hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
エンドセリンETB受容体の病態学的役割

また、ホモ接合体の腎および血管組織並びに尿中ET-1含量はDOCA-食塩処置により著しく増加したが、この増加はABT-627の投与によりsham群と同程度にまで抑制された。ホモ接合体の血漿中ET-1含量はDOCA-食塩処置によっては変化が認められなかったが、ABT-627の投与により著明な増加が認められた。以上、ET_B受容体を介する作用はDOCA-食塩誘発性高血圧並びにそれに伴う心血管、腎障害に対して防御的に機能するものと考えられた。また、ET_B受容体欠損によるDOCA-食塩高血圧の病態発症と進展の感受性増大には、ET-1の産生増加とET_A受容体系の機能亢進が密接に関与することが示唆された。このように、本病態の発症、進展におけるET_A受容体を介する作用の重要性について確認されるとともに、ET_A受容体拮抗薬が高血圧病変に対して臨床的に有用である可能性も示唆された。平成13年度科学研究費補助金により以下の実績を得た。虚血性急性腎不全の進展と維持におけるエンドセリンET_B受容体の役割を昨年度と同様にET_B受容体遺伝子欠損ラットを用いて調べた。実験には腎虚血再灌流モデルを用いた。虚血性急性腎不全はあらかじめ右腎摘除を施した動物の左腎動静脈を結紮して45分間血流を遮断し、次いで血流を再開することにより作成した。再灌流24時間後から一定時間採尿を行い、糸球体濾過などの腎機能を評価した。また一部の動物においては、再灌流24時間後に腎臓を摘出し、腎組織標本を作製して、腎組織障害を光学顕微鏡により調べた。同時に腎組織中のエンドセリン-1含量も測定した。腎虚血再灌流により、腎機能並びに組織障害はET_B受容体遺伝子欠損ラット、野生型ラット両動物群で同程度に認められ、これらの障害は時間経過とともに徐々に回復した。しかしながら、再灌流7日後の腎機能を比較した場合、野生型に比しホモ接合体においてその回復状態は明らかに遅延していた。また虚血再灌流後の腎ET-1含量の増大はホモ接合体において顕著であった。以上、ET_B受容体を介する作用は虚血性急性腎不全の進展に深く関与しないものの、腎虚血再灌流障害からの腎機能回復過程には密接に関わることが考えられた。また以前の結果を考え合わせて、本病態の発症、進展におけるET_A受容体を介する作用の重要性が確認されるとともに、選択的ET_A受容体拮抗薬が臨床的にも有用である可能性が示唆された。
酸素アルカリ法による穀物わらのパルプ化及び製紙原料としての用途開発

稲わらを原料として酸素アルカリ蒸解を行い、水酸化ナトリウム濃度、蒸解温度、蒸解時間、酸素濃度の影響について検討したところ、蒸解温度及び蒸解時間の増加に伴ってパルプのシリカ含有量が増加することが判明した。稲わらの酸素アルカリ蒸解は通常のアルカリ蒸解に比べて蒸解液中に一旦溶出したシリカの再沈積量が増加した。蒸解中におけるシリカの再沈積現象は、蒸解液の残留アルカリ濃度の低下及び、これに伴うpH値の低下と密接に関連していることを確認した。酸素アルカリ蒸解パルプ繊維シートはアルカリ蒸解パルプに比べて、密度や引張り強さが低下したが、白色度や比散乱係数のような光学特性の向上が認められた。さらに、酸素アルカリ蒸解パルプではシートの空隙率が大きく、多孔性を有し、特に直径1μm以下の細孔が広く分布していた。また、これらの微細な細孔の量は叩解処理によってほとんど変化しなかった。SEM-EDXAによる観察から、微細な細孔は主としてシート中に多量のシリカが存在することによってもたらされていることが判明した。シートの液体浸透性を測定したところ、酸素アルカリパルプでは水の浸透速度が速くなり、シート中にシリカが残存していることによるものと推測された。さらに、シートのインクジェット記録特性を評価したが、酸素アルカリ蒸解パルプ繊維シートに印字されたドットは、円形度及び印字濃度が最も高く、ドット面積のバラツキも少なく、市販のインクジェット用にに近い記録品質を示した。
前周期遷移金属アセチリド鎖体の合成と反応

本研究計画にある前周期遷移金属としてジルコニウムおよびバナジウムドの塩化物を用い、フエニルアセチリドとt-ブチルアセチリドのリチウム塩との反応を行い、以下の新錯体の単離、構造決定に成功するとともに、その反応性を検討した。1.ZrCl_4とLiCCtBuをテトラメチルエチレンジアミン(tmeda)存在下に反応させることにより、アセチリドが4個配位した錯体としては初めての例であるZr(CCtBu)_4(tmeda)_2を単離し、構造を決定した。ジルコニウムにはさらにtmeda配位子が2個結合しており、興味深い8配位構造となっている。2.tmeda存在下にVCL_3(trf)_3とLICCPhとの反応を行うと、[Li(tmeda)]_2[V(CCPh)_4(tmeda)]sV(CCPh)_2(tmeda)_2が得られた。一方、同様の反応をLiCCtBuと行うと、V(CCtBU)_2(tmeda)_2のみが単離された。どの場合もバナジウムは3価から2価に還元されており、アセチリドのリチウム塩が還元剤として働いているものと考えられる。事実、これらの反応においてはバナジウムクロリドに対して1倍当量余分のリチウム塩を加えると収率が顕著に増大する。3価バナジウムVCl_3(thf)_3の代わりに2価バナジウムVCl2(tmeda)2を用いてアセチリドリチウム塩との反応を行うと、上記錯体がさらに高収率で得られた。[Li(tmeda)]_2[V(CCPh)_4(tmeda)]はバナジウムにアセチリドが4個配位しており、リチウムが2個アセチリドのα炭素に架橋している。ジルコニウム錯体とは異なり、バナジウムにはアセチリドの他にtmedaが1分子のみ結合しており、6配位構造となる。これらバナジウムアセチリド錯体とMe_3SiCl,MeI,PhNCO,CO_2,およびCOとの反応がスムーズにおこり、アセチリドへの付加および挿入生成物を与えることを見いだした。
植物液胞タンパク質の小胞輸送と高次機能

