hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
肝細胞癌の発生・進展におけるマイクロＲＮＡの分子機能解析と革新的治療への展開

肝細胞癌の進展に関連するmicroRNAとして、肝細胞癌で上昇しているmiR-18a,低下しているmiR-199aを同定した。miR-18aが高い群では腫瘍マーカーが高く、腫瘍径が大きかった。miR-199aが低い群では腫瘍マーカーが有意に高く、癌が血管に入っている率が高かった。また、miR-18aが高い群、miR-199aが低い群は肝細胞癌に対して肝移植を行った後の再発が多いことがわかった。miR-18a、miR=199aが制御する遺伝子をそれぞれ同定した。肝癌細胞株を用いて、miR-18aを抑える、miR-199aを増やすことにより肝癌細胞の増殖や浸潤が抑えられることを明らかにした。肝細胞癌の発生、進展、転移、再発に関連するmicroRNA分子を同定するためにマイクロアレイにより発現の網羅的解析を行った。生体肝移植後肝細胞癌再発症例3例について、原発巣(T)、非癌部(N)、転移再発巣(M)から抽出したRNAを用いてマイクロアレイによるプロファイリングを行った肝癌原発巣および転移再発巣においてそれぞれ発現亢進しているmiR-18a,発現低下しているmiR-199aを同定した。このmiR-18a, 199aについて肝細胞癌に対する生体肝移植症例70例について検討したところ、miR-18aは癌部で有意に発現亢進しており、非癌部では有意に発現低下していた。臨床病理学的因子との解析を行ったところ、miR-18a高発現群ではAFP, PIVKAが有意に高く、腫瘍径が有意に大きかった。miR-199a低発現群ではPIVKAが有意に高く、門脈侵襲が有意に高率であった。また、miR-18a高発現群、miR-199a低発現群はそれぞれ無再発生存が有意に不良であった。以上より、miR-18a, 199aが肝細胞癌に対する肝移植後の予後因子となりうる可能性、肝細胞癌の生物学的悪性度に関連している可能性が示唆された。肝癌細胞株を用いて、細胞増殖アッセイ、細胞浸潤アッセイを行った。Anti-miR-18a、Pre-miR-199aの導入により肝癌細胞の増殖や浸潤が抑制されることを明らかにした。生体肝移植後肝細胞癌再発症例3例について、原発巣(T)、非癌部(N)、転移再発巣(M)から抽出したRNAを用いてマイクロアレイによるプロファイリングを行った。癌部/非癌部、肝癌原発巣/転移再発巣においてそれぞれ発現亢進しているmiR-18a,発現低下しているmiR-199aを同定した。miRNAの肝細胞癌における機能を確認するために肝癌細胞株を使用し、in vitroにて機能の解析を行った。肝癌細胞株にanti-miR-18aを導入してmiR-18aを抑制することで、増殖能・浸潤能が抑制された。肝癌細胞株にpre-miR-199aを導入してmiR-199aを強制発現させることで増殖能・浸潤能が抑制された。さらにmiRNAの標的遺伝子を検索し、ルシフェラーゼアッセイ、Western blotにてmiR-18aがTNFAIP3を、miR-199aがHIF1A, IGF1R, IGF2, VEGFAを標的遺伝子としていることを同定した。肝細胞癌の進展に関与しているmiR-18a高発現とmiR1-99a低発現が実際に癌の増殖や浸潤に影響していることを確認すること、またそれぞれのmiRNAがどのような遺伝子を標的としているかを同定することは非常に重要と考えた。肝癌細胞株を使用し、in vitroにて機能の解析を行った。

肝癌細胞株にanti-miR-18aを導入してmiR-18aを抑制することで、増殖能・浸潤能が抑制された。肝癌細胞株にpre-miR-199aを導入してmiR-199aを強制発現させることで増殖能・浸潤能が抑制された。オンラインデータベースを利用して、miR-18a, miR-199aの標的遺伝子を検索した。さらにmiRNAの標的遺伝子を検索し、ルシフェラーゼアッセイ、Western blotにてmiR-18aがTNFAIP3を、miR-199aがHIF1A, IGF1R, IGF2, VEGFAを標的遺伝子としていることを同定した。動物モデルを用いた個体レベルでのアンチセンスRNA導入法の検討および治療効果判定を行う。8週齢のマウス右背部皮下に2.5x106個のマウス肝癌細胞を播種したマウス皮下肝癌モデルを作成する。アンチセンスRNAの導入法(アデノウイルスベクター、センダイウイルスベクター、PLL-g-Dex等)を検討し導入効率を定量する。miRNA抑制による肝癌の新規分子標的治療の開発を行うために、ターゲットmiRNAに対するアンチセンスRNAを導入し個体レベルでの抗腫瘍効果を検討する。生化学的試薬に約500,000円、培養用試薬に約500,000円、実験動物関連費に700,000円、国内出張旅費に約250,000円、外国出張旅費に約260,000円を使用する予定としている。
蒸気爆発による超急速冷却現象を用いたアモルファス超微粒子の製造

高温融体を低沸点液体中に投入した場合、条件によっては、圧力波の発生を伴う蒸気爆発現象が発生する。蒸気爆発現象の特徴は、冷却速度が極めて大きいということである。従来の冷却方法では、1秒間に1万度から100万度までの冷却速度しか達成できなかったのに対して、微粒化した蒸気爆発の粒子では、その一桁上の1秒間に1000万度の冷却速度が可能となる。このような「超急速冷却」が可能となるのは、高温融体が微粒化によって極めて微小な粒子となることと密接な関係がある。数ミリの高温溶融体液滴を用いた蒸気爆発実験においては、直径がサブミリ以下のほぼ均一な微粒子が形成されることが確認されている。さらに、このような「超急速冷却」時の冷却速度は溶融金属の臨界冷却速度を超えており、生成した微粒子が、通常の結晶組織ではなく、非晶質のアモルファスとなっていることも確かめられている。このような蒸気爆発による超急速冷却を用いて製造されたアモルファス超微粒子は、優れた力学的特性や電磁気的特性を有する極めて利用価値の高い素材となることが期待される。本研究の目的は、蒸気爆発による超急速冷却現象を用いたアモルファス超微粒子の製造に必要となる要素技術の確立を目指すとともに、これらの要素技術を組み合わせて実際に金属アモルファス超微粒子の製造を試みることにあり、そのために必要となる要素技術を確立した。蒸気爆発による超急速冷却現象を用いたアモルファス超微粒子の製造に必要となる要素技術としては、蒸気爆発の発生する条件範囲を明らかにした。その上で、その条件を達成するために必要となる膜沸騰状態にある溶融液滴を、強力超音波を用いて任意の位置に保持する技術を確立した。そのために、超音波発生システムならびに溶融金属液滴の射出システムから構成される実験装置の設計・製作を行うとともに、作製した実験装置を用いて、膜沸騰状態にある高温溶融体が、超音波によって保持できるか否かを実証的に調べた。その結果、液体中の高温溶融液滴が強力超音波によって形成された定在波中に保持されることを、世界で初めて確認するとともに、蒸気爆発によって、微粒子が生成することが可能であることを示す結果を得ることができた。

