hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
前立腺癌の再然に関わる機能分子のプロテオミクス解析による同定と診断・治療への応用

前立腺癌細胞LNCapとアンドロゲン非依存性ヒト前立腺癌細胞株PC-3,DU-145株より、タンパク分画を抽出し、抗チロシンキナーゼ抗体他を用い、ウエスタン法にてそれぞれ機能タンパク質を分離した。それぞれにつき、プロテオミクス解析により更なる分析を進めた。この中で注目すべきチロシンキナーゼ型増殖因子受容体の1つとして、アンギオテンシンII受容体が注目された。(1)これにつきRT-PCR等でヒト正常前立腺組織および前立腺癌組織、再燃前立腺癌組織の発現パターンを調べ、これら組織にこのアンギオテンシンII受容体が発現していること、また特に前立腺癌および再燃癌で強く発現することを明らかにした。(2)またこの受容体のブロッカー薬剤より前立腺癌の増殖が抑えられるかどうかを調べ、再燃前立腺癌の増殖抑制に有効なことを明らかとした。またその際のMAPKinaseやSTAT3などの動きを調べ、そのメカニズムを明らかとした(Mol.Cancer Therap.2003)。現在、前立腺組織におけるこの受容体の特異的な型の有無とその発現パターンをプロテオミクス解析により解析中である。本研究では、前立腺癌におけるホルモン依存性の喪失機序として再燃癌の病態にプロテオミクス解析の手法の応用を試みた。前立腺癌の増殖に関わる重要分子であるチロシンキナーゼ型増殖因子受容体、アンドロゲン受容体共役因子等について解析を行った。今までにアンドロゲン依存性前立腺癌細胞LNCapとアンドロゲン非依存性ヒト前立腺癌細胞株PC-3、DU-145株より、タンパク分画を抽出し、抗チロシンキナーゼ抗体他を用い、ウェスタン法にてそれぞれ機能タンパク質を分離した。それぞれにつき、2次元電気泳動法を行い、アンドロゲン依存性LNCap細胞とアンドロゲン非依存性細胞とで異なる、泳動パターンを得た。この中で、特に注目すべきチロシンキナーゼ型増殖因子受容体の1つとして、アンギオテンシンII受容体AT1に注目し、これにつき、RT-PCR等でヒト正常前立腺組織に比して、前立腺癌組織、再燃前立腺癌組織の発現パターンを調べた。その結果、AT1受容体は前立腺組織で発現し、また、前立腺癌では強く発現することがわかった。またこの受容体のブロッカー薬剤より前立腺癌の増殖が抑えられるかどうかを調べたところ、このAT1受容体ブロッカーが、AT1からのシグナルとEGF受容体からのシグナルを両方をブロックし、これらの結果として、細胞を抑制することがわかった。さらにこの受容体の前立腺癌における特異的な型をプロテオミクス解析を用いて分析を続けており、同定に向けて研究を進行中である。これらの結果は本研究によりホルモン非依存性、ならびい再燃前立腺癌の新しい分子標的治療の可能性を明らかにできたものと考えている。またこれに基づく臨床応用(J.Urol.2005)が考えられ、スタートさせた。
基底膜分解に依存する神経回路再編メカニズムの研究

本研究では、ショウジョウバエ感覚ニューロンをモデルとして使用し、主としてin vivoライブイメージング、分子遺伝学的解析、RNAiの方法を融合させることにより、基底膜分解に依存する樹状突起の再編を制御する分子・細胞メカニズムを明らかにすることを目指した。その結果、局所分解され網目状になった基底膜の近傍に再編途中の樹状突起が存在することを見出した。本研究の目標は、神経回路が形態的、機能的に成熟するプロセスにおいて、樹状突起の再編が担う役割、およびその再編のメカニズムを理解することにある。そのために、ショウジョウバエの感覚ニューロンをモデル系に選び、樹状突起形態を精緻に生体内観察できるイメージングシステムを確立した。さらに、本研究開始時において、この独自の実験系を活用することにより、感覚ニューロン樹状突起の形態が、ハエ成虫が羽化してから24時間以内に、放射状から格子状へと劇的に再編されることを発見していた。この再編には、基底膜や細胞外プロテアーゼを含む細胞外環境の変化が重要であったが、具体的な作用機序は不明だった。平成24年度ではまず、樹状突起の再編過程における、細胞外プロテアーゼMmp2分子の挙動を可視化するために、GFP標識Mmp2ノックイン系統を作製した。この系統が有するGFP標識Mmp2分子は内在性のMmp2分子の挙動を再現していた。これはGFPシグナルの分布がMmp2発現細胞と一致するかを検証することにより示された。次に、樹状突起再編とプロテアーゼや基底膜の挙動を同時に可視化するために、樹状突起のイメージングシステムにGFP標識Mmp2分子や蛍光標識型の基底膜分子を導入した。詳細な観察の結果、Mmp2分布と樹状突起との間には明確な関連を見出せなかったが、基底膜と樹状突起との間に興味深い関係性を発見した。すなわち、基底膜が局所分解されるにつれて、樹状突起が基底膜の残存部分に移動する傾向が見られた。この結果は、基底膜が樹状突起の再編を誘引的に導く可能性を示唆している。研究期間全体を通じて、樹状突起の再編過程における、プロテアーゼ、基底膜、樹状突起の3者の挙動を生体内観察できる実験システムを構築することができた。これらの成果は、基底膜に依存した樹状突起再編の分子メカニズム解明につながると考えられる。本研究の目標は、神経回路が機能的に成熟するプロセスにおいて、樹状突起の可塑的形態変化が担う役割、およびその変化のメカニズムを理解することにある。そのために、ショウジョウバエの感覚ニューロンに着目して、樹状突起形態を単一ニューロンレベルで精緻に生体内観察できるイメージングシステムを確立した。さらに、この感覚ニューロンをその生涯に渡り観察する過程において、樹状突起の形態が、ハエ成虫が羽化してから24時間以内に、放射状から格子状へと劇的に再編されることを発見した。平成23年度では、この再編のメカニズムに下記3つの方向からアプローチした。樹状突起の再編過程において細胞外プロテアーゼMmp2分子が示す挙動を可視化するために、GFP標識Mmp2を細胞内に定常的に発現させたが、分子の挙動を追跡することはできなかった。その原因がMmp2を定常的に発現させたためではないかと考え、現在では新たに、生体内での発現調節機構を再現できるGFP標識Mmp2ノックイン系統の作製を進めている。再編を制御する基底膜分子を同定するために、再編の時期を通して細胞外基質を構成する様々な分子の分布を調査した。その結果、再編時に分布を変化させる細胞外基質分子syndecan, perlecanを新規に発見した。現在、これらの分子が再編を制御する可能性について検証している。ショウジョウバエ全遺伝子を対象にしたRNAiスクリーンを約2500系統に対して実施しており、基底膜由来の再編シグナルの受容に関与する候補遺伝子が約15個単離されている。また、これと並行して、候補遺伝子の探索を別方向から進めるために、EMS処理により変異体を作製し、その表現型を調査している。1、Mmp2依存的な基底膜分解が時間的・空間的に制御されるメカニズムの解明を目指すプロジェクトについては、GFP標識Mmp2の作製およびそれの生体内ニューロンへの適用が既に実施されている。残念ながらこの系統は有用でないことが判明したが、代替となる新規のノックイン系統の作製が順調に進行している。2、ニューロン樹状突起の再編を誘導する基底膜分子群の同定を目指すプロジェクトについては、基底膜分子を対象に再編時に分布が顕著に変化するものを探索し、細胞外基質分子のsyndecan, perlecanを新規に発見することができている。事前に同定されていたcollagenIVと合わせて、今後、基底膜分子の変異体を使い、どの分子が樹状突起の再編に重要であるかを調査するための準備が整っている。3、樹状突起による基底膜由来の再編シグナル受容とその細胞内伝達経路の解明を目指すプロジェクトについては、RNAiスクリーンを約2500系統に対して実施しており、候補遺伝子を約15個単離している。これは計画通りのペースで進行しており、今後も引き続きRNAiスクリーンに取り組んでいくことで成果が期待できる。

