hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
記憶に及ぼす自己修正活動の効果に関する研究

被験者自身が,不適切な文脈においてその文脈の不適切性を修正する活動が,記憶に対して促進的な効果をもつかどうかを検討し,以下のことが明らかになった。1.被験者自身が記銘語を含む文脈を修正するための情報を生成する条件(生成修正)は,不適切文脈が呈示されるのみの条件(呈示),及びはじめから適切文脈になる情報を生成する条件(生成)よりも記銘語の再生率を高める。これを自己修正精緻化効果と呼ぶ。2.自己修正精緻化効果は,記銘語と不適切な文脈が呈示された際に,奇異イメージによって,記銘語の差異性が高まること(奇異性効果),及び適切な修正語を生成することによって記銘語が認知構造に統合されること(適合性効果)の加算的効果によって生じる。ただし,修正語を生成するだけでこの効果が出現する場合もある。3.自己修正精緻化の有効性は,以下の要因によって規定される。(1)修正の対象(記銘語,枠組み文中の語)大人が被験者である場合,自己修正精緻化効果は,記銘語を修正する際に出現する。というのは,記銘語に対する修正語が,記銘語の有効な検索手がかりとなるからである。(2)イメージの有無文脈がイメージを喚起しない場合には,自己修正精緻化効果は出現しない。というのは,奇異イメージによる奇異性効果がないことになるので,適合性効果のみの効果だけが反映されるからである。(3)呈示形式(集中呈示,分散呈示)分散呈示によってより自己修正精緻化の有効性は促進されるが,集中呈示であっても奇異イメージが喚起される場合には,そのイメージが記銘語の有効な検索手がかりとなり,記憶成績が促進される。(4)年齢枠組み文を修正する場合には,小学2年生では自己修正精緻化効果がなく,6年生でその効果が出現する。というのは,知識が豊富になり,修正語を記銘語の検索に効果的に利用できるからである。本研究の目的は,文脈の不適合性を自己修正する活動が学習に及ぼす効果を検討することであった。本年度は,偶発記憶手続を用いて,記銘語がうまく当てはまらない不適合文を修正するという符号化(自己修正精緻化)が,偶発記憶を高めるか否かを検討した。自己修正精緻化は,自己生成修正精緻化(以下,生成修正)と自己選択修正(以下,選択修正)精緻化に分けられ,それらに対応する条件が設けられた。生成修正条件では,被験者は,記銘語が適合するように,枠組み文中の1語に代わる語を自分で生成し,選択修正条件では,被験者に2つの語の内,うまく適合する語の方を選択させた。これら2つの自己修正条件に対する統制条件として,修正語をあらかじめ実験者によって呈示され,それの適切性を評定させる実験者呈示修正精緻化(以下,呈示修正)条件,及び,枠組み文中の空欄に適切語を生成させる自己生成精緻化(以下,自己生成)条件を設定した。実験1では,生成修正,呈示修正及び自己生成条件間の比較を行ったが,偶発自由再生率に差はなく,実験2では,呈示修正条件を選択修正条件に変えて検討したが,ここでも条件間に差はなかった。

枠組み文中の語を修正することは,記銘語の偶発記憶に効果がないことが示されたので,実験3及び4では,記銘語を枠組み文に適合する語に修正させる手続きを用いて,記銘語の偶発自由再生率における条件間の違いを検討した。実験3では,生成修正>呈示修正という関係になり,修正語は被験者自身が生成した方が効果的であることを示した。また,実験4では,生成修正>選択修正という関係になり,修正語を選択させるよりも生成させる方が有効であることが示された。さらに,生成修正>自己生成という関係も見いだされ,適切語を生成するだけよりも,不適合な文脈を修正する語を生成する方が有効であることが明らかになった。本年度は、枠組み文が形容詞1語から構成されるように材料を変更し、記銘語(ex.ぞう)と枠組み文(は小さい。)の関係が適合しない場合に、適合するように記銘語を修正する場合(ex.ぞう→あり)、枠組み文中の語を修正する場合(ex.小さい→大きい)における自己修正の効果を検討した。実験14では、記銘語を修正する場合を検討した。実験1では、枠組み文のみを呈示する条件(呈示)、適合する語を生成する条件(は( )。)(生成)、及び記銘語を被験者自身が修正する条件(生成修正)を設定した。その結果、呈示<生成<生成修正という関係が示された。実験2では、修正語を実験者が呈示する条件(呈示修正)、生成及び生成修正条件を比較した。その結果、呈示修正<生成=生成修正という関係になった。生成と生成修正の有効性を直接比較するために、実験3ではこの2条件のみを設けて比較し、実験4でも手続きを変更して再度比較したが、両条件間に差はなかった。実験58では、枠組み文中の語を修正する場合を検討し、設定された条件は実験14に対応していた。その結果、生成修正=生成という関係は一貫しており、ともに呈示及び呈示修正条件よりも再生率が高かった。上記の実験はいずれも大人が被験者であったので、実験9では、小学2年生と6年生を被験者として、呈示、生成及び生成修正条件間の比較を行った。その結果、2年生では呈示=生成=生成修正、6年生では呈示=生成<生成修正という関係が示された。上述した実験から、文脈の適合性を認識でき、知識も豊富な大人では生成と生成修正間に有効性の違いはないが、適合性の認識がまだ充分でない6年生では修正することが記銘語を認知構造へ統合するのに有効な手がかりとして機能することが示された。また、知識が乏しい2年生では適合情報を生成させても、それが手がかりとして効果のないことが明らかになった。本年度は、記銘語に対して修正を求める枠組み文を、従来の奇異イメージが喚起される奇異文から、そのようなイメージが喚起されない普通の不適合文に変更し、3つの実験を行った。実験1では、枠組み文をすべて上述した不適合文にして検討した。枠組み文中の語を適切な語に修正する条件(自己修正精緻化;生成修正)、枠組みの文中の空欄に適切な語を記入する条件(自己生成精緻化;生成)及び記銘語の枠組み文への適合性を評定される条件(実験者呈示精緻化;呈示)が設けられたが。偶発自由再生率では生成修正=生成>呈示の関係が見いだされた。実験2では、不適合文と適合文を混在させて、被験者に枠組み文の不適合性を処理させる状況を設定した。その結果、生成修正>生成>生成という関係が見いだされた。この結果は、自己修正精緻化効果において、記銘語と枠組み文の不適合性を処理する過程が重要であることを示唆したものである。また、実験3では、生成修正条件に割り当てる記銘語数を増加させて、生成修正条件における不適合文と適合文の比較を行った。その結果、不適合文を修正させるよりも記銘語の再生率の高いことが明らかになった。
検注帳編年目録データベースの構築による荘園制研究の転回

