hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
摂動QCDにおける3ループ輻射補正の解析的評価及びクォーク質量の高精度決定

さらに、多重無限和と多重積分を互いに変換することで、Log(x),Log(1±x),Log(1±ix),Log(1-xy),Log(1-x/y)などを含んだ多重積分の評価法としても利用できる。Master積分の評価については、既存の結果の確認、一部の新しい値の解析的評価を行い、既知の解析的な値や数値的な結果とよい一致を見たが、最も複雑な3つのMaster積分に関しては未だに計算が完了していない。これらのMaster積分はεの一次までの展開係数が必要となるが、それらに現れる和はいずれも今回構築したアルゴリズムでは計算不可能な複雑なものであることが確認された。その計算のため、アルゴリズムの拡張(ガンマ関数を含む和に対する評価法や、一般化された超幾何関数を扱う方法)の研究を行った。3ループオーダーでのQCDポテンシャル計算に現れるMaster積分が予想以上に複雑なものであることが分かり、予定していたMellin-Barnes積分表示に留数定理を適用し、留数の無限級数を具体的に評価するという部分がより困難になったため。特に一部の無限級数が発散しており、その対処法を見つけるのに時間を要している。正則化のためにいくつかの変数を導入することになるが、最終結果を求めるためには、効率的な変数の導入の仕方や変数を残したまま計算を進める方法などを明らかにしなければならない。Master積分の解析的評価のためのアルゴリズムがまだ完成していないため、引き続きその開発のための研究を続ける。また、一部のMaster積分はMellin-Barnes積分表示を用いた評価が非常に困難であり、それ以外の評価法もいくつか考慮する必要があると思われる。いずれにしても最終的には無限級数の評価に帰着されると考えられるので、先ずはそのためのアルゴリズムの開発を進める。特により高いオーダーでは複雑なΓ関数の積が多く現れてキャンセルしないため、その場合にも適用できる一般的なアルゴリズムの開発を目標とする。
溶接残留応力の疲労への影響と、その低減法に関する研究

溶接残留応力の疲労現象への影響を検討するために、本年度は以下の研究を行った。1)引張残留応力、圧縮残留応力場から発生する疲労亀裂先端の残留応力の再分布挙動を、亀裂の開閉口挙動に注目しながら、検討を行った。亀裂の開閉口挙動については、二次元貫通亀裂に対しては、コンプライアンス法により、また、三次元表面亀裂については、超音波の透過度を利用して測定を行い疲労亀裂伝播に伴う、亀裂開閉口挙動の変化について検討を行った。また、亀裂開閉口挙動と切断法による亀裂先端での残留応力の測定結果とを比較・検討することにより、疲労亀裂伝播に伴う溶接残留応力の再分布挙動および残留応力の疲労現象に対する影響を検討した。2) T字隅肉溶接継手部に発生する溶接残留応力に注目し、入熱量、溶接順序などをパラメータとした熱弾塑性FEM解析を行い、溶接条件の溶接残留応力の3次元的な分布にどのように影響するかについて検討するとともに、溶接残留応力の低減手法について検討を行った。3)溶接継手部の疲労強度を向上させるために、溶接止端部に圧縮残留応力を導入させて、その効果を検討した。本研究では、圧縮残留応力を導入させるためにハンマーピーニング、及び溶接時の相変態温度を改良した溶接棒を用いた付加溶接を行い、継手試験体、及び桁試験体を用いて圧縮残留応力導入による疲労強度向上効果を検討した。更に、その溶接残留応力の低減、すなわち、圧縮残留応力の発生機構やそれによる疲労強度向上メカニズムについての検討を行った。・疲労亀裂進展に伴う溶接残留応力の再分布挙動について、実験的、及び解析的に検討した。縦方向溶液を施した中央貫通切り欠き試験体、及び3次元亀裂の進展を対象とした表面切り欠き試験体を用いて疲労試験を行い、疲労亀裂に伴う溶接残留応力の再分布について、切断法による疲労亀裂線上の残留応力の測定をすることにより検討した。その結果、亀裂先端には除荷時でも高い引張残留応力が測定されたが、亀裂がある程度進展すると引張残留応力の集中の程度が小さくなり、溶接なしの試験体同様に圧縮残留応力が測定された。また、超音波深傷、及び歪みゲージによる測定により亀裂開閉口点を求め、亀裂先端の残留応力状態と関連づけた。・圧縮溶接残留応力の疲労強度への影響を検討することを目的として、ハンマーピ-ニング処理による疲労強度の向上効果について検討を行った。その結果、ハンマーピ-ニング処理により圧縮残留応力が導入されることにより疲労強度が改善されるが、亀裂進展速度が遅くなる領域は、圧縮残留応力が導入されていた領域とほぼ一致することを示し、また疲労強度向上効果を破壊力学的手法を用いて残留応力面から検討した。
異常胚発現マウス胎仔肢芽におけるプログラム細胞死

AERはその直下の中枢葉を誘導することが知られているが5-FUによる細胞障害に対する修復反応としてAERのPCDが制限されてAERの退縮が遅れ、その直下の中枢葉を過剰に誘導するために、fpp、fmlのPCDが起こらずにその結果軸前側の過剰成分から多趾が誘発されたものと考えられた。当初の予定では、電気焼灼による多趾の誘発とPCDの関係を明らかにすることを主題としていたが、電気焼灼による多趾の誘発は歩止まりが悪いという問題があり、十分な実験結果は得られなかった。しかしながら電気焼灼した肢芽においても刺激によりできた血腫周囲にTUNEL陽性細胞が散見されることがわかった。また、Hammer-toeマウスでは、12.513.5日に通常みられる指間のPCDが起こらない事もわかりこれにより合指が誘発されることが推測できた。電気焼灼のかわりに5-FUにより誘発された多趾の実験結果が主となったが、この実験結果から新たな知見として、5-FU投与による多趾の誘発は、細胞障害に対する過剰修復によるものであることがわかった。また正常例におけるPCDの出現部位についても、元来いわれていた部位の他に、胎生11.011.5日に中心部静脈洞近位、13.013.5日の指節間(関節部)についてもPCDが起こることがわかった。
家族集積性の強い脳血管疾患の遺伝解析

