hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
アレンから形成されるローダサイクル中間体を利用した効率的な多環式骨格構築法の開発

筆者は、アレンから形成されるローダサイクル中間体を利用した新たな環状骨格構築法の開発を目的として研究を行ってきた。これまでにRh触媒とアレン、アルデヒド及びアルキンを分子内に有する基質を反応させると、アルデヒドとアレン及びRh錯体から形成される7員環ローダサイクル中間体を経由して8員環を含む二環式化合物が生成することを見出し、さらに4-アレナール(4-アレニルアルデヒド)とアルキン間での分子間反応への展開にも成功した。本年は、これらの8員環形成反応の開発途上で見出した、ロジウム触媒による4-アレナールの分子内ヒドロアシル化を不斉反応へと展開した。種々反応条件を検討した結果、触媒量のRh-DTBM-Segphos錯体および4-フルオロベンゾニトリル存在下、ラセミ体の4-アレナールを反応させると、目的の6員環ケトンを最高84%収率かつ95%の不斉収率で得ることに成功した。一般にアレンは、その置換形式により軸不斉を有することから、触媒的不斉反応へと展開された例は非常に少ない。その理由としては、おそらく軸不斉を有するアレンはラセミ体として存在するため、光学活性配位子を持つ遷移金属触媒と反応させると、アレンのエナンチオマーと触媒との組み合わせで速度論分割が起こるためと考えられる。今回筆者が見出した分子内不斉ヒドロアシル化反応では原料を回収することなく良好な収率かつ不斉収率で生成物を与えたことから、詳細は良く分かっていないものの、おそらく反応系中でアレンのエナンチオマー間でのラセミ化の経路が存在し、動的な速度論分割となることで、生成物の一方のエナンチオマーのみが高い収率で得られたものと考えている。この結果は、これまで触媒的不斉反応へと用いられることが少なかったアレンを様々な環化反応へと展開出来る可能性を提示するものであり、有機合成化学上有用なものと考えられる。(抄録なし)遷移金属触媒によって進行する反応の中には、金属を含む環状の中間体、いわゆる「メタラサイクル中間体」を経由して進行する反応が数多く報告されている。一般に、メタラサイクル中間体はアルキンやアルケンなどの多重結合が低原子価の遷移金属に酸化的環化付加を起こすことによって形成される。筆者は含窒素ヘテロ環カルベンを配位子として持つロジウム触媒と、側鎖にアルキンもしくはアルケンを持つ4-アレナールとを反応させると、通常のメタラサイクル中間体とは異なる「オキソローダサイクル中間体」を経由して反応が進行し、8員環を含む二環式化合物が一挙に得られることを見出した。反応機構の詳細な検討を行ったところ、まずはじめにロジウム錯体とアルデヒド、アレンから7員環オキソローダサイクル中間体が形成され、続いて中間体へ側鎖の多重結合が挿入することで反応が進行していることが明らかになった。本反応は報告例の少ない形式的な[6+2]環化付加反応であり、これらの結果は既に米国化学会誌に掲載されている。次に筆者は、本環化反応の途中で形成される7員環オキソローダサイクル中間体の反応性に興味を持ち、本反応の分子間反応への展開を試みた。すなわち4-アレナールとロジウム触媒とから7員環オキソローダサイクル中間体が形成され、さらに分子間で多重結合が挿入するのならば、単環式の8員環化合物が得られるのではないかと考えた。種々検討した結果、ロジウム触媒存在下、4-アレナールと末端アルキンとを反応させると、分子間[6+2]環化付加反応が進行し、8員環化合物が位置選択的に良好な収率で得られることを見出した。現在、基質の適用範囲の拡大及び反応機構の詳細を明らかにするべく検討中である。著者はロジウム錯体とアレンから形成されるローダサイクル中間体を利用した環化反応を利用した効率的な環状化合物の合成を目指して研究を行っており、これまでに側鎖にアルキンやアルケンなどの多重結合を有する4-アレナールとRh触媒との反応により分子内[6+2]環化付加反応が進行し、8員環を含む二環式ケトンが一挙に合成できることを報告している。一般に中員環である8員環の構築はエネルギー的に不利になることから比較的困難であることが知られており、効率的な8員環合成法の開発は有機合成化学上有用となりうる。そこで筆者は本[6+2]環化付加反応を分子間反応へと展開することで単環式8員環化合物が合成出来るのではないかと考え研究を行った。その結果、ロジウム触媒存在下、4-アレナールと末端アルキン間で分子間[6+2]環化付加反応が進行し、目的の単環式8員環ケトンが高収率かつ位置選択的に得られることを見出した。また本反応では光学活性な4-アレナールを用いると、アレン部位の軸不斉が生成物に転写され、8員環生成物が光学活性体として得られることから、天然物合成にも応用されることが期待される。また筆者は3ヶ月間の海外留学中に、オキサビシクロアルケンとシアン酸ナトリウムを、光学活性配位子を有するカチオン性ロジウム触媒存在下にて反応させると、環開裂反応が起こるとともに、系中で生じたシアン酸ナトリウムの求核攻撃が進行して、イソシアナート中間体が形成された後、生じたイソシアナートと水酸基が分子内環化することでオキサゾリジノン誘導体が高い不斉収率で生成することを見出した。本反応はロジウムによる触媒反応において、無機塩であるシアン酸塩を用いた初めての例である。

