hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
花弁特異的シスエレメントの同定と「青いチューリップ」創出への応用

チューリップおよびユリにおいて、花弁特異的な遺伝子発現に関わるシスエレメント配列の解析を行った。解析は、MYB遺伝子プロモーター領域への変異導入と液胞型鉄イオン輸送体(VIT)遺伝子を活用した独自の方法による。その結果、チューリップでは3つのTCATモチーフ、ユリではAAACTTTモチーフが花弁特異性に関わるシスエレメントであることが示唆された。また、ルシフェラーゼ(Luc)を活用して定量解析を行った結果、モチーフ数の増加に比例したLuc活性の増加が認められた。これらのモチーフとVIT遺伝子を活用して、アグロバクテリウム法により「青いチューリップ」作出のための形質転換体を得ることができた。(1)シスエレメント配列の解析:これまでの解析によりチューリップMYBプロモーター領域(1.2 kb)およびユリMYBプロモーター領域(2.8kb)の中でシスエレメントが存在すると推定された領域は各々200 bpと150 bpである。この結果を基にiPCR法により各シスエレメント領域の任意の部位に40 bp20 bpの欠失変異を導入し、花弁細胞における青色化の有無による更なるシスエレメント領域の絞り込みを行った結果、チューリップでは異なる2ヶ所の20 bp欠失部位に、ユリでは隣接する2ヶ所の20 bp欠失部位にそれぞれシスエレメント配列が存在することが示された。(2)プロモーター領域の定量化:ユリMYBプロモーターの活性を定量化するために(1)で明らかになったシスエレメント配列領域をルシフェラーゼ(Luc)遺伝子に繋いだベクターを構築し、花弁細胞に遺伝子導入を行いLuc活性を測定した。その結果、シスエレメント領域を1個、2個、3個とタンデムに繋ぐに従い活性の上昇が認められたことから、この領域が花弁での遺伝子発現を強く促す能力を有することが示唆された。チューリップMYBプロモーター活性の定量化についても現在解析を進めている。(3)形質転換体の作出:チューリップの組織培養系を活用した形質転換法について、遺伝子導入効率の向上と形質転換体作出までの期間短縮技術の開発を検討している。遺伝子導入効率については、アグロバクテリウム法において感染時のエチレン発生を抑制したスーパーアグロバクテリウム法を検討した結果、従来法に比べ約1.3倍の遺伝子導入効率の向上が認められた。また、再分化したシュートにインドール酪酸(IBA)の添加による発根誘導により、形成される次世代の小球根が従来法に比べ約2倍に肥大化することが判明した。この結果を基にiPCR法により各シスエレメント領域の任意の部位に40 bp、20 bp、1bpの欠失変異を導入し、花弁細胞における青色化の有無により更なるシスエレメント領域の絞り込みを行った結果、チューリップではTCAT配列が、ユリではAAACTTT配列が各々のMYBプロモーターにおける花弁特異性に関わるモチーフである可能性が示唆された。その結果、AAACTTTモチーフを1個、3個、6個とタンデムに連結するに従い活性の上昇が認められた。このことから、ユリ花弁での遺伝子発現を強く促す能力を有するのはAAACTTTモチーフであることが示唆された。現在、チューリップのTCATモチーフについても同様の定量解析を進めている。また、再分化したシュートにインドール酪酸(IBA)を添加することにより発根が誘導され、形成される次世代の小球根が従来法に比べ約2倍に肥大化することが判明した。さらに、培養によって得られる小球根の肥大化促進に酸化型グルタチオン(GSSG)の添加が有効であることが判明した。(1)シスエレメント配列の解析:おおむね順調に進展している。当初の予定通り、iPCR法によりシスエレメントが存在する領域の絞り込みが進んでいる。チューリップおよびユリ共に新鮮な花を材料とするため、解析時期が限られるが、現在、チューリップではタンデムに並ぶ2ヶ所のTCAT配列が、ユリではAAACTTT配列が花弁特異性を示すシスエレメントであることが示されている。(2)プロモーター領域の定量化:おおむね順調に進展している。(1)で明らかとなった配列をルシフェラーゼ遺伝子に繋ぎLuc活性を測定している。ユリで先行しているが、シスエレメント配列の増加に比例して活性の増加が認められており、(1)で得られた結果を強くサポートしている。また、チューリップでの解析も現在進行中である。(3)形質転換体の作出:おおむね順調に進展している。出発材料として主に花茎組織を用いた遺伝子導入を行っている。

従来はパーティクルガン法およびアグロバクテリウム法であったが、遺伝子導入効率を高めるためスーパーアグロバクテリウム法を検討した結果、約1.3倍導入効率を高めることに成功した。また、チューリップでは形質転換体を維持するためには小球根形成が必須であるが、インドール酪酸(IBA)を用いてシュートの発根誘導を行うことで、従来に比べ約2倍の大きさの小球根が得られることが判明した。さらに、小球根の誘導培地に1mMのGSSGを添加することで、得られる小球根の大きさが約20%増大することが明らかになった。(1)シスエレメント配列の解析:チューリップMYBプロモーター領域内に存在するTCAT配列およびユリMYBプロモーター領域内に存在するAAACTTT配列が各々花弁特異性に関わる重要なモチーフであることが、VIT(液胞型鉄イオントランスポーター)遺伝子をレポーターとする花弁細胞の青色化反応とiPCR法による一塩基欠失変異の導入解析により明らかになった。また、ユリには補助的に機能する2つのモチーフが存在することも判明した。(2)プロモーター領域の定量化:プロモーター活性を定量化するために(1)で明らかになったモチーフをルシフェラーゼ(Luc)遺伝子をレポーターとするベクターを構築し、花弁組織および葉組織に遺伝子導入を行った。粗タンパク質を抽出し、Luc活性を測定した結果、AAACTTT配列を繋いだベクターはユリ花弁でのみ発現が認められ葉組織での発現は認められなかった。さらに、AAACTTT配列を3個、6個とタンデムに連結したベクターを構築しLuc活性を測定したところ、モチーフの数に比例したLuc活性の増加が認められた。これらのことから、AAACTTTモチーフはユリにおける花弁特異的シスエレメントであることが強く示唆された。また、ユリのAAACTTTモチーフはチューリップでも機能するが、逆にチューリップのTCATモチーフはユリでは機能しないことが判明した。(3)形質転換体の作出:チューリップの組織培養系を活用したアグロバクテリウム法による形質転換系を開発した。特に、感染時のエチレン発生を抑制したスーパーアグロバクテリウム法においては従来法より約1.3倍の遺伝子導入効率の向上が認められている。また、ビアラホス耐性による選抜後の再分化およびそれに続く小球根形成まで進んだ個体を多数得ている。これらの小球根は非常に小さく開花までにはまだ数年を要するが、継続して育成を進める。チューリップおよびユリにおいて、花弁特異的な遺伝子発現に関わるシスエレメント配列の解析を行った。解析は、MYB遺伝子プロモーター領域への変異導入と液胞型鉄イオン輸送体(VIT)遺伝子を活用した独自の方法による。その結果、チューリップでは3つのTCATモチーフ、ユリではAAACTTTモチーフが花弁特異性に関わるシスエレメントであることが示唆された。また、ルシフェラーゼ(Luc)を活用して定量解析を行った結果、モチーフ数の増加に比例したLuc活性の増加が認められた。これらのモチーフとVIT遺伝子を活用して、アグロバクテリウム法により「青いチューリップ」作出のための形質転換体を得ることができた。(1)シスエレメント配列の解析:おおむね順調に進展している。
エイズ根治を目指した新規免疫賦活化療法の開発