(1)脳動脈瘤:3世代家系として9家系を見出し、パラメトリック連鎖解析においては、19q13.3に連鎖を認め、異なる民族(フィンランド)と共通の領域を見出した。また、人口10万規模の東日本のある地域において、29名の症例と35名の対照を用いて全ゲノムにわたるSNPsを搭載する10K arrayで相関解析を行った。その結果14番染色体のrs767603に相関を認め、この相関は、西日本の237名の症例、253名の対照を用いた集団でも確認された(p=0.00178,Bonferroni補正でp=0.048)。(2)もやもや病:17家系の連鎖解析で17q25.3に連鎖を認めた。領域は、さらにハプロタイプ解析の結果、75Mb-77Mbに絞ることに成功した。遺伝子は、NCBIのデータベースでは、大よそ30存在する。現在遺伝子の同定を行いつつある。家系のおよび発症者の集積に努力し、現在18三世代家系、家族歴を有する10家系、孤発例62名の計242名(発症者172名、非発症者79名)、MRA/MRIで異常を認めない384名の参加を得た。(3)脳動静脈奇形:地域における相関解析と家族発症者の2つの手法を併用し、全ゲノム領域にわたり有意な相関を検討した。相関解析の参加者は、同一地区に居住歴を有する非血縁の26名の患者と、30名の対照である。また連鎖解析は6家系12名の患者の参加により行った。さらに、2対の形質が一致しない一卵性双生児の全ゲノム解析を50Karrayで行った。相関解析と連鎖解析の双方で、p<0.05を満たす重複領域は認められなかった。また、2対の一卵性双生児の検討ではcopy number variation microdeletionなどの変化は認められなかった。脳動静脈奇形と類縁関係にある肺動静脈奇形の症例について遺伝子の検索を行い、Endoglinのexon 7に異常を見出した。モヤモヤ病の遺伝解析において、15家系を用いて、affected-member-onlyによるパラメトリック解析を行ったところ、ゲノムワイドで3.6を超える領域は17q25以外にはなく、LOD Score 8.08となった。この領域には90遺伝子が存在し、pseudogeneおよびhypothetical geneを除いた62の遺伝子について解析を進めている。脳動静脈奇形(AVM)の遺伝解析において家系内でAVMの発症のある6家系およびAVMの高発地域である岐阜県内のT市で症例26例および対照30例の協力を得て行なった。またこの地域では2組のdiscordant identical twinsの参加協力を得た。最大のLOD scoreを示す候補連鎖領域は、6p25で1.88(p=0.002)であった。一方高密度SNPsを用いた相関研究での検討では4つのSNPsと2つのハプロタイプがp<0.001を満たしていたが、候補連鎖領域への重なりは認められなかった。また、discordant identical twinsの2組を50Kの高密度SNPsでタイピングしたところ、配列の欠失、重複などは認められなかった。
豚精のう腺で発見された新規リラキシン様物質の遺伝子構成と機能発現機構の解明

I.リラキシン様物質の遺伝子のエキソン・イントロンの構造雄豚ゲノムDNAをEcoRIを含む5種類の制限酵素で完全消化させ、本物質cDNAを鋳型としてPCRで作製した種々のプローブを用いてゲノミックサザンハイブリダイゼーションを行った結果、いずれも23.1kbの位置に単一バンドが認められ、本遺伝子はシングルコピージーンであることが明らかとなった。さらに、LongPCRによって本遺伝子のクローニングを行い、塩基配列を決定した。解析の結果、本遺伝子は全長約5kbで、5つのエキソンより構成され、エキソン-イントロンの結合部分はGT-AGルールに合致しており、この部分で正確なスプライシングが行われていることが判明した。II.リラキシン様物質の遺伝子のプロモーター領域の構造と発現調節機構雄豚ゲノムDNAを制限酸素ApaIで完全消化した時生じる約2.5KbのDNA断片中に、本遺伝子のプロモーター領域が含まれることを見出した。このDNA断片をショ糖密度勾配遠心で分画し、本cDNAの5'非翻訳配列をプライマーとしてLongPCRを行い、5'上流域のクローン単離した。無細胞転写実験を行い、転写活性を持つ領域を同定し、本遺伝子のプロモーター領域の塩基配列を決定した。その結果、翻訳開始点の上流約50bp(-50)にTATA-boxを、さらに上流約450bp(-450)にCCAAT-boxを見出した。また、そのさらに上流にはテストステロンのリセプターが特異的に結合するホルモン応答性DNA配列が存在することを突き止め、本遺伝子がテストステロンによって発現誘導されることを明らかにした。
妊卵着床と妊娠維持機構における脱落膜の形態と機能に関する研究

ヒト子宮内膜と脱落膜で産生されるプロスタグランディン(PG)が、着床と妊娠維持機構に重要な役割を演じていることから、脱落膜におけるアラキドン酸代謝調節機構の一端を明らかとした。(1)ヒト子宮内膜では分泌期に、PGE_2の産生が、また、月径前ではPGF_<2α>の産生が増加する。しかし脱落膜ではPGE_2,PGF_<2α>の産生が阻害される。(2)脱落膜におけるPG合成酵素阻害物質を証明し、その部分精製を試みた。この物質は約55KD60KDの蛋白であることが明らかとなった。(3)ヒト脱落膜を酵素処理後にパ-コ-ル非連続濃度勾配遠心法を用いて、濃度20%分画に,脱落膜細胞のみを分離し、他のマクロファ-ジ・Tリンパ球を除く、脱落膜細胞培養系を確立した。(4)脱落膜細胞とマクロファ-ジを分離し、ともにサイクロオキシゲナ-ゼの存在を証明した。(5)脱落膜細胞の培養系にILーlを添加すると、PGE_2の産生とサイクロオキシゲナ-ゼの誘導が認められた。(6)3Hーアラキドン酸を細胞外に添加すると、脱落膜細胞はサイクロオキシゲナ-ゼ代謝産物であるPGを産生するが、細胞内に取り込まれたアラキドン酸からは、主にエポキシゲナ-ゼ代謝産物が同定された。(7)脱落膜細胞とマクロファ-ジは15ーketoーdehydrogeneseと13,14ーreluctaseを持っているため、PGは、各細胞で、代謝されることが明らかとなった。(8)脱落膜は12ーHETEを産生するが、エストロゲンの影響を受ける可能性が示唆された。以上、脱落膜細胞におけるアラキドン酸代謝は、内在するサイクロオキシゲナ-ゼ阻害物質や、ILーlで調節されており、脱落膜に存在するマクロファ-ジやリンバ球で産生されるサイトカインの役割の一つに脱落膜細胞のアラキドン酸代謝への調節の可能性が明らかとなった。(1)非妊時の雌マウスの背部より、一側の卵管を結紮して後に、妊娠させた。この結紮マウスの妊娠第一日目より七日目までの、結紮側子宮内膜と非結紮側子宮内膜を別個に採取し、それぞれの内膜におけるPG及びHETEの産生動態を検討した。第一日目より第四日目まで、結紮側と非結紮側ともに、PGE_2、PGF_<2α>、6Kedo、PGF_<1α>の産生は増加した。しかし、非結紮側(着床内膜)では、その後PG産生は抑制され第七日目では第一日目程度に減少した。一方、結紮側(非着床内膜)では、第四日目以後七日目まで、PG産生の抑制は認められなかった。従って、着床後に認められる脱落膜でのPG合成抑制は、全身的な循環ホルモン等によるものではなく、妊卵由来の局所生理活性物質による可能性が示唆された。(2)妊娠マウスの第1日目から7日目までの子宮内膜の凍結切断を調整し、各種FITC標識レクチンで染色し、組織化学的に、内膜表面のレクチンレセプタ-の発現様式を検討した。ガラクト-ス残基に特異的なGSIに対するレセプタ-は、第4日より発現し、以後増強した。

