hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
光水素発生デバイスにおけるエネルギー制御空間の開拓

これにより、光水素発生がRu錯体部のMLCT遷移によって誘起されること、及び錯体の紫外光分解が抑制されることが判明した。他方、このデバイスの断片構造を持つ白金単核錯体は、[Ru(bpy)_3]^<2+>(or[Ru(bpy)_2(5-amino-phen)]^<2+>)、及び2mM MV^<2+>の非存在下において行ったところ、光水素生成能が消失した。これらの比較にから、2種の錯体分子がペプチド結合したことによって単一分子光水素発生機能が発現したこと、及びその機能が光分解物によるものではないことが確認された。この他、以前合成した各種白金ルテニウム多核錯体(光水素生成機能を示さなかったもの)と光水素発生デバイスに関し、光吸収及び発光特性、ならびに電気化学的性質の比較検討を行った。その結果、Ru(bpy)_3^<2+>特有の発光および電気化学特性がある程度保持されていることが、この単一分子光水素発生デバイスの機能発現の鍵を握っていることが示唆された。光水素発生デバイスの光触媒反応機構の解明を目的とし、光水素発生速度デバイス濃度依存性を調べた。測定はデバイス濃度が0.01-0.2mMの範囲で、光照射開始後30分間の水素生成速度で比較した。MLCT吸収帯で全吸収の条件を満たす0.1-0.2mMの濃度範囲で、光水素生成速度はデバイス濃度に一次の相関を示すことが分かった。これにより、速い初期過程によって生じる反応中間体がもう一分子のデバイスと反応する過程が律速段階であることが示唆された。その他、各種白金単核錯体に対する量子化学計算を、溶媒和を考慮した条件にて行い、水素発生触媒活性と分子構造やレドックスとの相関についても比較検討を行った。水素は燃料電池との組み合わせにより、燃焼しても汚染物質を排出して空気を汚すことの無い最も有望な次世代クリーンエネルギーとして期待されている。しかし現在のところ、水素燃料を作り出すコストは水素燃料が生み出すエネルギーの価値を上回っており、実用化の域には程遠いのが現状である。本研究では、光増感能を有する[Ru(bpy)_3]^<2+>部位と、水素発生触媒能を有する白金錯体部位とを共有結合で連結することにより、単分子で光水素発生触媒能を有する多核錯体の合成を行った。特に、(a)効率よくプロトンを水素に還元する触媒反応空間の構築、及び(b)光水素発生デバイスにおける電子伝達空間の制御を目的として研究を行った。前者(a)について、これまでに、触媒中心である白金錯体が、(1)単核錯体よりも二核錯体の方が高活性、(2)二核錯体の場合、白金間距離が短いほど高活性、(3)配位子の配位子場が強いほど高活性、(4)平面性の高い配位子を持つ錯体の方が高活性、等の知見を得るに至っている。そのため、白金錯体のd_z2軌道が触媒反応に関与していると予想し、一連の白金錯体に対してd_z2軌道のエネルギーレベルをDFT計算により評価した。次いで、高い触媒作用が期待される白金錯体を設計、合成し、その光水素発生能を実験的に検証した。他方、(b)光水素発生デバイスにおける電子伝達空間の制御については、様々な架橋配位子を有するRu(II)Pt(II)二核錯体を合成し、その触媒活性の変動や光触媒機構の違いについて詳細な検討を行った。特に、架橋配位子の共役・非共役構造の違いは光水素発生挙動に大きな影響を与えることを明らかとした。
「糖尿病患者へのエンボディメントケア」の効果検証とその実用化への方略の検討

患者が自らへの気遣いを取り戻すことを目的に、エンボディメントケアプロトコールを習得した看護師が外来通院中の糖尿病患者8例に介入を行った結果、本ケアは効果が期待できることが示唆された。ケアの全過程を終了したのは5例であり、平均介入期間は9か月で平均年齢は54.4歳であった。5例における各指標の変化は、随時血糖値は5例とも低下し、HbA1cは3例が低下した。SCAQの「健康管理法の獲得と継続」「有効な支援の獲得」は5例中4例で得点が上昇した。SF-8は身体的健康は平均が48.4から52.9と上昇する一方で、精神的健康は51.9から45.3と変化し、低下の要因として生活上の変化の影響がみられた。1「糖尿病患者へのエンボディメントケア」の効果検証の準備本研究では、「糖尿病患者へのエンボディメントケア」プロトコールを習得した看護師が中心となって、現実世界での介入研究として注目されているeffectiveness researchの手法を用いて実践介入し、実際の効果を検証することを目指している。今年度は、研究準備として、研究協力者の選定や「糖尿病患者へのエンボディメントケア」プロトコールにおける介入の流れの検討、協力看護師へのサポート体制の整備、データ収集内容(基礎情報,outcome指標,effectiveness)の検討、研究実施にあたっての倫理的配慮の検討を行い、具体的な研究計画が完成した。所属機関の研究倫理委員会において承認を得て、研究開始準備が完了した。2実践者の育成と実践共同体の発展「糖尿病患者へのエンボディメントケア」プロトコールの体得を促すために、Community of Practiceの手法を用いて実践者育成ワークショップ(4か月間に5回)を開催した。今年度は10名の実践家が参加し修了した。エンボディメントケアを実践するコミュニティの発展、ワークショップ修了者の支援の活動としてはホームページを作成した。ホームページは、実践に伴う意見交換をすることにより、知識・技術・技能の伝播とコミュニティが発展できることを目指しており、双方向性コミュニケーションツールとして活用できるよう作成した。また、昨年度までに開催したワークショップにおいて、開始時と終了時に参加者の学習の軌道やコミュニティの発展についてフォーカスグループインタビューを行っている。今年度はインタビューデータの分析を行い、研究成果として発表を行った。1)「糖尿病患者へのエンボディメントケア」の効果検証の開始効果検証に際して、5名の実践者による介入の準備が整っている。3名の患者に対する介入を開始しており、各実践者の所属機関での研究倫理委員会の承認と患者選定が終わり次第、順次介入を開始する予定になっている。実践者は、「糖尿病患者へのエンボディメントケア」開発に携わった研究分担者、および研究協力者4名と、これまでに行った実践家育成のためのワークショップ修了者1名である。実践者育成の成果もあり、effectiveness researchによる「糖尿病患者へのエンボディメントケア」プロトコールを用いたケアの効果検証を実行中である。2)実践者の育成と実践共同体の発展1実践家の育成:実践者育成のために、Community of Practiceの手法を用いた「エンボディメントケアワークショップ」を開催した。今年度は10人の新たな実践家が参加し、修了した。ワークショップは、4か月間に5回行い、「糖尿病患者へのエンボディメントケア」プロトコールを用いながら、概念と方法についての学びの場を整えた。また、修了者のフォローアップのために、エンボディメントケアリサーチカンファレンスを2回開催し、エンボディメントケアの実践報告をベースに、修了者のスキルアップと、共同体形成の場とした。2実践共同体の発展と拡散・公表:これまでのワークショップ参加者の実践をケーススタディとし、日本糖尿病看護・教育学会、日本看護科学学会の各学術集会において、交流セッションを行った。修了者の共同体へのコミットメントを深めるとともに、自立した実践者の育成と、共同体の発展のための拡散ツールとした。さらに、一昨年度までのワークショップで行ったフォーカスグループインタビューデータを分析し、研究成果として発表した。現在投稿準備中である。平成27年度は、研究目的に掲げている「糖尿病患者へのエンボディメントケア」のプロトコールをCommunity of Practiceの手法を用いて患者・看護師にどのような効果が生じるのかについて明らかにするため、サンプル数を増やし、介入効果の分析を行った。結果、1.介入に関して反応すると考えられる糖尿病患者を現在進行形のケースも含めて6例選定した。選定に当たっては、患者、看護師、対象者の所属施設に研究内容の説明を行い、同意を得たうえで実施した。必要な施設においては、施設の倫理委員会の承認を得たうえで研究におけるデータ収集を行った。2.対象となる患者それぞれに研究協力者である看護師が先行研究において開発した「糖尿病患者へのエンボディメントケア」のプロトコールを実施し、入院から退院への移行期にある患者に対して、外来受診時に月に2回、30分から40分のケアを行った。3.介入した内容をプロトコールの記録用紙をもとにデータ収集を行った。4.介入によるefficacyとして、HbA1Cの経時的変化、肥満度、血糖の変動、看護師の職業達成度・満足度の指標をとり、effectivenessとして、誰に効くか、効かないか、どのように効くかについて着目し、介入時の会話や糖尿病患者に介入した看護師へのインタビューのデータを収集した。平成27年度は研究会議を4回開催し、研究メンバー間で記述データの分析を検討した。

