hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
博多湾内浚渫窪地の修復に伴う周辺底面環境の環境回復過程評価と環境創造効果の定量化

博多湾では1980年代の沿岸開発の埋立て材料として,室見川河口の海砂が利用されたため,二つの大きな浚渫窪地が残されており,浚渫窪地周辺では,夏季に毎年のように貧酸素水塊が発生している.そこで,平成23年度より,博多湾航路の浚渫土砂を利用して段階的に浚渫窪地を埋め戻す事業が福岡市と国土交通省によって実施されている.本課題では,博多湾内浚渫窪地周辺の底面環境が浚渫窪地を埋め戻すことによってどのように変化していくかを定量的に把握することを最終的な目的としている.浚渫窪地周辺での底面環境調査:調査項目(水質・底泥・底生生物)(観測・分析班:渡辺・伊豫岡)多項目水質計DS5を用いて,窪地内部および周辺底面環境の環境修復効果を確認する目的で,平成25年度に7月11月にかけて調査を実施した。調査時の詳しい観測結果に関しては、土木学会西部支部研究発表会および土木学会年会に発表する予定である。今年度の観測結果より、博多湾室見川河口沖に位置する浚渫窪地を埋め戻すことにより、周辺の貧酸素水塊の広がりが抑制されていることが分かってきた。また、底泥の酸素消費量をベルジャー型の観測機器を用いて観測することにより、底泥の酸素消費ポテンシャルを観測した。その結果、埋め戻し後の窪地周辺の底泥酸素消費ポテンシャルが低下し、底泥環境が改善されていることを確認することが出来た。浚渫窪地周辺で発生する貧酸素水塊に関しては博多湾において、その発生頻度が減少していることを観測しているが、湾奥部においては依然として貧酸素水塊が発生しており、今後も継続して観測および測定していくことで、改善状況をモニタリングしていく。浚渫窪地から貧酸素水塊が溢れ出し周辺底部に拡散していく現象に関しては、浚渫窪地を埋め戻しを実施し始めて以降は、貧酸素水塊の発生が抑制される傾向にあり、今後、数年をかけて完全に埋め戻すことによって、どの程度抑制されるかを継続的にモニタリングを行い、その改善状況も明らかにする。また、今後は底生生物の生息状況も底泥を直接サンプリングすることによって、回復状況を把握していく。平成26年度は、室見川沖に位置する浚渫窪地において埋戻し作業が進行中の東側窪地に関して観測を行うとともに,博多湾における貧酸素水塊の発生状況に関して調査を実施し、底泥の酸素消費量をベルジャー(現地での底泥酸素消費量を求める機器)を用いて観測するとともに、多項目水質計(DS5)を用いて、埋め戻し材料投入時の濁度などに関しても観測を行った。平成26年度の観測結果に関しては土木学会年会および西部支部研究発表会、日本水環境学会などで発表を行っていく予定である。今年度の観測結果より,窪地の埋め戻しに伴って周辺の底面環境も改善されている傾向が明らかとなってきた。例えば、窪地周辺でのベルジャーを用いての底泥酸素消費速度の実測によって、埋め戻し以前よりも底泥の酸素消費速度が低下していることが確認され、浚渫窪地の埋戻しに伴う効果を実測することが出来た。更に、埋め戻し材投入時の濁度を観測することによって、埋め戻し時の周辺フェンスなどの必要性に関しても検討を加える事が出来た。研究最終年となる平成27年度は、窪地周辺底部において、底泥の酸素消費量を引き続き現地観測を行い、周辺底面環境の回復状況を確認するとともに、堆積したヘドロの浄化手法に関しても検討を行っていく予定である。現地調査では、貧酸素水塊発生時期に合わせて調査を実施し、埋め戻し前と比較して、貧酸素水塊の発生状況がどのよいうに変化したかを把握する予定である。閉鎖性の内湾では全国的に貧酸素化による生態系の悪化が進行している.博多湾においても生態系を持続的に保全するためには,博多湾の貧酸素の形成過程を明らかにする必要があるが,貧酸素化の要因として底質による酸素消費が占める割合が大きいと考えられており,底質の酸素消費を把握する事は貧酸素化の対策を策定するうえでも重要である.しかし,底泥による酸素の消費速度の測定は問題点も多くかつ高コストであることから,必ずしも十分に実施されていない.本申請研究では、博多湾内の浚渫窪地を埋め立てることによって周辺の底面環境がどの程度回復するかを底泥の酸素消費量を直接観測することで定量化を行い、今後の解析に役立てることを今年度は実施した。また,博多湾では土取り跡窪地による貧酸素化の問題が指摘されてきたが,百道浜沖窪地においては埋め戻しが終了,今後は愛宕浜沖窪地においては埋め戻しが計画されている.今年度の酸素消費速度観測結果より、本研究室がベルジャーによる現地観測をはじめた平成24年度の値に比べその値が低下しており,また現地調査と室内実験の両結果でも周辺地点と比べ値が低かったことから埋め戻しの効果が底泥の酸素消費速度を低下させていることを確認することが出来た.今後は残りの愛宕浜沖浚渫窪地の埋め戻しが計画されており、今後の事業の進捗状況に合わせて、窪地埋め戻しによる環境修復効果を定量化していくことを目指している。博多湾では1980年代の沿岸開発の埋立て材料として,室見川河口の海砂が利用されたため,二つの大きな浚渫窪地が残されており,浚渫窪地周辺では,夏季に毎年のように貧酸素水塊が発生している.

そこで,平成23年度より,博多湾航路の浚渫土砂を利用して段階的に浚渫窪地を埋め戻す事業が福岡市と国土交通省によって実施されている.本課題では,博多湾内浚渫窪地周辺の底面環境が浚渫窪地を埋め戻すことによってどのように変化していくかを定量的に把握することを最終的な目的としている.研究の目的であった、浚渫窪地埋め戻しによる環境修復状況を底泥の酸素消費量をパラメーターとして確認することが出来ており、更に本年度は周辺での貧酸素水塊発生状況をモニタリングすることが可能となっているため。水環境工学これまでの観測および解析結果より、浚渫窪地埋め戻しによる効果は周辺底面環境の改善に大きな影響を与えていることが確認できた。研究最終年度は、底面環境を更に改善していくため浄化手法に関しても検討を加えていく。当初の目標としていた浚渫窪地周辺での貧酸素水塊の発生状況を的確にモニタリングし、確認することが出来ている。また、現地において底泥の酸素消費ポテンシャルを実測することで、埋め戻しによる環境改善効果を実測値により示すことが出来ているため。今後は、引き続き貧酸素水塊の発生状況をモニタリングするとともに、底泥の酸素消費ポテンシャルを実測し、浚渫窪地埋め戻しによる環境改善効果を定量的にとらえていく。また、底生生物の生息状況をサンプリングによって確認し、底質の環境回復状況を把握していく予定である。
有限温度の原子核物質の一次相転移における混合相

