hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
足細胞機能に関わる形態制御分子の解明

この分子の生理学的な役割を明らかにしていく予定である。ミオシンIIAの足細胞における生理学的役割を明らかにし、ミオシン重鎖の点突然変異が足細胞に及ぼす影響について分子レベルで解析することは、ミオシン重鎖の変異で起こるEpstein症候群などの疾患の診断と治療に大いに役立つものと考えている。本年度は以下のような成果を得た。非筋ミオシンIIA重鎖(Myh9)の点突然変異は腎障害を引き起こすことが知られているが、そのメカニズムは不明である。研究代表者らは非筋ミオシンIIAが腎糸球体足細胞においてビメンチン中間径フィラメントに結合すること、さらにR702C変異Myh9を発現する足細胞培養株を作成し、非筋ミオシンとビメンチンの結合能を調べた結果、変異ミオシンではビメンチンとの結合能が低下していることが明らかになった。昨年度作成に成功したR702C点突然変異Myh9のノックインマウスにおいてタモキシフェン誘導後に観察される形態学的変化の解析から、足細胞底部に出現する細線維束に焦点を当てて解析を進めてきた。その結果、足細胞の足突起消失とともに出現する細線維束には非筋ミオシン重鎖とアクチンが存在し、さらにalpha-actinin4の局在も明らかとなった。これらの3者はサルコメアと同様の分布を示す。このような変化は糸球体障害モデル動物で足突起の消失に伴う扁平化の際に認められる構造として報告されているものと類似している。このことから、変異ミオシンの発現に伴う形態学的変化の際に、アクチンと非筋ミオシンの相互作用が起こっていることが強く示唆された。変異ミオシンはATPase活性を失っており、サルコメア様の構造を示すものの収縮力は失っている可能性がある。これらのことから変異ミオシンはアクチンやalpha-actinin4とともにeffacementとして知られている足突起の消失と扁平化に関与しており、正常ミオシンとは異なる収縮力の低下による足細胞の接着力の低下が足細胞剥離の原因となっている可能性を示唆している。同様な所見をEpstein症候群の患者腎試料においても観察しており、新規作成したノックインマウスがヒトの病態を解析する上で、有用であることが判明した。現在、投稿準備中である。足細胞におけるミオシンIIA重鎖(NMMHCIIA)の局在をin vivoおよび培養足細胞において解析し、NMMHCIIAが突起形成に伴い細胞膜周囲のアクチン線維から突起に沿って束状化したビメンチン線維上に再分布すること、さらに両者の結合にプレクチンが介在することを明らかにした。Epstein症候群の原因となるR702C変異NMMHCIIAでは、ビメンチンとの結合能が低下し、突起形成が抑制された。以上の結果から、NMMHCIIAは足細胞において足細胞の突起形成とその維持に重要な役割を演じており、R702変異により中間径線維の結合能が低下することで足細胞の形態変化が起こる可能性が示唆された。次年度は以下のような研究を予定している。1.非筋ミオシンIIAの機能を解析する目的で、足細胞特異的に点変異を持った非筋ミオシンIIA重鎖を発現するマウスの作製を計画しており、次年度で解析を始める。
ロータリードラム型リアクターを用いた固定化植物細胞による二次代謝物の連続生産

植物細胞培養において、栄養源として培地に添加されるスクロースは、植物細胞の細胞壁中に含まれる酵素によって、単糖類であるグリコースとフルクトースに加水分解される。これらのスクロース分解過程を把握するために、スクロースの加水分解過程のないグルコースあるいはフルクトースのみを初期培地に添加した懸濁培養を行った。そして、両糖を別々に添加した培養ではグルコースの方が細胞増殖および二次代謝物生産が活発に起こること、また、両糖を等量づつ添加した培養ではフルクトースよりもグルコースの方が優先的に消費されることを実験的に明らかにした。さらに、グルコースとフルクトースを添加した培養結果から得られる個々の基質取り込み速度定数を算出し、スクロースを含む培養でのスクロースの分解速度定数を推算することにより、スクロース分解過程、グルコースとフルクトースそれぞれの取り込み過程を含む3つの基質消費過程が表現可能な速度論モデルを構築し、培養現象でのシュミレーションを行い、タバコ細胞培養における増殖や二次代謝物生産に及ぼす糖種変化の影響を考察した。これらの懸濁培養で最も良好な細胞増殖の見られたグルコースを添加した培地を用いて、アルギン酸カルシウムを担体とした固定化タバコ細胞の回分培養をロータリードラム型バイオリアクター内で行い、その細胞増殖および二代謝物生産に及ぼす固定化担体の影響を考察した。さらに、ロータリードラム型バイオリアクターを連続培養用に改良し、固定化細胞の連続培養における供給ガスの通気速度、酸素濃度を初め、希釈速度などの様々な因子の影響を検討すると共に、前述の速度論モデルを用いてこのような連続プロセスでの培養現象の解析を行っている。
コンクリートの圧縮破壊領域の推定とその性状評価

寸法、形状、最大骨材寸法を変化させたコンクリート円柱供試体の一軸圧縮試験をひずみ軟化領域に至るまで実施し、その軸方向局所ひずみ分布特性の詳細な検討を行った結果得られた成果の概要は以下の通りである。1.一軸圧縮応力下のコンクリートには、明らかにある特定長さの破壊領域(ひずみの局所化領域)が存在し、破壊領域の長さは、寸法、形状による影響よりもむしろ最大骨材寸法に大きく依存することが明らかになった。また圧縮破壊領域は、最大応力の80%まで応力が低下した時点を過ぎると、その点以降拡大する傾向はあまり見られず、破壊領域外においてひずみの戻り現象が顕著に現れることが示された。2.一軸圧縮応力下におけるコンクリートの圧縮破壊領域内の応力-局所ひずみ関係は、最大骨材寸法等の材料特性が同一なら、寸法、形状によらず唯一のものが存在する。また、最大骨材寸法が応力-局所ひずみ関係に及ぼす影響としては、最大骨材寸法が大きくなれば最大応力以降その挙動が脆性的な挙動を示すようになる。3.圧縮破壊領域内の消費エネルギーの概算値を推定した結果、その値としては約1020kgf・cm程度の値であることが分かった。今回は比較的数の少ない実験結果であるので、消費エネルギーを定量的に評価するには至らなかったが、さらに広範囲な実験・検討を破壊領域を明確にし、破壊領域内の挙動を詳細に調べる今回と同様の手順で進めていけば、コンクリートに対する圧縮破壊消費エネルギーを定量的に評価することができると考えられる。
mafおよびfos jun遺伝子群の細胞分化への役割