1、樹状突起の再編過程において細胞外プロテアーゼMmp2分子が示す挙動を可視化するために、GFP標識Mmp2ノックイン系統を作製する。この系統を使い、Mmp2分子の挙動を詳細にイメージングする。このとき、赤色蛍光タンパク質mCherry標識collagenIV分子を発現する系統を使って、Mmp2と基底膜の動態を同時に2色イメージングすることにより、樹状突起の再編の過程においてMmp2が基底膜に作用する様子を解析する。2、再編を制御する基底膜分子を同定するために、平成23年度に発見した樹状突起の再編に伴って分布が変化する分子(collagenIV、syndecan、perlecan)の変異体の解析を進める。一方では、基底膜に作用して機能するWnt,ヘッジホッグ等のモルフォゲンやガイダンス分子が樹状突起の形態形成を制御することが報告されている(Singh et al., Development (2010) 137:1351-1360)。そこで、基底膜分子に加えて、これらの分子群にも着目し、その動態と変異体による機能解析を同様におこなう。3、樹状突起の再編において、樹状突起が基底膜の分解再編をどのように感知し、応答するかを明らかにするために、全遺伝子の網羅的探索をおこなう。具体的には、当初計画したRNAiスクリーンに加えて、EMSを利用した変異体スクリーンを実施する。こうすることで、より確実に候補遺伝子を網羅できると考えている。獲得された候補遺伝子が樹状突起の再編にどのように作用しているのかを調査することによって、樹状突起の再編を制御する分子間ネットワークを同定し、その作動原理を明らかにする。【消耗品】分子生物学実験では、PCR、シーケンス、制限酵素処理、組換えDNA構築、免疫染色、組織処理をおこなうための酵素、抗体、薬剤が必要である。また、これらの実験をおこなうために、ピペットチップ、エッペンドルフチューブ、遠沈管が必要である。ショウジョウバエ実験には、ハエ、餌、飼育ビンが必要である。これら物品の購入に研究費を使用する。【旅費等】平成24年度は日本発生生物学会(兵庫)と日本分子生物学会年会(福岡)にて成果発表をおこなう。国際学術誌に本研究成果を発表する。これらのため、旅費交通費と学術誌上での発表料に研究費を使用する。
水牛の代謝エネルギ-節減特質に関する比較研究

I、タイ国において水牛とタイ在来牛のル-メン液のturnover rateを、消化性および体温調節機能と関連づけて比較検討した。すなわち、タイ国カセサ-ト大学農場で飼育しているタイ沼沢水牛およびタイ在来牛に、ル-メンフィステルを装着して実験に供した。飼料には新鮮な青刈ギニアグラスを用い、液相の指標物質としてCoーEDTA水溶液を本実験の採食直前に投与した。ル-メン液は3時間ごとに採取し、Co濃度とル-メン液浸透圧のほか血漿の浸透圧も測定した。得られた結果は以下(1)(6)の如くであった。(1)乾物摂取量は牛の方が高かった。(2)代謝体重当りの水分摂取量には差が認められなかった。(3)ル-メン液容積は水牛の方が大きかった。(4)ル-メン液turnover rateは水牛の方が低かった。(5)代謝体重当りのル-メン液流出量には差がなかった。(6)ル-メン液浸透圧と血液浸透圧の間には、両種とも差が認められなかった。水牛のル-メン液turnover rateが低い理由は唾液の分泌量が少ないためではなく、ル-メン壁からの水分吸収が牛より活発で指標物質が濃縮されるためと考えられる。II、農林水産省畜産試験場のズ-トロンにおいて、20°C、30°Cおよび35°C(RHはいずれも60%)の試験区を設定して、水牛とホルスタイン牛の血液量、細胞外水分量、血球量、血漿量、浸透圧、ADH濃度、アルデステロン濃度等を測定した。得られた結果は以下(1)(4)の如くであった。(1)牛の血液量は高温度環境下に移しても大きくは変化しなかったのに対して、水牛では有意に増加した。(2)水牛の血液量の増加は血漿量の増加に基づくものであり、総血球量には変化が見られなかった。(3)高温度環境下では水牛の血液浸透圧が低下したが、細胞外水分量は変化しなかったことから、水牛に認められた血漿量の増加は、主として消化管などからの水分の流入に起因するものであることが明らかになった。(4)体内水分維持作用に関係するホルモンであるADHおよびアルドステロンの濃度は、水牛においては高温度環境下でも変化せず、体内で生じた水分の移動には、これらのホルモンは直接的には関与していないことが示された。III、農林水産省畜産試験場のズ-トロンを用いて、20°C、30°Cおよぴ35°Cの温度環境下における皮ふ表面温度、皮下温度および直腸温度を、水牛と牛で比較した。それぞれの環境温度の上昇および下降は約1時間で完了することにした。得られた結果は以下(1)の如くであった。(1)環境温度が20°Cの場合、水牛の直腸温度は牛に比べて有意に低かった。(2)環境温度が20→30°C、30→35°Cと変化すると、水牛の直腸温度は牛に比べてより急激に増加した。(3)水牛の皮下温度は20°Cにおいては牛より低かったが、30°Cおよび35°Cにおいては牛より有意に高くなった。(4)水牛の皮ふ表面温度も、皮下温度と類以した変化を示した。これらの結果から、高温度環境下においては、水牛の体内対流は牛よりもより活発に進行することが示された。このような水牛に認められた体内対流の促進は、血液循環が促進されるためであり、血液循環の促進は、血漿量の増加に基づく血液粘度の低下によるものと考えられる。水牛においては、牛に比べてル-メン壁からの水分吸収がより活発なことも、血液希釈による体内対流の活性化に関係しているように思われる。

