hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
温度勾配ゲル電気泳動によるHIV-1逆転写酵素遺伝子変異の迅速検出

HIV-1の治療には各種のHIV-1逆転写酵素阻害剤が使われている。HIV-1逆転写酵素では、各種阻害剤に耐性となる変異が多数報告されているため、その配列決定を行ってから、有効な阻害剤を選択しなければならない。しかし、医療現場で本配列決定を行うことは、新興国では設備上困難である。本研究では、インドのジャイプルに集中研究室を設立し、変異の迅速な検出を実現することを目的としている。2018年度は、ビヤニ、保川、横田がデリー(インド)のインド大使館を訪問し、大使館秘書、独立行政法人国際協力機構(JICA)インド事務所駐在員と、インドでの活動について意見交換を行った。さらに、本研究を行う上で、ラジャスタン州の協力が得られるよう、インド大使館あるいはJICAから同州に働きかけていただくことを依頼した。そして、ビヤニ大学(ジャイプル)に集中研究室を設置した。現在、集中研究室のセットアップと実験を行う学生の教育を行っている。・集中検査室の設置: 2018年6月にビヤニ、保川、横田がデリー(インド)のインド大使館を訪問し、大使館秘書、独立行政法人国際協力機構(JICA)インド事務所駐在員に本研究に対する支援を依頼した。12月にビヤニ大学(ジャイプル)内に集中研究室を設置した。2019年2月に保川がビヤニ大学を訪問し、ビヤニ大学学生にRNA増幅法を指導した。現在、引き続き、集中検査室のセットアップを行っている。・TGGEによる変異の判別:変異検出のモデルとして、184位のアミノ酸残基がMetである遺伝子とValである遺伝子を検出する系を設計した。今後、実際に変曲点がどの程度異なるかを調べる。・TGGEの変曲点を検出するソフトウエアの開発:2018年度は、ある点における濃度値とその点が右方向に関して上下どの向きに進行しているかを判定し、順次一つの連続した線として保持し、線幅の情報を確定させることをめざした。そのために、各軌跡に対して、シグモイド関数のパラメータを変更しつつ、フィッティングに関する評価関数の値を求め、評価関数の幅により、軌跡を推定する処理を組み込むことに取り組んだ。また、京都大学でTGGEを行い、目視で変曲点を求める作業を行っている担当者と議論し、多くのTGGEパターンを入手した。下記の3項目を実施する。1.ラジャスタン州のハイリスク者中のHIV-1感染ハイリスク者の同定と見積もり:ラジャスタン州のハイリスク者の間でHIV-1感染の広まりを予測するのに役立つウエブサイトと質問インタビューを設計・開発する。ラジャスタン州のハイリスク者の間でHIV-1感染の広まりを予測するのに役立つ臨床テストデータを収集する、DEPSORを動力源としたPHC(可動型健康診断)依存型システムを設計・開発する。2.RPAとDEPSORを用いた、HIV-1感染の診断のための、現場で使用可能な迅速分子テストの開発:乾燥型RPA試薬を調製し、HIV-1ウイルス量と薬剤耐性変異を、DEPSORを用いて電気化学的にモニタリングする。3.TGGE解析を用いた、HIV-1の遺伝型多様性の分子診断法の開発:まず、HIV-1逆転写酵素のM184Vの変異を検出する系をモデルとして用いる。

また、京都大学でTGGEを行い、目視で変曲点を求める作業を行っている担当者と議論し、多くのTGGEパターンを入手した。下記の3項目を実施する。1.ラジャスタン州のハイリスク者中のHIV-1感染ハイリスク者の同定と見積もり:ラジャスタン州のハイリスク者の間でHIV-1感染の広まりを予測するのに役立つウエブサイトと質問インタビューを設計・開発する。ラジャスタン州のハイリスク者の間でHIV-1感染の広まりを予測するのに役立つ臨床テストデータを収集する、DEPSORを動力源としたPHC(可動型健康診断)依存型システムを設計・開発する。2.RPAとDEPSORを用いた、HIV-1感染の診断のための、現場で使用可能な迅速分子テストの開発:乾燥型RPA試薬を調製し、HIV-1ウイルス量と薬剤耐性変異を、DEPSORを用いて電気化学的にモニタリングする。3.TGGE解析を用いた、HIV-1の遺伝型多様性の分子診断法の開発:まず、HIV-1逆転写酵素のM184Vの変異を検出する系をモデルとして用いる。本研究課題が追加採択され、研究費の使用が可能になったのが、2018年度末であったために、当初の2018年度予算全額を、2018年度に使うための十分な使用計画をたてることができなかった。
ABCGタンパク質複合体の品質管理機構

ステロール輸送に関与するABCGタンパク質は、N末側に細胞質側のヌクレオチド結合領域、C末側に6回膜貫通ヘリックスを持つ。ABCG5とABCG8はヘテロ二量体を形成して初めて小胞体から細胞膜へ輸送され、細胞膜上で機能する。ホモ二量体を形成すると小胞体に残留し、分解される。ABCG5,ABCG8と相同なABCG1,ABCG2は、ホモ二量体を形成して細胞膜に発現し機能する。ABCGタンパク質を一例として、ホモ二量体、ヘテロ二量体の認識機構を明らかにし、膜タンパク質複合体の品質管理機構を明らかにすることを目的として、ABCG1とABCG5のキメラタンパク質を作成し、細胞内局在を解析した。細胞質領域がABCG1で膜領域がABCG5のキメラタンパク質は単独発現で細胞膜に局在したのに対し、細胞質領域がABCG5で膜領域がABCG1のキメラタンパク質は細胞内(小胞体)に局在した。また、ABCG2とABCG8のキメラタンパク質の細胞内局在を解析し、同様の結果が得られた。これらのことから、ABCG5,ABCG8の細胞質領域がホモ二量体の小胞体残留に関与すると予想された。これまでに細胞質領域のRXR配列が、K_<ATP>チャネルを含む膜タンパク質複合体の品質管理機構として、同定されている。ABCG5、ABCG8の細胞質領域中の種間で保存されているRXR配列が、二量体構造の認識に機能する可能性を検討するため、RXR配列変異体を作製した。免疫染色と糖鎖解析より、ABCG5のRXR配列変異体は、単独発現では細胞内に局在し、野生型ABCG8共発現させると細胞膜に局在することを明らかにした。ABCG8のRXR配列変異体でもABCG5変異体と同様の結果が得られた。これらのことから、ABCG5とABCG8では、RXR型小胞体残留・逆送シグナルと異なる機構で品質管理されることが明らかとなった。細胞質側に存在する未知のシグナルによって品質管理がなされている可能性が示唆された。ABCGタンパク質を一例として、膜タンパク質複合体の品質管理機構を明らかにするため、ヒトABCG5,ABCG8遺伝子をクローニングし、HEK293細胞で一過的に発現させた。糖鎖解析から、ABCG5,ABCG8をそれぞれ単独で発現させたときには単純糖鎖付加型であり、ABCG5とABCG8を共発現させると複合型糖鎖が付加することが分かった。免疫染色を行い、ABCG8単独では細胞内に局在するが、ABCG5を共発現させるとABCG8が細胞膜上にも局在することが明らかとなった。これらから、ABCG5,ABCG8単独では小胞体に残留し、ABCG5とABCG8が複合体を形成したときのみゴルジ体以降に輸送されることを明らかにした。RKR配列は、K_<ATP>チャネルなどの小胞体残留・逆送シグナルとして膜タンパク質複合体の品質管理に関与する。ABCG8のヌクレオチド結合領域(NBF)中の2箇所のRXR配列が、小胞体残留・逆送シグナルとなる可能性があるため、RXR配列をアラニンに置換した変異体(RLR196-198AAA,RRR218-220AAA)を作製し、局在を検討した。糖鎖解析と免疫染色から、ABCG8(RLRAAA)は単独発現でも共発現でも小胞体に局在し、ABCG8(RRRAAA)は単独発現時には小胞体に、ABCG5と共発現時には細胞膜上にも局在することが明らかとなった。従って、RXR配列の変異体でも、野生型と同様に単独発現時に小胞体残留が起こることが明らかとなった。野生型ABCG8とABCG8(RRRAAA)はATP類似体8-azido-ATPで光親和性標識されたが、ABCG8(RLRAAA)は光親和性標識されなかった。このことから、ABCG8(RLRAAA)変異体では、NBFの立体構造が崩れることで品質管理機構によって認識され、小胞体に残留することが示唆された。