研究分担者以外の看護師がデータ収集のために患者介入を行ったケースにおいては、研究者および研究分担者が介入のためのサポートに当たることができるための調整を行った。研究期間内に研究協力者が円滑にリクルートできるよう、エンボディメントケアリサーチカンファレンスを2回、3日間にわたるワークショップを1回開催した。カンファレンス及びワークショップでは、糖尿病患者へのエンボディメントケアの考え方の波及や、プロトコールを実践する看護師を育成するための場を作っていった。統計上の最低サンプル数である6例は、現在進行形の事例も含めて糖尿病患者と介入する看護師を特定後、研究を進めることができている。さらに集積できるサンプル数として2例は、研究による介入を開始することができる状況にあり、研究協力看護師の所属施設で介入ができる環境が整ってきている。研究協力施設における倫理審査の手続き、および対象者として該当する糖尿病患者のリクルートに当初の計画より時間を要しており、次年度まで研究期間を延長することで、さらなるサンプル数の増加を目指している段階である。研究者らが開発した「糖尿病患者へのエンボディメントケアプロトコール」を用いた看護介入の成果は以下である。プロトコールの開発者、ワークショップに参加しケアを習得した慢性疾患看護専門看護師がプロトコールを用いて介入を行った。エンボディメントケアは4つの段階的なケアで構成され、患者がケアを受けることによって自らへの気遣いを取り戻すことを目的に介入を行った。外来通院中の糖尿病患者にプロトコールを用いた介入を行い、成果は、随時血糖値、HbA1c、BMI、セルフケア能力(SCAQ)、健康関連QOL(SF-8)で評価した。Effectivenessは、介入記録とケースレポート、介入時の対話を録音したデータの解釈で評価した。介入前をベースラインとし、介入時と介入終了後6か月まで定期的に追跡調査した。ここではベースラインから介入終了後までの結果を報告する。7例に介入を行い、プロトコールを全て終了したのは5例であった。介入の平均期間は9か月(最短5か月、最長13か月)で、ケアを受けたの研究対象者の平均年齢は54.4(最小50、最大74)歳であった。5例における各指標(平均値)の介入前⇒後の変化は、随時血糖値は5例とも低下し、HbA1cは3例が低下した。SCAQの「健康管理法の獲得と継続」、「有効な支援の獲得」は5例中4例で得点が上昇した。SF-8は、身体的健康は平均が48.4⇒52.9と上昇する一方で、精神的健康は51.9⇒45.3と変化し、介入記録から低下の要因として生活上の変化の影響がみられた。本介入によって、気遣いの仕方と適切な支援を得る力を獲得することで身体的不調が改善し、身体的側面が安定することが影響していると推察され、血糖コントロールが改善する可能性が示された。
微生物細胞捕捉機能を有する高分子材料の合成及びバイオリアクタ-への応用

本研究代表者は最近の研究で不溶性ピリジニウム型樹脂が微生物細胞を生きた状態で強力に捕捉することが見いだした。このような機能を有する材料が見いだされたのは世界で最初である。本研究の目的は、この樹脂の表面に捕捉固定化した微生物細胞を用いて、新しい方式のバイオリアクタ-を開発することである。昨年度の研究において、アスパルタ-ゼ活性の高いEscherichia coli細胞をビ-ズ状の不溶性ピリジニウム型樹脂の表面に捕捉固定化してガラスカラムにつめ、フマル酸アンモニウムの水溶液を連続的に通液したところ、L-アスパラギン酸が90-95%という高い収率で得られ、本研究の方法が微生物細胞を固定化するための優れた方法であることが実証された。この生化学反応は溶媒として水を用いて行われるが、生化学反応に原料として用いられる基質および反応生成物には水に難溶性のものが少なくない。そこで本年度の研究においては、本研究の新しい微生物細胞捕捉固定化方法を、このような生化学反応に適用することについて検討した。3-ケトステロイドデヒドロゲナ-ゼ活性を有するArthrobacter simplex細胞を用いてコルチゾンをプレドニゾロンに変換する反応について検討した。今回はビ-ズ状の樹脂ではなく、水には不溶性であるが有機溶媒には可溶性のピリジニウム型ポリマ-で表面をコ-ティングしたレ-ヨン不織布を用いた。この不織布の表面に捕捉固定化した細胞をガラスカラムにつめ、5%のメタノ-ルを含むコルチゾンの水溶液を連続式に通液したところ、プレドニゾロンが約90%の収率で得られ、本研究で開発した微生物細胞捕捉固定化方法が、水に難溶性の基質を用いる生化学反応に対しても容易に適用できることが実証された。本研究代表者は最近不溶性ピリジニウム型樹脂が微生物細胞を生きた状態で強力に捕捉することを見出した。このような機能を有する材料が見出されたのは世界で最初である。本研究の目的は、この樹脂の表面に捕捉固定化した微生物菌体を用いて新しい方式のバイオリアクターを開発することである。モデル生化学反応としてフマル酸とアンモニアからLーアスパラギン酸を合成する反応を取り上げた。この反応を行う微生物としてアスパルターゼ活性の高いE.coliを用いた。不溶性ピリジニウム型樹脂1gに30mgのE.coli菌体を捕捉固定化し、ジャケット付きガラスカラムにつめ、0.1Mのフマル酸アンモニウム溶液を流して連続式に反応を行った。至適pHは7.47.7で、30°Cで空間速度0.410.83/hの時にLーアスパラギン酸が定量的収率で得られた。空間速度を1.57/hに上げても収率の低下は10%程度であった。さらにpH7.4、空間速度0.83/hの条件でフマル酸アンモニウムの濃度を0.5Mと高くしても87%の収率でLーアスパラギン酸が得られた。このバイオリアクターは30°Cで180hまでは安定で、約600hで活性は50%になった。本研究で開発した菌体細胞の捕促固定化法においては、共有結合法や架橋法の場合のように試薬を用いないのでは生体触媒の活性を低下させる危険性が少ない。菌体細胞は樹脂の表面に固定化されているために、現在最も広く用いられている包括固定化法の場合のように、基質および生成物の移動を妨げる要因がないから物質移動の障害による基質に対する親和性の低下は小さい。この樹脂による微生物細胞の捕捉は非常に強力であるため、イオン交換吸着法や物理吸着法の場合のように、生化学反応中に細胞が担体から剥離してリアクターから流失するという危険性がない。

