hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
非可換渦のダイナミクスとその高密度ＱＣＤ物質への応用

本年度は下記二点の研究成果を得た。[カイラル対称性の破れに伴って現れるドメインウォールの性質]低温・低密度でQCD物質はカイラル対称性の破れたハドロン相を呈する。ハドロン相ではドメインウォールと渦の複合ソリトンが存在するが、このような複合的構造体が実際の世界にあるとすれば観測的に知られている宇宙のエネルギー密度と矛盾してしまうことが知られていた(ドメインウォール問題)。本研究では、非可換渦の寄与を考えるとウォールと渦の複合構造が溶解することを位相的観点から示し、その溶解の様子を数値シミュレーションにより確認した。さらに、ドメインウォール中に非可換渦のループができることによりウォールが量子的に崩壊することを指摘し、その崩壊確率の見積もりを行った。この2つの効果の帰結として、カイラル相転移ではドメインウォール問題が現れないことを指摘した。[Cu+Au衝突を用いたクォークグルーオンプラズマ(QGP)の電気伝導度の推定]低密度・高温状態で現れるクォークグルーオンプラズマにおける渦ダイナミクスを考察する過程で、QGPの電気伝導度を実験から推定する方法を発見した。最近ブルックヘブン国立研究所にある加速器RHICでは、銅原子核と金原子核による非対称な重イオン衝突実験が行われている。金原子核同士の衝突とは異なり、銅・金衝突では銅原子核側に向う賞味の電場が存在する。この電場に対して衝突後に生成されたQGP内で電荷移動が起こり、電荷分布が双極子的に変形すると期待できる。この双極子の大きさがQGPの電気伝導度を反映しており、粒子分布の形を特徴付けるハーモニクスのうち一次の量の電荷依存部分が電気伝導度の情報を持っていることを指摘した。またこの効果の大きさが衝突のインパクトパラメータにどう依存するのかを調べるために、中心部を貫く電束の大きさのインパクトパラメータ依存性を解析した。本研究の結果は、今まで計測するのが困難であったQGPの電気伝導度測定の端緒を開くものである。カラー超電導における非可換渦の集団構造に関しては、技術的困難もあり未だ研究成果として発表できるまでに至っていない。一方で、低密度のハドロン相で非可換渦が大きな物理的役割を果たすことを見出した。クォークグルーオンプラズマの電気伝導度の推定についてもより詳細な解析を進めており、全体としては概ね順調に進展していると考えている。(抄録なし)本年度は、カラー超伝導の非可換渦の性質のうち、その電磁的な性質について、また渦内部に束縛されたゼロエネルギーフェルミオン状態に起因して生じる非可換統計の性質についての研究を主に行った。以下、それぞれについて記す。カラー超伝導の非可換渦は渦の上に局在した自由度を持っており、その自由度を表す場は2次元複素射影空間(CP(2))の元となっている。この非可換渦上に局在するCP(2)モードが、電磁相互作用に関する電荷を持っていることを示し、電磁場との結合を含めたCP(2)場の有効理論を構築した。さらにこの有効理論に基づいて、一本の渦や渦の格子がどのような電磁気的性質を持つのかを調べた。その結果、渦格子は光に対して偏光板として働くことがわかった。このような性質は、カラー超伝導体の存在を観測的に検証する上で有用となり得る。超伝導や超流動に現れる量子渦は内部にマヨラナフェルミオン的なゼロエネルギー束縛状態を持つことがあるが、カラー超伝導はこの一例である。ゼロエネルギー状態があると基底状態に縮退が生じ、渦の交換に際して非可換統計が現れることが知られている。この研究では、渦が内部にSO(N)のベクトル表現として変換するようなN個のフェルミオンを持つ場合の非可換統計が興味深い構造を持つことを明らかにした。まず、フェルミオンの演算子によって表現した渦の交換を表す演算子が二つの演算子の積として書けることを示した。一方の演算子は、渦に束縛されたフェルミオンが一個の場合の交換演算子と等価であり、もう一方はコクセター群の生成子の表現となっていることがわかった。さらに、ある基底における交換演算子の表現行列が、渦上のフェルミオンが一個の時の交換演算子の表現行列と、コクセター群の生成子の表現行列とのテンソル積で与えられることを示した。このような性質は渦内に複数のマヨラナフェルミオンがあれば系によらず持つべき性質であり、物性系での実現も期待できる。本年度は、昨年度に引き続いてカラー超伝導渦の電磁的性質の研究、またカラー超伝導渦の非可換統計に関する研究を行った。これらに加えて、新たに下記の研究を行った。[Cu+Au衝突を用いたクォークグルーオンプラズマ(QGP)の電気伝導度の推定]渦による記述の、低密度・高温状態で現れるクォーク・グルーオン・プラズマ(QGP)への応用を考える過程で、QGPの電気伝導度を実験から推定する方法を考案した。金原子核同士の衝突とは異なり、Cu+Au衝突では銅原子核側に向う賞味の電場が存在する。

本研究の結果は、今まで計測するのが困難であったQGPの電気伝導度測定の端緒を開くものである。【回転系での格子QCD計算]格子QCD計算は、通常は平衡状態のQCD物質の性質を調べるのに用いられる。本研究では、回転系のQCDの作用から出発することにより、回転系での格子QCD計算を初めて定式化した。構築した枠組みを用いてモンテ・カルロ計算を行い、回転系から見たQCD真空が有限の角運動量を持つことを確認した。[ホール粘性に対するStreda公式の導出]本研究では、まず粘弾性理論が電磁気学とよく似た形式で記述することを指摘した。特に「磁場」にあたる部分は通常の重力理論では現れない振率という量になる。この定式化を用いて、ホール粘性に対するStreda公式を導出した。本年度は下記二点の研究成果を得た。[カイラル対称性の破れに伴って現れるドメインウォールの性質]低温・低密度でQCD物質はカイラル対称性の破れたハドロン相を呈する。ハドロン相ではドメインウォールと渦の複合ソリトンが存在するが、このような複合的構造体が実際の世界にあるとすれば観測的に知られている宇宙のエネルギー密度と矛盾してしまうことが知られていた(ドメインウォール問題)。本研究では、非可換渦の寄与を考えるとウォールと渦の複合構造が溶解することを位相的観点から示し、その溶解の様子を数値シミュレーションにより確認した。さらに、ドメインウォール中に非可換渦のループができることによりウォールが量子的に崩壊することを指摘し、その崩壊確率の見積もりを行った。この2つの効果の帰結として、カイラル相転移ではドメインウォール問題が現れないことを指摘した。[Cu+Au衝突を用いたクォークグルーオンプラズマ(QGP)の電気伝導度の推定]低密度・高温状態で現れるクォークグルーオンプラズマにおける渦ダイナミクスを考察する過程で、QGPの電気伝導度を実験から推定する方法を発見した。最近ブルックヘブン国立研究所にある加速器RHICでは、銅原子核と金原子核による非対称な重イオン衝突実験が行われている。金原子核同士の衝突とは異なり、銅・金衝突では銅原子核側に向う賞味の電場が存在する。この電場に対して衝突後に生成されたQGP内で電荷移動が起こり、電荷分布が双極子的に変形すると期待できる。この双極子の大きさがQGPの電気伝導度を反映しており、粒子分布の形を特徴付けるハーモニクスのうち一次の量の電荷依存部分が電気伝導度の情報を持っていることを指摘した。またこの効果の大きさが衝突のインパクトパラメータにどう依存するのかを調べるために、中心部を貫く電束の大きさのインパクトパラメータ依存性を解析した。研究計画に記載したように本年度は主に一本の渦の性質に着目して研究を行った。特に電磁的性質に着目することで、カラー超伝導体の観測に繋がりうる議論をすることが出来た。またフェルミオンゼロモードによる非可換統計は、当初は期待していなかった意外な性質であったが、物性物理への応用も可能な一般的な議論をすることが出来た。当初の予定にあったFFLO状態における渦については結果が未だ出ていないものの、それ以外の部分、特に高密度QCDに留まらない部分については研究の進展があった。
造礁サンゴの初期生活史における褐虫藻獲得・共生成立過程

