hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
車椅子を中心とした移動機器等福祉機器の調査研究

(1)大鍋寿一ならびに水口文洋、米田郁夫、佐藤正之で、アメリカにある下記施設を訪問し、車椅子を中心とした移動機器等福祉機器に関する調査研究を行った。・訪問期間:平成12年9月17日平成12年9月27日(11日間)・訪問場所(2)大鍋寿一ならびに岡田徳次、水口文洋、畠中規で、ヨーロッパにおける車椅子を中心とした移動機器等福祉機器に関する調査研究を行った。・訪問期間:平成12年9月23日平成12年10月7日(15日間)・訪問場所(3)これらの調査成果を、第16回、第17回リハ工学カンファレンスで2件発表した。また、ヨーロッパにおける調査結果は「日本ロボット学会誌」に解説として3回にわたり計3件2002年、2003年に掲載された。さらに第18回リハ工学カンファレンスでも1件発表する。(4)これらの成果の一部を生かした関連研究結果を学会等で17件発表した。さらに7件発表する。さらに7件発表する。研究代表者並びに水口文洋、米田郁夫、佐藤正之で、アメリカの下記施設を訪問、車椅子を中心とした移動機器等福祉機器に関する調査研究を行った(田中理は別の機会にPittsburgh大の補足調査)。・訪問期間:平成12年9月17日平成12年9月27日(11日間)・訪問場所・トピックス:(1)車椅子を中心とした移動機器等福祉機器の研究動向を調査した。Pittsburgh大のCooper教授の研究所は、自分自身が脊髄損傷者の「車いす人」であることから、車いすに関するあらゆることを研究している。特性研究用車いすであるSmart wheelchairによる実験から、ゲーム感覚でTVモニターを見ながらPush rimを操作し(1)学ぶ(2)トレーニングまで行っている。実機に結びついた実用的研究を行っているが特徴である。またスポーツ医学のための最新研究施設を最近オープンし、最新計測機器を入れ活気があった。VA Palo Alto HCSでは、アームサイクルの開発(2)車椅子を中心とした移動機器等福祉機器に対する教育システムを調査した。University of Pittsburgh,School of Health RehabilitationScienceの教育カリキュラムは、色んな背景の学生用に、シーテイングと移動機器、エルゴノミックスとユニバーサル・デザイン、リハビリテーション研究、接近とコミュニケーション、リハビリテーション・バイオメカニックス、サービス管理の6ヶのコースが提供されている。(3)RESNAでは、特に車椅子の規格関係の調査を行った。(4)North Carolina State Universityでは、ユニバーサルデザインの研究動向を調査した。研究代表者ならびに岡田徳次、水口文洋、畠中規で、ヨーロッパにある下記施設を訪問し、車椅子を中心とした移動機器等福祉機器に関する調査研究を行った。・訪問期間:平成13年9月23日平成13年10月7日(15日間)・訪問場所・REHA CareInternational(国際リハビリテーション・介護機器展)(デュッセルドルフ、ドイツ)・トピックス:(1)多種多様な車いす⇒REHA Care International(国際リハビリテーション・介護機器展)には、走行形式から分類すると介助式では、手押し式、足こぎ式、搭載運搬式、また自操式では手動式、足動式、電動式、手動/電動混用式等各種出展されており、有益な情報を得るとともにDiscussが出来た。手動車いすと電動車いすを必要に応じて変更して使用できる車いすが予想より多かった。(2)各種階段昇降補助装置⇒ガイドレール式、クローラ式、複数車輪式等昇降するための様々な工夫を凝らした装置の展示があった。(3)車いす搭載型マニュピュレータ⇒MANUS(Lund University)は、それ自身の技術的なものもさることながら、これに対する使用者の立場からの評価研究にも感心を引くものであった。(4)福祉機器に対する教育システム⇒Lund UniversityのRehabilitation Centerではコンピュータを使用して教育カリキュラムの説明、日本の福祉工学教育に関して非常に参考になった。トピックス:(1)研究代表者ならびに水口文洋、釆田郁夫、佐藤正之、田中理で、ピッツバーグ大学における車椅子を中心とした移動威器等福祉機器の調査研究を行った結果を「第17回リハ工学カンファレンス」で発表した。(2)岡田徳次ならびに研究代表者、水口文洋、畠中規で、ヨーロッパにおける車椅子を中心とした移動磯器等福祉機器に関する調査研究を行った。

結果を「第17回リハ工学カンファレンス」で発表するとともに、「日本ロボット学会誌」に解説として3回にわたり掲載されることになった(第1回は発行済)。(3)研究代表者,と岡田徳次は、ピッツバーグ大学人間工学研究所所長のローリー・クーパー教授を新潟大学へお招きし、講演をして頂くとともに車椅子を中心とした移動機器等福祉機器について意見交換を行った。なお、この講演会には、新潟大学のみならず、新潟医療福祉大学、新潟工科大学、新渇医療専門学校福祉工学部、近隣の福祉施設などから総勢五十数名の参加者があった。(4)研究代表者と水口文洋は、研究成果の一部を展開し研究成果として、日本機械学会福祉工学シンポジヴムに2件(キャスタと後輪を考慮した手動車いすの動特性(名古屋)を含む)、日本福祉工学会シンポジウムに1件(車いすの転がり抵抗の簡易測定方法とその摘用(甲府))、日本機械学会[No.2-9]Dynamics and Design Conference福祉工学セッションで2件の論文を発表した。(5)研究代表者は平成14年度新潟大学工学部公開講座(新潟大学工学部主催,新潟市教育委員会後援),「超高齢社会における福祉人間工学の役割」の中で「福祉機器の必要な背景と車いす等移動福祉機器の動向について」の演題で講演を行に調査研究の成果を一般へ還元した。(平成14年10月19日).(6)岡田徳次は同上公開講座において、「階段昇降装置のいろいろ-車椅子でも昇降は簡単-」の演題で講演を行い成果を一般へ還元した。
ゲルマニウムを含む有機超伝導体ドナーの合成とその物性研究

