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海洋生物生産の支配因子リンは微生物群の還元により変動しているか

本研究では,海水中に含まれる各種リンの定量的検出系を確立し,それを用いて未だ知られていないリン酸還元現象を明らかにすることに挑む。本年度は,核磁気共鳴(NMR)によるリン検出の諸条件最適化に取り組み,内部標準化合物を選抜導入することで,従来までの無機リン酸のみならずC-P,C-O-P,N-P結合を有するリン化合物の定量が可能となった。海水中にはNMRを阻害する常磁性元素などの物質が含まれているため,これらを強力に除去し,リン化合物を抽出する必要がある。しかし従来法では,その抽出過程でリン化合物の変性をともなう可能性が指摘されており,海水中に含まれる様々な形態のリン化合物を検出することは困難とされてきた。本研究で構築した方法であれば,常磁性元素を豊富に大量に含む海水培地であっても各種リンの正確な検出が可能であり,さらに安定性の高い既知濃度の内部標準化合物を用いることで,定量性も確保することができた。このNMRベースの方法を用いることで,海洋微生物の各種リンの利用を解明することができた。すなわち試験した多くの海洋微生物(特に真核微生物)はリンの還元能を有していない。これらは酸化型のリンを積極的に利用しながらも,それらを還元することはない。この過程で,試験したいくつかの微生物は酸化型のリンを優先的に利用するものの,還元型のリンをも利用可能である。これらの微生物は海洋に広く分布する細菌群であり,種を特定するに至っている。この利用プロセスにリンの酸化・還元が関わる可能性ついては検討中であり,とりわけ後者を行う微生物については探索中である。今回得られた成果は,海洋におけるリン組成の解明ならびにおいて重要な知見になると期待される。これらの成果の一部は,国際シンポジウムにて発表しており,今後の実績基盤として位置付けられる。本研究の最大の目的はリン酸還元を行う微生物の探索にある。目的の生物を効率よく見出すために,まず海底泥における各種リンの分布・組成を明らかにし,還元型リンが豊富に含まれる試料を得る。それを各種条件で培養し,酸化・還元型リンの変動を調べることで,リンの還元ポテンシャルを有する微生物集積試料を調製,そこから目的生物を分離することを本年度の目的としている。1)各種リンの分布・組成現在までに,春季から冬季にかけて高知県浦ノ内湾の底泥を採取し,そこに含まれる各種リンの分布・組成を解析してきた。しかしながら,核磁気共鳴(NMR)を阻害する物質を完全に除去することが困難なため解析が難航している。2)海洋微生物による各種リンの利用前年度に確立した各種リン化合物の網羅的・定量的検出系により海洋微生物によるリンの利用が部分的に明らかとなった。少なくとも本研究で行った培養試験の結果をみる限り,海洋真核微生物が正リン酸を還元することはなく,また還元型リンも酸化等を経て利用することはない。一方,海洋原核生物である細菌のなかには,嫌気環境下においてリン還元を行うものが存在しうる可能性を抽出した。電子受容体として正リン酸のみが存在する培地にて細菌の増殖を見出せたことから,おそらくリン酸還元ポテンシャルを有しているものと推察される。現在までにそれらの集積培養を安定化できた段階にある。しかしながら,その試料を同組成の寒天培地に接種しても細菌などの微生物コロニーが得られず,純粋株の分離には至っていない。以上を踏まえ,当初の計画に比べて研究の進捗はやや遅れていると言わざるを得ない。この状況に鑑み,今後の研究をより合理的に推進可能な方策を立案・実施することで,研究の目的達成を図る。正リン酸の還元ポテンシャルを有する微生物群の探索に重点的に取り組む。この達成に向けて,研究を合理的に推進する方策を以下のように考えている。1)各種リンの定量的検出法現在まで,核磁気共鳴(NMR)をベースにした方法であれば,培養試料中の各種リンの定量的・網羅的解析が可能であることを示してきた。しかし海底の泥に含まれる各種リンについては正確に検出することができていない。この状況を打破し,リン酸還元ポテンシャルを評価するためには,NMRの阻害物質をより強力に除去する方法を考える必要がある。そこで今後は,様々なキレーターのNMR阻害軽減効果を検証していく。また,NMR阻害の改善が困難な場合を想定し,新たなリン検出技術の構築を図る。予備的に検討を重ねてきた酸化処理法により還元型リン酸を正リン酸に完全酸化可能な方法を構築する。その上で,正リン酸の一般定量法とプレートリーダーを組み合わせるにより,海水中の還元型リン酸を高速定量可能なことを示す。これらの系を実験に導入できれば,正リン酸と還元型リンの挙動を効率よく調べることができるため,研究計画を強力に推進できるものと期待される。2)リン酸還元を行う細菌の分離現在まで集積培養している細菌試料のうち,正リン酸の還元ポテンシャルを有する試料が見つかっている。当該試料より目的とするリン酸還元細菌を分離するにあたっては,分離の大幅な効率化を図る。ここでは集積培養で得られた試料を表面凸凹寒天培地(山口ら藻類2016)に塗抹し,細菌のコロニー形成(形成可能種の拡大)を促進する。この培地にはマイクロレベルの凹部が設けられているため,一般に用いられる“固相"寒天培地とは“液相"画分を有する点で大きく異なる。この液相凹部で微生物を増殖させることで,固相の乾燥ストレス等に耐えられない(増えることができない)

