hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ヒト骨髄性白血病細胞の分化誘導にかかわるシグナル伝達

骨髄性白血病は未だ不治の病であり、有効な治療法の開発が求められている。その一つとして分化誘導療法が注目されている。最近、レチノイン酸誘導体が前骨髄球性白血病患者に対し著効を示すことが明らかにされた。しかし、前骨髄球性以外の骨髄性や単球性の白血病患者に対しては、未だ有効な分化誘導物質は見つかっていない。我々はin vitro培養系で、骨髄芽球性白血病細胞ML-1をマクロファージ方向へ分化誘導する因子を抹消血単核白血球の培養上清より精製し、それが腫瘍壊死因子(TNF)であることを明らかにした。本研究では、分子誘導のシグナル伝達機構を明らかにする目的で、TNFの分化誘導の作用機序とTNFの作用を高める修飾物質の作用機序について検討し、以下2点を明らかにした。1)TNFによるML-1細胞のマクロファージ方向への分化は、二つのTNFレセプターp55Rあるいはp75Rのどちらか一方の刺激で誘導される。両方のレセプターの刺激で分化は相乗的に誘導される。2)病原性大腸菌が産生するエンテロトキシンはTNFの作用を相乗的に促進し、両者を併用するとほとんどの細胞(95%以上)が成熟マクロファージ様細胞に変化し、増殖が停止する。エンテロトキシンはGs以外のGTP結合タンパク質をADP-リボシル化し、作用を発揮する。TNFを分化誘導剤として臨床の場で応用していくことは、現在のところ副作用という点で難しい。しかし、細胞膜レセプターを介した分化誘導のシグナル伝達機構を解析していく上でTNFは有用であり、併用物質によっては副作用を起こさない用法で分化を誘導することが可能になると思われる。白血病細胞は従来の抗癌剤と異なる特異な分化誘導物質の処理で分化成熟し、増殖性や造腫瘍性が喪失する現象が明らかになっている。我々は先にinvitro培養系で末梢血単核白血球が産生する分化誘導因子を精製し、それが腫瘍壊死因子であることを同定した。TNFの作用はコレラトキシンと併用することにより著しく高まることが判明した。初年度はTNFの分化誘導の作用機序、相乗効果の機序を検討するためTNFレセプターの動態、コレラトキシンによるADP-リボシル化反応の役割について調べた。TNFには2種のレセプターの存在が知られているが、^<125>I-標識TNF、それぞれのレセプターに対する特異抗体を用いてヒト骨髄性白血病細胞ML-1のTNFレセプターについて解析した。その結果、(1)75kDaレセプターが80%、55kDaレセプターが20%の割合で膜上に存在し、(2)それぞれのレセプターは分化誘導のシグナルをメディエイトしており、(3)両方からのシグナルが合わさると相乗的に分化が誘導されることが明らかになった。また、(4)コレラトキシン処理により、75kDaレセプター数が増加し、55kDaレセプター数が低下することが明らかになった。この変動がTNFとの相乗作用にどのような意味をもつのか不明である。病原性大腸菌のエンテロトキシンもコレラトキシン同様にTNFと併用すると強い相乗作用を示すことが明らかになった。エンテロトキシン変異体を用いた研究等から、GTP結合タンパク質Gs-アデニレートサイクラーゼ以外のGタンパク質をADP-リボシル化し、それにカップルするエフェクターを介して分化を導誘していることが示唆された。また最近、ある種の分化誘導物質は通常の抗癌剤に難治性の前骨髄性白血病患者に対し治療効果を示すことが明らかにされた。しかし、骨髄性や単球性の白血病患者に有効な物質はまだみつかっていない。

我々はin vitro培養系で抹梢血単核白血球が産生する分化誘導因子を精製し、それが腫瘍壊死因子(TNF)であることを同定した。さらに最近TNFの作用はコレラトキシンと併用することにより著しく高まりヒト骨髄性白血病細胞ML-1の95%以上が成熟マクロファージ様細胞に分化し、増殖が停止することを見いだした。本研究は上記実験系で、両物質併用による分化誘導のシグナル伝達機構を明らかにし、今後副作用の少ない有効な分化誘導物質を開発していくための基礎的情報を提供する事を目的とした。今年度はTNFレセプターに焦点をあて、分化誘導における二つのレセプターの役割について解析した。ヒト骨髄性白血病細胞ML-1に発現する二つのTNFレセプターと分化誘導の関係を^<125>I-TNFと2つのレセプターに特異的なモノクローナル抗体を用いて解析した結果、以下の点が明らかになった。(1)分化は55kDaあるいは75kDaのどちらか一方の刺激で誘導される。(2)両方のレセプターの刺激で分化は相乗的に誘導される。(3)エンテロトキシン処理で75kDaレセプター数が増加する。(4)一次構造的に30%のホモロジーを有するリンホトキシンは、分化誘導活性をほとんど示さない。(5)リンホトキシンの結合活性はどちらのレセプターに対してもTNFの約1/3程である。しかし、75kDaレセプターに対する刺激が極めて弱いことが示唆された。白血病細胞は従来の抗癌剤と異なる特異な分化誘導物質の処理で分化成熟し、増殖性や造腫瘍性が喪失することが明らかになっている。最近、トランス型レチノイン酸(all-trans retinoic acid;ATRA)が、前骨髄球性白血病細胞を顆粒球系に分化誘導し、患者を完全寛解に導くことが明らかにされた。しかし、骨髄性や単球性など、他の分化段階にある白血病患者に対して有効な物質はまだみつかっていない。我々は骨髄芽球の分化段階にあるヒト骨髄性白血病細胞ML-1を、in vitro培養系でマクロファージ方向へ分化誘導する因子を末梢血単核白血球の培養上清から精製し、それが腫瘍壊死因子(TNF)であることを明らかにした。本年はレチノイン酸とサイトカインを併用し、ML-1細胞を顆粒球方向へ分化誘導することを試みた。ML-1細胞にATRA、GM-CSFを加え、細胞の生死と分化誘導に伴って現われる諸マーカーを経時的に測定し、以下の結果を得た。(1)GM-CSFは単独ではNBTの還元能をほとんど誘導しないが、ATRA存在下ではNBT還元能を濃度依存的に誘導した。(2)ATRAはML-1細胞を形態的に顆粒球様の細胞に分化誘導した。このときGM-CSFを併用を併用することにより桿状球と分葉核の現われる割合が増加し、両方合わせると80%以上に達した。(3)ATRA10^<-6>Mで細胞増殖が強く抑制されたが、長期間(10日間)培養してもほとんどの細胞は生存した。しかし、ATRAに低濃度のGM-CSF(0.01-1ng/ml)を加えるとほとんどの細胞が死滅した。高濃度(1-100ng/ml)では逆に生細胞の割合が増加した。成熟顆粒球の寿命は短い。従来、種々の誘導剤で単球/マクロファージ方向へ分化誘導される傾向にあった骨髄芽球や単芽球性の白血病細胞を顆粒球系へ分化誘導させることにより、細胞死を導く方法を確立したい。
閉じたき裂・枝分かれき裂の高信頼定量評価方法基盤の確立

