hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
カーボンナノチューブネットワークの物理とその応用に関する研究

一方でこれまでに得られた知見からCNTネットワークの低抵抗化に成功するなど、応用への道筋が立ってきた。早急にTFTを作製し、モデルとの比較を行う。これは分散技術を持つ共同研究者とのディスカッションを行いつつ進めていく。その後誘電率、導電率のモデルへと応用し、CNTネットワークの電気的特性の厳密なモデル化を行う。(抄録なし)
加齢性脳疾患の発症メカニズムと分子病態

平成14-15年度の2年間、加齢性脳疾患の発症メカニズムと分子病態について検討し、以下の結果を得た。1)加齢性脳疾患の発症メカニズムとフリーラジカルに関する検討:培養細胞を用いたフリーラジカルと神経細胞死に関する検討では、細胞外から細胞内へのカルシウムインフラックスにより神経細胞死の発現することが明らかとなった。また、この細胞死は電位依存性カルシウムチャンネル阻害によると考えられた。一方、虚〓時には細胞内高エネルギーリン酸化合物は急速に減少し、ハイポキサンチン、キサンチン、尿酸へと分解され、細胞内にラジカル、とくにヒドロキシラジカルが産生され、細胞死が発現すると考えられた。2)加齢性脳疾患の分子病態に関する検討:脳のMRI像とPET像を重ね合わせ、特定部位の血流、糖代謝レセプターの動態を解析できる方法を確立し、一部「痴呆」症状を示す症例について検討したところ、糖代謝、ならびに血流量の低下が認められ、さらにアデノシンA1レセプター、ベンゾジアゼピンレセプター発現の減少も認められた。また、犬の脳におけるグルタミン酸輸送担体の遺伝子配列を決定し、一部症例ではこの遺伝子産物が減少していることを認めた。一方、各種動物における加齢性の病変を組織学的に解析したところ、野生動物を含む多くの動物でヒトのアルツハイマー病で観察される老人斑や血管周囲のアミロイド沈着が認められた。さらに、視覚誘発電位について検討し、得られる波形の意義を明らかにするとともに、加齢にともなってP2の〓時が延長することを見出し、本法の診断的意義を確立した。3)動物モデルの作成:塩化鉄の脳内投与により、てんかんモデルラットを高率に作成できる系を確立し、このモデルラット脳内ではアスパラギン酸、グルタミン酸、タウリン、GABA濃度の減少する傾向が観察された。平成14年度の研究計画に基づいて検討し、以下の結果を得、ほぼ予定とおりに進行中である。加齢性脳疾患の発症メカニズムとフリーラジカルに関する検討:培養細胞を用いてフリーラジカルと神経細胞死について検討し、細胞外からラジカルを負荷したさいには、細胞外から細胞内へのカルシウムインフラックスにより細胞死が発現することが明らかとなった。また、細胞死は電位依存性カルシウムチャンネル阻害剤で抑制されることも明らかとなった。一方、細胞内のプリン代謝を検討した結果、高エネルギーリン酸化合物はラジカル負荷により急速に減少し、ハイポキサンチン、キサンチン、尿酸へと分解され、細胞内にラジカルの産生が認められた。さらに、細胞内カルシウムの増加も認められた。加齢性脳疾患の分子病態に関する検討:脳のMRI像とPET像を重ね合わせ、特定部位の血流、糖代謝、レセプターの動態を解析できる方法を確立した。また、一部「痴呆」症状を示す症例について検討したところ糖代謝率の低下ならびに血流量の低下が観察され、さらにアデノシンA1レセプター、ベンゾジアゼピンレセプター発現の減少も認められた。一方、各種動物における加齢性の病変を組織学的に解析したところ、野生動物を含む、多くの動物でヒトのアルツハイマー病で観察される老人斑が認められた。また血管周囲のアミロイド変性も認められた。動物モデルの作成:てんかんモデルをラットで作成することを試み、脳内に塩化鉄を投与する方法で効率にてんかんを発現する系を確立することが出来、現在その性状を解析中である。平成15年度の研究計画に基づいて検討し、以下の結果を得た。加齢性脳疾患の発症メカニズムとフリーラジカルに関する検討:

培養細胞を用いてフリーラジカルと神経細胞死について検討し、細胞外からラジカルを負荷したさいには、細胞外から細胞内へのカルシウムインフラックスにより細胞死が発現することが明らかとなった。また、細胞死は電位依存性カルシウムチャンネル阻害剤で抑制されることも明らかとなった。一方、細胞内のプリン代謝を検討した結果、高エネルギーリン酸化合物はラジカル負荷により急速に減少し、ハイポキサンチン、キサンチン、尿酸へと分解され、細胞内にラジカルの産生が認められた。さらに、細胞内カルシウムの増加も認められた。加齢性脳疾患の分子病態に関する検討:脳のMRI像とPET像を重ね合わせ、特定部位の血流、糖代謝、レセプターの動態を解析できる方法を確立した。また、一部「痴呆」症状を示す症例について検討したところ糖代謝率の低下ならびに血流量の低下が観察され、さらにアデノシンA1レセプター、ペンゾジアゼピンレセプター発現の減少も認められた。また、犬の脳におけるグルタミン酸輸送担体の遺伝子配列を決定し、一部症例ではこの遺伝子産物が減少していることを認めた。一方、各種動物における加齢性の病変を組織学的に解析したところ、野生動物を含む、多くの動物でヒトのアルツハイマー病で観察される老人斑が認められた。また血管周囲のアミロイド変性も認められた。動物モデルの作成:てんかんモデルをラットで作成することを試み、脳内に塩化鉄を投与する方法で効率にてんかんを発現する系を確立することが出来た。
癌細胞初代培養系（CTOS法）を用いた分化型腺癌の放射線耐性メカニズムの検討

