hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
EISCATレーダーを用いた国際共同実験による超高層大気の研究

太陽風エネルギーが地球環境へ流入・蓄積・解放する領域を広くカバーするEISCATレーダシステムを用いた観測・研究は、太陽風・磁気圏・電離圏結合の解明のみならず、太陽風エネルギーの地球大気環境への流入、それに伴う大気擾乱、域極中層大気の変質、気候変動への影響などの機構解明に大きな貢献をすることが期待される。本年度は次の項目を実施した。(1)高電子密度領域の極方向移動現象。2つのレーダーシステム(ESR and VHF radar)を用いた特別実験データの解析を進め、高電子密度領域の極方向移動の物理的解明を試みた。(2)下部熱圏ダイナミクス。2つのレーダーシステム(ESR and UHF radar)を用いたEISCAT特別実験を実施し、風系のみだけでなく、その原因たる温度構造の解明を試みた。また、これまであまり観測が行われていない極域下部熱圏におけるプラネタリー波に注目して研究を進めた。(3)オーロラ電流。地磁気擾乱時には極域電離圏において膨大な電流が流れており、その電流は磁気圏と沿磁力線電流を通して結合している。そこでEISCATレーダの特別実験データから沿磁力線電流を導出し、3次元電流系の研究を行った。(4)イオン流出現象の研究。これまで取得されたデータを用いて、イオン流出現象発生に大きく関係する加熱現象、さらには衛星同時観測データを用いてイオン流出現象の物理メカニズムの解明を試みた。(5)降下電子エネルギー。EISCAT UHFレーダと4波長フォトメーターの同時観測を行い、降下電子エネルギースペクトルの研究を実施した。そのためトロムソにおいて、4波長フォトメーターを設置した。これら以外にも、10年以上にわたる膨大なEISCATデータを用いて、超高層大気物理に関連した種々の研究が実施されている。(1)ブラックオーロラ。輝くオーロラの中に、フィラメント状または渦巻き込み型のような陰の部分が見られる。これはあたかも、オーロラが「黒く」輝いているように見える。この現象に付随する物理過程を解明するため、EISCATおよび、高感度テレビカメラ、全天・狭視野デジタルカメラを用いたキャンペーン観測を行った。EISCAT観測には最近開発されたarc1観測モード(時間分解能が0.44秒、高度分解能1km)を用いた。(2)高電子密度領域の極方向移動現象。(3)オーロラ電流。(4)イオン流出現象。
日常生活の健康関連行動と実験室場面の心理生物学的ストレス反応性との関連性

本研究は,実験的-フィールド研究のモデルに基づいて,日常生活場面の健康関連行動と実験室場面でのストレス課題に対する心理生物学的ストレス反応性との関連性を明らかにすることを目的とした.本年度は,対象者に健康関連行動調査を実施し,望ましい健康行動を実施している個人と実施していない個人を選抜し,実験室でのメンタルストレス負荷による心理生物学的ストレス反応性と作業成績の差異について検討した.また,BDIによる抑うつ傾向の強い個人の特徴についても検証した.1.望ましい健康行動を実施している個人と実施していない個人の比較望ましい健康行動を実施している個人は,実施していない個人に比較してfree-MHPGとコルチゾールの反応性が低く,s-IgAの反応性が高かった.この知見は昨年度の研究と同様であり,生物学的反応の方向性を明らかにした.すなわち,日常生活場面の健康行動が実験的に惹起される反応に影響することを示唆している.主観的ストレス反応についてもストレス負荷がかからない方向性を示した.作業成績については,望ましい健康行動を実施している個人の正解率が優れていた.日常生活で望ましい健康行動を実行している個人は,メンタルストレステストによって誘発される心理生物学的ストレス反応性が課題に対して積極的に取り組み,ネガティブな気分を抑制していることを示唆している.2.抑うつ傾向の強い個人の特徴BDIによって抑うつ者と健常者を抽出し,メンタルストレステスト負荷時の心理生理学的ストレス反応の差異について検討した.抑うつ群は,健常群に比較して,主観的ストレス反応を強く自覚しており,s-IgA分泌量が低値であり,課題の作業成績も悪かった.抑うつ者は,健常者に比べ,課題による認知的混乱が強くなり,それに伴い主観的なストレスを強く認識し,免疫活性も低いことが示唆される.本研究は,実験的-フィールド研究に基づいて,日常生活場面の健康関連行動と実験室場面でのストレス課題に対する心理生物学的ストレス反応性との関連性を明らかにすることを目的とした.本年度は,実験室でのストレス課題として,ストループ干渉課題,運動負荷及び温泉入浴を用いた際の心理生物学的ストレス反応性を検討した.また,フィールド場面で健康関連行動の調査を検討した.その結果,以下のような知見を得ることができた.free-MHPGをガスマス法,s-IgAをEIAキット,コルチゾールをELISAキットにて測定した.ストループ干渉課題では,free-MHPG, s-IgA及びコルチゾールともに,上昇し,回復期で基準値に戻った.運動負荷では,free-MHPGとコルチゾールは有意に上昇したが,s-IgAは変化が認められなかった.温泉入浴では,コルチゾールは有意に上昇したが,free-MHPGとs-IgAは変化が認められなかった.s-IgAの変化は個人差が大きかった.2.主観的ストレスの反応性主観的ストレス反応性を,ストレス状態質問紙とPOMSを用いて測定した.ストループ干渉課題は,ネガティブな気分が惹起し,ポジティブな気分が低下した.自己注目,コントロール感,課題関連妨害思考,課題無関連妨害思考が減少した.運動負荷と温泉入浴では,ポジティブな気分が上昇し,ネガティブな気分が下降した.3.ストレス反応性と課題遂行成績との関連性作業成績と心理生物学的ストレス反応性との関連性を検討したところ,課題中にs-IgAが低値を示す個人に比較して高値を示す個人ほど作業成績が高かった.4.健康関連行動の調査健康関連行動調査票を同一被験者に一年間に4回実施し,健康行動,健康信念,健康知識及び健康に関するコントロールの所在の変化について検討した.望ましい健康行動と望ましくない健康行動の差異を明らかにした.全体的に健康関連行動に大きな変化は認められず,個人の持っている健康観はほぼ固定化されていた.本研究は,実験的-フィールド研究に基づいて,日常生活場面の健康関連行動と実験室場面でのストレス課題に対する心理生物学的ストレス反応性との関連性を明らかにすることを目的とした.本年度は,対象者に健康関連行動調査を実施し,望ましい健康行動を実施している個人と実施していない個人を選抜し,実験室でのメンタルストレス負荷による心理生物学的ストレス反応性と作業成績の差異について検討した.同時に,保育所に通所している子どもを対象者として,唾液の採取を行い安定性と妥当性も同時に比較検討した.その結果,以下に示す知見を得ることができた.1.望ましい健康行動を実施している個人と実施していない個人の比較望ましい健康行動を実施している個人は,実施していない個人に比較してfree-MHPGとコルチゾールの反応性が低く,s-IgAの反応性が高く,緊張覚醒やT-A, D, F及びCなどのネガティブな気分と課題無関連妨害思考が低かった.健康関連行動の各下位尺度を従属変数としストレス反応性を独立変数として重回帰分析を行ったところ,栄養と食事習慣とA-H,努力,嗜好品とコントロール感,ポジティブ健康行動と自尊心及び課題無関連妨害思考,運転行動と努力及びF,予防行動とコントロール感及びエネルギー覚醒との関連性が認められた.作業成績については,望ましい健康行動を実施している個人の正解率が優れていた.日常生活で望ましい健康行動を実行している個人は,実験室でのメンタルストレステストによって誘発される心理生物学的ストレス反応性が課題に対して積極的に取り組み,ネガティブな気分を抑制していることを示唆している.2.子どもの唾液サンプルs-IgAのみ分析対象としたところ,平均40.6±8.3であり,年齢及び性差でも有意な差は認められず安定性と妥当性を検証することができた.