本研究は、検注帳の悉皆的収集・総合的分析を通して、荘園や公領の領主が現地の把握を行う検注という視角から荘園制、ひいては中世社会を捉えなおすことを目的とする。検注帳とは、領主が徴税のために作成した土地台帳であり、豊かな景観情報が記録されている。本研究では、検注帳を悉皆的に収集、検注帳編年目録データベースを構築し、検注帳の作成様式や時期、地域などの傾向を列島規模で分析する。また、2つの荘園を舞台にケーススタディを実施、分析結果を検証する。これにより、領主が検注を行う契機が明らかとなり、その背景にある荘園制との関係を追究することで、日本中世の地域社会で起こっていたダイナミズムの解明が期待される。
バラ科果樹の自家不和合性花粉側因子の同定とその利用

Prunus属植物などのバラ科植物は配偶体型自家不和合性を示す。この現象は非常に密接に連鎖した二つの遺伝子(雌ずいS遺伝子、花粉S遺伝子)によって支配されている。雌ずいS遺伝子産物はS-RNaseと呼ばれるRNA分解酵素である。一方、花粉S遺伝子は明らかになっていなかった.以前の研究から花粉S遺伝子が存在する領域をアーモンドのゲノム上で特定し塩基配列を明らかにしていたので、本研究では、その領域に存在し花粉で発現している遺伝子をクローニングした。アーモンド花粉cDNAを鋳型としたRACEを行ったところ、花粉S遺伝子にふさわしい性質を持つ遺伝子(SFB)が1つ単離された。SFBは花粉特異的に発現しており、F-boxタンパク質をコードしていた。また、S-RNaseと同程度の対立遺伝子特異的な配列多様性を示した。オーソログも他のPrunus属植物から単離されており、一次構造の比較から超可変領域と呼ばれるドメインが同定されている。超可変領域はS-RNaseにも見られるドメインで、Sハプロタイプ特異的な相互作用に必要不可欠であると考えられている。F-boxタンパク質は細胞内でSkplやCullinなどとともにSCF複合体を形成している。SCF複合体は26Sプロテアソームを介して細胞内タンパク質のタンパク質分解制御を行っており、制御の中心となるのはF-boxタンパク質である。したがって、SFBがF-boxタンパク質をコードしていることは、S-RNaseの分解制御が自家不和合性反応の中核を担っているということを示唆するものである。
神経成長因子受容体の構造と機能

イソロイシン除去法によってG1期に同調したPC12細胞を正常培地に戻し、経時的に調べると、【^(125)I】-NGFの結合はGI期に最大となり、S期になると減少した。Scatchard-type解析から高親和性部位がG1期に増加するのがわかった2.高【K^+】による【^(125)I】-NGFの結合と取り込みの促進50mM【K^+】での結合及び取り込み量は、それぞれ144±28%(n=6,SE),176±12%(n=6)に増加した。Scatchard解析から結合及び取り込み量の増加が判った。高【K^+】による結合と取り込みの増加はveratridineによっても起こり、又その変化は可逆的であった。しかし細胞外液の【Ca^(2+)】を除くと結合と取り込み量は共に抑えられた。高【K^+】の効果の生理学的意味を探る目的で突起の成長に対する効果を調べると、低いNGF濃度(0.1,1ng/ml)では、高【K^+】培地が突起の成長即ちNGFの作用を増強することがわかった。3.カテコールアミンによる【^(125)I】-NGF結合の増強【^(125)I】-NGFのPC12細胞に対する結合はノルアドレナリン(NA)によって約160%に増大し、濃度依存的に起こった。一方、NGF処理をした細胞ではこの効果は顕著に起こり、1-10μMのNAで約260%に達した。他にA,DA,db-cAMP,8Br-cAMPアデノシンでも効果があった。NAとdb-cAMPを合わせた時の効果に加算性が成り立たなかったことから、NAによる【^(125)I】-NGFの結合の増加はcAMPを介していると考えられた。さらに【^(32)Pi】でラベルした細胞をNA処理した後、可溶化しNGFアフィニティークロマトグラフィーにかけ、SDS-PAGEで解析すると、85Kのバンドが顕著にラベルされた。NAは実際にadenylate cyclase活性を上昇させることも示された。以上の結果をまとめると、NGF受容体は環境や生理的条件に対応して変化することから、シナプスの可塑性の機構として役割を果たす可能性がある。
乳児における投射影（ｃａｓｔ　ｓｈａｄｏｗ）知覚の実験的検討