大腸癌の多くは分化型腺癌であり、正常の腸管上皮細胞のような分化マーカーを発現している。正常の腸管上皮細胞の放射線感受性が分化の階層性に影響を受けることは、トランスジェニックマウスを用いた細胞系譜追跡実験によって数多く報告されている。しかし、大腸癌の幹細胞性/分化状態が、放射線感受性に与える影響に関しては、ほとんど研究されてこなかった。本研究は、三次元癌細胞初代培養系CTOS(Cancer Tissue-Originated Spheroid)法を用いて分化型腺癌の放射線耐性メカニズムを検討することを目的としている。CTOSは分化型腺癌の形質を保持しており、大腸癌CTOSの場合、培養条件の違いによってLGR5やEpHB3などの幹細胞性マーカー遺伝子の発現が変化する。CTOSを用いることで、同一腫瘍内における分化度の違いによる放射線感受性の差を検討することが可能となる。大腸癌CTOSを用いてX線照射後のCTOSの再増殖を調べると、9Gy照射後の再増殖にはCTOS間で大きなheterogeneityが存在した。我々は「幹細胞性/分化状態のゆらぎが放射線感受性に影響する」という仮説を立て、大腸がんの分化状態に影響を与える可能性のある薬剤を用いて放射線感受性への影響を検討した。その結果、Wnt阻害剤が放射線照射後のCTOSの再増殖を抑制することを見出した。つまり、放射線照射後に再増殖する細胞はWntシグナルが高い細胞であることが示唆された。また、HDAC阻害剤も9Gy照射後のCTOSの再増殖を完全に抑制した。HDAC阻害剤のCTOSの遺伝子発現への影響を検討したところ、DNA修復にかかわる遺伝子群に加えて、LGR5やASCL2などの腸管上皮細胞の幹細胞マーカーの遺伝子発現が著しく低下していた。これらのことから、分化状態の揺らぎは分化型腺癌の放射線感受性に影響を与えることが示唆された。CTOSは分化型腺癌の形質を保持しており、培養条件の違いによってLGR5やEpHB3などの幹細胞性マーカー遺伝子の発現が変化する。我々は、「X線照射後に再増殖する細胞は幹細胞的性質を保持した細胞である」という仮説を立て、分化型腺癌の放射線耐性メカニズムを検討している。本年度は、CTOSの分化状態に影響を与える可能性のある薬剤を用いて放射線感受性への影響を検討した。CTOSを機械的に粉砕すると、Wntシグナルが一過性に上昇する(Jhosep in preparation)。Wntシグナルが活性化した状態の粉砕後のCTOSとコントロールのCTOSの放射線感受性を比較すると、粉砕後のCTOSの方がより放射線耐性を示した。また、Wnt阻害剤であるXAV-939を前処理することで、粉砕後CTOSの放射線感受性が増大したことから、Wntシグナルの活性化している細胞が放射線耐性であることが示唆された。さらに、HDAC阻害剤であるトリコスタチンAがX線照射後のCTOSの再増殖を著しく低下させることを見出した。現在、マイクロアレイでHDAC阻害剤の標的遺伝子を検討しており、下流の責任分子を同定することを試みている。Wntシグナルが放射線耐性において重要であること、またHDAC阻害剤が放射線感受性を著しく増大させることを見出した。HDAC阻害剤は遺伝子発現に幅広く作用するので、どの経路の変化が放射線感受性に最も強く影響を与えるかを今後検証する。これまでに我々は、9GyのX線照射後のCTOSの再増殖に、個々のCTOS間で大きなheterogeneityが存在することを見出した。CTOSの再増殖はFocalであり、その確率はX線照射時のCTOSの状態によって変化した。我々は分化度の違いが放射線感受性に影響するという仮説を立て、大腸がんの分化状態に影響を与える可能性のある薬剤を用いて放射線感受性への影響を検討した。また、HDAC阻害剤であるトリコスタチンAおよびVorinostatによるCTOSのpre-treatmentも9Gy照射後のCTOSの再増殖を完全に抑制した。トリコスタチンAのCTOSの分化状態への影響をマイクロアレイで検討したところ、DNA修復やチェックポイント機能にかかわる遺伝子群に加えて、LGR5やASCL2などの腸管上皮細胞の幹細胞マーカーの遺伝子発現が著しく低下していた。これらのことから、大腸癌CTOSの放射線感受性に各細胞の分化状態が影響する可能性が示唆された。HDAC阻害剤の作用点の解析や他のCTOSラインの放射線感受性データなどが集積しつつあり、おおむね順調に進展している。

正常の腸管上皮細胞の放射線感受性が分化の階層性に影響を受けることは、トランスジェニックマウスを用いた細胞系譜追跡実験によって数多く報告されている。しかし、大腸癌の幹細胞性/分化状態が、放射線感受性に与える影響に関しては、ほとんど研究されてこなかった。本研究は、三次元癌細胞初代培養系CTOS(Cancer Tissue-Originated Spheroid)法を用いて分化型腺癌の放射線耐性メカニズムを検討することを目的としている。CTOSは分化型腺癌の形質を保持しており、大腸癌CTOSの場合、培養条件の違いによってLGR5やEpHB3などの幹細胞性マーカー遺伝子の発現が変化する。CTOSを用いることで、同一腫瘍内における分化度の違いによる放射線感受性の差を検討することが可能となる。大腸癌CTOSを用いてX線照射後のCTOSの再増殖を調べると、9Gy照射後の再増殖にはCTOS間で大きなheterogeneityが存在した。我々は「幹細胞性/分化状態のゆらぎが放射線感受性に影響する」という仮説を立て、大腸がんの分化状態に影響を与える可能性のある薬剤を用いて放射線感受性への影響を検討した。その結果、Wnt阻害剤が放射線照射後のCTOSの再増殖を抑制することを見出した。つまり、放射線照射後に再増殖する細胞はWntシグナルが高い細胞であることが示唆された。また、HDAC阻害剤も9Gy照射後のCTOSの再増殖を完全に抑制した。HDAC阻害剤のCTOSの遺伝子発現への影響を検討したところ、DNA修復にかかわる遺伝子群に加えて、LGR5やASCL2などの腸管上皮細胞の幹細胞マーカーの遺伝子発現が著しく低下していた。これらのことから、分化状態の揺らぎは分化型腺癌の放射線感受性に影響を与えることが示唆された。HDAC阻害剤の標的シグナルを検討する。マイクロアレイの結果を解析し、候補シグナル経路の鍵分子のノックダウン等を行い、放射線感受性への影響を検討する。また、HDAC阻害剤以外の放射線増感剤候補を得るため、ハイスループットスクリーニングの系を確立する。HDAC阻害剤のマイクロアレイの結果から、HDAC阻害剤はDNA修復関連遺伝子群および腸管上皮細胞の幹細胞遺伝子群の発現を抑制することが判明した。今後、それぞれの責任因子の候補分子を選択し、放射線感受性への影響を検討する。また、genetic markingの系を確立して、再増殖する細胞がclonalであるかどうかを検討する。培養に必要な試薬類や学会出張の旅費を他のグラントより支出したため、残額が生じた。(理由)試薬代等を他のグラントから供出したので残額が生じた。(使用計画)研究を進めるうえで必要となった備品の購入にあてる。培養試薬(StemPro hESC 5万円/セット)や必要備品の購入で使用する。またマウスの実験を行うため、動物購入費に充てる。
内包膜プロテイントランスロケーターによるプラスチドの機能発現とその制御機構の解析

