hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
疑似宇宙環境における基本的生命現象の可視化

a.可変重力環境における基本的生命現象の可視化・細胞周期プローブ:Fucci、Fucci(CA)、酸化ストレスプローブ、カルシウムプローブ:G-CaMP6sを恒常的に発現する細胞株を作製し、地球環境における細胞の増殖パターンやストレス応答について時空間情報のデータ化を進めた。細胞種によって、また細胞の環境によって応答が異なる事が分かってきた。・複数の細胞現象を同時に可視化することを目的に、プローブの多色化を進めた。DNA損傷部位可視化プローブ(本領域・原田先生より供与)やDsup(本領域・國枝先生より供与)についてはシアン色蛍光(mTurquoise2-53BP1M, Dsup-mTurquoise2)のタイプを準備した。これらを単独で、または上記プローブと同時に恒常的に発現する細胞を作製した。領域会議でこれら蛍光プローブの実用的利用の提案を行い、また宇宙環境実験系の提供および設計を目的とした連携を図った。・疑似微小重力環境下での蛍光イメージングを実現する為の蛍光顕微鏡システム開発について検討を進めた。具体的には、一般的なスマートフォンに搭載されているカメラを用いる方法と、超小型蛍光顕微鏡を独自に組み立てる方法の2つのアプローチより、多色蛍光を取得可能なシステムの開発を進めた。b.宇宙放射線被曝擬似実験等による、細胞ダメージの可視化・領域内より宇宙放射線被曝擬似実験環境の提供を受け、上記と同じFucciや酸化ストレスプローブ発現細胞で細胞動態を可視化することを目標に、まずUV-Cを用いた細胞ダメージの可視化実験を行った。細胞死に向かうきっかけはUV damageを受けた際、その細胞が居た細胞周期と相関があることが確認され、論文発表した。ここで確立した実験系を領域内連携により、鉄線(中村先生)、炭素線およびX線(高橋先生)などの影響を観る実験系へと応用を開始した。29年度が最終年度であるため、記入しない。a.可変重力環境における基本的生命現象の可視化<地球環境基本データの蓄積>Fucciおよび酸化ストレスプローブを恒常的に発現する細胞株を複数種作製し、地球環境における細胞の増殖パターンやストレス応答について時空間情報のデータ化を進めた。細胞種やその環境によって応答が異なる事が分かってきた。連携研究を視野に、蛍光を保持したままの細胞固定法の確立を行った。<宇宙環境実験>擬似微小重力実験(3Dクリノスタットなど)の実験環境提供について領域内に連携を図った。また、北川鉄工よりZeromoの1か月間の貸与を受けプレ実験を行った。疑似微小重力を体験した細胞では、酸化ストレスプローブが反応する様子が見られた。今後詳細な解析へと進めていく。b.宇宙放射線被曝擬似実験等による、細胞ダメージの可視化領域内より宇宙放射線被曝擬似実験環境の提供を受け、Fucciや酸化ストレスプローブの発現細胞で細胞動態を可視化することを目標に、まず研究室で保有しているUV crosslinkerを用いた細胞ダメージの可視化実験をすすめた。time-lapse imagingを継続したままUV照射を与える実験系を構築した。UVダメージに対して2日間以上の細胞動態を追跡することで、2.4 J/m2までの照射量では、一部S期遅延などを経過しつつも通常の細胞周期に復帰すること、しかし8 J/m2を超える照射量では、細胞の応答は急激に変化し、強いS期停止および細胞核の巨大化がおこること、さらに80 J/m2以上では、数時間のうちに多くの細胞が細胞死にいたること、などが明らかとなった。また、細胞死に向かうきっかけはUV damageを受けた際、その細胞が居た細胞周期と相関があることが確認された。擬似微小重力実験(3Dクリノスタットなど)の実験環境提供について領域内に連携を図り、2017年4月に実験装置の貸与を受けることとなった。擬似微小重力実験においては2016年度はデモによるプレ実験に留まったが、2017年度にはイメージング培養容器及び、蛍光イメージング装置の検討と並行して、微小重力環境における実験を重点的に推進していくこととする。また宇宙放射線被曝擬似実験環境の提供に関しても、2017年度に共同研究を開始できる見通しが立っている。2016年度に行ったUV damageに対する細胞の応答の可視化実験のノウハウを適用し、宇宙放射線被曝に対する細胞応答の可視化をスムースに進めていけると考えている。

具体的には、一般的なスマートフォンに搭載されているカメラを用いる方法と、超小型蛍光顕微鏡を独自に組み立てる方法の2つのアプローチより、多色蛍光を取得可能なシステムの開発を進めた。b.宇宙放射線被曝擬似実験等による、細胞ダメージの可視化・領域内より宇宙放射線被曝擬似実験環境の提供を受け、上記と同じFucciや酸化ストレスプローブ発現細胞で細胞動態を可視化することを目標に、まずUV-Cを用いた細胞ダメージの可視化実験を行った。細胞死に向かうきっかけはUV damageを受けた際、その細胞が居た細胞周期と相関があることが確認され、論文発表した。ここで確立した実験系を領域内連携により、鉄線(中村先生)、炭素線およびX線(高橋先生)などの影響を観る実験系へと応用を開始した。これまでに我々は、“実験を行う際の細胞の密集度や足場環境によっても、細胞は異なる反応を示す"という現象を目撃してきた。蛍光プローブで経時的にイメージング(FACSソーティングも併用)を行うことで、その一瞬の細胞のHeterogeneityを可視化することができる。時間情報、空間情報、重力情報の視点から、宇宙環境における細胞動態の理解をすすめていく。今後は、実際に3Dクリノスタットを導入していく。Fucciおよび酸化ストレスプローブの恒常発現細胞株に加え、Fucciマウスから採取する破骨細胞や造血幹細胞についても3Dクリノスタットを用いて微小重力への応答を確認していく。UV damage実験において確立した実験系を、宇宙放射線被曝擬似実験に応用すべく、領域内に実験環境の提供を図る。29年度が最終年度であるため、記入しない。
CA環境下におけるエチレン作用を考慮した生鮮農産物の呼吸反応解析

