hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
スキルス胃癌の難治性克服： 癌幹細胞のオートファジーと分子標的治療開発

スキルス胃癌は難治性の癌である。スキルス胃癌難治性の病態を癌幹細胞のオートファジーの観点から解明することを目的とした。スキルス胃癌幹細胞は、LC3A、LC3Bの発現が高く、オートファジーが亢進していた。また、酸化ストレスによりオートファジーが誘導された。クロロキンを用いてオートファジーを抑制することにより癌幹細胞増殖が有意に抑制された。また、胃癌組織のLC-3、beclin-1、p62の発現を評価した結果、オートファジーは、スキルスや転移と相関していた。以上から、スキルス胃癌癌幹細胞はオートファジーが関連しており、オートファジー抑制により癌幹細胞の増殖や転移が抑制されることが示唆された。(背景と目的)癌幹細胞は、自己複製能と多分化能を持ち、癌の増殖や浸潤だけでなく、転移再発にも大きな役割を担っていると報告されている。近年、オートファジーが癌細胞の生存に大きくかかわることが報告されているが、癌幹細胞におけるオートファジーの意義に関する報告は少ない。今回、我々は胃癌細胞株を用いて、癌幹細胞が多く存在するSide Population (SP)分画を分離し、癌幹細胞におけるオートファジーの意義を検討した。(対象と方法)胃癌細胞株OCUM12を用いて、FACScanにてSP分画をソーティングし、OCUM12/SPとした。OCUM12/SPにおけるオートファジー関連分子LC3A、LC3B、mTOR、ULK1発現をRT-PCRにより親株OCUM12と比較検討した。癌細胞のオートファジーをLysotrackerを用いた蛍光顕微鏡により評価した。また、癌細胞の酸化ストレス(ROS)状態を評価した。OCUM12/SPを用いてオートファジー抑制剤(クロロキン)による細胞増殖抑制効果についても検討した。(結果)OCUM12/SPは親株OCUM12に比し造腫瘍性や転移能が高く、癌幹細胞が多く含まれていることが示めされた。このOCUM12/SPは、オートファジー関連分子LC3Aの発現が高く、オートファジーが亢進していた。また、OCUM12/SPはROS産生が抑制されており、酸化ストレスによりオートファジーが誘導された。クロロキンを用いてオートファジーを抑制することによりOCUM12/SPの増殖が有意に抑制された。(結論)癌幹細胞の増殖には酸化ストレスやオートファジーが関連しており、オートファジーを抑制することにより癌幹細胞の増殖や転移が抑制されることが示唆された。オートファジーは細胞内の分解機構であり主に飢餓により誘導されるが、がんの発生や増殖進展にも関与することが報告されている。オートファジーに関与するオートファゴソームに結合する蛋白質としてLC-3があり、またautophagyを誘導する蛋白質としてbeclin-1がある。LC-3やbeclin-1において様々な癌腫にて予後との関連が報告されているが、胃癌オートファジーに関する報告は少ない。手術胃癌症例を用いて免疫組織学的染色によりLC-3、beclin-1の発現を評価し、臨床病理学的背景、予後について検討した。また胃癌細胞株2MD3を用いてストレス環境におけるLC3A、LC3B、beclin-1発現についてリアルタイムrt-PCR法で検討した。その結果LC-3陽性は79例(%)、beclin-1強陽性は130例(%)であり、そのうちオートファジー陽性は38例(%)であった。LC3陽性例、beclin1陽性例とそれぞれ陰性群の間で臨床病理因子に関して比較を行ったところ、分化型、高深達度、浸潤増殖様式、リンパ管侵襲、静脈侵襲に関して有意に相関が認められた。5年生存率に関しては、LC3陽性例、beclin1陽性例ともに陰性例と比較すると有意に生存率の低下を認めた。また、LC3陽性例、beclin1陽性例の生存に関する単変量解析では有意差を認めたが、多変量解析においては、独立予後因子とはならなかった。リアルタイムrtPCR法ではストレス暴露24時間後において、栄養飢餓(グルコース欠乏もしくはアミノ酸欠乏)条件でLC3A、LC3B、beclin-1発現が亢進していた。今回の検討により、LC-3陽性、beclin-1強陽性で判定されるautophagyは胃癌の悪性度に影響し、オートファジーを抑制することにより、癌の増殖進展を抑制することを明らかにすることが出来た。p62/SQSTM1(以下p62)はオートファジーにより選択的に分解される蛋白であるが、その他にNF-kB経路や酸化ストレスに関与するNrf2経路に関わることが報告されており、肺癌や乳癌についてはリンパ節転移や予後との関連が報告されている。胃癌に関して報告はなく、今回我々は、胃癌におけるp62発現について検討を行った。当科で手術を行った胃癌症例(542例)を材料に、免疫組織学的染色によりp62の発現を評価し、臨床病理学的背景について検討した。p62発現の判定は、染色された細胞の染色強度や占有率をスコア化し、それぞれ掛け合わせた値を算出しscore:4以上を陽性と判定した。また胃癌細胞株におけるp62発現についてリアルタイムrtPCR法とウェスタンブロット法を用いて検討した。その結果、p62陽性は123例、陰性419例であった。