■研究1:生後5-8ヶ月児は投射影と陰影を手がかりに形状を知覚できるのか明らかにすることを目的とした研究を行った。実験では5-8ヶ月児を対象に、成人がボール型を知覚する陰影図形と、ディスク型を知覚する投射影図形を用い、複数の陰影(または投射影)図形の中にひとつだけ周囲と異なる投射影(または陰影)図形を検出するか検討した。その結果、図形が影として知覚できる場合にのみ、7-8ヶ月児のみ周囲と異なる図形を検出することが示され、7-8ヶ月児は陰影・投射影から、3次元形状を知覚する可能性を示した。■研究2:影の中は暗いという前提を乳児が有するか明らかにするため、影を通過する物体の不自然な明るさ変化を検出するかを、生後5-8ヶ月児を対象に検討した。実験では5-8ヶ月児を対象に、影の中を物体(ヒヨコ)が自然に通過する自然動画と、影領域では不自然に明るく変化する不自然動画に対する視覚的選好を比較した。実験の結果、7-8ヶ月児のみ不自然動画を選好した。コントロール実験において各動画から影を取除いた場合には、選好は消失した。これらの結果は、7-8ヶ月児は影の中での不自然な明るさ変化を検出できることを示唆する。生後7-8ヶ月児は、影は照明量の減少した領域であるという前提から、影を通過する物体表面の明るさを知覚する可能性が示された。28年度が最終年度であるため、記入しない。本年度は乳児を対象に、3つの影知覚を検討する実験を完了・継続中である。1.乳児が物体の形状と投射影の形状の不一致を検出できるか検討するため、乳児の注視行動を指標とした行動実験を行い、本研究の成果は査読付き学術雑誌iPerception誌に掲載が決定した。2つの実験の結果から、7-8ヶ月児は物体と投射影の形状の不一致を検出できることを初めて報告した。この研究の結果は、7-8ヶ月児が投射影を知覚できることを示唆するものであった。本研究の成果は国際学会であるICIS 2014にて、ポスター発表を行った。更に本研究の成果に関して昨年行った第32回日本基礎心理学会におけるポスター発表に対し、本年度優秀発表賞を受賞した。2. shading, cast shadowと呼ばれる2種の影を、3次元形状を知覚するための手がかりとして用いることができるか検討する実験を計画し、データを取得完了した。実験では生後5-8ヶ月の乳児が複数のshading(またはcast shadow)からターゲットである1つのcast shadow(またはshading)を検出できるか、親近化法を用い検討した。更にコントロール実験として、影(shading, cast shadow)が背景より明るく、影として知覚し難い図形を作成し、同様の課題を行った。2つの実験の結果、7-8ヶ月児のみ、影を知覚できる場合にのみターゲットを検出したが、5-6か月児は検出しなかった。この成果は、7-8ヶ月児がcast shadowを手がかりに3次元形状が知覚できることを示唆するものである。本研究は、国際学会であるAPCV2014にてポスター発表を行い、Student Travel Awardを受賞した。3.乳児は影を周囲より暗い領域と知覚するか検討する実験を計画し、現在データ取得中である。本研究の成果の一部は国内学会においてポスター発表を行った。本年度は乳児を対象に2つの影知覚を検討する実験について、データ取得を完了・継続中である。1.shading, cast shadwと呼ばれる2種の影を、3次元形状を知覚するための手がかりとして用いることができるか検討する実験について、研究成果をまとめた論文が査読付き学術論文であるAttention, Perception & Psychophisics誌に掲載が決定した。また国内の研究会にて発表を行った。2.ヒトは物体が影を通過する際、物体表面の反射率が変化したのではなく、他の物体が照明を遮ったことにより物体表面の明るさが減少したという前提から、物体表面の明るさを知覚する。本研究では、影を通過する物体表面の明るさ変化を、乳児も成人同様に知覚するか検討した。実験では影の中で明るさが不自然に変化する不自然条件と自然に変化する条件とを提示し、不自然条件を選好するか検討した。本実験のデータを取得完了し、実験の結果をAPCV2015および日本視覚学会2015夏大会と冬大会にて発表した。3.背景が2種の誘導図形の中間の輝度となるとき、透明な主観的な面が知覚できる事が示されている。更に、背景を誘導図形より明るくしコントラスト極性を崩すと、面が知覚されないことを示した。実験ではこれらの現象を5-8ヶ月児が知覚できるか検討した。現在データ取得中であるが、中間報告を日本基礎心理学会にて発表した。当初の計画より早く、研究成果を査読付き英文学術誌に受理された。計画1・2年目の実験はス伝い修了し、現在次の論文を執筆中である。更に研究成果を発表した研究会において優秀発表賞を受賞した。また当初の計画になかった新たな実験計画についても立案し、データ取得を開始している点から、当初の計画委以上の進展がみられたといえる。

実験では5-8ヶ月児を対象に、成人がボール型を知覚する陰影図形と、ディスク型を知覚する投射影図形を用い、複数の陰影(または投射影)図形の中にひとつだけ周囲と異なる投射影(または陰影)図形を検出するか検討した。その結果、図形が影として知覚できる場合にのみ、7-8ヶ月児のみ周囲と異なる図形を検出することが示され、7-8ヶ月児は陰影・投射影から、3次元形状を知覚する可能性を示した。■研究2:影の中は暗いという前提を乳児が有するか明らかにするため、影を通過する物体の不自然な明るさ変化を検出するかを、生後5-8ヶ月児を対象に検討した。実験では5-8ヶ月児を対象に、影の中を物体(ヒヨコ)が自然に通過する自然動画と、影領域では不自然に明るく変化する不自然動画に対する視覚的選好を比較した。実験の結果、7-8ヶ月児のみ不自然動画を選好した。コントロール実験において各動画から影を取除いた場合には、選好は消失した。これらの結果は、7-8ヶ月児は影の中での不自然な明るさ変化を検出できることを示唆する。生後7-8ヶ月児は、影は照明量の減少した領域であるという前提から、影を通過する物体表面の明るさを知覚する可能性が示された。当初の計画より早く、研究成果を査読付き英文学術誌に掲載することができた。計画1年目の実験は終了し、すでに次の論文を執筆中である。また新たな当初の計画になかった新たな実験についても計画・データ取得を開始している点から、当初の計画以上の進展がみられたといえる。計画3年目の実験を遂行し、既に得られた研究成果の公刊といった活動に重点を置いて研究を行うことを予定している。特に現在投稿中の論文の査読・修正作業を完了し、現在実施している実験の論文執筆作業を完了することを目指す。具体的には、現在実施している乳児は影を周囲より暗い領域と知覚するか検討する実験のコントロール実験を終了し、乳児が成人と同様に、影内では物体表面は物体表面が暗くなるという前提から物体表面の明るさを知覚するか、明らかにする。また、コントラスト極性が主観的輪郭知覚に影響する現象について、乳児を対象に検討を行う。更に、得られた研究成果については、国内額の学会に於いて発表を行うことを予定している。28年度が最終年度であるため、記入しない。計画2年目の実験の遂行し、すでに得られた研究成果(現在国際誌へ投稿するため英語論文を執筆中)の公刊といった活動に重点を置いて研究を行うことを予定している。具体的には、現在実施している乳児は影を周囲より暗い領域と知覚するか検討する実験のコントロール実験を完了し、乳児が成人同様に、影内では物体表面は暗くなると知覚することを明らかにする。更に、得られた研究成果については、国内外の学会に於いて発表を行うことを予定している。
自己免疫性膵炎におけるＢＡＦＦ，ＡＰＲＩＬの臨床的有用性についての検討

