hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
頭蓋内胚細胞腫瘍の新規腫瘍マーカーの探索と発生機序・治療感受性に関する解析

1.頭蓋内胚細胞腫瘍(GCT)19例の凍結標本を用い,cDNA arrayによる遺伝子発現の解析を行なった.(1)従来から言われているマーカー,HCG-β,AFP, PLAP, c-Kitは,いずれもそれぞれに特有の組織型において発現している事が観察された.(1)BMP-4の染色性には既知のマーカーであるPLAP, cKit程の特異性は認められなかった.Germinomaにおいては21例中19例が陽性であった.ただ,染色強度は+から++までであったが,PLAPあるいはcKitに比べると弱いものが多かった.(2)Syncytiotrophoblastic giant cellについては染色性にばらつきがあり,細胞も少数なので明確には結果が判定できなかった.(3)卵黄嚢腫瘍,絨毛癌でも陽性所見が得られ,むしろgerminomaよりも染色性の強い症例が目立った.(4)奇形腫では,主として上皮成分,神経組織,間質の一部に陽性を認め,特に上皮の反応性が強いようであった.新規マーカーとしての可能性を示唆した.(1)BMP-4の染色性には既知のマーカーであるPLAP,cKit程の特異性は認められなかった.Germinomaにおいては21例中19例が陽性であったが,PLAPあるいはcKitに比べると弱いものが多かった.(2)Syncytiotrophoblastic giant cellについては染色性にばらつきがあり,細胞も少数なので明確には結果が判定できなかった.(3)卵黄嚢腫瘍,絨毛癌でも陽性所見が得られ,むしろgerminomaよりも染色性の強い症例が目立った.(4)奇形腫では,主として上皮成分,神経組織,間質の一部に陽性を認め,特に上皮の反応性が強いようであった.新規マーカーとしての可能性を示唆した.3.その他にgerminomaとnon-germinomatous tumorで発現に差があった遺伝子として,frizzled,SFRP,Soxllをピックアップした.これらについてcDNA arrayに用いた標本以外のサンプルを用いた免疫組織化学染色を行った.4.引き続きGCT手術サンプルを収集し12例を渉猟した.2.それぞれについて蛋白質の発現を確認するために免疫組織化学染色を行った.(1)BMP-4の染色性には既知のマーカーであるPLAP,cKit程の特異性は認められなかった.Germinomaにおいては21例中19例が陽性であったが,PLAPあるいはcKitに比べると染色性の弱いものが多かった.(2)BMP-4は卵黄嚢腫瘍,絨毛癌でも陽性所見が得られ,むしろgerminomaよりも染色性の強い症例が目立った.(3)BMP-4は奇形腫では,主として上皮成分,神経組織,間質の一部に陽性を認め,特に上皮の反応性が強いようであった.新規マーカーとしての可能性を示唆した.(4)SOX-11の免疫組織化学における発現はgerminomaにおいてもnon-germinomatous GCTにおいても見られたが,むしろgerminomaにおいて強く発現している症例が多かった。
リガンド分子設計によるチューブリンの薬物認識機構の解析

本研究では、チューブリン上のコルヒチン結合部位に作用する最小、最強のリガンドであるコンブレタスタチンA_4とビンブラスチン部位に結合する2種の環状ペプチド、フォモプシンとウスチロキシンをリードとし、夫々の薬剤結合部位における分子認識機構の解析および新規抗がん剤の設計を目指して以下の成果を得た。コンブレタスタチンA_4をリードとする化合物として、3,4,5-トリメトキシフェニル基と3-ヒドロキシ-4-メトキシフェニル基をアミド、アミン、エステル、エーテル結合で連結した化合物を合成し、細胞毒性およびチューブリン重合阻害活性を検定した。その中で、多種のN-アルキル置換のトリメトキシベンジルアニリン系化合物が高いチューブリン重合阻害活性を示し、これら化合物およびチューブリンには活性を示さなかった数種のアミド系化合物が1μM以下の濃度でHL-60,KB細胞の増殖を50%阻害した。現在、これら化合物の担がんマウスに対する抗腫瘍活性を検討中である。また、上記の、チューブリンに対して活性なN-置換ベンジルアニリン誘導体に光アフィニティー標識用官能基およびアフィニティークロマト用官能基の導入を試行している。フォモプシン、ウスチロキシンをリードとする化合物の設計では、最重要部分構造と考えられる13員環部分の全合成法を開発中であり、これに成功すれば各種誘導体の構築が可能となり、構造・活性の解明に役立つ。一方で、天然物としてウスチロキシン類では最も簡単なTyr-Val-Ile-Glyを基本単位とする環状ペプチド(ウスチロキシンD)が発見され、活性を有することから、この基本構造をもとに分子認識機構の解明と新規抗腫瘍剤の開発を行っている。
原子層成長法によるアト秒軟Ｘ線酸化物多層膜ミラーの開発

本課題では、研究代表者が独自に開発してきた酸化物軟X線光学素子の原子層成長技術を基盤に、サファイヤ基板上にZnO/TiO2酸化物超格子多層膜ミラーを作製できることを明らかにした。次に、ZnO/TiO2酸化物超格子構造が広い周波数帯域を提供する「水の窓」軟X線領域において高反射率でかつ多重周期により軟X線周波数を精密に位相制御できることを明らかにした。さらに、分子科学研究所UVSORの機器校正用ビームラインBL5Bを利用して、「水の窓」軟X線領域において比較的広帯域に軟X線多層膜光学素子構造の軟X線光学性能評価を行い、複数の吸収端近傍の異常分散を利用できることを明らかにした。平成23年度に得られた結果を基にして、平成24年度はより広いX線波長領域で有効なZnO/TiO2多層膜構造の反射率シミュレーションを行い、広帯域軟X線に対する多層膜構造の設計を行った。特にTiを使う理由は、軟X線領域における異常分散を利用することで、高反射率を期待できるためである。軟X線多層膜光学素子の性能をシミュレーションできるソフトウェアおよびデータベースは研究室で独自に構築し、同ソフトウェアおよびデータベースを駆使して、さらに最適なZnO/TiO2多層膜構造の設計を行った。その設計に従って、実際に厚さの異なるブロックを積み重ねて、ZnO/TiO2多層膜構造の原子層成長を行った。酸化物の原子層成長を実現できる軟X線多層膜光学素子構造作製装置を利用して、ZnO膜およびTiO2膜を同一基板(サファイヤC面)、同一基板温度(450°C)で作製できる条件を見いだし、ZnO/TiO2超格子多層膜構造の原子層成長を実現した。その多層膜構造を分子科学研究所UVSORの機器較正用ビームラインのUL5Bを施設利用して、軟X線光学性能評価を行ったところ、平成24年度の計画していた以上の高性能な多層膜構造が作製できていることが判明した。総じて、(1)より広いX線波長領域で有効な多層膜構造の反射率シミュレーション、(2)広帯域軟X線に対する多層膜構造の設計、(3)その設計通りに厚さの異なるブロックを積み重ねる、酸化物複数層膜構造の原子層成長の実施、(4)広いX線波長領域で有効な多層膜構造の実証に成功した。さらに付加的な成果であるが、新たな多層膜材料の組み合わせであるV2O3/TiO2超格子多層膜構造が、広帯域軟X線に対する多層膜構造になりうることを、反射率シミュレーションから導きだすことにも成功した。本課題では、研究代表者が独自に開発してきた酸化物軟X線光学素子の原子層成長技術を基盤に、ZnO/TiO2酸化物超格子多層膜ミラーを作製し、ZnO/TiO2酸化物超格子構造が広い周波数帯域を提供する「水の窓」軟X線領域において高反射率でかつ多重周期により軟X線周波数を精密に位相制御できることを世界に先駆けて実証し、最終的にはアト秒光学素子としての構造的な性能評価を行うことを目的とした。研究実施にあたっては、研究実施計画通り、まず、X線原子散乱因子のデータベースを基礎に、軟X線多層膜光学素子の性能を詳細にシミュレーションできる、研究室で独自に構築したコードおよびデータベースを駆使して、アト秒領域の広帯域なZnO/TiO2超格子多層膜構造を明らかにした。次に、軟X線多層膜光学素子構造作製装置を構築し、ZnO膜、TiO2膜と同一基板(サファイヤC面)、同一基板温度(450°C)で、ZnO/TiO2超格子多層膜構造の原子層成長を実証した。さらに、反射率シミュレーションで得られた広帯域なZnO/TiO2超格子多層膜構造の設計パラメータに従って、実際に周期長の異なるブロックを積み重ねて、広帯域な多重周期ZnO/TiO2超格子多層膜構造を作製した。最後に、研究代表者が分子科学研究所UVSORの機器較正用ビームラインのBL5Bを利用して、アト秒領域軟X線多層膜光学素子構造の軟X線光学性能評価を行った。X線原子散乱因子のデータベースを基礎に、世界最短波長のアト秒領域軟X線多層膜光学素子構造であるZnO/TiO2多層膜構造の設計を行った。