今後子どもを対象としての基礎研究として位置づけられた.本研究は,実験的-フィールド研究のモデルに基づいて,日常生活場面の健康関連行動と実験室場面でのストレス課題に対する心理生物学的ストレス反応性との関連性を明らかにすることを目的とした.本年度は,対象者に健康関連行動調査を実施し,望ましい健康行動を実施している個人と実施していない個人を選抜し,実験室でのメンタルストレス負荷による心理生物学的ストレス反応性と作業成績の差異について検討した.また,BDIによる抑うつ傾向の強い個人の特徴についても検証した.1.望ましい健康行動を実施している個人と実施していない個人の比較望ましい健康行動を実施している個人は,実施していない個人に比較してfree-MHPGとコルチゾールの反応性が低く,s-IgAの反応性が高かった.この知見は昨年度の研究と同様であり,生物学的反応の方向性を明らかにした.すなわち,日常生活場面の健康行動が実験的に惹起される反応に影響することを示唆している.主観的ストレス反応についてもストレス負荷がかからない方向性を示した.作業成績については,望ましい健康行動を実施している個人の正解率が優れていた.日常生活で望ましい健康行動を実行している個人は,メンタルストレステストによって誘発される心理生物学的ストレス反応性が課題に対して積極的に取り組み,ネガティブな気分を抑制していることを示唆している.2.抑うつ傾向の強い個人の特徴BDIによって抑うつ者と健常者を抽出し,メンタルストレステスト負荷時の心理生理学的ストレス反応の差異について検討した.抑うつ群は,健常群に比較して,主観的ストレス反応を強く自覚しており,s-IgA分泌量が低値であり,課題の作業成績も悪かった.抑うつ者は,健常者に比べ,課題による認知的混乱が強くなり,それに伴い主観的なストレスを強く認識し,免疫活性も低いことが示唆される.
フリーラジカル-グルタチオン代謝連関と再潅流心筋障害に関する研究-SH化合物を用いた検討

心筋細胞内グルタチオン(GSH)代謝は酸素ラジカル障害に対して酸化-還元反応を介して細胞機能の保持に重要な役割を果たしているが、GSHは細胞膜を透過し難いとされている。グルタチオン前駆物質であるγ-glutamylcysteine ethyl ester(TEI2306)は細胞膜透過性に優れており、細胞内でグルタチオンが合成され抗酸化作用を示す。また、ebselenはグルタチオンペルオキシダーゼ様作用を有しており、抗酸化作用も報告されている。今回、これらの薬剤による心筋障害防止効果を検討した。大冠動脈枝を90分間閉塞-5時間再潅流し、心筋梗塞モデルを作成した。TEI2306(3,10mg/kg,各々n=10)は再潅流直前に静脈内投与し、ebselen(50mg/kg,n=18)は冠動脈閉塞前に経口投与した。心筋二重染色法(エバンスブルー、TTC)により梗塞量を算出し、局所心筋血流量は、カラーマイクロスフェア法により測定した。虚血部並びに非虚血部の心筋GSH含量、ミエロペルオキシダーゼ活性(白血球浸潤度)も同時に計測した。その結果、(1)梗塞量は、対照群に比しTEI群、ebselen群では有意に縮小した。虚血時の局所心筋血流量、血行動態の経時的変化には各群間で差はなかった。(2)虚血心筋では非虚血心筋に比しGSH含量が著明に低下したがTEI群、ebselen群の虚血心筋ではGSH含量の低下が抑制された。(3)虚血心筋のミエロペルオキシダーゼ活性はTEI群、ebselen群で有意に抑制された。以上、細胞内グルタチオン代謝制御剤により心筋虚血-再潅流障害は著明に抑制された。これらの薬剤は、虚血心筋での細胞内GSH含量を保持し細胞保護作用を示すと共に、虚血心筋への白血球浸潤を抑制することにより心筋障害防止効果を示すことが示唆された。心筋細胞内グルタチオン(GSH)代謝は酸素ラジカル障害に対して酸素一還元反応を介して細胞機能の保持に重要な役割を果たしているが、GSHは細胞膜を透過し難いとされている。グルタチオン前駆物質であるγ-gluta mylcysteine ethylester(TEI2306)は細胞膜透過性に優れており、細胞内抗過酸化作用を示す。さらに再潅流時に虚血心筋に浸潤する白血球の走化能の亢進と細胞内GSH量の低下との関連も指摘されている。今回、TEI2306による心筋障害防止効果を検討した。犬冠動脈枝を90分間閉塞-5時間再潅流し、心筋梗塞モデルを作成した。TEI2306(3,10mg/kg,各々n=10)は再潅流直前に静脈内投与した。その結果、(1)梗塞量は、対照群に比しTEI群では用量依存性に縮小した。