本研究はき裂非破壊評価の高信頼化における三大障壁であるき裂閉口,き裂の枝分かれ,溶接部なる問題解決のための学術基盤の確立と技術基盤の開発を目的として2年継続により実施したものであり,以下のような研究成果を得た。1.結晶粒界からの超音波反射ノイズのアベレージングの最適化によるS/N比の向上オーステナイト系ステンレス鋼製試験片を対象とし,結晶粒界からの超音波反射ノイズを低減するための斜角超音波探傷法の最適サンプリング条件と探触子の走査条件を見出した。2.溶接部の閉じた裏面き裂の超音波探傷被検査物裏面に導入した様々な閉じ具合の疲労き裂を対象として,き裂寸法とき裂閉口圧を逆問題解析により同時に決定する手法を確立した。また,応力腐食割れを有する溶接試験体の表面をドライアイスにより局所的に冷却することで試験体内部に熱応力が発生し,応力腐食割れからの超音波応答が向上することを示した。3.非線形超音波による閉じたき裂の評価開口量を制御して導入した疲労き裂を対象として非線形超音波法を適用し,き裂開口と非線形挙動に一定の関係があることを示した。また,超音波の入射波振幅以下の極微細隙間を持つ欠陥により起こる2次高調波振幅を用いて,不完全接合部や応力腐食割れなどを画像化することに成功した。4.直流電位差法の高感度化肉厚40mmのステンレス製配管の配管外壁を局所的に加熱しながら電位差を測定することで,配管内壁に導入した深さ9mmの放電加工スリットが良好に検出できることを確認した。さらに四端子の繰返し接触機構等を付与した直流電位差法センサを開発し,従来法を飛躍的に上回る高精度な表面電位差計測を実現した。5.複合化による評価の高信頼化超音波探傷法,非線形超音波による探傷法ならびに高感度直流電位差法のき裂評価能力を種々の試験体を使用して比較し,複数の技術の併用が高信頼化の鍵であることを示した。平成16年度は以下の5項目について取組み、それぞれ以下のような研究実績を得た。1.超音波反射ノイズの自動探傷によるアベレージング最適条件の抽出オーステナイト系ステンレス鋼製試験片を対象とし、斜角超音波探傷法の最適サンプリング条件(周波数、アベレージング回数)と探触子の走査条件(モード、範囲、速度)を見出した。2.溶接部の閉じた疲労き裂の超音波探傷逆問題解析被検査物裏面に導入した様々な閉じ具合の疲労き裂を対象として、超音波底面エコーを収録した。この音圧分布におけるき裂エコーに基づき、き裂寸法とき裂閉口圧なる二つの未知量を無負荷状態下で逆問題解析により決定する手法を確立した。3.非線形超音波による閉口き裂評価の基礎実験開口量を制御して導入した疲労き裂で端部波の検出限界開口を検証した。従来法では計測困難な閉じたき裂に対して非線形超音波法を適用し、き裂開口と非線形挙動に一定の関係があることを示した。またニュートンリングを用いて光学的に既知の隙間量に対して、高調波反射波像を収録した。4.熱による電流径路制御の直流電位差法感度向上に対する有効性の検証肉厚40mmのステンレス製配管の内壁上に導入した深さ9mmの人工スリットに対して直流電位差法を適用した。従来法ではこのスリットを検出不能であったが、配管外壁を局所的に加熱しながら電位差を測定することで、このスリットが良好に検出できることを確認した。

5.熱による電流径路制御に基づく直流電位差法センサの試作被検査物表面の加熱機構、その周辺の断熱機構、5系統の電流入出力および電位差測定端子等を備えた直流電位差法センサを開発した。項目4の厚肉配管の人工スリットに対して種々の端子間隔の組合せで電位差測定を行い、最適な端子間隔を見出した。平成17年度は以下の5項目について取組み、それぞれ以下のような研究実績を得た。1.超音波手探傷への最適アベレージング機能の具備前年度に見出した自動探傷時の波形収録条件を踏まえて、超音波探触子の手動操作に合わせた受信波形の最適アベレージング機能について検討した。2.溶接部の応力腐食割れの超音波探傷応力腐食割れを有する溶接試験体の表面をドライアイスにより局所的に冷却しながら、項目1の知見を踏まえて応力腐食割れからの超音波応答をモニタリングした。試験体内部に発生した熱応力により応力腐食割れの端部からの超音波応答が向上することを示した。3.非線形超音波とき裂開口量制御との融合によるき裂情報の分離抽出超音波の入射波振幅以下の極微細隙間を持つ欠陥により起こる2次高調波振幅を用いて、結合力の弱い不完全接合部や繊維強化複合材料内の初期段階の損傷、スポット溶接・プロジェクション溶接部における微細欠陥、応力腐食割れなどを画像化することに成功した。またき裂閉口圧の影響とき裂深さの影響とを分離するために、応力腐食割れ試験体に曲げ応力を負荷した状態でき裂面からの超音波応答を取得した。4.裏面き裂の高感度電位差法定量評価前年度に試作した直流電位差法センサに四端子の繰返し接触機構を付与して得られた複数回の電位差を平均化することで、従来法を飛躍的に上回る高精度な表面電位差計測を実現した。同センサにより従来困難であった厚肉配管の裏面欠陥を検出すると共に、得られた電位差と有限要素法解析結果との比較により欠陥の定量評価が可能であることを示した。5.複合化による評価の高信頼化超音波探傷逆問題解析、非線形超音波による探傷ならびに高感度直流電位差法のき裂評価能力を種々の試験体を使用して比較し、複数の技術の併用が高信頼化の鍵であることを示した。
大脳皮質ＶＩＰ陽性抑制性細胞の入出力に関する形態学的解析