酸化物の原子層成長を実現できる軟X線多層膜光学素子構造作製装置を利用して、ZnO膜およびTiO2膜を同一基板(サファイヤC面)、同一基板温度(450°C)で作製できる条件を見いだし、ZnO/TiO2超格子多層膜構造の原子層成長を実現した。作製したZnO/TiO2多層膜構造の構造評価は、表面は原子間力顕微鏡、積層については断面透過型電子顕微鏡により、また多層膜の周期構造やヘテロエピタキシャル成長についてはX線回折装置を用いて行った。軟X線領域では多層膜界面のラフネスによる散乱損失により、軟X反射率の低下が著しく、積層欠陥の抑制方法を研究することで、欠陥の少ないZnO/TiO2多層膜構造の開発し、軟X線散乱損失の低減を図る必要があった。作製したZnO/TiO2超格子多層膜構造の軟X線反射率の測定は分子科学研究所のUVSORで行い、波長2.74nmの「水の窓」域軟X線に対して、僅か10周期で、29.4%の極めて高い反射率を得た。ZnO/TiO2超格子多層膜構造から発展して、近接するTiとVの2つの吸収端を利用できる、新しい、V2O3/TiO2超格子多層膜構造を見いだし、その可能性について、反射率シミュレーション解析により、有用であることを明らかにすることができた。軟X線領域では多層膜界面のラフネスによる散乱損失により、軟X反射率の低下が著しくなる問題点があった。しかし積層欠陥の抑制方法を研究することで、欠陥の少ないZnO/TiO2多層膜構造の開発し、軟X線散乱損失の低減に結果的に成功しているため。より広いX線波長領域で有効なV2O3/TiO2超格子多層膜構造が大いに期待できる。近接するTiとVの2つの吸収端を利用できるためである。V2O3薄膜の原子層成長に関して、サファイヤ基板、ルチル基板での結晶成長性等について検討を行い、V2O3/TiO2超格子多層膜構造の作製方法について検討し、V2O3/TiO2超格子多層膜構造の有用性の展望を見いだす。今後は、平成23年度に得られた結果を考慮して、その上で、より広いX線波長領域で有効な複数の吸収端を有する膜構造の反射率シミュレーションを行い、広帯域軟X線に対する複数層膜構造の設計を行う。その設計に従って、実際に複数の吸収端を有する膜構造を積み重ねて、酸化物複数層膜構造の原子層成長を行なう。申請者が現在施設利用している分子科学研究所UVSORの機器較正用ビームラインのUL5Bを利用して、アト秒領域複数層膜用酸化物構造の軟X線光学性能評価を行う。軟X線光学性能評価結果とシミュレーション結果を比較して、複数層膜構造の積層を改善し、広帯域な高反射率特性にフィードバックしていく。V2O3薄膜の原子層成長研究に関わる、基板材料、光学材料などの消耗品購入に主としてあてる。次年度は最終年になるので、得られた結果を取りまとめ、成果の発表、公表にも、研究費を利用する。アト秒光源は、可視近赤外域のチタンサファイヤレーザーをベースにしているので、その基本波光源の分離が必要である。そのためのレーザーミラー、多層膜基板など消耗品を購入する。また得られている成果を発表するための学会費、交通費に使用する。
極表層プラズマ反応場を駆使した大面積触媒ナノ粒子単層薄膜の生成に関する研究