慢性期SIV感染カニクイザルに対するcombination antiretroviral therapy(cART)モデルを樹立するために、SIVmac239の直腸感染を行い、明確なセットポイントウイルス量(VL)を示す慢性持続感染が確認された8頭に関して、感染後68週の慢性感染期にcARTを1日1回皮下投与により開始し、その治療効果を検討した。まず、核酸系逆転写酵素阻害剤(AZT+3TC)の二剤によるcARTを行った2頭では、開始後4週までに目立ったVLの抑制は観察されなかった。一方で、核酸系逆転写酵素阻害剤、非核酸系逆転写酵素阻害剤、インテグラーゼ阻害剤(FTC+TDF+DTG)の三剤を用いた6頭においては、全ての個体で開始後数週間の内にVLは検出限界以下に抑えられ、この効果は3ヶ月以上継続することが観察された。次に、この一連のcART経過観察の諸過程における免疫の状態を評価した。まずcARTによりCD4/CD8の割合は上昇していることから、cARTによるCD4陽性T細胞の回復が示唆された。一方で、フローサイトメーターを用いた解析から1)T細胞の分化成熟度、2)T細胞受容体刺激依存的なサイトカイン産生能、3) SIV抗原特異的CD8陽性T反応、はそれぞれcARTの有無による影響を受けないことが明らかとなった。以上より、本慢性期SIV感染カニクイザルcARTモデルは、実際のcART治療中患者における潜伏感染細胞及び免疫学的状態を高度に反映していると考えられ、cART期の潜伏感染細胞を標的とした新規治療法の前臨床評価モデルとして有用であると期待される。当初予定していた通り、慢性期SIV感染カニクイザルに対するcARTのための治療プロトコールを確立し、in vivoで完全にウイルス複製を抑制することに成功した。今後は確立した長期間SIV複製制御可能なcART治療プロトコールを用いて、選択した免疫賦活化剤のin vivoないしex vivo解析によるSIV潜伏感染細胞の再活性化能、ならびに抗原特異的CTL誘導能を評価することで、エイズ根治根治に向けた研究開発に繋げる。本年度は主にin vitro実験により、SIV感染細胞における自然免疫賦活化剤の免疫活性化能を評価した。具体的には、SIV潜伏感染状態のモデルとして、SIV感染後40週の慢性持続感染期にあるカニクイザルのうち、自然に血中ウイルス量が検出限界以下となっているが、末梢血単核細胞(PBMC)中のGag DNAは測定可能な8頭を対象とした実験を行った。まずこれら個体より血液を採取し、PBMCを分離精製後、このPBMCをin vitroで免疫賦活剤により刺激した。培養上清中のサイトカイン産生を測定した結果、SIV感染細胞を用いた場合においても、非感染細胞同様にTLR7/8リガンド、ならびにSTINGリガンドを用いた場合、Type-I INFやIFN-gを強力に産生することが明らかになった。またこれらリガンド添加により、感染細胞より産生されると考えられる培養上清中のウイルスRNA量が有意に増加した。つまり、これらリガンドは自然免疫反応の活性化を介して、SIV潜伏感染細胞の再活性化を引き起こすことができる可能性が示唆された。さらに抗原特異的CTL再活性化能を評価するために、上記感染個体由来PBMCをSIV gagペプチドで刺激し、polyfunctionalアッセイを行った。陰性対照およびTLR7/8アゴニスト添加群と比較して、STINGリガンド添加群において、抗原特異的CD107a、IFN-g、TNF産生細胞数が有意に増加していた。以上の結果をまとめると、少なくともin vitroにおいてSTINGリガンドは、SIV潜伏感染細胞の再活性化、ならびに抗原特異的CTL誘導能を有する可能性が示唆された。当初予定していた通り、SIV感染細胞を用いた免疫賦活化剤の活性評価のためのin vitroスクリーニングは完了した。

当初予定していた通り、慢性期SIV感染カニクイザルに対するcARTのための治療プロトコールを確立し、in vivoで完全にウイルス複製を抑制することに成功した。今後はまず長期間SIV複製制御可能なcART治療プロトコールを確立し、その上で選択した免疫賦活化剤のin vivo投与におけるSIV潜伏感染細胞の再活性化能、ならびに抗原特異的CTL誘導能を評価することで、エイズ根治根治に向けた研究開発に繋げる。今後は確立した長期間SIV複製制御可能なcART治療プロトコールを用いて、選択した免疫賦活化剤のin vivoないしex vivo解析によるSIV潜伏感染細胞の再活性化能、ならびに抗原特異的CTL誘導能を評価することで、エイズ根治根治に向けた研究開発に繋げる。
心臓手術後の換気補助を目的とする、電極の抜去可能な体外式横隔膜ペーサーの開発

1.カーボン線を用いたペーシングリードおよび刺激装置の作成心電図導出用電極(日本光電製:Xトランスロード)のリ-ド部分をカーボン線の素材とし、その周囲を医用グレードのシリコン(ダウコ-ニング製:Silastic)でコーティングした。このカーボン線の一端の被覆を先端から5mmだけ剥離して、刺激電極部位とした。また、カーボン線の他端の金属製接続部分を針状に加工し、胸壁を貫通できる様にした。また、2チャンネル(両側)・ABCD刺激型の連続ペーシング可能な小型(5cm×7cm×2cm)刺激装置を作成した。2.動物実験麻酔下の1頭の雑種成犬の両側の第3肋間を開胸し、大動脈弓基部に超音波血流量計(Trans Systems Inc:T201)を取付け、両側の横隔神経に試作したカーボンリードをフィブリン糊(ベ-リングベルケ製:ベリプラストP)で接着し、閉胸した。対極板を胸骨前方の皮下に植め込んだ。陽圧式人口呼吸下に対して、横隔膜ペーシング施工時には、心拍出量が約20%増加し、横隔離ペシングが心臓の負荷の軽減に寄与できる事が確認できた。また、1頭の雑種成犬の両側の横隔神経にカーボンリードをフィブリン糊で接着し、術後から連続ペーシングを開始した。レートは毎分15回で、覚醒時の動物の自発呼吸との顕著な競合は観られなかった。刺激強度は、最大換気量(25mL/Kg)の約80%(21mL/Kg)を得られる値(L:3mA,R:3.1mA)とした。1週間の連続ペーシングにおいて、一回換気量、刺激閾値に顕著な変動は無かった。1週間後、開胸下でのリ-ド抜去の際、出血等の問題は起こらなかった。本研究で提案した、ペーシング方式は、心臓手術後の換気補助として有望であると考えられる。
ヒトの随意運動における補足運動野、運動前野および運動連合野の機能に関する無侵襲的研究

