hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
口腔疾患手術後の言語障害に関する臨床的研究-構音時の舌, 口唇および顎運動の同期解析-

口腔疾患患者における言語障害を動的かつ客観的に分析し診断と治療に役立てることを目的として,高速度16mm映画(映画),ダイナミックパラトグラフ(DP),サウンドスペクトルグラフ(SG)を同期した構音運動の同期解析法を開発し,その研究方法の妥当性について検討した後,健常人および舌切除症例の構音時の舌,口唇,および顎運動を解析した.新しく開発した研究方法の概要は次の如くである.映画法の計測基準点を顔面各部に設け口腔内にはDP用人工口蓋を装着して頭部を固定し,構音時の顔貌を正面と側面から毎秒64駒で映画を撮影し,同時に同じ速度のDPと音声をカセットテープレコーダーに入力する.その際,同期信号発生装置によって16mmフィルムには発光ダイオードによる光信号をカセットテープには雑音信号を記録する.後にSG上に表われるそれぞれの同期信号により映画所見とDPを対比する.本法によって得られた結果は以下のとおりである.1)健常成人の/S/音産生中には舌運動,下顎運動とも変化するが, DPの最大接触時には垂直的に最も中心咬合位に接近し安定した.2)健常成人の/t/音産生過程においては, DPの最大接触を過ぎてから下顎が最小開口位に達し,下顎が下方移動を始めた後に舌前方部で声道の開放が認められた.3)舌癌術後患者において発語明瞭度が最も低い/t/音産生過程においては,舌のみでは不可能な声道の閉鎖・開放を口唇で代償し,舌と口唇の両者で/t/音を産生していた.4)舌癌術後患者において発語明瞭度が最も高い/s/音産生過程においては舌のみでは不十分な狭めを口唇で補い,残存舌,口唇,下顎を微妙に調整して声道を形成しているものと推察された.5)破裂音は摩擦音よりも代償構音の産生が難しいことが示唆された.口腔疾患患者における言語障害を動的かつ客観的に分析し診断と治療に役立てることを目的として,高速度16mm映画(映画),ダイナミックパラトグラフ(DP),サウンドスペクトルグラフ(SG)を同期した構音運動の同期解析法を開発し,その研究方法の妥当性について検討した後,健常人および舌切除症例の構音時の舌,口唇,および顎運動を解析した.新しく開発した研究方法の概要は次の如くである.映画法の計測基準点を顔面各部に設け口腔内にはDP用人工口蓋を装着して頭部を固定し,構音時の顔貌を正面と側面から毎秒64駒で映画を撮影し,同時に同じ速度のDPと音声をカセットテープレコーダーに入力する.その際,同期信号発生装置によって16mmフィルムには発光ダイオードによる光信号をカセットテープには雑音信号を記録する.後にSG上に表われるそれぞれの同期信号により映画所見とDPを対比する.本法によって得られた結果は以下のとおりである.1)健常成人の/S/音産生中には舌運動,下顎運動とも変化するが, DPの最大接触時には垂直的に最も中心咬合位に接近し安定した.2)健常成人の/t/音産生過程においては, DPの最大接触を過ぎてから下顎が最小開口位に達し,下顎が下方移動を始めた後に舌前方部で声道の開放が認められた.3)舌癌術後患者において発語明瞭度が最も低い/t/音産生過程においては,舌のみでは不可能な声道の閉鎖・開放を口唇で代償し,舌と口唇の両者で/t/音を産生していた.4)舌癌術後患者において発語明瞭度が最も高い/s/音産生過程においては舌のみでは不十分な狭めを口唇で補い,残存舌,口唇,下顎を微妙に調整して声道を形成しているものと推察された.5)破裂音は摩擦音よりも代償構音の産生が難しいことが示唆された.昨年度は高速度16mm映画法とダイナミックパラトグラフィー(DP法)を同期した構音運動の観察方法を確立した。今年度は本法を用いて健常成人および舌癌術後患者の構音運動について分析を進め、次のような結果を得た。健常成人男子のIasaI,IataIの1例について詳細な検討を加えたところ、IsI音産生中に舌運動、下顎運動とも変化するがDPの最大接触時には最上方最前方位で安定し、垂直的に最もCO(中心咬合位)に接近することが判った。また、ItI音産生過程においては、DPの最大接触時を過ぎてから下顎が最小開口位に達し、下顎が下方移動を始めた後に舌前方部での声道の開放が行ることが明らかとなった。つまり、破裂音ItI産生において下顎の開口運動が舌の開放に先行することが判明した。この結果は従来の報告にはなく、新しい知見であると考えている。舌癌術後患者については発語明瞭度検査の結果から舌前方部で構音する音のうち最も明瞭度が高いISI音(正答率100%)と最も明瞭度の低いItI音(正答率13%)について検討したところ、ISI音産生過程においては舌のみで不十分な狭めを口唇を用いて補っていることが明らかとなり、さらにISI音産生中は残存舌、口唇、下顎を微妙に調整して声道を刑成しているものと推察された。ItI音産生過程については、サウンドスペクトログラム上に見られる破裂音の産生は口唇によるものであることが判明し、舌のみでは不可能な声道の閉鎖・開放を口唇で代償していることが明らかとなった。

しかし、その後に舌の緩徐な破裂様運動が認められ、本症例では舌と口唇の両方を用いてItI音を産生しているものと思われた。
現段階における国際労働組織の実態に関する調査研究

(1)本年度は,第2次世界大戦後の国際労働組織の一方の潮流をなしていた世界労連(WFTU)と日本の労働組合運動とのかかわりについて,世界労連日本事務所の関係者を通しての情報菟集をおこない,昨年度に概要を捉えた国際自由労連(ICFTU)の潮流の位置をさらに確定していく作業を進めた。(2)と同時に,本年度は,イタリア,フランス,アメリカ合衆国などのナシヨナル・センタ-の国際活動を概観していく作業をすすめ,上述の国際労働組織の二つの潮流が,発達した資本主義諸国の労働組合運動といかにかかわっているかについて,相当の檢討をおこなった。(3)以上の作業をとおして,次の諸論点が明らかとなってきた。a世界労連は戦後の冷戦体制のもとで反戦,反帝,民族解放の運動に一定の役割を果たしたが,発達した資本主義諸国の組合運動に持続的な影響をもつにはいたらなかった。それは,世界労連自体の組織構成および運営の原理自体に起因する問題として総括されるべきである。b 1970年代に入って,それまで世界労連に加盟していたイタリアやフランスのナシヨナル・センタ-は世界労連から離れていく傾向を示しはじめ,欧州労連(ETUC)や国際産別(ITS)の場をとおして国際自由労連(ICFTU)加盟の諸組織とも連帯していく新たな統一の動きが進んでいる。cその意味ではEC統合にむけて欧州労連がいかに動いていくかは,この研究を深化させるうえでの一つの焦点となるであろう。(1)本年度は、国際自由労連日本連絡協議会(ICFTU-LC)が所蔵するICFTU関係の主要資料の複製をつくり、基礎資料の蒐集にかなりの成果をあげた。また、研究分担者は、各国のナショナル・センタ-との連絡をとって、イギリス、フランス、イタリ-については、それぞれのナショナル・センタ-の国際活動に関する資料の蒐集に着手するることができた。さらにアジア地域に関しては、組合活動家レベルでの国際連帯活動に関する資料を蒐集した。(2)同時に、日本の労働組合の代表として、国際労働組織に関係してきた組合指導者たちを招いて、ICFTU,ICFTU-APRO,IMFの現状についての聞きとりを開始した。(3)研究者が分担する各国のナショナル・センタ-が、ICFTU,ITSの国際活動にどのように関与しているか、というテ-マで、イギリス、イタリ-については年度内に研究会をおこなうことができた。以上、初年度としては、順調なスタ-トをなしえたと考えている。
樹木画テストの発達指標の普遍因子と文化による固有因子の抽出への試み

