hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
シリケートミクロ空間へのメソ-アルキルポルフィリンの配向集積化

独自に開発した剛直なポルフィン環の周りに,末端にトリメチルアンモニウム基が結合した柔軟なメチレン鎖を4本有するカチオン性ポルフィリン(PnA,メチレンの数(n)が3から9まで合成)を,二次元層状空間をもつフッ素四ケイ素雲母(TSM)へイオン交換法で導入し,ポルフィリン分子の配向・組織化を試みた.その結果,メチレン鎖長が5以上のPnAは,TSMのイオン交換容量に見合う量だけ層間中にイオン交換され,しかも層間中ではポルフィン環はウロトン化されずに遊離型をとっていることがUV-VISスペクトルから確認された.このようにして得られたポルフィリン-TSM層間化合物について,PnAのアルキル側鎖長と層間距離の関係を調べたところ,メチレン数と層間距離にきれいな直線関係があることがわかった.この関係を利用して,POA(ポルフィン環にトリメチルアンモニウム基が直結したカチオン性ポルフィリン)-TSM層間化合物の層間距離が約6.3Åであると見積もることができた.この時,POAの分子径を考慮して,POA分子はTSM層間中で層面に平行から約10度傾いた状態で配列していると推定した.また,TSM層間へのP5Aのイオン交換率を10100%と変えて層間距離の変化を調べると,イオン交換量が高まるにつれて層間距離が徐々に増大するのではなく,むしろ段階的に大きくなることがわかった.このことからもTSM層間中に導入されたPnAは,イオン交換率に応じた一定の配向・配列で層間で組織化されていることが明らかになった.ちなみに,100%イオン交換の場合には,TSM層間中でPnA分子が約10Å間隔で配列していると計算される.今後,PnA-TSM層間化合物の配向・配列状態を,分光化学的な手法で更に確認する予定である.独自に開発した剛直なポルフィン環の周りに,末端にトリメチルアンモニウム基が結合した柔軟なメチレン鎖を4本有するカチオン性ポルフィリン(PnA,メチレンの数(n)が3から9まで合成)を,二次元層状空間をもつフッ素四ケイ素雲母(TSM)へイオン交換法で導入し,ポルフィリン分子の配向・組織化を試みた.その結果,メチレン鎖長が5以上のPnAは,TSMのイオン交換容量に見合う量だけ層間中にイオン交換され,しかも層間中ではポルフィン環はウロトン化されずに遊離型をとっていることがUV-VISスペクトルから確認された.このようにして得られたポルフィリン-TSM層間化合物について,PnAのアルキル側鎖長と層間距離の関係を調べたところ,メチレン数と層間距離にきれいな直線関係があることがわかった.この関係を利用して,POA(ポルフィン環にトリメチルアンモニウム基が直結したカチオン性ポルフィリン)-TSM層間化合物の層間距離が約6.3Åであると見積もることができた.この時,POAの分子径を考慮して,POA分子はTSM層間中で層面に平行から約10度傾いた状態で配列していると推定した.また,TSM層間へのP5Aのイオン交換率を10100%と変えて層間距離の変化を調べると,イオン交換量が高まるにつれて層間距離が徐々に増大するのではなく,むしろ段階的に大きくなることがわかった.このことからもTSM層間中に導入されたPnAは,イオン交換率に応じた一定の配向・配列で層間で組織化されていることが明らかになった.ちなみに,100%イオン交換の場合には,TSM層間中でPnA分子が約10Å間隔で配列していると計算される.今後,PnA-TSM層間化合物の配向・配列状態を,分光化学的な手法で更に確認する予定である.