大脳皮質VIP陽性抑制性細胞は、現在他の種の抑制性細胞を抑制する、つまり脱抑制することで、皮質内局所回路の活動性を上昇させる役割を担っていることが近年分かり、注目されている。そのことから、VIP細胞への入出力様式を紐解くことで、皮質内局所の活動性制御の理解が進むものと考え、双極細胞と呼ばれるVIP細胞の樹状突起の形状を加味した高解像での解析を、第一次体性感覚皮質バレル野において行った。まず、本研究では、VIP細胞の可視化のために神経細胞特異的・強発現型のウイルスベクターを開発した。これにより従来法では困難であったVIP細胞の遠位樹状突起までも明瞭に可視化することに成功した。このウイルスベクターは本研究のような形態解析の他にも光遺伝学等に応用が期待される。VIP細胞への入力解析について、VIP細胞を駆動する興奮性入力は遠位樹状突起に入っていた。本研究でVIP細胞樹状突起を完全に再構築したところ、第1層に伸びる樹状突起が特に発達していることが分かっており、他領野からの皮質投射や、非中継核からの視床投射によりVIP細胞が駆動されることが分かった。さらに、抑制性入力については、遠位樹状突起はSOM細胞、傍細胞体はPV細胞により抑制を受けていることが分かり、これは興奮性錐体細胞への抑制支配と同様であった。VIP細胞の樹状突起は、遠位樹状突起と傍細胞体コンパートメントで後シナプス計算処理が異なることが分かっており、上記のコンパートメント毎に異なる前シナプス入力は、後シナプスでダイナミックな計算処理を施されることも推察された。さらに、VIP細胞はバレル野のセプタと呼ばれる領域に好んで出力していることも判明し、皮質局所回路の活動性上昇に特化した軸索展開をしているものと推察された。これらのVIP細胞への入出力解析から、VIP細胞は脱抑制回路を介して皮質局所回路の活動性制御に適した形態をしていると考えられた。26年度が最終年度であるため、記入しない。大脳新皮質の抑制性介在細胞を含めた神経回路の解明を目標としている。大脳新皮質の抑制性細胞は実に多様であり、神経回路の描写まずその分類学を確かにする必要がある。現在まで多く用いられている遺伝子発現による分類では、(1)パルブアルブミン(PV)陽性細胞(-40%)、(2)ソマトスタチン(SOM)陽性細胞(-30%)、(3)5HT3a受容体発現細胞(-30%)の3つに大分される。(2) SOM陽性細胞について、その構成要素もまたさらに多様であると言われていたが、本研究期間にその多様性をさらに検討し、プレプロダイノルフィン発現の有無によってSOM陽性細胞の集団が大きく2分割されることを報告した(Sohn et al., J Comp Neurol., 2014)。一方、2013年になって、(3)の多くを占めるVIP発現抑制性細胞が、特にPV陽性細胞やSOM陽性細胞を抑制することで、錐体細胞に脱抑制を導き、そのVIP陽性細胞が支配する領域の活性化をもたらすという論旨の論文が4本報告され、注目されている。このVIP陽性細胞が受ける入力様式の解明は、皮質め局所の活動性がどのように制御を受けているかを明らかにする上で非常に重要である。そこで、VIP陽性細胞の樹状突起を遺伝子工学技術を駆使して可視化し、そこへの入力を形態学的に解析している。その結果、2/3層に細胞体が存在するVIP陽性細胞の樹状突起は特に大脳皮質1層から4層までの入力を受け、また多くは遠位樹状突起にて入力を受けていることが分かっている。例外的にPV陽性細胞からの抑制性入力は細胞体付近に多いことがわかり、皮質局所の活動性支配の一端を担っていると考えられるVIP陽性細胞への入力は、ランダムではないことがわかり、その回路の一部が見えてきている。現在その嗜好性や意義について解析を行っているところである。

VIP細胞の樹状突起は、遠位樹状突起と傍細胞体コンパートメントで後シナプス計算処理が異なることが分かっており、上記のコンパートメント毎に異なる前シナプス入力は、後シナプスでダイナミックな計算処理を施されることも推察された。さらに、VIP細胞はバレル野のセプタと呼ばれる領域に好んで出力していることも判明し、皮質局所回路の活動性上昇に特化した軸索展開をしているものと推察された。これらのVIP細胞への入出力解析から、VIP細胞は脱抑制回路を介して皮質局所回路の活動性制御に適した形態をしていると考えられた。26年度が最終年度であるため、記入しない。本研究に必要なウイルスベクターの開発や手法はすでに確立され、主要なデータ取得もほぼ終了している。現在はその解析やさらなる追加実験を検討しているところである。VIP陽性細胞への皮質・皮質投射興奮性入力、視床一皮質投射興奮性入力、皮質・皮質間抑制性入力(亜群も含む)のデータ取得はすでにおおむね完了している。今後は、VIP陽性細胞を細胞体・近位樹状突起・遠位樹状突起に分け、そのコンパートメント別入力を詳細に解析することで、各種入力パターン・嗜好性を評価する。また、一つ、あるいは集団としてのVIP陽性細胞が受ける入力の総数を算出し、大脳新皮質の局所の活動性を支配する因子を網羅的に推算し、大脳新皮質全体にわたる共通原則に迫りたいと考えている
有機分子表面修飾金属ナノ粒子の光子場励起ダイナミクス

本研究では、有機化学的手法により系統的に合成したアルカンチオール分子により表面修飾された金属ナノ粒子について、フェムト秒超短パルス光の位相制御を行った干渉型時間分解2光子光電子分光測定により、表面修飾金属ナノ粒子系におけるエネルギー緩和(インコヒーレント時応答)及び量子位相緩和(コヒーレント時応答)の直接観測を試み、励起電子系及び表面修飾分子の光励起ダイナミクスの詳細を明らかにすることを目的とした。本年度は当初の計画通り、2相法と言われる有機化学的手法により合成した種々のアルカンチオレートにより表面修飾されたAgナノ粒子について干渉型時間分解2光子光電子分光測定を行った。それらの結果、アルカンチオレート表面修飾Agナノ粒子に特有なMieプラズモンの共鳴励起に起因した局所電場増大により2光子光電子放出強度が増大することを見い出し、アルカンチオレート表面修飾Agナノ粒子において観測した2光子光電子放出強度の干渉型2パルス相関には、2光子光電子放出過程における中間状態(single-particle excitation)およびプラズモン(collective excitation)の緩和の両者が寄与しており、両者の寄与を正確に評価する必要性があることを示唆していることがわかった。本年度は特にMieプラズモンの共鳴励起に起因してナノ粒子内部に誘起される有効局所電場の時間プロファイルを有限差分時間領域(Finite-Difference Time Domain : FDTD)法により理論的に評価し、それらとの比較よりsingle-particle及びcollectiveダイナミクスの寄与を分離して有機分子表面修飾金属ナノ粒子の光子場励起ダイナミクスについて現在総括的に考察を行っている。本研究では第1に、有機化学的手法により系統的に合成したアルカンチオール分子により表面修飾された単分散の金属ナノ粒子について、フェムト秒超短パルス光の位相制御を行った干渉型時間分解2光子光電子分光測定により、表面修飾金属ナノ粒子系におけるエネルギー緩和(インコヒーレント時応答)及び量子位相緩和(コヒーレント時応答)の直接観測を試み、励起電子系及び表面修飾分子の光励起ダイナミクスの詳細を明らかにする。第2に、自己組織化を用いて系統的に作製した表面修飾金属ナノ粒子配列アレイ構造における光励起ダイナミクス、特に光励起ダイナミクスにおける協力現象についても明らかにする。本年度は、モードロックチタンサファイア超短パルスレーザシステムにピエゾアクチュエータを用いたマッハチェンダー干渉計をベースとしたポンプ・プローブ分光用光学系および群速度分散補償用光学系の構築と調整を行い、ほぼ励起用超短パルス光源光学系の立ち上げは終了した。平行して逆ミセル法により合成したナノ粒子に高温化学処理を施すことによって、種々のアルカンチオレートにより表面修飾された単分散の金属ナノ粒子の合成方法を確立し、それらについての通常の実験室光源及び放射光を用いた光電子分光により、ナノ粒子-基板相互作用、化学状態、ナノ粒子-有機分子界面電子構造の詳細、とりわけそれらの表面修飾基依存性について明らかにした。これらの実験結果は次年度に電子ダイナミクスを詳細に議論する上でリファレンスとなる。
虚血による心筋細胞障害とその防御機構