生成体であるオキサゾリジノンは、Evansアルドール反応における不斉補助基として頻繁に用いられていることから、大変有用な反応である。筆者は、アレンから形成されるローダサイクル中間体を利用した新たな環状骨格構築法の開発を目的として研究を行ってきた。これまでにRh触媒とアレン、アルデヒド及びアルキンを分子内に有する基質を反応させると、アルデヒドとアレン及びRh錯体から形成される7員環ローダサイクル中間体を経由して8員環を含む二環式化合物が生成することを見出し、さらに4-アレナール(4-アレニルアルデヒド)とアルキン間での分子間反応への展開にも成功した。本年は、これらの8員環形成反応の開発途上で見出した、ロジウム触媒による4-アレナールの分子内ヒドロアシル化を不斉反応へと展開した。種々反応条件を検討した結果、触媒量のRh-DTBM-Segphos錯体および4-フルオロベンゾニトリル存在下、ラセミ体の4-アレナールを反応させると、目的の6員環ケトンを最高84%収率かつ95%の不斉収率で得ることに成功した。一般にアレンは、その置換形式により軸不斉を有することから、触媒的不斉反応へと展開された例は非常に少ない。その理由としては、おそらく軸不斉を有するアレンはラセミ体として存在するため、光学活性配位子を持つ遷移金属触媒と反応させると、アレンのエナンチオマーと触媒との組み合わせで速度論分割が起こるためと考えられる。今回筆者が見出した分子内不斉ヒドロアシル化反応では原料を回収することなく良好な収率かつ不斉収率で生成物を与えたことから、詳細は良く分かっていないものの、おそらく反応系中でアレンのエナンチオマー間でのラセミ化の経路が存在し、動的な速度論分割となることで、生成物の一方のエナンチオマーのみが高い収率で得られたものと考えている。この結果は、これまで触媒的不斉反応へと用いられることが少なかったアレンを様々な環化反応へと展開出来る可能性を提示するものであり、有機合成化学上有用なものと考えられる。筆者の見出した新規環化反応の適用範囲の拡大及び反応機構の詳細を検討し、その成果を米国化学会誌に投稿した。さらに、本反応を分子間反応へ展開させることに成功し、現在その成果を論文投稿に向けて準備中である。既に報告しているロジウム触媒による4-アレナールと多重結合との分子内[6+2]環化付加反応を、4-アレナールと末端アルキン間での分子間[6+2]環化反応へと展開させることに成功し、この成果は"Angewandte Chemie International Edition"誌に掲載された。さらに、上記の[6+2]環化付加反応の開発途上で4-アレナールとRh触媒との反応により、分子内ヒドロアシル化反応が進行して、6員環ケトンが収率良く得られることを新たに見出し、これをエナンチオ選択的な反応へと応用することにも成功した。また、カナダへの短期研究留学中に行っていた研究内容も最近"Organic Letters"誌に報告することができた。したがって期待以上の研究の進展があったと評価することができる。既に11で述べたように、ロジウム触媒による分子間[6+2]環化反応のさらなる検討を行う。続いて、研究計画に示したように、筆者の開発した分子内環化反応を不斉環化反応へと展開する。具体的には、不斉アレニル化と本環化反応を組み合わせたカスケード型反応とすることで、ラセミ体のアレン化合物からワンポットでの光学活性な環状化合物の合成を試みる。最後に、本環化反応を鍵反応として生物活性を有する多環式化合物の全合成を行う。
病的喉頭の発声時運動形態の臨床的・基礎的研究

声門閉鎖不全の代償作用の一つとして、両側仮声帯を接触させ振動させる仮声帯発声が指摘されているが、発声時の仮声帯の運動については、具体的な運動様式はよくわかっていない。そこで一側声帯麻痺の発声時の仮声帯の運動を観察し、発声機能などとの関連を知ることを目的に以下の検討を行った。対象は喉頭ファイバー下ストロボスコープを行った一側声帯麻痺患者385例で、そのうち211例では音声改善のために経皮的固化型シリコン声帯内注射を行っている。持続発声中の安定した場面について両側仮声帯の接近度を判定した。その結果、患側仮声帯の顕著な内転は9例2%に見られただけで、仮声帯発声は一側声帯麻痺ではその頻度はきわめて少ないことがわかった。また、高齢で、患側声帯が正中位でなく、誤嚥がある症例に健側仮声帯の内転は生じやすいことがわかった。一方、最大発声持続時間、平均呼気流量、基本周波数変動率、最大振幅変動率、規格化雑音エネルギーはすべて、内転のない群は内転の顕著な群より良好であった。このことから、仮声帯の内転は音声機能を改善するものではないことがわかった。シリコン注入前に内転の認められた125例のうち69例で内転が消失した。注入後に内転の残存した群と内転の消失した群とでは、注入前の、平均年齢、病悩期間、患側声帯の正中位固定の割合、誤嚥の割合、及び種々の音声機能では有意差を認めなかった。しかし、注入後の音声機能はすべて、内転の消失した群の方が良好であった。仮声帯の内転は音声機能の障碍を代償しようとする努力であると考えられた。以上より、仮声帯の内転は音声機能を代償しようとする作用であるが、実際には代償しきれておらず、音声機能は改善していないことがわかった。今後は、CT画像の解析や摘出喉頭によるシミュレーションを行っていきたい。
トロイダル群上の複素直線バンドルとその切断空間

1.トロイダル群が準アーベル多様体になる為の必要十分条件を、整数値2次交代形式を使って表した。これはトロイダル群のドラームコホモロジー群と解析的コホモロジー群をフーリエ解析的手法で計算し、トロイダル群の複素構造と有理構造の関係を明らかにすることによって得られた。古典的には、調和積分論によって複素トーラスがアーベル多様体になるためのリーマン条件が求められているが、これも上の方法を使って証明できる。2. 1の成果を元にして準アーベル多様体の周期行列の標準形を求めた。この結果をコンパクトの場合に適用するとアーベル多様体の周期行列の標準形を得る。3. 2の成果を元にして、準アーベル多様体を定義するエルミート形式が正値直線バンドルのメトリックの曲率形式から得られることがわかった。この正値直線バンドルの切断を使って準アーベル多様体を複素射影空間に埋め込むことが出来るので、この研究の目的はほぼ達成されたと思われる。埋め込みを定義する切断の集合をアーベル多様体の場合と同じように具体的に表すことは出来ていないが、この研究の過程で準アーベル多様体とアーベル多様体の関係が周期行列を通してわかってきたので、切断の具体的な形を得る見通しを得ることが出来た。4. 1の成果は1997年の第1回ISAAC国際会議(米国Delaware大)と第5回国際複素解析会議(中国北京大)で発表し、2の成果は1998年の第6回国際複素解析会議(韓国安東大)で発表した。3の成果は1999年に日本で行われる第2回ISAAC国際会議と第7回国際複素解析会議で発表する予定である。1.トロイダル群が仮似アーベル多様体になる為の必要十分条件を、整数値2次交代形式を使って表した。2.1の成果を1997年の6月37日に米国デラウェア大で行われたISAAC会議で発表した。この原稿をTeXで作成するときに設備費で購入した計算機を活用した。3.1の結果をもとにして、複素2次元のトロイダル群の周期行列の標準形を求め、トロイダル群の複素直線バンドルとその切断を具体的に表した。周期行列の基底の計算に、消耗品費で購入した数式処理システムMathematicaを活用した。4.3の成果を1997年の8月2430日に中国の北京大学で行われた第5回国際複素解析会議で発表した。この原稿のTeXによる作成にも設備費で購入した計算機を使用した。5.1の成果はISAAC会議のProceedings(Kluwer)に掲載され、3の成果は国際複素解析会議のProceedings(北京大学)に掲載されることになった。どちらの原稿も設備費購入の計算機を使ってTeXで作成した。6.この後の目標は、3の成果を一般次元のトロイダル群に拡張することと、トロイダル群を複素射影空間に埋め込む正値複素直線バンドルの切断を具体的に書き表すことである。今、この計算に、設備費で購入した計算機、複素解析に関する書籍および消耗品費で購入した数式処理システムMathematicaを活用して研究を進めている。この成果は1998年7月2631日に韓国の安東大で行われる国際複素解析会議で発表する予定である。1.準アーベル多様体(仮似アーベル多様体)の周期行列の標準形を求めた。