低密度原子核物質の構造と性質に関して、超新星コアを想定した条件で計算を進め、液相気相相転移による混合相の出現に関する理解を深めた。Urca過程による中性子星の冷却過程を、ハドロン-クォークの混合相を基に計算し、カシオペアAの冷却曲線をほぼ説明できることを示した。高密度におけるハドロン-クォーク混合相の研究で、クォーク相を記述するモデルを、これまで使っていたものよりも洗練されたモデルに切り換え、太陽質量の約2倍の重い中性子星の記述を可能にした。有限温度での原子核物質の混合相の構造と性質の研究として、24年度は中性子星の冷却機構の研究に取り組んだ。これまでの中性子星冷却に関する考え方は、小質量星に比べて大質量星ほど早く冷えるとされてきた。それは小質量星は核子だけから構成されているのに対し、大質量星では中心密度が高いためにクォーク物質ができており、核子のURCAより物質を早く冷やすクォーク冷却機構が働くためである。実際、中性子星質量と温度の観測値はこの傾向をよく表している。しかしカシオペア座Aでは、観測されている温度が高く通常の冷却機構では説明がつかない。そこで我々は天体内でのハドロンークォークの混合相とを考慮した。さらに、混合相中のクォークがある密度以上で超流動相、以下で通常クォーク相となると仮定した。超流動は、核子物質とクォーク物質の両方でURCAによる冷却を抑制する。また、カシオペア座Aの中性子星では内部の密度が高く、ハドロン-クォークの混合相のうち低密度クォーク相の領域が比較的狭く超流動の領域が広いため、クォーク超流動の寄与がかなり大きいことが数値計算の結果から得られた。その結果を元に天体の冷却過程を計算すると、観測値をかなりよく再現することができた。低密度の原子核物質では昨年度得られた結果すなわちニュートリノの存在が陽子含有率を増加させ、それによって非一様構造の出現を促進するように働くことを温度やレプトン含有率といった条件を変えながら確かめた。最終年度は中性子星の構造(サイズと質量)に関する研究に取り組んだ。高密度核物質においてハドロンからクォークへの相転移を考え、ハドロン相とクォーク相をそれぞれBrueckner-Hartree-Fock (BHF)モデルとnonlocal NJLモデルとで記述した。またハドロンークォークの混合相もパスタ構造まで含めて取り扱った。その結果我々による2008年に発表した同様の計算(BHFモデルによるハドロン相とbagモデルのクォーク相)では再現できなかった重い中性子星の記述が可能になった。また、フルに三次元の構造計算を低密度原子核物質に適用し、中性子星表面殻の力学的強度を計算する手法を開発した。まず、三次元での低密度原子核物質の基底状態を求め、体積を保存しながらそれを変形させたときのエネルギー増加率を計算する事で、剪断係数を求めた。その結果、われわれの新しいフル計算による剪断係数は、これまでの単純化された計算によるものより数パーセント低い、という予備的な結果を得た。またこの原因は、低密度原子核物質を構成する格子状に並んだ原子核の有限サイズの効果と、電子による荷電遮蔽の効果であると考察した。今後、この計算を有限温度に拡張する予定である。超新星コアや原始中性子星に実現している有限温度での原子核物質の混合相の構造と性質を相対論的平均場および局所密度近似の枠組みで調べた。まず、低密度領域での液相-気相の混合相について、表面やクーロン力といった有限サイズ効果を排除し化学ポテンシャルと圧力に関する単純な平衡条件のもとで調べた。低密度(気相)の原子核物質の圧縮による相転移に関する考察を、圧力-陽子含有率平面上での軌跡と共存曲線との関係として理解を深めた。また、相転移のcongruence (成分比合同性)を、共存曲線の広がり具合としてとらえ、(陽子含有率が0.5である対称原子核物質はcongruenceが高く中性子過剰原子核物質はcongruenceが低い事、温度の上昇とともにcongruenceが高くなること、中性子過剰原子核物質でcongruenceが低いのは陽子中性子間の強い引力によることなどを明らかにした。次に有限温度での低密度原子核物質の非一様構造「パスタ構造」を計算し、系の圧力と密度への依存性を求めた。これによって有限サイズ効果をすべて考慮したうえで液相-気相の混合相の状態方程式を求めることが可能となった。次に、実際の超新星コアや原始中性子星に対応する、有限温度でニュートリノがトラップされた状況での非一様構造を計算するようプロフラムを改良した。レプトン(ニュートリノと電子)含有率が一定としてベータ平衡条件を課した場合、電子含有率すなわち陽子含有率が高くなり、ニュートリノトラップの影響がパスタ構造を安定化するように働くことが分かった。それに対して原始中性子星内部のハドロン-クォークの混合相についても有限温度・ニュートリノトラップの計算を行い、ニュートリノの存在が局所電荷密度を低くするよう働き、パスタ構造の出現を抑制することが分かった。

当初予定に入れていた状態方程式のデータベース化についてはあまり進展していないが、物質の性質を調べることに重点を置くよう、方針を修正しつつある。また、天体の冷却過程に関して外部の研究者の協力を得て論文の出版に漕ぎ着けた点で、ある程度の成果が出せた。23年度実施計画では、(1)計算コードの作成、(2)低密度原子核物質の構造と性質の研究、(3)Wigner-Seitz近似を用いない計算による研究、(4)高密度でのK中間子凝縮物質の構造と性質の研究、(5)更に高密度でのハドロン-クォーク混合相の構造と性質の研究を行う予定であった。はじめの2項目と5番目の項目については、「研究実績の概要」に書いたとおり成果があった。3番目のWigner-Seitz近似を用いない研究については十分な成果があったが、本件とは別の科研費により研究を進めているためここでの報告は省略した。4番目のK中間子凝縮物質については、有限温度ではないがWigner-Seitz近似を用いない研究において計算を開始している。状態方程式のデータベース化には拘らず、原子核物質の性質を計算する手法をもっと進展させる方向で進めたい。特に高密度でのハドロン-クォーク混合相の構造と性質については、天体の質量や半径に重要であり、最近見つかった太陽質量の2倍の天体を支えられる状態方程式が得られるようなクォークのモデルを探りたいと思っている。低密度原子核物質の構造と性質に関して、超新星コアを想定した研究を進めるとともに、超新星爆発のシミュレーションに使える状態方程式のデータベース化についての方策を探る。また、原始中性子星の冷却過程の計算を外部の研究者と連絡を取りながら開始する。高密度におけるハドロン-クォーク混合相の研究で、クォーク相の取り扱いを現在使っているbagモデルよりも洗練されたモデルを適用する。温度依存性が運動エネルギーのみに影響するような枠組みを用いているが、相互作用部分にも温度依存性を入れる事を考える。主に旅費として使う予定だが、データ保存のための大容量ディスクの購入を検討している。プレゼン用のPCが老朽化した場合は買い替えるが、それ以外は主に旅費に用いる。特に、成果発表や研究交流の為に用いる。
女性ボクシングトレーナーによる「男性専用」動詞命令形の文脈に埋め込まれた機能

