hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ニューロン死における成長抑制因子の役割

アルツハイマー病などの変性疾患で、ニューロン死と共に成長抑制因子(GIF)が消失する。GIFには、神経栄養因子活性を抑制する作用だけでなく、フリーラジカル消去能もあることがわかっている。そこで、GIFの消失が、フリーラジカルを介して、ニューロン死を加速するかどうかを明かにするため、以下の研究計画を実施した。1.GIFが酸素ストレスからニューロンを保護するかどうかを調べた。培地に添加したGIFは50%酸素負荷によるニューロン死から培養ラット大脳皮質ニューロンを保護した。2.GIFはprotease類に抵抗性があるため、培養アストロサイト(ラット)にGIFのantisense oligonucleotideを導入してGIF mRNA発現を抑えても、培養アストロサイト内に存在するGIFがすぐに消失する保証はない。そこで、GIFの消失を証明するために、sandwich ELISAを開発した。ヒトGIFを抗原に、ラットGIFも認識する単クローン抗体を作製し、第一抗体とした。次に、ラットGIFのN末端の8-12残基に相当する合成ペプチド3種類、C末端の9-11残基に相当する合成ペプチド2種類に対する抗体を作製したが、C末端11残基ペプチドに対する抗体のみがsandwich ELISAの第二抗体として使用できた。この二種類のGIF抗体を用いて、sandwich ELISAを確立した。3.現在、培養アストロサイトにGIFのantisense oligonucleotideを導入し、GIF mRNA発現を抑えて、GIF蛋白を消失させる条件を検討しており、今後、GIF発現を抑えたアストロサイトと胎生大脳皮質ニューロンとをcocultureし、50%酸素負荷によるニューロン死が加速されるかどうか調べる予定である。
頸動脈小体glomus細胞における低酸素性化学伝達の遺伝的個体差についての検討

頚動脈小体(CB)の形態および機能的個体差が低酸素性呼吸応答(HVR)の遺伝的個体差に強く関与していることをこれまでに明らかにし,本研究では近交系マウスであるDBA/2J系マウス(DBA/2J : HVRが良く,発達が良く,形態も正常なCBを有する)とA/J系マウス(A/J : HVRは悪く,CBは小さく,正常な形態が保たれていない)のCBの形態および機能的個体差について検討した。【機能的個体差】DBA2/JのCBでは,正常なglomus細胞(GC)が多く観察され,そのGCの電圧依存性カリウムチャネル(Kv channel)の低酸素への感受性が強いことが示唆された。また,DBA/2JのGCのKv channelでは,アレチルコリンによって調節されており,電圧依存性カルシウムイオン活性型カリウムチャネル(BK channel)が重要な役割をしていた。一方,A/Jでは正常のGCは極わずかしか観察されず,Kv channelの低酸素への感受性も低いことが示唆された。DBA/2JとA/JにおけるGCのBK channelの分子生物学的個体差を比較したところ,BK channelのsubunitの発現に差(DBA/2JではA/Jと比較してBKαとBKβ2の発現量が多く,BKβ2に対するBKβ4の相対的な発現量が少ない)が観察され,このことがGCの低酸素への感受性の個体差に寄与していることが疑われた。近交系マウスであるDBA/2J系マウス(DBA/2J)とA/J系マウス(A/J)の頚動脈小体(CB)およびそれを形成するglomus細胞には明白な形態学的個体差が存在し,その個体差が低酸素性呼吸応答の個体差の要因となっていることをこれまでに明らかにし,その差には遺伝学的要因が存在することを証明してきた。本年度の研究において,CBの遺伝学的個体差の存在を確固たるものにするために,DBA/2JとA/Jを交配作成したF1マウス(F1)における形態学的特徴を調べ,その親であるDBA/2JとA/Jとその特徴について比較した。その結果,以下のことが明らかになった。1)F1のCBの大きさはDBA/2JとA/Jの中間であった,2)F1のCBの形は他の組織との境界が不明瞭で,A/Jに類似していた,3)F1のCBにおけるglomus細胞の形態は,DBA/2Jのそれに類似していた,4)F1のCBでは大きくて丸い核を持つ特徴的なglomus細胞が多数観察された,6)特徴的なglomus細胞の存在率を表すTyrosine Hydroxylase陽性率はDBA/2Jとほぼ同様であった,5)F1のCBにおけるドパミン陽性神経細胞の生存に重要な役割をしているglialcell-derived neurotrophic factor (GDNF)のmRNAの発現率は,DBA/2JとA/Jの中間であった,6)多数のglmous細胞が集合・密着しCBを形成するのに必要なsheath細胞の発達に重要な役割をしているglial fibrillaryacidic proteinのmRNAは,DBA/2J,A/J,F1全てのマウスにおいて強く発現し,差は認められなかった。以上の結果から,DBA/2JとA/JのCBの形態学的特徴の差における遺伝的要因の存在を強く示唆し,複数の遺伝的要素が複雑に関連しCBの形態,CBの大きさ,glomus細胞の形態,glomus細胞の数を決定していることが判った。そして,遺伝的個体差の存在にはGDNFが強く関わっていることが推測された。この研究結果は,頚動脈小体の遺伝的個体差の存在を確固として証明するもので,International Society of Arterial Chemoreceptors 2005 meetingにおいて高い評価を受けて,Advances in Experimental Medicine and Biolology誌(2006年)に掲載された。
景観遺伝子学から見た緑地植物導入が自然環境に及ぼす影響と緑地植物の植栽のあり方

