hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
口腔硬組織欠損に対する修復促進作用を有する創保護材の開発に関する基礎的研究

しかし、唾液や血液が存在すると組織接着性が全く無くなり、また、寒天状で脆いため咀嚼の振動で崩壊する欠点が明らかになった。LYDEXは、本研究では口腔内応用には適していないが、組織内でのDDS作用を活用した骨癒合などの臨床応用では有用であると思われた。LYDEXは生体親和性をもち、抗菌作用を持っており、生体内で安静に保てる部位に応用すると、組織接着性があり、劣化分解時期を調節でき、また、FGF-2などのサイトカインとも混和でき、さらに徐々に分解するためDrug Delivery System (DDS)作用も期待できる理想的な生体材料である。平成27年度では、柔軟性の評価の手順に問題があったため、次年度で継続して行うことになった。この評価では、予備実験を行っているため、そのデータを追加すれば、予定通り実験計画を遂行できると思われる。平成27-28年度の計画では、LYDEXの柔軟性試験で、柔軟性の調節と評価方法に問題があり見つかり、この実験のみ中止をして、再検討をおこない試験を行っているが、新しい手法を作り出すことはできない状況である。そのため、この実験のみ本研究から削除して、残りの研究を完了する計画にした。平成29年度は、上述の実験に加えて、計画のLYDEXの瘢痕拘縮抑制作用の検討も行う予定である。すなわち、粘膜欠損部のみ形成して放置したものと、LYDEX充填をしたものとの粘膜拘縮の程度を評価する予定である。口腔外科学研究計画でのLYDEXの「柔軟性の評価」は、技術的手順が誤っており、実験ができなかった。この実験は、次年度に持ち越し使用する予定である。本年度はLYDEXの精製および硬化時間、柔軟性、自己分解時間の調整を行い、硬化時間は60-120秒(平均110秒)に調整した。しかし、柔軟性に関しては、材料自体が脆い性状であり、柔軟性を自在に改善できる条件を見出すことが出来なかった。これは次年度に継続して行うことにしたため、この実験のみできていないため、繰り越しになっている。また、生物検定での実験1「口腔粘膜欠損への創保護材としての有用性の検討」の途中の実験方法に問題があり、本年度は施行できなかったため、この実験費も繰り越しになっている。「柔軟性の評価」では、計測装置を組み立てるため、約58万円使用する予定である。その他は、平成28年度の計画に使用する。平成29年度計画のLYDEXの瘢痕拘縮抑制作用の検討を予定通り行うが、本年度の柔軟性に関しての実験および生物検定での実験「口腔粘膜欠損への創保護材としての有用性の検討」を併せて行い、研究費を使用する計画である。
開発・環境運動・宗教実践の交叉と動態に関する人類学的研究

本研究の目的は、南インド・カルナータカ州マンガルール郡における大規模な開発事業の進展とその影響について、ブータ祭祀と呼ばれる神霊祭祀に焦点を当てて検討し、開発と環境、宗教実践の関係を明らかにすることである。本研究では、開発事業に伴う大規模な環境破壊と住民の強制的移住、反開発運動の展開、工場内での宗教祭祀の復興という今日的なイシューについて、地域の土地や自然と密接に結びついたブータ祭祀を基軸として検討してきた。本研究は、1現地調査、2文献研究、3論文・著書の執筆を三つの柱としてとしている。平成26年度はブータ祭祀との関連を中心に、開発の影響を被っている村落住民、ならびに反開発運動を主導する社会運動家と環境団体の活動について調査を行った。平成27年度は工業プラントでの参与観察を実施し、開発を主導する企業の幹部、技術者、その他の雇用者へのインタビューを行うとともに、プラント内でのブータ祭祀について調査を行った。平成28年度は開発事業をめぐる住民同士の抗争について複数の村落で事例を収集するとともに、これまでの研究成果をまとめ、学術図書を執筆・出版した。平成29年度は追加調査を実施するとともに、研究成果の英語での執筆を開始した。最終年度である平成30年度は、マンガルールでの追加調査に加えてウッタラカンナダ県における比較研究を実施した。また、本研究の成果をまとめた著書(英語版)の執筆を完成させ、現段階では出版社によるレビュー中である。研究代表者は、平成26年8月から9月にかけてと平成27年3月の二回、インド・カルナータカ州マンガロールを中心に現地調査を行った。平成26年夏の調査では、主にマンガロール経済特区と村落社会の関係に関する調査を進め、経済特区内に新設された多国籍企業の幹部らにインタビューを行った。平成27年3月の調査では、マンガロールの村落部における神霊祭祀の動態に関する調査を継続するとともに、経済特区の進出に対する反対運動において中心的な役割を担った人々へのインタビューを行った。さらに、Asian Anthropology, Asian Ethnology, NatureCultureをはじめとする国際学術誌に論文を投稿し、掲載を認められた。申請者は、平成27年8月と平成28年3月の二回、インド・カルナータカ州マンガロールの村落部にて、神霊(ブータ)祭祀の実践と開発問題に関する現地調査を行った。平成27年の調査では、2000年以降における当該地域へのマンガロール経済特区の進出と、それに対する反開発運動の展開、そして政府による開発計画の取り下げに至る経緯について、マンガロール在住の社会運動家、村落社会の領主一族、元小作農民層、低カーストの運動家とのインタビューを中心に詳細な調査を行った。平成28年の調査では、改修工事後の神霊の大社における年中儀礼を参与観察し、改修前との変化を中心に詳しい記録をとるとともに、関係者にインタビューを行った。この調査から、改修工事の計画や監督を担った管理委員会の中で、資金の調達と配分等をめぐって混乱や対立が生じており、その結果、管理委員会から疎外されてきた伝統的な領主層への支持が再び高まっていることが明らかになった。平成27年7月には、アデレードで開催されたICAS9(The 9th International Convention of Asia Scholars)で、インドの社会運動におけるグローバルとローカル双方のアクターに焦点を当てたパネル発表を行った。また、Ethnos, NatureCultureをはじめとする国際学術誌に、マンガロールの神霊祭祀と開発、インフラストラクチャーの関係をテーマとする論文が掲載された。平成27年度の調査では、領主層、指定カースト民、社会運動家といった多様なアクターの反開発運動への関わりと、政府による開発計画取り下げの経緯についての調査が当初の計画以上に進展した。また、マンガロール近郊の僧院や政府与党と反開発運動の関係という新たな調査対象を見出すことができた。さらに、これまでの研究成果をまとめた草稿をほぼ完成させ、平成28年度中の出版に向けてブラッシュアップする段階に至ることができた。本年度は、2008年からインド・カルナータカ州沿岸部(南カナラ)で実施してきた調査研究の成果となる著書の執筆を行った。日本学術振興会科学研究費補助金(研究成果公開促進費・課題番号16HP5120)の交付を受け、2017年2月末に単著『環世界の人類学ー南インドにおける野生・近代・神霊祭祀』を京都大学学術出版会から出版した。この著書において代表者は、ユクスキュルの環世界論を独自に発展させたヴァイツゼッカーのゲシュタルトクライス論を、贈与交換論や人格論をはじめとする重要な人類学理論と交叉させつつ、南カナラにおける人々の日常的実践と、自然=野生の領域を基底とするその環世界との関係について多角的に検討した。この検討を通して、植民地化や近代法制度の施行、そして大規模開発をはじめとする幾度もの社会変化の中で、神霊祭祀を通して自然=野生の領域とのつながりを模索し、創造的に更新してきた人々の実践と、その環世界との相互的な形成と変容の過程が明らかになった。具体的には、1地域の土地・自然と結びついた神霊祭祀と地域社会における土地保有・親族システム・ヒエラルキーの関係、2植民地期以降の南インドにおける近代法の普及と神霊祭祀の変容、3経済特区の建設に対する反開発運動の勃興と神霊祭祀の新たな展開が本書の骨子である。代表者は、現地調査と行政記録の詳細な分析を通して、母系制をとる領主層の土地保有制度と結びついた神霊祭祀の持続と変容の過程を明らかにした。