両群間で臨床病理因子に関して比較を行ったところ、スキルス型、低分化型、T2以深、リンパ節転移、腹膜転移、腹水細胞診陽性、浸潤増殖様式、リンパ管侵襲、脈管侵襲、腫瘍径5cm以上に関して相関関係が認められた。5年生存率に関しては、陽性例は陰性例と比較すると有意(69.8%:53.9%、P=0.0012)に生存率の低下を認めた。また胃癌症例全体の多変量解析においては独立予後因子とはならなかったが、リンパ節転移陽性ステージII/III症例においてはスキルス型、脈管侵襲に加えp62陽性が独立した予後因子となった。リアルタイムrtPCRでの胃癌細胞株におけるp62のmRNA発現の解析ではocum12が他の細胞株と比較し有意に高かった。また、グルコース飢餓におけるp62の蛋白発現をocum12を用いてウェスタンブロットにて解析すると、グルコース飢餓24時間後においてp62の発現は低下していた。以上の結果からp62は胃癌の悪性度に関与する因子であり、p62はリンパ節転移陽性胃癌において有用な予後予測因子となる可能性が示唆された。今回の検討により、p62が胃癌のリンパ節転移などの悪性度に関与することが明らかにされ、治療標的分子の可能性が示唆され、29年度の研究に発展することが考えられた。また、27年度の研究である癌幹細胞の治療標的にもp62を用いたオートファジー抑制が有用であることが示唆された。癌幹細胞は癌の増殖進展や癌治療抵抗性に重要な役割を果たすことが示唆されている。オートファジーは細胞内成分の分解再利用機構であり、低栄養や低酸素などのストレス環境により誘導される。オートファジーは癌細胞において活性化しており、生存に強く関わることが報告されているが、癌幹細胞におけるオートファジー機構については明らかにされていない。本研究は癌幹細胞におけるオートファジーの意義を明らかにすることを目的とした。研究材料として、胃癌細胞株OCUM-2MD3およびOCUM-12を用いた。FACSにて同定されるSide Population(SP)細胞分画に癌幹細胞が多く存在することらから、胃癌細胞株のSP分画をそれぞれソーティングし、オートファジー分子(LC3A、LC3B)の発現を検討した。SP細胞をストレス環境(グルコース欠乏、アミノ酸欠乏、血清欠乏)で培養し生存率を検討した。さらに、オートファジー阻害剤(クロロキン)が癌幹細胞増殖能に及ぼす影響やSP含有率に及ぼす影響を検討した。その結果、SP細胞はオートファジー分子(LC3A、LC3B)発現が亢進していた。SP細胞は通常細胞株と比較し、ストレス環境(グルコース欠乏、アミノ酸欠乏、血清欠乏)に有意に高い生存率を示した。オートファジー阻害剤によりSP分画は減少し有意に増殖能が抑制された。以上のことから、ストレス環境における癌幹細胞の幹細胞性維持にはオートファジーが関与していた。オートファジー阻害剤は癌の増殖進展や治療抵抗性抑制に有用であることが示唆された。スキルス胃癌は難治性の癌である。スキルス胃癌難治性の病態を癌幹細胞のオートファジーの観点から解明することを目的とした。スキルス胃癌幹細胞は、LC3A、LC3Bの発現が高く、オートファジーが亢進していた。また、酸化ストレスによりオートファジーが誘導された。クロロキンを用いてオートファジーを抑制することにより癌幹細胞増殖が有意に抑制された。
小児ＡＤＨＤの抑制機能障害に関するＮＩＲＳを用いたモニタリング法の確立

我々は、低拘束性な脳機能検査装置であるfNIRS用いて、小児ADHDの多動・衝動性や不注意症状に関わる脳機能低下領域が、右前頭前野、右下頭頂葉にある事を可視化した。さらに、抑制機能に関与する認知機能課題を使用した計測システムは、約95%の小児ADHDに計測可能であり、かつ、個人レベルでADHDを高精度に弁別可能であると考えられた。次に、申請者はADHD治療薬有効例を対象とし、脳機能学的薬理効果を検討するため、無作為化二重盲検プラセボ対照試験を実施した。その結果、治療有効例のADHDにおいて、多動・衝動に関与する特異的脳機能低下が、ADHD治療薬内服後に回復する過程を可視化することに成功した。本研究は、現時点では客観的に判別できるツールがない、小児注意欠陥多動性障害(ADHD)の診断、治療効果判定法の確立を目的としている。小児脳機能障害であるADHDの中心病態は行動抑制機能障害、注意機能障害であり、それらの関連認知機能課題中に拘束性の低い、非侵襲的な脳機能検査法である近赤外線スペクトロスコピー(functional near-infrared spectroscopy)を用いてADHDの脳機能低下と薬物治療後の脳機能回復について検証した。ADHD群において、治療薬物である塩酸メチルフェニデート(MPH)内服前には行動抑制機能と注意機能関連領域である右前頭前野の脳機能が、発達障害のない小児群(定型発達)と比較して統計学的に有意に低下し、MPH内服後に脳機能が回復した。プラセボ薬(偽薬)を使用した二重盲検試験を用いて、ADHD症状が顕在化する6歳前後の極めて多動性の強い小児ADHD症例に対して脳機能検査を成功させた世界で初めての報告である(Neurophotonics 2014,日本薬物脳波学会雑誌2013,2014)。2013年度は4回の招待講演があり、発達障害全般にわたり、客観的な診断手法の開発ニーズが極めて高いと考えられる。以上から、fNIRS計測を用いた我々の解析系は、小児発達障害を対象とした客観的なバイオマーカーの確立と、臨床応用に関するエポックになりうると考える。現在までにADHD児150名、定型発達児100名、自閉症児50名の検査を実施した。今後は、個人個人の脳機能検査データを解析し、実臨床で応用可能な診断検査の開発や症状に合わせたオーダーメイド治療について検討する。さらに、自閉症児とADHD児の脳機能低下の異同について検討する予定である。本研究計画の目的である、ADHD児の抑制機能における前頭前野の神経基盤を明らかにするために、ADHDの治療薬であるMPHの服用早期における客観的効果予測因子の判定法を確立する目的とした検討を実施した。すなわち、ADHD児に対して治療薬の有効性の評価を目的として,健常児16名とADHD児16名(年齢、性別マッチ)に対して二重盲検査プラセボ試験を実施したfNIRS研究である。6歳という、低年齢児を含めた、世界初の脳機能イメージング研究報告である。健常群で認めた右前頭前野の脳機能活性が、ADHD児の治療前には活性がなく、治療薬であるMPH服用後にのみ認めた事実から、fNIRSを用いた我々の解析系が、治療薬の客観的効果判定に有用であると考えられた。(文献1,2)発表論文2門田行史;小児ADHDに対するMPH投与効果のNIRSによる評価法の探索・日本薬物脳波学会雑誌2012; 13:57-66我々は、低拘束性な脳機能検査装置であるfNIRS用いて、小児ADHDに適合し、かつ、ADHDの病態解明に関与する研究をすすめてきた。その結果、ADHDの中心的病態に関与する「多動・衝動性の制御」を反映する認知機能課題中にfNIRS計測を実施し、小児ADHDの多動・衝動性や不注意症状に関わる脳機能低下領域が、右前頭前野(右中前頭回と下前頭回)にある事を可視化した。さらに、本計測システムは、約95%の小児ADHDに計測可能であり、かつ、個人レベルでADHDを高精度に弁別可能(感度83%)であることを実証した(特許出願中)。次に、ADHDの主症状である、不注意症状に着目した。オドボール課題という注意昨日課題を作成し、課題遂行中にfNIRS計測を実施した。結果、定型発達児では右前頭前野に加え、右頭頂葉の有意な活動を認めた。一方、ADHD児では治療薬内服前とプラセボ内服後には、全脳領域において有意な脳活動はなく、塩酸メチルフェニデート徐放薬(MPH)の内服後に右前頭前野の活動が強く作用した。