このように本研究で開発した不溶性ピリジニウム型樹脂の表面に捕捉固定化した微生物菌体は、バイオリアクターとして多くの利点があるので、今後の発展が期待される。本研究代表者は最近の研究で不溶性ピリジニウム型樹脂が微生物細胞を生きた状態で強力に捕捉することを見いだした。このような機能を有する材料が見いだされたのは世界で最初である。本研究の目的は、この樹脂の表面に捕捉固定化した微生物菌体細胞を用いて新しい方式のバイオリアクタ-を開発することである。昨年度の研究において、アスパルタ-ゼ活性の高いE.coli細胞をビ-ズ状の不溶性ピリジニウム型樹脂の表面に捕捉固定化し、これをガラスカラムにつめて連続式に反応を行ったところ、フマル酸アンモニウムからLーアスパラギン酸が高い収率で得られ、本研究の方法が微生物細胞の新しい優れた固定化方法であることが実証された。この生化学反応は溶媒として水を用いて行われるが、生化学反応に原料として用いられる基質および反応生成物には水に難溶性のものが少なくない。そこで本年度の研究においては、不溶性ピリジニウム型樹脂の表面に捕捉固定化した微生物細胞を、このような生化学反応に適用することについて検討した。3ーケトステロイドデヒドロゲナ-ゼ活性を有するArthrobacter simplex細胞を、ビ-ズ状の不溶性ピリジニウム型樹脂の表面に捕捉固定化してガラスカラムにつめ、5%メタノ-ル水溶液を溶媒として用いた連続式反応でコルチゾンをプレドニゾロンに変換することを試みた。しかしプレドニゾロンは20%程度の収率でしか得られなかった。これは不溶性ピリジニウム型樹脂の塩基性が強すぎるためではないかと思われたので、ビ-ズ状の樹脂の代わりに水には不溶性であるが有機溶媒には可溶性のピリジニウム型ポリマ-で表面をコ-ティングしたレ-ヨン不織布を用いたところ、プレドニゾロンが90%の収率で得られ、本研究の新しい微生物細胞固定化方法が、水に難溶性を対象とする生化学反応にも適用することのできることが実証された。
細菌2成分性膜孔形成毒素の「超チャネル」の構造と形成機構

1.ヒト多型核白血球膜の不溶性膜画分(DRM)、ラフト上における黄色ブドウ球菌のロイコシジン膜孔オリゴマーの形成:黄色ブドウ球菌のロイコシジン(Luk)はLukSとLukFの2成分が共同してヒト多型核白血球(HPMNL)、単球、マクロファージなどを崩壊する。HPMNLにLukSを単独で作用させると、24%がラフト上に存在し、2成分を作用させた場合には膜に結合した毒素成分の90%がリング状複合体としてラフトに存在した。一方LukFは単独ではラフトには存在しなかった。10mMメチルβサイクロデキストリン処理によりLukのラフトへの集合が阻害され、崩壊活性は示さなかった。これらの結果からLukの2成分がヒト多型核白血球膜上の不溶性膜画分(DRM)ラフト上で膜孔オリゴマーを形成することを明らかにした。2.標的細胞膜ラフト上において膜孔の形成並びに膜孔クラスター化を実証した。すなわちCa^<++>包埋ラフトリポソームとメルカプトエタノール存在下でのみステムを形成するプレステムヘテロ7量変異中間体及びローダミン(Rod2)と反応させ、蛍光顕微鏡下でプレステムの本中間体Capドメインからの切り離しタイミングの可視化に成功した。さらに本リポソーム上における膜孔のクラスター化を「一分子測定技術」で可視化に成功した。3.膜結合型プロテインキナーゼの発見、及びリン酸化シグナル伝達系の解析:界面活性剤NP-40で可溶化した白血球膜からラフトリポソームを調製し、本リポソームにLukS、LukF、ATPを添加した結果、LukS上におけるリン酸化反応が起きることを明らかにした。1.黄色ブドウ球菌膜孔形成毒素の標的細胞上での膜孔形成タイミングの「一分子技法」による可視化:黄色ブドウ球菌γヘモリジンにおいて、LukFのステムのT117Cの位置に、疎水環境で蛍光を発する色素BAD州を導入した誘導体、並びにHlg2において[LukF-Hlg2]複合体形成に重要な位置にあるT29Cへ、紫外線照射により離脱する保護基nitrobenzyl bromide(NB)を導入した誘導体を作製した。両誘導体を赤血球ゴースト膜上に添加後、紫外線照射により膜孔形成を開始させた。LukF-BADAN誘導体とHlg2が分子集合し、膜上で疎水領域を貫通したステムが形成された時に発する蛍光現象が1分子技術で観察された。2.ヒト多型核白血球膜の不溶性膜画分(DRM)、ラフト上における黄色ブドウ球菌のロイコシジン膜孔オリゴマーの形成:黄色ブドウ球菌のロイコシジン(Luk)はLukSとLukFの2成分が共同してヒト多型核白血球(HPMNL)、単球、マクロファージなどを崩壊する。HPMNLにLukSを単独で作用させるとそのうち24%がラフト上に存在し、2成分を作用させた場合には膜に結合した毒素成分の90%がリング状複合体としてラフトに存在した。
有機物半導体センサーを用いた新しい放射線検出器の開発