プラスチドは植物の器官・組織を構成する様々な細胞中に、機能的にも形態的にも多様に分化して存在し、生育段階や環境変化による時間的かつ空間的な複雑な制御を受けている。多様なプラスチドの機能維持には、適した蛋白質セットが、適時に発現、適所に配置され、色々な制御を受けて機能しているからに他ならない。このような複雑な蛋白質社会を形成維持することは、単に遺伝子発現レベルの調節だけでは不可能で、転写翻訳後の様々なレベルでの調節が必要である。その重要なひとつが、プラスチドへ蛋白質を輸送し配置する分子装置プロテイントランスロケーターによるものである。しかし、特に内包膜のトランスロケーターTic複合体に関しては、その構成因子も制御機構も不明の点が多い。われわれはこれまでシロイヌナズナ・エンドウ・トウモロコシの内包膜の既知の輸送装置のコンポーネントに関しては抗体を用いた比較解析等を進めてきた。その結果、内包膜の蛋白質輸送装置に関してはこれまで中心的役割を担うと考えられてきたTic110分子は、むしろストロマ側で分子シャペロンと共に膜透過後期過程に関与し、その前段階としておよそ1MDaの内包膜膜透過チャネル複合体が存在することを見いだした。この新奇Tic複合体に内包膜での輸送制御の鍵を握るコンポーネントとしてTic20が含まれていることを明らかにした。また多くの既知のTicコンポーネントは、この1MDa複合体に含まれていないが、Tic21と呼ばれる最近見つかった因子がこの複合体にペリフェラルに結合していることを明らかにした。葉緑体を構成する蛋白質の多くは前駆体として細胞質ゾルで合成された後、プラスチドへと輸送される。この輸送にはプラスチド外包膜および内包膜に存在する蛋白質膜透過装置、TocとTicが関与している。われわれは、特に、プラスチド内包膜の蛋白質膜透過装置Ticが、2000-3000種類とも言われる様々な葉緑体蛋白質を正しく認識し輸送していくのか、分子生物学・生化学・細胞生物学・分子遺伝学などの様々な手法を用いて明らかにすることを目的とする0これまでの解析の成果のひとつは、また、これまで、光による輸送の制御は、ないと考えられてきたプラスチド包膜における蛋白質輸送過程において、前駆体蛋白質によっては、光照射下と非照射下において、輸送特性が大きく異なる蛋白質群が存在することを明らかにし、また、異なる器官から単離したプラスチドでも輸送特性に明確な差異が見られることを突き止めた。そして、これらの輸送制御が内包膜の輸送装置の段階で行なわれていることを示した。さらに、シロイヌナズナ・エンドウ・トウモロコシ外包膜および内包膜の既知の輸送装置のコンポーネントに関しては抗体を用いた比較解析等を進めてきた。その結果内包膜の蛋白質輸送装置に関してはこれまで中心的役割を担うと考えられてきたTic110分子は、むしろストロマ側で分子シャペロンと共に膜透過後期過程に関与し、その前段階としておよそ1MDaの内包膜透過チャネル複合体が存在することを見いだした。得られた実験結果より、異なるTic20イソログが異なる植物器官が機能しており、輸送の選択性やプラスチド分化、ひいては器官のアイデンティティの確立に寄与している可能性を提唱し、その生理的意義に関して現在検証を進めている。
インターフェロン受容体発現によるC型肝炎治療効果の基礎実験

C型肝炎ウイルス(HCV)感染の治療としてインターフェロン(IFN)が用いられるが,この受容体であるIFNリセプター(IFN-AR1)のm-RNAを遺伝子導入することで受容体の発現量を増加させ,ウイルス排泄の効率が上がるかを検討している.受容体の定量はrealtime PCRを用いて行った.その結果,遺伝子導入する前に比較して,導入後には10100倍にIFN-AR1の遺伝子発現量は増加していることを確認した.現段階では遺伝子レベルで発現が増加しているのみで,その作用発現も同様に増加しているか否かは疑問である.そのため以下のことで検討を重ねる必要がある.1)蛋白量としてIFN-AR1が増加しているか否か.2)蛋白量は増加している場合,そのシグナルは細胞内に効果的に発現しているかの指標を何におくか(現在はウイルス排除に必要とするIFNの量を考えているが間接的なものである).蛋白量の定量はWestern Blotting法にて行っている.今後上記の点をふまえて実験を進めていく必要がある.IFNの発現効果を直接測定可能であれば確認が可能であるが,困難な場合にはHCV感染が可能である培養系でIFN-AR1が発現していないもので,IFN-AR1のm-RNAの遺伝子導入によってIFNによるウイルス排除が可能になるかなどの検討を考えている.C型肝炎ウイルス(HCV)感染の治療としてインターフェロン(IFN)が用いられるが,この受容体であるIFNリセプター(IFN-AR1)のm-RNAを遺伝子導入することで受容体の発現量を増加させ,ウイルス排泄の効率が上がるかを検討している.受容体の定量はrealtime PCRを用いて行った.その結果,遺伝子導入する前に比較して,導入後には10100倍にIFN-AR1の遺伝子発現量は増加していることを確認した.現段階では遺伝子レベルで発現が増加しているのみで,その作用発現も同様に増加しているか否かは疑問である.そのため以下のことで検討を重ねる必要がある.1)蛋白量としてIFN-AR1が増加しているか否か.2)蛋白量は増加している場合,そのシグナルは細胞内に効果的に発現しているかの指標を何におくか(現在はウイルス排除に必要とするIFNの量を考えているが間接的なものである).蛋白量の定量はWestern Blotting法にて行っている.今後上記の点をふまえて実験を進めていく必要がある.IFNの発現効果を直接測定可能であれば確認が可能であるが,困難な場合にはHCV感染が可能である培養系でIFN-AR1が発現していないもので,IFN-AR1のm-RNAの遺伝子導入によってIFNによるウイルス排除が可能になるかなどの検討を考えている.
生体機能調節因子としてのテトラヒドロビオプテリンの分子生物学的研究

テトラヒドロビオプテリンは、カテコールアミン生合成やNO合成に必須であり、多くの生理機能への関与が示唆されている。我々は、BH4の生合成律速酵素であるGTPシクロヒドロラーゼI(GCH)の酵素化学的性質を調べるために、ヒトGCHを大腸菌発現系により大量発現し精製酵素標品の解析を行った。ヒトGCHのcDNAを大腸菌のGST融合タンパク質発現用ベクターに組み込み、GST融合ヒトGCH(GST-hGCH)を発現させた。GST-hGCHの精製は、グルタチオンセファロースカラムとゲルろ過カラムを用いて行った。また、野生型GCHばかりでなく、優性遺伝するドーパ反応性ジストニア(HPD)においてみつかったミスセンス変異体(M88,M201)と、劣性遺伝形式の悪性高フェニルアラニン血症(HPA)でみつかった変異体(M184,M211)のそれぞれを大腸菌で発現させ精製した。ネイティブなGCHは、活性部位を5つのオリゴマーで形成し、これが上下に2つ重なった十量体を形成することが報告されている。ゲルろ過上の溶出位置とキネティクスの解析からM88、M184、M201はオリゴマー形成が正しく行われず失活していると考えられた。これに対して、M211はオリゴマー形成は正常に行われているようだったが、GTPに対する親和性が大きく低下していた。以上の結果から、GCHのオリゴマー形成および活性発現に重要なアミノ酸残基が明らかとなった。また、変異体の性状にHPDとHPAとで明確な違いがなかったことから、HPDの発症を決める要因はGCHタンパク質の性質以外にあることが示唆された。本補助金により購入した超低温フリーザーは、精製酵素の保存やヒトGTPシクロヒドロラーゼI発現大腸菌の保存などに有効に活用されている。
細胞特異的親和性を有するバイオマテリアルの開発

