hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
新規ACE2ホモローグcollectrinの相互作用分子同定と高血圧症への関与

我々は、進行性腎障害共通の分子メカニズムを明らかにするために、5/6腎臓摘出ICR.マウスの腎肥大期において発現の上昇する遺伝子のスクリーニングを行った(Zhang H et al. Kidney lnt 56(2),549-558,1999)。得られた遺伝子のうちNX-17は様々な臓器のノーザン解析から、腎臓特異的に発現することが明らかとなった。この遺伝子の全長のcoding sequenceをマウス、ヒト、ラットにおいてクローニングしたところ、まったく新規の遺伝子であることが判明した。その遺伝子産物は222アミノ酸残基からなり、N末端にシグナルペプチドと膜ドメインを有する膜蛋白である。ln situ hybridizationやポリクローナル抗体による免疫染色の結果、腎皮質部及び髄質部の集合管特異的に発現することが判明した。そこで我々はこの新規膜蛋白をcollectrinと命名し報告した(Zhang H et al.JBiol Cli ein 276(20),17132-17139,2001)。Collectrinの細胞内ドメインに結合する蛋白のスクリーニングをYeast two hybrid systemを用いて行った。マウス腎臓mRNAを抽出し、MATCHMAKER Library constmction & Screening Kit(CLONTECH)を用いて、cDNAを合成し、pGADT7-Recベクターに挿入しライブラリーを作製した。一方collectrinの細胞内ドメインをpGBKT7ベクターにサブクローニングして、baitとして用いた。その結果6種類の独立したクローンを得た。そのひとつがsnapin(Synaptaosomal-associated protein 25 binding protein)であった。CollectrinとSNARE complexとの関係が示唆されたため、各種集合管細胞株(mlMCD-3,mlMCD-K2,RCCD1,RCCD2)のSNARE complexの構成分子の確認を行った。PCR法を用いて、SNAP-23,syntaxin-4,VAMP-2の集合管培養細胞での発現を確認した。さらに免疫沈降法によってこれらの分子が複合体を形成していることが確認できた。進行性腎障害共通の分子メカニズムを明らかにするために、5/6腎臓摘出ICRマウスの腎肥大期において発現の上昇する遺伝子のスクリーニングを行った(Kidney Int 56(2),549-558,1999)。
褥瘡対策体制における病院での多職種の機能を生かす医療サービスの提供システムの検討

目的:褥瘡対策の現状を明らかにする。多職種およびスペシャリストを生かした褥瘡対策体制を提案する。方法:平成15年度には、本研究のパイロットスタディとして、特定機能病院に限定した褥瘡対策チームおよび褥瘡対策に関する多職種協働について郵送によるアンケート調査を行った。平成16年には、病院年鑑に400床以上の病院として記載のある854施設に質問紙を郵送する大規模な調査を実施した。結果:大規模な調査では、384施設から回答が得られた。次のような結果が得られた。褥瘡の有病率は、平均3.09%であった。体圧分散寝具の100床あたりの保有台数は、平均20.7台であった。褥瘡予防基準がある施設では体圧分散寝具が多い傾向にあった。予防基準は、薬剤師が活動している施設に有意に整備されていた。寝具選択基準は、栄養士、理学療法士、WOC/ETが対策チームで活動している施設に有意に整備されていた。治療基準は、薬剤師が活動している施設の方が整備されていた。院内教育の形式は、講義が207施設(74.2%)と最も多く、次いで回診145施設(52.0%)、事例検討会72施設(25.8%)であった。ケア基準を整備している施設では、有意に講義形式の教育が施されていた。WOC/ETが講師を担当している施設では、講義回数と受講者数共に有意に多かった。実際の施設では褥瘡対策チームに多数の機能を期待し、スタッフと管理部門に期待する役割機能が少なかった。考察:数年前に比較し、褥瘡有病率が低下して、褥瘡対策が充実してきていることが明らかになった。しかしながら、施設によって褥瘡対策体制の格差は大きかった。多職種協働にはケア基準の整備が重要であることが示唆された。WOC/ETは褥瘡ケアの教育活動に明らかな影響が確認され、教育機会やその対象者の数が多くなり、スペシャリストとしてのスタッフ指導の機能が果たせていることが明確になった。職種横断的な活動を管理運営できる病院管理者の育成が課題と考えられた。本研究のパイロットスタディとして、特定機能病院に限定した褥瘡対策チームおよび褥瘡対策に関する多職種協働について郵送によるアンケート調査を行った。郵送する質問紙は、複数回答可能な選択式の47項目と数字の記入式の回答形式の3項目、合計50問の質問紙を作成した。2003年6月に、特定機能病院81施設長に調査研究の趣旨と協力依頼を発送し、68施設から同意が得られ、同年8月に同意書の得られた施設を対象に調査を実施した。61病院からの調査用紙を回収(回収率90%)し、SPSSにより統計処理をおこなった。主な結界として、以下の実態が明らかになった。褥瘡対策に、予算がついているのは15%であった。医師と看護師以外のチーム構成員として、栄養士が一番多く(78%)、次に薬剤師(69%)、事務職(67%)、理学療法士(33%)の順であり、多職種協働体制で取り組んでいた。

