hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
凝集性物質における温度軸上での分子ダイナミックス

分子が球形になるにつれて(CH_3)_3CCNは,T_1/D=2.5×10^9m^<-2>s^2,(CH_3)_3CNO_2と(CH_3)_3CClは両方とも3.3×10^9m^<-2>s^2,そして,(CH_3)_4ZSiは,3.7×10^9m^<-2>s^2という興味ある結果を得た。さらに測定データを増やすことによって,これらの解析から分子性液体におけるT_1とDの新しい関係式の導出が期待できる。分子性物質についての試料自身の蒸気圧下における結晶-結晶相転移、結晶-液体相転移(融解)という相変化は、温度をパラメータとすると分子運動の励起過程と密接に関係していて非常に興味深いものである。本研究では、(CH_3)_4Siはじめ(CH_3)_3CClなど13種類の分子性物質について、これらの結晶相における分子運動のデータと液体状態の分子運動を合わせて検討するために、そのバルク液体状態における拡散係数(D)を融点から試料内部蒸気圧が1気圧になるまでの広い温度範囲にわたって測定した。さらに、これらの分子運動の運動空間を制限した場合の運動の変化を調べるために、6、9、10nmの孔サイズの多孔質シシカを用い、細孔内分子の拡散係数の測定も行った。バルク液体状態における拡散係数の温度依存性は、いずれの試料も温度上昇に伴い絶対温度の逆数に対して指数関数的に増加した。この温度依存性にArrhenius型依存性(D=D_0exp(ΔG^*/RT))を仮定し、D_0とΔG^*を求めた。D_0の値が、その超臨界気体状態の拡散係数に近づく傾向があることがわかった。また、結晶状態においてすでに分子全体の回転運動や拡散運動が十分に励起しているのにも関わらず、液体状態における拡散運動の速さが、それらの運動の影響をあまり受けていないような傾向を示すのも興味深いものである。細孔内分子の拡散運動は、バルク状態よりも1桁ほど速い時間スケールで運動していることが明らかとなった。しかし、ΔG^*の値は、測定誤差の範囲内で等しいということは特徴的である。また、これらが、分子の電気的極性の有無に関わらず同じ傾向を示すということも興味深い。
レベニューマネジメントと収益モデルのイノベーションに関する研究

本研究では、わが国における優良企業の管理会計実務を観察することによって、各企業が、どのように原価計算対象を設定し、収益性分析のための製品原価計算システムを構築し、運用しているのかを明らかにする。その際、各組織のコンテクストや企業を取り巻く外部環境を詳細に分析するとともに、いかにして、利益を最大化させるための原価計算対象をソリューションという形で設定してレベニューマネジメントを実施しているのかを中心に検討する。したがって、本研究では、ソリューション別の原価計算対象を設定し、顧客へ価値提案をし、「コスト<販売価格<価値」の関係を構築して収益性を確保するための理論を体系化する。
次世代計算機・観測から迫る高エネルギー爆発天体現象の理論的解明

本申請課題によりIDSA法という極めて効率の良い輻射輸送法を多次元流体計算に取り入れることで、世界に先駆けてニュートリノ加熱メカニズムで爆発する3次元の超新星モデルを発表することができた。爆発に際して放射される重力波、電磁波シグナルの観測可能性を精査したうえで、核燃焼の効果やニュートリノ自己相互作用の効果など、従来のスタンダードシナリオに囚われない新機軸の研究テーマも実行することができた。(1)コラプサーモデルは長い継続時間を持つガンマ線バーストの物理的起源を説明するモデルとして最も有力なモデルである。大質量星の中心核におけるニュートリノ冷却・加熱を近似的手法によって取り込んだ2次元の重力崩壊の特殊相対論的磁気流体数値シミュレーションを行い、ブラックホール周りの降着円盤の長時間の動的変化、それに伴って放射される重力波放射について調べた。結果、遠心力の効果で扁平になった準定常状態の降着円盤から「非等方に放射される」ニュートリノが重力波の源として最も大きな寄与を持つことを明らかにした。この重力波は10Mpcの距離にあるコラプサーに対して、DECIGOをはじめとする次世代重力波検出器の検出限界内にあることを指摘できた。降着円盤がブラックホールに吸い込まれると、重力波のシグナルが突然消失する。このように重力波シグナルから明らかにできる中心エンジンの具体的物理的性質(ここでは角運動量)に関する示唆が得られることを示したのが、本成果の大きな特徴になっている。また非等方性を正確に見積もるために、一般相対論的時空におけるレイトレース法に基づく輻射輸送計算法を開発することができた。(2)超新星爆発の3次元輻射流体流体シミュレーションを世界に先駆けて実行した。輻射計算に関しては、光線分割法によって超並列計算を可能にした独自のスキームを実装しているのが特徴となっている。本年は空間解像度の依存性を系統的に調べ、爆発エネルギーや衝撃波の形状において一定の数値的収束が得られる分解能が存在することを指摘した。(3)磁気回転不安定性(MRI)に関する局所シミュレーションを行った結果、重力崩壊前の親星が高速回転している場合、MRIによる自転エネルギーの散逸により、従来のニュートリノ加熱爆発を助けられる可能性があることを指摘した。大質量星がその進化の最終段階において迎える超新星がどのような仕組みで爆発にいたるのかは、過去40年以上にわたる宇宙物理学の謎である。この謎を解明する為に欠かせないのは、ニュートリノ・重力波を始めとする先進の宇宙観測、さらには大型計算機を駆使した第一原理に基づく超新星爆発の数値シミュレーションである。以下に述べるように本申請課題では、当初の研究計画に従って円滑に研究を実行し、予想を上回る成果を得ることができた。本研究課題によりIDSA法という極めて効率の良い輻射輸送法を流体計算に取り入れることで、世界に先駆けてニュートリノ加熱メカニズムで爆発する3次元の超新星モデルを発表することができた。この成果は「爆発を起こすシミュレーションモデルが作れない」という従来の最も大きな問題の解決に向けた大きな弾みを与えたものである。当初の研究計画に従って高密度状態方程式の効果を調べた結果、(核物質の非圧縮率に加え)対称エネルギーの大小が爆発のしやすさに支配的な効果を及ぼすことも明らかにできた。また核燃焼の効果やニュートリノ自己相互作用効果など、従来のスタンダードシナリオにとらわれない新機軸の研究テーマも実行することができた。上記の研究と並行して、爆発時に放射される重力波のシグナルとその観測可能性を詳細に調べた。その結果、特に非軸対称モードが従来よりも早いタイムスケールでコアバウンス後に成長し、銀河中心の超新星に対しては現在の重力波干渉計の検出限界に届く強い重力波が放射されることを明らかにした。さらにコラプサーと呼ばれる極超新星に付随すると考えられている天体から放射される重力波、中性子星の冷却曲線、爆発に際して放射される高エネルギーニュートリノと重力波の相関観測についても検討し、理論と観測の双方の視点から高密度天体の爆発機構に迫るテーマを開拓・遂行することができた。初年度に得られた成果を以下の箇条書きでまとめたい。1.空間3次元、ニュートリノ位相空間1次元の合計4次元の数値シミュレーションを世界に先駆けて実行し、11太陽質量の星がニュートリノ加熱メカニズムで爆発することを突き止めた。従来の系の軸対称性を仮定した空間2次元シミュレーションに比べ、非軸対称方向における対流・流体不安定性の発達により、ニュートリノによるエネルギー輸送効率が向上することから、爆発を再現するためには3次元シミュレーションが不可欠であることを指摘することができた。2.超新星爆発の3次元輻射流体シミュレーションに基づき、爆発時に放射される重力波形を評価・詳細に解析した。自転の効果によって、星の水平面方向に非軸対称モードが発達し、このモードに伴って密度・温度が上昇するため、ニュートリノの放射としては、星の自転軸から見たときが最大となることが分かった。さらにこのニュートリノ放射の非対称性が作る重力波が強度としてもっとも強く、その観測には日本で計画されている干渉計DECIGOが不可欠であることも指摘できた。