本研究の目的は、細胞レベルでの生体材料の最適化をはかることである。デンタルインプラントは上皮を貫通して顎骨内に固定されるのがその特徴で、部位によって接している生体組織が異なるため、材料表面に求められる生物学的特性が部位によって異なる。本研究の成果より、チタン表面を量子線照射処理することにより細胞特異的親和性(Cell-selective affinity)を付与できる可能性が示唆された。本研究の目的は、細胞特異的親和性を有するバイオマテリアルを開発することである。デンタルインプラントは上皮を貫通して顎骨内に固定されるのがその特徴で、部位によって接している生体組織が異なるためマテリアルの最適なバイオロジー的特性が部位によって異なる。初年度は、バイオマテリアルの準備と各種バイオマテリアル上での上皮系細胞の増殖と機能を比較検討することを到達目標とした。1)バイオマテリアルサンプルの準備本研究には純チタンならびにジルコニアディスクが必要となるが、初年度は本実験に適したジルコニアディスクが見つからなかったため、今後も継続して検索していく予定である。純チタンディスクに関しては、無処理のものと光照射処理したものをSEM、AFMおよびXPSにて表面性状を解析したところサンプル表面の元素分布に有意な違いがあることが判明した。2)サンプルディスク上での上皮系細胞の増殖と機能の比較検討8週齢のSprague-Dawley系雄ラットの上顎歯肉から採取し分離培養した上皮系細胞をサンルディスク上に播き、一定期間培養後サンプル表面に付着している細胞数を調べたところラット骨髄由来間葉系幹細胞の結果とは相反する結果が得られたことから光照射処理した純チタンディスクの細胞特異的親和性が確認された。今後はさらに培養開始直後のマテリアル表面への細胞の初期接着とその後の増殖能、ならびに上皮系細胞間および上皮系細胞とバイオマテリアル間の接着に関与する遺伝子の発現を解析していく必要があると思われる。本研究課題の最終年度にあたる本年度は、前年度の実験結果をもとに新規サーフェイスのさらなる改良とバイオマテリアル上での細胞運動、細胞接着ならびにマテリアルの安全性を調べることを到達目標とした。1.バイオマテリアルサンプルの準備初年度に用いたチタンディスクに加えて、現在、実際にアバットメント用として臨床応用されているジルコニアをインプラントメーカーより入手した。このジルコニアディスクを用いて、無処理のものと光照射処理したものを準備した。2.バイオマテリアル上での細胞運動・細胞接着ならびにマテリアルの安全性の検討8週齢の雄ラットから採取し分離培養した骨芽細胞の細胞運動および細胞接着に関与するlntegrin、Racl、RhoA、Cdc42に着目し、発現パターンを網羅的に解析した。また、in vitroでのFlow cytometryによるCellviability testを行い、光照射処理したバイオマテリアルの安全性についても確認した。しかしながら、当初予定していた上皮細胞を用いた実験系では必ずしも期待通りの実験結果とはならなかったため、今後さらなる検討を継続する予定である。
宇宙飛行に伴う前庭－血圧反射の可塑性とその対策

前庭ー血圧反射は起立時の血圧維持に重要な役割を果たしている。しかし,前庭系は可塑性が強い器官であることが知られており,長期の宇宙滞在により前庭ー血圧反射の調節力が変化する可能性がある。このことが宇宙から帰還後の起立性低血圧に関与している可能性がある。このことを国際宇宙ステーションに4ー6ヵ月滞在した宇宙飛行士において調べた。宇宙から帰還1日ー2週間後には前庭ー血圧反射が全く働かなくなり,起立直後に血圧が低下することが分かった。また,弱い電流で末梢前庭系を電気刺激することにより低下した前庭機能が改善する可能性を示した。宇宙飛行士を被験者とした研究:HoustonのJohnson SpaceCenterにおいて,国際宇宙ステーション(ISS)滞在前後(滞在2ヶ月前,帰還1日後,2週間後,2ヶ月後)にHead-up tile (HUT)実験を実施し,HUT時の血圧調節における前庭ー血圧反射の関与を調べた。26年3月31日の時点で,2名の宇宙飛行士に関しては全てのデータセットを取得した。他の2名に関しては滞在前のデータを取得した。この2名については26年度中に滞在後のデータを取得予定である。全データセット取得完了した2名については,ISS滞在前には前庭ー血圧反射が働いてHUT時の血圧が維持されていた。しかし,帰還1日後と2週間後には前庭ー血圧反射が全く働かなくなっていた。前庭ー血圧反射の機能は,帰還後2カ月で,元のレベルにまで回復した。前庭ー血圧反射機能の低下およびその回復過程は,宇宙飛行士の〝フラツキ"の自覚とその回復過程とよく一致していた。ラットを用いた研究:異なる重力環境下で生活すると引き起こされる前庭機能の低下が,外部から前庭系を電気刺激することにより予防できるかどうかを調べた。ラットを2週間3 gの過重力環境で飼育する前後で,前庭ー血圧反射試験,ロータロッド試験を行い,前庭系を介する血圧調節と運動制御を評価した。過重力負荷により,前庭ー血圧反射が低下しとロータロッド上の歩行時間も減少した。これらの機能低下は,過重力環境下で飼育中に,前庭系を電気刺激することにより有意に回復した。この実験結果は,微弱な電流で間欠的に前庭系を刺激することにより,前庭系の機能低下が予防できる可能性を示すものである。マウスを用いた研究:27年度にISS搭載予定で開発中のマウス飼育装置および1 g負荷短腕遠心装置を岐阜大学に設置し,回転によるコリオリ力の影響を調べた。宇宙飛行士を被験者とした研究:ヒューストンのJohnson Space Centerにおいて,宇宙飛行前後に,Head-up tilt (HUT)実験を行い,HUT時の血圧調節における前庭ー血圧反射の関与を調べた。1名の宇宙飛行士においては,飛行前,4ヶ月の宇宙飛行から帰還後1日,2週間,2ヵ月のデータが取得できた。もう1名の宇宙飛行士においては,宇宙飛行前のデータを取得した(飛行後のデータ取得は平成25年57月の予定)。宇宙飛行前には,前庭ー血圧反射が働いて,HUT時の血圧が維持されていた。しかし,帰還直後には前庭ー血圧反射が全く働かなくなっていた。ラットを2週間3 gの過重力環境で飼育する前後で,ロータロッド試験を行い,前庭系を介する運動機能を評価した。過重力負荷により,ロータロッド上の歩行時間が有意に減少した。この減少は,過重力環境下で飼育中に,前庭系を電気刺激することにより有意に回復した。宇宙飛行士を被験者とした研究:HoustonのJohnson SpaceCenterにおいて,国際宇宙ステーション(ISS)に4ー6ヵ月間滞在した前・後(宇宙飛行2ヵ月前,帰還直後1ー2日,2週間後,2ヵ月後)にHead-up tilt(HUT)実験を実施し,起立時の血圧調節における前庭ー血圧反射の関与を調べた。Galvanic Vestibular Stimulation (GVS)で前庭系からの入力をマスクして前庭ー血圧反射が起こらないようにした状態での血圧応答と,GVSがない状態での血圧応答の差により前庭ー血圧反射の大きさを評価した。

