hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
アフラトキシン産生菌の毒素産生に関与する要因と制御

YES培地(酵母エキス2%、ショ糖20%、pH6.0)にAspergillusflavus株を接種後一旦高圧滅菌し、その後Rhizopus株を培養して7日間培養し、前後のAF量を測定菌したところ、3757%アフラトキシン(AF)が分解されることが判明した。他方、Rhizopus株を7日間前培養したYES培地を高圧滅した上で、A.flavus株を接種・培養した場合にも、AF産生量は著しく少なかった。これには前培養による栄養素の枯渇も考えられることから、Rhizopus前培養液に酵母エキスとショ糖を追加してA.flavus株を接種した。この場合にも、Rhizopus株を前培養した例ではA.flavus株により程度の違いはあるもののAF産生量は少なく、061%に抑制されていた。このことにより、Rhizopus sp株がAFの分解のみならず、産生も抑えていることが確認された。AF産生抑制物質がRhizopus株の前培養液中に存在すると考えられるので、種々の溶媒による抑制物質の抽出を試みた。ベンゼン、クロロホルム、アセトニトリル・クロロホルムなどの溶媒では水層に残る量が多かった。培養濾液を塩酸酸性下(pH2.0)でエーテル抽出すると水層にはほとんど活性が残らず、エーテル層に大半の活性が認められた。エーテル抽出物は、黒褐色を呈しており、YES培地に溶かすと酸性(pH34)であった。高圧滅菌すると褐色の沈殿物が生じたが、NaOHで中和すると再び溶解した。pH無修正のまま沈殿を除去すると培養液の活性がなくなり、この沈殿物中に活性が認められた。また、エーテル抽出物を溶解して室温あるいは低温で放置すると失活することから、グルコン酸や蓚酸等の低分子のものではないものと推定された。クロマトグラフィーによる精製を試みているが、assayに時間がかかるため、現在のところ、十分なデータは得られていない。飼料に混在する糸状菌がA.flavus株のアフラトキシン産生に影響を及ぼす可能性についてRhizopus株を用いて検討した。A.flavus株単独培養例とRhizopus株との混合培養例のAFB_1量を調べると、混合培養例のAFB_1量が著しく少なかった。このことは、鶏用飼料と精白米のいずれを基質とした実験においても認められた。Rhizopus株がアフラトキシンを分解しているか、あるいは産生抑制している可能性が示唆された。また、精白米培地に添加する水分量を変えた場合、高水分量での混合培養例のAFB_1量の減少がより明らかであり、両菌種の発育条件も関与していると考えられた。アフラトキシンの分解あるいは産生抑制のいずれが起きているかを調べるために、A.flavus株を培養後高圧滅菌してさらにRhizopus株を接種・培養した場合と、その逆の場合を設け、A.flavus株単独培養例のアフラトキシン産生量と比較した。A.flavus株を先に培養した群のアフラトキシン量は、対照群より著しく少なく、Rhizopus株によってアフラトキシンが分解されていることが示された。他方、Rhizopus株を前培養した群でもアフラトキシン量が極めて少なかったことから、Rhizopus株の前培養によってA.flavus株のアフラトキシン産生を阻害する因子が産生されたものか、単なる栄養素の枯渇によるものと考えられた。

精白米培地にA.flavus株とRhizopus株を単独あるいは同時に接種して培養すると、それぞれ、濃緑色、灰白色、両者の混在した色調を呈したが、これらを高圧滅菌すると、緑灰色緑褐色、淡黄色黄褐色、赤褐色黒褐色に変わり、混合培養により赤褐色系統の物質が蓄積していると考えられた。そこで、versicolorin Aなどの中間代謝産物の検索を文献報告に従って実施したが検出できなかった。Rhizopus株によるアフラトキシン(AF)産生抑制を液体培地(ショ糖と酵母エキスのみからなる)で調べるため、液体培地のpHと栄養素量について検討した。液体培地をpH6(初期条件)とpH8(Rhizopus株前培養後のpHに相当)に調整してAspergillus flavus株を接種したところ、9602株とPー1株ではAF産生量に差はなかったが、ATCC15517株では後者の産生量が少なかった。液体培地のショ糖濃度をSomogyiーNelson法で測定したが、Rhizopus株前培養後の濃度は妨害物質のため測定できなかった。そこで、前培養後初期量の栄養素を追加することとし、2倍濃度の対照群を調べたところ、pH6では通常のものと産生量は変わらなかったが、pH8では産生量が少なくなった。Rhizopus株を前培養後濾過により菌体を除去してpH6に調整しA.flavus株を接種したところ、いずれの菌株についてもAFが産生されなかった。前培養後に菌体を除去して高圧滅菌し、pH調整の後A.flavus株を接種しても同様であった。pH調整前に栄養素を追加した群でも、わずかしか産生しなかった。前培養後に菌体を含んだまま高圧滅菌し、その後菌体を除去してpH調整し、A.flavus株を接種すると、産生量は通常の22ー45%に抑制された。この際、pH調整前に栄養素を追加しても抑制の程度は変わらなかったことから、高圧滅菌操作によりRhizopus菌体成分が栄養分となるものと考えられた。これらの成績から、Rhizopus株によりAFの産生量が減少するのは、pHや栄養素の枯渇によるものではなく、培養液中に抑制物質があるものと判断される。Rhizopus株前培養液を酢酸エチルで抽出したところ、油溶性画分、水溶性画分ともにAF産生抑制効果が認められた。現在、分画法について検討を重ねているところである。YES培地(酵母エキス2%、シヨ糖20%、pH6.0)にAspergillusflavus株を培養後一旦高圧減菌し、その後Rhizopus株を接種して7日間培養し、前後のAF量を測定したところ、3757%のアフラトキシン(AF)が分解されることが判明した。他方、Rhizpopus株を7日間前培養したYES培地を高圧滅菌した上で、A.flavus株を接種・培養した場合にも、AF産生量は著しく少なかった。これには前培養による栄養素の枯渇も考えられることから、Rhizopus前培養液に酵母エキスとショ糖を追加してA.flavus株を接種した。この場合にも、Rhizopus株を前培養した例ではA.flavus株により程度の違いはあるもののAF産生量は少なく、061%に抑制されていた。このことにより、Rhizopus sp.株がAFの分解のみならず、産生も抑えていることが確認された。AF産生抑制物質がRhizopus株の前培養液中に存在すると考えられるので、種々の溶楳による抑制物質の抽出を試みた。
新規ユビキチン化酵素KPC複合体による細胞周期制御因子p27の分解機構の解析

