hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
機能多様性ペプチド複合中分子の高効率合成と生体内機能発現

平成29年度に引き続き、がんに免疫応答を引き起こすために、細胞表面で糖鎖抗原中分子を複合化させる検討を行なった。既に確立した糖鎖アルブミンを用いて金(III)触媒を特定の細胞表面に担持し、末端にプロパルギルエステルを持つ糖鎖でアミド結合による複合化を検討した。この際に、別課題で既に合成していたC末端にプロパルギルエステルを持つペプチドを使用したところ、これらのペプチドも効果的にがん細胞の表面に導入されることが判明した。さらに、いくつかのペプチド構造を実験に使用することで、がん細胞の増殖を効果的に抑制できることが判明した。構造が異なるペプチドを細胞表面に導入することや、コントロール実験として糖鎖アルブミン触媒を用いない場合、あるいはC末端にプロパルギルエステルがないペプチドを使用した場合には全く抑制効果は見られなかった。以上の結果は、特定のペプチド分子をがん細胞表面に導入することでがん増殖を抑制できることを示しており、細胞上でのペプチド中分子複合化による新たながん戦略として大変稀な例を見出すことができた。一方、本年度では、研究期間前半で確立した細胞表面でのペプチド・糖鎖中分子の直接的合成による選択的な細胞ターゲティング法を、がん細胞を区別する戦略として展開した。がん認識ペプチドと数種類のN-型糖鎖を用いて、マイクロプレート上の様々ながん細胞に作用させ、「細胞上複合化」を行った。その結果、それぞれのがん細胞に選択的なペプチド、およびN-型糖鎖のコンビネーションを見出した。さらに、ヌードマウスに播種した異なる種類のがん細胞に対して、細胞実験で見出したペプチドとN-型糖鎖のコンビネーションを静脈注射することにより、マウス内の特定のがんに対しても選択的な複合化反応を実現し、それぞれを区別することに成功した。がん細胞に対して中分子を作用させて活性を示す例は多数あるが、表面に中分子を複合化させて細胞障害性を示す例は非常に限られている。平成30年度に見出したペプチド中分子の新規な構造と、これを細胞表面に「中分子複合化」させて機能を発揮させるという戦略は、新しい治療戦略を提示するものであり、大変意義深い。これまでに実施してきた糖鎖抗原中分子を複合化させる「生体内合成戦略」と併せて、本領域のさらなる進展と新しい領域の開拓に繋がる成果であると考える。一方、研究前半で確立した「細胞表面での中分子合成技術」をがん細胞の差別化に用いることにも成功し、本研究期間内で技術開発に止まることなく、これを新たな診断法として展開できた。従って、研究は順調に進展していると評価する。平成30年度に、ある種のペプチドをがん細胞に導入すると、がん細胞の増殖を効果的に抑制できることが判明した。そこで平成31年度では、分子生物学的手法を用いてそのメカニズムを解明するとともに、がん増殖を抑制するペプチド中分子をマウス内のがん組織に複合化することによって、生体内で直接がん治療する。すなわち、ヌードマウスに担持したHeLaがんに対して、これを生体内でも高度に認識するN-型糖鎖クラスターを「金属の運び屋」として用い、Au(III)触媒をがん組織に効率的に担持する。その後、プロパルギル基を持つペプチド中分子をマウス内に導入し、マウスレベルでもがん増殖が抑制できるかどうかについて検証する。開発したドラッグデリバリーシステムがマウス内でも選択的にがんを認識するかどうかを分子イメージングにより追跡しながら、尾静脈注射、あるいはより直接的にがん組織に試薬を導入することで効果を検証する。生体内でのペプチド中分子複合化と平成30年度までに実施した糖鎖抗原中分子複合化を合わせて、本領域最終年度に「インビボ有機合成化学」による画期的な抗がん治療の新たな戦略を確立する。さらに、平成30年度には実施できなかった細胞表面でのワンポットageladine A中分子複合体の合成にも挑む。このテーマは、ペプチド中分子や糖鎖中分子を細胞表面に複合化するよりも遥かに難題である。複数の有機合成化学反応を生きている細胞の上で実現しなければならない。報告者が既に研究期間前半で確立したワンポット法に従い、タンパク質表面のアルギニン残基に対して、アルデヒド基やアミン誘導体を順次導入し、神経細胞のニューロン選択的な誘導を可能とするageladine Aの中分子複合体合成を目指す。まずはタンパク質のアルギニン残基に対してカスケード反応を検証した後、最終的に細胞表面の複合化を目指す。平成27年度では、まずアルギニン残基に対するageladine A誘導体の複合化について検討した。これまでに広範囲に渡る化合物の調製には限界があった。そこで報告者はまず、アルギニンの翻訳後修飾に注目して、ageladine Aのコア構造部分である2-アミノイミダゾールの効率的な合成法開発に取り組んだ。すなわち、グアニジン官能基に対して塩基性条件下、不飽和アルデヒドを作用させることにより、温和な条件下でイミンの形成、分子内環化反応、続く芳香化反応による2-アミノイミダゾールの合成を実現した。次いで同フラスコ内に続けて試薬を追加することにより、さらに数種類の反応を進行させ、アルギニン残基を含むageladine A誘導体を最大で34%の収率で得ることに成功した。さらに置換グアニジン、またはその原料となるアニリンを原料として、フラスコ内に次々と試薬を導入するだけで、従来合成できなかった様々な天然物複合体を迅速に調製できた。次いで、これらワンポット・バイオインスパード・カスケード合成で得られた多様性中分子を用いて、様々な活性評価を行った。その結果、マウスから誘導したES細胞をnMレベルでニューロンへと強力に分化誘導する、あるいは阻害する化合物を見出した。