この周期行列の標準形は古典的なアーベル多様体の周期行列の標準形を拡張したものであり、証明も筆者が得たトロイダル群のドラームコホモロジー群の計算結果を基本にしており、アーベル多様体の周期行列の標準形もこの方法で求めることが出来る。2. 1の成果を1998年の7月2630日に韓国の安東大学で行われた第6回国際複素解析会議で発表した。これをもとにして論文を作成し、国際複素解析会議のProceedings(安東大学)に掲載された。この原稿をTeXで作成するときに昨年度と今年度の設備費で購入した計算機、ブースター及びメモリを活用した。3.筆者が得た準アーベル多様体の周期行列とアーベル多様体の周期行列の関係を調べることによって、準アーベル多様体を定義するヘルミート形式が正値直線バンドルのメトリックの曲率形式から得られることがわがった。特に2次元の場合における証明を論文としてまとめて九州産業大学工学部研究報告第35号に掲載された。一般の場合も現在論文として作成して投稿の準備を行っているところである。これで、研究課題の目標はほとんど達成されたと思われる。これらの原稿をTeXで作成するときも昨年度と今年度の設備費で購入した計算機、ブースター及びメモリを活用した。4.設備費で購入した関数論関係図書は、筆者の研究の代数幾何学的側面に特に効果があった。数値解析関係図書は設備費で購入した計算機、ブースター及びメモリとともに、3におけるメトリック関数の計算に威力を発揮した。5. 3の成果を1999年3月10日に九州産業大学で行われた「Nonassociative Algebraに関する研究会」で発表した。6. 1の成果の証明を改良したものが第9回微分方程式国際会議(Plovdiv,Bulgaria)のProceedingsに掲載されることになった。
生活習慣病改善作用を有する難吸収性食品因子の新規作用機序の解明

腸管から吸収されにくいにも関わらず、生活習慣病改善作用を発揮しうる食品因子の作用機構を検討した。特に抗炎症作用を有するスフィンゴミエリンの作用について詳細に検討したところ、腸管透過性を亢進させることと血中エキソソームのグルコース取り込み促進作用を亢進させることが明らかとなった。これらの結果は、腸管から吸収されにくい食品因子が腸管に対する作用、または腸管を経由し血中エキソソームの組成を変化させる作用を発揮することで、生体に影響を及ぼすという新たな作用機構の存在を示唆するものと考えられた。本研究は体内に吸収されにくい食品因子がどのような機構で、その作用を及ぼしているかを明らかにすることを主たる目的としている。今年度は当初計画していた食品因子の一つであり、抗炎症作用を有するスフィンゴミエリンの作用について主として検討を行った。小腸上皮細胞モデルとしてはCaco-2細胞を用いた。スフィンゴミエリンが小腸上皮細胞にどのような影響を及ぼすかを明らかにするため、Caco-2細胞をカルチャーインサート上で培養し、上皮細胞様に分化させ、Apical側にミセル化したスフィンゴミエリンを添加し、膜電位の変化、蛍光物質の透過性への影響を検討したところ、添加するスフィンゴミエリンの濃度依存的に、膜電位が低下し、蛍光物質の透過性も低下することが明らかとなった。さらにApical側に、マクロファージを刺激し炎症を惹起する作用を有するLPSを添加し、Basolateral側でマクロファージ様細胞RAW264.7を培養した状態で、スフィンゴミエリンを添加したところ、RAW264.7の活性化が抑制される可能性を見出した。この結果は、スフィンゴミエリンが小腸上皮の透過性を低下させ、腸管内からの炎症性シグナルの伝達を抑制することで、炎症抑制作用を発揮している可能性を示唆している。現在、この現象のメカニズムを明らかにするため、スフィンゴミエリンを添加した際の馴らし培地を、別のCaco-2に添加することで透過性が変化するかを検討しており、変化が見られた際には培地中のエキソソームの分析を実施する予定である。もう一つの食品因子であるアスパラチンについては培地中のアスパラチン濃度の測定法の検討を実施したが、Caco-2細胞を用いた検討はまだ実施できていない。前年度にスフィンゴミエリンの腸管透過性に対する作用を明らかにしている。今年度も検討を継続し、スフィンゴミエリンを小腸上皮細胞のモデルであるCaco-2細胞に添加し、その影響を検討した。その結果、スフィンゴミエリンの添加により、膜電位が有意に低下し、透過性の指標となる蛍光物質の透過量が有意に増加するという結果が得られ、スフィンゴミエリンが腸管透過性を有意に亢進させることが明らかとなった。さらにスフィンゴミエリンミセルを形成させ、その中に蛍光物質を含有させた状態で、透過性を検討したところ、ミセル化していない群に比べて、その透過量が有意に増加することも明らかとなった。以上の結果はスフィンゴミエリンが腸管透過性を変化させ、腸内に存在している食品因子や生理活性物質の作用を高めることで生体に影響する可能性を示唆したものであり、最終年にさらに詳細を検討する予定である。なおスフィンゴミエリンの作用機構を検討するためにタイトジャンクション構成タンパク質の一つであるオクルーディンの発現量を測定したが、変化は観察されなかった。またアスパラチンの腸管透過性を評価する系を立ち上げ、アスパラチンの透過性が低いことを確認し、その透過性に対するスフィンゴミエリンおよびそのミセルの影響を検討している。さらに研究計画書に記載のスフィンゴミエリンがエキソソームを介してその生理作用を発揮している可能性について検討し、スフィンゴミエリンを経口投与したラット血清より調製したエキソソームが筋肉細胞のグルコース取り込み能を亢進すること、その作用はエキソソームの細胞への取り込みを阻害するアネキシンにより阻害されることを見出した。この結果は食事由来のスフィンゴミエリンが腸管でのエキソソーム分泌に影響し、その生理作用を発揮しているという本研究の仮説を支持するものであり、最終年度にはその詳細をさらに検討する予定である。前年度はスフィンゴミエリンに関する検討が先行し、アスパラチンに関する検討が遅れていた。またその検討も細胞培養系を用いたものが中心となり、当初の目的である動物を用いた検討に着手することができなかったが、今年度はアスパラチンに関する検討を開始し、一定の成果を得ることができたことに加え、スフィンゴミエリンを経口投与した際、血中エキソソームの生理作用が変化することを見出し、本研究の当初の目的である「腸管から吸収されにくい食品因子が生理作用を発揮する新たな機構を見出す」という課題に回答を与える可能性がある成果の端緒を見出すことに成功したので、順調に進行していると判断した。また前年度からの継続であるスフィンゴミエリンの腸管上皮透過性に対する検討も順調に進行しており、さらにスフィンゴミエリンを利用して吸収性の低い食品因子を効率よく体内に取り込ませるという新たな手法の開発につながる成果を得ることにも成功しているため、このように判断した。本研究ではスフィンゴミエリンとアスパラチンを用い、腸管から吸収されにくい機能性食品因子がどのようなメカニズムでその生理作用を発揮しているかを明らかにすることも目的とした。

