hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
多嚢胞性卵巣症候群患者に対する治療法の個別化に関する内分泌学的検討

PCOSの排卵誘発におけるメトホルミン(Met)の臨床効果について、どのような患者に効果が高いかに関して解析した。【方法】PCOS患者にインフォームドコンセントを得てMetを投与した症例を対象とした症例調査を行い、1.クロミフェン(Cl)抵抗性の患者に対するCl-Met併用療法、2.Cl抵抗性のない患者に対するCl-Met併用療法、3.第一選択としてのCl-Met併用療法、4.Met単独療法に分類して検討した。合計178症例・798周期のうち、不適例を除外し162症例・480周期を解析した。【成績】1.(80例221周期):排卵率は周期別65.1%、症例別69.9%と高率で、単一卵胞発育率も81.1%と高かった。BMI30以上の群は30未満の3群よりも妊娠率が有意に高かった。2.(57例205周期):妊娠率は周期別16.7%、症例別50.9%と高率であった。3.(7例12周期):排卵率は周期別83.3%、症例別85.7%と高率であり、単一卵胞発育率も71.4%と高率であった。4.(18例42周期):排卵率は周期別70.0%、症例別60.0%と高率であった。5.副作用は3.6%(17/472)にみられ、主に消化器系のものであった。6.妊娠例に多胎はなく(0/42)、児の奇形は3.4%(1/29、心奇形)であった。【結論】Metは、主としてCl単独で排卵が起きない症例に対して、Clとの併用療法として試みられ、一定の効果が見られている。特に肥満またはインスリン抵抗性のある患者に有用である。また、第一選択としてのMet単独療法も一定の効果が見られており、奏効が期待できる肥満またはインスリン抵抗性症例では、実施を検討する余地があると思われた。医歯薬学PCOSの病態の違いに基づく病型を分類するために必要なホルモン測定系の相違に関するデータを解析でき、また、代謝異常に基づき病型分類するために有用な因子を明らかにした。テストステロンの新測定系を用いて、PCOSの診断における新測定系の有意性を証明した。PCOSでは代謝異常とホルモン異常に関連がある一群があり、それらの群では代謝異常に目を向けた治療が病態改善に有用であると思われる。次年度には、インスリン抵抗性の改善による治療が奏効する因子について検討し、PCOS治療の個別化の指針作製を試みる。血中ホルモンの測定値の測定系間の整合性の検討(テストステロン以外):内分泌的検討の結果を一般化するために、LH、FSH、プロラクチン、エストラジオール、プロゲステロンの国内の測定系について、患者血液検体を用いて、多数の測定系で測定し、測定系間の測定値の違いを明らかにする。臨床的に問題となる相違については、多数の測定系間の測定値補正の方法を検討する。PCOS患者の生活習慣病発症リスク因子の検討:PCOS患者のBMI、血中アンドロゲン値、血中LH値、月経異常のタイプ、卵巣体積などと、HOMAーIR空腹時インスリン値、750gOGTT、血圧、血中コレステロール値等の関係を解析し、生活習慣病発症のリスク因子を検討する。日本人のPCOS患者におけるメトホルミンの治療成績の検討:アンケート結果を集計し、メトホルミンの使用方法や内分泌状態の違い等より細かく分類し治療成績を詳細に解析する。実験に失敗することも少なく、スムーズに行われたので物品購入が少なくなった為。平成25年度に予算執行しなかった140,193円を平成26年度の物品費に繰り入れ、試薬などの購入に充てる。該当なし
戦後日本におけるアブノーマルなセクシュアリティと近代化/反近代化論

本研究はこれまで研究対象とされてこなかったアブノーマル性風俗雑誌『奇譚クラブ』の1950年代のテクスト群を主たる分析対象とし、サドマゾヒズムを媒介とすることで行われた近代化論・反近代化論の展開を明らかにすることを目的とする。本年度は、研究実施計画に基づき、第2の課題に関する検討を進めた。年度前半は前年度に収集した『あまとりあ』、『生心リポート』、『夫婦生活』、「キンゼイ報告」に言及する雑誌記事等と、ヨーロッパ精神医学の動向を照らし合わせ分析を行なった。来年度は本成果を論文として取りまとめる予定である。次に、これまでに明らかにした村上信彦によるサディズム論が、1980年代以降米国で展開したフェミニスト・セックス戦争におけるいくつかの論点を大幅に先取りしていることを踏まえ、米国で最も大きな争点の1つであった女性のマゾヒズムについて、村上がいかに論じているのかを検討し、その議論に対するマゾヒストからの批判を分析した。論文としてとりまとめ、現在査読の過程上にある。上記の検討から、村上は愛好当事者でありながら、サディズムを野蛮な原始本能、女性のマゾヒズムを抑圧によって生じた病とみており、サディズム・女性のマゾヒズムがいずれも前近代性と結びついていたことが明らかになった。サディズムとマゾヒズムはフロイト学説以降しばしば一対の概念とみなされてきたが、戦後日本においては全く起源の異なるものと理解されていた。とするならば、加害行為ではなく、封建制の残滓でもない男性のマゾヒズムは、これらとは根本的に異なる概念であったと考えられる。そこで次に、戦後の男性にとって、マゾヒズム概念とはいかなる役割を果たしていたのかという点について、沼正三「家畜人ヤプー」の分析を通じて検討した。本成果は論文集の1章として執筆し、現在印刷中である。研究実施計画通りに研究を進展させることができたため。今後も研究実施計画に基づき、研究を進めていく予定である。来年度は、前半においてはドイツ国・ベルリンにおける現代BDSMカルチャーのフィールドワークを行ないつつ、前年度の成果を論文として執筆する。後半は、日本において資料を調査し、フィールドワークの成果とあわせて論文としてとりまとめる。本研究はこれまで研究対象とされてこなかったアブノーマル性風俗雑誌『奇譚クラブ』の1950年代のテクスト群を主たる分析対象とし、第一に、サドマゾヒズムを媒介とすることで行われた近代的人間の特異な模索報を明らかにし、第二に、1954年に起こったビキニ事件を画期として誌上に現れる、核と人種論、マゾヒズムが結びついた反近代化論の展開を明らかにすることを目的とする。本年度は、研究実施計画に基づき、第一の課題に関する資料の網羅的収集・検討を行なった。年度前半は国立国会図書館、風俗資料館、古書店等、国内を中心に、『奇譚クラブ』と同時代の性風俗雑誌や雑誌記事を収集、ほぼこれを完了した(『あまとりあ』、『生心リポート』、『夫婦生活』、「キンゼイ報告」に言及する雑誌記事等)。これによって、当該期の性風俗雑誌それぞれの位置関係、及び性科学・精神医学との関連の強弱を把握することができた。すなわち、今回収集した雑誌は、戦前に流行した通俗性欲学の流れを汲み、性科学や精神分析・精神医学に依拠する度合いが極めて高いが、『奇譚クラブ』ではこのような態度は見られない。『奇譚クラブ』の誌面構成は他の風俗雑誌と比較して独特であり、むしろ文芸批評誌と構成・読者層ともに相似するが、同形式の性風俗雑誌は『奇譚クラブ』の他に発見することができなかった。以上のことから、『奇譚クラブ』が極めて独自性の強い貴重な雑誌であることが明らかになるとともに、当時の文壇・文学運動との結びつきが示唆された。年度後半は、ドイツにてマグヌス・ヒルシュフェルト、リヒャルト・フォン・クラフト=エビングら、日本に大きな影響力を持った性科学、精神医学者の文献収集に入った。来年度以降も継続して収集・検討を進める予定である。

