hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
古墳時代木棺の展開過程における鎹の基礎的研究

本研究計画は、古墳出土の鎹を集成し、その具体的な使用の部位や方法を復元的に検討するための基礎的資料の収集を行い、鎹使用のあり方、棺構造、棺と槨の関係などを整理した上で、日本における鎹の出現と展開を、古墳時代木棺の総体的な展開過程、さらには東アジアにおける棺槨の大きな流れの中に位置づけることを目的とする。最終年度である本年度は、昨年度に引き続き、主として文献収集による古墳出土の鎹と出土古墳の発掘調査データの収集、出土鎹資料の詳細な観察に基づく調書作成等を実施した。保管機関における作業は、中・後期古墳出土の事例を中心に、のべ11機関に赴いて行い、簡易な実体顕微鏡等を使用して、鎹そのもの、および付着した木質の詳細な観察とともに、調書の作成、画像データ等の収集を行った。3年間にわたる一連の作業の結果、鎹の出土状態、鎹に付着する材(の痕跡)の類型化、その他の付着物、鎹そのものの変形などに着目し、それらの情報をパターン化して整理、検討することで、鎹の具体的な使用法を明らかにする方法論を確立することができた。結論的には、鎹の使用法には中期古墳に特有のあり方と後期古墳に特有のあり方があり、棺形態の上でも、前者は割竹形木棺・長持形木棺、後者は釘付式木棺を主体とする点で差異があることを明らかにした。少なくとも前者の使用法は、朝鮮半島東南部の木槨墓や石槨墓に顕著に見られるあり方と共通する。また、鎹を使用した木棺構造についても、従来あまり知られていなかった細部についての復元案を示すことが出来た。これらの成果については研究成果報告書として取りまとめ、公表した。日本考古学本年度は、昨年度に引き続き、主として文献収集による古墳出土の鎹と出土古墳の発掘調査データの収集、出土鎹資料の詳細な観察に基づく調書作成等を実施した。保管機関における作業は、当初6機関程度を想定していたが、のべ4機関において実施できた。本研究の目的を達成するためには、出土鎹資料の詳細な観察にもとづき、鎹の具体的な使用部位、使用方法を復元的に検討するための方法論の確立が不可欠である。本年度は、鎹の出土状態、鎹に付着する材(の痕跡)の類型化、その他の付着物、鎹そのものの変形などに着目し、それらの情報をパターン化して整理し、総合的に検討することで、鎹の具体的な使用法を明らかにする方法論についてとりまとめることができた。本年度は、主として文献収集による古墳出土の鎹と出土古墳の発掘調査データの収集、出土鎹資料の詳細な観察に基づく調書作成等を実施した。保管機関における作業は、当初6機関程度を想定していたが、のべ8機関において実施できた。また、本研究の目的を達成するためには、出土鎹資料の詳細な観察にもとづき、鎹の具体的な使用部位、使用方法の復元的な検討するための方法論の確立が不可欠である。本年度に実施した資料の観察作業を通じて、鎹に付着する材(の痕跡)の類型化について一定の見通しが得られるとともに、その効率的な観察手法をほぼ確立できたと考えている。次年度も引き続き、主として文献収集による古墳出土の鎹と出土古墳の発掘調査データの収集、出土鎹資料の詳細な観察に基づく調書作成等を実施する。本年度から、中期古墳出土の事例に加え、後期古墳出土の事例についても作業を進めているが、次年度も同様とする。内容として、本園度と同様、簡易な実体顕微鏡等を使用して、鎹そのもの、および付着した木質の詳細な観察とともに、調書の作成、画像データ等の収集を行う。また、本年度は収集資料のデータベース化を行い、総合的な考察を加えた報告書を作成する予定である。保管機関における作業は、中期古墳出土の事例に加え、後期古墳出土の事例についても進めていく予定である。内容としては、本年度と同様、簡易な実体顕微鏡等を使用して、鎹そのもの、および付着した木質の詳細な観察とともに、調書の作成、画像データ等の収集を行う。
アーキアにおけるイノシトールキナーゼとリン酸化イノシトールの生理学的役割の解明

アーキアにおけるmyo-inositol kinaseの生理学的役割の解明を目的とし研究を進めた。まず、本酵素がinositolの6つのヒドロキシル基の内3位をリン酸化し、生成物がinositol 3-phosphateであることを同定した。また、本遺伝子の発現量が上昇する培養条件を同定した。さらに、超好熱性アーキアThermococcus kodakarensisにおいてinositol kinase遺伝子の破壊株を作製・解析し、その増殖特性解析やメタボローム解析を行った。まず、超好熱性アーキアThermococcus kodakarensis由来のイノシトールキナーゼ(TK2285)がイノシトールのどの位置のヒドロキシル基をリン酸化しているかを同定することを目指した。TK2285反応産物のNMR解析とキラルカラムを用いたLC-MS解析に加えヒドロキシル基が欠けたイノシトール誘導体に対する活性測定解析を行った。その結果、本酵素はイノシトールの3位のヒドロキシル基をリン酸化していることが明らかとなった。イノシトール3-リン酸は、浸透圧調整物質の生合成に利用されたり、グルコース6-リン酸に変換された後に解糖系によって代謝されることも可能である。よって、リン酸化されていないイノシトールを産生する経路は不明であるが、本酵素によりイノシトールを再び代謝できる化合物に変換、つまりリサイクルできる可能性が示唆された。次に、TK2285認識抗体を用いたWestern blot解析により、TK2285の発現を活性化する培地条件を検討した。その結果、多糖を添加した培地(解糖条件)に比べてピルビン酸を添加した培地(糖新生条件)の方がTK2285の発現量が多いことが明らかとなった。また、ピルビン酸培地にさらに4種のヌクレオシド(アデノシン、ウリジン、グアノシン、シチジン)を添加した培地で発現量が明確に上昇した。今後、これらの培地条件でTK2285の発現量が上昇する理由を検討し、生理的役割の解明につなげる。さらにTK2285遺伝子破壊株を作製し、その増殖が抑制される培養条件を探索した。上記の解糖・糖新生条件で培養を行ったところ、解糖条件において増殖が若干悪化した。意外なことにTK2285の発現が活性化される条件と破壊株の増殖が抑制される条件は異なっていた。また、培地にイノシトールを添加した条件での培養を検討したが、野生株ですら増殖は亢進せず、少なくとも現在検討している条件では外部からイノシトールを取り込んで同化している可能性は低いことが示唆された。超好熱性アーキアThermococcus kodakarensisにおけるmyo-inositol kinase(TK2285)の生理学的役割の解明を目指して研究を進めている。本年度はまず、高温および高浸透圧というストレス条件下におけるTK2285遺伝子破壊株および宿主株の増殖特性を比較した。人工海水の濃度を至適濃度の1.5倍とした培地においては宿主と破壊株の間で増殖の差は見られなかった。一方で、至適生育温度である85°Cに対して90°C(ストレス条件)での増殖を検討した結果、解糖条件の培地においてTK2285破壊株では宿主と比べて明らかな増殖の悪化が見られた。さらに、TK2285のタンパク質量をWestern blotにより解析したところ、解糖・糖新生条件にかかわらず85°Cと比べ90°Cにおいてそのタンパク質量が有意に増加していることが明らかとなった。また計画の通り、1宿主vsTK2285遺伝子破壊株、2myo-inositol添加vs非添加、3Nucleoside添加vs非添加、またそれに加え今年度同定した4解糖条件の85°Cvs90°Cにおける全遺伝子転写量の変動をDNAマイクロアレイを用いて解析した。その結果の中で特筆すべきものとして、1のTK2285遺伝子破壊株においてprefoldin構成遺伝子の転写量が宿主と比べ増加していたことがあげられる(3-4倍)。Prefoldinは変性タンパク質の崩れた折りたたみ構造を正しいものに戻すために、変性タンパク質をシャペロニンに運ぶ役割があるとされている。TK2285遺伝子破壊株においてprefoldinの転写量が増加したことから、TK2285も本来はタンパク質の安定化に関わる機能を担っている可能性が予測された。以上の結果からTK2285は高温ストレス応答に寄与している可能性が考えられる。本年度に予定していた実験は全て順調に行い、TK2285が高温ストレスに応答に何らかの寄与をしていることを明らかにできた。これにより、最終目標である生理学的役割の同定に大きく近づいたと考えている。よって概ね順調に進展していると考えられる。本研究ではアーキアにおけるmyo-inositol kinaseの生理学的役割の解明を目的として研究を行った。初年度および2年目までには、本酵素がinositolの6つのヒドロキシル基の内3位をリン酸化し、inositol 3-phosphate(Ins3P)を生成することを明らかにした。Ins3Pはヒートショックなどに対応するための適合溶質の生合成基質になり得る。

