hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
制御性T細胞の機能解析及び同細胞の操作による炎症性腸疾患の新しい治療法の開発

NKT細胞の特異的活性脂質α-galactosylceramideによってNKT細胞を活性化した場合、実験的腸炎を含め自己免疫性能脊髄炎など様々な病態の改善が可能であることが示されている。我々は、α-galactosylceramideをマウスに投与した場合の免疫制御機構を探る目的で、NKT細胞と樹状細胞の相互作用について検討してきた。α-galactosylceramideを単回投与されたマウスでは、樹状細胞の著明な活性化・成熟が起こり、抗原刺激に対してTh1に偏った反応が見られた。一方、α-galact、sylceramideを頻回投与されたマウスでは、樹状細胞の活性化は低減し、Th1分化能も失われていることが判明した。Toll-like receptor4または9からの刺激による樹状細胞からのサイトカイン産生は、α-galactosylceramideの投与形態によって変化しており、頻回投与されたマウスから得られた樹状細胞では、IL-12の産生性が低下し逆に制御性サイトカインの一種であるIL-10の産生性が亢進していた。神経組織抗原を樹状細胞にパルスしたものを接種することによって起こる自己免疫性脳脊髄炎の発症は、後者の樹状細胞投与により有意に抑制された。以上より、NKT細胞の慢性的な活性化は樹状細胞に制御性の変化をもたらし、ひいてはこれが生体の免疫制御に寄与していることが推察された(論文準備中)。また、自然免疫寛容誘導が起こるマウス肝移植にてCD25陽性の制御性T細胞を抗体にて除去する実験を行った。その結果、同寛容誘導にはレシピエント側のCD25陽性制御性T細胞の存在が重要であることが判明した(論文準備中)。以上のような結果から、免疫制御に携わるT細胞の生体における役割を包括的に明らかにしてきた。NKT細胞は、T、B、NK細胞に続く第4のリンパ球とも呼ばれ、最近になってその存在が明らかになった新しい免疫担当細胞である。最近、我々を含めた数グループはNKT細胞が免疫制御細胞(regulatory T細胞)として重要な役割を果たしていることを明らかにした。免疫制御細胞としてはこの他にCD4^+CD25^+T細胞がよく知られている。制御性T細胞の研究は様々な免疫疾患の新しい治療法の開発につながることが期待される。その対象疾患として本研究では炎症性腸疾患(IBD)に着目している。IBDは臨床でしばしば遭遇する、異常免疫反応が関わる難治性疾患である。実際の治療にはステロイドなど免疫抑制剤が使われる他、最近欧米では抗TNF抗体が成果をあげている。しかし現実には内科的・外科的にもコントロール不良な症例が少なからず存在し、次世代の治療法の開発が期待されている。動物実験レベルでは、CD25陰性T細胞の移入によってIBDが発症しCD4^+CD25^+T細胞の同時投与によって完全に抑制できることが知られている。同様に、NKT細胞の活性化によってIBDの制御が可能であるかどうかは興味深い。これらの実験を進め、基礎免疫学的検討に加え、NKT細胞もしくはCD25陽性T細胞の操作による新しいIBDの治療法開発が可能であるかどうか検討するべく、基礎的実験を行った。NKT細胞の特異的リガンドであるαGalCerをマウスに投与すると、抗原提示細胞である樹状細胞(DC)の、phenotypeに変化が起こった。具体的にはヒトplasmacytoid DCのマウスホモログであるB220陽性のDCの数が増え、アロMLRなどにおける抗原提示能が低下することが分かった。NKT細胞による免疫制御のメカニズムの一端を示すものと考えられた。
最新PCR技術とカスタムアレイを用いた胃癌の新規再発予測法の臨床応用

1.Real-time PCR用の酵素キットがhot start Taqを用いたDyNAmo^<TM> HS SYBR GREEN qPCRKitに変更となり、国立がんセンターの108例の洗浄腹水サンプルを用いて、CEAと12の新しい遺伝子について再度Real-time PCRを行い、陽性判定のためのカットオフ値を改めて設定した。正確で客観的な診断系構築のため、感度特異度が最高となる遺伝子の組み合わせを検討し、CEAとA群の5遺伝子、TACSTD1,PRSS4の8遺伝子のうち、3つ以上で検出されたものを陽性とすると、感度93%特異度92%となった。2.Multiplex-RT-PCR法とカスタムアレイによるミニチップアッセイを、CEAと12の新しい遺伝子について、24例の洗浄腹水サンプルで行い、早期胃癌で高頻度に発現を認める3遺伝子を除外した。CEAとA群の5遺伝子、MASPIN,GW112,TACSTD1,PRSS4の10遺伝子に対し、愛知県がんセンターより提供されたサンプルを加えた145例の洗浄腹水サンプルを用いてミニチップアッセイを行った。カットオフ値が容易に設定可能なのはTFF1,TFF2,CK20,FABP1,TACSTD1の5遺伝子であり、2つ以上で陽性となったものを陽性とすると、同時性転移または再発に対し96%の陽性的中率を示した。東大病院にて新たに約120例の洗浄腹水サンプルと約50例の胃癌手術材料を、国立がんセンターにて新たに約500例の洗浄腹水サンプルを採取した。
日高帯, 神居古潭帯および常呂帯の岩石学的構造とテクトニクス

