hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
線虫の筋肉遺伝子の発現時期と発現量を決める転写因子の単離同定

筋肉はいくつかの部品で構成されている分子モーターである。生化学的手法で構成成分の単離同定が行われ、物理化学的方法で生理機能が調べられている。本研究では線虫を使って筋肉の構成部品合成を促進する因子CeMyoDの合成を制御している上流め因子について解析した。主な手法は遺伝子操作技術に加えて酵母ツーハイブリッドシステム、酵母ワンハイブリッドシステム、形質転換線虫における蛍光標識遺伝子の観察である。またゲノムのデーター解析もおこなった。得られた結論は分子モーターの組立にはプラモデル型の全製品を準備して各部毎に組み立てるのではなく、全体計画の中で大まかな調節と各部品の個別制御を組み合わせたやり方であった。線虫の体壁筋で発現する筋肉遺伝子(群)の発現時期と発現量を制御する転写因子(複合体)を単離同定する目的で、CeMyoDの遺伝子hlh-lのイントロン内にある3つのエンハンサー配列に結合する転写因子複合体にっいて調べた。これまでに酵母ツーハイブリッド法でCeMyoDと結合する3つのLIMドメインを持つ蛋白質LIM-8と,酵母ワンハイブリッド法でhlh-lにあるエンハンサー1275配列と結合する2つのCCH型Znフィンガーを持つ蛋白質CeTISllを単離した。これらの蛋白質が線虫の筋肉でどのように分布しているか、in vitroで直接結合するかどうかを明らかにした。抗CeTISll抗体により、CeTISllはCeMyoDとLIM-8と体壁筋に存在する事を確かめた。CeMyoDがLIM-8および、CeTIS11と結合するかどうかは、大腸菌で生産した各蛋白質を用いて、SDS-PAGEおよびウエスタンプロッティング法で調べた。オーバーレイしたCeMyoDはLIM-8および、CeTIS11と結合した。3つめのエンハンサー1330配列に結合する因子の単離を酵母ワンハイブリッド法による単離を行ったが、単離出来ていない。以上の結果を第15回国際線虫集会、第2回東アジア線虫集会(ソウル)および、日本遺伝学会、日本生物学会にて発表した。投稿論文は2編準備中である。関連論文は合計7編発表した。1線虫の体壁筋遺伝子の発現制御に関わる新規蛋白質LIM-8のN端側がCeMyoDと結合することを酵母ツーハイブリッドシステムで確認した。次に、LIM-8のGFPレポーター遺伝子を用いた蛍光観察により体壁筋、浸透圧調節細胞、間隙細胞など多数の組織で発現することを明らかにし、LIM-8に対する抗体を用いた免疫組織学的手法で体壁筋の核内に存在することを観察した(16年度購入蛍光装備付き実体顕微鏡)。RNAi法によりLIM-8を除去しても筋肉の形態に変化は見られなかったが、レポーターGFPの蛍光量が減少して、線虫の運動速度は20%減少した。LIM-8のN端側と中央部の核外移動シグナルを除去するとトロポニンCの量が12%および35%増加した。LIM-8遺伝子の熱誘導による強制発現では体壁筋特異的なミオシン重鎖とトロポニンCの量がともに増加することをウエスタン解析により確かめた。以上ことからLIM-8は体壁筋の核内でCeMyoDと協同して遺伝子発現に関わっていると結論できたので投稿論文を準備中である。

2 CeMyoD遺伝子にある3つのエンハンサー配列のうち、一つの配列にCeMyoDが結合することを酵母のワンハイブリッド法を用いて確かめた。別のエンハンサー配列に結合する新規蛋白質CeTIS11のGFPレポーター遺伝子を線虫に形質転換して観察した結果、咽頭筋および体壁筋で発現することを確認した(16年度購入蛍光装備付き実体顕微鏡)。抗体を作成したのでさらに詳しい細胞内局在を調べている。RNAi法によりCeTIS11を除去したときに、線虫の著しい運動不良が起こることを明らかにした。以上の結果はCeTIS11はLIM-8と結合して体壁筋遺伝子nの発現量を促進していることを示唆する。3トロポニンIの4つのアイソフォームについて発現場所、発現制御配列についての結果を論文に発表した。組織特異的な発現制御領域の限定は現在行っている。1.線虫の体壁筋遺伝子の発現調節に関わるLIM-8について昨年までに酵母ツーハイブリッドシステムを用いてLIM-8のN-末端側が筋肉蛋白質の転写因子CeMyoDと結合することを見いだしている。今年度はLIM-8のプロリンに富むN-末端側とLIMドメインを3つ含むC-末端側の2つのペプチドを大腸菌体内にて作成してメンブレンにブロットした。別途調製したCeMyoDを蛋白質オーバーレイ法により結合させ、CeMyoDのモノクローナル抗体を用いて確かめところ、LIM-8の全長ペプチドとのみ結合した。このことはLIM-8が折り畳まれた立体構造を取ることでCeMyoDと結合して転写制御複合体を形成することを示している。さらにCeMyoDの細胞核内での局在を調べた。昨年までにLIM-8が細胞核内のDAPIで染色されるDNAとは別の所に存在することを確かめており、LIM-8はCeMyoDと局在する場所が共通する事が分かった。2.線虫の体壁筋遺伝子の発現を促進するCeTIS11についてCeMyoDと結合するもう一つの転写因子としてC3H型Znフインガーを持つCeTIS11についても解析しており、昨年はその遺伝子をRNA干渉法によりノックダウンすると、著しく線虫の運動や産卵などの筋肉機能が低下することを見いだした。LIM-8はCeMyoDと結合して筋肉遺伝子の発現を制御していると考えられるが、CeTIS11はCeMyoDが結合するエンハンサーDNAの隣接部位に結合配列が存在しているのでLIM-8より顕著に遺伝子発現に関与しているのだろう。CeMyoDの3つめのエンハンサーに結合する因子の単離を酵母ワンハイブリッド法により行っているが、まだ単離されてないので、H18度も引き続きスクリーニングを行う予定である。3.その他筋肉遺伝子発現調節を行っている5`上流領域のエンハンサー配列についてゲノムワイドの解析を行った。線虫の体壁筋で発現する筋肉遺伝子(群)の発現時期と発現量を制御する転写因子(複合体)を単離同定する目的で、CeMyoDの遺伝子hlh-1のイントロン内にある3つのエンハンサー配列に結合する転写因子複合体について調べている。これまでに酵母ツーハイブリッド法でCeMyoDと結合する3つのLIMドメインを持つ蛋白質LIM-8と,酵母ワンハイブリッド法でhlh-1にあるエンハンサー配列と結合する2つのCCH型Znフィンガーを持つ蛋白質CeTIS11を単離した。
有髄歯漂白剤に関する研究