最近の「言語とジェンダー」研究では、日本語のいわゆる「女性語」「男性語」の概念は、言語選択時のコンテキストから乖離した「規範意識」であるという批判が起こっている。本論では、この立場に立ち、日本国内のボクシングジムでの練習中に使用される、従来、「最も丁寧度が低く」(Smith 1992)、話者の性と直接結びつけられてきた動詞命令形の選択及びその機能を分析した。分析の結果、これらの言語形式の使用は、実際にはその場のボクシング対戦の状況や相互行為上の要請と深く関わっていることを示した。日本女性の言葉遣いの多様性を捉え直す試みとして、従来、研究対象となっていなかった女性ボクシングトレーナーの言語使用を分析した。特に「男性語」とされてきた動詞命令形について、1)どのような談話文脈で選択されるのか、2)そのコンテキストにおける、これらの言語形式を含む発話の機能は何か、を分析した。これまでの分析の結果は、英語、日本語双方の論文にまとめ、現在、改稿段階に入っている。また、当該科学研究費補助金を受けて開催したマルチモダリティー・ワークショップや、東京明治学院大学で行われたエスノメソドロジー・会話分析研究会の2006年春の研究例会において、分析データの報告を行った。上記論文では、2006年初頭までに収集した468分のデータを研究対象とすることにしたため、2006年度は新たなフィールドノーツへの記録及びビデオデータの収集は行わなかった。468分のデータは、女性トレーナーが指導を行う同一の選手について異なった形態で練習を行っているものに焦点を当てて整理、編集した。468分のうち、分を研究協力者の助力を得て書き起こした。また微視的会話分析に必要な静止画像も数枚取り出し、論文に載せることができた。研究の方法論的課題については、上記研究会及びワークショップにおいて分析方法や着眼点が明確になり、それを基に6、7例の会話断片について詳細なデータ分析を行った。分析を通じ、丁寧さだけで動詞命令形の意味機能を捉えることができない、という結果を得、現在それが日本女性の言語使用の多様性についてどのような意味を持っているのか考察を進めている。また上記研究と同じデータ、同じ方法論から発展した別の研究として、「ボクシングジムでの学習における相互行為」について今年度考察を試みた。成果として、第20回社会言語科学会研究大会においてワークショップ「インストラクション場面における『職業的/専門的な見方』とその組織化の様相」を組織し、その企画責任者となった。上記2つの研究を支えるデータ編集処理作業として、今年度は専門家に依頼して静止画像取り出し及び画像加工を行い、上記の英文論文及びワークショップに使用した。また文字化作業としては、研究補助者によるデータ書き起こし作業を進めた。研究の方法論的課題、データ分析、分析結果の考察については米国ウィスコンシン大学の森順子教授、カリフォルニア大学ロサンジェルス校のCharles Goodwin、MarjorieH.Goodwinの両教授より、ご指導をいただいた。2008年度は分析の一層の精緻化を目指したい。最近の「言語とジェンダー」研究では、日本語のいわゆる「女性語」「男性語」の概念は言語選択時のコンテキストから乖離した抽象的な「イデオロギー(ある言語選択をすべきだという規範意識)」である、という批判が起こっている。本研究ではこの立場に立ち、これまで「普通の」女性の言語のモデルから「例外」としてあまり顧みられることのなかったスポーツ(ボクシング)指導に従事する女性の言語使用を分析した。特に、ボクシング指導時に女性トレーナーによって使用される、これまで男性専用指示表現とされてきた動詞命令形(例:「打て」)に焦点をあて、1)どのような談話文脈でこれらが選択されるのか、2)そのコンテキストにおける、これらの言語形式を含む発話機能は何か、を分析した。本年度、データ編集・処理法の調査・文字化として、データ書き起こし方法を検討し研究補助者に書き起こしを依頼した。本年度末現在で本研究データベース全体の約70%が書き起こし済みである。本年は、本論文のデータを用いまた本論文の方法論を発展させて、言語表現「はい」の機能研究について論文を完成した。その際、同研究のデータ画像の加工処理を研究補助者に依頼した。また同論において、動詞命令形論文の方法論的課題であったマルチモダリティー重視の分析方法をさらに発展させ、参加者の活動への志向を表す「参加」の概念を検討した。この「はい」の機能研究については、平成21年度初頭に出版予定である。動詞命令形のデータ分析及び分析結果の考察としては、これらの動詞命令形が話者の性のみでなく、その場の行為や活動の様々な要素(身体動作、動作の即時性の希求など)と結びついていることを明らかにした。平成20年度中旬、本研究の成果を「Japanese Applied Linguistics」という著書の第6章として出版した。
メダカ胚性幹細胞の樹立とその全能性の研究

メダカは脊椎動物の原形として発生生物学の優れた実験動物となっている。このメダカで遺伝子ターゲティングの技術を確立するために、胚幹細胞株の樹立と、これを用いたキメラの作製を試みた。野生型体色の純系メダカHNI-Iの胞胚期胚の細胞を、ダルベッコ変法イ-グル培地にLIF、bFGF、コイ血清、牛胎児血清などを添加した培養液で培養した。その結果、細胞の直径が7μm程度の小型で丸い形態を持ち、コロニーを形成しながら活発に増殖する細胞株OLES1およびOLES2の樹立に成功した。これらの細胞は強いアルカリフォスファターゼ活性を持ち、レチノイン酸処理で、黒色素細胞、ドーパ陽性細胞、トロポニンT陽性細胞、神経様細胞などに分化した。また、85%の細胞が正常な二倍体であることもわかった。LIFおよびbFGFの濃度と細胞の増殖の関係を調べたところ、LIFは010^4U/m1の範囲で、細胞の増殖に明らかな影響を与えなかったが、bFGFは020ng/m1の範囲で濃度依存的に細胞の増殖を促進した。20ng/m1の濃度での集団倍加時間は24時間であった。濃度0の場合には細胞の増殖は大幅に遅れ、大型で扁平な形態に変化した。このことからbFGFはメダカES細胞が活発な増殖を維持し、未分化状態を保つために必要であることがわかった。これらの細胞を胚に注入し、キメラの作製を試みているが、これまでのところ、細胞を移植した個体での黒色素胞の分化や生殖系列キメラの作製にはいたっていない。細胞を蛍光標識して胚に注入し、細胞の胚の中での動向を追跡したところ、細胞が胚の様々な組織に取り込まれていることがわかった。また。注入実験を氷温で行うことによって、注入細胞が胚の中に広く分散することがわかった。この方法を用いることによって、キメラ作製の効率が上がることが期待できる。また。メダカは脊椎動物の原形として発生生物学の秀れた実験動物となっている。このメダカで遺伝子ターゲッティングの技術を確立するための第一段階として胚幹細胞株(ES細胞)を樹立し、多分化能を調べた。さらにこれを胚に移植して、キメラ形成を調べた。体色が野生型の純系メダカHNIの胞胚期の細胞を白血病阻止因子(LIF)、繊維芽細胞増殖因子(bFGF)、コイ血清、牛胎児血清などを添加したマウスES細胞の培養で用いられている培地で培養した。最初に、メダカから得たフィーダー細胞を用いてOLES1を樹立した。次いでフィーダーを用いない通常の方法でOLES2を樹立した。これら二つの細胞株は7-10μmと小型である、細胞質の大部分を核が占める、活発に増殖しコロニーを形成する、など細胞の形態、増殖様式ともにマウスのES細胞に酷似していた。二つの細胞株は、レチノイン酸で処理すると黒色素細胞、ドーパ陽性細胞、トロポニンT陽性細胞、筋肉様細胞、神経様細胞などに分化し、これらの細胞株が多分可能をもつことが明らかになった。二つの細胞株をアルビノメダカの後期桑実胚から胞胚期の胚に移植した。黒色素細胞の分化は今のところ見られていない。蛍光標識した細胞を移植して、その行動を追跡すると一部の細胞は宿主胚に取り込まれることが明らかになった。

