hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
スタビライザータイプ人工膝関節の動的動作解析と最適設計

その結果、動的条件においてスタビライザーはその設置目的である膝動作の安定化、つまり膝屈曲が大きくなった時の大腿骨の後方移動(ロール・バック・ムーブメント)に大きく寄与していること、スタビライザー位置のわずかな移動により動作上大きな問題になる接触状態となること、現在の設置位置はこれらの問題が生じない状態になっていること等がわかった。また最適設計として、生体膝関節動作との同一性、なめらかな関節接触点移動、膝関節接触面の摩耗、スタビライザー接触部の摩耗の4つのパラメータを用いて大腿骨スタビライザー設置位置の評価を行ったところ、現在の設置位置よりもより最適な場所があること、またパラメータにより最適位置は異なる結果となったため、これらの総合的な判断が必要であることが判明した。さらにこれらの手法を応用して、手術時における人工膝関節コンポーネント自体の設置誤差による関節動作への影響を検討したところ、設置精度により関節動作は大きな影響を受け、人工関節の長寿命化のためにも正確な位置決めの必要性、さらにはこれらの誤差をもある程度は吸収できるような人工関節コンポーネント検討の必要性が示唆された。歩行動作以外の日常動作についても測定・検討を行ったが、現有の動作解析装置に不具合が生じ、信憑性のあるデータが取れなかったため、今後引き続き検討することとした。
地域流行性甲状腺疾患についてヨ-ド摂取量の違いにより起こる疾病構造の変化の解析ー岩手県釜石市及び中国吉林省長白山系住民の疫学的調査よりー

1.昭和49年以来実施してきた釜石市での検診活動を平成3年度も実施した。1616名の受診者に対して検診を行なった。結果、甲状腺癌4名、良性結節性腫瘍6名、濔慢性単純性甲状腺腫64名、慢性甲状腺炎8名を発見診断した。現在、昭和49年以来の受診者約12、000名分の検診結果の集計を行なっている。2.平成3年度には、中国における第三回目の検診活動を実施した。今回は、先天性甲状腺機能低下症(クレチン病)が多発した青山村住民997名、及びその隣村の住民637名の計1634名の検診を実施した。検診は、まず触診を行なった後、受診者全員に超音波検査を行なった。7.5MHzの超音波エコ-2台を使用して、約6500枚の甲状腺エコ-写真を撮影した。現在デ-タ分析中であるが、これまでに以下の興味ある事実を突き止めた。1)甲状腺腫瘍の発生頻度は、ヨ-ドを加えた食塩の投与を開始した時期を境にして大きく異なっていることが判明した。ヨ-ド加食塩投与を開始した1960年以後に出生した住民では、甲状腺腫瘍の発生頻度は3.5%であるのに対して1960年以前に出生した住民では53%と驚くべき高い頻度であった。2)前頸部に突出し巨大な甲状腺腫は50才以上の住民にのみ認められた。3)甲状腺腫の多くは、著明な石灰化を伴っており、前年に実施したクレチン病患者に見られた甲状腺腫と類似していた。4)超音波エコ-の所見からは、殆どの甲状腺腫は腺腫様甲状腺腫の所見であった。5)2030才代の住民には、超音波エコ-の所見で甲状腺内の静脈が著明に拡張しているものが多数認められた。6)本研究に協力している吉林省地方病第二防治研究所が行なった調査では、1960年以前の調査地域住民のヨ-ド摂取量は50μg/day以下であったが、ヨ-ド加食塩摂取を開始してからは100μg/day以上を摂取していることが判明した。1.昭和48年以来実施してきた釜石市における検診活動を今年度も行なった。1565名の受診者に対して検診を行なった結果甲状腺癌2名、良性結節性腫瘍14名、慢性甲状腺炎11名を発見診断した。2.平成2年度は中国における第二回目の検診活動を実施した。低ヨ-ド帯としては吉林省吉林市郊外の青山村を選んだ。この地域は知能低下を伴う甲状腺機能低下症(クレチン病)が多発しており、検診は主にクレチン病患者を対象として触診のみならず、7.5MHz超音波エコ-を用いて甲状腺の微細な形態的変化も調査した。31名のクレチン病患者を調査して得られた興味深い事実は、クレチン病患者の甲状腺の形態は一般的に萎縮性である点である。地元におる吉林省第二風土病研究所が以前に実施した青山村全住民2029名の調査では、触診のみにより地方性甲状腺腫175名が発見されている。すなわちこの地域では甲状腺の腫大を特徴とする地方性甲状腺腫が多発する一方で、甲状腺の萎縮を示すクレチン病患者も多発している、という興味ある事実である。第一回調査地域では甲状腺疾患の多発は認められたがクレチン病の発生は見られなかった。このように青山村は甲状腺疾患の発生が極めて特徴的であり、来年度は青山村全住民2029名を対象とした調査を実施する計画である。3.中国吉林省青山村住民の摂取食物の状況も併せて調査した。その結果主食は米で、大豆を豆腐・大豆油などから多量に摂取している事が分かった。魚類も摂取しているが全てが近くの松花湖で獲れる川魚であり、海産物は殆ど摂取していな様子であった。1979年以来住民は政府の指導によりヨ-ドを加えた食塩を摂取していることがわかった。

3)甲状腺腫の多くは、著明な石灰化を伴っており、前年に実施したクレチン病患者に見られた甲状腺腫と類似していた。4)超音波エコ-の所見からは、殆どの甲状腺腫は腺腫様甲状腺腫の所見であった。5)2030才代の住民には、超音波エコ-の所見で甲状腺内の静脈が著明に拡張しているものが多数認められた。6)本研究に協力している吉林省地方病第二防治研究所が行なった調査では、1960年以前の調査地域住民のヨ-ド摂取量は50μg/day以下であったが、ヨ-ド加食塩摂取を開始してからは100μg/day以上を摂取していることが判明した。
日英バイリンガル児のコードスイッチングの言語分析―通時的研究