1.有機物半導体サンプルの半導体としての性質を確認するために電気的特性の測定を行った。電解重合によって作った有機物半導体サンプルに電極を取り付け、その電圧電流特性を測り、電導率を求めた。電導率の値として10^<-4>10^<-6>S/cmというオーダーの半導体を作ることができた。また、暗電流の温度依存性の測定から、これらのサンプルが半導体的(温度の上昇とともに電流が増加)であることを確認した。2.半導体サンプルの電導率の最適化やセンサー構造の改良等を行って、より性能の良いセンサーを作った。オシロスコープでの信号の観測から、単一半導体に電極をつけた形のセンサーの場合は、電導率が10^<-4>10^<-6>S/cm位の値のものが最も信号のS/N比が良いことが分かった。これよりも電導率が高いと暗電流が増えてノイズが大きくなり、また低いとキャリヤーの移動度が小さすぎて信号が小さくなってしまう。3.有機物半導体センサーに高利得の増幅器をつなぐとともにバイアス電圧をかけて、各種強度、各種波長のレーザー光を照射した。このとき、レーザー光が当たった所に発生するキャリヤー電荷は、バイアス電圧によって集められ、その信号は増幅器で増幅された後に、ADC(アナログ・デジタル変換器)に入力され、オンライン・データ取得システムによって、数値としてパーソナルコンピューターに読み込まれた。得られたデータを解析して、波高、S/N比などの量を求めた。ポリチオフェンのセンサーの場合で、電極間隔が5mmの場合はバイアス電圧が約300V以上でプラトーが現れることが分かった。4.レーザー光に対する有機物半導体センサーからの出力信号を捕らえることはできたが、その信号の大きさはレーザーの波長が532nmの場合で、市販のPINフォトダイオードに比べて約10^<-5>倍であることが分かった。この感度では、放射線一個を捕らえることは不可能である。センサーの性能をより向上させる必要がある。本研究は、各種ある有機物半導体について、これらをセンサーとして用いた放射線検出器を試作する。これらのサンプル検出器にレーザー光やベータ線を照射し、出力電荷信号を測定し、S/N比などの量を求める。これらの量を比較検討して、各種ある有機物半導体の中から放射線検出器のセンサーとして適しているものを探す。また、半導体の電導率や電極の材質など検出器の性能に影響を与える量について、最適化することを目的としている。本年度は、各種ある有機物半導体の中から、ポリピロールやポリチオフェンを選択した。電解重合装置を製作して、これらのフィルムを合成し、電極を取り付けて放射線検出器のセンサーとした。このセンサーサンプルに対して、半導体であることを確認するために電気的特性の測定を行った。最初に室温で電流・電圧特性曲線を測り、暗電流の大きさからセンサーフィルムの電気伝導度を求め、このフィルムが半導体領域の低効率を持っていることを確認した。また、暗電流の温度依存性を測定し、フィルムが半導体的温度依存性(高温で暗電流が増加)を示すことを確認した。次に、このセンサーにストロンチウム90からのベータ線を照射して、電流の増加を確認し、ベータ線誘起電流の大きさを測定した。また、市販のフォトダイオードについても同様の測定を行い、これをキャリブレーションに用いて誘起半導体センサーの電荷収集効率を求めた。これより現在のセンサーの効率はフォトダイオードと比べて同程度以下であることが解った。本研究は、当研究室にある半導体計測用マイクロプローバー装置、YAGレーザー装置、PCを用いたオンラインデータ取得システムなどの既存の設備を活用しながら行っている。現在は、センサーサンプルに高利得の増幅器を取りつけ、バイアス電圧をかけて、各種強度・波長のレーザー光を照射したときの、出力信号の探索を行っている。

4.レーザー光に対する有機物半導体センサーからの出力信号を捕らえることはできたが、その信号の大きさはレーザーの波長が532nmの場合で、市販のPINフォトダイオードに比べて約10^<-5>倍であることが分かった。この感度では、放射線一個を捕らえることは不可能である。センサーの性能をより向上させる必要がある。
遺伝学・染色体工学的手法による新規セントロメアタンパク質の同定と機能解析

セントロメアは染色体分配に本質的な役割を行うDNA-タンパク質の複合体である。高等脊椎動物のセントロメアの研究では、酵母で有用に用いられている遺伝学的機能解析法を用いることが困難であるため、セントロメアタンパク質の細胞内での解析は遅れており、高等脊椎動物のセントロメアの機能を実現する機構については、多くが未知である。我々は、哺乳類細胞の数十から数百倍の高頻度に相同組換えを起こすニワトリB細胞由来のDT40細胞を用いることで、高等脊椎動物のセントロメア機能を遺伝学的に解析することを試みている。昨年度までに、重要なセントロメアタンパク質であるCENP-Cの温度感受性変異株の作成を行い、4種類の変異株の単離に成功した。また、温度感受性変異株がSUMO-1遺伝子の大量発現により、CENP-C変異が抑圧されることを示した。本年度は新規セントロメアタンパク質CENP-Hを同定しその機能解析を行った。はじめに、CENP-Hの遺伝子をCENP-H-GFPに置き換えた細胞株を樹立して、CENP-Hが細胞周期を通じてセントロメアに局在することを明らかにした。次に、DT40細胞でtetシステムを応用してCENP-Hの条件的ノックアウト株を作成し、表現型を解析した。CENP-Hのノックアウト細胞は分裂中期で増殖を停止して死滅した。また、染色体の不等分配や染色体配置に異常が生じた。抗体染色の結果、CENP-HがCENP-Cのセントロメアの局在に必須の働きを行っ.ていることが明らかになった。本年度は、重要なセントロメアタンパク質であるCENP-Cの温度感受性変異株の作成を行い、現在までに4種類の変異株の単離に成功した。温度感受性変異株は34°Cで通常に生育するが、43°Cでは温度移行後24h以内に80%の細胞が死滅した。我々が作成したCENP-Cのノックアウト株では、多くの細胞がM期で異常を示した後死滅したが、間期に死滅する細胞も観察された。温度感受性変異株では、M期の異常よりはG1/S期で増殖を停止して死滅した。これは、CENP-CはG1/SとM期で機能するが、温度感受性変異はG1/S期特異的な変異であることを示唆している。さらに、レトロウイルスベクターを用いて、変異を抑圧する遺伝子の単離を試みた結果、SUMO-1遺伝子の大量発現により、CENP-C変異が抑圧された。SUMO化が行われないDT40細胞の解析を行った結果、細胞分裂後期に異常を生じており、SUMO化と細胞分裂の関連性が示唆された。
サンゴー褐虫藻共同体の生態学的研究