水溶液の極表層に高密度のプラズマをつくることができる低エネルギー電子ビームを駆使した貴金属ナノ粒子から成る薄膜の生成を目的に、貴金属イオンを単成分あるいは複数成分含む種々の条件の水溶液に数十keVの電子ビームを照射し、水溶液の色相のその場分光分析結果や生成した薄膜のナノサイズレベルの構造解析・化学組成解析結果から薄膜の生成過程を解明した。また、生成した薄膜の触媒性能の結果と併せて、極表層プラズマ反応場を用いた新たな触媒作製技術の可能性を拓いた。本研究では、従来研究には無い粒子径の揃った貴金属ナノ粒子を大面積で高密度に単層で配列するユニークな触媒ナノ粒子薄膜の生成手法に関するもので、物質の極表層に高密度プラズマ場を形成できる数十keVの低エネルギー電子線を駆使して、気液界面での貴金属ナノ粒子を高密度で生成・配列した触媒薄膜の新たな合成法の確立を目的とする。平成27年度は、本研究で設計・製作したコリメータ付照射容器を用いて、水溶液中に1 mmol/Lの塩化金酸(III)イオン(以下、Auイオン)と、2-プロパノールやエタノールを0.520v%の濃度で含む水溶液に電子線照射した結果、1v%の低濃度アルコール条件で水溶液表面に膜状生成物の生成が促進し、2-プロパノールの場合において5-20nmで比較的粒径が揃い、かつ高密度な粒子薄膜が生成することを見出した。またこの粒子膜のXPS分析から、この膜の主成分はAuで、2-プロパノールの条件において膜中Auの約85%程度が金属状であること、またエタノール共存下ではAuイオンが還元されにくいことを明らかにした。さらに、Auナノ粒子膜をアナターセ型TiO2基板に転写後、加熱温度200°Cで1000 ppmvのCO/空気を流通した結果、CO2に相当する赤外吸収ピークが観察され、このAuナノ粒子膜はCOを酸化できる触媒性能を有することを見出した。これらの結果から、対象貴金属がAuについてのみではあるが、粒子や薄膜の生成挙動が明らかとなり、大面積の貴金属ナノ粒子単層薄膜の合成法の開発につながる重要な成果が得られた。電子加速器メーカーの協力のもと、電子発生管内の熱電子放出用のフィラメントの長さを従来の5mmから10mmとすることにより、本研究の遂行に必要な約20cm2の照射面積を有する電子発生管の改良に成功した。また、雰囲気ガスの流通状態や試料水温を制御し、かつ電子線を約0.88mm2の面積まで段階的に絞ることができるコリメータ機能を有する電子線照射容器(コリメータ付照射容器)を自ら設計・作製を行った。さらに、照射水溶液の“その場"分光システムの要となる分光分析対応照射容器も設計・製作した。これらの反応容器を用いて、低濃度アルコール共存下で対象貴金属として金を中心に、当初の計画に沿って、種々の水溶液組成、電子線照射条件で粒子薄膜の生成を試みるとともに、貴金属ナノ粒子薄膜の形態・構造、化学状態について明らかにした。またTiO2を主に、セラミック基板に転写したAuナノ粒子薄膜がCOの酸化触媒能を有することを見出し、貴金属ナノ粒子単層薄膜の合成法の開発につながる重要な知見と得た。この一連の成果を第39回静電気学会全国大会で発表した。これらの結果から、Auについてのみではあるが粒子や薄膜の生成挙動が明らかとなり、大面積の貴金属ナノ粒子単層薄膜の合成法の開発につながる重要な成果が得られた。本研究では、従来研究には無い粒子径の揃った貴金属ナノ粒子を大面積で高密度に単層で配列するユニークな触媒ナノ粒子薄膜の生成手法に関するもので、物質の極表層に高密度プラズマ場を形成できる数十keVの低エネルギー電子線を駆使して、気液界面での貴金属ナノ粒子を高密度で生成・配列した触媒薄膜の新たな合成法の確率を目的とする。平成28年度は、昨年同様にコリメータ付き照射容器を用いて、水溶液中に1 mmol/Lの塩化パラジウム(II)イオン(以下、Pdイオン)と2-プロパノールやエタノールを0.510v%の濃度で含む水溶液を試料水溶液として電子線を照射するとともに、水溶液表面に生成した膜状生成物の分析を行った。その結果、どちらのアルコールでも0.51v%の低濃度で膜状生成物の生成が促進すること、またPdのXPS分析結果から触媒能を有するPd(0)の生成割合は約80%であることが分かった。またTEM観察結果から、一次粒子として5 nm以下の比較的粒径が揃い、かつ高密度な粒子薄膜が生成することが分かった。さらに、分光分析対応照射容器を用いて調べたPdやAuイオンを含む照射水溶液の色相変化から、いずれのアルコール濃度でも水溶液表層の貴金属原子や粒子は還元・析出するが、アルコールが高濃度の場合ではアルコールの界面活性効果により、析出した原子や粒子が水溶液中に拡散することにより薄膜が形成されにくいことが分かった。さらに、厚さ数百nmの三酸化タングステン基板にこのPdナノ粒子薄膜を転写した試料について、水素ガスや空気への曝露時の着色変化から、この薄膜は150°Cにおいて水素解離触媒能を有することを見出した。これらの結果から、貴金属粒子や膜の生成機構を明らか生成したPd薄膜をにするとともに、触媒作用を有する貴金属ナノ粒子単層薄膜の合成法につながる重要な成果を得た。

平成27年度に引き続き、対象となる貴金属をパラジウムイオンまで拡大し、貴金属ナノ粒子薄膜の生成、転写したナノ粒子薄膜の形態観察や組成分析、さらに触媒活性の定量解析等を実施した。また、貴金属イオンを含む水溶液中のその場分光計測と合わせてナノ粒子膜の生成過程を明らかにした。これらの結果から、1種の貴金属イオンを含む水溶液についてではあるが、当初予定していた貴金属ナノ粒子薄膜の生成過程の全容を明らかにし、貴金属ナノ粒子単層薄膜の合成法の開発につながる重要な成果を得ることに成功した。本研究は、従来研究にはない粒子径の揃った貴金属ナノ粒子を大面積で高密度に単層で配列するユニークな触媒ナノ粒子薄膜の生成手法に関するもので、物質の極表層に高密度プラズマ場を形成できる数十keVの低エネルギー電子線を駆使して、気液界面で貴金属ナノ粒子を高密度で単層に生成・配列した触媒薄膜の新たな合成法の確立を目的とする。平成28年度までに実施した、金(Au)やパラジウム(Pd)イオンに続き、平成29年度は白金(Pt)イオンを含む水溶液について電子線照射による薄膜生成について調べた。その結果、AuやPdイオンと同様に、0.51v%の低アルコール濃度で薄膜の生成が促進すること、粒子径が5 nm以下の一次粒子からなり、金属PtであるPt(0)の生成割合は約70%の薄膜であり、さらにこの薄膜は室温で水素解離能を有することを見出した。以上の単一成分の貴金属イオンで得られた知見をもとに、複数成分のPtとPdイオンを合計1 mMで、その濃度比が異なる水溶液について同様の実験を行った結果、水溶液表面に数nmの幅を有する網目構造を有する薄膜が形成されること、水溶液中のPt、Pdイオンのそれぞれの濃度に応じた生成比でPt(0)、Pd(0)をそれぞれ含む薄膜が形成されることを見出した。さらに、薄膜の水素分子の解離触媒能の結果と予備的に実施したTEM-EDSの分析結果から、複数成分水溶液で生成した薄膜はPt(0)の微粒子は存在せずにPd(0)との合金を形成している可能性が示唆された。以上の結果から、水溶液中の貴金属イオンの組成に応じて薄膜中の還元貴金属成分の組成を制御できることを見出すとともに、一連の知見から、気液界面で単成分、複成分からなる貴金属ナノ粒子を高密度で単層に生成・配列メカニズムを解明するとともに、その触媒薄膜の新たな合成法の確立に一定の目途がついた。水溶液の極表層に高密度のプラズマをつくることができる低エネルギー電子ビームを駆使した貴金属ナノ粒子から成る薄膜の生成を目的に、貴金属イオンを単成分あるいは複数成分含む種々の条件の水溶液に数十keVの電子ビームを照射し、水溶液の色相のその場分光分析結果や生成した薄膜のナノサイズレベルの構造解析・化学組成解析結果から薄膜の生成過程を解明した。また、生成した薄膜の触媒性能の結果と併せて、極表層プラズマ反応場を用いた新たな触媒作製技術の可能性を拓いた。これまでAuを対象とした研究で確立・得られたノウハウを十分に活用し、一部着手が遅れている白金やパラジウムなどの貴金属について研究を順次拡大するとともに、Auを中心にこれらの貴金属についても、転写するセラミック基板をTiO2だけでなくAl2O3やSiO2などにも応用し、粒子薄膜の構造と触媒活性の定量解析を実施し、基板(担体)と触媒貴金属間の相互作用(SMSI効果)について考察を行う。また、単成分の貴金属イオンを対象とした知見を十分に活用し、複数成分の貴金属イオンを含む水溶液について水溶液組成や種々の電子線照射条件をパラメーターとし、貴金属ナノ粒子薄膜の生成を試みる。
近代移行期における「音」と「音楽」―グローバル化する地域文化の連続と変容―

