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日独の戦後オリンピックへの復帰過程にみるスポーツを通じた外交と国際交流

その結果、日本人選手は試合や交流会などを通して外国人選手と関わることで、競技力と人間形成の両面で変容していったことが明らかになった。その際、自分自身、あるいは家族や指導者、チームメイト等他者を交えた振り返りを行うことで、国際交流の経験がより深く定着することが確認された。2020年東京オリンピック・パラリンピックの開催が決定して以降、我が国の文化外交・交流におけるスポーツの位置付けが高まっている。こうした動向を視野に入れながら、本研究では、スポーツがナショナル・アイデンティティを昇華させる力に着目し、世界共通のソフトパワーとしての力をより発揮するための諸条件などについても考察を進めている。第1回アジア競技大会への参加経緯を検討した結果、国際競技大会への参加をめぐるスポーツと政治のつながりを構造的に明らかにすることができた。このことは、今後の研究に大きな示唆を与えるものである。関連して、ソフトパワーとしてのスポーツに関する研究、大学スポーツの国際交流に関する調査も進行中であり、幾つかの柱で研究が進行している。第二次世界大戦後に、日本のスポーツ界が国際スポーツ界に復帰していく過程について明らかにするために、まず、戦後日本の国内競技連盟(NFs)の国際競技連盟(IFs)再加盟についての史料を検討した。その結果、陸上競技ではアメリカの影響が強く、後にIOC会長になるアベリー・ブランデージの日本支持が強く示唆された。国際組織からの国内組織の除名の理由と背景については、政治を理由としたスポーツ界における排除の構造を解明することが検討課題として浮かび上がった。球技系種目ではハンドボールにおいて、IFの創設及び加盟時に日本のドイツとの強い関わりを確認することができた。ハンドボールについては、さらに戦後の大学スポーツに着目して史料収集と検討を行なった。その結果、大学ハンドボールにおける国際交流の再開には11年の歳月を要しており、他の競技に比較して早いとは言えなかった。その背景には、世界のハンドボール界の国際組織を巡る複雑な状況があったことが示唆された。ハンドボールは1936年(ベルリン)にオリンピック競技になったものの、その後除外され、1972年(ミュンヘン)で復活する。そこに政治問題と競技採用に関する新たな研究課題が見出せた。新たな史料収集として、戦後から1952年ヘルシンキオリンピックまでのIOCとIFsとの往復文書、またヘルシンキ及びミュンヘンにてオリンピック施設の視察と文献・史料収集を行った。国際政治を背景としたスポーツ界への影響の一端を明らかにするため、1980年モスクワオリンピック当時の日本代表選手へのアンケート調査結果の検討を進めている。また、近年の動向として、外務省が2013年に策定した「Sport for Tommorrow」プログラムにおける大学の活動内容について状況を把握した。さらに国際スポーツ大会に参加した中学生選手の人間的成長のプロセスについての研究をまとめた。日本側の資料収集及び分析については概ね順調に運んでいるが、ドイツ側の資料収集と分析が遅れているため、比較研究の段階にまで至っていない。
脳卒中患者のバランス改善を目的としたノイズ付き前庭電気刺激法の開発

立位バランス改善のためのノイズ前庭電気刺激における最適なノイズを検討し、そのノイズ前庭電気刺激を用いた治療が脳卒中患者に効果がみられるかについて、研究を実施した。健常者ならびに脳卒中患者に対して、立位バランスを改善するためには強い強度(0dBW)を持つホワイトノイズを用いて感覚閾値の70%の刺激強度が最適であることが示唆された。また、脳卒中患者に対する治療効果は、治療期間直後は効果が認められるものの、その治療期間終了後は効果が持続しなかった。脳卒中患者は大脳の前庭系に関連する領域が障害されると立位バランスが低下することが報告されている。この立位バランスの低下は、視覚を用いることで代償されていると考えられている。ノイズ前庭電気刺激を用いた前庭系への介入により、バランス改善に有効なノイズの種類と刺激強度を明らかにすることを目的とした。健常者若年者15名、健常高齢者14名ならびに脳卒中患者9名を対象とした。パーソナルコンピュータにより作成したノイズ波形を前庭電気刺激に付加して被験者へ適用した。ノイズはノイズ種類、ノイズ強度、刺激強度を変化させた際の立位動揺を重心動揺計により30秒間計測した。ノイズ種類はホワイトノイズおよびピンクノイズとし、ノイズ強度は0dBW、-10dBWとした。刺激強度は事前に測定した各被験者の通電感覚閾値をもとに、健常者では30%、50%、70%、90%、110%とし、脳卒中者ではノイズ強度を0dBW、刺激強度は30%、50%、70%、90%とした。健常若年者および健常高齢者については、通電感覚閾値の約70%の刺激強度で動揺が減少する傾向が認められた。また、ノイズ種類の違いによる差は認められなかった。ノイズ強度は0dBWの条件において、動揺が減少する傾向が認められた。脳卒中患者でもノイズ種類の違いによる差は認められず、重心動揺が改善するノイズ強度は50%ー90%の間であり、明らかな傾向が認められなかった。閾値下の刺激強度で前庭電気刺激にノイズを加えた際に重心動揺の改善が見られたことから、健常者、脳卒中者ともに確率共振現象による前庭感覚の今後、脳卒中患者に対するノイズ前庭電気刺激の長期的効果について検討するにあたり、最適なノイズ前庭電気刺激の強度については一律に設定できず、個別に測定した値を用いて実施する必要がある。本研究は概ね計画通りに進捗している。計画では脳卒中患者の被験者数を当初19名程度と予定していたが、測定対象の被験者数を十分に確保できなかった。しかし、9名の被験者数でも重心動揺が改善する傾向は認められた。このため、今後の長期的な効果検証のための条件設定は構築可能である。また、今後も実験を継続して被験者数を増やす予定としている。ノイズ前庭電気刺激(n-GVS)は健常者の立位重心動揺を改善させることが報告されている。我々は前年度の研究で健常若年者、健常高齢者、脳卒中患者に対するn-GVSの効果について、ノイズ種類、ノイズ強度を変更して検討を行った。その結果、ノイズ種類の違いについては差を認めず、ノイズ強度は強いノイズ条件において重心動揺の改善効果が認められる傾向にあった。いずれの条件においても、n-GVSの電流刺激強度は各被験者の通電感覚閾値の50-90%程度で動揺の改善がみられた。そこで今回我々は、脳卒中患者の立位バランス改善のための治療にn-GVSを用いることで、効果が得られるかについて検討を行った。対象は回復期病院に入院中の脳卒中患者10名とした。先行研究で実施した結果から得られた最適なノイズ種類、ノイズ強度を用いたn-GVSをパーソナルコンピュータにより作成し、被験者へ適用した。刺激電流強度は被験者の通電感覚閾値の70%の電流量とした。介入は2週間とし、通常のリハビリテーションに加えて15分/日のノイズ前庭電気刺激を安静座位で適用した。最初の1週間を介入期(通電感覚閾値の70%電流)、後の1週間を偽刺激期(0%電流)として、介入前、介入後、偽刺激後にそれぞれ開眼時、閉眼時、閉眼+n-GVS時の重心動揺の計測を実施した。介入前と比較して介入後は閉眼時、閉眼+ n-GVS時の重心動揺は有意に減少が認められた。しかし、偽刺激後は介入前と同程度の重心動揺であった。本研究では介入時期における重心動揺の改善効果は認められたものの、効果の持続は見られなかった。n-GVSによって前庭脊髄路の賦活が起こり学習されるのか、前庭情報を利用しやすくなった結果、一時的に前庭系への依存が高まった結果であったのかについては明らかとなっていない。今後、n-GVSの効果発現機序について検討する必要がある。本年度の研究については、計画通り実施していく。