自己免疫性膵炎(AIP)や悪性疾患の病態にBAFFが関与している事が示されているが、その役割は不明である。本研究では、AIPおよび膵癌におけるBAFFの役割を明らかにする。膵癌患者の血清・組織および膵癌細胞株を用いた基礎的検討の結果、遠隔転移のある膵癌患者において血清濃度の上昇しているBAFFは、膵癌細胞周囲に浸潤するB細胞から産生され, EMTを介して膵癌の進展に関与していることを見出した。また、AIP患者の組織および血清、AIP類似マウスモデルを用い、BAFFを含む各種サイトカイン・ケモカインについて解析し、Lymphotoxin βがAIPの病態に関わる新しい因子であることを見出した。我々は、自己免疫性膵炎(AIP)症例では血清BAFFの発現が高く、膵癌との鑑別診断および治療効果判定に有用であるが、その機序および役割については不明である。また、BAFFと高い相同性を持つAPRILの役割についても不明である。本研究では、以下の2つの方向性で研究が進められた。1.AIPにおけるLymphotoxin β(LT-β)の役割:AIPのステロイド治療による奏功率は97%と高いが、治療中止後には53%が再発する。また、再治療を行った場合の再発率は37%であり、ステロイド治療抵抗例,減量困難例を経験する。そこで、AIPの病態に関与する因子を同定する目的でAIP患者および慢性膵炎患者の組織および血清を用い、PCR法、ELISA法および免疫染色法により、各種サイトカインおよびケモカインについて解析した。その結果、AIP患者ではm-RNAレベルでLT-βおよびLT-αの発現が増強しており、LT関連のケモカインはステロイドにより影響を受けなかった。また、LT-βおよびLT-αが特異的に膵腺房細胞で強発現され、膵病変および膵外病変を発症するAIP類似マウスモデルを作成し、各種サイトカインおよびケモカインについてステロイドの有無で解析した。その結果、Lymphotoxin βがAIPの病態に関わる新しい因子であることを見出した。2.膵癌におけるBAFFの役割:AIPにおけるBAFFの役割について解析している際に、血清BAFFが対照である膵癌症例で健常人と比較して高値であることを見出した。造血器腫瘍および乳癌の進展にBAFFが関与することが報告されているが、BAFFの膵癌の病態および進展への関与については不明である。そこで、BAFFの膵癌の病態および進展への関与を明らかにすることを目的とし、現在血清および組織を用いて各種解析を行っている。我々は、これまでに自己免疫性膵炎(AIP)症例では血清BAFFの発現が高く、膵癌との鑑別診断およびステロイド治療効果判定に有用であることを明らかにした。しかし、その機序および役割については不明である。なお、AIPにおけるBAFFの役割について解析している際に、血清BAFFが対照である膵癌症例で健常人と比較して高値であることを見出していた。本研究では、AIPおよび膵癌の患者血清を用いた基礎的検討において、BAFF同様にAPRILが両疾患の鑑別およびAIPの治療効果判定のマーカーであることを示すことはできなかったため、両疾患におけるBAFFの役割に関して、以下の2つの方向性で研究が進められた。1. AIPの病態に関与する因子の同定:AIP患者および慢性膵炎患者の組織および血清を用い、PCR法、ELISA法および免疫染色法により、各種サイトカイン・ケモカインについて解析した。また、LT-βおよびLT-αが特異的に膵腺房細胞で強発現され、膵病変および膵外病変を発症するAIP類似マウスモデルを作成し、各種サイトカイン・ケモカインについてステロイドの有無で解析した。2.膵癌におけるBAFFの役割:膵癌患者の血清・組織および膵癌細胞株を用いた基礎的検討の結果、遠隔転移のある膵癌患者において血清濃度の上昇しているBAFFは、膵癌細胞周囲に浸潤するB細胞から産生され,膵癌の進展に関与していることを見出した。自己免疫性膵炎(AIP)は、厚生労働省難治性膵疾患に指定されている自己免疫機序が想定される特殊な膵炎である.典型的な症例では、IgG、IgG4、抗核抗体などの免疫マーカーが診断に有用であるが、AIPは高齢者に多く、これらが陰性の非典型例では、悪性疾患との鑑別に苦慮する。AIPのステロイド治療による奏功率は97%と高いが、ステロイド中止後には53%が再発する。

また、ステロイド再治療を行った場合の再発率は37%であり、ステロイド治療抵抗例,減量困難例を経験する。BAFFとAPRILは高い相同性を持ち、B細胞の液性免疫に強く関わっている。全身性エリテマトーデスおよび関節リウマチにおいて血清BAFF濃度の上昇が報告されており、BAFF及びAPRILを標的とした治療により疾患の活動性が低下することが報告されている。このことから、自己免疫性疾患の病態に関与するBAFF及びAPRILが、自己免疫機序が想定されるAIPの病態に関与していると考えられ、BAFF及びAPRILはAIPの鑑別診断や治療の標的として用いることができる可能性がある。これまでに申請者らは、AIP症例において、血清BAFFの発現が高いことを明らかにしたが、その機序および役割については不明である。そこで、AIP、慢性膵炎、膵癌、胆管癌及び健常人を対象に、(1)AIPの診断およびステロイド治療効果判定における血清BAFF及びAPRIL測定の意義、(2)血清BAFF及びAPRILの濃度と上述の免疫マーカー、膵病変の程度、膵外病変の数及び耐糖能障害との相関および(3)BAFF、APRIL及び関連するマーカーのAIP患者膵組織における発現について検討する。これらのことを遂行するために現在、患者エントリーおよび試料保存を行っている。過去にAIPと診断された患者および対照の保存血清を用いて解析を行い、新たな知見を得たため。AIP自体が稀な疾患であるため、患者エントリーが遅れている。1.AIPにおけるLymphotoxin β(LT-β)の役割に関しては、さらにAIP患者の治療経過において、特に治療効果の予測においてどの様な役割を果たしているのかを解明していく。2.膵癌におけるBAFFの役割に関する続きとして、BAFFと相同性のあるAPRILに関して膵癌およびAIP患者を対象として同様の解析を行う。また、膵癌の浸潤にBAFFが関与していることが示唆されたので、膵癌細胞株を用いた基礎的検討を行っていく。当院における前向きに研究を進めるのが理想的である。しかし、患者エントリーの進まない場合には、当院だけではなく、関連施設に依頼して症例の蓄積を行う予定である。さらには、既に保存されている試料を用いることも検討しており、既に倫理委員会の承諾を得ている。上記研究計画のもと各種試薬を購入し、解析を行う。また、得られた結果を国際学会および英文誌に発表する予定であり、その費用に充てる。症例が集積できた時点で各種試薬を購入し、測定する予定である。
ベヴァリッジの経済思想:社会保障論と失業論の接合