昨年度までにsmall Maf蛋白がCNC familyのbZip蛋白とヘテロ2量体を形成して血球細胞特異的な転写因子NF-E2として機能することなどが明らかになっていた。このNF-E2やv-Mafの転写活性化能を解析する過程で様々な細胞にMafあるいはNF-E2ヘテロ2量体とDNA認識特異性で類似する内在性の極めて強い転写促進活性の存在が観察された。この転写活性化因子は特にNF-E2と類似した認識配列特異性を有するが、gel shift法による解析ではNF-E2やMafのホモ2量体などよりかなり大きな移動度を示した。またMaffamily蛋白のdominant negative mutantを細胞に発現する実験などからも、この内在性の強い転写促進活性の本体はおそらく未知のbZip蛋白のヘテロ2量体であり、しかもそのcomponentのいずれかはMaffamily蛋白と2量体を形成しうる可能性が強く示唆された。そこでこの因子のcloningを試みている。現在までにWest-western法で未知の遺伝子がいくつか得られ、Two-hybrid法によるcloneも解析中である。既に明らかになっているFos, Junなどとのヘテロ2量体形成に加え、さらに多くのbZip蛋白との2量体形成を明らかにし、その多様な2量体のDNA認識特異性、発現などを明らかにすることによって、Mafファミリー蛋白の正常機能、過剰発現による細胞がん化の機構なども明らかにしていくことが出来るものと期待される。
医療倫理学の方法論における<原則>と<物語>の統合についての研究

医療倫理学の方法論として、原則論と物語論の有機的な統合を試みることが、本研究の目的であった。主な研究成果として、まず英語圏での医療倫理学における物語論についての主要な論点を整理した。その上で、医療倫理学の統合的方法の要件が規範性、物語性、社会構成性の3つであることを明らかにした。統合的方法の実践的展開のために、ライフヒストリーのレビュー、複数の物語の併存の把握、普遍的な問いと個別的な問いの定立を提案した。本研究は、医療倫理学の方法論を、「原則論か物語論か」という二者択一ではなく、両者の方法論上の関係を検討し、両者の有機的な結合の基盤を構築することが本研究の目的である。具体的には、以下の3点を明らかにすることを目指した。(1)元フティヴ・データによる倫理的ジレンマの再構成-医療の諸領域における倫理的ジレンマを、当事者の語り(ナラティヴ・データ)によって再構成する。(2)倫理的ジレンマの物語論的分析-当事者によって認識されている倫理的ジレンマの物語論的な構造を分析する。(3)物語論的に再構成された倫理的ジレンマの、原則論的な分析-物語論的に再構成された倫理的ジレンマについて、倫理原則への参照や、それを用いた推論が可能かについて検討を行う。また、これまで欧米の研究者らによって提案されてきた原則のセットが、十分に適用可能なのか、それともさらに別の原則を要請するのかを検討する。本研究は、医療倫理学の「原則論」「物語論」の関係を検討し、両者の有機的な結合の基盤を構築することを目的とするものである。本年度は、(1)文献資料の収集、(2)ナラティヴ・データの収集を中心に研究計画を実施した。総論的な理論研究の成果として、欧米の医療倫理学の方法論を概観して「原則論」「手順論」「物語論」という三つの視点から問題を検討する方法論を提示した。その概略は以下の通りである。<倫理原則は、あらゆるレベルでの医療倫理問題の推論を行うための基盤となるが、これを具体的・個別的な法制度や医療従事者の行為のレベルで担保するための「手順」として規定する方法論が発達している。これに対し、近年注目されてきた物語論的方法論では、個々人の生の文脈の中で、病気や健康に関わる問題がどんな意味づけを持つかに着目する。これら観点が分裂することなく、統合して検討されることが、医療倫理学の方法論において不可欠である。>このような理論的な研究成果を、雑誌論文1編、図書1編として発表した。(次頁「研究発表」の〔雑誌論文〕第2項、〔図書〕第2項)また、各論的な研究として、【A】性と生殖(性同一性障害、不妊治療等)、【B】終末期医療(生命維持処置の差し控えと中止、ターミナルケア等)、【C】医療資源としての身体利用(臨床試験、臓器移植等)、【D】患者の権利と公共の福祉(精神医療、感染症医療などにおける患者の権利の制限等)の四領域について、(1)ナラティヴ・データによる倫理的ジレンマの再構成、(2)倫理的ジレンマについての物語論的分析、(3)物語論的に再構成された倫理的ジレンマについての原則論的な分析を行った。本年度においては、このうち【D】に関連して、「ハンセン病問題」の分析で具体的な成果を見た。特に「ハンセン病患者に対する懲罰」と「胎児標本問題」に焦点を当てた分析を行い、雑誌論文1編、図書1編として発表した。(次頁「研究発表」の〔雑誌論文〕第1項、〔図書〕第1項)本研究は、医療倫理学の「原則論」「物語論」の関係を検討し、両者の有機的な結合の基盤を構築することを目的とするものである。本年度は、(1)文献資料の収集、(2)ナラティヴ・データの収集、(3)倫理的ジレンマの生成と解消についての物語論的分析、(4)物語論的に構成された倫理的ジレンマに対する、原則論的な検討を中心に研究計画を実施した。総論的な理論研究の成果として、医療倫理に関連した公共政策の分析に物語論的な視座を導入し、<心理的な距離>や<無関心>が保健医療政策にどのように影響を与えうるかを検討した。その一環として、終末期医療における生命維持処置の不開始や中止の問題を特に掘り下げて検討し、欧州各国におけるターミナルケア(ホスピス・緩和ケア)の現状や規制を比較検討した。また、各論的な研究として、【A】性と生殖(性同-性障害、不妊治療等)、【B】終末期医療(生命維持処置の差し控えと中止、ターミナルケア等)、【C】医療資源としての身体利用(臨床試験、臓器移植等)、【D】

