hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
プレート沈み込み帯境界域における蛇紋岩化作用と交代作用

マリアナ海溝西側に位置する前弧域には、海溝軸に沿って海山群が存在する。この海山群の岩石試料を用いて、沈み込み帯境界における地学現象を岩石学的側面から追求した。プレート境界では、沈み込むプレートがもたらした水を含む形質堆積物とすぐ上にあるマントルかんらん岩とが反応し、元素移動を引き起こす交代作用が生じていること、高温型の蛇紋石であるアンティゴライトを伴う蛇紋岩科作用が鉄に富む流体を生み出し、初生かんらん石の組成を改変するという特異な現象が起きていることを明らかにした。かんらん岩の蛇紋岩化作用は、還元的な環境をつくり出し、生命の起源となる水素を好む好熱菌を発生させたと考えられ、近年注目を浴びている。また、沈み込み帯におけるウェッジマントルの蛇紋岩化作用は地震発生と密接に関係しており、地震学的にも活発に研究が進められている。今年度の研究では、海洋研究開発機構研究船『よこすか』,『かいれい』によって北部マリアナ前弧に位置する二つの蛇紋岩海山(雷神海山とツインピークス海山)から回収されたかんらん岩試料を用いて、沈み込み帯深部で進行している蛇紋岩化作用を岩石・鉱物学的に理解する目的で行った。偏光顕微鏡、EPMA,微小領域XRDを用いて、詳細な岩石学的・鉱物学的解析を行い、以下の成果を得た。(1)高温型の蛇紋石鉱物であるアンティゴライトが両者のかんらん岩から発見された。アンティゴライト+ディオプサイド+かんらん石+トレモラ閃石の共生から、蛇紋岩化作用が400-500°Cで生じたと考えられる。(2)蛇紋石作用の際に、Feに富む変成かんらん石(Fo_<77-88>)とFeに乏しい変成かんらん石(Fo_<92-95>)の両者が形成されることが明らかとなった。(3)Feに富むかんらん石は、熱水の経路に集中すること、Feに乏しい変成かんらん石の形成は、磁鉄鉱の形成に密接に関係があることを見いだした。(2)の二種の変成かんらん石の発見は世界的にも例が無い。(3)で示したように、Feに富むかんらん石と磁鉄鉱の分布は強い相関があり、また、流体の通路とおぼしき箇所に集中する。Feに富むかんらん石の形成については、Feに富む熱水の関与、磁鉄鉱の分解によるFeの供給の可能性などが考えられる。かんらん石の著しいMg/Fe比のばらつきは、一つの試料についても認められ、その原因解明は今後の重要な課題である。蛇紋石鉱物には、低温で安定なクリソタイルおよびリザルダイトと高温で安定なアンティゴライトがある。かんらん岩の蛇紋岩化作用は広い温度範囲で起こるため、その主たる化学反応は、温度によって異なる可能性が考えられる。低温で安定なクリソタイルを生成する蛇紋岩化作用と、高温で安定なアンティゴライトを生成するものとは、それぞれ異なる化学反応による可能性があり、両者を区別して研究を進める必要がある。平成23年度の研究は、マリアナ前弧全域に分布する蛇紋岩海山群を構成するかんらん岩類の記載と蛇紋岩化作用の特徴を明らかにすることに重点を置いた。その結果、(1)クリソタイルおよびリザルダイトを主とする蛇紋岩では、細粒の磁鉄鉱結晶を多量に伴うこと、(2)アンティゴライトを主とする蛇紋岩では、多量の細粒磁鉄鉱結晶を伴わないことが多く、鉄に富むかんらん石を含むことがあること、の2点が明らかになった。(2)の鉄に富むかんらん石は、組成上不均一で、その分布は流体の通路とおぼしき箇所に集中する。これまでに、陸上の蛇紋岩体の花こう岩マグマによる接触変成域において、鉄に不均質に富むかんらん石が、細粒磁鉄鉱結晶を消費して生成されるとの説が提案されているが、マリアナ前弧の蛇紋岩試料では、磁鉄鉱と鉄に富むかんらん石の関係が明瞭にわかっていない。蛇紋岩化作用は、地球上における生命の発生や沈み込み帯における地震発生に強い関わりがあると考えられており、その主要な化学反応とその多様性を正しく理解することは、地球科学や生物学において、きわめて重要である。今後、磁鉄鉱と鉄に富むかんらん石との関係を中心に、さらなる詳細な岩石学的解析を実施し、蛇紋岩化作用によって生成された鉱物の化学組成と共生関係を明らかにし、蛇紋岩化作用の本質に迫る予定である。

2003年から2009年にかけて実施した海洋研究開発機構の研究船による研究航海において、マリアナ前弧に分布する蛇紋岩海山から回収した主要な蛇紋岩、変成岩試料について、鉱物共生、鉱物組成を解析し、プレート沈み込み境界域の岩石学的、地球化学的検討を行うとともに、陸上の高圧変成帯における同種の岩石や反応帯の産状、化学組成変化、鉱物共生等を、蛇紋岩海山のそれらと対比・解析し、結果に基づき、沈み込み帯境界域における蛇紋岩化作用および交代作用の特徴を調べ、以下を明らかにした。(1)マリアナ中部のツインピークス海山において、高圧変成岩が数十メートルの岩塊として蛇紋岩中に産する。これらの高圧変成岩は、藍閃石+パンペリー石、ローソン石+アルカリ輝石の共生で特徴づけられ、低温高圧下で形成された。これら鉱物共生に先立ち、緑色角閃石-エピドート-フェンジャイト-ルチルの共生が認められ、高圧変成作用に先立ちより深所高温部での変成作用を経験した。(2)マリアナ前弧において、コニカル海山、サウスチャモロ海山、ツインピークス海山の3箇所から高圧変成岩が発見されたことから、マリアナ沈み込み帯において、広範に高圧変成作用が起こっている。(3)サウスチャモロ海山の藍閃石岩やコニカル海山のフェンジャイト-蛇紋石-アルカリ輝石岩と三波川帯における蛇紋岩体に接するトレモライト岩を岩石学的に解析した結果、これらの岩石類は、沈み込むプレートの上載珪質堆積物とウエッジマントルが接触することによって、交代作用で生じた可能性が高い。マリアナ前弧域での航海で採取した岩石試料の整理がほぼ終了し、データの取りまとめの段階に入っている。昨年度は大学業務が予想外に多く、十分な進捗状況にあるとはいえないが、最終年度で目標を達成するつもりである。24年度が最終年度であるため、記入しない。マリアナ前弧における個々の蛇紋岩海山のかんらん岩の記載と大枠的な鉱物の化学組成の解析が終了したので、最終年度に当たる今年度は、かんらん岩試料のうち重要なものについて、鉱物の化学組成の解析、鉱物共生の解析を、重点的に行い、マリアナ沈み込み帯における蛇紋岩化作用の特徴を明らかにし、同時にその多様性についての理解を深める。
がん症状マネジメントにおける看護介入モデルの症状別臨床普及版の開発