このような蒸気爆発による超急速冷却を用いて製造されたアモルファス超微粒子は、優れた力学的特性や電磁気的特性を有する極めて利用価値の高い素材となることが期待される。本研究の目的は、蒸気爆発による超急速冷却現象を用いたアモルファス超微粒子の製造に必要となる要素技術の確立を目指すとともに、これらの要素技術を組み合わせて実際に金属アモルファス超微粒子の製造を試みることにある。平成12年度においては、蒸気爆発による超急速冷却現象を用いたアモルファス超微粒子の製造に必要となる要素技術の確立を行った。具体的には、まず膜沸騰状態にある溶融液滴の強力超音波による保持技術を確立した。そのために必要となる超音波発生システムならびに溶融金属液滴の射出システムから構成される実験装置の設計・製作を行うとともに、作製した実験装置を用いて、膜沸騰状態にある高温溶融体が、超音波によって保持できるか否かを実証的に調べた。その結果、液体中の高温溶融液滴が強力超音波によって形成された定在波中に保持されることを、世界で初めて確認した。この結果は、蒸気爆発時を用いてアモルファス超微粒子を製造することが可能であることを実証する結果である。高温融体を低沸点液体中に投入した場合、条件によっては、圧力波の発生を伴う蒸気爆発現象が発生する。蒸気爆発現象の特徴は、冷却速度が極めて大きいということである。従来の冷却方法では、1秒間に1万度から100万度までの冷却速度しか達成できなかったのに対して、微粒化した蒸気爆発の粒子では、その一桁上の1秒間に1000万度の冷却速度が可能となる。このような「超急速冷却」が可能となるのは、高温融体が微粒化によって極めて微小な粒子となることと密接な関係がある。数ミリの高温溶融体液滴を用いた蒸気爆発実験においては、直径がサブミリ以下のほぼ均一な微粒子が形成されることが確認されている。さらに、このような「超急速冷却」時の冷却速度は溶融金属の臨界冷却速度を超えており、生成した微粒子が、通常の結晶組織ではなく、非晶質のアモルファスとなっていることも確かめられている。平成13年度においては、蒸気爆発による超急速冷却現象を用いたアモルファス超微粒子の製造に必要となる要素技術を確立した。具体的には、まず膜沸騰状態にある溶融液滴の強力超音波による保持技術を確立するとともに、そのために必要となる超音波発生システムならびに溶融金属液滴の射出システムから構成される実験装置の設計・製作を行い、作製した実験装置を用いて膜沸騰状態にある高温溶融体が、超音波によって保持できることを実証した。その結果、液体中の高温溶融液滴が強力超音波によって形成された定在波中に保持されることを、世界で初めて確認するとともに、蒸気爆発時を用いてアモルファス超微粒子を製造することが可能であることを実証することができた。
哺乳類概日振動体の構成的な理解

哺乳類概日時計を駆動する分子機構を、周期長の温度補償性に着目して構成的に理解することを目指した。哺乳類概日時計の律速過程を担い試験管内で温度非依存的なリン酸化活性を示すCKIδについて、高温条件で基質との親和性が低下する一方、リン酸化生成物との親和性が上昇することを示した。この過程に重要なCKIδの領域を明らかにし、この領域を他の酵素に移植することで温度補償性を示す酵素を設計できることを提示した。さらに、リン酸化温度補償性を欠くCKIδ変異体の過剰発現はマウス個体の概日時計周期長やマウス組織の概日周期長の温度感受性に有意に影響を与えることを観測し、その個体レベルにおける意義を一部明らかにした。本研究課題では、未だに解明されていない哺乳類概日時計の持つ温度補償性の分子機構の理解を目標に掲げている。具体的には、試験管内で再現されたCKIε/δによるPER2ペプチドのリン酸化過程の温度補償性を解析し、温度補償性を生み出す基質と酵素を設計可能な程まで理解すること、また、温度補償性を制御する化合物を設計し、概日周期の温度補償性の制御を可能とすることを課題の一つとして設定している。CKIε/δによるPER2ペプチドのリン酸化過程は温度補償性が保たれているものの、複雑な多段階反応が生じるため、PER2ペプチドそのものを用いて温度補償性の分子機構を解明するのは困難である。当該年度において我々は、リン酸化ペプチドの量比を経時的かつハイスループットに解析可能なモビリティーシフトアッセイを用いて、温度補償性が担保されている、より単純なペプチドモデル系の探索を行った。その結果、興味深いことにリン酸化部位をわずか1箇所しか含まないにも関わらず温度に依存しないリン酸化反応を示すペプチドモチーフを見出した。また、概日周期の頑強な温度補償性がCKIδのリン酸化過程に由来すると仮定すると、CKIδに温度補償性を生み出す機能が内在的に備わっているはずである。そこで、一連のCKIδの変異体を網羅的に作製し、試験管内においてリン酸化活性を評価したところ、変異導入によりCKIδのリン酸化活性の温度依存性が著明に変化するアミノ酸部位を同定した。更に、ハイスループットなモビリティーシフトアッセイを用いてLOPACのケミカルライブラリからリン酸化活性に対する薬剤のケミカルスクリーニングを行った結果、CKIδのリン酸化反応の逆反応を効率的に阻害するリード化合物を発見した。具体的には、試験管内で再現されたCKIε/δによるPER2ペプチドのリン酸化過程の温度補償性を解析し、温度補償性を生み出す基質と酵素を設計可能な程まで理解することを課題の一つとして設定している。これまでに我々はリン酸化部位を1箇所のみ含み、かつ温度に依存しないリン酸化反応を示す基質ペプチドモチーフを発見した。また、変異導入によりCKIδのリン酸化活性の温度依存性が著明に変化するアミノ酸部位を同定し、温度補償性が欠損するCKIδ変異体を見出した。更には、CKIδのリン酸化反応の逆反応を効率的に阻害するリード化合物を発見した。当該年度において我々は、これらの知見に基づき、CKIδによるリン酸化反応における温度非依存性の起源となる分子機構の解明に取り組んだ。等温滴定型熱量計(ITC)、表面プラズモン共鳴センサー(Biacoreシステム)、1分子蛍光分析システム(MF-20)を用いて定量的かつ動力学的な分子間相互作用解析を行った結果、基質ペプチドモチーフのリン酸化産物とCKIδが安定な複合体を形成するだけでなく、温度が高い程その親和性が向上することを明らかにした。一方、試験管内ケミカルスクリーニングによって発見されたリン酸化反応の温度非依存性が欠損したCKIδ変異体は、リン酸化産物と複合体を形成しなかった。更に、CKIδのリン酸化反応の逆反応を阻害するリード化合物がどのような機序で作用しているかを検証するために、CKIδと化合物のin silicoドッキングシミュレーションを行った結果、化合物の酵素に対する標的部位が温度補償性に寄与するアミノ酸残基周辺であることが示された、以上から、酵素の生成物結合がリン酸化反応の温度非依存性の起源である可能性が示唆された。平成28年度の研究に於いて、明確な進展が得られたこととして、本研究の2つの柱である温度補償性の理解、周期長制御の理解に密接な関係を見出したことが挙げられる。すなわち、昨年度までに見出していたリン酸化産物と酵素(CKIδ)の安定的な複合体結合能が、試験管内での温度非依存的なリン酸化反応速度の担保だけでなく、概日周期長制御にも重要であることが明らかとなった。上記リン酸化産物結合を阻害するようなCKIδ変異や、低分子化合物は、リン酸化産物結合による酵素活性の拮抗的阻害を抑制し、CKIδ活性を賦活化、さらに概日周期長を短縮することが見出された。これらの結果は、リン酸化産物結合機構が、実際の概日時計機構においても重要な役割を果たしていることを強く示唆する。特に、本研究の3つ目の柱である、個体レベルでの分子機構の確認を達成するために、リン酸化産物結合が減弱した変異CKIδを発現するマウスの概日行動周期長が顕著に短縮することを確認することができた点を強調したい。これらの結果は、in vitroでのリン酸化反応速度制御の徹底的な理解によって、個体全体の生理活性リズムを制御するための知見を得ることができる好例を提示している。

