hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
SPECTによる精神分裂病患者における抗精神病薬のメカニズムに関する研究

この所見は過去に我々が行ったハロペリドールの急性投与(筋注)によるSPECTのrOBF変化に関する研究で、大脳皮質の全般的なrOBFの低下がみられた所見と一致する。今後さらに例数を増やし、個々の脳部位に対するハロペリドールの作用の差違や、それと精神症状との相関の有無についても解析する予定である。目的:未治療の(drug-naive)精神分裂病患者を対象として、種々の抗精神病薬の慢性投与による脳への作用をSPECTによる局所脳血流(rCBF)の変化を指標として探る目的で、今回はハロペリドールの経口投与による作用を検討した。対象と方法:現在までに施行できた未治療の精神分裂病患者は10例(男性4例、女性6例、1930歳、罹病期間310年)で、初診時の精神病像については全例で幻覚・妄想状態(幻聴や奇異な被害関係妄想が主体)がみられた。全例でSPECT検査施行に先立ち、患者本人と保護義務者に研究の主旨を説明し、両者から文書で同意を得た。なおSPECT検査の費用は全額本科研費で負担した。方法は初診日または初診後23日以内でPANSSによる精神症状評価と第1回目の安静覚醒時における^<99m>Tc-HMPAOによるSPECT検査を施行した。その後、ハロペリドール4.5mg/day(症例によっては2.25mg/dayより漸増)、ビペリデン3mg/dayを経口投与し、また症例によっては睡眠薬(主にハルシオン0.25mg/day)を眠前に投与した。これらの眠薬を2週間続けた後、再度PANSSによる精神症状評価と第2回目の安静覚醒時における^<99m>Tc-HMPAOによるSPECT検査を施行した。なお全例にMRI検査を施行した。SPECT画像の解析はMRIとの融合により種々の高さのスライスで左右合計54ヶ所のROIを設定し、rCBFの絶対値を測定した。結果と考察:ハロペリドールの投与前後のSPECTの個々のROIにおけるrCBF絶対値の統計解析(MANOVA)で、投与後のrCBFの有意な減少がみられ、これはとくに両側orbitofrontal cortexで顕著にみられた。(p<0.05)。また右のmiddle or inferior frontal cortexのrCBFと幻覚や妄想との間に有意な相関が見られた(p<0.01)。これらの結果はハロペリドールの脳機能への影響に部位特異性があること、また前頭葉の機能が幻覚や妄想の発現に関係することを示唆する。代表的な定型的抗精神病薬であるhaloperidol(HPD)の抗精神病作用を探る目的で、急性期の幻覚妄想状態にある未投薬の精神分裂病患者12例を対象として、99mTc-HMPA0 SPECTによる局所脳血流(rCBF)に及ぼすHPD(4.5mg/dayの慢性経口投与)の影響を検討した。また健常成人20例と患者群とのrCBF動態の差異についても検討した。結果は以下のごとくであった。1.健常者群とHPD投与前の患者群のrCBFの比較で、左右の上前頭回、中前頭回、帯状回、中側頭回、中心前回、中心後回、下頭頂葉、海馬、視床および左の上側頭回の計19部位で、患者群で健常者群よりもrCBFは有意に増加してみられた。しかし健常者群とHPD投与後の患者群のrCBFの比較では、患者群でrCBFの有意な増加が左右の中心前回と中心後回の4部位でみられただけであった。2.患者群におけるHPDの投与前後のrCBFの比較で、左右の上前頭回、中前頭回、下前頭回、上側頭回、中側頭回および左の島回の計11部位で、HPDの投与後で投与前に比べrCBFは有意に減少してみられた。3.HPD投与前後のPANSSによる精神病症状評価スコアの比較で、投与後、幻覚や妄想から成る陽性症状の有意な改善がみられた。またHPD投与前後のrCBFと精神病症状評価スコアとの間で、右の下前頭回のrCBFと幻覚(主に幻聴)および陽性症状、右の上側頭回のrCBFと妄想、左の視床のrCBFと妄想、左の島回のrCBFと陰性症状、左の視床のrCBFと陰性症状の間で正の相関がみられた。
重粒子線の微視的飛跡シミュレーションコードの研究開発

1.目的モンテカルロシミュレーションによって得られた分子レベルの放射線飛跡構造(電離や励起の微視的空間分布)は放射線影響研究に大きく貢献している。低エネルギー陽子とα粒子について、電荷交換過程と核弾性散乱を取り入れた新世代の重イオン飛跡生成コードを開発した。2.方法0.3MeV/u以下のエネルギーではH^+やHe^<2+>のような裸のイオンとともに、電子捕獲によってH^0あるいはHe^+,He^0のイオンまたは中性原子が共存している。したがってモンテカルロシミュレーションにおいてはこれらすべての粒子に対する電離、励起、電荷交換、弾性散乱の断面積が必要となる。水分子についてのこれらの実験的・理論的断面積を収集・整備し、コードの入力データに用いた。二次電子は自作の電子コードkurbucによって追跡した。生成された飛跡データより、様々な物理量を求め、他のデータと比較し、コードの信頼性を確かめた。3.結果衝突阻止能、核阻止能、飛程、W値の計算値は10%以内の精度でICRUデータと一致した。さらにマイクロドシメトリの見地から重要なパラメータである動径線量分布、制限阻止能、イベントサイズ分布、リニアルエネルギー分布なども飛跡データを解析することによって得られた。いずれも公表されたデータとのよい一致を示した。4.結論新たに開発した低エネルギー陽子コードlephistと低エネルギーα粒子コードleahistは、従来の"track segment code"と異なり、世界的にも初めての"full slowing down code"であり、飛跡構造研究におけるインパクトは大きい。有効エネルギー範囲は陽子が1keV-1MeV、α粒子が1keV-8MeVであるため、とりわけ中性子や環境中重粒子の生物影響メカニズム研究への応用が期待される。物理的段階で生成されたH_2O^+、H_2O^*、e^-は直ちに水分子との化学反応を起こし、その結果OH、H、e_<aq>^-などのラジカルが形成される。今後の課題は、放射線化学過程(ラジカルの拡散や反応)を時間の関数として記述する包括的飛跡構造コードの開発である。1.目的モンテカルロシミュレーションによって得られた分子レベルの放射線飛跡構造(電離や励起の空間分布)は放射線影響研究に大きく貢献している。低エネルギー陽子とα粒子について、電荷交換過程と核弾性散乱を取り入れた新世代の重イオン飛跡生成コードの開発を試みた。水分子についてのこれらの実験的・理論的断面積を収集整理し、コードの入力データに用いた。3.結果衝突阻止能、核阻止能、飛程の計算値は10%の精度でICRU49データ(1993)と一致した。陽子のW値は実験値とよく一致したが、α粒子については信頼できるデータがないため、はっきりした結論は得られていないが、高エネルギーの極限値は陽子のW値とほとんど同じ30.5eVであった。