褥瘡対策チームの主な活動として、定期的な会議や患者訪問やスタッフ教育の講義などがあったが、定期訪問延べ人数や講義時間数に大きな開きがあった。創傷・オストミー・失禁看護認定看護師(以下WOCNと略す)が褥瘡対策チームに携わっている34施設(56%)では、「褥瘡対策におけるスタッフ教育の講義時間(年間5時間以上・10時間以上)」と「必要に応じて訪問して対応する患者数(月延べ数20・30人以上)」が有意に多かった。WOCNの関わりがなく講義形式による現任教育の機会を持たない8施設では、褥瘡対策チームが訪問して対応する際の一人当たりにかかる時間が有意に長かった(30分以上)。以上の結果から、特定機能病院において褥瘡対策体制がまだ確立されておらず、施設内での位置づけや活動に大きな格差があることが伺えた。WOCNに関しては「スタッフ教育」と「個別のニーズに応じた患者訪問対応」で、貢献していることが明らかになった。また、スタッフ教育は、能力開発と褥瘡対策に関わる人件費の節減に効果的であることが示唆された。さらに、次年度の大規模調査に向けての、質問項目および質問形式の検討資料が得られた。平成15年度の予備調査としての特定機能病院を対象とした調査の結果を踏まえ、全国の400床以上の病院に対する大規模調査用紙を作成した。病院の特徴、褥瘡対策体制の機能と役割分担、体圧分散寝具の保有状況、褥瘡対策に関する施設内教育、褥瘡対策チームの患者訪問などについてより具体的に調査するよう、項目を調整した。また、数を回答してもらう際には、正確に把握しているか否かも訪ね、分析の精度を増すよう、配慮した。平成16年7月に病院年鑑に400床以上の病院として記載のある554施設に質問紙を送付し,384施設から回答が得られた(回収率45%)。そのうち在院日数や稼働率や看護体制などの傾向が著しく異質である専門病院(精神病・ハンセン氏病)ならびに療養型施設を除く一般病院とがんセンターならびに特定機能病院287施設(有効回答率34%)ついて分析した。褥瘡の有病率は0.00214.1%で,平均3%。100床あたりの体圧分散寝具の保有台数は、0100台以上と大きくばらついており、平均は21台であった。体圧分散寝具購入の予算があるのは36%で、平成15年度の100床あたりの体圧分散寝具の購入費は01,000,000円以上とおおきな開きがあり、平均は30万円であった。褥瘡対策に関する施設内教育として、講義形式の教育を80%の施設が行っていた。対象は主に看護師で、回数は平均3回、100床あたりの受講者の平均は25人であった。講師はWOC看護認定看護師や皮膚科や形成外科の医師が多かった。褥瘡対策チームの患者訪問の平成15年度の延べ患者数は、01300人と大きな開きがあるが、正確な訪問患者数を把握しているとしている153施設の平均は251人であった。褥瘡対策体制の要素として、「体圧分散寝具の保有台数」と「褥瘡ケアに関する講義受講人数」と「褥瘡対策チームの患者訪問数」には相関があり、褥瘡対策体制を評価する指標のひとつになりうる事が示唆された。平成17年度には、平成16年に実施した大規模調査(病院年鑑に400床以上の病院として記載のある854施設に質問紙を送付、384施設から回答が得られた)のうち一般病院とがんセンターならびに特定機能病院について分析し、その成果を学会や専門雑誌に発表した。【褥瘡有病率】褥瘡有病率を算出し、その値を回答していた199施設を分析対象とした。褥瘡の有病率は、平均3.09%であった。【体圧分散寝具の保有状況】体圧分散寝具の100床あたりの保有台数は、平均20.7台であった。褥瘡予防基準がある施設では体圧分散寝具が多い傾向にあった。
内水氾濫解析法の評価と水害危険予測への応用

近年,流域の都市化に伴う出水の尖鋭化によって,中小河川の氾濫が頻発する傾向にある.このような洪水氾濫災害を防止・軽減するためには,洪水氾濫機構を物理的に究明するとともに洪水氾濫の解析法を確立することが急務である.本研究では,まずはじめに差分法による従来の不定法(一次元)一貯留モデルの機能強化を行った.すなわち,河道流については不定流の一次元解析を行うものとし,氾濫域を表す貯留タンクを平面的に接続し氾濫水を連続した状態で取り扱えるようにした.これにより,氾濫域で氾濫水位が不連続になるなどの問題点が改善され,解析精度を飛躍的に向上させることができた.しかし,洪水氾濫機構を物理的に究明して水害危険度の予測法を確立するためには,更に精緻な解析モデルが望まれる.そこで,第2段階として,有限要素法を適用して,氾濫流を平面的に解析するモデルを開発した.これまで有限要素法では,大型のマトリックスの逆行列を解くことが前提となっており,計算コストの上から難点があった.本モデルでは,時間微分にかかわる行列を対角行列に集中化するとともに,時間微分を陽的に展開し, 2step Lax-Wendroff法を用いて解析する手法を採用し,大型マトリックスの演算を回避している.これにより,計算量と計算コストの大幅な軽減が可能になり, FEMモデル実用性が高められた.次に,これらの解析モデルを昭和61年7月豪雨によって内水災害を被った巨椋低平流域及び昭和58年7月山陰豪雨で甚大な被害を被った島根西部の益田川流域に適用し,氾濫流の動態について吟味したのち,それぞれのモデルの得失について評価した.その結果内水氾濫主体の場合には氾濫水の流速がそれほど大きくないため,不定流一貯留モデルで十分であるが,外水氾濫主体の場合には二次元モデルの適用が必要であることが判明した.近年,流域の都市化に伴う出水の尖鋭化によって,中小河川の氾濫が頻発する傾向にある.このような洪水氾濫災害を防止・軽減するためには,洪水氾濫機構を物理的に究明するとともに洪水氾濫の解析法を確立することが急務である.本研究では,まずはじめに差分法による従来の不定法(一次元)一貯留モデルの機能強化を行った.すなわち,河道流については不定流の一次元解析を行うものとし,氾濫域を表す貯留タンクを平面的に接続し氾濫水を連続した状態で取り扱えるようにした.これにより,氾濫域で氾濫水位が不連続になるなどの問題点が改善され,解析精度を飛躍的に向上させることができた.しかし,洪水氾濫機構を物理的に究明して水害危険度の予測法を確立するためには,更に精緻な解析モデルが望まれる.そこで,第2段階として,有限要素法を適用して,氾濫流を平面的に解析するモデルを開発した.これまで有限要素法では,大型のマトリックスの逆行列を解くことが前提となっており,計算コストの上から難点があった.本モデルでは,時間微分にかかわる行列を対角行列に集中化するとともに,時間微分を陽的に展開し, 2step Lax-Wendroff法を用いて解析する手法を採用し,大型マトリックスの演算を回避している.これにより,計算量と計算コストの大幅な軽減が可能になり, FEMモデル実用性が高められた.次に,これらの解析モデルを昭和61年7月豪雨によって内水災害を被った巨椋低平流域及び昭和58年7月山陰豪雨で甚大な被害を被った島根西部の益田川流域に適用し,氾濫流の動態について吟味したのち,それぞれのモデルの得失について評価した.その結果内水氾濫主体の場合には氾濫水の流速がそれほど大きくないため,不定流一貯留モデルで十分であるが,外水氾濫主体の場合には二次元モデルの適用が必要であることが判明した.
足細胞におけるポドシンのエンドサイトーシスを誘導する蛋白質と阻害物質の解明