平成15年度から18年度の4年間にわたる研究では、さまざまな地域の自然植生に触れ、観察し、それぞれの地域でそこに暮らす人々に樹木画を描いてもらい、それを収集してきた。その地域は、西アフリカ・カメルーンの北部マロア、インドネシア・バリ州、中国・麗江、バングラデッシュ、スリランカ、ルーマニアのクルージュ・ナポカ、ハンガリーのブタペスト、カメルーンの中南部の首都ヤウンデ、北アイルランドのベルファストである。最後のベルファストは、自然植生の観察のみで、調査の準備がたたず樹木画は収集できていない。収集した樹木画は、小野芳彦らの開発したバウム・ピューアー・ソフトによって画像をコンピュータに整理し、一方で、実際の樹木画から、幹先端処理、樹冠と幹の比率、表面の処理、樹木の位置、大きさ、大地の有無、根の表現等を数値化してそれぞれの地域の特徴を比較検討した。樹木画を描くにあたって、教示に用いる言語はそれぞれの地域によって当然異なっている。したがって、樹木という言葉がそれぞれの文化の中でどういった意味をになっているのか検討する必要があった。そこで、木、地、水、火、風、空(天)、草、人、森の9つの言葉を用いたSD法によって樹木の意味空間的な配置を検討した。樹木画は、それぞれの地域風土によって、そこに暮らす人々の精神性を反映するものであることが推察された。たとえば、ヤシの木とともに生活し、ヤシ型の樹木を多く描く地域では、ヤシ特有のシュートを描くことが多く、さらにそのシュートの表現は、その他の種類の樹木を描くときにも影響を受けており、その地域の生命観がそこに現れていると考えられた。また、樹木画の表現形式に対する教育の影響は非常に大きなものであるということもカメルーンの樹木画を中心に検討された。イメージ生成における描線を一本引くことの意味を深く考えさせられるものが多くあった。本年度は研究を始めるにあたって、1994年ごろからすでに別の調査研究にあわせて予備的に行ってきたバウムテストの資料を画像処理し、種々の数量的検討に耐えうるデータ・ベースの作成から始めた。データ・ベースの作成は主として小野芳彦が行い、バウムを検討する観点に従って、幹先端処理、樹冠と幹の比率、表面の処理、位置、大きさなどそれぞれの基準で分類整理ができるバウム・ビューアー・ソフトの作成を試みた。その一端は平成16年3月21日、国立民族学博物館で行われた成果報告会において口頭で発表した。バウムをその植生との関連や、当該の地域社会の自然観などとの関連において理解するために、その土地々々での樹木という言葉のイメージを、土、空、水といった言葉のイメージと合わせてSD法による分析のための質問紙を作成し、調査にあわせて施行した。実際の調査は平成15年12月から平成16年2月にかけて、江口一久を中心として西アフリカのカメルーン北部、マロワ市街の中学、高校、大学生を対象として行われた。ほぼ10年前に同一地域で行われた調査時にもバウムテストが施行されており、その時代的変化を検討することができた。10年の間に受けた近代化の道は、一方で西アフリカ固有の樹木を題材にしたものが減少し、輸入されたさまざまな果樹が取り上げられることが増えるなど、時代の影響をバウムも確実に受けていることが感じられた。これらの研究経過も、上記の成果報告会において報告し、国内のバウム当の描画法の研究者(高橋依子、岸本寛之、皆藤章、加藤清)を招いて検討課題を議論した。これらの成果については、16年度の日本心理臨床学会の大会において、改めて報告する予定である。本年度は、昨年度のカメルーン・マロワ市、に引続き、バングラデシュ、中国・麗江、インドネシア・バリ州で樹木画のデータを収集してきた。また、バリ州では風景構成法も施行した。

樹木画の分析方法;1)これまで、発達的指標とされてきた形態の分析についての比較検討2)それぞれの文化に特徴的であると思われる特徴についての比較検討切られた枝、樹皮の強調、根の強調、大地線3)使用空間の分析結果;インドネシア・バリ州では、樹木画では、一般的な発達指標の発達的な変化のいくつかは、バリ州全体のデータの中にも認められる。また、バリ固有の描画の特徴が認められる、たとえば、切られた枝の頻度が高く、また、紙面左端の使用が多い、同じバリ州内でも、異なった地域による描画表現の違いも比較的明瞭にあることが認められた。風景構成法では、バリ州独自の描画がさらに明瞭に認められる。樹木画と風景構成法の併用は、そこに光の部分と影の部分が分かれて描かれており、併用することで初めて全体的な心の表現が捉えられるという意義があるように思われる。中国・麗江では、樹皮の細かな表現が、特徴的である。バングラデシュでは、稲が木として描かれるなどの特徴が見られた。また、カメルーン・マロワでは、根と大地に特徴があるなど多くの地域的特徴がみられた。また、樹種についても検討している。木、森、草、火、地、水、人、天、風の9つの言葉を形容詞対を用いた質問紙によって、評価させ、分析した。言語は、すべて教育言語とした。具体的な形容詞対は、日本語で美醜・強弱・遅速・快不快・軽重・寒暖・悲喜・堅脆・鋭鈍・親疎に該当するものである。相対的な位置関係を求めるためならば、主成分分析を採用して分散の大きい軸を中心に見ていく必要がある。結果は現在、カメルーンとバリ州についてのみ出ているが、意味空間の中で、木と火と地の作る三角形の平面状に他の語が含まれる形となっていた。本年度は、調査地として8月にルーマニア、11月にスリランカ、年明けの2月にカメルーンで調査を行った。8月のルーマニアでは、予備調査としてルーマニアの植生と地域性について調べ、来年度の調査学校の選定、及び依頼を行った。現在のところルーマニア、クルージュ地区にあるルーマニア人学校と同地区のハンガリア人学校で来年度6月に調査する予定となっている。11月には、スリランカですでに前年に選定し依頼していたアッタナガラの僧院にある日曜学校と近隣の高校で本調査を行った。本調査は、樹木画、風景構成法、樹木や水、火等の自然を表す言語のイメージ調査としてSD法質問紙を集団的に実施する。5歳から54歳までの379名に実施することができた。スリランカのバウム、風景構成法は、インドネシア、バリ島でのバウム、風景構成法と類似しており、ヤシの木を中心に描かれ、風景もその色使い等において共通したものを感じさせた。それぞれの文化が、一方は上座部・テーラワーダ仏教、一方がバリ・ヒンドゥー教の独自の宗教で色づけられているにもかかわらず、その描き方、色使いに共通する点を多く感じさせたのは、それぞれの国の宗教文化よりもさらに「深層」にある日常の生活や身体に根ざしたものであり、離れていても同じ東南アジアの気候風土を共有するものが描画に現れる人格の一側面に反映しているのではないか、とも推察される。今後の検討が求められる点であろう。
ファージ由来溶菌酵素を利用するメチシリン耐性黄色ブドウ球菌院内感染制御

