hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
微細藻類による魚介類フレ-バ-の生産とその利用に関する研究

本研究では揮発性有機イオウ化合物、特にジメチルサルファイドに注目して研究をおこなったが、この物質を大量に生産するのは海産緑藻、ハプト藻や渦鞭毛藻であり、この物質は地球におけるイオウ循環にも大きな役割を果していることが明らかになった。このジメチルサルファイドを大量に生産する渦鞭毛藻の中でCrypthecodinium cohniiに注目し、その培養条件を検討したところ,グルコ-ス添加培地で通気培養すると12g wet weight/lと高い収率を得ることができた。ジメチルサルファイドの生合成系をC,cohniiを用いて調ベ、メチオニンからジメチルーβープロピオテチンを経ていることを明らかにした。特にメチオニンはピリドキサ-ル燐酸を補酸素とする脱炭酸酵素でまず脱炭酸され、そののち脱アミノされ、メチル基が付加されてジメチルーβープロピオテチンとなる経路を明らかにした。このジメチルーβープロピオテチンには魚類に対して摂餌誘引活性をもつこと、さらにこの物質を餌に混ぜて魚を飼育した場合、混ぜない対称区に較べて成長が有意に良好であることが明らかになった。また、ジメチルーβープロピオテチンはメチルメチオニンと同様に胃潰瘍を予防する作用をもつことが確認され、C,Cohniiの藻体そのものにもその活性が認められた。C,cohiniiの揮発性化合物としては、ジメチルサルファイド以外に、アクリル酸、甘い香気をもった3ーhydroxyー2ーmethylー4Hーpyranー4ーone(maltol),2ーhydroxyー3ーmethylー2ーcyclopentenー1ーone(cyclotene)および2,5ーdimethylー4ーhydroxyー3(2H)ーfuranone(furaneol)が比較的多く存在することが明らかになった。食物連鎖の上位に位置するアサリやイカの含硫香気成分としては、ジチアジンやジアチアジンが多いことが明らかになった。本研究は海産及び淡水産微細藻類が産生する魚介類の各種フレーバー(特に含硫有機化合物および含窒有機化合物)を検索・同定するとともに、それらの化合物の生合成系を明らかにし、さらにはそれらの化合物を産生する微細藻類の大量培養系を確立し、工業レベルでの生産を行おうとするものである。本年度に得られた新しい成果と知見は下記のとおりである。ウニのフレーバーの中心をなしている物質は揮発性含硫有機化合物ジメチルサルファイド(dimethylsulfide)であり、渦鞭毛藻Crypthecodinium cohniiはこの物質を培地中に大量に生産することを見つけた。淡水産渦鞭毛藻であるPeridinium bipesも同様にこの物質を生産することをみつけている。またこの物質の前駆体はジメチルーβープロピテチンであることを明らかにした。細胞内に取り込まれたイオウのうち低分子画分の90%以上がこの物質で占められていた。2.ジメチルーβープロピオテチンの生合成系に関する研究3ーmethiolpropionateとS-adenosylemthionineからメチル転移反応によって酵素的にこの物質が生合成される可能性を明らかにした。本藻に海水とグルコース、酵母エキスを基本とする培地で従属栄養的に非常に良く増殖することが明らかになった。4.ジメチルーβープロピオテチンの生理活性物質としての役割本物質はハマチ、マダイ、およびヒラメの稚魚に対して摂餌誘引活性を示すとともに、特にハマチでは餌料に本物質を添加すると著しい成長促進効果があることが明らかになった。

魚介類のフレ-バ-は、海の食物連鎖の影響をうけ、直接・間接、餌料生物である海洋微細藻類や海藻に起因すると推定される。本研究では、魚介類のフレ-バ-の分析を揮発性イオウ化合物を中心に行うとともに、それらフレ-バ-を微細藻類から生産しようとした。また、それらフレ-バ-を、魚介類の摂餌誘因などの養殖漁業への応用、医薬品としての利用の道を開こうとした。本年度までの得られた成果は下記の通りである。1.アサリやイカのフレ-バ-の分析を行い、ジチアジンやジアチアジンを見出した。2.渦鞭毛藻Crypthecodinium cohniiからジメチル・β・プロピオテチン(DMPT)を主成分とするウニのフレ-バ-を抽出した。3.本藻の大量培養のための培地組成を確立し、細胞収量4g(湿重)1lを得た。4.DMPTがタイやハマチの摂餌誘因物質として有効であることを示した。5.DMPTが高い抗胃潰瘍性を示すことを明らかにした。本年度は、微細藻類の魚介類フレ-バ-の中で、揮発性有機イオウ化合物,特にジメチルサルファイドに注目して研究をおこなった。また、本藻を用いて.ジメチルサルファイドの生合成系を調べたところ、無機の硫酸(海水中に存在する)はメチオニンにまで合成され,このメチオニンからジメチルーβープロピオテチンを経ていることが明らかになった。特にメチオニンはピリドキサ-ル燐酸を補酵素とする脱炭酸酵素でまず脱炭酸され,その後,脱アミノとメチル基添加反応を経てジメチルーβープロピオテチンとなる経路を明らかにした。このジメチルーβープロピオテチンは、アルカリ処理あるいは酵素的にジメチルサルファイドとアクリル酸となる。このジメチルーβープロピオテチンは構造的に類似しているメチルメチオニン同様、胃潰瘍を防止する作用を有することが確認され.C、cohniiの藻体そのものにもその活性が認められた。C、cohniiの揮発性化合物としては、ジメチルサルファイド以外に、アクリル酸,甘い香気をもった3ーhydroxyー2ーmethylー4Hーpyranー4ーone(maltol),2ーhydroxyー3ーmethlー2ーoyclopentenー1ーone(oyclstene)および2,5ーdimethlー4ーhydroxyー3(2H)ーfuranone(furaneol)が比較的多く存在していた。食物連鎖の上位に位置するアサリやイカの含硫香気成分としては、ジチアジンやジアチアジンが多いことも明らかになった。
ＣＴＬと制御性Ｔ細胞の同時機能調節と分化抑制による、癌特異的ＣＴＬ細胞療法の樹立

