hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
小動物の脳疾患に対する核磁気共鳴画像診断装置の有用性と限界

1)撮像方法の確立永久磁石型低磁場核磁気共鳴画像装置(以下MRI)(Hitachi, MRP-AIRIS, 0.3T)で小動物の脳を撮像する際の最適条件を検討した。その結果、T1強調像、T2強調像に加え病変検出力の高いFLAIR像を基本撮像方法とした。造影MRIでは人と比べガドリニウム製剤による増強効果が低いため、比較的高容量の0.3mmol/kgを使用することとした。2)犬および猫の自然発症脳疾患のMRI診断研究期間中に脳疾患が疑われてMRI検査を行った症例のうち157症例について解析を行った。てんかん様発作を主訴とする症例では、MRI検査上異常を認めない真性てんかん、脳腫瘍、脳室拡大あるいは髄膜脳炎像など様々な画像所見が得られ、真性てんかんと症候性てんかんの鑑別に有用であった。犬の水頭症症例については、品種および個体による脳室の大きさにバリエーションがあり水頭症の診断を困難にしている。このため側脳室の容積、形状の測定を行い、犬種間の比較を行ったところ、大型犬種では側脳室が小さく、個体間のばらつきも少ない傾向が認めた。一方、先天性水頭症の好発犬種とされている多くの小型犬種では側脳室の容積のばらつきが大きい傾向を認めた。脳炎と診断された症例については、犬ジステンパーウイルス(CDV)による脳炎が疑われる症例が多く認められたが、CDV脳炎のMRI像は多岐にわたり、特異的な所見はなかった。一方、壊死性脳炎の症例もMRI検査により数例診断され、そのMRI像の経時的な変化についても解析を行った。さらに従来生前の確定診断が不可能とされてきた肉芽腫性髄膜脳炎の症例についても、MRI検査およびCSF検査から診断できる可能性が得られた。脳腫瘍の症例については、髄膜腫等ではそのMRI所見から腫瘍の種類まで診断が可能であった。また、MRIによるボリュームデータは手術法の検討に有用であった。1)撮像方法の確立東京大学大学院農学生命科学研究科附属家畜病院で使用している核磁気共鳴画像診断装置(以下MRI)(Hitachi,MRP-AIRIS,0.3T)で小動物の脳を撮像する際の最適条件を検討した。通常のMRI検査で用いられるT1強調像,T2強調像の他に、病変の検出力に優れているとされるプロトン密度強調像、FLAIR像について検討した結果、本装置ではFLAIR像がより病変検出力に優れていた。また、ヒトで脳実質の高いコントラストが得られることが報告されているSTIR法に関しては、本装置の磁場強度が低いため、診断に有用な画像は得られなかった。したがって、本研究における基本撮像方法としては,T1強調像,T2強調像に加えFLAIR像を使用することとした。いっぽう,造影MRIではヒトと比ベガドリニウム製剤による増強効果が低い傾向が認められたため、比較的高用量の0.30.4nmol/kgを使用することとした。2)犬および猫の自然発症脳疾患のMRIによる診断今年度は脳疾患が疑われて来院した犬、猫の約200症例についてMRI検査を行った。てんかん様発作を主訴とする症例では、MRI検査上異常所見を認めない真性てんかん、脳腫瘍、脳室拡大など様々な画像所見が得られた。今後同時に行っている脳脊髄液検査結果等と合わせて詳しい解析を行う予定である。

水頭症の症例では、MRI画像で側脳室前角のrounding、第3脳室の拡大などヒトで脳圧亢進の指標とされている所見が動物でも同様に認められた。今後は脳室の形状についてさらに詳細な解析を加える予定である。脳炎と診断された症例については、犬ではイヌジステンパーウィルス(CDV)による脳炎が疑われる症例が数多く認められた。これらの症例のMRI像は非常に多岐にわたり、CDV脳炎に特異的な所見は得られなかった.しかしながら、病期や症状とMRI所見との間には関連が認められ、今後、MRI検査所見をCDV脳炎の病期診断や予後判定に使用できる可能性がある。今年度は脳疾患が疑われて来院した犬、猫の約200症例についてMRI検査を行った。そのうち臨床所見、神経学的検査、臨床検査などのMRI以外のデータも十分な症例約100症例について、てんかん、水頭症、脳腫瘍、脳炎、前庭疾患の各疾患ごとにMRI像の解析を行った。てんかん様発作を主訴とする症例では、MRI検査上異常を認めない真性てんかん、脳腫瘍、脳室拡大あるいは髄膜脳炎像など様々な画像所見が得られ、多くの脳疾患によりてんかん様発作が発症する事が確認された。犬の水頭症症例については、品種および個体による脳室の大きさにバリエーションがあり水頭症の診断を困難にしている。このためMRI検査を行った症例のうち、脳室の大きさの変化以外の脳病変が認められなかった86症例について、側脳室の容積、形状の測定を行い、犬種間の比較を行った。その結果、ラブラドール、ダルメシアンなど大型犬種では側脳室が小さく、個体間のばらつきも少ない傾向が認められた。一方、マルチーズ、チワワなどの先天性水頭症の好発犬種とされている多くの小型犬種では側脳室の容積のばらつきが大きい傾向がみとめられ、無症候性でも脳室の拡大を生じている犬が多いことが予想された。脳炎と診断された症例については、犬ジステンパーウイルス(CDV)による脳炎が疑われる症例が多く認められた。一方、壊死性脳炎の症例もMRI検査により数例診断され、そのMRI像の経時的な変化についても解析を行った。さらに従来生前の確定診断が不可能とされてきた肉芽腫性髄膜脳炎の症例についても、MRI検査およびCSF検査から診断できる可能性が得られた。脳腫瘍の症例については、髄膜腫等ではそのMRI所見から腫瘍の種類まで診断が可能であった。また、MRIによるボリュームデータは手術法の検討に有用であった。この他、前庭疾患、出血性病変の診断についてもMRI検査の有用性が示された。
九大所蔵十万頌般若経古写本の研究