本研究では、日英バランスバイリンガルが自然な環境で行うコードスイッチング(CS)のデータを、文法構造面に加えて語用論的な側面からも、分析をしたものである。バイリンガル児のケーススタディからの縦断的なCSデータと、国際高校の生徒の横断的CSデータが、使われた。コードスイッチングの起こった節は、Muyskenの分類法により、挿入、交替、融合の3パターンに判別され、そこにHallidayの機能文法の対人的機能、テクスト形成的機能からの分析も行われた。同じ節の中で、違った言語には、違ったメタ機能がわりあてられていることがわかった。当該年度は、国際ジャーナルInternational Journal of Bilingual Eductaion and Bilingualismで、特集号"Bilingualism as a First Language in Japan"が出版。これにより、日本でのバイリンガリズム研究がどのような分野をカバーし、どこまで進展しているのか、を世界の研究者に向けて発信する一助になったと考えられる。その中で、本研究の成果の一端として、Non-insertional code-switching in English-Japanese bilingual children: alternation and congruent lexicalisationという記事を発表。コードスイッチングへの構造的アプローチとして、CSを3種類に分けるMuysken(2000)の枠組を、日本語と英語を同時に習得するバイリンガル児のデータ分析に用いた。コードスイッチングの構造の分析で、insertionは文法的な面からの分析に焦点をあてるが、alternationに関しては、語用論的、心理言語学的な視点から、より緻密な分析ができることを示した。日英のコードスイッチングにおいては、現れにくいと考えられる、congruent lexicalisationについても、実例を示して説明をすることができた。また、日本語と英語という言語類型的に距離のある言語を扱うことは、他の距離のある言語の組み合わせにも応用できると考えられ、他の言語間のCSの研究者にも、有益な一例となることが考えられる。国内では、事務局長として関わっている第1言語としてのバイリンガリズム研究会の東京での研究会を開催し、バイリンガリズム研究の裾野を拡げる試みをさらに続けた。書き起しは、今年度さらに13ファイルが完成。当該年度は、これまでに収集してきたデータをもとに、Halliday (1994)の選択体系機能文法のフレームワークでの分析をすることを、大きなテーマと位置づけた。このフレームワークは、語用論に重点をおいた文法理論ともいえるもので、コードスイッチングのメカニズム(文法構造)と機能(語用論的働き)をリンクさせたアプローチとして、有効だと考えられる。バイリンガリズムの国際学会第9回International Symposium on Bilingualism (シンガポール)で、A Systemic Functional Approach to Japanese-English Code-switchingというタイトルの研究を口頭発表し、この新しい分析方法について、他の研究者からのコメント・示唆を得ることができた、特に日本語ー英語ではないが、この機能文法をコードスイッチングの説明に使うというアプローチを試みたことのある研究者と意見交換ができたことは有益だと考えられる。バイリンガリズム研究の裾野を広げる目的で設立した、第1言語としてのバイリンガリズム研究会のメンバーで、2014年8月に、オーストラリアで行われる世界応用言語学会AILAで、コロキアムでの合同発表をする予定をしている。ここではさらに選択体系機能文法でのコードスイッチングの研究の進展したものを発表する予定である。さらにこの研究会のメンバーで、バイリンガリズム入門の教科書の執筆をする、など研究の成果を研究者のみならず、幅広い読者にも拡めていく活動に取り組んできたが、本年度前半にこの本の出版が予定されている。当研究のデータは、これまでの研究(2008年のPhD論文、2009-2010年の科研費研究生活スタート支援)ですでに収集、書き起こし、データ分析が完了しているものもある。そこからの成果を国際学会(2011年6月に8th International Symposium on Bilingualism)で英語での口頭発表し、また英語での出版(2012年1月にLambert Academic PubilishingよりEnglish-Japanese Code-switching and Formulaic Language)などを行い、日本語と英語のコードスイッチングの研究について世界の研究者に幅広くしってもらうことを狙いとした。一方日本国内に向けては、この分野の裾野を拡げることを目的として、国内の研究会(2011年10月に第5回第一言語としてのバイリンガリズム研究会にてタイトルは「日英バイリンガルのコードスイッチングデータの分析」)で講演を行い、2012年2月には、Bilingual First Language Acquisitionの研究で第一人者のAnnick De Houwer博士を招聘して国際シンポジウムとワークショップを開き(立命館大学言語情報教育研究科主催、第1言語としてのバイリンガリズム研究会共催)、コードスイッチングの分科会で、日英バイリンガリズムの構造的分析法についての、ワークショップを行った。バイリンガル児の縦断的研究からの音声データの書き起しはMD7枚分が書起し協力者により完成。一方横断的研究からのデータに関しては、10組の会話データ中、9組分についてコードスイッチングパターンの抽出、言語のタグ付けが終了した。前年度にコードスイッチングのデータを文法構造面から分析する上での新しいアプローチとして、Halliday (1994)の選択体系機能文法のフレームワークを用いることをテーマとし、バイリンガリズムの国際学会ISB9 (Singapore)で発表を行った。当該年度はさらにこの分析を進め、また内外の学会発表をし、他の研究者の意見を仰ぐことに努めた。海外では、オーストラリアのブリズベンで行われたAILA

2014(応用言語学会世界大会)、国内では、機能文法の研究者が集まる第22回日本機能言語学会秋季大会でも発表をし、有益なフィードバックを得ることができた。日英コードスイッチングのデータを文法的に分析するときに、母体言語(Matrix Language=ML)の観点から分析をしていくが、このMLを対人的機能の面からと、テクスト形成機能の面からも設定をしてみていくことで、これまでに説明が難しかった日本語英語のコードスイッチングのパターンについての説明が可能になった。対人的機能を表現する終助詞、テクスト形成機能である主題を示すトピックマーカーなどがある日本語については、有効な方法だと考えられる。自分が事務局長を務める「第一言語としてのバイリンガリズム研究会」の中心メンバーとともに、年に2回の研究会を運営し、バイリンガリズム関係の発表、執筆などに取り組んだ。上記AILA2014での発表はこのメンバーでのコロキアム形式での発表をし、また「バイリンガリズム入門」の本を出版、研究成果を第8章のコードスイッチングの文法面についての章に活かすことができた。日本語でのこの分野での書き下ろしの入門書は初めてのものだと考えられる。コードスイッチングの構造分析をテーマとする研究協力者に書き起こしを担当してもらえることになり、ここ2年間中断していた書き起こし作業と、すでに書き起こし済みのデータを整理して、エクセルに入力する作業を進めることができた。7本の書き起こし+データ整理、5本のデータ整理を完成することができた。日英バイリンガル高校生のグループでの会話の横断的データと、日英バイリンガル兄弟のケーススタディーから得られた縦断的データ双方のデータベースを完成するというこの研究の目標にさらに近づくことができた。この協力者が、自分の研究・データ収集などを始め、一時多忙になったために、予定通り進まなかった部分があるが、研究期間を延長して、次年度に完成をする予定である。平成27年度は研究の完成年度であり、記事の発表などはできたが、書き起こし作業が遅れているために、この研究の目的であるデータベースの完成をすることはできず、研究期間の延長をした。このことにより、やや遅れていると判断した。
肝幹細胞分化を基軸としたＨＢＶ ｃｃｃＤＮＡの完全排除を目指す新規治療の創成