この研究は計画書の予定通り、次の2つの大きな成果を上げることができた。1.2004年1月31日(土)に学術総合センターで行った国際セミナー「ベヴァリッジの経済思想とその後」(英語のみ)の開催が、初年度の最大の成果である。英国からAlan Booth博士(Exeter U)を招き、基調講演「イギリス福祉国家の視点:ボブソンからサッチャーまで」を発表してもらった。この中で3人の知識人が福祉国家の展開とともに、国家と市民の関係そして社会と経済の関係を議論する基盤になったことが示された。続いて小峯による「ベヴァリッジの経済参謀」が発表された。ここでは福祉国家の提唱者であるベヴァリッジが、いかに管理経済を初期から提唱し、その影響力がケインズの失業救済策を含む経済政策助言活動につながったかを示された。2.総合セミナー「福祉国家の経済思想:自由と統制の混合」2005年2月19日土曜、中央大学駿河台記念館、10時半から18時まで)の開催が、二年目の最大の成果である。5人の発表者それぞれに討論者を付け、経済学史・社会学・法哲学を専攻する若手研究者を中心とした討論を行った。研究代表者はこのセミナーの組織者・討論者・総括コメント者という役割を担った。報告者・討論者との事前うち合わせやメール交換において、本研究テーマを深めることになった。なお当日の報告論文とコメントを冊子にした。以上のセミナーを中心に、ベヴァリッジの初期・中期・後期の社会思想(社会保障論)と経済思想(失業論)を接合し、総合的な観点から彼を経済学史上に正しく位置づけることができた。労働市場の創造と社会保険を結ぶことで、国家の義務(完全雇用と社会保険)と市民の義務(自発的活動)の三重社会をベヴァリッジは企図したのである。なお2.は研究成果促進補助金を申請した後、ナカニシヤ出版から出版予定である。2004年1月31日(土)に学術総合センターで行った国際セミナー「ベヴァリッジの経済思想とその後」(英語のみ)の開催が、今年度の最大の成果である。英国からAlan Booth博士(Exeter U.)を招き、基調講演「イギリス福祉国家の視点:ホブソンからサッチャーまで」を発表してもらった。このセミナーを支えるため、多くの準備活動を行った。2003年4月の経済学史学会東北部会での発表「在外研究報告:PROとLSEの文書をめぐって」、2003年5月の経済学史学会全国大会における発表「初期ベヴァリッジの経済思想」でこれまでの成果を発表した。2003年8月9月にはイギリスに渡り英国経済思想学会に出席し、議論を深めた。同時に、LSE、PRO、大英図書館を閲覧し、ベヴァリッジやウェッブ夫妻に関する一次文献を収集した。これらと購入したベヴァリッジ文書マイクロフィルムを用いて、失業論の高まりが次第に社会保険論とどのように関連するかの基礎文献が調えられた。その他、政府がどの程度経済に介入すべきかという議論(新自由主義や集産主義)の考察に、「1940年代ヘンダーソンの自由主義」を執筆した。

なお成果は日本語だけでなく、英語でも発表するように心がけた。総合セミナー「福祉国家の経済思想:自由と統制の混合」(2005年2月19日土曜、中央大学駿河台記念館、10時半から18時まで)の開催が、今年度の最大の成果である。5人の発表者それぞれに討論者を付け、経済学史・社会学・法哲学を専攻する若手研究者を中心とした討論を行った。研究代表者はこのセミナーの組織者・討論者・総括コメント者という役割を担った。報告者・討論者との事前うち合わせやメール交換において、本研究テーマを深めることになった。なお当日は報告論文とコメントを冊子にした。当日の議論を踏まえ、いずれ専門書として出版する計画が持ち上がっている。学会出張としては、経済思想研究会(4/18、岩手県立大学;8/6。東北大学)・経済学史学会年大会(5/29-30、北星学園大学)・History of Economic Thought UK(9/1-3、Kingston University, London)・国際セミナー「19世紀末戦間期における経済思想の国際比較」(12/12-13、東京都立大学)に出向き、質疑応答に参加した。英語を含む論文成果は以下の通りである。
遷移金属多核錯体の高精度金属核配列制御

本特定領域研究では、金属原子団を1次元および2次元に配列制御するための分子科学的配列法を開発することを目的として研究を行った。その結果、共役π系不飽和炭化水素を「分子テンプレート」として利用する化学的手法を発展させることに成功し、分子中で金属核配列を精密に制御するための手法の確立に向けた実質的進展を得ることができた。金属原子団の構造を高精度に1次元配列制御、2次元配列制御することは、「ナノワイヤー」や「ナノシート」等の新機能性物質・材料への夢を実現する鍵であるが、その分子科学的配列法は未発達である。本研究では、既存の金属の自発的自己集合法では達成できない、高精度の金属の1次元および2次元の規則配列法を確立することを目指して研究を進めている。具体的には、共役π系不飽和炭化水素を「分子テンプレート」として利用した新しい化学的手法を開発し、分子中で金属核配列を精密に制御することを目指す。また、次元あるいは2次元の金属規則配列をもとにした、新しい物性、反応性、触媒作用の基礎科学へと展開し、新機能性物質・材料の概念の創出を探ってゆく。また、構造と金属の原子価を精密制御することによりその金属-金属結合の化学結合性を解明するとともに、1次元あるいは2次元の金属規則配列をもとにした、新しい物性、反応性、触媒作用の基礎科学へと展開し、新機能性物質・材料の概念の創出を探ってゆく。平成18年度では、1次元金属ワイヤーの高精度金属核配列制御を目指して検討をおこなった。1,2-ビス(4-フェニル-1,3-ブタジエニル)ベンゼン(o-BPBB)を鋳型配位子として用いたところ、2箇所で30度屈曲した弓形パラジウム4核鎖が形成されることを明らかにした。弓形パラジウム鎖を含むo-BPBBサンドイッチ化合物の構造は、X線構造解析によって決定している。この結果は、屈曲したπ-共役骨格を持つ不飽和炭化水素配位子を鋳型配位子として用いることで、1次元金属鎖を決まった角度(今回の場合は30°)で折り曲げることが可能であることを示している。平成19年度では、1次元金属ワイヤーと2次元シートの間の相互変換について検討した。その結果、四核鎖パラジウム骨格を有するビスペリレンパラジウム四核錯体とシクロオクタテトラエンを反応させると片側のペリレンがシクロオクタテトラエンと交換し、その際に鎖状四核パラジウムが菱形状に骨格転位を起こすことが明らかになった。さらに生成したペリレン-シクロオクタテトラエン混合サンドイッチ錯体とジフェニルオクタテトラエンとの反応により、ペリレンとジクロオクタテトラエンがともにテトラエンと交換し、菱形状四核パラジウムは鎖状に戻ることも判明した。また、一次元パラジウム鎖錯体の物性検討についても開始し、電気伝導性について検討をおこなう中で、ポリエン-ポリパラジウム錯体が比較的高い電気伝導性を示すことを明らかにした。平成20年度では、1次元金属ワイヤー錯体の動的挙動および酸化還元挙動について検討を進めた。

