hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
精神障害者の就労支援予測に関する研究

東日本大震災の影響による協力機関への負担を考慮し、調査が遅れているが、今後は現在フォローアップ中の対象者の追加データをもとに、実証データに基づく科学的かつ合理的な精神障害者の就労支援の特徴を描く予定である。【現在までの達成度】800本年度は、精神障害者の生活技能評価及び就労支援における評価に関して、予備調査におけるデータの解析を中心に、医療及び福祉領域における既存の知見と比較検討を行い、得られたデータから、就労支援における評価として妥当な指標の抽出、調査項目の選定を行った。さらに、研究協力可能な施設(病院・クリニックの精神科デイケア、障害福祉サービス事業所等)を募り、調査協力への内諾を得、各施設の倫理委員会審査承認後に調査を実施する準備を整えた。現在迄の調査結果から、医療・福祉系サービスの施設属性を問わず就労を希望する利用者が、より就労に近いサービスへ移行していることが結果として明らかになっている。さらに、国際生活機能分類;ICFの「心身機能」と「活動と参加」の構成要素から症状や生活技能の変化に着目した支援量のスケールでは、精神科デイケアや障害福祉サービス事業所の利用の開始時において、「重度の困難;(常時介入を必要とするもの)」が含まれた者はおらず、それは終了時においても同様であった。課題項目別では『動機付け』『注意の維持』『注意の移動』については支援量の減少がみられ、全員が「自立」・「見守り」の評定であった。サービス終了時に他の支援量(診察の頻度、他サービス機関の利用時間)に大きな変化はなく、症状が安定していたと考えられた。東日本大震災の影響による協力機関への負担を考慮し、調査実施が遅れているが、今後は、現在フォローアップ中の対象者の追加データをもとに、実証データに基づく科学的かつ合理的な精神障害者の就労支援の特徴を描く予定である。平成23、24年度に得られた前向き追跡調査の結果を基に、利用者のサービス開始時とサービス終了時の生活機能の比較を行い、1就労支援ステージの分類とそのステージにあったサービス供給量の予測、2就労支援量の予測(目標、時間)について得られたデータの解析を進める。さらに、就労した者や施設終了後の利用者の同意が得られれば、就労支援担当者を通じて可能な限り就労継続の期間についてフォローアップを行う。回収した調査票については、随時電子化し遅滞なきよう分析を行い、その保管にも十分に注意する。引き続き東日本大震災の影響による協力機関への負担を最小限に留める工夫を常に念頭に置きながら、調査の運営・管理については万全な配慮を行い遂行にあたる。予備調査、並びに平成23年度に得られた結果を基に、利用者のサービス開始時とサービス終了時(前向きコホート)の能力の比較を行い、(1)就労支援ステージの分類とそのステージにあったサービス供給量の予測、(2)就労予測(目標、時間)の提示について得られたデータの解析を行う。
特殊偏光ビームによる異形穴レーザ加工

レーザ・ビームの偏光分布を利用して微細穴の形状を制御するレーザ加工技術の開発を行う。レーザによって数10umの径をもつ深穴加工が行われているが、その形状は丸穴に限られる。ビーム走査や強度分の制御だけで、集光回折限界に近い開口穴の形状を制御することは原理的に困難である。本研究では、レーザから射出されたビームの偏光を外部素子によって特別な偏光分布をもつビームに変換し、偏光による吸収率の差を利用することで微細穴の形状制御を可能にすることを数値シミュレーション、および、実験により実証する。この成果は、微小ノズル穴の形成技術として、モノ作り産業に寄与することが期待される。
「真理の多元論」と整合的な形而上学的立場についての研究

真理論においては「真理の多元論」と呼ばれる立場が21世紀以降において注目を集めている。《真理についての哲学的立場》と《形而上学的世界観》との間には密接な関係があるはずだが、従来の対応説などとは異なり真理の多元論についてはそこから帰結する形而上学的描像についての研究が十分に進んでいない。本研究では、両主題に繋がりを作るための補助線としてプラグマティズムに着目し、《真理の多元論のための形而上学的世界観》を構築することでこの現状の打開を試みる。
パーリ聖典における梵我一如思想の併存

インド初期仏典中には梵我一如思想が2つ併存する.1つはバラモンによる,四無量を通じて最高神brahman-(梵天)への到達を説くもの.もう1つは仏教徒による,仏教徒が最高の境地とする涅槃をbrahman-と称し,そこへの四諦による到達を説くものである.これについて,仏教徒はバラモンの主張を認め,四無量を仏教の修行道中に取り込んだ.一方で仏教徒は,梵天は最高神と言えど輪廻に囚われた者であり,輪廻から脱した涅槃への道を説いたのがブッダであると主張し,仏教の優位性を保とうとした.なおこの修行構造では,最高神brahman-への到達を目指す修行は,仏教徒のbrahman-つまり涅槃へ向かう事にもなる.本年度は,本研究を進める上で必須となる,パーリ聖典におけるbrahman-の用例(全約5000例)の収集,読解,整理を進めた.また,仏典に限らず,ヴェーダ文献,ジャイナ教文献,マハーバーラタ等の文献におけるbrahman-について論じられた国内外の主要な二次文献を収集した.本年度の研究の中間報告として,人文科学研究所(京都大学)の進める研究プロジェクト「ブラフマニズムとヒンドゥイズム」の定例研究会において,「初期仏典における梵我一如の併存」と題した研究発表を行った(2017年1月20日,於人文科学研究所,京都大学).この発表では,パーリ聖典中に,仏教側の主張する梵我一如思想と,バラモン側の主張する梵我一如思想とが併存していること,仏教側がバラモン側のその思想を,「改変なし」にそのまま自分たちの修行体系の「途中に」取り込んでいる,つまり,バラモン側の主張をその通りに認めつつ,かつ,仏教側は自分たちの修業体系の優位性を保持していることを指摘した.申請者は初期仏教を専門とするが,上記プロジェクトの主な参加者は,ヴェーダやヒンドゥー文化の研究者である.ここでの発表を通じて,異分野間で最新知見を共有する機会を得た.また,この様に異分野間で学術的交流を行う際に注意すべき様々な課題が明確になったことも,本研究の様な(インド学内での)学際的研究を進める上で大きな収穫となった.なお,この発表が契機となって,同プロジェクトにより開催されるシンポジウム(2018年9月末頃)に登壇し,更なる成果を発表させて頂くことになった.また,現在定期的に開催されているジャイナ教律文献研究会へ参加し,そこでの交流を通じて,ジャイナ教におけるbrahman-の用法について多くの示唆を得た.「研究実績の概要」で述べた様に,brahman-の用例は,パーリ聖典には約5000例存在する.その用例数ゆえに収集だけでも多くの時間を要する.しかし,報告者は本研究と関連する研究を先に行っており(「パーリ聖典における四無量心の予備的研究:四無量心と涅槃の関係について」『真宗文化』25, pp. 1-21),その際からbrahman-の用例収集に着手していた為,収集作業は本年度内に完了し得た.現在は読解,整理を進めている最中である.この作業も,次年度夏頃の完了を予定している.また,本研究を進める上で,「研究実績の概要」に挙げた仏教外分野におけるbrahman-の用法を知る必要がある.これについては,二次文献の渉猟や,「研究実績の概要」に述べた異分野の研究者らとの情報交換により,充分な情報を得ることが出来た.ただし,この情報の多くは,あくまで,二次文献や異分野の研究者といった媒介を通じた情報である.本来であれば,自ら各分野の原典を参照せねばならない.可能な限り,主要例に関しては直接原典を参照する様努めているが,参照し得ていない原典も少なくない.その理由は,パーリ聖典におけるbrahman-の用例だけでも約5000例も存在する為である.今後も仏教外分野の原典参照は可能な限り継続するが,基本的に,本研究ではパーリ聖典における用例を徹底的に調査することに集中し,異分野における用例の本格的な渉猟は,本研究完了後,改めて行うことにしたい.紀元前6世紀頃のインド文化を伝える古ウパニシャッド文献によれば,当時のバラモンは,最高原理ブラフマンと,アートマン(個々人に備わる霊魂的存在)との合一を究極的境地として目指す,いわゆる梵我一如思想を信奉していたという.その後,紀元前4-5世紀頃に仏教が現れるが,その頃の様子を伝えるインド初期仏典に,前述の梵我一如思想の痕跡を見る事が出来る.しかしその内容は古ウパニシャッド文献とは若干異なり,バラモンは最高神ブラフマーという人格神になる事を目指していた事になっている.しかもその合一方法は,四無量心(慈悲喜捨の無限の拡散)という,仏教以前または同時代の文献には確認されない修行実践とされている.一方,インド初期仏典には,当時の仏教徒が再定義した梵我一如思想も現れている.即ち仏教徒は,彼らにとっての究極的境地である涅槃を,古代インドの伝統で究極的存在の名であった梵と称し,そこへ自身(我)が到達する事を梵我一如と呼んだのである.以上の如くインド初期仏典には,バラモンにとっての究極的境地であるブラフマー神になるという梵我一如と,仏教徒が再定義した涅槃への到達という梵我一如との,2つの梵我一如が存在する.