そこで、これらの食品因子が腸管において作用を示している可能性を検討し、前年度までにスフィンゴミエリンがCaco-2細胞の細胞間透過性を亢進すること、アスパラチンがそれを低下させることを見出した。またスフィンゴミエリンを経口投与した際の血中エキソソームが炎症抑制作用、筋肉細胞へのグルコース取り込みを促進することを見出した。最終年度にはそれらの検討をさらに進めて以下の成果を得た。すなわち、腸管細胞に対する作用に関しては、スフィンゴミエリンの細胞間透過性亢進作用は細胞毒性によるものではなく、可逆的な作用であること、ミセルを介した細胞内輸送には影響しないこと、スフィンゴミエリンを経口投与することで腸管からのグルコース取り込みが一過性に上昇することを見出した。またスフィンゴミエリンを経口投与した際の血中エキソソームの構成タンパク質を質量分析により解析したところ、血清蛋白質の混入が確認されたので、精製法を見直し、検討を進めたところ、血中エキソソームが筋芽細胞の増殖を促進する作用を有すること、食事性のスフィンゴミエリンはその作用を亢進することを新たに見出した。アスパラチンについては、スフィンゴミエリンの作用を利用したアスパラチン吸収性の改善の可能性について検討したところ、アスパラチンの吸収率が非常に低く、スフィンゴミエリンの影響を観察するには至らなかった。以上の結果は、難吸収性の食品因子であるスフィンゴミエリンが腸管で作用を発揮する可能性、また血中エキソソームを介してその作用を発揮している可能性を示すものであり、機能性食品研究に新たな知見を与えるものと考えられる。腸管から吸収されにくいにも関わらず、生活習慣病改善作用を発揮しうる食品因子の作用機構を検討した。特に抗炎症作用を有するスフィンゴミエリンの作用について詳細に検討したところ、腸管透過性を亢進させることと血中エキソソームのグルコース取り込み促進作用を亢進させることが明らかとなった。これらの結果は、腸管から吸収されにくい食品因子が腸管に対する作用、または腸管を経由し血中エキソソームの組成を変化させる作用を発揮することで、生体に影響を及ぼすという新たな作用機構の存在を示唆するものと考えられた。当初の計画では水溶性食品因子として抗糖尿病作用を有するアスパラチンを、脂溶性食品因子として抗炎症作用を有するスフィンゴミエリンを、それぞれ用いて検討することとしていた。今年度はスフィンゴミエリンを中心に検討を進めたため、アスパラチンの作用とその機構に関する検討が十分に進められていない。これは培地中のアスパラチン濃度の定量法の確立に時間がかかったためである。また、スフィンゴミエリン添加後の馴らし培地の作用を検討するところまでは進められたが、エキソソームを分離し、その構成成分を分析するところまで進めることはできなかった。この理由は、Caco-2細胞の分化状態を確認する手法の確立に時間を要したこと、Caco-2細胞を安定して上皮様細胞に分化させることに手間取ったことなど、Caco-2細胞モデルの確立に予想以上の時間を要したためである。最終年度にはスフィンゴミエリンを経口投与した際の血中エキソソームの詳細な解析を行う。具体的には調製したエキソソームからその構成タンパク質を調製し、対照群(スフィンゴミエリンを投与していない群)から同様に調製したものと比較し、含有量に差が見られたバンドを切り出し、LC-MS/MSにより、スフィンゴミエリン投与が影響したタンパク質の同定を行い、エキソソームを介したスフィンゴミエリンの生理作用の詳細を明らかにする。
侵襲による生体反応に対する遺伝子分析に基づく個別化対策に関する研究

一方,IL-6の主要な転写因子のコンセンサス配列近傍に位置するIL-6-174^*G/Cについては,IL-6-174^*C carrierは一例も存在しなかった.またIL-6-596^*G/Aにおいても,IL-6-596^*Acarrierは存在しなかった.今回検討した遺伝子多型のうち,TNF-α-308^*G/A, IL-6-174^*G/C,およびIL-6-596^*G/Aは,Caucasianを対象とした既報との間にallele頻度について大きな較差が認められた.これは遺伝子多型によって人種間格差が存在することを示す一例である.一方で,このように臨床経過に大きな影響を及ぼすSNPは患者の重症化を予知する上で有用な指標となり得る.一方,IL-6の主要な転写因子のコンセンサス配列近傍に位置するIL-6-174^*G/Cについては,IL-6-174^*C carrierは一例も存在しなかった.またIL-6-596^*G/Aにおいても,IL-6-596^*Acarrierは存在しなかった.今回検討した遺伝子多型のうち,TNF-α-308^*G/A, IL-6-174^*G/C,およびIL-6-596^*G/Aは,Caucasianを対象とした既報との間にallele頻度について大きな較差が認められた.これは遺伝子多型によって人種間格差が存在することを示す一例である.一方で,このように臨床経過に大きな影響を及ぼすSNPは患者の重症化を予知する上で有用な指標となり得る.侵襲により引き起こされる全身性炎症反応症候群(SIRS)が,二次性多臓器不全発症の背景病態として近年注目されている.そしてSIRSの病態として,侵襲により局所で産生された炎症性サイトカインが血中に吸収され全身を循環する状態,すなわち高サイトカイン血症が指摘されている.今回,高サイトカイン血症(hypercytokinemia)発症における遺伝的因子の関与を明らかにしたうえで,遺伝的高サイトカイン血症ハイリスク患者を効果的に予知し,それらの症例に対しては積極的かつ強力な集中治療を施すという遺伝子分析に基づく個別化対策に発展させる目的で本研究を計画した.これらの目的に対して本年度は以下の如く検討を行った.(1)当ICUに入院してきた重症患者全員に対し,患者の重症度判定に有用であると我々が報告しているIL-6(interleukin-6)血中濃度迅速測定システムを用いて,IL-6血中濃度を入室時に測定し,その値が10,000 pg/mL以上の異常高値群と10,000 pg/mL未満の群とに分類した.そしてインフォームド・コンセントを得た上で,各々の群でサイトカイン関連遺伝子としてIL-6およびTNF(tumor necrosis factor)-αのpromoter領域における多型を解析し,IL-6血中濃度異常高値群と対照群においてgenotype distributionを比較した.(2)一方でIL-6血中濃度異常上昇の引き金となりうるTNF-αについてもELISA(enzyme-linked immunosorbent assay)法にて血中濃度を測定した.また今後,各症例におけるサイトカイン血中濃度の推移をはじめとした臨床経過および予後への遺伝的因子の関与を検討し,さらに重症化への影響を客観的に評価する目的で各種重症度評価法に基づいた重症度スコアリングも実施中である.侵襲により惹起される全身性炎症反応症候群(SIRS)が,二次性多臓器不全発症の背景病態として近年注目されている.そしてSIRSの病態として,侵襲により局所で産生された炎症性サイトカインが血中に吸収され全身を循環する状態,すなわち高サイトカイン血症が指摘されている.今回,高サイトカイン血症発症における遺伝的因子の関与を明らかにしたうえで,遺伝的高サイトカイン血症ハイリスク患者を効果的に予知し,それらの症例に対しては積極的かつ強力な集中治療を施すという遺伝子分析に基づく個別化対策に発展させる目的で本研究を計画した.当ICUに入院した重症患者に対し,患者の重症度判定に有用であるとされるIL-6(interleukin-6)血中濃度を,迅速測定システムを用いて経日的に測定し,その値が10,000Pg/mL以上の異常高値群,10,000pg/mL未満の患者対照群および健常者対照群とに分類した.そして,各群でサイトカイン関連遺伝子としてIL-6,およびその上流のサイトカインであるTNF (tumor necrosis factor)-αとIL-1βのpromoter領域における多型を解析し,IL-6血中濃度異常高値群と対照群においてgenotype分布を比較した.結果,IL-6 promoter(-174G/C)一塩基多型は,対象例中に存在しなかつたが,TNF-α(-308G/A)とIL1-β(-511C/T)のpromoter一塩基多型におけるgenotype分布は,何れもIL-6異常高値症例群と,患者対照群および健常者対照群の何れとも有意に異なっており,IL-6異常高値症例群に多く認められるgenotypeの患者は重症度スコアが同程度でも予後不良であった.今後,これら予後の違いに対する血中サイトカイン動態の関与や,血液浄化療法を中心とした個別化対策の可能性につき検討予定である.一方,IL-6の主要な転写因子のコンセンサス配列近傍に位置するIL-6-174^*G/Cについては,IL-6-174^