サディズムとマゾヒズムはフロイト学説以降しばしば一対の概念とみなされてきたが、戦後日本においては全く起源の異なるものと理解されていた。とするならば、加害行為ではなく、封建制の残滓でもない男性のマゾヒズムは、これらとは根本的に異なる概念であったと考えられる。そこで次に、戦後の男性にとって、マゾヒズム概念とはいかなる役割を果たしていたのかという点について、沼正三「家畜人ヤプー」の分析を通じて検討した。本成果は論文集の1章として執筆し、現在印刷中である。研究実施計画通りに研究を進展させることができたため。今後も研究実施計画に基づき、研究を進めていく予定である。来年度は、本年度収集した資料の検討に基づき、論文2本の執筆・1度の学会発表を予定している。引き続き国外における資料収集・検討を実施するとともに、第二の課題の検討に入っていく。来年度は、前半においてはドイツ国・ベルリンにおける現代BDSMカルチャーのフィールドワークを行ないつつ、前年度の成果を論文として執筆する。後半は、日本において資料を調査し、フィールドワークの成果とあわせて論文としてとりまとめる。
超弦理論によるクォーク・グルーオン・プラズマの物理

本研究では、超弦理論のAdS/CFT双対性をクォーク・グルーオン・プラズマや強相関の物性系といった現実の物理系へと応用した。これらの系では強結合の物理の理解が必須であるために、理論的な計算はこれまで困難であった。AdS/CFT双対性によると、強結合の場の理論はブラックホールと等価だとされ、ブラックホールによるこれらの物理の解析の可能性が開かれた。本研究では、特に(1)因果的流体力学の解析、(2)二次相転移点での臨界現象の解析、(3)強結合超伝導系への応用について成果をあげた。本研究では、AdS/CFT双対性を現実の物理系へ応用することを目的としている。特に、クォーク・グルーオン・プラズマ(QGP)や強相関の物性系といった応用を扱っている。超弦理論のAdS/CFT双対性によると、強結合の場の理論はブラックホールと等価だとされ、ブラックホールによるこれらの物理の解析の可能性が開かれた。本年度は主に以下のテーマで研究をおこなった:1)因果的流体力学の解析QGPの解析では、通常の流体力学ではなく「因果的流体力学」を使う必要性が示唆されている。この場合、新たな輸送係数が現れることが知られているが、これらの輸送係数を強結合のゲージ理論の立場から計算することは著しく困難である。そこで、ブラックホールの立場からこれらの輸送係数を求めた。特に着目したのは一般的な傾向・特徴である。このため、該当する輸送係数を様々なブラックホール(様々なゲージ理論)で系統的に見積もった。これらの係数について得られた一般的な知見は、実験結果の解釈や近年行われているQGPの流体力学シミュレーションでも有用だと思われる。2)動的臨界現象の解析AdS/CFTを使い、二次相転移点での臨界現象の解析をはじめた。QCDの相転移は一般に二次相転移ではないが、臨界端点が存在する。また、AdS/CFTを使った物性系の解析でも、臨界現象の研究は注目を集めている。我々は二次相転移を起こすある種のブラックホールを使い、静的臨界指数や動的臨界指数を求め、それらが通常の臨界現象の理論通りの振るまいをすることを確かめた(van Hove臨界緩和理論など)。ブラックホールが動的臨界現象という観点から調べられたのは、本研究がはじめてである。ただし、現時点では完全な解析は終了しておらず次年度以降もとり組む予定である。本研究では、AdS/CFT双対性をクォーク・グルーオン・プラズマ(QGP)や強相関の物性系といった現実の物理系へ応用することを目的としている。本年度は、AdS/CFT双対性にあらわれるブラックホールの一種、ホログラフィック超伝導を主に調べた。これは、一種の超伝導をあらわす系と考えられている。とくに以下のテーマで研究をおこなった:1.ホログラフィック超伝導の臨界現象このブラックホールは二次相転移を起こすため、相転移近傍での臨界現象を調べた。静的臨界現象の場合、通常のギンツブルグ-ランダウ理論と同じ静的臨界指数をもつことを示した。また、動的臨界現象では、そのユニバーサリティ・クラスがHohenberg-Halperinの分類でモデルAであることを示した。この研究は昨年度のブラックホールの臨界現象の研究を下敷きしたものであるが、昨年度とは違うユニバーサリティ・クラスのブラックホールを調べたという意味で興味深い。2.ホログラフィック超伝導での渦糸解の構成超伝導体は、磁場への反応の違いによって第I種と第II種に分けられるが、第II超伝導では、全体として超伝導状態を保ちつつ磁気侵入が起こる。この磁気侵入は渦糸の生成という形で起こる。ホログラフィック超伝導は第II種超伝導であるため、このモデルでアブリコソフ渦糸格子を構成した。さらに、ギンツブルグーランダウ理論同様、三角格子がもっとも安定な配位であることを示した。本研究では、超弦理論のAdS/CFT双対性をQCDや強相関の物性系へ応用することを目的としている。本年度は主に以下のテーマで研究をおこなった。