B型肝炎ウイルス(HBV)は成熟肝細胞でのみで複製するとされるが、肝細胞が一定の速度でturn overしているにも関わらず、複製中間体のcccDNAが核内に残存し続ける原因は不明である。本研究では、ヒトiPS細胞から肝幹・前駆細胞を分化・誘導し、純化することにより継代可能な培養法を確立した。これを用いてHBV感染実験を行ったところ、成熟肝細胞より未分化なヒトiPS細胞由来肝幹・前駆細胞においても感染が認められ、幹細胞類似形質を持つ細胞においてcccDNAが保存されることが慢性化の一因である可能性が示唆された。1.細胞分化度を調節可能な、ヒトiPS細胞由来肝幹・前駆細胞および成熟肝細胞の誘導・培養系の確立:細胞分化度の変化がHBV感染サイクルに与える影響を解析するために、ヒトiPS細胞にActivinA, FGF, HGFを段階的に添加し肝細胞系への分化誘導を行った。肝幹細胞マーカーCD13, CD133陽性細胞をFACSで分離し、ヒトiPS細胞由来肝幹・前駆細胞のより効率的な純化・培養法を開発した。またOSM・細胞外マトリクス等の刺激により成熟肝細胞への分化が誘導された細胞の培養法を構築している。2.細胞分化度を調節し得る細胞培養系におけるHBV増殖系の構築と細胞分化度の変化がHBVライフサイクルに与える影響の解析:本研究に使用するHBV増殖細胞モデルとしては、わが国に多く存在するHBVゲノタイプB、C株及び本来欧米に多いが近年わが国で蔓延兆候のあるゲノタイプA株の1.24倍長ゲノムをクローン化した感染粒子形成可能なプラスミドを作成した。成熟肝細胞への分化が誘導された細胞におけるHBV及びHCVのレセプター発現を解析し、通常の肝癌細胞株における発現より高発現であることを確認した。現在プラスミドを導入しウイルス蛋白の発現解析を遂行中である。1.ヒトiPS細胞由来肝幹・前駆細胞および成熟肝細胞の誘導・培養系の確立:HBVは成熟肝細胞でのみで複製するとされるが、定常状態の肝細胞が一定の速度でturn overしているにも関わらず、複製中間体のcccDNAが核内に残存し続ける原因は不明であるため、本研究では、より未分化な幹細胞類似形質を持つ細胞においてcccDNAが保存されることが一因であるかを解明するために、細胞分化度を調節し得る培養系を確立した。即ち、肝細胞分化度の変化がHBV感染サイクルに与える影響を解析するために、ヒトiPS細胞株にactivin A、FGF、BMP4、HGFを段階的に添加することにより肝細胞系譜へと分化誘導した後、これらのうち肝幹細胞マーカーCD13+CD133+陽性細胞を繰り返しFACSにより分離することで、AFP、HNF4aを高度に発現するより純化されたiPS由来肝幹・前駆細胞(iPS-Hep細胞)の培養法を確立し、一定期間の継代培養を可能とした。またOSM・細胞外マトリクス等の刺激により成熟肝細胞への分化が誘導された細胞の培養法を構築した。消化器内科細胞分化度を調節可能な、ヒトiPS細胞由来肝幹・前駆細胞および成熟肝細胞の誘導・培養系の確立は改良の余地があるが、おおむね順調に進捗している。現在得ている成熟肝細胞のHBV、HCVレセプターの発現は通常用いる肝癌細胞株よりは高発現であるものの、感染系を確立するためには十分ではない。従って転写因子を強制発現させるなど、より成熟肝細胞へ分化した細胞培養系の構築を行っているところである。これら及び異なる分化度の細胞において、HBVプラスミドの強制導入と感染実験により、細胞分化度の違いがHBVライフサイクルに与える影響を解析し、治療標的としての意義を検討する。また、より簡便にHBV感染系の評価を可能とするためにレポーター蛋白および蛍光色素遺伝子を内包したHBVコンストラクトを入手し使用する方針である。試薬等が計画当初より廉価で購入可能であったため。検討する数・種類を拡大して解析を行うため、試薬を増量して購入する予定である。
現代中国語圏文化における逸脱の表象

本科研は、20世紀以降の中国語研文化を対象に、性別役割(ジェンダーロール)と国家/国民想像(ナショナルイメージ)という二つの規範がどのような共犯関係を結んできたか、またこの二つの規範に回収されない「逸脱の表象」がどのように生起し、伏流的に発展してきたのかを、小説、映画、演劇といった文化芸術作品(創作)と、歴史/社会的文献をつき合わせながら読み解いてきた。3年の研究計画の中で、2016年には大阪の国際ワークショップ「20世紀東アジア:越境する文学形式と思考の流動」にて国境を跨ぐテクストと作家の可能性について国内外の研究者と意見を交換した。また2017年には武漢大学にて「漂泊と越境:東アジアのビジョンにおける作家の流浪と文学の創生」シンポジウムを行い、それぞれの研究領域について報告をまとめ、日中の研究者と問題意識を共有した。具体的に、濱田は作家張愛玲の晩期創作を通じてジェンダーとナショナリズムの共犯関係を問い、田村は稀代の女形梅蘭芳とそのブレーン齊如山を取り上げて演劇とナショナリズムの関係を論じた。三須は日中戦争期に様々なメディアで語られた『秋海棠』の物語からクィア表象とナショナリズムについて考察し、白井は「異化」概念を用いて左翼リアリズム作家における政治性と作家性の撞着を分析、小笠原は日本語で綴られた台湾「蕃地」における恋愛描写における権力構造のねじれを検討した。2017年には現代中国学会にも参加し、ジェンダーとナショナリズムについて更に議論を深めることができた。最終年度では「現代中国語圏文藝における逸脱の表象」と題したワークショップを名古屋で開催、国内外の識者を招いて「逸脱」という資格が中国語圏の現代文学を読む上で極めて有効なものであることを確認した。3年を通して論文8篇と図書(訳書、共著を含む)9冊を世に問うており、十分な成果があげられたと考えられる。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。本研究は、20世紀以降の中国語圏文化を対象に、性別役割(ジェンダーロール)と国家/国民想像(ナショナルイメージ)という二つの規範がどのような共犯関係を結んできたか、またこの二つの規範に回収されない「逸脱の表象」の生起とその伏流的な発展について、小説、映画、演劇といった文化芸術作品(創作)と、歴史/社会的文献及び新聞記事やポスター、ネット上の書き込みといった時事性の高いエフェメラルメディアを付き合わせながら読み解こうとするものである。中国大陸、台湾、香港のほか、東南アジアや米国の華人社会をも対象として、ジェンダーロールとナショナルイメージの変容を多角的に検討することをめざしている。今年は、まずキックオフミーティングにおいて分担者三須が「ホモエロティシズムという欲望と抵抗ー(擬似)戦争下のマスター・ナラティブ、抵抗としての逸脱(クィア)」、田村が「中国社会主義プロパガンダにおける「母親」の表象」と題した報告を行い、活発な討論が行われた。また、中国の体制に異議を唱え続けている作家・閻連科を神戸に招き、講演をしていただくと同時に中国における文学創作空間について討議を行った。さらに植民地朝鮮文学の研究者である波田野節子氏や柳忠熙氏、そして満洲文学研究の羽田朝子氏を招き、大日本帝国の枠組みから逸脱した/しなかった日本語文学のあり方について、東アジア全域を包括した研究の可能性について探った。予定していた武漢ワークショップは来年に延期となったが、大阪にて「20世紀東アジア:越境する文学形式と思考の流動」ワークショップを共催し、今後の展望について確認しあった。研究代表者はアメリカ・ハーバード大学とトロント開催のアジア研究協議会にて中国民国期におけるジェンダーとナショナリティの関係について報告を行い、海外の研究者と知見を共有した。参加者の日程が合わず、予定していた武漢ワークショップは延期になったが、地元大阪で同規模のワークショップを共催の形で開くことができた。本年度は、9月に武漢大学文学院とシンポジウムを共催し、研究分担者全員が参加して討論を行った。濱田麻矢はジェンダーとナショナリティについて検討した。田村容子は稀代の名優、梅蘭芳のブレーンであった斉如山が渡台後に行った活動に注目し、演劇の紡ぐナショナルイメージに迫った。三須祐介は女性を演じる男性を詳細に追うことでクィア表象とナショナリズムとの共犯関係を明らかにした。白井重範は左翼リアリズム文学をマルクス主義文学理論における異化の概念で捉え直し、政治性と作家性の撞着について新たな位置付けを行った。小笠原淳は日本語で台湾の「蕃地」を描いた作品を比較検討しながら、そこに現れる「蕃女たち」の「恋情」に注目し、台湾を描く文学の性と暴力、さらには宗主国の言語である日本語を使用することの特権性を暴露してみせた。二日間にわたって20人を越える参加者があったシンポジウムの中で、この科研メンバーの報告は高く評価され、国籍、言語、性別、領域を「逸脱」したテクスト/パフォーマンスを追うことの重要性を国内外の研究者と共有することができた。また、十月には現代中国学会にて「演じられる性ー現代中国の演劇・映画におけるジェンダーロールとナショナルイメージの交錯と逸脱」と題したパネルを組んだ。三須祐介は民国期の人気小説が舞台化や映画化されて変容していく中で主人公のジェンダーロール/セクシュアリティがどのように変遷し、時代が要請したナショナリズムにどう応えていたのかを詳細に追い、"男性性"の変容の諸相について論じた。

