hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ヒト角膜輪部、結膜組織からの体性幹細胞の探索と評価

本年度の研究は幹細胞候補コロニーの増殖能や基底細胞層の発現蛋白質の検討、単一細胞由来角膜・結膜上皮様シートの作成、角膜・結膜上皮特異的ケラチンパターンの発現検討をすることにより、幹細胞候補コロニーの同定と幹細胞採取法の確立を目指して実施した。その結果、幹細胞様コロニーは活発な増殖能をもち、基底膜マーカーであるP63に陽性であり、単一細胞由来の角膜・結膜シートにまで組織を形成することを確認した。これらは採取組織由来の角膜、結膜上皮への分化能をもっており、異なる増殖因子による刺激で杯細胞へも分化誘導が可能であり多分化能の発揮を確認した。ただし幹細胞の特徴である再複製能は弱く、現時点では前駆細胞であることを証明するに留まった。培養条件の検索の結果、成分既知な完全無血清培養で移植に耐えうる角膜上皮シート、結膜上皮シートの作成に成功したが、その際に重要な因子は既に明らかになっている増殖因子の作用に加え、脂溶性栄養素の添加が必須なことが判明した。そのため本研究成果によって、遂に感染症の心配の無い再生医療の実施のみならず、幹細胞と癌、ウィルス、幹細胞・癌細胞マーカーの探索と医学への応用などかなり広範囲に医学の発展に寄与し我が国のライフサイエンス事業を国際的な先導役に導く可能性を持つ幹細胞を用いた研究の実施が可能となった。また幹細胞を採取するには幹細胞採取用培養器具の開発が必須なことが判明し、本発明による商品化に成功した。既に国内・海外の理化学機器メーカーによる新製品の開発競争が始まっており、本研究成果の結果、学術的な知見に留まらず、世界的な培養器具の変革をもたらす重要な成果が得られた。本研究成果の継続的かつ発展的な研究活動の実施により今後更に重要性は高まっていくと考えられ、極めて大きな成果が得られたものと考えられる。1.平成18年度計画の研究実績の概要「角膜上皮幹細胞と結膜上皮幹細胞の採取と評価」角膜輪部と結膜組織より得られた幹細胞様細胞の組織構築能と増殖能、再複製能を検討した結果一個の細胞より上皮組織が形成できるほどの強い組織形成能が存在することが判明した。また再複製能は2回まで確認できた。BrdUによる免疫染色法で陽性であり強い増殖能を保持していた。また、細胞の発現蛋白質を免疫染色法で確認したところ角膜組織由来の細胞コロニーは最終的に確認した限り元の組織由来である角膜上皮へと分化した。結膜も同様に最終的に結膜上皮細胞へと分化する。明確に機能する他細胞への分化能としては眼表面に存在するゴブレット細胞への分化も新たに判明した。よって本研究事業により成人角膜上皮幹細胞と結膜上皮幹細胞の単離に成功した。2.平成18年度計画以外での新規な研究実績概要平成19年度の計画ではあるが研究進捗が順調であるため遂行した。その結果、2種のマーカー候補を決定しEACSによる分離を試みた。結果、100万個の組織細胞より10個程度の幹細胞の採取に成功した。しかしながら、幹細胞の性質上現在存在する幹細胞分離機器、方法による採取効率上昇は見込めない。また既に幹細胞を培養方法の工夫により効率良く分離できていることから、ヒトのへの応用を考え特異的マーカーを用いた分離について再検討を行う予定である。3.単離細胞の培養、大量培養法の検討、濃縮幹細胞を用いた角膜上皮シートの作製当初、3T3細胞との共培養法を予定していたがヒトへ即座に使えることを視野にいれて完全無血清培養法へと変更した。結果、無血清培地にて単離細胞を組織まで構築することが可能となった。大量培養法には継代が難しいなどの問題点が残されており平成19年度中の解決を目指す。幹細胞の濃縮については幹細胞の特性が明らかになり採取時点での濃縮は可能となった。

既に国内・海外の理化学機器メーカーによる新製品の開発競争が始まっており、本研究成果の結果、学術的な知見に留まらず、世界的な培養器具の変革をもたらす重要な成果が得られた。本研究成果の継続的かつ発展的な研究活動の実施により今後更に重要性は高まっていくと考えられ、極めて大きな成果が得られたものと考えられる。
"未来の生態系"天然二酸化炭素噴出地における植物の適応と進化

龍神沼、湯ノ川、丹生周辺の三つのCO2噴出地において環境測定、植生調査および生育植物の生理生態学的調査を行い、高二酸化炭素環境が葉の性質に影響していること、また、その影響が種によって異なることを報告した(Onoda et al. 2007)。高二酸化炭素環境への適応を調べるため、現地の植物を東北大学実験圃場にあるオープントップチャンバーに移植し、植物の生理生態学的性質を調査した。小野田は龍神沼と湯ノ川からオオイタドリを、丹生からオオバコを移植し、光合成特性を比較した。その結果、湯ノ川から移植したオオイタドリの気孔コンダクタンスが対照区から移植した個体に比べ有意に低いこと、丹生のオオバコのデンプン蓄積濃度が低いことを見いだした。さらに大学院生中村伊都が個体成長について詳細な解析を行った。高二酸化炭素領域由来の個体はバイオマスを地上部に多く投資し個体重あたりの葉面積が大きいこと、好適栄養条件では成長速度が高いことなど多くの特性に違いがあることを発見した。丹生のオオバコについては、東北大学生命科学研究科河田雅圭教授のグループの助けを得て遺伝学的解析に着手した。マイクロサテライトマーカーを用いた解析の結果、高二酸化炭素領域のオオバコと低二酸化炭素領域のオオバコの間では比較的遺伝的距離が離れていることを発見した。高二酸化炭素領域のオオバコはヘテロ接合度頻度が低く、繁殖様式が遺伝的分化に影響していることが示唆された。これらの結果から、我々は丹生の高二酸化炭素領域のオオバコが通常領域のオオバコとは異なる遺伝的性質をもつこと、つまり何らかの進化が起こっていることを明らかにしたといえる。・青森県八甲田山系の二つのCO2噴出地(龍神沼・湯ノ川)と山形県湯殿山神社のCO2噴出地(丹生)の3カ所で大気組成・土壌栄養・植物生理生態パラメータの基礎的測定を行った(Onoda et al.投稿中)。・上記3カ所のCO2噴出地と付近のコントロールサイトから代表的草本(八甲田からオオイタドリ・丹生からオオバコ)を仙台の実験圃場に移植し、一定期間生育させたのち、光合成特性を測定した。噴出地由来とコントロール由来の間で比較すると、多くの性質に違いは見られなかったが、水利用効率などに有意差が見られるケースがあった(Onoda et al.論文準備中)。・丹生のオオバコについては、移植個体を増やし、実験圃場のオープントップチャンバー内で水耕栽培を行い、成長を非破壊的に追跡した。バイオマス分配などに由来間で有意差が見られ、CO2噴出地付近に生育する個体が高CO2環境に適応し、進化している可能性が示唆された。・八甲田山系ではオオイタドリを対象とし、様々な光環境・土壌栄養条件・CO2濃度が個葉光合成特性に与える影響を現地調査した。その結果、CO2の効果は光環境の効果に比べて小さく、多くの特性はCO2濃度に依存していなかった。しかし、葉重/葉面積比はCO2濃度上昇により有意に増加しており、CO2濃度の影響が確認された。八甲田山系に存在する複数のCO2噴出地周辺にて、高CO2環境と低CO2環境に自生するオオイタドリの生理生態特性を比較した。CO2環境が葉窒素濃度や葉内窒素利用に影響していることを明らかにした。八甲田山系のCO2噴出地の一つは、近年上層木が刈り取られ、光環境の改善により遷移が始まった。高CO2濃度領域では低CO2濃度領域と異なる種が優占しつつあることを発見した(Onoda et al. 2005)。湯殿山にあるCO2噴出地付近からオオバコを実験圃場に移植し、高CO2環境と低CO2環境で育成した。高CO2由来の個体ほどシュートにバイオマスを多く投資することを発見した。さらに、この個体から自殖種子を得て育て、高CO2由来の子供がシュートに多くバイオマスを投資していることを確認した。マイクロサテライトマーカーを用いて湯殿山のCO2噴出地付近のオオバコ集団の遺伝的解析を行った。その結果、高CO2環境の集団は低CO2環境の集団より若干離れていることを見出した。この他、湯殿山CO2噴出地のオオバコは種子発芽にこかかる時間が短いなどの発見をし、現在追試を行っている。

