hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
血中ラミニンγ2鎖濃度測定による頭頚部癌の浸潤・転移能の診断-浸潤・転移能を判定する新たな腫瘍マーカーへの展開-

1)血中LNγ2鎖濃度は14.5324.2ng/mlにわたっており、正常上限は50ng/ml程度であることが推測された。2)25例(34%)では血中LNγ2鎖濃度が正常上限を超えて上昇していた。3)原発巣部位による血中LNγ2鎖の濃度差はみられなかった。4)原発巣進行度と血中LNγ2鎖濃度に相関がみられ、T4症例の濃度は有意に上昇していた。5)頸部リンパ節転移進行度と血中LNγ2鎖濃度には相関がみられなかった。6)臨床病期進行度が進行するにつれて血中LNγ2鎖濃度が上昇する傾向がみられたが、統計学的有意差はなかった。7)治療前の血中LNγ2鎖濃度が正常上限以下の症例では、治療に伴う濃度変化はほとんどみられず、治療後も正常上限以下であった。8)治療前に血中LNγ2鎖濃度が異常高値を示した症例では、根治治療による腫瘍消失に伴い治療後の渡度は正常範囲に低下した。9)末期癌状態となった3例では血中LNγ2鎖濃度が100ng/mlを越えて著明に上昇し、その後原病死した。以上より、血中LNγ2鎖濃度は主に原発巣におけるLNγ2鎖発現陽性な癌細胞の総和を反映すると考えられ、治療の奏効度や進行・再発などの臨床的経過を評価するマーカーとして有用であることが示唆された。佐賀大学医学部付属病院耳鼻咽喉科にて入院加療した73名の頭頸部癌(扁平上皮癌)患者の血清中のラミニンγ2鎖N末端フラグメント濃度(LNγ2鎖濃度)の測定結果(平成18年度実績報告書に記載)から、血中LNγ2鎖濃度は主に原発巣におけるLNγ2鎖発現陽性な癌細胞の総和を反映すると考えられ、治療の奏効度や進行・再発などの臨床的経過を評価するマーカーとして有用であることが示唆された。この研究成果を国内学会等に出席し発表するとともに、研究関連の情報を収集した。また、研究成果を英文論文としてまとめ、Head&Neck誌に投稿しアクセプトされた。
単一試行事象関連電位の自動検出法の臨床応用および認知機能の解明に関する研究

事象関連電位(EPR)は、外部刺激に対する認知や期待など脳の高次機能に関連した電位であり、各刺激毎のERP波形を抽出し、その特徴を調べることは、医学の分野において重要な課題である。先に、バンドパスフィルタを用いて健常成人11名の単一試行ERPを記録し、その中で最も重要なP300波形の自動検出を行い、良好な結果を得た。本方法を臨床応用しょうとした場合、小児や痴呆症患者では、主な雑音成分である背景脳波の周波数帯域が低下し、P300の周波数帯域と重なるために、バンドパスフィルタによるSNの比の向上が望めない。本研究では、両者の周波数帯域が重なる被検者に対する単一試行P300記録のためのモルフォロジーフィルタの設計法を提案した。本方法では、時系列に対するモルフォロジーフィルタの特性を明確にし、雑音成分と有効成分の特性を考慮に入れたフィルタの設計を行った。本方法の妥当性を示すために、シミュレーションを行った結果、バンドパスフィルタを用いた場合には、雑音成分が振動的波として残り、P300の自動検出がうまくいかなかったのに対して、モルフォロジーフィルタを用いた場合では、振動的な波も残らないために、P300が明確になり、良好な自動検出結果を得た。本方法を小児9名のデータに適用した結果、シミュレーションと同様な良好な結果が得られた。本方法は、有効成分と雑音成分の周波数帯域が重畳した場合のSN比向上に有効であるため、乳幼児の脳の発達、麻酔中の認知機能の解明、痴呆症患者の認知障害の解明等の臨床に役立てることが期待できる。本年度の研究成果は、国際学会(KACC)で発表し、現在、Journal of Biomedical Engineeringの論文誌に投稿中である。また、今年度の研究を進める上で重要となった健常成人のP300の自動検出法に関する研究が論文集に掲載決定となったので、本報告書の研究発表の項目に記載した。
内分泌攪乱化学物質による脳機能発達障害の総合的評価

