hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
家族が用いる認知症早期発見のための展望的記憶評価ツールの開発

本研究は,認知症の早期発見を目指し家族等が使用可能な簡便な評価ツールを検討することを目的に,地域在住の認知症の可能性のない高齢者1560人を対象に日常記憶チェックリストについて調査した。その結果,地域在住高齢者の日常記憶チェックリストの回答分布,平均値等から先行研究を支持する結果が得られ,さらに他者評価との高い相関も得ることができ,高齢者自身及び家族による評価での使用可能性を確認することができた。本研究は,高齢者の日常生活における展望記憶に視点を当てることで,日常生活について把握している家族や身近な者が便用可能な信頼性・妥当性の高い認知症早期発見のための尺度の開発を目的としている。そこで,本研究は,主に以下の内容・手順で開始したところである。平成20年度は,研究開始年度であることから,調査対象の検討とその確保から開始した。地域の高齢化率を検討した結果,N市における平均的な高齢化率であるM区の内,商工地域,住宅地域,文教地域等を考慮し,3区域を対象地域とすることとした。続いて,そこに居住する65歳以上75歳未満の高齢者夫婦(いずれも)916組を選挙人名簿から選定した。調査票は,「生活記憶チェックリスト(EMC)」評価13項目を基本に,夫婦個々人に基本属性はもとより,時計描写テスト,食事,排泄,入浴などのADL項目の自立度,手段的自立度,社会活動などで構成されている老研式活動能力指標,趣味や社会活動の日々の実施状況,外出や交流の頻度,合わせて認知症に対する知識,認識,考え等についても把握した。ただし,調査に関して,2年後の継続調査の趣旨を説明し,ID番号の付与ならびに夫婦ペアで調査に承諾した者が回答するよう,個人情報のほど等も合わせて説明し調査への回答依頼を行うこととした。調査票は2週間の留め置き後,郵送にて返送を依頼した。その結果,58%の回収率を得ることができた。た。今後,順次調査票の集計を進めていく予定である。本研究は、高齢者の日常生活における記憶(主に展望記憶)に視点を当てることで,日常生活について把握している家族や身近な者が使用可能な信頼性・妥当性の高い認知症早期発見のための尺度の開発を目的としている。そこで,本研究は,主に以下の内容・手順で開始した。平成21年度は,平成20年度に実施したデータを分析することを中心に行った。A県B市の選挙人名簿抄本より,65歳以上75歳未満の前期高齢者1560人を無作為抽出し,基本属性,「生活記憶チェックリスト(Everyday Memory_Checklist: EMC)(39点)」,主観的健康感(5段階),老研式活動能力指標等を把握した。有効回答率は89.2%(815人)であった。対象者は,男性320人(39.3%),女性495人(60.7%)で,平均年齢は70.0±2.8歳であった。EMC項目の得点分布は,0点から27点の範囲であり,平均点は男性7.9±5.0点,女性7.3±4.4点で性差による違いはみられなかった。しかし,EMC得点と各要因との相関をみたところ,GDS5(r=.21,p<.01)と有意差がみられ,年齢,手段的ADL,社会的役割,知的能動性にも弱い相関が認められた。一方,最終学歴,主観的健康感とは有意差がみられなかった。以上から,地域在住の前期高齢者における日常生活に関する記憶は,年齢と相関があり年齢が高くなるほど主観的な記憶力は低下するという結果であった。さらに,記憶力低下と抑うつとの関連が認められ,初期の認知症やMCIのある者に抑うつの存在が指摘されているがその結果を支持するものであった。しかし,ほぼ平均年齢が同じ先行研究の結果に比べ,本研究の対象者の記憶力は高いという結果であった。以上から,EMCと関連した年齢や抑うつ,さらに本調査の高い得点傾向など,今後さらに新たなデータを収集し詳細に検討していきたいと考えている。本研究は,高齢者の日常生活における記憶の変化から,家族や身近な者が使用可能な信頼性・妥当性の高い認知症早期発見のための尺度の開発を目的としている。平成22年度は,平成20年度に実施したデータの回答者に対して追跡調査を実施した。平成20年度の調査対象者であるA県B市の選挙人名簿抄本より無作為抽出された65歳以上75歳未満の前期高齢者1560人の内,有効回答が得られた815人からさらに転居,病弱,死亡等を除いた724人に対して追跡調査を実施した。調査項目は20年度実施した本人による「生活記憶チェックリスト(Everyday Memory Checklist : EMC)(39点)」に加え,配偶者による他者評価のEMC調査も併せて実施した。回収数は604人(82.0%)であった。

内訳として,男性297人(49.2%),女性307人(50.8%)で,平均年齢は71.15±3.69歳であった。EMC項目得点の自己評価の平均点は男性8.38±6.38点,女性7.06±4.40点で性差が見られた(p<0.01)。また,男性に対する妻によるEMCの他者評価は,7.66±6.75点で,夫自身の自己評価EMCより肯定的に評価しているものの有意差は見られなかった。女性では夫による他者評価EMCは7.01±5.74であり,本人評価との差は認められなかった。さらに,平成20年度及び22年度ともにEMC得点が得られた477人の変化を比較したところ,男性(240人)では,20年度8.18±5.94が22年度8.26±5.96であり,女性(237人)では20年度7.43±±4.20が22年度は7.09±4.50であり,いずれも有意差がみられなかった。今後,さらにデータを詳細に分析し,脱落者との関係などからEMCの意義について考察を深める予定である。
実行時並列化によるノイマンコンピュ-タの高速化に関する研究