患者の権利と公共の福祉(精神医療、感染症医療などにおける患者の権利の制限等)の四領域について、ナラティヴ・データによる倫理的ジレンマの再構成を昨年度に引き続いて行った。このうち【B】に関連して難病(神経難病)およびターミナルケア(ホスピス・緩和ケア)、【D】に関連してハンセン病問題、またの分析で具体的な成果を見た。このような理論的な研究成果を、雑誌論文4編、学会発表5件(国際学会での発表3件を含む)として発表した。(次頁「研究発表」の〔雑誌論文〕、〔学会発表〕参照)本研究は、医療倫理学の方法論を、「原則論か物語論か」という二者択一ではなく、両者の方法論上の関係を検討し、両者の有機的な結合の基盤を構築することを目的とした研究である。そのために、(1)文献資料の収集、(2)ナラティヴ・データの収集、(3)理論的構築という3つの方法を採用し、(1)ナラティヴ・データによる倫理的ジレンマの再構成、(2)倫理的ジレンマの物語論的分析、(3)倫理的ジレンマの原則論的な分析、を行った。主な研究成果として、英語圏での医療倫理学における物語論(ナラティヴ・アプローチ)の文献レビューを公刊した。これは、この題材について本邦初の詳細なレビューであり、特に、医療倫理学領域でのナラティヴ・アプローチを(1)道徳教育、(2)道徳的方法論、(3)道徳的な討議の適切な形式、(4)道徳的な正当化、の四つに系統的に分類さ乳ていることを明示したことで、従来漠然と語られることの多かった医療倫理学の方法論としてのナラティヴ・アプローチをより厳密に定義してゆくことがより容易となった。また、医療倫理学のナラティヴ・アプローチについて、既存の有力な方法論であるジョンセンらの決疑論的方法(「臨床倫理」)、およびビーチャムとチルドレスの原則論的方法(「四原則」)と対比して考察し、ナラティヴ・アプローチが備えるべき条件について検討し、公刊した。その中で、医療倫理学におけるナラティヴ・アプローチが他の方法論と異なる固有の特色として、規範性、物語性、社会構成性という3要件が求められることを提示した。これによって、原則論と物語論有機的な統合のための理論的基盤をある程度構築することができた。本研究は、医療倫理学の方法論を、「原則論か物語論か」という二者択一ではなく、両者の方法論上の関係を検討し、両者の有機的な結合の基盤を構築することを目的とした研究である。主な研究成果として、英語圏での医療倫理学における物語論(ナラティヴ・アプローチ)の文献レビューを示した上で、本研究の目的である医療倫理学における、原則論と物語論とを統合する方法を、一定の題材について示すことができた。この成果は、『ナラティヴ・アプローチ』(勁草書房刊、野口祐二編)として刊行された。これは、この題材について本邦初の詳細なレビューであり、特に、医療倫理学領域でのナラティヴ・アプローチの要件を規範性、物語性、社会構成性の3つとして提示した。これにより、従来漠然と語られることの多かった医療倫理学の方法論としてのナラティヴ・アプローチをより厳密に定義してゆくことがより容易となった。また、医療倫理学のナラティヴ・アプローチについて、既存の有力な方法論であるジョンセンらの決疑論的方法(「臨床倫理」)、およびビーチャムとチルドレスの原則論的方法(「四原則」)と対比して考察し、実践可能な医療倫理学におけるナラティヴ・アプローチの方向性を検討した。その結果、当時者の「ライフヒストリー」のレビューを行い、なおかつ
食肉タンパク質由来のロイシンオリゴペプチドの機能解明と利用法開発

ロイシンジペプチドに注目し、その機能性の解明と利用法の開発を目指した。ロイシンジペプチドの抗酸化活性を検討した結果、アラニン、アルギニン、リジンを有するもので活性が高いことが判明した。ロイシンジペプチド由来のメイラード反応生成物では、アルギニンとリジンを有するもので活性上昇が顕著であった。これらの高活性試料は、経口投与によっても酸化ストレス軽減をもたらした。さらに、ロイシンジペプチドの中には、加齢に伴う骨格筋の萎縮の予防に寄与しうるものもあることが示唆された。ロイシンジペプチドおよびそのメイラード反応生成物は、食肉において重要な役割を演じると共に、新たな食品素材開発に役立つものと期待される。ロイシンは食肉タンパク質中に多く含まれるアミノ酸であり、筋肉強化や抗ストレス・抗疲労作用など多くの保健的機能を有する。また、メイラード反応により、保健的機能が向上することも知られている。ロイシンはペプチドの形では異なる機能を有しているが、十分な解明はされていない。本研究は、食肉タンパク質の分解により生成するロイシンオリゴペプチドに注目し、食肉・食肉製品における役割解明や積極的利用、そして新規ペプチド食品素材の開発につながる知見を得ることを目的として計画されたものである。本年度は、Leu-XあるいはX-Leuの配列を有するロイシンジペプチドとそのメイラード反応生成物の保健的機能の解明を中心に検討を行った。Leu-XおよびX-LeuのX部分に用いるアミノ酸は、食肉タンパク質中の存在を考えたうえで、単独でメイラード反応生成物を調製した場合に高い抗酸化活性(スーパーオキソイドイオン消去能)を示したアラニン、アルギニン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、プロリン、セリン、スレオニンを用いた。Leu-XおよびX-Leu計19種類のロイシンジペプチドの抗酸化活性を測定したところ、アラニン、アルギニン、リジンを含むペプチドで高い活性が見られた。その中でC末端がロイシンであるLeu-Alaは高い活性を示したが、メイラード反応後では活性は低かった。一方、N末端がロイシンであるAla-Leuはジペプチドもメイラード反応後のものも高い活性を示した。また、Leu-ArgとArg-LeuおよびLeu-LysとLys-Leuはそれぞれメイラード反応後に高い活性を示した。予備的なin vivoの検討では、リジンを含むペプチドおよびそのメイラード反応生成物は、酸化ストレス度を低下させることが示唆された。これら一連の成果は、今後の動物実験レベルにおける検討に際して重要な知見となる。当初計画に基づき、本研究課題に着手した。ロイシンジペプチドの機能解析については、in vitroの検討を中心にほぼ順調に進行している。in vivo解析については着手が遅れているものの、初年度の計画では重視していなかったロイシンジペプチド由来のメイラード反応生成物に関する知見が多く得られた。このような状況から、全体としてはおおむね順調に研究計画が進展しているものと評価している。食肉タンパク質中に多く存在するロイシンは、分岐鎖アミノ酸(BCAA)の一つであり、その摂取により抗ストレスや抗疲労などの保健的作用が期待できる。ロイシンはグルコースなどの還元糖の存在下で加熱することによりメイラード反応生成物が生じ、新たな保健的機能が出現することも示されている。また、ロイシンはペプチドの形でも、様々な生理機能を発揮する。これらの状況を背景とし、本研究では、食肉タンパク質の分解により生成するロイシンオリゴペプチドや合成ロイシンジペプチドに注目し、食品中における機能解明や積極的な利用方法の開発を目指している。19種類のLeu-XあるいはX-Leu(X:アラニン、アルギニン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、プロリン、セリン、スレオニン)を調製し、その保健的機能を検討した。アラニン、アルギニン、リジンを含むロイシンジペプチドで高い抗酸化活性(スーパーオキサイドイオン消去作用など)が見られた。また、これらのロイシンジペプチドから生じるメイラード反応生成物にも、興味深い変化が認められた。アラニン、アルギニン、リジンを構成アミノ酸とするロイシンジペプチドとそれらのメイラード反応生成物をマウスに経口投与し、血中酸化ストレス度の指標として血清ヒドロペルオキシド値の変化を見た。Leu-Lysとそのメイラード反応生成物で強い酸化ストレス低減作用が認められ、ついでAla-Leuとそのメイラード反応生成物に強い効果が見られた。Leu-Lysは、水酸化ラジカルや次亜塩素酸ラジカルによるタンパク質分解を強く抑制することも示された。これらの結果は、ロイシンジペプチドやそのメイラード反応生成物の有用性を示唆するものである。今後、Leu-Lysを中心として、機能解明や利用法開発につながる検討を進めていく予定である。計画に従い、ほぼ予定通りに実施することができた。初年度に遅れがあったin vivoにおける検討においても、着実な成果をあげることができた。ロイシンは、食肉タンパク質を構成するアミノ酸として比較的多く存在するものである。分岐鎖アミノ酸(BCAA)であるロイシンの摂取は、ストレスや疲労の軽減が期待される。さらに、これまでの検討により、Leu-XあるいはX-Leuというロイシンジペプチドの中には、高い保健的機能(抗酸化作用等)を期待できるものが存在することが示された。Leu-Lysおよびそのメイラード反応生成物は、抗酸化作用(スーパーオキサイドイオン消去能等)が強く、マウスへの経口投与においても血清ヒドロペルオキシド値の低下が認められた。