研究期間最終年度である本年度は今までの成果を投稿論文公表にむけて解析、整理を進めた。また具体的実験としては以下の3つを行った。1.ポリ塩化ビフェニル(PCB)、特にヒトの体内で代謝され存在する中間代謝産物である水酸化PCBの神経系発達に与える影響の評価を行った。今回は2種類の異性体を選択した。ひとつは既に化学物質の性質として抗甲状腺ホルモン様作用を有すると知られている異性体(OHPCB106)、もうひとつは現在のヒトの血液、脳脊髄液中で高頻度、高濃度で検出される異性体(OHPCB187)である。OHPCB106については妊娠ラットに皮下埋没ポンプを用いて持続的曝露を行い次世代個体の脳における遺伝子発現を評価した。その結果このOHPCB106は生体脳の中でも甲状腺に制御されている遺伝子発現について抗甲状腺ホルモン様作用を示すこと、その結果グルタミン酸による神経伝達に不可欠な遺伝子の発現が撹乱されることを示した。またOHPCB187については初代培養神経細胞への曝露および新生仔ラットへの曝露を行い、同様に遺伝子発現を評価した結果、多数の遺伝子発現が撹乱され、興味深いことに新生仔曝露ではこの異性体も抗甲状腺ホルモン様作用が見られた。甲状腺ホルモンは神経系発達に不可欠な働きを有することを考えるとこの結果は重要な知見である。2.実験飼育下カニクイザル母体のPCB汚染程度と次世代個体の行動を検討した結果、いくつかの行動特性が母体の汚染程度と相関した。この結果は現在追加データと併せて検討中である。3.ジフェニルアルシン酸を妊娠カニクイザルに曝露し血中動態や残留性等の背景データを評価した後、次世代行動における評価をスタートした。被検物質による影響は現在のところ確認されていない。本年度は内分泌撹乱化学物質の中でもエストロジェン様化学物質として知られるビスフェノールAおよびノニルフェノールの周産期暴露が後の行動発達に与える影響を検討し、以下の結果を得た。ビスフェノールA暴露は自発運動量やオープンフィールドテスト等の一般行動には影響を与えなかったが、電気刺激を回避させる学習能力試験においては有意に学習能力低下が認められた。またモノアミン負荷試験という脳内モノアミン系を撹乱させる試験を行った結果、ビスフェノールA暴露はモノアミン系の撹乱に対する反応性が低下していた。このことは脳内モノアミン系発達異常を示唆した。ノニルフェノール暴露は一般行動および学習能力試験における成績に影響を与えなかったが、モノアミン負荷試験において反応性の充進が検出された。以上のことは周産期に弱いエストロジェン様化学物質を比較的低濃度で暴露した場合、モノアミン系発達障害が生じていることが示唆され、また2つの物質で作用機序は異なる、即ちエストロジェン様作用以外のメカニズムの存在を示唆した。この結果は環境毒性学の一流紙であるEnvironmental Health Perspectives誌に公表した。またこれらの物質の吸収、分布、代謝、排泄におけるげっ歯類ラットと霊長類サルの間にある種差を検討し、Experimental Animals誌に公表した。またカニクイザルにおける試験についても周産期ビスフェノールA暴露サルの行動試験結果が集まりつつあり現在解析を行っているところである。さらに甲状腺機能低下サルの作成を検討し、試験を開始した。同時に母体血中PCB濃度と次世代サルの行動発達の間にあるかもしれない因果関係を検討し結果の一部をOrganohalogen Compounds誌に公表した。昨年度、げっ歯類においてモノアミン系発達障害を明らかにしたビスフェノールA(BPA、内分泌撹乱化学物質として疑われる物質の一つ)を妊娠カニクイザルに皮下ポンプを用いて10μg/kg/dayの濃度で投与し、次世代個体に対して母子行動(育児行動)、出会わせ試験(同世代個体に対する意識)、アイコンタクトテスト(ヒトに対する意識)および指迷路試験(記憶学習能力)を評価した結果、母子行動についてBPAオス新生仔の行動の複数項目がメスと同様になるという「オスのメス化」が観察された。現在出会わせ試験の結果を解析中である。またアイコンタクトテスト、指迷路試験においても同様に「オスのメス化」傾向がみられた。来年度にこれらの結果をまとめて投稿する予定である。環境化学物質のヒトへの影響を評価するにあたって、よりヒトに近縁であるカニクイザルを用いることは重要であるが、BPAのカニクイザルへの投与は世界初の試みでありその結果「オスのメス化」という現象を検出したことは毒性学領域において非常にインパクトのある結果である。甲状腺ホルモン撹乱による神経系発達障害の臨界期を検討するために、胎生期のみ甲状腺ホルモン欠乏にしたラットと胎生期・授乳期にわたり甲状腺ホルモン欠乏にしたラットを作成し、各種行動試験により行動を比較・評価した。その結果、周産期にわたり甲状腺ホルモンを欠乏させた個体は多動を示したのに対し、胎生期のみ欠乏させたラットは逆の不動傾向を示した。このことは甲状腺ホルモン欠乏により多動障害が発生するための臨界期は出生後であり、出生前つまり胎生期の甲状腺ホルモン欠乏はむしろ逆の表現型を誘発するという障害の時期特異性の存在を示唆する。

ひとつは既に化学物質の性質として抗甲状腺ホルモン様作用を有すると知られている異性体(OHPCB106)、もうひとつは現在のヒトの血液、脳脊髄液中で高頻度、高濃度で検出される異性体(OHPCB187)である。OHPCB106については妊娠ラットに皮下埋没ポンプを用いて持続的曝露を行い次世代個体の脳における遺伝子発現を評価した。その結果このOHPCB106は生体脳の中でも甲状腺に制御されている遺伝子発現について抗甲状腺ホルモン様作用を示すこと、その結果グルタミン酸による神経伝達に不可欠な遺伝子の発現が撹乱されることを示した。またOHPCB187については初代培養神経細胞への曝露および新生仔ラットへの曝露を行い、同様に遺伝子発現を評価した結果、多数の遺伝子発現が撹乱され、興味深いことに新生仔曝露ではこの異性体も抗甲状腺ホルモン様作用が見られた。甲状腺ホルモンは神経系発達に不可欠な働きを有することを考えるとこの結果は重要な知見である。2.実験飼育下カニクイザル母体のPCB汚染程度と次世代個体の行動を検討した結果、いくつかの行動特性が母体の汚染程度と相関した。この結果は現在追加データと併せて検討中である。3.ジフェニルアルシン酸を妊娠カニクイザルに曝露し血中動態や残留性等の背景データを評価した後、次世代行動における評価をスタートした。被検物質による影響は現在のところ確認されていない。
幕末・明治期の先駆的英国人日本学者による国学の受容と評価

本研究では、ケンブリッジ大学図書館に所蔵されているW.G.アストン旧蔵の和書のうち、国学著作(霊能真柱、古史徴、たまたすき、入学問答、すずのたまぐし、俗神道大意、くずばな、鬼神新論、古今妖魅考、末賀能比連、祝詞考、祝詞正訓、大祓詞後釈、出雲国造神寿後釈、玉くしけ別本)に記されたアストンおよびサトウの鉛筆書き入れを資料として収集し、分析を加えた。その結果、アストンもサトウも本居宣長、賀茂真淵、平田篤胤らの国学著作の内容を精力的に理解・研究したこと、とりわけ篤胤の国学研究を高く評価していたことが明らかになった。(1)横浜開港資料館所蔵の幕末・明治期の英字紙The Japan weekly Mailを1870年以降について調査して、攘夷関係記事を収集した。(2)英国ロンドン市の国立公文書館において、Satow Papersのうち、サトウの日記(PR030/33/15/1-17)をデジタル・カメラによって撮影し、画像をUSBメモリに保存した。(3)同国ケンブリッジ市のケンブリッジ大学図書館において、「アストン和書目録」登載の国学著作と当館所蔵アストン・コレクション中の国学著作との照合・書き込み調査を行い、調査結果をUSBメモリに保存した。乕尾達哉『先駆的英国人日本学者のネットワーク』(平成1618年度科学研究費補助金(基盤研究(C))研究成果報告書)を適宜参照した。具体的には、平田篤胤「たまだすき」で、本の各頁上部余白に鉛筆書きによる夥しい書き込みがなされ、アストンが篤胤の著作を丹念に読み込もうとしたことが明らかになった。また、この過程で、アストン旧宅の蔵書と「アストン和書目録」との関係を媒介するラベル機能を有する紙片を発見し、「アストン和書目録」が実際にアストンによってどのように使用されたかを具体的に明らかにした。この成果は論文として発表した。(4)横浜開港資料館において、日本アジア協会紀要に掲載されたサトウ、アストン、チェンバレンらの著作から国学著作を引用・言及した記述を調査した。(2)英国ロンドン市の国立公文書館において、Satow Papersのうち、サトウの日記をデジタル・カメラによって撮影し、画像をUSBメモリに保存した。具体的には、平田篤胤「たまだすき」で、本の各頁上部余白に見られる鉛筆書きの夥しい書き込みをすべて撮影し、画像をUSBメモリに保存した。1英国ロンドン市の国立公文書館において、Satow Papersのうちサトウの日記を中心にデジタル・カメラによって撮影し、画像をUSBメモリに保存した。21で収集した資料から、攘夷や国学者・国学著作関連の記述をUSBメモリに保存した。3同国ケンブリッジ市のケンブリッジ大学図書館において、「アストン和書目録」登載の国学著作と当館所蔵アストン・コレクション中の国学著作との照合・書き込み調査を行い、書き込み資料をデジタル・カメラによって撮影し、すべてUSBメモリに保存した。今年度撮影保存した書き込みは、「たまたすき」、「霊能真柱」、「くずばな」、「鬼神新論」、「古事記伝」であり、またアストン「蔵書目録」、チェンバレン「王堂蔵書目録」も撮影・保存した。この結果、サトウやアストンが宣長や篤胤の国学著作を真摯に学び、かつ合理的な観点からできるかぎり客観的な理解に努めようとした形跡が明らかになった。サトウやアストンら先駆的英国人日本学者が日本の学問・宗教・文化を研究する上で、国学著作がそれらの根幹につながる必読文献と高く評価していたことは確実である。とりわけ、サトウは国学著作を高く評価していた。たとえば、サトウとアストンは同版の「たまたすき」を所蔵していたが、本書に対する書き込みはサトウの方が圧倒的に多い。サトウはアストンの日本学三部作に相当するような著作は残さなかったが、日本学者として国学著作を十分に学び、深い素養を蓄えていたことがわかる。1横浜開港資料館