1.地帯構造論(1)日高変成帯は,第三紀に形成された島孤地殻岩石層が水平すべりによってduplexを形成し,さらにそれがdexfral-reverse運動によってもちあがった構造帯である.(2)常呂帯にアルカリ角閃石,アルカリ輝石,ローソン石,アラレ石が発見され,さらに変成分帯がなされ,後期白亜紀の高圧中間群変成帯であることが明らかになった.(3)空知-エゾ帯(神居古潭帯を含む)は先白亜紀オフィオライト(下部空知層群)と,それに堆積したチャートを含む前期白亜紀陸源砕砕岩(上部空知層群),それに整合的な中・後期白亜紀エゾ層群を基本構成体とする白亜紀前弧海盆であり,さらにこれらの一部が高圧型の変成作用を受けた結晶片岩と蛇紋岩の混合体-蛇紋岩メランジーに貫入された構造帯である.(4)日高帯の一部は,空知-エゾ帯の外側(東側)に形成された後期白亜紀付加帯である.2.岩石成因論,(1)日高変成帯におけるP-T-t-Dpathの解析がなされ4段階の発展史が明らかになった.(2)神居古潭帯結晶片岩についてる帯の変成分帯がなされ, P-Tpathが解析された.(3)常呂帯においてパンペリー石-アルカリ輝石-緑泥石相の存在が提案された.3.テクトニクス,(1)後期白亜紀には現在の北海道周辺に西向きのサブダクションと,東東北向きのサブダクションが起っていた.(2)第三紀初期までには両者のサブダクション帯は収れんし,中間の海洋は消滅した,(3)第三紀EoceneからMiocene初期にかけて日高帯に島弧の火成活動が起った.1.地帯構造論(1)日高変成帯は,第三紀に形成された島孤地殻岩石層が水平すべりによってduplexを形成し,さらにそれがdexfral-reverse運動によってもちあがった構造帯である.(2)常呂帯にアルカリ角閃石,アルカリ輝石,ローソン石,アラレ石が発見され,さらに変成分帯がなされ,後期白亜紀の高圧中間群変成帯であることが明らかになった.(3)空知-エゾ帯(神居古潭帯を含む)は先白亜紀オフィオライト(下部空知層群)と,それに堆積したチャートを含む前期白亜紀陸源砕砕岩(上部空知層群),それに整合的な中・後期白亜紀エゾ層群を基本構成体とする白亜紀前弧海盆であり,さらにこれらの一部が高圧型の変成作用を受けた結晶片岩と蛇紋岩の混合体-蛇紋岩メランジーに貫入された構造帯である.(4)日高帯の一部は,空知-エゾ帯の外側(東側)に形成された後期白亜紀付加帯である.2.岩石成因論,(1)日高変成帯におけるP-T-t-Dpathの解析がなされ4段階の発展史が明らかになった.(2)神居古潭帯結晶片岩についてる帯の変成分帯がなされ, P-Tpathが解析された.(3)常呂帯においてパンペリー石-アルカリ輝石-緑泥石相の存在が提案された.3.テクトニクス,(1)後期白亜紀には現在の北海道周辺に西向きのサブダクションと,東東北向きのサブダクションが起っていた.(2)第三紀初期までには両者のサブダクション帯は収れんし,中間の海洋は消滅した,(3)第三紀EoceneからMiocene初期にかけて日高帯に島弧の火成活動が起った.1.日高変成帯。(1)花こう岩質岩体のへい入深度による4つのグループについて主要元素、微量元素の分析、変成岩包有物とマグロの反応、変成岩母岩とマグマの反応の解析がなされ、へい入深度によってそれらの関係に系統的違いがあることが明らかになった。すなわち中上部不均質トーナル岩は閉緑岩質マグマの分化と変成岩母岩の機械的混合、中部不均質トーナル岩は機械的混合と変成岩包有物の部分溶融による溶液の混合、下部不均質トーナル岩は主として変成岩包有物の部分溶融による溶液の混合によって形成された。(2)日高変成帯-日高島弧地殻の形成と上昇プロセスの解析が進み主要な3つの段階が区別され、各段階の実証的研究がなされた。ア.島弧の衝突による地層の厚化過程(古第三紀初)、イ.島弧火成活動と変成作用(4417Ma)、ウ.地殻の水平すべり移動と低角衝上(1710Ma)、および山脈化(10Ma以降)。2.神居古潭帯。(1)変成作用の解析、ローソン石、緑レン石と共存するパンペリー石の化学組成変化が解析され、詳細な変成分帯がなされた。またヒスイ輝石-石英の組合せをもつ変成岩は蛇紋岩中のブロックとしてのみ産出すること、そのP-T条件と形成過程の解析が進んだ。(2)紋岩メランジ中の変成岩ブロックについて3つのタイプが区分され、その解析から低圧-中圧-高圧の3段階を経ていることが明らかになった。3.北海道中生代の構造帯の時代と形成過程が解析され、西側島弧-

海溝系は前期白亜紀および後期白亜紀付加帯の2帯、東側島弧-海溝系は後期白亜紀付加帯のみよりなること、日高帯には東・亜2つの島弧-海溝系付加帯が構造的に複合していることが明らかにされた。この複合は2つの島弧-海溝系の衝突・接合によるものであり、この時期は古第三紀初期に限定される。
咀嚼リズム発生器のニューロン機構に関する摘出脳幹標本による解析

(1)幼弱モルモット摘出脳幹標本による実験:(方法)エーテル麻酔下で断頭後直ちに4°Cの人工脳脊髄液中に浸漬し、頭蓋骨より脳を摘出する。摘出した脳はその場で上丘、下丘間で除脳、除小脳を行ない、36°Cに温められた飽和酸素脳脊髄液中に均側端を上方に向けて固定する。記録は三叉神経、顔面神経根から単極性に導出した。(結果)錐体路の連続電気刺激により三叉神経および顔面神経よりリズミカルな神経斉射が見られた。このことから、幼弱モルモット摘出標本では、短時間ではあるが、錐体路の連続刺激では咀嚼リズム発生路は脳幹内に存在し、三叉神経および顔面神経の運動ニューロンにそのリズミカルな興奮性出力を送っていることが判明した。しかし、さらにリズム発生に関与する神経機構の存在する延髄網様体ニューロンの活動様式の検索には、長時間のニューロン活生の維持は困難であった。(2)若い成熟モルモットの摘出標本による実験:(方法)体重200250gのモルモットを用いて、ハロセン麻酔下で断頭後直ちに4°Cの人工脳脊髄液中に浸漬し、頭蓋骨から脳を摘出し、直ちに、5%CO_2含有のO_2で飽和させた4°Cの人工脊髄液中に浸漬し、椎骨動脈にカニューレを挿入し、加圧した4°Cの人工脊髄液を灌流させる。後大脳動脈、後交叉動脈結紮後、硬膜を除去し、上丘ー下丘間で除脳し、小脳を除去する。記録用電極凾に固定し、外側および血管内の灌流液は37°Cに温めた人工脊髄液に切換える。〈結果〉三叉神経および顔面神経から、錐体路の連続電気刺激でリズミカルな神経活動が誘発された。顎二腹筋運動ニューロンプールでも、単発刺激および連続刺激に対して、それぞれ潜時8.0msの陰性電場電位とそのリズミカルな変動記録された。延髄巨大細胞網様体からは同様にリズミカルな電場電位の変化が見られたが、これはピクロトキシンの血流内投与によって消失した。現在までの研究は以下に示す様に行なった.1)脳幹摘出標本の作製:生後03日の新生モルモットをハロセンで吸入麻酔したのち脊髄のC_2のレベルで断頭し,ただちに95%O_2,5%Co_2で飽和した人工脳脊髄液で充したdisseceion chamber中に浸漬する.実体顕微鏡下で,頭部腹側部を上方にむけて,皮慮の端を虫ピンで固定する.次に下顎骨を除去し,三又神経,顔面神経,舌下神経に注意しながら,脳頭蓋底を銑刀で除去する.次いて側方の骨も除去し,三又神経,顔面神経,舌下神経を少なくとも2ー4mm残す様にする.ついで,頭蓋骨をすべて除去し,全体を取り出し,上丘の上編で除脳し,ただちに,記録用chamberに,脳幹底を上方に向けて,上丘と脊髄を虫ピンで,記録用,chamberの底のシリコンゴムに固定する.2)刺激および記録方法:刺激はタングステン電極を用いて,側から錐体路を片側柱に刺激する.