虚血時の局所心筋血流量、血行動態の経時的変化には各群間で差はなかった。(2)虚血心筋では非虚血心筋に比しGSH含量が著明に低下したがTEI群の虚血心筋ではGSH含量の低下が抑制された。(3)虚血心筋のミエロペルオキシダーゼ活性はTEI群で用量依存性に抑制された。以上、グルタチオン前駆物質TEI2306により心筋虚血-再潅流障害は著明に抑制された。TEIは、虚血心筋での細胞内GSH含量を保持し細胞保護作用を示すと共に、虚血心筋への白血球浸潤を抑制することにより心筋障害防止効果を示すことが示唆された。心筋細胞内グルタチオン-グルタチオンペルオキシダーゼ代謝系は酸素ラジカル障害に対して酸化-還元反応を介して細胞機能の保持に重要な役割を果たしている。ebselenはグルタチオンペルオキシダーゼ様作用、抗酸化作用を有しており、リポキシゲナーゼ阻害による抗白血球作用も報告されている。今回、ebselenによる心筋障害防止効果を検討した。犬冠動脈枝を90分間閉塞-5時間再潅流し、心筋梗塞モデルを作成した。ebselen(50mg/kg,n=18)は冠動脈閉塞前に経口投与した。心筋二重染色法(エバンスブルー、TTC)により梗塞量を算出し、局所心筋血流量は、カラーマイクロスフェア法により測定した。虚血部並びに非虚血部の心筋グルタチオン、ミエロペルオキシダーゼ活性(白血球浸潤度)も同時に計測した。その結果、(1)梗塞量は、対照群に比しebselen群では縮小した(39.1±4.9% VS 27.6±5.1%,p<0.05)。特に再潅流時にebselen血中濃度が高い群(>5μM、ebselen-H群)では著明に縮小した(20.8±3.1%)。(2)虚血心筋では非虚血心筋に比しグルタチオンが著明に低下したが(1.57±0.11 VS 0.63±0.10μmol/g,p<0.01)、ebselen群の虚血心筋ではグルタチオン含量の低下が抑制された(1.15±0.21μmol/g,p<0.05)。(3)虚血心筋のミエロペルオキシダーゼ活性はebselen群で著明に抑制された。以上グルタチオンペルオキシダーゼ様作用を有するebselenにより心筋虚血-再潅流障害は著明に抑制された。ebselenは、虚血心筋での細胞内グルタチオン含量を保持し細胞保護作用を示すと共に、虚血心筋への白血球浸潤を抑制することにより心筋障害防止効果を示すことが示唆された。
ドーパミン関連神経精神疾患モデルにおけるtPAの動態と機能解析

本研究では、ドーパミン関連神経精神疾患の動物モデルを用いて、その病態生理・病因にtPA-プラスミンシステムが関与しているかどうか行動薬理学的に解析した。その結果、tPA-プラスミンシステムが覚せい剤依存および覚せい剤精神病の形成に重要な役割を果たしていることが示唆された。さらに、脳内におけるtPA放出にドーパミンD1受容体刺激が重要であり、ドーパミンD1受容体-tPAシグナルが記憶形成に関与していることも明らかにした。これまでに我々は、組織プラスミノーゲン活性化因子(tPA)-プラスミン系が脳内のドーパミン(DA)遊離を調節することにより、モルヒネやニコチンの依存形成に重要な役割を果たしていることを明らかにした。さらに、tPA-プラスミンシグナルが側坐核における活動依存的なDA遊離、すなわち、生理的なDA遊離の制御にも関与していることを証明した。そこで本研究では、DAの関与が示唆されている統合失調症、発達障害およびパーキンソン病の動物モデルを作製し、これらDA関連神経精神疾患の病態生理・病因にtPA-プラスミンシグナルが関与しているかどうか調べた。さらに、神経精神疾患に対する治療薬の効果や副作用にtPAが関与しているかどうかについても検討し、tPA関連分子を標的とした新しい神経精神疾患治療薬の可能性について検討した。本研究では、統合失調症やパーキンソン病などのドーパミン関連神経精神疾患の動物モデルを作製し、その病態生理・病因に組織プラスミノーゲン活性化因子(tPA)-プラスミンシグナルが関与しているかどうか検討する。さらに、神経精神疾患に対する治療薬の効果や副作用にtPAが関与しているかどうかについても検討し、tPA関連分子を標的とした新しい神経精神疾患治療薬の薬理学的コンセプトの確立を目指す。平成19年度は、脳内におけるtPA放出の制御機構について、in situ zymography法を用いて解析した。ドーパミンD1受容体刺激により側坐核においてtPA放出が誘発され、その反応はドーパミンD1受容体アンタゴニストおよびPKA阻害剤により拮抗された。したがって、ドーパミンD1受容体-PKAシグナルがポストシナプス側からのtPA放出に重要であることが示唆された。さらに、メタンフェタミン(METH)を連続投与した覚せい剤精神病モデルマウスにおけるドーパミン神経伝達の異常にtPA-プラスミンシグナルが関与しているかどうか検討した。野生型マウスではMETH連続投与により側坐核におけるMETH誘発性ドーパミン遊離に逆耐性が観察されたが、tPA-KOマウスではドーパミン遊離の逆耐性現象は認められなかった。したがって、覚せい剤精神病モデルにおけるドーパミン神経伝達の異常亢進にtPAが重要な役割を果たしていることが示唆された。本研究では、統合失調症やパーキンソン病などのドーパミン(DA)関連神経精神疾患の動物モデルを作製し、その病態生理・病因に組織プラスミノーゲン活性化因子(tPA)-プラスミンシグナルが関与しているかどうか検討する。平成20年度は覚せい剤精神病および発達障害動物モデルを作製し、脳内におけるtPA関連分子の動態を解析することにより、その病態生理・病因にtPA-プラスミンシグナルが関与しているかどうか検討した。1.メタンフェタミン(METH)を連続投与した野生型マウス(覚せい剤精神病動物モデル)においては、METH誘発性DA遊離の増強とDA作動性神経系のマーカーであるチロシンヒドロキシラーゼ(TH)の減少が認められた。一方、tPA遺伝子欠損マウスではDA遊離の増強は消失したが、THタンパクの減少は野生型マウスと同程度であった。以上より、tPAは覚せい剤精神病におけるDA作動性神経系の機能亢進に関与していること、METHのDA作動性神経系に対する神経毒性には関与が少ないことが示唆された。2.離乳直後より隔離飼育を施した長期隔離飼育マウスの学習記憶・情動の変化と海馬における遺伝子発現の変化を調べた。長期隔離飼育マウスは学習記憶障害、情動異常および海馬における神経新生の低下を示した。しかし、海馬におけるtPA遺伝子の発現には変化は認められなかった。平成21年度は、前頭葉皮質のドーパミンが長期記憶に重要な役割を果たしていることから、長期記憶における前頭葉皮質のtPAの役割について行動薬理学的および神経化学的に解析し、認知症との関連性を検討した。