所蔵の幕末・明治期の英字紙The Japan weekly Mailを1870年以降について調査して、攘夷関係記事を収集した。2英国ロンドン市の国立公文書館において、Satow Papersのうち、サトウの日記をデジタル・カメラによって撮影し、画像をUSBメモリに保存した。3同国ケンブリッジ市のケンブリッジ大学図書館において、「アストン和書目録」登載の国学著作と当館所蔵アストン・コレクション中の国学著作との照合・書き込み調査を行い、調査結果をUSBメモリに保存した。乕尾達哉『先駆的英国人日本学者のネットワーク』(平成1618年度科学研究費補助金(基盤研究(C))研究成果報告書)を適宜参照した。具体的には、「玉かつま」「柳庵随筆初編」「古史徴」「たまたすき」「鬼神新論」「祝詞考」「玉くしけ別本」などで、本の各頁上部余白に見られる鉛筆書きの夥しい書き込みをすべて撮影し、画像をUSBメモリに保存した。4横浜開港資料館において、日本アジア協会紀要に掲載されたサトウ、アストン、チェンバレンらの著作から国学著作を引用・言及した記述を調査した。ケンブリッジ大学図書館所蔵アストン・コレクション中の国学著作にはアストンまたはサトウによる夥しい書き込みが見られ、先駆的英国人日本学者たちが国学著作を冷静に評価し、その研究成果を自らの著作に取り入れようとしたことが明らかになりつつある。25年度が最終年度であるため、記入しない。基本的にはこれまでの研究方法を維持するが、ケンブリッジ大学図書館所蔵のアストン・コレクションは膨大な量に上り、1日の借り出し点数も5冊までと限定されているので、国学著作の書き込み調査は予め対象を絞って実施する必要がある。
多施設データの標準化システムの構築およびQIによる術後AKIの予防診療の質評価

1.多施設データの標準化・統合化システム構築:平成30年度は、本研究で活用するp-Retrevierの各施設におけるデータ抽出が滞っている問題を解消するために、システムの改変を進めた。現在、京都大学医学部付属病院に導入されているp-Retrevierの改変作業を行っており、作業が終了次第、他施設での改変も進める予定である。同時に、各データを突合・連結不可能匿名化したのちに中央データに集約するための環境整備についても検討を行っている。2.急性腎障害(Acute Kidney Injury;AKI)発症の予測モデルの作成:京都大学医学部附属病院の2015年度のデータを用い、サンプルサイズを確認したところ、全身麻酔の手術を受けた約4700名の患者で、参入基準を満たしアウトカムデータ取得可能な患者のうちAKIを発症したのは約3%であった。予測モデル作成および検証のためには、複数年度・複数施設のデータが必要である。・平成30年度は産休を取得したため・各施設におけるp-Retrevierへのデータ読み込み(ローカル運用)作業が滞っており、整備が必要であるため。・京大附属病院のp-Retrevierのシステム改変が終わり次第、研究者自身が他各施設に赴き改変作業を行うことで、各施設のローカル運用の整備を促進する。さらに中央データシステムの構築(クラウド管理を予定)の検討および導入を進める。・AKI予測モデルの作成に関し、予測複数年度・複数施設のデータが必要であることが再確認できたため、前述のシステム構築を進め、データ収集・解析開始を目指す。1.多施設データの標準化・統合化システム構築:平成29年度は、本研究で活用するp-Retrevierの各施設における現在の稼働状況を確認した。医療データ(DPC、外来レセプト、検査データ)の読み込みは各施設が担当するため(ローカル運用)、複数の施設で最新データの読み込みが滞っていた。そのため、データ読み込みの促進を行うとともに、各データを突合・連結不可能匿名家したのちに中央データに集約するための環境整備について検討を行った。現段階では、クラウド上で管理することを検討しており、平成30年度以降に実施する予定である。2.急性腎障害(Acute Kidney Injury;AKI)発症の予測モデルの作成:周術期AKIおよび入院中のAKIに関連する先行研究の再検索を行い、リスク要因およびアウトカムの再検討および必要変数の整理を改めて行った。2016年度のデータを用いて予測モデルの作成(Derivation)を行い、2015年度のデータまたは他施設のデータを用いてexternal validationを行う予定であるが、平成29年度は、各施設におけるデータ読み込みの遅延もあったため、パイロット的に、京都大学医学部付属病院の2014年度の医療データを用いて必要データの入手可能性、各変数の測定方法の信頼性・妥当性などの検討を行った。予測モデルの精度をあげるために、機会学習によるモデルの構築も検討しており、平成30年度も検討を続ける予定である。・各施設におけるp-Retrevierへのデータ読み込み(ローカル運用)が滞っており、整備が必要であったため。・先行研究を再検索した結果、周術期AKIのリスク要因が各疾患・手術により異なっており、腎臓内科以外の複数分野の医師が納得できる、また日常的に使用しやすいリスクモデルを作成するためにより十分な検討が必要であると考えたため。・平成30年度以降も、引き続き研究者自身が各施設に赴き作業を行うことにより、各施設のローカル運用の整備を促進する。・AKI予測モデルの作成に関し、当初の研究計画通りの周術期AKI予測モデルの構築で進めるか、または複数分野の非腎臓内科医師に貢献できるよう改変を行うかの決定を行う。また、ローカル運用が整備され次第、データの本格的な解析を実施する。*研究代表者は平成30年度に産前産後休暇を取得し、研究は一時中断する予定である(別途、期間延長申請書を提出する予定である)・京大附属病院のp-Retrevierのシステム改変が終わり次第、研究者自身が他各施設に赴き改変作業を行うことで、各施設のローカル運用の整備を促進する。・多施設データの標準化・統合化システムの構築、および中央データ集積システムの構築(クラウド環境を予定)・各施設への訪問(システム整備、データ抽出)