また田村容子は日中戦争期にさまざまなジャンルで描かれた「救国する妓女」をとりあげ、肉体を売り物にすることで正規の婚姻の埒外に置かれた妓女とナショナリズムの交錯した関係を解き明かした。ディスカッサントとして小笠原淳が、チェアパーソンとして濱田麻矢が参加し、フロアからも活発な意見が寄せられて成功納めた。武漢大学のシンポジウムと現代中国学会でのパネルでは、ともにフロアからかなりの反響を得て、東アジアにおけるジェンダーロールとナショナリティの問題が非常に今日的なものであることを確認できた。代表者と分担者の所属機関が離れていているため、直接顔を合わせて交流する機会を持つことはなかなか難しいが、インターネットによってコミュニケーションを維持し、モチベーションを高め合うことが可能になっている。本科研は、20世紀以降の中国語研文化を対象に、性別役割(ジェンダーロール)と国家/国民想像(ナショナルイメージ)という二つの規範がどのような共犯関係を結んできたか、またこの二つの規範に回収されない「逸脱の表象」がどのように生起し、伏流的に発展してきたのかを、小説、映画、演劇といった文化芸術作品(創作)と、歴史/社会的文献をつき合わせながら読み解いてきた。3年の研究計画の中で、2016年には大阪の国際ワークショップ「20世紀東アジア:越境する文学形式と思考の流動」にて国境を跨ぐテクストと作家の可能性について国内外の研究者と意見を交換した。また2017年には武漢大学にて「漂泊と越境:東アジアのビジョンにおける作家の流浪と文学の創生」シンポジウムを行い、それぞれの研究領域について報告をまとめ、日中の研究者と問題意識を共有した。具体的に、濱田は作家張愛玲の晩期創作を通じてジェンダーとナショナリズムの共犯関係を問い、田村は稀代の女形梅蘭芳とそのブレーン齊如山を取り上げて演劇とナショナリズムの関係を論じた。三須は日中戦争期に様々なメディアで語られた『秋海棠』の物語からクィア表象とナショナリズムについて考察し、白井は「異化」概念を用いて左翼リアリズム作家における政治性と作家性の撞着を分析、小笠原は日本語で綴られた台湾「蕃地」における恋愛描写における権力構造のねじれを検討した。2017年には現代中国学会にも参加し、ジェンダーとナショナリズムについて更に議論を深めることができた。最終年度では「現代中国語圏文藝における逸脱の表象」と題したワークショップを名古屋で開催、国内外の識者を招いて「逸脱」という資格が中国語圏の現代文学を読む上で極めて有効なものであることを確認した。3年を通して論文8篇と図書(訳書、共著を含む)9冊を世に問うており、十分な成果があげられたと考えられる。ソウルで開催されるアジア協議会にて、コロニアリズムとナショナリズム、そしてジェンダーの関係をテーマとするパネルに参加し、他領域の研究者と共同研究について討議する。また武漢にて越境と翻訳について討議するシンポジウムを開催予定。引き続き関係資料を購入し、学会発表でのフィードバックをとりいれつつ各自論文を執筆する。各人の研究を進めながら、互いの研究をゆるやかに重ね合わせて大きな問題意識として世に問う手段を考えたい。まずは研究協力者の参加を要請しつつ非公開の形で徹底討論し、出版、あるいは公開シンポジウムの形での成果の還元を試みる。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。
金属伝導性を示す多孔性配位高分子の開発

これまでに金属的な伝導特性と規則的なナノ細孔の両方を同時に有する多孔材料は報告例が無い。本研究では、金属酸化物からなるネットワーク構造を骨格に有する新規の多孔性配位高分子(PCP)の創成とそのキャリアドーピングにより、今まで誰も無し得なかった金属伝導性を示すPCPの開発に挑む。PCPではこれまでに空間のデザインを基盤とした化学が発展してきた。本研究により、未開拓であった骨格における電子物性を開拓することで、空間と骨格の機能を連携させた新しい科学への展開を推し進める。
重症熱性血小板減少症候群（SFTS）ウイルス特異的免疫応答の解析