ABCG5、ABCG8の細胞質領域中の種間で保存されているRXR配列が、二量体構造の認識に機能する可能性を検討するため、RXR配列変異体を作製した。免疫染色と糖鎖解析より、ABCG5のRXR配列変異体は、単独発現では細胞内に局在し、野生型ABCG8共発現させると細胞膜に局在することを明らかにした。ABCG8のRXR配列変異体でもABCG5変異体と同様の結果が得られた。これらのことから、ABCG5とABCG8では、RXR型小胞体残留・逆送シグナルと異なる機構で品質管理されることが明らかとなった。細胞質側に存在する未知のシグナルによって品質管理がなされている可能性が示唆された。
チーズホエーからのトキシン中和活性ネオ糖タンパク質の作出とその誘導活性の特性解析

初年度には、研究の出発材料であるカゼイノグリコペプチド(CGP)をチーズホエーより調製する方法をまず確立した。この方法で調製したVGPに対して、化学的および生物学的手法によりN-アセチルノイラミン酸(NANA)を結合するシアリルラクトース(酸性3糖)糖鎖を新規に導入する手法を比較検討し、ネオ糖タンパク質(ネオCGP)を作出することに成功した。また、ネオCGPに結合する糖鎖の修飾度およびそれらの正確な糖鎖の化学構造を詳細に検討した。本年度は、トキシン中和活性の高感度分析法を新たに開発し、この手法を用いて初年度に作出したネオ糖タンパク質(ネオCGP)のコレラトキシン中和活性の測定と、オリジナルのCGPS比較した中和活性の増強度を詳細に検討した。すなわち、これまでのマイクロプレートを用いた同様な測定法の種々の欠点を克服した。まず、ポリスチレンビーズ上にコレラトキシンの特異的に認識結合する糖脂質GM1を結合させ、ここにコレラトキシンを結合させた。ついでGM1上のエピトープ構造であるNANAを結合するピオチン化糖鎖プローブを反応させ、標識ストレプトアビジンを反応させ、ビーズを他のウェルに移してから発色に導いた。これにより高感度で、バックの低い理想的な「コレラトキシン中和活性測定法」が完成した。本法では、GM1と競合するシアル酸を有する中和活性化合物が存在すると、コレラトキシンに結合することで糖鎖プローブ結合量が減少し、呈色度が減少することで中和活性が正確に測定できる。初年度に合成したネオCGPは、いずれもCGPに比較して有意に高いトキシン中和活性が検出された。以上の結果より、将来安全な手法で既存のタンパク質にNANA糖鎖を導入することで、トキシン中和活性を誘導できることと、導入糖鎖の種類を変えることで、多くのトキシンに対して中和活性を示すネオ糖タンパク質が誘導できる可能性を初めて示すことができた。平成8年度は、研究の出発材料であるカゼイノグリコペプチド(CGP)をチーズホエーより調製し、化学的および生物学的手法により、N-アセチルノイラミン酸(NANA)を含むシアリルラクトース糖鎖を新規導入したネオ糖タンパク質(ネオCGP)を作出した。また、結合糖鎖の修飾度およびそれらの正確な化学構造を詳細に検討した。1市販のチーズホエーパウダー(CWP)を出発材料にし、先に著者らが開発したアルコール分画・イオン交換法によりCGPを調製する。2ラクトース(Galβ1-4Glc)またはN-アセチルラクトサミン(Galβ1-4GlcNAc)を、(1)炭酸水素アンモニウム・アンモニア水溶液中で、直接C-1水酸基をアミノ基に置換する、(2)パラアミノフェニル誘導体化し、または(3)アミノカルボニル反応の3種の化学低合成法により、まず中性2糖糖鎖をCGPに新規導入した。3牛胎仔血清中のシアル酸転移酵素能を利用し、CMP-NANAよりシアル酸分子を既に導入した中性2糖糖鎖の非還元末端のガラクトース残基に転移させ、N-アセチルノイラミニルラクトース糖鎖とした。4このようにして、新たに作出されたネオ糖タンパク質(ネオCGP)を60度下でのヒドラジン分解により、結合しているO-グリコシド型糖鎖を切り出し、ピリジルアミノ化により蛍光ラベルしてHPLC分析により、その導入度を評価した。