さらにマイクロドシメトリの見地から重要なパラメータである動径線量分布、制限阻止能、イベントサイズ分布なども飛跡データを解析することによって得られた。いずれも公表されたデータとのよい一致を示した。4.結論新たに開発した低エネルギー陽子コード(LEPHIST)と低エネルギーα粒子コード(LEAHIST)は世界的にも初めてのfull slowing down codeであり、飛跡構造研究におけるインパクトは大きい。これにより、とりわけ中性子や環境中重粒子の生物影響メカニズム研究の進歩が期待される。目的モンテカルロシミュレーションによって得られる分子レベルの放射線飛跡構造は放射線影響研究に大きく貢献している.低エネルギー陽子とα粒子について,電荷交換過程と核弾性散乱を取り入れた新世代の重イオン飛跡生成コードを開発した.方法0.3MeVu^<-1>以下のエネルギーではH^+やHe^<2+>のような裸のイオンとともに,電子捕獲によってH^0あるいはHe^+,He^0のイオンまたは中性原子が共存している.したがってシミュレーションにおいてはこれらすべての粒子に対する電離・励起・電荷交換・核弾性散乱の断面積が必要になる.水分子について可能な限り実験的・理論的断面積をコンパイルし,入力データに用いた.二次電子は自作の電子コードKurbucによって追跡した.生成された飛跡データより,さまざまな物理量を導くことができ,他のデータと比較してコードの信頼性を確かめた.結果衝突阻止能,核阻止能,飛程,W値の計算値は10%以内の精度でICRUデータと一致した.さらにマイクロドシメトリにおいて重要なパラメータである動径線量分布,制限阻止能,イベントサイズ分布,リニアルエネルギー分布なども飛跡データを解析することによって得られた.いずれも公表されたデータとのよい一致を示した.考察と結論新たに開発した低エネルギー陽子コードlephistと低エネルギーα粒子コードleahistは,従来の"track segment code"と異なり,世界的にも初めての"full slowing down code"であり,飛跡構造研究におけるインパクトは大きい.有効エネルギー範囲は陽子が1keV-lMeV,α粒子が1keV-8MeVであるため,とりわけ中性子や環境中あるいは宇宙での重粒子の生物影響メカニズム研究への応用が期待される.物理的段階で生成されたH_2O^+,H_2O^*, e^-は直ちに水分子との化学反応を起こし,その結果OH,H,e_<aq>^-などのラジカルが形成される.今後の課題は放射線化学過程(ラジカルの拡散や反応)を時間の関数として記述する包括的飛跡構造コードの開発である.
スピン偏極原子の光近接場相互作用における量子光学効果の研究

誘電体表面でのレーザー光の全反射で作られる、横電場モードエバネッセント波の合成によって形成される格子状局所的回転電場により、誘電体表面近傍の冷却Cs原子団の二次元スピン偏極パターンを形成し、その放射特性のスピン依存性を詳細に調べ、光近接場における広義の共振器量子電気力学効果が、原子と放射場の近接場相互作用における角運度量選択則やパリディー保存にもたらす質的な変化を解明することを目的として,実験研究と理論研究を密接に関連させて研究を遂行した。実験研究では、本研究で初めて誘電体表面の法線を軸とする局所回転電場格子をなす光近接場を発生させうることを実証しその(1)光学装置と、(2)二次元原子格子からの極微弱散乱光検出系、(3)蛍光面付マイクロチャンネルプレートと冷却CCDカメラを併用した観測系を持つ、レーザーCs冷却原子団のスピン偏極格子状配列生成装置、(4)静電レンズによる生成イオン誘導装置、(5)光近接場偏極格子による偏極効率を十分な信号強度で計測可能な原子冷却装置を組み合わせ、全近接場光による共鳴イオン化顕微分析特性の計測を行うとともに、イオン収束特性およびマイクロチャンネルプレートによる解像度などの諸特性の計測に基づく、装置完成に向けての新技術開発を行い、スピン偏極原子の二次元格子生成・観測の技術開発を推し進めた。同時に光近接場におけるFM雑音分光法を確立した。理論研究では、近接場相互作用のトンネル描像に基づく第二量子化理論の枠組みを開発し、散逸系に対して詳細に評価し、近接場における多重極放射のアンギュラースペクトル展開の基礎理論の全体を構築し終えるとともに、光近接場における散逸過程が励起移動およびスピン転移に対して果たす役割の重要性を明らかにする計算結果を導いた。これらの結果から、ナノデバイスの電気信号伝達機能の素過程の評価等、応用上も極めて重要な結果を得た。表面近傍での自然放出におけるスピンに依存する遷移の選択則の変調効果の解析に基づき、スピン偏極原子格子の量子光学的振る舞いについて研究し、その性質を明らかにするとともに、表面スピンデバイスとの融合領域に研究を展開した。エバネッセント波レーザー光の合成によって形成される、格子状に並んだ局所的回転電場によって、冷却CS原子団の光ポンピングにより二次元スピン偏極パターンを形成し、放射特性のスピン依存性を含む光近接場における共振器量子電気力学効果として、角運度量選択則やパリティー保存の質的な変化を解明するための基礎技術開発と理論研究を行った。実験研究では、表面の法線を軸とする局所回転電場パターンを持つ光近接場の存在とその周期性を明らかにするため、微小球および先鋭化光ファイバープローブを用い、フェムトワットレベルの極微弱散乱光偏光解析装置を開発し、初めて完全に光近接場の編極状態の特殊な性質を明らかにし、また二次元原子格子からの散乱光検出系を確立した。さらに、蛍光面付マイクロチャンネルプレートと冷却CCDカメラを併用した観測系を持つ、レーザーCs冷却原子団のスピン偏極格子状配列生成装置を構築し、近接場光共鳴イオン化顕微分析技術の基礎研究を行った。さらに,近接場偏極格子による偏極効率を+分な信号強度で計測するために、冷却原子誘導光学系の開発と、定在波レーザー光ポンピングによる、縞状超微細準位空間パターン生成技術の開発を進めている。局所スピン分析の補助手段として光近接場におけるFM雑音分光法を確立し、非線形光分解分光に成功した。

