリー希釈冷凍機の試作開発のために以下のような機器の設計、購入、試作を行った。1、GM冷凍機の選定を行い、冷凍能力、信頼性、また空冷で使用可能なことから住友重機械製SRDK-408DAを選定し、購入した。(主要設備品)さらに冷凍機、希釈冷凍機部をおさめる真空チャンバー(主要設備備品)の設計を行い、大陽東洋酸素(株)により製作、冷凍機の組み付けを行った。2、希釈冷凍機部、ジュールトムソン弁を兼ねる熱交換器部の詳細設計をほかの研究分野で共同研究の関係があるドイツWalther-Meissner-Institutと意見交換を行いつつ進め、各部の設計を完了し、部品の製作をおこない一部が完成した。3、希釈冷凍機用ガスハンドリングシステムの設計製作をおこない、これを完成し(主要設備備品ロータリーポンプ)真空気密テストを行い漏れのないことを確認した。現在、希釈冷凍機部、熱交換器部、GM冷凍機部の各接続部の設計を行っている。次年度は接続部の設計を完了、製作を行い、継続してすすめている希釈冷凍機部の各部品の製作の完了をまって全体の組み立てを行う予定である。組み立て完了後は真空気密テスト、GM冷凍機テストなどを経て試験運転を年度後半から行う予定である。これに平行して大陽東洋酸素(株)が製作する簡易型希釈冷凍機の組み込みの可能性を検討し試作設計を開始する。またGM冷凍機冷却型超伝導マグネットとの組み合わせにより、極低温、高磁場環境をヘリウムフリーで実現するべく希釈冷凍機部外径の小型化(真空チャンバー、輻射シールドの小型化)を検討する予定である。本年度は以下にあげる各項目について試作、試験を行った。1,前年度に取り付けを行ったギホードマクマホン冷凍機単体での試験運転を行い、各温度ステージにおける最低到達温度の確認を行った。この結果導入ガスラインから熱輻射によると思われる熟侵入があり4Kステージの最低到達温度が初期の目標値(4K以下)より若干高く(4.5K)なっていた。これを改善するためにガスラインに40Kステージにおいて熱輻射よけ用の配管を新たに増設するべく改良を施している。その他の点については長時間安定性を含めて問題は発生していない。2,前年度に設計、一部製作した希釈冷凍機部の最終組み立て、漏れのチェックを行った。希釈冷凍機部の最終組み立て段階において2重管式熱交換器部と分留器部のつなぎの部分において微小な漏れがあることがわかりこの部分の再製作を行う必要があった。このため本年度中には組み立て完了に至らなかった。すでに必要部品の製作は修了しているので次年度に早急に組み立て、試験を完了する予定である。

3,試験運転時に必要なガスハンドリングシステムの最終試験を行い、漏れのないことを確認した。今後運転に必要なヘリウム3,ヘリウム4混合ガスを充填し次年度の試運転に備える。これと平行して真空排気系、温度測定系の整備を行った。温度測定系には本年度備品として購入した交流抵抗ブリッジを組み込んだ自動測定システムを整備した。この測定システムにより同時に8箇所の温度測定とヘリウム3ガス循環量を長時間にわたって計測できるようになった。4,簡易型の希釈冷凍機部の設計を行った。2重管式熱交換器部に設計の変更が必要になるため現在慎重に設計、検討を進めている。以上のように本年度は進捗状況に若干の遅れがあったが、次年度における試運転は問題なく行える結果が得られらた。本年度は以下にあげる項目についてギホードマクマホン冷凍機冷却型ヘリウムフリー希釈冷凍機の試作開発をおこなった。1.前年度に取り付け、試験をおこなったギホードマクマホン冷凍機単体での試験運転を継続的に行い、各温度ステージでの最低到達温度の確認をおこなった。この結果、ガス導入ラインその他の熱輻射よけを適宜施し、改善することにより、最低到達温度3.05Kを連続的に達成し、希釈冷凍機基部の到達温度として十分であることを確認した。2.前年度までに完成した希釈冷凍機部の真空漏れテストを行い、前年度発見された微小な漏れ個所の特定、補修をおこなった。測定の結果、室温での漏れは確認できず、一応修理は完了した。3.前年度までに最終試験運転を終了したガスハンドリングシステム部にヘリウム3、ヘリウム4混合ガスを充填し、ガスの循環テストをおこない、循環量などを調べる試験運転をおこなった。4.ギホードマクマホン冷凍機と希釈冷凍機部の取り付け、配管をおこなった。このさい2個所で配管の接合部において真空漏れが見つかり、これの補修、再試験をおこない最終的にもれはなくなった。5.温度測定用抵抗温度計、各部ヒーターの取り付け、配線をおこなった。6.現在、希釈冷凍機部とガスハンドリング部を結合し冷却テストをおこなっているところである。
双結晶及び多結晶を用いたセラミックスの界面構造と強化機能の解明

