hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
がんの発生と進展におけるDNAメチル化およびヒストン修飾異常の役割

DNAメチル化やヒストン修飾異常の解析が進みつつあるが、腫瘍の種類によっては、エピジェネティックな異常により不活化を受ける標的遺伝子の情報は十分ではない。本研究では、がんにおけるDNAメチル化やヒストン修飾異常について網羅的に解析し、発がんの分子機構を明らかにすることを目的とする。マイクロアレイを用いて、脱メチル化により発現誘導される遺伝子の解析を行い、多数の新規がん抑制遺伝子候補を同定した。DNAメチル化は、抗がん剤予測のマーカーとしても有用である。さらに、網羅的エピゲノム解析による、DNAメチル化、ヒストン修飾と機能性RNAの関連に関する解析を行い、ヒストンH3K4のピークが未知のnon-coding RNAのエピジェネティックな異常を解析するための分子マーカーとして有用であることを明らかにした。DNAメチル化やピストン修飾異常は、がん化において重要な役割を果たしている。これら、エピジェネティックな異常により不活化されている遺伝子の同定し、その機能を解析することにより、がん化の分子機構の解明だけでなく、新しいがんの診断や治療法の開発に重要な知見が得られると考えられる。本研究では、DNAメチル化により不活化される新規遺伝子を同定し、がんの発生と進展における役割について明らかにすることを目的とする。RASの負の制御遺伝子RASSF遺伝子群の解析により、RASSF2が大腸癌において異常メチル化によりサイレンシングされており、Rasの活性化には、K-rasやBRAFの遺伝子変異だけでなく、RASの負の制御遺伝子がエピジェネティックな異常により不活化されていることが重要であることを明らかにした(Gastroenterol, 2005)。また、DNAメチル化阻害剤投与により発現誘導される遺伝子の網羅的解析により、WNTの調節遺伝子、SFRPが大腸癌において異常メチル化により不活化されていることを報告した(Nat Genet, 2004)。胃癌においては、APC遺伝子やβ-catenin遺伝子の変異の頻度は低いにもかかわらず、WNT経路の活性化がしばしばおこっている。胃癌細胞株において、SFRP1、SFRP2、SFRP5、DKK1がメチル化されており、エピジェネティックな異常が、WNTシグナルの活性化に重要である可能性が示唆された。Methylated CpG island Amplification(MCA)法を用いて、腎癌において異常メチル化している遺伝子群をスクリーニングし、HOXB13遺伝子が、メチル化により不活化されていることを明らかにした(Oncogene, 2005)。HOXB13の遺伝子導入により、腫瘍細胞にアポトーシスを誘導でき、その不活化は腎癌の発生に関与することが示唆された。DNAメチル化やヒストン修飾異常などのエピジェネティックな変化はがん抑制遺伝子不活化の機構として重要であるが、メチル化により不活化される遺伝子の発がんにおける役割や、メチル化が起こるメカニズムに関しては不明な点が多い。本研究ではメチル化により不活化される遺伝子の網羅的解析により、がんの発生と進展におけるエピジェネティックな異常の役割を明らかにすることを目的とする。本年度は、がんのシグナル伝達異常における異常メチル化の役割、ヒストン修飾異常による遺伝子サイレンシングの分子機構にっいて検討した。WNTの制御遺伝子であるDKKの異常メチル化について解析し、DKK1およびDKK2遺伝子が大腸癌および胃癌において高頻度に不活化されており、消化管腫瘍の発生に重要な役割を果たしていることを明らかにした。また、PR domainを有する遺伝子ファミリー、PRDM1-16のエピジェネティックな異常について解析し、PRDM5遺伝子のサイレンシングにはDNAメチル化依存性のサイレンシング以外に、ヒストンメチル化酵素EZH2による、ヒストンH3リジン27のトリメチル化が関与する場合があることを明らかにした。また、乳癌において、PRDM14遺伝子が遺伝子増幅により発現が充進し、がん化に関与することを明らかにした。異常メチル化している遺伝子のゲノム配列をin silicoで解析し、p53の標的遺伝子であるC10orf58やDFNA5がDNAメチル化により不活化されていること、メチル化阻害剤により、エピジェネティックに不活化されたp53標的遺伝子の発現を回復出来ることを示した。発癌過程においてジェネティックな異常とエピジェネティックが蓄積して,より悪性度の高い腫瘍に進展すると考えられている。我々は,個々の腫瘍における遺伝子変異とDNAメチル化の関連について解析し,大腸癌が,マイクロサテライト不安定性陽性,BRAF変異陽性かつCpGアイランドメチル化形質陽性の群(CIMP1),マイクロサテライト不安定性陰性,K-ras変異陽性かつCpGアイランドメチル化形質陽性の群(CIMP2),CpGアイランドメチル化形質陰性,p53変異陽性群(CIMPO)の3つのカテゴリーに大きく分類されることを明らかにした(Proc Natl Acad Sci USA, 2007)。また,異常メチル化により不活化される遺伝子の機能解析を行い,Rasの負の制御遺伝子であるRASSF2がNF-

kappaBシグナルを抑制すること,RASF2の核から細胞質への移行がアポトーシス誘導能に関与することを明らかにした。さらに,APCやbeta-cateninの遺伝子変異を認めない乳癌や口腔扁平上皮癌においても,SFRP1,2,5が異常メチル化により不活化することが,WNTシグナルの活性化に関与することを明らかにした。癌におけるDNAメチル化の分子機構に関しては不明な点が多い。我々は,Dicerを遺伝学的にノックアウトした大腸癌細胞株を用いて,Dicer機能がSFRP4遺伝子のDNAメチル化の維持に重要なこと,Dicer機能が,ヒストンH3K9のメチル化に重要であることを明らかにした。本研究により,癌におけるRNA干渉系とDNAメチル化・ヒストン修飾のクロストークを初めて明らかにした。今後,Dicerによりプロセスされ遺伝子メチル化に関与する機能性RNAを同定することが必要と考えられる。DNAメチル化やピストン修飾異常は、癌抑制遺伝子不活化の分子機構として重要であるが、その標的遺伝子や癌化における役割に関しては未知の点が多い。本研究では、異常メチル化により不活化される遺伝子の機能解析を行い、DNAメチル化の発癌における役割を明らかにする。また、発癌過程でDNAメチル化やヒストン修飾異常を起こす分子機構の解明を目指す。本年度は、大腸癌や胃癌においてDNAメチル化により不活化されるユビキチンリガーゼCHFRの機能解析を行った。CHFRを大腸癌細胞株に遺伝子導入することにより、NF-kBに関連する遺伝子の発現抑制を認めた。CHFRによりNF-kBの標的遺伝子の一つ、IL-8の発現は転写レベルで抑制された。また、CHFR変異体の解析からNF-kBの抑制はユビキチンリガーゼ活性に非依存性であることを明らかにした。CHFRを大腸癌のマウスXenograftにアデノウイルスベクターを用いて遺伝子導入すると、腫瘍細胞の増殖を抑制した。また、CHFRの遺伝子導入により、腫瘍血管の造成が抑制されていた。以上の結果から、CHFRは細胞周期チェックポイント遺伝子としてだけではなく、NF-kB抑制を介して抗腫瘍効果を発揮することが示唆された。DNMT1、DMT3およびDicerをノックアウトした大腸癌細胞を用いて、ChIP on ChIP法によりDNAメチル化およびヒストン修飾に関して網羅的解析を行った。その結果、ICAM1をはじめとする一部の遺伝子のDNAメチル化の維持に、RNA干渉が関与することを明らかにした。また、DNAメチル化非依存性、ピストンH3K27メチル化依存性の遺伝子サイレンシングにDicerが関与することを示した。
ヒト胎盤に発現するニューロトロフィンの役割と胎児発育におけるその意義