*C carrierは一例も存在しなかった.またIL-6-596^*G/Aにおいても,IL-6-596^*Acarrierは存在しなかった.今回検討した遺伝子多型のうち,TNF-α-308^*G/A, IL-6-174^*G/C,およびIL-6-596^*G/Aは,Caucasianを対象とした既報との間にallele頻度について大きな較差が認められた.これは遺伝子多型によって人種間格差が存在することを示す一例である.一方で,このように臨床経過に大きな影響を及ぼすSNPは患者の重症化を予知する上で有用な指標となり得る.
シリコン/微小空隙/シリコン構造を用いたトンネル分光マイクロセンサの研究

単結晶シリコン/シリコン酸化膜/単結晶シリコン基板を用いたシリコン/微小空隙(マイクロギャップ)/シリコン構造デバイスにより、従来のトンネル分光法が分光対象としていた固体に加えて、液体、気体材料の分光も可能にするトンネル分光マイクロセンシング法を開拓する目的に対して、マイクロセンサの微小空隙に液体を導入することにより、液体の導入を静電容量とコンダクタンスの変化で検出できることを明らかにしている。超清浄精密制御熱酸化装置を用いて、2枚の単結晶シリコンウェハ表面に100nmの厚さのシリコン酸化膜を形成し、エッチングによりシリコン酸化膜の一部を除去した後、シリコン酸化膜除去部を向かい合わせて2枚のシリコンウェハを室温で貼り合わせ、貼り合わせたウェハを超高純度窒素ガス中での1000°Cの加熱処理を行い、2枚のウェハを埋め込み酸化膜となるシリコン酸化膜を介して接着させ、シリコン酸化膜除去部が微小空隙となるマイクロセンサ構造を製作している。マイクロセンサの微小空隙を通るシリコン間の距離は200nmである。シリコン/シリコン酸化膜/シリコン構造部の両方のシリコン外側表面に金属を蒸着して、電極を形成し、センシングデバイスを製作している。次に、マイクロセンサの微小空隙に超純水を導入する前の所定の印加直流電圧で所定の印加交流電圧での静電容量とコンダクタンスを測定しておき、微小空隙に超純水を導入したときに同じ印加電圧での静電容量とコンダクタンスが変化することを明らかにしている。さらに、マイクロセンサの微小空隙に超純水が導入されていることを、フーリエ変換赤外吸収測定により確認している。単結晶シリコン/極薄シリコン酸化膜/単結晶シリコン基板を用いたシリコン/微小空隙(マイクロギャップ)/シリコン構造デバイスにより、従来のトンネル分光法が分光対象としていた固体に加えて、液体、気体材料の分光も可能にするトンネル分光マイクロセンシング法を開拓する目的に対して、シリコン/極薄シリコン酸化膜/シリコン貼り合わせ基板を製作している。超清浄精密制御熱酸化装置を用いて、単結晶シリコンウェハ表面に2.5nmの厚さの極めて薄いシリコン酸化膜を形成し、水素終端化表面の単結晶シリコンウェハと表面を向かい合わせて室温で貼り合わせ、貼り合わせたウェハを超高純度酸素、窒素、あるいは水素ガス中での1000°Cの加熱処理を60分間行い、2枚のウェハを埋め込み酸化膜となる極薄シリコン酸化膜を介して接着させ、貼り合わせ基板を製作している。さらに、貼り合わせ基板の貼り合わせ強度をブレード法により測定し、酸素ガス中および窒素ガス中で接着させた基板の貼り合わせ強度が強く、水素ガス中で接着させた基板の貼り合わせ強度が弱いことを明らかにしている。また、超清浄精密制御熱酸化装置を用いて、単結晶シリコンウェハ表面に1.710.Onmの厚さの極めて薄いシリコン酸化膜を形成し、水素終端化表面の単結晶シリコンウェハと表面を向かい合わせて室温で貼り合わせ、貼り合わせたウェハのフーリエ変換赤外分光法による赤外光吸収測定を行い、シリコン-酸素結合による吸収量とエリプソメトリにより測定した極薄シリコン酸化膜厚が比例関係を示すことを明らかにし、埋め込みシリコン酸化膜厚を赤外光吸収測定により決定するための校正式を得ている。単結晶シリコン/極薄シリコン酸化膜/単結晶シリコン基板を用いたシリコン/微小空隙(マイクロギャップ)/シリコン構造デバイスにより、従来のトンネル分光法が分光対象としていた固体に加えて、液体、気体材料の分光も可能にするトンネル分光マイクロセンシング法を開拓する目的に対して、マイクロセンサの微小空隙に種類の異なる気体を導入することにより、気体の違いを電流の変化で検出できることを明らかにしている。超清浄精密制御熱酸化装置を用いて、2枚のリンドープドn型単結晶シリコンウェハ表面に2.2nmの厚さの極めて薄いシリコン酸化膜を形成し、エッチングにより極薄シリコン酸化膜の一部を除去した後、シリコン酸化膜除去部を向かい合わせて2枚のシリコンウェハを室温で貼り合わせ、貼り合わせたウェハを超高純度窒素ガス中での1000°Cの加熱処理を60分間行い、2枚のウェハを埋め込み酸化膜となる極薄シリコン酸化膜を介して接着させ、シリコン酸化膜除去部が微小空隙となるマイクロセンサ構造を製作している。マイクロセンサの微小空隙を通るシリコン間の距離は4.4nmである。シリコン/極薄シリコン酸化膜/シリコン構造部の両方のシリコン外側表面にアルミニウムを蒸着して、電極を形成し、センシングデバイスを製作している。次に、マイクロセンサをガス容器内に設置して、容器内に高純度の窒素ガスを1気圧で流入したときの所定の印加電圧での検出電流を測定しておき、容器内の酸素ガスが20%と水分が2%になるように窒素ガス、酸素ガス、および水分を1気圧で流入したときに同じ印加電圧での検出電流が増加することを明らかにしている。