3.素粒子研究者の間で話題となっていたニュートリノの自己相互作用の効果を実験的に超新星数値シミュレーションに取り入れ、実際に超新星の爆発に効くような振動パラメータに制限を与えた。より首尾一貫した定式化に向けて、一つの方向性を与えた研究成果であると考えている。4.超新星爆発の理論モデル研究の最前線について、依頼されレビュー論文を執筆した。まさにこの研究課題のテーマである「数値計算から予言される観測予測とさらに先進の観測から理論にフィードバックを方向性」を追求した内容で、初年度にこの成果をレビューできたのはタイムリーであったと考えている。研究概要に記したそれぞれのテーマに関して達成度に関する自己評価を記載していく。(1)従来のコラプサーの流体シミュレーションにおいては、大質量星の重力崩壊から開始して典型的には1秒以内の動的進化にフォーカスしたものがほとんどであった。本シミュレーションでは中心のブラックホールは計算の内部境界条件として簡単化しつつも、観測されるガンマ線バーストの典型的継続時間である10秒を磁気流体シミュレーションでカバーすることに成功したのが大きな特徴となっている。この長時間計算に伴っては、従来の核密度付近の状態方程式から(ブラックホールによる流体吸収によって薄くなった)低密度付近まで連続的に覆うものに拡張すること、さらに低密度強磁場領域の計算を可能にする数値計算法の工夫も必要で、これが従来の研究のボトルネックになっていた。この両者を克服し、さらにブラックホールの存在によりゆがんだ時空の下、源泉関数の効果まで含めた一般相対論的ニュートリノ輻射輸送を行ったこと、それに基づき重力波の定量的予測を行ったこと、二点とも当初の計画よりも早いスピードで進めることが出来た。(2)超新星爆発の数値計算はその計算コストの高さから、計算結果の数値分解能依存性を調べることは至難の課題であった。例として、二次元軸対称性を仮定したシミュレーションでも一つのモデルに関して爆発までカバーしようとすると、512並列の計算を持ってしても2カ月ほどの計算時間を要する。幸い昨年度から稼働している次世代スパコン・京の優先課題に選んで頂いたことで、(世界に先駆けて)3次元計算における数値分解能依存性を調べるという当初の計画よりもさらに踏み込んだテーマに関する研究を行うことができた。(3)上記成果の発展課題として神戸大学の政田洋平氏との共同研究を行い、MRIに関する新機軸のテーマを開始することができた。上記の「研究実績の概要」の(1-4)に対応して、その達成度について述べてゆく1.このテーマは交付申請書に記載した「多次元輻射磁気流体シミュレーションに基づく爆発メカニズムの解明」に対応している。多次元のニュートリノ輻射輸送は、ニュートリノがフェルミ粒子であることからブロッキングの効果を考慮する必要があり、著しく輻射輸送方程式が非線形になること、さらにニュートリノ反応にはエネルギー依存性、さらにはエネルギー・角度方向にも輸送があることから、非常に計算コストが高いことが知られている。
妊娠高血圧症候群に対する運動の有効性の検討ならびにそのメカニズムの解明

【活動内容】本研究は、妊娠高血圧症候群に対する運動効果を検討することを目的としている。本研究では、実験動物を用い、運動効果のアウトプットとして、血圧と動脈機能に着目する。今年度は、実際に実験動物で、トレッドミル運動による有酸素性運動を実施した。具体的には、以下の通りである。(1)米国での研究成果のまとめ昨年度までの研究留学で得られた成果を、Experimental biology 2012で発表した。様々な意見交換やアドバイスをもらうなど、非常に有意義であった。(2)運動強度、頻度の選定実験動物をトレッドミル上で走らせ、速度やトレーニング頻度についての設定を行った。(3)血圧測定のための技術の練習テレメトリー法による血圧測定を行うため、実験動物の頸動脈にカテーテルを挿入し、トランスミッターを体内に埋め込む手術技術練習を行った。(4)動脈機能および血液生化学データの予備的検討予備実験を行った実験動物から、採血および動脈を摘出し、動脈機能の評価および血液学的な生理変化を検討した。【意義・重要性】今年度は、研究環境を整えるとともに、実際、実験動物を用いた予備検討まで行った。予備実験では、運動トレーニング条件の検討及び、生理学的にどのような変化が生じるのかを観察した。これらの作業は、今後の研究遂行に重要不可欠なものであり,24年度中に予備実験を行えたことは、本研究が大きく前進したといえる。これらを総合的に考えると、本年度の研究活動内容は,非常に意義のあるものであったと判断できる。【活動内容】本研究は,妊娠高血圧症候群に対する運動効果を検討することを目的としている.実験では,妊娠高血圧症候群モデルマウスを用い,運動効果のアウトプットとして,血圧と動脈機能に着目する予定である.実験を遂行するにあたり,血圧をモニターする技術や血管機能を評価する実験技術が必要である.今年度は米国コロラド大学の統合生理学部,加齢研究室に留学をし,本実験遂行に必要な実験手技を学んだ,具体的には以下の手技である.1.血管内皮機能評価の測定技術の獲得マウスから摘出した動脈(頸動脈や大腿動脈)をアセチルコリンおよびニトロプルシドなどの薬剤を投与して血管内皮機能を評価する方法を修得した.2.血圧測定のための技術の獲得・テレメトリー法マウスの頸動脈にカテーテルを挿入し,トランスミッターを体内に埋め込む手術技術を修得した.・テールカフ法マウスの尾にカフを装着し,血圧を測定する方法を修得した.3.動脈硬化度の測定技術の獲得動脈脈波伝播速度法を用いてマウスの動脈伸展性を測定する技術を獲得した.【意義・重要性】実験手技の獲得は本実験遂行に重要不可欠なものであり,23年度中に実験技術を修得出来たことは,研究の遂行に大きく前進したといえる.また,米国での研究体験を通じ,日本との研究環境や研究文化の違いを確認することができ,今後の研究活動に生かすことができるのではないかと期待している.これらを総合的に考えると,本年度の研究活動内容は,非常に意義のあるものであったと判断できる.【活動内容】本研究は、妊娠高血圧症候群に対する運動効果を検討することを目的としている。本年度は米国コロラド大学に研究留学し,申請研究の遂行に必要な実験手技を習得した.このことによって,研究が大きく前進し,来年度からの研究が円滑に遂行できる見通しが立ったため.来年度は研究拠点を日本に移し,妊娠高血圧症候群モデルマウスを用いて,予備実験および本実験に取り組む予定である.
GーCSFを用いた白血病細胞の病態,とくに成熟停止機序に関する分子生物学的解析

