hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
接着耐性を利用した骨髄腫幹細胞の同定と臨床応用

一見均一に見える骨髄腫細胞集団であるが、クローン性の増殖を示す細胞は100100,000個に1個しか存在しないことは70年代から示されていた。最近の研究から骨髄腫幹細胞のマーカーはCD138-/CD19+/CD27+/CD38-であることが示されており、これはメモリーBリンパ球に相当する。メモリーBリンパ球の段階で免疫グロブリン重鎖を含む染色体転座や高二倍体化によって骨髄腫幹細胞が生じ、形質細胞に分化した段階で微小環境との相互作用により骨髄腫として発症する。骨髄微小環境との相互作用により細胞周期停止・抗がん剤抵抗性(接着耐性)が獲得されるが、その責任分子がVLA-4(CD49d/CD29)であることを明らかにした。骨髄腫幹細胞を標的とする治療により、治療成績の大いなる改善が期待される。多発性骨髄腫の治療成績の向上を目的として、骨髄腫幹細胞の同定とその薬剤耐性のメカニズムの解明を試みた。今年度は以下を明らかにした。1)骨髄腫幹細胞はCD49d/CD29複合体(VLA-4)を発現しており、この複合体を介する骨髄間質細胞との接着が細胞周期停止と抗がん剤耐性に重要な役割を果たしている。siRNAを用いてCD49d発現を低下させると、ストローマ細胞存在下における骨髄腫の抗がん剤感受性が亢進した。またプロテアソーム阻害剤であるbortezomibは、CD49d発現を低下させ、骨髄腫細胞の抗がん剤感受性を亢進させた。2)骨髄腫幹細胞はCD49d陽性・CD138陰性をマーカーとしてenrichすることが可能と考えられる。骨髄腫細胞株ならびに臨床検体からこの分画をソーティングし、NOGマウスに移植して定着を確認しているところである。同時にこの分画に特異的に発現する遺伝子をDNA arrayにてスクリーニングし、骨髄腫幹細胞に特異的に発現する分子の同定を試みている。3)骨髄腫幹細胞はヒストン脱アセチル化酵素(HDAC)を強発現しており、HDACを介するクロマチン構造の安定化が抗がん剤耐性に関与していることを明らかにした。Bortezomibは骨髄腫細胞におけるHDAC発現を転写レベルで抑制し、細胞死を誘導することがわかった。またこの効果はHDAC阻害剤の併用によって増強された。Bortezomib単剤およびHDAC阻害剤との組み合せは、骨髄腫幹細胞のターゲティングに有効と考えられる。またプロテアソーム阻害剤であるボルテゾミブは、CD49d発現を低下させ、骨髄腫細胞の抗がん剤感受性を亢進させた。ボルテゾミブは骨髄腫細胞におけるHDAC発現を転写レベルで抑制し、細胞死を誘導することがわかった。この結果に基づき、ボルテゾミブとHDAC阻害剤の併用効果をマウス・モデルにて確認した。両剤の組み合せは、骨髄腫幹細胞のターゲティングに有効と考えられる。

またプロテアソーム阻害剤であるボルテゾミブは、CD49d発現を低下させ、骨髄腫細胞の抗がん剤感受性を亢進させた。2)骨髄腫幹細胞はCD49d陽性・CD138陰性をマーカーとしてenrichすることが可能と考えられる。骨髄腫細胞株ならびに臨床検体からこの分画をソーティングし、NOGマウスに移植して定着を確認しているところである。同時にこの分画に特異的に発現する遺伝子をDNA arrayにてスクリーニングし、骨髄腫幹細胞に特異的に発現する分子の同定を試みている。3)骨髄腫幹細胞はヒストン脱アセチル化酵素(HDAC)を強発現しており、HDACを介するクロマチン構造の安定化が抗がん剤耐性に関与していることを明らかにした。ボルテゾミブは骨髄腫細胞におけるHDAC発現を転写レベルで抑制し、細胞死を誘導することがわかった。またこの効果はHDAC阻害剤の併用によって増強された。この結果に基づき、ボルテゾミブとHDAC阻害剤の併用効果をマウス・モデルにて確認した。両剤の組み合せは、骨髄腫幹細胞のターゲティングに有効と考えられる。当初の目的どおりに骨髄腫の薬剤抵抗性の分子メカニズムを明らかにしつつあり、骨髄腫幹細胞を標的とする可能性のある新規薬剤を組み合わせて、高い治療効果が得られることをマウス・モデルにて確認できたことは大きな進捗と考える。24年度が最終年度であるため、記入しない。骨髄腫幹細胞を含むと考えられるfractionをNOGマウスに移植しても定着が得られないことが最大の問題点である。骨髄内への直接の移植やウサギ骨片を用いる方法などを導入し、移植効率の改善を図りたい。
マウス肝移植における抗体プローブイメージング法を用いた拒絶反応の診断と病態解析