ニューロトロフィン受容体のTrkB発現は、子宮内胎児発育遅延(IUGR)や妊娠高血圧症候群(PIH)症例および双胎の低体重児側の胎盤で亢進しており、PIHではTrkBリガンドであるBDNFの母体血中濃度が増加していた。また絨毛癌細胞株やヒト胎盤組織培養系で、酸化ストレスによる細胞死がBDNF/TrkBの活性化で抑制されたことから、IUGRやPIHでは、BDNF/TrkBは防御的に機能し、その発症制御に関与している可能性が示唆された。子宮内胎児発育遅延(IUGR)や妊娠高血圧症候群(PIH)は、胎児の低出生体重をきたす重要な疾患である。また胎児神経系の発育は出生後の神経学的予後に影響する点で非常に重要である。本研究は、胎児神経発育に必須であり、卵巣や子宮内膜などに発現して生殖現象においても役割を果たしているニューロトロフィン(NTs)とその受容体の、胎盤や胎児・母体血中における発現を詳細に調べるとともに、培養細胞やIUGRモデルマウスを用いてその働きを調べることにより、胎児・胎盤発育におけるNTsの役割を検討すると共に、NTsを介した胎児-胎盤間の協調作用及び胎児神経発育に関する新たな知見を得ることを目的としている。平成21年度は、ヒト胎盤においてNT受容体のうち主としてTrkBが発現していること、その発現は絨毛組織に局在していること、また妊娠の経過とともに増加しIUGRやPIH症例では亢進していること、さらに体重差のある双胎において低体重児の胎盤で発現が亢進していることを明らかにした。一方NTsのうちTrkBの主なリガンドであるBDNFが胎児・母体血中に存在し、PIH症例でその母体血中濃度が増加していることを見いだした。次に、TrkBを発現している絨毛癌培養細胞を用いて、BDNFが酸化ストレスによるアポトーシスを抑制することを確認した。これらの結果より、IUGRやPIHの病態において、BDNF/TrkBシグナルが何らかの関与をしていることが強く示唆された。今後、さらにその機能について検討を重ねて行く予定である。本研究は、胎児神経発育に必須であり、卵巣や子宮内膜などに発現して生殖現象においても役割を果たしているニューロトロフィン(NTs)とその受容体の、胎盤や胎児・母体血中における発現を詳細に調べるとともに、培養細胞やIUGRモデルマウスを用いてその働きを調べることにより、胎児・胎盤発育におけるNTsの役割を検討すると共に、NTsを介した胎児-胎盤間の協調作用及び胎児神経発育に関する新たな知見を得ることを目印としている。平成21年度、ヒト胎盤絨毛組織にNT受容体のうちTrkBが発現し、IUGRやPIH症例および双胎の低体重児の胎盤で発現亢進していること、NTsのうちTrkBの主なリガンドであるBDNFが胎児・母体血中に存在し、PIH症例で母体血中濃度が増加していることを明らかにした。平成22年度には、TrkBを発現している絨毛癌培養細胞を用いて、BDNFが酸化ストレスによるアポトーシスを抑制すること、またその作用はTrkB阻害剤の添加で減弱することを確認した。これらの結果より、IUGRやPIHの病態において、BDNF/TrkBシグナルが酸化ストレスに対して防御的に機能している可能性が強く示唆された。今後、さらにその機能について検証、検討を重ねて行く予定である。本研究では、胎児神経発育に必須の因子であるニューロトロフィン(NTs)とその受容体の、胎盤や胎児・母体血中における発現と、胎児・胎盤発育におけるNTsの役割を検討すると共に、NTsを介した胎児-胎盤間の協調作用及び胎児神経発育に関する新たな知見を得ることを目的とした。平成22年度までに、ヒト胎盤絨毛組織にNT受容体のTrkBが発現し、IUGRやPIH症例および双胎の低体重児の胎盤で発現が亢進していること、またTrkBのリガンドであるBDNFが胎児・母体血中に存在し、PIH症例では母体血中濃度が増加していることを明らかにしてきた。また、TrkBを発現している絨毛癌細胞培養系を用いて、BDNFの添加により酸化ストレスによるアポトーシスが抑制されること、またその作用はTrkBの選択的阻害剤の添加で減弱することを確認した。平成23年度は、酸化ストレスによる細胞死がBDNF/TrkBで抑制されることを、より臨床に近いヒト胎盤より採取した組織培養系を用いて確認した。

これらの結果を総合的に考察し、酸化ストレスが亢進していると考えられるIUGRやPIHの病態においては、BDNF/TrkBシグナルが活性化されて防御的に機能し、その発症制御に関与している可能性が示唆された。なお、本研究の成果は学会発表および学術論文として公表した。
古人骨の化学分析から見た水田稲作農耕による食生活・生業形態の変化(4)