がんだけを殺傷する患者リンパ球(がん特異的CTL)を効率よく体外で育て、体内へ戻すCTL細胞療法の開発研究を行った。がん抗原と、リンパ球刺激作用のあるOX40によりT細胞を培養すると、がん特異的CTLが効率よく誘導できた。制御性T細胞抑制作用も併せ持つOX40を前投与した担癌マウスに、CTLを細胞移入すると、免疫抑制状態を打ち破り、CTLが長期間機能維持し、腫瘍拒絶した。がん特異的CTLの効率的な作成に、IL-21やB7-DCも有力候補だとわかった。ヒトリンパ球からも、抗原(HA)特異的CTLがOX40刺激により効率よく誘導できた。今後、がん患者に対するCTL細胞療法へ応用できると考えます。OX40補助刺激因子のもつ、担癌生体の制御性T細胞の機能抑制作用とCTL増殖作用とアポトーシス抑制作用に着目し、さらに、IL-21のもつCD8+ T細胞の分化抑制作用に着目した。両者を利用することで癌抗原特異的CTLが担癌生体内で免疫トレランスに打ち勝ち、抗腫瘍免疫機能を強く長く維持できるCTL細胞治療法の樹立を目的に研究を行った。マウス(FVB/N)モデルで、腫瘍ペプチドとOX40補助刺激下で誘導された腫瘍抗原特異的CTLが、OX40補助刺激で制御性T細胞抑制処置されたレシピエント担癌マウスに細胞移入されると、アポトーシスが抑制されたCTLが維持し強い抗腫瘍効果を示すことわかった。さらにIL-21刺激下で腫瘍抗原特異的CTLを誘導すると、分裂能を維持し高い抗腫瘍効果を示すCTLが誘導されることを検証している。腫瘍抗原(HER2/neu)に対しての免疫寛容マウスモデル(HER2/neu transgenic mouse (neu-N))を用いて行い、OX40刺激とIL-21刺激を受けたCTLが、腫瘍抗原に対する免疫寛容状態を打ち破ってその機能が維持され、抗腫瘍効果を発揮することを試みているが、至適条件を捜している段階である。ヒト癌免疫細胞治療に応用するため、まず、ヒトインフルエンザウイルス抗原(HA)特異的CTLを誘導する際に、OX40補助刺激を加えることにより、高頻度にHA特異的CTLが樹立できた。さらに、IL-21刺激を加えることにより、CTLの抗原刺激による分裂能が維持され、アポトーシス抑制タンパクが高発現することを確認しているところである。さらにCTL細胞治療法に用いるT細胞補助刺激因子としてmutant-type B7-DC-Fcfusion proteinを作成し、ワクチン増強作用をマウスのin vitroとin vivo実験で確認した。癌抗原特異的CTLが免疫トレランス状態の担癌生体内で長期間機能を維持できる細胞治療法を樹立するために、エフェクターT細胞機能を増強する一方、制御性T細胞の抑制機能を減弱する働きのあるOX40の補助刺激作用を利用した。腫瘍抗原ペプチド(RNEU420-429)をT2Dq細胞(抗原提示細胞)にパルスし、HER2/neu発現NT腫瘍接種とHER2/neuワクチン接種を受けたマウス脾細胞よりNylon woolカラムで分離したT細胞と接触し2日間培養した。RNEU420-429特異的CD8+T細胞を誘導し増殖させた後、CD8+ T細胞を分離した。この分離CD8+ T細胞中には、約3%のRNEU420-429特異的CD8+ T細胞を認めた。この約3%のRNEU420-429特異的CD8+T細胞を含むCD8+ T細胞を、NT腫瘍接種を受け担癌状態になったマウスに、6x107個を養子移入した。養子移入6日目に、レシピエント脾臓中には0.5%のRNEU420-429特異的CD8+T細胞が細胞内IFN-γ染色(ICS)により検出可能であった。このwild-typeマウスを用いた系で、担癌生体の制御性T細胞機能をOX40刺激で抑制した状態で、OX40刺激により機能増強したCTLを細胞移入すると、CTLはアポトーシスが抑制され、分裂能が維持され、抗腫瘍免疫効果が増強することを、非免疫寛容マウスモデルで証明した。評価は腫瘍径の測定と、レシピエント脾細胞におけるRNEU420-429特異的CD8+T細胞を細胞内INF-γ染色(ICS)でおこなった。癌抗原特異的CTLが免疫トレランス状態の担癌生体内で長期間機能を維持できる細胞治療法を樹立するために、エフェクターT細胞機能を増強する一方、制御性T細胞の抑制機能を減弱する働きのあるOX40などのT細胞補助刺激作用を利用して研究を進めてきた。昨年度より、T細胞に対して補助刺激作用があるが、PD-1に対する刺激作用がなくT細胞をアポトーシス誘導へと導かないmutant-

type B7-DC-Fcを腫瘍抗原ワクチンとともに用いて研究を進め、CTL作用の効果増強を確認し、担癌マウスへの抗腫瘍効果と腫瘍局所への腫瘍抗原特異的CTLの集積も確認できた。今後は、さらにそれらの作用機序の違いを明らかにしたいと考えています。また、このCTL機能増強作用をもつoriginal-B7DC-Fcを細胞治療に応用するため、CTL誘導培地中へのoriginal-B7DC-Fc投与を行い、OX40刺激や、IL-21刺激とともに用いて、腫瘍抗原特異的CTLによるがん免疫細胞治療の効果増強を図っていきたいと考えています。外科腫瘍学、腫瘍免疫、OX40補助刺激因子における腫瘍抗原特異的T細胞の効果的誘導と制御性T細胞の機能抑制については、おおむね順調に研究が進んでいる。IL-21刺激を加えることにより、CTLの抗原刺激による分裂能が維持され、アポトーシス抑制タンパクが高発現することの確認については、いまだ研究中である。マウスだけでなく、ヒト細胞を使用しての、HAペプチドとOX40補助刺激による抗HA特異的CTLの誘導は効果的に誘導されている。しかし、まだ、IL21刺激によるCTLの分化抑制については研究中である。平成24年度の計画に記した、癌抗原特異的CTLの担癌生体内で機能の維持の研究に関し、wild-typeマウス(FVB/N)モデルを用いて養子移入可能な数の癌抗原特異的CTLを樹立し、抗OX40抗体を用いて、その作用の増強と、担癌マウスの制御性T細胞機能の抑制を行う細胞治療により、移入CTLの機能維持を強力に行うことができ抗腫瘍免疫効果を増強できた。。同様のことを、免疫寛容マウスモデル(HER2/neu transgenic mouse (neu-N))を用いて行っているところであり、おおむね順調に研究は進展していると考えている。IL21刺激による腫瘍抗原特異的CTLの分化誘導抑制とOX40補助刺激との併用効果について、マウス、および、ヒトリンパ球を用いて調べる。研究計画への追加として、CTLの補助刺激としてB7-DC-Fc有効であることが判明したので、これと抗PD-1抗体とを併用することにより、より有効に腫瘍抗原特異的CTLの誘導と機能強化を試みる。ペプチドワクチン接種大腸癌患者から得た末梢血中T細胞を用いて、ペプチド、T2-A24抗原提示細胞、OX40補助刺激、IL21刺激により、大腸癌抗原特異的CTLの樹立を試みる。〈癌抗原特異的CTLの担癌生体内で機能の維持〉CTL誘導過程でOX40補助刺激に加え、分化誘導を抑制する目的でIL-21刺激も加えたあと、このCTLをレシピエント担癌マウスに養子移入し、抗腫瘍効果の増強、RNEU420-429特異的CTLがさらに機能維持されているかどうかを明らかにする。また、移入前のCD8+T細胞をCSFEで標識し、IL-21刺激のある無しにより、移入後の担癌レシピエント内でのCD8+T細胞分裂回数の違いを明らかにする。さらに、誘導されたCTLのBcl-2,Bcl-xL発現を調べ、アポトーシス抑制状態を観察する。〈効果的なヒト癌特異的CTL細胞の樹立〉1)ボランティア末梢血からOX40補助刺激、IL-21刺激によるHA特異的CTLの樹立2)大腸癌
現代青年の性(sexuality)の形成に関する実証的研究