マイクロサテライトマーカーを用いた解析の結果、高二酸化炭素領域のオオバコと低二酸化炭素領域のオオバコの間では比較的遺伝的距離が離れていることを発見した。高二酸化炭素領域のオオバコはヘテロ接合度頻度が低く、繁殖様式が遺伝的分化に影響していることが示唆された。これらの結果から、我々は丹生の高二酸化炭素領域のオオバコが通常領域のオオバコとは異なる遺伝的性質をもつこと、つまり何らかの進化が起こっていることを明らかにしたといえる。
マンナン結合タンパク質依存性細胞性細胞障害反応(MDCC)の機構解明

血清マンナン結合タンパク質(MBP)はマンノース、N-アセチルグルコサミンに特異的な動物レクチンであり、異物表面の糖鎖と結合して補体活性化能を示すなど、異物認識分子として先天性免疫において重要な役割を果たす。研究代表者らはMBPが担癌マウスにおいて補体非依存的とみられる抗腫瘍作用を示すことを見いだし、この機構として補体非依存的細胞性細胞障害作用(MDCC)を提唱した。本研究課題においてはまず、MDCCがin vitroにおいて再現されることを見いだした。すなわち、ヒト結腸癌由来細胞株SW1116を標的細胞に、単球系細胞THP-1をエフェクター細胞として用い細胞障害試験を行ったところ、顕著なMBP依存的細胞障害が認められた。この実験でエフェクター細胞が産生する細胞障害因子は可溶性かつ易熱性を有することが明らかとなり、何らかのタンパク質の関与が示唆された。なお、細胞障害を誘導するタンパク質としてよく知られる腫瘍壊死因子(TNF-α)ついては本機構には関与しないことがわかった。また、合成糖鎖リガンドを用いてMBPによる補体非依存的な白血球活性化作用を調べ、固定化リガンドに結合したMBPにより好中球の凝集および活性酸素の放出が誘導されることを見いだした。MBPのコラーゲン用領域フラグメントを固相化した場合も同様の活性化が認められたことから、MBPによる好中球刺激作用にはMBPのコラーゲン様領域が重要であることが示唆された。また、この活性化機構には血小板活性化因子(PAF)が関与することがアンタゴニストを用いた実験より明らかとなった。さらに、本研究においては、担癌マウスにMBPを投与した後の腫瘍組織内にマクロファージおよび好中球が浸潤することを見いだしており、MDCCにはミエロイド系細胞が重要な役割を果たすことが強く示唆された。申請者らはMBPリガンドを高発現する腫瘍細胞株SW1116を移植したマウスにおいて、MBPが補体非依存的に抗腫瘍作用を示すことを見い出しており、その機構としてMBP依存性細胞性細胞傷害作用(MDCC)が想定された。本年度はMDCCの機構を解明するため、まず、in vitroにおけるMDCCについて検討した。ヒト単球系細胞株をエフェクター細胞、SW1116を標的細胞として、細胞障害性試験を行ったところ、MBPの存在下においてのみ顕著な標的細胞の減少が認められた。すなわち、in vitroにおいてMDCCが再現できることを明らかにした。さらに、MBP存在下における共培養の培養上清はSW1116に対して細胞障害作用を示し、細胞障害性エフェクター分子は可溶性分子であると考えられた。一方、MBPが補体非依存的に免疫細胞を活性化する可能性をより簡素な実験系を用いて検討したところ、固相化リガンドに結合させたMBPが補体非依存的に好中球を活性化することを見い出した。また、in vivoにおけるMBPの抗腫瘍作用の詳細を調べるため、MBP投与後に腫瘍組織内への浸潤する細胞の同定を免疫組織化学的に検討した。その結果、MBP投与後早期に好中球の浸潤が認められ、MBPによる腫瘍の退縮が顕著となる後期には、好中球とマクロファージの両者の浸潤が認められた。
イミダゾール二量体を基盤とする高速光スイッチング分子の高性能化と高次複合化