5完全な導入糖鎖の化学構造は、著者らが通常行っている単糖分析(GLC、HPLC)、メチル化分析(GC-MS)およびNMR分析等により総合的に確認した。来年度は、トキシン中和活性の高感度分析法を開発し、この手法を用いて本年度作出したネオ糖タンパク質(ネオCGP)のコレラトキシンの中和活性の増強度を測定する予定である。初年度には、研究の出発材料であるカゼイノグリコペプチド(CGP)をチーズホエーより調製する方法をまず確立した。この方法で調製したCGPに対して、化学的および生物学的手法によりN-アセチルノイラミン酸(NANA)を結合するシアリルラクトース(酸性3糖)糖鎖を新規に導入する手法を比較検討し、ネオ糖タンパク質(ネオCGP)を作出することに成功した。また、ネオCGPに結合する糖鎖の修飾度およびそれらの正確な糖鎖の化学構造を詳細に検討した。本年度は、トキシン中和活性の高感度分析法を新たに開発し、この手法を用いて初年度に作出したネオ糖タンパク質(ネオCGP)のコレラトキシン中和活性の測定と、オリジナルのCGPと比較した中和活性の増強度を詳細に検討した。すなわち、これまでのマイクロプレートを用いた同様な測定法の種々の欠点を克服した。まず、ポリスチレンビーズ上にコレラトキシンの特異的に認識結合する糖脂質GM1を結合させ、ここにコレラトキシンを結合させた。ついでGM1のエピトープ構造であるNANAを結合するビオチン化糖鎖プローブを反応させ、標識ストレプトアビジンを反応させ、ビーズを他のウエルに移してから発色に導いた。これにより高感度で、バックの低い理想的な「コレラトキシン中和活性測定法」が完成した。本法では、GM1と競合するシアル酸を有する中和活性化合物が存在すると、コレラトキシンに結合することで糖鎖プローブ結合量が減少し、呈色度が減少することで中和活性が正確に測定出来る。初年度に合成したネオCGPは、いずれもCGPに比較して有意に高いトキシン中和活性が検出された。以上の結果より、将来安全な手法で既存のタンパク質にNANA糖鎖を導入することで、トキシン中和活性を誘導できることと、導入糖鎖の種類を変えることで、多くのトキシンに対して中和活性を示すネオ糖タンパ質が誘導できる可能性を初めて示すことが出来た。
神経変性疾患、特にリソゾーム蓄積症の病態形成にオートファジーが果たす役割について

本年度新たにカテプシンDとp62とのダブルノックアウトマウスを作成することに成功したが、神経病理学的所見はカテプシンD単独欠損マウスと異なる点は見いだすことが出来なかった。一方最近様々なリソソーム蓄積症においてオートファジーが抑制されているという報告が相次いでいる。カテプシンD欠損マウスにて、ユビキチン・p62強陽性の構造物が存在する理由として、当初オートファジーの阻害された結果蓄積している構造物と考えられたが、申請者らがカテプシンDとAtg7およびp62とのダブルノックアウトマウスを用いて遺伝学的に解析したところ、カテプシンD欠損マウスのこのようなユビキチン陽性の構造物は、オートファジー依存的にむしろ増大し、p62の有無に影響されないことから、これらの構造物はKomatsuらがAtg7欠損マウスで報告した凝集体とは全く別の構造物であることを強く示唆する結果を得た(Koike et.al..,投稿準備中)。また、カテプシンD/Atg7ダブルノックアウトマウス神経細胞体においては異常なリソゾーム様構造物の蓄積がカテプシンD単独欠損マウスと同様認められた。これはカテプシンD/Atg7ダブルノックアウトマウスの異常なリソゾーム内にはエンドサイトーシスないしマクロオートファジー以外のオートファジー経路によりリソソームに取り込まれた基質が分解されずに蓄積している可能性がある。以上の着眼点を基に、カテプシンD/Atg7ダブルノックアウトマウスとカテプシンD単独ノックアウトマウスを比較検討し、カテプシンD欠損マウスの病態形成におけるオートファジーの関与についてその実体を検討中である。カテプシンD欠損マウスでは神経セロイドリポフスチン蓄積症の診断基準であるgranular osmiophilic deposits(GROD)が蓄積する。このGRODは分解されない基質を有し、細胞質の一部と共に、二重膜構造を持つオートファゴソームにしばしば取り込まれる。すなわち、GROD自身がオートファジーを誘導し、これが異常なリソゾームの蓄積に寄与する可能性を示唆している。私達は、1)光顕的に検索すると神経細胞内のLC3陽性の顆粒状構造物にユビキチンとA170/p62/SQSTMI(p62)が共存すること、2)凍結超薄切片を用いた免疫電顕により、GRODの膜表面にユビキチン、p62の両者が局在すること、を見いだした。このことは、ユビキチン-p62複合体が隔離膜上のLC3と会合することで効率的にGRODをオートファゴソームに取り込む機構の存在を示唆し、その機構の繰り返しによって病態が形成されることを示している。以上を更に検証するため、3)中枢神経系特異的Atg7ノックアウトマウスとカテプシンD欠損マウスとのダブルノックアウトマウスを作成して解析した結果、同マウスはカテプシンD単独欠損マウスと同様の生存期間を有し、神経細胞には、GROD自身は依然存在するが、やはりそのGRODを隔離するように特殊な二重膜が不完全に取り囲み、その膜自身は粗面小胞体と連続していることが分かった。これらの結果は、隔離膜の由来を考える上で重要な所見であり、さらに解析を続けている。
高効率切断活性または新規な基質特異性をもつ人工リボザイムの合成と応用に関する研究

本研究は、固定化RNAとPCR(polymerase chain reaction)法を用いた新規に考案した手法によって、現在まで知られていない高効率切断活性を持つRNA酵素や、全く新しい基質特異性を持つRNA酵素を、一部分が任意の配列を持つ人工的に合成したRNAプールの中から選択増幅し、それらの構造を詳細に解析することで、RNA酵素の活性と構造との相関関係を明かにすることを目的としている。平成4年度では、まず固定化RNAを作成し、任意な配列をもつRNAプールから切断活性を持つRNA酵素を選択増幅する最適な反応条件を確立した。次に、第一段階として、ヘアピン型RNA酵素を出発材料に用い、ヘアピン型RNA酵素による切断箇所に近い内部ループ領域4塩基を任意な配列として持つ変異RNAプール(4^4=256種類のRNAからなるプール)から、固定化RNAを用いて選択増幅実験を実際に行った。2回の選択増幅反応を行ったところ、野性型のRNA酵素と同程度の切断活性を持つRNAプールが得られた。そのRNAプールから任意に選んだ24個のクローンによる切断活性を調べたところ、全てのクローンが切断活性を示し、今回開発した固定化RNAを用いた選択的増幅反応法が極めて有効であることが解った。更に得られたクローンの塩基配列を決定した結果、ヘアピン型RNA酵素においては切断箇所に近い内部ループ領域4塩基中の真中の2塩基GAが切断活性に必須であることが判明した。現在、更に別の箇所の内部ループ領域に変異を導入したプールを作成して解析中である。
不妊疾患マウスとiPS細胞を用いた治療モデルの開発