これら二つの細胞株は魚類では初めての多分可能をもつ胚幹細胞株である。これらの細胞を用いて生殖系列キメラを形成することが今後の課題である。1.胚幹(ES)様細胞株OLES2の性質と培養液の検討:OLES2はアルカリフォスファターゼ陽性でフィーダー細胞を用いずに培養できる。核型解析で、85%の細胞が正常な二倍体(2n=48)であることがわかった。次に培養液に添加しているLIFおよびbFGF(牛)の濃度と細胞の増殖の関係を調べた。LIFは010^4U/mlの範囲で、細胞の増殖に明らかな影響を与えなかった。bFGFは、020ng/mlの範囲で濃度依存的に細胞の増殖を促進したが、これ以上の濃度では差が見られなかった。20ng/mlの濃度での集団倍加時間は24時間であった。濃度0の場合には細胞の増殖は大幅に遅れ、大型で扁平な形態に変化した。このことからbFGFはメダカES細胞が活発な増殖を維持し、未分化状態を保つために必要であることがわかった。2.ES様細胞を用いたキメラの作製法の改良:胚に注入されたES様細胞が胚の組織に取り込まれることは昨年度の研究からわかっているが、細胞を移植した個体での黒色素胞の分化や生殖系列キメラの作製にはいたっていない。蛍光標識した細胞の胚の中での動向を追跡した所、室温での注入実験の場合、多くの胚の中で、注入された細胞は互いに接着して一つの大きな細胞塊を形成しており、広く分散していないことがわかった。これを改善するために、注入実験を氷温で行ったところ、70%の胚で注入細胞が胚の中に広く分散することがわかった。また、分散の程度も氷温のほうがはるかに高かった。この成果を用いることによって、キメラ作製の効率が上がることが期待できる。
微生物の代謝活性と局在性を同時検出するマイクロイメージング技術の開発

習慣的多量飲酒によって大腸がんが誘発されることがわかっており,その原因としてアセトアルデヒドが少なからず影響を及ぼしていると考える.本研究では,腸内細菌が実際にヒト大腸内でアセトアルデヒドを生成しているのか調べ,生成量に依存した識別方法で可視化することを最終目標に掲げた.はじめに,実際に腸内細菌の作用によって大腸内でAcHが生成していることを確認した結果,今まで大腸がんとは一緒に議論されてこなかった特定の属が重要な役割を担っていることが推定できた.次にFISH法によって対象微生物を蛍光染色し,顕微鏡観察した.その結果,対象微生物が腺腫表面に高密度に局在している様子が観察できた.研究開始当初の目標として,アルコール依存症と健常者の腸内細菌叢の違いを明らかにすることを掲げた.24年度は久里浜アルコール症センターから,アルコール依存症患者の糞便の提供を受け,はじめにアルコールおよびアセトアルデヒドの代謝能を調査した.また腸内細菌叢の比較のための予備データを得た.25年度は腸内細菌叢をより詳しく明らかにするため,久里浜医療センターから提供を受けたアルコール依存症患者のポリープについて,腸内細菌のDNAを抽出後,次世代シークエンス解析することで,微生物叢の解析を試みた.以前の研究で,患者の糞便の微生物叢解析は行っていたが,今回はポリープ表面という,より病態に近く,変異誘発に関与していると思われる微生物群の推定に成功した.この結果から,これらのポリープ表層に局在する微生物をin situで解析するため,ポリープを用いたfluorescence in situ hybridizasion (FISH)解析を試みた.アセトアルデヒド代謝に特に重要に係わっていると考えられる4種の微生物種について,それらのリボソーム小サブユニットRNAに特異的に結合する蛍光プローブを設計し,ポリープ表面での微生物の局在性を調査した.その結果,特定の微生物群がポリープ表面に局所的に存在していることが確認できた.この微生物密集地帯では,高濃度のアセトアルデヒドの生成が起こっていると考えられる.今年度は,微生物の活性を保ったまま,ポリープ表面でのアセトアルデヒド生成をリアルタイムで検出することを主眼とする.習慣的多量飲酒によって大腸がんが誘発されることがわかっており,その原因としてアセトアルデヒドが少なからず影響を及ぼしていると考える.本研究では,腸内細菌が実際にヒト大腸内でアセトアルデヒドを生成しているのか調べ,生成量に依存した識別方法で可視化することを最終目標に掲げた.はじめに,実際に腸内細菌の作用によって大腸内でAcHが生成していることを確認した結果,今まで大腸がんとは一緒に議論されてこなかった特定の属が重要な役割を担っていることが推定できた.次にFISH法によって対象微生物を蛍光染色し,顕微鏡観察した.その結果,対象微生物が腺腫表面に高密度に局在している様子が観察できた.本研究ははじめの目標として,アルコール症患者と健常者の腸内細菌叢の違いを明らかにすることを掲げた.このため,久里浜アルコール症センターの横山先生からアルコール症患者の糞便サンプルを提供していただき,DNAを抽出後,網羅的にシークエンスすることで微生物の組成を明らかにすることを試みた.この結果を受け,糞便サンプルのアルコールおよびアルデヒド代謝能を調査した後,微生物叢を解析した.アルデヒド代謝に深く関与すると思われる代表的な微生物の存在が確認できた場合には分離を試み,分離株のアルデヒド生産・分解活性の評価を行う予定である.ここまで準備できた際は,アルコール症センターでは定期的に入手できるアルコール症患者のバイオプシーサンプル(ポリープ)の一部分を同センターの水上健先生から提供していただき,微生物の局在性を調査する.具体的には,電子顕微鏡観察,蛍光顕微鏡観察によって微生物のポリープ状での局在性を調査する.さらに初年度は腸内細菌のDNAを抽出し,より詳細に組成を明らかにするため,次世代シークエンスによって調査した.ここで検出された微生物のアセトアルデヒドを生産能を詳細に解析し,血中から染み出してくるエタノールを基質としてアセトアルデヒドを生成しているモデルを構築した.この時の腸内細菌の遺伝子発現変動をmRNAのパイロシークエンスを行い,腸内細菌全体のエタノール代謝経路を解析することを試みる.またこのパイロシークエンスによってポリープ表面でアセトアルデヒドが局所的に生産されることを証明する.この研究は,習慣的多量飲酒によって大腸がんが誘発されることがわかっている.既知の事実として,エタノールが体内で代謝されて生成するアセトアルデヒド(AcH)には発がん性があることが明らかになっている.我々のグループでは,ヒトが肝臓で生成するAcH以外にも,腸内細菌が大腸内で生成するAcHはヒト大腸発がんに無視できない影響をもたらしていると考えている.そこで本研究では,腸内細菌が実際にヒト大腸内でアセトアルデヒドを生成しているのか調べ,生成量に依存した識別方法で可視化することを最終目標に掲げた.はじめに,実際に腸内細菌の作用によって大腸内でAcHが生成していることを確認するため,アルコール症患者の糞便を使用し,エタノールからのAcH生成を確認した.また,糞便から腸内細菌をさまざまな選択培地を用いて分離し,分離できた微生物株についてAcH代謝能を調査した.その結果,AcHを特異的に生成・蓄積する微生物株が特定でき,それらの株が分類される属が推定できた.