I.黄色ブドウ球菌ファージ由来溶菌酵素投与の安全性の検討(1)過剰投与の影響:ファージ由来溶菌酵素500Uは、マウス鼻腔からのMRSA除菌およびMRSA全身感染マウスの救命に十分な量であることを確認した。更に、腹腔内に過剰量の溶菌酵素1000U,2000U,4000Uを単独で投与し、接種直後から3ヶ月後まで生存率および全身状態を検討した。その結果全てのマウスにおいて生存率および全身状態に何ら影響は認められなかった。またマウス鼻腔内に溶菌酵素500U単独滴下した場合も、マウスの全身状態への影響は認められなかった。(2)反復投与の影響:マウス腹腔に500U溶菌酵素を10日毎に3回投与を行なった。3回目投与においても、全身状態に何ら影響はなくアナフィラキシー等は観察されなかった。(3)抗溶菌酵素抗体の産生および溶菌活性への影響の検討:上記3回溶菌酵素投与マウスの血清を採取し、Western blotting法及びELISA法により抗溶菌酵素抗体の産生を確認した。抗溶菌酵素抗血清と溶菌酵素を混合後37°C、1時間保温し溶菌活性への影響を検討した。しかし、抗体の溶菌活性への影響はほとんど認められなかった。II.溶菌酵素調剤法の検討:ヒト鼻腔、皮膚への溶菌酵素投与用薬剤開発を目指し、粉末剤および軟膏剤としての製剤法の可能性を検討した。(1)精製酵素溶液を凍結乾燥して粉末状にし、10日後生食等で再度溶液化し溶菌活性を検討した。その結果粉末状でも活性を保持していることが分かった。(2)溶菌酵素溶液を水溶性軟膏基剤と混合し、4°Cで10日間保存し溶菌活性を検討した結果軟膏基剤と混合した状態でも、溶菌活性は安定に保持されることが明らかとなった。ファージ由来溶菌酵素は、安全性の高い薬剤としてMRSA除菌等に使用できる可能性が強く示唆された。今日の医療現場で深刻な難治性感染症を引き起こしている様々な抗生物質耐性菌を効率よく溶菌するバクテリオファージの探索・単離を行い、さらにこれら治療用ファージが産生する溶菌酵素の遺伝子クローニングから酵素蛋白(ライシン)を精製し、殺菌効果と安全性を検討することを目的に研究を行い、以下の成果を得た。1.治療用ファージパネルの構築:黄色ブドウ球菌、大腸菌、腸球菌、緑膿菌に対する治療用ファージの選別・単離をほぼ完了し、緑膿菌以外は動物実験にてin vivoでの治療学的有効性と安全性を確認した。2.溶菌酵素遺伝子の同定とクローニング:上記の独自に分離した新規の治療用ファージ群のうち、まず黄色ブドウ球菌ファージφMR11のゲノムDNA(約41kb)断片をクローニングし、これをもとに全ゲノム塩基配列を解読した。次いでφMR11ゲノムにコードされるライシン遺伝子を同定、そのORFを発現ベクターpTrc99Aにサブクローニングした(pTrc99A-φMR11/Lysin-6xHis)。3.溶菌酵素の精製と治療学的効果の検討:上記pTrc99A-φMR11/Lysin-6xHisにより、大腸菌で活性ライシンの融合蛋白を発現させ、Coカラム精製にて活性ライシンの調製に成功した。この精製ライシンがin vitroであらゆる臨床分離MRSA/VRSA株を極めて強力に溶菌することを明らかにした。現在、φMR11由来精製ライシンの有効性と安全性をin vivoで確認するとともに、精製ライシンの回収率を高める改良調整法についても検討中である。また、黄色ブドウ球菌以外のファージ由来ライシン遺伝子の同定、クローニング、精製作業についても実施中である。

その結果粉末状でも活性を保持していることが分かった。(2)溶菌酵素溶液を水溶性軟膏基剤と混合し、4°Cで10日間保存し溶菌活性を検討した結果軟膏基剤と混合した状態でも、溶菌活性は安定に保持されることが明らかとなった。ファージ由来溶菌酵素は、安全性の高い薬剤としてMRSA除菌等に使用できる可能性が強く示唆された。
下肢虚血性潰瘍に対する低酸素刺激を加えた細胞シートによる治療法の開発