造礁サンゴは褐虫藻と共生するが、初期生活史における共生系成立過程については不明な点が多い。本研究では、サンゴ幼生や初期ポリプがいつどの遺伝子型の褐虫藻を獲得し共生系を成立させるかを、室内実験と野外調査により明らかにした。その結果、幼生9種で褐虫藻獲得が確認され、獲得には内部構造の発達が重要であること、自然条件下でも幼生が様々な遺伝子型の褐虫藻を獲得すること、定着後1カ月、1年以上経過したポリプともに複数の褐虫藻タイプと共生していたが、後者ではあるタイプは出現しなくなることが明らかとなった。これより、サンゴの初期生活史では褐虫藻獲得に選択性はなく、成長とともにより共生に適した褐虫藻遺伝子型に変化することが示唆された。サンゴ礁に生息する造礁サンゴ類は単細胞の藻類「褐虫藻」と共生するが、初期生活史における褐虫藻獲得と共生系成立過程については不明な点が多い。本研究では、外部環境から褐虫藻を獲得する水平伝搬型サンゴの浮遊幼生および初期ポリプが、いつどのように褐虫藻を獲得し共生系を成立させるかを、長期野外調査と室内実験によって明らかにする。特に、褐虫藻は複数のクレードに分類され、どのタイプと共生するかにより環境耐性が異なることが報告されている。本研究では、幼生や初期ポリプがどの褐虫藻タイプと共生するのかを異なる環境下で調査し、成体と比較することによって、サンゴが初期生活史の段階から環境に応じた褐虫藻タイプを選択的に獲得し共生系を成立させるのかどうかを明らかにする。本年度は、室内実験においてサンゴ数種の幼生に褐虫藻を与え、獲得の有無や時期、内部構造の関係を明らかにした。その結果、5属9種の幼生で褐虫藻獲得が確認され、そのうちミドリイシ属サンゴ(Acropora spp.)は受精後5, 6日目以降に獲得を開始すること、口部および胃腔の発達に伴い獲得数が増加することがわかった(Harii et al.2009)。これより多くの水平伝搬型サンゴは、浮遊期間中に褐虫藻を獲得する可能性があることが示唆された。野外調査では、ミドリイシ属サンゴについて成体の褐虫藻クレード、および幼生と初期ポリプの褐虫藻獲得について調べた。その結果、成体は褐虫藻クレードCと共生すること、また、幼生は野外でも藻類を獲得し、その藻類は複数のクレードを含む褐虫藻であることがわかった。初期ポリプについては、異なる水深2カ所にポリプを設置し数ヶ月おきに採取して固定した。今後、得られた試料から褐虫藻クレードの特定を行う予定である。本研究では、造礁サンゴ類の初期生活史における褐虫藻獲得・共生成立過程を解明するため、外部環境から共生藻類(褐虫藻)を獲得する水平伝搬型サンゴ幼生や初期ポリプが、遺伝子型の異なるどの褐虫藻タイプと共生するのかを昨年度から継続して実験・調査する。得られた結果を成体サンゴの褐虫藻タイプと比較して、初期生活史における褐虫藻共生の選択性を明らかにする。本年度は以下の成果が得られている。室内実験では、数種のサンゴ幼生がいくつかの異なる遺伝子型を持つ褐虫藻タイプを獲得し、共生することを明らかにした。野外実験において幼生を飼育したところ、本研究で初めて自然条件下でもサンゴ幼生が褐虫藻を獲得することが明らかとなった。これらの褐虫藻の遺伝子型を調べたところ、約10タイプを特定することに成功した。また水温・光環境の異なる水深2m、20mの地点においてサンゴの初期ポリプを飼育したところ、両地点ともに定着後一カ月では幼生と同様に複数のタイプが出現した。その後1年以上経過したポリプでは、成体サンゴと同じ褐虫藻タイプも含めた複数のタイプと共生しているものの、あるタイプの褐虫藻は出現しなくなった。以上より、サンゴの初期生活史では褐虫藻を獲得し共生する際、遺伝子型を選択していないことが明らかとなった。幼生や定着後1カ月程度の初期ポリプは、まず環境中に存在するどの褐虫藻も獲得し、エネルギーを獲得したり骨格形成を促進させたりし、後により共生関係に適したものに変化して定着した環境に適応していくことが示唆された。
遷移金属錯体の酸化還元能を利用する小員還化合物の電子移動反応

シクロプロパンなどの小員環化合物から光誘起電子移動によって生成する活性種の化学的特性を明らかにし、その合成化学的展開を図ることを目的として、適当な電子受容性化合物とビニリデンシクロプロパン、メチリデンシクロプロパン、およびシクロプロパノンシリルアセタールとの光反応を検討し、以下の知見を得た。1.9,10-ジシアノアントラセン(DCA)を光増感剤として、アセトニトリル中、1-(ビス(4-メトキシフェニル)ビニリデン)-2,3-ジメチルシクロプロパンに光照射すると、速やかに光異性化し、シス体とトランス体の比が3:7の光定常状態を与えることを見いだした。また、この系に少量の酸素やMg(ClO_4)_2を加えると、光異性化の量子収量が著しく増大すること、光異性化の活性種がシクロプロパンラジカルカチオンであることを明らかにした。2.DCAを光増感剤として、1-(ジフェニルメチリデン)-2,2,3,3-テトラメチルシクロプロパンを含むベンゼン溶液に光照射すると、DCAとシクロプロパンから生成するエキシプレックスを経由して1-(1-メチルエチリデン)-2,2-ジメチル-3,3-ジフェニルシクロプロパンに定量的に光異性化することを明らかにした。3.シクロプロパノンシリルアセタールはフェナントレンを光増感剤に用いると、i,1-ジシアノ-2-フェニルエテンなどの電子受容性芳香族アルケンと速やかに反応し、位置選択的にC-3ユニットを導入した付加体を与えることを見出した。
大面積ナノレベル超周期構造の形成とその応用

