hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
TGF-βファミリー因子による初期発生パターン形成の分子メカニズム

1980年代に細胞増殖因子が初期発生の制御に極めて重要な役割を担っていることが明らかにされて以来、それらの制御メカニズムの解明に多くの発生生物学者の努力が注がれてきた。とくにアフリカツメガエルなどの両生類をモデルとした研究から。初期発生の制御のなかでも胚葉形成に不可欠な二つの誘導現像、すなわち中胚葉誘導、神経誘導が細胞増殖因子によって制御されていることが示唆されてきた。本共同研究によって、中胚葉誘導にはTGF-βファミリー因子のうちアクチビンやVg1が背側化因子として脊索や筋肉の形成に、BMPが腹側化因子として血液、間充織などの形成を促すことが明らかになった。またもう一つの誘導現象である神経誘導においてはBMPが神経形成阻害因子として働き、BMPがその結合蛋白質であるnoggin,chordin,follistatinなどによって阻害されることにより、神経誘導が起こるというモデルを提唱した。また我々の共同研究によってリガンド分子の機能ばかりでなく、受容体の構造や機能、シグナル伝達の特異性についても明らかにされた。また受容体以降のシグナル伝達系についても多くの知見が得られ、アクチビン、BMPの細胞内情報伝達系を担う分子Smadがどのように異なるシグナルの特異性を決定しているのか、そのメカニズムが明らかにされた。また、BMPシグナルの一部を担う新規MAPKKK,TAK1およびその活性化因子TAB1の機能についても明らかになった。このように、この数年間の研究によってTGF-βファミリー因子が初期発生過程でどのように作用し、どのように細胞分化を促すのか、パターン形成の分子メカニズムの一部が明らかにされたと考えている。初期発生のパターン形成の分子機構に関する研究は主に細胞増殖因子やそれらの標的細胞内のシグナル伝達機構に注目して行われている。本共同研究では以下の2点に絞って共同研究が行われた。1)TGF-βスーパーファミリー受容体はすべてSer/Thrキナーゼであるが、この受容体ファミリーは少なくとも7つのメンバーからなるファミリーを形成しており、リガンドはそれぞれに特異的な受容体と結合する。しかしながら、ひとつのリガンドが複数の受容体に結合したり、ひとつの受容体が複数のリガンドによって共有されていることがわかっている。これらの複雑なリガンド受容体システムははどのように使い分けられているのだろうか。初期発生を制御するTGF-βスーパーファミリー受容体のシグナル伝達の質の違いについて検討する。受容体から発せられたシグナルは何らかのかたちで細胞内、そして核へその情報が伝達される。その細胞内情報を担っているものにはどのような分子があるのだろうか、BMPシグナルの下流因子を同定する。得られた結果1)Ser/Thrキナーゼ受容体を改変して構成的活性型とすることにより、リガンドの非存在下で細胞内情報伝達を活性化することが可能であることが明らかになった。そこでALK2,ALK3,ALK3のそれぞれを構成的活性型に改変し、ツメガエル初期胚に過剰発現させ形態形成への影響を観察した。その結果、調べた受容体すべては腹側化に関わる受容体であることが判明した。2)ショウジョウバエの研究から発見されたmadのツメガエル相同遺伝子MADR1を単離し、同遺伝子はBMPのシグナル伝達に介在していることを示した。また、BMPによって誘導される遺伝子Msxを単独で過剰発現させても腹側化が起こることからMsxもBMPのシグナルを一部担っているものと考えられた。研究概要follistainとBMPの相互作用の解明(上野、Hemmati-Brivanlouとの共同研究)Hemmati-Brivanlouらはfollistatinが神経分化阻害作用を示すことや、形成体(オ-ガナイザー)に限局して発現することを明らかにした。上野らは神経分化阻害因子としてのBMPの役割に注目し、細胞外におけるその活性制御メカニズムについて解析した。

アクチビン結合タンパク質として知られていたfollistatinがBMPの結合タンパク質であることを表面プラズモン共鳴バイオセンサーを用いて証明した。またアフリカツメガエル初期胚を用いたアッセイ系で、Hemmati-Brivanlouらが単離したfollistatin cDNAを過剰発現させることによりfollistatinがBMP活性を阻害しうることを明らかにした。TAK1およびその活性化因子であるTAB1のBMPシグナル伝達における機能。(上野、Thomsenとの共同研究)上野らはアフリカツメガエル(Xenopus laevis)におけるTAK1とTAB1遺伝子をクローニングし、それらの初期胚における遺伝子発現がBMPの発現とオーバーラップすることを示した。また、TAK1経路の活性化はBMP様の活性、すなわち中胚葉の腹側化、神経形成の抑制を起こすことを明らかにした。細胞内因子Smad1およびSmad5はBMPの下流因子として働き、それらの過剰発現によってBMP様活性を観察することができる。Thomsenらが単離したSmad遺伝子を用いて、両Smad作用を不活性化型TAK1が抑制することから既存のSmad経路に加えて、TAK1経路もBMPの情報伝達に重要であり、両経路が相互作用することにより、BMPシグナルが伝達されていることを示唆した。アクチビンおよびBMPシグナル伝達経路におけるSmad経路の役割(ChoとThomsenとの共同研究ChoらはThomsenらが単離したSmadがアクチビン経路とBMP経路をどのように制御するのかを解析し、Smad2がアクチビンによる背側化シグナルに、Smad1および5がBMPによる腹側化シグナルを制御する経路特異的作用を担い、Smad4が両者の活性を促進する共通因子として働くことを見いだした。
原三溪関係資料の基礎的研究－コレクション形成の具体相の解明－

