hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
非がん高齢者終末期ケアへの介入タイミングを支持するアセスメントツールの検討

本研究の目的は、余命予測の難しい非がん高齢者終末期について、多様な高齢者終末期像を体系化し、終末期ケアの介入アセスメントを明らかにすることである。高齢者終末期ステージのうち、臨死期前の移行期を、終末期ケアの介入タイミングとして注目し、移行期の高齢者状態像とケア実践に焦点を当てる。研究初年度の平成23年度は、在宅における非がん高齢者終末期医療に関わる訪問看護ステーションおよび在宅支援診療所を対象に、非がん高齢者のターミナル開始の判断、臨死期移行時の悪化の2時点の予後予測の判断を明らかにすることを目的とした調査を計画した。調査対象は、政令市9市の在宅支援診療所および訪問看護ステーション全数とした。調査項目は、(1)過去2年間の在宅看取り数(2)病状変化3分類(病状の軌跡ABC3類型(Lynn J(2001)参照)の割合数(3)予後予測と実際のずれ(4)予後予測に用いる指標(5)事前指示の有無と実施状況(6)看取りの場の患者家族希望の有無と実施状況(7)予後予測のチームケアの合意形成および体制づくり状況(8)終末期医療、ケアの満足度である。調査は、郵送留め置き法とする。データ分析は、在宅支援診療所と訪問看護師の予後予測に関する判断や実践の実態に関する記述統計処理を行った後に、3類型の取扱比率と基本属性との関連、予後予測と実際のずれの要因分析を行い、非がん高齢者のターミナルケア医療と看護のケア実践の実態を明らかにする。現在、データ収集期間中であるが、調査票の回収率が低いため、調査期間を延長している。前年度の調査結果から、指標となる症状などのアセスメント項目は示されたが、この調査においては非がん疾患数の多さに比較して、回収率が少なかったため、一般化するには限界があると判断し調査結果の矛盾点、不明点などの丁寧な分析も続けているために、アセスメントツール作成の計画がやや遅れている。一方、臨床で活用できる高齢者終末期ケア介入の指標となるアセスメントツールとしての構成がなかなか決定しないために既存の高齢者終末期のケア基準や指標、またはクリティカルパス等の作成過程、構成を検討をしている。また、今後、訪問看護実践のデータベース化をすることが看護実践向上において期待される。実践がデータベースとして集約できるシステムによって、今回のように調査結果のエビデンスが高くない結果として試作するアセスメントツールのその後の検証に役立つと考え、現在、海外訪問事業所の地域看護過程オマハシステムのソフトを参考に看護実践のデータベース項目としての看護項目の翻訳も始めているために研究計画はやや遅れている。在宅における非がん高齢者の終末期におけて、特に、判断が難しい臨死期の移行期の調査の枠組みと調査項目、調査対象、調査方法についての研究計画が難航したため、調査計画に時間を要し調査開始が遅れた。さらに調査対象を在宅支援診療所と訪問看護ステーションとしたため幾分予測はしていたものの回収率が低くデータ収集期間を延長し分析に耐えうるデータ収集を行っている。最終年度は、前年度の調査結果による非がん高齢者のターミナル期移行の傾向として出現が高かった症状をもとにしたアセスメント項目と緩和ケア介入で構成するアセスメントツールを試作することである。このツールの妥当性や有用性の検証は、研究期間が短いため、訪問看護ステーションの1年間の終末期高齢者の事例の経過や看護を用いて、在宅緩和ケア専門家や熟練訪問看護師によって、そのツールの妥当性、有用性を確認し、試作に改良を重ねて成果とする。(1)初年度調査の分析に有効なデータ数を確保する。
腸管免疫におけるセマフォリンシグナルを標的とした生活習慣病発症機序の解明

血管内皮に発現するSemaphorin3G(以下Sema3G)を同定し、このKOマウスを用いて腸内細菌叢ならびに高脂肪食負荷による代謝の変化を検討した。Sema3G KOではBacteroides門がFirmicutes門に比して増加する傾向が見られた。メタゲノム解析ではSema3G KOにおいてはCyanobacteriaが増加、Verrucomicrobiaの減少がみられた。また、高脂肪食負荷では、KOマウスでは耐糖能が良好で、インスリン感受性がよく、脂肪肝が軽減される事が分かった。Semaphorin分子は元々神経の成長円錐を退縮させるガイダンス分子として同定されたが、近年免疫調節、癌、血管新生など様々な生命現象に関わる事が報告されている。一方で近年、腸内細菌叢や腸管免疫の変化と肥満や生活習慣病の関わりを指摘する論文があいついでいる。我々は血管内皮と腎ポドサイトに発現するSemaphorin3G(以下Sema3G)を同定し、このKOマウスを用いて腸内細菌叢の検索を行った。12週齢のマウスを用い、代謝ケージを用いて24時間蓄便を行い、代表的な腸内細菌であるFirmicutes門およびBacteroides門の細菌量をリアルタイムPCRにて測定した。野生型においてはBacteroidesとFirmicutesは全菌種のそれぞれ25%程度を占めておりほぼ同等であった。一方、Sema3GノックアウトにおいてはBacteroidesは18-30%、Firmicutes17-25%とばらつきが大きく、BacteroidesがFirmicutesに対し相対的に増加する傾向が見られた。平均のBacteroides/Firmicutes比は野生型1.05、ノックアウト1.30であり、有意差には至らなかったものの興味深い傾向が見られた。更に、メタゲノム解析を用いて詳細な検討を行ったところ、Sema3G KOにおいては先述のBacteroidesとFirmicutesの変化とともに、Cyanobacteriaが増加、Verrucomicrobiaの減少がみられ、また、Bcteroides門の中ではBacteroidalesが増加し、Firmicutes門の中ではClostridialesの減少がみられた。一方でSema3G KOマウスは野生型よりも体重増加する傾向がある事が分かり、このような腸内細菌の変化が体重増加を惹起しているか否か今後検討したい我々は血管内皮と腎ポドサイトに発現するSemaphorin3G(以下Sema3G)を同定し、このKOマウスを用いて腸内細菌叢ならびに高脂肪食負荷による代謝の変化を検討した。代表的な腸内細菌であるFirmicutes門およびBacteroides門の細菌量をリアルタイムPCRにて測定したところ、野生型においてはBacteroidesとFirmicutesは全菌種のそれぞれ25%程度を占めておりほぼ同等であった。一方、Sema3G KOではBacteroidesがFirmicutesに対し相対的に増加する傾向が見られた。平均のBacteroides/Firmicutes比は野生型1.05、ノックアウト1.30であり、有意差には至らなかった。更に、メタゲノム解ではSema3G KOにおいては先述のBacteroidesとFirmicutesの変化とともに、Cyanobacteriaが増加、Verrucomicrobiaの減少がみられ、また、Bcteroides門の中ではBacteroidalesが増加し、Firmicutes門の中ではClostridialesの減少がみられた。また、高脂肪食負荷の影響を検討したが、KOマウスでは耐糖能が野生型に比較して高く、インスリン感受性がよく、脂肪肝が軽減される事が分かった。肝臓における炎症性サイトカインの発現も、KOマウスで減少する傾向があった。Sema3G KOマウスは野生型よりも普通食では体重増加する傾向があったが、高脂肪食であると明らかな体重の差は見られなかった。以上より、Sema3Gは腸内細菌に影響している事、また高脂肪食下で脂肪肝を促進し、インスリン抵抗性を促進していると想定されるが、未だそのメカニズムは不明のままであり、今後もこの解明に取り組んでいく。老年医学Sema3Gノックアウトの糞便を用い、腸内細菌のメタゲノム解析を更に検体数を増やして続行し、詳細な解析を施行する。また、Sema3G KOマウスと野生型の腸内細菌叢をそれぞれ無菌マウスに移植し、高脂肪食負荷による体重に差が見られるかどうか検討する。更に、Sema3 KOマウス、野生型マウスそれぞれに高脂肪食負荷をかけ、腸管壁における遺伝発現をマイクロアレーにて、特に炎症関連遺伝子や免疫関連遺伝子発現を検討する。さらに単球、マクロファージ、T細胞それぞれの腸管壁における局在を免疫組織染色にて検討し、Sema3Gの腸管免疫機構に対する影響を明らかにする。加えて、Sema3Gは血管内皮細胞において高発現するとされているので、腸管の血管及びリンパ管形成へのSema3Gの役割をノックアウトマウスを用いて検討する。