生殖細胞が消失した不妊疾患患者に対する治療法は全く存在していない。そこで、本研究では性染色体異常により生殖細胞が消失するクラインフェルター症候群モデルのXXY型マウスを用いて、治療モデルの開発を試みた。まず、生殖細胞の再生を行うために、人口多能性幹細胞(iPS細胞)の樹立を試みた。しかしながら、iPS細胞様の株は数ライン樹立できたものの、外来遺伝子を除去できなかったために、生殖細胞の再生には至らなかった。これまでに、何らかの理由で生殖細胞がなくなってしまった不妊疾患患者に対する治療法は全く存在していない。そこで、本研究では、性染色体異常により生殖細胞が消失するクラインフェルター症候群モデルのXXY型マウスより、人口多能性幹細胞(iPS細胞)を樹立し、疾患の要因を取り除いた後、生殖細胞へと分化させる試みを行い、治療方法がなかった生殖細胞のない不妊疾患に対する治療モデルの開発を目的としている。本研究では外来遺伝子のないiPS細胞を得ることが重要なポイントとなる。そこで、平成22年度は、トランスポゼースの働きによって、トランスポゾンで挟まれた塩基配列をベクターから染色体に導入することができ、逆に染色体から1塩基も残さずに抜き取ることができるpiggyBacシステムを用いて、XXY型のマウス胎生繊維芽細胞(MEF)からiPS様細胞を複数ライン樹立した。しかし、導入した遺伝子(Oc t-4,Sox2,Klf4,Myc,HNE)を抜き取れたラインの樹立は、まだできていない。平成23年度は引き続き、iPS細胞へと誘導するために導入した遺伝子を取除き、過剰なX染色体をCre/Inverted LoxPシステムを用いて削除することで、クラインフェルター症候群の治療モデルの確立を試みる。一方で、平成22年度は生殖系列に寄与するラットES細胞を樹立にも成功した。このラットES細胞をマウスの胚盤胞に打込むことで、マウス←ラットESキメラを誕生させることができた、この異種キメラでは、マウスだけでなく、ラット由来の精子形成も確認できた。この結果は、異種動物を用いた不妊治療モデルの可能性を示唆した。そこで、本研究では、性染色体異常により生殖細胞が消失するクラインフェルター症候群モデルのXXY型マウスより、人口多能性幹細胞(iPS細胞)を樹立し、疾患の要因を取り除いた後、生殖細胞へと分化させる試みを行い、治療方法がなかった生殖細胞のない不妊疾患に対する治療モデルの開発を目的とした。そこで、平成23年度は、平成22年度にXXY型のマウス胎生繊維芽細胞(MEF)からpiggyBacシステムを用いて、樹立したiPS様細胞から導入したiPS細胞誘導遺伝子(Oct-4,Sox2,Klf4,Myc,LINE)を抜き取る試みを行った。しかし、残念ながら、iPS細胞誘導遺伝子が完全になくなったiPS細胞を得ることはできなかった。この結果は、複数の箇所に挿入されたiPS細胞誘導遺伝子はpiggyBacにより染色体から切り出されるが、piggyBacは切り出すだけでなく、染色体に挿入させる活性もあるので、別の箇所に挿入してしまったのではないかと予測された。このことは、多コピー数の遺伝子が導入されなければiPS細胞は樹立されにくいことを示唆し、外来遺伝子を持たないiPS細胞の樹立の難しさを示した。一方で、精子をGFPで標識されたトランスジェニックラットのES細胞を樹立して、マウスの胚盤胞に打込んで異種キメラを作製することにより、ラット精子の形態を示す精子が、ラットのセルトリ細胞に支持されてできたマウスのゲノムをもつ精子ではなく、ラットES細胞に由来するものであることを確認した。この結果は、異種動物を用いた遺伝子組換え動物の作製や、不妊治療モデルの可能性を示唆した。
クーロン摩擦を受ける高コンプライアンスな機械システムの運動解析と制御