今年度の研究によって得られたものは次のとおりである。PNプログラムはプログラムの基本ブロックと基本ブロックとのリンクにより成り立っている。基本ブロックとは分岐関連命令を含まないプログラムブロックのことである。基本ブロックは通常その最後に条件分岐命令が入るので、これらを何段階も飛び越えて効率よくリンクすることはかなり複雑になることが明らかになった。しかしながら、ほとんどのプログラムは一段階のリンクで済ますことができると考えられるので、この深さを1と考えてPNコンピュ-タのハ-ドウェアを構成した。また、PNコンピュ-タは計算命令流、転送命令流、分岐命令流の3個の処理の流れが並列に流れる並列計算機になっているが、条件分岐の条件設定とそれぞれの流れの分岐の実行を分岐命令流のみで行うのがよいか、それぞれの流れの中で行うのがよいかが不明であった。これに関して研究を続けた結果、これらは実行する問題の種類によってその実行効率が違うので、簡単に結論が出せないことがあきらかになり、そのため、問題の種類に関係の薄い新分岐方式を提案した。命令体系については、根本的に変更が必要な命令は見つからず、小変更の必要性があるもののほぼ現在の命令体系で十分であることが明らかになった。メモリやレジスタの競合やマルチボ-ドの度合については、現構成よりも簡単にすることが出来ることが明らかになった。しかしながら、PNコンピュ-タを本当に実用的なより高速なコンピュ-タにするためには、パイプライン処理やキャッシュメモリの導入が不可欠のことと思われる。これらの研究は今後の課題である。
栄養代謝調節因子Ｆｏｘｏ１が制御する膵ベータ細胞機能と寿命、糖代謝の統合的研究

FoxO1遺伝子欠損膵ベータ細胞株を得る目的で、FoxO1 flox/floxマウスとIT6マウスを交配し、その膵腫瘍からFoxO1-flox-MIN6細胞を得た。この細胞にCre発現アデノウイルスを投与し、FoxO1遺伝子欠損膵ベータ細胞株(FoxO1-KO-MIN6細胞)を得ることに成功した。この細胞を用いて、遺伝子の網羅的検討を行い、膵ベータ細胞でFoxo1が制御する遺伝子群の単離を行った。Foxo1は膵ベータ細胞の機能維持に関与すると考えられ、これらの遺伝子群の解析は新たな糖尿病治療の開発に貢献すると考えられる。平成24年度はFoxo1 KO MIN6細胞の解析を中心に行った。Foxo1 flox/floxマウスと膵ベータ細胞特異的にSV40T抗原を発現するIT6トランスジェニックマウスとの交配により、Foxo1 flox/flox膵ベータ細胞株を得た。この細胞にCre発現アデノウイルスベクターを感染させることにより、Foxo1 KO MIN6細胞を得た。Foxo1 KO MIN6細胞細胞は高グルコース負荷時におけるインスリン分泌反応が亢進しており、細胞増殖が強く、また、アポトーシスを起こしている細胞数が有意に多かった。Foxo1は転写因子であることから、そのtarget遺伝子がこれらの表現型を制御している可能性がある。そこで、Foxo1が制御する遺伝子群を網羅的に解析するため、Foxo1 KO MIN6細胞に対して、AdVベクターにてconstitutive activeのFoxo1遺伝子を導入したものとEGFP遺伝子を導入したものの間で、遺伝子発現パターンを比較検討した。その結果、種々の遺伝子が単離され、このことをGenes Cells 17: 758-67, 2012で報告した。in vivoのFoxo1 KOマウスの解析については、このマウスの遺伝的背景を均一にするべくC57BL/6マウスに戻し交配を行っているが、Foxo1 flox/floxマウスは産児数が少なく、まだ十分なマウスの数を得られず、本年度は解析を行えなかった。Foxo1は細胞の栄養代謝状態を制御し、糖代謝のみならずストレス応答、寿命にも関与している。一方、代謝制御には液性因子としてインスリンが重要な役割を果たしている。そこで本研究では、栄養状態などの外的要因がFoxo1制御下のインスリン分泌機構を介し、どのように糖代謝やストレス応答、寿命に関与するかを解明する目的で、膵ベータ細胞特異的Foxo1ノックアウトマウスと当該マウスから得た膵ベータ細胞株を用いて分子レベルでの解析を行なう。本研究は栄養状態を分子レベルでとらえる統合的な代謝栄養学の進展に寄与するものと考えられる。また、Foxo1下流経路の解明は新たな糖尿病薬の創薬にも多大に貢献し、社会への還元が期待できる。平成24年度は転写因子foxo1の制御因子を検討する目的でDNAarrayを行った。当初、foxo1-flox-MIN6細胞を用いてadeno-creを導入したものと、コントロールとしてadeno-egfpを導入してものの間で検討を行ったが、発現量の差が十分でなかったため、Creにてfoxo1ノックアウトを行ったMIN6細胞に対して、Adeno-constitutive active-foxo1を導入したものと、adeno-egfpを導入したのの間で検討を行った。その結果、β細胞の傷害を引き起こすNr4a1遺伝子がfoxo1で抑制されることがわかった。このことから、foxo1は膵β細胞に対して、Nr4a1がコードするNur77を介して細胞保護を行っている可能性が考えられた。そこで本研究では、栄養状態などの外的要因がFoxo1制御下のインスリン分泌機構を介し、どのように糖代謝やストレス応答、寿命に関与するかを解明する目的で、膵ベータ細胞特異的Foxo1ノックアウトマウスと当該マウスから得た膵ベータ細胞株を用いて分子レベルでの解析を行う。平成23年度はFoxo1遺伝子座をfloxではさむ形のtargeting vectorを作成し、定法を用いてFoxo1 flox/floxマウスを得た。膵ベータ細胞特異的にFoxo