・多施設データの標準化・統合化システムの構築、および中央データ集積システムの構築(クラウド環境を予定)・各施設への訪問(システム整備、データ抽出)・学会参加
周期関数型メンバシップ関数の極座標表示と非ファジィ化の提案

本研究では,非ファジィ化の際に台集合の扱いが煩雑となる周期関数型のメンバシップ関数を極座標(円座標)変換し,座標を固定することにより一意に表す手法を提案した。この直交座標系から円座標系に変換し,閉じた平面図形として表された周期関数型メンバシップ関数からクリスプ値である特徴点(代表点)を抽出する非ファジィ化法について,通常のファジィ推論法で多く用いられている重心法の概念を踏まえた方法を提案した。ファジィ推論における非ファジィ化演算で,メンバシップ関数のグラフの形状から台集合の1点を決定する際,周期関数の定義域の区間設定を適切に行わないと非ファジィ化されたクリスプ値である推論エンジンの出力値が意味を持たないものになってしまう。正確な値を得るためには台集合の平行移動が必要となる。本研究では,このように非ファジィ化の際に台集合の扱いが煩雑となる周期関数型のメンバシップ関数を極座標(円座標)変換し,座標を固定することにより一意に表す手法を提案した。この円座標上で求められた特徴点から直交座標系上の特徴点を定める手法を提案した。この点を非ファジィ値として推論結果とみなす。これらの提案手法の妥当性を確認するために,すなわち,円座標に変換後再び直交座標上で得られた非ファジィ値と,直交座標系上のまま座標軸の変換を行って得た非ファジィ値の一致をいくつかの数値例で確認した。提案手法を色彩決定の推論システムに適用した。色合いを表す色相は色相環であるのでメンバシップ関数として定式化すると周期関数となり上述のように台集合の扱いが煩雑となる。しかしながら本手法は通常のファジィ推論を適用するより平易な演算で推論できることが確認できた。ファジィ推論に用いられるメンバシップ関数のうち,周期関数型のメンバシップ関数について極座標表示を行った。現在のところ,実際には円座標変換で十分な結果を得られると考えられる。メンバシップ関数の変数を偏角,それに対するファジィ値を動径に変換することによって周期関数が定められた同一の座標系(区間)に一意に定義することができた。これにより,例えば三角型のメンバシップ関数であるならばしずく型に変換されるように,周期関数は閉じた平面図形に変換される。この図形からある偏角を定め,その値を与える周期関数の台集合の値を重心とした。この一連の計算過程を周期型のメンバシップ関数の重心計算法とした。極座標における偏角の算出方法は,極座標変換で得られた図形の面積を1対1に分ける中心からの直線の角度とした。しかしながらこの方法には今後さまざまな課題や不都合が生じると予想できるので精査すべきであると考える。現在,これらは釣鐘型,三角型,台形型などの具体的な形をした関数について数値例を与えて手法の実現性,有用性を実験的に確認している。また,平行して任意の形をした周期型メンバシップ関数に対して実験が行えるようにシミュレーションの実装を試みている。本手法の適用例としていかなるものがあるかについては,様々な分野,例えば経営科学,会計学,OR,色彩デザイン等の研究者や企業のエンジニア等と意見交換を行い,もっとも効果的な応用の手段を模索中である。以下の要因が挙げられる。周期関数型のメンバシップ関数を極座標変換した後の閉じた図形の面積を算出する方法に関して,釣鐘型,三角型,台形型の関数のように形の定まった個々のケースに関しては比較的容易に求めることが可能であるが,一般的の関数については計算アルゴリズムが確定できていない。よって線形近似することで近似値を代用せざるを得ない状況である。これが次の段階である非ファジィ化計算の連続性の証明などに進めない要因となっている。他には周期関数の定義域の設定について,明快な結論が導き出せていない。これは実用段階になればさほど問題にならないのであるが,数理モデルに一般化する際,どこまで一般化すべきかの程度を計りかねている。提案する非ファジィ化演算を周期型メンバシップ関数集合を台集合とした汎関数とみなして連続性の解析を行う。つまり,メンバシップ関数が少しだけ変化したら,それに伴って非ファジィ化の値も変化するかということである。この性質が得られれば最適制御の存在性を証明できる可能性がある。ファジィ推論への入力値である前件部変数に対する連続性,具体的には入力の変化に伴う推論結果の変化の連続性についても明らかにする。これらの連続性は最適化問題の解法や閉ループ系制御システムの状態方程式の解の存在性に大きく寄与する性質であると考える。

以前行った色彩決定研究へ適用を試み,提案手法と従来手法を比較検討し優位性を明らかにする。さらに,応募者らがこれまで行ってきた最適制御問題に適用し,最適解の収束に関して考察する。一方で,1入力1出力の一般的なモデルを構築し,評価関数に極値を与えるメンバシップ関数を逐次近似する。該当なし
破骨細胞分化エピゲノム解析と破骨細胞を介する骨芽細胞機能調節機構への応用

我々はこれまで、破骨細胞分化に重要な転写因子NFATc1(nuclear factor activated T-cell, cytoplasmic 1)を過剰発現させたHEK293細胞からAffinity PurificationによりNFATc1とその結合蛋白を抽出し、LC-MS/MSによりNFATc1結合候補分子を同定してきた。数あるNFATc1結合候補分子の中でWHSC1(Wolf-Hirschhorn syndrome candidate 1)はmethyltransferase活性を持つ蛋白であり、ヒストンメチル化を介してNFATc1を介する遺伝子発現を調節している可能性が考えられる。そこで我々はsiRNAによるgene silencingを用い、WHSC1の破骨細胞分化関連遺伝子の発現に与える影響について破骨細胞様細胞RAW264.7細胞を用いて検討した。予想した通り、si-WHSC1, si-NFATc1のtransfectionによって、いずれもRANKL刺激後の破骨細胞分化関連遺伝子(ACP5, CTSK, OCSTAMPなど)の発現が抑制され、WHSC1が破骨細胞分化、融合、活性化に関連する遺伝子発現調節に関与する可能性が示唆された。興味深いことに、WHSC1の遺伝子発現を抑制するとNFATc1の遺伝子発現も低下し逆もまた同様であったことから、NFATc1の転写調節にWHSC1が影響を与え、その機序としてWHSC1がヒストン修飾を介してNFATc1クロマチン複合体の構造変化をもたらしている可能性が考えられた。
タンパク質修飾酵素トランスグルタミナーゼの生理機能解析