超清浄精密制御熱酸化装置を用いて、2枚の単結晶シリコンウェハ表面に100nmの厚さのシリコン酸化膜を形成し、エッチングによりシリコン酸化膜の一部を除去した後、シリコン酸化膜除去部を向かい合わせて2枚のシリコンウェハを室温で貼り合わせ、貼り合わせたウェハを超高純度窒素ガス中での1000°Cの加熱処理を行い、2枚のウェハを埋め込み酸化膜となるシリコン酸化膜を介して接着させ、シリコン酸化膜除去部が微小空隙となるマイクロセンサ構造を製作している。マイクロセンサの微小空隙を通るシリコン間の距離は200nmである。シリコン/シリコン酸化膜/シリコン構造部の両方のシリコン外側表面に金属を蒸着して、電極を形成し、センシングデバイスを製作している。次に、マイクロセンサの微小空隙に超純水を導入する前の所定の印加直流電圧で所定の印加交流電圧での静電容量とコンダクタンスを測定しておき、微小空隙に超純水を導入したときに同じ印加電圧での静電容量とコンダクタンスが変化することを明らかにしている。さらに、マイクロセンサの微小空隙に超純水が導入されていることを、フーリエ変換赤外吸収測定により確認している。
アフリカにおける都市化の比較調査 とくに、地域形成・国民社会形成との関われにおいて

この調査は、現代アフリカに進行している、もっとも大きな社会変化である都市化と地域形成の実態を、国民社会の形成、都市社会の構造、地域社会の形成と都市・村落関係の展開、地域共通文化の機能、地域共通語(リングア・フランカ)の機能などとの関連において、長期間の継続的比較調査をおこない、その収集された資料によって、動態的に解明しようとするものである。長期調査計画の最終年度として、全研究担当者は、それぞれの担当地域において、調査資料の最終的収集にあたった。研究代表者の日野舜也は、タンザニア内陸部のスワヒリ都市ウジジにおいて、1962年のタンザニア独立以来の国民社会形成のなかにおいて、この伝統都市がどのような変化をとげたか、すなわち、スワヒリ都市の社会・経済的変化の経緯を、住民の社会生活の変容、部族関係の変化、国民文化としてのスワヒリ文化によるスワヒリ化などの側面に焦点をしぼって、参与観察、ライフヒストリ-の聞き取りによって調査した。研究分担者の松下周二は、ナイジェリア北部を中心にするハウサ都市文化集団の地域的構造、歴史的展開を、ハウサ方言の変化の分析をつうじておこなうための、資料収集をおこなっているが、今年度は、ハウサ中心部のナイジェリアとともに、ハウサ社会のフロンテイアであるチュニジアにおける調査をおこなった。富川盛道は、タンザニア北部の植民地都市アル-シャを中心とする地域形成の過程を、とくに、周囲の牧畜社会の変容に焦点をしぼって調査資料の収集をおこなった。上田將は、ケニアのスワヒリ交易都市マリアカ-ニにおいて、とくに、カンバ人が前植民地時代から沿岸部のスワヒリ商人とのあいだでつづけてきた長距離交易の歴史的展開、地域的構造の調査をおこなった。赤坂賢は、西アフリカの前植民地的都市文化地域であるマンデインゴ文化圏であるマリ南部、コ-トジボア-ル北部において、定期市のネットワ-クの形成を、国民社会形成とのかかわりのなかで、把握するために、人の移動、ものの流通、イスラム化の展開などの調査資料の収集をおこなった。小倉充夫は、ザンビアにおいて、植民地都市ルサカと、鉱山都市ルアンシャにおいて、労働者の地域移動の実態、とくに、労働移住民が、都市社会にいかにとりこまれていくのか、鉱業の衰退からくる国民社会全体の社会経済的変化によって都市農村関係がどう変化していくのかなどの問題の解明にあたった。同時に、今年度は、比較調査として、ジンバブウエ、マラウイにおける同様の視点での調査をおこなった。松田素二は、ケニアの植民地都市ナイロビのマラゴリ人移住民の居住地域であるカンゲミ地区において、マラゴリ人社会について、地域における他の民族社会との社会関係、母村マラゴリとの社会関係を中心に調査をおこなった。とくに、かれらが、ナイロビで死んだ同胞の母村への死体移送のために組織した互助組織とその活動の実態をめぐって、かれらの信仰、世界観のレベルまで深化した調査がおこなわれた。同時にナイロビと同様の歴史をもつ植民地都市であるジンバブウエののハラレにおいて、比較調査をおこなった。カメル-ンのエルドリッジ・モハンマドは、北部のカメル-ンのフルベ都市において、都市形成史、諸民族社会が展開してきた地域形成の問題についての、口頭伝承資料の収集にあたった。本調査計画は、本年度をもって全計画を終了するが、アジアアフリカ言語文化研究所における、共同研究プロジェクト「アフリカにおける都市化の比較研究」は、なお数年間継続することになっており、各分担者が、収集された資料の整理、分析をおこなうとともに、その資料にもとずく、集中的討論、比較研究をおこなうことによって、それぞれの調査成果の一層の推敲につとめる。その研究成果は、AA研の英文ジャ-ナル"AFRICANURBAN STUDIES“(VOL.1.,VOL.11.既刊)にひきつづき収録していくことになっており、また、近い将来まとまった和文報告書として公刊する予定である。