腸管壁リンパ管の過剰な形成による脂質吸収の亢進は肥満や脂肪肝の形成に関与する可能性があり、その逆にリンパ管形成抑制は肥満抑制をもたらす可能性がある。このような研究により、肥満やメタボリックシンドロームの研究に新たな発見を加える事ができると期待される。
オスミウム同位体を環境科学に応用する試み

オスミウム(Os)は原子番号76の白金属元素であり、自然界で硫化物、金属相に濃集するというユニークな挙動を示す。そのため、Osは、地球科学的諸現象を研究する際に従来用いられてきた元素では読めなかった、自然界からの信号の読みとりの鍵になりうる。本研究は、このOs同位体を環境科学に応用しようという試みである。しかし、環境科学、試料中のOs濃度が低い上に、Osの化学分析が難しいため、実用化されていない。今回は海水中のOsの濃度、同位体を分析することにより、火山噴出物、あるいは化石燃料の燃焼に伴うばい煙などの人為的排出物の量の見積もり、その環境への影響を探ることを試みた。まだ論文として公表できる段階ではないとはいえ、海水中から二酸化マンガンファイバー8.65gに吸着した6.5×10^<-10>gのOsの分析に成功した。これはもちろん、世界初のデータである。また、Osを用いた、ロシアカムチャツカ半島から北海道にかけての玄武岩の分析から、最近頻発している地震の発生機構を探る試みを行った。手始めとして行った標準岩石JP-1中のOsの正確な濃度3.59ppb(10^<-9>g/g)、同位体比0.1210±0.025の値を得た。この値は今後Osを用いた研究を試みる他の研究者の基準となるであろう。以上の結果から、今回の研究で第一の目標であった、Os濃度の極端に低い玄武岩及び海水の分析方法の確立は達成された。Os同位体が地球科学の世界で用いられるようになって、年数が浅く、ましてや環境科学への応用は本研究が初めての試みである。今後は、本研究で目的としていたカムチャツカ玄武岩の分析を進める。海水のOs同位体比の測定データが得られれば、海水中でのOsの挙動、地球規模での循環が明らかになるであろう。そのデータを用い、環境影響物質の海洋中での滞留時間を明らかにし、その起源を探る。
セレクチンと糖鎖を介する細胞間コミュニケーション

P-セレクチンは,活性化された血小板と血管内皮細胞に発現する細胞接着分子であり,白血球表面の糖鎖リガンドに結合することによって血管損傷や炎症部位への白血球の集積の初期段階を媒介する。白血球表面のリガンドとしては,PSGL-1と呼ばれる糖タンパク質に存在するシアル酸を含む糖鎖構造とチロシン残基に付加する硫酸基が重要な役割を果たしていると考えられている。本研究では,化学的に合成された硫酸化シアル酸誘導体(NMS03)によりP-セレクチン依存的な細胞接着が制御される可能性について検討し以下の結果を得た。1.DNAトランスフェクションによりP-セレクチンを強制発現させたCHO細胞あるいはプレートに固相化した精製P-セレクチンに対し,蛍光色素BCECF-AMで標識したヒト白血病細胞株HL-60細胞を加え,40分後の細胞接着率を測定した。硫酸化シアル酸誘導体(NMS03)は,P-セレクチン-CHO細胞あるいは固相化P-セレクチンに対するHL-60細胞の接着を濃度依存的に阻害した。また,阻害に要する濃度は,ヘパリン,コロミン酸,デキストラン硫酸などの酸性多糖よりも低濃度であった。2.NMS03の共存下あるいは非共存下で,固相化P-セレクチン上でヒト末梢血単球を4時間培養後,その上清に放出されるTNF-α活性を測定したところ,NMS03によりTNF-αの産生および放出が阻害された。以上より硫酸化シアル酸誘導体がP-セレクチン依存性白血球接着反応の阻害を通じて炎症アレルギー反応を制御する可能性が示された。
低濃度吸入麻酔薬の高次神経機能の定量的比較(麻酔状態の定義と関連して)