また、アトモキセチン(ATX)内服後には右前頭前野と右頭頂葉の活動の両方が弱く作用していた。アトモキセチンの注意機能に関する薬理効果については、fMRI、脳波、PET、MEG、などの全脳機能検査を含めても世界で初めての報告である。MPHを服用した場合とATXを内服した場合、それぞれの薬特有の回復効果を可視化した。この結果については、現在推定されているモノアミン(ドパミン、ノルアドレナリン)ネットワークの脳内分布と、各薬剤の薬理作用から考察可能である。すなわち、MPHはドパミン系ネットワークを中心に作用し、ATXはノルアドレナリン系ネットワークを中心に作用していると考えられ、その結果は、薬理学的機序と一致し、脳内における治療薬の薬理作用機序の検証に光トポグラフィが有用である可能性が示唆された。小児発達障害当初の予定を上回り、小児注意欠陥多動性障害例(ADHD児)150名、定型発達児100名をリクルートし、脳機能解析を実施できている。結果、ADHDが有する行動抑制機能低下と注意機能低下が右前頭前野と頭頂葉にあり、治療薬である塩酸メチルフェニデート(MPH)を内服すると定型発達児のレベルにまで脳活動が回復し、プラセボ薬を内服しても回復がない事を報告した(2014年:Neurophotonics, 2013-2014年:日本薬物脳波学会雑誌、2013-2014年の招待講演は4回)。自閉症児(ASD)も50名リクルートでき、ADHD、定型発達児、ASDにおいて同じ抑制機能課題を実施し、ADHDにおいてのみ右前頭前野の機能不全を認めた。よって、本解析系を用いて抽出される右前頭前野の機能低下は、ADHDのバイオマーカーになりうると考えられる(未発表)。今後の課題は、ADHDと定型発達児における、年齢に伴う脳成熟プロセスの異同に関する研究である。我々がリクルートした各対象者における計測から1年後の脳機能を縦断解析し、脳成熟プロセスについて検討する予定である。本研究の目的は、ADHD児に加えて健常児、鑑別が必要な高機能自閉症(HFPDD)において、fNIRSを用いた抑制機能検査を実施し、小児ADHDの診断・治療につながる客観的生物学的バイオマーカーを創出する事である。我々は、健常群とADHD児における脳機能解析を実施し、報告した(文献1)。HFPDDについては、現在16名のリクルートと脳機能解析を終了し、報告予定である。また、ADHD児における脳機能低下を抽出する解析手法の基盤は確立しているため、平成25年度に実施する、健常児、ADHD児、HFPDD児の脳機能成熟変化の解明を目的とした縦断的検討を実施が可能である。当初の計画通り、1年の間隔をあけて縦断解析を実施し、参加した対象者(合計300名)において発達に伴う脳活性パターンの変化を検討する。脳機能低下を伴うADHD/自閉症児の脳機能学的変化と定型発達児との異同を確認し、脳の成熟障害の有無やプロセスを解明する。また、ADHDについては治療薬であるMPHの効果あり/なしの集団に分類し、脳機能変化の異同を後方視的に検討する。我々は、健常群とADHD児における脳機能解析を実施し、報告した。
多相高分子の表面設計と環境応答特性の制御

多相高分子の表面および界面の構造や形態が、接触媒体と相互作用したとき、どの様な反応挙動を示すかを明らかにすることは、新素材の分子設計にとって極めて重要である。本研究では、化学構造のみならず物理特性をも考慮した種々の多相高分子をモデル高分子として合成し、そのモデル表面と環境応答挙動との関係を体系的に明らかにした。モデル表面を形成する構造明確な多相高分子として、疎水性であるポリウレタンおよび親水性であるポリビニルアルコールを幹成分とし、ポリシロキサン、ポリエーテル、ポリアミン、ポリスチレンをグラフト鎖として導入したグラフト型共重合体を合成した。これらは、化学構造のみならず、集合体物性として、ガラス-ゴム状態、結晶-非晶状態が考慮されている。これらを用いて、空気中および水中における表面構造の変化および応答速度をXPSおよび接触角法を用いて評価した。その結果、多相高分子表面では、キャスト製膜過程で特定セグメント成分の表面濃縮が容易に起こり、それは表面エネルギーを最も小さくする方向であり、また、その表面層の厚さは、枝成分含量を調整することにより制御し得た。多相高分子を水中に浸漬すると、比較的短いタイムスケールで表面濃縮成分が可逆的に変化することが認められた。その応答速度は、枝鎖の長短によって変わり、また、ガラス状態および結晶状態では、環境応答をしない場合が認められた。以上の結果、多相高分子表面は一般に接触する媒体の変化によって短い時間で著しい構造・形態の変化を生じ、枝鎖の長さ密度を含む一次化学構造および分子集合状態の適切な選択によって表面構造を制御し得ることが示された。この成果は、多相高分子のフレキシビリティを生かした新界面機能素材の分子設計の基礎となるものと期待される。
新規トロンボキサンA2受容体会合タンパク質KIAA1005の機能の解明