近年,植物の高次機能に細胞内の小胞輸送が重要な役割を果たしていることが明らかとなりつつある.シロイヌナズナ変異体を用いた解析から,茎の重力屈性反応や葉脈形成や塩耐性などに小胞輸送系の遺伝子が関与していることが明らかとなっている.本研究では,液胞タンパク質の輸送変異体を単離し,高次機能における役割を解明することを目的としている.貯蔵タンパク質の輸送異常を示すmag1変異体は小胞輸送に関与するレトロマー複合体のVPS29であった.レトロマー複合体の別の因子であるVPS35の変異体でも同様に輸送異常が起こることが判明した.さらに詳しく解析するとvps35変異体では,老化葉が早く出現するなどの表現型が見られ,植物体としての表現型も見られた.より簡便に輸送変異体を取得するためにGFPを用いた新たなスクリーニング法を考案し,多数の新規変異体の取得に成功した.タンパク質蓄積型液胞に局在化するGFPは野生型種子中では不安定であり,弱いGFP蛍光を示す.一方,これを輸送変異体に導入すると,誤って細胞外へ分泌され安定化する.これにより,輸送変異体では種子自体で強いGFP蛍光を示し,変異体のスクリーニングが可能となる.貯蔵タンパク質の選別に関与するVSRは正常であるが,輸送異常を示す変異体を多数取得した.これらの変異体の中には根の伸張不全や稔性の低下などの表現型を示すものがある.これらは栄養器官の液胞タンパク質の小胞輸送の異常により,現れた表現型と考えられる.細胞内輸送が植物の高次機能に関わっていることが明らかとなった.多細胞生物である植物の高次機能に細胞内の小胞輸送が重要であることが明らかとなりつつある.例えば,茎の重力屈性反応や葉脈形成や塩耐性などに小胞輸送系の遺伝子が関与していることが変異体の解析から明らかとなっている.本研究では,液胞タンパク質の輸送変異体を単離し,高次機能における役割を解明することを目的としている.分泌輸送系オルガネラの構造異常を示すkam2変異体は種子貯蔵タンパク質の輸送異常が見られる.KAM2遺伝子は線虫でエンドサイトーシスに関わるJドメインタンパク質のホモログであった.kam2変異体種子の約半数の種子は奇形を示す.これは種子内の胚が本来とは逆の方向に屈曲することにより引き起こされるためである.今年度は,さらにGFPを用いた新たなスクリーニング法を考案し,変異体の取得と解析を行った.タンパク質蓄積型液胞に局在化するGFPは野生型種子中では不安定であり,弱いGFP蛍光を示す.一方,これを輸送変異体に導入すると,誤って細胞外へ分泌され安定化することが判明した.これにより,変異体の種子では強いGFP蛍光を示す.これを利用して,新たな変異体のスクリーニングを行い,貯蔵タンパク質の輸送に関わるAtVSR1のアリル変異体が多数取得できた.また,AtVSRが正常である変異体を多数取得した.これらの変異体の中には植物体としても表現型を示すものがある.これらは栄養器官の液胞タンパク質の小胞輸送の異常により,現れた表現型と考えられる.近年,植物の高次機能に細胞内の小胞輸送が重要な役割を果たしていることが明らかとなりつつある.シロイヌナズナ変異体を用いた解析から,茎の重力屈性反応や葉脈形成や塩耐性などに小胞輸送系の遺伝子が関与していることが明らかとなっている.本研究では,液胞タンパク質の輸送変異体を単離し,高次機能における役割を解明することを目的としている.貯蔵タンパク質の輸送異常を示すmag1変異体は小胞輸送に関与するレトロマー複合体のVPS29であった.レトロマー複合体の別の因子であるVPS35の変異体でも同様に輸送異常が起こることが判明した.さらに詳しく解析するとvps35変異体では,老化葉が早く出現するなどの表現型が見られ,植物体としての表現型も見られた.より簡便に輸送変異体を取得するためにGFPを用いた新たなスクリーニング法を考案し,多数の新規変異体の取得に成功した.タンパク質蓄積型液胞に局在化するGFPは野生型種子中では不安定であり,弱いGFP蛍光を示す.一方,これを輸送変異体に導入すると,誤って細胞外へ分泌され安定化する.これにより,輸送変異体では種子自体で強いGFP蛍光を示し,変異体のスクリーニングが可能となる.貯蔵タンパク質の選別に関与するVSRは正常であるが,輸送異常を示す変異体を多数取得した.これらの変異体の中には根の伸張不全や稔性の低下などの表現型を示すものがある.これらは栄養器官の液胞タンパク質の小胞輸送の異常により,現れた表現型と考えられる.細胞内輸送が植物の高次機能に関わっていることが明らかとなった.
受精の膜融合における活性化メカニズム

受精の膜融合の分子メカニズムは、未知の部分が多く詳細な解明に至っていない。本研究課題では、膜融合の解明に向けて研究を推進し、以下のような研究成果を得た。精子側の融合因子であるIZUMO1と精子上で相互作用する精巣特異的な分子ACE3を同定し、ノックアウトマウスを作製し、その解析を行った。その結果、ACE3ノックアウトマウスは不妊ではなかったが、その精子はIZUMO1の局在に影響があることが明らかになった。またIZUMO1ノックアウト精子を利用して、精子は透明帯により先体反応が誘起され、先体内の消化酵素を用いて透明帯を通過できるようになるという定説を覆す新知見を発表した。受精は生命現象の始まりという極めて重要な現象にも関わらず、分子生物学的な機構については未知の部分が多い。特に膜融合機構に関する研究は世界的に見ても詳細な解明に至っていない。そのようななか、私は世界で始めて精子側の融合因子IZUMO1を発見した。さらに最近、私は融合を阻害するIZUMO1のモノクローナル抗体とBiacoreを用いた解析により、IZUMO1の融合を制御するコア領域(IZUMO1_<PFF>: putative fusion fragment)の同定に成功した。本年度の成果は、108アミノ酸残基のIZUMO1_<PFF>のなかでさらに重要な配列を明らかにするため、IZUMO1_<PFF>のリコンビナントタンパク質を免疫原として10種類のモノクローナル抗体を作製し、膜融合を阻害する抗体を選別した。さらに、これら抗体を用いたエピトープ解析から真の機能領域を8アミノ酸レベルまで浮き彫りにすることに成功した。今後は、この領域のアミノ酸を変異させたIZUMO1を発現するトランスジェニックマウスを作製し、Izumo1ノックアウトバックグランドを用いた雄の妊孕性等のin vitroの解析と体外受精や融合解析によるin vivoの解析により、この領域が真に重要かを明らかにしたい。また、円二色性、超遠心、X線溶液散乱等を用いた物性研究からこの領域の構造上の解析も進んでおり、αヘリックス含量が多く含まれている構造であることが明らかになった。今後は、結晶構造解析等の手法により、この構造がどのように重要なのかを明らかにしていきたい。受精は生命現象の始まりという極めて重要な現象にもかかわらず、分子生物学的な機構については未知の部分が多い。これまでに我々は、受精の膜融合を特異的に阻害するモノクローナル抗体を用いて、世界で始めて精子側の融合因子IZUMO1を発見した。また最近、融合を阻害するIZUMO1のモノクローナル抗体とBiacoreを用いた解析により、IZUMO1の融合を制御するコア領域(IZUMO1_<PFF>: putative fusion fragment)の同定に成功した。今年度の若手研究(A)の成果として、IZUMO1_<PFF>に対するモノクローナル抗体を複数作製し、これら抗体のエピトープ解析により、IZUMO1_<PFF>のなかのヘリックス構造が特に融合にとって重要であることを見出した。またIZUMO1にmCherryを融合させたタンパク質を精子上で発現するTGマウスを作製し、このマウスとCSUを利用した非侵襲性のレーザー顕微鏡を用いた、受精のタイムラプス観察により、融合の瞬間にIZUMO1が融合の起点となる精子頭部のエカトリアルセグメント上に局在することを明らかにした。今後の解析では、IZUMO1の構造と局在に関するデータをもとに、卵子側の融合因子であるCD9や精子上のIZUMO1以外の融合因子との関わりを明らかにするにとにより、より包括的に受精の膜融合の分子メカニズムを明らかにしていきたい。これまでに我々は、世界で始めて精子側の融合因子IZUMO1を発見した。最近、融合を阻害するIZUMO1のモノクローナル抗体とBiacoreを用いた解析により、IZUMO1の融合を制御するコア領域(IZUMO1_<PFF>:putative fusion fuagment)の同定に成功した。また、円二色性、超遠心、X線溶液散乱等を用いた物性解析から、この領域は、αヘリックス含量が多い構造であることが明らかになった。今年度は、IZUMO1_<PFF>の構造をより詳細に解析するために、この領域の結晶構造解析を試みた。その結果、最大1mmもの結晶が得られ、構造解析には至っていないものの、その条件は整いつつある。