更にこの2つの梵我一如の関係を見ると,仏教徒による異教の巧みな取り込みを指摘出来る.即ち仏教徒は,バラモンが主張した,ブラフマー神への四無量心による到達方法を,全くその通りに是認し,仏教の修業段階中の高位に位置づけた.しかしブラフマー神も輪廻に囚われた存在でしかなく,輪廻を脱した涅槃こそが真の究極的境地であり,そこへと到達する修行を説いたのがブッダであると主張したのである.ここからは,異教の思想を全く否定する事なしに自身を優位性を保とうとする立場を指摘する事が出来る.また本研究課題の遂行中,四無量心の起源について見通しを得ることが出来た.そこで,その詳細の解明を次なる課題としたい.インド初期仏典中には梵我一如思想が2つ併存する.1つはバラモンによる,四無量を通じて最高神brahman-(梵天)への到達を説くもの.もう1つは仏教徒による,仏教徒が最高の境地とする涅槃をbrahman-と称し,そこへの四諦による到達を説くものである.これについて,仏教徒はバラモンの主張を認め,四無量を仏教の修行道中に取り込んだ.一方で仏教徒は,梵天は最高神と言えど輪廻に囚われた者であり,輪廻から脱した涅槃への道を説いたのがブッダであると主張し,仏教の優位性を保とうとした.なおこの修行構造では,最高神brahman-への到達を目指す修行は,仏教徒のbrahman-つまり涅槃へ向かう事にもなる.次年度も,基本的には本年度同様,パーリ聖典中のbrahman-の読解・整理,各研究会における発表や参加による情報収集を行う.ただし次年度は特に,仏教分野を中心に研究発表を行う.これにより,本年度得た仏教外分野におけるbrahman-の用法に関する最新知見を仏教分野に持ち帰って学界を裨益し,かつ,仏教文献の専門家から本研究への批判を受け,研究精度を高めたい.また,最終年度となる次年度中に,パーリ聖典中のbrahman-の用例表を,電子媒体で公開したい.パーリ聖典には一応コンコーダンス(F. L. Woodward et al. (eds.), Pali Tipi.taaka.m Concordance, 3vols., Oxford: The Pali Text Society, 1991-1993)が存在するが,brahman-より相当前の語で,未完のままプロジェクトは終了してしまった.brahman-という語は,仏教に留まらず他の様々な古代インド文献において重要な位置を占める.申請者による用例集の公開は,専門家にとっても骨の折れる膨大な用例数の俯瞰視点を供する点で,仏教分野に限らず広く斯学に利益をもたらすことになる.今のところ,用例集の公開の場としては,Academia.edu等の既存の論文共有サイトの使用を予定している.必要な機能が備わり,独自のサイトを運営するコストも掛からない為である.29年度が最終年度であるため、記入しない。インド初期仏教文献学29年度が最終年度であるため、記入しない。
心筋梗塞発症関連遺伝子リンホトキシンαによる細胞接着制御機構の解明

心筋梗塞発症関連遺伝子リンホトキシンα(LTA)による細胞接着の機序を検討した。LTAは接着因子の発現を増強することにより、動脈硬化の初期段階である単球・血管内皮細胞の接着に寄与していた。LTAによる接着因子の発現と細胞接着の増強は、TNF I型受容体、PI3K-Akt / NFkB経路の活性化を介していた。我々は大阪大学を中心とした多施設共同研究である大阪冠症候群研究会(OACIS: Osaka Acute Coronary Insufficiency Study)の遺伝子バンクを用いて症例対照研究を行い、Tumor Necrosis Factor (TNF)スーパーファミリーの一員であるリンホトキシンα(LTA)が心筋梗塞発症関連遺伝子であることを見出した。またLTA遺伝子の多型は機能的差異を有し、転写活性およびICAM産生を変化させること、またLTA遺伝子のみならずその結合蛋白であるGalectin-2遺伝子の多型は心筋梗塞発症に深く関与していることを明らかにした。しかしながらこれまでLTAに関する基礎的研究は主に免疫系においてなされてきたのみであり、その動脈硬化における役割はほとんど解明されていなかった。そこで我々は動脈硬化におけるLTAの役割を解明するため、ヒト臍帯静脈内皮細胞(HUVEC)、ヒト冠動脈内皮細胞(HCAEC)においてE-セレクチン、VCAM、ICAMなどの細胞接着因子の発現がLTAにより強く特異的に誘導されることをAffymetrix社製Focus array Gene Chip(約8000項目)および定量的PCR法、ウエスタンブロッティング法により確認した。また、LTAで刺激されたHUVECには単球の接着が増強されること、またこの血管内皮細胞と単球の接着に関わる一連の機構にTNF受容体(I型)を介したPI3K(フォスファチジルイノシトール3リン酸)/Akt/NF-KB経路が関与していることを明らかにした(投稿準備中)。すなわちLTAは血管内皮細胞における接着因子の発現を誘導し、またそれにより動脈硬化の初期段階である単球と血管内皮細胞の接着を増強することにより動脈硬化の初期段階を制御しているものと考えられる。我々は大阪大学を中心とした多施設共同研究である大阪冠症候群研究会(OACIS: Osaka Acute Coronary Insufficiency Study)の遺伝子バンクを用いて症例対照研究を行い、Tumor Necrosis Factor(TNF)スーパーファミリーの一員であるリンホトキシンα(LTA)が心筋梗塞発症関連遺伝子であることを見出した。また、LTAで刺激されたHUVECには単球の接着が増強されること、またこの血管内皮細胞と単球の接着に関わる一連の機構にTNF受容体(I型)を介したPI3K(フォスファチジルイノシトール3リン酸)/Akt/NF-KB経路が関与していることを明らかにした。
グリオーマにおけるp53リン酸化と標的遺伝子の選択性に関する検討

