hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
卒前教育における「医療管理学」の実践的教育技法の研究

これによって「自ら行う医療の質の確保」と「組識の合理的な運営管理」に必要な能力を養う、実習に基づいた多角的、自己発見的な教育システムの確立を目指したい。【研究目的】医学生が、将来いかなる分野で活動するにせよ「合理的な医療の運営」ができる医師になるために、必要な基本的視野、知識、および判断能力を養う卒前教育の手法の確立をめざしている。【主眼】・ミクロ的視点の教育:---医療の応需、処方せん、診療記録の取扱、プライバシー保護とインフォームドコンセントの成立など医療者の持つべきコミュニケーション行動。・マクロ的視点の教育:---組織管理・情報管理を主題に、在宅医療、診療・看護連携、病院組織運営、医薬資材流通、施設間連携など医療資源の効率のよい運営をを認識する。【実践教育法の改良】従来、全体講義が主流であった方略を改め、臨床実習期間に5名1グループ、2グループ同時独立にフィールドワークを基にしたチュートリアルシステムでの学習法を工夫した。学生は、「2010年の理想病院の設計」という想定主題を与えられ、「病院長」「事務長」「看護婦長」「診療科長」「患者」「家族」などの立場に扮して延べ36時間の見学実習、企画、ロールプレイ演習を行った。学生は扮した役割の視点で附属病院の医療管理部門、公的診療所を拠点に、医療運営機構、在宅医療地域医療連携の実態を見学する。それを基に自分達が「理想とする病院」「理想的な地域医療体制」のありかたを、各種文献検索をおこないつつ検討する。さらに成果発表と「患者が企画した病院を受診する」という想定のシミュレーションを行い、企画の妥当性、実現性の評価、および医師の取るべき判断、決断についての具体行動態度についてグループ間討論を行う。【教育効果の評価】医療の運営管理に関する知識および視野が、実習・演習の前後にどの様な変化が生じたかを分析した。実習前のプレテストでは、学生の関心は病態の診断・治療が主体であり、社会システムとしての医療の視野に乏しかった。実習後に飛躍的に拡大し、教育効果が認められた。
新しい核酸医薬で敗血症を治療するための分子基盤の構築

細菌が感染して炎症が全身に及ぶと敗血症となり、死に至ることも多い。敗血症では一酸化窒素が過剰に合成されて血管を拡張させ、血圧低下(ショック)が起こる。本研究では、ラット肝細胞を用いて一酸化窒素合成酵素のメッセンジャーRNAを減少させるオリゴヌクレオチドを見つけた。これを敗血症モデルラットに投与すると、生存率が有意に改善されたことから、新たなヒト敗血症の治療薬となりうる新しい核酸医薬と期待される。1.ヒト培養細胞を用いたセンスオリゴの最適化:ヒト培養細胞として肝細胞由来の細胞では誘導型一酸化窒素合成酵素(iNOS)の発現が非常に低く解析が難しかったため、iNOSの誘導的発現が認められているDLD-1株を用いて実験を行った。まずヒトmRNAの二次構造を予測し、種間で保存されている配列をもとにしてiNOSのセンスオリゴの配列を設計した。次にiNOSのセンスオリゴを細胞に導入し、リアルタイムRT-PCR法でiNOS mRNAを定量してセンスオリゴの効果を判定した。iNOS mRNA量が最も減少する配列を決めるため、センスオリゴ配列の位置を少しずつずらしたものを作製し、細胞に導入した。その結果、iNOS mRNA量が顕著に減る最適化配列がほぼ決まった。2.敗血症モデル動物の遺伝子発現のパターンの解析:敗血症モデルにはガラクトサミンとLPSを投与したラット、および部分肝切除後にLPS投与したラットを用いた。投与後に肝臓を摘出してRNAを抽出し、対照ラットのRNAとともにマイクロアレイ解析を行い、mRNA発現のデータが得られた。現在、それぞれのmRNA発現の比較解析を開始した。3.敗血症モデル動物でのセンスオリゴの効果の検討:平成28年度の実施を計画していたが、ラット用のiNOSセンスオリゴの最適化配列がわかっていたので、ラット投与実験を始めた。センスオリゴの単回投与を試みているが、投与方法や投与条件の至適化を開始した。1.ヒト培養細胞を用いたセンスオリゴの最適化:ヒト用センスオリゴの配列の検討についてはiNOS発現が認められている培養細胞株を用いたため、最適な配列がほぼ決まった。トランスフェクション試薬についての検討も不要であったため、目標どおりに進んでいる。しかし配列最適化にかなり時間がかかったため、センスオリゴの塩基修飾(S化、LNA、2'-O-メチル化など)については検討はあまり進んでいない。2.敗血症モデル動物の遺伝子発現のパターンの解析:敗血症モデルのマイクロアレイ解析を行い、発現データが得られた。mRNAのパターン比較にはかなり時間がかかっている。3.敗血症モデル動物でのセンスオリゴの効果の検討:iNOSセンスオリゴの最適化配列がわかっているものの、塩基修飾したセンスオリゴを使うため、ラットに投与するとなるとかなり高額になる。そのため致死率の改善だけを評価指標としても、一回の実験でiNOSセンスオリゴを投与するラットの匹数を多くすることができない。したがって、投与方法や投与条件の至適化に時間がかかっている。1.ヒト培養細胞を用いたセンスオリゴの最適化:肝細胞由来の細胞では誘導型一酸化窒素合成酵素(iNOS)の発現が非常に低く解析が難しかったため、iNOSの誘導的発現が認められているヒト培養細胞(DLD-1株)を用いて、前年に引き続きセンスオリゴの細胞導入実験を行った。種間で二次構造が保存されている配列をもとにしてヒト用のiNOSのセンスオリゴの配列を設計した。次にiNOSセンスオリゴを細胞に導入し、リアルタイムRT-PCR法でiNOS mRNAを定量して、iNOS mRNAに対するセンスオリゴの効果を判定した。その結果、iNOS mRNA量を有意に減らす配列が大体決まってきたが、もう少し再現性の確認が必要である。投与後に肝臓を摘出してtotal RNAを抽出し、対照ラットのtotal RNAとともにマイクロアレイ解析を行い、mRNA発現量のデータが得られ、mRNA発現の比較解析を行った。代表的なmRNAについてのパターン比較を行うこともできた。3.敗血症モデルラットでのセンスオリゴの効果の検討:平成27年度に引き続き、ラット用のiNOSセンスオリゴの投与実験を行った。センスオリゴ投与の方法を変えて、条件の至適化を行った。トランスフェクション試薬についての検討は不要であったが、配列最適化にかなり時間がかかっている。センスオリゴの塩基修飾の検討はあまり進んでいない。2.敗血症モデル動物でのセンスオリゴの効果の検討:iNOSセンスオリゴの最適化配列がわかっているものの、塩基修飾したセンスオリゴを使うため、ラットに投与するとなるとかなり高額になる。そのため1回の実験でiNOSセンスオリゴを投与するラットの匹数を多くすることができなかった。したがって、投与の方法や条件の至適化に時間がかかっている。またセンスオリゴ配列を最適化して、さらに効果を高める必要がある。