本年度は本研究の最終年度として、これまでの研究活動を統合しまとめる活動が中心となった。以下、今年度開催したシンポジウムの概要と刊行予定著書について述べる。<国際歴史シンポジウム>「グローバル化の中の東北と近代移行期の「音」文化」のタイトルで7月21-22日に青森中央学院大学で開催した。初日は「グローバル化の中の東北」としてハーバード大学のデビット・ハウエル教授の基調講演「津軽海峡から世界へ」と、研究分担者武内恵美子による「近世東北の楽」とした古琴演奏を行った。二日目は「近代移行期の「音」文化」についての研究報告と討論で、山下須美礼「東北のハリストス正教と音楽」、鈴木啓孝「士族の近代と東北」、武内恵美子「弘前藩と音楽」の3本の研究報告に続き、「グローバル化の中の東北と文化」についての参加者全員によるディスカッションを行なった。このシンポジウムは一般に公開し、両日合わせて約400名の参加を得た。<刊行予定著書>「近代移行期における地域形成と音楽ー作られる伝統と異文化接触」のタイトルでミネルヴァ書房から2019年8月末に刊行予定。本研究では、プレグローバル化の状況にあった近世社会の、身分階層で異なっていた音楽の諸相や士族の近代への影響力、ハリストス正教など北からのグローバル化について明らかにしてきたが、本書では「歴史資料に音を読む」という視点を共通視座として、社会の階層によって異なっていた音楽文化が、グローバル化の中で、どう変容したか、また音楽文化がどのように世情を写したか、さらに北奥地域の音楽文化が近代日本の文化のあり方にどう影響したか、を論じた。日本史を基軸に音楽を論じるものとして、従来の日本史および文化史研究に新たな視点を投じるものと考えている。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。本研究の目的は、幕末から明治にかけた北奥羽地域の、民衆の「音」や武士階級の「楽」など、音楽にかかわる諸相に注目し、移行期の社会と文化について、グローバル化の視点から考察することである。本年度は、参加研究者それぞれが、近世、近代、民俗の各専門分野から関連資料調査を行った。近世については、弘前市立弘前図書館所蔵資料を中心として調査を行い、農民、町民、武士の各社会階層の視点からの資料収集を行った。また相対化の視点から、平戸藩に目を向け、藩主松浦煕が完成させた平戸囃子及び旧平戸藩、佐賀藩、大浦藩領内の民俗芸能調査も行った。近代に関しては、Japan Weekly Mailの解読を定期的に行い、膨大な量の中からのオルガン導入にかかわる資料選定を進めた。また、東京芸術大学所蔵資料から、近代文化形成における士族層の影響に関する資料を収集した。民俗に関しては、沖縄・与論島調査を行った。エイサーなどのフィールド調査に加えて文献調査を行い、明治政府の施策による村落社会の変貌を跡付ける基礎資料を整備した。また琉球と日本本土の双方からの影響により民俗変容していることを示す資料を収集、さらに辺野古をめぐる出稼ぎや移民などグローバル化の動きにも目を向けた。以上の国内調査を進める中で、10月に筑波大学で開催されたシンポジウム「グローバルな「知」と地域の「知」ー「知」受容と創造ー」において、代表者の北原が本研究の内容を報告するとともに、研究分担者・協力者全員によるディスカッションを行った。さらに、当初の予定には無かったが、3月にロシアのモスクワ音楽院研究者たちとの交流・アカデミックミーティングの機会を得て、ニコライを初めとした来日ロシア人宣教師たちについての日露合同ディスカッションを行った。今後、同音楽院研究者たちとも共同研究を行うことになり、「北からのグローバル」を考察するうえで貴重な協力体制を築いた。当初予定していた調査は、担当者がそれぞれのフィールドにおいて滞り無く進めており、合同ディスカッションによって研究展開の方向性を全員で共有するなど、順調に推移している。さらに今年は、当初の予定には無かったロシアのモスクワ音楽院研究者たちとの交流が実現した。「北からのグローバル」は、本研究の基軸の一つだが、これを解明する上で、ロシアとの関係は非常に重要である。今後日ロ共同研究により幅広く研究の進捗が期待できることから、最初の計画より進展していると考える。近世については国立国会図書館、弘前市立弘前図書館所蔵資料および岩手県立図書館資料を中心に資料収集翻刻解読を行った。近代は青森県立図書館所蔵資料の調査とJapan Weekly Mailの解読を続けた。また民俗に関しては琉球大学附属図書館所蔵資料および恩納村立歴史民俗資料館の調査を行なった。9月4日にはこれまでの成果に基づいた「ひらめきときめきサイエンス」事業を行なった。テーマは「音楽で学ぶ青森の近代ー幕末明治の音楽を体験しようー」で、青森市内の高校生23名を対象として、講義および参加者による琴の実演を行い、若い世代への歴史や音楽への関心を高める機会を提供できた。当初予定していた調査を担当者がそれぞれのフィールドにおいて滞り無く進めており、学会などを利用した合同ディスカッションによって研究展開の方向性を全員で共有するなど、順調に推移している。

また成果も徐々に公開を始め、特に本年度は「ひらめきときめきサイエンス」により、若い世代に研究成果を伝える機会を得たことは、今後の研究展開を考える上でも大きく利するところがあったと考えている。本年度も昨年に続き、近世、近代、民俗の各専門分野から関連資料調査を継続した。近世については国立国会図書館、国文学研究資料館、弘前市立弘前図書館、東北大学付属図書館、宮城県図書館の所蔵資料を中心に資料収集翻刻解読を行った。近代は弘前市立弘前図書館、東北大学付属図書館、仙台市博物館の所蔵資料調査を行った。またケンブリッジ大学図書館所蔵資料から近代初期の東北地方に関する紀行文に関連する資料を掘り起こした。民俗に関しては秋田県角館の火ぶりかまくらと祭礼の変化について調査を実施するとともに、相対化の視点から沖縄本島の豊年祭と周辺民俗調査および史料の検討を行った。またハリストス正教の音楽受容に関して研究協力をお願いしているモスクワ音楽院首席研究員のナタリア・クロブコヴァ氏の協力を得て、8月7日に「日本におけるハリストス正教の聖歌ーその歴史と現在ー(Japanese Orthodox Chanting: A Brief History and Present-day Conditions)と題した講演会を実施し、成果公開の機会をもった。予定した調査は滞りなく進み、たとえば初期ハリストス正教関係資料や近代初期の東北を描く資料など当初の予想以上の資料を発掘している。昨年に続き、今年度も国際学会でもパネルとして参加して成果発表を行った。国内各地で開かれたさまざまな研究会においても、それぞれのメンバーが数度にわたって自分の成果を発表した。学会発表だけではなく、これまで発掘した資料紹介や、それに基づく論文などでも次々に成果が出てきている。以上に加え、今年は海外在住の研究者との共同研究についても、その成果を研究者のみならず一般の人たちも対象とした講演会で公開することができた。本年度は本研究の最終年度として、これまでの研究活動を統合しまとめる活動が中心となった。以下、今年度開催したシンポジウムの概要と刊行予定著書について述べる。<国際歴史シンポジウム>「グローバル化の中の東北と近代移行期の「音」文化」のタイトルで7月21-22日に青森中央学院大学で開催した。初日は「グローバル化の中の東北」としてハーバード大学のデビット・ハウエル教授の基調講演「津軽海峡から世界へ」と、研究分担者武内恵美子による「近世東北の楽」とした古琴演奏を行った。二日目は「近代移行期の「音」文化」についての研究報告と討論で、山下須美礼「東北のハリストス正教と音楽」、鈴木啓孝「士族の近代と東北」、武内恵美子「弘前藩と音楽」の3本の研究報告に続き、「グローバル化の中の東北と文化」についての参加者全員によるディスカッションを行なった。このシンポジウムは一般に公開し、両日合わせて約400名の参加を得た。<刊行予定著書>「近代移行期における地域形成と音楽ー作られる伝統と異文化接触」のタイトルでミネルヴァ書房から2019年8月末に刊行予定。
分子性導体の外部パラメター制御による物性熱力学的研究