そこでとくに、Lue-LysとLys-Leuおよびこれらのジペプチドのメイラード反応生成物に注目して検討を進めた。これらの物質を食品等に利用する場合、その嗜好性も重要なものとなる。Leu-LysとLys-Leuは、ヒトや愛玩動物において比較的好ましい嗜好性を示した。さらに、加熱処理(メイラード反応)により嗜好性が向上することも確認された。味覚センサによる検討結果から、メイラード反応により塩味強度が高まることが示され、これが加熱処理による嗜好性向上に関与することが推測された。一方、加齢に伴う骨格筋の萎縮が問題となっており、これには酸化ストレスが関与していると推測されている。そこで、抗酸化作用を有するロイシンジペプチド(Leu-LysおよびLys-Leu)の骨格筋肥大経路に及ぼす影響を検討した。筋芽細胞において、Lys-Leuの添加はP-Aktの発現を増加させ、Leu-Lysの添加はP-p70S6Kの発現を増加させた。この結果は、Leu-Lysが酸化ストレスによる骨格筋肥大阻害の抑制に関与することを示唆している。これらのペプチドをマウスに経口投与した際の影響や、それぞれのペプチドのメイラード反応生成物についても、検討を進めている。ロイシンジペプチドに注目し、その機能性の解明と利用法の開発を目指した。ロイシンジペプチドの抗酸化活性を検討した結果、アラニン、アルギニン、リジンを有するもので活性が高いことが判明した。ロイシンジペプチド由来のメイラード反応生成物では、アルギニンとリジンを有するもので活性上昇が顕著であった。これらの高活性試料は、経口投与によっても酸化ストレス軽減をもたらした。さらに、ロイシンジペプチドの中には、加齢に伴う骨格筋の萎縮の予防に寄与しうるものもあることが示唆された。ロイシンジペプチドおよびそのメイラード反応生成物は、食肉において重要な役割を演じると共に、新たな食品素材開発に役立つものと期待される。in vivoの検討など初年度に十分な成果を得ることができなかった項目について、次年度以降に重点的に研究を進展させる予定である。平成29年度は本研究の最終年度にあたるため、製品レベル近い検討に着手し、産業的な展開につながるような成果を得たいと考えている。29年度が最終年度であるため、記入しない。農学代表者が所属する研究室のwebページである。webページ中の掲載記事に、本研究成果に関連する記載がある。
血管新生抑制因子徐放デバイスによる新規加齢黄斑変性治療法の開発

我々の開発したデバイスは、薬剤を徐放膜を通して1方向性に放出させ、薬剤量をコントロールできるものである。今回の検討において、42kDaの高分子タンパク質であるvasohibin-1を経強膜的に網膜に届けることができ、動物モデルでCNVサイズを抑制した。AMDに対して安全かつ有効な治療法となる可能性を示した。デバイス作成:Polyethylenglycol dimethacrylate(PEGDM)と500mg/mlのcollagen粒子の混合液をUV照射し、徐放膜を作成した。鋳型にTriethyleneglycol dimethacrylate(TEGDM)をキャストしUV照射してリザーバーを作成した。PEGDMでペレット化した各濃度のVASHをリザーバーに充填し、徐放膜で蓋をした。充填したVASH濃度は0uM (vehicleのみ;NVDD)、1uM (VDD)、10uM (10VDD)である。また10uMのVASHのペレット化のみ(pellet)も作成した。デバイスからのVASH徐放(in vitro):各デバイスを200ulのELISA bufferに浸し37°Cでincubationし、経時的にbufferを回収しELISAを用いてVASH放出量を測定した。pelletでは、初期バーストがみられ7日目ではほとんど放出が見られなかった。一方、VDDや10VDDでは、持続的な放出が確認できた。デバイスからのVASH徐放(in vivo):デバイスをSprague-Dawleyラット強膜上に移植し、2週目にVASHの免疫染色を行った。10VDDでは神経網膜や視神経にVASH陽性所見が得られ、NVDDでは認めなかった。CNV実験:Brawn Norwayラットに対しレーザーを用いて実験的CNVを作成した。デバイスとペレットを光凝固施行後同日に強膜上に移植し、硝子体注射は光凝固後4日目に行った。VASH硝子体注射では、NVDD、VASHペレット、vehicle硝子体注射に比べて有意に蛍光眼底造影検査(FA)点数が低かった。また、10VDDはNVDDに比べて有意にFA点数が低かった。現在AMD治療の標準薬剤となっているRanibizumabをDDS化し(R-DDS)、その有効性を確認した。(1)R-DDSの作成:CAD/CAM微細加工機を用いて鋳型を作成し、鋳型にTriethilenglycol dimethactylate(TEGDM)をキャストしUV照射しリザーバーを作成した。RanibizumabをPolyethylenglycol dimethacrylate(PEGDM)と蒸留水の比率を変えてペレット化し、リザーバーに充填しデバイスを完成させた(R-DDS)。(2)R-DDSの徐放性の確認:R-DDSおよびPBS-DDSをPBS 500ulを入れた24ウェルプレートに浸し、経時的にPBSを回収し、その徐放性を確認した。R-DDSからは初期バーストを起こすことなくデバイスからの徐放をin vitroやin vivoで確認でき、実験的ラットCNVを用いてその効果を確認した。現在既存の血管新生抑制薬を用いて同様の実験を行っている。25年度が最終年度であるため、記入しない。ラットを用いたVASH-DDSでの有効性を確認した後は、既存薬剤での同様の実験を行う予定である。
半導体光合成セルによる炭酸ガス固定