GーCSFは顆粒球に特異な生理活性物質として知られ、その分化・増殖・産生を促進する。一方急性白血病細胞の本熊は成熟停止機構にあると考えられている。従ってこの異常な白血病細胞の機構の本態にせまるには、GーCSFを用いて検計することが不可欠である。この観点より先ず各種白血病を用いてin vitro,in vivoにおけるGーCSFに対する反応性を検討したところ、骨髄性白血病の多くで増殖が促進されることを明らかにすることができた。この結果に基づいて(1)GーCSFリセプタ-(R)の精製、遺伝子クロ-ニングと白血病における性状、(2)GーCSF反応性白血病細胞におけるシグナル伝達系の解析、ならびに(3顆粒球系細胞特異的タンパク質の解析といった方向性からの白血病に対するアプロ-チを試みた。(1)に関してはヒト白血病細胞株KG-1を用い、その膜分画よりG-CSFアフニティカラムにて分子量的15KdのG-CSFRを精製した。しかし、この段階で長田博士らのG-CSFR cDNAクロ-ン化の報告があった為、その後共同研究を行い、各種白血病細胞におけるG-CSFR mRNA発現解析を行った。これによると上述のG-CSFに対する反応性の結果と概ね一攷していた。(2)に関してはG-CSFがG-CSFRと結合後、GTP結合タンパク/アデニレ-トシクラ-ゼ系の活性化と、それに続くマウス白血病NFS60において細胞内cAMP濃度上昇、さらには細胞内Ca^<2+>濃度の上昇とプロテインキナ-ゼCの活性化が起こることを明らかにした。(3)に関しては、G-CSF処理前後の白血病細胞からcDNAライブラリ-を作製し、subtraction法ならびにdifferentialhybridization法にてスクリ-ニングし、G-CSF反応性白血病細胞おける増殖ならびに成熟停止関連物質cdNAのクロ-ン化を行っている。またALP,MPOhck,c-mycなどの顆粒球系成熱マ-カ-遺伝子に関してはノザン法にて、GーCSF処理のよりALP,hckmRNAの増加、MPO,cーmycmRNAの低下をみとめた。以上、本研究の成果は白血病の病態解明さらには新たな治療法の開発につながるものと考えられる。1.G-CSFの受容体の分子量はおよそ150,000、結合定数は約100pMである。この値はNFS60細胞、KGー1細胞、正常ヒト骨髄単核細胞、成熟好中球の間で差は認められなかった。現在患者より直接得られる各種白血病細胞についても検討を行っている。2.比較的G-CSF受容体数の多いKG-1細胞株の膜分画を可溶化し、G-CSFアフィニテークロマトグラフィーで分子量150,000のG-CSF受容体が単離できた。アミノ酸配列の決定に必要充分な量を得るべく、KG-1細胞の大量培養による純化を繰返す一方で、pol-ysomal RNAを抽出し、それよりcDNAライブラリーを作製、^<125>IG-CSFを用いてクローンを検索していく予定である。3.G-

CSFによって増殖が刺激されるNFS60細胞の細胞内cAMPはG-CSF添加後約10分、37°C下で上昇し、G結合たんぱくの結合定数が変化することが観察された。また、Cキナーゼの膜分画への移動がNFS60細胞で観察されるが、その動態は成熟好中球では異っていた。現在、たんぱくリン酸化について検討中である。これらについて正常骨髄細胞の比較を行っていく。4.顆粒球系細胞のAl-PaseはG-CSF刺激によって誘導されることが示された。骨髄性白血病細胞の生物学特性としての分化停止の機序の解明には、G-CSFによって発現が調節されるこれら特異的たんぱくの遺伝子発現機構を知る必要があると思われる。研究計画の各研究計画の実績は以下の通りである。1.GーCSF受容体(R)のクロ-ニング:KG1細胞によりGーCSFRの精製を試みたが、十分量のたんぱく量は得られなかった。そこでKG1細胞より調整したmRNAよりcDNAを合成しλgt11ベクタ-を用いてcDNAライブラリ-を作成し、^<125>I標識GーCSFをプロ-ブとしてGーCSF結合ファ-ジをクロ-ン化した。現在、そのcDNAに関し、Sanger法を用いて部分塩基配列を調べている。2.GーCSF作用機序:GーCSFの結合によってNFS60細胞のG結合たんぱくが活性化し、細胞内cAMPが上昇すること、また、キナ-ゼ活性の膜分画への移動することを明らかにし、好中球のその動態と比較した。一方、白血病症例を用いたGーCSF添加前後のcーmyb、cーhckなどのオンコジ-ンmRNAの発現には著しい変化は認められていない。3.アルカリフォスタ-ゼ(ALP)、ミエロペルオキシタ-ゼ(MPO)の発現調節:主として骨髄異形成症候群のALP、MPO遺伝子の発現病態の検討を行っているが、GーCSF刺激によってMPOmRNAの発現低下が起こることが明らかになった。尚、ALP遺伝子のプロモ-タ-領域DNAについては陽性クロ-ンが得られ、現在その塩基配列を同定中である。4.白血病細胞によるGーCSFの産生:一部骨髄性白血病細胞がGーCSFを産生することが分かり、その増殖機構としてオ-トクリン機構が示唆された。これに関連して、細胞レベルで産生態を調べる目的でGーCSFmRNA in situハイブリダイゼ-ション法を確立した。本年度の研究に関しては3項目に関して下記のような研究を行い以下の成果を得た。(1)GーCSFリセプタ-(GーCSFR)cDNAのクロ-ニングならびに白血病におけるその性状解析:KGー1細胞の膜分画よりGーCSFアフィニティクロマトグラフィおよび高速液体クロマトグラフィを用いて分子量的150kdのGーCSFを約7385倍迄に精製した。これを用いcdNAクロ-ン化を行おうとした時点で、長田重一博士らによるGーCSFRcDNAクロ-ン化の報告がなされた。従ってその後はGーCSFRcDNAプロ-ブを用いた共同研究を行っている。GーCSFRは骨髄性白血病細胞に一般に発現しており、GーCSFに対する反応性の有無とGーCSFRmRNAの発現の有無は概ね一致したが、例外も1例みとめられている。現在GーCSFR遺伝子の構造をサザン法にて解析中である。
シンクロトロン放射光励起原子層エピタキシ-によるII-VI族化合物成長