1)ホログラフィック超伝導の物理昨年度に引き続き、AdS/CFT双対性にあらわれるブラックホールの一種、ホログラフィック超伝導の物理を調べた。これは、一種の超伝導/超流動をあらわす系である。昨年度、このモデルで磁場をかけたときに渦糸ができることを示したが、電磁場のもとでの渦糸の運動を調べた。またAdS/CFTで調べられている系では、ずり粘性率とエントロピー密度の比は強結合で普遍的な値を持つことが知られているが、ホログラフィック超伝導に対してこのずり粘性率を調べた。ホログラフィック超伝導でも普遍的な値を持ち、常流動相でも超流動相でも同じ値になることが判明した。ただし、一部のホログラフィック超伝導ではこの結果が成り立たないこともわかった。2)ゲージ理論における動的臨界現象QCDの相図には、二次相転移を起こす臨界端点が存在すると考えられ、理論的にも実験的にも大きな注目を集めている。臨界点では様々な物理量が特異的な振る舞いをするが、QCDの場合、動的にはHohenberg-Halperinの分類でモデルHと呼ばれる振る舞いとされている。我々はAdS/CFTを使い、改めてこの問題を調べた。ラージ-Nc SU(Nc)ゲージ理論では、モデルHの効果は1/Nc^2で抑えられることが判明した。このため、モデルHの効果は実際の重イオン実験では観測が難しいものと考えられる。
ホスホリルコリンに対する粘膜免疫応答と動脈硬化との関連性

経鼻免疫法による分泌液中への抗体産生を調べたところ、PC-KLHで免役されたマウスの血清および粘膜分泌液中の抗体価はLPSを同時投与することにより上昇した。LPSはCTの代わりの粘膜アジュバントとして使用可能であることを明らかにした。また、疫学的調査より、血中IgM抗PC抗体は動脈硬化リスクの低下と関連しているが、同リスクを分析するにあたり、歯周疾患の有無を考慮する必要があることが分かった。具体的には、血清および鼻腔洗浄液中のIgM、IgGおよびIgAアイソタイプ抗PC抗体はともに上昇し、唾液中においてはIgA抗PC抗体のみ上昇を示した。LPSによる抗体産生量はCTと同程度であり、これはAFCs数の増加より細胞レベルでも確認することができた。粘膜アジュバントとしてのLPSの潜在性を異なるハプテンモデル(TNP-KLH免疫)で証明することができ、LPSはCTの代わりの粘膜アジュバントとして使用可能であることを明らかにした。長崎県五島市で実施された特定健康診査において採取した血漿と唾液を前年度に確立したELISA測定系に用いた。動脈硬化リスクと血中および唾液中のアイソタイプ別抗PC抗体との関連性を検討した結果,血中のIgM抗PC抗体価の上昇が動脈硬化リスクの低下と関連することが示された。また、歯周健常群では,血中IgM抗PC抗体価が動脈硬化リスクの低下と有意に関連することが示唆された。歯周疾患群でも,統計学的に有意ではないが血中IgM抗PC抗体価の上昇が動脈硬化リスクの低下と関連する傾向が,さらに唾液中IgA抗PC抗体価の上昇が動脈硬化リスクの上昇と関連する傾向にあることが示唆された。血中IgM抗PC抗体は動脈硬化リスクの低下と関連しているが,血中および唾液中の抗PC抗体の動脈硬化リスクへの影響を分析するにあたり,歯周疾患の有無という背景因子を考慮する必要があると考えられる。経鼻免疫法による分泌液中への抗体産生を調べたところ、TNP-KLHで免疫されたマウスの鼻腔洗浄液、および唾液中のTNP特異的IgAとIgG抗体のレベルはPC-KLH免疫されたマウスのPC特異的抗体よりも高い傾向が認められた。対照的にPC免疫されたマウスの鼻腔洗浄液中のIgM抗体のレベルはTNP免疫されたマウスのそれよりも高い値を示した。一方、全身性の免疫応答については、血清中の抗原特異的抗体を測定することにより調べた。PC-KLHの免疫により抗原特異的抗体レベルの増加の程度はTNP-KLHを免疫したときよりも大きくなる傾向が見られ、特にIgM抗体でその傾向は顕著であった。マウスはTNPと同程度のPCに対する応答性を持っていることが示された。PCは自己細胞や環境中に常在する物質であり、ワクチン接種前の何らかの自然感作の可能性を想定していたが、以上の結果はSPFとはいえ無菌・無抗原状態ではない正常マウスがPCに対する免疫記憶あるいは免疫寛容のいずれの感作も受けていないことを示唆している。ヒトの体液中のPC特異的抗体を測定するためにPC-BSA共有結合物を固相化抗原とするELISA法を試みたところ、キャリアタンパクであるBSAに対する抗体を少なからぬ割合のヒトがかなりの程度の濃度で保有することが明らかになった。そこでPC-BSAを固相化抗原とする測定系と同時に並行してBSAのみを固相化抗原とする測定を行い、抗PC-BSA活性から抗BSA活性を減算することによってPC特異的な抗体活性を測定することが可能となった。これにより各試料中の抗PC-IgA、IgGおよびIgM抗体価測定のための、ヒトのPC特異的抗体のELISA測定系を確立することができた。口腔内に生息するPC抗原陽性細菌の粘膜感作を想定し、抗原決定基(ハプテン:TNPやPC)とLPS、CTなどのアジュバント性物質が別の分子から供給される感作形態を設定し、C57BL6マウスを感作した時に誘導される、全身性と粘膜系の免疫現象に関する実験を行った。正常マウスはTNPと同程度のPCに対する応答性を示すことが明らかになった。計画時点ではPCは自己細胞や環境中に常在する物質であるのでワクチン接種前の何らかの自然感作の可能性を想定していたが、今回の結果は無菌・無抗原状態ではない正常マウスがPCに対する免疫記憶あるいは免疫寛容のいずれの感作も受けていないことを示唆した。むしろ、鼻腔洗浄液中IgM抗体や血清中の全アイソタイプの抗体の増加度が、TNPよりもPCに対して強く誘導されるという結果はワクチンを投与されない正常マウスがPCに対して免疫学的にナイーブであることを支持している。

抗PC-BSA活性から抗BSA活性を減算することによってPC特異的な抗体活性を測定することが可能となり、各試料中の抗PC-IgA、IgGおよびIgM抗体価測定のための、ヒトのPC特異的抗体のELISA測定系を確立することができた。測定系の確立という目的は達成したと言える。初年度の結果に基いて動物実験において引き続き、抗原投与経路、抗原量、物質形態、宿主側の遺伝要因、応答を担うリンパ球亜群のタイプやサイトカイン群等の詳細について理解を深めるとともに、疫学的研究を遂行して、ヒトの抗PC免疫応答の存在と実態を探る予定である。最終的に両者から得られた知見を統合し、PC対する免疫応答の調節に対する口腔細菌の影響を明らかにする。ヒトサンプルの抗PC抗体測定について、当該専門技術を有する口腔科学教育部大学院生の研究補助を求めて、代表者の指導の下で遂行する。初年度に引き続いて動物実験を行うため、再測定用の各種のモノクローナル抗体を含む免疫研究試薬群、細胞培養用試薬、一般試薬、実験動物および飼料の購入代金として物品費を使用する予定である。旅費に関しては、国内および海外の研究動向を積極的に調査するために得られた成果を海外の学会で発表して、国際共同研究への展開を目指した討議を行っていく考えであり、そのための外国旅費として使用する予定である。また博士課程大学院生との継続的な研究協力体制下に実施する計画であるため、謝金等にも研究費を使用する予定である。繰越金は次年度の物品費にて使用する予定である。
骨の微小環境を利用したスキャフォールドによるiPS細胞の骨芽細胞への分化誘導促進