高コンプライアンスな機械システムの最も基本的な例として,座屈近傍状態での梁をとりあげ動的解析を行った.その結果,座屈後挙動においてクーロン摩擦の影響により不安定な平衡点近傍に安定な領域が存在することを理論的ならびに実験的に明らかにした.さらに座屈点近傍(高コンプライアンス下)での梁の安定化法を提案した.すなわち,軸方向加振により不安定で自明な平衡状態を安定化出来ることを理論的ならびに実験的に明らかにした.またこのような高周波加振によって,クーロン摩擦の影響で発生する無数の非自明な安定平衡状態は不安定化し,自明な平衡状態へ安定化が可能であることを理論的ならびに実験によって指摘した.また以上のような特徴的なダイナミクスを支配するクーロン摩擦の同定法を導いた。すなわち一般に微小なクーロン摩擦を実験で得られた自由振動波形から同定する方法を提案し,両端単純支持梁の支持点に作用する微小なクーロン摩擦の大きさを計測した.次に,劣駆動マニピュレータを取り上げた。このシステムはアクチュエータのない関節が存在するため,高コンプライアンスなシステムである.劣駆動リンクが剛体の場合と弾性体の場合について,運動方程式を定式化し,特異摂動法を用いて理論解析を行った.その結果,劣駆動リンクには様々な分岐現象が発生するとともに,様々な位置に安定な平衡点を作り出せることが明らかになった.さらに,コンプライアンスの高さから対象物に対する衝撃が十分低く抑えられる点が特徴である,ロボットハンドを理論的に提案した.高周波でハンドの支持部を加振するとその振幅と振動数に応じてハンドの位置が変化し,対象物の把持が出来る構造で,ロボットのみならず様々な把持作業をともなう機械システムに広く応用が可能である.高コンプライアンスな機械システムの最も基本的な例として,座屈近傍状態での梁をとりあげ動的解析を行った.その結果,座屈後挙動においてクーロン摩擦の影響により不安定な平衡点近傍に安定な領域が存在することを理論的ならびに実験的に明らかにした.さらに座屈点近傍(高コンプライアンス下)での梁の安定化法を提案した.すなわち,軸方向加振により不安定で自明な平衡状態を安定化出来ることを理論的ならびに実験的に明らかにした.またこのような高周波加振によって,クーロン摩擦の影響で発生する無数の非自明な安定平衡状態は不安定化し,自明な平衡状態へ安定化が可能であることを理論的ならびに実験によって指摘した.また以上のような特徴的なダイナミクスを支配するクーロン摩擦の同定法を導いた。このシステムはアクチュエータのない関節が存在するため,高コンプライアンスなシステムである.劣駆動リンクが剛体の場合と弾性体の場合について,運動方程式を定式化し,特異摂動法を用いて理論解析を行った.その結果,劣駆動リンクには様々な分岐現象が発生するとともに,様々な位置に安定な平衡点を作り出せることが明らかになった.さらに,コンプライアンスの高さから対象物に対する衝撃が十分低く抑えられる点が特徴である,ロボットハンドを理論的に提案した.高周波でハンドの支持部を加振するとその振幅と振動数に応じてハンドの位置が変化し,対象物の把持が出来る構造で,ロボットのみならず様々な把持作業をともなう機械システムに広く応用が可能である.本年度は,高コンプライアンス状態にある梁の挙動の解析と安定化法を理論的に提案した.さらに解析の妥当性と安定化法の有効性を実験的に検討した.高コンプラアンス下にある梁は座屈現象による分岐点近傍の状態であり,容易に静的不安定な状態に陥る.このような状態に対してクーロン摩擦が,どのような影響を及ぼすかを理論的に明らかにした.その結果座屈後挙動においてもクーロン摩擦の影響によって不安定な平衡点近傍に安定な領域が発生することを非線形力学系理論と分岐理論をもちいて理論的に指摘し,実際の梁を用いた模型実験により分岐図を描くことによって,実験的にそれを確認した.さらに,座屈現象を生じた場合の安定化手法については,従来のフィードバック制御による方法とは異なった,フィードバックを用いない安定化法を提案した.軸方向に高周波で加振することにより不安定な平衡状態を安定化できることを理論的に指摘し,実験によりそれを確認した.さらに,加振振動数や加振振幅が大きいほど,分岐点が移動し,座屈が生じにくくなることなどの,特徴的な現象を理論と実験によって明らかにした.本手法は倒立振り子のフィードバックを用いない安定化手法を座屈現象に応用したものであるが,クーロン摩擦を受ける高コンプライアンスシステムへの応用はこれまで行われておらず,劣駆動マニピュレータの運動制御や自励振動機械等などの機械システムに今後広範囲な応用が期待できる.昨年度は、微小なクーロン摩擦が高コンプライアンスな系に存在する場合、それが臨界点近傍の挙動に大きく影響を及ぼすことを単純支持梁の座屈に関して指摘し、その妥当性を実験で観察した。本年度はさらに、クーロン摩擦による曲げモーメントが両端支持点で発生しない両端固定梁について実験を行い、昨年度の実験結果との比較から、微小なクーロン摩擦が分岐点近傍でのダイナミクスに大きく影響を与えることを実験的に確認した。微小重力下で劣駆動マニピュレータのフリーリンクは、高コンプライアンスなシステムとみなすことができるが、本年度はこのようなシステムの実験機を試作した。

また、マニピュレータの運動方程式を構築し(連立2階非線形常上微分方程式)、それを多重時間を導入して、摂動法によって解析的に解き、自律系の平均化方程式を導いた。この結果、マニピュレータの関節に摩擦潤滑ベアリングが使われた場合のマニピュレータは、その高コンプライアンス性をもちいることにより、様々な角度での位置決めが可能なことを指摘した。すなわち、高コンプライアンス性に起因して、安定な平衡点が連続的に存在するようになるため、過渡状態を適切に設定することにより、フィードバック制御なしに目標位置へ位置決めが可能であることを指摘した。過渡状態の適切な制御は、アクティブリンク(アクチュエータが接続されたリンク)によって行う必要があり、この制御は次年度の課題である。昨年度に,明らかになった高コンプライアンスなシステムに対する,微小なクーロン摩擦の影響をさらに検討し,本年度はそのようなシステムの位置決め制御の可能性について検討した.対象としたモデルは両端単純支持梁であり,軸方向高周波加振によって,分岐点近傍において,回転部分を持つ支持点でのクーロン摩擦の影響が低減され,さらに分岐点が移動し,分岐の非線形特性が超臨界ピッチフォーク分岐から亜臨界ピッチフォーク分岐に変化することを実験的に明らかにした.なお,高コンプライアンスな状態でもクーロン摩擦の影響がほとんど現れない,両端固定支持の場合も同様な分岐現象の変化が観察された.さらに,高コンプライアンスなリンクが,微小重力の下で座屈した場合のリンクの位置決め制御法を提案した.リンクを軸力を受ける梁とみなし,運動方程式を導出した.特異摂動法を利用して平均化を行い解析的近似解を求めた.その結果から分岐図を描いた.安定な平衡状態を利用してリンク先端の位置決め制御法を提案し,実験によりその有効性を検討した.最後に,高コンプライアンスなロボットハンドを理論的に提案した.コンプライアンスの高さから対象物に対する衝撃が十分低く抑えられる点が特徴である.高周波でハンドの支持部分を加振すると,その振幅と振動数に依存してハンドの位置が変化し,対象物を把持できる構造であり,ロボットのみならず様々な把持作業を行う機械システムに広く応用が可能である.
シェイクスピア演劇における航海とナショナリズムに関する考察