理論研究では、検出器モードによるエバネッセント波を含む電磁場の第二量子化と、アンギュラースペクトル表現による多重極放射の量子光学的な取り扱いを拡張し、表面での多重散乱過程を励起のトンネルとして捕らえるナノフォトニクス的な取扱いを確立した。原子準位のミキシングの理論的評価と、表面近傍での自然放出におけるスピンに依存する遷移の選択則の変調効果解析を進めている。エバネッセント波レーザー光の合成によって形成される格子状局所的回転電場により、誘電体表面近傍の冷却Cs原子団の二次元スピン偏極パターンを形成し、その放射特性のスピン依存性を詳細に調べ、光近接場における広義の共振器量子電気力学効果が、原子と放射場の近接場相互作用における角運度量選択則やパリティー保存にもたらす質的な変化を解明することを目的として、実験研究と理論研究を並列して行った。実験研究では、前年度に存在を実証した表面の法線を軸とする局所回転電場格子をなす(1)光近接場を発生させる光学装置と、これまでに製作を進めてきた、(2)二次元原子格子からの極微弱散乱光検出系、(3)蛍光面付マイクロチャンネルプレートと冷却CCDカメラを併用した観測系を持つ、レーザーCs冷却原子団のスピン偏極格子状配列生成装置に、(4)静電レンズによる生成イオン誘導装置を設計製作して組み込み、近接場光共鳴イオン化顕微分析に必要なイオン収束特性およびマイクロチャンネルプレートによる解像度などの諸特性を測定した。これに基づいて装置完成に向けての技術的考察を行った。さらに、(5)光近接場偏極格子による偏極効率を十分な信号強度で計測可能な、改良型原子冷却装置を製作するとともに、原子誘導光学系による感度の向上を検討し、最終的に定在波レーザー光ポンピングによる、縞状のスピン編極原子の二次元格子生成・観測の技術開発を推し進めた。理論研究では、近接場相互作用をトンネル現象として記述する理論的枠組みを構築するとともに、表面での多重散乱と原子準位のミキシングを理論的に評価し、表面近傍での自然放出におけるスピンに依存する遷移の選択則の変調効果を解析した。誘電体表面でのレーザー光の全反射で作られる、横電場モードエバネッセント波の合成によって形成される格子状局所的回転電場により、誘電体表面近傍の冷却Cs原子団の二次元スピン偏極パターンを形成し、その放射特性のスピン依存性を詳細に調べ、光近接場における広義の共振器量子電気力学効果が、原子と放射場の近接場相互作用における角運度量選択則やパリティー保存にもたらす質的な変化を解明することを目的として,実験研究と理論研究を密接に関連させて研究を遂行した。実験研究では、本研究で初めて存在を実証した、誘電体表面の法線を軸とする局所回転電場格子をなす光近接場を発生させる(1)光学装置と、(2)二次元原子格子からの極微弱散乱光検出系、(3)蛍光面付マイクロチャンネルプレートと冷却CCDカメラを併用した観測系を持つ、レーザーCs冷却原子団のスピン偏極格子状
鳥類骨格筋グルコース輸送支配遺伝子群の特性解析 -食肉生産の制御基盤-

家禽における特異的なグルコース代謝は、調節蛋白質であるGLUT(グルコースの細胞内への取り込み)や解糖系酵素(ヘキソキナーゼ(HK)の特異性に依存していると推測されている。そこで本研究では、鶏骨格筋細胞の増殖・分化をグルコース輸送系遺伝子群の制御により調節し、新たな食肉生産の基盤とすることを試みた。(1)インスリン誘導性糖取り込み活性化状態における解糖系酵素遺伝子群の発現推移鶏骨格筋細胞でインスリン添加条件下におけるグルコース輸送調節蛋白質遺伝子発現変動を観察したところ、GLUT1およびHKII遺伝子発現がインスリン添加濃度依存的に増加していた。(2)siRNAによるGLUT1およびHKII遺伝子抑制条件下における筋分化関連因子の遺伝子発現GLUT1およびHKIIのsiRNAを導入して、各遺伝子を約70%以上ノックダウンした細胞における骨格筋分化関連因子の遺伝子発現を検討したところ、IGF-I、Myogenein、MyoDのいずれの分化促進遺伝子発現も低下していた。よって、鶏骨格筋の分化を調節するには、糖代謝関連因子、特にGLUT1とHKIIの調節が有効であることが明らかとなった。(3)低血糖初生ヒナを用いたin vivoグルコース輸送系活性化骨格筋の発達に対する作用初生ヒナにインスリン、あるいはトルブタミドを投与し、骨格筋へのグルコース輸送を一時的に増加させた場合、筋衛星細胞のマーカー遺伝子であるPAX7の発現が、対照区の生理食塩水投与区に比べ、3日齢で亢進した。(4)絶食あるいはプレスターター飼料を用いた初生ヒナの骨格筋発達に対する作用よって本試験により、「グルコース輸送系の制御」→「筋細胞の増殖・分化の制御」を明示することができた。(4)絶食あるいはプレスターター飼料を用いた初生ヒナの骨格筋発達に対する作用Early post hatchfeedを給与したヒナでは、体重、骨格筋重量ともに対照区に比べ有意に大きく、骨格筋のIGF-I発現が上昇、Myostatin発現が低下していた。よって本試験により、「グルコース輸送系の制御」→「筋細胞の増殖・分化の制御」を明示することができた。家禽類の特異的なグルコース代謝は、調節蛋白質であるGLUT(グルコースの細胞内への取り込み)や解糖系酵素(ヘキソキナーゼ(HK))の特異性に依存していると推測されている。そこで本研究では、鶏骨格筋細胞の増殖・分化をグルコース輸送系遺伝子群の制御により調節し、新たな食肉生産の基盤とすることを試みる。本年度は、グルコース輸送が活性化した状態の骨格筋細胞培養系を構築し、グルコース輸送調節蛋白質の遺伝子発現および筋分化関連遺伝子発現変動を観察するとともに、鶏骨格筋細胞のGLUT1およびHKIIをノックダウンさせた状態における筋分化関連因子の発現変動を調査することを試みた。(1)インスリン誘導性糖取り込み活性化状態における筋分化および解糖系酵素遺伝子群の発現推移2日齢のブロイラー骨格筋(浅胸筋)より単離した筋衛星細胞を、成熟した筋管が形成したステージまで培養して、試験を行った。まず、インスリンを0.25μg/mlの濃度で培養培地に添加して、非代謝性グルコースである2-Deoxyglucoseの取り込みがインスリン添加濃度依存的に増加する培養実験系を構築した。次いで、インスリン添加条件下におけるグルコース輸送調節蛋白質遺伝子発現変動を観察したところ、GLUT1およびHKII遺伝子発現がインスリン添加濃度依存的に増加していた。さらに、筋分化関連因子であるIGF-Iおよびミオスタチン(MYSN)の遺伝子発現が、インスリン添加濃度依存的に増加する傾向が認められた。すなわち、GLUT1およびHKIIによる骨格筋細胞のグルコース輸送能の活性化が、鶏骨格筋分化と関連がある可能性が示唆された。(2)siRNAによるGLUT1およびHKII遺伝子抑制条件下における筋分化関連因子の遺伝子発現まず、鶏骨格筋細胞におけるsiRNA導入の最適条件を検討し、FITCラベルプローブを効率よく取り込む条件を確立した。