胆汁酸生合成関連酵素の基質特異性ならびに反応の立体化学的特異性の解明

胆汁酸生合成における側鎖開裂反応(β-酸化)には肝ペルオキシソーム内に存在するacyl CoA oxidaseenoyl CoA hydratase/dehydrogenase(bifunctional enzyme)及び3-oxoacyl CoA thiolaseが関与するが,これら各酵素の基質にそれぞれ対応する胆汁酸生合成中間体CoAエステルを化学合成した。また,各酵素の特異性を詳細に検討するために側鎖構造(側鎖炭素数の異なる誘導体,側鎖メチル基を除いた誘導体)及び母核水酸基数の異なる誘導体を合成した。次いで、上記合成標品を用いて胆汁酸生合成中間体であるCoAエステルの直接的な分析法を確立した.CoAエステルは熱的,化学的に不安定であり,また,中間体の立体異性体の分離も考慮してHPLCによる一斉分析法を開発した.また,超微量にも対応を可能とするための高感度な分析法として蛍光検出(CoAエステルを加水分解した後ラベル化を行う)によるHPLCの分析法の開発も併せて行った。次いで,酵素反応中のCoAエステルの加水分解に伴う遊離型C27-胆汁酸の定量法として分離能に優れたキャピラリーGCによる簡便な分析法の開発を行った.さらに各種体液中に存在する生合成中間体の分析に適したGC/MSによるC27-胆汁酸の微量一斉分析法の開発を検討し,生体試料中(特に胆汁酸代謝異常症患者)の胆汁酸生合成中間体の分析も検討した。次いで、上記合成標品を用いて胆汁酸生合成中間体であるCoAエステルの直接的な分析法を確立した。CoAエステルは熱的,化学的に不安定であり,また,中間体の立体異性体の分離も考慮してHPLCによる一斉分析法を開発した.また,超微量にも対応を可能とするための高感度な分析法として蛍光検出(CoAエステルを加水分解した後ラべル化を行う)によるHPLCの分析法の開発も併せて行った。次いで,酵素反応中のCoAエステルの加水分解に伴う遊離型C27-胆汁酸の定量法として分離能に優れたキャピラリーGCによる簡便な分析法の開発を行った.さらに各種体液中に存在する生合成中間体の分析に適したGC/MSによるC27-胆汁酸の微量一斉分析法の開発を検封し,生体試料中(特に胆汁酸代謝異常症患者)の胆汁酸生合成中間体の分析も検封した。現在、上記合成標品及び分析法を用いて代謝物の検討を行い、その結果を投稿中である。さらに各種体液中に存在する生合成中間体の分析に適したGC/MSによるC27-胆汁酸の微量一斉分析法の開発を行い,生体試料中(特に胆汁酸代謝異常症患者)の胆汁酸生合成中間体の分析も検討した。
ROR1を標的とした肺癌の免疫治療に向けた基盤研究

肺癌の新たな治療法として発展している免疫治療において,標的となるヘルパーT細胞癌抗原としてROR1(Receptor tyrosine kinase-like orphan receptor 1)に着目し研究した.ROR1とEGFRの発現には正の相関がみられた.ROR1は多くの癌腫で発現しており,また正常細胞には発現が見られないことから,癌免疫治療の有用な標的になる可能性が示唆された.当院の肺癌患者の検体を用いて,ROR1の免疫染色を行い,予後との関連を検討した.また,各種細胞株を用いて,ROR1の発現を検討した.研究対象となる原発性肺腺癌患者240名の組織ブロックより,マイクロアレイを作成した.1スライドに15例の肺癌組織を並べ,ROR1,EGFR,EGFR(L858R),EGFR(E746-A750)の免疫染色を施行した.結果,ROR1発現とEGFRの発現に正の相関がみられた.ROR1とEGFR(L858R),EGFR(E746-A750)には明らかな相関はみられなかった.次に,ROR1発現やEGFR発現が予後と相関しているかを確認するために質問紙法を用いて,肺癌患者240例の予後調査を行った.ROR1/EGFR発現と臨床病理学的因子について多変量解析を行ったが,これらには明らかな相関はみられなかった.癌免疫療法を構築するためには,腫瘍でROR1が発現していることに加え,正常組織でROR1の発現がみられないことが重要である.正常組織でROR1の発現がみられた場合,自己免疫疾患を誘発し,癌治療に支障を来す.肺腺癌を含む各種癌細胞株と正常細胞株(自己樹状細胞)を用いて,ウエスタンブロット法を施行した結果,癌細胞株の約80%でROR1の発現がみられた.それに対し,正常細胞株ではROR1の発現はみられなかった.更に,市販の癌組織アレイ,正常組織アレイでROR1の発現を免疫染色で確認したところ,正常組織アレイでのROR1発現はみられなかった.