中村元臣:冠動脈攣縮の動物モデルにX線を照射することによって動脈硬化を進展させた所、攣縮発作によって壁内出血が生じる事を明らかにした。心筋虚血の発作要因を実験モデルを用いて解析した。細田瑳一:ラットを低酸素状態にするとクレアチンリン酸が低下し、冠動脈を結紮すると直後よりpHが低下した。^<31>PーMRSはinvivoでの代謝変化を評価する上で有用であった。山本尚三:シクロオキシゲナーゼの障害によって出血傾向のある症例についてリポキシゲナーゼの動態を調べ、酸素蛋白の異常を明らかにした。井上通敏:冠微小血管塞栓における持続性心筋虚血においてもフリーラジカルが産生され、心筋障害・浮腫形成の促進に関与していた。居石克夫:心臓死5例を含む40例の剖検心をサリチル酸メチルで透微し、冠動脈壁内の新生血管の分布と性状を立体的に観察した。金澤知博:冠閉塞モデルにおいて、非虚血部心筋におけるエネルギー代謝障害を急性期と慢性期に認めた。徳永皓一:exvivoの心筋虚血潅流障害にコハク酸が有効であった。山本徳男:WHHLウサギ大動脈のcDNAライブラリーを調製し、特異的cDNAクローンを単離した。脂肪酸活性化酵素の構造と調節を解析した。井上圭三:虚血心筋でホスホリパーゼA_2活性の亢進を明らかにした。田川邦夫:虚血による細胞内酵素の漏出機転をATPと関連させ解析した。井上正康:長時間血中を循環し、虚血巣に集まり易いSuperoxide dismutase誘導体を開発した。これらは致死性不整脈を有効に阻止した。亘弘:ラットランゲンドルフ潅流心をNMR測定に供した。無酸素での心筋障害の可逆性をNa/k ATPase活性化が規定していた。
トランスクリプトーム解析による二枚貝の浸透圧調節分子機構の解明

茨城県におけるヤマトシジミの主要漁場である涸沼川下流域は潮汐の影響を強く受けるのに対し、涸沼では影響が少ない。汽水性無脊椎動物の環境塩分変化に対する遺伝子発現制御や代謝調節の機構解明のため、メタボロームおよびトランスクリプトーム解析を行った。満潮時および干潮時の涸沼川および涸沼からヤマトシジミ雌雄を採取し、解析した結果、β-アラニンやオルニチンなどの代謝産物量や代謝関連酵素をコードする遺伝子のmRNA蓄積量は塩分変化により変動することが明らかとなった。以上の結果から、ヤマトシジミは環境塩分の変化に対応して種々の代謝物質が変化し、その変化が遺伝子で制御されている可能性が示唆された。茨城県におけるヤマトシジミCorbicula japonicaの主要漁場は涸沼川と涸沼からなる涸沼川水系にある。涸沼川下流域は海岸域からの距離が近いため、潮汐の影響を強く受けるのに対し、涸沼ではその影響が少ない。本研究では、汽水性無脊椎動物の環境塩分の変化に対する遺伝子発現や代謝の調節機構解明のため、ヤマトシジミの鰓および足筋を用いてメタボローム解析を行い、さらに雌の鰓を対象にトランスクリプトーム解析を行った。2012年6月7日のヤマトシジミ採取地の涸沼川では、満潮時で塩分20.5 ‰、水温18.0度、干潮時で4.0 ‰、21.7度であった。一方、涸沼では2.8 ‰、22.4度と一定であった。満潮時および干潮時の涸沼川および涸沼からヤマトシジミ雌雄それぞれ5個体を採取し、各個体から鰓および足筋を摘出した。次に、キャピラリー電気泳動-飛行時間型質量分析用の試料溶液を調製し、代謝産物の解析を行った。さらに、涸沼川の満潮時および干潮時に採取した雌から鰓を摘出し、mRNAを調製してcDNAライブラリーを作製し、Ion Torrent PGM次世代シークエンサを用いてトランスクリプトーム解析を行った。ヤマトシジミ雌の鰓を対象としたメタボローム解析の結果、β-アラニン含有量は満潮時の方が干潮時と比べて2.3倍多かった。次に、グリシンベタイン量は干潮時の方が満潮時と比較して1.4倍多かったが、その前駆物質であるコリンおよびベタインアルデヒドは満潮時の方が多かった。また、オルニチンは満潮時の方が2.8倍多かった。トランスクリプトーム解析の結果、オルニチン生成酵素アルギナーゼをコードする遺伝子のmRNA蓄積量は、満潮時の方が4.4倍多いことが明らかとなった。以上の結果から、ヤマトシジミは環境塩分の変化に対応して種々の代謝物質が変化し、その変化が遺伝子で制御されていることが示唆された。ヤマトシジミは日本全域に生息しており、茨城県の主要漁場は涸沼川と涸沼からなる涸沼川水系である。涸沼川下流域は沿岸域からの距離が近いため、潮汐の影響を強く受けるのに対し、涸沼ではその距離が遠く影響が少ない。本研究では、満潮および干潮時の涸沼川および涸沼から採取したヤマトシジミの鰓および足筋を用いてメタボローム解析を行った。次に、上述の条件で採取した涸沼川産個体の鰓を対象にトランスクリプトーム解析した。試料採取時の水質は、涸沼川の満潮時で塩分20.5 ‰、水温18.0 °C、干潮時で4.0 ‰、21.7 °Cであった。一方、涸沼では涸沼川の満潮時、干潮時で差がなく、2.8 ‰、22.4 °Cであった。満潮時および干潮時の涸沼川および涸沼で採取したヤマトシジミから鰓および足筋を摘出し、CE-TOFMSで代謝産物の解析を行った。次に、涸沼川および涸沼の満潮時および干潮時の雌から鰓を採取し、mRNAを調製してcDNAライブラリーを作製し、次世代シークエンサを用いてトランスクリプトーム解析した。メタボローム解析の結果、雌雄にかかわらず、鰓および足筋とも塩分上昇でGABAの含有量が増加した。また、雄は鰓での増加量が大きかったのに対し、雌は足筋の方で大きかった。さらに、満潮時に採取した試料の方が干潮時のものと比べてシステイン酸からタウリンへの代謝速度が速い傾向があった。