1遺伝子を欠損させる目的でRIP-CreERマウスと交配し、Foxo1-KOマウスとし、Foxo1-flox/wtマウスをコントロールとし、Tamoxifen投与前後で各種インスリン分泌刺激試験を行い耐糖能の検討を行った。その結果、有意ではないが、また、KOマウスの耐糖能はflox/wtマウスに比し、より良い傾向が認められ、Foxo1遺伝子がインスリン分泌を負に制御している可能性が示唆された。また、この傾向を顕著する目的で高脂肪食負荷も行ったが、有意な差は認められなかった。Foxo1 KO MIN6細胞の解析を行い、論文発表を行うことができたので、研究の進行はおおむね良好であると考えている。Foxo1 floxマウスは、妊娠しにくく、また出産数も少ないことがわかった。詳細に検討したところ、flox/floxにおいても、Foxo1が若干低下傾向にあることが判明した。今回作成した、floxのカセットの挿入部位は、Foxo1蛋白発言に影響を与えないように、3' UTRであるが、mRNAの安定性などに問題がある可能性がある。そこで、平成23年度は、元来、B6バックグラウンドで作成しているflox/floxマウスの遺伝的バックグラウンドをBDF1に変更し、flox/floxマウスのn数を増やすことを試み、解析に供した。BDF1バックグラウンドにしたことで挙児数は増えたが、個体間のばらつきが増えたため、耐糖能に関しても有意さが得られなかったものと考えられる。しかし、Foxo1のin vivoにおける役割をおおよそ類推することが可能であり、平成23年度の目的に達したものと考えている。今後はFoxo1 KO MIN6細胞の解析で得られたFoxo1 target遺伝子とFoxo1 KO MIN6細胞の表現型について検討してゆく。また、Foxo1 KOマウスの解析をC57BL/6にN7-N8ぐらいまで十分に戻し交配を行ってから解析を行う。平成23年度で得られたin vivoの結果を考慮し、in vitroの検討を行う。我々はFoxo1遺伝子欠損膵ベータ細胞株を得る目的で、Foxo1 flox/floxマウスとIT6マウスを交配し、その膵腫瘍からFoxO1-flox-MIN6細胞を得た。この細胞にCre発現アデノウイルスを投与し、Foxo1遺伝子欠損膵ベータ細胞株(FoxO1-KO-MIN6細胞)を得た。この細胞株を用い、グルコース、アルギニン等によるインスリン分泌試験を行う。また、飢餓状態を再現するために、血清除去条件化での培養を行い、インスリン分泌能を評価する。また、resveratrol添加による影響も合わせて検討する。また、Foxo1は種々の外的ストレスに応答することが知られているので、高血糖のストレス、過酸化水素などを用いた酸化ストレス、ThapsigarginなどのERストレスによる影響についても検討を行う。本年度も遺伝子の解析を行うため、遺伝子解析用の試薬の購入や培養細胞維持のための牛胎児血清などの購入する必要がある。また、細胞保管用の冷凍庫を購入する必要もある。
被災後の健康二次被害削減とコミュニティ活性促進のための地域参加型アプローチの開発

本研究は『被災後の健康二次被害削減とコミュニティ活性促進のための地域参加型アプローチ』を開発し、大規模自然災害時における人々の健康生活再建、事前復興、持続可能な地域包括ケアシステムへ活かすことを目的とする。1先行事例や実践活動を基に、被災後のコミュニティおよび住民や関係機関との地域協働に関する取組みについて、コミュニティレジリエンスの概念を基盤として分析し、インタビューガイドを作成する2復興コミュニティ支援へ関わった住民や自治体、関係者へインタビューを行い、研究班でその共通性や多様性の特性を分析・体系化し、アプローチ(案)を作成する3フォーカスグループにて洗練化しアプローチモデルを可視化する。
mRNA輸送障害に基づくTDP-43関連疾患発症機序の解明

筋萎縮性側索硬化症、前頭側頭葉変性症の神経細胞ではRNA結合蛋白質TDP-43の異常沈着がみられる。我々はTDP-43が持つ神経突起へのmRNA輸送機能がその沈着により障害され特定のmRNAの供給不足を通じて同疾患を発症すると考え、TDP-43の輸送標的としてリボソーム蛋白質(Rp)mRNAを同定した。本研究ではRp mRNAが非翻訳領域を介してTDP-43と結合し両者は神経突起内で共局在すること、TDP-43の発現低下により神経突起の伸長が阻害されその際神経突起でのリボソーム機能の低下がみられること、神経突起内へ移入されたRpは内在性リボソームにアセンブリされることを検証した。筋萎縮性側索硬化症(ALS)、前頭側頭葉変性症(FTLD-U)ではRNA結合蛋白質であるTDP-43の細胞質への沈着がみられる。我々はTDP-43が持つ神経突起へのmRNA輸送機能がその沈着により障害され、特定のmRNAの供給不足を通じて同疾患を発症すると考え、神経細胞区画培養法を用いてTDP-43の輸送標的としてリボソーム蛋白質(Rp)mRNAを同定した。この知見をもとに本年度は1TDP-43によるRp mRNAの神経突起への輸送機構の解析、および2TDP-43の機能低下による局所翻訳機能障害と神経変性機構の解析、を行った。1についてはマウス大脳皮質神経細胞においてRp mRNAが神経突起内でTDP-43と共局在して移動すること、TDP-43の発現低下により神経突起内のRp mRNAが減少することを見出した。非翻訳領域の欠失によりRp mRNAのTDP-43との結合は減少するとともにその神経突起内での量も減少し、Rp mRNAの神経突起内への輸送にTDP-43が重要な役割を果たしていることが推測された。2についてはTDP-43の発現低下によりマウス大脳皮質神経細胞の神経突起伸長が阻害されるとともに細胞死が生じることが確認された。その際神経突起でのRp蛋白質量の減少がみられるとともに局所蛋白質合成能の低下がみられ、神経突起におけるリボソームの機能障害が起こっていることが示唆された。この知見をもとに本年度は1神経突起内に存在するRpの内在性リボソームへのアセンブリの有無、2神経細胞特異的TDP-43欠損マウスの大脳白質におけるRp mRNA量低下の有無、につき検討を行った。1についてはTAT配列を付加したRpを合成して区画培養したマウス大脳皮質神経細胞の軸索側に加えて観察した。その結果TAT配列のみでは軸索への取り込みはみられなかったが、TAT-Rpは軸索へ取り込まれて内在するリボソームと共局在した。2についてはTDP-43ホモ欠損マウスの大脳白質をレーザーマイクロダイセクションにより採取し、RNAを抽出して定量的PCRを行い対照マウスと比較した。その結果ホモ欠損マウスの大脳白質ではRp mRNA量の低下傾向がみられた。この知見をもとに本年度は1神経細胞特異的TDP-43欠損マウス由来の培養大脳皮質神経細胞における神経突起の形態や局所蛋白質合成能の変化の有無、および2ALS患者剖検組織におけるRp mRNA量減少の有無、の解析を行った。1については神経細胞特異的TDP-43ホモ欠損マウス由来の大脳皮質神経細胞は対照マウス由来の神経細胞と比較して神経突起の伸長が不良であった。また神経細胞特異的TDP-43ホモ欠損マウス由来の大脳皮質神経細胞では対照マウスに比し神経突起でのリボソームによる蛋白質合成能が低下していた。2についてはALS患者7例、対照例2例の大脳運動野白質を用いてRp mRNAの定量を行い、ALS患者群では対照群に比し複数のRp mRNA量が減少する傾向が見られた。