また、神霊祭祀をめぐる複数の裁判事例と、儀礼にみられる人々と神霊との交渉の分析を通して、慣習的な宗教祭祀と近代法制度の再帰的な関係を明らかにした。さらに、一般には調査の困難な経済特区での現地調査を通して、大規模開発の進展と反開発運動の勃興に伴う神霊祭祀の新たな役割と、企業幹部を祭主として経済特区の内部で興隆している神霊祭祀の新たな展開を明らかにした。当初の研究計画では、最終年度である2017年度に研究成果をまとめ、単著として刊行することを予定していた。しかし、2008年にカルナータカ州での調査を開始して以降、当初の予想以上に多くの資料が蓄積されてきたこと、また、本年度までに行った数多くの研究発表や論文執筆に基づき、単著を構成するに足るデータと理論的展望が得られたことによって、予定よりも一年ほど早く、研究成果である単著を刊行することができた。以上から、本研究は当初の計画以上に進展しているといえる。2017年度は、2017年2月に刊行した著書『環世界の人類学ー南インドにおける野生・近代・神霊祭祀』(京都大学学術出版会)の英語への翻訳作業を行った。2018年度中に英訳を完成し、出版する予定である。この翻訳作業に加えて、2017年9月と2018年3月に南インドで現地調査を行った。具体的には、2017年9月にカルナータカ州のMangaluruとUdupiにて、僧院と神霊祭祀の関係、ならびに土地保有制度に関する調査を行った。この調査を通して、1)Udupiの僧院とDakshina Kannada県マンガルール郡の農村との密接な関係、2)神霊祭祀とブラーマン的祭祀との関係、3)Udupiにおける僧院の歴史と現状、4)Udupiの宗教指導者が反開発運動において果たしてきた役割等の事項が明らかになった。また2018年3月には、西ガーツ山脈を中心として1980年代から勃興してきた環境運動に関する調査を開始するとともに、ケーララ州で比較調査を行った。この調査を通して、西ガーツ山脈の環境保全を目指す社会運動が、現在のマンガルールにおける反開発運動といかに結びついているのかという問題について、個人史の次元から理解を深めることができた。今回の現地調査で得られた情報は、西ガーツ山脈における環境運動と宗教実践に関する新たなプロジェクトの基盤となりうる。また、2017年7月にはタイ王国のチェンマイで開催された国際学会(ICAS10)で発表し、各国の研究者と意見交換を行った。これによって形成されたネットワークを基盤として、インドでの共同研究プロジェクトを構想中である。昨年度末に刊行した和文著書の英訳はすでに8割程度完了しているため、英語版は当初の予定よりもかなり早期に完成することが見込まれる。その一方で、本プロジェクトの総まとめとなる現地調査は比較的短期にとどまっているため、再度追加調査を行って事実関係の確認を行い、英語版の刊行に必要な情報を収集・整理する必要がある。本研究の目的は、南インド・カルナータカ州マンガルール郡における大規模な開発事業の進展とその影響について、ブータ祭祀と呼ばれる神霊祭祀に焦点を当てて検討し、開発と環境、宗教実践の関係を明らかにすることである。
非アポトーシス型細胞死変異株の分離とその分子機構の解析