大きく分けて2つの研究を行った。まず、野外実験として、東京都西東京市にある東京大学附属田無試験地に自然生育している個体から、異なるハプロタイプ(B1、Ja)を持つアオキ個体を選択し、相互授粉実験を行い、交雑可能性を検証した。その結果、B1、Ja両ハプロタイプともに相互に授粉実験は成功し、異なるハプロタイプ間での結実が確認された。このことから、造園用材料として、他の地域由来の個体を導入し、それが野外へと逸出・定着し、繁殖する際に、元から地域に自生するアオキ個体と交雑している可能性が高いと考えられ、この研究成果を学術論文として発表した。2つ目として、昨年度までに収集していた関東地方対象区域の衛星画像データ、採取したアオキ個体のハプロタイプデータを用い、都市地域・農村地域における自生型(Ja)・非自生型(B1)ハプロタイプ個体の生育割合と自然環境要因、人為的要因との関連性を解明した。具体的には、目的変数を各樹林パッチにおけるB1タイプの出現割合、説明変数をランドスケープレベル、樹林パッチレベルにおいて抽出しか項目(例えば、地形、樹林パッチの面積・形状等)として、一般化線形混合モデルを構築し、stepAIC関数によるモデル選択を行った。その結果、周辺森林面積率、地形、過去に当該樹林パッチの林相に変化があったか、という項目について非自生型B1タイプ個体の出現割合が顕著に影響を受けていることが明らかになった。このことにより、植栽からある程度年月が経過した導入樹木の逸出・定着状況が野外の広範囲地域で提示された。平成19年度は、主に野外調査と実験解析を集中のに行った。4月下旬から6月にわたり、関東地方東部計800km^2の地域を対象として、200箇所よりアオキを1000個体採集し、各個体の遺伝的起源を明らかにした。結果、約30%は遺伝的起源からみて明らかに非自生個体であり、人為的導入に端を肇する植物の自然環境5の逸出が広範囲に及んていた。また、自生個体と同じ遺伝的タイプを示す個体の中にも植栽された個体が多数含まれ、商業的流通を経て植栽された可能性が高かった。詳細なスケールにおいては、つくば市周辺地域に注目し、解析を進めた。その結果、非自生個体の出現頻度には人目密度と相関があり、都市部に植栽されている個体群億自生・非自生タイプ共に周辺農村地域や森林に生育する集団に比ベ遺伝的多様性が低いことがわかった。つまり、人為的活動圏内に植栽され登個体は、自然自生集団と同、じタイプに分類される個体であっても、その遺伝的多様性は自然集団とは大きく異なる可能性があり、造園・園芸用植物材料の自然集団への「目に見えない」影響を示唆す蚤重要な結果を得た。現在、その一部結果を学術論文として執筆中である。また、近畿・東海・関東地方におけるアオキの自然集団の遺伝的多様性の解明に向けた調査を行った。関東地方において確認されたアオキの非自生タイプの自然生育地域が近畿・東海地方であり、この地域における自然集団の遺伝的組成を把握することにより、関東地方で同所的に生育する自生・非自生個体の交雑の様子をより相対的に解析できるようになると考えた。これら調査地域では遺伝的に異なるタイプのものが同所的に生育している場所は皆無であり、また関東地方で多く見られた斑入り個体も確認されなかったことから、改めて関東地方での人為的植栽由来個体と自生個体との遺伝的交流の様子を明らかにすることの重要性が認められた。現在は結果解析の段階にある。
接触ロール系に発生するパターン形成現象の防止対策に関する研究

産業界では,接触回転系の稼働にともなって徐々に規則的なパターンがロールやロールに接触している系に形成されて,それがまた激しい振動を誘発したり,製品に転写されて欠陥製品となる現象が多く見受けられる.たとえば,鉄道車両とレール,繊維機械のワインダ系の糸玉を介したドライブロールとボビンホルダ,一対の抄紙機ゴム巻きロール,自動車タイヤと道路,製鉄機械,工作機械などの系には特定のパターンが形成される.申請者らはこれらの現象をパターン形成現象と呼び,その発生メカニズムの解明と対策の研究を行ってきた.特に,製鉄機械においては,テンションレベラのチャタマーク,熱間・冷間圧延時のチャタリングなどが製品の精度要求の高まりとともに製品管理上重大な問題となっている.また,一方では,抄紙機のプレスパートにおけるスムーザロールやゲートロールサイズプレスのロール多角形化現象も,ライン速度の向上を阻害する最も主要な原因である.これらの現象のほとんどは,ロールとロールが接触回転する接触ロール系に発生するパターン形成現象である.このような接触回転系のパターン形成現象の研究は,世界的な研究の見地から見ても,主に工作機械のびびり現象と鉄道レールのコルゲーションが国内で多く研究されているのみで,ロールとロールが接触回転する接触ロール系のパターン形成現象に関する研究は,現在発展途上段階にある.そこで研究は,このような接触ロール系に発生するパターン形成現象の防止対策として,接触するロールの外径比変更の影響,ロール回転速度の変動によるパターン形成現象遅延対策について,理論および実験の両面から検討を行った.その結果,ロールの外径変更には最適値が存在すること,ロール回転数変動はパターン形成現象の遅延対策となりうることがわかった.産業界では,接触回転系の稼働にともなって徐々に規則的なパターンがロールやロールに接触している系に形成されて,それがまた激しい振動を誘発したり,製品に転写されて欠陥製品となる現象が多く見受けられる.たとえば,鉄道車両とレール,繊維機械のワインダ系の糸玉を介したドライブロールとボビンホルダ,一対の抄紙機ゴム巻きロール,自動車タイヤと道路,製鉄機械,工作機械などの系には特定のパターンが形成される.申請者らはこれらの現象をパターン形成現象と呼び,その発生メカニズムの解明と対策の研究を行ってきた.特に,製鉄機械においては,テンションレベラのチャタマーク,熱間・冷間圧延時のチャタリングなどが製品の精度要求の高まりとともに製品管理上重大な問題となっている.また,一方では,抄紙機のプレスパートにおけるスムーザロールやゲートロールサイズプレスのロール多角形化現象も,ライン速度の向上を阻害する最も主要な原因である.これらの現象のほとんどは,ロールとロールが接触回転する接触ロール系に発生するパターン形成現象である.このような接触回転系のパターン形成現象の研究は,世界的な研究の見地から見ても,主に工作機械のびびり現象と鉄道レールのコルゲーションが国内で多く研究されているのみで,ロールとロールが接触回転する接触ロール系のパターン形成現象に関する研究は,現在発展途上段階にある.そこで研究は,このような接触ロール系に発生するパターン形成現象の防止対策として,接触するロールの外径比変更の影響,ロール回転速度の変動によるパターン形成現象遅延対策について,理論および実験の両面から検討を行った.その結果,ロールの外径変更には最適値が存在すること,ロール回転数変動はパターン形成現象の遅延対策となりうることがわかった.製鉄機械や抄紙機に対するパターン形成現象の防止対策の一環として,主に以下のような数値計算および実験を行うことにより,防止および遅延対策の効果を検証した.理論的検証として,製鉄機械のホットレベラのワークロールに発生するパターン形成現象に対し,ロール回転数を変動させることによるパターン形成現象の成長を遅延させる回転数変動パターンの検討を行ってきた.その結果,2つの回転数間で回転数変動を行う場合,各回転数における運転時間の最適値が存在すること,回転数を順次高くしていくと大きな遅延効果があることなどが分かった.上下ロールの直径比の影響に関しては現在検討中である.また,実験的検証として,上下2軸に固定された一対の金属ロールが接触回転する実験装置を製作した.両軸はそれぞれACサーボモータにより独立に一定速度で回転される.実験で発生するパターン形成現象を特定するため,上軸にS45CまたはSUS304の軟質材,下軸にSCM435(浸炭焼き入れ)の硬質材を配置し,軟質材側にパターンを発生させた.その結果,上軸の曲げ1次モードの固有振動数でパターンが成長することが確認できた.異なるロール回転数による実験により,パターン形成現象が,(パターン角形数×ロール回転数=系の固有振動数)なる関係を有していることが判明した.この結果は,これまでの理論解析結果と定性的に一致している.また,パターン形成現象の遅延対策の一環として,ロール回転数を順次変更することにより不安定化を抑制させる実験も行った.その結果,一定回転数で実験を行った場合と比較して,パターン形成現象の遅延効果があることが実験的に確認された.これに関しては,定量的な評価を行う必要があるため継続的な実験が必要である.産業界では,接触回転系の稼働にともなって徐々に規則的なパターンがロールやロールに接触している系に形成されて,それがまた激しい振動を誘発したり,製品に転写されて欠陥製品となる現象が多く見受けられる.たとえば,鉄道車両とレール,繊維機械のワインダ系の糸玉を介したドライブロールとボピンホルダ,一対の抄紙機ゴム巻きロール,自動車タイヤと道路,製鉄機械,工作機械などの系には特定のパターンが形成される.申請者らはこれらの現象をパターン形成現象と呼び,その発生メカニズムの解明と対策の研究を行ってきた.