次に、GLUT1およびHKIIのsiRNAを導入して、各遺伝子を約70%以上ノックダウンした細胞における骨格筋分化関連因子の遺伝子発現を検討した。その結果、IGF-I、Myogenein、MyoDのいずれの分化促進遺伝子発現も低下していた。よって、鶏骨格筋の分化を調節するには、糖代謝関連因子、特にGLUT1とHKIIの調節が、有効な手法の一つであることが明らかとなった。本研究では、鶏骨格筋細胞の増殖・分化をグルコース輸送系遺伝子群の制御により調節し、新たな食肉生産の基盤とすることを試みた。本年度は、骨格筋細胞の増殖が著しいin vivo初期成長期のヒナでグルコース輸送系を制御する手法を構築し、新たな食肉生産向上技術の実用化へ向けてのアプローチを試みる。(1)低血糖初生ヒナを用いたin vivoグルコース輸送系活性化骨格筋の発達に対する作用初生ヒナの腹腔内にインスリンを投与し、骨格筋へのグルコース輸送を増加させた場合の骨格筋重量・分化制御因子発現(Myo D, Myogenin, IGF)の変動を経日的に観察した。初生ヒナへのインスリン投与により、筋衛星細胞のマーカー遺伝子であるPAX7の発現が、対照区の生理食塩水投与区に比べ、3日齢で亢進した。よって、インスリンによる初生ヒナの骨格筋へのグルコース輸送の亢進は、骨格筋細胞の増殖を促進する可能性が示唆された。(2)サルファ剤投与ヒナ用いたin vivoグルコース輸送系活性化骨格筋の発達に対する作用前試験と同様に、初生ヒナに内因性のインスリンを分泌させるトルブタミドを経口投与した。その結果、骨格筋の細胞増殖や7日齢の体重、浅胸筋重量が、対照区のヒナに比べて有意に増加した。(3)絶食あるいはプレスターター飼料を用いた初生ヒナの骨格筋発達に対する作用細胞増殖が著しい初生ヒナの骨格筋にエネルギー基質を効率よく供給するための一つの手法であるearly posthatchfeedを適用した。Eafly posthatchfeedを給与したヒナでは、体重、骨格筋重量ともに対照区に比べ有意に大きく、骨格筋のIGF-I発現が上昇、Myostatin発現が低下していた。よって本試験により、「グルコース輸送系の制御」→「筋細胞の増殖・分化の制御」を明示することができた。
RhoのターゲットとしてのCD44ERM-アクチンシステム

低分子量GTP結合蛋白質のうち、rhoは、細胞接着やストレスファイバー/分裂溝の形成に関わっていることから、アクチンフィラメントと細胞膜の結合部位がそのターゲットではないかと推測されている。しかし、アクチンフィラメントと細胞膜の結合部位の基本的な分子構築に関する我々の理解が浅かったために、rhoのアクチン系への作用メカニズムに関しては解析がなかなか進まなかった。我々は、アクチンフィラメントと細胞膜の結合のための基本ユニットとして、上述のCD44-ERM-アクチンシステムを同定し、そこにrhoGDIが存在する事を見いだした。したがって、このシステムがrhoの直接のターゲットとなっている可能性が高い。本研究は、CD44とERMの結合およびERMとアクチンの結合にrhoがどのような影響を及ぼすかについてin vivoとin vitroの両面からアプローチした。作業仮説としては、CD44とERMの結合、または、ERMとアクチンフィラメントの結合が、rhoによって制御されていると考えた。このことを証明するためには、まず、in vitroでこれらの結合を測定できるシステムを構築する事が必要である。そのために:(1)エズリン、ラディキシン、モエシンをそれぞれバキュロウイルスの系を用いて、大量発現させ、精製した。(2)CD44の細胞質領域とGSTの融合蛋白質を大腸菌で作らせた。(3)グルタチオンカラムを用いて、GST-CD44とリコンビナントERMとの結合を測定する系を構築した。(4)アクチンフィラメントとリコンビナントERMとの結合を、やはり、in vitroで検出する系を確立した。このようにして確立したCD44とERM、およびERMとアクチンフィラメントの結合のアッセイ系を用いて、これらの結合に対するrhoの影響を調べた。(1)rhoとしては、大阪大学高井義美教授から頂いたリコンビナントを用いた。(2)rhoをGTP-γS、およびGDP存在下で、上記のアッセイ系に加え、GTPの状態によってrhoの影響に変化があるかを調べた。
離島に居住する独居高齢者の"生活の術"～大腿骨骨折術後の後期高齢者～

離島に居住する独居高齢者は、猛暑や台風という厳しい自然環境下での生活を受容し、海上にある島嶼性故に家族と離れざるを得ない境遇にありながらも、継続して働き続けることを誇りにしていた。また祖先崇拝をはじめ、自らに適した様々な土着信仰を信心することで自らを慰めて心のより所を得ていた。そして、シマ社会という地縁・血縁を基盤とした相互扶助ネットワークを用いながら、しがらみを見極めた交際を巧みに行っていた。また、男性後期高齢者の"生活の術"は、祖先崇拝による精神的基盤、出来る限り頼りたくない思いと自尊心であることが明らかになった。本研究では、離島で独居生活をする大腿骨骨折術後の後期高齢者における、"生活の術"を明らかにすることを目的とした。研究方法は、情報提供者自宅に通い、又は宿泊にて寝食を共にし、エスノグラフィーの手法を用いて参加観察とインタビューにより平常時の暮らしぶりの情報を収集した。研究期間は平成21年22年度の2年間。情報提供者は、A島B市に居住する大腿骨骨折術後の1)女性独居後期高齢者8名、2)男性独居高齢者2名で、術後経過順調な方(ADL及び自立歩行が回復過程にある方)とし、認知症状のある方は除外対象とした。その結果、離島に居住する大腿骨骨折術後の女性後期高齢者の"生活の術"は、以下のように8つの大カテゴリーと24の中カテゴリー、70の小カテゴリーが抽出された。以下に8つの大カテゴリーを記述する。1)逆らえない南国の自然を受容、2)ひとり身の境遇で自らを鼓舞しつつ選んだ生活、3)継続して働くことが誇り、4)旅に出ている家族による精神的支えと経済的支え、5)多くの信仰から今の自分に合ったものを選択、6)生活を補完する公的支援を見極めて利用、7)互酬性が根付いている土壌、8)しがらみのあるシマ社会。以上より、離島に居住する独居高齢者は、猛暑や台風という厳しい自然環境下での生活を受容し、海上にある島嶼性故に家族と離れざるを得ない境遇にありながらも、継続して働き続けることを誇りにしていた。
基質特異的阻害剤をツールとするグリコシダーゼの生物有機化学的研究