IN VIVOでは咀嚼リズムを話発する錐体路刺激の条件と同じ30Hz100μs巾のパルスを与えた.記録は三又神経,顔面神経,舌下神経からの神経放電を吸引電極を用いて記録した.3)実験結果:実験用chamberに移してから約15分後に記録を開始した.三つの神経から約40分間Tonicな放電が出現し,錐体路刺激による試発電位は記録出来なかった.しかし約90分後からこの自発放電も少なくなりその結果試発電位が記録された.その潜時は三又神経で約8ms,顔面神経で8.5ms,舌下神経で約8.5msであった.次いで,30Hzの高頻度で錐体路を刺激すると,自発放電に重響して,リズミカルな神経放電が記録された.この様な神経放電は約手術后4時間程観察された.今后この様本を本にして,顎運動のリズム発生に関与する神経機構を切断,記録,刺激,破壊の手法を用いて研索していく.幼弱ラット(生後2日以内)での摘出脳幹標本による咀嚼リズム発生器の神経機構の検索は、脳幹そのものが、ラットと比較してかなり大きいため、ニューロンの活動性を長時間維持することは困難であった。このため細胞内記録までの時間が制限されることになり、結果としては能率の低いものであった。そこで、今年度は200250gの若い成熟モルモットの脳幹摘出標本を用いて、外液の潅流ばかりでなく、椎骨動脈から加圧によって潅流液を注入することで、ニューロン活性を幼弱ラットとほぼ同程度に保つことが可能となった。以下に標本の作製方法と結果を示す。〈標本作製〉ハロセン吸入麻酔下で断頭し、直ちに、4°C灌流液中に浸漬し、脳全体を摘出する。摘出した脳は5%Co_2混入のO_2を通過させた4°Cに冷却した灌流液中に移し、椎骨動脈にカニューレを挿入し、加圧により動脈内灌流を行なう、直に硬膜を刹離し、後大脳動脈、後交連動脈を結糺し、小脳を除去するとともに、小脳静脈を解放する。その後、上丘、下丘間で切断して、記録用電極凾に〓側切断面を上にむけて設置する。外液および血管内灌流液は34°Cに温められてから供給される。〈結果〉錐体路の連続電気刺激により顎=腹筋運動ニューロンプールから、その単発刺激では約8.5msの陰性電場電位を記録され、30Hzの高頻度連続刺激では、リズミカルな電場電位の変化が見られた。この結果は、inbiboで大脳皮質の連続刺激で誘発される顎=腹筋運動ニューロンプールの電場電位に一致している。さらに、巨大細胞網様核〓側部に於ける電場電位の記録は同様にリズミカルな電位変動を示したが、ピクロトキシンを灌流液中に投与すると、これらのリズミカルな変動は停止した。
多様体の幾何学的諸構造と関連分野の総合的研究

今年度の研究項目は、1.変換群および低次元多様体の位相幾何学的諸性質についての研究、2.多様体上の力学系の諸性質の解明、3.代数多様体上の微分作用子環の研究と表現論への応用についての研究、の3項目であった。1について、内田は、球面上に実解析的に働く非コンパクトリイ群の作用(これをtwisted linear actionと名付けた)に関する研究を行い、寡零リイ群の場合に、半単純リイ群の場合と異なる様相を呈する作用の系列を発見した。大池はtwisted linear actionと名付けた作用が、複素射影空間および複素グラスマン多様体に対しても、球面の場合と同様に定義できることを示し、その作用について研究した。両者の研究成果は一部が印刷発表された。2について、仲田は、フックス群の極限集合の上への作用を推移力学系で表現し、極限集合のハウスドルフ次元を評価する研究について学会発表を行った。諸沢は、上記ハウスドルフ次元の評価をフックス群のポアンカレ級数の収束指数の評価に応用した。井伊は吉岡朗と共同でsymplectic多様体上のsymplecticな一径数変換群による軌道の振舞いについて成果をあげた。河村は、位相力学系の相空間の状態が、非可換な構造を持つC^*一環にいかに拡大されていくかを調べた。佐藤は、コンパクト非可換群上の測度のLpマルチプライヤ-空間におけるスペクトルについての成果を得た。中里は、寡零リイ群上の楕円型微分作用素の生成する一径数半群および、対応する熱方程式の基本解について成果を上げた。いずれも印刷発表予定である。3について、福田は、実2次体のλ-不変量を総虚代数体のλ-不変量と関連付けて研究し、成果を印刷発表した。
重い電子系における圧力誘起量子現象の中性子散乱による研究

この研究課題は、重い電子系物質で顕著にみられる、圧力によって誘起される種々の磁気的量子現象を中性子散乱の手法で研究しようとするものである。そのために、2002年度までに、希釈冷凍機組み込み用小型セルを開発し、2トンの応力を付加できる非クランプ型の一軸応力、静水圧装置を完成した。内径3mmの圧力セルでの到達圧力は約3GPaである。1軸応力装置を用いた実験ではURu2Si2の圧力による反強磁性誘起には強い異方性があること、及び一軸応力の変化に対して誘起モーメントに履歴現象を伴うことが明らかになった。これは、非Kramers基底二重項を持つこの物質の、反強磁性と軌道秩序の共存に関する重要な情報である。また、Ce(Ru,Rh)2Si2のSi→Ge置換した系でSDWの静水圧応答を調べた結果、準粒子型秩序から局在電子型秩序へのクロスニオーバーと考えられる顕著な磁気モーメントと転移温度の変化を初めて観測することが出来た。2002年度は、荷重制御装置を附加するなど、装置の改善を進めながら、前年度に引き続き、Ce(Ru,Rh)2Si2のSi→Ge置換系の波数ベクトルの圧力効果など詳しい実験を重ねた結果、外部圧力と化学圧力の組み合わせにより、よい準粒子バンド磁性を示す領域と、局在スピン磁性を示す領域が明瞭に分離されることを確認した。重い電子系で、このような磁性の遷移が確認されたのは初めてであり、我々が従来持っていた量子臨界領域での磁気秩序の性質に関する仮説(良い準粒子バンドの中に発生する秩序がいわゆる徴少モーメント秩序の起源であり、また量子臨界点付近で残存する局在生が非フェルミ液体現象を決定する)の一部を証明できた。そのために、いくつかのタイプの高圧装置を開発製作することが必要になる。これまで、次の二つのタイプの高圧セルの製作を試み、一つは実用に、もう一つはテスト段階に到達している。1.希釈冷凍機組込用小型セルHe3/He4希釈冷凍機に組み込んで、mK低温領域で使用するための直径約10mmの小型圧力セルを試作し、15kbarまでの弾性散乱実験に用いて、いくつかの物質系で成果を得た。2.非クランプ型高圧クライオスタット」従来の高圧下での中性子散乱実験に用いられている、クランプ型高圧セルを改良して、クライオスタットの中に圧力セルを入れたまま外部からの操作によって圧力をコントロール出来る装置について、クライオスタット、熱アンカー用冷凍機の導入を終了し、他の主な部分の製作も終了して、現在組み立て、一部テストを実行中である。今年度内に装置を完成させる予定。この研究課題は、重い電子系物質で顕薯にみられる、圧力によって誘起される種々の磁気的量子現象を中性子散乱の手法で研究しようとするものである。そのために、初年度(2000年度)には、希釈冷凍機組み込み用小型セルを開発した。2001年度は、2トンの応力を付加できる非クランプ型の一軸応力、静水圧装置を完成した。内径3mmの圧力セルでの到達圧力は3GPaである。