細菌等の微生物を効率よく培養できることが期待される。海洋生物生産はリンの挙動によって左右される。海洋研究では,リンとは完全酸化型の正リン酸のことを指すのが常識である。しかし最近,海水中から亜リン酸態化合物が検出され,それが気候変動・生物生産に及ぼす影響が指摘されている。そのため亜リン酸の生成プロセスに世界の注目が集まっているものの合理的な説明は果たされていない。本研究では,海水中に含まれる各種リンの定量的検出系を確立し,それを用いて未だ知られていないリン酸還元現象を明らかにすることに挑む。本年度に実施した研究により,海水に含まれる各種リンの網羅・定量的検出に関わる諸条件について検討を重ねてきた。その結果,従来までのキレーター,強酸,強アルカリ処理法では成しえなかった,海水中の各種リン,具体的には正リン酸,亜リン酸,次亜リン酸,リン酸モノエステル,リン酸ジエステルならびにホスホネートの精確な検出が31P NMR(核磁気共鳴)により可能となった。本法は,NMRを阻害する各種常磁性元素が含まれる海水であっても,その阻害作用を大幅に軽減することができる点で優れており,今後のリン組成の解明において強力なツールの一つになると期待される。ただし,NMR解析には時間を要するのが難点であり,リン酸還元現象を効率よく解析する上では律速になりかねない。この点については,亜リン酸を迅速定量可能な分光法により一部解決できつつある。すなわち,従来のモリブデンブルー法でも,ある種の有機溶媒を添加することで亜リン酸を定量することが可能となり,さらに高速分光測定器の採用により定量を高速化することができた。これらにより,リン酸還元を引き起こしうる微生物群を探索可能なシステムを構築するまでに至った。これらの成果の一部は,学会等で発表しており,今後の実績の基盤として位置付けられる。本年度においては,海洋環境に含まれる各種リン酸の定量的検出系の確立,ならびにそれを用いたリン酸の分布・組成の解明を目指し研究を進めてきた。現在までに,核磁気共鳴(NMR)解析を阻害する常磁性元素(鉄・コバルトなど)の新規除去法を開発し,さらに定量に不可欠となる内部標準リン化合物を選定することができた。これらにより,海水に含まれる各種リン,具体的には正リン酸,亜リン酸,次亜リン酸,リン酸モノエステル,リン酸ジエステルならびにホスホネートの定量的検出が可能となり,目的の達成に大きく前進した。この検出系により,微生物によるリン利用の詳細が解析可能となった。すなわち,多種多様なリン化合物が存在する海水試料において,試験する微生物が優先利用するリン化合物,それに伴って変動する各化合物の化学形態・濃度を捉えることが可能である。現在まで,当研究室で保存・管理している微生物による一般的な酸化型リンについての利用能については,本検出系で解析することが可能なことを実証できた。還元態リンについても試験している段階にある。また,迅速に亜リン酸を検出可能な系も確立しつつある。この系の確立においては,検出に不可欠な各種有機溶媒について試験し,もっとも適した溶媒と試料の処理条件を見出すことができた。以上より,海水中に含まれる各種リン化合物の精確な解析システムが整いつつある。
慢性腎不全と関連する猫モルビリウイルスの病原性発現機構の解明

これまで猫の腎炎とウイルスの関係に注目した研究はほとんどなかった。しかし、2012年に香港で尿細管間質性腎炎と関連するネコモルビリウイルス(FeMV)が発見された。FeMVはパラミクソウイルス科モルビリウイルス属に分類されるウイルスで、猫の尿や糞便から検出されている。アジア、ヨーロッパ、アメリカの様々な国でFeMVの検出がなされていることから、同ウイルスは世界中に広まっていると考えられている。しかし、その一方でこのウイルスの病原性発現機構は不明である。そこで本研究においては、FeMV感染時の宿主の免疫応答に着目し、FeMV感染とウイルス性腎炎の関係を明らかにすることを目的として研究を行った。ネコの死因の上位を占めている疾病として慢性腎不全がある。慢性腎不全の原因は単一ではないと考えられているが、2012年になってネコの慢性腎不全と関連するウイルスが香港で発見された。ネコモルビリウイルス(FeMV)と命名されたこのウイルスは、モルビリウイルス属に分類されている。FeMVは慢性腎不全の中でも、尿細管間質性腎炎と関連している。また、高齢ネコに多い慢性腎不全の多くは、尿細管間質性腎炎である。本研究の目的は、FeMVの病原性発現機構を明らかにし、ウイルスと腎炎の関係を明確にすることである。近年、過剰なインターフェロン(IFN)の持続産生が腎障害を引き起こすことや、欠陥干渉ウイルス粒子がIFN経路を活性化することが報告されている。本研究では、FeMV感染細胞におけるIFN、IFN誘導遺伝子(ISGs)、サイトカインの発現状況を調べた。その結果、FeMV感染により、複数のIFN, ISGsおよびサイトカイン遺伝子の発現上昇が認められ、感染細胞中に「コピーバック型欠陥干渉FeMVゲノム」が検出された。センダイウイルスなどでは、コピーバック型欠陥干渉ゲノムが強力な自然免疫誘導因子となることはこれまでの研究で明らかになっていることから、腎炎発症機構に、欠陥干渉ウイルスによる宿主の持続的な自然免疫の活性化が関与している可能性が示唆された。また、FeMVに対する液性免疫応答について解析した。FeMVは中和抗体存在下でも慢性感染し、尿に感染性のウイルスが検出された。また、血清疫学調査によって、FeMVに対する中和抗体と腎不全に相関があることが明らかとなった。さらに、リバースジェネティクス技術を用いたFeMVのミニゲノム系の作出にも取り組んでいる。現在、組換えタンパク質の発現効率を上昇させるために、ミニゲノム系の改良を行っている。今後、組換えFeMVの人工合成系を確立する。今期はFeMVに対する自然免疫ならびに液性免疫応答の解析を行った。その結果、FeMV感染によって誘導されるインターフェロン関連遺伝子と欠陥干渉ウイルス粒子が、FeMVによる腎炎発症機構と関与している可能性が明らかとなった。また、FeMVは中和抗体存在下においても完全に排斥されず、腎に慢性感染することを見出し、FeMVの慢性感染と病原性発現機構を説明する上で重要な知見を得ることができた。本研究で得られた知見は、獣医臨床上問題となっているネコの慢性腎不全の予防・治療法確立に貢献するものであり、今後さらなる研究の発展が期待される。次年度も引き続き、FeMV感染に応答する宿主の自然免疫因子の解析を推進する。昨年度に確立したin vitro持続感染系を利用して、FeMV感染初期と持続感染時において、ウイルスセンサー、IFN・サイトカインの発現がどのように異なるかを比較する。これにより、宿主体内において、FeMV持続感染時に発現が上昇する自然免疫因子を推定する。さらに、FeMV感染初期および持続感染細胞からウイルスRNAを抽出し、次世代シークエンサーを用いて持続感染前後の遺伝子変異を調べ、FeMVの持続感染に重要なアミノ酸変異を明らかにする。獣医ウイルス学当初申請では2年目は160万円を必要としていたが、配分予定額は90万円と44%も削減された。当初申請では1年目では340万円必要として申請していたが、配分額は200万円と42%も削減された。挑戦的萌芽研究の上限は500万円であるが、500万円で遂行できる研究計画を提出していたので、削減により一部実験をとりやめた。2年目の研究に必要な研究費は当初計画と同じ額が見込まれた。そこで、70万円を繰り越しし2年目の実験に備えることとした。当初計画通り研究を遂行する予定である。
腸上皮化生から分化型胃癌発生の分子機構の解明