1.ヒト培養細胞を用いたセンスオリゴの最適化:誘導型一酸化窒素合成酵素(iNOS)の発現が認められているヒト培養細胞(DLD-1株)を用いて、前年度に引き続きセンスオリゴの細胞導入実験を行った。種間で保存されている配列をもとにしてヒト用のiNOSのセンスオリゴの配列を設計した。次にiNOSセンスオリゴを細胞に導入し、定量的RT-PCR法でiNOS mRNAを定量して、iNOS mRNAに対するセンスオリゴの効果を判定した。iNOS mRNA量が最も減少する配列を決めるため、センスオリゴ配列の位置をずらしたものを作製して細胞に導入した。その結果、iNOS mRNA量を有意に減らす配列がほぼ決まった。2.敗血症モデル動物の遺伝子発現のパターン解析:敗血症モデルにはガラクトサミンとLPSを投与したラット、および部分肝切除後にLPS投与したラットの肝臓total RNAのマイクロアレイ解析を行った。陰性対照ラットとmRNA発現の比較解析を行い、発現の高いmRNAについてのパターン比較を行った。3.敗血症モデルラットでのセンスオリゴの効果の検討:前年度に引き続き、ラット用のiNOSセンスオリゴの投与実験を行った。センスオリゴ投与の方法を変えて、敗血症モデルラットへの投与条件の至適化を行った。また肝細胞を用いて、センスオリゴの配列、長さ、修飾などの微調整を行い、iNOS mRNA量を減少させる1種類のiNOSセンスオリゴを選んだ。このセンスオリゴを敗血症モデルラットに投与すると、生存率が有意に改善された。肝臓を採取して組織を解析すると、センスオリゴを投与したラットでは、肝細胞のアポトーシスが有意に減少し、好中球浸潤が減少する傾向が見られた。すなわち、このiNOSセンスオリゴは、敗血症による肝障害を軽減した。細菌が感染して炎症が全身に及ぶと敗血症となり、死に至ることも多い。敗血症では一酸化窒素が過剰に合成されて血管を拡張させ、血圧低下(ショック)が起こる。本研究では、ラット肝細胞を用いて一酸化窒素合成酵素のメッセンジャーRNAを減少させるオリゴヌクレオチドを見つけた。これを敗血症モデルラットに投与すると、生存率が有意に改善されたことから、新たなヒト敗血症の治療薬となりうる新しい核酸医薬と期待される。1.ヒト培養細胞を用いたセンスオリゴの最適化:ヒト用のiNOSセンスオリゴについては最適配列がほぼ決まったので、塩基修飾(S化、LNA、2'-O-メチル化など)について検討を行う。常法にしたがい、まずS化とLNAについて試みる予定である。目的遺伝子以外への有害な効果(off-target効果)についても調べる。iNOSと同じ細胞株をもちいて、ヒト用のTNFのセンスオリゴの最適配列や塩基修飾についても検討していく。2.敗血症モデル動物の遺伝子発現のパターンの解析:敗血症モデルラットのマイクロアレイ解析データをもちいて、mRNAパターンの比較解析を継続して行う。3.敗血症モデル動物でのセンスオリゴの効果の検討:高額な塩基修飾iNOSセンスオリゴを使うという制限があるが、ラットへの投与回数や投与量などの条件の検討を行う。
感染管理認定看護師の高齢者施設訪問による感染対策の実態調査と効果的介入方法の提案

昨年度に引き続き、本研究で独自に作成した感染対策チェックリストに基づいて、A県内の65施設(今年度33施設)の高齢者施設(特別養護老人ホーム33施設、介護老人保健施設11施設、養護老人ホーム5施設、介護療養型医療施設他16施設)について感染管理認定看護師による訪問調査を実施した。訪問調査時には訪問結果のフィードバックと合わせて施設の実態に応じた研修や相談対応を行っている。調査施設数が多かった特別養護老人ホームについては、平成28年度に実施した質問紙調査との比較検討を実施した結果、以下の2点が明らかになった。1.不適切、要改善と評価された項目は「スタッフの健康管理」、「手指衛生」、「患者ケア用品の管理」、「洗浄・消毒」、「入浴設備」等に関する11項目であり、特に高齢者施設特有の課題としての手指消毒剤の居室入り口への設置や適切な管理、手指衛生遵守に向けた取り組みが不十分である。2.高齢者施設における感染症多発(アウトブレイク)予防のための感染症・感染症症状を把握するしくみはあるが、効果的な感染対策に活用できていない。また、訪問調査を実施した施設8施設(特別養護老人ホーム7施設、他1施設)に半年1年後のフォローアップ調査を実施した。今後、フォローアップ研修を追加実施し、感染管理認定看護師が実施した訪問調査のフィードバック、研修等の介入効果を明らかにするとともに、高齢者施設の感染対策改善に活用できる資料を作成する。平成29年度からの2年間で、A県内の8保健医療圏毎に512施設について感染対策チェックリストに基づいた訪問調査を実施することができ、また、質問紙調査との比較検討から、高齢者施設の感染対策の課題をさらに明確にすることができた。フォローアップの訪問調査結果の分析はこれからであるが、訪問調査時に感染管理認定看護師が実施した教育的介入の実績や各施設が訪問調査後に実施した取り組み事例などの情報収集結果から、高齢者施設の感染対策への提案の方向性についての示唆が得られたと考える。1.訪問ラウンドによる教育的介入効果の検討フォローアップ訪問調査をさらに各圏域12施設程度実施した上で、感染管理認定看護師の教育的介入の効果について評価する。2.高齢者施設の効果的な感染対策のサポートブックを作成する。これまでの訪問調査により得られた感染対策の実態及び上記の介入効果を踏まえて、高齢者施設の感染対策の改善に活用できるサポートブックを作成し配布する。A県の特別養護老人ホーム(152施設)、養護老人ホーム(22施設)、軽費老人ホーム(47施設)、介護療養型医療施設(34施設)、介護老人保健施設(66施設)、計321施設を対象に「感染対策の現状」及び「感染対策が実践できていない原因や関連因子」について質問紙調査を行なった。調査項目は、施設及び回答者の属性に関する項目5項目、施設の感染管理体制に関する項目(委員会、マニュアルの作成、感染症の把握等)25項目、感染対策の実践状況に関する項目(手指衛生、個人防護用具の使用状況、洗浄・消毒、廃棄物管理等)28項目、感染対策の困り事(自由記載)とした。調査票の回収数(率)は、軽費老人ホーム26施設(55.3%)、養護老人ホーム13施設(59.1%)、特別養護老人ホーム71施(53.0%)、介護老人保健施設37施設(56.1%)、介護療養型医療施設11施設(34.4%)、計158施設(49.1%)であった。質問紙調査結果に基づき、高齢者保健福祉施設の実態把握のための感染対策チェックリスト(案)を作成した。チェックリストの項目は、「委員会の設置、感染対策マニュアル作成・設置、感染研修、スタッフの健康管理、感染症の把握、手指衛生、個人防護用具、洗浄・消毒、患者ケア用品管理、廃棄物管理、リネン管理、清掃、入浴設備、共有場所の管理、食品管理」の15の中項目と65の小項目とした。県内の特別養護老人施設2施設を対象に、感染対策チェックリスト(案)のプレテストを実施し、チェック項目の検討・修正を行った上で、特別養護老人ホーム3施設、看護老人保健施設3施設、養護老人ホーム1施設、軽費老人ホーム1施設、その他(グループホーム)1施設の計9施設の訪問調査を実施した。質問紙調査については概ね50%の回答を得ることができ、高齢者保健福祉施設における感染対策の基本的な状況の把握ができた。また、作成した高齢者保健福祉施設の感染対策チェックリストを用いて感染管理認定看護師が9施設の訪問調査を実施し、チェックリストの適正の確認及び、チェック項目に沿って感染対策の実態を具体的に把握し、そのデータを蓄積しており、ほぼ順調に進んでいる。昨年度実施した質問紙調査結果をふまえて作成した感染対策チェックリストに基づき、A県内の32施設(特別養護老人ホーム19施設、介護老人保健施設4施設、養護老人ホーム2施設、介護療養型医療施設・軽費老人ホーム他7施設)について訪問調査を実施した。感染対策チェックリストは15の中項目、65の小項目で構成しているが、15の中項目のうち、「感染委員会の設置」、「感染防止対策マニュアルの整備」、「感染症の把握」、「廃棄物管理」、「感染研修」、「食品管理・食中毒予防」の6項目については、概ね7割以上の施設で適切に実施されていた。「手洗い」、「個人防護用具」、「洗浄・消毒」、「スタッフの健康管理」、「入浴設備」の5項目については、適切に行われている施設が5割を下回っている小項目が、特にアルコール手指消毒剤の管理と使い捨て手袋等の適切な使用について課題を認めた。