サンゴ礁海域の高い生産力を解析することを目的として,サンゴー褐虫藻共同体の老合成特性を中心にして研究を行った.研究の主なフィールドは沖縄本島北部の瀬底縞にある琉球大学熱帯海洋科学研究センター前のサンゴ礁である.サンゴ礁海域は生物生産力の高い場であるにもかかわらず,水質的には全〓濃度が20μg/l以下と必ずしも栄養的に高くはなかった.にもかかわらず生産力が高い理由としてはサンゴー褐虫藻共同体という動物-植物の共生関係が大きく関係しているものと考えられる.溶存酸素計を用いて,サンゴー褐虫藻共同体の光一光合成曲線を作成し,その特徴を解析した.サンゴ礁内の浅い部分に生育するものは常に強光下に生活しているために陽葉型の曲線となり,水深4m付近から得られたものは陰陽型の曲線となった.両者の中間にあたる水深2mより得られたものは光一光合成曲線も陰一陽葉型の中間の曲線となった.以上のことから,サンゴの成育水深にあわせて,褐虫藻はサンゴ虫内でもっとも効率良く光を受け,生産効率を上げるような部位に成育していることが考えられる.Galaxea F〓scicularisを主として,サンゴ群体内の個虫内に生息する褐虫藻の量をクロロフィルを抽出することによって検討した.個虫内のクロロフィルα量は個虫の大きさ,群体中の部位によって大きく変動するが,最大は32μgchl.a/indで,多くは1020μg/indとなっていた.これらの量を被覆面積当たりに換算すると120400μgchl.a/m^2となり,〓水湖沼の富栄養湖に匹敵する植物量となる.サンゴ虫の呼吸量も含めてのPg/R比は常に1以上であり, Assimilation numkerも10以上となり,サンゴ礁海域の生物生産力がサンゴに共生する褐虫藻に支えられていることが確認された.その生産性を支えるものがサンゴ虫との共生関係であり,さらに詳細な研究が必要である.サンゴ-褐虫藻共同体での栄養塩の収支を研究する前段階として、サンゴ礁海域における栄養塩の濃度特性を測定した。サンプリングは月に最低1回を予定し、3月から行っている。。さらに、水温がもっとも高くなる8月と、もっとも低くなる3月(1987年)にはより広域なサンゴ礁海域を対象にしてサンプリングを行った。その結果については現在整理中であるが、既略についてみると全窒素では3701300μg・【l^(-1)】、全燐は1425μg・【l^(-1)】となり、全窒素量に比較して全燐量が低い傾向が認められた。既存の文献によれば沖縄近海のサンゴ礁域における全窒素の供給源は陸上にあり、その濃度が極めて高いことが報告されており、今回の結果もそれを支持している。これらのことからサンゴ-褐虫藻共同体における栄養塩の収支を研究する際にはよりミクロな空間での栄養塩の変動を測定すると同時に、実験系での研究が必要であることがわかった。サンゴ-褐虫藻共同体での栄養塩ならびに有機物の収支には浮遊または付着性のバクテリアの関与の可能性がある。そこで、サンゴ礁海域におけるバクテリアの実体についての研究を計画に加えて行った。同一地点での浮遊バクテリアの密度は12月において0.92.8×105/mlと干満による差は大きくはない。スライドグラスを浸漬してのバクテリアの付着実験によると浸漬2時間後にすでに付着バクテリアが観察され、20時間後にはデトライタスと共に付着バクテリアが増加、さらに分裂中のものも増加していることが観察された。今後は同様な測定法によって、サンゴ-褐虫藻共同体そのものに付着するバクテリアおよびそれらと近接したミクロな空間でのバクテリアの実体を研究し、これらのバクテリアが共同体の栄養塩および有機物の収支にどのように関与するかを合わせて研究することを計画している。。サンゴ礁海域の高い生産力を解析することを目的として,サンゴー褐虫藻共同体の老合成特性を中心にして研究を行った.研究の主なフィールドは沖縄本島北部の瀬底縞にある琉球大学熱帯海洋科学研究センター前のサンゴ礁である.サンゴ礁海域は生物生産力の高い場であるにもかかわらず,水質的には全〓濃度が20μg/l以下と必ずしも栄養的に高くはなかった.にもかかわらず生産力が高い理由としてはサンゴー褐虫藻共同体という動物-植物の共生関係が大きく関係しているものと考えられる.溶存酸素計を用いて,サンゴー褐虫藻共同体の光一光合成曲線を作成し,その特徴を解析した.サンゴ礁内の浅い部分に生育するものは常に強光下に生活しているために陽葉型の曲線となり,水深4m付近から得られたものは陰陽型の曲線となった.両者の中間にあたる水深2mより得られたものは光一光合成曲線も陰一陽葉型の中間の曲線となった.以上のことから,サンゴの成育水深にあわせて,褐虫藻はサンゴ虫内でもっとも効率良く光を受け,生産効率を上げるような部位に成育していることが考えられる.Galaxea F〓scicularisを主として,サンゴ群体内の個虫内に生息する褐虫藻の量をクロロフィルを抽出することによって検討した.個虫内のクロロフィルα量は個虫の大きさ,群体中の部位によって大きく変動するが,最大は32μgchl.a/indで,多くは1020μg/indとなっていた.

これらの量を被覆面積当たりに換算すると120400μgchl.a/m^2となり,〓水湖沼の富栄養湖に匹敵する植物量となる.サンゴ虫の呼吸量も含めてのPg/R比は常に1以上であり, Assimilation numkerも10以上となり,サンゴ礁海域の生物生産力がサンゴに共生する褐虫藻に支えられていることが確認された.その生産性を支えるものがサンゴ虫との共生関係であり,さらに詳細な研究が必要である.
肝細胞増殖因子により誘導され、抗アポトーシス分子の候補であるNpn3の機能解析

HGF特異的に発現誘導される遺伝子としてnpn3を同定した。さらに、human npn3の発現ベクターを構築し、培養細胞へ遺伝子導入することでアポトーシス誘導に対して抵抗性を獲得することを確認した。「研究の目的」Npn3の機能解析を目的に、まずヒトnpn3の発現ベクターを構築し、in vitroでの抗アポトーシス効果を確認する。さらに、in vivoにおいてはnpn3発現アデノウイルスベクターを構築し、マウス肝において特異的なNpn3の発現を一過性に誘導する。この遺伝子導入マウスの抗Fas抗体感受性を検討することでNpn3の抗アポトーシス作用を明らかにする。「研究実績」(1)npn3発現ベクターの構築:インビトロジェン社のORF libraryよりhuman npn3クローンを購入、Gatewayシステムを利用しpcDNA^TM 6.2/GFP-DEST Gateway[○!R]vectorへ組換え、Npn3発現vector (pcDNA/hNpn3)を構築した。(2)in vitroにおけるnpn3の抗アポトーシス効果の確認:Lipofectamine2000を用いてpcDNA/hNpn3をdRLh84に遺伝子導入後、過酸化水素水添加によりアポトーシスを誘導し、MTT assayで生細胞数を評価した。pcDNA/hNpn3導入により抗アポトーシス作用が認められた。(3)抗ヒトNpn3抗体の作成:ヒトNpn3のアミノ酸配列を参考に合成ペプチドを作成し、ウサギに免疫後のヒトNpn3抗血清を採取し、抗ヒトポリクローナル抗体とした。上記抗体のfhnctionは未解析である。「研究の目的」我々が、抗アポトーシス機能を持つ分子の候補として同定したNpn3の機能解析を目的とする。そのために、(1)ヒトnpn3の発現ベクターを構築し、in vitroでの抗アポトーシス効果を確認する。(2)in vivoにおいてはnpn3発現アデノウイルスベクターを構築し、マウス肝において特異的なNpn3の発現を一過性に誘導する。「研究実績」また、in vivoでの評価のためにアデノウイルスベクターを構築し、マウス肝特異的に一過性のNpn3発現を誘導し、抗Fas抗体感受性の検討を計画した。しかし、アデノウイルスベクターへの組換え効率や、組変え後のアデノウイルスベクターの増殖効率が著しく悪く、結果としてアデノウイルスベクターの構築に難渋し、構築に至らなかった。原因としてはnpn3の遺伝子配列に特異的な、複製効率の悪さ等が考えられるが、推測の域を出ず、特定には至っていない。使用した、npn3の供給源(library)に問題のあった可能性もあり、当初に立ち戻っての発現ベクターの構築を試みる。
モノサイクル量子もつれ光の実現と新しい時間領域トモグラフィ法による検証