ヒトグリオーマ細胞株におけるp53誘導性のアポトーシスには、p53の15番目と20番目のセリン残基のリン酸化が深く関与しており、両セリン残基のリン酸化が同時に起こった場合には、それだけで十分にp53誘導性のアポトーシスが引き起こされる。その際にはp53標的遺伝子の一つであるFasおよびPUMA遺伝子の転写活性が選択的に上昇し、各々death receptor pathwayとmitochondrial pathwayを経由してp53誘導性のアポトーシスが惹起される。1.グリオーマ細胞におけるp53遺伝子導入と生物学的効果の検討p53遺伝子に変異を持つグリオーマ細胞株(U251)に野生型p53遺伝子を導入すると、p53のN端側のセリン残基(Ser6,9,15,20,33,37,46)がリン酸化され、劇的なアポトーシスを引き起こすことがWestern blottingおよびAnnexin V assayにより確認された。一方野生型p53遺伝子を有するグリオーマ細胞株(U87,D54)に野生型のp53遺伝子を導入しても、同セリン残基のリン酸化は起こらず、アポトーシスも誘導されなかったが、DNA障害性のストレス刺激として、放射線照射あるいはプラチナ製剤を追加投与したところ、同セリン残基がすべてリン酸化され、アポトーシスが誘導された。これによりp53のN端側のセリン残基のリン酸化がp53誘導性のアポトーシスに非常に重要な役割を果たしていることが明らかとなった。2.グリオーマ細胞における53のリン酸化と標的造伝子の選択性の検討グリオーマ細胞株において、p53のリン酸化により引き起こされるアポトーシスがどのようなpathwayを賦活化して誘導されるのかをWestern blottingにより確認した。アポトーシスを起こした細胞ではCaspase8および9がともに活性化されていたことより、death receptor pathwayおよびmitochondrial pathwayの両者がともに賦活化されてアポトーシスを引き起こすことが確認された。さらにその上流のp53標的遺伝子の発現をWestern blottingにより確認したところ、それぞれのpathwayを賦活化するFas、PUMAの発現量が有意に上昇していたが、Baxの発現量には変化を認めなかったことより、p53のリン酸化により特定の標的遺伝子が転写活性されることが明らかとなった。3.グリオーマ細胞におけるp53の特異的リン酸化の担う役割の検討グリオーマ細胞株においてp53のN端側のセリンおよびスレオニン残基のリン酸化がp53誘導性アポトーシスを引き起こすが、その時にFasやPUMAなど特定のp53標的遺伝子の発現量が上昇していることがウエスタンブロット法で確認された。ここでp53のN端側のセリン残基やスレオニン残基を選択的に擬似リン酸化させたp53遺伝子発現プラスミドやアデノウイルスを用いて、グリオーマ細胞株に特異的リン酸化を起こしたp53遺伝子を発現させることで、また選択的に同残基のリン酸化をブロックするように変異させたp53遺伝子を発現させることで、同残基のリン酸化が担う役割について検討した結果、18番目のスレオニン残基(Thr18)と20番目のセリン残基(Ser20)が選択的に同時にリン酸化された場合にp53誘導性のアポトーシスを引き起こすことがcell cycle analysisやAnnexin V assayで確認された。また同様にSer15とSer20が選択的に同時にリン酸化された場合も、p53誘導性アポトーシスを引き起こすことが確認された。一方Ser15やSer20単独のリン酸化だけではアポトーシスが誘導されなかったことから、グリオーマ細胞株におけるN端側のセリン残基は複数箇所が同時にリン酸化された場合に、p53誘導性のアポトーシスが引き起こされることが示唆された。この時のp53標的遺伝子の活性化をChIP assayで確認したところ、PUMAやFasなどの特定の標的遺伝子の転写活性が上昇していることが示された。以上より、グリオーマ細胞におけるp53のリン酸化は、選択的に複数箇所同時にリン酸化された場合に、その標的遺伝子であるPUMAやFasの転写活性が上昇し、p53誘導性のアポトーシスを引き起こすことが示唆された。
老化マウスの血管内皮細胞機能と動脈硬化