また、超好熱性アーキアThermococcus kodakarensisにおいて本酵素をコードする遺伝子の破壊株を作製・解析したところ、解糖・高温条件(90°C)で増殖が悪化すること、および熱変性したタンパク質の折り畳みに寄与し得るprefoldinの転写量が増加していることを明らかにできた。また、本遺伝子の発現量が高温条件下の培養で亢進することも明らかとなった。これらのことから、本酵素は高温ストレス適応機構に寄与していることが示唆された。最終年度は、本機構の分子メカニズムの解明のため、メタボローム解析を中心に研究を進めた。まず宿主株および本遺伝子の破壊株を上記の増殖に差が出る条件で培養し、各細胞から、適合溶質を含む化合物群を抽出した。抽出化合物群のNMR解析の結果、宿主のみで大きくなるケミカルシフトが見出された。これはserineである可能性も考えられたため、serine生合成および代謝経路の解明を進めたが、本酵素とは異なるkinaseが機能していることが明らかとなった。そこで、宿主特異的に検出される化合物の同定を目指し、抽出化合物群のHPLC解析を進めた。その結果、宿主株で特異的に検出されるピークを見出すことができた。その化合物の同定を進めた結果、200-210 nm付近に吸光を示すことが分かり、またLC-MS解析によってその分子量を同定できた。さらに、HPLCによる精製条件を確立し、精製化合物のNMR解析を行った。その結果、本化合物はリン原子を含むことが示唆された。今後、本化合物の構造決定を行い、論文を作成する。平成26年度の計画として、A:イノシトールキナーゼがリン酸化するヒドロキシル基の同定、B:イノシトールキナーゼの発現を活性化する条件の検討、C:イノシトールキナーゼ遺伝子破壊株の作製および解析、の3つを予定していた。上述の研究実施の概要の通り本年度は、A:イノシトールキナーゼがイノシトールをリン酸化する際のリン酸化ヒドロキシル部位が3位であることを同定し、B:TK2285が解糖条件より糖新生条件で発現量が多いこと、およびピルビン酸添加培地にヌクレオシドを添加するとさらに明確に発現が活性化されることを明らかにし、C:TK2285遺伝子破壊株の作製に成功し、解糖条件で若干増殖が抑制されることを明らかにした。発現活性化条件に関してはまだ検討しきれていない条件もあるが、予定していた3つ全ての項目についてポジティブな結果を得ることができたため、おおむね順調に進展していると判断した。本年度の結果から、TK2285は(特に解糖条件における)高温ストレス応答において機能することが予測された。今後はこの分子メカニズムを解明し、生理学的役割の解明を目指す。Inositolはタンパク質の安定化にも寄与するとされているcompatible soluteの原料となりえるため、TK2285はcompatible soluteの生産に寄与している可能性が考えられる。
上下振動している微細構造物の高精度3次元形状測定法の開発