1980年代末から欧米諸国で非常にポピュラーになった変色歯の漂白法は、歯を削除することなく歯の色調のみを変える方法で、日本でも臨床現場では認知されつつある。有髄歯の漂白は、歯の表面から薬剤を作用させるので効果には偏差が存在し、満足できる結果をうるには、漂白メカニズムの解明や有効な術式の検討が必要不可欠である。本研究の目的は、有髄変色歯の漂白メカニズムの解明と効果的な漂白剤を検討することである。Office Breach剤を活性化する従来型の200500mmW程度の強度の照射器に代えて、1000mmW以上の光量のキセノン光源の照射器を使用すると、処置時間は180秒から30秒へ減少した。また、過酸化尿素10%とカスタムトレーを使用するHome Bleach法を80名に対し適用し、臨床症状が発現しにくく、漂白効果の高い有用性の高い漂白法であることがあきらかになった。さらに漂白用主剤である過酸化水素に苛性ソーダを加えpHを中性にしてラジカルの発生を促進させ、人口変色させたウシ下顎前歯を漂白する実験を行った。その結果、ウシ下顎前歯を0.5%塩基性フクシンに4日間浸漬して作成した実験室的な変色歯に、三種の漂白剤、松風ハイライト(第1世代Office Breach剤)、pHが中世の漂白剤、Quasar Brite,Apollo Secretを塗布し、ハロゲンランプ60秒照射のハイライトは△Eが7.9であったのに対し、キセノンランプ30秒照射では△E21.3と、短時間で大きな漂白効果を示し、またQuasar Briteにキセノンランプ30秒照射では△E23.4ときわめて大きな色調変化を示した。処置後のエナメル質表面の性状をSEMで観察しとところ、pH3.84.1程度の漂白剤は、7.48.0程度のものに比べやや粗造になる様子が観察された。米国では90年代はじめから販売されていた、有髄変色歯漂白剤Shofu Hi-liteが、厚生省の薬事認可を得て98年5月から日本でも販売されるようになり、審美的歯科治療がマスコミに取り上げられたことも相まって有髄歯の漂白法が次第に認知されつつある。平成10年度は、Office Bleach薬剤である松風ハイライトが漂白剤を活性化するのに用いている、200500mmW程度の光強度を有するコンポジットレジン重合用照射器に代えて、1000mmW以上の光量を有するキセノン光源の照射器を使用することを試み、同程度の漂白効果ならばチェータイムを大幅に減少させることができる可能性が示唆された。また、過酸化尿素を10%程度含むゲルとカスタムトレーを使用するHome Bleach法(Discus Dental Nite White Excel)については、80名の患者に対する臨床試験を行い、本法が知覚過敏などの臨床症状が発現しにくく、漂白効果の高い有用性の高い漂白法であることを報告した。さらに、漂白用主剤である過酸化水素のpHを、苛性ソーダなどを用いて塩基性よりにして、ラジカルの発生を促進して漂白効果を向上させるような試みを、実験室的に行っている。臨床的にはOffice Bleach法あるいはHome Bleach法によっても、患者が要求する審美性を完全に達成することのできない重度の変色症例が存在するために、このような症例には両者を併用しながらなおかつ知覚過敏の生じにくい効果的な術式を、平成11年度において検討する予定である。

有髄歯の漂白は、歯の表面から薬剤を作用させるので効果には偏差が存在し、満足できる結果をうるには、漂白メカニズムの解明や有効な術式の検討が必要不可欠である。本研究の目的は、有髄変色歯の漂白メカニズムの解明と効果的な漂白法を検討することである。Office Bleach剤を活性化する従来型の200500mmW程度の強度の照射器に代えて、1000mmW以上の光量のキセノン光源の照射器を使用すると、処置時間は180秒から30秒へ減少した。また、過酸化尿素10%とカスタムトレーを使用するHome Bleach法を80名に対し適用し、臨床症状が発現しにくく、漂白効果の高い有用性の高い漂白法であることがあきらかになった。さらに、漂白用主剤である過酸化水素に苛性ソーダを加えpHを中性にしてラジカルの発生を促進させ、人工変色させたウシ下顎前歯を漂白する実験を行った。その結果、ウシ下顎前歯を0.5%塩基性フクシンに4日間浸潰して作成した実験室的な変色歯に、三種の漂白剤、松風ハイライト(第1世代Office Bleach剤)、pHが中性の漂白剤、Quasar Brite、Apollo Secretを塗布し、ハロゲンランプあるいはキセノンランプにより光照射した場合、漂白前と漂白後の色調の差(色差△E、CIELab表色系)は、ハロゲンランプ60秒照射のハイライトは△Eが7.9であったのに対し、キセノンランプ30秒照射では△E21.3と、短時間で大きな漂白効果を示し、またQuasar Briteにキセノンランプ30秒照射では△E23.4ときわめて大きな色調変化を示した。処置後のエナメル質表面の性状をSEMで観察したところ、pH3.84.1程度の漂白剤は、7.48.0程度のものに比べやや粗造になる様子が観察された。
多段階発がんを促進する遺伝要因の作用機構

発がんは多段階で起り、その各段階には遺伝子の突然変異が関与していると考えられている。本研究は、そのような多段階のそれぞれが促進されたり、抑制されたりすることがあり、それがどのような機構によるかを解明することを目的とする。患者が高頻度に発がんする高発がん性遺伝病は、そのような研究にもっとも適した対象である。太陽光中の紫外線という外的要因によって皮膚がんを多発しやすい色素性乾皮症患者の皮膚腫瘍における、がん遺伝子(H-,K-,N-ras)とがん抑制遺伝子(P53)の突然変異を解析した。ras遺伝子は、多くのヒトがんで、第12、13、61コドンの突然変異が見出され、がん化の原因と考えられているが、そのような変異は、色素性乾皮症患者には見出されなかった。一方P53遺伝子の突然変異は高頻度に見出され、しかも、紫外線特有と考えられるDNA損傷がすべて関係していた。マウスに人工的に紫外線で作成した皮膚がんでは、逆にras遺伝子の突然変異は高頻度に見出されたのに対し、P53遺伝子の突然変異は検出できなかった。この結果から、ヒトの紫外線発がんにおいては、P53遺伝子の突然変異の促進が重要であり、ras遺伝子の役割は小さいと結論できる。ヒトとマウスの違いの理由は、両者の紫外線損傷修復機構の差異による可能性が考えられ、今後の研究課題である。
硬組織の形成と破壊を制御するストア作動性カルシウム流入機構の解明