縄文時代および弥生時代の遺跡から出土する骨試料より残存するタンパク質(コラーゲン)を抽出してその炭素・窒素同位体比を測定した。その結果、縄文時代の貝塚遺跡から出土した人骨群はC_3植物と海産物を結ぶ直線状に分布する傾向が見られた。このことから、貝塚遺跡に居住した縄文時代人はC_3植物と海産物のふたつを主なタンパク質源としており、その遺跡立地や個体の履歴によってその割合が変化するものと考えられる。一方、今回分析した弥生時代集団でも縄文時代と同様に大きな地理的変異が認められた。しかし、集団内での個体差を検討すると、千葉県安房神社遺跡と神奈川県大浦山遺跡で炭素同位体比と窒素同位体比の間に有意な正の相関関係が見出さた。その回帰直線は海生魚類とC_3植物の間を結んでいるが、弥生時代にはC_3植物の窒素同位体比が上昇している傾向が認められる。これは水田稲作農耕によって土壌が嫌気的な環境となったため、窒素同位体比が上昇していたことを示唆する。また、海洋表層の放射性炭素年代における深層水の影響、すなわち「海洋リザーバー効果」を縄文時代の北海道北黄金貝塚から出土した動物骨で検討したところ、オットセイの骨はシカの骨よりも見かけの年代が約860年古くなることが明らかになった。この相違は世界的に見ても大きなもので、北海道を含む北太平洋西部が湧昇流の影響を強くうけていることを示している。さらに、同遺跡から出土した人骨試料で年代測定を実施したところ、シカよりも約680年古い値を示した。このことから北黄金遺跡の縄文人が摂取したタンパク質の約8割が海洋に由来すると考えられる。海洋リザーバー年代は、上述の安定同位体比とは独立した指標であり、炭素・窒素安定同位体比よりも高精度に定量的な復元が可能なことが明らかになった。
リンパ球前駆制御及び幹細胞の産生・維持機構と免疫監視機構の再生制御

免疫監視機構の主体となるリンパ球の発生・分化について、造血幹細胞やリンパ球前駆細胞の増幅分化制御機構及び増幅の場に注目して解析し、免疫監視機構の再生や強化法への基盤確立を試みた。Lnkは、その欠損によって造血幹細胞の増加及び機能亢進が生じることから、造血幹細胞の新しい抑制性制御機構を担う分子であることが明らかになってきている。これまでにLnk阻害体を開発し、その免疫監視機構の再生・制御への応用の可能性を検討した。本年度はさらにLnk依存性制御系の作用機序について解析を進めた。Lnk欠損により造血幹細胞の増加に至る分子機構、白血病化することなく増加する過程の解析を試みた。Lnk欠損によって生じる造血幹細胞の増加及び機能亢進には、トロンボポイエチン(TPO)受容体からのシグナル増強が大きく関与することをLnk/TPO重複欠損マウスの作成ならびに種々の培養系や生化学的解析により明らかにした。骨髄移植モデル系にてLnkの一過性阻害でも造血前駆細胞の生着能が亢進することを示しており、またTPO欠損下でLnk欠損の影響は相当に減弱するものの消失はせず、他機構の関与が依然考えられた。Lnkファミリー蛋白質が、アクチン細胞骨格系の制御に関与する可能性を示し、Lnk欠損造血前駆細胞、脾臓B細胞、血小板などの細胞外基質上での細胞動態に変化がみられること、細胞外基質や接着分子からの刺激受容系において変化が生じていることを明らかにし、免疫監視機構維持における新しい制御機構を示した。免疫監視機構の主体となるリンパ球の発生及び分化制御機構について、リンパ球前駆細胞や造血幹細胞の著しい増幅がみられる抑制性アダプター蛋白質Lnkの遺伝子欠損マウスを起点とし、白血病化することなく増加する分子機構、制御破綻過程の解明を試みた。免疫監視機構の維持・再生に必須である造血幹細胞、リンパ球前駆細胞の増幅及び維持機構を明らかにし、免疫監視機構の再生制御に向けた基盤の確立を目指した。Lnkは富プロリン部を含むN末領域、PH、SH2ドメイン、C末端チロシンリン酸化部位を持つ。これらの各部位にアミノ酸置換変異や欠失変異を導入した種々のLnk変異体を作製し検討したところ、増殖抑制にはSH2ドメインが必須であり、SH2変異Lnkがドミナントネガティブ(DN)変異体として働きうることがわかった。SH2変異に加えてPHドメイン欠損とC末端領域欠損を組み合わせると、より効果的に野生型Lnkの機能を阻害することができた。得られたDN-Lnk変異体をレトロウィルスベクターによりマウス造血前駆細胞に感染導入したところ、放射線照射したマウスへ移植した際の造血能の亢進がみられた。さらに、DN-Lnk変異体の一過性発現によっても造血前駆細胞の生着能が亢進することがわかった。DN-Lnk変異体により造血前駆細胞に内因性に発現するLnkを阻害することができ、造血能あるいは生着能を亢進させることが骨髄移植モデル系で確認された。その一過性阻害でも生着能の亢進に効果がみられ、Lnk依存性制御系は造血幹細胞及び造血前駆細胞の機能制御に大変有用な標的系と思われる。
ホーソーンのトランスナショナリティ

