hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
抗腫瘍免疫回避を含む白血病治療抵抗性モデルの構築と機序の解明

急性骨髄性白血病において、制御性T細胞分画の分布について、末梢血と骨髄細胞の双方を比較検討し、特に骨髄検体の方に特異的なプロファイルがある訳ではないことが確認された。造血器腫瘍患者検体において、制御性T細胞など免疫細胞のプロファイルの相違について検討し、特に病期が進行しつつある骨髄異形成症候群の患者検体を中心に施行した。また、TIM-3やPD-1/PD-L1など、腫瘍浸潤性リンパ球・腫瘍関連マクロファージ・制御性T細胞分画に特異的な発現が報告および示唆されている表面マーカーの発現パターンについて網羅的な解析を行った。そのなかで、アザシチジン治療経過中において、制御性T細胞分画の抑制傾向とともに、check point分子の発現修飾が認められた。現在、更なる検体の解析を進めている。そこから更に、免疫チェックポイント阻害薬などの効果を評価するとともに(ニボルマブ投与の医師主導治験とバイオマーカー随伴研究を開始させている)、治療反応性に伴うバイオマーカーの検討をGSEAなど含め並行して進める準備を開始している。これまでの研究から得られている知見に基づき、急性骨髄性白血病細胞株やプライマリー細胞を用いて、抗がん剤やキナーゼ阻害剤に対する微小環境における治療抵抗性AMLモデルの樹立と開発を継続しており、その抵抗性を担っている分子やシグナル経路の解明を進めている。また、マルチカラーフローサイトメトリーを用いた白血病細胞の解析系についても更なる改良のもと樹立しつつある。アザシチジン治療経過中検体において、興味深い予備データが得られている。制御性T細胞など免疫細胞のプロファイルの解析については、すでに安定したアッセイ系を確立させられている。更に多数例の解析を行う準備も順調に進んでいる。基本となる実験手法は既存のものに最新機器を加えたアッセイ系がベースとなっているが、これらに多種の臨床検体に合わせた最適化が進められており、基礎的な各種アッセイ系も兼ね備えた独自の研究内容として進行できている。骨髄系腫瘍を含めたニボルマブ投与の医師主導治験とバイオマーカー随伴研究を開始させている。制御性T細胞などの免疫細胞のプロファイルの解析が順調に進んでいるため、こちらを中心に研究を進める。また、アザシチジン治療経過中検体において、興味深い予備データが得られているいるため、こちらについても掘り下げていく。微小環境における治療抵抗性AMLモデルについて、それまでに得られた残存メカニズムに関する結果やその解釈に基づいて、更に妥当な評価モデル系の確立を目指す。治療抵抗性AMLモデル系において、PD-1/PD-L1標的以外の免疫チェックポイント阻害薬の効果や作用機序、正常細胞に対する毒性についての基礎実験を継続する。TIM-3やPD-1/PD-L1など、制御性T細胞や腫瘍浸潤性リンパ球・腫瘍関連マクロファージに特異的な発現が示唆されている表面マーカーの発現やその重複について、網羅的な解析を行う。また、標準阻害剤キットや阻害剤および抗体ライブラリーを用いた薬剤スクリーニングを、ストローマ共培養系や低酸素下培養系を用いて施行し、正常幹細胞と白血病細胞の感受性を比較検討することによって新規候補を探索していく。また、残存白血病細胞に対する免疫チェックポイント阻害薬の効果についても検討を行う。造血器腫瘍患者検体において、制御性T細胞など免疫細胞のプロファイルの相違について検討を行った。特に病期が進行しつつある骨髄異形成症候群の患者検体を中心に施行した。そのなかで、アザシチジン治療経過中において、制御性T細胞分画の抑制が認められた。そこから更に、免疫チェックポイント阻害薬などの効果を評価するとともに、治療反応性に伴うバイオマーカーの検討をGSEAなど含め並行して進める準備を開始している。急性骨髄性白血病において、制御性T細胞分画の分布について、末梢血と骨髄細胞の双方を比較検討しているが、特に骨髄検体の方に特異的なプロファイルがある訳ではないことも突き止めている。

また、TIM-3やPD-1/PD-L1など、腫瘍浸潤性リンパ球・腫瘍関連マクロファージ・制御性T細胞分画に特異的な発現が報告および示唆されている表面マーカーの発現パターンについて網羅的な解析を行った。そのなかで、アザシチジン治療経過中において、制御性T細胞分画の抑制傾向とともに、check point分子の発現修飾が認められた。現在、更なる検体の解析を進めている。そこから更に、免疫チェックポイント阻害薬などの効果を評価するとともに(ニボルマブ投与の医師主導治験とバイオマーカー随伴研究を開始させている)、治療反応性に伴うバイオマーカーの検討をGSEAなど含め並行して進める準備を開始している。これまでの研究から得られている知見に基づき、急性骨髄性白血病細胞株やプライマリー細胞を用いて、抗がん剤やキナーゼ阻害剤に対する微小環境における治療抵抗性AMLモデルの樹立と開発を継続しており、その抵抗性を担っている分子やシグナル経路の解明を進めている。また、マルチカラーフローサイトメトリーを用いた白血病細胞の解析系についても更なる改良のもと樹立しつつある。アザシチジン治療経過中検体において、興味深い予備データが得られている。制御性T細胞など免疫細胞のプロファイルの解析については、すでに安定したアッセイ系を確立させられている。更に多数例の解析を行う準備も順調に進んでいる。基本となる実験手法は既存のものに最新機器を加えたアッセイ系がベースとなっているが、これらに多種の臨床検体に合わせた最適化が進められており、基礎的な各種アッセイ系も兼ね備えた独自の研究内容として進行できている。前述の様に、制御性T細胞などの免疫細胞のプロファイルの解析が順調に進んでいるため、こちらを中心に研究を進める。また、アザシチジン治療経過中検体において、興味深い予備データが得られているいるため、こちらについても掘り下げていく。微小環境における治療抵抗性AMLモデルについて、それまでに得られた残存メカニズムに関する結果やその解釈に基づいて、更に妥当な評価モデル系の確立を目指す。治療抵抗性AMLモデル系において、PD-1/PD-L1標的以外の免疫チェックポイント阻害薬の効果や作用機序、正常細胞に対する毒性についての基礎実験を継続する。TIM-3やPD-1/PD-L1など、制御性T細胞や腫瘍浸潤性リンパ球・腫瘍関連マクロファージに特異的な発現が示唆されている表面マーカーの発現やその重複について、網羅的な解析を行う。また、標準阻害剤キットや阻害剤および抗体ライブラリーを用いた薬剤スクリーニングを、ストローマ共培養系や低酸素下培養系を用いて施行し、正常幹細胞と白血病細胞の感受性を比較検討することによって新規候補を探索していく。また、残存白血病細胞に対する免疫チェックポイント阻害薬の効果についても検討を行う。骨髄系腫瘍を含めたニボルマブ投与の医師主導治験とバイオマーカー随伴研究を開始させている。制御性T細胞などの免疫細胞のプロファイルの解析が順調に進んでいるため、こちらを中心に研究を進める。
減数分裂における細胞周期の制御