免疫系細胞は造血幹細胞より分化し、骨髄において骨芽細胞や破骨細胞などの硬組織構成細胞と共通の微少環境を形成し、多くのシグナル分子を共有している。破骨細胞分化に必須な共刺激シグナルであるITAM-カルシウム経路に注目し、細胞内カルシウム感知センサーとしてのSOCE(Store-operated Calcium Entry)を詳細に解析することで、造血系細胞のみならず間葉系分化の分子機構についても新しいシグナル伝達経路を提唱できるかどうか検討した。T細胞においてNFATを活性化する因子のスクリーニング系から、SOCEを調節するセンサー分子であるSTIM1/2および細胞膜型チャネルOrail遺伝子クラスターを同定し、C2C12細胞を用いたBMP-2依存性の骨芽細胞分化誘導系、骨髄マクロファージを用いたRANKL依存性の破骨細胞分化誘導系において、STIM1/2・Orail遺伝子の発現を確認した。さらに、RAW264.7からのRANKL依存性の破骨細胞分化が、STIM1/2およびOrailのsiRNAによるノックダウンによって明らかに抑制されることを示した。Orai遺伝子のexon2をpGK-Neoで置換し、3'long armにDTAを挿入したターゲティングベクターを作製し、ES細胞にelectroporationして得られた相同組換え体をblastcyst注入し、独立したキメラマウスを2系統得た。ヘテロマウスの交配によって作出されたホモマウスは新生仔致死性であった。STIM1/STIM2については両遺伝子のdouble floxマウスをCathepsin K CreまたはSox9 Creと交配し、破骨細胞または骨軟骨前駆細胞における表現型の解析をおこなっている。
超音波２波法によるスポーツ競技選手の骨組成の検討－特に骨質に注目して－

本研究は,大学スポーツ選手を対象に,スポーツが骨構造に与える影響について,筋のトレーニング効果と関連して検討を加えるものである.特に本研究は,トレーニング課程における「骨」の変化を観察する目的から,超音波を使用した骨密度測定装置を使用した.その結果、トレーニングの過程における「筋」の変化を「骨」の変化とともに観察した場合,筋肥大を目的としたウェイト・トレーニングでは皮質骨骨密度と,パワー向上を目的としたウェイト・トレーニングでは,海面骨骨密度との間に関係があることが判明した.今後は,各種スポーツ活動およびトレーニング方法の違いによる骨構造の変化を,超音波測定装置を用いて検討を加える.本研究は,超音波を用いた骨密度測定装置を用いて,スポーツ活動によって生じる重力負荷が「骨強度」および「骨質」にどのような影響を与えるのかを考究する.今回使用する骨密度測定装置は,超音波により定量的骨質評価を行うもので,超音波の弾性波動を利用するため,従来のX線法では計測不可能な骨の構造的弾性性質すなわち「骨質」を評価できる特性を持つ.このような超音波の伝搬特性を生かした新しい超音波法によって,骨の内部構造と骨強度,骨密度と弾性定数すなわち骨質を定量的に計測する.本研究は,以上の研究内容を,整形外科医,アスレチックトレーナー,超音波法骨密度測定装置の開発技術者と共同で実施し,スポーツ競技選手の資質,特にスポーツと骨組成の関係について多角的な視野から検討を加える.調査項目は従来の一般的計測に加えて,多用途筋機能評価運動装置による等速性筋力,インピーダンス法測定装置を用いて体脂肪量,筋量,体水分量等の体組成等を調査する.また,シーズン中に発生した外傷の記録から,骨とスポーツ傷害の関連性についても検証を行う.最終的に,それらの研究成果を競技力向上のための新しいトレーニングメニューとスポーツ傷害リスクを発見するスクリーニングテストの開発に運用する.本研究は,大学体育会所属クラブのスポーツ競技選手を対象として各種測定からスポーツ選手の資質を明らかにし,大学スポーツの競技力向上に貢献することも目的とする.大学スポーツは,日本の国際的競技力を支える重要なカテゴリーである.そのため,将来的な競技力向上を視野に入れた場合,大学生スポーツ選手を科学的に分析・強化することが,我が国の競技力を向上させることになると考え本研究を実施する.本研究は,大学スポーツ競技選手を対象として,超音波骨密度測定装置を使用し,スポーツが骨組成に与える影響について,筋のトレーニング効果と対比して検討を加える.本研究において骨組成測定に使用する機器は,超音波により定量的骨質評価とともに,また超音波の弾性波動を利用するため,従来のX線法では計測不可能な骨の構造的弾性性質すなわち「骨質」を評価できる特性を持つ.このような,超音波の高速波と低速波の2波の伝搬特性を生かした新しい超音波法によって,骨の内部構造と骨強度,骨密度及び弾性定数すなわち骨質を定量的に計測する.そのため本研究は,特に従来では不可能であったスポーツと骨質の関係について検討を加えることが可能になった.また骨組成測定と同時に,MRI検査装置による筋形質の観察,多用途筋機能評価運動装置による等速性筋力,インピーダンス法測定装置を用いて体脂肪量,筋量,体水分量等の体組成等を調査し,スポーツ活動による運動負荷が,骨組成に与える影響を多角的に検討する.以上の測定に加え,シーズン中に発生した外傷の記録から,骨とスポーツ傷害の関連性についても検証を行う.最終的に,それらの研究成果を競技力向上のための新しいトレーニング・メニューとスポーツ傷害リスクを発見するスクリーニング・テストの開発に運用する.本研究は,同志社大学スポーツ健康科学部の人的・物的資源を利用するだけでなく,総合大学としての同志社大学のメリットを最大限活用することにより,スポーツ競技選手に必要と考えられる外的・内的資質を検討する.2015年度は,2014年度に引き続き,スポーツ選手の体組成および身体的パワーと骨組成との関係に注目し検証を行った.測定項目は,超音波骨密度測定装置により骨塩量,骨弾性等の骨組成の詳細な調査とともに,形態計測と体組成測定(体脂肪量・筋量・体水分量)等から身体的特徴および,ジャンプ・テストにより身体的パワーを調査した.以上の成果を2015年7月に開催された国際学会で発表するとともに,海外のジャーナルに投稿した.本研究は,大学スポーツ競技選手を対象として,スポーツが骨組成に与える影響について,筋のトレーニング効果と対比して,検討を加えることを目的としている.本研究は,トレーニング課程における「骨」の変化をみるため,超音波骨密度測定装置を使用して観察する.また筋形質の変化の観察は,MRI検査装置により行う.その成果を効果的なトレーニング作成のための資料とし,競技力向上に貢献することもその目的とする.本研究で使用する超音波骨密度測定装置は,超音波の弾性波動を利用し,X線法では実現しなかった「骨質」すなわち骨の「弾性的特性」を評価できるため,新しい角度からスポーツ活動による重力負荷および筋収縮と骨組成との関係について検討を加えることが可能である.本研究は,大学体育会所属クラブのスポーツ競技選手を対象として各種測定を実施する.その理由は,大学スポーツは社会人スポーツとともに日本の国際的競技力を支える重要なカテゴリーであるためである.そのため,将来的な競技力向上を視野に入れた場合,大学生スポーツ選手を科学的に分析・強化することが,我が国の競技力を向上に貢献できると考えたためである.現在まで,トレーニング過程における筋の変化と対比して「骨」の変化を観察した場合,筋肥大を目的としたウェイト・トレーニングにおいては,皮質骨骨密度とに有意な関係がみられ,パワー向上を目的としたウェイト・トレーニングでは,海面骨骨密度との間に有意な関係がみられた.