腸上皮化生は、胃癌をはじめパレット食道癌などの前癌状態として重要であることが知られている。しかし、本来の粘膜上皮が腸上皮に形質変換する機構については不明であった。われわれは、転写因子CDX1,2の発現がこの形質転換に重要な役割を果たしていることをあきらかにしてきた。特に、CDX2を胃に異所性に発現させることにより、腸上皮化成トランスジェニックマウスを作成することに成功した。さらにこのマウスでは長期維持することによりほぼ100%のマウスに分化型胃癌の発生が見られることを報告した(Cancer Res. 2004)。このマウスにおける胃癌では、ヒト胃癌と同様、多くの場合p53やAPC遺伝子変異を伴っており、ヒト分化型胃癌発生モデルとしても有用であることが示唆された。またこのマウスをp53欠損マウス、あるいはAPC遺伝子変異マウス(Min)と交配すると、胃癌発生が短期間に起きることも明らかとなり胃癌発生が多因子の影響を受けてその発生時期が決まってくることも示された。一方、われわれは腸上皮化生粘膜では、基底膜側に通常の胃粘膜には見られないPericryptal fibroblastが誘導されることも見出し報告した(Gut 2005)。これは上皮-間質間の相互作用が上皮細胞のシグナルによって誘導されることを示した知見であり、今後上皮間質相互作用の分子機構について詳細な検討を行う予定である。また腸上皮化生では、腸上皮に見られる内分泌細胞が発生してくるが、そのメカニズムとしてCDX2による別の転写因子Math 1が重要な役割を果たしていることを明らかにし報告した(Differentiation in press)。腸上皮化生に先立つ変化として萎縮があるが、この過程に形態形成因子であるSonic Hedgehogが関与している可能性についても検討を行い、欧州消化器病学会で報告した。転写因子CDX1,2を壁細胞に発現させるトランスジェニックマウスを作成すると、固有胃粘膜がやがて腸上皮化生粘膜に置き換わることを報告してきた。ただ、CDX1,CDX2トランスジェニックマウスの腸上皮化生の性状は、同一ではなく、それぞれの転写因子の作用は一部重複するものの、同一ではないことが明らかにされた。これはGut誌に発表している。またこれらのトランスジェニックマウスのうちCDX2発現マウスモデルでは、長期間飼育(2年)すると胃粘膜に腫瘍が形成され、粘膜下層や筋層に浸潤する癌の発生が高率に観察された。このマウスに認められる胃腫瘍は、ヒトで腸上皮化生を背景に発生すると考えられる分化型腺癌と同様の形質を示していた。これらの腫瘍の分子異常を検討すると、p53遺伝子異常やAPC遺伝子異常が高頻度に認められ、ヒトの胃癌に認められる遺伝子異常と類似していることがあきらかとなった。この研究はCancer Research誌に発表した。このように、CDX2トランスジェニックマウスは、腸上皮化生から分化型胃癌が発生する過程を明らかにする上で極めて有用なモデルとなると考えられる。さらに、CDX2トランスジェニックマウスでは、腸上皮化生の形成とともに、上皮細胞を支持する基底膜側に分布する線維芽細胞が腸型の形質に転換していることも明らかにした。このように、腸上皮化生は単に上皮細胞だけの形質転換ではなく、Epithelial-Mesenchymal Interatactionにも大きな変化が起きていることをはじめて明らかにした。この研究はGut誌に発表している。

さらに腸上皮化生が、単に胃粘膜にとどまらず、他の臓器における炎症や腫瘍発生に関与している可能性を考え、手術で摘出した胆嚢における発現を検討したところ、胆嚢に腸上皮化生が起きており、CDX2が発現していることを見出した。これはAm.J.Surg. Pathol.に報告した。このように、腸上皮化生からの発癌は胃にとどまらず、食道(Barrett腺癌)、胆嚢がんなどより広範な発癌に関与している可能性があることが示唆された。転写因子Cdx1,Cdx2を壁細胞に異所性に発現させるトランスジェニックマウスを作成し、これらのマウスの胃粘膜が腸上皮に変換すること(BBRC 2002、Gut 2004)、Cdx2トランスジェニックマウスでは、腸上皮化生粘膜から胃癌が発生することを論文発表した(Cancer Res.2004)。これらのマウスは、腸上皮化生発生機構や腸上皮化生から分化型胃癌発生機構を解明するうえで有用なモデルとなることが期待される。このマウスの腸上皮化生粘膜では、単に上皮細胞のみの形質転換だけではなく、支持組織である間葉系細胞も変化することを見出した(Gut 2005)。さらに、腸上皮化生における内分泌系細胞の誘導には、別の転写因子Math1の関与があることも明らかにしえた(Differentiation2006)。胃の腸上皮化生は胃炎を母地として発生するが、この過程で酸分泌の低下とともに、Cdxが発現してくる。われわれは、除菌すると酸分泌が壁細胞の増加を伴わず劇的に回復することを明らかにした(Gut 2006)が、この過程にはCdxとは別の形態形成遺伝子Sonic Hedgehog (SHH)が一部関与する可能性がある。SHHは胃では壁細胞に発現し、萎縮の進行とともに発現が低下するが、除菌によりその発現が回復することをわれわれは見出している。またSHHは胃粘膜細胞増殖活性を有していることも明らかにした(BBRC2006)。このように腸上皮化生の発現にはCdxのみならず複雑な形態形成遺伝子間の相互作用があることが明らかになりつつある。一方腸上皮化生を介する発癌経路は、胃癌のみならずBarrett食道癌、胆道癌、膵癌など他の臓器においても存在する。今後、腸上皮化生の形成とそれを経由する発癌機構の解明は、高齢化社会における疾病機構の解明の重要な課題であり、今後も研究を継続する予定である。
高感度小型磁気共鳴力計測装置による早期アポトーシス検出技術の開発（国際共同研究強化）

