hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
官能基化星型ポリマーの精密合成と特異な形態と表面を有するナノ物質の創製

我々が報告してきた一連の繰り返し法による星型ポリマーの連続合成法は全く新しい概念であり,これまで合成例がなかった望み通りの数と種類の腕セグメントを有するヘテロアーム星型高分子の系統的な精密合成が初めて可能になった.本年度の研究では,上記連続合成法の適用範囲の拡張を目的とし,イオン結合を利用した新規のポリマー合成を試みた.構成セグメントには,ポリスチレン(PS)と導電性ポリマーであるポリアセチレン(PA)を用いた.ミクロ相分離構造の形成後,PAセグメントのみを単離することができれば,新規ナノ材料開発への期待がもたれる.ここで,末端官能基化PAの直接合成は困難であること,PAは汎用溶媒に不溶であることを考え,末端官能基化ポリフェニルビニルスルホキシド(PPVSO)を合成し,末端官能基化PSとの相分離構造の構築後,PAへの変換を行うことを考えた.アニオンリビング重合法により,鎖末端にジメチルアミノ基を有するPPVSO,および鎖末端にカルボキシル基を有するPSの精密合成を行った.得られたポリマーを用い,アミノ基とカルボキシル基の相互作用を利用したイオン結合性ABブロックおよびA_2Bヘテロアームスターポリマーの合成を行った.IR,NMRスペクトルよりイオン結合の形成が示された.また,SLSにより求めた分子量はいずれの場合も計算値とよく一致しており会合体の形成を示唆している.次に,これらのポリマーを製膜した後,PPVSOセグメントのPA化反応を行った.反応の進行とともにフィルムは黒色へと変化し,不溶化した.トルエンで脱離成分を除去した後,IR測定により反応の進行を確認した.反応後のフィルムをヨウ素により染色(ドーピング)し,TEM観察を行った結果,A_2Bヘテロアームスターポリマーのフィルムにおいてラメラ構造(黒:PAドメイン)が観察された.PAラメラ相は長く直線的な形態を示しており,今後,その導電性を生かした新規デバイスとしての応用が期待される.我々が報告してきた一連の繰り返し法による星型ポリマーの連続合成法は全く新しい概念であり,これまで合成例がなかった望み通りの数と種類の腕セグメントを有するヘテロアーム星型高分子の系統的な精密合成が初めて可能になった.本年度の研究では,上記連続合成法の適用範囲の拡張を目的とし,イオン結合を利用した新規のポリマー合成を試みた.構成セグメントには,ポリスチレン(PS)と導電性ポリマーであるポリアセチレン(PA)を用いた.ミクロ相分離構造の形成後,PAセグメントのみを単離することができれば,新規ナノ材料開発への期待がもたれる.ここで,末端官能基化PAの直接合成は困難であること,PAは汎用溶媒に不溶であることを考え,末端官能基化ポリフェニルビニルスルホキシド(PPVSO)を合成し,末端官能基化PSとの相分離構造の構築後,PAへの変換を行うことを考えた.アニオンリビング重合法により,鎖末端にジメチルアミノ基を有するPPVSO,および鎖末端にカルボキシル基を有するPSの精密合成を行った.得られたポリマーを用い,アミノ基とカルボキシル基の相互作用を利用したイオン結合性ABブロックおよびA_2Bヘテロアームスターポリマーの合成を行った.IR,NMRスペクトルよりイオン結合の形成が示された.また,SLSにより求めた分子量はいずれの場合も計算値とよく一致しており会合体の形成を示唆している.次に,これらのポリマーを製膜した後,PPVSOセグメントのPA化反応を行った.反応の進行とともにフィルムは黒色へと変化し,不溶化した.トルエンで脱離成分を除去した後,IR測定により反応の進行を確認した.反応後のフィルムをヨウ素により染色(ドーピング)し,TEM観察を行った結果,A_2Bヘテロアームスターポリマーのフィルムにおいてラメラ構造(黒:PAドメイン)が観察された.PAラメラ相は長く直線的な形態を示しており,今後,その導電性を生かした新規デバイスとしての応用が期待される.
出芽酵母におけるゲノムの再編技術の開発と有用菌株育種への応用

本年度は、細胞内RNA含量を高めるためrRNA遺伝子の転写上昇を示す変異株の分離を計画した。RNAポリメラ-ゼIによるrRNA遺伝子の転写にはUAF(Upstream Activation Factor, RRN5, RRN9, RRN10からなる複合体)と呼ばれる転写活性化因子が必要である。この因子の活性を無くするとrRNA遺伝子の転写がほとんど起こらなくなり、増殖が著しく阻害される。そこでまず、RRN10遺伝子をPCRによって破壊することにより増殖が阻害されたrrn10株を取得した。実際にrRNA含量が減少しているかどうかをreal time RT-PCR法を用いて確認した結果、野生型株に比べrRNA含量が3040%減少している事が分かった。続いて、そのrrn10破壊株のEMS(ethylmethanesulfonate)処理により突然変異を誘導し、増殖が回復した7つの抑圧変異株を分離した。この抑圧変異株を用いた遺伝学的解析からすべての抑圧変異が優性変異である事、それらの変異は単一遺伝子の変異ではなく多重変異である事が分かった。次に抑圧変異株におけるrRNA含量を測定した結果、抑圧変異株ではrrn10破壊株に比べてRNA含量が約2050%増加していた。今後は、これらのrrn10破壊変異を持つ抑圧変異株にRRN10遺伝子を導入する事により、野生型の遺伝背景でrRNA含量の高い株を同定する予定である。その後、交雑によって、この抑圧変異を平成18年度に育種したrDNA遺伝子のコピー数の上昇を示す株に導入し、野生型株よりさらに高いrRNA含量を持つ株が育種することを計画している。本年度は、細胞内RNA含量を高めるためrDNAのコピー数を増加させることを考え、2つのrDNAクラスターを持つ異数体酵母株の構築を計画した。このためにまず、正常な第12番染色体を持つ株(SH6602株)とTRP1マーカーによってマークされた「rDNA人工染色体」を持つ株(ID-12株)を交雑し、四分子解析を行った。その四分子の中でTrp^+でしかも2つの胞子が生存したものを選別し、CHEFパルスフィールド電気泳動による核型分析とサザン解析によって正常な第12番染色体に加えてrDNA人工染色体を保有している6つの株を選別した。親株であるID-12株のrDNA人工染色体の長さは、これまでの研究によって、約1500kbであることがわかっており、これは、rDNA遺伝子の約150コピーに相当する。従って、これらの株におけるrDNA遺伝子のコピー数は、12番染色体由来のものと合わせて、合計で約300コピーであると予想される。実際、この6つの株のゲノムDNAを制限酵素で切断し、18SとADE2(ゲノム当たり1コピーの内在性コントロール)をプローブとしたサザン解析の結果から、予想通り、rDNA遺伝子のコピー数が約270375コピーである事が明らかになった。次にrDNA遺伝子のコピー数が増加した6つの株について、rRNAの含量をReal time RT-PCR法及びPerchloric acid法を用いて測定した。その結果、いずれについてもrRNA含量は親株と比べ有意な差は見られなかった。これらの株はいずれの株も野生型1倍体株が持つ150コピーよりrDNA遺伝子のコピー数が増加していたので、この結果は、rDNAのコピー数が増加しても、必ずしもrRNA含量が高くはならない可能性を示唆している。この可能性については、今後さらに慎重な解明が必要であると考えている。
V型分子モーターのメカニカルレギュレーション

