hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
IgA腎症の成因と進展機序の究明

これまでにIgA腎症発症におけるIgA/IgA免疫複合体(IC)の役割を検討する目的で、メサンギウム細(MC)に発現するFcαRの性質を解析したが、今回は腎炎におけるFcRの役割を検討した。1)機能的FcRの発現を欠くFcRγ鎖ノックアウトマウス(γ(-/-))では、自然経過とともにIgA腎症同様に糸球体メサンギウム領域に大量のICが沈着することを確認した。54週令γ(-/-)に対して、野生型マウス(WT)の骨髄を移植し(Wγ)検討したところ、末血がWTに入れ替わっても、炎症は惹起されず、IC沈着量も不変であった。しかし、Wγとγ(-/-)にウサギ抗マウスIgG抗体を投与すると、Wγでは一過性に炎症が惹起され、2週後にはウサギIgG/ICが完全にクリアされたが、γ(-/-)では不変であった。以上から、FcRは局所のICの除去といった生理機能上も重要と考えられた。同時に炎症の惹起にも関与し、それは単位時間当たりのICの暴露量にも影響を受けている可能性が示された。2)次に馬杉腎炎をFcRの視点から再評価した。先述のγ(-/-)を用い馬杉腎炎を検討したところ、初期相が完全に欠落した。また、抑制性のシグナルを伝えるFcγRIIbのノックアウトマウスも検討したところ、浸潤血球数がWTと差がないにも関わらず、初期相は早期にそして重症化した。初期相の鍵を握る分子は、補体ではなくFcRであることが明らかにされた。しかし1週間後にはγ(-/-)において異なる組織像を呈する腎炎が誘導され、FcR非依存性、抗体依存性の経路も確認された。これはrenin-angiotensin系(RAS)と関連すると仮説をたて、angiotensinII receptorノックアウトマウス(AT(-/-))とγ(-/-)間で骨髄移植を行いキメラマウスを作製して検討したところ、腎臓がATl(-/-)、末梢血がγ(-/-)の場合炎症が、一切惹起されなかった,即ち馬杉腎炎の発症はFcRおよびRASに強く制御されてることが判明した。これは腎糸球体に沈着するICは、病的多面性を有していることを意味し、IgA腎症の発症、進展を考える上で示唆に富む知見と考えられた。当文部省科学研究費補助金(9年度予算)を用い、IgA腎症発症におけるIgA/IgA免疫複合体の役割を検討する目的で、培養メサンギウム細胞(MC)に発現するFcαRの性質を解析した。その結果、MCに発現するFcαRは骨髄系細胞で報告されているものと塩基配列上完全に一致し、さらにその結合ドメインの欠落するsplicing formが存在していることも確認した。MCにおけるFcαRのmRNA発現は、我々が作製したbinding siteを認識している抗ヒトFcαR抗体刺激により増強された。また、高濃度凝集IgA刺激下においてMC上のFcαRは、シグナル伝達分子であるγ鎖と分子的に会合しうることを初めて証明した(論文投稿中)。

つまりMC上に発現するFcαRは多量体のIgAあるいはIgA-ICにより架橋されることで発現を増強し、同時にFcRγ鎖と分子的会合を起こすということである。このことは、IgA/IgA-IC(とくに多量体構造をとるものほど)が、FcαRを介して直接的にMCを活性化できることを意味し、FcαRはIgA腎症の病態を考える上で重要であることを明らかにした。次に、FcRの腎炎全般における役割を解析するため、古典的実験腎炎モデルである馬杉腎炎をFcRの視点から再評価した。先述のγ鎖ノックアウトマウスに馬杉腎炎を惹起し検討したところ、初期のheterologous phaseが完全に欠落することを確認した。また、FcγRからの刺激に対して抑制性のシグナルを伝えようとするFcγRIIbノックアウトマウスを用い同様に検討したところ、浸潤する多核白血球数が野生型マウスと差がないにも関わらず、初期の炎症は早期にそして重症化した。いままで補体に制御されると考えられていたこのphaseにおいてもFcRがその鍵を握る分子であることが明らかにされた。同時に、FcRに非依存性の経路の存在も確認し、これがレニン・アンギオテンシン系と深く関わっていることも明らかにした。(論文投稿中)。これまでにIgA腎症発症におけるIgA/IgA免疫複合体の役割を検討する目的で、培養メサンギウム細胞(MC)に発現するFcRの性質を解析したが、今回は腎炎におけるFcRの役割を検討した。1)我々は、既にFcRγ鎖ノックアウトマウス(γ(-/-))では、自然経過とともに糸球体メサンギウム領域に大量の免疫複合体(IC)が沈着することを報告している。今回は、糸球体に大量のIC沈着を認める54週令のγ(-/-)に対して、野生型マウスの骨髄を移植しその変化を検討した。末梢血のgenotypeが完全に入れ替わっても、炎症の惹起や、炎症性細胞の浸潤が起こらず、IC沈着量も不変であった。しかし,この骨髄移植したマウス(γW)とγ(-/-)にウサギ抗マウスIgG抗体を投与したところ、γWでは一過性に炎症が惹起され、2週後にはウサギIgG/ICが完全にクリアされたにも関わらず、γ(-/-)では不変であった。以上から、局所のICのクリアランスには、末梢血上のFcRが生理的にも重要な役割を果たしていることか考えられた。同時に、炎症の惹起にも関与し、それは単位時間当たりのICの暴露量にも影響を受けている可能性が示された。2)我々は、馬杉腎炎の発症において、FcRが鍵を握る分子であることを既に報告している。同時にFcR非依存性経路が存在し、それはrenin-angiotensin系(RAS)に関与していることも確認した。そこで今回は、angiotensin II type la receptorノックアウトマウス(AT1(-/-))とγ(-/-)の間で骨髄移植を行いキメラマウスを作製して検討した。即ち、腎臓がAT1(-/-)、末梢血がγ(-/-)であるマウスに馬杉腎炎の惹起を試みたが、炎症が一切惹起されなかった。このことから、馬杉腎炎の発症はFcRおよびRASに強く制御されていることが明らかにされた。今後はさらにFcR.RASに関与する責任細胞を特定し、詳細な病態解明を予定している。
バイオ分子を活用した先進ナノ材料の新規室温合成と高次構造制御