サイクリン依存性キナーゼ(CDK)インヒビターであるp27は、細胞周期においてG_0-G_1移行期にSkp2非依存的にユビキチンープロテアソーム経路で分解される。最近われわれは、G_1期におけるp27のユビキチン依存性分解を制御している新規ユビキチンリガーゼとしてKPC(Kip1 ubiquitylation-promoting complex)を同定した。KPCはKPC1とKPC2から構成される複合体である。この複合体形成はKPC1の安定化に必須であり、それにはKPC2のUBLドメインが必要であった。また、KPC2はUBLドメインおよびN末端側UBAドメインを介して26Sプロテアソームと、さらに2つのUBAドメインを介してポリユビキチン化タンパク質とそれぞれ相互作用することが明らかとなった。加えて、KPC2は多くのUBL-UBAタンパク質に存在する機能不明のSTI1ドメインを含んでいた。KPC2のSTI1ドメインは、KPC1の安定化とKPC1によるp27のポリユビキチン化に必要であった。このことより、UBL、UBAドメインだけでなく、STI1ドメインもKPC2の機能に重要な役割を果たしていることが示唆された。一方、RNA干渉法を用いてKPC2の発現を抑制すると、G1期におけるp27の分解が阻害された。ポリユビキチン鎖と結合できないKPC2変異体をKPC2発現抑制細胞に導入すると、KPC2発現抑制時に観察されるKPC1の不安定化は回復できたが、p27の分解は阻害されたままであった。以上の結果から、UBL-UBAタンパク質KPC2はKPC1の正常な機能発現と協調したp27の分解制御に寄与することが示唆された。サイクリン依存性キナーゼ(CDK)インヒビターであるp27は、細胞周期においてG_0-G_1移行期にSkp2非依存的にユビキチン-プロテアソーム経路で分解される。最近われわれは、G_1期におけるp27のユビキチン依存性分解を制御している新規のユビキチンリガーゼとしてKPC(Kiplubiquitylation-promoting complex)を同定した。今回われわれは、KPC1とKPC2およびp27との相互作用における構造的必要条件を調べた。KPC1のNH_2末端領域はKPC2やp27との結合に重要な役割を果たしていることが判明した。この領域を欠失したKPC1変異体はin vitroにおいてp27をポリユビキチン化できなかった。さらに、in vivoにおいてそのような変異体を発現させるとp27の分解が遅延した。われわれはp27についても一連の変異体を作製し、CDK阻害ドメインを欠失した変異体はKPCによりユビキチン化されないことを見出した。興味深いことに、サイクリンE・CDK2複合体は、KPCによるp27のポリユビキチン化を阻害し、さらにKPCとp27の相互作用も阻害した。キナーゼ活性を失ったCDK2変異体とサイクリンEとの複合体も同様の阻害効果を有することから、サイクリンE・CDK2複合体はp27のCDK阻害ドメインに接近する際にKPC1と競合していることが示唆される。これらの結果は、KPC2とも会合したKPC1のNH_2末端領域は遊離型p27を認識し、続いてp27がKPC1のCOOH末端のRINGフィンガードメインでユビキチン化されることを示唆している。
マウス接触皮膚炎モデルでの炎症発症機序におけるASK-1の関与

細胞内Redoxの異常とp38 mitogenactivated protein kinaseの活性化とをつなぐ分子としてよく知られているASK-1分子のノックアウトマウスを用いて、ハプテン塗布後の樹状細胞の活性化ならびに所属リンパ節への遊走におけるASK-1分子の重要性を明らかにした。また、この結果は、我々がこれまで提唱してきた接触皮膚炎の感作相における細胞内redox変化とp38 MAPKの活性化の役割を示唆する結果であった細胞内Redoxの異常とp38 mitogenactivated protein kinaseの活性化とをつなぐ分子としてよく知られているASK-1分子のノックアウトマウスを用いて、ハプテン塗布後の樹状細胞の活性化ならびに所属リンパ節への遊走におけるASK-1分子の重要性を明らかにした。また、この結果は、我々がこれまで提唱してきた接触皮膚炎の感作相における細胞内redox変化とp38 MAPKの活性化の役割を示唆する結果であった接触皮膚炎感作課程におけるランゲルハンス細胞ならびに樹状細胞の活性化および所属リンパ節遊走におけるシグナル伝達分子ASK-1の役割を明らかにする目的で、ASK-1ノックアウトマウスとコントロールマウスを用いて実験を行った。ハプテンとしてDNFBを用いて腹部皮膚に塗布して24時間後、48時間後の表皮ランゲルハンス細胞表面のIa抗原、CD54、CD80、CD86、CD83分子の発現をノックアウトマウスとコントロールマウスで比較したところ、細胞表面マーカーの発現には際だった相異が見いだされなかった。しかし、一方で、マウス腹部皮膚にハプテンであり、同時に、蛍光色素であるFITCを塗布して、所属リンパ節に遊走してくる皮膚由来樹状細胞の数を経時的に比較した。その結果、ASK-1ノックアウトマウスで優位に遊走細胞数が減少していることが観察された。また、同時に測定した遊走樹状細胞の表面抗原発現に関しては、ノックアウトマウスとコントロールマウスで明かな相異は見いだされなかった。この結果は、これまで明らかにされていなかったASK-1分子の樹状細胞遊走に関する役割を明らかにするものである。細胞内Redoxの異常とp38 mitogenactivated protein kinaseの活性化とをつなぐ分子としてよく知られているASK-1分子のノックアウトマウスを用いて、ハプテン塗布後の樹状細胞(DC)の活性化ならびに所属リンパ節への遊走におけるASK-1分子の役割を検討した。(1)ハプテン刺激に対するASK-1-/-マウス表皮ランゲルハンス細胞(LC)の低応答マウス耳介皮膚にハプテンを塗布し、経時的にLCをIa抗体で染色したところ、wild typeマウスでは、経時的にLCの数が減少したのに対し、ASK-1-/-マウスでは、その減少が観察されなかった。また、LCのDCの活性化マーカーの一つであるIa抗原とCD86分子の発現をflow cytometryにて観察したところASK-1-/-マウスでIa抗原、CD86分子の発現増強の低下が認められた。(2) ASK-1-/-マウスにおけるハプテン塗布後の所属リンパ節におけるDC数の減少次に、腹部にハプテンを塗布した後、経時的に所属リンパ節の樹状細胞数を計測したところ、ASK-1-/-マウスにおいて所属リンパ節に遊走してくる樹状細胞の低下が明らかとなった。また、DCのCD80分子、CD86分子、Ia抗原の発現低下もASK-1-/-マウスにおいて認められた。(3) ASK-1-/-マウス培養DCにおける成熟促進と刺激に対する反応性の増強次に、マウスの骨髄より造血幹細胞を採取し、それをGM-CSFとIL-4の存在下に培養し骨髄由来DCに分化させた。これらDCにNiCl2、DNCBを添加し、DCの成熟をwild typeマウスとASK-1-/-マウスとで比較したところ、予想外にASK-1-/-マウスでDCの成熟抑促進とハプテン刺激後の反応性の増強が認められた。以上の結果より、ハプテン刺激後のDCの活性化におけるASK-1分子の重要性が明らかになった。
高等植物原形質膜に局在するGタンパク質の精製と構造解析

