hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
口腔癌に対するゲルダナマイシンを用いての分子標的治療についての基礎的研究

口腔癌において予後を左右する因子とし癌細胞の転移・浸潤が大きな因子の一つとして挙げられる。この転移・浸潤に関して足場蛋白として種々の癌腫において発現し予後と相関すると報告されているα-actinin-4、EMS1について病理組織学的因子との関連、細胞生物学的特性について検討した。その結果、前者は浸潤型と、後者は腫瘍サイズ、所属リンパ節転移、浸潤型と相関し、また、各についてsiRNAにより浸潤能の低下がみられ、分子標的治療のターゲットに成りうることが示唆された。ヒトHSP90にはいくつかの点突然変異が報告されている.そのうちHSP90αアイソフォームで報告されている488番目のグルタミンがヒスチジンに置換したケースでは,酵母発現系を用いた実験によって,変異型HSP90が機能しえないと報告されている.しかしそのメカニズムは不明である.そこでこの変異がHSP90のどの機能を変化させるのかを検討した.バクテリア2-ハイブリッドシステムを用いて、この置換がヒトHSP90αのダイマー形成に及ぼす影響を検討した。HSP90αのミドルC末ドメイン内のGln488His置換体では、HSP90αのダイマー形成能の低下が認められ、この部位のアミノ酸変異がダイマー形成に寄与している可能性が示唆された。従来HSP90はダイマーで機能すると考えられてきたが,今回の発見は実際にダイマー形成能の低下が実際にHSP90機能に直接影響することを示している.しかしながら、このダイマー形成能の低下の理由として、発現した変異タンパク質の構造変化のために溶解度が低下し,その結果,ダイマー濃度が低くなっている可能性も残っているために、現在、さらに検討中である。舌下腺に発生した高悪性と考えられる乳頭状嚢腺癌について、文献的に考察を行い、論文として発表し掲載予定となっている。唾液腺導の管上皮より発生する導管内乳頭腫瘍についても、免疫組織学的ならびに文献的に考察し学会発表を行い、論文としても発表し掲載予定となっている。また、下顎歯肉の腺様扁平上皮癌と食道扁平上皮癌の同時異性重複癌のきわめて稀な症例について臨床的ならびに病理組織学的および文献的に検討し論文として発表し掲載予定となっている。また、過去15年間の顎矯正手術の臨床統計的検討を行い文献的検討を加えて、論文として発表した。口腔扁平上皮癌の予後を左右する因子として,癌細胞の浸潤能がある。腫瘍の転移には細胞間接着の減弱,マトリックスメタロプロテアーゼなどの活性化,細胞の運動の亢進などが重要であると考えられており,なかでも細胞骨格であるアクチン束状化のダイナミックな変化が重要な因子の一つであると認識されている。そこで,本研究では口腔扁平上皮癌におけるアクチン束状化タンパク質actinin-4の発現と臨床病理学的因子との関連を明らかにすることを目的とした。当科で治療を行った口腔扁平上皮癌64例の生検時標本および正常口腔粘膜症例10例を用い,抗ヒトactinin4抗体で免疫組織化学染色を行った。さらに,腫瘍細胞株SAS, OSC20, HSC-2, HSC-3, HSC-4, SCC25, Ca9-22, MCF7を用いてactinin4に関して,半定量RT-PCRでmRNA発現の解析を行い,細胞生物学的特性との関連を検討した。actinin4の発現は正常口腔粘膜および口腔扁平上皮癌にみられたが,口腔扁平上皮癌において優位に過剰発現していた。また,性別,年齢,腫瘍サイズ,頸部所属リンパ節転移および分化度との間に相関性はみられなかったが,浸潤パターンとの間に相関性(P<0.05)がみられ,癌細胞浸潤能との相関が示唆された。また,培養細胞においてもactinin4mRNA発現は癌細胞浸潤能を反映していた。actinin4は口腔扁平上皮癌において癌細胞浸潤に関与していることが示唆された。現在,actinin4の発現をRNAiで抑制し浸潤能,増殖能への影響を検討中である。また,頬粘膜に発生した巨細胞線維腫,頬粘膜に発生した導管内乳頭腫,舌下腺に発生した乳頭状嚢腺腫について免疫組織科学的,あるいは文献的に検討し論文として発表した。そこで,本研究では口腔扁平上皮癌におけるアクチン束状化タンパク質actlnln-4および足場蛋白であるEMS1(cortactin)の発現と臨床病理学的因子との関連を明らかにすることを目的とした。当科で治療を行った口腔扁平上皮癌の生検時標本および正常口腔粘膜症例を用い,抗ヒトactinln4抗体および抗cortactin抗体で免疫組織化学染色を行った。

さらに,腫瘍細胞株を用いてactinin4、EMS1に関して,半定量RT-PCRでmRNA発現の解析を行い,細胞生物学的特性との関連を検討した。actinin4の発現は正常口腔粘膜および口腔扁平上皮癌にみられたが,口腔扁平上皮癌において優位に過剰発現していた。また, actlnln4では浸潤型と、EMS1では腫瘍サイズ,頸部所属リンパ節転移および浸潤型との間に相関性(P<0.05)がみられ,癌細胞浸潤能との相関が示唆された。また,培養細胞においてsiRNAにより各々のmRNAの発現を抑制したところ、癌細胞の浸潤能の有意な低下がみられ、口腔扁平上皮癌において癌細胞浸潤に関与していることともに分子標的治療のターゲットとなりうる可能性が示唆された。
微細形状を有する基板に接したプラズマのミクロ構造の解析

