hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
モバイルスレッドによるピアツーピア・サービス基盤に関する研究

本研究では、ピアツーピア(P2P)ネットワークを、サービス提供基盤として位置づける「P2Pサービス基盤」について、その確立を目指した。そして、P2Pにおける規模追従性、負荷分散と均衡化、そして信頼性や障害耐性のためのレジリエンスを、従来のコンテンツではなくサービスを単位として実現する要素技術、特にモバイルスレッドの活用、それらの統合化について成果を挙げた。複数の国際学術誌論文や国際会議論文を発表し、それらには複数の最優秀論文表彰も含まれる。さらに英文専門教科書の分担執筆にもつながった。ピアツーピア(P2P)ネットワークを、Webサービスと同様に、サービスを提供する基盤として構築する「ピアツーピア・サービス基盤」について、規模追従性、負荷分散と均衡化、信頼性と障害耐性を踏まえた確立に向けて、本年度は以下のような成果をあげた。(1)コンテンツ共有の負荷分散と均衡化について、関連成果を研究会などで数件発表するとともに、査読論文投稿を行った。さらに、モバイルスレッドによる負荷分散と均衡化について、基礎的な検討を行い、査読論文投稿の準備に取りかかった。次年度前半には投稿する。(2)従来のP2Pにおける検索方式の効率化について、方式設計と予備的な実験評価を行い、関連成果を研究会などで数件発表した。(3)P2Pサービス基盤における検索方式について、名前空間の構造化、分散データベースの極細粒度化などの検討と方式設計を進め、査読論文投稿を行った。(4)適応型ネットワークに関する成果を研究会などで数件発表した。(5)サービスの一形態であるストリーミングについて、適応型ネットワークの技術論文が、分担執筆の形で英文専門教科書に掲載決定した。以上のように、初年度として然るべき成果を挙げることができたと考えている。次年度からは、当初の研究計画に従って、本年度の成果をさらに拡張・深化させ、最終的な実地実験での評価に結びつけていく。研究会発表にとどまらず、国際会議発表や学術論文誌への投稿を積極的・集中的に進める。ピアツーピア(P2P)ネットワークを、Webサービスと同様に、サービスを提供する基盤として構築する「ピアツーピア・サービス基盤」について、規模追従性、負荷分散と均衡化に関する前年度の成果を踏まえ,本年度は動的な負荷分散、信頼性と障害耐性の確保に向けて、以下のような成果をあげた。(1)モバイル技術による動的なネットワーク資源配置について、国内論文誌に論文掲載した。また、関連する動的ネットワーク技術についても、国内学会で発表し、国際会議へも論文投稿中である。現在は、さらに関連論文の国際論文誌への投稿準備中である。(2) P2Pにおける検索方式の効率化について、国際会議で複数件の発表を行い、内1件は最優秀論文賞を獲得した。現在は、関連論文の国際論文誌への投稿準備中である。(3) P2Pサービス基盤の基本方式について、名前空間の構造化、分散データベースの極細粒度化に関する論文発表を国際会議で行った。(4)ネットワークの自律分散的な信頼性確保について、国内会議で論文発表を行い、国際会議へも複数件の論文投稿中である。(5)他にも高度分散システムの一般的見地から、複数件の国際会議で論文発表ないし論文採択となった。以上のように、2年めとして然るべき成果を挙げることができたと考えている。次年度は最終年度であり、当初の研究計画に従って、本年度までの成果をさらに拡張・深化させ、最終的な評価や統括に向けて取り組むとともに、今まで以上に積極的・集中的に国際的な場での発表・発信を進めていく。ピアツーピア(P2P)ネットワークを、Webサービスと同様に、サービスを提供する基盤として構築する「ピアツーピア・サービス基盤」について、規模追従性、負荷分散と均衡化、信頼性と障害耐性に関する前年度までの成果を踏まえ、最終年度である本年度は以下のような成果をあげた。1.モバイルスレッドによる動的な負荷分散と均衡化について論文をまとめ上げ、国際論文誌に投稿した。2.動的サービスの一例としてストリーミングを捉え、そのP2P配信を動的に最適化するとともに信頼性を確保する方式を、複雑ネットワークの解析に用いられ始めているネットワーク・モチーフを応用する形で構築した。世界的にも極めて斬新な成果を達成し、国際会議で発表した論文は最優秀論文賞を獲得した。ストリーミングについては、適応型ストリーミングネットワークの技術解説を分担執筆の形で掲載した英文専門教科書が出版された。3. P2Pサービスの基幹技術であるサービス発見ならびに検索方式の効率化について、国際論文誌に論文掲載した。4.ネットワークの信頼性および障害耐性の観点から、関連技術であるDelay Tolerant Networksの効率化に取り組み、国際会議で論文発表した。5.ネットワーク一般に関する設計技術の高度化について、複数の国際会議や国内研究会で論文発表を行なった。6.以上の研究成果を具体的にクラウド構築技術に応用し、適応型のプロビジョニング(資源配分予測)を動的P2Pによって可能にした成果を国際論文誌に論文発表した。

以上のように、「ピアツーピア・サービス基盤」の実現に向けて、要素技術の構築、複数関連技術の統合、応用例への適用まで行ない、小規模ではあるが実地検証も行なった。研究全体として、然るべき成果を挙げることができたものと考える。26年度が最終年度であるため、記入しない。計算機ネットワーク26年度が最終年度であるため、記入しない。初年度の本年度からさっそく関連研究成果を幾つかの研究会で発表し、意見交換なども行なった。発表の幾つかは学会受賞につながっている。また、関連する技術論文が、分担執筆の形で英文専門教科書に掲載決定した。現在は、学術論文誌への複数の論文投稿が査読を受けているところである。本年度の主要な成果は、国際・国内論文誌2件、国際会議(採録決定を含む)5件、内1件は最優秀論文賞、国内会議(全文査読)1件である。加えて、国際会議投稿中3件、国際・国内論文誌査読中2件、同投稿準備中2件という状況である。当初の研究計画に従って、本年度の成果をさらに拡張・深化させ、最終的な実地実験での評価に結びつけていく。研究会発表にとどまらず、国際会議発表や学術論文誌への投稿を積極的・集中的に進める。次年度は最終年度であり、本年度までの成果をさらに拡張・深化させ、関東と九州という国内の遠隔環境の上で実ネットワークでの実証実験と検証に取り組む。そして、3年間の最終的な評価および統括、さらに残された課題の洗い出しなども行う。今まで以上に積極的・集中的に国際的な論文誌や会議での論文発表を進めるとともに、ウェブ等も最大限に活用して、社会・国民に向けて発信していく。
有形・無形を問わない文化的景観の調査方法とその保護方法の提案

