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単一サイクル赤外光パルスを用いた強相関電子系の瞬時強電場効果の研究

光電場の位相が固定された、パルス幅6 fs(1.3サイクル)、瞬時電場強度100 MV/cmにおよぶ極限的な赤外パルス光源を開発し、多体電子系(固体)を対象に、光の高周波強電場が導く極端非平衡を実験的に検証した。>10 MV/cmの高周波強電場が駆動する電荷の局在化(動的局在:電荷の移動積分tの減少)として、(TMTTF)2AsF6(電荷秩序系)におけるプラズマ周波数ωp(∝√t)の減少、α-(ET)2I3(電荷秩序系)における光誘起金属→絶縁体転移(電荷の局在化)、κ-(ET)2X(ダイマーモット系)の金属-絶縁体相境界における光誘起モット転移(ダイマーの安定化:金属→絶縁体)を観測した。光電場の振動を一周期以下しか含まない極限的な赤外光パルス(単一サイクル、サブサイクルパルス;パルス幅5フェムト秒(fs)、中心波長1.7μm)の瞬時強電場(>>10 MV/cm)は、多体電子系(強相関電子系)を極端な非平衡状態(衝撃場非平衡)へと導くことができる。本研究では、単一サイクルの高強度、キャリアエンベロープ位相(CEP)安定化光源を開発し、瞬時強電場で電子の運動を瞬時に凍結、秩序化、偏極させることによって、理論的に予測されている電子の局在化(動的局在)、強誘電性、(反)強磁性秩序の増強、負温度状態の生成などを実験的に検証する。平成26年度は、まず、赤外7 fs(1.5サイクル)パルスを用いた反射型ポンプ-プローブ分光から、電荷秩序系の有機伝導体α-(BEDT-TTF)2I3の高温金属相(転移温度135 K)において、金属→絶縁体転移(動的局在)を観測した[Nature Commun. 5, 5528 (2014)]。絶縁化を反映するスペクトル形状と共に、電荷ギャップのエネルギー(の逆数)に相当する周期20 fsの時間軸振動が現れる。絶縁化の信号は、転移温度近傍、強電場印加の場合に顕著であり、光の高周波強電場によって電子のサイト間移動積分を直接変調することで起こる、電子の局在化(動的局在)を実現したと言える。さらに、光源の短パルス化(単一サイクル、サブサイクル)と高強度化を目的に光源の改良を行った。光パラメトリック増幅器(OPA)から出力されるCEPが固定されたアイドラー光を、希ガスを充填した中空ファイバーを用いて広帯域化し、チャープミラーと形状可変鏡を併用してパルス圧縮を行っている。アイドラー光の中空ファイバーへの集光条件の見直しによる高強度化(10 →20 MV/cm)と、形状可変鏡パルス圧縮器の改良による短パルス化(7 fs:1.5サイクル→6 fs:1.3サイクル)を達成している。光電場の振動を一周期以下しか含まない極限的な赤外光パルス(単一サイクル:パルス幅5フェムト秒(fs)、中心波長1.7μm)の瞬時強電場(>>10 MV/cm)は、多体電子系(強相関電子系)を極端な非平衡状態へと導くことができる。本研究では、単一サイクルの高強度、キャリアエンベロープ位相(CEP)安定化光源を開発し、理論的に予測されている極端非平衡の中でも最も基本的な電子の局在化(動的局在:移動積分tの減少)を実験的に検証した。光源開発:光パラメトリック増幅器から出力されるCEPが固定されたアイドラー光に対して、Krガスを充填した中空ファイバーによる広帯域化を行い、チャープミラーと形状可変鏡を併用したパルス圧縮によって、瞬時電場強度90 MV/cm、パルス幅6 fs(1.3サイクル)の究極的な光パルスを発生した。電荷の局在化(動的局在):瞬時電場強度>10 MV/cmの赤外極短パルスを用いた反射型ポンプ-プローブ分光によって、電荷秩序系の有機伝導体α-(BEDT-TTF)2I3における金属→絶縁体転移[Nature Commun. 5, 5528 (2014)]、(TMTTF)2AsF6における電荷移動積分tの減少(プラズマ周波数ωpの減少)[Phys. Rev. B 93, 165126 (2016)]、ダイマーモット系の有機伝導体κ型BEDT-TTF塩における金属→絶縁体転移を捉えている。さらに、>20 MV/cmの瞬時強電場を用いた実験から、モット-ハバード型の典型的な遷移金属酸化物V2O3の金属相においても電荷の局在化を示唆する結果を得ている。これらの結果は、試料に対して極めて高強度の高周波電場を非破壊的に印加できる本実験手法によって初めて実現された現象である。特に、光誘起金属→絶縁体転移(電荷の局在化)は、従来よく知られる光誘起絶縁体→金属転移(電荷の秩序の光融解)とは逆の電子状態の変化であり、光による固体の物質制御に向けた新たな指針を示す結果と言える。