6人の健康男性被験者で笑気、ハロセン(H)、イソフルレン(I)、エンフルレン(E)、セボフルレン(S)、メトキシフルレン(M)の各々0.2MACの吸入による鎮痛作用(中浜式疼痛計による疼痛閾値の変化)と麻酔作用(パソコンで音反応時間を測定)の変化を調べた。笑気による疼痛閾値はコントロールや他の麻酔薬に比し有意に上昇した。MはHに比し有意に疼痛閾値を上昇させた。吸入前、吸入中の変化では、Hによる閾値の低下と笑気による上昇に有意差をみた。0.2MACのI、E、Sは疼痛閾値を変化させなかった。音反応時間はすべての吸入麻酔薬で延長した。Eによる反応時間の延長は、M、H、S、笑気より大きかった。この様に、麻酔薬により抑制を受ける機能が異なることから、閾痛刺激による反応であるMACは必ずしも正確な麻酔強度を反映していないと考えられた。また麻酔薬の鎮痛作用はMACの測定にあまり影響しないと考えられた。次に、笑気の鎮痛、麻酔作用に対する耐性形成の有無を6人の被験者で調べた。また笑気の作用に対するナロキソンの拮抗の有無についても調べた。100分間の笑気吸入中には鎮痛、麻酔作用共に耐性は生じなかった。また合計1.4mgのナロキソン投与では麻酔作用鎮痛作用共に笑気に対する拮抗は認められなかった。ヒトでは笑気の耐性は短時間のうちに画一的に生じるものではなく、またナロキソンは笑気に対してはオピエイトに対する様な拮抗作用を有さないと考えた。笑気吸入中止により音反応時間は速やかに回復したが、疼痛閾値の上昇は吸入中止30後も持続した。笑気の鎮痛作用は単純に脳内笑気分圧で規定されるものではなく、何等かの生化学的な影響を受けていると考えられた。吸入麻酔栗(笑気,ハロセン,メトキシフルレン,エンフルレン,イソフルレン,セボフルレン)の0.2MACによる疼痛闘値,音反応時間の変化を求めた.その結果,笑気,メトキシフルレンを除く吸入麻酔薬には鎮痛作用はなく, MACで表現される麻酔状態では意識がないから疼痛刺激に反応しないのであって鎮痛効果による寄与は少ないと考えた.また,音反応時間についは,どの麻酔薬延長するが,その程度は同じとは言い切れなかった.本年度には,健常成人もちいて,鎮痛作用を有する笑気に商店を絞り,その鎮痛作用(中浜式疼痛計)音反応時間(パソコン使用による)の経時的変化(長時間笑気吸入時の耐性や中断後の鎮痛作用の持続)を観察した.なお,ナロキソンによる拮抗についても調べた.結果は,笑気吸入90分の間には疼痛闘値,音反応時間には耐性は生じず,ナロキンによる拮抗も観察れなかった.笑気中断後の経過では,音反応時間は中断10分後には吸入前値に復帰したが,疼痛闘値の復帰には40分を要した.中断後のナロキソン投与の影響は,音反応時間についてはまったくなく,疼痛闘値についは,予想に反してナロキン投与時の方が復帰時間が延長する傾向を認めた.これらの結果より,(1)笑気の鎮痛作用は単純なオピエート受容体への直接作用とは考えにくいこと,(2)笑気の鎮痛作用は麻酔作用(今回の実験では音反応時間で観察)とは別個のものであること(排出が早い笑気でさえ中断40分は鎮痛作用が持続する),(3)長時間の笑気吸入時に生じると報告されている耐性は今回の実験モデルでは存在しないことが判明した.6人の健康男性被験者で笑気、ハロセン(H)、イソフルレン(I)、エンフルレン(E)、セボフルレン(S)、メトキシフルレン(M)の各々0.2MACの吸入による鎮痛作用(中浜式疼痛計による疼痛閾値の変化)と麻酔作用(パソコンで音反応時間を測定)の変化を調べた。

笑気の鎮痛作用は単純に脳内笑気分圧で規定されるものではなく、何等かの生化学的な影響を受けていると考えられた。笑気の耐性については比較的短時間で耐性が生じるとの報告がある。また笑気の作用に対するナロキソンの拮抗の有無についても調べた。笑気の特に鎮痛作用に関してはオピエイト系の関与が考えられており、オピエイトの拮抗薬であるナロキソンで拮抗されるとの報告もある。但し、笑気の耐性形成、ナロキソンの拮抗に対しては共に異論がある。6名の健常成人男性を被験者として笑気の鎮痛および麻酔作用に対する耐性形成の有無を調べた。またナロキソンの笑気の作用に対する拮抗作用もみた。鎮痛作用は中浜式疼痛計による疼痛閾値で、麻酔作用はパソコンを用いた音反応時間で測定した。吸入前値を測定後、笑気を100分間吸入させ吸入終了60分後まで、疼痛閾値、音反応時間共に15分間隔で測定し、経時的変化をみた。ナロキソンは30分おきに合計1.4mg投与した。被験者1名につき笑気投与の有無、ナロキソン投与の有無の4通りの組合せで4回の試行を行った。100分間の30%笑気吸入では麻酔作用、鎮痛作用共に耐性は生じなかった。ナロキソン投与により麻酔作用、鎮痛作用共に笑気に対する拮抗は認められなかった。この結果より、ヒトでは笑気の耐性は短時間のうちに画一的に生じるものではなく、またナロキソンは笑気に対してはオピエイトに対する様な拮抗作用を有さないと考えた。しかし、この実験でも笑気投与例では笑気吸入終了に伴い音反応時間は速やかに回復したが、疼痛閾値は吸入終了30分後まで上昇していた。このことから笑気の疼痛作用は何らかの生化学的影響を受けていることが示唆された。また笑気非投与の場合、測定回数につれて疼痛閾値が上昇しhabituationが生じたが、ナロキソン投与例ではみられず、habituationとオピエイト系との関連が考えられた。
神経特異的polysome解析によるALS/FTLD病態解明と分子標的療法の開発

ALSやFTLDなどの原因不明な神経変性疾患の病態を解明するにはニューロン特異的な解析が必須であるが、モデル動物において変性過程にあるニューロンの単離は非常に困難であった。この問題を解決するために、我々はニューロン特異的human synapsin 1プロモーター下にRibotag(GFP-RPL10a)とCreを共発現するSyn-Ribotag-Creマウスを作成し、このマウスとALS/FTLD病態の中でloss-of-functionが想定されているTDP-43やTBK1のfloxマウスと交配することで、ニューロン特異的なtranscriptome解析を可能にし、ALS/FTLDの変性機構を明らかにすることを目的に研究を進めている。昨年度までにSyn-Ribotag-Creマウスのラインを確立し、GFP-RPL10aとCre蛋白の発現パターンの解析を行った。2018年度はSyn-Ribotag-CreマウスとTDP-43 floxマウスを交配させてニューロン特異的TDP-43ノックアウトマウスの作成を行った。Syn-Ribotag-Cre+/-; TDP-43flox/+マウスは問題なく出生した。表現系解析としてnovel object recognitiontest, open field test, elevated-plus maze test, social interaction test, fear conditioningtest, rotarodtest, grip strength testを生後29週齢のマウス(コントロール10匹、ノックアウトマウス10匹)に対して行ったが目立った表現系は観察されなかった。TBK1 floxマウスとの交配も行いSyn-Ribotag-Cre+/-; TBK1flox/+マウスを得、表現系の解析を行っている。Syn-Ribotag-Cre+/-; TDP-43flox/floxマウスとSyn-Ribotag-Cre+/-; TBK1flox/floxマウスをさらなる交配により取得し表現系解析、各マウス組織よりトランスクリプトーム解析を行う予定である。ALSやFTLD-TDPなどの原因不明な神経変性疾患の病態を解明するにはニューロン特異的な解析が必須であるが、モデル動物において変性過程にあるニューロンの単離は非常に困難であった。平成29年度は2つのSyn-Ribotag-Creマウスのラインを確立し、それぞれのラインにおけるGFP-RPL10aとCre蛋白の発現パターンの解析を行った。GFP-RPL10aに関しては抗GFP抗体を用いた免疫染色を、Creに対してはCreレポーター(ROSA26-LacZ)マウスと交配し発現パターンを解析した。脳脊髄内の広範なニューロンにGFP、Creの発現が確認でき、蛍光2重染色にてこれらの発現はグリア細胞内にはなくニューロン特異的であることが判明した。また、Syn-Ribotag-Creマウスの脳脊髄のホモジェネートから抗GFP抗体ビーズを用いてpolysome(mRNA-ribosome複合体)を免疫沈降しtotal RNAを抽出し、RT-qPCRによりRNAがニューロン特異的であることも確認できた。現在Syn-Ribotag-CreマウスとTDP-43 floxマウスを交配させてニューロン特異的TDP-43ノックアウトマウスの作成を行っている。今年度早々にTBK1 floxマウスとの交配も開始する予定である。TDP-43とTBK1それぞれのニューロン