一方、これらの化合物はアストロサイトへの誘導や阻害には影響を与えない。天然物であるageladine Aには、ニューロン分化活性に影響を与えるDyrk1Aの阻害活性があるが、今回調製した中分子にはその活性は全く見られなかった。すなわち、報告者のワンポット・バイオインスパード・カスケード合成を経た新規なageladine A誘導体合成により、Dyrk1Aの阻害活性を完全に切り離すことに成功した。このように、アルギニンとの中分子複合化により本来の天然物の機能とは異なる新しいニューロン分化誘導活性を発現させることに成功した。平成27年度ではアルギニン残基を含む中分子ペプチドとの複合化までには至らなかったが、アルギニン残基との複合化を実現する高効率的なワンポット天然物複合化法を実現した。さらにこの手法で合成した誘導体の中から、新しい機構でES細胞をnMレベルという効率でニューロン分化誘導を制御する中分子を見出した。以上の成果から、研究は順調に進展していると評価できる。平成27年度の研究過程において、グアニジン、またはアルギニンを基質としたバイオインスパード・ワンポットageladine A天然物合成に成功した。さらに、アルギニンへの複合化により、ES細胞から誘導される神経細胞をニューロンへと誘導したり、阻害する化合物郡を発見した。これらの分子は、アストロサイトへの誘導には全く関わっておらず、ニューロンに選択的な稀な化合物郡である。このように天然物とペプチドの複合化により、それぞれの機能とは異なる新しい活性を発現させることに成功した。そこで平成28年度では、確立したバイオインスパード・ワンポット手法を、さらにニューロンへの選択的な分化・阻害機構解析のツールとしても展開した。すなわち、ビオチンやクリック反応基であるアジドやアセチレン基を導入したアルギニン含有ペプチドを調製し、上記に確立したワンポット複合化法を実施した。その結果、ageladine A中分子複合体が発揮した、神経細胞の分化誘導制御機構を解析するプローブ分子群を一挙に調製することができた。これらの分子郡を用いた検討、さらに神経分化に関する酵素群の阻害活性を総合的に評価した。その結果、標的酵素への特異的な結合が選択的なニューロンへの分化活性を制御している可能性を見出した。さらにこれらの知見を基に、より選択的で創薬にも使用可能な天然物・ペプチド複合体を検討した。平成27年度に続けて、より複雑、そして機能を持つペプチド内のアルギニン残基に対して、ageladine A誘導体のワンポット合成を検討した。アルギニン残基を含む直鎖や環状ペプチドに対して、共役ジアルデヒド、アンモニアや一級アミン、置換アルデヒドを順次作用させることにより、多様性を持つ中分子複合体を合成することができた。研究開始当初は計画班員との共同研究により、固相やフロー法を使用して、中分子複合体ライブラリーから他の活性を求めることも計画していた。
頑健な３次元ポイントデータ特徴抽出手法の開発

本年度は,レーザースキャンで取得した大規模ポイントデータから,自動的に事物を抽出する頑健な手法を開発した.レーザースキャンは3次元都市モデルの構築のための技術として大変脚光を浴びており,都市計画や施設管理,ナヴィゲーションシステムなど広範な応用範囲を持つ.しかしながら,レーザースキャンで取得したデータには様々な雑音や異常値が含まれており,また,情報の欠損もたびたび生ずる.これらはモデル構築の大きな障害となっていることから,新たな事物抽出手法の理論構築と実証分析を行った.まず初めに,円筒状の事物について,自動かつ頑健な抽出手法を開発した.頑健な主成分分析手法(Robust Principal Component Analysis)に基づいて重要な情報のみを選択,それらを用いて3次元モデルを構築することで,ノイズや情報の欠損に対して頑健な手法とした.仮想の数値シミュレーション及び実データを用いた実証実験を通じ,既存手法と比べた優位性を明らかにした.次に,棒状の事物を抽出する手法の開発を実施した.棒状の事物とは,信号塔や旗竿,細い樹木の幹や枝など,円筒状の事物ほど太さを持たないものを指す.頑健な主成分分析を利用したアルゴリズムを再度利用し,理論構築と実証分析を行ったところ,既存手法と比較してモデル構築の精度が大きく向上することを確認できた.以上の成果は,研究発表大会の口頭発表及び3本の雑誌論文としてまとめ,後者については1本は採択済み,2本は現在査読中である.29年度が最終年度であるため、記入しない。29年度が最終年度であるため、記入しない。近年,地形や人口構造物など,3次元空間オブジェクトのデータモデル構築のために,移動体に登載したレーザースキャナーやLiDAR(Light Detection and Ranging),地表面スキャンニングなどによって得られる膨大な3次元ポイントデータが用いられる.これらのデータに曲面片群や曲線分群を適合させ,そこから特徴抽出を行うことで元の空間オブジェクトを推定し構築する.この特徴抽出には,曲面の分割,平滑化,適合の反復が必要であるが,この処理は測定誤差や異常値に敏感であり,収束計算が長時間に及んだり,手作業が必要になることがある.そこで本研究では,道路面構造物に代表される人工地物に焦点を当て,迅速にデータモデル構築を行うための新たな手法を提案する.特にここでは,特徴抽出において自然地物と人工地物を予め分離し,後者のみを抽出することで,頑健性と高速性の両立を図る.本年度は,既存の特徴抽出手法の詳細なレビューを実施した.画像処理の分野に相当の研究蓄積があるものの,離散的ポイントデータ,特に3次元データを想定したものは限られていることから,それらを網羅的かつ体系的に分類し,それぞれの特性を明らかにした.次に,3次元ポイントデータから,サーフェスデータを復元する手法を開発した.元データの異常値や測定誤差に対応するには,手法の頑健性が肝要である.そこでここではRANSAC,ロバスト主成分分析,ロバスト回帰,及びMCMD (Maximum Consistent with Minimum Distance)アルゴリズムを援用し,安定性の高い手法を開発した.さらに,開発した手法の有効性を検証するために,実データへの適用実験を行った.手法開発,データ入手等,順調に進んでおり,計画通りと判断できる.本年度は,レーザースキャンで取得した大規模ポイントデータから,自動的に事物を抽出する頑健な手法を開発した.レーザースキャンは3次元都市モデルの構築のための技術として大変脚光を浴びており,都市計画や施設管理,ナヴィゲーションシステムなど広範な応用範囲を持つ.しかしながら,レーザースキャンで取得したデータには様々な雑音や異常値が含まれており,また,情報の欠損もたびたび生ずる.これらはモデル構築の大きな障害となっていることから,新たな事物抽出手法の理論構築と実証分析を行った.まず初めに,円筒状の事物について,自動かつ頑健な抽出手法を開発した.頑健な主成分分析手法(Robust Principal Component Analysis)に基づいて重要な情報のみを選択,それらを用いて3次元モデルを構築することで,ノイズや情報の欠損に対して頑健な手法とした.仮想の数値シミュレーション及び実データを用いた実証実験を通じ,既存手法と比べた優位性を明らかにした.次に,棒状の事物を抽出する手法の開発を実施した.棒状の事物とは,信号塔や旗竿,細い樹木の幹や枝など,円筒状の事物ほど太さを持たないものを指す.頑健な主成分分析を利用したアルゴリズムを再度利用し,理論構築と実証分析を行ったところ,既存手法と比較してモデル構築の精度が大きく向上することを確認できた.以上の成果は,研究発表大会の口頭発表及び3本の雑誌論文としてまとめ,後者については1本は採択済み,2本は現在査読中である.今後も計画通り,研究を進める.まず,前年度に実施した適用実験の結果を精査する.結果が良好であればそのまま次の段階へ進むが,必要な精度が得られていない場合には,サーフェスデータの復元手法を再検討し,その改良と適用を繰り返す.次に,サーフェスデータにおいて自然地物と人工地物を分離する手法を開発する.分離にはサーフェスの分類,分割,特徴抽出などの適切な組み合わせが必要であるが,組み合わせの選択には人工知能分野の既存手法を援用する.現時点では,機械学習による組み合わせ選択と,組み合わせを所与とする方法の双方を試み,精度の高い結果を得られる方法を採用する予定である.開発した手法は,前年度取得したデータに適用し,その結果を考察する.サーフェスデータの復元手法と同様,良好な結果を得られるまで手法の改良と適用を繰り返す.年度末には,得られた研究成果の公表を行う.学会発表,学術論文執筆などの方法で,研究成果を社会に還元する.29年度が最終年度であるため、記入しない。
呼吸循環不全に対する人工臓器による長期間心肺補助に関する基礎的臨床的研究