プロブラム細胞死は、個体の形態形成や恒常性維持に必須の機能である。ミトコンドリアにおけるアポトーシス促進因子Bax,Bak二重変異マウスの解析においてp53依存性のアポトーシスが阻止されることが報告されていたが、当研究室での詳細な解析の結果、実際にはオートファジー様細胞死が誘導されていることが見いだされた。オートファジーの分子機構の解析は出芽酵母変異体の解析により、大きな進展を見せた。近年マウスを用いた解析が進み、オートファジーはほ乳類においても必須であり、様々な生命現象や疾患と関連する証拠が示されている。例えば、神経変性疾患や心臓疾患との関連が示されており、細胞が細菌に感染した後オートファジーを誘導し細菌の増殖を抑えようとすることや、さらに老化との関連性も指摘されている。一方、オートファジーのほ乳類での分子機構は未知の部分が大きい。本研究では、Bax,Bak二重変異と両アレル変異を導入できるBloomシステム(nature,429:896)とを組み合わせ、オートファジー様細胞死変異株を分離し、関連遺伝子のスクリーニングを行うことを目的とした。前年度までに作製したBloom-Bak KO ES細胞へ、更にBax変異を導入した。前年度、Bax遺伝子座には多数の一塩基変異があることがわかったので、ターゲッティングベクターをC57B16Jと129SvJゲノムを用いて二種類構築した。ジーンターゲッティングの結果、Baxホモ欠損ES細胞を得る事ができた。Bak,Bax二重変異マウスが生存可能であるように二重変異ES細胞も正常に増殖する。すでに、変異導入するためのレトロウイルスは作製しているので、今後二重変異細胞において効率のいいオートファジー様細胞死誘導数系を構築する必要が有る。また、今年度、Bloomシステムの有効性を更に示すため、作製した変異導入レトロウイルスを用いて、ES細胞の未分化性に関するスクリーニングを行った。現在までに、ホモ欠損で未分化維持機構に関連すると思われる候補遺伝子を得た。これは、Bloomシステムを用いない場合には分離できなかったので、Bloomシステムが遺伝子探索ツールとして有効である事を示していると考えられる。プログラム細胞死は、細胞の形態形成や恒常性維持に必須の機能である。ミトコンドリアにおけるアポトーシス促進因子Bax,Bak二重変異マウスの解析においてp53依存性のアポトーシスが阻止されることが報告されたが、当研究室の詳細な解析の結果、実際にはオートファジー様細胞死が誘導されていることが見いだされた。オートファジーの分子機構の解析は出芽酵母変異体の解析により進展しつつあるが、ほ乳類では未知の部分が大きい。本研究では、Bax,Bak二重変異と両アレル変異を導入できるBloomシステム(Nature 429:896)とを組み合わせ、オートファジー様細胞死変異株を分離し、関連遺伝子のスクリーニングを行うことを目的としている。本年度は、まず、Bloomシステムが導入されたES細胞にBax,Bak二重変異を導入することより開始した。Bax,Bakのターゲッティングベクターを構築し、順次、ターゲッティングを行っている。これまでにBakのノックアウトが終了し、サザンブロット解析により正しくゲノムの改変が行われていること、またウェスタンブロット解析によりBakタンパク質が完全に消失していることを確認した。現在Baxノックアウトを進めている。また、変異導入を行うため、新たなジーントラップ型レトロウイルスを構築した。ジーントラップによる変異導入には、変異株取得後の原因遺伝子の同定を簡略に行える利点がある。Bloomシステムに最適なジーントラップ型レトロウイルスとしてLRT領域にFRT部位を導入し、変異株取得の後、Flp組換え酵素を発現させることで復帰株を作製できるよう工夫した。実際にウイルスを作製してみたところ、十分に高いタイターのウイルスを作製でき、また遺伝子とラップによる変異導入、また復帰株の作製が可能であることを、Hprt遺伝子を指標としたスクリーニングより確認した。次年度においては、Baxノックアウトを完了させ、スクリーニング系の確立を目指す。また、両アレル変異の導入効率を向上させるためBloomシステムの改善を目指す。ミトコンドリアにおいけるアポトーシス促進因子Bax, Bak二重変異マウスの解析においてp53依存性のアポトーシスが阻止されることが報告されていたが、当研究室での詳細な解析の結果、実際にはオートファジー様細胞死が誘導されていることが見いだされた。最近になって、オートファジーに必須に遺伝子のマウスホモログを欠損させたノックアウトマウスが作製され、出産直後の一過的な栄養飢餓状態を乗り切るために必須であることが示された。また、コンディショナルノックアウトマウスの解析から神経変性疾患との関連が解析された。このように、オートファジーはほ乳類においても必須の現象であり、また種々の疾患との関連も示唆されている重要な生命現象である。しかし、そのほ乳類での分子機構は未知の部分が大きい。本研究では、Bax, Bak二重変異と両アレル変異を導入できるBloomシステム(nature,429:896)とを組み合わせ、オートファジー様細胞死変異株を分離し、関連遺伝子のスクリーニングを行うことを目的としている。昨年度において、Bloomシステムを導入したES細胞へBak遺伝子のホモ欠損を導入した。今年度は、Bax遺伝子の欠損の導入を目指した。

Bax遺伝子座へのジーンターゲッティングは、通常のジーンターゲッティング効率に比べて、格段に低く、複数回のターゲッティング操作を行う必要があった。また、ヘテロ欠損株樹立後、同じターゲッティングベクターを用いてもう片方の遺伝子座へのターゲッティングを行ったが、正しくターゲッティングされた株を樹立することができなかった。これは、Bloomシステムを導入した.ES細胞は、マウス129系統の中の亜系統問のF1交配より樹立されており、過去に調べられ、現在公開されているSSLP等の多型マーカーを調べてみるとBax遺伝子座近傍の約30Mbにおいて特に多型が集中していることが、ターゲッティングへ悪影響を与えていると考え得られた。実際ターゲッティングベクターに用いた部分の配列を調べてみると通常マウスの異なる系統でも数kbに1つといわれている一塩基多型がターゲッティングアーム9.3kb内に13箇所存在した。129系統の亜系統間でこれほどの頻度で一塩基多型が存在することは、ターゲッティングベクター構築に際して、注意を要することが示めされた。現在、ターゲッティングベクターを129亜系統ゲノムのもので再構築を行い、再度ジーンターゲッティングを進めている段階である。プロブラム細胞死は、個体の形態形成や恒常性維持に必須の機能である。ミトコンドリアにおけるアポトーシス促進因子Bax,Bak二重変異マウスの解析においてp53依存性のアポトーシスが阻止されることが報告されていたが、当研究室での詳細な解析の結果、実際にはオートファジー様細胞死が誘導されていることが見いだされた。オートファジーの分子機構の解析は出芽酵母変異体の解析により、大きな進展を見せた。近年マウスを用いた解析が進み、オートファジーはほ乳類においても必須であり、様々な生命現象や疾患と関連する証拠が示されている。例えば、神経変性疾患や心臓疾患との関連が示されており、細胞が細菌に感染した後オートファジーを誘導し細菌の増殖を抑えようとすることや、さらに老化との関連性も指摘されている。一方、オートファジーのほ乳類での分子機構は未知の部分が大きい。本研究では、Bax,Bak二重変異と両アレル変異を導入できるBloomシステム(nature,429:896)とを組み合わせ、オートファジー様細胞死変異株を分離し、関連遺伝子のスクリーニングを行うことを目的とした。前年度までに作製したBloom-Bak KO ES細胞へ、更にBax変異を導入した。前年度、Bax遺伝子座には多数の一塩基変異があることがわかったので、ターゲッティングベクターをC57B16Jと129SvJゲノムを用いて二種類構築した。ジーンターゲッティングの結果、Baxホモ欠損ES細胞を得る事ができた。Bak,Bax二重変異マウスが生存可能であるように二重変異ES細胞も正常に増殖する。すでに、変異導入するためのレトロウイルスは作製しているので、今後二重変異細胞において効率のいいオートファジー様細胞死誘導数系を構築する必要が有る。
電場で制御する分離:電気二重層クロマトグラフィーの開発