当研究では、抗体プローブを用いた肝移植後拒絶反応の検出法を開発することを目的とし、発光タンパクを結合した抗体プローブの全身投与により、グラフトへの浸潤細胞の検出を試みた。我々は異系統間マウス肝移植により、急性細胞性拒絶反応を誘導することに成功した。浸潤細胞にはCD3発現が確認されたが、抗CD3抗体を全身投与により浸潤細胞に結合させることは出来なかった。さらに臓器灌流装置による抗CD3抗体のデリバリーを試みたが、浸潤細胞への結合は確認できなかった。浸潤細胞は免疫染色では良好に染色された。当研究では、抗体を血行路経由で肝臓グラフトへの浸潤細胞まで到達させることは、困難であることが明らかとなった。平成24年度は、マウス肝移植モデルを肝移植後細胞性拒絶反応モデルへと拡張するため、異系統マウス間で肝移植を行い術後経過および組織学的評価をもとに条件検討を行った。ドナーにC57BL/6マウス、レシピエントにC3H/HeJマウスを用いた異系統間肝移植では、同系統肝移植と同等の移植後生存が得られたが、移植後グラフトの組織学的評価では、門脈域に著明な炎症性細胞浸潤を認めた。このような所見は同系統間肝移植における移植後グラフトには認められなかった。これらの炎症性浸潤細胞が肝移植後急性細胞性拒絶反応を検出するための標的細胞として妥当性があるか、また抗体プローブによるイメージングが可能であるかを検討するため、移植後グラフトの免疫染色を行ったところ、これらの細胞はCD3陽性のT細胞であり、当研究で用いた抗CD3抗体(Abcam CD3 antibody [145-2C11], ab91497)により強く染色されることが確認された。抗CD4抗体および抗CD8抗体を用いた免疫染色も行ったが、当検討における染色強度は弱かった。これらの知見より、抗体プローブには予定通り、抗CD3抗体および抗TCR抗体を用いることとした。次にイメージングプロトコルの検討のため、全身投与された抗体プローブが肝臓グラフトに浸潤したT細胞に結合可能か否かを検討した。当研究において抗体プローブとして用いる抗CD3抗体および抗TCR抗体を異系統間肝移植後のレシピエントマウスに陰茎静脈より全身投与し、その後サンプリングした肝臓グラフトを二次抗体により免疫染色を行うことにより、全身投与した抗CD3抗体および抗TCR抗体の検出を試みたが、現在までに全身投与した一次抗体は浸潤細胞上に検出できていない。当研究では、抗体プローブを用いた生体イメージングによる肝移植後拒絶反応の検出法を開発することを目的とし、異系統間マウス肝移植モデルにおいて発光タンパクを結合した抗体プローブを全身投与することにより、グラフトに浸潤した傷害性細胞を検出することを目的としている。我々はまず、研究の基礎となるマウス肝移植モデルの確立に成功し、さらにC57BL/6系統のマウスからC3H/HeJ系統のマウスへの肝移植により、急性細胞性拒絶反応を誘導することに成功した。続いて、異系統移植後にレシピエントから摘出した肝臓グラフトの免疫染色により、大部分の浸潤細胞はT細胞であり、抗CD3抗体により良好に染色されることが分かった。そこで、急性細胞性拒絶反応下のレシピエントに抗CD3ハムスターモノクローナル抗体の全身投与を行い、その6時間後に摘出したグラフトにおいて抗ハムスター抗体を2次抗体とする免疫染色を行ったが、浸潤細胞に結合した抗CD3抗体を検出することは出来なかった。平成25年度は、全身投与により抗CD3抗体を浸潤細胞に結合させるための条件検討をさらに進めた。まず、浸潤細胞への抗CD3抗体の結合から2次抗体による検出までのプロセスにおいて想定される問題点を除外するため、蛍光色素(Cy5)を結合した抗CD3抗体を急性細胞性拒絶反応下のレシピエントに投与し、これを蛍光顕微鏡により摘出したグラフトにおいて直接検出する実験を行ったが、検出は出来なかった。この結果より、問題点は全身投与された抗体の浸潤細胞への結合のプロセスにあるものと考え、生体におけるグラフトへの抗体のデリバリーにおいて想定される問題点を除外するためにマウス肝臓の体外灌流装置を開発し、この灌流装置上でCy5結合抗CD3抗体を含む灌流液を用いた6時間のグラフト灌流を行った後、蛍光顕微鏡による検出を行ったが、浸潤細胞に結合した抗体は検出できなかった。当研究は抗体プローブを用いた生体イメージングによる肝移植後拒絶反応の検出法を開発することを目的としたものであり、本年度はマウスを用いた動物実験系の確立を進めた。当研究では同種異系マウス間で肝移植を行い、拒絶反応を誘導するモデルを用いる。マウスにおいて肝臓は免疫寛容誘導臓器であり、同種異系間の肝移植ではほぼ全ての系統間で臓器は受容されることが知られている。

拒絶反応を誘導する方法としては、ドナーとレシピエントに特定の系統の組み合わせを用いる方法やCD25抗体を術前にレシピエントに全身投与し、制御性T細胞の除去を行う方法などが報告されている。当研究では急性細胞性拒絶反応を研究対象としているが、肝移植においては虚血再環流傷害など他の原因による炎症性細胞浸潤を伴うグラフト傷害が生じるため、手術侵襲による影響を最小限とする必要がある。そのため、我々は最初に、動物モデルの安定した作成を目的として、同種同系マウス間の肝移植において術式および麻酔法の改良を行った。操作手順および使用器械に改良を加え、出血量の減少と無肝期の短縮が達成された。また、麻酔回路を用いた吸入麻酔システムを導入することにより麻酔深度の精密な調節が可能となり術後生存率が向上した。その結果、移植後長期生存率が向上し、移植後グラフトの組織所見においても炎症細胞浸潤はごく軽度となった。次にマウス肝移植モデルにおける拒絶反応誘導の条件検討を行った。我々はより自然な形の拒絶反応を誘導するため、種々の系統間で肝移植を行ったが、強い急性細胞性拒絶反応の所見を認める組み合わせを認めるに至ってはおらず、現在野生型マウスを含むレシピエントとマウスの組み合わせの探索を行うと同時に抗体前投与による方法も準備を進めているところである。当研究では、平成23年度にマウス肝移植法を構築し、平成24年度には、異系統間肝移植によりグラフトの門脈域に著明なCD3陽性のT細胞の浸潤を生じる肝移植後細胞性拒絶反応モデルを確立し、続いてプローブ投与の条件検討を開始した。拒絶反応モデルについては文献的知見が乏しく確立までに時間を要した。また、プローブ投与条件検討の実験系として、抗CD3抗体を移植後マウスに全身投与し、この抗体を標的とした免疫染色による検出を試みているが、現在までにこれらは検出できておらず、投与条件は少用量より逐次的に検討しているため予定より大幅に遅れている。そのため、当研究に関しては平成25年度までの延長を申請している。本年度の到達目標は拒絶反応の誘導を含めたマウス同種異系肝移植モデルの確立であったが、現在も拒絶反応誘導の条件検討中であり、研究の達成度に関してはやや遅れを認めている。マウス肝移植系は難易度が高いため、技術的な安定化に時間がかかった。特に当研究では拒絶反応に関する精度の高い解析を可能とするため、手術侵襲、出血量、無肝期の長さといったの拒絶反応以外の因子によるグラフト傷害の影響を最小限とする必要があるため、マウス肝移植の技術的改良に多くの時間を要した。また、拒絶反応の誘発のため、種々の系統のマウスを用いて肝移植を行ったが、系統間での解剖学的特徴や手術侵襲への耐性の差により手術手技の調整に時間を要した。平成25年度には1全身投与により抗CD3抗体および抗TCR抗体を肝臓グラフトへの浸潤T細胞に結合させるための抗体投与プロトコルの確立、2抗CD3抗体および抗TCR抗体を用いた抗体プローブの作成、3抗体プローブを用いた生体イメージングおよび4世界肝移植学会での報告を予定している。我々は肝グラフトへの炎症細胞浸潤を表面抗原に対する抗体プローブを用いて非侵襲的に検出するという肝移植後拒絶反応の新規診断法の開発を目指しており、当研究ではその基礎研究としてマウスを用いた実験系の構築を行っている。
核小体機能を標的とした新たな細胞増殖抑制機構の解明

本研究は、核小体機能を阻害することによってがん細胞の増殖を抑制する化合物を見出し、がん細胞における核小体機能を標的とした新たな細胞増殖抑制機構を解明することを目的としている。細胞内で生じた核小体ストレスをライブイメージングの手法を用いて検出し、がん細胞に核小体ストレスを惹起する新規の植物由来の化合物を探索することを試みる。さらに得られた化合物による核小体ストレスを惹起するメカニズムの解析を詳細に行うことにより、新たな核小体ストレスによるがん細胞の増殖抑制のメカニズムを解明する。
情報システムアーキテクト育成のための遠隔教育システム