本研究では高速フォトクロミック分子の機能開拓を行い、高分子や液晶との複合化を行うことでマクロな物性を高い時空間分解能で光制御することを目的とする。平成27年度は、既報の高速フォトクロミックイミダゾール二量体と種々の有機ラジカルをベースとしてイミダゾール二量体の枠を超えた新奇な高速フォトクロミック分子の開発を試みた。これまでの研究ではフォトクロミズムを示すイミダゾール二量体に改良を重ねることで、迅速なラジカル再結合反応により光照射しているときだけ発色する高速フォトクロミズムを示す化合物の研究に取り組んできた。一方でトリアリールイミダゾリルラジカルと同様に、フェノールを酸化することで得られるフェノキシルラジカルもラジカル間二量化反応を起こす。フェノキシルラジカル二量体に紫外光照射するとラジカル解離反応によりフェノキシルラジカルを生成するものの、その光反応効率は極めて低いことが報告されている。そこでわれわれは、イミダゾリルラジカルとフェノキシルラジカルの類似性に着目し、ベンゼン環のオルト位にフェノキシルラジカルとイミダゾリルラジカルを導入したビラジカルが分子内ラジカル間結合により高速フォトクロミズムを示すフェノキシルーイミダゾリルラジカル複合体(PIC)を生成することを見いだした。異なる種類のラジカルが可逆的に結合形成およびラジカル解離する報告例はほとんどないが、PICはヘテロラジカル複合体がラジカル解離型フォトクロミズムを示す初めての例である。PICは様々な分子修飾が容易であり、消色反応に相当する熱戻り反応速度を自在に制御できること、および優れた繰り返し耐久性を有することから、高性能光スイッチ分子として、調光材料、実時間ホログラム材料、セキュリティインク材料、分子マシン材料などのさまざまな用途に応じた利用が期待できる。27年度が最終年度であるため、記入しない。
小脳発生における皮質層構造の形成障害の分子機構

中枢神経皮質構造の形成過程においてはニューロン-グリアの細胞間相互作用が重要な役割を演ずる。小脳形成過程においても放射状グリアならびに幼若アストログリアは神経細胞配列の位置情報の呈示に関与し、アストログリアの発生機構は小脳皮質形成障害と密接な関連を持つと考えられる。本研究では小脳皮質形成障害の機構を明らかにするために、発生過程において幼若アストログリア、皮質プルキンエ細胞に特異的に発現する遺伝子を指標として正常発生過程の解析を行なうとともに、遺伝的皮質形成障害を示すリーラーマウスにおけるニューロン-グリア相関について検討した。幼若アストログリアのマーカーとして細胞接着因子tenascin、プルキンエ細胞のマーカーとしてはL7を用いて、in situ hybridization、免疫組織化学により形態学的に解析を行った。正常小脳発生過程において、胎生期放射状グリアはtenascinを発現し、プルキンエ細胞の皮質への移動をガイドした後に突起を短縮し、かつ細胞体が皮質へ移動してglial fibrillary acidic protein(GFAP)の発現を示すBergmannグリアへと分化した。リーラーミュータントマウスの小脳形成過程においては、放射状グリア細胞体の皮質への移動が障害されていた。一部の放射状グリアは皮質へ到達したが突起の形成と配列に異常を示し、ごく少数のBergmannグリアのみがプルキンエ細胞と接していた。一方、プルキンエ細胞は皮質下に分節状の集塊を形成し、集塊の位置によってその領域に存在するアストログリアにおけるGFAPの発現様式に大きな差異が認められた。以上の所見から、リーラーマウスにおいてはニューロン-グリアの細胞間相互作用の異常により皮質形成障害がおこり、ニューロン、グリア両者の配置と分化の異常が引き起こされることが強く示唆された。中枢神経発生過程において脳室面で形成された幼若神経細胞は、放射状グリアの突起に沿って皮質へ移動し、層状に規則正しく配列する。この過程に、ニューロン-グリア間の細胞間相互作用、細胞接着因子の発現、神経細胞の位置情報を規定する遺伝子の発現が重要な役割を演ずると考えられている。小脳皮質層構造の形成異常のメカニズムを明らかにするため、正常ならびにリーラーミュータントマウスを用いてプルキンエ細胞ならびに放射状グリアの発生分化の様式について、遺伝子発現のレベルで形態学的解析を行なった。(1)胎生期小脳の放射状グリアに発現する細胞接着因子tenascinのcDNAをマウス新生仔小脳からRT-PCR法によりグローニングした。そして、digoxigeninで標識したプローブを用いて、小脳発生過程におけるtenascin遺伝子発現様式をin situ hybridization組織化学法により形態学的に観察した。mRNAの局在はalkaline phosphatase標識抗digoxigenin抗体を用いて検出した。(2)正常マウスにおいては、胎生13日にすでに脳室面神経上皮にtenascin遺伝子発現細胞(tenascin gene expressing cell,TGEC)が一層に配列していた。胎生14日以降、TGECは皮質へ向かって放射状に移動を開始した。そして、胎生16日以降、皮質に数層の層状配列を形成していった。生後5日には、TGESはBergmann gliaの細胞体に相当した一層の配列を形成した。(3)リーラーマウスの小脳発生過程においては、TGESは脳室面から放射状に移動するが、胎生16日以降においても皮質への層状配列は形成されなかった。以上の所見から、リーラーマウスにおいてはtenascin遺伝子を発現した放射状グリアの形成、配列の異常が認められ、皮質層構造の形成異常に関与することを示唆する所見が得られた。さらに、プルキンエ細胞の分化、位置情報に関与すると考えられる転写因子rhombotinのcDNAクローニングを行ない、in situ hybridizationにより小脳発生過程における発現様式の検討を開始している。

中枢神経系の皮質層構造形成過程において、放射状グリアならびに幼若アストログリアは神経細胞配列の位置情報の呈示に関与し、アストログリアの発生機構は小脳皮質形成障害と密接な関連を持つと考えられる。本研究では、幼若アストログリアに特異的に発現する遺伝子を指標として、小脳皮質Bergmennグリアの発生様式と小脳アストログリアの発生・分化との関連を検討した。そして、この所見をもとに、遺伝的皮質形成障害を示すリ-ラミュータントマウスの小脳皮質形成過程におけるニューロン-グリア相関について形態学的解析を行った。2.リーラーミュータントマウス小脳におけるニューロン-グリア相関:プルキンエ細胞に特異的に発現する遺伝子L7のin situ hybridizationによりその配列を観察すると、正常発生過程では皮質に分布するプルキンエ細胞は分節状を呈した。これに対し、リーラーでは生後においても皮質下に分節状の集塊を形成していた。tenascin遺伝子を発現したBergmannグリアは皮質に分布するが、その突起の形態は形成異常を示した。さらに、GFAP陽性のアストログリアは内側のプルキンエ細胞集塊内には認められるが、外側の集塊内には認められなかった。以上の所見から、Bergmannグリアは小脳発生において放射状グリアに起源を有し、プルキンエ細胞の皮質への配列過程の制御に関与するとともに、アストログリアの分化はプルキンエ細胞との相互作用に依存する可能性が示された。したがって、リーラー小脳皮質形成障害はニューロン-グリアの細胞間相互作用の異常に起因することが強く示唆された。
上皮細胞間接着における新規分子Calminの機能解析

