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ハンセン病絶対隔離政策に抵抗した医療実践の研究

小笠原登は、皮膚科特研に患者を入院させることで、患者の治療より患者の撲滅を目指し、強制労働や強制断種・堕胎が日常化している国公立ハンセン病療養所への隔離から患者を守ろうとし、無癩県運動の渦中においてもそうした姿勢を貫いた。しかし、その一方で、小笠原は警察との連絡を密にし、逃走患者については詳細に警察に報告していた。小笠原は、癩予防法を遵守する姿勢を鮮明にし、そのなかで、皮膚科特研への患者収容を維持し、それをもって国公立療養所への隔離から患者を守り得た。愛知県あま市の圓周寺所蔵の小笠原登の日記、書簡の解読を進め、特に1941年の日記をほぼ解読し、さらに、この年の小笠原をめぐる新聞・雑誌記事の調査・収集を行った。この年の12月、日本が対米英戦争に突入する直前、大阪帝国大学で開催された日本癩学会で、国立ハンセン病療養所の医師ら患者の強制隔離を進める立場のひとびとから、小笠原は隔離政策に反対する「国賊」のように誹諺され、激しく攻撃された。このときの事情は、これまでにも学会の機関誌『レプラ』などで明らかにされていたが、日記を解読することで、小笠原の心情や、小笠原を支持する京都帝国大学医学部皮膚科特別研究室のスタッフ、さらには同室の入院患者の言動も鮮明となり、理不尽な隔離政策を進める国策への小笠原と同室スタッフの強固な対決姿勢も解明することができた。こうした研究成果をもとに、同学会の状況は、医学の分野におけるファシズムの学問弾圧としてみなすことが出来る。これまでのファシズムによる学問弾圧というと、滝川幸辰、美濃部達吉、矢内原忠雄、河合栄治郎、津田左右吉など人文・社会科学の分野の学者への事例は知られているが、自然科学の分野でのそれはほとんど注目されなかった。そうした意味では、日記の解読によって、日本癩学会による小笠原登への激しい攻撃の実態の全体像が明白になったことは意義があると考えられる。また、書簡のなかには、小笠原を激しく攻撃した側の医師たちとの個人的な親交も読み取れた。学者として同学の士と親しく交流しながらも、ハンセン病患者は強制隔離する必要はないという自らの学説に対しては、国策と対決しても譲らなかった小笠原の強い意志があることを理解した。なぜ、そのような強固な意志を持ちえたかについては、日記のなかからは、浄土真宗の信仰があったからと判断できる。なお、2012年度は、1941年の日記の内容を活字化するとともに、1942年以降の日記の解読を進めたい。主として圓周寺所蔵の「小笠原登関係文書」のうち、1941年の小笠原登の日記、及び関係する書簡類の解読を終え、以下のような結論を得た。ハンセン病の発症については体質が大きく作用するという学説は、小笠原登のみが唱えたものではないし、第15回日本癩学会総会のときにのみ主張されたものでもない。むしろ、そうした学説には、学会で一定の支持があり、絶対隔離を推進する医師の間にも小笠原の学説に賛成する者もいた。それにもかかわらず、第15回日本癩学会総会で小笠原が絶対隔離を推進する医師たちから激しく攻撃されたのは、『中外日報』『朝日新聞(大阪)』が、小笠原がハンセン病について、あたかも遺伝病であるかのごとく説いているように報じたからであった。この記事の内容を否定して、ハンセン病は治癒できない感染症であるから絶対隔離が必要であることをあらためて世論に訴えるため、絶対隔離を推進する医師たちは15回総会で小笠原登を集中的に攻撃するという異常な事態を演出したのである。すなわち、絶対隔離を推進する医師たちは、京都帝国大学医学部附属医院皮膚科特別研究室でおこなっている小笠原の医療実践を攻撃したのではなく、新聞報道された内容を攻撃したのである。したがって、以後も、小笠原は自らの医療実践を変えることはなかった。この事実から、小笠原の医療実践もまた、絶対隔離政策の枠内にあったのではないかと推測される。小笠原もまた、絶対隔離の法である癩予防法を遵守し、その中で可能な限りの絶対隔離への抵抗を試みていた。これまでの研究では、小笠原は癩予防法にあえて違反しても、通院治療や退院を実施していたとみなされてきたが、「小笠原登関係文書」の分析をとおして、そうした理解に大きな疑問を懐くに至った。圓周寺所蔵の「小笠原登日記」の解読を進め、1943年1944年分の内容について分析した。戦局が悪化するなかで、京都帝国大学医学部附属医院皮膚科特別研究室で、ハンセン病患者へのどのような医療が実施されていたのかということの解明が、その課題である。まず、第一に明らかになったことは、この時期、小笠原は率先して、入院患者に対し、紀元節、天長節、明治節、海軍記念日などの祝日の奉祝行事を実施し、また、防空訓練にも積極的に参加していた事実である。

小笠原は、絶対隔離政策という国策には反対しつつも、それ以外の戦争遂行の国策には積極的に従っていた。京都陸軍病院から、ハンセン病を発症した兵士の入院を受け入れてもいるし、国立ハンセン病療養所とも連絡をとり、患者の受け入れもおこなっている。小笠原には反権力の医師というイメージが存在するが、けっしてそうではなく、小笠原は、日常的に皇室の恩、国家の恩を患者に説いていた。次に、そのうえで、患者を絶対隔離政策から守るべく、細心の注意を払っていた事実も明らかになった。これまで戦局が悪化すると、隔離も不徹底になったように考えられてきたが、「日記」を読む限り、そのようなことはなかった。無癩県運動は継続しておこなわれ、そうしたなか、小笠原は、皮膚科特研に入院させることで、患者を強制隔離から守ろうと尽力していた。この点で、当時、やはりハンセン病患者を外来診療をおこないつつ、訪れる患者に国立療養所への隔離に応じるように圧力を加えていた大阪帝国大学大阪皮膚病研究所と大きく異なっていた。2013年度の研究では、こうした事実を明らかにすることができた。前年度に引き続き「小笠原登日記」の1941年1942年分の解読を進め、その分析をおこなった。結論は以下のとおりである。小笠原登は癩予防法に医学的な誤りを認めつつ、遵法の立場から法律の範囲内でハンセン病患者の生活と人権を守ろうとした。換言すれば、小笠原の医療もまた、癩予防法の内にあったということになる。小笠原が強く反対したのは、治療をおろそかにして隔離のみを実施する国立療養所の医師たちの姿勢であった。小笠原は、隔離政策そのものに反対したのではなく、ハンセン病の感染力の実態や個々の患者の症状の相違を無視して、すべての患者とその家族の生活と人生を奪う絶対隔離という政策を厳しく批判したのである。これまでの研究では、小笠原の医療実践はあえて法律に違反しても患者の人権を守ったという評価であったが、今回の日記の分析により小笠原の実践は法の枠内にあったことを実証できたことは大きな成果である。今後は、こうした新たな評価の上に、研究を進めていくことができる。圓周寺所蔵の小笠原登関係文書の3度目の調査をおこない、新たな資料を発見するとともに、これまでの資料の再検討をおこない、以下のような結論に達した。小笠原登は、皮膚科特研に患者を入院させることで、患者の治療より患者の撲滅を目指し、強制労働や強制断種・堕胎が日常化している国公立ハンセン病療養所への隔離から患者を守ろうとし、無癩県運動の渦中においてもそうした姿勢を貫いた。皮膚科特研という京都帝国大学附属医院皮膚科とは別棟の施設にハンセン病患者は院内隔離されていたが、そこでは強制労働や強制断種・堕胎がなされないだけではなく、患者を治癒させようとする医療が実施されていた。患者の外出や一時帰省も小笠原が許せば可能であった。そして、治癒と判断されれば退院も許されていた。皮膚科特研への院内隔離は、国公立療養所への隔離とはまったく異なる形態であった。その一方で、小笠原は警察との連絡を密にし、逃走患者については詳細に警察に報告していた。その点では、皮膚科特研もまた絶対隔離政策の枠内、すなわち、無癩県運動の枠内にあった。小笠原は、癩予防法を遵守する姿勢を鮮明にし、そのなかで、皮膚科特研への患者収容を維持し、それをもって国公立療養所への隔離から患者を守り得たのである。しかし、皮膚科特研を一歩出れば、患者は無癩県運動の対象となり、国公立療養所に隔離される危険にさらされていた。
遺伝的に不安定なマイクロサテライトの単離とその性質

