hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
腎髄質における細胞外高浸透圧に釣り合った細胞内有機浸透圧物質蓄積メカニズムの検討

脱水などの抗利尿時、腎乳頭部には細胞外の高浸透圧に適応するため、電解質(Na・K)ではなくsorbitol,myoinositol,betaine,glycerophosphorlcholine(以下GPCと略す)などの有機浸透圧物質が蓄積されている。今年度の検討では、in vivoにおけるそれらの蓄積及びそのメカニズムを検討した。1.アミノ酸も腎髄質有機浸透圧物質として機能していることを、従来の有機浸透圧物質測定用HPLC法に加えてアミノ酸分析計を併用し、Wistar系ratにおいて高張Na投与と低張溶液投与群の比較、およびcontrol(水分自由摂取)と脱水状態(水分制限)の比較により腎髄質の高浸透圧状態においてtaurineの蓄積も増加することを明らかにした。2.腎乳頭部における細胞外液溶質(Na,urea)と細胞内有機浸透圧物質の関係を明らかにする上で、水分制限ratの検討では、髄質部のNaのみならずureaも高濃度となりそれぞれの効果を区別することは不可能であった。そこで、高張Na溶液、高張urea溶液を経静脈的に投与することにより、それぞれの溶質による腎髄質高浸透圧状態におけるin vivoでの有機浸透圧物質蓄積を検討した。高張Na投与条件では全ての腎髄質有機浸透圧物質の増加が見られるに対し、高張urea投与条件ではGPCのみの増加が見られた。3.カリウム欠乏状態における尿濃縮障害と腎髄質有機浸透圧物質蓄積の関係を明らかにするため、2週間低カリウム食を投与したrat(LOWK)、およびさらに3日間の水分制限を加えた条件(LOWK+DEHY)で以下の検討を行なった。腎髄質有機浸透圧物質の中でその蓄積メカニズムが分子生物学的に明らかになっているsorbitol及び、その合成に関与するaldose reductaseの活性とmRNA量を検討した。LOWK条件ではsorbitol含量、活性、mRNA量の有意の低下が見られた。LOWK+DEHY条件ではいずれも正常ratのcontrol levelまでしか回復せず、通常の脱水条件よりは有意に低値であった。
新規マイクロＲＮＡ分子ｍｉｒｔｒｏｎから明らかにする哺乳類の神経構築制御機構

本課題により、ほ乳類特異的mirtronであるmir-877が、セロトニン神経発生の運命決定およびアドレナリン/ノルアドレナリン作動性神経の分化と機能制御に関わる遺伝子Xを標的として、個体の脳内セロトニン神経の調節に関わること、および、ストレス反応の中枢性制御に関わる遺伝子Yを標的として、全身性ストレス反応に重要な糖質コルチコイドの放出の調節に関わることを、ノックアウトマウスを用いた解析にからそれぞれ示唆する知見を得た。これにより、ほ乳類特異的mirtronがほ乳類の脳機能を多機能的に制御する可能性が示された。前年度は、セロトニン神経発生の運命決定およびアドレナリン/ノルアドレナリン作動性神経の分化と機能制御に関わる遺伝子Xについて、mir-877がこれの発現を標的として神経機能を調節することを示唆する知見が、個体レベルの検討で得られた。本年度は、さらに、新たな角度からmir-877の神経機能に関わる役割を評価するために、脳内のストレス中枢制御に関わる別の標的遺伝子Yについて、解析を行った。その結果、mir-877欠損により、ストレス中枢である視床下部、偏桃核におけるYの発現が、ノックアウト個体で上昇していることを蛋白レベルで観察した。Yがストレス経路に対し促進的に働く機能を持つことから、ノックアウトではストレス経路が活性化することが予想され、血中糖質コルチコイド濃度を測定したところ、野生型マウスに比べて有意に上昇していた。さらに、mir-877の発現自身が、個体がストレスに暴露された時に低下することを、脳内各組織のnorthern blot解析により明らかとした。従って、本年度の研究によりmir-877のストレス応答性マイクロRNAとしての新たな側面を明らかとし、その機構として、ストレス中枢におけるYの発現を制御することにより個体のストレス反応を制御することが推察された。本研究を通じて、mir-877の持つ多様な脳機能制御が新たに判明し、セロトニン神経や神経内分泌機能といった、ストレスに強く関わる脳内制御機構に、mir-877が深く関わることが明らかとなった。本年度は、mir-877の標的としてこれまでに同定した、セロトニン神経発生の運命決定およびアドレナリン/ノルアドレナリン作動性神経の分化と機能制御に関わる遺伝子Xの発現が、ノックアウト個体で影響を受けているかについて検討した。まず、成体において、交感神経細胞からなる代表的臓器である副腎髄質での発現を、ウェスタンブロッティングにより検討したところ、ノックアウトではX蛋白量の増加が認められた。さらに、X遺伝子によって転写活性化される酵素の副腎髄質における発現量を、免疫染色により検討したところ、有意に増加していた。胎児期の交感神経形成における機能の解析については、神経堤から腹側への移動が起こる時期の神経管に沿った交感神経細胞分布を、免疫染色により観察したところ、予備的検討の段階ではあるが、ノックアウトでは細胞数の増加が認められた。また、胎児期新生期の脳幹で発現し、脳幹セロトニン神経発生に対して抑制的に働くことから、生後0日の新生仔(P0)脳幹を単離し同様にウェスタンブロッティングにより検討したところ、やはりノックアウトでは増加が認められた。遺伝子Xの発現増加によりセロトニン神経発生が抑制されるとすると、5HT(セロトニン)の発現量が低下することが予想されたため免疫染色で検討したところ、P0脳幹でノックアウトでは有意な減少が認められた。発生の起こる胎児期(E10.5)脳幹の5HT染色を行い検討した結果、陽性細胞が減少する予備的知見が得られている。このように、本年度は、mir877が遺伝子Xを標的として神経機能を調節することを示唆する知見が、個体レベルの検討で得られた。25年度には、欠損による様々な遺伝子発現の変化についてmRNAレベルでの検討を行い、予想される血中モノアミンの変動について解析する。これらの検討が十分に仮説にマッチした場合には、行動解析のステップへと移行する。当初計画に掲げた、交感神経発生と機能についての解析は実際に遂行し、mir877の標的遺伝子がノックアウトマウスで変動した場合に予想される交感神経細胞の機能亢進が、副腎髄質におけるチロシン水酸化酵素の増大という形で観察されたこと、および、その発生時期にさかのぼって影響が認められたことから、期待される表現系とおおむね一致する知見を収集できたと言える。また、中枢性セロトニン神経の発生についても、脳幹縫線核のセロトニン発現を実際に解析し、ノックアウト個体で予想どおり低下している知見を得、これが胎児期にすで起こっていることを観察できた。以上のことより、計画していた個体を用いた行動解析の実施など達成できなかった事項があるものの、今年度に遂行する予定の計画はおおむね7割程度達成できた。25年度は、関連遺伝子群のRNA発現変動の解析や、アドレナリン/ノルアドレナリンの血中濃度の解析、組織中セロトニンの定量など、24年度に得られた知見を裏付けるためのさまざまな検討を行う。