本研究の目的は量子力学的もつれを利用した高い同時性をもつ光子対の発生である。当該年度では前年度実施されたチャープ擬似位相整合素子を用いた超広帯域光子対の量子もつれを評価すべく、1.超広帯域周波数相関の直接測定、及び2.二色量子干渉を用いた周波数量子もつれの特性評価、の二点について主体的に実験的研究を実施した。また量子計測科学への応用に向け、超伝導単一光子検出器の評価及び量子OCTの実現に関する2編の論文が共著者として出版された(Jpn. J. Appl. Phys. 52, 102801 (2013), Phys. Rev. A88, 043845 (2013))。1.前年度実施された光子対の周波数相関測定を継続し、モノサイクル時間もつれが可能である光子対に対して相関測定を実施した。その結果、相関幅が192THzである世界最大の周波数相関幅測定に世界に先駆けて成功した。実験では光電子増倍管(浜松ホトニクスとの共同研究)とSiアヴァランシェフォトダイオードを用い、二光子波動関数の周波数領域の情報(絶対値の自乗)を読み出す事に成功した。2. 1.と同様の広帯域光子対を発生させ、二色の周波数フィルターを有するHong-Ou-Mandel干渉計で二色の光子対の量子もつれを評価した。フィルターの透過周波数差が最大177THzまでの5通りの二色量子状態につき、最大もつれ状態との忠実度が全て古典限界の70%を破る89%以上という結果を得た。干渉計の位相雑音の評価により、フィルタリング前の超広帯域光子対は高い純粋状態である事が予測される。これは時間領域でも純粋状態である事を意味し、実験に用いたチャープ素子でモノサイクル量子もつれ状態が可能である直接の証拠となる。また光子対の和周波発生については、引き続き修士の学生に理論面で詳細な議論を行い実験を担当してもらった。光子対のモノサイクル化に向け、プリズムペアを用いた分散補償系を導入し、非チャープ素子の光子対の和周波発生効率が9倍増加した。これは二光子波動関数の時間領域操作に相当し、今後の時間領域二光子エンジニアリングに道を開くものと期待される。(抄録なし)本研究の目的は量子力学的もつれを利用した高い同時性をもつ光子対の発生である。当該年度ではチャープ擬似位相整合素子を用い、自発的パラメトリック下方変換により非同軸方向に光子対を発生する実験系を構築し、その分光測定を基軸として研究活動を進めた。二光子波動関数の周波数特性を評価する為、分極反転周期がチャープされたタンタル酸リチウム結晶(栗村直博士ら(NIMS)との共同研究)をグリーンレーザー(波長532nm)で励起し、レーザーと非同軸方向に光子対を発生させ、もつれ光子対の分光測定を行った。2つのアイリスで光子対をレーザー光軸から±0.25°方向に分離し、光子を分光器に通し、近赤外の波長全域に感応する検出器である超伝導単一光子検出器(南京大との共同研究)及び光電子増倍管で光子計数測定を行った。結果として二光子の各々が790-1610nmという広帯域な波長域において連続的なスペクトルをもつことを確認した。またHarrisの理論(PRL、98,063602(2007))の拡張として非同軸な光子対の片側にチャープ補正を加え、和周波発生で時間相関を測定するというアイデアを発案した。この方法では、実験結果として得られた二光子の同時性は中心波長1064nmの光の1.1周期まで原理的には圧縮可能であり、時間領域における二光子波導関数の絶対値が測定可能と判明した。また今年度構築した実験系は波長フィルタリング後の光子対の同時計数測定に連続的に移行することが可能である為、今後は二光子の周波数もつれ測定が期待される。さらに時間特性を評価するため、空間位相変調器を用いたチャープ補正の詳細な設計を行い、パルス圧縮の基礎技術にも習熟を深めた。トモグラフィ理論においては、共同研究者のH.Hofmann博士(広島大)らのグループ及びSteinberg博士(Toronto大)と議論を行った。当該年度では前年度実施されたチャープ擬似位相整合素子を用いた超広帯域光子対発生実験について論文を執筆し、Optics Express誌に掲載された(Opt.Express20(23),25228-25238(2012)。今年度の実験状況については、時間領域トモグラフィに先立ち、光子対の周波数相関測定を実施した。その結果、65THzという世界最大の帯域幅を持つ周波数相関光子対の直接測定に成功した。実験では光電子増倍管(浜松ホトニクスとの共同研究)を用い、励起光パワーを最適化した。測定結果が周波数領域の波動関数の絶対値の自乗に比例していることから、部分的であるが二光子波動関数のトモグラフィを実施できたといえる。また当初予定していた和周波発生実験を修士課程の学生及びボスドクが実施する方針に変更し、密な議論を重ねた結果相関光子対の和周波発生に成功した。