ただこの属に関しても,属・種まで同一と推定されるにもかかわらず代謝能が全く異なる株が共存することがわかり,一概に危険・安全な属と定義することは困難であることがわかった.しかし大まかに分類すると,今まで大腸がんとは一緒に議論されてこなかった特定の属が重要な役割を担っていることが推定できた次にこれらの属を可視化するため,fluorescence in situ hybridizationによって対象微生物を蛍光染色し,顕微鏡観察した.アルコール症患者から摘出された腺腫を観察したが,焦点深度の厚さとヘモグロビンの自家蛍光の問題で観察が困難であった.この問題を解決するため,デジタルマイクロスコープとCy7蛍光色素を用いたところ,対象微生物が腺腫表面に高密度に局在している様子が観察できた.微生物生態学計画通り,アルコール依存症患者と健常者について,糞便中の微生物叢の違いを明らかにし,糞便中に含まれる腸内細菌のアセトアルデヒド代謝能を明らかにした.また次世代シークエンス解析することで,アセトアルデヒド代謝に関与すると思われる微生物群を特定できた.FISHで局在性も明らかにできたことから,今後行うin situでのアセトアルデヒドの代謝解析の調査対象とする微生物群の絞り込みを終えている.このため,予定通りイメージング技術の検討を行える見通しである.当初の予定通り,アルコール依存症患者のポリープを用いて,微生物叢の詳細を明らかにした.ここで検出された微生物のアセトアルデヒド代謝能の詳細については次年度の目標に掲げた.次年度はポリープ表面に生息する微生物の検出を行うが,これは微生物叢の調査の結果明らかになった微生物を対象に行える.またこれらの微生物のアセトアルデヒド代謝能については現在手法を開発中であるが,微生物を絞り込めたことで,検出系開発の見通しが立てられる.アルコール依存症患者の糞便とポリープ表面に接着する微生物群を比較したことで,アセトアルデヒド代謝に大きく寄与するであろう微生物の特定に成功した.これは重要な知見であり,今後はサンプル数を増やして,普遍性を調査する必要がある.そのため,ポリープ表面の微生物叢解析を次世代シークエンス技術を用いて引き続き行う.さらに,ポリープ表面のアセトアルデヒド代謝能の検出を行う.これにはFISHで局所的に微生物が存在していると確認されたサンプルを用いる.進捗状況次第では,アセトアルデヒドによってDNAに付加体が生じるなどの変異原性の原因となる変化が起きていないか,ヒトDNAの変異も調査したい.前年度のパイロシークエンスの結果の解析を引き続き行い,腸内細菌全体のエタノール代謝経路を解析する.エタノールの有無によって生じた遺伝子発現の差を検出できたら,塩基配列から微生物種を推定し,アルデヒド生成に関与する微生物種の分離を試みる.今までの腸内細菌の研究では腸から分離した微生物の性質を調べる際,試験管内で代謝能を評価している.この場合腸内環境での生育環境を再現できているか判断するのは困難である.腸表面ではpHグラディエントがある粘膜層で覆われており,この粘膜層の厚さは微生物のヒトへの感染へ大きく影響することがわかっている.そこで微生物の性質を調べる際,pHグラディエントや微好気酸素濃度条件など,できる限り腸内環境を再現する擬似腸粘膜構築法を開発する.この擬似腸粘膜を用いてより現実に近い解析結果をえることを試みる.微生物代謝評価方法が確立できた後,ポリープ上での微生物の局在性を調査する.
珍しい特徴を有する二つの酵素の立体構造に基づく触媒機構解明とその利用