長期的な効果検証であるため、合併症や途中脱落など一定の被験者数を確保することが困難であることが予測される。この対処法として、介入期間の短縮、脱落例を含めた検討などの工夫を行うことを検討している。リハビリテーション当該年度の研究では、被験者の確保が計画通りに実施できず、データ計測にかかる人件費や謝金を十分に使用できなかった。また同様に、計測にかかる交通費や成果発表にかかる旅費などを計画通りに使用できなかったため、当初の使用予定額との相違が生じた。当該年度の研究遂行に必要な物品などについて、当初予定以上の使用額が生じている。次年度の研究計画を遂行するために必要な物品は当初予定よりも高額となる見積もりであり、当該年度に生じた金額を充てる予定である。また、成果発表などにかかる旅費も発生するため、計画的に使用できると考える。
アノード酸化による金多孔質皮膜の作製

カルボン酸水溶液中で金のアノード酸化挙動を確認したところ,しゅう酸水溶液では金の多孔質皮膜が得られるのに対し,クエン酸水溶液中では金酸化物の多孔質皮膜が成長し,その細孔構造が非常に微細であることがわかった.また,酸化皮膜は不安定であり,大気中で自発的に金のナノスケール多孔質皮膜に還元されることがわかった.金多孔質皮膜の平均細孔径は約7nm,比表面積は約60gcm-2であった.一方,硫酸水溶液をはじめとした無機酸及び無機酸塩の水溶液中では,皮膜中に有機物を含まない金酸化物の多孔質皮膜が得られる事,アノード酸化後のカソード還元によって迅速に金多孔質皮膜が得られることが確認された.はじめに,金をカルボン酸水溶液中でアノード掃引した際の電気化学的挙動を確認した.しゅう酸水溶液中では,水銀/硫酸水銀参照極に対して0.4Vからアノード電流が立ち上がるが,1.2Vあたりから急減し,再び立ち上がっていく.しかし,クエン酸を始めとするその他のカルボン酸11種の水溶液では1.4Vからアノード電流が立ち上がり,その後直線的に増加していった.その時の電流値はカルボン酸水溶液の電導度に依存した.しゅう酸水溶液中で得られた皮膜は黒色であるが,しゅう酸以外のカルボン酸水溶液では,金酸化物の形成を示すオレンジ色となった.この皮膜は室温で不安定であり,アノード酸化後のオレンジ色が数日で黒色となり,その後退色し,約1ヶ月後には灰色がかった金色となった.クエン酸水溶液中で形成したアノード酸化皮膜のSEM観察では,室温での変化を認めることができなかった.しかし,TEM観察により,アノード酸化後の色調の変化の際にナノ粒子状の金が成長することがわかった.アノード酸化後の黒色化は,皮膜中に高密度で分散した微細な金による入射光の散乱と吸収によるものと推測される.退色は,より成長した粒子状の金の表面で,バルクの金に類似した反射特性を示すものと考えられる.退色後の皮膜に20at.%程度の炭素が残存するため,金本来の色調に戻らず,灰色がかった色になっているものと思われる.皮膜の色調変化をXPS測定で化学的に追跡したところ,アノード酸化直後の皮膜中の金は3価の酸化状態であるが,その後金酸化物の還元が進行し,退色皮膜では金酸化物が消滅することが確認された.クエン酸水溶液中で金をアノード酸化し,その後十分な時間をかけて還元させた試料について窒素の吸着等温線とBET法により多孔体としての評価を行ったところ,試料は10nm前後のメソ細孔を有し,その比表面積は約60m2/gであることがわかった.昨年度は各種カルボン酸水溶液中での金のアノード酸化挙動について検討を行ったが,今年度は,無機系の電解液を用いて研究を進めた.硫酸水溶液中での金のアノード分極に関する研究は古くから行われており,酸素の単層吸脱着に基づく金の表面積計測も確立されている.しかし,研究者はアノード分極を維持し,酸化反応を持続させるとナノスケールの金酸化物の多孔質皮膜が得られることを,試料の電子顕微鏡観察により明らかにした.また,XPS測定から,金酸化物がアノード酸化後に自発的に還元され,アノード酸化から1ヶ月ほど経過すると金のナノスケール多孔質皮膜になる事がわかった.多孔質皮膜中の不純物の存在についてXPSの元素分析により確認したところ,硫酸イオン中の元素であるSの存在が確認されなかったことから,得られた金酸化物はアニオン成分を含んでいないか,含んでいても0.1 at.%以下の低濃度であることがわかった.硫酸以外の無機系電解質について検討を拡げたところ,リン酸,過塩素酸,炭酸およびそれらのナトリウム塩を電解質とした水溶液中でも,硫酸あるいは硫酸ナトリウム水溶液と同様の結果が得られた.昨年度検討を行ったカルボン酸水溶液中で形成される金酸化物の多孔質皮膜は有機物成分を多量に含んでいるが,無機系の電解質では純度の高い金酸化物が得られた.その特徴を活かし,金のアノード酸化直後に適切な電位でカソード反応を進めることにより,迅速に金酸化物の還元を実施することができた.平成26度は硫酸を中心とした酸性の電解液,硫酸ナトリウムなどの中性の電解液中での金のアノード酸化挙動について検討を行ったが,平成27度は,水酸化ナトリウムなどの塩基性の水溶液中での金のアノード酸化について検討を進めた.その結果,これまでと同様に金酸化物の皮膜の形成が確認されたものの,電子顕微鏡による微細構造の観察の結果,直径30nm程度の金の微粒子が膜中に埋もれた構造であり,明確な多孔質構造を確認することができなかった.この原因は現時点では不明であるが,塩基性の電解液を用いる事によって金の水酸化物あるいは水和した水酸化物が優先的に生成し,還元時の体積収縮が著しくなり網目状の細孔骨格を保持できなかったものと推測される.得られた酸化皮膜をカソード還元し,その際の電気量を計測することにより,酸化皮膜の生成量を見積もった.酸化皮膜の生成量とアノード酸化時の電気量の比較からアノード酸化時の皮膜生成効率(クーロン効率)を求めたところ,硫酸水溶液中でアノード酸化を行った際の効率(約1%)に対して,約0.7%と低い結果となった.