>10 MV/cmの高周波強電場が駆動する電荷の局在化(動的局在:電荷の移動積分tの減少)として、(TMTTF)2AsF6(電荷秩序系)におけるプラズマ周波数ωp(∝√t)の減少、α-(ET)2I3(電荷秩序系)における光誘起金属→絶縁体転移(電荷の局在化)、κ-(ET)2X(ダイマーモット系)の金属-絶縁体相境界における光誘起モット転移(ダイマーの安定化:金属→絶縁体)を観測した。高強度単一サイクルパルス(パルス幅5 fs、瞬時電場強度40 MV/cm)の発生に向けて、平成2627年度の2年間で、短パルス化と高強度化を段階的に進める計画であった。特に初年度は光源開発に注力する計画であり、申請時と比較して、パルス幅(7 fs:1.5サイクル→6 fs:1.3サイクル)、瞬時電場強度(10 →20 MV/cm)共に性能を向上している。また、オクターブ以上への広帯域化、f-2f位相干渉計を用いたCEP安定性の確認も完了しており、光源開発が順調に進展している。さらに、平成27年度に実施予定であった、強相関電子系における瞬時強電場効果の検証実験をすでに開始しており、電荷秩序系の有機伝導体において、光の高周波強電場がサイト間の電荷移動積分を変調することで起こる動的局在(α型BEDT-TTF塩:光誘起金属→絶縁体転移、θ型BEDT-TTF塩、TMTTF塩:有効質量の増大)を観測した。特に、α型BEDT-TTF塩における絶縁化は、従来の光誘起絶縁体→金属転移(電荷秩序の融解)とは逆の光誘起現象であり、光による絶縁体-金属間の双方向制御の可能性を示した結果である。また、系統的な物性実験に向けた準備として、測定光学系の構築も進めている。具体的には、電子状態の変化を検出する過渡反射(ポンプ-プローブ)測定系に加えて、空間反転対称性の破れを検出する第二高調波発生検出系、電子分極の位相緩和時間を検出する縮退四光波混合測定系の構築がほぼ完了している。さらに、ワイヤーグリッド偏光子の導入によって、赤外光のパルス幅に影響を与えること無く、入射光の強度(瞬時電場強度)や偏光の可変制御、光電場の反転(CEPのπ変化)が可能となった。強相関電子系における瞬時強電場効果を検証するための、系統的な物性実験に向けた準備が整いつつある。以上のことから、当初の計画以上に進展していると言える。27年度が最終年度であるため、記入しない。光物性物理学現時点ですでに、電荷秩序系のα型BEDT-TTF塩において、10 MV/cmの瞬時強電場を印加した結果、光照射後<50 fsの時間領域でのみ起こる、動的局在による金属→絶縁体転移を観測している。しかし、電荷が局在化する時間スケールを決定づける要因や、電荷の局在パターンに関しては明らかでない。平成27年度前半は、まず、縮退四光波混合による電子分極の位相緩和時間の測定や、反転対称性の破れを検出する第二高調波発生から、絶縁化ダイナミクスの詳細を明らかにする。また、電子-格子相互作用が強いダイマーモット系(κ型BEDT-TTF塩)との比較を行い、有機強相関系における瞬時強電場効果を整理する。さらに、瞬時強電場によって駆動される多電子の運動を調べるために必要な、位相制御された赤外極短パルスの光源開発を進める。広帯域化条件の最適化(中空ファイバーおよびチャンバーの再設計、集光条件の見直し)とパルス圧縮器の再構築(チャープミラー、形状可変鏡パルス圧縮器の再設計)を行い、本計画の最終目標である単一サイクル(パルス幅5 fs)、瞬時電場強度40 MV/cmの極限的な赤外パルスの発生を目指す。平成27年度の後半は、40 MV/cmに及ぶ極限的な瞬時強電場が駆動する新奇な極端非平衡状態の実現を試みる。具体的には、有機(BEDT-TTF塩やTMTTF塩)、無機(Co、Cu酸化物などの遷移金属化合物)の強相関電子系物質を対象に系統的な実験を行い、理論的に予測されている負温度状態の生成、強誘電性の発現や(反)強磁性秩序の増強、電子相関を介した光キャリアの増殖や高次高調波発生などを検証する。
RNAポリメラーゼIIとRNA・クロマチンのクロストーク

ヒストンH3Lys36(H3K36)のメチル化は真核細胞で広く保存され、エピジェネティックな制御に重要と考えられる。出芽酵母での研究からこのメチル化はヒストン脱アセチル化酵素の呼び込みを介して遺伝子内の不正な転写を抑制する機能があることが示されているが、それ以外の生物での解析は進んでいない。高等真核生物に近いクロマチン制御システムをもつ分裂酵母を用いて唯一のH3K36メチル化酵素であるSet2に着目して解析をおこない、これまでにSet2は出芽酵母Set2と同様にC末領域に存在するSRIドメインを介して転写途中のRNAポリメラーIIと結合し、転写と共役してH3K36のトリメチル化をおこうこと、および、出芽酵母ではH3K36のジメチル化、トリメチル化ともにが不正転写抑制に機能するが、分裂酵母ではトリメチル化のみが、不正転写とくにアンチセンス転写の抑制に機能し、ジメチル化には抑制能がない事をみいだしていた。本年度は以下の知見を得た。1.ユークロマチン領域ではH3K36トリメチル化は、標的遺伝子の転写抑制に機能する。2.ヘテロクロマチンでは転写抑制ではなく、転写されたRNAの分解により遺伝子発現抑制をおこなう。これらの結果は、はじめてトリメチル化特異的なH3K36メチル化機能を明確にしめすとともに、RNA分解を介した遺伝子抑制という新たな遺伝子抑制メカニズムを明らかにしたもので、H3K36ジメチル化酵素とトリメチル化酵素をそれぞれ複数持つ高等真核生物での、H3K36メチル化機能を理解する上で重要な知見であり、エピジェネティクス研究分野に貢献する成果である。26年度が最終年度であるため、記入しない。ヒストンH3の36番目のリジンH(H3K36)のメチル化は、遺伝子中のcripticな転写を抑制する事が出芽酵母で示されているが、それ以外の機能については不明である。我々は分裂酵母H3K36メチル化酵素をコードする遺伝子set2の機能解析をおこなっている。Set2はRNAポリメラーゼII(RNAPII)のCTD領域と特異的に相互作用し、転写と共役してH3K36メチル化を行う。このRNAPIIとの相互作用に必要な領域の欠失変異体(set2ΔSRI)を作成したところ、細胞に存在する、ジメチル化されたH3K36 (H3K36me2)は維持されるがトリメチル化されたもの(H3K36me3)は消失することがわかった。この時、H3K36me2とH3K36me3のゲノムワイドな分布をChIP-sequencingにより解析すると、両者共に転写ユニットと重なる形で存在し、set2ΔSRIではH3K36me3が失われるが、me2は影響を受けない。これはジメチル化も転写と共役しておこることを示しており、Set2が未知のモードでRNAPIIと相互作用することを示している。一方、野生型株、set2破壊株、ΔSRI株のゲノムワイドな転写をマイクロアレイを用いて解析をおこなったところ、set2破壊株、set2ΔSRI株で見られる発現のパターンがほぼ同一であった。前述のChIP-sequencingの結果を考慮するとH3K36me3が遺伝子発現制御に重要でH3K36me2は機能を持たないということを示している。また、H3K36me3の欠損により、大きく遺伝子発現が上昇する遺伝子の多くがanti-sense RNAと減数分裂期に発現する遺伝子であることがわかった。これはH3K36me3が特にanti-senseの不用な転写の抑制と、減数分裂特異的遺伝子発現抑制という生理的機能をもつことを示唆している。

Set2-H3K36メチル化によるクロマチン制御、遺伝子発現制御の解明をめざして解析を進めているが、今年度はゲノムワイドの解析により、以下の重要な発見を行うことができた。1) H36K36トリメチル化が遺伝子発現調節に重要でジメチル化は重要でない2) Set2はRNAポリメラーゼのCTDとの相互作用以外に転写と共役する機構をもつ3) H3K36トリメチル化は減数分裂関連遺伝子発現、anti-sense RNA発現の抑制に重要である。これらの新知見は当初の目的とするヒストン修飾と、転写、クロマチン制御のクロストークのメカニズムの一端とその生理的意義を解明する上で重要な知見で有り、これらの知見をもとに残された期間解析を推進することで当初の目的を達成する可能性が高まったと考える。以下の三点を明らかにする。1) Set2がRNAポリメラーゼIIと共役してヒストン修飾をおこなう分子機構の解明。特にジメチル化を行う時にどのようにRNAポリメラーゼIIと相互作用するのか、仲介因子の存在も考慮にいれて、Set2との相互作用因子の解析など生化学的解析を推進する。2) H3K36トリメチル化による遺伝子発現抑制機構の解明。トリメチル化を特異的に認識結合して機能する因子の存在が想定できる。そこで、すでにK36トリメチルを認識するドメイン(PWWPドメイン)を有する分裂酵母の3つのタンパク質について、遺伝子破壊株を作製し、set2破壊株との比較などの解析をおこなう。一方で、H3K36トリメチルを含むペプチドを用いて生化学的に結合因子の同定を試みる。3) H3K36トリメチル化の減数分裂期遺伝子の発現調節の解析。H3K36トリメチル化により抑制を受けている減数分裂期特異的遺伝子について、減数分裂期でのH3K36トリメチル化の変化などを解析する事で、その生理的機能を明らかにする。
マイクロマシニングを用いた前方視血管内超音波内視鏡