まず、前年度に引続いて、慢性動物実験により人工肺を組込んだ補助人工心臓システム(VAD)による長期間心肺補助について検討を進めた。成山羊4頭を用い、右心房ー肺動脈間に装着したVADの送血コンデュイットに特殊微小孔膜を用いた試作小型人工肺を挿入・装着し、短時間作用性抗凝血薬による局所抗凝血療法下に長期間心肺補助を施行した。最高15日間の呼吸循環補助(24L/minの循環補助、40120ml/minのガス交換)が可能で、局所抗凝血療法により出血傾向は完全に回避された。また血液障害や臓器障害も認めず、本方法の有用性・安全性が示された。つぎに、システムの抗血栓化処理に必要な、ガス透過性を有するヘパリン化材料の合成について検討した。ポリジメチルシロキサン、ポリウレタン、第3級アミノ基含有ポリエ-テルの三元共重合体を合成し、アミノ基を4級化した後ヘパリンをイオン結合させた。開発素材は極めて優れた抗血栓性を示し、また生理食塩水中での2週間のヘパリン溶出処理後も抗血栓性を維持していた。現在各種材質表面へのコ-ティング技術の検討を行なっており、本研究を含む多目的への応用が期待される。人工肺人工心臓一体型の心肺補助装置については、設計を終了して試作段階にある。構造の概略は、hollow fiberガス交換膜を外部潅流方式に配列して人工肺部分を形成し、ハウジングにあたる部位はすべて抗血栓性ポリウレタンの円筒型ポッティングとし、その前後に人工弁付きポ-トを1つ有するプッシャ-プレ-ト型の人工心臓を接続して一体化するというものである。本構造により、抗血栓性における血液流体的要因は大きく改善され、装置内血流の可視化実験から血液欝滞や血流の不均衡化が解消されたことが確認された。またガス交換の高効率化や装置全体の小型化も同時に実現した。次段階として全血流路のヘパリン化表面処理を検討中であり、抗凝血療法の完全不要化の実現が期待される。本研究の目的である、重症呼吸循環不全患者に対する人工臓器的手法を用いた心肺同時補助による治療体系を確立するために、本年度は人工肺を組込んだ補助人工心臓(VAD)システムを用いて、慢性動物実験により心肺同時補助効果の基礎的検討を行なった。実験動物には体重40kg以上の成山羊を使用した。先ず我々の施設で開発したVADシステムを右心房一肺動脈間に右心補助人工心臓(RVAD)として装着し、約2週間後にRVAD送血管に人工肺を挿入・装着し、長期間心肺補助を試行した。人工肺は、血漿漏出防止が可能なものを使用した。本心肺補助システム下での右心補助効果、酸素添加量・炭酸ガス排出量の推移、および血液性状の変化を検討した。その結果、システム自体に起因する合牧症を認めることなく最長2週間の心肺補助を安定して施行することができた。循環補助に関しては34L/minの最大バイパス流量を得ることが可能で、呼吸補助に関しては130ml/min前後の酸素添加、および110ml/min前後の炭酸ガス除去が可能であった。補助期間中、血液性状には大きな変動を認めず、本システムによる血液性状への影響は軽微であると思われた。本システムはリザ-バなしの小容量閉鎖回路であり、またVADの良好な抗血栓性ともあいまって、人工肺以外の回路全体が抗凝血療法不要のものとなった。本検討においても、実験終了後の回路の検索では、人工肺以外の回路部分にはVADも含めてく血栓形成は認められなかった。またVADの良好な血液適合性は、その繊細な制御性とともに、ポンプの長期間の駆動による血液損傷の問題を解決することに繋がり、現行のECMOあるいはV-Aバイパスシステムと比較してこの点においても極めて優れていることが証明された。以上より、人工心臓と人工肺を組み合わせることにより種々の利点を獲得し得ることが示され、安全な長期間心肺同時補助方法へと発展し得ることが確認された。

構造の概略は、hollow fiberガス交換膜を外部潅流方式に配列して人工肺部分を形成し、ハウジングにあたる部位はすべて抗血栓性ポリウレタンの円筒型ポッティングとし、その前後に人工弁付きポ-トを1つ有するプッシャ-プレ-ト型の人工心臓を接続して一体化するというものである。本構造により、抗血栓性における血液流体的要因は大きく改善され、装置内血流の可視化実験から血液欝滞や血流の不均衡化が解消されたことが確認された。またガス交換の高効率化や装置全体の小型化も同時に実現した。次段階として全血流路のヘパリン化表面処理を検討中であり、抗凝血療法の完全不要化の実現が期待される。
微小管を介して染色体分離及び細胞形態に関与する新規低分子量G蛋白質の解析