このことから,ROR1は癌免疫療法の有用なターゲットとなることが示唆された.対象肺腺癌患者について,より詳細な予後の調査と統計処理を施行した.ROR1は免染の強度を03+で評価し,1+以上を陽性.EGFRは癌細胞膜が染色されたものを陽性とし,臨床病理学的に検討した.また,ウエスタンブロット法で各種癌細胞株のROR1発現状況について検討した.平均経過観察期間は2114±1257日,平均年齢66歳,男126例/女114例,喫煙歴54%.病期はI:197例,II:19例,III:22例,IV:2例,5年生存率は85.2%であった.肺腺癌においてROR1は88%,EGFRは81%,EGFR変異(L858R)は23%,EGFR変異(E746-A750)は21%で陽性であった.ROR1発現/EGFR陽性/L858R陽性/E746-A750陽性率は,0/33%/7%/3%,1+/84%/25%/20%,2+/93%/25%/27%,3+/97%/24%/30%であり,ROR1とEGFR,E746-A750陽性率に正の相関あり.Cox比例ハザードモデルにおいてROR1/EGFR発現と予後に相関なし.多変量解析ではROR1/EGFR発現と性別,喫煙歴,病期,生存,再発は関連なし.ウエスタンブロット法で多くの癌細胞株にROR1の発現を認めたが正常細胞では認めなかった.肺腺癌は未だ予後不良であり新治療法が希求されている.肺腺癌ではROR1が高頻度に陽性で,EGFRと正の相関がみられた.ROR1やEGFR発現は予後予測因子ではないが,両者が肺腺癌で協調して発現している可能性が示された.ROR1は正常組織で発現なく,癌関連抗原としてEGFRとともに新たな分子標的薬や癌免疫療法の標的となる可能性が示唆された.おおむね順調に進んでいると考える.肺癌の新たな治療法として発展している免疫治療において,標的となる癌抗原としてROR1(Receptor tyrosine kinase-like orphan receptor 1)に着目し研究した.まず,各種細胞株および手術材料におけるROR1の発現の検討を行った.肺腺癌の手術材料よりパラフィン包埋切片を作製し,市販の抗体を用いて免疫染色により発現を検討した.その結果,ROR1は88%,EGFRは81%,EGFR(L858R変異)は23%,EGFR(E746-A750)は21%で陽性であった.ROR1発現は染色強度を0(発現無し),1+,2+,3+(強発現)に分類し検討したところ,これらの染色強度とEGFR発現に正の相関がみられた.ROR1と予後を含めた種々の臨床像との相関を検討したが,ROR1と予後は相関が見られなかった.各種癌細胞株でのROR1発現をウエスタンブロット法で検討したところ,ROR1は肺腺癌のみでなく,肺扁平上皮癌,肺大細胞癌,乳癌,咽頭癌,舌癌,結腸癌,膀胱癌での発現を確認できた.腎癌,前立腺癌,NKT lymphoma,正常細胞では発現していなかった.Multiple tumor

tissue arrayを用いてROR1の発現を検討したが,正常組織でのROR1発現はみられなかった.すなわちROR1は自己免疫疾患を引き起こす可能性が低く,癌特異抗原として可能性があると判断できた.ROR1は937塩基からなる膜受容体型偽チロシンキナーゼであり,メイヨークリニックで実際に運用されているヒトHLAクラスII分子にpromiscuousに結合可能なペプチド配列を選び出すアルゴリズム解析ソフトを用いて,2種類の候補ペプチドを合成,精製した.現在この候補ペプチドを用いて,健常人からROR1特異的CD4+T cellの誘導を行い,さらにデータを蓄積している.肺癌の新たな治療法として発展している免疫治療において,標的となるヘルパーT細胞癌抗原としてROR1(Receptor tyrosine kinase-like orphan receptor 1)に着目し研究した.ROR1とEGFRの発現には正の相関がみられた.ROR1は多くの癌腫で発現しており,また正常細胞には発現が見られないことから,癌免疫治療の有用な標的になる可能性が示唆された.現在のところ,おおむね順調に進展している.更に予後調査を行う.肺癌現在の部分までで,論文に仕上げ報告する.その後,可能であればペプチドを作成し,予備実験を開始する予定である.計画通り進行中である.物品購入が遅れたため.翌年に経費のかかる実験があるため実験用機材の購入を行う.今後はROR1を標的とした特異的T細胞の樹立を行う.実験用物品の購入実験の進行状況に合わせて物品を購入したため今後,ペプチドの作成など,多額の出費が想定される.