本研究は、現代青年の性(sexuality)の形成に関わる諸事象の実態を明らかにし、学校教育及び家庭教育に資することを目的としたものである。首都圏の高校1,2年生を対象とした質問紙調査の結果概要を以下に述べる(数値は、無回答を含んだ全サンプルに対する比率である)。回答は、男子371名、女子460名、合計841名(性別不明10名)を得た。恋愛についてたずねたところ、「現在好きな人がいる」ものは6割、一方、「現在交際している恋人」がいるものは2割強であった。異性に恋愛感情を持ったことがあるものは約9割、同性に恋愛感情を持ったことがあるものは2.4%である。性行動について、キスの経験があるものは6割、性交経験があるものは3割であった。また、性規範や性の神話など、性意識についてたずねたところ、「結婚するまでは、性交すべきではない」と考えるものは約1割、「愛し合っているなら、結婚していない間柄でも、性交してよい」約7割、「望まない妊娠なら、人工妊娠中絶してよい」3分の1などの結果が得られた。性の知識については「膣外射精は、確実な避妊の方法である」に対して「誤り」と答えたものが45%、「生理(月経)が始まったとき、排卵している」に「誤り」が3割弱、「射精しないでいれば、精子は体内に吸収される」に「正しい」が1割弱であった。性の情報源として多くあげられたのは、友人、テレビ、学校の授業、マンガ・コミックス、月刊誌・週刊誌の順である。学校での性教育が役に立つと思うものは6割であった。性被害についてもたずねたところ、女子の3分の2が「痴漢」にあったことがあり、4割強が裸や性器を見せられた経験がある。本研究は、現代青年の性(sexuality)の形成に関わる諸事象の実態を明らかにし、学校教育および家庭教育に資することを目的とする。調査方法として、高校生を対象とする質問紙調査をとり、現在、実施・分析中である。調査項目は、性役割観、性規範・性意識および性行動、学校で受けた性教育内容、マス・メディア等の性情報の受容・認識の様態、メディアを使用したコミュニケーション状況、将来展望を含めた生活意識や価値観、学校・家族・友人関係といった、性の形成に関わる環境要因であり、以上を包括的に検討している。先行研究によって9割を越える高校生が「学校では性教育を受けたことがある」と認識していることが明らかになっているが、その主要な教科には、保健体育と家庭科が考えられる。そこで調査と並行して高等学校家庭科の教科書(家庭一般、主要4社6冊)の内容分析を行ったところ、保育の領域において、精通現象や月経などの二次性徴、結婚、妊娠・分娩・産褥、家族計画・避妊(受胎調節)・人工妊娠中絶について言及されていた。(1冊のみ、二次性徴に触れられていない)。人工妊娠中絶に関わって、全冊、優生保護法に触れられている一方、避妊の方法について具体的に掲載されていたのは2冊にすぎなかった。性的行為の当事者という点では、高校生に対してきわめて慎重な態度を示しているといえる。家庭科の教科書においては、以上の記述は基本的に「保育」につながるよう構成されているので、性(sexuality)に関わって、それ以上多様な言及はほとんどなされていないものの、なかには「性の商品化」に触れた教科書もあった。また、「結婚・出産を通して家族を形成する」というライフ・スタイル以外について記述した教科書もみられた。
企業・教育・福祉が一体となった障害者就労支援の農業福祉モデル構築と支援者養成

