hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
熱変形抑制構造工作機械

次世代生産技術を確立する上で必要不可欠な工作機械の熱変形抑制構造について構造設計面から検討し,工作機械構造の中で重要な構成要素である主軸系の熱特性解析のための新たな方法論を提示した。更に,新たな構造概念による超精密加工用熱変形抑制構造工作機械を構築することができた。本研究により以下のような結論が得られた。(1)転がり軸受を用いた主軸系を対象に,運転中の主軸系においては熱的・力学的境界条件が相互に影響を与えながら変動する,いわゆる特性変化の因果関係の連鎖から成る熱的閉ル-プシステムが存在することを指摘すると共に,その妥当性を確認した。(2)熱的閉ル-プ概念を主軸系に適用することにより,従来その有効性が経験的に認識されているに過ぎなかった高速主軸アダプタの熱変形緩和効果を統一的に考察した。更に,主軸系全体の熱特性に大きな影響を及ぼすと考えられる軸受ハウジングとクイル構造の熱的特性について,その主軸系の熱変形に及ぼす効果を,熱的閉ル-プ概念を用いて主軸受周辺構造体の放熱効果の観点から説明できることを明らかにした。(3)熱的閉ル-プ概念と有限要素モデルによる熱特性解明のための動的シミュレ-ション方法を提案すると共に,それにより軸受ハウジング構造及びクイル構造が主軸系全体の熱的特性に及ぼす影響を解明した。更に,主軸頭内に設けられた補強リブや隔壁は,従来力学的観点からの検討が主体であったのに対し,ここでは熱慣性効果の観点から熱変形に大きな影響を及ぼすことを明らかにした。(4)極限加工を実現する上で必要不可欠であると考えられる熱変形抑制構造工作機械について詳細な検討を行ない,新たな構造概念に基づく超精密加工用小型切削加工機を開発した。そして,その評価を行なった結果,熱変形抑制構造を合理的に実現していることを明らかにした。各種製品ニ-ズの多様化、複雑化に伴って、生産システムにおける中核加工機能を構成する工作機械の高性能化が要求されている。今後益々、増大する極限加工のニ-ズに対し、それらを合目的的に実現する上での最大の誤差要因は、工作機械内外に存在する各種熱源による発生熱や不均一な温度分布に基づく熱変形であることが指摘できる。ところが、このような熱変形問題に対して構造設計面からの解決を図ろうとする試みは国内外共にほとんど行われておらず、次世代工作機械を実現する際の大きな問題になると予測される。本研究では極限加工を実現する上で必要不可欠な工作機械の熱変形抑制構造について構造設計面から詳細に検討を行った。本年度は特に、熱変形抑制の観点から工作機械構造の機能要素の体系化を行い、その結果、重要な構成要素である主軸系とテ-ブルの送り駆動系を対象として熱変形抑制構造について検討を行った。具体的には、1.主軸系とテ-ブルに送り駆動系の基本的特性を解明するため、それぞれの解析モデル構築用実験装置を作成し、種々の熱変形抑制構造について検討した。2.主軸-軸受システムの熱変形解析用シミュレ-ションモデルを構築し、熱変形のダイナミック・シミュレ-ションを行った。3.テ-ブル送り駆動系として、リニアモ-タ駆動による静圧空気テ-ブルを試作し、その熱特性、熱変形抑制方法について検討を行った。これらの要素研究の成果にもとづいて、次年度はそれらを総合して新たな概念による熱変形抑制構造の工作機械を構築し、総合評価を行う。

次世代生産技術を確立する上で必要不可欠な工作機械の熱変形抑制構造について構造設計面から検討し,工作機械構造の中で重要な構成要素である主軸系の熱特性解析のための新たな方法論を提示した.更に,新たな構造概念による超精密加工用熱変形抑制構造工作機械を構築することができた.本研究により以下のような結論が得られた.(1)転がり軸受を用いた主軸系を対象に,運転中の主軸系においては熱的・力学的境界条件が相互に影響を与えながら変動する,いわゆる特性変化の因果関係の連鎖から成る熱的閉ル-プシステムが存在することを指摘すると共に,その妥当性を確認した.(2)熱的閉ル-プ概念を主軸系に適用することにより,従来その有効性が経験的に認識されているに過ぎなかった高速主軸アダプタの熱変形緩和効果を統一的に考察した.更に,主軸系全体の熱特性に大きな影響を及ぼすと考えられる軸受ハウジングとクイル構造の熱的特性について,その主軸系の熱変形に及ぼす効果を,熱的閉ル-プ概念を用いて主軸受周辺構造体の放熱効果の観点から説明できることを明らかにした.(3)熱的閉ル-プ概念と有限要素モデルによる熱特性解明のための動的シミュレ-ション方法を提案すると共に,それにより軸受ハウジング構造及びクイル構造が主軸系全体の構的特性に及ぼす影響を解明した.更に,主軸頭内に設けられた補強リブや隔壁は,従来力学的観点からの検討が主体であったのに対し,ここでは熱慣性効果の観点から熱変形に大きな影響を及ぼすことを明らかにした.(4)極限加工を実現する上で必要不可欠であると考えられる熱変形抑制構造工作機械について詳細な検討を行ない,新たな構造概念に基づく超精密加工用小型切削加工機を開発した.そして,その評価を行なった結果,熱変形抑制構造を合理的に実現していることを明らかにした.
原生代における高Mg堆積岩類の形成場と形成環境