まず、基板上での膜堆積やエッチングなどの反応過程の境界条件となる物理量として、気相から基板表面へ輸送されるラジカルのフラックスを求めた。具体例として、SiH_2ラジカルやH原子の密度を測定し、非晶質や多結晶のシリコン薄膜の形成機構におけるそれらの役割を議論した。次に、ラジカルの表面反応過程を直接調べるため、高速位相変調フーリエ変換赤外分光エリプソメトリー(FT-IR PMSE)という手法を新しく開発した。その方法を用いてフロロカーボン系のプラズマに晒されたSi基板表面での結合状態を系統的に調べた。気相での測定結果と対比することによって、イオン衝撃支援エッチングが進行している条件では、一定の厚みのフッ化層が形成されており、逆にイオン衝撃の少ない条件では、CF_2を主な前駆体とするポリマー膜が堆積して、エッチング反応を抑制していることがわかった。今回開発したin-situ表面計測法は化学結合状態が高感度に測定できるが、空間分解能が悪いため、ミクロ構造をもつ基板に対しては有効ではない。そこで現在、反射干渉法を利用した新しい表面加工形状の測定法を考案しており、それを併用することによってサブミクロンの空間分解能でプラズマと表面の相互作用を計測していく計画を進めている。また、表面反応や加工形状に大きな影響をもつイオンの入射エネルギーとその角度分布についても、微細な貫通穴をもつ基板を透過してきたイオンを質量分析する手法で直接測定する実験を遂行している。超LSI等のプラズマプロセスでは、ミクロな構造をもつ基板によってプラズマの局所的なシース構造が変化し、基板に入射するイオンの速度や方向が変化してプロセス結果に悪影響を及ぼす。本研究では、模擬実験及びシミュレーションによって、その効果を低減する方策を検討することを目的としている。初年度は、基板に近接したプラズマ中の局所的な領域での粒子の選択的計測法を確立するために、レーザー誘起蛍光法や吸収法に顕微測定法を取り入れた光学系を開発した。それを用いて、励起状態稀ガス原子などの時空間分解測定が可能であることを確認した。さらに、2次元的な速度分布の計測を可能にするために、吸収スペクトル線のドップラープロフィルが解析できるよう、レーザー光源の狭帯域化と計測系の調整を行っている。近々、この測定システムを誘導放電型プラズマ装置に組み込んで、まず窒素プラズマ中のN_2^+イオンについて、基板付近での速度分布を計測する予定である。一方、プラズマプロセスに広く用いられている平行平板型RF放電プラズマ装置においても、基板に入射するイオンの種類と速度分布を解析するために、阻止電圧型エネルギーアナライザーを試作して、アルゴンやメタンガスのプラズマから基板に入射するイオンのエネルギーを分析し、放電の外部パラメータとの関連を系統的に調べた。また、2光子励起レーザー誘起蛍光法を用いて、プラズマ中の基底状態水素原子密度の時空間分解計測を行った。昨年度に続いて気相でのラジカル計測を進め、基板上での膜堆積やエッチングなどの反応過程の境界条件となる物理量として、気相から基板表面へ輸送されるラジカルのフラックスを求めた。一方、ラジカルの表面反応過程を直接調べるため、高速位相変調フーリエ変換赤外分光エリプソメトリー(FT-IR PMSE)という手法を新しく開発した。そこで現在、反射干渉法を利用した新しい表面加工形状の測定法を考案しており、それを併用することによって、サブミクロンの空間分解能でプラズマと表面の相互作用を計測していく計画を進めている。

また、表面反応や加工形状に大きな影響をもつイオンの入射エネルギーとその角度分布についても、微細な貫通穴をもつ基板を透過してきたイオンを質量分析する手法で直接測定する実験を進めている。
DHラインを利用した作物の冠水耐性および酸性土壌耐性の生理生態学および分子生物学的研究

冠水による最大の被害の一つは光合成速度の低下によるバイオマスの減少や生長の抑制である。その理由としていろいろなことが考えられているが、オオムギの場合は不明な点が多い。そこで、本研究では品種間差異について検討した。その結果、冠水処理によって、光合成速度や蒸散速度の低下が認められたが、そこには品種間差異が認められた。この光合成速度の動さは、可溶性糖類の代謝と関係していると考えられる。冠水による酸素不足が起こると、作物は気孔が閉じて光合成速度が低下させるだけでなく、分子状酸素が還元することによって遊離活性酸素などの毒性物質が生じることが明らかとなっている。そのため、抗酸化酵素の活性について多くの検討が行われているが、その結果は対象植物や処理によって異なっている。そこで、本研究ではオオムギ品種を用いて、この点について検討を行なった。すなわち、冠水抵抗性が異なる2品種をポット栽培し、冠水処理を行い、対照区と比較検討した。その結果、抵抗性品種に比較して感受性品種の葉においてmalondialdehydeの含量が有意に増えた。superoxide dismutaseについては一定の傾向が認められなかったが、peroxidaseは前期は減少し、後期に増加した。また、catalaseやglutathione reductaseが増加した。冠水抵抗性における品種間差異は、酵素活性の程度の差で識別できる可能性が考えられた。14年度は9月に来日し半年間の研究を行った.このため成果発表はまだ行っていないが,有意義な成果が得られつつある.オオムギは,ビール加工用を中心に中国における重要作物のひとつであるが,しばしば土壌過湿や冠水の被害が発生することから,冠水耐性の高い品種の選抜や育成,ならびに,冠水耐性のメカニズムの解明や遺伝学的解析が必要である.本研究においては,中国で選抜・作出した品種やDHラインを用いて,オオムギの耐湿性に関する生理生態学的研究と分子生物学的解析を目指すが,その手はじめとして14年度においては,中国のオオムギ品種を用いたポット試験により,時期の異なる冠水処理が光合成に及ぼす影響を調べた.その結果,冠水による光合成速度の低下程度は品種によって異なった.miniPAMにより測定したクロロフィル吸光度の低下から,冠水耐性の弱い品種では光合成系IIに強い障害が生じたと考えられたので,そのメカニズムを解析するため脂質過酸化産物(MDA)や抗酸化酵素(SOD, POD, CAT, GR)の分析も行った.また,気孔コンダクタンスにも低下がみられることから,光合成系IIの障害以外の要因も,冠水による光合成の低下に関与していると考えられる.これらの諸要因については,冠水開始からの時間経過にともない順を追って発生するものと考えられ,詳細を検討している.冠水に強い耐性を示した品種は,冠水中に光合成速度を高く維持していたのみならず,冠水前歴を持たせることで,以後の冠水により強い耐性を示した.また,この耐性品種では,2-3日の冠水処理によって,土壌表層に多数の細い根が現れたことから,冠水による土壌中の酸素濃度低下に発育形態学的にも反応し,より溶存酸素量の多い地表面に根を発達させる機構を備えているものと推察された.冠水による最大の被害の一つは光合成速度の低下によるバイオマスの減少や生長の抑制である。
超好熱性古細菌の糖代謝に関与する酵素の機能解析とX線結晶構造解析