特異的ノックアウトマウスSyn-Ribotag-Cre+/-;TDP/ TBK1flox/flox(Ribotag-TDP/TBK1 CKO)の表現型を解析し、さらにその結果を元に発症前、発症早期・後期の脳と脊髄からpolysomeを精製し、transcriptome解析により病態に応じて変化する分子(経路)をコントロールマウス(Syn-Ribotag-Cre+/-)polysomeのデータと比較することにより明らかにする。また、Ribotag-TBK1 CKOマウスの各病期の脳脊髄の病理学的変化を観察し、孤発性ALS/FTLD類似の病理像を再現できるかどうかを確認する。TDP-43やTBK1ノックアウトニューロンの解析から変性に伴って変化する分子を標的とした治療法の開発を目指し、各ノックアウトマウスにおいて治療効果を検証する予定である。Syn-Ribotag-Cre+/-; TDP-43flox/floxマウスとSyn-Ribotag-Cre+/-; TBK1flox/floxマウスをさらなる交配により取得し表現系解析、各マウス組織よりトランスクリプトーム解析を行う予定である。(理由)本年度3月に使用した動物実験施設使用料の請求が4月以降となるため。(使用計画)既に、マウス実験で使用済みである。(理由)実験用マウス購入を予定していたが、無償譲渡を受けたため、未使用額が発生した。(使用計画)未使用額については、令和元年度に行うマウス飼育費に使用する予定である。
被災直後の混乱期対応に有効な保健師の健康危機管理支援ツールと研修プログラムの開発

保健師の健康危機管理能力向上プログラムの開発のために、行政機関から減災を推進するための2次救急体制の実態を調査する必要があった。このため本年度は、DMAT体制のある2箇所の災害拠点病院の医療従事者に対し、被災時の救急体制の実態についての講演会の開催に合わせて、医療従事者本人の危機管理の準備状況についての実態調査及び組織における管理体制の理解度についての無記名・自記式アンケート調査を行った。調査の結果、2施設の職員計242名の協力をえて調査を実施した。所属機関の災害体制が整備されていると回答した者は、21.1%と有意に低く、災害対策がされていないという意識を持っているものが78.9%という結果であった。被災対応の経験の有無と各災害拠点病院内の組織の体制の準備状況を分析した結果、所属機関の準備状況11項目のうち「所属機関の災害対策マニュアルの理解」「災害時の連絡・指示系統の理解」の2項目において、有意な関連を認めた。11項目のうち、最も理解度が低かった項目は「災害時の医療面での備え」「災害活動に必要とされる医療職の必要数の算出」であった。また、医療従事者個人の危機管理体制の準備状況も低く、災害時の医療従事に関わる人員の想定が不十分であるという課題が明らかになった。自由記載の内容には、毎年行う防災訓練も全職員の実施が困難なこと、実際に震災が起きた時に、医療従事者個人として、家族を置き去りにして医療提供し続けられるか等、実際に想定していなかった状況を不安視する声もきかれた。組織体制だけでなく、家庭環境を含めた医療体制整備に必要な条件を整理すると共に、意識の徹底の難しさ等の実態が確認された。以上の結果から組織的な減災対策の整備が喫緊の課題であることが確認された。大規模災害経験者の聞き取りから「行動と判断の思考過程」を体系化する研究はコード分析からカテゴリの抽出、体系化を進行中である。研究計画にある実際に東日本大震災等で被災対応を経験した保健師の「行動と判断の思考過程」の分析は、逐語録のコード化及びカテゴリ化から体系化を進行中である。これらの結果の妥当性を確保するために、聞き取りを行った保健師に妥当性の確認をしていく必要がある。体系化が完成していないため、研究の進捗はやや遅れていると判断した。減災行動を迅速に判断できる支援ツールの作成においては、支援ツールの精度を高めるために、課題である2次救急との連携を実践的なものにしていくために、2次救急病院等の医療体制の実態を確認した。このため、協力自治体(袋井市、掛川市、菊川市)の原案に加筆できていない状況にある。「支援ツール」の完成は2019年度であるため、大幅な遅れではないと判断した。支援ツールの開発に関わる災害時における「保健師の行動と判断の思考過程」の体系化については、2019年度はインタビュー調査協力をいただいた保健師に、妥当性を確認してもらい、修正をし完成させる。減災行動を迅速に判断できる支援ツールの作成においては、協力自治体(袋井市、掛川市、菊川市)の原案に本年度行った、2次救急医療体制の調査研究結果を加えること、協力自治体の自治体災害マニュアルとの整合性を図る。また、自治体の防災訓練等で実践をおこない、支援ツールの有効性を確認していく。保健師が自律して必要な判断をしていくための技能研修プログラムについては、「保健師の行動と判断の思考過程」によって体系化された項目を参考に、研修プログラムを開発する。研修プログラムにおいて避難所運営訓練の内容を盛り込んだ構成を目指す。

研究計画にある実際に東日本大震災等で被災対応を経験した保健師の「行動と判断の思考過程」の分析は、逐語録のコード化及びカテゴリ化から体系化を進行中である。これらの結果の妥当性を確保するために、聞き取りを行った保健師に妥当性の確認をしていく必要がある。体系化が完成していないため、研究の進捗はやや遅れていると判断した。減災行動を迅速に判断できる支援ツールの作成においては、支援ツールの精度を高めるために、課題である2次救急との連携を実践的なものにしていくために、2次救急病院等の医療体制の実態を確認した。このため、協力自治体(袋井市、掛川市、菊川市)の原案に加筆できていない状況にある。「支援ツール」の完成は2019年度であるため、大幅な遅れではないと判断した。支援ツールの開発に関わる災害時における「保健師の行動と判断の思考過程」の体系化については、2019年度はインタビュー調査協力をいただいた保健師に、妥当性を確認してもらい、修正をし完成させる。減災行動を迅速に判断できる支援ツールの作成においては、協力自治体(袋井市、掛川市、菊川市)の原案に本年度行った、2次救急医療体制の調査研究結果を加えること、協力自治体の自治体災害マニュアルとの整合性を図る。また、自治体の防災訓練等で実践をおこない、支援ツールの有効性を確認していく。保健師が自律して必要な判断をしていくための技能研修プログラムについては、「保健師の行動と判断の思考過程」によって体系化された項目を参考に、研修プログラムを開発する。研修プログラムにおいて避難所運営訓練の内容を盛り込んだ構成を目指す。東日本大震災の被災対応を経験した保健師の聞き取り内容の分析が進行中であり、妥当性の聞き取り調査にいくことができなかったため、旅費の使用が少なかった。保健師の行動と判断の思考過程の体系化の遅れに伴い、支援ツールの作成に関する専門的知識の提供をも当初予定していた回数より少なく研究費の使用に至らなかった。2019年度は妥当性の確認のための聞き取り調査及び、支援ツールの原案に2次救急医療体制の実情を加え、ツールの完成を目指すため、専門的知識の提供による研究費の適正な使用をおこなう。
血管とリンパ管が独立したネットワークを構築する原理の解明