分裂酵母のmei4_+遺伝子産物はフォークヘッドDNA結合ドメインを有する転写因子として、第一分裂前期以降の減数分裂の進行を転写レベルで制御することが推定されている。本年度はMei4転写因子のターゲット遺伝子を同定するためのいくつかの試みを中心に研究を進めた。(1)ゲルシフト等の実験に用いるMei4蛋白質を調整することを試みた。グルタチオンSトランスフェラーゼ(GST)と融合させたMei4蛋白質を大腸菌で発現させ、アフィニティー精製した。(2)分裂酵母のゲノムDNAをSau3Aで分解し、両端にPCR用のタグを付け、ライブラリーを作成した。ライブラリーからGST-Mei4蛋白質と結合したDNA断片をPCR増幅した。この操作を繰り返し、Mei4蛋白質と結合し得るDNA断片を濃縮した。現在クローニングとシークエンスを行っている。(3)動物細胞のフォークヘッド蛋白質が認識する共通塩基配列が報告された。そこで、分裂酵母の減数分裂関連遺伝子について検索したところ、mei4_+遺伝子自体、spo6_+遺伝子、mesl_+遺伝子などの5'上流に、このコンセンサス配列と類似した配列が見いだされた。これらの配列を持つオリゴヌクレオチドを合成し、それをプローブとしてゲルシフトアッセイを行った。その結果、いくつかの配列とGST-Mei4蛋白質との結合が示唆された。
伝統的な茶の風味成分の解析と分類

初年度、茶の香気成分の分析方法として新たにSPME法を確立した。その方法を用いて新たに伝統的に製造されていることが明らかとなったミャンマーの竹筒茶の解析を行った。その結果、低沸点化合物まらびにカロチノイドの熱分解物のヨノンの生成が認められた。また、竹筒を燻すことによる煙成分のフェノール類の増加も明らかとなった。またカテキンの熱分解物の定量も可能となりカテキンのエピメル化物として(-)-ガロカテキンガレート、(-)-ガロカテキン、(-)-カテキン-3-ガレートが新たに生成していた。茶のDNAの解析としてスリランカの茶葉について収集及び葉緑体DNAの抽出を行い、プライマーとしてrbcLを用いて解析を行った。その結果スリランカの茶葉のDNAは、多くはCamellia sinensis var.assamicaであることが明らかとなった。また、タイ北部の茶に関しても同様に検討した結果、新たにACtypeのものが存在していた。この茶は、ミヤンの製造に使用されていることが明らかとなった。プラーマーとしてmatKを用いてこれまでの試料について分類を行ったところ、rbcLで分類出来なかったCamellia sinensis var.sinensisを2種類に分類することが可能となった。製品となった紅茶からの品種判別方法として新たにAFLPの方法を検討した。セレクティブPCRのプライマーの選択を検討した結果、EcoR IとMse Iのプライマーの組み合わせとして64通りを行った。その結果EcoR I-ACAとMse I-CTGを用いたものが有効であることが明らかとなった。紅茶用品種について品種の特徴的なフラグメントが明らかとなった。また、国産の緑茶用31品種についてもその品種特性を明らかとすることができた。本年度は、茶の香気成分の分析方法として新たにSPME法を確立した。これまでのSDEの方法は試料を多量に必要とし、また香気成分の低沸点化合物の検出が困難であった。今回のSPME法は、カラムに香気成分を吸着させ、その吸着した成分をGCを用いて高温で脱着させる方法である。予備実験の結果、試料としての茶の使用量は400mgが最も良く、抽出には5mol/lの食塩を共存させた。内部標準物質として2-ヘプタノール100ppmを2μl用いた。抽出温度は70°C30分撹拌抽出を行った。SPMEファイバーは、DVB/カーボン・PDMSが有効であることが認められた。この条件で行うことによりSPMEを用いた茶の香気成分の抽出が可能となった。これまでに茶のDNAの試料として、中国・東南アジア・インドなど多くの地域のものを用いて解析を行ってきた。今回は、今まで解析していないスリランカの茶葉について収集及び葉緑体DNAの抽出を行い、プライマーとしてrbcLを用いて解析を行った。その結果スリランカの茶葉のDNAは、多くはCamellia sinensis var. assamicaであることが明らかとなった。また、製品となった紅茶からの品種判別方法として新たにAFLPの方法を検討した。まず紅茶からDNAを抽出検討するために、1、3番茶を用いて紅茶の製造を行った。独立法人野菜・茶業研究所圃場の品種べにほまれ、べにひかり、べにふうき、はつもみじ、いずみ、からべに、Z-1の7品種を用いて紅茶を製造した。紅茶は、オーソドックス製法とCTC製法で製造を行った。また、各製造段階毎(萎凋、揉捻、発酵1、2、3時間)に試料を採取して定法で乾燥した。これらの試料を用いてDNAの抽出の検討を行った。