1.3量体G蛋白質のβサブユニットは、そのポリペプチド内に、Trp-Aspを含む40アミノ酸残基(WD-40 Repeat)の繰り返し構造を7回有することが知られている。このWD-40 Repeatの7回繰り返し構造を有するcDNA(RWD)をイネcDNAライブラリーより単離し、その塩基配列を決定した。今回単離した産物は、ホモロジー検索より、RACK(Receptor for activated C-kinase)グループに属することが示唆された。3量体G蛋白質βサブユニットのcDNAは単離できなかったが、Kinaseに関連する産物が得られたことは、高等植物の情報伝達系を解析する上で興味深い。2.イネG-タンパク質複合体のαサブユニットに対するcDNA(RGA1)を単離し、塩基配列を決定した。このcDNAは380アミノ酸残基からなるOpenreading frameを有し、基質であるGTPの結合部位のアミノ酸配列は、高等植物のみならず高等動物も含めて高度に保存されていた。一方、レセプターと相互作用すると想定されているC末端領域は、アラビドプシスαサブユニット(GPA1)およびトマトαサブユニット(TGA1)とも異なっており、高等植物間においても相違が見られた。RGA1に対するmRNAは、根、黄色葉、緑葉に少量、蓄積しており、恒常的に発現している分子種に1つと考えられた。
プロスタグランジン類の短段階一般合成法

プロスタグランジン(PG)は特異な生理作用を有し生命維持の中枢ともいうべき循環器および消化器を中心とするオータコイドとして知られている。これらは生体内超微量成分であり天然からの採取が難かしく、したがって化学合成に基づくPG類の大量供給,ひいては確固たる分子設計に基づく新規類縁体の簡便な合成法の開拓が強く望まれてきた。われわれは、このような状況下に、独自に収束的3成分連結法を編み出しPG類の超短段階合成法の確立をもくろんだ。その結果(1)本プロセスの要となるべき3成分連結法の案出に成巧した。すなわち有機銅共役付加反応で生成するエノラートに有機スズ化合物を用いてトランスメタル化を施こすとハロゲン化アルキルとの直接的アルキル化がスムーズに進行し、一段階でPG骨格の構築が達成された。(2)上記合成法によりPG【E_2】が3段階で合成され、立体選択的還元を行うことによりPG【F_2】αの効果的合成も達成された。(3)上記方法により一段階で5,6-デヒドロ-PG【E_2】が高収率で合成された。本化合物はプロスタサイクリン(PG【I_2】)を含むすべての第一次および第2次PG類一般合成法の鍵中間体となった。本プロセスにより、PG【I_2】がわずか5段階で合成された。(4)上記プロセスは天然のPG類のみならず、重要な人工類縁体の合成も可能とした。本プロセスにより臨床上重要と考えられるすべとのPGアナローグが短段階にて合成された。本研究により所期の目標はすべて完遂できた。本研究成果の汎用性は大きく、その応用は拡大の一途をたどっている。現在、本プロセスを機軸としたイソカルバサイクリンの合成を手がけているが、成功はまちがいない。本研究費に大変感謝したい。以上。以上。
読み聞かせボランティアの実態調査

本研究は、読み聞かせボランティアの意義や効用および弊害の研究を今後進めていくために、基礎的な知見を得るための、調査研究であった。このような地道な調査はあまり行われていないため、本研究は重要な統計資料となったといえよう。調査の方法及び結果は以下の通りである。1.調査の方法往復葉書によるアンケート調査。平成14年11月30日に、全国公立私立の小中学校全4949校に、往復葉書を送付した。平成14年2月20日までに返信された2614校のうち、転居先不明及び休校中21校を除く2593校から、読み聞かせボランティアの実態についての回答を得た。2.調査の結果読者数の多い学会誌(日本国語教育学会『月刊国語教育研究』、「研究」枠)に投稿した。その要点を示す。(1)実施率読み聞かせボランティアを本年度行っている学校は48.0%、行っていない学校は49.9%、残りが行っていたがやめたか、今後行うつもりであるということであった。しかし、内訳をみると小学校が64.0%であり、中学校はわずかに7.5%であった。(2)増加率何年前からボランティアを行っているかを調査したところ、5年前から今年度まで順に、8.2%、12.9%、12.4%、20.9%、20.6%となっており、年々順調に実施校が増加してきたことが明らかになった。(3)主体読み聞かせボランティアの主体は、在校生保護者が62.1%と最も多く、ついで地域住民、卒業生保護者となった。しかし、中にはサークル組織となっているものも見られた。ボランティアに使う本の出所については、ボランティアの私物がもっとも多く(86.1%)、選書についてもボランティア自身が行っている割合が73.1%と最も高かった。(4)評価読み聞かせボランティアの増加を「よい傾向」ととらえている学校は、全体の91.8%に上った。その要点を示す。
PNSと他の看護提供方式による患者満足度と看護師の職務満足度に関する調査研究