特に,製鉄機械においては,テンションレベラのチャタマーク,熱間・冷間圧延時のチャタリングなどが製品の精度要求の高まりとともに製品管理上重大な問題となっている.また,一方では,抄紙機のプレスパートにおけるスムーザロールやゲートロールサイズプレスのロール多角形化現象も,ライン速度の向上を阻害する最も主要な原因である.これらの現象のほとんどは,ロールとロールが接触回転する接触ロール系に発生するパターン形成現象である.このような接触回転系のパターン形成現象の研究は,世界的な研究の見地から見ても,主に工作機械のびびり現象と鉄道レールのコルゲーションが国内で多く研究されているのみで,ロールとロールが接触回転する接触ロール系のパターン形成現象に関する研究は,現在発展途上段階にある.そこで研究は,このような接触ロール系に発生するパターン形成現象の防止対策として,接触するロールの外径比変更の影響,ロール回転速度の変動によるパターン形成現象遅延対策について,理論および実験の両面から検討を行った.その結果,ロールの外径変更には最適値が存在すること,ロール回転数変動はパターン形成現象の遅延対策となりうることがわかった。
障害者および支援者による災害時の排泄問題対策に関する研究

本研究は、災害時の排泄問題に対する障害者自身による対策を促進させる知見を得ることを目的とした。頸髄損傷者へのインタビュー調査により、災害時の排泄問題に対して抱える不安とそれをやわらげる対策(排泄介助者の安定供給、安心して排泄できる環境の確保、水や排泄用品の十分な備え)を特定し、これらの対策を後押しする主題(旅行経験、失敗経験、ピアからの情報)を抽出した。頸髄損傷者への質問票調査では、災害時要援護者名簿への登録と同じ障害のある者から災害体験を聞いた経験との関連を見出した。研究結果から、同じ障害のある者(ピア)からの情報提供が、自助による災害時排泄問題対策を促進する可能性が示唆された。災害時における障害者は、情報支障、危険回避行動支障、移動行動支障、生活行動支障、適応支障、経済支障等の問題に直面することが知られている。これらの問題に対しては、まずは障害者自身による自助を促すことが重要である。公的な支援が期待できない発災後数日間は、障害の有無に関わらず、自分の生活は自分で守らなければならない。しかし、災害時における障害者の自助を促そうとする取り組みは、国際的にもまだ始まったばかりである。特に、災害時における障害者の生活や尊厳に大きな影響を及ぼす排泄を考慮した対策は具体化されていない。そこで本研究は、災害時における障害者の排泄問題について、障害当事者及び支援者による対策を促進させることを目的とする。研究期間内に、文献レビュー、インタビュー調査、質問票調査、マニュアル等の資料作成を実施し、以下4点を明らかにする。1.災害時排泄問題に対し障害者自身が準備・実施すべき事項、2.障害者の災害時排泄問題対策に影響する心理社会的要因、3.支援者が実施すべき具体的支援方法、4.災害時排泄問題対策マニュアルの効果。当該年度には、文献レビュー及びインタビュー調査を実施し、災害時排泄問題に対し障害者自身が準備・実施すべき事項について検討を行った。本研究の結果は、障害者が自身で災害時排泄問題への対策を進めることに役立つ。また、支援者が具体的支援方法を考案する際の有用な資料となることも期待できる。本研究は、これまでの災害時に繰り返されてきた障害者の排泄問題に対し、障害者自身と支援者による適切な対策を促進する社会的意義の高いものである。当該年度には、インタビュー調査の成果発表と質問票調査を実施し、災害時排泄問題に対し障害者自身が準備・実施すべき事項、障害者の災害時排泄問題対策に影響する心理社会的要因について検討を行った。初年度に実施した文献レビューや専門家へのインタビューの結果、対象となる障害を限定し、障害者自身による災害時排泄問題対策に影響を及ぼす心理社会的要因を質的研究手法により抽出する必要があるとの結論に達した。対象とする障害と調査協力組織の選定、質的研究の実施と分析に時間がかかり、質問票調査の実施が遅れた。しかし、災害時における障害者の自助を促そうとする取組みは、国際的にもまだ始まったばかりである。そこで本研究は、災害時に生じる障害者の排泄問題とその対策について、定性的及び定量的方法を用いて多角的に分析し、障害者自身と支援者による適切な対策を促進させるための知見を得ることを目的とした。最終年度は、頸髄損傷者による災害時排泄問題対策への影響要因に係る定量的分析を実施した。インターネット調査により得られた頸髄損傷当事者組織メンバー