より迅速な細胞診断をするために、本研究ではハイスループットで個々の細胞が測定できるフローサイトメトリーと非侵食で細胞内部の活性濃度を直接測定する電子スピン共鳴力計測法に着目した。ラジカルの濃度を計測するための微小振動子を用いて大気圧下液中にいる細胞を計測対象とするために、真空封止型の磁気センサの開発を行った。また、ダイヤモンド膜内にあるNVセンターを有するプローブを作製し,それが蛍光強度計測に基づく磁気プローブセンサとして応用することができることを示した。また、アポトーシス等を起こした細胞の質量変化(数ピコグラム)を計測できるような振動型のマイクロ流路の開発を行った。内定年度:2015細胞診断のためのフローサイトメトリの実証のためには,マイクロ流路デバイスと融合させた走査プローブの開発を早急に進める必要がある。そこで、マイクロ流路デバイスの作製と高感度な走査プローブとして期待されるNVセンターを有するダイヤモンドプローブの開発のための基礎実験として、ナノダイヤモンド微粒子のもつNVセンターを利用して、蛍光強度が応力応答に依存し、力学応答センサとして応用することが可能かを検証した。具体的には、フローサイトメトリのためのマイクロ流路デバイスを、アセンブリングによる新たなマイクロ流路の構築技術を東北大学で開発している。また、電子スピン共鳴法(ESR)による高感度磁気共鳴観測のため,ダイヤモンド微粒子の蛍光感度の応力応答性に着目し、マックスプランク研究所のPhysics at Interfacesグループが所有する、蛍光顕微鏡(FCS)と原子間力顕微鏡(AFM)の複合装置を構築して、蛍光特性を有するダイヤモンドナノ微粒子の蛍光特性の応力特性評価を進めた。東北大学より、ガラス基板上にダイヤモンドナノ微粒子をほどよく分散させたサンプルを準備した。マックスプランク研究所では、まず、基板上に分散させたナノダイヤモンド微粒子の蛍光特性の計測環境の最適化を進めた。また、ナノダイヤモンドの蛍光特性は、2.87GHzの電磁波により走査することが可能で、2.87GHzもの高周波の電磁波を効率的にナノダイヤモンド微粒子に照射するためのコイルの設計や作製、FCSへのセットアップを行った。FCSによる計測強度計測では、数百ミリワットのレーザー励起光による照射で数十kHzの光子カウンティングするという好条件を見いだし、蛍光強度計測を実施することができた。東北大学ではアセンブリングによるマイクロ流路の開発を進めた。共同研究先であるドイツ・マックスプランク高分子研究所に行き、東北大学で準備したサンプルを用いて、研究計画に上げていたNVセンターを有する蛍光プローブ評価のためのAFMや蛍光顕微鏡との複合観察装置を構築することができた。細胞が起こすアポトーシスを早期発見するマイクロ流路デバイス型フローサイトメトリーのための電子スピンプローブの開発とマイクロ流路型の質量センサの開発を行った。そこで、高感度な電子スピンプローブとして知られているダイヤモンド微粒子のもつNVセンターを利用して、NVセンターを有するプローブを作製し,蛍光強度が応力応答に依存し,力学応答センサとして応用することが可能かを検証し,アポトーシスを起こした細胞の質量変化(数ピコグラム)を計測できるような振動型のマイクロ流路の作製と,さらにその性能の実証を行った.具体的には, NVセンターを有するダイヤモンド微粒子をカンチレバー振動子の表面に分散付着させ,酸化ケイ素膜により固定し,ダイヤモンド微粒子の蛍光感度の応力応答性に着目し、カンチレバーの振動に応じた表面応力をNVセンターに印可し,NVセンターの蛍光特性の応力特性評価を行った.また,マイクロ流路作製には,振動子部と指示部を別々に作製しそれらを組み立てることで作製した.実際に,液体を流路に挿入し,質量変化の妥当性と質量分解能を求めた.磁石を近づけることでNVセンターを有するナノダイヤモンド微粒子の蛍光強度スペクトルが,結晶軸方向に関係して分離することを確認し,それらの各ピーク強度の変化を,ナノダイヤモンド微粒子を根元に配置固定したカンチレバー振動子の振動の位相との関係を観測した.その結果,NVセンターに印可される圧縮と引っ張りの応力に最も敏感なピークが存在することを確認し,その蛍光強度変化から走査型プローブの振動状態をモニタできることを示すことができた.また,組立式マイクロ流路デバイスを作製し,液体を流した状態で自励発振を起こさせ,流路型質量センサの質量分解能が1.04pgであり,アポトーシスを起こした細胞の質量変化を観測できるデバイスであることを示すことができた.より迅速な細胞診断をするために、本研究ではハイスループットで個々の細胞が測定できるフローサイトメトリーと非侵食で細胞内部の活性濃度を直接測定する電子スピン共鳴力計測法に着目した。ダイヤモンドプローブの研究においては、ドイツ滞在期間中に得られた知見をもとに、東北大学内で応力を用いた微小磁気力計測の精査実験をすすめる予定である。また、細胞流路の作製評価を進める。国際共同研究を促進するために、ドイツ・マックスプランク高分子研究所に所属するより研究者を東北大学に招聘し、有機分子の熱応答、質量評価などを実施し、共著論文の出版などより多くのアウトプットが出せるようにする。マイクロシステム
立体電子効果によるシクロプロペン誘導体の開環制御

シクロプロペニルカチオン類と求核試薬とから付加によりシクロプロペン誘導体を中間に発生させ、これらの開環反応を制御することによって、諸種の生成物への誘導を行った。すなわち、トリス(アルキルチオ)シクロプロペニルカチオン類と求核試薬から生じるシクロプロペン誘導体を利用して、以下の合成反応を確立した。1.オキサゾール類およびイソニトリル類からピリジン誘導体の合成2.酸素転位を利用する不飽和カルボン酸類の合成以上1については、J.Heterocyclic Chem.に、2についてはJ.Chem.Soc., Chem.Commun.にそれぞれ報告した。
気道知覚神経終末からの神経性ペプタイド放出制御に関する研究

気道に存在する自律神経由来のペプタイドの役割と放出に関する研究を行った。方法はおもに、当科研費によって購入したフォ-ストランジュ-サ-による気道平滑筋の等尺性収縮力の測定によって行った。猫気管支には非アドレナリン作動性抑制神経が存在し、そのトランスミッタ-はペプタイドであろうと考えられている。私達は、この非アドレナリン作動性抑制神経のニュ-ロトランスミッタ-が、副交感神経運動枝終末からアセチルコリン放出を抑制することを示した。気管支喘息の病態に副交感神経の役割は重要で、非アドレナリン作動神経からのニュ-ロトランスミッタ-の放出制御は今後検討する予定である。知覚神経C線維はタキキニン等数種のペプタイドを有するが、その代表的存在であるサブスタンスP(SP)の咳反射に及ぼす影響を検討した。SPは健常人には咳を誘発しないが、上気道炎罹患後の人では10^<-15>モルと極めて低濃度で咳を生じた。この作用は上気道炎の軽快と共に消失し、交感神経刺激薬内服で阻止された。一方、アンギオテンシン変換酵素(ACE)阻害薬は広く高血圧症の治療に用いられるが、副作用として咳を生ずる。私達はACE阻害剤内服中に咳を生じた人を調べると、著しくブラディキニン吸入に対する咳反応が亢進していることを示した。これらより、ペプタイドは内因性咳誘発物質の可能性があり、交感神経刺激剤は鎮咳剤となりうる。知覚神経C線維からのペプタイドの放出をプロスタグランジンE_1(PGE_1)が強く抑制することが明らかとなった。又、PGE_1はカプサイシンによる神経原性炎症も抑制した。PGE_1は動脈閉塞症で既に人に使用されている薬剤である。今後、PGE_1の呼吸器疾患治療の可能性を検討する予定である。近年、各種神経性ペプタイドを有する知覚神経が呼吸器疾患及び呼吸機能に及ぼす影響とその機序に関する検討がされつつある。今回、神経性ペプタイド中代表的物質であるサブスタンスP (SP)と腸管作動性ペプタイド(VIP)の迷走神経からのアセチルコリン放出促進能及び咳嗽に及ぼす影響を検討した。イタチ器官を用い、フォーストランスジューサーにて、器官平骨筋の等尺性収縮を測定した。V IPは、10^<-6>モル濃度まで外来アセチルコリンによる収縮性を変えないが、10^<-12>10^<-9>モル濃度で電気刺激による収縮を増強するが、それより高濃度で逆に減弱した。従って、VIPは濃度依存性に、迷走神経終末よりアセチルコリンの遊離を促進又は抑制することが示された。VIPは非アドレナリン作動性抑制(NANC)神経のニューロトランスミッターと考えられているが、内因性NA NC神経の迷走神経終末らりのアセチルコリン放出能を猫気管支を用いて検討した。NANC神経刺激により、電気刺激による迷走神経性収縮は抑制されたが、外来性アセチルコリンによる収縮は変化しなかった。迷走神経性収縮の抑制は低周波で顕著であり、この成績より生体内でNANC神経は迷走神経からアセチルコリンの遊離を抑制している可能性が示唆された。人でSPにより誘発される咳を検討した。発生する咳の数に閾値を設定し、咳反応を定量化した。SPは健常人及び気管支喘息患者では10^<-5>モル濃度まで咳を誘発しないが、急性気管支炎患者では10^<-15>