1.ドーパミンD1受容体アゴニストSKF38393の投与により、マウス前頭葉皮質において長期記憶形成およびタンパク合成に重要なシグナルタンパクERK1/2のリン酸化が用量依存的に増加した。2.SKF38393の投与により、マウス前頭葉皮質におけるtPAのタンパク発現が増加した。3.tPA遺伝子欠損マウスでは、新奇物体認知試験における認知記憶に障害が認められた。4.tPAと同様に、細胞外マトリックス分解活性を有する分泌型の亜鉛要求性マトリックスメタロプロテアーゼMMP-9の遺伝子欠損マウスにおいても、認知記憶障害が認められた。以上の結果より、前頭葉皮質におけるERK1/2の活性化およびtPAの合成にはドーパミンD1受容体が関与していることが示唆された。さらに、前頭葉皮質における細胞外マトリックスの再構成が長期記憶に重要な役割を果たしている可能性が考えられる。
地殻変動における応力の履歴に依存して発現する塑性歪みに関する研究

地殻変動は、応力の変化(弾性変形)やその絶対値(粘性流動)に依存して生じると考えられてきた。しかし、地殻変動は、応力の変化や絶対値だけでなく、実はその履歴にも依存して生じるのではないかと考えられる。本研究では、2011年東北地方太平洋沖地震前後の地殻変動データを解析することによって、地殻変動が応力の履歴に依存することを示すと共に、南海トラフ巨大地震が近付きつつある西日本で今後の地殻変動がどのようになるのかその理論的予測を示し、南海地震前に発生が懸念される内陸地震に備える一助とする。
脳内アミンニューロン系ストレス反応機構におけるサイトカインの関与

本研究はアミンニューロン系のストレス反応機構について、サイト力インの関与を中心に形態学的手法を用いて明らかにすることを目的とし、具体的には、まずストレス反応神経細胞分布領域を検索するために、成熟ラットに感染ストレスとして0.9%の生理食塩水に溶解したLPS投与(0、25、50、100mg/l00gbodyweight、i.p.)、情動ストレスとして拘束ストレス(30分)を施し、LPS投与60、120、180分後、及び拘束ストレス開始30、60、90分後に潅流固定し、全脳にわたるレベルにおいて抗c-FOS抗体によるABC免疫組織化学を行った。感染ストレスおよび情動ストレスによる視床下部室傍核におけるFOS結合蛋白は、その免疫陽性細胞核の発現数と分布形態においてよく似ていたにもかかわらず、大脳皮質におけるFOS蛋白発現は全く異なる分布を示した(Yokoyama and Sasaki,1999)。また、感染ストレス群および情動ストレス群において、延髄外側被蓋野および青斑核のノルアドレナリンニューロン分布領域にFOS蛋白が発現していたが、前頭前皮質に特異的に投射すると考えられるドーパミンニューロン分布領域である腹側被蓋野正中部では情動ストレス群においてのみFOS蛋白が発現していた(Yokoyama and Sasaki、投稿準備中)。また、LPSおよびサイトカイン投与、または情動ストレス時のアミン代謝回転の脳内各部位での変化について検討の準備段階としてマイクロパンチ法によるアミンとその代謝物の測定のためのHPLC-ECDシステムをたちあげた。本研究はアミンニューロン系のストレス反応機構について,サイトカインの関与を中心に形態学的手法を用いて明らかにすることを目的とし,具体的には,まずストレス反応神経細胞分布領域を検索するために,感染ストレスとして0.9%の生理食塩水に溶解したLPS投与(0,25,50,100μg/100gbody weight,i.p.),情動ストレスとして拘束ストレス(30分)を施し,LPS投与60,120,180分後,及び拘束ストレス開始30,60,90分後に潅流固定し,全脳にわたるレベルにおいて抗c-FOS抗体によるABC免疫組織化学を行った.感染ストレスおよび情動ストレスによる視床下部室傍核におけるFOS蛋白発現は,その免疫陽性細胞核の発現数と分布形態においてよく似ていたにも関わらず,大脳皮質におけるFOS蛋白発現は全く異なっていた(Yokoyama and Sasaki,投稿準備中).また,感染ストレス群および情動ストレス群において,延髄外側被蓋野および青斑核のノルアドレナリンニューロン分布領域にFOS蛋白が発現していたが,前頭前皮質に特異的に投射すると考えられるドーパミンニューロン分布領域である腹側被蓋野正中部では情動ストレス群においてのみFOS蛋白が発現していた(Yokoyama and Sasaki,投稿準備中).続いて,LPSおよびサイトカイン(IL-1,IL-6)投与,または情動ストレス時のアミン代謝回転の脳内各部位での変化について検討するため,マイクロパンチ法によるアミンとその代謝産物の測定をHPLC-ECDシステムを用いて現在施行中である.本研究はアミンニューロン系のストレス反応機構について、サイト力インの関与を中心に形態学的手法を用いて明らかにすることを目的とし、具体的には、まずストレス反応神経細胞分布領域を検索するために、成熟ラットに感染ストレスとして0.9%の生理食塩水に溶解したLPS投与(0、25、50、100mg/l00gbodyweight、i.p.)、情動ストレスとして拘束ストレス(30分)を施し、LPS投与60、120、180分後、及び拘束ストレス開始30、60、90分後に潅流固定し、全脳にわたるレベルにおいて抗c-FOS抗体によるABC免疫組織化学を行った。
酸性物質により誘起される氷の表面融解とそのオゾン破壊反応に対する影響