本研究では,エダマメ,ミニトマトを対象に,種々の温度,O_2濃度下でのO_2吸収,CO_2排出速度を通気法により測定した。過去に報告されているMichaelis-Menten酵素反応速度論に基づくモデルに実測値をあてはめたところ,極めて高い適合性が認められた。反応動力学定数K_m,V_<max>がArrhenius型の温度依存性を示したことを考慮し,呼吸速度に対する温度効果についても記述できるようモデルを拡張した。このモデルによって,種々の温度,O_2濃度下でのエダマメの呼吸速度が予測可能となった。さらに,低酸素環境に対するエダマメやミニトマト果実の呼吸やエチレン生成の応答性について検討した。酸素濃度を21%から3.5%へと急減させた前後におけるの酸素吸収,二酸化炭素排出およびエチレン生成速度を測定した。低酸素環境に変更することによってガス代謝速度は指数関数的に減少すると仮定した数学モデルは実測値とよく一致し,新たに定義された応答速度定数Kによって低酸素濃度に対する各ガス代謝の応答性の定量的な評価が可能となった。K値は,酸素吸収,二酸化炭素排出,エチレン生成でそれぞれ異なり,特に二酸化炭素排出の応答が鈍いことが明らかとなった。また,二酸化炭素排出のK値は青果物の種類,熟度によっても異なった。これらの結果は,酸素,二酸化炭素,エチレン自体の特性の違いや,青果物の果皮面や果肉の組織構造の違いに由来するものと考えられた。生鮮農産物は,収穫後にもその生命活動を維持しているところに大きな特色がある。特に「呼吸速度」は組織内での生理反応をも含んだ個体トータルの状態を反映した唯一のシグナルであり,逆にこれを人為的に制御することで,安定的にかつ高品質な農産物を流通させることが可能となる。これまで呼吸制御に関する多数の研究がなされてきたが,品目を越えた普遍的呼吸抑制機作の解明までには至っていない。標記の研究では,酸素,二酸化炭素,エチレン濃度の異なる環境を計画的に創出し,種々のガス環境下における呼吸速度を計測,検討し,このことを明らかにすることを目的としている。本年度においては,修正ガス環境下での呼吸速度を,精密かつ効率的に計測できる自動ガス代謝計測装置を開発し,低酸素濃度に変更したガス環境での,ブロッコリー,ミニトマト,エダマメについて酸素吸収速度,二酸化炭素排出速度およびエチレン生成速度を計測した。その結果,酸素濃度の急減に対し,まず酸素吸収速度が,ついでエチレン生成速度,二酸化炭素排出速度の順に抑制されることが明らかとなり,呼吸の応答性に対する環境要因の影響は,ガス濃度差よりもむしろ温度による影響が強いことが示唆された。また,エダマメの修正ガス組成に対する呼吸反応に関して,Michaelis-Menten酵素反応速度論に基づいた解析を行い,その反応動力学定数のArrhenius型温度依存性を認めた上で,種々の温度,ガス環境における呼吸速度を予測しうる数学モデルを構築した。
縮合的連鎖重合による新規精密縮合系高分子の合成とその自己組織化

本研究はこれまで不可能であった重縮合における高分子の分子量及び分子量分布の制御を連鎖重合で進行する重縮合(連鎖重縮合)によって達成し、かつ得られた新規精密高分子のこれまでにない自己組織化現象を探索することを目的とした。この研究によってこれまで単に構成材料として主に使われてきた縮合系高分子が、ブロック共重合体のような緻密な分子アーキテクチャーの1つの構成要素として使えるようになるだけではなく、剛直な縮合系高分子を含む高分子の新しい自己組織化現象の発見が期待される。得られた研究成果は以下のとおりである。(1)芳香族ポリエーテル、芳香族ポリエステル、芳香族ポリエーテルスルホン、ポリチオフェンの分子量と分子量分布の制御に成功した。また芳香族ポリエーテルがシリコン基盤上でシリコン結晶格子を反映して球状または円盤状の自己組織体を形成することを見いだした(エピタキシー現象)。(2)分子量分布の狭い芳香族ポリアミドとポリエチレングリコール、ポリスチレン、ポリTHFとのブロック共重合体を合成した。またN-アルキル芳香族ポリアミドとN-H芳香族ポリアミドとのブロック共重合体を合成し、この共重合休がTHF中、自己組織化してマイクロメーター単位の巨大糸状組織体になることを見出した。(3)ポリスチレンに芳香族ポリアミドがグラフトした新規グラフトポリマーを合成した。(4)芳香族ポリアミドを含むスターポリマーおよびスターブロック共重合体を合成した。本年度は連鎖重縮合によるポリエーテルの合成とその自己組織化現象の検討、および分子量分布の狭いポリアミドを用いる種々のブロック共重合体の合成とその自己組織化現象の検討を行った。前者の検討では、5-シアノ-4-フルオロ-2-プロピルフェノールカリウム塩の重合を検討した。その結果、活性な求電子剤を開始剤として用いると、開始剤量に対応する理論分子量どおりのポリエーテルが狭い分子量分布(1.1以下)を保ったまま得られた。またこのポリエーテルはシリコン基盤上で球状または円盤状の自己組織体を形成することを見いだした。さらにX線回折ではシリコン上のエピタキシー現象が見られた。後者の検討では、ポリアミドとポリエチレングリコール(PEG)とのブロック共重合体の合成を検討した。その結果、連鎖重縮合によって得たポリアミドのフェニルエステル末端に市販のPEGモノメチルエーテルが塩基存在化反応し、分子量分布の狭いポリアミドーPEGブロック共重合体が合成できた。この共重合体はメタノール中で自己組織化し、ナノからマイクロ単位のミセルが形成されることを見いだした。また疎水性基を側鎖に持つポリアミドと親水性基を側鎖に持つポリアミドとのブロック共重合体も合成した。本年度は連鎖重縮合による(1)グラフトポリマーの合成、(2)スターポリマーの合成、(3)二芳香環モノマーの連鎖重縮合、(4)ポリチオフェンの分子量と分子量分布の制御、を検討した。(1)ではフェニルエステル部位を有するポリスチレンを合成し、このエステル部位を開始部位とするポリアミド合成の連鎖重縮合を行った。