我々は腎臓糸球体上皮細胞である足細胞のスリット膜関連蛋白質、synaptopodinとpodocinの染色性の違いから、不可逆的な糸球体腎炎において染色領域に差異が出現する事に気づいた。このpodocinの細胞内移動はSorting Nexin 9(SNX9)が先導していることを同定した。事実、podocinとSNX9は接着性を有することが我々の実験において証明された。種々の腎炎においてSNX9の発現を調査し、不可逆的病変とされた巣状糸球体硬化症の病変や予後不良のIgA腎症の検体においてSNX9の発現が著しく増強していることが判明した。SNX9の役割について詳細な検討を進めているところである。糸球体腎炎において足細胞の役割が重要であることが、先天性ネフローゼモデルの病態解明から判明してきた。腎炎モデルにおいて足細胞の形態学的な変化が糸球体硬化を引き起こし、最終的には不可逆的な形態変化を引き起こしてゆくことが腎不全の原因であると推測される。足細胞に特異的に発現するpodocinは通常隣接する細胞間隙であるスリット膜に存在しいているが、マウスの腎炎モデル、ヒトの腎炎モデルにおいて細胞質内移動していることを、我々は免疫染色において見出した。また、同時にYeast two hybridにおいてpodocinと結合する数十種類の候補たんぱく質を抽出した。その中で、細胞内移動に強くかかわっている、SNX9(sorting nexin 9)と呼ばれる蛋白質が存在することが判明した。SNX9は、クラスリン依存性のエンドサイトーシスに強くかかわっていることが既に数々の論文において判明している。エンドサイトーシスにおける鍵となるたんぱく質であるdynamin2に対してSNX9が強く関係していることもわかってきている。一方でdynamin2は腎炎モデルにおいても重要な役割を担うことが報告されている。SNX9は足細胞に発現していることがわかっており、podocinの細胞質内移動を誘導している可能性がある。現在のところ様々なモデルにおいて、これらの病態を証明しているところである。これらのことが判明すれば、podocinの細胞内移動を阻止することができれば、糸球体腎炎の進展を防ぎ、不可逆的な糸球体変化を止めることができるかもしれないと考えている。最終的には、糸球体腎炎の進展を阻止する物質を同定し、創薬へつなげたいと考えている。我々は腎臓糸球体上皮細胞である足細胞のスリット膜関連蛋白質、synaptopodinとpodocinの染色性の違いから、不可逆的な糸球体腎炎において染色領域が変化してくることに気づいた。可逆的病変では目立たないpodocinの細胞膜から細胞質側への移動が、不可逆的病変において顕著になっていた。このpodocinの細胞内移動は何らかの蛋白質が先導的な役割を持っているのではないかと推察し、それらの蛋白質をyeast to hybrid法を用いてSorting Nexin 9(SNX9)であると同定した。数々の糸球体腎炎におけるSNX9の発現を調査したところ、不可逆的病変とされた巣状糸球体硬化症の病変や予後不良のIgA腎症の検体においてSNX9の発現が著しく増強していることが判明した。一方、可逆性病変とされる微小変化群やIgA腎症の予後良好群では、SNX9の発現はほとんど認められない。また、podocinとSNX9の染色を調査してみると、両者とも不可逆的病変において染色領域が極めて一致していることがわかった。SNX9は、細胞が内部に取り込む際に用いられる現象であるエンドサイトーシスにおいて、dyanaminと共に重要な役割を行っていることがわかっている。また蛍光デキストランの足細胞における取り込みで観察されるように、足細胞は定常状態で盛んにエンドサイトーシスを行っている細胞であることがわかっている。非可逆的病態においてはこれらのエンドサイトーシスがスリット関連蛋白質を巻き込んでしまうことが病態の本幹である可能性があり、それらを証明すべく、SNX9の発現を落とした足細胞や過剰発現した細胞を作成して、表現形を調べてゆくことにしている。これらの推測が正しければ、SNX9の役割が解明され、創薬治療に結びつく可能性があると考えている。1.ポドサイトのポドシンエンドサイトーシス誘導蛋白質ポドシンの細胞質に存在するアミノ酸配列とヒト腎臓のcDNAライブラリーを使用してYeast two hybridを行った。それにより多数の候補遺伝子が判明したが、最終的に重要なものとして数種類の蛋白がポドシンに蛋白間相互作用ががある候補蛋白としてが導き出された。その中から、蛋白質のtraffickingにかかわる蛋白質の一群で、proline richなPhox homologyとリン脂質に結合するドメインを保持している蛋白(Protein X)をピックアップした。ヒト腎生件病変と実験

動物モデルの腎臓に対してProtein Xの染色を行っている。染色結果を詳細に分析しているところである。2.ポドサイトにおけるProtein Xの役割ポドシンとProtein Xの蛋白質相互作用を確認するために、まず、HEK293T細胞に遺伝子導入後に共免疫沈降法を施行した。予想通り、ポドシンはProtein Xに結合したが、決して強い結合ではなかった。ポドシンとProtein Xとの結合に何らかの条件、状況の必要性を示唆された。他にもポドサイトから抽出した蛋白質を用いて両者の内因性蛋白質としての相互作用を検討している最中である。他にも蛋白質精製を行い直接的な相互作用を確認する予定である。3.Protein X transgenic, Protein X knockedoutマウスでの表現系の検討と実験モデル条件での腎病変の検討現在までに実験動物における特異的ノックアウトマウスは作成されていない。我々は腎臓特異的にProtein Xを欠損したマウスと強発現したマウスを作成することで腎臓における表現系を比較検討し、実験モデルにおいてどのような病態を呈するのかを検討することとしている。SNX9とpodocinの直接的な相互作用を調査中であるが、なかなか良い結果が出ずに時間がかかっている。もしかしたら間接的な相互作用の可能性もあると考え、調査中である。実験モデルにおけるそれぞれの蛋白質の動きを調査しているが、良い画像を得るのに時間がかかっている。Protein Xとポドシンの結合が思ったより強くなく、十分な条件設定が必要と考えられること。Protein Xとポドシンとの間に他のたんぱく質が関与している可能性もあり、それらの検討も行う必要があったため、時間を要してしまった。蛋白質間の相互作用を様々な観点から証明し、実験モデルにおけるそれぞれの蛋白質の動きを、組織、蛋白質量等の観点から実験を進めてゆく予定である。また、ある程度の結果が得られたら、論文にまとめることにしている。阻害物質の同定には多少時間がかかるものと考えているので、それらの実験は病態モデルの解明が判明次第着手する予定である。Protein Xが重要な局面(ポドサイトの不可逆的変化;アポトーシスなど)で働いていることは疑いがない。これらの病態を、in vitroではポドサイトを中心とした培養系で確立し、in vivoではマウスを使った発現系で詳細に分析し、最終的にはそれらの阻害物質の開発により、腎不全進行を抑制し血液透析に移行する患者の減少につなげたいと考えている。実験モデルの作成(マウスの維持管理)、蛋白質の発現を調べるための実験系、特異抗体の作成、免疫染色のための実験系、実験系を統計学的に処理するための統計ソフトなどの購入、論文にまとめることができたら、発表のための旅費、ポスターやスライドの作成等に関して使用させていただく予定です。
リンゴ園における蒸発散量・土壌水分量の統合的推定手法の開発