本研究は、明治期に横浜で活躍した実業家・原三溪の関係資料群を分析の対象とした基礎的調査研究である。対象とする資料群は。古美術から近代美術、さらには古建築を含む三溪のコレクション形成にかかわる、多種多様な内容を示す貴重な資料群である。本研究では、この資料群の分析および解釈により、三溪のコレクション形成の様相を詳細に復元するとともに、その志向性を明らかにするものである。研究の2年度目となる平成30年度は、平成29年度に引き続ぎ1資料群の全体の把握、2資料調査および撮影、3調査・撮影済み資料の再整理を主な作業目標とし、あわせて4三溪の蒐集活動について先行研究の把握を含めた情報収集も進めることとした。作業12については蓄積データの管理のための機器を備え、目録作成のための基礎作業に着手した。3再整理については研究活動終了後の活用のあり方を想定しつつ現時点で最適な方法を模索している。4情報収集として三溪や近代横浜についての古書等、参考資料の蒐集に努め、調査資料群の理解の基盤となる時代相の研究を進めた。平成30年度終了時点では、目録作成のための基礎データ取集の途中にある。次年度以降は、目録作成に向けて、資料群の内容を包括的にとらえるためのデータ収集、撮影記録の整理を進め、多様な資料形態に応じて再整理を進めることとする。2019年は三溪生誕150年・没後80年にあたり現時点で知られる旧蔵作品を集めた展覧会も企画されており、そうした成果もふまえつつ新出資料群の調査を進める。研究活動全体としては進捗があったが、資料群の基礎データ収集作業がやや遅れている。データ収集と管理の体制、資料再整理の方針を整えることにより、次年度以降はより効果的に作業を進め遅れを解消できる見込みである。基礎データ収集、撮影と同時に一次目録を作成する。目録作成に合せて再整理を行う。本研究は、明治期に横浜で活躍した実業家・原三溪の関係資料群を分析の対象とした基礎的調査研究であり、対象とする資料群は、古美出から近代美術、さらには古建築を含む三溪のコレクション形成にかかわる、多種多様な内容を示す貴重な資料群である。研究の初年度となる平成29年度は、1資料群の全体像の把握、2資料調査および撮影、3調査・撮影済み資料の再整理、を主な作業目標とし、主に2資料調査および撮影を中心に作業を進めた。冊子、ノート、紙片、写真等、多様な形態の資料に即して、安全かつ効率的な調書作成および撮影を行った。初年度である平成29年度終了時点では、目録作成のための基礎情報を収集した状態であり、次年度以降、本格的な目録作成を進めることとする。一方、今後の調査遂行のため、研究代表者および分担者各自で必要と判断される文献の収集や調査を進めており、多角的な視点からなる資料群解釈を行う基盤も形成されてきている。研究の実施場所であり、資料群の保管場所でもある申請機関の改修工事期間にあたり、作業の安全性を優先して作業実施を見合わせた期間があり、当初の計画より作業が遅れた。工事期間は終了しており、次年度以降の作業で遅れは解消できる見込みである。対象とする資料群は。初年度の作業をもとに作業方針や方法を確定、目録作成に向けて、具体的な入力作業を開始する。写真撮影は基礎調査と継続して進める。

研究の実施場所であり、研究対象である資料群の保管場所でもある申請機関の改修工事期間にあたり、作業の安全性を優先した結果、実質的に研究遂行が困難であった時期が生じたため、次年度使用額が生じた。工事は終了しており、作業の遅れ自体は次年度以降の作業の中で解消できると見込まれ、それに伴い、翌年度分として請求した助成金も合わせて計画的な使用が可能と見込んでいる。調査対象資料群の取扱いや作業方法、再整理方法について慎重に検討しつつ作業を進めており、必要物品の購入などが遅れがちであった。2019年度、2020年度で再整理と目録作成を計画しており、重点的に物品購入の必要が生じるため滞りなく使用することが可能であると見込んでいる。
移植肝におけるC型肝炎ウイルス感染の分子メカニズムの解明

C型肝硬変に対する肝移植術後インターフェロン(IFN)治療を48週以上施行し得た症例を対象とした。Core領域アミノ酸変異、NS5Aの変異、IL28BSNPとVR率およびSVR率との比較を行った。IFN治療によるSVR率は47. 8%であった。IL28B major/major群(n=29)およびmajor含有群(n=20)のSVR率はそれぞれ68. 9%および15. 0%であった。また、major/major群の内、AA70/91(double wild=1)、ISDR(変異2個以上=1)、IRRDR(変異6個以上=1)で解析すると、合計ポイント0(n=5)、1(n=12)、2(n=10)、3(n=2)それぞれのSVR率は40. 0%、66. 7%、80. 0%、100%であった。またmajor群のSVR率は15/19=78. 9%、minor群のSVR率は33. 3%であった。(1)肝移植時のHCV遺伝子多型に関する経時的検討。HCVはゲノムの更正機構を持たず、その配列のなかに非常にmutationの多い領域を有する。すなわちE2領域内のHVR-1を用いてSSCP法を用いて多型解析を行った。その結果、HCVは移植前から多数のspeciesとして存在していたが、再環流6時間後に最も遺伝子型が集約されていた。更にdirect sequence法では、再環流後6時間後にはHCVの遺伝子多型は1つに集約されていた。すなわち、新グラフト移植後6時間を目安にしたHCVに対する治療が、HCVのescape機構を効果的に排除した状態での治療となることが示唆された。Pre-emprtive治療の有効性を示唆する結果であった。(2)肝外HCV複製の影響に関する検討:肝および血性HCV遺伝子比較。HCVRNAが最低値に近くなる再環流後6時間の時点でもHCVRNA量は少量ではあるが存在した。SSCPにて検索した結果、移植前と移植後で大きくconsensusが変化した。以上より移植後初感染においては肝外HCV replicationが移植後Dominancyになりうる可能性が示唆された。(3)C型肝硬変に対する肝移植術後インターフェロン(IFN)治療効果予測に関する研究。肝移植後HCV再発に対しIFN治療を48週以上施行し得た症例を対象とした。Direct sequenceにて、Core領域に関してはアミノ酸(aa)70/91の変異の有無を検討し、NS5A領域に関してはISDR(aa2209-2248)およびIRRDR(aa2334-2379)のそれぞれの変異数を検討、VR(viral response)率およびSVR(sustained viral response)率との比較を行った。結果は、コア領域のaa70および91のDouble wildで有意にSVR達成率が高率(65% vs.33%)、ISDR変異数〓2、IRRDR変異数〓6の症例は、それぞれの変異数が少ないものに比し、SVR率が高率であった(67% vs.37%、78% vs.28%)。すなわち、移植後IFN感受性は、HCVの遺伝子型により大きく影響されていた。C型肝硬変に対する肝移植術後インターフェロン(IFN)治療効果予測に関する研究。全年度までの結果は、コア領域のaa70および91のDouble wildで有意にSVR達成率が高率(65% vs.33%)、ISDR変異数≧2、IRRDR変異数≧6の症例は、それぞれの変異数が少ないものに比し、SVR率が高率であった(67% vs.37%、78% vs.28%)。すなわち、移植後IFN感受性は、HCVの遺伝子型により大きく影響されていることが判明していた。本年度は、さらに18例の新規症例(I型のみ)を追加して解析を行った。