この速度に雌雄差は認められなかったが、部位別では足筋の方が速かった。トランスクリプトーム解析では塩基配列解析およびアッセンブリにより得られた300 bp以上のコンティグに対し、E-value 10-10の条件下でblastx解析したところ、満潮時および干潮時の試料とも28 %の遺伝子が既知タンパク質と相同性を示した。とくに、干潮時の試料で筋小胞体カルシウム結合タンパク質遺伝子の発現量が大幅に増大していた。涸沼および涸沼川産のヤマトシジミを対象に代謝産物量および遺伝子発現量に及ぼす塩分の影響を調べた。メタボローム解析で代謝産物量を調べた結果、雌雄にかかわらず、鰓および足筋とも塩分上昇でGABAの含有量が増加した。また、雄は鰓での増加量が大きかったのに対し、雌は足筋の方で大きかった。さらに、雌雄を問わず、満潮時に採取した試料の方が干潮時のものと比べてシステイン酸からタウリンへの代謝速度が速い傾向があり、部位別では足筋の方が速かった。トランスクリプトーム解析で遺伝子発現量を調べたところ、満潮時および干潮時の試料とも28 %の遺伝子が既知タンパク質と相同性を示し、とくに、干潮時の試料で筋小胞体カルシウム結合タンパク質遺伝子の発現量が大幅に増大していた。以上のように、平成24年度の研究でヤマトシジミの代謝産物量および遺伝子発現量に及ぼす塩分の影響の概要を明らかに示すことができた。平成24年度の研究で、ヤマトシジミの代謝産物量および遺伝子発現量に及ぼす塩分の影響の概要を明らかに示すことができた。平成25年度ではさらに、GABA生成関連酵素や、システイン酸からタウリンへの変換酵素など、代謝産物量の変化に及ぼす代謝酵素の発現の塩分応答を、トランスクリプトーム解析データを詳細に解析して調べる予定である。また、平成25年度においても再度、涸沼および涸沼川からヤマトシジミを満潮時および干潮時に採取して、メタボローム解析およびトランスクリプトーム解析に供し、平成24年度に得られたデータの再現性を確かめる予定である。平成24年度では試料分析、データ解析に多くの時間を費やし、1回の採取の試料のみを分析およびデータ解析の対象としかできず、約40万円の次年度使用額を生じた。平成25年度では当該研究費を合わせて、試料採取を再度実施するとともに、データ解析を詳細に行う予定である。
スマートフォンによるユーザ参加型主観的情報システムのリコメンド機能の開発

ユーザ参加型主観的情報センシングシステムとして,地名,位置情報,画像,コメント,評価等の主観的情報を,インターネットを通じて収集し,特徴的な観光情報をソフトコンピューティングの手法を用いて抽出し,スマートフォンアプリケーションで提供した。ユーザの感性を情緒計算式により推定し,ユーザが求める情報をリコメンデーションする機能を開発した。情緒計算式に必要な個人の感情を推定するモデルを質問紙調査により開発した。投稿情報の件数が少ない観光地の場合,WebやSNSなどのようなネットワークコミュニティで大量の情報を分析し,観光情報として提供した。これらの仕組みをもつソーシャルネットワークシステムを開発した。本研究においては,我々がすでに開発した「ユーザ参加型主観的情報センシングシステム」を用いて,ソフトコンピューティングの手法により特徴的な観光情報を抽出する。これらの特徴を用いて,魅力ある観光情報を旅行者に推薦する仕組みを研究開発している。投稿情報の件数が少ない観光地の場合,WebやSNSなどのようなネットワークコミュニティで大量の情報を分析し,ユーザが欲する情報をリコメンドする必要がある。旅行者個人によって欲しい情報が異なるので,ユーザ参加型主観的情報システムにおいて個人の情緒に対応したリコメンデーション機能を開発することを目的としている。平成25年度は,当初の計画通り,次の5つのテーマにおいて,概ね当初計画通りに計画を進めることができた。1)GPS位置情報,写真,数値による評価値,コメント(自然言語)の観光情報データを収集するAndroidスマートフォンアプリケーションを改良し,セキュリティを考慮したサーバで記録した。2)画像処理やパターン認識を行うために,OpenCVを用いて,抽出された画像の特徴を複数のカテゴリに自動で分類するために,投稿された写真から基本的な特徴パターンを手動で決定した。3)欠損値や曖昧性がある情報を分類し,特徴を抽出するデータマイニング手法として,木構造を用いたニューラルネットワークによる学習と知識獲得手法で知識を獲得するために開発した手法において,パラメタにチューニングを行い,知識獲得手法を開発した。4)Webサイト,ブログなどの観光情報データをWebから著作権を考慮して収集し,一般的な観光情報の特徴を抽出した。5)旅行者に応じた感性に合った観光情報を調査するために,行者の観光に対する関心を質問紙において調査し,旅行者の行動について因子分析などの統計的な手法を用いて解析した。これらの結果をもとに,旅行者の関心に関するモデルを構築し,定式化した。平成26年度は,当初の計画通り,次の3つのテーマにおいて,概ね当初計画通りに計画を進めることができた。1)観光情報について,多くの人が参照するものとユーザの感性に基づいた評価をもとに,旅行者に対する観光情報リコメンドシステムを開発し,スマートフォンアプリケーションとして提供した。特に,リコメンドシステムにおいては,Google検索結果数,ブログ情報に基づくTF-IDF値,ユーザの感性の3つの観点をもとに評価式を開発し,場所や状況に応じて推薦内容を適応的に変化させることが可能な推論システムを開発した。2)写真や評価値,コメント文のような主観的情報を介した主観的情報ソーシャルネットワークサービスを構築するために,オープンソースによるソーシャルネットワークサービスシステムを構築した。3)開発したスマートフォンアプリケーションとSNSを用いて,学生等による検証実験を行った。その後,広島県江田島市役所と協働してスマートフォンによる観光情報投稿コンテストとして実証実験を行った。検証実験後の観光情報の注目度数を調査したところ,情報バースト現象が見られた。なお,利用者への調査結果から他のOSで動作するアプリケーションを開発した。ユーザ参加型主観的情報センシングシステムとして,地名,位置情報,画像,コメント,評価などの主観的情報を,インターネットを通じて収集し,特徴的な観光情報をソフトコンピューティングの手法を用いて抽出し,スマートフォンアプリケーションで提供した。研究は当初の計画通り進められ,次の研究を実施した。1)GPS位置情報,写真,数値による評価値,コメント(自然言語)の観光情報データを収集するスマートフォンアプリケーションを開発した。2)画像認識を行うために,Deep Learning法を用いて,抽出された画像を複数のカテゴリに自動分類した。3)欠損値や曖昧性がある情報を分類するため,階層成長型自己組織化マップによる学習結果をC4.5を用いて知識を獲得した。4)Webサイト,ブログなどの観光情報データをWebから収集し,一般的な観光情報の特徴を抽出した。5)これらの知識や特徴をもとに評価の高い観光情報をSNSで自動発信するシステムを開発した。6)旅行者の感性に合った観光情報を調査するために,質問紙調査し,旅行者の行動について因子分析などの統計的な手法を用いて解析した。旅行者の感性に基づく行動モデルを開発し,観光情報(観光スポット,購買物)に関する優先順位を求め,リコメンドする方法を開発し,Androidスマートフォンアプリを開発した。