老化現象と動脈硬化を示すマウス(klothoマウス)が確立され,klotho遺伝子の異常によることを明らかにした.高血圧や動脈硬化では,スーパーオキサイドアニオン(O_2)の産生が亢進し内皮由来一酸化窒素(NO)の作用を阻害することが知られている.6-10週齢のへテロ型と野生型について,24時間採尿後,飲料水として精製水またはLNAME500mg/Lを与える2群に分けた.尿中NO代謝物はへテロ型で野生型の約60%だった.LNAME投与で,尿中NO代謝物は野生型でより減少し,両個体間の差は消失した.遺伝子組換えヒトSODにレシチン基を結合させ(レシチン化SOD),SODの組織移行性を高めたレシチン化SOD(0.254.0Unit/ml)によるklothoマウス大動脈の弛緩反応をLNAME10^<-4>Mの存在下と非存在下で観察した.LNAME非存在下ではへテロ型のレシチン化SODに対する拡張反応は有意に低かった.LNAMEでレシチン化SODに対する拡張反応は両個体とも消失し,両個体間の差はなくなった.klothoマウスでは,血管内皮細胞のNOの作用が減弱している.klothoマウスのNOの低下はO_2の上昇によるNO消去の亢進よりも,NO産生自体の低下が寄与する.klotho遺伝子は,血管内皮細胞のNO産生を高めることにより血管保護作用を示す.老化現象と動脈硬化を示すマウス(klothoマウス)が確立され,klotho遺伝子の異常によることを明らかにした.高血圧や動脈硬化では,スーパーオキサイドアニオン(O_2)の産生が亢進し内皮由来一酸化窒素(NO)の作用を阻害することが知られている.6-10週齢のへテロ型と野生型について,24時間採尿後,飲料水として精製水またはLNAME500mg/Lを与える2群に分けた.尿中NO代謝物はへテロ型で野生型の約60%だった.LNAME投与で,尿中NO代謝物は野生型でより減少し,両個体間の差は消失した.遺伝子組換えヒトSODにレシチン基を結合させ(レシチン化SOD),SODの組織移行性を高めたレシチン化SOD(0.254.0Unit/ml)によるklothoマウス大動脈の弛緩反応をLNAME10^<-4>Mの存在下と非存在下で観察した.LNAME非存在下ではへテロ型のレシチン化SODに対する拡張反応は有意に低かった.LNAMEでレシチン化SODに対する拡張反応は両個体とも消失し,両個体間の差はなくなった.klothoマウスでは,血管内皮細胞のNOの作用が減弱している.klothoマウスのNOの低下はO_2の上昇によるNO消去の亢進よりも,NO産生自体の低下が寄与する.klotho遺伝子は,血管内皮細胞のNO産生を高めることにより血管保護作用を示す.老化現象と動脈硬化を示すマウス(klotho欠損マウス)が確立され,klotho遺伝子の異常であることが明らかにされた.このマウスのホモ個体では,動脈硬化が全身の血管で生じる.このマウスの内皮細胞機能を検討した.6-8週齢のヘテロ型(雄15匹、雌15匹)と野生型(雄15匹,雌15匹)を用いた.胸部大動脈輪状標本のNoepinephrine(NE)に対する収縮反応とAcetylcholine(ACh)に対する拡張反応を,NO合成阻害薬N^G-nitro-L-arginine methyl ester(LNAME)の存在下と非存在下で測定した.LNAME非存在下ではヘテトロ型のNEに対する収縮反応は有意に亢進し,AChによる弛緩反応は低下していた.LNAMEで,NEに対する収縮反応は両個体も亢進したが,その亢進は野生型でより大きく,両個体間の差はなくなった.AChによる内皮依存性血管拡張反応は,両個体ともLNAMEで消失した.このマウスの動脈硬化に内皮細胞機能障害の深い関与が示唆された.NO産生量を測定した.6-10週齢のヘテロ型(雄15匹,雌15匹)と野生型(雄15匹,雌15匹)を用いた.代謝ケージで,24時間の採尿と採便,食餌摂取量と飲水量を測定後,飲料水として精製水またはLNAME500mg/Lを与える2群に分け,10日後に同じ測定をした.食餌摂取量,飲水量,尿cAMP,cGMPには両個体間で差はなかった.雄,雌とも尿中NO代謝物はヘテロ型で野生型の約60%だった.便中NO代謝物は尿中の2-3%であり,両個体間で差はなかった.LNAME投与で,尿中NO代謝物は,野生型でより大きく減少し,両個体間の差は消失した.klothoマウスの内皮細胞機能異常は,NO産生の低下であることが明確となった.klotho遺伝子は,内皮細胞のNO産生を高めることにより血管保護作用を示すと考えられた.老化現象と全身の血管の動脈硬化を示すマウス(klotho欠損マウス)が確立された,このマウスの表現型の異常はklotho遺伝子の異常に起因している.我々はklotho欠損マウスの大動脈と骨格筋細動脈で内皮細胞機能異常が存在し,この内皮細胞機能異常が一酸化窒素(NO)産生の低下であることを明らかにした.

このマウスの一酸化窒素の低下はO_2の亢進によるNO消去の亢進ではなく,NO産生の低下であることが示された.kIotho欠損マウスのNO産生の低下には,NO合成酵素の発現低下やアルギニン利用能低下などが関与すると考えられた.
陣痛発来機構の解明と分娩を調節する新しい因子の発見

本研究はオキシトシン受容体欠損マウスの分娩を子細に検討することによって、陣痛発来機構のメカニズムや陣痛をコントロールする根源的な因子を同定することを目的とした。オキシトシン受容体欠損マウスは正常に分娩し、その他の周産期事象も野生型マウスと差を認めなかった。哺乳類の分娩ではオキシトシン(OT)-オキシトシン受容体(OTR)系はプロスタグランディン(PG)系と並んで重要な役割を果たすと考えられているためオギシトシンの系と同様に早産などで極めて重要な収縮系であるプロスタグランディンの系を検討した.プロスタグランディンPGの受容体は両者とも発現差がなかったことから、OT-OTR系、PG系以外の収縮系が代償している可能性が示唆された。マイクロアレイを用いた検討ではLPS受容体であるCD14の発現が有意に増加しており、それはオキシトシン受容体欠損マウスのLPS感受性が有意に亢進していることからも、プロスタグランジン産生そのものとの関連が示唆された。しかし、すべてのマウス分娩がLPS刺激で誘起されるわけはなく、CD14へのその他のリガンドの存在が考えられた.そこで、未知のリガンド乃至は未知の収縮誘発系の検索をするためにSubtractive Suppressive Hybridization法(以下SSH法)を用いてOTR欠損マウスで特異的に発現している遺伝子の同定を試みた.その結果、得られた103の遺伝子のうち、OTRKOからカルシウム依存性情報伝達機構に関わる遺伝子群、特にJuhD, FKbp, TPt=1,Dscr, IGFbp7などのCalcineurin関連遺伝子が多数得られた。Calcineurinの系はカルシウム情報伝達系の重要な因子であり、IL-2などサイトカインの発現調節や免疫応答に関与する因子である。この系の網羅的定量PCRでは、Calcineurin Al NFATclなどの発現増加が確認された。本研究はオキシドシン受容体の代償機構と考えられるものとして、CD14やCalcineurinなどの細胞性免疫応答に関わる分子を同定し得た。これはオキシトシンの代償としてのみならず、ヒトの妊娠高血圧症候群や自己免疫疾患合併妊娠における早産のメカニズムを説明する上で極めて有用な知見である。更に、陣痛発来ないし調節機構としてこの系が重要な分子である可能性も強く示唆され、このテーマの新たな展開を迎えたと言い得る。哺乳類の生殖において、分娩という現象について、現在まで種々の研究が行われてきたが、すべての哺乳類が一定の期間の後陣痛が起こり、分娩するのかについては正確な理解には至っていない。現在までの所、哺乳類の陣痛発来にはオキシトシン(OT)系とプロスタグランディン(PG)系が重要であると考えられており、PG系の遺伝子を欠損させたマウスの分娩が観察されてきたが、それらの知見からOT系が少なくともマウスの分娩には必要不可欠であるのではないかと考えられるに至った。そこで我々は、OT受容体の欠損(OTR-/-)マウスを作成し、その分娩を観察し、さらにどのような物質が関与しているかを網羅的に検討することで哺乳類の陣痛発来についての理解を深める事を目的として本研究を開始した。