平成30年度にはまず、京都産業大学の中西佳世子氏と共に、ホーソーンの『アフリカ巡航日誌』を翻訳する作業を進めた。年度内にすべての章の翻訳原稿を作成することができたが、出版のためには、表記の統一や19世紀のアフリカに関する歴史的詳細の確認、解説原稿の作成など、まだいくつかの作業が残っている。平成31年度にはこれらの作業を完了し、出版社に完成原稿を提出したい。また、論文「ホーソーンが編集した二つの航海記の海軍言説と『緋文字』」が、共著『海洋国家アメリカの文学的想像力』に収録され、出版された。これは、ホーソーンが『アフリカ巡航日誌』と「ダートムーア老囚人の手記」を編集する過程で19世紀前半の大西洋やカリブ海の状況を知り、それが『緋文字』の船乗りや海の描写に大きく影響していること示した論文である。平成30年9月にはボストンを訪問し、ハーヴァード大学やマサチューセッツ州ローリーに移転したピーボディ・エセックス博物館のフィリップス図書館を訪問し、本研究に関する貴重な資料を多数入手することができた。平成30年度後半には、ホーソーンとアフリカや中南米との関わりについて入手した情報を使いながら作品におけるトランスナショナリティを考える作業を進めるなかで、12月には日本ナサニエル・ホーソーン協会東京支部が企画したケンブリッジコンパニオンシリーズの2018年出版の論文集を論じる読書会で司会と発表を行い、発表ではホーソーンのトランスナショナリティに関する章を扱った。2月には、同学会の東京支部例会でホーソーンの初期の作品「白髪の戦士」に関する研究発表を行った。その他、アメリカ文学におけるホワイトネスの問題に関する論文集の書評が日本英文学会の会誌『英文学研究』に、ケンブリッジコンパニオンのアメリカン・ルネサンス文学に関する論文集の書評が日本ナサニエル・ホーソーン協会の会誌『フォーラム』に掲載された。平成30年度には、『アフリカ巡航日誌』のすべての章の翻訳原稿を作成することができたが、実際に翻訳書を出版するためには予想していたより多くの作業が必要だったことがわかり、まだ出版の目途が立っていない。論文執筆については、『アフリカ巡航日誌』と「ダートムーア老囚人の手記」がホーソーンの作品に及ぼした影響に関する論文を出版できたが、本研究における次の論文の執筆が進んでいない。また、中南米とホーソーンの関わりを研究するうえで重要だと思われる、妻ソファイアのキューバ滞在に関する資料を入手し、精査したいと思っているが、資料はある程度揃っているものの、それを読み考察する作業が進んでいない。一方で、ホーソーンの作品におけるトランスナショナリティの研究の途中経過を、日本ナサニエル・ホーソーン協会東京支部会で二回発表し、他の研究者から貴重な助言を得ることができた。本研究に関連する研究書の書評も二つの学会の会誌に掲載することができ、その執筆の過程で有益な情報を得ることができた。平成31年度にはまず、『アフリカ巡航日誌』各章の翻訳原稿を出版できる形に完成させ、注や巻末資料、解説も仕上げ、具体的な出版計画を立てたい。次に、アフリカや中南米とホーソーンの関わりについて調べてきたことを利用しながら、作品のトランスナショナリティを考察する論文を完成させ、学会のジャーナルに投稿したいと思っている。また、ホーソーンの妻ソファイアの「キューバ・ジャーナル」など、ホーソーンと中南米の接点を探るために入手しているがまだ研究を進めていない資料を読み、その結果を学会で発表できたらと思っている。当初の計画では、平成31年度も夏にボストンを訪問し、資料収集を行う予定だったが、求めていた資料が日本国内でも入手できるようになったため、海外出張をやめ、その時間を国内で論文を執筆する時間に充てたいと思う。海外出張の代わりに国内での学会参加を増やし、他の研究者との情報交換や研究成果の発表をしたいと考えている。本研究は、ホーソーンの文学的想像力が、ヨーロッパだけでなくアフリカや中南米を含むトランスナショナルな影響関係や交流の中で形成されたことを明らかにするものである。平成29年度にはまず、京都産業大学の中西佳世子氏と共に『アフリカ巡航日誌』を翻訳する作業を進めた。年度内に翻訳原稿を完成させることはできなかったが、平成30年度の夏までに翻訳を終え、解説を添えて書籍として出版する準備をしたいと思っている。作業の過程では、アメリカ植民協会の活動、リベリアの実態、当時のアフリカとアメリカの関係についての資料を集め、歴史的背景を知ることもできた。さらに、第一次資料や研究書を使って、19世紀前半頃のアメリカ大西洋岸の海で、商船や海軍の活動と奴隷商人や海賊などの非合法の動きの両方が互いに領域侵犯を繰り返しながら混在していた実態を調査する中で、あるセイラムの名士が1812年の戦争中に私掠船で航海をした経験を記録し、ホーソーンが編集して出版した「ダートムーア老囚人の手記」を見つけた。この手記と『アフリカ巡航日誌』がホーソーンの後の作品に与えた影響を考察した論文「ホーソーンが編集した二つの航海記の海軍言説と『緋文字』」が、平成30年度中に出版される予定である。平成29年度には、アフリカや奴隷制度がホーソーンの作品の中でどのように描かれているのかを理解するために、ホーソーンの作品を分析することも予定していた。研究の成果は、論文「「ナショナルな風景」の解体ー「主として戦争問題について」をめぐって」にまとめ、それが論集『エコクリティシズムの波を超えて』に掲載された。

また、ホーソーンが子どもを対象にマサチューセッツの歴史を書いた『おじいさんの椅子の全歴史』が重要なのではないかと考えるようになり、この作品の研究を計画に加え、3月には「他者」と「共感」をキーワードに作品を分析する内容の学会発表をした。平成29年度には、『アフリカ巡航日誌』各章の試訳を最後の数章を除いて作成し、その過程で奴隷貿易やそれを取り締まる海軍の活動、19世紀前半頃のアフリカ西海岸の社会や文化、アメリカとの関係などについての資料を読み、情報を集めることができた。また、ホーソーンが『アフリカ巡航日誌』と同時期に編集した「ダートムーア老囚人の手記」を見つけ、精読し、関連する資料を精査することができたのは、本研究にとって大きな収穫となった。この手記はアメリカにおいてもほとんど研究されていないが、19世紀前半頃の大西洋やカリブ海地域における私掠船や商船、海軍の活動を明らかにするだけでなく、『アフリカ巡航日誌』とともにホーソーンの後の創作活動に影響を与えていると思われるからである。ホーソーンの作品の中にアフリカや奴隷貿易と関連する問題を探る作業については、「主として戦争問題について」を分析した論文が完成したほか、『おじいさんの椅子の全歴史』の研究を始め、作品中で人種的な他者を描いている部分を分析するところまで進んだ。平成29年度の秋には、10日間程度アメリカに滞在し、ボストンやセイラムで19世紀前半のマサチューセッツの航海や奴隷貿易に関する第一次資料を探す予定だったが、大学の仕事の関係で時間をとることができなかった。平成30年度にはアメリカでの資料収集の時間をとりたいと思っている。平成30年度にはまず、京都産業大学の中西佳世子氏と共に、ホーソーンの『アフリカ巡航日誌』を翻訳する作業を進めた。年度内にすべての章の翻訳原稿を作成することができたが、出版のためには、表記の統一や19世紀のアフリカに関する歴史的詳細の確認、解説原稿の作成など、まだいくつかの作業が残っている。平成31年度にはこれらの作業を完了し、出版社に完成原稿を提出したい。また、論文「ホーソーンが編集した二つの航海記の海軍言説と『緋文字』」が、共著『海洋国家アメリカの文学的想像力』に収録され、出版された。これは、ホーソーンが『アフリカ巡航日誌』と「ダートムーア老囚人の手記」を編集する過程で19世紀前半の大西洋やカリブ海の状況を知り、それが『緋文字』の船乗りや海の描写に大きく影響していること示した論文である。平成30年9月にはボストンを訪問し、ハーヴァード大学やマサチューセッツ州ローリーに移転したピーボディ・エセックス博物館のフィリップス図書館を訪問し、本研究に関する貴重な資料を多数入手することができた。平成30年度後半には、ホーソーンとアフリカや中南米との関わりについて入手した情報を使いながら作品におけるトランスナショナリティを考える作業を進めるなかで、12月には日本ナサニエル・ホーソーン協会東京支部が企画したケンブリッジコンパニオンシリーズの2018年出版の論文集を論じる読書会で司会と発表を行い、発表ではホーソーンのトランスナショナリティに関する章を扱った。2月には、同学会の東京支部例会でホーソーンの初期の作品「白髪の戦士」に関する研究発表を行った。その他、アメリカ文学におけるホワイトネスの問題に関する論文集の書評が日本英文学会の会誌
シート構造を有するメソポーラスシリカの創製とその応用に関する研究