7)広島県江田島市において実証実験を行った。開発したシステムは自動で情報が更新される仕組みになっており,地域活性化が望まれるところである。ユーザ参加型主観的情報センシングシステムとして,地名,位置情報,画像,コメント,評価等の主観的情報を,インターネットを通じて収集し,特徴的な観光情報をソフトコンピューティングの手法を用いて抽出し,スマートフォンアプリケーションで提供した。ユーザの感性を情緒計算式により推定し,ユーザが求める情報をリコメンデーションする機能を開発した。情緒計算式に必要な個人の感情を推定するモデルを質問紙調査により開発した。投稿情報の件数が少ない観光地の場合,WebやSNSなどのようなネットワークコミュニティで大量の情報を分析し,観光情報として提供した。これらの仕組みをもつソーシャルネットワークシステムを開発した。平成26年度は,当初の計画通り,次の3つのテーマにおいて,概ね当初計画通りに計画を進めることができた。1)観光情報リコメンドシステムにおいて,Google検索結果数,ブログ情報に基づくTF-IDF値,ユーザの感性の3つの観点をもとに評価式を開発した。さらに,ユーザの現在地や状況に応じて推薦内容を適応的に変化させるためにファジィペトリネットによる推論システムを開発した。2)オープンソースによるソーシャルネットワークサービスを構築した。また,リコメンドした情報を広く知らせるために既存のSNSにも情報を発信するシステムを開発した。3)システムの有効性の検証のために,学生等による評価を行った。その結果をもとに,広島県江田島市役所と「えたじまいいね!」コンテストを実施した。これにより,観光情報が少ない地域での活用方法についての検討を行うことができた。知能情報学有名な観光地の情報については,同じ内容が投稿されていることが多い。特に,写真については高精度の類似性判別方法が求められており,画像クラスタリング手法の改良を行う必要があり,このために,Deep Learning法を適用する。スマートフォンアプリケーションによって収集された情報から,主観的評価式を開発し,旅行者にリコメンドするシステムを開発した。このシステムによって旅行者がその観光地を訪問するサイクルが可能となっている。この周期性を自動化することにより,自治体や観光協会が運用可能な手段について検討する。平成25年度計画にあった5個の研究項目において,次のような研究結果を得られた。
代数構造を起点とする統計的推測および実験計画の研究

統計的推測の手法では,複雑な積分や大規模な和の計算が障害となって,実施が困難になることがある.このような問題を念頭にホロノミック勾配法とよばれる微分方程式を利用した数値計算の手法が提案され,盛んに研究が行われている.本研究では,Veronese配置に付随するGKZ-超幾何系を利用したホロノミック勾配法の計算手順を与えた.また,複数の分解能を利用した実験計画の指標に関連して,これまで2水準の場合に得られていた結果を多水準の場合に拡張した.本研究の目的は,統計的推測や実験計画法の問題に付随する代数的構造に着目することによって,実問題で重要となる統計的推測における数値計算手法を確立すること,および実験計画法における基礎理論を構築することであった.このような目的意識のもとで,次のような進展が見られた.1.統計的推測に関しては,当初の計画通りにVeronese配置に付随する超幾何系の特別な場合について,ホロノミック勾配法による数値計算で利用しやすい形のパフィアン系の計算手順が得られた.研究の初期段階では,この問題の応用先として条件付き分布に基づく統計的推測における規格化定数の計算を念頭に置いていた.しかし,東京大学の清智也氏らが,より自然な応用先としてグラフィカルモデルのロバスト推定に関連する規格化定数計算の研究を行っていたため,その流れに沿って共同研究の形で進める運びとなった.2.実験計画の理論では,語長パターンに基づく基準が多く提案されている.特によく用いられるものとして分解能や最小aberration基準がある.その一方で,注目している一部の交互作用を交絡なしに推定する計画のクラスを特徴付けるための概念や,どの要因間に交互作用が起き得るかに関する事前知識を有効活用するための計画のクラスが2水準の要因を扱う計画として議論されてきた.本研究では,一般の水準数の計画について,各水準を1のn乗根にエンコードすることでこれらの結果の一部を一般化した.その際には,FontanaとRogantinが主に進展させた,1のn乗根でのエンコードにおける指示関数の理論が有用であることがわかった.研究の目的に沿った形で順調に進展が得られているため.本研究の目的は,統計的推測および実験計画の問題の背後にある代数的構造に着目し,それを積極的に利用することにより問題を解決することである.本年度は,昨年度に得られた理論的成果の精査と,提案手法の実装に主に取り組んだ.統計的推測の研究としては,昨年度から行っている代替的t-分布の規格化定数の数値計算に関する研究を継続した.この問題は,第一象限に制限された多変量切断正規分布のモーメント計算に帰着される.本研究ではVeronese配置の特別な場合に付随するA-超幾何系に基づくホロノミック勾配法による数値計算手法の確立を目標としていた.前年度の研究から,ホロノミック勾配法に基づく計算で必要になるパフィアン系の計算手順は得られていた.この計算手順はやや煩雑なものではあるが,今年度の研究により,パフィアン系に基づく計算の前提となる初期値計算の手法も含め,ホロノミック勾配法の一通りの手続きを実装した.特殊関数もしくは複数の一次元の積分に帰着され,精度のよい計算が容易に行える場合を用いて,提案手法の実装についてその性能を検証した.実験計画に関しては,昨年度から行っている研究内容を精査し,国際会議で発表を行った.具体的には,各要因の水準を1のn乗根でエンコードした場合を考え,複数の分解能を用いたよい実験計画の基準を満たす計画を構成する問題に取り組んだ.要因のグループごとに一定の性能をもつ計画をもとにして,全体としての要件を満たす計画を構成する方法を構築し,数理統計学の国際会議で発表した.統計的推測の手法では,複雑な積分や大規模な和の計算が障害となって,実施が困難になることがある.このような問題を念頭にホロノミック勾配法とよばれる微分方程式を利用した数値計算の手法が提案され,盛んに研究が行われている.本研究では,Veronese配置に付随するGKZ-超幾何系を利用したホロノミック勾配法の計算手順を与えた.また,複数の分解能を利用した実験計画の指標に関連して,これまで2水準の場合に得られていた結果を多水準の場合に拡張した.ホロノミック勾配法については実装し,その性能を数値実験により調べる.実験計画についてはこれまでに得られた結果を精査するとともに,さらに追加の結果が得られないか検討する.28年度が最終年度であるため、記入しない。計算代数統計学28年度が最終年度であるため、記入しない。
エストロゲン様化学物質によるエピジェネティクスへの影響に関する研究