「患者ケア用品」の管理においては、尿器や陰部洗浄用ボトルの管理において改善を必要とする施設が3割程度であった。「リネンの管理」においては、リネンの保管に課題を認めた。「清掃」については、概ね5割が適切であったが、再利用のモップ・雑巾の管理に課題を認めた。また、各施設の状況に応じた感染対策の工夫例や取り組み事例等の収集も行った。訪問調査時にはあわせて施設の状況や要望に応じた研修、相談対応、情報提供等の教育的介入を行った。また、訪問終了後に感染対策チェックリストのよる評価結果に加え、対策が適切に行われている点と改善が必要な点をわかりやすく示した報告書を施設管理者に送付することにより、高齢者施設の感染対策に活用できる資料として提供している。これらの介入効果については、次年度にフォローアップの訪問調査を行い、実態調査及びインタビューを行う予定としている。A県内の8保健医療圏毎に13施設について感染対策チェックリストに基づいた訪問調査を実施することができ、地域全体としての感染対策の課題を明らかにすることができた。また、訪問時に感染管理認定看護師が行った教育的介入策や各施設で独自に行っている工夫例や取り組み事例についても情報収集できたことによって、効果的な介入策の検討につながる有用なデータが得られたと考える。昨年度に引き続き、本研究で独自に作成した感染対策チェックリストに基づいて、A県内の65施設(今年度33施設)の高齢者施設(特別養護老人ホーム33施設、介護老人保健施設11施設、養護老人ホーム5施設、介護療養型医療施設他16施設)について感染管理認定看護師による訪問調査を実施した。訪問調査時には訪問結果のフィードバックと合わせて施設の実態に応じた研修や相談対応を行っている。調査施設数が多かった特別養護老人ホームについては、平成28年度に実施した質問紙調査との比較検討を実施した結果、以下の2点が明らかになった。1.不適切、要改善と評価された項目は「スタッフの健康管理」、「手指衛生」、「患者ケア用品の管理」、「洗浄・消毒」、「入浴設備」等に関する11項目であり、特に高齢者施設特有の課題としての手指消毒剤の居室入り口への設置や適切な管理、手指衛生遵守に向けた取り組みが不十分である。2.高齢者施設における感染症多発(アウトブレイク)予防のための感染症・感染症症状を把握するしくみはあるが、効果的な感染対策に活用できていない。また、訪問調査を実施した施設8施設(特別養護老人ホーム7施設、他1施設)に半年1年後のフォローアップ調査を実施した。今後、フォローアップ研修を追加実施し、感染管理認定看護師が実施した訪問調査のフィードバック、研修等の介入効果を明らかにするとともに、高齢者施設の感染対策改善に活用できる資料を作成する。平成29年度からの2年間で、A県内の8保健医療圏毎に512施設について感染対策チェックリストに基づいた訪問調査を実施することができ、また、質問紙調査との比較検討から、高齢者施設の感染対策の課題をさらに明確にすることができた。フォローアップの訪問調査結果の分析はこれからであるが、訪問調査時に感染管理認定看護師が実施した教育的介入の実績や各施設が訪問調査後に実施した取り組み事例などの情報収集結果から、高齢者施設の感染対策への提案の方向性についての示唆が得られたと考える。1.施設の感染対策の現状を把握するうえで、作成したチェックリストが適正かの判定を行う。
新規ニューラルネットワークを用いた口蓋裂異常構音の可視化診断・訓練システムの開発