イオン交換クロマトグラフィー(IEC)は省エネルギー精密分離手法として医薬品をはじめとして多くの分野で利用されている。IECは多孔性充填剤(固定相)に導入されたイオン交換基と溶質の相互作用の違いが分離原理である(移動速度差分離)。実際にはIEC分離では単純なイオン交換反応のみではなく、電気二重層あるいは電気泳動などの複雑な現象が生じている。本研究は、さまざまなIECカラムにおける分子排除特性を測定した。この結果から細孔径分布に関する情報を抽出した。次にさまざまなIECカラムにおける勾配溶出実験を行い、溶出塩濃度を測定し、既に提案している方法により分配係数と塩濃度の関係を求めた。さらに分配係数と吸着サイト数さらに平衡定数を求め、細孔分布との関係を基に電気二重層や電気泳動効果について考察した。細孔径の小さいIECカラムが保持力が強い(高い塩濃度で溶出する)こと、また吸着量が高くなると細孔内の物質移動が電気泳動効果により促進されることが示唆された。今後は、電気泳動効果と電気二重層効果をより効果的に制御する操作方法についての検討が必要である。電気二重層を利用するクロマトグラフィーの開発のために,静電気的相互作用についての基礎的な実験的検討を行った.吸着サイトと分子形状および電荷分布との関係を調査するためにイオン交換クロマトグラフィー勾配溶出実験を行い,溶出塩濃度と規格化した勾配のプロットを作成した.このプロットから分配係数を算出し,吸着サイト数を決定する方法を考案した.決定されたサイト数は分子の電荷分布に依存するものの,吸着剤の特性にはあまり影響されなかった.(スチレンジビニルベンゼン系の多孔性吸着剤,アガロース系の多孔性吸着剤,非多孔性球状吸着剤について検討した).平衡定数についても算出したところ,吸着サイト数とともに大きくなる傾向が明らかとなった.定量的な解析は今後の検討課題である.次に物質移動について調査した.粒子内拡散がクロマトグラフィー物質移動を支配していることはよく知られている.多孔性粒子と比較しながら対流促進が期待できる充填剤について物質移動機構を調べた.一体型クロマトグラフィーと膜クロマトグラフィーについてサイズ排除曲線を決定したところ,拡散細孔が存在しないことがわかった.パルス応答実験から吸着しない条件下ではピーク幅は流速に依存せず一定であり,拡散による物質移動抵抗が無視できることが明らかとなった.破過曲線の測定により吸着物質移動特性を検討した.静的吸着容量(平衡吸着量)は多孔性吸着剤よりかなり低いものの動的吸着容量が流速に依存しないので早い流速(短い滞留時間)では多孔性吸着剤より高くなる領域が存在することが示された(多孔性吸着剤の動的吸着量は流速とともに急激に減少する).イオン交換クロマトグラフィー(IEC)は省エネルギー精密分離手法として医薬品をはじめとして多くの分野で利用されている。本研究では、さまざまなIECカラムにおける分子排除特性を測定した。
心筋症病態形成に果たすキマ-ゼの役割の解析と薬物治療

ヒト心臓において、キマ-ゼがアンジオテンシンII(ANGII)産生酵素として機能していることが示され、心疾患の病態形成にこのキマ-ゼ依存性のANGII産生経路が重要な役割を果たしている可能性が注目されている。しかし、キマ-ゼの酵素学的特性には動物種差が存在することから、ヒト心疾患の病態解明にはANGII産生能を有するヒト型キマ-ゼを持つ小動物モデルが必要である。このような背景の中で私は、ヒトキマ-ゼと同様にANGII産生能を有するキマ-ゼ様酵素が齧歯類の中では、ハムスターのみに存在する事実を薬理学的実験により見いだした。本研究課題でこの酵素がキマ-ゼであること確定し、酵素学的解析を行うために精製を行い、さらにキマ-ゼの役割を遺伝子レベルから解析することを目的として、遺伝子クローニングを行った。また、ヒト病態モデルとして心筋症ハムスターを用いて心臓キマ-ゼの動態を検討した。その結果、ハムスターキマ-ゼは、ヒトキマ-ゼと同様に特異的にANGIIを産生する酵素である事が明らかになった(LifeSci.58:591-597,1996)。ハムスターキマ-ゼ遺伝子は、全長約3kbで5個のエクソンと4個のイントロンからなる。またハムスターキマ-ゼは、プレプロ酵素として合成され、プレ配列とプロ配列が切断されて227個のアミノ酸残基よりなる活性型酵素になることが解った(論文投稿中)。心筋症ハムスターでは心筋症の発症に一致して心臓キマ-ゼの発現が特異的に亢進し、心臓局所でのANGII産生の増加を介して心筋症病態の形成に関わることを始めて明らかにした(論文投稿中)。ハムスターは、ANGII産生能を有するヒト型キマ-ゼを持つことから、ヒト生体内でのキマ-ゼの役割を解析する上で極めて有用な動物モデルである。本研究課題の研究計画は完全に実行でき、極めて有意義な成果を得ることができた。
アストロサイトのカルシウムオシレーションに対する揮発性麻酔薬の影響

揮発性麻酔薬の作用機序に関して、グルタミン酸作動性ニューロンはその標的の候補として考えられている。アストロサイトはシナプス間隙でグルタミン酸の放出を調節することが知られている。アストロサイトのグルタミン酸放出の機序としてカルシウムオシレーションが知られている。本研究ではカルシウムオシレーションとグルタミン酸濃度の関連性を揮発性麻酔薬の有無の条件で測定することを目的とした。結果としてグルタミン酸濃度の測定値にばらつきが多く、明らかな傾向は認められなかった。揮発性麻酔薬の鎮静作用について、その機序は興奮性ニューロンの抑制、あるいは、抑制性ニューロンの亢進として考えられてきたが、現在なお明らかにされていない問題である。グルタミン酸は興奮性神経伝達物質であり、意識を覚醒させる方向に作用している。従って、グルタミン酸作動性ニューロンは麻酔作用の標的の一つとして取り上げられてきた。近年、アストロサイトはニューロンのシナプス伝達に関し積極的な役割を示していることが明らかになっている。アストロサイトは、細胞内のカルシウムオシレーションに依存したグルタミン酸放出を起こすことによってシナプス間隙でのニューロン間の刺激伝達に関わっている。本研究では、中枢に対する揮発性麻酔薬の鎮静作用について、その作用点がアストロサイトのカルシウムオシレーションの抑制であるという仮説をたて、アストロサイトのカルシウムオシレーションに対する揮発性麻酔薬の効果を明らかにすることを目的とし、以下の研究を行った。マウス由来アストロサイト培養細胞(KT-5)をカバーグラス上で培養し、クローズドチャンバーシステムでカルシウム指示薬であるFluo-3 AMをカルシウム指示薬としたカルシウムオシレーションの共焦点レーザー顕微鏡での観察の条件検討を行った。還流液を採取し、HTEC-500微量生体試料分析システム(エイコム(株))によりマイクロダイアリシスを行ってグルタミン酸濃度を計測するための条件検討を行った。マウス由来アストロサイト培養細胞(KT-5)をカバーグラス上で培養し、クローズドチャンバーシステムでカルシウム指示薬であるFluo-3AMをカルシウム指示薬としたカルシウムオシレーションの共焦点レーザー顕微鏡での観察の条件検討を行った。還流液を採取し、HTEC-500微量生体試料分析システム(エイコム(株))によりマイクロダイアリシスを行ってグルタミン酸濃度を行った。結果として測定したグルタミン酸の濃度にばらつきが多く、有意差がえられなかった。
動物培養細胞における機械刺激の細胞内情報への伝達機構