本研究では,骨の無機質の構造を微小環境としてスキャフォールドに導入することで,iPS細胞の骨芽細胞への分化を促進できると考えた.溶解析出型相変換を利用して,連続気孔を有するカーボネイトアパタイトスキャフォールドを作製した.カーボネイトアパタイト上で培養した間葉系幹細胞が骨芽細胞へ分化することが明らかとなった.また,BMPと複合化したカーボネイトアパタイトがラット背部皮下で異所性に骨を形成することが明らかとなった.iPS細胞の骨芽細胞へ分化誘導効率を改善するために,iPS細胞を一度間葉系幹細胞へ分化させ,このiPS細胞由来の間葉系幹細胞を骨芽細胞へ分化させた.本研究では,骨の無機質の構造を微小環境としてスキャフォールドに導入することで,iPS細胞の骨芽細胞への分化を促進できると考えた.溶解析出型相変換を利用して,連続気孔を有するカーボネイトアパタイトスキャフォールドを作製した.カーボネイトアパタイト上で培養した間葉系幹細胞が骨芽細胞へ分化することが明らかとなった.また,BMPと複合化したカーボネイトアパタイトがラット背部皮下で異所性に骨を形成することが明らかとなった.iPS細胞の骨芽細胞へ分化誘導効率を改善するために,iPS細胞を一度間葉系幹細胞へ分化させ,このiPS細胞由来の間葉系幹細胞を骨芽細胞へ分化させた.iPS細胞はあらゆる細胞に分化できるが、効率の良い骨芽細胞への分化誘導法は開発されていない。そこで、iPS細胞の分化誘導のために再生医療において重要なファクターであるスキャフォールド(SF)を利用し、骨芽細胞を効率的に誘導することを考えた。本年度は、まずiPS細胞の維持培養を確立し、骨芽細胞への分化誘導を確認するとともに、スキャフォールドとして、カーボネイトアパタイト(CAp)を用い、in vitroで骨芽細胞への分化が誘導されるか検討した。ヒトiPS細胞(253G1)は理化学研究所から購入した。マウス胚線維芽細胞(MEF)をフィーダーとして培養し、iPS細胞の未分化能を確認した。また、in vivoへの応用のため、iPS細胞のフィーダレス培養を行い、未分化能を確認することができた。さらに、フィーダーフリーで培養したiPS細胞を骨分化誘導培地で3週間培養し、骨芽細胞への分化誘導を検討したところ、アリザリンレッド染色により少量の石灰化ノジュールが確認された。続いて、iPS細胞をCAp顆粒を含有した骨分化誘導培地で培養し、培養を試みたが、細胞増殖は抑制された。しかしながら、一部のiPS細胞は顆粒に接着し、骨芽細胞樣の細胞が誘導されていた。また、CApディスクを作製した。Ca(OH)2粉末を用いて、同様に成型し、室温でCO2ガスを流通させて炭酸化を図り、その後、Na2HPO4水溶液中で60°C、14日間放置してリン酸化を行い、CApディスクを作成することができた。iPS細胞はあらゆる細胞への分化能を有する細胞であるが,効率の良い骨芽細胞への分化誘導法は開発されていない.これまでのiPS細胞の分化誘導研究は誘導因子によるものであり,再生医療において重要なファクターであるスキャフォールドに関する研究はほとんどない.申請者らは,骨の無機質の構造を微小環境としてスキャフォールドに導入すれば,iPS細胞を効率よく骨芽細胞へと分化させることができると考え,昨年度,iPS細胞とCAp顆粒を混合して骨分化誘導培地で培養し,一部の細胞がCAp顆粒に接着して骨芽細胞様の細胞が誘導されたことを確認した.本年度は,効率よく骨芽細胞への分化誘導を行うために,iPS細胞の間葉系幹細胞への分化誘導法を検討し,さらに,連通気孔を有するCApスキャフォールドを作製した.iPS細胞の間葉系幹細胞への分化誘導:コンフルエントに達したiPS細胞をペトリディッシュ上に播種し,形成された胚様体を細胞培養用ディッシュに移して10-6 Mのレチノイン酸を加えたDMEM-10% FCSで培養した.8日後に,全細胞を回収し,ゼラチンコートした細胞培養用ディッシュで1時間培養し,接着細胞を血清低減培養液に10ng/ml bFGFを加えた間葉系間細胞用培地で継代培養し,iPS細胞由来の間葉系幹細胞を得た.多孔質のポリウレタンフォームをα-TCP懸濁液に浸漬乾燥させてウレタン骨格にα-TCPを付着させた後,焼成することで,α-TCPの焼結とウレタンフォームの焼却を同時に行って,連通気口を有するα-TCPフォームを調製した.このα-TCPフォームを炭酸塩水溶液中で水熱処理することで溶解析出型の相変換反応を行って,連通気孔を有するCApフォームを作製した. X線回折装置およびフーリエ変換赤外分光光度計の分析から,作製したCApフォームは低結晶性のCO3-APであることが明らかとなった.医歯薬学iPS細胞とアパタイト顆粒を用いて細胞分化誘導を試みたが、細胞増殖が抑制される傾向があったため、予想通りの骨芽細胞分化誘導を得ることができなかった。アパタイト顆粒によってpHが変化したこと、またアパタイト顆粒が細胞培養時に可動性を有し、物理的に細胞接着、細胞増殖を抑制したためと考えられる。まずは、in vitroでiPS細胞とアパタイト顆粒を用いた細胞分化誘導を再度行う。

今年度、細胞増殖が抑制される傾向があったため、物理的な抑制を排除するため、アパタイトディスクを用いて再度検討を行う。続いて、多孔質のポリウレタンフォームを用いて連通気孔を有するα-TCPフォームを調製し、さらに、炭酸塩水溶液中で水熱処理することにより溶解-析出型の相変換反応を行い、形態を保ったまま組成をCApに変換し、連通気孔を有するCApスキャフォールドを作成する。この多孔性を有するスキャフォールドを用い、in vitroで骨芽細胞への分化誘導を検討するとともに、そのスキャフォールド内で培養したiPS細胞を用いてヌードマウスの皮下に移植することでin vivoで骨再生能を検討し、マイクロCTおよび組織学的評価を行う。iPS細胞培養のための試薬購入が当初の予定より少なかったため。次年度は、動物へのin vivo応用のため、iPS細胞を大量培養する必要があり、試薬および培養器具を追加で購入する予定である。
肝臓と肝リンパにおける樹状細胞のダイナミックス