口蓋裂患者の異常構音は、しばしば患者のコミュニケーション障害を招き、患者のQOLを著しく低下させる.正常な言語を早期に獲得するには、幼少時に鼻咽腔閉鎖機能や構音動作を正確に判定し、非侵襲で信頼性の高い検査法、さらには訓練法を確立することが重要である.本研究の目的は、新規構音ニューラルネットワークを応用し、マイク入力した音声信号を用いて口蓋裂術後の異常構音特徴を視覚的に表現すること.さらに,同様に色彩表示した母音の鼻咽腔閉鎖機能と子音の異常構音との関連性を解明し,異常構音の発現要因を明かにするとともに,その診断補助や構音訓練の視覚フィードバックに用いる非侵襲的なリアルタイム音声可視化システムを構築し、臨床応用を目指すものである.研究実績は、音声データ収集のための録音系統整備を行うとともに,音素毎の構音解析のために検査語音50語の切り出し編集ツールの作成により,録音・編集・解析・可視化の各機能を有するプロトタイプシステムを構築した.さらに、ニューラルネットワーク出力の高精度化(時間分解能の向上等)を行った.構築したプロトタイプシステムを用いて,口蓋裂術後の鼻口蓋瘻孔ならびに,それに関連した鼻咽腔閉鎖機能不全と異常構音を有する患者を対象に,鼻口蓋瘻孔閉鎖術前後ならびに構音訓練後の経時的な構音特徴の変化を観察した.その結果,鼻口蓋瘻孔閉鎖に伴う鼻咽腔閉鎖機能の改善と合わせて,構音点の異常が徐々に健常者の構音と近い形に改善されてていくことが描出された.また,口蓋裂児と健常児の音声データを収集し,5母音の色彩表示による音声可視化表示を行うとともに,ネーザランス,鼻咽腔内視鏡所見との関連を解析した.その結果,検査語音50語の色彩表示された5母音の音声特徴はネーザランスと相関し,鼻咽腔閉鎖が良くなれば健常者と同じ色調で描出できることが分かった.音声解析システムの構築面では,音声データ収集のための録音系統整備を行うとともに,音素毎の構音解析のための検査語音50語の切り出し編集機能,解析機能の高精度化,そして新たな可視化機能を付加したプロトタイプシステムを構築した.また,音声解析システムの臨床応用の面では,口蓋裂児および健常児の音声データについては経時的データの収集,整理を進めて,5母音の色彩表示による音声可視化表示を行うとともに,ネーザランスと色彩表示された母音の音声特徴の相関について解析を行うことができた,同時に,新たに構築したニューラルネットワーク出力解析システムを用いて構音操作の可視化表示が行えることを確認し,得られた音声特徴が聴覚的な異常構音と相関していることが明かになった.この内容については,すでに国際誌に論文投稿済みである.平成30年度は、構築した音声解析プロトタイプシステムを用いて,口蓋裂術後の鼻口蓋瘻孔ならびに,それに関連した鼻咽腔閉鎖機能不全と異常構音を有する患者を対象に,鼻口蓋瘻孔閉鎖術前後ならびに構音訓練後の経時的な構音特徴の変化を観察した.その結果,鼻口蓋瘻孔閉鎖に伴う鼻咽腔閉鎖機能の改善と合わせて,構音点の異常が徐々に健常者の構音と近い形に改善されていくことが描出可能となった.さらに、異常構音の改善を導くには成立メカニズムを知ることが重要であることから,口蓋化構音、咽頭摩擦音、声門破裂音などの構音点の後方化を呈する患者8名の経時的音声データを用いて、ニューラルネットワーク出力解析による子音の分析を行いその結果を、米国オハイオ州で開催された第2回国際VPD (鼻咽腔閉鎖機能障害)シンポジウムで発表した.この内容は現在論文作成中である.今までの研究により、ニューラルネットワークを用いた構音機能の解析・可視化システムが,患者の母音および子音の構音動作を正しく,また,視覚的に確認し得るレベルで可視化表示できることを示しており,本研究の目的である,医療現場での実用可能な有用な診断・訓練システムに発展し得ることが確認された.平成31年度は,上記のニューラルネットワーク出力解析システムをさらに医療現場での利用可能とするために、リアルタイムな子音・母音の分析結果を、色表示システムで画面上に描出し、患者自身が自分の音声の異常を色認識しながら構音訓練できるようなシステム構築を目指す.さらに、異常構音の改善を導くには成立メカニズムを知ることが重要であることから,口蓋化構音、咽頭摩擦音、声門破裂音などの構音における構音点の後方化を呈する患者の経時的音声データを用いて、母音バランスチャート,ニューラルネットワーク出力解析による子音のリアルタイム音声分析,および鼻咽腔閉鎖機能との相互関連を調べる.さらに、電気声門図観測装置(EGG装置)を用いて、音声分析により得られる音声特徴量と発声時の異常構音指標(声門破裂や鼻腔開閉など)を声帯振動波形や鼻腔振動波形から確認し、これらの総合的な観察結果をもとに、異常構音定着に至る生体の音響環境の影響を解析する計画である.口蓋裂患者の異常構音は、しばしば患者のコミュニケーション障害を招き、患者のQOLを著しく低下させる.正常な言語を早期に獲得するには、幼少時に鼻咽腔閉鎖機能や構音動作を正確に判定し、非侵襲で信頼性の高い検査法、さらには訓練法を確立することが重要である.

本研究の目的は、新規構音ニューラルネットワークを応用し、マイク入力した音声信号を用いて口蓋裂術後の異常構音特徴を視覚的に表現すること.さらに,同様に色彩表示した母音の鼻咽腔閉鎖機能と子音の異常構音との関連性を解明し,異常構音の発現要因を明かにするとともに,その診断補助や構音訓練の視覚フィードバックに用いる非侵襲的なリアルタイム音声可視化システムを構築し、臨床応用を目指すものである.平成29年度は,音声データ収集のための録音系統整備を行うとともに,音素毎の構音解析のために検査語音50語の切り出し編集ツールの作成により,録音・編集・解析・可視化の各機能を有するプロトタイプシステムを構築した.さらに、ニューラルネットワーク出力の高精度化(時間分解能の向上等)を行った.構築したプロトタイプシステムを用いて,口蓋裂術後の鼻口蓋瘻孔ならびに,それに関連した鼻咽腔閉鎖機能不全と異常構音を有する患者を対象に,鼻口蓋瘻孔閉鎖術前後ならびに構音訓練後の経時的な構音特徴の変化を観察した.その結果,鼻口蓋瘻孔閉鎖に伴う鼻咽腔閉鎖機能の改善と合わせて,構音点の異常が徐々に健常者の構音と近い形に改善されてていくことが描出された.また,口蓋裂児と健常児の音声データを収集し,5母音の色彩表示による音声可視化表示を行うとともに,ネーザランス,鼻咽腔内視鏡所見との関連を解析した.その結果,検査語音50語の色彩表示された5母音の音声特徴はネーザランスと相関し,鼻咽腔閉鎖が良くなれば健常者と同じ色調で描出できることが分かった.音声解析システムの構築面では,音声データ収集のための録音系統整備を行うとともに,音素毎の構音解析のための検査語音50語の切り出し編集機能,解析機能の高精度化,そして新たな可視化機能を付加したプロトタイプシステムを構築した.また,音声解析システムの臨床応用の面では,口蓋裂児および健常児の音声データについては経時的データの収集,整理が進むとともに,5母音の色彩表示による音声可視化表示を行うとともに,ネーザランスと色彩表示された母音の音声特徴の相関について解析を行うことができた,同時に,新たに構築したニューラルネットワーク出力解析システムを用いて構音操作の可視化表示が行えることを確認し,得られた音声特徴が聴覚的な異常構音と相関していることが明かになった.以上のことは,構音機能の解析・可視化システムが,患者の母音および子音の構音動作を正しく,また,視覚的に確認し得るレベルで可視化表示できることを示しており,本研究の目的である,医療現場での実用可能な有用な診断・訓練システムに発展し得ることが確認された.口蓋裂患者の異常構音は、しばしば患者のコミュニケーション障害を招き、患者のQOLを著しく低下させる.正常な言語を早期に獲得するには、幼少時に鼻咽腔閉鎖機能や構音動作を正確に判定し、非侵襲で信頼性の高い検査法、さらには訓練法を確立することが重要である.本研究の目的は、新規構音ニューラルネットワークを応用し、マイク入力した音声信号を用いて口蓋裂術後の異常構音特徴を視覚的に表現すること.さらに,同様に色彩表示した母音の鼻咽腔閉鎖機能と子音の異常構音との関連性を解明し,異常構音の発現要因を明かにするとともに,その診断補助や構音訓練の視覚フィードバックに用いる非侵襲的なリアルタイム音声可視化システムを構築し、臨床応用を目指すものである.研究実績は、音声データ収集のための録音系統整備を行うとともに,音素毎の構音解析のために検査語音50語の切り出し編集ツールの作成により,録音・編集・解析・可視化の各機能を有するプロトタイプシステムを構築した.さらに、ニューラルネットワーク出力の高精度化(時間分解能の向上等)を行った.構築したプロトタイプシステムを用いて,口蓋裂術後の鼻口蓋瘻孔ならびに,それに関連した鼻咽腔閉鎖機能不全と異常構音を有する患者を対象に,鼻口蓋瘻孔閉鎖術前後ならびに構音訓練後の経時的な構音特徴の変化を観察した.
合理的配慮に関する聴覚障害学生の意思表明スキル獲得とその活用過程