また、Ce(Ru, Rh)2Si2のSi→Ge置換した系でSDWの静水圧応答を調べた結果、準粒子型秩序から局在電子型秩序へのクロスオーバーと考えられる顕著な変化を初めて観測することが出来た。これらの成果は一部発表済みであるが、現在論文執筆中である。非クランプ型圧力(応力)装置の最終目標は20トン応力装置であるが、これも、問もなく完成の見込みである。この研究課題は、重い電子系物質で顕著にみられる、圧力によって誘起される種々の磁気的量子現象を中性子散乱の手法で研究しようとするものである。そのために、2002年度までに、希釈冷凍機組み込み用小型セルを開発し、2トンの応力を付加できる非クランプ型の一軸応力、静水圧装置を完成した。内径3mmの圧力セルでの到達圧力は約3GPaである。1軸応力装置を用いた実験ではURu2Si2の圧力による反強磁性誘起には強い異方性があること、及び一軸応力の変化に対して誘起モーメントに履歴現象を伴うことが明らかになった。これは、非Kramers基底二重項を持つこの物質の、反強磁性と軌道秩序の共存に関する重要な情報である。また、Ce(Ru, Rh)2Si2のSi→Ge置換した系でSDWの静水圧応答を調べた結果、準粒子型秩序から局在電子型秩序へのクロスオーバーと考えられる顕著な磁気モーメントと転移温度の変化を初めて観測することが出来た。2002年度は、荷重制御装置を附加するなど、装置の改善を進めながら、前年度に引き続き、Ce(Ru, Rh)2Si2のSi→Ge置換系の波数ベクトルの圧力効果など詳しい実験を重ねた結果、外部圧力と化学圧力の組み合わせにより、よい準粒子バンド磁性を示す領域と、局在スピン磁性を示す領域が明瞭に分離されることを確認した。重い電子系で、このような磁性の遷移が確認されたのは初めてであり、我々が従来持っていた両氏臨界領域での磁気秩序の性質に関する仮説(良い準粒子バンドの中に発生する秩序がいわゆる微少モーメント秩序の起源であり、また量子臨界点付近で残存する局在生が非フェルミ液体現象を決定する)の一部を証明できた。
長期療養環境における認知症の人のＱＯＬ

厚生労働省より人口動態調査「死亡票」の調査票情報の提供を受け、原死因が認知症または老衰の者を抽出して二次解析を行った。1996年10月-2016年9月の死亡者960,423名のうち、医療機関で死亡したのは434,795名(45.3%)であった。在宅死が238,429名(24.8%)、老人ホームが220,652名(23.0%)、介護老人保健施設が66,547名(6.9%)いた。介護保険制度の開始(2000年4月)、地域密着型サービス・地域包括支援センターの導入(2006年4月)、後期高齢者医療制度・在宅療養支援診療所の導入(2008年4月)、およびオレンジプラン(2013年4月)のいずれも在宅死亡の増加に対する寄与はみられなかった。これらの制度を導入する前と比べ、導入した後の死亡者はより医療機関や介護老人保健施設で死亡する割合が高かった。これまでの研究成果をもとに認知症ケアの実践モデルを整理して、看護・介護職員を対象とした認知症ケア研修プログラムを開発した。参加同意を得られた居宅介護支援事業所、訪問看護ステーション、認知症対応型共同生活介護の看護・介護職員を対象として、2日間に渡る研修プログラムを試行した。介護従事者86名のケア提供を受けている利用者219名について、研修プログラム実施直後および6か月後における痛み、抗精神病薬、行動心理症状の情報を収集した。プログラム実施後に痛み(t(218) = 2.63, p = .009)と行動心理症状は有意に減少した( t(218) = 8.19, p < 0.001)。抗精神病薬の使用は変化がなかった(χ2(1) = 2.78, p = .180)。厚生労働省「介護サービス施設・事業所調査」の調査票情報から、介護保険施設の退所者や訪問看護ステーション利用者の個票と施設票を取得し、認知症の人の長期療養環境を提供している施設・事業所の機関属性を把握した。介護老人保健施設の退所者の分析では、認知症を主傷病とする者は医療機関や施設等への退所または死亡退所の割合が高かった。医療法人、定員数が大きい施設、リハ職員(理学療法士・作業療法士・言語聴覚士)の配置が低い施設、高齢者人口あたり介護老人福祉施設の定員数が少ない二次医療圏にある施設では医療機関へ退所する割合が高かった。加えて訪問看護ステーション・介護老人福祉施設・介護療養型医療施設のターミナルケア利用者の分析を行った。訪問看護利用者の多くが悪性新生物を主傷病としており、認知症が主傷病の者は少なかった。認知症を主傷病とする者は疼痛管理の実施割合が低かった。厚生労働省「介護サービス施設・事業所調査」の調査票情報の二次解析が順調に進み、また諸外国での認知症ケアの優良実践の例を現地調査により把握したことで、平成28年度に実施する予定であった「認知症ケア」や「QOL」の概念整理を先行して行えた。2016年4月1日の時点で東京都の介護サービス情報公表システムに登録されている居宅介護支援事業所・小規模多機能型居宅介護支援・認知症対応型共同生活介護、および精神科入院病棟の利用者を対象とした質問紙調査を実施した。居宅介護支援専門員が4人以下の居宅介護支援事業所、開設から1年未満の事業所は対象から除外した。各事業所で看護・介護職員を4名選んで質問紙票を渡し、各職員は直近で関わりをもった認知症を有する利用者4名について回答した。利用者のQOL評価にはQLDJ尺度(ADRQL尺度日本語版)を用いた。調査票を配布した1,414事業所(607居宅介護支援事業所, 158小規模多機能型居宅介護支援, 542認知症対応型共同生活介護, 107精神科入院病棟)のうち、346事業所から職員2,239名、利用者4,143名分の記入済み調査票の返送があった。データ解析の結果、利用者の年齢の高さ、女性であること、ADL障害や認知機能障害が低いこと、および抗精神病薬を使用していないことがQLDJ得点の高さと関連していた。また質問紙調査において、事業所の認知症ケアに関する体制や外部支援の有無、および利用者について回答する職員自身の認知症ケアに対する認識をあわせて調査した。認知症ケアに対する認識の評価にはqPAD尺度日本語版を用いた。qPAD尺度で測定した認知症緩和ケアの知識と態度得点ともに、認知症対応型共同生活介護の職員で居宅介護支援事業所より高かった。また職員のqPAD尺度の得点で利用者を三群に分け、QLDJ尺度の得点を比較したところ、知識でも態度でも得点の高い群では中間の群や低い群と比べて、利用者のQLDJ尺度得点は高かった。以上の結果をもとに認知症ケアの実践モデルを整理した。当初の計画では平成29年度に予定していた質問紙調査を一年前倒しで実施した。調査結果の解析が円滑に進行したことで、在宅や施設における認知症の人のQOLの実態把握およびQOLと関連するケア提供者側の要因を明らかにすることができた。それにより、平成29年度の目的としていた認知症ケアの実践モデルの整理に到達した。