CO_2の光電気化学還元については裸のpーGaPを用い、電極表面処理および光強度の影響を詳細に検討した。CO_2の電気化学還元に対し興味ある挙動を示すAuとZn電極について、さらに、ガス拡散電極を用いたCO_2の電気化学還元等について検討を加え、以下の結果を得た。(1)0.1M KHCO_3電解液中、王水で表面処理したpーGaPを光カソ-ドとした時の還元生成物はギ酸、COとH_2であり、ギ酸生成のηはー0.8Vで75%に達することが前年度までにわかったが、王水以外に濃塩酸、濃硝酸、アルカリ性フェリシアン化物水溶液で表面処理をすると、後二者の場合ギ酸生成のηが減少し、H_2生成が主となり、エッチングによる電極表面状態の変化が反応の選択性に大きく影響する。種々の光強度と電極電位で光電解した結果、ギ酸生成の部分電流密度と全平均電流密度の間には一次の関係が成立ち、先行反応が存在する。生成物の効率への光強度の影響は光強度の違いによる光電流の大きさに依存するものと解釈された。(2)pH2.56.8のリン酸緩衝溶液中での金電極によるCO_2の電気化学還元で、主生成物はCOとH_2であり、pH5.2以下の電解液中、貴な電位では、CO生成の部分電流密度と電極電位の関係は一本の傾き120mVのTafel線で表され、卑な電位ではCO_2の供給律速による限界電流が観察された。pH6.2以上ではTafel線はpHの上昇につれ卑電位側にシフトし、これは電極表面に生成する吸着種による電極の触媒活性の低下による。CO生成の律速段階は一電子移行反応であると示唆された。(3)K_2SO_4溶液中Zn電極でのCO_2の電気化学還元でCO生成のηはー1.6Vで80%に達し、これはZn電極表面の酸化物と形態に大いに関係する。(4)銅を担持したガス拡散電極によるKHCO_3電解液中での予備的なCO_2の電気化学還元実験で1桁以上の電流密度の向上が認められた。(5)希薄CO_2捕集用のCo(III)錯体を合成した。
高次までの合成球面波を用いた小型高利得アンテナの基礎研究

本年度は、小型高利得アンテナの理論から考え方を発展させた低漏洩マイクロ波ビームの効果的設計手法をパイロット信号に適応することで、信頼性の高いマイクロ波電力伝送システムを構成する手法について検討した。ビーム伝搬法を用いたシミュレーションにより、ビームパイロット信号を用いることによりマルチパスの影響がなくなり、正確な相反定理を満たすことを示した。また、揺らぎ伝送路においてはビームパイロット信号の放射方向を制御することにより、伝送効率が設計値まで改善可能であることを示した。さらに、上記システムの実現するアンテナハードウェアとして、パイロット信号とマイクロ波電力を独立に放射吸収する直交2重モード誘電体共振器アンテナ素子の開発を行った。試作したアンテナのアイソレーション特性をネットワークアナライザにより測定した結果、直交するポート間で60デシベルを超えるアイソレーションレベルを得ることが出来、システムの実現に向けた見通しを得ることが出来た。この直交2重モード誘電体共振器で用いた反射板上に設置された半球の誘電体共振器が持つ放射電磁界は、球面波の最低次モードである微小磁気ダイポールモード放射と完全に等価である。これらの研究成果をまとめて、無線電力伝送の国際論文誌Wireless Power Transferに投稿し採録された。また、かねてより投稿していた高次までの球面は合成による小型高利得アンテナの原理に関する論文の採録が決定し、低漏洩マイクロ波ビームの効果的設計手法に関する論文が出版された。このように、採用期間3年間の研究を通して、新しい原理に基づいたユビキタス型マイクロ波電力伝送システムのための小型高利得アンテナの基本構造を確立するとともに、信頼性の高い低漏洩ビーム型マイクロ波電力伝送システムの実現見通しを得ることが出来た。28年度が最終年度であるため、記入しない。本研究では、高次までの合成球面波を用いた小型高利得アンテナについて検討を進めている。採用1年目となる本年度では、小型高利得アンテナの理論から考え方を発展させた、低漏洩マイクロ波電力伝送システムのためのマイクロ波ビームの設計手法について基礎的な研究を行い、その有効性を示した。マイクロ波を用いた無線電力伝送には、大きく分けてユビキタス型とビーム型の2種類が存在する。ユビキタス型電力伝送においては、マイクロ波を空間に広く分布させることにより、分散的にデバイスに電力を伝送する方式である。人体の安全性を考慮すると、空間の電力密度は一定以上大きくすることが出来ないため、デバイス駆動に必要な電力を供給するためには、大きな有効開口面積を持つアンテナが必要となる。一方で、ビーム型電力伝送においては、通信機器との干渉や人体の安全性の観点から、閉じ込め性の良いマイクロ波ビームの設計が重要となる。本年度は、高次までの合成球面波を用いた小型高利得アンテナの考え方を発展させ、低漏洩マイクロ波電力伝送システムのためのマイクロ波ビームの設計手法について検討を行った。本研究ではこれまで、高い指向性利得を持った小型アンテナの開発を目的として、平面波の展開係数を用いて球面波を合成した電磁界について詳細な検討を行ってきた。その結果新たに、放射波と吸収波を合成することにより、ビーム伝搬電磁界が得られることを明らかにした。さらに本研究において、放射波と球面波の合成電磁界を詳細に解析することにより、球面波の合成電磁界を用いたビーム設計手法を提案するに至った。この手法においては、波源を構成するアンテナアレー素子の入力振幅に先立って、高いエネルギー閉じ込め性を持つ伝搬電磁界を設計する。これにより、良好な特性を持つマイクロ波ビームの理論限界を明確にした送電アンテナ設計が可能となる。本年度は、小型高利得アンテナの研究を発展させた低漏洩マイクロ波ビームの効果的設計手法を確立した。本研究で提案した設計手法においては、アレーアンテナ素子の入力振幅に先立って真空中を伝搬するビーム電磁界を設計する。真空中を伝搬するビーム電磁界の設計には合成球面波を用いる。平面波の係数を用いて、ある最大次数までの球面波によってビーム電磁界を合成した場合、比較的大きなサイドローブが存在する。そこで本研究では、平面波の係数を調整することによってエネルギー閉じ込め性の高いビーム電磁界が合成可能であることを示した。また、調整係数が十分に大きい場合には、球面波合成ビームとガウシアンビームがほとんど一致することを明らかにした。アレーアンテナ素子の入力振幅に先立って真空中のビーム電磁界を設計する手法は、現在特許出願中である。さらに、これらの研究成果は、2件の学会発表の後、電子情報通信学会の和文論文誌Cに投稿した。また、本年度から低漏洩ビームを実現するアンテナハードウェアの検討を始めた。回転方向のアンテナ素子を同相同振幅で可能なリング配列アレーおよび最小の共振電磁界を持つ球形誘電体共振器について基礎的な検討を行った。低漏洩マイクロ波ビームはビームの伝搬軸に対して回転対称な位相を持つ。そこで本研究では、低漏洩ビームを形成するアンテナ配列方式として、リング配列アレーを提案した。リング配列を用いることにより、位相と振幅の設計パラメータを大幅に低減することが出来る。さらに、相互結合の小さな素子アンテナとして、最小の共振電磁界を持つ球形誘電体共振器について検討した。今後は、これらのアンテナハードウェアに関する検討をさらに進め、論文投稿を目指す。本年度の研究によって、小型高利得アンテナの理論から発展した低漏洩マイクロ波ビームの設計手法を確立し、特許出願および論文投稿を行うことが出来た。