リンゴ園で微気象観測ならびに乱流計測を長期間実施し、複数の解析手法により蒸発散量を明らかにした。また、群落内貯熱量や融雪潜熱量の推定手法を考案するとともに、渦相関法における熱収支インバランス問題を追究し、得られた成果を蒸発散量の計算プロセスに反映させた。その結果、土壌水分推定法の開発には至らなかったが、月別の作物係数をもとにした蒸発散量の高精度推定を可能にした。更に衛星画像を利用した日射量推定法や、これを利用した蒸発散量推定法を考案し、蒸発散速度の広域的推定に展望を開いた。1.観測タワーにおいて、熱収支法および渦相関法による、リンゴ園の蒸発散量の連続観測を実施した。このうち熱収支法では、ほぼ欠測なく観測を実施できた。また渦相関法では、計測機器の不調により観測中断を余儀なくされたものの、10月以降はほぼ毎日観測を実施できた。複数の手法によってリンゴ園の蒸発散量を長期間観測した事例はあまり報告されておらず、貴重な成果である。成果の一部を学会で報告した。2.土壌水分観測は、計画通り実施することは出来なかった。これは、8月に発注した土壌水分張力計が12月になってようやく納入されたが、既に積雪期に入っており、観測を立ち上げることができなかったためである。なお、平成20年4月から観測を行っている。3.本研究費で新たに購入した2台を含め、3台の超音波風速温度計を異なる高度に設置し、顕熱輸送量の比較観測を実施した。各高度の顕熱輸送量は理想的には一致すべきものであるが、天候や時刻によって若干の違いが見られた。現在観測結果をもとに熱収支インバランス問題を追究している。4.葉面積指数の計測は、秋末に数本の樹で実施した。季節変化の調査は平成20年に繰り下げて実施することとした。5.群落内貯熱量の集中観測は、二酸化炭素貯留量の観測と合わせて9月に実施した。また、計画になかった融雪潜熱の評価も実施した。その結果、群落内貯熱や融雪潜熱が無視できない場合があることが判明し、学会で報告した。6.人工衛星画像の解析については、東北地方の遠赤外画像を用いて予備的な解析を実施した。1.群落内貯熱量の集中観測を、平成19年9月に続き、平成20年4月にも実施した。また融雪潜熱についても、平成20年13月分を追加解析した。その結果、23月の蒸発散量は融雪潜熱を考慮しなければ正確に見積もれないことがわかり、日射量と気温から融雪潜熱を推定して、蒸発散量の計算に反映させる手法を開発した。2.熱収支法と渦相関法によるリンゴ園の微気象・乱流観測を通年実施し、観測結果を丁寧に解析して蒸発散量を計算した。本年度は、機器の相次ぐ故障により熱収支法において観測欠落期間が生じたが、渦相関法ではほぼ毎日観測を実施できた。渦相関法と熱収支法で得た蒸発散量は、月単位にみると2月を除いてほぼ完全に一致した。3.蒸発散量に大きな影響を与える土壌水分張力のモニタリングを平成20年5月から開始し、現在も継続している。また、リンゴ樹の葉面積の多少が蒸散量に大きな影響を与えるため、その季節変化を知るための野外調査を実施した。4. FAOの手法に基づいて基準蒸発散量を日々算出し、リンゴ園に日蒸発散量と比較して作物係数を求めた。現在、この作物係数が土壌水分や葉面積に応じてどのように変動し、どのような季節変化を示すのか、解析を進めている。5.蒸発散量を広域的に推定するには、まず日射量を広域的に推定する必要がある。そこで、多少の誤差はあるが、気象衛星ひまわり6号の可視及び赤外画像から東北地方各地の日射量を推定する手法を開発した。6.乱流計測器を2高渡に設置し、機器設置高度の違いが蒸発散量の計算結果に与える影響を解析する予定であったが、業者の都合で機器の納入が1月になり実施できなかった。1リンゴ園において渦相関法ならびに熱収支法による乱流計測と微気象観測を通年実施し、観測結果をもとに蒸発散速度を計算した。計算に当たっては、前年度までに得られた成果に基づいて群落内貯熱量や融雪潜熱量を考慮し、計算精度が一層高まるよう留意した。渦相関法で得た蒸発散量は、熱収支インバランスを補正すれば、一部の月を除いて熱収支法で得た蒸発散量とよく一致した。2上記リンゴ園において土壌水分量の計測を通年実施したが、測器の不調などもあり、残念ながら欠測期間が多かった。従って、土壌水分量が減少して水ストレスがかかる日には、蒸発散量が減少していることは確認できたものの、土壌水分の多少が蒸発散量に及ぼす影響を定量的に解析するには至らなかった。

3上記リンゴ園の基準蒸発散量を2カ年にわたって日々算出し、観測で得た日々の実蒸発散量と比較して、リンゴの作物係数を決定した。リンゴの作物係数は2月頃最小(0.5前後)、11月頃最大(1.1前後)となった。リンゴの作物係数を月別に決定できたので、リンゴ園の蒸発散量を気象データのみから概略推定することが可能となった。4渦相関法による水蒸気密度計測を粗度層内(高度7m)で実施し、計算される蒸発散速度が境界層内(高度9m)と異なるのか検討した。その結果、高度7mでは、高度9mの観測から計算された蒸発散速度と比較して37%も過小評価された。このことから、観測高度の不足が観測値の過小評価、すなわち熱収支インバランスの一因になることが示唆された。5昨年度、人工衛星「ひまわり」の画像から日射量を推定する手法を開発したが、本年は人工衛星MODISの画像から地表面温度を推定し、両者をあわせて青森県内リンゴ園の蒸発散速度を広域的に推定することを試みた。現在、上記リンゴ園について衛星画像から推定した地表面温度と蒸発散速度が実際の観測値と一致するよう、パラメータの調整を行っている。
無機／有機ナノハイブリッド太陽電池のワンポット合成