また精子-卵子の膜融合不全のIZUMO1やCD9ノックアウトマウスを利用して、囲卵腔内にいる融合前の精子をマイクロマニピュレーションの技術を利用して取り出し、新しく準備した卵子と体外受精を行った結果、受精が成立し、その胚を移植すると、妊孕性のあるマウスが正常に発生した。これは、一度受精の準備を終えた精子が受精できないというこれまでの概念を見直すべき結果となった。今後の解析では、IZUMO1の構造に関するデータをもとに、卵子側の融合因子であるCD9や精子上のIZUMO1以外の融合因子との関わりを明らかにすることにより、より包括的に受精の膜融合の分子メカニズムを明らかにしていきたい。
高エネルギー天体現象の電波観測

那須に建設した球面鏡により、観測周波数1.4GHzで電波観測を行い、世界ではじめて高銀緯にトランジェント電波源を発見した。観測結果の発表などは雑誌論文の項目に記載してある。光やX線、ガンマ線などの領域では空の広い範囲を常時モニターする観測が行われ、トランジェントな天体が数多く発見されてきた。ガンマ線バーストはその典型であり、1960年代に発見されながらその正体が宇宙理論的な距離にある高エネルギー天体現象であることが判明するのに30年以上かかった。電波領域では、CygX-3のように銀河面にあって数年に1度電波バーストを起こすトランジェントな天体が1970年代からすでに知られていたにもかかわらず、それらを捜す観測装置はこれまで存在しなかった。その理由は、視野が広くかっ多方向を同時に観測できる装置がつくりにくかったからである。我々はディジタル信号処理のアルゴリズムを工夫し、またそこへ入力する宇宙からの微弱な信号を集光する大面積のアンテナを極めて安くつくる工夫をして、通常の建設コストの数十分の一の経費でこの課題を達成した。アルゴリズムの問題としては、信号の流れのビット幅が、信号処理の各段階において拡大も縮小もせず一定に保たれることに成功したことがカギであった。これにより、空間領域と時間領域の両方に広がった信号を、あふれさせることなく、また逆に処理装置が遊ぶこともなく常に100%の稼働率で働くことが、可能となった。さらに曲率が一定であることを利用して大面積のアンテナ、固定球面鏡を極めて安く開発した。追尾機能をもたせ微弱な天体の観測も可能となって、上記の観測が可能となった。「高エネルギー天体現象の電波観測(基盤研究A H14-)」は、早稲田大学64素子電波干渉計と那須パルサー観測所に建設中の球面鏡アレイを用いてクェーサーやBL Lac型天体などの活動銀河核、パルサー、トランジェント電波源などの物理的性質を電波観測から解明しようとするものである。那須では、20m鏡8台が完成しており、天頂から5度の方向を見る球面鏡を開発して、高感度の観測をはじめている。本研究は、この成果をさらに拡大すべく天頂から18度以内の天体を追尾できる30mの球面鏡を開発し、半数以上が未同定であるEGRETガンマ線天体の電波同定をまずめざす。EGRETガンマ線天体は、数個が銀河面近くのガンマ線・電波パルサーに、また高銀緯天体のいくつかはBL Lac型天体などの活動銀河核に同定されたが、多くはその正体が分かっていない。その理由は、ガンマ線天体の位置精度が2度程度と悪く、その中にある無数の天体のどれであるかが決定出来ないからである。本研究で開発中の30m球面鏡は、専用機であり、長時間にわたって広い空をモニターできる。すでに20m球面鏡で、CygX-3の電波バーストをとらえているが、このような突発的に輝く天体が続々検出されるであろう。そして、そのようなトランジェント天体がEGRETガンマ線天体である確立が極めて高いのである。初年度は、30m球面鏡の建設と、64素子干渉計の信号処理を行っている空間時間FFTプロセッサーを用いた観測が中心である。30m鏡は、基盤研究Aで極めて安く建設費したにもかかわらず、目的をしぼって高い性能を達成している。例えば当面の観測周波数1.4GHzはもちろん、10GHzでも使用可能であろう。天体を追尾する駆動系や副鏡の製作は次年度の計画となり、観測もそれにともなうことになるが、本研究はすでに世界から注目されている。早稲田大学は小型のアンテナを密に並べて高感度を達成する干渉計を開発してきたが、これは世界にひろまったケンブリッジ大学の干渉計とは全く原理が異なる。