予備実験では、オキシトシン受容体(OTR)の欠損マウスは正常に分娩し、必ずしもPG系が代償する訳ではない可能性が強く示唆される結果が得られたので、他の代償機構を検索する目的で、妊娠18.5日目の子宮からcDNAライブラリーを構築し、変化のある遺伝子をSubtractive Suppressive Hybridization(SSH)法で検索し、positive cloneのスクリーニングを施行し、プラスミドにサブクローニングしたところ、現在までに計170個以上の分娩に関係すると考えられるクローンが得られた。これらをDNA sequencerで塩基配列決定を進めているが、いくつかの転写因子などきわめて興味深い遺伝子の存在が明らかになって来た。また、同時に行った予備実験ではLPS受容体であるCD14の増加が認められた事から、OTR-/-マウスと野生型マウスの子宮にLPSを添加し、LPS下流にあるNFkB, COX-2,PGE2などの発現をELISAで検討したが、OTR-/-マウスの妊娠末期子宮筋ではLPS感受性が有意に上昇していることがわかった。現在、この系が代償機構である可能性がないか検討を進めている。哺乳類の分娩にはオキシトシン-オキシトシン受容体(OT-OTR)系が重要な役割を果たすと考えられているが、OTR欠損マウスは正常に分娩が進行することからOTR欠損マウスの分娩を更に詳細に検討した結果、OTR欠損マウスではLPS受容体であるCD14の発現が有意に増加していることを発見した。そこで我々はOT-OTR系及びそれらを代償する因子としてのLPS感受性の分娩に与える影響を検討した。その結果、子宮筋のLPS感受性が亢進していることが確認された。OTR欠損マウスと野生型マウスではTNF-α産生に差はなく、サイトカインに依存しない未知の内因性リガンドによるプロスタグランディン合成系がOT-OTR系を代償している可能性が考えられた。OTR欠損マウスの分娩における発現遺伝子プロファイルを更に詳細に検討するために、Subtractive Suppressive Hybridization法(以下SSH法)を用いてOTR欠損マウスで特異的に発現している遺伝子の同定を試みたところ、遺伝子は総数176個が得られた。このうち、73はリンカーコンカテマーなどartifactであった。残りの103の遺伝子のうち、OTRKOからカルシウム依存性情報伝達機構に関わる遺伝子群、特にJunD,FKbp,Tpt-1,Dscr,IGFbp7などのCalcineurin関連遺伝子が多数得られた。CalcineurinはIL-2などサイトカインの発現調節や免疫応答に関与する因子であり、カルシウム依存性情報伝達機構系がOTRKOの分娩時子宮筋で活性化可能性が考えられる。また、早産の治療薬としてカルシウムチャンネル拮抗剤が良好な成績を収めており、カルシウムによるシグナル伝達系が分娩に影響している蓋然性が高く、in vivo gene transferの系などを用いて現在Calcineurinの系を阻害する実験系を構築して検討した。
ウィンドラッシュ 再考ーアフロ・カリブ系女性移民作家を中心に

本研究では、主にウィンドラッシュ以後のイギリスに活動拠点をもつアフロ・カリブ系女性移民作家に焦点を当て、これまでの男性中心主義的で排他的とされるウィンドラッシュ世代の文学観からの転換を試みる。男性作家たちの華麗なる活躍の影でなかなか評価されることのなかった女性作家たちの作品、具体的にいえば、Una Marson、Louise Bennett、Beryl Gilroy、Pauline Melville、Andrea Levy、Valerie Bloom、Hannah Loweらの文学的活動、及び女性ならではの家族・子どもらへの視点にも光を当てることにより、ウィンドラッシュ以後のカリブ系作家たちによる文学活動の新たな全体像を再構築する契機となる研究である。
シュウ酸輸送体の結晶構造解析

シュウ酸輸送体であるOxlT(Oxalate Transporter)は基質駆動型輸送体の中で最大であるMFS(Major Facilitator Superfamily)ファミリに属し、細胞膜を介してシュウ酸とギ酸の対向輸送を行う。このOxlTの輸送メカニズムを解明するために、既存の結晶の改善を考えたが環境が整わず、既存のデータのみを用いて構造解析を行った。OxlTは他のMFSメンバと同様に6本の膜貫通ヘリックスからなる2つのドメインを有し、ドメインが大きく動いて基質を輸送すると考えられている。OxlTとFABの共結晶を得ているが、結晶中でOxlTは基質を内包する閉じたコンフォメーションをとっていると予想している。データはSPring-8のビームライン(BL26B2およびBL41XU)で収集し、CCP4パッケージを用いて解析した。異方性が高いものの全体的に概ね3.2 A程度での回折強度データを得た。このときの結晶の格子定数はおよそa=115 A;, b=233 A;, c=51 A;, a=b=g=90°で空間群はP22121であった。共結晶中にはOxlTのN末、C末ドメインとFABドメインの3つが含まれ、実際PDBに登録されているこれらのドメイン構造を用いて、分子置換を行った。OxlT部分については、他のMFSメンバの構造からホモロジーモデルを作成した。FAB部分については、初期にはFAB全体を1つのドメインとしたが後には重鎖、軽鎖、さらにそれらの可変領域と定常領域に分けて合わせた。分子置換したモデルを多少修正し、暫定的に精密化プログラムを動かしたところ、3.2 A分解能でR-Factor/Free-Rが0.3/0.4であった。今後はモデルを改善し、論文の形で報告し、輸送メカニズムを議論したい。現在の所属先において新たに結晶化実験を行うための環境が主に人的な面で整わないために現在は収集済のデータの解析にシフトしている。SPring-8のビームラインBL26B2等で収集したX線回折データをHKL2000またはXDSを用いて指数付けおよび積分を行い予備的に解析した結果、異方性が高いものの方向によっては分解能が4.0 Åを超える回折強度データが得られている。このときの結晶の格子定数はおおよそa = 113 Å, b = 234 Å, c = 51 Å, a = b =g = 90°で、空間群はP21212と考えられる。引き続き結晶の改善を行うことが理想的だが現状を考慮し現時点ではこれまでの収集済データの構造解析を行い有用な構造情報を引き出すことを目指している。申請者が想定していた研究体制を整えることが出来ていないため。新規に研究体制を再構築する必要がある。それまでは現体制でも可能な収集済データの構造解析を行う。結晶化を進めるための研究体制が構築できなかったため、既存の取得済みデータの構造解析を中心に行うことにした。そのため計算用のPCは必要となったが予定していた実験関係の出費が無くなった。体制が変わらない場合は引き続きデータの構造解析を行う予定であり、そのための環境整備に使用する予定である。
富山大学附属図書館所蔵ヘルン文庫を活用したラフカディオ・ハーン研究体制の構築