1.蛍光色素で染色した培養動物細胞の細胞内カルシウム濃度(分布)の時間経過をテレビ画像として記録することのできる顕微光学系が完成した。2.温度制御機能を備えた、「流動下細胞顕微観察装置」を製作した。蛍光顕微鏡の視野下に捉えた培養細胞を水流下に置き、細胞内カルシウムイオン濃度、細胞内pH、細胞内ナトリウムイオン濃度などを1秒程度の時間分解で追跡することが可能となった。3.機械刺激(水流)に対する培養細胞の応答の大きさ(細胞内カルシウムイオン濃度の上昇の程度)が、ある実験では非常に顕著に現れるが、また別の実験では極めて小さいということが観察された。溶液の条件や温度などはほぼ一定に保ってあるので、実験ごとの再現性の乏しさはこれらに帰することは難しい。現在までの細胞培養の方法では、種々の成長ステ-ジの細胞が混在しており、細胞成長は同調していない。おそらく、実験ごとのばらつきは細胞周期のステ-ジの違いによるものと考えられる。4.今年度は、細胞を同調培養し、細胞周期と機械応答の関連に着目して実験する予定であったが、主として培養関係の困難により、充分実験をすることができず、所期の目的を達成していない。[経過と目的]申請者は、細胞内Ca^<++>指示薬Furaー2で染色した培養細胞を蛍光顕微鏡の画像として捉え、種々の薬物を投与して細胞応答を記録する一連の実験の過程で、機械刺激(液流)に応答して細胞内Ca^<++>濃度が一過的に上昇する現象を観察した。この現象は、細胞膜の機械受容イオンチャネルの開口による細胞外からのCa^<++>流入だけで説明することは難しい。むしろ、機械的刺激を引金とする細胞内Ca^<++>ストアからのCa^<++>動員を想定したほうが観察事実を説明する。本実験の目的は、機械的刺激の受容から細胞内Ca^<++>濃度上昇に至る細胞内情報伝達の様式を、蛍光色素による細胞内Ca^<++>濃度など細胞内情報の画象化とその追跡を主な実験手段として明かにすることである。[設備製作の進展状況]温度制御機能を装備した、[流動下細胞顕微観察装置]が完成した。蛍光顕微鏡の視野下に捉えた培養細胞を水流下に置き、細胞内カルシウムイオン濃度、細胞内pH、細胞内ナトリウムイオン濃度などを1秒程度の時間分解で追跡可能となった。[機械刺激受容応答の新しい知見]機械刺激(水流)に対する培養細胞の応答の大きさ(細胞内カルシウムイオン濃度の上昇の程度)が、ある実験では非常に顕著に現れるが、また別の実験では極めて小さいということが観察された。おそらく、実験ごとのばらつきは細胞周期のステ-ジの違いによるのであろう。今年度は、細胞を同調培養し、細胞周期と機械応答の関連に着目して実験する予定である。
大正期における不敬事件の研究

研究成果報告書『大正期における不敬事件の研究』(A4版214頁)には、大正期(19121926)に発生した不敬事件211事例と参考事例22事例が載録されており、それぞれの事例について、その概要が記述され、参考文献が掲げられている。載録された不敬事件には、刑法大逆罪・不敬罪、新聞紙法、出版法、治安警察法、治安維持法などによって立件された犯罪としての不敬事件と、思想的・社会的な意味での不敬事件(国民道徳的な不敬事件)とが含まれている。また何に対する不敬が問題とされたのかについて言えば、天皇、皇族、歴代、皇陵、神宮、御真影、教育勅語など、多岐にわたっている。不敬行為の態様についても、新聞記事、図書の記述、日記や雑記帳の記述、演説、議論、口論、宣伝ビラ、落書き、野次、直訴など、多様である。このように多種多様な大正期の不敬事件について、200件を超える事例を一書にまとめて載録したのは、本研究が初めてのことである。近代日本のありように甚大な影響を与えた天皇制の特質について考察する上で、これだけ多数の不敬事件の事例を学界の共有財産とすることができたところに、本研究報告書の意義がある。1明治期における不敬事件の研究の後を承けて、大正期に発生した不敬事件の事例をできるだけ多数蒐集し、明治期との比較に留意しつつ、大正期における不敬事件の特質と歴史的意味を明らかにすることが本研究の目的である。そのため、刑法に規定する不敬罪をも含みながら、むしろ、思想的・文化的・政治的な意味での不敬事件を主たる対象に調査を進めた結果、本年度において35件の不敬事件リストを作成することができた。そのリストは、次のような諸事件からなっている。(1)大正4年山口県柳井尋常高等小学校の御真影焼却事件、大正12年新潟県西頸城郡小学校の御真影・教育勅語謄本焼失事件など、学校における御真影・教育勅語の紛失・盗難・焼失・隠匿などの事件多数。(2)大正4年萩野由之東京帝国大学教授の不敬論文事件、大正15年井上哲次郎の三種の神器不敬事件など、学問研究・言論弾圧事件。(3)大正元年福岡県直方高等小学校における聖書事件、同4年富山中学校生徒の神社参拝欠席事件など、キリスト教徒への迫害事件。(4)大正10年第一次大本教不敬事件などの宗教弾圧事件。(5)大正12年朴烈・金子文子の天皇・皇太子暗殺計画事件、同年難波大助の虎ノ門事件などの大逆罪事件。(6)大正14年京都学連事件という治安維持法違反事件。2次年度においては、引き続き未知の事件の発掘に努めるとともに、上記個別の事件についての事例研究を深める予定である。大正期に発生した不敬事件の事例をできるだけ多数蒐集し、大正期におけるその特質と歴史的意味を明らかにすることが本研究の目的である。そのため刑法に規定する不敬罪のほか、思想的・文化的・政治的な意味での不敬事件も含めて調査を進めた結果、平成9・10年度の研究期間において、50件の不敬事件をリストアップすることができた。そのリストは次のような類型の事件からなっている。(1)大正4年山口県柳井小学校の御真影焼却事件、同12年新潟県西頸城郡小学校の御真影・教育勅語謄本焼失事件など、学校における御真影・教育勅語謄本の紛失・盗難・焼失・隠匿などの事件多数。(2)大正4年萩野由之東京帝国大学教授の不敬論文事件、同15年井上哲次郎の三種の神器不敬事件など、学問研究・言論弾圧事件。(4)大正10年第1次大本教不敬事件などの宗教弾圧事件。
近赤外光による疼痛関連領野同定法の開発とこれを用いた磁気刺激での疼痛治療