超好熱性古細菌Sulfolobustokodaii由来のATP依存性新規ヘキソキナーゼ(StHK)の特徴的な基質認識機構の分子基盤を解明するために、StHKと数種類の基質分子との複合体のX線結晶構造を決定することを目指した。前年度までに、4つの異なる状態[(1)アポ状態、(2)グルコース複合体、(3)ADP複合体、(4)キシロース・Mg^<2+>・ADP複合体]の結晶構造を決定し、StHKはヌクレオチドの結合ではなく糖基質の結合により大きな構造変化を起こすことや、StHKは他のヘキソキナーゼの酵素と大きくことなる基質結合部位ループをもつごとなどを明ちかにした。本年度は、StHKの基質認識機構とリン酸転移反応機構をより詳細に理解するために、(1)N-アセチルグルコサミン・(GlcNAc)との二者複合体、および(2)グルコース、ADP、Mg^<2+>との四者複合体のX線結晶構造解析を目指した。GlcNAc複合体については、結晶化スクリーニングを行い、単結晶を得ることに成功したが、X線をほとんど回折しなかった。一方、グルコース、ADP、Mg^<2+>複合体については、複合体結晶を得て、2AまでのX線回折データを収集し、分子置換法により位相を決定し、現在精密化を行っている。これまでに得られた結果を、2007年9月に東京大学で開催された東京大学生命科学研究シンポジウム2007にてポスター発表し、さらにPFトピックスおよびPFニュースにて発表した。超好熱性古細菌Sulfolobus tokodaii菌体抽出液中から5段階のカラムクロマトグラフィーによりATP依存性ヘキソキナーゼ活性を持つタンパク質(StHK)を精製し、ペプチドマスフィンガープリント法によりその遺伝子(ORF ST2354)を同定した。ST2354は、"hypothetical protein"とアノテーションされており、ヒト由来N-アセチルグルコサミン(GlcNAc)キナーゼと約25%の配列同一性を持つことがわかった。精製した組換えStHKの機能解析を行い、StHKはグルコースに加えGlcNAcなどの複数のヘキソースのリン酸化を触媒できる新奇耐熱性ヘキソキナーゼであることが明らかにした。アミノ酸配列の類似性から、StHKはSulfolobus属に特徴的なヘキソキナーゼであることが示唆された。StHKの基質認識機構の分子機構を解明するために、セレノメチオニン置換体を用いた多波長異常分散法または分子置換法により、StHKの4つの異なる状態[(1)アポ状態、(2)グルコース複合体、(3)ADP複合体、(4)キシロース・Mg^<2+>・ADP複合体]の結晶構造を1.65-2.0Å分解能で決定した。アポ状態とADP複合体はopen型構造をとるのに対し、グルコース複合体とキシロース・Mg^<2+>・ADP複合体はclosed型構造をとることから、糖結合は大きな構造変化を誘導するがADP結合は構造変化を誘導しないことが示唆された。StHKはヘキソキナーゼファミリーに特徴的なコアフォールドを持つが、基質認識に関与するループ構造が他のヘキソキナーゼファミリーのメンバーのそれと大きく異なることがわかった。StHKとGlcNAcキナーゼおよびヘキソキナーゼとの構造比較から、なぜStHKはグルコースとGlcNAcの両方をリン酸化できるのかを説明することができた。さらに、キシロース・Mg^<2+>・ADP複合体は、ヘキソキナーゼファミリーにおいてMg^<2+>イオンの結合様式が可視化された初めての例であり、これまでにヘキソキナーゼにおいて提唱されていたリン酸転移機構についてより精確に理解することが可能となった。以上の結果を、2006年9月にフランスで開催された国際学会Extremophilesにてポスター発表し、さらに2報の学術論文として発表した。

これまでに得られた結果を、2007年9月に東京大学で開催された東京大学生命科学研究シンポジウム2007にてポスター発表し、さらにPFトピックスおよびPFニュースにて発表した。
オセアニア環礁景観の考古学的・歴史人類学的綜合研究とその現在的活用策の検討

人間と自然の関係史を探究する歴史生態学や環境史の視点にもとづき、人間の営為と自然の営力の動態的絡み合いの歴史的産物として「景観」を措定し、マーシャル諸島マジュロ環礁の現景観生み出した歴史の通史的研究を実施した。考古学と地球科学が連節したジオアーケオロジーを中心に、歴史人類学ならびに形質人類学と現地調査を共有し、環礁州島が形成され始めた完新世後期からおよそ2000年間にわたる景観史を明らかにした。赤道付近の貿易風帯には環礁の島々が点在する。海抜4メートルをめったにこえない陸地は高潮や津波に対して脆弱である。なによりも陸水を持たないため、そこに定着できる動植物も少ない。それゆえに、楽園オセアニアのなかにあって環礁の島々だけは、機上からの景色とは裏腹に人間の居住にとってはきわめて厳しい環境とみなされ、19世紀の旅行記ばかりか、気候変動に関する政府間パネル(IPCC)の最新レポートでさえすべての環礁を脆弱な小島嗅国としてステレオタイプ化して扱う傾向にある。しかし、平成18年度にフィールドワークをおこなったマーシャル諸島マジュロ環礁では、発掘調査によって確認された最下文化層の放射性炭素年代が二千年前に遡る結果となった。地球科学的研究によれば、オセアニア環礁の陸地形成は完新世後期の海面低下以降に始まったと考えられるから、この説が正しければ、マジュロ環礁では出来たての州島陸地に人間が居住を開始したことになる。これは、一見一様にみえる環礁州島にバリエーションがあることを意味する。3500mmをこえる年間降水量が形成をうながす淡水の地下水レンズに、マジュロの初期居住を支えた要因を求めることができるかもしれない。いずれにせよ、居住を開始した先史島民は地下水レンズを巧みに利用しなが、サトイモ科ミズズイキ類の栽培に用いるピット耕地を遅くとも1800年ほど前から意図的に掘削しはじめていた。マジュロ環礁でもっとも大きいローラ州島における分布調査によって、総計195基ものピット耕地が確認された。面積は357,797m^2と大小さまざまで、平均は721m^2る。地下水レンズがもっとも厚く形成される州島中央部に大型のピットが数多く分布する。地下水の水頭まで掘り込まれた耕地とその廃土からなる起伏はまさに、自然の営力と人間の営為の合わせ業が生み出した歴史的産物と考えてよい。人間による環境への働きかけ、その結果として生じる新しい環境が文化や社会に及ぼす影響といった相互作用の連鎖は、遠く先史時代から始まっていた。それゆえ、過去の社会や伝統文化を単純に理想化し、自然と調和的なものとして語る風潮はかならずしも正しくない。そのことを示すためにも、今まさに温暖化問題に直面するオセアニア環礁の景観史研究を進め、先史から現在に連続する「絡み合う人と自然の歴史学」を構築することが本研究の目的である。そのために、マーシャル諸島マジュロ環礁にてジオアーケオロジー調査と歴史人類学的調査を実施した。ジオアーケオロジー調査では、根茎類が栽培されるピット耕地と居住空間の配置関係を時系列にそって把握するための発掘と、完新世後期の海面低下にともなう環礁州島の地形発達プロセスを解明するための堆積物採取を実施した。2000年前に始まった人間居住と農耕活動が、陸地の拡張と地下水レンズの安定化に呼応するかたちで展開し、現在みる景観の主要要素が1000年前にはほぼ出そろっていたことが明らかとなった。また、発掘調査によって複数の墓墳が確認された。これらは農耕活動とあわせて、先史の空間構成を復元するための貴重な情報となる。歴史人類学的調査にともなう聴取や史料渉猟は、18世紀以降の植民地時代に土地に対するさまざまな働きかけがあったことを明らかにした。特に、日本信託領時代(大正期)に生じた大型台風による被害の復旧として開かれたココヤシのプランテーションが現在の景観の主要要素となっていることを確認できた。さらに、環礁州島に点在する外来樹種の分布が植民地期の土地利用にかかわる感触を現地踏査でえた。これらの成果を公開した「第21回太平洋学術会議」では、自然と人間の長期的・累積的な関係をテーマとする景観史研究が地球科学と文化人類学を連接する文理融合型の歴史学となりうることをアピールできた。炭酸カルシウムの骨格をもつ造礁サンゴが海底から低潮位線ぎりぎりまで積み重なった生物起源の地形である。その礁原の上に、サンゴの破砕片や有孔虫殻が波浪の物理的作用によって打ち上げられ、その堆積物が低平な州島を形成した。人間の生存にとってはきわめて厳しい環境だが、環礁島民はそこで暮らすためのさまざまな工夫を土地に刻んできた。州島の現景観は、自然の営力と人間の営為が絡み合うことによって生みだした歴史的産物である。