70名のデータを統計解析し、避難行動要支援者名簿への登録と同じ障害(頸髄損傷)のある者から災害体験を聞いたことのある経験との関連を見出した。この結果は、前年度に実施した質的研究により生成された「同じ障害のある者からの情報提供が自助による災害対策を促進する」という仮説を支持するものであった。本研究の結果は、障害者が自身で災害時排泄問題への対策を進めることに直接的に役立つものであり、支援者が具体的支援方法を考案する際の有用な資料となることも期待できる。本研究は、これまでの災害時に繰り返されてきた障害者の排泄問題に対し、障害者自身と支援者による適切な対策を促進する社会的意義の高いものである。本研究は、災害時の排泄問題に対する障害者自身による対策を促進させる知見を得ることを目的とした。頸髄損傷者へのインタビュー調査により、災害時の排泄問題に対して抱える不安とそれをやわらげる対策(排泄介助者の安定供給、安心して排泄できる環境の確保、水や排泄用品の十分な備え)を特定し、これらの対策を後押しする主題(旅行経験、失敗経験、ピアからの情報)を抽出した。頸髄損傷者への質問票調査では、災害時要援護者名簿への登録と同じ障害のある者から災害体験を聞いた経験との関連を見出した。研究結果から、同じ障害のある者(ピア)からの情報提供が、自助による災害時排泄問題対策を促進する可能性が示唆された。文献レビューや専門家へのインタビューの結果、対象となる障害を限定し、障害者自身による災害時排泄問題対策に影響を及ぼす心理社会的要因を質的研究手法により抽出する必要があるとの結論に達した。対象とする障害と調査協力組織の選定、質的研究の準備と実施に時間がかかり、当初予定していた質問票調査を開始できなかった。頸髄損傷の当事者組織メンバーを対象とした質問票調査の分析を実施する。どのような心理社会的特性のあるものが災害時排泄問題対策を実施しているのか、あるいは実施していないのかを、多変量解析により検証する。文献レビュー、専門家へのインタビュー、質的研究、質問票調査の結果をもとに、頸髄損傷者と支援者のための災害時排泄問題対策マニュアルを作成する。作成したマニュアルを調査協力組織等のホームページ上で公開し、その効果について検証する。地域保健頸髄損傷の当事者組織メンバーを対象とした質問票調査を実施する。研究の進捗が遅れていることから、研究成果発表費用が未使用となった。研究の進捗がやや遅れていることから、研究成果発表費用が未使用となった。次年度は主に、質問票調査の成果発表、災害時排泄問題対策マニュアルの作成に研究費を使用する予定である。次年度は主に、質的研究の成果発表、質問票調査の解析と成果発表、さらに災害時排泄問題対策マニュアルの作成に研究費を使用する予定である。
細胞膜とその機能発現

細胞膜を構築する成分や因子の構造を調べ、その生合成課程でのプロセシング機構を明らかにし、さらにそれに伴って発現する膜機能を研究することが、本研究計画の目的である。(1)細胞膜構造の研究:田中は神経細胞のシナプスにおける膜燐酸化、中尾は赤血球膜の形状維持を細胞骨格の燐酸化の面から研究した。林はシビレエイのアセチルコリン受容体の糖鎖の構造を世界に先駆けて解明した。また、シビレエイ電気器官の中に、α-ブンガロトキシンやカルバミルコリンと結合するが、アセチルコリン受容体とは区別されるという興味ある蛋白を見出している。(2)細胞膜機能の研究:井村は膵ランゲルハンス島の刺激応答性のイノシトールポリ燐酸の代謝、山本はクローン化骨芽細胞でEGFに応答するプロスタグランジン【E_2】の生合成で、シクロオキシゲナーゼが誘動されるらしいことを明らかにした。室田はリンパ球におけるIL-2産生に、リポキシゲナーゼ産物の関与することを見出している。成宮は抗腫瘍性プロスタグランジン【J_2】の細胞内、特に核への取込みを追跡した。(3)膜酵素の研究:水上は白血球の活性酸素【(O-2^-)】生成にかゝわるNADPH酸化酵素を、膜から単離精製している。松田はγ-グルタミルトランスペプチターゼ(γ-GTP)をラット腎刷子縁から精製し、その不活性前駆体の限定分解部位のアミノ酸配列を決定し、その合成ペプチドを抗原として得た抗体を使うアフィニティクロマトで、プロセシングプロテアーゼを単離精製することに成功した。その生理的役割の研究が進められている。
汎用無線モジュールとフルカラーLEDを利用した目印誘導システムの開発研究

1.研究目的近年,我が国では地震・台風・豪雨・火山噴火などの自然災害が頻発し,大きな被害を日本全国にもたらしている.東日本大震災に代表される大災害時には,避難する過程で日常生活に必要な物を持てない,または紛失しているために避難先での生活は困難を極める.通常,毛布や衣類などの備蓄品は比較的素早く配布されるが,「メガネ」「コンタクトレンズ」などのような個人専用となっているものは代替がきかない.本研究では夜間の避難所等において「各個人専用の光る目印」を簡易的に設け,視覚不良者をはじめ高齢者や子供達でも遠くから簡単に認識出来るシステムの開発を進めた.2.研究成果本システムは「2.4GHz無線送信機」,「2.4GHz無線受信機」と「マイコン制御系」から構成し,フルカラーLEDの色・点滅間隔など,自由度の高い制御系を構築した.今回,これらの受信機を試験的に自転車に装着し,小型無線送信機から信号を送ることで雪が積もった暗闇の中でも特定の受信機だけが点灯し,容易に自分の自転車を発見可能であることを確認した.避難所などのほか,自車両の位置を特定することが難しいような場面でも「簡易的な目印」として応用展開の可能性があり,汎用性の面でも効果的であるとの実証を行なった.さらに,混乱した現場でも簡単に多くの送受信機に対応できるペアリング方式についても研究を進めた.各送信機及び受信機内には磁石により動作するラインスイッチ(以下LS)と永久磁石とを対になるように配置し,それぞれを接近させることで相手側の磁石によりLSが導通状態(スイッチON)になってペアリングの準備が整う,この状態で各送信機及び受信機に内蔵してある赤外線LEDとフォトダイオードとの間で光通信が始まり登録が完了する.これらの要素技術を応用し,別途開発した防災機器において特許出願を完了したとともに,論文投稿,学会発表を行なった.1.研究目的近年,我が国では地震・台風・豪雨・火山噴火などの自然災害が頻発し,大きな被害を日本全国にもたらしている.東日本大震災に代表される大災害時には,避難する過程で日常生活に必要な物を持てない,または紛失しているために避難先での生活は困難を極める.通常,毛布や衣類などの備蓄品は比較的素早く配布されるが,「メガネ」「コンタクトレンズ」などのような個人専用となっているものは代替がきかない.本研究では夜間の避難所等において「各個人専用の光る目印」を簡易的に設け,視覚不良者をはじめ高齢者や子供達でも遠くから簡単に認識出来るシステムの開発を進めた.2.研究成果本システムは「2.4GHz無線送信機」,「2.4GHz無線受信機」と「マイコン制御系」から構成し,フルカラーLEDの色・点滅間隔など,自由度の高い制御系を構築した.今回,これらの受信機を試験的に自転車に装着し,小型無線送信機から信号を送ることで雪が積もった暗闇の中でも特定の受信機だけが点灯し,容易に自分の自転車を発見可能であることを確認した.避難所などのほか,自車両の位置を特定することが難しいような場面でも「簡易的な目印」として応用展開の可能性があり,汎用性の面でも効果的であるとの実証を行なった.さらに,混乱した現場でも簡単に多くの送受信機に対応できるペアリング方式についても研究を進めた.各送信機及び受信機内には磁石により動作するラインスイッチ(以下LS)と永久磁石とを対になるように配置し,それぞれを接近させることで相手側の磁石によりLSが導通状態(スイッチON)になってペアリングの準備が整う,この状態で各送信機及び受信機に内蔵してある赤外線LEDとフォトダイオードとの間で光通信が始まり登録が完了する.これらの要素技術を応用し,別途開発した防災機器において特許出願を完了したとともに,論文投稿,学会発表を行なった.
海岸マツ林生態系の環境修復をめざした樹木共生菌の探索とその機能解析