その結果、ポリスチレンに芳香族ポリアミドがグラフトした新規グラフトポリマーが得られた。(2)では三官能性フェニルエステル開始剤を合成し、このエステル部位を開始部分とするポリアミド合成の連鎖重縮合を行った。その結果、三本鎖のポリアミドスターポリマーが得られた。それぞれの鎖は分子量分布狭く、分子量が制御されていることを鎖の切断実験から確認した。(3)では2つの芳香環に求核部位と求電子部位をそれぞれ有するモノマーとして、4-フルオロ-4'-ヒドロキシジフェニルスルホンの連鎖重縮合を検討した。その結果、20量体までは分子量と分子量分布が制御されたポリエーテルスルホンが得られた。(4)では2,5-ジブロモ-3-ヘキシルチオフェンのGrignard試薬とNi触媒を用いる重縮合の連鎖重合性を検討した。その結果、モノマー転化率に比例して分子量が分子量分布の狭いまま増加することよりこの重縮合が連鎖重合で進行することを明らかにした。また分子量もNi触媒の量によって制御できることを見出した。本研究はこれまで不可能であった重縮合における高分子の分子量及び分子量分布の制御を連鎖重合で進行する重縮合(連鎖重縮合)によって達成し、かつ得られた新規精密高分子のこれまでにない自己組織化現象を探索することを目的とした。この研究によってこれまで単に構成材料として主に使われてきた縮合系高分子が、ブロック共重合体のような緻密な分子アーキテクチャーの1つの構成要素として使えるようになるだけではなく、剛直な縮合系高分子を含む高分子の新しい自己組織化現象の発見が期待される。本年度は連鎖重縮合による(1)芳香族ポリアミドブロック共重合体の合成とその自己組織化、(2)スターブロック共重合体の合成とその自己組織化、(3)N-アルキル芳香族ポリアミドの立体構造の解明、(4)ポリエステルの分子量と分子量分布の制御、を検討した。(1)ではN-アルキル芳香族ポリアミドとN-無置換芳香族ポリアミドとのブロック共重合体を合成し、この共重合体がTHF中、自己組織化してマイクロメーター単位の巨大糸状組織体になることを見出した。(2)では三官能性フェニルエステル開始剤を用いて2種類のスターブロック共重合体を合成した。1つはN-アルキルが異なる芳香族ポリアミドのブロック共重合体をアームとしたもの、もう1つは芳香族ポリアミドとポリエチレングリコールのブロック共重合体をアームとしたものである。後者のスターブロック共重合体はメタノール中、自己組織化して約380nmの粒径分布の狭い粒子を形成することを動的光散乱測定と電子顕微鏡観察から確認した。(3)ではN-メチル芳香族オリゴアミドを有機合成的に逐次合成し、その単結晶のX線構造解析を行った。その結果、N-メチル芳香族オリゴアミドはモノマー単位3つで1ピッチのらせん構造をとることが明らかになった。(4)では低温で強塩基をモノマーに作用させると、エステル交換が抑制されて分子量分布の狭い芳香族ポリエステルが得られることを見いだした。
口腔staphylococciに関する分子疫学的研究

Staphylococcus aureusは、口腔常在菌の一翼を担っておるが、近年、院内感染で問題になっているMRSAは、主に鼻腔から分離され口腔からの分離報告例は少ない。鼻腔および口腔から採取したsampleを比較検討することにより、S. aureusが鼻腔および口腔に定着を起こすことの意義を明らかにするために本実験を行っている。20歳以上65歳以下の健常者をボランティアとして35名募った。鼻腔からは、滅菌綿棒によるswabで菌を採取した。健常者でのS.aureus保有率は、約64%であった。皮膚からは、手指を直接培地に押しつけ採取した。健常者でのS. aureus保有率は、約58%であった。唾液は200ulを採取し希釈せず培地に接種した。S. aureus保有率は、約51%であった。Dental plaqueからの採取は、グレーシ-のスケーラーを用い、縁上歯垢を採取しVMGAIII輸送培地中で分散しこれを希釈せず培地に接種した。健常者でのS. aureus保有率は、約14%であった。健常者からは、いずれのsampleからもMRSAは検出されなかった。また、今回分離した、S. aureusにはBacteriocin活性はみられなかった。しかし、歯垢から分離した菌株中S. epidermidisに強いBacteriocin活性を産生する菌株を検出した。本研究で得た、臨床分離の約280株について、その基本的性状を検討した。マンニトール、マルトース、トレハロース、スクロース分解能、コアグラーゼ、カタラーゼ、嫌気的グルコース分解能はいずれの菌株も陽性で共通した性状を示した。Dental plaqueからもS. aureusを分離した5症例においては、同一個人の各部位から分離した菌株を2菌株ずつ供試して菌体のEDTA可溶画分を、SDS-PAGEで比較した。12.5%の分離ゲルを用い銀染色後比較検討した結果は、各部位から分離した菌株間に大きな差異を見られなかった。このSDS-PAGEをWestern transfer後、ニトロセルロース膜上で、各種レクチンとの付着性を検討したところ、高分子量部で若干の差異が見受けられるようであるが、主要なバンドは共通しており引き続き検討が必要と思われる。
子宮内発育遅延の分子遺伝学的研究:GRB10のimprinting異常・変異解析