その歴史を通史として描くために、マーシャル諸島マジュロ環礁とツバルのフナフチ環礁をフィールドとして選択し、連携研究者である棚橋訓(お茶の水女子大)、吉田俊爾(日本歯科大)、茅根創(東京大)とともに現地調査を実施した。マジュロ環礁では、環礁州島の地下にしみ込んだ海水の上に帯水する淡水レンズと人間居住の関係を探究するために、面積の異なる州島を複数選択し、植生調査と発掘調査をおこなった。その結果、大型で細粒堆積物からなる州島、小型で細粒堆積物からなる州島、小型で粗粒堆積物からなる州島で、人間の居住にとって重要な根茎類キルトスペルマやパンノキの分布に差異があり、居住年代も前者ほど古くさかのぼることを確認できた。フナフチ環礁では、ロンドン王立協会(Royal Society of London)によって19世紀終盤に記録されたフォンガファレ州島の微細な起伏を、第2次世界大戦以降改変された現景観のなかに確認するとともに、州島を構成する堆積物と文化層の有無を把握するために5カ所で試掘を実施した。その結果、陸上地形の形成史と人間居住史の拡大について所見を得ることができた。
慢性関節リウマチの骨破壊における骨芽細胞および破骨細胞の役割

RA患者およびOA患者骨髄より培養したOCを24穴ディシュにて72時間培養後、上清中のStromelysin(MMP-3)およびTIMP-1を測定・比較した所、RA患者でいずれも高い産生がみられた。IL-1β(1,10および100u/ml)はMMP-3産生を有意に増強したが、IL-4(10および100u/ml)存在下ではIL-1βの作用は消失した。また、IL-4単独でもMMP-3産生を有意に抑制した。一方、IL-1βはTIMP-1産生をやや増強したのに対し、IL-4はTIMP-1産生を著明に、しかも有意に増強した。IL-6についても検討した所、IL-4と類似の作用が認められた。次に、OC(2×10^5/ml)を^<45>Caラベル骨芽細胞に添加し、6時間培溶後の上清の放射活性を測定することにより、OCのCa遊離活性を検討したが、OA由来OCに比べRA由来OCにおいて、やや高いCa遊離作用が認められたが、両群間では有意な差はみられなかった。以上より、RA患者OCにおいては、骨破壊因子のみでなく、骨破壊抑制因子も増加しており、これらのOCの機能的変化には、IL-1βIL-4およびIL-6などのサイトカインが関係することがわかった。すなわち、IL-1βは骨破壊的にIL-4ないし、IL-6は骨破壊抑制的に作用することが示唆された。慢性関節リウマチ(RA)および変型性膝関節症(OA)患者の関節手術時に骨髄血を得,分離した単核球から破骨細胞(OC)を培養し,各種機能を検討した。OCは高いILー6を産生し,これはILーlBやTNFーαにより増強された。一方,ocはtissue inhibitor of metallo proteinases(TIMP)を産生しこれはIlーlβにより増強された。TIMP産生はOAに比べRAで高い。また,OCはsuperoxideを産生するが,これは軟骨細胞同様,極く少量であった。ocは象牙切片の骨吸収を惹起した。ocの骨吸収作用はヒト骨芽細胞を用い, ^<45>Ca遊離法でも行なうべく準備中であり,この測定系を用い,RAとOA間でOCの骨吸収活性を比較する予定である。OCに各種サイトカインを加え培養した上清につき,ILーlβ産生を測定中である。さらに,ハンクス液中で各種サイトカインを加え培養した上清ではコラゲナ-ゼ活性を東京医科歯科大難治研の永井裕教授と協同で測定中である。以上より,OCは軟骨細胞同様,各種サイトカインを産生し,蛋白分解酵素とそのinhibitorやsuperoxideを産生,これら組織破壊因子が高まるかまたは逆にinhibitor産生が低下すると,骨吸収を主体とした骨破壊がおこるものと思われる。慢性関節リウマチ(RA)患者骨髄より培養した破骨細胞(OC)の機能と骨破壊におけるその役割につき検討した。一方自発的に石灰化をきたす骨芽細胞(OB)を培養し、^<45>Caラベル後、OC(2×10^5/ml)を添加培養すると対照(100%)に比べ有意に高い^<45>Ca遊離がみられた(136%)。これはカタラーゼ添加により抑制されたことから、OCの骨吸収作用には過酸化水素や次亜塩素酸が関与することが示唆された。次にOCの骨吸収作用における接着因子の関与につき検討する目的でOBないしOCを96穴プレートで培養し、各種サイトカインを加え、さらに24時間培養後固定し、接着因子単クローン抗体を用いて各種接着因子発現をcell ELISA法で定量した。OCではICAM-1およびVCAM-