その結果、セロトニン低下やアドレナリン変動による行動への影響が十分に期待できることが判断されれば、個体を用いた不安水準に関するさまざまな行動解析へと発展させる。当初計画では、mir-877の成熟化因子の同定を当年度に記載したが、現時点では、前述の解析に最も力を注ぐべきと考えられる。24年度の繰越額はすべて次年度物品費に充てる計画である。
量産を目的としたマイクロ光造形法に関する研究

光硬化性樹脂を用いたマイクロ造形に関する研究は近年盛んに行われている.その中で,現状の造形手法は主に積層手法を用いていることから,造形物が小さくなると相対的に積層面の段差が製品精度に及ぼす影響が大きくなる.また,レーザ走査によって樹脂を硬化させる原理を用いていることから,一品ものの試作品などには多く応用されているが,大量生産には不向きなシステムとなっている.現在の高精度微小部品は射出成形によって作られるものが多く,そこで用いられる金型技術が大量・安価に高精度部品を供給することに役立っている.そこで,本研究においては光硬化性樹脂を用いたマイクロ部品の成形方法として,金型を用いた方法を提案した.本研究では実際に成形用のマイクロ金型を作成し,微小形状の転写性を検証した.実験結果より,良い転写性が確認でき,光硬化性樹脂を用いた高精度微小部品の大量生産の可能性を見出した.具体的には,幅数10μm数100μm幅の微小線を持つ格子状成形物と円形の成形物を作成し,レーザ顕微鏡を用いて形状測定を行い両者とも良い転写性を有することを確認した.同時に数十回の成形を行い,繰り返し成形可能であることを確認した.この場合,充填する樹脂と離型剤の量を適切な量に調整することにより,成形品の離形性が向上することもわかった.本研究で光硬化性樹脂を用いたマイクロメートルレベルの微小部品を量産する技術的な点がクリアとなり,その問題点も明確となった.今後は問題点を解決し,コスト的な面も考えた実機を作成し,量産化する体制を整える段階にある.光硬化性樹脂を用いたマイクロ造形に関する研究は近年盛んに行われている.その中で,現状の造形手法は主に積層手法を用いていることから,造形物が小さくなると相対的に積層面の段差が製品精度に及ぼす影響が大きくなる.また,レーザ走査によって樹脂を硬化させる原理を用いていることから,一品ものの試作品などには多く応用されているが,大量生産には不向きなシステムとなっている.現在の高精度微小部品は射出成形によって作られるものが多く,そこで用いられる金型技術が大量・安価に高精度部品を供給することに役立っている.そこで,本研究においては光硬化性樹脂を用いたマイクロ部品の成形方法として,金型を用いた方法を提案した.本研究では実際に成形用のマイクロ金型を作成し,微小形状の転写性を検証した.実験結果より,良い転写性が確認でき,光硬化性樹脂を用いた高精度微小部品の大量生産の可能性を見出した.具体的には,幅数10μm数100μm幅の微小線を持つ格子状成形物と円形の成形物を作成し,レーザ顕微鏡を用いて形状測定を行い両者とも良い転写性を有することを確認した.同時に数十回の成形を行い,繰り返し成形可能であることを確認した.この場合,充填する樹脂と離型剤の量を適切な量に調整することにより,成形品の離形性が向上することもわかった.本研究で光硬化性樹脂を用いたマイクロメートルレベルの微小部品を量産する技術的な点がクリアとなり,その問題点も明確となった.今後は問題点を解決し,コスト的な面も考えた実機を作成し,量産化する体制を整える段階にある.本研究では光造形法と型技術を組み合わせた微小部品の量産手法を提案している.装置の構成を大別すると(1)CAD/CAMシステムを含むソフトウェア部と(2)光造形装置を含む造形機,そして(3)型内のキャビティ,コア,ランナーなどを作成する微小加工装置となる.今年度は(1)ソフトウェア部と(3)微小加工装置の開発を行った.また,使用する光硬化性樹脂の硬化特性の調査を行った.現在は本研究の為のマイクロ金型を設計し,作成している.現在まで開発したソフトウェア,装置の仕様を以下に示す.(1) CAD/CAMソフトウェア:このソフトウェアはまず作成物の形状を定義し,その形状を積層形に変換する.そして,微小加工装置用のカッターパスを作成する.(2)微小加工装置:この装置は先端が鋭利になっているダイヤモンド触針を試料に押しつけ,引っ掻くことにより加工する.装置の分解能は面方向で1μm,加工深さは数100nmのレベルで制御できる.加工できる大きさは面方向で5mm四方である.現在の研究過程から,サブミリメートルレベルの微小プラスチック製品を大量に生産する金型は作成できる見通しを得た.しかし,離型時に非常に大きな力を有することが予備実験により確認されており,製品の変形,われが生じ,信頼性,精度の面で問題がある.今後はそれらの点を材料面,表面形状の面から検討し,解決を図っていく予定である.光硬化性樹脂を用いたマイクロ造形に関する研究は近年盛んに行われている.その中で,現状の造形手法は主に積層手法を用いていることから,造形物が小さくなると相対的に積層面の段差が製品精度に及ぼす影響が大きくなる.また,レーザ走査によって樹脂を硬化させる原理を用いていることから,一品ものの試作品などには多く応用されているが,大量生産には不向きなシステムとなっている.現在の高精度微小部品は射出成形によって作られるものが多く,そこで用いられる金型技術が大量・安価に高精度部品を供給することに役立っている.そこで,本研究においては光硬化性樹脂を用いたマイクロ部品の成形方法として,金型を用いた方法を提案した.本研究では実際に成形用のマイクロ金型を作成し,微小形状の転写性を検証した.実験結果より,良い転写性が確認でき,光硬化性樹脂を用いた高精度微小部品の大量生産の可能性を見出した.