奥能登の重要無形民俗文化財として残る「あえのこと」と呼ばれる儀礼,東風を「あいのかぜ」と読む越中の方言,「あいの風」を唄う能登の舟唄,富山県の方で能登から吹く風を「能登アイ」と呼ぶ慣習,富山湾の藍色の海色を「あいがめ」と呼ぶ深海の地形など,先人が育んできた文化や山海の風景を注意深く観察してきた結果が辛うじて地方の言葉として残っている.このように日常の言葉は風景と深い関わりがあるにも関わらず,無形であるため,文化的価値として認め,位置付けることが難しい.現代の社会としては,それも止むを得ない現象と言えるが,風景学の分野においては,これを見過ごすには忍び難い.そこで,本研究では地方に残る言葉を頼りに,風景を再認識し,文化的景観として位置付け,その方法論を提示することを研究の目的とする.本研究では地方に残る言葉を頼りに,風景を再認識し,文化的景観として位置付け,その方法論を提示するために,初年度である平成29年度は,文字資料の収集とそのデジタル化,テキスト分析,現地調査により風景用語抽出を行う.平成30年度には,抽出した風景用語に地理属性を加え,地理空間情報としてデータベース化する.地理空間分析は,文字資料を紀行文,俳書・詩集,民謡,絵図・古地図に大別し,場所の特性を明らかにする.最終年度はとりまとめ研究成果の外部への還元に努める.以上により,本研究では,有形・無形を問わない文化的景観の調査方法および文化的景観を保護するための方法論を検討し,提案する.29年度は,文字資料収集とそのデジタル化および現地調査を行った.本年度は,対象とする主な郷土文学資料のデジタル化および地理情報システム(GIS)による空間把握を行った.とりわけ,民謡と詩歌のテキスト分析と空間分析を中心に分析を進めた.この結果,民謡全曲(220曲)を対象とし,テキスト分析を行った結果,能登全域に関わる特徴語の抽出は難しいものの,同様の分析を,河北郡(16曲),羽咋郡(43曲),鹿島郡(56曲),鳳至郡(78曲),珠洲郡(34曲)というように地域を区分してテキスト分析を行うと,地方の特色を表わす特徴語がある程度具体的に把握できることが分かった.抽出した特徴語の関連性を,郷土資料と読み合わせると,歴史的出来事,生業,風習,信仰,気象を表す語が多く,紀行文や名所案内に示す特徴とは異なる能登文化の基層や大衆文化につながる言葉が導出できることが明らかとなった.これとは別に,歌う場所や目的によって分類した柳田國男の分類方法に従って220曲の民謡を分類したところ,田歌,庭歌,祝歌,遊び歌などに関しては,地域的な特徴は現れなかったが,山歌,海歌,業唄,道唄に関しては,分布の法則性があることが明らかとなり,民謡は地域の文化的景観を位置づける上で有益な資料となりうると言える.一方で,詩歌に関しては,テキスト分析により,一定の特徴語を抽出できるが,空間的に地域に共通する特徴語導出するには限界があると言える.ただし,詩歌によっては,詩歌自体あるいは,詩歌に詠まれる語句が,民謡のそれとは異なり,言語芸術として認められ,これが,上層文化や地域の固有の性質として広く享受される特徴があり,民謡とは異なる種類の表現や特性を認識する上で貴重であると言える.31年度は,30年度に引き続き,抽出した風景用語のテキスト分析および地理的空間把握を行う.紀行文,俳書・詩集,民謡,絵図・古地図のうち,残る紀行文の用語の地理的特性および比較分析を行う.紀行文および紀行日記に関しては,旅路,旅程,訪問場所を抽出し,前年度にデジタルテキスト化された言葉に位置属性を加える.これらの作業には,地理情報システムソフトウェア(ArcGIS)を使用する.これにより,どのような場所で,どのような種類の語句が使用されているのかが明らかとなる.出現頻度の高い語句の分布,集積,連続性により,地域における言葉の特性およびその分布を明らかにする.民謡に関しては,抽出した語句を,地域の文化的景観特性として位置づけ,論文発表を行う.最後に,研究のとりまとめを行い,得られた成果の執筆作業を行う.奥能登の重要無形民俗文化財として残る「あえのこと」と呼ばれる儀礼,東風を「あいのかぜ」と読む越中の方言,「あいの風」を唄う能登の舟唄,富山県の方で能登から吹く風を「能登アイ」と呼ぶ慣習,富山湾の藍色の海色を「あいがめ」と呼ぶ深海の地形など,先人が育んできた文化や山海の風景を注意深く観察してきた結果が辛うじて地方の言葉として残っている.このように日常の言葉は風景と深い関わりがあるにも関わらず、無形であるため,文化的価値として認め、位置付けることが難しい.現代の社会としては,それも止むを得ない現象と言えるが,風景学の分野においては,これを見過ごすには忍び難い.そこで,本研究では地方に残る言葉を頼りに、風景を再認識し,文化的景観として位置付け、その方法論を提示することを研究の目的とする.初年度である平成29年度は、文字資料の収集とそのデジタル化、テキスト分析、現地調査により風景用語抽出を行った。文字資料収集に関しては、下記に記す全ての資料収集を終えた。収集した資料は、以下の通りである。1紀行文および紀行日記:『能登遊記』『能州遊勝』『能登一覧記』『能登浦傳』『能州紀行』『能州日歴』『能登紀行』(7冊)2紀行日記:『能登日記』『三日月の日記』『能登日記』『能北日記』『鶴村日記』(5冊)3俳書・詩集:『珠洲の海』『能登遊嚢』(3冊)

4民謡:227曲ある.この中には,1)祝儀唄,儀礼の唄:(お田植え神事の唄,起舟祝い唄),2)歳時唄:踊り唄,3)生活の唄,4)作業歌:田植唄,田切唄,紙すき唄,糸ひき唄,茶もみ唄,たたら唄,5)名所唄などを含む。テキスト分析については、現在進行中の資料もあるが、資料の種類によって異なる用語が抽出され、幅広い用語が収集できていると言える。加えて、現在では注視されていない用語も明らかとなり、これらは、風景を再認識する糸口と成り得る。29年度は、文字資料収集とそのデジタル化および現地調査を行った。文字資料収集に関しては、下記に記す全ての資料収集を終え、収集した文字資料のデジタル化およびテキスト分析に関しては、一部を残し終了した。俳書を除く、詩集および民謡に関しては、全てのデジタル化作業を終え、テキストマイニングソフトウェアによって、計量的分析を行った。これにより、頻度の高い単語を品詞ごとに150語抽出、抽出語からの、内容が似た文書の群(クラスター分析)、語と語の結びつき(共起ネットワーク分析)を行い、語句の関係性を明らかにした。紀行文、および紀行日記においては、漢文体あるいは、古体の漢字が用いられている文字資料が多数あり、デジタル化に際し、文字化け等による構文エラーが生じ、デジタル化に遅れが出た。対象とする紀行文の中では最長である『能登遊記』のデジタル化についは終了したが、残りの文献については、30年度も継続して行う。デジタル化において一部の遅れがある一方で、31年度に予定する空間把握を先行して行った資料もある。計画当初予定していた現地調査として曳山祭り、キリコ祭り、火祭り、奉燈、鵜祭りなどの年中行事は、天候不良および一部予定調整が困難な時期があったため、30年度も継続して行う。奥能登の重要無形民俗文化財として残る「あえのこと」と呼ばれる儀礼,東風を「あいのかぜ」と読む越中の方言,「あいの風」を唄う能登の舟唄,富山県の方で能登から吹く風を「能登アイ」と呼ぶ慣習,富山湾の藍色の海色を「あいがめ」と呼ぶ深海の地形など,先人が育んできた文化や山海の風景を注意深く観察してきた結果が辛うじて地方の言葉として残っている.このように日常の言葉は風景と深い関わりがあるにも関わらず,無形であるため,文化的価値として認め,位置付けることが難しい.現代の社会としては,それも止むを得ない現象と言えるが,風景学の分野においては,これを見過ごすには忍び難い.そこで,本研究では地方に残る言葉を頼りに,風景を再認識し,文化的景観として位置付け,その方法論を提示することを研究の目的とする.本研究では地方に残る言葉を頼りに,風景を再認識し,文化的景観として位置付け,その方法論を提示するために,初年度である平成29年度は,文字資料の収集とそのデジタル化,テキスト分析,現地調査により風景用語抽出を行う.平成30年度には,抽出した風景用語に地理属性を加え,地理空間情報としてデータベース化する.地理空間分析は,文字資料を紀行文,俳書・詩集,民謡,絵図・古地図に大別し,場所の特性を明らかにする.最終年度はとりまとめ研究成果の外部への還元に努める.以上により,本研究では,有形・無形を問わない文化的景観の調査方法および文化的景観を保護するための方法論を検討し,提案する.29年度は,文字資料収集とそのデジタル化および現地調査を行った.本年度は,対象とする主な郷土文学資料のデジタル化および地理情報システム(GIS)による空間把握を行った.とりわけ,民謡と詩歌のテキスト分析と空間分析を中心に分析を進めた.
動脈硬化症予防に関するNOS遺伝子多型を考慮した職域集団における介入研究