その結果、三核パラジウム鎖サンドイッチ錯体が、固体状態において2種類の配位モードを取り得ることを見出した。即ち、共役トリエン配位子がパラジウム三核上でスライドすることによって生じる2種類の配位異性体の構造をX線構造解析により同定することに成功した。また1次元金属ワイヤー錯体の酸化還元挙動についても検討を続けており、2電子酸化還元により、共役テトラエン配位子が四核パラジウム鎖上を可逆的にスライドし配位モードを変化させることを明らかにした。金属原子団の構造を高精度に1次元配列制御、2次元配列制御することは、「ナノワイヤー」や「ナノシート」等の新機能性物質・材料実現の鍵となるが、その分子科学的配列法は未開拓である。本研究では、既存の金属の自発的自己集合法では達成できない、高精度の金属の1次元および2次元の規則配列法を確立することを目指して研究を遂行している。共役π系不飽和炭化水素を「分子テンプレート」として利用した新しい化学的手法を開発し、分子中で金属核配列を精密に制御しようとしており、1次元および2次元規則配列法の開拓に成功してきている。平成21年度では、2次元金属シートの構造制御に関連する検討を行い、サンドイッチ型四核シート錯体の性質解明を進めた結果、9員環シクロノナテトラエニルが正方形型四核パラジウムシートに対して面キャップ型配位子として有効に機能することを見出した。平成19年度に、ビスペリレンパラジウム四核錯体がシクロオクタテトラエンと室温で速やかに反応し、片側のペリレン配位子がシクロオクタテトラエンと置き換わった混合サンドイッチ錯体に変換することを明らかにしている。この混合サンドイッチ型4核錯体が9員環芳香族アニオンであるシクロノナテトラエニルと反応し、シクロオクタテトラエン-シクロノナテトラエニル混合サンドイッチ型四核錯体が生じることを明らかにした。また、不飽和炭化水素に挟み込まれた金属集合体のレドックス挙動について研究を進め、不飽和炭化水素上での金属の移動を伴う構造変換が起こることを明らかにした。
がん関連遺伝子の異常からみた大腸微小病変の悪性度に関する研究

近年の分子生物学の進歩は,大腸の多段階発癌過程において種々の癌関連遺伝子が関与することを明らかにしてきた。しかしながら,その報告の多くは,大腸の腺腫や進行癌をそれぞれmassとして解析したものであり,個々の症例について実際にそれらの遺伝子変化が生じる時期またその果たす役割などの詳細については不明であった。今回,我々が主に研究対象とした大腸腺腫内癌は,大腸のadenoma-carcinoma sequenceにおける最も初期の悪性病変ぶあり,癌化に関連した遺伝子変化の解析には格好の臨床材料である。また,我々の行っているmicroanalysisにより,同一症例から正常粘膜,種々の異型度の腺腫および癌の複数の検体を最小限のcontaminationのもとに採取し解析することができ,免疫組織化学をも含めた病理学的所見との対比も行えることから,病理組織レベルでの詳細な遺伝子異常の検索が可能である。今回の研究の結果,大腸のadenoma-carcinoma sequenceにおいて腺種から微小癌に到るturning pointにp53遺伝子の異常が関与していることが明らかになった。この事から,臨床上も大腸ポリ-プの悪性度の評価にp53遺伝子異常の解析が有用であることが示唆された。それに対し,K-ras遺伝子変異は従来からの報告と一致して腺種の異型度昴進との関連が確認されたが,腺腫と腺腫内癌との間でその変異率に差を認めず,癌化への関与は否定的であった。そして同一腺腫内の異なる異型度部分の解析からは,K-ras変異が異型度昴進の結果である可能性が示唆された。また,preliminaryではあるが,DNAミスマッチ修復系の異常によって生じるゲノム不安定性,ならびに細胞周期関連因子であるWAF1,cyclin D,cdc2/cdk2などの大腸腫瘍における解析も合わせて行い,いくつかの知見を得た。その結果の一部は既に,別記の学会ならびに論文にて発表している。内視鏡下あるいは手術時に切除された大腸ポリープを対象とし,全例にマイクロウエーブ固定,パラフィン包埋を行った。モノクローナル抗体PAb1801(Novocastra)を用いてABC法で免疫染色を行うと共に,その隣接切片から顕微鏡下に目的とする部分を切り出し,DNAを抽出した。具体的には,腺腫内癌の場合,正常粘膜(N),腺腫(A),癌(T)からそれぞれDNAを抽出し,以下の遺伝子解析を行った。まず,p53遺伝子の3'flanking regionのBam HI polymorphismを利用し,PCRで増幅の後,RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism)法にて,p53遺伝子のalleleのlossを検索した。また,PCR-SSCP(Single Strand Conformation Polymorphism)法にて,exon5-8のmutationの有無を検索した。結果として以下の知見を得た。(1)75例中62例(83%)で,免疫染色と遺伝子解析の結果は一致した。不一致の13例のうち,8例は免疫染色(+)でmutation(-)であったが,exon5-8以外の領域のmutationあるいはSSCP法の検出感度上のfalse negativeと考えられた。他の5例は免疫染色(-)でmutation(+)であったが,mutationはexon6に集中しており,sequencingの結果,4例でcodon213のnonsense mutationが確認された。(2)腺腫内癌を伴う腺腫34例中,4例では腺腫部分にp53のmutationが検出された。その組織型は,mild dysplasia 1例,moderate dysplasia 3例であった。

(3)腺腫部分でp53の異常の認められなかった30例のうち22例(73%)では癌部分でp53の遺伝子異常が確認された。従来から大腸発癌においてp53遺伝子はその後期すなわち,腺腫から早期癌に到る過程および癌の進展の過程に関与すると考えられてきたが,今回の我々の研究結果からp53遺伝子は大腸癌発生のadenoma-carcinoma sequenceにおいて,腺腫から微小癌に至る初期過程に関与していることが明らかとなった。今年度は,大腸の初期病変におけるK-ras遺伝子の変化を主に解析し,その結果を前年度のp53遺伝子の解析結果と比較検討した。長径10mm以上の大腸腺腫32例および大腸腺腫内癌30例のマイクロウエーブ固定パラフイン切片から顕微鏡下に正常部分,種々の異型度の腺腫部分及び癌部分を取り出し,DNAを抽出した。次いで,Nested-PCRを組み合わせたPCR-RFLP法によりK-ras遺伝子のcodon12,13の変異を解析した。良性の大腸腺腫におけるK-ras変異は,32例中13例(41%)に認められたが,組織型別の内訳は,mild dysplasia23例中4例(17%),moderate dysplasia22例中11例(50%)であった。一方,大腸腺腫内癌症例におけるK-ras変異は,腺腫部分で36例中17例(47%),癌部分で36例中14例(39%)であった。すなわち,K-ras遺伝子変異について,腺腫の異型度の昂進に伴った頻度の増加はあるものの腺腫内癌症例の腺腫部分と癌部分では差を認めず,悪性化の段階での関与は否定的であった。また,同一腺腫内の異なる異型度の部分が解析できた11例において,mild dysplasiaで変異(-),moderate dysplasiaで変異(+)のものは1例しかないことからK-ras遺伝子変異は,腺腫の異型度の昂進の原因では無くむしろその結果であること,すなわち変異が異型度の高い腺腫でより生じやすいことが示唆された。腺腫内癌をK-ras変異(-)群と変異(+)群にわけてp53遺伝子変異の頻度を検討したところ後者にやや高い傾向が認められたが,有位な差ではなかった。以上の結果は,従来報告されてきた大腸発癌におけるK-ras遺伝子の積極的な関与についてむしろ否定的な示唆を与えるもので興味深く,今後のさらなる検討が待たれるところである。
熱・振動・圧力低エネルギー複合化による新しい生体組織接合技術の確立