直接インプリントと陽極酸化を技術ベースとし、高密度自己規則化条件を利用して、3mm角サイズで30nmまでの短周期の高規則ホールアレイ構造を実現した。この手法は1インチサイズまでは有効で、20mm角サイズで173nmの初期窪み周期構造からは100nm周期への短周期化に加えて、新たに1/3に相当する58nm周期への一段での短周期化も実現した。大面積化のために低圧転写可能なUVインプリント技術を導入し、モールド洗浄法を開発するとともに3インチまでの均一ナノパタン形成にメドをつけた。ナノオーダー(数nm数百nm)の周期配列構造を大面積(2インチ程度)で実現すること、並びにその応用検討を行うことが本研究の目的である。本年度は3mm平方領域に電子ビームリソグラフィ技術の限界に近い52nm周期までの三角配列ドットパタンを持つSiCモールド(大きさは10mm平方)を作製し、アルミ板及びSi上の蒸着アルミへの直接パタン転写の検討を既存の高温インプリント装置を用いて行った。圧力と温度を最適化することにより、いづれの基板においてもアルミ面にナノホールの開始点となる窪み配列の形成条件を明らかにできた。特に破損することなく、Si基板上蒸着アルミへパタン転写が成功したことは、今後の大面積化への見通しを明るくする重要な成果である。陽極酸化装置と周期構造の評価系は20年度で必要な装置の手配が終わったので、21年度早々にシステム立ち上げを完了させ、1/√<3>の陽極酸化条件を利用した短周期化研究を本格化させる予定である。応用研究に関してはドイツのマックスプランク研究所で担当者と直接打ち合わせを行い、共同研究することで、合意した。サンプルを提供するという形で、他にも内外の複数機関との共同研究を開始する予定である。インプリント装置に関しても大面積で均一な圧力でのプレスができるように既存装置に高性能ヘッドを導入し、大面積化の際の研究課題克服のための装置改善に着手した。今年度は研究期間も短く、立ち上げ的な研究段階であり、成果発表の実績はゼロである。平成21年度までに数mm平方サイズで、30nmまでの短周期の規則配列構造を実現した。ウェハサイズまでの大面積化のためは解決しなければならない課題が2つある。一つ目として、これまで行ってきたSiC基板に形成された突起をアルミ素材へ直接インプリント転写する方法では、面積が大きくなるにつれて、加える圧力が高くなるために再現性に乏しい技術であることが判明した。例えば、高圧下では微妙な加重偏りでも面内均一性は著しく低下する。あるいは基板間にゴミがあると高耐圧なSiC基板でも容易に破損する。直接プリント法では最大面積20mm角のナノホールを実現したが、このあたりが限界である。圧力軽減をはかるために、H20年度後半から直接プリント法よりも1/10以下の圧力でパタン転写可能なUVインプリント法の検討を開始し、研究費も投入した。ただし、この方法はレジストに一旦転写したものをさらにドライエッチングによりアルミ基板に転写するため、プロセス工程が増える。均一性、再現性を覚悟すべく、本年度も引き続き条件把握の実験を行うが必要である。大面積化のために解決しなければならないもう一つの課題はアルミ陽極酸化時の温度制御である。例えば、20mm角のアルミ板に陽極酸化で100nm周期のホールアレイを作製しようとすると電流値が数Aに達し、アルミ界面の電解質溶液の温度が急激に上昇する。電気化学反応における温度変化(特に急激な変化)は規則性が乱れるなど、ナノホールの高規則化に影響を及ぼす。そこで大面積化のためには反応槽の冷却法を工夫するなどの必要が生じている。大面積化りための2つの課題を今年度の中頃までには解決し、最終年度となるH22年摩中には1インチサイズで、周期30nmを目標に高規則ナノホール作製技術を確立する予定である。応用に関してはいくつか検討中であり、年度後半には対外発表を予定している。前年度報告したが、大面積化の課題(高圧)を解決するために、今年度はUVインプリント法を利用したナノホール形成に重点化した。まず任意のドット配列パタンの形成された石英モールド(サイズは最大3インチ)をEB描画とドライエッチングで作製する。有期溶剤溶解性のUVレジストを用いることにより、いわゆるリフトオフプロセスが可能となり、UVインプリント法によるメタルパタンを各種基板に形成する技術の立ち上げに成功した。UVインプリントによるメタルパタンの形成は極めて有意義なもので、各種デバイス応用が期待される。インプリントにより形成されたメタルをマスクにして、各種基板をエッチングすることにより、高アスペクトパタンをもつモールドの作製も可能になった。

SiCモールドの複製も容易となり、モールドコストの著しい低減とともにゴミなどによる破損にも対処できるようになった(これまでは原盤を利用するので壊れたら高価なモールド再作製が必要で効率が悪く高コストであった)。このようにして作製したモールドを利用し、20mm角の大きさで173nm周期から100nm周期への低周期化も再現性よくできるようになった。その際、もう一つの大面積化のための課題である発熱低減を狙って、陽極酸化時の溶液温度を室温(2025°C)から5°Cに下げた結果、173nm周期から一気に1/3に相当する58nm周期の配列が得られた。実験の再現性はあるが、酸化電圧は1/√3の条件なので、得られた結果が説明できない。現象解明のために条件を変えた実験を進めていたが、年度後半から装置トラブルが相次ぎ、思うように実験が進まず、未解明の状態である。震災の影響などもあったが、諸装置が徐々に立ち上がりつつあるので、H22年度で補助金は終了するが、引き続き自主研究を続け、今後1年の結果は科研費の成果として発表をする予定である。
グルココルチコイド誘発性糖尿病に対する薬物治療の洗練化と発症予測因子の検討