それらの内、有効なウイルスタイプ解析が施行できたのは16例で、コア領域アミノ酸がwild typeであるものを1点、ISDRおよびIRRDR領域のmutation typeをそれぞれ1点としてカウントすると、スコア0点が5例、1点が5例、5例、3点が1例であった。また抗ウイルス治療の効果はVRが8例、NRが5例、それ以外は現在治療中である。これら症例を加えた全症例での解析(n=68)ではVR率はスコア0、1、2、3点でそれぞれ23%、34%、66%、83%(p=0.001)、SVR率は20%、42%、75%、100%(p=0.03)であり、上記スコアとIFN治療の効果には非常に強い相関認めた。C型肝硬変に対する肝移植術後インターフェロン(IFN)治療効果予測に関する研究を行った。肝移植後HCV再発に対しIFN治療を48週以上施行し得た症例を対象とした。Direct sequenceにて、Core領域に関してはアミノ酸(aa)70/91の変異の有無を検討し、NS5A領域に関してはISDR(aa2209-2248)およびIRRDR(aa2334-2379)のそれぞれの変異数を検討、VR (viral response)率およびSVR (sustained viral response)率との比較を行った。さらに98例にてIL28BのSNPを測定することができた。94例(1型82例、2型12例)にペグインターフェロン・リバビリン療法を行った。治療によるEVR率は20.2%、VR率は58.5%、SVR率は47.8%であった。SVR(n=45)となった症例の内、EVR-SVRは20例(44.4%)であり、半数以上の25例(55.6%)はdelayed VR後に48週以上の治療を追加した症例であった。移植前HCVRNA陰性であった症例(n=12)の内、3例で移植後HCVRNA陽性となったが、いずれも術後ペグインターフェロン・リバビリン療法にてSVRとなっている。また、胆汁鬱滞性肝炎が12例に発症した。ペグインターフェロン・リバビリン療法が施行された症例が9例の内、7例で同疾患のコントロールおよびSVRが得られた。1b型症例の内、49例でドナー・レシピエントのIL28B-SNP解析が可能であった。IL28B major/major群(n=29)およびmajor含有群(n=20)のSVR率はそれぞれ68.9%および15.0%であった。また、major/major群の内、AA70/91(double wild=1)、ISDR(変異2個以上=1)、IRRDR(変異6個以上=1)で解析すると、合計ポイント0(n=5)、1(n=12)、2(n=10)、3(n=2)それぞれのSVR率は40.0%、66.7%、80.0%、100%であった。またdelayed VR症例の内、majorは19症例、minorは6症例であるが、major群のSVR率は15/19=78.9%、minor群のSVR率は33.3%であった。
育児グループにおける地域組織活動の活動効果の測定指標に関する研究

1.育児グループにおける組織活動状況に関する研究O市の育児グループの会長79人を対象に組織活動に関する調査を行った結果、78人から回答を得た。組織の母親会員数は平均53.3人と大規模が多い。活動状況は小グループ活動59%、子育て座談会80%、健康学習会62%で実施。関連組織との連携は90%がもっていた。運営の問題点は、「役員の負担」「会員が受け身」、大規模組織で「活動場所がない」があげられていた。2.地域における育児グループの活動効果に関する研究育児グループの母親会員3,881人に調査票を配布し、2,695人より回収した(回収率69.4%)。育児による疲労感は約90%の母親が感じ、父親の育児参加と母親の疲労感は関連がみられた。父親の育児参加は95%しているが家事参加は75%と低い。育児グループ活動の満足80%、育児グループ内の親しい友人80%がもっていた。育児グループの参加による子育てへの効果は、子どもや母親にとって多くあり、父親と地域には少ない。母親の育児不安は70%にみられた。父親や地域社会との共同の子育てを多くの母親が求めていた。効果の測定指標として44項目を因子分析した結果、「育児不安」「楽しい育児」「父親の育児参加」「ゆとりの育児」「母親と子どもの楽しい体験」「地域とのつながり」「子育ての束縛感」「地域での子育て」「育児相談」「育児のイライラ感」が因子として抽出された。3.今後の研究計画上記の調査結果をもとに、活動状況と母親の子育て意識との関連を検討し、組織活動の評価指標を求めていく。あわせて、地域の実践活動に参加することで活動評価の活用について検討を加える。1.育児グループにおける組織活動状況に関する調査(1)岡山市保健所担当者調査おやこクラブネットワークは、昭和59年に全市組織化。地域の小学校区に1クラブが組織され、自由な活動とブロック活動や会長交流などを行っている。会員(母親)は約4500名、1歳4歳までの子どもが中心。組織の活動方針、行政や地域との関係を明らかにした。(2)平成10年度の地区おやこクラブ会長への活動に関する調査79組織中78組織より回答を得た。組織の母親会員数は平均27.8人、週1回活動が多く、小グループ活動59%、座談会80%、学習会62%、会報の発行86%。会の運営は役員の合議が87%、他組織とのつながりを90%以上がもっていた。クラブの問題点には、役員の負担、会員の協力がない、活動場所がないなどがあげられていた。2.地域における子育てに関する実態調査おやこクラブの母親会員3881人に調査票を配布し、2695人より回収した(回収率69.4%)。母親の平均年齢は31歳、子ども数は1.9人、母親の育児による疲労感は約90%にみられ、父親の育児参加は35%。おやこクラブの加入期間は平均2年間、活動の満足80%、負担37%。親しい友人80%、子育てへの影響は子どもや母親にとって多くあり、父親と地域には少ない。育児不安は70%にみられ、子育てに対する考え方には、母親としての制約の容認と女性としての自立の両面性をもっていた。父親や地域社会との共同子育ては多くの母親が求めていた。1.育児グループにおける組織活動状況に関する研究

O市の育児グループの会長79人を対象に組織活動に関する調査を行った結果、78人から回答を得た。組織の母親会員数は平均53.28人と大規模が多い。活動状況は小グループ活動59%、子育て座談会80%、健康学習会62%で実施。関連組織との連携は90%がもっていた。運営の問題点は、「役員の負担」「会員が受け身」、大規模組織で「活動場所がない」があげられていた。2.地域における育児グループの活動効果に関する研究育児グループの母親会員3,881人に調査票を配布し、2,695人より回収した(回収率69.4%)。育児による疲労感は約90%の母親が感じ、父親の育児参加と母親の疲労感は関連がみられた。父親の育児参加は95%しているが家事参加は75%と低い。育児グループ活動の満足80%、育児グループ内の親しい友人80%がもっていた。育児グループの参加による子育てへの効果は、子どもや母親にとって多くあり、父親と地域には少ない。母親の育児不安は70%にみられた。父親や地域社会との共同の子育てを多くの母親が求めていた。効果の測定指標として44項目を因子分析した結果、「育児不安」「楽しい育児」「父親の育児参加」「ゆとりの育児」「母親と子どもの楽しい体験」「地域とのつながり」「子育ての束縛感」「地域での子育て」「育児相談」「育児のイライラ感」が因子として抽出された。
クラウンゴール腫瘍形成初期過程の分子論的研究