1.肝間質性樹状細胞の動態:定常状態では23週間で肝臓を去り、肝リンパから肝所属リンパ節へ遊走し、T細胞領域に集積する(発表論文1番目)。2.前駆細胞の肝内リクルートの解析:ラット前駆細胞はラテックスを静注後12時間で肝臓に集積する(発表論文2番目)。また、マウスで細菌(P. acnes死菌)投与によっても数時間で血中に前駆細胞が多数出現し、肝臓に集積する(発表論文4、8番目)。3.生体肝における樹状細胞の類洞・リンパ転位経路の解明:ホストラットに静脈投与後、樹状細胞はすぐに肝臓内の門脈終枝領域に出現し、小葉辺縁部の類洞内でクッパー細胞と結合・集積し、その後類洞血管外に出る(発表論文2番目および発表図書)。4.クツパー細胞との相互作用の解析:ラットの樹状細胞および、前駆細胞がin vivoおよびin vitroで、クッパー細胞にN-acetylgalactosamine (GalNAc)レクチンとGa1NAc/galactose特異的糖鎖を介して選択的に結合する(発表論文2、3番目)。5.肝内祖樹状細胞:幼弱な樹状細胞が、異系ラット肝移植後にホストの全身のリンパ組織に遊走し、上記のロゼットを形成する(投稿準備中)。6.肝樹状細胞のリンパ組織における抗原提示:異系ラットに静脈内樹状細胞投与または、心移植をおこなうと、ドナー由来樹状細胞は肝リンパ節でDNA合成を開始したホストのT細胞(Tリンパ芽球)とクラスター(ロゼット)を形成し、このロゼットのなかでホストの免疫応答(T細胞増殖性応答)が始まった(発表論文5、6番目)。本研究から、肝の樹状細胞システムは機動性と免疫系との綿密な連関を持っており、血行性の抗原に対する全身性防御に与ることが明らかになった。(1)肝間質性樹状細胞の動態(肝内分布とターンオーバー)定常状態では前駆細胞が骨髄から血行性にコンスタントに供給され、見張り番のInterstitial DCとして主にグリソン鞘の門脈領域などの肝臓間質に分布する。抗原刺激がない場合でも23週間で肝臓を去り、肝リンパから肝所属リンパ節へ遊走し、T細胞領域に集積することがわかった(発表論文1番目)。(2)生体肝における血液由来樹状細胞の類洞・リンパ転位経路の解明ホストラットに静脈投与後、樹状細胞はすぐに肝臓内の門脈終枝領域に出現し、小葉辺縁部の類洞内でクッパー細胞と付着・集積し、その後類洞血管外に出る。一方、リポゾーム投与によりクッパー細胞を除去したホストでは、樹状細胞の肝内集積は見られなくなることまでわかった(第6回樹状細胞国際シンポジウムで発表)。また、心移植の系でも移植心由来の樹状細胞がこの経路をとることが明らかになった(発表論文4番目)。(3)クッパー細胞との相互作用の解析樹状細胞とクッパー細胞の接着にはN-acetylgalactosamine特異的なレクチン様レセプター分子が関与していることを証明した(発表論文3番目)。(4)前駆細胞の肝内リクルートの解析ラット前駆細胞が内毒素を静注後12時間で肝臓に集積することが明らかになった(投稿中)。また、マウスで細菌(P.acnes死菌)投与によっても数時間で血中に前駆細胞が多数出現し、肝臓に集積することを証明した(発表論文4番目)。目的(3)クッパー細胞との相互作用:ラットの樹状細胞および、前駆細胞がin vivoおよびin vitroで、クッパー細胞にN-acetylgalactosamine (GalNAc)糖鎖を介して選択的に結合することがわかった。

さらに免疫染色とRT-PCRにより本細胞がGalNAc特異的マクロファージレクチンの蛋白とmRNAを保有することが証明された。以上から、樹状細胞の肝臓へのリクルート・集積は、樹状細胞とクッパー細胞の結合によって起こることが証明された。さらに、この結合は樹状細胞のGalNAc/galactose特異的レクチンを介したものであること、このレクチンが接着分子として使われるのみならず、GalNAc糖鎖抗原を摂取するための受容体としても働くことが強く示唆された(発表論文1、2番目)。目的(4)前駆細胞の肝内リクルート:ラット前駆細胞がラッテクスを静注後12時間で肝臓に集積することが明らかになった(発表論文2番目)。目的(6)肝樹状細胞のリンパ組織における抗原提示:異系ラットに肝樹状細胞を静脈内投与すると、肝リンパ節のT細胞領域に選択的に遊走した。本細胞はDNA合成を開始したホストのT細胞(Tリンパ芽球)とクラスター(ロゼット)を形成し、このロゼットのなかでホストの免疫応答(T細胞増殖性応答)が始まった。(発表論文3、4番目および発表図書)。目的(5)肝内祖樹状細胞:幼弱な樹状細胞が、異系ラット肝移植後にホストの全身のリンパ組織に遊走し、上記のロゼットを形成することがわかった(投稿準備中)。
高齢者の権利保護をめぐる諸問題