重症熱性血小板減少症候群(SFTS)は有用な治療がなく、非常に致死率の高い疾患である。我々はRNAポリメラーゼ阻害作用を有するファビピラビルによるSFTSに対する有効性と安全性を検討する多施設臨床試験を実施し、合計20例を対象に解析を行った。(対象と方法)2016年4月12月および2017年9月2018年5月までにSFTSと確定診断された患者,又はSFTSV感染症が強く疑われる患者を対象に,ファビピラビルを714日間投与し、その有効性と安全性を検討した。合計20名(男性11名、女性9名、年齢5684歳)が登録された。SFTSと診断確定された17名のうち14名は比較的速やかに臨床症状および検査値の改善を認め、問題となる後遺障害もなく回復した。しかし残りの3名はいずれも治療56日目にSFTSによる多臓器不全のため死亡した。回復した14名では治療開始後に血中SFTSウイルス量(Real-time PCR法)は減少し、414日目には検出されなくなった。有害事象として既報の高尿酸血症および肝機能障害の増悪が認められる症例があったが、新規の重篤な有害事象は認められなかった。ファビピラビルにより速やかな臨床症状の改善が得られた症例も認められ、その有効性が示唆された。しかし17例中3例は多臓器不全で病勢のコントロールが得られず、抗ウイルス療法に加え支持療法の重要性も示唆された。当院で経験したSFTS症例で末梢血のサンプリングを行った4例ではいずれも異型細胞が見られ、形態学的に好塩基性の強い大型の形質細胞様であり、フローサイトメトリー法においてCD19およびCD38が強陽性であり、CD20の発現は乏しかった。通常、異型リンパ球はヘルペス感染症で見られ、表現型はT細胞リンパ球であるが、SFTSでは特異的免疫反応が生じる可能性が示唆された。我々はSFTS重症患者の末梢血にT細胞リンパ球由来の異型細胞ではなく,B細胞系リンパ球が増加する現象を経験し,この現象がSFTSウイルスの免疫原性によって惹起される特徴であるか否かを検討した。現時点で、重症で入院が必要な3名のSFTS患者リンパ球の機能解析を行った。異型リンパ球はDowneyの分類によると、1単球様、2形質細胞様、3リンパ芽球様の3つに分かれる。1例目は末梢血に12.5%の異形リンパ球の出現を認め、形態上は形質細胞様であり、表現型はCD3 8%, CD4 4%, CD8 13%, CD19% 86%, CD20 7.1%, CD38 95%, CD25 2%, TCRα/β17%, TCRγ/δ4%, Smlg-κ2.3%, Smlg-λ2.7%であった。2例目は末梢血に2.0%の異形リンパ球の出現を認め、形態上は形質細胞様であり、表現型はCD4 0.6%, CD8 10%, CD19% 91%, CD20 48%, CD38 99%, CD25 6.3%, TCRα/β1.0%, TCRγ/δ0.1%, Smlg-κ0%, Smlg-λ97%であった。3例目は形態上は形質細胞様であり、表現型はCD3 4%, CD4 1.6%, CD8 27%, CD19% 80%, CD20 48%, CD38 98%, CD25 1.6%, CD56 0.7%, CD16 1.4%, Smlg-κ1.7%, Smlg-λ1.9%であった。我々が分析を行った重症SFTS患者3名の末梢血異型リンパ球は、いずれもB細胞系リンパ球の表現型を有し、形質細胞様の形態で,単一に増加していた。一般のウイルス感染症(EBVやCMVなど)による末梢血異型リンパ球がT細胞由来であることと大きく異なっており、臨床的に意義のある解析であった。2017年3月の時点で、愛媛県のSFTS患者は累計21人と、国内で3番目に多い地域であり、一定量の検体採取・保存を行っている。しかしながら、2016年度は愛媛県保健福祉部衛生環境研究所の啓蒙活動の影響のためか、1名の患者発生に留まっている。今後も当県でのSFTSの発生状況が低く推移するようであれば、発生頻度の高い宮崎県や高知県の医療施設に検体送付を依頼する予定である。今後の研究に必要な検体採取および他施設との連携はとれており、現時点で研究継続に支障はきたしていない。重症熱性血小板減少症候群に対するファビピラビルの有効性と安全性の検討を行った。西日本を中心とした医療機関において15例が登録され、SFTSウイルス陽性症例は12例であった(SFTSウイルス陽性症例:56歳81歳(中央値66.5歳)、男性9人、女性3人)。ファビピラビルを初日1800 mg、2日目以降800 mgを514日投与した。登録されたうち3例は、ダニ刺痕を認め、臨床症状ならびに検査成績はSFTSに類似していたが、SFTSウイルスゲノム検査は陰性であった。SFTSV陽性12例中2例は治療6日目に原疾患の増悪のため死亡した。

SFTSウイルス陽性12例の検討から以下のことが明らかとなった。ファビピラビル治療開始時の血中SFTSウイルス量と予後の相関は認められなかった。回復例では治療開始後に血中ウイルス量の速やかな減少をみとめ、14日目以降は消失していた。治療開始後の血小板の増加が予後の指標となる可能性が示唆された。ファビピラビルによる重篤な有害事象はみとめなかった。我が国におけるSFTS患者の発生状況を西日本の診療施設の代表として取りまとめており、その病態解明と治療法の開発を積極的に行うことが出来た。本年度は特に、ファビピラビルによるSFTSの新規治療法開発を実施することが出来た。今後の研究に必要な検体採取および他施設との連携はとれており、現時点で研究継続に支障はきたしていない。重症熱性血小板減少症候群(SFTS)は有用な治療がなく、非常に致死率の高い疾患である。我々はRNAポリメラーゼ阻害作用を有するファビピラビルによるSFTSに対する有効性と安全性を検討する多施設臨床試験を実施し、合計20例を対象に解析を行った。(対象と方法)2016年4月12月および2017年9月2018年5月までにSFTSと確定診断された患者,又はSFTSV感染症が強く疑われる患者を対象に,ファビピラビルを714日間投与し、その有効性と安全性を検討した。合計20名(男性11名、女性9名、年齢5684歳)が登録された。SFTSと診断確定された17名のうち14名は比較的速やかに臨床症状および検査値の改善を認め、問題となる後遺障害もなく回復した。しかし残りの3名はいずれも治療56日目にSFTSによる多臓器不全のため死亡した。回復した14名では治療開始後に血中SFTSウイルス量(Real-time PCR法)は減少し、414日目には検出されなくなった。有害事象として既報の高尿酸血症および肝機能障害の増悪が認められる症例があったが、新規の重篤な有害事象は認められなかった。ファビピラビルにより速やかな臨床症状の改善が得られた症例も認められ、その有効性が示唆された。しかし17例中3例は多臓器不全で病勢のコントロールが得られず、抗ウイルス療法に加え支持療法の重要性も示唆された。当院で経験したSFTS症例で末梢血のサンプリングを行った4例ではいずれも異型細胞が見られ、形態学的に好塩基性の強い大型の形質細胞様であり、フローサイトメトリー法においてCD19およびCD38が強陽性であり、CD20の発現は乏しかった。通常、異型リンパ球はヘルペス感染症で見られ、表現型はT細胞リンパ球であるが、SFTSでは特異的免疫反応が生じる可能性が示唆された。我々は本研究にあたり、以下の3つの実験系を柱として計画を遂行中である。すなわち、1急性期SFTS患者末梢血リンパ球におけるリンパ球表面形質の解析とサイトカイン産生プロファイル、2SFTSウイルス感染細胞の同定、3SFTSウイルス特異的T細胞クローンの樹立、である。現在、1を中心に取り組んでいるが、患者末梢血から一定の異型リンパ球の採取に成功し、セルソーターを用いた2の実験系を遂行予定である。また、1におけるSFTSでの異型リンパ球の表現型がB細胞系リンパ球であるという現象が、SFTSに特異的であり他のウイルス感染で本当に見られないか否かを確認するため、当院受診患者で末梢血に異型リンパ球が見られた既存のウイルス感染症(EBウイルスとサイトメガロウイルス)でその表現型を確認中である。1におけるサイトカイン産生プロファイルにおいては、患者末梢血からficoll-Conray法で分離した単核球を抗CD3抗体および抗CD28抗体で刺激し、その培養上清に産生される各種サイトカイン濃度を定量的に測定し、Th1,Th2,Th12,Tregといったリンパ球の活性化を検討する予定である。
Ｘ線および中性子結晶構造解析による生体分子の水和水の揺らぎの解析