マウスゲノムライブラリーより約50種類のマイクロサテライトを単離した。これらの中から遺伝的に不安定なマイクロサテライトを単離する目的で、放射線照射マウスを用いてマイクロサテライトの不安定性をPCR-SSCP法で検討した。現在まで、約20種のマクロサテライト座を解析したが、全て遺伝的に安定であり不安定なマイクロサテライトの単離はきわめて困難と考えられた。そこで、我々が報告した遺伝的に不安定なマウスのミニサテライト(Pc-2)を用いて、ミニサテライトとマイクロサテライトの両群に属すると考えられるような鎖長の短いDNA断片の単離を試みた。Pc-2座に変異を持つ3頭のF1マウスのゲノムDNAをHinf I消化し、Pc-2をプローブとしサザンブロット法を行ったところPc-2座(C3Hアレル:4kb)の他に約2kb(C3Hアレル)のDNA断片とクロスハイブリダイズし、しかも個体間でDNA鎖長の違い(変異)を示すバンドがみられた。C3Hマウスゲノムからこのバンドをクローン化、DNA塩基配列を決定し、このクローン(Pc-3)のDNA鎖長が2Kbで、中にPc-2の反復単位(AGGCAGG)が約200回繰り返す配列を含むことを明らかにした。Pc-3のフランキング配列に対しプライマーを作成し、PCR法でゲノムの遺伝的不安定性を検討した。C3Hの雄マウスに3Grayの放射線を照射し、1週間と3週間後にB6雌マウスと交配し作成したF1マウスのPc-3座の変異を調べた。対照の非照射群、1週ならびに3週群における変異の頻度はそれぞれ、B6アレルで28%(11/39),25%(12/48),32%(15/47),CH3アレルで21%(8/39),35%(17/48),47%(22/47)であり、これまで報告されている変異検出系の中で最も高感度に変異を検出できる系であることが明らかとなった。この系では、PCR法を利用しているので簡便に、かつ同時に多数の試料を短時間で分析できる利点を持つ。今後、環境汚染物質や食品添加物に含まれる変異原の生物に対する遺伝的影響を鋭敏に知るための分析系として活用されることが期待できる。
多発性硬化症モデルの予後に関連する再発・寛解維持の制御機構～自己免疫ワクチン

脳炎惹起性ペプチドを感作することで多発性硬化症(MS)の多彩な経過に類似した動物モデル(EAE)が作成可能である。SJL/Jマウスでは再発型EAEを惹起するPLP139-151と単相型EAEを惹起するPLP136-150がオーバーラップしていることから、遺伝的素因に依らないで寛解を維持する因子として、(1)脳炎惹起性ペプチド自体のヒエラルキー:優位性が高いペプチドほどそれで惹起したEAEは再発・再誘導されにくいという逆相関があること、(2)末梢リンパ節に寛解期以降で誘導されるCD4+CD25+T細胞(Treg):高値で維持され、最も制御能の高いCD69CD103共陽性の分画(DP-Treg)を多く含むことを突き止めた。さらにこのDP-Tregは病態形成に深く関わるTh17との類似点もありながらIL-6Rが低く維持されてTregの性質を保ったまま適材適所で制御性機能を発揮できると推定された。またこのTregは症状が起こらない条件でも誘導でき、ワクチンのように発症を抑制できることも示した。多発性硬化症(以下MS)は中枢神経系に脱髄病変を生じ、症状の再発・寛解を繰り返す神経難病であり、代表的な動物モデルとして実験的自己免疫性脳脊髄炎(以下EAE)が研究され、現在では単相型・再発寛解型・慢性型などMSの多彩な経過に類似した様々なモデルが作成されつつある。しかし感作する脳炎惹起性ペプチドはモデル動物種や系統に依存していることからEAEの臨床経過も遺伝的に一律であると思われてきた。我々は複数の脳炎惹起性ペプチドが同定されているSJL/Jマウスにおいては感作ペプチドの違いによって全く異なる臨床経過をとることを発見し、遺伝的素因によらない再発寛解のメカニズムを解明する糸口と考えた。まず再発寛解型のモデルとして広く使用されているPLP139-151によるEAEがさらに寛解後にどのペプチドで追加免疫しても再誘導されるのに対し、これと重複するPLP136-150によって誘導されるEAEは一切再発しない単相型で、寛解後にどのペプチドで追加免疫しても再誘導されず寛解を長期に維持するという大きな違いを示すことを見いだした。その違いが末梢リンパ節に寛解期以降で誘導されるCD4^+CD25^+FQxp3^+制御性T細胞(Treg)が長期に高値で維持されるかどうかという量的な動態の違いと、最も制御能の高いCD69CD103共陽性の分画(DP-Treg)を多く含むかどうかという質的な違いによることを発見し、さらに脳炎惹起性ペプチドにはヒエラルキーがあり優位性が高いペプチドほどそれで誘導したEAEはむしろ再発・再誘導されにくいことを明らかにした。そしてこのDP-Tregは特にCrLA4, ICOS, LAG3, FR4などの主要なTreg関連分子の発現が他の分画より圧倒的に高く、IL10やLAPの産生も多く、Foxp3とともにRORgtも共発現し、IL17も少量産生する特殊な一群であり、IL17産生Treg・active Tregや制御性Th17細胞と呼ばれる細胞群の範疇に属すると考えられ、EAEの発症・増悪の本態である炎症性Th17細胞との関係で解析すべき群であると思われた。多発性硬化症(以下MS)は中枢神経系に脱髄病変を生じ、症状の再発・寛解を繰り返す神経難病であり、代表的な動物モデルとしては脳炎惹起性ペプチドの感作で誘導される実験的自己免疫性脳脊髄炎(以下EAE)があり、現在では単相型・再発寛解型・慢性型などMSの多彩な経過に類似した様々なモデルが作成されている。しかし感作ペプチドは動物種や系統に依存していることからEAEの臨床経過も遺伝的に一律であると思われてきた。我々は脳炎惹起性ペプチドが複数同定されているSJL/Jマウスにおいては感作ペプチドの違いによって全く異なる臨床経過をとることを発見し、遺伝的素因によらない再発寛解の機構を解明する糸口と考えた。まず再発寛解型のモデルとして広く使用されているPLP139-151によるEAEがさらに寛解後にどのペプチドで追加免疫しても再誘導されるのに対し、これと重複する