上腕-足首脈波伝播速度(baPWV)により軽度の動脈硬化有りと判定された対象者を情報提供(弱い介入)と介入(強い介入)においてbaPWV改善傾向を解析した。NOS遺伝子多型(T-^<786>C遺伝子多型)の-786Cアレル群と非-786Cアレル群ともに情報提供では有意な改善は見られなかったが、介入により非-786Cアレル群でのみ有意な改善傾向が認められた。-786Cアレル群では、介入による効果は低いことが示唆された。血管内皮細胞由来の一酸化窒素合成酵素(NOS)はL-arginineを基質とし、一酸化窒素(NO)を生成する。NOは、様々な機能が発見され、血管の機能維持に重要な役割をはたしており、抗動脈硬化的に働いていると考えられている。NOS遺伝子プロモーター領域にあるT^(-786)C遺伝子多型(転写開始点より786塩基上流にあるチミンのシトシンへの置換)は、心筋梗塞、冠動脈攣縮との関連があると報告されており、動脈硬化症との関連性が国内・外の研究により強く示唆されている。しかし、NOS遺伝子多型(T^(-786)C遺伝子多型)の動脈硬化症発症への関与が指摘されながら、実施されてきた研究は、症例対照研究によるものがほとんどであり、動脈硬化症予防に関する介入研究は見られない。そこで、動脈硬化症予防に関するNOS遺伝子多型を考慮した職域集団における介入研究を実施し、より有効な動脈硬化予防プログラムを開発することを本研究の目的としている。目的;一酸化窒素合成酵素(NOS)遺伝子多型(T^<-786>C遺伝子多型)の動脈硬化症発症への関与が指摘されながら、動脈硬化症予防に関する介入研究は見られない。対象と方法;大動脈脈波伝播速度の測定により、軽度の動脈硬化有りと判定された対象者を34名選んだ。クロスオーバーデザインによる介入研究のために、34名を無作為に17名ずつの2群に分け、それぞれ前期介入群、後期介入群とした。介入期間はそれぞれ3ヶ月間(12週間)とし、1回/週の動脈硬化症に関する学習と運動療法を中心とした動脈硬化予防プログラムを実施した。また、遺伝子多型の同定に関しては、介入開始時の検査での残存採血血液を用いて行った。結果と考察;前期介入群の3ヶ月間における変化については、大動脈脈波伝播速度の平均値は、1588.3cm/sから1537.0cm/sに減少傾向を示したが、有意な変化ではなかった(p=0.079)。体重、BMI、腹囲、血圧値等も減少傾向を示したが有意な変化ではなかった。血液検査のうちHbAlcについては、5.51%から5.27%に有意に減少した(p=0.017)。T^<-786>C遺伝子多型については、17名のうち12名がTTで5名がTCであった。現在、後期介入群に対してプログラムを実施中であるが、症例数を増やして遺伝子型別に効果を解析したいと考えている。目的;一酸化窒素合成酵素(NOS)遺伝子多型(T^<-786> C遺伝子多型)の動脈硬化症発症への関与が指摘されながら、動脈硬化症予防に関する介入研究は見られない。対象と方法;大動脈脈波伝播速度の測定により、軽度の動脈硬化有りと判定された対象者を2年間の累積で54名選んだ。54名を無作為に23名、31名ずつの2群に分け、それぞれ介入群、対照群とした。介入期間は3ヶ月間(12週間)とし、1回/週の動脈硬化症に関する学習と運動療法を中心とした動脈硬化予防プログラムを実施した。結果と考察;介入群の3ヶ月間における変化に関しては、大動脈脈波伝播速度の平均値は、1538cm/sから1477cm/sに有意な減少傾向を示した(p=0.01)。一方、対照群では有意な変化は見られなかった。介入群を-786Cアレル・キャリアーと非-786Cアレル・キャリアーに分けて介入効果を比較検討したが、大動脈脈波伝播速度の変化に関する効果は-786Cアレル・キャリアーでのみ有意な改善傾向が認められた。介入効果にT^<-786> C遺伝子多型の影響のあることが示唆され、今後、症例数をさらに増やして解析したい。

目的;一酸化窒素合成酵素(NOS)遺伝子多型(T^<-786>C遺伝子多型)の動脈硬化症発症への関与が指摘されながら、動脈硬化症予防に関する介入研究は見られない。そこで、動脈硬化症予防に関するNOS遺伝子多型を考慮した職域集団における介入研究を実施し、より有効な動脈硬化予防プログラムを開発することを本研究の目的としている。対象と方法;大動脈脈波伝播速度の測定により、軽度の動脈硬化有りと判定された対象者を2年間の累積で44名選んだ。対象者を情報提供期間(弱い介入)と介入期間(強い介入)において改善傾向を解析した。情報提供期間・介入期間はそれぞれ3ヶ月間(12週間)とし、介入方法として1回/週の動脈硬化症に関する学習と運動療法を中心とした動脈硬化予防プログラムを実施した。また、遺伝子多型の同定に関しては、介入開始時の検査での残存採血血液を用いて行った。結果と考察;対象者を-786Cアレル保有群と-786Cアレル非保有群に分けて情報提供と介入の効果を比較検討したが、大動脈脈波伝播速度の変化に関する効果は両群ともに情報提供(弱い介入)では有意な改善は見られなかったが、介入(強い介入)により-786Cアレル非保有群でのみ有意な改善傾向が認められた。-786Cアレル保有者では介入による大動脈脈波伝播速度改善効果が低い可能性が示唆された。対象と方法;対象者は某事業所の従業者で,2006年9月から始まった動脈硬化症予防プログラムの参加者84名である。3ヶ月間の介入期間の終了時の大動脈脈波伝播速度(baPWV)の値が介入開始時の値と比較し5%減少していたとき,「介入効果あり」と判断した。対象者を-786Cアレル保有群と-786Cアレル非保有群に分けて、baPWV5%減少効果の発現にかんする影響を性・年齢・生活習慣で調節した多変量ロジスティック回帰分析で検討した。結果と考察;-786Cアレル保有群は-786Cアレル非保有群と比較しbaPWV5%減少効果が出現するオッズ比が0.385(95%CI : 0.120-1.234, p=0.108)と有意ではないが弱い関連性がみられた.-786Cアレル保有者では介入による大動脈脈波伝播速度改善効果が低い可能性が示唆された。
マスト細胞におけるヒスタミン分泌機序の核磁気共鳴法による解析