GRB10がインプリンティングを受けるか否かについて,胎児脳組織およびヒト第7番染色体を含むヒト・ハムスター体細胞ハイブリッドを用いて検討した.次に58例のラッセル・シルバ.症候群患者からゲノムDNAを抽出しGRB10遺伝子をPCR増幅後、変性高速液体クロマトグラフィーおよび直接シーケンシング法を用いて変異スクリーニングをおこなった.[成績](1)ヒトGRB10mRNAの発現は胎児脳組織において片親性発現であった。(2)ヒトGRB10mRNAは母由来の第7番染色体を一本含むハイブリッド細胞で発現し,父由来の第7番染色体を一本含むハイブリッド細胞で発現しなかった。(3)ラッセル・シルバー症候群患者58例中2例に,第753番塩基のヘテロの一塩基置換(C→T)によるアミノ酸置換(P95S)をアミノ末端プロリン豊富領域内に認めた.このアミノ酸置換は正常対照100例(200染色体)には認められず、母親から受け継がれていた.[考察]二つの異なる方法を用いてヒトGRB10が母性発現インプリンティング遺伝子であることを示した.ラッセル・シルバー症候群患者2例に特異的なGRB10のアミノ酸置換(P95S)が発見され,この変異が母親由来であったことからGRB10遺伝子が本症の発症に関与している可能性が示唆された.15q26-qter領域の欠失によりIGF1受容体の欠失を有する患者および11p15重複によりIGF2遺伝子およびその抑制性調節遺伝子の重複を有する患者がラッセル・シルバー症候群の表現型を呈することから、「IGF1受容体を介するシグナル伝達系の1)リガンドであるIGF2,2)IGF2の受容体であるIGF1受容体,3)IGF1受容体の結合蛋白であるGRB10のいずれかのレベルでIGF1受容体を介するシグナル伝達が遮断されるとラッセル・シルバー症候群を発症する」という発症機序に関する統一仮説を提唱した.出生前後の発育遅滞を主徴とするラッセル・シルバー症候群の10%の患者に第7番染色体の母性片親性ダイソミーを認める観察から、同染色体上の遺伝子にインプリンティングの存在が示唆されてきた.7p11.2-p12にマップされるGRB10遺伝子は、胎児発育に不可欠な成長ホルモンあるいはIGF1受容体との相互作用を通して成長抑制効果を示す.そのマウス相同遺伝子は母親由来のアレルのみから発現し、インプリンティングを受けていることから、ラッセル・シルバー症候群の有力な原因候補遺伝子と考えられた.本研究では、GRB10遺伝子のインプリンティングの有無を検討し、その発現異常とラッセル・シルバー症候群発症との関連について検討した。最初にインプリンティングの有無について検討した.GRB10遺伝子のエキソン3内に存在するポリモルフィズムを利用して判明したヘテロ接合体の胎児脳組織から、mRNAを抽出しRT-PCRをおこない、この遺伝子が片親性発現することを示した.また、ヒト体細胞ハイブリッドに一本のみ含まれる第7番染色体の親由来を、RT-PCR法およびメチル化解析法を用いて判定し、GRB10遺伝子が母由来の第7番染色体でのみ発現することを示した.以上の成績からGRB10遺伝子は母性発現インプリンティング遺伝子であると判定した.さらに、変性高速液体クロマトグラフィー(DHPLC)システムを用いて患者検体の変異解析をおこない、患者58例中2例に第753番塩基の一塩基置換(C→T)を示すアミノ酸置換(P95S)を発見した.RFLP法により、P95Sアレルが正常対照100例(200染色体)に認められないことから、GRB10遺伝子の発現異常と本疾患発症との関連が示唆された.今後の予定は、1.大規模な患者集団における変異解析、2.GRB10遺伝子の近傍に存在する新規インプリンティング遺伝子の同定である.GRB10がインプリンティングを受けるか否かについて,胎児脳組織およびヒト第7番染色体を含むヒト・ハムスター体細胞ハイブリッドを用いて検討した.次に58例のラッセル・シルバ.症候群患者からゲノムDNAを抽出しGRB10遺伝子をPCR増幅後、変性高速液体クロマトグラフィーおよび直接シーケンシング法を用いて変異スクリーニングをおこなった.[成績](1)ヒトGRB10mRNAの発現は胎児脳組織において片親性発現であった。(3)ラッセル・シルバー症候群患者58例中2例に,第753番塩基のヘテロの一塩基置換(C→T)によるアミノ酸置換(P95S)をアミノ末端プロリン豊富領域内に認めた.このアミノ酸置換は正常対照100例(200染色体)には認められず、母親から受け継がれていた.[考察]二つの異なる方法を用いてヒトGRB10が母性発現インプリンティング遺伝子であることを示した.ラッセル・シルバー症候群患者2例に特異的なGRB10のアミノ酸置換(P95S)が発見され,この変異が母親由来であったことからGRB10遺伝子が本症の発症に関与している可能性が示唆された.15q26-qter領域の欠失によりIGF1受容体の欠失を有する患者および11p15重複によりIGF2遺伝子およびその抑制性調節

遺伝子の重複を有する患者がラッセル・シルバー症候群の表現型を呈することから、「IGF1受容体を介するシグナル伝達系の1)リガンドであるIGF2,2)IGF2の受容体であるIGF1受容体,3)IGF1受容体の結合蛋白であるGRB10のいずれかのレベルでIGF1受容体を介するシグナル伝達が遮断されるとラッセル・シルバー症候群を発症する」という発症機序に関する統一仮説を提唱した.
唐通事と日本近世文学・語学の研究ー日中比較文学実践史ー

長崎の唐通事、唐話学者たちが行った日常的な通訳業務「通弁」や唐話辞書編纂などの活動が、日本近世文学・語学にどのような影響をおよぼしたか、その解明が本研究の目的である。この報告書においては、およそ次の項目についての調査・考察をおこなった。(1)唐通事の機構・職制の歴史の概要唐通事の制度は、慶長8年(1603)に来泊唐人憑六を長崎奉行小笠原一菴が任命したことに始まった。寛永17年(1640)に大通事、小通事、承応2年(1653)に稽古通事などが設置され、機構が次第に整備されてゆく過程を『訳詞統譜』などの資料をもとに探り、その機構と職制の歴史的概要をまとめた。(2)唐通事の家系と活動唐通事は、風説書の翻訳や貿易業務などの公務に従事しているが、かれらは学芸、詩作にも興味をもつ文化人でもあった。代表的な大通事林道栄、劉宣義、素軒親子らの家系を調査し、彼らの詩作・学芸などの創造的な活動を調査した。(3)唐話辞書について唐話辞書の編纂は元禄時代から行われ、かつて唐通事であった岡島冠山系の辞書が流布しているが、このほかにも実用的な辞書が作成されている。それらの内から魏氏編纂の『東京異詞相〓解』(長崎県立図書館蔵本、長崎大学附属図書館経済学部分館武藤文庫蔵本)を翻刻・紹介し、当時の俗語・訳語の様相を検討した。平成6年度唐通事の職制・家系などに関する史・資料、編纂された唐話辞書、出版された言語・文学に関する資料の発掘・探索および資料収集を行った。国立公文書館、国会図書館、大坂府立中之島図書館、祐徳文庫などを調査し、文献写真・コピーなどで資料収集した。1)唐通事の職制・家系などに関する資料調査・収集長崎県立図書館・長崎市立博物館で長崎聖堂及び唐通事の職制・家系の調査2)唐通事の子孫の家、墓碑、過去帳および関係資料の調査長崎市の寺院の墓碑調査、祐徳文庫で林道栄関係資料の調査3)唐通事編纂の辞書の調査・収集長崎大学経済学部図書館武藤文庫所蔵の唐話学関係の調査唐通事の職制に関する資料は、長崎市立博物館、長崎県立図書館においてある程度まとまったオリジナル資料を調査でき、予定どうりの収穫があった。唐通事の墓碑調査については、相当な時間を要することが分かった。今後年次ごとに計画的に効率よく調査を進めたい。唐話学関係の資料に関しては今年度は僅かに2点の調査に終わったが、次年度は全国の情報をえて広範囲の収集活動を行いたい。平成7年度は、主として唐通事の職制・家系などに関する史・資料、編纂された唐和辞書、出版された言語・文学に関する資料の発掘・探索および資料収集を行った。国立公文書館、国会図書館、大阪府立中之島図書館、祐徳文庫などを調査し、文献写真・コピーなどで資料収集した。1)唐通事の職制・家系に関する資料調査・収集長崎県立図書館・長崎市立博物館で長崎聖堂及び唐通事の職制・家系の調査2)唐通事の子孫の家、墓碑、過去帳および関係資料の調査長崎市の寺院の墓碑調査、祐徳文庫で林道栄関係資料の調査3)唐通事編纂の辞書の調査・収集長崎大学経済学部図書館武藤文庫所蔵の唐話学関係の調査唐通事の職制に関する資料は、長崎市立博物館、長崎県立図書館においてある程度まとまったオリジナル資料の調査ができた。唐通事の墓碑調査は、崇福寺、興福寺、本蓮寺等を行った。墓碑と系譜類との付き合わせが必要であり、時間を要したが事実をおさえることができた。唐話学関係の資料に関しては今年度は長崎大学武藤文庫、天理図書館、国会図書館等の調査・資料収集を行ったが、まだ残した資料が少なくない。資料収集については継続していく予定である。