TDP-43により神経突起へ輸送されるRp mRNAがそこでのリボソーム機能の維持に直接関わる可能性が培養神経細胞で示されているとともに、マウスの大脳白質においてもTDP-43によりRp mRNAが輸送されることが示唆され、in vitroからin vivoまで一貫性のある研究成果が得られつつある。神経内科学既に解析を行っている神経特異的TDP-43欠損マウスを用いてさらに詳細な解析を進めるとともに、TDP-43 miRNAを発現するアデノウイルスベクター、子宮内電気穿孔法等を用いたマウス脳内でのTDP-43発現低下により、in vivoでのTDP-43の神経突起内Rp mRNA輸送機能の生理的な意義につき多方面からの検討を行っていく。Rp mRNAが非翻訳領域を介してTDP-43と結合し神経突起へ輸送されていることが明らかにされるとともに、TDP-43の発現低下に伴って神経突起でのRp mRNAの供給不足によるリボソーム機能の障害が生じることが見出され、本研究の目的であるTDP-43による神経突起への輸送標的としてのRp mRNAの生理的意義をほぼ順調に示すことができていると考えられる。昨年度、本年度の実験が当初予定よりもやや少ない量の試薬で遂行できたため。本年度にマウス大脳皮質神経培養細胞を用いて示したRp mRNAのTDP-43による神経突起への輸送につき、その分子機構および神経突起での局所蛋白質合成機能への影響および神経細胞機能との関連につき、今後さらに詳細な解析を進める。合わせてすでに入手している神経細胞特異的TDP-43欠損マウスを用いて神経突起でのRp mRNAの輸送と機能につき、in vivoでも同様にみられるかを検証する方針である。次年度に用いる試薬の必要量の増大が見込まれるため、次年度の物品費に組み入れる予定である。本年度の実験が当初予定よりもやや少ない量の試薬で遂行できたため。
底生微細藻類の浅海域物質循環に果たす役割の解明と環境保全への応用

本研究では,底生微細藻類の働きがバクテリア群集および浅海域堆積有機物に及ぼす影響について検討した.脂肪酸とその安定同位体比を用いて食物連鎖を解析したところ,底生微細藻類の光合成は脂肪酸のうち難分解成分である長鎖脂肪酸の分解を促進させることが確認された.長鎖脂肪酸は比較的難分解性である陸上植物のバイオマーカーであり,底生微細藻類の光合成によって分解成分の分解が促進され,微生物ループを介した腐食連鎖の強化がもたらされることがわかった.本研究では,底生微細藻類の働きがバクテリア群集および浅海域堆積有機物に及ぼす影響について検討した.脂肪酸とその安定同位体比を用いて食物連鎖を解析したところ,底生微細藻類の光合成は脂肪酸のうち難分解成分である長鎖脂肪酸の分解を促進させることが確認された.長鎖脂肪酸は比較的難分解性である陸上植物のバイオマーカーであり,底生微細藻類の光合成によって分解成分の分解が促進され,微生物ループを介した腐食連鎖の強化がもたらされることがわかった.底生微細藻類は干潟における主要な一次生産者である一方,底質にO_2や細胞外高分子物質(EPS)を供給し,分解者であるバクテリアを活性化させることによって有機物の分解を促進させる役割も担っていると考えられている.既往の研究のなかで干潟メソコスム実験系において非遮光系では遮光系と比較して有機物の蓄積が抑制されたという報告もあり,底生藻類の代謝が微生物群集の呼吸活性を増大させ,それによる有機物分解が藻類の有機物生産よりも卓越したためと考察されている.そこで本研究では干潟生態系において底生微細藻類が有機物の生産と分解のバランスに作用するプロセスと,その結果堆積有機物収支に与える影響について検討し,以下のような結論を得た。・底生微細藻類の光合成がバクテリアの有機物分解活性に与える影響は,底質へのO_2供給によるものではない.・干潟においては砂質,砂泥質,泥質といった底質性状で区別できる場所に関わらず,光合成によって生産された有機物はバクテリアによって生産速度とほぼ同じ速度で分解される.・干潟底質中の有機物の大部分が難分解性であり,それらの有機物はDOを供給しただけでは分解されない.・干潟底質中の生態系において,底生微細藻類が生産した有機物はバクテリア活性の制限要因となる資化分解基質であり,底生微細藻類の生産量が大きくなるとそれにともなって分解量も大きくなるため,結果的に有機物収支に影響が現れない.・底生微細藻類の光合成があることでバクテリア活性が高く保たれ,外来性有機物の分解が促進される.本研究では、干潟堆積有機物の分解過程におけるバクテリアの炭素、窒素安定同位体比を分析することで、バクテリアが同化している有機物起源を推定した。あわせて分解過程における堆積有機物の脂肪酸組成の経時変化を分析することで、どの生物に由来する有機物を分解しているかを明らかにし、干潟に堆積する有機物の分解特性を考察した。堆積有機物および食物源候補である陸上植物、海洋粒状有機物、河川粒状有機物および底生微小藻類は、蒲生干潟および七北田川河口より採取した。安定同位対比により陸上植物(δ13C=-26.6、δ15N=3.6)および河川粒状有機物(δ13C=-25.5、δ15N=8.9)は、底生微小藻類(δ13C=-16.3、δ15N=6.2)および海洋粒状有機物(δ13C=-20.3、δ15N=10.3)と明確に区別できた。干潟堆積物をアクリル製コアーサンプラーによって採取し、そのコアーを押し上げて表層堆積物0.5cmを採取し実験室に持ち帰った。そして、採集した堆積物を全て混合しシャーレ(直径10cm×高さ1cm)に高さ0.5cmまで入れて暗室で分解実験を行った。50日間の堆積有機物の分解実験において、堆積有機物のδ13C値は-19.1 ‰から20.7 ‰に減少した。この理由はバクテリアがより高いδ13Cを有する有機物、すなわち底生微小藻類および海洋粒状有機物を優先的に利用するためと考えられた。また脂肪酸をバイオマーカとした解析から陸上植物および河川粒状有機物は、底生微小藻類および海洋粒状有機物の分解が進行した後に分解し始めることが明らかとなった。本研究では,脂肪酸-安定同位体比分析というツールを用いて,底生微細藻類のはたらきが干潟に生息するバクテリア群集に与える影響,さらに,それが底質環境に与える影響について検討した.七北田川河口干潟から底質の表層5mmを採取し,現地水も合わせて採取し持ち帰った.実験室で内径105mm×高さ25mmのシャーレーに堆積物の深さが5mm程度,現地水を堆積物の直上5mmとなるように注入し,これを培養試料とした.そして明培養系では培養期間中照度5,000luxの光を照射し続けた.暗培養系ではシャーレ周囲をアルミ箔で覆って遮光した.温度を20±1°Cに保ちて48日間の培養を行い,所定に培養期間で底質試料を回収し,TOC,クロロフィルa,脂肪酸組成,脂肪酸-安定同位体比を測定した.明培養系(底生微細藻類の生育する系)