アレルギー疾患やアナフラキシ-・ショックはマスト細胞からのヒスタミンなどの分泌によって引き起こされる。本研究ではマスト細胞の^1H-核磁気共鳴(NMR)スペクトルを非破壊的に測定し、マスト細胞のヒタミン分泌機序について検討し、以下の結果を得た。1.ラット腹腔内から分離・収集したマスト細胞の^1H-NMRスペクトルでは、マスト細胞内のヒスタミンが検出できた。その共鳴線は水溶液に比べ低磁場側に出現し、線幅が広く、しかも磁化の飽和移動がみられた。これらから、マスト細胞内のヒスタミンは分子運動が束縛された状態であり、分泌顆粒に結合していると考えられた。2.脱顆粒剤であるcompound 48/80の投与によって、マスト細胞から分泌された遊離ヒスタミンが検出できた。同時に、乳酸の共鳴線が出現した。マスト細胞浮遊液にブドウ糖を加えなくても、ヒスタミン分泌がcompound 48/80によって生じたが、この際には乳酸は出現しなかった。従って、ヒスタミン分泌時にブドウ糖が細胞内へ取り込まれ、解糖系によって乳酸ができることが明らかとなった。3.マスト細胞を等張のスクロース溶液に浮遊させると、顆粒分泌の際に遊離ヒスタミンは出現せず、結合型ヒスタミンのままであった。この浮遊液にNaClを追加すると、遊離ヒスタミンが出現した。このことから、ヒスタミンは分泌顆粒に結合したまま細胞外に放出された後、外液のNa^+イオンの存在下に顆粒から遊離すると考えられた。アレルギー疾患やアナフラキシ-・ショックなどはマスト細胞からのヒスタミンなどの分泌によって引き起こされる。本研究では^1H-核磁気共鳴(NMR)法を用い、マスト細胞のヒスタミンを非破壊的に測定し、マスト細胞からのヒタミン分泌機序を検討し、以下の結果を得た。1.ラット腹腔内からマスト細胞を得た。採取した腹腔内の浮遊細胞をパーコールによる比重遠心法で分離・収集した細胞の98%以上はマスト細胞であり、細胞生存率は96%以上であった。2.マスト細胞浮遊液の^1H-NMRスペクトルを測定した。生理的な条件である軽水溶液中でマスト細胞内のヒスタミンが^1H-NMRスペクトルで検出できた。水の巨大な共鳴線の励起をさけるために1331パルス系列などの選択的スピン励起法を用いた。3.脱顆粒剤であるcompound48/80の投与によって、分泌された遊離ヒスタミンの共鳴線がマスト細胞のヒスタミンの共鳴線よりも高磁場側に出現した。マスト細胞内のヒスタミンと分泌された遊離ヒスタミンが同時に^1H-NMRスペクトルで検出できることが明らかになった。4.ヒスタミン分泌時に乳酸の共鳴線が出現した。浮遊液にブドウ糖を加えなくても、ヒスタミン分泌がcompound48/80によって生じたが、この際には乳酸は出現しなかった。従って、ヒスタミン分泌時にブドウ糖の取り込みが促進し、解糖系が亢進することが明らかとなった。5.マスト細胞内のヒスタミンの共鳴線は線幅が広く、選択的水飽和法で^1H-NMRスペクトルを測定すると、その共鳴線は消失し、水溶液中のヒスタミンのみが検出可能となることを見い出した。この結果は細胞内のヒスタミンは分泌顆粒に結合していることを示唆し、現在、研究継続中である。^1H-核磁気共鳴(NMR)法を用い、マスト細胞のヒタミン分泌機序を解析し、以下の結果を得た。1.マスト細胞の^1H-NMRスペクトルにヒスタミンが検出できた。その共鳴線は水溶液に比べ低磁場に出現し、線幅が広く、しかも磁化の飽和移動が生じた。これらのことから、マスト細胞内のヒスタミンは運動が制限された状態であり、分泌顆粒に結合していると考えられた。2.分泌顆粒内にはヘパリンがある。

寒天に結合させたヘパリン溶液にヒスタミンを混和させると、ヒスタミンの線幅は増加し低磁場側に移動した。しかし、磁化の飽和移動は生じなかった。従って、マスト細胞のヒスタミンは顆粒内のヘパリンと結合している可能性があるが、その結合様式は単なるヘパリンとの混和では説明できなかった。3.マスト細胞が顆粒を分泌すると、遊離ヒスタミンが出現した。ところが、マスト細胞を等張のスクロース溶液に浮遊させると、顆粒分泌の際に遊離ヒスタミンは出現せず、結合型ヒスタミンのままであった。この浮遊液にNaClを追加すると、遊離ヒスタミンが出現した。このことから、ヒスタミンは分泌顆粒に結合したまま細胞外に放出された後、外液のNa^+イオンの存在下に顆粒から遊離すると考えられた。4.線虫を経皮感染させたラットでは小腸の消化管粘膜にマスト細胞が著明に増加する。その消化管を用いてin situでマスト細胞が検出できるかを検討したが、マスト細胞の同定にまでいたらなかった。また、マスト細胞浮遊液の^<31>P-NMRスペクトルを測定したが、十分なS/N比が得られず、ATPや細胞内pHの測定には多量のマスト細胞が入手可能な培養細胞系の確立が望まれた。
有限要素法および境界要素法を用いた電気機器における電磁力解析手法の開発