本研究は「合理的配慮に関する聴覚障害学生の意思表明スキル獲得とその活用過程」をテーマに、聴覚障害学生がどのような経験や要因によって意思表明スキルを獲得し、活用していくのか、その過程ならびに関連要因を当事者の語りから明らかにするものである。2年目にあたる今年度は、昨年度に引き続き、さらに3名の対象者にインタビュー調査を行うとともに、インタビューで収集した調査データの文字化と、意思表明スキル獲得および活用過程に関する質的分析に注力した。当初の予定では、対象者を10名程度としていたが、対象者6名の調査結果からでも一定の傾向が見いだせる可能性が高いため、対象者をこれ以上増やすことはせず、追加調査により事例を深く掘り下げることで結果の精緻化を図ることとした。質的分析にあたっては、MAXQDAという質的分析ソフトを用い、得られた発話データからテーマに関連する語りを抽出し、さらにコード化を行った。現時点では81個のコードが生成されているが、コードの個数が多いため、さらなる精緻化が必要であり、分析を継続する必要がある。さらに、分析を進めていく中で、意思表明スキル獲得および活用過程を明確にしていくためには、対象者に再度尋ねるべき事項が出てきたこと、さらなる結果の精緻化のため、対象者への追加調査も実施した。本研究のオリジナリティは、聴覚障害者の意思表明スキル獲得過程のみならず、大学卒業後、社会にて意思表明スキルをどのように活用しているのか、その過程を明らかにすることである。したがって、今後の分析では意思表明スキルの獲得段階および活用段階、この2つの段階に分け、関連要因等の整理も行う。計画通りに進めることができたが、研究の進捗がやや遅れている。その理由として、(1)事例を深く掘り下げるために追加調査などが必要となり、インタビュー調査に時間を要したことと、(2)得られた調査データの文字おこしに時間を要したことがあげられる。(1)計画の段階では10名程度を予定していたが、1年目(平成29年度)に実施できたインタビューは3名であった。意思表明スキル獲得に関するエピソードを多岐に亘り収集し、さらにライフヒストリーとして充分に聞き取るために時間を要したため、3名にとどまった。また今年度も3名調査を行い、さらに前年度の対象者への追加調査も実施したため、遅れている現状である。(2)本研究の対象者は全て聴覚障害者であり、その大半が現在手話を第一言語とする方であったため、分析資料生成のための「手話の日本語翻訳ならびに文字化」の作業に時間を要した。手話から日本語への翻訳技術を有する者への協力を得たことで、正確かつ効率的にデータの文字化を図るよう努めたが、インタビューデータ量の多さと経費節約の関係で時間を要し、本格的な分析に着手する時期が遅れた。分析着手が遅れたため、成果発表の予定も遅れている。最終年度である今年度は、これまでの研究成果を踏まえ、以下の項目について遂行する。(1)質的データ分析による概念化・精緻化ならびに過程の検討、(2)研究成果の発表および論文執筆活動(1)関連する先行研究を参考に質的データ分析を行い、得られた発話データの概念化(コード化)を行う。現在は81個のコードが生成されているが、コード個数が多いため、さらに精緻化を行う必要がある。その後、得られたコードを基に意思表明スキル獲得および活用過程の検討を実施する。(2)分析と並行して、第一段階の研究成果を教育現場に還元する琴を目的に、学会発表を行う。具体的には10月上旬に開催予定の「全国保健管理研究集会」において発表(コード化に関する成果)を予定している。さらに分析を進め、特殊教育学会誌等への論文投稿ならびに全国高等教育障害学生支援協議会等、関連学会における成果発表を目指す。障害者の意思表明に関する研究は最近になって行われてきたものであるため、先行研究がほとんどみられない。したがって、関連しうる先行研究(例えば、意思決定支援や障害の受容、開示に関する研究)をあたりつつ、さらに現在進められている研究に関する情報収集も行いながら、本研究のオリジナリティの模索を行ってきた。今年度研究を進めてきた結果、意思表明スキルの獲得過程のみならず、聴覚障害学生が大学を卒業した後、社会で意思表明スキルを活用していく過程も明らかにすることが本研究のオリジナリティであると方針を立てることができた。このことは本研究にとって非常に意義あることである。そのほか、今年度は対象者へのインタビュー調査に注力した。研究代表者がこれまで実際に支援を行い、信頼関係を十分に築けている聴覚障害者3名にインタビューを行った。信頼関係を築けているおかげで、意思表明スキル獲得に関わるエピソードを多岐に亘り収集できたと思われる。しかし、対象者の負担を考慮して調査時間は23時間としたが、その時間では対象者のライフヒストリーを十分に聞き取れなかった部分があるため、追加調査を実施する予定である。平成29年度は以下の3つを行う予定としていた。その3つとも順調に進められた。(1)インタビューガイド等の検討:インタビューガイドの作成ならびに本研究のオリジナリティの検討のため、本研究に関連しうる文献を分析した。(2)データ収集:対象者3名に対し、個別に半構造化インタビュー調査を行った。

信頼関係を築けているおかげで、意思表明スキル獲得に関わるエピソードを多岐に亘り収集できたと思われる。ただ、対象者の負担を考慮し、調査時間は23時間としたが、その時間ではまだ十分に聞き取れないことがあるため、追加調査を実施する予定である。当初の予定では対象者を10名程度としていたが、対象者3名の調査結果からでも一定の傾向が見いだせる可能性が高いため、対象者をもう2,3名追加するだけとし、事例を深く掘り下げることで結果を精緻化することとする。(3)データの文字化:対象者のうち、手話だけではなく音声を明瞭に発する対象者に関しては順調に文字化を行えたが、手話のみで発言する対象者の文字化は不十分なところがある。手話から日本語への翻訳技術を有する者への協力を得ることで、正確かつ効率的にデータの文字化をはかれるようにする。本研究は「合理的配慮に関する聴覚障害学生の意思表明スキル獲得とその活用過程」をテーマに、聴覚障害学生がどのような経験や要因によって意思表明スキルを獲得し、活用していくのか、その過程ならびに関連要因を当事者の語りから明らかにするものである。2年目にあたる今年度は、昨年度に引き続き、さらに3名の対象者にインタビュー調査を行うとともに、インタビューで収集した調査データの文字化と、意思表明スキル獲得および活用過程に関する質的分析に注力した。当初の予定では、対象者を10名程度としていたが、対象者6名の調査結果からでも一定の傾向が見いだせる可能性が高いため、対象者をこれ以上増やすことはせず、追加調査により事例を深く掘り下げることで結果の精緻化を図ることとした。質的分析にあたっては、MAXQDAという質的分析ソフトを用い、得られた発話データからテーマに関連する語りを抽出し、さらにコード化を行った。現時点では81個のコードが生成されているが、コードの個数が多いため、さらなる精緻化が必要であり、分析を継続する必要がある。さらに、分析を進めていく中で、意思表明スキル獲得および活用過程を明確にしていくためには、対象者に再度尋ねるべき事項が出てきたこと、さらなる結果の精緻化のため、対象者への追加調査も実施した。本研究のオリジナリティは、聴覚障害者の意思表明スキル獲得過程のみならず、大学卒業後、社会にて意思表明スキルをどのように活用しているのか、その過程を明らかにすることである。したがって、今後の分析では意思表明スキルの獲得段階および活用段階、この2つの段階に分け、関連要因等の整理も行う。計画通りに進めることができたが、研究の進捗がやや遅れている。その理由として、(1)事例を深く掘り下げるために追加調査などが必要となり、インタビュー調査に時間を要したことと、(2)得られた調査データの文字おこしに時間を要したことがあげられる。(1)計画の段階では10名程度を予定していたが、1年目(平成29年度)に実施できたインタビューは3名であった。意思表明スキル獲得に関するエピソードを多岐に亘り収集し、さらにライフヒストリーとして充分に聞き取るために時間を要したため、3名にとどまった。また今年度も3名調査を行い、さらに前年度の対象者への追加調査も実施したため、遅れている現状である。
転換畑ラッカセイの異形的根粒形成のエチレンによる制御機序の解析