平成9年度から平成11年度にかけて、我々は科学研究費補助金(基盤研究c2)の支給を受け、その支援の下に3年間に行うことのできた研究成果は次の通りである。なおここでの成果は、共同研究によるものを中心として、個人的なものは割愛した。著書としては、「老を考える」(関西大学出版部)、「高齢者の権利保護をめぐる諸問題-成年後見制度を考える-」(関西大学法学研究所)、「成年障害者の支援システム」(関西大学法学研究所)の三冊を刊行した。紙数の関係で祥述はできないので、それらの目次を挙げてみると、『老を考える』では、「老いと健康」「高齢者のメンタルヘルス」「高齢社会と社会的ケアシステム」「家族制度と高齢者」「高齢者の賦産管理」「相続財産と法」である。『高齢者の権利保護をめぐる諸問題』では、「成年後見制度-現状からフレームワーク構築へ」「成年後見制度における日常生活支援の効果判定方法」「高齢者と世話人」「成年後見制度を考えるにあたって」「遺言者の意思能力の判定に関する判例研究」「成年後見における法人の役割」等である。『成年障害者の支援システム』では「成年後見制度理解のための医学的基礎」「成年後見制度の改正に関する要網案の検討-精神医学の立場から-」「在宅医療における家族介護者のQOLへの影響」「イタリアの地域精神医療」「フランス成年後見制度調査報告」「ドイツ世話法改正について」「成年後見制度改正要網案について(後見・保佐;補助、任意後見に分けて)」等である。書物の他にも、公開講座において市民の方々に3回発表を行った。「成年後見制度と意思能力」「高齢社会と成年後見制度」「高齢者の権利擁護-新しい成年後見制度をめぐって-」である。ここに報告した研究成果が何らかの形で、社会に役立ち得ることがあることを期待して報告を終ります。我々の研究グループは、関西大学法学部教授3名、社会学部教授2名を研究分担者とするものであり、法学部教員は民法学を、社会学部教員は老人福祉、精神医学を専攻とするものである。今日高齢化社会を迎え、あらゆる場面において検討すべき課題は多いが、我々は、高齢者を中心として痴呆・アルツハイマー症状のあれ人々の権利擁護の立場から現行法制度の検討及び改正を必要とする場合には、その立法的考察をも検討すべく研究する。平成9年度科学研究費補助金の交付を受け、資料、備品等が補われ各研究員の個別研究及び共同研究も大いに進捗することができた。まず、松原研究員が、9月にブラジル国で開催された国際社会福祉学会において、日本の成年後見制度の論議についての報告を行なった。また、研究員一同、高齢者の尊厳と人権を守る施設運営を先進的に取り入れていると評判の、函館にある特別養護老人ホーム「旭ヶ丘の家」に赴き副園長を始め職員の方々より、取り組みの実際の教示を受けた。入所されている人々の財産のパソコンを利用した管理など参考となる面が多くあった。研究会においては、各人の専門分野との関連で、各自それぞれにおいて研究した事柄を報告し合い討議を重ねてきた。その成果を発表しようとしているものが、関西大学法学研究所叢書第16冊である。順次テーマのみを紹介すると、國府研究員「成年後見制度を考えるにあたって」、飯田研究員「キャンバーウエル要求度評価尺度-成年後見制度における日常生活支援の効果判定方法」、千籐研究員「高齢者の遺言能力の有無に関する総合判例研究」、月岡研究員「高齢者と世話人(法定後見人)ドイツの先例から視た世話人の選任、職務権限等について-」、松原研究員「成年後見制度-現状からフレームワーク構築へ-」などである。

他に協力研究員の論文、招聘研究者を囲んでの拡大研究会の討論を登載する。平成10年度の前半は、平成10年4月10日、在仏日本領事館員(マルセイユ)の方より「フランスにおける成年後見制度」について講義を受け、日本の成年後見制との関係を研究した。その後3月に出版した「高齢者の権利保護をめぐる諸問題-成年後見を考える」を素材として討論・研究を行った。一方で、我々は教員でもあるので、その研究成果を学生諸君に還元すべく、大学の教養科目にある総合コースに「老いを考える」という科目を開設していただき、〈豊かな老い〉〈健やかな老い〉というサブ・テーマの下に、前・後期各2単位で講義した。それとともに、法制審議会で審議中であった「成年後見制度に関する民法改正の要綱試案」についての検討を行い、法務省民事局参事官室へ意見書を提出した。夏季は、各自研究するとともに海外の成年後見制度の調査研究を行った。飯田紀彦研究員は、ロンドンでの医学大会で成年後見に関連した報告を行った。後期から現在にかけては、成年後見制度に関する民法改正に向けて、法制審議会が要綱案を発表しているので、それの検討を行っている。その成果の一環として、法学研究所主催の公開講座で、「高齢化社会と成年後見」というテーマで、松原一郎研究員が講演を行い好評を博した。他方では、この改正法が成立した場合の多方面に及ぼす影響等についても検討する必要があり、まず地方自治体における取り組みの聞き取り調査を行った。例えば、こうべ市福祉振興会福祉部安心サポート課の係長より「権利擁護センターの立ち上げに至るまで」の話を聞くなどして実務上の問題点を理解すべく努めた。今年度も基本的には、各自の専門分野の研究を通して行って来ましたが,年間11回の研究会と1回の現代法セミナーを開催した。研究員の1人は国際大会でも報告を行った。また、内外のゲストを招き討議を行った。主なものを略説すると次の通りである。(1)法学研究所主催の「現代法セミナー」を実施。平成11年6月19日午後1時5時30分。月岡研究員の司会・進行の下に行い,國府研究員より「新しい成年後見制度の概要」の報告の後,池田弁護士より「自律的自己決定とアドボケイト」,折田特別養護老人ホーム施設長から「高齢者の権利擁護の側に立ち得る人は誰か」,野村大阪後見支援センター所長代理から「成年後見制度を支えるために-相談機関を通して-」との報告があり、引き続いて飯田・千藤・松原の各研究員より,コメンテーターとしての発言がなされた。この報告書は,法学研究所発行の「ノモス」に登載予定です。(2)平成11年度夏季調査研究として、平成11年8月31日9月2日大分県社会福祉法人「太陽の家」を訪問見学。常務理事と懇談し,施設の実態・運営方法等を尋ねる.また国東半島にある養護施設をも見学。寮長と設立の目的や現状を尋ねる。(3)在日のMrs Mcleod氏より「カナダ(アルバータ州)での成年後見について」の話を聞く。自己の体験を通して、成年後見人の実態の報告であつた。
ブドウに含まれるI型アレルギー抗原の同定・精製

1.ブドウ果実をすりつぶして得た果汁でスクラッチテストを施行し、陽性反応を得た.このことより,当該患者におけるI型アレルギー抗原はブドウ果実中に確実に存在することが知れた.2.市販のブドウジュースについて検討したところ,あるメーカーのもの(ブドウ果汁を約10%含む)でスクラッチテスト陽性が得られた.このジュースを孔径0.02mumのミリポアフィルターで濾過し、その濾液でスクラッチテストを施行したところ,陽性反応が得られた.このことより,当該患者におけるI型アレルギー抗原がこのジュースの中に確実に存在することが知れ、さらに抗原はこのジュースの可溶成分に含まれると考えられた.以上のことから,このジュースを当研究の原料として適当なものであると判断した.3.現在,抗原精製に足る量のこのジュースを購入し,濾過・濃縮等・抗原の準備を進めている.1.ブドウ果実をすりつぶして得た果汁でスクラッチテストを施行し、陽性反応を得た.このことより,当該患者におけるI型アレルギー抗原はブドウ果実中に確実に存在することが知れた.2.市販のブドウジュースについて検討したところ,あるメーカーのもの(ブドウ果汁を約10%含む)でスクラッチテスト陽性が得られた.このジュースを孔径0.02mumのミリポアフィルターで濾過し、その濾液でスクラッチテストを施行したところ,陽性反応が得られた.このことより,当該患者におけるI型アレルギー抗原がこのジュースの中に確実に存在することが知れ、さらに抗原はこのジュースの可溶成分に含まれると考えられた.以上のことから,このジュースを当研究の原料として適当なものであると判断した.3.現在,抗原精製に足る量のこのジュースを購入し,濾過・濃縮等・抗原の準備を進めている.
IgEトランスジェニックマウスを用いてのアレルギー慢性化過程の解明