シンクロトロン放射光を光源とし,原料としてDEZn,DETeを用いて、ZnTe(100)基板上にホモエピタキシャル成長を試みた。光源としては,岡崎国立共同研究機構分子科学研究所の極端紫外光施設にあるシンクロトロン放射光(BL-8A白色光)を使用した。表面反応を積極的に利用するため,原料供給時の成長室圧力を10^<-5>Torr程度とし,原料の供給方法として,交互に原料ガスを供給した場合と両原料を同時に供給した場合との双方を試み比較検討した。成長温度は,室温で実施した。交互供給の場合,非常に平坦な表面をもつエピタキシャル層が得られたが,ある限られた原料供給量範囲でしか原子層成長が達成できないことが分かった。これは,DETe原料の付着係数が非常に小さいためであると予想された。そこで,このことを明確にするため,XPSによる分析実験と成長実験双方を試みた。分析実験の場合,解析が容易なGaAs基板を用いるとDEZnとDETeに対し付着係数の違いが認められないことが分かり,成長実験の結果と矛盾していた。これは原料DETeがGa面と強く結合するためと考えられ,ZnTe基板を用いて分析実験を継続した。この場合,基板による信号と原料による信号とが重なり,解析が困難であり,現在も継続して測定データーを検討している。成長実験に関しては,各々の原料供給量が成長にどのような影響を及ぼすかを明らかにするため,同時供給法により一方の原料供給量を固定し,他方の原料供給量を変えた実験を試みた。その結果,交互供給した場合と異なり,光強度を反映した膜厚分布を有した成長層しか得られなかったが,この実験から,DETeの付着係数が小さいことを示唆する実験結果が得られ,DEZn供給量に比べDETe供給量を20倍程度多くすることにより良好な表面状態のエピタキシャル層が得られることを示した。最後に,結晶品質について議論するため,成長層のフォトルミネッセンス測定を試みた。本成長法による成長層のフォトルミネッセンススペクトルに関してはこれまで報告例がなかったが,本研究により初めてこれが達成できた。
ヒトパピローマウイルスと子宮頚癌の関係

本班は、主として疫学的な立場からこの課題について研究を行なっている。本年度については、以下の研究業績があった。(1)子宮頚癌、前癌病変におけるHPV検出率本邦の子宮頚癌376例中132(35.1%)にHPVー16が、239例中23(9.6%)にHPVー18がShouthern blot法にて検出された。その他、HPVー31、33、52b、58等も数%に検出され、合わせると約65%にHPVが検出された。前癌病変である異形成のうち、軽度中等度に約20%、高度異形成と上皮内膜に約45%にHPVー16が検出された。(2)PCR法を用いた検出率の向上PCR法によるHPV検出法の開発が行なわれている。福島班員によれば、PCRを用いることによりHPV検出率が約20%上昇したという。(3)新しい型のHPVの発見菅生班員は、子宮頚部の悪性病変より、HPVー58、59、61の新しい型のHPVを発見し、クローニングに成功した。(4)正常婦人子宮頚部からのHPV検出Filter in situ hybridizationを用い、細胞診class1、2の正常子宮頚部からHPV検出を行なったところ、666例中6例(0.9%)に11型が、12例(1.8%)に16型が、4例(0.6%)に18型が検出された。一方、class3、4、5の前癌、癌病変からは127例中HPVー11、16、18型がそれぞれ3.9%、25.2%、7.1%に検出されている。(5)HPV検出子宮頚部の追跡調査小数例ではあるが、HPVの検出された症例についての追跡調査を行なった。12年でははっきりしたことは言えないが、検出例に特に悪性化が強いということはないようである。(6)血清抗体検出のための、検出法の開発を行なっている。
脳性麻痺におけるミクログリアの機能解析

神経細胞とマイクログリアは神経伝達物質を介して低酸素性虚血性脳障害に関与している。新生児ラットを用いて、神経伝達物質ノルエピネフリンの低酸素性虚血性脳障害への影響ならびにマイクログリアの関与を検討した。日齢7日目新生児ラットに低酸素虚血処置を施行し生理食塩水あるいは選択的ノルエピネフリン再取り込み阻害剤アトモキセチンを投与した。アトモキセチン投与群では生理食塩水投与群に比較してTUNEL陽性細胞数の減少およびリン酸化CREB発現亢進を伴って脳障害を軽減させた。また、アトモキセチン投与群ではIba1陽性細胞数が保持されており、マイクログリアが脳保護的に作用してる可能性が示唆された。本年度は、モノアミン系神経伝達物質が新生児低酸素性虚血性脳症(HIE)の治療標的になりうるかSDラットを用いて検討した。新生児ラット脳より初代ミクログリアを樹立し、ヒトHIEの原因と考えられている低酸素または感染を模倣して、低酸素負荷またLPSを添加して炎症性サイトカインの動態を調べた。更に、モノアミン系神経伝達物質の一つであるノルエピネフリンが炎症性サイトカインやNOの産生を抑制するか検討した。続いて、日齢7日目の新生児ラットに低酸素虚血負荷(総頚動脈結紮・離断、8%酸素2時間)を施行し、ノルエピネフリンの腹腔内投与による脳障害軽減効果の有無を解析した。結果、ノルエピネフリンはラット初代培養ミクログリアのLPS誘発性IL-1β、IL-6、TNF-α、NO産生(mRNA、蛋白)を抑制した。一方、低酸素刺激自体では炎症性サイトカイン産生を抑制する傾向にあり、胎仔ラット脳より初代培養した皮質ニューロンとの共培養下で低酸素負荷をかけると、ミクログリアはIL-1β、NOを産生をした。培養系ミクログリアの性質として低酸素環境自体だけでは炎症性サイトカインを産生せず、LPS誘発性炎症性サイトカインをノルエピネフリンで抑制できることが確認できた。続いて、新生児ラットに低酸素虚血処置直後にノルエピネフリンを腹腔内投与したが、大脳皮質・線条体・海馬・視床のいずれの領域においても組織学的に明らかな脳障害軽減効果は認められなかった。また、LPS前投薬による感染虚血モデルの確立を目指したが、作製率が60%前後で不安定であった。最終年度は、モノアミン系神経伝達物質ノルエピネフリンの新生児低酸素性虚血性脳障害に対する効果の有無を新生児SDラットを用いて検討した。日齢7日目新生児SDラットの左総頸動脈を結紮後8%酸素濃度2時間負荷し、その後に生理食塩水あるいは選択的ノルエピネフリン再取り込み阻害剤アトモキセチンを腹腔内投与した。処置7日後に脳を摘出し、クリューバー・バレラ組織染色にて脳構造を評価した。生理食塩水投与群では患側大脳皮質・線条体・海馬・視床の神経構造が広範に失われていた。一方、アトモキセチン投与群では萎縮があるものの生理食塩水投与群と比較して脳構造が保たれていた。この機序として、ノルエピネフリンが転写因子CREBのリン酸化を介して細胞生存シグナルであるBcl-2やBDNFを活性化するとの既報に着目し、処置24時間後にリン酸化CREBならびにTUNEL染色を施行し評価した。生理食塩水投与群に比較してアトモキセチン投与群では、リン酸化CREBの発現亢進およびTUNEL陽性細胞数の減少を認めた。脳内には神経細胞だけでなく、脳発達に関わるマイクログリアが存在し脳内炎症に関与することが知られている。そこで、この過程における脳内炎症細胞マイクリグリアの関与を調べるため、処置24時間後にIba1染色を施行した。生理食塩水投与群に比較しアトモキセチン投与群ではIba1陽性細胞数が保たれていた。昨年度の研究において、新生児日齢1日目SDラット脳から樹立した初代培養マイクログリア細胞が、低酸素4時間負荷下で炎症性サイトカインIL-1βをmRNAならびに蛋白レベルで上昇を認めなかったことを踏まえると、周産期脳障害過程においてマイクログリアが脳保護的に作用している可能性が示唆された。胎児医学感染を模倣したLPS前投与による脳障害モデルの作製率が安定せず、感染が虚血負荷を助長する機構の解明および薬剤投与まで到達できなかった。1ノルエピネフリン腹腔内投与は脳保護効果の増強には結びつかなかったため、選択的ノルエピネフリン再取り込み阻害剤を用いて脳内ノルエピネフリンの作用増強をはかり、脳障害軽減効果があるか検討する。2LPS前投与と低酸素虚血負荷の組み合わせによる感染虚血モデルの脳障害作製の安定化を目指し改良を行う。特記すべき意図および理由なし。次年度交付分とあわせて研究費の使用計画は下記である。
仮想現実空間を用いた体性感覚弁別学習における大脳皮質フィードバック回路の機能解明