本研究は3年計画で立案した.最終年度の研究遂行概要は以下の通りである.研究の目的は,コメの生産調整が終了した平成30年度以降,水田転換畑に多様な畑作物を導入することがより重要になることを鑑み,水田転換畑での栽培が試みられていないラッカセイについて.その根系発育と根粒形成の様態について明らかにすることを試みた.すなわち,ラッカセイを西南暖地の沖積土の転換畑に導入する可能性を探るために,過剰水分に対する根の発育と根粒形成の応答反応を明らかにすることを目的として研究を遂行した.最終年度には,灰色低地土の水田転換畑(畑転換4年目)に,おおまさりと千葉半立を栽培し,生育後期における単位根長あたりの根粒数の変化と根粒形成の異形性を調査するとともに,収穫残渣となる茎葉部の転換畑への窒素付加の量的評価を行った.大津市(灰色低地土圃場)において5月17日に播種し,1,2年目とほぼ同様の方法で圃場試験を行った.9月中旬の莢肥大期には,おおまさりが千葉半立に比べて根粒数が多く,単位根長当たりの根粒密度が高かった.また,黒ボク土と灰色低地土における根粒形成の異同についてポット試験で検討し,前者において主根の単位根長あたりの根粒数が高い値を示すことが明らかになった.さらに,本年度の試験では,両品種を生育適期に収穫した際の収穫残渣の窒素供給能力について評価するため,収穫直後に茎葉部のすき込みを行い,コムギ(ミナミノカオリ)を播種した.現在栽培中であるが,生育調査の結果からは,両品種ともにすき込み区における窒素吸収量の有意な増大が推察されている.収穫調査は6月初旬に行う予定である.なお,過剰水分条件下で生成されるエチレンによって誘導されるインドール酢酸の動態ならびにエチレン受容体遺伝子の導入については,本研究期間内では明らかにすることができず,今後の検討課題となった.日本では,食料自給率向上や地域農業の活性化の視点から多様な農作物の転換畑への導入が重要となっている.本研究では,ラッカセイを沖積土の水田転換畑に導入する可能性を探るために,過剰水分に対する根の発育と根粒形成の応答反応を明らかにすることを目的に研究を遂行している.初年目は,転換畑では単位根長あたりの根粒数が多く,分枝根の分化と根粒形成との間に競争的関係が生じるような現象(異形性)を確認し,次年度以降に予定している異形性の機序解析のための基礎的知見を得ることができた.大津市および丹波市の転換畑圃場において,2016年6月初旬に品種「おおまさり」と「千葉半立」を播種または定植し,茎葉部の生育,根系発育,根粒形成を経時的に調査し,10月中旬から適宜収穫して子実収量を調査した.いずれの圃場でも,一般に火山灰土壌で栽培した場合と比較して根粒が密に着生すること,養分吸収に機能する細根の発生が少ない傾向が認められた.また,両品種ともに多くの個体において,地際部には数本の不定根が発生し,そこに根粒が形成された.さらに地際部に位置する分枝においては基部から3ー4 cm程度の箇所まで茎粒が認められたが,これは不定根原基に根粒菌が感染したものと推察された.根粒の密生程度には品種間で差異があることが示唆されたが,個体間変動が大きく再検討を要する.総根長は千葉半立に比べておおまさりで大きい値を示した.また,おおまさりでは茎葉部の生育量が著しく大きく,過繁茂の様相を呈した.子実収量は,おおまさりで約300 g/m2と比較的多収であった.さらに,湛水土壌における地力窒素の発現と根茎発育の様態との関係について,両品種を供試して人工気象室内で試験を行ったところ,湛水土壌で生成されるアンモニウム態窒素が単位根長あたりの根粒数を増加させる可能性は低いと考えられ,他の要因から機序を探る必要が示唆された.水田転換畑におけるラッカセイの根粒形成の異形性について,その事象の明確な記述と機序の解析を目的に本研究を開始した.初年目は,これまでの予備実験の結果をもとにさらなる追試験によって,灰色低地土圃場における過剰水分に対する根の発育と根粒形成の応答反応の一部をラッカセイ2品種について明らかにすることができた.品種間の比較は3年目以降に行う予定ではあるが,実際に西南暖地の転換畑圃場への導入が期待される供試2品種については,単位根長あたりの根粒が著しく多く,分枝根の分化と根粒形成との間に競争的関係が生じる異形性を確認することができた.このことは,次年度以降に予定している異形性の機序解析のための基礎的知見として重要であり,立案通り概ね研究が進展していることを示す成果であると考えている.初年目には,機序解析の予備実験として,転換畑土壌の還元化で生じる有機物由来の外生エチレンと過剰水分で生じる植物の内生エチレンのそれぞれの定量を試み,特に外生エチレン定量の手法を確立することができた.