1990年代に入ると早稲田方式の有効性が認識され,SKAと呼ばれる1平方kmを超える集光面積をもつ干渉計の構想が現在国際協力で議論されるようになった。これを実現出来る最も具体的なシステムが、早稲田64素子干渉計であり、那須の球面鏡アレイなのである。2003年7月のIAU国際天文連合シドニー総会で、本研究で開発した30m球面鏡などの報告を行う。那須パルサー観測所30m球面鏡の光学系・駆動系/2004Mar日本天文学会での報告より《1那須30m球面鏡の光学系》2002年度からスタートした30m固定球面鏡は、鏡面が完成し2003年度に副鏡・フィードホーンの設置を行っている。光学系は、すでに稼働している20m×8台の球面鏡アレイと組み合わせた干渉計として作動できるよう、同一の光路長および焦点位置としているが、以下の点で拡張がなされている。(1)20m鏡が天頂から5度のゾーンをサーベイするAz軸のみの駆動系を採用したのに対し、30m鏡は天体の追尾を可能にするAz,El 2軸制御をとった。これによりパルサーのタイミング観測において、最大で2時間を超える連続ナイキストレートデータ記録が可能になる。(2)赤緯で19度-55度の、アレシボからほとんど観測出来ない領域が、観測できる。《2駆動系》副鏡の駆動はバランスをとるカウンターウエイトをとりつけることにより、すべての赤緯で安定した観測を可能にしている。フィードホーンも新たに半径方向に動く自由度が増えたため一定曲率のH鋼をカイドとし、その上をチェーン・ギヤ駆動で移動できるようにした。《3観測領域・観測対象》パルサー分散消去のための160GBナイキストレートレコーダーは、すでにテストを終えており、数百万点のデータ取得に成功している。パルサーのタイミング観測、EGRET天体の同定が初期の観測目標となる。南では、かにパルサーまでが観測可能である。2004年度は那須パルサー観測所30mの駆動系を完成させ、試験観測を開始した。以下にその概要をまとめる。これは日本天文学会(2005年3月日野)での報告である。トラッキングが可能な30m球面鏡は2004に試験観測をはじめ、静かな環境での駆動計のチェックをかねたデータを得ている。スイッチング無しの観測で、Cyg-A、天の川、だけでなく3C84も受信できたことから、安定な受信システムであることが確認できた。観測領域は天頂から+/-18度あり、かに星雲も受信している。パルサー観測用のハードウエアとしては、20MHzナイキストレコーダ(吉村2004)、GPS受信機による時刻信号の取り込み(岳藤2004)、800MHzナイキストレコーダ(今林2005)の開発をすすめている。ナイキスト条件を満たすことによりFourier変換を有限次元ヒルベルト空間における基底の変換として扱え、800MHz複素サンプルしてディスクアレイに記録した数十分のパルサー観測データを、ソフトウエアで分散消去できる見込みである。ディスクアレイは0.8テラバイト、PCの実装メモリとしては8ギガバイトが普通に利用できる時代に合わせて上記ハードウエアを開発している。2002年度報告の雑誌論文の頁は391-392と確定した。那須に建設した球面鏡により、観測周波数1.4GHzで電波観測を行い、世界ではじめて高銀緯にトランジェント電波源を発見した。観測結果の発表などは雑誌論文の項目に記載してある。
種々の統計情報を統合した統計的自然言語解析に関する研究

本研究では,構文解析の曖昧性解消を行うために,構文的な統計情報と語彙的な統計情報を統合する手法を提案する.我々が提案する統合的確率言語モデルは,構文的優先度などの構文的な統計情報を反映する構文モデルと,単語の出現頻度や単語の共起関係などの語彙的な統計情報を反映する語彙モデルの2つの下位モデルから成る.この統合的確率言語モデルは,構文的な統計情報と語彙的な統計情報を同時に学習する去の多くのモデルと異なり,両者を個別に学習する点に特徴がある.構文的な統計情報と語彙的な統計情報を独立に取り扱うことにより,それぞれの統計情報を異なる言語資源から独立に学習することができるだけでなく,それぞれの統計情報が曖昧性解消においてどのような効果を果たすのかを容易に分析することができる.この統合的確率言語モデルを評価するために,日本語文の文節の係り受け解析を行った.構文モデルを用いたときの文節の正解率は73.38$%となり,ベースラインに比べて11.70$%向上した.また,構文モデルと語彙モデルを組み合わせることにより,文節の正解率はさらに10.96$%向上し84.34$%となった.この結果,本研究で提案する枠組において,語彙的な統計情報は構文的な統計情報と同程度に曖昧性解消に貢献することを確認した.なお,本研究の成果は下記国際会議で報告されている。
溶液状態でのDNAの動的・静的構造精密化のためのNMR法の開発

DNA糖部構造解析精密化手法の開発:DNAの溶液構造をその動的平衡を含めて正確に評価する事を目的として、徹底したスピン結合定数測定の精密化、および構造を規定することの可能なより多くのスピン結合定数を集積するためのNMR手法開発を行った。1)糖部^1H核間スピン結合定数の精密測定:^1H核間スピン結合測定に従来よく用いられているHCCH-E.COSY法では観測感度が低く、その誤差の範囲も測定毎に変わり、NMR情報の精密化を進める上では適当な方法ではない。そこで当該年度では、HCCH-E.COSY法に変わる、より信頼のおける測定法としてJ-変調型の2次元測定法(J-mod.HSQC)をデザインしてその評価を行った。この測定法の適用に当たっては、観測対象とする^1Hスピン対を孤立させた状況にする必要があるため、すでに本研究室で確立された^<13>C/^2Hの2重標識技術を用いて^<13>C完全標識したうえでC2',C3',C5'の各位置に重水素標識(C2'では、H2"のみが^2Hと置換、C5'位では、H5',H5"のそれぞれが50%づつ^2Hに置換されている)したチミジンを調製しそれをd(CGCGAATTCGCG)_2配列のオリゴマー中のT7の位置に導入し解析対象とした。この方法では、J-結合の強さを、2Dスペクトル上のクロスピークの強度変調の様子から読みとるが、8点程度の観測点から1つのJ-値を抽出するのでノイズに対して値のぶれが小さくかつ観測誤差を正確に評価できる。この測定の結果、T7位の糖部に関してJ(H1',H2')=8.2±0.2Hzまた、J(H4',H5r')=2.7±0.2Hz、J(H4'H5s')=2.8±0.4Hzと精度よく観測できた。この結果から、糖部のコンフォメーションをO4'-endoと決めることができた。この結果は単結晶構造中に見られる2つのストランド中の構造がO4'-endoとC1'-exoであることと異なっており、溶液中の構造と結晶構造の相異を意味する。また、2つのH4',H5'間のJ-結合定数の値から、T7のγ-torsionが50°であり、結晶構造と対応していることと、実験精度の範囲でγ-torsion回りで露な構造平衡が生じていないという動的構造の面でも新たな知見を得ることがてきた。これは溶液中でのγ-torsion解析の初めての例である。2)糖部^1H-^<13>C間結合定数の測定手法の開発:上記のような^1H核間結合定数では、糖部が2つのコンフォマ-間での平衡にあるような場合には、おのおのの状態を記述するに十分名実験値が得られない。そこで、この情報の不足を補うために、NOEによる磁化移動を利用したE.COSY型の測定をデザインし適用した。E.COSY型の測定なので観測精度は低いが、同方法を用いてほとんどすべての^1J(C,H),^2J(C,H),^3J(C,H)を測定でき、新たな構造情報として用いることができた。このように抽出された構造情報は、精度が悪いが、1つの結合角に対して多くの実験的な角度範囲を制約を与えるため得られる実権値の両を増やすことで、より精密な糖部構造の記述を可能とする。