今後は,このトレーニング方法の違いによる骨密度の変化を引き続き追求するとともに,スポーツと骨質すなわち骨の弾性的性質との関係を明らかにする.2016年度は,昨年度と同様に同志社大学体育会に加盟するスポーツ競技選手,特に片手で用具を操作する競技選手とコンタクトスポーツ選手を対象として各種の測定を実施した.研究方法は,BIODEXを使用した等速性筋力測定,インピーダンス法による形態・体組成測定,超音波骨密度測定装置による手関節骨密度測定を行い,それと同時にMRIによる筋画像撮像・解析を実施した.各測定は,厳寒期と猛暑期を除いて,春期および秋期のトレーニング開始期と試合期前のトレーニング終了期の2回に分けて実施した.被験者は,前年から継続して測定に協力してもらい,トレーニング負荷が及ぼす骨・筋の変化を観察した.本研究は,将来的な国際的な競技力向上を視野に入れたことから,大学スポーツ競技選手を対象として,スポーツが骨組成に与える影響について,筋のトレーニング効果と対比して,検討を加えた.特に本研究は,トレーニング課程における「骨」の変化を観察する目的から,超音波を使用した骨密度測定装置を使用した.また筋形質の変化の観察は,MRI検査装置を用いた.その成果を効果的なトレーニング作成のための資料とし,競技力向上に貢献することもその目的とした.以上の測定の結果、現在まで,トレーニング過程における筋の変化と対比して「骨」の変化を観察した場合,筋肥大を目的としたウェイト・トレーニングにおいては,皮質骨骨密度とに有意な関係がみられ,パワー向上を目的としたウェイト・トレーニングでは,海面骨骨密度との間に有意な関係がみられた.本研究で使用した超音波骨密度測定装置は,超音波の弾性波動を利用し,X線CT法では実現しなかった「骨質」すなわち骨の「弾性的特性」を評価できるため,スポーツ活動による重力負荷および筋収縮と骨組成との関係について検討を加えることが可能である.その結果,野球選手における検討では,ボールスピードの向上と骨の弾性的特性において、相反する結果が見られたことは興味深いものであった.今後は,各種スポーツ活動およびトレーニング方法の違いによる骨組成の変化を,超音波測定装置の特長を生かた,特に,スポーツ活動と骨質すなわち骨の弾性的性質との関係に注目し検討を加える.本研究は,大学スポーツ選手を対象に,スポーツが骨構造に与える影響について,筋のトレーニング効果と関連して検討を加えるものである.特に本研究は,トレーニング課程における「骨」の変化を観察する目的から,超音波を使用した骨密度測定装置を使用した.その結果、トレーニングの過程における「筋」の変化を「骨」の変化とともに観察した場合,筋肥大を目的としたウェイト・トレーニングでは皮質骨骨密度と,パワー向上を目的としたウェイト・トレーニングでは,海面骨骨密度との間に関係があることが判明した.
添加物を用いない衝撃波による乳化加工技術の研究

分散質、分散媒がともに液体である分散系溶液となる乳化は、食品、材料、燃料等に多く利用されている。安定的な乳化を得るためには、乳化剤が多用され、さらに長時間の攪拌を必要とする。本研究は、衝撃波を用いて乳化を行うことで、使用する乳化剤の量を低減すること、乳化の際にかかるエネルギーと時間の低減を目的としている。本研究では油滴が水中に分散するエマルションを水中油滴水中油滴(O/W型)エマルションについて実験を行った。衝撃波発生源としては火工品である導爆線(カヤク・ジャパン(株)製)を使用し、起爆には6号電気雷管(カヤク・ジャパン(株)製)を使用した。試料に負荷する水中衝撃波の圧力は導爆線と試料との距離を変化させることで調節可能である。作成したエマルションの評価は、粒度分布測定機(Malvern社製Zetasizer Nano ZS)を用い、それぞれについて油滴の平均粒径を測定することで行った。また、経時変化も測定し、エマルションの安定度も評価した。全体的には、各試料とも平均粒径が2μm以下となり、良好なエマルションを生成した。また、平均粒径の測定結果から、衝撃波処理後時間が経ったものの粒径が小さくなる結果が出た。通常エマルションは、時間が経っごとに分散した液滴が合一していき、液滴の粒径が大きくなっていく。今回の実験の結果は、それとは全く逆の結果が出ている。この原因としては、初期段階で存在した粒径の大きな液滴が、時間が経っとともに合一し、完全に分離してしまったのではないかということが考えられる。しかし、試料を目視で比較したところ、白濁度合いに明らかな変化は確認されず、同一の状態を保持しているように見受けられた。顕微鏡観察・比重測定による原因解明が今後の研究課題である。
Rab7低分子量G蛋白質による後期エンドソーム/リソソーム系輸送制御機構の解明

研究代表者は、これまでにCytoTrap法を用いてRab7低分子量G蛋白質の新規標的蛋白質Rabring7を同定している。本研究では、Rab7による後期エンドソーム/リソソーム系の輸送制御を解明することを目的に、Rabring7の解析を進めた。そのなかで、Rabring7にはアミノ酸レベルで約40%の相同を示す相同遺伝子が存在することを見い出した。この遺伝子産物は、Rab7とは結合せずにRab8と特異的に結合することからRabring8と命名した。Rabring8もRabring7と同様に、N末端側にRab結合領域、C末端側にRING finger motifしており、このRING finger motifがRabring8によるRab8のポリユビキチン化反応に寄与していることを明らかにした。Rabring8によるRab8のポリユビキチン化はK48Rユビキチン変異体を発現させた細胞でも観察されたこと、また、Rabring8の強制発現により細胞内Rab8の発現量は変化しなかったことから、Rabring8はユビキチンープロテアソーム系を介してRab8の発現量を調節しているのではないことが示唆された。Rab8はトランスゴルジネットワーク(TGN)から形質膜への輸送を制御すると考えられている。実際、Rabring8の強制発現によりTGNから形質膜へのEGF受容体の輸送が、GTP結合型Rab8を強制発現させた場合と同様に抑制を受けた。ユビキチンは後期エンドソーム/リソソーム系輸送制御においても鍵となる分子であることから、来年度はRabring8で得られた知見をもとに、Rabring7とユビキチン化反応との関連に注目した解析を行いたい。このように本年度の研究は予想以上に進展し、当初の目的はほぼ達成できた。
教育における対話実践の思想史的検討ーローゼンツヴァイクを起源としてー