本研究では,情報システムアーキテクトを育成するための遠隔モデリング教育に関する研究を行った.本研究では,情報システムアーキテクトを育成するための遠隔モデリング教育に関する研究を行った.情報システムのアーキテクチャをデザインする専門職である「情報システムアーキテクト」の育成が社会的に重要であり,効果的な教育手法の確立が求められている.アーキテクトが身につけるべき,モデリング能力を育成するには,グループワーク演習が効果的であるとされる.しかしながら,教室で行うモデリング演習に参加することは,学習者にとって時間的・空間的制約がある.そこで,本研究では社会人教育における利用を想定したモデリング遠隔教育支援システムを研究開発している.特に,特にユーザ企業の社会人を対象としたモデリング教育支援環境を構築し,その有用性を確かめることを目標^とし,ソフトウェアシステムの研究開発を行っている.平成20年度の研究では,本教育システムを利用すると想定されるドメインの調査と,オブジェクト指向分析を行った.また,オブジェクト指向型のモデリングプロセスを実施している企業におけるアーキテクト育成の状況や,教育機関におけるアーキテクチャ記述能力育成に関する教育手法を調査した.これらを受けて,遠隔教育支援システムの機能要件並びに非機能要件を整理し,システムの要件を分析して,設計した.これとともに,ソフトウェアを開発するための計算機及びソフトウェアを整備し,開発環境を整えた.現在,システムの根幹となるベースライン・アーキテクチャ・を備えたプロトタイプの開発を行っている.次年度からは,開発作業をより本格化させ,遠隔教育支援システムの完成と有効性の評価を実施する.情報システムのアーキテクチャをデザインする専門職である「情報システムアーキテクト」の育成が社会的に重要であり,効果的な教育手法の確立が求められている.アーキテラトが身につけるべき,モデリング能力を育成するには,グループワーク演習が効果的であるとされる.しかしながら,教室で行うモデリング演習に参加することは,学習者にとって時間的・空間的制約がある.そこで,本研究では社会人教育における利用を想定したモデリング遠隔教育支援システムを研究開発した.平成21年度の研究では,前年度策定したシステムの要件に基づき,教育支援システムの実装を行った。このシステムは,業務のフローを記述した業務手順書と呼ばれるシナリオを,図解にして分析するツールである。この手法をSBVA (Scenario-Based Visual Analysis)法と呼び,この分析を行うためのエディタを試作した。また,プロジェクト型教育(PBL: Project Based Learning)において遠隔での共同作業を行うツールとしてiPBL (Infrastructure for PBL)を作成し,運用した。これらの結果からモデリング教育を支援するための遠隔システムの有用性が示された。
マヤ文明の政治経済組織の通時的変化に関する基礎的研究

中米グアテマラ共和国に立地する、マヤ文明のセイバル遺跡の神殿ピラミッド跡や王宮などの建造物跡とその周囲の広範な発掘区の層位的発掘調査及び出土遺物の分析を行った。その結果、マヤ文明の公共祭祀建築と公共広場は、従来の学説より少なくとも200年早く、前1000年頃に建設されたことが明らかになり、10世紀に至る建造物の増改築を確認した。研究成果を2013年に米国の科学誌『サイエンス』に発表し、マヤの人々は、地域間ネットワークに参加して遠隔地から重要な物資を搬入するだけでなく、観念や美術・建築様式などの知識を取捨選択して、マヤ文明を築き上げていった、という新しい学説を提唱した。中米グアテマラ共和国セイバル遺跡において、広範な発掘区の層位的発掘調査を実施した。出土した遺物の詳細な分析を通して、マヤ文明の政治経済組織の通時的変化に関する基礎的研究を行った。研究協力者(海外共同研究)と協力して、土器、石器、その他の遺物の全ての出土遺物を分析対象とした。セイバル遺跡の9世紀の王宮を発掘し、その壁を装飾した漆喰彫刻が出土した。さらに、その下の建造物の増改築を明らかにして、前700年頃の大型の公共建造物を検出した。またセイバル最大の神殿ピラミッドの前の層位的発掘調査を実施した結果、前1000前400年の建造物の増改築を確認できた。セイバルの初期の建設活動は、従来考えられていたよりも盛んだったのである。一方、前700年頃のオルメカ美術様式の緑石製磨製石斧の埋納が見つかった。セイバルの支配層は、先古典期中期の初期からメソアメリカのオルメカ美術様式を構成する遠距離交換網に参加していたことがわかった。セイバル遺跡から出土した石器の製作技術・工程に関する属性分析を行い、石器の分析データをコンピュータに入力してデータベース化した。また出土した主要な石器の写真撮影を行った。セイバルは、前1000後1000年の約2000年にわたる政治経済組織の通時的研究(マヤ文明の起源、王権や都市の盛衰)に理想的な遺跡といえる。その結果、マヤ文明の起源に関する重要な考古資料を得ることができた。まずセイバル遺跡の神殿ピラミッド複合を発掘し、前1000年頃の最古の公共建造物を検出した。一方、前1000650年頃のオルメカ美術様式の緑石製磨製石斧の埋納が見つかった。中米グアテマラ共和国に立地する、マヤ文明のセイバル遺跡の神殿ピラミッド跡と王宮の建造物跡などの層位的発掘調査と出土遺物の分析を行った。その結果、先古典期中期のマヤ文明の起源に関する重要な考古資料を得ることができた。セイバル遺跡の神殿ピラミッドの発掘では、前1000年頃の最古の公共建造物を検出し、10世紀に至る建造物の増改築を確認した。セイバルの支配層は、先古典期中期の初期から遠距離交換網に参加し、権威を強化していたことがわかった。セイバル遺跡から出土した石器の製作技術・工程に関する属性分析を行い、主要な石器の写真撮影を行った。さらに石器の分析データをコンピュータに入力してデータベース化した。中米グアテマラ共和国エル・ペテン県に立地する、マヤ文明のセイバル遺跡において、神殿ピラミッド跡や王宮をはじめとする住居跡の層位的な発掘調査と多種多様な遺物の分析を行った。セイバル遺跡の層位的な発掘調査によって、自然の地盤の上に前1000年頃に建造された公共広場と、その東と西に面する土製の公共祭祀建築の基壇が出土した。