近年陰性運動現象が注目されているが、その中枢制御機序はまだ明らかでないので、本研究では正常者が手の筋収縮を随意的に中止する時に働く皮質機構を明らかにすることを目的とした。(1)運動関連脳電位の記録正常者10名を対象とし、10-15秒の自らのペースで、右手首伸展位から屈筋の収縮を伴うことなく伸筋群の随意的弛緩による手首落下運動を起こさせ、指先に設置した加速度計で記録した変位開始時点をトリガーとして、同時記録した脳波を加算平均し、運動関連脳電位を求めた。対照として屈筋の随意的収縮による手首屈曲運動に伴う脳電位を記録した。その結果、随意的筋弛緩に1-2秒先行して、筋収縮の場合と全く同波形の陰性緩電位が中心部に認められ、そのうち特に早期成分(狭義の準備電位)はむしろ弛緩の方で収縮の場合より大きかった。また多くの被検者において、弛緩に先行して前頭部に表面陽性の緩電位が認められた。なおこの検査のために、電気刺激装置(設備備品費)および生体現象記録装置(現有設備)を用いた。(2)PETによる局所脳血流の測定正常者6名を対象として、上記と同様の運動課題を音刺激にあわせて2秒毎に行わせ、15-Oで標識した水を静注して、PET(現有設備)で脳血流を測定し、statistical parametric mapping(SPM)を用いて、筋弛緩課題および筋収縮課題の各々と音刺激のみの対照課題の間の差異を求め、さらに両課題間における差異を求めた。その結果、筋収縮課題では反対側の一次運動野に、また筋弛緩課題では前頭前野内側部により著明な血流増加を認めた。15EA06:以上の所見から、ヒトの随意的筋弛緩(随意的陰性運動現象)に際して運動皮質が積極的に活動するものと考えられる。また前頭前野内側部が陰性運動現象に重要な働きをなすことが想定されるが、脳磁場によってその確認を行う計画である。
ストリゴラクトンおよびジベレリン受容体アゴニスト／アンタゴニストの創出

本年度は,ストリゴラクトン(SL)受容体アンタゴニストをSL構造活性相関と受容体D14の活性化機構の知見に基づいて設計・合成し,それら化合物の活性をin vitroおよびin vivoで評価した。また,その成果を植物化学調節学会および日本農薬学会で発表した。α/β-加水分解酵素ファミリーに属するD14は受容体でありながら酵素活性を有し,SLのD環5′炭素への求核攻撃によるフラノン環の開環を介して,ABC環とD環を繋ぐエノールエーテル部分を加水分解によって切断する。加水分解産物であるABC環およびD環(D-OH)はSL自体と比較して著しく活性が低下することから,加水分解によってD環を切断する際のD14の配座変化がSLシグナル伝達には重要であると考えられる。従って,D14には結合するものの,加水分解されない化合物はD14アンタゴニストとして機能する可能性がある。本研究ではこの戦略に基づいて,合成SLであるGR24およびSLミミックとして知られる4BDの2(5H)-フラノン環を2-シクロペンテノン環に置換した1′-carba-GR24および1′-carba-4BDを加水分解耐性型のSL受容体アンタゴニスト候補化合物として設計・合成した。イネのOsD14に対する活性を評価した結果,両化合物は予想通り加水分解耐性を示し,またGR24との共処理においてはOsD14によるGR24の加水分解を濃度依存的に阻害した。また,イネのSL生合成酵素欠損株d10を用いた第二げつ伸長試験に供したところ,両化合物共にGR24による第二分げつの伸長抑制を阻害してSL拮抗活性を示した。以上,SL活性にはエーテルを介して結合したフラノン環がD14によって加水分解されることが重要であり,これらの化学修飾によってD14アンタゴニスの創出が可能であることを示した。27年度が最終年度であるため、記入しない。
植物由来イソプレノイドの抗腫瘍効果および抗血管新生作用についての検討

イソプレノイドの一種である、セイヨウイチイ由来のドセタキセル(Docetaxe1)・パクリタキセル(Paclitaxel)は、乳癌をはじめとする多種の癌腫に対して抗癌作用を有することが確認され、既に臨床的に実用化されている。これらの抗癌剤と同じイソプレノイドに属するプラウノトールは植物Plau-noiの葉より抽出される抗潰瘍薬剤であり、日本・タイにおいて既に長年に渡る臨床実績を有する。その抗潰瘍治療効果の作用機序として内因性セクレチンの遊離促進やプロスタグランジンPGE2やPGI2の産生増加などが判明している。プラウノトールの癌に対する作用に関する報告はこれまで皆無であった。一方、プロッコリなどに多く含まれるスルフォラファンの抗癌作用も近年注目されている。我々はプラウノトール及びスルフォラファンに注目し、血管新生に対する作用及び癌細胞に及ぼす影響について検討を行った。まず、癌の増殖進展に重要不可欠である血管新生の実験モデルとして、ヒト臍帯静脈内皮細胞(HUVEC)を用いた。一方、癌細胞への影響を検討するため、胃癌細胞株であるMKN-45、大腸癌細胞株であるHT-29を用いて検討を行った。プラウノトールはHUVECsの増殖を濃度依存的に抑制した。その機序として、細胞外基質であるゼラチンやvitronectinに対するHUVECsの接着能抑制が関与していることが明らかとなった。さらには、マトリジェル上での管腔形成能もプラウノトールの濃度依存性に抑制されていた。よって、プラウノトールは、血管新生の過程の重要なステップを抑制することが確認された。一方、スルフォラファンは内皮細胞のアポトーシス誘導により増殖を抑制した。次に、冒癌及び大腸癌に及ぼすプラウノトールの影響を検討したところ、プラウノトールの濃度依存性に胃癌及び大腸癌の増殖抑制効果が確認された。胃癌及び大腸癌の増殖抑制は細胞アポトーシスの誘導に依存することが確認された。以上の結果より、プラウノトールは消化器癌細胞のアポトーシス死を誘導すると同時に、癌細胞の増殖・進展の必須条件である血管新生をも抑制することが明らかとなり、またスルフォラファンも抗癌作用に加えて抗血管新生作用を有することが明らかとなり、両者とも複合的な抗癌剤としての可能性が示唆された。今後の臨床治験により、プラウノトール及びスルフォラファンの抗癌剤としての有用性を明らかにしていきたい。イソプレノイドの一種である、セイヨウイチイ由来のドセタキセル(Docetaxel)・パクリタキセル(Paclitaxel)は、乳癌をはじめとする多種の癌腫に対して抗癌作用を有することが確認され、既ににている。その抗潰瘍治療効果の作用機序として内因性セクレチンの遊離促進やプロスタグランジンPGE_2やPGI_2の産生増加などが判明している。発売後約20年の歴史を持つ薬剤であるプラウノトールの抗潰瘍治療効果の機序については、上記のように多数の研究がなされているが、癌に対する作用に関する報告はこれまで皆無であった。我々はこのプラウノトールに注目し、血管新生に対する作用及び癌細胞に及ぼす影響について検討を行った。まず、癌の増殖進展に重要不可欠である血管新生の実験モデルとしてヒト臍帯静脈内皮細胞(HUVEC)を用いた。プラウノトールはHUVECsの増殖を濃度依存的に抑制し、また、細胞外基質であるゼラチンやvitronectinに対するHUVECsの接着能も抑制した。次に、胃癌及び大腸癌に及ぼすプラウノトールの影響を検討したところ、プラウノトールの濃度依存性に胃癌及び大腸癌の増殖抑制効果が確認された。冑癌及び大腸癌の増殖抑制は細胞アポトーシスの誘導に依存することが確認された。これまでの結果より、プラウノトールは癌細胞のアポトーシス死を誘導すると同時に、癌細胞の増殖・進展の必須条件である血管新生をも抑制することが明らかとなり、複合的な杭癌剤とての可能性が示唆された。今後の臨床治験により、プラウノトールの抗癌剤としての有用性を明らかにしていきたい。