本研究は、単結晶試料に対する極限環境下、複合外場環境下での熱的な測定を能動的に展開することを目指して提案された。平成19年度は、柔らかい格子系をもつ分子性導体の電子状態が最も敏感に変化する外部圧力印加状態での、熱容量の振る舞いを調べるため、前年度スタらトした高圧下熱測定の開発の本格的な展開と分子性導体への適応を中心に研究を行った。期間前半は、高圧状態での分子性化合物1OOμg程度の単結晶を用いた高圧下での熱測定を行うための装置開発と整備、測定技術の開発を進めた。Be-Cu、Be-Cu+NicrAlのクランプタイプの高圧力セル内に交流法による熱容量測定ユニットをつくり、ヒーター部と温度検出部の間に単結晶を挟む構造で試料周辺の温度変調を検出するための機構を作,成した。加熱用ヒーター、ならびに温度検出には酸化ルテニウムの圧膜構造チップを利用した新しいセルを作成した。極微チップ(0.6mm×0.4mm×0.2mm)であるため、熱電対の接点に近い微小体積でありながら、低温で感度の高い四端子計測が可能であり、四端子計測した抵抗成分の周期的加熱による振動分を位相検波する方法で実験を行った。期間後半は、まず、金属インジウムの標準試料測定によって超伝導転移の熱的な検出を試みた。圧力印加とともに転移点が低下することを確認した後、5Kの転移温度を示す有機超伝導体であるK-(BEDT-TTF)_2Ag(CN)_H_2Oを用いた圧力下での測定を行った。格子によるバックグランドが非常に大きくなるため、高圧下交流熱測定装置では熱異常の定量的評価は難しいが、交流周波数20Hz,加熱電流70μAの条件下で、常圧で、5K付近に超伝導に伴う相転移の熱異常を検出すること解できた。磁場印加下でのデータを差し引くと、この熱異常は磁場によって抑制されていく様子がわかる。次いで7kbarの圧力をかけた状態でのOT,2Tのデータの差を調べると、磁場による変化がまったく観測されず、この圧力下では正常金属状態になっていることが判明した。分子性固体の小型単結晶試料の熱力学的な測定は緩和型、交流型の熱容量測定法によって行われるが、それらの方法では外界からの熱の流入を完全に遮断せず平衡状態を保った形の測定が可能である。そのため、本研究では、分子性導体の熱力学的な電子物性研究を外的な環境を制御しながら行い、他物性と相補的な情報を提案する目的で計画した。平成18年度は、主として磁場、圧力の環境制御下での測定を行うための装置開発を中心に行った。低温、磁場下で十分な感度をもつ酸化ルテニウムの小型チップ抵抗を圧力下温度計として用いて高感度ブリッジ信号の振幅検出を通して測定をおこなうことを試みた。このチップ抵抗は、厚膜状に成型された焼結体の抵抗体であり圧力下でも十分に温度計として使用可能であることが期待される。低温、圧力印加状態での基礎データをとり、これらのチップ型温度計を十分感度の良いセンサーとして使用できることを確認した。次いで有機化合物単結晶試料の測定を行うため、Be-Cuの高圧力セルを用いた交流型の熱容量測定を作製した。四端子計測した抵抗成分の周期的加熱による振動を位相検波する方法で、100μg程度のMn_4クラスターからなる分子性磁性体の相転移挙動を捉える予備実験を行った。最低到達温度は0.9Kであり、試料にものよるが10kbarまでの加圧下での測定を試みたところ、2Kでの磁気相転移のピークが3kbar程度の加圧により一度ブロードになり、さらに圧力印加すると再びシャープに変化していくことが見出された。圧力下熱容量の定性的な変化を比較的高感度に捉えることが可能であるため、電荷秩序絶縁体が形成される(DI-DCNQI)_2Ag系に対する熱容量の測定を進め、6K付近で生じる磁気相転移が消失していく様子を検出することに成功した。

圧力印加とともに転移点が低下することを確認した後、5Kの転移温度を示す有機超伝導体であるK-(BEDT-TTF)_2Ag(CN)_H_2Oを用いた圧力下での測定を行った。格子によるバックグランドが非常に大きくなるため、高圧下交流熱測定装置では熱異常の定量的評価は難しいが、交流周波数20Hz,加熱電流70μAの条件下で、常圧で、5K付近に超伝導に伴う相転移の熱異常を検出すること解できた。磁場印加下でのデータを差し引くと、この熱異常は磁場によって抑制されていく様子がわかる。次いで7kbarの圧力をかけた状態でのOT,2Tのデータの差を調べると、磁場による変化がまったく観測されず、この圧力下では正常金属状態になっていることが判明した。
葉層構造の位相的性質と微分幾何的性質の関係についての研究