モル濃度と極めて低濃度で咳を誘発した。しかし、急性気管支炎患者はヒスタミンに対しては咳を生ぜず、クエン酸に対しても咳反応の亢進を認めなかった。SPの主要分解酵素であるエンケファリナーゼの代謝産物であるSP_<1-9>の咳誘導能は著しく低下した。これより、急性上気道炎時にみられる咳にSPが関与しており、エンケファリナーゼがSPによる咳を調節している可能性が示された。私達は既に、プロスタグランジンE_2(PGE_1)が、知覚神経終末より神経性ペプタイドの放出を抑制することを観察した。そこで、PGE_1が実際に気道手細血管透過性亢進に伴う粘膜浮腫を防ぐか否かを検討した。ラットにカプサイシン(150μg/kg)を静注するとエバンズブル-の毛細血管外ろう出を起こすが、PGE_1を前投与するとエバンズブル-のろう出が用量依存性に抑制された。しかしPGE_1はサブスタンスPによるエバンズブル-の毛細血管外ろう出を全く防がないことより、PGE_1は知覚神経終末より神経原性ペプタイドの放出を抑制して、神経原性炎症を防ぐと考えられた。PGE_1は既に動脈閉塞症等の治療に用いられており、今後呼吸器疾患、殊に炎症性呼吸器疾患に対する有用性を検討する予定である。更に、知覚神経終末よりペプタイド放出を防ぐ物質として、私達の発見したPGE_1の他にニュ-ロペプタイドY、GABA、アルファ-アドレナリン作動薬、オピオイドが知られているが、これらの物質は細胞内のセカンドメッセンジャ-であるサイクリックAMP(cAMP)を上昇させて作用している可能性がある。私達はダイブチルcAMPをモルモットの気管支に投与して、電気刺激による非アドレナリン、非コリン作動性の収縮を検討した。ダイブチルcAMPはペプタイドによる非アドレナリン、非コリン作動性収縮を完全に抑制するが、迷走神経性収縮は抑制しなかった。以上より、アセチルコリン夜出とペプタイド防出の細胞内制御機序が異なることを示唆する。今後、更に細胞内セカンドメッセンジャ-の知覚神経性ペプタイド防出制御に関する検討を予定している。
マグネシウムイオンに着目した葉緑体チラコイド構造の制御機構の解明

植物の葉緑体はチラコイドと呼ばれる膜構造体を有しており、光合成の場として重要な役割をしている。チラコイドは光環境に応じてダイナミックに構造を変化させことが知られている。この構造変化には葉緑体内のマグネシウムイオンの変化が重要であると推測されているが、その決定的な証拠は得られていない。本研究は、光環境による葉緑体内部構造の制御機構をマグネシウムイオンに着目して研究する。本研究では、蛍光タンパク質MagFRETによる葉緑体内マグネシウムイオン濃度のin vivo測定系の確立を通して、葉緑体内におけるマグネシウムイオン恒常性の制御機構と、チラコイド構造変化に着目したその生理学的意義を実証する。今年度は、昨年度から引き続き本研究の要となるMagFRETによる葉緑体内マグネシウム濃度測定系の確立を目指した。シロイヌナズナから単離したプロトプラストを用いた一過的発現系を用いて、葉緑体移行型MagFRETの植物内発現・蓄積に最適なプロモーター及び葉緑体移行シグナル配列を探索した。その結果、植物シキミ酸経路で働く3-deoxy-D-ardbino-heptulosonate 7-phosphate synthase 1 (DHS1)のプロモーター及び葉緑体移行シグナルを融合したMagFRET形質転換プロトプラストでは、Cerulean/Citrine由来の青/黄色の蛍光シグナルが葉緑体ストロマ領域に観察された。本プロトプラスト由来のCitrine/ Cerulean蛍光比からストロマ内マグネシウム濃度が概算され、文献値と比較しても妥当な値となった。MagFRET蓄積形質転換体の作成の際に、最適なプロモーターと葉緑体移行シグナル配列の組み合わせを選抜するのに時間を要したため。本コンストラクトを用いてシロイヌナズナ野生型に形質転換をし、系統の確立を行っている。系統の確立後は、様々な光環境下でのマグネシウム濃度の測定を行い、チラコイド構造との関連付けを行っていく。本研究では、光環境による葉緑体内部構造の制御機構をマグネシウムイオンに着目して研究する。蛍光タンパク質MagFRETによる葉緑体内マグネシウムイオン濃度のin vivo測定系を確立し、葉緑体内マグネシウム濃度の改変がチラコイド及び光合成に与える影響を検証する。さらに葉緑体マグネシウム濃度制御に関わる分子の機能解析を行う。初年度は本研究の要となるMagFRETによる葉緑体内マグネシウム濃度測定系の確立を目指した。シロイヌナズナ内での発現にコドンを最適化したMagFRET配列に対して、HAタグをコードする配列を3`末端側に、ルビスコ小サブユニットRBCS1Aタンパク質の葉緑体移行シグナル部分をコードする配列を5`末端側に融合させた。上記配列を35Sプロモーター下で植物体内に発現させるベクター上に乗せ、シロイヌナズナ野生型Col-0に形質転換した。得られたT1形質転換候補に対して、遺伝子導入の可否をPCRにて確認したのち、MagFRET遺伝子の発現およびMagFRETタンパク質の蓄積をHAタグに対するウェスタンブロットによって確認した。しかし、得られた形質転換候補すべてにおいて、MagFRET-HAタンパク質の検出は認められなかった。葉緑体移行シグナルをRBCS1Aのものから別の葉緑体局在タンパク質(3-Deoxy-D-arabinoheptulosonate 7-phosphate synthase 1; DHS1)のものに置き換えて再度形質転換をしたが、本形質転換体候補でもMagFRET-HAタンパク質の蓄積は検出できなかった。植物におけるMagFRETを用いたマグネシウムイメージング系は前例がないため、植物体内でMagFRET-HAタンパク質が蓄積されにくい可能性がある。本可能性を検証するため、シロイヌナズナ野生型本葉から単離したプロトプラストへ一過的にMagFRETタンパク質を発現させた。しかし本実験においても、MagFRET由来の蛍光を発する細胞は認められなかった。一方でMagFRET遺伝子は正常に発現していることをPCRにより確認していることから、MagFRETタンパク質は葉緑体内で極めて蓄積しにくいタンパク質であることが推測できる植物の葉緑体はチラコイドと呼ばれる膜構造体を有しており、光合成の場として重要な役割をしている。