V-ATPaseは、ATPの合成・分解を触媒するV1モーター部分と、プロトン駆動力で回転力を発生させるVoモーター部分からなる。両モーター間の回転軸は繋がっており、回転力の伝達により両モーター間のエネルギー伝達が起こる。回転中の回転軸サブユニット間のずれ込みが起こると伝達効率が変化する。この様なずれ込みが起こるかを検証し、「メカニカルレギュレーション」の可能性を探るのが本研究の眼目である。試料の調製法、回転プローブであるビーズの調製法、観察条件等の検討をさらに徹底的に行い、発見確率のさらなる改善に成功した。再構成したVoV1の性質を改善された観察系で調べ、回転触媒機構に関する基本的な性質を明らかにした。1分子同時観察系により、回転中の軸サブユニット間のずれ込みをFRET効率の変化として蛍光1分子観察により検出することを試みたが、回転にともなうFRET効率の変化が検出されたことはなかった。プロトン駆動力によるATP合成反応を詳細に調べたところ、プロトンが4つ透過したときにATPが1分子合成されることがわかった。Vo部分では1回転で12個プロトンが透過する。V1部分のATP結合部位は3つであり、この結果はATP合成反応時において両モーター間の回転が固く共役していることを示唆している。一方軸間の結合力を変化させうる変位導入により、ATP分解活性が一定なのにも関わらず、合成活性が20%以下に減少した。この結果は、軸サブユニット間の結合力の変化による両モーター間の共役効率が変化しうることを示唆する。軸間のずれ込みが起こっているのかもしれない。V-ATPaseは2002年に申請者らによって回転機構によって働くことが証明された回転分子モーターである。回転中の回転軸サブユニット間のずれ込みを1分子同時観察法で検証することにより、「メカニカルレギュレーション」の可能性を探るのが本研究の眼目である。1分子同時観察系により、回転中の軸サブユニット間のずれ込みをFRET効率の変化として蛍光1分子観察により検出するとともに、回転軸間の相互作用を変化させる変異導入により回転軸間のずれを議論する。1分子同時観察のための発現精製系の構築はほぼ終了した。同時観察するための試料には、V1の軸サブユニットであるFおよびVo側の軸サブユニットであるVo・dにそれぞれCy3とCy5が導入されている。ラベル化したV_oとV_1から再構成されたV-ATPaseが野生型と同様のATPase活性、ATP合成活性を持ち、カップリングしたintactなものであることを証明できた。この過程で、V1部分の再構成経路を明らかにすることができた。また、この修飾されたサンプルの回転も確認できた。データの収集には多くの回転分子の解析が必要である。一回の観察で1個程度であり、統計処理に足るデータ収集には問題があった。申請期間中に試料の調製法、回転プローブであるビーズの調製法、観察条件等の検討をさらに徹底的に行い、発見確率のさらなる改善に成功した。

1分子同時観察系により、回転中の軸サブユニット間のずれ込みをFRET効率の変化として蛍光1分子観察により検出することを試みたが、回転にともなうFRET効率の変化が検出されたことはなかった。プロトン駆動力によるATP合成反応を詳細に調べたところ、プロトンが4つ透過したときにATPが1分子合成されることがわかった。Vo部分では1回転で12個プロトンが透過する。V1部分のATP結合部位は3つであり、この結果はATP合成反応時において両モーター間の回転が固く共役していることを示唆している。一方軸間の結合力を変化させうる変位導入により、ATP分解活性が一定なのにも関わらず、合成活性が20%以下に減少した。この結果は、軸サブユニット間の結合力の変化による両モーター間の共役効率が変化しうることを示唆する。軸間のずれ込みが起こっているのかもしれない。
自閉症治療に対する新規DDS開発 -経鼻投与によるoxytocinの脳内送達-