本年度は、昨年度に合成したビナフチル系も含めほかのセレンユニット及びゲルマニウム化合物の反応をいくつか検討したところ、ゲルマニウムを中心とする硫黄のスピロ型4配位化合物と推定される化合物を得た。また、合成設計の指針に供するため、Ge-Se結合に関する基礎データの測定(NMR、レーザーラマン)も行った。以下はその概要である。(a)ビナフチルセレノシアナートを種々の条件下、GeI_2と反応させたが単量体として安定な化合物は得られなかった。(b)1、8-ジセレノナフチルジアニオンとGeI_2、GeCl_4GeMe_2Cl_2などを反応させ、有機溶媒に不溶な化合物を得た。この化合物の構造を検討中である。(c)さらに他のテトラチアンユニットとGeI_2の反応を試みたところ、有機溶媒に溶けにくい黄色粉末を得た。この結晶は元素分析、各種スペクトルデータにより、ゲルマニウム原子を中心とする硫黄のスピロ型4配位化合物であることが推定された。2この硫黄原子が互いに直交しているため、結晶内で2次元的なπ軌道および硫黄原子同士の分子間接触が可能であり、新しいタイプの導電性物質として興味がもたれる。(d)合成を進める傍ら、Ge-Se結合に関する基礎情報を得るため、ジセレノゲルマンおよびセレノゲルマンを合成し、その低波数領域でのレーザーラマンスペクトルの測定(Ge-Seの伸縮振動数は220Cm^<-1>と帰属された)およびジセレノゲルマシクロヘキサン誘導体の立体配座解析を行った。後者はきわめて対称性のよいtwits-boat配座であり(結晶状態;X線解析/溶液中;温度変化NMR;配座変換の活性化エンタルピー;7.74kCal/mol)、6員環としてこのような配座の最初の例である。ヘテロ元素系の特殊性を顕著に示す例であり、セレンの電子効果およびその非共有電子対の空間的広がりに関する情報を含むデータとして、含セレン有機超伝導体分子設計一般に役立つものと考えられる。
脊椎のremodelingに関する実験的研究

幼若のラットの頚椎部に手術的操作を加え、傍脊柱筋を剥離し、経時的に観察したが、mal-alignmentを作ることは難渋した。これはラットの頭部の重量が軽すぎること、頚椎のalignmentが急峻でないこと、傍脊柱筋が強靭で変化を受けにくいことなどが理由と思われた。そこで実験動物を、二本脚動物のコシャモに変更したところ、局所的な後弯変形を実験的に作ることに成功した。(科研費で購入したcoagulatorとhigh-speed drillを用いることで、手術の精度を飛躍的に高めることができた)いまのところ、変形に対する二次的な矯正変化(骨添加など)を観察中であるが、明らかなremodelingは確認されない。しかし新知見として、手術で変形した部位以外に、新たな変形が生じることがわかった。手術高位を変えてみると,部位は異なるものの、やはり同様の変形が生じる。これは頭の位置を一定に維持するための、二次的なcompensationの変形と考えられる。(これは、いまだ原因不明の先天性後弯症のモデルになり得る可能性がある)今後,さらに経時的に術後変化を観察し、変形に対する脊椎remodelingのメカニズムを実験的に解明してゆく予定である。幼少の実験動物(Wistar系ラットを使用)の頚椎部から労脊柱筋を剥離、一部椎間関節、棘間靭帯を切除、さらにC1、C2の椎弓を後方よりワイヤー固定した。(同手術には、科学研究費補助金で購入した小動物用マイクロ手術器具を使用した。)ラットの成長に伴い、経時的に、ソフテックスによるX線撮影を行い、頚椎弯曲の変化を観察した。X線上、一時的に局所性後弯変形を作成できた例もあるが、現在のところ、成長に伴い、さらにそれがremodeling変化を来したものはない。人間の頚椎と比べ、ラットは、労脊柱筋が強力であること、頭部の重量が軽いこと、四つ脚であることなどが理由と思われる。今後、手術方法の改良(頭部の重量を分銅などで重くする、椎弓切除など後方の侵襲をおおきくする)実験動物の変吏(二本足の鳥類に変更する)などを行い、実験を続行する予定である。幼若の実験動物の頸椎部より傍脊柱筋郡を剥離することにより、実験的に局所性後湾変形を作成することが出来た。(当初、Wister系ラットを使用していたが、二本脚動物のコシャモに変更した。また幼若動物の頸部におこなう手術の精度を高めるために科研費で購入した電気凝固機械と、サージェアートーム装置が手術操作を飛躍的に向上させた)実験的に変形を生じた動物を、経時的に観察しているが、いまのところ予想されている研究結果(成長にともない、remodelingにより、変形の矯正が行われる)は確認されていない。しかし、新知見として、手術処理をくわえた頸椎の部位より離れた場所に新たに変形が生じることがわかった。頸椎の高位を変えて手術をおこなっても、同様にcompensationの変形が生じ、頭部の位置がたもたれることが観察された。(これらは、いまだ原因不明の先天性後湾症のモデルになり得る可能性がある)成長期にある脊椎では、各種の脊椎変形に対して、それを矯正しようとするする何らかのremodeling機構が椎体、および脊柱全体にみられると考えられる。今後は、実験的に作成した変形部位について、より検討分析を加えて、そのメカニズムを解明していきたい。
大腸癌のFTDに対するDNA損傷応答の解明と治療効果増強への展開

TAS-102は直接DNA合成を阻害する新たな作用機序をもち、従来の治療に抵抗する症例への効果が期待される。TAS-102はチミンの類似物質であるTrifluridine(FTD)が細胞周期のS期でDNAに取り込まれることにより作用し、細胞の生死はG2/M期チェックポイントに依存している可能性が高い。我々は細胞周期のG2/M期チェックポイントを阻害し抗がん治療の増強効果が得られることを報告した。本研究では、FTDに対する大腸癌細胞のDNA損傷応答のメカニズムを解明し、治療効果の増強に導く方法の開発、さらには臨床応用を目指していく。
再生骨のための配向性制御アパタイトの創製

生体骨を構成するアパタイト結晶(HAp)は、骨各部位に依存してその配向性が変化する。本研究では、骨再生の適正足場材料の探索を図ると共に、一軸配向性を示す尺骨に注目して、この骨再生のための足場材料の創製とこの足場材料を利用しての骨再生過程をアパタイト結晶のc-軸配向性に注目して評価した。カルシウム欠損アパタイト(DAp)粉末をα-TCPを加水分解することにより合成した。この加水分解時の溶液のPHを制御することにより、Ca/P比の制御が可能である。このDApのCa/P比は合成PHの増加に伴って増加した。このDAp粉末とHAp粉末複合体への骨類似層の形成速度は、Ca/P比の低下に伴って速くなり、また骨芽細胞様細胞の接着性も改善される。従って、その骨再生速度をDApのカルシウム欠損量により制御できることを明らかにした。また、焼成しコラーゲンを除いた一軸配向性アパタイト結晶を有する牛大腿骨を欠損部に埋め込み骨再生を図ると、足場材料を用いない場合に比して、その配向性の回復に顕著な効果が認められた。また、HAp焼結体を圧縮応力下で熱処理することにより、そのc-軸配向性を制御することが可能であることが明らかとなった。生体骨内でのアパタイト結晶の配向性はコラーゲン線維の配向と密接な関係がある。この配向性コラーゲンを利用し、自己組織化現象を利用してのコラーゲン・アパタイト複合体の創製とその石灰化機構を明らかにすると共に、この再生足場を利用しての骨再生過程を調べた。牛大腿骨を長軸および短軸方向に切断し、EDTA溶液に浸漬し、アパタイトを脱灰後、交互浸漬法により石灰化処理を行い、アパタイト結晶の配向性を調べたところ、残存するコラーゲン線維方向に依存して石灰化過程でのアパタイト結晶の配向性の制御が可能となった。この再生足場を用いれば、骨再生のデザインが可能であることを明らかにした。生体骨は、水分を除けば無機質である生体アパタイトと有機質であるコラーゲンより構成され、この生体アパタイトの結晶配向性に依存して、生体骨の力学特性等が影響を受ける。本年度は、アパタイトの配向性の生体各部位依存性を調べるため、家兎の尺骨・頭蓋骨・顎骨について微小領域X線解析法により、その結晶配向性を分析した。尺骨は長手方向にアパタイトのc軸が配列した一軸配向性を示し、頭蓋骨は平面に沿ってc軸が配列する二軸配列を示すが、顎骨はその骨形状と咀嚼荷重が相互に影響を及ぼし,複雑な配向を示すことが判明した。この配向性を利用して骨再生過程と再生に及ぼす成長因子の役割を評価した形態的に再生している場合でも、アパタイトの配向の観点から見れば必ずしもそれと連動していない。しかし、正常部分の配向が核となり、再生過程のアパタイト配向を促進する。また、b-FGF等の成長因子はアパタイト配向性の面でも促進効果があることが明らかとなったこのような、骨再生過程でのアパタイト配向性促進のための足場材料としてのアパタイト結晶の創製をコロイドプロセスで行った。そのための適正分散剤、スラリーの注入条件、加圧鋳造条件、熱処理条件を調整し、アパタイト結晶の配向性制御に成功した。
低酸素PETを用いた脳腫瘍の遺伝子解析と腫瘍幹細胞をターゲットとした治療法の開発