これは、マヤ低地で最古の「Eグループ」であり、この成果を米国の科学誌Scienceに発表した(Inomata et al. 2013)。公共広場の東と西に面する公共祭祀建築の基壇は増改築され続け、前9世紀に西側の基壇は神殿ピラミッドを構成した。神殿ピラミッドは、後に人工の神聖な山を象徴した。多くの人を動員して神殿を増改築してさらに大きな神聖な山を築き、権力を強化したのである。前8世紀には東側の基壇の長さは50mを超え、石造の階段が設けられた。セイバル最大の神殿ピラミッドを頂く「大基壇」の発掘調査によって、先古典期中期の前半(前1000前700年)に建造された幅が34mを超える大きな基壇が検出された。初期の建設活動は、従来考えられていたよりも盛んだったのである。セイバルはその後も発展し続けるが、後5世紀半ばに一時的に衰退した。しかしセイバル王朝は、7世紀に再興し、9世紀にパシオン川流域で最大の都市として栄えた。発掘調査によって、10世紀に王宮が破壊され、火をかけられたことがわかった。しかも王宮を飾った漆喰彫刻の男性像の顔が、儀礼的に打ち首にされていた。王宮では、破壊儀礼が行われたのである。また「中央広場」に面する神殿ピラミッドでも、同様に破壊儀礼が執行されたことが判明した。セイバル王朝の最後は、暴力を伴ったのである。中米グアテマラ共和国に立地する、マヤ文明のセイバル遺跡の神殿ピラミッド跡と王宮の建造物跡などの層位的発掘調査と出土遺物の分析を行った。昨年度に引き続き、セイバル遺跡の「グループA」を調査すると共に、今年度は「グループD」においても発掘調査を実施した。さらに遺跡中心部だけでなく、遺跡周辺部においても発掘調査も行った。その結果、先古典期中期のマヤ文明の起源に関する重要な考古資料を得ることができた。セイバル遺跡の神殿ピラミッドの発掘では、前1000年頃の最古の公共建造物を検出し、10世紀に至る建造物の増改築を確認した。セイバル遺跡の大規模で精密な層位的な発掘調査および豊富な試料の14C年代による詳細な編年の結果、マヤ文明の起源を考える上で重要な定型化された公共祭祀建築は、従来の学説よりも200年ほど早く、前1000年頃から建設されたことが明らかになった。先古典期後期の2世紀頃、マヤ低地南部の一部の大都市が衰退したが、セイバルは衰退せず、繁栄し続けた。しかし、セイバルは5世紀に一時的に衰退した。セイバルは7世紀に再興し、2回目の繁栄期を迎える。セイバルでは、マヤ低地南部の諸都市が9世紀に衰退する中でパシオン川流域最大の都市として大建造物が増改築され、素晴らしい石碑が建立され続けた。セイバル王朝の最後は、暴力を伴った。しかも王宮を飾った漆喰彫刻の男性像の首が儀礼的に切られていた。王宮では,破壊儀礼が行われたのである。研究協力者(海外共同研究)と協力して、土器、石器、その他の遺物の全ての出土遺物を分析対象とした。セイバル遺跡から出土した石器の製作技術・工程に関する属性分析を行い、主要な石器の写真撮影を行った。さらに石器の分析データをコンピュータに入力してデータベース化した。
グルコキナーゼ(GK)遺伝子の発現異常とNIDDM

グルコキナーゼ(GK)遺伝子の異常がNIDDMのサブタイプであるMODYの原因となることが明らかになった。また一般のNIDDMにおいても、GK遺伝子のマイクロテサライト領域を利用した解析では日本人を含めた複数の人種でGK遺伝子と糖尿病に関連を認めた。しかしながら一般のNIDDMにおいては、アミノ酸レベルでの異常を起こすような遺伝子変異は見つからず、我々は遺伝子のcoding region以外の調節領域に遺伝子異常が存在し、それが糖尿病の発症原因となる可能性を追求することにした。また、プロモーター領域に結合する組織特異的な転写因子をクローニングすることも試みた。更に、NIDDM発症候補遺伝子として肝/膵型トランスポーター(GLUT2)遺伝子、HepG2型グルコーストランスポーター(GLUT1)遺伝子、mGPDH遺伝子の解析も行った。1. GK遺伝子の-30の領域のA/G多型性が存在し、-30 : Aは-30 : Gに比しプロモーター活性が低いことが明らかとなった。2.非糖尿群における経口糖負荷テストによる解析で、-30 : Aを有する固体は、-30 : Gを有する個体に比して耐糖能異常を示す頻度が高い(A/Ahomozygoteで4名中3名、A/G heterozygoteで10名中5名、G/G homozygoteでは8名はすべて正常型)ことがわかった。3.更にA/A群はG/G群より糖負荷テストにおける90分と120分血糖値が有意に高いことが明らかにされた。4. GK遺伝子膵型プロモーターの転写開始点から上流約200bpのDNAフラグメントをプローブとしてヒトインスリノーマcDNAライブラリーをスクリーニングした結果陽性クローンを得ることはできなかった。5. GLUT1, GLUT2遺伝子は日本人糖尿病の高頻度の発症因子とはならないものと推測された。GK遺伝子islet promoterのバリアントの生理的な意義を知るため、非糖尿病者に経口糖負荷試験を行った。islet promoter-30部位の塩基配列がG/G(ホモ)のもの8名、A/A(ホモ)のもの4名、G/A(ヘテロ)のもの10名につき糖負荷テストを行った。75gグルコースを経口投与後、血糖値、血中インスリンレベルを、0、30、60、90、120分に測定した。各群間で血中インスリンレベルは差がなかった。90分及び120分の血糖値はA/A群とG/G群間で有意差を認め(6.9±1.8mmol/Lvs4.5±1.7mmol/Lat90min,6.7±1.9mmol/Lvs4.6±1.2mmol/Lat120min,p<0.05)た。また120分間の血糖値の総和(ΣPG)で比較してもA/A群(34.2±7.4mmol/L)は,G/G群(24.2±4.9mmol/L)より有意(p<0.05)に高値を示した。またA/A群の3名がA/G群の6名が境界型を示したがG/Gでは全例が正常型であった。従って-30の塩基配列の違いが耐糖能に影響する可能性が示唆された。次に、インスリン分泌能をより詳細に検討する目的で非糖尿病者に経静脈糖負荷試験を行った。