アレルギー疾患の1つの困難性はその慢性化にある。その慢性化過程を理解するため本研究では、高IgE血症ということに着目して解析した。手段としては、私達が樹立した化学物質ハプテンTNP(trinitrophenol)と卵白アルブミン(OVA:ovalbumin)に対するIgEのトランスジェニックマウスを用いた。2つのトランスジェニックマウスともに3050μg/mlのIgEを血中に産生し抗原の静注により全身性のアナフィラキシー反応を示した。また、トランスジェニックマウスでは高IgE血症に伴うIgEの高親和性レセプターFcεRIの発現上昇が見られた。マスト細胞の抗原に対する反応性はFcεRIの発現上昇とともに増加することが報告され、このIgE依存性FcεRIの発現上昇の機構の理解はアレルギー患者の病態、さらに治療に重要と考えられている。細胞膜表面のFcεRIの半減期を調べたところ、IgEの結合していないFcεRIは速やかに消失するのに対し、IgEの結合しているFcεRIは細胞膜表面で安定していることが判明した。IgEがFcεRIに結合することでFcεRIを安定すると考えられる。さらに、私たちが樹立した2つのIgEトランスジェニックマウスを皮膚炎及び喘息の疾患モデルとして確立した。TNP・IgEトランスジゥニックマウスでは皮膚への抗原感作によりアレルギー性浮腫が即時相、遅発相に加え非常に強い第3相が数日後に観察された。この反応が慢性化にともないどのようになるか検討しているところである。また、OVA・IgEトランスジェニックマウスではT細胞が免疫されていなくともOVAの3日間連続の暴露だけで喘息の即時相を誘発することができた。喘息におけるIgE依存姓のアレルギー反応を解析する上でよい系と考えられる。慢性アトピー患者では、血中IgE上昇に伴うFcεRIの発現上昇が知られている。我々は、アトピー慢性化機構の解明の第一歩として、IgE、FcεRIの関係を我々の樹立した抗TNP-IgEトランスジェニックマウスを用いて解析した。このIgEトランスジェニックマウスはIgEを血清中に3050μg/mlと通常マウスの数百倍産生していた。IgEトランスジェニックマウスでのマスト細胞上のFcεRI数を解析すると通常マウスの5倍、IgEの全くないB細胞欠損マウス(μm-/-)の30倍も上昇していた。次にIgEの結合しているFcεRIの割合を求めると、通常マウスでも90%近いFcεRIがポリクローナルなIgEによって覆われていた。一方、IgEトランスジェニックマウスではほぼ100%のFcεRIがIgEで覆われていた。この高IgEによるFcεRIの発現上昇が速やかに起こるかをB細胞欠損マウス及び通常マウスに1度だけ300μgのIgEを注射し確かめた。正常マウスでは3日後に2倍、B細胞欠損マウスでは16倍のFcεRI上昇が認められた。このIgEによるFcεRIの発現上昇の生理的な意味を知るために通常マウスとIgEトランスジェニックマウスを抗IgE抗体を注射することで全身性のアナフィラキシー反応誘導した。しかしながら、最大反応に関する限り両者に差は認められなかった。現在、FcεRIの発現上昇に伴うFcεRIを介するシグナルの感受性の亢進が認められるか検討中である。また、FcεしたたRIの発現上昇も機構もIgEによるFcεRIの安定化という視点に立ってマウス腹腔マスト細胞を使用することで解明している最中である(論文準備中)。IgEによるFcεRIの発現上昇は臨床的にも多く認められその機構、生理的な意味を知ることはアレルギーの慢性化、増悪化の解明にも繋がると考えられIgEトランスジェニックマウスを使用することでその詳細を解明していくことにしている。
ストレンジネス=-2の核力と核物質の研究

ストレンジクオーク(S)を2個ふくむ核物質は、まだほとんど未知の領域であり、核物理のフロンティアである。本研究の目的は大強度K中間子ビームを用いて、これまでにくらべ約100倍の統計でS=-2の核物質およびハイペロン-核子相互作用の研究を行うことである。最近Brookhaven国立研(BNL)でKEKの約100のK中間子ビーム強度が達成され、我々の提案によりScintillating Fiber Detector(SCIFI)を用いて5000以上のΞ-C原子を観測する実験が進行中である。(BNL-E885)今年度は、7月までテスト的な実験を行い、(K^-,K^+)反応測定用のスペクトロメーター系の特にSCIFIのためのトリガーのテストや、大強度ビームでのSCIFIの動作テストなどをおこない、テスト的なデータを得た。これらのテストデータを解析した結果、(K^-,K^+)反応で生成されたΞ-がSCIFIでとらえられていることを確認した。これをもとに本実験のセットアップ、とくに(K^-,K^+)反応とΞ-ストップさせてΞ-C原子を作る、標的領域、SCIFIおよびそれらの周囲の検出器を最適化するという作業を行い、少なくとも5000以上、うまくすると10000以上のΞ-C原子を得られる見通しを得た。これは過去のKEKの我々の実験の100倍になる。本実験はすでにこの3月にスタートしており、今年7月までには大量のデータを得る。この大量のSCIFIの画像データの処理を行い、Ξ-C原子からのS=-2の核やHダイバリオンの研究を高精度で行うことによって、S=-2の核物理の研究の質的発展が期待される。
超高感度RIイメージング検出系を用いた植物生長調節物質の動態解析