これまでに外生菌根菌(以下、菌根菌)の培養実験を通して塩類耐性菌の選抜を行なってきた。しかし、一般に特定の環境下で有効とされる菌根菌を接種した場合でも野外ではその効果がみられない場合がある。それは接種した菌が、土着菌によって駆逐されてしまうためと考えられている。したがって、本年度は海岸地域に生息する菌根菌を明らかにするため、天然に更新したクロマツ実生苗に着目して、その根系に形成された外生菌根の形態的、分子生物学的類別を行なった。三重県河芸町の海岸クロマツ林(30×550m)内の12ヶ所から、当年生クロマツ実生(以下、当年生実生)を15個体と1年生以上のクロマツ実生(以下、1年生実生)を14個体それぞれ採取した。それらは顕微鏡観察とDNA解析に用いた。実生を地際で切断後、地上部は105°C24時間乾燥させた後に重量測定を行なった。地下部に形成された外生菌根は実体、光学顕微鏡を用いて観察し、菌鞘表面の菌糸配列組織、クランプの有無などにもとづき形態タイプに類別した。さらに各形態タイプはrDNAのITS領域を対象としたPCR-RFLP解析を行ないRFLPタイプに類別した。その結果、当年生、1年生実生からはそれぞれ11タイプ、15タイプに類別され、合計15タイプの形態タイプが識別された。そのうち、菌根の色や菌鞘表面構造からCenococcum geophilumが定着菌と同定され、その他に未同定担子菌類、チチタケ属菌の感染が推察された。類別した形態タイプは、ITS-RFLP解析によって合計13RFLPタイプに識別された。当年生と一年生実生の1個体の根系に形成された菌根のタイプ数は,それぞれ2.5±0.9,3.4±0.8であった。実生の齢に関わらずRFLPタイプ13かRFLPタイプ3の菌根数、実生への出現頻度が高かった。クロマツ実生地上部の乾燥重量は,全菌根数と強い正の相関関係が認められたが(r=0.865,p<0.001)、タイプ数との間には相関は認められなかった(r=0.167,p=0.385)。海岸マツ林生態系の環境修復をめざした樹木共生菌の探索とその機能解析を遂行するため、本年度は以下の主に2項目について調査・実験を行った。1.海岸クロマツ林における外生菌根菌相を明らかにするための一環として、それらが形成する子実体の発生調査を定期的に行った。また、本研究終了時に海岸部に生息する菌根菌相の特徴を見出す目的で、内陸部に生育するクロマツ林においても子実体の発生調査を行った。その結果、海岸部、内陸部においてそれぞれ合計6、18種の外生菌根性子実体の発生が認められた。いずれの調査地も外生菌根を形成する樹種はクロマツのみであったことから、発生したこれらの菌はクロマツと菌根共生しているものと考えられた。2.海岸付近の塩ストレスの高い地域に適したマツ実生苗を作出するための基礎データを得るため、異なる塩化ナトリウム濃度(0mM、20mM、50mM、100mM、200mM区)がクロマツおよび外生菌根菌4種6菌株(コツブタケ3菌株(三重県産2菌株、福島県産1菌株)、ショウロ、ヌメリイグチ、Cenococcum geophilumは各1菌株)の生育に与える影響を調査した。実生苗の地上部重、地下部重、T/R率は、いずれの処理区間でも有意な差は認められなかったが、50mM区の根端数は、0mM区のものに比べて有意に減少した。このことから、NaClがクロマツの生育に及ぼす影響はまず根端形成にあらわれるものと推察された。また、NaCl濃度の上昇に伴なってコツブタケやショウロの生育は増加頃向を示したが、ヌメリイグチやCenococcum geophilumは減少傾向を示した。このことから、前者のグループは海岸地域におけるクロマツに対する接種菌として有効であると考えられた。1.昨年度からの継続として外生菌根菌子実体の発生調査を海岸部、内陸部の2箇所において定期的に行った。その結果、海岸部、内陸部においてそれぞれ合計3、20種の外生菌根性子実体の発生が認められ、そのうち前者ではヒメコナカブリツルタケが、後者ではクサハツ、テングツルタケ、ホウキタケ属菌の一種、アセタケ属菌5種類は本年度の調査から新たにクロマツと菌根共生している種と考えられた。2.海岸付近の塩ストレスの高い地域に適したマツ実生苗を作出するための基礎データを得るため、異なる塩化ナトリウム濃度(0mM、20mM、50mM、200mM、500mM、1000mM区)がコツブタケ11菌株の菌糸伸長に与える影響を調査した。菌糸伸長量が最大となった処理区は11菌株とも25mMであったが,0mM区に比べて菌糸伸長量が抑制された濃度は菌株によって異なっていた。