(3)妊娠マウスの第3、第4日目にGSIを尾静脈より注入すると、第7日目の子宮内膜は、妊卵の周期で出血巣を形成し、妊娠維持が阻害された。従って、妊娠4日目より発現するガラクト-ス残基を有する子宮内膜表面の複合糖質は、妊娠維持に重要であることが示唆された。(4)ヒト子宮内膜の各時期と、妊娠初期脱落膜を採取し、short incubationした時、放出された12ーHETEを、HPLCにて測定した。PGと異なり、脱落膜でのHETE産生は低下しなかった。従って、12ーHETEの脱落膜における免疫応答への関与が示唆された。以上、脱落膜における生化学的特異性の一端が明らかとなり、脱落膜の妊娠維持機構における免疫応答の関与へと、研究を展開したい。(1)ヒト脱落膜を採取し、酵素処理の後、パ-コ-ル密度勾配法で分離し、ヒトマクロファ-ジ,Tcell,Bcell,白血球のモノクロ-ナル抗体を用いて組織化学的に、脱落膜細胞組成を固定した。妊娠初期では、間質細胞以外に顆粒大リンパ球が多く、後期では、間質細胞が中心で、顆粒大リンパ球は減少し、Tcellとマクロファ-ジが証明された。(2)妊娠後期脱落膜から分離した間質細胞でのPG産生は少いが、ILー1の添加で、PGE_2産生量は約10倍増加した。またILー1は、PG合成酵素であるCyclooxygenaseを強力に誘導した。(3)妊娠後期の脱落膜では、間質細胞の外に、マクロファ-ジの存在が著明であり、このマクロファ-ジは、ILー1を、endotoxin刺激で産生する。この結果、マクロファ-ジの産生するILー1は間質細胞のcyclooxygenaseを誘導し、PGE_2産生を刺激することが明らかとなり、妊娠初期脱落膜の顆粒大リンパ球と間質細胞のアラキドン酸代謝調節が今後の課題として注目されてきた。(4)脱落膜より分離した間質細胞とマクロファ-ジは、それぞれ、アラキドン酸からPGとhyduxyeicosaeuoicacidを産生するが、細胞に取りこまれたアラキドン酸は、主にepoxygenase代謝産物を産生することが明らかとなりアラキドン酸代謝経路に部位別の相違が存在すると思われた。(5)妊娠初期脱落膜では、アラキドン酸から12ーHETEの産生が、子宮内膜分泌期に比し、著明に抑制されることが明らかとなり、脱落膜では、PGの外にlipoxygenase代謝産物とeporygenase代謝産物が産生されその生理活性の解明が必須の課題として、注目されてきた。ヒト分泌期子宮内膜で産生されるプロスタグランディン(PG)が、妊娠後の脱落膜では、その産生が著明に抑制されることから、脱落膜でのPG合成調節機序の一端を、in vitroの系で明らかとした。(1)ヒト妊娠初期脱落膜を酵素処理後にパ-コ-ル非連続濃度勾配遠心法を用いて、濃度20%に脱落膜細胞を、また濃度40%にマクロファ-ジを80%以上含む細胞を分離し、脱落膜細胞のみを用いる培養糸を確立し、PG産生とサイクロオキシゲナ-ゼの誘導調節機序解明の方法を確立した。(2)脱落膜を構成する脱落膜細胞以外の細胞の種類を、免疫担当細胞の表面抗原に対するモノクロ-ナル抗体を用いて同定し、マクロファ-ジ(6070%)とTーcell(28%)の存在が明らかとなった。またこれらの細胞には、サイクロオキシゲナ-ゼの存在が確認された。(3)上記知見から脱落膜細胞のPG産生に、マクロファ-ジより遊離されるILー1の関与が考えられ、脱落膜細胞の3回目の培養系にILー1βを添加すると24時間後にサイクロオキシゲナ-ゼが誘導され、PGE_2の産生も増加し、アラキドン酸添加でPGE_2は2倍増量した。(4)しかし培養1日目の脱落膜細胞では、ILー1βでサイクロオキシゲナ-ゼは誘導されるが、アラキドン酸添加でもPGE_2の産生は認められない。従ってPGE_2産生調節には、サイクロオキシゲナ-ゼの誘導やアラキドン酸の動員以外に酵素活性阻害物質の関与も示唆された。
環境教育を目的とした自作環境紙芝居のデジタル化による実践と教育効果の検討

○研究の目的:これまで環境に対する意識向上を目的に自作環境紙芝居を用いた環境教育活動を小学校の総合的な学習の時間などで行っている。しかしながら、移動等の時間や手段も考えると活動エリアに限界がある。そこで、本研究ではデジタル化のデメリットである人の声や絵のぬくもりなどが損なわれないデジタル環境紙芝居を製作し小学校へのアンケート調査等を通し、児童にとって環境意識についての教育効果について検討するとともにデジタル環境紙芝居を小学校等への配布することを目的とする。○研究方法:これまでの、自作環境紙芝居の公演を行った際のアンケート結果をもとに、環境紙芝居の改善点を明確にした。その改善点を踏まえデジタル環境紙芝居の内容の検討および作画を行った。デジタル化する方法においては、比較検討版としてPower Pointデータによるデジタル紙芝居を製作し発表展示を行い、意見をいただいた中で音声を加えたデジタル環境紙芝居を製作し宇都宮市内の小学校68校に配布しアンケート調査を行い環境紙芝居の教育効果について検討を行った。○研究成果:本研究を通し、デジタル紙芝居に対する評価が非常に高くこれまで取り組んできた環境紙芝居をひとつの教材として配布可能となった。また、教育課程の変更に伴い総合的な学習の時間が変化することから、これまでは総合的な学習の時間への支援という立場から活動を行ってきたが、環境教育を目的とした教材として、「社会」や「道徳」といった教科に合わせた内容も検討していくことでよりよい教材が提供できると考える。研究成果は、平成22年5月に開催さえる日本環境教育学会にて発表する。
看護師勤務表作成支援システムと可視化による演算効率化