(1)ネガティブクリスタル法により氷の試料表面を作製する手法を確立した。これにより、汚染のない、面方位が厳密に規定された、分子レベルで平らな氷表面を得ることができた。また、ネガティブクリスタルの成長速度を制御することで、直径2mmサイズの表面を得ることが可能になった。(2)ファラデーセル型偏光解析装置に搭載した氷結晶容器に作成した氷結晶表面を置き、195K以下に冷却して、試料表面の偏光解析測定を行った。従来行われていたミクロトームなどによる研磨法で作成した試料表面では、明確な反射光スポットを検出できないが、ネガティブクリスタル法で作成した試料は完全な鏡面反射が実現でき、偏光解析の精度を十分確保できることが確かめられた。(3)ガラスプリズムを使用して、氷結晶表面に対するレーザー光の入射角を精密に決定し、0.01度の精度で入射角を決定できることを確認した。これにより、低温環境下での氷表面擬似液体層の精密測定実施法が確立された。(4)擬似液体層の厚みと屈折率をパラメータとして、最も簡単な一層モデルによる偏光変化のシミュレーションを行った。(5)氷結晶表面にHCIガスを吹きかけると、偏光シグナルに明確な変化が起こることが確認された。氷結晶表面に構造相変化が起きたことを強く示唆する。(6)連携研究者の佐崎は、氷/水界面での分子ステップのイメージを得ることに成功した。これは、氷と擬似液体層の問に界面構造の解析にも応用できる。(7)本研究により、低温環境下での氷の表面構造の精密解析手法を確立し、オゾン破壊物質により表面融解が促進される直接証拠が得られ、萌芽研究としての役割を十分に果たした。1.本年度は、主として実験システムの構築を行い、予備的な実験を実施した。まず、ファラデーセル型偏光解析装置に搭載可能な真空実験容器の設計し、その製作を行った。試料を冷却するために、ヘリウム圧縮型冷凍機により試料基盤を冷却可能なシステムとし、-150°C程度までの冷却が可能であることが確認された。また、本実験装置では、HC1ガスなどの強い腐食性のガスを使用するため、通常の真空装置では、必要な真空状態を作ることが困難である、このため、真空排気系に直接腐食性ガスが流入しないようなシステムを新たに考案した。2.氷結晶試料表面を作成するためにネガティブクリスタル法を用いるが、このための氷単結晶試料を作成するための単結晶育成装置を製作した。この装置により、直径30mm長さ20cmの良質の円筒状氷単結晶の供給が可能になった。供給できる単結晶の量は、2本/月であるが、実験に使用する量としては十分である。この単結晶を使い、氷のネガティブクリスタルを作りシステムも構築した。これは、細い注射針を氷単結晶に突き刺し、注射針を通して氷をゆっくり蒸発させるkとで、針の先端に六角柱状の穴を作る装置である。この装置で、1-2mmのサイズの清浄かつ面指数の決まった良質表面を作成することができるようになった。3.この試料を、真空容器に入れ、偏光解析装置で測定を開始した。このシステムで、氷表面薄膜の高感度測定が可能であることが明らかになっており、2年度には氷結晶表面にHC1ガスを吹き付けたときに表面構造の変化をモニターする本格的な測定を実施する。
σー共役系ポリシランをドナーとする新規光起電力材料の開発研究

直鎖状ポリシランの側鎖に良好な電子受容基であるフラーレンを導入し、ドナー・アクセプター系σー共役系高分子の合成に成功した。また、規則正しく分岐した構造を有するポリシランデンドリマーの末端にフラーレンを導入したフラロポリシランデンドリマーの合成にも成功した。得られたフラーレン含有ポリシランでは光照射による電荷移動が起こることが観測され、光起電力材料への応用が期待できる成果を得た。フェニル置換第一世代ポリシランデンドリマー(1G(Ph))にトリフルオロメタンスルホン酸と塩化アンモニウムを順に反応させ末端のフェニル基を塩素化した後,ビニル基を有するGrignard反応剤を反応させ末端に二重結合を持つデンドリマー1G(Vi)を合成した.次に,末端二重結合へ臭化水素を付加しハロアルカンを持つデンドリマー1G(CBr)を得た.その後,アジ化ナトリウムを用いてハロゲン置換基をアジ化し,アジド基を持つデンドリマー1G(N3)を合成した.さらに,1G(N3)と[60]フラーレンをトルエン溶媒中,加熱還流条件下で反応させることで1G(C60)を合成した.フラーレン導入前と導入後のデンドリマーの紫外吸収スペクトルを比較すると,フラーレン導入後では256 nmの吸収が大きくなり,320 nm付近に新たな吸収の肩が現れた.また,フラーレン導入後では吸収領域端が長波長領域(500 nm)まで広がった.これらの紫外吸収スペクトルの変化は,末端に導入したフラーレンに起因しているものと考えられる.さらに,フラーレン自身はTHFに全く溶けないが,フラーレンを導入したデンドリマーはTHFに容易に溶けて褐色を示し,他の有機溶媒への溶解性も良好であった.合成したフラロポリシランデンドリマーは薄膜の形成が容易に行えると考えられるため,加工性の向上および機能性材料への応用が期待できる成果を得た.この他にも全年度に引き続き、直鎖状のポリシランの側鎖にフラーレンが結合した高分子化合物についても、その分子量、置換基などを変化させた高分子について合成を検討した。種々のポリシランをナトリウム金属によるWürtzカップリングにより調製した。このとき、ドナー・アクセプター系の構築を見据えて、用いるモノマーの置換基および反応活性点の数を工夫した。反応活性点が2個であるモノマーから得られた直鎖状のポリシランをアセトンによる再沈殿法で精製することにより数平均分子量で500010000程度の直鎖状ポリシランを得ることができ、同様にメタノールで再沈殿させることにより数平均分子量で8001000程度の直鎖状ポリシランを得ることができた。また、モノマーの反応活性点を3個に増加させることで、ケイ素が三次元的なネットワーク状につながったポリシランを得ることもできた。これらのポリシランの側鎖官能基を活性な置換基に変換することで良好な電子アクセプターとして知られるフラーレンをポリシラン鎖に導入することに成功した。主な成果をまとめると以下の通りである。・アセトンによる再沈殿を行うことで精製すると高分子料のポリシランが得られた(数平均分子量で500010000程度)・メタノールによる再沈殿を行うことで精製すると高分子料のポリシランが得られた(数平均分子量で8001000程度)・三官能性モノマーでポリシランの合成を行うとネットワーク状ポリシランが得られた。・それぞれの直鎖状ポリシランに電子アクセプターであるフラーレンを側鎖官能基を通して直接共有結合で導入することに初めて成功した。・ネットワーク状ポリシランにもフラーレンを末端の官能基を通して共有結合で導入することに成功した。・フラーレン含有ポリシランと、母体となるフラーレンの無いポリシランの紫外可視吸収スペクトルおよび発光スペクトルに明らかな相違が見られた。これまでドナー・アクセプター系ポリシランの合成には、電子受容体としてフラーレンの導入を検討してきた。しかし、フラーレンをポリシランに共有結合を通して導入することは、フラーレンの立体障害や反応性の低さの原因から収率の高いものではなかった。今年度はフラーレンと同様に電子受容体として有望なペリレンの導入を検討した。導入に際しては反応収率の高いクリック反応を利用した。そのため、p-エチニルフェニル基を導入したペリレンを新規合成し、アジド基を有するポリシランと反応させることにより対応するペリレンを側鎖に有するポリシランを合成した。得られたポリシランの同定は各種各磁気共鳴および赤外吸収スペクトルにおいて行った。また、ペリレンおよびポリシランの紫外可視吸収スペクトルの測定を行った。また、これまで得られたフラーレンを側鎖に有するポリシランやフラーレンを末端に有するポリシランデンドリマーの電気化学的評価を行うため、光起電力を測定する為のデバイス作成を行った。ITO基板上にスピンコートによりPEDOT:PSSの薄膜を調製し、さらにその上にフラロポリシランをスピンコートにより薄膜を形成させた。