また,200mM区と500mM区では菌株によっては菌糸が伸長しなかったことから,高濃度のNaClに対しては菌株間で耐性が異なることが明らかとなった。200mMと500mMで菌糸伸長がみられた菌株は,NaCl濃度が高い土壌でも,生育する可能性が示唆された。菌糸伸長試験の結果から,25mM区で菌糸伸長量が大きく,200mMと500mM区においても菌糸の伸長がみられた2菌株は,クロマツへの接種菌株として有望と考えられた。これまでに外生菌根菌(以下、菌根菌)の培養実験を通して塩類耐性菌の選抜を行なってきた。しかし、一般に特定の環境下で有効とされる菌根菌を接種した場合でも野外ではその効果がみられない場合がある。それは接種した菌が、土着菌によって駆逐されてしまうためと考えられている。したがって、本年度は海岸地域に生息する菌根菌を明らかにするため、天然に更新したクロマツ実生苗に着目して、その根系に形成された外生菌根の形態的、分子生物学的類別を行なった。三重県河芸町の海岸クロマツ林(30×550m)内の12ヶ所から、当年生クロマツ実生(以下、当年生実生)を15個体と1年生以上のクロマツ実生(以下、1年生実生)を14個体それぞれ採取した。それらは顕微鏡観察とDNA解析に用いた。実生を地際で切断後、地上部は105°C24時間乾燥させた後に重量測定を行なった。地下部に形成された外生菌根は実体、光学顕微鏡を用いて観察し、菌鞘表面の菌糸配列組織、クランプの有無などにもとづき形態タイプに類別した。さらに各形態タイプはrDNAのITS領域を対象としたPCR-RFLP解析を行ないRFLPタイプに類別した。その結果、当年生、1年生実生からはそれぞれ11タイプ、15タイプに類別され、合計15タイプの形態タイプが識別された。そのうち、菌根の色や菌鞘表面構造からCenococcum geophilumが定着菌と同定され、その他に未同定担子菌類、チチタケ属菌の感染が推察された。類別した形態タイプは、ITS-RFLP解析によって合計13RFLPタイプに識別された。当年生と一年生実生の1個体の根系に形成された菌根のタイプ数は,それぞれ2.5±0.9,3.4±0.8であった。実生の齢に関わらずRFLPタイプ13かRFLPタイプ3の菌根数、実生への出現頻度が高かった。クロマツ実生地上部の乾燥重量は,全菌根数と強い正の相関関係が認められたが(r=0.865,p<0.001)、タイプ数との間には相関は認められなかった(r=0.167,p=0.385)。
口臭に関連する口腔細菌叢の多様性解析

口臭に関係する口腔フローラを見いだす目的で、分子生物学的手法を用いて口腔内細菌叢の多様性解析を行い、得られた細菌叢パターンと口臭の主要な原因物質である揮発性硫黄化合物の濃度との関係を比較分析した。また、我が国の成人の半数以上が感染しておりさまざまな胃腸疾患を引き起こすHelicobacter pylori DNAの口腔内検出と口臭との関連について調べた。さらに、心理テストを利用して口臭患者の心身医学的症状を整理し、生活習慣では飲酒習慣と口臭レベルの正の相関をみいだした。口腔細菌叢の多様性解析130名の口臭患者と61名のボランティア計191名について、刺激唾液より調製した細菌DNAを鋳型とし、分子生物学的手法(terminal restriction fragment length polymorphism,T-RFLP)を用いて口腔細菌叢の多様性を調べた。同時にガスクロマトグラフィーを用いて口臭の主要な原因ガスである揮発性硫黄化合物(volatile sulfur compound,VSC)の濃度を測定した。その結果、被験者は口腔内の細菌叢パターンに基づいて3グループに分類でき、グループ間でVSC全体や各VSC激に有意差が認められた。さらに、口臭の影響因子とされる口腔内臨床所見との関連を調べたところ、5mm以上の歯周ポケットを有する頻度が、細菌叢パターングループ間で有意に異なっていた。一方、唾液流出量や舌苔付着量には差が見られなかった。これまでの成果から、口臭に関連する口腔細菌叢パターンの存在が示唆されたことになる。現在はT-RFLP解析の結果から口臭レベルを推定する方法の開発を行っている。口臭と生活習慣、精神状態に関する研究口臭発生におけるストレスや生活環境の影響を検討するために、初診時の口臭問診票とCMI健康調査票(Cornell Medical Index Health Questionnaire)の回答結果を解析し、精神状態と実際の口臭レベルとの関連性を調べた。口臭問診票の解析より、口臭レベルの低い患者では、他人からの指摘でなく自分で口臭に気づいたと答える割合が高く、対人関係に問題を抱えているとの回答が多かった。CMI健康調査票の解析では、口臭レベルが低いほど、身体的にも精神的にも自覚症状のスコアが高く、神経症傾向も強いことが明らかになった。生活習慣では、飲酒習慣と強い口臭との間に正の相関があることがわかった。歯周病や舌苔などの病的原因を持たない口臭を生理的口臭という。我々は、生理的口臭と口腔細菌叢の関連性を検討するために、130名の健康な歯周組織を持つ口臭患者の唾液サンプルについてT-RFLP解析を行い、口腔細菌叢と揮発性硫化物(volatile sulfur compound, VSC)の関係を調べた。その結果、細菌叢パターンをもとに分類した3群のうち、VSCレベルの高い1群をみいだした。同群は、舌苔因子を取り除いても、他群と比較して有意に高いVSCレベルを示し、口腔細菌叢が潜在的に生理的口臭に影響することが示唆された。Helicobacter pyloriは胃腸粘膜疾患との深い関連性を知られる菌である。同菌は口腔内で検出されることもあり、口腔内におけるH. pyloriの存在は、再感染や感染の入り口として重要とされ、また歯周病や口臭との関連も注目されている。そこで、口腔内のH. pylori感染と口臭の関連性を検討するために、口臭患者362名の唾液サンプルについて16SrRNA遺伝子を利用したPCR解析を行った。その結果、H. pylori陽性は21名(6.4%)、陰性は305名(93.6%)であった。陽性群は陰性群に比べて、唾液潜血、動揺度、歯周ポケット、歯周病原細菌の検出などの歯周病パラメータにおいて統計学的に高い値を示した。次に、両群の口臭パラメータを比較したところ、メチルメルカプタンにおいて陽性群が有意に高かった。口臭患者における口腔のH. pylori感染の報告は本研究が初めてであり、H. pyloriは進行した歯周病環境下にて多く検出され、代表的な歯周病原細菌と同時検出されることがわかった。さらに、舌苔因子を取り除いた解析により、H. pyloriの口腔感染は歯周病を介して間接的に口臭に関係していることが示唆された。
相互注視成立判定方式の確立と会話エージェントへの応用