垂直走査型の白色干渉形状測定法では装置と測定対象を一定間隔に保ち,測定ヘッドを数十nmステップで近づけながら,毎回干渉像を記録する必要があり,振動環境下では使用不可能だった.開発した手法では垂直走査型白色干渉顕微鏡内にレ-ザ光を持ち込み,白色光と同軸で被測定面に照射し,レ-ザ干渉像を高速ラインカメラで取り込む.この干渉像をFPGAで高速処理し光路差変化をnm精度で抽出して,撮影が必要となる光路差のタイミングで白色光をフラッシュさせることで,振動環境下でも段差を持つ微細構造物の3次元形状を高精度に測定できるようになった.垂直走査型の白色干渉形状測定法では装置と測定対象を一定間隔に保ち,測定ヘッドを数十nmステップで近づけながら,毎回干渉像を記録する必要があり,振動環境下では使用不可能だった.開発した手法では垂直走査型白色干渉顕微鏡内にレ-ザ光を持ち込み,白色光と同軸で被測定面に照射し,レ-ザ干渉像を高速ラインカメラで取り込む.この干渉像をFPGAで高速処理し光路差変化をnm精度で抽出して,撮影が必要となる光路差のタイミングで白色光をフラッシュさせることで,振動環境下でも段差を持つ微細構造物の3次元形状を高精度に測定できるようになった.下記に箇条書きの研究実績を記載する.1.半導体レーザ光源を顕微鏡に導入するための半導体レーザ光源導入用ステージと,半導体レーザ光による干渉画像を読み取るためのラインカメラ接続部を設計製作して,顕微鏡に装着し,リレーレンズ等の光学系を調整してそれぞれが所定の部分を照明ならびに撮像できるようにした.2.半導体レーザ光源(波長407nm)を上記ステージを使って顕微鏡に組み込んだところ,カメラでの撮像干渉光強度が非常に低くなってしまうことが判明.この原因は,干渉対物レンズの半透明鏡が波長407nmの短波長光を想定していなく,その光に対し半透明鏡の反射率がかなり低いためであることが分かった.この半透明鏡を交換する方法や,波長の異なる半導体レーザ素子を使用して解決を図る方法を検討し,最終的に発振素子を変更し波長を473nmに変更する方法を採用した.その結果,十分に強い干渉光強度の信号を得た.3.実際に半導体レーザー光の干渉信号をカメラに取り込んで後,光路差を振動環境下でリアルタイム測定するためのアルゴリズムを検討した.光路差を変える時の干渉光強度変化のモジュレーションやオフセットは画素によって大きく違っている.これらは画素毎に違っていても光路差変化に対しては一定値だろう想定していたが,このモジュレーションやオフセットが光路差を変える時に大きく変化する画素も多く観察された.この現象は高精度な光路差計測をかなり難しくすると予想する.光路差計測法としていくつかの方法を計画していたので,これらの方法を個別に適用しながら,より高精度な計測方法を開発中である.4.FPGAボードを導入し,ラインカメラのデータを取り込んで高速に処理できるようにした.上記の3を開発中であるために,最終的なアルゴリズム処理には至っていない.下記に,研究実績を箇条書きに記載する。1.光路差が変わる時の干渉光強度変化のモジュレーションやオフセットは測定対象となる物体の微細形状とカメラ画素の相対位置によって大きく異なる。また,大きな光路差の変化と共にそれらの値は変動もする。この現象は高精度な光路差計測をかなり難しくする。そこで,光路差が数波長変化する毎にモジュレーションやオフセットを更新する方法をアルゴリズム検証プログラム(リアルタイム測定はできない)に組み込み,誤差を改善できるようにした。標準段差試料を用いての実際の干渉画像データをアルゴリズム検証プログラムで処理した結果,誤差はかなり改善できた。更新頻度だが,5波長毎の更新を2波長毎に変更しても測定結果には大きな違いが出なかった。2.上記のように改良したアルゴリズムを基にFPGAボード用VHDLプログラムを開発し,これをFPGAボードにダウンロードしラインカメラのデータをFPGAボードに直接取り込んでトリガー信号を出せるようにした。また,FPGAボードが処理した中間データをボード外部に出力させ,その出力結果とアルゴリズム検証プログラムによる処理結果を比較して,動作がほぼ正しく動いていることを確認した。3.測定対象が鏡面でなく粗面となる場合についての,レーザ光干渉データを2次元カメラ撮影により集めた。また,本方法をミロー型対物レンズに応用する場合に関しても干渉データを集めた。また,これらのデータから粗面やミロー型対物レンズを用いる場合のデータ処理に関して検討した。段差を持つ微細構造物の3次元形状を極めて高精度に測定しようとする場合,白色干渉を使う方法が現在広く用いられる.この方法では被測定物体をほぼ完全な静止状態に保ち,測定ヘッドを物体に数十nmずつ近づけ(もしくは遠ざけ)ながら,その都度,白色干渉像を多数枚取り込む必要がある.この時の移動精度は得られる計測精度に深く関わるため,製造現場などの振動環境下では,この測定法はほとんど使用不可能だった.本研究では白色干渉顕微鏡内に短波長のレーザー光を持ち込み,白色光と同軸で被測定面に照射し,レーザーによる物体の干渉縞を顕微鏡に追加的に装着した56kHzの高速ラインカメラで取り込んだ.この干渉縞をFPGA(Field programmable gate array)で高速処理することで,振動環境下にあっても56kHzで光路差変化をnm精度で計測できるようになった.これを使って数十nmの所定量移動毎に白色光源をフラッシュ(1ms間)点灯し,白色干渉縞を2次元カメラに多数枚取り込む方法により,干渉計に強制的に導入した振幅100nm,周波数10Hzの振動環境下でも,段差を持つ微細構造物の3次元形状を高精度に測定できた.

また,測定対象物体が粗面になった場合に用いるべき光路差変化測定法に関しても検討した.細かな凹凸を持つ粗面の場合,光路差変化と共にピンボケで各画素でのモジュレーションやオフセットが大きく変化する.そこで,ESPI(Electronic Speckle pattern Interferometry)の手法の適用を考えた.そしてレーザー干渉画像を2次元カメラで取りこんでラインカメラに相当する線上データを抜きだし,ESPIの手法を適用する実験を種々行い,振動下でも粗面を持つ物体の形状測定を行うための貴重な指針を得た.
各種抗がん剤による温度感覚異常に温度感受性チャネルが関与するのか?

【背景】現在の痺れや痛みを主訴とするような末梢神経障害には、冷覚異常、刺痛、灼熱感、感覚鈍麻などの様々な症状があり、その治療は画一的な対症療法(症状を軽減する治療)が現状である。今回の申請研究の目的は、パクリタキセルによる冷覚異常の発症メカニズムに焦点を当て、その治療原理の確立に必要なエビデンスを構築することにある。【方法】はじめに、末梢神経障害モデル動物の作製と神経毒性評価を行った。ウィスター系雄性ラットにパクリタキセルを投与し、その神経毒性を調べるためにオスミウム・トルイジンブルー染色法にて脊髄後根部位を形態学的に評価した。また、冷刺激に対する感受性異常を評価するために、アセトン試験による行動学的解析を行った。さらに、温度感受性チャネルのタンパク質発現レベルを、温度感受性チャネル(TRPV1, TRPV4,TRPM8及びTRPA1)の各種特異抗体を用い、ウエスタンブロット法にて解析した。【結果・考察】パクリタキセル投与による末梢神経障害モデルラットにおいて、冷刺激による痛覚異常が認められた。また、パクリタキセル投与ラットの後根部位において、有髄神経での軸索間隙の拡大が若干認められたものの、明らかな形態学的差異を認めなかった。このモデルラットを用いて、パクリタキセルによる各種温度受容体の発現レベルを解析したところ、TRPA1の発現増加が2-4日目に認められた。一方、その他のTRPチャネルについては、パクリタキセル投与による発現の変動が認められなかった。これらの結果より、パクリタキセル(副作用として冷覚異常が知られている抗がん剤)を投与することにより、温度感受性チャネルであるTRPA1のタンパク質発現が増加することを明らかにした。したがって、パクリタキセルによる冷覚異常にTRPA1が一部関与することが考えられる。
生体活性処理したチタンへの破骨細胞の接着と骨改造(in vitro)