セラミックスの結晶構造、界面構造と機械的性質の相関を明らかにし、高機能構造材料の開発指針を提案することを目的として研究を行い、以下の実績を得た。1微視応力下における単結晶および焼結炭化ケイ素の機械的挙動の評価(1)破壊靭性KICはAl_2O_3添加焼結SiC(6MPa・m^<1/2>)>B、C添加焼結SiC>単結晶{1100}〈1120〉>単結晶(0001)〈1100〉=単結晶(0001)[1120]>単結晶{1100}[0001](2MPa・m^<1/2>)の順である。単結晶においては結晶方位による差(壁開面の影響)が顕著である。Al_2O_3添加焼結SiCは板状結晶粒が発達し、この粒界で亀裂が屈局すること等により高い靭性を得る。粒界の結合が比較的強固なB、C添加SiCでは粒内破壊を起すが、この際にも、亀裂は壁開面を選択して進む傾向があるためわずかな屈局をともない、単結晶より高い靭性を示す。(2)微構造と機械的性質の関係を一義的に評価することは出来ない。高い破壊靭性を持つSiCほど圧痕部の損傷が大きい。Al_2O_3においても同じ傾向が認められた。1巨視的応力下における焼結破壊挙動と微構造の関係BおよびC添加焼結法、Al_2O_3添加焼結法により組織を制御したSiCに曲げによる巨視的応力を負荷し、微構造と破壊挙動の関係を研究した。(1)破壊開始表面エネルギーγiはB、C添加焼結SiC低く(10J/m^2)、Al_2O_3添加焼結SiCでは高い(50J/m^2)。(2)破壊進展表面エネルギーγwofはγiより高く、全般にγwofはγiより粒界や微構造によるエネルギー吸収機構を強く反映する。2双結晶による評価および材料設計への提言双結晶モデルとして、23mmの単結晶6H-SiCで構成される気相成長SiCを試料として検討を行った。粒界をはさむ各結晶間には方位により、亀裂の発生や進展挙動に差があることに加え、エッチング時の挙動や研磨傷発生に対する抵抗性に顕著な差が認められる。材料設計においては、(1)材料特性の面からは、結晶および粒界の性質を出来るだけ定量的に把握すること、(2)使用環境の面からは、曲げ試験等により発生する巨視的応力下での挙動、研磨や微粒子衝突時に発生する局所の微視的応力下での挙動等、求める性質を明確にした微構造制御が必要と考えられる。

セラミックスの結晶構造、界面構造と機械的性質の相関を明らかにし、高機能構造材料の開発指針を提案することを最終目的として、初年度は以下の研究を行った。1単結晶と多結晶Al_2O_3を接触させ、1600°C以上の高温で処理後、その粒成長について方位像電子顕微鏡による観察を行った結果、相接する結晶の方位関係は〈0001〉に平行な共通回転軸を持つものは少なく、〈1100〉や〈3301〉等、c軸と6090°Cをなす共通回転軸を持つものが多い等の新しい知見を得た。2気相成長させたSiCの微細粒および数mmの巨大結晶粒の方位関係および界面構造に関する解析を方位像電子顕微鏡や粉末X線回折法等により実施した。この結果、微細粒は3C型SiCからなり、結晶粒界は主にΣ3、Σ9、Σ27等の対応粒界からなること、粒の成長とともに結晶構造は6H型に変化すること等の新しい知見を得た。また、この結果を粒界エネルギーの安定性をもとに考察した。3ビッカースインデンター等により、微視的応力下における亀裂進展挙動に関する基礎試験を行い、破壊エネルギーが、多結晶焼結体SiC>気相成長SiC>単結晶SiCの順に変化すること、この差が亀裂進展にともなう結晶および粒界との相互作用により生ずると考えられる、等の基礎的知見を得た。4 Al_2O_3添加SiCの多結晶焼結体に曲げを主体とした巨視的応力を負荷して、各種の破壊エネルギーを研究するため、装置の改良および標準試料による基礎データの取得をおこなった。次年度は上記の基礎的知見を発展させ、機械的性質の測定および電子顕微鏡観察等により、結晶構造、界面構造と機械的性質の相関をさらに明らかにするための研究を推進する。セラミックスの結晶構造、界面構造と機械的性質の相関を明らかにし、高機能構造材料の開発指針を提案することを最終目的として、11年度は以下の研究を行った。1各種の異なったプロセス(CVD法、BおよびC添加焼結法、Al_2O_3添加焼結法)により組織を制御したSiCにインデンテーションによる微視的応力、曲げによる巨視的応力を負荷し、微構造と破壊エネルギーの関係を研究した。(1)亀裂はCVD法、BおよびC添加焼結法、Al_2O_3添加焼結法の順に、直線的な進展から、粒界による影響を受けた屈曲の多い進展の仕方に変化する。(2)破壊開始表面エネルギーγ_iはCVDSiCで最も低く(5J/m^2)、Al_2O_3添加焼結SiCで最も高い(50J/m^2)。(3)破壊進展表面エネルギーγ_<wof>はγ_iより高く、全般にγ_<wof>はγ_iより粒界や微構造によるエネルギー吸収機構を強く反映する。(4)エッチング液による侵食速度はCVDSiCで最も遅く、BおよびC添加焼結SiC、Al_2O_3添加焼結SiCの順に早くなる。この破壊エネルギーやエッチング速度の傾向は粒界の結合強度や化学的安定性を反映していると考えられる。2 SiCおよびAl_2O_3単結晶を、異なったモデル粒界を介して双結晶化させるための基礎的検討を進めた。次年度は、上記の知見をさらに発展させ、結晶構造・粒界構造と機械的性質との相関を明らかにするとともに、高機能構造材料の開発指針につき検討する。セラミックスの結晶構造、界面構造と機械的性質の相関を明らかにし、高機能構造材料の開発指針を提案することを目的として、12年度は以下の研究を行った。1特に今年度は結晶学的性質に注目し、異なったプロセスにより組織を制御したSiCにビッカースインデンテイションによる微視的応力を加え、微構造と破壊挙動の関係を研究した。(1)破壊靭性K_<IC>はAl_2O_3添加焼結SiC(6MPa・m^<l/2>)>B、C添加焼結SiC>
時空制御された入力信号による細胞内情報伝達回路の反応解析