本研究の目的は含サフィリン片麻岩の原岩である高Mg堆積岩類の形成場・形成環境を明らかにし,体系化を試み地球環境の変遷を考察することある。本年度は以下の研究を行った.スコットランド,サウスハリス地城では,昨年度実施した岩石試料(30試料)の選定に基づき,蛍光X線全岩化学分析ならびにICP-MSによる希土類元素の測定を行った.塩基性グラニュライトに関してはMORBに類似したパターンが得られ従来の予測に調和的であることが明らかとなった.また,堆積岩由来の泥質グラニュライトについては採取されたエリアごとにHREEのパターンに相違が認められた.このことは,異なる形成場で全岩化学組成を異にする堆積岩類が形成したことを示唆しており,その詳細を今後検討していく.また,先行して研究を進めてきた含サフィリン・ザクロ石-斜方輝石グラニュライトについては,これまで数回,国際学術雑誌に投稿を行った.基本的な着想についてはおおむね受け入れられてはいるものの,1)酸素同位体組成の推定,2)同位体初生値3)分析精度の向上などが指摘され,受理には至っていない。本研究期間内にはすべてを達成することは現時点で困難であり,今後それらに対して改善,追加実験を行う予定である.高Mg堆積岩類の形成場・形成環境について体系化を試みるために,世界各地に露出する含サフィリン片麻岩類についての情報収集を行った.米国コロラド州に分布する含サフィリン片麻岩類については昨年度実施した野外調査をとりまとめ,全岩化学分析を実施した.さらにオーストラリア,アルンタ複合岩体ならびにブラジル,アナポリス岩体に産する含サフィリン片麻岩類の希土類元素のパターンも同時に比較したが,共通性は明らかにならず,これらがすべて熱水変質に由来するとは断言できない可能性が明らかになった.高Mg岩類の例として,スコットランド北西,サウスハリス地域に分布するルーイシアン岩体から見出された含サフィリン-斜方輝石-ザクロ石グラニュライト(SGO)について全岩化学組成分析を行った.分析に際しては,その周辺に分布する塩基性グラニュライト(5試料)についても同時に行った.SGOグラニュライトの全岩化学組成は周囲の塩基性グラニュライトに比べて,CaO(-10wt.%),SiO_2(-69wt.%),Na_2O(-2.4wt.%),MnO(-0.1wt.%)に枯渇しており,MgO(+10wt.%),Al_2O_3(+3.5wt.%),K_2O(+4wt.%)に富むことが明らかになった.また,この結果を現在の海嶺にみられる熱水変質帯に分布する変質玄武岩,非変質玄武岩と比較したところ,同様の元素変動を確認することができた.微量元素についても,幾つかの共通点が挙げられたことから,SGOグラニュライトの原岩は原生代の熱水変質作用を被った玄武岩であることが明らかとなった.この結果は日本地質学会111年会において「含サフィリン-ザクロ石-斜方輝石グラニュライトは海嶺熱水変質玄武岩の化石か?」として報告した.この詳細について英文論文を作成中である.また,他の例として東南極シュリマッヘルヒルズに産する含サフィリン-斜方輝石-ザクロ石(SOG)グラニュライトについても全岩化学組成分析を行った.主要元素については測定を終了したが,微量元素については未測定のため継続して化学分析を行う予定である.SOGグラニュライトの周囲に産する塩基性グラニュライトはFeに富む原岩に由来することがその鉱物組み合わせ,鉱物化学組成から示唆された.このことからサウスハリス地域とは異なる形成過程を考察し,比較対照する必要がある.また,本地域は変成年代が明確でなかったことから,SHRIMP-IIを用いてU-Pbジルコン年代測定を行い,600800Maの年代を得た.この年代は従来の研究結果と大きく異なっており,注目すべき点である.また,本岩石は中央ドロンイングモードランド地域において超高温変成作用の存在を意味しており,この新知見について英文論文を作成し投稿した.本研究の目的は特異な全岩化学組成を示す含サフィリン片麻岩の原岩である高Mg堆積岩類の形成場・形成環境を明らかにし,地球環境の変遷を考察することを目的する。本年度は以下の研究を行った.スコットランド,サウスハリス地域では,XMg60以上の高Mg堆積岩類の産状が既に明らかにされている(1/100地質図:馬場,2000).堆積岩起源片麻岩,塩基性片麻岩の主要元素の存在比の特徴を明らかにすることを目的として,岩石試料(30試料)を精密な地質図に基づき厳選した.それらについて,蛍光X線全岩化学分析を行った.得られた全岩化学組成データについての解釈は現在進行中である.また,先行して研究を進めてきた含サフィリン・ザクロ石-斜方輝石グラニュライトについては,鉱物化学組成の変化の詳細を明確にすることを目的としてEPMA分析などの補足分析を行った.これにもとづき,学術雑誌への再投稿の準備を進めている.高Mg堆積岩類の形成場・形成環境について体系化を試みるために,世界各地に露出する含サフィリン片麻岩類についての情報収集を行った.これにより,米国コロラド州に分布する含サフィリン片麻岩類,およびオーストラリア,アルンタ複合岩体に産する含

サフィリン片麻岩類に注目することが有益である結論を得た.前者の産状を把握するために現地に渡航し野外地質調査を行い,岩石試料(40試料)を採取した.また,後者については,既に調査経験のある九州大学小山内教授より岩石試料の提供を得ることができた.今後はこれらの試料についても同様の化学分析を行い,形成場・形成環境を推定し,サウスハリス地域との相違を明らかにする予定である.本研究の目的は含サフィリン片麻岩の原岩である高Mg堆積岩類の形成場・形成環境を明らかにし,体系化を試み地球環境の変遷を考察することある。本年度は以下の研究を行った.スコットランド,サウスハリス地城では,昨年度実施した岩石試料(30試料)の選定に基づき,蛍光X線全岩化学分析ならびにICP-MSによる希土類元素の測定を行った.塩基性グラニュライトに関してはMORBに類似したパターンが得られ従来の予測に調和的であることが明らかとなった.また,堆積岩由来の泥質グラニュライトについては採取されたエリアごとにHREEのパターンに相違が認められた.このことは,異なる形成場で全岩化学組成を異にする堆積岩類が形成したことを示唆しており,その詳細を今後検討していく.また,先行して研究を進めてきた含サフィリン・ザクロ石-斜方輝石グラニュライトについては,これまで数回,国際学術雑誌に投稿を行った.基本的な着想についてはおおむね受け入れられてはいるものの,1)酸素同位体組成の推定,2)同位体初生値3)分析精度の向上などが指摘され,受理には至っていない。本研究期間内にはすべてを達成することは現時点で困難であり,今後それらに対して改善,追加実験を行う予定である.高Mg堆積岩類の形成場・形成環境について体系化を試みるために,世界各地に露出する含サフィリン片麻岩類についての情報収集を行った.米国コロラド州に分布する含サフィリン片麻岩類については昨年度実施した野外調査をとりまとめ,全岩化学分析を実施した.さらにオーストラリア,アルンタ複合岩体ならびにブラジル,アナポリス岩体に産する含サフィリン片麻岩類の希土類元素のパターンも同時に比較したが,共通性は明らかにならず,これらがすべて熱水変質に由来するとは断言できない可能性が明らかになった.
精巣における内分泌攪乱物質の標的タンパク質の探索