ビーグル犬をメデトメジンの筋肉注射にて導入麻酔を行ったのち、セレネース、コントミンの静脈注射にて鎮静を維持した。頭部を固定したのち、口蓋直下に近赤外光のアダプタを設置し、頭皮上4カ所に光センサーを設置した。上肢の正中神経、下肢では腓骨神経を電気刺激して、頭皮上の光センサーでシグナルを拾うことが可能か、またその条件を検索した。当初導入麻酔としてイソフルレンの吸入麻酔やプロポフォールの静脈麻酔など行ったが、麻酔深度が浅くならないとシグナルが出現せず安定した結果は得られなかった。このため種々の薬剤による麻酔・鎮静を行った結果、上記のようなメデトメジン・セレネース・コントミンでの麻酔/鎮静であればシグナルを安定してとらえることができることが明らかとなった。ただし薬剤の効果には個体差がありシグナルをとらえる条件は様々であった。電気刺激から約200m秒の潜時で出現し500m秒まで振幅が漸減しながらシグナルが波状に持続する点は共通し再現性もみられた。刺激前には出現しないことから、このシグナルは末梢神経電気刺激に反応した体性感覚誘発反応の一種と考えられるが、潜時の長さから電気反応を直接とらえたものではなく、血流あるいは血管の反応をとらえた可能性が考えられる。シグナルの出現部位は大脳半球感覚野付近から出現し空間解像度は高いと思われるが、刺激と反対側の場合もあれば両側に出現する場合もみられた。四足歩行動物である犬を用いたため、対側ならびに同側の反応を捉えた可能性があるが、このシグナルの発生源自体不明であるため、今後の更なる研究が求められる。
HIV産生骨髄単球性白血病細胞株を用いたHIV感染メカニズムの解明

私は慢性的にHIV-1ウイルスを産生する骨髄単球性白血病細胞株(J-_<22>-HL60)を樹立したが、その細胞は各種分化誘導物質を作用させて分化するとともにウイルス産生量が増加することが見出されていた。今回はそのメカニズムを解明する目的で研究を行った。得られた成果は下記のごとくである。1.各種分化誘導物質あるいは細胞増殖因子のうち、ウイルス産生刺激の多いものとしては腫瘍壊死因子(TNF)、TPA、LPSがあげられた。2.生理的物質のTNFに注目して実験を進めたが、TNFは量依存性にウイルス産生を増加させ、その作用はTNF抗体で中和された。3.分化誘導物質であるビタミンD_3もウイルス産生を増加させたが、その増加は細胞培養48時間以後に認められた。これに反し、TNFではウイルス産生刺激は12時間以内に認められた。4.TNFのウイルス産生刺激作用は現在HIV感染症治療に用いられている薬剤AZTでは抑えられなかった。5.ビタミンD_3によるウイルス産生刺激作用はTNF抗体で抑制され、実際ビタミンD_3刺激でTNFがJ_<22>-HL60細胞より産生されることにより、ビタミンD_3のウイルス産生作用はTNFを介したものと考えられた。6.継代培養を繰り返していくと細胞培養上清中のウイルス量はほとんど検出できないレベルに低下したが、同時に培養上清中のTNFレベルの著減していた。しかし、この状態でもTNFを培養系に加えることによりウイルス産生は著明に認められた。以上、HIVの標的細胞である単球・マクロファージ系細胞においてTNFはウイルス産生の重要な役割を果していると考えられた。
境界潤滑機構の解明およびその表面微細形状創成への応用

塑性加工において最も支配的な境界潤滑領域における摩擦挙動の解明を試みた。圧延高速摩擦試験材を用いて、アルミニウム合金A3004を被加工材として、各種条件を変更した実験を行い、これらの因子の摩擦状態への影響および、素板圧延方向と加工方向との角度が摩擦挙動に及ぼす影響を明からにした。さらにしごき加工における薄肉化最適条件の検討を行い以下の結論を得た。1)圧下率が摩擦係数(μ)に及ぼす影響は見られなかった。φ=0゚では、μが90゚の約1.5倍になった。加速速度を大きくするとφ=0゚、90゚ともμは減少し、両者の差も小さくなった。2)潤滑油の粘度がμに及ぼす影響は、φ=0゚、45゚では粘度を大きくしてもほぼ一定の値を示す。90゚においては粘度を大きくするにつれてμも増加した。φ=0゚、45゚、90゚の順ではμは減少しており、φ=0゚では突起部の境界潤滑、90゚では微視的塑性流体潤滑になっていると思われる。45゚は0゚と90゚の中間的な状態であると思われる。3)試料表面粗さを大きくするにしたがってμが増加する。また、粗さ0.1μmRaではどの条件においても摩擦係数はほぼ同じ値を取り、0.5、0.7μmRaでは潤滑油Cのφ=0゚、30゚、Aのφ=0゚、30゚の順で減少している。以上のことをまとめると素板の圧延方向が及ぼす影響を小さくするためには、加工速度を大きく、潤滑油粘度を大きく、試料表面粗さを小さくすればよいことがわかった。4)薄肉化のための試験装置として帯板U曲げしごき加工装置を作製した。パンチに作用する垂直力Npと摩擦力Fpを直接分離測定することによって、パンチ面の摩擦係数を測定し得る。パンチとダイス間距離を小さくすることによってしごき率を上げ、薄肉限界が求められる。5)試料として無酸素銅板C1020Pを用い、摩擦条件因子と薄肉化条件の検討を行った。しごき率10%,20%,30%を任意に組み合わせ、試料に複数回のしごき加工を施した結果、薄肉化限界は加工プロセスに依存しない。潤滑油粘度の相違による摩擦係数の変化は、1回のしごき加工では見られないが、複数回のしごき加工では見られる。油の高粘度化に伴い摩擦係数は低くなる。しごき率や潤滑油を変えても破断直前の硬度は120130Hvの一定値をとる。いずれの条件においても加工後の試料表面に焼付き痕が見られない。6)被加工材の中間焼鈍と、極圧性潤滑剤を用いることにより、さらなる薄肉化が可能である。