平成30年度実施予定としていた膠原病患者におけるグルココルチコイド誘発性糖尿病に対する処方実態調査および治療薬の有用性の検討を行うために、慶應義塾大学医学部倫理委員会および薬学部人を対象とする研究倫理委員会の承認を得た後、2012年1月1日2018年3月2日までに慶應義塾大学病院リウマチ・膠原病内科にてグルココルチコイド投与後にグルココルチコイド誘発性糖尿病と診断され糖尿病薬(注射・内服)が処方された膠原病患者を対象として、診療録をレトロスペクティブに調査した。調査対象患者は31名であった。そのうち約8割の患者は糖尿病の既往合併がある患者および診断はされていないが高血糖状態の患者であった。また、約3割の患者は高血糖誘発が報告されている薬剤(免疫抑制剤など)を併用していた。高用量(プレドニゾロン30mg/日以上)グルココルチコイド内服投与患者あるいは短期高用量グルココルチコイド静脈内投与(ステロイドパルス)患者16名・22件のグルココルチコイド投与開始5日後の血糖推移を調査したところ、夕食前および就寝前血糖値は、朝食前と比較して有意に上昇していた。入院患者の第1選択薬剤としては速効型インスリンの前向き用量調節(スライディングスケール法)や食前投与が多く、その後DPP-4阻害薬や食後過血糖改善薬等の経口糖尿病薬に変更され、さらに変更が必要な患者に対してはビグアナイド薬やチアゾリジン薬が処方されていることが明らかとなった。インスリンの使用後にグルココルチコイド誘発性糖尿病の特徴である食後の血糖上昇の抑制を目的とした薬剤が選択され、それでも血糖コントロール不良な症例に対しインスリン抵抗性改善薬が処方されたと考えられた。内服薬の第一選択としてDPP-4阻害薬や食後過血糖改善薬が有用である可能性があるが、今後詳細な検討が必要である。平成30年度中に、膠原病患者における11β-HSD1活性測定を行うための準備として、健常人検体を用いたCortisol、Cortisoneおよびその代謝に関わるステロイドの血中・尿中濃度測定による11β-HSD1の活性測定の条件検討を完了する予定であったが、現時点でまだ完了していないため。グルココルチコイド誘発性糖尿病等、グルココルチコイドの投与による代謝異常に脂肪細胞のグルココルチコイド受容体が寄与しているという論文が最近報告された。それによると、少数での検討ながら、クッシング症候群患者は健常人と比較してグルココルチコイド受容体活性の指標となるFKBP5 mRNA発現量が有意に多いという結果が示されており、グルココルチコイド誘発性糖尿病の発現予測因子として、患者のFKBP5 mRNA発現量が利用できる可能性がある。本研究でも、11β-HSD1活性測定と合わせてFKBP5 mRNAについても検討していきたいと考えている。それによると、少数での検討ながら、クッシング症候群患者は健常人と比較してグルココルチコイド受容体活性の指標となるFKBP5 mRNA発現量が有意に多いという結果が示されており、グルココルチコイド誘発性糖尿病の発現予測因子として、患者のFKBP5 mRNA

発現量が利用できる可能性がある。本研究でも、11β-HSD1活性測定と合わせてFKBP5 mRNAについても検討していきたいと考えている。平成30年度に実施する予定であった、Cortisol、Cortisone及びその代謝産物の血中、尿中濃度測定条件検討ができなかったため、試薬等の購入費が支出されなかった。平成31年度の助成金と合わせ、試薬等の購入を行い、条件検討から開始していきたいと考えている。
近代ヨーロッパにおける子ども観と家族構造に関する歴史人口学的研究

1.本研究は、近代ヨーロッパにおける人口動態と家族構造の変化を分析することによって、この時期の子ども観の変容を明らかにすることである。まず人口動態の変化については、歴史人口学の研究成果から子ども数、出産回数、子どもの死亡率などの人口動態学的指標に即して子ども観の変動要因を抽出するための先行研究を渉猟した。また、家族史研究の成果からは、生物学的な再生産のメカニズムを支配する「家族戦略」の史的変容のプロセスを明らかにするために、求愛行動の文化、完成家族規模、家内集団などについての先行研究を渉猟した。2.これらの調査研究うによって得られた新たな知見の一部は、近代教育思想史研究会第5会大会(1995. 8. 28)のフォーラムにおいて「教育の歴史人類学の可能性について-再生産の歴史人類学を中心に」と題して口頭発表した。また、本年度の研究計画における中間考察の一部は、比較家族史学会編『事典・家族』(弘文堂,1996. 2)に所収の「育児」「サイコヒストリー」「心性」「若者」「求愛行動」「完成家族規模」「擬制的親子関係」「求婚滞在」「家族復元法」「バンドリング」「ドナージュ」「ヴェイエ」「ワルプルギスの夜」「ゴットファーザ-」「ヨーロッパ的結婚パターン」「付き添い慣習」など合計18項目の執筆に反映している。3.初年度としては、文献収集が多岐にわたったこともあって、このテーマに収斂する領域の基礎的な情報収集とそのデータベース化に多大の人件費と相当の時間を要したが、すでに絶版になった文献も多く、労多くして実り少なしの感は否めない。しかし、収集できた文献からだけでも、子ども観の変容に及ぼした人口動態・家族構造の変化の概要はつかむことができたので、次年度以降はこの作業をさらに徹底してすすめる予定である。
癌抑制分子 Cbl の腫瘍化制御メカニズムの解明

c-CblはE3ユビキチンリガーゼとして機能する分子であり、造血細胞において様々なチロシンキナーゼ活性を抑制する作用を持つ。これらの機能はCblのN末端側のドメインが担っているが、CblにはC末端側に様々なキナーゼによって著明にリン酸化されるチロシン残基が存在し、この構造はCrkやCasなどの細胞骨格制御分子に類似している。そこで我々はCblの細胞骨格制御への関与についてCbl欠損細胞を用いて検討を行った。その結果、Cbl欠損細胞はインテグリン刺激後のアクチン再構成が遅延していることが明らかとなり、Cbl欠損造血細胞はSDF1やフィブロネクチンへの走化能が低下している事が判明した。さらに、Cbl欠損未分化造血細胞はRac活性が低下することにより骨髄へのホーミング能が低下することが明らかとなった。そして、CblからRacへのシグナルはCblのTyr700とTyr774の2カ所のチロシン残基によって伝達されていることが明らかとなった。今回の研究成果により、我々はCblがC末端側に存在するTyr700とTyr774の2カ所のチロシンを介してRacを活性化し、未分化造血細胞の骨髄へのホーミングおよびケモカインへの走化性を制御していることを明らかにした。この成果は、Cblによる血液腫瘍発症メカニズムの解明に役立つものと期待される。本年度は造血系細胞におけるCblの細胞骨格制御について検討を行った。その結果、Cblノックアウト(KO)マウス由来の線維芽細胞では、フィブロネクチン接着後のアクチン細胞骨格線維の再構成能が低下しており、また未分化造血細胞では骨髄へのホーミング能が有意に低下していることが明らかとなった。また、Cbl KO血液細胞はフィブロネクチンやSDF-1などのケモカインに対する遊走能が有意に低下しており、これがホーミングの低下に関係していると予想された。血液細胞の骨髄ホーミングには低分子量G蛋白であるRhoファミリー分子(Rho, Rac, Cdc42)の機能が重要で有ることが知られているため、血液細胞におけるこれらのG蛋白活性を測定したところCbl KO細胞ではRac活性が有意に低下していることが明らかとなった。KO細胞に認められた細胞骨格制御能(ホーミング能)は活性型Racを導入することで回復することが判明したため、造血細胞はCbl-Racとつながるシグナル伝達系によって細胞骨格再構成能および骨髄ホーミング能が制御されていると考えられた。Cblについては、これまで腫瘍化との関連で数多くの研究結果が報告されており、これらはCblのユビキチン化能の障害およびチロシンキナーゼの制御障害と関係して述べられることが多かったが、今回私が明らかにした知見は、Cblが細胞骨格の制御にも関わっていることを示しており、極めて意義深い発見と考えている。細胞骨格制御の破綻は腫瘍化にも関わるため、今後は腫瘍化と細胞骨格制御およびCblからRacに至るシグナル経路について分子生物学的に解析を加えていきたい。本年度は昨年度に引き続き、造血系細胞におけるCb1の細胞骨格制御について検討を行った。昨年までに、Cb1ノックアウト(KO)マウスの未分化造血細胞では骨髄へのホーミング能やフィブロネクチン、SDF-1などへの走化性が有意に低下している事を確認し、これがRac活性の低下によることを明らかにしたが、本年度はCb1からRacに至るシグナル経路について検討した。その結果、Cb1からRacへのシグナル伝達には、Cb1のC末端側に存在するチロシン残基が重要であり、さらに3つのチロシン残基Y700,Y731,Y774のうちY700とY774がRacへのシグナル伝達に重要であることを見出した。これは、Cb1 KO由来の未分化造血細胞にこれら3つの残基の変異体を導入すると、Y700とY774が同時に変異している変異体を導入したときのみ、ホーミング能が回復しなかったことによる。