得られた結果は以下(1)(4)の如くであった。(1)牛の血液量は高温度環境下に移しても大きくは変化しなかったのに対して、水牛では有意に増加した。(2)水牛の血液量の増加は血漿量の増加に基づくものであり、総血球量には変化が見られなかった。(3)高温度環境下では水牛の血液浸透圧が低下したが、細胞外水分量は変化しなかったことから、水牛に認められた血漿量の増加は、主として消化管などからの水分の流入に起因するものであることが明らかになった。(4)体内水分維持作用に関係するホルモンであるADHおよびアルドステロンの濃度は、水牛においては高温度環境下でも変化せず、体内で生じた水分の移動には、これらのホルモンは直接的には関与していないことが示された。III、農林水産省畜産試験場のズ-トロンを用いて、20°C、30°Cおよぴ35°Cの温度環境下における皮ふ表面温度、皮下温度および直腸温度を、水牛と牛で比較した。それぞれの環境温度の上昇および下降は約1時間で完了することにした。得られた結果は以下(1)の如くであった。(1)環境温度が20°Cの場合、水牛の直腸温度は牛に比べて有意に低かった。(2)環境温度が20→30°C、30→35°Cと変化すると、水牛の直腸温度は牛に比べてより急激に増加した。(3)水牛の皮下温度は20°Cにおいては牛より低かったが、30°Cおよび35°Cにおいては牛より有意に高くなった。(4)水牛の皮ふ表面温度も、皮下温度と類以した変化を示した。これらの結果から、高温度環境下においては、水牛の体内対流は牛よりもより活発に進行することが示された。このような水牛に認められた体内対流の促進は、血液循環が促進されるためであり、血液循環の促進は、血漿量の増加に基づく血液粘度の低下によるものと考えられる。水牛においては、牛に比べてル-メン壁からの水分吸収がより活発なことも、血液希釈による体内対流の活性化に関係しているように思われる。
現代日本における社会階層の流動化と再編に関する総合的研究

この研究の目的は,現代の日本社会を対象に階層研究の新たな展開を図り,2005年に実施予定の第6回SSM調査(「社会階層と社会移動に関する全国調査」)の準備を進めることにある。この目的に沿って,過去5回のSSM調査データを用いた階層研究の理論的及び実証的な検討と,独自のパイロット調査による方法論的な検討を行った。既存データの分析に関して,近藤(2005)はSSM調査データに対し2段階最小二乗法を適用し,間接的に推定された親の所得から若年世代の教育達成をリアルタイムで分析する方法について検討した。そうした検討から,SSM調査データの広範な利用可能性が社会学のみならず教育学や経済学などの隣接分野に向けて示された。さらに,ライフヒストリー・カレンダー(Life History Calendar)法による面接聴き取り調査を仙台,大阪,島根の3地点で実施し,SSM調査の基本となる回顧的データの収集と分析の技法について集中的な検討を行った。この調査から,個々人のライフヒストリーに関する情報を449人×45行×92列のデータ・シートとしてまとめ,それより系列的データ(sequential data)を構成して,多様な角度から分析を試みた。その結果,データ収集については,時間順序を回答者に意識させた調査方式と意識させない調査方式で回答の内容や精度が異なることが明らかとされた。また,系列的データの分析からは,現在の中高年者のライフコースが男女とも標準化されたパターンをもつこと,ライフコース全体を規定する要因として出身背景や家族状況よりも本人の教育経験が重要であること,現在の若年層ではライフコースの非標準化が進んでいることなどが確認された。最終的に,このパイロット調査の結果をもとに研究成果報告書を作成した。継続研究の初年度として、研究計画全体の方向と役割分担を確認し、以下の3つの課題について協議を進めながら関連する資料の収集を行った。(1)近年の社会変化を踏まえた階層研究の新しい課題の探求、(2)階層と移動に関するデータ収集技法の改善、(3)階層と移動に関するデータ分析の方法的革新。なお、協議の一部は、日本の階層研究に関わる他の科研費グループとも連携をとりながら共同で進めた。課題(1)については、児童・生徒の学力や教育費の問題など学校制度における近年の顕著な変化と社会階層との関係、若年層の就業行動や意識からみた脱階層志向の現状、労働市場における職業威信構造の長期的な変化について、女子就業に焦点を当てた階層システムの国際比較の可能性、社会関係資本の観点から把握された信頼と階層の連関構造、等々の問題を取り上げ、階層研究全体の流れに位置づけながら各々の意義について検討した。課題(2)については、回顧的データの収集技法について再検討を行った。また、ISCO等の国際標準職業分類の利用についても検討し、外国の階層研究で用いられている各種の職業的地位指標を資料として収集した。次年度に、これらの検討結果を踏まえて予備的な調査を行う予定である。課題(3)については、移動表分析における安田指数とログリニア・モデルの適用に関して、初職移動と職歴移動を同時に分析するなど幾つかの実験的な試みを行った。継続研究の中間年にあたる本年度は、現代社会の階層構造に見合う新しいデータ収集及び分析技法の開拓を目的として、統計調査と口述誌を結合させた実験的な調査を行った。この調査は、ライフコース研究の分野で用いられることのある「人生史カレンダー法」(Life History Calendar)を、個人の地位形成に焦点を当てて応用したもので、この調査法の導入により、従来の階層研究の中心であった量的なアプローチにエスノグラフィー的手法に代表される質的なアプローチを重ねることが可能となった。