タンパク質修飾酵素トランスグルタミナーゼ(TGase)の生理機能を分子レベルで解明するために、組織型TGaseのタンパク質基質と相互作用タンパク質についての解析およびショウジョバエをモデル生物とした機能解析実験を行った。1.酵素反応特異的基質ラベル法で見出された基質候補ベタイン-ホモシステインメチルトランスフェラーゼ(BHMT)が、TGase基質として反応することを、精製した肝BHMTと肝TGaseを用いた実験で確認した。肝BHMTは、TGaseの架橋修飾を受けることにより、活性が減少した。「TGaseによるBHMT制御が、動物の加齢に伴うホモシステイン代謝の変動と関連する」という仮説を、証明するための実験を、標準型および老化促進型のマウスを使用して、行っている。2.相互作用タンパク質の解析は、抗TGaseモノクローナル抗体結合ビーズを用いる免疫アフィニティー法(A法)とSos/Ras伝達系の活性化を利用するCytoTrap two-hybridシステムを用いて行う酵母Two hybrid法(B法)で行っている。A法からは、55kDaのタンパク質が相互作用タンパク質であることを示唆するデータを得ているが、今のところ明確ではない。B法をマウス肝について適用した最初の結果は、各種の酵素タンパク質、プロテアーゼインヒビター、細胞外タンパク質が、相互作用タンパク質の候補者であることを示した。B法をヒト脳についても適用するための準備を進めている。3.ショウジョバエの遺伝子データベースから、1つのTGase遺伝子の存在とそれに基づく2つの転写産物の存在が判明した。TGaseのcDNAを用いて、GAL4-UAS標的発現システムを利用したTGase遺伝子の発生時期・組織特異的な発現増強・抑制実験を行うための、ベクターを構築している。タンパク質修飾酵素トランスグルタミナーゼ(TGase)ファミリーのうち、組織型TGaseの生理機能を分子レベルで明らかにすることが、本研究の目的である。本年度は、組織型TGaseのタンパク質基質と相互作用タンパク質についての解析を中心に行った。1.ベタイン-ホモシステインメチルトランスフェラーゼ(BHMT)が本酵素の基質になることを、in vitro実験で解析した。精製したブタ肝BHMTとモルモット肝TGaseを材料として用いた。TGaseは、BHMTに5-(ビオチンアミド)ペンチルアミンや[^3H]ヒスタミンを時間依存的に導入した。ポリアミンであるプトレシンやスペルミジンもTGaseによりBHMTに導入された。アミン基質非共存下では、TGaseは、BHMT分子を、分子間および分子内で架橋した。TGaseによる架橋形成により、BHMT活性は半分程度まで減少した。アミン導入は、BHMT活性をわずかに減少させた。5-(ビオチンアミド)ペンチルアミンを導入したBHMTについて、その導入部位をタンパク質化学的に解析した結果、TGaseと反応性をもつBHMTのグルタミン残基は、カルボキシル末端に近い領域に存在することが判った。今回のin vitro実験の結果は、肝BHMTが、TGaseの架橋修飾を受けることにより、活性を抑制する方向に制御される機構を示唆した。このTGaseによるBHMT活性制御の機構は、肝におけるホモシステイン代謝の制御に関与するかもしれない。2.肝におけるTGase相互作用タンパク質の検索を、CytoTrap酵母two-hybrid法と免疫アフィニティー法で行った。酵母two-hybrid法では、各種の酵素タンパク質、プロテアーゼインヒビター、細胞外タンパク質などと相同性を示すタンパク質が、相互作用タンパク質の候補として見出された。免疫アフィニティー法では、アクチンが相互作用タンパク質として、同定された。1.酵素反応

特異的基質ラベル法で見出された基質候補ベタイン-ホモシステインメチルトランスフェラーゼ(BHMT)が、TGase基質として反応することを、精製した肝BHMTと肝TGaseを用いた実験で確認した。肝BHMTは、TGaseの架橋修飾を受けることにより、活性が減少した。「TGaseによるBHMT制御が、動物の加齢に伴うホモシステイン代謝の変動と関連する」という仮説を、証明するための実験を、標準型および老化促進型のマウスを使用して、行っている。2.相互作用タンパク質の解析は、抗TGaseモノクローナル抗体結合ビーズを用いる免疫アフィニティー法(A法)とSos/Ras伝達系の活性化を利用するCytoTrap two-hybridシステムを用いて行う酵母Two hybrid法(B法)で行っている。A法からは、55kDaのタンパク質が相互作用タンパク質であることを示唆するデータを得ているが、今のところ明確ではない。B法をマウス肝について適用した最初の結果は、各種の酵素タンパク質、プロテアーゼインヒビター、細胞外タンパク質が、相互作用タンパク質の候補者であることを示した。B法をヒト脳についても適用するための準備を進めている。3.ショウジョバエの遺伝子データベースから、1つのTGase遺伝子の存在とそれに基づく2つの転写産物の存在が判明した。TGaseのcDNAを用いて、GAL4-UAS標的発現システムを利用したTGase遺伝子の発生時期・組織特異的な発現増強・抑制実験を行うための、ベクターを構築している。
自己成長するプロトセルの形態変化観察と物理学的解析