本研究は、グリコシダーゼ研究のあらかる段階で有用な「化学的ツール」となる特異的な阻害剤を開発し、それを用いてグリコシダーゼに関する汎用的な研究手法を確立することを目的としたものである。これまでの研究により、保護基を使わず糖がら2段階で合成できるβ-グリコシルアミジン誘導体が、基質の構造を忠実に再現しながら、グリコシダーゼの触媒する反応の遷移状態の特徴である正電荷を組み込んだ「遷移状態:基質アナログ複合型」グリコーシダーゼ阻害剤として作用し、対応するグリコン基質特異性をもつβ-グリコシダーゼを、選択的にかつ強力に阻害する活性を有することを見いだし、その合成展開を行ってきた。本年度は、酵素のアグリコン基質特異性を利用して阻害の選択性をさらに向上させ、個々の酵素に応じた阻害剤をテーラーメードに開発する手法の確立を目指し、アグリコン部に種々のアルキル置換基および水素結合に関与する官能基を有するβ-グルコシルアミジン誘導体を多数合成し、オリジンおよびfamilyの異なるβ-グルコシダーゼに対する阻害活性を調べた。その結果、水素結合を形成するアグリコン部をもつ阻害剤が、きわめて強い阻害活性を示し、酵素のアグリコン基質特異性を阻害の選択性に反映させることができることを示した。また、酵素のグリコン基質特異性に応じた高い選択的阻害活性をもつことに着目し、β-グリコシルアミジン誘導体をリガンドとするアフィニティー吸着体を作製したところ、予想通り、対応するグリコン基質特異性をもった酵素を特異的に吸着、粗酵素抽出液から1段階で電気泳動的に単一の精製酵素を得ることに成功した。また、得られた酵素のアミノ酸配列から、当該酵素のクローニングにも成功した。この結果、β-グリコシダーゼのグリコン部の基質特異性を唯一の指標として、未知のグリコシダーゼをテーラーメードに単離し、その遺伝子をクローニングするまでの一連の研究を可能にする化学的ツールが確立できた。本年度は、糖部分をグルコシルに固定し、さまざまなアルキルあるいはアリール基をアグリコン部分をもつ一連のβ-グルコシルアミジン誘導体を13種類合成し、グリコン基質特異性および立体特異性の異なる10種類のグリコシダーゼに対する阻害活性を調べた。その結果、単純なアルキルあるいはアリール基をもつβ-グルコシルアミジシは、一様に、カビ由来のβ-glucosidaseに対し強い阻害活性を示し、阻害定数(Ki)にして0.1μM以下の値が得られた。一方、異なる酵素ファミリーに属しアグリコン部の基質特異性が異なるアーモンドのβ-glucosidaseに対しては、アミジンのアグリコン部に導入した構造によって阻害活性に大きな違いが見られ、カビ由来の酵素との選択性は10^6倍にのぼった。アーモンド由来の酵素について、本酵素のアグリコン基質特異性に対応して、アリール基をもつグルコシルアミジンによって強く阻害される傾向が見られたことから、β-グルコシルアミジンは、グリコンのみならず、アグリコン部に対する酵素の結合にもとづき、阻害の選択性を自由にデザインできるユニークな阻害剤であることが示された。一方、β-グルコシルアミジンをリガンドとしてアフィニティー吸着体を作製したところ、チャ葉から抽出したきわめて純度の低い粗酵素液から、1ステップで、ほぼ純粋のβ-glucosidaseをアフィニティー精製することに成功した。同様に、β-ガラクトシルアミジンをリガンドとするアフィニティー吸着体を作製し、カビ由来のβ-galactosidaseをクロマトしたところ、これも1段階で、ほぼ純粋のβ-galactosidaseが得られた。

一方、β-glucosidaseはβ-ガラクトシルアミジンをリガンドとするカラムに全く吸着せず、同様に、β-galactosidaseはβ-グルコシルアミジンをリガンドとするカラムに全く吸着されなかった。このことは、グリコシルアミジンが酵素のグリコン部基質特異性ときわめてよく対応した選択的なリガンドとして機能していることを示している。さらに、本研究で作製したアフィニティー吸着体は、共通の担体、スペーサーの先端に、ワンポットで、望む構造のリガンド(グリコシルアミジン)をカセットのごとく導入できるため、簡便な操作で狙った酵素だけを釣り上げることのできるテーラーメードのアフィニティー吸着体として有用である。本研究は、きわめて選択的で強力なグリコシダーゼの阻害剤として、本申請者らが開発したグリコシルアミジン誘導体について、その合成的展開と、グリコシダーゼ研究におけるツールとしての応用を目的としたものである。本年度の研究成果は以下のとおりである。1.酵素のアグリコン部の基質特異性に応じた選択的なグリコシダーゼ阻害剤をテーラーメードに得るため、グリコン部分をglucosylに固定し、アグリコン部にさまざまな構造をもったβ-glucosylamidine誘導体を合成した。そして、アグリコン部に対し高い基質特異性を有するいくつかのβ-グルコシダーゼに対して、その阻害活性を測定した。その結果、アグリコン部に芳香環を好む一連のβ-グルコシダーゼは、アグリコン部に芳香環を有するβ-glucosylamidine誘導体によって強く阻害され、アグリコン部の基質特異性に応じた選択的な阻害が見られた。2.α-グリコシダーゼに対し選択的に作用する阻害剤を得るべく、グルコースから4段階で得られるα-アジドを、PPh_3で処理することにより、2位の水酸基と1位がα配置で環状イミドを形成したオキサゾリン誘導体を高収率で得ることに成功した。この中間体を鍵として、アミンを反応させることにより、α-グルコシルアミジシを合成するルートが開けつつある。3.ファミリー18および20に属するN-アセチルヘキソサミニダーゼやキチナーゼは、他のグリコシダーゼと異なり、2位のN-アセチル基の分子内アシストにより、環状オキサゾリンを中間体として反応を触媒する。これらの酵素に対しては、従来型のグルコシルアミジンはほとんど阻害作用を示さないことを見いだし、これが反応機構の違いを反映したものであると考え、酵素反応の中間体に類似した構造の、環状アミジンの合成に着手した。グルコサミンから5段階で保護基のついた環状グルコシルアミジンを合成し、現在、合成の最終ステップを行っている。化合物が得られたら、ファミリー18および20の酵素についての阻害活性を調べ、反応機構と阻害剤の設計についての知見を得る予定である。4.β-グルコシルアミジンをリガンドとするアフィニティー吸着体を作製し、茶葉から抽出した粗酵素を流すことにより、ワンステップで、2種類のβ-グルコシダーゼを単一にまで精製した。得られた酵素のアミノ酸配列から、それら2種の酵素をコードする遺伝子をクローニングすることに成功し、アミノ酸配列から、ファミリー3に属する、グルカンヒドロラーゼの一種であることを突きとめた。
高圧下でのアルカリ土類金属銅酸化物の合成