塩化亜鉛と酸素、ローダミンBを含む混合水溶液からのカソード電析により、酸化亜鉛とローダミンBがナノスケールで相互貫入した特異的な三次元ナノ構造複合体が得られる現象を見出した。この複合体は太陽電池活性層としての機能を示し、ハイブリッド太陽電池をワンポットから自己組織的に製造出来る可能性を示した。反応の電気化学分析、生成物の構造観察と組成分析、計算シミュレーションの結果を統合し、ローダミンBが活性化因子、酸化亜鉛が抑制因子として作用する反応拡散系で説明される、世界初のナノスケールチューリングパターンであることを明らかにした。本研究では、無機化合物半導体薄膜の電解析出において、電解浴中に添加することで無機/有機ナノハイブリッド薄膜を形成し、その自己組織化構造体を用いた太陽電池の性能向上を果たし、太陽電池のワンポット合成に対する活路を見出すことを目的とする。同時に、ナノスケールでの相分離による自発的なナノ構造の発現について、その形成原理と制御手法の解明を目指す。H24年度は、ZnOとの複合化によって特異的なナノ構造複合体を与えるローダミンBを、電析によって直接高結晶性の薄膜を得ることが可能な広バンドギャップP型半導体であるCuSCN薄膜系に適用することを検討した。水/エタノール混合溶媒比や添加するローダミン量を適宜制御することで、色素で濃厚に着色され、微細なナノ構造を有したCuSCN/ローダミンBハイブリッド膜を得ることに成功した。この薄膜をジメチルアセトアミドに浸漬することで、膜中のローダミンをほぼ完全に除去出来ることが分かり、広比表面積且つ高結晶性なポーラス結晶構造CuSCNが得られた。これら成果は論文投稿準備中。このハイブリッド電析膜を発電層として、従来のZnO系ハイブリッド膜とは反転した構造のワンポット太陽電池の評価に取り組む他、ホール注入可能な増感色素を探索し、光カソードに基づく色素増感太陽電池へも展開する。一方、Turingの反応拡散モデルによって構造構築が起こると考えられるZnO/ローダミンBハイブリッド膜について、JFEテクノリサーチ株式会社の協力により、FIB-SEMによって連続的な断面画像を得て、3D画像を構築することに成功した。膜の成長方向について、カーテンウォール構造が折り畳まれていく過程の詳細が明らかになると期待される。今後組成の異なるハイブリッド膜やローダミンの誘導体についてもこの観察手法を適用して、形成原理の究明と電池性能の向上を進める。前年度の検討で見出された、ナノ多孔質構造を持った高結晶性のp-CuSCN薄膜をローダミンBとの自己組織化と後処理による脱離によって得る手法は、その膜を色素増感光カソードとして用いる検討に展開し、期待通り多孔質化によって光電流を増大することを明らかにした。それら成果を論文投稿し、J. Phys. Chem. C誌に掲載決定されるなどの成果を得た。一方、これまでに多様な有機色素分子のZnO及びCuSCN電析系への添加を試みたが、チューリングの反応拡散モデルによって自己組織化されるナノパターンの形成は既知のZnO/ローダミンB系以外を見出すに至っていない。ZnO/ローダミンBハイブリッド膜については、ローダミンB濃度の変化によるナノ構造の変化の詳細を明らかにしつつある。また、JFEテクノリサーチ株式会社の協力により、FIB-SEMによる連続的な断面SEM像の獲得と、三次元画像の構築を高度化し、水平方向(膜面方向)でのチューリングパターンの経時変化を示す動画の獲得に成功した。さらに、ポリゴン画像への加工にも成功し、自己組織化ナノ構造の詳細な構造解明に極めてインパクトの大きい画像が得られた。今後電析初期条件を変化させた場合のナノ構造の相違についても同様な手法による画像獲得を試み、ナノサイズチューリングパターンの完全解明を果たすとともに、成果のハイインパクト誌への投稿準備を進める計画である。ナノスケールでの組織化がチューリングの反応拡散機構によると推定されたZnO/ローダミンBハイブリッド薄膜電析系に集中し、検討を進めた。しかし、再現性に著しい問題を生じ、実験条件を見直す必要に迫られた。条件と得られる膜構造との関連を子細に調べたところ、酸素飽和に用いるガス噴射管を電解液に深く挿入し、電解液バルク中に酸素の気泡が大量に含まれる時に所望の構造が得られる事に気づいた。そこで、セル底部に大型のガラスフィルターを配置し、微細な気泡中に電極を設置して、酸素気泡によって物質輸送を制御するバブルバス型電界装置を新たに構築し、実験を進めたところ、極めて再現良く均一なチューリングパターンが得られる事を発見した。

ローダミンBが高い界面活性を持つことは従来分かっていたが、そのために酸素気泡が安定化され、従来用いていたRDE型電界装置においても電解液は酸素気泡に満たされていた状態にあった事が分かり、同時にこの酸素気泡の存在が製膜において極めて重要であることが判明した。酸素気泡を極力排除しようとしていた従来の方向性の誤りに気づき、同時になぜ酸素気泡が必要となるかの考察を進める機会を得た。ローダミンの還元が起こる電解電位とすることが必要だが、得られる膜においてはローダミンはその酸化体として析出し、膜は赤く着色している。電解中のスペクトル変化その場観察などから得られた情報と総合すると、ローダミンは還元されると亜鉛イオンと錯体を形成する。そして、その錯体が酸素気泡と接触すると、酸化体に戻ると同時にZnOを生じる。すなわち、その触媒的ZnO生成のサイクルがローダミンの活性化因子としての役割であることが判明した。また、反応拡散モデルのシミュレーションと得られる膜構造との相関にも良い一致を見た。これまでの謎が解明され、一気にサークルが閉じたので、これら成果をハイインパクト誌に投稿する準備が完了した。26年度が最終年度であるため、記入しない。電気化学26年度が最終年度であるため、記入しない。岐阜大学から山形大学への異動に際して、年度初めに装置の移設や再立ち上げのための時間を要したため。現在は実験等は1頂調に進んでいる。ZnO/ローダミンB系以外にナノスケールチューリングパターンの自己組織化を見いだせないことは残念であるが、ZnO/ローダミンBハイブリッド膜については、極めてインパクトのある動画による詳細画像、成長過程の可視化に成功するなどの進歩があった。また、前年度に見出したCuSCN/ローダミンBハイブリッド膜の作製とこれを用いた太陽電池について、論文発表をするなど、成果の発信も順調に進んでいる。ZnO/ローダミン系の構造観察としてはFIB-SEMが最も有効な手段であることが分かったので、これを中心に実施する。自己組織化をもたらす色素群の探索を進める。ワンポット太陽電池のみに限定されることなく、得られた材料を色素増感系に用いたり、異種の有機半導体と複合化させるなどの検討も進める。ZnO/ローダミンBハイブリッド膜のチューリングパターンについては、ローダミンB濃度を制御することで、漸進的にその形態が変化することを表面SEM写真から確認している。H25年度には、ZnO体積とローダミンB凝集体体積がほぼ1対1になる、代表的なゼブラ模様のハイブリッド膜について、FIB-SEMによる三次元画像獲得に成功した。今後は、異なるチューリングパターンの膜についても同手法による画像獲得を試み、チューリングパターン発生、その成長過程の完全な可視化を実現する。その動画を含め、世界初となるナノスケールでのチューリングパターン発生の事実を、材料系のハイインパクト誌に投稿する。一方、H26年度は、自己組織化材料の太陽電池への展開を最重要課題として取り組む計画である。
符号理論とデザインの研究