温度感受性simian virus 40(tsSV40)大型T抗原遺伝子導入トランスジェニック(TG)マウスは,特異的機能を保持した不死化細胞株樹立に非常に有用な動物で,これまでに多数の臓器から数々の機能を保持した有用な細胞株が樹立された.また,同遺伝子導入TGラットも特異的機能を保持した不死化細胞株樹立に有用であることが示されている.今回我々は,tsSV40大型T抗原遺伝子導入TGマウスとラットから機能を保持した精巣セルトリ細胞株TTE3,RTS3-3と精巣ライディッヒ細胞株TTE1,種々の胃粘膜上皮細胞株樹立に成功した.cDNAマイクロアレイは,スライドガラス上に多数のcDNAを高密度にスポットしたもので,網羅的に遺伝子発現を解析できることからポストゲノムシーケンス時代における非常に重要な技術として注目されている.我々は,この技術を利用して,細胞の機能変化によって発現変動する遺伝子を数多く明らかにした.ビスフェノールA(BPA)の精巣セルトリ細胞への暴露によりCa^<2+>-ATPase阻害作用に基づく細胞内カルシウム濃度の一過性の上昇に続いて小胞体ストレスが誘導され,時間依存的に細胞障害が惹起された.約2,000種類の遺伝子の発現を検討した結果,BPAにより1/2以下に発現量が減少する遺伝子が3種類,2倍以上に増加する遺伝子が39種類同定された.これらの遺伝子は,6,12または24時間に発現量がピークになる3グループに分けられ,各々c-mycとfra-2,オルニチンデカルボキシラーゼ(ODC)およびchopの発現変動が顕著であった.BPAはGRP78,HSP90,chop,酸化ストレス誘導タンパク質,ODC等のストレス関連遺伝子の発現量を顕著に増加させた.温度感受性simian virus 40(tsSV40)大型T抗原遺伝子導入トランスジェニック(TG)マウスは,特異的機能を保持した不死化細胞株樹立に非常に有用な動物で,これまでに多数の臓器から数々の機能を保持した有用な細胞株が樹立された.また,同遺伝子導入TGラットも特異的機能を保持した不死化細胞株樹立に有用であることが示されている.今回我々は,tsSV40大型T抗原遺伝子導入TGマウスとラットから機能を保持した精巣セルトリ細胞株TTE3,RTS3-3と精巣ライディッヒ細胞株TTE1,種々の胃粘膜上皮細胞株樹立に成功した.cDNAマイクロアレイは,スライドガラス上に多数のcDNAを高密度にスポットしたもので,網羅的に遺伝子発現を解析できることからポストゲノムシーケンス時代における非常に重要な技術として注目されている.我々は,この技術を利用して,細胞の機能変化によって発現変動する遺伝子を数多く明らかにした.ビスフェノールA(BPA)の精巣セルトリ細胞への暴露によりCa^<2+>-ATPase阻害作用に基づく細胞内カルシウム濃度の一過性の上昇に続いて小胞体ストレスが誘導され,時間依存的に細胞障害が惹起された.約2,000種類の遺伝子の発現を検討した結果,BPAにより1/2以下に発現量が減少する遺伝子が3種類,2倍以上に増加する遺伝子が39種類同定された.これらの遺伝子は,6,12または24時間に発現量がピークになる3グループに分けられ,各々c-mycとfra-2,オルニチンデカルボキシラーゼ(ODC)およびchopの発現変動が顕著であった.BPAはGRP78,HSP90,chop,酸化ストレス誘導タンパク質,ODC等のストレス関連遺伝子の発現量を顕著に増加させた.アルキルフェノール誘導体ビスフェノールA(BPA)はポリカーボネイト,ポリスチレン樹脂等の原料として用いられ,多量に環境中に排泄されている.種々のin vitro実験系において,BPAはエストロゲン受容体に結合し,エストロゲン様活性を示すことから環境におけるBPAの内分泌撹乱作用が懸念されている.しかしながら,BPAのエストロゲン様活性は17β-エストラジオールの約数千数万の一と非常に弱い.一方,in vivo動物実験系においてBPAによる精巣上体重量の減少,精子運動能の低下,セルトリ細胞の機能変化などの精巣機能障害が報告されている.BPAによるセルトリ細胞障害誘導機構を詳細に明らかにするために,BPA処理後の遺伝子発現変化の時間経過をcDNAマイクロアレイを用いて検討した.BPA(200μM)は濃度依存的かつ時間依存的に細胞障害を惹起した.また,BPA(100-400μM)により濃度依存的に細胞内Ca^<2+>濃度が一過性に上昇し,200μMBPAによりERストレスのマーカー遺伝子BipGRP78が時間依存的に増加した.200μMBPA処置細胞の遺伝子発現変化をマイクロアレイを用いて経時的に観察した.31個の遺伝子発現の上昇が認められた.これらの遺伝子は、大きく1)時間依存的に増加する遺伝子,2)6時間後に発現が最大になる遺伝子,3)12時聞後に発現が最大になる遺伝子,に分類された.これらの遺伝子の中でchopが薬物処理直後から最も大きく変動する遺伝子であることが判明した.また,myc oncogene, fra-2とornithine decarboxylaseの顕著な発現上昇も認められた.これら4つの遺伝子の発現量の上昇はTaqMan定量的PCRで確認された.BPAによる細胞障害におけるchopの役割を解析する目的で,chopの遺伝子発現を抑制したchopR細胞を構築した.ChopR細胞ではmock細胞に比べてBPAによるchopタンパク質の発現誘導が約半分に抑制された.

同細胞において,BPAによる細胞障害は有意に抑制されたので,BPAの細胞障害に少なくとも一部chopが関与していることが示された.ビスフェノールA(BPA)は,ポリカーボネイト,ポリスチレン樹脂等の原料として用いられ,多量に環境中に排泄されているのでその環境における内分泌撹乱作用が懸念されている.BPAの作用発現機構解明を目的として,樹立した精巣セルトリTTE3細胞とcDNAマイクロアレイを用いて,BPAによって発現が変化する遺伝子群を解析した.合計約2,000種類の遺伝子の発現を検討した結果,BPAにより1/2以下に発現量が減少する遺伝子が3種類2倍以上に増加する遺伝子が39種類同定された.今回行なった実験条件下において,BPA暴露直後から最も発現が上昇する遺伝子はCEBP転写因子ファミリーに属するchopであった.本遺伝子の役割を検討するために,TTE3細胞にアンチセンスの向きでchopの遺伝子の全長を安定発現し,chopタンパク質発現量が減少したchopR14細胞を樹立した.chopR14細胞において,BPAによるchopタンパク質の発現は,mock細胞(ベクターのみ導入細胞)に比べて有意に減少した.ChopR14とmock細胞を比較した時,chop14細胞ではBPAによる細胞障害が有意に低下したが,小胞体ストレスのマーカーであるGRP78の遺伝子発現は両細胞間で差は認められなかった.これらの成績から,BPAによる精巣セルトリ細胞の機能障害発現機構の少なくとも一部にchopが関与していることが示された.
磁化した分子雲コアの分裂と収縮:動的収縮するガス円盤の非軸対称進化と連星系の形成