本研究では、植物ホルモンであるオーキシンを放射性同位体で標識し、その分布様式をライブイメージング法および高解像度可視化法での検出を試みた。その結果、ライブイメージング法ではシロイヌナズナの根において、葉から根へ輸送されるオーキシンを経時的に捉えることに成功した。続いて、高解像度解析では、凍結切片を作成した後、ラジオルミノグラフィおよびオートラジオグラフィを用いてオーキシン分布を可視化し、維管束や維管束間組織のオーキシン分布を可視化することに成功した。以上の取り組みにより、植物ホルモンの分布情報を得るための手法として、放射性同位体を用いたイメージング解析が有効な方法の1つであることを示せた。初年度は、これまでのRIイメージング手法のうち、特に凍結切片法によるオートラジオグラフィ法について、生理活性物質への適用を試行した。14Cや3Hで標識したオーキシンをイネ幼植物へ添加し、イネ根端を採取の後凍結切片を作成して根端のRI分布の可視化を試みた。その結果、14Cよりも3Hの方が解像度高く可視化することができた一方で、14Cの方がβ線のエネルギーが強いことから、解像度が悪いものの可視化できる成功率が高く、またハンドリングが容易であった。また、市販されている標識化合物において、3Hの方が14Cに比較してmolあたりのBq数が圧倒的に多いことから、薄い濃度域でのオーキシンを検出するには3Hを使うのがよいと判断された。続いて、RIラベルしたオーキシン分布とオーキシン応答遺伝子の発現パターンとを比較するため、ダイズおよびイネにおいてDR5-gus等を導入した植物の作成を行った。特にダイズは根が太いことから凍結切片も作成しやすく、RIイメージングの技術開発を行うには適していると判断し、ダイズの形質転換に挑戦した。選択培地で生育するダイズ個体を得ることができている。当初の計画通り、放射性炭素であるC-14や放射性水素であるH-3で標識したオーキシンを植物の根に添加し、その像を得ることができた。特に、凍結での切片を作成してから放射性同位体の分布をイメージングする手法を適用することで、微量のオーキシンの像を得ることができたため。こうしたオーキシンの像を既存のオーキシン応答遺伝子の発現とを比較する計画で進めており、現在、DR5-gus等の形質転換体をイネおよびダイズで作成しているところであり、そろそろ種子を得られる段階である。これらの事から、RIイメージング手法開発としては概ね順調に進展していると考えられる。本年度は、RIラベルしたオーキシンを用いて、シロイヌナズナ、イネ、ダイズにおける投与方法、可視化方法を検討した。その結果、従来方法ではシロイヌナズナにおいては根端の凍結切片を作成するのが困難であり、中心柱をまっすぐに切断するような切片を作ることが出来なかった上、切片厚さを5μm程度にすると細胞の形などが保持されていないことがわかった。そこで、あらかじめ冷却していたアルミニウム製の板にresinを載せ、シロイヌナズナ根を置いた後直ちにやはり冷却したアルミニウムで挟むような瞬間冷却をしたところ、細胞の形がほぼ保たれる状態となることがわかった。次に、シロイヌナズナへのRIラベルオーキシン投与方法を検討した。根端から入れた場合の動きは大変に遅かったが、根の上部や葉から投与すると、根端までオーキシンが移行することがわかった。今後、様々なミュータントでオーキシン移行動態解析をRIイメージングで実施する予定であることから、pin2に代表されるオーキシン輸送関連遺伝子欠損株を収集した。また、変異体解析のための基盤技術作りとして、野生型株を用いて根の中のオーキシン分布を根の基部側から根端まで連続した分布像(イメージング)で捉える試みを行い、実施できる見通しが立った。イネ、ダイズにおいては既に切片作成がある程度できる状況であったが、さらに根端の精密な切片作成に試みており、来年度も引き続き挑戦する予定である。今年度は、種子取りのための栽培を継続して実施し、特にイネにおいて多数の種子を得られる見通しが立った。計画に有るとおり、イメージング技術の深化・汎用化を進める上で必要な技術の開発ができた。特にシロイヌナズナは切断が難しかったが、凍結方法を工夫することで、凍結切片が作成できる見込みを立てられた。現在、DR5-gus等を導入したイネ、ダイズを育成中だが、順調に種子が取れる見込みが立っている。・根の太いダイズにおいてオーキシンの分布を調べた。C-14で標識したオーキシンを子葉から投与した後、一定時間後に根をサンプリングし液体窒素で凍結させた。その後凍結したまま切片を作成する方法を採用し、その後、ラジオルミノグラフィにて可視化することで、オーキシンのダイズ根での分布様式を解析した。比較対象として、師管液で最も多い成分であるショ糖を用い、やはりC-14で標識したショ糖を子葉から投与して同様の作業を行った。その結果、オーキシンは維管束のある中心柱に多く分布していることが確認された上、皮層部分にも分布していた。一方で、ショ糖は中心柱に部分に局所的な分布が見られたが、皮層や表皮への分布はほとんどみられなかった。これは、オーキシンが中心柱を通って長距離輸送されることとともに、皮層部分にも意図的に輸送していることが示唆された。

・シロイヌナズナの花茎を用い、オーキシンを凍結切片法により可視化し、既に報告されているDR5:GFP発現と比較した。その結果、標識したオーキシン由来の放射線シグナルは、導管、維管束間組織で観察された。これまでの報告から、DR5-GFPは形成層や師部、木部柔組織で強い発現をしているものの、導管はもちろん維管束間組織では検出されていなかった。本研究により、DR5-GUSがオーキシンの分布を表しているものではなくあくまでオーキシンの応答レベルを示していることを確認するとともに、本手法ではDR5-GUSなどのオーキシン応答遺伝子では検出できないオーキシン分布を知るのに有効であることを示している。本研究では、植物ホルモンであるオーキシンを放射性同位体で標識し、その分布様式をライブイメージング法および高解像度可視化法での検出を試みた。その結果、ライブイメージング法ではシロイヌナズナの根において、葉から根へ輸送されるオーキシンを経時的に捉えることに成功した。続いて、高解像度解析では、凍結切片を作成した後、ラジオルミノグラフィおよびオートラジオグラフィを用いてオーキシン分布を可視化し、維管束や維管束間組織のオーキシン分布を可視化することに成功した。以上の取り組みにより、植物ホルモンの分布情報を得るための手法として、放射性同位体を用いたイメージング解析が有効な方法の1つであることを示せた。研究計画では多種多様な化学物質をイメージングの対象にする方針であったが、研究を進めるうちに、化学物質を絞りイメージング技術の深化・汎用化を進める方が有意義であるとかんがえられるようになってきた。そこで、生理活性物質をオーキシンに絞った上で、ミュータントの解析などを通じてどういった手法・解析例が重要であるかを判断しながら、技術開発をより進める方向で研究計画したいと考えている。今後は、この基盤研究B課題のアウトプットとして、シロイヌナズナの根においてRIイメージングによりオーキシン移行動態解析ができる実験系の確立を目指す。切片による詳細なオーキシン分布像は、DR5-gus等を導入したイネもしくはダイズにおいて実施し、その分布の相違について議論したい。29年度が最終年度であるため、記入しない。放射線植物生理学29年度が最終年度であるため、記入しない。