本研究は、教育における対話実践の理論を、ローゼンツヴァイクを起源として捉え直すことで、「聞く」という観点から対話のあり方を構想し直し、教育思想史に対話のあり方についての新たな理論的・実践的なインプリケーションを示すことを目的として開始された。当初、まずローゼンツヴァイクの教育論と翻訳論に含まれる対話思想を明らかにすることを目標としていたが、精査してみると彼の対話思想は、主著『救済の星』の「救済」概念において、すでに現われていることがわかった。このことは、単に彼の教育思想において対話を重視していたのではなく、彼の思想全体を貫く重要な概念として対話を重視していたことを示している。そのため、本研究について、イスラエルで行われた国際ローゼンツヴァイク学会で「社会的次元における「救済」の意味」(ドイツ語)というタイトルで発表した。そこでは最先端のローゼンツヴァイク研究者と意見を交換することもできた。ドイツ語の解釈についてや、ローゼンツヴァイクの「民族」の解釈についてなど、本研究の遂行にとってきわめて貴重な意見や質問を得ることができたため、今後の研究に活かしたい。また、初年度である本年度は、日本語訳のないローゼンツヴァイクの講義録や書簡等の翻訳作業を、中央大学の村岡晋一先生とともに行った。論文集として出版する計画を進めているが、出版社の担当の方が代わったため、次年度に具体的に話を進めていくことになる。国際学会での発表により、ローゼンツヴァイクの教育論と翻訳論に含まれる対話思想を明らかにするための予備的考察ができたこと、そして、日本語訳のないローゼンツヴァイクの講義録や書簡等の翻訳が順調に進展していることから、おおむね順調だと言える。翻訳については自由ユダヤ学院で行われた講義録やそれについて書かれた書簡で重要となるものについては、残るところ2つとなった。しかし、教育論と翻訳論に含まれる対話思想については、予備的な考察に留まっているため、次年度に行いたい。次年度は、本年度の成果を踏まえて以下の課題に取り組みたい。1.ローゼンツヴァイクの教育論や講義録の翻訳を終え、論文集として出版する。2.教育論と翻訳論にふくまれる対話思想を明らかにする。とくに彼が創設し教鞭をふるった自由ユダヤ学舎での教育実践を、当時の時代状況の分析とともに明らかにすることを計画している。3.2の成果を学会発表ないし論文として発表する。残りの金額で購入予定の図書を購入すると、海外から取り寄せのため、次年度に繰り越してしまう可能性が高かったため、若干の金額が残っている。次年度にローゼンツヴァイク全集の一部の購入に充てる予定である。
ラン科植物ムヨウラン属植物の菌根共生系の実態解明、および栽培に関する研究

研究目的:本申請では、移植、栽培が困難な野生ランであるムヨウラン属植物を対象とし、(1)日本国内に自生するムヨウラン属植物全12種の菌根菌の多様性を明らかにすることでムヨウラン属植物が、どのような菌根菌と共生し、生育しているのかを明らかにし、(2)比較的個体数の多いムヨウランについて、菌根菌の分離培養および外生菌根形成試験を行い、樹木、菌根菌の共生系が確立させ、(3)そこへムヨウランの種子を播種し、種子発芽から開花に至るまで栽培することで、ムヨウラン属植物の増殖技術確立のための基礎的知見の集積を行うことを目的とするものである。研究方法:新潟県沖縄県に至る広範囲な地域よりムヨウラン属植物の根の一部を125株分採集した。実験室に持ち帰り、菌根菌の菌糸塊を抽出し、そこからDNAを抽出し、ITS1・ITS4のプライマーを用いrDNAのITS領域を増幅した後、シーケンスを行うことでDNAの塩基配列を決定し、菌根共生する菌種を特定した。菌根菌の分離培養には、外生菌根性菌類の培養に使用するMMN培地を使用し、根から菌糸塊を抽出し培養した。研究成果:ムヨウラン属植物はベニタケ科のチチタケ属およびベニタケ属菌に特異性を持ち生育することが明らかとなった。この菌への特異性は種によって大きく異なり、エンシュウムヨウランについては採集した4地点すべての個体よりチョウジチチタケに極めて近縁な菌種が高頻度で検出された、それに対しクロムヨウラン、ムヨウラン、ホクリクムヨウランなどの種ではベニタケ属、チチタケ属の様々な菌種が分離され、菌根菌への強い特異性はみられなかった。また、南方に分布するシラヒゲムヨウラン、アワムヨウランなどはAtheliaceaeの菌種も菌根菌となることも明らかとなった。全体の結果から、南方起源のムヨウラン属が温帯地域に適応するに従い、チチタケ属植物の特定の種と共生関係が構築されるようになったことが併せて想定された。菌根菌の分離培養は、チチタケ属菌の菌根菌が10系統分離された。しかし、ベニタケ属菌やAtheloaceaeなどの菌根菌は分離培養することができなかった。その理由として、これらの菌種は樹木に外生菌根を形成することが知られていることから、特殊な栄養要求性を有しているのがその原因と考えられる。これらの菌株を外生菌根性樹種であるコナラの実生苗の根に定着させ外生菌根を形成させる実験を行ったが、現在のところ菌根形成は確認されていない。本研究ではサンプリングと実験に多大な時間を要したので菌根定着試験を行う段階にまで至らなかった。
植物-植物相互作用における細胞外空間の可塑的動態