1、撮像プログラムの作成と像構成あらかじめ発信振動子と受信振動子のすべての組み合わせの反射波形を測定し、各ピクセルに対応した遅延時間をソフトウェア上で加え重ね合わせる、ソフトウェア式フェイズドアレイプログラムを作成した。2、撮像実験およびコンポジット型PZTリングアレイ超音波プローブの作製外径φ3mm、内径2mmの8素子のPZTリングアレイ超音波振動子を用いてデータ取得を行い、上記の撮像プログラムを用いてプローブ正面に置いたφ1mmの真棒およびφ3mmのボールベアリングの撮像を行った。撮像物体の像および移動の様子が確認されたが、超音波パルスのリンギングおよび不要な振動モードに起因すると思われる多数の虚像が同時に観察された。そこでDice and Fill法によりリング状の1-3コンポジット素子を新たに作製し、リンギングの若干の減少と不要な振動モードの除去を確認した。3、ファインピッチ1-3コンポジット型超音波振動子作製プロセス虚像のないより鮮明な画像を得るためにはPZTの1-3コンポジットをより微細に作る必要がある。RIE(反応性イオンエッチング)によるディープエッチングを行ったシリコンを鋳型にしてPZTを焼結するSi-lost-mold法を改良し、φ7μmのPZTロッドのアレイを試作した。4、RIEを用いたPZT加工法の開発ファインピッチ1-3コンポジットを作製するための新たなPZT加工法として、RIE(反応性イオンエッチング)で直接PZT基板をエッチングする方法を開発した。これは、SF6ガスのプラズマ中で発生したイオンに電界をかけて加速し、PZT基板に衝突させるもので、あらかじめパターニングしたNiマスクのない場所でPZTが選択的に取り去られる1.PZTリングアレイ超音波プローブの開発外径¢3mm、内径2mmの8素子のPZT製リングアレイ超音波振動子を試作し、個々の素子の動作確認を行った。このリングアレイ超音波振動子をポリイミドとアルミによるフレキシブル配線を利用してカテーテルのダミ-ヘ実装した。2.リングアレイ駆動・受信回路の作製フェーズドアレイによってPZTリングアレイプロープを駆動し画像を得るための回路を作製した。これは、高速TTLを用いたディレイライン回路および受信用増幅回路で構成されている。現在はディスクリートだが、最終的には一部をCMOSプロセスを用いて集積化しカテーテル先端へ実装することを目指す。3.コンポジット型超音波振動子の開発直径16μm、高さ100μmのPZT口ッドのアレイをポリマーで埋めた1-3コンポジット構造を作製した。このアスペクト比の高い構造を実現するため、加工したシリコンを鋳型にしてPZTを焼結するSi-lost-mold法を開発した。シリコンにRIE(反応性イオンエッチング)で深い孔をあけ、これにPZTのスラリーを充填した後、HIP(熱間等方圧焼成)により等方的に加圧しながら高温で焼結する。その後シリコンをXeF_2を用いた気相エッチングで取り去る。この方法により高密度かつ高精度形状のセラミックス微細構造体を作製できた。また、カテーテル先端へ実装する目的で円周状にロッド群を試作した。ポリマーを口ッドの間に充填することでコンポジット構造が完成する。これは、SF6ガスのプラズマ中で発生したイオンに電界をかけて加速し、PZT基板に衝突させるもので、あらかじめパターニングしたNiマスクのない場所でPZTが選択的に取り去られる
頭頸部癌患者に対するアミノ酸系消化態栄養剤の口腔粘膜炎発症予防効果に関する検討

頭頸部癌患者に対する放射線化学療法は主要な治療法である。この治療法では口腔粘膜炎の発症及び重篤化が認められ、食事摂取量の低下及び栄養状態の悪化が問題となってきた。口腔粘膜炎に対しては、ポラプレジンク・アルギン酸ナトリウム含嗽液や口腔内ステロイドが使用されてきた。本研究の目的は、放射線化学療法を施行している頭頸部癌患者を対象として、アミノ酸系消化態栄養剤による口内炎の発症予防効果および軽減効果について検討することであった。放射線化学療法を施行された患者を、ポラプレジンク・アルギン酸ナトリウムの含嗽液+アミノ酸系消化態栄養剤投与群と対照群(ポラプレジンク・アルギン酸ナトリウムの含嗽液のみ)に分けた。アミノ酸系消化態栄養剤は治療開始から終了時まで継続した。治療終了時における、口腔粘膜炎の発現状況、食事摂取量、栄養状態の変化などを評価した。調査期間中(6/1-3/31)に入院にて放射線化学療法を施行した頭頸部癌患者は22名であった。その結果、治療終了時の口腔粘膜炎のGrade (CTCAEを用いて評価)(p=0.87)、食事摂取量(主食: p=0.76)(副食: p=0.61)、血清アルブミン値の変化量(p=0.52)いずれにおいても、対照群(n=12)と投与群(n=9)において有意差は認められなかった。治療前後の体重変化は、有意差は認めなかった(p=0.0739)が、投与群のほうが体重減少が小さい傾向にあった。これはアミノ酸系消化態栄養剤による補給カロリーの増加や蛋白投与による筋肉量の保持による影響が考えられた。以上から、ポラプレジンク・アルギン酸ナトリウム含嗽液にアミノ酸系消化態栄養剤を加えた口腔粘膜炎の予防法はポラプレジンク・アルギン酸ナトリウム単剤による予防法に比べ有益な予防方法とならないことが示唆されたが、カロリー及びアミノ酸の負荷による体重減少の低減には一定の効果があることが推察された。
難治性C型肝炎の完全治癒を目指した新規ウイルス制御機構の解明