低酸素PETを行い、膠芽腫の組織内で低酸素領域と診断された部位とそれ以外の部位より組織を採取した。各腫瘍組織を培養し、HIF-1αなどの酸化ストレスに関係する因子をRT-PCRにて解析した結果、確かに生体内での低酸素による影響がみられた。腫瘍幹細胞移植モデルによる低酸素状態での治療法の検討として、低酸素領域の腫瘍とその他部位における、抗癌剤の反応性をvitroにて比較したが、優位な差は見られなかった。しかしながら、それぞれの部位で遺伝子修復酵素の発現量に相違があり、低酸素ストレス下での抗癌剤の効果に差がある可能性が示唆された。H25年度はまず、組織学的評価を評価する前段階として研究計画(1)PET検査、(2)画像診断によるサンプル部位の決定と検体採取を行った。悪性脳腫瘍が疑われる症例に同意を取り、術前の造影MRI画像に各々PET検査をfusionさせ、摘出範囲内でメチオニンが高集積となっている部位、[18F]FRP-170が高集積となっている部位、両者とも集積が見られている部位、両者とも集積が見られていない部位を評価し、手術プランニングを立てた。メチオニンPET及び低酸素PETを両方施行できた症例は3例。各検査の集積部位の酸素濃度を、術中に組織酸素分圧測定装置を用いてモニタリング、求めている部位であることを確認して採取した。今研究に該当する症例は年間数例であり、現在も該当症例を検討している状況である。次に研究計画(3)標本の免疫組織化学染色での検討も同時進行として進めている。手術時に得られたサンプルを、現在免疫染色(IDH1、p53、GFAP、S100、MGMT、MIB-1)の評価を行っている。現時点では腫瘍関連に遺伝子(IDH1、p53、MGMT)には各検体で優位な差はみられていない。増殖能や特異抗体に関しては検体数を増やしてから検討を行う予定である。また研究目的(6)癌幹細胞の採取及び培養にしたがって、各部位から採取された腫瘍細胞から癌幹細胞を培養を始めている。採取検体から幹細胞を単離することはできたが、培養及びヌードマウス等での生体内での培養増殖は、未だ成功していない。今後条件をかえて引き続き実行予定である。平成26年度低酸素部位での遺伝子解析低酸素PETを用いた腫瘍組織での遺伝子解析を引き続き行っている。癌幹細胞の培養及び膠芽腫の生体内での増殖がうまくいっておらず、現在進行中である。低酸素状態におかれた腫瘍増幹細胞に対して、テモダールなどの臨床に用いられている薬剤の効果を、非低酸素状態と比較検討している。現在、脳腫瘍細胞の耐性克服薬がいくつか報告されているが、それらの相乗効果について検討中である。また採取した部位でのタンパク量の変化をウエスタンブロット、遺伝子発現をreal-time quantitative PCRで定量化し、低酸素が及ぼす影響も引き続き検討中である。低酸素状態における培養腫瘍幹細胞をターゲットとした化学療法の検討をおこなっているが、また結果が出ていない。引き続き実施する。(1)低酸素部位での遺伝子解析低酸素PETで低酸素領域と診断された部位とそれ以外の部位より採取された腫瘍組織を培養し、HIF-1α等の酸化ストレスに関係する因子をRT-PCRにて調べた結果、確かに低酸素による影響が見られた。(2)脳腫瘍幹細胞移植モデルにおける低酸素状態での治療法の検討脳腫瘍細胞や脳腫瘍幹細胞をヌードマウスの皮下及び脳内に移植し、MRIで腫瘍を定量化を試みた。しかしながら低酸素部位で採取した幹細胞にいたっては発育が見られなかった。現在引き続き原因を捜索中である。低酸素領域の腫瘍とその他部位の腫瘍における、テモゾロミドの反応性をvitroにて観察したが、有意な差は見られなかった。しかしながら、それぞれ低酸素ストレス下でのMGMTの発現量に相違があり、低酸素ストレス下での抗癌剤の効果には差がある可能性が示唆された。今後も引き続き研究を続けていく。当研究室では、小動物を低酸素飼育可能な装置を有している。そこで腫瘍塊が一定の大きさになった時点で、in vitroで有効性が確かめられた薬剤、抗がん剤の効果が、定常状態と低酸素状態で異なった反応性を検討できる。今回は採取された腫瘍幹細胞のvivoでの発育が見られず、予定していた生体内実験が進まなかった。原因を究明し今後の研究に繋げる。さらには低酸素状態に大きく影響する放射線治療と酸化ストレス因子をターゲットとした薬剤の組み合わせにより、低酸素領域での腫瘍幹細胞に対する放射線感受性が高まるかなど検討していく予定である。腫瘍幹細胞培養と確立がなかなか進行しない。サンプルとなる症例が少ない為、データを出すに至っていない。引き続き症例を増やして検討していく。

脳腫瘍症例を増やしながら、各検体において諸所の研究を同時進行で行っていく。悪性脳腫瘍患者の術前の画像検査、PET検査の施行状況や術前の検体採取計画及び術中の目的検体採取に関しては順調に行えている。しかしながら該当症例が少ない為、採取された検体からの組織学的検討までには至っていない。腫瘍幹細胞の採取、培養増殖に関してはin vitroからin vivoへの移行が進まない状況である。マウス脳内での腫瘍幹細胞の生着、培養はスピードが遅い上、実験に使用できる細胞株としてストックに至るにはもう少し技術の追加が必要と考えている。まずは検体数を増やす為、メチオニンPET検査、及び低酸素PET検査を行っていく。その上で得られた検体の免疫学的評価を随時進めていく。腫瘍幹細胞採取に関しては現在その知識に長けているものの協力を得ながら、進行している状況であり、早めの採取法確立に努める。
唾液タンパク質と口腔細菌の相互作用:菌体付着と菌体凝集を決定する因子の解明