平成18年度はThe Comedy of Errorsを中心として研究を進め、この劇における航海とナショナリズムの主題を考察する際には『オデュッセイア』に登場する、毒薬で男を獣の姿に変える魔女circeとその文学的伝統が重要であることが確認された。平成19年度はこの成果に基づいて、Periclesに関してCirceを取り巻く様々な伝統との関係を考察した。特にMarinaが売られてきたMytileneの売春宿で客の男たちを改心させる場面に着目し、この場面におけるMarinaをCirceと比較した。Circeは性的魅力によって男性を骨抜きにしてしまう魔女として描かれてきた伝統があり、貞淑な乙女であるMarinaは性的に積極的であるCirceとは対極的な存在であるように見える。しかしながら、男たちからその性的能力を奪っている点で、MarinaはCirceの伝統の中に位置づけられる可能性が明らかになった。この指摘は西洋文学において繰り返し現れてくるCirceの伝統に新たな側面を付け加えるものである。Circeはその被害者である男性の様々なアイデンティティに対する脅威となっており、初期近代イングランドではRoger AschamのThe Schoolmasterがイタリアを、Raphael Holinshedの『年代記』がアイルランドをそれぞれこの魔女にたとえてイングランド人男性への危険な魅力を表している。本研究で示されたThe Comedy of ErrorsならびにPericlesとCirceとの関連は、これらの劇が初期近代におけるイングランド人(男性)アイデンティティの脆弱性に関する言説の中に位置付けられることを明らかにするものである。本年度は二年計画の初年度として、シェイクスピアのエリザベス朝期の劇作品と古典古代以来の文学的伝統との関係に焦点を当てて、主に以下の三方向から研究を進めた。1.Titus Andronicusにおいてアエネアスが「放浪の王」として言及されていることから出発して、『アエネイス』以来の文学的伝統のエリザベス朝文学における扱われ方を考察した。Dido, Queen of CarthageやThe Faerie Queeneと比較しながらTitusとOthelloを考察し二論文を発表した。Titusと古典文学との関係については"The Partner of Empire : Literacy and Imperialism in Titus Andronicus"において論じ、Othelloについて『アエネイス』との間テクスト性が従来論じられていたよりもはるかに強く認められることを「アエネアスとディドの変容-『オセロー』における文学的伝統」において論じた。2.ホリンシェッドの『年代記』の「アイルランド史」の中でアイルランドがThe Comedy of Errorsで言及される魔女キルケーに例えられていることから、イングランドとケルト周縁地域との関係とキルケー表象の問題に着目し、特にHenry IV, Part 1におけるウェールズとファルスタッフに焦点を当てて考察を進めている。3.シェイクスピアのエリザベス朝喜劇と比較するため、ミドルトンのジェイムズ朝喜劇におけるイングランド・ナショナリズムの問題を"I' the Heart of London"において分析した。前年度はThe Comedy of Errorsを中心として研究を進め、この劇における航海とナショナリズムの主題を考察する際には『オデュッセイア』に登場する、毒薬で男を獣の姿に変える魔女Circeとその文学的伝統が重要であることが確認された。本年度はこの成果に基づいて、Periclesに関してCirceを取り巻く様々な伝統との関係を考察した。特にMarinaが海賊にさらわれ、売られてきたMytileneの売春宿で客の男たちを改心させる場面に着目し、この場面におけるMarinaをCirceと比較した。この研究は西洋文学において繰り返し現れてくるCirceの伝統に新たな側面を付け加えるものである。この内容の一部を平成19年4月に行われたアメリカ・シェイクスピア学会年次大会におけるセミナーにて発表し、さらに現在論文として出版を準備している。
膵癌における高感度、遺伝子診断によるk-ras遺伝子異常の臨床的意義について

1.高感度検出法を用いて、膵癌,慢性膵炎、正常膵組織のK-ras点突然変異を検討した.【結果】膵癌14例中11例(78%),慢性膵炎8例中(腫瘤形成性膵炎6例,慢性膵炎2例)3例(38%),正常膵9例中0例(0%)にK-ras点突然変異が認められた.2.膵癌において神経叢やリンパ節におけるK-ras点突然変異を検索し、微小転移巣と予後との関係を検討する。【結果】リンパ節,神経叢に病理学的転移がないと診断された膵癌において,腫瘍と同一のK-ras点突然変異が,いくつかのリンパ節,神経叢に認められ,病理学的に診断できない微小転移巣が遺伝子的に検出された.3.膵癌患者の末梢血におけるK-rasの点突然変異を検索し、血中癌細胞の存在と臨床腫瘍学的特性について比較検討をする。【結果】膵液中にK-rasの点突然変異を認めた症例(感度:腺管癌75%,嚢胞腺癌100%,特異性:87%)でも,末梢血中には認めなかった.(0%)1.高感度検出法を用いて、膵癌,慢性膵炎、正常膵組織のK-ras点突然変異を検討した.【結果】膵癌14例中11例(78%),慢性膵炎8例中(腫瘤形成性膵炎6例,慢性膵炎2例)3例(38%),正常膵9例中0例(0%)にK-ras点突然変異が認められた.2.膵癌において神経叢やリンパ節におけるK-ras点突然変異を検索し、微小転移巣と予後との関係を検討する。【結果】膵液中にK-rasの点突然変異を認めた症例(感度:腺管癌75%,嚢胞腺癌100%,特異性:87%)でも,末梢血中には認めなかった.(0%)
臨床応用可能なウイルスベクター製造のための企画調査

本企画調査により,ウイルスベクター製造のためのコアプロセスをフローチャート化し,各プロセスにおける業務を明確に記述し,各作業員の業務分担と責任および権限を明らかにすることが,臨床グレードの細胞治療または遺伝子治療用の製剤を生産するために重要であることが指摘された.まず,コアプロセスとして(1)細胞またはウイルスベクター製造部門,(2)品質管理部門,(3)ベクター設計・開発部門,(4)業務部門をあげ,それぞれのプロセスを必要に応じて細かく分類し,設備,要員の配置を行った.cGMP基準を満たすための文書管理に十分な人的資源を配分することが必要と考えられた.また,ベクター製造施設に携わる全ての職員に品質管理の重要性を認識するためのセミナーを行った.各部門間のコミュニケーションの重要性も指摘されたので,週1回の全体会議において自由な意見交換が行われるよう留意した.その一方で,トップダウン式の意志決定の重要性も指摘された.特に製造物の品質に関して,材料の購入から製剤の搬出まで一貫して高い品質を保つことが重要であり,仮に最終検査で不適合品が出現した場合でも,製剤にトレーサビリティを持たせておくことにより,是正処置がとれるように配慮した.これらのプロセスが正しく行われているかどうかを監査するために,定期的な内部監査を行うことも必要とされた.このシステムが全体として円滑に運営されるためのマネジメント・システムを構築することが重要であることが指摘された.本企画調査により,ウイルスベクター製造のためのコアプロセスをフローチャート化し,各プロセスにおける業務を明確に記述し,各作業員の業務分担と責任および権限を明らかにすることが,臨床グレードの細胞治療または遺伝子治療用の製剤を生産するために重要であることが指摘された.まず,コアプロセスとして(1)細胞またはウイルスベクター製造部門,(2)品質管理部門,(3)ベクター設計・開発部門,(4)業務部門をあげ,それぞれのプロセスを必要に応じて細かく分類し,設備,要員の配置を行った.cGMP基準を満たすための文書管理に十分な人的資源を配分することが必要と考えられた.また,ベクター製造施設に携わる全ての職員に品質管理の重要性を認識するためのセミナーを行った.各部門間のコミュニケーションの重要性も指摘されたので,週1回の全体会議において自由な意見交換が行われるよう留意した.その一方で,トップダウン式の意志決定の重要性も指摘された.特に製造物の品質に関して,材料の購入から製剤の搬出まで一貫して高い品質を保つことが重要であり,仮に最終検査で不適合品が出現した場合でも,製剤にトレーサビリティを持たせておくことにより,是正処置がとれるように配慮した.これらのプロセスが正しく行われているかどうかを監査するために,定期的な内部監査を行うことも必要とされた.このシステムが全体として円滑に運営されるためのマネジメント・システムを構築することが重要であることが指摘された.
タイ国における地方分権化に関する基礎的研究