本研究の主な目的は、高圧合成法を用い、アルカリ土類金属-銅酸化物系において、新しい構造や物性が期待される化合物を合成することにあった。研究の初期において、ランタン-ストロンチウム-銅酸化物系において、新しい化合物La_<1-x>Sr_xCuO_<2.5>が合成できることを見出し、圧力6万気圧、温度9001000°Cの合成条件で単相の多結晶試料を得ることに成功した。X線回折、電子線回折実験とその解析により、試料の結晶構造を決定し、この化合物が銅と酸素がはしご状に並んだ擬1次元構造を持つことを示した。同様のはしご格子は、最近、理論により、特異な物性と特に新しい超伝導を示しうることが指摘されており、実験面でも大きな注目を浴びている。例えば、SrCu_2O_3は、低温で理論的に予測されたように、400K程度の大きさのスピンギャップを有することが確立されている。しかし、これまでに知られているはしご化合物では、超伝導性を得るために必要と指摘されている伝導キャリアの導入が困難であったため、その確認がなされなかった。本実験で発見されたLa_<1-x>Sr_xCuO_<2.5>では、ストロンチウムの量によってキャリア濃度を調整することができ、キャリア量増加に伴う絶縁体-金属転移が観測された。しかしながら、超伝導性を確認するには至らなかった。今後の研究において、その原因を明らかにすることで、さらに新しいはしご化合物合成の指針が得られるものと期待される。
パーキンソン病発症機構における核内受容体Nurr1の機能解析

パーキンソン病(PD)は、65歳以上の1%が発症しているとされ、振戦などの運動障害を主徴とする進行性神経変性疾患である。PDの病理学的特徴として、中脳ドーパミンニューロンの脱落変性が挙げられる。近年、あるパーキンソン病家系において、核内受容体Nurr1遺伝子上に変異があることが報告された。本研究では、生後脳における中脳ドーパミンニューロンの機能維持・生存へのNurr1の機能を明らかにすることで、Nurr1機能異常とPD発症との関係を明らかにし、新たなPD発症機構の解明を行うことを目的とした。生後脳でのNurr1遺伝子の機能解析を行うため、Cre-loxPシステムによる時期・部位特異的にNurr1遺伝子をノックアウトする手法を用いることにした(Nurr1^<flox/flox>マウス)。これまでの解析により、成体Nurr1^<flox/flox>マウスの黒質緻密部へAAV2-Cre投与を行いNurr1遺伝子破壊により、ドーパミン生合成律速酵素であるチロシン水酸化酵素(TH)の発現減少が観察された。また、複数の個体においてはドーパミンニューロン自体の消失が観察された。定量的解析により、AAV2-Cre投与後6週間でドーパミン量の有意な減少が、また中脳腹側部位においてTH陽性細胞の有意な減少が明らかとなった。本研究結果により、Nurr1は中脳ドーパミンニューロンの機能維持だけでなく、その生存維持にも必須であり、Nurr1発現量減少がパーキンソン病発症へと繋がる可能性を示唆することができると考えられる。現在は論文投稿に向け、準備を進めている。近年、統合失調症患者の前頭前野において、Nurr1、およびそのサブファミリーであるNGFI-BのmRNA量が減少していることが報告された。当研究室では、上記と同様の手法を用いてNurr1^<flox/flox>・NGFI-B^<flox/flox>マウスを作成し、成体マウスの前頭前野におけるこれら遺伝子の機能解析を行った。現在、AAV-Cre投与4週間後に前頭前野投与側および非投与側を採材し、二次元電気泳動法により、タンパク質の発現へ及ぼす影響を網羅的に解析している。Nurr1ホモノックアウトマウス(Nurr1^<-/->マウス)の解析により、Nurr1が中脳ドーパミンニューロンの発生過程において必須であることが明らかとなっているが、Nurr1^<-/->マウスは生後すぐに死亡してしまうため、生後脳での解析は不可能であった。

定量的解析により、AAV2-Cre投与後6週間でドーパミン量の有意な減少が、また中脳腹側部位においてTH陽性細胞の有意な減少が明らかとなった。本研究結果により、Nurr1は中脳ドーパミンニューロンの機能維持だけでなく、その生存維持にも必須であり、Nurr1発現量減少がパーキンソン病発症へと繋がる可能性を示唆することができると考えられる。現在は論文投稿に向け、準備を進めている。近年、統合失調症患者の前頭前野において、Nurr1、およびそのサブファミリーであるNGFI-BのmRNA量が減少していることが報告された。当研究室では、上記と同様の手法を用いてNurr1^<flox/flox>・NGFI-B^<flox/flox>マウスを作成し、成体マウスの前頭前野におけるこれら遺伝子の機能解析を行った。現在、AAV-Cre投与4週間後に前頭前野投与側および非投与側を採材し、二次元電気泳動法により、タンパク質の発現へ及ぼす影響を網羅的に解析している。
内臓脂肪組織における免疫システムの改善を介した食品成分の食餌性肥満軽減機構の解明