本研究では,看護師勤務表作成問題に遺伝的アルゴリズムを適用する場合において,適切な遺伝的演算方法やそれらのパラメータ設定に対する指針を得るために,解探索過程の可視化手法の開発を行った.これまで,各目的に対する重視度を与え,その加重線形和をとることで,一目的問題としての解探索およびその探索過程可視化を行ってきたが,本年度は,看護師勤務表作成を多目的最適化問題ととらえ,この問題に適した遺伝的アルゴリズム(NSGA-II)を適用した.これにより,看護師長は,事前に各目的への重視度を数値で与える必要がなくなり,得られた複数の解候補から,求める解(勤務表)を選択することが可能となる.ただし,看護師勤務表作成問題における目的関数の数が多いことで,遺伝的アルゴリズムを適用した際に,膨大な数の解候補が得られることに加え,評価値が多次元であることで,その特徴を把握/解を選択することが困難となる.そこで,多次元評価値空間上でクラスタリングを行うことで解候補群を集約し,線形射影手法を用いて次元圧縮を行うことで解候補群/クラスタの可視化を行う手法を開発した.クラスタリングにFuzzy-C-Means (FCM),線形射影手法にFuzzy Multiple Discriminant Analysis (FMDA)を用いる手法を提案し,その有効性を論文としてまとめ,現在投稿準備中である.また,可視化手法の確立を目的に取り組んでいる,自由書式により書かれたドキュメントから特徴や傾向を発見・分析する知識抽出手法について検討を行ってきた.昨年度開発したテキストマイニングツールHKグラフを,WEB上でのユーザレビュー解析に適用し,製品評価支援ツールとしての可能性を模索した.本研究では,看護師勤務表作成問題に遺伝的アルゴリズムを適用する場合において,適切な遺伝的演算方法やそれらのパラメータ設定に対する指針を得るために,解探索過程の可視化手法の開発を目指した.自己組織化マップを用いて,解候補である個体同士の相対的位置関係を可視化することで,解探索過程を把握し,評価値の優劣からだけでは得られない,解の収束の様子や多様性を保持している様子,交叉・突然変異による新個体の配置と集散の様子などを把握することが可能となり,遺伝的演算の工夫や遺伝的演算のパラメータ値の評価に新たな指標を得ることができる可視化手法を提案した.染色体の多様性維持を目的とする2つの遺伝的演算法による探索過程を可視化し,個体の分布の様子及び突然変異や交叉による新個体生成の様子を把握することで,それらの探索効果を明らかにした.得られた情報に基づき,遺伝的演算方法にフィードバックを行うことで,解探索の効率化が計れることを示した.これらの成果をまとめた論文が,情報処理学会誌に掲載決定された.また,可視化手法の確立を目的に取り組んでいる,自由書式により書かれたドキュメントから特徴や傾向を発見・分析する知識抽出手法について検討を行ってきた.病院におけるインシデントレポート(ヒヤリ・ハット報告書)を対象に,メタデータに記されている事例の内容を表す概念と文章中の語句の共起情報を用いた,階層的なキーワードグラフ作成によるテキストマイニング手法を提案した.実際のインシデントレポートに提案手法を適用し,レポート網羅性,重要語句抽出性能の面から本手法の有用性について検証するとともに,本手法を用いた解析結果を示した論文としてまとめ,日本知能情報ファジィ学会誌に掲載された.本研究では,看護師勤務表作成問題に遺伝的アルゴリズムを適用する場合において,適切な遺伝的演算方法やそれらのパラメータ設定に対する指針を得るために,解探索過程の可視化手法の開発を行った.これまで,各目的に対する重視度を与え,その加重線形和をとることで,一目的問題としての解探索およびその探索過程可視化を行ってきたが,本年度は,看護師勤務表作成を多目的最適化問題ととらえ,この問題に適した遺伝的アルゴリズム(NSGA-II)を適用した.これにより,看護師長は,事前に各目的への重視度を数値で与える必要がなくなり,得られた複数の解候補から,求める解(勤務表)を選択することが可能となる.ただし,看護師勤務表作成問題における目的関数の数が多いことで,遺伝的アルゴリズムを適用した際に,膨大な数の解候補が得られることに加え,評価値が多次元であることで,その特徴を把握/解を選択することが困難となる.そこで,多次元評価値空間上でクラスタリングを行うことで解候補群を集約し,線形射影手法を用いて次元圧縮を行うことで解候補群/クラスタの可視化を行う手法を開発した.クラスタリングにFuzzy-C-Means (FCM),線形射影手法にFuzzy Multiple Discriminant Analysis (FMDA)を用いる手法を提案し,その有効性を論文としてまとめ,現在投稿準備中である.また,可視化手法の確立を目的に取り組んでいる,自由書式により書かれたドキュメントから特徴や傾向を発見・分析する知識抽出手法について検討を行ってきた.昨年度開発したテキストマイニングツールHKグラフを,WEB上でのユーザレビュー解析に適用し,製品評価支援ツールとしての可能性を模索した.
ランタノイドを触媒とするアミノアシル転移反応のモデル系構築

2,2'-ビピリジンの6,6'-位にフェニルアラニンと安息香酸とのアミド結合をそれぞれ持つ6-benzoylamino-6'-phenylaranylamino-2,2'-bipyridine(1a)は、メタノール中30°Cという温和な条件で、触媒量のランタニド塩化物が存在すると、フェニルアラニン側アミド結合のみが加溶媒分解を受け、フェニルアラニンメチルエステルがほぼ定量的に生成する。この反応の進行には、基質のビピリジンおよびビスアミド構造が不可欠であり、基質のビピリジンおよびアミド酸素が配位した1:1錯体中間体を経由して反応することを各種スペクトル法を用いて確認した。また、α-アミノ基を持つアシル側アミドのみが加溶媒分解を受けるが、このときα-アミノ基が結合した側のアミドプロトンは解離しやすくなり、解離型アミド構造をとることが電子スペクトルより明らかにした。解離型アミドでは、アミド酸素が負電荷を持つためにランタニドへの配位が強くなり、その結果キレート環内の歪みが大きくなり、カルボニル炭素上の正の部分電荷が増加することを結晶学的データや分子軌道計算などを用いて示し、温和な条件でもアルコール酸素の求核攻撃を受けやすくなることが、効率の良い加溶媒分解を可能としているものと推定した。
中世後期から近世の形而上学における〈存在の一義性〉の思考についての研究