我々はプラウノトール及びスルフォラファンに注目し、血管新生に対する作用及び癌細胞に及ぼす影響について検討を行った。まず、癌の増殖進展に重要不可欠である血管新生の実験モデルとして、ヒト臍帯静脈内皮細胞(HUVEC)を用いた。一方、癌細胞への影響を検討するため、胃癌細胞株であるMKN-45、大腸癌細胞株であるHT-29を用いて検討を行った。プラウノトールはHUVECsの増殖を濃度依存的に抑制した。その機序として、細胞外基質であるゼラチンやvitronectinに対するHUVECsの接着能抑制が関与していることが明らかとなった。さらには、マトリジェル上での管腔形成能もプラウノトールの濃度依存性に抑制されていた。よって、プラウノトールは、血管新生の過程の重要なステップを抑制することが確認された。一方、スルフォラファンは内皮細胞のアポトーシス誘導により増殖を抑制した。次に、冒癌及び大腸癌に及ぼすプラウノトールの影響を検討したところ、プラウノトールの濃度依存性に胃癌及び大腸癌の増殖抑制効果が確認された。胃癌及び大腸癌の増殖抑制は細胞アポトーシスの誘導に依存することが確認された。以上の結果より、プラウノトールは消化器癌細胞のアポトーシス死を誘導すると同時に、癌細胞の増殖・進展の必須条件である血管新生をも抑制することが明らかとなり、またスルフォラファンも抗癌作用に加えて抗血管新生作用を有することが明らかとなり、両者とも複合的な抗癌剤としての可能性が示唆された。今後の臨床治験により、プラウノトール及びスルフォラファンの抗癌剤としての有用性を明らかにしていきたい。
扁桃体の単一ニューロン特性及び海馬体との神経連絡に関する電気生理学的研究

扁桃体の単一ニューロンの電気生理学的および形態学的特性を調べるとともに,海馬体のうち特に内嗅野の深層の電気刺激に誘発される鋭波(200Hz)およびガンマ波(40-100Hz)(Funahashi and Stewart,J.Physiol.510(1)191-208,1998)と扁桃体ニューロン活動の相互関係について検討を行った。扁桃体の諸核うち外側核,基底外側核および中心核の単一ニューロンについて細胞内記録を用いて脱分極性の細胞内通電(1mA,200ms)に対する発火パターンを調べた結果,殆どの外側核ニューロンが一般的に見られる連続発火を示し最初の数発のスパイク間隔が短いのが特徴的であった。また,基底外側核のニューロンでは強い後電位を伴うバースト発火が多く見られ,中等度の活動電位の順応が見られた。一方,中心核ニューロンでは大部分に著しい活動電位の順応を伴うバースト発火が観察された。内嗅野の電気刺激に対する応答は外側核および基底外側核のみに見られ,これらは内嗅野の鋭波およびガンマ波を含むバースト発火に同期するもので,誘発電位にIPSPが強く見られないニューロンに多く観察された。記録終了後にニューロバイオチントレーサーを注入しておいたニューロンについては記録部位の確認を行い,また細胞体および樹上突起の形態,シナプス突起の有無による形態学的分類を行った。外側核および基底外側核ニューゴンの細胞体の直径は約15ミクロン,70%以上が錘体細胞でシナプス突起が著名に見られた。細胞形態と発火パターンとの相互関係についてはさらに検討を行う予定であり,直径が約10ミクロンと小さく,ニューロバイオチントレーサーの注入がより困難な中心核ニューロンについても更なる検討が必要とされる。この研究は扁桃体及び海馬体(海馬,海馬傍回,海馬支脚,海馬支脚の総称)の単一ニュローンの特性さらにはニューロンネットワークの特性を解明し,扁桃体-海馬体を含む大脳辺縁系の機能について考察するために行なった。SD系の雄ラットを用いて扁桃体及び海馬体を含む脳スライス標本を作製し,フィールド電位と細胞内電位の記録を行った。誘発電位を得るために双極性の刺激電極を用いた。海馬傍回と傍海馬支脚の単一ニューロンの細胞内記録により,同部の深層(主に第5層)ニューロンが電気刺激により誘発される巨大なバースト発火を示すことが明らかとなった。このバースト発火は同部位に特異的現象で,しかも何ら薬物も用いずに起こり,0.05Hz程度の反復電気刺激でEPSPが増強され,ついにはバースト発火に至ることが分かった。また,細胞内へのカレントインジェクションでは同部の細胞はバースト発火を示さず,シナプス入力が必要であり,しかもより多くのニューロンネットワークがスライス中に健全に存在することが必要であることも明らかとなった。さらにこのバースト発火のはじめの50msから400msの間にガンマオッシレーション(40-100Hz)が観察され,2-30μMチオペントバルビタールにより周期が遅くなり,50μMピクロトキシンで周期が少し早くなることが明らかとなった。これらはガンマオッシレーションの形成にIPSPが関与していることを示唆するものである。扁桃体の基底外側核及び中心核内にて,海馬傍回の電気刺激に応答するフィールド電位が観察された。潜時が20-40msであり,多シナプス性の神経連絡があることが示唆された。また,基底外側核ではバースト発火が見られ,海馬体のバースト発火及びガンマオッシレーションとの関連を調べるのが今後の課題である。
ＥＢＡ患者１００例の臨床像と自己抗体の抗原エピトープの関連性の検討