その結果、植物シキミ酸経路で働く3-deoxy-D-ardbino-heptulosonate 7-phosphate synthase 1 (DHS1)のプロモーター及び葉緑体移行シグナルを融合したMagFRET形質転換プロトプラストでは、Cerulean/Citrine由来の青/黄色の蛍光シグナルが葉緑体ストロマ領域に観察された。本プロトプラスト由来のCitrine/ Cerulean蛍光比からストロマ内マグネシウム濃度が概算され、文献値と比較しても妥当な値となった。MagFRET蓄積形質転換体の作成の際に、最適なプロモーターと葉緑体移行シグナル配列の組み合わせを選抜するのに時間を要したため。MagFRETは比較的分子量の大きいタンパク質であることから、細胞質で翻訳されたMagFRETタンパク質が葉緑体内に移行できなかった可能性もある。今後は、他のプロモーターや葉緑体移行シグナルを用いて、まずプロトプラスト内で安定的にMagFRETを蓄積する組み合わせを探る。その後、形質転換を行うことで、安定的に発現する形質転換系統の作出を行い、研究を進めていきたいと考えている。本コンストラクトを用いてシロイヌナズナ野生型に形質転換をし、系統の確立を行っている。系統の確立後は、様々な光環境下でのマグネシウム濃度の測定を行い、チラコイド構造との関連付けを行っていく。
整環の総合的研究とその応用

下記の5つの環の代数的構造を、主として、研究した.(1)半単純アルチン環上の歪部分多項式環に3つの異なる中心的冪等元が存在することを示した.更に、素根基の構造を決定すると共に素イデアルは極大イデアルで単項、又は冪等元であることを示した.(2)非可換付値環上のオーレ拡大は常に一般的ベズー環になることを示した.更に、オーレ拡大が十分に有界である必要且つ十分条件を見つけた.(3)非可換付値環上の接合積の素イデアルを分類することができた.(4)プリュファー環の局所システムを素イデアルを用いて分類することができた.(5)可換デデキンド環上の歪多項式環の素イデアルを分類し、素商環の構造を決定した.下記の5つの環の代数的構造を、主として、研究した.(1)半単純アルチン環上の歪部分多項式環に3つの異なる中心的冪等元が存在することを示した.更に、素根基の構造を決定すると共に素イデアルは極大イデアルで単項、又は冪等元であることを示した.(2)非可換付値環上のオーレ拡大は常に一般的ベズー環になることを示した.更に、オーレ拡大が十分に有界である必要且つ十分条件を見つけた.(3)非可換付値環上の接合積の素イデアルを分類することができた.(4)プリュファー環の局所システムを素イデアルを用いて分類することができた.(5)可換デデキンド環上の歪多項式環の素イデアルを分類し、素商環の構造を決定した.これらの成果の基に(a)Graded extensionsの素イデアルを研究するため、上記(3)の分類の性質を調べ、2つのタイプに分類することができた。次のステップとして、素イデアルの構造をこの二つのタイプ別々に調べる予定である。(b)K(X,σ)の中のGauss extensionsのresidue skew fieldの構造を決定することができた(基本的に2つのタイプがあることがわかった)。また、それらのタイプの例を構成することもできた。更に、H.Brungsにより提起された問題:任意の自然数nに対応する、the residue skew fieldが存在するか?に対して、肯定的解答を与えることができた。(1):Rをsemisimple Artinain ringでpartial actionαを持つと仮定する。更にR[x,α]をpartial skew polynomial ringとする。Rのcentral idempotentsが3つの異なるタイプに分類できる。この分類を基にして、R[x,α]のprime radical,及びprime idealsの構造を完全に決定した。特に、prime idealsはmaximalで、principalか又はidempotentであることを証明した。(3):(1)の成果はC*-algebrasの研究に応用されることが期待される。(1) Vをskewfield Kの中のtotal valuationring,Gをright ordered group,PをGのconeとする.さらに、crossed product algebra K*Gの商環Dが存在すると仮定する.Dの中のtotal valuation ring RでR∩K=Vを満たすRを研究した.そのようなRに対して、Gauss extensionという概念を定義し、prime idealsを分類することができた(Vのprime idealsとGの中のPのover coneの性質を用いて).(2)R/Pがhereditaryringになる必要かつ十分条件(3)R/Pがhereditaryringにならない必要かつ十分条件を与えることができた.Gauss integersを用いて、(1),(2)、(3)を満たす例も与えることができた.尚、これらの結果は、Arimendarizの肯定的解決をも与えている.(3) Prufer ringsのlocalizingsystemsをprime idealsを用いて完全に分類することができた.
底面流速解析法に基づく開水路三次元流解析法の体系化と非平衡流砂力学の新展開