その結果、オーソドックス紅茶からのDNAの抽出は良好であった。CTC製造方法より抽出したDNAは、生葉に比較して若干の分解が認められた。また、AFLPによる解析方法としてセレクティブPCRのプライマーの選択を検討した。その結果、EcoRIとMse Iのプライマーの組み合わせとして64通りを行った結果EcoR I-ACAとMse I-CTGを用いたものが有効であることが明らかとなった。今後は、この組み合わせによる各種品種のAFLPによる比較検討を行いたいと考えている。本年度は、茶の香気成分の分析方法として確立したSPME (Solid phase micro extraction)を用いて、ミャンマーの竹筒茶の分析を行った。その結果、低沸点化合物ならびにカロチノイドの加熱分解物のヨノンの生成が認められた。また、製造工程中に竹筒を燻す事による煙成分としてフェノール類が増加することが明らかとなった。また、竹筒茶の風味成分としては、カテキンの分解物としてカテキンのエピメル化物の損材が明らかとなり、(-)-ガロカテキン-3-ガレート、(-)-ガロカテキン、(-)-カテキン-3-ガレートが新たに生成していることが認められた。一方、茶DNAに関しては、タイにおける茶葉として北タイを中心に収集を行った。その結果タイには2種類の後発酵茶ミヤンの存在が明らかとなった。1つは、チェンマイ近郊のミヤンの製造方法である。この方法は、従来からのカムを用いた方法であった。一方北タイのナン県においては、これとは異なった製造方法を行っていることが明らかとなった。それはラオスにおけるミヤンの製造方法と同じである。カムを作らず茶葉をそのまま竹の紐でくくった方法で壷や瓶に漬け込む方法を用いていた。また、チェンライ近郊には、台湾式のウーロン茶を製造している地域が存在していた。これらの茶DNAについて、Ribulose bisphosphate carboxylase large subunit (rbcL)を用いて解析した結果チェンライ近郊の茶は、Camellia sinensis var. sinensisであった。しかし、他の地域はCamellia sinensis var. assamicaのパターンを示していた。一部チェンマイ近郊の村ではACタイプを示す茶の存在が明らかとなった。これらのタイプで茶の製造をしていることは非常に希であった。昨年、紅茶用品種を用いてAFLPで解析した結果、品種特性が明らかとなったために、本年度は日本の緑茶用品種31種を用いてその品種特性を明らかとした。その結果、EcoR I- ACA/MseI-CTGにより識別が可能となった。
超音速ボルテックスジェネレーターの提案

本研究では、亜音速場でよく用いられる縦渦導入による境界層剥離制御法が超音速流中の境界層剥離に対しても有効かどうかを数値解析でもって調べること,およびそのための効率よい数値計算手法の構築を目的とし,研究を以下のように進めて大きな成果を得た.1.超音速流中のボルテックスジェネレーターまわりの詳細な数値計算を効率よく行うための数値解法の開発を進めた.従来の差分法計算法に生じる計算特異点等の問題点を解決するため,非構造格子法によるナビエ・ストークス計算コードの開発を進めた.その結果,計算特異点等の問題が解決されたことにより計算時間は従来の計算法に比べ数分の1に減らすことが可能になり,その有効性を確認した.この計算法は,世界的に現在主流の差分法に基づく計算法に取って代わりうる能力があり,数値流体力学研究への貢献は非常に大きい.2.平板上に三角錐状の突起をつけた場合および同様の形状の空洞を設けた場合について,それらが超音速流中において誘起する流れ場をナビエ・ストークス数値計算により調べた.その結果,突起形態および空洞形態ともその後流に対の縦渦を誘起することを確認し,かつその誘起渦度の強さは三角錐の開き角と一様流のマッハ数との関係で大きく変化することを見いだした.また,空洞型ボルテックスジェネレーターは超音速場での衝撃波発生および空力加熱問題点で有利であるが,生成された縦渦が下流では壁面へと進んで平板境界層と融合し,境界層外の運動量を境界層に導く効果は弱くなってしまうこと,また,三角錐開き角とマッハ数との関係も上流境界層が厚い場合は明確ではないとの結果を得た.以上の研究において,備品として購入したコンピュータはプログラム開発および計算前処理と後処理端末として非常に有効であった.本研究では、亜音速場でよく用いられる縦渦導入による境界層剥離制御法が超音速流中の境界層剥離に対しても有効かどうかを数値解析でもって調べること,およびそのための効率よい数値計算手法の構築を目的とし,研究を以下のように進めて大きな成果を得た.1.超音速流中のボルテックスジェネレーターまわりの詳細な数値計算を効率よく行うための数値解法の開発を進めた.従来の差分法計算法に生じる計算特異点等の問題点を解決するため,非構造格子法によるナビエ・ストークス計算コードの開発を進めた.その結果,計算特異点等の問題が解決されたことにより計算時間は従来の計算法に比べ数分の1に減らすことが可能になり,その有効性を確認した.この計算法は,世界的に現在主流の差分法に基づく計算法に取って代わりうる能力があり,数値流体力学研究への貢献は非常に大きい.2.平板上に三角錐状の突起をつけた場合および同様の形状の空洞を設けた場合について,それらが超音速流中において誘起する流れ場をナビエ・ストークス数値計算により調べた.その結果,突起形態および空洞形態ともその後流に対の縦渦を誘起することを確認し,かつその誘起渦度の強さは三角錐の開き角と一様流のマッハ数との関係で大きく変化することを見いだした.また,空洞型ボルテックスジェネレーターは超音速場での衝撃波発生および空力加熱問題点で有利であるが,生成された縦渦が下流では壁面へと進んで平板境界層と融合し,境界層外の運動量を境界層に導く効果は弱くなってしまうこと,また,三角錐開き角とマッハ数との関係も上流境界層が厚い場合は明確ではないとの結果を得た.以上の研究において,備品として購入したコンピュータはプログラム開発および計算前処理と後処理端末として非常に有効であった.
情報機器の紙やテープの挙動解明