現在まで詳細に解析が進められている既存の低分子量G蛋白質ファミリーは,細胞外からの刺激に応答したシグナル伝達のオン・オフを担う制御因子として重要な役割を果たしている。一方,我々が見出したDi-Ras, Gieをはじめとする新規低分子量G蛋白質群は固有の生化学的特性をもち既存の因子とは異なる生物現象に関与していると考えられる。私はこれらの因子の発現時期及びその細胞内局在の変化に注目することで新規蛋白質群の活性制御機構が解明できると考えている。また,これらの相互作用因子を同定することで新規蛋白質群が関与するシグナル伝達機構を解明できると考えている。そこで,前者に関しては細胞内過剰発現系やRNA干渉法による発現抑制系を用いた表現型の観察を,また後者に関しては質量分析を用いて相互作用因子の同定を行うことでこれら新規低分子量G蛋白質群の機能解析を網羅的に行い,低分子量G蛋白質ファミリーの共通点及び多様性を明らかにすることを目的に研究を進めている。本年度はこれらの新規蛋白質群のうち,多細胞生物に高度に保存されているGieについて以下に示す知見を得た。(1)内在性Gieは間期において主にGTP型でそんざいするが,細胞分裂期になるとGDP型が増加することを見出した。(2)細胞分裂期に増加したGDP型GieがNir2という因子に相互作用することを見出した。現在はこのNir2がGieのシグナル伝達にどのように関与しているかを詳細に検討するとともに,Gieの下流因子を探索するために質量分析や酵母Two-hybridスクリーニングを用いた相互作用因子の探索を行い,Gieの染色体分離における制御機構の解明を進めている。
慢性疲労の発生,進展,回復時における睡眠・覚醒条件に関する研究

本研究では,発症前24週間にわたり労働条件,生活条件が同定できる客観的なデータが揃った時短勤務中のホワイトカラー労働者の過労障害事例の睡眠-覚醒リズムを分析した。被災者の過労障害の発症は,被災者の業務がラップトップコンピュータを用いれば場所と時間が問われず遂行できる業務,またプレイイング・マネージャー的業務であることを背景としていた。被災者の過労障害の発症は,Saitoの指摘する,多重負担,発症前3カ月からの過労状態,生理心理的な休息にならない休日の3つの特徴と合致した。生理心理的な休息にならない休日の内容は,休日の覚醒時には感情が生じて心身を休息させないこと,睡眠時には"the sleep apprehension"によって睡眠時の徐波睡眠が剥奪されることと推測された。被災者の過労障害発症のプロセスは,3つの段階で捉えることができた。第1段階は,メール関連指標の悪化に代表され,第2段階は労働時間の増大に代表され,第3段階は,睡眠時間の短縮に代表された。本症例では,Wadaが指摘している「一般に"Karoshi"発症直前の労働負担は高くなるといわれている」ことを必ずしも踏襲しなかった。したがって現時点では,発症直前の労働負荷が必ずしも高く現われない場合もあることを認識しながら,労働負荷のかかりかたとその反応である負担の遅延を詳細に見ていくことが重要である。そのためには,本事例研究で採用した週内性過労の視点から勤務日と休日の過労像がどのように進展するかを検討すること,また長期的な時系列変化として捉えていくことが重要と思われる。過労死,過労自死,過労障害に被災された本人,またその家族に対して,被災前の慢性疲労状態における睡眠-覚醒条件を検討するために,1回60分-90分の面接を2-3回にわたって行った。面接は,半構造化面接であり,1回目の面接は,主に被災者が健康であった頃の睡眠-覚醒周期を聴取し,2回目の面接は,それが仕事の忙しさとともに,どのように変化したかを聴取した。その際,面接は被災者本人,家族に本調査の趣旨を十分説明し,同意を得て行った。具体的な面接内容は,入眠困難度,中途覚醒度,早朝覚醒度,鼾の有無,寝言の有無,夢見の有無,寝汗の有無,昼寝の有無,入眠に対する努力(睡眠薬,アルコール)の有無等であった。また被災前,1週間,1か月,6か月,1年の範囲でretrospectiveに労働状況と疲労徴候を聴取した。疲労徴候は,行動水準と自覚的疲労感を主に聴取した。行動水準では,日常の会話,入浴の有無,食事時刻など1日単位の行動,外食,洗車,飲酒など休日に行う週単位の行動,散髪,記念日の祝福など月単位の行動の変化に着目した。面接した被災者は,過労死事例4名,過労自死事例6名,過労障害事例3名であった。被災事例全13例のうち,労働災害認定事例は6例であった。過労死・過労障害の死因は,脳疾患が2事例,心臓疾患が5事例であり,過労自死の手段は,投身が3事例,縊頸が2事例,服薬が1事例であった。被災者の職種,被災前の労働条件は多岐にわたった。面接の結果として,まずベッドパートナーであっても被災者の睡眠状況を詳しく説明できないことが多かった。また総じて被災者の睡眠は,短縮傾向にあったが,発症に関しては,短縮直後より,長期の休日,休日直後のように比較的長時間の睡眠がとられている時期に生じている事例が多くみられた。過労死家族の会、労働組合などから紹介を受けた過労死7事例、過労自死9事例、過労障害4事例、慢性的うつ病1事例に罹災・罹患した本人、または家族に対して、1回90分間の半構造化面接を2回実施し、罹災・罹患前の慢性疲労条件、および慢性疲労状態を発生1年に遡ってretrospectiveに聴取した。

またこれらの事例が係争中の場合は、裁判所や労働基準監督署に提出した資料を収集した。その結果、これらの疾病前の慢性疲労状態・条件として、退職希求を伴うほどの疲労困憊・労働意欲の低下、著しい感情の起伏が聴取された。また21事例中12事例が長時間労働中の発症ではなく、長時間労働後の休息機会における発症を占めたことが特徴であった。慢性疲労発生から進展時の睡眠条件では、睡眠時間の短縮が継続し、睡眠圧が強い状態にも係らず、入眠困難、中途覚醒、早朝覚醒の睡眠障害が生じていたことが、過労死(脳・心臓疾患)、過労自死(精神疾患)に係らず共通していたことが特徴であった。ただし、具体的な睡眠時間の短縮期間については、面接対象者の記憶に曖昧さのために、明確にすることができなかった。睡眠障害の変化については、まず入眠困難が生じ、次に中途覚醒もしくは早朝覚醒が生じる事例が多くを占めた。また覚醒条件においては、被災者の家族からは聴取できなかったが、過労障害を生じた被災者4名からは、睡眠短縮が生じているにもかかわらず日中に著しい眠気が生じることはなかったことが共通して得られた。ただし休日においては、一日中臥位状態で睡眠をとっていることが多く、その睡眠の特徴としては、著しい「いびき」を伴う睡眠であることが共通していた。これらの関係を現在、解析中である。
ミリ波マイクロ波帯超広帯域発振器としてのコンパクトFELの研究