これまでの研究の中で、マウス胎児皮膚の発達過程で発現量が変化する新規の遺伝子としてCalminを単離した。このCalminはN端にCalponin類似のアクチン結合領域とC端に膜貫通領域を持つ。ヒト上皮株細胞であるHaCaT細胞やA431細胞を用いて検討した結果、Calminは上皮細胞において細胞間接着を構成する新規のタンパク質であることが示唆された。Calminの機能を明らかにすべく本年度は以下の検討を行った。1.これまでの研究によって、Calminは細胞間接着領域に局在することが明らかになっていたが、組織および細胞免疫染色を用いた検討により、核内にも局在することが示唆された。ウエスタン法を施行した結果、A431細胞をはじめとする上皮細胞の核画分にもCalminタンパク質の存在が確認された。ヒトCalminタンパク質の様々な切断変異体をGFP融合タンパク質としてMDCK細胞内で発現させたところ、膜貫通領域を欠き、かつ291380の領域を含むタンパク質が核に局在した。よって、ヒトCalmin291380ペプチド鎖内に核局在に必要な領域が含まれていることが明らかとなった。このペプチドに既知の核移行シグナル配列は見いだせない。どの様な機構により核に局在するのかを明らかにするためには更なる研究が必要である。2.前年度までにPlakoglobin(g-catenin)、p120cateninあるいはSmoothelinがCalminと結合するタンパク質である可能性が示されていたが、これを確認するための十分な検討が出来なかった。今後、継続すべき課題である。3.siRNA発現による発現抑制については、U6プロモーター持つプラスミドベクターに複数の標的配列を組み込み検討を行ったが十分な抑制効果を持つものが得られなかった。現在、tRNA^<VAL>プロモーター持つベクターを用いて新たに検討を行っている。我々が単離したCalminは、N端にCalponin類似のアクチン結合領域とC端に膜貫通領域を持つタンパク質である。本研究の目的は、Calminが上皮細胞内で相互作用をするタンパク質を同定し、Calminが関与する細胞間接着の分子機構を明らかにすることである。この目的に従って今年度は以下の研究を行った。(1)BacterioMatch II Two-hybrid System (Stratagene)を用いて相互作用するタンパク質の単離を試みた。スクリニング用のbaitとして、Calminタンパク質を3つの領域(N端;1301、中間;291643、C端;626972)に分けて調製した。N端をbaitとしてスクリーニングした結果、Smoothelinが単離された。Smoothelinは371アミノ酸から成るタンパク質でC端側に単一のcalponin homology (CH)domainを持つ。腸管平滑筋や血管平滑筋で発現が強く、幾つかの研究結果からα-smooth muscle actinとの関連が示されている。Western法により、A431細胞においてもSmoothelinの存在が確認されたが、CalminとSmoothelinとの関連については現在検討中である。このシステムによるスクリーニングについては、今後も継続して行うこととする。(2)上皮接着装置を構成するタンパク質に対する抗体を用いて、免疫沈降によるCalmin結合タンパク質の探索を行っている。(3)合成siRNAを用いた研究では、Calminタンパク質の有意な発現抑制作用が見られたが、細胞接着への影響は確認できなかった。さらに強力な抑制作用を期待して、アデノウイルスベクターを用いたsiRNA発現系の確立とプラスミドベクターに由来するsiRNAを安定に発現する細胞株の樹立を試みている。3.siRNA

発現による発現抑制については、U6プロモーター持つプラスミドベクターに複数の標的配列を組み込み検討を行ったが十分な抑制効果を持つものが得られなかった。現在、tRNA^<VAL>プロモーター持つベクターを用いて新たに検討を行っている。
大規模接触問題の領域分割法による並列解析手法の開発

大規模な接触問題解析を実現するために,領域分割法に基づく並列解析手法を開発することが本研究の目的である.最初に,摩擦のない接触問題の解法として, Semismooth Newton法の改良手法,内点法とSemismooth Newton法の組み合わせ手法を提案した.次に,内点法やSemismooth Newton法の反復の中に現れる等式制約条件付線形問題を多点拘束条件を考慮したBDD法で解くためのアルゴリズムの開発について検討した.GPGPU実装による高速化についてもプロトタイプコードを開発した.当初の研究計画には,摩擦のある大規模接触問題の解法の開発が含まれていたが,基礎的な検討にとどまり,研究期間内に実用的な手法を開発することはできなかった.申請者が提案したBDD法による等式制約条件付問題の解析手法と,申請者等がこれまでに開発した数理計画法に基づく大規模不等式制約条件付問題の解析手法(内点法+semismooth Newton法)をそれぞれ発展させた上で組み合わせ,次世代の超並列計算機上で大規模な摩擦のある接触問題解析を実現する.実用的な解析に用いることができるような解析コードを開発し,地震工学,建築構造分野等の例題に適用する.大規模な接触問題解析を実現するために,領域分割法に基づく並列解析手法を開発することが本研究の目的である.最初に,摩擦のない接触問題の解法として, Semismooth Newton法の改良手法,内点法とSemismooth Newton法の組み合わせ手法を提案した.次に,内点法やSemismooth Newton法の反復の中に現れる等式制約条件付線形問題を多点拘束条件を考慮したBDD法で解くためのアルゴリズムの開発について検討した.GPGPU実装による高速化についてもプロトタイプコードを開発した.当初の研究計画には,摩擦のある大規模接触問題の解法の開発が含まれていたが,基礎的な検討にとどまり,研究期間内に実用的な手法を開発することはできなかった.本研究の目的は,数理計画法に基づく接触問題の効率的解法を開発し,その中の線形問題をバランシング領域分割法により並列計算することにより,大規模接触問題の解析を可能とすることである.平成21年度には,以下の研究を実施した.1.内点法における線形問題への反復型適用内点法における線形問題の求解について検討した.バランシング領域分割法は,共役勾配法に対する前処理手法として定式化されているため,まず,内点法における線形問題に対して共役勾配法を適用することを試みた.内点法における線形問題は,ペナルティ法における線形問題と同様に非常に悪条件問題となる.制約前処理と呼ばれる手法を前処理として用いることにより,収束解が得られることがわかった.2.摩擦のある接触問題,動的問題についての検討摩擦のない接触問題の解法に対して,当初の計画以上に時間がかかったため.本年度では摩擦のある接触問題の定式化の整理のみを行った.また,バランシング領域分割法により動的解析を実施可能なコードを開発した.3.PCクラスタの構築購入したPCサーバにLinuxをインストールし,ネットワークで接続することでPCクラスタを構築した.また,並列計算用の開発環境,コンパイラをインストールした.本研究の目的は,バランシング領域分割法をベースとした接触問題の効率的解法を開発し,大規模接触問題の解析を実現することである.平成21年度には,以下のように理論と実装に関する研究を実施した.接触問題の解法として内点法とSemismooth Newton法を組み合わせた手法を開発した.内点法により解の近傍を計算し,そこでSemismooth Newton法に切り換えることで,少ない反復ステップで解を求めることができるようになった.提案手法はInternational Journal for Numerical Methods in Engineering誌に掲載された.2.摩擦のある接触問題,動的問題の解析コードの開発摩擦のある接触問題の解析コードのプロトタイプを開発した.今のところは線形ソルバーとしてスパースソルバーを用いており,次年度に接触,滑りの非線形問題に対する求解アルゴリズムの検討を行う予定である.また,バランシング領域分割法による非線形動的解析を実施可能な並列コードも開発した.3.PCクラスタの改良昨年度,構築したPCクラスタにバランシング領域分割法のコードを移植し,性能が出ることを確認した.更に,マルチコアCPUに対応できるように,OpenMPによるスパース行列,ベクトル積の並列計算について検討した.(1)BDD法による摩擦のない接触問題の解析コードの開発本研究の目的のひとつは,次世代のスーパーコンピュータで大規模な接触問題解析を実現することであり,そのために,本研究で開発する解析コードのベースとなるBDD法に基づく非線形有限要素解析コードであるADVENTURE-Solidの解析機能の汎用化を先に行うこととした.しかし,当初予定していた接触解析機能の実装作業は遅れており,本年度には完成しなかった.マルチコア型CPUへのOpenMP,pthreadによる対応等の機能は完成した.以上の成果を日本機械学会計算力学講演会等において発表した.(2)摩擦のある接触問題への対応引き続き,プロトタイプコードの開発を行い,スパースソルバーを用いたコードを完成させた.二つの直方体を滑らしたときの摩擦のある接触問題を例題としてコードのテストを進めた.(3)建築構造における接触問題建築構造における接触問題(合成梁と柱の接触,2枚のALCパネル外壁の接触等)についてメッシュ作成の手法について検討した.(4)GPGPU対応GPUを用いた接触判定アルゴリズムを検討,実装し,日本計算工学会で発表した.別途機能拡張している並列有限要素解析コードADVENTURE Solidは,BDD法に基づく固体の非線形応力解析が可能であり,OpenMPによるマルチコアCPU上でのスレッド並列計算機能も実装されている.また,多点拘束条件(MPC)を扱うことも可能である.