OA機器、情報機器の普及により紙やテープを扱う機械が増えているが、このような機器では精度が不足すると容易に紙やテープにしわ、おれ曲がりなどが生ずる。本研究ではこのような機器のハンドリング技術を向上させるため、紙などのしわや折れ曲がり発生のメカニズムの解明を数値シミュレーションおよび実験を通して行った。本研究により得られた主な結果を以下にまとめる。(1)紙のような薄肉媒体の大変形解析プログラムの開発。紙やテープのように薄い媒体では大変形のみならず容易にダイヤモンド状の折れ曲がりを生ずる。この大変形折れ曲がりが解析できるようにシェル要素を用いた大変形解析プログラムを開発した。ここでシェル要素は変位を双一次式で仮定し低減積分を用いる要素を用いた。この解析ソフトにより、分割を細かくすればダイヤモンド状の折れ曲がりはほぼ解析できそうであることがわかった。(2)大変形モードの変化の検討薄い媒体では大変形時に異なった荷重を受けると容易に変形モードが変化する。また薄肉構造物ではある荷重を越えるとそれ以上の荷重を支えることはできなくなり、荷重とともに剛性が低下することもあるが、変位強制型の解析または修正Riks法を用いればうまく計算可能であることがわかった。また紙のような薄肉の媒体では初期の変形が剛性に大きく影響することもわかった。(3)大変形接触挙動情報媒体として紙やテープのように薄い媒体では機器から力をうけて変形するとともに移動する。このため解析ソフトでは大変形かつ接触解析の機能が必要となり、ペナルティ関数を用いた接触解析を行いほぼ実機に生じる問題に近い形で解析できるようになった。(4)実際の機器での紙の挙動の解明紙が機器のガイドから力をうけて変形し移動するメカニズムを解析し、紙の初期不整により紙の変形剛性が大幅に変化するため機器の信頼性のためには紙の初期不整などの制御も必要であることがわかった。実測値との定量的な比較をするためにはさらに多くのパラメータを含めた解析が必要である。OA機器、情報機器の普及により、情報媒体として紙やテープを扱う機器が増えている。紙やテープのように薄い媒体では機器のハンドリングにかなりの精度を必要とし、機器の精度が不足すると容易に紙やテープにしわ、ジャム、おれ曲がりなどが生ずることはよく知られているところである。本研究ではこの現象に関して基本的なデータをとる実験を計画し、これらのデータとこれまで公表されているデータの分析も含めて,数値シミュレーションを主体に整理を行い、しわの発生メカニズムの検討を行う。本研究では主に(1)紙のように薄いシートのきわめて大きな変形をするときの挙動をまず有限要素法により解明する。さらに紙が機器の中をガイドに沿って接触をしながら移動するときの挙動についても解析を行う。(2)しわ発生のメカニズムを数値解析を行い、またモアレ縞などを用いて測定する。等について研究を進める本年度中に行った研究では下記の知見が得られた。(1)まず紙の大変形挙動が解析できるようになった。四辺形シェル要素を用いた有限要素法により、updated Lagrangianの定式化を行った。これにより不安定領域の変形挙動も解析できるようになった。紙の初期の変形によって力と変形の関係が大きく異なってくることがわかった。(2)シェル要素を用いた有限要素法ソフトにペナルティ法を用いて接触解析機能を追加し、接触解析もできるようになった。これにより紙が機器に接触して変形する状況が解析できるようになった。しかし十実用的な問題では収束に問題があり、複雑な問題に関してはさらに検討が必要であることがわかった。今後の予定として(1)実験を計画するため、紙の大変形挙動や紙が機器に接触して変形する状況について種々のパラメータを変更してパラメータサーベイを行う。(2)簡単なモデルを用いて紙にしわが発生するまでの挙動に関して実験データを得る。また、解析と比較し、パラメータサーベイを行う。

(4)実際の機器での紙の挙動の解明紙が機器のガイドから力をうけて変形し移動するメカニズムを解析し、紙の初期不整により紙の変形剛性が大幅に変化するため機器の信頼性のためには紙の初期不整などの制御も必要であることがわかった。実測値との定量的な比較をするためにはさらに多くのパラメータを含めた解析が必要である。OA機器、情報機器の普及により紙やテープを扱う機械が増えているが、このような機器では精度が不足すると容易に紙やテープにしわ、おれ曲がりなどが生ずる。本研究ではこのような機器のハンドリング技術を向上させるため、紙などのしわや折れ曲がり発生のメカニズムの解明を数値シミュレーションおよび実験を通して行った。本研究により得られた主な結果を以下にまとめる。(1)紙のような薄肉媒体の大変形解析プログラムの開発。紙やテープのように薄い媒体では大変形のみならず容易にダイヤモンド状の折れ曲がりを生ずる。この大変形折れ曲がりが解析できるようにシェル要素を用いた大変形解析プログラムを開発した。ここでシェル要素は変位を双一次式で仮定し低減積分を用いる要素を用いた。この解析ソフトにより、分割を細かくすればダイヤモンド状の折れ曲がりはほぼ解析できそうであることがわかった。(2)大変形モードの変化の検討薄い媒体では大変形時に異なった荷重を受けると容易に変形モードが変化する。また薄肉構造物ではある荷重を越えるとそれ以上の荷重を支えることはできなくなり、荷重とともに剛性が低下することもあるが、変位強制型の解析または修正Riks法を用いればうまく計算可能であることがわかった。また紙のような薄肉の媒体では初期の変形が剛性に大きく影響することもわかった。(3)大変形接触挙動情報媒体として紙やテープのように薄い媒体では機器から力をうけて変形するとともに移動する。このため解析ソフトでは大変形かつ接触解析の機能が必要となり、ペナルティ関数を用いた接触解析を行いほぼ実機に生じる問題に近い形で解析できるようになった。
AAA ATPaseの作動原理の解明

AAAタンパク質の共通のエンジンであるAAA ATPaseの作動原理、すなわちATP加水分解機構、基質タンパク質への作用機構の解明に取り組んだ。AAAプロテアーゼFtsHの変異体の解析から、ATPaseリングの孔に位置する酸性残基の重要性や基質特異性に関わる残基を明らかにした。また、FtsHと線虫のホモログとのキメラタンパク質の解析から、基質ポリペプチドの分解がATPの結合だけで起こるという結果を得た。このキメラによる基質分解は、ATPaseリングのボアの保存された芳香族残基への依存性も無くなっていた。これは、ATPの加水分解非依存的トランスロケーションの可能性を示唆する知見である。線虫のfidgetinホモログの解析から、ATP加水分解の「分子間触媒モデル」とサブユニット間の協調性に関する知見を得た。線虫のp97についてin vitroで、タンパク質の凝集体形成を抑制するシャペロン活性を認め、この活性はATPに非依存的であることを明らかにした。線虫のspstinホモログSPAS-1およびヒトkataninについて微小管への作用を解析した。SPAS-1については、培養細胞で強制発現することにより、微小管の消失を観察した。Walkerモチーフの変異体やATPaseリングの孔の保存された芳香族残基の変異体の強制発現では微小管の消失が認められず、SPAS-1の活性にATPaseやボアの重要性が示された。一方、kataninについては蛍光顕微鏡下で微小管の切断を観察し、ATPaseリングの孔の保存された芳香族残基の変異体は微小管切断活性を失うことを確認した。KataninとATPに依存した微小管切断過程を高速原子間力顕微鏡により観察した。AAAプロテアーゼFtsHの変異体の解析から、ATPaseリングの孔に位置する酸性残基の重要性や基質特異性に関わる残基を明らかにし、FtsHがポリペプチド鎖の内部から分解を開始できることを明らかにした。アンフォールディング活性の上昇したFtsHをスクリーニングする系を構築した。線虫のp97についてin vitroで、タンパク質の凝集体形成を抑制するシャペロン活性を認めた。脱凝集活性についても検討している。線虫のspastinホモログSPAS-1およびヒトkataninについて微小管への作用を解析した。Kataninについては蛍光顕微鏡下で微小管の切断を観察し、変異体を用いた解析に着手するとともに、高速原子間力顕微鏡による観察条件を検討している。SPAS-1についても精製タンパク質を用いて微小管の切断を確認中である。AAAタンパク質の共通のエンジンであるAAA ATPaseの作動原理の解明を進めた。AAAプロテアーゼFtsHと線虫のホモログのキメラタンパク質の解析から、基質ポリペプチドの分解がATPの結合だけで起こり、基質トランズロケーションがエネルギー非依存的に起こることを示唆する結果を得た。このキメラによる基質分解は、ATPaseリングのポアの保存された芳香族残基への依存性も無くなっていた。