富山大学附属図書館所蔵のラフカディオ・ハーン旧蔵書を研究資源として活用することを目的として遂行された本研究によって、ハーンがどのような読書経験を通じて自らの講義や創作活動を実践するに至ったのかを具体的に解明することができた。とりわけ、蔵書の各所に見られる書き込み調査の結果として、たとえばアメリカ時代の無署名の新聞のコラムが、蔵書からの引用であることが解明でき、ハーンのものと同定する根拠を示すことができた。また、ハーンの作品には、『ギリシア詞華集』などの影響も色濃いことを具体的に論証することができた。さらには、ハーンが日本近代文学に及ぼした影響についても具体的に例証することができた。研究代表者中島が、ギリシア詞華集におけるハーンの書き込みについて国際比較文学会世界大会において発表を行った(2016年7月9日)。2016年9月17日富山大学において国際シンポジウム「ラフカディオ・ハーン研究の新たな試みーヨーロッパ・アメリカ・日本をつなぐものー」を開催。2017年2月11日・12日富山大学においてラフカディオ・ハーン研究シンポジウムを開催。内容は、基調講演として「多言語的なアメリカとハーン」西成彦および「ハーンの言語観と英語教育」西川盛雄、発表「ハーンのニューオリンズ時代における日および本との出会いー『日本の詩瞥見』をめぐって」中島淑恵、「ハーン『チタ;最後の島の記憶』を読むーアイルランドと日本の交点としてのアメリカ」結城史郎、「ことば、記憶、“Creolization"ー前衛小説として読むハーンの『チタ』」難波江仁美「ハーンにおける「クレオール性」の再読解:イナ・セゼールを中心に」廣松勲、「ハーンにおける異質なるものの表象」長岡真吾、「ハーン作品における『ひとりであること』について」池田志郎、「ハーンの『柔術』について」濱田明、「シンシナティ時代におけるハーンの新聞記事について」水野真理子、「ハーンの弟子達のボードレール」小谷瑛輔、「小学校・中学校国語教科書における小泉八雲作品の行方」西田谷洋。これに基づいて研究論集『ヘルン研究』第2号を刊行。この他、日本フランス語フランス文学会秋季大会において「ラフカディオ・ハーンとフランス」という題目でワークショップを行った(2016年10月23日)ほか、日本比較文学会関西支部大会にて、共同研究者小谷が「芥川龍之介「黒衣聖母」に見られるボードレール受容」として発表を行い、また研究代表者中島が同会にて、「ハーン研究の新展開ヘルン文庫の活用法」としてワークショップを主宰(2016年11月12日甲南大学)。本年度中にギリシア詞華集におけるハーンの書き込みについて国際比較文学会世界大会において発表を行うことができた(2016年7月9日)他、2016年9月17日富山大学において国際シンポジウム「ラフカディオ・ハーン研究の新たな試みーヨーロッパ・アメリカ・日本をつなぐものー」を開催することができ、当初の予定にはなかったヴァージニア州立大学のハーン関連草稿類研究者ロジャー・ウィリアムソンと研究成果を共有すると同時に今後の協力連携体制を打ち立てることができた。また、2017年2月11日・12日富山大学において開催したラフカディオ・ハーン研究シンポジウムにおいて、従来ハーン研究者として定評のある西成彦と西川盛雄に基調講演をお願いし、これも今後の研究協力体制を構築することができた。また、ハーンのアメリカ時代の専門研究者である難波江仁美やクレオール文学研究者である廣松勲、熊本のハーン研究者池田志郎など本プロジェクト外の専門研究者を招聘して意見交換を行ない、今後の研究協力体制を構築することができた。また、っ本プロジェクト連携研究者である長岡真吾、濱田明についても、発表・議論を通した意見交換を行うことができた。また、共同研究者であり富山大学ヘルン研究会のメンバーである水野真理子、西田谷洋。小谷瑛輔、結城史郎もそれぞれの関連研究を推進し、この機会に発表を行い、これに基づいて研究論集『ヘルン研究』第2号を刊行することができた。また、日本フランス語フランス文学会秋季大会や日本比較文学会開催支部大会にて関連のワークショップを行い、これまでの研究成果を披露すると同時に、今後のヘルン文庫を活用した研究体制構築あるいは新たな研究の可能性について十分意見交換を行うことができたため。昨年度に引き続き、富山大学附属図書館所蔵ヘルン文庫の資料を中心にした書き込み調査を推進すると同時に、研究代表者及び研究分担者がそれぞれにラフカディオ・ハーンに関する個別研究を行い、各学会等で発表した。また、「ラフカディオ・ハーン国際研究シンポジウム」を開催し、学内外の外国人研究者を含む研究者を招聘して基調講演(小森陽一東京大学教授「二つの『心』ーハーンと漱石」、小泉凡島根県立大学短期大学教授で本研究の連携研究者「文化資源としての作家と文学」)の他、研究発表と意見交換を行い、その成果を「ヘルン研究」第3号として刊行した(研究代表者中島淑恵「」ヘルン文庫書き込み調査報告ー『ギリシア詞華集』と『ルバイヤート』をつなぐものー、研究分担者西田谷洋「戦後高等学校国語教科書の中の小泉八雲・序説」、小谷瑛輔「文学教育の題材としての小泉八雲ー富山大学の実践例をもとにー」、結城史郎『ラフカディオ・ハーンの再話と日本人の文化的記憶の変容』、水野真理子『ハーンはアメリカでどう読まれたかー『日本ー一つの解明を中心にー』)。