本研究課題では、マウス後肢脳領域に対応した一次体性感覚野へのトップダウン入力をもたらす回路の機能的役割を明らかにすることが目的である。本研究課題の3年目にあたる本年度は以下の1と2を実施した。1マウスの行動課題昨年と同様にマウスの脳を固定した状態で体性感覚刺激の弁別課題を実行した。この課題ではランダムなタイミングで音刺激(キュー)が与えられる。この足刺激の待ち時間は平均2秒の指数分布に従う乱数で決まる。この待ち時間後に足刺激が与えられ、その足刺激に反応(給水口のリッキング)したならば報酬(水)が与えられる。このオペラント行動課題をベースとして、2種類の音刺激Aと音刺激Bを与える行動実験を確立した。音刺激Aが提示された場合、足刺激の発生確率は100%である。一方、音刺激Bが提示された場合、足刺激の発生確率は20-25%とした。音刺激A提示後の足刺激に対する反応速度と音刺激B提示後の足刺激に対する反応速度を比較した。2一次体性感覚野に投射する二次運動野シナプス前細胞の同定狂犬病ウイルスを使ったトランスシナプス標識法によって、一次体性感覚野の神経細胞に投射する二次運動野の神経細胞を標識した。まず遺伝子改変マウスを使って、大脳皮質5層錐体細胞特異的にEnvA受容体であるTVAと狂犬病ウイルスの構成に必要なGタンパク質を発現させた。4週間後に同一の脳領域に、EnvAをエンベロープにもちGタンパク質を欠損した狂犬病ウイルスを打った。およそ1週間後に脳切片の観察を行った。インジェクションサイトである一次体性感覚野ではStarter cellが確認でき、Starter cellのシナプス前細胞が二次運動野においてGFP陽性細胞として標識された。同様に一次体性感覚野の抑制性神経細胞に投射する二次運動野の神経細胞を標識した。28年度が最終年度であるため、記入しない。本研究課題では、マウス後肢脳領域に対応した二次運動野から一次体性感覚野へのフォードバック回路の機能的役割を明らかにすることを目的としている。本研究課題の初年度にあたる本年度は、1マウスの脳を固定した状態で体性感覚刺激の検出課題を構築した。この行動課題では、試行開始と同時に合図(視覚刺激)が与えられ、その後に後肢刺激が与えられる。マウスが後肢刺激に反応(リッキング:給水口を舐める行動)すれば報酬(水)が与えられる。トレーニング初期段階ではマウスは試行開始合図に反応するが、トレーニングを重ねるとその合図には反応せずに後肢刺激後に反応するようになった。足刺激後の反応率はトレーニング2週間後には、およそ100%となった。この結果はマウスが視覚刺激と後肢への体性感覚を弁別していることを意味し、後肢刺激がマウスの反応を統制しいることを示している。2行動課題中のマウスから慢性経頭蓋広視野カルシウムイメージングを行った(単一神経細胞の活動ではなく神経細胞集団の活動を記録した)。本行動課題に関与する皮質脳領域を同定することができた。視覚刺激に対しては一次視覚野、後肢刺激に対しては一次体性感覚野後肢領域が活性化し、共に前頭前野に神経活動が伝搬する。更に行動課題の学習初期に比べて課題学習が進むと、後肢刺激に対する一次体性感覚野と二次運動野の神経応答が上昇するという結果を得た。一方、視覚刺激応答は変化しなかった。3行動課題中のマウスから細胞外記録を行った。より詳細な解析が今後必要であるが、一次体性感覚野5層では足刺激に対して活動が上昇する神経細胞、減少する神経細胞がそれぞれ存在し、足の動きとも相関を示す神経細胞の存在を確認した。本研究課題の二年目にあたる本年度は以下の1と2を実施した。1マウスの行動課題マウスの脳を固定した状態で体性感覚刺激の弁別課題を実行した。マウスにとって検出できる最小足刺激強度を明らかにするために、足刺激強度と正答率の関係性(心理応答曲線)を求めた。心理応答曲線を求める実験中でもマウスの成績は安定しており、刺激強度を高めるほど正答率が上昇する結果を得た。これは足刺激強度を変化させることで課題の難易度を調節できることを示す。また、刺激強度と反応時間の関係も求めた。足刺激強度が弱いと刺激に対する反応時間が遅くなるという結果を得た。2抑制入力によるS1神経活動の修飾本研究で注目する一次体性感覚野へフィードバック入力を与える脳部位として前脳基底部の抑制性ニューロンに注目した。VGAT-creマウスの前脳基底部にAAV-Flex-ChR2を注入し、前脳基底部の抑制性ニューロンのみに光活性化タンパク質ChR2を発現させた。一次体性感覚野から細胞外記録を行い、同時に前脳基底部の抑制性ニューロンの軸索を光刺激で活性化させた。光刺激は記録部位(一次体性感覚野)で行った。一次体性感覚野において神経活動が抑制される神経細胞だけでなく、興奮する神経細胞も観察された。これは脱抑制による神経活動上昇を示唆する。