具体的には,幅数10μm数100μm幅の微小線を持つ格子状成形物と円形の成形物を作成し,レーザ顕微鏡を用いて形状測定を行い両者とも良い転写性を有することを確認した.同時に数十回の成形を行い,繰り返し成形可能であることを確認した.この場合,充填する樹脂と離型剤の量を適切な量に調整することにより,成形品の離形性が向上することもわかった.
短時間虚血による心筋preconditioning効果の加齢による変化

平成6年度は12週齢の若年ラットを用いて持続時間の異なる虚血と再灌流に対する心筋障害の程度、不整脈、sarcoplasmic reticulum(SR)機能、短時間虚血によるpreconditioning効果を検討した(Am J Physiol 268:(in press))。平成7年度は心筋虚血・再灌流傷害に対する感受性と短時間虚血によるpreconditioning効果に与える加齢の影響を検討するため、12週齢(若年群)にさらに50週齢(初老群)のラットの摘出灌流心を用いた。15分、20分または25分の完全虚血と30分間の再灌流を行ない、左室圧、同微分、心表面心電図を記録した。虚血前、虚血終了後、灌流実験終了後に心筋抽出液あるいはhomogenateを用いて心筋エネルギー代謝産物、電解質含量、SR機能を検討した。[結果]若年群、初老群間で虚血前の心筋エネルギー代謝産物、電解質含量、SR機能、新機能に差はなかった。しかし15分、20分または25分の完全虚血の左室発生圧、+dp/dt、-dp/dtの回復は初老群では若年群の30-50%で左室拡張期圧は著明に上昇し、心筋高エネルギー燐酸化合物の回復も50-60%であった。心室細動・頻拍の頻度も20分虚血後で、若年群の12.5%に対し初老群では50%と高率であった。短時間虚血により若年群では再灌流後の心機能の回復が30-50%改善され再灌流に伴う心室細動・頻拍の頻度も減少したのに対して初老群では短時間虚血によるpreconditioningは心機能改善・再灌流不整脈軽減の効果が観られなかった。若年群では短時間虚血を先行させると虚血終了時点におけるSRのCa^<2+>遊離チャネルの過剰な開口抑制が観られ細胞質における[Ca^<2+>]の上昇軽減が推測されたが、初老群では短時間虚血の先行によってもSRのCa^<2+>遊離チャネルの開口抑制は認められず、初老群のpreconditioning効果消失と対応していた。[結論]若年期に比べ初老期に既に心筋の虚血・再灌流傷害感受性は亢進しpreconditioning効果の消失が認められた。3月齢WKYラット(70匹)をLangendorff手技で灌流した。対照群では25分間の持続虚血と30分間の再灌流を行った。PC群では5分間の短時間虚血と5分間の再灌流を一対としたPCを3回行い、同様に25分間の完全虚血と30分間の再灌流を行った。左室機能指標:PC群と対照群の30分間再灌流後の左室収縮期圧に差を認めなかった(対照群:52.7±4.9、PC群:53.8±2.4mmHg)。対照群の25分間虚血作成前の左室拡張末期圧およびPC群のPC作成前のその間に差を認めなかった(対照群:0.8±0.5、PC群:1.0±1.0mmHg)。

30分間再灌流後の左室拡張末期圧は対照群で14.3±3.3mmHgに上昇したがPC群では1.3±1.3mmHgの上昇に留まった。30分間再灌流後の左室発生圧の回復は対照群(50.1±5.0%)に比しPC群は良好だった(73.9±8.1%)。心筋エネルギー代謝産物:虚血作成前、再灌流直前および再灌流後の各時点のPC群の心筋ATP、CP、lactate含量は、対照群と差がなかった。心筋^<45>Ca^<2+>取り込み量:25分間虚血作成前の心筋^<45>Ca^<2+>取り込み量に両群間で差を認めなかったが30分間再灌流後の心筋^<45>Ca^<2+>取り込み量は対照群の3.15±0.32μmol/gdwtに比し、PC群で1.29±0.18μmol/gdwtで低値であった。心筋筋小胞体^<45>Ca^<2+> uptake:25分間虚血開始直前時点の筋小胞体^<45>Ca^<2+> uptake率にはRyanodine非処置下、前処置下のいずれも両群間に差がなかった(対照群;非処置下:34.4±1.9、前処置下:48.7±2.1、PC群;非処置下:30.3±3.4、前処置下:44.3±3.1nmol/分/mg)。30分間の再灌流終了時点では筋小胞体^<45>Ca^<2+> uptake率は薬剤非処置下、前処置下のいずれも^<45>Ca^<2+> uptake率はPC群に比較し対照群で大であった(対照群;非処置下:45.3±1.9、前処置下:77.7±8.8、PC群;非処置下:24.3±1.8、前処置下:36.1±2.2nmol/分/mg)。平成6年度は12週齢の若年ラットを用いて持続時間の異なる虚血と再灌流に対する心筋障害の程度、不整脈、sarcoplasmic reticulum (SR)機能、短時間虚血によるpreconditioning効果を検討した(Am J Physiol 268 : (inpress))。平成7年度は心筋虚血・再灌流障害に対する感受性と短時間虚血によるpreconditioning効果に与える加齢の影響を検討するため、12週齢(若年群)にさらに50週齢(初老群)のラットの摘出灌流心を用いた。15分、20分または25分の完全虚血と30分間の再灌流を行ない、左室圧、同微分、心表面心電図を記録した。虚血前、虚血終了後、灌流実験終了後に心筋抽出液あるいはhomogenateを用いて心筋エネルギー代謝産物、電解質含量、SR機能を検討した。[結果]若年群、初老群間で虚血前の心筋エネルギー代謝産物、電解質含量、SR機能、心機能に差はなかった。しかし15分、20分または25分の完全虚血の左室発生圧、+dP/dt、-dP/dtの回復は初老群では若年群の30-50%で左室拡張期圧は著明に上昇し、心筋高エネルギー燐酸化合物の回復も50-60%であった。心室細動・頻拍の頻度も20分虚血後で、若年群の12.5%に対し初老群では50%と高率であった。短時間虚血により若年群では再灌流後の心機能の回復が30-50%改善され再灌流に伴う心室細動・頻拍の頻度も減少したのに対して初老群では短時間虚血によるpreconditioningは心機能改善・再灌流不整脈軽減の効果が観られなかった。若年群では短時間虚血を先行させると虚血終了時点におけるSRのCa^<2+>遊離チャネルの過剰な開口抑制が観られ細胞質における[Ca^<2+>]の上昇軽減が推測されたが、初老群では短時間虚血の先行によってもSRのCa^<2+>遊離チャネルの開口抑制は認められず、初老群のpreconditioning効果消失と対応していた。[結論]
理科、算数・数学の基礎概念の抽出とその最適学習学年に関する研究