環境中の化学物質や、食品中の成分、薬剤の中にはエストロゲンなどのヒトが持つホルモンと構造が似たものがあり、それらを摂取することによって正常なホルモンの働きに悪影響が起こることが懸念されている。本研究では、培養細胞にエストロゲン様の化学物質を加えてその影響を調べたところ、DNAメチル化を担う遺伝子の発現が変化したことから、エピジェネティクスという遺伝子発現の調節機構に影響が起こることが示唆された。平成19年度は2種類の子宮癌細胞と1種類の乳癌細胞を用いて、培地へのエストロゲン様化学物質の添加がDNAメチル基転移酵素Dnmt1、Dnmt3a、Dnmt3bの発現に与える影響について検討した。エストロゲン作用を持つ物質として、天然エストロゲンの17βエストラジオール(E2)および合成エストロゲンのジエチルスチルベストロール(DES)を使用した。1種類の子宮癌細胞ではDNAメチル基転移酵素の発現に変化は見られなかったが、もう1種類の子宮癌細胞では高濃度(1020μM)のDESに曝露されたときにDnmt3a、Dnmt3bの発現低下が見られた。一方、乳癌細胞では幅広い濃度(10pM10μM)のDESへの曝露でDnmt1、Dnmt3bの発現が上昇していた。乳癌細胞ではE2への曝露でも同様な遺伝子発現変化が観察されたが、子宮癌細胞ではE2への曝露では遺伝子発現変化は観察されなかった。エストロゲンレセプター阻害剤のICIl82,780を培地中に加えたところ、これらの遺伝子発現変化が部分的、または完全に阻害された。以上の結果より、子宮癌細胞、乳癌細胞の培地中にE2、DESを加えるとDNAメチル基転移酵素の発現が変化する場合があることが明らかとなった。また、細胞によって応答がなかったり、発現が変化する遺伝子の種類が異なったり、E2とDESへの応答が異なったり、発現の増加・減少が逆転している現象を観察できたことから、今後遺伝子発現変化のメカニズムを解明する上で有用な情報が得られたと考えられる。平成20年度も前年度に引き続き、子宮癌細胞と乳癌細胞の培地中にエストロゲン様作用を持つ化学物質を添加し、DNAメチル基転移酵素Dnmt1、Dnmt3a、Dnmt3b等の発現に及ぼす影響を調べ、そのメカニズムを考察した。mRNAの発現量はリアルタイムRT-PCR法で、タンパク質の発現量はウェスタンブロッティング法で定量を行った。子宮癌細胞では1020μMの高濃度のエストラジオール(E2)、ジエチルスチルベストロール(DES)でDnmt3a、Dnmt3bのmRNA、タンパク質がともに減少していたが、乳癌細胞では10pM10μMの濃度でDnmt1、Dnmt3bのmRNA、タンパク質は逆に増加していた。使用した細胞のエストロゲンレセプター(ER)及びエストロゲン関連レセプター(ERR)の発現を調べたところ、子宮癌細胞ではERαの発現量は小さかったが、乳癌細胞では大きかった。一方、ERRの発現は両者に大きな違いはなかった。DNAメチル基転移酵素の発現制御機構については未だに明らかにされていないものの、ERK/MAPキナーゼ経路の関与が報告されている。本研究でも、MEK(MAPキナーゼキナーゼ)阻害剤のPD98059を添加することによって、DNAメチル基転移酵素の発現が低下することが認められた。エストロゲン様物質がERK/MAPキナーゼ経路を活性化するかどうか今後の検討が必要と思われた。本研究から、エストロゲン様物質を培地に添加することにより、DNAメチル基転移酵素の発現が変化することが分かったが、その細胞による詳細なメカニズム、関与するレセプター等の分子などは明らかとなるまでには至らなかった。また、本研究で観察されたDNAメチル基転移酵素の発現変化が、実際にどの程度の影響(DNAメチル化の変化やそれによる細胞機能の変化等)を及ぼすのかについても今後の検討課題として残った。
イタリア都市貴族と日本人―異文化との直接的邂逅とイメージの受容―

申請者は2010年よりローマの有力貴族であるコロンナ家のコロンナ文書館を継続的に調査し、天正・慶長両使節の当時の様子を伝えると同時に彼らとの関係を明らかにする数多くの未刊新出の書簡・報告書を発掘、これまで着目されてこなかったコロンナ家と両使節との関係を明らかにしてきた。本研究では、この際に培った研究方法を運用し、両使節が訪れたイタリアの各都市に点在する公・私立文書館、とりわけローマを中心に文献調査を実施、イタリアの貴族と両使節に関連する新出史料の発見を目指す。その上で、「イタリア貴族の日本像」を考究し、グローバル化最初期ともいえる1617世紀におけるイタリアの異文化接触の諸相を明らかにする。
新しいコミュニティの構想-東部被災地をフィールドとして