本研究では2種の酵素の構造と機能の関係を解明し利用することを目指した。第一の酵素ODCaseについては、生成物ウリジン一リン酸との複合体構造(1.03Å分解能)をはじめ、約10種類の結晶構造を決定した。分解能1.03Åは、これまでに解析された200個以上のODCase構造の中で群を抜いて高い。得た構造と生化学的な解析および計算科学的手法を組み合わせ、ODCaseの触媒反応における遷移状態自由エネルギー低下の10-15%は、基質の歪みに由来することを見いだした。もう一つの酵素Cyc2については、アミノ酸配列及び機能が類似した別酵素を対象に、精製及び結晶化に取り組んでいる並行して連携研究者と密に連絡を取りながら、計算機シミュレーションを行った。シミュレーションの結果は、ODCaseの基質であるOMPは、carboxylate基がpyrimidine環から回転し、また、平面から歪んだ状態で結合するという構造解析結果と矛盾しなかった。反応のエネルギー過程を見積もったところ、酵素学的アッセイの結果から導かれるODCaseによるΔΔGの低下を非常に良く再現した。計算結果から導かれる歪みの反応への貢献は10-15%程度であることがわかった。これらの結果を論文にまとめ、JACS誌に投稿、受理された。もう一つの酵素Cyc2については、アミノ酸配列及び機能が類似した別酵素を対象に、精製及び結晶化に取り組んでいるODCaseについては、生成物Uridine monophosphate (UMP)との複合体構造を1.03Å分解能で決定した。この分解能は、これまでにタンパク質構造データベース(Protein Data Bank)に登録されているODCaseの200個近い構造の中で、群を抜いて高い分解能である。この構造の観察により、UMPのpyrimidine環と活性残基であるLys72が互いに接触し、UMPのpyrimidine環は平面構造が崩れていること、Lys72はdouble conformationをとっていることを見いだした。また表面プラズモン共鳴法による分析を行い、Lys72をアラニン残基に置換したK72A変異体は、UMPとの結合力が野生型と比べて10の5乗倍上昇することを示した。これらの結果は、Lys72とUMPが互いに斥力を及ぼし合っていることを示す。ODCaseの反応触媒機構に基質の歪みが利用されている仮説は古くから提唱されてきたが、歪められる置換基を持たないUMPが野生型OMPと強くは結合しないという実験事実が、この仮説の妥当性に大きな疑念を与えてきた。本研究によりこの疑念は解消され、ODCaseはその触媒反応に基質の歪みを利用している可能性が一段と高くなった。その他、未だ役割の解明されていない基質周辺の保存残基の役割の解明や、連携研究者の開発したシミュレーション法による触媒機構の解析も進めた。Cyc2については、枯草菌由来の酵素について、結晶化に適した試料調製法の検討を行った。還元剤の添加、金属イオンの存在、付加する発現系タグの見直しなど、様々な検討を行ったが、未だ結晶を得ていない。ODCaseについては、2012年度に生成物Uridine monophosphate (UMP)との複合体構造を1.03Å分解能で決定した。この分解能は、これまでにタンパク質構造データベースに登録されているODCaseの200以上の構造の中で、群を抜いて高い分解能である。この構造と、表面プラズモン共鳴法による分析を組み合わせ、Lys72とUMPが互いに斥力を及ぼし合っていることを示し、論文にまとめた。2013年度には、8つの酵素-基質アナログ複合体構造と反応素過程の計算機シミュレーションを組み合わせ、ODCaseの基質であるOMPはcarboxylate基がpyrimidine環から回転し、平面から歪んだ状態で結合し、反応が進行することを示した。シミュレーション結果から、基質歪みの反応への貢献は少なくとも10-15%程度はあることがわかった。2014年度には、活性中心に存在するアスパラギン酸残基と、基質OMPのcarboxyl基の間に静電的な反発があるのかを確かめるため、より高分解能でのX線構造解析や中性子線による構造解析を目指した。このため、結晶格子形成に関わる残基に変異を導入したり、大量の精製試料を得る方法の開発に努めた。また、日本語と英語それぞれの総説を執筆した。Cyc2については、当初Bacillus subtilis由来の酵素の結晶化及び構造解析を目指してきた。2012年度の研究により、連携研究者により確立されていた方法で精製した酵素は、不均質な多量体を形成しており、結晶化には適していないことが明らかになった。2013年度には発現用タグの見直しや精製法の改良を行ったが、性状の改善には成功しなかった。2014年度には、配列類似の酵素のうち、結晶化に適しているものの検索を行った。その結果、Bacillus属の別の種由来の酵素が比較的性状が良いことがわかった。

今後、この酵素の結晶化に取り組む計画である。構造生物学ODCaseの反応触媒機構には歪みが関わるという仮説について、昨年度の研究により、その仮説に対する最も大きな反論を取り除いた。続いて本年度の研究により、歪みがどの程度反応に関わるかを計算により求めた。このため、ODCaseについては計画をやや上回るペースで研究が進んでいる。Cyc2については、結晶化に適した試料が未だ得られておらず、その結果結晶化に未だ成功していない。こちらは計画より遅れ気味である。ODCaseについては、計画を上回る速度で研究が進展し、論文にまとめることが出来た。Cyc2については、計画通りに精製条件の検討などを行ったが、結晶化に適した試料調製条件は見いだせていない。以上を総合的に勘案し、「おおむね順調」とした。ODCaseについては変異体の解析などを行い、歪みがどのように起こるのかを明らかにする。並行して、この酵素が還元剤を用いずにAzido基のAmino基に変換する可能性について、検証するための系を構築する。Cyc2については、この酵素が枯草菌由来であることを考えて、大腸菌では無く枯草菌の発現系を利用して、結晶化用の試料を作成する計画である。また、別の生物種由来のホモログ酵素も、構造解析対象に含めて研究をすすめる。ODCaseについては、構造解析・酵素学的アッセイ・計算機シミュレーションを併用した反応機構の解析を続ける。従来の研究では、別々のグループによる3つの手法による解析を、互いの実験条件の違いを考慮せずに解釈している例が目立つ。本研究では特にシミュレーションの基礎となる結晶構造の解釈・生化学的反応条件等について連携研究者と密に連絡を取り、反応機構の解釈に直結するシミュレーションを行う。また、未だ役割の解明されていない基質周辺の保存残基の役割の解明も、基質アナログ複合体のX線結晶構造解析や酵素学的アッセイによって進める。Cyc2については、様々なBuffer条件下で酵素活性を測定できる系を構築する。また、これまでの試料は大腸菌を用いて大量発現させてきたが、本来の宿主である枯草菌の発現系を活用することで、性質の変化が無いかを確かめる。これらの方法により、結晶化に適した試料を得る。以上の方法でも良い試料が得られない場合は、近縁の菌株由来のCyc2ホモログをターゲットとして、連携研究者の協力を得て活性を確認した上で、構造解析に取り組む。連携研究者、海外の共同研究者等とのミーティングに要した費用について、先方が旅費の負担を行って下さったなどの理由により、見積もりより大幅に少なく研究を遂行できた。このため、主に旅費に大きな残高が生じている。今年度は、これまでに進めてきた研究をさらに発展させるとともに、カナダモントリオールで開かれる国際結晶学会での発表を計画している。このような方針で研究費を使用させて頂く計画である。本研究費の繰越は、前年度に前倒し請求したうちの一部である。この前倒し請求は、前年度の研究が順調に進んだため、本年度に行う予定であった研究の一部を先行して行うために行った。
日本語小論文の自動評価採点、および作文支援システムの開発