後天性表皮水疱症(EBA)患者100例以上の血清学的な診断結果を解析し、エンボプラキンやデスモコリン、7型コラーゲンのNC1/2ドメインなどの免疫ブロットを用いて、病因抗原の種類と組織分布の結果と臨床像との関連性について検討を加えて集計した。1.後天性表皮水疱症(Epidermolysis bullosa acquisita、EBA)の血清学的な診断結果を集計し、統計解析した昨年度のデータを基に、エンボプラキンやデスモコリン、7型コラーゲンのNC1/2ドメインなどの免疫ブロットを用いて、病因抗原の種類と組織分布の結果、臨床像との関連性について検討を加えた。2.1M NaCl処理によって、表皮と真皮を分離した皮膚を基質とした蛍光抗体間接法を用いた解析方法を応用して、真皮側IgAの沈着がみられるEBAとlinear IgA bullous dermatosis (LABD)との鑑別が出来るかどうかについても検討した。蛍光オーバーレイ法を用いた共焦点レーザースキャン顕微鏡による高解像度の画像解析を行った。4型コラーゲンの表皮側と真皮側にLABDとEBAの抗原がそれぞれ分布することが画像上で有意な差をもって確認できた。3.自己抗体の7型コラーゲン蛋白上のエピトープマッピングについては、NC1ドメインのフラグメントによる自己血清の反応性の有無の確認についての研究が海外の共同研究者主導にて既に始められたため、更に詳細なエピトープのマッピングと共通ペプチド配列の確認、3次元構造に依存した特異性やホットスポットの有無の確認などを行う方向で目標を変更し、本年度は、ペプチドマイクロアレイを用いたペプチド作製のための準備を行った。1.過去15年間で国内外の多数の医療施設より自己免疫水疱症が疑われる症例の血清を渉猟し当科症例を加え後天性表皮水疱症と診断した130名を検討した。血清学的には、1M食塩水剥離ヒト皮膚切片のIIF(split skin IIF)で真皮側にIgG沈着、免疫ブロット法で290kDaの7型コラーゲンを後天性表皮水疱症と診断した。2.発症年齢は4歳94歳(平均56.02歳)、10代以下は6例(4.6%)、男女比は1:1.02と性差はなかった。古典型EBAと炎症型EBAの比率は1;2とされるが、自験例はほぼ同数で、粘膜病変は半数とされるが75%が粘膜病変を有していた。3.粘膜類天疱瘡は口腔粘膜のみの粘膜病変を有するが、標的抗原は7型コラーゲンも含めラミニン332やBP180 NC16a・C末端領域など多様である。今回の診断では粘膜病変のみの12例(12%)は粘膜類天疱瘡とすることもできるが、血清学的にEBAとも捉えられ、粘膜類天疱瘡型EBAとした。海外でも粘膜類天疱瘡型EBAの報告はあるが、今後粘膜類天疱瘡に分類されていくであろう。4.EBAは抗p-200類天疱瘡や抗ラミニン332型粘膜類天疱瘡、水疱性類天疱瘡等の自己免疫性水疱性疾患と合併する報告が散見され、複数自己抗原検出例にもあったが、特異的な臨床症状はなかった。免疫ブロットで28例に290kDa以外の200kDa蛋白、ラミニン332、BP180NC16aなど複数の自己抗原が検出された。抗7型コラーゲン抗体のELISA法の感度は93.8%、特異度は98.1%との既報告と比較して、自験例のELISA法の感度は89.9%と免疫ブロットより僅かに感度が高かった。5.ステロイド内服と併用療法が大半で重症度と治療法の関連はなかったが、治療後の症状軽快と共にELISA値が低下し病勢評価や治療効果判定に有用であった。最終年度には、エンボプラキンやデスモコリンをはじめとした、種々の自己免疫性水疱症患者血清が横断的に反応するような自己抗原が見られる症例が見出されたため、後天性表皮水疱症(Epidermolysis bullosa acquisita、EBA)患者血清のこれらの様々な自己抗原に対する反応性などを免疫ブロット法やELISA法を用いて確認し、自己抗体の存在を検証するとともに、その臨床像との関連についてもさらに検討を加えた。研究期間全体を通じて、患者100例以上の血清学的な診断結果を集計し、統計解析したデータを基に、エンボプラキンやデスモコリン、7型コラーゲンのNC1/2ドメインなどの免疫ブロットを用いて、病因抗原の種類と組織分布の結果、臨床像との関連性について検討を加えた。1M NaCl処理によって、表皮と真皮を分離した皮膚を基質とした蛍光抗体間接法を用いた解析方法を応用して、真皮側IgAの沈着がみられるEBAとlinear IgA bullous dermatosis (LABD)との鑑別が出来るかどうかについての検討も加えて。皮膚科学

1.EBAのこれまでの患者血清渉猟数が100例を超え、現在までに行われた解析環境の規模をはるかに上回る数のデータを基にした分析が可能となった。2.分子疫学解析や、病因抗原である7型コラーゲンの血清抗体によるエピトープマッピング、更にエンボプラキンやデスモコリンをはじめとした、種々の自己免疫性水疱症患者血清が横断的に反応する自己抗原に対する、患者血清の反応性などの確認を開始することが出来る状況になった。3.リコンビナント蛋白を用いた免疫ブロットやELISA assayによって、感度特異度ともに更に高い診断法の確立に向けた予備実験を開始した。1.症例の渉猟数が100例を超え、これまでの臨床統計解析を上回る症例数の患者の血清学的診断結果を集めることができた。また、世界各国から幅広い年代の患者と、口腔粘膜を始め様々な粘膜病変を有する患者についても分子疫学解析を行うことができた。2.病因抗原の種類と組織分布の結果と臨床像の関連性については、明らかな所見は見いだせなかったが、さらにエンボプラキンやデスモコリン、7型コラーゲンのNC1/2ドメインの免疫ブロットや、これらに対する抗体を用いた、免疫電顕の結果を解析対象にした結果と、臨床上や病型との相互関連性について、さらに今後解析を進めていくことが必要と考えられる。3.症例数が多く、その情報収集に多くの時間を費やした。詳細な統計解析などについて、未解決な点もあるが、計画以上の数の症例に対し、今後さらに様々な側面からみた検討や、免疫・血清学的検査や、分子生物学的実験的手法による解析も行っていきたい。1.7型コラーゲン特異的なヘルパーT細胞の働きを確認するために、渉猟したEBA患者の末梢血を用いたELISPOT解析を行う。IL-5分泌Th2細胞、IFN-γ分泌Th細胞などの関与について検討を加える。2.ペプチドマイクロアレイ作成のための予備実験やペプチド作製を行い、エピトープマッピングに向けての準備を進める。1.当初の計画に従い、7型コラーゲンのNC1ドメインに対する抗体陽性の症例の患者血清50例以上を集め、免疫ブロット法、ELISA,ELISPOTなどの免疫学的解析法を駆使して、コラーゲン分子上の詳細なエピトープマッピングを行い、ホットスポットの有無や、複数のホットスポットがあれば臨床像と相互に関連性があるかどうかについて検討する。2.当初は、リコンビナント蛋白にてNC1のフラグメントを2つずつ含むものをつくり、ELISA,免疫ブロット、ELISPOTを行う計画であったが、さらに詳細にエピトープ配列を明らかにするために、三次元構造やホットスポットをコンピュータシュミレーションし、抗体のターゲットとなるエピトープを多数[3800種類]のペプチドを作成してペプチドマイクロアレイ上で解析し、エピトープの機能の解明や治療への応用などもできるような研究を推進していく予定である。産前産後の休暇取得に伴う補助事業期間延長を申請し、平成24-25年度の事業期間を26年度まで延長したため。平成25年度の後半に行う予定であった研究内容を、平成26年度後半に行う。ELISPOT解析に加えて、ペプチドマイクロアレイ解析のための基盤となる研究を行う。1.NC1ドメイン内のフラグメントのリコンビナント蛋白は、海外の研究者から無償提供され、作製の費用が必要なくなった。従って、リコンビナント蛋白発現や精製のための24年度予算の大半を25年度に繰り越し、上記のマイクロアレイを行うことを計画している。2.本年度分の研究費と次年度分の研究費を併せて、ペプチドマイクロアレイなど最新の解析技術を用いて、抗体価の高い患者血清についての詳細な解析を進めていく予定である。
リーマン面の退化の分裂について