実験は5Wの励起光、非チャープMgSLT結晶を光子対の発生及び和周波の発生に用い、毎秒20カウントの和周波発生信号を記録した。和周波発生の測定結果が時間領域の波動関数の絶対値の自乗に比例していることから、時間領域トモグラフィに向けた今後の実験を加速させるものと考えられる。チャープ補正については理論計算の結果、分極反転周期のチャープ方向を反転することで群遅延分散が7400fs2から240fs2まで減少することが判明した。これはより単純な二光子波動関数の圧縮方法として素子の向きを逆にするとよいことを意味する。本研究の目的は量子力学的もつれを利用した高い同時性をもつ光子対の発生である。当該年度では前年度実施されたチャープ擬似位相整合素子を用いた超広帯域光子対の量子もつれを評価すべく、1.超広帯域周波数相関の直接測定、及び2.二色量子干渉を用いた周波数量子もつれの特性評価、の二点について主体的に実験的研究を実施した。また量子計測科学への応用に向け、超伝導単一光子検出器の評価及び量子OCTの実現に関する2編の論文が共著者として出版された(Jpn. J. Appl. Phys. 52, 102801 (2013), Phys. Rev. A88, 043845 (2013))。1.前年度実施された光子対の周波数相関測定を継続し、モノサイクル時間もつれが可能である光子対に対して相関測定を実施した。その結果、相関幅が192THzである世界最大の周波数相関幅測定に世界に先駆けて成功した。実験では光電子増倍管(浜松ホトニクスとの共同研究)とSiアヴァランシェフォトダイオードを用い、二光子波動関数の周波数領域の情報(絶対値の自乗)を読み出す事に成功した。2. 1.と同様の広帯域光子対を発生させ、二色の周波数フィルターを有するHong-Ou-Mandel干渉計で二色の光子対の量子もつれを評価した。フィルターの透過周波数差が最大177THzまでの5通りの二色量子状態につき、最大もつれ状態との忠実度が全て古典限界の70%を破る89%以上という結果を得た。干渉計の位相雑音の評価により、フィルタリング前の超広帯域光子対は高い純粋状態である事が予測される。これは時間領域でも純粋状態である事を意味し、実験に用いたチャープ素子でモノサイクル量子もつれ状態が可能である直接の証拠となる。また光子対の和周波発生については、引き続き修士の学生に理論面で詳細な議論を行い実験を担当してもらった。光子対のモノサイクル化に向け、プリズムペアを用いた分散補償系を導入し、非チャープ素子の光子対の和周波発生効率が9倍増加した。これは二光子波動関数の時間領域操作に相当し、今後の時間領域二光子エンジニアリングに道を開くものと期待される。実験の結果、チャープ擬似位相整合素子は原理的には1.1サイクルの時間相関の圧縮が達成可能なスペクトルをもち、モノサイクルもつれ光子対光源として利用可能であることが判明した。同時に超広帯域な光子検出可能な検出器(SNSPD及びPMT)の評価が進み、このような広帯域なもつれ光子対の周波数もつれ測定が見込まれる。理論的には、空間位相変調器などで光子対の時間相関の圧縮を行い、非同軸条件の二光子波動関数の絶対値測定が可能である。以上により、おおむね順調に進展していると考える。二光子波動関数の時間幅を測定する際の最大の障壁であった和周波発生が測定できた。また、光子対の周波数相関幅が測定可能となったことから、これら二種の実験を比較することが可能となった。チャープ補正については効率的に行う方法が判明し、トモグラフィ理論については前年度でほぼ提示されため。(1)を付けられない理由は実験を行う機会が少なかったため。
ルテニウムー99のメスバウア-分光とガンマ線摂動角相関

濃縮安定同位体^<99>Ru(金属)を理研の160cmサイクロトンで加速した12MeVのプロトンで照射し、(p,n)反応により^<99>Rhを製造した。タ-ゲットを水酸化カリウム水溶液に溶解し、ルテニウムを塩素で酸化し、四酸化ルテニウムとして四塩化炭素に抽出して除去した。溶液に残った^<99>Rhをイオン交換により精製したのち、水酸化鉄と共沈させた。沈澱を空気中750°Cで2時間焼成しαーFe_2O_3(^<99>Rh)とした。この試料を線源とし、濃縮^<99>Ru金属を吸収体として、液体ヘリウム温度で90KeVのガンマ線についてメスバウア-スペクトルの測定を行った。得られたスペクトルは多くのショルダ-をもつ非対称の巾の広い線で、^<99>Rhから生成する^<99>Ruがコランダム型の反強磁性体であるαーFe_2O_3の中で、超微細磁場と電場勾配を感じていることが示された。また、異性体シフトから^<99>Ruは3価の状態にあることが明らかになった。一方、フッ化バリウムシンチレ-タを検出器とするガンマ線摂動角相関測定器を組み立てた。1.5インチΦ×1インチのシンチレ-タと標準的なファ-ストースロウ系を用いて、400ps以下の時間分解能が得られた。この測定器を用いて、αーFe_2O_3(^<99>Rh)の摂動角相関の測定を353と90KeVのガンマ線について行った。室温においては電気的四極相互作用と超微細磁場双方による摂動が観測された。αーFe_2O_3のネ-ル点より高い750°Cにおいては、電気的四極相互作用のみによるパタ-ンが観測された。これらのデ-タから、^<99>RhはαーFe_2O_3の鉄イオンを置換し、これからEC壊変で生成する。^<99>Ruも同サイトを占め、周囲の磁性鉄イオンとSUPERTRANSFERRED超微細相互作用をしていることが結論された。現在、同様の実験をFe_3O_4について行っており、あわせて^<99>Ruと磁性鉄イオンとの間の相互作用についてより定量的な議論を行う予定である。
知的障害の原因分子探索と病態メカニズムの解明

A2BP1は、自閉性疾患、知的障害などで遺伝子異常が報告されている。本研究では、A2BP1が大脳皮質形成に果たす役割を解析した。特異抗体を用いた解析では発達期の脳で特徴的な発現様式を示し、分化終了後の皮質神経細胞の核に局在した。海馬神経細胞では、核以外にも細胞質、軸索、樹状突起に局在した。特に樹状突起ではシナプス以外の班点状の局所的集積が認められた。発生期のマウス大脳皮質でA2BP1の発現を抑制すると、神経細胞の局在障害が観察された。一方、神経細胞極性関連分子Lin7についても同様の解析を行った結果、Lin7はシナプスに局在し、A2BP1同様に発生期のマウス大脳皮質神経細胞の局在への関与が示唆された。小児神経領域において、てんかん・けいれんと精神遅滞は大きな割合を占める。これらの症状は互いに関連しており、原因の共通性が示唆される。その共通する病態は脳神経回路の機能障害である。このような脳神経回路の機能障害の原因のひとつとして、大脳皮質形成過程における神経細胞の移動障害が明らかとなっている。近年、私達が研究を進めてきたコシャペロン(SIL1)が関与するヒト遺伝子変異疾患“マリネスコ・シェーグレン症候群"においてもてんかんや精神遅滞が存在することから、今回、子宮内胎仔脳遺伝子導入による遺伝子発現のノックダウンとそのレスキュー実験を行い、シャペロンならびにコシャペロンが大脳皮質形成過程の細胞移動において重要な役割を果たしている可能性を見出した。すなわち、SIL1の発現抑制により大脳皮質神経細胞の移動障害がおこり、大脳皮質構築の異常が示された。この異常は正常型SIL1の発現により改善されるが、マリネスコ・シェーグレン症候群を引き起こすSIL1の変異体を発現させても改善しなかった。これまでシャペロンあるいはコシャペロンが、大脳皮質形成過程でどのように関与するかという報告はなく、脳神経発達障害における新たな視点を提起できると考えている。近年、私達が研究を進めてきたコシャペロン(SIL1)が関与するヒト遺伝子変異疾患"マリネスコ・シェーグレン症候群"においてもてんかんや精神遅滞が存在することから、今回、子宮内胎仔脳遺伝子導入による遺伝子発現のノックダウンとそのレスキュー実験を行い、シャペロンならびにコシャペロンが大脳皮質形成過程の細胞移動において重要な役割を果たしている可能性を見出した。知的障害は全人口の23%に認められ、重度知的障害の5060%は遺伝的要因の関与が想定される。当施設の中央病院でも、知的障害児の約25%は病因が特定されず診断不能となっており、病因遺伝子の同定とその分子病態メカニズムの解明が喫緊の課題である。そのような状況下で私共は、子宮内エレクトロポレーション法(子宮内胎仔脳への遺伝子導入法)と共焦点レーザー顕微鏡ライブイメージングを組み合わせて、知的障害原因遺伝子の探索と機能解析のための新規実験システムを構築した。本研究では、1)未知の知的障害病因遺伝子候補群の選別・確定と細胞機能の特定、2)既知の知的障害病因遺伝子の機能異常の分子メカニズムの解明、を目的として遺伝子スクリーニングを行っている。その過程で、マリネスコ・シェーグレン症候群の原因遺伝子SIL1の新規変異を発見し、この変異や従来報告されて来たSIL1変異が大脳皮質形成に必須の役割を果たすことを見出すことができたので、おおむね順調に研究計画は進展していると考えている。この成果は、現在国際学術誌へ投稿するために論文執筆中である。私共は、1)子宮内エレクトロポレーション法を用いてマウス胎仔脳に遺伝子やsiRNAを導入し、その後、経時的に大脳皮質スライスを作製し、2)そのスライスを共焦点レーザー顕微鏡下で培養しながら長時間リアルタイム観察することで、大脳皮質形成過程を詳細に解析する手法(共焦点レーザー顕微鏡ライブイメージング法)を構築している。研究初年度はこの技術を十分に駆使出来なかった。