しかし,硫酸水溶液中で形成した酸化皮膜に対して自発的な還元の速度が低い傾向が見られたことから,今後検討を進める酸化金電池の自己放電を抑制する手がかりとなる事が期待される.平成27年度は,本研究課題で蓄積した金のアノード酸化に関する知見をもとに,銀のアノード酸化についても検討を加えた.銀は,金と比較してアノード酸化時の溶解が激しく,表面構造の制御が困難であったが,電解液のpH等を適切に制御することにより,ナノスケールの細孔を有する酸化皮膜が成長するアノード酸化条件を見出すことができた.また,金のアノード酸化では見られなかった,特徴的な3次元構造が成長する事も見出した.カルボン酸水溶液中で金のアノード酸化挙動を確認したところ,しゅう酸水溶液では金の多孔質皮膜が得られるのに対し,クエン酸水溶液中では金酸化物の多孔質皮膜が成長し,その細孔構造が非常に微細であることがわかった.また,酸化皮膜は不安定であり,大気中で自発的に金のナノスケール多孔質皮膜に還元されることがわかった.金多孔質皮膜の平均細孔径は約7nm,比表面積は約60gcm-2であった.一方,硫酸水溶液をはじめとした無機酸及び無機酸塩の水溶液中では,皮膜中に有機物を含まない金酸化物の多孔質皮膜が得られる事,アノード酸化後のカソード還元によって迅速に金多孔質皮膜が得られることが確認された.昨年度のカルボン酸水溶液に続き,無機系電解質水溶液中での金のアノード酸化挙動について,基本的な特性を把握することができた.材料化学,電気化学アノード酸化後にカソード還元を行った際のカソード電気量から,その時点での金酸化物の定量が可能である.今後は,金酸化物多孔質皮膜の還元状態をカソード電気量の計測から調べていき,還元速度ついて詳細な解析を進めていく.カルボン酸水溶液中での金のアノード酸化挙動について,基本的な物性を把握する事ができた.金多孔質皮膜が得られるしゅう酸水溶液中でのアノード酸化に対し,しゅう酸以外のカルボン酸水溶液を用いると金酸化物の多孔質皮膜が得られたが,室温で変性(金酸化物の還元)が進行するため,その評価に時間を要した.そのためにしゅう酸とクエン酸以外のカルボン酸水溶液中での挙動の把握が進んでいないものの,金酸化物皮膜を形成するという根本的な評価は済ませている.当初の計画では,研究の初年度(平成25年度)にガスクロマトグラフィーを購入する予定であったが,アノード酸化皮膜の物性解析を優先して進めたために購入を取り止め,依頼分析などで対応する事とした.今年度は無機系の電解液中で形成したアノード酸化皮膜の物性の把握を中心に行ったことからガスクロマトグラフィーの測定を実施せず,次年度使用額が生じる事となった.カルボン酸水溶液では,クエン酸と分子構造が大きく異なるカルボン酸である,蟻酸を中心にアノード酸化皮膜の特性の評価を進めていく.また,硫酸,過塩素酸,リン酸などの無機酸とその塩類を電解液とした金のアノード酸化挙動の把握を行い,皮膜中での不純物の混入量とその状態,金酸化物の還元に伴う不純物の変化を調査していく.金のアノード酸化では電解液の電気分解を伴うため,気体を含む分解物の定性・定量解析によるアノード酸化挙動の把握を行う.次年度は無機系の電解液中で形成した金のアノード酸化皮膜の還元挙動について,還元電気量の計測に基づいて解析を進めていく.また,当初から計画していたものの,優先順位を下げて延期していたアノード酸化時に生成するガス分析を次年度に実施する.この分析に未使用額を執行しながら,アノード酸化時の反応を詳細に調査する計画である.当初の計画ではガスクロマトグラフィーを購入し,金をアノード酸化した際に電極表面で発生するガスの定性・定量分析を実施する予定であった.しかし,研究を遂行する中でガスクロマトグラフィーの緊急性が下がり,より基本的な装置である電気化学分析装置を購入する事となった.次年度使用額が生じた主な原因は,これらの装置の差額となっている.
大脳の組織形成に関与するマイクロRNAが調節する分子の探究