平成6年度から平成8年度に至る3年間において、私は長崎の唐通事たちが、日本の近世文字、語学に及ぼした顕著な活動と影響について以下の諸項について調査研究を行ない、報告をした。読本などへの影響については概要を記すにとどめた。1)唐通事の機構・職制とその歴史について唐通事は慶長8年(1603)に来泊唐人馮六を長崎奉行小笠原一菴が任命した時に始まる。寛永17年(1640)に大通事、万治元年(1658)に小通事、その後稽古通事などの機構・職制が整備されていく過程を記した。すでに『譯司続譜』があり、これを基礎に概要をまとめた。2)唐通事の伝記とその事歴について唐通事は唐船風説書の翻訳などの情報活動や実際の貿易業務にかかわり、通訳業務を行なった。彼らは文化人としての一面を持ち、詩作や書に興じている。彼らの文字・語学についての事歴を追跡し、代表的な大通事について調査した。(a)官梅道栄の詩作活動とその家系(b)劉宣義、劉素軒親子の詩作活動と家系(c)岡嶋冠山の唐話学と唐話辞書の編集と流布(d)東京通詞魏氏の事歴と家系3)唐通事の辞書について唐話辞書の編集は享保時代前後に盛んに行なわれているが、出版された冠山系辞書、稗史、演義小説読解用の字彙が流布されている。その他実用的な辞書類が編集され、写本で伝わっている。『東京異詞相〓解』及び『俗語解』(一部)その他を資料として報告書に収録した。報告書は本年度3月刊の予定である。
大脳皮質構造形成機構におけるCNR遺伝子多重欠損マウスの解析

CNR分子群は大脳皮質形成機構に関わるReelin分子の多重受容体として機能していることが示唆されており、CNR分子群の分子機能解析により大脳皮質層構造形成機構の一端が明らかにされることが期待される。本研究では、特にCNR分子群の分子多様性の機能を明らかにすることを目的として、(1)CNR遺伝子多重欠損マウスの作製および解析、(2)各CNR特異抗体作製によるCNR分子多様性の機能解析、の2つのアプローチによる解析を行った。(1)CNR分子群のゲノム構造は、T細胞受容体や免疫グロブリンのゲノム構造に類似した遺伝子クラスター構造を形成している。このことからCNR遺伝子多重欠損マウスの作製法としては各CNRの多様性を形成している可変領域2カ所にloxP配列を導入し、Cre-loxP系を用いてCNR可変領域を欠失させることによりおこなった。まず、1カ所目にloxP配列を導入したES細胞よりホモマウスが作製されている。また、loxPの導入されているES細胞に2カ所目のloxP配列を導入し2カ所にloxP配列が導入されているES細胞よりキメラマウスが3ライン作製されている。現在、ホモマウスの作製を行っており、今後、Creマウスとの掛け合わせにより、CNR遺伝子重欠損マウスを作製し、CNR分子多様性のマウス成体内における機能解析を行う。(2)各CNR蛋白質に対する特異抗体作製は、各CNRで多様性のあるEC2-3領域をGST融合蛋白質として作製し抗原に用いマウスモノクローナル抗体を作製した。また、各CNRで特異的なアミノ酸配列をKLH-ペプチド抗原として合成し抗原にもちい、ラットおよびウサギにおいてそれぞれモノクローナル抗体およびポリクローナル抗体を作製した。マウスモノクローナル抗体においては2種類の単一CNR特異認識抗体が得られている。また、ラットモノクローナル抗体においては5種類の単一CNR特異認識抗体が、ウサギポリクローナル抗体においては12種類の単一CNR特異認識抗体が得られた。これらの抗体を用いた成体マウス脳における免疫染色法での陽性細胞の局在様式は、各CNRに対する特異プローブを用いたin situハイブリダイゼーション法によるCNR mRNAの発現様式とほぼ同様であった。また、生後マウス脳における単一CNR特異抗体を用いた二重蛍光染色の結果、大脳皮質V層の神経細胞において異なる神経細胞にCNR蛋白質が発現していることが示された。今後、作製した各CNR特異抗体を用いて、マウス脳形成過程におけるCNR蛋白質の発現および局在様式の解析を行い、脳形成機構におけるCNR分子群の分子機能の解析を行う。CNRカドヘリンファミリーは大脳皮質層構造形成機構に必須のReelin分子の多重受容体として機能している。CNR分子群を欠損したマウスを作製し生体内でのCNR分子群の大脳皮質層構造形成機構における役割を明らかにすることを目的とする。CNRファミリーはマウスゲノム上に遺伝子クラスター構造を形成している。CNR遺伝子クラスターの2カ所にloxPを導入し、Cre-loxP系をもちいてCNRを複数欠損させたマウスの作製を行っている。現在までに、1カ所にloxPが導入されたマウスが作製されており、そのES細胞にもう一カ所loxPを導入したES細胞を、マウスにもどしキメラマウス作製を行っている。また、同様に他の部位にloxPを導入したES細胞を作製し、このES細胞についてもキメラマウスの作製を行いマウスの掛け合わせにより2カ所loxPが導入されたマウスの作製についても平行して行っている。CNR多重欠損マウスの解析および各CNR分子の機能解析に用いることを目的として各CNR特異抗体の作製を行った。現在までにペプチド抗原を用いてウサギ抗CNRポリクローナル抗体が複数作製され、また、ラットおよびマウスを用いて抗CNRモノクローナル抗体を作製し、それぞれ8種類以上の抗体が作製された。異なるホスト動物種での各CNR特異抗体が作製されたことにより多重免疫染色が可能になり、それぞれのCNR分子群の蛋白質レベルでの解析によりCNR分子多様性と機能特異性を明らかにできるものと考える。