平成28年度の研究においては、第一に平成27年度に実施したネナシカズラ-ダイズ寄生部位細胞壁構成成分の観測結果の普遍性をもう一つの寄生系であるアメリカネナシカズラ-シロイヌナズナ寄生系において確認を行った。すると、ネナシカズラ-ダイズ系で顕著に観察された後生篩部でのフコシル化キシログルカンの高度蓄積が、アメリカネナシカズラ-シロイヌナズナ系では見られないことがわかった。それに対して、吸器先端部においてネナシカズラ-ダイズ系で観察されたLM6抗体抗原の高度蓄積はアメリカネナシカズラ-シロイヌナズナ系でも観察され、吸器先端の探索糸と呼ばれる伸張性のある細胞の細胞壁に蓄積していることが明らかとなった。この蓄積物質を明確にするためLM2抗体ならびにヤリブ染色を実施し、その結果探索糸細胞壁に高蓄積しているのはアラビノガラクタンタンパク質(AGP)であることがわかった。アメリカネナシカズラには67個のAGP遺伝子があるため、探索糸で発現しているAGP遺伝子をin situハイブリダイゼーションにより探索した。その結果、探索糸で発現する5つのファシクリン様AGP遺伝子を同定した。探索糸AGPの寄生における役割を明らかにするために、ヤリブ試薬の寄生部への投与や、AGP糖鎖分解酵素発現シロイヌナズナを宿主として使うこと等を実施したが、寄生を非効率化するような影響は見られなかった。今後5つのAGP遺伝子のサイレンシングを継続する。第二に吸器内での維管束分化機構に関与する遺伝子を同定するため、ネナシカズラCLE41ホモログ遺伝子の発現プロフィールと発現部位を精査した。その結果、CLE41遺伝子は維管束分化に先駆けて一過的に発現上昇し、in situハイブリダイゼーションにより道管隣接領域と宿主篩管隣接細胞で発現していることが明らかとなった。アンチセンスRNAも吸器で発現が確認された。28年度が最終年度であるため、記入しない。平成27年度の研究においては、第一に宿主茎組織中でのネナシカズラ寄生根伸長の時間的変化の再確認を行なった。計画立案の段階では、寄生根が宿主ダイズ茎組織に侵入する際に「一旦形成層より先に進んで、その後形成層まで後退して維管束と接続を作る」という観測をしていたが、今年度この寄生根の挙動について寄生部位横断切片を作製し、今年度購入した生物顕微鏡を用いて確認を行なった。すると、上述した挙動は典型的ではないことがわかった。典型的には、寄生根の先端が形成層付近で停止しその後寄生根先端が形成層に沿って茎の円周方向に拡がる、という挙動が見られることが明らかとなった。よって今後の研究はこの観測に基づいて遂行することにした。第二点目として、寄生部位における細胞壁構成成分の時空間的分布を6種類のエピトープ特異的抗体を用いて観測した。併せてフロログルシノール染色によってリグニン化の進んだ細胞壁の分布を観測した。この中で、フコシル化キシログルカン特異的抗体であるCCRC-M1抗体を用いたところ、寄生初期ではネナシカズラ茎の表皮に集積が見られたが、寄生後期では寄生根周辺の宿主ダイズの側後生師部の細胞壁に集積が見られた。また宿主細胞壁のリグニン化は、寄生根の先端側で抑制され寄生根の円周方向側で顕著に進むことが明らかになった。逆に寄生根内部の細胞壁ではリグニン化はほとんど見られなかった。第三点として、準備研究の段階で行なった寄生部位の寄生段階別RNA-Seqの結果の中から、細胞壁分解合成関連遺伝子と維管束形成関連遺伝子に関して、実際に発現しているcDNAのクローニングを進め、本年度購入したリアルタイムPCR装置を用いてRNA-Seqの結果の検証に着手した。維管束形成制御遺伝子の一部のものに関して、センスおよびアンチセンス両方の転写産物が生産されていることを明らかにした。当初計画で労力配分が大きいと考えられていた細胞壁構成成分の免疫染色による観測と、遺伝子クローニングと発現再確認がほぼ計画通りに進行していることに加え、それらの過程でさらに発展的に寄生機構を説明できると思われる作業仮説を設定できるような実験事実が得られたため。探索糸

AGPの寄生における役割を明らかにするために、ヤリブ試薬の寄生部への投与や、AGP糖鎖分解酵素発現シロイヌナズナを宿主として使うこと等を実施したが、寄生を非効率化するような影響は見られなかった。今後5つのAGP遺伝子のサイレンシングを継続する。第二に吸器内での維管束分化機構に関与する遺伝子を同定するため、ネナシカズラCLE41ホモログ遺伝子の発現プロフィールと発現部位を精査した。その結果、CLE41遺伝子は維管束分化に先駆けて一過的に発現上昇し、in situハイブリダイゼーションにより道管隣接領域と宿主篩管隣接細胞で発現していることが明らかとなった。アンチセンスRNAも吸器で発現が確認された。H28年度においては、まず細胞壁構成成分の免疫染色から、寄生根の侵入に伴って宿主ダイズの師部および木部の細胞壁構成が影響を受けている可能性が示唆されたので、この点に関する検証を進める。師部細胞マーカー遺伝子であるAPLやSEORを用いてフコシル化キシログルカン含有細胞壁が増加している細胞を特定し、寄生根侵入との因果関係を明らかにする。また木部リグニン化が抑制された変異体等を用いて、寄生根から木部リグニン化制御因子が出ている可能性を検証する。第二点目としては、維管束形成制御に関与するセンス転写物およびアンチセンス転写物の寄生根内部での発現場所を特定するとともに、LNAを用いたストランド特異的にRNA干渉をかける技術を用いて、アンチセンス転写物の寄生過程への必要性を検証したい。また更なる研究の効率化を図るためCuscuta campestrisとシロイヌナズナのペアからなる寄生系へ移行を進める。28年度が最終年度であるため、記入しない。
脊椎動物のボディープランの分子的基盤-形態形成遺伝子-

Hox遺伝子群が肢芽間充織との相互作用により四肢筋前駆体で位置特異的に発現し、筋の断裂過程と密接に関連する事を明らかにした。Six2の腱前駆体での発現には軟骨及び表皮からのシグナルが協調的に作用し、Hoxがこれらに対する感受性を調節していることを明らかにした。(黒岩)δ-クリスタリン遺伝子のエンハンサーDC5に作用する転写調節因子として、胚発生過程において水晶体プラコードで発現するSOX2/SOX3およびPax6を同定した。胚への異所的遺伝子導入法により、これらの転写因子が水晶体プラコードの分化を誘導できることを明らかにした。(近藤)ホヤの胚発生におけるホメオボックス遺伝子群の機能及び発現調節機構の解析を通じて脊椎動物に至るボディープラン確立について検討を行った。特にOtxは前方神経への分化を促進すること、また転写活性化因子として下流標的遺伝子の転写調節を行っていることを明らかにした。(西駕)Hox-c4標的遺伝子として線虫のmab21のオーソログmmab1及びそのホモログmmab2をマウスの新規遺伝子として分離同定した。これらの遺伝子の機能解析を行うためにノックアウトマウスを作製したところ、胸骨形成過程でHox-c4によるmmab1の発現制御が示唆される結果を得た。(高橋)ショウジョウバエstill lifeのマウスホモログSTEFはRacに特異的なグアニンヌクレオチド交換因子である。STEF分子はRacの活性化を介してアクチン細胞骨格系の構造変化を引き起こし、神経細胞の移動、突起伸展、シナプス形成に関与していることが示唆された。(鍋島)ショウジョウバエ突然変異の解析により、個体のサイズを決定する遺伝子がありこれが進化的に保存された機能未知のタンパク質をコードすることを見出した。遺伝的相互作用の解析から、E2Fの上流で機能し、細胞の発育に関わるインスリン受容体シグナル伝達系への関与が明らかになった。(西田)Hox遺伝子群が肢芽間充織との相互作用により四肢筋前駆体で位置特異的に発現し、筋の断裂過程と密接に関連する事を明らかにした。(西田)四肢軟骨分化に重要な機能を持つBMP_-4はHoxとオーバーラップした発現様式を示す。トランジエントトランスフェクション系でHoxa_-13は、BMP_-4プロモーターの転写活性化を行う事が示され、BMP_-4がHoxの標的遺伝子である可能性が示された。(黒岩)Pax6とSox2/3の共発現が水晶体分化の必要条件であり、誘導による外胚葉からの分化でも、分化転換の場合にも成り立つことを示した。眼胞から外胚葉への作用によって、外胚葉にSox2/3の発現が誘導され、水晶体原基を規定することを示した。(近藤)線虫と哺乳類で共通なHox標的遺伝子と考えられるmab遺伝子の発生過程における発現パターンと細胞内局在をin situハイブリダイゼーションおよび免疫組織化学的方法で明らかにした。(高橋)筋細胞分化過程で分化する細胞とreserve cellのサブポピュレーションに分かれること、この現象はcell autonomousであること、分化誘導初期のMyoDの発現の維持(分化細胞)、停止(reserve cell)に依存している。発生に関与しているSim2,Nrf2のノックアウトマウスの作製に成功し、表現型について解析中である。(鍋島)新規のパターン形成突然変異Gp6には複数のP因子が挿入されており、その純化を行った。ショウジョウバエp38相同遺伝子(Dmpk2)をクローニングし、これのdominat negative型の高発現により、Dpp/Tkvシグナル伝達系の下流で機能することを明らかにした(西田)