更に一次体性感覚野に逆行性トレーサーであるFastblueを打ち、前脳基底部の抑制性ニューロンが標識されることも確かめた。一方、前脳基底部の抑制性ニューロンが一次体性感覚野の深層に投射することも確認した。これらの結果は前脳基底部抑制性ニューロンが一次体性感覚野の神経活動を修飾(興奮または抑制)することを示している。行動課題をよりマウスが体性感覚を検出する刺激条件を詳細に調べ、刺激強度と反応の関係を調べたため。また、注目すべき神経回路を形態学実験と生理学実験により同定したため。本研究課題では、マウス後肢脳領域に対応した一次体性感覚野へのトップダウン入力をもたらす回路の機能的役割を明らかにすることが目的である。本研究課題の3年目にあたる本年度は以下の1と2を実施した。1マウスの行動課題昨年と同様にマウスの脳を固定した状態で体性感覚刺激の弁別課題を実行した。この課題ではランダムなタイミングで音刺激(キュー)が与えられる。この足刺激の待ち時間は平均2秒の指数分布に従う乱数で決まる。この待ち時間後に足刺激が与えられ、その足刺激に反応(給水口のリッキング)したならば報酬(水)が与えられる。このオペラント行動課題をベースとして、2種類の音刺激Aと音刺激Bを与える行動実験を確立した。音刺激Aが提示された場合、足刺激の発生確率は100%である。一方、音刺激Bが提示された場合、足刺激の発生確率は20-25%とした。音刺激A提示後の足刺激に対する反応速度と音刺激B提示後の足刺激に対する反応速度を比較した。2一次体性感覚野に投射する二次運動野シナプス前細胞の同定狂犬病ウイルスを使ったトランスシナプス標識法によって、一次体性感覚野の神経細胞に投射する二次運動野の神経細胞を標識した。まず遺伝子改変マウスを使って、大脳皮質5層錐体細胞特異的にEnvA受容体であるTVAと狂犬病ウイルスの構成に必要なGタンパク質を発現させた。4週間後に同一の脳領域に、EnvAをエンベロープにもちGタンパク質を欠損した狂犬病ウイルスを打った。およそ1週間後に脳切片の観察を行った。インジェクションサイトである一次体性感覚野ではStarter cellが確認でき、Starter cellのシナプス前細胞が二次運動野においてGFP陽性細胞として標識された。同様に一次体性感覚野の抑制性神経細胞に投射する二次運動野の神経細胞を標識した。行動課題中のマウスからの慢性経頭蓋広視野カルシウムイメージング、細胞外記録とそのデータ解析環境・手法を確立したため。本研究で用いる細胞内記録・細胞外記録手法に関する論文が二件、学術雑誌に採択および掲載されたため。1前脳基底部の抑制性細胞が体性感覚の弁別課題に必要であるかを光遺伝学的手法を用いて明らかにする。遺伝子改変マウス(VGAT-cre, PV-cre, Sst-cre mouse)の前脳基底部にAAV-Flex-ChR2またはAAV-Flex-Archを打ち、行動課題中マウスの一次体性感覚野を光照射する。これにより前脳基底部抑制性神経細胞から一次体性感覚野への入力を制御(興奮または抑制)する。この光照射によってマウスの成績がどのように変化するかを明らかにする。2行動課題中のマウスの前脳基底部と一次体性感覚野から細胞外記録を行う。このとき光遺伝学手法を用いて記録神経細胞の細胞種同定を行う。
マイクロ/ナノ空間の電気化学的pH制御技術の開発と細胞内ATP合成制御への応用

近年,電子制御が主であったエレクトロニクスにイオン制御機構を加えることでデバイスに新たな機能を誘発させる学際研究“バイオイオントロニクス(バイオエレクトロニクスとイオニクスの融合)"が注目されている.申請者は世界に先駆けて電気信号を溶液中の水素イオン濃度(pH)信号に変換する有機電極を開発し,本電極と細胞から単離したミトコンドリアを組み合わせることで,生体機能を制御するバイオプロトニクスを実現してきた.本申請では,本有機電極を基盤とすることで細胞膜中ATP合成酵素の機能解析・活性制御に加え,細胞内ミトコンドリアにおけるATP合成を制御するチャレンジに取り組む.近年,電子制御が主であったエレクトロニクスにイオン制御機構を加えることでデバイスに新たな機能を誘発させる学際研究“バイオイオントロニクス(バイオエレクトロニクスとイオニクスの融合)"が注目されている.申請者は世界に先駆けて電気信号を溶液中の水素イオン濃度(pH)信号に変換する有機電極を開発し,本電極と細胞から単離したミトコンドリアを組み合わせることで,生体機能を制御するバイオプロトニクスを実現してきた.本申請では,本有機電極を基盤とすることで細胞膜中ATP合成酵素の機能解析・活性制御に加え,細胞内ミトコンドリアにおけるATP合成を制御するチャレンジに取り組む.
かご型金属種の積極的性状制御法の確立