本研究では末梢循環障害による難治性皮膚潰瘍に対して、成長因子を分泌する末梢血単核球とコラーゲンを分泌する線維芽細胞シートを共培養して作製した細胞混合シートの移植法を開発したものである。この細胞混合シートは、末梢血単核球が分泌する成長因子が線維芽細胞に作用することで、線維芽細胞が分泌するVEGFの産生量が飛躍的に上昇し、皮膚潰瘍の早期の創傷治癒を促すことが示唆された。また、皮膚全層欠損に移植された細胞混合シートは皮膚全層欠損が治癒した組織には残存しないことが確認されている。本研究において、この細胞混合シート移植治療は、難治性皮膚潰瘍に対する新しい治療法となる可能性を有していることが示唆された。難治性皮膚潰瘍は国内約130万人以上で罹患しており、超高齢化社会化により患者数は今後も右肩上がりで上昇するものと予想される。本疾患は、糖尿病や褥瘡、閉塞性動脈硬化症に伴って生じるものであり、患部血流がなく、また感染を起こしているケースも多い。その為、人工真皮などでは対応できず、現状は効果的な治療法がない。本研究では、患部での長期生存を可能にする細胞シート技術を応用して、難治性皮膚潰瘍に対する新規治療法の開発を目指している。平成27年度は、ウサギの耳から採取した線維芽細胞と末梢血から単離した単核球細胞を混合して細胞シートが作製し得るか否かの検証を行い、さらに、作製したウサギ細胞混合シートの機能賦活化の検討を行った。結果、ウサギ細胞混合シートの作製および低酸素処理によるシートの機能賦活化に成功した。さらに、機能賦活化したウサギ細胞混合シートを皮膚全層欠損モデルへ自家移植し、組織再生、血管新生、血流回復、などのパラメータで治療効果を検証したところ、極めて良好な治療効果を得た。また、皮膚損傷の既存薬であるフィブラストスプレー(科研製薬)との治療効果の比較を行ったところ、驚くべきことに、細胞混合シート移植群において最も高い治療効果を得た。平成28年度は、治癒過程の詳細な検証を行い、本法の有効性・有用性について実証していく。平成27年度の研究計画は、ウサギからの細胞混合シートの作製とその細胞機能の検証、機能賦活化法の確立、ウサギ皮膚全層欠損モデルへの自家移植による治療効果の実証、などであり、これらはおおむね順調に進めることができた。本研究は、重症虚血肢に伴う難治性潰瘍に対する画期的な治療法の確立を目的とし、低酸素プレコンディショニング法の組み合わせで、細胞混合シートからの血管成長因子産生の飛躍的増加という独自の知見を活かし、糖尿病や褥瘡などが原因の難治性皮膚潰瘍に対しても有効な治療法の開発を目指している。本年度はラビットでの自己末梢血単核球と線維芽細胞の2種類の細胞を用いて作製した細胞混合シートの機能をin vitroで解析した。細胞シートが分泌する成長因子の血管新生作用を解析する為に、HUVECを用いたtube formationアッセイを行った。末梢血単核球、線維芽細胞シート、細胞混合シートの培養上清を、HUVECに与えて12時間後のtube formationを観察すると、細胞混合シートの培養上清は、末梢血単核球、線維芽細胞シートの培養上清よりも優位にHUVECが形成するTotal tube lengthが長い結果となった。また、各培養上清の線維芽細胞に対する細胞増殖アッセイを行ったところ、細胞混合シートの培養上清は、末梢血単核球の培養上清よりも、線維芽細胞の増殖を優位に高める結果となった。細胞混合シート作製時における末梢血単核球の挙動を観察するために、PKH26で末梢血単核球を染色後に、線維芽細胞と混合培養して細胞混合シートを作製し、PKH26の陽性細胞を観察したところ、細胞混合シート中にPKH26陽性細胞が観察された。平成28年度は、当初の実験計画通り、細胞混合シートの創傷治癒に対する効果をin vitroで検証出来た。本研究は、重症虚血肢に伴う難治性潰瘍に対する画期的な治療法の確立を目的とする。本年度は、ヒト末梢血単核球とヒト線維芽細胞の2種類の細胞を用いてヒト細胞混合シート作製法を確立する。線維芽細胞は口腔内組織から単離する方法を確立するために、ボランティアである健常者の口腔内から採取した組織を用いて培養法の確立を試みた。口腔内組織から線維芽細胞を単離するために、explant法を試みたところ、培養開始して5日目には細胞が生え出ているのが観察された。細胞表面抗原を解析したところ、CD90陽性の細胞群は90%以上であった。末梢血単核球は、静脈血から採血した血液から比重遠心法により採取された。ヒト細胞混合シートにおけるVEGF産生能を解析するために、ヒト細胞混合シート、ヒト線維芽細胞シート、末梢血単核球において3日間通常培養(37°C、5%CO2)した条件、および、低酸素プレコンディショニング法である2日間通常培養(37°C、5%CO2)後に1日間低酸素培養(33°C、5%CO2、2%O2)した条件である6群で比較検討した。末梢血単核球は通常培養および低酸素プレコンディショニング法の培養条件では、VEGFは検出されなかった。通常培養および低酸素プレコンディショニング法の培養条件におけるVEGF濃度については、線維芽細胞シートは1443pg/mLおよび1754pg/mL、細胞混合シートは2695pg/mLおよび5113pg/mLであった。

ルシフェラーゼ遺伝子が導入されたヒト線維芽細胞シートをヌードマウスに移植すると、移植後21日目までは発光が観察された。本研究では末梢循環障害による難治性皮膚潰瘍に対して、成長因子を分泌する末梢血単核球とコラーゲンを分泌する線維芽細胞シートを共培養して作製した細胞混合シートの移植法を開発したものである。この細胞混合シートは、末梢血単核球が分泌する成長因子が線維芽細胞に作用することで、線維芽細胞が分泌するVEGFの産生量が飛躍的に上昇し、皮膚潰瘍の早期の創傷治癒を促すことが示唆された。また、皮膚全層欠損に移植された細胞混合シートは皮膚全層欠損が治癒した組織には残存しないことが確認されている。本研究において、この細胞混合シート移植治療は、難治性皮膚潰瘍に対する新しい治療法となる可能性を有していることが示唆された。平成28年度には、引き続きウサギ皮膚全層欠損モデルへの自家移植実験を行い、治癒効果の詳細な検証を行う。具体的には、免疫組織化学や遺伝子発現解析などを実施することで、細胞シート移植群における通常の創傷治癒(皮膚再生)過程との違いについて検証し、実用化へ向けた足掛かりとする。平成29年度は、ヒトの末梢血単核球と線維芽細胞から構成させる細胞混合シート作製法を行う。また、ヒト細胞混合シートが分泌する成長因子の測定を行なうことで、難治性皮膚潰瘍に対する細胞シート治療法の開発を進めていく。29年度が最終年度であるため、記入しない。再生医療、心臓血管外科学29年度が最終年度であるため、記入しない。
海岸域の隆起運動とそのメカニズムに関する変動地形学的検討