生体分子の機能発現は、水和構造の揺らぎが深く関わっている。本課題では、タンパク質結晶の含水量に依存した構造転移の解析、および、ヌクレオチド等の高水和物結晶の含水量と温度に依存した構造転移の高分解能の解析をX線および中性子結晶構造解析などの実験的手法と、分子間相互作用に関する計算科学的手法を併用して行い、水の揺らぎと構造転移の相関を明らかにした。タンパク質の水和水の振る舞いについては、中性子非弾性散乱、計算機シミュレーションなどの解析に基づきこれまでに報告されてきた描像と良く対応する結果を得た。一方、核酸の水和水はタンパク質の水和水とは少し異なる性格を持つことが示された。生体分子の機能発現には、揺らぎをもった水和水の存在が不可欠であることが指摘されている。本課題では、含水量の変化が構造転移を誘起する蛋白質結晶、オリゴヌクレオチド結晶に注目し、水和構造の揺らぎを解析するとともに、これが生体分子の構造と揺らぎにどのような効果をもたらしているのかを明らかにすることを目指している。平成24年度においては、第一に、含水量に依存した結晶構造転移が誘起される正方晶タウマチンについて、低湿度で安定な相についてX線結晶構造解析により構造精密化を行い、含水量の低下により引き起こされる転移に伴う水和水分布の変化を明らかにした。X線結晶構造解析により位置が決まる水和水数は高湿度相の方が多いが、蛋白質を架橋する形で分子間相互作用に直接かかわる水和水の数は低湿度型においてむしろ増加する、即ち揺らぎが減少することが示された。また、同じく含水量に依存した構造転移がおこるウマ心筋由来シトクロムcの三方晶の結晶について、新たな転移を見いだし、相転移後の構造を決定した。今後、水和構造という観点から、既知の構造転移との差異の解析を進めていく。第二に、正方晶シトクロムcについて、J-PARC/MLF(BL-03,iBIX)において中性子回折強度データの収集を行った。中性子結晶構造解析により、機能発現部位であるヘム近傍における水素結合および水和状態の詳細を明らかにしていく事を予定している。第三に、ヌクレオチド化合物のうち、高湿度型と低湿度型の可逆的な構造転移がいくつかの中間相を経て進行するグアノシン5'-一リン酸七水和物について、中間相の構造決定に成功した。段階的転移と水和構造との相関を考察する上での貴重な情報を得ることが出来た。生体分子の機能発現において、生体分子およびその集合体に設計されている構造柔軟性は欠くべからざる要素で有り、その発現には動的水和構造が深く関わっている。平成25年度は、第1に含水量の変化により相転移がひきおこされるヌクレオチドやクロモリンナトリウム等の水和物結晶について、低温での水の凍結に伴う相転移の解析をおこない、水の揺らぎと構造転移の相関を明らかにした。また、カウンターイオンを変えることにより、水和水と生体分子集合構造の揺らぎを制御する試みをヌクレオチド水和物結晶について行い、制御の指針を得た。第2に微結晶しか得られない試料について、粉末中性子回折データから水和水の水素原子の位置情報を得るための解析手法の検討を行い、マキシマム・エントロピー法(MEM)等を用いた解析手順を確立した。特徴有る水和水の揺らぎの存在が、相転移実験および分子動力学計算より予測されていたグアノシン2水和物について、この方法を適用し、水和水の揺らぎについて、予測を支持する結果を得た。第3に昨年度中性子回折データの収集を行ったシトクロムc等のデータを用いて、タンパク質の中性子構造解析より揺らぎの大きい水和水についての情報を得るための手法の検討を進めた。今後、3年間の研究の成果を基に、分子動力学計算を併用した解析を進め、生体分子およびその集合体の全体振動へ水和水が及ぼす効果に焦点を絞り、生体分子と水和水の相関の特性をより明確化していきたいと考えている。本課題では、含水量の変化が構造転移を誘起する蛋白質結晶、オリゴヌクレオチド結晶に注目し、水和構造の揺らぎを解析するとともに、これが生体分子の構造と運動性にどのような効果をもたらしているのかを明らかにすることを目指している。平成23年度においては、含水量に依存した結晶構造転移が誘起されることを既に見出していた2種の蛋白質結晶(斜方晶キシロースイソメラーゼおよび正方晶タウマチン)について、転移に伴う蛋白質分子の構造および分子間相互作用の変化についての解析を行い、その特性を明らかにした。また、ウマ心筋由来シトクロム

c三方晶を得て、水和水の減少に伴う相転移現象が誘起されることを新たに確認するとともに、X線結晶構造解析により相転移前後の構造を決定し、変化の概要を明らかにした。オリゴヌクレオチド水和物の含水量に依存した構造転移の解析に関しては、デオキシシチジリル-(3'-5')-デオキシグアノシン(d(CpG))のアンモニウム塩についてX線回折法により相対湿度に依存した相転移の解析を行い、相対湿度に依存して3水和物ー1水和物間の可逆的転移が誘起されること、およびこの転移はリボースのコンフォメーション変化を伴っていることを明らかにした。これと並行して、中性子構造解析に向けて一辺1mm程度の結晶を得る条件をタウマチン、ウマ心筋由来シトクロムc、d(CpG)(NH4)について確立した。今後、この条件を用いて数mm角の結晶を作成することを計画している。含水量に依存した相転移がおこる蛋白質結晶の低湿度型の構造精密化に成功し、構造転移に伴う水和状態を変化を明らかに出来たこと、シトクロムcについて、中性子回折強度データを得たことなど、本研究課題の目的とする生体分子の水和水の挙動の解析へ向けた計画が順調に進行している。当初予定していた2種の蛋白質結晶(斜方晶キシロースイソメラーゼ、正方晶タウマチン)およびジヌクレオチド結晶(d(CpG)(NH4))について、含水量の増減と相関した構造転移の特性を明らかにすることが出来た。また、新たに1種の蛋白質結晶(ウマ心筋由来シトクロムc)について相転移が誘起されることを見いだした。一方、斜方晶キシロースイソメラーゼについては2mm、正方晶タウマチン、チトクロムcおよびd(CpG)(NH4)については1mm程度の大きさの結晶を得る条件を既に確立できており、中性子構造解析に向けた数mm角の結晶を得る結晶化条件の探索も順調に進行している。平成24年度において得た中性子回折強度データを用いて構造解析を進め、水素位置を明らかにすることにより蛋白質の水和状態についての知見を深めること、水和水の揺らぎの温度依存性の解析を行い、水和水のネットワークの揺らぎが含水量および温度に依存してどの様に収束していくかを明らかにすることを予定している。また、平成25年度は最終年度にあたるので、これまでの知見と総合し、非弾性散乱、広帯域誘電分光などからの情報も取り入れ生体分子の水和水の揺らぎの特性を明らかにする。含水量の増減と相関した構造転移の誘起される蛋白質結晶(斜方晶キシロースイソメラーゼ、正方晶タウマチン)については、相転移を誘起する温度および湿度条件を検討することにより相転移に伴う結晶性の低下を減少させ、高分解能のX線回折データを得て構造精密化を行い、相転移前後の水和水状態、および水和水の揺らぎの変化を明らかにすることを予定している。オリゴヌクレオチドについては、十量体および十二量体の結晶化を行い、含水量を制御して、含水量に依存した相転移の有無の解析を進める。一方、前年度に引き続き、同様な現象を起こす蛋白質結晶の探索を進め、普遍的な特性を明らかにすることを目指す。来年度は最終年度にあたる。研究費は結晶化に必要な試薬および器機に使用することを予定している。なお、繰越が90,674円あるが、これは顕微鏡用CCDカメが当初の予定より安価に入手できたためで、次年度試薬代として活用することを予定している。平成24年度の研究費では、主要備品として結晶化条件探索実験における結晶観察用CCDカメラの購入を予定している。
慢性血栓塞栓性肺高血圧症診断における血管内視鏡の意義について