今年度活動の結果、ラフカディオ・ハーンの文学的活動において、アメリカ時代、とりわけニューオリンズ時代を中心に書かれた、ジャーナリストから作家へと移行する時期の著作がのちの怪談作家としてのハーンにとって重要な転換点となったことが解明された。また、ハーンの作品の日本国内における影響のみならず、アメリカにおいても後世に大きな影響を及ぼしていることが明らかになった。さらには、従来仏教思想の反映とされていた無常観や輪廻転生のような世界観が、古代ギリシアやペルシアの思想の反映であることも蔵書の書き込み調査から実証的に証明できることとなった。さらに、日本の神話とギリシア神話の相同性やマルチニークの民話と他のクレオールの民話の類似性にハーンが着目していたことも明らかになった。富山大学附属図書館所蔵のラフカディオ・ハーン旧蔵書を研究資源として活用することを目的として遂行された本研究によって、ハーンがどのような読書経験を通じて自らの講義や創作活動を実践するに至ったのかを具体的に解明することができた。とりわけ、蔵書の各所に見られる書き込み調査の結果として、たとえばアメリカ時代の無署名の新聞のコラムが、蔵書からの引用であることが解明でき、ハーンのものと同定する根拠を示すことができた。また、ハーンの作品には、『ギリシア詞華集』などの影響も色濃いことを具体的に論証することができた。さらには、ハーンが日本近代文学に及ぼした影響についても具体的に例証することができた。これまでの研究会、講演会、シンポジウムの成果により、本プロジェクトによる研究チームが、ラフカディオ・ハーンについての学術研究のセンターの一つとして国内外の専門研究者および広く世間に認知されつつある。次年度はこの成果を踏まえ、研究会において研究者個々のハーン関連研究を推進すると同時に、ヘルン文庫蔵書の書き込み調査を推進する。また、富山大学附属図書館と連携して、ヘルン文庫蔵書のデジタル・アーカイヴ化をさらに進め、国内外の研究者との協力連携関係をさらに強化する。また、とりわけ国外の研究者の需要に応えるため、ホームページの英語版および仏語版を早急に作成する必要がある。これに加えて、ヘルン文庫および研究活動の英文による活動報告書も作成・公開する必要がある。また、これらの研究の成果としてこれまで実施してきた国際シンポジウムを次年度も開催し、その結果を研究論集『ヘルン研究』第3号として取りまとめる。今回は可能なら国内外の若年研究者に参加を広く呼びかけ、査読体制も充実させて、学術研究会および学術研究誌としての質の向上に努めることにしたい。なお、当初の予定にはなかったヴァージニア州立大学図書館収蔵ラフカディオ・ハーン関連研究資料の活用と同図書館との連携も視野に入れたアメリカのハーン研究者および研究機関との研究体制の構築に努めたい。また、ラフカディオ・ハーン関係研究書および、ヘルン文庫を補完する資料(たとえばアメリカ時代にハーンが執筆したとされる新聞記事のアーカイヴなど)と同時に、ヘルン文庫目録にも遺漏が多いことから、この補遺を逐次作成し、デジタル公開できるように努める。比較文学当初購入を予定していたラフカディオ・ハーン
音節パターンの連結に基づく不特定話者の単語音声認識法の研究

大語彙単語音声認識では、標準パターンの記憶量や認識処理量の増大、さらには登録用パターンの発声の負担等が問題となり、単語単位の標準パターンとの照合による方法は非常に困難となる。一方、音韻や音節を認識の単位とする方法が有効と考えられるが、セグメンテーションという非常に難しい問題を解決しなければならず、又音韻系列や音節系列からの単語への変換も容易ではない。そこで、音節パターン等を連結して単語標準パターンを構成し単語単位の認識アルゴリズムを採用する方法が試みられている。しかし、計算量は単語単位の認識法と同等であり改良を要した。これらの問題を解決する一つとして、研究代表者は、LESS COST法の研究を行なってきた。しかし、それは孤立発声された単音節を連結して単語標準パターンとして用いたため、調音結合の影響を受けた単語中の音節パターンと異なるため認識率の低下を生じた。そこで、今年度、大語彙音声認識の基礎として、単語中から音節を抽出し標準パターンを抽出した。通常、単語中からの音節抽出は、波形・スペクトル等の視察に頼っているが、これらを自動化するための方法を提案し、視察によるものと比較・評価したところ、同等の精度が得られた。さらに、単語中から抽出した音節パターンより子音パターン・母音部の平均化パターンを求め、それに疑似パターンを加えた3種のパターンの連結で音節標準パターンを表わしたもの、および各音韻カテゴリの特徴パラメータの共分散行列を用いて、国語辞典から抽出した200単語の認識実験を不特定の成人男性10名について行なった。今回提案したLESSCOST法と併用のパス限定ストキャスティックDP法により、平均約93%の認識率が得られ、本手法が不特定話者の大語彙単語音声に有効であることがわかった。
歴史的鉄筋コンクリート造建築物の保存に関する調査研究

わが国における鉄筋コンクリート造建築物の黎明期に生産され,かつ現在も供用中の工場(山口県山陽小野田市)を対象に,当該建築物に関する資料調査と実測調査とを行った。併せて黎明期の鉄筋コンクリート造に関する著作の調査も行った。その結果,我が国が明治時代より近代化をすすめた際の建築材料製造技術の歴史ならびにその材料を用いた新しい構工法である鉄筋コンクリート造建築物の歴史の一端を明らかにすることができた。ここで得られた成果は,黎明期の同構造建築物における耐久性を解明するための基礎的な資料となるとともに,現在,各地で進められている多くの鉄筋コンクリート造建築物の文化財としての保存に対し,補修改修方針の策定に関しても資するものである。今年度は,鉄筋コンクリート造建築物(RC造)生産の黎明期である1911(明治44)年に生産され,現在も工場として供用中であるRC造3棟(山陽小野田市太平洋セメント株式会社小野田工場敷地内の修繕工場・鋸切工場・製樽工場)を対象として,同工場内外において,当該建築物に関する設計者に関する資料・図面などの有無,構工法・構造・使用材料に関する建築技術および材料製造技術に関する歴史的資料の有無やその内容についての確認調査を行なった。また,外観目視調査による構工法や劣化状況の把握,鉄筋探査機による配筋調査,レーザー距離計による当該建築物の寸法調査なども行なった。併せて,鋸切工場と製樽工場については,文化財の指定を前提とした場合には破壊行為となる壁体からのコア抜きについての考え方を整理し,採取計画を立案すると共に,その計画に基づいて海風による劣化外力が厳しいと推察される南側壁面からコア試験体を採取し,目視観察とともに壁厚と中性化深さとを測定し,竣工当時に使用されていたコンクリートに関する技術データを収集した。併せて,黎明期に生産された国内のRC造建築物に関する資料調査を一部行い,地域別に一覧としてまとめた。その結果,設計には笠井真三(当時同社社長)が深く関与しているようであること,当該建築物の鉄筋は当時一般的であった異型鉄筋ではなく丸鋼であること,しかも壁体はダブル配筋で屋根はシングル配筋であること,柱には約600x160mm(2尺x5分)の型枠が用いられていること,外壁には13層のモルタル塗り仕上げがなされており,現在のコンクリートと遜色のない圧縮強度であること,などが判った。ここで得られた成果は,RC造という新しい建築構工法の導入期において同建築構造物が実現していた耐久性を解する糸口になるととともに,建築生産技術の変遷および進歩の過程を明らかにする基礎的資料となるものである。昨年度に引き続き,鉄筋コンクリート造建築物3棟(山陽小野田市太平洋セメント株式会社小野田工場敷地内)を対象として,昨年度の追加調査を行った。また,文化財(建造物)指定における時代区分のうち「近代」に生産されたRC造に関する解体報告書等を収集し,コンクリートと鉄筋に関わる調査項目に関して調査した。その結果,報告書等に記された工事目的は多岐に亘り,調査項目は工事目的,分割工事の有無,工事主体,工事にかかわる経費などによる差異が示唆されることなどが判り,現在の文化財指定保存などの場合と大差は認められなかった。さらに,RC造の黎明期に発行され我が国初のRC造に関する本格的かつ総合的な著作とされる日比忠彦著『鐵筋混凝土の理論及其應用』を対象に,コンクリートと鉄筋とに焦点を絞り調査した。併せて日本工業規格(JIS),建築工事標準仕様書・同解説(JASS 5),および鉄筋コンクリート構造計算規準書・同解説に基づいて現在の技術との比較を行った。その結果,当時のコンクリートは現在と比較してポルトランドセメントの成分は大きく異なり水和水の概念はなかったのではないかと考えられること,C_3Sが少なくC_2Sが多いことから当時のセメントの凝結時間はかなり遅緩であったのではないかと考えられること,粗骨材の寸法が大きいこと,調合表記は所定の材料を簡便かつ効率よく得るための容積表記であり,現在のような所定の強度を得るためのものではないこと,水量が一定ではないために調合表による強度推定は不可能であり,現在より強度規準は低いこと,練混ぜ水には塩化物イオン混入の可能性があること,ならびに鉄筋として錬鉄使用の場合には強度不足の可能性が高いことなどが判った。さらに,ここで得られた知見に基づいて調査対象RC造建築物の調査結果を検討した結果,当該RC造のコンクリートは当時の技術水準と比較すると高品質であることが示唆された。昨年度に引き続き,歴史的鉄筋コンクリート造建築物3棟(山陽小野田市太平洋セメント株式会社小野田工場敷地内)のうち主として1棟(修繕工場)を対象として,追加調査を行った。修繕工場は,1911(明治44)年から6ヵ年計画で行われた工場拡張の一環として最初に建設された鉄筋コンクリート造(以下,RC造と記す)である。