1変数によりパラメータ付けされたリーマン面の族で特異ファイバーをもつものをリーマン面の退化族という。退化族のトポロジー型は,位相モ/ドロミーにより沢まる(松本モンテシノスの定理)特に,位相モバロミーガ周期的,つまり何乗がすると恒等写像になるはあい。特異ファイバーの形状は星形になる。さて,コアがリーマン球面でしかも枝の本数がちょうと3本のとも阿原一志氏(明治大学)この共同研究によって,そのような特異ファイバーは必ず分裂族をもつことを示した。この分裂族の存在定理の証明には私により示された剥離族の存在の判定法を本質的に用いる。この判定法は特異ファイバーを複素曲面上の因子とみなしたとも,特別な部分因子が存在するかどうかて剥離族が存在するかを判定する。この結果はシュプリンガー社の数学講義録1886としてまとめられ出版された。さて,コアガリーマン球面で枝の本数が4本以上の星形の特異ファイバーのはあいには,この判定法を「すり抜けて」しまう場合があることも,阿原氏との共同研究でわかった。このことは,一般に剥離族をもたない退化族でも分裂族をもつことがあるかという新たな問題を提起する。この方向の研究は今後の課題でもある。リーマン面の退化の分裂族において,元の特異ファイバーは2種類の特異ファイバー(主要ファイバーと付随ファイバー)に分裂するが,このうちの付随ファイバーの研究を詳しく行なった。特筆すべきは新しい結果としては付随ファイバー上の特異点の個数を表す公式を得たことや,更に特異点の位置が古典的な関数リーマンのテータ関数から作られるある種の多項式の零点と関わっていることを示したことが挙げられる。特に後者のリーマンのデータ関数と付随ファイバー上の特異点の関係は,リーマン面の退化の分裂族という比較的新しい研究対象が,非常に古典的な関数の零点と密接な関係をもっているということを提示したという点で画期的である。また,更に深い結果として、上記の多項式(つまりリーマンのテータ関数から作られた多項式)の零点の位数は、付随ファイバー上の特異点の「型」を本質的に決めていること,たとえば極端な場合として,この多項式が単純根のみをもつときは,付随ファイバー上の特異点はすべからくノード(結節点)であることや(これは特殊なばあいに栗田氏により示されていた),この多項式がただ1つの根しかもたないばあいは,付随ファイバー上の特異点はただ1つのA型特異点になること,などを示した。ダイナミックな力学系的な視点,すなわち特異点のモース化の立場からいうと,上の2列の前者(ノードのみをもつ場合)は,後者のA型特異点をモース化して得られるという点で興味ぶかい。リーマン面の退化は,特異ファイバーのまわりのモノドロミーにより特徴づけられることが松本幸夫とモンテシノスにより示されている。この結果により,リーマン面の退化は特殊な写像類群の元(擬周期写像)と1対1に対応することが分かる。このことから,リーマン面の退化のトポロジカルな分類が得られる。一方,リコリッシュの古典的な結果により,任意の写像類群の元はデーン・ツイストの積にかけることが分かる。ここで次のことを問題にする。リーマン面の退化のモノドロミーを,退化の分裂変形を用いてデーン・ツイストへ分解せよ。また,このとき得られたデーン・ツイストを何らかの意味で特徴づけよ。私は剥離族と呼ばれる特別な分裂変形のクラスを構成し,それを用いて対称性が高いリーマン面の自己同相写像で,位数有限なものに対しデーン・ツイスト分解を構成した。結果から見えてくるのは,剥離族を作るときの補助点の取り方により,デーン・ツイスト分解の対称性が崩れたりする場合があるということである。今のところ完全な理論化には到っていないが,分裂変形の初期条件のデータとモノドロミーのデーン・ツイスト分解のトポロジカルな性質の間の相関関係がわかってきた。リーマン面の退化の特異ファイバーは、位相モノドロミーによりその形状が決まることが松本幸夫とモンテシノスにより示された。

それによると、位相モノドロミーが周期的な場合はコアと呼ばれる中心成分と射影直線の鎖(枝)により特異ファイバーは構成されている。コアが射影直線で、かつ枝の本数がちょうど3本のとき、阿原一志氏との共同研究により、この特異ファイバーは必ず分裂族をもつことを示した。証明には、私により示された剥離族の存在の判定法を本質的に用いる。とくに重要な系として、特異ファイバーが、3本の枝をもちコアが射影直線の星形の場合には、その周期的モノドロミーは、"幾何的に"、つまり分裂属を系由して周期的モノドロミーの群論的分解が得られることが判明した。一方、枝の本数が4本以上の特異ファイバーの場合には私の剥離族の存在の判定法をすり抜けてしまう場合があることも計算機実験でわかった。つまり、枝の本数が4本以上の場合には、剥離族を構成する際にカギとなる単純外皮が必ずしも存在しないときがあることを発見した。ただし、この場合にも、単純外皮でなく、複数の外皮で剥離族が作れる可能性があるので一概に分裂しないとは言えない。しかしながら、複数の外皮から剥離族を作るには、膨大な計算を要するので、この方向の研究は今後の課題でもある。リーマン面の退化族の位相型は、特異ファイバーのまわりの位相モノドロミーにより完全に決定される(松本・モンテシノスの定理)。一方、リーマン面の退化族の分裂変形は、元の特異ファイバーの分裂および元の位相モノドロミーの分解を引き起こす。これらの幾何学的描写を、モース理論的立場から与えられないかということを考察した。つまり、モース理論におけるグラジェント・フローに対応するベクトル場を用いて、分裂変形に伴う特異ファイバーの分裂現象や位相モノドロミーの分解法則を体系的に記述できないかどうか研究を行った。具体的に言うと、元の位相モノドロミーを記述するに際し、円周上のベクトル場をリーマン面の退化族の全空間に持ち上げて積分することにより、位相モノドロミーをフローの観点から定めることができる。このフローを時間経過とともに動かして、分裂変形の全空間である複素3次元多様体に拡張し、位相モノドロミーの分解を理解しようという方針である。今のところ特異ファイバーが簡単な形をしている場合には、フローが拡張できることが分かったが、一般的な場合はベクトル場の分岐を詳しく研究することが必要で今後の重要な課題である。
知覚情報処理の熟達化に知覚経験の言語化が及ぼす影響の検討