<研究1>小規模作業所の設立背景と実際の活動を,M-GTAにより分析を試みた.その結果,支援者の"活動の原動力"として【ひきよせ】【つなぎ】【ゆらぎ】【シナリオ】が浮上した.<研究2>進路指導教員及び企業管理職の抱く「就労支援」イメージを把握するため,PAC分析を行った。その結果,教員は,《センシティビティ》《寄り添い》《自己研鑽》,一方,企業管理職は≪行動力≫≪支え≫≪相互有益≫という認知的枠組みが確認された.<研究1>小規模作業所の設立背景と実際の活動を,M-GTAにより分析を試みた.その結果,支援者の"活動の原動力"として【ひきよせ】【つなぎ】【ゆらぎ】【シナリオ】が浮上した.<研究2>進路指導教員及び企業管理職の抱く「就労支援」イメージを把握するため,PAC分析を行った。その結果,教員は,《センシティビティ》《寄り添い》《自己研鑽》,一方,企業管理職は≪行動力≫≪支え≫≪相互有益≫という認知的枠組みが確認された.本研究は、知的障害者を中心として独自の歩みを続けている小規模作業所「あさひのあたる家」について、その設立に至るまでの背景と実際の活動を分析し、制度的、財政的なバックアップの少ない作業所が、どのようにして立ち上がり、維持、運営されているのかというひとつの道標を提示することができた。その結果、作業所設立の動機づけとして、【保護者の願い】【卒業生の行き場のなさ】【解雇・リストラの対応】【中継地点】【会社側のプレッシャー】【ヒューマニズム】【先導者の存在】が明らかとなった。また、小規模作業所の設立や運営を維持していくためには、支援者の根強い力と気持ち、行動力が求められる。行き場を失った卒業生にとって、「仲間と共に働く」という、私たちにとっては当たり前とされがちな活動に生きがいを見出し、生活の再スタートを切っていく姿は、支援者の継続的なサポートの原動力にもつながっている。地域の人々や関係企業などは、常に、学校や保護者、子どもたちの動きにも着目していることが明らかとなった。設立に至る過程では、「やれるわけがない」「何を素人集団がやっているのか」「すぐにやめてしまうだろう」などの声もよく受けていた。それだけ、この設立に関わった者たちは、何も知らない、分からないところからスタートをしている。ただ、ひたすらに、子どもたちの生活や労働を求め、紆余曲折しながらも、前向きに活動している姿が、一人、また、一人と協賛者、協働者を呼び寄せることが証明されたとも考えられる。支援者同士でありながら、足の引っ張り合いをしたり、保護者間の関係性を調整することができずに、仲間を失っていくこともあった。利用者が増えてくるにしたがい、保護者間の調整もより必要となり、支援者の輪が広がるとともに、それらをうまくコーディネートしていくことも求められる。小規模作業所が本来持っていた利点やまとまりに課題も出てきているが、常に、作業所の設立と目的の原点に立ち返って、一つひとつの課題を紐解いていかなくてはならない。本年度の研究では農業福祉を主体とした活動に関与している地域企業に焦点を当ててフィールドワーク調査を実施してきた。昨年度に得られたデータをも加えながら、今回は、質的データを量的データに変換しつつ、より実証的根拠のある理論を形成していくための基礎データ作りを中心に研究を進めてきた。その方法論としては、<研究1>フィールドワークで得られたデータをQSR社の質的データ分析ソフトNUDIST VIVO,ver.8(以下,NVivo.8)と富士通FIBシステムズ社のテキスト型データ解析ソフトWord Minerを併用して,Data Miningを行い,新しい情報の再発見,統合化とデータの可視化を行なった。また,<研究2>として農業福祉を支えている地域企業の管理職、福祉作業所代表、特別支援学校進路担当教員に対してインタビューを実施し、障害者の農業福祉活動を促進していくために必要な要因を浮上させていくという枠組みから,その手立てとして,個人の主観的構造を把握していくためのツールであるPAC(Personal Attitude Construct;個人別態度構造)分析を用いて「農業福祉を支えるための視点」を集約しようとしてきた。なお,上記二つの研究は,これまでに得られた質的データにおける結果に加え、テキストデータの「数量化」と「視覚化」という強みをもっており,今後進めていく予定の、農業福祉を支える人材やボランティアづくりに向けた活動の根拠資料となりうると考えている。研究のプロセスは、第1段階:大量のデータからノイズを取り除いてパターンを見出していく、第2段階:発見された数種のパターンから隠れた法則を見つけ出していく、第3段階:見出された法則の中から,価値,有用性のあるものをたぐり寄せていく、第4段階:法則性について,再度,ローデータにも立ち返りながら,根拠ある解釈を行なっていく.という流れでデータ処理を行なっていった。現在は、まだ、データの分析途上であり、ここで得られた結果を用いながら、最終的な障害者の農業福祉促進に向けたモデル構築と支援者養成のあり方について検討を行なっていく本年度も、農業福祉・地域福祉を主体とした活動に関与している地域企業や福祉施設および関連団体に焦点を当ててフィールドワーク調査を実施した。昨年度に得られたデータをも加えながら、質的データの整理を行い、さらに、質的データを量的データに変換しつつ、より実証的根拠のある理論を形成していくための基礎データ作りを中心に研究を進めた。

その方法論としては<研究1>フィールドワークで得られたデータをQSR社の質的データ分析ソフトNUDIST Vivo, Ver.8(以下,NVivo.8)と富士通FIBシステムズ社のテキスト型データ解析ソフトWord Minerを併用して,Data Miningを行い,新しい情報の再発見,統合化とデータの可視化を継続して行なった。.また<研究2>として,農業福祉を支えている地域企業の管理職、福祉作業所代表、特別支援学校進路担当教員に対してインタビューを実施し、障害者の農業福祉活動を促進していくために必要な要因を浮上させていくという枠組みから,その手立てとして,個人の主観的構造を把握していくためのツールであるPAC(Personal Attitude Construct;個人別態度構造)分析を用いて「農業福祉を支えるための視点」を集約した。なお,上記二つの研究は,これまでに得られた質的データにおける結果に加え、テキストデータの「数量化」と「視覚化」という強みをもっており,今後進めていく予定の、農業福祉を支える人材育成に向けた活動の根拠資料となった。一方、新たに<研究3>として、地域に根差した活動を継続している小規模作業所についての研究を深めていくことを目的として、M-GTAを援用しながら、支援者の活動の原動力に関する分析を行った。その結果、作業所活動を支えている支援者の意識構造として、「ひきよせ」「つなぎ」「ゆらぎ」「シナリオ」の四要因を浮上させることができた。本年度から、他大学に異動となったため、ボランティア養成に向けた取り組みが十分実施できなかった。また、各実践現場におけるフィールドワーク調査で得られた膨大な質的データの量的データへの変換に時間を要しているため、本研究は、やや遅れていると感じている。データ処理を迅速に行なっていきたいと考えている。24年度が最終年度であるため、記入しない。研究調査で得られたデータを迅速に処理し、この結果に基づいた理論構築を図らなくてはならない。本研究で得られたデータの迅速な処理のために、当時は想定していなかったデータ処理ソフトの追加がいくつか必要となり、予算的にも厳しい状況下で研究を遂行している。また、実際の現場における研究者自身のフィールドワーク活動が予定していたよりも、若干、日数と時間を要しており、より計画的に調査を遂行したいと考えている。また、研究経過報告や学会発表、共同研究者との打ち合わせ等も時間と費用を要している。最終的には、障害者における農業福祉モデルの構築を目指していくとともに、その活動に不可欠な支援者養成に向けた取り組みの準備段階までは研究を遂行したいと考えている。
真空紫外円二色性による蛋白質構造解析の新展開