本研究は、新看護提供方式PNS導入病院と今後PNS導入予定の病院を対象に患者満足度と職務満足度を調査し、1PNS導入病院の実態・特徴把握、2看護提供方式間での比較、3PNS導入前後の比較を実施し、より患者・看護師双方の満足につながるPNSを検討することを目的としている。平成30年度は、看護師のオカレンスと看護師の職務満足度、患者満足度の経年時比較を行った。看護師の職職務満足度の経年時比較では、PNS導入2年後に比べ6年後が、「全体」(p<0.05)と、「看護管理」(p<0.05)、「給与」「職業的地位」(p<0.001)、「専門職としての自立」「看護師相互の影響」(p<0.01)の5領域で高かった。更に、項目では「看護師間で患者ケアの問題を話し合う時間と機会がある」(p<0.05)が高かった。患者満足度とPNSの特徴の項目のPNS導入1年後と5年後7年後の経年時的比較では、PNS導入1年後より5年後が【患者への接近】の領域の項目「家族(重要他者)の絆を強める」の満足度が(p<0.05)高くなった。また、PNSの特徴の項目では「点滴や薬等の確認を2人で行い安心」「担当者2人で自分の状態を確認し安心で」が、PNS導入1年後より5年後、7年後で満足度が(p<0.05)高くなった。PNS導入1年後と5年後のインシデント比較でも、インシデント総数では21.5%、中でも新人看護師のインシデント数が46.7%、影響レベル3a以上では42.5%減少し、項目では「誤薬」「褥瘡発生率」も減少した。以上より、看護提供方式の比較では、PNSはその定着に従いプライマリーナーシングよりも、PNSの特徴である「看護師2人で行う」ことが、看護師の職務満足度と患者満足度を高め、看護師の重大なインシデントの減少につながることが示唆された。今年度は、PNS導入病院の調査を行い、過去に同様の調査を行った1施設について、PNS導入後の、経年時的な患者満足度、看護師の職務満足度の変化を分析した。桜井らの患者満足度尺度と、PNS関連の『担当者が2人いることで』「迅速な対応」「頻回の訪室」等11項目を調査し、4段階で回答を得た。患者満足度尺度の各領域得点に影響するPNS関連項目を明らかにするため、患者満足度と各変数の相関係数を算出し、有意差のある変数を独立変数とし、重回帰分析(ステップワイズ法)を行った。PNS導入後の患者満足度は「看護師間の伝達」以外は約90%が、PNS関連項目では、導入後2、5年目共に『担当者が2人いることで』「迅速な対応」「2人で薬の確認」「2人で状態確認」で90%以上、「検温時話が弾む」「頻回の訪室」で80%以上が満足と答えた。調整済み決定係数は患者満足度7領域で0.0370.51(全領域p<0.001)の幅があった。看護師の職務満足度はStampsー尾崎翻訳修正版尺度を使用し、7構成要素の平均値を算出し、PNS導入1年前、導入2年目、導入6年目について一元配置分散分析を行った。平均値はPNS導入前3.41、導入2年目3.32、6年目3.49で、「医師と看護師間の関係」「看護業務」以外は導入1年前から導入2年目で低下し、導入6年目には導入1年前より上昇した。構成要素間比較では、「給与」「専門職としての自律」は、PNS導入前から導入6年目、導入2年目と6年目で有意に上昇した(P<0.05)。「職業的地位」「看護師間相互の影響」は、導入2年目と6年目で有意に上昇した(P<0.05)。「給与」は超過勤務減少に伴う給与減少後、WLB改善で労働に見合うと認識が変化し、「専門職としての自律」等は、PNSの基盤であるパートナーシップや補完体制が効果的に機能し、導入6年目の有意な満足度上昇に繋がったと考える。計画時は、H28年度にPNS以外の看護提供方式からPNSに変更予定の病院を対象にアンケート調査を行う予定であった。しかし、研究協力の内諾を得ていた固定チームナーシング、プライマリーナーシングの施設共に、既に一部PNSを取り入れていることが分かった。そのため、他の研究協力施設を探した。平成28年度は、これまでPNS導入後、経年時的に患者満足度、看護師の職務満足度調査を行っていた施設のデータ収集と分析を行い、研究計画の再検討を行った。本研究は、新看護提供方式PNS導入病院と今後PNS導入予定の病院を対象に患者満足度と職務満足度を調査し、1PNS導入病院の実態・特徴把握、2各看護提供方式間での比較、3PNS導入前後の比較を実施し、より患者・看護師双方の満足につながるPNSを検討することを目的としている。

平成29年度は、PNS導入病院の1施設について、PNS導入病院の特徴として、患者満足度に影響を与えるインシデントについて、PNS導入1年後(2012年)と導入5年後(2016年)の患者満足度に影響を与える影響レベル2(軽微な一過性の障害)以上のインシデントの「総数」、「看護師のインシデント数」、「誤薬」、「影響レベル」と、「褥瘡発生率」を追加調査し、経年時的な患者満足度との関係を分析した。PNS導入1年後と5年後のインシデントを比較すると、インシデント総数は-21.5%、看護師のインシデント数は-24%、新人看護師のインシデントも-46.7%と減少した。影響レベルでは、影響レベル2のインシデントは-16.1%、影響レベル3a以上は-42.5%に、「誤薬」は-30.5%と減少し、褥瘡発生率も0.74%から0.4%に減少した。患者満足度の領域毎のPNS導入1年後と5年後の経年時的比較では、【場をつくる】の「伝えてほしいことを1人の看護師に言えば、他の看護師にも伝わった」の項目では81%から87.8%に、【インシデントを防ぐ】の「看護師がいることで安心して検査や治療が受けられた」の項目では、96.8%から97.1%に改善した。一方、PNS関連11項目と患者満足度との重回帰分析(ステップワイズ法)結果より、担当者が2人いることで「迅速な対応」「自分の状態を2人で確認してもらえ安心」の2項目が、患者満足度の【インシデントを防ぐ】の領域の満足度を高めたこと(p<0.001)が示唆された。PNSを導入した施設でも、導入実態にばらつきが大きいため、導入実態等の調査項目の追加や分析方法の変更など、研究計画の再検討を行うとともに、これまでPNS導入後、経年時的に患者満足度、看護師の職務満足度調査を行っていた施設の追加データ収集と分析を行った。本研究は、新看護提供方式PNS導入病院と今後PNS導入予定の病院を対象に患者満足度と職務満足度を調査し、1PNS導入病院の実態・特徴把握、2看護提供方式間での比較、3PNS導入前後の比較を実施し、より患者・看護師双方の満足につながるPNSを検討することを目的としている。平成30年度は、看護師のオカレンスと看護師の職務満足度、患者満足度の経年時比較を行った。看護師の職職務満足度の経年時比較では、PNS導入2年後に比べ6年後が、「全体」(p<0.05)と、「看護管理」(p<0.05)、「給与」「職業的地位」(p<0.001)、「専門職としての自立」「看護師相互の影響」(p<0.01)の5領域で高かった。更に、項目では「看護師間で患者ケアの問題を話し合う時間と機会がある」(p<0.05)が高かった。患者満足度とPNSの特徴の項目のPNS導入1年後と5年後7年後の経年時的比較では、PNS導入1年後より5年後が【患者への接近】の領域の項目「家族(重要他者)の絆を強める」の満足度が(p<0.05)高くなった。また、PNSの特徴の項目では「点滴や薬等の確認を2人で行い安心」「担当者2人で自分の状態を確認し安心で」が、PNS導入1年後より5年後、7年後で満足度が(p<0.05)高くなった。PNS導入1年後と5年後のインシデント比較でも、インシデント総数では21.5%、中でも新人看護師のインシデント数が46.7%、影響レベル3a以上では42.5%減少し、項目では「誤薬」「褥瘡発生率」も減少した。以上より、看護提供方式の比較では、PNSはその定着に従いプライマリーナーシングよりも、PNSの特徴である「看護師2人で行う」ことが、看護師の職務満足度と患者満足度を高め、看護師の重大なインシデントの減少につながることが示唆された。平成29年度は、固定チームナーシングからPNSに変更予定の2施設の内諾を得たため、PNS導入前後、経年時的に患者満足度、看護師の職務満足度調査に実施する。また、プライマリーナーシングから、PNSに変更予定の施設がないため、固定チームナーシングからPNSへ変更した施設に絞り、対象数を増やし実施することに計画変更を行う。更に、同一施設内で部署により異なった看護提供方式を行っている場合、看護提供方式の違いによる患者満足度、看護師の職務満足度の部署間の比較を追加する。
複雑な岐路を持つ建築空間における迷い行動に関する認知心理学的研究-探索行動実験からの手続き知識の分析