年齢、肥満度を一致させたA/A,A/G,G/Gの3群間(各4名)で糖負荷後のインスリンのピーク値の平均を比較したところ、A/A群が24.3±6.2μU/ml,A/G群が36.2±15.2μU/ml,G/G群が42.6±26.7μU/mlとプロモーター活性の低いものほどインスリンピークも低いという結果になった。ただし有意差はないので今後の検討が必要である。プロモーターへの結合蛋白については現在検討中である。グルコキナーゼ遺伝子のプロモーター領域に結合する組織特異的な転写因子をクローニングすることを試みた。方法としてはヒトグルコキナーゼ遺伝子膵型プロモーターの転写開始点の約200bp上流のDNAをPCRにより32Pでラベルしてプローブを作成、ヒトインスリノーマ発現ライブラリーをスクリーニングした。しかしながら陽性クローンを得ることはできなかった。一方、NIDDM発症候補遺伝子として肝/膵型トランスポーター(GLUT2)遺伝子、HepG2型グルコーストランスポーター(GLUT1)遺伝子、ミトコンドリア・グリセロフォスフェイトデヒドロゲナーゼ(mGPDH)遺伝子の解析も行った。GLUT1遺伝子及びGLUT2遺伝子はNIDDM患者を対象にPCR-SSCPにより遺伝子変異の同定を試みた。GLUT1遺伝子においては遺伝子変異は存在するもののすべてサイレント変異であった。GLUT2遺伝子においてはエクソン3における2種のミスセンス変異を含めて型5種類の変異が同定された。しかしGLUT2におけるミスセンス変異も家系調査では糖尿病とは連鎖していないことが明らかとなり結局、二つの候補遺伝子は日本人糖尿病における頻度の高い原因とはならないであろうと結論した。mGPDH遺伝子に関しては、ヒト遺伝子のクローニングを終了し、PCR-SSCP法による糖尿病患者における解析が進行中である。既にアミノ酸置換を来す2種変異を同定しており、それらに関しては現在酵素活性の検討を行っている。
郊外計画住宅団地におけるプレイス・アタッチメント醸成に関する研究

場所愛着に関する研究はいくつかあるが、いずれも戸建を中心とした住宅や古い既成住宅地域を対象とした研究である。本研究では、戦後郊外に面開発されてきた比較的新しい計画住宅団地とその周辺地域に対する愛着の醸成について考察する。同一県内に異なる時期に開発され、計画の異なる2つの住宅地を対象とし、居住者の大人と子どもにプレイス・アタッチメントを問う計量的・質的調査を行った。その結果、住民の入居時期と年齢層によって異なる愛着の状態が形成されている実相を示し、それを反映した研究手法が地域のプレイス・アタッチメント研究に今後求められることを明らかにした。本研究は,「プレイス・アタッチメント」(場所への愛着)の醸成に着目し,それを指標化して計測可能な住宅地の質的評価に結びつけることを目指す.特に新しい住宅地において研究を行い,将来の居住世代である子どもたちがどのようにプレイス・アタッチメントを醸成しているのかについても考慮する.本年は,日本の郊外計画住宅団地に適用可能なプレイス・アタッチメントの指標について既往文献の整理をし,特に子どもに対して適用可能な指標を考察した.またそれをもとに質問紙を作成,埋め立て地上に日本では珍しい中庭型集合住宅を建設してつくられた新しい住宅地区で,小学生に対してプレイス・アタッチメントを測る調査を実施した.日本の伝統にはない新しいデザインの住宅地区においても,子どもたちは一定の高さのプレイス・アタッチメントを示すことが示唆された.特異なデザインの新しい集合住宅地区についてのプレイス・アタッチメントの調査はこれまでなく,この結果については2014年度人間・環境学会大会にて発表予定である.また,千葉県に新規計画されたニュータウンではどのような景観要素が記憶され回想されるか.について,大人に対する詳細なインタビュー調査をし,その結果をもとにニュータウンに醸成されるプレイス・アタッチメントについていくつかの仮説を抽出した。この結果は2014年度日本建築学会大会にて発表予定である.そのほか,日本におけるプレイス・アタッチメントの研究状況についての情報収集を日本建築学会,人間・環境学会で行った.新奇な計画の郊外住宅地へのプレイス・アタッチメントの醸成を知るために、近年新奇に計画された中庭型集合住宅地区と、高度経済成長期に新奇な計画として導入されたニュータウンの計画住宅地との2種類の住宅団地で、プレイス・アタッチメントに関するアンケート調査およびインタビュー調査を行い、分析する研究である。中庭型集合住宅地区をとりあげ、そこにおいて平成25年度に子どもに対するプレイス・アタッチメント指標を作成して調査を行ったが、本年度はまずその結果を統計分析し、結果をまとめて人間・環境学会(MERA)第21回大会にて発表した。周りの市街とは全く異なる計画の集合住宅地区であるにもかかわらず、子どもたちは愛着を形成していることがうかがわれた。また子どもたちが気にいっている場所があげられ、中でも小学校に自宅マンションと同程度の強い愛着を持つという特徴があることが指摘された。さらに、子どものプレイス・アタッチメントの詳細を知るための詳細なインタビュー調査を行い、愛着を持っている場所に対する子どもの語りを収集、整理した。一方、いわゆるニュータウンにおける大人へのプレイス・アタッチメントの調査については、調査結果をまとめて分析を行い、日本建築学会およびIAPS国際会議にて発表した。Hernandezらの指標を用いたときに欧米と同様にニュータウンに当初入居した家族と新住民との差が現れる可能性を示唆した。また両者への詳細なインタビューから、当初入居した家族でも、愛着のある風景としてニュータウン外に残された田園の風景があげられること、新住民には敢えて好きな街であるにもかかわらず愛着をなるべく持たないようにしたいアンビバレントな感情があることがあることなど、ニュータウンの特徴と見られるプレイス・アタッチメントの様態を指摘した。新奇な計画の郊外住宅地へのプレイス・アタッチメントの醸成(場所への愛着形成)を知るために、近年新しく計画され開発された中庭型集合住宅地区と、高度経済成長期以降に新奇な計画として導入されてきたニュータウンの計画住宅地との2種の住宅団地で、プレイス・アタッチメントに関するアンケート調査およびインタビュー調査を行い、分析してきた。本年度は、1ニュータウンの調査については調査対象者数を増し、結果をより明確なものとした。ニュータウンに対するプレイス・アタッチメントは必ずしも一意には定まらず、ニュータウン外側の田園景観に愛着が見られたり、またなるべくニュータウンの中に愛着を持たないようにする者がいるなど、アンビバレントな群が見られた。また、居住者はニュータウンに当初から入居した第1世代、その子供のニュータウン育ちなど、いくつかの層があることがわかった。2中庭型集合住宅地区の調査結果については昨年度までに得られた子どものインタビューデータのテキスト分析を進め、新奇な住宅地にもかかわらずそこで育った子どもたちのプレイス・アタッチメントが醸成されていること、その場所や内容は別地域の既往研究で大人の語った子ども時代の場所や内容とは異なること、その原因が、子どもがより場所アイデンティティを求める傾向があるためではないかと思われることなどが明らかになった。さらに、3中庭型集合住宅地区の子供たちの親世代にあたる大人の街へのプレイスアタッチメントについて、評価グリッド法に則ったインタビュー調査を試みて、子どもとは異なる場所への愛着が得られた。上記1、2の成果は米国の環境デザイン学国際会議EDRA46のシンポジウム(開催地:ロサンゼルス)において発表し、米国研究者との議論を行った。3も投稿を予定している。