ベシクル系をベースとして細胞機能を再現するプロトセルを、非平衡ゆらぎが起こる場として考え、生命現象がどのような物理的機構を経て成り立っているのかを理解する。具体的には、ベシクルの内空間から新たに脂質を供給し自己成長・分裂を促すことで、ベシクルの形態変化を観察しその物理を解析する。平成29年度は以下のような研究実績を得ることができた。再構築した脂肪酸合成系の最適化を行なった。具体的には酵素比を変えることにより、飽和脂肪酸メジャーな状態から不飽和脂肪酸をメジャーとする系に改良した。これにより、合成産物である脂肪酸による酵素タンパク質の凝集や不活化を防ぐことに成功した。改良した系により、C18:1、C16:0、C16:1をメジャー脂肪酸として合成することができた。また、嫌気条件下で強瀬を行なったところ、C18:1のみ約1.5倍の合成量の増加が観察できた。これらの最適化により、再構築系で200uMの脂肪酸を合成することができた。これは、直径20umのベシクル内部でどう反応を行なった場合、母ベシクルを構成する資質に対して約20%の脂質を合成できることを意味している。よりベシクル内部の環境に近ずけるため、また合成した脂肪酸の局在場所を提供する目的で、直径200nmのリポソームを反応液に加えて脂肪酸合成を行なった。その結果合成初速度が大幅に上昇する結果が得られた。これは、合成された脂肪酸がリポソーム膜に吸収(局在)され、酵素に付着する頻度が減少し、その結果脂肪酸による酵素阻害が低下したことで合成スピードが保たれたものと考えられる。最適化した再構築系をベシクルに内包し内部で反応を行いながらベシクルを観察した。その結果、わずかではあるがベシクル表面から細いチューブ状の樹状のベシクルが観察された。この現象が内部の反応依存的なものかどうかを現在確かめている。29年度が最終年度であるため、記入しない。精製酵素を基質となるacyl-CoAとmalonyl-CoA、電子供与体であるNADPHとNADHを混合し、37度で脂肪酸合成反応を行なった。その結果、C16:0からC12:0までの鎖長の脂肪酸の合成がLC-MS解析により確認できた。これについては現在定量中である。しかし、反応中、数マイクロメートルほどの大きさの凝集体が、時間依存的に形成されること、短い反応時間が現在問題となっている。形成された凝集体が何の酵素なのか、現在SDS-PAGEにより解析中である。何れにしても、反応産物である脂肪酸と酵素タンパク質が結合し凝集化を引き起こしていることがうかがえる。今年度は本研究に技術的に関係する内容として、和文レビュー・ブックチャプター合わせて4報を報告した。当初凝集化のため精製が困難であった酵素ACPとFabZについて、発現株、培養条件、菌体破砕条件、バッファー条件等を最適化することで克服することができた。しかしながら、FabZに関しては依然と凝集化しやすく、単体で安定に存在することができにくいタンパク質であることがわかった。またこのfabZに関しては、ACPと共存させることで安定的に可溶性の状態を保つことから、生体内では両者が複合体を形成していることが予想される。このことは2016年のCell Researchにも報告例がある。これまでの生化学的解析により、FabZの凝集化が合成した脂肪酸によるものであることが示唆されている。このことは、プロダクトである脂肪酸によるネガティブなフィードバック機構がタンパク質のレベルで行われていることほのめかすものである。このように、酵素の精製過程を経て新たな疑問が出てきたことは、次の研究の方向性を決めるものであり、その意味では順調に進展していると言える。

これは、合成された脂肪酸がリポソーム膜に吸収(局在)され、酵素に付着する頻度が減少し、その結果脂肪酸による酵素阻害が低下したことで合成スピードが保たれたものと考えられる。最適化した再構築系をベシクルに内包し内部で反応を行いながらベシクルを観察した。その結果、わずかではあるがベシクル表面から細いチューブ状の樹状のベシクルが観察された。この現象が内部の反応依存的なものかどうかを現在確かめている。問題点である、Fab酵素の凝集化と、脂肪酸合成反応の短時間内の反応停止について、進展と解決を狙う。すでに、リン脂質膜の投下による凝集化の抑制を検出している。そのため、合成産物である脂肪酸が、再構築した合成系内でどのようダイナミクスを経ているのかについて、解析を進める。また、Giant Unilamelar Vesicle(GUV)内での脂肪酸合成を積極的に行い、GUVの形態的変化の観察を試みる。さらに脂肪酸がGUV膜に挿入した直接の証拠を得る方法を模索する。これらの推進方策により研究を進めることで、初期細胞生命における自己複製機構がどのように成立していたのかを考える手がかりとするだけでなく、細胞質内での脂肪酸合成の動的なプロセスを解明することを狙う。29年度が最終年度であるため、記入しない。
理工系論文作成に資する基礎的研究および教材開発

本研究は、留学生の工学実験系日本語論文作成や読解に資することを目的とし、同分野論文の「結果と考察」章の表現意図による細かいレベルの構造と重層的論理構造を明らかにした。また、「考察」の表現意図に含まれる種々の下位の表現意図別に文型を整理した。さらに、英語論文作成手法「スタンダードプロセス」(潮田(1999)『科学英語論文のすべて』日本物理学会編、丸善)を留学生の日本語論文作成に一部改変して試行した結果、添削可能な文章の自立的産出に有効であった。この手法と上述の論文分析結果を合わせて教育方法を考案し、提言を行った。平成24年度の研究では、第一に、23年度に行った「結果と考察」章全文の表現意図の名付け、その表現意図の文型一覧作成、「結果と考察」章の表現意図による談話構造の図式化を整理し、発展させた。具体的には、Swalesの"Move"と"Step"、樺島の「意図」の概念を合わせて作成した「表現意図のトリー図」を簡素化し見やすくしたこと、各文の表現意図を帰納的に収束して4つの「談話構成意図」にまとめたこと、さらに「談話構成意図」を「談話内」と「談話超」に適用することにより、文章全体の重層的論理構造の記述法を考案したことである。以上の「表現意図のトリー図」および「談話構成意図」概念の作成作業から、以下の判明事項をより簡素化した図式で表すことができた。1)「結果と考察」章には、「導入、方法説明、結果報告、考察」という構成要素を持つ談話のまとまりが繰り返し出現すること。2)「結果と考察」章では、談話が相互に重層的に関わっていること、すなわち章の後半では、前述の章や著者の既報、先行研究を基盤とした「考察」など、「考察」の対象となる談話の範囲が広がって、1)で述べた構成要素を持つ談話のまとまりを越えて、文章の中で重層的な談話構造を構成する場合があること。3)「考察」の表現意図は「得られた実験結果の原因の考察」だけではなく、「その他の考察」が半数近く存在すること。それらは、すなわち、1.「推論(実験で生じた現象の順序、メカニズム、計算結果から導かれた概数)」2.「(解析実施上の)問題点の指摘」3.「問題点の解決策の提示、(設計上の)必要事項の指摘、助言」4.「今後の課題提示」である。第二に、分析資料のデータベース化の試みを行った。資料の全文を入力し、ExcelのCSVを用いて表現意図により区切りを行う試みである。平成25年度は、研究目的の一つである、教材作成につながる教育への示唆・応用について研究を行った。専門指導教員が添削可能な文章を、留学生が自立的に産出することを目指し、学生等が英語論文を推敲を経て作成する手法である「スタンダードプロセス」潮田(1999)という手法を日本語版に改訂して試用し、指導事例を報告・評価するとともに、事例の第一稿と最終稿を比較して、誤用を分類・分析した。その結果、以下が明らかになった。1)初稿で短文が創出され,中国語母語学習者に散見される助詞相当語や複文のつながりの文法ミス等に起因する意味不明文がまったく創出されなかったため添削が容易であった。この手法が、添削可能な文章の自立的産出に一定の効果があると認められたため、学習者に本手法の使用を推奨することができる。2)誤用を潮田により「A.局所的問題」と「B.巨視的問題」に分類し、「A.局所的問題」は「a.語彙・文法」「b.文体」「c.表現意図による文型の知識」、「B.巨視的問題」は「a.論理構造を整えるための文順入替え」,「b.記述内容の要素の不足を補う文の追加」,「c.論理の流れを明確にするための接続詞の追加」に細分した。「A.局所的問題」の「a.語彙・文法」「b.文体」は、誤用しやすい注意点として誤用分類と例を学習者に示すことで、学習が効率化すると考えられる。また、「c.表現意図による文型の知識」は、各章に出現する表現意図による文型検索を整えることにより、誤用を防ぐことができると考えられ、本研究課題の「考察」の表現意図の分析が資する。論理に関わる重い誤用である「B.巨視的問題」の「a.論理構造を整えるための文順入替え」は、誤用例を収集し、類型モデル化して学習者に提示すると教育上効果があると考えられる。潮田資勝(1999).「2章英語論文を書く」『科学英語論文のすべて』日本物理学会編丸善:27-85本研究は、留学生の工学実験系日本語論文作成や読解に資することを目的とし、同分野論文の「結果と考察」章の表現意図による細かいレベルの構造と重層的論理構造を明らかにした。本研究は、留学生の理工系論文作成に資するため、理工系論文の「結果および考察」部について以下の分析を行うことを目的としている。