1が発現しており、IL-1βで増強された(ICAM-1はOD540値0.301±0.014から0.504±0.028に、VCAM-1は0.473±0.075から0.718±0.154に)。OCにはさらにVLA-4、LFA-1、Mac-1も発現していたが、このうちMac-1はIFN-γによって増強された(0.089から0.151)。一方OBにはICAM-1が発現しており、IFN-γによって増強された(0.563から0.795)、したがってOCによるOBからの骨吸収にはICAM-1/Mac-1(IFA-1)およびVCAM-1/VIA-4経路の関与が示唆された。OCによる骨吸収における接着因子の関与につき、以上の接着因子単クローン抗体を用い、さらに検討中である。慢性関節リウマチ(RA)患者9例および変型性関節炎(OA)患者8例の骨髄より、破骨細胞様細胞(OC)を培養し、メタロプロテアーゼ(MMP)およびTissue inhibitor of MMP(TIMP)産生、Ca遊離活性(骨吸収活性)につき検討し、さらに、これらの作用に対するサイトカインの影響を検討した。RA患者およびOA患者骨髄より培養したOCを24穴ディシュにて72時間培養後、上清中のStromelysin(MMP-3)およびTIMP-1を測定・比較した所、RA患者でいずれも高い産生がみられた。IL-1beta(1,10および100u/ml)はMMP-3産生を有意に増強したが、IL-4(10および100u/ml)存在下ではIL-1betaの作用は消失した。また、IL-4単独でもMMP-3産生を有意に抑制した。一方、IL-1betaはTIMP-1産生をやや増強したのに対し、IL-4はTIMP-1産生を著明に、しかも有意に増強した。IL-6についても検討した所、IL-4と類似の作用が認められた。次に、OC(2×10^5/ml)を^<45>Caラベル骨芽細胞に添加し、6時間培養後の上清の放射活性を測定することにより、OCのCa遊離活性を検討したが、OA由来OCに比べRA由来OCにおいて、やや高いCa遊離作用が認められたが、両群間では有意な差はみられなかった。以上より、RA患者OCにおいては、骨破壊因子のみでなく、骨破壊折制因子も増加しており、これらのOCの機能的変化には、IL-1beta、IL-4およびIL-6などのサイトカインが関係することがわかった。すなわち、IL-1betaは骨破壊的にIL-4ないしはIL-6は骨破壊抑制的に作用することが示唆された。
中山間地域の農業構造に関する東日本と西日本との比較研究-土地利用型経営展開、農地保全方式、および農地潰廃に関する地域性の検討-

今年度は、中山間地域の農業構造に関する東日本と西日本との比較研究をテーマとして実態調査を行った。東日本では山形県最上郡真室川町、西日本では広島県高田郡向原町と熊本県球磨郡多良木町の農業構造を分析した。その結果、最上中山間地域では緩やかな過疎化のなかで一定程度上層農家部分が形成されてきているが、その経営構造は旧来からの稲作と和牛および出稼ぎなどの不安定農外就業の結合した「旧来型」農家経済構造のもとにとどまっていた。他方で西日本では中国中山間地域と九州中山間地域とでは大きく展開方向が異なる。前者では農家と農地の継承すら危ぶまれる状況下にあるが、後者では西南暖地型の気候条件のなかで過疎化のなかで成長する「集約再編型」地域農業の展開がみられた。そこでは過疎化にともなう拡大志向農家群の形成とそこでの田畑輪換型の大規模複合経営の成立がみられる。以上、中山間地域農業の地域性を分析したが、最後にこれをふまえた各地域農業の支援方向を考察した。その場合、農村型第三セクターの意味が重要であることが指摘された。しかし展開型の中山間地域と後退型の中山間地域とで、第三セクターの方向性にはいくつかの多様性があるべきことが指摘された。
B細胞分化・成熟誘導の分子機構の解明

我々が単離した幼若B細胞特異的遺伝子の8HSー20は約730bpのイントロンを介在してleaderおよびexon1により構成され、exonl3'側約100bpの塩基配列はヒトおよびマウスVκ,VλのFRIII領域と30ー40%のhomologyを示す。またその全長はB細胞特異的VpreBー1遺伝子と約40%のhomologyを示した。cDNA塩基配列から予想されるアミノ酸配列から、8HSー20遺伝子はIg gene superfamilyに属することが示唆された。8HSー20遺伝子は前B細胞株および骨髄で顕著に約0.7Kbのサイズで発現し、また低レベルではあるが脾臓、IgM産生ハイブリド-マに同一サイズで発現されるものの他のB細胞株での発現は認められない。cDNA塩基配列により予想される8HSー20C末領域に対するウサギ抗血法を作製し免疫沈降を行なったところ、8HSー20遺伝子は分子量13.5,15.5KDa,PI4.7ー4.8および分子量14,16KDa PI4.1ー4.2の蛋白質をコ-ドすることが示唆され、さらにこれらの蛋白質は前B細胞μ鎖に結合することが示唆された。得られた抗体を用いPulse/chaseによる免疫沈降を行なうと、前B細胞株において8HSー20遺伝子産物はμ鎖産生直後に結合し、一方λ5,VpreBー1遺伝子産物はμ鎖産生後期に結合することが明らかにされ、この事は8HSー20遺伝子産物がμ鎖輸送初期に何らかの役割をはたすことを示唆した。また8HSー20遺伝子を組み込んだ2系統のトランスジェニックマウスを解析すると、約20匹中3匹のネズミ骨髄、脾臓においてCD45R陽性細胞数の減少が、15週令以上の10匹のネズミ中3匹にMacー1陽性細胞の著明な上昇が認められた。またILー7依存性in vitroB細胞産生の系において全例にCD45Rおよびμ鎖陽性細胞産生の遅延が認められ、8HSー20遺伝子産物の過剰発現によりB細胞μ鎖発現が抑制される可能性が示唆された。我々が幼若B細胞株より単離した8HSー20は、その全塩基配列の解析により、既知のB特異的遺伝子(λ5,VpreB,B29,mbー1)とは異なる新しい遺伝子であることが明かとなった。この遺伝子は前B細胞、virginB細胞で強く発現されるが、成熟B細胞では殆ど発現されない。8HSー20は幼若B細胞に産生されるμ鎖の一部と結合する分子量14および糖鎖結合の結果生じた16kの蛋白質分子をコ-ドし、2次元電気泳動を用いた解析では、遺伝子産物はP14.1ー4.2の位置に泳動されるが、同時にP14.7ー4.8、分子量11および15kの未知の蛋白分子が共沈されることが明かとなった。8HSー20遺伝子の成熟段階特異的発現の意義、およびその機能を解析するための一つの手段として、自身の発現調節領域を除去した8HSー20遺伝子を発現ベクタ-PUC/IgーEに組み込み、これを用いてトランスジェニックマウスを作製し、外来性の8HSー20を発現する2系統のマウスを確立した。