本研究は,洪水流と河床変動に含まれる現象の多重スケール性やその現象解明,および流れの解析法に合わせたときに生じる既存の流砂解析法の課題の整理と高度化を目指し,洪水時の多重スケール構造の一体解析法の構築と,それに基づいた既存技術の体系化と非平衡流砂力学の新たな展開を目的としたものである.前者に対して,スケール間の相互作用は水深スケールで主に生じると考えられることから,大きなスケールの解析が可能な平面二次元解析法(2DC)の枠組で,水深スケールの三次元流れの解析法を底面流速解析法(BVC法)に基づいて開発する.BVC法は申請者らが独自に開発してきた解析法であり,湾曲二次流などの特定の三次元流れをモデル化しようとした従来の水深積分モデルの改良と異なり,水深スケールの三次元渦運動の支配方程式を導き,用いているために,様々の三次元流れを統一的に解析できる可能性がある.本年度は,流れ解析のベンチマーク問題を検討するために,急拡部段落ち部下流の流況の遷移過程を,必要条件と十分条件から明らかにした.また,蛇行部を流下する二つの特徴的な段波挙動を実験的に明らかにした.数値解析法の構築に関して,開水路流中の抵抗体の流体力特性を実験的に検討し,その評価法を提案するとともに,これまで困難とされていた水没植生群を有する流れの水深積分モデルに基づく解析法を提案した.後者に対して,河床波などの小規模スケールと河道全体の流れの相互作用を実験的に明らかにするとともに,混合粒径河床の移動床解析の持つ課題を示し,これを解決する新たな解析法を提案した.本研究では,三次元解析法に比べて計算コストが小さい平面二次元解析法の枠組みの中で,流れの三次元性と河床極近傍の流れ,河床せん断応力を解析できる,国内外に例のない非平衡粗面抵抗則を用いた非静水圧準三次元解析法に基づいた洪水流と河床変動解析法の高度化を目指している.これまでに急変段落ち流れ解析に関して,跳水形態と段波挙動について新しいベンチマーク問題を提案するとともに,開水路流中に抵抗体を有する構造物の流体力評価法と水没植生を有する流れの水深積分モデルを用いた解析法を提案している.また,河床変動に対して,流れと河床変動の多重スケール性に着目した実験結果や混合粒径河床の新たな解析法を非静水圧準三次元解析法とカップリングしやすい形で提案しており,本研究は順調に進展していると言える.ベンチマーク問題や新たな流れ解析法の発展など,解析法の高度化に関して更なる検討を行うほか,底面流速解析法を通して,単純化された解析法の提案や,現象解明技術,および既存解析技術の体系化について検討を行う.本研究は,洪水流と河床変動に含まれる現象の多重スケール性やその現象解明,および流れの解析法に合わせたときに生じる既存の流砂解析法の課題の整理と高度化を目指し,洪水時の多重スケール構造の一体解析法の構築と,それに基づいた既存技術の体系化と非平衡流砂力学の新たな展開を目的としたものである.前者に対して,スケール間の相互作用は水深スケールで主に生じると考えられることから,大きなスケールの解析が可能な平面二次元解析法(2DC)の枠組で,水深スケールの三次元流れの解析法を底面流速解析法(BVC法)に基づいて開発する.BVC法は申請者らが独自に開発してきた解析法であり,湾曲二次流などの特定の三次元流れをモデル化しようとした従来の水深積分モデルの改良と異なり,水深スケールの三次元渦運動の支配方程式を導き,用いているために,様々の三次元流れを統一的に解析できる可能性がある.本年度は,流れ解析のベンチマーク問題を検討するために,急拡部段落ち部下流の流況の遷移過程を,必要条件と十分条件から明らかにした.また,蛇行部を流下する二つの特徴的な段波挙動を実験的に明らかにした.数値解析法の構築に関して,開水路流中の抵抗体の流体力特性を実験的に検討し,その評価法を提案するとともに,これまで困難とされていた水没植生群を有する流れの水深積分モデルに基づく解析法を提案した.後者に対して,河床波などの小規模スケールと河道全体の流れの相互作用を実験的に明らかにするとともに,混合粒径河床の移動床解析の持つ課題を示し,これを解決する新たな解析法を提案した.本研究では,三次元解析法に比べて計算コストが小さい平面二次元解析法の枠組みの中で,流れの三次元性と河床極近傍の流れ,河床せん断応力を解析できる,国内外に例のない非平衡粗面抵抗則を用いた非静水圧準三次元解析法に基づいた洪水流と河床変動解析法の高度化を目指している.これまでに急変段落ち流れ解析に関して,跳水形態と段波挙動について新しいベンチマーク問題を提案するとともに,開水路流中に抵抗体を有する構造物の流体力評価法と水没植生を有する流れの水深積分モデルを用いた解析法を提案している.また,河床変動に対して,流れと河床変動の多重スケール性に着目した実験結果や混合粒径河床の新たな解析法を非静水圧準三次元解析法とカップリングしやすい形で提案しており,本研究は順調に進展していると言える.ベンチマーク問題や新たな流れ解析法の発展など,解析法の高度化に関して更なる検討を行うほか,底面流速解析法を通して,単純化された解析法の提案や,現象解明技術,および既存解析技術の体系化について検討を行う.
κ-ε乱流モデルの欠陥と改良モデルの提案

乱流現象を解明するためのアプローチの1つとして,レイノルズ方程式に様々な仮定と近似を用い,方程式を閉じさせる手法がある.最近ではκ-εモデルが乱流現象をある程度シュミレートすることのできるモデルとして注目を集めている.しかしながら実験結果とκ-εモデルによる数値解とは十分な一致が見られない場合が多い.乱流現象を代表する特性量として,乱れエネルギーκとエネルギー散逸率εを採用しクローズさせるのは妥当であると考えられるにもかかわらず,実測値との完全な一致が見られないのはκ-ε方程式を構成する項の普遍定数が十分正確に決定されていないことが原因の1つであると考えられる.本研究はこれら普遍定数の再評価・決定を目的とし,そのためにシンプルな乱流場での詳細な乱れの測定を行なった.まず,乱れの乱流拡散とエネルギー散逸の卓越した振動格子乱流・粗面振動乱流の実験を行ない, LDV・FLVを使って2方向乱れの同時測定を行なった.ついでグリセリンを加えて動粘性係数νを変化させた実験を行ない,乱れやεの拡散項とκやεの散逸項を評価し,定数を決定した.また,平均流による輸送項と散逸項がバランスした一様格子乱流での測定を行ない,定数を決定した.得られた普遍定数値は従来より与えられている値とやや異っており,この新しい定数を用いたκ-εモデルにより精度良い乱流場の解析値が大いに期待される.唯, ε方程式の生成項の定数C_<ε1>だけは今回の実験では決定出来なかったので,逆に数値実験を行ないフィッティングさせることにより決定される.得られた普遍定数値は以下のようである.C_κ=0.23, C_ε=0.138, C_<ε2>=2.0乱流現象を解明するためのアプローチの1つとして,レイノルズ方程式に様々な仮定と近似を用い,方程式を閉じさせる手法がある.最近ではκ-εモデルが乱流現象をある程度シュミレートすることのできるモデルとして注目を集めている.しかしながら実験結果とκ-εモデルによる数値解とは十分な一致が見られない場合が多い.乱流現象を代表する特性量として,乱れエネルギーκとエネルギー散逸率εを採用しクローズさせるのは妥当であると考えられるにもかかわらず,実測値との完全な一致が見られないのはκ-ε方程式を構成する項の普遍定数が十分正確に決定されていないことが原因の1つであると考えられる.本研究はこれら普遍定数の再評価・決定を目的とし,そのためにシンプルな乱流場での詳細な乱れの測定を行なった.まず,乱れの乱流拡散とエネルギー散逸の卓越した振動格子乱流・粗面振動乱流の実験を行ない, LDV・FLVを使って2方向乱れの同時測定を行なった.ついでグリセリンを加えて動粘性係数νを変化させた実験を行ない,乱れやεの拡散項とκやεの散逸項を評価し,定数を決定した.また,平均流による輸送項と散逸項がバランスした一様格子乱流での測定を行ない,定数を決定した.得られた普遍定数値は従来より与えられている値とやや異っており,この新しい定数を用いたκ-εモデルにより精度良い乱流場の解析値が大いに期待される.唯, ε方程式の生成項の定数C_<ε1>だけは今回の実験では決定出来なかったので,逆に数値実験を行ないフィッティングさせることにより決定される.得られた普遍定数値は以下のようである.C_κ=0.23, C_ε=0.138, C_<ε2>=2.0
ベンチャー企業における会計システムの発展