本研究では、DNAの折り畳み現象を利用したハイブリッドナノ構造の構築プロセスを系統的に検討し、新規三次元ナノマテリアルの創製を試みた。DNA上に析出させハイブリッド化される無機材料として、パラジウムや白金等の電気導電性だけではなく触媒機能等を有する貴金属を積極的に検討した。また、貴金属だけでなく種々の機能を有する金属酸化物の析出も、本研究グループが発見したペプチド分子によるバイオミネラリゼーションを活用し検討した本研究では、DNAの折り畳み現象を利用したハイブリッドナノ構造の構築プロセスを系統的に検討し、新規三次元ナノマテリアルの創製を試みた。また、貴金属だけでなく種々の機能を有する金属酸化物の析出も、本研究グループが発見したペプチド分子によるバイオミネラリゼーションを活用し検討した(1)DNAの高次構造制御我々は、DNA上へ金属イオンを濃縮させて還元・析出しハイブリッドナノ構造体を作製する場合、その基軸となるDNA高次構造の形態が重要と考えた。そこで、まず初めに、パラジウムイオン濃度変化により、DNAがどのように形態変化をするかを、蛍光顕微鏡技術を中心に追求した。次に、金属イオン種を変化(パラジウム□金、銀、白金、酸化亜鉛およびこれの混合物)させ、同様の濃度依存性を系統的に検討し、金属イオンの濃度や種類(価数)が、DNAの構造相転移に与える影響を明らかにした。(2)金属-DNAハイブリッドナノマテリアルの高次構造制御DNA上へ濃縮した金属イオンを還元剤により析出させ、金属-DNAハイブリットナノ構造体を作製した。これまでの研究で、(1)の還元処理前のDNA高次構造だけでなく、還元条件も最終的の形成されるハイブリットナノマテリアルの構造形態に影響を与えることが分かった。そこで、還元条件(還元剤の種類、濃度、時間)を系統的に変化させ、作製された金属-DNAハイブリットナノ構造体の形態を、電子顕微鏡技術を中心に観察した。またその際、新規ナノサイズ空間の創製可能性を併せて検討した。そして、(1)で得られた還元処理前のDNA高次構造と(2)で得られる金属-DNAハイブリットナノ構造を比較し、金属-DNAハイブリットナノマテリアルの構造形成機構を体系化した。(3)ハイブリッドナノマテリアルの機能探索(大原・名嘉)作製したハイブリッドナノマテリアルを、触媒機能、電気特性、空間構造等の観点から検討し、燃料電池電極、センサー、ナノリアクター、ナノ触媒等への応用可能性を探索した。1、ハイブリッドナノマテリアルの機能探索本研究では、作製したハイブリッドナノマテリアルを、電気特性、空間構造等の観点から検討し、燃料電池電極、センサー、アクチュエーター等への応用可能性を探索した。特に、金属-DNAハイブリッドナノ構造体に関しては、固体高分子形燃料電池としての適用の目指し、金属ナノ料子のサイズや分散状態、また、ナノからミクロレベルでの空間サイズやその均一性等を、電極性能の高性能化の観点から評価した。2、高分子電解質の適用検討高分子電解質は解離基が多く連なった高分子で、水溶液中では電化の連なった高分子と反対符号の電荷をもつカウンターイオンに解離して存在する。そのため、DNA同様、その表面に金属イオンを濃縮する性質があり、また、DNAのような折り畳み構造変化を示す。そこで本研究では、DNAの代わりに高分子電解質をテンプレートとした、金属-高分子ハイブリッドナノマテリアル創製に関する予備検討を実施した。具体的には、高分子電解質材料として、分子量の異なるポリエチレングリコールやポリカルボン酸を取り上げ、高分子電解質の高次構造制御や金属-高分子ハイブリッドナノマテリアルの高次構造制御を検討した。1、ハイブリッドナノマテリアルの応用検討作製したハイブリッドナノマテリアルを、触媒機能、電気特性、空間構造等の観点から検討し、燃料電池電極、センサー、リアクター、触媒、アクチュエータ等への応用可能性を探索した。具体的には、パラジウム-DNA及び白金-DNAハイブリッドナノ構造体に関しては、固体高分子形燃料電池としての適用の目指し、パラジウム及び白金ナノ粒子のサイズや分散状態、また、ナノからミクロレベルでの空間サイズやその均一性等を、電極性能の高性能化の観点から検討した。更に、コバルトハイブリッドナノマテリアルに関しては小型アクチュエータ、錫ハイブリッドナノマテリアルに関しては鉛フリーはんだへの適用性を検討した。2、金属-高分子電解質ハイブリッドナノマテリアルの作製高分子電解質は解離基が多く連なった高分子で、水溶液中では電荷の連なった高分子と反対符号の電荷をもつカウンターイオンに解離して存在する。そこで、本研究では、DNAの代わりに高分子電解質をテンプレートとした、金属-高分子ハイブリッドナノマテリアル創製に関する検討した。具体的には、高分子電解質材料として分子量の異なるポリカルボン酸等を、金属材料としてパラジウム、白金、コバルト、錫等を取り上げ、平成18年度と19年度に実施した研究結果をべースに、高分子電解質の高次構造制御や高分子-DNAハイブリッドナノマテリアルの高次構造制御の確立に努めた。
アメリカ文学におけるユダヤ人像-アンビヴァレンスの解読

非ユダヤ系アメリカ作家のユダヤ人観は、現在もなお「神話的ユダヤ人」と「隣人としてのユダヤ人」の間を揺れ動いており、その揺れ動き、即ち彼らがユダヤ人にたいして懐き続けてきた相互矛盾的、愛憎併存的態度を歴史的に辿ることが、「ユダヤ人像」研究の課題となる。この観点から、ロングフェロウ、ホイッティアー、ホームズら19世紀詩人からホ-ソーンを経て、ヘンリー・アダムズ、ヘンリー・ジェイムズ、マーク・トウェイン、ウィラ・キャザ-ら20世紀初期の作家まで関連作品の分析を試みた。研究期間中に発表した2編の論文を検討しつつ、新たに得られた知見を数点のみ以下に列記する。(1)ロングフェロウとホイッティアーがユダヤ人に示した理解と寛容は印象的だが、それぞれキリスト教徒として、ユダヤ性の捉え方にバイアスを生じていた。たとえば同時代のユダヤ人に関心を懐かず、ユダヤ教経典の解釈にキリスト教的情念を注ぎ込んでいた。(2)ホ-ソーンの滞英日記中に激烈なユダヤ人憎悪が噴出しており、その憎悪が後期の小説『大理石の牧神』に反映している。この作品のなかで彼は「彷徨えるユダヤ人」伝説に依拠しつつ、そのシニカルな悪の権化としての側面のみを表象した。(3)ヘンリー・アダムズは、劣等異民族による社会中枢の崩壊という危機意識に駆られ、産業経営者と金融資本家の悪弊を一切ユダヤ人に仮託して、終生反ユダヤを貫いた。名門アダムズ家に生まれながら国政に参与し得なかった疎外感、そしてカトリック教を基軸とした「文化的統一性」の理想を台無しにされた絶望感が、その根底をなしている。(4)反ユダヤ性が熾烈なペアとして、ヘンリー・アダムズとエズラ・パウンドが並ぶとしたら、反ユダヤ的な敬遠や軽蔑が創作上の必要からなのか、それとも固定観念の表出なのか定かでないペアとして、ヘンリー・ジェイムズとT.S.エリオットを並べ得る。(5)上記の諸文人、そしてマーク・トウェインとウィラ・キャザ-の反ユダヤ的表現を考察しながら終始筆者がつきまとわれていたのは、各者の反ユダヤ性のどこまでが個人的で、どこからが集団的なのか、という難問である。画然たる識別は所詮無理と思われるが、今後の宿題として探索を続けたい。本研究課題を遂行するための足固めとして、まずユダヤ系アメリカ人の歴史と、アメリカ史、アメリカ文学史を相互対照的に捉え直す作業から始めました。試行錯誤の末、「序章」「ユダヤ系アメリカ人の歴史--南北戦争前後まで」「文学的ユダヤ人像の形成--ロングフエロウからホ-ソーンまで」という3章仕立てで、90枚(400字詰め)の論文「アメリカ文学にみるユダヤ人像(その1)」を『法政大学教養部紀要』第92号(1995年2月刊行)に発表しました。ホ-ソーンの章を書き終えた段階で、紀要の紙幅制限を20枚も超過し、メルヴィルの長詩『クラレル』に関する論考は次号に回さざるを得なくなりました。『クラレル』に描かれたユダヤ人像は、そこに含まれた宗教的、心理的問題とともに複雑多岐を極めており、さらに検討を重ねる猶予ができたことで、実は内心ほっとしています。