この結果から、糖部のコンフォメーションをO4'-endoと決めることができた。この結果は単結晶構造中に見られる2つのストランド中の構造がO4'-endoとC1'-exoであることと異なっており、溶液中の構造と結晶構造の相異を意味する。また、2つのH4',H5'間のJ-結合定数の値から、T7のγ-torsionが50°であり、結晶構造と対応していることと、実験精度の範囲でγ-torsion回りで露な構造平衡が生じていないという動的構造の面でも新たな知見を得ることがてきた。これは溶液中でのγ-torsion解析の初めての例である。2)糖部^1H-^<13>C間結合定数の測定手法の開発:上記のような^1H核間結合定数では、糖部が2つのコンフォマ-間での平衡にあるような場合には、おのおのの状態を記述するに十分名実験値が得られない。そこで、この情報の不足を補うために、NOEによる磁化移動を利用したE.COSY型の測定をデザインし適用した。E.COSY型の測定なので観測精度は低いが、同方法を用いてほとんどすべての^1J(C,H),^2J(C,H),^3J(C,H)を測定でき、新たな構造情報として用いることができた。このように抽出された構造情報は、精度が悪いが、1つの結合角に対して多くの実験的な角度範囲を制約を与えるため得られる実権値の両を増やすことで、より精密な糖部構造の記述を可能とする。
ヒト乳歯・永久歯歯髄細胞株の樹立および新しい細胞毒性試験の開発

1.ヒト歯髄細胞の分離及び癌化遺伝子導入ヒト乳歯歯髄細胞、ヒト永久歯歯髄組織を無菌的に分離した。取り出した組織をメスにて可及的に細切後、0.1%トリプシン、0.02%EDTAを含む生理的食塩水(PBS)で処理後、2mg/mlコラゲナーゼを含むPBSで処理し、細胞を分散させた。分散した細胞は径60mmディッシュに播種し、炭酸ガスインキュベータ-内で細胞培養を行った。継代培養を2-3回行い、十分に細胞数を調製後、遺伝子導入を行った。癌化遺伝子の導入は電気穿孔法によって行い、安定的遺伝子導入細胞を選択し、細胞培養を行った。2.細胞の株化と基本的形質の解析安定的遺伝子導入細胞の培養を行い、継代を重ね、細胞倍加指数(PDL)が100PDL以上の細胞株を株化細胞とした。いずれの株細胞も軟寒天内コロニー形成能を示さず、またヌードマウスヘの可移植性を示さなかったため、腫瘍化まではしていない、一般的な不死化細胞の形質を示した。3.象牙質を介した細胞毒性試験の開発2.で樹立した細胞株を試験細胞として、歯科修復材料に対する細胞毒性試験を行った。象牙質切片を介して修復材料の毒性試験を行う事で、歯冠修復材料が実際に象牙細管を通過して歯髄組織に作用するかどうかを明らかにする事が可能となった。また毒性試験後の培地や細胞を分析する事で、各種サイトカインの定量や細胞死の同定が可能である事も示した。今回の実験では、歯冠修復材料の一つである、レジンに対して毒性試験を行い、生細胞数の計測、ELISAによるIL-1βの定量、apoptosisの有無を検討した。その結果、未重合レジンが象牙細管を介して細胞毒性を発現する事が明らかとなった。apoptosisが認められなかったため、necrosisによる細胞死が生じている事が明かとなった。この毒性感受性については乳歯と永久歯間で有意差は無く、IL-1βの産生は認められなかった。1.ヒト乳歯歯髄細胞の分離および癌化遺伝子導入ヒト乳歯歯髄を無菌的に取り出し,歯髄細胞を分離した。explant-outgrowth法によって細胞を採取する予定であったが,増殖が遅く,遺伝子導入に必要な細胞数を得るのに時間がかかりすぎた。そこで歯髄細胞をcollagenase処理し,細胞を分散する事によって多数の歯髄細胞を分離することが可能になった。サルの癌化ウイルスであるsimian virus 40の感染によって,ヒト乳歯歯髄細胞にlarge T antigenの導入を試みたが,ヒト細胞は当virusの半許容細胞で,virusの増殖が進み,apoptosisによる細胞死が誘導されてしまった。そこでlarge T antigen cDNAを入手し,そのcDNAを真核細胞発現ベクターに組み込み,遺伝子導入を行った。導入の確認はlargeT antigenに対する蛍光抗体を使用し,免疫染色によって蛋白質の発現が誘導されていることを確認した。発現ベクターはneomycin耐性遺伝子も有しているので,免疫染色とともにneomycinによって遺伝子導入細胞のselectionを行い,stableな遺伝子導入細胞の調製を行うとともにヒト乳歯歯髄細胞株の樹立を行う予定である(長谷川)。2.ヒト象牙質

特異的蛋白質フォスフォフォリンに対する抗体の調製ヒト象牙質より蛋白質を抽出・精製したフォスフォフォリンを使用して,ポリクローナル抗体を調製した。この抗体の使用によって,免疫沈降法によるフォスフォフォリンの定量分析・免疫染色,FACSが可能になった。今後この抗体を使用して,遺伝子導入細胞株の中から象牙芽細胞の選択を行う予定である(渡邊)。1.ヒト永久歯歯髄細胞の分離及び癌化遺伝子導入ヒト乳歯歯髄細胞と同様に、ヒト永久歯歯髄組織を無菌的に分離した。取り出した組織をメスにて可及的に細切後、0.1%トリプシン、0.02%EDTAを含む生理的食塩水(PBS)で処理後、2mg/mlコラゲナーゼを含むPBSで処理し、細胞を分散させた。分散した細胞は径60mmディッシュに播種し、炭酸ガスインキュベータ-内で細胞培養を行った。継代培養を2-3回行い、十分に細胞数を調製後、乳歯歯髄と同様にして遺伝子導入を行った。癌化遺伝子の導入は電気穿孔法によって行い、安定的遺伝子導入細胞を選択し、細胞培養を行った。2.細胞の株化と基本的形質の解析安定的遺伝子導入細胞の培養を行い、継代を重ね、細胞倍加指数(PDL)が100PDL以上の細胞株を株化細胞とした。いずれの株細胞も軟寒天内コロニー形成能を示さず、またヌードマウスへの可移植性を示さなかったため、腫瘍化まではしていない、一般的な不死化細胞の形質を示した。3.象牙質を介した細胞毒性試験の開発2.で樹立した細胞株を試験細胞として、歯科修復材料に対する細胞毒性試験を行った。象牙質切片を介して修復材料の毒性試験を行う事で、歯冠修復材料が実際に象牙細管を通過して歯髄組織に作用するかどうかを明らかにする事が可能となった。また毒性試験後の培地や細胞を分析する事で、各種サイトカインの定量や細胞死の同定が可能である事も示した。今回の実験では、歯冠修復材料の一つである、レジンに対して毒性試験を行い、生細胞数の計測、ELISAによるIL-1βの定量、apoptosisの有無を検討した。その結果、未重合レジンが象牙細管を介して細胞毒性を発現する事が明らかとなった。apoptosisが認められなかったため、necrosisによる細胞死が生じている事が明らかとなった。この毒性感受性については乳歯と永久歯間で有意差は無く、IL-1βの産生は認められなかった。
錯体ナノ空間への高分子導入による創発機能の開拓