金属イオンや酵素を効率的に吸着させ回収する機能を発揮するシート型メソポーラスシリカ(MSP)の合成とその応用について検討した。トリブロック型P123と正電荷を持つCTACの2種類の界面活性剤を組み合わせたデュアルテンプレート法を採用することで、シート状のMPS粒子が得られた。合成したシート状MPSに有機修飾を施したカルボキシル化MPSを用いて、金属イオン混合溶液から、ディスプロシウム(Dy)選択的吸着量を検討した。その結果、N-(6-aminohexyl)amino propyl基およびカルボキシル基で修飾されたシート形状MPSが、最も高いDy吸着量を示すことが分かった。一般的にMPS粒子は、作製条件を変化させることで、その粒子構造を球型や棒型に変化することが知られている。しかし、シート型MPSを安定的に多量作製する方法は、いまだ確立していない。そこで、27年度は、シート型MPS (細孔サイズを210 nmの範囲で持つ)の簡便な多量作製方法を確立する。最初に、MPSの粒子構造を決定する要因である有機テンプレートの構造を最適化する。これまでの我々の予備実験で、アミノ酸と脂肪酸を組みあわせた界面活性物質(C16-L-Ala)が、MPSの構造をシ-ト化にする要因であることを明らかにしている。そこで、シート型MPSの横や厚さのサイズをコントロールして作製するために、この有機テンプレート構造を再度検討・合成して、有機テンプレートの構造がシート構造に及ぼす影響について解明した。具体的には、C16-L-Alaの添加量や、反応温度や時間などの作製プロセスを詳細に検討することで、シート型MPSの簡便な作製方法を確立した。さらにシート型MPSの作成方法の簡便化を目指して、有機テンプレートとして、CTACおよびP123の2種類の汎用化合物のみを用いた合成方法を開発した。作製したシート型MPSの構造解析については以下の分析機器を利用した。粒子形態を確認するために電子顕微鏡(SEMやTEM)観察を行い、粒子の持つ比表面積や細孔サイズは、ガス吸着法(BET法)により測定した。平成27年度は、シート型MPSの作製とその構造解析を研究目的としており、界面活性剤を有機テンプレートとして使用した場合のシート構造の形成機構について詳細に解析した。以上から研究は、おおむね順調に進展していると思われる。レアアースの一種であるジスプロシウム(Dy)は、次世代自動車のモーターとして使用されているネオジム磁石に添加され、産業の発展に大きく貢献している。しかし近年では、レアアースの不足と価格高騰のため、レアアースの回収や再利用に関する研究が活発に行われている。これまでの研究では、Dyを選択的に吸着、分離するカルボキシル基修飾シリカゲルが報告されている。本研究では、高い表面積を持つメソポーラスシリカ(MPS)を吸着担体として使用した。粒子構造の異なるシリカ(シート型MPS Sheet、球状MPS MCM-41s、細孔を持たないシリカStober)を有機鎖構造の異なる表面修飾剤でカルボキシル基修飾し、Dy吸着能に与える影響を調査した。各シリカへのアミノ基とカルボキシル基の修飾量を熱重量減少により算出した。Sheet及びStoberへのアミノ基の修飾量は同程度(0.51.98 umol/mg)であったのに対し、MCM-41sでは1.593.36 umol/mgと高いアミノ基修飾量を示した。しかし、アミノ基修飾されたMCM-41sへのカルボキシル基の修飾量は、4455 %程度減少した。Sheet MPSはアミノ基修飾量と同程度のカルボキシル基が修飾されていた。Sheet-2HNHCOOHが最も高いDy吸着量(13.3 ug/mg)を示し、一方で、カルボキシル基の修飾量が少ないMCM-41sの3つのシリカでは、Dyの吸着量が大きく低下した。その他の金属イオン(Cu, Fe, Nd, Zn)では、全てのサンプルで低い吸着量を示した。平成28年度は、【前年度に作製したシート型MPSの表面改質を行い、高効率な金属イオン吸着剤を作製することが研究目標であった。メソポーラスシリカの構造、表面官能基の選定、優先吸着元素の探索と効率を調査して、ほぼ当初の目標を達成している。RNAは、タンパク質に翻訳されるmessenger RNA (mRNA)やアミノ酸を運搬するtransfer RNA (tRNA)、リボソームを形成するribosomal RNA (rRNA)など様々な種類が存在し、生体内で多様な役割を果たしている。そのため、RNAを用いた研究は盛んに行われているが、研究に用いる際には組織からのRNA抽出は必須のプロセスである。今回、我々は粒子サイズが50 nm程度のアミノ化メソポーラスシリカ(MPS)へのRNAとDNAの吸着量に差が生じることを発見した。MPS粒子のサイズと含有するアミノ基の量を変化させ、RNA及びDNAの吸着に与える影響についても検討した。粒子サイズ50 nm程度のMPSをMCM-41c、150 nmと300 nmの粒子サイズを有するMPSはそれぞれMCM-41s 0.15、MCM-41s 0.3とした。合成時のTEOS/APTESモル比を25/1, 12/1, 11/2と調節したMCM-41cを用意した。また、Stoberは細孔を持たない粒子サイズが50 nm程度のシリカである。