唾液タンパク質と口腔細菌との相互作用で起こる2つの現象(エナメル質への菌体付着と唾液中での菌体凝集)が生じる条件を調べ、口腔細菌のクリアランスを強く進める条件を明らかにすることを目指した。その結果、齲蝕細菌ストレプトコッカスミュータンスのクリアランスを進めるには、菌体凝集を強く誘導するために唾液凝集素のSRCRP5領域を活用することが有効であることが示唆された。口腔ケアによる口腔バイオフィルムのコントロールは口腔および全身の健康のために重要な課題である。唾液タンパク質と口腔細菌との相互作用で起こる2つの現象(固相への菌体付着と液相での菌体凝集)が生じる条件を調べ、口腔細菌のクリアランスを強く進める条件を明らかにすることを目指した。本年度はハイドロキシアパタイトビーズに吸着したヒト唾液タンパク質gp-340へのS. mutans菌体の付着に及ぼす各種pH、塩濃度の影響を調べたところ、マイクロプレートの場合と同様にpH 47およびNaCl濃度101000 mMで菌体付着に大きな差はなかった。次にgp-340のアミノ酸配列をもとに1020アミノ酸からなる断片ペプチドを作製し、各ペプチドへのS. mutans菌体の付着および各ペプチドの菌体凝集誘導能を評価したところ、SRCRP2への付着とSRCRP5による菌体凝集を認めた。このうちSRCRP2に対する特異抗体を作製してマイクロプレートに吸着させたgp-340におけるSRCRP2の顕示状態を調べたが、本抗体でこの機能領域の検出はできなかった。すなわちgp-340をマイクロプレートに吸着させた状態でSRCRP2は表面に顕示されていない可能性が示唆された。さらにSRCRP5はS. mutansの菌体凝集に関与する因子である表層タンパク抗原PAcを欠損させた変異株の凝集も誘導することが認められた。この結果から、SRCRP5はPAc以外を認識し菌体凝集を誘導することが認められた。以上の結果からS. mutansのクリアランスを進めるには、菌体凝集を強く誘導するためにgp-340のSRCRP5領域を活用することが有用であることが示唆された。口腔ケアによる口腔バイオフィルムのコントロールは国民の健康増進のための重要なテーマである。口腔バイオフィルムは、唾液タンパク質と口腔細菌との相互作用によって形成される。すなわちエナメル質等の固相に吸着した唾液タンパク質への菌体付着と液相で生じる菌体凝集作用のバランスによって生じる。本研究の目的は、この菌体付着と凝集が生じる条件を調べ、口腔細菌のクリアランスを強く進める条件を明らかにすることである。口腔バイオフィルム形成に重要な役割を果たすStreptococcus mutansを対象菌として用い、その付着、凝集いずれも誘導するヒト唾液タンパク質(gp-340)を精製して検討を行った。1)まずgp-340の固相への吸着に及ぼす緩衝液のpH、塩濃度の影響を調べた。pH 47の各種リン酸緩衝液に溶解したgp-340は、ポリスチレン製マイクロプレートに同程度に吸着することが認められた。またpH 7、NaCl濃度101000 mMの各種リン酸緩衝液に溶解したgp-340も同様にマイクロプレートに吸着することが認められた。2)次にS. mutans菌体のgp-340による凝集誘導に及ぼすpHの影響を調べたところ、pH 6以下の酸性条件では凝集が弱くなり、pH 5では凝集を生じないことが認められた。さらにエナメル質表面へのearly colonizerとして知られるStreptococcus sanguinis、Streptococcus gordonii等のレンサ球菌を共存させてS. mutansの菌体凝集を調べたところ、同様の結果が得られた。以上より、gp-340のマイクロプレートへの吸着にはpHや塩濃度は大きな影響を及ぼさないこと、S. mutans菌体のgp-340による凝集は、pH 79で生じることが認められた。S. mutans菌体の固相に吸着したgp-340への付着に及ぼす各種pH及び塩濃度の影響を調べるためにポリスチレンプレートを用いて検討を行ったが、非特異的な付着が生じた。この点を改善するための各種緩衝液の組成調整に時間を要した。また反応系についてもポリスチレンプレートではなく、より口腔環境に近いハイドロキシアパタイトビーズを用いて菌体付着実験を行うための予備的試験にも時間を要し、研究の達成度は当初の予定よりもやや遅れている。まず固相に吸着したgp-340へのS. mutans菌体の付着に及ぼす各種pH、塩濃度の影響をハイドロキシアパタイトビーズを用いて調べる。次にgp-340のアミノ酸配列をもとに1020アミノ酸からなる断片ペプチドを作製し、各ペプチドへのS. mutans菌体の付着および各ペプチドの菌体凝集誘導能を評価する。これらの結果からS. mutansの付着、凝集に関与するgp-340の機能領域を決定した後、各機能領域に対する特異抗体を作製する。

その後リン酸緩衝液に溶解したgp-340をマイクロプレートに吸着させ、gp-340における各機能領域の顕示状態を、特異抗体を用いて調べる。さらに各種口腔レンサ球菌、歯周病細菌が共存した状態でS. mutansとgp-340を反応させた後にgp-340をマイクロプレートに吸着させ、各機能領域の顕示状態を調べる。以上の結果より、gp-340の菌体付着および菌体凝集を誘導する領域およびその発現機序について考察を行う。固相に吸着したgp-340へのS. mutans菌体の付着に関する実験が遅れているため当該実験に要する研究費を次年度に繰り越すことになった。平成24年度は、この繰り越し分と当初請求予定の研究費を、より口腔環境に近い反応系であるハイドロキシアパタイトビーズを用いた菌体付着実験関連費用として使用する。さらに当初の計画を進めるため、次年度の研究費は、試薬、抗体、プラスチック器具、培地、研究成果発表旅費、英語論文校閲費に用いる。
中国の八部衆像に関する調査・研究