広島大学放射光科学研究センターで開発した真空紫外円二色性(VUVCD)分散計を用い,蛋白質の二次構造解析入の有用性を検討した。1.変性蛋白質の構造解析:metmyoglobin, thioredoxin, staphylococcal nucleaseの酸・熱・低温変性状態のVUVCDスペクトルを172nmまで測定し,塩酸グアニジン変性状態との比較からこれら変性状態においても多くの二次構造が保持されていることを明らかにした。また,種々の濃度のトリフルオロエタノールとメタノール水溶液中では,70%以上のα-ヘリックが形成されており,アルコール変性は他の変性構造と大きく異なることがわかった。2.アミノ酸配列レベルでの二次構造予測:30種類のタンパク質のVUVCDから得られたα-ヘリックスとβ-ストランドの含有率と本数をNeural-Network法に組み込むことにより,各二次構造部位の予測精度が大きく改善(75%)できることを見出した。3.蛋白質・脂質相互作用系の解析:α_1-acid-glycoproteinとリン脂質の相互作用により,α-ヘリックスは11%(2本)から50%(7本)に,β-ストランドは40%(11本)から10%(4本)へと変化し,これらの構造変化は主としてリガンド結合部位で起こっていることを明らかにした。4.蛋白質・蛋白質相互作用系(アミロイド)の解析:β_2-microglobulinとその2本の断片ペプチド(#21-31・#21-29)のVUVCDスペクトルを175nmまで測定し,アミロイド形成によりβ-シート構造が増加することを明らかにした。現在,R.W.Woody教授(海外研究協力者)とともに,詳細な二次構造の理論解析を行なっている。以上の結果から,VUVCD分光法が蛋白質の二次構造解析に,新規で詳細な情報をもたらすことがわかった。広島大学放射光科学研究センターの真空紫外円二色性(VUVCD)分散計を用い,変性タンパク質のVUVCDスペクトルを測定し、VUVCD分光法による変性タンパク質構造解析への有用性を検討した。また、VUVCD分光法にアミノ酸配列情報を組み込み、残基レベルで二次構造解析が可能な新規構造解析プログラムの開発を行った。3種類のタンパク質(metmyoglobin・thioredoxin・staphylococcal nuclease)の酸・熱・低温変性状態のVUVCDスペクトルを172nmまで測定し、塩酸グアニジン変性状態との比較からこれら変性状態においても多くの二次構造が保持されていることが分かった。31種類の天然タンパク質のVUVCDスペクトルを参照データとし、プログラムSEL,CON3で二次構造解析をした結果、天然状態に比べHelixは減少、Strand・PPII・Unorderedは増加することが確認された。また、これらの変性状態には、水素結合を持たないStrand構造が多く存在していることが明らかとなった。アミノ酸配列からの二次構造予測にはChou-Fasman(CF)法とNeural-Network(NN)法を用い、またPDBデータからの二次構造の帰属にはDSSP法を用いた。30種類の基底タンパク質に対してアミノ酸配列から二次構造(α-helix,β-strand,other)を予測した結果、CF法のみでは予測精度が53%程度であったが、VUVCDからのタンパク質のα-helixとβ-strand含有率の情報を加えることで59%まで上昇した。同様にNN法では、VUVCDからの二次構造含有率と本数の導入により、予測精度が60%から65%まで改善された。さらに、NN法と多重アラインメントを組み合わせた場合では、予測精度は70%から72%に向上した。

以上の結果から、VUVCD分光法が、タンパク質の構造解析に対して有効であることが示された。広島大学放射光科学研究センターの真空紫外円二色性(VUVCD)分散計を用い,以下の3点について研究した。[1]蛋白質・脂質相互作用系の解析:α_1-acid-glycoprotein (AGP)とリン脂質の相互作用を調べた。AGPはリン脂質との混合によりα-ヘリックスは11%(2本)から50%(7本)に,β-ストランドは40%(11本)から10%(4本)へと変化し,脂質との相互作用により大きな二次構造変化が誘起されることがわかった。さらに,昨年度開発したニューラルネットワーク法により二次構造部位を予測した結果,これらの構造変化は主としてリガンド結合部位で起こっており,構造と機能との関係について重要な知見が得られた。[2]アルコール変性状態の構造解析:6種の蛋白質のVUVCDスペクトルを,種々の濃度のトリフルオロエタノール(TFE)とメタノール(MeOH)水溶液中で170nmまで測定した。すべての蛋白質で70%以上のα-ヘリックが形成されているものの,MeOH中では蛋白質によってはβ-ストランドが20%程度形成されており,アルコール変性は他の変性構造と大きく異なることがわかった。[3]蛋白質・蛋白質系(アミロイド構造)の解析:β_2-microglobulin (β2-m)とその2本の断片ペプチド(#21-31・#21-29)をアミロイド化した後,175nmまでVUVCDスペクトル測定した結果,β-シート構造の形成が観察された。現在,海外研究協力者であるR.W. Woody教授とともに,詳細な二次構造解析を行なっている。これらの結果は,VUVCD分光法が蛋白質構造解析に対して有用な情報を提供することを示している。
ストレス応答としての瞳孔散大反応の有用性とそのメカニズムの解明