ハイドロキシアパタイト(HAP)をコートしたチタン上において,骨改造現象に関与する骨髄細胞,破骨細胞の挙動を分子生物学的ならびに超微構造的に調べ,長期に安定した人工歯根を得るための最適な表面改質に関する基礎資料を得ることを目的とする.1.平成16年度の研究計画についての点検評価1)HAP薄膜の形成チタン材表面にHAP薄膜を形成する手法としてエキシマレーザーアブレージョン法を用い,500,2000,5000Åの膜厚を作製して380°C,60分でアニーリングした結果,全ての膜厚で結晶化していることをX線回折で確認できたが,500Åでは2000,5000Åに比べて結晶化度が低かった.一方で,SEM観察では全ての膜厚で薄膜が均一に形成されていることが明らかとなった.2)HAP薄膜上での破骨細胞の培養マウス骨髄細胞と骨芽細胞のコラーゲンゲルを用いた共存培養系で破骨細胞を作製した.チタン板上およびHAP薄膜上で培養し,数種類のインテグリンmRNAの発現をリアルタイムPCR法を用いて解析したところ,HAP薄膜の有無で有意な差は認められなかった.また培養前後で両表面をSEM観察したが,特記すべき変化は認められなかった.2.総括チタン板上で形成されたHAP薄膜上で,マウス骨髄細胞が破骨細胞分化因子によってアクチンリングの形成おまびカルシトニンレセプターmRNAの発現量が有意に高かったことを平成15年度計画で明らかにし,HAPでコートドした人工歯根周囲では骨改造現象が盛んであることを考察した.さらに,本年度計画の結果から,成熟した破骨細胞はHAP薄膜を形成したチタン表面に影響を与えないことが明らかとなった.以上の結果から,エキシマレーザーアブレージョン法を用いたHAP薄膜は長期に安定した入工歯根を得るための表面改質の一つの方法であり得ることが示唆された.1.平成15年度の研究計画についての点検評価ハイドロキシアパタイト(HAP)をコートしたチタン上において,骨改造現象に関与する骨髄細胞,破骨細胞の挙動を分子生物学的ならびに超微構造的に調べ,長期に安定した人工歯根を得るための最適な表面改質に関する基礎資料を得ることを目的とする.(1)HAP薄膜の形成チタン材表面にHAP薄膜を形成する手法としてエキシマレーザーアブレージョン法を用いた.380°C,60分でアニーリングしX緑回折で結晶化していることを確認した.(2)HAP薄膜上での破骨細胞の分化誘導マウス骨髄細胞をチタン板上で形成された薄膜の上で、破骨細胞分化因子であるRANKLとM-CSF(マクロファージコロニー刺激因子)の存在下で培養し,1週間後に破骨細胞のマーカーであるアクチンリングの形成を,共焦点レーザー生物顕微鏡を用いて確認した.その結果,薄膜の存在下で非存在下のチタン板に比較して有意に高かった.さらに,RT-PCR法を用いてカルシトニンレセプターmRNAの発現量を検討したところ薄膜の存在下で有意に大きかった.以上の結果から,HAPでコートした人工歯根周囲では処理しない条件に比較して骨改造現象を盛んに起こしていることが予想される.一方で,コラーゲンゲルを用いた共存培養系で形成された破骨細胞をチタン板の上で培養し,各種の細胞接着関連遺伝子の発現の解析を行うことは今後の課題である.2.16年度の研究計画平成15年度に得た結果に基づいて,未解決の研究課題も含めて残りの研究計画について重点的に研究を進め,2年度にわたる研究を完成させたい.ハイドロキシアパタイト(HAP)をコートしたチタン上において,骨改造現象に関与する骨髄細胞,破骨細胞の挙動を分子生物学的ならびに超微構造的に調べ,長期に安定した人工歯根を得るための最適な表面改質に関する基礎資料を得ることを目的とする.1.平成16年度の研究計画についての点検評価1)HAP薄膜の形成チタン材表面にHAP薄膜を形成する手法としてエキシマレーザーアブレージョン法を用い,500,2000,5000Åの膜厚を作製して380°C,60分でアニーリングした結果,全ての膜厚で結晶化していることをX線回折で確認できたが,500Åでは2000,5000Åに比べて結晶化度が低かった.一方で,SEM観察では全ての膜厚で薄膜が均一に形成されていることが明らかとなった.2)HAP薄膜上での破骨細胞の培養マウス骨髄細胞と骨芽細胞のコラーゲンゲルを用いた共存培養系で破骨細胞を作製した.チタン板上およびHAP薄膜上で培養し,数種類のインテグリンmRNAの発現をリアルタイムPCR法を用いて解析したところ,HAP薄膜の有無で有意な差は認められなかった.また培養前後で両表面をSEM観察したが,特記すべき変化は認められなかった.2.総括チタン板上で形成されたHAP薄膜上で,マウス骨髄細胞が破骨細胞分化因子によってアクチンリングの形成おまび

カルシトニンレセプターmRNAの発現量が有意に高かったことを平成15年度計画で明らかにし,HAPでコートドした人工歯根周囲では骨改造現象が盛んであることを考察した.さらに,本年度計画の結果から,成熟した破骨細胞はHAP薄膜を形成したチタン表面に影響を与えないことが明らかとなった.以上の結果から,エキシマレーザーアブレージョン法を用いたHAP薄膜は長期に安定した入工歯根を得るための表面改質の一つの方法であり得ることが示唆された.
ネコ網膜水平細胞の機能分化の生理学的・分子生物学的研究…グルタミン酸受容体と周辺受容野修飾機構の関連…