本研究の目的は、日本の理科,算数・数学科における基礎概念をもとに,海外の基礎概念と比較することを通して,各基礎概念の最適な学習学年を明らかにすることであった。このため,まず,歴史的見地から我が国の初等・前期中等教育の理科,算数・数学科における基礎概念を抽出し,次に,比較教育学的見地から抽出した基礎概念を海外と比較し,その基礎概念の最適な学習学年を明らかにしていくという方法を用いた。具体的には、以下のことを行った。(1)我が国の初等・前期中等教育の理科,算数・数学科における基礎概念を抽出し,日本において,その基礎概念が学習されている学年を同定した。このため,第二次世界大戦後の我が国の初等・前期中等教育の学習指導要領から基礎概念を抽出し,その基礎概念が日本ではおおむねどの学年で学習されているかを同定するとともに,日本におけるその基礎概念を扱う学年の特徴を歴史的見地から概観した。(2)前項で抽出した我が国の初等・前期中等教育の理科,算数・数学科の基礎概念とその基礎概念が学習されている学年を用いて,現在使用されているアメリカやイギリス,ドイツ,シンガポールなどの諸外国の代表的なカリキュラムと比較し,その基礎概念を学習する上で最適と考えられる学年を導出するとともに,その特徴を比較教育学的見地から概観した。上述の方法を用いて抽出した基礎概念に関して、理科では86%,算数・数学科で88%の最適学習学年を導出できた。なお、学習内容は教育的背景と大きく関わると考えられる。そこで、今後は今回導出した最適学習学年を現在の我が国での教育的背景と関連づけて吟味することが必要と考える。本研究は、我が国における初等・前期中等教育の理科、算数・数学の基礎概念の最適な学習学年を明らかにしていくことを目的とする。このため、まず、歴史的見地から、我が国の初等・前期中等教育の理科、算数・数学における基礎概念を抽出し、次に、抽出した基礎概念を比較教育学的見地から海外のカリキュラムにおける基礎概念と検討することから、我が国における初等・前期中等教育の理科、算数・数学の基礎概念の最適な学習学年を明らかにしていく。上述の研究計画において、15年度は、歴史的見地から、我が国の初等・前期中等教育の理科、算数・数学のカリキュラムの構造とともに基礎概念の変遷を分析することにより、我が国の初等・前期中等教育の理科、算数・数学の基礎概念を抽出することを具体的な目標とした。このため、我が国における戦後の初等・前期中等教育の理科、算数・数学の学習指導要領に示された学習内容の詳細をすべて抽出した。そして、抽出したそれらの学習内容を年代ごとに整理・比較することから基礎概念の変遷を分析し、理科、算数.数学の基礎概念の抽出を行った。その結果、以下の2点が明らかになった。(1)小学校理科では268個,中学校理科では269個、のそれぞれが基礎概念として抽出できた。(2)小学校算数では150個,中学校数学では150個、のそれぞれが基礎概念として抽出できた。平成16年度は、平成15年度に抽出した我が国の初等・中等教育における理科、算数・数学の基礎概念をもとに、比較教育学的見地から海外のカリキュラムにおける基礎概念と比較検討することから、初等・中等教育の理科、算数・数学における基礎概念の学習学年をカリキュラム構造とともに同定することを目的とした。このため、アメリカ、イギリス、ドイツ、シンガポールなどの各国に赴き、両教科のカリキュラムとその作成の意図を顕在化するとともに、アメリカ、イギリス、ドイツ、シンガポールなどの理科や数学のカリキュラムを組織的に収集した。収集したカリキュラムを比較教育学的見地から分析、検討した結果、理科の基礎概念との関連単元に関するものを例にすると、各国に共通するものとして、例えば、次のようなことが明らかになった。(1)物理領域においては、力と運動、エネルギー、電気と磁気など。(2)化学領域においては、物質の種類と性質、物質の変化など。

(3)生物領域においては、生命の連続性、環境と生物の反応など。(4)地学領域においては、地球の構成、地球表層など。また、比較教育学的見地から分析、検討した結果、上述の各単元に含まれる基礎概念の学習学年についても各国に共通する順序を抽出することができた。17年度は、16年度に同定した、諸外国のカリキュラム構造における初等・前期中等教育の理科、算数・数学の基礎概念を我が国の初等・前期中等教育の理科、数学における基礎概念と比較検討することから、各概念の最適な学習学年を明らかにすることを目的とした。このため、以下の2点に大別して研究を行った。(1)我が国の基礎概念の変遷と対応学年を同定した。具体的には、理科や算数・数学において以下の2点のことを行った。(1)まず、初等・前期中等教育の理科、算数・数学それぞれの基礎概念について、日本における対応学年を同定した。(2)そして、我が国における基礎概念や対応学年の特徴を明らかにした。(2)諸外国との比較による最適学習学年の抽出(1)において同定した我が国の学習内容をもとに、理科や算数・数学において次の3点を行った。(1)まず、米国、英国、ドイツなどの各国における基礎概念の学習時期を検討した。(2)次に、諸外国との比較により、基礎概念の最適学習学年を同定した。(3)そして、諸外国との比較により、基礎概念や最適学習学年の特徴を明確にした。以上の手順で行った研究の手法は、今まで国内外で行われてきたカリキュラム研究の間隙を埋めるとともに、カリキュラムに関する国際比較研究に新しい研究のあり方を提案すると考えられるので、その結果を研究成果報告書としてまとめ整理した。
青斑核ノルアドレナリン神経の多様性を生み出す機構の解明

1)異なる青斑核神経群への入力元の解明:青斑核神経への解剖学的な入力について検討をした。既存のRabiesSAD19株ではウイルスに効率もしくは神経回路特異的な標識があるためかうまく標識できない脳部位が存在した。そのため効率的かつ長期的に細胞に感染可能な改変型Rabiesを作製した。このウイルスにてトレーシングを行ったところ従来のものよりも多くの細胞が感染し、青斑核ノルアドレナリン神経に入力するものをより多く標識することができた。扁桃体中心核や分界条床核といったいくつかの脳部位が特異的に青斑核に入力をしていることを明らかとした。また新たに順行性の経シナプスウイルスについても検討を行い有効性を確認した。前頭前野の異なる領域が青斑核に入力していることを確認した。2)青斑核神経応答の解明:カルシウムイメージングを用いることにより青斑核の神経応答をとらえることを検討した。青斑核特異的にカルシウムセンサーを発現させてGRINレンズを留置し、GRINレンズ越しのシグナルを観察した。青斑核は脳室に近いためにイメージング用のレンズを埋めても脳室の律動によるアーティファクトが多いことが判明した。そこで電気生理による記録に切り替えて投射神経群を記録することに成功した。またイメージング用のアーティファクトを減らす方法についても検討を行った。3)遺伝子発現の網羅的解析:異なる細胞群を染め分ける新規ウイルスの作製を行った。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。1) 1シナプス間を逆行性に輸送されるウイルスベクター(Rabies)を用い、Tyrosine-hydroxylase(Th)-Creラットの青斑核ノルアドレナリン細胞全体への入力について検討を行った。マウスの青斑核ですでに報告されていたように、ラットにおいても扁桃体中心核、分界条床核、視床下部外側野などからの入力があることが確認できた。2)恐怖条件づけと消去には異なるノルアドレナリン神経群が関与することを我々は明らかとしている。次に報酬学習とその消去過程においてノルアドレナリン神経が関与するかを検討するため、ラットを用いた行動実験系の立ち上げを行った。恐怖条件づけと同様の日数で報酬学習と消去を行うことができる最適な条件を見つけることができた。3)ノルアドレナリン神経の活動を捉えるためにカルシウムプローブであるGCaMPの青斑核における発現を検討した。Th-Creラットの青斑核ノルアドレナリン神経特異的にアデノ随伴ウイルスを投与してGCaMPを発現させようと試みた。しかしながら、検討したGCaMP(6f,6m,6s,G-CaMP7,G-CaMP8など)においてラットのノルアドレナリン神経には発現しなかった。一方でTh-Creマウスにおいて発現をみたところ、マウスの青斑核ではGCaMPが発現することが明らかとなった。4)青斑核の多様性に関する論文投稿を行った。査読者より必要とされたChR2を用いる追加実験を行い、前頭前野に投射するノルアドレナリン神経を活性化させると恐怖記憶の消去が阻害されること、それは前頭前野のa1受容体によるものであることを明らかとした。GCaMPがラットの青斑核では発現しなかったため、マウスを用いる必要があり進展が遅くなった。当初の計画よりは一部のプロジェクトで少し遅れているものの、他の部分は順調に進んでいる。1)1シナプス間を逆行性に輸送されるウイルスベクター(Rabies)を用いることで青斑核扁桃体投射群と前頭前野投射群にそれぞれ入力する神経細胞を検討した。入力の違いは見られなかったものの、現在使用しているSAD19株Rabiesにより標識される神経細胞が少ないことが明らかとなった。また、前頭前野からの入力について逆行性トレーサーを青斑核に投与すると多くの細胞が標識されるものの、SAD株Rabiesではまったく確認することができていない。扁桃体でも前頭前野の入力が見れないことを確認しており、ベクターの問題であることが明らかとなった。2)光遺伝学を用いて青斑核ノルアドレナリン神経の報酬学習における役割を検討した。ラットにはウイルスベクターにより前頭前野もしくは扁桃体投射のノルアドレナリン神経群に光感受性抑制性のハロロドプシンを発現させ、光ファイバーを青斑核上部に留置した。報酬学習中は音が鳴っている間にスクロース溶液を提示し、消去では音のみを提示し、ラットがスクロース溶液を提示するポートに入った時間を測定した。学習中もしくは消去の音が鳴っている間にワイヤレス装置を用いてレーザーを照射した。前頭前野投射群を抑制すると報酬学習とその消去を阻害すること、一方で扁桃体投射群では効果はないことが明らかとなった。3)ベクターにより扁桃体投射群もしくは前頭前野投射群にGFPを発現させた。そののちフローサイトメトリーを用いて神経細胞を分離し、RNAを抽出したところRNAの質が悪くなることが明らかとなった。そのため、リボソームタンパク質であるl10aにGFPで標識したGFP-l10aを作成し、これをベクターにより発現させる系を作成・検討した。GFP抗体を用いて免疫沈降を行うことでGFPを発現しているリボソームを集めることができ、ここからRNAを抽出することで質の高いRNAを得ることができた。いくつか実験において問題はでるものの、代替方法によりおおむね順調に進展している。