具体的には、居住歴、教育歴、職業歴、家族歴に関する個々人のライフヒストリーを1年単位で連続的に記録し、それと関連づけて自分自身の経歴に対する評価や社会的な態度をデータ化した。調査は、ライフヒストリーを記録するA票と意識項目を中心とするB票の2種類の調査票を用いて、宮城県、大阪府、島根県を調査地域に、研究分担者の所属大学の学生を主たる調査員として、平成15年12月平成16年1月の期間に実施した。実験的な試みであるので、できるだけ多様なパターンを集めることに主眼をおき、合計449のケースを機縁法により収集した。現在、1ケースの情報をExcelのシート1枚に収める形でコウディング作業を進めているが、この調査法に関して本邦に先例は見当たらないので、データ収集のみならずコウディングや集計も先駆的な試みとなる。今後は、現在のコウディング作業を平成16年5月までに終え、ライフヒストリー・データを用いた階層研究の可能性についてさらに検討を進めていく予定である。まず,昨年度に実施したLHC(Life History Calendar)調査について,職歴等のデータ・コーディング作業を完了させ,その情報を449人×45行×92列のデータ・シートにまとめた。このデータの特徴は,居住・教育・職業・家族等に関する個人の情報を一年単位の時間軸にそって系列的データ(sequential data)として整理し,ライフコース上の諸々の出来事を個人史及び社会史の全体的観点から俯瞰できるようにしたところにある。つぎに,このLHC調査データを用いて研究課題に関連するさまざまな検討を行った。1つは,世代ごとのライフコースの特徴を抽出し,社会階層の様態を明らかにすることである。それより,中高年者のライフコースが男女とも標準化されたパターンをもつこと,そこにおいて教育経験がライフコース全体を規定する中心要因となっていること,それと同時に資格取得や転職といった若年時の経験が中高年時の職業的地位に一定程度の影響力を持つこと,これに対して若年者ではライフコースの非標準化傾向が進んでいること,等が確認された。もう1つは方法的な検討であり,これは系列的データの収集法と系列的データの分析法の両面から行った。データ収集については,時間順序を意識させない調査方式と時間順序を意識させた調査方式での回答精度の違い,前者での回答内容と後者での回答内容の対応関係等をLHC調査と既存の階層調査の比較から検討した。データ分析については,LHC調査データに対して「決定木分析」「最適マッチング分析」「ラグ系列分析」等を当てはめ,それらの手法の階層研究への適合について検討した。最終的に,これらの研究成果を,2005年SSM調査の実施を共通目的とする共同の研究会で報告するとともに,報告書冊子としてまとめた。
Cuナノワイヤを基軸にした高性能・高耐久な透明導電膜の創製と太陽電池応用

酸化インジウムスズは、太陽電池の透明導電膜として使用されているが、Inの希少性や毒性の観点から、Cuナノワイヤへの代替が検討されている。しかし、Cuナノワイヤは酸化により、安定性が低く、従来法で合成されたCuナノワイヤは実用化に耐えうる特性を発現できていない。代表者はこれまで低環境負荷な手法を基礎として、Cuナノ材料の合成・表面制御法を開発している。そこで、本技術をナノワイヤへ応用、展開し、高性能・高耐久なCuナノワイヤ透明導電膜を低コストに創出し、太陽電池の低コスト・高効率化を試みる。
FDG PET腫瘍診断と腫瘍遺伝子変異の関連に基づくテーラーメイド医療の開発

FDG(フルオロデオキシグルコース)PET(ポジトロン断層撮影)による腫瘍ブドウ糖代謝評価と病理組織を対比し、FDG PETにより微視的変化を予測することに挑戦した。膵癌において、FDGの最大集積度が腫瘍浸潤と関連することが明らかとなり、膵癌診療における治療方針決定のテーラーメイド化に必要な知見に役立つことが明らかとなった。また、手術不能と判定された症例と、手術症例の比較によって、腫瘍容積が治療方針に過大に影響していることも明らかとなり、FDGの最大集積度が治療方針決定により重要であることが示唆された。また、腫瘍細胞中のp53遺伝子変異がFDGの取り込みに影響していることも明らかとなった。予定通り、膵臓癌を第1の検討対象患者群として選択した。H26年度は予定通り、症例の選択(ステップ1)と、画像および肉眼的病理所見の解析(ステップ2,3)を行った。2010年より2014年にかけて行われたFDG PET症例の内、外科切除対象となり、病理学的検討が可能であったのは16例であった。画像解析としては、腫瘍のSUVmax値(FDGの集積の半定量的評価基準)および正常肝と腫瘍のSUVの比(Tumor to Liver Ratio: TLB)を60分値、90分値でそれぞれ求めた。また、腫瘍における90分と60分のSUVmax値の差分(SUVincrease)を検討した。病理組織上の所見として、静脈侵襲(v),リンパ管侵襲(ly),膵内神経浸潤(ne)との関係を検討した。静脈侵襲とFDG PETのパラメーターの間では、SUVincreaseおよび90分のSUVmaxの値で有意な相関が認められ、静脈浸潤が強いほどFDGの集積パラメーターが大きくなった。神経浸潤との間では、同じくFDGの集積度と侵襲度に関係の傾向が見られたが、有意性に達さなかった。一方、リンパ管侵襲については、FDGと全く関係が認められなかった。このことから、静脈侵襲、神経浸潤の予測因子としてFDG PETが治療の個別化(テーラーメイド医療)に役立つ可能性が示されたが、リンパ管侵襲の予測因子となる可能性が低いことも、また明らかとなった。また、H27年度以降に行われる遺伝子解析(ステップ4)の予備調査として、細胞株H1299におけるp53の変異(123A, 175H, 273H)とFDGの取り込みの関係の検討を行った。p53が正常の場合は抑制の傾向があり、変異した場合は亢進の傾向が見られた。この予備検討の結果を利用して、H27年度のステップ4における解析すべき遺伝子変異のターゲットがある程度絞り込めたものと思われる。H26年度に引き続き、2010年より2014年にかけて当院にて行われたFDG PET症例の内、膵臓癌を第1の検討対象患者群として選択して、FDG PET画像による検討および、病理標本との対比を行った(ステップ2,3)。腫瘍のSUVmax値(FDGの集積の半定量的評価基準)および正常肝と腫瘍のSUVの比(Tumor to Background Ratio: TBR)を60分値、90分値でそれぞれ求めた。また、SUVmax, TBRのそれぞれの90分と60分値の差分値(SUV-diff, TBR-diff)を検討した。現時点では、病理学的検討が可能であった症例は15例である。静脈侵襲(v),リンパ管侵襲(ly),膵内神経浸潤(ne)をそれぞれ侵襲無し(0)から強い侵襲(3)に4段階に分類し、統計学的に関係を求めた。また、FDG PETの60分でのパラメーターと、90分でのパラメータのいずれが、病理学的侵襲度の予測により役立つかを検討した。静脈侵襲においてのみFDGのパラメーターと病理所見の間に統計学的に有意な関係が見られた。また、神経侵襲についても、統計学的な有意性には至らなかったが、侵襲度の間に一定の関係が見られた。v, neともに、90分後像および60分後像と90分後の差分値で、より関係が明瞭になる傾向が見られ、病理学的進展度の予測には通常の投与後60分撮影よりも、90分後撮影が優位性を持つことが明らかとなり、FDG PETによる腫瘍進展度の予測を用いたテーラーメイド治療のためにはFDG PETの撮像時間を通常の60分より遅い撮像時間にすることが有効であることが明らかとなった。ただし、リンパ管侵襲については、全くFDGとの関係が認められなかった。この、FDGの集積度、FDGの投与後撮影までの時間、と病理学的な進展度の対比については、今まで報告がなく、新たな知見である。研究分担者の一部の学外への異動、退職に伴い、遺伝子解析(ステップ4)の段階の検討が遅れている。また、初年度に明らかとなった症例数の少なさが克服できていない。一方で、病理学的所見とFDGの集積に関連性においては、従来ほとんど報告のないFDG90分後像との関連性が得られ、2015年の欧州核医学会において、一部結果を発表できたことが成果である。この新たな知見を生かすため、膵癌症例数を増やすことを考える。このために院内で、現在一つの外科にのみ限定していた症例を、複数の外科に協力を依頼することを計画する。