フラーレン含有率の高いフラロポリシランおよび低分子量のフラロポリシランでは、膜形成がフラーレンにより阻害され、良好な膜を作成することができなかった。一方、フラロポリシランデンドリマーは結晶性が高いため、スピンコートによる製膜には適さないことがわかった。有機金属化学前年度では直鎖状のポリシランの側鎖にフラーレンを導入することに主眼をおいて検討してきたが、本年度では枝分かれ構造のあるポリシランであるポリシランデンドリマーの末端にフラーレンを導入する反応を検討し、第1世代ポリシランデンドリマーの末端にフラーレンを導入したフラロポリシランデンドリマーの合成に成功し、その特異な紫外可視吸収スペクトルを明らかにすることができた。この成果は当該年度の目標をおおむね達成できたと言うことができ、次年度における種々のデバイス作成や薄膜の評価に資するものが得られたと考えられる。当初目標はフラーレン等を側鎖および末端に有するポリシラン合成手法の確立を目指すものであったが、平成24年度までにフラーレンとポリシランを直接共有結合で結びつけたフラロポリシランの合成に成功し、その紫外可視吸収スペクトルおよび発光スペクトルを明らかにすることができた。このことは十分に当該年度の目標をおおむね達成できたと言うことができる。合成したフラーレン含有ポリシランおよびポリシランデンドリマーの光照射による電子移動反応を、紫外・可視吸収スペクトルおよび蛍光スペクトルの測定により明らかにする。また、ケイ素鎖からフラーレンに一電子移動した後の電荷分離状態を、レーザー照射による過渡吸収スペクトル測定、蛍光寿命や温度依存性、波長依存性などから光反応機構などを詳細に調べる。さらに直鎖状あるいは分岐状といった構造が光励起に与える影響を検討し、従来にないσ-共役系をドナーとする光起電力性の評価を行う。また、フラーレン含有ポリシランおよびポリシランデンドリマーの光起電力の評価を行う。ITO基板上に導電材としてPEDOT:PSS薄膜を塗布し、その上にフラーレン含有ポリシランやポリシランデンドリマー薄膜をスピンコートにより作成する。さらに膜上にMgやAlを蒸着させた右図のような装置を組み、光照射時の導電性や起電力特性などを調べる。可能であれば、電気出力の波長依存性も測定し、分子の骨格構造に由来するσー共役の電子状態評価を電気化学的視点から探求する。本年度では主に、フラーレン末端を有するポリシランデンドリマーの合成を目指す。前年度で確立させた手法を用いて、種々の直鎖状ドナー・アクセプター系ポリシランを合成すると共に、主鎖骨格が高度に規則正しく分岐したポリシランデンドリマーを調製し、その末端にフラーレンのようなアクセプター分子を導入した分岐型の主鎖骨格を有するドナー・アクセプター系ポリシランデンドリマーの創製を行う。具体的には、主鎖がケイ素で構成される規則正しく分岐した構造を有するポリシランデンドリマーを、分岐した構造を有するシリルリチウム(分岐合成試剤)を用いる発散法により合成する。得られたポリシランデンドリマーの末端は保護基であるアリール基が球状に広がった分子の外側を向いて規則正しく配列することになる。この保護基を脱保護し、前年度に確立させた手法を用いてフラーレンをデンドリマー末端に共有結合で導入させる。
「萌える」キャラクタの顔と声のデザインのための科学的設計指針の構築