新しいルイス酸創成をめざし、有機骨格包含かご型金属種の開発を行なった。その結果、ケイ素を基幹部分に有するかご型錯体や、多様な置換基(電子吸引、供与基)の導入に成功した。それらの錯体の配位子解離速度を精密に測定し、立体因子と極性因子の二つのチューニングファクターが性状制御に関わることを明らかにした。また、理論計算において、LUMO順位が緻密に変化することも確認でき、ルイス酸触媒反応への応用にも成功した。有機骨格包含かご型金属種を新しい金属性状制御手法の提供につながると考え、その合成と性質に関する基礎的知見を得るための検討を行った。金属種として三つのチューニングサイト(金属中心、腕、基幹部分)を考慮し以下に示す検討を行った。実際には、フェノキシ配位金属錯体をメインに行った。1)基幹部分への他の元素導入炭素より大きなケイ素およびゲルマニウムを基幹部分にとりこんだ錯体を合成した。その結果、緻密にルイス酸性が制御されることを明らかにした。2)金属部分への他の元素導入ホウ素よりも大きな金属であるアルミニウムを導入することを試みたが、予想に反して多核錯体が得られた。現在構造決定を行っているところであるが、新しい形のルイス酸触媒として作用する可能性が見いだされた。3)腕部分への立体的・電子的制御置換基の導入電子求引基を腕部位に導入することで、大きなルイス酸性の向上を達成することができた。また、立体的にかさ高い置換基を金属周りに導入することで、立体選択的な合成反応触媒として用いることが可能となった。4)基幹部分にπ電子効果誘起部位を導入基幹部分に電子効果誘起部位としてベンゼンを導入する錯体の合成に成功した。中心金属はサイズの大きなガリウムが適切で、その結晶構造解析にも成功した。高配位状態をとりやすいガリウムをかご型にすることで、背面からの配位を抑制した形のルイス酸を構築することが可能となり、新しいルイス酸触媒としての可能性を拓くことができた。初年度に合成に成功した有機骨格包含かご型金属種をさらに発展させる、もしくは新型のテンプレートを用いる検討を行った。1)三座配位リチウム錯体フェノキシ部位を3つ有する配位子とブチルリチウムとの反応により、複核のリチウム錯体が生成し、かご型を二つ有した形のユニークな化合物の合成に成功した。リチウムが6つ酸素が6つで六角柱型の構造をしており、堅固な構造である。X線結晶構造解析に成功し、詳細な構造学的特性に関する情報を得ることができた。また、この化合物の各種溶媒中での挙動を分光学的に観測し、かご型金属種の性状を詳細に検討した。予想よりもはるかに速い配位子交換が起こっていることや、金属の交換が進行していることがわかった。2)かご型錯体の不斉環境導入すでに合成したかご型錯体に光学活性な配位子を導入し,ジアステレオマーとして錯体を得ることに成功した。これらのCDスペクトルに基づく光物性を観測することで、不斉配位子のかご型錯体への影響を検討中である。また、配位子の酸素に対するオルト位に置換基を入れる手法をいくつか成功したことから、今後はこの部位にキラル源を導入する検討を行い、同様の検討を行う。3)多種官能基導入かご型錯体の性状緻密制御ケイ素を基幹部分に有するかご型錯体に、多様な置換基(電子吸引、供与基)を導入し、その性状変化を検討した。その結果、配位子解離速度が変化することがわかった。これは、ケイ素とホウ素のスルースペース相互作用が影響している可能性が示唆される結果である。また、理論計算において、LUMO順位が緻密に変化することも確認できた。新しいルイス酸創成をめざし、有機骨格包含かご型金属種の開発を目的としている。本年度、以下の成果を得た。1)スルースペース相互作用の確立かご型錯体の中心元素としてケイ素、ゲルマニウムを配した形の金属種を合成し、そのスルースペース効果を見積もった。その物性挙動をスペクトル的に解析し、配位子交換速度をモデルとして、ルイス酸性の緻密な制御に成功した。2)かご型錯体の不斉環境導入ビアリール骨格を有する不斉環境を有するかご型ホウ素錯体の合成に成功した。この触媒がhetero Diels-Alder反応において、80%eeを越える不斉収率を与えた。芳香族アルデヒドよりも、脂肪族アルデヒドにおいて高いエナンチオ選択性を達成した。また、CDスペクトルによりその挙動を明らかとした。3)重元素ルイス酸の構築金属中心に重元素を用いるルイス酸は、これまであまり研究されておらず、またその立体的要因と物性挙動の関係が明らかになっていない。本研究のかご型錯体のテンプレートに、重金属を導入する検討をおこなったところ、スズやビスマスを導入したものが生成した。現在、スペクトル的な証拠のみが得られている。

4)芳香族選択的反応かご型金属錯体の金属反応場周辺に、芳香環で囲ったπポケットを配する錯体を合成した。これが、芳香族アルデヒドよりも脂肪族アルデヒドに対して圧倒的な選択性をしめす触媒として作用することを明らかとした。
中枢性疲労発生機構の解明-疲労感へのTGF-βの関与-

疲労したラットの脳脊髄液に存在し、おそらく疲労感を生成することでその自発行動を抑制する物質がTGF-βであると考えられた。本年度はこれが中枢神経系に作用し、疲労感を生成する機構を調べる上での基礎的なデータとして、脳室内にTGF-βを投与したときの脳波と呼吸商について検討した。TGF-βは脳内において疲労感を引き起こす役割を担っていると考えられた。そこでこの作用が実際に疲労している動物と同一であることを確かめるため、まず運動により疲労させたラットの脳波の変化を明らかにした。ラットには無拘束で脳波を測定できる小型テレメトリー送信器を頭部に埋め込み、術後1週間の回復期間をおいてから測定を行った。ラットを疲労させる条件は、脳脊髄液中のTGF-β濃度増大を見いだした場合と同じ条件とし、流水プール中にて15分遊泳、5分休憩を1セットとする運動を8セット行わせた。運動前1時間の脳波を測定してベースラインを取り、運動後4時間の脳波を測定した。得られた脳波は高速フーリエ変換によりδ(0.8-4Hz)、θ(4-7Hz)、α(7-13Hz)、β(13-30Hz)の各振動数の波に分割し、各々を運動していないラッドの脳波のそれと比較した。運動により疲労したラットの脳波では、安静なラットのそれと比較して全体に対するθ波の割合が高く、。波の割合が低くなった。今後運動をさせずTGF-βを脳内に投与したときに同様の脳波の変化が起こるかどうかを検証したい。脳内は末梢から分離された環境であり、脳室内に投与された物質が末梢で何らかの変化を引き起こした場合それは神経系を介したものと考えられる。TGF-βは運動により消耗した部分を回復させる方向に身体の代謝状態を変化させる役割を持つものと予想された。そこで身体の代謝状態の概要をつかむため呼吸商の測定を行った。ラットの脳室にサンプルを投与するためのカニューレを施し、1週間の回復期間の後呼吸商を測定するチャンバーに入れてベースラインを測定した。30分の測定の後、TGF-βを投与し、呼吸商の変化を測定した。vehicleを投与した群と比較し、TGF-βを投与された群では呼吸商が低下し、酸素消費量が上昇した。消費する基質を分析したところ、糖質の燃焼量が減少し、脂質燃焼量が増大していた。このような変化が、生理的にどのような意味を持っているか現在解析中である。疲労したラットの脳脊髄液には、これをマウスの脳内に投与したときその自発行動を抑制する活性があるが、疲労していないラットの脳脊髄液にはこのような活性は存在しない。この活性は疲労した感覚の生成に関与していると考えられる。ヒドラを用いたバイオアッセイにより、この活性の本体がTGF-betaであることが予想された。H9年度には以下の事実を明らかにした。1.マウスの行動実験TGF-beta単体をマウス脳内に投与すると、vehicleに比べその自発行動量が投与量依存的に有意に滅少した。本来マウスの自発行動量を減少させる活性が存在するはずの、疲労したラットの脳脊髄液を、抗TGF-beta抗体で処理し、マウスの脳内に投与すると、マウスの自発行動量を減少させる活性が消失する。以上のことから、TGF-betaそのものがマウスの自発行動量を抑制する活性を持つ事が明らかとなり、疲労したラットの脳脊髄液中にTGF-betaが存在していることが示唆された。2.ヒドラによるバイオアッセイTGF-betaには構造の類似したスーパーファミリーが存在する。このようなファミリーのメンバーで、TGF-betaと同様の反応を引き起こすものがあるかどうかを調べた。代表的なメンバーとして、アクチビン、インヒビン、BMP4、GDNFについてヒドラの応答を比較したが、いずれもTGF-betaとは異なる応答パターンを示し、疲労したラット脳脊髄液に存在する物質とは違うことが示された。