したがって,次年度以降は,本手法を用いていくつかの条件を設定することで,転換畑圃場における外生エチレンの発生について量的に評価し,あわせて,ラッカセイ根茎発育と根粒着生への影響を明らかにできるであろう.また,現地圃場での調査に加えて,地下水位が調節可能な大型ポットを用いたモデル試験については,予備的な遂行にとどまり,この手法を用いた解析については,やや計画が遅れたものの,人工気象室での無機態窒素の動態についての実験を優先させたことで,エチレンに焦点を絞った研究が進捗すると考えている.これらの初年目に得られた知見を基盤にして,次年度以降は,異形的な根粒形成と莢収量および収穫残渣の窒素含量との関係にまで言及して,西南暖地の転換畑へラッカセイの導入を試みる際の学術的知見を集積できると考えている.コメの生産調整が終了した平成30年度以降,水田の利用形態がどのように変化するかは不透明であるが,水田転換畑に多様な畑作物を導入することが重要であることに変わりはない.本研究ではラッカセイを沖積土の転換畑に導入する可能性を探るために,過剰水分に対する根の発育と根粒形成の応答反応を明らかにすることを目的として研究を行っている.初年目に続き2年目には,灰色低地土の水田転換畑(畑転換3年目)約10アールで実際栽培に近い形で大粒品種おおまさりを栽培し,それらの個体において生育後期に単位根長あたりの根粒が多く,根粒形成に異形性を示すことを再確認することができた.栽培は大津市(灰色低地土圃場)において行った.5月19日に播種し,畝間は管理機で適宜除草し,株間は手取り除草した.開花は7月初旬から始まり,降雨後の乾燥で土壌クラストが生じたが,子房柄の貫入に問題はなかった.おおまさりは茎葉部の生育が過剰な特性を示すが,本試験でも同様であった.完熟莢を10月下旬から収穫したが,10月の降雨量が多く収穫は11月上旬までかかった.莢実収量は53.1±9.7kg/畝,剥き実上実割合は64%であった.水田土壌をフラスコに充填し,湛水または圃場容水量にして密栓後に気相をアルゴン置換して24,48時間後に採取した気相には湛水区でエチレンが検出された.そこで2-Chloroethylphosphonic acid(エテホン)を用い,エチレンがラッカセイの根粒形成に及ぼす影響を検証した.土壌を充填したポットに`おおまさり'の10日齢実生を移植し,13 mMエテホンを10 ml/ポット投与する区,7日間湛水する区,畑区の3処理区を設けた.移植後31日目の根粒数は,畑区に比べて,エテホン区では2.9倍,湛水区では4.6倍とそれぞれ多く,過剰水分で発生するエチレンが旺盛な根粒形成を誘導する可能性が示唆された.水田転換畑におけるラッカセイの根粒形成の様態が畑条件でのそれとは異なることに着目して,その事象の明確な記述と機序解析を目的に本研究を開始した.2年目は,より実際栽培に近い形で生育と収量ならびに根粒形成の様態を明確にするための圃場試験を試みた.すなわち,灰色低地土の水田転換畑圃場10aを利用して,大粒品種のおおまさりを栽培し,その様態を明らかにすることができた.品種間の比較は3年目にも行う予定であるが,販売単価を考慮すると転換畑への導入にメリットが高い大粒品種のおおまさりについて,先行研究では明らかにされてこなかった過剰水分に対する応答反応について,実際の莢収量を評価した上で根粒の異形的な形成について解析できたことは重要であると判断している.また,特に過剰水分条件下で生じる土壌中の有機物由来の外生エチレンと嫌気条件下で生じるラッカセイ根の内生エチレンに着目して,発生するエチレンの量的評価とエテホンの施用試験によって,嫌気条件下での根系発育と根粒数に及ぼすエチレンの影響を評価できたことは,今後の機序解析につながる成果であると考えている.これらの点から,2年目の評価としては,概ね予定通り研究が進展したと考えている.一方,現地圃場での調査に加えて,地下水位が調節可能な大型ポットを用いたモデル試験については,地下水位の制御を予定通り行うことができなかったので,最終年度に再度試験を試みる.また,エチレン生合成阻害剤を用いた機序解析については,上記の実験系が得られたことから最終年度に試験を進めることができると考えている.
炎症性皮膚疾患に対する転写因子結合デコイ型核酸による治療に関する基礎研究

炎症性皮膚疾患においては、さまざまなサイトカイン、ケモカインが病態に深く関与していることが知られている。Thymusand activation regulated chemokine(TARC)は、アトピー性皮膚炎の表皮細胞、水疱性類天疱瘡の水疱内容液に検出され、これらの患者血清で高値を示す。我々はTNFαおよびIFNγ刺激刺激によりHaCaT細胞からのTARC産生は相乗的に誘導され、このTARC産生誘導がNFκB、p38の阻害により抑制されること、またEGF受容体活性化阻害剤によりその産生が誘導されることを明らかにした。また、IFNγのシグナル伝達に中心的役割を果たすSTAT1はこの産生誘導に関与していないことが明らかとなった。また、PLA2阻害剤であるMAFP、ロイコトリエンB4受容体阻害剤であるLYがTARC産生を濃度依存的に抑制したことから、TARC産生に脂質系シグナル経路が関与する可能性が示唆された。また、NFKBシグナル伝達阻害剤として開発されたIMDは、HaCaT細胞からのTARC産生を濃度依存的に抑制した。今後IMDのvivoでの効果について検討を加える予定である。機械的刺激は、尋常性乾癬における皮疹の誘導に関与し、また乾癬の病態におけるIL-15の重要性も報告されている。これらの刺激は表皮細胞にMAPキナーゼの活性化をもたらし、細胞増殖の誘導とアポトーシスの抑制をもたらした。機械的刺激はEGF受容体活性化とERK、PI3K活性化をもたらし、IL-15刺激はERK、PI3K活性化をもたらした。現在さらに下流の転写因子についても検討中である。今後アトピー性皮膚炎や乾癬の治療における、これらのシグナル分子抑制や、さらに下流にある転写因子の抑制などの方法について検討していく予定である。HaCaT細胞からのTARC産生は、TNF、IFNγにより誘導されるが、我々は種々のアンチセンスオリゴを用いた実験により、その誘導にNFκB、C/EBPβ、GATA-3が関与しており、c-Fosは関与していないという結果を得た。TARCのプロモーター部分を含む領域をPCRにて増幅してルシフェラーゼベクターに挿入し、TARCプロモータールシフェラーゼコンストラクトを作成した。このコンストラクトは扁平上皮癌の細胞株であるDJM細胞において活性が認められた。現在、数種類のプロモーターコンストラクトを作成中であり、今後これらのコンストラクトを用いて、TARCプロモーター領域におけるTNF、IFNγの応答部位および、誘導に関与する転写因子を明らかにしていく予定である。一方、IL-15は乾癬などの炎症性皮膚疾患の形成に重要な役割を演じていることが報告されているが、IL-15がHaCaT細胞に働いてERK、P13Kを活性化するが、JNK、p38は活性化しないことが我々の検討により明らかとなった。IL-15はIFNγなどの炎症性サイトカインにより細胞表面に発現が誘導され、近隣の表皮細胞に情報が伝達されると考えられるが、IL-15による情報伝達がERKやP13KといったEGFR活性化などの他の炎症による情報伝達経路と共通していることから、これらの分子も炎症性皮膚疾患治療のターゲットとなりうると考えられる。炎症性皮膚疾患における表皮細胞からは、TARC、CTACKなどのケモカインが多量に産生され、炎症性細胞の浸潤に必要不可欠な役割を演じていると考えられる。炎症性皮膚疾患においては、ケブネル現象として、外傷部位に皮疹の新生を見ることがしばしば観察される。