赤坂賢は、西アフリカの前植民地的都市文化地域であるマンデインゴ文化圏であるマリ南部、コ-トジボア-ル北部において、定期市のネットワ-クの形成を、国民社会形成とのかかわりのなかで、把握するために、人の移動、ものの流通、イスラム化の展開などの調査資料の収集をおこなった。小倉充夫は、ザンビアにおいて、植民地都市ルサカと、鉱山都市ルアンシャにおいて、労働者の地域移動の実態、とくに、労働移住民が、都市社会にいかにとりこまれていくのか、鉱業の衰退からくる国民社会全体の社会経済的変化によって都市農村関係がどう変化していくのかなどの問題の解明にあたった。同時に、今年度は、比較調査として、ジンバブウエ、マラウイにおける同様の視点での調査をおこなった。松田素二は、ケニアの植民地都市ナイロビのマラゴリ人移住民の居住地域であるカンゲミ地区において、マラゴリ人社会について、地域における他の民族社会との社会関係、母村マラゴリとの社会関係を中心に調査をおこなった。とくに、かれらが、ナイロビで死んだ同胞の母村への死体移送のために組織した互助組織とその活動の実態をめぐって、かれらの信仰、世界観のレベルまで深化した調査がおこなわれた。同時にナイロビと同様の歴史をもつ植民地都市であるジンバブウエののハラレにおいて、比較調査をおこなった。カメル-ンのエルドリッジ・モハンマドは、北部のカメル-ンのフルベ都市において、都市形成史、諸民族社会が展開してきた地域形成の問題についての、口頭伝承資料の収集にあたった。本調査計画は、本年度をもって全計画を終了するが、アジアアフリカ言語文化研究所における、共同研究プロジェクト「アフリカにおける都市化の比較研究」は、なお数年間継続することになっており、各分担者が、収集された資料の整理、分析をおこなうとともに、その資料にもとずく、集中的討論、比較研究をおこなうことによって、それぞれの調査成果の一層の推敲につとめる。その研究成果は、AA研の英文ジャ-ナル"AFRICANURBAN STUDIES“(VOL.1.,VOL.11.既刊)にひきつづき収録していくことになっており、また、近い将来まとまった和文報告書として公刊する予定である。全体としての共通課題、既ち、現代アフリカに進行している都市化の実態を国民社会形成、地域形成、都市の社会構造、地域共通文化と地域共通語との関連において調査し、比較調査資料を収集するとともに、各分担者の専門的関心に基づく独創的資料が得られたと考えられる。日野(研究代表者)は、タンザニア西部ウジジにおいて、スワヒリ都市民が、国民社会形成の過程にいかに組み込まれていくかを、1964ー66年の現地調査以来25年間の社会変化の分脈において、生活史、住民意識の変化などを中心に追跡調査を行った。松下は、ナイジェリア、ニジェ-ルのハウサ社会において地域形成、住民移動にともなうハウサ語方言の統合化の調査を行った。富川は、タンザニア北部アル-シャ地域形成と常設市、定期市の機能について調査した。
シリア・中心体系による生体情報フローの制御

1研究成果のとりまとめ:いくつかの国内での学会を利用して、旧班員(主に計画班員)が集まり、成果発表と情報交換を行い、5年間の研究成果をとりまとめた。2国内外での研究成果発表:3国内の繊毛関係の研究会(繊毛研究会)に参加し、最新の成果と旧班員のその後の動向について、情報収集を行った。29年度が最終年度であるため、記入しない。
「小さな惑星のための乗物」自転車の利用システム化に関する研究

日本の自動車対策は一つの矛盾を抱えている。一方では、地球環境間題を契機として自動車利用を〈促進〉する機運が高まっており、他方では、駐輪場整備が巨大化するにつれ自転車利用を〈抑制〉しようとの意向が強まっている。この矛盾を解くカギの一つがレンタルサイクル方式(RC方式)の導入であろう。RC方式とは会員か共有する有料の貸し自転車システムである。自宅から駅への移動と駅から職場などへの移動とで1台の自転車を共用し、駐輪場の残る台数を減らすのがその狙いである。神奈川県平塚駅(1980年)での実施例はわが国最初のRC方式であり、実物第一号を造ってそのイメージを具体化した。埼玉県上尾駅(1983年)の実施例では利用率(=契約者数/自転車台数)が150%を越え、条件さえ揃えば理念どおりのRC方式を実現させうる可能性を示した。練馬区大泉学園駅(1989年)での実施例は、土地の有効利用にも効果があることを実証した。こうした実践を通して、RC方式の成功条件が次第に明らかになりつつある。今後の研究課題を整理しておきたい。(1)用語や概念を整理してRC方式を正確に定義すること。(2)全国での実例を収集して、RC方式の成功条件を検討すること。(3)駐輪場の有料化や放置規制の強化などの現行対策との関連を明確にすること(これわ軽視するとRC方式は単なる奇抜なアイデアと見られやすい。)(4)簡便て実用的な計画手法を体系化すること。(5)民間経営に向けて採算性を詳しく吟味すること。
近世朝廷の仏事・神事に関する建築史的研究

(1)朝儀としての神事・仏事の実態の解明・禁裏御所で行われる朝儀・仏事・神事の実態を明らかにするために、これらの行事の開催日時・場所などを調査し、その概要を整理した。・禁裏御所造営後の朝儀への御用商人の参加の事例を検討し、朝儀・神事の場の体験が近世京都の都市民衆にとって重要であったことを解明した。・朝儀・仏事・神事に関わる朝廷の動向を解明するために、該当期間の公家の日記を網羅的に調査し、事例を整理した。・禁裏御所の外の寺院で行われる仏事(回忌法会)に着目し、その特性を分析した。その結果、近世後期になると朝儀復古にあわせるように勅願寺等における勅会の再興がみられることが明らかとなった。(2)禁裏御所における神事・祭礼の場の特性の解明・朝儀・仏事・神事の場や儀式開催時の禁裏御所内外の空間特性を明らかにする作業を実施した。・朝儀や神事(神社祭礼)に伴う天皇の出御の場の特性やその変遷を考察した。その結果、禁裏御所南門前での儀式(祭礼神事)の開催と天皇の御覧が、天皇と近世京都の都市民衆(町人)との接点の場として重要であることが判明した。・これらの成果を現在、論文としてまとめており、近日中に学術誌に投稿予定である。(3)研究支援データベースの構築・整理した朝儀・仏事・神事の記録をデータ化した。・刊行されている近世史料や各研究所等に所蔵されている近世の史料(公家の日記、禁裏御所に関する史料、近世京都に関する町関係史料や文献)を調査し、出来る限りデータ化した。(1)朝儀・仏事・神事の実態の解明・禁裏御所で行われる朝儀・仏事・神事の実態を明らかにするために、主に元禄期から宝永期に行われたこれらの行事の開催日時・場所などを調査し、その概要を整理した。・朝儀・仏事・神事に関わる公家の動向を把握するために、該当期間の公家の日記を網羅的に調査し、その関与を考察した。・これまでそれほど明らかでなかった天皇の朝儀や神事への関与を明らかにするために、天皇の出御を伴う朝儀・神事の事例に注目し、その動向を整理した。・朝儀・仏事・神事の実施に際し先例となる近世以前の朝儀等の様相を確認する作業を行った。(2)朝儀・仏事・神事を行う場の特性の解明・朝儀・仏事・神事の場となる内裏建物の使われ方や儀式開催時の禁裏御所内外の空間特性を明らかにする作業を実施した。・朝儀や神事に伴う天皇の出御の場の特性やその変遷を考察した。・これらの作業により、特に賀茂祭と御霊祭開催にともなう朝儀や神事の際に、天皇と都市社会の接点となる場が見いだせることが明らかになった。・朝儀にともなう禁裏御所周辺の様相を検証し、禁裏御所と都市空間の関係を建築・都市史的観点から明らかにする作業を行った。・これらの成果を現在、論文としてまとめている。
心臓よりクローンしたcAMP依存性Clチャネル活性のリン酸化状態による制御機構