一般の理工系研究室(3φ220V/3系列の電源設備を想定)で実験できる超広帯域マイクロ波コンパクト自由電子レーザ(FEL)を目指して研究を進めた.これを纏めると次の通りである.1.ヘリカル構造のソレノイド誘導型ウイグラーの開発.平面構造の研究から出発し,これをヘリカル構造の研究に展開して,周期長λ_wが短くなると磁場強度は平面の場合と同等になることを見出し,この研究目的にかなうλ_w=16mmについてその特性を明らかにした.平面の場合と違って電子ビームに集束性を有し,このヘリカルウイグラの実験研究は他の文献には見当たらない.2. CO_2レーザ加熱LaB_6陰極による電子ビーム系の設計.当初の外部陰極電源から真空チャンバー内の陰極電流を制御する方式から,電池による内部陰極電源方式で外部からのレーザー光照射による電流制御方式に変えたが,結局は外部からの高強度CO_2レーザー光による陰極加熱方式を採用するに至った.これは出力70WのCO_2レーザー装置が当研究室で使用可能となったためであり,真空チャンバー内の装置の簡素化,電子ビーム電流制御の容易性,高電圧の耐圧,安全性の確保が飛躍的に向上した.このため平成10年度予定の電子ビーム技術の確立は,その新方式の電子銃の設計に止まる結果となった.以上により,本研究の目的とする超広帯域コンパクトマイクロ波FEL装置の基本的な技術基盤は確立されたと考えている.今後この装置の完成に向けて努力する考えである.一般の理工系研究室(3φ220V/3系列の電源設備を想定)で実験できる超広帯域マイクロ波コンパクト自由電子レーザ(FEL)を目指して研究を進めた.これを纏めると次の通りである.1.ヘリカル構造のソレノイド誘導型ウイグラーの開発.平面構造の研究から出発し,これをヘリカル構造の研究に展開して,周期長λ_wが短くなると磁場強度は平面の場合と同等になることを見出し,この研究目的にかなうλ_w=16mmについてその特性を明らかにした.平面の場合と違って電子ビームに集束性を有し,このヘリカルウイグラの実験研究は他の文献には見当たらない.2. CO_2レーザ加熱LaB_6陰極による電子ビーム系の設計.当初の外部陰極電源から真空チャンバー内の陰極電流を制御する方式から,電池による内部陰極電源方式で外部からのレーザー光照射による電流制御方式に変えたが,結局は外部からの高強度CO_2レーザー光による陰極加熱方式を採用するに至った.これは出力70WのCO_2レーザー装置が当研究室で使用可能となったためであり,真空チャンバー内の装置の簡素化,電子ビーム電流制御の容易性,高電圧の耐圧,安全性の確保が飛躍的に向上した.このため平成10年度予定の電子ビーム技術の確立は,その新方式の電子銃の設計に止まる結果となった.以上により,本研究の目的とする超広帯域コンパクトマイクロ波FEL装置の基本的な技術基盤は確立されたと考えている.今後この装置の完成に向けて努力する考えである.通常の研究室でも実験できるコンパクト自由電子レーザとして、ミリ波、マイクロ波帯の超広帯域発振器の実現を目的としているが、本年度は周期長可変のソレノイド誘導型平面ウイグラ装置の開発を目的として次の研究を実施した。1.数kGのソレノイド磁場中に長方形の鉄ブロックを周期配列して横磁場を誘導させ平面ウイグラを形成するのであるが、磁極間隙長、鉄ブロック外半径は、電子ビーム伝搬条件およびソレノイド磁場発生条件により決まり、それぞれ16mm,23mmとした。鉄ブロックはこの制限のもとで最適設計することになる。その結果基本的には12mm×13mm×20mmの長方形となるが、その外側の1辺を適当にカットした構造が磁束の縦誘導を抑えて横誘導を強めることになる。そのカット量の最適値を磁場コード(JMAG)により決めた。その結果、周期長44mm、磁場間隙16mmの配置で、ソレノイド磁場1.8kGのとき、ウイグラ磁場(横磁場)1.3kGが得られることが分かった。これは十分実用できる値である。2.これらの計算を基にして、周期長可変のウイグラ装置の設計を行い、現在、その殆どの部品が仕上がった段階である。したがって、これからソレノイドコイルを巻いて装置は完成するが、続いて磁場計測に入り、周期長変化による磁場特性を実験的に明らかにする。これは4月末になり、少し遅れているが、その後、予定通り電子ビーム関係の研究に入る。昨年度行ったソレノイド誘導型平面ウイグラの基本設計に基づいて、本年度はその磁場テスト装置を製作し、磁場特性を得ることができた。外径50mm,長さ1270mmの銅製ボビンに4mm×5mmのポリエチレン被覆方形銅線を3371回巻いて、電流10Aでソレノイド磁場330Gを得た。実際は100Aの電流を流すために磁場はこの10倍になる。この磁場中に鉄ブロックを間隙長16mmで上下2列に周期配列させて、周期長22mm,33mm,44mmの平面ウイグラを形成させ、それぞれ71G、158G、248Gのウイグラ磁場を得た。これにより周期長が長くなるほどウイグラ磁場が強くなる定量的な資料が得られ、その磁気回路による説明もできた。