・暗培養系(底生微細藻類の生育しない系)の有機物フローを全有機炭素TOCの動態からまとめると、まず干潟デトリタスの大部分は難分解性でありほとんど分解されないこと、よって暗培養系における有機物フローの経路は底生微細藻類からバクテリアへ向かう流れのみであること、底生微細藻類の光合成は干潟デトリタスの分解にほとんど影響を及ぼさないことがわかった。しかし、脂肪酸動態の結果より,底質中にわずかに含まれる比較的難分解有機物である長鎖脂肪酸LCFAsは底生微細藻類の光合成により分解が促進されること、また,脂肪酸-安定同位体比の結果よりLCFAsの分解が促進された結果,LCFAs由来のCO_2が放出され,それを底生微細藻類が光合成に利用するという新たな炭素循環が生じていることがわかった.すなわち,明培養系においては底生微細藻類が光合成を行い,微生物ループが駆動されることによってバクテリアによる無機化が促進されることで物質循環が活性化した生態系が形成されていると考えられた.
性分化異常および精巣機能異常の分子生物学的診断に関する基礎的および臨床的研究

1.AZFのcloningY染色体特異的DNAprobeを用い、男性不妊症患者の遺伝子分析を行い、微小なY染色体DNAの欠失部分を同定した。更にchromosomal walkingなどの分子生物学的手法を用いcioning中で、現在yzll.23の区間のかなり狭い領域まで絞りこまれている。2.性分化異常および精巣機能異常症例の末梢リンパ球遺伝子分析完全型精巣性女性化症4例でhAR遺伝子のexonB.C.D.Hにそれぞれ1塩基の突然変異を認めた。35例の特発性男性不妊症例中3例でexonB.C.Dにおける1塩基の突然変異を認めた。また、AZFの分析では65症例の特発性男性不妊症例中12例でAZFの欠失を認めた。3.精巣機能異常症例組織での遺伝子発現の分析停留精巣患者、特発性男性不妊症患者より生検にて得た精巣組織について、AR.FSH-R.inhibinの発現をNorthern biotで検討した。停留精巣では正常精巣よりAR.FSH-Rは有意に減少しており、inhibinは増加傾向があった。一部の特発性不妊精巣ではAR.FSH-Rの減少を認め、男性不妊症の原因として、これらの異常の存在が示唆された。以上の研究成果により、性分化異常の病態がかなり解明された。また特発性男性不妊症という従来原因不明とされてきた疾患の原因の一部が解明された。性分化異常や男性不妊症をはじめとする精巣機能異常の病態を解明するため,以下の検討を行なった。Y染色体長腕に存在すると推測されていた精子形成関連遺伝子AZFのcloningはほぼ完了し、現在塩基配列を決定中である.2.性分化異常および精巣機能異常症例の末梢リンパ球遺伝子分析XXmale等の性分化異常症例でSRY遺伝子の有無をPCR法で検討,複雑な病態を示した性分化異常症例も正確に診断しえた。また精巣性女性化症および男性不妊症患者のAR遺伝子の異常の有無をPCR-SSCP法にて検討、精巣性女性化症4例全例の点突然変異を検出した.また20例の特発性男性不妊症中2例でもAR遺伝子の点突然変異を発見した.3.精巣機能異常症例精巣組織での遺伝子発現の分析特発性男性不妊症患者より得た生検精巣組織中のFSH mRNA,AR mRNAの発現を検討し,FSH mRNA,AR mRNAの発現を認められない症例をそれぞれ数例認めた.1.AZFのcloningY染色体特異的DNAprobeを用い、男性不妊症患者の遺伝子分析を行い、微小なY染色体DNAの欠失部分を同定した。更にchromosomal walkingなどの分子生物学的手法を用いcloning中で、現在Yg11.23の区間のかなり狭い領域まで絞りこまれている。2.性分化異常および精巣機能異常症例の末梢リンパ球遺伝子分析完全型精巣性女性化症および特発性男性不妊症の一部の症例の末梢血より得られたDNAを分離し、hAR遺伝子を分け、PCR法にて遺伝子塩基配列の異常の有無を検討した。完全型精巣性女性化症例ではexon B,C,D,Hにそれぞれ1塩基の突然変異を認めた。35例の特発性男性不妊症例中3例でexon B,C,Dにおける1塩基の突然変異を認めた。3.精巣機能異常症例精巣組織での遺伝子発現の分析停留精巣患者、特発性男性不妊症患者より生検にて得た精巣組織について、AR,FSH-R,inhibinの発現をNorthern blotで検討した。停留精巣ではAR,FSH-Rは正常精巣より有意に減少しており、inhibinは増加傾向があった。一部の時発性不妊精巣ではAR,FSH-Rの減少を認め、男性不妊症の原因をして、これらの異常の存在が示唆された。
細胞運動時の極性形成におけるARFの役割