上記論文の執筆で新たに得られた知見のいくつかを次に列記します。(1)ロングフェロウ、ホイッティアー、ホームズら19世紀詩人が、ユダヤ人に示した理解と寛容は印象的だったが、それぞれキリスト教徒として、ユダヤ性の捉え方にバイアスを生じていることが分かった。(2)ホ-ソーンの滞英日記中に激烈な反ユダヤ主義の表現を見出し、その影響が後期の小説『大理石の牧神』に及んでいることを確かめた。(3)20世紀アメリカにおける反ユダヤ主義は、南北戦争をその主たる淵源とすることが認められた。「アメリカ文学にみるユダヤ人像(その2)」の序章として、南北戦争以降大恐慌までのユダヤ系アメリカ人の歴史を辿り、とりわけ19世紀末に大挙流入したきわめて異質な東欧ユダヤ人移民が、E.ウォートンやH.アダムズらのアングロサクソン中華思想に及ぼした脅威感と危機意識を確認しました。文学的ユダヤ人像の代表としては、(1)F.ノリスの『マクティーグ』をまずとりあげ、彼の自然主義的作風が固定観念的なユダヤ人像を「自然に」吸収できるものか具体的に検討しました。(2)H.ジェイムズの『悲劇の女神』とN.ホ-ソーンの『大理石の牧神』の共通点を採りながら、アングロサクソン中心主義的な作家のユダヤ人権の本質について考えました。(3)W.キャザ-の『教授の家』では、ユダヤ人男性が創造的でなく、ただ搾取的な存在として描かれており、その憎悪の動機を作者の実生活に見出せることが分かりました。(4)M.トウェインは弱小民族に同情的な作家と信じていたのですが、ユダヤ系女流作家C.オジックによれば、「思いがけぬ反ユダヤ主義の露頭」があるそうで、改めて本研究の複雑さを痛感しました。平成8年度中に刊行された小生の論考は3点で、本研究関連としては、「アメリカ文学にみるユダヤ人像(その2)」が『法政大学教養部紀要』第99号(1997年2月刊)に掲載されました。この論文は400字詰めで95枚、全5章で構成されています。第1章は「移民の大挙移入と反ユダヤ主義」と題して、南北戦争中に噴出した反ユダヤ主義が、1880年代以降東・南欧から押し寄せた新移民との接触でいっそう激化し、西欧で流行していた北方民族優越論とも呼応して、劣等異民族によるアメリカ社会中枢の崩壊という危機意識を煽った経緯について述べました。第2章では、その危機意識に駆られエズラ・パウンドに劣らぬ過激さでユダヤ人を憎悪したヘンリー・アダムズの精神構造を分析し、第3章では、アダムズほど過激ではないとしても、国際性にアングロサクソン的地方性を微妙に絡ませ、複雑に層状化した社会と文化を描き出す過程で、敬遠とも軽蔑ともつかぬ反ユダヤ的表現表象を用いたヘンリー・ジェイムズを考察しました。第4章ではマーク・トウェインのユダヤ人観を、とくに彼のエッセイ「ユダヤ人に関して」から抽出しました。大文豪トウェインでさえ、「ユダヤ人は頭がよくて金持ち」という通念から脱却できず、「一斑を以て全豹を卜する」の過ちを侵したという結論になりました。第5章では、ウィラ・キャザ-の『教授の家』に登場する教授の婿でユダヤ人のルイ・マ-セラスに焦点を当て、彼を寄生的、搾取的人間として描いた作者の意図を探究しましたが、キャザ-の反ユダヤ性のどこまでが個人的でどこからが集団的なのか、画然たる判定は無理だということを悟りました。研究期間内に完結し得なかった1920年代以降に関する論考は、(その3)として来年度の紀要に発表いたします。
自然再生の順応的ガバナンスに向けた社会的評価システムの構築