我々の銀河系に広がった希薄な星間ガスは、分裂・収縮を繰り返し、巨大分子雲・分子雲・分子雲コアといった階層構造を形成する。これらガスの塊のうち密度の高い領域(分子雲コア)では、生まれたばかりの星が観測され、星間ガスの繰り返される分裂・収縮の最終段階で、星が形成されることが認識されるようになってきた。また、最近の観測によると、ほとんどの星が連星系をなして生まれることが明らかになってきた。本研究の目的は、密度の高いガス雲の分裂・収縮過程を調べることにより連星が形成されやすい理由や形成される連星の物理的性質を明らかにすることである。前年度の研究から、磁場に貫かれた分子雲コアが重力収縮すると、その中心部は、初期条件にあまり依らない、温度のみで決まるガス円盤(自己相似解)に近付くことが明らかになった。さらにこの円盤は収縮を続け、細長い棒に変形することが分かった。本年度の研究から、この円盤は、さらに収縮すると、複数の塊に分裂することが分かった。さらに中心部には、回転平衡状態に近付いた円盤部分が形成され、ガス塊+ガス円盤の系へと進化する。幾つかのコアは、形成途中で近傍のコアと合体し、大きく成長する。本研究から、分かった重要なことは、星形成領域に際だって多く存在する磁気分子雲コアは、重力収縮過程において、はじめ円盤に変形し、次に細長い棒に変形し、最終的に複数のガス塊に分裂しやすいことである。つまり、星形成の標準プロセスは、従来までに考えられていたような単独星形成ではなく、連星系形成であると言える。最近の観測では、若い星の少なくとも半分は、連星系であることが分かっている。この観測事実は、磁気分子雲コアの重力収縮過程の一般的な性質であることが分かった。これらのガスの塊のうち、密度の高い領域では生まれたばかりの若い星が観測され、星間ガスの繰り返される分裂・収縮の最終段階で、星が形成されることが認識されるようになってきた。本研究の目的は、密度の高いガス雲の分裂・収縮課程を調べることにより、連星が形成されやすい理由や形成される連星の物理的性質について明らかにすることである。本年度は、磁場に貫かれたガス雲の重力収縮過程を2次元非線形数値シミュレーションにより調べた。計算は主に、国立天文台天文学データ解析研究センターの並列型ベクトル計算機を用いた。この研究から、連星のもととなるガス円盤は、その重力収縮過程において周期的に振動しながら、自己相似的に収縮を続けることが明らかになった。収縮するガス円盤の物理的性質を明らかにするために、様々な初期条件からガス雲の進化を追跡し、このガス円盤は収縮を続けるうちに、初期条件の影響を徐々に小さし、一つの解に収束することがわかった。さらに、この解を半解析的に導き、計算結果をよく再現することを示した。また、振動する間、2種類の衝撃波が発生することも明らかになった。この研究成果は現在、論文として投稿中である。
新規筋萎縮誘発法を用いたストレッチングとレスベラトロール内服の併用効果の検討

長期間にわたるギプス固定などの不動によって、廃用性の筋萎縮や筋線維化が生じる。このため、筋力低下や筋拘縮により柔軟性が制限され、ADLの低下を引き起こす。臨床的には、その改善のためにストレッチングが行われているが、効果的な介入方法は確立されていない。私たちは前課題で、ポリフェノールの一種レスベラトロールが、先天性筋ジストロフィーモデルマウスに対して筋線維化を改善することにより筋萎縮、筋力低下を改善させることを見出した。今回、その病態に線維化が関係しているとされる廃用性筋萎縮に着目した。レスベラトロールが先天性筋ジストロフィーの慢性の筋線維化を改善するのであれば、同様に線維化を改善することにより廃用性筋萎縮も改善できるのではないかと考えた。さらに、臨床で廃用性筋萎縮や線維化の防止のため日常的に実施されているストレッチングを組み合わせることで、その相乗効果でより高い効果が得られるのではないかと仮説を立てた。本研究課題では、筋萎縮モデルマウスを用いて、ストレッチングとレスベラトロール内服併用の廃用性筋萎縮・筋拘縮に対する効果を検討することを研究目的としている。昨年度までに、野生型C57BL6マウスに対して筋委縮を誘発し、その後再荷重を行うプロセスにおける筋萎縮、筋線維化に関係するファクターの変動を検討した。本年度は、筋萎縮誘発モデルマウスに対して、ストレッチングおよびレスベラトロールの投与を実施し、その効果を検討した。骨格筋の萎縮誘発には、従来から用いられているギプス固定法を用いた。ストレッチングは徒手的に実施し、レスベラトロールは食餌中に混ぜて経口摂取させた。その結果、ストレッチングとレスベラトロール内服併用群と対照群では、体重と骨格筋湿重量に関して明らかな有意な差はみられなかった。廃用性筋委縮の誘発には、独自に開発したマジックテープを用いた方法(ベルクロ法)を採用した。本研究課題では、新規誘発法による筋萎縮モデルマウスを用いて、ストレッチングとレスベラトロール内服併用の廃用性筋萎縮・筋拘縮に対する効果を検討することを研究目的としている。本年度は、野生型C57BL6マウスに対してベルクロ法で筋委縮を誘発し、その効果を従来から筋委縮誘発法として使用されているギプス固定法と比較検討を行った。その結果、新規ベルクロ法は、従来のギプス固定法を代替しうる有効な筋委縮誘発法であることが明らかになった。現在、この筋萎縮誘発モデルマウスに対する、ストレッチングおよびレスベラトロールの投与について、至適な条件を検討中である。野生型C57BL6マウスに対して、独自に開発したマジックテープを用いた方法(ベルクロ法)で筋委縮を誘発し、従来から行われているギプス固定法と比較検討を行った。その結果、ベルクロ法による筋委縮誘発は、ギプス固定法と同程度の筋萎縮を誘発可能で、しかも簡便で損傷が少ないことが明らかになった。この成果は英文誌投稿し、審査中である。現在、この筋萎縮誘発モデルマウスに対するストレッチングおよびレスベラトロールの投与について、至適な条件を絞り込んでいるところである。このように、研究予定はほぼ計画通り解析が進んでいるため、おおむね順調と評価した。廃用性筋委縮の誘発には、従来から用いられているギプス固定法と独自に開発したベルクロ法を用い比較検討を行った。本年度は、野生型C57