トロンボキサンA_2(TXA_2)は強力な血管平滑筋収縮作用や血小板凝集作用を示すアラキドン酸代謝物で、血栓形成に伴う末梢循環障害の発症に深く関わっている。このTXA_2はTXA_2受容体(TP受容体)を介して作用を発現するが、TP受容体C末端に会合するタンパク質として我々は最近新規タンパク質のKIAA1005を見出した。KIAA1005は2005年にはじめて全長の塩基配列が報告されたが、その生理機能については、まったく不明なままである。そこで本研究では、TP受容体の活性調節におけるKIAA1005の生理的な意義の解明を目的とした。はじめに新規タンパク質であるKIAA1005mRNAの生体内発現をRT-PCRにより解析した結果、全身にユビキタスに発現し、胸腺で特に強く発現していることを明らかにした。KIAA1005はTP受容体C末に会合するタンパク質として酵母ツーハイブリッド系により我々の手ではじめて見出されたが、生体内でもKIAA1005がTP受容体と会合することを、免疫沈降法により明らかにした。ヒトTPはスプライシングによって生じる二つのアイソフォーム(TPαおよびTPβ)が知られているが、KIAA1005は二つのアイソフォームにともに会合することも明らかにした。次に、TPの機能に及ぼすKIAA1005の影響を、KIAA1005過剰発現細胞を用いて検討した。その結果、TP刺激によって惹起される、ホスホリパーゼCの活性化およびextracellular signal-regulated kinase 1/2(ERK1/2)の活性化をKIAA1005は抑制した。ムスカリニックM3受容体刺激によるホスホリパーゼCの活性化はKIAA1005によっては抑制されず、TP受容体特異性を示した。一方ヒトアストロサイトーマ細胞(1321N1)における内因性のTP刺激によるIL-6 mRNA発現の亢進をKIAA1005は強く抑制した。細胞膜のTP受容体を[3H]SQ29548結合により解析すると、TPαおよびTPβの細胞表面量(Bmax)がKIAA1005の発現によって減少した。これらの結果を総合すると、KIAA1005はTPシグナル伝達を負に制御していることが考えられ、その一つの作用機構としてTP受容体の細胞膜発現を抑制している可能性が示唆された。トロンボキサンA_2(TXA_2)は強力な血小板凝集作用および血管平滑筋収縮作用を示すアラキドン酸代謝物で、血栓形成に伴う末梢循環障害の発症に深く関わっている。このTXA_2はTXA_2受容体(TP受容体)を介して作用を発現するが、我々は最近、TP受容体C末端に会合するタンパク質の解析から新規タンパク質のKIAA1005を見出した。そこで本研究では、TP受容体の活性調節におけるKIAA1005の生理的な意義を解明を目的とした。はじめに新規タンパク質であるKIAA1005 mRNAの生体内発現をRT-PCRにより解析した結果、全身にユビキタスに発現し、胸腺で特に強く発現していることを明らかにした。また、KIAA1005の機能を解析するツールとしてその抗体の作成にも成功した。その結果、TP刺激によって惹起される、ホスホリパーゼCの活性化、extracellular signal-regulated kinase 1/2 (ERK1/2)の活性化、IL-6 mRNA発現の亢進をKIAA1005はすべて抑制し、KIAA1005はTPシグナル伝達を負に制御している可能性が示唆された。

次に、TPの機能に及ぼすKIAA1005の影響を、KIAA1005過剰発現細胞を用いて検討した。その結果、TP刺激によって惹起される、ホスホリパーゼCの活性化およびextracellular signal-regulated kinase 1/2(ERK1/2)の活性化をKIAA1005は抑制した。ムスカリニックM3受容体刺激によるホスホリパーゼCの活性化はKIAA1005によっては抑制されず、TP受容体特異性を示した。一方ヒトアストロサイトーマ細胞(1321N1)における内因性のTP刺激によるIL-6 mRNA発現の亢進をKIAA1005は強く抑制した。細胞膜のTP受容体を[3H]SQ29548結合により解析すると、TPαおよびTPβの細胞表面量(Bmax)がKIAA1005の発現によって減少した。これらの結果を総合すると、KIAA1005はTPシグナル伝達を負に制御していることが考えられ、その一つの作用機構としてTP受容体の細胞膜発現を抑制している可能性が示唆された。
日本産キリギリス類の分化に関する研究

日本産直翅目昆虫の中ではキリギリス科がもっとも分化したと思われる.今回の調査ではこの科のうちヒメツユムシ亜科とキリギリス亜科の種について検討し,種分化の研究を行った.結果は次のようである.1.八重山諸島におけるPhlugiolopsis属ヒメツユムシの発見.この種は今回記載された種であるが,本属の昆虫は,従来,ロンドン郊外のキュー植物園のシダ温室からのみ知られていて,これ以外には発見されていないものであった.それが今回の発見によって,本属が東洋区系由来であることが証明されたことにより,いわゆるキュー植物園種も東洋区由来にちがいないと推定される.2.ヒメツユムシ亜科のLepto teratura属の琉球列島における種分化.この属のヒメツユムシ類は,これまで本州のみから知られていたが,今回の調査で,琉球列島に分布することが明らかになった.琉球列島のもののうち,沖縄産2種は同所的に生ずるもののごとくであるが,両者はひどく異っていて,それぞれヨナヒメツユムシとヨナハナヒメツユムシと命名された.一方,八重山諸島中石垣島・西表島両島に分布するものは同一の種で,ヤエヤマヒメツユムシとしたが,台湾のTaiwanaに近いものである.これら種の関係と琉球列島の地史にまとずき,琉球列島におけるLeptoturaの種分化について考察した.3.対馬産の大形キリギリス類の1種について.対馬に森林依存の大形のキリギリス類の1種が生息するが,韓国産の近縁種と比較し,新種と判断されたので,記載を行い,また大陸からの侵入径路について推定した.日本産直翅目昆虫の中ではキリギリス科がもっとも分化したと思われる.今回の調査ではこの科のうちヒメツユムシ亜科とキリギリス亜科の種について検討し,種分化の研究を行った.結果は次のようである.1.八重山諸島におけるPhlugiolopsis属ヒメツユムシの発見.この種は今回記載された種であるが,本属の昆虫は,従来,ロンドン郊外のキュー植物園のシダ温室からのみ知られていて,これ以外には発見されていないものであった.それが今回の発見によって,本属が東洋区系由来であることが証明されたことにより,いわゆるキュー植物園種も東洋区由来にちがいないと推定される.2.ヒメツユムシ亜科のLepto teratura属の琉球列島における種分化.この属のヒメツユムシ類は,これまで本州のみから知られていたが,今回の調査で,琉球列島に分布することが明らかになった.琉球列島のもののうち,沖縄産2種は同所的に生ずるもののごとくであるが,両者はひどく異っていて,それぞれヨナヒメツユムシとヨナハナヒメツユムシと命名された.一方,八重山諸島中石垣島・西表島両島に分布するものは同一の種で,ヤエヤマヒメツユムシとしたが,台湾のTaiwanaに近いものである.これら種の関係と琉球列島の地史にまとずき,琉球列島におけるLeptoturaの種分化について考察した.3.対馬産の大形キリギリス類の1種について.対馬に森林依存の大形のキリギリス類の1種が生息するが,韓国産の近縁種と比較し,新種と判断されたので,記載を行い,また大陸からの侵入径路について推定した.本年度の日本各地の気象は、昆虫類の成育にとって甚だ悪条件がつづいたと言え、各地で成虫の発生が遅れた。そのためキリギリス類の調査時期の選定が甚だ困難であった。本年度の調査でもっとも重点をおいたのは、分布地が北海道道南部と推定されるヒメツユムシの一種であったが、二度の北海道調査でも、その実体の解明にはいたらなかった。しかしながら、新たにこの種の別種を得、北海道にもヒメツユムシ類が生息することだけは確認した。再度、道南部の調査を試みたいと考えている。次に、本年度、上記研究課題で研究を行ったもので、発表したものについて述べる。どちらも日本昆虫学会の機関誌「昆虫」誌上に掲載された。1.琉球列島八重山諸島に分布するヒメツユムシ一種が、Phlugiolopsis属に属することをつきとめ、これを報告した。この種は、島としての成因の古い西表島と石垣島両島にのみ分布するものと思われ、いわゆるこれらの島の固有種で、昼なお暗いジャングル内の樹上に生息している。本種を研究した結果、1940年にロンドン近郊のキュー植物園の熱帯温室から発見記載された、いわゆる"キュー植物園種"と呼ばれるPhlugiolopsis henryiに極めて近い種と考えられた。キュー植物園種は熱帯温室にのみみられたことから、いずこからか英国へ侵入したと考えられ、かつ長い間その原産地の知られない種であった。今回の琉球列島からの本属の発見は、中国大陸亜熱帯圏に同属のものがいるらしいと推定されることと併せて、キュー植物園種が東洋熱帯または亜熱帯から植物についてロンドン近郊へ運ばれたのであろうと推定された。2.対馬に産する大形キリギリス類の一種を、朝鮮半島の材料と比較して、新種として認定し、発表した。対馬の固有種と考えられ、その系統に関して論考した。おそらく最後の海退時に対馬へ侵入したのであろう。
MRIによる下歯槽神経障害の定量的評価法の確立