(成果)1.九大所蔵のターラ古写本(330葉)の約半分をコンピュータによってローマ字に書写した。2.東京大学、京都大学に所蔵されている『十万頌般若経』写本のコピーを入手し、それらとの照合を上記の書写の範囲についてなした。3.漢訳、チベット語訳との照合も上記の書写の範囲についてなした。ただ、チベット語訳との照合はなお多くの問題点を残した。4.九大所蔵の写本には葉番号の不明な葉が数十枚あるが、それらの番号の推定(別言すれば、それらの葉の位置の推定)はなしえなかった。それは、この推定が、葉番号の分かっている葉をすべてローマ字化したのち始めて可能なことであるからである。(総括と今後の課題)今後、後半のローマ字化をなし、同時にそれを他の写本や漢訳、チベット語訳との照合をなすことはもちろんであるが、なお外国に所蔵されている写本を入手、照合することなど、残された問題は多い。しかし、本研究はもともと、最終目的である九大所蔵古写本のローマ字化による公刊のための端緒をつけることを目指したものであるが、それは果たせたと思う。本研究代表者は平成5年3月31日をもって停年退官する。残る九大関係者が継続してこの研究の最終目的を成し遂げるのを見守りたい。
衛星・音響データと数値モデルによる養殖場周りの土砂流出警告システムの開発

2018年7月に発生した西日本豪雨では,広島県を中心に死者200人を超す大災害となった.この災害では,河川を通じ大量の土砂が瀬戸内海に流出し,地元特産のカキなどの養殖場に大きなダメージを与えた.しかし頻発する豪雨災害に対応が追いつかない現状がある.そこで,本研究では,今後の同様な豪雨災害を見据えて,養殖場まわりに流れ込んだ土砂流出分布を衛星や音響トモグラフィーで即時把握するシステムを構築するとともに,非接触計測できる音響トモグラフィーや衛星によるモニタリングデータを数値モデルに同化させて,養殖業者などの被害軽減を対象として平時からの流出土砂量警告システムの開発を目的とする.2018年7月に発生した西日本豪雨では,広島県を中心に死者200人を超す大災害となった.この災害では,河川を通じ大量の土砂が瀬戸内海に流出し,地元特産のカキなどの養殖場に大きなダメージを与えた.しかし頻発する豪雨災害に対応が追いつかない現状がある.そこで,本研究では,今後の同様な豪雨災害を見据えて,養殖場まわりに流れ込んだ土砂流出分布を衛星や音響トモグラフィーで即時把握するシステムを構築するとともに,非接触計測できる音響トモグラフィーや衛星によるモニタリングデータを数値モデルに同化させて,養殖業者などの被害軽減を対象として平時からの流出土砂量警告システムの開発を目的とする.
歯科におけるクォリティーオブライフについて-日常の意識と臨床所見との相関について-

研究目的:個人の口腔機能に関する意識と臨床所見との関連を見いだし、歯科におけるクォリティーオブライフとは何かを考え、歯周治療の新たなゴールを求めることを目的とする。研究方法:20-44歳の健康な成人376人について、プラーク指数、ポケット、アタッチメントレベルなどの臨床検診を行い、各個人の平均値およびCPITNを算出した。また、咀嚼能率ガムを50回咬ませた後、色彩色度計にてガムの色の変化を測定し、個人の咀嚼能率を色度で表した。さらにパノラマX線写真による齲蝕、欠損歯、骨吸収の判定を行った。日常の意識調査としては、口腔衛生習慣、喫煙などの他、歯周病に関係すると思われる18項目についてアンケート調査を行った。研究結果:1.自覚症状と各臨床検査との関連自覚症状『あり』と回答した数と年齢、および臨床検診における各個人別平均値との間に有意な相関が認められた。2.CPITNとの関連CPITN2、3と4を基準として、自覚症状18項目のうち6項目以上『あり』と回答したものを重症とした場合、感度0.68、特異度0.67であった。3.パノラマX線写真との関連咬合痛に関する項目は、齲蝕や欠損に影響を受け、また、要抜歯とされる高度な骨吸収を有するものは、咬合痛の症状を必ず有していた。4.咀嚼能率咀嚼能率は骨吸収とは相関せず、欠損歯の数に依存していた。今回の研究において、自覚症状(日常の意識)は臨床所見とかなり相関を示していた。現在、特に日常生活に影響を与える臨床症状はどの程度のものであるか、さらに分析を進め、快適な日常生活を送るためのゴールを設定する予定である。
歯周炎局所における歯周病原菌の歯肉上皮細胞への付着、侵入メカニズムの解析

本菌はPorphyromoans gingivalis等の歯周病原菌とは異なり、これまで宿主歯肉上皮細胞内へ侵入しないと考えられてきた。本解析により、我々の共焦点顕微鏡と3Dイメージングソフトウエアを用いた画像解析によりによりヒト歯肉上皮細胞へ侵入することが明らかにすることができた。さらに本菌の病原因子であるdentilisinを相同組換えによりノックアウトした欠損株を用いた実験により、この細胞侵入にはdentilisinが関与していることを明らかにした。このプロテアーゼは本菌において宿主に対する病原性が高いことがわかっており、今後この菌の感染を防ぎ、生体内でその病原性を制御する際のターゲットの分子となりうる可能性を示唆することができた。本菌の野生株とDentilisin、Mspをそれぞれ遺伝子欠損させた株を感染させ、in vitroWound healing assayを行い、スクラッチにより細胞がなくなった部分への上皮細胞の遊走速度を測定し,本菌の細胞侵入が与える影響を解析した。本菌を感染させない状態においては上皮細胞のスクラッチ部分への速やかな遊走が起こり、約8時間程度でスクラッチ部分が完全に閉鎖した。一方本菌野生株を感染させるとスクラッチ部分閉鎖の遅延が認められた。Dentilisin、Mspの遺伝子欠損株を感染させた場合のスクラッチ部分の閉鎖は非感染の場合と差がみられなかった。このことより本菌の細胞侵入が歯肉上皮細胞の創傷治癒に影響を及ぼし、その作用にはdentilisin,Mspが関わることが示唆された。本年度は本研究課題の初年度であり、口腔内病原菌のなかでもred complexといわれ特に歯周病との関わりが深いと考えられているもののうち、Treponema. denticolaの口腔内における病原性とPorphyromonas gingivalisの口腔内における環境の変化による遺伝子発現の変化について解析した。T.denticolaはトレポネーマであり、歯周病原菌としては大型のため、これまで宿主細胞内へ侵入しないと考えられてきたが、我々の研究によりヒト歯肉上皮細胞へ侵入することが共焦点顕微鏡と3Dイメージングソフトウエアを用いた画像解析により明らかになった。さらに本菌の病原因子を遺伝子操作によりノックアウトした欠損株を用いた実験により、この細胞侵入には菌表層プロテアーゼであるDentilisiが関与していることを示した。このプロテアーゼは本菌において宿主に対する病原性が高いことがわかっており、今後この菌を生体内で制御する際のターゲットの分子となりうる可能性を示唆した。また、本菌はStreptococcus pyogenesのIdeS proteaseと相同性の高プロテアーゼ(Dentipainと命名)の遺伝子を持ち、実際にタンパク質のレベルで発現している事を明らかにした。口腔内ではこのプロテアーゼの作用により病原性を発揮する事を示唆するものである。一方、P.gingivalisはノルアドレナリンの添加によりその増殖が抑えられる一方で、自身の主要プロテアーゼであるArgXの発現は上昇することがあきらかになった。このことより、本菌は環境の変化に適応するためにプロテアーゼであるArgXを発現させ、自身を適応させていることが示唆された。
体温調節反応形成に関わる中枢神経系機能地図の作成