予備実験であるが、トランスジェニックマウスでは、B細胞産生が誘導抑制されることが示唆された。一方、8HSー20を発現しない成熟B細胞株へ遺伝子導入を行ったところ、予備実験で、μ鎖を介したシグナル伝達が抑制される可能性を示唆する結果を得た。現在両系を用い、得られた現象を詳細に解析中である。一方、幼若B細胞μ鎖複合体あるいは細胞成熟のシグナルやホ-ミングに対応する未知のレセプタ-に対する抗体を作製する目的で、幼若前B細胞株をラットに免疫し、μ陽性前B細胞株、virgin B細胞株に反応するが、成熟B細胞株に反応しないモノクロナ-ル抗体520ー113,208ー16を確立した。520ー113は208ー16と異なりμ鎖陰性の前B細胞株も染色する。これらの抗体は骨髄細胞中のμ鎖弱陽性から陰性に属する約5%の細胞集団を染色するが、脾臓細胞を染色しない。その染色パタ-ンからこれらの抗体は既知の幼若、成熟B細胞特異的抗体とは異なることが示唆された。現在これらの抗体が認識する細胞表面抗原の性状を検討中である。人為的に分化誘導可能でそのμ鎖発現がVH gene replacementにより誘導される前B細胞株46より得られた計4つのクロ-ンを対象として各クロ-ン内で産生されるμ鎖の多様性について検討した。この結果VーVDJ結合に際し、VH遺伝子3'側に位置する5mer CAAGAが常に保存され結合体を形成すること、一方非機能的VDJ遺伝子側では結合に際しV遺伝子のみならずD領域も欠如することが多いことが明らかとなった。この機序を考慮にすでに発表されているin vivoで産生されるIg遺伝子構造を検討すると、その一部がVH gene replacementにより産生された可能性が示唆された。またμ陽性46ー6よりCircular DNAを分離し、非機能的VDJ結合体のV_Hをプロ-グとしてクロ-ニングおよび塩基配列を決定した。この結果、V_H gene replacementは通常VーDJ結合と同様、再構成に際し、5'V_Hおよび非機能的VDJ結合体間のIntrachromosamal deletionを伴うことが明らかになった。人為的に成熟誘導可能な前B細胞株を対象として幼若B細胞株に特異的に発現増強する遺伝子8HSー20を単離した。8HSー20cDNAクロ-ンは全長約600bpであり、その塩基配列と、cDNAをプロ-ブとして単離、クロ-ニングされた全長約1.5Kbの胚細胞型8HSー20遺伝子座の塩基配列の比較から、8HSー20は約730bpのイントロンを介在してleaderおよびexon1により構成されることが明らかとなった。exon13'側約100bpの塩基配列はヒトおよびマウスVκ,VλのFRIII領域と30ー40%のhomologyを示し、またその全長はB細胞特異的VpreBー1遺伝子と約40%のhomologyを示した。cDNA塩基配列から予想される8HSー20アミノ酸配列は、VpreBー1,ヒトVλ,Vκ,ネズミVλ,VKと30ー40%のhomologyを示し、更にネズミVH,T細胞レセプタ-Vα,VβおよびCD8と20ー30%のhomologyを示し、8HSー20遺伝子はIg gene superfamilyに属することが示唆された。8HSー20C末領域に対応するウサギ抗血法を作製し免疫沈降を行なった。結果、8HSー20遺伝子は分子量13.5,15.5KDa,PI4.7ー4.8および分子量14,16KDa PI4.1ー4.2の蛋白質をコ-ドすることが示唆され、さらにこれらの蛋白質は前B細胞μ鎖に結合することが示唆された。
トリプレットリピート病におけるリピート伸長機構の解明と制御

筋強直性ジストロフィー症やハンチントン病など、トリプレットリピート病の3塩基繰り返し配列(リピート)は、世代を経るごとに、また年齢とともに伸長する傾向(リピート不安定性, repeat instability)があり、リピートが長いほど重症となる。こうしたリピート不安定性を制御することは治療的観点からも重要であるが、その詳細な機構はいまだ解明されていない。われわれは、800ものCTG・CAGリピートをもつ転写誘導細胞モデルに、リピート結合性低分子化合物を投与して、そのリピート不安定性をsmall-pool PCRおよびSouthern blot法で解析した。この結果、リピート結合性低分子化合物によりCTG・CAGリピートの不安定性が変化することを見出した。これまでにリピート不安定性はDNAの複製に伴い起こるものとされてきたが、本研究結果は、リピート配列がRNAに転写される際にslip-stranded DNAが生成され、これがリピート不安定性に関与するという、Transcription-induced repeat instability説を支持するものである。このことは、トリプレットリピート病での罹患組織であり、DNA複製の乏しい脳細胞や筋細胞でも、Transcription-induced repeat instability機構を制御すればリピート不安定性に対する治療介入が可能であることを示唆している。翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。
Prunus属果樹類の雌ずい細胞外タンパク質の網羅的解析