本年度は以下のような成果を挙げた。(1)植物シグナルのAgrobacteriumへの伝達様式:VirAタンパク質は、vir遺伝子が植物のシグナル物質(フェノールと糖)に応答して発現するための膜結合型のセンサーである。virA遺伝子にin vitroで点突然変異を導入し各ドメインの機能を解析した。その結果、ペリプラズムドメインとTM2膜結合ドメインは糖シグナルの伝達に関与していること、TM2と細胞質ドメインとの境界領域から細胞質側はフェノールシグナルの伝達に関与していることがわかった。糖に応答しないvirA遺伝子の変異株から、糖に応答するにようになったchvE遺伝子のサプレッサー変異株を分離できた。このことは、ChvEタンパク質とVirAタンパク質が直接相互作用していることを示している。我々は、T-DNAのAgrobacteriumから植物細胞への移動頻度を測定する方法を開発し、この方法により、vir領域の遺伝子のうち、virBのすべての遺伝子virD4は移動に必須であること、virE2は必須ではないが移動を促進していることを示した。我々はすでに、T-DNAの組み込みにはT-DNAと染色体の間に短い塩基配例上の類似性が重要であることを提唱しているが、新たに解析した組み込み部位周辺の構造からもそのことが裏付けられた。二つの別個の染色体上のT-DNAのすぐ近傍には共通な反復配列が存在していた。我々はこの反復配列がSINE(Short Interspersed DNA Element)であることを証明した(これをTS familyと命名した)。その分子構成は、全体としては動物のものとほとんど同じであったが、植物に固有と思われる特徴を有する。今後の興味深い問題は、TS familyとT-DNAの組み込みとの間に何等かの関連があるかどうかという点である。本研究は、クラウンゴ-ル腫瘍形成の初期過程を解明することを目的としている。我々は四つの側面からこの問題にアプロ-チしている。つまり、(1)植物シグナルの<Agrobacterium>___ー細胞内への伝達の解明、(2)TーDNAの植物細胞への移動機構の解析、(3)<Agrobacterium>___ーの感染に応答して発現する遺伝子の探索、(4)TーDNAの植物染色体への組み込み機構の研究である。その結果、以下のような成果が得られた。(1)TーDNAの移動は、バクテリアが植物に感染することにより誘導的に起こる。このDNAの移動は、植物が合成するフェノ-ル物質により発現が誘導されるバクテリアの<vir>___ー遺伝子の産物により触媒される。我々は、このようなフェノ-ル物質による<vir>___ー遺伝子の誘導的発現が、グルコ-スのような単糖により著しく促進されることを見つけた。さらに、促進活性のある糖は、特定の立体構造をしていることがわかった。(2)TーDNAの移動のプロセスを解明するために、イントロンを含むGUS(βーグルクロニダ-ゼ)遺伝子を作製し、TーDNAに入れた。この(GUS)TーDNAが植物細胞に移行したときのみ、GUS遺伝子が発現することがわかった。したがって、GUS活性を指標にして、TーDNAが植物細胞に移行したかどうかを定量できることがわかった。(3)まだ、<Agrobacterium>___ーにより発現が誘導される遺伝子は分離されていない。(4)TーDNAの組み込みに、TーDNA上の配列と植物DNAの配列との相同性が関係あると思われる結果が得られた。また、TーDNA組み込みの標的となる植物染色体DNAには、共通構造をしたある種の配列が存在している可能性がでてきた以上の研究を遂行するために、予定どうり分離用超遠心機、DNA合成装置、PCR装置、微量遠心機などを購入した。

我々は四つの側面からこの問題にアプロ-チしている。つまり、(1)植物シグナルのAgrobacterium細胞内への伝達機構の解明、(2)TーDNAの植物細胞への移動機構の解析、(3)Agrobacteriumの感染に応答して発現する遺伝子の探索、(4)TーDNAの植物染色体への組み込み機構の研究である。本年度は、以下のような成果が得られた。(1)TーDNAの移動は、バクテリアが植物に感染することにより誘導的に起こる。このDNAの移動は、植物が合成するフェノ-ル物質により発現が誘導されるバクテリアのvir遺伝子の産物により触媒される。我々は、すでにこのようなフェノ-ル物質によるvir遺伝子の誘導的発現が、グルコ-スのような特定の単糖により著しく促進されることを明らかにしている。今年度は、フェノ-ル物質に対するレセプタ-であるVirAタンパク質がこの促進に関与していること、またそこに相互作用するタンパク質遺伝子を見いだした。(2)TーDNAの移動のプロセスを解明するための新しい方法を開発した。この方法では、イントロンを含むGUS(βグルクロニダ-ゼ)(IGUS)遺伝子を持つTーDNAを利用している。つまり、この(IGUS)TーDNAは植物細胞核に移行したときのみ、GUS遺伝子が発見するので、GUS活性を指標にして、TーDNAの植物細胞核への移行を定量できる。この方法により、vir遺伝子のうちvirBとvirD4遺伝子が移動に必須であること、virE2遺伝子は必須ではないが、効率のよい移動には必要であることがわかった。(3)まだ、Agrobacteriumにより発現が誘導される遺伝子は分離されていない。(4)TーDNAの組み込みに、TーDNA上の配列と植物DNAの配列との相同性が関係あると思われる結果が得られた。また、昨年度、TーDNA組み込みの標的部位の近傍には、共通構造をしたある種の反復配列で存在していることを見いだしたが、本年度の解析により、それがレトロポソンの一種であるSINEであることがわかった。以上の研究を遂行するために、予定どうりの設備・備品を購入した。本年度は以下のような成果を挙げた。(1)植物シグナルのAgrobacteriumへの伝達様式:VirAタンパク質は、vir遺伝子が植物のシグナル物質(フェノールと糖)に応答して発現するための膜結合型のセンサーである。virA遺伝子にin vitroで点突然変異を導入し各ドメインの機能を解折した。その結果、ペリプラズムドメインとTM2膜結合ドメインは糖シグナルの伝達に関与していること、TM2と細胞質ドメインとの境界領域から細胞質側はフェノールシグナルの伝達に関与していることがわかった。糖に応答しないvirA遺伝子の変異株から、糖の応答するようになったchvE遺伝子のサプレッサー変異株を分離できた。
発声の制御遺伝子の同定と分子進化の解明