種々の温度情報を統合して体温調節反応を発現させるための神経回路網や環境温度変化への中枢神経系の適応機構については、ほとんど解明されていない。本研究では、ニューロン活動のマーカーとして、プロトオンコジーンであるFosに着目し、体温調節に関与する中枢神経部位をFos免疫組織化学により調節反応に関わる中枢神経系機能地図を作成することを目的とした。1)寒冷適応機構;幼児期の寒冷刺激は成熟生体でのFos発現を変化させる幼児期に寒冷刺激を与えると、成熟生体になった時点で寒冷適応を示すことがある。そこで、生後2週間4度の寒冷刺激を毎日2時間与え、寒冷適応した成熟個体を用いて中枢神経系におけるFos発現を調べたところ、視床下部のいくつかのぶいにおいて顕著なFos発現減少が認められたが、延髄・脊髄では変化がなかった。この結果は、寒冷適応の機構として視床下部神経回路の適応的変化が考えられる。2)LPS刺激による体温上昇とオキシトシン・バソプレッシン神経LPS投与は顕著な体温上昇を起こすことが知られている。しかし、LPSに依存した体温上昇の中枢神経部位・特にオキシトシン・バソプレッシン神経の関与についてはよくわかっていない。そこで、LPS投与後のオキシトシン・バソプレッシン神経におけるFos発現を2重染色法により調べた。その結果、LPS投与後、Fosはオキシトシン・バソプレッシンに一過的に発現することが明らかになった。LPS投与による、体温上昇に伴い血管収縮作用や水分調節作用のあるこれらのペプチドホルモンが重要な働きを持つことがわかった。種々の温度情報を統合して体温調節反応を発現させるための神経回路網や、環境温度変化への中枢神経系の適応機構については、ほとんど解明されていない。本研究ではニューロン活動のマーカーとして、プロトオンコジーンであるc-fosに着目し、種々の体温調節反応を発現している神経系においてc-fosを免疫組織学的に発現させ、調節反応の形成に関わる中枢神経系機能地図を作成することを目的とした。1.自律性体温調節時のc-fos発現部位の検索ラットに急性寒冷刺激(4°C)あるいは温熱刺激(33°C)を負荷して、十分な尾部皮膚血管の収縮や拡張を惹起させた状態で脳を灌流固定し、c-fosの発現部位を検索して、自律性体温調節に関連する神経機能地図を作成した。その発現部位は視策上核や前視床下部を中心とする視床下部、中脳や延髄、脊髄など、広い部分に広がっていたが、脳幹部では温熱刺激時の発現が寒冷刺激群に比べ、発現の程度が少なかった。これらの結果は、寒冷刺激時と温熱刺激時では体温調節に関与する神経回路が異なることを示唆している。2.発熱時のc-fos発現部位の検索ラットに外因性発熱物質であるLPSを投与して強制的に発熱させ、発熱反応発現に関連する部位の神経機能地図を作成すると、視策上核、室傍核、青斑核、孤束核などに多くのc-fos陽性細胞が発現していた。自律性体温調節発現時のそれと比較検討している。また同じ発熱物質であるIL-1投与時のc-fos発現部位についても解析中である。1.寒冷ストレス刺激による脳内でのFos及びシナプス前タンパクの発現変化ラットを急性寒冷刺激(4°C)刺激するとその発現部位は視策

上核や前視床下部を中心とする視床下部、中脳や延髄、脊髄など、広い部分に広がっていたが、海馬、大脳皮質、視索前野におけるc-FosとSynaptophysinとSNAP-25の発現変化を比較検討した。c-Fosの発現には新規な発現は観察されなかったが、Synaptophysinは海馬と視索前野では発現の増減が逆であり、機能と関連したタンパクレベルでの変化である可能性が示唆された。2.環境温変化に対するNaG-LacZマウスの体温調節ニューロン尾温度受容機構において、得意なナトリウムチャンネルが関与しているという証拠があるので、ナトリウムチャンネルの一つのサブタイプを欠損したノックアウトマウスを用いて、その体温調節能力について調べた。活動期の体温はノックアウトマウスの体温はワイルドマウスのそれに比べ有意に高かったが、調節能には差がなかった。種々の温度情報を統合して体温調節反応を発現させるための神経回路網や、環境温度変化への中枢神経系の適応機構については、ほとんど解明されていない。本研究ではニューロン活動のマーカーとして、プロトオンコジーンであるc-fosに着目し、種々の体温調節反応を発現している神経系においてc-fosを免疫組織学的に発現させ、調節反応の形成に関わる中枢神経系機能地図を作成することを目的とした。1.発熱物質投与刺激による脳内でのFos発見変化ラットに発熱物質投与刺激するとその発現部位は視策上核や前視床下部を中心とする視床下部、中脳や延髄、脊髄など、広い部分に広がっていたが、海馬、大脳皮質、視索前野におけるc-Fosの発現変化を、特に下垂体後葉については形態変化を中心に検討した。c-Fosの発現には新規な発現は観察されなかった。2.カイコを使った温度受容機構の解析哺乳動物のニューロンの温度受容機構において、特異的なナトリウムチャンネルが関与しているという証拠があるが、カイコではカルシウム依存性のカリウムチャンネルガ関与していることを明らかにした。また、温度下降する時にカルシウムスパイクを発生している。3、環境温変化に対する体温調節行動暑熱逃避行動学習時の脳内機構を調べる目的で、オペラント行動学習装置の作成と、予備的実験を行った。暑熱逃避行動の学習は非常に早く、学習過程の検討には課題をもっと複雑にする必要があるなどの問題点を明らかにした。
細胞診液状化検体を利用した子宮頸癌の高感度検査法の開発研究