メルコスル発足によるリオグランデドスル州民の「国民意識」と「地域意識」の変化

本研究は、同質的な「国民」像から解放された人々の間で、新たな集合的アイデンティティが形成されていく過程を、ブラジル・リオグランデドスル州における地域主義の復興を事例に考察するものである。今日の州民の集合的アイデンティティは、ブラジル国内だけではなく、世界の政治的、経済的、文化的影響を受けながら形成されるという見方から、まずは昨年度までに収集した先行研究や資料を用いて、権威主義体制崩壊後の国家、ラテンアメリカ社会、世界と州の関係を考察、分析した。本研究の中心に据えている、「国民意識」及び「地域意識」に関する州民の意識調査は、9月に実施した。グローバル化が引き起こす、多国籍企業の第3国への進出という面のみをみても、世界各地は投資や工場の誘致を求めて自地域を特殊化、差異化し、リオグランデドスル州ではメルコスルの発足もあって、メルコスル諸国との地理的な近接性から州の利点や特殊性が強調され(ゼネラル・モーターズの自動車工場の誘致に成功)、ローカル性が活性化されている。そのような状況下で新たな集合的アイデンティティが形成される過程において、州民は非常に身近なところで「地域意識」が問われる機会に接し(メディアでの議論、近年活発化し州政府の援助を受ける伝統主義運動の存在、各種伝統行事への参加機会の増加と容易化、地域文化を考慮した多国籍企業の広告戦略など)、自己のアイデンティティを再帰的に問いかけていることが意識調査の結果、明らかになった。なお、これまでの研究・調査の成果は、拙稿「近年のブラジル・リオグランデドスル州におけるローカル・アイデンティティに対する関心の高まり-ファロウピーリャ・キャンプの模様を中心に-(仮題)」にまとめ、上智大学イベロアメリカ研究所発行の『イベロアメリカ研究』(2003年25巻第1号)に投稿した。現在、査読中である。今後は学会や研究会でも発表する予定である。現在、査読中である。
高速アザ電子環状反応によるPETイメージング法の開発と糖鎖付加機能性高分子の創成

アザ電子環状反応を基盤とした高速標識プローブを開発した後、様々なペプチドやタンパク質のPETや非侵襲的蛍光イメージングに成功した。次いで、N-結合型糖鎖の汎用的固相合成法を確立した後、生体内での"糖鎖多価効果"を疑似化するために、効率的な糖鎖クラスター調製法やタンパク質や生細胞に対する糖鎖導入法を開発した。さらに、これらN-結合型糖鎖クラスターや糖鎖付加人工細胞を用いて、糖鎖構造に依存する生体内分布や臓器/癌への選択的集積、または排出過程の相違を可視化することに成功した。本研究では独自に開発した"超高速アザ電子環状反応"による迅速修飾法を用いて、(i)水中での生体分子アミノ基選択的な高速放射線標識化法を開発する。次いでこれを用いて(ii)ペプチド、タンパク質、および極微量の貴重なモノクロナール抗体のリジン残基選択的修飾によるPETイメージング、さらにはこれまで単糖を除いてほとんど例のない糖鎖のPETイメージングを実施する。このように、オリジナルの迅速修飾反応を活用して、非常に取り扱いにくい短寿命放射線中間体を単離することなくPETイメージングへと導き、生体内現象解明、ならびに診断技術に貢献する新たな一般的方法論を確立する。またこれらの結果を基に、(iii)申請者らが独自の合成技術により構築する合成糖クラスタ分子や天然糖タンパク質または合成糖ペプチドライブラリー(アスパラギン結合型)の中から、PETイメージングを指標にして癌や炎症部位へのターゲッティングを実施する。糖タンパク質またはペプチドに関しては、対応するペプチドや糖鎖部分自体のPET集積挙動と比較することにより、糖鎖部分の新しい機能を見出す。すなわち、糖鎖を付加させることにより、全く新たな機能を有する高分子や人工糖ペプチドの探索・創成技術を開発する。本研究では、独自に開発した"高速アザ電子環状反応"による迅速修飾法を用いて、水中での生体分子アミノ基選択的な高速放射線標識化法を開発した後、これを用いて極微量の貴重なペプチド、タンパク質、およびモノクロナール抗体のリジン残基選択的修飾によるPETイメージング、さらにはこれまで単糖を除いてほとんど例のない糖鎖のPETイメージングを実施することを目的とする。