血管とリンパ管は、同じ脈管系の組織でありながら、最終的な合流地点(頸部の静脈角)を除き、一切接続することは無く、血流とリンパ流が交わることは無い。血管の機能としては、主に肺から取り入れた酸素を赤血球を担体として末梢組織に運搬し、毛細血管で組織に受け渡す。一方、リンパ管は毛細血管が回収しきれなかった組織液を取り込み、頸部の静脈角から血液へと環流する。しかしながら、血管とリンパ管の構造・組織学的特徴を比べると、ほぼ見分けがつかないほど酷似しており、両者がお互いをどのように見分け、独立性を担保するのかは未解明である。本研究は、腎がん抑制遺伝子として知られてきたX遺伝子に関し、血管内皮細胞特異的欠損マウスを作成したところ、ホモ欠損マウスが胎生後期(胎生15.5日目)に致死であること、また、出生後のタモキシフェン誘導性血管内皮特異的X遺伝子欠損マウスでも見られ、血管内皮とリンパ管内皮が完全に分化して管腔を形成し、それぞれのidentityを確立した後でも、特定の分子機構の破綻によって容易に異常吻合しうるという予備的知見をもとに展開されている。これまでの成果としては、遺伝子改変マウス(Prox1とのダブルノックアウトマウス)や培養細胞の解析において、Xがリンパ管発生のマスター転写因子であるProx1の発現量を何らかの形で負に制御しており、血管内皮細胞においてこの制御が破綻すると、血管がリンパ管を接続すべき同志であると認識してしまうことを見出してしている。本研究は分子Xに関し、血管内皮細胞特異的欠損マウスを作成したところ、血管とリンパ管の異常吻合により致死となる、という表現型を足掛かりとして展開されている。まずXがProx1を制御する分子メカニズムに関して、細胞生物学的・生化学的な手技(Two-hybrid法、CHIP-seq、ルシフェラーゼアッセイなど)を駆使し、結合タンパク、プロモーター活性の観点から解き明かすべく遂行されている。そのなかで、分子XとProx1とを橋渡しする転写因子を同定するに至ったという成果は非常に大きい。その転写因子に関して、CHIP-seq法により、Prox1の新規制御領域への結合は確認できたが、ルシフェラーゼアッセイについては結果が安定せず、さらなる実験の積み重ねが必要である。一方、遺伝子改変マウスの交配によるレスキュー効果(Prox1遺伝子とのダブルノックアウト)では、ほぼ完全にX遺伝子欠失の表現型が打ち消されたことを確認できたのは、当初の想定通りといえる。また、研究協力者の佐谷秀行教授(慶應義塾大学)のサポートを得て、転移性がんモデルにおける血管特異的X欠損マウスの表現型、つまり腫瘍血管・リンパ管新生、および腫瘍遠隔転移におけるX欠損の影響を解析したところ、驚くべきことに、腫瘍血管・リンパ管においても異常な吻合がみられ、腫瘍移植早期から、腸間膜リンパ節へのリンパ行性転移がほぼ100%の確立でみられたという観察がえられている。血管とリンパ管は生命現象全体の観点から俯瞰した場合、全く別物の組織であるが、その解剖学的、組織学的特徴を比べると、かなり類似しており、特に毛細血管と毛細リンパ管、細静脈と集合リンパ管とはほぼ見分けがつかないほど酷似している。個体の発生過程において、脈管組織がネットワークを形成する過程では、頻繁に管腔どうしの吻合、切離を繰り返しつつ、各臓器にカスタマイズされた形で成熟したものとなっていく。従って、血管とリンパ管が各々独立してネットワークを形成するためには、血管内皮細胞とリンパ管内皮細胞がお互いを別物として認識し、相互に排他的である必要がある。その一方、血管内皮細胞とリンパ管内皮細胞が如何にしてお互いのidentityを感知し、別々に発生していくのか、そしてネットワーク確立後もどのようにして独立性を担保しているかは全く以て不明である。本研究は、従来のパラダイムにおける発想を転換し、放っておくと血管とリンパ管同志が吻合してしまう、つまりお互いかなりの可塑性を有するが、その行使を防ぐ分子基盤が存在するという観点に立ち、これまで得られた遺伝子Xの機能を軸とし、その全容を明らかにする。今後の研究計画としては、分子Xの下流で働くと目される転写因子が、本当に機能しているかどうか、ダブルノックアウトマウスを用いて検証する。さらには、昨年度得られたプレリミナリーな結果である、腫瘍リンパ節転移増加の表現型に関し、実験を重ね、その詳細を明らかにする。また、培養細胞を用いた生化学的な実験として、CHIP-seqの結果を補うべく、初代培養血管内皮細胞を用いたChIP解析を行うとともに、ルシフェラーゼアッセイにより、その制御を定量化する。本研究は、腎がん抑制遺伝子として知られてきたX遺伝子に関し、血管内皮細胞特異的欠損マウスを作成したところ、ホモ欠損マウスが胎生後期(胎生15.5日目)に致死であること、また、出生後のタモキシフェン誘導性血管内皮