PLP136-150によるEAEは一切再発しない単相型で、寛解後に追加免疫しても再誘導されず寛解を長期に維持するという大きな違いを示すことを見いだした。その違いが末梢リンパ節に寛解期以降で誘導されるCD4^+CD25^+Foxp3^+制御性T細胞(Treg)が長期に高値で維持されるか否かという量的な動態の違いと、最も制御能の高いCD69CD103共陽性の分画(DP-Treg)を多く含むか否かという質的な違いによることを発見し、そしてこのDP-Tregは特にCTLA4, ICOS, LAG3, FR4などの主要なTreg関連分子の発現が他の分画より圧倒的に高くIL10やLAPの産生も特に多いこと、CCR2, CCR5やCCR6などが常に高くCD62LやCCR7が低いeffector cellであり炎症性細胞と動態を共にして適材適所で作用すること、Foxp3とRORγtを共発現しIL-17も少量産生しつつIL-6Rが持続して低いために炎症性Th17細胞に転化しにくい特殊な一群であることが証明された。また脳炎惹起性ペプチドにはヒエラルキーがあり優位性が高いペプチドほどそれで誘導したEAEはむしろ再発・再誘導されにくく、上記のDP-Tregの誘導能と相関することを明らかにした。さらにこれはEAEを誘導しない条件でも有効であることが判明し、自己免疫ワクチンへの布石と考えた。
標的造影治療複合剤による磁気共鳴細胞分子イメージングの開発および疾患治療への適用

高磁場MRIを用いて、(1)Ca2+チャネルを通過するマンガン造影剤を使用し、脳虚血後に生じるグリア細胞の増殖であるグリオーシスのin vivo検出および経時的観察に成功した、(2)DDS技術による腫瘍集積性を生かしたフラーレン・マンガン造影剤を使用した微小腫瘍の検出、および超音波/光治療の効果判定と経時的追跡を行った、(3)光イメージングにおいて良好な周波数分解能を持つカンタムドット(Quantum dots; QD)を使用した光・MRIのハイブリッド造影剤の開発に成功した。磁気共鳴細胞分子イメージングを達成する、(1)Ca^<2+>チャネルを通過するマンガン造影剤を使用し、脳虚血後に生じるグリア細胞の増殖であるグリオーシスのin vivo検出、およびグリオーシスの抑制あるいは促進による治療効果の経時的観察、(2)DDS技術による腫瘍集積性を生かしたフラーレン・マンガン造影剤を使用した微小腫瘍の検出、および超音波/光治療の効果判定と経時的追跡、(3)光イメージングにおいて良好な周波数分解能を持つカンタムドット(QD)を使用した光・MRIのハイブリッド造影剤の開発とmicroPETを使用したトリプル・ハイブリッド造影剤への拡張、の3項目を達成する事を目的に、本年度は、(1)脳虚血後に生じるグリア細胞の増殖であるグリオーシスのin vivo検出の最適化とメカニズムの検討、(2)フラーレン・マンガン造影剤によるin vivoモデルによる腫瘍集積効果の最適化、(3)QDとMRIのハイブリッド造影剤の精製および造影効果の検討を行った。(1)に関しては、栓子や梗塞時間の最適化によりモデルを安定化させ、グリオーシスモデルについてMRIと各種免疫組織学染色による詳細な比較、T1計算画像法による定量的画像評価を行い報告した。(2)については、フラーレンの腫瘍集積性を高め、マンガンのキレート結合力を検討し、超音波照射による細胞障害性を検討した。(3)に関しては、QDにMRI造影剤の結合について安定性の高い構造を決定し、in vitroにて腫瘍細胞に対してQDの結合能を評価し報告した。以上から、提示した研究計画について、本年度は予定通り遂行された。本研究目標である磁気共鳴細胞分子イメージングを達成する、(1)Ca^<2+>チャネルを通過するマンガン造影剤を使用し、脳虚血後に生じるグリア細胞の増殖であるグリオーシスのin vivo検出、およびグリオーシスの抑制あるいは促進による治療効果の経時的観察、(2)DDS技術による腫瘍集積性を生かしたフラーレン・マンガン造影剤を使用した微小腫瘍の検出、および超音波/光治療の効果判定と経時的追跡、(3)光イメージングにおいて良好な周波数分解能を持つカンタムドット(QD)を使用した光・MRIのハイブリッド造影剤の開発とmicroPETを使用したトリプル・ハイブリッド造影剤への拡張、の3項目を達成する事を目的に、最終年度は、(1)脳虚血後に生じるグリア細胞の増殖であるグリオーシスのin vivo検出に成功、虚血周辺にリング状の高い信号領域を検出しか、(2)フラーレン・マンガン造影剤によるin vivoモデルによる腫瘍集積を可視化する事に成功した。併せて拡散強調画像法による治療効果の評価にも成功した、(3)QDとMRIのハイブリッド造影剤の合成に成功し、大腸癌細胞表面に集積することが確認された。(1)に関しては、栓子や梗塞時間の最適化によりモデルを安定化させることに成功、MRIと各種免疫組織学染色による詳細な比較を行い報告した。(2)については、フラーレンの腫瘍集積性を高め、可視化に成功した。また超音波照射による細胞障害性を可視化した。(3)に関しては、in vitroにて腫瘍細胞に対してQDの結合能を評価し報告した。microPETへの適用に関しては、半減期の関係からSPECT核種(^<99>Tc)に変更し、グルタチオンを介してリポソーム内への封入する実験に成功した。
ウィークボゾン生成過程を用いた標準模型を越える理論の研究