1.HPV16型について、Real-time PCR法により、液状化細胞診検体中のHPV copy数の計測と、HPVウイルスの宿主細胞内での存在様式を検討した。結果、high-gradeの異形成ではlow-gradeのものよりHPV copy数が低下する傾向が明らかであり、また年齢に従いcopy数は減少していく傾向があった。ウイルスの存在様式との関連では、integrated(細胞内組み込み型)症例は有意にウイルスcopy数が低く、年齢も他のパターンに比べ10歳以上も高いことが明らかとなった。このことは、臨床検体において、従来までのHPVの有無や型判定に加え、存在様式の判定やcopy数の計測が症例の予後推測や経過観察にきわめて有用であるとの結論に至った。2.HPV感染に伴いL1 capsid蛋白はウイルス粒子を産性する初期にのみ粘膜表層の感染細胞に発現してくることがわかっている。そこで、HPV高悪性群のL1 capsid蛋白に反応するモノクローナル抗体を用いて、液状化細胞診検体において、P16抗体とあわせ免疫染色を行ったところ、p16蛋白は一部のCIN1症例とCIN2症例以上のほぼすべての検体で陽性を示す一方で、L1陽性例は感染初期例と考えられる早期病変の一部にのみ陽性を示した。またp16との組み合わせではL1-/p16-,L1+/p16-;L1+/p16+,L1-/p16+の順でほぼ病変が進行していくことが示唆され、このうちL1-/p16-,L1+/p16-の両群は感染初期で細胞増殖周期に異常を起こしていない状態であり、さらにL1-/p16-はウイルス粒子も産性しないstableな感染状態と考えられ、病変退縮の可能性を秘めた経過観察の絶好の対象となりえる病変で、L1とp16染色の併用は、治療方針決定にきわめて有用であることがあきらかとなった。各種異形成から癌の液状化細胞診検体を利用し、HPV DNAの検出と亜型分類を行ったのち、新しい臨床応用可能なマーカーの創出にむけて検討を行った。1.液状化検体から抽出したmRNAをもとにp16やHPV E6などを標的とし、Real-time PCR法にてmRNAの定量を行ったが、効率的なmRNAの増幅ができなった。これは現在使われている液状化細胞診保存液がmRNAの保存に適してなく、固定保存液中でのmRNAの破壊が原因になっている可能性が考えられた。これについては今後固定保存液の変更や見直しが必要との結論に至った。2.臨床的に最も多くを占めるHPV16型について、Real-time PCR法により、液状化細胞診検体中のHPV copy数の計測を試みた。すなわち、HPV E6領域を増幅し、培養細胞(SiHa細胞=1copy/cell)との相対的なcopy数を算出し、さらにhouskeeping geneとしてのβ-actinを同時測定することで、検体中の細胞数で補正された正確なcopy数が計測できる。一方、E2領域の増幅割合をも比較することで、HPVウイルスの宿主細胞内での存在様式も同時に判定した。これらのHPV copy数、存在様式と各種臨床病理学的因子を検討した。

このことは、臨床検体において、従来までのHPVの有無や型判定に加え、存在様式の判定やcopy数:の計測が症例の予後推測や経過観察にきわめて有用であるとの結論に至った。現在までに,病理組織および細胞診上の子宮頚部病変のマーカーとしてp16が利用されている。p16発現は子宮頚部病変の初期から浸潤癌までの過程で一貫して過剰発現しており,HPV DNA testと併用して,病変存在のマーカーと見なされる。一方で,HPV感染の初期には,多くの症例で一過性の炎症や可逆性の異形成病変を起こしたのちに治癒することが知られており,何らかの病変早期にのみ発現するマーカーがあれば,感染初期の病変のみを抽出し,経過観察をすることで,不必要な治療を減らせる可能性がある。HPV感染に伴いL1 capsid蛋白はウイルス粒子を産性する初期にのみ粘膜表層の感染細胞に発現してくることがわかっている。そこで,今回,HPV高悪性群のL1 capsid蛋白に反応するモノクローナル抗体を用いて,液状化細胞診検体において免疫染色を行い,初期病変のスクリーニングが可能かどうか検討した。p16抗体とあわせ免疫染色を行ったところ,L1陽性例はCIN1からCIN2の症例の一部に限られ,CIN3や癌症例では検出できなかった。一方,p16蛋白は一部のCIN1症例とCIN2症例以上のほぼすべての検体で陽性を示した。このことから,L1陽性例は感染初期例と考えられる早期病変の一部にのみ陽性を示した。またp16との組み合わせではL1-/p16-,L1+/p16-,L1+/p16+,L1-/p16+の順でほぼ病変が進行していくことが示唆され,このうちL1-/p16-,L1+/p16-の両群は感染初期で細胞増殖周期に異常を起こしていない状態であり,さらにL1-/p16-はウイルス粒子も産性しないstableな感染状態と考えられ,病変退縮の可能性を秘めた経過観察の絶好の対象となりえる病変で,L1とp16染色の併用は,治療方針決定にきわめて有用であることがあきらかとなった。
潮汐性産卵リズムに関わる水圧情報伝達の脳内経路の解明

温帯域に生息する魚類では、繁殖や摂餌に関わる活動は、光・水温などの外部環境と密接に結びついている。産卵期には満潮付近で毎日産卵を繰り返すベラ科のミツボシキュウセンは水圧刺激から受け取る潮汐情報が本種の潮汐性産卵リズムに極めて重要だと考えられている。本研究では、ミツボシキュウセンにおける潮汐性産卵リズムを制御する脳内の水圧情報伝達経路を解明するために、水圧刺激を受容する器官の特定水圧付加・水圧刺激によって発現変動する遺伝子の探索・水圧情報伝達に関わる脳内神経の解明に取り組んでいく。潮汐情報が内的因子に変換される経路を明らかにする事で魚類の生理メカニズムの仕組みの理解を進めるものである。
痛みの知覚の性差とそのメカニズム(1)ホルマリン誘発侵害刺激に対するpCREB発現の脳内マッピングとその経時的変化