本研究の目的は,学習の途上で知覚対象を言語化することが,学習に及ぼす影響を検討することであった。先行研究において,顔やワインの味といった知覚的情報の記憶を言葉で想起すると,かえって後の記憶テストの成績が低下することが報告されてきた。この現象は,言語陰蔽効果と呼ばれている。言語陰蔽効果は,知覚対象の分類やスポーツといった,知覚情報処理の熟達を伴う学習においても生じる可能性が示唆されているが,先行研究では主に記憶テストによって言語化によるネガティブな効果が検討されており,学習の成立そのものに言語化が及ぼす影響についてはあまり検討されてこなかった。そこで,本研究では,まず知覚情報の熟達が成立する前に知覚対象の特徴を言語化することが,その後の学習成績に及ぼす影響を検討した。具体的には,参加者に対して未知の植物(キノコ)の画像を呈示し,二つのカテゴリーに分ける分類課題を課した。参加者の半数は分類課題を遂行する途中で呈示された刺激の特徴を記憶を頼りに説明する課題を行い,残りの半数は無関連な課題を行い,再び分類課題を行った。その結果,刺激の特徴を言語化した参加者は,しなかった参加者に比べて課題後の分類課題の成績が低くなり,その差は分類課題が終了するまで継続した。すなわち,言語陰蔽効果が生じた。さらに,言語化を行った参加者は,分類課題の成績がそうでない参加者に比べて低いにもかかわらず,分類課題の難易度に差がなかった。上記の結果は,知覚対象の学習において,学習の途中で対象の記憶を言葉で描写することが学習成績そのものにネガティブな影響を持続的に与える可能性を示唆している。学習場面において,対象の特徴を言葉で整理することは頻繁に起こりえると考えられるが,場合によっては,このような言語化が,学習を阻害する可能性が示された。翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。
ヒト膵ラ氏島移植のための効率的ラ氏島分離法の開発とその移植前免疫学的修飾に関する研究

研究実績の概要糖尿病性腎症の治療法としての「膵移植」の内分離ラ氏島のみを移植する「ラ氏島移植」は現在までところ広く臨床で行なわれる方法とは成り得ていない。これは手技が簡便で移植にともなう手技的合併症がないこと等多くの利点を持つ反面、ヒト膵より効率よくラ氏島を分離する有用な方法が確立されていないこと、拒絶反応により容易に機能廃絶してしまい長期間移植ラ氏島の機能を維持させることが難しいこと等解決すべき問題点が少なくないからである。われわれは、多大な労力と時間が必要で実際的とはいえず、またラ氏島の収量も極めて不良であった従来のラ氏島分離の為のコラゲナーゼ消化法を改良した自動コラゲナーゼ持続潅流ラ氏島分離装置を作製し、摘出膵よりviabilityの高いラ氏島の効率的分離法に関する研究を模索してきた。その結果、自動コラゲナーゼ持続潅流ラ氏島分離装置の使用のみでは過消化、未消化のラ氏島が混在し膵組織の消化を均一に行なうことは困難で、消化を効率化し時間を短縮する必要があると考えられた。そこで膵組織細切の為のメカニカルチョッパーを試作、これと自動ラ氏島分離装置の併用で膵消化時間の短縮をはかったところ、サイズの大きなラ氏島の分離、分離ラ氏島数の向上が得られ、その結果ラ氏島収量の向上が得られている。このラ氏島収率の向上は、現在困難である一ドナーから一レシピエントといった1:1の移植を恒常的に行なえる可能性が示唆されることをあらわしている。一方ラ氏島の移植前免疫学的修飾に関する研究は分離されたラ氏島の短時間培養を行い、培養中に種々の操作すなわちラ氏島細胞の表面に存在する種々の抗原に対する抗体処理またはレーザー照射等による抗原性の低下,消失等を試みたが、当初の目的を達成し得たとはいえず、来年度以降の研究継続への研究費補助を望みたい。ラ氏島移植は移植手技が簡便で移植手技にともなう合併症がないこと等、多くの利点を有しているが、ヒト膵より効率よくラ氏島を分離する有用な方法がないこと、拒絶反応により容易に機能廃絶してしまうこと等解決すべき問題点も少なくない。そこで本研究では、多大な労力と時間が必要で実際的とはいえず、またラ氏島の収量も極めて不良であった従来のラ氏島分離の為のコラゲナーゼ消化法を改良した自動コラゲナーゼ持続潅流ラ氏島分離装置を作製し、ヒト摘出膵よりviabilityの高いラ氏島の効率的分離法を確立することが可能か否か研究を行った。恒温槽、ペリスタポンプ、分離チェンバー、フィルター等よりなる自動ラ氏島分離装置を試作した。この自動ラ氏島分離装置簡易モデルにおいて装置の素材、回路の材質、分離チェンバーの振動数、さらにはコラゲナーゼの種類、消化時間、外分泌細胞よりの単離方法等についてイヌ、ブタ摘出膵を用いて検討し問題点を明らかにした。その結果ラ氏島の分離がこの自動ラ氏島分離装置のみでは不十分であり、1ドナーから1レシピエントといった1:1の移植を恒常的に行なうことが困難であった。これは過消化、未消化のラ氏島が混在する為であり、消化を効率化し時間を短縮する必要があると考えられた。そこで平成5年度に於ては、膵組織細切の為のメカニカルチョッパーの導入を考慮している。

試験的研究ではメカニカルチョッパーと自動ラ氏島分離装置の併用で膵消化時間の短縮、サイズの大きなラ氏島の分離、分離ラ氏島数の向上が観察されている。糖尿病性腎症の治療法としての「膵移植」の内分離ラ氏島のみを移植する「ラ氏島移植」は現在までところ広く臨床で行なわれる方法とは成り得ていない。これは手技が簡便で移植にともなう手技的合併症がないこと等多くの利点を持つ反面、ヒト膵より効率よくラ氏島を分離する有用な方法が確立されていないこと、拒絶反応により容易に機能廃絶してしまい長期間移植ラ氏島の機能を維持させることが難しいこと等解決すべき問題点が少なくないからである。われわれは、多大な労力と時間が必要で実際的とはいえず、またラ氏島の収量も極めて不良であった従来のラ氏島分離の為のコラゲナーゼ消化法を改良した自動コラゲナーゼ持続潅流ラ氏島分離装置を作製し、摘出膵よりviabilityの高いラ氏島の効率的分離法に関する研究を模索してきた。その結果、自動コラゲナーゼ持続潅流ラ氏島分離装置の使用のみでは過消化、未消化のラ氏島が混在し膵組織の消化を均一に行なうことは困難で、消化を効率化し時間を短縮する必要があると考えられた。そこで膵組織細切の為のメカニカルチョッパーを試作、これと自動ラ氏島分離装置の併用で膵消化時間の短縮をはかったところ、サイズの大きなラ氏島の分離、分離ラ氏島数の向上が得られ、その結果ラ氏島収量の向上が得られている。このラ氏島収率の向上は、現在困難である一ドナーから一レシピエントといった1:1の移植を恒常的に行なえる可能性が示唆されることをあらわしている。一方ラ氏島の移植前免疫学的修飾に関する研究は分離されたラ氏島の短時間培養を行い、培養中に種々の操作すなわちラ氏島細胞の表面に存在する種々の抗原に対する抗体処理またはレーザー照射等による抗原性の低下、消失等を試みたが、当初の目的を達成し得たとはいえず、来年度以降の研究継続への研究費補助を望みたい。
北宋西北辺地域における統治体制―黒水城出土「宋西北辺境軍政文書」の分析を通じて―