1.温度補償性:温度非依存性のタンパク質リン酸化反応の理解と設計CKIδ/εによるリン酸化反応速度が温度に依存しないという、常識に反する現象に対して、3年間の研究によって、具体的な動作原理(温度依存的にリン酸化産物と酵素の結合が安定化される)を提唱し、さらに低分子化合物および、酵素変異体を用いて、動作原理を検証することが出来た。従って、我々は温度非依存性のリン酸化反応の深い「理解」を得た。さらに、酵素変異体解析から、温度依存的なリン酸化産物との結合に重要な酵素ドメインを決定しており、「設計」へ向けて研究を展開している。2.自律発振機構:概日振動体発振・周期長制御機構の理解と設計周期長を短縮する低分子化合物候補については、上記の温度補償性の理解に基づき、すでにATAを得た。また、タンパク質についてもCKIδおよびCRY1について、顕著な周期長短縮効果を示す領域をアミノ酸残基レベルで同定している。これらの結果は、タンパク質構造に基づく予測・変異導入を行っており、周期長を制御するタンパク質の設計を部分的に達成している。これらの結果は同時に、CKIδやCRY1がリン酸化を駆動力とする振動子を構成する有力な候補であることを裏付けている。3.個体レベルでの概日振動体動作原理の検証100%ES細胞由来マウス作製技術を運用し、実際にこの技術を用いて、CKIδやCRY1の個体レベルでの機能解析を進めている。さらにノックアウト作成技術や、個体の行動・睡眠覚醒リズム解析の新規手法を開発した。これらの手法は、開発のみならず、実際に研究グループの中でコンスタントに使用しており、1.や2.で得られた知見の個体レベルでの検証を進めている。当初の目標通り、計画通りの進行である。昨年までの研究からリン酸化酵素CKIδ/εの基質リン酸化速度が試験管内での酵素ー基質アッセイでは、温度に依存しないことを説明するモデルとして、温度依存的にリン酸化産物と酵素の結合が安定化し反応律速段階となることを提唱し、さらにその結合を担う残基候補として細胞を用いたスクリーニング系からCKIδの責任アミノ酸残基を同定した。本年度は、この残基の変異導入によって、実際にリン酸化産物との親和性が低下するのみならず、この変異導入によって、試験管内でのリン酸化速度についての温度非依存性が崩れることを確認した。これらのことから、試験管内では提唱した温度補償性のモデルが現象をよく説明することが裏付けられ、さらに特定のアミノ酸残基によって、リン酸化基質と酵素の結合が調整されうることが示唆された。また、分子レベルの知見から得られた概日周期調節に重要な役割を果たす因子の個体レベルでの行動周期調節に果たす役割を検証するために、高効率に変異概日時計遺伝子をノックインし、速やかに行動周期を測定する実験スキームを確立した。続いて、試験管内でのリン酸化温度補償性の崩れが、生体内での概日時計周期長制御に与える影響を調べるために、上述した責任アミノ酸残基に変異を導入したCKIδをノックインしたマウス系統を作出した。これまでに行ってきた行動周期長観測に加えて、このマウスから脳組織レベルで概日周期長を測定するための長期培養系をセットアップした。これにより、単純な行動周期長のみならず、培養温度を変化させた際の組織レベルでの概日周期長変化を正確に測定できるようになった。
ナシ・リンゴにおける自家不和合性花粉側因子候補の機能解析

ナシ・リンゴの自家不和合性花粉側因子(花粉S遺伝子)の実体は長く不明だったが、我々はリンゴS遺伝子座の詳細な解析により、非常に有力な花粉S遺伝子候補として新規のF-box遺伝子を同定してSFBBと命名した。SFBBは他の種の花粉S遺伝子(候補)と異なり、単-ハプロタイプに複数存在するというユニークな特徴があった。複数のSFBBのうち1つだけが花粉S遺伝子であるのか、複数が花粉特異性決定に関与しているのかは現時点では不明である。その後の解析で、SFBB様配列はさらに多い事が見出されている(未発表)。ナシ・リンゴは同じバラ科のサクラ亜科とは花粉S遺伝子の作用が異なる可能性が示唆されており、ナシ・リンゴ特有の複数のSFBBとの関連は興味深い。本年度は、これまでに見出された多数のSFBB様配列について、FISH法による染色体上への物理的位置づけを行った。その結果、これらSFBB様配列は例外なくS-RNase遺伝子と物理的に連鎖していることが明らかになった。さらに、リンゴS遺伝子座はヘテロクロマチン領域に存在することも明らかとなった。SFBBは他の種の花粉S遺伝子(候補)と異なり、単一ハプロタイプに複数存在するというユニークな特徴があった。本年度は、これまでに見出された多数のSFBB様配列について、これらのコード領域の完全長配列を決定し、互いを識別可能なCAPS(cleaved amplified polymorphic sequence)解析の系を構築した。このCAPS系の利用により、リンゴ品種間の交雑後代を用いてSFBB様配列がS-RNase遺伝子と連鎖しているかどうかを解析していく。リンゴS-RNase遺伝子の近傍に存在する事が既に明らかなSFBBを用いて形質転換ベクターを構築した。今後、構築されたベクターをアグロバクテリウムに導入し、リンゴ・ナシの培養植物葉片に感染し、形質転換を行っていく。本年度は、これまでに見出された多数のSFBB様配列について、これらを互いを識別可能なCAPS(cleaved amplified polymorphic sequence)解析の系を用いてリンゴ品種間の交雑後代の遺伝解析を行った。その結果、これらSFBB様配列は例外なくS-RNase遺伝子と連鎖していることが明らかになった。さらに、CAPS系とRT-PCRを組み合わせて発現器官特異性を解析したところ、これらは花粉特異的に発現していることも明らかとなった。
コンプレックスな系における転移とダイナミックス