本課題は、日本語小論文を自動採点ならびに作文支援を行うシステムを試作し、その性能を定量的に評価することにある。試作システムの採点基準については、アメリカにおけるビジネススクール入学のための共通試験であるGMATで用いられている構造、組織、内容をほぼそのまま踏襲し、修辞、論理構成、内容の3つの観点から評価する。日本語小論文の自動採点システムは我が国では初の試みで、既に本研究代表者らが特許出願済みであることに加え、作文支援システムはさらにこれを一歩進めるものである。この分野における研究を格段に先行するものであると言える。幸いなことに本システムについては、平成17年2月15日付け朝日新聞夕刊の1面トップにて紹介されたのを皮切りに、ASAhlパソコン(2005.4.15号「コンピュータピープル欄」)、ニッポン放送他、多くのメディアで取り上げられ、教育測定関連の研究者だけでなく広く一般にも認知されるようになった。Yahoo!インターネットガイド(2006年6月)では、「インターネットでできること300」の一つとして本システムのWebページが紹介された。本課題では以下の各項について研究を行った。(1)小論文の自動採点システムを試作し、Webで公開した。プログラムはCシェルスクリプト、jgawk, jsed, perl, Cで書かれ、全部で約1万行となった。応答時間は800から1,600字程度の小論文に対して1秒以内を達成した。(2)採点の論拠となる各メトリクス指標の影響を統計的に評価し、システム性能の向上に努めた;また評価メトリクスそのものを精緻化した。すなわち、より詳細なメトリクス指標を採用、あるいは新規に考案した。(3)評定だけでなく、診断情報を表示する作文支援機能を追加した。(4)本システムを開発環境であるLinuxからWindowsへ移植し、ネットワークを介さないクローズドの環境でも動作するようにした。(1)試作したシステムのWebでの公開新規購入したワークステーションを既存のネットワークに接続し、Webサーバを立ち上げた。プログラムはCシェルスクリプト,jgawk,jsed,perl,Cで書かれており、全部で約1万行である。応答時間は800から1,600字程度の小論文に対して2秒以内を達成した。(2)採点の論拠となる各メトリクス指標の影響評価毎日新聞のCD-ROMに納められている社説やコラム(「余録」)を模範エッセイとした場合に、文章がいかによく書かれているかの評価尺度である「修辞」と、文章の論理的構成尺度である「論理構成」の各評価尺度の特性値の分布がどのようであるのか、また代替特性となる評価尺度はどのようなもので、それらの定量的な関係はどうであるかを調査した。言い替えれば、模範エッセイの内容分析を行なった。これにより、よい小論文とは、どのような修辞上の特性と論理構成を持つのかを定量的に理解できた。(3)作文支援機能英文においてはCriterionというシステムが既にその機能を実装しており、これを参考にして日本文においても実現できるよう調査を進めた。その製品仕様だけでなく、その開発グループが国際会議等で発表した論文を調査し、技術的な詳細について知識を獲得した。作文支援には大別して1.文法(grammar)の誤り、語使用(usage)の誤り、誤植(mechanics)の類など、コンピュータが的確に作文の不備を指摘することが比較的容易と思われるものの他に、2.文体や文章の書き換え、論文構成、議論の展開など、従来、人間による高度な診断に基づいてなされる指摘とがあり、本研究では後者についてもその解決を試みるべく調査をおこなった。

研究成果はデータベースに関する有名な国際会議であるDEXAに論文が採択された。また国内では日本行動計量学会誌、および日本教育工学会論文誌に論文が採録された。これらは全て学術審査論文である。また、平成17年2月15日朝日新聞夕刊1面トップに本システムが紹介された。1)関連する研究論文4編が学術審査論文として採択された。また、本研究テーマについては、大川情報通信基金(大川財団)より人工知能分野にて研究助成を受けることが決定した。研究助成対象者は国内40件、海外10件であり、人工知能分野では4件が採択された。採択率8%。2)本システムを以下のアドレスにて公開/運用している。http://coca.rd.dnc.ac.jp/jess/800から1,600字程度の小論文に対して2秒以内で評価・採点を行う。本システムは、平成17年2月15日朝日新聞夕刊1面トップに紹介されたために、多くの反響があり、ニッポン放送、週刊アサヒパソコンなどの取材を受けた。またこれらのマスコミで紹介された。3)本システムの名称Jessを第41類にて商標登録すべく、登録願を特許庁に出願した。提出日:平成17年9月29日。4)井上達紀講師(早稲田大アジア太平洋研究センター)を中心として進めているWindowsへの移植作業(試作版)が完了した。5)本研究代表者が、日本行動計量学会第33回大会(長岡科学技術大学)で特別セッション「テキストマイニング-最新技術動向と応用事例-」をオーガナイズし,共同研究者の生田和重先生(徳島文理大)と井上達紀先生(早稲田大)が発表を行った。6)論文の論理構造の把握に関する関連文献を調査した。本システムに組み入れる予定である。1)関連する研究論文2編が学術審査論文として採択された。採択されたColing-ACL2006の国際会議は、計算機言語学および自然言語処理で最も権威のある国際会議で、ともに40年以上の歴史の中で今回は3回目の共催となった。両会議とも採択の厳しいことで知られ、今回は応募628件に対し採択140件で採択率22%であった。他にも言語処理学会第13回年次大会で、共同研究者の生田が口頭発表を行った。本システムについてはいままでも朝日新聞を始めとして多くのマスコミで紹介されてきたが、2006年6月には、Yahoo!インターネットガイドで「インターネットでできること」の一つとして本システムのWebページが紹介された。3)本システムの名称Jessが本年6月に第41類にて商標登録された。指定役務は「小論文試験に対するインターネットあるいはコンピュータによる小論文の評点付与の結果に関する情報の提供」である。4)共同研究者の井上(早稲田大アジア太平洋研究センター)を中心として進めているWindowsへの移植作業(試作版)が完了し、マニュアルを作成した。
ヒトアポ蛋白(a)過剰発現トランスジェニックウサギ作製とその動脈硬化研究への応用

平成9年度にヒトアポ蛋白(a)トランスジェニックウサギfounder lineの作製を行った。アポ蛋白(a)の発現についてはトランスジェニックウサギの血漿リポ蛋白を分離しSDS-PAGE並びにAgarosegelで分析し更にimmunoblotを行った。トランスジェニックウサギのヒトアポ蛋白(a)の分子量はヒトと同じ30kdで,血清のヒトアポ蛋白(a)の濃度は約0.5mg/dlであった。このトランスジェニックウサギを用いて正常ウサギと交配させ、さらにヘテロとホモウサギを作り出した。そして、高脂血症であるWHHLウサギを用いてアポ蛋白(a)トランスジェニックウサギとcrossbreedingも行った。アポ蛋白(a)の動脈硬化発生に及ぼす影響を検討するため、これらのウサギを用いて0.3%コレステロール食餌を負荷して、現在8週目になるが、両群との間に血清の脂質変化は認めなかった。動脈硬化の解析は16週目に予定されている。また、ヒトリポ蛋白リパーゼを過剰発現するトランスジェニックウサギの作製も試みた。現在、一羽のリポ蛋白リパーゼトランスジェニックウサギが成功した。ヒトリポ蛋白リパーゼの量は約350ng/dlでヒトの2倍ぐらいあると思われる。リポ蛋白リパーゼの活性を分析したところ、このトランスジェニックウサギのリポ蛋白リパーゼの活性は正常ウサギより約5倍高値であった。そのウサギの解析も現在進行中である。平成8年度にヒトアポ蛋白(a)トランスジェニックウサギfounder lineの作製を行った。まず,Stanford大学Dr.Lawnから提供されたヒトアポ蛋白(a)cDNAを肝臓で発現するmouse transferrinにligateし,トランスジェニックベクター(pTfHa17)をcloningした。ホルモン注射によって100匹のドナーウサギから1981個の受精卵を採集し,それにpTfHa17をマイクロインジェクションした。マイクロインジェクションした1142個の受精卵を41羽の偽妊娠(仮親)ウサギの卵管内に移植した。全部で43羽の子ウサギが生まれた。耳介生検を行い、その組織からDNAを調製してサザーンブロット法並びにPCR法によって導入遺伝子を同定した。仮親の出産率は50%で平均1羽の仮親に当たり5羽の子ウサギが生まれた。そのうち,ヒトアポ蛋白(a)遺伝子が組み込まれているトランスジェニックウサギは4羽で全体の陽性率は10%であった。導入遺伝子のコピー数はそれぞれ1,20,50,100であった。現在4羽のトランスジェニックウサギのうち,2羽が生存している。アポ蛋白(a)の発現についてはトランスジェニックウサギの血漿リポ蛋白を分離しSDS-PAGE並びにAgarose gelで分析し更にimmunoblotを行った。トランスジェニックウサギのヒトアポ蛋白(a)の分子量はヒトと同じ60kdで,血清のヒトアポ蛋白(a)の濃度は約0.5mg/dlであった。現在までにヒトアポ蛋白(a)の過剰発現するトランスジェニックウサギの作成に成功した。血清のヒトアポ蛋白(a)の濃度が低いため更に高発現founderの作成が必要である。現在,これらのトランスジェニックウサギのヒトアポ蛋白(a)発現様式について検討すると共に新しいfounderの作成も行っている。
胃癌腹膜播種に対する光技術を応用した新規治療法の開発