平成30年度は引き続きマウス胎仔大脳由来の単離した神経芽細胞の培養方法を確立する研究を行った。昨年度は予定した実験ができなかったが、本年度はCell Application社からマウス神経幹細胞を購入し、培養方法の確立することができた。これまでの研究により、神経幹細胞の分化に関与しているマイクロRNAについて、妊娠12日から15日の間において、大脳で最も発現量が増加したmiRNAはlet7b-5p (let7)であり、その一本鎖let7(ss-let7)と二本鎖miRNA(ds-let7)、同時期に最も発現量が減少したmiR409-3p (409)の3種類マイクロRNAとすでに細胞に影響を与えないことが分かっているmiRNAを神経幹細胞への導入し、それによって誘導されるRNA発現量の変化を探索するマイクロアレイ法による解析を行った。その結果、導入後ss-let7群の5つのmRNAの発現レベルは対照群と比較して2倍以上増加し、ss-let7群の13のmRNAは対照群と比較して半分以下減少した。ss-let7群で発現レベルが低下したRNAの1つであるN-myc下流調節遺伝子1は、細胞分裂に関与していた。ds-let7群における2つのmRNAの発現レベルは、対照群と比較して2倍を超えて増加し、ds-let7b-5p群における6つのmRNAは、対照群と比較して半分以下減少した。ds-let7群において導入後に発現レベルが低下したRNAの1つであるthrombospondin 1は、グリア分化に関与していた。409群の2つのmRNAの発現レベルが2倍以上増加し、409群の15のmRNAが半分以下減少した。miR409-3p群において導入後に発現レベルが低下した2つのRNAであるthrombospondin 1およびc-fosは、グリア分化および神経移動に関与していた。昨年度に行う予定のマイクロアレイ法による解析を行うことができ、その結果として、大脳の組織形成に関与し、マイクロRNAによって発現が調節されていると予測される遺伝子に候補を挙げることができた。マウス胎仔大脳におけるその遺伝子よって転写・翻訳されたたんぱく質の局在を解析している。マイクロRNAをマウス胎仔脳室へ注入し、導入したマウス胎仔大脳におけるたんぱく質の局在を解析し、同時に遺伝子発現について解析する予定である。平成29年度は、マウス胎仔大脳由来の単離した神経芽細胞の培養方法を確立する研究を行った。Applied Biological Materials社からマウス神経幹細胞を購入し、培養実験を行った。培養途中に真菌によるコンタミネーションが発生し、その原因を追究するために多くの時間と労力を費やした。培養液や細胞分離液など培養に使った物品を1つずつ汚染している物品を探索した。その結果、購入時点から神経幹細胞が汚染されていた可能性が濃厚になった。そのため、現在では、他社であるCell Application社からマウス神経幹細胞を購入し、培養方法の確立に努力している。今後予定しているマイクロRNAの神経幹細胞への導入し、それによって誘導されるRNA発現量の変化を探索するマイクロアレイ法による解析には、1検体当たり10の7乗個の細胞由来のRNAを必要とする。これまでの研究により、神経幹細胞の分化に関与しているマイクロRNAについて、妊娠12日から15日の間において、大脳で最も発現量が増加したmiRNAはlet7b-5pであり、同様に最も発現量が減少したmiR409-3pあることが分かっている。そのため、マイクロRNAの発現量を抑制する2本鎖のlet7b-5pと過剰発現状態を起こさせる1本鎖のmiR409-3pとコントロール実験用のマイクロRNAを導入した処理群において、各3検体を解析する予定であり、合計9検体を解析するためには10の8から9乗個の細胞が必要となると予測している。そのためにマウス神経幹細胞の分化を抑制し、未分化な状態を維持したまま神経幹細胞を大量に増やす必要がある。29年度中にすでに神経幹細胞へ導入するための2本鎖のlet7b-5pと1本鎖のmiR409-3pは用意した。海外手配したマウス胎仔大脳由来の神経幹細胞の入手に時間がかかり、その上培養細胞に酵母菌を含む真菌によるコンタミネーションが発生しため、その原因追及に時間がかかり、その結果、出荷時から汚染の可能性が高いことが分かった。このように、神経幹細胞の培養の課程で時間がかかったため、やや遅れている。

ss-let7群で発現レベルが低下したRNAの1つであるN-myc下流調節遺伝子1は、細胞分裂に関与していた。ds-let7群における2つのmRNAの発現レベルは、対照群と比較して2倍を超えて増加し、ds-let7b-5p群における6つのmRNAは、対照群と比較して半分以下減少した。ds-let7群において導入後に発現レベルが低下したRNAの1つであるthrombospondin 1は、グリア分化に関与していた。409群の2つのmRNAの発現レベルが2倍以上増加し、409群の15のmRNAが半分以下減少した。miR409-3p群において導入後に発現レベルが低下した2つのRNAであるthrombospondin 1およびc-fosは、グリア分化および神経移動に関与していた。昨年度に行う予定のマイクロアレイ法による解析を行うことができ、その結果として、大脳の組織形成に関与し、マイクロRNAによって発現が調節されていると予測される遺伝子に候補を挙げることができた。マウス胎仔大脳におけるその遺伝子よって転写・翻訳されたたんぱく質の局在を解析している。すでにCell Application社からマウス神経幹細胞を購入し、培養方法の確立に着手しており、平成29年度に予定していた実験は、今年度前半には終了する予定である。平成30年度に予定している2本鎖let7b-5pとmiR409-3pを神経芽細胞にエレクトロポレーション法により導入し、マイクロアレイ法により発現量が最も変化したmRNAを同定した結果を元に、それらのmRNAの大脳における発現部位を妊娠15日、18日、生後2日の正常マウス胎仔および新生児においてin situ hybridization法によって同定する。マイクロRNAをマウス胎仔脳室へ注入し、導入したマウス胎仔大脳におけるたんぱく質の局在を解析し、同時に遺伝子発現について解析する予定である。神経幹細胞の培養が真菌によるコンタミネーションが発生したため、マイクロRNAを導入した神経幹細胞のmRNAの発現量の変化を解析するために予定していた、委託解析であるマイクロアレイ法による解析を発注することができなかったため。残高は16,716円と少額であり、今年度の交付金を合わせて支出する予定である。
戦時下の漫画に描かれた戦地及び植民地の表象研究