以上より、造血細胞はCb1-Racとつながるシグナル伝達系によって細胞骨格再構成能および骨髄ホーミング能が制御されており、そのシグナル制御にはCb1のY700とY774が重要であると考えられた。Cb1については、これまで腫瘍化との関連で数多くの研究結果が報告されており、これらはCb1のユビキチン化能の障害およびチロシンキナーゼの制御障害と関係して述べられることが多かったが、今回私が明らかにした知見は、Cb1が細胞骨格の制御にも関わっていることを示しており、極めて意義深い発見と考えている。今回の研究期間において、造血系細胞におけるCblの細胞骨格制御について検討を行った。Cblノックアウトマウスの未分化造血細胞では骨髄へのホーミング能やフィブロネクチン、SDF1などへの走化性が有意に低下している事を確認し、これがRac活性の低下によることを明らかにした。そして、CblからRacへのシグナル伝達には、CblのC末端側に存在するチロシン残基が重要であり、さらに3つのチロシン残基Y700, Y731, Y774のうち、Y700とY774がRacへのシグナル伝達に重要であることを見出した。以上より、造血細胞はCbl-Racとつながるシグナル伝達系によって細胞骨格最高性能および骨髄ホーミング能が制御されており、そのシグナル制御にはCblのY700とY774が重要であることが判明した。Cblについては、これまで腫瘍化との関連で数多くの研究結果が報告されており、これらはCblのユビキチン化能の障害およびチロシンキナーゼの制御障害と関係して述べられることが多かったが、今回明らかにした知見は、Cblが細胞骨格の制御にも関わっていることを示しており、極めて意義深い発見と考えている。Cb1の細胞骨格制御機能について、Cb1-Rac経路の重要性を明らかにし、Cb1異常が未分化造血細胞に与える影響について知見を得ることができたため。24年度が最終年度であるため、記入しない。今後は、Cb1変異体の腫瘍促進メカニズムについて分子生物学的に明らかにしていく方針である。
19-20世紀日本における記念碑文化の比較史的研究

本研究では19世紀から20世紀日本全国において広範に建立された記念碑の多様性と、その建立と背景、その歴史的意義を解明することを目的とした。記念碑の実態調査を愛知県をフィールドとして実施し、戦前以来の市町村史・記念碑調査書などを当面は網羅的に調べ、愛知県内に建立さた記念碑の基礎データの作成をおこない、3,500基に及ぶ記念碑情報を集積することができた。また19世紀昭和戦前期の南朝遺蹟の顕彰運動に関して、隠岐島・鳥取県西部地域・京都市・三重県において調査を実施した。愛知県内の種々の記念碑の概容の把握、南朝関係の遺蹟・記念碑群の調査を通じて、記念碑文化の思想史的背景、民族意識の形成、「伝統」という概念、近代日本人の歴史意識それらの諸問題を検討する手がかりを得た。本研究では日本の記念碑文化を他の社会・民族の記念碑・石造物と比較研究することを目的としている。中国(上海・南京・安徽省・広州・北京・天津市・唐山など)と韓国(安東市・慶州市・釜山市)において石碑・石造物の調査を実施した。中国では明代から中華民国時代にかけて建立された「牌坊」(Memorial Archways)、アヘン戦争関係及び辛亥革命関係、唐山地震などの記念碑を実見し、他方韓国では第二次大戦後に建立された史蹟記念碑・戦争記念碑の調査を実施し、あわせて史蹟保存の現状に関して多くの資料を得ることができた。こうした調査により、中国・韓国における文化財保存に関しての現状と問題点、政治的事情で破壊された文化財の修復状況、歴史的遺蹟の顕彰とナショナリズムとの関係、社会主義かでの死者追悼などについての多くの知見を得た。今年度は次の調査・研究を実施した。(ア)本研究では19世紀から20世紀日本全国において広範に建立された記念碑の多様性と、その建立と背景、その歴史的意義を解明することを目的としているが、建立された記念碑の実態調査を愛知県をフィールドとしておこなった。戦前以来の市町村史・記念碑調査書などを当面は網羅的に調べ、愛知県内記念碑データの作成を始めた。(イ)本研究では日本の記念碑文化を他の社会・民族の記念碑・石造物と比較研究することを目的としている。今年度は中国(上海・南京・安徽省・広州など)において石碑・石造物の調査を実施し、とくに明代から中華民国時代にかけて建立された「牌坊」(Memorial Archways)、アヘン戦争関係及び辛亥革命関係の記念碑を実見し、今後の比較研究のための多くの資料を得ることができた。またこの調査では中国における文化財保存に関しての現状と問題点、特に文化大革命によって破壊された文化財の修復状況の一端、歴史的遺蹟の顕彰が現代中国ナショナリズムの昂揚のなかで政策的に押し進められていることも確認することができた。(ウ)明治末から大正期に行われた明治天皇行幸遺蹟の保存、記念碑の建立に関する調査を愛知県内において実施し、"聖蹟"の成立のプロセスを検討し、その成果を「天皇と行幸」と題する論文のなかで発表した。(エ)19世紀に形成されてくる日本の記念碑文化の思想史的背景を考えるために、「膨張する皇国・開化する皇国」という論文で、この時期の国家・民族意識を検討した。(ア)本研究では19世紀から20世紀日本全国において広範に建立された記念碑の多様性と、その建立と背景、その歴史的意義を解明することを目的としているが、建立されたさまざまな種類の記念碑の実態調査を愛知県をフィールドとしておこなった。戦前以来の市町村史・記念碑調査書などを網羅的に調べ、愛知県内記念碑データベースの作成を昨年度からの計画的事業として引き続きおこなった。