1.視線,音声情報からの会話における優位性推定複数人からなるグループユーザに対応する会話エージェントシステムでは,ユーザ同士の会話の様子を自動認識することが重要である.本研究では,音声と視線による非言語情報からユーザ同士の会話における会話参加者の優位性を自動推定する方式を考案した.まずWizard-of-Oz手法を用いた会話エージェントと3人の被験者との会話収集実験を行い,音声とモーションキャプチャによる注視方向データを収集し,注視・相互注視情報と,発話時間や発話権取得についての音声情報から会話参加者の優位性の推定を行うための重回帰モデルを作成した.その結果重相関係数が0.85となり,会話における優位性の高い人物を特定するのに十分な精度が得られた.2.複数人対応会話エージェントにおける受話者推定機構の構築人とエージェントとの複数人会話において,エージェントが応答すべき時に的確に応答するには,ユーザの発話が誰に向けられているのかを判断する機能が不可欠である.本研究では,ユーザの音声情報と頭部方向情報を用いて受話者を推定する方式を考案した.音声情報・頭部方向情報と受話者との相関関係の分析を行った結果,ユーザはエージェントに対して話している時は,より高く,大きい声で,ゆっくりと話すことが分かった.また,もう一人のユーザが受話者である時は,33.5%の時間しか,受話者を見ていないことがわかった.これにより,ユーザは頻繁に受話者を見るが,頭部方向情報のみでは受話者を推定することが困難であることが分かった.これらの分析結果に基づき,音声情報と頭部方向情報を統合し,SVMによる受話者推定モデルを構築し,さらにリアルタイムで動作する受話者推定システムを構築し,評価実験を実施したところ,不正な音声入力を除いた場合には, 80%以上の分類精度が得られた.24年度が最終年度であるため、記入しない。24年度が最終年度であるため、記入しない。2011年度の目標は視線・表情データに基づく相互注視成立判定方式の提案であったが,相互注視の成立だけを扱うのではなく,コミュニケーションにおいて相互注視が担う機能に着目し,相互注視が成立することにより,コミュニケーションにおいて具体的どのような効果が得られるかを中心に研究を進めた.その結果を,以下2点にまとめる.(1)会話参加態度推定:ユーザがエージェントとの会話に積極的に参加しているか否かを推定する方式の改良を行った.今年度は,従来の注視対象の遷移パターンに加え,エージェントとの相互注視を含む各注視対象への注視時間や瞳孔径等の情報,さらには頭部動作の情報も加え,非積極的態度の検出精度F値0.753を達成し,従来の我々の提案方式よりも精度を向上させることに成功した.(2)受話者推定:ユーザ2名とエージェントとの多人数会話を想定し,ユーザが誰に話しかけているのかを推定する受話者推定方式の研究に取り組んだ.受話者推定には,話者が受話者の方を見ているという顔向きの情報に加え,情報提供者であるエージェントと友人同士であるもう一人のユーザに対してとでは話し方が異なることによる韻律的な特徴が利用可能であると考え,SVMを用いた韻律情報と顔向き情報による受話者推定モデルを作成した.その結果,受話者推定精度80%を達成した.また,もう1つの目的である,コミュニケーション障害の解明や支援への応用については,認知症患者とエージェントとのコミュニケーションを分析し,次のような成果を得た.まず,患者であるユーザに,体調や日々の生活について質問をすることにより,ユーザの話を聞く,聞き手エージェントを作成し,エージェントからの語りかけにどの程度よい反応をしていたかを応答までにかかった時間,頭部の動き,頷き回数等を指標に分析した.その結果,反応性の良さには人により違いがあることがわかり,コミュニケーションの問題点を発見する評価指標として利用できる可能性を見出した.1.視線,音声情報からの会話における優位性推定複数人からなるグループユーザに対応する会話エージェントシステムでは,ユーザ同士の会話の様子を自動認識することが重要である.本研究では,音声と視線による非言語情報からユーザ同士の会話における会話参加者の優位性を自動推定する方式を考案した.まずWizard-of-Oz手法を用いた会話エージェントと3人の被験者との会話収集実験を行い,音声とモーションキャプチャによる注視方向データを収集し,注視・相互注視情報と,発話時間や発話権取得についての音声情報から会話参加者の優位性の推定を行うための重回帰モデルを作成した.その結果重相関係数が0.85となり,会話における優位性の高い人物を特定するのに十分な精度が得られた.2.複数人対応会話エージェントにおける受話者推定機構の構築人とエージェントとの複数人会話において,エージェントが応答すべき時に的確に応答するには,ユーザの発話が誰に向けられているのかを判断する機能が不可欠である.本研究では,ユーザの音声情報と頭部方向情報を用いて受話者を推定する方式を考案した.音声情報・頭部方向情報と受話者との相関関係の分析を行った結果,ユーザはエージェントに対して話している時は,より高く,大きい声で,ゆっくりと話すことが分かった.また,もう一人のユーザが受話者である時は,33.5%の時間しか,受話者を見ていないことがわかった.これにより,ユーザは頻繁に受話者を見るが,頭部方向情報のみでは受話者を推定することが困難であることが分かった.

これらの分析結果に基づき,音声情報と頭部方向情報を統合し,SVMによる受話者推定モデルを構築し,さらにリアルタイムで動作する受話者推定システムを構築し,評価実験を実施したところ,不正な音声入力を除いた場合には, 80%以上の分類精度が得られた.24年度が最終年度であるため、記入しない。注視行動をフェーストラッキングやモーションキャプチャによって認識し,そこからコミュニケーションの状態を知る技術を開発し,それらについて会話エージェントに利用可能な程度の精度を確認できたため.24年度が最終年度であるため、記入しない。24年度は予定通り,23年度に開発した技術を実装し,全自動の会話エージェントを開発することを目標とする.また,コミュニケーション障害への応用については,会話エージェントを通した,コミュニケーション状態の自動評価・診断を研究の中心的テーマとし,実用化に向けた検討を進める.
グルココルチコイドのBcl-2誘導による虚血性臓器障害抑制