BL6マウスに対して筋委縮を誘発しその後再荷重を行うプロセスにおける、筋萎縮、筋線維化に関係するファクターの変動を検討した。その結果、酸化ストレス度マーカーやマイオカインやマトリックスメタロプロテアーゼ(MMPs)の中に、実験期間中に大きな変動を示すものがみられた。現在、筋萎縮誘発モデルマウスに対して、ストレッチングおよびレスベラトロールの投与を実施し、これらのファクターがどのように変化するか検討中である。本課題で取り組んできた、野生型C57BL6マウスに対して独自に開発した方法(ベルクロ法)で筋委縮を誘発し、従来から行われているギプス固定法と比較検討を行った結果は英文誌に発表した(Aihara et al., 2017)。筋委縮を誘発しその後再荷重を行うプロセスにおける、筋萎縮、筋線維化に関係するファクターのうち、酸化ストレス度マーカー(酸化ストレス度、抗酸化力)の変動については、解析の結果を英文誌に発表した(Katsuta et al., 2018)。その他、マイオカインやマトリックスメタロプロテアーゼ(MMPs)の中に、実験期間中に大きな変動を示すものがみられた。興味深いことに、骨格筋中と血中で動態が異なるものがいくつか見出された。現在、筋萎縮誘発モデルマウスに対して、ストレッチングおよびレスベラトロールの投与を実施中で、すべて終了後にこれらのファクターが対照群と比較してどのように変化するか検討する予定である。このように、研究予定はほぼ計画通り解析が進んでいるため、おおむね順調と評価した。長期間にわたるギプス固定などの不動によって、廃用性の筋萎縮や筋線維化が生じる。このため、筋力低下や筋拘縮により柔軟性が制限され、ADLの低下を引き起こす。臨床的には、その改善のためにストレッチングが行われているが、効果的な介入方法は確立されていない。私たちは前課題で、ポリフェノールの一種レスベラトロールが、先天性筋ジストロフィーモデルマウスに対して筋線維化を改善することにより筋萎縮、筋力低下を改善させることを見出した。今回、その病態に線維化が関係しているとされる廃用性筋萎縮に着目した。レスベラトロールが先天性筋ジストロフィーの慢性の筋線維化を改善するのであれば、同様に線維化を改善することにより廃用性筋萎縮も改善できるのではないかと考えた。さらに、臨床で廃用性筋萎縮や線維化の防止のため日常的に実施されているストレッチングを組み合わせることで、その相乗効果でより高い効果が得られるのではないかと仮説を立てた。本研究課題では、筋萎縮モデルマウスを用いて、ストレッチングとレスベラトロール内服併用の廃用性筋萎縮・筋拘縮に対する効果を検討することを研究目的としている。昨年度までに、野生型C57BL6マウスに対して筋委縮を誘発し、その後再荷重を行うプロセスにおける筋萎縮、筋線維化に関係するファクターの変動を検討した。本年度は、筋萎縮誘発モデルマウスに対して、ストレッチングおよびレスベラトロールの投与を実施し、その効果を検討した。骨格筋の萎縮誘発には、従来から用いられているギプス固定法を用いた。ストレッチングは徒手的に実施し、レスベラトロールは食餌中に混ぜて経口摂取させた。
A-B-A三元ブロック共重合体を用いた高分子単分子膜中の鎖末端間距離のAFM測定

高分子単分子膜中の分子パッキングを明らかにするために、polystyrene-b-poly(methyl methacrylate)-b-polystyrene(PS-b-PMMA-b-PS)を少量PMMA単分子膜に可溶化させた単分子膜を作成し、両端のPSブロックが親水基を持たないため粒子状に凝集することを用いて鎖末端間距離を測定することを目的として研究を進めている。平成25年度は、ガラス転移温度の差により、可溶化したPMMA鎖が観察できることがわかっているpoly(n-nonyl acrylate)(PNA)を用いてブロック鎖が分散できる条件を検討した。本年度は、その条件を用いて、マトリックスをPMMAに変更し、可溶化したPS-b-PMMA-b-PSの鎖末端間距離の測定を行った。測定の結果、可溶化したPMMAブロック鎖の鎖末端間距離は、PNA、PMMAマトリックスともほぼ同一であり、2次元の理想鎖に予想される鎖末端間距離の2.5倍であり、従来の予想に反し、2次元膜中で分子鎖は大きく広がり、他の分子と強く相互侵入していることが明らかになった。26年度が最終年度であるため、記入しない。高分子単分子膜中の分子鎖パッキングを明らかにするために、polystyrene-b-poly(methyl methacrylate)-b-polystyrene (PS-b-PMMA-b-PS)を少量PMMA単分子膜に可溶化させた単分子膜を作成し、両端のPSブロックが親水基を持たないため粒子状に凝集することを用いて鎖末端間距離を測定することを目的として研究を進めている。平成25年度は、まずガラス転移温度の差により、可溶化したPMMA鎖が観察できることがわかっているpoly(n-nonyl acrylate) (PNA)をマトリックスとして用い、PS-b-PMMA-b-PSが分子レベルで可溶化できる条件を探索した。その結果、(1)ブロック共重合体をPS-b-PMMA-b-PS/PNA<1/200に希釈すること、(2)展開溶液の濃度を10-4g/mLより濃くして、展開時に常にブロック共重合体の周りにPNA分子鎖が存在するようにすることで、両端のPSブロック鎖が互いに融合することなくPS-b-PMMA-b-PSを分子分散できることを見出した。さらに、マトリックスをPMMAに変更し、本コンセプトでPMMA分子末端間距離を測定できることを実証した。
マントルダイナミクスの解明に向けた大容量高圧発生技術の開発