低エネルギー複合化による新しい生体組織接合技術の確立を行った.加熱・加圧によるコラーゲンの形態学的変化を観察し,熱架橋結合が接合に関係することを見出した.専用加熱制御回路を開発し,接合時間を20秒まで短縮した.金属表面修飾により接合強度を制御可能であることや極性基を有する高分子が生体組織と接着することを見出した.動物実験で,炎症を起こさずに接合部の良好な温存と1月以上の接合維持が可能であることを確認した.低エネルギー複合化による新しい生体組織接合技術の確立を行った.加熱・加圧によるコラーゲンの形態学的変化を観察し,熱架橋結合が接合に関係することを見出した.専用加熱制御回路を開発し,接合時間を20秒まで短縮した.金属表面修飾により接合強度を制御可能であることや極性基を有する高分子が生体組織と接着することを見出した.動物実験で,炎症を起こさずに接合部の良好な温存と1月以上の接合維持が可能であることを確認した.低レベル量の振動エネルギー,熱エネルギー,圧力エネルギーを組み合わせることで,生体組織のコラーゲン等の構造タンパク質の融解,再凝固を生起し,低損傷な生体組織接合技術の確立を行う.そのために以下の研究を実施した.1.接着機序の解明a)接合部分の可視化:遺伝子組み換え豚(クサビラオレンジの蛍光発色)組織と通常組織を接着し,その断面を観察する実験系を構築した.b)コラーゲン含有率と接着強度の関係調査:コラーゲン含有率が部位により異なる豚の大動脈を用いて接着,接着強度評価実験系を構築した.2.生体組織同士の接合技術,金属材料と生体組織の接合技術の改良と接合デバイスの開発a)生体組織同士の接合技術の最適化:接着時間の短縮に焦点をあてて生体組織同時の接合技術の最適化を図った.専用のセラミックヒータ加熱部およびPWM加熱制御回路を開発し,把持部位の昇温時間の短縮,温度制御精度の向上を図る.また,接着加温時における伝熱シミュレーションを行い,最適な昇温制御方法の確立を行う.その結果,20秒まで接合時間を短縮できた.b)金属材料と生体組織の接合技術の最適化:ダイヤモンドライクカーボンの薄膜をプラズマCVD装置及びスパッタリング装置を用いてコーティングした改質表面や表面粗さを粗くした金属表面は優位に接着強度が増すことを実験で確認した.c)ハンドピース型組織接合装置の開発:動物実験専用のハンドピース型組織装置を開発した.3.高分子材料と生体組織の接合技術,接着補助材の開発セグメント化ポリウレタンと生体組織の接合技術の開発,改良を行い,接合に適した高分子材料の選定,最適な接合時温度を探索した.4.動物実験による接着評価,安全性評価,治癒過程評価本技術の安全性試験のための慢性実験モデルの開発を行った.低レベル量の熱・振動・圧力の複合エネルギー生体組織接合技術の確立として,平成23年度は,22年度につづいて「接合デバイスの改良と動物実験による評価」,「生体組織接合促進技術の開発」を行った。・動物実験用デバイスの改良ブタを用いた動物実験より,ヒータに取り付けた温度センサが1つであったため小径血管組織に温度センサが触れない場合があった.ヒータ接触部に複数の温度センサを配置し,専用の温度センサ判別プログラムを組込むことで小径血管に対応出来た.また,生体組織とヒータの接合抑制を目的にフッ素40%添加したダイヤモンドライクカーボン(DLC)をヒータ表面にコーティングし,ブタ大動脈血管を用いた接合実験を行った.フッ素添加DLCをヒータにコーティングすることで,ヒータと生体組織接合率を1/5に抑えられることを確認し,ヒータ表面改質を図った.・動物実験による接合性能評価温度100^。C,時間30秒の条件でラット頸動脈血管をin vivoで接合を行い,血流を遮断した.2週間にわたる接合部の経過観察を行った.接合後3日目において接合した頸動脈血管は他組織との癒着,炎症は見られなかった.接合後1週間目は,軽度の癒着は見られるものの,炎症は見られなかった.また接合した頸動脈血管の血流開放は接合後2週間までで見られず,本接合方法の血管止血効果を確認した.頸動脈血管接合実験から接合デバイスの十分な接合性能が確認された.・高分子材料と生体組織の接合技術,接着補助材の開発高分子材料に使用できる接着補助剤としてDLCを考え,DLCコーティングを血管に行った.走査型電子顕微鏡(SEM)の観察より,血管にDLCコーティングが出来ていることを確認した.DLCコーティング処理の血管と未処理の血管の接合実験より,DLCコーティングしても接合出来ることを確認した.またDLCコーティングすることで生体組織損傷をより小さくできることが分かった.臨床応用を見据えた熱・振動・圧力の低エネルギー複合化による生体組織接合技術の確立を行うために今年度実施した研究を以下に示す。1.コラーゲンの熱変性観察による接合機序の検討:コラーゲン単体を加熱・加圧し,形態学的変化の観察を行った。原子間力顕微鏡(AFM)の観察より,空気中で加熱温度63°C,80°C,120°Cにおいてコラーゲン線維同士の帯状化を確認した。要因をコラーゲン線維間の熱架橋形成とし,本接合技術の高い接合強度に寄与している可能性があることがわかった。また走査型電子顕微鏡(SEM)の観察より,コラーゲンを加熱・加圧することでコラーゲン線維同士の融合を確認した。2.動物実験による接合性能評価:昨年度のin vivo実験より動物実験用デバイスの先端を細くしヒータ形状に改良を行った。

接合温度100°C,接合時間30秒の条件でラット頸動脈血管をin vivoで接合を行い血流を遮断した。4週間にわたる接合部の経過観察を行った。接合後28日目において接合した5例の内,1例で止血状態を維持,1例で血管の切断,3例で自然治癒が原因と考えられる止血部の開通を観察した.頸動脈血管接合実験から本接合デバイスの十分な接合性能を確認した。3.生体組織接合促進技術の開発:高分子フィルムを用いた高分子ー生体組織間の接着実験では極性基を有する高分子が生体組織と接着することを見出し、生体非接着性であるポリエチレン(PE)フィルムを高分子グラフトにて表面改質した。生体組織との接着実験では、カルボキシル基あるいはヒドロキシル基を有する高分子グラフトPEフィルムにて接着性が観察された。研究目的「新しい熱・振動・圧力の複合低エネルギーによる生体組織接合技術の確立」を達成するために,慢性動物実験モデルを用いた接着評価が必要である.しかし,本年度はラットを用いた急性動物実験を実施し,接着性能・安全性を評価して良好な結果が得られた.このことから本研究はおおむね順調に進展していると言える.24年度が最終年度であるため、記入しない。あらゆる状況の手術手技に対応するために,様々な動物実験用接着デバイス先端のアタッチメントを開発する.ラットより大きい動物モデルを構築して,慢性動物実験を実施する.慢性実験より接着補強材・補助材の評価を行う.そして,複合低エネルギーによる生体組織接合技術を確立する.24年度が最終年度であるため、記入しない。
薬剤感受性遺伝子導入による悪性脳腫瘍に対する遺伝子治療