近年、日本各地で進められている自然再生は当該地域社会にさまざまな影響を及ぼすことから、社会の仕組みを順応的に変えていく順応的ガバナンスを実現することが課題となる。本研究は自然再生が当該地域社会に与える影響・効果・課題などを評価する社会的評価モデルを構築することを通じて、政策と研究に有益な指針を提示することを試みた。その結果、自然再生が地域社会にもたらす影響として、課題認識、アクター、ネットワーク、プラットフォーム、知識、自然再生技術、アクション、社会技術、意思決定の仕組み、豊かさの変化、社会的評価、主観的評価という12の評価指標を設定し、事例研究を通じて有益な指針となりうることを確認した。本研究課題は、自然再生が当該地域社会に与える影響・効果・課題などを評価する社会的評価モデルを構築することを通して、順応的ガバナンスに向けた政策と研究に有益な指針を提示することを目的としている。本年度は以下の研究を実施した。(1)フィールド研究会:9月に北海道浜中町・鶴居村でフィールドワークと研究会を開催した。浜中町の湿地トラストの取り組み、鶴居村のタンチョウと共生する地域づくりの取り組みについて情報を収集した。さらに研究会を開催し、昨年度抽出した知識・情報、ステークホルダー、ネットワーク、課題認識、目標設定、社会的評価、意思決定の方法、社会的ストックというキーワードをもとに議論を進め、評価指標の検討とモデル構築を試みた。本研究の評価指標を用いたモデルは、研究者のみならず地域の多様なステークホルダーが使用可能であることを確認した。(2)研究会:12月に京都市内で研究会を実施した。9月の研究会で抽出した評価指標を用い、石川県加賀市のラムサール登録湿地の片野鴨池、新潟県佐渡島の加茂湖水系再生研究所、兵庫県豊岡市の田結湿地、沖縄県石垣島のサンゴ村という事例の分析を進め、以下の評価指標を再設定した。・人(のつながり):アクター、ネットワーク、プラットホーム、・知識:知識、技術、課題認識、学び、ビジョン、・効果:豊かさ(社会・経済・自然)、外部評価、主観的評価(3)フィールド研究会:2月に愛媛県西予市においてフィールド研究会を実施し、コウノトリに飛来による放棄田の再生に関する事例調査を行い、情報の収集に努め、ワークショップを開催した。12月に京都市で実施した研究会での議論を踏まえ、事例の分析を進めた。この評価指標を用いた事例の分析をすすめた結果、より動的な指標として設定し直すとともに、動的なプロセスを表現できるモデルの構築の必要性を確認した。本研究課題は、自然再生が当該地域社会に与える影響・効果・課題などを評価する社会的評価モデルを構築することを通じて、順応的ガバナンスに向けた政策と研究に有益な指針を提示することを目的としている。最終年度である本年度は、社会的評価モデルの完成度を高めるための議論と成果の発表に向けた議論を行った。5月に東京で研究会を開催し、自然再生の社会的評価モデルの要素となる社会的評価指標に関する議論を進めた。昨年度に設定した知識・情報、ステークホルダー、ネットワーク、課題認識、目標設定、社会的評価、意思決定の有無、社会的評価という指標の有効性に関して議論し、それらの再設定に関する議論を行った。その結果、課題認識、アクター、ネットワーク、プラットフォーム、知識、自然再生技術、アクション、社会技術、意思決定の仕組み、豊かさの変化、社会的評価、主観的評価という12の指標を再設定し、兵庫県豊岡市田結地区の小さな自然再生の事例を分析し、社会的評価モデルの有効性を確認した。6月にアダプティブガバナンスに関する研究会において、社会的評価モデルを使用した事例分析を報告した。研究会のなかで、第一に当モデルは自然再生の社会的プロセスを確認するツールとして有効であること、第二に研究者のみでなく地域住民や行政、NPOにとっても自己の活動を評価するツールとして使いやすいこと、という2点を議論した。その結果、順応的ガバナンスに向けた政策と研究に有益な指針となりうることを確認できた。9月に京都で研究会を開催し、沖縄県石垣島、新潟県佐渡島における自然再生を事例とした報告を行い、社会的評価モデルの有効性に関する議論を進めた。1月に京都で研究会を行い、論文執筆に向けた議論を進め、研究代表者と研究分担者、連携研究者の役割分担を確認し、執筆をすすめているところである。この目的を達成するため、本年度は以下の研究を実施した。(1)研究の理念とデザインの確定:6月に石川県加賀市で研究会を開催し、各々の研究テーマ、フィールドについて発表しあい、自然再生を社会的に評価する仕組みの構築という研究デザインを共有した。議論から自律、談義や討議といった双方向的なコミュニケーション、地域の問題解決システム、環境ストックといったキーワードを抽出した。

(2)フィールド研究会:自然再生による地域社会への変化・効果・課題等を見出すため、主要ステークホルダーを対象としたフィールド研究会を実施した。調査対象は、石川県加賀市のラムサール登録湿地の片野鴨池、北海道鶴居村のタンチョウの保護を軸にした地域づくり活動、新潟県佐渡市の加茂湖の再生である。いずれも代表者と研究分担者が、これまで研究および実践的にかかわってきた地域であるが、本研究のデザインを踏まえた調査を実施した。(3)自然再生の社会的評価指標の抽出:フィールド研究会に合わせてワークショップを開催した。9月に北海道札幌市で実施したワークショップでは、先行研究のレビューを通して、知識・情報、ステークホルダー、ネットワーク、課題認識、目標設定、社会的評価、意思決定の方法、社会的ストックという自然再生の評価指標の抽出を試みた。2月に新潟県佐渡市で実施したワークショップでは、この評価指標を用いた事例の分析を試み、より動的な指標として設定し直す必要性を確認した。3回の研究会を開催した。そのうち2回はフィールドワークを兼ねており、自然再生が地域社会に与えた社会的影響に関する情報を収集することができ、知見を深めることができた。3回の研究会では、いずれも時間をかけた研究会を行い、(1)自然再生の順応的ガバナンスについての先行研究に関する評価、(2)自然再生の社会的評価指標の抽出の実施、(3)社会的評価指標を用いた事例の分析、を行った。本研究で設定した指標を用いてこれまで研究代表者及び研究分担者が蓄積してきた事例の再分析を進め、社会的評価モデルの構築に向けた議論を行い、社会的評価指標の持つ有効性と課題を確認することができた。また、NPO活動家を加えた議論で、本研究で進めている自然再生の順応的管理に向けた社会的評価モデルのユーザーは、研究者のみではなく、地域で活動しているNPO、住民、行政といったステークホルダーが使用できる可能性が高いことも確認できた。3回のフィールド研究会を開催し、フィールドワークを実施することにより、自然再生が地域社会に与えた社会的影響に関する知見を深めることができた。フィールド研究会では、ワークショップを行い、(1)本研究の理念とデザインの確定、(2)自然再生の順応的ガバナンスについての先行研究に関する評価、(3)自然再生の社会的評価指標の抽出を実施し、暫定的な社会的評価指標を設定することができた。その指標を用いてこれまで蓄積してきた事例の再分析を進め、社会的評価モデルの構築に向けた議論を行い、暫定的な社会的評価指標の持つ有効性と課題を確認することができた。自然再生の社会的評価指標を用いたモデル構築に関する研究を進め、論文の執筆作業を進めていく。(1)事例分析:これまでの現地調査で収集したデータを整理するとともに、・人(のつながり):アクター、ネットワーク、プラットホーム、・知識:知識、技術、課題認識、学び、ビジョン、・効果:豊かさ(社会・経済・自然)、外部評価、主観的評価という自然再生による地域社会への影響・効果・課題に関する指標の関係性について事例の分析を通じて図表化する。
ゴム手袋使用作業者におけるラテックス特異IgE抗体保有率と身体所見との関連