ISS滞在前には前庭ー血圧反射により12±2 mmHgの昇圧がみられ,HUT直後の血圧は維持されていた。しかし,帰還直後及び2週間後には前庭ー血圧反射は全く働かなくなり,HUT直後に血圧が低下した。帰還2ヵ月後には前庭ー血圧反射により10±4 mmHgの昇圧がみられるようになった。以上の結果から,4ー6ヵ月の宇宙滞在により,前庭系の機能が低下し,起立時に前庭ー血圧反射が起こらなくなって血圧が低下することが示された。この前庭機能の低下は,帰還後2ヵ月をかけて徐々に回復してくることが分かった。動物実験:平成27年度にISS内に設置予定の短腕遠心機内でマウスを飼育する影響を調べるため,岐阜大学に設置した短腕遠心機と長腕遠心機で1.4 G環境を作成し,その中でマウスを飼育して効果を検証した。1.4 G飼育開始直後に摂食・摂水量は大きく減少し,3日目には前値に戻った。これに伴い,4週間の飼育後には体重は1 G群と比べて1.5 g減少した。また,前庭神経核でのグルタミン酸受容体の発現量は80%に減少した。これらの応答に短腕と長腕間に差はなかった。以上の結果から,短腕遠心機も長腕遠心機と同様重力負荷装置として小動物の飼育が可能であることが示された。環境生理学宇宙飛行士の実験時間は厳密に管理され,また多くの実験申し込みがあるため,宇宙飛行士の同意を得るために激しい競争がある。その中で,24,25年度で2名の滞在前後のデータセット取得が完了した。他の2名については,滞在前のデータが取得でき,26年度に滞在後のデータを取得できる予定である。さらに,新たに2名の宇宙飛行士が我々の実験に参加することに同意した。これらの宇宙飛行士については,2627年度にかけて実験する予定である。従って,宇宙飛行士を被験者とした研究は,若干の遅れがあるものの予定した被験者数を確保できる。ラットを用いた研究では,前庭系を外部から微弱な電流で間欠的に前庭系を刺激することにより,前庭系の機能低下が予防できる可能性が示された。今までにない新たな予防法として,ヒトへの応用実験を行っている。また,新たにマウス研究を立ち上げ,27年度にマウスをISSに長期滞在させる実験の予備地上実験を行っている。従って,動物実験についてもほぼ予定通り順調に進展していると判断できる。宇宙飛行士の実験時間は厳密に管理され,また多くの実験申し込みがあるため,宇宙飛行士の同意を得るために激しい競争がある。その中で,初年度は,1名の宇宙飛行士の飛行前後のデータ取得が完了した。また,もう1名の宇宙飛行士については,飛行前のデータが取得できた。この宇宙飛行士の飛行後のデータは平成25年度に取得完了予定である。さらに,新たに2名の宇宙飛行士が我々の実験に同意した。これらの宇宙飛行士については,平成2526年度にかけて実験する予定である。従って,宇宙飛行士を被験者とした研究は,概ね予定通りに進展していると判断できる。今までにない新たなカウンターメジャーとして,今後この研究が進展する可能性がある。26年度中にn=4を達成できる。
20世紀初頭における「中国」表象の受容・形成・展開についての総合的研究

本研究では、191020年代における日中の人的交流のさまを、文化、教育、メディアの面から捉えた。当時の東京帝国大学で、中国最新刊の『西廂記』テキストを用いて講義が行われていた(芥川龍之介聴講ノート)ことが確認され、それが後年の梅蘭芳訪日公演(1919,1924)による日華関係改善の試みにつながった可能性も見えた。その一方で、各帝国大学では歴史教育を通じて中国の政治的無力と日本による支配の必然性が強調された傾向があり、“戯劇"の受容にもバイアスがかかったと言える。反面、同時期の中国では、“戯劇"が政治諷刺の力を持ち、有効なメディアとして働いたことが確認された。本研究は、近代日本の知識人が、どのような「中国」表象をいかに受容し、(再)生産していったかを解明しようとするものである。手がかりとして用いているのは、日本近代文学を中心とするメディア上の言説や、文学者を中心とした知識人たちの受けた教育についての資料である。初年度である平成27年度、最も大きく力を注いだのは、芥川龍之介「支那戯曲講義ノート」の分析である。このノートは芥川が東京帝国大学に在籍していた1910年代初めに、塩谷温助教授の「西廂記」に関する授業を受けて筆記したもので、現物は、芥川の他の講義ノートとともに山梨県立文学館におさめられている。本研究では、すでに平成26年までに撮影しておいた「戯曲ノート」を、「西廂記」関連文献を参照しながら翻刻を進めるとともに、改めて同文学館を訪ねてこれらのノートの実物を見学、学芸員の教示も求めた。同時に、日本近代文学関連の一次資料に詳しい研究者にも、資料の扱い方、解読上の注意などを受けることができた。第二に力を注いだのは、191020年代の『大阪毎日新聞』と作家たちの関わりについての分析、芥川龍之介「上海游記」の言説分析である。これについては、平成27年8月30日の公開研究会で、成果の一部を共有することができた。第三は、日本近代文学の担い手たちが「中国」についてどのような言説を発しているかを広く調査したことである。この作業中、同時代の中国の知識人が「日本」に対してどのような発言をしてきたかを見ることもできた。これらの成果の一部は、『日中の120年文芸・評論作品選』15(岩波書店、研究代表者篠崎=同書の編集協力者)として公刊中である。平成27年年6月、研究代表者が専務校の役職(入試部長)に就き、過密な校務のために連泊の出張が不可能になった。そこで、当初予定していた北京における京劇関連文献調査を平成28年度に延期せざるを得なくなってしまった。研究の遅れは、この点において生じたものである。一方、日帰りの研究会をこまめに開催し、在京で可能な文献調査の結果を共有することはできた。また、1泊で山梨県立図書館、山梨県立文学館を訪れ、芥川龍之介「支那戯曲講義ノート」についての調査を行うとともに、一次文献の分析方法について専門家の教示を受けることもできた。同資料の翻刻は順調に進んでいる。具体的には、近代文学の担い手の発した言説や、彼らの受けた教育の内実を調査、分析する研究だと言ってよい。初年度の平成27年度は、芥川龍之介が東京帝国大学の学生時代に記録した聴講ノート「支那戯曲講義(塩谷温助教授)」を主な調査対象として、その翻刻に力を注いだが、今年度は、その成果の一部を活字にすることができた。翻刻は引き続き進行中である。また、芥川が塩谷温から「支那戯曲」(「西廂記」)の講義を受けたという事実を核として、研究を以下の三方向に拡大することができた。1.芥川が東京帝国大学において筆記した聴講ノートをもとに、19001910年当時の帝国大学で、「支那戯曲」を初めとする「中国」に関連する知がどのようなものとして位置づけられていたのかを分析。(庄司)2.「支那戯曲」の講義を担当した塩谷温自身が、どのようなプロセスをたどって「中国」に関する知を身につけ、生涯にわたってどのような言説を発信していったのかを調査。(田中)3.1900年1910年当時に東京、京都、東北帝国大学で「支那」を抑圧する帝国主義的言説が講義されていた一方で、上海同文書院には、日華関係を改善し共存を目指す知識人を養成する「未発の可能性」も見られたことを確認。(篠崎)これらの成果は、学会パネル発表で公開した。さらにそれを踏まえ、1920年代の日華関係と京劇などの“戯劇"との関係の調査も開始している。平成27年度は、研究代表者が専務校の役職(入試部長)に就き、過密な校務のために予定していた海外出張が難しくなり研究の進展が遅れてしまったが、28年度はその役を離れ、ほぼ2年分の調査出張を実施することができた。また、中国における学会でのパネル発表の機会や、単行本刊行や紀要論文の発表の機会に恵まれ、これまで地道に積み重ねてきた調査、分析の成果の多くを公開することができた。