1)異なる青斑核神経群への入力元の解明:青斑核神経への解剖学的な入力について検討をした。既存のRabiesSAD19株ではウイルスに効率もしくは神経回路特異的な標識があるためかうまく標識できない脳部位が存在した。そのため効率的かつ長期的に細胞に感染可能な改変型Rabiesを作製した。このウイルスにてトレーシングを行ったところ従来のものよりも多くの細胞が感染し、青斑核ノルアドレナリン神経に入力するものをより多く標識することができた。扁桃体中心核や分界条床核といったいくつかの脳部位が特異的に青斑核に入力をしていることを明らかとした。また新たに順行性の経シナプスウイルスについても検討を行い有効性を確認した。前頭前野の異なる領域が青斑核に入力していることを確認した。2)青斑核神経応答の解明:カルシウムイメージングを用いることにより青斑核の神経応答をとらえることを検討した。青斑核特異的にカルシウムセンサーを発現させてGRINレンズを留置し、GRINレンズ越しのシグナルを観察した。青斑核は脳室に近いためにイメージング用のレンズを埋めても脳室の律動によるアーティファクトが多いことが判明した。そこで電気生理による記録に切り替えて投射神経群を記録することに成功した。またイメージング用のアーティファクトを減らす方法についても検討を行った。3)遺伝子発現の網羅的解析:異なる細胞群を染め分ける新規ウイルスの作製を行った。1)青斑核ノルアドレナリン神経における前頭前野投射群と扁桃体投射群にそれぞれ特異的にRabiesを投与し、それぞれの入力について検討を行う。2)報酬学習、または消去中において前頭前野投射群もしくは扁桃体投射群を光遺伝学により操作し、因果関係について検討する。イメージング技術や装置の立ち上げを行う。3)前頭前野または扁桃体投射群それぞれのRNAを抽出する方法について検討を行う。1)SAD19株Rabiesと異なる新たなCDS株を使用することを検討している。論文ではCDS株がSAD株に比べて毒性が低くまた効率も良いことが報告されている。今年度中にこれを作成し、投射群ごとに投与を行い、入力先について検討をおこなう。2)イメージング装置の使用方法・解析法については確立をした。青斑核に一番よいカルシウムプローブについても検討を行ったので、今後は実際に行動をしている際のイメージングを行う。3)RNAを抽出することができているため、今後はこのRNAを次世代シークエンサーにかけることで特異的なマーカーがあるかどうか検討を行う。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。
赤目砂鉄に分類される砂鉄を使用した古代製鉄技術の研究

チタンを多く含む赤目砂鉄を原料として古代たたら製鉄の研究を行った。砂鉄に含まれる元素成分は元になる母岩の生成過程に影響を受けるため、産出地域によって差異が生じる。特に、チタンの含有量が5%以上の砂鉄を赤目砂鉄、それ以下を真砂砂鉄として分類している。両者の融点には差があり、異なる製鉄方法が確立された。このように、古代製鉄では原料となる砂鉄に適応した製鉄方法が考案されたため、たたら炉の大きさや形状は地域によって異なって発展したと考えられる。このような背景を踏まえ、同じ赤目砂鉄に分類される鎌倉砂鉄(神奈川県鎌倉市)および、東浪見砂鉄(千葉県九十九里浜)、種子島砂鉄(鹿児島県種子島)について同一工程で砂鉄選鉱およびたたら製鉄を行った。その結果、いずれの赤目砂鉄においても高純度の鉄を得ることができることを確認した。この結果、我々が確立した製鉄工程は赤目砂鉄に適した製鉄工程と考えることができる。本工程では製鉄のパラメータになるのは砂鉄密度、選鉱方法、添加粘土量、装荷比、炉内温度、送風量、炉の高さ、炉内構造、木炭の品質である。さらに、鎌倉砂鉄から得られた鉧(生成鉄)の鍛造、研磨により短刀を作ることができた。これまで、鎌倉砂鉄から得られた鉧は鍛造が難しく刀に成形することが困難だったため、鎌倉砂鉄は刀剣の原料には適していないと考えられてきた。しかし、本研究結果により古代の鎌倉でつくられた刀の原料には鎌倉砂鉄は使用されていないという考え方に一石を投じる結果となった。炉内観察と原料となった砂鉄および鉧について鉄を含む17種類の元素分析を行ったところ、鉧生成の過程において合金液滴が形成され、炭素(一酸化炭素ガス)によって強力に還元されていることが確認された。その結果、炉底に不純物を含まない高純度の鉧が生成する。一方、砂鉄とケラに微量に含まれる銅およびニッケルの成分割合はほとんど変化が見られないことがわかった。これら微量元素の含有量変化を調べることで鉧や古代鉄の原料になった砂鉄の産地を特定する手がかりになる可能性があり、今後の研究に期待できる。
協調・融合技術を用いる中日機械翻訳システムに関する研究