Oxytocin (OXT)はアミノ酸9個からなるペプチドホルモンであり、視床下部で合成され脳下垂体後葉から分泌される。中枢神経系では神経伝達物質として機能し、愛情や信頼に基づく良好な人間関係を構築する生物学的基盤として重要であることが明らかとなっており、近年OXTはASDに対する治療薬としての期待が高まっている。しかし、ペプチドの脳移行は血液脳関門により厳しく制限されているためOXTを効率よく脳内送達可能なDDSの開発が望まれる。本研究では、脳への直接的な移行経路が確認されている鼻腔に着目し、化学修飾と製剤学的な工夫に基づくOXTの効率的な脳送達システムを構築する。本研究はオキシトシン(OXT)の鼻腔内投与後の脳送達性を向上する新たなDDSを開発することで、OXT鼻腔内投与によるASD治療法を構築することを目的とする。すなわち、OXTに吸収促進効果を有する脂肪酸修飾を施した誘導体あるいはOXTの鼻腔内滞留性を向上させる添加剤を添加した製剤を開発することで、OXTの鼻粘膜透過性を改善するとともに、鼻腔から脳への直接移行性の向上を目指す。まず、OXTに対してカプロン酸等の短鎖脂肪酸修飾体を作製した。その結果、膜透過性は高まったものの、溶解性が非常に低かった。この短鎖脂肪酸修飾OXTをマウスに鼻腔内投与し脳移行性を評価したが効率的な脳移行性を示さなかった。この結果から、膜透過性と溶解性のバランスのとれた短鎖脂肪酸修飾体を作製する必要があると考えられる。次に、microdialysis法(MD法)を用いたOXTの脳移行性を評価した。まず基礎的検討として、MD法の際に使用する透析probeの種類(透析膜の分子量サイズの大・小)、シリンジの流速(3 uL/min, 5 uL/min)を検討した。その結果、OXTの透析probeからの回収率は透析膜の分子量サイズの大きいprobe,透析膜の分子量サイズの小さいprobeの順に大きくなり、本実験には透析膜のないprobeあるいは透析膜の分子量サイズの大きいprobeを使用することにした。また、流速については、3 uL/minが5 uL/minより高濃度に回収できたものの、回収量自体は少なくなってしまうため、回収濃度と回収量のバランスから5 uL/minで実験を進めることにした。本年度はこの基礎検討を元にOXTあるいはOXT修飾体の脳移行性を検討する予定である。OXTに対してカプロン酸等の短鎖脂肪酸修飾体を作製した結果、脂溶性は高まったが、水溶性が非常に低い値を示した。その後、この短鎖脂肪酸修飾OXTをDMSOを少量用いて溶解し、マウスに鼻腔内投与後の脳移行性を評価したが効率的な脳移行性を示さなかった。これは、鼻腔内投与すると通常CSFなどを介して脳に直接移行するが、水溶性が非常に低いためCSFに移行することができなかったと考えられる。したがって、引き続き脂肪酸修飾体を作製し、脂溶性と水溶性のバランスに優れた修飾体を決定する必要があると考えられる。(1) OXTの脳内送達に対する短鎖脂肪酸修飾の影響:カプロン酸等を付加した脂肪酸修飾体を作製した結果、脂溶性は高まったものの水溶性が非常に低い結果となった。2019年度も引き続き、脂肪酸修飾体を作製し、脂溶性と水溶性のバランスに優れた修飾体を決定する。(2) OXTの鼻腔内滞留性の向上を目指した粉末製剤あるいは溶液製剤の作製:(1)の作製を進めると共に、OXT単独の脳移行性を高める異なる方法として、上皮細胞の繊毛運動によるOXTの鼻腔外への排泄を抑制し、鼻腔内滞留性を改善するために、溶解に伴い粘性を示すヒドロキシプロピルセルロースやカルメロースを添加する。添加濃度によっては、粘性の増大に伴い、基剤内でのOXTの拡散速度が律速となる場合があるため、至適な添加量を設定する必要がある。(3)鼻腔内投与後の動態解析、microdialysis (MD法)によるOXTの脳移行性及び薬理効果の検討:(1)及び(2)の結果に基づいて、最適化した修飾体と製剤処方で、動物に投与する製剤を調製する。マウス、ラットの鼻腔内に最適化製剤を投与した後、体内動態ならびに脳移行性を評価する。評価にはmicrodialysis法を用い、脳細胞外液中のOXT濃度を継時的に測定し、血漿中OXT濃度とともに薬物速度論解析を行う。同時に、血中コルチコステロン濃度を指標にOXTの薬理効果を評価し、体内動態や脳移行性との関連を明らかにする。

すなわち、OXTに吸収促進効果を有する脂肪酸修飾を施した誘導体あるいはOXTの鼻腔内滞留性を向上させる添加剤を添加した製剤を開発することで、OXTの鼻粘膜透過性を改善するとともに、鼻腔から脳への直接移行性の向上を目指す。まず、OXTに対してカプロン酸等の短鎖脂肪酸修飾体を作製した。その結果、膜透過性は高まったものの、溶解性が非常に低かった。この短鎖脂肪酸修飾OXTをマウスに鼻腔内投与し脳移行性を評価したが効率的な脳移行性を示さなかった。この結果から、膜透過性と溶解性のバランスのとれた短鎖脂肪酸修飾体を作製する必要があると考えられる。次に、microdialysis法(MD法)を用いたOXTの脳移行性を評価した。まず基礎的検討として、MD法の際に使用する透析probeの種類(透析膜の分子量サイズの大・小)、シリンジの流速(3 uL/min, 5 uL/min)を検討した。その結果、OXTの透析probeからの回収率は透析膜の分子量サイズの大きいprobe,透析膜の分子量サイズの小さいprobeの順に大きくなり、本実験には透析膜のないprobeあるいは透析膜の分子量サイズの大きいprobeを使用することにした。また、流速については、3 uL/minが5 uL/minより高濃度に回収できたものの、回収量自体は少なくなってしまうため、回収濃度と回収量のバランスから5 uL/minで実験を進めることにした。本年度はこの基礎検討を元にOXTあるいはOXT修飾体の脳移行性を検討する予定である。OXTに対してカプロン酸等の短鎖脂肪酸修飾体を作製した結果、脂溶性は高まったが、水溶性が非常に低い値を示した。その後、この短鎖脂肪酸修飾OXTをDMSOを少量用いて溶解し、マウスに鼻腔内投与後の脳移行性を評価したが効率的な脳移行性を示さなかった。これは、鼻腔内投与すると通常CSFなどを介して脳に直接移行するが、水溶性が非常に低いためCSFに移行することができなかったと考えられる。したがって、引き続き脂肪酸修飾体を作製し、脂溶性と水溶性のバランスに優れた修飾体を決定する必要があると考えられる。(1) OXTの脳内送達に対する短鎖脂肪酸修飾の影響:カプロン酸等を付加した脂肪酸修飾体を作製した結果、脂溶性は高まったものの水溶性が非常に低い結果となった。2019年度も引き続き、脂肪酸修飾体を作製し、脂溶性と水溶性のバランスに優れた修飾体を決定する。(2) OXTの鼻腔内滞留性の向上を目指した粉末製剤あるいは溶液製剤の作製:(1)の作製を進めると共に、OXT単独の脳移行性を高める異なる方法として、上皮細胞の繊毛運動によるOXTの鼻腔外への排泄を抑制し、鼻腔内滞留性を改善するために、溶解に伴い粘性を示すヒドロキシプロピルセルロースやカルメロースを添加する。添加濃度によっては、粘性の増大に伴い、基剤内でのOXTの拡散速度が律速となる場合があるため、至適な添加量を設定する必要がある。(3)鼻腔内投与後の動態解析、microdialysis (MD法)によるOXTの脳移行性及び薬理効果の検討:(1)及び(2)の結果に基づいて、最適化した修飾体と製剤処方で、動物に投与する製剤を調製する。マウス、ラットの鼻腔内に最適化製剤を投与した後、体内動態ならびに脳移行性を評価する。評価にはmicrodialysis法を用い、脳細胞外液中のOXT濃度を継時的に測定し、血漿中OXT濃度とともに薬物速度論解析を行う。
プロモーターから発現するlncRNAによるcyclin D1遺伝子の発現制御機構