研究の意義:下歯槽神経は、歯科臨床において最も損傷される可能性が高い神経の1つである。下歯槽神経の走行やその状態を正確に評価することは、下歯槽神経障害の診断やその治療効果判定のために重要であり、MRIにより非侵襲的に下歯槽神経の病態および形態を評価することを目的とした。健常者の下歯槽神経の走行や状態をMRIにて評価する基礎的研究は成果をあげており、今後その手法を下歯槽神経支配領域に神経障害を有する患者に適応し、下歯槽神経障害を客観的・定量的に評価する。現在の状況:研究者の施設異動があり、異動先施設のMRI装置上の問題によりその解決に予想以上の時間がかかっている。診療放射線技師の協力のもと、実験用のファントムを作成し、拡散強調画像と拡散テンソル画像を取得しADC (Apparent Diffusion Coefficient)、Average ADC、FA(Fractional Anisotropy)を計測している。計測終了後、それらの値の頑強性や再現性に関して統計学的に検討する。現在までに、ファントムを使用しMRI装置で使用できる最適な脂肪抑制法を正規化順位法で視覚評価した。その結果、通常のT1強調像、T2強調像を含めた頭頸部MRI撮像の際には、不均一性に関して、視覚評価の順位は上位からSTIR, IDEAL, CHESSでありSTIRとIDEALの間で統計学的な有意差を認めた。コントラストに関してはCHESS, IDEAL, STIRでありIDEALとSTIR間で統計学的な有意差を認めた。また頭頸部では歯科金属の影響を受けることが多いため、歯科補綴物を封入したファントムを使用しアーチファクトの影響も考慮した。その結果、上位からSTIR, IDEAL, CHESSであったが、統計学的な有意差を認めなかった。研究者の施設異動および異動先施設のMRI上の問題の解決に予想以上の時間がかかっている。理由として、1.当初は3T MRIを使用予定であったが、1.5T MRIの利用となった。2.MRI撮像パラメーターは前施設において最適化されたものであり、現在の施設において最適化するためにはファントム実験から施行することが最適と考えられた。3.当該施設において健常者のリクルートが以前の施設より困難である。以上の3点が挙げられた。現在、診療放射線技師の協力のもと、まずは倫理的な問題のないファントムを使用した実験から施行している。健常者での検査、下歯槽神経障害を有する患者へと発展させていく予定である。しかしながら、拡散強調像、拡散テンソル画像に関しては通常のT1強調像、T2強調像と使用できる脂肪抑制法も異なるため、今後、スライス厚とMPG軸数、b値、加算回数などのパラメーターを変化させて撮像を行い、ADC、Average ADC、FAに対する影響を検証する。次年度は、ファントムを使用した実験から、健常者での検査、下歯槽神経障害を有する患者へと発展させていく予定である。現在の施設にある1.5T MRIで、下歯槽神経撮像における3D MRI、拡散強調像および拡散テンソル画像の適切な撮像パラメーターを検討するためファントム実験から施行する。ファントム実験では診療放射線技師の協力を得ながら進めていき、当該MRIにおける、最適な3D MRI撮像法、DWI、DTIの適正化(スライス厚、MPG軸数、b値、加算回数など)と進めていく予定である。

3.当該施設において健常者のリクルートが以前の施設より困難である。以上の3点が挙げられた。現在、診療放射線技師の協力のもと、まずは倫理的な問題のないファントムを使用した実験から施行している。健常者での検査、下歯槽神経障害を有する患者へと発展させていく予定である。しかしながら、拡散強調像、拡散テンソル画像に関しては通常のT1強調像、T2強調像と使用できる脂肪抑制法も異なるため、今後、スライス厚とMPG軸数、b値、加算回数などのパラメーターを変化させて撮像を行い、ADC、Average ADC、FAに対する影響を検証する。次年度は、ファントムを使用した実験から、健常者での検査、下歯槽神経障害を有する患者へと発展させていく予定である。現在の施設にある1.5T MRIで、下歯槽神経撮像における3D MRI、拡散強調像および拡散テンソル画像の適切な撮像パラメーターを検討するためファントム実験から施行する。ファントム実験では診療放射線技師の協力を得ながら進めていき、当該MRIにおける、最適な3D MRI撮像法、DWI、DTIの適正化(スライス厚、MPG軸数、b値、加算回数など)と進めていく予定である。ボランティアを対象とした撮像を予定していたため、3TMRI使用料とボランティアへの謝礼を考えていたが、現在の施設の1.5Tを使用することとしたため、人件費・謝礼に差異が生じた。今後は学会参加費や英文校正費、論文投稿費として使用する予定である。
カンキツ属植物における多胚発生制御遺伝子の同定とその多様化に関する研究