ネコ網膜にはA及びB型の二種類の水平細胞が存在し、視細胞に抑制性フィードバックをかける事により周辺受容野を形成する事が知られているが、その機能分化については明らかにされていない。前年度の研究で、A、B型が樹状突起終末部で異なるAMPA/カイニン酸受容体サブユニット構成を持ち、特に、低親和性カイニン酸受容体サブユニットであるGluR6/7が、A型にのみ多く発現している事が明らかとなった。本年度は、グルタミン酸受容体サブユニット(GluR2/3,4,6/7)の局在を免疫組織化学電顕法を用いて調べた。HRP標識二次抗体の金粒子置換銀増強ペリオキシダーゼ法を用いた結果、リボンシナプス直下の水平細胞後シナプス側の電子密度内に、受容体の染色粒子が認められた。錐体視細胞シナプス終末部ではGluR2/3,4,6/7の全サブユニットが発現し、シナプス陵に沿った狭い膜電子密度の領域にその局在が限定されていた。それに対し、B型水平細胞のみにある桿体視細胞シナプス終末部では、GluR2/3だけがリボンシナプス直下の後シナプス側の電子密度内に局在していた。また、双極細胞の内、錐体視細胞シナプス終末部に接するOFF型双極細胞後シナプス側の電子密度内に、顕著なGluR6/7の局在が認められた。この事実は、魚類水平細胞のみならず有尾両生類OFF型双極細胞で、ドーパミンによるグルタミン酸応答の増大が認められる電気生理学的事実と合致し、ネコ網膜においても、プロテインキナーゼAにより直接燐酸化され得るGluR6サブユニットが、ドーパミンによりグルタミン酸応答を増大させる可能性を高めた。A型水平細胞はB型と異なり、明視野から暗視野へ移行した時に強固なギャップ結合が認められる事から、明視野下でドーパミンによるグルタミン酸応答の増大とギャップ結合の解離により、A型水平細胞の周辺受容野が深く、狭く修飾され、明視野でのedge-detectionに寄与する可能性が示唆される。本年度は、その機能分化を検討するために、グルタミン酸受容体サブユニット(GluR 2/3,2/4,4,6/7)の発現様式を、A、B型を染め分け得る抗カルビンデイン抗体との二重染色免疫組織化学法で調べた。その結果、樹状突起終末部は、A型では抗GluR4,6/7抗体で鮮明に染まったのに対し、B型ではこれらの抗体で明確に染まらなかった。抗GluR2/3,2/4抗体では両型とも濃く染まった。この研究でA、B型が樹状突起終末部で異なるAMPA/カイニン酸受容体サブユニット構成を持ち、特に、低親和性カイニン酸受容体サブユニットであるGluR6/7が、A型にのみ多く発現している事が明らかとなった。GluR6サブユニットは、プロテインキナーゼAにより直接燐酸化され、グルタミン酸応答を増大させ得る唯一のGluRサブユニットであり、この燐酸化が周辺受容野修飾機構に影響を与えると考えられる。GluR6とGluR7のC端末部はシーケンスホモロジーが高いため、今後は、それらのサブユニットに特異的なmRNA塩基配列を検出することによって、上記の発現サブユニットがGluR6である事を確認する必要がある。既に、GluR6及びGluR7に特異的な塩基配列を持つオリゴDNAプライマーを作製し、現在、10-20個のA型水平細胞のmRNAの抽出・精製、さらに、RT-PCRを実施中である。

A型水平細胞はB型と異なり、明視野から暗視野へ移行した時に強固なギャップ結合が認められる事から、明視野下でドーパミンによるグルタミン酸応答の増大とギャップ結合の解離により、A型水平細胞の周辺受容野が深く、狭く修飾され、明視野でのedge-detectionに寄与する可能性が示唆される。
マルチメディアを利用した日本語教育支援システムの開発

本年度は、3ヵ年計画の最終年度にあたり、データベースの拡充とともにこれまでの研究成果のまとめを中心に研究を進めた。具体的には以下の項目について研究を進めた。1.教材データベースの質的・量的拡充・テキスト教材を大幅に追加拡充・漢字辞書データベースにネルソン漢英辞典の部首番号を項目追加・単語辞書に専門分野を項目追加2.音声データベースの作成・約3000語の単語の発音データをデータベース化3.画像データベースの作成・約200語の単語の意味を表すイラストをデータベース化4.研究成果の公開・研究発表会の開催・研究報告書の作成本年度は以下のことについて研究を行った。【デ-タベ-ス班】(1)既に構築されている教材デ-タベ-スの種類、内容、量について検討を加え、量的拡大、質的拡充を図った。(2)日本語教育特有の属性デ-タ(例えば用例デ-タでは重文、複文といった文の種類や、疑問文か肯定文かといった区別等)を、それぞれの教材デ-タに付加した。(3)画像デ-タを教材デ-タベ-スとして活用するためのデ-タベ-ス構造について検討した。(4)日本語教育に実際に利用されている図、写真、スライド等の一次資料を収集し、コンピュ-タへの入力、属性デ-タの付加等を行う方式を検討した。【ソフトウェア班】(1)これまでの研究で開発されたプロトタイプのシステムの諸プログラムの見直し、整理・統合を行い、全体としてのレベルアップを図った。(2)画像デ-タを教材として活用できるようにするためのデ-タベ-ス化には、既存の画像処理技術だけでは十分ではなく、そのための諸技術(プログラム)や手法の開発を行った。(3)画像デ-タを教材として利用する教育的側面を検討し、そのために必要なソフトウェアについての仕様を決定した。【データベース班】(1)既に構策されている教材データベースの種類、内容、量について検討を加え、量的拡大、質的拡充を図った。(2)日本語教育特有の属性データ(漢字のコンポーネント分解、基本漢字レベル、分野別頻度、日本語教育特有の部首番号等)を、それぞれの教材データに付加した。(3)画像データを教材データベースとして活用するためのデータベース構造について検討した。(4)日本語教育に実際に利用されている図、写真、スライド等の一次資料を収集し、コンピュータへの入力、属性データの付加等を行った。(2)画像データを教材として活用できるようにするためのデータベース化には、既存の画像処理技術だけでは十分ではなく、そのための諸技術(プログラム)や手法の開発を行った。(3)画像データを教材として利用する教育的側面を検討し、そのために必要なソフトウェアについて、試作した。本年度は、3カ年計画の最終年度にあたり、データベースの拡充とともにこれまでの研究成果のまとめを中心に研究を進めた。1.教材データベースの質的・量的拡充・テキスト教材を大幅に追加拡充・漢字辞書データベースにネルソン漢英辞典の部首番号を項目追加・単語辞書に専門分野を項目追加2.音声データベースの作成・約3000語の単語の発音データをデータベース化3.画像データベースの作成・約200語の単語の意味を表すイラストをデータベース化4.研究成果の公開・研究発表会の開催・研究報告書の作成
酸化ストレスを消去する腸管作用型新規ナノ粒子を利用した動脈硬化抑制の試み

本研究では、pH非崩壊型ニトロキシドラジカル含有ナノ粒子(RNP-O)が動脈硬化を抑制しうるか、動脈硬化モデルLDL受容体欠損マウスを用いて解析した。コントロール群に比べてRNP-O群の動脈硬化形成は有意に減少した。体重、血中の総コレステロール、HDLコレステロール、non-HDLコレステロール、血中および腸管の酸化ストレスには、群間での差は認められなかった。腸内細菌叢の検討から、control群と比較してRNP-O群ではある特定の門に属する最近グループの減少が認められた。したがって、RNP-Oは腸管において腸内細菌叢の組成の変化を介して抗動脈硬化作用を発揮する可能性が示唆された。活性酸素種(ROS)は細胞・組織を障害し、動脈硬化の形成・促進に関与することから、酸化ストレスを除去する新しいテクノロジーは、動脈硬化症や血管合併症の予防・治療効果が期待される。我々は、動物実験にて、腸管で作用し過剰な酸化ストレスを除去する新規ニトロキシドラジカル含有ナノ粒子(RNP-O)の投与が動脈硬化を抑制することを見出した。そこで本研究では、RNP-Oによる動脈硬化抑制効果の評価とその分子メカニズムの解析を行い、RNP-Oの臨床応用への端緒とすることを目的とした。本年度は、RNP-Oが動脈硬化を抑制する分子メカニズムを、腸内細菌叢および腸管透過性から検討した。コントロールに比べて、RNP-Oを投与したLDLRKOマウスでは、腸内細菌叢の変化と腸管透過性に重要なoccludinの発現増加が認められた。RNP-Oの抗動脈硬化作用に、腸内細菌叢の変化を介した腸内環境の改善が関与する可能性が示唆され、現在その関連を解析中である。代謝内分泌学
植物の活性アルデヒド解毒代謝による環境ストレス耐性機構の解明