ポリ(N-ビニルカルバゾール)(PVCz)は蛍光性、光導電性を持つ高分子として注目されており、様々な研究が行われている。バルク状態のPVCzは高分子鎖間の相互作用が光物性に大きく影響を及ぼすと考えられており、PVCz一本鎖としての光物性評価は重要である。一方、2nm以下の均一な細孔を有する多孔性金属錯体が近年注目を集めている。我々はこれらが有するナノ細孔を重合反応場として利用することで、生成高分子の構造制御や、複合体の物性制御の研究を行ってきた。本研究では、一次元チャネルを有する多孔性金属錯体の細孔内でPVCzを一本鎖状態で合成し、その光物性について検討を行った。さらに複合体から単離したPVCzのモルフォロジーがホスト結晶の形状を保持していることを見出した。[La(1,3,5-benzenetrisbenzoate)](1)が有する一次元チャネル(細孔サイズ=1nm)にN-ビニルカルバゾールと重合開始剤を導入し、窒素雰囲気化、70°Cで重合を行った。NMR、GPC等の測定によりPVCzが細孔内で良好な収率で合成できていることを確認した。1の細孔サイズからPVCzは細孔内で一本鎖状態と考えられ、MDシミュレーションからもそのことが示唆された。得られた複合体(1⊃PVCz)の蛍光スペクトル測定の結果、380-500nmにPVCz由来の発光が見られた。通常のバルク状態のPVCzの蛍光スペクトルと比較すると、バルク状態のPVCzに見られる370nm付近のショルダーが1⊃PVCzには見られなかった。PVCzはカルバゾール環のスタッキング状態の違いにより370nmにpartial overlap型のエキシマー発光ピークが、420nmにfull overlap型のエキシマー発光ピークが観測されることが知られている。このことより、PVCzは細孔内においてカルバゾール環のfull overlap型がより多くなるような配置で並んでいることが明らかとなった。このことはMDシミュレーションの結果にもよく合致した。金属イオンと有機架橋配位子から自己集合的に構築される多孔性金属錯体の特徴の1つに、溶媒吸着やガス吸着といった化学的刺激によって構造が柔軟に変化できる事が挙げられる。そのような多孔性金属錯体にゲスト分子を導入後、外部刺激によってホストの構造を変化させ、ゲスト周りの環境変化を誘起する事で、ゲスト分子の持つ物性をコントロールできると期待される。本研究では、蛍光性オリゴマーであるdistyrylbenzene(DSB)を導入し、吸着や熱といった外部刺激を与える事で、発光をスイッチングすることを試みた。ホスト錯体として、正方形型のチャンネル構造(細孔径=7.5×7.5Å^2)を有する[Zn_2(terephthalate)_2(triethylenediamine)]_n(1)を合成した。DSBと1を混合した後、DSBを昇華させる事でホストへの導入に成功した。XRPD測定より、DSB導入後の複合体のホスト骨格は、元の骨格が歪んだ別の骨格1'に変化している事を確認した。また、その複合体(1'⊃DSB)にアセトニトリルを吸着させると、ホスト骨格が元の1へと変化した複合体(1⊃[DSB+CH_3CN])が得られた。蛍光測定を行ったところ、1'⊃DSBではゲスト分子由来の蛍光が消光している一方、1⊃[DSB+CH_3CN]では蛍光強度が大きくなっている事が判明した。IRやUV測定、及び理論計算より、1'⊃DSBにおいて細孔内のDSBは平面状からかなりねじれを生じている事が明らかになり、これが消光の要因になっている事が示唆された。1⊃[DSB+CH3CN]において、アセトニトリルを加熱除去する事でホスト骨格や蛍光挙動が1'⊃DSBに可逆に戻る事を確認しており、吸着や熱といった外部刺激を与える事により、ホスト骨格の変化を伴う発光スイッチングをする事ができた。

通常のバルク状態のPVCzの蛍光スペクトルと比較すると、バルク状態のPVCzに見られる370nm付近のショルダーが1⊃PVCzには見られなかった。PVCzはカルバゾール環のスタッキング状態の違いにより370nmにpartial overlap型のエキシマー発光ピークが、420nmにfull overlap型のエキシマー発光ピークが観測されることが知られている。このことより、PVCzは細孔内においてカルバゾール環のfull overlap型がより多くなるような配置で並んでいることが明らかとなった。このことはMDシミュレーションの結果にもよく合致した。
聴覚情報処理システムを構成する機能的神経回路地図の体系的な解明

音を用いた同種間コミュニケーションを行う動物にとって、同種の音情報を雑音から識別する神経機構の獲得は不可欠である。キイロショウジョウバエは、種特異的な時間間隔(Inter-pulse Interval, IPI)を持つ羽音(求愛歌,平均IPI 35 ms)を用いて求愛行動を行う。近年、求愛歌受容に重要な2次神経細胞(2次)が同定された。2次の機能阻害により求愛歌に対する応答行動は減少する。さらに、その神経活動はIPI 25 msの音に最も強く応答し、IPI 15 msの音に減少した応答を示す。しかし、どの神経細胞のどの様な神経活動によって時間間隔情報を抽出しているのか、その神経機構は不明である。今年度、2次の上流の神経細胞はIPI 15 msの音に最も強く応答することをCa2+イメージングにより明らかにした。このことから、2次は抑制性入力を受けている可能性がある。そこで、GABA受容体を2次で発現抑制しその神経活動を観察した。その結果、神経活動は短いIPIの音に対して上昇した。これは、2次がGABA作動性の抑制性入力を受けていることを示唆している。次に、GABA作動性の局所介在神経細胞(LN)を探索し、2種類のLNが2次と空間的に近接することを明らかにした。様々なIPIの音に対する2種類のLNの神経活動は、IPI 15 msの音に最も強く応答した。これは、これらLNが短いIPIの音において2次により強く抑制性出力することを示唆している。さらに、2種類のLNの機能阻害により求愛歌に対する応答行動が上昇するのかを検証する為、LNをそれぞれ機能阻害したメスを用いて人工求愛歌に対する応答行動を観察した。その結果、メスの応答行動は上昇した。この様に、LNが2次の神経活動を抑制するという小規模な神経回路によって、短いIPI情報を抑制するフィルター機能が獲得されているのかもしれない。28年度が最終年度であるため、記入しない。音による個体間交信を行う動物にとって、同種由来の音情報を雑音から識別する神経機構の獲得は不可欠である。しかし、感覚器官で受容された聴覚情報が脳内の神経細胞に伝達されていく過程で、どの様な情報処理が行われているのかはまだ多くは明らかになっていない。これまで、キイロショウジョウバエを用いた研究において、聴覚一次中枢に投射する感覚細胞群が各々どの周波数の聴覚情報を受容するのかが明らかになり、感覚細胞群の周波数に対する機能的地図が作成された。さらに、感覚細胞群からの聴覚情報受容が示唆される高次聴覚神経細胞が、解剖学的に44種類同定された。そこで、聴覚一次中枢に投射し一次中枢内の活動を制御すると推察される局所介在神経細胞(AMMC-B2, AMMC-LN細胞群)に着目した。今年度、私はまず、上記の神経細胞が感覚細胞と接続することをGRASP法により明らかにした。次に、B2細胞がどの聴覚情報を受容しているのかを検証する為に、Ca2+イメージングにより純振動刺激に対する神経活動を観察した。その結果、B2細胞は純振動刺激に応答を示した。さらに、様々な周波数の純振動刺激に対するB2細胞の応答強度は、与えた純振動刺激に対して同程度であった。これは、B2細胞は様々な周波数情報を受容することを示している。次に、特定の時間間隔(Inter-pulse Interval, IPI)を持つ音刺激に対する、聴感覚細胞とLN細胞の神経活動をCa2+イメージングにより観察した。その結果、聴覚情報を受容する感覚細胞群はより長いIPIの音に強い応答を示した。しかし、LN細胞は短いパルス音に最も強く応答を示した。さらに、蛍光免疫染色法により、LN細胞はGABA作動性であると示唆された。これらのことから、LN細胞が抑制的に下流の神経細胞を制御することにより、より長いIPI情報を際立たせる役割を担う可能性が示された。平成27年度の研究計画である1.カルシウムイメージングにより触角の振動刺激に対するAMMC-B2神経細胞の周波数特性を解明する。において、計画通りB2神経細胞の周波数特性の解明を終えた。B2神経細胞は様々な周波数の聴覚情報を受容していることが明らかとなった。2.片側の触角で受容された聴覚情報を伝達するB2神経細胞が反対側の1次聴覚中枢の応答性を制御する可能性を検討し、その制御は促進的、もしくは抑制的であるのかを解明する。において、感覚細胞とB2神経細胞の同時カルシウムイメージングによりB2神経細胞と非聴覚入力側の1次聴覚中枢を観察した結果、B2神経細胞の活動は観察されたが、感覚細胞において神経活動は観察されなかった。つまり、B2神経細胞は感覚細胞をカルシウムイメージングで観察できるほど促進的に制御しているわけではないことが明らかになった。3.膜移行型GCaMP6を発現させる為のUAS系統の作成を行う。この系統によりA1神経細胞に膜移行型GCaMP6を発現させ、聴覚刺激に対するA1神経細胞の活動を観察する。において、膜移行型GCaMP6を発現させるためのUAS系統の作成は完了した。まだ、A1神経細胞に発現させて、神経活動を計測してはいないが、蛍光抗体染色法により作成されたUAS系統を用いることでGCaMP6を膜に移行させることが出来ることを確認している。4.聴覚・視覚刺激の同時入力が可能であり、その時の神経活動を可視化できる実験系を確立する。