中世後期から近世にかけての形而上学の歴史における〈存在の一義性〉の思考の意味と、それを通じてのスピノザ哲学の独自性を測定することを目的として研究を進め、次の知見を得た。1.〈存在の一義性〉の思考の意味を明確にするために、現代においてこの思考の可能性を追求したジル・ドゥルーズの哲学を再検討し、〈存在の一義性〉の思考の核心を、存在・意味=形式・個体化の様態の三位一体としてモデル化した上で、モデルの核心として取り出された個体化の様態を巡る問題をドゥンス・スコトウス及びスピノザの理説と数学における微分論という二つの観点から解明し、さらにこのモデルがドゥルーズの『意味の論理学』における意味論と接合されるべきであることを明らかにして、モデルの一層の精緻化をはかった。2.それと平行して、ドゥンス・スコトゥスにおける〈存在の一義性〉の思考の意味を、(スコトゥス的な)形而上学の形成との関係において明らかにする作業を、とりわけOrdinatioを素材に進め、形相的区別の理論と内在的様態の理説の解釈が争点となることを明らかにした。スコトゥスの議論と対抗関係にあるトマスにおける存在の類比の理説に関しては、その時期的な変遷に留意しながら大筋を把握するに至った。但し、研究の過程において、スコトゥスの議論とアヴィケンナの議論との関係の検討の必要性が強く意識されることになり、中世哲学における〈存在の一義性〉の問いの扱いを通時的に検討する作業を始めた。3.スピノザにおける〈存在の一義性〉の思考の持分とその意義を、この思考こそが、超越的な存在者としての神と他の存在者一般をつなぐ論理としての存在の類比の思考の崩壊を導き、存在-神-論としての形而上学と対抗関係となった、という作業仮説の検証という仕方で明らかにした。その際、特にマルブランシュの哲学との関係を新たに解明した。1.に関しては、既に刊行された論文、及び刊行予定の論文においてその研究成果を公表した(する)が、2.に関しては研究内容の深化、及び、若干の変更に伴い、成果の公表に至っていない。3.に関しては、初期著作と『エチカ』との関係に関して現在論文を執筆中であり、またオランダのスコラ学者の理説との関係については2.の研究成果の公表の後に、その成果を取り入れつつ公表することになろう。中世哲学における〈存在の一義性〉の議論の展開を背景にしたスピノザの思考の位置測定が次の研究の主たる課題となる。中世後期から近世にかけての形而上学の歴史における、<存在の一義性>の思考の意味と、それを通じてのスピノザ哲学の独自性を測定することを目的として研究は進められたが、今年度は次の知見を得た。1、<存在の一義性>の思考の意味を明確にするために、現代においてこの思考の可能性を追求したジル・ドゥルーズの哲学を検討し、<存在の一義性>の思考の核心を、存在・意味=形式・個体化の様態の三位一体としてモデル化した。2、それと平行して、ドゥンス・スコトゥスにおける<存在の一義性>の思考の意味を、(スコトゥス的な)形而上学の形成との関係において明らかにする作業を、とりわけOrdinatioを素材に進めた。形相的区別の理論と内在的様態(modus intrinsecus)の理説の解釈が争点となることが明らかにされたが、そのテクストの難解さもあり、残念ながら最終的な結論を得るには至っていない。スコトゥスの議論と対抗関係にあるトマスにおける存在の類比の理説に関しては、その時期的な変遷に留意しながら大筋を把握するに至ったが、両者の議論の突き合わせの作業は現在進行中である。今年度の研究成果を受けて、来年度は、1、<存在の一義性>の思考のモデルの核心として明らかにされた、個体化の様態を巡る問題を、とりわけドゥルーズの議論の再検討を通して解明すると共に、2、スコトゥスの理説の意義に関して一定の見通しを確立した上で、3、スピノザにおける<存在の一義性>の思考の持分とその意義を明らかにし、最終的には、<存在の一義性>の思考こそが、超越的な存在者としての神と他の存在者一般をつなぐ論理としての存在の類比の思考の崩壊を導き、また、存在-神-論としての形而上学と対抗関係にある、という仮設を検討することになろう。

スコトゥスの議論と対抗関係にあるトマスにおける存在の類比の理説に関しては、その時期的な変遷に留意しながら大筋を把握するに至った。但し、研究の過程において、スコトゥスの議論とアヴィケンナの議論との関係の検討の必要性が強く意識されることになり、中世哲学における〈存在の一義性〉の問いの扱いを通時的に検討する作業を始めた。3.スピノザにおける〈存在の一義性〉の思考の持分とその意義を、この思考こそが、超越的な存在者としての神と他の存在者一般をつなぐ論理としての存在の類比の思考の崩壊を導き、存在-神-論としての形而上学と対抗関係となった、という作業仮説の検証という仕方で明らかにした。その際、特にマルブランシュの哲学との関係を新たに解明した。1.に関しては、既に刊行された論文、及び刊行予定の論文においてその研究成果を公表した(する)が、2.に関しては研究内容の深化、及び、若干の変更に伴い、成果の公表に至っていない。3.に関しては、初期著作と『エチカ』との関係に関して現在論文を執筆中であり、またオランダのスコラ学者の理説との関係については2.の研究成果の公表の後に、その成果を取り入れつつ公表することになろう。中世哲学における〈存在の一義性〉の議論の展開を背景にしたスピノザの思考の位置測定が次の研究の主たる課題となる。
グリア細胞による神経回路の病的書き換え機構の解明

病態時の神経回路再編において、アストロサイトによる貪食を介した不要神経回路、不要物質の除去が起きているのか、またその機能的役割を検証することを目的とした。その結果、病態時のアストロサイト貪食にABCA1貪食経路が重要であることをin vivoレベルで明らかにし、さらには、本分子のアストロサイト特異的欠損マウスが、病的な神経回路再編によって生じると考えられている神経障害性疼痛を発症しないことを見出した。アストロサイトによる貪食が、傷害後の脳内環境の整備だけでなく機能的神経回路網の再編成に積極的に参画している可能性が示唆された。神経障害性疼痛は、痛み閾値の著しい低下、触刺激を激しい痛みと感じるなどの症状を呈する難治性慢性疼痛である。近年の研究により、脳・脊髄における神経回路の可塑的な機能変調(長期増強、脱抑制、神経回路再編による混線)が原因と考えられている。予備検討から、GFAP-Cre(アストロサイト特異的プロモーター)依存的にABCA1分子を欠損させると、坐骨神経結紮による神経障害性疼痛を引き起こさないことが明らかになった。本年度はABCA1 flox/flox::GFAP-Creマウスを用いて、1. ABCA1分子の貪食能への重要性、2.責任領野の同定、3.アストロサイトのABCA1が神経障害性疼痛の形成へ重要であること、について検討を重ねた。3次元電子顕微鏡観察により、ABCA1 flox/flox;GFAP-Creマウスでは、病態時のアストロサイトの貪食能が顕著に低下していることが明らかになった。また貪食マーカーの発現低下も観察された。ABCA1分子が病態時のアストロサイトの貪食性を制御する重要な分子であることが示唆された。2について、同マウスはこれまで神経障害性疼痛との関わりが指摘されている脊髄においてABCA1発現の低下を認めず、大脳皮質において強い発現低下が観察された。脊髄より高次の中枢で疼痛形成を制御している可能性が示唆された。3について、GFAP-Cre発現は発生期に神経細胞にもリークする。アストロサイトが責任細胞であることを証明するには、より確実にアストロサイト選択的にABCA1分子を欠損させる必要が考えられたため、ABCA1 flox/flox;GLAST-CreERT2(時期・細胞種特異的)を作出した。一般的なタモキシフェン投与プロトコルでABCA1欠損を誘導したが、通常通り痛み閾値の低下を認め、また、ロバストなABCA1発現低下も観察されなかった。病態時において、アストロサイトによる貪食がABCA1依存的であることを3次元電子顕微鏡観察によって明らかにできたことは大きな進捗である。しかし、神経障害性疼痛の形成におけるアストロサイトの役割、ABCA1分子を介した機能についての検討まで進むことができなかった。まずはアストロサイトが責任細胞であることを検討するためにGLASTーCreERT2による実験を進めたかったが、既存のタモキシフェン投与プロトコルではノックアウト効率が低いということが明らかになり、十分に進められなかった。また、動物施設の感染・除染によるマウス出生率の低下なども進行が遅れた一因であった。ABCA1flox/flox;GLAST-CreERT2へのタモキシフェン投与方法を改善し、ノックアウト効率を向上させる。AAV-GFAP-Creベクターを用い(作出済み)、領野・時期・細胞種特異的にノックアウトすることでも可能なので、こちらの手法の条件検討も進める。神経障害性疼痛形成期に大脳皮質体性感覚野第五層の神経細胞において神経回路の再編成が活発化すること、それらが疼痛形成に必要十分条件であることが報告されている。神経障害性疼痛を形成しないABCA1flox/flox;GFAP-Creマウスの神経回路再編を観察するため、Thy1-YFPトランスジェニックと掛け合わせを行い、作出を完了した。このマウスを用いて、神経障害性疼痛形成期における神経回路の再編を観察し、疼痛形成との相関関係について検討を進める。神経化学
金属表面での有機合成による分子の微細加工