本年度は主にpncRNA-Dのメチル化(m6A修飾)の影響について研究を進めた。昨年度の結果より、pncRNA-Dは通常、高いメチル化レベルを示し、メチル化レベルが減少すると半減期が延び、さらにpncRNA-Dのm6Aには核内RNA結合タンパク質であるYTHDC1が主に結合していることを明らかにした。しかし、YTHDC1をノックダウンしてもpncRNA-Dの半減期に変化はなかった。そこでpncRNA-DとTLSとの結合に関与しているのではないかと予想した。m6A修飾が起こりやすい配列としてGGACUという配列が知られているが、602塩基の全長を持つpncRNA-Dの配列中には一箇所しか存在しない。さらにその配列の周辺はRNA結合タンパク質TLSとの相互作用において重要であることが分かっている。そこでGGACU配列を中心に20ntのRNA断片を合成し、m6A修飾有無により2つのRNA断片を用意した。まずm6A修飾の有無により上記のRNA断片とTLSとの結合が変化するか、RNA断片とHeLa核抽出液を混ぜて確認したところ、m6A修飾が入っている断片でTLSとの結合が弱まった。in vitroの実験系でも、強制発現したYTHDC1を添加すると、低濃度よりTLSとの競合作用がみられ、等量を入れたところ完全に結合を阻害した。またYTHDC1をノックダウンしたHeLa細胞より作製した核抽出液との反応では、m6A修飾が入ったRNA断片においてTLSとの結合が回復した。RNAメチル化や高浸透圧ストレスが細胞周期に及ぼす影響についても検証した。METTL3をノックダウンすると、細胞周期がG0/G1期で止まることがわかった。高浸透圧でも同様の結果が得られた。そこで同じタイミングでpncRNA-Dをノックダウンすると、細胞周期のアレストが若干ではあるが解消された。本年度はlncRNAのメチル化という、研究が進んでいない分野でその意義を一端を解明することができた。RNAメチル化や高浸透圧ストレスによる細胞周期のアレストを、pncRNA-Dのノックダウンにより部分的に解消することを明らかにした。また細胞周期との関連や、そこにlncRNAがどう関与していくかの手がかりとなる研究結果を得ることができた。当初計画していた研究項目を達成できたため、(2)の評価とした。本年度の結果より、pncRNA-Dが細胞ストレス応答のみではなく、通常の細胞周期にも関与していることが予想されたので、pncRNA-Dと細胞周期、細胞増殖につい研究を進める。本研究の目的はlong noncoding RNAによるCCND1遺伝子の発現制御メカニズムを解明することである。平成29年度は、研究計画に従い1メチル化したpncRNA-D断片6とTLSとの結合、2pncRNA-Dのm6A修飾を認識するリーダータンパク質の決定、3修飾酵素であるMETTL3とリーダータンパク質のノックダウンによる影響、を検証した。1については、m6A修飾を受けていると考えられる配列(GGACU)を中心に、20ntの長さのRNAを合成し、m6A修飾を入れたものと入れていないRNAを用意した。それぞれ5'側をbiotin標識しており、強制発現させたTLSとの結合を見た。その結果、m6A修飾単体ではTLSとの結合が強まることを明らかにした。2については、候補であったYTHDF1, 2, YTHDC1, hnRNP-A2B1の抗体を用いたRNA免疫沈降法によりYTHDC1が主にpncRNA-Dのm6A修飾を認識していることを明らかにした。3についてはMETTL3と2で同定したYTHDC1を、siRNAを用いてノックダウンした。METTL3のノックダウンではpncRNA-Dの発現量が上がり、さらに安定性が上昇した。YTHDC1のノックダウンはRNAの安定性には関与していなかったが、METTL3のノックダウンとともにTLSとの結合が強まった。以上より、m6A修飾がpncRNA-Dの安定性とTLSとの結合に関与していることを明らかにしたので、平成30年度はpncRNA-Dが通常の細胞周期にも関与しているか、に着目して研究を進める。また細胞ストレスにより誘導されるpncRNA-D自体の転写調節機構についても研究を進める。平成29年度の研究計画に従い、1ではpncRNA-Dのメチル化の有無によるTLSとの結合強度の違いを、2ではpncRNA-Dのm6A修飾を認識するリーダータンパク質がYTHDC1であることを同定した。3についてはMETTL3とYTHDC1のノックダウンによりpncRNA-DとTLSとの結合が強まることを明らかにした。

そこでGGACU配列を中心に20ntのRNA断片を合成し、m6A修飾有無により2つのRNA断片を用意した。まずm6A修飾の有無により上記のRNA断片とTLSとの結合が変化するか、RNA断片とHeLa核抽出液を混ぜて確認したところ、m6A修飾が入っている断片でTLSとの結合が弱まった。in vitroの実験系でも、強制発現したYTHDC1を添加すると、低濃度よりTLSとの競合作用がみられ、等量を入れたところ完全に結合を阻害した。またYTHDC1をノックダウンしたHeLa細胞より作製した核抽出液との反応では、m6A修飾が入ったRNA断片においてTLSとの結合が回復した。RNAメチル化や高浸透圧ストレスが細胞周期に及ぼす影響についても検証した。METTL3をノックダウンすると、細胞周期がG0/G1期で止まることがわかった。高浸透圧でも同様の結果が得られた。そこで同じタイミングでpncRNA-Dをノックダウンすると、細胞周期のアレストが若干ではあるが解消された。本年度はlncRNAのメチル化という、研究が進んでいない分野でその意義を一端を解明することができた。RNAメチル化や高浸透圧ストレスによる細胞周期のアレストを、pncRNA-Dのノックダウンにより部分的に解消することを明らかにした。また細胞周期との関連や、そこにlncRNAがどう関与していくかの手がかりとなる研究結果を得ることができた。当初計画していた研究項目を達成できたため、(2)の評価とした。今後はsiRNAによりYTHDC1やMETTL3をノックダウンすることで、細胞周期にどのような影響が出るのかを検証する。また、pncRNA-Dによる細胞周期への影響を確認するため、細胞分裂や増殖が促進しているのかを検証する。今までの実験ではHeLa細胞を用いて研究を進めてきたので、今後は肺がんや乳がん由来の細胞株であるA549やMCF7を用いて、同様の実験を行う予定である。本年度の結果より、pncRNA-Dが細胞ストレス応答のみではなく、通常の細胞周期にも関与していることが予想されたので、pncRNA-Dと細胞周期、細胞増殖につい研究を進める。
岩手山における火山性微動・火山性地震の発生機構に関する観測研究