協調・融合技術を用いる新しい中日機械翻訳アルゴリズムに関する研究を行った.1.これまでとは異なる機械翻訳手法、即ち、翻訳過程を規則主導翻訳、用例主導翻訳、さらには意味理解に基づく翻訳、常識による翻訳等の部分問題に分割した後、各部分問題の解を適切に組み合わせ、融合する新しい手法を提案した.2.自然言語対話文における省略およびその他の非文法的現象を頑健に解析して,効率の高い機械翻訳システムを実現するため,分散協調アリゴリズムを開発した.さらに,実際な対話文を用い小規模な実験を行った.3.実資料から名詞意味属性、動詞の格関係にかかわるデータを抽出した.特に日本語の格助詞と中国語補助語の対応関係を上記のデータを利用して纏めた.日本語の格助詞の中に対応する中国語補助語の候補が多いのは格助詞「で」と「に」であることは分かった.さらに補助語の自動生成実験を行い,その有効性を確かめることができた.4.実験用の日中翻訳辞書構造およびテストデータを開発した.5.小規模な中日機械翻訳実験システムを作成し,中国語文の形態素解析方法を研究した.特に,中国語複合語のデータを抽出してその特徴を検討し,日本語表現との対応関係および接続関係を研究した.研究成果としての12編研究発表(発表予定の2編も含む)があった.今後,この成果を生かして実用的な中日機械翻訳システムの開発を行う予定である.協調・融合技術を用いる新しい中日機械翻訳アルゴリズムに関する研究を行った.1.これまでとは異なる機械翻訳手法、即ち、翻訳過程を規則主導翻訳、用例主導翻訳、さらには意味理解に基づく翻訳、常識による翻訳等の部分問題に分割した後、各部分問題の解を適切に組み合わせ、融合する新しい手法を提案した.2.自然言語対話文における省略およびその他の非文法的現象を頑健に解析して,効率の高い機械翻訳システムを実現するため,分散協調アリゴリズムを開発した.さらに,実際な対話文を用い小規模な実験を行った.3.実資料から名詞意味属性、動詞の格関係にかかわるデータを抽出した.特に日本語の格助詞と中国語補助語の対応関係を上記のデータを利用して纏めた.日本語の格助詞の中に対応する中国語補助語の候補が多いのは格助詞「で」と「に」であることは分かった.さらに補助語の自動生成実験を行い,その有効性を確かめることができた.4.実験用の日中翻訳辞書構造およびテストデータを開発した.5.小規模な中日機械翻訳実験システムを作成し,中国語文の形態素解析方法を研究した.特に,中国語複合語のデータを抽出してその特徴を検討し,日本語表現との対応関係および接続関係を研究した.研究成果としての12編研究発表(発表予定の2編も含む)があった.今後,この成果を生かして実用的な中日機械翻訳システムの開発を行う予定である.
食成分によるＡＫＴシグナル伝達系分子の機能調節解析

種々の食成分によってPI3K/AKTやp38MAPKの活性化がどのように変化するのかを、ラットの骨髄初代培養系や培養細胞系において検討し、RANKLやTNFなどのサイトカイン産生との関わりを明らかにした。また、アルツハイマー病や生活習慣病関連するPTEN遺伝子の発現解析結果を踏まえて効果的な食事のデザインを考案した。さらに食成分による遺伝子発現調節結果を踏まえて、疾患などの予防に食事のデザインを、例えば生活習慣病関連遺伝子の発現解析結果や本研究成果を踏まえて検討し、種々の疾患の治療や予防へと結びつける示唆と考察を総説論文として発表した。香辛料の適度の摂取が安全な食欲増進効果をもたらし健康への良好な結果を得てきたことが知られているが、刺激要因の同定とAKTやp38MAPKの下流で誘導されるmRNAやmiRNAの発現調節に関する研究を行った。この学術背景として、食要因で調節することが可能な腸管免疫の働きが注目されており、一部の食成分は腸内細菌叢(腸内フローラ)を介して免疫状態にも影響するためである。種々の食成分によってAKTやp38MAPKの活性化がどのように変化するのかを、培養細胞系においてさらに検討している。同様にして、食成分によって誘導されるmiRNAを解析し、サイトカイン産生との関わりを解析した。一般に使用される香辛料の成分をターゲットとして、各種標的細胞からどのような摂食ホルモンの誘導を引き起こすのか、ペプチドホルモンのmRNAの発現を調べ、サイトカインやマイクロRNAの誘導を解析して、体内の食欲増進にどのように働くのかを分子生物学的アプローチした。種々のスパイスやハーブ、そして植物ポリフェノール類の刺激やカプサイシンなどによってグレリンやレプチンなどのホルモン産生がどのように変化するのかを培養細胞系において検討した。そして、誘導されるマイクロRNAをウエスタンブロッティングや蛍光組織染色そしてin situハイブリダイズを用いて解析し摂食システムとの関わりを追及した。摂食ホルモン発現に関与する食事成分と遺伝子発現系にこれら分子を介した影響を与えうる食事成分があることを明らかにした。また、がん遺伝子発現の増減にも影響していることを見出した。それらの成果として、生活習慣病関連遺伝子のSNPs解析結果や本研究成果を踏まえて効果的な食事のデザインを考案した。種々の疾患の治療や予防へと結びつける示唆と考察を総説論文として発表した。細胞における遺伝子発現に影響を与えうる刺激要因の同定とAKTやp38MAPKの下流で誘導されるmRNAの発現調節に関する研究を行った。この学術背景として、香辛料の適度の摂取が安全な食欲増進効果をもたらし健康への良好な結果を得てきたことが知られており、食要因で調節することが可能な腸管免疫の働きが腸内細菌叢を介して免疫状態にも影響するためである。種々の食成分によってAKTやp38MAPKの活性化がどのように変化するのかを、ラットの骨髄初代培養系や培養細胞系において検討している。RANKLやTNFなどのサイトカイン産生との関わりを解析した。食成分による遺伝子発現調節結果を踏まえて、疾患などの予防に食事のデザインを、例えば生活習慣病関連遺伝子のSNPs解析結果や本研究成果を踏まえて検討した。RNA干渉を分子機能解析に応用し、AKTやp38MAPKなどの遺伝子発現においても同様に解析を進めた。また、種々のスパイスやハーブ、そして植物ポリフェノール類の刺激やカプサイシンなどによってAKTを含む細胞内シグナル伝達系がどのように変化するのかを検討した。そして、誘導される遺伝子産物をウエスタンブロッティングや蛍光組織染色そしてin situハイブリダイズを用いて解析し、生活習慣病との関わりを追及した。遺伝子発現系にこれら分子を介した影響を与えうる食事成分があることを明らかにした。また、がん遺伝子やがん抑制遺伝子発現の増減にも影響していることを見出した。本研究成果を踏まえて関連する疾患の効果的な食事のデザインを考案した。そして、種々の疾患の治療や予防へと結びつける示唆と考察を総説論文として発表した。AKTやp38MAPKは代表的なセリン・スレオニンキナーゼであるため、細胞における遺伝子発現に影響を与えうる刺激要因の同定とAKTやp38MAPKの下流で誘導されるmRNAの発現調節に関する研究を行った。実験動物を用いて血中のサイトカイン量の解析や食餌成分との関連を、誘導させたRNA干渉との相関関係の観点から検討した。さらに、それぞれの分子のリン酸化動態を解析した。ポリフェノールやビタミンDなどの転写因子リガンド刺激もしくは抑制によって核内で起動する遺伝子調節系を利用した解析も行った。種々の食成分によってAKTやp38MAPKの活性化がどのように変化するのかを、ラットの骨髄初代培養系や培養細胞系において検討した結果、TobやRANKLやTNFなどのサイトカイン産生との関わりを解析した。また、Dアミノ酸や植物ポリフェノール類の刺激などによってAKT/PTENを含む細胞内シグナル伝達系がどのように変化するのかを検討した。そして、誘導される遺伝子産物についてウエスタンブロッティングを用いて解析し生活習慣病との関わりを議論した。本研究成果を踏まえて関連する疾患の効果的な食事のデザインを考案し、骨疾患や肝臓疾患など種々の疾患の治療や予防へと結びつける考察を総説論文として発表している。