がん治療中の4つの有害症状(リンパ浮腫、皮膚症状、口腔粘膜炎、排便障害)のマネジメントの実態を観察研究で明らかにした。56名の患者の多くが通常医療下で症状を管理できていたが自己効力感は低下していた。データ分析後、追加すべき知識、技術、看護サポートが明らかになり、Integrated Approach to Symptom Management(IASM)に組み入れ、患者教育用マテリアルを開発した(http://sm-support.net/)。その後の介入研究では現在までに全例でセルフケア能力、自己効力感、QOLの維持または向上が見られている。今後事例数を増やし検証を行う。具体的内容:がん療養を支援する看護師からヒアリングを行い、治療に伴う有害事象の中で取り組むべき優先順位の高い「口腔粘膜炎」「リンパ浮腫」「皮膚障害」「排便障害」の4症状について、症状マネジメント統合的アプローチモデル(Integrated Approach to Symptom Management : LASM)による看護介入をデザインした。LASM臨床適用の訓練を受けたがん看護専門看護師12名が研究協力員として研究に参加し、症状毎に4つの研究班を編成し、次の作業を行った。(1)エビデンス検索(文献検討)文献レビューを研究班毎に行い、苦痛症状緩和のエビデンス検索を行った。(2)マネジメントの知識、技術、看護サポートのパッケージ化文献検討をもとに患者に提供する「知識」「技術」を充実させ患者用パンフレットを作成し介入の準備を行った。さらに臨床症状毎の】ASMガイドブックおよび記録角紙の改訂を行った。(3)webサイトの準備研究班内での情報交換、介入時のマテリアル入手ができるように各症状毎にページを作成した。4班の活動概要は以下のとおりである。【口腔粘膜炎班】化学療法による口腔粘膜炎の先行研究を検討し発症予防及び発症後の2段階を設定し介入内容を作成した。【排便障害班】がん療養中の排便障害を対象とし、排便マネジメントの支援をデザインした。【リンパ浮腫班】手術療法、放射線療法に伴うIIII期のリンパ浮腫を対象とする介入デザインとした。【皮膚障害班】分子標的治療薬(EGFR阻害剤、マルチキナーゼ阻害剤)による皮膚障害を対象とし、先行研究に基づき発症予防及び発症後の2段階介入を作成した。意義及び重要性:がん治療・療養の現場では、上記4つの症状は頻繁に見られ、治療中断の原因になっている。患者のセルフケア能力を活用したマネジメント戦略の構築は重要であり意義がある。がん診療の現場で優先順位の高い4つの苦痛症状(口腔粘膜炎、リンパ浮腫、皮膚障害、排便障害)について、前年度に組織したがん看護専門看護師からなる4つの研究班に分かれて取り組んだ。平成25年度は対照群のデータの蓄積を目的に観察研究の研究計画を完成させ、倫理委員会承認後に症状マネジメントモデルMSMを用いてデータ収集を開始した。3班(排便障害班は実態調査)でデータ収集を実施中で、現在17例(+実態調査10例)のデータ収集が終わったが目標40-60例には達していない。排便障害班は、化学療法中の患者の排便障害の実態が明らかでなく、先行研究もないことから、実際にどのように排便障害が起こっているのか実態調査を行った。他の班に1年遅れて観察研究、介入研究が実施できるものと思われる。26年度介入研究の準備では、それぞれの有害事象と対応について文献検討を行いエビデンスを確認して患者教育用マテリアル(パンフレット)や介入プロトコールの原案を完成させた。内容を精錬して一部は最終稿までこぎつけている。さらに介入に必要な物品を検討し、簡便に提供できるよう準備した。→皮膚障害、リンパ浮腫、口腔粘膜炎の3班についてパンフレットと介入ガイドブック原案完成また、介入の効果を図るために既存の質問紙の準備行った。セルフケア能力については既存の判定スケールがないため、理論的背景を考慮して研究班で独自に作成し、内容妥当性について調査検討を行い、学会発表を行った。Webサイトについては、前年度にモデルの基本となる痛みのマネジメントに関して知識を掲載している。今後介入研究で活用できるように症状ごとのパンフレットや介入ガイドブックが完成し次第サイトに掲載し、どこでもダウンロードが可能なよう設定する予定である。がん診療の現場で優先順位の高い4つの苦痛症状(口腔粘膜炎、リンパ浮腫、皮膚障害、排便障害)毎に、がん看護専門看護師からなる研究班を組織し、リンパ浮腫班、口腔粘膜炎班、皮膚障害班は対照群のデータの蓄積のために観察研究によりデータ収集を行った。排便障害班は症状の実態把握のための調査を行った。リンパ浮腫班は14例のデータを収集し、分科会を6回開催してデータ分析を行った。3カ月の期間、多くの事例で症状の改善は認められず、患者は指導された方法をなんとか実施して悪化しないように維持しているという実態が明らかとなった。口腔粘膜炎班は14例のデータを収集し、分科会を4回開催してデータ分析を行った。化学療法開始後4週の間に症状の著明な悪化は認められなかったが、ケアの実施には患者の過去の習慣が大きく関与していることが明らかとなった。皮膚障害班は5例のデータを収集し、分科会を3回開催しデータ分析を行い、皮膚症状の改善は認めなかったが、患者が生活の中でケアの優先順位を判断し、実用的なスキンケアを実施していることが明らかとなった。これら3つの班は平成27年度に予定されている介入研究の研究計画を完成させ、大学の倫理委員会の承認を得た。

残る1班である排便障害班は化学療法中の患者の排便障害の実態調査を行い、23例のデータを収集した。排便障害によって生活に支障をきたすほどではないが困難な状況になっても医療者にアクセスしていないという実態が明らかになり、次年度に向け観察研究の計画を完成し、倫理委員会承認が済み、対象者のリクルートを開始している。4つの班は並行して介入時に用いる患者教育用マテリアル(パンフレット)の開発を行い、一部が完成(ISBN取得済み)し、介入研究用にwebサイトに掲載予定である。さらにセルフケア能力測定用のスケールについて表面妥当性をする調査が終了し、投稿原稿を完成させた。がん診療の現場で優先順位の高い4つの苦痛症状(リンパ浮腫、口腔粘膜炎、皮膚障害、排便障害)毎にがん看護専門看護師からなる研究班を組織した。排便障害班を除く3つの症状班は、平成26年度までに収集した観察研究(対照群)のデータの分析を行い症状マネジメントの実態を明らかにした。排便障害班は実態調査をまとめ、誌上発表の準備を行うとともに介入研究の対象とする患者群の特定を行った。3つの症状班は並行して、IASM介入研究で用いる介入プロトコール(IASM看護活動ガイドブック)を、観察研究で得られた症状マネジメントの特徴を踏まえて精錬させ完成させた。リンパ浮腫班は対照群14例を分析し、ケア継続の負担や症状悪化への不安に対応する必要性を認め、ケアの効果をフィードバックしてケア継続の動機づけを意図的にサポートすることを介入手順に明記した(分科会5回開催)。口腔粘膜炎班は14例を分析して、習慣化した口腔ケアに加えて、患者が薬物療法を繰り返し行う中で獲得した方法を用いている様子を明らかにした。重篤化せず維持しているにもかかわらず患者の自己効力感が低いことがわかり、患者の過去の症状体験に理解を示し、努力の成果を示してエンパワーすることを介入手順に明記した(分科会3回開催)。皮膚障害班は5例を分析し、ケアをしても症状が持続するため患者の自己効力感が低下していることを明らかにし、症状との付き合い方を話しあうことや情緒的サポートを手順に加えた(分科会4回開催)。各班は知識および技術を提供する際に用いる患者教育用マテリアルを完成させ(ISBN取得)、webサイトに掲載した。3つの班は介入研究を開始し、リンパ浮腫班は1例、口腔粘膜炎班は5例への介入を継続中であり、ほぼ全例でセルフケア能力や自己効力感、QOLの維持または向上が見られている。尚、本研究の報告書は研究班webサイトにて公開予定である。がん治療中の4つの有害症状(リンパ浮腫、皮膚症状、口腔粘膜炎、排便障害)のマネジメントの実態を観察研究で明らかにした。56名の患者の多くが通常医療下で症状を管理できていたが自己効力感は低下していた。データ分析後、追加すべき知識、技術、看護サポートが明らかになり、Integrated Approach to Symptom Management(IASM)に組み入れ、患者教育用マテリアルを開発した(http://sm-support.net/)。
ロングスパンブリッジ用新規CAD/CAM用レジンの開発およびその臨床応用