(2)各CNR蛋白質に対する特異抗体作製は、各CNRで多様性のあるEC2-3領域をGST融合蛋白質として作製し抗原に用いマウスモノクローナル抗体を作製した。また、各CNRで特異的なアミノ酸配列をKLH-ペプチド抗原として合成し抗原にもちい、ラットおよびウサギにおいてそれぞれモノクローナル抗体およびポリクローナル抗体を作製した。マウスモノクローナル抗体においては2種類の単一CNR特異認識抗体が得られている。また、ラットモノクローナル抗体においては5種類の単一CNR特異認識抗体が、ウサギポリクローナル抗体においては12種類の単一CNR特異認識抗体が得られた。これらの抗体を用いた成体マウス脳における免疫染色法での陽性細胞の局在様式は、各CNRに対する特異プローブを用いたin situハイブリダイゼーション法によるCNR mRNAの発現様式とほぼ同様であった。また、生後マウス脳における単一CNR特異抗体を用いた二重蛍光染色の結果、大脳皮質V層の神経細胞において異なる神経細胞にCNR蛋白質が発現していることが示された。今後、作製した各CNR特異抗体を用いて、マウス脳形成過程におけるCNR蛋白質の発現および局在様式の解析を行い、脳形成機構におけるCNR分子群の分子機能の解析を行う。
大規模データにおける不動産市場の統計的分析

本研究は、多様な大規模データベースから、現実の問題の解決に寄与するデータ項目を効率よく抽出し、それらを統合してモデル化するための基盤技術の創出を目指すものであり、適用例として、J-REIT投資法人が所有する物件情報をもとに、どのような指標が価格決定に影響を与えているのかを様々な統計手法を用いて解析した。信用リスク評価のためのアプローチとして、投資法人債を発行している法人に注目し、その市場価格データをもとに、倒産確率と回収率の推計を行うことで、信用リスクがどのように反映されているのかを明らかにした。本研究は、多様な大規模データベースから、現実の問題の解決に寄与するデータ項目を効率よく抽出し、それらを統合してモデル化するための基盤技術の創出を目指すものであり、このモデルの適用例として、不動産市場データに注目した。近年、不動産証券化の市場規模の拡大により、投資家からの情報の透明性の要望を受け、実際の「取引価格」情報が公開されつつあるが、対象物件の地理情報、物件を保有する企業の財務データや、各府省で管理されている政府統計データなど、価格付けに関連する項目を、あらゆる大規模データから抽出することで、より市況にあった不動産価格評価モデルを構築することが可能となる。これにより、不動産を担保にした投資を行う際の、リスク評価の計測にも活用することができるため、企業のデフォルト確率および回収率の推計において市場状況を考慮した評価が可能となる。実際、J-REITの投資法人が所有する物件情報が,ホームページなどを通して一般に公開されているので,これらの情報を用いて,不動産物件データベースを構築し、投資法人が発行する法人債の市場価格データから、投資法人の信用リスク評価を行った。その際、保有物件の取得価格やキャップレートを用いることで、不動産価格の時間的な構造変動を評価することができ、それらを反映した形で、インプライドな倒産確率と回収率を推定することができたため、これらの成果を学会等で報告した。引き続き、不動産の価格評価に有効なデータベースの構築を進め、取引価格データを用いたヘドニック価格関数の推定を行い、どのような指標が価格決定に影響を与えているのかを見極めることにより,市場の動向を把握することを目指すとともに、中小企業の資金調達のストラクチャーの整備に生かしていけるような指標づくりにつなげる.本研究は、多様な大規模データベースから、現実の問題の解決に寄与するデータ項目を効率よく抽出し、それらを統合してモデル化するための基盤技術の創出を目指すものであり、このモデルの適用例として、不動産市場データに注目した。近年、投資家の情報の透明性の要望を受け、これまで困難とされてきた「取引価格」情報が一般に公開されつつある中、不動産鑑定士による「鑑定価格」情報とのかい離度を評価することにより、従来の「鑑定価格」情報を活かしつつ、これまでの不動産価格の時間的な構造変動を評価することができるようになる。さらに、対象物件の地理情報、物件を保有する企業の財務データや、各府省で管理されている政府統計データなど、価格付けに関連する項目を、あらゆる大規模データから抽出することで、より市況にあった不動産価格評価モデルを構築することを目指した。これにより、不動産を担保にした投資を行う際の、リスク評価の計測に活用することができるため、企業のデフォルト確率および回収率の推計において市場状況を考慮した評価ができるようになる。具体的には、J-REIT投資法人が所有する物件情報をもとに、どのような指標が価格決定に影響を与えているのかを様々な統計手法を用いて解析することで、市場の動向を探ってきた。信用リスク評価のためのアプローチとして、投資法人債を発行している法人に注目し、その市場価格データをもとに、倒産確率と回収率の推計を行うことで、信用リスクがどのように反映されているのかを明らかにしていった。J-REITデータにより解析した結果を踏まえて、大規模データでの価格評価関数の推定を進めるとともに、取引価格の構造変化をとらえるために状態空間モデルを適用した分析を進めていった。これにより,中小企業の資金調達のためのストラクチャーの整備にも生かしていけるような指標づくりにつなげていけると考えている。
ＭＲ組織学技術を用いたヒト剖検脳の組織構築画像による病理診断法の開発