平成19年度は、主にペプチドやタンパク質の短寿命放射線金属標識化によるPETイメージング、およびMRIおよび蛍光イメージング法への展開を目指して検討を行った。すなわち、まず標識プロープの効率的合成法を確立すべく、Melda1/Sharplessのクリック反応や18F-Bアート錯体などを活用した様々な合成法を検討した結果、最終的にStilleカップリングを鍵反応とした新規合成法を開発した。その後、ソマトスタチンなどのペプチド、またはTNF-αやTGF-β3などの極微量サイトカインに対して、短時間(1030分)、10^<-8>Mの濃度(サンプル量:100ng)でほぼ定量的にDOTA標識することに成功した。さらに抗EGFR抗体に対しても同様にDOTAリガンドで標識を施し、放射性金属核種として68Gaを導入した後、マウスに移植した癌細胞を標的としたPETイメージングを行った。その結果、マウス血中内では、抗EGFR抗体の素早い分解が見られたものの、癌組織における集積を観察することに成功した。一方、DOTA配位子はMRIによるイメージングの配位子としてもよく利用されていることから、生体高分子に対する同手法を用いた希土類金属の導入を検討した。その結果、まず当該プローブに対してGd(III)を導入した後、酸化、リジン残基への電子環状反応を経て、生体分子を一挙に標識化することに成功した。一方、同様の手法を用いて、蛍光基を導入したプローブの開発とそのリジン残基への高速・低濃度での標識化にも成功し、高速アザ電子環状反応による標識化法を一般化させた。平成19年度までに開発した、アザ電子環状反応によるアミノ基選択的な高速標識化法を基盤にして、糖鎖の初めてのPET実験を実現するべく、平成20年度は以下の3項目に焦点を当てて検討した。(1)N-結合型糖タンパク質糖鎖のライブラリー合成:本研究では、N-結合型糖タンパク質糖鎖(N-結合型糖鎖)を主なトレーサーとしてPET実験を行うが、まず固相法による様々な糖鎖の供給法を検討した。その結果、JandaJeI^<TM>を担体として順次固相上に効率的なグリコシル化反応を実現することにより、シアル酸を有する初めての複合型N-結合聖糖鎖の固相合成に成功した。(2)糖鎖クラスターの調製:天然や合成糖鎖を効率良く特定器官や癌細胞に集積させることを意図して、これら糖鎖のクラスター調製法を検討した。末端にアセチレン基を有するポリリジン型デンドリマーに対して、申請者らが開発したヒスチジンを活性化基とする自己活性化型Huisgen環化反応を実施した。

その結果、簡単な単糖や二糖構造だけではなく、N-結合型糖鎖のような複雑な構造を持つ11糖においても、室温、40分で定量的に16分子をクスラスター化させることに成功した。(3)糖鎖クラスターの生体内イメージング:上記(2)で調製した糖鎖クラスターは、末端にリジン残基を持つように設計した。そこで、平成19年度で開発した標識法を用いて[^<68>Ga]-DOTAで短寿命放射線標識化を行った。まずアザ電子環状反応を用いて糖鎖クラスターをDOTAで標識した後、^<68>Gaの導入とHPLCでの精製を経て迅速に放射線標識化することができた。一方、同様にアザ電子環状反応を用いて蛍光標識化し、これを正常マウスや担癌マウスに導入して蛍光イメージングを実施した。その結果、糖鎖の構造によって、その臓器分布が劇的に変化することを世界で初めて明らかたした。このように、様々な糖鎖糖鎖ライブラリーのPETイメージングやターゲティングを実施する基盤を築いた。平成20年度までに実施した、(i)超高速アザ電子環状反応を用いた新規標識化プローブの開発、(ii)生体高分子の迅速な標識化とPETイメージング、(iii)N-結合型糖鎖の固相合成、および(iv)天然N-結合型糖鎖のクラスター化とその予備的なPETイメージングをもとに、以下の3点について検討した。