特異的X遺伝子欠損マウスでも見られ、血管内皮とリンパ管内皮が完全に分化して管腔を形成し、それぞれのidentityを確立した後でも、特定の分子機構の破綻によって容易に異常吻合しうるという予備的知見をもとに展開されている。これまでの成果としては、遺伝子改変マウス(Prox1とのダブルノックアウトマウス)や培養細胞の解析において、Xがリンパ管発生のマスター転写因子であるProx1の発現量を何らかの形で負に制御しており、血管内皮細胞においてこの制御が破綻すると、血管がリンパ管を接続すべき同志であると認識してしまうことを見出してしている。本研究は分子Xに関し、血管内皮細胞特異的欠損マウスを作成したところ、血管とリンパ管の異常吻合により致死となる、という表現型を足掛かりとして展開されている。まずXがProx1を制御する分子メカニズムに関して、細胞生物学的・生化学的な手技(Two-hybrid法、CHIP-seq、ルシフェラーゼアッセイなど)を駆使し、結合タンパク、プロモーター活性の観点から解き明かすべく遂行されている。そのなかで、分子XとProx1とを橋渡しする転写因子を同定するに至ったという成果は非常に大きい。その転写因子に関して、CHIP-seq法により、Prox1の新規制御領域への結合は確認できたが、ルシフェラーゼアッセイについては結果が安定せず、さらなる実験の積み重ねが必要である。一方、遺伝子改変マウスの交配によるレスキュー効果(Prox1遺伝子とのダブルノックアウト)では、ほぼ完全にX遺伝子欠失の表現型が打ち消されたことを確認できたのは、当初の想定通りといえる。また、研究協力者の佐谷秀行教授(慶應義塾大学)のサポートを得て、転移性がんモデルにおける血管特異的X欠損マウスの表現型、つまり腫瘍血管・リンパ管新生、および腫瘍遠隔転移におけるX欠損の影響を解析したところ、驚くべきことに、腫瘍血管・リンパ管においても異常な吻合がみられ、腫瘍移植早期から、腸間膜リンパ節へのリンパ行性転移がほぼ100%の確立でみられたという観察がえられている。血管とリンパ管は生命現象全体の観点から俯瞰した場合、全く別物の組織であるが、その解剖学的、組織学的特徴を比べると、かなり類似しており、特に毛細血管と毛細リンパ管、細静脈と集合リンパ管とはほぼ見分けがつかないほど酷似している。個体の発生過程において、脈管組織がネットワークを形成する過程では、頻繁に管腔どうしの吻合、切離を繰り返しつつ、各臓器にカスタマイズされた形で成熟したものとなっていく。従って、血管とリンパ管が各々独立してネットワークを形成するためには、血管内皮細胞とリンパ管内皮細胞がお互いを別物として認識し、相互に排他的である必要がある。その一方、血管内皮細胞とリンパ管内皮細胞が如何にしてお互いのidentityを感知し、別々に発生していくのか、そしてネットワーク確立後もどのようにして独立性を担保しているかは全く以て不明である。本研究は、従来のパラダイムにおける発想を転換し、放っておくと血管とリンパ管同志が吻合してしまう、つまりお互いかなりの可塑性を有するが、その行使を防ぐ分子基盤が存在するという観点に立ち、これまで得られた遺伝子Xの機能を軸とし、その全容を明らかにする。今後の研究計画としては、分子Xの下流で働くと目される転写因子が、本当に機能しているかどうか、ダブルノックアウトマウスを用いて検証する。
若年者の視神経乳頭解析と緑内障罹患率の調査研究

日本人の15歳20歳の若年者において緑内障の罹患率および若年者の視神経乳頭形態を調査解析した。調査対象の中では緑内障は認めなかった。若年者の視神経乳頭は、これまでの報告にある高齢者の視神経乳頭の形態および屈折とは異なる分布であった。既存の診断装置において緑内障診断に乳頭の傾斜が影響することが判明した。これまでの本邦における緑内障の疫学調査において緑内障の有病率が算出された。疫学調査の対象は40歳以上の中高齢者であり、加齢とともに罹患率の増加が確認された。日常の臨床の現場においてもより若年者が緑内障と診断されることもあり、これまでの報告よりさらに年齢層の低い集団をもとにした調査が必要と考え、今回の研究に至った。対象を20歳以下にするため、連携研究者の勤務先である高等専門学校においてデータを収集することとなった。データの採取に使用する機器類による測定(視力、屈折・角膜曲率、非接触眼圧測定、眼軸長測定、無散瞳眼底写真撮影、視神経乳頭立体撮影、視神経乳頭形状解析装置による撮影、自動視野計による視野測定)は、日常臨床で使用している装置であるが、対象が未成年であることも考慮し、金沢大学医学部の倫理委員会に研究の申請をし、承認をえた。その後当研究の連携研究者である眼科教授の名において、対象となる高等学校・高等専門学校長に研究の趣旨および参加において対象となる生徒およびその保護者に対する説明と同意のあとで、参加に関しては生徒本人および保護者の自由として許可申請を出し、学内審査で了承を得た対象者および保護者に文章および連携研究者を通して説明および同意を取得した。対象となる生徒は1340名であったが、最終的に本人と保護者から同意を得られた433名を対象に緑内障検診を施行した。前述の検査を連携研究者である眼科医師、視能訓練士、眼科医療従事者により行われた。一次検診として行った各検査データを金沢大学眼科に送付し、連携研究者による判定を行った。眼圧が20mmHg以上、視野検査で異常の検出、眼底写真で眼底に異常が疑われたものを抽出し、二次検査を行った。二次検査には433名中38名が対象となり、緑内障と判定されたものはいなかった。昨年度の研究の結果、1520歳前後の若年者において緑内障は検出されなかったが、若年者においては眼球そのものが発達していく途上にあることから、各種の眼球のパラメータや屈折及び身体にかかわる因子(身長・体重)も変化し加齢に伴う影響も十分に考えられる。また、最近の疫学調査等の結果から男女の違いがかなり影響するとの報告もあり、性差による影響も考慮する必要がある。H22年度はより低年齢層(小学生中学生)を対象としたデータ収集を試みる予定であったが、データ収集の際に用いる検査機器において、機器の精度は向上しているが、被検者の低年齢化に伴いデータ取得にかかる時間内の姿勢や固視の持続が困難であることが日常診療で予想され現時点ではより若年層の検診は困難であると判断した。そのためこれまでに取得した各検査機器のデータ(視力、屈折・角膜曲率、非接触眼圧測定、眼軸長測定、無散瞳眼底写真撮影、視神経乳頭立体撮影、視神経乳頭形状解析装置による撮影、自動視野計による視野測定)を綿密に解析し、若年層における緑内障罹患率をはじめとする検討だけでなく緑内障にかかわると考えられる視神経乳頭所見上のパラメータでより関連のある因子の抽出の検討をした。検査機器の中心となった視神経乳頭形状解析装置であるハイデルベルグレチナトモグラフIIは視神経乳頭をいろんな2次元的および3次元的なパラメータで解析可能であるが、視神経乳頭の傾斜の程度に個人差がありそのことがパラメータ数値に影響することが明確になった。このことに関して他の検査機器とのデータの関連性や視神経乳頭傾斜の影響を少なくする解析方法に関してH22年度開催された学会にて発表した。一昨年度および昨年度の研究の結果、1520歳前後の若年者において緑内障は検出されなかったが、若年者においては眼球そのものが発達していく途上にあることから、各種の眼球のパラメータや屈折及び身体にかかわる因子(身長・体重)も変化し加齢に伴う影響も十分に考えられた。当初はより低年齢層(小学生中学生)を対象としたデータ収集を試みる予定であったが、データ収集の際に用いる検査機器において、機器の精度は向上しているが、被検者の低年齢化に伴いデータ取得にかかる時間内の姿勢や固視の持続が困難であることが日常診療で予想され現時点ではより若年層の検診は困難であると判断し、これまでに取得した各検査機器のデータ(視力、屈折・角膜曲率、非接触眼圧測定、眼軸長測定、無散瞳眼底写真撮影、視神経乳頭立体撮影、視神経乳頭形状解析装置による撮影、自動視野計による視野測定)を綿密に解析し、若年層における緑内障罹患率をはじめとする検討だけでなく緑内障にかかわると考えられる視神経乳頭所見上のパラメータでより関連のある因子の抽出の検討をした。