緩慢に隆起していると思われるような、長波長・小起伏の海岸地域を対象として、詳細な変動地形調査を実施した。その結果、海成段丘面の変形や傾動を示すような旧汀線高度の変化といった地形の異常が認められ、離水ベンチが分布していることが明らかになった。これらの事実は、海域の活断層運動による間欠的な地震性隆起が卓越することを示している。また、プレート境界であっても、海底活断層は固有の地震活動を繰り返していることがわかった。変動地形学的に海底活断層の位置・形状を正確に把握することが重要である。北海道積丹半島と青森県下北半島を調査地域とし,MIS 5e前後に形成された海成段丘面の分布を明らかにし,その高度・形状などをもとに,海岸部の隆起運動が活断層運動によってもたらされたことを検討した.海成段丘面の編年は,112115kaに噴出・堆積したToya火山灰を用いて行った.積丹半島西岸部では,MIS 5eに形成された海成段丘面が連続的に分布している.その旧汀線高度は,南東部の泊付近では30m未満であるが,北西部の神恵内村周辺では60m以上となる.また,約7kaに形成されたと推定される海成段丘面の高度も,4.5m(南東部)から北西に高度を上げ,神恵内村の北西においては8m以上となる.このような急激な汀線高度の変化は,西方海域の海底活断層の活動によってもたらされたと考えられる.以上の研究成果は,日本地震学会2009年度秋季大会において公表した.下北半島においても,Toya火山灰に覆われるMIS 5eに形成された海成段丘面が広く分布している.半島東部では,これらの旧汀線高度は3050m程度であるが,ここでは短波長の高度変化は認められない.しかし,半島東部南部の東岸では,陸側のMIS 5eの海成段丘面はほぼ水平に分布するのに対し,海側では2度程度の傾斜で東へ傾斜することが確認された.急斜部の幅は約1kmである.程度の撓曲変形が認められる.このような変形は,規模の大きな逆断層の活動によって,海成段丘面が撓曲していることを示している.MIS 5eの海成段丘面の変形をより詳細に示すために,1970年代に撮影された空中写真を用いた写真測量を実施し,5mメッシュのDEMを作成した.このDEMに基づく地形解析結果は,2010年5月の地球惑星科学関連学会2010年連合大会において発表する.北海道積丹半島と島根県松江市周辺の海岸地域を調査地域とし,MIS 5e前後に形成された海成段丘面の分布を明らかにした。それらの高度.形状や、離水ベンチの分布などをもとに,海岸部の隆起運動が活断層運動によってもたらされたことを検討した.海成段丘面の編年は,積丹半島では112115kaに噴出・堆積したToya火山灰を、島根県松江市周辺海岸地域では、130kaに噴出・堆積したDMPと110kaに噴出・堆積したSKなどを用いて行った.積丹半島西岸部では,MIS 5eに形成された海成段丘面が連続的に分布している.当初、その旧汀線高度は,南東部の泊付近では30m未満,北西部の神恵内村周辺では60m以上となると予想した。しかし、崖錐堆積層の厚さが予想より厚く、泊り付近では20m、神恵内付近では3035mに修正した。離水ベンチは、ほぼ連続的に分布している。地質的に硬い岩石の分布域においては、高度は高く、分布は広い。これらの状況は、積丹半島西岸では地震性隆起が卓越することを示唆している。これらの結果は、本年度の地震学会において公表する予定である。島根県松江市周辺の海岸域においては、三瓶火山起源のテフラの分析と、海成段丘面の分布と離水ベンチの高度を明らかにしてきた。三瓶起源のテフラとしては、約110kaのSKにつづき、SUn・SI・SI'などのテフラを確認した。また、広域火山灰として、Ata火山灰や大山起源のDMPの同定を行った。その結果、本地域に分布する海成段丘面のうち、MIS 5eに形成されたものの汀線高度は約35mであること、MIS7の海成段丘面の汀線高度はこれより10数m程度高いことが判明した。離水ベンチ高度は、十六島地域において最も高く、右ずれ変位を主体とする鹿島断層の延長がかなり長く、海岸部の地殻変動に大きな影響を与えていることが明らかになってきた。これらの研究成果は、本年度以降の地震学会・活断層学会にて公表してゆく予定である。

2011年3月11日に発生した、東北地方太平洋沖地震(3・11超巨大地震)によって、本研究の調査地域として選定していた三陸海岸地域に大きな地殻変動が現れた。三陸海岸一帯は数10cmも沈降したが、従来の測量学的成果によると、本地域は定常的にも沈降傾向にある。しかしながら、更新世以降という長期のタイムスケールの中では、海成段丘面の発達の程度から判断して、本地域は隆起していることは明らかである。この問題を検討するために、三陸海岸に分布する海成段丘面の高度分布をもとに、海成段丘面の変形状態を明らかにした。その結果、少なくとも三陸海岸北部の沿岸浅海底には、陸側を隆起させる活断層が存在する可能性が高いことを示した。なお、3・11超巨大地震時には、甚大な津波被害も発生した。本研究では、その被害の様子に関しても記載・考察を行った。日本海溝およびその周辺海域の立体映像解析に基づく、詳細な活断層判読も継続してきた。その結果、3・11超巨大地震は、三陸沖茨城県沖に連続する長大な逆断層の活動によって発生した可能性が高いことが判明した。多数の歴史地震の震源域も、我々が認定した海底活断層と分布が一致しており、海底活断層の位置・形状は、プレート境界周辺における地震発生場所や規模の推定にとって重要な情報であることを提示した。南海トラフ-駿河トラフにおける巨大地震の発生と関連して、糸魚川-静岡構造線活断層系の活動が連動する可能性が指摘されている。この問題を具体的に検討するためには、糸魚川-静岡構造線活断層系の活動履歴を明らかにする必要がある。このような課題に関しても、成果を公表した。また、昨年度まで精力的に調査を継続してきた、下北半島西部の隆起運動についても一定の成果を得て報告した。ここでは、海成段丘面の高度分布や離水ベンチの分布などから、海岸域の隆起運動は北方海域の海底活断層の活動によりもたらされることが明らかになった。昨年に引き続き、日本海溝周辺のアナグリフ画像の解析による、海溝周辺の海底活断層の認定を行った。とくに、津波との関係を重視し津波シミュレータも用いて、従来より信頼性の高い断層モデルを構築することができた。2011年3月11日に発生した東北地方太平洋沖地震による津波の到達範囲や、被害の分布に関する成果も公表し、変動地形調査の有効性を示すことができた。アナグリフ画像を用いた立体視による海底活断層調査に関して、日本海東縁部において同様の研究を行った。北海道西方沖から富山湾にいたる海域の変動地形解析を行い、従来と比較して格段に精度の高い活断層図を作成した。その結果、いくつかの歴史地震との関連性が明らかになったが、1993年北海道南西沖地震については、震源域と海底活断層との対応が見られなかった。この問題を詳細に検討し、震源域や断層変位様式などについて、変動地形をもとに詳しく検討してゆく予定である。なお、山形沖においては、海底谷の下流側が隆起するために、先行谷が形成されている事例を発見することができた。このような海底活断層は極めて新しい時代に活動的であると考えられる。今後の地震や津波の発生域として注目される。また、北陸中国地方の日本海沿岸地域の海成段丘面の分布や編年に関する変動地形学的調査を実施し、能登半島西岸・若狭湾周辺・島根県松江市周辺の海成段丘面や離水ベンチの分布を明らかにした。この地域では、後期更新世に噴出したテフラ層序も明らかにすることができたので、今後の変動地形研究のための基礎的データを揃えることができた。小浜湾においては音波探査も実施し、海底活断層による地層の変形を明らかにした。近畿地方では原子力施設が林立しており、活断層との関係を慎重に検討してゆくことが必要であることも具体的に検討して示した。3・11超巨大地震の発生により、津波に関する緊急の調査・研究が必要となったことにより、海成段丘面の調査がやや遅れ気味である。
中国清朝・民国時代の北京等都市における非漢語出版文化に関する社会史的研究