中国における八部衆像の初期図像形成おいて、神王像の図像との影響関係があることはすでに指摘したが、神王像そのものの展開の過程において特にどの段階の図像が同化されやすいのかを中心に、河南省および河北省に残る作例の考察にあたった。神王像の服制は、俗形(長衣を着るもの)、天人形(上半身裸形で裙を着るもの)から、しだいに神将形(着甲するもの)が登場する。神格化するモティーフも、自然景物に由来するもの(岩・山・河・樹など)、神獣に由来するもの(竜・獅子・象・鳥・牛など)、自然現象に由来するもの(火・風など)が広く認められたが、「鳥」(鳥頭人身)、「獅子」(獅子冠)、「火」(火炎宝珠)、「風」(逆立つ髮の表現)、「樹」(樹木や宝珠)や「河」(大魚を担ぐ)などと、その他の特徴が曖昧な神将形神王像へと崩れが認められる。また、「竜」の独立して造像される傾向も強い。このような神王像の変化と照らし合わせると、初期の八部衆像に竜が含まれない場合がある、髪を逆立て宝珠や火炎宝珠を持物にする尊像がある、獅子冠をかぶる図像が初期から登場するなど、八部衆像の初期図像形成段階に与えた神王像の図像を限定することができよう。また、八部衆像10世紀以降、仏・菩薩の守護神像としてはみられなくなる。そのため、陜西省の北宋石窟に認められる神将形護法尊像を収集することにより、いかにして八部衆像が姿を消すことになったのか考察に及んだ。中原において顕著なように、二天(梵天・帝釈天)・二王天向が多くあり、「四天王」という語句はあっても四尊が揃っているものは意外に限られている。あわせて、おそらく禅宗の影響により、伝統的な護法尊像の組み合わせへ回帰が作用し、一般的な神将像へと集約されていったと推測された。「中国の八部衆像に関する調査・研究」と題し、平成18年度から19年度の二ヶ年にわたる研究の一年目である。今年度は、平成18年8月に山東省、12月から平成19年1月に四川省の実地調査を行った。いずれも石窟・石庭および博物館の所蔵作品について、八部衆を構成する各像に限らず、図像的に関連が見受けられる尊像まで視野を広げ、デジタルカメラによる撮影と調書の作成を行い、制作年代の検討および図像的特徴を確認した。また、これまで取り組んできた韓国の作例との比較を行うことで、本年度の調査においては主に次の点において成果を上げることができた。第一に、山東省の石窟および博物館に所蔵される石像には、韓国の統一新羅時代以降にみられる八部衆像と直接的な影響関係がある作例が見出せなかったことである。また、韓国の八部衆像には、中国・中原地域を中心に56世紀にかけて盛んに造像された守護神像群である神王像の図像が一部において混在しているが、山東半島の作例にはそれさえ見出し得なかった。この結果は、67世紀に中国から朝鮮半島へどのように八部衆像の構成と図像が伝播したのか、そのルートを考察する際の重要な成果となった。第二に、四川省には多数の八部衆像が現存するが、その中でも制作年代および図像的特徴から重要な作例は、広元千仏崖(初唐盛唐)および梓潼重竜山石窟(初唐)の作例であった。本研究者は、中国における八部衆形成の場所は6世紀後半の中原地域であり、そこから四川省など中国国内に、また朝鮮半島に直接伝播したとみなしているが、四川省における八部衆造像の初期の秀作においてさえ、神王像との図像的関連が見出せなかった。このことから、すでに7世紀の段階で、韓国に伝播した群像形式や図像構成と中国国内における作例の傾向が異なっていたことをうかがわせる結果となった。

また、八部衆像10世紀以降、仏・菩薩の守護神像としてはみられなくなる。そのため、陜西省の北宋石窟に認められる神将形護法尊像を収集することにより、いかにして八部衆像が姿を消すことになったのか考察に及んだ。中原において顕著なように、二天(梵天・帝釈天)・二王天向が多くあり、「四天王」という語句はあっても四尊が揃っているものは意外に限られている。あわせて、おそらく禅宗の影響により、伝統的な護法尊像の組み合わせへ回帰が作用し、一般的な神将像へと集約されていったと推測された。
病床再編及び原発事故後の組織運営に関する理論の構築―看護管理学事例研究手法の開発

少数事例や固有事例を詳細に分析し有用な知見を抽出・蓄積することは、看護管理学の発展に不可欠である。本研究は、看護管理学分野に特化した事例研究手法を開発すること、及び、この手法を用いて東日本大震災に起因する原発事故後に避難指示隣接地区で稼働を続けた病院の看護組織を分析し、新たな理論を構築することを目的とした。本研究では、実際に研究を進めながら研究手法を開発した。2016年6月2018年11月、発災時に福島第一原発3080キロ圏の7病院に所属していた看護職39名に平均87分のインタビューを実施した。同意撤回1名を除く38名のデータを分析に使用したが、理論構築には共通する現象を描けると判断した原発4050キロ圏の5病院のデータ(看護師長8名、看護師23名)を用いた。勤務表や文献等の資料も収集した。個人の語りから職場の現象を描く方法を見出すため、さまざまな視点や手法で分析を行い、各方法で描き出された現象が何かを確認することを繰り返した。なお、本研究は東京大学大学院医学系研究科倫理委員会の承認(No. 11176)を得たが、研究遂行中も研究者間で倫理的課題を検討した。本研究により、個人の語りから個人を超えて存在する職場の現象を描く「複数組織事例研究手法」を開発した。この手法は、個人や施設の匿名性を保ちながら、複数の組織に共通するダイナミクスを詳細に描くことができるため、他の場にも転用しやすい理論を生成できる。本研究では実際にこの手法を用いて、原発事故後に福島県内避難指示隣接地区で稼働を続けた病院で看護師長及び看護師が経験した現象を、個人や施設を超えて共通する職場のダイナミクスとして多角的かつ詳細に描いた。また、この手法を用いて研究を遂行・公表する際に必要な倫理的配慮も明らかにした。本研究で開発した「複数組織事例研究手法」は看護管理学の発展に寄与するものと期待される。本研究は看護管理学分野に特化した事例研究手法、すなわち、組織を分析単位として多様な関係者からデータを収集し分析する手順や、データ間の矛盾に注目しながら深層に迫る理論・モデルを構築する手法、複数事例を統合する手法を確立することを目的としている。同時に、看護管理の事例研究に特有な倫理的課題とその対処指針を明確化することも目指している。これらの目的を達成するため、実際に事例研究を展開しながら方法論の開発や倫理的課題の検討を行うこととした。事例研究は稀な事例や複雑な事例を分析するのに適していることから、福島原発事故後の管理実践を取り上げることとした。特に自主避難をめぐって看護管理者がどのように思考し意思決定したか、またその判断や行為が短期的及び中長期的に部下や組織にどのような影響を与えたかについて、様々な立場から複数の視点から描き出すことを目的とした。平成28年度は縁故法により福島県内の避難指示地区に隣接する地区の1病院から研究参加の同意が得られ、震災当時同じ部署であった看護師長、副看護師長、主任、スタッフのそれぞれに2時間のインタビューを実施した。その結果、どの対象者も事象や事実に関する語りは一致していたが、自主避難をめぐって経験した感情や他者の行為の解釈は全く異なることがわかった。また、職場ではこの話題が避けられ、自らの経験や感情をこれまで表出していないことがわかった。看護管理の事例研究の倫理的課題については、班会議や専門家を交えた検討会で検討を重ねた。個人や施設を特定する情報を除いても、事例研究という性質上、ある程度文脈を描く必要があり、対象者が自分に関する記述を見つけることで周囲の反応を知る可能性が示唆された。特に今回、他者に隠していた感情が多く語られたことから、研究結果の公表には慎重を期す必要があり、複数事例を統合した上で、構造面から描く配慮が必要だという意見で一致した。平成28年度は1データ収集やデータ分析の手順や方法を検討すること、2福島原発事故後対応事例についてデータ収集と分析を開始すること、3倫理的課題と倫理的配慮の検討をすることの3点を目的としていた。1については文献検討した後、班会議により、同一部署の複数の対象者を募集する方法、また、対象者が安全な環境でインタビューを受けるための方法について検討した。その結果、縁故法を用いながらも匿名性の高い募集を行う方法、対象者の自由意思に配慮した説明と同意取得の方法、組織内の関係性やその中の個人の経験を聞きとるためのインタビュー時の注意点、データを扱う上での注意点等を明らかにした。2については、まず計画どおり、1の方法を用いて福島県内の1施設1部署をリクルートし、様々な立場の対象者4名から研究参加の同意を得て、それぞれプライバシーを保護しながらインタビューを実施することができた。分析の結果、対象者たちが経験した感情や他者の行為の解釈が全く異なることがわかり、また、ネガティブな感情やアンビバレントな感情を表出しないまま抱え続けていることもわかった。このため、研究協力依頼は難しく、看護部長が心理的状態を見極めたうえで、他者にわからないよう打診する必要があった。3により公表に際してはより多くの対象者へのインタビューが必要だとわかったため、同施設の他部署、及び他施設へも研究協力依頼を行い内諾を得た。3については計画どおり、班会議と倫理の専門家を招いての検討会において倫理的課題と必要な配慮について議論した。