本年度は、小型高利得アンテナの理論から考え方を発展させた低漏洩マイクロ波ビームの効果的設計手法をパイロット信号に適応することで、信頼性の高いマイクロ波電力伝送システムを構成する手法について検討した。ビーム伝搬法を用いたシミュレーションにより、ビームパイロット信号を用いることによりマルチパスの影響がなくなり、正確な相反定理を満たすことを示した。また、揺らぎ伝送路においてはビームパイロット信号の放射方向を制御することにより、伝送効率が設計値まで改善可能であることを示した。さらに、上記システムの実現するアンテナハードウェアとして、パイロット信号とマイクロ波電力を独立に放射吸収する直交2重モード誘電体共振器アンテナ素子の開発を行った。試作したアンテナのアイソレーション特性をネットワークアナライザにより測定した結果、直交するポート間で60デシベルを超えるアイソレーションレベルを得ることが出来、システムの実現に向けた見通しを得ることが出来た。この直交2重モード誘電体共振器で用いた反射板上に設置された半球の誘電体共振器が持つ放射電磁界は、球面波の最低次モードである微小磁気ダイポールモード放射と完全に等価である。これらの研究成果をまとめて、無線電力伝送の国際論文誌Wireless Power Transferに投稿し採録された。また、かねてより投稿していた高次までの球面は合成による小型高利得アンテナの原理に関する論文の採録が決定し、低漏洩マイクロ波ビームの効果的設計手法に関する論文が出版された。このように、採用期間3年間の研究を通して、新しい原理に基づいたユビキタス型マイクロ波電力伝送システムのための小型高利得アンテナの基本構造を確立するとともに、信頼性の高い低漏洩ビーム型マイクロ波電力伝送システムの実現見通しを得ることが出来た。本年度は、小型高利得アンテナの理論から考え方を発展させ、低漏洩マイクロ波電力伝送システムのためのマイクロ波ビームの設計手法について基礎的な研究を行い、その有効性を示した。このことにより本研究は、ユビキタス型とビーム型の2つの方式のマイクロ波無線電力伝送の両方を視野に入れた研究へと広がりを見せた。今後は、低漏洩ビームを形成するアンテナハードウェアについて詳細な検討を行い、誘電体共振器アレーアンテナを開発する予定である。誘電体共振器アレーアンテナは小型高利得アンテナの段階的な実現に向けた最低次モードの球面波のアプリケーションに対応する。28年度が最終年度であるため、記入しない。今後は、本年度提案したビーム設計手法についてさらに詳細な検討を進めるとともに、閉じ込め性の高いビーム型電力伝送システムの実現に向けて、低反射誘電体共振器アレーアンテナの開発を行う。この低反射誘電体共振器アレーアンテナは、当初の研究目的であった小型高利得アンテナの段階的な実現に向けた、最低次モードの球面波のアプリケーションに対応する。
遠隔臓器障害における化学伝達物質輸送担体としての血小板マイクロパーティクルの研究