本研究は、従来、制作者達のセンスや経験に基づいて制作されていた萌えキャラクタ(萌えキャラ)の顔および声のデザインとその知覚印象との関係について知覚実験によって明らかにすることで、萌えキャラ制作のための科学的設計指針を得ることを目的としたものである。実験の結果、萌えキャラの顔は、美人キャラに比べて、丸顔で目が大きく開いていることが定量的に示された。また、萌えキャラの声は、基本周波数、スペクトル重心が高く、話速が速いことが明らかになった。これらは、未成熟な女性を示唆する特徴を示すものであった。アニメ、テレビゲーム、マンガなどは、現在、重要な輸出産業・文化として位置づけられ、「クールジャパン」コンテンツと呼ばれている。これらにおいて「萌え」というキーワードは重要な位置を占めている。本研究は、従来、制作者達のセンスや経験、勘に基づいて制作されていた「萌えキャラクタ」の顔および声のデザインとその知覚印象との関係について、心理学的・工学的手法による実験研究で明らかにすることで、「萌えキャラ」のための科学的設計指針を得ることを目的とする。本年度は、まずCGソフトを用いて、プロのデザイナに「萌える」顔および「美人だが萌えない」顔を作成させた。次に、両目の間の距離、目の大きさ、口の位置、顔輪郭の縦横比などのパラメータを両者の間で内挿的、外挿的に変化させた顔を作成した。これらの83種類の刺激素材を用いて、SD法を用いた印象評定実験を行い、因子分析を行った結果、これらのキャラクタの顔の印象は、「美しさ」、「派手さ」、「力強さ」、「大人っぽさ」の4因子で説明できることが分かった。また、美しくて、地味で、大人っぽい顔は美人と感じられ、美しくて、派手で、子供っぽい顔には「萌え」が感じられることが分かった。今後、様々な顔構成パラメータと印象との関係を精査していく予定である。一方、「おにいちゃん」という言葉を12人の声優が100通りの言い方で発話したアーカイブを用い、その印象をSD法を用いた実験で明らかにしたところ、これらの発話の印象は「美しさ」と「活動性」の2因子で説明でき、「萌え」は「美しさ」と関係が非常に深いことが明らかになった。また、「萌え」の度合いは、発話のプロソディーには大きく依存せず、発話者によって大きく異なる様子が見られた。今後、基本周波数、スペクトル重心、発話時間などのパラメータとの関係を精査していく予定である。アニメ、テレビゲーム、マンガなどは、現在重要な輸出産業・文化として位置づけられ、「クールジャパン」コンテンツと呼ばれている。これらのコンテンツにおいて「萌え」というキーワードは重要な位置を占めている。本研究は、従来、制作者達のセンスや経験、勘に基づいて制作されていた「萌えキャラクタ」の顔及び声のデザインとその知覚印象との関係について、心理学的・工学的手法による実験研究で明らかにすることで、「萌えキャラ」のための科学的設計指針を得ることを目的とするものである。「萌えキャラ」の顔デザインに関しては、現在までに、CGソフトを用いて、プロのデザイナに「萌える」顔および「美人」だが萌えない顔を作成させ、これらを基に様々なパラメータを変化させた顔を合成し、これらを用いた印象評定実験を行った。その結果、萌える顔及び美人顔の顔の構成要素のサイズ比を明らかにすることができた。一方、「萌える」声については「おにいちゃん」という言葉を12人の声優が100通りの言い方で発話したアーカイブを用い、「萌え」の印象と発話音のパラメータの関係を調べた。その結果、基本周波数、スペクトル重心がともに高く、発話速度が少し速い発話が「萌える」声であることが明らかになった。このことは発話者の声帯が未発達で声道長も短い、すなわちサイズが小さい発話者であることを示唆する証拠がある場合、「萌える」ことを意味する。アニメ、テレビゲーム、マンガなどは、現在、重要な輸出産業・文化として位置づけられ「クール・ジャパン」コンテンツと呼ばれている。本研究は、従来、制作者達のセンスや経験と勘に基づいて制作されていた「萌えキャラクタ」の顔及び声のデザインとその知覚印象との関係について、心理学的・工学的手法による実験研究で明らかにすることで、「萌えキャラ」の他、ヱmp科学的設計指針を得ることを目的としたものである。「萌えキャラ」の顔デザインについて、CGソフトを用いてプロのデザイナに「萌える」顔および「美人」だが萌えない顔を作成させ、これらを基に様々なパラメータを変化させた顔を合成し、印象評定実験を行った。その結果、萌え顔および美人顔を構成する顔パーツの構成比を、重回帰分析により明らかにした。これらの結果について検討した結果、本研究で得られた美人顔の構成比は、ある整形外科医の提唱する美人顔の構成比に合致しており、萌え顔の構成比は、実際のアニメ数作品に登場する萌えキャラクタのそれと合致することが示された。一方、「萌える」声については、「おにいちゃん」という言葉を12人の声優がそれぞれ100通りのしゃべり方で発話したアーカイブを用い「萌える」印象と発話音のパラメータとの関係を調べた。これらの発話音の基本周波数、スペクトル重心、発話速度と萌えとの関係について重回帰分析した結果、発話者のサイズが小さいことを示唆する証拠がある場合「萌える」ことが示された。

しかし、これらの発話音の各パラメータを変更した合成音を用いて、「萌え」との関係を調べた結果、これらの各パラメータがどの数値ゾーンに入ったとき「萌える」という単純な関係は得られず、これらパラメータ間の交互関係によって決定されることが明らかになった。「萌えキャラクタ」の顔デザインに関しては、「萌える」顔、および「美人」顔の様々な構成要素のサイズ比を具体的に求めることができた。例えば目の横幅と縦幅の比、顔の横幅と縦幅の比などである。ここまでは計画通りの成果であったが、本年度さらに、これらの比と実際の顔デザインとの関係を調べた結果、「美人」顔については、ある整形外科医が提唱する美人顔の構成比と合致し、「萌え」顔については、実際のアニメ数作品に登場する萌えキャラクタの構成比と合致することまで示された。これにより、本研究結果が実際の顔デザインにおいて有効な設計指針となり得ることが示された。声デザインについては、当初予定していた「萌えない」声の収録を取りやめ、アーカイブの音声を様々に分析合成を行いこれらと「萌え」の知覚との関係を精査した。その結果、これらの各パラメータがどの数値ゾーンに入ったとき「萌える」という単純な関係は得られず、これらパラメータ間の交互関係によって決定されることが明らかになった。以上のように顔デザイン、声デザインともに当初の計画より進展した。アニメ、テレビゲーム、マンガなどは、現在、重要な輸出産業・文化として位置づけられ「クール・ジャパン」コンテンツと呼ばれている。これらのコンテンツにおいて「萌え」というキーワードは重要な位置を占めている。本研究は、従来、制作者達のセンスや経験と勘に基づいて制作されていた「萌えキャラクタ(萌えキャラと略記する)」の顔および声のデザインとその知覚印象との関係について、心理学的・工学的手法による実験研究で明らかにすることで、「萌えキャラ」制作のための科学的設計指針を得ることを目的としたものである。「萌えキャラ」の顔デザインについて、CGソフトを用いてプロのデザイナに「萌える」顔、および、「美人」だが萌えない顔を作成させ、これらを基に様々なパラメータを変化させた顔を合成し、印象評定実験を行った。その結果、萌え顔および美人顔を構成する顔パーツの構成比を2次曲線を用いた重回帰分析により明らかにした。これらの結果について検討した結果、本研究で得られた美人顔の構成比は、ある整形外科医の提唱する美人顔の構成比に合致しており、萌え顔の構成比は、実際のアニメ数作品に登場する萌えキャラのそれと合致することが示された。一方、「萌える」声については、「おにいちゃん」という言葉を12人の女性声優がそれぞれ100通りのしゃべり方で発話したアーカイブを用い、「萌える」印象と発話音のパラメータとの関係を調べた。アーカイブ中の発話音の基本周波数、スペクトル重心、発話速度などを様々に変化させた合成発話音を用いて、「萌え」が感じられる度合いと、パラメータとの関係を調べた結果、基本周波数が高く、基本周波数の変動が大きく、発話速度が速い発話に対して「萌え」やすいという関係が分かった。ただし、基本周波数が高すぎたり、発話が速すぎると違和感が生じ、これらの関係は一定の数値の範囲内でしか成立しないことも明らかになった。
各種日本住血吸虫ワクチン分子の野外試験評価と効果発現の分子的機序の解析