合成したシリカは全て球状であり、StoberとMCM-41cサンプルは粒子の凝集体であった。粒子のサイズが150 nmや300 nmになるとRNA吸着量が大きく低下し、一方、DNA吸着量は同程度であった。含有するアミノ基量を減少させる(TEOS/APTES比を12/1から25/1)とDNA及びRNA吸着量が共に減少し、RNAの吸着量はTEOS/APTES比が12/1のときに最大となった。また、高いRNA吸着量を持ち、RNAとDNAの吸着量の差を示したサンプルはMCM-41c 12/1であり、RNAの吸着量は272.6 &#61549;g/mg、RNA/DNA吸着量比は11.1であった。金属イオンや酵素を効率的に吸着させ回収する機能を発揮するシート型メソポーラスシリカ(MSP)の合成とその応用について検討した。トリブロック型P123と正電荷を持つCTACの2種類の界面活性剤を組み合わせたデュアルテンプレート法を採用することで、シート状のMPS粒子が得られた。合成したシート状MPSに有機修飾を施したカルボキシル化MPSを用いて、金属イオン混合溶液から、ディスプロシウム(Dy)選択的吸着量を検討した。その結果、N-(6-aminohexyl)amino propyl基およびカルボキシル基で修飾されたシート形状MPSが、最も高いDy吸着量を示すことが分かった。平成28年度は、27年度に作製したシート型MPSの表面改質を行い、高効率な金属イオン吸着剤を作製する。シート型MPSの金属イオンとの吸着親和性が増大させるため、各種シランカップリング剤を用いてMSP表面改質を行い、銅や亜鉛イオンなどの金属イオンの吸着能が最大となる表面構造を決定する。1シート型メソポーラスカーボン(MPC)を作製する。MPSのカーボン化については、これまで報告例のあるレプリカ法を採用する。すなわち糖やアルコールなどの有機物をシート型MPSの細孔に埋入し、窒素雰囲気化で焼結・カーボン化させた後に、シリカを溶解・除去し、MPCを作製する。2作製したシート型MPC上にバイオ燃料電池で使用される酵素(例えば、グルコース酸化酵素)を固定化し、酵素活性安定性について評価する。これらの検討結果から、カーボンナノチューブやグラフェンなど他のカーボン材料に固定化された酵素比較して、2倍以上の活性を発現するシート型MPC固定化酵素を創成する。材料工学、生体材料平成27年度の当初計画では、シリカ等無機化合物温度調節付き合成器(1台x 750千円)を購入予定としていたが、まずは、界面活性剤の合成およびシート状MPS作成実験および、TEMやSEMによる形態観察にほとんどの時間を費やした。そのため、合成条件の微調節が可能となる温度調節付き合成器は使用せず、混合する界面活性剤とシリカ源、溶媒検討を実施するにとどまった。H28年度使用予定であった消耗品の種類が予定していた数よりも少なく、必要な費用が少額となったため。平成28年度には、当初予定していた合成器の購入を計画している。H29年度は、電気泳動装置などの備品の購入も予定しており、全額を使用予定としている。
次世代共役ポリマーにおける巨大非線形光学応答と超高速光スイッチング現象の開拓

代表的な共役系高分子であるポリチオフェンの立体規則性を高めることにより、非線形感受率が増強できることを示した。また、ドナー性を有するチオフェン分子とアクセプター分子を交互に配列した交互重合電荷移動型共役系高分子において非線形性が増大することを見出した。さらに、化学ドープしたポリチオフェンにおいてポーラロン準位を利用した多重共鳴現象により非線形感受率が増大することを見出した。(1)側鎖基の秩序化による主鎖π電子共役系の非線形光学応答の制御ポリ3-アルキルチオフェンでは、共役鎖に対して側鎖を規則正しく配列することにより、head-to-tail構造の一次元鎖構造が得られる。この系の光学ギャップは、ランダムな側鎖配列を有する系のそれよりも、大幅に(約0.8eV)低エネルギーに位置する。この低エネルギーシフトは、共役長が十分に伸び、理想的な一次元共役電子系が形成されるためと考えられる。本研究では、このような構造秩序化したポリチオフェン薄膜について、第三高調波発生法を用いて、三次非線形感受率(χ^<(3)>)スペクトルを測定した。秩序度を徐々に大きくすると、ある秩序度から光学ギャップはほとんど変化しなくなる。しかし、非線形感受率の値は増大しつづける。これは、比較的広がりの小さい励起子状態に対しては共役鎖の延伸の効果が小さいが、広がった励起状態(大きい量子数をもつ励起子状態に相当)に対してはその効果が大きいことを意味している。すなわち、共役系高分子における主鎖の高秩序化は線形応答を支配する光学ギャップや吸収係数よりも非線形感受率に敏感に反映されることを意味している。また、この結果から非線形光学応答における性能指数(χ^<(3)>/α)の増大が明らかになった。(2)ドナー-アクセプター型共重合ポリマーによる非線形光学応答の制御ドナー性分子とアクセプター性分子からなる共重合共役ポリマーにおいて、第三高調波発生法により光学非線形性の評価を行っている。本年度は、アクセプター性の程度を連続的に制御しながら非線形性がどのように変化するかを明らかにした。ドナー分子であるチオフェンと弱いアクセプター性をもつチアゾールあるいは強いアクセプター性をもつキノキサリンとを交互に結合したポリマーについて研究した。その結果、電荷移動の強さ(ドナー性、アクセプター性の差)を大きくすると励起状態間の遷移双極子モーメントが増大することが明らかになった。これは、励起状態における電荷移動励起の程度を連続的に制御できることを意味している。主鎖の電子構造を精密に制御した新しいポリマー系を対象に巨大な三次非線形光学応答および超高速光スイッチング現象の実現をめざして研究を行っている。前年度までにポリ3ヘキシルチオフェンにおいて、側鎖構造の立体規則性の向上により三次光学非線形性が増大することを明らかにした。今年度は、主鎖構造の立体規則性をさらに増大させることを検討した。主鎖構造の立体規則性を低減させる一つの要因である側鎖による立体障害は、主鎖に近い部位の水素原子を取り除くことで劇的に低減できる。実際には、側鎖に三重結合をもつアルキニル鎖を導入すればよい。本研究では、このアルキニルチオフェンの側鎖を規則的に結合させたhead-to-head型ポリアルキニルチオフェンの非線形光学応答の評価を行った。このポリマーは、これまでのポリチオフェンに比べ、非常に鋭い励起子吸収帯を示す。これは、試料の共役長が十分に伸び、不均一幅が狭くなった結果である。第三高調波発生法による非線形感受率スペクトルの測定を行ったところ、零フォノン線に対し鋭い三光子共鳴ピークが得られた。非線形感受率のピーク値はhead-to-tail型ポリアルキルチオフェンの値よりも大きいことを明らかにした。このように、立体障害低減による共役長の延長によって、非線形感受率の増大を実現した。赤外領域で非線形光学動作する共役系高分子を開発する目的で、化学ドープ状態のポリチオフェンについて第三高調波発生法による非線形光学応答の研究を行った。非線形感受率スペクトル測定の結果、赤外領域に幅広い共鳴構造が観測された。離散準位モデルを用いたスペクトル解析により、この共鳴はポーラロン準位および励起子準位に多重共鳴した非線形光学過程に起因することを明らかにした。共役ポリマーにおけるポーラロンと非線形光学応答の関係を明らかにすることを目的として、下記の二項目について研究を行った。1.ポーラロン準位の吸収飽和現象の研究ポリチオフェンを化学ドープするとポーラロン状態が生成する。Z-scan法を用いてポーラロン吸収帯領域における三次光学非線形感受率を決定した。未ドープ試料との比較から、ポーラロン状態が著しく三次光学非線形感受率を増強させることを明らかにした。また、主鎖構造と非線形性の関係についても明らかにした。