その結果、住民の入居時期と年齢層によって異なる愛着の状態が形成されている実相を示し、それを反映した研究手法が地域のプレイス・アタッチメント研究に今後求められることを明らかにした。主要な調査がほぼ予定どおり実施され、分析の段階に入った。また段階的に分析結果を発表しつつある。一方で、中庭型集合住宅地区においては、子どものデータと対照するための大人のプレイス・アタッチメントのデータをとることによって、これまでの調査結果を補足し論理の完成度を上げる余地がまだある。また、ニュータウンにおいては、調査人数を追加して結果をより明確化する余地がまだ残っている。順調ではあるが補足調査の余地があるので、概ね順調とした。建築計画・都市計画調査についてはおおよそ実施できたが、ニュータウンの調査については調査対象者数を増し、結果をより明確にすることを予定している。また、中庭型集合住宅地区については本年度で得られた子どものインタビューデータのテキスト分析を進めるとともに、大人に対する補足調査を追加する。以上の補足調査は発生するが、平成27年度は主として得られた結果の分析を進め、国際会議等で発表する予定である。最終的には、2系統の調査結果をつなげて、新しい計画・景観の場所へのプレイス・アタッチメントの醸成プロセスを記述すると同時に、場所の語られ方の定量分析からプレイス・アタッチメントを推定し、計画と対照する手法を提案することを目指す。指標について考察を進め,調査に入ることができた.特異なデザインの中庭型集合住宅で構成された住宅地区については,小学生の住民に対して調査を行い予定以上の成果があがったが,その保護者層にあたる大人に対しての調査は今後の課題となったため,おおむね順調と言える.また,戸建てを含むニュータウンにおける調査では詳細インタビューを行うことができ,有益な資料が集まった.量的な拡充が今後の課題であるため,こちらもおおむね順調と考える.本年度研究分担者2名の海外学会発表を予定しており1名が発表を行ったが、もう1名は就職活動の都合等の理由からやむを得ず海外発表を断念したため、相当額の未使用となった。また研究分担者1名は学生を使ってニュータウン調査を追加するための謝金を予算に計上していたが、調査規模が予想を下回ったために謝金を中心に未使用の額が生じた。3人目の研究分担者は、学内業務との関係から文献整理を中心とした研究を遂行し物品を少々購入したが、研究室の運営費に計上したため、物品費小額が未使用となった。中庭型集合住宅地区では,個々の景観に対しての子どもの語りについて詳細な調査を行い,プレイス・アタッチメントに関わるテクストの分析を進める予定である.
常時接触ヘッド方式コンピューターハードディスクの摺動疲労損傷と寿命評価

1.ハードディスクの摺動摩耗試験装置の改良試作したハードディスク摩耗試験機にモーターの振動の影響を防ぐため,非接触高精度レーザー測定器を専用のスタンドに設置し,外側から摩耗量を測定できるように改良した。また,ディスクの固定はねじ方式を止めパッキンで押える方式に変更し,ガラス基盤のハードディスクでも対応できるようにした。さらにヘッドアームの上下にひずみゲージを接着しアームに加わる回転ディスク接線方向の力を測定しディスクとヘッド間の摩擦係数を評価できるようにした。2.ハードディスクの摺動摩耗実験負荷荷重が10g-100gまで段階的に荷重を変化させ摺動摩耗量を測定したところ,いずれの段階荷重でも類似した摩耗深さの変動を示し,30000回転以上では6μm-8μmの定常値に達している。これはハードディスクがクラッシュするとすぐに下地層(Ni-P)にまで摩耗損傷が到達する傾向があることを示している。このとき,アームに取り付けたひずみゲージより摩擦係数を評価したところ0.3-0.4の値が得られた。3.摺動接触荷重を受ける被覆板の応力解析厚さ1mmの基盤上に15μmの薄膜下地層(Ni-P)が接合された被覆板上に回転摺動接触荷重が働いた場合の接触荷重と実験により得られた摩擦係数を用いた接触摩擦せん断応力を与えた場合について3次元弾性論により応力解析を行った.温度上昇はほとんどなかったので熱応力は小さいとして無視した.この解析結果に基き応力分布の数値計算を行ったところ,円周応力はいずれの場合も被覆材表面で最大圧縮応力を示し,10g-100gに対応してアルミ基盤の場合は0.212MPa-2.12MPaの大きさとなり,ガラス基盤の場合は0.218MPa-2.18MPaの大きさとなる。また,せん断応力も被覆材表面で最大となり,10g-100gに対応してアルミ基盤の場合は0.104-1.04MPa,ガラス基盤の場合は0.103Mpa-1.03MPaの大きさとなり,被覆板表面に生ずる最大応力はアルミ基材とガラス基材ではあまり大きな違いが見られないことがわかった。1.ハードディスクの摺動摩耗試験装置の試作サーボモーター軸のミスアライメントを除去するためにフレキシブルカップリングを介し,その上に実際のコンピューターハードディスクをできるだけ水平を保つように設置し,試験装置全体を十分な剛性のアングルフレームで組立てた.アングルにはアルミニウム帯板状のヘッド用アームを設置しアーム先端にはステンレス製のボールを取付け,いわゆるPin-On-Disk摩耗試験機と類似した試験装置を試作した.ボール上に荷重を負荷できるようにし,摩耗量測定のため高精度レーザー測定器(キーエンス製LT900,精度10nm)をアングルに設置し,摺動痕を捉えられるように調整し,モニターにより摺動摩耗量を計測できるようにした2.予備実験の試行と実験結果手始めに100g,80g,60g,40g,20g,10gの6通りの荷重を負荷させて摺動摩耗量を測定した.なお,モータの回転速度を今回は500rpmとし,ヘッドの代用として用いた鋼球の直径は5mm,実際のハードディスクの直径は95mmである.100g-60gまでは摩耗量の変動にあまり変化はなく,1000回転で約5μm,3000回転以上で定常値に達し約8pmとなっている.40g,20g,10gの場合も1000回転ではほぼ同じ3μmとなっており,40gの場合は3000回転以上で定常値となり約7.5μmとなっている.20gの場合も3000回転以上で定常値となり約7μmとなっている.10gの場合は3000回転で約6μmとなっている.以上の実験結果より,一番小さい10gの場合でも,保護膜(約50nm),磁気層(約100nm),中間層(約300nm)をはるかに越え下地層(15μm)にまで摩耗損傷が到達していることになり,ヘッドの代わりに鋼球を用いた場合は,ハードディスクがクラッシュしないためにはさらなる荷重の低減が必要となることがわかった3.ヘルツの接触理論による変位量の評価ヘルツ接触による変位を計算した結果,変位量は9.15nmとなり,変位は保護膜の範囲内にあることがわかった1.ハードディスクの摺動摩耗試験装置の改良試作したハードディスク摩耗試験機にモーターの振動の影響を防ぐため,非接触高精度レーザー測定器を専用のスタンドに設置し,外側から摩耗量を測定できるように改良した。3.摺動接触荷重を受ける被覆板の応力解析