最終年度は、前年度までに選択された膵臓癌の術後症例をさらに一部追加すると共に、非手術症例についての検討も行った。病理所見として、静脈侵襲,リンパ管侵襲,膵内神経浸潤との関係を検討したところ、静脈侵襲の程度とSUVmaxの間に関係が見られた一方、TLGとの関係が認められなかった。多くの研究で予後その他の評価にSUVよりも優れているとされるTLGが、本研究対象例ではむしろ評価能力が劣る結果となった。一方で、手術できた症例と手術不能であった症例の間では、TLGが明らかに大きな有意差を認めた。このことは、術前の治療方針決定には腫瘍容積の要素が過大に評価されているが、実際の腫瘍進展度は、容積よりも腫瘍の最大代謝能力がより優れた予測能力を示すことを意味しており、治療方針決定のテーラーメイド化に有用な結果であると考えられた。遺伝子解析については、十分な症例数、サンプル量が得られなかったため、現在のところ有意な結果が得られていない。今後助成期間終了後も、次世代シークエンサーの利用法の改善、症例・サンプル数の増加によって、さらなる検討を進める予定である。FDG(フルオロデオキシグルコース)PET(ポジトロン断層撮影)による腫瘍ブドウ糖代謝評価と病理組織を対比し、FDG PETにより微視的変化を予測することに挑戦した。膵癌において、FDGの最大集積度が腫瘍浸潤と関連することが明らかとなり、膵癌診療における治療方針決定のテーラーメイド化に必要な知見に役立つことが明らかとなった。また、手術不能と判定された症例と、手術症例の比較によって、腫瘍容積が治療方針に過大に影響していることも明らかとなり、FDGの最大集積度が治療方針決定により重要であることが示唆された。また、腫瘍細胞中のp53遺伝子変異がFDGの取り込みに影響していることも明らかとなった。初年度の目的である、症例の選択(ステップ1)と、画像および肉眼的病理所見の解析(ステップ2,3)を行うことができたが、症例数が当初の予測以上に少ないことが判明した。これがやや遅れていると判断した要因である。対象症例を膵臓癌に限定したことが主な原因と考えられる。一方で、基礎実験を追加することで、次年度の遺伝子解析(ステップ4)の準備が進んだことは、今後の進捗によい影響を与えると考える。症例追加(ステップ1b)を実行する。このため、現在長崎大学第一外科にのみ依頼をしていた症例協力を、第二外科にも依頼することで、症例の倍増が期待される。症例の増加を見たところで、遺伝子解析(ステップ4)に移行するが、現在FDG PETの90分後撮影と、病理所見の間に関連があり、テーラーメイド治療のためには90分後撮影が望ましいとする、新たな知見が得られているため、この知見を生かすために、膵癌以外の遺伝子解析が期待できない症例(肺がんなど)についても、遺伝子解析を含まない病理学的解析を行い、FDG PETのテーラーメイド治療への応用性を模索する。核医学現時点で対象となった症例数が予想以上に少ないため、計画にある症例追加(ステップ1b)を実行する。膵癌にのみ症例を絞ることが症例数の少なさに繋がっていると考えられるため、外科との協議にて、膵以外の肝・胆道系腫瘍も対象症例として追加することを行う。肺癌を追加することも、症例数の増加に有効な手段と思われ考慮に値するが、現時点で協議中である。また、遺伝子解析(ステップ4)の実行にはある程度の症例数の蓄積が必要であるため、いくらかの遅れが予想される。このため、初年度に行った基礎実験を一部継続することで、解析すべき遺伝子をある程度絞り込み、今後の進捗を早めるための情報に役立てる予定である。
DNA複製とストレス応答におけるHERC2の機能解析