細胞に時空制御された入力信号を与える方法を開発し、細胞増殖、分化、走化性応答の情報伝達回路の解析に応用することが本研究の目的である。特に細胞増殖と分化、および走化性の情報伝達回路を測定の対象としている。当初計画したパッチピペット法、すなわちパッチピペットを細胞膜上に立て、内液をペプチドホルモン(EGFやNGF)やcAMP溶液で潅流すること。その際に、ピペットの場所、溶液の濃度と流速を変化させることにより、入力を時空制御する方法の開発をおこなうとともに、マイクロビーズ法、すなわち情報伝達分子を表面に共有結合したビーズを光ピンセットにより細胞表面の任意の場所に接触させ、入力を空間制御する方法を開発している。マイクロビーズ法の場合も、ビーズの大きさや伝達分子の表面密度を変えることにより、入力の大きさを調整することが可能である。パッチピペット法においては、1分子観察のために活性を失わないよう蛍光標識したEGF(上皮成長因子)、NGF(神経成長因子)、cAMP(細胞性粘菌の走化性因子)を合成し、それらの活性を評価し満足できる結果を得た。ビーズ法においても、直径1ミクロンのラテックスビーズ表面にEGFを活性を失わないように結合させ、細胞応答を起こさせることができるようになった。現在、入力刺激を時空制御することを試みている。
大腸がん特異抗体を用いた高感度便タンパク検出法の開発

本研究では大腸がん特異的抗体付加磁性ビーズによる高感度タンパク検出法(CLEIA法)の確立と大腸がん診断法への応用を目的とした。大腸がん特異的分子に対する複数クローンを取得し、抗エクソソーム抗体と大腸がん特異抗体を用いたサンドイッチELISAにより、目的とする分子がエクソソーム上に存在することを明らかにした。便タンパク検査へ向けた前段階として、末梢血中腫瘍由来エクソソームによる大腸がん診断法の検討を行い、大腸がん患者の陽性率は64.7%であった。今後は検査方法の最適化および自動化を行い、最終目標である便検体への応用を目指している。大腸がんの死亡率を低下させるために便潜血検査による大腸がん検診が行われている。検診受診率が目標の50%に近付いてきたが、便潜血検査には偽陰性大腸がん患者や偽陽性健常者の存在と、不必要な精密検査を受けることによる被験者の負担増、精密検査を行う内視鏡医や病理医の負担増という問題点があるため、精度の高い新しい大腸がん診断法の開発が求められている。本研究では便潜血検査と同様に便タンパクを対象とする。大腸がん特異的な抗体付加した磁性ビーズによる高感度タンパク検出法の確立と大腸がん診断法への応用を目的としている。平成27年度は、取得が困難な複数回膜貫通型の大腸がん特異的分子に対する高性能な抗体の取得を試みた。これまでに複数クローンを取得し、大腸がん細胞株に対する反応性をFACSで確認した。同様に大腸がん細胞株培養上清に対する反応性がELISAで確認可能であったことから、標的とする大腸がん特異的分子は細胞外に放出され対外診断に応用可能であることを見出した。さらにエクソソームマーカーである抗CD9抗体と大腸がん特異抗体を用いたサンドイッチELISAにより、目的とする分子がエクソソーム上に存在することも明らかにした。近年血中エクソソームによるがん診断が報告されている。そこで便タンパク検査へ向けた前段階として、末梢血中腫瘍由来エクソソームによる大腸がん診断法の検討を試みた。大腸がん特異的エクソソームを濃縮するため、捕捉用に大腸がん特異抗体を磁性ビーズに結合させ、検出用に標識した抗CD9抗体を組み合わせた検出法を樹立した。健常者と大腸がん患者間に明らかな差が見られたことから大腸がん患者では末梢血中に大腸がん特異的分子を有する腫瘍由来のエクソソームが循環していることが示唆された。研究初年度は樹立が困難な複数回膜貫通型細胞膜タンパクに対する抗体作製を行った。大腸がん細胞株だけでなく、今後の対外診断への応用を考慮しエクソソームなどの細胞外分泌物に対しても反応性がある抗体クローンを複数取得したことで順調に進展していると判断する。一方で便タンパクに対する検討は研究二年度以降に行う予定である。検診受診率が目標の50%に近付いてきたが、便潜血検査には偽陰性大腸がん患者や偽陽性健常者の存在と、不必要な精密検査を受けることによる被験者の負担増、精密検査を行う内視鏡医や病理医の負担増という問題点があるため、精度の高い大腸がん診断法の開発が求められている。本研究では大腸がん特異的抗体付加磁性ビーズによる高感度タンパク検出法の確立と大腸がん診断法への応用を目的とした。研究初年度は、取得が困難な複数回膜貫通型の大腸がん特異的分子に対する複数クローンを取得し、大腸がん細胞株に対する反応性をFACSならびに大腸がん細胞株培養上清に対する反応性をELISAにて確認できたため、標的とする分子は細胞外に放出され対外診断に応用可能であることを見出した。近年血中エクソソームによるがん診断が報告されているため、便タンパク検査へ向けた前段階として、末梢血中腫瘍由来エクソソームによる大腸がん診断法の検討を試みた。予備検討にて健常者と大腸がん患者間に明らかな差が見られたことから大腸がん患者では末梢血中に大腸がん特異的分子を有する腫瘍由来のエクソソームが循環していることが示唆されたため、研究最終年度は大腸がん患者68例および健常者50例の血清検体の検討を行った。健常者血清の平均値の3倍をカットオフとすると特異度は96%となった。その際の感度は64.7%であり、CEAの23.5%よりも優れていた。リンパ節転移を伴わないステージ1、2の大腸がんにおいても50%以上の感度を示していた。