今回の研究では、肝臓細胞内での肝炎ウイルス複製に対する新たなる抑制機構を解明するために、B型肝炎ウイルス蛋白を導入させたマウスや培養細胞モデルを用いて解析した。その結果、発癌抑制分子の一つであるサイクリン依存性キナーゼ阻害蛋白(p21)の細胞内局在を核内へ誘導コントロールすることにより、発癌抑制作用だけでなく抗ウイルス作用も発揮されることが示唆された。このことが、新規の抗ウイルス療法の開発に寄与し得るものと考えられる。1、酸化ストレスは細胞内のどの様なシグナル経路・分子活性を介して抗ウイルス効果を示すのか?申請者はこれまで、酸化ストレス誘導性のリン酸化酵素ERKが抗ウイルス制御機構に関与していることを見出している。その詳細な解析をするにあたり、C型肝炎ウイルス(HCV)のコア蛋白が細胞内の抗ウイルス的インターフェロン(IFN)システムや酸化ストレス発生を撹乱することに着目し、同様の作用を示すとされるB型肝炎ウイルス(HBV)X蛋白(HBX)発現マウスや細胞を用いた。その結果、HBXにより強力に誘導された発癌抑制分子p21の発現が、抗ウイルス剤のIFNによって抑えられたことを見出した。更に、HBX誘導性p21は優位に細胞質内に局在し、これがHBXによる細胞増殖促進、即ち発癌機構に関与していることが明らかになった。一方、IFNによりp21は核内へ移行されたから、p21の細胞内局在が細胞増殖だけでなくウイルス複製も制御している可能性が示唆された。2、p21の細胞内局在と酸化ストレス誘導性ERKは関連しているのか?今回の解析で、HBXによる細胞質内p21発現増強に、HBXとの直接的な相互作用によって活性化されたPKCαが介在していることも明らかになった。ところで、ERKの活性化にもPKCαが関与していることが知られている。PKCαはIFN処理で不活化され、これによりp21が細胞質から核内へ移行することが見出された。一方、ERKはHBX発現およびIFN処理でも活性化された。p21と同様、活性化ERKも細胞内の局在によって細胞に与える影響が異なることが知られており、PKCαとIFNの各々によって活性化されたERKでは作用が異なる可能性が示唆された。今後、HCV複製下でのp21とERKの細胞内局在を解析することでウイルス複製にどの様に関与しているのかを明らかにし、それに対する制御機構をより詳細に解明したい。1、酸化ストレス誘導性ERKを介した抗肝炎ウイルス複製抑制機構の解明申請者はこれまで、酸化ストレス誘導性の抗ウイルス抑制機構を解析するにあたり、C型肝炎ウイルス(HCV)コア蛋白と同様に肝細胞内のシグナル伝達を撹乱するとされている、B型肝炎ウイルスX蛋白(HBX)の発現実験モデルを用いてきた。その結果HBXにより誘導された発癌抑制分子p21、特にその細胞質内発現が、ウイルス複製にも関与していることが示唆された。細胞内p21発現は、酸化ストレスと関係があるPKCαやERKを介することが見出されているが、HBXによる細胞質内発現誘導にはPKCαのみが関与していた。一方、ERK誘導性のp21は主に核内発現であり、これはインターフェロン(IFN)がHBXによる細胞質p21を核内へ移行させる作用と同様であることから、ERKによる核内p21発現が抗ウイルス機構に関与していることが示唆された。2、酸化ストレス誘導性ERKによる核内p21の作用IFNは抗ウイルス効果だけでなく抗腫瘍作用も有し、制癌剤との併用により相乗効果を示すことから臨床の場でも多用されている。ところで、この相乗的な抗腫瘍機構は未だ解明されていないが、今回の解析で我々は核内p21発現を増すことによって、IFNによる制癌剤のアポトーシズ作用増強を更に促進させることが見出された。つまり、ERK誘導性核内p21はIFNによって増強するだけでなく、それ自体がIFNの作用を増強させた。実際に核内p21発現を増強させた状況でHBX発現細胞をIFNで処理すると、その蛋白発現の抑制が確認された。今後、HCV蛋白発現またはRNA複製下でも酸化ストレスを誘導することによって核内p21発現が増強され、抗肝炎ウイルス制御へ導かれるのか確認し、最終的にこの様な抗ウイルス機構と抗腫瘍機構が繋がるのではないか解明したい。
ヒト破骨細胞学

我々人類は基礎的な生命科学について実験用マウスモデルから非常に多くの知見を得てきたが、マウスとヒトでは遺伝学的相違、環境要因の差異、進化的な距離の遠さなどから、根本的に重大な点を見落としている可能性があるのも事実である。また近年、骨代謝学領域に限らず、マウスで研究された治療標的がヒトにおいては効果が確認できないことも多く、重要なヒト特異的遺伝子を見落としている可能性がある。破骨細胞研究においては、in vitroで分化させたマウス破骨細胞とヒト破骨細胞では明らかな形態的差異があり、その遺伝子発現制御機構は大いに異なっていることが予想されるにも関わらず、ヒト破骨細胞を用いた網羅的研究・分子細胞生物学的解析を組み合わせて重要性を確認する解析はほとんど行われてこなかった。本年度までに、複数ロット由来のヒト破骨細胞分化過程や、骨芽細胞における遺伝子発現解析・プロファイリングを行い、これまで申請者らが蓄積してきたマウスの網羅的発現データベースとの比較検討を行い、マウスには存在せずヒト特異的に存在する因子Xを発見した。このXは液性因子で、興味深いことに、この遺伝子Xはマウスだけでなく霊長類でもヒトを含む狭鼻下目以外では開始コドンが保存されておらず、ヒトに非常に近い霊長類(チンパンジーやオランウータンなど)にのみ保存されているということがわかった。さらに、因子Xの標的分子Yはヒトでもマウスでも高い相同性を示す破骨細胞分化促進性因子であり、XはYの機能を特異的に阻害することにより破骨細胞分化を著明に抑制することを見出した。すなわち、Xはヒト破骨細胞分化を特徴づける因子である可能性が示唆された。また近年、骨代謝学領域に限らず、マウスで効果が確認された治療ターゲットの多くが、ヒトの疾患においては効果が見られなかったという報告が相次いでおり、広く問題視されているのが現状である。本年度までに、複数ロットのヒト破骨前駆細胞に対し同一の条件で破骨細胞分化を誘導し、それぞれの分化段階における遺伝子の網羅的発現をRNA-Seq法によってそれぞれ解析し、これまで申請者らが蓄積してきたマウスの網羅的発現データベースとの比較検討を行った。破骨細胞分化に重要な役割を担う遺伝子に関する解析の結果、マウスには存在せずヒト特異的に存在する遺伝子Xを発見した。この遺伝子Xは液性因子であり、興味深いことに、この遺伝子Xはマウスだけでなく霊長類でもヒトを含む狭鼻下目以外では開始コドンが保存されておらず、ヒトに非常に近い霊長類(チンパンジーやオランウータンなど)にのみ保存されているということがわかった。ヒト破骨細胞分化培養系において、遺伝子Xがコードする液性因子はin vitroでの効果が確認された。現在まで、当初の計画通り研究が進行していることから。当初の計画通り、ヒト特異的遺伝子を含むゲノム領域のノックイン/コンディショナル欠損マウスの作製を行う。
初期島弧における海洋リソスフェアの再融解とボニナイトの生成に関する地質学的検証