線虫のp97についてin vitroで、タンパク質の凝集体形成を抑制するシャペロン活性を認め、この活性はATPに非依存的であることを明らかにした。線虫のspastinホモログSPAS-1およびヒトkataninについて微小管への作用を解析した。野生型のSPAS-1を培養細胞で強制発現すると微小管が消失したが、Walkerモチーフの変異体やATPaseリングの孔の保存された芳香族残基の変異体の強制発現では微小管の消失が認められず、ATPase活性やポアの重要性が示された。SPAS-1がチューブリンのC末端ペプチドと結合することを確認した。一方、kataninについては蛍光顕微鏡下で微小管の切断を観察し、ATPaseリングの孔の保存された芳香族残基の変異体は微小管切断活性を失うことを確認した。KataninとATPに依存した微小管切断過程を高速原子間力顕微鏡により観察した。p97は2つのAAA ATPaseドメインをもつが、N末端側のドメインのポアでは芳香族残基が保存されていない。酵母のp97ホモログCdc48pについてポア残基の変異体を作製し、in vivoで活性を調べたところ、興味深いことに芳香族残基をもつ変異体のみ相補活性を失った。
カール・ラートゲンの日本社会論と日独の近代化構造に関する研究

カール・ラートゲン(1856-1921)の出自・足跡・業績については判明していないことが多い。そこで、彼の主著『日本の国民経済と国家財政』の読解に取り組むとともに、日本及びドイツに遺されている第一次史料を渉猟し、彼の足跡を辿った。マールブルク大学図書館において、彼の同大学勤務時の学内資料を閲覧し、同大学に国家学ゼミナールを開設したのがラートゲンであったことを知ることができた。カールスルーエ総合公文書館、ハイデルベルク大学史料館、同大学図書館において、彼の同大学勤務時の重要史料を多数発見した。またその際、彼の同僚マックス・ヴェーバーに関する史料を多数発見した。同大学のM・ライナー・レプジウス教授と会見したところ、これらの多くは『マックス・ヴェーバー全集』の編集者の間でもまだ知られていなかった新資料であることがわかった。ベルリン・プロイセン機密公文書館においてラートゲン書簡を閲覧し、これによって、マールブルク大学からハイデルベルク大学への割愛の経緯を明らかにした。ドイツ外務省政治公文書館において、彼の滞日中の外務任務と帰国時とに関する史料を閲覧し、これによって、帰国からベルリン大学勤務までの経緯を明らかにした。他に、ドイツ各地の図書館において、ラートゲンとその周辺の人物に関する図書・史料を閲覧した。またラートゲンの令孫バルトホルト・C・ヴィッテ氏と二度会見した。この調査を通じて、ラートゲンとヴェーバーの大学人としての活動の一端が判明したので、第77回日本社会学会大会(2004年11月20日、於熊本大学)において、「マックス・ヴェーバーはいかにしてハイデルベルク大学に招聘されたか」と題する研究報告を行い、また論文「マックス・ヴェーバーとハイデルベルク大学(1)」(佛教大学『社会学論集』第39号、2004年9月)「同(2)」(同誌第40号、2005年3月)を執筆した。まず、当該課題に関連する内外の文献を読みながら、参照すべき未公刊資料や本邦未所蔵文献の所在をドイツの公文書館、図書館に問い合わせた。これを元に、平成15年8月に、マールブルク大学、マールブルク国立公文書館、カールスルーエ一般公文書館、ハイデルベルク大学図書館、ハイデルベルク大学史料館、バイエルン国立公文書館を訪問し、ラートゲン関係資料文献を蒐集・閲覧した。その結果、ラートゲンは、滞日中、東京大学および帝国大学の改革問題に係わったのと同様に、帰国後も、マールブルク大学とハイデルベルク大学において大学改革に積極的に係わったことが判明した。そして彼は、日本においてもドイツにおいても基本的に同様の見地からカリキュラム改革や組織改革に当たったと考えられるので、以後、十九世紀後半から二十世紀初頭にかけての日独の大学改革問題を中心に研究を進めることにした。平成16年1月には東京大学、学習院大学において日独の大学問題に関する文献を閲覧した。研究を進める中で、東京大学文学部の政治学科目の改変、独逸学協会学校の行政学講義、東京大学法政学部の設置、帝国大学法科大学の設立、国家学会の設立におけるラートゲンの位置づけに関して新知見を得た。また、ラートゲンと、義兄グスタフ・シュモラー、プロイセンの文部官僚フリードリヒ・アルトホフ、ハイデルベルク大学の同僚マックス・ヴェーバー、エーベルハルト・ゴートハインらとの関係が重要であることがわかった。ここから、大学の近代化の方向性とその日独の差異を探っている。また資料調査の過程で、ラートゲンとヴェーバーに係わる新資料を発見し、バルトホルト・ヴィッテ氏所蔵のラートゲン書簡を得た。現在、これらに依拠して論文作成を進めている。