本研究は、スピングラスを典型例とするような、要素間の相互作用が互いに競合している系(コンプレックス系)に固有な、新しいタイプの相転移とダイナミックスを明らかにすることにあり、ほぼ当初計画に沿って研究活動を展開した。本年度は、高山・鈴木が個別にアメリカグループを訪問し共同研究推進のための研究打ち合せ、討論を行った。また、研究分担者Ocioを招へい、大阪大学で都と共同実験を行うとともに、高山らと研究打ち合せ、討論を行った。さらに、前年度の筑波大学における第1回研究集会に引き続いて、今年度はサクレー原子核研究所(フランス)で第2回研究集会を開催した。同集会には日米仏グループの多数の研究分担者・協力者が参加し、「競合系の物理」に関して活発な研究討論を行った。本研究で得られた主な結果は以下の通りである。1.スピングラス(SG)の転移とダイナミックス1)数値シミュレーションによる解析:高山は、SGの常磁性相のうち特にグリフィス相と呼ばれる温度領域におけるスピンダイナミックスが二つの緩和過程、2次相転移に一般的な臨界緩和とSGに固有なクラスター緩和、からなることを示した。一方、Campbellは、イジングSGの転移温度近傍のスピン自己相関関数q(t)を解析し、臨界指数ηが非普遍的である(相互作用の分布の仕方による)こと、q(t)が引き延ばされた指数関数でよく記述される等の結果を得た。また、川村は自ら提起している、ベクトルSGにおける有限温度相転移としてカイラル自由度のランダムな凍結描像を検証する精密な解析を行った。2)SG相転移の実験による解析:伊藤は、磁化測定で共通にカスプが観測されるSG物質でも、メスバウワ-効果とμSRの実験からSGとクラスターグラスとを区別できることを示した。また、反強磁性状態とSG状態の共存する混合相へのリエントラント転移点で非線形磁化率の発散的振舞いを観測した。3)磁場中SG相のエイジング現象:Ocioは、定常磁場をある時間t_w待ってからその値を変えた後の状態変化を微小交流磁場に対する応答の虚部を追うことにより、熱残留磁化の緩和過程は、t_w依存性を含めてある普遍的なスケール則で記述されることを見いだした。Orbachは、多数の準安定状態の位相空間における分布の様子を規定する重なり関数P(q)を、磁場中冷却磁化とゼロ磁場冷却後の磁場誘起磁化の時間発展を詳細に解析することにより直接評価する方法を提起した。さらに、伊藤は、磁化-磁場曲線の磁場掃引速度依存性を広い磁場範囲で調べ、SGに固有なダイナミックスを観測した。2.粒状(セラミック)銅酸化物超伝導体の位相のダイナミックス:Ocioは、La_<1.8>Sr_<0.2>CuO_4の粒状試料に関する1/fノイズの測定から、外部磁場で誘起されるゲージの競合の他に、d波超伝導体間のπ接合の存在から帰結される競合効果があることを示した。川村は、ベクトルSGと同様なカイラリティー転移の描像をセラミック超伝導体の相転移に展開した。3.重い電子系:都は、Ce(Ru_<0.85>Rh_<0.15>)_2Si_2に関して中性子散乱等の実験から、局在スピン系から重い電子系へのクロスオーバー(近藤温度=22K)、重い電子状態におけるスピン密度波(SDW)状態への相転移(T_N=5.5K)、および、後者の転移に伴うインバー的振舞いをする磁気体積効果を詳しく検証した。4.SDWのダイナミックス:Clarkは、(TMTSF)_2PF_6にパルス電場をかけ、パルス終端側でSDWが不純物にピン止めされる過程をNMRで観測し、その過程が、高温領域では準粒子がSDWギャップを越える熱活性化過程、低温領域では量子力学的トンネル過程であることを示唆する実験結果を得た。5.相転移理論:鈴木は、一般の相転移を論ずるための数理物理的方法(指数関数演算子の高次分解法など)を提起、発展させた。これを量子スピン系を中心としたコンプレックス系の協力現象に適用し、多くの成果を得た。以上のように、本研究は多くの成果が得られ、日仏のグループによる共同実験も共著論文にまとめられている。次年度以降、ほぼ同じ研究者の構成による共同研究「コンプレックス系におけるエイジング現象」で、本研究を発展的に継承していく予定である。

一方、Campbellは、イジングSGの転移温度近傍のスピン自己相関関数q(t)を解析し、臨界指数ηが非普遍的である(相互作用の分布の仕方による)こと、q(t)が引き延ばされた指数関数でよく記述される等の結果を得た。また、川村は自ら提起している、ベクトルSGにおける有限温度相転移としてカイラル自由度のランダムな凍結描像を検証する精密な解析を行った。2)SG相転移の実験による解析:伊藤は、磁化測定で共通にカスプが観測されるSG物質でも、メスバウワ-効果とμSRの実験からSGとクラスターグラスとを区別できることを示した。また、反強磁性状態とSG状態の共存する混合相へのリエントラント転移点で非線形磁化率の発散的振舞いを観測した。3)磁場中SG相のエイジング現象:Ocioは、定常磁場をある時間t_w待ってからその値を変えた後の状態変化を微小交流磁場に対する応答の虚部を追うことにより、熱残留磁化の緩和過程は、t_w依存性を含めてある普遍的なスケール則で記述されることを見いだした。Orbachは、多数の準安定状態の位相空間における分布の様子を規定する重なり関数P(q)を、磁場中冷却磁化とゼロ磁場冷却後の磁場誘起磁化の時間発展を詳細に解析することにより直接評価する方法を提起した。さらに、伊藤は、磁化-磁場曲線の磁場掃引速度依存性を広い磁場範囲で調べ、SGに固有なダイナミックスを観測した。2.粒状(セラミック)銅酸化物超伝導体の位相のダイナミックス:Ocioは、La_<1.8>Sr_<0.2>CuO_4の粒状試料に関する1/fノイズの測定から、外部磁場で誘起されるゲージの競合の他に、d波超伝導体間のπ接合の存在から帰結される競合効果があることを示した。川村は、ベクトルSGと同様なカイラリティー転移の描像をセラミック超伝導体の相転移に展開した。3.重い電子系:都は、Ce(Ru_<0.85>Rh_<0.15>)_2Si_2に関して中性子散乱等の実験から、局在スピン系から重い電子系へのクロスオーバー(近藤温度=22K)、重い電子状態におけるスピン密度波(SDW)状態への相転移(T_N=5.5K)、および、後者の転移に伴うインバー的振舞いをする磁気体積効果を詳しく検証した。4.SDWのダイナミックス:Clarkは、(TMTSF)_2PF_6にパルス電場をかけ、パルス終端側でSDWが不純物にピン止めされる過程をNMRで観測し、その過程が、高温領域では準粒子がSDWギャップを越える熱活性化過程、低温領域では量子力学的トンネル過程であることを示唆する実験結果を得た。5.相転移理論:鈴木は、一般の相転移を論ずるための数理物理的方法(指数関数演算子の高次分解法など)を提起、発展させた。これを量子スピン系を中心としたコンプレックス系の協力現象に適用し、多くの成果を得た。以上のように、本研究は多くの成果が得られ、日仏のグループによる共同実験も共著論文にまとめられている。次年度以降、ほぼ同じ研究者の構成による共同研究「コンプレックス系におけるエイジング現象」で、本研究を発展的に継承していく予定である。本研究は、要素間の相互作用が互いに競合している系(コンプレックスな系)に固有な、新しいタイプの相転移とダイナミックスを明らかにすることにある。
恒常性破綻による蝸牛有毛細胞障害メカニズムの解明