四肢筋前駆体で時間的空間的に特徴的な発現様式を示すHoxa-11とHoxa-13について、これらの発現を制御する肢芽間充織因子について解析を行った。FGFはHoxa-11の誘導を行い、FGF,HGFは維持に機能する。肢芽後部間充織からのBMP-2シグナルは四肢筋前駆体のHoxa-13の発現に必要とされることが明らかになった。(黒岩)δ-クリスタリン・エンハンサーに作用する様々な転写制御因子の機能を評価した結果、(1)SOXの結合はδ-クリスタリン・エンハンサーの活性に必須である。(2)PAX6の結合は水晶体上皮でのクリスタリン発現を抑制している。(3)LargeMAFは、水晶体繊維部分でのエンハンサーの活性を高めることが明らかになった。(近藤)マウスHox標的遺伝子nmab1のシスエレメントの解析を行いHoxのin vivo結合領域に転写調節領域が存在することを明らかにした。線虫mab21遺伝子のエレメントの解析も行い、Hox(eg15)と遺伝学的に相互作用するrayでの発現を規定するエレメントによる発現が、eg15の異所的発現によって誘導されることを明らかにした。(高橋)Pax-5とFGF8が中脳視蓋の誘導に関わる中脳後脳境界部(峡部)で機能していることをin ovo electroporation法により検証した。また峡部より頭方で発現しているOtx-2と尾方で発現しているGbx2の強制発現実験よりOtx-2とGbx-2の境界部にFgf8の発現が誘導されることが示された。(仲村)神経回路網形成の基盤となる神経突起の伸展や移動などの分子機構を解析する目的で、新規グアニンヌクレオチド交換因子STEFを同定し構造を決定した。神経系における発現の解析や、培養細胞への遺伝子導入によりSTEF分子がRacの活性化を介してアクチン細胞骨格系の構造変化を引き起こし、神経細胞の移動や神経突起の伸長、およびシナプス形成等に関与していることが示唆された。(鍋島)ショウジョウバエMAPKKの優性復帰突然変異株の検索から、スフィンゴ脂質生合成の初期反応を触媒するSerinepalmityo-transferaseをコードする生存に必須なlaceを同定した。これの温和な変異体では、セラミドなどのスフィンゴ脂質のde novo合成の異常によりアポトーシスシグナルに対する感受性が高まっており、JNKカスケードの活性化によりアポトーシスが誘導され、一方、MAPKカスケードは抑制することが示唆された。(西田)Hoxa-13の標的遺伝子候補であるBmp-4について、トランジェントトランスフェクション系で転写調節機構の解析を行ったところ、Bmp-4プロモーターにあるSp1サイトを介することが判明した。この系用いHoxa-13タンパク質の機能ドメイン解析を行ない、ホメオドメイン及びそのすぐ上流に転写活性化ドメインがあり、またホメオドメインは転写活性化ドメインに対して制御的に作用していることを明らかにした。(黒岩)
マルチモーダルタッチケアロボットの開発と心理学的検証

インタラクションロボットが真に社会に浸透するために不可欠な人とロボットの信頼関係を構築するには、対話による視覚・聴覚刺激と共に触覚刺激を同時に与えるタッチケアが有用である。しかし、インタラクションロボットでは物理的接触が発生するコミュニケーションを主眼においた例は少ない。さらに単なる「さわる」という接触ではなく、より人にやさしく接触する「なでる・さする」動作を実現した例はない。本研究では、ロボットと人の親和性の向上を目的とし、「なでる・さする」動作の触覚刺激を含むマルチモーダルタッチケアロボットの開発を試みる。さらに、タッチケアロボットの効果を生体情報計測に基づく心理学的評価により検証する。本研究では、高齢者ケア等で必要とされているロボットと人の親和性の向上を目的とし、対話による視覚・聴覚刺激と共に「なでる・さする」動作の触覚刺激を含むマルチモーダルタッチケアロボットの開発を試みている。さらにタッチケアロボットの効果を生体情報計測に基づく心理学的評価によって検証を行う。視覚・聴覚刺激のみならず、繊細な「なでる・さする」動作をロボットで実現し、触覚刺激の情報をも含んだ統合的マルチモーダルタッチケアロボットを開発しようとする試みは、高齢化社会が進む現代においてその必要性と独自性の点で評価できる。タッチケアロボットの効果を生体情報計測に基づく心理学的評価によって検証することは、対話・ロボット制御技術の発展において重要な役目を果たすものと考えられる。
児童の性格要因とＱ－Ｕから見た学級経営の視点からの小学校外国語活動研究