また、アルツハイマー病や生活習慣病関連するPTEN遺伝子の発現解析結果を踏まえて効果的な食事のデザインを考案した。さらに食成分による遺伝子発現調節結果を踏まえて、疾患などの予防に食事のデザインを、例えば生活習慣病関連遺伝子の発現解析結果や本研究成果を踏まえて検討し、種々の疾患の治療や予防へと結びつける示唆と考察を総説論文として発表した。成果としてこれまでに査読付き英語論文を3報学術雑誌に発表しており、研究計画を基本として発展的な実験などもおおむね順調に進展している。食品機能分子生物学AKTやp38MAPKは代表的なセリン・スレオニンキナーゼである。ここまでの研究結果をin vivoで検証する目的で、マウスやラットなどのモデル疾患動物におけるリンパ細胞を、AKTやp38MAPKが関係するカベオラ構造の観点からも検討する。検証にRNA干渉を用いる。カベオリンや新規カベオリン結合蛋白質に対する特異抗体やcDNAを用いて、ウエスタンブロッティングや蛍光組織染色そしてin situハイブリダイズを行い、疾患動物と正常動物とを比較検討する。そしてそれぞれの分子のリン酸化動態を解析する。血中のサイトカイン量の解析や食餌成分との関連を、誘導させたRNA干渉との相関関係の観点から検討する。さらに、内分泌系の異常などによる生活習慣病モデル疾患動物を用いて同様の解析を加えつつ、生活習慣病モデル疾患動物へ有効性であることを検証する。疾患動物で特異的に誘導されているmiRNAとの相関関係の点からも検討する。転写因子のリガンド刺激(抑制)によって核内で起動する遺伝子調節系を利用した解析も行う。これによって効果的な食要因の構築を試みる。マウス実験系でin vivoにおけるターゲット蛋白質の機能調節から適切な投与法を含めて検討する。実験動物などで食餌性に摂取させることで、標的遺伝子発現が可能であることを確認する。研究計画を基本として発展的な実験なども順調に進展している。成果としてこれまでに査読付き英語論文を既に3報も学術雑誌に発表しているため。食成分による遺伝子発現調節結果を踏まえて、疾患などの予防に食事のデザインを、例えば生活習慣病関連遺伝子のSNPs解析結果や本研究成果を踏まえてデザインを決定する。糖尿病のリスクファクターとなる遺伝子SNPも最近報告されているので、株化細胞を用いて実際にそれらの細胞内発現を制御できることをin vitroの実験系を用いて検証していく。RNA干渉を分子機能解析に応用し、キー分子を標的としたノックダウン細胞を作製し、AKTやp38MAPKなどの遺伝子発現においても同様に解析を進める。実験に使用する消耗品費が予想以上にかかったためと、H25年度に購入予定だった超音波ホモジナイザーを他研究室から借りて使用したため、この機器の約半額が次年度の使用予定となった。今年度計画に加えて、実験に使用する消耗品費として使用予定である。
大環状配位子の特性に基づく異常原子価遷移金属イオンの化学

1.特異な配位環境をつくることのできる新規大環状配位子の合成-トリフェルニルフォンスをペンダントにもつ大環状テトラアミン(サイクラム)を合成、それらの金(III)や金(I)及び金(I)と金、(III)の両方を同時にもつ錯体等を合成し、それらの化学的性質を検討した。2.12員環トリアミン亜鉛錯体による炭酸脱水酵素(CA)モデル構築-芳香族スルホンアミドの選択的CA阻害作用を化学的に世界で初めて解明した。3.12員大環状トリアミン亜鉛錯体によるアルコール脱水素酵素(ALD)モデル構築-ALK活性中心における亜鉛イオンの機能を化学的に世界で初めて解明した。新たな“ヒドリド"転移触媒開発の途を開いた。4.14員環大環状テトラミンの金(III)錯体の構造解析とその新機能-新規の無公害、リサイクル可能な金メッキ剤として、極めて優れていることを発見、従来の金シアンに替わりうるものと期待される。5.アミノ基をペンダントに、持つ大環状テトラアミンニッケル錯体を合成した。そのアミノ基と二酸化炭素分子静電的相互により、高効率な二酸化炭素の電気化学的還元触媒の開発に成功した。
核内におけるイントロン分解とスプライシング因子のリサイクル機構の解明