末梢血管病変の進展や虚血再灌流時の臓器障害の際に、活性化血小板から種々の化学伝達物質が放出される。これらは血中で瞬時に分解されるにも関わらず、実際には末梢血管組織や遠隔臓器に作用する現象が観察される。私たちは、活性化血小板から放出させるマイクロパーティクル(MP)がこれら化学伝達物質の輸送担体であることを明らかにしてきた。臨床病態におけるMP産生機序と生理的意義を解明する目的で以下の検討を行った。救急領域において、systemic inflammatory response syndrome (SIRS)患者で、MP産性、血小板Pセレクチン表出、血小板Å単球結合、血小板Å多核白血球結合が上昇しており、イオノマイシン刺激時にはSIRS群で有意に亢進がみられた。Pセレクチンの抑制抗体にて血小板Å単球結合と血小板Å多核白血球結合は著しく抑制された。さらに、敗血症患者において、多核白血球からの白血球ÅMP産生ならびに血管内皮細胞からの血管内皮ÅMP産生が亢進していることが確認できた。また、マイクロアレイ血流分析装置を用いて敗血症患者全血のレオロジーを検討したところ、敗血症患者では白血球が硬化しており網細血管血流ないしは血管壁内外の白血球通過が障害されている可能性が推測された。この結果から、炎症により白血球が形態的に硬化して局所鬱滞する頻度と停滞時間を増加させると同時に、白血球に接着した血小板および血小板ÅMPが白血球同士のさらなる接着を惹起させるとともに凝固機序を開始させて、結果的に化学伝達物質を局所集積させるという全く新しい巡る機序が予想された。また、静脈血栓症において、我が国における活性化protein C抵抗性(activated protein C resistance = APC-R)の原因は欧米と異なりfactor V Leiden遺伝子変異によるものであることを明らかにしたが、我々の検討ではSLE患者およびSLE以外の患者とも、lupus anticoagulantやカルディオリピン抗体を含む各種リン脂質抗体ではなく、我が国におけるAPC-Rの原因がanti-protein S抗体であることを世界で初めて報告した(British Journal of Haematology 2002, 118, 577-583、Thromb Haemost 2002, 88, 716-722)。これらの伝達物質は血中で瞬時に分解されるにも関わらず、末梢血管組織や遠隔臓器に作用する。臨床病態におけるMP産生機序を解明する目的で、以下の検討を行った。まず、消化器外科領域で胃癌患者における外科手術後のズリ応力惹起血小板凝集能とMP産生の関係を検討した。その結果、術後はズリ応力惹起血小板凝集能が増加しており、2週間後に正常に復していることが確認できた。

MP産生は、特に高ズリ応力下で増加していることが確認できた。このMP産生は、α2-adrenergic receptor拮抗剤ならびに抗トロンビン剤で抑制できなかった。この結果は、外科侵襲がズリ応力惹起血小板凝集を活性化させてMP形成を増大させ、この血小板の易活性化あるいは産性されたMPが、動脈硬化性病変を有する患者の術後心筋梗塞や急性動脈閉塞の原因となっていると考えられた。さらに、手術侵襲により癌転移が進む事実の説明として、MP形成が関与している可能性も示唆された。また、救急領域において、systemic inflammatory response syndrome(SIRS)におけるイオノマイシン刺激によるMP産性、血小板Pセレクチン表出、血小板-単球結合、血小板-多核白血球結合について検討した。その結果、コントロール群に比してSIRS群ではMP産性、血小板Pセレクチンの表出、血小板-単球結合、血小板-多核白血球結合が上昇しており、イオノマイシンの刺激を加えるとSIRS群ではさらに亢進した。Pセレクチンの抑制抗体にて血小板-単球結合と血小板-多核白血球結合は著しく抑制された。末梢血管病変の進展や虚血再灌流時の臓器障害の際に、活性化血小板から種々の化学伝達物質が放出される。これら伝達物質が添加実験では血中で瞬時に分解されるにも関わらず、実際には末梢血管組織や遠隔臓器に作用する現象が観察される。私たちは、活性化血小板から放出させるマイクロパーティクル(MP)がこれら化学伝達物質の輸送担体であることを明らかにしてきた。臨床病態におけるMP産生機序を解明する目的で、以下の検討を行った。救急領域において、systemic inflammatory response syndrome (SIRS)患者で、MP産性、血小板Pセレクチン表出、血小板-単球結合、血小板-多核白血球結合が上昇しており、イオノマイシン刺激時にはSIRS群で有意に亢進がみられた。さらに、敗血症患者において、多核白血球からの白血球-MP産生ならびに血管内皮細胞からの血管内皮MP産生が亢進していることが確認できた。また、マイクロアレイ血流分析装置を用いて敗血症患者全血のレオロジーを検討したところ、敗血症患者では白血球が硬化しており網細血管血流ないしは血管壁内外の白血球通過が障害されている可能性が明らかになった。これらの事実は、炎症により白血球が形態的に硬化して局所鬱滞する頻度と停滞時間を増加させると同時に、白血球に接着した血小板および血小板-MPが白血球同士のさらなる接着を惹起させるとともに凝固機序を開始させて、結果的に化学伝達物質を局所集積させるという全く新しい巡る機序が予想された。申請者は末梢血管病変において,活性化血小板から放出されるマイクロパーティクル(MP)の化学伝達物質の輸送担体としての重要性を報告してきた.本研究では,平成13年度までにsystcmic inflammatory response syndrome(SIRS)患者や敗血症患者におけるMP産生の増強を確認し,血小板-単球結合・血小板白血球結合・白血球-白血球結合へのMPの関与を示唆し,臨床的にもMPが病態に大きく関与していることを示した.
浸漬による低アレルゲン米の作製とその有効性評価