オマーンオフィオライト北部に位置するフィズ岩体マントルセクションに分布するかんらん岩類と貫入岩類の構造と化学組成を分析し、中央海嶺における海洋リソスフェアの形成から海洋デタッチメントによる初期島弧での改変のプロセスを明らかにした。とくに融け残りかんらん岩の組成分布から海嶺セグメント構造が見いだされた。海嶺セグメント境界には高枯渇のハルツバージャイトとダナイトが分布し,海洋リソスフェアのデタッチメントに伴い,多量の流体が流動したことが明らかになった。本年度はオマーンオフィオライト北部フィズ岩体の地質調査ならびに構造と鉱物化学組成分布の解析を行った。その結果,フィズ岩体のマントルセクションに海嶺セグメント構造に対応する組成変化が検出された(村上ほか,2008)。セグメントの中心部は均質で部分融解度の高い融け残りかんらん岩からなり,末端部は部分融解度の低いかんらん岩と高枯渇岩が共存することが明らかになった。末端部の特徴は,中央海嶺下の部分融解と海洋プレート同士の衝上による再融解の痕跡を表わしている可能性が考えられる。次に,フィズ岩体最北部のマントルセクションの組成分布を検討した結果,新たな高枯渇岩の分布域が明らかになった。ハルツバージャイトとダナイトのカンラン石とスピネルの組成関係に2種類存在することも明らかになり,それらがハルツバージャイトの再融解によるボニナイトマグマの生成にともなうものと,ボニナイトマグマがマントルから地殻に上昇するときにハルツバージャイトと反応して形成したものに,それぞれ対応すると考えられる。苦鉄質超苦鉄質ダイクの分布と鉱物組成変化から,フィズ岩体最北部のマントルセクションの西部により未分化な斜方輝岩が,東部のモホに近い地域にウェブステライトが分布していることが判明した。貫入岩は,ボニナイトメルトが結晶分化しながら上昇する過程で結晶集積岩として形成したことが考えられる。来年度はさらに調査地域を広げながら,上記の仮説を検証して行くことを目標とする。本年度はオマーンオフィオライト北部フィズ岩体の構造解析と全岩化学組成変化の検討を行った。野外で定方位で採取した岩石試料を室内で構造解析し,上部マントルの流動センスと方向を推定した。その結果,モホ面近傍に凍結された粗粒等粒状組織の分布域では流動センスと方向に地域的な差異が確認された。すなわち,北部のWadi Rajmi地域からWadi Zabin地域にかけて上位側が南に流動するセンスが認められ,Wadi ZabinからWadi Fizh地域では上位側の流動方向が西に変化するが,岩体の南部では流動方向が再び南に向かう。粗粒等粒状組織分布域におけるマントル流動の特徴は,岩体東側で海嶺軸が北に進み,西側で別の海嶺軸が南に進むような重複海嶺の間に挟まれた海洋リソスフェアの時計回りの回転運動と調和的である。粗粒等粒状組織よりも構造的下位で分布するポーフィロクラスティック組織は南北方向の流動センスが特徴的である。一方,フィズ岩体に複数発達する北西-南東方向の剪断帯は粗粒等粒状組織とポーフィロクラスト状組織を共に横断しており、上記の重複海嶺に伴う回転運動よりも後期の変形運動によるものと考えられる。可能性としてはoceanic thrustingに伴うフィズ岩体全体におよぶ左ずれセンスの剪断変形が考えられる。剪断帯と平行に高枯渇帯(菅家・高澤2006)が存在するのはこのステージで沈みこむ海洋地殻から供給された流体によってリソスフェリックマントルが再融解したためと考えられる。ハルツバージャイトの全岩化学組成はモホ近傍から西側の基底スラストにかけてメルト成分のゆるやかな増加が認められた。この結果は中央海嶺で生じる融け残りマントルコラムモデルと調和的である。本研究はオマーンオフィオライトを初期島弧のアナログと見立て,初期島弧のステージでどのように流体がマントル内に流入し,海洋リソスフェリックマントルの再融解を引き起こしたのか,また,ボニナイトがどこで形成し,どのように上部マントルから地殻へ分離していったのか,これらの一連のダイナミクスを明らかにすることを目的とした。その結果,以下の3点が明らかになった。[1]高枯渇領域と剪断帯の成因関係フィズ岩体南西に位置する剪断帯にも高枯渇領域が見いだされたので,その延長に当たるヒルチ岩体で岩石を系統的に採取し,高枯渇領域の分布を明らかにする。今回の調査でヒルチ岩体の5本のワジ(枯れ沢)の踏査を行った。フィズ岩体南西部から連続する剪断帯にもダナイトとクロミタイトが多く,高枯渇帯の存在が示唆される。今後は化学分析を行ってその可能性を検証する必要がある。

[2]高枯渇領域に比較的多く分布するダナイトに着目し,高枯渇領域から分離したメルトの痕跡を見いだすことフィズ岩体の高枯渇帯を精査したところ,大量のダナイトが分布することが明らかになり,高枯渇帯は「大規模なダナイト集中帯」であることが判明した。ダナイトは多量のメルトの流動と反応の結果形成されるもので,今後ダナイトに含まれるメルト包有物を検討し,通過したメルトの性質を明らかにする必要がある。[3]高枯渇ハルツバージャイトと苦鉄質ガブロの微量元素含有量から,関与した流体の化学的特徴を明らかにする誘導結合プラズマ質量分析計を用いて,マントルセクションに貫入した苦鉄質岩類の微量元素含有量を測定した。その結果,中央海嶺玄武岩の組成に類似したものと,それよりもかなり濃度の低いものの二つのグループが存在することが明らかになった。後者は,デタッチメントによる沈み込み帯の形成と関連性が示唆される。
古典制限1次元状態和や数理物理学に現れる特殊多項式のパス模型を用いた研究