細胞運動は、我々の身体の至る所で見られ、それらは厳密にコントロールされており、一旦、異常が起こると、我々の身体に重篤な障害をもたらす。このように、細胞運動は、重要な生命現象であり、その仕組みが明らかになれば、病気の治療や解明といった様々な恩恵を我々は得ることができると期待される。近年の研究によって、細胞の移動の仕組みは明らかになりつつあるものの、移動の前段階である極性形成については、不明な点が多い。本研究では、この点に注目し、免疫細胞の一つである好中球の細胞に関与する分子を調べた。その結果、細胞内輸送に関与するGBF1が、好中球の細胞運動に極めて重要な役割を果たしていることが明らかとなった。細胞運動は、様々な生命活動で観察される現象であり、その分子メカニズムを明らかにすることは、形態形成過程や免疫応答などの正常な生命活動に加え、癌細胞の浸潤過程など様々な病気の過程を理解するうえでも重要であると考えられる。外界から刺激があると、細胞は刺激の方向を認識し、刺激の方向に移動できるように形態を変化させ、前後の極性を形成し、移動を開始する。この際、細胞内では、シグナル伝達、細胞骨格の再編、細胞内輸送、膜の再編など様々な変化が起こるが、これらの変化は協調的かつ統合的に起こっていると考えられている。近年、我々は、細胞内輸送に関わることが知られている低分子量Gタンパク質ARFに対するGAPの一つであるGIT2に注目し、研究を行ってきた。その結果、GIT2が、好中球の細胞運動に重要な働きをしていることを見出した。そこで本研究では、GIT2の上流分子であるARFに注目し、細胞運動時の極性形成におけるARFの役割を調べると共に、その際のARFの制御機構を明らかにすることで、細胞運動の分子メカニズムの解明に貢献したいと考えている。本年度は、HL-60細胞を好中球様に分化させた細胞を用い、走化性に関与するARGEFの同定を試みた。ヒトには16種類のARF GEFが存在するが、HL-60細胞を好中球様に分化させた細胞では、その内の10種類のmRNAが検出された。発現が認められた10種類各々のsiRNAを用い、fMLPに対する走化性を調べた。その結果、複数のsiRNAにおいてfMLPに対する走化性の減少が認められたが、特に、GBF1に対するsiRNAによって走化性が著しく減少した。この際、細胞内では、シグナル伝達、細胞骨格の再編、細胞内輸送、膜の再編など様々な変化が起こるが、これらの変化は協調的かっ統合的に起こっていると考えられている。昨年度の研究によって、我々は、好中球様に分化させたHL-60細胞において、ARFに対するGEFの一つであるGBF1が、細胞運動に重要な役割を果たしているという結果を得た。そこで、本年度は、GBF1に注目し、研究を行った。その結果、GBF1の発現をsiRNAによって抑えると、fMLPの刺激によるARF1の活性化が抑えられること、さらに、GBF1の局在が、fMLPの刺激による細胞運動の際に、細胞の前端部分に移行するが明らかになった。このようにGBF1は、ARF1を介して、好中球様に分化させたHL-60細胞の細胞運動に関わっていると考えられる。
建築CADのための建築形態記述言語に関する研究

近年コンピュ-タを活用した設計支援が検討されているが、建築設計の固有の問題に対処し設計者のイメ-ジにあったCADシステムが確立されるには至っていない。本研究では、設計者のイメ-ジに対応した建築形態記述言語を開発することを目的としている。このため(1)建築専門書に表れる建築形態を記述する用語を収集するとともに、(2)代表的な建築作品をどのように記述するか、また、記述された言語表現からどれだけ元の作品が復元できるかという実験を試み、建築形態記述言語に必要な基本条件を整理した。上記の基本条件を満たす基本モデルを提案し、これをコンピュ-タ上で作動させる建築形態記述言語システム(CONSTRUCTOR-I)を作成し、実用上の問題を検討した。さらに、これを改良し、設計者にとって「わかりやすい」「使いやすい」システムとするため、人工知能言語を活用した建築形態記述言語システム(CONSTRUCTOR-II)を作成した。このシステムの具体的な利用を通じて、建築形態記述言語としての基本条件を満足することを確認するとともに、設計者が記述をしなくとも、建築形態が(1)建築の常識として決まってくる場合や(2)不完全な記述でも他の人間には類推して理解できる場合があり、このような状況での記述を可能とすることが、建築形態記述言語システムの補助機能として必要なことが判明した。前者の代表的な場合として、とくに指定せずとも、架構性をもった建築形態として理解されるがあり、この架構性の概念に対応する補助システムを作成し、その有効性を検証した。また、後者の類推できる能力をコンピュ-タシステム上で実現する相関類推法を提案し、その理論的根拠と実用性を検証した。1.建築用語収集建築形態を記述する際に用いられる用語を,建築専門の辞典より収集し,分類を試みた,結果としては, (1)「天端」など部材の形状表現のための用語,(2)「心々」「内法」など部材間の位置関係を記述するための用語,(3)「モジュール」「基準線」などいわゆるレファレンス・システムの関する補助的用語が用いられていることが判明した.2.コンピュータ・グラフィクス標準仕様との接続可能性開発を目指している建築形態記述言語での表現が,現在普及しつつあるコンピュータ・グラフィクス標準仕様の命令言語に翻訳可能とするための検討を行なったが,現段階では標準仕様自体の変異が頻繁であることから,下記の作業と並行し具体的にプログラムを作り,画像装置上で画像出力が可能であることを確認した.3.建築形態記述言語の仕様の整理とプログラム化すでに骨子が作られている記述言語「CONSTRUCTOR」に基づき木造小住宅の小屋組の形態を記述するシステムを具体的に作成し,実用上の問題点を検討した.その結果, (1)設計者の使用する言葉を処理するためにはLisp,Prologなどの文字処理用計算機言語との翻訳可能性を保つ必要であること.(2)(1)部材の寸法,(2)部材間の位置関係,(3)部材の階層関係,(4)レテァレンス・システム,(5)部材の同一性・類似性の各々を記述するための述語が最低限必要ゐあること,(3)設計途中での変異に対応するため,(a)比較的変異の少ない部材間のトポロジー的関係の情報と(b)変異の多い寸法の情報を区別して記憶させることが有効であることなどが判明した.近年コンピュ-タを活用した設計支援が検討されているが、建築設計の固有の問題に対処し設計者のイメ-ジにあったCADシステムが確立されるには至っていない。I.建築物の形状事例分析1988年度に作られた建築形態記述言語仕様に基づいて、建築形態記述から形態情報へと変換するプログラム「CONSTRUCTOR」を用いて、実際に各種建築物の形状入力を試み、建築形態記述言語仕様の有効性を調査した。