ホルマリン固定臓器を撮像対象としたMR組織学の法医実務への応用について検討することを目的に、我々は法医解剖で摘出した臓器を対象に、緩和時間の測定、臨床用MR装置を用いた画像撮像、海馬領域に特化したMR画像と病理組織標本との比較検討を実施した。固定臓器の緩和時間はホルマリンの影響があることが判明したがこの実験は今後の研究への予備的検討として捉えるべきであった。一方、臨床用MR装置でも法医実務に有用と考えるMR組織学画像等の撮像は可能であった。MR組織学画像の撮像方法と診断活用法については引き続き検討されるべき点は多いが、法医実務への応用性は高いと期待される。本研究では,ホルマリンで固定した臓器を,磁気共鳴画像(MRI)用造影剤等に浸漬した後に,MRI装置で撮像する「MR組織学」の技術を,法医実務の診断上の有効性と応用性を検証すると共に,法医解剖での神経組織所見の把握の緻密化と,診断精度の向上を図ることを目的とする。平成25年度の研究では,法医解剖で摘出したヒト全脳を,ホルマリン・プロハンス混合固定液に浸漬固定して,3テスラの臨床用MR装置で撮像した。撮像シーケンスとしての条件で撮像した。本実験の結果,T1W VISTAならびMP-RAGEのシーケンスにて撮像することで,高コントラストの画像が得られると共に,0.5mmの3次元等方性高分解能画像を25分程度の撮像時間で達成可能となった。本実験での撮像プロトコールは,検体処理が極めて容易であり,撮像時間も比較的短時間にとどまりつつ,0.5mmというルーペレベルでの高分解能画像の取得が可能であった。本実験の手法により,形態計測学的手法を用いた神経疾患の診断,適切な切り出しの支援のための事前検討,脱髄疾患の病勢把握が可能となり,法医実務への応用性は極めて高いと考えられた。【1.予備実験の実施】法医解剖で摘出したホルマリン固定臓器に最適と考えられる磁気共鳴画像(MRI)撮像条件について探索し,性別,年齢,死因,死因の種類,死後経過時間,病歴との関わりを含めて検討した。また,脳や心臓などの各種臓器のT1値,T2値を計測し,ホルマリン固定の影響や,死後経過時間による変動を検討した。これらの結果を学会にて報告した。本予備実験は,死後経過時間別の固定臓器T1値・T2値を世界で始めて詳細に計測したものであり,今後の本実験に向けての重要な基礎データとなるばかりではなく,これ自体が論文として報告される価値がある重要な知見である。【2.MR組織学撮像実験】ヒト剖検固定脳の内,大脳皮質,海馬,大脳基底核,脳幹などの領域をガドリニウム造影剤などに浸漬させた後にMRI撮像し,高分解能画像の取得すると共に,S/N比やC/N比の変化を検討した。先行研究で示唆された高解像度画像撮像の成功に向けて,平成24年度は基礎データの蓄積を行った。【3.剖検摘出脳撮像予備実験】剖検摘出脳の臨床用MR装置で撮像した場合,MR組織学画像に匹敵する解像度が達成できるか予備的に実験を行い,平成25年度以降の本実験用の各種データを収集した。【4.画像アトラスの整備】実験で撮像したMR画像や,各種の肉眼・組織写真は,専用のPCと画像解析ソフトを調達・入手の上,今後の分析作業を効率的に実施できるように整備に着手した。ヒト剖検臓器の適切なMR組織学画像の撮像のために、固定臓器の緩和時間の測定実験を実施した。1検体処理:検体は、法医解剖で摘出した心筋、肝、脂肪、大脳の一部を個収集し、肉眼的・組織学的に病変がないことを確認した。検体は未固定群と固定群に分類した。未固定群の検体は、不活化液体を充満したチューブに挿入し、MR撮像した。一方、固定群検体は15-20%中性緩衝ホルマリンにて室温下で固定し、未固定群と同様に撮像した。2緩和時間の測定:未固定群・固定群の検体は、以下の条件でMR撮像を実施した。MR装置:vertical-bore 8.6-Tesla Bruker AVANCE400WB imaging spectrometer witha 30 mm 1H coil、シーケンス:RAREVTR

_bas,パラメータ:FOV = 2.0×2.0 cm (心筋、肝、脂肪組織), 4.0×4.0 cm (脳)、スライス厚= 2.0 mm、number average = 1、acquisition matrix = 128×128、interslice distance = 4 mm、TR = 500-10000 ms (心筋、肝、脳)、360-5000 ms (脂肪組織)、TE = 14-98 ms,Flipangle = 180.0 deg。1サンプルにつき取得した16枚のMR画像は、専用ソフトを用いて解析し、各検体のT1・T2値が計測した。3結果:脂肪組織を除き、T1値はホルマリン固定によっていずれも減少がみられた。T2値も同様の減少がみられ、脂肪組織では若干のT2値の上昇がみられたことが分かった。ただし、これらの結果は、方法上の信頼性に改善の余地があり、今後も検討を進める必要があると認める。法医学当初の予定の計画の撮像実験が実施できたのに加えて,その学術的成果を論文して報告することができたことから,研究の目的は順調に達成しつつあると,総合的に評価している。当初予定していた計画にほぼ沿って研究実験を遂行はできているが,症例数は若干予定よりは少なくなったと認められる。ただし,学会発表には十分な症例数ではあったことから,その学術的成果を直ちに報告し,今後の学術論文での公表に向けて追加実験をしたことで,平成24年分の研究実験計画により,研究の目的は順調に達成しつつあると,総合的に評価している。今後の追加実験として,高磁場の研究・動物用MR画像装置を用いた,切り出し済み脳組織について撮像実験を実施し,空間分解能をより一層向上させつつ,法医実務に即した撮像プロトコールの開発を推進する。平成25年度の研究実施計画としては、平成24年度に実施したのと同様に,法医解剖により摘出された脳組織のMR組織学画像撮像実験を継続する。平成25年度では,前年度の実験結果を踏まえて,造影剤などの浸漬液の種類・濃度,浸漬時間も変化させ,診断上有用なMR組織学技法の新規探索を行なう。MR組織学画像のS/N比やC/N比などの精度解析や,MR組織学正常画像アトラス整備,検体の病理組織標本作成と顕微鏡写真撮影と記録については,平成24年度と同様に継続する。平成24年度に実施した予備実験の結果については、撮像条件と死後経過時間やホルマリン固定時間との関係について解析を加えた後、学術集会ならび専門誌へ学術論文として投稿し,その成果を発表する。平成25年度は,撮像実験を実施しつつ,解析作業も併せて行う予定であったが,撮像実験を優先的に実施し,解析作業を平成26年度に繰り下げて実施することとした。そのため,解析作業に必要なソフトやパソコン機器の調達を延期したことにより,次年度使用額が生じた。平成26年度に繰り下げた画像解析について,これに必要な解析専門ソフトやパソコン関連機器を調達する予定である。MR組織学画像撮像実験に必要な消耗品費・試薬費・実験動物費を支出し,実験を継続する。また,所属機関外で撮像実験を実施する予定であるので,所要の人件費・謝金・旅費を支出する予定とする。平成25年度はより高次の撮像方法や解析方法を駆使する必要があるので,専門技術や知識を修得する目的で,必要な講習等の受講を実施する。関連分野の研究者と本研究に関わる研究協議を実施し,円滑な研究遂行を図るために,必要な旅費を支出する。平成25年度に得られた学術的成果を迅速に還元するために学術発表を適時実施するために,必要な旅費・英文校正費等の支出を実施する。
セツキシマブ耐性口腔扁平上皮癌培養細胞の作成と耐性機構の解析

【目的・研究実施計画】本研究の目的は、薬剤耐性に関与する遺伝子・シグナル経路の発現と抗癌剤耐性機構を解明し、最終的に個別化治療を確立するための基礎的データを蓄積することである。本研究の遂行によって、シスプラチン(CDDP)やセツキシマブ(Cmab)耐性症例を予測し、抗癌剤の有効性をin vitroで検討することで、ほかの有効な分子標的薬の選択が可能となる。【結果】SCCKNはCmabに対して早期に耐性を獲得し、400μg/mlのCmab存在下で継続的に培養が可能となった。NGSを用いたがん遺伝子の変異ではE542K, G<Aの遺伝子変異が確認されたことが確認された。Cmab耐性細胞は親株と比較してEGFRやPI3KやPTENに発現の差は認めなかったが、pEGFRは約1.7倍、Aktは約9倍、pAkt(Ser473)は約1.6倍とタンパク発現に差を認めた。Cmab耐性はリガンドの過剰発現やEGFR・Rasの変異などが報告されているが、さらに下流のPIK3CAに変異があれば容易に耐性が成立することが予想される。分子標的薬はシグナル上流を抑制するものが多く、従来の癌化学療法における獲得耐性がポイントであったことに対しintr insicresistanceも問題となり得ることが示された。
心筋虚血のメモリーイメージング-^<III>In-DTPA抗アネキシン抗体による検出-