研究の目的は、「なぜタイにおいて1990年代以降、急激な地方分権化が可能となったのか」という問いに対する政治学的説明を行なうことである。実績の概要は以下の通りである。第1に、1990年代以降分権化のアジェンダは、次の4つに渡って推移した。(1)県知事公選問題(1992年)、(2)タムボン自治体創設(1992年1994年)、(3)財政分権(1995年1997年)、そして(4)地方自治制度改革と地方分権計画策定・実施(1997年以降)である。第2に、これらのアジェンダを推進したアクターも、アジェンダ毎に微妙に異なっていた。すなわち、(1)は政党とマスメディア、(2)は政党と内務省及びマスメディア、(3)は官僚機構(特に大蔵省)、そして(4)は知識人及び政党である。(1)と(2)については、アジア経済研究所所蔵のタイ字紙を丹念に追う中で見えてきた。(3)と(4)は、タイ国で当事者に直接インタビューすることによって明らかにできた。これらが可能となったのも、潤沢な出張旅費のおかげである。以上4アジェンダのうち、(1)と(3)は実現せず、(2)と(4)は実現した。その理由は何か。仮説段階だが、次の3点が重要と思われる。第一は、連立政権内部の勢力関係である。(1)は、特定の連立与党政党が総選挙後の党勢退潮を受けて唱え始めたもので、他の連立与党からの支持が得られなかった。内務省も断固反対の立場を貫いた。(2)は、政権与党がほぼ一致して賛成した他、内務省も(1)の場合ほど反対しなかった。(3)は、(1)や(2)と違い、もっぱら財政学者や大蔵省によって主導されたが、地方自治制度に手をつけず、連立政権が毎年変わり、政権与党からの支持が十分得られなかったことが災いした。(4)は、知識人が1997年憲法や1999年地方分権推進法の制定過程に参加し、地方分権を制度的に推進する仕組みを作り上げたうえ、与党政治家の強い支持を受けていたこと(特に1997年2000年)が重要であった。以上の成果のうち、大きな枠組みについては試論的に論文で発表した。また、特に(4)については、いくつかの論文で詳細に検討した。平成14年度は基礎的な資料収集として、(1)アジア経済研究所でのタイ字紙マイクロ・フィルムのコピー作業(1990年1月から1991年7月まで)、及び1997年2002年までのタイ字紙のクリッピング収集作業、(2)「1997年タイ王国憲法の「第9章地方自治」及び「1999年地方分権推進法」の構想及び執筆にかかわった関係者への面談調査、(3)財政分権に関する資料収集及び関係者への面談調査、(4)地方分権が地方の政治に与える影響の現地調査(北部タイを中心に)、以上の作業に従事した。その結果、(1)1991年までマスコミでは地方分権に関する記事はほとんど見当たらず、(2)中央・地方間の経済格差解消や貧困撲滅との関連で収入分散の議論、及びカムナンや村長の任期を5年間に制限する議論が関心を占めており、(3)1992年以降になってから県知事公選やタムボンの法人化・自治体化の議論が出始めており、(4)この間、財政分権化の議論が大蔵省財政政策事務所に存在し、今日まで続いていることが判明した。また、雑誌論文に研究成果の一部を発表した以外に、総合研究開発機構(NIRA)の研究プロジェクト『アジアの地方行政官人材開発支援に関する研究』、国際協力事業団のタイ国別援助会議の報告書、及びアジア経済研究所の研究プロジェクト(『アジアの民主化過程と法』)にも、それぞれ自治体人事行政、タムボン自治体と地方分権の実態、地方分権委員会の機能と役割について原稿を執筆し、平成15年度中に発表される予定である。その理由は何か。

(1)は、特定の連立与党政党が総選挙後の党勢退潮を受けて唱え始めたもので、他の連立与党からの支持が得られなかった。内務省も断固反対の立場を貫いた。(2)は、政権与党がほぼ一致して賛成した他、内務省も(1)の場合ほど反対しなかった。(3)は、(1)や(2)と違い、もっぱら財政学者や大蔵省によって主導されたが、地方自治制度に手をつけず、連立政権が毎年変わり、政権与党からの支持が十分得られなかったことが災いした。(4)は、知識人が1997年憲法や1999年地方分権推進法の制定過程に参加し、地方分権を制度的に推進する仕組みを作り上げたうえ、与党政治家の強い支持を受けていたこと(特に1997年2000年)が重要であった。以上の成果のうち、大きな枠組みについては試論的に論文で発表した。また、特に(4)については、いくつかの論文で詳細に検討した。
遷移金属触媒によるホウ素-ケイ素結合活性化を鍵とする新合成反応

本特定領域研究においては、シリルボランのケイ素ーホウ素結合の遷移金属触媒による活性化を鍵として進行する、新しい触媒的炭素ー炭素結合形成反応の開発を行なった。1.ニッケル触媒によるアルキンの位置選択的二量化シリルホウ素化反応ニッケル2価塩と還元剤から調製した0価ニッケル種を触媒として用いアセチレンとシリルボランとの反応を行なったところ、シリルホウ素化を伴ったアルキンの二量化が進行し、1-シリル-4-ボリル-1,3-ジエン生成物が良好な収率で得られた。興味深いことに、末端アルキンを用いた場合この二量化は位置選択的に進行し、生成可能な4つの位置異性体のうちホウ素がアセチレンの末端炭素に付加した2つの異性体のみを3:1の比で与えた。内部アセチレンを用いた場合、シリルホウ素化二量化反応は末端アセチレンの場合よりも高収率で進行した。2.白金触媒によるアルデヒドと1,3-ジエンの立体選択的シリルホウ素化カップリング反応2,3-ジメチル-1,3-ブタジエンとシリルボランとの反応を白金触媒存在下、ベンズアルデヒドを共存させて行なったところ、シリルホウ素化を伴ったジエンとアルデヒドの立体選択的カップリング反応が進行し、3-ボリルメチル-2,3-ジメチル4-シロキシ-4-フェニルブテンが良好な収率で得られた。この反応は1,3-ブタジエンや1,2-ジメチレンシクロヘキサンを用いた場合にも同様に進行し、対応する生成物を立体選択的に与えた。
看護研究のための統計教育方法の検討-統計解析支援システムの開発-