内耳は、その内部構造がTJにより厳密にコンパートメント化されており、この内耳のコンパートメント化は、聴覚に必要不可欠な内リンパ電位の形成・維持に必須である。侵襲などによってこの恒常性が崩れると、有毛細胞変性を伴う難聴を引き起こすことが古くから知られており、このことは難聴に関する研究・治療の発展において大きな障害となっているが、そのメカニズムはほとんど分かっていない。このコンパートメントの破綻による有毛細胞変性メカニズムを解明することは、有毛細胞変性抑制のための手がかりとなり得る。そこで本研究では、これら細胞骨格と細胞接着に関与する構造タンパク質に注目し、治療への応用を目指した難聴の予防・治療に関連する知見を蓄積することを目的としている。初年度にあたる昨年度においては、有毛細胞変性メカニズムの解析を行うため、凍結精子と凍結胚から内耳有毛細胞の変性の表現型を持つTJ関連遺伝子(ILDR1,Tric)改変マウスをマウス系統を起こし繁殖させ、解析に必要な数のマウスを得ることが出来た。そして、これらのTJ関連遺伝子改変マウスで生じる有毛細胞障害は、生後2週までの特定の日齢に限定して起こることが明らかになっているため、この時期における有毛細胞変性に関する、主に形態異常について免疫染色や連続電子顕微鏡像などによって機能的、形態的の両面から解析を行い、細胞内部にいけるいくつかの形態異常を確認した。その異常の詳細を解析するために電子顕微鏡像の3D解析を進めている。凍結精子、凍結胚から目的の遺伝子改変マウスを起こし繁殖させ、解析に必要な数のマウスを得ることが出来た。そして、これらのTJ関連遺伝子改変マウスで生じる有毛細胞変性に関する、主に形態異常について免疫染色や連続電子顕微鏡像などによって機能的、形態的の両面から解析を行い、細胞内部にいけるいくつかの形態異常を確認できた。引き続き、内耳有毛細胞の変性の表現型を持つTJ関連遺伝子(ILDR1,Tric)改変マウスにおいて、有毛細胞変性メカニズムの解析を行う。METチャネルの透過能の検定、免疫染色や連続電子顕微鏡像などによって機能的、形態的の両面から解析を行い、障害の状態・原因を探る。これに並行し、TJ機能阻害剤を用いて有毛細胞障害を誘発する内耳障害難聴モデルの樹立を試みる。福島県立医科大学)および古瀬(生理学研究所)から、TJ機能阻害剤の供与を受けて行う。有毛細胞変性抑制・防止法の探索に有毛細胞変性抑制法の探索が順調であれば、侵襲モデルでの効果の確認を行う。
矯正装置装着後の血中金属イオン濃度と溶出遺イオンの関連性

各種市販矯正装置の腐食電位を測定し、異種金属接触腐食の駆動力となる装置間の電位差を評価した結果、矯正用ワイヤーでは、ステンレス鋼製ワイヤーの腐食電位が最も貴であり、Co-Cr-Ni合金製ワイヤー、β-Ti合金製ワイヤー、Ni-Ti合金製ワイヤーの順に腐食電位は卑となる傾向が認められた。ステンレス鋼製のコイルスプリングとRESPONDワイヤーは、他のステンレス鋼製ワイヤーと比較して、腐食電位は350mVほど卑な値を示した。ステンレス鋼製ブラケットの腐食電位は、その構造や接合部の有無によって大きな影響を受けた。2ピースタイプのブラケットは腐食電位が卑であり、ワイヤーと接触するとアノードとなって腐食する可能性が考えられた。表面を鏡面研磨した板状試料を用いてガルパニック電流を計測した。全ての組合せで時間の経過に伴うガルパニック電流の低下が認められ、24間経過後ガルパニック電流がほぼ一定になった。TiとNiTi合金を組合せた場合、24時間以降においても0.033μAを超えるガルパニック電流が計測された。この結果は、溶出イオンの計測においてTiがカソードとして作用しNiイオンの溶出が加速されたことを反映している。ステンレス鋼とNiTi合金を組合せた場合も、24時間以降0.044μAを超えるガルパニック電流が計測された。また、臨床的なブラケットとワイヤーの面積比についてコンピューター・データー分析システムを用いて計算し、実験に採用した結果、ブラケットとワイヤーの面積比のガルパニック電流に及ぼす影響は小さかった。5名の被験者についてマルチブラケット装着前(前日)と装着後(半年後)の静脈血を採取し、Ni、CoおよびCrに対するリンパ球芽球反応試験を行った結果、装置装着前と装着後での差は認められなかった。矯正臨床において考えられる異種金属接触腐食を溶出試験とガルバニック電流を計測することから調べた。ブラケット用金属としてはステンレス鋼とTi、ワイヤー用金属としてはNiTi合金、β-Ti合金、CoCr合金およびステンレス鋼を使用した。溶出試験では、TiとNiTi合金を組み合わせた場合、Tiがカソードとして作用し、単独浸漬と比較してNiイオンの溶出量が増加した。TiとCoCr合金を組合せた場合、Tiがアノードとして作用し、単独浸漬と比較してCoイオンとNiイオンの溶出量が減少した。ガルバニック電流の測定においては、全ての組み合わせで時間の経過に伴うガルバニック電流の低下が認められ、24間経過後ガルバニック電流がほぼ一定になった。TiとNiTi合金を組み合わせた場合、24時間以降においても0.05μAを超えるガルバニック電流が計測された。ステンレス鋼とNiTi合金を組み合わせた場合も、24時間以降0.05μAを超えるガルバニック電流が計測された。また、ガルバニック電流の計測においては、臨床的なブラケットとワイヤーの面積比についてコンピューター・データー分析システムを用いて計算し、実験に採用した。1:1、1:2.35および1:3.64の3種類の面積比を用いて実験を行った結果、ブラケットとワイヤーの面積比のガルバニック電流に及ぼす影響は小さかった。
乳房外パジェット病における生物学的特性の研究