金属表面上での有機合成反応をおこなうために,金ナノ粒子の合成をおこなった。塩化金酸とアルカンチオールを混合し金チオラートとしたのちに,還元剤を加えることにより金ナノ粒子を合成した。反応溶媒をテトラヒドロフランなどの有機溶媒として,還元剤にシラン系の還元剤を用いることで。水を用いずに,過剰量の還元剤を利用することなく金ナノ粒子を合成することが可能な新しい合成法の確立に成功した。シラン系還元剤として,トリエチルシラン,ペンタメチルジシロキサン,ジエトキシメチルシランなどのさまざまな有機シランを用いることができることがわかった。また,ポリ(メチルヒドロシロキサン)のようなポリマー系のシラン還元剤を用いる金ナノ粒子合成にも成功した。また,アルカンチオールの等価体としてチオール基をテトラヒドロピラニル基のような保護基を用いることで保護されたものを用いても金ナノ粒子が合成できることも明らかにした。得られた金ナノ粒子を透過型電子顕微鏡(TEM)観察することにより,このようにして合成した金ナノ粒子は非常に粒径分布の狭いものであることがわかった。さらに,金ナノ粒子を合成するための安定剤の有機化合物として単純なアルカンチオールだけでなく,二重結合,エステル基,シリル基などのさまざまな官能基を持つものを用いることができることがわかった。チオール基および反応性の官能基をもつ分子が金表面への吸着する可能性について検討した。まず,チオール分子を反応系中で発生させるための脱保護的な形成について検討した。チオール分子をジヒドロピランを用いることによりTHPチオエーテルへと変換した。THPチオエーテルと塩化金酸を混合した中に還元剤を添加したところ,金表面へのチオール分子の吸着が起こり,金ナノ粒子を形成することが確認できた。還元剤としてトリエチルシランを用いることにより,有機溶媒中で金ナノ粒子を形成できることがわかった。同様な反応が,アルデヒドとチオエタノールから生成するチオアセタールを用いても可能であるかどうかを検討した。生成した金ナノ粒子の表面状態を評価するための手法として^1H-NMRによる分析の可能性を検討した。分解能は十分ではないものの,ある程度の評価は可能であることがわかった。また,チオフェン骨格を分子内にもち,末端にチオール基を有する化合物の合成に成功した。これらを合成するために,遷移金属触媒を用いるクロスカップリング反応,ホモカップリング反応を検討し,われわれが最近開発したCH結合でのカップリング反応が有効であることも明らかになった。
ロバストなデッドビート制御方式の開発とその応用

ある有限な時刻以降,被制御量(出力)を目標値に完全に一致させるというデッドビート制御は、離散時間制御における主要な研究である.しかし,制御対象の変動や外乱に対して,制御出力が極度に劣化してしまうという問題点が指摘されており,実用上の問題点とされていた.申請者等はこの数年間いくつかの成果を学会誌に発表してきた.これらの成果を踏まえ,本研究は以下の点を明らかにした.(1)オーバーシュートなしのデッドビート制御:目標値が単位ステップに対する最小オーバーシュート制御の研究である.この理論はL_1最適制御と同様に線形計画問題に変換され全体は2段階にわかれる.第1段階では,最小オーバーシュート問題を解く.そしてもしオーバーシュートの最小値が負(つまりオーバーシュートがない)ならば第2段階へ進み,全時刻の偏差が負の条件下でその最小値を最大化した.問題を有限次元にするためにデッドビート制御の範囲で考察した.デッドビート段数を増やすほどオーバーシュートが小さくなる様子がシミュレーションにより確かめられた.(2)H_∞ロバストデッドビート制御:この制御はノミナルなプラントに対しデッドビート制御を達成し,かつプラントの変動に対し,H_∞の意味で最適な閉ループ系を達成する制御である.2自由度制御器を用いることにより上記の2つの目的をそれぞれ独立に考察することができた.デッドビート制御は以前からロバスト性が低いといわれてきたが,これによりその欠点が改善された.ある有限な時刻以降,被制御量(出力)を目標値に完全に一致させるというデッドビート制御は、離散時間制御における主要な研究である.しかし,制御対象の変動や外乱に対して,制御出力が極度に劣化してしまうという問題点が指摘されており,実用上の問題点とされていた.申請者等はこの数年間いくつかの成果を学会誌に発表してきた.これらの成果を踏まえ,本研究は以下の点を明らかにした.(1)オーバーシュートなしのデッドビート制御:目標値が単位ステップに対する最小オーバーシュート制御の研究である.この理論はL_1最適制御と同様に線形計画問題に変換され全体は2段階にわかれる.第1段階では,最小オーバーシュート問題を解く.そしてもしオーバーシュートの最小値が負(つまりオーバーシュートがない)ならば第2段階へ進み,全時刻の偏差が負の条件下でその最小値を最大化した.問題を有限次元にするためにデッドビート制御の範囲で考察した.デッドビート段数を増やすほどオーバーシュートが小さくなる様子がシミュレーションにより確かめられた.(2)H_∞ロバストデッドビート制御:この制御はノミナルなプラントに対しデッドビート制御を達成し,かつプラントの変動に対し,H_∞の意味で最適な閉ループ系を達成する制御である.2自由度制御器を用いることにより上記の2つの目的をそれぞれ独立に考察することができた.デッドビート制御は以前からロバスト性が低いといわれてきたが,これによりその欠点が改善された.
産業用ロボットを用いた高速プロトタイプ加工システムの開発