厚さ1mmの基盤上に15μmの薄膜下地層(Ni-P)が接合された被覆板上に回転摺動接触荷重が働いた場合の接触荷重と実験により得られた摩擦係数を用いた接触摩擦せん断応力を与えた場合について3次元弾性論により応力解析を行った.温度上昇はほとんどなかったので熱応力は小さいとして無視した.この解析結果に基き応力分布の数値計算を行ったところ,円周応力はいずれの場合も被覆材表面で最大圧縮応力を示し,10g-100gに対応してアルミ基盤の場合は0.212MPa-2.12MPaの大きさとなり,ガラス基盤の場合は0.218MPa-2.18MPaの大きさとなる。また,せん断応力も被覆材表面で最大となり,10g-100gに対応してアルミ基盤の場合は0.104-1.04MPa,ガラス基盤の場合は0.103Mpa-1.03MPaの大きさとなり,被覆板表面に生ずる最大応力はアルミ基材とガラス基材ではあまり大きな違いが見られないことがわかった。
歯科用プラズマ放電滅菌装置の開発

歯科では滅菌器としてオートクレーブが多用されている.しかしオートクレーブの使用には,炭素鋼器具のように,器具が劣化するということのほかに,インプラント材のように処理後においてもその表面に抗原物質が残存するなどの問題が指摘されている.本研究では,酵素プラズマ放電を用いた歯科用滅菌装置の開発を目的として,その特性について調べた.装置として低温灰化用プラズマリアクター(PR-31:ヤマト科学社製)を用いた.制御部は水晶発振による13.56MHzの高周波電力を反応部に供給し、出力は0300Wである.酸素流量は50ml/minあるいは100ml/mに固定して実験を行った.ガラス管(外径2mm,内径10.95mm,長さ200mm)をプラズマ処理した際の管内部の温度を,熱電対(直径0.08mm,iron-constntan)にて測定した。その結果,高周波電力が高くなるほど,ガラス管の内部温度は経時的に上昇した.金属試片(10mm×5mm×1mm)に口腔内由来細菌を1試片あたり100万CFUになるように塗布した.これを5試片作製した.同様に,10万CFU/試片を10枚,1万CFU/試片を10枚作製した.これらの試料を30分間,37°Cの恒温槽にて乾燥した後,酸素流量50ml/min,出力電力300W,印加時間10分間の条件にてプラズマ放電中に留意した.その後,試片を1枚づつBHI液体培地3mlに投入して,37°Cの好気的条件下で72時間培養した.その結果,25試料いずれも陰性培養であった新品の切削用バ-を滅菌処理して,バ-の表面構造を走査電子顕微鏡にて観察した.プラズマにて処理したバ-は,オートクレーブや乾熱滅菌器で処理したものと比べて,表面が最も清浄であった以上より,酸素プラズマ放電は歯科診療室にて使用することを目的とした小型の滅菌装置への応用性が高いと思われた.歯科では滅菌器としてオートクレーブが多用されている.しかしオートクレーブの使用には,炭素鋼器具のように,器具が劣化するということのほかに,インプラント材のように処理後においてもその表面に抗原物質が残存するなどの問題が指摘されている.本研究では,酵素プラズマ放電を用いた歯科用滅菌装置の開発を目的として,その特性について調べた.装置として低温灰化用プラズマリアクター(PR-31:ヤマト科学社製)を用いた.制御部は水晶発振による13.56MHzの高周波電力を反応部に供給し、出力は0300Wである.酸素流量は50ml/minあるいは100ml/mに固定して実験を行った.ガラス管(外径2mm,内径10.95mm,長さ200mm)をプラズマ処理した際の管内部の温度を,熱電対(直径0.08mm,iron-constntan)にて測定した。その結果,高周波電力が高くなるほど,ガラス管の内部温度は経時的に上昇した.金属試片(10mm×5mm×1mm)に口腔内由来細菌を1試片あたり100万CFUになるように塗布した.これを5試片作製した.同様に,10万CFU/試片を10枚,1万CFU/試片を10枚作製した.これらの試料を30分間,37°Cの恒温槽にて乾燥した後,酸素流量50ml/min,出力電力300W,印加時間10分間の条件にてプラズマ放電中に留意した.その後,試片を1枚づつBHI液体培地3mlに投入して,37°Cの好気的条件下で72時間培養した.その結果,25試料いずれも陰性培養であった新品の切削用バ-を滅菌処理して,バ-の表面構造を走査電子顕微鏡にて観察した.プラズマにて処理したバ-は,オートクレーブや乾熱滅菌器で処理したものと比べて,表面が最も清浄であった以上より,酸素プラズマ放電は歯科診療室にて使用することを目的とした小型の滅菌装置への応用性が高いと思われた.本年度は基礎的諸条件を得る目的で以下の項目について検討を加えた。プラズマ処理条件は酸素流量50ml/min、出力電力100W、反射電力4Wとし、装置に付帯しているタイマーにて印加時間を設定した。1.装置内の温度測定耐圧ガラス管中にバイメタル式温度計を挿入し減圧した後、プラズマ処理を行った。その後、真空ポンプを停止し温度計を取り出して温度を読み取った。測定時の室温は22度であり、高周波電力1分間印加した後の温度は32°C、10分後では42°Cであった。2.器具表面の清浄効果プラスチック製の容器に、蒸留水0.1mlを入れたもの(A群)、蒸留水0.05mlにアルブミン0.05gの混合物を入れたもの(B群)、アルブミン0.1gをいれたもの(C群)についてプラズマ処理を施した。試料の減少量は、2分後ではA群で0.07g、B群で0.05g、C群で0.01gであった。5分後ではA群0.1g、B群で0.06g、C群で0.02gであった。3.清毒効果口腔内細菌にて汚染した歯科用タービンハンドピース、歯ブラシ(A群)、およびリーマー、ファイル、レンツロなどの小器具類(B群)を対象として10分間のプラズマ処理を施した。これらを1本づつBHI液体培地(Brain Heart Infusion DIFCO社製、以下BHIと略す。