これまでに、甘果オウトウ(Prunus avium)が示す配偶体型自家不和合性には、雌ずいタンパク質であるS-RNaseが関与することを報告した。S-RNaseはT2/S typeRNaseに分類されるが、同じT2/S typeに属し、自家不和合性には関与しないRNase(non-S RNase)の存在が広範囲の植物種で知られている。non-S RNaseは、老化過程やリン酸欠乏時のRNAのターンオーバー、あるいは傷害や病原体に対する防御反応に関与することが知られている。本研究では、甘果オウトウ雌ずいで発現するnon-S-RNaseを同定し、そのアミノ酸配列やゲノム構造を解析し、S-RNaseとの進化学的関連性について考察した。甘果オウトウ雌ずいから抽出した可溶性タンパク質をPROTEAN IEFシステムを用いてIPG-strip上で分離させ、その後SDS-PAGEを行い、2D-PAGEプロファイルを得た。開花にともなって発現量が上昇し、なおかつS-RNaseと免疫学的に類似したタンパク質を網羅的に検出した。次に、得られたタンパク質スポットをプロテアーゼによりin-gel消化し、内部ペプチド配列を決定した。得られたアミノ酸配列情報を基に、'佐藤錦'雌ずいcDNAライブラリーをスクリーニングしたところ、non-SスポットをコードするcDNA(PA1,PA2)が得られた。これらcDNAクローンの推定アミノ酸配列は、T2/S typeRNaseの活性領域を含み、甘果オウトウS-RNaseあるいはnon-S-RNaseと30%程度の類似度を示した。系統樹を作成した結果、PA1はPA2とともに独立したクラスターを形成し、Prunus属S-RNaseのクラスターの近傍に位置した。またノーザン解析の結果、PA1およびPA2は雌ずい特異的に発現していた。DNAブロツト分析の結果、PA1およびPA2はマルチジーンファミリーを構成していることが明らかとなったが、供試した甘果オウトウ品種間では、ほぼ同じバンドパターンを示した。モモなどPrunus属果樹にはこれらPAのホモログが存在した。さらに、PAの遺伝子構造について解析した結果、Prunus属のS-RNaseが2つのイントロンをもつのに対し、PA遺伝子に存在するイントロンは1つであった。挿入部位は、Prunus属のS-RNaseの第2イントロンの挿入部位と同じく、可変領域に相当する部分に存在した。以上の結果より、甘果オウトウには雌ずい特異的に発現する塩基性のnon-S-RNaseが存在することが明らかとなった。S-RNaseとは様々な類似点がみられることから、進化学的に近い関係であると考えられた。しかし、遺伝子構造の比較から、今回得られたPAは、Prunus属のS-RNaseが出現する前から存在しているものと推察された。すなわち、PAがPrunus属S-RNaseの祖先分子種であり、PAから多くのS-RNase対立遺伝子が発生した可能性が考えられた。以上の結果より、甘果オウトウには雌ずい特異的に発現する塩基性のnon-S-

RNaseが存在することが明らかとなった。S-RNaseとは様々な類似点がみられることから、進化学的に近い関係であると考えられた。しかし、遺伝子構造の比較から、今回得られたPAは、Prunus属のS-RNaseが出現する前から存在しているものと推察された。すなわち、PAがPrunus属S-RNaseの祖先分子種であり、PAから多くのS-RNase対立遺伝子が発生した可能性が考えられた。
ロジウム錯体による触媒的分子間ヒドロアシル化反応

ロジウム錯体による触媒的分子間ヒドロアシル化反応を実用に供し得る素反応として開発するために、当該期間において、特に以下の2項目について、重点的に研究を推進し、一定の成果を得ることができた。1.ノルボルネン類を反応基質とする立体選択的ヒドロアシル化反応の開発:ロジウム錯体を用いたサリチルアルデヒドとノルボルネン類との分子間ヒドロアシル化反応を検討した。Wilkinson錯体[RhCl(PPh_3)_3]によるノルボルニレンのヒドロアシル化反応は、80°C加熱条件で定量的に進行し、exo-ヒドロアシル化体が立体選択的に得られた。また、AgClO_4を添加すると室温でも高収率で反応が進行した。これに対して、ノルボルナジエンとの反応では、K_3PO_4を添加すると反応は高収率に進行し、endo-ヒドロアシル化体が選択的に得られた。これはノルボルナジエンが二つのオレフィンを有するためロジウム金属とキレーションが可能となり、endo側で分子間ヒドロアシル化反応が進行したためと考察される。また、重水素化サリチルアルデヒドを用いることにより、上記推定反応機構が支持された。(Tetrahedron Letters,2005)(Chemical Engineering,2006)。2.分子間ヒドロアシル化反応におけるオレフィン基質適用範囲の拡大と反応位置選択性の完全な制御:分子間ヒドロアシル化反応における解決すべき問題点として、単純末端オレフィンへの適用とあわせて、反応の位置選択性制御があった。これらの問題解決のために検討を進め、アルケニルニトリルを基質をすると極めて温和な条件化、末端炭素にアシル化が生起したnormal-付加体を選択的かつ高収率で得ることを見出した。この発見を端緒として、さらにアセトニトリル等のニトリル化合物を添加剤として用いるだけで、単純末端オレフィンとの反応が良好に進行することを明らかにできた。本研究成果は触媒的分子間ヒドロアシル化反応研究においてブレークスルーともいえるものである(J.Org.Chem.,2007)。1.立体選択的分子間ヒドロアシル化の開発:ロジウム錯体を用いたサリチルアルデヒドとノルボルネン類との分子間ヒドロアシル化反応を検討した。(Tetrahedron Letters, 2005)2.不斉反応開発:1,5-ヘキサジエンとサリチルアルデヒドの反応では、種々のキラルリガンドを検討した結果、(S)-BINAPを用いたときに最も高いエナンチオ選択性を示した。特に、ある種の添加剤を加えた場合には高収率、高エナンチオ選択的に反応が進行し、鏡像体過剰率77%eeを示した。