平成27・28年度の結果をもとに認知症ケアの実践モデルを整理して、看護・介護職員を対象とした認知症ケア研修プログラム(初案)を開発した。参加同意を得られた居宅介護支援事業所、訪問看護ステーション、認知症対応型共同生活介護の看護・介護職員86名を対象として、2日間に渡る研修プログラムを試行した。またプログラム実施後の実践状況を把握するため、2か月後にフォローアップを実施した。認知症ケア研修およびフォローアップの開始直前に質問紙調査を行い、認知症ケアに対する対処可能感の変化を測定した。Sense of Competence in Dementia Care Staff(SCIDS)尺度日本語版の総得点は開始前よりも2か月後で有意に高く、より高い対処可能感を有していた(t (85) = 2.88, P = .005)。本プログラムが介護従事者の実践に対するスキル向上を達成したことが示唆された。また介護従事者86名のケア提供を受けている利用者219名について、研修プログラム実施直後および6か月後における行動心理症状の頻度と重症度、痛み、抗精神病薬の有無に関する情報を収集した。認知症ケアの実践モデルが早期に整理できたため、介護・看護現場への導入を速やかに行い、実践モデルの従事者アウトカムに対する効果検証まで進めることができた。厚生労働省より人口動態調査「死亡票」の調査票情報の提供を受け、原死因が認知症または老衰の者を抽出して二次解析を行った。1996年10月-2016年9月の死亡者960,423名のうち、医療機関で死亡したのは434,795名(45.3%)であった。在宅死が238,429名(24.8%)、老人ホームが220,652名(23.0%)、介護老人保健施設が66,547名(6.9%)いた。介護保険制度の開始(2000年4月)、地域密着型サービス・地域包括支援センターの導入(2006年4月)、後期高齢者医療制度・在宅療養支援診療所の導入(2008年4月)、およびオレンジプラン(2013年4月)のいずれも在宅死亡の増加に対する寄与はみられなかった。これらの制度を導入する前と比べ、導入した後の死亡者はより医療機関や介護老人保健施設で死亡する割合が高かった。これまでの研究成果をもとに認知症ケアの実践モデルを整理して、看護・介護職員を対象とした認知症ケア研修プログラムを開発した。参加同意を得られた居宅介護支援事業所、訪問看護ステーション、認知症対応型共同生活介護の看護・介護職員を対象として、2日間に渡る研修プログラムを試行した。介護従事者86名のケア提供を受けている利用者219名について、研修プログラム実施直後および6か月後における痛み、抗精神病薬、行動心理症状の情報を収集した。プログラム実施後に痛み(t(218) = 2.63, p = .009)と行動心理症状は有意に減少した( t(218) = 8.19, p < 0.001)。抗精神病薬の使用は変化がなかった(χ2(1) = 2.78, p = .180)。平成29年度に実施予定であった質問紙調査を平成28年度に実施する。調査対象は、介護サービス施設・事業所と医療機関の中から、平成27年度の分析をふまえて一定の条件で抽出した機関とする。調査結果から質の高い認知症ケアを提供していると思われる機関等を抽出する。また諸外国の現地調査の実施を継続して、公的な保健医療サービスや社会サービスの体制の違いをふまえ、日本における認知症ケアの改善点を明らかにする。平成29年度は、平成28年度の質問紙調査から抽出した機関を対象に、調査員による訪問調査を実施する。継続した生活支援が行われている事例とその支援体制について情報収集を行い、実践モデルを整理する。
乾海苔中の有用酵素の安定化機構に関する研究

【目的】岩海苔(Porphyra pseudolynearis)は独特な香りと風味を有し、海苔類の中でも高級なものとされている。乾岩海苔を焙焼後、温水に浸漬すると海苔の旨味成分である5'-IMPが急激に増加し、旨味が増すことが知られており、これにはアデニリックデアミナーゼ(ADase)の関与が示唆されている。また、高温処理によっても乾岩海苔中のADase活性は消失せず、酵素学的にも興味深い。本研究では、ADaseの安定化機構の解明を最終目的とし、ADaseの単離・精製法、さらに酵素の大量抽出法について検討を加えた。【方法】試料の乾岩海苔は、西伊豆土肥産のものを使用した。トリス酢酸緩衝液で抽出した酵素液にADase活性が認められたので、以下の方法により精製を試みた,すなわち試料に、リン酸カリウム緩衝液を加えてホモジナイズし、遠心分離した。透析・脱塩後、弱陰イオン交換体であるCellulose phosphate樹脂で処理し、0.45M1.0M KClを含む緩衝液によるリニアグラジエント法により分画した。次に、5'-AMP agaroseによるアフィニティークロマトグラフイー、続いてButyl Toyopear1650Sによる疎水クロマトグラフィーを行った。【結果】Cellulose phosphateカラムクロマトグラフイーの結果、ADase活性はKCl濃度0.5M付近に回活性画分を限外濃縮し5'-AMP agaroseを用いるアフィニティーカラムクロマトグラフィーに付したとKCl濃度0.2M付近に回収された。さらに硫安濃度1.5M0MまでのButyl Toyopear1650Sを用いる疎グラフィーに付した結果、硫安濃度1.3M付近に活性があり、5'-AMPを基質とした酵素反応試験の結果にADase活性が認められた。ポリアクリルアミドゲル電気泳動を行い、銀染色をした結果、薄い複数のバされたが、その中でも濃かった6万付近のバンドがADaseであると推測された。岩海苔(Porphyra pseudolynearis)は独特な香りと風味を有し、海苔類の中でも高級なものとされている。乾岩海苔を焙焼後、温水に浸漬すると5'-IMPが急激に増加する現象が知られており、これにはアデニリックデアミナーゼ(ADase)の関与が示唆されている。乾燥、高温処理によっても、酵素のADaseが失活しないことは酵素学的に非常に興味深い。本年度は、生岩海苔と乾岩海苔中のADase活性について検討した。まず、細切した生岩海苔と乾岩海苔を未処理、または焙焼(200°C・5分間)、温水浸漬(30°C・5分間)、およびエタノール浸漬(5分間)処理し、過塩素酸抽出法でエキスを調製した。その結果、乾岩海苔エキス中の5'-IMP含量を検討した結果、未処理試料に比べて5'-IMP含量は焙焼で約57倍、さらに温水浸漬で約560倍と急激に増加した。水分を付与することにより、ADase活性が賦活されることが推測された。試料中の5'-IMPの生成にはADaseが関与していることから、酵素の安定性を検討する目的でトリス酢酸緩衝液(pH6.5)を用いて上記の試料から粗酵素液を調製し、5'-AMPを基質とした酵素反応試験を行った結果、焙焼、温水浸漬、エタノール浸漬処理試料において5'-AMPが5'-IMPへほぼ100%変換し、ADase活性は消失していないことがわかった。一方、生岩海苔では、同様な処理を施した試料で5'-IMPへの変換は認められなかった。この結果から生岩海苔を乾燥させる過程でADaseを安定化させるなんらかの機構があると推定され、今後この機構について詳細に検討していく予定である。