現在、歯科補綴物の製作にCAD/CAMシステムが用いられており、補綴物の精度の向上および省力化に多大な貢献をしている。しかしながら、高強度硬質レジンブリッジ(HRBr)は、ガラス繊維の配置を考慮する必要があるためハンドメイドで製作する必要があり、CAD/CAMシステムが利用できない。また、HRBrは機械的強度が不足しているため、ロングスパンブリッジへの応用には適さない。そこで、これらの問題点を解決するため、ガラス繊維よりも高い機械的強度を持つSiC繊維の短繊維に着目し、ロングスパンブリッジに応用可能な機械的強度を持つ新規CAD/CAM用短繊維強化型コンポジットレジンの開発を行う。
固体型無機顔料増感太陽電池の開発

色素に代わって顔料を用いてしかも全固体化を実現する増感型太陽電池を最終目標とした研究で、それに先立って電解析出法を用いるナノポーラス酸化亜鉛/キサンテン系色素ハイブリッド薄膜の形成過程を仔細に検討した。これは酸素の電気化学的還元反応をトリガーとした酸化亜鉛製膜怯である。まず酸化亜鉛/エオシンY色素ハイブリッド薄膜形成における電気化学反応の動力学的解析、色素の吸着特性などの解析により、水溶液中におけるエオシンYの拡散係数が2.23×10^<-9>m^2s^<-1>であること、Langmuir型吸着におけるエオシシYの平衡吸着量及び最大吸着量がそれぞれ76909M^<-1>and 11.3×10^<-6>mol/g ZnOであること、エオシンYのアニオンラジカルとZn^<2+>イオンとの間で形成される錯体の安定度定数pKZn^<2+>として3.87と見積もられ、この錯体形成が酸化亜鉛/色素ハイブリッド薄膜の自己組織的形成の鍵を握っていることなどを明らかにした。また、酸素還元反応に対して、エオシンYが触媒として作用することを認め、さらにフルオレセイン、フロキシン、ローズベンガルなどの効果についても系統的に調べた。これらのデータに基づいて、他のキサンテン系色素に関する系統的検討へと発展させ、酸化亜鉛/色素ハイブリッド薄膜作製の最適化に結び付けつつある。研究成果はまだ未投稿ではあるが、平成17年1月に開催されたBMMP-5国際会議(名古屋)において発表しており、5月に開催されるACEC2005国際会議(上海)においても発表を予定している。
消化管における肝型および腸型脂肪酸結合蛋白(FABP)の分布と動態からみた存在意義に関する研究

1.ラット腸型FABPにたいする抗体作製精製ラット腸型FABPをウサギに免疫し,抗体を得たが,このポリクロナール抗体はヒト腸管との免疫交叉性がなく,現在,ヒト腸型FABPに対する抗体は作製できていない。2.ラット正常小腸における肝型および腸型FABPの分布ラット正常腸管における肝型と腸型FABPの分布を検討した結果,両者ともに小腸では空腸に最も多く,回腸,十二指腸の順で存在し,分布状況は同じであった。2種のFABPが脂肪の吸収に関与していることが示唆されたが,両者の役割分担の差異をみるために,脂肪含量の異なる食事負荷で検討した。高脂肪食負荷により肝型では空腸で有意にFABPの増加がみられ,脂肪負荷で誘導されることをしめしたが,回腸や十二指腸では変動はなかった。腸型では空腸,回腸とも増加し,後者において前者に比し有意の増加を示した点で肝型とは異なった動態を示した。低脂肪食負荷に対しては肝型,腸型とも通常食に比し有意差を認めなかった。3.ラット大腸におけるFABPの分布肝型は大腸でもかなりの量存在したが,腸型は存在せず,小腸とは対照的であった。生理的な脂肪の吸収は小腸で行われることから,大腸における肝型の存在は消化吸収以外の機能を予測させ興味深い点であり,アゾ発癌色素との親和性を有することからヒト大腸癌と肝型FABPの関連を検討した。大腸癌切除標本組織切片でPAP法によりFABP染色を行い,臨床病理学的因子との関連を検討し,癌の悪性度と関連を示すとされるDNA ploidy patternについても同一症例で検討した。1)大腸癌組織におけるFABPは高分化型腺癌で,低分化型に比し,強く染色される度合が多く,リンパ節転移陰性例や進行度(stage)の軽い症例で高染色例が多かった。2)染色程度と5年生存率との関係をみると,高染色群で低染色群に比し有意に生存率が良好であった。3)DNA ploidy patternとの関連ではdiploid群はaneuploid群に比しFABP高染色群が多く,両者に関連がみられた。1.ラット腸型FABPにたいする抗体作製ラット腸型FABPの精製標品(本学第2生化学小野輝夫教授より恵与されたもの)をウサギに免疫し、抗血清を得ることができた。この抗血清を硫安塩析、アフィニテイクロマトグラフィにて精製した。このポリクロナールはヒト腸管との免疫交叉性を有しておらず、今のところ、ヒト腸型FABPに対する抗体は作製できていない。2.ラット正常腸管(小腸)における肝型および腸型FABPの分布上記1および既に保有しているラット肝型FABPに対する抗体を用いて、1)ラット正常腸管における肝型および腸型FABPに分布を検討した。その結果、両者ともに小腸では空腸に最も多く、ついで回腸、十二指腸の順で多く存在した。即ち、腸管での分布状況は肝型、腸型ともに同じであり、脂肪の吸収が主として空腸上部で行われることにより、2種のFABPが関与していることが示唆された。