この結果として、(1)形状入力に際して、レファレンス・ライン(柱通り等を表現する補助線)の記述が、形態を記述するために必要であり、建築形態そのものの記述ではない補助表現的な記述のための言語仕様を確定する必要性があること、(2)表現された建築形態記述が、3次元空間に存在するものとして矛盾(ふたつの部材が同一場所を占めること等)していないこと、建築として利用可能であること(人間が移動すること、ドア等が開閉可能なクリァランスがあること等)等の記述の整合性をチェックする機能が必要なこと、(3)ある記述表現から、建築形態上、他の形態記述が相関していることが多く(例えば、ある部材を利用するとその周辺部材は殆ど選択の余地がないことが多い)、記述要素間の「文脈性」を考慮する必要があること、が判明し、仕様およびプログラムの修正の必要性が明らかとなった。II.建築形態記述言語の仕様書作成とプログラム化上述の結果から、建築形態記述言語の仕様の改善とプログラムの修正を試みた。前年度までに作成した建築形態記述言語システム(CONSTRUCTORーII)を用いて、建築設計においてもとくにディテ-ルの記述が煩雑な小屋組の記述を行う実験を繰り返し、設計者にとっての「わかりやすさ」「使いやすさ」の検証を行った。その結果、建築形態記述言語システムが持つべき基本条件を備えていることを確認した。しかし、実際の設計では、設計者間で正確で完全な記述をしていなくとも、他者に誤りなく形態情報が伝達しており、設計者としても、この人間どうしの伝達性を前提とした不完全な記述を利用していることが判明した。とくに、(1)設計者がとくに指定しなくとも、設計されるべき建築が架構性をもった建築形態として理解されること、(2)設計者の曖昧で不完全な記述でも、他者が類推して設計者の意図した建築形態情報を持ちうることが分かった。前者の問題に対応するため、コンピュ-タ内で、設計者の記述から架構性を満足する建築形態として理解し形態情報を決定してゆく方法を提案し、これを具体的なシステムとしてコンピュ-タ上に作成した。また、後者の問題に対応するため、設計者の不完全な記述から完全な建築形態情報を生成する相関類推法を提案し、コンピュ-タ上で動作可能なシステムを作成した。このふたつのシステムを建築形態記述言語システムの補助システムとして作動させることで、実用的な建築形態の記述が設計者のイメ-ジに適合した形で可能となることを示した。
精神分裂病の社会生活技能(social skills)の構造について

本研究の目的は、精神分裂病の患者が社会生活を送る上で障壁となる社会生活技能(Social Skills)の障害について、客観的な評価方法を確立し、障害の原因について解析し、治療方法開発の手がかりを得ることである。具体的には、精神分裂病の受信・処理・送信技能を客観的に評価するロールプレイテスト改訂版の作成と、尺度としての信頼性、妥当性の検討を行い、さらに杜会生活技能を規定する要因について検討した。ロールプレイテスト改訂版では、対象者が日常的に遭遇し臨床上も重要性の高い6場面を新たに選定し、実施方法や評価項目についても改訂を行った。評価基準を作成するために、専門家55名、精神分裂病外来通院患者32名へのアンケート調査を実施した。・改訂版ロールプレイテストは、臨床試験により実用性を備えていると考えられた。・被験者10名、評価者4名で、改訂版ロールプレイテスト13項目の評価者間一致度(ANOVA-ICC)を測定し、実用上問題のない値であった。・被験者36名にロールプレイテストおよびそのほかの臨床評価を行った。ロールプレイテストの因子分析の結果では、総合的スキル(対処能力)因子、スキルの主観的評価因子、場所・相手の認知因子、対処法修正の因子が抽出され、構成概念妥当性が裏付けられた。外的基準として用いた精神障害者杜会生活評価尺度のうちの対人関係尺度(LASMI-I)と、総合的スキルとは有意な相関を認め、基準関連妥当性が裏づけられた。GASとの有意な相関は認めず、今後の検討課題として残された。・総合的スキルと、陰性症状、解体症状、数字の逆唱、トレイルメーキングテストAおよびB、言語流暢性テスト(動物)、創造性思考検査(部分再生に属する回答数)が有意な相関を示し、重回帰分析では解体症状が有意な寄与をしめした。これは認知機能障害の寄与が大きいことを示していると考えられる。以上のように、改訂版ロールプレイテストの実用性・信頼性・妥当性が検証された。残された課題の一つは社会的妥当性ないしはスキルの有効性の評価であろう。本研究の目的:精神分裂病の患者が社会生活を送る上で障壁となる社会生活技能(Social Skills)の障害について、客観的な評価方法を確立し、障害の原因について解析し、治療方法開発の手がかりを得ることである。平成12年度は、「社会生活技能評価尺度」の作成と、国際的な標準版となる尺度としての信頼性、妥当性の検討を行う。平成12年度の研究実施内容:研究代表者である池淵が平成6年に公表したビデオによる評価システム(ロールプレイテスト)は、受信技能及び処理技能の評価が不十分であるために、その改訂版を作成した。*わが国ですでに先駆的な研究のある福島県立医大・神経精神科・神経生理学研究グループ(代表丹羽真一教授)と、慶應義塾大学・精神科・神経心理学研究グループ(代表水野雅文助手)と合同の検討会を3回実施した。*ロールプレイテストの刺激場面については、テストの妥当性や実用性や敏感性を保障するために、これまでの治療経験や文献レビューをもとに、新たに6場面選定した。*受信技能の評価のために、これまでの社会的状況認知テストをもとに、設問項目を作成した。

また処理技能評価については、文献による検討の結果、ロールプレイ場面のほかに、遂行機能評価を目的に、Fluency TestとTrail Making Test,簡便なsecondary memory検査、注意機能評価のために,Letter Cancellation Testを併用することとした。*平成13年度は、完成した改訂版のfield trialを実施し、尺度としての信頼性・妥当性を確立するとともに、そのデータをもとに、精神分裂病の社会的機能の障害の原因について検討し、リハビリテーションの方策を開発する予定である。*分担研究者であるリバーマン教授は、当初平成12年12月79日に来日予定であったが延期となり、あらためて平成13年7月26日29日に来日し、協同研究会を開催する予定が確定している。本研究の目的:精神分裂病の患者が社会生活を送る上で障壁となる社会生活技能(Social Skills)の障害について、客観的な評価方法を確立し、障害の原因について解析し、治療方法開発の手がかりを得ることである。「社会生活技能評価尺度」の作成と尺度としての信頼性、妥当性の検討を行い、また社会生活技能の構造を解析する。前年度の経過:研究代表者である池淵が平成6年に公表したビデオによる評価システム(ロールプレイテスト)の改訂版を作成した。作成は福島県立医大・神経精神科・神経生理学研究グループ(代表丹羽真一教授)と、慶應義塾大学・精神科・神経心理学研究グループ(代表水野雅文助手)と合同で行った。改訂版の特徴としては、a.ロールプレイテストの刺激場面をこれまでの治療経験や文献レビューをもとに、新たに6場面選定した、b.受信技能の評価のために、これまでの社会的状況認知テストをもとに、設問項目を作成した、c.処理技能評価については、ロールプレイ場面のほかに、遂行機能評価を目的に、Fluency TestとTrail Making Testを併用。平成13年度:3大学合同の研究会を5回、海外共同研究者であるリバーマン教授を招いての研究会を平成13年7月26日29日に実施した。平成13年9月に帝京大学医学部付属病院精神科デイケアにおいて分裂病と診断された15名を対象に、完成した改訂版のfield trialを実施した。さらに平成14年3月に福島県立医大及び慶応大学の関連精神病院において同様のfield trialを実施したうえで、全体のデータ解析を行う予定である。またロールプレイテストの刺激場面の臨床的な妥当性を検証するために、3大学のスタッフ60名と通院中の分裂病患者45名を対象にアンケート調査を行い、6場面いずれも日常生活で重要な状況であることが裏づけられた。
GHQ/CIE占領政策期における歴史教育論の類型化に関する研究