本年度は本コードに,Semismooth Newton法の一種であるactive-set法に基づく摩擦のない接触問題解析機能の実装を試みた.しかし,二つの直方体の接触問題に特化したプロトタイププログラムの実装しかできず,一般化については今後の課題である.ADVENTURE_Solidにより,多点拘束条件が数百万個付加された問題も解けるようにするために,射影の計算にスパースソルバーMUMPSを導入し,省メモリかつ高速に計算できるような実装方法を考案した.また,コースグリッドに付加されるMPCのペナルティ項の計算部分について,データの保存スキームを見直すことにより省メモリ化するためのアルゴリズムも考案した.3.摩擦のある接触問題に対する解法これまでに開発した摩擦のある接触問題を解くためのプロトタイプコードをBDD法に組み込むために,Augmented Lagrange法の収束性について調査した.4.建築構造における接触問題2枚のALCパネル外壁の接触問題について昨年度に引き続き検討を行った.5.まとめ4年間の研究成果をまとめた.達成されていない研究項目の今後の研究方針について検討した.
粘膜上皮層における抗原取り込みネットワークの解明

抗原取り込みに特化した細胞と考えられているM細胞の、亜集団も含めた外的制御因子や抗原取り込みメカニズム、分化誘導メカニズムを明らかにする目的で、M細胞特異的発現分子の同定と機能解析を行った。その結果、申請者らが発見した誘導型M様細胞は、その抗原取り込み能や形態などからM細胞と上皮細胞の中間的存在であることが示唆された。新規M細胞特異的分子として、GP2、MLPなどを同定した。GP2に関しては、FimHタンパク質を有する特定の細菌群がM細胞によって効率よく取り込まれるための足場として機能していることを共同研究により明らかにした。また、抗GP2抗体を樹立し、この抗体がワクチン抗原の効果的送達に用いることができることを確認した。他の分子に関しても遺伝子欠損マウスの作製、解析を通して、各分子のM細胞における機能解析を現在も進めている。平成20年度の研究実績について報告する。平成20年度は主に、初年度に得られた知見を基に共生細菌と上皮細胞並びにM細胞、絨毛M細胞の相互作用について解析を進めた。M細胞特有の糖鎖修飾構造であるα1,2-フコース将異的に結合するレクチンUEA-1で小腸上皮細胞を精査したところ、十二指腸側の絨毛ではUEA-1陽性細胞がほとんど観察されなかったのに対し、回腸部位ではほとんどの絨毛上皮細胞がUEA-1陽性であった。これらの上皮細胞の形態を電子顕微鏡にて観察したところ、典型的なM細胞や絨毛M細胞とは異なり、吸収上皮細泡と同様に規則的な微絨毛を有しポケット構造は見られなかった。これらのフコシル化上皮細胞の分布は腸内細菌の数鍬と相関する事から、腸内細菌刺激とフコシル化上皮細胞誘導の関係を調べるために、無菌マウス並びに抗生物質処理マウスを作成し解析したところ、フコシル化上皮細胞は完全に消失していた。これらの結果から、フコシル化上皮細胞は腸内細菌依存的に誘導される事が明らかとなった。また、様々なノトバイオートマウスの解析結果から、腸内細菌のうち回腸上皮細胞層に最優勢であるSegment filamentous bacteriaが、フコシル化上皮細胞を誘導する細菌の一つとして同定された。一方、これら回腸部位のフコシル化上皮細胞の抗原取り込み能を無菌マウスの上皮細胞と比較して解析したところ、フコシル化上皮細胞の方が病原細菌であるSalmonlla typhimuriumの取り込みが有意に上昇した。さらに、十二指腸と回腸め粘膜圃有層に存在する免疫担当細胞を解析したところ、特にB細胞、T細胞が回腸部位に多く集積されていた。以上の結果は、腸管における腸内細菌誘導性の新しい抗原侵入口の同定と共に、それらの細胞による免疫制御機構の存在を示唆する重要な発見と言える。抗原取り込み細胞として知られているM細胞は、その亜集団も含め、1)パイエル板・孤立リンパ小節といった誘導組織の上皮層にのみ存在する濾胞被覆上皮(Follicle-associated epithelium:FAE)-M細胞、2)絨毛上皮層に存在し、FAE-M細胞と相同の形質を示す絨毛M細胞、3)誘導組織と実効組織の両方の上皮層に存在するM-like細胞に区別される。効率的・効果的な粘膜免疫応答の誘導をちえた場合、FAE-M細胞を標的とした抗原送達系の構築が望まれる。我々は昨年度までに、FAE-M細胞の膜表面に特異的に発現する分子の一つとしてGP2を同定し、それに対するモノクローナル抗体を樹立した。今年度は、経口ワクチンモデルを用いてこの抗体の抗原送達系における効果を検討した。可溶性抗原である破傷風類毒素(tetanus toxoid; TT)をアビジンービオチン法により抗GP2抗体と結合させた経口ワクチンを作製した。これを週1回、計3回マウスに経口投与し、最後の投与から1週間後に血清と糞便を採取して、それぞれに含まれるTT特異的IgGおよびIgAをELISA法により定量した。その結果、TT結合抗GP2抗体の経口投与により、TT特異的糞便中IgAの産生のみならず、血清中IgG産生に関しても強い誘導効果が認められた。今後はこの抗体がさらに経口免疫寛容の誘導効果を有するかを検討していく予定である。また、昨年度までにDNAマイクロアレイ法を用いた網羅的な遺伝子解析によって、小腸組織においてM細胞特異的と同定された細胞内タンパク質のノックアウトマウスの作製を開始した。