2)両者がどの様に関与しているのかの差異をみるために、脂肪含量に異なる食事負荷により検討した。肝型では高脂肪負荷により、空腸で有意にFABPの増加がみられ、脂肪負荷で肝型が誘導されることがわかった。一方、回腸や十二指腸では著明な増加は観察されなかった。腸型については、平成5年度に検討する予定である。3.ラット大腸におけるFABPの分布肝型は大腸でもかなりの量存在したが、腸型は殆ど存在せず、小腸とは対照的であった。生理的な脂肪の吸収は小腸で行われることから、大腸における肝型の存在は消化吸収以外の機能を予測させ、興味深い。4.ヒト大腸癌と肝型FABPヒト大腸癌組織切片を用いてPAP法によりFABP染色を行った。高分化型で、低分化型に比し、強く染色される度合が多かった。現在臨床病理学的因子との関連を検討中である。1.小腸に存在する2種のFABP(肝型、腸型)の動態ラット正常腸管における肝型および腸型FABPの分布を検討した結果、両者ともに小腸では空腸に最も多く、回腸にはこれと同等かやや少なく、次いで十二指腸の順で、分布状況は同じであったことより、今年度は両者がどの様に脂肪吸収に関与しているのかの差異をみるために、脂肪含量の異なる食事負荷により検討した。1)高脂肪食負荷により肝型では空腸で有意にFABPの増加がみられ、脂肪負荷で肝型が誘導されることがわかった。腸型では空腸、回腸とも増加したが、回腸において著明であり、後者は前者に比し有意の増加を示した点で肝型とは異なった動態を示した。2)低脂肪食負荷に対しては肝型、腸型とも通常食に比し有意差を認めなかった。2.ラット大腸におけるFABPの分布肝型は大腸でもかなりの量存在したが、腸型はほとんど存在せず、小腸とは対照的であった。生理的な脂肪の吸収は小腸で行われることから、大腸における肝型FABPの存在は消化吸収以外の機能を予測させ興味深いところである。そこでFABPとアゾ発癌色素との高い親和性から、ヒト肝型FABP抗体を用いてヒト大腸癌とFABPとの関連について検討した。ヒト大腸癌組織切片を用いてPAP法によりFABP染色を行い、臨床病理学的因子との関連を検討した。また、癌の悪性度と関連を示すとされるDNA ploidy patternについても同一症例で検討した。1)大腸癌組織におけるFABPは高分化型腺癌で、低分化型に比し、強く染色される度合が多く、リンパ節転移陰性例や進行度(stage)の軽い症例で高染色例が多かった。2)染色程度と5年生存率との関係をみると、高染色群で低染色群に比し有意に生存率が良好であった。3)DNA ploidy patternとの関連ではdiploid群はaneuploid群に比しFABP高染色群が多く、両者に関連がみられた。
機能性ファイバによる干渉計測

1)不規則振動に対する光ファイバの応答特性を解明するために、直交2周波光ヘテロダインチ干渉計を構成し、その特性を調べた。偏波保持光ファイバの複屈折軸に直交2周波の偏波方向を一致させて入射させ、参照用2周波光と干渉させてレテロダイン出力を得た。ファイバの屈折率及び振幅ゆらぎの統計処理が可能であることが明らかにされた。2)機能性光ファイバの研究開発に資するため、2乗分布コア型サイドトンネル単一偏波ファイバの解析を進めた。新しい手法に基づいて、ファイバ内の平面的な電磁界分布を解析した結果、在来のファイバでは絶対単一偏波特性が得がたいことが判明したので、屈折率が2乗分布型のコアを提案した。これによって絶対単一偏波特性の改善が可能であり、コアの屈折率分布が特に重要な因子となることが示された。3)光ファイバの振動計測システムを構成し、その性能評価をおこなった。極限性能を追求する際に必要な干渉信号の安定化を計る位相変動補償方式を開発した。今後は、検出感度および周波数範囲などの主要性能の一層の向上を計る予定である。4)リング干渉方式とリング共振器の光ファイバジャイロの極限性能へ向けての研究をおこなった。特に、雑音要因の挙動把握に成功し雑音除去手法を見出すことにより、ファイバジャイロ開発に対する一つの知見を与えた。さらに、ドリフト対策を施した新しい光学系が考案された。5)非線形光ファイバセンシングという立場から、パルスの伝播特性の検討をおこなった。非線形媒質と負の分散媒質を用いたパルスの分離方法を詳細に調べた結果、この技術が基本的な光処理技術の一つであることが判った。6)光ヘテロダイン法に基づく全光ファイバエリプソメータを構成して、その性能評価を実施した。偏波保持複屈折ファイバを利用することにより、特殊環境で、かつ遠隔測定にも適することが判った。特に、可動部がなく、自動化しやすい長所がある。
脂質メタボローム解析のための臨床検査法の構築とその臨床応用

脂質分子は互いが分解、合成などに密接に関連しているため、脂質分子の機能分析では、各脂質分子の代謝の流れとして捉える必要がある。しかし、脂質分子は骨格、脂肪酸側鎖、付加物などにより多種多様であるため、その前駆物質や代謝物など、幅広い脂質分子種の組成分析が必要である。さらにヒトの病態解析では、多種多様な脂質分子種を少量検体で迅速に測定する必要がある。そのため、我々は、汎用性があるMALDI-TOF質量分析(MS)やGC MSの臨床検査への応用として、少量血液による脂質分子種の簡便で迅速な分析法の開発を目指している。今回、脂質分析の前処理として、MALDI-TOF MSやGC MSに適した試料調製法の構築を試みた。これまでの血液からの脂質抽出法としての簡易的なクロロホルム/メタノール混液抽出法(抽出法)の改良を行い、分子種組成は同等で回収率をほぼ100%にすることができた。脂質の部分精製としてこれまで、ミニカラムや薄層クロマトグラフィーを用いてきたが、さらに試料の微量化と操作の迅速性を向上させるため、高分子膜を利用した脂質調製法(高分子膜法)を開発し、トリグリセライドとリン脂質は、ほぼ100%の回収ができた。これまでの抽出法とその改良法また高分子膜法では、検出した脂質組成は類似しており、質量分析によるリン脂質分子種は、同一分子の負荷ピーク比は異なっていたが、同様な分子種組成が検出された。さらに、抽出法であるが、MALDI-TOF MSによる血液中脂肪酸組成、GC MSによるアシルグリセロール組成の分析法を開発できた。また血液疾患、IgG4関連疾患、気管支肺胞洗浄液中のリン脂質分子種の組成を分析できた。次年度は、これまでの脂質分子種分析に高分子膜脂質抽出法を導入して、分析試料の微量化、操作の簡便化を図り、臨床検査への応用できる脂質分子種分析法の構築を目指す。脂質分析の短所である脂質抽出法の迅速で簡便な方法が構築できたので、従来の脂質抽出法と新しい方法による微量脂質分子種成分の比較試験を行う必要がある。確認されれば、臨床検体の分析への応用が進む。これまでの臨床検査医学での脂質プロファイルシステムを統合、総括し、他施設での試料調製や分析、データ解析手法の統一化を図る。また、分析技術を伝承し、さらに全てのデータの統合でビッグデータとして共有活用できるシステムを作る。今回の研究では、これまで我々が構築した脂質プロファイル分析法を基に、臨床検査で利用可能な脂質メタボローム解析の基盤技術を構築し、その臨床応用を目的としている。研究成果として、血清中リポ蛋白質分画中のコレステロール、トリグリセライド,リン脂質濃度の関連性を明確し、さらにアポ蛋白濃度やアポ蛋白濃度とリポ蛋白質脂質濃度比との関連性を明確にした。また、アシルグリセロール分子間の関連性も明らかにでき、血清中での脂質分子動態の様子を推定できた。これらの結果は、脂質分子間およびリポ蛋白質間での脂質分子種プロファイルの関連性を分析するのに寄与すると考えられた。次いで、スクリーニング的に血清中の脂質分子種を分析するために、薄層クロマトグラフィー(TLC)で脂質分子クラスを分離後、質量分析のための脂質試料抽出法を検討した。これまでの一般的な方法としての目的脂質部分のゲルをかき取り脂質を抽出(かき取り法)または、ゲル切片に切断してゲルごと抽出液に浸し脂質を抽出(ゲル抽出法)と加熱転写装置を用いてTLCプレートから脂質の高分子膜へのブロッティングし、高分子膜の目的脂質部分を切り取り脂質を抽出(Far-Eastern Blot法:ブロッティング法)する3法を比較した。抽出試料をMatrix support laser desorptionionization time-of-flight mass spectrometer (MALDI-TOF MS)による分子種分析とガスクロマトグラフィー質量分析法(GCMS)による脂肪酸組成で分析した結果、3法でのリン脂質、トリグリセライド,コレステロールエステルの脂肪酸組成は類似していたが,回収率において差が認められたため、現在改善中である。本研究は、当初の予定どおりに進んでいる。脂質分子の分離調製を容易にする薄層クロマトグラフィー(TLC)とブロッティング法(加温圧力転写)の検討において、転写による脂質分子種組成比は、従来の脂質抽出法と同等の成績であるが、回収率において差がある。現在、操作条件を検討中である。これまでに完成した血液中リン脂質,総脂肪酸組成の分析プロトコールを用いて、臨床検体の脂質プロファイルの作成を開始した。