某精密機械製造工場の労働者1015名(男性965名。女性50名)を対象に定期検診の際に、手の皮膚症状に関する質問票と医師による他覚的観察を行った。更に非特異的IgE抗体(total IgE)、ラテックス特異IgE抗体(Latex RAST)を測定した(Pharmaciaユニキャップ特異IgE(R))。ゴム手袋使用者736名の中で、ラテックス特異IgE抗体(RAST)の陽性者はclass1:8名、class2:6名、class3:1名、class4:1名の16名(2.2%)であった。またゴム手袋使用者736名の中での皮膚異常症状経験者(以下、症状有り群)は184人(25.6%)であった。症状有り群は、ゴム手袋使用による皮膚の異常症状の非経験者(以下、症状無し群)に比べ、アトピー性皮膚炎の割合が有意に高く(p=0.002)、業務内容では、製造業務者の割合が高く認められた。約26%の者が手の皮膚の異常症状を経験していたにもかかわらず、医師の診察時に手の皮膚の異常を指摘された者はいなかった。これには質問票の記入日と診察日の時間的なずれによるもの、あるいはその症状がゴム手袋を外すことで短時間に消失してしまう性質のものという可能性も考えられた。また過去にアナフィラキシーの症状を呈した対象者もいなかったことから、ゴム手袋により生じた何らかの皮膚症状は、接触皮膚炎の中では遅発型アレルギー性接触性皮膚炎または刺激性接触性皮膚炎になるのではないかと推察された。しかし、RASTの敏感度の低さにもかかわらず、やや高度の陽性者がみられているので、ラテックスの関与が全く否定されるものではない。今回ゴム手袋を使用する作業者のラテックス特異IgE抗体の保有率について調査を行った。某精密機械製造工場の労働者1015名(男性965人、女性50人)に対して、定期健康診断の際に医師により手の皮膚を他覚的に観察した。さらに手の皮膚症状に関する質問票の調査を行った。また健診の血液検査と同時に非特異的IgE抗体(total IgE)、ラテックス特異IgE抗体(Latex RAST)を測定した。皮膚自覚症状の有無と業務内容およびゴム手袋使用歴について見ると、ゴム手袋使用者718人の内、ゴム手袋使用により手の皮膚異常症状を経験したことのある人(以下、症状有り群)は184人、皮膚の異常を経験したことのない人(以下、症状無し群)は534人であり、症状有り群は25.6%であった。皮膚異常自覚症状の有無とアレルギー性疾患既往歴との関連では、既往歴において症状有り群では、症状無し群との比較において、アトピー性皮膚炎の割合が有意に高かった。(P>0.0005)自覚症状の頻度として、「痒くなった」110人(59.8%)、「皮膚がぼろぼろめくれた」84人(45.7%)、「水ぶくれが出来た」24人(13.0%)、「発疹」22人(12.0%)、「皮膚の乾燥、肥厚」17人(9.2%)、「赤く腫れた」15人(8.2%)、「痛くなった」9人(4.9%)、その他12人(6.5%)の順に症状が見られた。ゴム手袋使用の有無とRAST陽性者の分布では、ラテックス特異IgE抗体(RAST)はゴム手袋使用者では16名が陽性であった(2.2%)。皮膚症状有り群の業務と、症状の種類では、症状有りの群では製造業務者が127人で、製造業務者総数の29.5%であった。

技術業務者は46人で、技術業務者総数の21.3%であった。またその他の業務者は11人で、その他の業務者総数の15.5%であった。3群間において症状有り群では、製造業務者の割合が有意に高かった。(P>0.0096)また「皮膚がぼろぼろめくれた」という症状の経験者も製造業務者で有意に多く認められた。(65人:51.2%)(P>0.002)某精密機械製造工場の労働者1015名(男性965名。女性50名)を対象に定期検診の際に、手の皮膚症状に関する質問票と医師による他覚的観察を行った。更に非特異的IgE抗体(total IgE)、ラテックス特異IgE抗体(Latex RAST)を測定した(Pharmaciaユニキャップ特異IgE【○!R】)。ゴム手袋使用者736名の中で、ラテックス特異IgE抗体(RAST)の陽性者はclass1 : 8名、class2 : 6名、class : 1名、class4 : 1名の16名(2.2%)であった。またゴム手袋使用者736名の中での皮膚異常症状経験者(以下、症状有り群)は184人(25.6%)であった。症状有り群は、ゴム手袋使用による皮膚の異常症状の非経験者(以下、症状無し群)に比べ、アトピー性皮膚炎の割合が有意に高く(p<0.0005)、業務内容では、製造業務者の割合が高く認められた。有症状者には、代替手袋(ポリエチレン製など)やインナー手袋(綿100%)の使用を試みたところ症状の軽減が認められた。RAST陽性者と有症状者は必ずしも一致していなかった。医師の診察による他覚的所見と自覚症状とが一致する対象者が無く、このことは質問票の記入日と診察日の時間的なずれによるもの、あるいはその症状がゴム手袋を外すことで短時間に消失してしまう性質のものという可能性も考えられた。また過去にアナフィラキシーの症状を呈した対象者もいなかったことから、ゴム手袋により生じた何らかの皮膚症状は、接触皮膚炎の中では遅発型アレルギー性接触性皮膚炎または刺激性接触性皮膚炎になるのではないかと予想されたが、両者を鑑別する事は困難であった。
フィトクロム単結晶の作製とそのX線結晶回折による構造解析

フィトクロムは緑色植物に存在する色素蛋白質で、赤色光吸収型Prと近赤外光吸収型Pfrの間を可逆的に光変換する。Pfrが生理学的な活性型で、PrがPfrに光変換する事によって様々な生理調節反応が誘き起こされるが分子機構は未知である。研究代表者等は昨年度、既にX線小角散乱法で得ていたフィトクロム分子構造モデルをさらに精密化すべく、結晶解析に使用できるlargeフィトクロム単結晶の作製条件を追及した。今年度方針を少し変えて以下の研究を行った。(1)前年度各種の沈殿剤を用いてlargeフィトクロムの結晶化を試みたが、単結晶の作製には成功しなかった。largeフィトクロムはアモルファスな沈殿を作り易くまた分子量も大きく後の解析も複雑となる事から、同フィトクロムをトリプシン処理して得られる59kDa発色団含有フラグメントの結晶化条件の追及を行い、硫酸アンモニュウムを沈殿剤とする結晶化が有望であるという結果を得て、現在結晶解析可能な単結晶を得るべく実験を継続中である。(2)上記の研究とは別に、結晶解析を行う際に必要となる発色団の分子構造の情報を得るべく、共鳴ラマン散乱法を用いた解析を行い、PrとPfrが異なるH^+化構造を持つ事を見つけ光変換にともなって分子内H^+移動反応を起こす可能性を示唆した(Tokutomi et al.,1990,FEBS Lett,;Mizutani et al.,1991,Biochemistry)。(3)共鳴ラマン散乱法で得られた発色団子構造に関する情報を考慮して、吸収スペクトルを良く再現するπ電子系を持つ発色団の子モデルを組み立てた(Tokutomi et al.,Photochem.Photobiol.1992,in press)。(4)配向フィトクロム試料の直線偏光二色性(LD)の測定結果から赤色光および青色光吸収帯遷移モ-メントとフィトクロム分子内二回回転対称軸との相対角を決定し、これらの結果から発色団の分子内配向の三次元モデルを組み立てた(徳富、1991、組織培養;Tokutomi et al.,Photochem.Photobiol 1992,in press)。現在、結晶解析可能な59kDaフラグメントの単結晶の作製を継続中であり、これが完成した暁には上記で得た結果を用いて構造解を行う予定である。フィトクロムは緑色植物に存在する色素蛋白質で、赤色光吸収型Prから近赤外光吸収型Pfrに光変換する事によって様々な生理調節反応を行うが、その光情報変換機構は未知である。申請者等は、シンクロトロン放射光を光源としたX線小角散乱法を用いて高次構造の解析を行ない、その二重体構造の低分解能モデルを提出した(Tokutomi et al.,1989,Nakasako et al,1990)。さらに同モデルを応用して偏光受容の分子機構が解釈できる事を示した(Tokutomi&Mimuro,1989)。さらに詳細な分子構造の解明を目指して本研究で結晶解析による研究を始めた。