研究二年度は、大腸がん患者および健常者の血清検体の追加検討を行う。確立した検出法を便タンパクにも応用する。また、抗体クローンの作製も平行して行う。腫瘍診断学抗体作製に時間を要して、臨床検体での評価数が少なかった。また、学会での研究成果の報告や論文発表などがなかったため、旅費や英文校正、別刷代など次年度に持ち越しとなった。次年度には多くの臨床検体での評価と、研究成果の積極的な報告を行う予定である。
風化基岩層内の雨水流動過程の解明による森林小流域の新たな水文モデルの構築

本研究では,土壌物理学的手法,水文学的手法,地球物理学的手法,地球化学的手法を組み合わせた実験・観測により,風化基岩層内の雨水流動過程を解明することを目的とした。風化花崗岩を母材とする山地小流域(面積240m^2)において,土層と基岩層の圧力水頭を詳細に計測し,土壌-基岩系における浸透水の挙動を検討すると共に,降雨流出に及ぼす土層と基岩層の影響について考察を加えた。降雨時の小流域からの総流出量は常に総雨量の5%以下であり,多量の雨水が基岩層に浸透することがわかった。基岩層内の圧力水頭変化は基岩直上の圧力水頭の変化と良く似たものとなり,土層が厚い斜面部位の基岩層内では不飽和浸透流が卓越していた。これは,浸潤前線が土層内を下降する過程で浸透強度が弱められるために土層と基岩の境界に飽和側方流が形成されないためであり,この様な部位では浸透水が流出に寄与しないことが示された。さらに,基岩内の水移動プロセスを解明するため,コイル型TDR式水分計を作製して風化花崗基岩層内に埋設し,含水率の計測を行った。基岩の含水率は年間を通じて比較的安定していたが,降雨時には小さな雨量でも上昇した。その上昇幅は土層のそれに匹敵したものの,降雨終了後には急激に低下した。貯留量でも同様の傾向が見られた。以上から,基岩の含水率変動には割れ目の寄与が考えられた。今まで簡易貫入試験により「基岩」と定義され,不透水とされた層にも雨水が浸透していることが本研究により明らかになった。本研究では,土壌物理学的手法,水文学的手法,地球物理学的手法,地球化学的手法を組み合わせた実験・観測により,風化基岩層内の雨水流動過程を解明することを目的としている。さらに,その結果を基に,森林小流域で実際に起きている水循環過程をより正確に表現できる新たな物理水文モデルを構築することを目指している。本年度の研究では,まず,観測を行う森林小流域を,大津市桐生試験地内(以下,K流域)と神戸市六甲試験地内(R流域)に設定した。共に風化花崗岩を母材とし,K流域は長さ30mの斜面を含む0.1ha,R流域は2haである。斜面部の土層と風化基岩層にテンシオメータと水分計を高密度で設置し,基岩層内の浸透水の物理的挙動や土層-基岩層の相互作用に関するデータ取得を開始した。これまでのところ,降雨の度に,基岩層内に飽和・不飽和浸透流が頻繁に発生することを示すデータが得られている。さらに,ダイアモンドコアドリルによる穿孔で岩石のサンプリングを行い,pF試験,飽和・不飽和透水試験を実施した。その結果,風化基岩層内では,ダルシー則に従う流れが生じ,飽和透水係数は9.5×10^<-5>cm/s1.2×10^<-4>cm/sの範囲にあることが示された。風化基岩とマサ土からなる森林土壌の水分特性を比較したところ,飽和体積含水率および飽和透水係数はともに土壌のほうが大きいが,湿潤領域(圧力水頭-50cm以上)で土壌の体積含水率および透水係数が急激に低下するために,乾燥領域(圧力水頭-50cm以下)では基岩の体積含水率は土壌より大きく,透水係数は土壌とほぼ同じであることがわかった。以上の結果は,土壌のほうが大間隙を多く含むのに対し小間隙は基岩のほうに多く含まれていることを示している。
新規脂肪酸Δ6不飽和化酵素分子種の単離・同定とその発現制御に関する研究