精白米を酸性溶液あるいはパイナップル果汁に浸漬させることで、低アレルゲン米を作製した。酸性溶液浸漬よりもパイナップル果汁浸漬のほうが低減化効果は大きかった。加熱パイナップル果汁浸漬では、その効果が低下したことから、パイナップル中のブロメリン(シシテインプロテアーゼ)がその低減化に有効であることが示唆された。精白米を0.63%クエン酸溶液、1.3%NaCl溶液、1.3%クエン酸溶液に順に浸漬させ、各溶液に浸漬後に精白米に残存している総タンパク質量をケルダール法で測定し、タンパク質組成をSDS-PAGEで解析し、米の14-16kDaアレルゲンを特異抗体を用いたイムノブロットで検出した。総タンパク質量は、原料米と比較して0.63%クエン酸溶液浸漬後に約20%減少し、その後はほとんど変化しなかった。次に、各段階におけるタンパク質組成を解析した結果、0.63%クエン酸溶液浸漬時に分子量が25kDa付近と14kDa付近のバンドが薄くなったことがわかった。次に、14-16kDaアレルゲンをイムノブロットにより検出した結果、0.63%クエン酸溶液浸漬時にバンドが薄くなり、その後のバンドの変化は見られなかった。そこで、14-16kDaアレルゲンの減少量を算出するためにイムノブロットのバンド強度について輝度解析を行った。原料米と比較して0.63%クエン酸溶液浸漬後に約87.5%減少した。その後大きな減少は見られなかった。この工程で作製した低アレルゲン米はタンパク質の栄養価は約80%保持し、アレルゲンであるアルブミンやグロブリンが87.5%減少することがわかった。以上の結果より、14-16kDaアレルゲンの減少は0.63%クエン酸溶液浸漬時に起こり、その後の工程でのアレルゲンの減少は見られなかったことから、0.63%クエン酸溶液浸漬以後の工程を省いても同じ結果が得られると考えられた。次に、製造工程の0.63%クエン酸溶液浸漬時にプロテアーゼM、デナプシン、ニューラーゼの3種の酵素を使用し、さらにアレルゲンが低減化されるかどうかを検討した。ニューラーゼを使用した場合、酵素処理後のアレルゲンは酵素を添加しない場合と比較して、顕著に減少しいた。精白米を、0.63%クエン酸溶液および生パイナップル果汁に40°Cで6時間浸漬後、水で洗浄し、精白米中に残存しているタンパク質をSDSおよびメルカプトエタノールを含む溶液で抽出し試料溶液とした。それぞれの試料溶液中のタンパク質組成をSDS-PAGEで、14-16kDaアレルゲンを特異抗体を用いたイムノブロットにより検出し、原料米と比較した。さらに、パイナップル果汁中の酵素の作用によって低アレルゲン化されたかどうかを確認するために、加熱したパイナップル果汁を用いて同様の実験を行った。浸漬後に精白米中に残存しているアレルゲン量は、原料米と比較して0.63%クエン酸溶液浸漬により25%に、生パイナップル果汁浸漬により12%に低減化しており、生パイナップル果汁浸漬の方が低アレルゲン化に効果的であることが明らかとなった。また、精白米を加熱した生パイナップル果汁に浸漬すると、その低アレルゲン効果は弱くなった。よって、米の低アレルゲン化には、酸性溶液浸漬に加えて、パイナップルに含まれるブロメリン(システインプロテアーゼ)が効果的に働くことが示唆された。精白米を0.63%のクエン酸溶液および生パイナップル果汁に40°Cで6時間浸漬後、水で洗浄し、精白米中に残存しているタンパク質をSDSおよびメルカプトエタノールを含む溶液で抽出し試料溶液とした。さらに、パイナップル果汁中の酵素によって低アレルゲン化されたかどうかを確認するために、加熱したパイナップル果汁を用いて同様の実験を行った。浸漬後に精白米中に残存しているアレルゲン量は、原料米と比較して0.63%クエン酸溶液浸漬により25%に、生パイナップル果汁浸漬により12%に低減化しており、生パイナップル果汁の方が低アレルゲン化に効果的であることが明らかとなった。また、精白米と加熱した生パイナップル果汁に浸漬すると、その低アレルゲン効果は弱まった。よって、精白米の低アレルゲン化には、酸性溶液に加えてパイナップルに含まれるブロメリン(システインプロテアーゼ)が効果的に作用することが示唆された。さらに、アレルゲン量が75%以上減少した生パイナップルルの原液果汁浸漬米、2倍希釈溶液6時間浸漬米、5倍希釈溶液24時間浸漬米と原料米で官能評価を行った。喫食調査で、2倍希釈溶液6時間浸漬米と5倍希釈溶液24時間浸漬米との間に大きな差がなく、パイナップル臭が残存していることが指摘された。そこで、工程の簡便さから、2倍希釈溶液6時間浸漬米を米粉にし、パイナップル臭を感じさせないレシピを考案した。

昨年度の研究により、酸溶液浸漬および精白米浸漬時に食品添加物であるプロテアーゼ(ニューラーゼ)を使用することで、アレルゲンの低減化が確認できた。本年度は、酸およびプロテアーゼ(ブロメリン)の両者を併せ持つパイナップル果汁を用いて低アレルゲン化を試みたところ、期待通り約10%にまで低減化がおこり実用化への可能性が示唆された。食品学パイナップル果汁を用いた精白米の浸漬により低アレルゲン化に効果がみられたものの、実際にその低アレルゲン米を炊飯してみるとパイナップル臭が残存し、実際に食するには抵抗があった。そのため、本年度は、作製した低アレルゲンを美味しく食するために加工および調理において工夫を施し、実用化へ向けた検討を行う予定である。また、浸漬後の米粒に残存しているアレルゲンのペプシンに対する消化性をin vitroの系で、さらにそれらをマウスに経口投与した後の小腸内での状態を解析する。この結果、消化性が向上していれば、実際に低減化しているばかりでなく、ある条件での浸漬が精白米のアレルゲン性を抑制している可能性が考察できる。さらに、米アレルギーモデルマウスを作製し、実際に低アレルゲン米を摂取した際に、アレルギー症状(直腸温の低下、炎症など)が抑制されるかどうかを検証する。最終的には、実際にヒトでも効果があるかどうかを検証する。方法としては、新奇低アレルゲン米のアレルギー患者へのプリック-トゥ-プリックテストにて皮膚症状を観察する。その際に、炎症反応が見られなければ、実際に食べて頂き、摂食後の症状を医師の監督下にて観察する。これらの結果をもとに、新奇アレルゲン米の実用化へと発展させる。当初の予定では、浸漬時に働く内因性の酵素が低アレルゲン化のキーになると予想して計画を立てたが、酸性の溶液浸漬のみで低減化が進行した。低アレルゲン化における内因性の酵素の働きは非常に低いと考えられたため、当初の予定を変更して、食品添加物として用いられている酵素を用いて低アレルゲン化されるかどうかを検討した。結果として、酸性溶液および酵素の添加で、期待できる成果が得られた。実際にアレルゲンタンパク質が10%ぐらいに低減化されていれば、米アレルゲン患者は食することが可能と考えられるので、この酸性溶液浸漬と添加する酵素に着目して、今後実験を行う予定である。酸性溶液および酵素の添加で米アレルゲンの低減化に効果が見られたことから、今後は、その両者を併せもつパイナップルの果汁などのプロテアーゼを含む溶液を利用して低アレルゲン化が可能かどうか模索する予定である。また、低減化後に米粒に残存しているアレルゲンのペプシンおよびパンクレアチンに対する消化性をin vitroの系で、さらにそれらをマウスに経口投与した後の小腸内での状態を解析する。方法としては、本研究で得られた新奇低アレルゲン米のアレルギー患者へのプリック-トゥ-プリックテストにて皮膚症状を観察する。これらの結果をもとに、新奇低アレルゲン米の実用化へと発展させる。