図書は、明治期の日独関係、帝政期ドイツの社会科学、ドイツの大学問題、近代日本法制史関係のものを中心に購入した。また、資料調査に必要な消耗品類を購入した。前年度に引き続き、カール・ラートゲンの主著『日本の国民経済と国家財政』の主骨格の把握に努めるとともに、彼の足跡について調査した。ベルリン・プロイセン機密公文書館において彼の書簡を閲覧し、プロイセンの大学行政官アルトホフと彼との関係を知ることができた。ドイツ外務省政治公文書館において、彼の滞日中の外務任務と帰国時とに関する史料を閲覧した。これによって、帰国からベルリン大学勤務までの経緯と、マールブルク大学からハイデルベルク大学への割愛の経緯とを明らかにした。これらは日本においてもドイツにおいても従来全く知られていなかった新事実である。カールスルーエ総合公文書館、ハイデルベルク大学史料館、同大学図書館において、彼の同大学勤務時の教務関係資料を閲覧した。その際、同大学の改革問題に彼が積極的に関与していたことが判明したので、彼の意向・動向と、彼の同僚マックス・ヴェーバーの意向・動向とを比較対照しながら、ドイツにおける大学の近代的変革について考察した。同大学のM・ライナー・レプジウス教授と会見し、ヴェーバーとラートゲンとの関係について意見を交換した。ラートゲンの令孫バルトホルト・C・ヴィツテ氏と二度会見し、同氏のご厚意により、ラートゲンの書簡を多数入手した。他に、ケルン大学、ボン大学、ベルリン国立図書館において、彼の周辺の人物に関する第一次史料と大学関係図書とを閲覧した。この調査を通じて、ラートゲンとヴェーバーの大学人としての活動の一端が判明したので、第77回日本社会学会大会(2004年11月20日、於熊本大学)において、「マックス・ヴェーバーはいかにしてハイデルベルク大学に招聘されたか」と題する研究報告を行い、また論文「マックス・ヴェーバーとハイデルベルク大学(1)」(佛教大学『社会学論集』第39号、2004年9月)「同(2)」(同誌第40号、2005年3月)を執筆した。
ヒスチジン脱炭酸酵素欠損マウスを用いたアレルギー炎症におけるヒスタミンの役割解析

ヒスチジン脱炭酸酵素(HDC)欠損マウスを用いてアレルギー性炎症におけるhistamineの役割について解析した。HDC欠損マウスにhistamineを皮内注射すると、野生型マウスと同程度の血管透過性亢進がみられ、histamineに対する反応性には変化がないことを確認した。しかし肥満細胞の脱顆粒を誘発するcompound48/80を皮内に注射しても血管透過性は全く亢進しなかった。さらに、これらのマウスにアレルギー性空気嚢型炎症を誘発し、血管透過性と白血球浸潤におけるhistamineの役割を解析した。抗原刺激により、野生型マウスではhistamineの遊離とともに、アナフィラキシー様の血管透過性が亢進するが、HDC欠損マウスではhistamineの遊離は認められず、血管透過性の亢進も全く認められなかった。また、抗原刺激後4から8時間後の白血球侵潤数は、HDC欠損マウスで野生型マウスより有意に増加した。野生型マウスにH_2受容体拮抗薬cimetidineを投与した場合、HDC欠損マウスと同程度まで浸潤白血球数が増加し、逆にHDC欠損マウスに抗原刺激とともにhistamineを空気嚢内に注射すると白血球浸潤は低下した。これらの結果から、肥満細胞の脱顆粒により誘発される血管透過性亢進にはhistamineが中心的な役割を果たしていること、さらに白血球浸潤に対してはH_2受容体を介して抑制的に作用していることが示唆された。このようにアレルギー性炎症において、histamineは多様な役割を果たしていることが明らかになった。
発達障害者を対象とした居場所支援の社会学的研究

成人の発達障害への社会的関心が高まっているが,その当事者にとって必要だと思われる「居場所」についての調査は進んでいない。本研究は,発達障害者も受け入れている若者自立支援に位置づいた「居場所」と発達障害者に対象を限定した「居場所」を対象として,両者の理念や支援の実態について検討した。支援が何を目的としてるかによって,当事者による「障害」や「居場所」の位置づけも,柔軟に意味づけ直されることなどを指摘した。本研究の目的は、発達障害を抱える若者への支援、特に就労支援の前段階ともいえる、当事者へ「居場所」を提供する支援(フリースペース、ミーティングなど)の現状を調査し、その機能および課題を明らかにすることにある。その上で障害が多様化する中で、一般就労からも福祉からも距離のある若者にいかなる支援が求められるのか、という問いに一定の解答を導き出すことを目指すものである。平成26年度は、3年に渡る本研究の準備段階と位置づけられ、先行研究の検討を主な課題とし、関連する文献の精査・検討作業、関連する研究のシンポジウム等への参加を通し、先行研究のマッピングアウト、本研究の位置づけの確認を行った。加えてフィールドワーク受け入れ先候補施設の選定、交渉を行い、一部調査対象組織から調査の内諾を得た。先行研究の検討においては、発達障害を抱える若者に対する自立支援がいかなる理念・障害観のもとに行われてきたか、「居場所」を提供する支援に関する研究の限界などが徐々に明らかになってきた。また、既に入手していたデータをもとに先行研究、理論の検討で得られた知見を組み合わせ、論文を執筆、投稿した(査読中)。平成27年度においては新規データの入手、分析と並行し、各種関連学会における口頭報告などの形でアウトプットも行っていく予定である。本研究の目的は、成人発達障害者への支援、特に就労支援の前段階ともいえる、当事者へ「居場所」を提供する支援(フリースペース、ミーティングなど)の現状を調査し、承認を重視した支援の発達障害当事者にとっての機能・課題を検討することにある。また,その上で障害が多様化する中で,一般就労からも福祉からも距離のある若者にいかなる支援が求められるのか,という問いに一定の解答を導き出すことを目指すものである。3年間のプロジェクトの2年目にあたる平成27年度は,本格的にフィールドでの調査を開始した。発達障害に特化したタイプの支援団体,特に発達障害に特化しない若者自立支援団体の2つのフィールドにおいて観察データ,インタビューデータの蓄積を中心に行ってきた。インタビューデータについてはのべ40人以上の支援者,利用者のデータを得ることができた。得られたデータを分析した結果,必ずしも障害に特化しない支援現場と障害に特化した支援現場の間では,1成員の多様性の重要度,2支援における表出性の重要度,3障害観,などにおける差異が明らかになってきた。これらのデータをもとに先行研究,理論の検討で得られた知見を組み合わせ,中間報告として学会口頭報告(社会政策学会)を行った。また,前年度学会誌に投稿した論文が掲載された。最終年度に当たる平成28年度にはThird ISA Forum of Sociologyによる報告,論文執筆などによる成果報告を予定している。前年度にフィールドエントリーに手間取り,やや進行が遅れていたが,本年度は予定していたデータ収集が順調に進行したおり,予定通り得られた成果の中間報告まで行うことができた。よって「おおむね順調に進展している」とした。本研究の目的は,成人発達障害者への支援,特に就労支援の前段階ともいえる,当事者へ「居場所」を提供する支援(フリースペース,ミーティングなど)の現状を調査し,居場所提供型支援の発達障害当事者にとっての機能・課題を検討することにある。3年間のプロジェクトの最終年度にあたる平成28年度の課題は,以下のような形でまとめられる。1フィールドワーク,インタビュー調査の継続:本研究においては発達障害に特化したタイプの支援団体,特に発達障害に特化しない若者自立支援団体の2つのフィールドにおいて調査データを蓄積してきた。本年度は特に後者において,支援者,利用者,元利用者のインタビューを実施した。支援者からは主として支援機関における障害認定のプロセスについて,利用者からは主として就労後の生活についてのデータを入手した。2データの分析:上記のデータをとりまとめ,障害に特化しない若者支援機関から障害者就労に向けての移行プロセスのなかで「障害」がいかなる形で理解されているか分析作業を行った。この作業を通して「障害」を疑われる者の存在による支援現場への影響や,若者支援機関における「障害」に対する当事者の意味付与の条件やプロセスなどが明らかになってきた。また,成果報告できていないデータが存在するため,その部分について継続的に論文の執筆作業を行った。これらについては平成29年度中の刊行を目指している。対象施設との交渉に想定以上に時間がかかったため、データの入手に遅れが生じている。ただし、フィールドエントリーのめどは立ちつつあり、次年度以降は計画的にデータを入手出来る予定である。以上より、「やや遅れている」という自己評価とした。1支援現場でのフィールドワークを継続し,データの厚みを増していく。2得られたデータの分析を行い,最終報告としての論文執筆を行う。