岩手山では1995年9月以降,火山性微動・火山性地震の活動が活発になった.特に,1998年4月8月には有感地震を含む活発な地震・微動活動が発生し,社会的にも注目された.われわれは,臨時地震観測点,地殻変動観測点の増設などを行い,活動機構の解明に努めた.これまでに得られた主な結果は以下の通りである.1.岩手山を取り囲む6点の定常観測点と15点の臨時観測点で地震観測を実施した結果,以下の事実が明らかになった.1)1998年3月8月,西岩手火山浅部において最大M3.4を含む7000個余りの地震が群発した.2)地震活動は西岩手火山東端の鬼ケ城付近に始まり,時間とともに西岩手火山西端の三ツ石火山西方まで拡大した.3)8月半ば以降地震活動はやや衰退する.特に震源域西部での活動の衰退が顕著である.2. 1998年9月3日,火山性地震活動域の南西端に隣接して,M6.1の地震が発生した.余震域は火山性地震活動域とほとんど重複しない.この地震直後の約1週間,岩手山山頂近傍の地震活動が一時活発になった.3.火山性地殻変動を捉えるために,連続観測点12点,繰り返し観測点8点の高密度GPS観測網を展開した,商用電源や電話回線のない山頂部での観測のために新たな観測システムを構築した.この観測網により,1998年2月8月に最大4cmに達する顕著な火山性地殻変動が観測された.水平変位分布から,これらの地殻変動は,はじめ西岩手火山東部深さ約10kmにあり,後に同火山西部深さ約2kmの浅部へ移動した圧力源(増圧)によって生じたことが解明された.9月3日の地震に伴う変動は,上記の変動と異なり,逆断層運動による変動である.以上の観測結果から,岩手山では1998年2月8月に山頂近傍のやや深部から西岩手火山浅部へのマグマ性流体の貫入・移動があり,これにともなって活発な地震活動と顕著な地殻変動が引き起こされたと推定される.岩手山では1995年9月以降,火山性微動・火山性地震の活動が活発になった.特に,1998年4月8月には有感地震を含む活発な地震・微動活動が発生し,社会的にも注目された.われわれは,臨時地震観測点,地殻変動観測点の増設などを行い,活動機構の解明に努めた.これまでに得られた主な結果は以下の通りである.1.岩手山を取り囲む6点の定常観測点と15点の臨時観測点で地震観測を実施した結果,以下の事実が明らかになった.1)1998年3月8月,西岩手火山浅部において最大M3.4を含む7000個余りの地震が群発した.2)地震活動は西岩手火山東端の鬼ケ城付近に始まり,時間とともに西岩手火山西端の三ツ石火山西方まで拡大した.3)8月半ば以降地震活動はやや衰退する.特に震源域西部での活動の衰退が顕著である.2. 1998年9月3日,火山性地震活動域の南西端に隣接して,M6.1の地震が発生した.余震域は火山性地震活動域とほとんど重複しない.この地震直後の約1週間,岩手山山頂近傍の地震活動が一時活発になった.3.火山性地殻変動を捉えるために,連続観測点12点,繰り返し観測点8点の高密度GPS観測網を展開した,商用電源や電話回線のない山頂部での観測のために新たな観測システムを構築した.この観測網により,1998年2月8月に最大4cmに達する顕著な火山性地殻変動が観測された.水平変位分布から,これらの地殻変動は,はじめ西岩手火山東部深さ約10kmにあり,後に同火山西部深さ約2kmの浅部へ移動した圧力源(増圧)によって生じたことが解明された.9月3日の地震に伴う変動は,上記の変動と異なり,逆断層運動による変動である.以上の観測結果から,岩手山では1998年2月8月に山頂近傍のやや深部から西岩手火山浅部へのマグマ性流体の貫入・移動があり,これにともなって活発な地震活動と顕著な地殻変動が引き起こされたと推定される.岩手山では1995年秋以降,火山性微動・火山性地震の活動が活発になっている.これらの活動の発生機構を明らかにするために,臨時地震観測,繰り返し測量を含む観測,ならびにデータの解析を行った.まだ,研究途中であるが,今年度,これまでに以下の結果が得られた.1.岩手山を取り囲む5点の定常観測点と5点の臨時観測点で地震観測を継続した.臨時観測点の内2点は1997年9月に設置した点である.観測の結果,1995年秋から1996年夏にかけて活発であった東山腹下深さ約10kmの火山性微動・低周波地震の活動は,その後やや低調であることがわかった.一方,これに代わって山頂付近浅部の高周波地震活動が活発になった.さらに,1997年12月以降は,南西山腹下3-4km付近で数Hzの卓越周波数をもつ地震が繰り返して群発していることが明らかになり,地震活動の変化が明瞭に把握された.

2.岩手山の北東,南東,南西に位置する3観測点で,孔井式歪計・傾斜計を用いて観測された地殻変動データの解析から、1996年8月に山頂直下浅部における増圧による可能性がある変動が見いだされた.その変動源は山頂直下の震源域とほぼ一致している.また,1997年末末からは山頂部の隆起を示す可能性のある変動が発生していることが明らかになった.この変動の開始時期は,南西山腹の地震活動が活発になった時期にほぼ対応しており今後の推移が注目される.3.山麓の7点でGPS観測を実施し,6点で精密重力測定を繰り返して実施した.しかし,これらの観測からは有意な変動は観測されなかった.以上の結果から,岩手山の浅部では小規模ながら火山活動が活発になっていると推定される.より詳細を解明するために,来年度も観測と解析を継続する.岩手山では1995年9月以降,火山性微動・火山性地震の活動が活発になった.特に,1998年4月8月には有感地震を含む活発な地震・微動活動が発生し,社会的にも注目された.われわれは,臨時地震観測点,地殻変動観測点の増設などを行い,活動機構の解明に努めた.これまでに得られた主な結果は以下の通りである.1.岩手山を取り囲む6点の定常観測点と15点の臨時観測点で地震観測を実施した結果,以下の事実が明らかになった.1)1998年3月8月,西岩手火山浅部において最大M3.4を含む7000個余りの地震が群発した.2)地震活動は西岩手火山東端の鬼ケ城付近に始まり,時間とともに西岩手火山西端の三ツ石火山西方まで拡大した.3)8月半ば以降地震活動はやや衰退する.特に震源域西部での活動の衰退が顕著である.2. 1998年9月3日,火山性地震活動域の南西端に隣接して,M6.lの地震が発生した.余震域は火山性地震活動域とほとんど重複しない.この地震直後の約1週間,岩手山山頂近傍の地震活動が一時活発になった.3.火山性地殻変動を捉えるために,連続観測点12点,繰り返し観測点8点の高密度GPS観測網を展開した.商用電源や電話回線のない山頂部での観測のために新たな観測システムを構築した.この観測網により,1998年2月8月に最大4cmに達する顕著な火山性地殻変動が観測された.水平変位分布から,これらの地殻変動は,はじめ西岩手火山東部深さ約10kmにあり,後に同火山西部深さ約2kmの浅部へ移動した圧力源(増圧)によって生じたことが解明された.9月3日の地震に伴う変動は,上記の変動と異なり,逆断層運動による変動である.以上の観測結果から,岩手山では1998年2月8月に山頂近傍のやや深部から西岩手火山浅部へのマグマ性流体の貫入・移動があり,これにともなって活発な地震活動と顕著な地殻変動が引き起こされたと推定される.
金属酸化物／炭素ナノコンポジットキャパシタの創製と界面特性の理解