食事脂肪酸の種類と量は各種の生活習慣病の防御機構と密接な関係を有していることから、細胞内脂質バランスにおける脂肪酸の防御機構が注目されている。アラキドン酸、エイコサペンタエン酸(EPA)およびドコサヘキサエン酸(DHA)などの多価不飽和脂肪酸(PUFA)は、生体膜の重要な構成成分である。これらPUFAは脂肪酸長鎖不飽和化反応により生成されるが、哺乳類ではこの反応の律速段階は、Δ6不飽和化酵素(D6D)により行われる。D6D活性が栄養環境や個体の生理状態により変化することは多数の研究者によって報告されてきた。さらにこの過程にはΔ5不飽和化酵素(D5D)および別の系列の不飽和化反応ではstearyl-CoA不飽和化酵素(SCD1および2)が関与している。本研究では、高脂血症治療薬であるフィブレート系薬剤、ジェンフィブロジルをラットに投与した実験および肝臓での不飽和化反応を抑制すると報告される大豆タンパク質食を摂食させた実験を行って、それぞれSCD1、D5DおよびD6DのmRNA量の違いを指標として、脂肪酸不飽和化酵素遺伝子の発現の調節する分子種の予測を行った。D6D遺伝子発現の食事およびジェンフィブロジルによる制御の機構を示すとD6Dの脂肪酸不飽和化反応の可能性のある分子は3つに大別される。(1)高度多価不飽和脂肪酸、(2)タンパク質源の違いによる細胞内情報伝達物質および(3)PPARのリガンドである。それぞれの物質は違った段階で制御を行っているようである。本年度の研究は、とくに食事タンパク質に注目して、分離大豆タンパク質(SPI)中の主成分であるβ-コングリシニンのD6D活性への影響をラットを用いて検討した。D6D活性はβ-コングリシニン>SPI>カゼインの順で低く、β-コングリシニンでの活性抑制作用が強かった。しかし、これはアミノ酸バランスの悪さが影響するものと考えられるので、β-コングリシニンの制限アミノ酸である,トリプトファンおよびメチオニンを添加して同様な実験を行ったところ、β-コングリシニン+Trp+Met>カゼインの順で抑制作用が強く発現した。従って、β-コングリシニン中のアミノ酸以外の何らかの物質が、D6D活性の制御に関わっていると考えられた。本研究では、高脂血症治療薬であるフイブレート系薬剤、ジェンフィブロジルをラットに投与した実験および肝臓での不飽和化反応を抑制すると報告される大豆タンパク質食を摂食させた実験を行って、それぞれSCD1、D5DおよびD6DのmRNA量の違いを指標として、脂肪酸不飽和化酵素遺伝子の発現の調節する分子種の予測を行った。結論としてD6D遺伝子発現の食事およびジェンフィブロジルによる制御の機構を示すとD6Dの脂肪酸不飽和化反応の可能性のある分子は3つに大別される。それぞれの段階でどのような分子が作用するかは、今後検討していきたいと考えている。D5DはD6Dと同じ制御機構、すなわち同じ分子種により制御されている可能性がある。しかし、脂肪酸合成酵素等で食事からよりも生体内で合成されるパルミチン酸を基質とするSCD1の遺怯子の発現は別の制御機構により制御されており、D6Dの制御とは違う分子がその反応に関わっている可能性がある。

D6D遺伝子発現の食事およびジェンフィブロジルによる制御の機構を示すとD6Dの脂肪酸不飽和化反応の可能性のある分子は3つに大別される。(1)高度多価不飽和脂肪酸、(2)タンパク質源の違いによる細胞内情報伝達物質および(3)PPARのリガンドである。それぞれの物質は違った段階で制御を行っているようである。本年度の研究は、とくに食事タンパク質に注目して、分離大豆タンパク質(SPI)中の主成分であるβ-コングリシニンのD6D活性への影響をラットを用いて検討した。D6D活性はβ-コングリシニン>SPI>カゼインの順で低く、β-コングリシニンでの活性抑制作用が強かった。しかし、これはアミノ酸バランスの悪さが影響するものと考えられるので、β-コングリシニンの制限アミノ酸である,トリプトファンおよびメチオニンを添加して同様な実験を行ったところ、β-コングリシニン+Trp+Met>カゼインの順で抑制作用が強く発現した。従って、β-コングリシニン中のアミノ酸以外の何らかの物質が、D6D活性の制御に関わっていると考えられた。
知識創造を促進するワークショップ・デザインに関する研究