この分子の完全ノックアウトマウスはすでに作製されており、胎生致死であることが報告されていたため、コンディショナルノックアウトマウスの作製を行った。定法に従い変異アレルを有するES細胞クローンを樹立した。このクローンを胚盤胞ヘマイクロインジェクションで移入し、現在キメラマウスの誕生を待っている。昨年度までにDNAマイクロアレイ法を用いた網羅的な遺伝子解析によって、小腸組織においてM細胞特異的と同定された細胞内タンパク質のノックアウトマウスの作製を開始した。このクローンを胚盤胞ヘマイクロインジェクションで移入し、キメラマウスを得、これと野生型マウスとの掛け合わせによりヘテロマウスを得た。現在、腸管上皮細胞特異的にCreタンパク質を発現するVillin1-Creマウスと交配を開始しており、M細胞特異的にこの遺伝子を欠損するホモマウスの誕生を待って、その表現型の解析に着手する予定である。加えて今年度は、前述の網羅的遺伝子解析結果をリアルタイムPCR法を用いて精査を行い、新たに5つのM細胞特異的遺伝子を同定した。このうちの一遺伝子に関してはin situハイブリダイゼーション法により、小腸上皮細胞においてM細胞特異的であることを確認している。この遺伝子に関してはコンディショナルノックアウトマウスの作製を開始し、M細胞における機能解析を行う予定である。また、他の4遺伝子に関しても組織学的にM細胞特異的に発現していることを継続して確認中であり、順次それらの遺伝子産物のM細胞における機能解析を開始する予定である。
上流側物体背後の円柱の空力振動のメカニズムの解明と風力発電装置への応用

本研究においては,各種断面の背後に置かれた円柱の空気力学的に極めて不安定な特性のメカニズムを各種風洞実験(主流方向と気流直交方向の2自由度支持及び気流直交方向の応答実験,スモークワイヤーを用いた可視化実験,熱線風速計による気流計測実験,微風圧計による圧力計測実験)ならびに渦法による断面周りの気流の解析によって検討すること,さらに,風力発電への利用の可能性について,自然風を模擬した乱れた気流中における振動特性の把握,風向が変化した場合の振動特性の把握及び振動振幅の変化の発電効率に及ぼす影響等について検討し,風力発電装置の実用化のための基礎的データを収集することを目的としていた.本研究では,以下に示す項目について検討を行い,得られた成果の概要を併せて示す.1)物体背後の後流側円柱のウェイクインデュースド振動の特性把握振動現象の正確な特性把握と風力発電の基礎資料として,上流側角柱の寸法・形状・設置位置等を変化させて後流側円柱の非常に複雑な応答特性を調査した.2)複数物体断面周りの流れの特性から円柱の空力振動の発生メカニズムの把握流れの可視化と精密な気流特性の計測を実施し,後流側円柱の空力振動の発生メカニズムについて検討した.3)渦法による複数物体周りの流れの解析による円柱の空力振動の発生メカニズムの把握渦法による複数物体周りの流れの解析によって後流側円柱の空力振動の発生メカニズムについて検討した.物体断面を近似する渦点全てから渦放出を行うことによる渦点の移動計算量のおびただしい増加に対して並列計算の有効性が検証された.これらの検討により,上流側物体から形成される後流の幅と下流側円柱の直径の割合,上流側角柱の厚みで基準化した下流側円柱の振動発現風速と角柱の後流幅等により,円柱の空力不安定振動を特徴づけると共に風力発電のための基礎資料が得られた.本研究においては,各種断面の背後に置かれた円柱の空気力学的に極めて不安定な特性のメカニズムを各種風洞実験(主流方向と気流直交方向の2自由度支持及び気流直交方向の応答実験,スモークワイヤーを用いた可視化実験,熱線風速計による気流計測実験,微風圧計による圧力計測実験)ならびに渦法による断面周りの気流の解析によって検討すること,さらに,風力発電への利用の可能性について,自然風を模擬した乱れた気流中における振動特性の把握,風向が変化した場合の振動特性の把握及び振動振幅の変化の発電効率に及ぼす影響等について検討し,風力発電装置の実用化のための基礎的データを収集することを目的としていた.本研究では,以下に示す項目について検討を行い,得られた成果の概要を併せて示す.1)物体背後の後流側円柱のウェイクインデュースド振動の特性把握振動現象の正確な特性把握と風力発電の基礎資料として,上流側角柱の寸法・形状・設置位置等を変化させて後流側円柱の非常に複雑な応答特性を調査した.2)複数物体断面周りの流れの特性から円柱の空力振動の発生メカニズムの把握流れの可視化と精密な気流特性の計測を実施し,後流側円柱の空力振動の発生メカニズムについて検討した.3)渦法による複数物体周りの流れの解析による円柱の空力振動の発生メカニズムの把握渦法による複数物体周りの流れの解析によって後流側円柱の空力振動の発生メカニズムについて検討した.物体断面を近似する渦点全てから渦放出を行うことによる渦点の移動計算量のおびただしい増加に対して並列計算の有効性が検証された.これらの検討により,上流側物体から形成される後流の幅と下流側円柱の直径の割合,上流側角柱の厚みで基準化した下流側円柱の振動発現風速と角柱の後流幅等により,円柱の空力不安定振動を特徴づけると共に風力発電のための基礎資料が得られた.
In situ hybridizationによる血小板活性化因子受容体の眼内分布