Cl^-チャネル蛋白でのプロテインキナーゼA(PKA)、PKC、ホスファターゼ(PP)によるリン酸化と脱リン酸化の相互作用を明らかにするために、Xenopus卵母細胞に心臓型CFTRを発現させ、ガラス電極法またはpatch clamp法によってCl^-電流を測定した.「結果A」PP1,2Aの阻害剤であるokadaic acid,microcystinを処置後,PKAの阻害剤Rp-cAMPSを投与して,CFTRを部分的にリン酸化された状態(P_1)にトラップした.その状態でホルボールエステルのPDBuを投与したところ(P_1→P_1P_c;PKCによるリン酸化が期待される),更なる電流の増強は見られなかった.従って、PKAによるリン酸化とは独立した状態でPKCがCFTRを活性化することはできないと思われた.「結果B」PKCによってリン酸化を受けると推定されるセリン残基(686番目と790番目)をミューテーションすると,PDBuによる作用が有意に抑制された.従って、機能に連関するPKCのリン酸化部位はCFTRの制御ドメインにあることが示唆された.「結果C」PKA触媒ユニットやPKCを直接細胞膜内側に与えることによって単一チャネル電流(10pS)が活性化されることがわかった.以上の結果から、(1)PDBuによるチャネルの活性化にはPKCによるリン酸化が必要であること、(2)PDBuによる活性化はPKAによるチャネルのbasalなリン酸化を更に促進するためであることが示唆された.プロテインキナーゼA(PKA)系ならびにプロテインキナーゼC(PKC)系によるリン酸化を介した心血管系のCl^-チャネルを活性化するメカニズムを、心臓型CFTR(cystic fibrosis transmembraneregulator)を発現させたXenopus卵母細胞を使って明らかにすることを試みた.「結果(1)」心臓型CFTRを発現した卵母細胞では、細胞内cAMP量を増加させる薬物(forskolin,IBMX etc.)によってCl^-電流が惹起された。この性質を持つ細胞で,ホルボールエステルの一つPDBuはPKC依存的に膜電流を増加させた.cAMP刺激で最大限にチャネルを活性化させた場合には、PDBuはそれ以上には活性化させなかった.PDBuの作用はPKA阻害薬であるRp-cAMPSの前処置によって抑制された.以上から、PKCによるCFTR Cl^-チャネルの活性化にはbasalなPKAによる刺激が重要であると考えられた。「結果(2)」脱リン酸化酵素PP1&2Aの阻害剤であるokadaic acid(OA)によってチャネルの活性化が惹起された.この作用はRp-cAMPSを前投与しておくと抑制された.cAMP刺激によるチャネルの活性化からの回復過程をOAの存在あるいは非存在下で調べた結果,OAによって有意に回復過程が延長したが,電流の回復を完全には抑制させることはなかった.以上の結果から,リン酸化と脱リン酸化のターンオーバーがbasalな状態で起きていると思われた.PP1&2AはPKAによるリン酸化の解除に一部役割を有しているが,PP1,2A以外の脱リン酸化酵素の関与も示唆された.Cl^-チャネル蛋白でのプロテインキナーゼA(PKA)、PKC、ホスファターゼ(PP)によるリン酸化と脱リン酸化の相互作用を明らかにするために、Xenopus卵母細胞に心臓型CFTRを発現させ、ガラス電極法またはpatch clamp法によってCl^-電流を測定した.「結果A」PP1,2Aの阻害剤であるokadaic acid,microcystinを処置後,PKAの阻害剤Rp-cAMPSを投与して,CFTRを部分的にリン酸化された状態(P_1)にトラップした.その状態でホルボールエステルのPDBuを投与したところ(P_1→P_1P_c;PKCによるリン酸化が期待される),更なる電流の増強は見られなかった.従って、PKAによるリン酸化とは独立した状態でPKCがCFTRを活性化することはできないと思われた.「結果B」PKCによってリン酸化を受けると推定されるセリン残基(686番目と790番目)をミューテーションすると,PDBuによる作用が有意に抑制された.従って、機能に連関するPKCのリン酸化部位はCFTRの制御ドメインにあることが示唆された.「結果C」PKA触媒ユニットやPKCを直接細胞膜内側に与えることによって単一チャネル電流(10pS)が活性化されることがわかった.以上の結果から、(1)PDBuによるチャネルの活性化にはPKCによるリン酸化が必要であること、(2)PDBuによる活性化はPKAによるチャネルのbasalなリン酸化を更に促進するためであることが示唆された.
中性子捕捉療法の改善と適応拡大のための基礎的臨床的研究

平成5年までに14例の悪性脳腫瘍患者に対し本療法を施行し、現在8名が生存しており、最長は2年を越えた。ホウ素化合物(BSH)のヒト脳腫瘍内濃度を検討しBNCT治療計画を再検討して深部腫瘍吸収線量を増加した結果、特に最近実施した5例については比較的良好な治療効果を認めている。一方、基礎研究に於ては、選択的脳腫瘍指向性と集積性を目指し種々のホウ素化合物を合成し、それらのBNCT効果を培養細胞系及び脳腫瘍担癌ラットなどで検討した。取り分けホウ素化アミノ酸の一つであるpBPAの誘導ペプタイドを合成し実験的BNCT効果を検討したところ、培養細胞系ではpBPAに比して約3倍の殺細胞効果を認め、一方脳腫瘍担癌ラットでも高いT/B比(約8)を認めた。今後ホウ素原子の濃縮化を図り投与量を低減化することにより臨床への応用が十分期待される。さらに平成4年度に引き続き核酸代謝に親和性を有するカルボラニルウリジン及びアミノ酸代謝に親和性を有するpBPAの腫瘍指向性と毒性の低減化を目指し種々の水酸化誘導体を合成し実験的BNCT効果を検討したが、水酸化により脳腫瘍への取り込みが変化しないことが明らかにされた。その他アミノ酸誘導体、Gd-B複合体など種々のホウ素化合物を研究班のみならず、国際研究協力の下に合成研究を展開している。炉物理面ではHyper-themalneutron mixed fieldの概念と理論を発表し現在実証実験を行っている。これにより熱中性子の組織透過性が増し治療効果の向上が期待される。正常脳組織の放射線耐用線量についてはラット脳について明らかにされた。これら研究成果は第5回原子力先端研究国際シンポジウム(1993,3水戸)、放射線腫瘍学国際会議(1993,6京都)、第3回アミノ酸国際会議(1993,8ウィーン)等において発表された。