植物におけるアポミクシスの分子機構を解明するため、ポジョショナクローニング法を適用して、カンキツ珠心胚発生の制御に関わる遺伝子の同定を試みた。第1連鎖群上の原因遺伝子座領域に対応するゲノム領域380 kbの配列を決定し、この領域における多型分化を解析した。原因遺伝子座領域に検出されたORFについては、多胚および単胚間での構造および発現比較した。また、これらと体細胞胚誘導時における発現遺伝子との関連を解析した。植物の無性胚発生に関わる遺伝子は未だに同定されていない。珠心胚発生により多胚種子を形成するカンキツでは、その遺伝子座の領域の詳細なマッピングが進められ、遺伝子の同定が期待される。そのためアプローチとして、多胚性制御遺伝子の座乗するカンキツ第1連鎖群上の領域をカバーするゲノム配列決定を目標とし、DNAマーカーにより'宮川早生'に由来するBACクローンを選抜した。'宮川早生'は胚性に対してヘテロ接合型であるため、BACクローンをSNPにより多胚性および単胚性と関連する2群に分別して、それぞれの胚性に対応するコンティグを作成した。新型シーケンス法により多胚性ハプロタイプ配列を高精度に解析し、次にギャップ部位を埋めることで380kbの全配列を決定した。遺伝子配列予測(RICEGAAS)により領域内に72の候補遺伝子ORFを検出した。ここで検出されたORFの配置は既にゲノム配列の公表されたブドウと高度に保存されていることが明らかになった。同時に単胚性ハプロタイプについても塩基配列決定を進めており、胚性と関連するゲノム塩基配列の構造差を検出してきている。一方、遺伝子発現からの制御遺伝子を同定するアプローチとして、多胚性品種'ポンカン'のカルス細胞からの胚誘導の実験系を用いて、胚形成過程における遺伝子発現のプロフィールの解析を開始した。その結果、培養による体細胞胚の発達段階と関連して変動するいくつかの転写因子遺伝子を検出した。また、多胚性遺伝子座領域に検出されたORFには、開花時における珠心と培養系における胚形成誘導時とで発現様式の異なるものが検出された。これらのゲノム配列および予測遺伝子の発現特性の解析が、制御遺伝子の同定と利用に繋がるものと期待される。これらの知見について現在論文の取りまとめ中である。植物の繁殖に重要な役割をもつ無性胚発生に関して、その発生を制御する遺伝子は同定されていない。本研究ではカンキツの珠心胚発生に関わる遺伝子を対象として、その単離と同定を目的に研究を行った。そのためのアプローチとして、連鎖地図に基づくポジショナルクローニングと珠心胚分化過程における遺伝子発現のプロフィール比較の手法を適用した。多胚性制御遺伝子の座乗するカンキツ第1連鎖群上のゲノム領域について、多胚性ハプロタイプを担架するBACクローンにより380kbの配列を決定した。この領域には遺伝子配列予測(RICEGAAS)により72の候補遺伝子ORFが予測された。対象遺伝子を限定するため、本年度は単胚性ハプロタイプを担架するBACクローンの塩基配列決定を行い、ハプロタイプ間の構造差を解析することで候補遺伝子の絞り込みを行った。この領域についてヘテロ接合型である'宮川早生'に由来するBACライブラリーから、単胚ハプロタイプを構成する3クローンを選抜し、新型シーケンサーによる配列決定を行った。得られた66,514の塩基配列について、多胚ハプロタイプ配列を参照してアセンブルし,単一のコンティグを得た。このコンティグ配列は、多胚配列全長の87%をカバーした。単胚ハプロタイプに予測されたORF配列には、エクソンーイントロン結合配列の変異、終止コドンの生成など遺伝子の構造の関わる変異が検出された。これらの配列差について、カンキツ品種に適用して胚性との関連解析を行った。次に、予測されたORFのうち、転写に差異が生じると予測される遺伝子を対象にして、多胚性品種および単胚性品種の珠心における発現プロフィールの比較解析を行った。また、転写制御遺伝子について、細胞培養による体細胞胚の発達段階と関連を解析した。これらの知見について学会発表を行い、また、論文を投稿中である。無性胚発生は植物の繁殖に重要な役割をもつため、その制御に関わる遺伝子の同定を目標に解析研究を行った。本研究ではカンキツの珠心に由来する体細胞胚発生に関わる遺伝子を研究対象として、連鎖地図に基づくポジショナルクローニングと遺伝子発現のプロフィール解析の方法からアプローチした。前年度までの解析で、多胚性制御遺伝子を第1連鎖群上約380kbに限定して、塩基配列を決定し、72の候補遺伝子ORFを予測した。これらのORFを対象遺伝子の候補として、単胚/単胚性ハプロタイプのゲノム配列比較を行い、構造差を検出した。本年度は、構造差に基づいて以下の解析を行った。1.胚性の異なるハプロタイプ配列に構造差のあった15ORFについて、発現比較を行った。多胚品種3点と単胚品種3点における胚珠の発育に伴う発現変動解析で胚性に共通したものの抽出を試みた。

これらには、胚形成と関連を推察される転写因子遺伝子などが含まれたが、胚性と関連した発現プロフィールを示すものは検出されなかった。シロイヌナズナに形質転換し、過剰発現させても発育への影響は観察されなかった。また、カンキツ培養細胞から体細胞胚誘導に伴って発現変動する遺伝子に、この領域との明瞭な関連を示さなかった。2.両ハプロタイプのゲノム配列には、多数の挿入欠失が33カ所に検出された。この配列差のうち、明瞭に識別可能な15カ所についてSTSプライマーを作成し、カンキツ54品種の多型解析に適用した。その結果,胚性と高い関連を示す挿入欠失型の出現は、多胚性遺伝子領域と推察された380kbの中央部にある150250kbの領域に高い連鎖不平衡を示し、これにより対象領域を約1/2に収斂させることができた。また、この領域では、単胚性品種のもつハプロタイプには多様な配列分化が認められたのに対して、多胚性ハプロタイプ間における差は極めて小さいことが分かり、多胚性遺伝子分化を考察し、目的遺伝子を単離するための重要な情報となった。
スケーラブルな並列数値パッケージの研究

並列計算機上で数値計算を効率良く実行するための手法について研究した。重要な点は、並列度が高くなった場合に並列化効率が下がらないことであり、これをスケーラビリティと呼ぶ。大規模な数値計算では、多くの場合反復法が用いられるので、見かけの並列度が高くても、収束が遅くなっては目的の解が得られるための時間は減少しない。そのため、本研究では偏微分方程式とくに拡散方程式をとりあげ、スケーラブルなアルゴリズムの可能性を追求した。MGCG(マルチグリッド前処理つき共役傾斜法)は、矩形領域の熱伝導問題の差分法に対して有効であることをしめしたが、本研究では、非矩形領域の移流拡散問題の有限要素法から得られる方程式に対し、MG Bi-CGSTAB法を適応し、その有効性を実証した。更に、熱伝導率の極めて低い障壁で迷路のように区切られた領域の熱伝導問題にも有効であることを示した。これは、本手法が、かなりたちの悪い問題に対してもロバストであることを示唆し、パッケージ化するために極めて適していることを示している。
リン酸形燃料電池の工学的基礎理論