本研究の目的は、阪神淡路大震災から10年後の被災地の現状を調査し、現代都市におけるコミュニティ、新たな可能性を問うことにあった。特にボランティアやNPOなど地域をこえた共助の連帯、あるいは日常のコミュニケーションや支援ネットワークに注目した。具体的に計画し実施した調査研究は次の3つである。(1)ネットワーク分析を軸として、2006年に兵庫県民を対象とする大規模調査を実施した。その結果、地域の様々な活動に参加することによって、多くの人が自分への支援ネットワークを得ていることが明らかになった。そこでさらに地域参加に消極的な若年層に対象を絞った調査を2007年に行なった。その結果、女性は子育て等を通じて地域にネットワークをもつものの、若年男性は限られた友人以外では社会的に孤立していることがわかった。(2)神戸市を中心に、まちづくりや福祉に関するNPOや市民活動の調査を2006-2007年の2年間にわたって実施した。そこでは長い歴史をもつ神戸の市民団体が、NPO法や介護保険法等の制度環境の変化とともに、自らの経営感覚と組織的アイデンティティを磨き、新たなコミュニティを築いていくブロセスを明らかにすることができた。同時に団体をつなぐパーソナルネットワークも具体的に解明した。(3)学生を中心にコミュニティセンターを開設し、ボランティアや地域行事のサポートをしながら調査をおこない、インターネット上にその結果をフィードバックした。それによって若年層が地域活動に参加し、地域への理解を深め、さらに実践を通じて彼らにみずからのコミュニティを構想させる試みをおこなった。今年度の調査研究は、次年度以降の調査に必要な資料収集と体制づくり、さらに予備調査をおこなった。1文献研究近年発刊された海外文献を中心に「コミュニティ文献コレクション」を開設し、その購読と研究を行った。特に経済社会学的視点からソーシャル・キャピタルやネットワークと、コミュニティの関係を中心に考察を進め、次年度以降の調査に活用できる項目を抽出した。2学生主導型の準備的なコミュニティ調査プロジェクト(1)震災復興検証調査対象である東部被災地の中でも、特に商業エリアの復興・再開発に注目し、特に西宮北口地域の再開発の現在を取材しつつ、この10年間の変遷を整理した。(2)テーマ・コミュニティ調査震災後10年をむかえ、地域でのさまざまなコミュニティ(団体)活動が生まれて展開しつつあることに着目し、その事例を収集・調査することで、東部被災地のコミュニティの現状を浮き彫りにしようと試みた。3コミュニティ・センター的なホームページの開設(1)今回の調査では、研究者や学生が対象者に対して一方的な調査を行うのではなく、あくまでも双方向的な調査形態を目指し、また特に政策提言に至ることができるような実践的な調査になることを目指している。そこで大学にコミュニティ・センター的なホームページを開設する準備を進めた。そこでは地域の掲示板的なページ、教員・研究者の研究発表ページ、あるいは大学院生や学生たちによる調査の経過報告ページの3つを柱としている。(2)なお、今回は調査事務局を設置し、購入した文献の整理とともに、各調査プロジェクトで集められた資料のデジタル化を行い、順次、ホームページのコンテンツとして利用しやすい形態で蓄積を進めた。今年度の研究は、1)学生主導型のコミュニティ調査プロジェクト、および2)兵庫県民を対象とするアンケート調査、の2つを柱として進められた。1)については、前年度から引き続き、震災復興検証プロジェクトおよびテーマコミュニティ・プロジェクトを中心にフィールドワーク調査をおこなった。前者では「アクタ西宮」という震災で消失した市場と商店街を復興するためにつくられた商業施設に聞き取り調査を行ないながら、その顧客からみたコミュニティの変容を検証した。後者では福祉・国際・子育て・アートのテーマに注目し、地域福祉センター、多文化共生センター、保育園、ギャラリーなどで、それぞれの活動に参加しながらの参与観察調査をおこない、現在の新しいコミュニティ像をさぐった。

2)については、地域参加(自治活動、趣味サークル、ボランティア)、ネットワーク(つきあい、たすけあい)、居住環境(移動も含む)、教育と就業の機会、地域情報、社会意識の各項目を軸とするアンケート調査の実施によって、被災地における現在のコミュニティの全体像を描出することを試みた。調査対象地は本研究が対象とする東部被災地の特徴を明らかにするために、被災地以外も含む県下20地点(18自治体)から無作為抽出により合計4000名を抽出して、1月に郵送法調査をおこなった。今年度から個人情報保護法が施行されたために調査環境が激変し、各自治体での選挙人名簿の閲覧が不可能になり、住民基本台帳抄本からの抽出に計画および予算を大幅に変更せねばならなかったが、最終的に3割近い回答を得ることができた。回収したアンケートは、その後、デジタルデータとして電算機入力をおこない、エラーチェック、リコード、論理エラーチェックなどのデータ編集を施し、年度内にデータを完成させ、4月以降の分析および研究発表に間に合わせることができた。2006年1月に実施した兵庫県民調査(1088票を有効回答として確定)のデータ分析会を定期的に同志社大学と甲南大学にておこなった。そのうち参加とネットワークを中心に、分析結果を10編の研究論文および基礎データ集にまとめて『2006年兵庫県民調査報告書』として2007年3月に出版した。これは本研究の中間報告書としても位置づけられる。そして、2006年度は、地域のグループやNPOを対象に、特に福祉系のボランティア活動に焦点を当てながら、インタビュー調査を実施した。その音声データはすべて書き起こした上、デジタル文字情報としてCD-ROMに記録蓄積され、研究者間で共有された。調査の結果、介護保険制度が導入されて以降、従来型のボランティア活動が困難になった状況が明らかになった。その上で我々は各団体のメンバーや利用者を対象とする計量調査を実施する計画でいたが、前年度の計量調査の分析結果や地域団体に対するインタビュー調査の結果、むしろ現在の地域コミュニティにとって最大の問題は若年層の不参加でありその不透明さではないかという結論にいたり、20・30歳代の地域生活に特化させて3月に計量調査を実施した。その結果、418票の有効回答を得た。(若年層は一般的な標本調査にするとほとんど回収が期待できないので、40地点を抽出した上で、ランダムウォークにより各地点で10票ずつを目処に回収を行なった。)また学生を中心とするプロジェクト調査も本研究の柱となっているが、前年度からの「東灘ボランティア団体・グループ調査」の継続、さらに、ウェブページ<地域情報コモンズ>には「ひがしなだ市民活動ダイレクトリー」「Web版フリーペーパー」などのリンクが蓄積されつつあり、以上の成果は逐次、ホームページ<コミュニティ・デザイン(code)>(http://www.code.glab.org/)に公表されている。