今年度は、昨年度までに確率した、川井型マルチアンビル装置を用いた高温高圧発生技術をさらに発展させ、50万気圧、2000°Cという温度圧力発生を可能にした。この値は従来マルチアンビル装置を用いて行われてきた実験の圧力が、27万気圧までで頭打ちされていたことを考えると、飛躍的な進歩である。高温条件での超高圧発生が可能になったことを利用し、22万気圧から50万気圧という幅広い圧力領域で、マントルの主要構成成分である、MgO-FeO-SiO_2系の相平衡実験を行い、下部マントルの研究へと応用した。実験には川井型マルチアンビル装置と焼結ダイヤモンドアンビルを組み合わせて使用し、発生圧力の決定には放射光その場観察実験法を用い、実験は主に大型放射光施設、SPring-8で行った。昨年度は1500°Cにおける一連の実験を行ったが、今年度はそれに加えて、2000°Cでの実験を45万気圧まで行った。それにより、深さ約1400km、下部マントル中部領域までの、MgO-FeO-SiO_2系の相平衡を決定した。下部マントルの主要構成鉱物である、マグネシウムケイ酸塩ペロブスカイトへの、鉄の最大固溶量の温度圧力依存性を詳細に決定し、また共存するマグネシオウスタイトとの間の、鉄-マグネシウム分配関係を明らかにした。その結果、下部マントル最上部から中部にかけては、分配係数に大きな圧力依存性が存在することが観察され、二価鉄イオンはマグネシオウスタイトに強く濃集することが判明した。また、2000°C、40万気圧という温度圧力条件では、マグネシウムケイ酸塩ペロブスカイトへ30%以上もの鉄成分が固溶することが初めて明らかになり、今回の実験から得られた試料を今後詳細に分析することは、固体地球最大の体積を持つ、マグネシウムケイ酸塩ペロブスカイト固溶体の性質を知る上で重要な手がかりとなる。今年度は当初の研究計画におおむね沿った成果が得られた。第一に14mm角焼結ダイヤモンドアンビルを用いた高圧発生技術を確立した。マルチアンビル装置に掛ける荷重を試料部へと伝える圧力媒体、ガスケットの材質、サイズを最適化することで40GPa以上の高圧力を安定して発生させることを可能とした。第二に、先に述べた試料設定を用いて室温におけるジルコニウムのω-β相転移のその場観察実験を行った。SPring-8放射光を用いたX線回折実験による圧力決定と、ジルコニウムの抵抗測定を同時に行うことにより相転移圧力を精密に決定した。この結果は室温の圧力較正点として有用なものである。第三に高温高圧発生用のセルアッセンブリーの開発を行った。室温の実験に用いたセルアッセンブリーにランタンクロマイトヒーターを組み込み、1800°C程度の温度を定常的に発生させることを可能とした。高温高圧実験時は1500±1°Cで30分間の保持が可能と、温度発生についても非常に高い安定性を実現した。第四にこの高温高圧発生用アッセンブリーを用いてMgO-FeO-SO_2系における相平衡実験を行った。SPring-8におけるその場観察と回収試料のEPMA分析、XRD分析によってペロブスカイトへの鉄の最大固容量と、共存するマグネシオウスタイトの鉄含有量を決定した。実験温度は1500°C、圧力範囲は27、35、43GPaと幅広くとっており、マルチアンビル装置を用いた実験としては異例といえる。
英語聴解に適した語彙定義文音声データベースの構築

本研究の目的は、語彙理解に役立つ平易な定義文の音声データベースを構築すること、また、作成された語彙定義文の英語学習における効果的な提示法、使用法、データベース化の手法を考案することにある。研究は以下の(1)から(7)の調査・実験、成果発表に基づき進められた。調査・実験は手法の再検討を基に、改良や新しい手法の追加を行い、繰り返し行われた。(1)題材選択英文の週刊雑誌の最新の号から、約1000語からなる100の記事を題材として選択(2)語彙選択語彙リストと学習者調査に基づき、難易度中程度以上の語彙を対象語彙として選択(3)連想語彙調査記事読解学習後、対象語彙から日本人英語学習者が連想する語彙の調査実施(4)語彙定義文録音英語母語話者による連想語彙リストを参照しながらの定義文の録音実施英英辞典から引用した定義文の録音実施(5)聴解実験実施2種類の音声定義文を用いた聴解実験実施(6)音声定義文提示モデル考案音声定義文を文脈に埋め込んだ提示モデル考案(7)データベース手法考案英英辞典音声定義文と作成音声定義文を埋め込んだデータベースソフト考案(8)研究成果発表国際学会に於ける研究成果の発表と意見・情報収集(9)研究成果公開研究成果報告書(冊子体)、定義文音声ファイル(CD)、データベースソフト(CD)の作成本研究の目的は、語彙理解に役立つ平易な定義文の音声データベースを構築すること、また、作成された語彙定義文の英語学習における効果的な提示法、使用法、データベース化の手法を考案することにある。(1)題材選択英文の週刊雑誌の最新の号から、約1000語からなる100の記事を題材として選択(2)語彙選択語彙リストと学習者調査に基づき、難易度中程度以上の語彙を対象語彙として選択(3)連想語彙調査記事読解学習後、対象語彙から日本人英語学習者が連想する語彙の調査実施(4)語彙定義文録音英語母語話者による連想語彙リストを参照しながらの定義文の録音実施英英辞典から引用した定義文の録音実施(5)聴解実験実施2種類の音声定義文を用いた聴解実験実施(6)音声定義文提示モデル考案音声定義文を文脈に埋め込んだ提示モデル考案(7)データベース手法考案英英辞典音声定義文と作成音声定義文を埋め込んだデータベースソフト考案(8)研究成果発表国際学会に於ける研究成果の発表と意見・情報収集(9)研究成果公開研究成果報告書(冊子体)、定義文音声ファイル(CD)、データベースソフト(CD)の作成本研究の目的は、リスニングでの語彙意味理解が可能である平易な定義文の音声データベースを構築し、作成された語彙定義を聴解の語彙学習に使用することで、学習者の聴解力が向上することを、言語実験を施行し検証することである。本年度は、機器購入により環境を整備し、また、データベース構築の研究方法について議論を行った。録音環境は、購入機器と現有設備の簡易防音室により、良好な環境での音声録音が可能となった。討議の結果、研究の具体的な手順は以下の17となった。1.日常生活上重要な英語語彙及び英語長文の選択・収集2.日常語彙及び長文から選択された語彙を対象とした、辞書からの定義文の選択・収集3.日本人英語学習者の、対象語彙からの連想語彙の調査、収集4.連想語彙調査から得られた結果に基づく、語彙定義文の作成5.辞書からの定義文と学習者の連想語を基に書かれた定義文の朗読及び録音6.朗読、録音された定義文を用いた、外国語学習教材の作成7.定義文2種類を用いた心理言語実験の実施第1段階の語彙と長文の選択、収集をはじめに、作業は段階的に進められているが、今後、語彙が蓄積されるに従い、学習者コーパスの調査、辞書定義文の調査、外国語学習者の心的語彙構造に関わる語彙レベルの調査、説明のわかりやすさに関する文章構造の調査、聴解に影響する発話速度や音声特徴の調査、音声データの効果的提示方法、定義文音声データを提示することの効果について、個々の段階から,研究の発展を促進させることが可能である。本研究の日的は、語彙意味理解に役立つ平易な定義文の音声データベースを構築することにある。また、作成された語彙定義文を学習に使用することで、学習者の語学力が向上することを、言語実験を施行し検証することである。本年度は、録音環境の改善、予備言語実験の施行、言語教育応用可能性の検討、データベース作成手法の検討、研究成果中間発表を中心に研究が進められた。特に、語彙連想ゲームを、即興発話データ収集手法として、また、発話・聴解教授法として試行し、発声・知覚の点から分析を行った。言語実験では、日本人英語母語話者間、英語母語話者間、日本人英語学習者と英語母語話者間の対話を、語彙連想ゲームを用いて録音した。録音データは、音声分析ソフトを用いて、母音の長さと音質を基準に分析し、それぞれの特徴を比較した。日本人英語学習者間の対話では、英語母語話者間対話の母語話者の母音と異なり、学習者の母音は、音質よりも長さの変化に依存することが観察された。