国会図書館などで収集した資料を基に、論文・学会発表、書籍の出版をした。主に子供雑誌に掲載された「外地」を描いたマンガを中心に、少年・少女小説、それに付随する挿絵なども同時に調査していった。「外地」の表象は、戦中、戦前とではとらえ方が異なっていたことが明確になり、他分野で研究、外地への旅とも関係していることがわかった。仮定として日本で活躍した外地出身のマンガ家がいると考えていた。日本名を使用していたことから、難航したが探し出すことができた。別々の人物として日本、韓国で語られている。彼の「朝鮮」を描いたマンガ、挿絵の表象と、日本での作品の差異は、未来への研究課題となったことが功績となった。夏・冬・春の授業のない期間、さらに土日を活用し、国会図書館、国際こども図書館、昭和館、演劇博物館などで資料を収集した。特に戦前の子ども向けの代表的雑誌である『少年倶楽部』『少女倶楽部』『幼年倶楽部』を中心に収集していった。また、大学の図書館において、昭和5,6,7,8年度の『復刻愛蔵版少年倶楽部』を購入していただいた。復刻版でも大変価値ある資料である。これらの資料をもとに、「マンガ史」の授業を行っている。戦争に起点をおき、マンガ作品や作家たちのことを話している。資料がほとんどない状態であったが、原書と同じ形をした復刻版やカラーの複写資料を活用することにより、学生たちが興味を示していた。また復刻版では付録のいくつかも再現されており、実際付録などを手にしてみると今では考えられないものが多く、復刻版であっても現物を学生の前に提示することの大事さを学んだ。現在とのマンガの差異に学生たちの驚嘆ぶりに、驚いていた。また授業においてこれらの研究を講義したことにより、2014年度卒業の学生が、戦前のマンガについて卒業論文を書き、本年度、同テーマで本学の大学院に入学した。本研究が採択される前年、2013年度、映像学会の分科会において「戦前・戦中の漫画-子どもたちはどのように需要したのか-」を発表しており、2014年度は資料収集と前年の発表をもとに紀要にて「少年倶楽部復刻愛蔵版-昭和五年一月号昭和八年一二月号の「漫画」をめぐって-」を執筆した。本年度、2014年5月、映像学会の大会にて「子供雑誌に描かれた「写真小説」-戦時下の漫画研究をめぐって-」の研究成果を発表する予定である。また本年度も紀要にて発表する予定である。一昨年度、昨年度と国会図書館、国際こども図書館、昭和館、演劇博物館などで収集した資料を基に、学会発表などをしていった。当時の子供雑誌に掲載された「外地」を描いたマンガを中心に、少年・少女小説、それに付随する挿絵なども調査していった。映像学会では「雑誌に描かれた「写真小説」-戦時下の漫画と映画-」と題し「戦時下の漫画に描かれた戦地及び植民地の表象研究」においての中間発表を行った。また映像学会の分会では「「外地」への憧れ-メディアとしての漫画-」と題し、現在まで調査した「外地」を描いたメディアとして考えたマンガを発表した。これらを基にし「メディア活用能力とコミュニケーション」というテキストを執筆した。本年度はこのテキストを「マンガ史」の講義のなかで使用していく。計画通りにすすんでいる。一昨年度、昨年度と調査した結果を「雑誌に描かれた「写真小説」-戦時下の漫画と映画-」と「「外地」への憧れ-メディアとしての漫画-」とし、中間発表を二回行った。さらに、中間発表の成果をテキスト「メディア活用能力とコミュニケーション」のなかで「「外地」への憧れ-メディアとしての漫画-」を執筆した。一昨年、昨年と同様に国会図書館、国際こども図書館、昭和館、演劇博物館などで収集した資料をもとに研究発表、論文作成をしていった。雑誌に発表されたマンガや挿絵に描かれる「外地」の表象は、戦中、戦前とではとらえ方が少し違っていた。それは他分野で並行している、戦前の外地への旅の研究がすすんでいることもあり、かなりそことリンクしていることがわかってきた。最終年度にあたる本年は、韓国のスンシル大学で発表を行うことができたため、戦前の「朝鮮」にスポットをあて、研究と発表をしてきた。今回、この研究をするにあたり、仮定として日本で活躍した外地出身のマンガ家を探せるのではないかと考えていた。当時はみな日本名を使用していることが多かったことから、なかなか探せなかったのだが、探し出すことができた。戦前の「朝鮮」を描いたマンガ、挿絵の表象と、日本で活躍していた外地のマンガ家の発表を行ったことで、新しい研究テーマがでてきたことは、大きな功績となった。同一人物であるにもかかわらず、日本名、韓国名と二つあることから、別々の人物として、日本、韓国で語られている人物であることがわかった。さらに時代をさかのぼり、日韓併合前の「朝鮮」の表象がどうであったのか、論文を作成した。その結果、併合前の「朝鮮」の表象が、その後、戦前、戦中の日本の雑誌での扱かわれかたに大きく影響していることがわかった。本研究「戦時下の漫画に描かれた戦地及び植民地の表象研究」により、より多くの研究課題がでてきたことは、未来へとつながる研究の布石となった。

主に子供雑誌に掲載された「外地」を描いたマンガを中心に、少年・少女小説、それに付随する挿絵なども同時に調査していった。「外地」の表象は、戦中、戦前とではとらえ方が異なっていたことが明確になり、他分野で研究、外地への旅とも関係していることがわかった。仮定として日本で活躍した外地出身のマンガ家がいると考えていた。日本名を使用していたことから、難航したが探し出すことができた。別々の人物として日本、韓国で語られている。彼の「朝鮮」を描いたマンガ、挿絵の表象と、日本での作品の差異は、未来への研究課題となったことが功績となった。計画通りの資料収集、発表を行っている。『少年倶楽部』『少女倶楽部』『幼年倶楽部』の資料収集を行っている。非常に高価なものが多い。また復刻版であっても高価である。そのため、現物よりもカラーコピーに頼っている。『少年倶楽部』におけるストーリーマンガの文法やどのようなことが子供たちに喜ばれていたのかはすでに論文となっている。また当時の外地での教科書や外地への観光旅行をした記録や絵なども収集している。現物を手に入れても劣化状況が激しく、保存が難しい状態である。調査をすることに関し、きりはないが、まだまだ講談社系の雑誌や絵本に掲載されていた「外地」を描いたマンガ作品はある。さらに当時の雑誌は、マンガというよりも読み物についている挿絵が大きな位置を占めている。また児童文学との関係も深い。当時の子供たちが「外地」への憧れを馳せる、あるいは煽る「マンガ」「絵」はまだまだある。そのなかでも、それとは反対に描かれている作品もある。当時の戦時状況を考えたときになぜそのような作品が掲載されたのかも調査していく。同時に戦争に関するマンガを描いていた作家たちについて調査していく。芸術夏・冬・春の授業のない期間、さらに土日を活用し、国会図書館、国際こども図書館、昭和館、演劇博物館などで資料を収集する。特に戦前の子ども向けの代表的雑誌である『少年倶楽部』『少女倶楽部』『幼年倶楽部』を中心に収集していく予定である。また同世代の雑誌、『少女画報』『少女世界』『少女の友』『飛行少年』『少年世界』『日本少年』『婦人倶楽部』など、多くは残されていないが、それらの雑誌についても調査していく予定である。本年度は、学会での発表、論文執筆も行っていく。
インスリン非依存性糖尿病原因遺伝子の検索-グリコーゲン合成酵素遺伝子について-

骨格筋グリコーゲン合成酵素(GS)遺伝子と日本人インスリン非依存性糖尿病(NIDDM)との関連性を、同遺伝子に存在するsimple tandem repest DNA polymorphim(STRP)を用いて検討した。対象は、日本人インスリン非依存糖尿病(NIDDM)患者164名と家族歴に糖尿病を有さない非糖尿病者115名で、いずれも非肥満者である。対象者の末梢血白血球よりgenomic DNAを抽出、PCR法にてGS遺伝子のSTRPを含むDNA断片を増幅し、8%polyacrylamidesequencinggelにて分離し、タイピングを行った。今回対象とした279名で9種類のalleleを検出した。Heterozygocity=0.692,Polymorphisminformation contex=0.521とこれらはpolymorphicであった。NIDDM群と非糖尿病群との間でこれらallele全体の分布に有意(p=0.0316)のかたより存在した。また、個々のalleleの出現頻度では、2G allele(TG repeatを20回有する)のみがNIDDM群で有意(p=0.0016)な高頻度であった。そこで、NIDDM群を2G alleleの保有の有無にて2群に分け、それらの臨床データーを比較した。その結果、NIDDMとの間に有意な相関県警が認められた2G allele保有群では非保有群に比し、糖尿病の家族歴(3親等内に糖尿病を有する)陽性頻度(p<0.05)、およびインスリン感受性の一つの指標と考えられている空腹時血中インスリン/Cペプチドモル比が有意(p<0.05)に高値(インスリン感受性低下)であった。また、糖尿病の慢性合併症に関しては、高血圧、虚血性心患者、糖尿病性網膜症合併頻度は、有意でないが2G allele保有群で高頻度の傾向を認めた。以上より、日本人において、GS遺伝子の多型性はNIDDMのマーカーとなりうる可能性が考えられた。
腫瘍抑制遺伝子及び神経発生制御因子としてのDRR1の機能解析