1.リッチ曲率が非負の完備な多様体上の余次元1極小葉層が,その葉の成長度が2以下ならば全測地的になることを示した.更に,Mirandaがユークリッド空間の極小グラフに対して得た第2基本形式のノルムの2乗の積分についての評価の別証を得ること,及び,ユークリッド空間の余次元1極小葉層に対してのMirandaの結果に対応する評価を得ることが出来た.2.(M, F, g)を正の断面曲率をもつ閉リーマン多様体(M, g)の余次元qメトリック葉層とするとき,ある種の「コンパクト葉の存在定理」を得た.特に,この結果の系としてBergerの結果の拡張を得た:正の断面曲率をもつ閉リーマン多様体上のキリングベクトル場はゼロ点か閉軌道を持つ.3.等周定数のひとつであるチーガー定数が有向グラフのほうでも定義でき、それが有向グラフの強連結性と深く関係していること,及び,点-連結度や辺-連結度の評価にも現れることを示すことが出来た.4.余次元1の葉層化多様体において,許容関数なるものを以前定義したが,この概念を有向グラフにも定義し,葉層化多様体の許容関数とその葉層化多様体に付随する有向グラフの許容関数との間に密接な関係があることを示すことが出来た.その応用として,葉層化多様体上の許容関数と同様に,その葉層化多様体に付随する有向グラフの許容関数もまた,ある種のdivergent(発散)の形で特徴付けることが出来た.1.リッチ曲率が非負の完備な多様体上の余次元1極小葉層が,その葉の成長度が2以下ならば全測地的になることを示した.更に,Mirandaがユークリッド空間の極小グラフに対して得た第2基本形式のノルムの2乗の積分についての評価の別証を得ること,及び,ユークリッド空間の余次元1極小葉層に対してのMirandaの結果に対応する評価を得ることが出来た.2.(M, F, g)を正の断面曲率をもつ閉リーマン多様体(M, g)の余次元qメトリック葉層とするとき,ある種の「コンパクト葉の存在定理」を得た.特に,この結果の系としてBergerの結果の拡張を得た:正の断面曲率をもつ閉リーマン多様体上のキリングベクトル場はゼロ点か閉軌道を持つ.3.等周定数のひとつであるチーガー定数が有向グラフのほうでも定義でき、それが有向グラフの強連結性と深く関係していること,及び,点-連結度や辺-連結度の評価にも現れることを示すことが出来た.4.余次元1の葉層化多様体において,許容関数なるものを以前定義したが,この概念を有向グラフにも定義し,葉層化多様体の許容関数とその葉層化多様体に付随する有向グラフの許容関数との間に密接な関係があることを示すことが出来た.その応用として,葉層化多様体上の許容関数と同様に,その葉層化多様体に付随する有向グラフの許容関数もまた,ある種のdivergent(発散)の形で特徴付けることが出来た.押切:有向グラフの許容関数の特徴づけを葉層の平均曲率関数との関係から与えた.また,リッチ曲率が非負の完備な多様体上の余次元1極小葉層が,その葉の成長度が2以下ならば全測地的になることを示した.更に,Mirandaがユークリッド空間の極小グラフに対して得た第2基本形式のノルムの2乗の積分についての評価の別証を得ること,及び,ユークリッド空間の余次元1極小葉層に対してのMirandaの結果に対応する評価を得ることが出来た.更に,(M, F, g)を正の断面曲率をもつ閉リーマン多様体(M, g)の余次元qメトリック葉層とするとき,ある種の「コンパクト葉の存在定理」を得た.特に,この結果の系としてBergerの結果の拡張を得た.小嶋:一般奇数レベル・一般指標付の半整数の重さのKohnen空間に属するモジュラ形式の平方因子が無い整数におけるFourier係数の平方が,本質的に志村対応による像を付随二次指標で捩ったゼータ関数のcentral valuesと一致することを証明した.飯田:4つの因子の化学反応を模した反応拡散系を適当に構成した上で,反応速度を大変速くした極限状況(特異極限)では,この系は2相分離を起こして古典的Stefan問題に帰着されることを証明した.川田:自然数を素数のべき乗の和で表す問題に関する仕事において,これまでは4乗数の場合は15個以上(Davenport 1939),5乗数の場合は23個以上(Thani gasalam 1986)でないと扱うことができなかった限界をそれぞれ14個,21個以上に改良した.葉層構造の位相的な研究に有向グラフの考え方が有効だったので,今年度は逆に,葉層構造で,以前我々が得ていたいくつかの結果を,有向グラフに移し替える事を試み,いくつかの結果を得ることが出来た:1.等周定数のひとつであるチーガー定数が有向グラフのほうでも定義でき,それが有向グラフの強連結性と深く関係していること,及び,点-連結度や辺-連結度の評価にも現れることを示すことが出来た.

2.余次元1の葉層化多様体において,許容関数なるものを以前定義したが,この概念を有向グラフにも定義し,葉層化多様体の許容関数とその葉層化多様体に付随する有向グラフの許容関数との間に密接な関係があることを示すことが出来た.その応用として,葉層化多様体上の許容関数と同様に,その葉層化多様体に付随する有向グラフの許容関数もまた,ある種のdivergent(発散)の形で特徴付けることが出来た.以上の結果は,論文の形で発表出来た.(cf.雑誌論文2と3)葉層構造の幾何的な性質を研究するのに有力な手掛りと思える許容関数に関しては,既に特徴づけや幾つかの興味深い性質を以前与えたが,「関数」を「ベクトル場」にかえると,状況はかなり変わってくる.P. SchweitzerとP.Walczakによって得られた一般次元の葉層構造の許容ベクトル場に関する最近の結果をヒントにして,余次元1の場合について,許容ベクトル場の特徴づけを試みた.これについては,現在論文を準備中である.また,リーマン葉層に付随する錐構造に対して幾つかの興味深い結果がWollakや他の人達によって得られているが,錐構造をより詳しく調べることにより,それらの結果の別証を得られる可能性があるが,これは,次年度の大きな課題の一つと考えている.1.葉層構造の位相的な研究に有向グラフの考え方が有効だったので,逆に,葉層構造で,以前我々が得ていたいくつかの結果を,有向グラフに移し替える事を試み,いくつかの結果を得ることが出来た:余次元1の葉層化多様体において,許容関数なるものを以前定義したが,この概念を有向グラフにも定義し,葉層化多様体の許容関数とその葉層化多様体に付随する有向グラフの許容関数との間に密接な関係があることを示すことが出来た.その応用として,葉層化多様体上の許容関数と同様に,その葉層化多様体に付随する有向グラフの許容関数もまた,ある種のdivergent(発散)の形で特徴付けることが出来た.以上の結果は,論文の形で発表出来た.(cf.論文1)また,上記の結果を純粋に組み合わせ的な立場から証明することが出来た.この結果については現在論文を準備中である.2.P.SchweitzerとP.Walczakによって得られた一般次元の葉層構造の許容ベクトル場に関する最近の結果をヒントにして,余次元1の場合について,許容ベクトル場の特徴づけを試みた.これについては,現在論文を準備中である.また,リーマン葉層に付随する錐構造に対して幾つかの興味深い結果がWollakや他の人達によって得られているが,錐構造をより詳しく調べることにより,それらの結果の別証を得られる可能性があることもわかった.
若年男児の妊孕性温存に最適な、精巣凍結保存-体外精子形成法確立に関する研究