本年度の活動としては、ロシア連邦(ロシア科学アカデミー東洋学研究所サンクト・ペテルブルグ支所)において資料調査をおこない、また国内研究機関・図書館(東洋文庫、天理図書館、京都大学附属図書館)でも資料調査をおこなった。19世紀以降、ほぼ1920年代までのモンゴル語・満洲語出版物のデータベース作成をおこなったが、現物を確認できていないものが多く、今後も調査を継続する予定である。そして本研究課題でえた成果にもとづき、ユネスコが出版している『中央アジア文明史/History of Civilizations of Central Asia』の最終巻、第6巻(2005年上半期刊行予定)に収録される、18世紀より20世紀初頭のモンゴルに関する章を執筆した。清朝によるモンゴル支配形成から20世紀はじめのモンゴルが独立するまでの時期を対象として、モンゴルをめぐる政治状況と社会変容を追いながら、そのなかでモンゴル独自の「文化」がどのように形成・発展し、外部の「文化」とどのように接触したか、これが基本的な論点である。特定領域研究「東アジア出版文化の研究」のなかでは、C・D班共催研究会《アジアの特殊文庫》(2004年5月15日、於京大会館)で研究報告「稲葉岩吉の蔵書と資料の行方」をおこない、またD班を中心とし編集された『ナオ・デ・ラ・チーナ』第6号へ「日本人東洋史学者と清朝内閣大庫史料との邂逅-東北大学附属図書館狩野文庫の「清査東大庫底档档」について-」を発表した。東アジア出版文化のなかでの内陸アジア語系出版資料の位置と意義を、共同研究のなかであきらかにしようとした。このほかInternational Workshop on Xingjiang Historical Sources(2004年12月12日14日、箱根)をおこない、海外からの研究者も招聘し、本研究課題では十分に扱うことができなかった、新疆地域におけるチュルク語(チャガタイ・トルコ語)による出版もふくめた史料所在状況を検討し、さらに海外からの出席者のうち、清朝史研究者を中心に「セミナー:中央ユーラシア史研究のあらたな展望」(2004年12月17日、AA研大会議室)を開催した。平成15年度に実施した研究活動のなかで、もっとも重点をおいたのは、日本・中国に伝存する(伝存した)、研究課題関係モンゴル語古籍の調査と分析である。このため、国内を中心に国外(中国・米国)でも調査を実施した。とくに戦前、小林高四郎の尽力によって、北京の原所蔵者のもとで写書され、日本へ将来されて、蒙古研究所が所蔵し、服部四郎により論文のなかで言及されているが、戦後は行方不明となっていた、「カラチン本蒙古源流」(Erdeni-yin tobci)の一抄本を米国ハーヴァード大学燕京研究所図書館において再発見し電子化し、既知の「蒙古源流」抄版本のどの系統に属するか、その資料的価値をあきらかにできたのは成果であった。また江上波夫により、戦前期に日本へもたらされた、モンゴル語資料(現在は、横浜ユーラシア文化館、東京大学東洋文化研究所などで保管)の整理をおこなった。江上収集資料は、おもに仏典を中心として、一部、社会史的資料もふくみ、時期的にも16世紀後半から19世紀におよび、採集地も内モンゴル各地にわたる。これをデーターにとり電子化し、基本的な整理をおこなうと同時に、横浜ユーラシア文化館で開催された、特別展覧会『オロンスム-モンゴル帝国のキリスト教遺跡-』の資料展示にも協力した。なお江上関係資料の戦後、接収され行方不明となった部分に関して、台湾国立故宮博物院および中央研究院歴史語言研究所、近代史研究所において追跡調査も実施した。

このほかInternational Workshop on Xingjiang Historical Sources(2004年12月12日14日、箱根)をおこない、海外からの研究者も招聘し、本研究課題では十分に扱うことができなかった、新疆地域におけるチュルク語(チャガタイ・トルコ語)による出版もふくめた史料所在状況を検討し、さらに海外からの出席者のうち、清朝史研究者を中心に「セミナー:中央ユーラシア史研究のあらたな展望」(2004年12月17日、AA研大会議室)を開催した。
iCAF：iPS由来の癌線維芽細胞による膵癌幹細胞、間質幹細胞の糖鎖標的探索