本研究は、リン酸形燃料電池の材料特性、構造、運転環境をもとに燃料電池内の電圧・電流、温度及びガス濃度分布を解析する理論を開発及び拡張し、機器の最適設計、運転方法の改善、あるいは異常時の特性予測などに広く活用することを目的としている。1.平成3年度には、燃料電池が遭遇する各種環境条件すなわち保管、停止、負荷変動、定常運転などに対応して、特性解析を行うためのセル要素の基礎データを取得した。すなわち、従来は空気と水素を供給した場合のセル特性しか報告されていないが、水素-水素、窒素-窒素、空気-空気、空気-窒素、窒素-水素など想定されるあらゆるガスの組み合わせについて、特性解析の基礎データとなるセル要素の電圧-電流特性及び腐食発生の指標となる炭酸ガス発生量を実験により明らかにした。2.平成4年度には、大型の燃料電池を用いて急激な負荷変動実験を行い、過渡状態における燃料電池内の特性変化を初めて測定した。燃料供給の遅れが大きくなると、燃料電池内部に水素不足箇所が発生し、局部的な腐食電流が流れることが、理論と実験により確かめられた。腐食が発生しない過渡応答限界を記述する理論を開発し、実験と合致することを示した。3.平成3年度後半から、燃料電池で発生する水分の移動メカニズムについて研究し、水分移動メカニズムを従来の特性解析理論に組み込むことにより、高精度の特性解析理論を完成させ、排出水分の予測など応用範囲拡大を計った。4.特性解析を適用する応用研究として、燃料電池内部にある局部短絡を検出する方法に関する研究、および燃料電池を長期間運転し、リン酸が不足してきた状態で起こる現象に関する研究を行った。以上の研究成果は、電気学会論文誌Bに6編の論文として発表した。本研究は、リン酸形燃料電池の設計や研究開発に役立つ工学的基礎理論を作る事を目的としている。この理論は、リン酸形燃料電池の材料特性、構造、運転環境をもとに燃料電池内の電圧・電流、温度、及びガス濃度分布を求めるものである。正常な燃料電池の定常状態における特性解析は既に報告しているが、本研究では起動,負荷変動などの非定常状態あるいは欠陥のある燃料電池の特性解析も行えるよう理論の拡張を行うものである。本年度は当初計画通り次のような研究成果を得た。1.燃料極と空気極にそれぞれ水素と水素,窒素と窒素,空気と空気,水素と窒素,窒素と空気及び水素と空気を供給した場合の電圧・電流特性及び腐食反応による炭酸ガス発生量を測定した(詳細は発表論文参照)。これらは、燃料電池が遭遇する各種環境条件すなわち定常,起動,負荷変動あるいはセル欠陥状態などにおける特性予測を行うための基礎デ-タとして必要不可欠なものである。2.電気化学反応によって発生する水分を測定する技術を開発し、空気極試験の水分排出特性を明かにした。多くの水分は空気と共に排出されるが、一部の水分はリン酸側へ移動しリン酸中に畜積されることが分かった(詳細は発表論文参照)。平成4年度はこの技術を用いて、セル内で発生する水分が空気極と燃料極に分配されるメカニズムを明かにし、セル内ガス濃度分布の計算精度向上を計る。3.欠陥セルの例として、セル内局部短絡がある場合とリン酸消失により空気と燃料ガスの混合が生じた場合の特性を調べた(詳細は発表論文参照)。4.起動過程における燃料電池内の過渡的な特性に関しては、平成3年3月に発表済みである。負荷変動時の過渡的な特性に関しては、平成4年度に実験予定である。

平成3年度には、燃料電池が遭遇する各種環境条件すなわち保管、停止負荷変動、定常運転などに対応して、特性解析を行うためのセル要素の基礎データを取得すると共に、燃料電池内で発生する水分の移動メカニズムを明らかにした。本年度は、大形の燃料電池を用いて急激な負荷変動実験を行い、過渡状態における燃料電池内の特性変化を初めて測定した。燃料供給の遅れが大きくなると、燃料電池内部に水素不足箇所が発生し、局部的な腐食電流が流れることが、理論と実験により確かめられた。腐食が発生しない過渡応答限界を記述する理論を開発し、実験と合致することを示した。これらの結果は、燃料電池の負荷応答運転のために不可欠な知見であり、電気学会論文誌Bに成果として発表した。平成3年度に明かにした水分移動メカニズムを従来の特性解析理論に組み込むことにより、高精度の特性解析理論を完成させた。この理論は、燃料電池内の特性分布を予測するのに有効であるだけでなく、リン酸形燃料電池発電プラントの熱・物質収支を計算するために必要な燃料電池からの排出水分の予測にも役立つものである。この特性解析理論は、現在電気学会論文誌Bに投稿中である。
圧縮性乱流渦の音波受容性・放出性の研究