本研究は電気機器設計に対する応用を前提とした三次元電磁界の有力な電磁力解析手法の開発を目的としている。解析手法としては,有限要素法,境界要素法,それに加えて我々が過去十数年近くにわたって研究開発を続けてきた有限要素・境界要素併用法を採用し,これらに関する基礎理論の研究と実機解析への応用を課題としてきた。基礎理論の検討としては,有限要素・境界要素併用法を運動する導体を含むモデルに適用し,解析精度の向上,無限領域の容易な処理,そして要素の再分割不要などの有用性を指摘した。また,従来の有限要素・境界要素併用法の欠点であった最終マトリクス処理の困難さを改善するための新たな解析手法である交互法の開発にも成功した。実機解析への応用としては、リニア誘導モータ,リニア同期モータ,そして磁極分割型同期モータなどへの適用を試み,それぞれの機器における構造の最適化を図ることができた。具体的には,比較的複雑な構造を有する歯,スロット,磁石などを含む鉄心領域には有限要素法を,運動による電磁的物理量を査定する空隙中や外部の無限領域には境界要素法を適用することで容易に高精度な解析を実現した。さらに,短二次リニアモータの一次コイル結線法・給電法に関する検討を行うことで,新たなブロック給電スイッチング法に対する今後の設計への指針を与えることができた。この他にも,通風ダクトを有する誘導機,超伝導機器,二次元X-Yモータなどに対する特性解析を行い,機器の性能改善の指針となる有効な解析結果を得て,提案手法の妥当性と有効性を確認した。本研究は、電気機器設計に対する応用を前提とした、三次元電磁界の有力な電磁力解析手法の開発を目的としている。解析手法としては、有限要素法、境界要素法、それに加えて我々が過去10年近くにわたって研究開発してきた有限要素・境界要素併用法を採用し、これらに関する基礎理論の研究と、実機解析への応用を課題としてきた。基礎理論の開発に関しては、従来の有限要素法の欠点であった、求める物理量がメッシュに対して離散的であるという点を克服するために、物理量を求めたい点を含むように適切に仮想領域を設定し、有限要素法により求めた値を境界条件として、境界要素法を適用し、内点計算をしなおすという手法を提案した。この手法の開発により、従来の有限要素法のみの解析とくらべ、電磁力計算を精度良く行う事が可能になった。また、実機解析への応用としては、リニアモータ等を解析対象として選び、リニア誘導モータにおける縁効果改善のための二次導体スリット効果、ならびに、等価エアギャップ減少作用を有するラダースキュー形二次導体に関する研究を行い、数値シミュレーションを用いることで、理想的な二次形状に関する検討を、試作なしにおこなう事が出来た。この他にも、ステッピングモータ、超伝導機器に対する解析を行い、機器の特性改善の指針となる有効な解析結果を得て、各提案手法の妥当性と有効性を確認した。以上、本年度は研究期間を通して予定通り研究を進める事ができた。基礎理論の検討としては、三次元有限要素・境界要素併用法を運動する導体を含む領域に適用し、解析精度向上、要素の再分割不要などの有用性を指摘した。また、併用法解析を行う場合の励磁電流入力方法に関する検討を行い、磁束密度B、磁気ベクトルポテンシャルA、磁気スカラポテンシャルΨなどを考察物理量とした場合において、ほとんど同じシンプルなアルゴリズムで、高速に、かつ精度良く入力を行うことのできる方法を提案した。実機解析への応用としては、本年度は特にリニア同期モータを解析対象として選び、新たな二次構成に関する検討を行った。

本研究において提案された機器は、二次側に分割磁極を有するものであり、特性に悪影響を及ぼす空間高調波を削減しつつ、磁極の間に同期特性を安定化させる制動導体を設けることができる。なお、解析の妥当性は、試作機による実験によって示された。この他にも、リニア誘導モータ、超電導機器等に対する解析を行い、機器の特性改善の指針となる有用な解析結果を得て、各提案手法の妥当性と有効性を確認した。以上、本年度は研究期間を通して予定通り研究を進める事ができた。本研究は、電気機器設計に対する応用を前提とした、三次元電磁界の有力な電磁力解析手法の開発を目的としている。解析手法としては、有限要素法、境界要素法、それに加えて我々が過去10年近くにわたって研究開発してきた有限要素・境界要素併用法を採用し、これらに関する基礎理論の研究と、実機解析への応用を課題としてきた。本年度の研究としては、はじめに基礎理論の開発に関して、従来の有限要素・境界要素併用法の欠点であった最終マトリクス処理の困難さを改善するための新たな解析手法の提案をおこなった。これは有限要素法、境界要素法を交互に適用することで、従来の併用法と比べマトリクス処理を簡単にすると同時に、計算機必要記憶容量の削減を実現できるものである。また、実機解析への応用としては、特に短二次リニアモータの一次コイル結線法・給電法に関する検討をおこない、今後の設計への指針を与えることができた。さらに、これらの検討結果をもとに新たなブロック給電スイッチング法に関する検討をおこなった。提案方式はコイル毎にスイッチングをおこなうことで従来の方法と比べ格段に励磁区間を短く設定できるものであり、本方式の有用性は試作機を用いた実験によりしめすことができた。この他にも回転型モータ、超伝導機器に対する解析をおこない、機器の特性改善の指針となる有効な解析結果を得て、各提案手法の妥当性と有効性を確認した。
冷戦期アメリカ文学における「核の想像力」の詩学-カート・ヴォネガットを中心に-