グアニン四重鎖(G4)特異的抗体(BG4抗体)によって細胞内G4を可視化して、G4の蓄積に協働する一連の分子群に対するHERC2分子の役割解析を行った。BLM-RPA結合がHERC2に依存的で、HERC2がBLM-RPA結合の制御を介してG4の解除を行っていることを明らかにした。BLM-RPA結合だけではなく、WRN-RPA結合もHERC2に依存的であって、HERC2はWRN-RPA結合の制御も同時に駆使して、G4の解除制御を行なっていた。BLMとWRNの機能不全時高頻度に見られる姉妹染色分体交換がHERC2の欠失やE3活性の失活時も同様に高頻度的に見られた。HERC2は姉妹染色分体交換の誘導に抑止機能を果たしていた。HERC2はRPAのヘリカーゼへのアセンブリを調整することによってG4の解除制御や姉妹染色分体交換の抑止に機能していることを明らかにした。人工合成DNAを用いたvitro解析では、HERC2がRPA分子を一本鎖DNAにドッキングさせていたことが分かった。免疫染色の解析では複製ストレス応答時一本鎖DNA上に集積したRPA分子とHERC2分子の共局在関係が解消され、HERC2分子が一本鎖DNAにRPA分子を装着させる役割がより明白になった。HERC2はRPA分子の新規ユビキチンリガーゼで、RPA分子をユビキチン化していた。G4の解除制御に機能している可能性も示されたが、このユビキチン修飾の分子学的な意義を解明することができなかった。今後の課題として検討する必要があった。Clonogenic survival解析ではHERC2の欠失やE3活性の失活細胞がDNA架橋剤や複製阻害薬に対して高い感受性を示さなかったが、PyridostatinおよびTelomestatinなどのG4安定化剤に対して高い薬剤感受性を示された。G4安定化剤が新規分子標的薬になりうる可能性を示した。本年度は計画に沿って研究を遂行した。表現型の解析にDNAコーミング法による複製ストレス時の複製フォーク伸長および複製起点発火の解析や複製ストレスによるチェックポイントの変化解析ではHERC2とBLM複合体との相関性を明らかにするができなかった。いずれも複数の関連因子がほぼ同時に同一経路に関わっていることにより、このような解析手法では結果を得ることが困難と結論をつけた。蛍光免疫染色解析では、HERC2分子とストレス応答時核内foci形成するRPA分子との共局在が解消されて、BLMやWRNとの共局在も解除されたことから、RPA分子がヘリカーゼへのアクセスにはHERC2分子のスキャフォルド的な役割が極めて重要と考え、HERC2分子が一本鎖DNAにRPA分子を装着する仮説を立て、vitro実験で検証して、HERC2がBLMと複合体形成することはBLM機能に与える影響が極めて大きいと結論をつけた。この研究にとっては大きな前進だった。HERC2の欠失やE3活性の失活によるG4の蓄積やSCEの亢進について、siRNAを用いた実験の解析では、HERC2が細胞内最も重要な二つのヘリカーゼであるBLMおよびWRNとRPAの結合を調節することによってG4制御と姉妹染色分体交換の抑止に機能していることが明らかになった。薬剤感受性の解析では、HERC2の欠失やE3活性の失活細胞はDNA架橋剤や複製阻害薬などの薬剤に対して高い感受性は示さず、G4安定化剤だけに特異性の高い薬剤感受性を示した結果が得られた、G4安定化剤が新規分子標的薬になりうる可能性を示した。研究結果を第77回日本癌学会学術総会にて発表し、Cancer Res.誌に公表した。研究期間内に明らかにする予定目標がほぼ達成できた。本年度の研究で、予定していた研究期間内に明らかにする目標がほぼ達成でき、論文をまとめ、公表したが、研究を進めていく過程で、新たな課題も幾つか浮かび上がってきた。HERC2やDNA損傷応答に関する新たな知見の発掘に更なる挑戦をしていきたいと考えている。HERC2はRPA2の新規ユビキチンリガーゼであることを本研究によって明らかになった。これは本来想定していた結果ではなかったが、HERC2のE3活性喪失がヘリカーゼBLMおよびWRNとRPA分子の結合に大きな影響を与え、G4の蓄積と高頻度の姉妹染色分体交換も誘発されたため、このユビキチン化修飾は生体にとって最も重要な二つのヘリカーゼであるBLMおよびWRNの機能調節や、G4の解除制御機構にも極めて重要であることが示唆された。その生物学的意義の解明は極めて重要である。このユビキチン化修飾は細胞内のどこで起こるか、どのようなシグナルによって誘発されるか、またはどのようなシグナルとして機能するか、どのようなユビキチン鎖が付加されるかなど、新たに多くの問題が生じた。これらの問題解決に向け、解析をさらに進めていきたいと考えている。RPA2のユビキチンリガーゼにはRFWD3とPRP-19が既に同定されている。

RFWD3とPRP-19はDNA損傷修復の過程でRPA2をユビキチン化することによって修復タンパク質のリクルートやRPA分子のクロマチンからの解離促進で相同組換え修復に機能するとも言われているが、果たしてHERC2のRPA2に対するユビキチン修飾も相同組換えに機能するのか、それともG4の解除制御に特化したシグナルとして機能するのか、RFWD3とPRP-19によって付加されるユビキチン鎖との違いに着目し、比較解析しながら、HERC2のG4解除制御と姉妹染色分体交換抑止機能の具体的な仕組みを明らかにしていきたいと考えている。HERC2とMCMおよびBLMとの相互作用の解析を行った。1)Thymidine-nocodazole block細胞同調法にて、細胞周期におけるHERC2とMCM及びBLM複合体の結合を免疫沈降にて解析した。HERC2とMCM及びBLM複合体は細胞周期依存的に形成された。分裂期およびG1期ではHERC2とMCM及びBLMを結合しなかった。合成期でMCM及びBLMとRPAの複合体形成はHERC2依存的だった。HERC2とMCM及びBLMとの相互作用はDNA複製に関与するのを示唆された結果であった。2)上記細胞分画解析では、HERC2とMCM及びBLMの複合体が主に可溶化核分画に局在し、クロマチン分画から検出されなかった。これらの複合体はDNA複製に必要なRPA分子を複製DNA領域上に引き渡す役割を果たしているような結果であった。3)HERC2がBLMのストレス応答機能に極めて重要な分子であることが明らかになった。MMC、HUで複製ストレスを加えた際、HERC2分子がBLM複合体を安定化させる機能を果たしていた。HERC2の非存在下では、BLM複合体が安定形成できず、RPA分子とも結合しなかったため、細胞のストレス応答に障害が来した。複合体形成様式の解析について、MCM複合体、BLM複合体、RPA複合体、BRCA1のそれぞれの構成因子をsiRNAにて発現抑制し、他の構成因子の結合状況を免疫沈降にて解析した。RPA複合体が他の複合体との結合はHERC2依存的だった。HERC2のC末端を介在して複合体間の結合が起き、その機能を果たしていた。ストレス応答時、HERC2欠失やまたはそのE3活性の失活でBLM-RPA複合体およびMCM-RPA複合体は核可溶分画からクロマチン分画に移動できず、BLM機能障害が生じていたのも明らかになった。本年度は計画に沿って研究を実施した。HERC2とMCMおよびBLMとの相互作用の解析とこれらの複合体の結合様式の解析はほぼ完了した。ストレス応答時、BLM-RPA複合体とMCM-RPA複合体が細胞分画間の移動状況も解析した。BLM-RPA複合体とMCM-RPAの形成はHERC2分子に依存し、細胞周期制御やストレス応答に機能していることを明らかにした。これらの結果から来年度はほぼ予定通りに研究計画が展開できると予想する。BLMのグアニン四重鎖の制御機能にHERC2が関わっていることが明らかになったため、その分子機構についてさらなる解析が今後の研究展開になるとも考え、予定していたImportinにおけるHERC2の役割の解析を一旦停止し、BLMのグアニン四重鎖の制御の分子機構解明に研究計画に付け加えた。グアニン四重鎖(G4)特異的抗体(BG4抗体)によって細胞内G4を可視化して、G4の蓄積に協働する一連の分子群に対するHERC2分子の役割解析を行った。BLM-RPA結合がHERC2に依存的で、HERC2がBLM-RPA結合の制御を介してG4の解除を行っていることを明らかにした。BLM-RPA結合だけではなく、WRN-RPA結合もHERC2に依存的であって、HERC2はWRN-RPA結合の制御も同時に駆使して、G4の解除制御を行なっていた。
重症心身障害児におけるパーソナルコンピュータを用いた意思伝達手段の形成