流体の圧縮性、特に音波が乱流渦に及ぼす影響を調べてきた。昨年度までの一様等方圧縮性乱流の数値シミュレーションに加え、今年度はケルビン・ヘルムホルツ不安定性を伴う混合性乱流の研究に着手した。圧縮性の影響を調べるための参照対象として非圧縮性流体の混合性乱流も行い、これとの対比で音波の放出性、圧縮性の影響などを調べた。圧縮性の混合乱流、一様せん断乱流では、レイノルズ応力項による運動エネルギーの生成低下や、圧力・速度発散相関項の働きなどが圧縮性による乱流揺動成長の低減の原因として挙げられている。本研究の主たる課題はこのような圧縮性の影響における渦構造の影響であり、これまでの一様等方乱流に見られたような、圧縮性の影響を受けた渦波の発生などに注目している。混合性乱流の解析の第一段階として、まず非圧縮性乱流のレイノルズ応力項によるエネルギー伝達機構を詳細に解析した。この解析には荒木(岡山理科大学)が開発した非発散性正規直交ウェーブレットを利用した。このウェーブレットは非発散性ベクトル場を構成するため、非圧縮性の速度場の解析に向いている。また、圧縮性成分の分離は、ヘルムホルツ分解によって用意に実現できるのが特長である。これまでの解析から、混合渦の発生に先立って、渦構造の成長を示唆するエネルギー伝達が発見されている。これらの結果については、第19回数値流体力学シンポジウムにおいて、荒木(前出)及び三浦の連名で発表した。現在、マッハ数0.2から1.0程度までの亜音速・遷音速領域における混合層シミュレーションを終えたところである。昨年度までに発見した音響的な渦波の発生機構がこのような混合乱流においてどのような役割を果たすか、特に圧縮性による乱流発達の抑制との関連について集中的に調べている段階であり、その成果は今後の国際会議等で発表の見通しである。圧縮性乱流における音波の受容性、放出性研究の第一段階として、乱流中の渦構造と音波の関係を調べた。研究の主な手段は一様等方圧縮性乱流の直接数値計算と、渦の同定・可視化手法[1,2]である。数値計算の格子点数は256^3-1024^3、乱流マッハ数は0.4-0.01、テイラー長尺度によるレイノルズ数は60程度である。減衰性一様等方圧縮性乱流のシミュレーションにおいて、管状渦構造は非圧縮性乱流の場合と非常に似通った時間発展を遂げる。しかし、管状渦構造の旋回中心軸上の渦度および渦伸張の分布を見ると、非圧縮性乱流には見られない微細な振動が発生していることがわかる。この振動の特徴を調べたところ、その波長はほぼ渦芯の直径程度であることなどがわかった。他方、渦音の発生源もまた渦中心軸付近に局在化していることから、この圧縮性乱流特有の振動は音波に非常に密接に関連している。さらに、速度場のヘルムホルツ分解により、この振動が音波そのものではないことが示される。また、渦軸上の波動の分散関係を調べると、その角振動数は音波よりも非常に遅い。以上の解析から、渦軸上に観測される振動は渦波であり、これが音波と連成的に成長しているものと結論付けられる。このような渦波の存在は、同じ振動数をもつ音波を外部から入射させた場合に共鳴するなどの相互作用が期待され、乱流の音波受容性についての重要な知見となった。この成果は国際会議Turbulence and Shear Flow Phenomena (TSFP-3,June 2003,Sendai)において口頭発表の後、J.Turbulence誌(Online Journa)に掲載された[3]。圧縮性乱流渦の音波放出性・受容性について、昨年度に引き続き研究を行った。研究の主な手段は一様等方乱流の直接数値計算と渦の同定・可視化手法である。今年度は、昨年度実行した減衰性一様等方乱流の数値計算(格子点数1024^3)で得られたデータについて詳細に調べた。また、圧縮性渦の運動解析の応用として、核融合実験装置LHD中の圧縮性MHD方程式直接数値計算を行い、そこに現れる圧縮性渦の発生と挙動について調べた。格子点数1024^3の圧縮性・減衰性一様等方乱流の直接数値計算データより渦を同定し、その渦上に現れる音響的な振動構造(渦波)について詳細な解析を行った。渦波の伝播を個別追跡し、その分散関係を調べたところ、大別して2種類の波動が混在していることがわかった。一方は音波の分散関係に従い、他方は非圧縮性渦波の分散関係に近いものであることがわかった。LHD中の圧縮性MHD方程式の直接数値計算では、圧縮性の存在が不安定性の成長率を非圧縮性の場合の1/3まで低下させるなど、これまでの圧縮性乱流で得られた結果と同様の結果が得られた。この圧縮性を伴う渦の運動により圧力の流体運動的輸送が行われ、不安定性の非線型飽和に繋がることなどを明らかにした。圧縮性の混合乱流、一様せん断

乱流では、レイノルズ応力項による運動エネルギーの生成低下や、圧力・速度発散相関項の働きなどが圧縮性による乱流揺動成長の低減の原因として挙げられている。本研究の主たる課題はこのような圧縮性の影響における渦構造の影響であり、これまでの一様等方乱流に見られたような、圧縮性の影響を受けた渦波の発生などに注目している。混合性乱流の解析の第一段階として、まず非圧縮性乱流のレイノルズ応力項によるエネルギー伝達機構を詳細に解析した。この解析には荒木(岡山理科大学)が開発した非発散性正規直交ウェーブレットを利用した。このウェーブレットは非発散性ベクトル場を構成するため、非圧縮性の速度場の解析に向いている。また、圧縮性成分の分離は、ヘルムホルツ分解によって用意に実現できるのが特長である。これまでの解析から、混合渦の発生に先立って、渦構造の成長を示唆するエネルギー伝達が発見されている。これらの結果については、第19回数値流体力学シンポジウムにおいて、荒木(前出)及び三浦の連名で発表した。現在、マッハ数0.2から1.0程度までの亜音速・遷音速領域における混合層シミュレーションを終えたところである。昨年度までに発見した音響的な渦波の発生機構がこのような混合乱流においてどのような役割を果たすか、特に圧縮性による乱流発達の抑制との関連について集中的に調べている段階であり、その成果は今後の国際会議等で発表の見通しである。
パーソナル・コンピューターによる関係型データベース会計システムの開発

60年度はdBASE【II】により、関係データベース会計システムを実現しようと試みたが、成功したとは言いがたい。その理由は、60年度報告で指摘したように、dBASE【II】が関係データベース"まがい"ないし"もどき"ではあっても、関係データベースではなかったからである。61年度はRBASE5000を購入し、関係データベース会計システムを再度開発した。RBASE5000はデイトの著書による基本的関係操作を実行しうるので、関係データベースと一応認めることができる。このRBASE5000すなわち関係データベースは、パソコン会計システムにとり大変重要な意味を持つことが明らかになった。第一に、RBASE5000により、会計処理は個別ファイル処理から、多次元データ空間での自由なファイル処理へ変化したのである。第二に、この多数ファイルの自由な操作によって、意思決定における会計データと非会計データの接合が容易に実現するようになる。ところで、こうした高度なファイル処理,情報操作はRBASE5000自体がインタープリーター方式を採用していることのほか、フロッピーディスクのみによる方法では処理速度が遅く、非実用的であったが、ハードディスクとRAMディスク,殊にRAMディスクが10メガバイト程度まで使用できるので、パーソナル・コンピューターによる関係データベース会計システムは実用性を保証されたと断言しうる(ただし、61年度研究では1.5メザバイトのRAMディスクしか実験できなかった)。以上の諸点を最も基本的な線にそくして、報告書「関係データベース会計システムの基礎」にまとめておいた。」60年度はdBASE【II】により、関係データベース会計システムを実現しようと試みたが、成功したとは言いがたい。」