これまでに実施してきた施設、看護系大学院生及び学生を対象にした調査結果から、今後の看護の専門性に対応した大学院における統計教育のあり方・方法について検討した。すなわち、大学院生に対して、(1)他の関連科目と連携した論理的かつ系統的な思考能力の強化、(2)統計的思考の理解を妨げる段階を明確にするとともにその時点での的確な対処、(3)統計学の基礎的な知識・技術の復習型教育から問題解決型教育への移行、などを骨子とする統計教育のモデルカリキュラムを提案した。それにそって、国内外の統計学書をクリティークした結果も踏まえ、看護系大学院テキストとして、(1)研究課題の選択、(2)情報・文献検索とそれらの結果の吟味、(3)統計的仮説の設定、(4)研究デザインの選択、(5)統計的手法の選択、(6)標本の大きさの決定、(7)研究計画書の作成、(8)倫理審査書類の作成、(9)データの収集、(10)データの入力・変換・蓄積、(11)単純集計結果の吟味、(12)二変量解析の適用、(13)多変量解析の適用、(14)論文の作成、(15)論文の投稿、などの一連の量的研究のプロセスが内容として含まれることが望ましいとの結論を得た。それに対応したテキストを新年度には公表する予定である。以上のような、看護系大学院生のためのモデルカリキュラム及び専門的なテキスト試案をベースに、当初から計画してきた統計的方法を利用したい看護学生・実践者・研究者のために、研究計画から論文の作成までを支援するシステムとして「(仮称)看護研究における統計的方法Q&A」の作成を試み、技術的な問題点なども含めて検討した。その結果、技術的には大きな問題点はなかったものの、看護学生・実践者・研究者の個別の知識・技術・ニーズの多様性に対処するには、未だに十分とはいえず、著作権などの問題も含め、さらに検討する必要があることが明らかになった。本年度は、まず、わが国の看護系大学院における統計学教育の実態を明らかにするため、5つの大学院において教員・施設を対象に調査を実施するとともに、全国看護系大学院を対象にしたインターネットによる情報検索を行った。その結果、統計関連科目開講の状況、授業科目名、担当教員、教育内容、利用している統計ソフト、統計教育のための教育用設備・施設の整備状況等の現状と課題についての概要を把握することができた。そして、統計学担当教員や施設面からの調査に加え、大学院生や看護師の立場からの統計学教育に対する意見や要望等の調査が必要であることが再確認された。この成果を踏まえ、看護大学院生・看護学生・看護師の意見や要望等を広範に得るためのインターネットを活用した調査システムの開発を検討した。次に、わが国の看護統計学書や看護研究において利用されてきた統計学的手法について、先行研究を検討するとともに、内外の看護関連学術雑誌を対象に調査した。その結果、わが国の看護の研究論文において、これまでよく使用されてきた統計学的手法、今後利用が多くなることが予想される統計学的手法が明らかになった。なお、統計学的手法についての記載不備や誤用の問題については、研究者の統計学の知識・技術の不足も否定できないが、看護学における統計学教育の位置付けや具体的な方法論の議論の不足や教師の養成に組織的な努力がなされてこなかったこと等も背景にあり、支援体制やチェック体制など環境整備が必要であることが示唆された。さらに、看護学生・看護師・看護研究者を対象にした内外の代表的な統計学書をクリティークした。そして、看護教育・研究に必要な統計学的手法の例示方法や教授法等について、看護統計解析支援システムの開発のために必要な知見を得た。前年度と本年度に実施した施設及び大学院生を対象にした調査結果を詳細に検討した。その結果,現在の看護系大学院における統計学教育の大学院生側の問題点として,大別すると3つの段階に問題点があることが明らかになった,すなわち,(1)数理的思考を含む量的研究方法そのものの基本的な理解ができていない,(2)因果関係を論じるための基本である2つの変数間の関係の分析方法についての理解ができていない,(3)推測統計の考え方が理解できていない等の問題点である。そこで,統計学教育では,各々,の大学院生がどの段階において理解不足であるかを見極めたうえで,各々に適切な支援プログラムを提供する必要があることが明らかになった。また,こうしたことは,将来大学院生になる可能性がある学部学生,あるいは統計的研究をあまり行っていない指導教員にも共通する問題であることも示唆された。そうした結果も踏まえ,内外の統計学書のクリティーク等を行い検討したところ,研究課題の明確化,研究デザインの選択,データの収集、分析,結果や考察の書き方,論文の投稿にいたる統計的研究方法の一連のプロセスを具体的に学習できる,統計学のテキストが必要であることが再確認され,その製作を行っている。これについては,来年度に公表する予定である。さらに,前述したテキストの内容を電子化することも視野に入れ,看護研究における統計解析支援システム「(仮称)看護研究における統計的方法Q&A」の開発実験を継続した。これについては既存のソフトでも可能であることを確認することができたが,我々がこれまでに地域看護分野において開発してきた「生涯健康手帳」のシステム化の知識、技術が応用できることが明らかになった。

すなわち、大学院生に対して、(1)他の関連科目と連携した論理的かつ系統的な思考能力の強化、(2)統計的思考の理解を妨げる段階を明確にするとともにその時点での的確な対処、(3)統計学の基礎的な知識・技術の復習型教育から問題解決型教育への移行、などを骨子とする統計教育のモデルカリキュラムを提案した。それにそって、国内外の統計学書をクリティークした結果も踏まえ、看護系大学院テキストとして、(1)研究課題の選択、(2)情報・文献検索とそれらの結果の吟味、(3)統計的仮説の設定、(4)研究デザインの選択、(5)統計的手法の選択、(6)標本の大きさの決定、(7)研究計画書の作成、(8)倫理審査書類の作成、(9)データの収集、(10)データの入力・変換・蓄積、(11)単純集計結果の吟味、(12)二変量解析の適用、(13)多変量解析の適用、(14)論文の作成、(15)論文の投稿、などの一連の量的研究のプロセスが内容として含まれることが望ましいとの結論を得た。それに対応したテキストを新年度には公表する予定である。以上のような、看護系大学院生のためのモデルカリキュラム及び専門的なテキスト試案をベースに、当初から計画してきた統計的方法を利用したい看護学生・実践者・研究者のために、研究計画から論文の作成までを支援するシステムとして「(仮称)看護研究における統計的方法Q&A」の作成を試み、技術的な問題点なども含めて検討した。その結果、技術的には大きな問題点はなかったものの、看護学生・実践者・研究者の個別の知識・技術・ニーズの多様性に対処するには、未だに十分とはいえず、著作権などの問題も含め、さらに検討する必要があることが明らかになった。