そこで今の平面ウイグラと違って、ソレノイド誘導型ヘリカルウイグラもその磁場がそれほど弱くならずに実用にできる資料が得られた。すなわち平面ウイグラ磁場とソレノイド磁場中の電子ビームには発散性があり、そのた集束用の2直線電流を使用する予定であった。しかしヘリカルウイグラ磁場の使用が可能ならそれ自身の集束性により、集束用の2直線電流は不要となる。さらにE-Gunコードにより、電子銃の設計を行った。それぞれ、0,-30,-60,-90,-100kVの軸対称円錐5電極による集束電子銃が計算でき、これは最大電圧-100kVが-10kVまでの変化に対して有効である。またこの計算結果を実現する実際の電極設計も行った。現在この電極に電圧を与えるため螺旋状高電圧分配抵抗と含浸カソードの研究を行っている。実際の高電圧印加の前に1kVより低い電圧で電子銃の基礎実験を本年度行う予定であったが、これは来年度になる。-100kVの電圧を印加した状態での陰極電圧用電源は真空チャンバ内に電池を入れてこれを-100kV電位で使用する。このとき外部からチャンバ内ヘレーザペンライト光を導入して、その光の計算機処理によえうFET制御で、陰極のヒ-タ電流をコントロールする計画でこの研究も進めている。安全性とヒ-タ電流の合理性を追及しており、これに時間をとられている現状である。一般の理工系研究室で実験できる超広帯域マイクロ波コンパクト自由電子レーザ(FEL)を目指して研究を進め,その心臓部であるウイグラーについて低エネルギー電子ビーム用として最適なウイグラーを開発した.これまでの研究実績は次の通りである.1.ヘリカル構造のソレノイド誘導型ウイグラーの開発.当初平面構造で研究を始めたが,ヘリカル構造では周期長がλw=20mm位に短くなると磁場強度は平面の場合と同等になることを見出し,λ_w=24,16mmについて磁場測定を行い,その特性を明らかした.平面の場合と違って電子ビームに集束性を有し,このヘリカルウイグラの実験研究は他の文献には見当たらない.2.CO_2レーザ加熱LaB_6陰極による電子ビーム系の設計.陰極電源の組込みが高電圧重畳のため難しく,当初は外部の電源から真空チャンバー内への電流供給を,続いて電池による内部電源方式で外部からのレーザー光照射による電流制御方式を計画したが,結局は外部からの高強度CO_2レーザー光による陰極加熱方式を採用するに至った.これは出力70WのCO_2レーザー装置が当研究室で使用可能となったためであり,真空チャンバー内の装置の簡素化,電子ビーム電流制御の容易性,高電圧の耐圧,安全性の確保が飛躍的に向上した.このため本年度予定の電子ビーム技術の確立は,その新方式の電子銃の設計に止まる結果となった.3.この装置によるFEL動作の解析.λ_w=16mmの場合,ソレノイド磁場3kG,ウイグラー磁場250Gで,ビームエネルギーE_b=111-200kcVの変化域に対して,発振周波数は15.4-37.2GHzの間,連続可変になる.またE_b=120kcV,ビーム電流I_b=50mA(P_b=6kw)で,飽和出力はP_<sat>=P_b/(4N_w)=50W(周期数N_w=30),小信号利得は0.4%となる.以上により,本研究の目的とする超広帯域コンパクトマイクロ波FEL装置の基本的な技術基盤は確立された.今後この装置の完成に向けて努力する考えである.
女性の出産に伴うトラウマ後の成長過程と看護者のケア提供モデルの構築

出産に伴ったトラウマを体験した女性は、10年の間、育児や離婚等の困難な状況に直面した時にはその体験を思い出し、恐怖や後悔などの感情を抱く一方、時間経過ともに肯定的未来志向感などの感情をより抱いていた。出産のトラウマ体験を乗り越えている要因は、自身の忍耐強さ、友人や家族の癒し、夫婦や家族のきずなや信頼の強さ、そして、状況に対する自らの意味づけや意思決定などによる自己への確信や信念を強めていた。また、子どもの成長や自立への探索などのように子どもの将来への見通しをもつ。さらに、趣味に没頭する、鈍感になるなどの楽観的感覚をもつことであった。看護者は女性自身がもつ内なる力を引き出す支援が重要である。本研究の目的は、女性の出産体験によるトラウマ後の成長(Post traumatic Growth;PTG)を明らかにし、心理的苦痛の緩和、長期化の予防のための対応策を看護の視点から提案することである。そのため、本研究は出産に伴ったトラウマ体験があり、出産後57年経過した女性が、どのように苦痛な体験を乗り越え、成長したかレジリエンスの過程とそれに作用した要因を明らかにし、レジリエンス獲得のための看護者の効果的な支援を明らかにすることを目標にしている。平成23年度は女性の出産体験によるトラウマ後の成長(Post traumatic Growth;PTG)に関する先行研究、および、本研究が注目している肯定的変容の概念「レジリエンス」の先行研究、そして、これらに関連する文献を、CINAHL、PubMed、医学中央雑誌のデータベースを活用し、文献検索を行い、本研究の共同研究メンバーと共通理解を図る学習会を開催した。平成24年度は女性の出産体験によるトラウマ後の成長(PTG)に関する先行研究やレジストリエンスの関する研究、その他の文献をもとに、研究計画書およびインタビューガイドなどの洗練化を図った。また、看護研究倫理審査委員会に本研究の承認を得るために必要な倫理審査申請書・研究計画書概要・依頼書・承諾書・インタビューガイド等の書類一式を完成させた。そして、これらの倫理審査に関する書類の準備をしながら、研究メンバーや協力者が尺度IES-RとCAPSの使用ができるよう学習会を開催した。本研究の目的は、女性の出産体験によるトラウマ後の成長(Post traumatic Growth;PTG)の過程を明らかにし、心理的苦痛の緩和、長期化の予防のための対応策を看護の視点から提案することである。そのため、本研究は出産に伴ったトラウマ体験があり、出産後78年経過した女性がどのように苦痛な体験を乗り越え、成長したかレジリエンスの過程とそれに作用した要因を明らかにし、レジリエンス獲得のための看護者の効果的な支援を明らかにすることを目標にしている。平成25年度は、看護研究倫理審査委員会に、1研究計画書概要、2研究協力依頼書(調査協力者用)3質問紙、4インタビューの協力に関する同意書、5同意取り消し書、6インタビューガイドを提出し、承認を得て、心的外傷後ストレスと感情に関する自記式質問紙を郵送し、調査を実施した。その自記式質問紙による調査結果を分析するためのデータ入力を一部終了した。そして、出産体験に伴うPTGの構造を明らかにできるように、出産に伴うトラウマとして印象に残っている体験や、出産に伴うトラウマ体験である苦痛な体験を乗り越えることに作用した要因などについてのインタビューガイドをもとにプレテストを実施し、洗練化を図った。さらに、自記式質問紙調査に協力いただいた研究対象者に、半構成的インタビューの対象者として協力を依頼し、同意を得られた段階である。また、半構成インタビューの協力に同意を得られた対象者にインタビューの実施場所等の調整をしている段階である。そこで、本年度は、出産における女性のトラウマ後の成長(Post traumatic Growth;PTG)に関する先行研究、および、本研究が注目している肯定的変容の概念「レジリエンス」の先行研究、そして、これらに関連する文献を、CINAHL、PubMed、医学中央雑誌のデータベースを活用し、文献検索を行った。次に、本研究の共同研究メンバーと、本研究者が実施した平成1922年度科学研究補助金基盤研究(C)研究課題:「出産に伴う母親のPTSDを予防するためのガイドラインの開発」の結果の概要、および、先行研究の文献検討を実施し、共通理解を図る学習会を開催した。そして、女性の出産体験のトラウマ後の成長(PTG)に関する先行研究やレジストリエンスの関する先行研究、その他関連する文献をもとに、本研究の研究計画を検討した。