神経芽腫細胞株に対してDRR1を強制発現すると、細胞の増殖は抑えられることは分かった。また、DRR1を僅かに発現している細胞株(NB39)に対してはDRR1をノックダウンすると、低い血清による細胞分化は抑制されることが認められた。さらに、我々はtumor sphereの分化を誘導し、RT-PCRで分化された細胞におけるDRR1の発現を検討した。分化前の細胞と比べると、分化された細胞においてDRR1の発現は上昇したことを明らかにした。体外培養の海馬神経細胞において、DRR1はデンドライトと軸索に局在することが認められた。また、DRR1をノックダウンすると神経突起は短くなることが認められた。これらの結果、DRR1は神経芽腫細胞の分化を調節することによって、細胞の増殖を影響する可能性を示した。1.神経芽腫における腫瘍抑制遺伝子としての機能神経芽腫細胞株に対してDRR1を強制発現すると、細胞の増殖は抑えられることは分かった。2.神経系の発生・維持に対する制御機能免疫染色によって初代培養の海馬神経細胞において、DRR1はデンドライトと軸索に局在することが認められた。また長時間培養の海馬神経細胞において、DRR1はシナプスに局在することが分かった。3.質量分析による結合タンパク質のスクリーニングTMOD2(tropomodulin2)は脳内におけるDRR1と物理的に結合するタンパク質として同定した。初代培養海馬神経細胞においてTMOD2の局在を検討した。その結果、TMOD2はDRR1と共局在することが認められた。本研究は、機能がほとんど未知の遺伝子であるDRR1について分子レベルの解析を行い、腫瘍抑制遺伝子としての神経芽腫への関与と、神経系発生・維持における役割を明らかにした。腫瘍抑制と神経系の発生・維持との間で、DRR1の働きは共通しているのか、あるいはそれぞれに特異的な作用機構が存在するのか、この点を明らかにしてDRR1の機能を理解することで、神経系の発生イベントと関係が深いと考えられている神経芽腫の発生メカニズムにも示唆が得られると考えている。また、NB39に対してはDRR1をノックダウンすると、低い血清による細胞分化は抑制されることが認められた。さらに、我々はtumorsphereの分化を誘導し、RT-PCRで分化された細胞におけるDRR1の発現を検討した。これらの結果、DRR1は神経突起の形成に対する影響がある可能性を示した。この結果をHela細胞を用いて、TMOD2-flagとDRR1-mycを共発現させて、免疫沈降で確認された。また、初代培養海馬神経細胞においてTMOD2の局在を検討した。
プロテオミクスアプローチによる末梢神経再生に関与する因子の探索

プロテオミクスの技術を用いて末梢神経損傷後におけるタンパク質発現の変化を探索した。末梢神経損傷後には時期、部位特異的に発現が増減するタンパク質があり、そのうちのいくつかは神経再生に関わるものであった。質量分析によるタンパク質解析であるプロテオミクスの技術を用いて末梢神経損傷部におけるタンパク質発現を一括して探索し,その変化を検討した。12週雌のSDラットを用いて切断群(4匹:坐骨神経の中央部で神経を切断)とSham群(4匹:坐骨神経の展開のみ)のラットモデルを作成した。術後5日で各々1cm神経を摘出し,タンパク質を抽出した。可溶部と不可溶部に分離されるが,不可溶部にさらにドデシル硫酸ナトリウム(SDS)を添加し,タンパク質の可溶化をはかった。各々を連続5-15%のゲルを用いて一次元電気泳動を行い,タンパク質が泳動した部分のゲルを全て切り出した。その後,トリプシンを用いてゲル内消化を行った。質量分析器(QSTAR:ESI-quadTOF)で得た情報を元に,データーベース検索でタパク質の同定を行った.このように,プロテオミクスと分子間ネットワーク検索を行うことにより,末梢神経損傷における動的な分子の変化を可視化することができた。プロテオミクスアプローチにより末梢神経損傷後に神経内に発現するタンパク質を経時的、包括的に探索し、その変化を検討した。ラットを用いて坐骨神経を切断した切断群と展開のみを行ったシャム群を作成した。切断群は術後5, 10, 35日後に神経を切断近位、遠位を各々断端を含めて1cm摘出し、シャム群は術後5日で1cmの神経を摘出した。摘出した神経を抽出バッファーに溶解し、可溶性画分と不溶性画分の両者を1次元電気泳動した後、タンパク質が泳動した部分のゲルを全て切り出した。トリプシンを用いてゲル内消化を行った後、質量分析器で解析を行いタンパク質を同定した。1cmの坐骨神経からシャムでは約900種、切断群では1000種のタンパク質が同定された。各々のステージで発現するタンパク質を分子機能や生物学的プロセスに沿って分類したが、著明な差は見られなかった。しかし、末梢神経切断後に時期、および部位特異的に発現が増加するタンパク質を複数同定することができた。そのうち、切断後10日の近位で発現が増加するa-FGFは末梢神経再生を促進する働きがあり、GAP-43は軸策伸張、シナプス形成などに関与している分子であった。また切断後5日の遠位で増加するPN-1, prosaposinはいずれも神経再生を促進する働きを持っていた。このように、ある特異的な発現様式を示すタンパク質には神経再生に関わる分子が含まれていることが分かった。
マラリア原虫赤血球侵入関連分子の機能ドメインの同定と侵入の制御