検査機器の中心となった視神経乳頭形状解析装置であるハイデルベルグレチナトモグラフIIは視神経乳頭をいろんな2次元的および3次元的なパラメータで解析可能であるが、視神経乳頭の傾斜の程度に個人差がありそのことがパラメータ数値に影響することが明確になった。視神経乳頭の傾斜を実測し傾斜の程度がどのように他の検査機器のデータに影響を及ぼすかを解析し視神経乳頭傾斜の影響を少なくする解析方法およびその結果に関して論文を作成し、平成24年3月末時点で査読中である。
二種類の新結核ワクチンによる新しいキラーＴ細胞分化機構とレセプターの解明

結核菌に対する抵抗力は主として結核菌に対するキラーT細胞により発揮される。(1)世界に先駆けて、HSP65 DNA+IL-12 DNAワクチン(HSP65ワクチン)及び15K Granulysin(Gra)ワクチンが強力なキラーT分化活性を示すことを明らかにした。(2)このことよりキラーTにGraレセプターの存在が強く示唆された。このレセプターの単離を試みている。(3)Graは産生するキラーTを中心にGra-Graポジティブフィードバックループを形成。(4)HSP65ワクチンとGraワクチンの相乗的キラーT分化と治療効果が示された。【研究の目的】(1)我々が世界に先駆けて発見した強力な結核予防効果・治療効果を示す新しいHVJ-エンベロープ/HSP65DNA+IL-12DNAワクチン(略してHSP65ワクチン)及びグラニュライシン(granulysin(Gra):キラーT由来結核菌殺傷タンパク)ワクチンの二種類の結核ワクチンによる新しいキラーT細胞分化機構を解明するとともにこれらのレセプターの単離解明の研究を行うことを目的。(2) GraによるキラーT分化機構ならびにGraレセプターは不明であり、Graレセプターの単離及び遺伝子クローニングを行う。(3) Gra-Graポジティブフィードバック経路及びHSP65ポジティブフィードバック経路を証明する。【研究実績の概要】(1)世界に先駆けてHSP65ワクチン及び15K Graが強力なキラーT分化活性を示すことを明らかにした。GraはIL-6によるキラーT分化に関与するが、一方、HSP65ワクチンはIL-6と異なるキラーT分化過程の活性化が示された。(2) 15K GraはキラーT分化因子としてキラーT前駆細胞に作用した。このことよりT細胞にGraレセプターの存在が強く示唆された。(3) Graは産生するキラーTを中心にGra-Graポジティブフィードバックループを形成して、結核菌に対する抵抗性を増強する経路が存在することが示唆された。(4)キラーTより産生されるKillersecretory protein of 37 kd(KSP37)蛋白とGraはキラーT分化相乗効果を示した。(5)一方、HSP65ワクチンはIL-15とキラーT分化を相乗的に誘導し、HSP65ポジティブフィードバックの存在が示唆された。(6) GraTgマウスはHSP65抗原に対するキラーT分化を増強したことより、二種のワクチンの相乗的キラーT分化と治療効果が示された。(5)一方、HSP65ワクチンはGraとキラーT分化を相乗的に誘導し結核治療効果が示唆された。(6) 15K Graに対するキラーT細胞上のレセプター遺伝子をYeast Two Hybrid Systemで解析中。【研究の目的】1.我々が世界に先駆けて発見した強力な結核予防効果・治療効果を示す新しいHVJ-エンベロープ/HSP65DNA+IL-12DNAワクチン(略してHSP65ワクチン)及びグラニュライシン(granulysin(Gra):キラーT由来結核菌殺傷タンパク)ワクチンの二種類の結核ワクチンによる新しいキラーT細胞分化機構を解明するとともにこれらのレセプターの単離解明の研究を行うことを目的。2.GraによるキラーT分化機構ならびにGraレセプターは不明であり、Graレセプターの単離及び遺伝子クローニングを行う。3.Gra-Graポジティブフィードバック経路及びHSP65ポジティブフィードバック経路を証明する。【研究実績の概要】1.世界に先駆けてHSP65ワクチン及び15K Graが強力なキラーT分化活性を示すことを明らかにした。

GraはIL-6によるキラーT分化過程に関与するが、一方、HSP65ワクチンはIL-6と異なるキラーT分化過程の活性化が示された。2.15K GraはキラーT分化因子としてキラーT前駆細胞に作用し,T細胞にGraレセプターの存在が強く示唆された。3.Graは産生するキラーTを中心にGra-Gra positive feedbackループを形成して、結核菌に対する抵抗性を増強するpathwayが存在することが示唆された。4.キラーTより産生されるKillersecretory protein of 37 kd(KSP37)蛋白とGraはキラーT分化相乗効果を示した。5.一方、HSP65ワクチンはIL-15とキラーT分化を相乗的に誘導し、HSP65ポジティブフィードバックの存在が示唆された。6.Gra TgマウスはHSP65抗原に対するキラーT分化を増強したことより、二種のワクチンの相乗的キラーT分化と治療効果が示された。1.マウスの系でHVJ-エンベロープ/HSP65 DNA + IL-12 DNA結核治療ワクチンは皮内投与方法により、今までの筋肉内投与方法や皮下投与よりも強力な結核治療効果を示し、キラーTも活性化することを明らかにしたことより、HSP65ワクチンの生体内キラーT分化解明が進展した。2.サルでもこの治療ワクチンの皮内投与は進展中。カニクイザルでHSP65DNA+IL-12 DNAワクチン皮内投与方法は従来の筋肉内投与方法に比較して、より強力な延命効果、赤血球沈降速度の改善が認められた。3.granulysin Tgマウス及びKSP37 Tgマウスを用いてキラーT分化解明が進展したこと。4.酵母two-hybrid法を用い、granulysinと結合するgranulysinレセプターを解析する手法が確立されたこと。ヒト・キラーT細胞cDNAを作成したこと。5.脾細胞やリンパ節T細胞のcDNAを用いても、上記酵母two-hybrid法にてgranulysinレセプターを解析中。1.ヒトTクローン確立方法(PNAS)を用い、granulysinレセプター発現クローンよりレセプターを解明する。
近世後期、畿内先進地域における地域社会構造と大庄屋に関する研究