1.ホルマリン侵害刺激に対する痛み行動の性差正常雄性ラットおよび発情前期ラットの足底皮下にホルマリンを投与すると、二相性の痛み行動が惹起された。その中間相5-10分の痛み行動は、雌性ラットの方が有意に強く、従って、雌性ラットの方がホルマリン侵害刺激に対する感受性の高いこと確認された。またこの性差はエストロジェン依存性であることがわかった。2.pCREBによる痛み受容脳領域のマッピングとその経時的変化雄性ラットおよび発情前期ラットを用いてホルマリンテストを行い、pCREB免疫陽性細胞の発現の変化を、投与前を0分として、5、10,30,120分後に検討した。その結果、分界条床核外側部において、発情前期のラットではpCREB発現が、ホルマリン投与後5分において、有意に増加した。すなわち、行動上の痛覚過敏性と一致して、この領域のCREBがリン酸化されることが明らかとなった。3.性腺ステロイドホルモンの役割ホルマリン投与によるpCREB発現に性差の認められた分界条床核外側部において、雌性ラットの性腺を摘除すると反応性が消失し、エストロジェンを補充すると、ホルマリンに対する反応性が回復した。以上、ホルマリン侵害刺激に対する痛み行動には性差が存在し、分界条床核外側部および側座核が関与すること、その性差は、性腺ステロイドホルモンに対する感受性の性差に起因することが推測された。さらに、ホルマリンテストにおいて、どのような分界条床核の細胞が雌型の発現パターンを示すのか、検討した。その結果、DARPP32免疫陽性細胞は、雌性特異的、かつ、ホルマリンテスト依存性にpCREBを発現することが明らかとなった。1.ホルマリン侵害刺激に対する痛み行動の性差正常雄性ラットおよび発情前期ラットの足底皮下に生理的食塩水を投与しても、痛み行動は惹起されなかった。ホルマリンの足底皮下投与により、両群において、2-15分と30-60分をピークとする二相性の痛み行動が惹起された。10-15分の痛み行動は、雌性ラットの方が有意に高く、従って、雌性ラットの方がホルマリン侵害刺激に対する感受性の高いこと、すなわち、痛がりであることが確認された。2.pCREBによる痛み受容脳領域のマッピングとその経時的変化生理的食塩水を対照群としてホルマリンを投与し、正常雄性ラットおよび発情前期ラットにおいてpCREB免疫陽性細胞の発現の変化を、投与前を0分として、5、10,30,120分後に検討した。その結果、室傍核、海馬、扁桃体(内側部、外側部、外側基底部、正中部)、および分界条床核内側部において、生理的食塩水投与群およびホルマリン投与群の間で、雌雄ラットにおいて、有意な変化は認められなかった。しかし、分界条床核外側部および側座核において、雄性ラットにおいては、生理的食塩水投与群およびホルマリン投与群の間でpCREB発現の有意な変化は認められなかったが、発情前期のラットでは、pCREB発現が、投与後5分において、有意に増加した。3.性腺ステロイドホルモンの役割ホルマリン投与によるpCREB発現に性差の認められた分界条床核外側部および側座核において、雌性ラットの性腺を摘除すると反応性が消失し、エストロジェンを補充すると、ホルマリンに対する反応性が回復した。前年度までに我々が明らかにした、ホルマリンテストにおける行動上の性差と分界条床核におけるpCREB発現の性差における性腺ステロイドホルモンの役割を、詳細に検討した。

ホルマリンテストにおいて、卵巣摘除ラットは雄型の行動およびpCREB発現パターンを示し、エストロジェンおよびテストステロン補充により、もとの雌型となった。雄性ラットにおいて精巣摘除は、ホルマリンテストにおける行動およびpCREB発現パターンに影響を及ぼさず、また、テストステロンやエストロジェンを補充しても、もとの雄型であった。従って、ホルマリンテストにおける雌性ラットの痛覚過敏状態には、エストロジェンの存在が不可欠で、雌性特異的なエストロジェンに対する反応性は、脳の性分化の結果であると推察した。そこで、行動上、十分に脳の性分化に影響を及ぼす量のテストステロンを脳の性分化の臨界時期に投与し、雌性ラットを雄型脳にして、性成熟の後、ホルマリンテストを行った。その結果、テストステロン投与により雄型の脳にした雌性ラットでも、卵巣摘除により雄型の、エストロジェン投与により雌型の、それぞれホルマリンテストに反応した。従って、雌型の、エストロジェン依存性のホルマリンテスト行動は、脳の性分化の影響を受けないことが示唆された。さらに、ホルマリンテストにおいて、どのような分界条床核の細胞が雌型の発現パターンを示すのか、検討した。その結果、DARPP32免疫陽性細胞は、雌性特異的、かつ、ホルマリンテスト依存性にpCREBを発現することが明らかとなった。従って、我々がホルマリンテストにより明らかにした、雌性特異的、かつ、エストロジェン依存性の痛覚過敏状態(行動上および分界条床核のpCREB発現)に、ドーパミンニューロンが関与している可能性が示唆された。
強心配糖体の化学修飾と成績体の精製分離

強心配糖体のプロシラリジン(Ps)はうつ血性心不全の優れた治療薬として繁用されているが、安全域が狭く不整脈等の副作用がある。そこで副作用を軽減するため、Psの不飽和ラクトンを化学修飾して得られた化合物に強心作用を認めたので、本研究ではさらに範囲を拡大し、オレフィニックあるいはアセチレニックジエノファイルによる化学修飾に加え糖水酸基のニトロ化も試みた。一方作用機序の関連から、強いNa^+輸送能を有するモネンシンについてもアミノ酸で化学修飾し、それらの強心作用を^<23>Na-NMRを用いて測定したNa^+の細胞内取り込み能を示標として比較した。まずPsの糖部をニトロ化したところ5種類のOーニトロ体が得られ、^1H-NMRで置換位置を決定した。この内2′,4′ーOージニトロ体と3′ーOーニトロ体に強いNa^+、K^+ーATPase阻害活性が認められた。さらにPsとヌチルビニルケトンあるいはメチルアクリレ-トとの〔1,4〕環化付加ではそれぞれ二種の付加体が生成し、HPLCで分離したのちスペクトルで立体配置を決定した。これら付加体は高温で芳香化し、アセトフェノンあるいは安息香酸メチルへと変換される。Psとメチルプロピオレ-トとの反応では芳香化した二種の安息香酸メチルが得られた。これらの修飾体の内、アセトフェノンが強い酵素阻害活性を示したので、ニトロ体を合わせ強心作用と副作用の有無を調べている。一方モネンシンをアミノ酸で修飾したものは、Na^+輸送能はPsと同じにもかかわらずPsと同じ生物活性を示さなかったので、分子内COOHとOH基の間でラクトン化し、脂溶性を高めたところNa^+輸送能に変化は見られなかった。そこで目下モルモットの心臓乳頭筋を用いて強心作用を検討している。強心配糖体プロシラリジン(Ps)の副作用を軽減し、より安全な治療薬に改良するため、我々は不飽和ラクトンおよび糖部分の化学修飾を行ない強心作用と活性相関について研究してきたが、今回は活性アセチレンの環化付加反応によるラクトン環の修飾をしたのち修飾体の強心作用を犬腎のNa^+,K^+-ATPase阻害活性を示標として測定した。また作用機序の関連から、細胞内へのNa^+輸送能が高いモネンシンについても天然型アミノ酸で化学修飾したのち、より高い脂溶性が期待できる大環状ラクトンに変換し、カチオンとの会合定数や輸送能を測定した。1.メチルプロピオレ-トによるラクトン環の化学修飾Psとメチルプロピオレ-トとをディ-ルスアルダ-反応に付し生成物を分離精製したところ〔4+2〕付加体の生成は認められず、付加体が芳香化した二種の安息香酸メチル具性体が得られた。この内パラ置換体がかなり強い酵素阻害活性を示した。2.モネンシルアミノ酸のラクトン化先に合成したモネンシルアミノ酸のNa^+輸送能はPsと殆ど変らないのに陽性変力作用等が劣ることが判明した。これは脂溶性の低下によるのではないかと考え、モネンシルアミノ酸類をCoreyのラクトン化試薬を用いて、アミノ酸未端COOHと26位OHの間でラクトン化させた。これらラクトンは脂溶性も高くまたカチオン輸送能もPsと同程度であったため現在酵素阻害活性とモルモットの摘出乳頭筋に対するPIEを測定中である。
急性心筋虚血により誘発された心筋内カテコラミン過放出の機序とその薬物的抑制