平成2年度はフィトクロムの結晶化を目指して以下の実験を行ったが、結晶解析に供する事のできる単結晶の作製には今の所成功していない。(1)大量の純品精製システムを確立させたlargeフィトクロム(エンドウ黄化芽生えからPr型のまま抽出精製を行い、内在性の蛋白質分解酵素による部分加水分解を受け、Nー末端側の6kDaのポリペプチドを欠落した分子量114kDaのサブユニットからなる二重体)のPr型の標品について、4種類の異なる沈殿剤を使用して結晶化の条件を調べた。硫酸アンモニュウムを用いて、偏光顕微鏡による観測で部分的に配向の見られる500um程度の塊を幾つか得たが、単結晶は得られていない。(2)現在largeフィトクロムの結晶化条件を追及するのと平行して、smallフィトクロムを調製して(largeフィトクロムのトリプシン加水分解物から精製した、Nー末端側の59kDaの発色団含有領域に対応するフラグメントで、溶液中で単量体として存在する)に関する結晶化条件の追及を行っている。(3)以上の他に将来結晶解析を行う際に必要となってくる、発色団の分子内構造と分子内配向に関する研究を行い、その三次元モデルを組み立て、1991年3月の植物生理学会年会で発表予定である(Tokutomi&Mimuro,Photochem.Photobiol.投稿中)。フィトクロムは緑色植物に存在する色素蛋白質で、赤色光吸収型Prと近赤外光吸収型Pfrの間を可逆的に光変換する。Pfrが生理学的な活性型で、PrがPfrに光変換する事によって様々な生理調節反応が誘き起こされるがその分子機構は未知である。研究代表者等は昨年度、既にX線小角散乱法で得ていたフィトクロム分子構造モデルをさらに精密化すべく、結晶解析に使用できるlargeフィトクロム単結晶の作製条件を追及した。今年度方針を少し変えて以下の研究を行った。(1)前年度各種の沈殿剤を用いてlargeフィトクロムの結晶化を試みたが、単結晶の作製には成功しなかった。largeフィトクロムはアモルファスな沈殿を作り易くまた分子量も大きく後の解析も複雑となる事から、同フィトクロムをトリプシン処理して得られる59kDa発色団含有フラグメントの結晶化条件の追及を行い、硫酸アンモニュウムを沈殿剤とする結晶化が有望であるという結果を得て、現在結晶解析可能な単結晶を得るべく実験を継続中である。(2)上記の研究とは別に、結晶解析を行う際に必要となる発色団の分子構造の情報を得るべく、共鳴ラマン散乱法を用いた解析を行い、PrとPfrが異なるH^+化構造を持つ事を見つけ、光変換にともなって分子内H^+移動反応を起こす可能性を示唆した(Tokutomi et al.,1990,FEBS Lett.;Mizutani et al.,1991,Biochemistry)。(3)共鳴ラマン散乱法で得られた発色団分子構造に関する情報を考慮して、吸収スペクトルを良く再現するπ電子系を持つ発色団の分子モデルを組み立てた(Tokutomi et al.,Photochem.Photobiol.1992,in press)。(4)配向フィトクロム試料の直線偏光二色性(LD)の測定結果から赤色光および青色光吸収帯遷移モ-メントとフィトクロム分子内二回回転対称軸との相対角を決定し、これらの結果から発色団の分子内配向の三次元モデルを組み立てた(徳富、1991、組織培養;Tokutomi et al.,Photochem.Photobiol 1992,in press)。現在、結晶解析可能な59kDaフラグメントの単結晶の作製を継続中であり、これが完成した暁には上記で得た結果を用いて構造解を行う予定である。
放射光を使った単色パルスX線による解像度8μmの微小心臓血管造影装置の開発

1.既存の空間解像度10μmの画像撮影装置をもとに、平成14年度には検出器部分を改良して解像度8μmでのX線動態画像撮影を可能とした。続いて平成15年度では、解像度6μmでのX線動態画像撮影を可能とした。平成16年度では、分光用シリコン結晶の改良や放射光自体の高輝度化によりX線強度が約2倍となり、画像のS/Nが約1.5倍向上し、高画質化をさらに進めることができた。2.X線動画像撮影制御装置を新たに製作し、既存の画像撮影装置と組み合わせて、平成15年度までにシャッター時間が最短で23ミリ秒である単色パルスX線による撮影で、心拍動下での微小血管造影を可能とした。平成16年度では、タンタル製のブレードの軽量化や動作タイミングの最適化をさらに進め、撮影視野サイズを1.2倍程度上下方向に拡大できた。3.開発した装置を用いて、正常と各種の病態モデルラットの摘出心を使い冠状動脈造影を施行し、血管作用薬に対する残存拡張・収縮能などを2030μmの血管についてまで評価した。病態モデルラットでは高血圧と糖尿病モデルを使い、血管作用薬にはアセチルコリン、アデノシン三リン酸、ニトロプルシド・ナトリウムを使った。正常動物の摘出心では全ての作用薬に反応し拡張反応が現れたが、高血圧ラット心では全ての作用薬に反応しない結果が得られた。糖尿病ラット心ではアセチルコリンには反応しないが、アデノシン三リン酸とニトロプルシド・ナトリウムにはわずかの拡張反応を示すことが分かった。この結果、病態モデルラットの摘出心のランゲンドルフ潅流下で2030μm径の微小血管について拡張収縮反応の画像化が実現し、冠微小循環障害などの進展過程の研究に適用可能となり当初の目的を達成できた。1.SPring-8の放射光を単色化した単色X線でのイメージングにおいて、既存の空間解像度10μmの画像撮影装置(1024×1024画素×10ビット、撮影速度30画像/秒)をもとに、検出器部分を改良して解像度8μmでのX線動態画像撮影を可能とした。具体的には、撮影視野サイズが従来は9.5mm角であったが、視野サイズ7mm角での撮影を可能とする改造で、画素サイズ7μmの画像が得られた。解像度評価チャートを撮影してX線画像の解像度を調べた結果では8μm幅のパターンまで画像化できており、目標の解像度8μmを達成できた。今回の改造の成功をもとにして、今後はさらに撮影視野を小さくしたモードでの撮影も可能とし、さらに高解像度化を進める。2.X線動画像撮影制御装置を新たに製作し、既存の画像撮影装置と組み合わせて、X線画像検出器の動態画像撮影のタイミング信号と同期させたX線シャッターの駆動により、シャッター時間が56ミリ秒でのパルスX線撮影が可能となった。通常は光学ミラーを装着してレーザー光の走査などに用いるガルバノメータースキャナをシャッター本体として使い、ミラーに替えてタンタル製のシャッターブレードを付けて、シーソーのような動きのチョッパーによるX線シャッターとした。撮影装置の基本構造が完成したため今後は、X線シャッターの改良(タンタル製のブレードの軽量化や動作タイミングの最適化)を進めて、目標である最短シャッター時間23ミリ秒の達成を実現する。3.開発した装置を用いて、正常ラットの摘出心を使いランゲンドルフ灌流下で、心拍動下に非イオン性ヨード造影剤を摘出心の大動脈起始部に注入して冠状動脈造影を施行した。そして、約50μm径の微小血管の動態での画像化に成功した。