世界的にも解析が遅れている膵癌における糖鎖解析に取り組んだ。臨床膵がん幹細胞様細胞株(CSCL-1)の糖鎖発現を網羅的に解析し、H type 3糖鎖が特異的に表出しており、rBC2レクチンがそれに結合する事を同定した。さらに、rBC2レクチンを直接がん幹細胞を標的とする治療担体としての応用に研究を展開した。また、間葉系幹細胞をCSCL-1と混合してマウス皮下に移植すると、腫瘍増生能は優位に促進されるが、CAFを第一世代(F1)、F2と単離しそれをCSCL-1と混合移植した所、腫瘍増生能はF0,F1,F2と徐々に弱くなる事が明らかになり、逆にCAFマーカーは高くなっていく傾向を示した。細胞の最外層に位置しているのはタンパク質や脂質を修飾する糖鎖であり、その構造は細胞の分化度や悪性度を鋭敏に反映する。このため細胞表面の糖鎖は有効な治療ターゲットであるはずだが、膵癌特異的な糖鎖修飾の多くは不明であった。そもそも、糖鎖は複雑に分岐して非常に多彩なため、微小でheterogeneityが強い臨床癌における糖鎖状態を解析することは技術的に困難であった。本研究では、膵癌の病理組織学的な特徴である間質組織増生に焦点を当て、間質組織が存在する状態における膵癌幹細胞、膵癌間質幹細胞に特異発現する糖鎖を同定する。従来の、膵癌細胞株やそれをマウスに植えた移植モデルは、間質組織をほとんど含まない癌細胞だけが充満した髄様性の増殖を示し、臨床膵癌の病理的特徴を模倣する事は出来ていなかった。我々はある間葉系幹細胞とある膵癌細胞株を混合する事で癌-間質相互作用の再現に成功した。さらに、この細胞株は間葉系幹細胞と混合しなくても、一定の間質組織誘導をもたらすことも明らかになり、癌幹細胞マーカーであるCD24,44,131といった分子の発現も保たれている事が明らかであった。本研究はさらに、この間葉系幹細胞の遺伝子、タンパクプロファイルを同定し、iPS細胞から再現性の高い安定したCAF(=iCAF)の開発を行う。膵癌-iCAF混合モデルにおいて、産総研独自の「レクチンアレイ」技術を使い、世界的にも解析が遅れている膵癌における糖鎖解析に取り組む。膵癌患者の新規治療標的となる意味のある糖鎖発現を癌、間質それぞれの分画毎に3種(合計6種)を炙り出す。難治癌の代表である膵癌は、既存の治療開発戦略では目覚ましい治療効果の改善が期待できず、本研究は“糖鎖"という新たな治療標的を提示する事を目的とする。当初、膵癌細胞株と間質細胞を混合培養してより臨床状態に近い癌を作り出し、それぞれをレーザーマイクロダイセクションによって取り分けて糖鎖解析をする予定であった。しかし、我々は、「癌細胞の腺管構造の形成とその周囲を取り囲む線維芽細胞の増殖」という臨床膵癌の形態を単独で再現する細胞株を見出し、極めて癌幹細胞に近い貴重な細胞株としてCancer Stem Cell Line-1 (CSCL-1)と名付けて以後の研究に用いた。一方、腺管形成をしない5つの膵癌細胞株をコントールに置き、CSCL-1において特異的な糖鎖発現を、96種類のレクチンが乗ってレクチンアレイによる糖鎖プロファイリング技術を用いて解析した。その結果、膵がんの治療ターゲットを網羅探索した結果、rBC2と呼ぶ低分子(16 kDa)のレクチンが、臨床膵がんに類似した形態形成能を有する膵がん細胞株に、強く特異的に結合することを見出した。奇しくも、このrBC2は、先に産総研がヒトiPS/ES細胞に特異的に反応するレクチンとして発見した分子と同一であった(Tateno et al. JBC 2011, BBRC 2013)。このrBC2レクチンが認識するH type 3糖鎖の修飾が癌幹細胞とiPS細胞に共通に起きている事は癌stemnessの解明、治療法開発への足がかりになる大きな発見であった。それに加えて、70例のヒト臨床膵臓がんにおけるrBC2レクチンの反応性を確認した所、ほぼ全例で強く反応することが確認でき、rBC2が認識するH type 3糖鎖を膵がんに対する有望な治療ターゲットと確信した。rBC2以外にも、CSCL-1において有意に高く反応するレクチンを8種類、反応が低下しているレクチンを2種類同定した。アンメットメディカルニーズの代表である膵癌に対しては、全く新しい概念に基づく新規治療法の開発が熱望されている。我々はある細胞株(CSCL-1)が間質組織誘導をもたらし、臨床膵癌の形態を再現すことを明らかにし、癌幹細胞マーカーであるCD24,44,131といった分子の発現も保たれている事から、臨床膵癌の特性を解析する絶好のモデルと認識した。我々は、産総研糖鎖グループが独自に開発した「レクチンアレイ」技術を使い、世界的にも解析が遅れている膵癌における糖鎖解析に取り組んだ。

臨床膵がん幹細胞様細胞株(CSCL-1)の糖鎖発現を網羅的に解析した結果、特異的に表出している糖鎖としてH type 3糖鎖と、それに反応するレクチンrBC2を同定した。奇しくも、このrBC2は、先に産総研がヒトiPS/ES細胞に特異的に反応するレクチンとして発見した分子と同一であった。このrBC2レクチンが認識するH type 3糖鎖の修飾が癌幹細胞とiPS細胞に共通に起きている事は癌stemnessの解明、治療法開発への足がかりになる大きな発見であった。それに加えて、70例のヒト臨床膵臓がんにおけるrBC2レクチンの反応性を確認した所、ほぼ全例で強く反応することが確認でき、rBC2が認識するH type 3糖鎖を膵がんに対する有望な治療ターゲットと確信した。ここで我々は、このrBC2レクチンを直接がん幹細胞を標的とする治療担体としての応用に研究を展開した。H28年度(2年目)は、1年目に明らかにした膵癌表面に特異的に発現するH type3糖鎖を標的とする治療法の開発にエフォートを割いた。まず、rBC2レクチンに緑膿菌外毒素(PE38)を結合させた薬剤融合レクチン(=rBC2-PE38)を作成した。6種類の膵癌細胞株(SUIT-2、AsPc-1、BxPc-3、CSCL-1、MiaPaca-2、PACN-1)、および申請者が樹立した日本人膵癌由来の細胞株8種類の糖鎖発現は様々である。rBC2に反応する糖鎖発現レベルをFACS及び、マウス移植腫瘍結節のレクチン組織染色にて把握した。これらの細胞に対してrBC2レクチン単体、rBC2-PE38,の殺細胞作用をMTT法により評価した。これまでの検討の結果、rBC2-PE38のIC50は、rBC2レクチンに親和性を持たない細胞株に対しては23.01711.2 ng/mlであった。一方、臨床膵がんに最も近い形態形成能を有する膵がん細胞株(CSCL-1)のみはrBC2に強い親和性があり、そのCSCL-1におけるIC50は1.7 pg/mlと極めて高い殺傷効果を示した。これは従来報告されている抗体-毒素(Immuno-toxin)における(ng/mlオーダー)と比較し約1000倍の強い殺細胞効果を示すものであった。ここで、レクチンが持つ可能性がある細胞凝集毒性が危惧されたため、rBC2レクチンの血液凝集反応を解析しが、A,B,O,AB型のヒト赤血球との混合試験において全く凝集を起こさず、マウスに15μgという大容量を静脈注射しても、マウスが一切死なない安全性を確認できた。そこで、in vivoでの効果を確認する為に、マウス皮下結節の近傍にrBC2-PE38を直接投与した所、劇的な腫瘍縮小効果を確認した。世界的にも解析が遅れている膵癌における糖鎖解析に取り組んだ。臨床膵がん幹細胞様細胞株(CSCL-1)の糖鎖発現を網羅的に解析し、H type 3糖鎖が特異的に表出しており、rBC2レクチンがそれに結合する事を同定した。さらに、rBC2レクチンを直接がん幹細胞を標的とする治療担体としての応用に研究を展開した。また、間葉系幹細胞をCSCL-1と混合してマウス皮下に移植すると、腫瘍増生能は優位に促進されるが、CAFを第一世代(F1)、F2と単離しそれをCSCL-1と混合移植した所、腫瘍増生能はF0,F1,F2と徐々に弱くなる事が明らかになり、逆にCAFマーカーは高くなっていく傾向を示した。本課題の目的は、間質組織が存在する状態における膵癌幹細胞、膵癌間質幹細胞に特異発現する糖鎖を同定する事である。
新規ペプチド・炭化フッ素ハイブリッド人工肺サーファクタントの基盤及び開発