本研究では,大学教育におけるワークショップ実践として,「利用者参加のもの作りワークショップ」,「FDのためのコースバトル」を対象にし,参加者の知識の創造を促進する「場のデザイン論」について検討した.具体的には,ノットワーキングの概念やビブリオバトルのコミュニケーション方式を理論的枠組みとして援用し,ワークショップの場のデザインと参加者の活動の事例分析を行った.その結果,それらフレームワークの実践的有効性が確認されたため,本研究を,他のワークショップをデザインするための一考察と位置付けた.本研究では,大学教育におけるワークショップ実践として,「利用者参加のもの作りワークショップ」,「FDのためのコースバトル」を対象にし,参加者の知識の創造を促進する「場のデザイン論」について検討した.具体的には,ノットワーキングの概念やビブリオバトルのコミュニケーション方式を理論的枠組みとして援用し,ワークショップの場のデザインと参加者の活動の事例分析を行った.その結果,それらフレームワークの実践的有効性が確認されたため,本研究を,他のワークショップをデザインするための一考察と位置付けた.今年度の研究では,プロジェクト学習のためのワークショップである京都大学と長野県諏訪地域の中小企業集積との連携による利用者参加のもの作りワークショップを対象とし,対面的なワークショップの場以外の時間,場所で,参加者たちがどのような協同作業をし,そこで情報技術がどういった役割を果たしていたかについて事例分析を行った.その結果,京都大学学生たちのユーザグループでは,携帯電話のカメラ機能を活用して,メンバーたちが日常生活での気付きを共有し合い,欲しいモノのコンセプトを明確化する事例が見られた.一方,長野県諏訪地域の製造業者たちの間では,地域のコミュニティ性をベースに,それが製作における協力関係として効果的に機能するよう「諏訪バーチャル団地」という情報発信,交流のツールの開設が試みられていた.それらのことから,対面的なワークショップの場以外の時間,場所で,情報技術は,アイデアの発見を支援する「ツール」としての役割,そして,地域のコミュニティ性を背景に製造業者たちの協力関係の促進を支援する「場」としての役割を果たしていたことが分かった.さらに,そうした対面的なワークショップの場以外の時間,場所での参加者たちの繋がりや協働を分析する枠組みとして,活動理論の新しい概念である「ノットワーキング」の概念が有効であることが分かった.以上,今年度の研究では,プロジェクト学習のためのワークショップの実践やそこでの情報技術の役割を明らかにすることを通して,フィールド情報学の手法としてのワークショップについての理論的,方法的整備を進めた.知的書評合戦「ビブリオバトル」のコミュニケーション方式を「場の設計論」として応用したFDワークショップである「FDのためのコースバトル」を設計し,学内で実践した.FDのためのコースバトルとは,教員と学生の教育に関するコミュニケーションの場にゲーム性を導入し,「人を通じて授業を知る」・「授業を通じて人を知る」ことを目的とした新しい対話場の設計手法である.本研究ではまず,FDのためのコースバトルの手順を,1)「自分が魅力に感じる教員の授業」を探してきて集まる(4,5名程度が登壇する),2)順番に一人10分で独自の表現方法により,その授業の魅力をプレゼンする(各プレゼン後に5分の全体議論の時間を設ける),3)「どの授業が最も魅力に感じたか?」で投票を行い,登壇者とオーディエンス全員で「チャンプ授業」を決定する(その後全員が投票理由を説明する)という3ステップで構成した.そして,このFDのためのコースバトルを学内の教員,学生を対象に連続的に実施した.その結果,本FD方式により,教員間,教員,学生間における授業に関する「知識」(効果的な教授法や教育内容)の共有,および,「授業観」(授業に関する価値観や授業への価値づけ)の相互理解が促進されることが分かった.そして,このような授業紹介を競技とした教員,学生の対話による新しいFD方式の実証的成果を,日本協同教育学会や国際プロジェクト・プログラムマネジメント学会などで発表した.さらに,本FD方式の理論と方法をまとめ,FDのためのビデオ教材「FDのためのコースバトル-理論と方法-」を開発し,本FD方法論の普及,拡大を図った.
回転パノラマX線撮影法に関する3次元的定量的検討

回転パノラマX線撮影法における断層域の3次元的位置関係を正しく把握することは、撮影上、診断上、重要である。そこで、実験的に断層中心を求め、全顎歯列弓域における断層域のMTFをスリット法にて測定し、そこから全顎歯列弓の立体的な断層域を求め、また、計算による断層域との比較検討を行なった。方法パノラマX線装置は、モリタ社製Veraviewを、増感紙・フイルム系は、Dupont HiPlus/Kodak X-OMAT RPの組合せを、1次スリット幅は、1.1mmとした。1.回転シャッタ-を用いて、断続的X線像を作成し、McDavidらの計算式により、断層中心を求めた。2.正中を基準として、左右側各9箇所、計19箇所について、スリットX線像を作成し、マイクロデンシトメ-タにより濃度測定を行ない、マイクロコンピュ-タにて、線像強度分布からMTFを計算した。さらに断層域を規定するため、10cycles/mmまでのMTF値の2乗積分値の100倍値(ITF値)を求めた。3.計算による断層域は、記録系のMTF値をDoiらのデ-タにより、WelanderらやMcDavidらの示した計算式より求めた。結果1.ITF値75までを断層域と規定すると、実測値では、正中部で約6mm、左右平均して、犬歯相当部で約7mm、大臼歯部で約15mm、顎関節相当部で約21mmであった。2.実測による断層域と計算による断層域とは、かなり一致していた。回転パノラマX線撮影における歯列弓全体の断層域について、MTF法による定量的検討を行うための系統的実験方法の確立を本研究の目的としている。本年度に行った実験方法・結果について以下に報告する。実験方法実験資料作製1.フィルムを垂直的、水平的に合わせて2枚設置し、回転ストロボ装置を使用し、一定時間間隔で断続的なX線撮影を行った。2.上記2枚のフィルムからデシタイザー、パーソナルコンピューターにより線束の角速度、フィルムの移動速度を計測し、歯列弓全体の断層中心位を決定した。3.スリット設置台を用いて、正中線に対して、X線束が、0度、左右側約15度、30度、50度、70度、90度、100度の計13箇所について、断層中心より一定間隔でフィルム側、X線管側へ移動し、パノラマX線撮影を行った。4.濃度を強度に変換するために、階談曝射装置を用いて、16段のX線撮影を行った。実験結果X線束解析実験から1.フィルム送り速度は、撮影開始後速やかに増加し、小臼歯部付近より減速し、正中を超えて犬歯部付近から再び増加し、最大値を示す。2.X線管の角速度は、撮影開始後速やかに増加し、一定範囲内の変動を繰り返し、正中を越えやや増加しながら撮影は終了する。3.X線管一回転軸間距離は、撮影開始後は、ほとんど変動せず、回転軸の移動が開始すると、増加し始め、正中部で最大値を示し、その後徐々に減少し、開始時とほぼ同値で撮影は終了する。4.断層治癒の形態は、左右側でやや異っていた。回転パノラマX線撮影法における断層域の2次元的位置関係を正しく把握していることは重要である。そこで、全顎歯列弓域における断層域のMTFをスリット法にて測定し、そこから全顎歯列弓の立体的な断層域を求め、また、計算による断層域との比較検討を行った。方法パノラマX線装置は、モリタ社製ベラビュ-を、増感紙フィルム系は、Dupont Hiplus/Kodak X-OMAT RPの組合せを、1次スリット幅は、1.1mmとした。