本研究の目的は「冷戦期アメリカ文学において歴史的事件としてのヒロシマ(およびナガサキ)を語る可能性」を検討することにある。これまではおもにカート・ヴォネガットの核文学を環太平洋的な文脈に位置付け直すことを通じて、冷戦期アメリカの政治的言説に抗するような文学的営みの可能性を析出してきた。そこでは、同時代の歴史が忘却・抑圧してきた広島や長崎に対する原爆攻撃が、目撃体験者の危機的語りのなかに表現されていることを確認した。研究3年目にあたる当該年度は、より広い歴史的文脈から本研究を再検討することに主眼を置いた。具体的には、南北戦争からイラク戦争にいたる米国のこれまでの戦争がいかに記憶(忘却)されてきたのかを視野に入れながら、現在も終わらない核・空爆といった問題について再考した。おもな業績は以下の通りである。(1)当初の研究計画通り、平成22年10月、日本アメリカ文学会第48回全国大会(於立正大学)にてシンポジウムに講師として参加し、口頭発表および討議をおこなった。本発表はマーク・トウェインの語りの伝統に現代作家カードヴォネガットを位置づけることで、支配的言説からこぼれおちるような戦争の記憶がいかに文学化されてきたかをより広いアメリカ文学史的見地から検討しようと試みたものである。発表内容は雑誌論文としてまとめられた。(3)前年度にひきつづき、数名の研究者とともに共著を準備中である。本邦初訳となる資料の選定をはじめ、全体の構成・執筆に企画段階から参加(『現代作家ガイドカート・ヴォネガット(仮)』彩流社,平成23年度刊行予定)。1、慶應義塾大学大学院文学研究科へ提出された博士号学位請求論文Surviving the World's End:Hiroshima,History,and Testimony in Kurt Vonnegut's Nuclear Fiction(英文:平成21年2月提出)は、カート・ヴォネガットの作品における核兵器の表象を核批評や冷戦期文化批評に基づいて分析することにより、冷戦期アメリカ文学のなかに歴史的事件としての原爆投下を再定位しようとする試みである。冷戦期アメリカにおいて核は未来に予測される核戦争の黙示録的イメージとして描かれることが多かったが、ヴォネガット文学は核兵器使用を現実にすでに起こった事件あるいはその証言として歴吏記述的メタフィクションのなかに書き込んでいく点に特異性がある。こうした視点はアメリカを核兵器使用国として再定義する一方、核を「まだ起こっていない事件」としていた1980年代の核批評を批判的に乗り越える契機を示している、と結論づけた。この研究に関わる特記事項は以下の通り。(1)平成20年5月資料調査:広島市立図書館および平和記念資料館(2)平成20年9月資料調査:米国インディアナ大学ブルーミントン校(ヴォネガット未発表草稿群)およびニューヨーク公立図書館、ラトガーズ大学図書館、プリンストン大学図書館(3)受入先・成蹊大学大学院文学研究科における研究発表3.次年度以降の研究計画に掲げた「国際学会での研究発表」を実現すべく準備を進めた。当該年度中に提出した研究発表プロポーザルが採用され、平成21年5月全米文学協会2009年年次大会(ボストン)にて口頭発表を行なう予定になっている。口頭発表の本文はヴォネガット協会を通じてインターネット上でも発表される予定。1.前年度慶應義塾大学大学院文学研究科へ提出された博士号学位請求論文Surviving the World's End : Hiroshima, History, and Testimony in Kurt Vonnegut's Nuclear Fiction、および平成21年度中に行われた口頭試問によって平成22年2月、慶應義塾大学より博士号学位を授与された。本研究は、カート・ヴォネガットの作品における核兵器の表象を核批評や冷戦期文化批評に基づいて分析することにより、冷戦期アメリカ文学のなかに歴史的事件としての原爆投下を再定位しようとする試みである。冷戦期アメリカにおいて核は未来に予測される核戦争の黙示録的イメージとして描かれることが多かったが、ヴォネガット文学は核兵器使用を現実にすでに起こった事件あるいはその証言として歴史記述的メタフィクションのなかに書き込んでいく点に特異性がある。こうした視点はアメリカを核兵器使用国として再定義する一方、核を「まだ起こっていない事件」としていた1980年代の核批評を批判的に乗り越える契機を示していると結論づけたものである。2.当初の研究計画通り、平成21年5月米国American Literature Association2009年年次大会(於ボストン)にて口頭発表(別紙7.研究発表1)をおこない、これまでの研究成果を世に問うと同時に、国際的なネットワークを築くことができた。発表の本文はKurt Vonnegut Societyを通じてインターネット上でも近々発表される予定。また、この渡米に際し、以前留学していたラトガーズ大学図書館にて資料調査をおこなった。3.当該年度中の研究を受けて、平成22年度には以下の研究発表・共著書刊行が内定している。・当該研究をより広いアメリカ文学史的文脈へ位置づける試みとして、日本アメリカ文学会全国大会におけるシンポジウム(講師5名、コメンテーター1名)へ講師として参加することが内定している。・数名の研究者とともに共著を準備中である。本邦初訳となる資料の選定をはじめ、全体の構成・執筆に企画段階から参加(『現代作家ガイドカート・ヴォネガット(仮)』彩流社、平成22年度中刊行予定)。

これまではおもにカート・ヴォネガットの核文学を環太平洋的な文脈に位置付け直すことを通じて、冷戦期アメリカの政治的言説に抗するような文学的営みの可能性を析出してきた。そこでは、同時代の歴史が忘却・抑圧してきた広島や長崎に対する原爆攻撃が、目撃体験者の危機的語りのなかに表現されていることを確認した。研究3年目にあたる当該年度は、より広い歴史的文脈から本研究を再検討することに主眼を置いた。具体的には、南北戦争からイラク戦争にいたる米国のこれまでの戦争がいかに記憶(忘却)されてきたのかを視野に入れながら、現在も終わらない核・空爆といった問題について再考した。おもな業績は以下の通りである。(1)当初の研究計画通り、平成22年10月、日本アメリカ文学会第48回全国大会(於立正大学)にてシンポジウムに講師として参加し、口頭発表および討議をおこなった。本発表はマーク・トウェインの語りの伝統に現代作家カードヴォネガットを位置づけることで、支配的言説からこぼれおちるような戦争の記憶がいかに文学化されてきたかをより広いアメリカ文学史的見地から検討しようと試みたものである。発表内容は雑誌論文としてまとめられた。(3)前年度にひきつづき、数名の研究者とともに共著を準備中である。本邦初訳となる資料の選定をはじめ、全体の構成・執筆に企画段階から参加(『現代作家ガイドカート・ヴォネガット(仮)』彩流社,平成23年度刊行予定)。
トキの個性の維持機構とその適応的意義

個性の発達は、個体の置かれている状況や学習による行動発達といった後天的な要因と、遺伝子のような先天的な要因が組み合わさって生じると考えられる。これらの個性を生じさせる候補遺伝子としてドーパミン受容体D4(DRD4)の多型が注目されてきている。シジュウカラ1),2)では探索行動の性質や臆病さが、オウゴンチョウ3)では新規順応性が、オオフラミンゴ4)では成長速度などが、DRD4遺伝子多型と関連することが報告されている。これまでの調査研究から、佐渡島において放鳥されたトキにも、人や車に対する警戒特性、放鳥後の分散傾向等に、個性がある。今回は、DRD4遺伝子多型とトキの行動特性(=個性)との関連性を予備解析し、DRD4多型が放鳥後の個体の生存などの適応度に与える可能性について検討した。5羽の始祖個体のDRD4遺伝子保存領域をダイレクトシークエンスした結果、放鳥したトキには4つの多型があることが明らかになった。第9回11回放鳥で放鳥されたトキの雌個体のうちDRD4多型を特定できた35個体について、DRD多型変異と放鳥後1年後の生存率、放鳥後2週間以内に観察した採餌効率(3分毎の飲み込み数)、分散距離の関係を解析した。その結果、ひとつのDRD4多型(IV)が放鳥後の生存に影響を与えている可能性が認められた。遺伝子多型IV型を持つ個体は、新規探索性が低いため、野外での採餌効率が低く、そのため、放鳥後の生存率が低くなると考えらた。佐渡島のトキの再導入個体群では、各個体の飼育履歴も残っているため、DRD4遺伝子多型と個体の行動特性との関係を明らかにするたための好適な材料を提供している。今後、雄を含めた多くの個体のDRD4多型を行動データを蓄積していくことで、DRD4多型がトキの個性に与える影響を解明することが可能と考えている。まだ、雄個体のDRD遺伝子多型解析が終了していないが、解析用試料からのDNA抽出は終了している。ただ、材料が特別天然記念物のため、飼育下での新規物の提示実験については許可が得られず、個性の実験的解析はできない。そのため、これまでどおり飼育ケージ内での行動記録による解析から新規性を判断せざるをえず、実験的手法による解析は断念せざるを得ない。材料が特別天然記念物のため、飼育下での新規物の提示実験については許可が得られず、個性の実験的解析はできない。個性は、集団中で様々な状況で個体が示す一貫した行動上の傾向であり、多くの動物において、大胆さ、探索行動、攻撃性などの行動形質で個性を示すことが知られている。最近、鳥類などの脊椎動物ではドーパミン受容体D4(DRD4)の多型が個性を生じさせる候補遺伝子としてのひとつであると考えられている。これまでトキにおいても、DRD4遺伝子の保存領域配列に9カ所の部位で7つのSNP多型と2つの挿入欠失変異があり、4種類の遺伝子多型が存在することが確認されている。本研究課題では、大胆さや臆病さ、分散行動等の個性形質と関連していると考えられるDRD4遺伝子多型とトキの行動特性との関連性を解明し、それが放鳥後の個体の生存や繁殖などの適応度に与える影響を解明する。佐渡島で2013年2016年に放鳥された雌個体35羽のDRD4遺伝子多型が放鳥後の個体の生存などの適応度に与える可能性について予備的な解析を行った。DRD4多型が影響を与えると考えられる個体属性として、放鳥後1年後の生存率、放鳥直後の採餌効率、分散距離を解析した。4つのDRD4ハプロタイプのうち、ハプロタイプIV型を持つ個体は放鳥後の採餌効率が低く、死亡率が高いことが明らかになった(Fisherexact test, P=0.065)。ハプロタイプI型とIII型を持つ生存率が高く、放鳥地より分散する傾向があったが、サンプル数が少ないため有意ではない。ハプロタイプII型をもつ個体は少ないため、統計的な検定はできなかった。これらの結果から、トキの雌では、特定のDRD4多型が放鳥後の生存に影響を与えている可能性が示唆された。ハプロIV型を持つ個体は、新規探索性が低いため、野外での採餌効率が低く、そのため、放鳥後の生存率が低くなったと考えられた。既放鳥個体の生態データのデータベース作成は順調に進んでいて、雌個体のDRD4遺伝子型情報と生存、分散等の個体形質の関連性の解析はうまくいっている。既放鳥の雌個体の個性解析は順調に終了しているが、雄個体についてはDNAサンプルが大きく欠損している部分があるため、現在、これらのDNAサンプルが入手できるようにトキ保護センターに依頼している状況である。そのため、当初、H29年度予定していた既放鳥個体のDRD4多型と個性形質の関連性の解析が半分しか終了していない。また、新既放鳥個体の放鳥後の行動・生態形質についての調査は順調に進んでいるものの、飼育下の個体への新規性や大胆さを検出するための実験方法については環境省や飼育関係者と調整中である。