麻酔開胸犬30頭を用いて、マイクロダイアリーシス法を拍動心に応用し、心筋虚血時の間質内ノルエピネフリン濃度の時間的推移について、検討した。マイクロダイアリーシスプローベ挿入直後は、心筋内カテコラミン放出がおこり、60分で定常状態に達した。その後40分間の左前下行枝の結紮による心筋虚血を作成し、再灌流した。虚血20分後より、心筋間質内ノルエピネフリン(NE)の増加を認め、虚血40分後には、controlの約10倍に達した。再灌流直後、一過性のNE増加を認めるが、すみやかに低下した。次に、3分間虚血、再灌流を3回繰り返すことにより、ischemic preconditioningを行った後に、同様のプロトコールを行った。心筋間質内NEの増加は、preconditioningを行なわない群に比し、低下傾向を示した。さらに、再灌流時の心室細動の頻度は、preconditioningを行なった群で、少ない傾向を示し、間質NEとの関連を示唆した。この成果は、1994年度、アメリカ心臓病学会へ報告する予定である。
mTORC1シグナルを介した胸腺環境維持機構の解明

T細胞を「教育」する場としての胸腺環境の重要性は言をまたず、その発生過程に関する知見は急速に深まっている。その一方、老化に伴う「胸腺退縮」の過程で胸腺環境が受けている制御の詳細については、未だ不明な点が多く残されている。研究代表者は、ごく最近、胸腺環境のmTORC1シグナルを誘導的に欠失させることで、本来は「年」の単位で進む胸腺退縮の過程を「数週間」に縮めうることを見出した。本研究ではこの系をモデルに、胸腺退縮を引き起こす分子基盤の解明を目指すとともに、その生理的意義の検証に取り組んだ。FACS解析の結果、mTORC1シグナルの欠失により、mTEC:cTECの比率の低下が観察されると共に、上皮細胞数そのものの減少も観察された。種々の解析から、胸腺上皮細胞数の低下の背景には増殖能の低下が存在するものと考えられた。これらの結果は、老齢マウスに認められる胸腺上皮細胞の変化に類似しており、mTORC1シグナルの低下によって、老齢マウスに見られる胸腺退縮と同様の変化がもたらされている可能性が示唆された。実際、老齢マウスの胸腺を回収し胸腺上皮細胞におけるmTORC1シグナル伝達経路の活性を定量したところ、若齢マウス由来の胸腺上皮細胞に比して有意な低下が認められた。以上の結果は、老齢化に伴う胸腺退縮の背景に、mTORC1シグナルの低下が存在することを強く示唆している。そこで、mTORC1シグナルの胸腺上皮細胞特異的な欠失が全身の免疫応答に及ぼす影響を調べるべく、Raptorコンディショナルノックアウトマウスとタモキシフェン誘導性にCreを発現可能なK14-CreERマウスの交配を試みた。しかし、胸腺上皮細胞以外のK14陽性組織におけるCreの発現の影響が大きく、結果的に個体レベルでの免疫応答能を解析するには至らなかった。28年度が最終年度であるため、記入しない。本年度は設定した3つの課題のうち、課題1「胸腺退縮の分子機構の解明」ならびに課題3「老化に伴うmTORC1シグナル変化の検証」について成果を得た。課題1「胸腺退縮の分子機構の解明」に関しては、FACS解析の結果、mTORC1シグナルの欠失により、mTEC:cTECの比率の低下が観察されると共に、上皮細胞数の減少が観察された。この結果は、老齢マウスに認められる胸腺上皮細胞の変化に類似しており、mTORC1シグナルの低下によって、老齢マウスに見られる胸腺退縮と同様の変化がもたらされている可能性が示唆された。実際、課題3「老化に伴うmTORC1シグナル変化の検証」において、老齢マウスの胸腺を回収し胸腺上皮細胞におけるmTORC1シグナル伝達経路の活性を定量したところ、若齢マウス由来の胸腺上皮細胞に比して有意な低下が認められた。以上の結果は、老齢化に伴う胸腺退縮の背景に、mTORC1シグナルの低下が存在することを示唆するものと考えている。本研究では、課題1「胸腺退縮の分子機構の解明」、課題2「胸腺退縮がT細胞分化に及ぼす影響の評価」ならびに課題3「老化に伴うmTORC1シグナル変化の検証」への取り組みを通じて、胸腺退縮の持つ生理的意義とその分子基盤の解明を目指す。現在までに、課題1・課題3への取り組みを通じて、mTORC1シグナルの低下が、加齢に伴う胸腺退縮の要因の一つであることを強く示唆する結果を得ている。一方、課題2「胸腺退縮がT細胞分化に及ぼす影響の評価」に関しては、内在性の胸腺を欠損したC57BL/6-nudeマウスの腎皮膜下に、Raptor-ERT2マウス(注:タモキシフェン処理により任意のタイミングでRaptorを欠失可能)の胎児胸腺を移植することで、Raptorの欠失がT細胞分化に与える影響の評価を試みた。しかし、C57BL/6-nudeマウスの繁殖がうまく進まず、また移植自体に高度な手技が必要となることから、想定していた数の解析に取り組むことができていない。