野外環境条件の変動は植物の葉での活性酸素生成を増大させる。細胞の抗酸化能は植物の最も重要な環境ストレス防御能のひとつである。1995年,ケント大学(ベルギー)のInzeらは,植物ゲノムから新たな抗酸化遺伝子を探索するため,シロイヌナズナcDNAライブラリを発現した酵母の酸化剤ジアミドに対する耐性スクリーニングを行い,新規な酸化還元酵素遺伝子を同定した。研究代表者はこの酵素の生理的基質を探索し,この酵素が過酸化脂質から生ずる毒性の高いα,β-不飽和アルデヒド(活性アルデヒド)のα,β-不飽和結合を還元し解毒する新規酵素2-alkenal reductase(AER)であることを明らかにした。本研究では植物の環境ストレスにおける活性アルデヒドの作用を解明することを目的とし,以下の成果を得た。(1)酸化的ストレスにより葉で生成するアルデヒド種の同定。葉緑体の活性酸素生成を促進するパラコートをシロイヌナズナ葉に与えると,C3およびC4活性アルデヒドであるアクロレインとクロトンアルデヒドが生成した。(2)活性アルデヒドによる光合成阻害。単離葉緑体にC3C9の活性アルデヒドを加えると,葉緑体のカルビン回路が特異的に阻害された。飽和アルデヒドは阻害が弱かった。チラコイド膜電子伝達活性は阻害されなかった。カルビン回路の複数の酵素が失活する,こと.がわかった。(3)AERによる葉の光酸素傷害防御。シロイヌナズナAER遺伝子を過剰発現させたタバコは,強光またはパラコートによる葉の光酸素ストレスおよびオゾンストレスに耐性を示した。以上の結果から,葉の光酸素ストレスにおいて活性アルデヒドが生成し,それが葉緑体カルビン回路を阻害するとともに細胞傷害をもたらすこと,AERによる活性アルデヒドの解毒は,光酸素傷害防御の重要な機能であることが明らかになった。過酸化脂質から生ずる2-アルケナール(活性アルデヒド)を特異的に還元・消去するシロイヌナズナ由来の新規酵素2-アルケナールαβ-ヒドロゲナーゼ(ALH)の詳細な酵素学的性質を調べ,その植物体内での生理機能を解明するために,ALH過剰発現タバコの酸化的ストレス耐性を評価した。ALHはすでに知られている4-ヒドロキシノネナールなどの他に,9-ketooctadecadienoic acidや4-oxo-nonenalを基質として効率よく還元することが新たに明らかになった。すなわちALHは過酸化脂質由来のアルケナール,共役エノンを広く解毒する。ALH過剰発現株はメチルビオローゲン存在下での光酸素障害に耐性を示すだけでなく,非存在下でも,強光照射に対して耐性を示した。この耐性は,酸化的ストレスで生ずる活性アルデヒドの消去と,消去のための還元力消費による過剰光エネルギーの散逸の両方の効果によると考えられた。以上の結果から,植物の葉において酸化的ストレスにより活性アルデヒドが生じ,細胞に損傷をもたらすこと,ALHは細胞内で活性アルデヒドを還元・解毒することにより植物の抗酸化防御に働くことが明らかになった。過酸化脂質が分解して生ずる毒性の強いα,β-不飽和アルデヒド(活性アルデヒド)の植物の環境ストレスへの関与を証明することを目的として,以下の成果を得た。(1)植物組織中の活性アルデヒドの定量法を確立した。この方法を用い,酸化的ストレスを与えたシロイヌナズナ葉の活性アルデヒド生成プロフィルを解析した。メチルビオローゲン+光による酸化的ストレスを与えると,C3およびC4活性アルデヒドであるアクロレイン,クロトンアルデヒドの含量が増大した。動物組織で典型的な過酸化脂質分解産物であるマロンジアルデヒドはほとんど生成しなかった。一方,サリチル酸による酸化的ストレスでは,活性アルデヒドの増大は認められなかった。

すなわち過酸化脂質の代謝経路がストレスの種類によって異なることが明らになった。(2)ホウレンソウから単離した葉緑体に活性アルデヒドを与え,光合成への影響を解析した。アクロレイン,クロトンアルデヒド,および4-ヒドロキシノネナールは,葉緑体の炭酸固定活性を強く阻害した。一方光合成電子伝達活性(H_2O→NADP^+)はほとんど阻害されなかった。葉緑体のグリセルアルデヒド3リン酸デヒドロゲナーゼおよびフルクトースビスホスファターゼが活性アルデヒドにより部分的に阻害されたことから,カルビン回路のチオール制御酵素が活性アルデヒドの主要なターゲット分子であることが明らかになった。(3)活性アルデヒドのα,β-不飽和結合を還元するアルケナールレダクターゼ(シロイヌナズナ遺伝子At5g16970の産物)をタバコで過剰発現させると,オゾン曝露による傷害が軽減された。すなわちオゾンによる葉の傷害に活性アルデヒドが関与していることが明らかになった。過酸化脂質が分解して生ずる毒性の強いα,β-不飽和アルデヒド(活性アルデヒド)の植物の環境ストレス傷害への関与を照明することを目的として,以下の成果を得た。(1)植物組織からのアルデヒドの抽出と定量分析の方法を確立し,シロイヌナズナ,タバコ,ホウレンソウの葉のアルデヒド組成を比較した。葉緑体には3Z-hexenalなどのC6アルデヒドが含まれること,n-プロパナールはチラコイド膜に特有であることを明らかにした。(2)タバコにオゾンストレスを与えると,葉でのC3C6活性アルデヒド,ホルムアルデヒド,アセトアルデヒドからC6までの飽和アルデヒドの含量が増大することを明らかにした。(3)ホウレンソウから単離した葉緑体に活性アルデヒドを与え,暗反応(カルビン回路反応)のみが阻害されることを明らかにした。カルビン回路酵素のなかのチオール制御酵素であるホスホリブロキナーゼ,グリセルアルデヒド3リン酸デヒドロゲナーゼは強く阻害され,フルクトースビスホスファターゼ,セドヘプチュロースビスホスファターゼは弱く阻害された。またアルドラーゼも阻害された。一方,リブロース2リン酸カルボキシラーゼは全く阻害されなかった。複数のターゲット酵素の失活の重層的な効果によりカルビン回路全体の活性が失われると考えられた。(4)葉緑体カルビン回路に対するアクロレインの毒性はグルタチオンにより抑制されたが,アスコルビン酸によっては抑制されなかった。葉緑体にアクロレインを添加すると葉緑体内のグルタチオンがまず減少し,その後カルビン回路活性が低下した。これらの結果から,葉緑体のグルタチオンは活性アルデヒドに対する第一防御因子として働くことが明らかになった。
LB膜を用いた膜厚制御による位相整合有機結晶非線形導波路波長変換