本研究では、20世紀前半、とくに19101920年ごろを中心とした日中間の人的交流を、文学、教育、メディア等の面から検証することができた。当時は、日本の侵略に伴い、五・四運動に象徴される抗日運動がめだち始めた時期として知られるが、それは見方を変えれば、それまでになく日中の市民が接触を持ち、交流を深めた時期であったと考えることも可能である。その実態を、複数の観点から確認した。まずは日本の知識人がどのように「中国」を認識したのかを知るモデルとして、1910年代の東京帝国大学における「芥川龍之介聴講ノート『支那戯曲講義塩谷温助教授』」を翻刻し、内容を調査した結果、1911年に上海で刊行されたばかりの『陳眉公批西廂記』という書物が数年以内に帝国大学のテキストとして使用されていた可能性が高いことがわかった。一方で、東北帝国大学、東亜同文書院などで教育された「中国」言説の調査を行った結果、当時の帝国大学では、一方で異国情緒あふれる理想の「中国」像が古典を通じて伝えられたとともに、一方では政治的に無力な「中国」像と日本による支配の必然性が強調されていたことが明らかになった。なお、中国の“戯劇"を一種のメディアとしてとらえたことも、我々の研究の大きな成果である。“戯劇"が中国の政治的な言説と密接にリンクしていた当時の実態を、ポンチ絵などを手掛かりに解明したばかりでなく、女形梅蘭芳の来日公演(1919,1924)が、日華関係の改善のために企画されたにも拘わらず、男性性の優位を重んじる言説の中で、むしろ日本市民の植民地主義的な欲望を満足させる結果に陥った経緯もとらえ得た。さらには、20世紀前半の台湾において、中国とは異なるどのような文化的「交流」があったかを、今後の課題として見出すこともできた。本研究では、191020年代における日中の人的交流のさまを、文化、教育、メディアの面から捉えた。当時の東京帝国大学で、中国最新刊の『西廂記』テキストを用いて講義が行われていた(芥川龍之介聴講ノート)ことが確認され、それが後年の梅蘭芳訪日公演(1919,1924)による日華関係改善の試みにつながった可能性も見えた。その一方で、各帝国大学では歴史教育を通じて中国の政治的無力と日本による支配の必然性が強調された傾向があり、“戯劇"の受容にもバイアスがかかったと言える。反面、同時期の中国では、“戯劇"が政治諷刺の力を持ち、有効なメディアとして働いたことが確認された。平成28年度は、まず、これまでの研究成果を第15回日本文学年会・国際シンポジウム(杭州師範大学)で口頭発表する予定である。また、27年度に実施することができなかった、北京における京劇資料の調査を行いたい。とくに、1920年代における梅蘭芳の2回の来日公演など、日華関係改善のために京劇にどのような期待が寄せられたのか、また京劇がどのような役割を果たしたのか、現地でしか見ることのできない資料を見、入手し、分析することにしたい。一方、芥川「支那戯曲講義ノート」の分析結果は、東京帝国大学における中国関係の「知」の受容の問題へと結実させる計画である。さらには、帝国大学における受容と東亜同文書院の受容とを比較対照させ、「中国」「支那」概念そのものを問い直す地点を目指すことにする。平成29年度は、国際芥川龍之介学会大会(海洋大学:中国青島)にパネル発表の形で参加し、これまでの成果を公開する予定である。平成28年度より、恵泉女学園大学平和文化研究共同研究プロジェクト「中国による近現代「日本」表象の形成と変遷」としばしば合同研究会を開いており、この学会にはチームを組んで参加し、日本知識人の「中国」表象と、中国知識人の「日本」表象の両面を示すことができるようにしたいと考えている。また、ひきつづき“戯劇"と日華、日中関係との関連、上海
ヒト卵胞液中のインヒビンの精製とリコンビナントヒトインヒビン産生システム開発