情報理論や符号理論の目的は、与えられた通信路を用いて情報の伝達を行なうとき、元の情報源をどのように符号化し復号化すれば、効率よく、かつ、信頼性の高い伝達が行なえるかをソフトの面から研究することである。雑音の無い通信路を用いて通信文を送る場合には、もっとも効率のよい符号化の方法がShannon, Haffman等によって求められているので、本研究では、通信路としては雑音のあるq元一様通信路を考え、符号化の方法としてはもっとも実用的な線形符号を考える。雑音のあるq元一様通信路を用いて、あるq元[n, k, d]符号(すなわち、符号長n、次元k、最小距離dのq元線形符号)の符号語を送る場合、もっとも多くのエラーを訂正できる符号を求めるためには、すべての整数k, d, qに対してn=n_q (k, d)であるようなq元[n, k, d]符号を求めればよいことが知られている。ここに、n_q(k, d)は与えられた整数k, d, qに対してq元[n, k, d]符号が存在するような整数nの最小値を表す。Griesmer(1960)は「与えられた整数k, d, qに対して、q元[n, k, d]符号が存在するならば、n≧g_q(k, d)成り立つ。」ことを示した。ここにg_q(k, d)はGriesmer boundと呼ばれるk, d, qによって決まる既知な関数である。本研究では、多くの整数k, d, qに対して、Griesmer boundの等号を満たすq元[n, k, d]符号が存在するかどうかを有限射影幾何を用いて調べ多くの結果を得た。詳しくは、平成12年度平成14年度文部科学省科学研究費補助金-研究成果報告書「符号理論とデザインの研究」を参照。雑音のあるq元対称通信路を用いて、あるq元[n,k,d]符号(すなわち、符号長n、次元k、最小距離dのq元線形符号)の符号語を送る場合、もっとも多くのエラーを訂正できる符号を求めるためには、すべての整数k,d,qに対して、次の問題Aを解けばよいことが知られている。問題A(1)与えられた整数k,d,qに対して、q元[n,k,d]符号が存在するような整数nの最小値(これをn_q(k,d)で表す)を求めよ。ただし、qは素数または素数べきである。(2)n=n_q(k,d)であるようなq元[n,k,d]符号を構成し、特徴付けをせよ。平成12年度の科学研究費補助金(研究代表者濱田昇)を用いて次の結果を得たので報告します。(1)k=6,d=16,q=3の場合にはn_3(6,16)=28or29であることが知られている。論文Hamada et.al[1]で、3元[28,6,16]符号は存在しないことを示し、n_3(6,16)=29であることを示した。(2)k=6,d=63,q=3の場合にはn_3(6,16)=97or98であることが知られている。論文Hamada,Helleseth[4]で3元[97,6,63]符号は存在しないことを示し、n_3(6,63)=98であることを示した。(3)k=6,d=104,q=3の場合にはn_3(6,104)=158or159であることが知られている。論文Hamada,Helleseth[2]で3元[158,6,104]符号は存在しないことを示しn_3(6,104)=159であることを示した。」ことを示した。

本研究では、多くの整数k, d, qに対して、Griesmer boundの等号を満たすq元[n, k, d]符号が存在するかどうかを有限射影幾何を用いて調べ多くの結果を得た。詳しくは、平成12年度平成14年度文部科学省科学研究費補助金-研究成果報告書「符号理論とデザインの研究」を参照。雑音のあるq元対称通信路を用いて、あるq元[n,k,d]符号(すなわち、符号長n、次元k、最小距離dのq元線形符号)の符号語を送る場合、もっとも多くのエラーを訂正できる符号を求めるためには、すべての整数k,d,qに対して、次の問題Aを解けばよいことが知られている。問題A(1)与えられた整数、k,d,qに対して、q元[n,k,d]符号が存在するような整数nの最小値(これをn_q(k,d)で表す)を求めよ。ただし、qは素数または素数べきである。(2)n=n_q(k,d)であるようなq元[n,k,d]符号を構成し、特徴付けをせよ。平成13年度の科学研究費補助金(研究代表者濱田昇)を用いて次の結果を得たので報告します。(1)k=6,d=63,q=3の場合にはn_3(6,63)=97or98であることが知られている。論文Hamada, Helleseth[1]で3元[97,6,63]符号は存在しないことを示し、n_3(6,63)=98であることを示した。(2)k=4,d=164,q=5の場合にはn_5(4,164)=206or207であることが知られている。論文Maruta, Hill[3]で5元[206,4,164]符号は存在しないことを示し、n_5(4,164)=207であることを示した。問題A(1)与えられた整数k,d,qに対して、q元[n,k,d]符号が存在するような整数nの最小値(これをn_q(k,d)で表す)を求めよ。平成14年度の科学研究費補助金(研究代表者濱田昇)を用いて次の結果を得ためで報告します。論文Hamada et. al[1]で、3元[97,6,63]符号は存在しないことを示し、n_3(6,63)=98であることを示した。(2)q元[n,k,d]符号Cが存在するとき、Cからq元[n+1,k,d+1]符号を構成することができるならば、符号Cは拡張可能(extendable)であるという。論文[2],[3]で3元[n,k,d]符号、q元[n,k,d]符号が拡張可能であるための十分条件をそれぞれ求めた。(3)線形符号と有限射影幾何の中のminihyperとの間には密接な関係があることが知られている。論文[4],[5]では、あるminihyperの特徴付けとminihyperの最小サイズを求めた。(4)詳しいことは、平成12年度平成14年度文部科学省科学研究費補助金-研究成果報告書(基盤研究(C):研究代表者-濱田昇:研究課題-符号理論とデザインの研究)を参照のこと。
環境汚染物質による性未成熟のインプリンティングと育児破綻の分子機構