Mirkovic-Vilonen多面体(以下、MV多面体と略す)の理論において以下の3つの結果を得た。(1)P,QをMV多面体とする。このとき,PとQのテンソル積に対応するMV多面体は,PとQのMinkowski和に含まれることを示した。(2)Demazure加群および反Demazure加群の結晶基底をMV多面体を用いて記述した。(3)MV多面体の理論を捩れのないA型の量子アフィン代数の場合に拡張した。Lakshmibai-Seshadri(LS)パスのなすパス模型を用いて、主に以下の研究を行う。(1) 1次元状態和を新たにパス模型の視点から研究し、1次元状態和に関する最重要課題であるX=M予想を解決する。そのためにrigged configurationとLSパスとの関係を調べる。(2)特殊化していないMacdonald多項式をLSパスを用いて表示する。そして、Kostka多項式やMacdonald多項式をパス模型の視点から研究する。Joel Kamnitzerは,有限次元単純リ一代数に付随した量子群の有限次元既約表現の結晶基底を,Mirkovic-Vilonen多面体(以下,MV多面体)を用いて幾何学的に実現した.本年度は,このMV多面体の概念を(当研究で重要な役割を果たす)量子アフィン代数U_q上のレベル・ゼロ基本表現の場合に拡張することを考えた.これが出来れば,MV多面体のなすクリスタルとレベル・ゼロ基本表現のパス模型の間の対応を調べることで,Lakshmibai-Seshadriパスの規則性,さらにはrigged configurationとの関係を幾何学的に調べることが出来るようになる.本年度に得られた結果は次の通りである.これらの結果(特に(1)や(2)は,上で述べた目標のための非常に重要なステップとなる.得られた結果.(1)U_qがA_l^<(1)>型(l≧2)の場合に(つまり,捩れのないA型の場合に),MV多面体の概念をU_qの可積分最高ウエイト表現の揚合に拡張することに成功した.(2)有限次元単純リー代数に付随した量子群のDemazure加群の結晶基底をMV多面体を用いて記述することに成功した(レベル・ゼロ基本表現の結晶基底はDemazure加群の結晶基底と密接な関係があることが観察されている).(3)B型,C型の有限次元単純リー代数の場合に,MV多面体の成すクリスタル上の"lowering"柏原作用素の記述を与えた(クリスタルの構造を具体的に調べるには柏原作用素の記述が必要になる).平成20年度は,平成19年度に引き続き, Mirkovic-Vilonen多面体(以下, MV多面体)の理論を量子アフィン代数上のレベル・ゼロ基本表現の結晶基底の場合に構築するすることを考えた.これが出来れば,MV多面体のなすクリスタルとレベル・ゼロ基本表現のパス模型の問の対応を調べることで, Lakshmibai-Seshadriパスの規則性,さらにはrigged configurationとの関係を幾何学的に調べることが出来るようになる.平成20年度に得られた結果. (1)gを有限次元単純リー代数とし, U_q(g)をその量子群とするU_q(g)の有限次元既約表現の結晶基底には,'opposite' Demazure加群の結晶基底が含まれる.そのopposite Demazure加群の結晶基底をMV多面体を用いて記述することに成功した. (平成19年度の実績報告書にも書いたが,レベル・ゼロ基本表現の結晶基底はDemazure加群の結晶基底と密接な関係があることが観察されている.)(2) gがA_n型の有限次元単純リー代数の場合に, MV多面体の(クリスタルの元としての)テンソル積について研究した.そして,ある自然な条件の下でMV多面体の最も基本的な1-skeletonに注目すると, MV多面体P, Qのテンソル積P〓Qは,各辺の長さがPの対応する辺の長さとQの対応する辺の長さの和になっているようなMV多面体になることを証明した. (クリスタルの理論において重要な結果を証明する際には,テンソル積がどのように記述できるかが鍵となることが多い.それゆえ,この研究は最初に述べた目的にとって非常に重要であると考える.)(1)本研究で主に用いるクリスタルの理論においては,テンソル積がどのように記述されるかを調べることが重要となる.本年度は,前年度に引き続き,Mirkovic-Vilonen多面体(以下,MV多面体)の研究を行い,次のテンソル積に関するMV多面体の評価を得た:「P,QをMV多面体とする.Pがextremalであるとき,テンソル積P[!○×]Qに対応するMV多面体は,PとQのMinkowski和P+Qに含まれる.」

これまでに当研究において得られたMV多面体に関する結果は,量子アフィン代数上のレベル・ゼロ基本表現の結晶基底に対応するMirkovic-Vilonen多面体(以下,MV多面体)の理論を構築し,当研究の主研究対象の1つであるrigged configurationを幾何学的に調べる際に極めて重要な役割をすると考えられる.(2)この研究では,エクストリーマル・ウェイト加群と呼ばれる量子アフィン展開環上の加群が重要な役割を果たす.実際,量子アフィン代数上のレベル・ゼロ基本表現の結晶基底は,対応するエクストリーマル・ウェイト加群の結晶基底を,null rootを法として考えることで得られる.そこで,本年度は"infinite rankの"量子アフィン代数のエクストリーマル・ウェイト加群を考え,それらの結晶基底に対するパス模型を構成することに成功した.そして,それらのパス模型のテンソル積の分解則をLittlewood-Richardson係数を用いて具体的に記述することが出来た.(1)本研究で主に用いるクリスタルの理論においては,テンソル積がどのように記述されるかを調べることが重要となる.前年度,私は加藤周氏および内藤聡氏との共同研究で次の結果を得た:「P,QをMirkovic-Vilonen(MV)多面体とする.Pがextremalであるとき,テンソル積P[○!×]Qに対応するMV多面体は,PとQのMinkowski和P+Qに含まれる.」本年度の研究によって,上の定理において「Pがextremal」という仮定が必要ないことが分かった.すなわち,勝手なMV多面体P,Qに対して,テンソル積P[○!×]Qに対応するMV多面体が,PとQのMinkowski和に含まれることを証明できた.また,昨年度に定理を証明した際は主に幾何的な手法を使ったのに対して,本年度は概ね組合せ論的な手法で上の定理の証明を与えた.これまでに得られたMV多面体に関する結果は,量子アフィン代数上のレベル・ゼロ基本表現の結晶基底に対応するMV多面体の理論を構築し,当研究の主研究対象の1つであるrigged configurationを幾何学的に調べる際に役に立つであろう思っている.(2)E^<(1)>_6型の量子アフィン代数上の随伴表現に対応する頂点に付随したKirillov-Reshetikhin(KR)加群については,結晶基底の存在は知られているが,その完全性はまだ証明されていない.尾角正人氏らは,この結晶基底に同型になると予想されるクリスタルを組合せ論的に構成した.本年度,この尾角氏らのクリスタルに含まれるA_<5->最高元たちの多面体的表示に関する予想を証明できた.これはKRクリスタルの完全性やrigged configurationとの関係を調べる上で重要な一歩である.
オーファン受容体とそのリガンド同定による放線菌二次代謝制御の統合的理解