(イ)本研究では、日本の記念碑文化を他の社会・民族の記念碑・石造物と比較研究することを目的としている。今年度は韓国(安東市・慶州市・釜山市)において石碑・石造物の調査を実施し、とくに第二次大戦後に建立された史蹟記念碑・戦争記念碑の調査を実施し、あわせて史蹟保存の現状に関して多くの資料を得ることができた。とくに1960年代の朴政権期に李朝時代の歴史遺産の見直し・保存事業が行われた点を確認することができ、工業化と歴史遺産に関する新たな知見を得た。(ウ)19世紀昭和戦前期の南朝遺蹟の顕彰運動に関して、隠岐島・鳥取県西部地域・京都市・三重県において調査を実施し、後醍醐天皇・南朝忠臣に関する記念碑を調査し、今後の南朝関係遺蹟と記念碑に関する全国的調査の地歩を築くことができた。南朝関係の遺蹟・記念碑は近代日本の歴史意識・歴史学の形成・歴史教育など広範な問題を含んで、保存・顕彰されてきたことを明らかにすることができた。(エ)19世紀20世紀日本の記念碑文化を理論的に位置づける作業の一環として、日本近代の「伝統」認識について検討を加えた。「伝統」という概念の形成とその背後にある歴史意識について成果を得ることができた。今年度は昨年度に引きつづき、次の調査・研究を実施した。(ア)本研究では19世紀から20世紀日本全国において広範に建立された記念碑の多様性と、その建立と背景、その歴史的意義を解明することを目的としているが、建立されたさまざまな種類の記念碑の実態調査を愛知県をフィールドとしておこなった。戦前以来の市町村史・記念碑調査書などを網羅的に調べ、愛知県内記念碑データベースの作成をおこなった。(イ)愛知県内の記念碑データベースでは、現在のところ4000基に及ぶ記念碑の情報を集積しており、建立年代・建立者・建立目的・撰文者などについて、データを整理しつつ、19-20世紀の記念碑文化の推移・特質など、全般的な知識を獲得するために、分析的作業を実施した。(ウ)本研究では、日本の記念碑文化を他の社会・民族の記念碑・石造物と比較研究することを目的としている。今年度は中国(北京市・天津市・唐山市)において石碑・石造物の調査を実施した。とくに唐山市においては、1976年の唐山大地震に関して地震記念碑・慰霊碑などの調査をおこない、現在民間団体の手で市内の公園に慰霊碑が建立されつつあり、社会主義体制下での死者追悼の様式・理念に関して貴重な情報を得ることができた。また北京・天津両市においては、種々の歴史的施設・史蹟における記念碑などの調査を実施し、あわせて史蹟保存の現状に関して多くの資料を得ることができた。(エ)記念碑文化の比較史的研究のために、西洋史・東洋史及び中国人研究者とともに、研究会を行い、その成果を『記録と記憶の比較文化史』と題して刊行した。
インド・ラダックにおける仏教ナショナリズムの展開に関する研究

本研究は、インド最北端ラダックにおけるチベット仏教徒による仏教ナショナリズムの展開過程を明らかにすることを目的として行った。方法として、先行研究および資料の検討を行い、フィールドワークを行って資料を補完した。その結果、以下の2点が明らかになった。まず「仏教徒ラダック人」というネーションは、カシミール改宗仏教徒により成立の契機を与えられ、その後ラダックの仏教徒組織に引き継がれ、インド独立、J&K州への併合を経験し、権利回復運動として展開していくなかで強固になった。次に、この運動は仏教徒コミュニティの内部においては仏教伝統を復興させる生活改善運動という面も併せ持っていた。本研究は、ラダックにおいてチベット仏教徒が行なってきた仏教ナショナリズム運動の展開過程について、特に1947年から1989年の間に焦点をあてて調査研究を行うものである。本年度は、主に以下の3点について、作業を行った。1,研究に必要な資料(書籍、論文、雑誌や新聞の記事)にどのようなものがあるかについて、手元にある文献、図書館やインターネットを使って調べ、その一覧を作成した。これまでにおよそ30の資料を記載した。2,未入手の資料について、どこでどのように収集することができるかについて、インターネットなどを用いて調べた。一部については所蔵先に問い合わせた。3,すでに手元にある資料を読み込んだ。主に、Bertelsenの論文2点(1997a, 1997b)である。そこに含まれる情報を大まかに分類する、年表を作成する、といった作業を行った。本年度は、先行研究や二次資料の読み込みを継続するとともに、平成27年8月にデリー市およびラダックのレー市において現地調査を行った。デリー市のデリー大学図書館では雑誌記事などの関連資料を閲覧・複写し、レー市のラダックでは、ラダック仏教徒協会副会長タシ・ムルプ氏やラダック地域史家タシ・ラブギャス氏を訪れてインタビューを行った他、仏教徒協会の公的資料を収集するなどした。現地調査後は、収集したインタビュー資料、複写した紙媒体の資料などを整理・検討し、まとめの作業を行った。一連の作業により、以下の2点を資料に基づいて裏付けることができた。まず、ラダックの仏教エリートが、インドが「ヒンドゥー教徒によるネーション・ステート」として独立したことを、自らのナショナリズムに正統性を付与するものと解釈したこと。次に、仏教徒たちが、1947年のインド独立を経てもジャンムー&カシミールによるラダック支配が基本的に維持継承されたことに大きく失望し、それが「仏教徒ラダック人」というネーションの構築とそれに基づくナショナリズム運動の昂揚の契機となったことである。これらにより、1949年以降「仏教徒ラダック人」たちが高僧バクラ・リンポチェを州議会やインド下院議会に送り、ラダックの仏教徒というアイデンティティに依拠して待遇改善や権利獲得を求めていく、その出発点がどのようなものであったかについての一端が明らかになる。今後、以上の成果を学会や学会誌などで発表する予定である。本研究課題は、概ね当初の予定通り本年度の目的を達成した。本年度の研究実施計画に記載した作業は、先行研究の収集を進めること、そしてその先行研究および先行研究に含まれる二次資料の読み込みを進めて論点を整理する、という2点であった。1,実際に先行研究の収集作業を行ったところ、3点の新たな先行研究に加え、雑誌や書籍に含まれる資料、インターネット上の資料がいくつも見つかった。そのため、これまでに収集済みの資料と合わせ、資料の一覧を作成し、内容別に整理するという作業を行った。2,先行研究や資料を読み込み、そこに含まれる情報を大まかに分類し、年表の作成を行った。ただしまだ作業の途上であるため、今後も継続して行っていく必要がある。以上のように、概ね当初の計画のとおり進展している。27年度が最終年度であるため、記入しない。宗教社会学、文化人類学本研究は2年計画で行われる。2年目にあたる平成27年度は、前年度に進めてきた、先行研究や資料の収集、そしてそれらの読み込みを継続して行っていく。また、夏期にラダックのレー市、そしてジャンムー市にて現地調査を行う。レー市では、ラダック仏教徒協会、ラダック僧院協会、大菩提会ラダック支部、中央仏教研究所において、各種の声明、政府機関への要望書、会議文書や議事録などの収集を行う予定である。ジャンムー市では、J&K州の新聞社を訪れ、記事を閲覧し、複写を行う。現地調査では資料を集めるだけでなく、適宜、関係者にインタビューを行う予定である。研究をまとめるにあたり、収集した資料のデータベースを構築し、ラダックの仏教ナショナリズムをインド(南アジア)における宗教ナショナリズムの文脈に位置づけることにより、分析を行う。分析にあたっては、「仏教徒ラダック人」というネーションがいかに構築されたか、仏教は運動の精神的側面と具体的な活動の側面において、どのような役割を果たしたかについて、分析を行う。
タチスベリヒユのカドミウム長距離輸送を用いたカドミウム浄化の基礎研究