食餌性肥満の内臓組織における免疫細胞の増加や活性化が生活習慣病への進行を促進することが明らかになっている。本研究では、ケルセチンを高脂肪、高ショ糖、コレステロール食である西洋型食に添加してマウスに摂取させることにより、ケルセチンが精巣周囲脂肪組織への免疫細胞の増加と活性化を抑制することを明らかにした。DNAマイクロアレイ解析、RT-PCR及び組織染色等の結果から、ケルセチンは西洋型食で誘導されるマクロファージ、T細胞等の免疫細胞の増加や活性化を広く抑制すると共に、CD4+/CD8+ T細胞のバランスを改善し、炎症に関わるTNFα等の発現を抑制して、脂肪組織の炎症を抑制すると考えられた。コントロール食、西洋型食(高脂肪、高コレステロール、高ショ糖食)またはケルセチン添加西洋型食を18週間摂取させたマウスの精巣周囲脂肪組織の遺伝子発現をDNAマイクロアレイを用いて解析した。その結果、西洋型及びケルセチンにより免疫及び炎症に関わる多くの遺伝子発現が有意に変動することが明らかになった。西洋型食は、マクロファージや単球、顆粒球の遊走、増殖、活性化等に関わる遺伝子発現を増加させた他、T細胞の活性化、マスト細胞の接着性、B細胞の量に関わる遺伝子発現を増加させた。ケルセチンは、このうちマクロファージの遊走、増殖、活性化に関わる遺伝子発現及び、T細胞の活性化やB細胞の量等に関わる遺伝子発現を有意に抑制した。そこで、RT-PCR法により、マクロファージに関連する遺伝子発現を測定した結果、ケルセチンは西洋型食で誘導されるF4/80、Cd11c及びMCP-1の発現を有意に抑制することが明らかになった。また炎症を抑制するM2マクロファージのマーカーであるCD206の発現も西洋型食で誘導され、ケルセチンで抑制された。一方、T細胞のマーカーであるCD3及びCD4の有意な発現変化は認められなかった。そこで、マクロファージのマーカーであるF4/80で脂肪組織を染色した結果、西洋型食によるマクロファージの増加を、ケルセチンが有意に抑制することが明らかになった。これらのことから、ケルセチンは主として脂肪組織におけるマクロファージの浸潤・増加を抑制すると考えられた。肥満による高血糖と免疫システムとの関係を明らかにするため、グルコースがHMC-1及びLAD2ヒトマスト細胞に及ぼす影響を検討した結果、グルコースは、HMC-1細胞において炎症性サイトカインであるTNFα、IL-1β及びIL-6等の発現を誘導し、またLAD2細胞においてTNFαの産生や脱顆粒を促進して、ヒトマスト細胞の活性化を誘導することが明らかになった。また一方、これまでの研究から高脂肪食が脂肪組織において免疫及び炎症に関わるサイトカイン等の遺伝子発現を誘導することが示唆された。そこで、フラボノイドのケルセチンの内臓脂肪組織における免疫システム改善効果を明らかにするため、高脂肪、高コレステロール、高脂肪食である西洋型食にケルセチンを添加してマウスに20週間自由摂取させ、精巣周囲脂肪組織の遺伝子発現をRT-PCR法を用いて測定した結果、ケルセチンは西洋型で誘導されるTNFα及びアディポサイトカインであるレプチンの発現を抑制することが明らかになった。さらにケルセチンは西洋型食で誘導されるTNFα及びレプチンの血中濃度の上昇を抑制した。そこで現在、西洋型食及びケルセチンがその他のサイトカイン等の発現に及ぼす影響を検討している。また、西洋型食にケルセチンを添加してマウスに20週間自由摂取させた後、精巣周囲脂肪組織より免疫担当細胞を含む間質血管細胞群を採取してフローサイトメーターを用いてT細胞バランスを測定したが、西洋型食及びケルセチンによるT細胞バランスの変化は認められず、西洋型食がT細胞バランスに及ぼす影響は少ないことが示唆された。コントロール食、西洋型食またはケルセチン添加西洋型食を18週間摂取させたマウスの精巣周囲組織の間質血管細胞をT細胞、ヘルパーT細胞及び細胞障害性T細胞のマーカーであるCD3、CD4及びCD8の抗体で染色し、フローサイトメーターを用いて測定した結果、西洋型食摂取によるCD4+細胞の割合の低下が、ケルセチンにより抑制されることが明らかになった。このようにケルセチンはマクロファージの活性化等に関わるCD8+T細胞の割合を低下させたが、RT-PCRを用いた遺伝子発現解析では、西洋型食により炎症に対する抑制性サイトカインであるIL10の発現が誘導され、ケルセチンにより抑制されること等も明らかになった。DNAマイクロアレイを用いた遺伝子発現の網羅解析の結果等から、ケルセチンは西洋型食で誘導されるマクロファージ、T細胞、マスト細胞等の免疫細胞の増加や活性化を抑制すると共に、TNFα及びIFNγを介する作用を広く抑制すると考えられる。遺伝子発現の網羅解析の結果は、ケルセチンは特にフリーラジカル消去能が強いことを示していた。

脂肪組織の免疫細胞に対して有効なケルセチン量を検討するため、脂肪組織のケルセチン及びその代謝産物の含量を測定した結果、0.05%ケルセチン含有西洋型食を18週間摂取したマウスの脂肪組織のケルセチン及びケルセチン代謝産物量は極めて少なく、ケルセチンは主として活性酸素種の除去等を介して、免疫細胞の増加や活性化を抑制すると考えられた。食品機能DNAマイクロアレイを用いた遺伝子発現解析により、西洋型食で誘導され、ケルセチンで抑制される多くの免疫、炎症関連遺伝子を明らかにすると共に、組織染色によりケルセチンが主としてマクロファージの増加を抑制することを明らかにできたため。計画に従い、ケルセチンが内臓脂肪組織の免疫、炎症関連遺伝子の発現変化に及ぼす影響を検討したが、数回にわたり食餌性肥満モデルの再現性を確認したため、現在も測定が継続中であるため、また西洋型食によるT細胞バランスの変化とケルセチンによるその抑制効果を予想して研究を行ったが、これらの変化が認められなかったため。平成26年度はケルセチンのマスト細胞及びCD8+エフェクターT細胞の活性化に及ぼす影響を検討する予定であったが、H25年度までの結果から、ケルセチンは主として脂肪組織でのマクロファージの増加を抑制し、T細胞バランスやマスト細胞への影響はより少ないと考えられた。そこで、平成26年度はフローサイトメーター及び組織染色等によりケルセチンが内臓脂肪組織中のT細胞及びマスト細胞に及ぼす影響を明らかにし、それらの結果に基づいて、初代培養細胞等を用いて作用機構を明らかにすることとする。H24年度に続き、ケルセチンが内臓脂肪組織の免疫、炎症関連遺伝子の発現変化に及ぼす影響をRT-PCRまたはDNAマイクロアレイを用いて検討することにより、西洋型食による免疫システムの変化とケルセチンによる抑制効果及びその特徴を明らかにし、その結果に基づいて、ケルセチンの内臓脂肪組織における免疫システム改善効果及びその作用機構を明らかにする。また、合わせてケルセチンのマスト細胞活性化抑制効果を検討する。本研究課題の推進のため、次年度の研究費は交付申請時の計画通り使用する。
ポートフォリオを活用した親子で学ぶ性教育プログラムの開発