さらに硫安濃度1.5M0MまでのButyl Toyopear1650Sを用いる疎グラフィーに付した結果、硫安濃度1.3M付近に活性があり、5'-AMPを基質とした酵素反応試験の結果にADase活性が認められた。ポリアクリルアミドゲル電気泳動を行い、銀染色をした結果、薄い複数のバされたが、その中でも濃かった6万付近のバンドがADaseであると推測された。
中国に関わる地域総合情報の体系的整理

今回の学術調査では、中国の西藏自治区(拉薩市及び同市周辺)と新疆維吾爾自治区(烏魯木斉市及び同市周辺)を調査研究対象地域とし、それらの地域における自然条件、生態環境、民族・宗教・言語・文化、並びに社会・経済、等の特徴を調査し、種々のメディアによる各種の情報を収集した。これによって明らかになった主要な点は、以下の通りである。(1)少数民族自治区は辺境の地にあり、従来は漢文化に浸透もあまり見られなかった。少数民族は、独自の文化と生活様式を居住地域の自然条件や生態環境に適応させ、それを維持してきた。その中に漢文化が色濃く浸透しなかったのは、彼等が自らの文化や生活様式を固守してきたことにもよるが、漢文化の浸透を許さざるをえない情況があまりなかったことにもよっている。(2)中国の広大な版図の中では、いくつもの経済圏がそれぞれの間に強いリンクを持たないままで共存していた。相互の依存関係は、全くなかったとは云わないが、強いものではなかった。ところが、最近になって、少数民族の居住地域での経済開発が進められるようになり、漢民族による資本・労働が大量に投入されるようになってきた。相互間の経済的依存関係は緊密化せざるを得ない。このような少数民族の居住地域における社会経済的基盤の変化は、これら地域への漢文化の流入を加速する。少数民族の伝統的で安定した文化や生活様式は混乱する。影響が大きくなれば、漢民族との摩擦を引き起こす可能性もある。このような基本的な認識に基づいて、今回の学術調査によって収集された諸種の情報を、中国全体としての地域総合情報システムの中で体系的に整理する。ただし、この整理の作業には多くの時間と労力が必要とされるため、その成果の公表は今後にまたざるを得ない。今回の学術調査では、中国の西蔵自治区(拉薩市及び同市周辺)と新疆維吾爾自治区(鳥魯木斉市及び同市周辺)を調査研究対象地域とし、それらの地域における自然条件、生態環境、民族・宗教・言語・文化、並びに社会・経済、等の特徴を調査し、種々のメディアによる各種の情報を収集した。(1)少数民族自治区は辺境の地にあり、従来は漢文化の浸透もあまり見られなかった。
C型慢性肝炎のインターフェロン治療抵抗性とHCV遺伝子変異との関連

現在治療抵抗性とそうでない慢性C型肝炎のCORE蛋白とNS5A蛋白をHuh7,HepG2,Hep3Bといった肝細胞癌由来のセルラインにトランスフェクトしており、細胞に遺伝子を移入するベクターが恒常的に細胞に発現していることを確認している。現在CORE蛋白とNS5A蛋白がどの程度実際に発現しているかウェスタンブロッティング法にて定量中である。今後インターフェロントランスダクションに関連した蛋白の発現を、mRNA段階ではCATアッセイもしくはルシフェラーゼアッセイで確認する。この際インターフェロンの影響を確認するため段階濃度でそれぞれの抗ウイルス蛋白の発現を測定する。また同時にNS5A蛋白がどの様な機序で細胞内で作用しているかを明らかにする。またこれらのHCV蛋白がインターフェロン投与の際ウイルス排除に重要な役割を果たしていると考えられている2′,5′-OAS, PKR, Mx蛋白等の抗ウイルス物質が産生されるが、現在NS5A蛋白がPKRを直接阻害することがin vitroの実験で示されておりこれがインターフェロン治療抵抗性の重要な機序の一つであると考えられている。既に我々は2′,5′-OAS,がウイルスのNS5蛋白の影響を強く受けていることをヨーロッパの雑誌やアメリカでの学会で発表してきたが現在肝癌細胞株にNS5A蛋白を発現させ、どの様な機序で抗ウイルス蛋白である2′,5′-OASやPKRが抑制されるか検討中である。慢性C型肝炎はC型肝炎ウイルス(HCV)が原因で起こる疾患であるが、自然経過で肝硬変、肝癌へと進行する予後不良の疾患である。現在唯一の治療法としてインターフェロン治療が行われているが、半分以上の患者は治療抵抗性である。1996年にHCV遺伝子のNS5A領域の遺伝子領域が慢性C型肝炎のインターフェロン治療抵抗性と関連が示され、NS5A領域がコードしている蛋白がインターフェロン抵抗性に重要な役割を果たしていることが示唆された。インターフェロンにに投与より2',5'-OAS,PKP,Mx蛋白等の抗ウイルス物質が産生されるが、現在NS5A蛋白がPKRを直接阻害することがin vitroの実験で示されておりこれがインターフェロン治療抵抗性の重要な機序の一つであると考えられている。しかしウイルス排除に重要な役割を果たしていると考えられている2',5'-OASについてはi未だに検討されていなかった。よって、我々はNS5Aの変異と2',5'-OASとの関連を実際の患者の検体より調査し、インターフェロン等与前の自然感染の状態では治療抵抗性のNS5A遺伝子を持つHCVでは抗ウイルス物質である2',5'-OASが有意に低下していることを示しヨーロッパの著名な雑誌に掲載した。現在肝癌細胞株にNS5A蛋白を発現させ、どの様な機序で抗ウイルス蛋白である2',5'-OASやPKRが抑制されるか様々な面より検討中である。
在日コリアンの「民族教育」における排他的構造の変化

在日コリアンの民族教育は、教育が行われる情況、教育の実践、学習者のアイデンティティの発達が連動的・因果的に相互作用する中で行われる。それを分析して在日コリアンの民族教育の排他的構造の変化を明らかにする。在日コリアンの民族教育は、1終戦と民族教育の出発教育闘争、2朝鮮・韓国戦争と反共体制の強化、3日韓国交正常化、41990年代以後の日本・コリア半島・在日コリアン社会の新たな関係の展開を経て行われ、14毎に排他的構造が変わってきたとみられる。本研究ではこの仮説的見方を確認した上、多文化共生社会の構築、学習者の文化的アイデンティティの発達とつながる論理を見出したい。
肝薬物代謝酵素の多様性とその動物からヒトへの外挿