前年度にマウス精巣を対象にした精巣組織凍結保存法については、白膜除去精巣組織を、Stem Cell Keep中で、ガラス化法により超急速凍結保存が、最も高率に凍結保存精巣組織から、体外培養で精子作出することが出来ることを明らかにした。現在確立中の精巣組織凍結保存技術をヒトに応用する際に、利用出来る精巣組織容積が極めて少ない事が予測される。このため、極少数の精子や精巣組織を凍結保存して、可及的に良好な細胞を回収する方法を検討するため、新規の精子・精巣組織凍結のために格納容器の開発を行った。CCSの保護者に対するアンケート調査を行うために、症例の登録を行っている。現時点で10名のCCS患者(患児)がリストアップされている。極少数精子を凍結保存するために用いる格納容器に開発を行った。生体適合材料である、アガロースゲルでできたカプセルに注目し、極少数の精子を凍結する方法を検討した。その結果、アガロースゲルカプセルに格納した、数個単位の精子は、回収率95%以上・回収時の生存率90%以上と極めて良好であった。(この結果は、Fertility and Sterility誌に投稿中)1.CCS患者(患児)の保護者に対する、アンケート調査を行う。2.極少量の精巣組織を凍結保存することに、今回確立したアガロースゲルカプセル法が有用であるか否かを、マウス精巣を用いて以下の面から検討する。1)凍結保存-融解後の回収出来た細胞数2)凍結保存-融解後に回収された細胞の生存率3)凍結保存-融解後に回収された細胞を体外培養による、成熟精子獲得数とこれを用いた顕微授精による産仔獲得率幼弱マウス精巣組織を凍結保存ー融解ー体外器官培養の最適凍結条件を検討した。1.凍結保存用の精巣組織片の作成方法に関する検討1精巣白膜が付着したまま組織片を作成するか、2精巣白膜除去して精巣組織片を作成するかの検討を行った。凍結保存液はStem Cell Keepを使用した。この結果、凍結保存ー融解時の生存精巣細胞率には、差がなかった。しかし、白膜を除去した精巣組織の方が、凍結保存ー融解ー体外培養での精子形成効率が高く、作出された精子を用いたICSIによる胚盤胞到達率も高率であった。2.凍結保護剤の検討幼弱マウス精巣組織凍結保存に、1DMSOを含む細胞凍結保護液2幹細胞凍結保存用のStem Cell Keepのいずれが、幼弱精巣凍結保存に最適かを検討した。この結果、Stem Cell Keepを用いた方が、凍結保存ー融解後の生存精巣細胞率が高かった。融解後の精巣組織を体外器官培養して得られる精子数もStem Cell Keepの方が多かった。作出された精子をICSIに用いた場合の、胚盤胞到達率もStem Cell Keepを用いた方が高かった。3.精子凍結方法の検討緩慢凍結法と、超急速凍結法であるガラス化法のいずれが、幼弱精巣精子凍結保存に最適かを検討した。幼弱マウス精巣組織を凍結保存ー融解後の、生存精巣細胞率はガラス化法の方が緩慢凍結法よりも高かった。融解後の精巣組織を、体外器官培養して得られる精子数も、ガラス化法の方が多かった。作出された精子をICSIに用いた場合の、胚盤胞到達率もガラス化法を用いた方が高かった。上記から、幼弱マウス精巣組織を凍結保存ー融解ー体外器官培養で精子作出しICSIに用いるには、白膜除去した精巣組織を、Stem Cell Keep中で、ガラス化法による超急速凍結保存が、最も有用であるとの結論に達した。幼弱マウスの凍結保存ー融解ー体外器官培養で成熟精子を作出し、これを用いた体外受精系は安定して稼働している。さらに、既に最適な凍結保存条件の決定も終了している。現在、平成30年度のアンケート調査に向けて、予備調査を行う体制を構築している。(この結果は、Fertility and Sterility誌に投稿中)

若年男児の精巣組織を凍結保存し、融解後に体外培養することで精子形成を起こさせる方法について、Childhood Cancer Survivor(CCS)の保護者とがん治療担当者への、2種類の意識調査を行う。第1調査: CCSの保護者に対する調査。平成29年度に確立した、幼弱マウス精巣の凍結保存ー融解ー体外培養により精子作出する方法が、ヒトに応用可能になった場合にCCSの保護者の受容について調査する。この場合のCCSの保護者は、自身の子どもの治療に当たっては、妊孕性温存手段がなかったため、これを実施していない人たちである。1CSSに妊孕性温存方法があれば、これを受けさせたかったと考えるか。2妊孕性温存方法があれば、困難を伴うがん治療に対しての受け入れや積極性に変化があったか。3精巣組織凍結保存ー融解ー体外培養による妊孕温存法を自身の子どもに応用することを希望したか。第2調査:小児がん治療担当医に対するアンケート調査。精巣毒性のあるがん化学療法を受ける予定の若年男子の保護者に対して、「精巣組織凍結保存ー融解ー体外培養による精子作出をすることで妊孕性温存可能」であれば、この方法を患児の保護者に対して勧めるか否かを調査する。さらに、上記の妊孕性温存方がある事での、がん化学療法を遂行する上でのメリット・デメリットに関して調査する。若年男子精巣組織を、凍結保存ー融解ー体外培養して精子作出する方法をヒトに応用するために、施設の倫理委員会(IRB)に対して倫理審査を申請する。IRBからの許可を得た上で、実際にがん化学療法を受ける若年男子の保護者に対して、精巣組織凍結保存-融解ー体外培養による精子作出法について説明し、同意が得られれば、平成29年度に確立した方法で、精巣組織凍結保存ー融解ー体外培養を行い、精子作出の可否を検討する。精子が作出された場合は凍結保存する。1.CCS患者(患児)の保護者に対する、アンケート調査を行う。2.極少量の精巣組織を凍結保存することに、今回確立したアガロースゲルカプセル法が有用であるか否かを、マウス精巣を用いて以下の面から検討する。1)凍結保存-融解後の回収出来た細胞数2)凍結保存-融解後に回収された細胞の生存率3)凍結保存-融解後に回収された細胞を体外培養による、成熟精子獲得数とこれを用いた顕微授精による産仔獲得率旅費及び人件費として申請した金額を使用しなかったため残金が生じた。次年度は国際学会の発表を予定しているためほぼ予定通りに使用する。本年度、学会旅費に使用する予定であったが参加しなかった。また、人件費・謝金についても該当案件がなかったため使用しなかった。このため次年度使用額が生じている。次年度については旅費および論文校正費等に使用していく予定である。
糸状菌の菌糸先端生長における細胞壁リモデリング関連因子のダイナミズム