得られた結果からポーラロン状態は効率よく吸収飽和を示し、非線形光学応答動作を示す有用な光学遷移であることを明らかにした。2.外部電場によるポーラロンの生成とその光学応答ポーラロン準位の生成に電場の与える影響を明らかにすることを目指し研究を行った。種々の電極構造によりポリチオフェンに電場を印加した場合の赤外スペクトルの測定を行った。その結果、アルミニウムと透明電極(ITO)によってポリチオフェン薄膜を挟んだ構造において、電場印加に伴うポーラロン状態の変化を観測した。解析の結果、試料-電極間の界面において電荷移動が起こりポーラロンを生成していることを明らかにした。共役系高分子の薄膜素子における光学応答を考える上で、内部電場の寄与が重要であることを明らかにした。赤外領域のみに限らず、従来から知られる可視光領域におけるシュタルク効果に対しても内部電場が影響を及ぼしていることを明らかにした。1.化学ドープしたポリチオフェンのポーラロン準位と非線形光学応答の関係立体規則性の高いポリ3-ヘキシルチオフェン(P3HT)を化学ドープし、Z-scan法とTHG法で非線形感受率(χ^(3))スペクトルを測定した。得られたχ^(3)スペクトルを離散準位モデルにより解析した。Z-scan、THGの二つの方法により得られたスペクトル形状および共鳴構造が共通のモデルで説明できることを明らかにした。この解析により、ポーラロン準位の関与した遷移双極子モーメントを決定した。2.導電性共役高分子PEDOT-PSSの非線形感受率測定導電性共役高分子poly(3, 4-ethylenedioxythiophene)-poly(styrensulfonate)(PEDOT-PSS)の三次非線形感受率の虚部Imχ^(3)スペクトルをZスキャン法により測定した。2つのポーラロン準位を考慮したモデルに基づいた解析から、Imχ^(3)スペクトルは二光子吸収、光シュタルク効果の成分で表されることがわかった。また、ドープしたP3HTの場合と異なり、吸収飽和成分の寄与はほとんどないことがわかった。このことより、PEDOT-PSSにおいては励起状態の速い緩和の可能性が示唆された。3.金属-ポリマー界面におけるポーラロンの生成とその光学応答P3HTをITOとアルミニウム電極ではさんだサンドウィッチ型の素子について、電場印加による吸収スペクトル変化を調べた。Al-P3HT界面における電荷の移動とそれに付随したポーラロン吸収帯が観測された。電場印加により、空乏層幅が変化し、ポーラロン吸収強度が変化し観測された。この研究により、Al-P3HTの界面において、ポーラロンが形成していることを明らかにした。
子ども・若者支援における専門性の構築─「社会教育的支援」の比較研究を踏まえて─

本研究は、子ども・若者支援を“第三の領域"として措定し、その領域の共通基礎となる専門性研究とそれに基づく養成・研修教材の作成ならびに研修システムの構築を到達目標として研究を展開している。I.歴史的・教育福祉的理論研究分野では、ドイツの関連大学・機関等を訪問調査(6月及び10月)し、資料収集、分析及び課題の整理を行い、2020年2月にドイツ・カッセル大学でワークショップを共同で実施する予定となった。II.支援論・方法論研究分野では、不登校の子どもの居場所づくりと事例検討会の実施などを通じ、支援の方法論と実践臨床研究を深めた。その成果は、『不登校の理解と対応ガイドブックー保護者編ー』にまとめることができた。III.養成・研修システム、教材開発研究分野の(III-1)子ども領域では、支援スタッフの養成・研修プログラムに関する関係団体へのアンケート及びヒアリング調査を実施した。また、日本社会教育学会においてラウンドテーブル「子ども支援における「社会教育的支援」の実践と課題(3)」(6月、東洋大学)を実施した。(III-2)若者領域では、京都市ユースサービス協会など若者支援のユースワーク関係5団体と共同で次の取り組みが実現できた。(1)専門性研究と研修カリキュラムの構築に向けた枠組みづくりについては、ユースワークの価値観と目標観を定めた。これらに基づき、ユースワーカー養成講座などを試行的に実施し検証作業を続けている。(2)事例研究向けの研修教材(ワークブック)『ユースワークって何だろう!?12の事例から考える』を作成した。ワークブックは、ワーカー編7事例、マネージャー編5事例からなり、それぞれの事例では「事例提示ー支援者の対応例(4パターン)ー支援の解説」という記載の流れで構成されている。以上を通して、「社会教育的支援」概念の整理、支援者の専門性の構築と可視化に一定の役割を果たした。研究を3分野・4領域に区分し展開しているが、それぞれの領域の責任体制と役割分担を明確にし取り組んだ。そのため、各分野・領域において一定の成果を上げることができた。I.歴史的・教育福祉的理論研究分野では、国際比較的視点を取り入れつつ来年度の活動につなげている。II.支援論・方法論研究分野では、居場所づくり実践、研修活動の展開、ならびにそれらの成果と課題分析に基づくガイドブックの作成があげられる。III.養成・研修システム、教材開発研究分野:(III-1)子ども領域では実態調査に向けた取り組み、(III-2)若者領域ではユースワークにおける組織的な職能集団としての活動を可視化するワークブック作成、養成・研修の枠組みの整理が行われている。研究の3分野・4領域を引き続き展開し、キーワードとなっている「社会教育的支援」概念の比較・実践的研究を深める。それとともに、子ども・若者の各領域での専門性の枠組み構築を踏まえて、子ども・若者支援に通底する専門性及び専門職のあり方について検討する。
創傷治癒促進効果を有する生理活性物質含有人工皮膚の開発