1. Bメソンの崩壊に関して,観測された異常に大きい崩壊率を説明するために,非傍観者(non-spectator)グラフを含んだ,新らしい崩壊メカニズムを提唱し,包括的及び非包括的崩壊過程の崩壊率の実験値を,非常に良く再現することができた。更に提唱したメカニズムを検証するために,スピンが1のK^*メソンへの崩壊率を予言した。また,BメソンがKメソンとη′メソンへの崩壊過程と全く同様のメカニズムが働くと予測される,Bメソンがパイメソンとη′メソンに崩壊する過程を研究した。この過程には別のグラフで記述される反応が存在し,非常に大きなCPの破れが直接観測される可能性が判明した。2.超対称性模型の場合,WWγに誘起された結合は,最も大きく見積ると,中性子および電子の電気双極子能率を,現在得られている実験上限値の0.1倍の大きさで惹き起こす。また,WWZに生じる結合の大きさは,近い将来の電子・陽電子散乱実験で,Wボゾン対生成過程を調べる事により検出が可能になる程,大きい値であることが判った。3. CPの破れの証拠となる,中性子や電子の電気双極子能率の理論的な予言値を,実験の上限値と比較する事により,模型に対する強い制限が得られる。この制限を満たしながら,トップクォークやBメソンの部分崩壊幅に現れるCP非対称性を研究した。4.線形加速器において軽いヒッグス粒子が一つ見つかった場合,超対称性模型を仮定したとして,超対称性模型のパラメーターであるtanβと超対称性の破れのスケールMが,どのくらい正確に決定できるかを調べた。5.自動計算システムGRACEにおいて,最小超対称性標準模型を扱うためのアルゴリズムを開発し,実装した。更にこれから得られたFORTRANソースコードを用いて,イベントジェネレータSUSY23 v2.0を構築した。また,GRACEで複合粒子を取り扱うためのユーティリティソフトウェアを開発した。今年度は,標準模型を越える模型に関して以下の研究を行い,3点の論文を発表した。1)研究協力者門吉朋子・大下範幸による研究ー超対称標準模型において,Wボゾンは,1ループのファインマン図形を通じて,電気双極子能率を持つ。この結果として,中性子や電子にも電気双極子能率が生ずる。これは,実験の精度が現在よりも一桁上がれば,検出される可能性を示した。2)研究分担者,及び研究協力者上杉智子・山口あづさによる研究ー標準模型にアイソシングレットクォークとシングレットヒッグスが加わると,新たなCPの破れの原因となる。この拡張模型において,宇宙のバリオン非対称性が,電荷輸送機構により,説明され得るか否かについて議論した。3)研究代表者等による研究-超対称標準模型においては,ゲージボゾンのパートナーとして,ニュートラリーノと呼ばれるマヨラナ粒子(粒子・反粒子が同一のフェルミオン)が4種類含まれる。これらが関係する相互作用は,フェルミオン数保存を破る。またディラックフェルミオンでも,チャージ-ノが関係する相互作用には,フェルミオン数保存を破るものがある。これらの相互作用を伴う粒子の生成反応に対して,その散乱振幅を数値化する自動計算システムを開発する為に,新たなアルゴリズムを考案した。更に,これを実装したシステムの検査を,多数の超対称性粒子生成反応について行った。1.宇宙には、バリオンが反バリオンよりも、多く存在している。これを説明するために、超対称性模型を仮定し、荷電輸送機構を用いて、宇宙の電弱相転移時において生成されうるバリオン数を求め、観測と矛盾しない結果を得た。

(論文[1],[2],[3],[4],[8])2.ゲージボソンWとZの三点結合におけるCPの破れは、標準模型の枠内では、非常に小さい。しかし、超対称性模型が背後にあるとすると、1ループの大きさで生じ、近い将来の実験で測定できる可能性があることを示した。(論文[6],[4])3.BメソンがX_sと2つの光子に崩壊する過程に寄与する、QCDに基づく遠距離力を、その運動量依存性を精密に考慮しながら議論した。運動量分布の比較的広い領域で、遠距離力は、高次の摂動による寄与より小さくなることが示された。(論文[5])4.BメソンのX_sとη'への崩壊確率は、理論予言値より大きく観測されている。そこで、摂動高次の項であるQCDペンギン図と、ノンスペクテーター図を組み合わせたメカニズムを提唱し、η'粒子と2つのグル-オンの結合が大きいことを用いて、実験値と非常に近い値を再現した。(論文[7])5.電子陽子衝突実験(HERA)において、運動量受渡し量Q^2の大きい領域で、標準理論の予言より大きい断面積が観測された。そこで、R-パリティの破れている超対称性模型に基づき、スカラークォークが生成されていると仮定して、Tevatron等での実験結果にも矛盾することなく、説明した。(論文[9])6.自動計算システムGRACEにおいて、超対称標準模型に現れるフェルミオン数を破る相互作用に対するアルゴリズムを考察して実装し、(論文[10])また,超対称標準模型に現れるすべての粒子と相互作用を記述するモデルファイルを構築した。(論文[11])更に,GRACEで複合粒子を扱う為のユ-ティリティソフトウェアを開発した。(論文[12])1.Bメソンの崩壊に関して,観測された異常に大きい崩壊率を説明するために,非傍観者(non-spectator)グラフを含んだ,新らしい崩壊メカニズムを提唱し、包括的及び非包括的崩壊過程の崩壊率の実験値を,非常に良く再現することができた。更に提唱したメカニズムを検証するために,スピンが1のK^*メソンへの崩壊率を予言した。(論文[1])次に,BメソンがKメソンとη′メソンへの崩壊過程と全く同様のメカニズムが働くと予測される,Bメソンがパイメソンとη′メソンに崩壊する過程を研究した。この過程には別のグラフで記述される反応が存在し,非常に大きなCPの破れが直接観測される可能性が判明した。(論文[2],[8])2.超対称性模型の場合,WWγに誘起された結合は,最も大きく見積ると,中性子および電子の電気双極子能率を,現在得られている実験上限値の0.1倍の大きさで惹き起こす。また,WWZに生じる結合の大きさは,近い将来の電子・陽電子散乱実験で,Wボゾン対生成過程を調べる事により検出が可能になる程,大きい値であることが判った。(論文[3])3.CPの破れの証拠となる,中性子や電子の電気双極子能率の理論的な予言値を,実験の上限値と比較する事により,模型に対する強い制限が得られる。この制限を満たしながら,トップクォークやBメソンの部分崩壊幅に現れるCP非対称性を研究した。(論文[4],[5])
肝類洞内皮細胞に発現する抑制性Ｆｃ受容体の食餌誘導性肝障害発症における役割