また、看護研究倫理審査委員会に承認を得るための準備として、研究計画書の概要およびインタビューガイド、研究対象者への研究協力同意書などの必要な書類を検討した。本研究の目的は女性の出産体験によるトラウマ後の成長(Post traumatic Growth;PTG)を明らかにし、心理的苦痛の緩和、長期化の予防のための対応策を看護の視点から提案することである。出産に伴ったトラウマ体験後10年経過した女性は、どのように苦痛な体験を乗り越えたのか、そのレジリエンスの過程とそれに作用した要因を明らかにすること、レジリエンス獲得のための看護者の効果的な支援を提案することを研究目標にし、以下の結果を得た。1.出産に伴ったトラウマ体験後の10年間は、特に子育ての困難、流産、家族関係の破綻などがあった時に出産体験を思い出し、「恐怖」「つらくなる」「自分を責める」「精神的不安定になる」などの感情を抱いていた。そして、それが時間経過ともに、「肯定的未来志向感」などのポジティブな感情をより多く抱くようになっていた。2.出産に伴う苦痛な体験を乗り越えることに作用した要因は、「過去・現在に苦労体験や忍耐強さがある」「友人・家族との会話による癒しがある」「夫婦・家族の結びつきが強く、信頼できる関係性である」「自ら情報収集し、意味づけや自己の意思決定をし、確信・信念をもつ」「子どもの成長や、子どものためになることへの探索、子どもを育てることに価値を置くなど自分の将来への見通しをもつ」。さらに、「鈍感になる、考えないなどの楽観的感覚をもつ」などであった。3.看護者は、女性がもつ内なる力や肯定的感覚などを促進する支援が重要である。1早期の看護介入として、出産レビューを重要な看護ケアとして位置づけ、母親の語りの中にトラウマ体験の兆候を発見する。2苦痛な状況に立ち向かい、それを乗り越え、そこから学び、それを変化させる力や苦痛な状況に直面してもそれを糧としてコンピテンスを高め成長する力(レジリエンス)をアセスメントし、支援する必要がある。生涯発達看護学母性・女性看護学研究メンバーの時間が確保できず、看護研究倫理審査委員会への承認に必要な研究計画書およびインタビューガイドなど書類の完成に時間を要した。これまで、研究メンバーの時間が確保できず、看護研究倫理審査や対象者選定などに時間を要し、出産に伴うトラウマ体験後78年経過した女性に、PTSDに関する自記式質問紙調査の実施、女性の出産体験によるトラウマ後の成長(Post traumatic Growth;PTG)の過程の構造化する半構成インタビューに協力いただく対象者の同意の手続きの進捗が遅れた。本研究の「出産体験に伴うトラウマ後の成長過程と看護者のケア提供モデル」は、平成1922年度科学研究補助金基盤研究(C)研究課題:「出産に伴う母親のPTSDを予防するためのガイドラインの開発」に引き続き行っている研究であり、その結果が本研究にも関連してくる。そのため、共同研究者との共通理解に時間を要した。研究目標
心筋再灌流障害におけるフリーラジカルの関与とラジカル消去剤の心筋保護に関する研究

(目的)心筋の再灌流障害時におけるフリーラジカルの関与を、各種実験モデルにおいて検討し、さらにこれらに対するラジカル消去剤の効果についても検討した。(結果)1.ラット灌流心(Langendorff,working heart)モデルおよび成犬の冠結紮再灌流モデルにおいて、Electron Spin Resonance(ESR)法により再灌流30秒から5分後においてPOBNによりトラッピングされるフリーラジカルを検出した。さらにSODの前投与は、フリーラジカルの発生を有意に抑制した。2.ラット灌流心および成犬の冠結紮再灌流モデルにおいて、短時間虚血後の再灌流心においては、心筋小胞体のCa-ATPase活性の有意な低下と膜構成蛋白の崩壊がより早期から起こることが示された。3.ラット再灌流および単離心筋細胞において、hydrogen peroxideと特異的に反応し沈着物として電顕観察が可能なCerium chlorideの投与により、血管内皮細胞およびmitochondriaから産生されるhydrogen peroxideを電顕でとらえ、再灌流障害時に発生するフリーラジカルの発生源を明らかにした。4.成犬の15分虚血後の再灌流心すなわちStunned myocardiumにおいて、ラジカル消去剤であるSODやACE阻害薬(alacepril)投与により、心機能や筋小胞体機能が有意に保持され、stunned myocardiumにおける心機能低下の一因として、フリーラジカルの関与が示唆された。(総括)以上より、いずれの実験モデルにおいても虚血再灌流時に発生するフリーラジカルが虚血再灌流心の細胞障害に重要な役割をになっていることが明らかとなり、さらにラジカル消去剤投与の有用性が示された。虚血性心疾患の再潅流障害におけるフリーラジカルの関与を成犬の虚血心筋モデル、ラットの摘出再潅流心モデル、ラットの再酸素化単離心筋細胞モデルを用いて検討した。フリーラジカル動態はESRにより虚血再潅流中に発生したラジカル種を経時的に測定し、特にラジカル発生媒体として重要視されるhydrogen peroxideに関してはcerium chlorideを用いて定量的に検討した。心筋障害の指標として、筋小胞体のCa-ATPase活性の変化等の生化学的測定を行った。また心筋の1μm切片を作成して超微形態学的な観察を行い、ラジカル発生源と細胞障害の検索を行った。今後臨床上再潅流障害の予防薬として期待されるsuperoxide dismutase (SOD)、catalaseを前投与し再潅流時の心筋保護効果について検討した。-結果-1.成犬虚血心モデル、ラットworking haert法潅流モデル、単離心筋細胞モデル、Langendorff法モデルのいずれにおいても再潅流後30秒5分にかけてPOBNでトラッピングされるフリーラジカルが検出された。2.ラット潅流心モデル、単離心筋細胞モデルにcerium chlorideを投与した後の電子顕微鏡的観察でhydrogen peroxideとの特異的な反応生成物が血管腔、ミトコンドリア周囲に沈着して観察された。3.フリーラジカルの発生に一致して心血行動態の悪化と筋小胞体CA-ATPase活性の低下がみられ、また組織学的には筋細線維間浮腫、ミトコンドリアの膨化が観察された。維4.SODの前投与によりラジカル発生の抑制と心筋障害の軽減がみられSODの保護効果が確認された。5.虚血を遷延化した実験系においては内因性catalase活性の低下がみられ、SOD単独投与により逆に障害の増悪がみられた。この系にcatalaseを併用前投与することにより再びSODの保護効果が得られた。