対象者や関係者、及びそれらの関係性を傷つけないためには、公表の際は複数事例を統合し、対象者本人でも自分の関係者の語りを特定できないようにすること、部署や病院という組織を超えた大きな力が働いていた可能性に注目し、構造やシステム面からそれぞれの選択がやむを得なかった背景を描く必要があることが確認された。人々に組織的に良質な看護サービスを提供するには、看護組織運営に関する知見を蓄積する必要がある。事例研究は、特定の状況下における組織ダイナミクスを描出し、少数事例からも管理実践理論やモデルの構築が可能な研究手法として期待される。しかし、組織を事例とする場合は個人を事例とする場合とは異なる方法論や倫理的配慮が必要となる。本研究は、実際に組織を対象とした事例研究を展開しながら、看護管理学分野に特化した事例研究手法、すなわち、組織を分析単位として多様な関係者からデータを収集し分析する手順や、データ間の矛盾に注目しながら深層に迫る理論やモデルを構築する手法、及び、複数事例を統合しより汎用性の高い理論やモデルを構築する手法の確立を目的とする。同時に組織事例研究に伴う倫理的課題とその対処指針の明確化も目指している。事例研究では、東日本大震災後の福島県内の病院での看護組織運営を扱うこととした。震災当時、福島第一原発から半径3050km圏内に立地する病院に勤務していた看護師長及び看護師を対象として、看護師の自主的避難をめぐって、各部署の看護師長がどのように意思決定し対処したか、またその判断や行為が短期的及び中長期的に個々の看護師や看護師チームにどのような影響を与えたかについて、組織内の多様な立場の視点から描き出すことを目的とした。平成28年度は震災当時同じ部署で働いていた職位の異なる4名にインタビューを行い、内容を分析するとともに、看護管理学分野の組織事例研究に特有な倫理的課題とその対処について検討した。その結果を受け、平成29年度は参加者を増やして、自主的避難をめぐって看護師がどのように意思決定し、その結果、職場でどのような経験をし、その後の職業生活や今の自分に影響を及ぼしたかを分析するとともに、同一部署でも立場によって経験は異なり、同じ事象でもその解釈が異なることについて分析を進めた。平成28年度のインタビューで、同一部署であっても、立場によって全く異なる経験をしており、同じ事象についても解釈が異なることや、特に自主的避難をめぐっては、出勤を続けた看護師も職場を離れた看護師も、震災から6年が経過してもなお、当時の自分や同僚の選択とその後の職場での経験について未解決な感情や葛藤を抱えたままであることがわかった。多様な立場から組織で起きた事象を描き出すために、また、対象者の匿名性を守るために、当初の計画よりも参加施設と参加者を大幅に増やして、個々の看護師の経験を詳細に分析した上で、組織単位の事例分析を行い、最終的に複数の組織事例分析の結果を統合する必要があると考えられた。そのため、平成29年度は機縁法に加えて、ホームページやチラシで個人単位での参加者も募り、5施設22看護単位の計37名(震災当時、看護師長8名、副看護師長・主任5名、看護師21名、看護部長・副看護部長3名)へのインタビューを終了した。看護師長を含む組織としてインタビューを実施できたのは4看護単位であった。
中国清代における人の移動と社会変容-四川省移住民社会の研究-

本研究は中国清代の人口移動と社会変容について、四川省の事例を中心に広く比較検討し、いわば中国における人口移動を特殊性と普遍性の両面から検討することを目的としていた。第一点、「特殊性」から見た中国の人口移動という観点は清代四川地域研究というかたちを通して進められた。具体的には、清代後半期に至り四川各地域に簇生した「公局」を考察の端緒として史料収集と分析にあたった。大量の移住民の流入は必然的に地方行政の広域化・高密度化を要請したが、硬直的な王朝国家行財政システムの下では実態に見合った柔軟な地方行政制度の変容は困難であった。そのため、膨張を続けた四川地方社会では、地域エリートの参画によって恒常的な行政の補完を行っていくための半官半民の組織=「公局」が誕生する。大規模な開発移住によって形成された新たな地域社会が、如何なる行政的編成のもとに調和的に組み込まれていくか、という観点から見るならば「公局」はまさしく自律的な地域秩序と行政権力とが接触・相互浸透する界面に他ならず、人口移動にともなう秩序と統合への潮流を解析するための鍵となるであろう。「公局」については地方誌をはじめ『南川公業図説』等の漢籍史料を複写により収集、基礎的データの集積と分析に着手した。一方、単に清代四川地域研究のみならず、中国の他地域、他時代における人口移動・変容との比較検討を通して、中国社会固有の特質を抽出することも本研究の重要な柱である。本年度に発表した書評(三石善吉『中国の千年王国』に対する書評、『歴史学研究』647号、1993年)もかかる比較検討作業の一環を成している。移住民社会の統合過程に出現する亀裂一千年王国的な様相を見せる「反乱」もまた、伝統中国的秩序の様態を開示する鍵の一つと予想される。以上、本研究は二つの方法的視角のもとに「秩序」の構造自体を射程として進められ基礎資料の蓄積と分析の深化を見ることができた。
ハーレム・ルネサンス期におけるコスモポリタニズム思想の展開