これらの個性を生じさせる候補遺伝子としてドーパミン受容体D4(DRD4)の多型が注目されてきている。シジュウカラ1),2)では探索行動の性質や臆病さが、オウゴンチョウ3)では新規順応性が、オオフラミンゴ4)では成長速度などが、DRD4遺伝子多型と関連することが報告されている。これまでの調査研究から、佐渡島において放鳥されたトキにも、人や車に対する警戒特性、放鳥後の分散傾向等に、個性がある。今回は、DRD4遺伝子多型とトキの行動特性(=個性)との関連性を予備解析し、DRD4多型が放鳥後の個体の生存などの適応度に与える可能性について検討した。5羽の始祖個体のDRD4遺伝子保存領域をダイレクトシークエンスした結果、放鳥したトキには4つの多型があることが明らかになった。第9回11回放鳥で放鳥されたトキの雌個体のうちDRD4多型を特定できた35個体について、DRD多型変異と放鳥後1年後の生存率、放鳥後2週間以内に観察した採餌効率(3分毎の飲み込み数)、分散距離の関係を解析した。その結果、ひとつのDRD4多型(IV)が放鳥後の生存に影響を与えている可能性が認められた。遺伝子多型IV型を持つ個体は、新規探索性が低いため、野外での採餌効率が低く、そのため、放鳥後の生存率が低くなると考えらた。佐渡島のトキの再導入個体群では、各個体の飼育履歴も残っているため、DRD4遺伝子多型と個体の行動特性との関係を明らかにするたための好適な材料を提供している。今後、雄を含めた多くの個体のDRD4多型を行動データを蓄積していくことで、DRD4多型がトキの個性に与える影響を解明することが可能と考えている。まだ、雄個体のDRD遺伝子多型解析が終了していないが、解析用試料からのDNA抽出は終了している。ただ、材料が特別天然記念物のため、飼育下での新規物の提示実験については許可が得られず、個性の実験的解析はできない。そのため、これまでどおり飼育ケージ内での行動記録による解析から新規性を判断せざるをえず、実験的手法による解析は断念せざるを得ない。既放鳥雄個体のうち手許にないDNA試料(手配中)を早急に入手してDRD4多型を行動特性との関連性を明らかにすることで、雄においても雌と同じような傾向があるのかを確認する。また、新既放鳥個体のDRD4多型と個性形質の関係を実験的な尺度を使って測定することで、新規性(大胆さ)に与える影響を解明する予定である。具体的には、放鳥前の順化訓練中に餌場に新規の物体を提示し、各個体が新規提示物体に接近するまでに要する時間をもって、新規性(大胆さ)の指標として、これを複数回、繰り返すことで各個体の個性属性を計測する方法を確立する予定である。また、大胆さには年令も影響している可能性があるため、年齢の効果を統計的に抽出する予定である。材料が特別天然記念物のため、飼育下での新規物の提示実験については許可が得られず、個性の実験的解析はできない。既放鳥トキのDNA解析用試料に欠損があったため、試料の入手の再手配にて間取り、年度内にDNA解析ができなかったために、H30年度に解析費用を繰り越した。不足分の解析試料の入手の見込みがたったため、H30年度にDRD4遺伝子多型解析を実施する薬品、消耗品に使用する予定である。また、映像データ収集のための機材が予定額より大幅に安いものが発売されたため、物品費も安く収まった。
グルタミン酸受容体自己抗体による中枢神経系障害の早期診断・治療