1.ウシの卵胞液から精製したインヒビンの抗体を用いたイムノアフィニテイクロマトグラフィーによってヒトの卵胞液中のインヒビンを初めて精製することに成功した。このヒトインヒビンを用いて特異的なヒトインヒビンの測定法を開発した。先ずインヒビンのαサブユニットの多クローン抗体をプロテインGアフィニテイクロマトで精製した。この精製抗体をポリスチレンビーズに結合させた。このビーズとインヒビンの標準品あるいは試料を反応させるとインヒビンは抗体によって捕捉される。さらに^<125>I標識したインヒビンのβサブユニットの単クローン抗体によってインヒビンを検出するimmunoradiometric assay(IRMA)を開発した。このインヒビンのIRMA法によってヒトインヒビンAの特異的測定法を初めて開発できた。2.インヒビンAのIRMA法によってヒトの月経周期と妊娠中のインヒビンAの測定で試みた。月経周期中の血中のインヒビン濃度はimmuno-reactive(ir)インヒビンを測定するRIAでは排卵期と黄体期にピークを示したが、IRMAによる測定結果は感度以下であった。RIAとIRMAの測定感度はほぼ同じであるので、月経周期中に分泌されるインヒビンは殆どirインヒビンであることが示唆された。一方、妊娠中の血中インヒビン値はRIAとIRMAの双方によって測定され、妊娠初期と後期にピークを示す二相性のパターンを示した。IRMAの値はRIAの値の約40%であることから妊娠中にも多くのirインヒビンが分泌されていることが示唆された。3.インヒビンのβBサブユニットのcDNAをCHO細胞に導入しリコンビナントアクチビンBの産生システムを開発すると共に純化することに成功した。1.ウシの卵胞液からインヒビンを精製し、そのインヒビンをヤギに免疫することによって高力価の抗体を大量に作成することができた。ウシインヒビンの単クローン抗体を結合させたアフィゲル10カラムに卵胞液を流し、素どうりする夾雑蛋白質を除いた後に酸性緩衝液で吸着しているインヒビンを溶出した。セファクリールS200によるゲルロカによって分離した後に逆相のHPLCによって最終精製を行った。このインヒビンをSDS-PAGEによってさらに精製しインヒビン分画のゲルをホモジェナイズしヤギに免疫した。毎月1回の免疫の後に約1リットルの血液を採取し抗血清を分離した。2.抗ウシインヒビン抗体を用いた免疫吸着クロマトによりヒトの卵胞液からインヒビンを精製するシステムを開発した。ヤギで作った抗血清を33%硫安により部分精製した抗体を脱塩した後にアフィゲル10とカップリングし免疫吸着クロマトカラムを作成した。IVF時に採取したヒト卵胞液500mlをmatrexgel redAカラムに通しインヒビン分画を吸着させ、夾雑タンパク質を洗浄した。吸着したインヒビン分画は1モル尿素によって溶出したのちに脱塩し免疫吸着クロマトにアプライした。ウシのインヒビンと同様に非吸着タンパク質を充分に洗浄したのちに酸性緩衝液によりインヒビンを溶出した。この方法によってヒトインヒビンは1万倍以上に精製された。さらにスパーデックスpg200を用いたゲルロカと逆相のHPLCによってヒトのインヒビンを精製した。ヒトのインヒビンは分子量の異なる34kDaと28kDaのisohormoneが存在した。精製したヒトのインヒビンはβAサブユニット単クローン抗体によって染色されることからインヒビンAであることが明かとなった。

1.ウシの卵胞液から精製したインヒビンの抗体を用いたイムノアフィニテイクロマトグラフィーによってヒトの卵胞液中のインヒビンを初めて精製することに成功した。このヒトインヒビンを用いて特異的なヒトインヒビンの測定法を開発した。先ずインヒビンのalphaサブユニットの多クローン抗体をプロテインGアフィニテイクロマトで精製した。この精製抗体をポリスチレンビーズに結合させた。このビーズとインヒビンの標準品あるいは試料を反応させるとインヒビンは抗体によって捕捉される。さらに^<125>I標識したインヒビンのbetaサブユニットの単クローン抗体によってインヒビンを検出するimmunoradiometricassay(IRMA)を開発した。このインヒビンのIRMA法によってヒトインヒビンAの特異的測定法を初めて開発できた。2.インヒビンAのIRMA法によってヒトの月経周期と妊娠中のインヒビンAの測定を試みた。月経周期中の血中インヒビン濃度は、immunoreactive(ir)インヒビンを測定するRIAでは排卵期と黄体期にピークを示したが、IRMAによる測定結果は感度以下であった。RIAとIRMAの測定感度はほぼ同じであるので、月経周期中に分泌されるインヒビンは殆どirインヒビンであることが示唆された。一方、妊娠中の血中インヒビン値はRIAとIRMAの双方によって測定され、妊娠初期と後期にピークを示す二相性のパターンを示した。IRMAの値はRIAの値の約40%であることから妊娠中にも多くのirインヒビンが分泌されていることが示唆された。3.インヒビンのbetaBサブユニットのcDNAをCHO細胞に導入しリコンビナントアクチビンBの産生システムを開発すると共に純化することに成功した。
モノクローナル抗体による神経成長因子受容体機能の研究

神経成長因子(NGF)は交感神経節及び知覚神経節を含む神経冠由来の細胞の成長、発育、分化を調節しているタンパク質である。NGFは細胞表層にある特異的受容体(NGF・R)との結合によりその作用を細胞内に伝え、分化した形質の発現を調節していると考えられる。NGF作用機構の解明にはまずNGF・Rの役割を明らかにする必要があると考え1.受容体の再構成と精製の試み及び2.モノクローナル抗体の作成を行った。1.受容体の再構成と精製の試み。上頚神経節を用いてポリエチレングリコールにより膜分画と3T3細胞を融合させると、RI標識した膜及びNGF結合活性の測定から15-35%の膜が取り込まれることが明らかになった。125I-NGFとの結合は飽和性であり、NGFの結合をモュレートするWGLを加えるとNGFの結合量は約80%増加し、さらに高親和性成分の割合も増加した。膜分画を可溶化した後NGFアフィニティークロマトグラフィーで部分精製した成分をリン脂質膜に組み込むと、NGFとの結合から高い親和性(Kd0.28nM)と低い親和性(Kd3.2nM)の2つのサイトを再現できた。WGLは高い親和性部位を増加せしめた。この再構成膜をさらに3T3細胞に植え込むこともできた。膜可溶化成分を高速液クロ(HPLC)で分析すると2つの成分が結合活性を示した、ハイドロキシアパタイトや陰イオン交換クロマトでは失活が激しく、ゲルロ過とアフィニティークロマトグラフィーのみがかなり精製されたNGF・Rを与えた。2.モノクローナル抗体作成。この様に部分精製したNGF・R成分を用いてin vitro immunization法によりモノクローナル抗体を作成した、現在ELISA法によって、ハイブリドーマのアッセィを行っている。さらに抗体の生理的作用についても調べる予定でいる。
大腸癌の進行に伴うがん遺伝子、抑制遺伝子の変化