FACS解析の結果、mTORC1シグナルの欠失により、mTEC:cTECの比率の低下が観察されると共に、上皮細胞数そのものの減少も観察された。種々の解析から、胸腺上皮細胞数の低下の背景には増殖能の低下が存在するものと考えられた。これらの結果は、老齢マウスに認められる胸腺上皮細胞の変化に類似しており、mTORC1シグナルの低下によって、老齢マウスに見られる胸腺退縮と同様の変化がもたらされている可能性が示唆された。実際、老齢マウスの胸腺を回収し胸腺上皮細胞におけるmTORC1シグナル伝達経路の活性を定量したところ、若齢マウス由来の胸腺上皮細胞に比して有意な低下が認められた。以上の結果は、老齢化に伴う胸腺退縮の背景に、mTORC1シグナルの低下が存在することを強く示唆している。そこで、mTORC1シグナルの胸腺上皮細胞特異的な欠失が全身の免疫応答に及ぼす影響を調べるべく、Raptorコンディショナルノックアウトマウスとタモキシフェン誘導性にCreを発現可能なK14-CreERマウスの交配を試みた。しかし、胸腺上皮細胞以外のK14陽性組織におけるCreの発現の影響が大きく、結果的に個体レベルでの免疫応答能を解析するには至らなかった。課題1「胸腺退縮の分子機構の解明」と課題3「老化に伴うmTORC1シグナル変化の検証」に関しては、当初の計画通り、mTORC1シグナルの低下が胸腺退縮を引き起こす分子機構の解明に取り組むとともに、mTORC1シグナルの人為的亢進によって胸腺退縮を回復することが可能か否か、検証を進める。なお、課題2「胸腺退縮がT細胞分化に及ぼす影響の評価」へのアプローチにも共通することであるが、C57BL/6-nudeマウスの腎皮膜下への胎児胸腺移植の系を用いて解析を進めるのは、技術的に困難であると判断されるため、当初計画の一部を変更し、胸腺上皮細胞においてタモキシフェン誘導性のCreを発現可能なK14-CreERマウスを利用した解析に取り組むこととする。具体的には、K14-CreERマウスとRaptorコンディショナルノックアウトマウス・Tsc1コンディショナルノックアウトマウスを交配して得られるマウスを用いて、mTORC1シグナルの低下・亢進がT細胞機能や及ぼす影響を評価する。28年度が最終年度であるため、記入しない。
持続可能な低未利用地の再生・管理と良好な景観の維持管理に関する検討

和歌山県内の集落景観、まちなみ、およびその中間に位置し双方の特徴を持つ調査地において、低未利用地の調査を行ったところ、次の共通点が明らかとなった。空き地、空き家、駐車場には集落やまちの周縁部に集中する傾向があり、地域や商業・産業の中心部から離れており交通アクセスや立地条件による課題もあるため、今後の利活用に向け、優先的に支援を行うことが必要であると考える。和歌山県白浜町にある中村は、富田川河口の西側に位置し、地引網漁での沿岸の漁獲と農業による富田川河口に広がる田園地帯を持ち、半農半漁で生活を営んできた。集落内には長屋門を持つ民家もあり、大網船納屋をはじめ、伝統的な漁業に関する施設がある。また、中村は近世菱垣廻船発祥の地といわれ、近世初期の江戸通いの大型廻船を供給していたことが白浜町誌にも記されており、漁労のみでなく、海運により発展したことが考えられる。中村では付属屋を持つ民家が7割以上を占め、付属屋の配置において二方が建物に囲まれそれ以外のところがニワとなるL字型、三方が建物に囲まれた間がニワとなるコの字型に配置されているところは約5割あり、いずれも通りと接するところに「カド」とよばれるニワが設けられている。近年、中村においては、海沿いにある松林の植林・清掃やかつて行われたお祭りや地引網漁の継承をはじめ、集落における維持管理が行われている。結果から、中村の景観は、歴史的には漁業や海とのつながりが強いことが考えられるが、生活・生業面からみると農業とのつながりが強いことがわかった。付属屋の配置により「カド」と呼ばれるニワのある民家は、「通り」と「母屋」をつなぎ、季節とともに変わる農の風景や祭りの風景が見られ、「通り」に近い半公共的な空間の役割を持っている。一方で、空き地、空き家が複数の箇所に集中しており、ともに集落の東側に多く、空き地は複数が隣接して集中する箇所がみられる。また、空き家についても、空き家や空き地に隣接するところが多い。今後は、集落景観の維持管理に関する様々な取り組みとともに、空き地・空き家についても取り組んでいく必要があると考える。H23年度は、まちなみが現存する御坊市旧御坊町において、空き地・空き家の現状について把握を行った。上川・下川より北を北部、南を南部として、空き家の件数だけで北部に72件と空き家の60%が集まっているが、全筆数をふまえると北部の空き家率は11%、南部の空き家は12%とあまり変わりないが、空き地は北部が約4割であるのに対し、南部は6割近くと多く、駐車場は南部が21%と北部の79%に比べ3倍以上の差があることから、南部の方が土地が活用されていないことが伺える。結果から、空き地、空き家、駐車場が集中するところは3箇所あり、いずれも調査範囲の周縁部であった。一方、中心部にあたる日高別院や商店街には空き地・空き家が少なく、利活用されやすいことが伺える。旧御坊町の北部は空き地、空き家のままで残っている場所は少なく、駐車場に変わっているところが多く見られた。その背景として、旧御坊町や日高別院がある北部は商業や観光の中心であり、人の往来も多く、紀州鉄道西御坊駅があるため交通の便が良いことなどが挙げられる。一方、南部には空き地、空き家が集中しており、またそれらが占める割合も高くなっている。その原因として、北部に比べ南部の敷地の面積が小さいこと、また、道が狭いため、交通面における課題があることが伺える。結果から、H22は農由漁村である白浜町中地区と同様に、空き地、空き家、駐車場には集落やまちの周縁部に集中する傾向があり、地域や商業・産業の中心部から離れており交通アクセスの課題もあるため、利活用が難しいことが推測される。H24年度は、引き続き歴史的環境を活かした低未利用地の活用法について検討すべく、まちなみと農山漁村の中間に位置し、双方の特徴を併せ持つ伝統的民家が多く現存する和歌山県伊都郡九度山町大字九度山を対象とした。調査の結果から、大字九度山においては、全体的な割合から見ると、低未利用地は、約17%と、2割近い割合で存在することがわかった。内訳については、空き家が69件と最も多く、駐車場が50件、空き地が32件であった。空き家の中には、伝統的な民家や工場も含まれており、歴史的な民家や建物を保全することの難しさが伺える。これらのほとんどが個人による努力により委ねられている側面があり、人口減少や高齢化が進む中、さらに維持管理が難しくなることが予想される。一方、伝統的な民家や建物は、歴史を伝える貴重な存在であり、環境学習の場としても利活用が考えられるため、今後は、住民や行政、学校、NPOをはじめとする、関連機関による支援の充実を図ることが重要と考える。