Fc gamma受容体(IIb型Fc受容体)は、主に白血球の細胞表面に発現し、抗原-抗体複合体と結合して免疫抑制的に機能することが知られている。一方で胎盤や肝臓の毛細血管にも発現しており、近年、IgG輸送や免疫応答に関与することが報告されているが、その詳細は明らかにはなっていない。我々は、食餌誘導性肝障害の発症段階においても、IIb型Fc受容体が免疫応答を緩徐にすることで肝障害の抑制に寄与するのではないかと考え、肝障害発症過程におけるIIb型Fc受容体の発現応答とその役割の解明を目的とした。食餌誘導性肝障害モデルとして、マウスに非アルコール性脂肪肝炎(NASH)誘導食を与え、NASH鑑別診断基準である大滴性脂肪沈着、風船様変性、炎症性細胞集積、線維化のすべての病理所見の再現を確認した。NASH発症に伴って肝臓のIIb型Fc受容体の遺伝子発現は有意に増加するものの、NASH亢進域では発現が減少することが明らかとなった。新規機能解明のため、近年報告のある新規リガンド候補分子について、マウス不死化肝類洞内皮細胞株を用いたバイオイメージング解析を行った。一方、ヒトNAFLD, NASH患者についても解析した。IIb型Fc受容体発現は、NASH発症初期の線維化ステージ1で最も発現が高く、その後減少する傾向が認められた。さらにNASH亢進や線維化の指標であるコラーゲンVI、ヒアルロン酸の血中濃度と負の相関を示すことが明らかとなった。近年、慢性肝炎の亢進と改善の分岐点で「線維化か、再生か」を規定するのは類洞内皮細胞の形質変化であるとする報告がある。本研究の成果はこの仮説を支持する所見のひとつとして大変重要な意義をもつ。抑制性Fcgamma受容体は(IIb型Fc受容体)は、主に白血球の細胞表面に発現し、抗原-抗体複合体と結合して免疫抑制的に機能することが知られている。一方で胎盤や肝臓の毛細血管内皮細胞にも発現しており、近年、IgG輸送や免疫応答に関与することが報告されているが、その詳細は明らかにはなっていない。本研究は、肝類洞内皮細胞に発現するIIb型Fc受容体の役割を解明することを目的としている。肝類洞内皮細胞に発現するIIb型Fc受容体は、肝障害発症時の免疫応答を緩徐にすることで肝障害の抑制に寄与すると予測される。食餌に伴うIIb型Fc受容体発現変動を明らかにするため、リシン制限食となるグルテン食、肥満やNAFLDの誘導食である高フルクトース+高脂肪食、NASH誘導食としてのコリン・メチオニン制限食などの実験系における発現動態の解析を行った。肝臓におけるIIb型Fc受容体mRNA発現は、各実験食群において促進されることを明らかにした。さらに生化学的解析に続いて形態学的解析を行うことにより、IIb型Fc受容体発現は肝組織における障害発症の初期段階から促進されていること、IIb型Fc受容体タンパク質発現の増強は肝組織に浸潤するクッパー細胞等の免疫系細胞ではなく、類洞内皮細胞に認められることを明らかにした。また今回用いたNASH誘導食は、IIb型Fc受容体の発現に特に有意な変動が認められ、IIb型Fc受容体の機能解析のための有用な実験系と成り得ることが示唆された。肝組織におけるIIb型Fc受容体発現動態を、グルテン食、高フルクトース+高脂肪食、コリン・メチオニン制限高脂肪食の3つの実験系において解析し、実験食投与初期段階よりIIb型Fc受容体発現が増強することを確認した。またNASH誘導食として用いたコリン・メチオニン制限高脂肪食では、特に有意なIIb型Fc受容体発現の増強が内皮細胞特異的に認められ、非肥満状態におけるNAFLD,NASH発症初期段階の内皮細胞応答として大変興味深い所見を得た。このうちグルテン食とコリン・メチオニン制限高脂肪食における研究成果について学会報告を行った(うち1件は発表確定)。コリン・メチオニン制限高脂肪食は、NASH発症機構を解析するモデルとして、また内皮細胞に発現するIIb型Fc受容体の機能を解明するモデルとして、今後の本研究の推進に寄与するものである。以上の理由により、本研究はおおむね順調に進展していると評価できる。抑制性Fcgamma受容体(IIb型Fc受容体)は、主に白血球の細胞表面に発現し、抗原-抗体複合体と結合して免疫抑制的に機能することが知られている。本研究は、肝類洞内皮細胞の応答に着目し、IIb型Fc受容体の果たす役割を明らかにすることを目的としている。食餌誘導性肝障害モデルとして、特にNASH誘導食であるコリン・メチオニン制限食摂取に着目することとした。NASH発症の初期段階において、肝類洞内皮細胞に発現するIIb型Fc受容体発現は有意に増加した。しかし主なリガンドであるIgGとは必ずしも共局在を示さないことから、IgG以外をリガンドとして機能することが予測された。いくつかの候補分子の中からIIb型Fc受容体と同様の発現動態を示す有力候補分子を特定した。一方で、ヒトNAFLD, NASH患者の肝生検試料におけるIIb型Fc受容体発現を免疫組織化学的に解析し、本モデル動物がヒトNASH発症の初期段階の検証に有用であることを確認した。

食餌誘導性NASH発症の初期段階において、肝類洞内皮細胞に発現するIIb型Fc受容体の発現は有意に増加した。当初の計画にはなかったが、上記の所見がヒトNASH発症の初期段階を反映するか否かを検証するため、ヒトNAFLD, NASH患者の肝生検試料の解析を計画した。倫理審査申請を行い承認された後に、同意を得たヒト肝生検試料を用いて検証を行うことができた。in vitro機能解析のため初代培養の肝類洞内皮細胞を用いる予定でいたが、不死化類洞内皮細胞分与の機会を得たので、実験動物数の削減と置き換えの観点から、まずこの細胞を用いた解析を優先させることとし、手法の検討を進めている。またNASH治療に有効といわれる食品成分の経口投与による回復期における発現動態の検証を開始した。以上の理由により、本研究はおおむね順調に進展していると評価できる。抑制性Fcgamma受容体(IIb型Fc受容体)は、主に白血球の細胞表面に発現し、抗原-抗体複合体と結合して免疫抑制的に機能することが知られている。一方で胎盤や肝臓の毛細血管にも発現しており、近年、IgG輸送や免疫応答に関与することが報告されているが、その詳細は明らかにはなっていない。本研究は、肝類洞内皮細胞の応答に着目し、IIb型Fc受容体の果たす役割を明らかにすることを目的としている。食餌誘導性肝障害モデルとして、コリン・メチオニン制限食によってNASHを誘導した。このモデルは、肝実質細胞への大滴性脂肪沈着だけでなく、風船様変性や炎症性細胞集積、線維化亢進など、NASH診断基準となる病理所見を満たすことを確認している。IIb型Fc受容体リガンド候補のうちFGL2は、NASH誘導に伴って遺伝子発現が有意に上昇し、IgG以外のリガンドとして有力であった。FGL2は、IIb型Fc受容体を介してアポトーシスを制御するとの報告があることから、本モデルにおけるアポトーシスを検出したところ、IIb型Fc受容体発現と同様の挙動を示し、NASH発症過程においてIIb型Fc受容体はアポトーシス制御にはたらく可能性が示唆された。さらに、より重篤なNASHモデル構築のため、組織修復の足場となる細胞外マトリックスの欠損マウスを用いたNASH誘導を開始した。食餌誘導性NASH発症の初期段階において、IIb型Fc受容体のリガンド候補を特定し、その機能として予測されるアポトーシス制御についてin vivoでの検証を行うことができた。in vitro機能解析については、分与を受けた不死化類洞内皮細胞は、類洞内皮細胞の特性として予測していたことではあるが、IIb型Fc受容体の発現が低下しており、遺伝子導入によりIIb型Fc受容体の発現を誘導する系を構築した。さらにNASH治療に有効と考えられているビタミンEを同モデルに投与し、IIb型Fc受容体を含む内皮細胞応答の視点から、治療効果の検討を開始した。一方で、昨年度から計画に加えたヒトNAFLD患者肝生検試料を用いたIIb型Fc受容体発現とNASH病態との関連については、現在論文投稿中である。Fc gamma受容体(IIb型Fc受容体)は、主に白血球の細胞表面に発現し、抗原-抗体複合体と結合して免疫抑制的に機能することが知られている。
ヴァルター・ベンヤミンとドイツ歴史哲学の総合的研究