脂質の部分精製としてこれまで、ミニカラムや薄層クロマトグラフィーを用いてきたが、さらに試料の微量化と操作の迅速性を向上させるため、高分子膜を利用した脂質調製法(高分子膜法)を開発し、トリグリセライドとリン脂質は、ほぼ100%の回収ができた。これまでの抽出法とその改良法また高分子膜法では、検出した脂質組成は類似しており、質量分析によるリン脂質分子種は、同一分子の負荷ピーク比は異なっていたが、同様な分子種組成が検出された。さらに、抽出法であるが、MALDI-TOF MSによる血液中脂肪酸組成、GC MSによるアシルグリセロール組成の分析法を開発できた。また血液疾患、IgG4関連疾患、気管支肺胞洗浄液中のリン脂質分子種の組成を分析できた。次年度は、これまでの脂質分子種分析に高分子膜脂質抽出法を導入して、分析試料の微量化、操作の簡便化を図り、臨床検査への応用できる脂質分子種分析法の構築を目指す。脂質分析の短所である脂質抽出法の迅速で簡便な方法が構築できたので、従来の脂質抽出法と新しい方法による微量脂質分子種成分の比較試験を行う必要がある。確認されれば、臨床検体の分析への応用が進む。1)血液中脂質プロファイリング:主要な脂質分子の分子種プロファイルをおこない、生化学データとの関連性を評価する。血清中リポ蛋白分画での分布を検討し、動脈硬化症や炎症性疾患での変動を評価する。スクリーニング結果および生化学データを踏まえて、疾患別に各分子別のプロファイルを評価し、疾患により特異的な脂質分子の変化を捉える。2)機能性脂質分子種プロファイル:脂質分子プロファイルで変化認められた場合、微量の脂質代謝関連産物(前駆物質と代謝産物)のプロファイルから、異常脂質代謝マップを構築する。3)ターゲット分子と関連酵素・受容体:疾患特異的な脂質分子種(ターゲット分子)が見出された場合、その生成や代謝に係わる酵素や受容体を検索する。現在BAL-F分析で疾患特的な脂質分子種が見出されており、その代謝産物を検討中である。4)乳幼児の成長と栄養との関連:牛乳や母乳などには、短鎖・中鎖脂肪酸が多く含まれており、血中脂質プイロファイルの変化と成長、栄養摂取の関連などを検索する。また、成人とのプロファイルの比較評価もおこなう。これまでの臨床検査医学での脂質プロファイルシステムを統合、総括し、他施設での試料調製や分析、データ解析手法の統一化を図る。また、分析技術を伝承し、さらに全てのデータの統合でビッグデータとして共有活用できるシステムを作る。年度末に納入された試薬,消耗品が,キャンペーン等で当初の見積もりより安くなったため、差額が生じた。次年度使用額は、平成30年度請求額とあわせて、物品費として試薬,消耗品の購入に使用する予定である。発注した実験試薬が、年度内に納入されなかったため、次年度の支払い予定である。
イネのＰＡＬ遺伝子ファミリーの機能解析

イネジャポニカ品種である日本晴およびインディカ品種であるカサラスの組織からRNAを抽出しそれぞれ9つのPAL様配列をサブクローニングした後、pColdベクターに導入した。大腸菌宿主で発現した組換えタンパク質を用いて、フェニルアラニンもしくはチロシンを基質として酵素反応を行い、反応物を液体クロマトグラフ質量分析計で解析した。日本晴由来のPAL(フェニルアラニンアンモニアリアーゼ)様配列のうち、染色体11および12に座乗するPAL様配列を除いた7つの配列でPAL活性が確認された。TAL(チロシンアンモニアリアーゼ)活性は、染色体4、11、12に座乗する6つの配列で確認された。また、TAM(チロシンアミノムターゼ)活性は、染色体12に座乗するPAL様配列のみで確認された。カサラスのPAL様配列については、欠失している染色体12のPAL様配列を除いて、PAL活性およびTAL活性に関して日本晴の対応するそれぞれの配列と同等の活性を確認することができた。以上のことから、イネのPAL様配列は、多くがPAL活性とTAL活性をともに有していることが判明した。また、TAM活性は染色体12に座乗するPAL様配列のみで確認でき、Yanら(2015)の結果を追認することができた。PAM(フェニルアラニンアミノムターゼ)活性は調整した組換えタンパク質で有することを確認することは出来なかった。PAM活性をもち、βフェニルアラニンを生合成する遺伝子の特定を行うことは出来なかったが、染色体12のPAL様配列はPAL活性およびTAL活性をもたず、TAM活性のみを有することが明らかとなった。植物が産出する二次代謝物の中には、病原菌や害虫に対する防御機能をもつものが多い。これらを活用すれば、植物自らがもつ自己防御機構を高めることができ、病虫害の被害を抑えることができる。我々は、PAL(フェニルアラニンアンモニアリアーゼ)様配列の一つがβチロシンの合成酵素をであることを、植物で初めて明らかにし、βチロシンに他感作用があることを明らかにした。PAL様配列は,PALの他にTAL(チロシンアンモニアリアーゼ),PAM(フェニルアラニンアンモニアムターゼ)およびTAM(チロシンアンモニアムターゼ)として機能していると考えられるが、イネに9個存在するPAL様配列が、それぞれどのような機能を有しているかは未解明である。本研究では、PAL様配列の機能を解明するとともに、βチロシンと類似した生合成反応で生じるβフェニルアラニンの合成酵素遺伝子を明らかにすることを目的とする。まず、日本晴からPAL様配列をRTーPCRで増幅して,大腸菌発現ベクターに導入したところ,8つのPAL様配列について発現タンパク質を得ることができた.全て可溶性画分で得られたことから,今後試験管内での合成反応を行う予定である.PAL様配列変異体の探索をTOS17ミュータントライブラリーなどWEBで公開されている変異集団を対象に行ったが,該当する変異体を見いだすに至ってない.その代替策としてPCRによるmPingミュータントライブラリーからのスクリーニングを行っている.12イネの葉身RNAから逆転写させたcDNAを用いてPAL様配列を得た。これらを大腸菌発現ベクターに導入し、発現タンパク質を得た。WEB上でデータベース公開されている変異体ライブラリーから、PAL様配列の変異体を探索したが、該当するものを選抜することはできなかった。我々は、PAL(フェニルアラニンアンモニアリアーゼ)様配列の一つがβチロシンの合成酵素であることを、植物で初めて明らかにし、βチロシンに他感作用があることを明らかにした。PAL様配列は、PALの他にTAL(チロシンアンモニアリアーゼ)、PAM(フェニルアラニンアンモニアムターゼ)およびTAM(チロシンアンモニアムターゼ)として機能していると考えられるが、イネに9個存在するPAL様配列が、それぞれどのような機能を有しているかは未解明である。まず、日本晴からPAL様配列をRT-PCRで増幅して、大腸菌発現ベクターに導入したところ、全てのPAL様配列について発現タンパク質を得ることができた。試験管内での合成反応を行ったところ、その一つについて既報通りβチロシンが産出されTAMであることが再確認できた。しかしながら他の8個のタンパク質については合成産物が確認できなかった。今後、反応条件を適宜変えながら再度合成反応を行い、合成物を分析する。また、強発現するイネ形質転換体を作成するとともに、タバコでの一過性発現系を構築して、生体内での合成を確認する予定である。大腸菌発現系を用いたPAL様配列遺伝子の発現を行ったが、LOC_Os12g33610のβチロシン合成のみが確認できた。PAL活性について現在解析している。