根治不能EMPDは化学療法の適応だがそのエビデンスは存在しない。一方同じ汗腺系由来の悪性腫瘍の乳房パジェット病は一般的な乳癌と同様に扱われ、ホルモン受容体とHER2タンパクの有無にて治療方針が決定する。近年EMPDもHER2の発現が報告されており、我々も抗HER2療法が奏功した症例報告を行っている。これらからEMPDの生物学的特性は乳癌に近いのではとの推測が生まれる。そのためEMPDの網羅的遺伝子解析を行い乳癌遺伝子シグネチャーの相関を検討し、サブタイプ分類する事を本研究の目的としている。本研究によりほとんど明かされていない疾患の特性が明らかになりEMPDの研究が革新的に進むことが期待される。
新しい手法による新規内皮特異的遺伝子の心血管発生における意義の解析

心血管系の発生と形作りのメカニズム解析は、生物学の中心課題であるだけでなく、先天性心血管奇形・遺伝性血管病などの様々なヒト疾患の病因解明に必須の研究テーマである。今回の研究において、私たちが近年報告した新しい血管特異的遺伝子の発現部位・発現量を規定する機構や分子としての働きを明らかにするための研究を行った。この遺伝子の欠損によってマウスの血管形成の重篤な異常が生ずることが判明しており、この遺伝子の発現制御に働くシグナル伝達系はヒト疾患の病態に深く関与する。今後、この遺伝子のヒト疾患における意義を検討することも重要な研究課題である。心血管系の発生・分化・形態形成の制御機構の解析は、生物学の中心課題であるだけでなく、先天性心血管奇形・遺伝性血管病を含む、様々なヒト疾患の病因解明に必須の研究テーマである。本研究はBMP-ALK1シグナル伝達系による発生・形態形成制御機構を、私たち自身が報告した新規下流分子TMEM100に焦点を当てて解析するものである。私たちはTMEM100の遺伝子発現がBMP9/BMP10刺激によるALK1受容体シグナルの活性化により著明な亢進を示すことを明らかにした。そのTMEM100発現調節メカニズムにはSMAD転写因子の活性化が必須であり、染色体高次構造の変化を伴うエピゲノム遺伝子発現制御機構に働く複数の分子も重要な役割を有することが明らかになった。一方、TMEM100と協調して働く複合体パートナー分子の同定も試み、これまでに細胞内の分子輸送に関連するタンパクとの複合体形成を示唆する結果を得た。また、TMEM100発現トランスジェニックマウスの系統樹立において、トランスジェニックマウスの正常な発育にはTMEM100の発現部位や発現レベルを精密にコントロールすることが必要と考えられ、誘導型Cre酵素発現によってTMEM100発現を制御するトランスジェニックマウス系統の樹立を目指して実験を進めている。これらの研究は、これまで注目されていなかったTMEM100の発現調節、分子機能、心血管発生・形態形成における意義について明らかにしようとする試みである。本年度までに私たちは、ヒト培養血管内皮細胞におけるTMEM100のmRNA発現がBMP9/BMP10刺激によるALK1受容体シグナルの活性化により著明な亢進を示すことを明らかにした。既知のALK1シグナル下流遺伝子の発現亢進が刺激後数時間後までにピークに達するのと対照的に、TMEM100の発現亢進は刺激後24時間まで徐々に増加する様式を取った。そのTMEM100 mRNA発現亢進にはSMAD転写因子の活性化が必須であるが、上記の既知ALK1シグナル下流遺伝子がSMAD転写因子のリン酸化による活性化と転写調節領域への結合によって生ずるのに対し、TMEM100遺伝子の転写調節領域にはSMAD転写因子の結合が認められないと考えられた。TMEM100 mRNA発現亢進には新たな蛋白質因子の生合成が必須であることも判明し、SMAD転写因子の活性化によって転写・蛋白質合成活性化を示す何らかの因子がTMEM100 mRNA発現の直接の制御因子になっていることが示唆された。また、TMEM100と協調して働く複合体パートナー分子として、細胞内分子輸送に関連するタンパクとの複合体形成を示唆する結果を得たが、TMEM100発現トランスジェニックマウス系統樹立については、マウスの正常発育にはTMEM100の発現部位・発現レベルの精密なコントロールが必要と考えられ、異なるストラテジーによるマウス系統の作成が必要と考えられた。さらに、TMEM100の心血管形態形成における意義に関して、ノックアウトマウスの詳細な検討を進め、全身血管の胎生期における形態形成に加えて、心臓房室管の内皮間葉細胞形質転換にTMEM100が必須の役割を有することを明らかにした。心血管系の発生・分化・形態形成の分子メカニズムの研究は、先天性心血管奇形・遺伝性血管病を含む、様々なヒト疾患の病因解明に必須の研究テーマである。TMEM100は胎生期の血管内皮細胞に特異的に発現する遺伝子であり、そのノックアウトマウスは重篤な血管形態形成異常によって致死となる。培養ヒト内皮細胞において、TMEM100遺伝子発現はBMP9/BMP10刺激に反応するALK1受容体シグナルの活性化により著明な亢進を示すが、そのメカニズムには何らかのタンパク質分子の追加産生が必要であることが明らかになった。ALK1受容体の活性化とタンパク質分子産生の間にはSMAD転写因子による転写調節が介在していることも示され、染色体高次構造の変化を伴うエピゲノム遺伝子発現制御機構に働く複数の分子の重要性が示唆された。トランスジェニックマウスを用いてマウス胎仔における血管内皮特異的発現に関する研究も進め、遠位に存在するエンハンサーが必須の役割を示すことが明らかになった。一方、近年TMEM100はTRPチャネルなどとの相互作用により細胞内カルシウムイオン制御系に影響を与えることが示されたが、実際にTMEM100ノックアウトマウスの内皮細胞においてカルシウムシグナル反応性の転写調節因子活性化の抑制が認められた。