ヒトにおいて遺伝的多様性があることが知られているデブリソキン水酸化酵素に対するキニジン、キニンの阻害作用をラットとヒトの肝ミクロゾ-ムを用いて検討した。キニジンはヒト肝の本酵素に対し強い阻害作明を示したが、その異性体であるキニンはその阻害作用が約60倍弱かった。一方、ラットではキニンの阻害作用がキニジンに比し約50倍強力であった。またキニジン、キニンとも本酵素活性を95%以上阻害し、阻害様式はそれぞれ競合的、可逆的であった。この結果は肝のチトクロ-ムPー450 db_1の活性中心の特性がラットとヒトでは異なることを示している。ジルチアゼムのラット、ヒト肝薬物化酵素に対する影響を検討した。ラットでは、トリメタジオン代謝、4ーヒドロキシアンチピリンの尿中排泄は増加したが、デブリソキンの4位水酸化反応は抑制された。一方、ヒトでは、アンチピリンクリアランスは減少し、特に4ーヒドロキシアンチピリンのフォ-メイションクリアランスが減少した。デブリソキンの水酸化も抑制されたがトリメタジオン代謝は著変をしめさなかった。この結果は、アンチピリンの4位水酸化反応に対してジルチアゼムの作用がラットとヒトでは全く逆であるが、デブリソキンの4位水酸化反応に対する作用はラットとヒトで同様であることを示している。エノキサシンのラット、ヒト肝薬物代謝に対する影響を検討した。3ーヒドロキシメチルアンチピリン、ノルアンチピリンのフォ-メイションクリアランスはラットではそれぞれ減少、増加したが、ヒトではアンチピリンの主要代謝物のクリアランスはすべて減少した。トリメタジオンの代謝はラット、ヒト共に著変を示さなかった。以上の結果より、肝薬物代謝に関するデ-タを動物からヒトへ外挿するためにはその差異に十分注意し、さらに多くの指標薬物で検討することが大切であることが示唆された。デブリソキンを代謝するヒト肝薬物代謝酵素は広く遺伝的な多様性が知られている。キニジンとその異性体であるキニンのラット、ヒト肝デブリソキン4-水酸化酵素(P-450db_1)に対する阻害作用を検討した。その結果、キニジン、キニンのヒト肝P-450db_1活性に対する阻害作用は可逆的であることがわかった。そこでラット、ヒト肝P-450db_1に対する両薬物の阻害曲線を検討し、阻害曲線よりキニジン、キニンのラット、ヒト肝P-450db_1活性に対するIC_<50>値を求めると、キニジンは、136.7μM(ラット)、3.6μM(ヒト)、キニンは2.4μM(ラット)、233.3μM(ヒト)となった。さらにDixonplot.Lineweaver-BurK's Plot法にて阻害様式を検討しKi値を求めるとキニジンはラット、ヒトとも競合的阻害でありKi値は0.6μM(ヒト)、50.0μM(ラット)であった。キニンも同様に競合的阻害を示しKi値は13.0μM(ヒト)、1.7μM(ラット)であった。以上の結果、キニジンとキニンのP-450db_1活性に対する阻害強度がヒトとラット肝で逆転することはヒト、ラットP-450db_1の活性中心に何か基本的な差異(質的差異)が存在する可能性がある。カルシウム拮抗薬ジルチアゼムの肝薬物代謝酵素系に対する作用をラット、ヒトで検討した。指標薬物としてアンチピリン、トリメタジオン、デブリソキンを用いin vivoで検討したところラットではアンチピリンの4位水酸化反応を促進させトリメタジオンの脱

メチル化反応も促進させた。しかしデブリソキンの4位水酸化反応は抑制した。一方ヒトで同様のin vivoの検討をしたところ血中アンチピリンのクリアランスを減少させ特に4位水酸化反応を抑制しトリメタジオンの代謝は変化を示さずデブリソキンの4位水酸化は同様に抑制した。以上の結果よりデブリソキンの水酸化に対するジルチアゼムの作用はラット、ヒトで類似しているがアンチピリン、トリメタジオンでは異なることが示唆された。エノキサシン(Ex)は広く臨床で使用されているニュ-キノロン系の抗生剤である。最近、Exがテオフィリンや他の薬物と肝臓での代謝において相互作用する事が報告されている。そこで今回は、肝薬物代謝酵素に対するExの作用をラットとヒトで検討した。アンチピリン、トリメタジオンを指標薬物として使用した。Exの単回投与ではラット肝ミクロゾ-ム中の代謝酵素活性およびチトクロ-ムPー450含量に著変はみられなかった。しかしEx(100mg/kg)1日3回、3日間投与ではPー450は有意に増加し、アニリン水酸化酵素や他の酸化酵素活性も増加した。同様にラットでアンチピリンのクリアランスはEx単回投与により用量に相関して減少し、反復投与では約30%減少した。Ex反復投与によるアンチピリン主要代謝物のフォ-メイション・クリアランスはCL_<HMA>が53%に減少、CL_<NORA>が155%に増加、CL_<OHA>が不変となった。同様にラットでのトリメタジオン代謝はEx投与により変化を受けなかった。一方、ヒトではEx(200mg)1日3回、3日間投与によりアンチピリンの消失速度数は有意に減少し、半減期、曲線下面積は約2倍に延長、増加し、クリアランスは45%に減少した。さらにアンチピリンの主要代謝物のフォ-メイション・クリアランスはCL_<HMA>、CL_<NORA>、CL_<OHA>とも61%、38%、60%にそれぞれ有意に減少した。しかし、トリメタジオン代謝はEx投与により有意に増加した。以上の結果より、Exは肝のPー450アイソザイムにそれぞれ誘導、抑制作用を示し、アンチピリン、トリメタジオン代謝に関わるPー450はラットとヒトでは異なる酵素化学的特性を有していると考えられる。
ペプチド作動性ナトリウムチャネルの構造機能相関と生理機能に関する研究