なぜ地球上で発声が生まれたのか?なぜ動物は種特有の発声ができ、さらに発声を学習することができるようになったのか?という発声・言語進化の根幹を成す問いは、大きな謎に包まれたまま残されており、遺伝子の実体は、いかなる生物においても明らかにされていない。本研究では、多階層的な技術基盤を結集し、先天的発声の制御遺伝子を同定し、遺伝子機能を立証する。さらに、それらの制御遺伝子のゲノム情報を、複数の動物種で比較解析して得る進化系統樹に、それらの動物種が示す音声コミュニケーションの階層性と意図共有の相違性により意味づけを行うことで、言語を可能にした下位機能の進化の分子基盤を明らかにする。既に、先天的発声の制御遺伝子の候補を抽出し、特に発声を誘導する制御遺伝子については、機能を立証することができたため。下記の実験1・2に示すように、ニワトリ品種内の比較解析により発声を支配する制御遺伝子を同定し、遺伝子機能を立証する。実験1)発声のモチベーションの制御遺伝子の機能の立証発声のモチベーションを制御する候補遺伝子の機能を立証し、成果をまとめて投稿する。実験2)発声のパターンの制御遺伝子の同定近年になって発展した集団遺伝学を用い、日本鶏の全ゲノム情報を解析し、責任遺伝子・SNPの抽出を行う。
病的声帯における振動部緊張度と振動部質量の関係

我々の今までの研究で,声門上下圧差(P)と音声基本周波数(Fo)との特異な関係を明らかにしてきた。すなわち、単位声門上下圧差あたりのFoの変動幅(dF/dP)をy軸に、Foをx軸にとると、その2者の関係はV字型のグラフで示される。そして,この関係は、Fo調節における振動部の緊張度と質量の組み合わせ方で決まることを示してきた。ヒトの病的声帯ではこの関係に変化があることも判明した。本研究ではこのヒトの病的声帯で観察された、dF/dPとFoの関係の変化が振動部の緊張度と質量の組み合わせの変化で説明できるかを、モデル実験で検討した。声帯に微細な病変があっても、ある許容内では、声帯自体の規則的振動は維持される。喉頭筋の補償的調整がなされ、その結果として、声帯振動部の緊張度・質量が再調節され、規則的振動を維持するものであろう。しかし,従来の喉頭検査では捉えられないこの調整作業を知ることは、微細な声帯病変の推定につながるものである。我々は声帯振動のゴム膜モデルを開発した。このモデルは、極めて単純な構造ながら、振動部の緊張度と質量を自在に変化させることができる。他に類をみない。このモデルを使い、我々は、人で観察された音声基本周波数の調節において声帯の緊張度と質量がどのような組み合わせで振動周波数を上昇させているかを明らかにし得た。すなわち,ゴム膜モデルでは振動部を伸展させるとFoは増加して,dF/dPは減少する.一方,振動部の質量を減少させるとFoは増加し,dF/dPも増加する.現有モデルでは、振動部の内圧(緊張度)と質量は、間接的推定値であるので、これらを直接測定できると共に微調節ができるように改良を加えた。他に類をみない。振動モデル1号に、空気注入実験をおこなった。方法:モデルの振動部(このモデルでは左右は独立していない)に空気を注入して、注入量(ml)と振動数(Fo)および単位送気圧あたりのFoの変化分(dF/dP)との関係を調べた。結果を以下に記す。1.空気注入量とFoは正の相関を示す。2.振動部の伸張とFoは正の相関を示す。3.振動部の伸張の方がFoに対する効果が大きい。4.空気注入量とdF/dpは負の相関を示す。4.振動部の伸張とdF/dPは負の相関を示す。5.空気注入量の方がdF/dPに対する効果が大きい。以上の結果からの結論として1.Foを上昇させる主役は、振動部の伸張である。2.dF/dPを減少させる主役は、振動部の空気注入量である。人がFoを上昇させる時は、地声の範囲内では、輪状甲状筋と甲状披裂筋とがほぼ平行して活動を増強させる。前者の筋は声帯の伸張、後者の筋は等長性に声帯の緊張を増加することによってFoを上昇させる。振動モデルでの結果を人の声帯に当てはめると、dF/dPの減少は、「声帯の伸張効果の効果よりも甲状披裂筋による等長性の緊張増加の効果が大きい」との仮説を立てることが出来る。13年度は材質を変えた複数のモデルで以上の追試を行う。今までに、声門上下圧差(P)と音声基本周波数(Fo)との特異な関係を明らかにしてきた。

すなわち、単位声門上下圧差あたりのFoの変動幅(dF/dP)をy軸に、Foをx軸にとると、その2者の関係はV字型のグラフで示される。この関係は、Fo調節における振動部の緊張度と質量の組み合わせ方で決まることを示してきた。ヒトの病的声帯ではこの関係に変化があることも判明した。本研究ではこのヒトの病的声帯で観察された、dF/dPとFoの関係の変化が振動部の緊張度と質量の組み合わせの変化で説明できるかを、モデル実験で検討した。声帯に微細な病変があっても、ある許容内では、声帯自体の規則的振動は維持される。喉頭筋の補償的調整がなされ、その結果として、声帯振動部の緊張度・質量が再調節され、規則的振動を維持するものであろう。しかし,従来の喉頭検査では捉えられないこの調整作業を知ることは、微細な声帯病変の推定につながるものである。我々は声帯振動のゴム膜モデルを開発した。このモデルは、極めて単純な構造ながら、振動部の緊張度と質量を自在に変化させることができる。他に類をみない。このモデルを使い、我々は、人で観察された音声基本周波数の調節において声帯の緊張度と質量がどのような組み合わせで振動周波数を上昇させているかを明らかにしえた。現有モデルでは、振動部の内圧(緊張度)と質量は、間接的推定値であるので、これらを直接測定できると共に微調節ができるように改良を加えた。
原虫の赤血球侵入を阻容する糖鎖ライブラリーの構築とそのバベシア症治療薬への応用