肺サーファクタント脂質の基本成分はDPPC/PG/PA(パルミチン酸)(=68:22:9,wt/wt/wt)を用いた。これは、羊水中の脂質組成と同様あり、最も有効な肺サーファクタント脂質混合物として多くの研究者によって用いられ、また臨床的にRDS治療薬にも適用されている。先ずin vitroで新規人工調製肺サーファクタント(DPPC/PG/PA/Hel 13-5:以下Helと略記)とRDS治療薬(Surfacten:TAと略記)の物性比較を行った。種々の表面物性解析法(π-A等温線、ΔV-A等温線、Hysteresis曲線、蛍光顕微鏡画像)で比較検討した結果、表面物性においてこのHelはTAに匹敵する結果が得られた。そこでこれらの結果をin vivoとの関連付けるために、それらの肺内物性を比較検討した。プロトコルとして、成熟Wistarラットに生理食塩水で肺洗浄を行い、肺サーファクタント欠乏モデルを作製した。その欠乏モデルに対し、100%酸素による人工換気下で、両調製物を気管内投与し、それぞれの経時肺コンプライアンス測定を行った。またその後、ラット肺を気胸させ、静的なP(肺内圧)-V(肺容量)曲線を測定し、肺サーファクタント効果の指標とした。以上より、実際の肺内物性においてもこの調製物HelはTAに匹敵することすることが見出された。表面物性及び肺内物性の両面からRDS第一選択薬Surfactenに匹敵する人工肺サーファクタントが調製され、この研究の成果は呼吸における肺機能メカニズムの解明及びSP-BやSP-Cの模倣ペプチドを含有するRDS治療薬の開発等に多大に貢献すると考えられる。また、in vitroとin vivo物性の相関関係が確立されたことから、部分フッ素化両親媒性物質を組込んだハイブリッド型人工肺サーファクタントへの応用・展開が期待される。本年度は、新規サーファクタントプロテインアナログ(Hel 13-5)とモデル膜構成成分(DDPC)の基礎物性および調製開発を界面科学的に明らかにした。結果を以下に示す。1)新規ペプチドの合成:SP-B,SP-Cを考慮し,両性質を合わせ持つペプチドを設計,1部を合成した。2)Langmuir膜の基本物性測定の結果各系において次のことが明らかになった。人工ペプチドHel 13-5には、天然の肺サーファクタントに見られるスクイズアウト現象に相当する平坦部分が存在し、肺サーファクタントタンパクアナログとしての可能性が存在した。また原子間力顕微鏡の結果よりスクイズアウトした人工ペプチドHel 13-5は下層に抜け出すことが明らかとなった。PGは、DPPC/Hel 13-5混合膜中においてHel 13-5の役割である膜成分の展開・再展開を助けた。天然の肺サーファクタントに見られるスクイズアウト現象に相当する平坦部分が存在した。パルミチン酸成分の混入よりスクイズアウト現象に相当する形態学的変化が蛍光画像に見られた。表面圧-面積等温線よりDPPC/PG/PA/Hel 13-5の調整成分はサーファクテンと同じ様な平坦な崩壊圧を示し、更に医療コストを考慮すると、その機能はサーファクテンより優れていると考えられる。結果を以下に示す。新規ペプチドの合成:SP-B, SP-Cを考慮し,両性質を合わせ持つペプチドを設計,Hel 13-5のD体を合成した。

Langmuir膜の基本物性測定の結果各系において次のことが明らかになった。DPPCは、展開溶媒系の違いにより蛍光顕微鏡形態学的観察において、LCドメインに顕著な差が観察され、この機構は現在考察中である。Hel 13-5(D3)単独系において、蛍光画像に二相共存領域が観察され、この現象はHel 13-5L体においては観察出来ておらず、新規の発見である.またDPPC/Hel 13-5(D3)において、Hel 13-5(D3)の組成に依存し、転移圧及び崩壊圧が上昇した.この挙動もHel 13-5 L体においては観察出来ておらず、あらたな発見である.新規人工ペプチドHel 13-5(D3)の天然の肺サーファクタントに見られるスクイズアウト現象に相当するほぼ平坦部分が存在し、肺サーファクタントタンパクアナログとしての十分の可能性を示した。これから多成分系に展開し既存薬Surfacten (R)(サーファクテン:牛肺抽出物)との比較に取り組む。ペプチド・炭化フッ素ハイブリッド人工肺サーファクタント系2種の部分フッ化両親媒性物質(FC)を人工調製サーファクタント系に組み込み、それらの気/液界面挙動を系統的にLangmuir isothermsより遂行した.FCは膜の圧縮に伴ってHel 13-5と共にDPPC単分子膜から排出された。長鎖FCは、Hel 13-5の排出現象を促進した。特に長鎖FCを510wt%添加すると、高圧部においてDPPCと混合単分子膜を形成することにより著しい膜安定化作用を示した。これらの結果、部分フッ素化両親媒性物質(長鎖FC)の添加によって高価なHel 13-5を少量化でき、さらに人工調製肺サーファクタントの薬効の増大が期待でき、更に医療コストを考慮すると、その機能はサーファクテンより優れていると考えられる。肺サーファクタント脂質の基本成分はDPPC/PG/PA(パルミチン酸)(=68:22:9,wt/wt/wt)を用いた。これは,羊水中の脂質組成と同様あり,最も有効な肺サーファクタント脂質混合物として多くの研究者によって用いられ,また臨床的にRDS治療薬にも適用されている。先ずin vitroで新規人工調製肺サーファクタント(DPPC/PG/PA/Hel 13-5:以下Helと略記)とRDS治療薬(Surfacten:TAと略記)の物性比較を行った。種々の表面物性解析法(π-A等温線,ΔV-A等温線,Hysteresis曲線,蛍光顕微鏡画像)で比較検討した結果,表面物性においてこのHelはTAに匹敵する結果が得られた。そこでこれらの結果をin vivoとの関連付けるために,それらの肺内物性を比較検討した。プロトコルとして,成熟Wistarラットに生理食塩水で肺洗浄を行い,肺サーファクタント欠乏モデルを作製した。その欠乏モデルに対し,100%酸素による人工換気下で,両調製物を気管内投与し,それぞれの経時肺コンプライアンス測定を行った。またその後,ラット肺を気胸させ,静的なP(肺内圧)-V(肺容量)曲線を測定し,肺サーファクタント効果の指標とした。以上より,実際の肺内物性においてもこの調製物HelはTAに匹敵することすることが見出された。表面物性及び肺内物性の両面からNRDS