以上より、いずれの実験系においても再潅流時フリーラジカルの発生に一致した心筋障害が証明され、一部のラジカルスカベンジャーの心筋保護効果については充分な結果を得たが、今後はラジカルスカベンジャーの相互作用に関して再検討が必要であると考えられた。(目的)心筋の再灌流障害時におけるフリーラジカルの関与とラジカル消去剤の効果を、ラットおよび成犬心の各種虚血再灌流モデルにおいて検討した。(結果)2.ラット灌流心および成犬の短時間虚血後の再灌流心において、虚血性不可逆性細胞障害発生以前の短時間虚血心においても再灌流により心筋小胞体のCa-ATPase活性の有意な低下と膜構成蛋白の崩壊が起こることが示された。3.ラット再灌流心および単離心筋細胞において、hydrogen peroxideと特異的に反応し沈着物として電顕観察が可能なCerium chlorideの投与により、血管内皮細胞およびmitochondriaから産生されるhydrogen peroxideを電顕でとらえ、再灌流障害時に発生するフリーラジカルの発生源を明らかにした。(総括)以上より、虚血再灌流時に発生するフリーラジカルが虚血再灌流心の細胞障害に重要な役割をになっていることが明らかとなり、さらにラジカル消去剤投与の有用性が示された。
革新的ルイス酸-アミン反応剤を用いるプロセス化学的炭素-炭素結合形成反応の開発

ルイス酸-アミン反応剤は,従来塩基法とかなり異なる反応性・選択性を示す.それに従い,独自のTi-Claisen縮合・aldol付加・オキシムエーテルを用いるMannich付加をプロセス化学的アプローチで開発してきた.これを利用し,有用な天然物・香料・医薬・新規ファインケミカルズの合成への短段階・実用的合成への応用を行ってきた.これらは現在,実験室では使われており,工業化も検討中である.今年度は,これまで未踏領域であった交差型不斉Ti-Claisen縮合の開発を中心に,複雑な構造を有す2つの光学活性生理活性天然物の合成を完成した.すなわち,容易に調整できる1, 4-ジオキソラン-2, 5-ジオンをキラルテンプレートとし,交差型不斉Ti-Claisen縮合を鍵段階として利用して(ほぼ100%交差選択性, >95%立体制御,不斉助剤も完全回収可能),生理活性天然物, (+)-Alternaric acid(9段階,通算収率16%)および(-)-Azaspirene(24段階,通算収率2.3%)の不斉全合成を達成した.昨年度に比べ,プロセス化学的な各工程のリファインを行った.さらに今年度, Ti-Claisen縮合で得られる各種β-ケトエステル類の高立体補完的エノールトシル化と立体保持クロスカップリング反応(SYNFACTS誌掲載),単純エステルの高効率α-ホルミル化, α-ヘテロ原子置換エステルの脱水型Ti-Claisen縮合など, Ti-Claisen縮合の大幅な展開を行った.一連の革新的アシル化反応の重要な展開として,また光学活性α-ヘテロ原子置換ブロックの実用的合成法として,今後もさらに大学や企業で広く利用できるレヴェルまで引き上げる.ルイス酸-アミン反応剤は,従来塩基法とかなり異なる反応性・選択性を示す.その一環として,これまで独自のTi-Claisen縮合・aldol付加・オキシムエーテルを用いるMannich付加をプロセス化学的アプローチで開発してきた.これを利用し,有用な天然物・香料・医薬・新規ファインケミカルズの合成への短段階・実用的合成への応用を行ってきた.これらは現在,実験室では使われており,工業化も検討中である.今年度は,これまで未踏領域であった交差型不斉Ti-Claisen縮合の開発を中心に,複雑な構造を有す2つの光学活性生理活性天然物の合成を目指した.すなわち,容易に調整できるアトロラクチン酸由来のキラルテンプレートとし,交差型不斉Ti-Claisen縮合を鍵段階として利用して(ほぼ100%交差選択性,>95%立体制御,不斉助剤も完全回収可能),生理活性天然物,(+)-Alternaric acid(9段階,通算収率16%)および(-)-Azaspirene(24段階,通算収率2.3%)の不斉全合成を達成した.前者は鎖状3不斉中心を有し,2例目の全合成であり,工程数・通算収率とも優れている.後者は環状連続3不斉中心を有する最近注目の化合物で3例目であり,工程数・通算収率は2番目である.今年は,最終年度として,この全合成のプロセス化学的な各工程のリファインを行う.また,一連の革新的アシル化反応の重要な研究として,光学活性α-ヘテロ原子置換ブロックの実用的合成法をさらに確立し,大学や企業で広く利用できるレヴェルまで引き上げ.集大成する.ルイス酸-アミン反応剤は,従来塩基法とかなり異なる反応性・選択性を示す.それに従い,独自のTi-Claisen縮合・aldol付加・オキシムエーテルを用いるMannich付加をプロセス化学的アプローチで開発してきた.これを利用し,有用な天然物・香料・医薬・新規ファインケミカルズの合成への短段階・実用的合成への応用を行ってきた.これらは現在,実験室では使われており,工業化も検討中である.今年度は,これまで未踏領域であった交差型不斉Ti-Claisen縮合の開発を中心に,複雑な構造を有す2つの光学活性生理活性天然物の合成を完成した.すなわち,容易に調整できる1, 4-ジオキソラン-2, 5-ジオンをキラルテンプレートとし,交差型不斉Ti-Claisen縮合を鍵段階として利用して(ほぼ100%交差選択性, >95%立体制御,不斉助剤も完全回収可能),生理活性天然物, (+)-Alternaric acid(9段階,通算収率16%)および(-)-Azaspirene(24段階,通算収率2.3%)の不斉全合成を達成した.昨年度に比べ,プロセス化学的な各工程のリファインを行った.さらに今年度, Ti-Claisen縮合で得られる各種β-ケトエステル類の高立体補完的エノールトシル化と立体保持クロスカップリング反応(SYNFACTS誌掲載),単純エステルの高効率α-ホルミル化, α-ヘテロ原子置換エステルの脱水型Ti-Claisen縮合など, Ti-Claisen縮合の大幅な展開を行った.一連の革新的アシル化反応の重要な展開として,また光学活性α-ヘテロ原子置換ブロックの実用的合成法として,今後もさらに大学や企業で広く利用できるレヴェルまで引き上げる.