同じ傾向が日本人英語学習者と英語母語話者間の対話でも観察された。母音を基準とした分析からは、学習者間と対母語話者で学習者の発話に向上は観察されないが、長期的学習による効果は期待できると思われる。実験結果を基に、対話形式の音声語彙定義文作成が日本人英語学習者の発話訓練や聴解訓練に役立つ可能性があることを示唆した。本年度の研究成果のまとめは、以下の17に示す通りである。1.語彙連想ゲームを用いた即興発話データ録音2.録音音声データ分析3.分析結果のまとめ4.語彙連想ゲームを用いた即興語彙定義発話の言語教育への応用可能性検討5.データベース作成手法検討6.言語習得関連国際学会での成果発表7.教育関連国際学会での成果発表本研究の目的は、語彙理解に役立つ平易な定義文の音声データベースを構築することにある。また、作成された語彙定義文の英語学習における効果的な提示法、使用法、データベース化の手法を考案することである。本年度は、言語実験、言語データの収集、結果データの分析を実施し、次の4点の成果を明らかにすることを目的に研究が進められた。(1)語彙理解に役立つ平易な定義文の音声データベースを試作し、選択語彙、作成文の妥当性を吟味する。(2)作成された語彙定義文のデータベース化手法を吟味する。(3)作成された語彙定義文の提示法モデルを吟味する。(4)音声データベースの言語学習への応用法を提案する。本年度の研究成果のまとめは、以下の(1)から(9)に示す通りである。(1)日本人英語学習者の連想語彙の収集(2)日本人英語学習者の連想語彙を加えた定義文の作成(3)英英辞典から引用した定義文と新たに作成した定義文の録音(4)2種類の定義文を用いた聴解実験の実施(5)実験結果のまとめ(6)音声語彙定義文の英語教育への応用可能性検討(7)音声語彙定義文提示モデルの考案(8)音声語彙定義文データベース化手法の考案(9)国際学会での成果発表
海洋性カロテノイドの新規作用機序を介した筋萎縮予防効果の解明

本研究では、筋萎縮初期応答に着目し、これまでに知られていない海洋性カロテノイドの作用機序と筋萎縮予防効果について、研究期間内に以下のことを証明する。(1)生体における海洋性カロテノイドの局在解析a.ミトコンドリア分画法による海洋性カロテノイドの局在解析、b.蛍光免疫染色によるミトコンドリア内での海洋性カロテノイドの局在解析(2)海洋性カロテノイドの機能性解析c.ミトコンドリア由来酸化ストレスに対する海洋性カロテノイドの作用、d. Z線構造崩壊に対する海洋性カロテノイドの作用(3)筋萎縮モデルマウスを用いた海洋性カロテノイドの効果e.筋萎縮抑制効果の検討本研究では、筋萎縮初期応答に着目し、これまでに知られていない海洋性カロテノイドの作用機序と筋萎縮予防効果について、研究期間内に以下のことを証明する。(1)生体における海洋性カロテノイドの局在解析a.ミトコンドリア分画法による海洋性カロテノイドの局在解析、b.蛍光免疫染色によるミトコンドリア内での海洋性カロテノイドの局在解析(2)海洋性カロテノイドの機能性解析c.ミトコンドリア由来酸化ストレスに対する海洋性カロテノイドの作用、d. Z線構造崩壊に対する海洋性カロテノイドの作用(3)筋萎縮モデルマウスを用いた海洋性カロテノイドの効果e.筋萎縮抑制効果の検討
筋浮腫の治療戦略を探る-リンパ管形成とそのメカニズムより