真核生物の核にコードされる遺伝子の多くは、イントロンと呼ばれる介在配列によって分断化されている。このことにより、核内で合成されたmRNA前駆体が、細胞質において蛋白質合成の鋳型として機能するためには、イントロンを取り除きエクソン同士を連結するRNAスプライシングが必須である。スプライシングにより切り出されたイントロンは核内にとどまり、スプライシング因子が除去された後、分解されると考えられている。ヒトではイントロンはmRNA前駆体の実に95%を占めている。またイントロン上にはsnoRNAやmicroRNAなどの遺伝子発現調節に関わるnoncoding RNAがコードされていることからも、イントロンの代謝は高等真核生物において重要だと思われるが、ほとんど解析されていない。本研究では、核内でのイントロンの代謝とそれに伴うスプライシング因子のリサイクル機構を解明することを目的としている。そこでこれまでに同定されている二つの因子、hDBR1とhPRP43に注目した。hDBR1と複合体を形成している因子を同定するため、培養細胞でFlagタグを付けたhDBR1とその不活性化変異体を発現させ、Flagタグに対する抗体を用いて免疫沈降を行った。その結果、新規のタンパク質因子を同定した。またin vitroでの結合実験より、この因子はhDBR1と特異的に結合することを確認した。またheterokaryon実験により、hDBR1が核と細胞質を往復する活性があることがわかり、細胞質での機能が示唆された。またRNAヘリケース様タンパク質であるhPRP43のヘリケースモチーフに変異を導入し、変異体をin vitroスプライシング反応に用いたところ、切り出されたラリアット型イントロンが安定化し、変異体タンパク質とともに沈降するのがみられた。このことにより、核内で合成されたmRNA前駆体が細胞質において蛋白質合成の鋳型として機能するためには、イントロンを取り除き、エクソン同士を連結するRNAスプライシングが必須な過程となっている。またイントロン上にはsnoRNAやmicroRNAなどのnon codingRNAがコードされており、イントロンの代謝は高等真核生物において重要だと考えられているが、ほとんど明らかにされていない。本研究では核内でのイントロンの代謝とそれに伴うスプライシング因子のリサイクル機構を解明するため、イントロンの脱ブランチ反応を司る酵素、hDBR1に注目した。イントロンが分解される過程では、まずこの脱ブランチ反応が起こることが明らかになっている。そこで、イントロンには会合できるが、脱ブランチ活性を持たない変異体を作製することで、イントロン分解過程のRNA-蛋白質複合体が単離できると考え、まずこの酵素のドメイン解析を試みた。最初にこの蛋白質の細胞内局在を調べたところ、核内(核質)に存在することが明らかになった。さらに興味深いことに、核小体周辺部にも強いシグナルが見られた。またこの蛋白質の核移行シグナルはカルボキシル末端の26アミノ酸の領域に存在することが明らかになった。さらにアミノ末端側に存在する、蛋白質脱リン酸化酵素に相同性のある領域に突然変異を導入した変異体を複数作製した。これらの変異体も安定に培養細胞内で発現することが確認されたが、どの変異体も脱ブランチ活性を持たず、この部位が活性に重要であることが明らかになった。
表音文字による中国語書写の歴史的研究

本研究ではかつて歴史上に出現した、表音文字を用いて中国語を表記する幾つかの事例に関する資料を、可能な限り収集整理して、それらを中国語史の脈絡中に位置づけること、更にこれらの文字使用の性格を明らかにすることを目的とした。またこれらの資料が表音文字であるという特質によって、中国語の歴史的研究にも役立つものであることが予想されることから、整理に際してはその面にも注意をはらった。その結果、資料については幾つかの目録を作製し、資料の出現に関わる歴史的背景の知見もかなりな程度得ることが出来た。また資料の分析を通じて、これらの漢字以外の文字使用は、十分な識字率が達成されていない社会において、あくまで副次的な役割に止まるものであること、つまり漢字の不完全な代替品であることが明らかとなった。その一方でこの種の資料は漢字では窺い得ない過去の言語の音的側面を復元する上で大きな效用があることは特筆されねばならない。漢字は中国語を表記するための文字として、すでに三千年以上にわたる長い歴史を持っていて、一般に中国語と漢字は切っても切り離せない存在であると考えられている。少なくとも中国語の正しい書記形態は漢字によるそれであるという通念は全く揺るぎないと言ってよい。では中国語と漢字の関係はどの程度まで密接不可分のものであろうか?中国語は漢字によって書かれるのでなければ、十分にその意味を表現し得ないのであろうか?漢字以外の表音文字で表記された中国語は、結局のところ何故大きな成功を収めることが出来なかったのか?本研究はこのような問題に対して初歩的な解答を与えるために、表音文字による中国語書写の歴史を辿り、言語的及び社会的両面からその特質を探ることを目的とする。この目的を達成するため本研究では、資料として一定のコーパスを確保し得る四つの事象について、それぞれの歴史的経緯を検証したいと考えている。本年度はこれまで経験と実績のある9・10世紀敦煌におけるチベット文字使用につき、再検証を行い、関連する課題について学会発表を行ったほか、総説的論文1篇を公刊した。またプロテスタント宣教師のもたらしたローマ字使用について、最も成功を収めたと見られる教会ローマ字の事例につき、宣教師の残した記録から史実を拾い出すとともに、台灣の台南市において文献調査を行った(長榮中學、台南神學院、國家台灣文學館)。その結果、各種の極めて豊富な材料を収集することが出来たが、研究材料として使用すべく現在整理中である。本研究は中国語と漢字の関係を本質的に追究すべく、その関係について初歩的な解答を与えるために、表音文字による中国語書写の歴史を辿り、言語的及び社会的両面からその特質を探ることを目的とする。本年度は次のような研究を行った。(1)9・10世紀敦煌におけるチベット文字使用につき、再検証を行い、関連する課題について学会発表を行うとともに、総説的論文1篇を公刊した。(2)またプロテスタント宣教師のもたらしたローマ字使用について、昨年度台灣台南市の長榮中學、台南神學院、國家台灣文學館において収集した各種の極めて豊富な材料の整理を進めるとともに、宣教師の伝記や報告などとすり合わせを行うことで、ローマ字使用の実態解明に大きな進展があった。(3)器物に残るパスパ文字資料の収集を行い、その音写形式と『蒙古字韻』などの表記との比較を行った。これはパスパ文字使用の広がりと偏差を考える上で大きなヒントとなる。(4)中国甘肅省南部の回族地域の中心地である臨夏のモスクにおいて、いわゆる「小兒錦」の学習班を見学し、その使用実態を詳しく検証するとともに、小兒錦で書かれた資料を多数収集した。現在その整理と分析を進めているところである。本研究は中国語と漢字との関係の本質を探り、その問題について初歩的な解答を与えるため、表音文字による中国語書写の歴史を辿り、言語的及び社会的両面からその特質を考察することを目的とする。この目的を達成するため本研究では、資料として一定のコーパスを確保し得る諸事象について、それぞれの歴史的経緯を検証したいと考えている。本年度は次のような研究成果を得た。(1) 9・10世紀敦煌におけるチベット文字使用につき、再検証を行い、チベット文字書写「長卷」の文字単位索引を作製した。

(2)またプロテスタント宣教師のもたらしたローマ字使用について、台灣台南市の長榮中學、台南神學院、國家台灣文學館において収集した豊富な材料の整理を進め、資料の草目を作製した。また宣教師の伝記や報告から教会ローマ字関連の記述を抜きだし、資料彙編を編纂した。また自身の所蔵する教会ローマ字資料の整理を行い、「映日書屋所蔵〓南語教会羅馬字文献目録」(未定稿)を作り、WEBで公開した。http://www.zinbun.kyoto-u.ac.jp/takata/LuomaziCata.pdf(3)昨年度、中国甘肅省南部の回族地域の中心地である臨夏のモスクにおいて収集した小兒錦資料の整理を行い、四川など他の地域の小兒錦資料、またドゥンガン族の伝えたアラビア文字資料などとの比較に基づく方言学的な分析を進めた。(4)新たな視点として唐代のインド文字使用に関わる研究の端緒を得るため、玄奘の大唐西域記のテキスト研究を行い、それに関する論文を執筆し、また研究発表を行った。