それぞれ廊下型とホール型の特徴を持つ2つの複合的な地域公共施設において探索行動実験(各施設6人,合計12人の被験者)を行い以下のような知見を得た。1.案内板・方向板のない建築空間では、被験者の探索経路は多様なタイプになり,特にエントランス周辺部で停止・途中後戻り等の迷い行動が発生する。2.エントランス周辺部での視認情報は,ホール・廊下等の空間的情報,ドア等の形態的情報,室名板のサイン情報などを総合的に入手している.3.思考内容は,被験者によって相違があり,特に方向判断に関する思考について見れば,サイン情報を優先する思考,目的室確認でドアの数を優先する思考,目的室確認で類似室のゾーンを優先する思考,空間全体の把握を優先する思考等のタイプがあった.4.案内板や方向板をなくした建築空間での迷い行動は,空間内の多種の情報を手がかりとするため被験者によっての相違が大きく,被験者の視認情報と思考内容との相互関係で説明される.傾向としては,空間の見通しの良い場所まで進んで,多くの情報を入手し総合的に判断した被験者の方が,適切な探索経路を選択しており,逆に限定された視認情報からの思考を基する被験者の場合,途中後戻りや回り道等が発生している.それぞれ廊下型とホール型の特徴を持つ2つの複合的な地域公共施設において探索行動実験(各施設6人,合計12人の被験者)を行い以下のような知見を得た。2.エントランス周辺部での視認情報は,ホール・廊下等の空間的情報,ドア等の形態的情報,室名板のサイン情報などを総合的に入手している.3.思考内容は,被験者によって相違があり,特に方向判断に関する思考について見れば,サイン情報を優先する思考,目的室確認でドアの数を優先する思考,目的室確認で類似室のゾーンを優先する思考,空間全体の把握を優先する思考等のタイプがあった.4.案内板や方向板をなくした建築空間での迷い行動は,空間内の多種の情報を手がかりとするため被験者によっての相違が大きく,被験者の視認情報と思考内容との相互関係で説明される.傾向としては,空間の見通しの良い場所まで進んで,多くの情報を入手し総合的に判断した被験者の方が,適切な探索経路を選択しており,逆に限定された視認情報からの思考を基する被験者の場合,途中後戻りや回り道等が発生している.
水稲子房における転流・転送系並びに蓄積系構造の組織・細胞学的解析

1.水稲の高温登熟に伴う貯蔵物質の蓄積構造の変化と食味への影響を解析する基礎知見として、登熟及び発芽初期生長に伴うデンプン粒及びタンパク顆粒の動態を明らかにした。2.高温登熟によって形成された多様な屑米及び不完全登熟米について、それらの胚乳構造とアミロプラストの構造変化を詳細に解析し、アミロプラストの多様な形態的異常が生じていること、アミロプラストの増殖様式が変化してアミロプラスト間に隙間が形成されていること、デンプン粒に分解が生じていること、これらが白色不透明粒の生じる要因であることを明らかにした。3.高温ストレスが珠心表皮の腹側からの退化を著しく促進すること、珠心突起部における栓物質の形成・沈着を促進し、転流ルートの封鎖を早め、胚乳背側部のアミロプラストの異常化と蓄積不良を招き、玄米品質の低下と不完全登熟米の増加に直結していること明らかにした。4.フェン現象により増加した不完全登熟粒の胚乳構造を解析し、アミロプラストの異常形態の多発により玄米品質が低下したことを明らかにした。5.13品種の水稲を供試して高温登熟耐性の違いを解析し、珠心表皮の退化速度やアミロプラストの異常化程度に品種間差異が認められることを明らかにし、それらの胚乳構造の特徴を明らかにした。本年度の研究実績は論文3報と学会講演8報である。論文では,水稲の登熟および発芽・初期生長に伴う貯蔵物質の動態を,とくにタンパク顆粒とデンプン粒について詳細に検討した。これらは,高温登熟に伴う貯蔵物質の蓄積構造の変化を検出する基礎知見となるものである。また,米の食味評価の基本的知見となる炊飯に伴うデンプン粒の糊化過程を,急速凍結・真空凍結乾燥法による試料調製と走査電子顕微鏡観察により初めて明らかにした。講演では,水稲の登熟期における高温条件が貯蔵物質の蓄積量と蓄積形態,とくにアミロプラストの形態と増殖特性に及ぼす影響について,デンプンを構成するアミロペクチンの側鎖長分布と糊化特性に及ぼす影響について,転流・転送系構造である子房の背部維管束および珠心表皮の構造変化・退化過程に及ぼす影響などについて初めて解析した。また,高温登熟によって形成された多様な屑米および不完全登熟米を供試して,それらの胚乳構造と貯蔵物質とくにアミロプラストの形態について詳細な解析を行い,水稲の登熟期における高温条件の影響について多くの新知見を明らかにした。とくに,アミロプラストの多様な形態的異常,増殖様式の変化,デンプン粒の分解像の確認などは,今後の本研究の進展に有益な示唆を与えるものと考えられる。さらに,不完全登熟米でみられる胚乳の白色不透明部と胚乳が白色不透明なモチおよび低アミロース品種・系統におけるアミロプラストの形態的特徴を比較検討し,両者の相違点を明らかにした。本年度の研究実績は学会発表8報である。まず高温及び遮光条件での登熟が蓄積系である胚乳のアミロプラストの構造に及ぼす影響を詳細に検討し,高温登熟が小型のアミロプラストを,遮光が収縮程度の大きいアミロプラストを,それぞれ著しく増加させること,これらが米粒の白色不透明化を招き,品質低下に直結する要因であることを明らかにした。また,転流・転送系構造である背部維管束と珠心表皮の退化過程に及ぼす高温登熟の影響を詳細に解析し,高温ストレスが珠心表皮の退化を早め胚乳腹部のアミロプラストの異常による登熟不良を招くこと,さらに背部維管束の珠心突起部における栓物質の形成・沈着を促進して転流ルートの封鎖を早め,胚乳背側部のアミロプラストの異常と登熟不良を招き玄米品質の低下と不完全登熟粒の増加に直結することを初めて明らかにした。次に,一時的な高温と乾燥条件が水稲の登熟に著しい悪影響を及ぼすフェーン現象により増加した不完全登熟粒を詳細に解析し,アミロプラストの異常形態が多発し玄米品質が悪化していること,屑米率の増加の要因は登熟後期のストレスによる胚乳細胞の肥大成長の抑制とアミロプラストの増殖異常などに伴う玄米粒厚の減少であることを明らかにした。