上記2点を中心に最終年度の研究を進めていく。また,中間報告として7月にオーストリアで開催されるThird ISA Forum of Sociologyにて報告予定である。教育社会学/福祉社会学平成27年度は、集中的にデータの入手、分析を行う。具体的には、許可を得た施設での継続的なフィールドワークを開始する。ここでは、支援の観察と支援者・当事者へのインタビュー調査を行う。観察においては、それぞれの施設における支援者ー当事者および当事者同士の相互行為を中心としたエスノグラフィーの記述を行い、当事者の社会参加へのプロセスを考察することを目指す。支援者インタビューにおいては、居場所開設の経緯・理由、団体・施設の基本情報に加え、運営上の困難、当事者のエピソードなど幅広い情報を引き出すことを目指す。当事者インタビューにおいては、支援に至る経緯、支援を受けての自身の変化、支援に期待することなどを聞き取ることとする。また、中間報告として10月前後に国内学会での報告(社会政策学会、または日本社会学会)を予定している。予備調査として簡易的なインタビューを予定していたが、上述の理由により、研究進捗は調査の内諾を得るにとどまっている。文字起こしなどインタビューにまつわる経費を執行できなかったことによる。まず、障害学関連書籍、場所論関連書籍などを10-20冊程度購入予定である。また、インタビュー調査の文字起こしを行う必要があるが、この作業を反訳業者に外注予定であり、その予算を計上している。得られた分析のためのPC、ソフトウェアの購入を予定している。平成27年度までの成果は、中間報告として国内学会にて報告予定であり、そのための旅費・滞在費を計上している。以上が平成27年度の主要な使用計画である。
神経冠細胞の移動制御と器官形成

末梢神経系を構成する神経ネットワークは、そのほとんどが神経冠細胞(Neural Crest Cells,神経堤細胞ともいう)によって構成される。神経冠細胞は発生初期において、神経管の背側正中線から移動を開始し、体内をダイナミックに移動した後、脊髄神経節や交換神経節などを作る。しかしながら、神経冠細胞の移動がどのようなしくみによって制御されているのかについてはほとんどわかっていない。我々は、神経冠細胞の移動のメカニズムを明らかにすることを目的として、神経冠サブタイプのなかでも特に遠距離を移動する交感神経-副腎髄質細胞の前駆体(SA細胞とよぶ)に注目している。これまでに、SA細胞の移動経路においてケモカインSDF1やBMP4が発現し、また移動細胞内ではこれらのリガンド受容体が発現することなどを観察している。そこでトリ胚操作を用いてSDF1やBMP4を異所的に作用させたところ、SA細胞がこれらのリガンドに誘引されることがわかった。さらに、RNAiノックダウン法によって、それぞれの受容体であるCXCR4やBMPRが神経冠細胞の移動に重要であることを見いだした。加えてCXCR4のノックアウトマウスにおいても、SA細胞の分布に異常がみられたことから、SA細胞の移動やガイダンスには種を超えて共通の機構がはたらくことが示唆された。SA細胞の一部はさらに腹側方向に移動し、最終的に副腎皮質と会合して副腎髄質細胞に分化する。このとき、皮質細胞で発現する転写因子SF1が髄質細胞との会合に重要であることを見いだしつつある。これらのデータより、SA細胞のダイナミックな移動には複数のガイダンス因子が関与すること、及び細胞移動を停止させるシグナルが移動先の環境によって調節されているなどの新規な知見が導かれた。高次機能をつかさどる神経ネットワークの構築には、初期発生過程において、神経細胞がダイナミックに移動して空間的に正しく配置されることが重要である。末梢神経の前駆体である神経冠細胞(Neural Crest:神経堤細胞ともいう)は、神経管背側部を離脱後、サブタイプによって決められたルートに沿って体内を移動し、目的地に辿り着いた後、その場所特異的な神経節を形成する。しかしながら、神経冠細胞の体内移動マップが提唱されてすでに30年以上が経過しているにもかかわらず、その移動のメカニズムはほとんど謎のままである。本研究では、神経冠細胞の移動の分子機構を解明すべく、副腎の形成に注目した。初期副腎は、髄質と皮質という2種類の細胞種によって構成される単純な組織である。髄質は神経冠細胞より、また皮質は体腔中胚葉より由来する。つまり両者とも、まずは本来の副腎とは離れた場所に出現し、その後副腎領域まで移動し、最終的に両者が会合する。また神経冠細胞の中でも髄質前駆体は、脊髄神経節や交感神経節を作るサブタイプよりもさらに長距離にわたって移動することから、さまざまな分子操作やその解析が行いやすい。本研究では、まずトリ胚操作を用いて、予定皮質領域を同定した。また、体腔中胚葉の細胞内に、直接的に遺伝子を導入する方法論を確立した。次に、髄質と皮質のどちらが両者の会合をリードしているかについて調べるために、皮質を異所的につくることを試みた。この目的のために、副腎に発現することが知られている転写因子を、予定皮質細胞内に強制発現させた。結果、本来の副腎の近傍に、新たな皮質様の構造が異所的につくられた。驚くべきことに、これらの異所皮質の近傍に、副腎髄質のマーカーTH陽性細胞が観察された。加えて、これらのTH陽性細胞は、神経冠細胞由来であることを確認した。逆に、神経冠細胞は皮質細胞の移動にはあまり関与していないらしい。これらのことから、副腎形成の場合には、皮質組織が神経冠細胞の移動をガイドしていることが示された。現在、皮質細胞による「ガイド分子」の実態を探索している。
未知システムから観測されたカオス時系列に対する高精度なリアプノフ解析手法の開発