1.血小板活性化因子受容体cDNAより約1kbのコーディング領域のみを新たなベクターにサブクローンした。このplasmidDNAよりコーディング領域とハイブリダイズするcRNAプローブを作成し、眼組織においてin situ hybridizationを行った。現在までに得られた当受容体に対する抗体は免疫組織染色に使用できないので、蛋白としての同定を組織切片で行うことはできなかった。2.結果・考察:当初、hybridizationによるシグナルは非常に弱く、通常のin situ hybridizationの検出感度を下回った。プローブの比活性を高くし、ハイブリダイズ後の洗浄の条件を最適化することによって特異的シグナルを検出することが可能になった。シグナルは網膜の神経節細胞層、内顆粒層、虹彩上皮、毛様体に認められた。より弱いシグナルが網膜外顆粒層、視細胞内節に認められた。試験的実験の結果では、発生の経過中で発現が著しく変化する段階はなかった。ハイブリダイズ後に行うニッスル染色およびヘマトキシリン・エオジン染色ではシグナルをもつ細胞の同定は困難であった。一方、脳組織において同様のin situ hybridizationを行ったところ、ニューロンだけでなく、グリア系の細胞にも当受容体mRNAが発現していることが判明した。現在、細胞マーカーを使用した染色を併用し、発現細胞の同定を目標にさらに解析を続けている。
混合病棟の小児看護初心者を教育する中堅・達人のための小児看護人材育成プログラム

本研究は、混合病棟において、小児への看護が初心者である看護師への教育担当者が抱える課題とその方策を明らかにし、それをもとに作成した研修プログラムを教育担当者対象に実施し、参加者から得られたデータによってプログラムの評価を行った。本プログラムは、混合病棟における小児看護初心者への教育担当者の教育力や気づきを高めるだけでなく、小児看護初心者という同僚を認め、尊重し合う組織文化の育成にも貢献する可能性がある。1.混合病棟における小児看護教育および教育担当者の現状把握混合病棟で初心者への教育を担当している小児看護経験3年以上および5年以上の看護師7名に半構成的面接法による面接調査を実施した。4施設から研究協力を得ることができ、病床数2655の混合病棟での小児病床は1027であった。看護師7名は、全員女性で、20代3名、30代3名、50代1名、平均小児看護経験年数は7.02年であった。面接内容は,混合病棟において小児看護初心者への教育を担当するうえでどのような工夫をしているか,どのようなことが困難か,その困難に対しどのように対処しているか等を中心とした。面接内容の分析から、成人患者とは違う特殊な小児ケアや、子どもよりも母親への関わりに戸惑う小児看護初心者への教育に困難を感じていることや、自分より年上の小児看護初心者への教育のやりづらさ、教育体制が整っていないことへの不安などが明らかになった。2.育成プログラム作成に向けた検討1.を基に,育成プログラムを実施する時期,時間,内容,アウトカム指標等を検討した。面接調査の分析結果から、混合病棟では、特殊性の高い小児看護からスタートさせたほうがよいという管理的な視点ではなく、小児看護初心者の立場になった教育支援が必要であることが示唆された。よって、病棟の研修等を尊重した上で次年度初心者を迎えるプログラムをスタッフとともに作成するための計画を立て、アウトカム指標として研究代表者が開発した尺度および既存尺度を使用し、プログラム前後の変化を把握することとした。以上の検討のために、専門家会議を2回実施した他にメールでも意見交換を行った。1.育成プログラム実施に向けた検討:プログラムの具体的内容、回数、時期、評価指標等について、前年度の研究成果をもとに、さらに専門家会議において検討した。2.育成プログラム試案の実施:1)育成プログラム参加者の選定:プログラムの参加者として、平成26年度に実施した面接調査の協力を得た施設および新たに協力依頼した施設の中から選定し、施設責任者の同意を得て参加者を募った。その結果、2施設計6名の協力を得ることができた。2)育成プログラムの実施:回数は、参加者の負担を考慮し、院内研修等の時期と重複しないように2回とし、1回目終了半年後に2回目を計画した。1回のプログラム所要時間は90分とした。内容は、【第1回】1導入5分(プログラム説明、プロフィール記入)、2講義25分(混合病棟における小児看護初心者教育の課題と方策)、3休憩5分、4リフレクション45分、5まとめ10分、【第2回】1導入5分、2リフレクション45分、3休憩5分、4面接調査2030分とした。第1回目に「私の取り組みシート」を配布し「小児看護初心者教育の目標」「半年の取り組み計画」「半年間の取り組みの経過」「まとめ・今後の課題」を記入してもらうよう依頼した。今年度はフィールドの都合で2施設とも第1回目のみ実施し、第2回目は平成28年度に予定している。3.平成26年度の研究成果の公表:1)学会発表「教育担当者がとらえた混合病棟における小児看護初心者への教育の課題とその方策」第35回日本看護科学学会学術集会、2)学術雑誌発表「教育担当者がとらえた混合病棟における小児看護初心者への教育の課題と方策」ヒューマンケア研究学会誌、7(2)、11-18、2016研究代表者の所属機関異動により、研究協力施設との調整開始が遅れたこと、平成26年度に面接調査を実施し、今回依頼を予定していた施設の研究協力者の異動により、プログラム実施についての協力が得られなかったこと、それにより新たな協力施設を開拓したため、プログラム実施開始時期が予定より遅れたことによる。プログラムは、2回セットとし、第1回目実施半年後に第2回目を計画しており、第2回目は平成28年度に実施することとなった。1.育成プログラム試案の実施:平成27年度に第1回目プログラムを実施し、平成28年度は第2回目を第1回目の約半年後に実施した。対象として、第1回目参加者と同じ2施設6名の協力を得た。第2回目の内容は、1導入5分、2リフレクション45分:第1回目に配布した「私の取り組みシート」に小児看護初心者への教育の計画と評価を記載してきてもらい、それをもとにリフレクションを実施、3休憩5分、4参加者への個別面接調査2030分とした。2.育成プログラムの評価:参加者への面接データを内容分析した結果、プログラムの評価は、「プログラムの実施に対する評価」と「プログラムの内容・方法に対する評価」に分けられた。参加者は小児看護初心者にとって特殊性の高い小児看護の経験の積み重ねを支援していた。また、教育担当者が小児看護初心者のキャリアから学び、キャリアを考慮して対応したことも成果としてとらえていた。一方、小児看護初心者教育のお手本がなく、小児看護初心者教育の評価は難しかったと課題をあげていた。