ニッケル(水)酸化物とカーボンナノチューブ(CNT)をコンポジット化することにより、電気化学キャパシタ電極を創製した。ステンレス箔を基材とし、市販の多層CNTを電気泳動法で膜状に堆積させ、CNT表面にパルスメッキ法でニッケル粒子を微細に析出した後、熱処理によってニッケルを酸化させた。これを作用極として電気化学測定によりキャパシタとしての容量を測定した結果、熱処理中に微粒子粗大化を抑えつつ酸化反応を進めることが高容量化に有効であると示唆された。多層カーボンナノチューブ(CNT)の電気泳動による膜化の条件がCNTの集積状態に及ぼす影響を種々検討したが、CNTの集積状態に明瞭な違いは見られなかった。このため、CNTの電気泳動による膜化はすでに行っている条件で固定し、ニッケルの電解析出法について検討した。種々のメッキ条件を検討した結果、パルスメッキにより直径約7 nmの超微細ニッケル粒子をCNT電気泳動膜の表面に析出させることに成功した。また、それらを所与の温度・時間で大気中加熱した結果、この加熱により電気化学キャパシタとしての容量が大幅に増加した。加熱前後の試料に対してX線回折(XRD)分析を行ったが、ニッケル種由来の回折ピークは見られなかった。試料に対するX線光電子分光(XPS)分析によれば、加熱(酸化)時間の違いにより酸化ニッケル・水酸化ニッケル・金属ニッケルの表面組成が異なり、短時間の加熱で金属ニッケルが酸化されて水酸化ニッケルの含有量が増えること、さらに長時間の加熱では水酸基からの脱水が促されて酸化ニッケルの含有量が増えることがわかった。また、走査電子顕微鏡(SEM)観察によれば、長時間の加熱ではニッケル種粒子が粗大化していた。水酸化ニッケルが最も効率的に容量を増加させるという過去の研究に基づいて今回の結果をまとめると、ニッケル種における結晶性やニッケルの酸化状態よりもニッケル種微細粒子の析出サイズが容量に大きく影響し、この微細分散性が酸化ニッケル系キャパシタの容量増大のカギであることが明らかとなった。市販の多層カーボンナノチューブ(CNT)を利用して、ニッケル酸化物(NiO)系のスーパーキャパシタを高性能化することを目的とした。CNTを電気泳動によりステンレス基板上に膜状に集積させ、そこにパルスメッキ法でニッケル微粒子を析出させた。その後大気中での熱処理によりニッケル微粒子を酸化した。このCNT/NiO電極をサイクリックボルタンメトリや充放電測定により測定し、また表面のニッケルの酸化状態をX線光電子分光分析で評価することで、パルスメッキおよび熱処理の最適条件、ならびにニッケルの最適な酸化状態を見出した。CNT表面に最小で粒径7 nmのNiO系粒子を担持させることに成功し、適切な時間での熱処理によりキャパシタ容量も最大となった。さらに、膜組織の均一化を図り、CNT電気泳動パルスメッキ熱処理の操作を多重に行うと、キャパシタ容量がさらに改善した。高分解能透過型電子顕微鏡(HR-TEM)および電子エネルギー損失分光(EELS)測定を行ったところ、走査型電子顕微鏡では観察されないような超微細なNi系粒子(2 nm)がCNT表面上に析出していることがわかった。キャパシタ容量の改善にはこの超微細粒子が関与している可能性があり、今後、多重プロセス中のどの要因がもとでこの超微細粒子が析出しているかを、パルスメッキ条件のさらなる最適化とHR-TEM観察等を通じて解明し、展開を図る。金属材料CNT膜の形成からニッケル析出条件・熱処理条件の最適化まで、予定通り行えた。透過電子顕微鏡による試料観察を行うとともに、さらなる容量増加のための追加実験を行う。
先住民と貧困:メキシコ市の先住民移住者の事例