ネズミマラリア原虫のRON5が、増殖阻害抗体の標的であるAMA1-RON複合体の一部をなし、赤血球侵入期だけでなく肝細胞侵入期にも発現する事を見出し、RhopH複合体の構成分子RhopH1Aの複合体形成に関与する領域を明らかにした。また、ネズミマラリア原虫の赤血球侵入タイムラプスイメージング解析の系を確立し、この原虫種が新たな赤血球に侵入するためには、感染赤血球から放出された後、形態変化する必要性がある事を見出した。本研究課題では、最近の研究の進展により注目を浴びているロプトリーに局在する2つの複合体について、ネズミマラリア原虫の系により、1)複合体形成を阻害すると、赤血球侵入が阻害されるAMA1-RON複合体の複合体形成インターフェイスの同定、2)特異抗体が増殖を阻害するRhopH複合体の赤血球結合領域の同定を行い、赤血球侵入を制御する新しい標的部位を明らかにすることを目的とする。本年度はネズミマラリア原虫(P.yoelii)のPyRhopH複合体の構成成分RhopH1Aの断片を発現する組換えネズミマラリア原虫を作成したが、5等分したPyRhopH1Aのすべてが複合体を形成しなかったため、各断片を組み合わせた大きい断片を発現する遺伝子組換えネズミマラリア原虫を作製した。C末端側1/5のみが欠けている全長の4/5の長さのRhopH1Aでも複合体形成が見られないため、全長を発現するプラスミドのデザインを行った。RON-AMA1複合体の構成生物RON2、RON5およびAMA1についてウサギとマウスを用いてペプチド抗体を作製し、原虫タンパク質に対する反応性を確認した。これらの抗体を用いた免疫沈降法にてRON-AMA1複合体形成が検出できることを確認した。また、RON-AMA1複合体形成インターフェイスがRON2の細胞外領域であることが決定されたため、この部位に対する抗体が増殖阻害効果を示すかどうかを検討するために、この部位の組換えタンパク質を大腸菌で発現するプラスミドのデザインを行った。平成23年度は全長、C末端から1/5、2/5、3/5、4/5を削除した組換えRhopH1Aタンパク質とタグとを融合タンパク質として発現するネズミマラリア原虫(P.yoelii)を新たに作製しなおし、免疫沈降により、RhopH2との複合体形成を再検討した所、全長、C末端から1/5、2/5、3/5を削除した組換えRhopH1Aタンパク質はRhopH2と複合体を形成するが、4/5を削除すると形成をしなくなる事を示唆する知見を得た。RON-AMA1複合体の解析を行った結果、RON5はRON2とRON4との複合体としては検出されるが、AMA1との結合は検出できなかった。RON2/RON4とAMA1は複合体を形成するので、RON5とAMA1は直接は複合体を形成していない可能性がある。大腸菌を用いて、RON2およびRhopH1の部分組換えタンパク質の作製を試みたが、困難で作製をすることができなかった。熱帯熱マラリア原虫のRhopH複合体構成成分およびRON複合体構成成分の部分組換えタンパク質について赤血球への結合および特異性を検討する実験を行うために、これらを発現する熱帯熱マラリア原虫のデザインを行った。本研究課題では、最近の研究の進展により注目を浴びているロプトリーに局在する2つの複合体について、ネズミマラリア原虫の系により、1)複合体形成を阻害すると、赤血球侵入が阻害されるAMA1-RON複合体の複合体形成インターフェイスの同定、2)特異抗体が増殖を阻害するRhopH複合体の赤血球結合領域の同定を行い、赤血球侵入を制御する新しい標的部位を明らかにすることを目的とした。1)のテーマは、他のグループにより複合体を形成する部位を同定したという発表がされたため、当初の予定を進めて、ネズミマラリア原虫が赤血球侵入においてAMA1-RON複合体を形成するタイミングを明らかにすることとし、ネズミのマラリア原虫の赤血球侵入をタイムラプス解析できる系を確立した。その過程で、ネズミマラリア原虫のメロゾイトは赤血球から放出された直後は卵形をしており、30秒ほどかかって球形となり新たな赤血球に侵入する事を見出した。さらに、赤血球侵入中のネズミマラリア原虫のメロゾイトにおけるRONやAMA1の局在を明らかにするために、いままで報告がないネズミマラリア原虫のメロゾイトの精製法も確立し、ネズミマラリア原虫のRONタンパク質の赤血球侵入中の局在を明らかにすることができた。

昨年からの課題となったRON2とRhopHの部分配列の組換えタンパク質発現はコムギ胚芽無細胞タンパク質発現系を用いて成功した。しかし、精製した組換えタンパク質の、正常赤血球や膜を反転させた赤血球への結合は明らかではなかった。そのため、これらを熱帯熱マラリア原虫が感染した赤血球内に発現させる系を用いて、赤血球内に発現した部分タンパク質を精製することで、相互作用する分子を同定する事を計画し、組換え原虫の作製を完了した。組換えタンパク質の大量調整を行うことを想定し、レアコドンを補充し、ジスルフィド結合形成も良いとされるNovagen社のRosetta-Gami2でマラリア原虫タンパク質の発現を試みたが、発現量が極端に少なく、条件検討を行うために時間を費やした。無細胞タンパク質発現系に切り替える決断をするまで時間がかかった。また、ネズミマラリア原虫への遺伝子導入が予想よりも効率が悪く、組換え原虫の作製に時間を取られた。24年度が最終年度であるため、記入しない。組換えタンパク質について、すでに一部を無細胞タンパク質発現系で作製し、大腸菌では発現できなかったものが、十分発現できることを確かめた。全ての組換えタンパク質発現を無細胞タンパク質発現系で行う決断をした。そのため、組換えタンパク質については問題は解決されたと考えている。ネズミマラリア原虫への遺伝子導入の効率が悪い点については、全てのプロトコールをもう一度見直し、また、新たな人材の投入も考慮している。
脳梗塞予防のための水分摂取のリスクとベネフィット：ガイドラインへの提言を目指して