歯科治療はストレスを伴う。本研究は、ストレスマーカーである唾液中ホルモンと麻酔深度のパラメーターである瞳孔を組み合わせたものである。つまり唾液中αアミラーゼなどを用い、cold pressor testでのストレス負荷により生じる瞳孔散大反応(PDR)が、単なる交感神経反射か?あるいはより中枢レベルの反射なのか?のメカニズムを解明することを本研究の目的とした。その結果、唾液中のαアミラーゼは刺激直後に上昇し、コルチゾールは刺激1012分あるいは2022分に上昇した。交感神経の上昇は、負荷開始3060秒前後にみられた。瞳孔散大はそのピークが、負荷3060秒後にみられる傾向にあった。本研究は、自律神経-副腎髄質系ストレスマーカーとして注目されている唾液中αアミラーゼと、麻酔深度のパラメーターとして用いられてきた瞳孔という極めてユニークな指標を組み合わせたものである。つまり、ストレス負荷時のαアミラーゼとストレス刺激により生じる瞳孔散大反応との関係を調べることで、瞳孔散大反応が、1.ストレス反応の指標として有用かどうか?2.刺激により生じる瞳孔散大反応が、単なる交感神経反射なのか?あるいはより中枢レベルの反射なのか?のメカニズムを解明することを本研究の目的にしている。具体的には、cold pressor testを痛みを伴うストレス刺激(tonic pain)を与え、ストレス前、ストレス時およびストレス後の唾液中のαアミラーゼおよびコルチゾールを測定し、瞳孔散大反応との関係を検討する。同時に、痛みの程度、血中ノルアドレナリン濃度、心拍変動(心拍ゆらぎ)、血圧、脈拍を測定する。当該年度(平成24年度)は、「瞳孔散大反応のストレス応答としての有用性」をテーマに行った。具体的には、30名の健康成人を対象に、点滴を確保し、コットンロールを噛ませ、唾液を採取した。同時に瞳孔径、心拍変動、血圧、脈拍を測定した。さらにノルエピネフリン測定のための採血も行った。唾液の採取は、ストレス時、ストレス後13分、57分後、1012分後、その後も刺激開始から30分まで行った。その結果、αアミラーゼは刺激直後(刺激後13分)にピークを示したが、コルチゾールは、刺激後1012分後にピークを示した。つまり、ストレス負荷時のαアミラーゼとストレス刺激により生じる瞳孔散大反応を調べることで、ストレス刺激により生じる瞳孔散大反応が、単なる交感神経反射なのか?あるいはより中枢レベルの反射なのか?のメカニズムを解明することを本研究の目的としている。被験者は、健康成人とした。具体的には、ストレス刺激として、cold pressortestにより生じるtonic painを用い、ストレス前、ストレス時およびストレス後の唾液中のαアミラーゼおよびコルチゾールを測定し、瞳孔散大反応との関係を検討した。同時に痛みの程度、心拍変動(心拍ゆらぎ)、血圧、脈拍等を測定した。最終年度は、総合的に全てのパラメーターを測定した。つまり、被験者を安静にさせた後、自律神経反射を測定するために、心電図を装着させ、心拍変動を測定した。その後、コットンロールを噛ませ唾液を採取した。同時に瞳孔径等を測定した。これらコントロール値の測定後、ストレッサーとしてcold pressortestを2分間行った。唾液の採取は、ストレス時,ストレス後13分、1012分、2022分、3032分の計6回行った。その結果、αアミラーゼは、刺激直後に上昇、コルチゾールは1012分あるいは2022分に上昇した。心拍変動に関しては、ストレス時、特にcold pressor test開始後30秒60秒前後に交感神経有意な状態になった。瞳孔散大反応は、cold pressortest開始直後より増加し始めたが、そのピークは3060秒にみられる傾向にあった。本研究は、自律神経ー副腎髄質系ストレスマーカーとして注目されている唾液中αアミラーゼと、麻酔深度のパラメーターとして用いられてきた瞳孔という極めてユニークな指標を組み合わせたものである。つまり、ストレス負荷時のαアミラーゼとストレス刺激により生じる瞳孔散大反応との関係を調べることで、瞳孔散大反応が、1.ストレス反応の指標として有用かどうか?2.刺激により生じる瞳孔散大反応が、単なる交感神経反射なのか?あるいはより中枢レベルの反射なのか?のメカニズムを解明することを本研究の目的としている。

具体的には、cold pressor testという痛みを伴うストレス刺激(tonic pain)を与え、ストレス前、ストレス時およびストレス後の唾液中のαアミラーゼおよびコルチゾールを測定し、瞳孔散大反応との関係を検討する。同時に、痛みの程度、血中のノルアドレナリン濃度、心拍変動(心拍ゆらぎ)、血圧、脈拍を測定する。当該年度(平成23年度)は、cold pressortestを用いたαアミラーゼの時間的推移を測定し、既存のシステムを調整する計画を立案した。方法として、10名以上の健康成人を被験者とし、4°Cのアイスパットに3分手首を浸すcoldpressortestを施行しストレスを与えた。その結果、αアミラーゼ濃度は、刺激直後(刺激後13分)にピーク値を示したが、刺激後5分には刺激前値に戻った。一方、コルチゾール値は、刺激後57分で増加し始め、刺激後1012分でも有意に上昇した。しかし、刺激後30分では刺激前値に戻った。これらストレスホルモンの経時的変化を前もって知っておくことで、既存のシステムのを調整することが可能となり、研究遂行をスムーズに行うにあたり、極めて重要となる。本年度の当該年度(平成24年度)の研究は、「瞳孔散大反応のストレス応答としての有用性」をテーマに行った。具体的には、30名の健康成人を対象に、刺激開始から30分まで、αアミラーゼ、コルチゾール、心拍ゆらぎ、行った。その結果、αアミラーゼは刺激直後(刺激後13分)にピークを示したが、コルチゾールは、刺激後1012分後にピークを示した。また、cold pressor test時に、痛みを訴え、また血圧、脈拍も上昇、増加した。本研究は、最終的には痛みの客観的測定、自律神経反射の測定、ノルエピネフリンの測定などのパラメーターを用いるが、自律神経反射の測定、ノルエピネフリンのデータがまだ十分でない。しかしそれ以外は極めて順調に進んでいる。本研究の当該年度(平成23年度)の研究計画は、cold pressortestを用いたαアミラーゼの時間的推移の検討であった。具体的には、4°Cのアイスパットに3分手首を浸すcoldpressortestを施行しストレスを与え、ストレス前、中、後のコルチゾールおよびαアミラーゼの変化を測定し、既存のシステムを調整することにあった。本研究は、最終的には、痛みの客観的測定、自律神経反射の測定、ノルエピネフリンの測定など、様々なパラメーターを用いる。中でも、2つのストレスホルモンのストレスによる経時的変化を前もって把握しておくことは、瞳孔測定の既存システムを含めた全システムを調整する上で大変重要なことを意味する。このことから、順調に進展していると断言できる。平成25年度は、本研究の最終年度にあたる。被験者約30名を用い、唾液を用いたαアミラーゼ、コルチゾールの測定、Visual Analogue Scaleを用いた痛みの測定、ノルエピネフリンの測定、自律神経反射の測定、バイタルサインの測定を行う。被験者30名のデータ採取が修了後、平成24年度のデータ約30名分とあわせて分析に入る。この中で、自律神経反射の測定は、唾液中のストレスホルモンとの関連性を検討することが難しい場合、最終的にデータとして採用しない予定である。
三次元多様体のオープンブック分解からみた結び目の負値性