低未利用地の分布からは、起伏のあるところに立地する大字九度山の地理的特徴が伺える周縁部に位置する急傾斜地においては空き家や空き地が集中する箇所があり、九度山駅から慈尊院へとつながるかつての主要道沿いには、空き家と駐車場が多く、県道13号沿いには駐車場が多くなっている。これらのことから、H22の農山漁村である白浜町中地区、H23のまちなみが現存する御坊市旧御坊町と同様に、空き地、空き家、駐車場には集落やまちの周縁部に集中する傾向があり、地域や商業・産業の中心部から離れており交通アクセスや立地条件による課題もあるため、今後の利活用に向け、優先的に支援を行うことが必要であると考える。当初の研究計画に挙げていた農山漁村およびまちなみにおける2か所での調査実施および結果の分析について、完了した。24年度が最終年度であるため、記入しない。調査対象地をH22年度は、計画通りに農山漁村で行った。H23年度は、H24年度に予定していたまちなみのある調査地において行った。すでに計画予定地での結果は得られたため、H24年度は、同じくまちなみのある調査地での調査を当初予定していたが、空間スケールの異なるところでの把握を行うため、農山漁村とまちなみの中間に位置する調査地にて実施予定である。
ラテンアメリカ諸国における集団的利益の保護と実現に関する比較法的・法文化的考察

本年度は、ブラジルを中心に、1困窮者の司法アクセスの問題、2消費者の集団的利益の保護と実現における公的機関の役割に焦点をあてて研究を行った。1について、わが国では、民訴法の訴訟救助と、総合法律支援法下の日本司法支援センター(法テラス)による法律扶助があり、前者では裁判所への予納がカバーされ最終的には国庫負担、後者では弁護士費用等がカバーされ、こちらは立替制を前提に扶助対象者が最終的な負担者となる。ブラジルでは、裁判所へ予納する費用も弁護士費用も訴訟費用として、民訴法典の「訴訟費用免除」の対象となる。また、法テラスの民事法律扶助の利用に際し、所得証明等を求めるわが国と異なり、ブラジルでは、自然人に限り困窮の推定規定があり、さらに、免除決定を受けた予納金は5年の除斥期間に服する。ブラジルの制度は非常に柔軟である反面、弁護士のイニシアティヴによる訴訟提起と訴訟費用免除の申立てが行われ濫用が問題となっている。2について、消費者の集団的利益を裁判において実現する機関のうち、公的機関である検察庁と公共弁護庁(わが国の法テラス)について、その活動における憲法的限界を中心に検討した。まず、検察庁については、判例上「社会的重要性」のある処分可能な集合的利益についてのみ集団訴訟の提訴権が認められているが、当該「社会的重要性」要件は、実質的に集団的利益の「同種性」要件としてオーバーラップする。次に、公共弁護庁については、わが国の法テラス同様、経済的弱者への対応を職務とするため、経済的弱者以外の者も含まれ得る集団的利益については理論的には集団訴訟の提訴権が認められないはずであるが、最高裁判例では、集団訴訟の一段階目にあたる概括給付判決については、集団構成員の属性を問わず、公共弁護庁の提訴権を認め、二段階目の判決清算手続については経済的困窮を証明する者のみ支援可能とした。ブラジルの検察庁及び公共弁護庁は、同国における集団的利益保護の重要なアクターとして位置付けられる二大公的機関である。本年度は、これらの二機関に焦点を当て、ブラジル連邦憲法下における両者の活動の理論的基礎を解明することができた。特に、わが国と異なりなぜ検察庁が民事訴訟である消費者の集団的利益保護に関わるのか、そして、本来は困窮者の司法アクセスをサポートする公共弁護庁がなぜ消費者の集団的保護に携わるのかを解明できたことをは大きな収穫である。上記の検討とともに、公共弁護庁の本来の職務である経済的弱者の司法アクセスがブラジルではいかなる法律の下でどのように運用されているのかを解明できた。本研究が、消費者のみならず広く弱者の法的保護とその法的利益の実現方法を検討対象とするという道筋を示すことができた。ブラジルの「行動調整」について検討する。行動調整とは、公的機関のみが締結可能な集団ADRであり、集団訴訟提起に先立ち試みられるもので、集団的利益保護の文脈において、集団訴訟以上に効果をあげている。わが国の消費者裁判手続特例法は未だ訴訟提起自体がなされていない状況にあるが、訴訟提起以前の取組みである「行動調整」の検討を通じて、国民生活センターのADR(国センADR)の効果的な運用について提言を行うことができると考える。ブラジルの民間弁護士の「プロボノ」活動の位置づけについて検討する。ブラジルのみならずラテンアメリカでは「プロボノ」を通じた弱者保護活動が盛んである反面、プロボノに対する弁護士会の対応についてはブラジルの州によってその差がみられる。この検討を通じて、ブラジルにおける民間弁護士を含めた弱者保護・救済の全貌を明らかにできると考える。

本年度は、これらの二機関に焦点を当て、ブラジル連邦憲法下における両者の活動の理論的基礎を解明することができた。特に、わが国と異なりなぜ検察庁が民事訴訟である消費者の集団的利益保護に関わるのか、そして、本来は困窮者の司法アクセスをサポートする公共弁護庁がなぜ消費者の集団的保護に携わるのかを解明できたことをは大きな収穫である。上記の検討とともに、公共弁護庁の本来の職務である経済的弱者の司法アクセスがブラジルではいかなる法律の下でどのように運用されているのかを解明できた。本研究が、消費者のみならず広く弱者の法的保護とその法的利益の実現方法を検討対象とするという道筋を示すことができた。ブラジルの「行動調整」について検討する。行動調整とは、公的機関のみが締結可能な集団ADRであり、集団訴訟提起に先立ち試みられるもので、集団的利益保護の文脈において、集団訴訟以上に効果をあげている。わが国の消費者裁判手続特例法は未だ訴訟提起自体がなされていない状況にあるが、訴訟提起以前の取組みである「行動調整」の検討を通じて、国民生活センターのADR(国センADR)の効果的な運用について提言を行うことができると考える。ブラジルの民間弁護士の「プロボノ」活動の位置づけについて検討する。ブラジルのみならずラテンアメリカでは「プロボノ」を通じた弱者保護活動が盛んである反面、プロボノに対する弁護士会の対応についてはブラジルの州によってその差がみられる。この検討を通じて、ブラジルにおける民間弁護士を含めた弱者保護・救済の全貌を明らかにできると考える。ブラジルへの渡航計画が大学業務のため実現できなくなったことで、その旅費予定部分が次年度使用額となった。渡航により実施が予定されていた研究については、物品費に含まれる図書を多数購入したこと、メールインタビューの手法による現地の実務家・研究者への聞取調査を行なったことで、当年度の研究遂行への支障はなかった。次年度使用額による増額分を含めた使用計画としては、PC購入による研究環境整備と旅費に充てる予定である。本年度の物品費は既述のとおり図書費として多く使用され、PC等の研究環境整備には使用されていないからである。