本研究は、平板導波路あるいはチャネル導波路を用いた光第2高調波発生(SHG)における位相整合法に関し、最も基本的な膜厚制御をLB膜の成膜性に着目して行われ、以下のような成果を得た。無機非線形光学結晶上へのLB膜積層:負の1軸結晶である、水に難溶性のLiNbo_3基板上に正の1軸結晶であるLiTaO_3結晶をエピ成長させた3層構造導波路に、水面上で安定なL膜を形成するN-dococyl-N′-(4-nitrophenyl)ureaをZ膜として積層した。3層導波路を使用した理由は、正負の結晶の組み合わせにより緩い位相整合許容幅が得られるからである。実際、実効的な許容幅を45nm(通常、1nm以下)に広げることができた。LiTaO_3結晶は表面が親水性であるため、積層にはステアリン酸を中間層として挿入する必要があることも判明した。有機結晶に対する設計:2次の非線形光学性能としては中庸であるが、透明性の高い有機(-)2-(α-methylbenzylamino)-5-nitropyridine結晶等を対象として、与えられた薄膜非線形結晶膜厚および基本波波長1064nmに対して、位相整合SHGのためのLB膜積層数および非線形結晶膜厚の位相整合許容幅に関する理論的考察を行い、以下の設計指針を得た。まず、単純な3層構造に対する積層効果を調べた結果、薄膜結晶の厚さが353368nmの範囲において位相整合SHGが得られることがわかったが、位相整合膜厚許容幅が狭く、この範囲を連続的に結ぶことが不可能であった。そこで、バッファー層を設けた結果、205278nmの範囲において連続的に位相整合SHGが達成できることが判明した。薄膜非線形結晶の厚さがこの範囲にあれば、4層目のLB膜の積層により位相整合を満足させることが可能なのである。実験的な検証については、現在、研究を続行中である。平成6年度の目標は、(1)既存有機非線形光学材料に対する理論設計、(2)種々のLB膜の屈折率測定、(3)既存無機非線形光学材料上へのLB膜積層、(4)既存有機非線形光学材料の大面積薄膜単結晶化であった。(1)に関しては、既存の有機材料MBANPおよびDMNPの非線形光学定数d_<22>およびd_<33>、d_<32>に対し、LB膜としてDONPUを用いた場合の解析を行い、基板ガラスを選定し、適当なバッファー層を設ければ、非線形層の厚さの許容範囲および変換効率が相互作用長5mmに対し、70、140、200nmおよび2.5、1.1、50mW(基本波パワー100mW)に達することが判明した(IKETANI Conferenceにて発表、投稿準備中)。これは、与えられた非線形層の厚さの下でLB膜を所望の層数、積層することで位相整合が可能となることを意味する。ただし、バッファー層の厚さはある程度、制御する必要がある。実験的には、(3)に関して、無機非線形光学LiNbO_3基板結晶上にエピ成長させたLiTaO_3薄膜結晶に対し、LB膜を積層して予測通りの広い位相整合許容範囲が得られた(1994年秋季応物学会にて発表)。LB膜製膜装置の入手が遅れたこともあり、(2)の実験は次年度に集中的に行われる予定である。

そのための(4)の大面積の有機非線形薄膜単結晶育成には、材料はMNAであるが成功している(MRジャパンにて発表、投稿準備中)。平成6年度に引き続き、(1)既存無機非線形光学結晶上へのLB膜堆積、(2)既存有機非線形光学材料の大面積薄膜単結晶化を行い、以下の結果を得た。負の1軸結晶LN (LiNbO_3)基板上に正の1軸結晶LT (LiTaO_3)をエピ成長させた3層構造導波路に、水面上で非常に安定なL膜を形成するDONPU (N-docosyl-N′- (4-nitrophenyl) urea)をZ膜として積層させた。これによって、光第2高調波発生(SHG)のための実効的な位相整合許容幅を45nm(通常、1nm以下)に広げることが可能であるとを確認し、LB膜の積層数によって位相整合基本波波長が制御できることを実証することができた。ただし、LT結晶は表面が親水性であるため、疏水性の基本上にのみ堆積可能なDONPUを積層するにはステアリン酸を中間層として挿入する必要があることも判明した。一方有機結晶に関しては、透明性の高いMBANP ((-2) 2- (α-methylbenzylamino) -5-nitropyridine)結晶を対象として、単純にDONPU-LB膜を積層する構造を検討した結果、MBANP薄膜結晶の厚さが353368nmの範囲において位相整合SHGが得られることがわかった。しかしながら積層毎に得られる位相整合膜厚許容幅がまだ狭く、この範囲を連続的に結ぶことが不可能であった。そこで、さらにバッファー層を設ける構造を検討した結果、MBANP薄膜結晶の厚さが205278nmの範囲において連続的に位相整合SHGを達成できることが明らかになった。また、有機2-methyl-4-nitroanilineを対象として、ブリッジマン法による融液からの結晶育成を行い、数十mm角の大面積薄膜単結晶およびリッジ型単結晶を得ることができた。
「四国史」宣命の索引作成