ソフト金属に対するキレータ分析法の最適化を行った。従来使用していた励起光波長580nm、検出波長770nmをそれぞれ、285nm、395nmに変更し、この条件化でポストラベル剤のCuとbathocuproine disulfonate濃度の最適化を行った。これにより、従来よりも一桁程度の感度向上が達成され、検出限界もファイトケラチン(PC2)で0.04pmol/injectionと世界最高の値が得られた。タチスベリヒユ中に含まれるCdのXAFS分析から、この葉、茎、根ではCdは酸素を配位子とする物質と結合して不溶体化いることが示唆されていた。茎の不溶体画分をペクチナーゼで処理し、可溶化画分をソフト金属キレータ分析で分析した。ここで生じるピーク画分を、精製し1H-NMR、13C-NMRで測定した。1H-NMRスペクトルには4.02、4.12、4.30、4.46、5.06ppmに幅広の信号が、また13C-NMRスペクトルには68、69、78、101、170ppmの位置に信号が得られた。このことから、この物質が糖であることが示唆され、特に13C-NMRスペクトルの170ppmの信号からカルボキシル基が存在すると考えられた。また、DOSYの測定からは、拡散係数が比較的小さいことが示唆された。以上から、Cd結合物質として、糖酸様の構造が示唆された。細胞壁にはポリガラクツロン酸の存在が知られているが、これがCd結合物質として機能していることが明らかとなった。Cdを含む水耕液で生育したタチスベリヒユを根、茎、葉にわけ、それぞれを湿式灰化の後にICP発光分析法でCdの定量を行った。その結果、Cdは、根に74%、茎に23%、葉に2%と根において最も多く存在していた。根について、Super Photon ring-8 GeV(Sprillg-8)内、BL37-XUにおいて、30KeVのX線をIpm程度のサイズに絞り込み、Cdの蛍光X線二次元イメージングを行った。その結果、根におけるCdは、成熟域では表皮と中心柱への分布に対して、組織が未分化な先端部においては、中心を除き全体への分布を示した。また、Cdの化学形態を調べるためにX線吸収微細構造(XANES)の測定を行った。部位別のXAFSは、すべての部位において、標準試料として用いたリンゴ酸Cdやペクチン酸Cdとほぼ同様のスペクトルを与えた。この解析から、Cdはどの部位においても酸素を配位原子とする物質と結合している可能性が示唆された。また、植物体を破砕したとこと、Cdはその大部分が沈殿画分に存在していた。この沈殿をペクチナーゼで処理すると、約20%のCdが可溶性画分に現れた。また、この可溶性画分にはCu(I)に結合能を有する物質が存在することが分った。この物質を、HPLCで精製を行った。現在、種々のNMR法、質量分析法を用いてこの物質の構造解析を行っている。一方、植物体の可溶性画分に存在するファイトケラチン(PC)の分析を行ったが、比較として用いたイネに比べて格段に少ない濃度を示した。この理由に関しては、試料の前処理法を含めて再検討を行っている。
海産無脊椎動物における生殖細胞系列の探索

1.イイダコを用いて、頭足類(軟体動物)の生殖細胞の出現過程および生殖巣の初期分化過程を明らかにした。生殖細胞は、胚体形成期のマントル直下に出現し囲心腔内に集合して、心臓に接した球体を形成する。雌では、孵化まえに減数分裂を開始して、卵母細胞は成長期に入るが、雄では、孵化後しばらくして、やっと減数分裂を開始し、精子形成がはじまる。2.カタユーレイボヤを用いて、単体ボヤ類(原索動物)の変態後の生殖巣出現過程および生殖巣の雌雄分化の過程を明らかにした。生殖細胞は、変態直後には、胃の噴門部附近に存在する退化組織塊に接続した細胞集団として出現する。変態12日まで、生殖巣原基は1個の細胞塊であるが、変態11日ごろに2個に分れ、精巣と卵巣に分化する。3.イトマキヒトデを用いてヒトデ類(棘皮動物)の生殖細胞の出現から生殖巣の分化に至る過程の詳細を明らかにした。受精4週間のブラキオラリア幼生に於て、生殖細胞は、第3体腔嚢に、約10個の細胞集団として出現する。変態後の稚ヒトデでは、この細胞塊は血洞系に入り生殖巣を形成する。4.マツバガイ(軟体動物)とホシムシ2種(星口動物)の生殖巣の周年変化を明らかにした。1.イトマキヒトデにおける生殖細胞の起源について。電子顕微鏡の観察により、生殖細胞の出現から出殖巣の分化に至る過程の詳細を明らかにした。受精4週間のブラキオラリア幼生において、生殖細胞は独立した約10個の細胞集団として存在していた。変態後の稚ヒトデでは、この細胞塊は血洞系に入り、細胞数を増しつつ反口側血洞系の分枝によって生殖巣を形成する。受精2日目の嚢胚に出現する第3体腔嚢を微細外科手術で取り除くと、ブラキオラリア幼生に出現する出殖細胞数が減少することから、生殖細胞の起源は第3体腔嚢にあると推定された。2.ユ-レイボヤにおける卵巣および精巣の起源について。従来全く不明であった単体ボヤにける生殖巣の出現過程を明らかにした。変態直後のユ-レイボヤを丹念に観察することにより、卵巣と精巣は、胃の噴門部附近の体腔上皮と胃壁の間の空間に存在する退化組織塊に接続した細胞集団として、別々に出現することを発見した。この細胞集団を超薄切片により電子顕微鏡的に観察した結果、これら2個の細胞集団は互いに形態的に非常に異なった細胞から構成されており、1方はERに富む細胞のみからなり、他方は生殖細胞質様の物質の存在から明らかに生殖細胞と同定できる大型細胞を含むことが判明した。両者とも細胞数を増しつつ胃壁に添って幽門部附近へ移動し、変態15日ごろ、前者は精巣の、後者は卵巣の形態をとるに至った。今後はさらに発生を遡って、変態前の幼生において生殖細胞を同定し、既に明らかなユ-レイボヤ発生時の細胞系譜と結びつけたい。1.頭足類の始原生殖細胞と生殖巣形成。ヒメイカおよびイイダコ初期胚において、電子顕微鏡により、始原生殖細胞を探索した。始原生殖細胞は、胚盤の覆い被せが終了し、胚体形成が開始する時期に、マントル原基直下に散在する大形の細胞として出現してくることが判明した。生殖細胞は、次第に集合して球体を形成するが、孵化までは、生殖巣の形態に雌雄の分化は見られない。イイダコにおいて、卵巣では、孵化直後に生殖細胞は減数分裂に入り、濾胞が出現する。精巣では、孵化後、生殖細胞の数は著しく増加するが、それが減数分裂に入るのは、孵化後数週間を経過してからである。2.ホヤ卵巣における卵原細胞の同定。ユーレイボヤの若い卵巣を抗原として生殖細胞を認識するモノクローナル抗体を作製した。これを用いて、従来、明らかでなかった卵原細胞を同定した。卵原細胞は、卵巣内の特定の位置に存在する初期卵母細胞の倍の直径を持つ大形細胞であった。