慢性血栓塞栓性肺高血圧症を対象に、血管内視鏡を施行し、血栓の部位や2次性肺高血圧性変化を正確に評価し、手術の効果を正確に予測し成績の向上をはかる事を目的とした。平成10年度の検討で、血管内視鏡のアプローチ方法としてはカイドワイヤー法よりもガイディングカテーテルを使用する方法が容易であること、また区域枝およびより末梢の血栓の観察に内視鏡が有用であることが明らかになったため、平成11年度は、先端側方付きバルーンカテーテルで誘導し、オリンパス社製AF type14で観察するアプローチで慢性例8例(年齢50±6歳、平均肺動脈圧36±9mmHg肺血管抵抗673±35dyn・s・cm^<-5>)、急性例2例に施行し、葉から亜区域レベルの肺血管を観察した。結果、慢性例においても、白色器質化血栓の他、3例で赤色血栓がみられ、肺動脈造影では、特に壁在血栓の場合その質的診断は困難であった。慢性例で赤色血栓の存在する症例の肺血管抵抗は比較的低く、血栓栓溶解療法の可能性を示唆した。さらに、血栓のない血管において強い黄色変化、薄い黄色変化、正常壁所見がみられ、同程度の肺血管抵抗でも壁の動脈硬化所見に差があることが明らかとなった。手術適応を考える上で、血栓閉塞に加え動脈硬化病変の把握が重要で、肺動脈造影上の末梢血栓に加え、内視鏡で動脈硬化病変が極めて強い症例は手術適応外とした。2例に手術を施行し、著明な改善がみられた。また、急性例で血管内視鏡にてはじめて残存血栓が検出される症例を経験し、症例報告した。血管内視鏡は、血栓の確定診断、質的診断、肺動脈腫瘍との鑑別に有用で、今後動脈硬化病変の評価にも使用されうると考えられた。慢性血栓塞栓性肺高血圧症(CTEPH)は、近年積極的に肺血栓内膜摘除術が施行され、症状、肺血行動態の著明な改善が得られてきた.手術適応を考える上で、その血栓存在部位の正確な診断は必須である。近年冠動脈疾患で普及してきた血管内視鏡は、直視にて血栓や血管の内膜変化を観察可能としたが、本邦のみならず欧米においてもその肺動脈における使用経験は少なく、検査の侵襲性もあってその意義は明らかとはいえない。今回CTEPH2例(症例1:平均肺動脈圧53mmHg、症例2:平均肺動脈圧24mmHg術後)に、バルーン付き血管内視鏡を使用し、肺動脈へのアプローチ法、適応、安全性について検討した。結果、アプローチ方法としてはカイドワイヤー法よりもガイディングカテーテルを使用する方法が容易であること、また区域枝およびより末梢の血栓の観察に有用であることが示唆された。しかしながらすべての血管をくまなく観察することは時間的、手技的にも困難で、肺動脈径が太い症例では、葉動脈レベルにおいても血流遮断をすることができず観察が困難であることが問題点として挙げられた。より容量の大きいバルーンの使用や、内視鏡でなくガイディングカテーテルにバルーンを装着する方法、先端にバルーンを装着しバルーン越しに見る方法などによって、より太いレベルの観察が可能となることも考えられたしかしながら、内視鏡の固定や血液排除はやはり困難であったとの報告もみられる。現時点で血管内視鏡は、他の画像診断で判定困難な区域枝入口部の血栓の存在の有無を明らかにすること、血管炎や腫瘍と血栓の鑑別に使用すること、新旧の血栓を鑑別し溶解療法の適応を決定することなどに有用と考えられた。肺動脈へのアプローチ法や観察に至適なファイバーの選択も定まっておらず、アプローチ法の確立、至適ファイバーの開発も重要と考えられた。

血管内視鏡は、血栓の確定診断、質的診断、肺動脈腫瘍との鑑別に有用で、今後動脈硬化病変の評価にも使用されうると考えられた。
HTLV-I感染によるミクログリア・アストログリアの反応と神経細胞死のメカニズム