さらに,水稲の登熟問題の重要課題である,いわゆる強勢穎果と弱勢穎果の特徴について,出穂までの穎果の発育程度の差が最終玄米重を左右すること,弱勢頴果の子房では初期の胚乳細胞形成が遅延していることを示した。また,水稲玄米で認めたデンプン粒の分解と全く同様な分解像がコムギの胚乳でも認められることを明らかにした。本年度の研究実績は、論文1報と学会発表8報である。まず、フェーン現象被害によって大型の屑米が増加した要因は高温・乾燥ストレスにより胚乳細胞の肥大生長と細胞層数の増加が抑制されたためであることを明らかにした。強勢穎果と弱勢穎果における登熟初期における子房の発達の違いと特徴を調べ、弱勢穎果では珠心の退化が著しく緩慢であり胚乳細胞の形成が遅延することを明らかにした。登熟期の高温ストレスに伴う玄米粒厚減少の構造的要因を調べ、胚乳細胞の分裂・増殖の異常化および同化産物の蓄積異常に起因する乾燥収縮であることを明らかにした。このような水稲胚乳における貯蔵物質蓄積の特徴と異常化を理解するため、雑穀の種子胚乳の構造についても調べた。また、13品種の水稲を供試して高温登熟耐性の違いを詳細に検討し、品種間差異の存在とその構造的特徴および不完全登熟米における胚乳構造の特徴を明らかにし、さらに高温登熟によって転送系構造の珠心表皮の退化が著しく促進されることをはじめて明らかにした。高温登熟させた子房の構造を詳細に検討し、胚乳組織の形成初期に果皮にデンプンが蓄積されず、胚乳細胞の分裂が異常化する例を見いだし、その要因として子房全体のシンク機能および転流・転送系機能がともに著しく低下していることが構造的に明らかになり、高温ストレス下では胚乳の組織形成が同化産物供給量の著しく少ない条件下で進行していたと推定された。正常な胚乳の組織形成についても、検討を進め、受精後の胚乳の発達にとって親組織の組織形成の重要性を明らかにした。
銀河面拡散X線放射の観測による銀河系内宇宙線加速の初期機構の解明

本年度は、銀河系中心領域の1000万度の高温ガスの精密調査、および過電離プラズマをもつ超新星残骸IC443のX線観測研究を主に行なった。これらの研究対象は、本研究の目的である「銀河系内の拡散X線放射を用いた銀河宇宙線」研究の基礎となるものである。銀河系中心領域には高温プラズマガスが満ちていることがわかっている。しかしその正体については現在でも活発に議論がされている。その主要なシナリオは、(1)暗いX線点源の寄せ集め、(2)真に広がった数千万度の高温ガス、である。広がった高温ガスの中でも比較的温度が低い成分について、その生成起源を解明するために、本年度は「すざく」衛星によるアーカイブデータを用いて、約1度の広範囲の調査を行なった。その結果、低温成分の温度は1000万度程度であり、元素組成は太陽のものと矛盾がない値であることがわかった。また、そのX線放射強度分布は一様ではなく。塊状に分布しているものもある。点源説の有力候補であるcoronal active starで説明するためには、無数の天体が必要になり、そのような塊状に偏ることはありえない。また、それらの天体は典型的に元素組成が太陽よりも小さくなることも矛盾する。これらのことから、この高温プラズマは真に広がっていることを明らかにした。またその起源として、銀河中心領域における高エネルギー活動である可能性を指摘した。また、超新星残骸IC443の「すざく」衛星のアーカイブデータを用いて、過電離状態であることを確認し、その生成過程について考察をした。その結果、過電離の有力起源とされた分子雲による冷却では説明できず、外部から電離される必要があることを示した。その電離源として、低エネルギー宇宙線が考えられる。本研究は銀河系拡散X線の中から、低エネルギー宇宙線由来の成分を探すことであるので、拡散X線放射の未知の部分を切り分ける必要がある。銀河中心領域において、高温プラズマの切り分けが成功したため、順調に進展していると言える。また、本研究目的である低エネルギー宇宙線が過電離プラズマの成因になり得ることがわかったことは大きな進展である。本年度は、銀河系拡散X線放射の候補の中でも寄与が無視ができない白色矮星連星系のX線観測における性質について調査を行う予定である。それを用いて、低エネルギー宇宙線由来のX線成分を切り分け、宇宙線総量の制限を行う。本研究は銀河系に広がる、点源に分解できないX線放射(銀河系拡散X線放射)の観測により、銀河系内の宇宙線の起源に迫るものである。本年度は、銀河宇宙線生成の最有力候補である超新星残骸に焦点を当て、これまでに我々が実証した「中性鉄の特性X線を用いた低エネルギー宇宙線の探査」の手法を用いて、観測研究を行った。このX線成分は淡く微弱なため、これまでで最高の感度を持つX線天文衛星「すざく」のアーカイブデータを使用した。その結果、およそ10天体から中性鉄の特性X線を発見することに成功した(Kes78, W28, W44, Kes 67, Kes 69, G323.7-1.0など)。さらに、詳細なスペクトル解析の結果、MeV (メガ電子ボルト)の運動エネルギーを持つ宇宙線陽子である可能性が高い。これまでは、超新星残骸からはGeV (ギガ電子ボルト)を超える宇宙線は見つかっていた。本結果は、宇宙線の生成初期における、低エネルギー成分を発見したことである。これは宇宙線の生成機構の解明に重要な情報である。また、X線天文衛星「ひとみ」が観測した超新星残骸N132Dのデータ解析を行った。「ひとみ」は2016年2月に打ち上げたものの残念ながら1ヶ月で運用を停止した。我々の解析の結果、天体由来の物質がプラズマになり高速で膨張していることを、特性X線のドップラーシフトを元に解明した。得られた結果を、主要著者の1名として投稿論文にまとめた。銀河系拡散X線放射における中性鉄の特性X線の起源は、低エネルギーの宇宙線である可能性がある。しかしその宇宙線がどこに由来するのかは、観測的に明らかになっていない。膨大な銀画面データを解析した結果、超新星残骸からも低エネルギー宇宙線起源の中性鉄の特性X線を発見した。このことは、当初予定していた計画を超えた結果である。

点源説の有力候補であるcoronal active starで説明するためには、無数の天体が必要になり、そのような塊状に偏ることはありえない。また、それらの天体は典型的に元素組成が太陽よりも小さくなることも矛盾する。これらのことから、この高温プラズマは真に広がっていることを明らかにした。またその起源として、銀河中心領域における高エネルギー活動である可能性を指摘した。また、超新星残骸IC443の「すざく」衛星のアーカイブデータを用いて、過電離状態であることを確認し、その生成過程について考察をした。その結果、過電離の有力起源とされた分子雲による冷却では説明できず、外部から電離される必要があることを示した。その電離源として、低エネルギー宇宙線が考えられる。本研究は銀河系拡散X線の中から、低エネルギー宇宙線由来の成分を探すことであるので、拡散X線放射の未知の部分を切り分ける必要がある。銀河中心領域において、高温プラズマの切り分けが成功したため、順調に進展していると言える。また、本研究目的である低エネルギー宇宙線が過電離プラズマの成因になり得ることがわかったことは大きな進展である。当初の予定通り、銀河面の広い範囲のデータを解析し、低エネルギー宇宙線の分布の測定を行う。銀河系拡散X線放射には、超新星残骸以外にも、白色矮星連星系などのX線星が混入している。純粋に目的としている宇宙線起源成分を抽出するためには、それらの成分を除く必要がある。適宜、超新星残骸やX線星などの調査も行い、主目的である成分にフィードバックをすることにする。本年度は、銀河系拡散X線放射の候補の中でも寄与が無視ができない白色矮星連星系のX線観測における性質について調査を行う予定である。それを用いて、低エネルギー宇宙線由来のX線成分を切り分け、宇宙線総量の制限を行う。申請時の計画予算からの減額分を補うため、当該年度に購入予定だった物品を別予算を用いて調達した。残額は次年度以降の物品購入、旅費に充てる。当初計画より予算が少なく、物品の購入に別の予算をあてたため。残額は本年度の物品購入および旅費に使用する予定である。
短期高等教育から職業への移行過程における無業者析出メカニズムの研究