今年度は、(1)平成12・13年度の二年間で集めた『日本後紀』『続日本後紀』『日本文徳天皇実録』『日本三代実録』の宣命(「四国史」宣命)の校合作業を行うこと(2)「四国史」宣命の読みを確定すること(3)昨年度入力した宣命XMLの形式を整え索引を作ることの三点を中心に研究を行った。まず(1)については、紙の上での校合作業を終えた。「四国史」に関しては、古いテキストが現存しておらず、写本による差異はあまりないと考えられてきたが、それぞれいくつかの系統に分かれることが明らかになった。今後は、宣命XMLへ注の形で入力し、校本として完成させる必要がある。(2)については、『類聚名義抄』などの字書の他、他の注釈書や研究書を参考にして、読みの確定作業を行った。今後は、確定した読みが正しいか否かについて、他の平安時代初期の訓点資料と比較するなどして、その精度を更に上げる必要がある。また(3)については、国立国語研究所の「太陽コーパス」を参考に、タグ付けを考え、宣命のKWIC索引を作成した。宣命XMLは、その読みを属性の形で入力したため、読み仮名の入ったテキスト、読み仮名の入らないテキストの両方を出力することができ、また、読み仮名による語彙検索、漢字・万葉仮名による文字検索が可能となった。今後は、「四国史」宣命と同じ宣命体資料である祝詞のXMLを作成することも、平安時代ごく初期の日本語を知るための基礎資料を整える、という意味で重要であると考えている。今年度は、五月から二月までの十ヶ月間内地研究をしていたため、「四国史」宣命のテキストデータをコンピュータに入力する作業を中心に行った。今年度行ったことは、(1)『類聚名義抄』や九条本の『祝詞』の訓を参考に、「四国史」宣命の訓みを確定する(2)「四国史」宣命のテキストをコンピュータに入力する(3)「四国史」宣命の索引を作るため、入力したデータをXMLの形式に整形するの三点である。(3)の宣命のXMLについては、現時点では国立国語研究所の作成している「太陽コーパス」の形式を参考にしているが、今後は宣命の形式に最適なタグ付け方法を自ら考案していく必要がある。また、今後は「四国史」宣命の漢字索引・語彙索引を作るために、(1)未収集の諸本や江戸時代から現在までの宣命研究書の収集(1)平成12・13年度の二年間で集めた「四国史」宣命の校合作業を行い、宣命のXMLの中に、諸本の校合結果を合わせて示す様式の考案などを行う必要がある。
コンサートホール音場における後期反射音の時間・空間分布密度と響きの質感

コンサートホールの残響音がもたらす心理効果として、`響きの長さ感'(時間的側面)および`音に包まれた感じ'(空間的側面)の存在が知られており音響設計の評価指標として用いられているが、音場の拡散条件にかかわる響きの質的側面からの心理評価については未解明である。本研究では、響きの質的側面として新たに“響きの質感"(Texture of reverberation, TRV)を定義し一連の音響心理実験によりこれを立証した。そして後期反射音群の時系列上の一様性並びに時間密度という2つの観点から、TRVがホール音場を設計評価するための一要素感覚として有効であることを明らかにした。1.実験システムの構築:被験者実験に供するため、簡易無響室内に反射音や残響音の分布密度を可変できる音場合成システムを構築した。畳込み演算装置を中心とするマルチスピーカによる再生方式であり、直接音用1系統,初期反射音用2系統,残響音用6系統をパーソナルコンピュータ(MIDI)により一括制御する方法とした。2.音響心理実験による成果概要:(1)ホール空間が“拡散している感じがする"(Diffusional Impression, DI)という印象語に関するアンケート調査並びに心理実験の結果から、DIが、`響きの質感が滑らかなー粗い'といった質的な性質を有する形容語からなる因子、並びに`拡がりのあるーやせた'といった空間的な性質を持つ形容語からなる因子を有することを示した。(2)後期残響音の時間分布密度と残響時間を独立に変化させた刺激音場を用い、響きの印象に関する非類似度実験、並びに(3)TRVとREVの心理的尺度値を求めるための一対比較実験を各々実施した。これらの結果から、響きの印象評価において`響きの質感'と`響きの長さ感'は有意に区別して知覚されること、また後期残響音の時間分布密度の変化が`響きの質感'の知覚に弁別可能な影響を与えること等を明らかにした。初年度の実施計画は、第一に音響心理実験のためのハードウェアを構築すること、第二に後期残響音のもたらす響きの質にかかわる基本的な聴感印象とは如何なるものかその存在を把握することにあった。1.心理実験システムの構築においては、後期残響音の系統数の制約について今後増強し改善する必要はあるが、後期残響音の時間分布密度の制御性能について所期の可変範囲が得られており初年度の目的を達している。2.実験研究の進捗状況についてその主たる内容は、上記の「研究実績の概要」に記載しているとおりであるが、さらに加えて、後期反射音の空間分布を変化させた模擬音場による基礎的な心理実験から、後期反射音群の到来方向分布の一様性の変化が響きの質の評価に有意な影響を与えることも示された。以上のように、本研究はほぼ順調に進展している。1.後期反射音の時間分布特性と`響きの質感'の関係に関する成果:後期反射音の時系列上の一様性を表す時間分布特性(TDIL)の周波数特性がTRVの知覚に与える影響について検討した。すなわち、高音域時間分布指数TDIL,H3(2k-8kHz帯域)および残響時間を独立に変化させた9つの刺激音場を用い、TRVの心理的距離尺度を求めるための音響心理実験(無響室内において電気音響的に模擬音場を構成し被験者に聴感印象を評価させる実験)を実施した。この結果から、TDIL,H3の変化がTRVの知覚において弁別可能な影響を与えること(相関係数0.89)、また残響時間の変化は影響しないことを明らかにした。2.後期反射音の空間分布特性と`響きの質感'の関係に関する成果:後期反射音の到来方向分布がTRVの知覚に与える影響について検討した。すなわち、時間分布特性を一定(TDIL,H3=0.65)に保ちながら、方向別後期反射音エネルギのばらつき度合いを表す空間分布指数SDILを変化させた刺激音場を用い、TRVに関する心理実験を実施した。この結果から、高音域時間分布指数TDIL,H3が高い場合、後期反射音のSDILの変化は`響きの質感'の知覚に弁別可能な影響を与えないことを示した。平成28年度の実施計画は、後期反射音エネルギを規定する物理量と`響きの質感'TRVの関係について検討し、TRVが響きの心理評価要因として寄与することを検証することにあった。また、TRVを規定する物理指標として、`樅の木状の減衰'音場を念頭に置き、後期反射音エネルギの時間特性および空間特性の2面から検討を試みる計画であった。実験研究の進捗状況についてその主たる内容は、上記の「研究実績の概要」に記載しているとおりであり、後期反射音の高音域時間分布指数TDIL,H3および空間分布指数SDILといった2種類の音響物理量とTRV知覚の関係について明らかにされてきている。これらのことは、コンサートホール音場で知覚される音像の質的側面を表す要素感覚としてTRVが有効であることを検証するものである。1.後期反射音エネルギの平均時間密度と`響きの質感'の関係に関する成果:これまで後期反射音の時系列上の一様性に着目して検討してきた。続いて、後期反射音の時系列上のエネルギ密度に焦点をあて、反射音群の平均時間密度dLがTRVの知覚に与える影響について検討した。