本年度は、前年度までの成果をうけて、以下のことを行った。まず、北宋の神宗期に将兵制が成立するまでの過程や背景を、対外情勢との関連に着目して検討した。北宋の将兵制は、決して画一的・均質的に成立したのではなく、陝西地域・河北地域8東南諸路のそれぞれで対峙する勢力への姿勢に応じた背景や過程をもって成立したことが明らかとなり、とりわけ、西夏と対峙して軍事衝突が頻発していた陝西地域は、北宋における軍事的な先進地域となり、その情勢は将兵制成立に見られる如く河北・東南地域にも影響を与えたことを確認した。このような軍事政策の観点に立てば、陝西地域は当時の国際情勢における「結節点」であったと言える。次に、黒水城遺趾から出土した「宋西北辺境軍政文書」中の「赦書」の語が見える109-28文書・109-98文書を手がかりに、南宋成立直後における中央政府と陝西地域の動向ならびに双方の動向を検討した。それにより、北宋から南宋への移行期に、金軍の侵攻に対して陝西地域は領域を維持し、建炎四年まで頑強に抵抗し続けていた。それを可能にしたのが、南宋成立直後における中央政府との連絡の復活であり、赦書という皇帝の"お墨付ぎ"を背景にした軍備再建であったのである。神宗期に成立した将兵制が、北宋末期から南宋初期に至るまで陝西地域で定着していたことは「宋西北辺境軍政文書」から明らかであり、このような将兵制が軍備の再建にも大きく寄与したと考えられるのである。本年度は、「宋西北辺境軍政文書」109件の分類・整理作業を行った。特に、その際に指標の一つとした文書書式に関しては、大きく状式・牒式・箚付の3つに分類されることが確認された。また、これらの書式の機能および文書の授受関係の分析により、「〓延路第七将」と周辺の諸機関との関係を検討し、当時の西北辺地域の統治体制が「州-県」という民政系統と「将-堡寨」という軍事系統がパラレルに並ぶ構造であり、その双方を経略安撫使が管轄するものであったことを見出した。さらに、1126年に北宋の首都・開封が金軍により陥落した後に、その救援のために西北辺地域で編制された「御前会合軍馬入援所」に関連する文書を分析した。この作業により、西北辺地域が北宋滅亡および南宋成立の後にも軍事力を保ち続けており、華北を占拠した金軍に対して徹底抗戦の意思を持っていたことが明らかとなった。両宋交代・宋金交代期における重要な事実である。2010年2月19日3月1日にかけて、ロシア・サンクトペテルブルクのロシア科学アカデミー東方文献研究所において、「宋西北辺境軍政文書」の実見調査を行うことができた。この調査により、従来は判読されていなかった印文の判読や、知られていなかった裏面の押印の確認などの成果をあげることができた。さらに現在は実見調査に基づき、孫継民『俄蔵黒水城所出《宋西北辺境軍政文書》整理与研究』(中華書局、2009年3月)で公開された全文書の録文の修正作業に取り組んでいる。本年度は前年度の成果を承け、「宋西北辺境軍政文書」(以下、「文書」)中の「御前会合軍馬入援所」(以下、「入援所」)関連文書の分析を行った。この「入援所」関連文書には赦書の内容が一部引用されているものがあり、その内容は『三朝北盟会編』所載の建炎元年(1127年)五月一日に降された赦書すなわち高宗即位時の赦書と一致する。また、文書に引用されているのは金軍により潰滅・離散した兵士たちを招集して軍容を建て直すための処置に関することである。そしてこの文書は「建炎元年五月」の日付を持つ別の文書と繋がる可能性が高いことも判明した。以上から窺えるのは、金軍による靖康の変・北宋滅亡の後、陜西地域はなし崩し的に金(あるいは金軍に呼応した西夏)の支配下に入ったのではなく軍事体制を建て直して「抵抗」を試みたこと、南宋政府成立の情報が迅速に陜西地域に伝えられ、密に連絡をとりつつ金軍に対処しようとしていたことなどである。従来、北宋滅亡から南宋成立とその後の宋金関係については、金軍の経略過程、南宋政権内部の権力闘争や岳飛などいわゆる「四大武将」の活躍、宋金和議交渉などに焦点があり、華北については金軍の侵攻にどのように対処し,情勢がどのように推移したのかなどについてはほとんど考えられてこなかった。しかし、北宋期以来、陜西地域が最大の軍事力を有していたことや、金の勃興以後ユーラシア東部地域に新たに形成された金・南宋・西夏の鼎立状況の中で陜西地域をめぐる角逐があったことなどに鑑みれば、当該時期の陜西地域の情勢を明らかにし,それがどのような意義を持つのか検討する必要がある。「文書」中の「入援所」関連文書やそこに見える赦書の分析をより深めることで,それらが可能となるのである。なお、2011年2月13日2月20日に,サンクトペテルブルク・ロシア科学アカデミー東方文献研究所にて「文書」の実見調査を行った。

まず、北宋の神宗期に将兵制が成立するまでの過程や背景を、対外情勢との関連に着目して検討した。北宋の将兵制は、決して画一的・均質的に成立したのではなく、陝西地域・河北地域8東南諸路のそれぞれで対峙する勢力への姿勢に応じた背景や過程をもって成立したことが明らかとなり、とりわけ、西夏と対峙して軍事衝突が頻発していた陝西地域は、北宋における軍事的な先進地域となり、その情勢は将兵制成立に見られる如く河北・東南地域にも影響を与えたことを確認した。このような軍事政策の観点に立てば、陝西地域は当時の国際情勢における「結節点」であったと言える。次に、黒水城遺趾から出土した「宋西北辺境軍政文書」中の「赦書」の語が見える109-28文書・109-98文書を手がかりに、南宋成立直後における中央政府と陝西地域の動向ならびに双方の動向を検討した。それにより、北宋から南宋への移行期に、金軍の侵攻に対して陝西地域は領域を維持し、建炎四年まで頑強に抵抗し続けていた。それを可能にしたのが、南宋成立直後における中央政府との連絡の復活であり、赦書という皇帝の"お墨付ぎ"を背景にした軍備再建であったのである。神宗期に成立した将兵制が、北宋末期から南宋初期に至るまで陝西地域で定着していたことは「宋西北辺境軍政文書」から明らかであり、このような将兵制が軍備の再建にも大きく寄与したと考えられるのである。
撮影方向・画角の超高速制御が可能なパラメトリックカメラの研究

カメラとは飛来する光線の強度を方向ごとに計測する装置である。通常のカメラではレンズの作用によって各画素と光線方向との対応付けがなされており、撮像素子上の全画素を狭い角度範囲の光線に集中的に割り当てるものが望遠レンズ、広い角度範囲の光線に割り当てるものが広角レンズと言える。また撮影範囲の中心方向は通常レンズの光軸方向に固定である。この撮像素子上の各画素の光線方向への割り当てを動的に制御することで、画角と撮影方向の制御が実現される。