アメリカの黒人文学は、人種問題を主題とする文学の総体であると考えられてきた。近年、しかしながら、必ずしも人種問題に言及することのない作品を残してきた黒人作家も少なからず存在しているという事実に、新たなる関心が向けられ始めている。本研究は、白人/黒人という人種的二項対立の思考法に必ずしも囚われることのない黒人文学作品の美学的・政治的価値を再検証した。その目的は、黒人文学の主題やジャンルの多様性を示すことにあった。ハーレム・ルネサンス以降の時代に焦点を当て、人種に囚われることのないコスモポリタンなスタイルを持つ作品、登場人物の人種的アイデンティティを明らかにすることのない恋愛詩などを再読した。本年度は、米国初の黒人芸術文化運動ハーレム・ルネサンス期において、コスモポリタニズムという思想を取り込んでいる文学作品を考察した。特に注目したのは、黒人知識人Alain Locke、黒人女性詩人Georgia Douglas Johnson、Angelina Weld Grimke、Carrie Williams Clifford、黒人作家Nella Larsen、Jean Toomerなどの作品である。研究成果を二つの国内学会にて発表し、三つの研究論文として出版した。Johnson, Grimke, Cliffordらの黒人女性作家の詩は、近年に発掘されたばかりであり、その研究はいまだ発展途上の段階にある。学会発表および論文はそれぞれ、これまであまり研究されることのなかった黒人女性詩人の恋愛詩というジャンルに注目しつつ、いかにこれらの恋愛詩ー特に愛やエクスタシーというテーマーが、モダニズム期米国において、白人と黒人との二項対立に基づくカラーラインを超越した地平において、コスモポリタンな共同性を創造/想像する契機となっているかについて明らかにした。さらに本年度は、カリブ海のノーベル賞詩人・戯曲家であるDereck Walcottの作品論を執筆し、西洋比較演劇学会発行のComparative Theatre Reviewにおけるウォルコット特集号に出版した。アメリカの奴隷制廃止論者DavidWalkerを登場人物とする戯曲『ウォーカー』は、アメリカにおける黒人ナショナリズムの伝統(黒人ナショナリスト演劇)と、カリブ海におけるコスモポリタニズムの伝統(混成演劇)とを対話的に上演するという実験性に特徴づけられる。本論考は、コスモポリタニズムという思想を、アメリカおよびカリブの思想的・歴史的文脈の双方から再検証する試みであった。カラーラインにより人種が二分化されていたかにみえる1920年代のハーレム・ルネサンス期(黒人初の芸術文化運動期)とは、同時に、多民族、多人種、多文化が共存しうるアメリカニズム/コスモポリタニズムという理想が様々な作家により模索された時期でもあった。今年度は、アメリカの黒人文学が内包する多様性への指向、地理的・時代的横断性を、ハーレム・ルネサンス期の黒人作家(Jean Toomer, Georgia Douglas Johnson, Angelina Grimke, Carrie William Clifford, Langston Hughes, Sterling Brown)の作品を精査し、論文にまとめた。従来の黒人文学批評においてはほとんど注目されることのなかった黒人女性詩人(Johnson, Grimke, Clifford)の作品を、コスモポリタニズムという視座から再評価できたことは一つの成果である。加えて、アメリカのブラック・ナショナリズム思想に影響を受けつつも独自の多文化主義(群島性)をカリブ海地域を背景に戯曲化したセントルシアのノーベル賞作家Dereck Walcottについての批評を執筆・投稿した。また、村上春樹文学の翻訳者であるJay Rubin氏を招いたシンポジウムにおいて、村上文学とアメリカ黒人音楽ジャズとの関連について講演する機会も得た。本研究が焦点を当てる時代・地域とは異なるものの、これらの研究は、黒人によるコスモポリタニズムの伝統が、いかに時代や国家を超えた枠組みにおいて受容、変容、発展してきたかについて再考する機会を与えてくれた。アーカイブ調査のため、ワシントンD.C.の議会図書館に赴き、黒人作家による貴重なマニュスクリプトの数々を手に入れることができた。来年度以降、文献を精査し、成果を発表できるよう努力したい。26年度が最終年度であるため、記入しない。アメリカ文学26年度が最終年度であるため、記入しない。研究成果を発表する場にも恵まれた。日本アメリカ文学会、専修大学人文学研究会で発表し、本務校の二つの学会誌(専修大学『現文研』、専修大学『人文科学研究所月報』)およびComparative Theatre Review、津田塾大学出版の所報(平成26年度に刊行予定)に出版することで、本務校の同僚および日本アメリカ文学会、西洋比較演劇学会の研究者からも貴重なレスポンスと批評を得ることができた。平成26年度の夏季休暇を利用し、米国のハワード大学図書館のマニュスクリプト・ディヴィジョンと、モダニズム期の黒人作家ジョン・マセウスの作品と資料を現在まとまった形で手に入れることができる数少ない場であるフロリダフロリダA&M大学に行く予定である。また本年度の研究の成果を二つのシンポジウムにて発表予定である。6月21日(土)の英文学会関東支部の「ユートピア/ディストピア再考

ー歴史、ジェンダー、共同体」というシンポジウムでは、ハーレム・ルネサンス期の女性詩人のユートピア思想を探る「黒人詩、ホモエロティシズム、ユートピア」という論考を発表する。6月27日(金)開催の専修大学人文学研究会では、黒人文学をめぐるシンポジウムを、一般の聴衆向けに公開する予定である。発表論考のタイトルは「アメリカ黒人文学における災害と絆」であり、第一の目的は、黒人文学・音楽に描かれる災害描写を考察すること、第二の目的は、災害という未曽有の事態の中で、いかにこれまでとは異なる共同性が生じる可能性があるのか、という問題について考えることである。両シンポジウムは、本研究のテーマであるコスモポリタニズムと密接なかかわりがある。というのも、ユートピア文学も災害文学もともに、いかに既存の共同性のオルタナティヴとなる新たなるつながりーユートピア的共同体や災害後の絆ーがはぐくまれるかという問に取り組むものだからである。このオルタナティヴとしての共同性は、しばしば、いまだかつてない多様性を含みこむ「コスモポリタン」な共同性としても創造/想像可能である。春期休暇中には、これらのシンポジウムでの発表を、英語論文としてまとめ、海外の学会誌に投稿する準備を行うとともに、米国シアトルで開催されるACLA(American Comparative Literature Association)にて発表を行う予定である。
加齢に伴う海馬シナプス機能低下における細胞内カルシウムホメオスタシスの役割