昨年度までに、CAGプロモーターを用いたアデノウイルスベクターの遺伝子導入の有効性と、この遺伝子導入法を用いた悪性脳腫瘍に対する5-fluorocytosine(5-FC)/cytosine deaminase(CD)遺伝子療法の有効性、問題点を検討してきた。今年度は、この遺伝子治療をより優れた方法とするために、CD遺伝子とUracil phosphoribosyltransferase(UPRT)遺伝子の2つを用いた薬剤感受性遺伝子治療を検討した。UPRT遺伝子を腫瘍細胞に導入すると、5-FUからFUMPの代謝が亢進し、より強力な抗腫瘍効果が発揮される。UPRT遺伝子を持ったアデノウイルスベクター(AdexCA-UPRT)を用い、9L細胞で検討した。まず、in vitroでCDとUPRT遺伝子を同時に腫瘍細胞に導入し、それら遺伝子か発現し十分作用していることが確認した。5-FCに対する感受性は、CDとUPRTの両方の遺伝子導入の場合、コントロールに比べ、約3000倍に増加し、またCD遺伝子単独導入よりも感受性の増加が認められた。また、このシステムに強いbystander effectがあることが認められた。in vivoでは、ラット9L脳腫瘍モデルを用いて、AdexCA-CD、AdexCA-UPRT及び5-FC投与を行い、長期生存の検討、ならびにMRIによる腫瘍サイズの計測を行い、治療群の長期生存と腫瘍の縮小が認められた。これらの結果より、悪性脳腫瘍に対し、5-FC/CD+UPRT遺伝子治療は非常に有用と考えられた。平成9年度の研究とその実績について報告する。レトロウイルスベクター産生細胞を用いた遺伝子導入により、6-thioxanthine/E.coli gpt遺伝子療法の有効性がin vitroで認められた。次に、9Lラット脳腫瘍モデルを用いて検討すると、レトロウイルスベクター産生細胞を用いた遺伝子導入によりE.coli gpt遺伝子が脳腫瘍内に導入され、6-thioxanthine投与による有効性が有意差をもって認められた。この結果は、Human Gene Therapyに掲載された。2)アデノウイルスベクターの改良、開発脳腫瘍細胞に対する遺伝子導入効率を高めるために、強力なCAGプロモーター用いたアデノウイルスベクター(AdexCALacG)を作成し、脳腫瘍細胞における遺伝子導入を検討した。in vitroでの遺伝子導入効率は、培養9L細胞では、MOI=25以上で2日以内に100%の導入が得られた。他のグリオーマ細胞株における検討でも9L細胞とほぼ同様の結果を得た。ラット脳腫瘍モデルでの検討では、AdexCALacZの腫瘍内注入4日後には、腫瘍全域にLacZ染色細胞が認められ、特に腫瘍辺縁部は濃染した。遺伝子発現は浸潤腫瘍細胞のみならず、腫瘍に接する正常脳細胞(グリア細胞、神経細胞)の一部にも認められた。上記結果をもとに、種々の薬剤感受性遺伝子を組み込んだ改良型アデノウイルスベクターを作成し、そのベクターを用いた脳腫瘍培養細胞での薬剤感受性遺伝子治療の検討を平成10年度に行う予定である。平成10年度の研究とその実績について報告する。1)アデノウイルスベクターの改良、開発脳腫瘍細胞に対する遺伝子導入効率を高めるために、強力なCAGプロモーターを用いたアデノウイルスベクター(AdexCALacG)を作成し、脳腫瘍細胞における遺伝子導入を検討した。In vitroでの遺伝子導入効率は、培養9L細胞では、MOI=25以上で2日以内に100%の導入が得られた。この結果は、脳と神経50(8):731-738,1998に掲載された。現在、さらにアデノウィルスのファイバー・ノブ・蛋白部分の変異体を作成し、脳腫瘍に対する遺伝子導入効率を検討している。上記のアデノウイルスベクターを用いた遺伝子導入により、5-fluorocytosine/cytosine deaminase遺伝子療法の有効性及び副作用を、9Lラット脳腫瘍モデルを用いて検討した。

この遺伝子治療は、脳腫瘍に対し非常に有効であったが、正常脳に対する神経毒性も軽度認められ、腫瘍選択的導入の必要性が示唆された。この結果は、Cancer Gene Therapyに掲載予定である。上記結果をもとに、種々の薬剤感受性遺伝子を組み込んだ改良型アテノウイルスベクターを作成し、脳腫瘍に対する薬剤感受性遺伝子治療の検討をさらに行う予定である。昨年度までに、CAGプロモーターを用いたアデノウイルスベクターの遺伝子導入の有効性と、この遺伝子導入法を用いた悪性脳腫瘍に対する5-fluorocytosine(5-FC)/cytosine deaminase(CD)遺伝子療法の有効性、問題点を検討してきた。今年度は、この遺伝子治療をより優れた方法とするために、CD遺伝子とUracil phosphoribosyltransferase(UPRT)遺伝子の2つを用いた薬剤感受性遺伝子治療を検討した。UPRT遺伝子を腫瘍細胞に導入すると、5-FUからFUMPの代謝が亢進し、より強力な抗腫瘍効果が発揮される。UPRT遺伝子を持ったアデノウイルスベクター(AdexCA-UPRT)を用い、9L細胞で検討した。まず、in vitroでCDとUPRT遺伝子を同時に腫瘍細胞に導入し、それら遺伝子が発現し十分作用していることが確認した。5-FCに対する感受性は、CDとUPRTの両方の遺伝子導入への場合、コントロールに比べ、約3000倍に増加し、またCD遺伝子単独導入よりも感受性の増加が認められた。また、このシステムに強いbystander effectがあることが認められた。in vivoでは、ラット9L脳腫瘍モデルを用いて、AdexCA-CD、AdexCA-UPRT及び5-FC投与を行い、長期生存の検討、ならびにMRIによる腫瘍サイズの計測を行い、治療群の長期生存と腫瘍の縮小が認められた。これらの結果より、悪性脳腫瘍に対し、5-FC/CD+UPRT遺伝子治療は非常に有用と考えられた。