歴史哲学は近代における自己理解の根本的形式である。本研究は、このような洞察に基づいて、ベンヤミンの歴史哲学を解明することを試みた。その成果は、ベンヤミンがこの自己理解を言語とイメージの解明を通して遂行しようとしたこと、その際、歴史とはこの自己理解の試みそのものにおいて表現されること、この表現においてベンヤミンのメシアニズム的思考が理解されねばならないことを明らかにした。平成25年度は、ベンヤミンの言語哲学と歴史哲学について関係の考察を主題に据え、研究を進めた。その際、基盤としたのは翻訳の原理的な考察を通じて言語と歴史の連関についての思考がはじめて明確に表現されたテクスト「翻訳者の使命Die Aufgabe des Uebersetzers」(1921)である。そこでベンヤミンは、生の概念を拡張し、言語を含めたすべてを生の概念から捉えようとしているが、そのようなことが可能であるのは、両者が同じ構造を持っているとみなされるからにほかならない。いやむしろ言語こそが生を理解するために範例的なものなのである。その理由を探ることによって、本年度の研究は生、言語、翻訳、歴史の連関を解釈することを試みた。ベンヤミンにおいて翻訳とは原作という言語形成物の生を「表現」にもたらすことである。この表現においてのみ諸言語の本質があらわになるとされるのだが、その際、言語の本質とは、諸言語が唯一のそして同一の言語、すなわち「純粋言語」を志向するということに見いだされる。この意味で「表現」とは「純粋言語」という歴史の終わりに位置づけられる、究極の言語存在との関係をあらわにすることなのである。そして、ベンヤミンにおいて生は表現されるかぎりで歴史と関係するのならば、言い換えれば、あらゆる生の表現は歴史との関連において存在するのならば、生に表現の可能性そのものを与えるのが歴史であるということにになる。つまり、いわばここで歴史とは、あらゆる表現に意味を与える「仮設hypothesis」として解釈可能なのだ。言語がその際、生の範例となるのは、言語がすぐれて表現として捉えられるからにほかならないだろう。言語と歴史との内的連関は、このように翻訳という具体的な実践の考察にもとづいた独得の表現概念によって産み出される。この表現概念のより詳細な考察は、平成26年度以降の課題としたい。平成26年度は、前年度に引き続き、「翻訳者の課題」(1921)の読解を中心に据え、ベンヤミンにおいて言語哲学と歴史哲学がいかにして交叉するのか、その鍵となる諸概念の解明に従事した。平成26年度の研究においては、昨年課題に挙げた表現概念の考察を通して、ベンヤミンが、いかに哲学史における表現概念の歴史を受け継ぎつつ、それを自らの言語哲学の中心概念にしたのかを究明することができたが、この概念の核心として言語表現の先取的構造をベンヤミンが強調していることを、言語と歴史の関連を翻訳概念から捉え直したいとした昨年度の問題意識のうちに位置づけることができたのは、大きな収穫であった。また「先取」の概念は、カント哲学のみならず、ライプニッツ哲学において大きな役割を演じているが、この問いは、以上の哲学史的な連関を踏まえながら、平成27年度に計画しているベンヤミンとライプニッツとの関係という研究の枠内でさらに進展させていく予定である。表現概念と並んで、もうひとつの焦点となったのは「志向性」の概念である。ベンヤミンは、言語の志向性という考え方にもとづいて、翻訳の概念を練り上げようとしていた。つまり、志向性もまた、ベンヤミンにおける言語と歴史との関係を考えるうえでの鍵概念にほかならない。このことを具体的なテクスト読解を通して示すことができたのは、平成26年度の研究のひとつの成果である。また平成27年度の研究計画を見越して、『ドイツ悲劇の根源』における、とりわけ十七世紀悲劇の表現の解釈にも着手し、十七世紀における演劇表現への問いが、ベンヤミンの歴史解釈の基盤となっていること、また十七世紀演劇へのベンヤミンの問いが、同時代の哲学者であるライプニッツ哲学の発想を下敷きにしながら、発せられていることを確認することができた。この洞察の端緒を平成27年度においては展開していきたいと考えている。平成27年度は、ベンヤミンとライプニッツ哲学との関係に取り組む計画を実行に移した。まずベンヤミンが学んだリヒャルト・ヘルベルツのライプニッツ論を媒介にすることによって、ベンヤミンのライプニッツ受容を正確に測ることを試みた。ヘルベルツは心理学的哲学の立場から無意識概念(ならびに微小表象の概念)の再評価を試みていた。ベンヤミンは一貫して心理学的哲学からは距離を取っていたものの、言語哲学においては志向性の概念を用いており、この概念はベンヤミンとライプニッツ哲学と関係を読み込む手がかりの概念のひとつとなる。この点に関しては、平成27年度に発表した論文において、ライプニッツとの関連までは踏み込めなかったものの、まずベンヤミンにおける志向性概念の基本構造を明らかにすることを試みた。この成果を念頭に置き、さらにライプニッツ哲学におけるモナド論と言語論(とりわけドイツ語論)との関連を考察するなど、ベンヤミンとライプニッツとの関係をより精緻に追うための準備に努めた。焦点になるのは、やはり言語における志向されるものの先取という志向性が孕む問題であり、ここに言語における先行性への問い、ライプニッツが微小表象や無意識の概念において取り組んだ問いとの関係が見出されるのである。