この転写調節因子活性の抑制が、胎生期の心血管系、特に内皮細胞の機能に影響を与え、ノックアウトマウスの心血管形態形成異常の一因になることが示唆された。心血管系の発生と形作りのメカニズム解析は、生物学の中心課題であるだけでなく、先天性心血管奇形・遺伝性血管病などの様々なヒト疾患の病因解明に必須の研究テーマである。今回の研究において、私たちが近年報告した新しい血管特異的遺伝子の発現部位・発現量を規定する機構や分子としての働きを明らかにするための研究を行った。この遺伝子の欠損によってマウスの血管形成の重篤な異常が生ずることが判明しており、この遺伝子の発現制御に働くシグナル伝達系はヒト疾患の病態に深く関与する。今後、この遺伝子のヒト疾患における意義を検討することも重要な研究課題である。内皮細胞におけるTMEM100の遺伝子発現が、BMP9もしくはBMP10によるALK1受容体シグナル活性化に引き続く、SMAD転写因子の活性化、何らかの蛋白質因子の生合成を介して生ずることが明らかになった。一方、TMEM100と複合体を形成して因子についての知見を得るとともに、TMEM100欠損マウスが心臓房室管の内皮間葉細胞形質転換の重篤な障害を生ずることを明らかにした。これらより、本研究はおおむね順調に進展していると考える。発生生物学循環器内科学小児循環器学本研究は、新しい血管内皮分子TMEM100の心血管発生・形態形成における発現制御機構、機能メカニズム、BMP-ALK1シグナル伝達系における生理的意義について、多方面から解析しようとするものである。今後、TMEM100発現制御機構に関しては、培養内皮細胞のみならずトランスジェニックマウス胎仔を用いたレポーター解析も取り入れて研究を進める。分子機能メカニズムについては、TMEM100の複合体パートナー候補の胎生期心血管系における発現様式の検討や、複合体形成による機能制御の可能性について検討して行く。また、生体レベルでTMEM100の複合体パートナーを検索するため、新しい組換えマウス系統の樹立も目指して研究を進めて行く。これまでにALK1受容体シグナルの活性化によるTMEM100遺伝子発現の著明な亢進においてSMAD転写因子の活性化が必須であり、染色体高次構造の変化を伴うエピゲノム遺伝子発現制御機構に働く複数の分子も重要な役割を有することを明らかにした。一方、TMEM100と細胞内分子輸送に関連するタンパクが複合体を形成して働く可能性を示唆する結果を得た。また、誘導型TMEM100発現トランスジェニックマウスの系統樹立のための実験は現在も進行中であるが、新年度に結果が得られると考えている。これまでの実験計画のうち、TMEM100発現制御機構の解析や複合体パートナー因子の検討を行ってきたが、遺伝子組換えマウス系統の樹立・繁殖や分子生物学的解析には至っておらず、そのため一部の動物・生化学・分子生物学的解析などが次年度に施行されることになった。本研究は、新しい血管内皮分子TMEM100の心血管発生・形態形成における発現制御機構、機能メカニズム、BMP-ALK
中世盛期アラゴン連合王国における統治構造の変容

前年度に続き、研究テーマである「中世盛期アラゴン連合王国における統治構造の変容」についての研究を行った。当該年度は特に君主権力と教会の関係についての分析を進めた。このうち、十二世紀のアラゴン連合王国国王とテンプル騎士修道会の関係についての研究は、論文としてまとめ、『西洋史学』誌に掲載することが出来た。また、十二世紀から十三世紀初頭にかけての同国王とタラゴーナ大司教座の関係についての研究も論文としてまとめ、『史学雑誌』誌に掲載することが出来た。さらに、十二世紀の国王とジローナ司教座の関係はスペイン語で論文としてまとめ、スペインの代表的な中世史専門の学術雑誌であるActa Historica Archaeologica et Mediaevalia誌に投稿し、2012年号への掲載が決定されている。また、論文の活字化に並行し、海外での学会報告も積極的に行うことが出来た。2011年6月にはスペインのリェイダ大学で開かれたInternational MedievalMeetingにおいて、また7月にはイギリスのリーズ大学で開かれたInternational Medieval Congressにおいて、それぞれイスラーム教徒からの征服地におけるアラゴン連合王国国王と教会の関係について報告を行った。さらに、バルセロナ大学中世史・古文書学専門分野の教授陣の勧めを受け、上記の諸成果をはじめとする研究成果をスペイン語で博士論文としてまとめ、同大学同専門分野に提出することが出来た。2012年2月に当該博士論文の審査会が開かれ、結果として同大学から博士号を授与された。このように、当該年度は多くの研究を様々な形態で成果として形に残し、かつ国内だけでなく、スペインやイギリスなど海外でも積極的に発信し、評価を得ることが出来た。このことは、我が国の西洋史研究の動向やレベルを国際的に認知してもらう上でも意義があり、また今後、国際的に研究活動を展開していく上で必要な知名度や人脈を築くことが出来た点で、重要性を有すると考えられる。当該年度は、主として12から13世紀におけるバルセロナ伯と教会の関係、またその統治構造や征服・植民活動への影響の分析を行った。その際、イスラム地域の征服・植民における教会の役割と、アラゴン連合国王(バルセロナ伯)の政策の解明に焦点を置いた。ローマ教会とバルセロナ伯の関係など、外交状況の影響も考慮された。地域的には、この時代にイスラム教徒から征服され、植民が進められたカタルーニャ南部が中心となった。史料はバルセロナ伯や教会領主、ローマ教会などの刊行史料を中心とした。具体的な作業は、地区ごと・時期ごとに、また文書発給の相手の類型ごとに、植民に際してバルセロナ伯の政策や対応にどのような差違が生じるかの、系統的な分析を中心とした。作業の過程で、8月にはバルセロナなどで調査活動を行い、バルセロナ大学の教授とも意見を交換し、議論を深め、かつアラゴン連合王国文書館などでも必要な補足調査を行った。これらの作業の結果、イスラム勢力から征服された地域の統治構造、社会発展、異文化並存について、現地の学界の従来の通説と異なる見解を導き出し、論証していくことが出来た。その成果は、博士論文としてまとめられ、2010年3月に東京大学大学院人文社会系研究科に提出された。また、その一部は雑誌論文としてまとめられ、2010年度の『地中海学研究』誌、また『歴史学研究』誌に掲載が決定している。日本学術振興会の優秀若手研究者海外派遣事業により、昨2010年度は1年間に渡りスペインのバルセロナ大学において研究課題「中世盛期アラゴン連合王国における統治構造の変容」に関する在外研究を行った。この間、研究課題についてスペイン内外の図書館や文書館で史資料を広く渉猟し、またヨーロッパ現地の研究者と意見を交換しつつ、多くの先行研究や史料を参考にして研究活動を進めることが出来た。この1年間の研究活動の成果はバルセロナ大学において高い評価を受けることが出来、2011年4月現在では、研究成果をまとめて博士論文としてバルセロナ大学に提出するよう、同大学の教授たちから勧めを受けている。また成果の一部は、バルセロナ大学が発行している中世史学専門の学術雑誌であるActa Historica Arcaeologica etMediaevalia誌の2011年号に雑誌論文として掲載される見込みである。また日本国内においても、昨年は多方面で多年に渡る研究の成果が確認された。2010年9月には、東京大学大学院人文社会系研究より博士号を授与されている。同大学に提出した博士論文の内容の一部は、雑誌論文として『地中海学研究』『歴史学研究』といった学術雑誌に掲載され、また歴史学研究会ヨーロッパ中世史・近世史合同部会や史学会大会といった複数の学会で発表されている。これらの研究は従来我が国で研究されてこなかったテーマや地域を扱ったものであり、我が国のヨーロッパ史研究において新たな分野を切り開くものとなると考えられる。