1.Kyokko製0.1mm鉛スリットを、正中を基準として左右側各9箇所計19箇所ににおいて、断層中心からフィルム側、X線管側へ一定感覚で移動したり11点でスリットX線像を作製した。マイクロデンシトメ-タ(Konika PDS-15)により濃度測定を行い、マイクロコンピュ-タ-(National Dperate C-7000)にて、線像強度分布からMTFを計算した。さらに断層域を規定するため、10cycles/mmまでのMTF値の2乗積分値の100倍値(ITF値)を求めた。2.計算による断層域は、記録系のMTF値をDoiらのデ-タを用いて、We IanderらやMc Dayidらの示した計算式より求めた。結果1.ITF値75までを断層域とすると、実測値では、正中部で薬6mm、犬歯相当部で左右平均して薬7mm、大臼歯相当分で左右平均して薬15mm、顎関節相当部で左右平均して薬21mmであった。2.実測による断層域と計算による断層域とはかなり一致していた。
腎皮質β型介在細胞の機能調節におけるG蛋白の役割

腎皮質集合管に局在し重炭酸排泄を行うβ型介在細胞の、G蛋白による機能調節の可能性を検討した。まず、尿細管微小潅流法を用いてβ型介在細胞の単一細胞内pHを測定し、その細胞機能におよぼすホルモンの影響を検討した。その結果、同細胞の管腔膜上に存在するCl/HCO_3交換系をisoproterenolが亢進させ、その細胞内情報伝達にadenylate cyclase系が役割を果たすことが確認され、さらに、そのisoproterenolの刺激作用をprostaglandin E_2が阻害することが示された。微小潅流法により、G蛋白のリボシル化を行う、百日咳毒素とコレラ毒素のβ型介在細胞の機能におよぼす影響を検討したが、有意の結果は得られず、実験系に問題のある可能性が示唆された。そこで、β型介在細胞にpeanut lectin agglutinin(PNA)が特異的に結合することを用いて、蛍光細胞分離装置による、同細胞の単離、培養を試みた。家兎腎皮質をコラゲナーゼ処理した後細胞浮遊液とし、FITCを標識したPNAを結合させ、その蛍光を指標として蛍光細胞分離装置を用いてβ介在細胞を単離した。その後コラーゲンで表面処理したdish上で3日から5日間培養した。この単離直後と培養後の細胞において、ホルモン反応性cAMP産生能とβ介在細胞の重要な特徴であるPNA結合性、免疫染色によるH^+-ATPaseの存在を検討したが、いずれもこれまで報告されたβ介在細胞での結果と一致していた。このようにして得られた初代培養β介在細胞を用いて、同細胞のリボシル化蛋白の存在と、patch clamp法によるCl^- channelの調節機構を検討した。その結果、同細胞には、コレラ毒素によりリボシル化される蛋白すなわちGs蛋白が存在し、Cl^- channelもisoproterenol、cAMP、γ-sGTPで活性化されることが示され、β介在細胞が、isoproterenolにより、G蛋白を介して調節されることが示された。当初、初年度に提出した実験計画に沿って、単離尿細管の微小潅流を行いβ型介在細胞の細胞内pHにおよぼすisoproterenolとprostaglandin E_2の作用を確認した。傍基底膜側へのisoproterenolの添加はCl^ー/HCO_3^ー交換系の活性化を介して有意の細胞内pHの低下を生じ(7.21±0.05から7.04±0.06へ)、この反応は10^<ー6>Mのprostaglandin E_2を傍基底膜側潅流液に添加し尿細管を15分間前処置することにより完全に消失した。そこで、G蛋白の関与を証明するため、百日咳毒素を傍基底膜側潅流液に添加し、60ー120分間尿細管を前処置した後、同様にisoproterenolを添加し細胞内pHの変化を検討した。しかし、isoproterenolへの反応性は、2回の実験で減弱がみられたものの、その他の3回の実験では、全く影響がみられず、一定の効果を判断することは不可能であった。