アルツハイマー病などの神経変性疾患とは異なり、通常の老化による認知機能の低下においては海馬神経細胞の脱落を必ずしも伴わないことから、近年では神経細胞死に先立って機能障害がおこり、シナプス伝達に変化が起こることが重要であると考えられてきている。細胞機能は細胞内Ca2+ホメオスタシスにより制御されており、これが破綻してシナプス可塑性を減弱させることが加齢性認知機能低下につながる可能性が高い。本研究は、加齢性に衰える脳機能における細胞内のCa2+ホメオスタシスの関与を証明し、この機序を明らかにすることによって予防・治療につなげることを目的としている。我々はこれまでに記憶・学習と関連が深いと考えられている海馬CA1領域の長期増強(Long-term potentiation:LTP)が加齢に伴い減弱することを示してきた。本年度は、この原因を探る一環としてCa2+イメージングシステムを立ち上げ、電気生理学的手法と組み合わせることにより詳細なシナプス解析が可能となった。これを用いて海馬CA1の興奮性シナプス後電位(EPSP)の波形解析を行ったところ、加齢に伴ってEPSPの減衰時間が延長することが明らかとなった。この減衰時間の延長は細胞内Ca2+動態とリンクしているため、加齢時にはCa2+ホメオスタシスに変化が生じていると示唆された。次に、このEPSP波形の延長に関与するCa2+ホメオスタシス関連分子の探索を行い、現在までのところCa2+排出系に大きく関与するNa+-Ca2+交換体(NCX)は関与しないとの結果を得ている。今後、加齢性に発現量が変化するCa2+ホメオスタシス関連分子を網羅的に検討し、それらのシナプス可塑性および認知機能への影響を検討することにより総合的なCa2+ホメオスタシスと加齢性認知機能低下の相関を検討していくことを予定している。申請時の研究計画では、マウスより得られた脳スライス切片や培養細胞からのホールセルパッチクランプとCa2+イメージングの同時記録によりシナプス内におけるCa2+動態を経時的・空間的に明らかにし、EPSP/EPSC波形とCa2+濃度の変化との対応を検討することによって、Ca2+ホメオスタシス関連分子のシナプスにおける役割の解明を行うことを目標としていた。平成29年度はこのような実験を行えるようにするため、新しく導入したCa2+および膜電位のイメージングシステムを立ち上げ、さらに電気記録との同時記録ができるような環境を整えることに成功した。また、海馬EPSPの減衰時間が加齢性に延長することを老齢マウスおよび老化促進モデルマウスにおいて示すことができた。今後EPSP波形の減衰時間に関連するCa2+ホメオスタシス関連分子を探索することで、加齢性シナプス機能低下のメカニズムに迫ることができる可能性を示した。さらに実際にCa2+関連分子の探索についても検討を行い、Ca2+排出関連タンパクの一つであるNa+-Ca2+体の関与が薄い可能性を示した。引き続いてCa2+放出関連分子の検討を行う予定であり、上述の点から、ほぼ当初の研究計画通りに進展していると判断した。今後は、昨年度から検討を行っているCa2+ホメオスタシス関連分子群の同定をさらに進めていくことを予定している。本年度はCa2+排出関連分子のみしか検討が行えていないが、今年度はCa2+供給関連分子や、イメージングと電気記録の同時記録を駆使して細胞内Ca2+バッファーの変化やシナプスの構造的変化(Ca2+チャネルとセンサー間の距離など)についても明らかにしていきたいと考えている。Ca2+ホメオスタシス関連分子の同定に成功した際には、各種因子を阻害する物質によるLTPのレスキュー実験を行うなどして、実際にそれらの分子が加齢性の記憶・学習能力の低下に関与しているのかを検討していく。このような過程で加齢性脳機能低下に関与する分子、抑制する分子の候補が見つかることが期待される。また、現状では通常の老化モデルを用いて実験を行っているが、加齢時には脳機能低下のみならず様々な循環器系や代謝系の疾患の併発が見られるため、それらの基礎疾患と脳機能の関連を明らかにすることも加齢性脳機能低下の予防や治療のためには必要であると考えている。よって、病態モデル動物も用いて多面的な検討を行っていき、加齢性脳機能低下の機序解明のための基礎研究に加えて臨床応用への道につなげていくことも検討している。

これを用いて海馬CA1の興奮性シナプス後電位(EPSP)の波形解析を行ったところ、加齢に伴ってEPSPの減衰時間が延長することが明らかとなった。この減衰時間の延長は細胞内Ca2+動態とリンクしているため、加齢時にはCa2+ホメオスタシスに変化が生じていると示唆された。次に、このEPSP波形の延長に関与するCa2+ホメオスタシス関連分子の探索を行い、現在までのところCa2+排出系に大きく関与するNa+-Ca2+交換体(NCX)は関与しないとの結果を得ている。今後、加齢性に発現量が変化するCa2+ホメオスタシス関連分子を網羅的に検討し、それらのシナプス可塑性および認知機能への影響を検討することにより総合的なCa2+ホメオスタシスと加齢性認知機能低下の相関を検討していくことを予定している。申請時の研究計画では、マウスより得られた脳スライス切片や培養細胞からのホールセルパッチクランプとCa2+イメージングの同時記録によりシナプス内におけるCa2+動態を経時的・空間的に明らかにし、EPSP/EPSC波形とCa2+濃度の変化との対応を検討することによって、Ca2+ホメオスタシス関連分子のシナプスにおける役割の解明を行うことを目標としていた。平成29年度はこのような実験を行えるようにするため、新しく導入したCa2+および膜電位のイメージングシステムを立ち上げ、さらに電気記録との同時記録ができるような環境を整えることに成功した。また、海馬EPSPの減衰時間が加齢性に延長することを老齢マウスおよび老化促進モデルマウスにおいて示すことができた。今後EPSP波形の減衰時間に関連するCa2+ホメオスタシス関連分子を探索することで、加齢性シナプス機能低下のメカニズムに迫ることができる可能性を示した。さらに実際にCa2+関連分子の探索についても検討を行い、Ca2+排出関連タンパクの一つであるNa+-Ca2+体の関与が薄い可能性を示した。引き続いてCa2+放出関連分子の検討を行う予定であり、上述の点から、ほぼ当初の研究計画通りに進展していると判断した。今後は、昨年度から検討を行っているCa2+ホメオスタシス関連分子群の同定をさらに進めていくことを予定している。本年度はCa2+排出関連分子のみしか検討が行えていないが、今年度はCa2+供給関連分子や、イメージングと電気記録の同時記録を駆使して細胞内Ca2+バッファーの変化やシナプスの構造的変化(Ca2+チャネルとセンサー間の距離など)についても明らかにしていきたいと考えている。Ca2+ホメオスタシス関連分子の同定に成功した際には、各種因子を阻害する物質によるLTPのレスキュー実験を行うなどして、実際にそれらの分子が加齢性の記憶・学習能力の低下に関与しているのかを検討していく。このような過程で加齢性脳機能低下に関与する分子、抑制する分子の候補が見つかることが期待される。また、現状では通常の老化モデルを用いて実験を行っているが、加齢時には脳機能低下のみならず様々な循環器系や代謝系の疾患の併発が見られるため、それらの基礎疾患と脳機能の関連を明らかにすることも加齢性脳機能低下の予防や治療のためには必要であると考えている。よって、病態モデル動物も用いて多面的な検討を行っていき、加齢性脳機能低下の機序解明のための基礎研究に加えて臨床応用への道につなげていくことも検討している。