今後は、この手法を活用して、SIL1およびこれまでに同定された病因遺伝子の機能を網羅的に解析し、大脳皮質形成(すなわち神経細胞の移動と形態)の異常およびシナプス・スパイン形成不全への関与の実態を解明したいと考えている。次年度は、1)共焦点レーザー顕微鏡ライブイメージングを用いた治療ターゲットの探索、および、2)スパイン・シナプス形成を原因とする知的障害の病因候補遺伝子の機能解析、を中心に研究を遂行する。次年度の研究費は、これらの実験に必要な消耗品、実験動物、細胞培養関連試薬の購入に充てる。また、研究成果発表のための国内学会参加旅費としても使用する。
修道院と教区共同体の相互影響関係と社会形成に関する比較研究

本研究は、修道院と世俗社会の相互影響関係を分析し、中世ヨーロッパ社会の形成において修道院が果たした役割を新たに見出した。1213世紀の具体的な事例から、シトー会修道院が既存の教会・礼拝堂の再建に貢献したこと、教区教会新設と農村共同体の形成に深く関わったこと、そして農村の社会秩序とアイデンティティ形成に影響を与えたことの3点を明らかにした。他のドイツ、フランス地域のシトー会修道院に関する史料・研究文献に基づいて、こうした現象が各地で相応に見られるのではないかという見通しを得た。本研究の課題は、キリスト教修道制が中世世俗社会の形成・発展にとって本質的な役割を担っていたという認識に基づき、中世盛期から後期のシトー会修道院と教区=村落共同体お間で行われたコミュニケーションの実態を分析し、両者の相互影響関係を明らかにするというものである。研究開始年度の平成26年度の研究実績は以下の通りである。1、研究計画に記したゲルマン語圏、とりわけライン=モーゼル地方とフランケン地方に焦点を絞って文献調査を行い、夏期には渡独して史料を収集した。2、分析の結果、1213世紀にいまだ教区の成立・整備が立ち遅れていたゲルマン語圏において、シトー会修道院がそれに大きく寄与していたことを明らかにした。3、王権との関係については、ロタリンギア地域に関して修道会は自律的に地域の平和維持に尽力しえおり、王権による保護は最後の手段として、積極的に活用する類のものではなかったことを明らかにした。本研究の課題は、キリスト教修道制が中世世俗社会の形成・発展にとって本質的な役割を担っていたという認識に基づき、中世盛期から後期のシトー会修道院と教区=村落共同体の間で行われたコミュニケーションの実態を分析し、両者の相互影響関係を明らかにするというものである。昨年の研究成果を踏まえて引き続き研究を深めていった平成27年度の研究実績は以下の通りである。1、研究計画に記した通り、ライン=モーゼル地方、フランケン地方、ブランシュヴァイク地方といったゲルマン語圏に加え、南フランスなどのロマンス語圏のシトー会修道院に関する一次史料、研究文献を収集し、分析作業を進めた。2、分析の結果、1人口の流出等によって空洞化した小教区で、パトロナートゥスの授与を通して司教と修道院の間の協働が推測されるということ、2修道院が小教区教会へ関与することで、結果として司牧の問題、修道院の収益の問題を超えて、小教区=村落共同体の形成や持続的発展に寄与していたということ、そして3修道院所領の住民、とりわけ賃金労働する人々と周辺の小教区にひも付けられた人々が、ミサを聞くことを目的として、彼らは相互に行き来していたこと、以上3点を明らかにした。おおむね研究計画に沿って研究を遂行しており、成果は査読付き論文、書評論文、国内外の学会での口頭発表で公表できた。昨年の研究成果を踏まえて引き続き研究を進めた平成28年度の研究実績は以下の通りである。1、研究計画に記した独仏国境地域のほか、ライン地方、フランケン地方、ブラウンシュヴァイク地方、ザクセン地方といったゲルマン語圏に加え、南フランスやイングランドのシトー会修道院に関する一次史料・研究文献を網羅的に収集する努力をし、分析作業を進めた。2、分析の結果、昨年度までに明らかになった諸点に関する認識が深められたほか、1シトー会修道院の所領では、修道院から送られてくる助修士に加えて周辺地域から農民らが流入してきたことが想定され、彼らの司牧が修道院で問題になっていたこと、2一部のシトー会修道院で、13世紀末になると修道士によって積極的に修道院内で司牧が行われるようになったこと、3托鉢修道院と利害が交錯することはほぼなかったこと、などが明らかになった。3、修道院による教会パトロナートゥス受領と小教区教会への関与について、北ドイツやイングランドなどのようにこれが観察されない地域もあるという認識が得られた。このことから、今後の課題として、西欧・中欧規模で地域的偏差が生じる背景を追究する必要がある。おおむね研究計画に沿って研究を遂行しており、成果は国内外の学会で発表できた。しかし、年度内に論文の形で公表できなかったので、この点は残された課題として次年度に取り組むことにしたい。これまで収集してきた一次史料、研究文献の分析を進めつつ、研究計画通り托鉢修道会と教区共同体の関係も分析し、シトー会の場合と比較していきたい。人文学ゲルマン語圏での調査・分析を進めつつ、研究計画通りロマンス語圏のシトー会修道院と教区共同体の関係を分析し、ゲルマン語圏とロマンス語圏で見られた様々な事象について比較していきたい。購入を予定していた文房具類が不要になったため。研究成果をまとめる際に使う文房具類の購入に充てる。