最終年度である本年度は、2004年(平成16年)8月の1ヵ月間、メキシコに滞在し調査活動に従事した。調査地は、オトミー(族)移住者の住むメキシコシティと彼らの出身農村ケレタロ州サンティアゴ・メスキティトラン(SM)である。主に収集した一次資料は、メキシコシティのクアウテモック行政区コロニア・ローマに位置する5つの不法占拠地に住むオトミー移住者116世帯についての世帯調査データである。日本では、殆どの時間を博士論文の執筆に取り組んだ。2005年3月には、「先住民と貧困:メキシコのオトミー・コミュニティサンティアゴ・メスキティトラン」と題する博士論文を東京大学大学院経済学研究科(現代経済専攻)に提出した。同博士論文は序章と結論も含め7つの章と1つの補論より構成されるが、そのすべてにおいて、200204年の間に貴会の助成を得て行った調査活動と執筆・発表活動の成果が生かされている。博士論文以外では、2005年中に出版される米村明夫編『貧困地域における教育開発:メキシコとブラジル(仮題)』明石書店に論文「メキシコのオトミー先住民コミュニティにおける学校教育の普及過程」を執筆した他、論文1本を学術雑誌に投稿中である。本年度は、2002年45月、2002年8月、2002年12月2003年1月にかけての3回、のべ5ヶ月間にわたりメキシコに滞在し、調査活動に従事した。調査地は、オトミー移住者の出身農村であるケレタロ州サンティアゴ・メスキテイトラン(SM)である。主な成果は、(1)オトミー族の教育に関するデータの収集、(2)91世帯への家計調査の実施、の2つである。前者については、教育水準の低さがオトミー族の経済的貧困の大きな原因となっているという点で、教育は重要な変数である。このため、現地の教育関係者への集中的なインタビュー等、教育についてのデータを広く集めた。家計調査は、農村SMの社会経済状況を正確に把握し数量的分析を行うことを目的になされた。現地の高校生を助手として雇い、かつ選ばれる世帯に偏りがないよう注意しつつ、6つの非オトミー世帯を含む91の世帯を訪問、それぞれの世帯に対し質問票調査を実施した。本年度はこのように一次資料の収集に主眼が置かれたものの、2002年11月16日に開催された日本ラテンアメリカ学会東日本部会において、「メキシコ先住民の教育問題-ケレタロ州サンティアゴ・メスキティトランのオトミーの事例を中心に-」という題目の発表(論文も配布)を行った他、2002年4月より参加しているアジア経済研究所の「メキシコとブラジルの教育」に関する研究会において同題の研究報告を執筆した。2003年3月2729日にかけて開催される2003年度LASA(国際ラテンアメリカ学会)大会には当初の予定通り参加し、「Schooling, Language and Poverty : Education and Indigenous People in Mexico」という題目の報告(論文も配布)をした。学術雑誌への投稿については、現在1本の英文論文を投稿中である。本年度は、2003年8月と2004年2月の2回、のべ6週間にわたりメキシコに滞在し、調査に従事した。2月の調査では、これらの他に、オトミー居住地域であるものの、SMとは異なりオトミー語教材を用いた二言語教育の実施されているイダルゴ州イスミキルパンも訪れた。主に収集した一次資料は、(1)オトミーの教育データ、特に二言語教育に関するデータ、(2)高齢のインフォーマントへのインタビューなどオトミーの歴史に関する情報、である。調査期間以外には、もっぱらオトミーを事例とする博士論文の執筆に取り組んだ。博論はメキシコ先住民の歴史と分析枠組を紹介したI章、農村コミュニティの変容を論じたII章、二言語教育も含む先住民の教育問題を論じたIII章、都市移住者の動向を論じたIV章、先行研究のない都市移住者への支援政策を評価したV章からなるが、本年度は特にIIII章の執筆を進めた。その一部は、2003年6月8日に開催された日本ラテンアメリカ学会第24回定期大会および9月27日に開催されたInternational Federation for Latin American and Caribbean Studiesの第11回大会で報告した。2004年3月27日には、21世紀ラテンアメリカ研究会で「メキシコ先住民と二言語教育」という題目の報告を行う。2002年4月より参加しているアジア経済研究所の「メキシコとブラジルの教育」に関する研究会では、最終報告を2004年3月に提出した。本報告を改正した論文を『アジア経済』に投稿する予定である。英語の学術論文については、本年度は投稿を見送っている。最後に、朝倉書店から近く出版される『新世界地理第14巻ラテンアメリカ』に論文「現代メキシコの貧困」を執筆した。

2005年3月には、「先住民と貧困:メキシコのオトミー・コミュニティサンティアゴ・メスキティトラン」と題する博士論文を東京大学大学院経済学研究科(現代経済専攻)に提出した。同博士論文は序章と結論も含め7つの章と1つの補論より構成されるが、そのすべてにおいて、200204年の間に貴会の助成を得て行った調査活動と執筆・発表活動の成果が生かされている。博士論文以外では、2005年中に出版される米村明夫編『貧困地域における教育開発:メキシコとブラジル(仮題)』明石書店に論文「メキシコのオトミー先住民コミュニティにおける学校教育の普及過程」を執筆した他、論文1本を学術雑誌に投稿中である。
ミトコンドリア内膜におけるタンパク質の制御機構に関する生命情報学的解析

最終年度までに開発を進めてきたミトコンドリアへの輸送に関わるN末端のシグナル(プレ配列)予測器をMitoFatesと命名し、当該分野で代表的な国際学会ISMB2014にて口頭発表を行い、また原著論文として発表した。既存の予測器に比してプレ配列予測の精度が高く、切断部位の予測に関しても精度を向上させたことが特徴である。精度の高さから、プロテオームのような大規模データに対しても偽陽性の割合を押さえつつ解析することが可能となっている。また、これまでに開発したミトコンドリアの1本型内膜膜貫通領域の予測器と切断部位が得られている出芽酵母のデータを付き合わせて解析を行った。膜貫通領域内部、あるいは下流で切断を受けるものは新規基質の候補となり得るためリスト化を行い、博士論文の一部として公開している。次なる課題として、開発したMitoFatesを用いることで、真核生物においてミトコンドリア移行プレ配列が進化的にどのような変遷を行っているかの解析を行った。プレ配列の認識と輸送にはミトコンドリア外膜のTOM40、ならびに内膜のTIM23複合体が協調的に働くことが知られているため、これら複合体の各遺伝子の有無とプレ配列の割合を解析した。真核生物から広くゲノムと遺伝子領域が得られる50種程度収集し、先述した複合体の各因子の有無を計算したところ、各因子の獲得時期は多様であることが示唆された。計算の結果、プレ配列の割合は、Tom20と協調的に働くことが知られるTom22ならびに内膜複合体Tim23の因子Tim21の有無と相関していることが示唆された。これらの因子が獲得され原始的な複合体が出現し、プレ配列の輸送系が次第に系統別に確立されていったであろうことが推測される。26年度が最終年度であるため、記入しない。ミトコンドリア内膜におけるタンパク質の局在や切断を解析するために、本研究ではシグナル配列(MTS)と膜貫通領域(脚D)、またタンパク質のドメイン等を利用したシステムの構築を考えている。本年度中に予定していたMTSの予測器の改良は順調に進行しており、酵母や植物だけではなくヒトなどを含む広範な生物種のミトコンドリアのシグナル配列を含んだテストデータセットにおいて、先行研究よりも高い精度で予測できることを確認した。この改良における重要な点の一つが、MPPというミトコンドリアマトリクス局在のプロテアーゼによって切断を受けるMTSの切断部位周辺の情報を整理した点であると考えられる。本年度中に、大規模実験により提供された切断部位周辺の情報を解析し、切断部位の周辺を表すプロファイルを作成しなおした。これにより、先行研究であるTargetP等よりも高い正確度でMPPによる切断部位の位置を予測することが可能となった。この切断部位の予測に関しても、ヒト、酵母、シロイヌナズナそしてイネなどにおける大規模実験の結果で検証を行っており、先行研究より高い正確度で予測が可能であることを確認している。切断部位周辺の配列は、ミトコンドリアタンパク質の輸送に関わるTOM20の認識モチーフと重なり得ることが知られている。切断部位周辺が切断に関する情報だけではなく、輸送に関係する情報も含んでいたため、重要な改良点となったと考えている。現在は、これらの結果をまとめ、論文誌への投稿用の原稿を作成している。また、内膜に局在するタンパク質の配列データも並行して集めており、現在解析用にローカルなストレージに保存を行っている。これとは別に、最近ヒトのプロテオームにおけるタンパク質分解に関する大規模な実験と、その結果を含んだデータベースが報告された。こういった将来の解析対象となるデータも併せて収集を行った。シグナル配列予測に関しては以前から進めていた進化的類縁配列を用いた解析を最終的にまとめ、原著論文として投稿・採択された。特にミトコンドリア局在シグナルは、一般的に言われているような「進化的に保存されている=構造的制約=重要」という一般的な認識と異なり、保存度が極めて低いのが特徴である。本研究では、その保存度の無さを逆に利用すると、予測力のある特徴として有望であると確認した。また、膜貫通領域の解析は、主として昨年度収集したデータに対し、ミトコンドリアの膜貫通領域と、それ以外の分泌系である小胞体や細胞膜など一般的な膜における膜貫通領域の間で何か差異があるのかを解析しつつ、予測力改善に焦点を当てた。スウェーデンのvon Heijneグループが提唱している一般的な膜貫通領域を定式化したモデルを用いて両者を比較解析した結果、以前から言われているようにミトコンドリア内膜は疎水性などが低く、長さも短い傾向が観測された。この疎水性の低さは、組成を解析したところ典型的なロイシンやイソロイシンの出現頻度がやや低く、特にグリシンの出現頻度が高いことで説明される。実際、グリシンの出現頻度は一般的な膜貫通領域に比して有意に多く、何らかの制約が存在していることを示唆している。また、位置毎の出現頻度を解析したところ以前報告されていたように、負電荷の残基の出現傾向が内膜ではマトリクス側で出現しにくく非対称であることが観測されている。予測力改善のため、こういった特徴量を数値化し、現在はSVMと呼ばれる機械学習の手法に与えることで膜貫通領域と細胞質の水溶性タンパク質内における判別が困難な部位との分類を精度良く行えるシステムを開発した。今後は、配向性などを考慮しつつ、より予測が難しい複数本型の正確な予測を行えるよう改善を目指す予定である。