今後は、撮影装置の改良で、2030μmの血管の画像化を目指し、平行して病態モデルラットでの実験に進む。1.SPring-8の放射光を単色化した単色X線でのイメージングにおいて、既存の空間解像度10μmの画像撮影装置(1024×1024画素×10ビット、撮影速度30画像/秒)をもとに、平成14年度には検出器部分を改良して解像度8μmでのX線動態画像撮影を可能とした。続いて平成15年度では、解像度6μmでのX線動態画像撮影を可能とした。具体的には、視野サイズ4.5mm角での撮影を可能とする改造で、画素サイズ4.5μmの画像が得られた。解像度評価チャートを撮影してX線画像の解像度を調べた結果では6μm幅のパターンまで画像化でき、従来の空間解像度10μmに対して検出器として限界的な解像度まで達した。2.平成14年度には、X線動画像撮影制御装置を新たに製作し、既存の画像撮影装置と組み合わせて、X線画像検出器の撮影タイミング信号と同期させたX線シャッターの駆動により、シャッター時間が56ミリ秒でのパルスX線撮影が可能となった。ここでは、レーザー光の走査などに用いるガルバノメータースキャナを使い、タンタル製のシャッターブレードを付けて、シーソーのような動きのチョッパーによるX線シャッターとした。平成15年度では、X線シャッターの改良(タンタル製のブレードの軽量化や動作タイミングの最適化)を進めて、目標である最短シャッター時間2ミリ秒を実現した。3.開発した装置を用いて、正常ラットの摘出心を使いランゲンドルフ灌流下で、心拍動下に非イオン性ヨード造影剤を摘出心の大動脈起始部に注入して冠状動脈造影を施行した。平成14年度では約50μm径までの微小血管の動態での画像化を行ったが、平成15年度では撮影装置の改良で、2030μmの血管の画像化までが可能となった。さらに、正常ラット摘出心から、糖尿病や高血圧症などの病態モデルラットの摘出心での実験に進んだ。1.既存の空間解像度10μmの画像撮影装置をもとに、平成14年度には検出器部分を改良して解像度8μmでのX線動態画像撮影を可能とした。平成16年度では、分光用シリコン結晶の改良や放射光自体の高輝度化によりX線強度が約2倍となり、画像のS/Nが約1.5倍向上し、高画質化をさらに進めることができた。2.X線動画像撮影制御装置を新たに製作し、既存の画像撮影装置と組み合わせて、平成15年度までにシャッター時間が最短で23ミリ秒である単色パルスX線による撮影で、心拍動下での微小血管造影を可能とした。平成16年度では、タンタル製のブレードの軽量化や動作タイミングの最適化をさらに進め、撮影視野サイズを1.2倍程度上下方向に拡大できた。3.開発した装置を用いて、正常と各種の病態モデルラットの摘出心を使い冠状動脈造影を施行し、血管作用薬に対する残存拡張・収縮能などを2030μmの血管についてまで評価した。病態モデルラットでは高血圧と糖尿病モデルを使い、血管作用薬にはアセチルコリン、アデノシン三リン酸、ニトロプルシド・ナトリウムを使った。正常動物の摘出心では全ての作用薬に反応し拡張反応が現れたが、高血圧ラット心では全ての作用薬に反応しない結果が得られた。糖尿病ラット心ではアセチルコリンには反応しないが、アデノシン三リン酸とニトロプルシド・ナトリウムにはわずかの拡張反応を示すことが分かった。
情報倫理教育における教授知識の体系的記述と教師教育システムへの適用

本研究では,情報教育に携わる初心者教師に授業設計において必要な知識を学習させるための教師教育システムの開発を行った.特に,情報教育において不可欠であるインターネットの利用に大きく関係する情報倫理教育に焦点を絞った.具体的な研究目的は,(1)情報教育における情報倫理に関わる教授知識を記述するための概念体系の明示化,(2)情報教育を担当する初心者教師に対する情報倫理教育のための教師教育システムの開発である.前者は,情報教育におけるどのような授業展開・教授行動に対してどのような情報倫理の項目について教育する必要があるか,といった教授知識を記述するための概念を明示化し,それらの間の関係(概念間の制約)を計算機可読的に記述することである(情報倫理教育オントロジーと呼ぶ).この情報倫理教育オントロジーによって,情報教育における情報倫理教育のための教授知識を統一的な枠組みで記述することが可能になり,教師間での知識の共有を促進するための基盤となる.後者は,前者で構築されるオントロジーに基づいて記述された情報倫理に関する教授知識を利用し,情報教育を担当する初心者教師の状況(環境設備,科目,単元,教育目標等)・ニーズに応じて情報倫理教育のための実践的な知識を学習できる教師教育システムを開発することである.この教師教育システムによって,指導内容・指導方法が曖昧で分かりにくい情報倫理に関する教授知識について,個々の教師や所属する学校の状況に応じて学ぶことができるようになった.本研究では,情報教育に携わる初心者教師に授業設計において必要な知識を学習させるための教師教育システムの開発を行うことを目的とする.今年度は情報倫理教育のための教授知識を記述する基盤の構築を行った。1.情報倫理に関する事例を収集日本学術振興会未来開拓学術研究推進事業「情報倫理の構築」等,先行研究の結果を参照すると同時に,岡山県内の情報教育を実践している教員にアンケート・インタビューすることで事例を収集・整理した.2.情報教育における教授行動を整理小中高での情報教育の実践授業を収集し,授業科目,単元,教育目標,環境設備,教授行動,学習活動,学習効果を抽出し,授業モデルとして蓄積する.この中で,教授活動と学習活動のパターンを整理した.3.情報教育における教授行動と情報倫理の関係を整理2.で収集・整理した情報教育の実践授業において,1.で収集・整理した情報倫理の内容を関連づける.つまり,どのような授業展開においてどのような情報倫理の項目を留意しなければならないかを整理した.4.情報倫理教育のための教授知識を記述する枠組みをオントロジーとして構築3.の作業の中で,情報倫理教育のための教授知識を記述するためにどのような概念が必要であるか,それらの概念間にどのような関係が存在するかをオントロジーとして構築した.オントロジーは,今年度に購入したパーソナルコンピュータ上で記述した.5.得られたオントロジーに従って,情報教育における情報倫理教育のための教授知識を記述オントロジーの公理を満足しているどうかを検査しながら教授知識を記述していった.この教授知識も今年度に購入したパーソナルコンピュータ上で記述した.本研究では,情報教育に携わる初心者教師に授業設計において必要な知識を学習させるための教師教育システムの開発を行うことを目的とする.本年度は情報倫理教育のための教授知識を記述し教師教育システムの実装を行った.1.昨年度構築したオントロジーと教授知識の洗練化昨年度構築した情報倫理教育オントロジーとそのオントロジーに従って記述した教授知識を現場の教師や専門家と協議しながら洗練化していった.2.教師教育のための教授戦略・学習形態の整理学習者(初心者教師)の理解状態,ニーズに応じて様々な学習形態を用意する.本研究では,教授知識を視覚化して提示,情報倫理の内容を学習する教材の提示,環境設備や単元を仮定した上での授業設計を通してのインタラクティブな学習形態等を用意し,学習者の理解状態に応じてこれらの学習形態を動的に使い分ける教授戦略機構を設計した.そのための学習者モデル構築機構も設計した.3.教師教育システムの実装2.で整理・設計した各機構を,前年度購入したパーソナルコンピュータ上でJava言語とProlog言語を用いて開発した.インタフェース部分はJavaを,学習者モデル構築,教授戦略の決定部はPrologを用いた.本研究では,情報教育に携わる初心者教師に授業設計において必要な知識を学習させるための教師教育システムの開発を行った.特に,情報教育において不可欠であるインターネットの利用に大きく関係する情報倫理教育に焦点を絞った.具体的な研究目的は,(1)情報教育における情報倫理に関わる教授知識を記述するための概念体系の明示化,(2)情報教育を担当する初心者教師に対する情報倫理教育のための教師教育システムの開発である.前者は,情報教育におけるどのような授業展開・教授行動に対してどのような情報倫理の項目について教育する必要があるか,といった教授知識を記述するための概念を明示化し,それらの間の関係(概念間の制約)を計算機可読的に記述することである(情報倫理教育オントロジーと呼ぶ).この情報倫理教育オントロジーによって,情報教育における情報倫理教育のための教授知識を統一的な枠組みで記述することが可能になり,教師間での知識の共有を促進するための基盤となる.後者は,前者で構築されるオントロジーに基づいて記述された情報倫理に関する教授知識を利用し,情報教育を担当する初心者教師の状況(環境設備,科目,単元,教育目標等)・ニーズに応じて情報倫理教育のための実践的な知識を学習できる教師教育システムを開発することである.この教師教育システムによって,指導内容・指導方法が曖昧で分かりにくい情報倫理に関する教授知識について,個々の教師や所属する学校の状況に応じて学ぶことができるようになった.
生体材料評価系としてのストレスシグナル伝達系の開発と応用