CADによる設計形状を立体表現するために、3次元実体モデルを産業用ロボットによる切削加工で試作するための技術を開発する。本年度は『ロボットの剛性が低く、切削力を受けて大きく変形する』という問題を解決するために、ロボットハンド先端の変位量を推定するための剛性モデルの構築と、推定した変位量を補正する手法を確立することを目的とした。(1)ロボット各関節部の剛性測定ロボットに外力を作用させてロボット各部の変位を測定し、関節を挟む2点の相対変位と力の関係から関節部の剛性を測定した。実験に使用した垂直多関節型ロボットでは、ハンド先端に近い関節ほど剛性が低く、荷重-変位曲線におけるヒステリシスも大きい。また、ロボットのベースに近い関節は、変形がわずかであってもリンク長によって拡大されるために、ハンド先端の変位量に悪影響を及ぼしている。(2)ロボットの静剛性モデルの構築ロボット各関節部の静剛性を考慮し、ロボットの姿勢ならびにロボットハンド先端に作用する外力とロボットハンド先端の変位との関係を定義したロボットの静剛性モデルを構築した。推定される変位量を8つの姿勢について実測値と比較検証したところ最大で26%の誤差を生じ、荷重-変位曲線におけるヒステリシスや関節部のバックラッシュの影響が無視できないことがわかった。(3)パソコンCADによるオフラインティーチングの実現2.5次元の形状が定義できる簡単なパソコンCADを開発し、そこで求められる工具経路情報から切削加工のためのロボットの教示プログラムを自動生成することでオフラインティーチングを実現した。加工誤差をフィードバックする事で、加工精度が改善できることはこれまでの研究で明らかにしているが、実用上の観点ではハンド先端の変位量を精度良く推定し、教示プログラムを作成する時点でこれを考慮して加工精度を改善することが今後の課題である。
幼稚園英語教育における指導者のヒューリスティックスに関する理論的・実証的研究

本研究は、実際に英語教育を実践している幼稚園・保育園・英会話教室の協力の下で、実際のさまざまな保育場面に応じた指導者による意志決定について主に観察法を用いた実証的研究を行い、実際に幼稚園において英語教育を実施している指導者の「実践知」を、共有できる形に明示化することを目的とした。また、調査研究の場を就学前英語教育に求めることに加えて、教授経験の有無や英語活動が行われている場がもたらす影響を検討することにより、幼稚園英語教育の指導者を育成するためのカリキュラム開発に対する具体的な示唆を得ることが期待される。本研究ではまず、3年間もの長期に渡る幼稚園英語活動の観察において、COLT Part Aに加えてCOLT Part Bの分析を行い、さらにより質的に分析することによって指導者の指導実践の変容と活動内での指導者と園児のコミュニケーションの志向性に見られる変容を明らかにした。これはこの分野における縦断的な研究の必要性・重要性を示唆したものとなった。またCOLT Part Aを利用して教育背景の異なる3つのクラス間での比較を行い、国内の早期英語活動における多様性を客観的に記述・把握し、その多様性を構成する要因の解明と英語活動への影響を探求した。その結果、幼児英語教材などに見られる英語学習を目的としたタスクの使用が、実生活に密着した話題から言語を乖離する一要因となっていることを明らかにした。平成14年度は、幼稚園英語教育における教師のヒューリスティックス分析のための理論的枠組みの構築、データベース構築のためのデジタル化作業の準備、及び、指導者の意志決定に関する記述的研究のためのプレ調査分析に重点を置いた。この結果、幼稚園での英語教育の活動は、学習者の日常に即したプロジェクト・ワークやネイティブスピーカーと日本人の指導者によるティームティーチングが行われており、小学校英語教育と共通する点が認められた。中学校以上の英語教育との差異を考慮して、COLTを変更・修正した改訂版(the COLT Modified Version : COLT-Mod)を作製した。オリジナルのCOLTは、授業活動を記述するとPart Aと言語行動におけるコミュニカティブな志向性を分析するPart Bからなる。COLT-ModではPart Aを基本として、Part Bの項目を移動、既存項目の削除、及び新項目の付加を行うことで作成された。次に、データベース構築のためビデオ撮影された授業をデジタル化し、活動毎に分割して編集、DVD化した。そしてデジタル化された活動毎にCOLT-Modによる授業分析をプレ調査として行った。この結果、COLT-Modは幼稚園における英語授業の分析に有効であり、量的な分析のみでなく、Part Bも取り入れたことで質的な分析も可能であることが示唆された。これらのデータベースの構築ならびにデジタル化、その分析の作業は次年度以降も継続していく。またプレ調査の結果に関しては、平成15年度に学会発表が予定されている。平成15年度は、新たに2カ所での英語学習活動の観察を開始するとともに、2000年6月より継続的に観察している岐阜市内の幼稚園英語活動の2年間分の分析を主体に行った。昨年度に引き続き、授業分析のためのフレームワークとしてはCommunicative Orientation of Language Teaching(以下COLT)を用いた。昨年度は1年間の英語活動をCOLT PART Aを中心に分析し、指導者並びに学習者(園児)の変容を数量的に示したが、本年度は分析対象の期間を2年間に拡大するとともに、PART Bでの分析も行うことによって活動全体の量的分析に加えて、共通する活動内におけるコミュニケーションの変容を分析した。国内におけるCOLTによる授業分析は、これまでもいくつか行われてきた。しかしそれらはPART Aによるものであり、PART B分析による先行研究はその精密且つ煩雑な作業手順のためか見受けられなかった。本年度はPART A、PART Bの分析結果に関する研究発表を3度に渡って行い、PART A以上にCOLT PART Bが授業内のコミュニケーション活動を詳細にわたって記述することができるツールであることを初めて示唆した。しかし、それ以上に、2年間の幼稚園英語活動の中で学習者と指導者のともに様々な変容を記述できた点が最大の成果であろう。PART Aの分析を通して、まず、初めは個人としてしか活動できなかった学習者が、クラスとして、さらにはグループとして機能していく過程が認められた。

また指導者の指導の焦点が、日常生活を可能にするという初期の段階から、幼稚園生活のための管理行動、そして、英語活動へと移行していく過程も量的分析で確認された。MorningCircle Timeの内でのコミュニケーション活動を対象としたPART B分析からは、指導者の意志決定過程の手がかりとなる表現や応答の変容、それに先行する学習者の発話などを詳細にわたって質的に記述することができた。平成16年度の成果は大きく分けて以下の2つである。まず、これまで行っていた私立幼稚園での英語活動の2年間の分析に、更に1年間分を加え、年少クラスから年長クラスまでの3年間の指導者及び学習者(園児)の変容を分析した。この分析には昨年度に引き続き、Communicative Orientation of Language Teaching(以下COLTを分析フレームワークとして用いた。英語活動全体を量的に分析するCOLT PART Aのみならず、3年間に共通する活動内における発話行為をPART Bによって分析し、質的な変容に関しても記述することができた。この成果は、国内全国学会のシンポジウムや国際学会のポスターセッションにおいて発表され、高い評価を得た。論文化されたものも国際誌での掲載が決定している。次に、観察・分析対象のクラスを拡大した。観察対象として小学生低学年を対象とした英会話教室と保育園での教育実習も追加し、異なる教育背景において英語活動にどのような客観的差違が生じているのかということを明らかにした。更に、授業を明確に把握する手段としてCOLT-Aの結果をいくつかの分析観点からなるレーダーチャート化するCOLT Profilingを開発した。この成果は国内全国学会で研究発表をし、国際誌への投稿が予定されている。
スギ花粉特異的減感作療法における治療エキスの免疫原性に関する研究