三次元球面に埋め込まれた円周を結び目といい、埋め込まれた円周がいくつかあるときは絡み目という。任意の向きづけられたコンパクト3次元多様体は適切な絡み目をその多様体から除くことで、円周上のある曲面束の構造を持つ。これをオープンブック分解という。オープンブック分解が与えられたとき、あるファイバーを一つ固定し、その境界にバンドを取り付けると新しい曲面が得られる。特に、各バンドがそれぞれ異なるファイバーの上に乗っているとき、できる曲面をフラットプラミングバスケットという。例えば、三次元球面から何も結ばっていない結び目を除くと残りはソリッドトーラス(中身の詰まったトーラス)となるので、これは一つのオープンブック分解を与える。これをディスクオープンブックという。ディスクオープンブックのファイバーはディスクである。Furihata-Hirasawa-Kobayashiによりどんな絡み目もあるディスクオープンブックのフラットプラミングバスケットの境界として実現できることが示されている。そこで興味の対象となるのが、与えられた絡み目に対し、その絡み目を境界に持つフラットプラミングバスケットのバンドの数の最小値はどのように求めればよいか、という問題である。その最小値をフラットプラミングバスケット数と呼ぶ。本研究では、フラットプラミングバスケット数と、対応するオープンブック分解から定まる三次元多様体の接触構造の関係を記述することを目標とする。当該年度は研究の基盤となる、フラットプラミングバスケット数と絡み目の最大自己絡み数に関する不等式(sl-fpbk不等式)の完成を目指した。本研究申請段階で証明の目処は立っていたが、その後、より簡潔かつ図式的な証明に修正することができた。さらに、いくつかの結び目のクラスについてはこの不等式を使ってフラットプラミングバスケット数を決定できた。現在までの研究により、sl-fpbk不等式の証明の簡略化を与えることができた。さらに、トーラス絡み目についてsl-fpbk不等式からフラットプラミングバスケット数を決定できた。しかしながら、当初の目標の一つであった、強擬負絡み目についてsl-fpbk不等式の等号が成立するかという問題については、12交点までの結び目については正しいことが確かめられたが、一般に正しいかについては未解決である。もう一つの目標であった、一般のオープンブック分解に関するsl-fpbk不等式については、証明の方針は立っているが、技術的に難しい点があるため、今のところ証明には至っていない。以上の理由により、現在までの進捗状況はやや遅れている。今後の研究の推進方策として、まずは基盤となるsl-fpbk不等式に関する最初の論文の出版を目指す。また、強擬負性がsl-fpbk不等式の等号を誘導するか、という問題については交点数が少ないところでは反例が見つからなかったため、より大きな交点数を持つ強擬負結び目について考察を行う。その際に、実際にフラットプラミングバスケットを構成する必要があるため、より少ないバンド数でフラットプラミングバスケットを構成するテクニックの開発も同時進行で行う。また、フラットプラミングバスケット数を実現するフラットプラミングバスケットを村杉和分解したときに、各因子が再びフラットプラミングバスケット数を実現するか、という加法性に関する問題についても取り組む。

今後の研究の推進方策として、まずは基盤となるsl-fpbk不等式に関する最初の論文の出版を目指す。また、強擬負性がsl-fpbk不等式の等号を誘導するか、という問題については交点数が少ないところでは反例が見つからなかったため、より大きな交点数を持つ強擬負結び目について考察を行う。その際に、実際にフラットプラミングバスケットを構成する必要があるため、より少ないバンド数でフラットプラミングバスケットを構成するテクニックの開発も同時進行で行う。また、フラットプラミングバスケット数を実現するフラットプラミングバスケットを村杉和分解したときに、各因子が再びフラットプラミングバスケット数を実現するか、という加法性に関する問題についても取り組む。所属研究機関の変更に伴う私事により、年度末に予定していた出張を取りやめたため使用額が予定額を下回った。次年度使用額は、新所属機関でのプリンタおよびパソコン周辺機器の購入に充てる。
超音波を用いた結晶構造がもつカイラリティとフラストレーションによる多極子物性研究

近年,多極子が重要な役割を果たす多彩な物理が国内外で研究されている。ここで,スピンの研究ではカイラリティ(対掌性)や幾何学的フラストレーションなどの結晶構造がもつ特異性に起因した新奇な物理現象が明らかになっているが,多極子においては必ずしも解明されていない。本申請者は多極子による電子状態に富む,結晶構造のカイラリティや幾何学的フラストレーションをもつ物質群を見出した。本研究では,多極子の一つである電気四極子の良いプローブである超音波実験を駆使して系統的な研究を行い,電気四極子のカイラルらせん秩序や電気四極子のゆらぎに起因した量子臨界現象の有無の解明を行う。
生涯発達から見る、乳がん女性が構築する「乳房喪失」の意味