本研究は、炎症性サイトカインや様々な物理化学的ストレス刺激によって活性化され、細胞の生と死の制御に非常に重要なシグナルを伝達しているストレスシグナル伝達系に注目し、生体材料適合性・安全性の新たな評価系としてこの伝達系の活性化を指標とすることにより、医用生体材料の生体適合性・安全性の迅速かつ高感度な判定方法を全く新しい観点から構築することを目的とした。まず、ストレス感受性キナーゼであるJNKならびにp38の活性化を鋭敏に検出する系を確立し、さらにそれらの制御分子であるASK1が酸化ストレスによるJNK, p38の正常な活性化に必須であることを明らかにした。続いて、ASK1の活性化を鋭敏にモニターできる抗体の作製ならびにその評価を行った。我々はASK1のキナーゼ領域に存在する845番目のスレオニン残基のリン酸化がASK1の活性化に必須であることを見いだし、その部位のリン酸化状態を認識する抗体を作製した。この抗体は、これまでのin vitroキナーゼ解析によるキナーゼ活性評価法を上回る感度でASK1の活性化を認識しうることが確認された。この抗体を用いた生化学的な解析とASK1ノックアウトマウスのさらなる解析により、ASK1は酸化ストレスのみならず、小胞体ストレスによるアポトーシスの誘導にも必須の分子であることが明らかとなった。これらのことから、ASK1-MAPキナーゼ系は、予想以上の様々なストレスに対する反応性を規定する重要なシグナル伝達系であり、その活性化を捉えることが本研究の目指す生体材料評価系として非常に有用であることが示唆された。本研究は、炎症性サイトカインや様々な物理化学的ストレス刺激によって活性化され、細胞の生と死の制御に非常に重要なシグナルを伝達しているストレスシグナル伝達系に注目し、生体材料適合性・安全性の新たな評価系としてこの伝達系の活性化を指標とすることにより、医用生体材料の生体適合性・安全性の迅速かつ高感度な判定方法を全く新しい観点から構築することを目的としている。ストレスシグナル系、とくにMAPキナーゼ系を構成する分子群については、われわれをはじめ多くのグループがノックアウトマウスを作製している。それらのマウスとの比較も想定し、培養も容易なマウス胎児由来線維芽細胞を用い、様々なストレス刺激を加え、おもにJNKならびにp38の2つの経路の活性化を検討した。様々なストレス刺激によりJNK, p38が非常に鋭敏に活性化されること、また刺激の種類によってそれぞれの活性化程度と様式が異なることを確認した。さらにJNK, p38活性化の特異性を検討するため、両経路の制御因子の一つであるASK1のノックアウトマウス由来の細胞と野生型マウス由来の細胞を比較して、様々な刺激によるJNK, p38の活性化を検出した。その結果、ASK1がおもに酸化ストレスによるJNK, p38の正常な活性化に必須であることが明らかとなった。活性酸素種による酸化ストレスは、様々なストレス刺激の共通のメディエーターと考えられていることから、ASK1-MAPキナーゼ系の活性化を捉えることが、本研究の目指す生体材料評価系として非常に有用であることが示唆された。昨年度までにストレス感受性キナーゼであるJNKならびにp38の活性化を鋭敏に検出する系を確立し、さらにそれらの制御分子であるASK1が酸化ストレスによるJNK, p38の正常な活性化に必須であることを明らかにした。本年度はASK1の活性化を鋭敏にモニターできる抗体の作製ならびにその評価を行った。

我々はASK1のキナーゼ領域に存在する845番目のスレオニン残基のリン酸化がASK1の活性化に必須であることを見いだし、その部位のリン酸化状態を認識する抗体を作製した。この抗体は、これまでのin vitroキナーゼ解析によるキナーゼ活性評価法を上回る感度でASK1の活性化を認識しうることが確認された。この抗体を用いた生化学的な解析とASK1ノックアウトマウスのさらなる解析により、ASK1は酸化ストレスのみならず、小胞体ストレスによるアポトーシスの誘導にも必須の分子であることが明らかとなった。これらのことから、ASK1l-MAPキナーゼ系は、予想以上の様々なストレスに対する反応性を規定する重要なシグナル伝達系であり、その活性化を捉えることが本研究の目指す生体材料評価系として非常に有用であることが改めて示唆された。