本研究は深達性熱傷や難治性皮膚潰瘍の治療に使用されている生理活性物質含有軟膏に代わる新しい医療用具の開発を目指した基礎研究である。生理活性物質の一つであるジブチリルサイクリックAMPの水溶液をヒアルロン酸のスポンジに含浸させた人工皮膚を作成し、ラットを用いた動物実験により創傷治癒促進効果を調べた。同様に、遺伝子工学技術で生産される線維芽細胞成長因子(FGF)をヒアルロン酸のスポンジに含浸させた人工皮膚を作成し、ラットを用いた動物実験により創傷治癒促進効果を調べた。生理活性物質による創傷治癒促進効果とスポンジ材料自身による創傷治癒促進効果により顕著な新生組織の形成が認められた。この概念をさらに展開させるものとして生理活性物質を産生する線維芽細胞を生体材料からなるスポンジに組み込んだ人工皮膚の研究を展開した。線維芽細胞は種々の生理活性物質(サイトカイン)を産生するが、その中で特に血管新生を促進する血管内皮成長因子(VEGF)は難治性皮膚潰瘍の治療に極めて有効である。本研究では、VEGFの産生量をELISA法により測定した。生理活性物質を産生する線維芽細胞をスポンジに組み入れるためには細胞接着性の高い素材をスポンジ成分とする必要がある。そこで、ヒアルロン酸とコラーゲンからなる2層構造のスポンジを作成し、このコラーゲン部分に線維芽細胞を接着させた人工皮膚を作成した。ヒアルロン酸自身は細胞移動を促進する効果をもち、コラーゲン自身は細胞に対する走化性因子としての効果をもつ。そして、線維芽細胞から産生されるVEGFは血管新生を促進する効果をもつ。本研究は、生理活性物質を生体材料に含有させた人工皮膚の開発を行なう過程で、さらに発展させたものとして生理活性物質を産生する細胞を生体材料に組み入れた人工皮膚の開発を行った。現在、難治性皮膚潰瘍の治療にはアクトシン軟膏が使用されている。この軟膏にはジブチリルサイクリックAMP(DBcAMP)が含まれており、この物質は治癒を促進する作用をもつ。しかしながら、軟膏にる治療は頻繁に包帯交換を必要とする。そこで、本研究では創傷治癒促進効果をもつ生体材料であるヒアルロン酸に着目し、ヒアルロン酸のスポンジに生理活性物質であるDBcAMPを含有する人工皮膚の開発を進めている。ヒアルロン酸のスポンジは、水溶性エポキシ化合物で分子間架橋した上層と未架橋の下層からなる2層構造をもつ。ラット背部に全層皮膚欠損創を作成して、EOG滅菌したヒアルロン酸スポンジを貼付し、さらにDBcAMP水溶液を含浸させて市販のポリウレタン膜製被覆材で被覆保護して包帯固定した。対照実験として、ヒアルロン酸スポンジ単独使用および市販のアルギン酸カルシウム塩不織布の創傷被覆材を使用した。創面積の変化と肉芽組織形成に関して、肉眼的ならびに組織学的に治癒効果を評価した。アルギン酸カルシウム塩不織布の創傷被覆材を適用した場合は、材料が創傷面に残留するため創面積の減少と肉芽組織形成が物理的に抑制される結果となった。これに対して、ヒアルロン酸スポンジ単独使用の場合は、材料の残留は認められず、良好な肉芽組織が形成され、それに伴う創面積の減少が観察された。ヒアルロン酸スポンジにDBcAMP水溶液を含浸させた場合には、さらに良好な血管新生に富む肉芽組織が形成され、それに伴う創面積の顕著な減少が観察された。この研究成果はJ.Biomater.Sci.Polymer Ed.に投稿する予定である。本研究は、深達性の褥瘡や難治性皮膚潰瘍の治療に使用されている生理活性物質含有軟膏に代わる新しい医療用具の開発を目指した基礎研究である。

生理活性物質の一つであるジブチリルサイクリックAMPの水溶液をヒアルロン酸のスポンジに含浸させた創傷被覆材を作成し、ラットを用いた動物実験により創傷治癒促進効果を調べた。発酵法で製造された分子量約200万のヒアルロン酸の粉末を蒸留水に1%の濃度で溶解し、希塩酸でPH3.5に調整し、所定量の水溶性エポキシ化合物を添加してポリスチレン容器に入れて50°Cの条件で5時間反応させながら濃縮した。その後、-85°Cの冷凍庫で急速凍結して、凍結真空乾燥機でスポンジ状のシートを作成した。このスポンジを蒸留水に入れて未反応の架橋剤を洗浄除去し、再度、凍結真空乾燥により精製されたスポンジ状のシートを作成した。このスポンジを滅菌袋に入れ、121°Cの条件で2時間、乾熱滅菌した。ヒアルロン酸スポンジは、エチレンオキシドガスやγ線による滅菌では変性してしまうことが判明したので乾熱滅菌を行った。ジブチリルサイクリックAMPは、水分のある状態での長期保存や滅菌において変性するため、使用する際に、水溶液を調製して濾過滅菌し、これを乾熱滅菌したヒアルロン酸スポンジに含浸させて皮膚欠損創に適用した。ラット背部全層皮膚欠損創にヒアルロン酸スポンジを適用し、ジブチリルサイクリックAMPの水溶液を含浸させ、ポリウレタン製の創傷被覆材で密閉して伸縮性テープで圧迫固定して創傷治癒過程を肉眼的ならびに組織学的に調べた。市販の創傷被覆材であるアルギン酸製の被覆材と比較して顕著な創傷治癒促進効果を発現した。ヒアルロン酸スポンジの製法に関しては平成13年1月に特許申請を行ったので、今後、学会発表を行う。来年度は、他の生理活性物質としてアスコルビン酸2リン酸を使用して、ヒアルロン酸スポンジを基材とした新規の創傷被覆材の基礎研究データを蓄積し、新規の創傷被覆材の開発を目指す。本研究は、深達性の褥瘡や難治性皮膚潰瘍の治療に使用されている生理活性物質含有軟膏あるいは生理活性物質含有水溶液に代わる新しい人工皮膚(医療用具あるいは医薬品)の開発を目指した基礎研究である。生理活性物質の一つであるジブチリルサイクリツクAMPの水溶液をヒアルロン酸のスポンジに含浸させた創傷被覆材を作成し、ラット背部全層皮膚欠損創に適用して創傷治癒促進効果を調べた。ヒアルロン酸スポンジ単独の場合は、市販の創傷被覆材であるアルギン酸製の創傷被覆材と比較して顕著な創傷治癒促進効果を発現した。ジブチリルサイクリックAMPをヒアルロン酸スポンジに含浸させた場合は、さらに顕著な創傷治癒促進効果を発現した。次に、生理活性物質として細胞成長因子であるヒト線維芽細胞成長因子(aFGF)の性能評価を行った。ヒト線維芽細胞成長因子がヒト皮膚由来の線維芽細胞の増殖を顕著に促進する最適添加濃度を培養フラスコ内で明らかにした。ヒト線維芽細胞成長因子を含浸させたヒアルロン酸スポンジを使用した臨床試験を行うための予備試験としてラット皮膚由来の線維芽細胞の増殖を顕著に促進する最適添加濃度を培養フラスコ内で明らかにした。そして、ヒト線維芽細胞成長因子を含浸させたヒアルロン酸スポンジをラット背部全層皮膚欠損創に適用して創傷治癒促進効果を調べた。