1)「「考察」の表現意図」を下位項目に細分し、その表現意図を論理的に支持する論理展開の型を記述する。2)それらの表現意図で使用される文を、表現意図別文型に整理する。3)日・英論文を対照する。4)「論理展開の型」「表現意図別文型」を教材にまとめる。平成23年度の研究では、「考察」の表現意図の下位項目を特定し、その表現意図の文型一覧および「結果と考察」部の表現意図による談話構造の型を記述する作業を実施した。「考察」の表現意図の下位項目特定の分析方法には、Swalesの"Move"と"Step"、樺島の「意図」の概念を合わせて用いた。分析結果から、以下のことが判明した。1)「結果と考察」部には、「導入、方法説明、結果報告、考察」という構成要素を持つ談話のまとまりが繰り返し出現すること。2)「結果と考察」部では、1)の談話が相互に重層的に関わっていること、すなわち部の後半では、前述した部や著者の既報、先行研究を基盤とした「考察」など、「考察」の対象となる談話の範囲が広がって<1)の談話範囲>を越える談話が出現すること。3)「考察」の表現意図は「得られた実験結果の原因の考察」だけではなく、「先行研究値と実験値の異なる原因の推論」「実験で生じた現象のメカニズムの推論」「解析実施上の問題点の指摘」「問題点の解決策の提示」「概数の推定」「切断進行順序の推論」「複数の実験結果の解釈」「設計上の必要事項の指摘」「設計上の必要事項への助言」「今後の課題提示」等があること。本研究は、留学生の理工系日本語論文作成や読解に資する事を目的に、理工系分野の論文で細部の論理構造分析が十分になされていない「結果と考察」章に着目し、当該章の表現意図による細かいレベルの構造分析、および全体におよぶ重層的論理構造を明らかにするために、磁気学論文のテクスト分析を行い、次の3点の特徴を得た。「結果と考察」章には、1)「図表による実験等結果の提示」という表現意図を核とした談話のまとまりが観察され、この談話の基本構成は「「実験等の結果報告」の導入Introduction」、「実験等の方法説明Method」、「実験等の結果報告Result」、「考察Discussion」であること、2)「結果と考察」章初出部のIMRD型談話全体が、次に続くIMRD談話の「「実験等の結果報告」の導入」になる例が多いこと、および「結果と考察」章後半部に「考察」の対象が複数談話や著者既報・先行研究に広がるといった談話が出現することにより、談話相互が重層的論理構造で結びついていること、3)「考察」の表現意図には「実験結果の原因推論・説明」とほぼ同数の、論文総体や実験結果のまとめに関わる「その他の考察」が出現し、論文総体に関わる場合部内後半の談話に出現する傾向がみられること、である。さらに、論文作成と読解に役立てるため、「考察」に含まれる種々の表現意図別に文型を整理した。最後に、教育への示唆として、英語論文執筆に資する「スタンダードプロセス」(潮田(1999)『科学英語論文のすべて』日本物理学会編、丸善)という手法を、日本語論文執筆に置き換え一部改変して留学生に試行した結果、添削可能な文章の自立的産出に有効であった。また、論理構造にかかる重い誤用を留学生が自省する際、章別に現れる表現意図の種類や構造が手掛りになるため、本結果と上述の論文分析の結果を合わせて教育手法を考案し、提言を行った。日本語教育、日本語学平成24年度以降の計画は、以下のとおりであった。1)平成23年度の分析結果の整理。2)「日本語理工系論文「結果および考察」章全文」のコーパス作成。3)日本語論文の分析資料の拡大。
抗菌剤含有コラーゲンシートを用いたDrug Delivery Systemの研究

コラーゲンシート内に含有された抗菌剤がDDSとして有効であるかについて検討し、更に素材の異なる使い捨てコンタクトレンズの含有抗菌剤のDDSについても調べた。1.抗菌剤含有コラーゲンシートの抗菌剤の取り込みと徐放性についてアテロコラーゲン溶液とアルカリ可溶コラーゲン溶液を風乾させた。直径10mmのシートを生理食塩水に入れ、両コラーゲンの溶解率について調べた。アテロコラーゲンの溶解率が有意に低かった。アテロコラーゲンの溶解率に紫外線照射による架橋の有用性について検討した。紫外線を10、20、30、40、60分間照射架橋を施したものの溶解率は紫外線を60分以上照射することで逆に溶解率の上昇傾向を認めた。抗菌剤ロメフロキサシン(LFLX)、ノルフロキサシン(NFLX)、オフロキサシン(OFLX)のアテロコラーゲンシートへ含浸させた時のシートの膨潤度は紫外線20分照射時にLFLXの場合、OFLX、NFLXに比べて有意に高かった。更にLFLXの実取り込み量も紫外線照射したシートで有意に他の2例に比べて高いことから、DDSとして有用であることが推測された。2.新しい使い捨てソフトコンタクトレンズのDDSとしての効果の検討FAD分類のタイプの異なる使い捨てソフトコンタクトレンズ(アキュビュー^<【○!R】>、メダリスト^<【○!R】>、14UV^<【○!R】>)のLFLX、NFLX、OFLXの取り込みと徐放性について、その有用な組み合わせについて検討した結果、アキュビューレンズ(FDA分類タイプIV)にLFLXの組み合わせがDDSとして最も有用であった。更にこの組み合わせで家兎眼への本レンズ装用とLFLX点眼とでの角膜前房内への移行性について調べた。レンズ装用眼での角膜内への移行は2時間から4時間で最高値を示し、前房内へは4時間でピークを示し、8時間まではLFLXのMIC90を越す濃度を維持することが出来ることが判明した。(1)コラーゲンシートの作成に関する検討ドラッグデリバリーに使用するコラーゲンシートを作製する場合、溶解されたコラーゲン溶液を滅菌下で風乾させた後架橋する。架橋する方法には紫外線とγ線による方法がある。今回は大学施設内で容易に行うことができる紫外線照射による架橋方法を採用して酸性の1%アテロコラーゲン溶液を容器(10×10cm)に高さ7mmになるように流し込み、コラーゲンのシートを作製した。このシートは酸性であるため、水に入れるとすぐに溶けてしまうため、コラーゲンシートに波長254nmのUVランプを照射し、コラーゲン分子間に架橋を行った。UVの照射量は照射時間によってコントロールできる。UV光の強さを500μW/・に設定し照射した場合には、10分の照射でシートは溶解しなくなる。この状態を溶出率0%とした。しかしUV照射時間を長く続けるとコラーゲン分子の分解が起こる。(2)ニューキノロン系抗菌剤のソフトコンタクトレンズよりの放出抗菌剤含有コラーゲンシート内からの抗菌剤の経時的放出を測定する前に、各種ソフトコンタクトレンズ内に浸透させた抗菌剤を経時的に放出濃度を測定した。本実験に用いた含水性ソフトコンタクトレンズは含水率38%非イオン性、含水率74%非イオン性の2種のソフトコンタクトレンズである。抗菌剤はロメフロキサシンとオフロキサシンを用いた。抗菌剤(0.3%ロメフロキサシン、0.3%オフロキサシン)の各点眼液5ml内にレンズを35°C下で24時間振盪浸漬させた。レンズ内の抗菌剤の放出は含水率38%ソフトコンタクトレンズの方が、高含水率ソフトコンタクトレンズに比べて長時間にわたって徐々に抗菌剤が放出されることがわかった。