プログラムの実施方法は適切であり、リフレクションのファシリテートによって、思いを表出できたことや、取り組みシートによって意識して教育に取り組めたことは、小児看護初心者教育の課題の明確化につながった。プログラムを継続して成果を還元することや、課題や目標の明文化、日々の業務の中で評価が課題としてあげられ、教育担当者へのサポートの必要性が示された。3.学会におけるテーマセッション:「既卒の小児看護初心者の強みを活かそう!」日本小児看護学会第26回学術集会本研究は、混合病棟において、小児への看護が初心者である看護師への教育担当者が抱える課題とその方策を明らかにし、それをもとに作成した研修プログラムを教育担当者対象に実施し、参加者から得られたデータによってプログラムの評価を行った。本プログラムは、混合病棟における小児看護初心者への教育担当者の教育力や気づきを高めるだけでなく、小児看護初心者という同僚を認め、尊重し合う組織文化の育成にも貢献する可能性がある。研究代表者の先行研究において協力を得た小児病棟を有する施設から混合病棟を選定して研究協力を求めたことで、協力が得やすく、面接調査がほぼ計画通りに進んだと考えられる。1.育成プログラムの実施と評価平成27年度に第1回目を実施した施設で、第2回目を実施する。内容は、1導入5分、2リフレクション45分、3休憩5分、4面接調査2030分とする。1回目に配布した「私の取り組みシート」の記載内容を活用する。面接内容から育成プログラムの評価を行い、改善すべき課題を明確にする。2.育成プログラムの修正・改良評価結果をもとに、研究分担者や混合病棟看護師らとの検討会、研究分担者との専門家会議を通じ、育成プログラムの修正・改良を行う。また、学術集会で小児看護初心者への教育支援についてのテーマセッションを企画・実施し、本育成プログラム修正・改良への示唆を得る。小児看護学育成プログラム試案の実施1.育成プログラム参加者の選定:プログラムの参加者として、平成26年度に面接調査の協力を得た施設の中から選定し、施設責任者の同意を得て、参加者を募る。2.育成プログラムの回数・時期:回数は,参加者の負担を考慮し,院内研修等の時期と重複しないように計画する。1回につき,3040分とし,最低3回連続して実施する。プログラムにはリフレクションの勉強会を取り入れる。3.評価指標等の調査:プログラム実施前後において、1研究代表者が開発した短期入院の子どもと家族への看護実践評価尺度23項目,2看護師の自律性測定尺度47項目,3参加者の性別,年齢,看護経験年数,小児看護経験年数,教育担当経験年数,小児病棟配置希望の有無,新卒からの継続小児病棟勤務の有無,卒業看護基礎教育課程,婚姻の有無,子どもの有無,4プログラム継続率(参加の程度)について調査し、プログラム実施前後の差を明らかにする。あわせて,プログラムの効果について,参加者への面接調査を行い、質的に分析する。研究者の所属機関異動により、研究協力施設開拓が遅れ、育成プログラム実施の開始が予定より遅くなったこと、それにより実施にかかる経費、旅費が少なかったことによる。研究協力者の都合で、面接調査の時期が年度末になった対象が1名いたため、それにかかる費用を繰り越した。育成プログラム実施および学術学会でのテーマセッションにかかる経費として使用する。
薫物文化の包括的把握と再興に向けた文献学的研究

2018年度には、3名の研究協力者(志學館大学専任講師・日高愛子氏、帝京大学短期大学専任講師・中村健太郎氏、広島県立歴史博物館主任学芸員・石橋健太郎氏)とともに2度にわたり公益財団法人陽明文庫での古文書古典籍閲覧調査会を実施して、同文庫に収蔵される近衛家伝来の香・薫物関係の貴重書の閲覧及び資料収集調査を行った他、研究代表者が単独で武雄市歴史資料館を訪問して、武雄鍋島家伝来の香・薫物関係の貴重書の閲覧及び資料収集調査を行った。閲覧した資料の一部については翻刻稿を執筆中である他、書中に記載される室町時代から江戸時代までの人物についての調査研究も行い、これらの人物の「合香家」としての新たな業績の発掘と検証に取り組んでいる。執筆活動と並行して、学術大会における口頭発表、大学及び地方自治体が市民を対象に無償で開催するワークショップへの出講も行い、研究成果の社会への還元と市民との対話の実現に努力した。これらのワークショップでは、薫物文化の歴史と実相について、秘伝書や王朝物語作品等の記述をもとに解説を行った後、実際の処方に基づく調香作業を実施する等して、薫物文化を体験的に理解、習熟いただけるよう努力した。なお、2018年度に実施したワークショップでは、薫香の専門企業(鳩居堂)の協力を得て、信頼できる品質の香料を使用することができた。研究の進捗状況は予想以上に順調であることから、2019年度には、当初計画で最終年度に予定していた国内での資料収集調査及び国際研究集会での成果報告を、前倒しして実施するべく準備を進めている。これに伴い、研究協力者との連携強化を図る必要から、研究協力者3名の内2名(日高氏及び中村氏)については、2019年度より役割を研究分担者に変更した。主たる閲覧調査先である公益財団法人陽明文庫の理解と研究協力者3名の協力を得て、計画当初は3年を要するものと予測していた閲覧調査期間を、1年に短縮して完了することができた。本研究の波及効果として、計画当初に予定しなかったアウトリーチ活動への、2019年度以降の参加についても決定している。岩手県西磐井郡平泉町では、2021年6月に世界遺産登録10周年を迎えるのを前に「平泉のかをり創造プロジェクト」が発足して、古代の薫物の処方などをもとに、地域の新たな土産品として〈平泉のかをり〉の開発に取り組むことが計画されている。プロジェクトの参加者は地域住民を始めとする有志である。プロジェクトでは、参加者が平安時代の類纂と伝わる文献に記載された薫物の処方などを読み解きながら、奥州藤原氏の繁栄した当時の平泉において調合、賞玩されたであろう薫物についての、基礎的な知識及び調合技能を習得できるような催しの実施も計画中である。研究代表者はこのプロジェクトに参加して、必要な情報提供等を行う予定である。これにより、本研究の将来的な波及効果として期待している〈薫物文化の復興〉、すなわち、近代以降に衰退した薫物文化が、身近な教養や嗜好として再び普及し、多くの人々が手軽に、かつ持続的に享受できるような社会の実現に向けて、着実な一歩を踏み出すことができたと自負している。当初計画では研究期間の最終年次に予定していた国際研究集会での研究成果報告を、研究期間の2年次にあたる2019年度中に実施する計画に改め、研究分担者2名及び研究協力者2名(内1名は海外在住)との発表パネルを編成し、2019年3月に応募を完了した。採択された場合には、2019年11月中に国際研究集会でのパネル形式による研究成果報告を実施する計画である。上記の応募が残念ながら不採択となった場合には、研究期間の3年次にあたる2020年度中の計画として予定している国内の某家に伝来する薫物・香関係の古文書古典籍の閲覧調査を前倒しして、2020年2月中に実施したい考えである。岩手県を拠点とした「平泉のかをり創造プロジェクト」にも引き続き参加して、2021年度中の完成と発売に向けた協力を行う予定である。なお、2018年度中の調査研究成果については、近日中に論文化し、2019年10月発行予定の雑誌に掲載して公開する他、同時期に開催予定の市民向け公開講座等において、講演又は展示の形式により公開する計画である。