最終年度までに開発を進めてきたミトコンドリアへの輸送に関わるN末端のシグナル(プレ配列)予測器をMitoFatesと命名し、当該分野で代表的な国際学会ISMB2014にて口頭発表を行い、また原著論文として発表した。既存の予測器に比してプレ配列予測の精度が高く、切断部位の予測に関しても精度を向上させたことが特徴である。精度の高さから、プロテオームのような大規模データに対しても偽陽性の割合を押さえつつ解析することが可能となっている。また、これまでに開発したミトコンドリアの1本型内膜膜貫通領域の予測器と切断部位が得られている出芽酵母のデータを付き合わせて解析を行った。膜貫通領域内部、あるいは下流で切断を受けるものは新規基質の候補となり得るためリスト化を行い、博士論文の一部として公開している。次なる課題として、開発したMitoFatesを用いることで、真核生物においてミトコンドリア移行プレ配列が進化的にどのような変遷を行っているかの解析を行った。プレ配列の認識と輸送にはミトコンドリア外膜のTOM40、ならびに内膜のTIM23複合体が協調的に働くことが知られているため、これら複合体の各遺伝子の有無とプレ配列の割合を解析した。真核生物から広くゲノムと遺伝子領域が得られる50種程度収集し、先述した複合体の各因子の有無を計算したところ、各因子の獲得時期は多様であることが示唆された。計算の結果、プレ配列の割合は、Tom20と協調的に働くことが知られるTom22ならびに内膜複合体Tim23の因子Tim21の有無と相関していることが示唆された。これらの因子が獲得され原始的な複合体が出現し、プレ配列の輸送系が次第に系統別に確立されていったであろうことが推測される。26年度が最終年度であるため、記入しない。予定していた予測器の改良は順調に進んでおり、ヒト等未検証であった生物種においても適用可能であることを確認した。また、データの収集も進めており、来年度に向けて準備はおおむね順調であると考えている。計画通り予測システムの構築は順調に進んでおり、予想外であったグリシンの出現頻度が高いという特徴などを発見し、利用している。本年度作成した予測器を他の特徴と組み合わせることで、ミトコンドリア内膜解析のパイプラインを作成する。これを用いて、既存のデータベース中の配列を解析する準備とする。これとは別に、パイプライン作成が順調に終了した場合、本年度収集した大規模なタンパク質切断の解析結果とも照合する。後者のデータはミトコンドリアタンパク質の切断も含んでおり、次年度以降の解析において非常に有用なデータである。MTS予測や内膜の解析と組み合わせることで、創薬支援に繋がると考えている。膜タンパク質と水溶性のタンパク質を判別する問題に関しては概ね終了したため、今後は配向性の予測に焦点を当てる。
エチオピアをケースとするサブサハラアフリカでの飢餓,環境保全及び食糧保障への農業科学技術の対処

前年度の一般情報検索、アジア中進国での調査事例及び前倒しで進めたアフリカ在の国際機関の現地訪問と調査分析を参考に、サブサハラアフリカの代表としてエチオピアでのフィールドワークによる事例研究を中心に行った。アジアでの事例研究の成果について技術移転の成功例とアフリカ諸国の問題点の事項とエチオピアとの相違点を比較した。また、国連機関の俯瞰情報や国際会議参加を通してアフリカ諸国での一般的な共通知見を調査、集積体系化整理する。これらに基づき、エチオピアに関し、一般的な見解とまた地域、民族、文化、政治など諸要素を含めた各論的な事項について検討を行った。ここでも、時間枠、資材(critical mass)、インフラストラクチャー、能力構築、社会受容、技術移転における多様な社会的制限要素や上流の政策について、重点を置き、農業科学技術での低プロファイルテクノロジー及びハイプロファイルテクノロジーそれぞれの要件を調査した。アジアとの比較、アフリカ諸国の一般的諸状況、エチオピアでの特化した情報の総合検討により、食糧保障と環境保全を念頭においたエチオピアへの農業科学技術のテクノロジートランスファーの可能性と要件を取りまとめた。本研究は、アフリカ諸国への参考となるように、報告書を兼ねた印刷物を英文で作成し情報の流通をはかり、修了とする。