いずれの条件においても加工後の試料表面に焼付き痕が見られない。6)被加工材の中間焼鈍と、極圧性潤滑剤を用いることにより、さらなる薄肉化が可能である。本年度は、塑性加工において最も支配的な境界潤滑領域における摩擦挙動の解明を試みに圧延形高速摩擦試験材を用いて、アルミニウム合金A3004を被加工材として、圧下率、加工速度、潤滑油粘度、塗布油膜厚さ、表面粗さを変更した実験を行い、これらの条件因子の摩擦状態への影響および、素板圧延方向と加工方向との角度が摩擦挙動に及ぼす影響を明らかにした。1)圧下率が摩擦係数(μ)に及ぼす影響は見られなかった。φ=0゚では、μが90゚の約1.5倍になった。2)加工速度を大きくするとφ=0゚、90゚ともμは減少し、両者の差も小さくなった。3)潤滑油の粘度がμに及ぼす影響は、φ=0゚、45゚では粘度を大きくしてもほぼ一定の値を示す。90°においては粘度を大きくするにつれてμも増加した。φ=0゚、45°、90゚の順でμは減少しており、φ=O゚では突起部の境界潤滑、90゚では微視的塑性流体潤滑になっていると思われる。45°は0゚と90゚の中間的な状態であると思われる。4)試料表面粗さがμに及ぼす影響は、粗さを大きくするにしたがってμが増加する。また、粗さ0.1μmRaではどの条件においても摩擦係数はほぼ同じ値を取り、0.5、0.7μmRaでは潤滑油Cのφ=0°、30°、Aのφ=0°、30°の順で減少している。以上のことをまとめるとφが及ぼす影響を小さくするためには、加工速度を大きく、潤滑油粘度を大きく、試料表面粗さを小さくすればよいことがわかった。本年度は摩擦条件が最も顕著に影響すると考えられる超薄肉板厚板のしごき加工における摩擦挙動および薄肉化最適条件の検討を行い以下の結論を得た。1.薄肉化のための試験装置として帯板U曲げしごき加工装置を作製した。一本の帯板を相対する位置にセットされた一対のダイス間に配置し、その中央にパンチを押込むことによって、U曲げされた壁部材料が同時にしごき加工が行われる。パンチに作用する垂直力Npと摩擦力Fpを直接分離測定することによって、パンチ面の摩擦係数を測定し得る。パンチとダイス間距離を小さくすることによってしごき率を上げ、薄肉限界が求められる。2.試料として無酸素銅板C1020Pを被加工材として摩擦条件因子と薄肉化条件の検討を行った。(1)しごき率10%,20%,30%を任意に組み合わせ、試料に複数回のしごき加工を施した結果、薄肉化限界は加工プロセスに依存しない。(2)潤滑油粘度の相違による摩擦係数の変化は、1回のしごき加工では見られないが、複数回のしごき加工では見られる。油の高粘度化に伴い摩擦係数は低くなる。(3)無酸素銅板にしごき加工をする際、しごき率や潤滑油を変えても破断直前の硬度は120130Hvの一定値をとる。(4)いずれの条件においても加工後の試料表面に焼付き痕が見られなく、無酸素銅は耐焼付きの良い材料である。3.被加工材の中間焼鈍と、極圧性潤滑剤を用いることにより、さらなる薄肉化が可能である。
ブタ成熟卵子の初期胚発生過程におけるS期誘導因子に関する分子生物学的研究

はじめに,卵子減数分裂の進行におけるメカニズムを明らかにする目的で,ブタ卵子の減数分裂再開時におけるプロジェステロンレセプター(PR)に関して検討を行った.その結果,AタイプPR(PR-A)およびBタイプ(PR-B)は拮抗的な作用を持ち,これら二つのPRの発現によって減数分裂の再開が制御されていること,PRのantagonistで処理するとADAMTS-1の発現が抑制され,減数分裂再開時に生じる卵丘細胞の膨潤が抑制されることを明らかにした.また,初期胚発生過程におけるメカニズムを解明する目的で,ブタ卵子をモデルとして卵子活性化機構について検討を行った.その結果,卵子活性化時に生じる細胞内カルシウムイオンはカルモジュリン依存性リン酸化酵素(CaMKII)を活性化させ,成熟促進因子(p34^<cdc2> kinase)の制御因子であるcyclin Bを減少させることが明らかされた.一方,CaMKIIの活性化はMAP kinaseの不活性化には関与しておらず,プロテインキナーゼCの活性化により誘起されることも明らかにされた.さらに,この活性化時におけるMAP kinaseの不活性化時期は,減数分裂の完了に伴う第二極体の放出と密接な関係を持つことも明らかにした.さらにこれらの知見を元にして,現在最も作製が難しいと考えられている体細胞核移植を用いたクローンラットについて検討を行った.その結果,体細胞核移植に伴って卵子内に誘起される現象である早期染色体凝集(PCC)が,ラットではほとんど誘起されないこと,またその原因としてラット卵子内のp34^<cdc2> kinase活性がマウスに比べて潜在的に少ないことが明らかとなった.さらに薬剤処理によりp34^<cdc2> kinaseの活性化を人為的に促すことにより,PCC誘起率を改善できることも明らかにした.近年繁殖技術の進歩により,多くの哺乳動物において核移植による体細胞クローンの作出に成功している.しかし,現在最適な方法で核移植を行った場合でも,産子の獲得に成功する割合は著しく低い.この原因として特にブタにおいては,卵子の活性化処理法が十分に確立していないことがあげられる.本研究では,下等動物の受精時に活性化することが知られているプロテインキナーゼC(PKC)に着目し,ブタ卵子におけるPKCの役割を明らかにすることによって,PKCの活性化を考慮したブタ卵子の新規活性化処理法を確立することを目的とした.その結果,細胞内Ca^<2+>イオンを上昇させる処理であるCa^<2+>イオノフォア処理後,PKC抑制剤Calphostin C添加培地で培養した卵子において,Calphostin Cの濃度依存的にMAP kinase活性の低下と前核形成が抑制されたことから,Ca^<2+>イオノフォア処理による卵子の活性化にはPKCが関与していることが明らかとなった.また,PKC活性化剤PMAの添加濃度依存的にMAP kinase活性の低下が認められた.しかし,すべての濃度のPMA処理区において,p34^<cdc2> kinase活性の十分な低下は認められなかった.さらに,Ca^<2+>イオノフォア処理後,PMA添加培地で培養すると,卵子のp34^<cdc2>kinase活性,MAP kinase活性のいずれも十分に低下し,多くの卵子は前核を形成した.以上のことから,ブタ卵子の活性化時において,Ca^<2+>イオンの上昇を介したp34^<cdc2>kinase活性の低下とPKCの活性化を介したMAP kinase活性の低下により前核形成が誘起されることが明らかとなった.またCa^<2+>イオンの上昇およびPKCの活性化を利用した活性化処理であるCa^<2+>イオノフォアとPMAの複合処理は,ブタ卵子を効率よく活性化できる方法であると考えられた.はじめに,卵子減数分裂の進行におけるメカニズムを明らかにする目的で,ブタ卵子の減数分裂再開時におけるプロジェステロンレセプター(PR)に関して検討を行った.その結果,AタイプPR(PR-A)およびBタイプ(PR-B)は拮抗的な作用を持ち,これら二つのPRの発現によって減数分裂の再開が制御されていること,PRのantagonistで処理するとADAMTS-1の発現が抑制され,減数分裂再開時に生じる卵丘細胞の膨潤が抑制されることを明らかにした.また,初期胚発生過程におけるメカニズムを解明する目的で,ブタ卵子をモデルとして卵子活性化機構について検討を行った.その結果,卵子活性化時に生じる細胞内カルシウムイオンはカルモジュリン依存性リン酸化酵素(CaMKII)を活性化させ,成熟促進因子(p34^<cdc2> kinase)の制御因子であるcyclin Bを減少させることが明らかされた.一方,CaMKIIの活性化はMAP kinaseの不活性化には関与しておらず,プロテインキナーゼCの活性化により誘起されることも明らかにされた.さらに,この活性化時におけるMAP kinaseの不活性化時期は,減数分裂の完了に伴う第二極体の放出と密接な関係を持つことも明らかにした.さらにこれらの知見を元にして,現在最も作製が難しいと考えられている体細胞核移植を用いたクローンラットについて検討を行った.その結果,体細胞核移植に伴って卵子内に誘起される現象である早期染色体凝集(PCC)が,ラットではほとんど誘起されないこと,またその原因としてラット卵子内のp34^<cdc2> kinase活性がマウスに比べて潜在的に少ないことが明らかとなった.
非線形特性を活用した人工膜の機能開発