日本晴由来のPAL(フェニルアラニンアンモニアリアーゼ)様配列のうち、染色体11および12に座乗するPAL様配列を除いた7つの配列でPAL活性が確認された。TAL(チロシンアンモニアリアーゼ)活性は、染色体4、11、12に座乗する6つの配列で確認された。また、TAM(チロシンアミノムターゼ)活性は、染色体12に座乗するPAL様配列のみで確認された。カサラスのPAL様配列については、欠失している染色体12のPAL様配列を除いて、PAL活性およびTAL活性に関して日本晴の対応するそれぞれの配列と同等の活性を確認することができた。以上のことから、イネのPAL様配列は、多くがPAL活性とTAL活性をともに有していることが判明した。また、TAM活性は染色体12に座乗するPAL様配列のみで確認でき、Yanら(2015)の結果を追認することができた。PAM(フェニルアラニンアミノムターゼ)活性は調整した組換えタンパク質で有することを確認することは出来なかった。PAM活性をもち、βフェニルアラニンを生合成する遺伝子の特定を行うことは出来なかったが、染色体12のPAL様配列はPAL活性およびTAL活性をもたず、TAM活性のみを有することが明らかとなった。発現タンパク質を使って酵素学的実験を行い、PAL様配列の機能を明らかにする。PCRベースでスクリーニング可能な突然変異集団からPAL様配列の変異体を選抜する。βフェニルアラニン生合成に関わる遺伝子が判明すれば、ノックアウト形質転換体を作成し、機能解明を進めていく。大腸菌発現系だけでなく、タバコ葉を用いた一過性発現系の構築、ならびに過剰発現イネ形質転換体の作成を試みている。In vitroおよびIn vivoにおけるタンパク質の発現と代謝物の合成を行い、PAL様配列の解析を進める。大腸菌発現タンパク質を用いた酵素学的実験の反応物分析において新規の物質が同定されなかったことにより,既存の試薬で賄うことができ,新たな標品の準備等の経費が発生しなかったため大腸菌発現タンパク質を用いた酵素学的実験に由来する反応物だけでなく,イネ変異体からもタンパク質を抽出して新規分室の同定を試みる
有機触媒を有いた新反応の開発とナカドマリンの全合成研究

昨年度合成に成功した単環化合物からナカドマリン合成の重要な合成中間体である四環式複素環化合物への誘導を目指して、以下に示す二つの新たな合成ルートを検討した。まず、四級炭素上のエステル基をアルデヒドに変換し水酸基をアセチル基で保護した後、N-アルキルヒドロキシアミンとの反応により得られたニトロンに対してフリル基の分子内フリーデルクラフツ反応による5員環形成反応を検討した。しかし反応は期待通りに進行したものの、所望の立体とは逆の絶対配置を有する生成物が単一で得られた。そこで、次に反応させる順序を逆にして、パラジウム触媒を用いたジアステレオ選択的なアリル位アミノ化反応を行った後、分子内フリーデルクラフツ反応を行う第2のルートを検討した。具体的には、先に合成したアルデヒドを2-アミノエタノールと処理してヒドロキシイミンを合成したのち、パラジウム触媒と塩基存在下で加熱したところ、分子内の水酸基がイミンを攻撃しO,N-アセタールが形成すると同時に分子内アリル位アミノ化反応が進行して、新たに形成する末端ビニルに関して望む立体化学を有する二環性ラクタム体へと誘導することに成功した。このジアステレオ選択性は、用いる塩基の種類やイミン形成に使用する1,n-アミノアルコールによって、大きく変化することを突き止めた。種々条件検討した結果、最適条件下において所望の立体化学を有する生成物を収率80%、5:1のジアステレオ選択性で主生成物として得ることができた。最後に、単離精製したO,N-アセタール体に対して、ルイス酸としてTMSOTfを氷冷下反応させることで、フリル基の分子内フリーデルクラフツ反応が高立体選択的かつ高収率で進行し、ほぼ定量的に目的とする四環式化合物を単一化合物として合成することに成功した。今後も、全合成を目指して研究を続行する予定である。ナカドマリンAの不斉全合成を目指して申請者は今年度、ナカドマリンAの合成において一つ目の鍵段階となる...-不飽和アルデヒドに対するエナンチオ選択的なマイケル反応の検討に取り組んだ。申請者は本反応においてナカドマリンA8位の不斉炭素の立体制御と同時にD環の構築を一挙に行うことを検討しているため、求核剤としてD環と同じピロリジン構造を有するものを用いる必要があった。そのためまず申請者はピロリジン骨格を有する種々の活性メチレン化合物の合成を行った。出発物質として・-バレロラクタムを用い窒素上をBn基あるいはBoc基で保護した後にラクタムカルボニル炭素の・位に電子求引基を導入することで目的の求核剤を種々合成した。また、4-メトキシ-3-メトキシカルボニル-4-オキソブタンカルボン酸のカルボキシル基をベンジルアミンと縮合させたのち酸による閉環反応を行わせることで、ピロリジン-2,5-ジオン構造を持った求核剤を合成することにも成功した。次に申請者は合成した種々の求核剤を用いて鍵反応の条件検討を行った。基質としてナカドマリンA合成に展開可能となるように・位に3-フリル基を有する・,・-不飽和アルデヒドを用いることとした。アミノチオ尿素型触媒とプロリン型触媒を中心に様々な不斉有機触媒を検討したところ、求核剤として1-tert-ブチル3-メチル-2-オキソピロリジン-1,3-ジカルボキシレートを、触媒としてリチウムプロリンカルボキシレートを用いることでナカドマリンAの部分骨格であるフラン環とD環を有する目的のマイケル付加体を高い収率で得ることに成功した。残念ながらエナンチオ選択性は非常に低い値であったため、今後さらなる触媒骨格の検討を行うことで立体選択性の向上を目指す。昨年度に引き続きナカドマリンの不斉全合成研究を行った。昨年度の結果より、ピロリジノン環を有する環状β-ケトエステルの不飽和アルデヒドへの共役付加反応は、どのようなプロリン誘導体を用いても付加体は得られるものの立体選択性を向上させることはできなかった。そこでプロリン誘導体で実績のあるマロン酸エステルを求核剤に変更し、不飽和アルデヒドへのマイケル付加反応を検討した。その結果、常法に従い3級水酸基をTBS基で保護したプロリノール誘導体を触媒として有機溶媒中で反応を行ったが、立体選択性は向上したものの反応が遅く中程度の収率でしか反応が進行しなかった。そこで更なる条件検討を行ったところ、水中で反応を行うことにより、98%eeというほぼ完壁な選択性で目的物が収率良く得られることを見出した。さらに、得られた付加体と1級アミンを還元的アミノ化、それに続く分子内ラクタム化により6員環ラクタムへと変換後、パラジウムを用いた1,4-ブテンジオールモノアセテートとのジアステレオ選択的なアリル位アルキル化により、4級不斉炭素の構築にも成功した。現在この生成物の立体化学の決定を行っている。さらに全合成に関しては、以下の二つの合成ルートを検討した。1つ目は、生成物のアリルアルコール部位をOverman転位反応に附すことでアミノ基を導入、分子内のエステル基との環化により、重要中間体である二環性ラクタム体へと誘導した。2つ目のルートとして、生成物のエステル部位を1級アミンとの縮合によりアミドラクタム体へと変換した。現在、この化合物に対して2度目のパラジウム触媒を用いた分子内アミド化反応を利用して、窒素上に必要なアルキル側鎖を既に含んだ二環性ラクタム体への誘導を検討中である。