本研究は、短期高等教育における無業者に関する研究である。進路が決まらないまま卒業する学生・生徒はなぜ発生するのかを明らかにし、その防止策に関する示唆を得る。就職活動支援をする教職員へのヒアリング調査と、短期大学・専門学校卒業生に対するアンケート調査を実施した。その結果、短期高等教育ではクラス担任が就職活動に対して重要な役割を果たしており、進路指導室とともに比較的良好な就業機会の提供を行っている。ただ、就職活動シーズンの晩期にはその役割が限定的となって、なかなか進路が決まらない学生・生徒に対しては学外のハローワーク等が就業機会を提供しており、短期高等教育内部でのさらなる制度充実が求められている。本研究の目的は、短大や専門学校などの短期高等教育から職業への移行過程において無業者が発生するメカニズムを明らかにすることにある。短期高等教育においては学校による進路指導のあり方と学生・生徒の進路選択との相互作用の中で問題が発生している可能性が高いと考え、学校側と学生・生徒側の双方の視点に注意を払い問題の構図を描くことを目指している。研究期間初年度の平成25年度は、問題の焦点を短期高等教育進学時点の進路希望にも広げることを検討した。これは、研究グループでの検討・議論において、短期高等教育(特に専門学校)においては職業に特化した教育を展開しており、進路希望については短期高等教育入学時にある程度固まっているのではないかという意見が出たためである。そこで、聞き取り調査を行う対象として高等学校の教員も含めることとし、短期高等教育への進学者が一定程度存在する学校を選定して、聞き取り調査を実施した。聞き取り内容については、次年度以降引き続き分析を行いとりまとめる。他方で、学生・生徒を対象とする質問紙調査の設計のために、過去に行われた調査の調査項目に関する検討、および分析結果の再検討を研究グループにおいて重ねた。また、作業の効率化のためにインターネット調査にした場合の設計についても検討を行った。最終的な研究結果のとりまとめに向けて、引き続き先行研究の整理を行うとともに、我が国のこれまでの高等教育政策において短期高等教育がどのような位置づけであったかについても再整理を行い、研究成果の政策的インプリケーションについて検討する準備も行った。研究期間2年目の平成26年度は、専門学校に焦点を絞って専門学校における進路指導の実態を明らかにすることを試みた。専門学校には多様な規模・学科があり、それぞれに抱えている問題は異なるのではないかと考え、先行研究を参考にしながら4類型に分類して、各分類に該当する学校を選び進路指導担当職員を対象に聞き取り調査を実施した。すなわち、規模については大規模か小規模か、学科については資格教育分野(医療、衛生、教育・社会福祉、工業のうち一部学科)であるかどうかという基準を用いて分類した。結果として、たとえば次のようなことが明らかになった。(1)専門学校ではクラス担任制を取ることが一般的で、就職活動の時期になるとクラス担任が日常的な生活指導の延長として進路指導を行っていくケースが多い。(2)学校が企業からの依頼に基づいて推薦を行うこともあるが、その際は学業成績などを基準に選抜が行われることもある。(3)規模の大きな学校では進路指導を専門的に行う職員を配置しているケースも見受けられるが、規模の小さな学校では教員が進路指導の職を兼ねて行っているケースが多い。(4)資格教育分野の学校では資格取得時期によっては就職活動や就職指導が卒業後になってしまう学校もある。以上のことから、専門学校における進路指導は担任が大きな役割を果たして進行する高等学校と性格が似ていると言える。研究期間3年目の平成27年度は研究期間最終年度であり、短大および専門学校卒業生(2016年3月卒業者含む)に対して進路決定に関するアンケート調査をインターネットにより実施した。実施時期は2016年3月上旬、調査会社に業務を委託し、調査会社が保有しているモニターから短大もしくは専門学校の卒業生を抽出して調査依頼をかけた。回答者数は1327名(専門卒が899名、短大卒が428名)であった。このうち、本研究が関心を寄せる卒業時点での無業者は、回答者全体の17.7%にあたる235名であった。無業者の在学中における行動の特徴の一つとして、担任などの教員と進路に関する話題をあまりしなかったという点が指摘できる。そもそも、短期高等教育における就職活動は、4年制大学のそれと比して学校の関与が大きい。就職決定者のうち6割程度は何らかの学校による支援、たとえば在学中の実習先にそのまま就職したり、あるいは教員および進路指導室による紹介によって初職を見つけたりしている。こうした進路決定メカニズムがある中で、担任とのコミュニケーションがうまくいっていないなど学校による指導に乗れていない場合に、進路決定に至らず無業者になる可能性が高いことが今回の調査によって示唆された。

専門学校に限って言えば、この調査結果は昨年度実施した教員聞き取り調査の結果と整合的である。日常的な学校の指導に乗れなかった生徒に対する支援は、担任制度とは別の仕組みを構築する必要があるのかもしれない。本研究は、短期高等教育における無業者に関する研究である。進路が決まらないまま卒業する学生・生徒はなぜ発生するのかを明らかにし、その防止策に関する示唆を得る。就職活動支援をする教職員へのヒアリング調査と、短期大学・専門学校卒業生に対するアンケート調査を実施した。その結果、短期高等教育ではクラス担任が就職活動に対して重要な役割を果たしており、進路指導室とともに比較的良好な就業機会の提供を行っている。ただ、就職活動シーズンの晩期にはその役割が限定的となって、なかなか進路が決まらない学生・生徒に対しては学外のハローワーク等が就業機会を提供しており、短期高等教育内部でのさらなる制度充実が求められている。本研究は、聞き取り調査と質問紙調査の2調査を主として行うが、聞き取り調査については専門学校での調査において計画以上の成果を上げることができている。しかしながら、質問紙調査については質問項目の検討に時間を要したことと調査時期・回数との関係で実施を次年度に延期しているため、全体としてはおおむね順調に進展している。教育社会学研究期間3年目の平成27年度は、これまでに実施した聞き取り調査の整理とまとめを行う。また、延期している質問紙調査を実施する。また、研究期間最終年度であるので、これまでに行ってきた先行研究の整理を踏まえながら、研究成果のとりまとめを行っていく。本研究は、聞き取り調査と質問紙調査の2調査を主として行うが、そのいずれにおいてもほぼ予定通りに準備・実施が進んでおり、研究はおおむね順調に進展していると評価できる。平成26年度に実施予定であった質問紙調査を、調査項目の検討に時間を要した等の理由から年度内の実施ができなくなったため。研究期間2年目の平成26年度は、聞き取り調査および質問紙調査を引き続き実施する。また、先行研究の状況にも引き続き注意を払い、研究期間最終年度の研究成果とりまとめのための準備も進めておくことにしたい。当初予定通り質問紙調査の実施に使用する。購入予定であった統計ソフトの選定に時間を要し年度内の執行ができなくなったため当初予定通り統計ソフトの購入に使用する
胎児仮死の指標としての羊水エリスロポエチン:予後との関連及びラットでの基礎的検討