現在のスギ花粉特異的減感作療法治療用エキスの大きな問題点としては,副作用としてアナフィラキシー反応が出現することである。アナフィラキシー反応が生じる最大の理由はB細胞エピトープが治療エキスに含まれているからであるが,B細胞の抗原認識はT細胞の抗原認識と比べ,より蛋白のコンフォメーショナルな構造認識を行うことから,蛋白構造を何らかの処理により変性させることでT細胞認識のみを賦活化させることが理論上可能ではないかと推測された。また,T細胞のみが賦活化されるならば抗原投与量を早期に増量でき,治療期間を短縮することが可能になると考えられた。そこで,今回,現行のスギ花粉特異的減感作療法治療用エキスに熱変性処理を行ったスギ抗原エキスを用いて,スギ特異的T細胞株増殖反応及び皮膚試験について検討した。スギ花粉特異的減感作療法治療エキスを用いて,その中に含有されているスギ蛋白主要抗原のCry j 1とCry j 2をまず変性させ,Cry j 1とCry j 2の熱変性処理には,100°Cの10分間の加熱処理が有効であることがわかった。次にスギ花粉を感作させたBALB/cマウスからスギ花粉特異的T細胞株を作成し,抗原提示細胞を用いて作成したスギ抗原エキスを加え,リンパ球幼若化反応を3H-thymidineの取り込みにより測定した。熱変性エキスを用いた場合のT細胞レベルでの効果判定は,現行の熱変性処理を加えていないスギ抗原エキスを用いた場合と比較すると約6割の治療効果が期待できるという結果に至った。熱変性エキスを用いた皮膚試験は,全く反応を起こさなかったため重大な副作用であるアナフィラキシー反応は回避できると思われた。同様にして,スギ花粉症患者の末梢血より単核球を分離し,熱変性処理を行ったスギ抗原エキスを用いて,スギ特異的T細胞株増殖反応及び皮膚試験について検討したところ,重大な副作用であるアナフィラキシー反応は回避でき,BALB/cマウスの場合と同程度の治療効果が期待できるという結果に至った。熱変性エキスが治療上有効であれば,現在開発中のペプチド免疫療法とほぼ同等の効果が期待できる可能性があり,スギ花粉症に対する減感作療法の有効率の向上と患者の負担軽減に大きく貢献すると思われるため,治療効果が最大限にあがるための一層の検討を加えていきたいと考える。現在のスギ花粉特異的減感作療法治療用エキスの大きな問題点としては、副作用としてアナフィラキシー反応が出現することである。アナフィラキシー反応が生じる最大の理由はB細胞エピトープが治療エキスに含まれているためであるが、B細胞の抗原認識はT細胞の抗原認識と比べ、より蛋白のコンフォメーショナルな構造認識を行うことから、蛋白構造を何らかの処理により変性させることでT細胞認識のみを賦活化させることが理論上可能ではないかと推測された。また、T細胞のみが賦活化されるならば抗原投与量を早期に増量でき、治療期間を短縮することが可能になると考えられた。そこで、今回、現行のスギ花粉特異的減感作療法治療用エキスに熱変性処理を行ったスギ抗原エキスを用いて、スギ特異的T細胞株増殖反応及び皮膚試験について検討した。スギ花粉特異的減感作療法治療用エキスを用いて、その中に含有されているスギ蛋白主要抗原のCryj1とCryj2をまず変性させた。方法として、37°C、56°C、100°Cにてそれぞれ60分間エキスの加熱処理を行った。100°Cの加熱処理においては60分間のほかに10分間という短時間処理の検討も加えた。その結果、Cryj1とCryj2の熱変性処理には、100°C10分間の加熱処理が有効であることが判明した。次にスギ花粉を感作させたBALB/cマウスからスギ花粉特異的T細胞株を作成し、抗原提示細胞を用いて作成したスギ抗原エキスを加え、リンパ球幼若化反応を3H-thymidineの取り込みにより測定した。熱変性エキスを用いた場合のT細胞レベルでの効果判定は、現行の熱処理を加えていないスギ抗原エキスを用いた場合と比べると、約6割の治療効果が期待できるという結果に至った。熱変性エキスを用いた皮膚試験は、全く反応を起こさなかったため重大な副作用であるアナフィラキシー反応は回避できると思われた。熱変性エキスが治療上有効であれば、現在開発中のペプチド免疫療法とほぼ同等の効果が期待できる可能性があり、スギ花粉症に対する減感作療法の有効率の向上と患者の負担軽減に大きく貢献すると思われるため、一層の検討を加えていきたいと考える。スギ花粉

特異的減感作療法治療エキスを用いて,その中に含有されているスギ蛋白主要抗原のCry j 1とCry j 2をまず変性させ,Cry j 1とCry j 2の熱変性処理には,100°Cの10分間の加熱処理が有効であることがわかった。次にスギ花粉を感作させたBALB/cマウスからスギ花粉特異的T細胞株を作成し,抗原提示細胞を用いて作成したスギ抗原エキスを加え,リンパ球幼若化反応を3H-thymidineの取り込みにより測定した。熱変性エキスを用いた場合のT細胞レベルでの効果判定は,現行の熱変性処理を加えていないスギ抗原エキスを用いた場合と比較すると約6割の治療効果が期待できるという結果に至った。熱変性エキスを用いた皮膚試験は,全く反応を起こさなかったため重大な副作用であるアナフィラキシー反応は回避できると思われた。同様にして,スギ花粉症患者の末梢血より単核球を分離し,熱変性処理を行ったスギ抗原エキスを用いて,スギ特異的T細胞株増殖反応及び皮膚試験について検討したところ,重大な副作用であるアナフィラキシー反応は回避でき,BALB/cマウスの場合と同程度の治療効果が期待できるという結果に至った。熱変性エキスが治療上有効であれば,現在開発中のペプチド免疫療法とほぼ同等の効果が期待できる可能性があり,スギ花粉症に対する減感作療法の有効率の向上と患者の負担軽減に大きく貢献すると思われるため,治療効果が最大限にあがるための一層の検討を加えていきたいと考える。