昨年度合成に成功した単環化合物からナカドマリン合成の重要な合成中間体である四環式複素環化合物への誘導を目指して、以下に示す二つの新たな合成ルートを検討した。まず、四級炭素上のエステル基をアルデヒドに変換し水酸基をアセチル基で保護した後、N-アルキルヒドロキシアミンとの反応により得られたニトロンに対してフリル基の分子内フリーデルクラフツ反応による5員環形成反応を検討した。しかし反応は期待通りに進行したものの、所望の立体とは逆の絶対配置を有する生成物が単一で得られた。そこで、次に反応させる順序を逆にして、パラジウム触媒を用いたジアステレオ選択的なアリル位アミノ化反応を行った後、分子内フリーデルクラフツ反応を行う第2のルートを検討した。具体的には、先に合成したアルデヒドを2-アミノエタノールと処理してヒドロキシイミンを合成したのち、パラジウム触媒と塩基存在下で加熱したところ、分子内の水酸基がイミンを攻撃しO,N-アセタールが形成すると同時に分子内アリル位アミノ化反応が進行して、新たに形成する末端ビニルに関して望む立体化学を有する二環性ラクタム体へと誘導することに成功した。このジアステレオ選択性は、用いる塩基の種類やイミン形成に使用する1,n-アミノアルコールによって、大きく変化することを突き止めた。種々条件検討した結果、最適条件下において所望の立体化学を有する生成物を収率80%、5:1のジアステレオ選択性で主生成物として得ることができた。最後に、単離精製したO,N-アセタール体に対して、ルイス酸としてTMSOTfを氷冷下反応させることで、フリル基の分子内フリーデルクラフツ反応が高立体選択的かつ高収率で進行し、ほぼ定量的に目的とする四環式化合物を単一化合物として合成することに成功した。今後も、全合成を目指して研究を続行する予定である。
B細胞の活性化と細胞死を制御する新規遺伝子のin vivoにおける機能

B細胞の活性化を制御する分子機構を明らかにするために、私たちは休止期B細胞が活性化される際に発現誘導される遺伝子Clast1と、逆に活性化に伴い発現が抑制される遺伝子Clast5のin vivoにおける機能の解析を行った。Clast1分子をB細胞で特異的に発現させたトランスジェニック(Tg)マウスでは、抗原刺激に対するB細胞の反応性が上昇し、T依存性抗体産生が顕著に元進した。僅か一回の免疫で長期にわたり、抗原特異的なIgM抗体の産生が増加し続けた。これらの結果から、Clast1は、CD40からのシグナルによって特異的に誘導され、B細胞の活性化を正に制御する分子と推察された。一方、Clast5-Tgマウスにおいては、脾臓と胸腺の大きさ及び細胞数がコントロールの半分以下に減少した。また、抗IgM抗体やCD40リガンドなどの刺激に対し、B細胞の反応性が低下したことが示された。さらにT依存性抗原に対する抗体産生が障害され、胚中心の表現型をもつB細胞が減少した。従って、Clast5は、抗原レセプターをはじめ、様々な補助刺激分子からのシグナルの核内ターゲットであり、B細胞の活性化を負に制御する転写因子であることが示唆された。現在、ノックアウトマウスを作製中である。平成13年度は、CD40Lによって特異的に誘導される新規遺伝子であるClast3とClast5の機能解析を行った。Clast3は264個のアミノ酸からなる細胞質蛋白で、正常B細胞においては、CD40Lをはじめ、抗IgM抗体、IL-4またはLPSなどによってその発現が速やかに誘導されることが判明した。細胞周期での発現は、G0/G1期では低く、S期からM期にかけてその発現が急速に誘導される。NIH3T3細胞でClast3を過剰発現させると、細胞の異常分裂を伴うDNA量の倍数化現象がみられた。逆に、anti-sense oligoを用いてClast3の発現を抑制すると、分裂中期の細胞が減少するとともに、アポトーシスが誘導された。以上の結果により、Clast3は細胞分裂に必須な役割をはたすが、過剰発現すると分裂異常を誘導することが示された。一方、Clast5は、細胞周期のGO!G1でもっとも発現が高く、B細胞の活性化に伴いその発現が消失することが判明した。B細胞株で強制発現させると、細胞周期の進行を阻害することがわかった。また、NIH3T3細胞で過剰発現させると、コロニー形成能を抑制することが示された。従って、Clast5はB細胞活性化に対し抑制的に働くことが示唆された。現在、遺伝子改変マウスを用いた解析を進めているところである。平成14年度は、活性化B細胞で発現が抑制されるClast5遺伝子のトランスジェニックマウス(Tg)を作製し、解析を行った。Clast5-Tgでは、体重はコントロールと変わりないものの、脾臓や胸腺が小さく、脾細胞数、胸腺細胞数ともには約半分以下に減少していた。また,Clast5-Tgの胸腺においては、CD44+25+のpro-T及びCD44-25+のPre-T細胞が減少し、初期T細胞の分化、増殖が阻害されていた。骨髄ではPro-B及びPre-B細胞が明らかに減少し、初期B細胞分化が著しく障害されていることが分かった。種々の刺激に対する脾細胞の増殖反応を調べたところ、Clast5-Tgでは、CD40 ligand (CD40L),抗IgM抗体,抗CD3抗体,Con-Aなどに対する反応性が低下していた。また骨髄では、IL-7に対する反応性が低くなっていた。さらに、Clast5-TgマウスをDNP-OVAで免疫した結果、12日目の脾臓ではB220+PNA+の胚中心B細胞が減少していた。以上の結果より、Clast5は抗IgM抗体、CD40L、IL4などの刺激によりその発現が速やかに抑制されること、また、強制発現させると、B及びTリンパ球の活性化が障害されることが判明した。