レンズ装用眼での角膜内への移行は2時間から4時間で最高値を示し、前房内へは4時間でピークを示し、8時間まではLFLXのMIC90を越す濃度を維持することが出来ることが判明した。ソフトコンタクトレンズは多量生産が可能となり、使い捨ての考え方が導入された。使い捨てレンズ(DSCL)は角膜疾患の治療目的で応用されるようになった。DSCLが抗菌剤のDDSとしての応用を検討した。DSCLとしてFDA分類のタイプの異なるレンズ(ワンデーアキュビュー、メダリスト、14UV)による3種類のニューキノロン(NQ)系抗菌剤(オフロキサシン(OFX)、ロメフロキサシン(LFX)、ノルフロキサシン(NFX))の取り込みと除放性について調べた。1.方法(1)各種DSCLのNQ剤取り込み量の測定:NQ系3種の抗菌点眼液500μlにDSCLを1枚浸し、その容器を25°C、毎分80回転で浸盪し、1、4、24時間後に50μlを取り、HPLCにて各NQ濃度を測定し、DSCL内への取り込み量を測定した。(2)各DSCLのNQ剤の放出量測定:NQ剤が取り込まれたDSCLを生理食塩水20ml内に浸し、35°C、毎分80回転で浸盪し、5分、30分、2、4、24時間後に500μlを取り、HPLCにて各NQ濃度を測定し放出量を算定した。2.結果(1)各種DSCLのNQ剤取り込み量の測定:全てのNQ剤が4時間で飽和取り込み量となった。取り込み量の最も多かったDSCLは、全てのNQ剤でワンデーアキュビューであった。NQ点眼剤を24時間取り込んだDSCL中のNQ剤濃度を算出した結果、ワンデーアキュビューおよびメダリストが全ての抗菌剤で飽和濃度以上となった。特にワンデーアキュビューに取り込まれたLFXは飽和濃度より約10倍高かった。(2)各種DSCLのNQ剤の放出量測定:各NQ剤の3種のDSCLからの放出量は放出2時間目でDSCL中の残存率が25%以下となったが、ワンデーアキュビューとメダリストは14UVに比べて除放化傾向が見られ、DDSとして応用する場合、その有意性の高いDSCLはワンデーアキュビューと思われた。抗菌剤含有アテロコラーゲンシート(ACS)からの徐放性について検討した。またDDSとして可能性のある使い捨てソフトコンタクトレンズ(DSCL)による抗菌剤の家兎眼装用下での角膜・前房水への移行性についても調べた。1.方法(1)ニューキノロン系抗菌剤含有ACSの取り込みと徐放ACS紫外線未架橋と、両面に248nmUVを10、20分間照射した直径10mmの本シートにオフロキサシン(OFLX)、ノルフロキサシン(NFLX)、ロメフロキサシン(LFLX)点眼薬(20°C、80回/分、1時間)を含浸させた。加温5、30分、1、2時間後に試料を採取し、各抗菌剤の濃度をHPLC.で測定した。更にシートを変性溶解させた後、抗菌剤を同様に測定した。(2)LFLX含有DSCLの眼組織の移行性1枚のアキュビューレンズにLFX点眼液を浸した後、レンズを家兎眼の右眼に装用させ、左眼はコントロールとしてLFX点眼液40μlを1時間ごとに8回行い、角膜、前房水への移行性をレンズ装用後30分、2、4、6、8時間後にHPLCで測定した。2.結果
出土文字資料の再調査と集成より見た古代地域史の研究-古代越後・佐渡国域を例に-

新発田市(旧豊浦町)曽根遺跡,南魚沼市(旧六日町)長表遺跡,佐渡市(旧真野町)高野遺跡、同(旧金井町)本屋敷遺跡等,平成3年度の和島村八幡林遺跡遺物報告より以前の報告に係る諸遺跡出土墨書土器の写真撮影、調査を行った。これらの墨書土器については,すでに発掘調査報告書があるが,報告書にあっても今は見つからないもの,逆に,実物はあるけれども報告書に載っていないものがあることが判明したので平成18年度、19年度にかけて,(1)実測、トレース(今回新発見ないし報告書記載漏れ資料が対象),(2)写真撮影(原則として対象墨書土器全点)を行った。19年度は,高精細デジタルカメラによる撮影が中心となった。撮影と併せて,文献史学的見地から見た墨書の釈文の再検討と,考古学的見地から見た土器そのものの再検討を行った。前者では,既存の報告書や諸集成において報告されている釈文を若干修正するものもあったが,むしろ,既存の報告で読めていることになっている文字について,より慎重な姿勢の必要性を感じさせられた。こうした場合,無理に釈文を作らず,今回撮影したような精細な写真を客観的に残しておく方法には利点があると思われる。一方,土器そのものの検討では,年代観について,現在最も優れた編年によって統一した見解を与えることができ,大きな成果であったと考える。また,墨書土器ではないが,関連して新潟県の出土文字資料について若干の考察を行い,報告した。本研究は,当初より,研究代表者の個人論文に帰結するものではなく,客観的報告,特に写真、図などの提供、権限を目標にしてきたので,関連論文の本数は少ないが,今まで報告書等におけるデータの不備を指摘されながら,実物調査もできにくい状況にあったこれら対象資料の写真撮影,再検討には大きな成果があったが,それらデータの完全な公開をするには,データベース入力の手間,および費用と媒体の問題がある。今後の課題として残った点である。