人工膜の機能として,(1)化学センシング,(2)スカラ-的な化学エネルギ-のベクトル的な力への変換,の2点に重点を置いて研究を進めた。(1)非線形特性を活用した化学センシング。本年度は特に,非線形振動子における“引き込み同調"効果を利用した,センシング方法の開発を進めた。一般に,電気化学系は,容量や抵抗値が電位依存性となる。このような電位依存性の,インピ-ダンスの非線形性を定量的に評価するために,フ-リェ変換を応用する方法は,私達によって開発されている。今回の方法は,フ-リェ変換をすることなく,非線形特性を直接評価する点に特徴がある。具体的には,電気化学系を通常のサイン波発生回路(ウィ-ンブリッジ発振回路)と結合し,そのときの電気化学系の“引き込み"同調を調べる方法である。もし,電気化学系が線形特性のみであれば,引き込み同調は起こらない。そこで,本方法は,非線形特性だけを拾い出す方法となっていることが分る。実際に,本方法を用いて,味物質について実験を行なった。その結果、味物質のカテゴリ-に依存して,特異的な引き込みパタ-ンが出現することが分った。実験にあたっては,標準液に対して,回路の可変抵抗を調整することにより,再現性・安定性とも,優れた結果が得られている。(2)化学エネルギ-のベクトル的な力への変換。ジャボチンスキ-反応系など,周期的に酸化還元反応を繰り返す実験系について,引き込み同調の実験を進めた。具体的には,複数の反応槽の間に細孔をあけ,細孔を通じて反応液が交換する効果による,振動反応系同士の相互作用を調べた。この中で,特に,3つの反応槽を正三角形型に配置し,相互作用させると,互いに120゚位相のずれた,三相モ-ドが安定に出現することが分った。三相モ-ドでは,三相交流として,電力を取り出せることを意味しており,トルクを無理なく発生させる方法として興味深い。(1)電極界面での非線形特性を指標としたセンサ-の開発、および(2)ベクトル的な力をとり出すことのできる膜の開発、の2つの主目的のもと研究をすすめた。このうち、前者の課題を中心について、実績を説明したい。新しい原理に基づく化学センサを考案するこができた。測定系にサイン波(周波数Wo)の電圧を入力し、その系を流れる電流を計測する。測定系が非線形の場合電流-電圧曲線は楕円形であり、電流波形をフ-リエ変換すると、入力周波数以外(2Wo、3Wo、...)にピ-クが現れる。本研究では、この歪、すなわちフ-リエスペクトルの高調波成分を定量的に評価する方法を新たに考え出した。一般に、電極系は非線形であるので、電流-電圧特性は歪んだ曲線を示し、味物質により特異的な曲線を示す。そして、曲線の歪は、フ-リエスペクトルの高調波として現れ、この多くの高調波成分を情報として、化学物質を定性、定量化できる。さらに、フ-リエスペクトルから測定系の電気容量の特性のシミュレ-ションが可能となった。以上のように、電気化学系における非線形特性の検出の実験及び、理論的解析に成功した。これとは別に、ウィ-ンブリッジ発振回路を利用し、この回路の一部を電極系に置き換え、発振を起こし、さらに外部から電極系にサイン波の電圧を印加する実験を考案した。

この実験より、引き込み現象を情報としたセンサをつくれることが明らかとなった。この測定系は回路内のつまみの微調整により再現性のより波形が得られる。また、非線形性を考慮した理論計算も可能であり、測定系の非線形特性を知る新たな手段ともなる。人工膜の機能として,(1)化学センシング,(2)スカラ-的な化学エネルギ-のベクトル的な力への変換,の2点に重点を置いて研究を進めた。(1)非線形特性を活用した化学センシング。本年度は特に,非線形振動子における"引き込み同調"効果を利用した,センシング方法の開発を進めた。一般に,電気化学系は,容量や抵抗値が電位依存性となる。このような電位依存性の,インピ-ダンスの非線形性を定量的に評価するために,フ-リェ変換を応用する方法は,私達によって開発されている。今回の方法は,フ-リェ変換をすることなく,非線形特性を直接評価する点に特徴がいる。具体的には,電気化学系を通常のサイン波発生回路(ウィ-ンブリッジ発振回路)と結合し,そのときの電気化学系の"引き込み"同調を調べる方法である。もし,電気化学系が線形特性のみであれば,引き込み同調は起こらない。そこで,本方法は,非線形特性だけを拾い出す方法となっていることが分る。実際に,本方法を用いて,味物質について実験を行なった。その結果,味物質のカテゴリ-に依存して,特異的な引き込みパタ-ンが出現することが分った。実験にあたっては,標準液に対して,回路の可変抵抗を調整することにより,再現性・安定性とも,優れた結果が得られている。(2)化学エネルギ-のベクトル的な力への変換。ジャボチンスキ-反応系など,周期的に酸化還元反応を繰り返す実験系について,引き込み同調の実験を進めた。具体的には,複数の反応槽の間に細孔をあけ,細孔を通じて反応液が交換する効果による,振動反応系同士の相互作用を調べた。この中で,特に,3つの反応槽を正三角形型に配置し,相互作用させると,互いに120゚位相のずれた,三相モ-ドが安定に出現することが分った。三相モ-ドでは,三相交流として,電力を取り出せることを意味しており,トルクを無理なく発生させる方法として興味深い。
学校・民間教育機関・地域社会の協働による不登校・高校中退者の進路支援に関する研究

本研究は、学校と民間教育機関、地域社会の相互連携による不登校・高校中退支援実践に着目し、1地域社会(地域住民および地域行政関係者)の果たす役割とは何か、2学校社会(高校)と地域社会とを媒介する民間教育機関の役割とその課題は何か、3高校段階での地域学校協働における各アクター間の円滑な連携はいかにして可能か、の考察を通して、地域学校協働による持続可能な支援モデル(セーフティーネット)の描出を目指す。