前年度は、ウマバベシア原虫(Babesia equiおよびB. caballi)の赤血球感染において、宿主シアル酸がレセプター候補であることを明らかにした。今年度は、トリプシンあるいはキモトリプシン処理赤血球へのウシバベシア原虫(B. bovisおよびB. bigemina)の接着・侵入の詳細な検討により、ウシ赤血球表面のシアル酸を含む糖蛋白質分子がトリプシン感受性であること、そしてこれがウシバベシア原虫の赤血球侵入を抑制することを見出した。このウシバベシア原虫に特異的なシアル酸の赤血球侵入への関与をさらに共焦点レーザー顕微鏡を用いて検討した結果、原虫の侵入に伴って赤血球膜表面のシアル酸が赤血球内部へ取り込まれた後、赤血球内バベシア原虫の表面へと段階的に移動する像が認められた。以上のことから、シアル酸がB. bovisの赤血球侵入に重要な役割を担っていると考えられた。次に、シアル酸を豊富に含むグライコフォリンAを欠損したマウスを用いてマウスバベシア原虫(B. rodohaini)感染試験を行ったところ、本来致死的経過を示す本感染に対してグライコフォリン欠損マウスは抵抗性を示したため、シアル酸を各種バベシア感染に対する治療に応用し得る糖鎖ライブラリーの主要メンバーと位置づけた。また、上記試験と並行してその他の糖鎖、特に硫酸化多糖(フコイダン、ヘパリン、ヘパラン硫酸、コンドロイチン硫酸、デキストラン硫酸)についても検討し、その原虫侵入抑制効果が観察されたことから、シアル酸とともに当該糖鎖ライブラリーを構築するメンバーとして加えられた。Babesia equiおよびBabesia caballiによるウマバベシア症は、貧血や血色素尿症をはじめとする重篤な症状を引き起こし、世界的に甚大な被害をもたらしている。本原虫の赤血球侵入メカニズムを解明することは、いまだ立ち後れているワクチン開発に有用な情報を提供すると考えられる。そこで、我々はウマ赤血球側のレセプター候補を探索することを目的として、赤血球表面のシアル酸に着目し、以下の実験を行った。まず、ウマ赤血球をノイラミニダーゼで処理し、赤血球表面シアル酸への影響を調べた。フローサイトメトリーにより、ノイラミニダーゼ処理赤血球表面におけるシアル酸の減少が認められた。また、PAS染色およびレクチンブロットにより、赤血球膜貫通糖蛋白質グライコフォリンに含まれるα2-3結合シアル酸の除去が確認された。次に、このシアル酸除去赤血球を80%含む赤血球を用いてBabesia equiおよびBabesia caballiのin vitro培養を行ったところ、いずれの原虫においてもその増殖は前処理に用いたノイラミニダーゼ濃度に依存して強く阻害された。さらに、Babesia caballiの無血清培養液中に3'シアリルラクトース(α2-3結合シアル酸含有)、6'シアリルラクトース(α2-6結合シアル酸含有)あるいはラクトースを添加すると、3'シアリルラクトースにおいてのみ20%程度の顕著な原虫増殖抑制が認められた。以上のことから、Babesia equiおよびBabesia caballiの赤血球侵入メカニズムには、宿主グライコフォリンに含まれるα2-3結合シアル酸が関与することが強く示唆された。
遷移金属硫化物・複素環式化合物分子結晶の創製と電気的性質

遷移金属(Ti)とイオウ(S)との粉末に、M(Zr, V, Fe, Sn)粉末を乾式混合後、石英ガラス管に真空封入・熱処理し、Ti_<1-x>M_XS_2を得た。昨年度得た最適合成条件を元に成形体を作製し、構造解析および磁化測定を行い、結晶構造を精密化し、これらの物質が反磁性体でかつ半金属的な物質であることを確認した。次に、ピロール、ピリジン、ピロリジン、ピペラジン、イミダゾールなどの複素環式化合物蒸気をTiS_2あるいはNbS_2結晶と接触させることにより、遷移金属硫化物・複素環式化合物分子結晶の創製を行い、TiS_2ではFirst Order、NbS_2ではSecond OrderでMS_2層間に入った分子結晶が合成された。この分子結晶は、有機物挿入により層間距離が開いた構造で、これら分子結晶の電気伝導度測定を行ったところ、いずれも半導体的な性質を示した。バンド計算をおこなったところ、これら分子結晶は間接遷移型の半導体であるという結果になり、実験結果とほぼ一致した。ある種のTiS_2-複素環式化合物(未投稿につき詳細の記載を省略)分子結晶は、140K付近で電気抵抗が急激に低下した。VSMによる磁化測定ではこのような異常は認められず、現在追跡調査を行っている。以上示したように今年度は、単相で結晶性のよいTiS_2、Ti_<1-x>M_XS_2、NbS_2、およびそれら分子結晶についての電気的性質を中心に調べた。分子結晶の電導度異常についてさらに研究を行う必要がある。初年度は、遷移金属(Ti)とイオウ(S)との粉末に、M(Zr,V,Fe,Sn)粉末を乾式混合後、石英ガラス管に真空封入・熱処理し、Ti_1-_xM_xS_2を得た。粉末X線回折結果をP3-m1でリートベルト解析し、それぞれS値が1.3以下の良好な解析結果を得た。最適合成条件が得られたので、これら試料をCIP成形し、本年度購入した振動試料型磁力計を用いて、77K300Kの磁化率を測定した。いずれの試料も反磁性を示したことから、Mは低スピン状態で、しかもTi原子サイトを置換していることが示された。次に、Tiの代わりにNbを用い、NbS_2単相を合成した。S値はTiS_2ほどは小さくなく、NbS_2の場合には文献値よりもややc軸が長い結果となった。次に、ピロール、ピリジン、ピロリジン、ピペラジン、イミダゾールなどの複素環式化合物蒸気をTiS_2あるいはNbS_2結晶と接触させることにより、遷移金属硫化物・複素環式化合物分子結晶の創製を試みた。その結果、TiS_2ではFirst Order、NbS_2ではSecond OrderでMS_2層間に入った分子結晶が合成された。以上示したように今年度は、単相で結晶性のよいTiS_2、Ti_<1-x>M_xS_2、NbS_2、およびそれら分子結晶が合成された。遷移金属(Ti)とイオウ(S)との粉末に、M(Zr,V,Fe,Sn)粉末を乾式混合後、石英ガラス管に真空封入・熱処理し、Ti_<1-x>M_xS_2を得た。

次に、ピロール、ピリジン、ピロリジン、ピペラジン、イミダゾールなどの複素環式化合物蒸気をTiS_2あるいはNbS_2結晶と接触させることにより、遷移金属硫化物・複素環式化合物分子結晶の創製を行い、TiS_2ではFirst Order、NbS_2ではSecond OrderでMS_2層間に入った分子結晶が合成された。この分子結晶は、有機物挿入により層間距離が開いた構造で、これら分子結晶の電気伝導度測定を行ったところ、いずれも半導体的な性質を示した。バンド計算をおこなったところ、これら分子結晶は間接遷移型の半導体であるという結果になり、実験結果とほぼ一致した。以上示したように今年度は、単相で結晶性のよいTiS_2、Ti_<1-x>M_xS_2、NbS_2、およびそれら分子結晶についての電気的性質を中心に調べた。遷移金属(Ti)とイオウ(S)との粉末に、M(Zr,V,Fe,Sn)粉末を乾式混合後、石英ガラス管に真空封入・熱処理し、Ti_<1-x>M_xS_2を得た。昨年度得た最適合成条件を元に成形体を作製し、構造解析および磁化測定を行い、結晶構造を精密化し、これらの物質が反磁性体でかつ半金属的な物質であることを確認した。ある種のTiS_2-複素環式化合物(未投稿につき詳細の記載を省略)分子結晶は、140K付近で電気抵抗が急激に低下した。VSMによる磁化測定ではこのような異常は認められず、現在追跡調査を行っている。分子結晶の電導度異常についてさらに研究を行う必要がある。
ウシおよびマウス卵巣における支持細胞系譜の性的可塑性について