本研究の対象児童は重症心身障害児のなかでも、比較的知能障害の軽度なもので潜在的コミュニケーション能力が高いと認められる児童1名(7歳3か月)である。本児に対しては、まず運動機能障害の様相やコミュニケーション欲求、手段とその内容について多角的に検討した。その結果、コミュニケーションのために使用可能な随意運動としては右上肢の親指と小指であることがわかった。また、これらの指の可動範囲は座位をとった本児の右体側のかなり狭い領域に限定されていること、さらにその姿勢では視線が左上方向に向きやすいことが明らかになった。そこで、本児の見やすい位置にモニターを設置するとともに、親指と小指で操作可能なスティック状の補助入力装置を試作した。学習課題としては本児の好きなくだものの絵のペインティング学習を取り入れた。その結果、従来では課題設定が困難であった麻痺の強い児童もうまく絵を描くことが可能になった。
大規模堆積盆地の長周期地震動の形成作用に関する研究

中・大地震により関東堆積盆地において励起された長周期地震動(周期410秒)の大きさと卓越周期の特徴を調べた。その結果、上下動と水平動のフーリエスペクトルを比較すると、水平動のほうが振幅が大きく卓越周期が長い特徴がみられた。この結果は、解析した長周期地震動についてはLove波が支配的であることを示唆する。また、房総半島の中央部では卓越周期が長くなる現象がみられた。関東堆積盆地の地震波速度構造モデル(SBVSM)を用いた長周期地震動シミュレーションでは、観測された長周期地震動の振幅と包絡線形状を概ね再現できることが確認された。本研究の主な目的は、大規模な堆積盆地がどのような地震波応答によって大振幅かつ継続時間の長い長周期地震動(表面波:Love波およびRayleigh波)を励起するのか、その励起過程を観測波形の解析から明らかにするとともに、明らかにされた表面波の励起過程を三次元数値シミュレーションに基づいて物理的に解釈することにより、その背景にある波動論的作用を解明することにある。本研究(期間3年)の一年目にあたる本年度は、主に、地震防災上の観点から社会的な注目度が特に高い関東堆積盆地に敷設された強震観測網(K-NET/KiK-net)および首都圏強震動総合ネットワーク(SK-net)の波形記録を対象とし、水平動記録と上下動記録を独立に解析することにより、周期210秒の帯域の表面波(Love波およびRayleigh波)により励起される長周期地震動の震央方位別の大きさと卓越周期の特徴を詳しく調べた。得られた研究成果の詳細については、現在までの進捗状況の項目において紹介する。また、本年度の研究では、盆地堆積層の地震波速度構造をYoshimoto and Takemura (2014)の手法によりモデル化し、中規模地震を対象とした差分法地震動シミュレーションにより堆積盆地端部の地震波速度構造を推定するための解析手法を開発した。さらに、この解析手法を関東堆積盆地北部に適用して有効性を検証した。この研究成果については国際学術誌に投稿した。関東堆積盆地における長周期地震動の大きさと卓越周期の震央方位依存性を、同堆積盆地の周囲で発生した計15の中・大地震(Mw5.86.9)を対象として精査し、以下の特徴を明らかにした。・上下動と水平動のフーリエスペクトルを比較すると、水平動の振幅のほうが大きく、卓越周期も長い傾向がある。平均的な卓越周期は、上下動と水平動でそれぞれ4.8秒と6.1秒であった。これらの結果は、関東堆積盆地の長周期地震動の励起においてはLove波が支配的であることを示唆する。・長周期地震動の卓越周期は、地震基盤深度2km以浅では地震基盤深度の増大とともに長くなる特徴がある。一方で、地震基盤深度2km以深では周期34、6、9秒程度の地震動が卓越する傾向がある。・周期34秒と周期6秒の地震動については既往研究と整合的(それぞれ、震源断層の破壊継続時間と堆積層により特に強く励起されるLove波の周期に対応する)である。その一方で、周期9秒程度の地震動の成因については不明であり、今後の研究課題である。本研究(期間3年)の2年目にあたる本年度は、主に、(1)近地地震の震源リストの作成とイベント地震波形のデータベースの構築、(2)関東堆積盆地内で観測された長周期地震動(周期220秒)の大きさと卓越周期および震央方位変化に関する研究、(3)長周期地震動を引き起こす表面波(Love波およびRayleigh波)の位相速度をアレイ解析によって推定する方法についての検討などを遂行した。得られた研究成果は、国内の学会や国際学会などで発表した。これらの研究成果の詳細については、現在までの進捗状況の項目において紹介する。また、地震動の継続時間に関連した研究として、地震波速度変化に対するコーダ波の感度カーネルを三次元ベクトル波一次散乱モデルに基づいて評価した。この研究成果については国際学術誌で発表した。以上のように、本研究はこれまでの2年間、当初の研究計画どおりに概ね順調に進展している。これまでの研究成果を踏まえて、研究の最終年の平成29年度には今後の研究の推進方策に示す内容の研究を遂行する。本研究の2年目の平成28年度には、主に以下のような研究成果が得られた。・関東堆積盆地内のK-NET/KiK-netおよびSK-netの強震記録を水平動成分と上下動成分に分けて解析し、周期220秒の帯域の長周期地震動の大きさと卓越周期および震央方位変化について詳しく調べた。その結果、震央方位により発生する長周期地震動の地域分布に大きな差異が見られることを確認した。水平動と上下動のスペクトルを比較すると、水平動の方が振幅が大きく、卓越周期も長いことがわかった。この結果は、関東堆積盆地の長周期地震動においてはLove波が支配的であることを示唆するものである。