日本住血吸虫カルパインのレコンビナントタンパクを大量精製して単クローン抗体の作製とブタでのワクチントライアルに供した。作製した単クローン抗体を用いた免疫組織化学的検討によりカルパインの住血吸虫での発現を発育過程に応じて追跡した結果、セルカリアの時期に分泌腺を中心に強い発現を認め、カルパインワクチンの効果発現の機序解明を示唆する所見を得た。ブタにおけるワクチン効果を中国側共同研究者と共に実施したがわずかに産卵抑制が観察されたものの感染抑止効果は観察できなかった。その原因を検討するために免疫群の抗体産生を経時的に観察したがマウスの実験で見られた感染によるブースト効果が見られず、ワクチンの投与法に検討の余地のあることが判明した。ブタの感染実験ではパラミオシンやGSTなど他のワクチン抗原が感染によるブースター効果を示すと考えられることからカルパインのワクチン候補分子としての特殊性が示唆された。昨年度に引き続いて検討したカルパインのDNAワクチンは耳部の皮下注射により高い抗体価の上昇を誘導することを確認したが抗体価の上昇と感染防御効果とは有意な相関を示さず、日本住血吸虫の感染防御に細胞性免疫の効果が大きいことが確認できた。CpGオリゴヌクレオチド(CpG ODN)が単独で発症阻止効果を持つことを観察したが、その強いTh1誘導効果をアジュバントとして応用する試みを行なった。マウスの実験ではCpG ODNの併用によって免疫応答がTh1にシフトすることが確認され、さらにCpGの経鼻投与でも同様の効果がみられた。CpG ODNの体内半減期が短いことから身体侵襲の少ない投与法を確立して頻回投与を行なうことも必要と思われた。以上を総括して家畜動物を標的とした日本住血吸虫ワクチンの実用化の方針を日中双方の研究者で確認した。人獣共通寄生虫感染症である日本住血吸虫症の制圧に、保虫宿主動物に対するワクチン実用化を図るため、パラミオシンとカルパインの大型動物での効果試験とその防御免疫誘導の分子機序を解析した。当初計画通り、パラミオシンとカルパインのレコンビナント分子作製を進め、マウスでの効果確認後、前者についてはブタを用いた試験を実施した。マウスでの予備実験ではパラミオシンが感染防御に強い活性を示すのに対して、カルパインは感染防御と虫卵肉芽腫形成抑止の双方に効果があることがわかった。特にカルパインでは免疫した個体に強いγインターフェロン産生が誘導され、また免疫した後のチャレンジ感染によってブースト効果が認められた。レコンビナント分子の作製が順調に進んだパラミオシンについては今年度、ブタでワクチン効果を試験したところ、前回の有意な防御効果が再現できなかった。投与方法、用いたアジュバント、実験に用いたブタの感染感受性などに問題があった可能性もあり、条件を再検討してワクチン効果の検討を試みることとした。保虫宿主動物の対策がヒトの感染にどのような影響を与えるのかを調べるために、中国湖南省の日本住血吸虫症流行地にモデル集落を設定し、そのベースラインスタディを実施した。揚子江沿いのこ洪市村を選び、住民の80%にあたる949名の検便検査と一部住民の血清検査とを実施した。その結果8.5%が検便にて虫卵陽性であり、虫卵陽性者の抗体検査で81%のsero-positive者を確認した。超音波検査で肝臓の繊維化を評価し、15才以上の虫卵陽性者の19.2%に住血吸虫性肝線維症の所見を認めた。これらのデータをもとに、カルパインとパラミオシンに対する抗体応答と感染防御について疫学的な評価を進めている。日本住血吸虫のパラミオシンとカルパインの家畜動物でのワクチン実用化に向けた実験を進めた。

カルパインはレコンビナントタンパク質を大量精製するために複数の発現系を比較検討したがGST融合タンパクでのみ大量精製が可能であったため、この方法を取ることとした。レコンビナント分子に対する単クローン抗体を作製して住血吸虫における発現分布を調べたが、日本住血吸虫とマンソン住血吸虫で、および雄虫と雌虫とで分布が異なり、免疫応答による障害部位にも種間での違いのあることを明らかにした。カルパインは通常の感染では抗体価が強く上昇する標的抗原ではないことがわかり、免疫による効果が期待されることも明かとなった。タンパク分子によるワクチン開発と平行して日本住血吸虫カルパインのDNAワクチンの可能性も検討した。タンパク質レベルでワクチン効果が確認されXXYYのDNA領域をZZZベクターに組み込み、大腸菌で増幅したあとBALB/cマウスの皮下にaaμgで投与した。投与したマウスbb匹中1匹でカルパインに対する抗体の上昇が観察された。しかし、このマウスに日本住血吸虫セルカリアをチャレンジ感染させたが回収虫体数には影響がなかったDNAワクチンの投与方法に依然として改善の余地が残されており、投与量、投与ルートについて引き続き検討を加える。同時に検討したCpGオリゴヌクレオチドの単独投与では強い発症阻止効果がみられ、DNAワクチンの増強効果が期待される。パラミオシンの家畜動物でのトライアルはすでに複数回実施しているが、今年度実施したトライアルではワクチン効果についての再現性を観察することができなかった。その原因を究明中であるが、抗体価の上昇は見られていることからワクチンタンパクの劣化等の問題というよりも投与タイミングやdoseなどの再検討が必要なことも示唆された。日本住血吸虫カルパインのレコンビナントタンパクを大量精製して単クローン抗体の作製とブタでのワクチントライアルに供した。作製した単クローン抗体を用いた免疫組織化学的検討によりカルパインの住血吸虫での発現を発育過程に応じて追跡した結果、セルカリアの時期に分泌腺を中心に強い発現を認め、カルパインワクチンの効果発現の機序解明を示唆する所見を得た。ブタにおけるワクチン効果を中国側共同研究者と共に実施したがわずかに産卵抑制が観察されたものの感染抑止効果は観察できなかった。その原因を検討するために免疫群の抗体産生を経時的に観察したがマウスの実験で見られた感染によるブースト効果が見られず、ワクチンの投与法に検討の余地のあることが判明した。ブタの感染実験ではパラミオシンやGSTなど他のワクチン抗原が感染によるブースター効果を示すと考えられることからカルパインのワクチン候補分子としての特殊性が示唆された。昨年度に引き続いて検討したカルパインのDNAワクチンは耳部の皮下注射により高い抗体価の上昇を誘導することを確認したが抗体価の上昇と感染防御効果とは有意な相関を示さず、日本住血吸虫の感染防御に細胞性免疫の効果が大きいことが確認できた。CpGオリゴヌクレオチド(CpG ODN)が単独で発症阻止効果を持つことを観察したが、その強いTh1誘導効果をアジュバントとして応用する試みを行なった。マウスの実験ではCpG ODNの併用によって免疫応答がTh1にシフトすることが確認され、さらにCpGの経鼻投与でも同様の効果がみられた。