本年度は、ウシ・フリーマーチン性腺に関する形態学的な解析について、国際誌に投稿・受理された。本論文は、XXの性染色体を持つウシにおいて、セルトリ細胞、ライディッヒ細胞、筋様細胞という本来精巣においてのみ認められる細胞群が存在することをタンパクレベルで示した初めての論文である。また、マウスの性分化に関するレビューをまとめ、国際誌に投稿・受理された。マウス生殖腺の性分化期の性的未分化性・可塑性に関する研究成果については、筆頭著者として一流国際学術誌に投稿を試み、現在Reviseの作業を進めている。本論文は、マウス卵巣に、性分化期から生後にかけて継続的に性的未分化な細胞が存在することを示し、さらに、これら細胞がXX精巣化に寄与していることを示したものである。また、以前より、ウシ・フリーマーチンの発症機序の解明を目的として、マウス・フリーマーチンモデル(XX精巣化モデル)の作製を試みてきた。今年度は、新たに経時的にフリーマーチンモデルを採材し、マイクロアレイおよびリアルタイムPCRによって網羅的に遺伝学的解析を行った。この結果からは、フリーマーチシの発症原因となる液性因子の解明、また、発症過程で発現が上昇・低下する性分化関連因子の同定を行うことができた。本結果は、繁殖生物学会などで発表を行った。特にXX精巣化過程で発現低下が認められる因子に関しては、正常な卵巣を維持するために必須の遺伝子である可能性があるため、今後さらに解析を進める必要がある。昨年度、新たに(1)の目的に関して、新たな知見を得た。形態的に非常に雄性化が進んでいるフリーマーチン生殖腺に対し、免疫組織化学染色を行った結果、セルトリ細胞マーカーであるSOX9の発現のみではなく、ライディッヒ細胞マーカーである3β-HSD陽性細胞群が間質に認められることを見出した。これは、XX個体であるフリーマーチン生殖腺が、形態学レベル・遺伝子発現レベルの両者において、支持細胞系譜が完全に精巣化していることを強く示唆する驚くべき結果である。さらに、精巣を取り巻く筋様細胞マーカーSMAと、セルトリ細胞・ライディッヒ細胞マーカーSF1で染色を行ったところ、SMA陽性・SF1陽性の形態的に細長い細胞群が、精巣様構造周囲に存在することを見出した。これは、卵巣における夾膜細胞と、精巣における筋様細胞の中間型と考えられ、夾膜細胞と筋様細胞が相同な細胞由来であることを初めて示唆する非常に興味深い結果となった。以上から、ウシのフリーマーチン疾患は、支持細胞系譜において完全に雄性化するが、一部『性のゆらぎ』を残した状態であることが明らかとなった。さらに、(2)に関しては、マウスXX胎子性腺をヌードマウス雄腎臓被膜下へ移植することにより、支持細胞の一部において、SOX9/SF1/GDNF(セルトリ細胞マーカー)陽性の精細管様構造を形成することに成功した。これは、未だ手技の確立や、SOX9陽性細胞出現率等に関して検討課題も多いものの、先のフリーマーチンモデルをマウスで簡便に再現し、示すことができたと言える23年度までに行った研究結果をまとめ、1.ウシ・フリーマーチン症の形態学的および免疫組織化学による解析結果、2.マウス生殖腺の性分化期の性的未分化性・可塑性に関する研究成果を、筆頭著者として国際学術誌に投稿を試み、現在Reviseの作業を進めている。さらに、ウシ・フリーマーチンの発症機序の解明を目的として、フリーマーチン症マウスモデルを用い、発症前・後について、マイクロアレイを行った。さらに、現在報告されている雄性化・雌性化遺伝子群との比較検討により候補因子の絞込みを行った。この結果については現在、リアルタイムPCR、RT-PCRや、in situ hybridizationによって解析中ではあるが、新規マウス卵巣因子、フリーマーチン原因因子と考えられる因子群を得ることができた。これは現在まで長年同定されていなかった、胎子期の性分化における新たな卵巣化因子および、「性のゆらぎ」の原因となる因子(XXでありながら卵巣から精巣へ性転換する原因となる因子)を得られる可能性があり、今後の性分化・繁殖学の研究の進展において非常に重要な実験である。また、昨年度目標としていた生殖細胞欠損状態でのXX精巣化過程の観察・コントロール群との比較についても、形態学的、および免疫組織化学による解析が進められており、生殖細胞の性分化に対する影響を検討している。生殖細胞の性分化への影響については、哺乳類以外の脊椎動物では数多く報告されているものの、哺乳類では未だ明らかとなっておらず、哺乳類の性分化および生物の性分化を知る上で重要な実験であると考えている。

今年度は、新たに経時的にフリーマーチンモデルを採材し、マイクロアレイおよびリアルタイムPCRによって網羅的に遺伝学的解析を行った。この結果からは、フリーマーチシの発症原因となる液性因子の解明、また、発症過程で発現が上昇・低下する性分化関連因子の同定を行うことができた。本結果は、繁殖生物学会などで発表を行った。特にXX精巣化過程で発現低下が認められる因子に関しては、正常な卵巣を維持するために必須の遺伝子である可能性があるため、今後さらに解析を進める必要がある。目標としていた課題の結果は未だ解析中ではあるが、実験を進め、その研究成果は、繁殖生物学会や、分子生物学会などで発表を行った。よって、全体として期待通り研究が進展したと評価出来る。今後は、1.マイクロアレイの結果の解析、2.アレイ結果からの新規因子の絞込み、3.新規因子の遺伝子改変マウスを用いた未分化細胞の変化の観察を行う予定である。
マルチモーダルテクストを「よむ」学習活動の創発に向けた理論的基盤の構築