1.グルタミン酸受容体ε2に対する自己抗体陽性症例の臨床特徴グルタミン酸受容体(GluR)の内のε2に対する自己抗体の高感度検出システムを確立し、小児慢性進行性持続性部分てんかん症例でスクリーニングを進めたところ8例中7例で陽性所見を得た。ウエスト症候群15例、レノックス症候群9例、局在関連性てんかん9例と対照6例においてはGluR ε2自己抗体は認めなかった。自己抗体はIgG/IgM型の自己抗体で、IgA型は見られなかった。一部の症例ではIgM型自己抗体からIgG型自己抗体へのスイッチが見られた。2.グルタミン酸受容体ε2に対する自己抗体陽性症例のエピトープ解析グルタミン酸受容体ε2に対する自己抗体陽性となった小児慢性進行性持続性部分てんかん症例で、ε2分子のどの部位が抗原となっているのかを明らかにするため、大腸菌蛋白発現系(PEXシステムなど)を用いて、自己抗体の抗原認識部位を検討した。その結果、全例で、C末側の細胞内ドメインに対する自己抗体の形成が見られ、1例では病期が進むとN末に対する自己抗体も一過性に出現した。C末は、細胞内情報伝達に重要な部位であり、その部位に対する自己抗体がEPC発現に関与している可能性がある。3.ε2以外のグルタミン酸受容体自己抗体検出システムの確立δ2グルタミン酸受容体を発現するテトラサイクリンシステムレポーター遺伝子を、トランスアクチベーター遺伝子を導入した細胞株にステイブルトランスフェクションし、発現したGluR δ2を抗原として患者血清中の自己抗体の有無を検索中である。4.自己抗体陽性例での免疫学的早期治療の検討グルタミン酸受容体ε2自己抗体陽性の小児慢性進行性持続性部分てんかん症例のうち、四肢麻痺となっている進行例にてγ-グロブリン大量療法・ステロイド療法を試みた。現在のところ著しい効果は認めていない。われわれは、グルタミン酸受容体に対する自己抗体による中枢神経系障害を早期に診断し、早期治療に導くための研究を行ってきた。本年度は以下のような研究成果が得られている。(1)グルタミン酸受容体に対する自己抗体検出システムの確立グルタミン酸受容体の内のε2を発現するテトラサイクリンシステムのレポーター遺伝子を、テトラサイクリンシステムのトランスアクチベーターをステイブルトランスフェクションした細胞(3T3-TA)にエレクトロポレーションし、3つのクローンがε2-cDNAを組み込んでいる事をPCRにて確認した(3T3-TA-ε2)。3T3-TA-ε2のホモジネートをε2抗体を用いたウエスタンブロットにて解析したところ、ε2蛋白の発現を確認できた。このことより、抗ε2抗体のスクリーニングが可能となった。(2)グルタミン酸受容体に対する自己抗体の検出(3)テトラサイクリンシステムのグルタミン酸受容体発現用レポーター遺伝子(ε2、δ2以外)の構築ε1、ε3、ε4、ξ1のcDNAを現在調製中で、制限酵素サイトが確認出来次第、グルタミン酸受容体発現用レポーター遺伝子を構築する。次年度の計画現在δ2-cDNAを3T3-TAにトランスフェクションし、ピュウロマイシンにて選択中であるので、ステイブルクローンが得られ次第、抗δ2抗体を用いてδ2蛋白の発現を確認し、患者血清のスクリーニングに入りたい。また抗ε2抗体のスクリーニングを幅広い患者で行い、他のグルタミン酸受容体に対する自己抗体検出システムの確立を急ぐ予定である。

昨年度の研究の中で、グルタミン酸受容体の内のε2に対する自己抗体の高感度検出システムを確立したのに引き続いて、グルタミン酸受容体抗体病の早期診断・早期治療を可能とするため本年度は以下のような研究を行ってきた。1.グルタミン酸受容体(ε2以外)に対する自己抗体の検出システムの確立テトラサイクリンシステムのトランスアクチベータをステイブルトランスフェクションした細胞(3T3-TA)に、δ2グルタミン酸受容体のレポーター遺伝子をエレクトロポレーションし、4つのクローンがδ2-cDNAを組み込んでいる事をPCRにて確認した(3T3-TA-δ2)。3T3-TA-δ2のホモジネートをδ2抗体を用いたウエスタンブロットにて解析したところ、4つのクローンでδ2蛋白の発現を確認できた。この事より、抗δ2抗体のスクリーニングが可能となった。2.グルタミン酸受容体自己抗体病の疾患単位の確立昨年度確立したε2グルタミン酸受容体自己抗体のスクリーニングシステムを用いて、難治性てんかん患者さんの血清を中心としてスクリーニングしたところ、小児の慢性進行性持続性部分てんかん患者4例、症候性部分てんかん1例が陽性となった。小児の慢性進行性持続性部分てんかんの中にε2に対する自己抗体が病態に関与していると思われる症例があった。3.自己抗体陽性例での免疫学的早期治療の検討ε2グルタミン酸受容体自己抗体陽性例の小児の慢性進行性持続性部分てんかんの1例で、γーグロブリン大量療法を試みたところ、持続性ミオクローヌスの減弱とけいれん発作の現象を認めた。1.グルタミン酸受容体ε2に対する自己抗体陽性症例の臨床特徴グルタミン酸受容体(GluR)の内のε2に対する自己抗体の高感度検出システムを確立し、小児慢性進行性持続性部分てんかん症例でスクリーニングを進めたところ8例中7例で陽性所見を得た。ウエスト症候詳15例、レノックス症候群9例、局在関連性てんかん9例と対照6例においてはGluRε2自己抗体は認めなかった。自己抗体はIgG/IgM型の自己抗体で、IgA型は見られなかった。一部の症例ではIgM型自己抗体からIgG型自己抗体へのスイッチが見られた。2.グルタミン酸受容体ε2に対する自己抗体陽性症例のエピトープ解析グルタミン酸受容体ε2に対する自己抗体陽性となった小児慢性進行性持続性部分てんかん症例で、ε2分子のどの部位が抗原となっているのかを明らかにするため、大腸菌蛋白発現系(PEXシステムなど)を用いて、自己抗体の抗原認識部位を検討した。その結果、全例で、C末側の細胞内ドメインに対する自己抗体の形成が見られ、1例では病期が進むとN末に対する自己抗体も一過性に出現した。C末は、細胞内情報伝達に重要な部位であり、その部位に対する自己抗体がEPC発現に関与している可能性がある。3.ε2以外のグルタミン酸受容体自己抗体検出システムの確立δ2グルタミン酸受容体を発現するテトラサイクリンシステムレポーター遺伝子、トランスアクチベーター遺伝子を導入した細胞株にステイブルトランスフェクションし、発現したGluRδ2を抗原として患者血清中の自己抗体の有無を検索中である。4.自己抗体陽性例での免疫学的早期治療の検討グルタミン酸受容体ε2自己抗体陽性の小児慢性進行性持続性部分てんかん症例のうち、四肢麻痺となっている進行例にてγ-
点変異HUとキメラHUーIHFを用いたDNA構造認識とDNA結合の機構の解析

大腸菌のヒストン様蛋白質と呼ばれるHUは、DNAに結合してゲノムDNAの諸機能(複製、部位特異的組換え、転写制御)の発現に関与している。一方IHFもDNAに結合して、ゲノムDNAの諸機能に必要な蛋白質であるが、HUと異なって、特異なDNA塩基配列に結合する。それなによってHUとは異なったゲノム機能に関与している。HUとIHFはいづれも2成分因子でヘテロ2量体を構成し、蛋白化学的に類似している。HUとIHFのDNA結合様式や作用の特徴がどのドメイン構造によって発揮されるのかを明らかにするために、これらの蛋白質間でキメラ構造を作成した。本年度は4種類のキメラ蛋白質を作成して、DNA結合性や生理活性を検討した。その結果、HUとC末端側の22残基のアミノ酸配列(逆平行βsheetで形成されるarm構造領域)がDNA結合に必要であり、IHFαのこの領域はDNAの特異的シグナル配列の識別に関与することを示唆する知見を得た。IHFβのarm領域はHUと同様にDNAに非特異的に結合する作用をもつと考えられた。HUのN末端側の21残基のアミノ酸配例(αhelix2ーβ1構造領域)は、従来の多量体形成に必要な領域という考えに加えて、DNA結合を補佐することを見出した。一方、HUのDNA結合ドメインを大腸菌のHUよりも強くDNA結合する好熱性細菌のHUを参考にして改変し、HU機能は保持したまま、よりDNA結合性を増したHU(ス-パ-HU)を作成し、その性質について解析を行った。その結果、3種類のス-パ-HUの作成に成功し、それらのDNA結合様式とMuファ-ジDNA複製などへの効果を調べた。