A群では80ml、B群では3ml)に投入した。又、プラズマ処理をせずに細菌で汚染した器材を投入した培地を陽性の対照とし、器材を投入しない培地を陰性の対照とした。これらの培養基はいずれも37°Cの好気的条件下で培養を行い、混濁の有無にて判定を行った。その結果A群では1週間後においてもいずれも陰性培養であった。B群においては10本のうち1本が陽性培養を示した。次年度は、高周波電力の印加条件(酸素流量、出力電力、印加時間、温度など)と滅菌所要時間について更に詳細な検討を行い、臨床使用の最適条件を決定する予定である。プラズマ放電効果について検討して,以下の成果を得た.1.出力調整ダイヤルを固定して,反射電力を変化させて出力電力を測定した.その結果,反射電力が大になるほど出力電力は小さくなった.2.プラズマ処理したガラス管の温度特性ガラス管(外径2mm,内径10.95mm,長さ200mm,先端が盲管となっている)をプラズマ処理した際の管内部の温度を,熱電対(直径0.08mm iron-constntan)にて測定(熱電対温度計:横河電気株式会社製,Type2809)した.酸素流量は50ml/minあるいは100ml/min,高周波電力は100W,200W,300Wの3条件にてプラズマ処理をした.高周波電力が高くなるほど,管内部の温度は径時的に上昇した.3.口腔内細菌にて汚染した切削用バ-や金属試料およびタービンハンドピ-スをプラズマ処理した.これらを,BHI(Brain Heart Infusion:DIFCO社製)液体および平板培地に接種して,37°C,72時間好気的条件にて培養した.その結果,出力電力が高いほど,また印加時間が長いほど,消毒効果が上昇した.4.新品の切削用バ-を滅菌処理して、バ-の表面構造を走査電子顕微鏡にて観察した.オートクレーブにて処理したバ-は刃部,軸部ともに錆が生じ,面荒れが著しかった。乾熱にて処理したバ-は,製造工程中に生じたと考えられる微少な異物が多数観察された.これらに比較して,プラズマにて処理したバ-は表面が最も清浄であった.中でも出力100W,印加時間10分の処理条件が,清浄効果が優れていた.以上より,生体内に残置するインプラント材の滅菌や炭素鋼製のバ-などの切削器具の消毒にはプラズマ放電による滅菌法が有用であると考
頭頚部悪性腫瘍手術後患者の生活の満足度を左右する因子を探る

頭頚部悪性腫瘍手術後患者(以下対象者と称す)の生活の満足度を左右する因子を探ることを目的に、対象者55名に対して質問紙調査を実施した。回収率は90.9%、有効回答率は92.0%であった。質問内容は、日常生活の状況や身体的不具合、手術を受けたことに対する思い、再発に対する不安、今の生活に対する満足度(以下満足度と称す)などである。疾患群は舌・口腔底群・中咽頭群・喉頭群・下咽頭群の4群を対象とした。対象者の特性は、手術後経過年数は5年以上が最も多く、次いで1年未満、3年以上4年未満であった。性別は89.1%が男性で平均年齢は67.2±8.0歳であった。日常生活の中でまた身体的に不具合である割合が高かった項目は、「頚や肩にしびれや痛みがある」、次いで「他人に思いが伝わらない」であった。またこれらの項目の訴え状況を疾患群別に見ると、「他人の目が気になる」、「食べたいと思う食事が食べられない」など4項目に有意差が見られた。満足度に関してはフェイススケールを併用して包括的に測定したが、「どちらともいえない」が最も多かった。手術を受けたことに対する思いは、「よかった」が最も多く、手術を受けたことに対する思いと満足度とは弱い相関関係が見られた。再発に対する不安は、「不安に感じるが考えても仕方がない」が最も多く、再発に対する不安と満足度との関係は見られなかった。日常生活の状況や身体的不具合の訴え状況と満足度との関係では、「食べたいと思う食事が食べられない」、「洗濯や衣服の着脱などに不自由がある」など3項目にかなりの相関関係が見られた。手術後の経過年数・性別と満足度の間には明らかな相関関係は得られなかった。満足度を従属変数、その他の項目を独立変数として重回帰分析を試みたが、明らかな関係は見い出せなかった。今後対象者数を増やし、モデルを再検討し、更に研究を進めていきたいと考えている。今年度は、研究対象者である頭頸部悪性腫瘍手術後患者の、身体的状態や障害の程度・生活の現状と、それらに対する対象者の満足度を評価するための指標を作成することを目標に、研究を進めてきた。まず、頭頸部領域におけるQOLに関する研究、生活の質の評価に関する研究等の分野から先行文献の検索を行った。また、研究対象者の身体的状態や障害の程度は、診療録等から情報収集を行った。それらの内容は、パーソナルコンピューターを用いて整理を行った。また、QOL研究会に出席してQOLの統計解析法等の講演を聴講し、その内容をマイクロカセットレコーダーを用いて録音し、統計解析法等の資料収集を行った。更に、社会心理学的側面からの知見も必要と考え、それに関する図書からも資料収集を行ってきた。頭頸部悪性腫瘍手術後に起こってくる諸障害は、日常生活の特定の行動(例えば食事や他者とのコミュニケーション等)にのみ影響を与えているのではなく、日常生活全般に影響を及ぼしていることがわかったが、そのような視点から対象者の生活における影響を捉えている文献は見あたらず、対象者の生活の現状や満足度を測定するためには、何を評価基準にすることが最も妥当なのかという規定が難しく、指標作成に難航している現状である。今後は、まず指標作成を早急に行い、その指標を用いて対象者の生活の現状や満足度に関するデータを収集するため、留め置き法による自記式調査を行う予定である。それらのデータをどのように統計解析することが最も効果的なのかを更に検討し、研究を進めていく予定である。

満足度を従属変数、その他の項目を独立変数として重回帰分析を試みたが、明らかな関係は見い出せなかった。今後対象者数を増やし、モデルを再検討し、更に研究を進めていきたいと考えている。
血液細胞の分化におけるPI3キナーゼの役割

我々は最近PI3キナーゼの最も主要な調節サブユニットであるp85αのノックアウトマウスを作成し、B細胞を含む種々の血液細胞の分化および活性化におけるPI3キナーゼの機能を詳細に検討した。p85α欠損マウスのin vivoにおけるマクロファージおよび樹状細胞の数は野生型と比べて大きな違いはなかったが、骨髄細胞をGM-CSF共存下で培養することによりin vitroでマクロファージを誘導すると、p85αノックアウトマウスにおいてはマクロファージの誘導が抑制されていることがわかった。さらにこの骨髄細胞由来マクロファージの機能について検討したところ、IL-12およびIL-18刺激によるIFNγの生産が著しく抑えられていることが明らかとなった。さらに、p85α欠損マクロファージではIFNγ刺激によるNOの生産も阻害されており、p85α分子がマクロファージの分化、活性化に重要な働きをしていることが示唆された。また、p85α欠損マウス由来の血小板において、コラーゲン誘導性の血小板の凝集反応が抑制されていることが明らかとなり、PI3キナーゼが血小板の凝集反応に関わっていることが示された。B細胞の分化に関しては、Btkノックアウトマウスとの類似性が注目されていたが、今回我々はBtkとp85αとのシグナル伝達における関係を解明する目的でBtkとp85αのダブルノックアウトマウスを作成した。ダブルノックアウトにおけるB細胞の分化および機能はそれぞれの単独ノックアウトに比べて相加的に阻害されていることが明らかとなり、p85αとBtkはB細胞のシグナル伝達において単純な上下関係にあるのではなく、それぞれ異なる機能を果たしていることが明らかとなった。