本研究では,これまで教科書に印刷された文字教材が学習における中心を成してきた国語科にあって,映像や図表等もテクストとして位置づけ,メディアの技術革新に対応させた「よむ」学習活動を支える理論的基板を解明することを目ざした。そのアプローチとして,戦前から現代にいたる広範な期間における「よむこと」の実態を解明するとともに,周辺関連分野の先行研究を渉猟し,理論的な枠組みを解明した。また,試行的な教育実践等を対象とした参与観察研究として,群馬大学の附属学校において実証実験を行い,国語科としての新しい学習指導のあり方の概容を解明した。平成24年度における研究実績としては,以下の2点が挙げられる。第1に,成果として公刊されたものとして,学会誌掲載課題研究論文1編(「国語科教育学における『メディア』概念の射程」『国語科教育』(全国大学国語教育学会)第72集,平成24年9月,8589頁,ならびに共著書中の分担執筆1編(「教科内容を保障する授業づくり」,東京学芸大学国語教育学会他編著『小学校子どもが生きる国語科学習用語』東洋館出版社,平成25年2月,98頁)が挙げられる。ここでは,マルチモーダルテクストを含めたメディア一般を対象としたフレームワークや,教科の学習としてのポイントを示すことができた。研究課題として掲げた理論的基盤のうち,文献的な研究の成果としては十分な成果が蓄積されつつある。第2に,現時点で進行中の研究として,群馬大学附属小・中学校との共同研究がある。こちらも相応の成果を得ることができている。その一端は,早くも「毎日新聞」平成25年2月9日・23日掲載の記事において広く紹介された。関係者からの反響もあり,社会貢献につながる成果が期待されているところである。ただし,これらの成果を学会において発表したり,論文として公刊するには,もうしばらく検討の時間も要することから,発表・公刊の時期としては次年度(平成25年度)を予定している。このように,研究課題として掲げた理論的基盤のうち,実践知に踏み込んだ研究においても,確実な成果につながるデータが明らかになってきた。平成25年度における研究実績としては,発表論文2編(大島崇・後閑芳孝・髙橋典平・中村敦雄・濵田秀行・藤本裕一・山本宏樹「小・中学校国語科におけるマルチモーダルな言語活動の可能性ー情報端末活用による実践開発の試み」『群馬大学教育実践研究』第31号,平成26年3月,110頁,ならびに,小林正行・中村敦雄・伊藤宏康・片岡美穂・木本悠太・小林香名江・武井彩香・八木美穂「〔伝統的な言語文化〕の学習指導改善ー落語教材の検討を通してー」同誌,235248頁),ならびに共著書中の分担執筆1編(「学習者が能動的・主体的に参加する説明文の授業づくり」大熊徹他編著『国語科授業を活かす理論×実践』東洋館出版社,平成26年3月,4449頁)の公刊が挙げられる。発表論文のうち前者は,「毎日新聞」平成25年2月9日・23日掲載の記事で紹介された学習指導実践について,その後の理論的な考察を加えて完成させた重要な成果であり,その一端は,平成26年2月18日に開催された「デジタル教科書教材協議会(DiTT)」の研究会においても発表を行い,研究成果を社会に還元することを果たした。3年間にわたる研究の成果として,理論から実践,言語から映像までを包括的に布置した枠組みのもとで探求を行った。その結果,当初は仮説的に想定していた「よむこと」の可能性が,実践的な検証を経て,明確化されたことは,今後の小・中学校における国語科の学習指導開発にとって,意義深い貢献であると評価できよう。平成23年度(第1年目)における研究実績としては,研究論文3編の公刊が挙げられる。くわしくは,次のとおりである。(1)自身による研究の再検討として,過去に行った自身の研究について,争点の把握,研究方法論の妥当性等リフレクションを行った。必要に応じて他の研究者による批判的検討を要請した。(2)国内外の文献収集・検討として,「マルチモーダルテクスト」に直接関係した海外の先端的な研究成果や,「読むこと」についての伝統的な研究成果を広く渉猟し,関連する諸争点を把握した。(3)学会参加により,論文化されていない先端的争点の把握・情報交換・議論を行う。母語教育に関連する学会だけでなく,教育工学等の隣接学会にも参加し,ネットワークを確保した。「研究実績の概要」でも述べたとおり,前年度は計画に比べて遅れ気味であった研究全体としての進捗状況は,本年度にあって,計画どおりののぞましい方向へと改善されてきたといえよう。平成23年度(第1年目)における研究の達成度は,次のとおりである。

研究業績で記した(1)(3)について,達成をみた。一方,次の点については,機材やソフトウェアの未整備,研究環境整備の遅れ,さらには,研究手法の見直しのために,初年度の着手を控えた。そうした不足については2年目以降に回復を期する。(4)実践参与観察としては,従来,研究上で交流のあるイギリスやオーストラリアはもちろん,「マルチモーダルテクスト」の試行で注目されている国や地域にも範囲を広げて現状の把握やデータの収集に取り組む。(5)マルチモーダルテクストを「よむ」実態研究については,プロトコル等を取るなどして,実際に学習者がいかにして「よむ」のか,研究上の分析・検討の枠組みを仮説的に構築する。当初の予定どおりの進捗を予定している。今後の研究の推進方策については,次のとおりである。上記の(4)に関しては,文献的な方法による現状の把握やデータの収集が可能であることが判明したので,方法論上の選択肢を広げて取り組む。上記の(5)に関しては,附属学校園との連携を生かしながら,研究に従事し,研究上の分析・検討の枠組みを仮説的に構築する。初年度に遅れがちであったこの2点については,平成24年度(第2年目)の優先的な課題として位置づけ,研究を推進する。当初の計画にのっとった使用を予定している。研究の推進方策のうち,実践参与観察に関して当初申請時の予定と変わったために,結果的に研究費の未使用が生じ,繰越を行った。そこで,当該繰越額は,実践参与観察やその成果を学会等で発表するための旅費として使用する。加えて,以下のような使用計画にもとづいた研究を推進する。(6)国内外の文献収集・検討においては,前年度に引き続き,諸争点の把握につとめるとともに,その妥当性についての理論的検討を行う。(7)学会参加により,先端的争点の把握の把握につとめるとともに,学会における研究発表や,シンポジウムやラウンドテーブル等の機会をとらえて議論に参加することで,成果の妥当性について検証する機会を設ける。(8)実践参与観察では,データの収集を進めることで,よりデータの確実性を高めるとともに,その内容についての批判的な検討を行い,観察において起こりやすいバイアスなどの低減を行う。(9)マルチモーダルテクストを「よむ」実態研究については,前年度に策定した枠組みを生かして,被験者を増やして,発達論的な視点も加えつつ,実態の解明に当たる。