昨年度までの研究により、1)2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin (TCDD ;最強毒性ダイオキシン)の妊娠期曝露が、胎児の黄体形成ホルモン低下に基づいて出生後にgonadotropin-releasing hormone (GnRH)レベルを低下させ交尾行動不全を惹起すること、2)TCDDは育児期母体のprolactin低下によって育児破綻ひいては出生児の発育を障害すること、ならびに3)他の内分泌撹乱物質であるフタル酸エステルやCdCl_2等も生殖腺や脳下垂体のホルモン水準を抑制しうることを見出している。本年度は、これらの詳細機構と対処法の提示に向け研究を実施し、以下の成果を挙げた。1.栄養成分であるα-リポ酸が、エネルギー産生系ならびに葉酸代謝系の恒常性を維持することで、TCDD依存的な児の性未成熟に対して拮抗する可能性があることを見出した。この事実は、α-リポ酸が次世代の健全性を守る方策として有用であることを提示する重要知見と思われる。2.児のGnRH低下が、発達期の性ステロイドやセロトニンの代謝撹乱に基づくGnRH神経の成熟抑制に基づいて起こるとの新たな可能性を見出した。3.育児母のprolactin低下には、prolactin産生細胞数の減少が寄与することを明らかにした。さらに、TCDDは次世代以降の児にもprolactin低下や育児減退ならびにこれに基づく発育障害を継承しうることも発見した。これらは、環境汚染物質が次世代のみならず孫世代以降にも障害を残す可能性を示唆しており、近年のヒト社会における育児問題との関連から興味深い知見である。4.ダイオキシン以外の内分泌撹乱物質につき、現実的曝露に即した処理法である妊娠期飲水曝露に切り替えて、母子の脳下垂体-生殖腺ホルモンへの影響を調べた。その結果、胎児脳下垂体ホルモンがメチル水銀やカドミウム、ビスフェノールA等によって変動することを見出し、これらが発育への影響に繋がる可能性が浮上した。ダイオキシン(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin; TCDD)が周産期に黄体形成ホルモン(LH)を一過性に障害し、これが成長後の交尾不全の要因であることは以前の研究で分かっていた。しかし、交尾能力減退に直結し、かつ成長後にまで継続する障害は不明であった。そこでH24年度はTCDD曝露母からの出生児を成長させたのち、マイクロアレイ解析を実施した。その結果、多くの遺伝子の発現の増減が観察されたが、その中に交尾行動惹起に必要なホルモンの一種であるゴナドトロピン遊離促進ホルモン(GnRH)の低下を見いだした。本遺伝子の発現は、生後4日目から抑制され、成熟後も回復しなかった。GnRHの低下が交尾不全の主要因であることは、本ホルモンの持続注入によって障害が完全に消滅することから実証することができた。これまでの解析から、TCDDによって育児母のプロラクチン(PRL)が低下し、これが出生児の脱落の要因であることを推定していた。育児母PRL低下の機構を探るため、マイクロアレイ解析を行った。しかし、多くの変動遺伝子を観察できたものの、PRL低下に直結すると思われる候補を抽出できず、今後の課題となった。TCDD以外の内分泌撹乱物質としてトリブチルスズ、ビスフェノールA、鉛およびカドミウムの障害性と用量依存性ついて検討し(単回経口投与法)、前2者には胎児生殖腺の性ステロイド合成抑制作用が観察された。また、今年度は低濃度水溶液による飲水処理法についても検討した結果、カドミウムは低濃度(0.01 ppm)で障害を惹起することを見いだした。ただ、その機構はTCDDと違っており、胎児精巣に対する直接的影響に基づくと考えられた。ダイオキシン(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin; TCDD)の妊娠期曝露による児の成長抑制に及ぼす機構に関して、格段の研究進展が実現できた。これまでの我々の研究によって、TCDDの母体曝露は周産期の黄体形成ホルモン(luteinizing hormone; LH)の低下を介して、成長後にまで継続する性未成熟を惹起することを見出していた。これに加え、TCDDは周産期の児の成長ホルモン(growth hormone; GH)を低下させ、これによって身体の成長を抑制することを見い出した。この原因としては、GH産生細胞の増殖に関わる糖質コルチコイドが低下する機構が推定された。また、糖質コルチコイドの低下には、母子の同ホルモン不活性化代謝酵素がTCDDによって誘導されるためと考えられた。本年度の研究では、周産期の児のLHやGHの抑制に芳香族炭化水素受容体(AHR)の活性化が関与するか否かについても進展をもたらすことができた。すなわち、TCDDに対して高親和性のAHRを発現するマウス(C55BL/6J系統)と低親和性AHRのマウス(DBA/2J系統)を用いた検討から、LHやGHの抑制にはAHR活性化が関与することが示唆された。TCDD以外の内分泌撹乱物質に関しては、di(2-ethylhexyl)phthalate (DEHP)およびメチル水銀等の9化合物につき、単回投与法と慢性飲水法によって検討を行った。その結果、妊娠ラットへの投与により胎児精巣のステロイド合成系を抑制する物質が認められた。しかし、TCDDと同様に脳下垂体ホルモンの抑制を介して作用を惹起すると思われる物質は見い出せなかった。

ダイオキシン(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin; TCDD)の妊娠期曝露による児の性未成熟の機構に関して、格段の研究進展が実現できた。これまでの我々の研究によって、TCDDの母体曝露は周産期の黄体形成ホルモン(luteinizing hormone; LH)の低下を介して、成長後にまで継続する性未成熟を惹起することを見出していた。しかし、一過性のLH低下が何故、交尾不全をもたらすかは全く不明であった。本年度はこの課題を解決し、周産期の一過性のLH低下はgonadotropin-releasing hormone (GnRH)の低水準を固着させ、これが交尾不全の直接的原因であることを証明した。また、TCDDは周産期の児のgrowth hormone (GH)を低下させ、これによって身体の成長を抑制することを見いだしていたが、この機構はエピジェネティック制御の変動を介して生起するLH低下と異なり、GH産生細胞の分化・増殖が抑制されるためであることを突き止めた。TCDD以外の内分泌かく乱物質については、低濃度(0.01および0.1 ppm)のCdCl2含有水を妊娠ラットに慢性的に飲水させると、胎児精巣のステロイドホルモン合成の律速過程に関わるsteroidogenic acute-regulatory protein (StAR)の発現が抑制されることを見いだした。低濃度CdCl2による性腺機能障害は、新規に発見されたものである。我々はTCDD曝露妊娠ラットから出生した児における死亡率増加や成長遅滞が、胎児・新生児側のgrowth hormone (GH)の低下、並びに育児母のprolactin (PRL)の低下に起因する可能性を提唱している。里親実験により、PRL抑制はTCDDの母への直接的影響であることを明らかにした。また、TCDD曝露母から出生した雌児では低PRL体質が固着してしまうことを最近になって発見した。これらの成績は、近年のヒト社会における育児放棄や児童虐待と関連させて興味深く、環境汚染物質が次世代の健全性を障害する可能性を暗示している。昨年度までの研究により、1)2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin (TCDD ;最強毒性ダイオキシン)の妊娠期曝露が、胎児の黄体形成ホルモン低下に基づいて出生後にgonadotropin-releasing hormone (GnRH)レベルを低下させ交尾行動不全を惹起すること、2)TCDDは育児期母体のprolactin低下によって育児破綻ひいては出生児の発育を障害すること、ならびに3)他の内分泌撹乱物質であるフタル酸エステルやCdCl_2等も生殖腺や脳下垂体のホルモン水準を抑制しうることを見出している。本年度は、これらの詳細機構と対処法の提示に向け研究を実施し、以下の成果を挙げた。1.栄養成分であるα-リポ酸が、エネルギー産生系ならびに葉酸代謝系の恒常性を維持することで、TCDD依存的な児の性未成熟に対して拮抗する可能性があることを見出した。この事実は、α-リポ酸が次世代の健全性を守る方策として有用であることを提示する重要知見と思われる。
語法及び用語の比較による版本狂言記四種の分類と日本語史上の位置づけ