今後運動をさせずTGF-βを脳内に投与したときに同様の脳波の変化が起こるかどうかを検証したい。脳内は末梢から分離された環境であり、脳室内に投与された物質が末梢で何らかの変化を引き起こした場合それは神経系を介したものと考えられる。TGF-βは運動により消耗した部分を回復させる方向に身体の代謝状態を変化させる役割を持つものと予想された。そこで身体の代謝状態の概要をつかむため呼吸商の測定を行った。ラットの脳室にサンプルを投与するためのカニューレを施し、1週間の回復期間の後呼吸商を測定するチャンバーに入れてベースラインを測定した。30分の測定の後、TGF-βを投与し、呼吸商の変化を測定した。vehicleを投与した群と比較し、TGF-βを投与された群では呼吸商が低下し、酸素消費量が上昇した。消費する基質を分析したところ、糖質の燃焼量が減少し、脂質燃焼量が増大していた。このような変化が、生理的にどのような意味を持っているか現在解析中である。
アメリカ軍政下の韓国における政治的変化の研究ー軍政と韓国諸政治勢力との相互関係を中心としてー

本研究は、戦後南朝鮮(韓国)を占領したアメリカ軍による軍政と、韓国諸政治勢力との相互関係を中心として、戦後韓国(1945ー1948年)における政治的変化を、政治史的に研究したものである。まず第一に、アメリカ軍政は国際情勢の変化、とくに冷戦の進行=ソ連との対抗、および韓国内部の政治的対立などを契機として変化した。当初の民主的朝鮮の確立という基本方針は、やがて韓国の「変革派」の否認、および「保守派」の擁護、次いで「左右合作工作」へと変化し、最終的には南朝鮮単独の国家樹立へと至った。軍政を一貫したものは、韓国政治勢力間に抑制と均衡を築くことであったが、それは結局、勢力均衡策=分断統治にほかならなかった。そしてそれは、戦前の日本の植民地朝鮮に対する統治政策とも、相通ずるものだったのである。第二に、韓国内部においても、反日独立運動の分裂という戦前の状況、および国際情勢の変化などを反映して、諸政治勢力が相互に分裂・対立した。人民共和国建国を推進した「変革派」も、共産主義者の工作で分裂し、「保守派」もまた、李承晩派、韓民党、臨政グル-プと分裂した。結局この中から、李承晩派が単独国家の樹立を推進して、勝利を得た。その政治的戦術こそ、国際政治の変化の利用と、有力国家の支援の獲得とであった。それは伝統的な「事大主義」の発揮にほかならなかった。第三に、第一と第二の変化とは、相互に密接に連関した。分割統治と「事大主義」との結合がそれである。この結合こそ、政治的変化の帰趨を決定したのである。しかも、この結合は、その後の韓国政治の動向を決定したばかりでなく、韓国の政治的行動様式を特徴づけることとなった。それらは、伝統的価値観の温存、両班政治的政治行動の継承(経済計画軽視)、ソウル中心の擬似的官僚統治などである。以上の知見を、成果として、学術雑誌に発表する予定である。
動脈硬化初期病変形性における血管内皮細胞の活性化とその分子機構

本研究では、動脈硬化初期病変形成の分子メカニズム解明に向け研究を進め、以下の結果を得た。(1)すでに、動脈硬化巣形成には低比重リポ蛋白質(LDL)の酸化が重要であることが我々を含む世界の研究室で明らかにされてきたが、我々の見出した酸化LDL受容体、LOX-1に可溶型が存在することを明らかにした。また、LOX-1は糖化されるが、その機構を明らかにし、糖化が機能発現に重要であることを示した。(2)酸化LDLで増加するリン脂質Lysophosphatidylcholine(LPC)が転写因子Egr-1を発現誘導し、Egr-1を介して動脈硬化に関わる遺伝子発現を制御することを見出した。(3)新規酸化LDL受容体SR-PSOXを見出し、動脈硬化への関与を示すとともに、桿菌の接着にも重要であることを明らかにした。(4)動脈硬化の形成には、マクロファージの遊走が重要であるが、遊走因子MCP-1がマクロファージを活性化する際、細胞接着と遊走には、異なる細胞内情報伝達経路で情報が伝わることを明らかにした。(5)動脈硬化の最終段階は、血小板活性化に引き続く血栓形成にあるが、我々が見出した内皮細胞に発現している細胞接着因子JAMが血小板にも発現しており、血小板活性化に伴い強くリン酸化されることを見出した。さらに、セミインタクト血小板のシステムを確立し、血小板凝集には低分子量GTP結合蛋白質Rhoが、また、α顆粒放出にはRab4が重要な働きをしいることを見出した。従来より我々は粥状動脈硬化の初期事象としての血管内皮細胞の機能解析に焦点を当てて研究に取り組んできた。血管内皮細胞活性化の分子機構の解析に関しては、従来明らかにしてきたリゾフォスファチジルコリン(LPC)の役割、なかでもその分子機構を明らかにすることをめざし、とくにPDGF-A鎖の発現における転写因子CREBの関わりにつき解析した。また新規酸化LDL受容体LOX-1の発現調節として、炎症性サイトカイン、ずり応力による調節機構が関与することを証明した。またLOX-1がヒト粥状動脈硬化病変において発現することを明らかにしたが、さらにその生物学的役割について解析を試みている。さらに新規細胞間接着分子JAMの機能解析を行ない、その細胞内分布に果たすTNF-α、IFN-γの役割につき解析した。現在粥状動脈硬化、血栓形成との関連性を追及するべく、血小板におけるJAM分子の挙動、分子機能につき解析中である。また血管内皮細胞の活性化に引き続き生じる事象である白血球とくに単球の血管内皮細胞下層への侵入、マクロファージへの分化の生物学的意義につき、M-CSF受容体であるc-fms情報伝達遮断をおこなうことにより解析した。本研究では、動脈硬化初期病変形成の分子メカニズム解明に向け研究を進め、本年度は以下の結果を得た。(1)すでに、動脈硬化巣形成には低比重リポ蛋白質(LDL)の酸化が重要であることが我々を含む世界の研究室で明らかにされてきたが、我々の見出した酸化LDL受容体LOX-1に可溶型が存在することを明らかにした。また、LOX-1は糖化機構を明らかにし、糖化が機能発現に重要であることを示した。

(5)動脈硬化の最終段階は、血小板活性化に引き続く血栓形成にあるが、我々が見出した内皮細胞に発現している細胞接着因子JAMが血小板にも発現しており、血小板活性化に伴い強くリン酸化されることを見出した。さらに、セミインタクト血小板のシステムを確立し、血小板凝集には低分子量GTP結合蛋白質Rhoが、また、α顆粒放出にはRab4が重要な働きをしていることを見出した。