この主題については、来年度に業績としてかたちにできればと考えている。平成27年度9月より在外研究にてドイツ・フランクフルトに滞在しているが、当該年度後半は、上記課題に加え、前年度のイメージの問題をより広範な哲学的史的な視座から研究するための文献調査を行い、とりわけ十九世紀から二十世紀初頭にかけてのイメージ論ないしファンタジー論を精査した。同時に平成28年度の計画を前倒しにし、ベンヤミンの歴史哲学と終末論の関係について考察するための準備研究として、ヤーコプ・タウベスの『西洋の終末論』に集中的に取り組んだ。平成27年度は、前期に開講した大学院講義において、ベンヤミンの言語哲学を取り上げ、「言語一般および人間の言語について」、ならびに「翻訳者の課題」を集中的に扱い、ライプニッツとの関係なども論じた。ここで得られた認識を加えて、平成26年度に行った発表をもとに「翻訳者の課題」を主題にした論文を執筆し、ベンヤミンの言語哲学における基本概念、すなわち志向性、先取性、純粋言語、歴史などのあいだにある連関を考察した。平成27年度後半は、年度前半で得られた知見を生かし、ライプニッツとの関連を踏まえた文献調査を行った。9月から在外研究でドイツ・フランクフルトのマックス・プランク経験美学研究所に滞在しているが、充分な研究時間を割くことができたため、今年度の計画のみならず、前年度に課題としたイメージをめぐる問いに関連する文献もさらに精査し、充実した基礎研究を行うことができた。また平成28年度に計画していた歴史哲学の研究にも前倒しで着手し、平成28年度の研究計画といままでの研究との関連づけ、さらには四年間の研究の締めくくる見通しを得ることを試みた。当初の計画以上に進展しているとしたのは、前期において大学院で個別テーマに集中して取り組めたこと、後期は在外研究にて課題の研究に時間を割くことができ、前年度、来年度の研究との関連づけを行うことができたことに拠る。最終年度はベンヤミンの歴史哲学を終末論の関係を重視して読むことを試みた。その際、ヤーコプ・タウベスの『西洋の終末論』を終末論一般の理解の基盤として援用し、またベンヤミンに影響を与えたフランツ・オーヴァーベックの遺稿『キリスト教と文化』とその他の論文を重視した。その際、浮かび上がったのは、ベンヤミンの歴史哲学が終末を、来るべき未来でも、到来しつつあるものとしてでもなく、瞬間との関係において思考しようとしていることである。この瞬間が現在とどのような関係をもつのかについての検討は次なる課題としたい。また本年度はイタリア・ヴェローナ大学でベンヤミンのゲーテ解釈についての発表を行ったほか、日本現象学会においてベンヤミンのイメージ論について発表を行った。研究期間を通じて、ベンヤミンの歴史哲学をライプニッツ以来の哲学的伝統との関連において考察することを試みたが、関連文献の渉猟と読解は十分に進捗した。中心となった問題意識は、言語哲学、イメージをめぐる思考、神学的思考と歴史哲学と関係であった。イメージをめぐる思考に関しては、ブロッホのイメージ論がベンヤミンの歴史哲学へ大きな影響を与えていることが明らかになったのは大きな収穫である。この関連では19世紀末から20世紀初頭のドイツにおけるイメージ論と想像力論についての読解もすすみ、以上を基盤にベンヤミンの「弁証法的イメージ」の概念を再解釈する試みを開始することができた。
救急外来におけるトリアージナース支援プログラムの開発とその評価

A県の救急外来において、トリアージナースのストレッサー調査を実施した。その結果、トリアージナースのストレッサー尺度の下位項目で、「待たせている患者の訴え」の得点が有意に高かった。そのため、共同研究者である救急外来の認定看護師とともに、ストレッサー軽減のための、プログラムを作成した。プログラムはその救急外来によくある事例を基に、認知行動療法をベースとしたグループワークをメインとした内容である。34週間に一度、合計3回を4か月間にわたり実施した。実施後のストレッサー調査では、「待たせている患者の訴え」の得点は有意に減少した。しかしその一方で、「多忙な業務」の得点が高かった。B県の救急外来において同様のプログラムを実施した。この際も「待たせている患者の訴え」が高得点を示し、支援プログラムを病院管理者と共に検討し、実施した。その結果、「待たせている患者の訴え」は低下を認めたが、他の複数項目で高得点を示した。以上のことから、待っている患者への対応に注力したことから、業務の多忙さのストレッサーに影響したと推察できる。今後は、支援プログラムの洗練に加え、各因子間の関連も検討する必要があることが明らかになった。次にC県の救急外来で同様の支援プログラムを実施し始めている。年度内では、実施前のストレッサー調査をお願いしているところで終了した。今後引き続き、多くの救急外来で支援プログラムを検討していく予定である。研究者が前段階で行った研究結果であるトリアージナースのストレッサーの内容からトリアージナースのストレッサー尺度に必要な質問項目内容を抽出した.救急看護学に精通した研究者からのスーパーバイズを受けながら,トリアージナースの属性8項目,トリアージナースのストレッサー尺度87項目,臨床看護職者のストレッサー尺度(NJSS)33項目,Stress Response Scacle-18(SRS-18)の18項目の合計146項目の質問紙を作成した.全国の救急外来に勤務するトリアージナースに質問紙を郵送し,回答を依頼した.その結果,363名の回答に基づき,87項目の因子分析を行い,トリアージの能力不足,多忙なトリアージ業務,説明に理解が得られない患者,待たせている患者の訴え,トリアージ能力を高める支援の5因子44項目で構成されるストレッサー尺度を作成した.次に作成したトリアージナースのストレッサー尺度の信頼性・妥当性を検証した.本尺度はCronbach's α係数が高いこと,再テスト法により,すべての因子間で中程度の相関がみられ,内的一貫性,安定性はある程度確認された.また,因子分析では予備研究で見出されたストレッサー内容とほぼ一致する5因子が抽出され,既知グループ法の仮説が検証されたことで構成概念妥当性確認され,さらに,本尺度とSRS-18,NJSSの総得点は共に正の相関があり,基準関連妥当性が確認された.提出した計画書通りに、救急外来のトリアージナースのストレッサーを測定する尺度の作成が出来ているため.前年度に作成したトリアージナースのストレッサー尺度を用いて、救急外来でトリアージを担当しているトリアージナースを支援するためのプログラム案を作成した。専門家集団として、救急看護学に精通した看護学研究者、救急看護に携わる経験年数10年程度の看護師の意見を聞きながら、1.トリアージに必要な知識や技術を学ぶ(講義)、トリアージ場面のシミュレーション(演習)が含まれたプログラム案が完成した。演習ではシミュレーション教育を取り入れるため、シミュレーション教育に関する学習会及び関連学会に参加し、知見を集めた。また同時に、プログラムを救急外来で実施するためのアクションリサーチの内容を検討し、実施できる病院を模索した。また、救急外来におけるトリアージナースのストレッサー尺度の開発について、関連学会で発表を行った。プログラム案の作成及びアクションリサーチ法は本研究の要であり、慎重な検討に多くの時間を費やしたため。昨年度までに作成したトリアージナースのストレッサーを測定できる尺度及び救急看護経験者や救急看護研究者と内容妥当性を検討したトリアージナース支援プログラム案を用いて介入を行った。関西圏の病院において、2018年1月から3月までの3か月間において、研究協力の同意が得られた病院の看護師長とプログラム導入について打ち合わせを行った。ERで勤務するトリアージナースを参加群と対照群とに分け、支援プログラム案を実施し、評価としてストレッサー尺度を使用した。支援プログラムは全3回であり、出席者は9名、対照群は10名であった。プログラムには参加群のトリアージナースが全員参加することができた。はじめにストレッサー調査を行い、トリアージナースのストレッサーの特徴を把握した。その内容をもとに、ERのスタッフとともに支援内容の最終案を検討した。プログラムは無事に3回とも終了し、終了後に再度ストレッサー尺度調査を行った。参加群及び対照群のストレッサー尺度の回収率は100%であった。ストレッサー結果は、まだ分析途中であるが、参加群と対照群の比較検討を行っていく予定である。それと同時に、次回介入を行う別の病院のリクルートを行っている。ERを抱える総合病院の部長に内諾を得ることができたため、そちらの準備を行っている。トリアージナースへの支援プログラムの内容については、検討内容を8月にイギリスの国際学会で報告予定であり、その準備も行っている。病院とのスケジュール調整がうまくいかず、介入がやや遅れている。