本年度は、時系列データに対するリアプノフ解析の際に生じる疑似リアプノフ指数の問題を解消し、その精度を向上させる手法の開発を試みた。はじめに、力学系が既知の数理モデルの対する理論解析により、n次元の力学系から生成される時系列データより求まるm(>n)個のリアプノフ指数は、生成システムのリアプノフ指数と一致するn個の真値と、理論値が-∞となるm-n個の擬似リアプノフ指数で構成されることを明らかにした。また、従来のリアプノフ解析法で求まるリアプノフ指数が、理論値と一致しない原因が、時系列データより推定する局所ダイナミクスの写像の近似の不正確さに起因することを明らかにした。さらに、ノイズが印可された時系列データに対するリアプノフ解析では、疑似リアプノフ指数が理論値の-∞に収束せず真値と真値の間の値をとる傾向があり、疑似リアプノフ指数の特定が困難になる問題があることを明らかにした。また、時系列データに印可するノイズ強度の変化に対する疑似リアプノフ指数の変化量が、真値に対応するリアプノフ指数の変化量に比べて特徴的な違いがあることを明らかにした。上記の成果を踏まえて、新しいリアプノフ解析手法の開発も行った。新手法では、局所ダイナミクスの写像を高次のオーダで近似することでリアプノフスペクトルの推定精度を大きく向上した。また、時系列データに強度が異なる多様なノイズを印可し、そのリアプノフ解析の結果を比較検討することにより、真値に対応するリアプノフ指数を特定するアルゴリズムを組み込んだ。この新手法を、観測ノイズが少ない時系列データに対して適用することで、その力学系の高精度なリアプノフスペクトル解析が可能である。ところで、新手法を、「血圧」や「脳波」などの時系列に適用する場合、時系列に含まれる強度の観測ノイズにより解析結果が安定しない問題がある。この観測ノイズの適切な除去手法を確立が、今後の課題である。本研究では,実システムに対するリアプノフ解析の精度が低下する支配的原因を解明し,その原因を直接的に削除・低減することで高精度なリアプノフ解析法の開発を目指している.本年度は,計算機シミュレーションにおいてリアプノフ解析の精度が低下する原因の解明を試みるための解析ツールを開発した.本ツールは,力学系が既知である数理モデルに対して,局所ダイナミクスの数式表現や近似精度,また,時系列データに印加されるノイズの種類や程度を段階的に変化させた場合のリアプノフ解析の結果を比較・評価することが可能である.なお,シミュレーションに用いる解析ツールの開発には技術計算ソフトウェアMatlabを用いた.解析結果より,従来のリアプノフ解析では識別困難な,時系列データへの改変や特徴量の印加が実現できる可能性が示唆されており,その応用として,秘匿性の優れた電子透かし法の開発についての研究も行った.本年度に提案した電子透かし法は,優れた秘匿性を実現可能であるが,従来の透かし除去攻撃に対する耐性に改善の余地があることがわかっている.本年度得られた解析結果の理論的な解明と,それを考慮したより識別精度の優れた実システムに対するアプノフ解析法の開発は来年度以降の課題である.また,「血圧」や「脳波」といった実際の生体システムから観測した膨大な時系列データに対するリアプノフ解析のシミュレーションにおいても,同様な知見が得られるかなどの検証も必要である.本年度は、時系列データに対するリアプノフ解析の際に生じる疑似リアプノフ指数の問題を解消し、その精度を向上させる手法の開発を試みた。
基本転写装置と機能的に共役する液滴オルガネラの試験管内再構成とその機能解析

今年度は、主に遺伝学的な解析を行い、1Mpt5pの過剰発現が、taf1ΔTAND株特異的に生育阻害効果を示すこと(TAF1株では生育阻害効果を示さないこと)、2Mpt5p[5A](Cbk1p/RAMのコンセンサス標的配列を含む5箇所のセリンをアラニンで置換した非リン酸化型変異体)及びSsd1p(野生型・非リン酸化型変異体)の過剰発現は、TANDの有無にかかわらず生育阻害効果を示すこと、3Mpt5pの過剰発現による生育阻害効果は、ssd1-d株において有意に増大することを見出した。これらの結果は、1本研究の端緒となったΔRAM ssd1-d taf1ΔTAND三重変異株における合成致死性がMpt5pの機能昂進によるものであること、2Mpt5pとSsd1pが標的mRNAに対して一部競合的に結合すること等を示唆しており、大変興味深い。Ssd1p, Mpt5pはPボディの構成成分であり、Cbk1p[RAM]によりリン酸化された両タンパク質はPボディから解離し、その結果として標的mRNAの翻訳が可能になるものと考えられる。Ssd1p, Mpt5pを含む液滴オルガネラ(Pボディ)の構築とCbk1p[RAM]によるその溶解という新たな分子機構について解析を進めるため、今後は試験管内アッセイ系の構築が急務と考えられる。基本転写因子TFIIDはTBPと14種類のTAFから構成される巨大な複合体であり、SAGAとともにコアプロモーター上で働き、TBP-DNA相互作用を制御することによって転写の活性化を行う。我々は、主としてSAGA依存的に転写されるmRNA(のうち少なくとも一部)がRAM-Ssd1p-Mpt5p軸による局所翻訳制御を受ける可能性を新たに見出し、Ssd1p/Mpt5pが標的RNAとともに形成する液滴オルガネラの性状がRAMシグナリングにより変化するとの仮説を立て、現在その検証を試みている。当初の予想に反して、TAND欠失変異とRAM欠損変異間の合成致死性の原因がMpt5pの機能昂進にあることが判明し、計画の変更が必要となったため。次年度については、新たな分子モデルの検証に取り組むとともに、当初の計画通り試験管内アッセイ系の構築を進める。