まず、ベンチャー企業における会計システムについて文献研究を行った。その結果、ベンチャー企業の何らかの特性に基づいて類型化し、発展段階を記述・整理した研究はほとんどないことが判明した。会計システムの発展に関しては、新規上場における会計システムの整備についての要件が報告されているだけであった。これは、会社が上場する際、外部監査人による財務諸表監査が上場基準の一つであることから、財務諸表監査が実施できるほどの内部統制制度が整備されているか否かが要件とされるのである。上場が目的で、上場するのに足りる要件として会計システムの整備が求められている。本研究では、成功しているベンチャー企業では上場・非上場を問わず、会計システムが発展していると考え、会計システムの整備が成功の要件になっているとする研究仮説を立て、中小企業において会計システムの整備状況をアンケート調査することにした。ベンチャー企業の多くが上場を目指すが、上場を目指している企業とそのような意図を持たない企業を外部から区別することは非常に困難である。経営者の意図だからである。そこで、アンケート調査を実施する際には、現状だけではなく、過去についても調査項目を設けることによって、企業がどのように会計システムを発展させているかを調査することにした。これにより、上場しようとしているかどうか不明の企業にアンケートを発送し、回答を得ることで、ベンチャー企業の成功要因としての会計システムの整備状況を間接的に調査することにした。本年度はアンケートでの調査項目の選定を研究課題とした、この課題はほぼクリアした。次年度にアンケート調査を実施する予定である。
現代アイルランド詩および演劇における西洋古典文学の役割

当初の研究計画はアイルランドの現代詩および現代劇における古典文学の影響を究明することであった。但し、アイルランドとイギリスの現代詩は互いに影響を及ぼして活性化しているところがあるので、両者における古典文学の影響に焦点を当てるのがより生産的なものになると思われた。この研究成果は3点あり、ひとつは国際会議で数多く口頭発表したこと、さらに査読付き学術誌に論文が掲載されたこと、くわえて研究書を出版できたことである。本研究の一年目の間、コンピュータ等必要な設備を購入し、多くの資料を収集しました。これから論文を書く作業に力を入れることができます。さらに、2009年9月に英国に行ってきました。シェフィールド大学とシェフィールド・ハラム大学で資料調査を行い、Professor Neil RobertsとDr Matthew Boswellと打ち合わせができました。北アイルランドのクイーンズ大学(ベルファスト)でも資料収集を行いました。2010年3月に東北大学のDr Miki Iwataと打ち合わせをしました。この調査の結果、本研究の範囲を少し修正し、演劇より詩に焦点を当てるつもりです。さらに、アイルランド人詩人に対して、英国人詩人の影響を考慮することも本研究の計画に追加する方針です。研究業績として、平成21年度に二つの論文を出版し、Paul Muldoonに関する論文を査読付き学会誌に送るところです。今年北海道大学メディア・コミュニケーション研究院の学会誌Media and CommunicationStudiesに論文を提出する予定です。平成22年度に二つの学会発表の準備も進めています。今年、近代詩に対して古典文学の影響という研究を続け、論文執筆と学会発表を行った。2010年8月に英国へ出張し、シェフィールド大学とサルフォード大学とケンブリッジ大学で研究打ち合わせをした。その結果、研究プロジェクトに関して様々な助言をいただき、研究者ネットワークも広げた。シェフィールド大学の図書館で資料収集も行った。平成22年度に4つの学会発表をした(フィンランド、英国、米国、ニュージーランド)。発表の内容は主に英国とアイルランドの近代詩における神話の使用(特にMichael Longley, SeamusHeaney, Paul Muldoon, Ted HughesとChristopher Reidの詩)に関するものであった。すべての発表は、出席者が多く、貴重なフィードバックを受ける機会となった。さらに二つの発表を論文にし、国際的査読付き学会誌に提出した。平成22年度に4本の論文が査読付き学会誌によってアクセプトされた:北海道大学の紀要(2本)とEnglish Studies(1本)とIrish Studies(1本)。後者はアイルランド研究の一流学会誌で2011年の秋に出版される予定である。本論文はMuldoonの詩に対してヴァージルの影響を分析したものである。さらに、2011年2月に近代詩と牧歌的哀歌(the pastoral elegy)をテーマにした本の契約を調印した。この本は古典モデルの継続的影響を分析し、近代詩人がどうやって古典的構成を進化させたかを考慮するものである。原稿の締め切りは2011年9月で、執筆は順調に進んでいる。最後に今年Paul Muldoonの詩における古典的モチーフの影響に関する論文を書く予定である。二つの国際学会発表も予定されている。アイルランドの詩人や劇作家はこれまでかなりの分量の古典文学素材を翻訳あるいは翻案しており、かならずやこの研究は実りあるものとなり、現代アイルランドの文学作品のみならず古典文学の理解の幅も広げるものと思われた。この研究は現在盛んに行われている受容研究の一端を担うものであり、当該の作家と歴史を関連付ける際にこれまで支配的だったポストモダニズム、ポストコロニアリズム、ポスト構造主義の解釈に取って代わる視点をもたらそうとするものであった。研究1年目にイングランド、北アイルランド、日本各地の大学を訪問して調査したところ、計画に盛り込まれていた現代劇部門については他の研究者によってすでに研究し尽くされていることが判明したため、研究の目的と範囲を変更した。すなわち、アイルランドとイギリスの現代詩は互いに影響を及ぼして活性化しているところがあるので、両者における古典文学の影響に焦点を当てるのがより生産的なものになると思われた。研究2年目と3年目にはフィンランド、スウェーデン、日本、ニュージーランド、連合王国、アメリカ合衆国で開催された国際会議で口頭発表を行ったほか、第一級の査読付き学術誌に当該テーマに関する論文を発表した。本研究の主たる目的は研究書の出版にあったが、2010年2月に『イギリス・アイルランドの現代詩における牧歌的エレジー』の出版契約が整った。本書は最近の詩においても古典文学の素材が根強く人気を博していることを考察したものである。2011年9月に脱稿し、イギリスでは2012年3月に出版され、アメリカでは2012年の5月に出版予定である。