^<III>In標識抗ヒトアネキシンV抗体イメージングを用いた心筋虚血の検出^<III>In標識抗ヒトアネキシンV抗体が,心筋虚血を陽性に描出できるかについて検討を行った.【方法】wister ratを,心筋虚血群(N=39),コントロール群(N=25)に分類し,心筋虚血群では冠動脈左前下行枝を10分閉塞して,その後再潅流をおこなった.両群ともに,モデル作成2,7,14,21および50日後に^<III>In標識抗ヒトアネキシンV抗体イメージングを施行した.【結果】心筋虚血群では2日,7日,14日目まで^<III>In標識抗アネキシン抗体の心高集積所見が認められ,21日以降は集積が低下した.コントロール群は,いずれも心集積がなかった.マクロオートグラフィの結果,虚血群では左前下行枝領域に一致して,^<III>In標識抗アネキシンV抗体の高集積が見られた.【結語】^<III>In標識抗アネキシンV抗体イメージングは,10分再潅流の心筋虚血モデルにおいて,2日から14日後まで心筋虚血領域を高集積所見として描出した.^<III>In標識抗アネキシンV抗体イメージングは,心筋虚血を運動負荷をもちいずに描出する方法として期待できる.^<III>In標識抗ヒトアネキシンV抗体イメージングを用いた心筋虚血の検出^<III>In標識抗ヒトアネキシンV抗体が,心筋虚血を陽性に描出できるかについて検討を行った.【方法】wister ratを,心筋虚血群(N=39),コントロール群(N=25)に分類し,心筋虚血群では冠動脈左前下行枝を10分閉塞して,その後再潅流をおこなった.両群ともに,モデル作成2,7,14,21および50日後に^<III>In標識抗ヒトアネキシンV抗体イメージングを施行した.【結果】心筋虚血群では2日,7日,14日目まで^<III>In標識抗アネキシン抗体の心高集積所見が認められ,21日以降は集積が低下した.コントロール群は,いずれも心集積がなかった.マクロオートグラフィの結果,虚血群では左前下行枝領域に一致して,^<III>In標識抗アネキシンV抗体の高集積が見られた.【結語】^<III>In標識抗アネキシンV抗体イメージングは,10分再潅流の心筋虚血モデルにおいて,2日から14日後まで心筋虚血領域を高集積所見として描出した.^<III>In標識抗アネキシンV抗体イメージングは,心筋虚血を運動負荷をもちいずに描出する方法として期待できる.本研究は、In-111標識した抗アネキシンV抗体を用いた、虚血心筋のメモリーイメージングの診断能力について検討することにある。【特色・独創的な点】アネキシンVが、心筋虚血により心筋細胞膜に抗原を提示することを、研究分担者の金子らが最近明らかにした.アネキシンVのtranslocationによって、心筋細胞膜にアネキシンV抗原を提示することを利用する、虚血の診断方法は、いままでに全く試みられていない方法である.【平成11年度研究の成果】左前下行枝を10分間閉塞後に再潅流を施行したreperfusionラットモデル40匹と、心膜剥離後に閉胸したコントロールラット30匹を作成した。In-111-DTPA抗アネキシンV抗体を心筋虚血のモデル作成後の2日、7日、14日、21日、40日後に慢性期に投与して、24時間後にイメージング(正面プラナー像)、マクロオートブラフィおよびbiodistributionについて検討した.その結果、抗アネキシン抗体の集積は、2日14日まで心筋に高集積を呈し、21日以降は集積が低下した。マクロオートグラフィでは、虚血領域に限局している結果が得られた。いずれの時期においても極めて良好な画質のイメージが得られた。このため、臨床応用についての可能性も期待できる。^<111>In標識抗ヒトアネキシンV抗体イメージングを用いた心筋虚血の検出^<111>In標識抗ヒトアネキシンV抗体が,心筋虚血を陽性に描出できるかについて検討を行った.【方法】wister ratを,心筋虚血群(N=39),コントロール群(N=25)に分類し,心筋虚血群では冠動脈左前下行枝を10分閉塞して,その後再潅流をおこなった.両群ともに,モデル作成2,7,14,21および50日後に^<111>In標識抗ヒトアネキシンV抗体イメージングを施行した.【結果】心筋虚血群では2日,7日,14日目まで^<111>In標識抗アネキシン抗体の心高集積所見が認められ,21日以降は集積が低下した.コントロール群は,いずれも心集積がなかった.マクロオートグラフィの結果,虚血群では左前下行枝領域に一致して,^<111>In標識抗アネキシンV抗体の高集積が見られた.【結語】^<111>

In標識抗アネキシンV抗体イメージングは,10分再潅流の心筋虚血モデルにおいて,2日から14日後まで心筋虚血領域を高集積所見として描出した.^<111>In標識抗アネキシンV抗体イメージングは,心筋虚血を運動負荷をもちいずに描出する方法として期待できる.
設計過程の論理的モデルへの複数観点の導入に関する研究

本研究では、観点という概念を取り込んだ設計過程の論理的な形式化を行なった。これまでの設計過程の研究では知識の普遍性を前提としてきたので、観点という概念は含まれてこなかった。ところが実際の設計では、複数の対象モデルを扱うことが多く、これらをどう使い分けていくかなど、観点に関わる設計行為が設計過程の中で頻出する。本研究では論理的な記述方法によって、観点の記述とその利用について考察を行なった。ここでは観点とは、一つの概念化による対象世界の記述であると考える。まず観点(aspect)は他に依存しない基本aspectと他のaspectを利用して定義を行なう複合aspectに大別される。さらに複合aspectは異なる対象領域のaspectを結合する組み合わせaspectと同じ領域に対するaspectを関連づけるカテゴリーaspectに分けられる。特に後者は観点の多重性などを実現する際重要である。基本aspectは、論理的な理論(logical theory)とその名前の組として定義され、組み合わせaspectはその和として定義される。カテゴリーaspectは様相論理を用いて定義され、各利用aspectを可能性としてもつ理論として定義される。この定義により、compactness、rigidnessなど各種のaspectの性質を議論することができた。次にaspect間の知識の変換についても考察し、カテゴリーaspectにある定義を利用することで変換が可能であることを示した。また、設計の中でどのようにaspectが使われるかをみるために、設計過程に現れる知識をaspectに分散化し、それらのaspectを適宜利用することで、設計が進行することを示した。