また、論文の活字化に並行し、海外での学会報告も積極的に行うことが出来た。2011年6月にはスペインのリェイダ大学で開かれたInternational MedievalMeetingにおいて、また7月にはイギリスのリーズ大学で開かれたInternational Medieval Congressにおいて、それぞれイスラーム教徒からの征服地におけるアラゴン連合王国国王と教会の関係について報告を行った。さらに、バルセロナ大学中世史・古文書学専門分野の教授陣の勧めを受け、上記の諸成果をはじめとする研究成果をスペイン語で博士論文としてまとめ、同大学同専門分野に提出することが出来た。2012年2月に当該博士論文の審査会が開かれ、結果として同大学から博士号を授与された。このように、当該年度は多くの研究を様々な形態で成果として形に残し、かつ国内だけでなく、スペインやイギリスなど海外でも積極的に発信し、評価を得ることが出来た。このことは、我が国の西洋史研究の動向やレベルを国際的に認知してもらう上でも意義があり、また今後、国際的に研究活動を展開していく上で必要な知名度や人脈を築くことが出来た点で、重要性を有すると考えられる。
通常の学級における自閉症児の支援マニュアルの開発と運用に関する実証的研究

本研究「通常の学級における自閉症児の支援マニュアルの開発と運用に関する実証的研究」における研究実績は,以下の通りである。平成13年度は,『通常の学級の先生へ自閉症児の支援マニュアル(試案)』を通常の学級担任にモニターして貰い,その成果と課題から『通常の学級の先生へ自閉症児の支援マニュアル(改訂版)』を作成し発刊した。2点目は,2事例であるが特定の自閉症児のための『通常の学級の先生へ-オーダーメイドマニュアル平成16年度版-』を作成したことである。このオーダーメイドマニュアルは,平成13年度から開始し,学級担任や保護者といった関係者に配布し,年度を重ねる中で対象児の情報を整理し修正するなどして利用して貰っている。3点目は,これらの研究成果を踏まえ特殊教育学会等で発表したり,雑誌等に一部経過報告等を行っている。また,3年間の研究成果報告書『通常の学級における自閉症児の支援マニュアルの開発と運用に関する実証的研究』を作成した。科学研究基盤(C)の「通常の学級における自閉症児の支援マニュアルの開発と運用に関する研究」は、今年度が初年度である。今年度の研究の実績としては、国立特殊教育総合研究所分室の一般研究「通常の学級における自閉的傾向のある児童の教育に関する研究」の一環として実施した、質問紙調査の回答者である自閉症児を指導する通常の学級担任158名を対象に、「指導マニュアル作成上必要な情報」の調査を実施した。具体的には、通常の学級で自閉症児を指導する学級担任から、自閉症児を指導する際のマニュアルで必要な内容や、知りたい情報のニーズ調査を実施した。結果は、77%の回収率で122名の学級担任から回答を得ている。現在はこの結果を集計し、知的に遅れがないと考えられる自閉症児群(H群と定義)と、主要教科全てが2学年以上遅れている自閉症児群(L群と定義)、H群とL群に入らない自閉症児群(M群と定義)の3群に分けて分析を実施しているところである。現在までの途中結果を報告すると、指導マニュアル作成にあたって学級担任が必要とする指導や対応の内容傾向は、学習中や生活場面における行動上の対応には3群間の大きな差はみられていないことが明らかになってきている。また、来年度は実際の指導マニュアルを作成するにあたり、今年度は、執筆者としての研究協力者を、茨城県や東京都、福岡県の情緒障害特殊学級・通級指導学級担任に依頼した。科学研究基盤(C)の「通常の学級における自閉症児の支援マニュアルの開発と運用に関する実証的研究」は、今年度が2年目である。今年度の研究の実績としては2点ほどある。まず1点目は,国立特殊教育総合研究所分室の一般研究「通常の学級における自閉的傾向のある児童の教育に関する研究」の一環として実施した、質問紙調査の回答者である自閉症児を指導する通常の学級担任158名を対象に、「指導マニュアル作成上必要な情報」として47項目を用意し,その優先順位の調査を実施した。その結果、自閉症児の学校生活における1日の時間系列の中で,学級担任が指導をする際に必要な情報が43項目に絞れたため,研究協力者17名と分担者によってその34項目をQ&A方式で執筆し、試案の段階であるが「通常の学級担任へ自閉症児の支援マニュアル(試案)」を作成した。この試案を印刷し冊子として、全国47都道府県教育委員会および教育センター等に配布した。次年度は、この試案を使用した通常の学級担任にモニターを依頼し、その結果を分析し修正した完成版を刊行する予定である。もう1点は、2事例ではあるが特定の自閉症児のための支援「オーダーメイドマニュアル」を作成し、自閉症児を指導する通常の学級担任にモニターをしてもらい、その結果を分析し修正版を作成した。この結果については、本研究所の研究紀要30巻に、「自閉症児を指導する通常の学級担任へのコンサルテーションの実践-オーダーメイド・マニュアルを使用した事例から-」というテーマで発表している。科学研究基盤(C)の「通常の学級における自閉症児の支援マニュアルの開発と運用に関する実証的研究」は、最終年度である。3年間の研究の実績としては以下の通りである。平成13年度は,2事例ではあるが特定の自閉症児のための支援「オーダーメイドマニュアル」を作成し、自閉症児を指導する通常の学級担任にモニターをしてもらい、その結果を分析し14年度版を作成した。平成14年度は,自閉症児を指導する通常の学級担任158名を対象に、支援マニュアルを作成する上で必要な情報の調査を実施した。

その結果、自閉症児の学校生活の中で,学級担任が指導をする際に必要な情報が43項目に絞れたため,研究協力者17名と分担者によってその34項目をQ&A方式で執筆し、試案の段階であるが『通常の学級担任へ自閉症児の支援マニュアル(試案)』を作成した。この試案は冊子として、全国47都道府県教育委員会および教育センター等に配布した。また,2事例の自閉症児のための「オーダーメイドマニュアル」は,平成14年度版を自閉症児を指導する通常の学級担任にモニターをしてもらい、その結果を分析し修正版を作成した。平成15年度は,平成14年度に発刊した『通常の学級担任へ自閉症児の支援マニュアル(試案)』を通常の学級担任にモニターして貰い,その成果と課題から『通常の学級担任へ自閉症児の支援マニュアル(改訂版)』を作成し発刊した。また2事例の自閉症児のための「オーダーメイドマニュアル」は,平成15年度版を自閉症児を指導する通常の学級担任にモニターをしてもらい、その結果を分析し平成16年度版を作成した。