本研究で得られた結果は、ロジウム錯体による初めての不斉分子間ヒドロアシル化反応の例として意義あるものと考える。(投稿準備中)3.分子間ヒドロアシル化反応におけるアルデヒドの適用範囲の拡大:この分子間ヒドロアシル化反応は従来、基質のアルデヒドのオルト位にフェノール性水酸基が必須であり、一般性に問題を有していた。そこで、ロジウム錯体とキレーション可能な各種アルデヒドについて反応を検討した。2-(アルキルチオ)ベンズアルデヒドおよび2-(ジフェニルホスフィノ)ベンズアルデヒドの分子間ヒドロアシル化反応は、室温で進行し、高収率でnormal-ヒドロアシル化体を与えた。また、2-ホルミルキノリン-N-オキシドとノルボルネン類との分子間ヒドロアシル化反応も進行し、高収率にexo-ヒドロアシル化体を優先的に与えた。これは、初めて複素芳香環アルデヒドで分子間ヒドロアシル化反応が進行した例である。(投稿準備中)ロジウム錯体による触媒的分子間ヒドロアシル化反応を実用に供し得る素反応へと展開するためには、いくつかの改善を必要とされている現状があった。そのため、18年度では、特に以下の2項目について、重点的に研究を推進し、一定の成果を得ることができた。1.ノルボルネン類を反応基質とする立体選択的ヒドロアシル化反応の開発:Wilkinson錯体[RhCl(PPh_3)_3]によるノルボルニレンのヒドロアシル化反応は、加熱条件で定量的に進行し、exo-ヒドロアシル化体が立体選択的に得られた。また、添加剤の効果により室温でも高収率で反応が進行することを明らかにできた。一方、ノルボルナジエンとの反応では、endo-ヒドロアシル化体が立体選択的かつ高収率で得られた。本反応の推定反応機構も提唱した(Chemical Engineering,2006)。2.分子間ヒドロアシル化反応におけるオレフィン基質適用範囲の拡大と反応位置選択性の完全な制御:分子間ヒドロアシル化反応における解決すべき問題点として、単純末端オレフィンへの適用とあわせて、反応の位置選択性制御があった。これらの問題解決のために検討を進め、アルケニルニトリルを基質をすると極めて温和な条件化、末端炭素にアシル化が生起したnormal-付加体を選択的かつ高収率で得ることを見出した。この発見を端緒として、さらにアセトニトリル等のニトリル化合物を添加剤として用いるだけで、単純末端オレフィンとの反応が良好に進行することを明らかにできた。本研究成果は触媒的分子間ヒドロアシル化反応研究においてブレークスルーともいえるものである(J. Org. Chem.,2007)。
高齢者痴呆症の早期発見における高次脳機能検査の妥当性に関する研究

本研究の目的は、痴呆症の早期発見のために用いることが有用な検査方法の妥当性を検討することである。日常生活に支障のない地域在住の一般高齢者で、本調査の趣旨に同意を得た222名(男性71名、女性151名)を対象に次の調査を実施した。対象者の平均年齢は、男性が72.9歳、女性が69.6歳であった。調査項目は、問診(既往歴、ライフスタイルなど)、身体計測(肥満度など)、血圧、血液生化学検査13項目、ApoEフェノタイプ、骨密度、高次脳機能検査(ミニ・メンタルテストMMS、Raven色彩マトリックス検査(RCPM)、仮名ひろいテストなど)、体力指標(握力、大腿四頭筋筋力、柔軟性、敏捷性、手指先運動、全身反応、平衡能力など)である。従来から痴呆症のスクリーニング検査として知られているMMS検査の本集団における得点は、全員が20点以上(平均値は26.8点)であり、本研究対象者は、通常のMMSによるスクリーニング検査では痴呆症要精検者としては検出される可能性の少ない者であった。近年、Apolipoprotein E4 alleleを有する者は、遅発型のアルツハイマー痴呆に早期に高率に羅患するとの報告がされている。対象者のうち、ApoE遺伝子解析が可能あった者は、95名(男性56、女性39)であった。ApoEフェノタイプの頻度分布は、E2/2型が1名(1.1%)、E2/3型が7名(7.4%)、E2/4型が1名(1.1%)、E3/3型が71名(74.7%)、E3/4型が13名(13.7%)、E4/4型が2名(2.1%)であった。E2/2型とE2/3型をE2、E3/3型をE3、E2/4型、E3/4型、E4/4型をE4と分類し、性別に各検査値との関連を比較した。E3群とE4群で有意(p<0.1)な差が認められた項目は、体重、拡張期血圧、手指先運動能、血液検査項目(血小板数、総コレステロール、遊離脂肪酸)であった。これらの検査項目は、早期痴呆の検出に関連している可能性が示唆された。本研究の目的は、痴呆症の早期発見のために用いた種々の検査方法の妥当性を検討することである。本年度は、調査項目の検討と、対象者へ調査依頼を実施した。調査対象者は60歳以上の在宅高齢者で、日常生活には支障のない者である。現在、約100名の者から調査および検査の同意を得ている。第1回目の調査は、平成9年4月に実施予定である。調査内容の概略は、次のとおりである。1.問診(自記式調査票および面接問診)項目既往歴、現在の健康状態、ライフスタイル、精神状態(鬱尺度)など2.血液検査動脈硬化度、アポリポ蛋白E4表現型などなお、アポリポ漂白E4表現型は、近年、遅発型アルツハイマー型痴呆の診断マーカーとして報告されているので、本研究でも検査項目として加えた。3.高次脳機能、神経心理学的検査ミニ・メンタルテスト(MMS)、Raven色彩マトリックス検査(RCPM)、仮名ひろいテストなど4.体力指標握力、大腿四頭筋筋力、柔軟性、敏捷性、全身反応、平衡能力(片足立ち)など本研究の目的は、痴呆症の早期発見のために用いることが有用な検査方法の妥当性を検討することである。

E3群とE4群で有意(p<0.1)な差が認められた項目は、体重、拡張期血圧、手指先運動能、血液検査項目(血小板数、総コレステロール、遊離脂肪酸)であった。これらの検査項目は、早期痴呆の検出に関連している可能性が示唆された。
TOLL様受容体の認識機構と包括的活性制御機構の解明

病原体センサーであるToll-like receptor (TLR)は非自己である病原体を直接認識することで、病原体に対する防御反応を誘導する。TLR7/TLR9はそれぞれ病原体由来のRNA/DNAに応答する。近年、TLR7/9がDNAやRNAに対する自己抗体産生に貢献し、自己免疫疾患に関与していることがモデルマウスにおいて示されている。TLR7/9の特異性は、必ずしも病原体に特異的ではなく、自己の核酸に対しても応答することが分かっている。したがって、TLR7/9の応答性は、感染防御には十分であるけれども、自己免疫疾患を誘導しない程度に制御される必要がある。しかしながら、その制御機構については、まだ不明な点が多い。我々は、TLR7/9の応答性を制御する分子の検索をこれまで進めてきた。その結果、Unc93B1という分子がTLR7、TLR9の応答性を相反的に制御しているという結果を得た。Unc93B1はTLR7、TLR9に会合し、TLR7/9を小胞体から、エンドリソソームに輸送する分子である。TLR7/9は小胞体に普段は局在しているが、リガンドである核酸はエンドリソソームに輸送される。したがって、Unc93B1によって輸送されなければ、TLR7/9はリガンドに応答できない。今回、我々の結果から、Unc93B1との会合は、TLR7、TLR9との間において競合しており、しかもUnc93B1はTLR9を優先的に輸送していることが明らかとなった。この制御機構が破綻すると、感染免疫にどのような影響があるのか、今後調べてゆく必要がある。