本研究では、小学校外国語活動、学級経営、児童の性格要因という三者の関係を調査した。学級経営の状態と児童のソーシャルスキルの測定にはhyper-QU質問紙を、児童の性格要因の測定には、小学生用所要5因子性格検査を用いた。結果は、外国語活動の成否は、良い学級作りがその土台にあることが再確認された。また、良い学級風土は、児童個々の性格要因の醸成に寄与していることも分かった。さらには、豊かな心や社会規範、他者を思いやる気持ちを持った児童ほど、外国語活動に積極的に参加し楽しんでいることも明らかとなった。1年目の予備調査に続き、2年目の昨年度は本調査を行った。調査対象としたのは、仙台市内の中規模小学校2校の5・6年生5クラス、及び東北地区で小中一貫教育の特区を受けている1校の4年生から中学1年生までの8クラスである。質問紙として使用したのは、学級の状態と児童・生徒個人のソーシャルスキルを測定するhyper-QUと、児童・生徒の性格要因を測定する(小学生用)主要5因子性格検査(The Big Five Personality Inventory)、及び12教科に対する好き・嫌いを尋ねる質問紙である。調査回数及び時期は、新学期が始まりまだ学級の状態が定まっていない4月と学級風土がほぼ確立したと考えられる12月の2回である。データの分析は、最初の調査時に行われたhyper-QUと12教科に対する好き・嫌いの関係に止まっている。結果は、外国語活動と道徳や特別活動などの教科外科目との間に相関が見られた。また教科との関係では、特に国語科との間に相関が見られた。この結果はおおむね予備調査の結果と同じものとなったが、データ数が増えたことにより相関の強さやその傾向は、予備調査のものより弱いものとなっている。また、学級経営と外国語活動の関係でも予備調査同様、所属するクラスに満足している児童ほど外国語活動に好意的に取り組んでいることが分かった。ソーシャルスキルとの関係も予備調査同様、このスキルに優れた児童の方が外国語活動を楽しんでいた。予備調査では見られなかった結果としては、教師が管理的な学級経営をしているクラスでは、国語科以外に数学科や社会科、理科などの教科科目と外国語活動の間に相関が見られ、逆に多くのクラスで見られていた道徳や特別活動との間には相関は見られなかった。研究1年目の今年度は、2年目の本調査に向けて仙台市内にある小学校の5年生・6年生を対象に予備調査を行った。予備調査で明らかにしたかったことは、1)外国語活動と他教科との関わり、2)学級風土が外国語活動に与える影響、3)ソーシャルスキルと外国語活動の関係である。1)の結果であるが、外国語活動は、道徳・特別活動・学級会活動・音楽・図工などと強い相関がみられた。2)のところでも触れるが、支持的で道徳的素養が育った学級を作り上げることが外国語活動の成否にかかわることがうかがえる。また、学力が反映されやすい主要教科ではなく、実技科目とのかかわりがみられた。これらの相関関係は体験的に外国語に慣れ親しませ、外国語についての暗示的な知識を涵養することを目的とする外国語活動の特徴が表れたものと言える。さらには主要科目では、言語を扱う国語とのみ相関が確認された。この結果も外国語活動の特徴を表すものとして興味深い。次に2)の結果であるが、hyper-QUを使った調査から、学級に満足している児童ほど外国語活動を肯定的に評価していることが分かった。先の他教科との関係でも触れたが、外国語活動を行う上での学級経営の重要性がうかがえる。3)の結果であるが、同じくhyper-QUを使い調査したが、ソーシャルスキルが高い児童ほど、外国語活動に積極的に関わっていた。またその中でも特に、他者に対する配慮ができる児童ほど、外国語活動を好意的にとらえる傾向が見られた。外国活動からは少し外れるが、ソーシャルスキルが高い児童は他の教科科目に対しても肯定的な態度を示すことが分かった。本調査では、学級風土以上に教科学習に影響を与える要因となっていた。最終年度の本年度は、昨年度の本調査で得た仙台市内の中規模小学校5・6年生5クラス分、及び東北地区で小中一貫校の特区認定を受けている1校の小学4年生から中学1年生までの8クラス分のデータ分析を行った。分析の一つ目は、1年目の予備調査で明らかとなった。hyper-QUで診断した学級経営の状態(学級風土)と外国語活動の好き嫌い発生の関係である。結果は、予備調査同様、自分が所属している学級に満足している児童ほど、外国語活動に好意的な姿勢を示していることが分かった(仙台市内A小学校5・6年生の結果:英語嫌い19名中9名が満足群に所属していたが、この集団の満足群の平均の分布から見ると14名の英語嫌いが発生していてもよいはず。

また、侵害行為認知群には推測値で1名強(0.062%)の英語嫌いしか発生しないはずだが、この学校では3名(6.20%)の英語嫌いが確認された。さらに、全データの中で1名も英語嫌いが確認されなかった5年1組では、在籍する27名の児童の内、27名(93%)が満足群に属していた。全国平均は38%であることから、学級の友好的雰囲気が英語嫌いの発生を抑えた可能性がある。また、予備調査同様、縦型の管理型の学級経営が英語嫌いを生むことも再確認された。)さらに、小中一貫校B校6年生では、学級崩壊に近づきつつあるクラスで平均値より多くの英語嫌いが確認された。次に性格5因子で測定された性格要因と外国語活動の関係の分析であるが、満足群にいながら英語嫌いになる児童は、同じ満足群にいる児童に比べ、協調性、勤勉性、知性が低いことが明らかとなった。また逆に、攻撃性が高くなっていた。また先の英語嫌い0名のクラスの標準得点を分析すると、学級経営の良さが児童個々の自己効力感、有能間を高め、それが結果として外国語活動をはじめとする教科教育に対する肯定的な態度を育んでいることがうかがえる。英語教育学・第二言語習得論・小学校外国語活動今回の本調査及び昨年度までの予備調査を通じて、目標としていた1,000名を超える被験者からデータを収集できたが、その処理はhyper-QUから読み取れる学級経営に関する部分とソーシャルスキルに関する部分、及び12教科に対する好き・嫌いの部分の予備調査分と本調査の第一回目の部分にしか及んでいない。本調査は、学級経営、性格要因、外国語活動への取り組みといった3者も関係を明らかにするために計画されたものである。性格要因に関する分析はまだ行われていない。また、本調査2回目のデータに関しても分析は行われていないため、現在までの到達度は、やや遅れていると判断せざるを得ない。1年目の研究計画として挙げていたものは、1)先行文献調査・資料収集、2)5因子性格質問紙の選定、3)調査依頼校の選定・打ち合わせ、4)予備調査の4点である。4)に関しては先の研究実績の概要で述べたとおりである。2)のところにもかかわるが、予備調査段階で、妥当性・信頼性が確認されている小学生用に開発された5因子性格質問紙を使ってデータを収集したが、その解析が終わっていない。本調査に入る前に、早急に解析を進め、性格要因が外国語活動及び学級風土の形成に与える影響を明らかにしたい。1)に関しては順調に資料の収集にあたっている。3)に関しては、宮城県内の一般小学校2校、同じく宮城県内の小中一貫校1校、山形県内の一般小学校1校、計4校から年2回、hyper-QUを使った調査に入ることへの了解を取り付けている。被験者数は810名になる予定であり、先行研究でのデータを加えると当初予定した最低1000名の被験者数は確保できる予定である。現在までの到達度の反省でも述べたが、1,000を超える被験者のデータ処理がその一部分にしか及んでいない。特に、性格要因に関するデータに関しては、全く手つかずの状態である。本調査は、学級風土、性格要因、外国語活動への取り組みの3者の関係を明らかにするものである。調査対象とした3つの学校の内