本邦における胃癌治療は優れた治療成績を誇っているが、転移の進んだ高度進行胃癌に対する治療はいまだ満足のいくものではない。なかでも腹膜播種をきたした胃癌患者の予後は極めて不良で、その治療法の開発は急務である。当該研究は、近年急速に進歩している光技術を応用して胃癌腹膜播種に対する新規治療法の開発を目的とするものである。具体的には、これまで困難であった抗体へのconjugateが可能となった新規光増感剤IR700(Ogawa et al., 2011)を用いて標的細胞特異的なconjugate抗体を作製し、選択的な光増感剤のデリバリーを行う、従来のphotodynamic therapy(PDT)に分子標的治療の特異性を付加した“光免疫治療"の胃癌腹膜播種への応用開発を目的とするものである。まず、胃癌腹膜播種患者の腹水から樹立した胃癌細胞株を用いた実験をもとにCXCR4受容体の発現が腹膜播種形成メカニズムに重要な役割を示しており、腹膜播種関連胃癌幹細胞の有用なマーカーとなることを別紙のとおり学会において発表した。このCXCR4受容体を標的とする抗体に新規光増感剤であるIR700を安定的にconjugateすることに成功し胃癌細胞株に取り込ませることが可能であった。さらに690nmの近赤外光を照射することで、照射範囲内の抗体を取り込んだ細胞だけに超選択的な殺細胞効果をもたらすことができた。この結果から光免疫治療に必要な抗体濃度、近赤外光の出力、必要な顕微鏡検出感度などについての基礎データを収集することができた。
リキア地方沿岸古代・中世交易都市の美術、建築、都市計画の調査

平成4年に提出した「平成5年度の調査研究実施計画」に基づいてその実績の概要を記す。1.これまでのリキア沿岸地域の調査を通じ、初期ビザンティン都市と多数の建築の遺構、陶片、フレスコ、モザイク等を発見し、既知のものと併せて組織的測量、記述を行ってきた。後述のように、本年度の調査によって、新発見の遺構の数はさらに増している。他方、これらの遺構の性格を確定し、その歴史的位置を確かめるには、他地域の関連する遺構との比較研究が不可欠である。そのため今年度は、リキア地方における調査に先立ち、あるいはこれと平行して、イタリア、ギリシャで調査、写真撮影を行なった。(1)浅野、益田、大橋はローマ市の古代遺跡フォロ・ロマ-ノに立つ5-7世紀の教会サンタ・マリア・アンティクワの壁画群を調査、撮影した。遺例の少ないこの時代の代表作としてきわめて重要なモニュメントであるにもかかわらず、これに関する写真資料はきわめて乏しく、しかも近年はその立ち入りすら厳しく制限されている。その意味でイタリア当局の許可を得、短時日ではあるが貴重な資料を得ることができたのはまことに幸であった。(2)合阪は単身ローマ以南、シシリ-等における古代の港湾都市を視察した。(3)勝又はイオニア沿岸のロドス、コス、キオス等の島にある初期ビザンティン遺跡と、その出土品を調査し、多くの知見を得た。またアテネ、テサロニキ等において、関連する領域の研究者と討論を行い、多数の文献資料を渉猟した。2.現地、とくに当該地域の中心をなすゲミレル島に関しては航空写真の必要が強く感じられる。今年も現地で、フェティエ市博物館を通じ、色々てだてを探したが、再び実現を見送ることとなった。それに代えて、大橋は、エリュデニズ-ゲミレル湾岸の東にある標高2,000mのババ山頂まで登り、湾岸全体を捉えての撮影に成功した。3.本年の現地における調査の主要部分は、ゲミレル東北岸に展開する都市の構造、機能の解明にあてられた。これに関連し、まず島全体の都市学的構成が島の頂点を中心とする古代から続く墓地(ネクロポリス)と島の東部分を占めるビザンティン時代のネクロポリス、それに島北面と沿岸部分を占める住居区域に明確に分かたれていることを確認したのは重要であった。この前提に立って観察するなら、第3会堂はおそらく古ネクロポリスの中心におかれたものであり、これに対し第2、4会堂はいずれも住居部分とネクロポリスの境界上にあると考えられる。さらにこの二会堂に関しては、住居地域を抜けて会堂に入るそのアクセッス部分に、おそらく象徴的意味を持つと思われる複数のヴォ-ルト構造の建築を配している。今回の調査ではこれら特定の建築コンプレックスに対し集中的に測量を行なった。また市街を構成する格子状に配された通路が、とくに港湾施設との関連でどのように辿れるかを構造の残されている範囲で精査し、合わせて沿岸部の諸構造を詳しく調査した。4.すでにこれまでに調査に着手した会堂に関し、測量を拡大して行なった。とくに第1教会は、今日までその全体像が不明確であったが、今回は新たに洗礼槽の発見を加えて、これまでよりは統一的平面を獲得することができた。ゲミレル島対岸の新発見の教会についての測量も予定通り完了した。5.モザイクに関する資料整理、クリアリング等は、人員の張り付けができなかったため、今後の課題としてこれを持ち越した。6.観光公害対策としては、前年度に引き続き、重要な遺構のフェンシング、観光客に対する注意と呼びかけを記した立て札の設置等を行った。水質保全を含めての組織的な環境保全計画については、今後ム-ラ県立大学、ボスフォラス大学(イスタンブル)との提携計画に平行してこれを考えることとし、その旨をム-ラ県知事と話し合った。以上前年度に提出した計画に沿った成果以外に、今年度はエリュデニズ-ゲミレル湾岸の一般調査から、従来あまり知られておらず、全く調査されていなかったいくつかの教会堂の遺構を発見した。その中でも、エリュデニズ村海水浴場近くで発見された教会堂南アプス装飾は、大部分が欠落しているものの、なお図像全体の輪郭がほぼ復元可能であり、フレスコの一部がよく残存している。これまでこの地域で発見されたもののうちでも最も芸術的質が高く、聖像論争以前のビザンティン絵画史研究に重要な資料となるであろう。