本研究課題は、現在、アミノ酸配列が知られている唯一のペプチド作動性ナトリウムチャネルであるFMRFamide作動性Na^+チャネルの構造と機能を明らかにすることを目的として、FMRFamide作動性Na^+チャネルの生物物理学的特長の解析、および点変異体チャネルの作成とその機能解析を主に行った。その結果、次のような成果を得た。(1)FMRFamide作動性Na^+チャネルの定常状態チャネル電流は内向き整流性をしめすが、この主要因は細胞内外のNa+濃度の不均衡によることがわかった。(2)FMRFamide作動性Na^+チャネル電流は、外液にMg^<2+>が多いと増強され、Ca^<2+>が多いと阻害されたが、この主要因は、二価イオンによるチャネルゲート機構の修飾とチャネルポアブロックによることがわかった。(3)FMRFamide作動性Na^+チャネルのゲート機構には電位依存性があり、過分極側でチャネルが開状態となりやすいこと、また、この電位依存性にも二価イオンが影響を与えることがわかった。(4)上記のFMRFamide作動性Na^+チャネルに対する二価イオンの作用には、このチャネルのサブユニットのアミノ酸配列における552番目のアスパラギン酸が関与しており、この部位をアスパラギンに変えただけで二価イオン作用が消失、あるいは減弱した。以上、FMRFamide作動性Na^+チャネルの生物物理学的特長を明らかし、特に、チャネルサブユニットにおける552番目のアスパラギン酸が、チャネルのゲート機構に大きく関わる部位であることを発見した。現在は、552番目のアスパラギン酸が二価イオン結合部位となることでチャネルゲート機構に関与するという仮説を検証するための研究を進めている。本研究課題では、現在構造が知られている唯一のペプチド作動性イオンチャネルであるFMRFamide作動性ナトリウムチャネルの構造機能相関および生理機能を明らかにすることを目的としている。本年度に行った研究により、次のことが明らかになった。(1)二価イオン結合によるチャネル機能阻害FMRFamide作動性ナトリウムチャネルは、外液のCa^<2+>によってチャネル阻害を受ける。そこで、他の二価イオンの作用を検討した。その結果、Ni^<2+>、Mn^<2+>、Zn^<2+>、Cd^<2+>にも阻害作用が認められた。また、これらの二価イオンは、チャネルの開閉機構にも影響を与えることが明らかになった(第28回日本比較生理生化学会大会、第77回日本動物学会大会で発表)。(2)二価イオン結合部位の同定Ca^<2+>は、FMRFamide作動性ナトリウムチャネルを阻害するだけでなく、その脱感作を抑制する。一方、Mg^<2+>はCa^<2+>とは異なり、チャネルを阻害することなく脱感作を増強する。これらの二価イオン作用の分子機構を明らかにするために、二価イオン結合部位の探索を試みた。チャネルの一次構造を同じイオンチャネル族に属する他のチャネルと比較することにより、二価イオン結合部位の候補と思われる箇所を2箇所見出し、各々に点変異を導入した変異体チャネルを作製した。これらのチャネルの機能を調べたところ、脱感作に対する二価イオン作用が欠落したチャネルになっていることがわかった(発表準備中)。今後は、(2)の研究をさらに進展させるために、同定された箇所における別種の変異体チャネルを作製して機能解析を行う。また、(1)でみられた二価イオンによるチャネル阻害やチャネル開閉機構の修飾に関わる二価イオン結合部位の同定もあわせて進めていく予定である。本研究課題では、ペプチド作動性イオンチャネルであるFMRFamide作動性ナトリウムチャネルの構造機能相関および生理機能を明らかにすることを目的としており、本年度に行った研究により、以下のことが明らかになった。(1)点変異導入法によるFMRFamide作動性Na^+チャネルの機能解析前年度の研究で明らかになったFMRFamide作動性Na^+チャネルに対するMg^<2+>

の作用に関わる部位として、552番目のアスパラギン酸を同定した。この部位のアミノ酸を他のアミノ酸に置換した6種類の変異体チャネルを作成し、機能解析を行ったところ、この部位がイオンチャネルの活性化に関わる重要な部位であり、ここにMg^<2+>やCa^<2+>などの生理的な二価イオンが作用することが、このイオンチャネルの生理機能において重要であることが明らかになった(投稿準備中)。(2)FMRFamide作動性Na^+チャネルを発現しているアメフラシのニューロンを同定するために、in situハイブリダイゼーションを行い、腹部神経節と足神経節にこのイオンチャネルを発現するニューロンが存在することを示す結果を得た。しかし、検出された細胞が少なく、そのシグナルも弱いものであったので、この結果に関しては、今後さらに検討する予定である。以上の研究成果について、日本比較生理生化学会、日本動物学会、北米神経科学会、日本生理学会で発表した。
双極I型障害とII型障害の違いに着眼した、画像所見や薬物反応性の比較研究

まず、双極性の薬物療法に関してガイドラインや関連文献を精査して、現状を明らかにした。その結果、リチウムは躁病エピソードの予防が得意であり、ラモトリギンはうつ病エピソードの予防が得意であること、さらに双極性障害の亜型に関して、双極I型障害が躁病エピソードの予防を重要とし双極II型障害がうつ病エピソードの予防を重要とすることをから、双極I型障害の治療にリチウム、双極II型障害の治療にラモトリギンを使用することが合理的である事が示唆された。次に、双極I型障害6名とII型障害9名におけるn-back課題中の脳活動の比較を行った。双極I型障害と双極II型障害の患者背景は、それぞれ平均年齢が45歳と42歳、性比(男性:女性)が3:3と1:8,平均罹病期間が17年と13年、平均ハミルトンの抑うつ状態評価得点が7点と8点、平均ヤング躁状態評価得点が1点と1点と、性比を除いて差はなかった。n-back課題の平均正答率は、双極I型障害と双極II型障害でそれぞれ0-backで70%と82%, 1-backで59%と71%、2-backで46%と51%、3-backで38%と51%とやや双極I型障害が劣るように見えるが、統計学的にはすべて有意差はなかった。n-back課題中のfMRIにおける脳の賦活については、双極II型ー双極I型でleft insulaにおいて3 back課題の遂行中に賦活の有意差傾向(p=0.061)が見られた。本研究の目的は、双極I型障害と双極II型障害の違い、具体的には機能画像(fMRI, FDG-PET)や形態画像(MRI)を用いて病態生理の違いを検討し、さらに薬物反応性の比較をリチウムやカルバマゼピン、抗うつ薬や非定型精神病薬などにおいて行う。これまで進めてきた気質研究の成果も踏まえ、画像所見や薬物反応性を従属変数として、双極性障害の亜型すなわちI型かII型かの主効果と、発揚気質や循環気質など気質得点の高低の主効果、そして両者の交互作用を独立変数として、重回帰分析にかけることである。このうち、fMRIの所見を提示したが、FDG-PETに関しても症例を蓄積している。また、薬物療法に関しては、当科におけるデータベースの構築を進めているところである。これまでと同様に研究を進める。すなわち、機能画像(fMRI, FDG-PET)や形態画像(MRI)を用いて病態生理の違いを検討し、さらに薬物反応性の比較をリチウムやカルバマゼピン、抗うつ薬や非定型精神病薬などにおいて行う。画像所見や薬物反応性を従属変数として、双極性障害の亜型すなわちI型かII型かの主効果と、発揚気質や循環気質など気質得点の高低の主効果、そして両者の交互作用を独立変数として、重回帰分析にかけることである。

すなわち、機能画像(fMRI, FDG-PET)や形態画像(MRI)を用いて病態生理の違いを検討し、さらに薬物反応性の比較をリチウムやカルバマゼピン、抗うつ薬や非定型精神病薬などにおいて行う。画像所見や薬物反応性を従属変数として、双極性障害の亜型すなわちI型かII型かの主効果と、発揚気質や循環気質など気質得点の高低の主効果、そして両者の交互作用を独立変数として、重回帰分析にかけることである。昨年度は費用のあまりかからないfMRIを優先させたので使用額が少なかった。今年度はFDGーPETの被験者を増やす計画なので、高額なPET撮像費用が増える予定である。