本研究は、乳がんsurvlvorsの生活世界に即した声から、経験のありのままを明らかすることで、家族やパートナー、医療者ひいては社会一般がsurvivorsへの理解を深めることを促すと考える。乳がん治療を受ける当事者・sirvivors・家族は、医療ケア、雇用、日常生活全般、セクシュアリティなど人生全般にわたる多くの課題を持っている。しかし、現時点ではボディイメージに係る課題に焦点があてられることが多い。そのために、本研究は乳房の一部または全部の切除手術を受けようとする、または受けた女性の語りを手がかりに、「乳房喪失」という事実が乳がんsurvivorsにどのような意味を持つのか、生涯発達点から明らかにしようとするものである。乳がんのために乳房を切除せざるを得なかった女性を対象として、非構成的インタビューを実施した。手術前後1週間(計2週間)、退院後初回・2回目の外来通院時なのど、時期を設定しおこなった。(1)「乳房喪失」という体験にどのような意味付与をおこなったか、また、(2)その意味付与の過程はどのようであったか、(3)それらには何らかの共通性が認められるかを明確化することを目的として実施した。(1)については、これまでも、意味付与過程の研究を重ねてきたが、それらの過程をより深く分析するための情報を得ることができ、現在精緻な分析をすすめているところである。また、本研究の一部は、2008年シンガポールにて開催された国際がん看護学会で報告をおこなった。本研究は、乳房の一部または全部の切除手術を受けようとする、または受けた女性の語りを手がかりに、「乳房喪失」という事実が乳がんsurvivorsにどのような意味を持つのかを明らかにすることを目的とした。本研究は質的帰納的研究デザインの研究であり、インタビューと観察を行い、対象の生活世界に即した声から経験の意味づけとその構造を明らかにすることを目指す。経験のありのままを明らかにすることで、家族やパートナー、医療者ひいては社会一般が乳がんsurvivorsへの理解を深めることを促すと考える。初年度である平成18年度は2年目以降への足がかりとして以下の2点に取り組んだ。(1)近接対象への「意味」研究の整理近年、当事者の語りから経験の「意味」を明らかにしようとする研究が増えている。質的帰納的研究デザインによる文献の中で、乳がん患者に類似すると思われる「がん患者」「中途障害者」を対象とした文献(国内)と、乳がん患者を対象とした文献(国内)の傾向を考察した。乳がん患者を対象とした研究では、術式選択の決定要因・心理的経過、術後の心理過程などの分析を行っているものがほとんどで、「乳房喪失」の意味を問うているものはなかった。また、国際がん看護学会発表では、「乳がん罹患や乳房喪失の意味」を文化的差異から明らかにしようとするものが見受けられた。この結果、本研究を日本という文化を背景として行う意義は大きいと再確認された。(2)フィールドワークに入る準備本研究のフィールド調査の計画について、社会学研究者・臨床看護師に協力を得て、研究目的をより明確にするとともに、インタビューガイドの作成、分析視角の設定などを開始した。インタビュー実施を予定する病院に連絡を取り、医師の協力を得て調査方法や対象に関する示唆を得た。協力医師からの支援を得て、フィールドワークに係る病院責任者からの許可を得た。本研究は、乳房の一部または全部の切除手術を受けようとする、または受けた女性の語りを手がかりに、「乳房喪失」という事実が乳がんsurvivorsにどのような意味をもつのかを明らかにすることを目的とした。本研究は質的帰納的デザインの研究であり、インタビューと観察を行い、対象者の生活世界に即した声から経験の意味づけとその構造を明らかにすることを目指す。平成19年度は、これまでの成果を一部発表および、新規インタビューの準備を実施した。(1)発表内容の一部の概要としては、総合病院一般外科で乳房切除術施行後、初回の化学療法のために入院している女性6名を対象とした。McAdamsのライフストーリー法を参考に半構成的インタビューを実施した。語りデータをエスノフラフィの分析法を参考としてデータの分析を行った。その結果、乳がん術後女性にとっての「乳房喪失」の意味は、【自己の否定的変化】【一時的苦痛】【立ち向かう対象】【新しい属性】【自己を再吟味すね対象】の5つあることが確認された。さらに、経過とともに意味を変えていくわけではなく、時間とともにいくつもの意味を積み重ねていく、重層構造をもっていることが明らかになった。(2)新規インタビューの準備これまでのインタビュー内容、分析結果を元に、社会学研究者・臨床看護師・医師の協力を得て、インタビューガイドの改訂、分析視角の検討を行った。

乳がんのために乳房を切除せざるを得なかった女性を対象として、非構成的インタビューを実施した。手術前後1週間(計2週間)、退院後初回・2回目の外来通院時なのど、時期を設定しおこなった。(1)「乳房喪失」という体験にどのような意味付与をおこなったか、また、(2)その意味付与の過程はどのようであったか、(3)それらには何らかの共通性が認められるかを明確化することを目的として実施した。(1)については、これまでも、意味付与過程の研究を重ねてきたが、それらの過程をより深く分析するための情報を得ることができ、現在精緻な分析をすすめているところである。また、本研究の一部は、2008年シンガポールにて開催された国際がん看護学会で報告をおこなった。
高歪リン配位子の開環反応を利用した有機遷移金属錯体の多核化法の開発

リン架橋[1]フェロセノファン(1,1'-ferrocenediyl)phenylphosphine(fcppと略)をMnおよびWフラグメントに配位させたCpMn(CO)_2(fcpp)およびW(CO)_5(fcpp)を合成し、これらの錯体に0価の白金錯体(PtL_4:L=PMe_3,PPh_3)を反応させた。Pt上のホスフィンがPMe_3の場合、Pt(PMe_3)_2がフェロセン-リン結合に挿入したホスフィド架橋異核2核錯体が得られた。この錯体は、熱的に安定で配位子交換などの反応性を示さなかった。一方、Pt上のホスフィンがPPh_3の場合、同様の反応が起こるものの、Pt上の立体的込み合いのため2つのPPh_3のうちの1つが脱離した。この空いた配位座をもつ状態は、金属-金属結合と架橋カルボニル結合が形成されることで安定な構造へと変化した。しかしながら、これらの結合は熱的に解裂しやすく、容易にもとのこの空いた配位座をもつ状態に戻るため種々の反応性を示した。Cp(CO)Mn(μ-CO){μ-P(Ph)(C_5H_4FeC_5H_4)}-PtPPh_3とフェニルアセチレンとを反応させるとフェニルアセチレンの活性C-H結合が切断されフェニルエチニル基と水素がそれぞれリン原子とフェロセン基に結合したものが得られた。一方、(OC)_4(PPh_3)W(μ-CO){μ-P(Ph)(C_5H_4FeC_5H_4)}PtPPh_3を加熱するとタングステン上のPPh_3のP-Ph結合が活性化されPhがPPh_3からフェロセン上へと転移するという前例のない反応が見つかった。多核の有機遷移金属錯体は、単核の錯体にない特性をもつため近年注目されている。そこで、目的の多核錯体やポリマー錯体を合成するための汎用性のある素反応を開発することが、重要な課題となってくる。本研究では、リン原子を環に組み込んだ高歪環状フェロセンを用い、開環反応を利用することによって多核化およびポリマー化を行う。本年度は、有機遷移金属錯体ポリマーの合成を中心に研究を進めた。その結果、高歪み環状フェロセンとしてリン架橋[1]フェロセノファン(1,1'-ferrocenediyl)phenyl-phosphine(fcppと略)が、光照射により重合することを見いだした。さらにこれを配位子にもつ錯体Cp(CO)_2Mn(fcpp)および(CO)_5W(fcpp)を合成し、同様に光照射を行うと分子量分布が最大で2万・平均で3000程度のポリマーが得られた。リン架橋[1]フェロセノファンのポリマー化法としては、既にa)熱反応による重合、b)アルキルリチウムを開始剤としたリビングアニオン重合、c)金属錯体触媒を用いた重合が知られていたが、何れの方法も有機遷移金属錯体に配位したリン架橋[1]フェロセノファンには、適用できなかった。本研究では見出した方法は、温和な反応条件でしかも10分間の光照射により反応が完結した。さらに、リン化合物は、配位子として種々の金属錯体に結合することができるので、この反応は、幅広い有機遷移金属錯体に適用可能であると期待できる。