設計者を確定するまでの資料は見いだし得なかったものの,今回の調査によりドイツで鉄筋コンクリート構造を学んだ同社四代目社長笠井真三(18731942)のもとで社内に特設された「臨時工事掛」が行ったと考えられること,ならびに同工場(16スパン)は,第一期工事が東部分(4スパン),第二期工事が中央部分(7スパン),第三期工事が西部分(5スパン)であることが新たに判明した。第一期工事部分では,鉄筋探査機(S社)による配筋状況を探査により縦方向の四隅には幅広の強い反応が,横方向は600mm間隔で反応が見られたことから,縦方向には鉄骨材の利用が想定された。第二期工事部分の西側3スパン(911スパン目)は2階建てである。実測よると1スパン4.65m,全体では32.55mであり,スパン・面積とも資料と合致した。第三期工事部分では工事中の写真が残されており,これによると撮影された1911(明治44)年8月の段階では鉄筋が立ち上がり同年12月に竣工したとされる。また昨年度と同様に日比忠彦著「鐵筋混凝土の理論及其應用」を対象として,今年度は様式に対する算定法と構法の記述が整っている床スラブに焦点を絞り黎明期の様式への構造計算の適用について調査した。その結果,当時の様式は構法と算定法との組合せによって構造計算が可能であることが示唆された。また,構造計算に際し同一の様式であっても年代によっては異なる算定法を適用している可能性が示唆された。
心保護におけるアデノシン産生酵素リン酸化・活性化の分子メカニズムとその臨床的意義

当該研究者の過去の検討により、カテコラミンα1受容体刺激により、Protein Kinase C活性化を介して、アデノシン酸性酵素(ecto-5'-Nucleotidase)が活性化されることが見出されたことから、その知見を発展させるべく、1)アデノシン産生酵素が、アデノシン産生増加を介して心筋保護的に作用するか、2)如何なる因子がアデノシン産生酵素誘導・活性化を惹起するのか、3)サイトカインやカテコラミン等で誘導活性化されたアデノシン産生酵素は心保護的に作用するのか、の3点から検討した。まず1)は、我々が行ったイヌ心筋梗塞モデルにて、心筋局所にアデノシンの前駆物質ATPを投与すると、すばやくアデノシンに代謝され、心筋梗塞サイズを縮小することが明らかとなった。また、今回アデノシン産生酵素の心筋過剰発現トランスジェニックマウスの作成に成功し、現在されを用いたアデノシン産生酵素の心筋保護作用についての分子生物学的検証を進めている。また、最終目標の一つである臨床での投与による比較研究を、COATstudyとして進行中で、その中間成績において有効である旨報告を行った。次に2)は、AICAriboside、Na/H交換チャンネル阻害剤、ATP依存性Kチャンネル開口剤の投与で各々心筋でのアデノシン酸性酵素が活性化されることを見出し、実際にイヌ心筋梗塞モデルでそれらの投与が心筋梗塞サイズを縮小することを報告した。更に3)は、上記の知見から間接的に証明された形だが、さらに直接的検討を加え、イヌ心筋梗塞・イヌ短時間虚血後スタニングモデルにて各々、ニコチン前投与によるニコチン感受性カテコラミン受容体刺激によって、心筋のα1受容体刺激・アデノシン産生酵素活性化・及び局所のアデノシンの増加を介して心筋保護作用(梗塞サイズ縮小効果及び心筋収縮回復効果)を発揮することを報告した(投稿中)。以上より、アデノシン産生酵素-アデノシン系の心筋保護を中心とした基礎・臨床的知見が更に集積し、臨床応用への礎を更に強固としたと考えられる。平成10年度は、培養心筋細胞、ビ-グルイヌを用い、低酸素・再酸素化・虚血・再灌流により生じる心筋不可逆性障害におけるアデノシンの意義を検討した。ラット培養心筋細胞においてリポフェクチン法を用いccto-5'-rtuclcotidascのcDNAを遺伝子導入する。24-48時間後、ccto-5'-nuclcotidascの蛋白量・活性は増大した。かかる細胞において3時間低酸素3時間再酸素化したところ非導入細胞に比べLDH放出量・トリパンブル-染色法により評価した不可逆性心筋細胞障害は著明に軽減した。このことにより、ccto-5'-nuclcotidaseは心筋低酸素障害に対し保護的に作用することが示された。一方、ラット、ウサギ、イヌなどのin vivoモデルにおいて、短時間心筋虚血が先行すると、引き続き生じる長時間心筋虚血による不可逆性細胞障害を軽減させる(プレコンディショニング現象、IP)。我々は、麻酔開胸犬において、1)IPによりccto-5'-nuclcotidaseのセリン・スレオニン残基がリン酸化され、その活性が増加すること、2)ccto-5'-nuclcotidase阻害剤にてIPの心筋梗塞縮小効果が消失すること、3)ccto-5'-nuclctoidase活性化には、α_1-アドレナリン受容体刺激-