本研究期間中に、脳梗塞既往314名の方に参加登録をして頂き、季節ごとの水分摂取の違い、及び一週間の水分摂取量の変動に関するデータベースを作成した。一方、並行して行っている健常者を対象とした「日常的な健康度を指標とした都市コホート研究」(神戸トライアル)の内、比較対象となる1013名のデータを整理して脳卒中患者との比較のためのデータベースを作成した。さらに、健常者の水分摂取状況について学会発表を行った。脳卒中の発症・再発予防のための血圧管理、減塩、禁煙等の指導は科学的なエビデンスに基づいて実施されている。一方、日常診療や啓発活動で述べられることの多い「水分摂取」については、脱水が脳梗塞発症・再発リスクとなることは示唆されているものの、積極的な水分摂取や就寝前の水分摂取が脳卒中発症率・再発率を低減させるという明確なエビデンスは示されていない。本研究では、平成25年度から平成27年度にかけて、脳梗塞患者を対象に水分摂取パターン(摂取量及び時間帯)の長期評価を行い、1脳梗塞患者の水分摂取パターンの特徴を一般集団との比較から明らかにする。さらに、2水分摂取パターンと脳卒中再発、および水分摂取過多による有害事象との関係を明らかにするコホート研究のためのデータベースを構築し、追跡調査を行う。平成25年度末の時点で、下記の1)5)を行った。1)協力施設及び関連部署を訪問し、文書による説明及び同意の取得を行った。2)被験者に対する同意書及び調査用紙を作成した。3)各施設で脳梗塞と診断された患者をピックアップし、外来にて同意書及び調査用紙を順次配布を行い、ベースラインデータの作成を開始した。4)被験者が水分摂取について記録しやすいような、「飲み物記録手帳」(水分摂取手帳)を試験的に作成した。5)診療録及びアンケート調査等から得られる情報の「電子管理データベース」の構築を開始した。これに際して、スタンドアローンのノートパソコンを一台購入した。平成26年度末の時点で、下記の1)2)を行った。1)平成25年度に続き、各施設で脳梗塞と診断された患者をピックアップし、外来にて同意書及び調査用紙を順次配布を行い、ベースラインデータの作成を継続した。2)診療録及びアンケート調査等から得られる情報の「電子管理データベース」の構築を行った。本研究では、平成25年度から平成27年度にかけて、脳梗塞患者を対象に水分摂取パターン(摂取量及び時間帯)の長期評価を行い、1脳梗塞患者の水分摂取パターンの特徴を一般集団との比較から明らかにすること、及び2水分摂取パターンと脳卒中再発、および水分摂取過多による有害事象との関係を明らかにするコホート研究のためのデータベースを構築し、追跡調査を行うことを目的とした。平成27年度末の時点で、下記の1)4)を行った。3)水分摂取手帳の作成を行い、本研究参加者のデータを収集した。4)神戸トライアルにおける健常者の水分摂取状況に関するデータを整理して発表した。合計314名の被登録者を得ることができ、予定数の300名に到達した。昨年度は研究補助員を確保できずデータ入力が遅れていたが、本年度は研究補助員を確保できた。このためデータベースの作成及び季節毎経過観察の発送作業を安定して進めていけるようになった。脳卒中予防平成27年度の予定は次の通りである。1)ベースラインの調査票からデータベースの作成を完了させる。2)1年間の季節毎の調査を完了させる。3)1年毎の有害事象聞き取り調査を開始する。

4)ベースライン調査データベース完成次第、神戸トライアルの横断的調査のデータとの比較を行う。5)日本公衆衛生学会及び欧州公衆衛生学会にて成果を順次発表していく。6)並行して論文作成を行う。これらを推進していくためには、以下の方策が必要と考える。1)協力施設、特に外来担当看護師などの関係者の協力を引き続きお願いしていく。2)季節毎の調査用紙及び有害事象聞き取り調査用紙を作成し、被登録者に気持ちよく研究協力していただけるよう工夫(脳卒中予防の啓発等のリーフレットを挿入するなど)していく。主に郵送での返送を想定しており、良好な返送を得るための工夫は必須であると考える。3)データ入力に遅滞が生じないよう継続的に研究補助員を確保する。4)学会参加などを通じて、最新の研究に触れ続ける。関連大学(滋賀医科大学、京都光華女子大学)及び各協力施設(滋賀成人病センター、独立行政法人京都医療センター)での倫理委員会を平成25年度中頃までに無事に通過することが出来た。同時に、承諾書、ベースライン調査票の冊子も作成できた。これにより、ほぼ予定していたとおり、最も遅くスタートした施設でも平成25年11月より患者登録に着手することができた。3月末時点での被登録者数は221名であり、このままのペースで登録していくことが出来れば、想定より早期に予定数の300名に到達すると推測される。その理由としては、協力施設での外来関係者の協力が予想外に良好に得られたこと、被登録者が協力的であったことが推測される。ただし、外来通院患者の来院予約日程がほぼ一巡している施設があること、4月以降の外来関係者の変更などがあるため、平成26年度は同様のペースで進まない恐れが高いと考えている。現時点でデータ入力がやや遅れがちになっている。想定以上に好調な登録状況も影響しているが、それに加えて研究補助員を確保できていないことにも起因すると考える。予算的に雇用条件を厳しくせざるを得ず、京都光華女子大学の人事関係者などを通じて募集しているものの適切な人員が見つかっていない。そのため、データ入力や発送、回収作業に無理が生じている。水分摂取手帳の試験的作成は、京都光華女子大学健康栄養学科の管理栄養士資格保持者の協力を得ることが出来たため、想定外に順調に行えた。栄養管理で使われる食事摂取記録などを参考に作成を行った。特に成人病センター調査票のデータ入力要員の確保が困難であったため、滋賀医科大学にお願いしている部分の進捗状況が不十分であった。引き続き研究補助員の確保を進め、初期の計画通り3年目の研究を推進していく。平成26年度の予定は次の通りである。1)今後も協力施設にてベースライン登録を継続していく。2)これと並行して、1年間の季節毎の調査及び1年毎の有害事象聞き取り調査を開始する。3)水分摂取手帳の配布及びその使用に関して調査を行う。4)ベースライン調査終了次第、神戸トライアルの横断的調査のデータとの比較を行う。5)平成27年度学会発表に向けて準備を進めていく。
イソギンチャクの上皮増殖因子様ペプチド毒の分布・構造・生物活性

1.ハタゴイソギンチャクからサワガニに対して一過性の強い麻痺を引き起こすペプチド毒(SgI)を単離し、46残基目までのアミノ酸配列を決定した。TOFMSで求めた分子量(5369)から残り23残基と判断された。SgIのアミノ酸配列は哺乳類由来の上皮増殖因子(EGF)と3540%の相同性を示し、6個のCys残基をはじめとしたEGFモチーフはよく保存されていた。2.SgIはED3.6μg/kgでサワガニに一過性の麻痺を引き起こすが、1mg/kgの投与でもサワガニ、キンギョおよびマウスに対する致死作用は示さなかった。なお、対照として用いたヒトEGFはいずれの活性も陰性であった。3.SgIはヒト頭頸部ガン細胞(A431細胞)に形態変化(多角形から球状への変化)を引き起こすこと、またウエスタンブロッティングによりA431細胞のEGFレセプターに結合してリン酸化を促進することを明らかにした。SgIのこれら活性の強さはヒトEGFの1/100程度とかなり弱かったものの、SgIは毒性とEGF活性の両者を併せ持つ世界最初のペプチドであることが確認された。4.ハタゴイソギンチャク近縁のイボハタゴイソギンチャクをはじめとした約20種イソギンチャクについてA431細胞に及ぼす効果を検索したところ、数種イソギンチャクに細胞毒性が認められたがEGF活性はいずれも陰性であった。また、サワガニに対しては致死活性はすべて陽性であったが、一過性の麻痺作用は観察されなかった。以上より、SgIのような特異なEGF様ペプチド毒は、ハタゴイソギンチャク特有の成分であると推定された。