免疫組織化学的に肝組織にも十分量のBcl-2が存在することを発見した。また細胞内の局在を明かとし、最も豊富に存在し、かつ機能上重要であるミトコンドリア内でのBcl-2の局在について、これまで言われていたミトコンドリア外膜ではなく、内膜中心であることを発見した。2.虚血に対するミトコンドリアBcl-2の変化肝虚血時には肝実質細胞が産生するオキシダントが類洞内皮細胞を選択的にアポトーシスに導く。そこでアポトーシス抑制遺伝子であるBcl-2に着目し、肝虚血に対するミトコンドリアBcl-2タンパクの変化を超氷薄切片免疫電顕法を用いて調べた。その結果、虚血により類洞内皮細胞ミトコンドリアBcl-2が有意に減少し、この変化は特異的キサンチンオキシダーゼ阻害剤により有意に抑制された。これに対し肝細胞ミトコンドリアBcl-2に変化は認められなかった。虚血肝における類洞内皮細胞アポトーシスにBcl-2が関与していることを発見した。3.メチルプレドニゾロンによる虚血性肝障害抑制機序メチルプレドニゾロンの虚血性肝障害抑制効果を検討した結果、メチルプレドニゾロンのhigh dose(30mg/kg)、low dose(3mg/kg)前投与は肝虚血による過酸化水素産生を抑制することなく、ミトコンドリア膜電位低下を抑制した。メチルプレドニゾロンによる新たな虚血性肝障害抑制機序を発見した。アポトーシス抑制遺伝子であるBcl-2による虚血性肝障害抑制機構を明らかとし、日常臨床で使われているグルココルチコイドを用いBcl-2を誘導にすることによって虚血性肝障害を抑制することを目的とした。我々はすでに肝組織にも十分量のBcl-2が存在すること、また細胞内の局在はこれまで言われていたミトコンドリア外膜ではなく、内膜中心であることを発表している。(Motoyama et al, Biochem Biophysic Res Comm, 1998)2.虚血に対するミトコンドリアBcl-2の変化我々は1998年、肝虚血時に肝実質細胞が産生するオキシダントが類洞内皮細胞を選択的にアポトーシスに導くという新しい虚血性障害機構を発見した。今回の研究では、アポトーシス抑制遺伝子であるBcl-2に着目し、肝虚血に対するミトコンドリアBcl-2タンパクの変化を超氷薄切片免疫電顕法を用いて調べた。その結果、虚血により類洞内皮細胞ミトコンドリアBcl-2が有意に減少し、この変化は特異的キサンチンオキシダーゼ阻害剤により有意に抑制されることが判明した。虚血肝における類洞内皮細胞アポトーシスにBcl-2が関与していることが確認された。(論文投稿中)3.メチルプレドニゾロンによる虚血性肝障害抑制機序摘出ラット肝灌流モデルにおいてメチルプレドニゾロンの虚血性肝障害抑制効果を検討した。その結果、メチルプレドニゾロンの前投与は肝虚血による過酸化水素産生を抑制することなく、ミトコンドリア膜電位低下を抑制することによって虚血性肝障害を抑制することを発見した。(論文投稿中)免疫組織化学的に肝組織にも十分量のBcl-2が存在することを発見した。虚血性肝障害進展機序を分子生物学的に解明し、臨床応用を視野に入れたグルココルチコイドによる虚血性肝障害抑制について研究した。摘出ラット肝を用い、門脈流入量を25%まで減少させ、2時間灌流させた、肝虚血モデルを作成し、酸素ラジカルとアポトーシスが関与した虚血性肝障害進展機序、アポトーシス抑制遺伝子であるBcl-2の関与、臨床応用に直結するグルココルチコイドによる虚血性肝障害抑制機序について検討した。その結果、肝虚血によりキサンチンオキシダーゼ由来の過酸化水素が、肝小葉内midzoneで肝実質細胞より産生され、類洞内皮細胞が選択的にアポトーシスとなった。

類洞内皮細胞のアポトーシスから始まる新しい虚血性肝障害進展機序を発見した。肝虚血によりアポトーシスとなる類洞内皮細胞でミトコンドリア内Bc1-2は有意に減少した。メチルプレドニゾロンをhigh dose(30mg/kg)、low dose(3mg/kg)で前投与したところ、酸素ラジカルの産生は抑制しなかったが、虚血によるミトコンドリア膜電位の低下を有意に抑制した。以上、肝虚血によって産生される酸素ラジカル由来の虚血性肝障害に対するグルココルチコイドのミトコンドリア保護効果およびBc1-2の関与が明らかとなった。
新しく分離した扁平上皮癌関連抗原による頭頸部癌の免疫学的研究

今回の研究で新しく作製した抗扁平上皮癌関連抗体は,株化樹立喉頭扁平上皮癌培養細胞を材料に,ロトフォアによる等電点電気泳動法を用いてPI5.95-6.05の間に分画された成分を分取し,家兎を免疫して得られた抗体である。この抗体の認識する扁平上皮癌関連抗原の分子量は,SDS-PAGおよびWestern blotにより還元未処理の材料で約180KDと推定され,またオクタロニー法によりIgG抗体であることが確認された。次に,抗扁平上皮癌関連抗体の有用性を検討するため,市販品抗体のなかからポリクロナール抗体3種類,モノクロナール抗体3種類を選定し,各種頭頸部組織に対し免疫組織化学的方法(ABC法)により,陽性率,陽性反応部位,偽陽性率を求め比較検討を行った。被検組織は,上顎癌,喉頭癌,舌癌,扁桃癌,上顎洞粘膜,扁桃,耳下腺,口頭蓋で使用した市販品抗体は,抗ケラチン抗体,抗インボルクリン抗体,抗EGF-R抗体,抗サイトケラチン(PKK_2)抗体,抗K-ras(P21)抗体である。抗扁平上皮癌関連抗体の頭頸部癌組織に対する平均陽性率は85%で,他の市販抗体による陽性率とは大差はないが,非腫瘍性組織に対する偽陽性率では,抗体により著しい差がみられ,我々の抗体では10.4%であるが市販品抗体では18.3%-85.3%となっている。今日,腫瘍抗体の評価法に診断効率によるものがある。診断効率=(感度)×(特異性)÷100として示されるが、今回の実験成績を診断効率で表わすと,抗扁平上皮癌関連抗体は76%,抗インボリクリン抗体は48%,抗ケラチン抗体は14%,抗EGF-R抗体は44%,抗EMA抗体は49%,抗PKK_2抗体は36%,抗K-ras(P21)抗体は33%となる。この成績は抗扁平上皮癌関連抗体が診断用抗血清として有用であることを示している。癌の臨床的対応策は,今日なお早期発見と早期治療である。かかる認識から,我々は扁平上皮癌の早期診断法の開発をめざし,癌関連抗原の新しい分離法を考案し,家兎を免疫して特異性の高い抗扁平上皮癌関連抗体を作成した。この抗体による早期診断での陽性率や特異性に関しては,各種市販品抗体と比較し優位であることを論文,学会等で報告してきた。当該年度の課題は,上顎扁平上皮細胞の株化樹立と株化培養細胞の大量培養および,これらの細胞を材料とした扁平上皮癌関連抗原の分離と分取を第一目標とし,また第二目標には,大量分離をした扁平上皮癌関連抗原は4分画成分からなるタンパク複合体であることがこれまでの実験で知られているので,この4分画複合体をロトフォアによる等電点電気泳動法によりPH5.96.2の間で,単一分画成分に分離することである。更に単一に分画分取した癌関連抗原抗原で家兎を免疫し,抗単一分画成分抗体の物理化学的,免疫学的検索と抗体としての特異性の検討を行うことである。現在までの進行状況は,上顎扁平上皮癌細胞株化樹立は成功し,また同細胞の大量培養は可能となり,単一分画成分の分離・分取は進行中で,一部分離された単一分画成分による家兎への免疫作業は開始されている。当該年度計画に基づく結果の判明と評価は,本年5月中旬が見込まれている。