リンパ管系は骨格筋組織の恒常性維持に重要な役割を担っている。当研究グループでは、廃用性筋萎縮時、および筋力トレーニングによる筋萎縮からの回復促進応答と、筋内リンパ管分布との関係や、そのメカニズムの解明に取り組んでいる。1)11週齢のC57BL/6Jマウスを2週間と4週間の尾部懸垂(Tail suspension, TS)による後肢筋萎縮モデルを作製した。各群からヒラメ筋などを採取し、凍結切片を用いてHE染色または免疫組織化学染色による観察を行った。結果として、対照群(Con)と比べて、ヒラメ筋の横断面積(CSA)およびCD31陽性毛細血管数はTS 2週とTS 4週ともに減少したことが分かった。LYVE-1陽性リンパ管数は、TS 2週では有意な差が無かったが、TS 4週では有意に少なかった。また、VEGF-CとEndostatinのタンパク発現量では、前者がTS 4週に、後者がTS 2週、TS 4週ともにCon群と比べて有意に多かった。TSによる廃用性筋萎縮に伴い、リンパ管分布構造の変化が毛細血管と比較してやや遅いことは、両脈管の役割の違いが反映していると考えられた。また、筋内リンパ管数の減少にはEndostatinが関与する可能性が示唆された。2)筋萎縮に対する筋力トレーニング(TR)については、足関節の底屈筋群に低周波電気刺激による等尺性収縮運動を施行した。実験群では、4週間TSの後1-2週間のTRを行い、Con群では、4週間TSの後1-2週間に通常飼育した。また、底屈トルクの測定による筋力の評価や筋組織のHE染色像による横断面積の評価を行った。その結果、萎縮から回復促進の効果が示唆された。ただし、免疫組織化学染色等によりリンパ管の形態応答に及ぼす影響とそのメカニズムの検証は進行中である。該当年度の目標は萎縮筋に対する運動刺激がリンパ管の形態応答に及ぼす影響を検証することである。そのためにリンパ管内皮細胞の特異的マーカーであるLYVE-1、血管内皮細胞のマーカーであるCD31を用いて、免疫組織化学的に筋内毛細リンパ管及び毛細血管の同定や定量分析を行った。特に、筋萎縮4週目頃リンパ管の数が減らし、毛細血管の減少より遅れることが判明した。この結果から筋内微小循環の恒常性の維持に毛細血管と毛細リンパ管の役割の違いが示唆された。また、尾部懸垂モデルには筋浮腫に対するリンパ管の増殖応答が低下する可能性があるため、リンパ管の新生因子として重要と考えられているVEGF-C、VEGF-D、VEGFR-3のタンパク質量の解析が難航していた。そこで、血管内皮細胞の増殖や遊走を阻害するEndostatinなどの関与を検討し始めた。さらに、筋力トレーニングによる筋萎縮領域の筋線維回復が観察されたが、リンパ管の大きさや密度、内皮細胞の増殖能などとの関連性を調べるには、リンパ管内皮細胞特異的マーカーとして重要なProx-1やpodoplaninなどを併用すべきと考えられた。当初の計画に沿って研究を推進し、以下の3つの問題を解決する実験も行う予定である。1)筋萎縮からトレーニング強度による筋力回復促進応答を模索中ですが、マウスを用いた実験における運動負荷量の設定は、特にリンパ管に対する最適な負荷量が判明するのはかなり難しいため、さらに筋力測定装置の精度を上げ、動物の数を増やして検証する必要がある。2)筋萎縮に伴うリンパ管の分布が減少する傾向が認められたが、筋浮腫に関わる間質液の変化をどのように検証するかとの課題が残るため、筋萎縮以外に筋損傷モデルの作成が必要あると考える。筋損傷の回復に関わるリンパ管の機能・構造的変化や筋委縮時に比べることで、筋疾患におけるリンパ管の役割を考える上で重要である。3)タンパク質レベルの研究から疑問に思ったことを明らかにするため、RT-PCRを用いた遺伝子レベルでの解析に力を入れて取り組んでいる。外科術後の固定や長期臥床等による不動状態は、筋萎縮とともに筋浮腫を引き起こす。この筋浮腫は関節の可動域制限や日常生活活動の低下を引き起こし、その治療や予防は理学療法にとって重要な課題である。筋中組織液の汲み上げは血管系還流に加えリンパ管系が重要な役割を担っている。よって、筋浮腫は不動によるリンパ管系の何らかの機能低下が原因と考えられるが、その治療戦略はもとより、病態像やそのメカニズムすら不明な点が多い。そこで、筋萎縮モデルマウスを用いて、不動による筋萎縮・筋浮腫と筋内リンパ管系の分布との関係、およびそのメカニズムを検証する。更に、我々の開発した定量的運動負荷装置を用いて、運動刺激によるリンパ管の形態応答や最適な運動刺激方法を明らかにするとともに、そのメカニズムを検証する。該当年度では、マウス尾部懸垂モデルを作製し、一般的な組織学的観察に加えリンパ管の特異的マーカーであるLYVE-1、Podoplaninを用いた免疫組織学的観察により、リンパ管の分布、大きさ及び密度などの検証を行った。また、リンパ管新生の指標としてVEGF-C/-Dなどを、リンパ管新生抑制の指標としてEndostatinの活性をWestern blotting法による解析した。その結果、骨格筋の萎縮時には、リンパ管の総数や筋線維あたりのリンパ管数は変化しないが、単位面積あたりのリンパ管数が増加することが判明した。一方、この現象に関しての生化学的な検証については、VEGF-C/-D蛋白の発現が認められた。現在萎縮筋に対する運動刺激がリンパ管の形態応答に及ぼす影響を検証している。

当該年度の目標は不動による筋萎縮と筋内リンパ管系分布との関係を検証することである。そのために、24週間の尾部懸垂により筋萎縮モデルを作製した。筋萎縮群マウスの足関節底屈筋群を採取し、一般的な組織学的観察に加え、LYVE-1やCD 31などを用いた免疫組織学的検証により、萎縮に伴うリンパ管や毛細血管の分布や数、構造などの変化を検証した。また、リンパ管増殖因子であるVEGF-Cなどを、リンパ管新生抑制の指標としてEndostatinなどの活性をWestern blottingやRT-PCRによる生化学的な検証を実施した。電子顕微鏡や免疫電子顕微鏡を用いて、リンパ管内皮細胞間の接合や細胞小器官の変化など、正常とは異なる所見の有無を検証中である。以上、本課題はおおむね順調に進展していると考える。リンパ管系は骨格筋組織の恒常性維持に重要な役割を担っている。当研究グループでは、廃用性筋萎縮時、および筋力トレーニングによる筋萎縮からの回復促進応答と、筋内リンパ管分布との関係や、そのメカニズムの解明に取り組んでいる。1)11週齢のC57BL/6Jマウスを2週間と4週間の尾部懸垂(Tail suspension, TS)による後肢筋萎縮モデルを作製した。各群からヒラメ筋などを採取し、凍結切片を用いてHE染色または免疫組織化学染色による観察を行った。結果として、対照群(Con)と比べて、ヒラメ筋の横断面積(CSA)およびCD31陽性毛細血管数はTS 2週とTS 4週ともに減少したことが分かった。LYVE-1陽性リンパ管数は、TS 2週では有意な差が無かったが、TS 4週では有意に少なかった。また、VEGF-CとEndostatinのタンパク発現量では、前者がTS 4週に、後者がTS 2週、TS 4週ともにCon群と比べて有意に多かった。TSによる廃用性筋萎縮に伴い、リンパ管分布構造の変化が毛細血管と比較してやや遅いことは、両脈管の役割の違いが反映していると考えられた。また、筋内リンパ管数の減少にはEndostatinが関与する可能性が示唆された。2)筋萎縮に対する筋力トレーニング(TR)については、足関節の底屈筋群に低周波電気刺激による等尺性収縮運動を施行した。実験群では、4週間TSの後1-2週間のTRを行い、Con群では、4週間TSの後1-2週間に通常飼育した。また、底屈トルクの測定による筋力の評価や筋組織のHE染色像による横断面積の評価を行った。その結果、萎縮から回復促進の効果が示唆された。ただし、免疫組織化学染色等によりリンパ管の形態応答に及ぼす影響とそのメカニズムの検証は進行中である。該当年度の目標は萎縮筋に対する運動刺激がリンパ管の形態応答に及ぼす影響を検証することである。そのためにリンパ管内皮細胞の特異的マーカーであるLYVE-1、血管内皮細胞のマーカーであるCD31を用いて、免疫組織化学的に筋内毛細リンパ管及び毛細血管の同定や定量分析を行った。特に、筋萎縮4週目頃リンパ管の数が減らし、毛細血管の減少より遅れることが判明した。この結果から筋内微小循環の恒常性の維持に毛細血管と毛細リンパ管の役割の違いが示唆された。