について、これはまだ行っていない。5.1,2の結果を国内/国際学会で発表する。について、2015年7月に開催された第38回日本神経科学大会、2015年5月に開催されたThe 3rd APDRCにおいてポスター発表を行った。音を用いた同種間コミュニケーションを行う動物にとって、同種の音情報を雑音から識別する神経機構の獲得は不可欠である。キイロショウジョウバエは、種特異的な時間間隔(Inter-pulse Interval, IPI)を持つ羽音(求愛歌,平均IPI 35 ms)を用いて求愛行動を行う。近年、求愛歌受容に重要な2次神経細胞(2次)が同定された。2次の機能阻害により求愛歌に対する応答行動は減少する。さらに、その神経活動はIPI 25 msの音に最も強く応答し、IPI 15 msの音に減少した応答を示す。しかし、どの神経細胞のどの様な神経活動によって時間間隔情報を抽出しているのか、その神経機構は不明である。今年度、2次の上流の神経細胞はIPI 15 msの音に最も強く応答することをCa2+イメージングにより明らかにした。このことから、2次は抑制性入力を受けている可能性がある。そこで、GABA受容体を2次で発現抑制しその神経活動を観察した。その結果、神経活動は短いIPIの音に対して上昇した。これは、2次がGABA作動性の抑制性入力を受けていることを示唆している。次に、GABA作動性の局所介在神経細胞(LN)を探索し、2種類のLNが2次と空間的に近接することを明らかにした。様々なIPIの音に対する2種類のLNの神経活動は、IPI 15 msの音に最も強く応答した。これは、これらLNが短いIPIの音において2次により強く抑制性出力することを示唆している。さらに、2種類のLNの機能阻害により求愛歌に対する応答行動が上昇するのかを検証する為、LNをそれぞれ機能阻害したメスを用いて人工求愛歌に対する応答行動を観察した。その結果、メスの応答行動は上昇した。この様に、LNが2次の神経活動を抑制するという小規模な神経回路によって、短いIPI情報を抑制するフィルター機能が獲得されているのかもしれない。今年度は、昨年度から着目しているAMMC-B2神経細胞と同様の解剖学的特徴を持つAMMC-LN神経細胞についても情報処理という観点から研究を行いたいと考えている。上記2つの神経細胞はいずれも局所介在神経細胞であり、脳内の聴覚一次中枢に投射し一次中枢内の制御を行っていると考えられる。また、近年44種類の高次聴覚神経細胞が同定されたが、その内の5種類のみが局所介在神経細胞である。聴覚一次中枢の制御が示唆される局所介在神経細胞が聴覚情報処理においてどの様な役割を果たしているのかを明らかにしたい。AMMC-LN神経細胞について、この神経細胞の機能阻害により聴覚応答行動が減少することが報告されている。また、この細胞群の一部はGABA作動性の抑制性神経細胞であるということも報告されている。そこで、1.AMMC-LN神経細胞が実際に感覚細胞と接続するのかをGRASP法により検証する。
降雪地域における温度差発電適地調査とその実用化実験

【研究目的】我国が国連総会の場で表明したCO_2排出量削減割合を達成するには太陽光や風力のみならず、製造から廃棄まで、トータルで環境負荷の少ない温度差発電の普及促進が重要かつ急務である。そこでメンテナンス等が容易な熱電発電素子を使用し、降雪地域で発電することを考えた。具体的には米沢市周辺の発電適地を調査すると共に、降雪地域に適した温度差発電システムの実用化を目指した基盤実験を行うことを目的とした。【研究方法】豪雪地域では耐久性やメンテナンス等を考慮し、太陽光発電等との併用ではなく、熱電発電素子のみを使用する単独方式が最良である。また温度差の確保は米沢市周辺の温泉から溢出する温排水と近隣を流れる河川水を利用するのが得策と考えられる。そこで温泉施設の温排水温度と河川水温度の経時変化を測定し、適地を決定する。次いで使用する熱電発電素子の発電性能を評価し、モデル発電実験を行う。【研究成果】購入した熱電発電素子(S.T.S社製:T150-85-127S型)の発電性能試験を行った。その結果、素子5個を直列配線し、その両面に25°C以上の温度差を与えれば、接続したLED(大和科学教材研究所:高輝度発光ダイオード)の発光が確認出来た。また適地決定のため平成22年10月29日30日、小野川温泉うめや旅館の温排水および近隣の大樽川の水温を24時間測定した。温排水温度は43°C±0.3°C、河川水温度は8°C10°Cと日較差はほとんど認められなかった。これより小野川温泉地域は温度差発電に必要な温水と冷水の質、量共に良好であり、その適地であることが分かった。なお、本研究成果の一部を平成22年度東北地区国立大学法人等技術職員研修技術発表会において「熱電マイクロ発電の普及促進を目指して」の題目で口頭発表した。
放射オージェスペクトルの化学効果