1、羊水エリスロポエチン(EPO)異常高値例の予後の検討羊水EPO異常高値例の短期的予後には不良例が多いことを臍帯血EPO異常高値例との比較も含めて日本小児学会総会(1994年5月、札幌)にて報告した。羊水EPO、臍帯血EPOの胎児仮死の指標としてのCUT OFF値を設定し、異常高値例の臨床的意義を、胎児心拍の異常との比較を行って検討し日本新生児学会総会(1994年7月、東京)にて報告した。2、羊水EPO、臍帯血EPOの子宮内低酸素状態に対する反応の違いを経時的、定量的に評価妊娠ラットを用いて、低酸素負荷を与えることにより上記の検討を行った。酸素濃度13%では有効な低酸素負荷にはならなかったが、9%では有効なEPOの反応が得られた。その結果、臍帯血EPOは1.5時間の低酸素負荷で有意の上昇があったが、羊水EPOでは上昇に9時間を要した。つまり、羊水EPOは臍帯血EPOに比べてより長時間の子宮内低酸素状態を反映すると考えられた。この結果は日本未熟児新生児学会(1994年10月、東京)にて報告した。また、24時間低酸素負荷後に正常に戻るまで臍帯血EPOは12時間であったのに対し、羊水EPOは48時間でも正常化しなかった。この結果については今後発表の予定である。
新たな流産誘発因子adipsin-胎盤内の補体活性または脂質代謝に与える影響

補体活性化因子adipsinはマウス流産胎盤の迷路部領域において検出量が著明に増加していたが、活性型補体C3bおよび補体第二経路活性の亢進は検出されなかった。一方、adipsinの活性化経路下流で働く抑制性因子Crryが増加しており、流産胎盤ではadipsinの補体活性化作用は機能していない可能性が示唆された。Adipsinは胎盤内への脂質取り込みなど、他にも繁殖生理に影響する可能性がある。先に行った網羅的遺伝子解析により,マワス自然流産胎盤において高頻度な遺伝子発現が認められた補体活性化因子adipsinについて,胎盤内動態・作用に関する検討を行った。免疫組織化学的検索により胎盤内の分布を調べると,adipsinは正常胎盤の迷路部において微弱ながら反応性が認められたが,流産胎盤ではその検出強度が明瞭に亢進していた。特に,栄養膜細胞の母体側血液に接する細胞膜,および母体血液の血漿成分に陽性反応が認められた。補体副経路において,adipsinを介し活性化される補体C3について胎盤内局在を同様に調べると,adipsinと同じく栄養膜細胞の表面に陽性反応が認められ,さらに母体-胎児間領域に存在する栄養膜巨細胞の内部にも穎粒状の反応性が認められた。胎盤よりタンバク質を抽出し,CH50法で補体活性を測定すると,正常胎盤に比べて流産胎盤で約3倍の亢進が認められた。流産胎盤の補体活性は,膜成分の溶解分画よりも胎盤を細切・洗浄して得た分画で高く検出された。尚,血清の補体活性は,妊娠と非妊娠マウスの間では変化はなかった。流産胎盤では,体液などに由来する表在性の補体成分が胎盤内で活性化され,その機序には栄養膜細胞が産生するadipsinが関与すると考えちれた。補体活性化の傷害部位,生殖学的意義については更なる検討が必要であるが,活性化されたC3は栄養膜細胞に付着して細胞膜を傷害し,胎児への栄養供給・ガス交換能力を低下させ,流産誘起の要因として,あるいは流産胎児・胎盤の退行過程での組織吸収に関与すると考えられた。流産胎盤におけるadipsin(Factor D)の局在と機能について検討を行った。マウスの自然流産胎盤を注意深く観察すると、胎盤の変性は胚の吸収に遅れて起きていた。流産胎盤の変性部位は、胎児との栄養交換に重要である迷路部において特に顕著であった。免疫染色では、adipsinの陽性反応は迷路部領域において認められ、反応性は組織変性の初期に最も亢進した。ウエスタンブロットで調べると、流産胎盤においてadipsinタンパクの有意な増加を認め、特に体液成分および組織の表在成分に豊富に含まれることが分かった。補体活性を調べると、正常に比べ流産胎盤で強い活性が認められ、やはり体液成分で有意な上昇が認められた。補体活性の中心的役割を持つComplement factor C3について検討すると、C3前駆体、活性化体(C3b)、不活化体(iC3b)が流産部位で増加しており、特にC3bの増加が著明であった。流産胎盤ではadipsinが豊富に含まれ、補体C3の限定分解経路を促進し、胎盤内補体活性を増加させていることが示唆された。特に、流産の発生初期において、活性化した補体系が胎盤迷路部の組織変性に関与している可能性が考えられた。今後の展開としては、妊娠期におけるadipsinの特異的産生部位を同定し、胎盤内への流入経路について検討を行う。同時に、adipsinと補体の細胞傷害作用について評価を加える。さらに、adipsinは脂質代謝にも関わることが知られているため、妊娠の維持と脂質代謝との関係性にadipsinがどのように関わるのか、研究を展開していく予定である。マウス胎盤内のadipsinタンパクについて調べると、妊娠10.5日、14.5日の両日とも正常部位に比べ、流産部位における量的増加が認められた。流産胎盤におけるadipsinの局在部位は迷路部および基底部領域で顕著であったが、正常部位の脱落膜においても陽性反応が認められた。In situ hybridizationでadipsinのmRNA局在を調べると、栄養膜細胞系列で陽性反応が確認できたが、特に巨細胞で強い反応が認められた。この所見は流産胎盤で顕著であったが、正常胎盤でも同様の傾向が見られた。つまり、流産胎盤の巨細胞はadipsinを高発現し、胎盤内へ分泌する可能性がある。Adipsinによって活性化される補体C3について調べると、流産部位においてC3の前駆体と不活化体iC3bの増加が確認された。次に補体活性経路のうち、adipsinが最も関与する副経路について調べると、流産部位より抽出したタンパクには副経路を活性化させる作用が認められたが、その増強効果は正常部位抽出タンパクに比べ約1.1倍であり、予想していた強い作用ではなかった。