『祝本狂言集』について、語法・用語の比較を行いその結果を論文として発表した。また、狂言記の完成したリストをもとに、補助者の協力を得て版本狂言記全二百番の曲の分類をパソコン上で行った。複雑な表の形であらわれたものから、各曲の伝承関係・固定化の程度を加味して、意味のある分類表として整理している。その一部は報告書に資料として示した。その成果として雑誌『日本語学』の「近代日本語研究」特集号に、狂言資料全般と版本狂言記の近世・近代語研究からみた資料的位置づけについて論文を書く機会を得たので、「おまへ」という代名詞を例にふれて述べた。こうした考察を通じて、二百番全てをきれいに整理することよりも、特徴的な曲を取り出して位置づけることが可能ではないかという見通しを得た。そこで大蔵流や和泉流と類似する曲について位置づけを試みたのが「狂言記研究の構想」(現在印刷中)である。版本調査の過程で、正篇や外篇の版本を資料として新たに入手することが出来た。また基礎資料として語彙対照表(正篇/外篇)を作成したが、その一部を報告書に資料として示した。このもととなった正篇・外篇の電子化した索引も含めて、今後どのように公開し活用していくかについては検討中である。『続狂言記』『狂言記拾遺』については、初版本の本文について、二種の翻字本の対照を補助者の協力を得て完成した。その中の異同部分について、本学蔵本と法政大学能楽研究所・早稲田大学演劇博物館・東京芸術大学・天理図書館の蔵書を実見、写真でも確認しながら、清濁、記号を含めた詳細な本文を確定できた。『狂言記』については、補助者の協力を得て索引の電子テキスト化を完成した。また、元禄十二年初版の刷りのよいものを、古本屋から購入することが出来、本文の確認確定がさらに確実なものとなった。しかし対照については語形の異同の確認作業に手間取り、四種の版本の見出し語対照表にまでは至っていない。『祝本』の用語・語法の調査も半分ほど進んでいるが、完成していない。ともに次年度への課題である。昨年度から引き続きの見出し語対照表については、補助者の協力により『狂言記正篇』と『狂言記外五十番』の2種との間の対照表が完成した。これをもとに分類の候補となる語について残る2種の狂言記の索引と対照して絞り込んでいる。その際に『祝本狂言集』にもある語かどうかについてのチェックも同時に進めている。これらの語を手がかりに、実際に二百の曲を分類するのが次年度の課題である。こうした作業の経過報告として「祝本狂言集について(二)」という論文を、研究室の雑誌である『筑波日本語研究』8号に発表した。同時期の成立と推定できる版本狂言記四種とはまた用語のうえで異なる位置に祝本狂言集があることを、具体例から考察した。また、北原保雄監修『日本語使い方考え方辞典』に協力して、30項目ほどの日本語史に関わる項目を執筆した。再刷されなかったために、現存する版本が少なく、本学図書館にもこれまで所蔵されていなかった『狂言記外五十番』を幸運にも古本屋から購入することができた。これまで調査してきた他の『狂言記外五十番』との刷りの具合など詳細な比較から、外篇についての出版事情を推定する手がかりが増え、また昨年度購入した元禄版『狂言記正篇』と合わせて、本学に版本狂言記四種の全ての版本が揃ったことになる。遅れていた分類のための語法・用語リストは完成した。この過程で『祝本狂言集』との比較は、『祝本』自体の資料的検討が不十分なため、ひとまず分類からははずして作業を進めることとした。完成したリストをもとに、補助者の協力を得て版本狂言記全二百番の曲の分類をパソコン上で行った。複雑な表の形であらわれたものから、各曲の伝承関係・固定化の程度を加味して、意味のある分類表として整理し、位置づけることを急いでいる。二百番全てをきれいに整理することよりも、特徴的な曲を取り出して位置づけることが可能ではないかという見通しを得ている。

その一環として雑誌『日本語学』の「近代日本語研究」特集号に、狂言資料全般と特に版本狂言記の近世・近代語研究からみた資料的位置づけについて論文を書く機会を得たので、上記のような本研究の成果の一部を「おまへ」という代名詞を例に挙げながら公表した。また、マイクロフィルムで早稲田大学演劇博物館蔵の版本狂言記諸本の写真を購入し、諸本研究に新たな資料を加えることができた。写本では、実践女子大学常盤松文庫蔵『鷺流狂言台本』を実見する機会を得た。これまで鷺流狂言と狂言記との関係をあまり重視してこなかったが、保教本などの研究からは、狂言記が鷺流狂言に与えた影響も考えられ、写本の一種を実際に調査して大変参考になった。
クモ膜下出血後の脳血管攣縮におけるアラキドン酸リポキシゲナ-ゼ産物の関与

我々は、実験モデルにおいて、クモ膜下血腫内に多量の12ーリポキシゲナ-ゼ産物(12ーHETE)の存在すること、ならびに攣縮脳底動脈での5ーリポキシゲナ-ゼの活性化について報告している。今回の研究は、攣縮血管における5ーリポキシゲ-ゼの局在および12ーリポキシゲナ-ゼ産物が、遅発性脳血管攣縮を誘発し得るかを実験モデルにて検討することを旨とした。ブタ白血球の5ーリポキシゲナ-ゼに対するポリクロ-ン化抗体(交叉性に関しては、犬白血球のサイトゾルを用いて確認した)を用いて、HRPー標識間接法にて犬正常および攣縮脳底動脈の5ーリポキシゲナ-ゼの局在を検討したが、両者ともに免疫組織化学的には陽性とはならなかった。これは、抗原量の不足が原因として考えられた。次に、12ーHPETE(0.5mg)を犬大槽内に注入すると8時間以上のライムライを持ち、35日持続する脳血管攣縮を作製し得た(自家動脈血一回髄注モデルに匹敵する)。12ーHETE(0.5mg)注入では、軽度の遅発性の収縮を認めたにすぎなかった。また、髄注した12ーHPETEは、髄液内で急速に12ーHETEに代謝され、12ーHETE自体も3時間で髄液中より消失していた。in vitvoにおける12ーHPETEの半減期を考慮すると髄腔内には、12HPETEを能動的に代謝・吸収する系の存在が示唆されるとともに、12ーHPETEは、遅発性脳血管攣縮の誘発物質であって、維持には関与していないものと考えられた。更に、血管攣縮誘発作用が、アラキドン酸の過酸化物(12ーHPETE15ーHPETE)に特異的なものなのか、あるいは、脂質の過酸化物一般に認められる作用であるのかを検討するため、リノ-ル酸の過酸化(13HPOD 0.5mg)髄注した。13ーHPOD注入により12ーHPETEより収縮は弱いが、むしろ長期間(2週間)持続する遅発性脳血管攣縮を作製し得た。このことより、遅発性脳血管攣縮の誘発作用は、脂質過酸化物一般に認められる作用である可能性が示唆された。脳血管攣縮をおこした血管のアラキドン酸リポキシゲナ-ゼの活性化が観察されたため、その活性化が、白血球浸潤によるものか否かをまず検討した。ブタ白血球より得られた5-リポキシゲナ-ゼを使い、ウサギによりつくられた抗体が、犬白血球の5-リポキシゲナ-ゼと交叉することをたしかめた。犬two-hemorrhageモデルを用い、7日目の攣縮をおこした血管と、正常な血管を上記の抗体と反応するかをしらべてみたが、両者とも反応しなかった。一般に、実験モデルでは攣縮血管でも、白血球浸潤は、ほとんど認められないが、今回の組織学的検索においても、白血球はそまらなかった。