放射オージェ(RA)過程は、1光子放出を同時に伴う2電子遷移による内殻空孔の緩和過程であり、特性X線の低エネルギー側にサテライトバンドを与える。このバンドスペクトルは硬X線領域にありながら、実験の難しい軟X線吸収スペクトルと類似の情報を含んでおり、凝縮系の電子状態の有用なプローブになる可能性をもっている。しかし、これまでの研究例は少なく、詳細は未だ不明な点が多い。RAスペクトルの物性研究への応用を究極の目的として、本年度はまず、強度の弱いRAスペクトルを高分解能で測定する分光器の開発からはじめた。具体的には、手持ちのX線ラマン散乱用分光器をベースに、真空パス接続部と検出器設置部を改造し、1次元検出器並びにヨハンソン型湾曲結晶を組み込んだ。湾曲結晶は試料に応じて何種類か準備したが、その中には本経費で購入したSiO_2結晶も含まれる。この分光器によって数日程度の清算で数eVの分解能のRAスペクトル測定が可能になった。開発した分光器を使って、いくつかのKとCa化合物のRAスペクトルを測定したところ、化学的環境の違いに応じて形状が変化する複雑な構造が観測された。こうした化学効果は、電子状態研究のプローブとしてのRAスペクトルの可能性をあらためて確認させるものである。得られたRAスペクトルの解釈にあたってDV-Xα法を導入したところ、RAスペクトルの構造とその化学効果を、化学的常識と矛盾させずに、試料の電子構造と結びつける事ができた。詳細はすでに雑誌論文として発表している。本研究で用いた方法:RAスペクトルの高分解能測定とDV-Xα法による解析は、他の元素の化合物についても有効と期待される。現在、Ti、V、Cr、Mnの化合物について同様のやり方を系統的に行っているところである。今後もこうした基礎データを蓄積する事で、RAスペクトルの実用化に寄与したいと考えている。
細胞接着分子を標的とした選択的オートファジー誘導による口腔癌転移阻止療法の開発

本研究は,口腔扁平上皮癌細胞に選択的オートファジーのアダプター分子であるp62発現を誘導することにより,インテグリンαvの分解を亢進し,扁平上皮癌細胞のインテグリンαv発現を低下させ,口腔癌の増殖や浸潤・転移を阻止する新しい口腔癌治療法を開発することを目的としている.そのために,インテグリンαv分解とp62を介する選択的オートファジーとの関連を検討するために,インテグリンαvとp62の複合体形成について解析する.さらに遺伝子導入によるp62発現誘導が,口腔扁平上皮癌細胞のインテグリンαv発現に与える影響を検討するとともに,増殖能,浸潤能や転移能に対する影響について解析することを計画している.本研究は,口腔扁平上皮癌細胞に選択的オートファジーのアダプター分子であるp62発現を誘導することにより,インテグリンαvの分解を亢進し,扁平上皮癌細胞のインテグリンαv発現を低下させ,口腔癌の増殖や浸潤・転移を阻止する新しい口腔癌治療法を開発することを目的としている.そのために,インテグリンαv分解とp62を介する選択的オートファジーとの関連を検討するために,インテグリンαvとp62の複合体形成について解析する.さらに遺伝子導入によるp62発現誘導が,口腔扁平上皮癌細胞のインテグリンαv発現に与える影響を検討するとともに,増殖能,浸潤能や転移能に対する影響について解析することを計画している.
プロスポーツ観戦者のセグメント・マーケティングに関する研究

プロスポーツ観戦者のセグメントマーケティング戦略の策定に有効な情報を開発するために、日本プロサッカーリーグの公式戦(平成11年、平成12年)及び第3回FIFA女子ワールドカップ大会(平成11年)の観戦者を対象とした社会調査を実施した。観戦者のセグメントファクターとして、ジェンダー、観戦動機、観戦歴、観戦頻度、組織化の有無、競技会場の立地、競技会場の収容規模などの有効性が示唆された。各々のファクターについて、マーケティングレコメンデーションを含め、論文化を進めた。一方、それらレコメンデーションのフィジビリティースタディーとして、2つのプロサッカークラブのマーケティング担当者と共同で、いくつかの試験的な事業を行った(平成12年)。第3回FIFA女子ワールドカップ大会のデータからは、女性アスリートの観戦者の社会心理特性について、北米スポーツマネジメント学会で報告した(平成12年)。プロスポーツ観戦者のセグメント・マーケティング戦略の策定に有効な情報を開発するために、日本プロサッカーリーグ(Jリーグ)の公式リーグ戦及び第3回FIFA女子ワールドカップ大会(WWC'99)の観戦者に関する社会調査を行った。セグメント・ファクターとして、観戦者のジェンダー、社会心理的特性、観戦歴、及び競技会場の立地、収容規模の有効性が示唆された。ジェンダーについては論文化し、「スポーツ産業学研究」に発表したが、他のファクターについても、今後、それを基礎としたマーケティング施策について研究をすすめていく予定である。Jリーグのデータからは、観戦動機としてVicarious Achievement,Drama,Community Attachment,Player Attachment,Sport Attachment,Team Attachmentの6つの因子が抽出され、それらと観戦者属性及び観戦行動の特徴の関係について分析を行い、北米スポーツマネジメント学会(バンクーバー、カナダ)のシンポジウムの内容として報告した。国内では、口頭発表としてプロスポーツ観戦者の社会心理的特性についてを日本体育学会および日本プロスポーツ産業学会の学会大会において報告した。平成12年度は、社会心理的特性の分析を中心としながら、プレイヤーの性差(JリーグとWWC'99の比較など)による観戦者特性との関係を扱う予定である。
ヒトデの生殖腺刺激ホルモンの作用機構：受容体との相互作用と放卵のメカニズム

生殖腺刺激ホルモン(GTH)は脊椎動物ばかりでなく無脊椎動物においても生殖細胞の形成や成長・成熟に重要な働きを持つ。ヒトデのGTHは放射神経に存在し、リラキシンとよく似た2本鎖ペプチドから構成されるペプチドホルモンである。それ故、ヒトデのGTHをリラキシン様生殖腺刺激ペプチド(relaxin-like gonad-stimulating peptide, RGP)と呼ぶ。本研究は、ヒトデをモデルに生殖制御機構を分子レベルで解明することを目的として、RGP受容体を同定し、RGPと受容体との相互作用の解析を行い、さらに、これまでほとんど未解決であった放卵・放精のメカニズムについて解析する。