家族性大腸腺腫症(FAP)患者に発生した腺腫と癌における対立遺伝子欠失(欠失)を解析した結果、腺腫の発生と高異型化におけるAPC遺伝子領域の欠失の関与、腺腫から粘膜内癌への転換におけるp53遺伝子領域の欠失の関与、および粘膜内癌から浸潤癌への進展におけるDCC遺伝子領域に欠失や染色体の22q欠失の関与が明らかになった。今年度新たに、一般集団に発生した中異型腺腫、高異型腺腫、粘膜内癌、浸潤癌について遺伝子変化を解析した結果FAPと同様の変化が染色体5q,17p,18q,22qに検出された。5qの欠失は中異型腺腫で14%、高異型腺腫、粘膜内癌、浸潤癌で4047%の頻度で検出された。17pの欠失はFAPの場合と同様に腺腫では検出されず、粘膜内癌になって初めて検出され、その他の異常もFAPと同様の頻度で検出された。これらの結果から、FAPと一般集団の違いは腺瘍発生の段階だけにあると言える。17pの欠失を調べたFAP患者の腫瘍274検体についてp53遺伝子の突然変異をPCRーSSCP法により解析し、56個の変異を検出した。これらの変異が多段階発癌のどの過程に寄与するかを明らかにするため、腫瘍の病理組織診断と対比させた。その結果、腺腫から早期癌への転換(コンバ-ジョン)とp53遺伝子の変異と欠失による不活性化が必須であることが明らかとなった。さらに、浸潤癌では新たに染色体1pの欠失が約30%の頻度で検出された。培養大腸癌細胞に正常1番染色体を移入すると癌形質の抑制が観察されたので、1pにも大腸癌の抑制遺伝子が存在すると考えられる。
地下研究施設国際ネットワークによる宇宙の歴史の解明

世界最高感度での暗黒物質探索をリードする二相式液体キセノンTPC実験XENONnTを国際協力のもとで推進するため、XENONコラボレーションとMoUを締結し、日本グループが国際コラボレーションに新たに参加することとなった。地下素核領域で開発した硫酸ガドリニウム水溶液を外槽に用いることで、最も厄介な中性子バックグラウンドを低減するとともに、中性子の発生源を特定することが可能となり、探索感度の改善が見込まれる。通常探索の限界と考えられるニュートリノフロアを突破できる技術として方向感度を持った暗黒物質探索の重要性が高まる中、グランサッソ研究所、ミュンヘン工科大学、CERNなどとともに暗黒物質探索実験の国際ネットワークを推進した。神岡地下に世界を呼び込み方向有感検出器開発環境の世界的ハブに展開しつつある。超高分解能の極低温熱量計に二重ベータ崩壊核を含むフッ化カルシウムシンチレーション結晶を導入した蛍光熱量計を韓国AMoRE実験との協力で開発し、粒子識別性能や検出器特性の調査を行い、温度センサーへの蛍光入射によるエネルギー分解能悪化などの問題点を切り分け、設計改善にフィードバックした。また低温熱量計は、低質量暗黒物質探索にも適用できる技術であるため、二重ベータ崩壊研究と低質量暗黒物質探索の双方を目的とした連携を開始した。その他、SK-Gd計画のためのガドリニウムの中性子捕獲反応モデル作成、超新星ニュートリノの炭素・酸素標的での中世カレント反応の国際共同研究、ハワイ大学と共同で光電子増倍管の時間応答の高精度化に関する研究推進、フランス・インドとの部局間国際協定による連携、国際連携のCYGNUSプロジェクトの連携拡大のための活動、ニュートリノ反応国際スクールの開催、重力波とニュートリノ、さらに光学とのマルチメッセンジャー観測のための国際ネットワーク構築を支援した。暗黒物質の方向測定で、神岡地下施設、英国Boulby地下実験施設、イタリアフラスカティ研究所を含んだ国際ネットワーク形成が進んでいる。また、マサチューセッツ工科大学などとの電子回路の共同開発が進んでいる。さらに、イタリアグランサッソ研究所で国際共同研究の予備実験を始めるなど国際ネットワーク形成の進展があった。これらの協働には大学院生も参加しており、将来的な展開が期待できる。その他、韓国の地下実験施設(IBS Center for Underground Physics及びJangyang地下実験施設)ともインフラ整備・極低放射能環境と測定技術について議論し、情報交換や共同実験の下地を作った。また、韓国標準科学研究院(KRISS)と共同の極低エネルギー構成線源の開発を支援した。また、SK-Gdの極低放射能化に関連して、外国人ポスドクを雇用し神岡地下での国際共同研究体制をより強固にしたほか、英国Boulbyとも協働の極低放射能測定を実施・支援した。さらに、国際ニュートリノ原子核反応スクールを共催し若手育成にも貢献した。その他、神岡地下実験への海外からの参加を支援し、KamLAND外水槽の改修など大規模な研究展開にも貢献した。また、重力波観測とニュートリノ観測が連携してマルチメッセンジャー観測を行うことに対して新たにMoUを交わした。英国Boulby・イタリアGran Sassoの地下施設との地下施設の国際ネットワーク形成が順調に進んでいる。また地下素核研究で使用する電子回路の共同開発が検討されるなど、新たな国際活動が芽吹いている。若手も国際協働に関与できており国際活動支援が順調に進んでいる。方向に感度を持つ暗黒物質探索実験の将来の国際協力のため、CYGNUS proto-collaborationを結成し、密な議論を重ねている。5人のsteering committee memberに加わるとともに、約50名のproto-collaborationに対して約20名の日本人が参加し中核的な存在である。また、原子核乾板を用いた方向に感度を持つ暗黒物質探索実験NEWSdmが、グランサッソ地下実験室で原子核乾板を用いた予備実験を開始した。さらに、韓国の地下実験施設(IBS Center for Undergroun Physics及びYangYang地下実験室)との研究協力体制を築き、極低放射能測定技術に関する情報交換を行った。その他、マサチューセッツ工科大学との電子回路の共同開発に加えて重力波とニュートリノの協調観測を進展させている。神岡での国際共同研究も大きく進展し、ニュートリノを伴わない二重ベータ崩壊探索では世界を大きくリードする感度を実現した。CYGNUS proto-collaborationの形成を実現し、国際的な連携が実現した。また、イタリアグランサッソでの予備実験が実現したほか、韓国IBSや米国MITとの国際連携が進んでいる。超高分解能な極低温熱量計を、フッ化カルシウムシンチレーション結晶と組み合わせ、粒子識別が可能な極低温蛍光熱量計としてニュートリノを伴わない二重ベータ崩壊探索に適用するため、クライオ技術・超高感度温度読み出しなどの習得を目的として、韓国のAMoRE実験と協力して韓国IBS研究所に置いて試験実験を行い、粒子識別性能や検出器特性の調査を行なった。感度を持つ暗黒物質実験の国際ネットワークを展開し、英国シェフィールド大・フランスLPSC研究所・CERN・中国ジンピン地下実験施設などと協力して、国際共同で国内での検出器試験を行うことを決定した。英国が検出器本体、日本が試験チェンバー及び配管・検出器搭載用のプレートを準備する。また、原子核乾板を使った暗黒物質探索としてイタリアナポリ大・グランサッソ研究所などと協力してグランサッソ地下施設において装置の設置調整を行った。世界最先端でのWIMPs暗黒物質探索に貢献するため現在世界最大級の計画であるXENONnT国際共同実験への参加が決まり、その支援を始めた。