従って、Clast5はB及びT細胞抗原レセプターをはじめ、様々な補助刺激分子やサイトカインレセプターからのシグナルの核内ターゲットで、リンパ球の活性化を抑制するマスターレギュレーターである可能性が示唆された。
中南米における早期胃癌診断率向上のための継続的遠隔医療教育システムの構築

1.プロジェクト会議の開催(清水、森山智彦): 6月にアメリカ・ワシントンDCで開催された消化器病週間(DDW)に合わせ、拠点5カ国からの主要メンバーに加えボリビアの代表を加えて第3回目となるミーティングを開催した。ブラジルのミナスジェライスからはビデオ会議で参加する形で各国の活動報告や今年度の計画について協議した。2.招聘研修プログラム(森山智彦、工藤、森山大樹):8月に医師4名、1月には医師4名と技術者2名の計6名を招聘し、それぞれ1か月間の研修プログラムを開催した。今年度は拠点国以外にボリビア、エクアドル、ウルグアイ、ペルー、アルゼンチンから初めて招聘したと同時に、ブラジルからもミナスジェライスの大学病院から初めて医師と技術者を招聘した。研修後の報告会では、ペルーとの新たな接続を構築できた。3.遠隔医療ワークショップ(清水、森山智彦、工藤):メキシコでの消化器学会に合わせ、11月に第1回メキシコ遠隔医療ワークショップを開催した。また同月チリでは第2回遠隔医療ワークショップを開催した。共に国内の主要施設から医師と技術担当者が出席し、今後の遠隔医療活動の拡大について発表や討論を行った。4.現地訪問(清水、森山智彦):ブラジル、ボリビア、コロンビアの3カ国を訪問し、各国の医療事情や情報通信技術の現状を視察した。それぞれサンパウロ、サンタクルス、またカリとボゴタを訪問したが、特にボゴタではキリスト教大学視察後にインターネットの状況が劇的に改善されその後のテレビ会議の状況が格段に改善された他、ラセレナ大学訪問を契機に翌年度の招聘者を決定した。5.技術的問題点(工藤、中島、岡村):最大の問題は、音声である。定期的に開催されるラテンテレカンファレンスでも多くの施設が参加するため、音声の不安定な施設が毎回必ず存在する。引き続き、検討が必要である。今年度は研究期間のちょうど中間に当たる。これまでの主要5カ国中心の活動を周辺国や自国内の新たな施設へと展開し始める時期となる。その意味で、ボリビア、エクアドル、ウルグアイ、ペルー、アルゼンチンの5カ国からの研修生を受け入れ、そのうちペルーと新たな接続を構築できたことの意義は大きい。またブラジルにおいてもミナスジェライスは本プロジェクトにおいてリオデジャネイロやサンパウロに次いで重要な地区であり、その中心的な施設から医師と技術者を受け入れて活動を展開したこと、またコロンビアにおいてもラセレナ大学という新たな施設との活動が始まることは、来年度以降の活動にとっても良い流れで進んでいると言える。来年度はプロジェクトの後半へ向かう年となる。これまでの良い流れをキープし、主要5カ国での活動を自国内へさらに拡大し自立的な発展が出来るような体制を整備していくと同時に、周辺国への拡大も加速する。具体的にはパラグアイが新たな対象国となる予定で、その他ペルー、アルゼンチン、ボリビアなども研修への招聘および遠隔接続の両面において関係を強化する予定である。具体的な計画としては、以下が考えられる。1)5月の米国サンディエゴにおける第4回プロジェクト会議、2)7月に招聘研修プログラム、3)定期的なラテン内視鏡テレカンファレンスの実施、4)中南米への現地調査、5)3月にリオデジャネイロで開催される世界内視鏡学会におけるライブデモンストレーションの実施に関する協議。平成28年5月にサンディエゴで開催されたアメリカ消化器病週間に合わせ、本プロジェクトのキックオフミーティングを行った。7カ国12施設18名の参加者に対し、本研究の趣旨や今後の進め方などについて説明・協議した。メキシコ、コスタリカ、コロンビア、チリ、ブラジルを主要国と位置づけ、それぞれ国立自治大学病院、コスタリカ大学病院、ザビエル基督教大学聖イグナシオ病院、アレマナ病院、サンパウロ大学病院を拠点病院とした。その中のコロンビアを除く4カ国6施設より5名の医師と6名の技術研究者の計11名を本学へ招聘し、それぞれ1ヶ月間の医療分野および遠隔医療システムに関する研修を行った。研修中、各施設における「通信情報と映像伝送環境」および「胃癌診療の実態」に関する調査も同時に行った。技術的な問題点を共有・解決した後、帰国前にはそれぞれ自施設とのテスト接続を行い、研修報告を双方のスタッフが共有する形で今後の計画についても話し合った。また9月にはメキシコシティーでの研究会に合わせ日本とコスタリカを加えた3カ国を同時接続した遠隔医療教育のデモンストレーションを実施した他、6月にはチリを訪問しチリ大学やチリ学術ネットワーク(REUNA)を視察して講演と施設見学を行った。またメキシコでは第2の拠点病院となり得るグアダラハラ大学付属市民病院を3月に訪問し、今後の共同研究に関する協議を行った。主要国以外ではボリビアとの接続を行い日本から遠隔講演を試みた他、アルゼンチンとエクアドルの施設が3月の遠隔医療プログラムへの参加を希望し初めての接続を試みた。年度当初から活動を開始し、共同研究主要国と拠点医療施設を選定して趣旨の理解や活動計画を協議することができた。また11名の医師と技術研究者を同時に本学へ招聘して各国主要施設における医療と通信情報の両分野における現状調査を施行したことに加え、これら全施設との遠隔会議システムを構築して招聘者の発表を共有し今後の共同研究の進め方について協議した。さらに主要国以外からも参加依頼があり、個別に試験接続を施行することができた。1.アップデートミーティングの開催(清水、森山智彦):今年度も5月にアメリカ・シカゴで開催された消化器病週間(DDW)に合わせ拠点5カ国から主要メンバーによるアップデートミーティングを開催した。昨年の活動報告や今年度の計画を話し合った他、これまでのテレカンファレンスにおける問題点や参加各国における活動の広がりなどについても討議した。