今回、表皮細胞に、伸展刺激を加えることにより、細胞内シグナルが生じ、細胞増殖、アポトーシス抑制機構が働くこと、その結果炎症性ケラチンK6が誘導され、分化型ケラチンK10が抑制されること、転写因子であるAP-1が活性化することを見出し、J Invest Dermatolに報告した。また、表皮細胞の細胞株であるHaCaT細胞ではTNFα、IFNγ刺激によりMDCが産生されるが、その産生はIL-4、IL-13により抑制されることをJ Dermatol Sciに報告した。また、アトピー性皮膚炎では血清eotaxinレベルが上昇し、またアトピー性皮膚炎、乾癬患者血清中ではCTACKレベルが上昇していることをJ Allergy Clin Immunolに発表した。これらの炎症性変化を抑制するのに、シグナル伝達経路のどの因子を抑制するのが効果的かを検討するため、HaCaT細胞をもちいて検討を加えている。現在、いくつかの転写因子、シグナル伝達物質の阻害により、これらのケモカイン産生が抑制されることを見出し、その分子生物学的メカニズムを検討中である。来年度は、これらの因子を効率的に抑制するための薬剤についての検討を行いたいと考えている。炎症性皮膚疾患においては、さまざまなサイトカイン、ケモカインが病態に深く関与していることが知られている。Thymusand activation regulated chemokine(TARC)は、アトピー性皮膚炎の表皮細胞、水疱性類天疱瘡の水疱内容液に検出され、これらの患者血清で高値を示す。我々はTNFαおよびIFNγ刺激刺激によりHaCaT細胞からのTARC産生は相乗的に誘導され、このTARC産生誘導がNFκB、p38の阻害により抑制されること、またEGF受容体活性化阻害剤によりその産生が誘導されることを明らかにした。また、IFNγのシグナル伝達に中心的役割を果たすSTAT1はこの産生誘導に関与していないことが明らかとなった。また、PLA2阻害剤であるMAFP、ロイコトリエンB4受容体阻害剤であるLYがTARC産生を濃度依存的に抑制したことから、TARC産生に脂質系シグナル経路が関与する可能性が示唆された。また、NFκBシグナル伝達阻害剤として開発されたIMDは、HaCaT細胞からのTARC産生を濃度依存的に抑制した。今後IMDのvivoでの効果について検討を加える予定である。機械的刺激は、尋常性乾癬における皮疹の誘導に関与し、また乾癬の病態におけるIL-15の重要性も報告されている。これらの刺激は表皮細胞にMAPキナーゼの活性化をもたらし、細胞増殖の誘導とアポトーシスの抑制をもたらした。機械的刺激はEGF受容体活性化とERK、PI3K活性化をもたらし、IL-15刺激はERK、PI3K活性化をもたらした。現在さらに下流の転写因子についても検討中である。
電子映像による造形表現の研究

現代のエレクトロニクスや情報のネットワーク化に直結した表現形態としての電子映像を取り上げ、その時間的・空間的造形性の特性を明らかにしつつ、効果・可能性について実験制作を通して研究を行った。実験制作は主に大阪芸術大学9号館スタジオを利用し、ビデオメディアを中心にコンピュータグラフィックスや写真・カラーコピーなどを用いた。これらの作業を通して、映像の知覚リズムの性格-光と影、色彩の時間的・空間的分布-と、観客の関与性が問題点として表出されてきた。そして、最終的にビデオインスタレーションの形態の実験作品を構成し、展覧会形式で公開した。実験作品は20台のTVモニターと3台のVTR、2枚の写真(15×180cm)と画廊空間で構成されている。道路に面して20台のTVモニターを横5台縦4台に積上げて、幅3m高さ1,9mのTVモニターの塀を建てる。VTRから3種類の映像を送出し、モニター上に交互に配列して映し出す。3つの映像はそれぞれ90度づつ色相の差があり、21分で1周する構成になっている。人が知覚する変化と停止を、ビデオの機械的構造と映像信号の成り立ちに重ね合わせた。このようにして実験作品を公開し、見てくれた人の意見・感想を取材したが、作り手の意図とは異なるところで関心を持たれたり、評価や批判を受けることがむしろ多くあったと思う。これらを考察の手掛かりとして、電子映像による造形表現という課題を論としてまとめていった。
放線菌由来インドロカルバゾール生合成研究及び新規物質創製への展開

インドロカルバゾール骨格を有する天然化合物は、放線菌由来の産物を主として多数報告されている。強力なプロテインキナーゼ活性を有するスタウロスポリン(STA)やDNAトポイソメラーゼ阻害剤であるレベッカマイシン(REB)など多くの興味深い生理活性物質が存在するために、医薬品などへの産業利用が期待される化合物群である。その生合成経路については、これまでほとんど知られていなかったが、近年、我々のグループの他、複数の欧米グループの精力的な研究により生合成機構の全貌が遺伝子レベルで明らかになった。これらの成果によってコンビナトリアル生合成を用いた新規アナログ創製法なども実現しつつあり、インドロカルバゾール医薬品の創製等が期待されるまでになっている。本研究では、インドロカルバゾール骨格の生合成に関与するユニークな酵素群の反応機構の解明について行った。(1)クロモピロリン酸合成酵素STA生合成経路において、IPAよりCPAを生成する酵素・StaDは既知蛋白とのアミノ酸配列上の相同性が見られないユニークな酵素である。我々は大腸菌を用いて活性型のStaD酵素発現を行い、4量体構造を取る巨大ヘモプロテインであることを明らかにした。(2)本生合成に関与する2つのP450酵素StaDによって生成するCPAはその後2段階の酸化反応を経てSTAアグリコンへと変換される。本酸化反応の詳細は未知であるが、StaC, StaPの2つの酵素が関与することが明らかになっている。このうち、StaPはP450酵素である。一方、STAアグリコンと糖部位は2ヶ所のC-N結合によって結ばれているが、このうちの1ヶ所はP450ホモログであるStaNが関与している。スタウロスポリン(STA)などのインドロカルバゾール骨格を有する化合物はこれまでの研究で、その全ての化合物生合成においてクロモピロリン酸が中間体であることが明らかになっている。また、クロモピロリン酸が生合成の中間体として利用されている例はインドロカルバゾール化合物群以外に報告されていない。クロモピロリン酸生合成に関与すると推定されるStaDは推定分子量が12万の巨大蛋白であり、StaDにはVioB、RebDと類縁する蛋白質が存在するが、いずれについても詳細な解析例はなく、また、StaDのアミノ酸配列から既知の蛋白モチーフとの類似性も明らかになっていないため、その反応機構の詳細は全く明らかになっていない。そこで、StaDについて、発現蛋白質の解析を行い機能推定を行った。大腸菌を宿主としてC末端にHis×6タグを連結したStaDをGroES-ELシャペロンと共発現し、可溶性蛋白質を得た。インドールピルビン酸(IPA)とNH4Clを基質として精製StaDを添加し反応を行ったところクロモピロリン酸が産生した。StaDなしの反応でも極少量のCAが検出されたことから、StaDは自然反応の促進を担うような新規な機能を有することが示唆された。IPAに対するKmを測定したところ235μMであった。ゲル濾過法により推定分子量約480kDaであることが示され、四量体の巨大な構造を有することが明らかになった。吸収スペクトル測定の結果、還元型StaDは420nmに強い吸収が存在した。これらのことからStaDは新規構造を有するヘム蛋白質であることが示唆された。