全ゲノム情報が明らかにされ、又工業生産上極めて重要な医薬品avermectinの生産菌であるS. avermilitisを用いて、転写発現パターンより、125個のTetRファミリー制御因子群、及び2成分制御系のセンサーキナーゼ60個から、リガンドに応答して二次代謝に関与する制御因子を選別した。その後、組換え型タンパク質をアフィニティ担体として低分子リガンドを迅速精製し、LC-MS/MS並びに高分解能H-NMRを用いてその構造を決定した。新規有用化合物の主要な生産菌であり、また医薬品の重要な工業生産菌であるStreptomyces属放線菌を対象として、機能未知の31ファミリー約650個の制御因子のうち、未知信号物質のセンシングに関わると推定される制御因子群(TetR系125個、2成分制御系60個)について、二次代謝発現に関与する低分子リガンドとその受容体として機能する制御因子の同定を行い、低分子リガンドの迅速な構造決定と制御因子の機能解析を通じて、新たな二次代謝制御カスケードを明らかにする。全ゲノム情報が明らかにされ、又工業生産上極めて重要な医薬品avermectinの生産菌であるS.avermilitisを用いて、RNAiによる発現抑制が二次代謝へ及ぼす影響から、125個のTetRファミリー制御因子群、及び2成分制御系のセンサーキナーゼ60個より、二次代謝に関与する制御因子を選別する。その後、組換え型タンパク質をアフィニティ担体として低分子リガンドを迅速精製し、LC-MS/MS並びに高分解能H-NMRを用いてその構造を決定する。同時に、受容体である制御因子の遺伝子破壊株、強制高発現株を作成し、二次代謝産物の生産並びに、全32種の生合成遺伝子クラスター発現への影響を精査することで、該当するリガンドと受容体のペアーが二次代謝制御に果たす役割を確定する。1.全ゲノム情報から、バイオインフォマテックの各種手法により、TetRファミリー制御遺伝子群、及び2成分制御系のセンサーキナーゼ遺伝子群を推定し、周辺遺伝子の解析と合わせて、二次代謝でのオーファン受容体として働き得る候補遺伝子を同定した。さまざまな微生物に由来する同群因子のアミノ酸配列に基づく隠れマルコフモデルにより、潜在的な同群制御因子ももれなく同定した。また、リガンド結合領域に焦点をしぼった配列解析を行い、アミノ酸、糖、核酸などの単純な一次代謝産物、並びに典型的な抗生物質を結合する制御因子は除外した。2.選別した制御因子7種につき、転写プロファイル解析を行い、最も有望な制御因子を選択し、大腸菌を用いて組換え型制御因子タンパク質の大量発現に成功した。1.各制御遺伝子についての、転写プロファイル解析とRNAiによる転写抑制/多波長HPLCによる二次代謝産物解析最小培地、炭素源制限培地、窒素源制限培地、リン源制限培地、無機塩制限培地、各種難資化性炭素源培地など、異なる培養条件下で液体培養を行い、候補とした制御因子遺伝子の転写プロファイルをRT-PCRにより解析した。同時に、多波長逆相HPLCにより、二次代謝産物の生産プロファイルを詳細に測定し、各培養条件でどの時期から二次代謝モードに移行するかを決定した。二次代謝への移行時期に、明瞭な転写変化、特に転写上昇を示す制御因子群が、オーファン受容体のまず第1の候補群となる。各遺伝子につき、RNAi手法を援用して転写を抑制し、転写抑制が二次代謝産物のプロファイルや開始時期に与える影響を決定することで、オーファン受容体の第2の候補群を選別した。2.組換え型受容体タンパク質をアフィニティー担体とした低分子リガンドの濃縮、精製、構造決定信号物質として作用する化合物は、通常低濃度でしか存在せず、効率的な濃縮と高感度の精製法が必須である。このため、オーファン受容体として機能する制御因子を組換え型タンパク質として大量発現し、アフィニティー担体として用いて高度選択的に濃縮を行った。濃縮された低分子リガンドには、更にtert-butyldiphenylsilyl化などの発色性誘導体化を施し、逆相HPLCにて精製を行っている。全ゲノム情報が明らかにされ、又工業生産上極めて重要な医薬品avermectinの生産菌であるS. avermilitisを用いて、RNAiによる発現抑制が二次代謝へ及ぼす影響から、125個のTetRファミリー制御因子群、及び2成分制御系のセンサーキナーゼ60個より、二次代謝に関与する制御因子を選別する。培養時における転写パターンなどから遺伝子sav6781が最も可能性が高いと判断し、C-末端側にマルトース結合ドメインを融合した組換え融合タンパク質として大腸菌で発現させた。高発現に成功し、単一バンドを示すタンパク質として精製した。S.

avermitilisの培養上清を、組換え融合タンパク質を保持したアフィニティーカラムに負荷し、未結合低分子化合物を洗い流した後、結合化合物を溶出した結果、コントロールとの間で有意な差がみられなかったため、溶出画分を2,4-ジニトロベンゾイルクロライドを用いて誘導体化した。HPLC解析の結果、溶出時間15.1分に組換えSAV6781タンパク質に依存する特異的なピークを得ることに成功した。現在構造解析に必要な十分量の精製標品を調整中である。原核微生物は、温度や光など、また栄養状態など刻々と変化する環境の中で生活している。そのため、外界の変化に対応するため、細胞内にシグナルを伝達し外界の変化に応答する環境応答と呼ばれるシステムを持つ。有用二次代謝産物の生産菌として著名な放線菌が、最も多く持つのは、TetR型転写制御因子を介した環境応答系であり、477種知られている放線菌の各種は、平均して70個のTetR型制御因子を有する。現在までに、放線菌においては、112種のTetR型制御因子に関して研究がなされ、その機能が推定されてきている。しかし、これら制御因子に結合するシグナル分子が同定された報告は極めて少なく、わずか14のリガンドが報告されているに留まる。同定されたリガンドの数が少ない要因の一つとして、菌体中でのリガンドの絶対量が少ないことが挙げられる。たとえば、我々が同定したエバノライドは、2,000Lの培養液からわずか1.2 mgしか単離できない。このため、迅速なリガンド同定には、効率的なリガンド補足法が必須となり、本研究では、大腸菌で大量発現させた組換え型制御因子をアフィニティ担体としてリガンドを選択的に濃縮して溶出する手法を開発し、その後高速液体クロマトグラフィーでリガンド候補を選別し、LC-MS/MSを用いて同定するという研究手法の開発に成功した。本研究では、全ゲノム配列が決定され、殺中剤として著名なアバメクチンの生産菌であるStreptomyces avermitilisを対象として、コードされる全75種のTetR型制御因子について検討した。アミノ酸や糖などありきたりの化合物をリガンドとするものを除き、未同定のリガンドと結合して機能を発揮すると思われる制御因子について重点的に研究を進めた結果、3,4-ジヒドロキシブチルアセテートなど、新規なリガンドを同定するに至っている。全ゲノム情報が明らかにされ、又工業生産上極めて重要な医薬品avermectinの生産菌であるS. avermilitisを用いて、転写発現パターンより、125個のTetRファミリー制御因子群、及び2成分制御系のセンサーキナーゼ60個から、リガンドに応答して二次代謝に関与する制御因子を選別した。その後、組換え型タンパク質をアフィニティ担体として低分子リガンドを迅速精製し、LC-MS/MS並びに高分解能H-NMRを用いてその構造を決定した。未同定リガンドを有すると推定できるTetR型制御因子の決定、マルトース結合ドメインを融合した組換え型TetR型制御因子の大腸菌での大量発現と精製、またS.avermitilis培養上清を負荷したアフィニティクロマトグラフィーで、TetR型制御因子に依存する特異的な低分子化合物ピークの同定に成功している。27年度が最終年度であるため、記入しない。分子微生物学TetR型制御因子に依存する特異的な低分子化合物ピークを十分量精製し、高分解能LC-MSなどの機器分析によりその構造を決定する。S.
沖縄県の島嶼地域における社会的養護関連職員のストレスマネジメント・システムの創造