そのため、共同研究者である救急外来の認定看護師とともに、ストレッサー軽減のための、プログラムを作成した。プログラムはその救急外来によくある事例を基に、認知行動療法をベースとしたグループワークをメインとした内容である。34週間に一度、合計3回を4か月間にわたり実施した。実施後のストレッサー調査では、「待たせている患者の訴え」の得点は有意に減少した。しかしその一方で、「多忙な業務」の得点が高かった。B県の救急外来において同様のプログラムを実施した。この際も「待たせている患者の訴え」が高得点を示し、支援プログラムを病院管理者と共に検討し、実施した。その結果、「待たせている患者の訴え」は低下を認めたが、他の複数項目で高得点を示した。以上のことから、待っている患者への対応に注力したことから、業務の多忙さのストレッサーに影響したと推察できる。今後は、支援プログラムの洗練に加え、各因子間の関連も検討する必要があることが明らかになった。次にC県の救急外来で同様の支援プログラムを実施し始めている。年度内では、実施前のストレッサー調査をお願いしているところで終了した。今後引き続き、多くの救急外来で支援プログラムを検討していく予定である。計画書通り進めていく予定である.今後は,救急外来のトリアージナースを支援できる支援プログラム内容の抽出を行う.また,専門家集団によるフォーカスグループインタビューを行い,プログラムの妥当性の検証を行う.完成後は,近隣の救急外来において,プログラムを実施し,評価していく予定である.アクションリサーチを実施できる病院をサンプリングし、プログラム案を実施・評価を行う。病院のサンプリングは課題となっているため、関連学会等に参加し、研究協力に関する情報を得るようにする。現在は1施設で実施したのみであり、今後、介入する病院数を増やしていく必要がある。そのうえで、トリアージナースへの支援プログラムの有効性について、検討していく予定である。ストレッサー尺度の全国調査で得られたデータの入力を自分で行い,人件費として計上していた額に満たなかったため.当初予定していたトリアージナースの支援プログラム案の実施まで進まなかったため介入を行う病院について、1施設のみしか実施しておらず、執行が遅れた。今年度は増やしていく計画であるため、執行予定である。また、学会発表が控えており、費用が必要である。データ入力は今年度も必要であり,人件費として使用する.研究協力が可能な病院を決定し、プログラム案に関するアクションリサーチを実施する
ナノ開口を用いた高濃度蛍光１分子イメージングによるＲｕｖＢの６量体形成機構解析

本研究の目的は、DNAの相同組換えの進行に重要な役割を果たすRuvBタンパク質がHolliday Junction複合体を形成するメカニズムを明らかにすることである。蛍光顕微鏡と蛍光標識RuvBを用いて、Holliday Junction DNAと相互作用するRuvBをリアルタイムでイメージングし、6量体形成のメカニズムを明らかにすることにした。RuvBの6量体形成過程の観察には高濃度(>200 nM)のRuvBの存在が必須である。通常の蛍光1分子イメージングの方法では高濃度での観察ができないため、ガラス上に直径および深さが100ナノメートル程度の穴が空いた「ナノ開口基板」を用いて研究を行うことにした。昨年度はナノ開口の作製法を確立し、機能を保ったままRuvBを蛍光標識することにも成功した。本年度は、RuvAと結合させたHolliday Junction DNAをナノ開口の底部に固定し、そこに蛍光標識RuvBを加え、Holliday Junction DNAとRuvBが相互作用する様子をヌクレオチドがない条件、ADP存在下、ATPgammaS存在下、ADPとATPgammaS存在下の4つの異なるヌクレオチド条件下で観察した。その結果、ADPあるいはATPgammaS存在下でより多くのRuvBがHolliday Junction DNAと相互作用することが解った。これらの結果は、ATPが単にRuvB hexameric ringの形成だけでなく、RuvBがRuvA-Holliday junctionと安定な複合体を形成することに重要な役割を果たしていることを示唆している。26年度が最終年度であるため、記入しない。本研究では蛍光1分子イメージングの手法を用いてRuvBと呼ばれるモータータンパク質の機能解析を行っている。RuvBは6量体のリング構造をとるモータータンパク質でDNA相同組み換えが行われる際に形成される十字型構造のDNA (Holliday Junction DNA)の周囲にRuvA4量体と共に複合体を形成し、ATP加水分解エネルギーを利用したDNAの巻き戻しを行うことで、相同組み換えを進行する。その配列はヒトのDNA安定化に大きく寄与するMGS1タンパク質に保存されており、またRuvBの属するAAA^+ATPaseファミリータンパク質は、生体内でATPの加水分解エネルギーを利用したDNAの複製や組換え・タンパク質の分解・細胞内輸送など多岐にわたる重要な役割を担っている。つまりRuvBの機能を明らかにすることはヒトのゲノム維持機構やAAA^+ATPaseファミリーに属する多くの生体分子の機能解明へとつながる。本研究ではナノ開口を用いた高濃度条件下でRuvBの1分子イメージングを行うことで、これまでに溶液中のヌクレオチド条件がRuvBとHolliday Junction DNAの結合・解離速度に影響する様子を明らかにした。これによって溶液中のヌクレオチドがRuvBの構造に影響を与える可能性が示唆されていた。ただし溶液中にATPが存在する場合においては、速やかにHolliday Junction DNAが分解されるために観測を行うことができなかった。また今回新たにRuvBのDNA巻き戻しドメインが結合できないように長さを調整したHolliday Junction DNAを用いることによってATP存在下でのRuvBの蛍光1分子イメージングに成功した。この時RuvBはHolliday Junction DNAと非常に速い速度で結合・解離を繰り返している様子が確認できた。顕微鏡のマシントラブルにより長期間研究の中断を余儀なくされたためRuvBのDNA巻き戻しドメインが結合できないように長さを調整したHelliday Junction DNA上では、RuvBはATP存在でHolliday Junction DNAと非常に速い速度で結合・解離を繰り返すという今回新たに得た知見と、これまでに判明していた溶液中のヌクレオチド条件がRuvBの活性に与える影響を比較しながらより詳細なRuvBの機能解明を目指す。