さらに高濃度の百日咳毒素による実験も考慮したが、潅流実験に用いる溶液は常に95%O_25%CO_2によりbabblingする必要があり、また、潅流ポンプにより3ml/分の速度で常に潅流槽の溶液を交換する必要があることなどから、物理学的刺激により、毒素の変性を生じる可能性が高いと考えられ、さらに、比較的大量の潅流液を要することから、試薬の費用が高額になることなどより、単離尿細管による実験を断念し、最近当研究室で成功した細胞分離装置により単離したβ型介在細胞を用いることに計画を変更した。単離β型介在細胞は、単離尿細管と同様に、isoproterenolに反応性を有し、adenyloate cyclase活性化を生じることが確認された。さらに、単一細胞の細胞内Ca濃度を測定したところ、prostaglandinE2に反応して一過性の上昇が認められ、protein kinase CとG蛋白の関与が強く示唆された。現在、このCa濃度上昇機序を中心として検討中である。細胞分離装置(Fluorescent activatedcell Sorter)を用いて、以下のごとく、β型介在細胞を単離することに成功した。まず、コラゲナーゼで家兎腎皮質を処理し、percollの濃度勾配を用いて、近位尿細管と遠位尿細管の比重差により、両者を遠心分離した。この後、さらに酵素処理を行ない、尿細管を遊離細胞とした。この細胞浮遊液にβ型介在細胞と特異的に結合するFITC標識peanut lectinを添加し、FITCを指標として、β型介在細胞を細胞分離装置により単離した。単離された細胞は、一部は直ちにホルモン反応性の検討に用い、一部は初代培養に供した。単離直後のβ型介在細胞は、既知のごとく、イソプロテレノールに反応して、用量依存性にサイクリックAMP産生が増大し、一方、抗利尿ホルモンに対しては有意の反応を示さなかった。また、β型介在細胞のクロールイオン輸送に対し、イソプロテレノールと拮抗的に作用するプロスタグランディンE_2は、基礎のサイクリックAMP産生に対しても、イソプロテレノール刺激下においても、有意の作用を示さなかった。さらに、初代培養細胞にて、同様のホルモン反応性を検討した。その結果、イソプロテレノール、抗利尿ホルモン、プロスタグランディンに対するサイクリックAMP産生反応は単離直後の細胞と同等であった。β型介在細胞に存在するG蛋白の性質を検討するため、コレラ毒素・百日咳毒素の存在下でリボシル化される蛋白を、単離細胞と初代培養細胞で同定した。その結果、両細胞ともにコレラ毒素存在下でのみリボシル化蛋白が検出され、Gs蛋白の存在が示された。今後は、初代培養細胞を用いて、G蛋白活性化とβ型介在細胞の機能調節につき、検討する予定である。前年度の研究成果により、腎皮質よりbeta型介在細胞を蛍光細胞分離装置を用いて単離、初代培養を行うことに成功した。また、この培養beta介在細胞では、prostaglandin E_2はcAMP産生に影響を及ぼさないことが明かとなった。そこで、本年度は、まず、細胞内情報伝達系でadenylate cyclase系と同様に重要な役割を果たす、細胞内Ca^<2+>濃度を指標としてprostaglandin E_2のbeta介在細胞への影響を検討した。細胞単離後3-5日の初代培養細胞を用いて、fura-2AMを細胞内に取りこませ、蛍光側光装置を用いて細胞内Ca^<2+>の変化を測定した。近年、beta受容体刺激剤により細胞内Ca^<2+>が上昇する場合も報告されていることから、まずisoproterenolの影響を検討したが、beta介在細胞においては有意の変化を示さなかった。
実験的神経因性疼痛モデルの疼痛過敏現象に対するECT(電気痙攣療法)の影響

近年,動物を用いた神経損傷後疼痛の研究がおこなわれるようになり,末梢神経損傷後には末梢神経一次ニューロンはもとより脊髄後角,視床,大脳皮質知覚野にいたる痛覚伝導系全体の病的変化が起こることが明らかになってきている。電気痙攣療法(以下ECT)は,薬物抵抗性のうつ病の治療として一般的になっており,末梢神経損傷後疼痛の緩和法としても効果が期待できる。そこで,ラットの坐骨神経を損傷することにより作成した痛覚過敏モデルを用いてECTの効果を調べた。ラットの右坐骨神経をクロミックガットで緩く4回結紮することにより熱刺激及び機械刺激に対する痛覚過敏を示すモデルを作成した。坐骨神経損傷7日後よりハロセン麻酔下にラット両耳に100mA,1.0sec,50HzのECTを1日1回6日間連続で与えた。一旦発生した熱刺激に対する痛覚過敏現象は6日間連続のECTの48時間後において有為に抑制されたが1回だけのECTでは有為な効果はなかった。コントロール群においては熱刺激に対する痛覚過敏現象は抑制されなかった。また,ECTは通常の熱刺激の逃避行動に影響を与えなかった。また,ECTに先立ってnifedipine(5mg/kg i.p.)を投与するとECTの痛覚過敏抑制効果は拮抗された。神経損傷後機械刺激に対する痛覚過敏現象に対してはECTは効果がなかった。ECTの効果はnifedipineの投与により抑制されたことにより,L-type calclum channelを介していることが示唆された。ECTは熱刺激に対する痛覚過敏現象には効果が認められたが,機械刺激に対しては認められなかった。これは,機械刺激に対する痛覚過敏現象が脊髄レベルより下位の経路が関与しているのに対し,熱刺激に対する痛覚過敏現象はより上位の中枢神経系も関与していることが示唆された。ECTは治療法として一部の症例に対する効果が期待できる。1.SDラットの坐骨神経を4回緩く結紮することにより作成した神経因性疼痛モデルを用いて1)熱刺激に対する疼痛過敏現象は単発のECTにより影響されないが、24時間おきに6日間連続施行すると抑制される。このことから、このモデルにおける熱刺激に対する疼痛過敏現象は上位中枢が関与していることが示唆された。3)Von Frey hairを用いた機械的刺激に対する疼痛過敏現象はECT直後においてもECTを連続に施行した後も影響を受けない。このことから、このモデルにおける機械的刺激に対する疼痛過敏現象には、上位中枢の寄与は少なく、脊髄レベルでの反射による可能性が高いことが示唆された。神経因性疼痛モデルに対するリチウムの髄腔内投与の影響リチウムを神経因性疼痛モデルラットの髄腔内に投与すると、用量依存性に熱刺激に対する疼痛過敏現象、機械刺激に対する疼痛過敏現象、冷刺激に対する疼痛過敏現象を抑制した。リチウムは躁鬱病の治療薬としてすでに臨床で使用されている薬剤であり、ラットの神経因性疼痛モデルで効果を有することより、臨床応用できる可能性が示唆された。以上より、神経因性疼痛の治療に対し、上位中枢へ作動すると考えられる方法が応用できる可能性が示唆された。