糸状菌細胞壁の主要構成成分であるキチンの合成及び分解(リモデリング)は菌糸先端生長において中心的な役割を果たすと考えられ、ミオシンと相同性を有するドメイン(myosin motor-likedomain ; MMD)をタンパク質のN末端側に持つキチン合成酵素は菌糸先端に局在し、アクチン細胞骨格との相互作用により菌糸先端における極性生長と細胞壁合成を繋ぐ重要な因子であると予想される。本研究では糸状菌のモデル生物であるAspergillus nidulansのMMDを持つキチン合成酵素CsmAの菌糸内局在化機構等について解析し、糸状菌の細胞表層の形成を司る複数のタンパク質の輸送、局在化の制御機構、各々の相互作用等を総合的に解明することを目的とした。本年度は研究計画に則り、MMDを元来持たないキチン合成酵素であり、菌糸先端生長に必須の機能を果たすChsBの局在化機構について、CsmAとの比較を行った。キネシン破壊株におけるChsBの局在観察、キネシンとの局在部位の比較及び物理的相互作用の解析の結果、ChsBはCsmAと同様にキネシンとの相互作用により菌糸先端付近へ輸送されることが示唆された。また、CsmAとChsBの局在部位を比較したところ、菌糸先端において両者は一部近接した部位に観察されたが、ChsBが菌糸最先端部に見られるのに対し、CsmAは先端からやや後方の形質膜上に見られるという局在部位の違いも観察された。更に、両者の物理的相互作用は検出されなかった。これらの結果から、菌糸先端生長に必須の機能を担うキチン合成酵素CsmAとChsBは、共にキネシンとの相互作用を介して微小管上を菌糸先端付近へ輸送され、菌糸先端の形質膜上の一部異なる領域に局在化することが示唆された。本研究では、菌糸細胞壁の形成を司る因子群について総合的に解明することを目的としており、これまでに菌糸表層の細胞壁形成に直接的に関与し菌糸先端生長に必須のキチン合成酵素について、その輸送機構及び局在化機構を明らかにした。今後、これらのキチン合成酵素の機能因子を同定し、機能的相関や相互作用を明らかにしていくことにより、菌糸先端生長の総合的解明に大きく貢献する成果が期待される。菌糸先端生長の総合的解明の為には、先端生長に必須のキチン合成酵素CsmA及びChsBについて、酵母ツーハイブリッド法や免疫沈降法等により相互作用する因子を同定し、機能的相関の解析を行なっていくことが有効であると考えられる。また、これまでに明らかとなっている菌糸先端生長に重要な極性決定因子やアクチン細胞骨格及び微小管上の輸送に関わる因子についても、CsmAやChsBとの機能的関連を解析する必要がある。糸状菌細胞壁の主要構成成分であるキチンの合成及び分解(リモデリング)は菌系先端生長において中心的な役割を果たすと考えられ、ミオシンと相同性を有するドメイン(myosin motor-like domain; MMD)をタンパク質のN末端側に持つキチン合成酵素は菌糸先端に局在し、アクチン細胞骨格との相互作用により菌糸先端における極性生長と細胞壁合成を繋ぐ重要な因子であると予想される。本年度は研究計画に則り、まずCsmAの生細胞における挙動の解析を行なった。微小管重合阻害剤による菌糸処理やキネシンをコードするkinA遺伝子の破壊により、菌糸先端付近におけるCsmAの局在異常が観察された。また、微小管に沿ってフィラメント状の局在を示す変異型キネシンKinA^<rigot>とCsmAの局在観察の結果、先端から後方の菌糸内においてCsmAとKinA^<rigot>との共局在が観察された。更に、CamAはKinA^<rigot>とin vivoにおいて相互作用することが示された。これらの結果から、CsmAはKinAとの相互作用により微小管上を菌糸先端付近へ輸送されることが示唆された。次にCsmAの微小管上の輸送におけるMMDの役割について検討した。MMD欠失型CsmA(△MA)の局在観察の結果、菌糸先端から後方においてKinA^<rigot>との共局在が観察された。また、△MAとKinA^<rigot>とのin vivoにおける相互作用が示された。これらの結果から、菌糸先端付近へ向かう微小管上のCsmAの輸送にはMMDが不要であることが示唆された。

本研究では糸状菌のモデル生物であるAspergillus nidulansのMMDを持つキチン合成酵素CsmAの菌糸内局在化機構等について解析し、糸状菌の細胞表層の形成を司る複数のタンパク質の輸送、局在化の制御機構、各々の相互作用等を総合的に解明することを目的とした。本年度は研究計画に則り、MMDを元来持たないキチン合成酵素であり、菌糸先端生長に必須の機能を果たすChsBの局在化機構について、CsmAとの比較を行った。キネシン破壊株におけるChsBの局在観察、キネシンとの局在部位の比較及び物理的相互作用の解析の結果、ChsBはCsmAと同様にキネシンとの相互作用により菌糸先端付近へ輸送されることが示唆された。また、CsmAとChsBの局在部位を比較したところ、菌糸先端において両者は一部近接した部位に観察されたが、ChsBが菌糸最先端部に見られるのに対し、CsmAは先端からやや後方の形質膜上に見られるという局在部位の違いも観察された。更に、両者の物理的相互作用は検出されなかった。これらの結果から、菌糸先端生長に必須の機能を担うキチン合成酵素CsmAとChsBは、共にキネシンとの相互作用を介して微小管上を菌糸先端付近へ輸送され、菌糸先端の形質膜上の一部異なる領域に局在化することが示唆された。本研究では、菌糸細胞壁の形成を司る因子群について総合的に解明することを目的としており、これまでに菌糸表層の細胞壁形成に直接的に関与し菌糸先端生長に必須のキチン合成酵素について、その輸送機構及び局在化機構を明らかにした。今後、これらのキチン合成酵素の機能因子を同定し、機能的相関や相互作用を明らかにしていくことにより、菌糸先端生長の総合的解明に大きく貢献する成果が期待される。菌糸先端生長の総合的解明の為には、先端生長に必須のキチン合成酵素CsmA及びChsBについて、酵母ツーハイブリッド法や免疫沈降法等により相互作用する因子を同定し、機能的相関の解析を行なっていくことが有効であると考えられる。また、これまでに明らかとなっている菌糸先端生長に重要な極性決定因子やアクチン細胞骨格及び微小管上の輸送に関わる因子についても、CsmAやChsBとの機能的関連を解析する必要がある。
アメリカにおけるダ-ウィニズム受容と自然主義文学に関する新歴史主義的研究

(1)ケ-ト・ショパンの「めざめ」(1899)をテクストにして自然主義とフェミニズムの関係を、文学テクストとそれと同時代の歴史資料を新歴史主義的に解釈しながら研究した。その際、自然主義文学がフェミニズムの影響をうけながら、その「動物的なもの」のイメージをどのように変容させていったかを中心に検討した。その成果が拙論「自然主義・フェミニズム・ショパン『めざめ』」である。ゾラ、ノリスのなかでは「動物的なもの」は人間のなかの犯罪性とむすびついている否定的なものにすぎなかったが、ショパンの文学のなかでは、女性の内部の「動物的なもの」はより積極的な価値をもつものとしてあつかわれている。すなわちそれは、19世紀末を支配していたいわゆる「非性欲の神話」--正常な女性のなかには官能性が存在しない--という抑圧的な女性観を否定する解放的な力として表象されているのである。(2)人間の内部にある「動物的なもの」というダ-ウィニズム的枠組み自体はフランスの自然主義と共有しながら、しかしアメリカの自然主義は19世紀から20世紀にかけてその「動物的なもの」の価値づけを徐々に転換していったようにみえる。しかしその価値づけの転換を促したのは、かならずしもフェミニズムであったわけではない。たとえば『荒野の呼び声』(1903)のジャック・ロンドンにおいても、「動物的なもの」の価値づけは180度転換しているからである。そこにはやはり無垢なる自然という、アメリカの伝統的な価値観が作用しているように思われる。フランスの自然主義がアメリカの伝統的な自然観のもとでいかなる変容を示したか--それを今後の課題としたい。