近世後期の摂津国尼崎藩における大庄屋(十数から二,三十ヶ村を一行政区として支配する最上層の村役人)制を事例として、畿内先進農業地帯における村落地域社会の構造と大庄屋制の特質を検討した。結果、(1)尼崎藩での大庄屋の組(一大庄屋の支配区域)行政は、大庄屋と数人の支配下庄屋らによって担われ、尼崎城下の町宿の果たす役割が大きかったこと、(2)1830年頃から1850年頃にかけて組行政の担い手たる庄屋に変化が見られたが、その時期はいわゆる富農経営が経営的限界に達した時期と一致したことなどが明らかとなった。科研初年度にあたる今回は、おもに武庫郡上瓦林村岡本家文書の収集・整理に主眼を置き、大庄屋入用関係文書、役方御用日記、万日記など、尼崎藩大庄屋の具体的職務内容が明らかになる史料類を中心に焼き付けを行った。他方、地域の社会構造を明らかにするという点では、岡本家の管轄行政区の戸口関係史料を部分的に収集するにとどまった。これら史料の分析を通じて、1,尼崎藩領の地域的入用は、大仲間入用(郡中レベル)と仲間入用(組=1行政区レベル)との2レベルに分けられること、2,大仲間入用では、大庄屋七人の参会時における町宿諸賄費を中心にしつつも(全体額の約4割)、殿様献上諸品代も少なからず見られること、3,大庄屋には各々毎年銀100匁宛の小賄料が認められていること、4,大仲間入用には、他地域の場合にしばしば見られる庄屋層の立替入用が一切計上されていないこと等が明らかとなった。5,仲間入用では、灘屋、鯛屋といった用聞が関与した経費が多く認められ、6,各村庄屋の立替入用は比較的少ないといった特徴が明らかとなった。これらのことから、尼崎藩の大庄屋制は、大庄屋仲間の「閉鎖性」が他地域と比べて比較的強いこと、町場の用聞が組行政に関与する度合いが高かったこと等が窺われる。次年度以降では、上記の諸特徴をさらに詳細に明らかにするとともに、どの時期からそうした特徴が顕著になったのか等、時期的な問題も明らかにする必要がある。尼崎藩地域は18世紀以降農村商工業が高度に発達した地域として著名であり、国訴などの広域訴願運動が高揚した地域でもある。これら当地域の社会経済的状況と尼崎藩大庄屋制の地域的特質との関連性追求も今後の課題である。研究2年目にあたる今年度は、前年度と同様に、武庫郡上瓦林村岡本家文書の収集・整理を重点的に行った。また、国文学研究資料館や東京大学史料編纂所がそれぞれ来年度以降閲覧停止措置を取ることを発表したため、両機関が所蔵する尼崎藩関係史料のなかから研究課題に関わる史料を調査し、適宜収集を行った。大庄屋の役職関係では、岡本家文書中に収められた、御用銀・御借入銀関係史料や冥加銀関係史料、千石夫・御用縄藁徴収関係、国役銀徴収関係史料などを重点的に収集し、焼き付けした上で分析に着手した。多様な職掌を持つ大庄屋は本来夫役徴発を主要な任務としていたと考えられるが、近世初期段階の現人足による夫役徴発体制が17世紀半ば以降に代銀納化されていく状況の中で、役銭徴収事務が重要な大庄屋職務となり、それが核となって近世後期の地域的入用システムが形成されたと考えられる。尼崎藩大庄屋文書の中には、国役銀徴発に関する史料が多く残されており、大庄屋-庄屋のもとで行われる二段階の地域的入用体制もそうした夫役徴発→代銀納化という流れの上に位置づけるべきという見通しを得た。近年の畿内近国支配論では近世前期と後期の研究がやや断絶している観があるが、両者を結びつけるキー概念として「役」徴発があり、次年度以降はこの「役」に注目して検討を行う予定である。近世後期の尼崎藩では郡中全体に関わる支配行政は領内から選出された2名前後の大庄屋が輪番で執り行っており、城下近在の特定の大庄屋が専従する形式をとっていない。こうした近世後期的なシステムがどの時期から存在していたのかということなども来年度以降の検討課題である。また、岡本家文書中の経営帳簿などの分析を通じて、当地域の経済構造と大庄屋の職務との関係も今後の検討課題である。昨年度に引き続いて今年度も武庫郡上瓦林村岡本俊二家文書を中心に史料の収集と分析を行った。今年度は、大庄屋の公的な役職に関する史料として、岡本家文書中に収められた巡見使・奉幣使関係史料などを重点的に収集し、焼き付けした上で分析に着手した。

他方、当地域の大庄屋の社会経済的地位については岡本家の個別経営史料の分析が必要であるが、今年度は十分に検討できなかった。地域社会構造の一端を物語る素材としては、岡本家が支配した行政区内の人別移動という点などから分析を行った。具体的には、瓦林組を構成する31ヶ村の天保期以降明治初年までの人別移動について、生死者・領分参人・他領参人・領分遣し人・他領遣し人などの区分に従って、村ごとに増減の傾向を把握し、おなじ瓦林組構成村であっても異なる類型の村々があることなどを確認した。次年度ではこうした村ごとの類型の違いをさらに多角的に押さえたうえで、地域有力者の分布状況などとの相関性について検討する予定である。尼崎藩領では岸和田藩領などと同じように、在村の宗教者や諸社会集団の人別支配にも大庄屋が深く関わっている。こうした事態は中間地帯の藩領では比較的希なことであり、畿内の大庄屋制がもつひとつの特徴と思われる。元禄期尼崎藩領では、有力社の神職が白川家等の本所支配に加えて奉行-大庄屋-庄屋という系統でも統制されていた。今後は百姓身分以外の諸身分の支配に当藩の大庄屋がどの程度関わっていたのかなどという点についてもさらに追究する必要がある。今年度は、地域的入用の検討と瓦林組の地域構造の検討、天保6年国訴における瓦林組の対応の検討等を通じて、日常的な組行政における中心的担い手と国訴など非日常的な場面における惣代との関係について分析を行った。その結果、(1)日常的な組行政では、大庄屋と組内一部地域の庄屋が中心的に業務を担っていたこと、(2)その場合、尼崎城下に設置された町宿が重要な機能を果たしたこと、(3)天保6年国訴の際には、上記(1)のような組の執行部的存在-大庄屋と一部の庄屋-は、運動の前面には立たなかったこと、(4)大庄屋は藩に対して国訴へ合流する件について逐一報告を行っており、いわば藩ぐるみの対応を尼崎藩領村々では行ったこと、などが明らかになった。そして畿内の地域社会像については、幕藩権力・対・国訴結集村々のように、権力と村々を二項対立的にとらえるのではなく、藩と藩領民との関係にまずは重きをおいて畿内の地域社会を再検討すべきという見解が得られた。一方、研究を進めるなか、大庄屋の身分的問題と家意識が改めて重要なものとして再認識された。そこで、当該問題について比較的史料の残されている松本藩の事例を検討した。その結果、(1)苗字帯刀特権をはじめとする近世後期の大庄屋の身分待遇は、幕府と藩で異なった認識や取り扱われ方が同時に存在していたこと、(2)19世紀初頭の幕令以降、百姓身分の大庄屋には藩領外で苗字帯刀を行使することが原則許されなくなったこと、(3)弘化期の和歌山藩大庄屋への幕府からの特例許可が先例となり、以後一部の藩にも特例が認められるようになったこと、(4)幕府が諸藩に特例を許可するにあたっては、地士であるかどうかがカギとなったこと、(5)幕末期に特例を認められた藩では以後大庄屋の身分意識が士身分に準じるものとして大きく変容していったこと、などが明らかになった。