昨年度までの2年間において「技法の有効性」に関してはストレスマネジメント技法としてのTREおよびリセットの沖縄県内島嶼地域の社会的養護関連職員のストレスマネジメント・スキルとしての有効性の検証を2期4回にわたって実施しワークショップ実施当日の肯定的変化について確認できた。その後のアンケートの結果より、有効性を実感したスキルであっても、日々の多忙な業務の中でそのスキルを継続できるかどうかが課題となる点が再確認できた。また、島嶼地域特有のストレスの有無については、利用者との生活圏が重なる事によるストレスと同時に、個人のサポートネットワークやストレス発散方法の種類によっては狭い地域性故に逆にサポートネットワークが活用できるという肯定面も確認された。また、「関連専門職員のストレスマネジメント・システムの構築と有効性の検証」に関しては、地域において職場組織を超えた研修会が不十分であると感じられている状況が確認できた。ストレスを原因として離職する職員がみられる状況については、ストレスマネジメント的な対応と共に、専門スキルの向上をはかるための研修会の実施や、状況に応じた専門的知識・技能の提供の必要性も確認された。最終年度においては過去の実践研究において課題としてあがった「リセットのプラクティショナー(実践者)の養成」の有効性の検証を実施した。リセットの開発者の協力のもと、ワークショップ終了後に新たにフォローアップを1ヶ月間実施する工夫も加えた。個人的なストレスマネジメントへの活用のみでなく身近な職員等への指導も可能なスキルを取得した状況においても、その継続的な活用は限定的であった。今後の課題としては、既に各個人が活用している様々なストレス発散方法への今回取り上げたスキルの融合の可能性の確認ともに、職員の離職予防という観点からはこのようなスキルの組織単位で活用の検討も今後の課題といえる。1.TREおよびリセットの宮古島市内の社会的養護関連職員のストレスマネジメント・スキルとしての有効性の検証1)ワークショップの実施:有資格者3名が2泊3日の旅程で市内の児童養護施設を会場とした2回のワークショップを実施する。各回ワークショップの定員は10名程度とし、セミ・クローズドで参加者を募集。同様のワークショップを合計4回実施する(2回×2期間)。2)TREの有効性に関する調査:事前・事後の「専門職のQOL-第4版」(日本語版)を用いた調査実施および、個別の聞取り調査の実施した。島嶼地域特有のストレスの有無については、その地域の出身者かどうかがサポートネットの質の差につながっている。TREおよびリセットについては、研修当日は概ね肯定的な変化と共に、その後の継続に関する課題が確認された。2.宮古島市内における児童養護施設を拠点とした関連専門職員のストレスマネジメント・システムの構築と有効性の検証:上記のワークショップの参加者を対象として、ストレスマネジメントおよび、児童養護施設を核にした関連専門職員支援に関するアンケート調査(実態・ニーズ調査)および個別の聞取り調査を実施した。地域において職場組織を超えた研修会の実施は行われていおらず、ストレスを原因として離職する職員がみられる状況であった。ストレスマネジメント的な対応と共に、専門スキルの向上をはかるための研修会の実施の必要性に関する指摘もあった。児童養護施設を核にした研修会実施については、施設への理解を深める機会になるという点を含めて、肯定的な意見が多くみられた。1.TREおよびリセットの宮古島市内の社会的養護関連職員のストレスマネジメント・スキルとしての有効性の検証を2期4回にわたって実施したワークショップを通して実施することができた。施設行事の変更等によって参加人数が少なくなったことによりアンケート調査や聞き取り調査の対象者が想定よりも少ない状況であったが、ワークショップ実施当日の肯定的変化について確認できた。その後のアンケートの結果より、有効性を実感したスキルであったも、日々の多忙な業務の中でそのスキルを継続できるかどうかが課題となる点が確認できた。また、島嶼地域特有のストレスの有無については、出身者の場合には、狭い地域性故に逆にサポートネットワークが活用できるという肯定面が確認された。2.宮古島市内における児童養護施設を拠点とした関連専門職員のストレスマネジメント・システムの構築と有効性の検証:地域において職場組織を超えた研修会の状況が確認できた。ストレスを原因として離職する職員がみられる状況については、ストレスマネジメント的な対応と共に、専門スキルの向上をはかるための研修会の実施の必要性の指摘も確認できた。児童養護施設を核にした研修会については、肯定的な意見が多くみられたが、その具体的な展開方法(特に役割分担等)については主体がどこになるのかが課題となる。3.リセットのプラクティショナー(実践者)の養成:新たな展開課題として、現在島内にはリセットのプラクティショナーがおらず、有効性が実感されても個人的に継続しない場合も確認されており、この技法を継続的に地域で展開するためには、島内におけるプラクティショナー養成も課題となる可能性があることが確認された。1.TREおよびリセットの石垣市内の社会的養護関連職員のストレスマネジメント・スキルとしての有効性の検証1)ワークショップの実施:有資格者3名2日間の日程で市内の児童養護施設を会場とした2回のワークショップを実施する。島嶼地域特有のストレスの有無については、その地域の出身者かどうかやストレス発散方法の種類等がその差につながっている。TREおよびリセットについては、研修当日は昨年度同様に概ね肯定的な変化がみられると共に、その後の継続に関する課題が確認された。

2.石垣市内における児童養護施設を拠点とした関連専門職員のストレスマネジメント・システムの構築と有効性の検証:上記のワークショップの参加者を対象として、ストレスマネジメントおよび、児童養護施設を核にした関連専門職員支援に関するアンケート調査(実態・ニーズ調査)および個別の聞取り調査を実施した。地域において職場組織を超えた研修会の実施は十分に行われておらず、ストレスを原因として離職する職員が確認された。ストレスマネジメント的な対応と共に、専門スキルの向上をはかるための研修会の実施の必要性に関する指摘もあり、また、支援上の課題を解決するヒントを提供する専門家へのニーズも確認された。児童養護施設を核にした研修会実施については、施設への理解を深める機会になるという点を含めて、肯定的な意見が多くみられた。(理由)1.TREおよびリセットの石垣市内の社会的養護関連職員のストレスマネジメント・スキルとしての有効性の検証を2期4回にわたって実施したワークショップを通して実施することができた。職員勤務のローテーションの都合等によって参加人数が少なくなったことによりアンケート調査や聞き取り調査の対象者が想定よりも少なかったが、ワークショップ実施当日の肯定的変化について確認できた。その後のアンケートの結果より、有効性を実感したスキルであっても、日々の多忙な業務の中でそのスキルを継続できるかどうかが課題となる点が再確認できた。また、島嶼地域特有のストレスの有無については、個人のネットワークやストレス発散方法の種類によっては狭い地域性故に逆にサポートネットワークが活用できるという肯定面が確認された。2.石垣市内における児童養護施設を拠点とした関連専門職員のストレスマネジメント・システムの構築と有効性の検証:地域において職場組織を超えた研修会が不十分であると感じられている状況が確認できた。ストレスを原因として離職する職員がみられる状況については、ストレスマネジメント的な対応と共に、専門スキルの向上をはかるための研修会の実施や、状況に応じた専門的知識・技能の提供の必要性も確認された。児童養護施設を核にした研修会については、肯定的な意見が確認された。3.リセットのプラクティショナー(実践者)の養成:新たな展開課題として、現在島内にはリセットのプラクティショナーがおらず、有効性が実感された場合においても個人的な活用として継続しない場合も確認され、この技法を継続的に地域で展開するためには、当地におけるプラクティショナー養成も課題となる可能性があることが確認された。