わが国の子育て期にある親が、子どもから受ける性の質問に対して満足に対応できない現状がある。そこで、本研究は幼児期から親子で学ぶ性教育にポートフォリオを取り入れ、次世代まで継続できる性教育プログラムを開発し、実施・評価することを目的とした。その結果、幼児期から親子で始める性教育が親子関係に与える効果および性教育にポートフォリオを取り入れた効果について評価を得た。本研究は、幼児期から親子で学ぶ性教育にポートフォリオ(親子で性教育を共有してきた成果物を挟むファイル)を取り入れ、親が自信をもって子どもに性教育を行い、次世代まで継続できる性教育プログラムを開発することを目的としている。これまでの研究成果において、性教育プログラムに参加する親の期待には、社会的・情緒的発達を促す学習内容と、家庭で活用できる教材を求めていることを把握した。平成26年度は、34歳児親子を対象にした性教育プログラム(全3回)、質問紙調査およびグループインタビューをA・B・C3市において実施した。第1回は、エプロンシアターを教材とし、胎児の発育および命の誕生を喜ぶ内容とした。第2回は、ペープサートを教材とし、新しいきょうだいの誕生場面に対象児が自己を同一視させ、家族の喜びを認識させた。第3回はパネルシアターを教材とし、性別による体の違い、大切な性器について、学習内容とした。参加した親子は19組、そのうち全3回を出席した親子は11組であった。得られたデータから、56歳児親子性教育プログラムの検討に際して、「親が教え難いと避けてきた性の内容を親に代わって説明すること」、「子どもが主体的に参加できる構成にすること」、「家庭で繰り返し活用できる教材の工夫」が示唆された。平成27年度は、26年度に引き続き34歳児親子性教育プログラムに加え、56歳児親子性教育プログラムをA・C・D市において実施した。これまでのアンケート結果を参考に検討した56歳親子性教育プログラムのテーマには、第1回「赤ちゃんになって生まれる体験」をエプロンシアターと産道体験の組み合わせ、第2回「大切なからだ」をパネルシアターで行い、第3回のテーマを「自分も大切、みんなも大切」とし、体を動かすゲームを取り入れた健康教育とした。第3回のプログラムが終了した約1か月後にグループインタビューを実施した。前年度の出席状況から、34歳児クラスを受講体験した親子が56歳児クラスを受講する可能性が低いことが予測されたため、56歳児親子性教育プログラムは34歳児クラスの学習内容を含めたものとした。ポートフォリオには参加の都度、使用した教材を印刷して保護者に配布し活用方法を説明した。研究協力者の参加人数を確保するため、2市において広報誌掲載、児童館、小児科外来でのポスター掲示等広報活動を行った。実践経過中、全3回のうち1回欠席する親子があり、C市にて日程を追加して性教育プログラムを実施した。その結果、34歳児クラス全出席親子は7組/18組中、56歳児クラス全出席親子は5組/16組中であった。平成26年度から累計すると、34歳児クラス全出席親子は14組/33組中、56歳児クラス全出席親子は11組/27組中であった。研究協力者が参加可能な日程が土・日に限られ、研究連携者とスケジュール調整を行いながら3市の性教育日程を決定したが、前年度同様、対象児の兄・姉の学校行事(参観日・運動会・子ども会・祭り等)と重なり、全日程を出席できない親子が複数いたため、必要標本数に達しなかった。本研究は、幼児期から親子で学ぶ性教育にポートフォリオ(親子で性教育を共有してきた成果物を挟むファイル)を取り入れ、家庭で親が自信をもって子どもに性教育を行うことができ、子どもは自分のポートフォリオを用いて、次世代までわが子に性教育を継続して教えることのできる性教育プログラムを開発することを目的とした。平成2627年度にA市・B市・C市・D市において、34歳児親子および56歳児親子クラスの性教育プログラム(各全3回)を開催した。第1回第3回の性教育プログラム実施内容は、目標を一貫させ幼児が理解し易いよう、発達に合わせた教材を使用し、34歳・56歳クラスに分かれて行った。第1回第3回まで全てに出席した親子は25組であった。平成28年度は広報活動を行い、C市において初回時、3-4歳児クラス13組、5-6歳児クラス7組の出席であったが、家族のレジャーや子どもの体調不良等で欠席があり、第1回第3回まで全てに出席した親子は10組であり、そのうち3-4歳児クラスは6組、5-6歳児クラスは4組であった。平成26年度から累計すると、各クラス3回全てに出席した親子は併せて35組であり、3-4歳児クラスは20組/35組中、5-6歳児クラスは15組/35組中であった。これまで得られた35組のデータを分析して、幼児期から親子が一緒に性教育を受講することが親子関係にどのような影響があるかについて考察した。その結果、受講当初に抱いていたストレスが軽減され、親の子どもの見方も変化し、家庭で性教育を継続することのできる親子関係を築いていくことが明らかになった。更にデータ分析を行い、明確になった事実について執筆し、現在投稿中である。当初の予定より必要標本数が足りないため、平成29年度まで研究期間を延長することを決定した。研究協力者の参加可能な日程が土・日に限られ、連携研究者全員が他県で就業しているため前年度以上に日程調整が困難となった。

また、子どもの体調不良や家族レジャー等で性教育プログラムの欠席があり、全3回を出席できた親子が初回参加数の1/2となったため、必要標本数に達しなかった。本研究の目的は、幼児期から親子で学ぶ性教育にポートフォリオ(親子で性教育を共有してきた成果物を挟むファイル)を取り入れ、親が自信をもって子どもに性教育を行い、次世代まで継続できる性教育プログラムの開発をすることである。事前の調査により、幼児期から親子で学ぶ性教育プログラムを受講する親は、社会的・情緒的発達を促す内容、および家庭で活用できる性教育の教材を期待していることを把握し、繰り返し教材の検討を行った。その結果、3-4歳児親子・5-6歳児親子の2クラスに分け、プログラムを各クラス3つのテーマで構成し、毎月1テーマずつ、全3回を実施した。第1回目に参加した保護者にポートフォリオを配布した。第3回目終了1ヵ月後、保護者を対象に性教育ポートフォリオの効果についてグループインタビューを実施した。第2回目以降の調査より、親子で性教育プログラムを受講することは、子どもの感情リテラシー発達を促し、親自身が育児自己効力感を得ることがわかった。最終年度は、性教育ポートフォリオの効果について評価することであったが、全3回を受講した親子が少なかったため、研究期間を延長して3-4歳児親子および5-6歳児親子クラスの性教育プログラムを実施し、グループインタビューの結果を分析した。分析の結果、性教育ポートフォリオを活用することは、子どもの興味を教材の中から見つけ、親子が共通の会話を楽しみながら、子どもから親へのアタッチメント形成に役立つことが示唆された。引き続き性教育にポートフォリオを取り入れた効果を検証し、次世代まで継続できる性教育プログラムの開発を検討していく。わが国の子育て期にある親が、子どもから受ける性の質問に対して満足に対応できない現状がある。そこで、本研究は幼児期から親子で学ぶ性教育にポートフォリオを取り入れ、次世代まで継続できる性教育プログラムを開発し、実施・評価することを目的とした。その結果、幼児期から親子で始める性教育が親子関係に与える効果および性教育にポートフォリオを取り入れた効果について評価を得た。幼児期に性教育を必要としない保護者が多く、研究協力への理解が得られにくいことが原因にあり、研究者らの所属施設関連の幼稚園・保育園への研究協力依頼に留まっていたことで、必要標本数に達しなかった。また、性教育プログラム開催日が土・日または祝日になるため、対象児と兄姉の所属施設の行事や家族レジャー等の欠席により、全3回を出席した親子が約半数となった。平成28年度は、広報誌掲載、幼稚園・保育園への広報活動を行い、34歳児親子および56歳児親子性教育プログラムを実施し研究協力者数を確保する。研究協力者を確保するため、広報誌掲載、幼稚園、保育園、小児科、産婦人科外来への広報活動を行う。助産学・母性看護学研究協力者を拡充するため、広報誌活用、児童館、小児科外来に掲示する等幼児をもつ保護者への呼び掛けを行い、参加当日に研究協力依頼および同意を得る予定である。平成27年度は、56歳児親子性教育プログラム実施に際し、第4回は、エプロンシアター・手づくり産道体験を行い、第5回は、パネルシアターで大切なからだについて健康教育を行い、第6回は、体を動かすゲーム形式として自分も周囲の人も大切な存在であることを学習する予定である。