また、水平動の長周期地震動の卓越周期は、地震基盤深度2km以浅では地震基盤深度の増大とともにほぼ比例して長周期化するが、地震基盤深度2km以深では地域差が無視できないことが明らかになった。房総半島の中央部で特に卓越周期が長くなる現象が確認された。・関東堆積盆地の地震波速度構造モデルSBVSM(増田・他2014; Takemura et al. 2015)を対象とし、関東平野南東部で発生した中規模地震の長周期地震動シュミレーションにより、東京湾周辺を含む関東堆積盆地の南部における長周期地震動の再現性を評価するとともに、SBVSMの改良の可能性について検討した。・近接した地震観測点で収録された地震波形データを対象とし、長周期地震動を引き起こす表面波の位相速度をアレイ解析により推定する方法について検討した。その結果、Rayleigh波では基本モードと高次モードが同程度に発達するため解析が困難になるが、Love波では基本モードが主に発達するため解析しやすいことが確認できた。・地震波速度変化に対するコーダ波の感度カーネルを三次元ベクトル波一次散乱モデルに基づいて評価し、その研究成果を国際学術誌で発表した。関東堆積盆地における長周期地震動の大きさと卓越周期を、その周囲で発生した計15の中・大地震(Mw5.86.9)を対象として調査した。その結果、震央方位によって長周期地震動の地域分布に大きな差異が現れることを確認した。また、上下動と水平動のフーリエスペクトルを比較すると、水平動振幅のほうが大きく、卓越周期が長い特徴がみられた。平均的な卓越周期は、地震基盤深度2 km以深の場所で、上下動と水平動でそれぞれ4.8秒と6.1秒であった。これらの結果は、関東堆積盆地の長周期地震動の励起においてはLove波が支配的であることを示唆する。水平動の長周期地震動の卓越周期は、地震基盤深度2 km以浅の場所では地震基盤深度にほぼ比例して長くなるが、地震基盤深度2 km以深の場所では概ね一定(67秒)になる特徴が確認された。ただし、房総半島の中央部では卓越周期が9秒程度にまで長くなる現象がみられた。関東堆積盆地の地震波速度構造モデルSmoothed Basin Velocity Structure Model (SBVSM) (増田・他2014; Takemura et al. 2015)を用いた中規模地震の長周期地震動シミュレーションにより、関東堆積盆地南部における長周期地震動の特徴を評価した。その結果、SBVSMは観測された長周期地震動の振幅、包絡線形状、継続時間を概ね再現するものの、東京湾周辺では長周期地震動の大きさと卓越周期を過小評価することがわかった。この傾向は、房総半島の中央部を含む東京湾周辺の堆積層浅部(深度2 km以浅)の地震波速度が、関東堆積盆地内のその他の地域と比べて相対的に小さくなっていることにより説明できることを示した。さらに、海底地震計で収録された地震波形の解析から、海域の相模湾の堆積層上でも長周期地震動が発生していることを確認した。中・大地震により関東堆積盆地において励起された長周期地震動(周期410秒)の大きさと卓越周期の特徴を調べた。その結果、上下動と水平動のフーリエスペクトルを比較すると、水平動のほうが振幅が大きく卓越周期が長い特徴がみられた。この結果は、解析した長周期地震動についてはLove波が支配的であることを示唆する。また、房総半島の中央部では卓越周期が長くなる現象がみられた。
巨大地震時の粘性土の繰り返し挙動と構成モデル

兵庫県南部地震における地盤災害として砂質土の液状化の問題がクローズアップされたが、大阪湾周辺等大都市臨海部では厚い沖積粘土層が堆積している。マグニチュード7クラス以上の巨大地震下における地盤の耐震性能の正確な把握には沖積粘土の地震時地盤挙動に対する役割を明らかにすることが重要である。このため液状化に比べて手薄であった粘性土の繰り返し挙動を明らかにすると共にそのモデル化を行うことが研究の目的である。1%以下の微小なひずみから10%を越える大ひずみまでの動的な挙動を説明しうるモデル化である。このため、繰り返し載荷装置を設置した中空ねじり試験を深草粘土で行った。さらに、既往のデータとすでに提案している非線形移動硬化則に基づく弾粘塑性モデルを基礎に、新たに高周波数域におけるエネルギー消散をモデル化するため、粘弾性3要素モデルを組み込んだ繰り返し弾粘ー連塑性構成式を提案した。また、兵庫県南部地震のデータを用いて神戸市ポートアイランドにおける一次元地震時のシミュレーションを行い、粘土層のモデル化の影響を明らかにした。兵庫県南部地震における地盤災害として砂質土の液状化の問題がクローズアップされたが、大阪湾沿岸部では海岸部に海成の沖積粘土層が厚く堆積している。大都市臨海部では厚い沖積粘土層が堆積している。地盤の耐震性能の把握には沖積及び沖積粘土の地震時地盤挙動に対する役割を明らかにすることはは重要である。このため、砂液状化挙動に比較し手薄であった粘性土の繰り返し載荷時の変形挙動を明らかにすることが本研究の目的である。特に、マグニチュード7クラスの巨大地震時などので見られる、微小ひずみから数%から10%を越えるような大ひずみまでの挙動の構成モデル化を行うことである。広いひずみと周波数レベルで適用可能な粘弾性と粘塑性を考慮した繰り返し構成式の開発が必要である。このため、本年度は次のような研究を行った。現有の中空ねじり試験機に、繰り返し載荷装置を新たに設置し、均質な試料として再圧密された深草粘土を用いた予備実験を行い、本年度の試験実施に関する知見及び注意点を明らかにした。さらに、非線形移動硬化則に基づく弾粘塑性構成式に関して、硬化則のさらなる一般化を行ない、その妥当性を数値シミュレーションにより行った。また、兵庫県南部地震でのデータに基づき、神戸市ポートアイランドにおいて、沖積粘土層を簡易繰り返し弾粘塑性構成式でモデル化した、一次元地震時挙動解析を行いその有効性を明らかにしている。このため、繰り返し載荷装置を設置した中空ねじり試験を深草粘土の対して行った。さらに、既往のデータとすでに提案している非線形移動硬化則にもとづく弾粘塑性モデルを基礎に、新たに高周波数域におけるエネルーギ消散をモデル化するため粘弾性3要素モデルを組み込んだ繰り返し粘弾-粘塑性構成式を提案した。また、兵庫県南部地震のデータを用いて神戸市ポートアイランドにおける一次元地震時挙動のシミュレーションを行い、粘土層のモデル化の影響を明らかにした。