3.ヤムシにおける受精補助細胞の構造。ナイカイヤムシの卵巣において、輪卵管(=貯精管)と卵形成部の間には、柱状細胞と卵柄細胞が介在している。卵柄細胞は、2個が並列に連なり、卵母細胞と輪卵管を結んでいる。この細胞内に、微小管が密に詰った直径3μmほどの管状構造が存在する。連続切片で調べたところ、これは、輪卵管壁シンシチウムが、卵柄細胞内に管状に伸び出したもので、4-5回ラセン状に巻いた後、先端は卵母細胞付近に達していることが判明した。この構造は、貯精管から卵母細胞への精子の移動に関係していると考えられる。1.イトマキヒトデ(棘皮動物):電子顕微鏡の観察により、生殖細胞の出現から生殖巣の分化に至る過程の詳細を明らかにした。受精4週間のブラキオラリア幼生に於て、生殖細胞は、第3体腔嚢に、約10個の細胞集団として出現する。変態後の稚ヒトデでは、この細胞塊は血洞系に入り生殖巣を形成する。2.ユーレイボヤ(原索動物):単体ボヤにける生殖巣の出現過程を明らかにした。生殖細胞は、変態直後には、胃の噴門部附近に存在する退化組織塊に接続した細胞集団として出現する。変態12日まで、生殖巣原基は1個の細胞塊であるが、変態11日ごろに2個に分れ、精巣と卵巣に分化する。また、生殖細胞に対するモノクローナル抗体を作り、それを用いて、卵巣中の卵原細胞を同定した。3.頭足類(軟体動物):ヒメイカおよびイイダコ初期胚において、電子顕微鏡により、始原生殖細胞を明らかにした。始原生殖細胞は、胚盤の覆い被せが終了し、胚体出現時、マントル原基直下に散在する大形の細胞として出現してくる。イイダコにおいて、卵巣では、生殖細胞は孵化直前に減数分裂に入り濾胞を形成する。精巣では、生殖細胞が減数分裂に入るのは、孵化後7週間を経過してからである。4.その他:マツバガイ(軟体動物)、ホシムシ2種(星口動物)の生殖周年サイクルを明らかにした。
DCLK1は膵神経内分泌腫瘍細胞のstemness形質を制御する

神経内分泌腫瘍(NET)の起源や発生、そして浸潤・転移機序については不明な点が多い。我々は、癌幹細胞マーカーDCLK1が膵NET組織に強くびまん性に発現している所見を見出した。ヒト膵NET細胞株においては、DCLK1がFAK-Tyr925残基のリン酸化を促進し、EMT regulatorであるSLUGの発現を上昇させることを初めて示した。DCLK1自体の詳細な機能が不明な中、FAKを介したEMT制御に関わる点を今回明らかにした。“高率に転移する"NETの臨床的特徴や、NETに対する新規治療標的分子をDCLK1-FAK-SLUG軸に沿って考案する上で重要な知見であると考える。1.ヒト膵NET組織を用いた免疫組織化学的染色とその解析久留米大学病院にて外科切除された膵NET組織全15症例において免疫染色によるDCLK1の発現を検討した.全15症例の内訳は男性/女性; 8/7例,平均年齢; 56(17-77)歳,平均最大腫瘍径; 30.2(12-93)mm,NETG1/G2; 10/5例,機能性/非機能性; 3/12例であった.全15症例で腫瘍部にびまん性にDCLK1の発現が確認され,一般的な神経内分泌マーカー(シナプトフィジン、クロモグラニンA、CD56)よりも陽性率が高かった.染色強度と面積でスコア化し,腫瘍因子(悪性度、腫瘍径、転移の有無など)との関連性を検討したが,その関連性に有意差は認められなかった.2.膵NET株におけるDCLK1発現の決定と、その新規機能の追求(1),(2) DCLK1を発現している膵NET細胞株CM細胞を用いて, siRNAによりDCLK1ノックダウン細胞を作製した.DCLK1ノックダウン細胞はコントロールと比較し細胞増殖・遊走能が有意に低下した.WB法による解析ではDCLK1ノックダウン細胞でSTAT3及びAKTのリン酸化が低下し,PTEN脱リン酸化の上昇が確認された.(3) DCLK1を発現していない膵NET細胞株QGP1細胞にプラスミドベクターを導入し, DCLK1過剰発現細胞株(QGP1-DCLK1)を作製した.コントロールであるQGP1-EVと比較し細胞形態に著明な変化が認められた.マイクロアレイ法での網羅的に解析では, EMTに関連する幾つかの分子に有意な変化が認められた.リアルタイムPCR法, WB法を用いてメッセージ,蛋白レベルでの解析では, SLUG及び,間葉系マーカーN-CADHERIN, VIMENTINが上昇した.またAKT、Erk、FAKのリン酸化, CYCLIN D1の上昇も認められた.DCLK1は神経内分泌腫瘍において、非常にkeyとなる分子であり、その機能は糖代謝に関連するものであると推測していた.しかしながらその後の実験では再現性にやや乏しく,糖代謝関連の証明が困難となった.しかしながら今回新たに別の重要な機能が分かり,現在実験継続中である.それに関しては実験計画と概ね予想された結果で順調に実験は進んでいると判断している.3. Xenograftモデルを用いて、dclk1過剰発現がもたらす効果を解析した。(1) DCLK1過剰発現細胞株(QGP1-DCLK1)はコントロール(QGP1-EV)と比較し有意に大きな腫瘍を形成した。(2)腫瘍組織を免疫組織化学染色にて評価を行った。in vitroの結果同様にQGP1-DCLK1での腫瘍組織はSLUGおよびp-FAKTy925の発現が上昇していた。また核分裂像は有意にQGP1-DCLK1で増加した。(3) QGP1細胞は細胞カウントが非常に難しく、エベロリムスの上乗せ効果の評価は困難であったが、スフィア形成を比較したところQGP1-DCLK1で有意に大きなスフェアを形成した。4. DCLK1特異的阻害剤である小分子化合物LRRK2-IN-1やXMD8-92を用いて、その抗腫瘍効果をin vitroおよびin vivoで検討する。(1) QGP1-DCLK1にLRRK2-IN-1およびXMD8-92を投与、またDCLK1を発現するCM細胞にXMD8-92を投与したところSLUGおよびp-FAKTy925の発現が低下した。更に、FAKとSLUGの関係性を詳細に検討するためにQGP1-DCLK1細胞にsiRNAをもちいてFAKの発現をノックダウンしたところ、SLUGの発現も低下した。つまりFAKはSLUGの上流にある分子であると示唆され、DCLK1はこのFAKTy925のリン酸化を促すことで、増殖においてはMAPK pathwayを中心とした分子が関与し、転移・遊走に関してはEMTのregulatorであるSLUGを中心とした分子が関与していると考えられた。(2) Xenograftモデルを用いて、同阻害剤の抗腫瘍効果を検討する。Xenograftモデルでの阻害剤の抗腫瘍効果に関しては、十分な検討ができなかったため今回は評価困難と判断した。