近年、HTLV-I関連脊髄症の研究は大きく前進したが神経系の細胞に具体的にどのようにウイルスないしウイルス感染細胞が傷害を起こしているのかという点は未だ良く解っていない。一方、初代培養による神経細胞、グリア細胞の実験が比較的容易に応用できるようになり、この方法を用いてHTLV-I感染と神経細胞死のメカニズムを検討する試みを行った。初代培養による小脳顆粒細胞に対するHTLV-I感染細胞株であるMT-1、MT-2、HCT-I、W7TM-I、HAM患者より分離したT-cellなどの培養上清を用いて細胞障害性を、MTT法、fluorescin diacetate法による生細胞数の測定を行ったところMT-1、MT-2で神経細胞障害性が容量依存性に見られた。この現象はtax遺伝子の関与が推測されたがtax蛋白に対する抗体を含んだ患者血清での中和実験では、抑制できずtax蛋白そのものというよりはtax蛋白によって発現が亢進したサイトカインなどの因子によるものと推測された。次ぎに、初代培養のアストロサイト、ミクログリア、小脳顆粒細胞など神経系細胞へのtax蛋白遺伝子導入を試みたが、導入効率で問題があった。そこでミクログリアと基本的に同じ性格を持つと考えられる細胞としてU937細胞株を用い遺伝子導入を試み、良好な導入効率がえられた。tax遺伝子をサイトメガロウイルスのプロモーターの顆粒に挿入したvectorを用いてリポフェクトアミン法で導入し、神経系に障害性を持つnitric oxide(NO)を測定、またinducible NO synthase(iNOS)のmRNAを半定量PCR法で測定した。その結果、tax遺伝子を導入したU937細胞はNO濃度は高値で、iNOSのmRNAは有意に多く発現しておりIFN-_γ刺激によって増強された。このことから、HAMの発症病理に於てresidentialなマクロファージやミクログリアより誘導されるNOが神経組織障害に関与している可能性が示唆された。I)培養小脳顆粒細胞に対するMT-2、HCT-1、W7TM-1、HAM患者より分離したT-cellなどの培養上清の細胞障害性を、MTT法、fluorescin diacetate法による生細胞数の測定し解析したが、MT-1、MT-2では神経細胞障害性が容量依存性に見られたものの、HAM患者末梢血Tリンパ球、W7TM-1では障害性は確認できず、tax遺伝子の発現が強いものに障害性が強い可能性が示唆されたがHAMの患者由来リンパ球で確認できなかったことから、HAM発症のメカニズムとの関連は不明であった。II)神経系細胞への感染の有無を確認するため、HTLV-I感染ヒトTリンパ球細胞株であるHCT-1(HAM患者髄液由来CD4陽性T細胞株,Nakamura et al.,1989)、MT-2およびHTLV-I感染ラット由来(WKAH)Tリンパ球細胞株であるW7TM-1と混合培養した。これらのアストロサイト、ミクログリアはHTLV-Iを発現するが、これらの細胞を抗ヒトTcellレセプター抗体で染色すると、高頻度に染色されたことからMT-2自身が培養フラスコ面、あるいは培養アストロサイトと直接接着する可能性や、細胞融合が起こっている可能性が考えられた。そこで、HTLV-Iウイルスのtax部位をサイトメガロウイルスのプロモーターにつないだ発現ベクターを用いた。またHTLV-IのLTR部分をプロモーターとして蛍光発色蛋白(GFP)を作成し、cotransfectすることでtax発現のマーカーとし、in vitroのtransfectionでtax遺伝子を発現させて、tax遺伝子の神経系細胞に及ぼす影響、神経細胞障害のメカニズムを検討することとした。

リポフェクトアミン法によるtransfectionではヒト・マクロファージ細胞株U937細胞とラット・初代培養ミクログリアへのtax遺伝子導入を試み、U937細胞では活性窒素(NO)の産生はtax遺伝子導入により亢進することが明らかになった(未発表データ)。今後はこれらのtax遺伝子導入細胞の機能変化・小脳顆粒細胞に及ぼす影響を検討する予定である。初代培養による小脳顆粒細胞に対するHTLV-I感染細胞株であるMT-2、HCT-I、W7TM-I、HAM患者より分離したT-cellなどの培養上清の細胞障害性を、MTT法、fluorescin diacetate法による生細胞数の測定を行ったがMT-I、MT-2で神経細胞障害性が容量依存性に見られた。この現象はtax遺伝子の関与が推測されたがtax蛋白に対する抗体を含んだ患者血清での中和実験では、抑制できずtax蛋白そのものというよりはtax蛋白によって発現が亢進したサイトカインなどの因子によるものと推測された。次ぎに、初代培養のアストロサイト、ミクログリア、小脳顆粒細胞など神経系細胞へのtax蛋白遺伝子導入を試みたが、導入効率で問題があった。そこでミクログリアと基本的に同じ性格を持つと考えられる細胞としてU937細胞株を用い遺伝子導入を試み、良好な導入効率がえられた。tax遺伝子をサイトメガロウイルスのプロモーターの顆粒に挿入したvectorを用いてリポフェクトアミン法でU937細胞株に導入し、神経系に障害性を持つnitric oxide(NO)を測定、またinducible NO synthase(iNOS)のmRNA発現量を半定量PCR法で測定した。その結果、tax遺伝子を導入したU937細胞はNO濃度は高値で、iNOSのmRNAは有意に多く発現しておりIFN-γ刺激によって更に増強された。このことから、HAMの発症病理に於てresidentialなマクロファージやミクログリアより誘導されるNOが神経組織障害に関与している可能性が示唆された。これまでにHAMの唯一のモデルであるいわゆるHAMラットではマクロファージ/ミクログリアの組織内での障害への関与が示唆されており我々の研究結果と合わせてHAMの発症病態に重要と思われる。
ヘリウムガス流れにおける相互情報量を用いた電磁弁のオンライン音響故障診断

工場において強い背景騒音中、ガス漏洩音を検出するのは非常に重要である。特に原子電力発電所や化学工場などで高温や有機性の気体の漏洩が起こった場合には重大な事故を引き起こし、作業員や周辺の住民の人命にも関わる大きな問題が生じる可能性がある。著者は相互情報量を用いたオンライン音響故障診断システムを構成し、それを用いることにより実システムに対しリアルタイムで診断が行えることの確認を行った。その結果、漏洩音と騒音のS/N比0.85の空気圧電磁弁からの故障音を検出することに成功している。しかし、ヘリウム(He)ガスの電磁弁からの漏れ音を測定することは大変困難である。それはHeガスの分子量は空気の分子量に比べて小さいためである。そこで、本研究では強い背景雑音がある工場内において、電磁弁からHeガスが漏洩した場合を想定し、S/N比が0.85以下の小さい音においても故障音を検出する。そのために、いかにして背景雑音の影響を軽減し、Heガス漏洩音の特徴を検出するか、また信号の一連の処理をオンラインで行うか。そこで、オンライン音響故障診断システムを用いることにより、実システムに対しリアルタイムで診断が行えることを目的としている。本研究で用いたオンライン音響故障診断システムは、騒音計(RION NL-15)とノート型パソコン(Sony VAIOPCG-GR500)で構成される。本システムは、対象となる音響サンプルを騒音計により取得し、ノート型パソコンに音響信号データを送信する。そしてノート型パソコンに送信された信号はA/D変換され、ニューラルネットワークフィルタに送られる。この時の音響信号データのサンプリング時間は0.125ms、データ数は1024である。それらは100サンプル採取され、ニューラルネットワークフィルタに送信され、学習させた後、相互情報量の値を求める。この音響信号データの相互情報量の値が、電磁弁の故障診断を示す。結果、以下のような成果が得られた。1)騒音計とA/D変換を含むオンライン音響故障診断システムを構築することによって、S/N比が0.85以下の小さい場合において、Heガス漏洩音の基礎実験を行い、検出システムの有効性が確認された。2)応用実験として、上記のオンライン故障診断システムを用い,強い背景騒音中でHeガス漏洩の実実験を実施し,リアルタイムで診断を行い、提案したオンライン音響故障診断の有効性が確認された。