第一年目の平成9年度は、研究主題である占領政策期、社会科成立期における歴史教育の類型化に必要な基礎データを収集するため、各研究機関に出向いて所蔵資料の関連項目を調査しし、敗戦直後の教科書作成作業や雑誌等に発表された歴史教育論に絞って収集、複写、整理し、パソコンデータとてしてデータソフト「DBプロ」に整理した。第二年目の平成10年度は、前年度に加えて、1947年1949年にかけての、歴史教育の類型化に必要な史・資料を収集しつつ、歴史教育の各類型が検定教科書へと結実させていく前段階、中等国史教科書編纂委員会による「英文原稿」の詳細な訳出とデータ化を中心に行った。平成11年度は、これまでの研究をふまえ、三つの成果を得ることができた。まず第一に、これまで収集・整理したデータをデータソフトに入力する作業を終えた。第二に、中等国史教科書編纂委員会の委員かが作成にかかわった検定日本史教科書を個々に分析し、戦後歴史教科書の典型的記述の初発時点での特徴を整理した。第三に、これまで未検討であった「文部省著作教科書」について総括的な比較分析を行った。これらの成果は、その都度全国学会で報告し、全国学会誌や大学紀要に発表した。(発表論文名は本書類に記載)継続研究の第一年目にあたる本年度は、資料の収集と整理、データ入力を中心とした研究活動を行った。研究主題となる占領政策期、社会科成立期における歴史教育の類型化に必要な基礎データを収集するため、本年度は、本件研究主題に関連する資料を豊富に所属していると思われる、国会図書館、国立教育研究所、京都大学、広島大学、九州大学に出張し、それぞれの所属資料の関連項目を調節した。今回は、とりわけ、敗戦直後の教科書作成作業や雑誌等に発表された歴史教育論に絞って収集、複写、整理し、パソコンデータとして入力した。パソコンソフトは、当初「桐」を考えていたが、ウインドウズ95対応ソフトであることが望ましいことから、「DBプロ」を使ってデータベースを作成することにした。本年度は、時間の制限もあり、各研究機関に所属されていす関連資料のうち、敗戦直後のものに絞って収集することしかできなかった。次年度以降は、1947年から1950年にかけて、歴史教育の各類型が、それぞれの立場を鮮明にしながら検定教科書へと結実させていく過程、およびその教科書内容についても、資料収集、整理、データ入力を進めながら、さらに研究を深めていきたいと考えている。また、本年度の研究過程で整理した成果は、1997年9月の日本社会科教育学会(宮城教育大学)、同10月の全国社会科教育学会で報告し、1998年3月刊行の鹿児島大学教育がくぶ研究紀要に論文として掲載した。(発表論文名は本書類に記載)継続研究の第二年目にあたる本年度は、第一年目に続く資料の収集と整理、データ入力を中心とした研究活動を行った。前年度に、敗戦直後のものに絞って収集したことに加え、1947年1949年にかけての、歴史教育の類型化に必要な史・資料を収集するため、国会図書館、国立教育研究所、京都大学、立命館大学、広島大学、九州大学等に出張し、それぞれの所蔵資料を調査、収集、複写した。本年度は、1947年から1949年にかけて、歴史教育の各類型が検定教科書へと結実させていく前段階、中等国史教科書編纂委員会による「英文原稿」の詳細な訳出とデータ化を中心に研究を行った。この「英文原稿」については、これまでも他の『日本の成長』(和歌森太郎)や『日本の歴史』(歴研・民科歴史部会)との対照的考察を加えた論考を発表してきたが、今回は、「英文原稿」そのものについて、社会科教育史、社会科的内容、歴史記述内容、の諸点から、本格的に考察することができた。データは、「一太郎8」でテキスト化し、「DBプロ3.2」に整理しているが、ウィンドウズ98対応ソフトへのバージョンアップを計画している。本年度の研究過程で整理した成果は、1999年3月刊行の『戦後教育史研究』第12号(明星大学戦後史研究センター)に論文として、1999年3月刊行の『戦後教育の総合評価』(図書刊行会)に所収論文として掲載した。

最終年度である1999年度は、1950年前後の第一期検定歴史教科書の登場に焦点をあてた作業を行う予定である。本年度は継続研究の最終年度にあたる。第一年目の年度は、研究主題となる占領政策期、社会科成立期における歴史教育の類型化に必要な基礎データを収集するため、各研究機関に出向いて所蔵資料の関連項目を調査しし、敗戦直後の教科書作成作業や雑誌等に発表された歴史教育論に絞って収集、複写、整理し、パソコンデータとして入力した。第二年目の年度は、前年度に加えて、1947年1949年にかけての、歴史教育の類型化に必要な史・資料を収集しつつ、歴史教育の各類型が検定教科書へと結実させていく前段階、中等国史教科書編纂委員会による「英文原稿」の詳細は訳出とデータ化を中心に行った。最終年度である本年度は、これまで収集・整理したデータをデータソフトに入力する作業を終えるとともに、これまで未検討であった「文部省著作教科書」について、改めて総括的な比較分析を行った。このため、本年度も、「文部省著作教科書」関係の文献・資料を収集するため各研究機関に出向いて、調査・収集を行った。その成果は、1999年11月島根大学で開催された全国社会科教育学会において報告した。