(1)固相法を用いたシアル酸含有N-結合型糖鎖合成の一般化とライブラリー合成:平成20年度に確立したJandaJel^<TM>を担体とするN-結合型糖鎖固相合成をさらに一般化させることを意図して、還元末端にアスパラギン誘導体、およびフコースを有する糖鎖の部分合成を達成した。さらに、本フラグメントを用いた複合型N-結合型糖鎖のライブラリー合成研究を開始した。(2)合成糖鎖クラスターの調製とインビボイメージング:平成20年度に確立したポリリジン型デンドリマー調製法を利用して、天然および合成糖鎖をクラスター化させ、PETや蛍光イメージングを実施した。その結果、2次リンパ器官として重要な脾臓に選択的に取り込まれるクラスターを初めて見出すとともに、シアル酸糖鎖構造による胆嚢、または腎臓を経た代謝過程の相違を可視化することに成功した。(3)人工糖鎖付加タンパク質の調製:タンパク質に対して、超高速アザ電子環状反応とStaudingerライゲーションを併用して用いることにより、ビオチン分子やN-結合型糖鎖を効率的に導入することに成功した。また、銅触媒下におけるHuisgen環化反応との併用によるプロトコルも完成させ、糖鎖付加タンパク質や細胞の動態変化をPETや蛍光インビボイメージングにより検証する基礎を築いた。平成21年度までに達成した、(i)超高速アザ電子環状反応を用いた標識化プローブの開発と生体高分子のPETイメージング、(ii)フコースやシアル酸を有するN-結合型糖鎖の合成手法、(iii)N-結合型糖鎖クラスタープローブの開発とその正常マウスにおけるPETや蛍光イメージング、および(iv)N-結合型糖鎖の生体分子に対する化学的なエンジニアリング法を基にして、以下の3点を検討した。1フコースやシアル酸を持つN-結合型糖鎖合成の固相ライブラリー合成:還元末端にアスパラギン残基、およびフコースやシアル酸を含む、天然から単離することが難しい複合型N-結合型糖鎖の液相合成を初めて達成した。
脳内メゾ神経回路の同定に向けた活動神経回路の可視化とその定量的解析基盤の確立

機能的に重要な役割を担う神経回路の形態学的な特徴を明らかにすることを目的に、脳内で頻繁に活動する神経回路を可視化するための要素技術の確立を目指した。歯状回顆粒細胞ーCA3錐体細胞間の回路網とCA3ーCA1錐体細胞間の神経連絡に焦点を当て、シナプス結合や分子発現に関する活性化回路の解剖学的特徴を明らかしながら、1)活動の高い細胞群は幾つの回路に分類できるのか?2)活動レベルの高いシナプス後神経細胞には幾つの活動レベルの高いシナプス前細胞が存在するか?等、脳内活動回路に関する基本的な疑問の答えを求め、メゾ回路の実体に迫りたいと解析を進めてきた。本研究課題は、大別して実験動物作製とメゾ回路の解剖学的解析の2本立ての計画で、平成23年度分の動物作出実験は予想通り進み、回路の解析は遅れた。そこで24年度は神経連絡の解剖学的解析を中心に推進した。しかし、この解析の初期段階で、活動神経回路の全体を明瞭に標識し、活動レベルの高低を電子顕微鏡下で判別できる様にすることが難しいことが判明した。そこで明瞭に標識された一部分の神経組織のみを解析対象にして、その中に含まれる神経細胞の微細構造を特徴付けし、活動神経回路が持つ機能ドメインの形態的特徴を明らかにすることにした。具体的にはシナプス前後の活動標識の有無によりシナプスを分類し、そのシナプス後肥厚の大きさ(面積)を計測した。この結果、活動マーカーがシナプス前後に陽性のシナプスは、片方が陽性のシナプスに比べて有意に大きいシナプス後肥厚を持ち、前後共に陰性のシナプスは小さいことを示す解析結果を得た。この結果は、高い活動レベルの神経細胞どうしはより機能的に成熟したシナプス構造で結合し、機能的にも強く結びついていることを示唆している。24年度が最終年度であるため、記入しない。要素的な機能を持つ回路(メゾ神経回路)に立脚した脳の情報処理基盤を明らかにする手掛かりとして、機能的に結びついた神経細胞どうしが形成する神経回路網を可視化し、その解剖学的な特徴を明らかにすることを目的としている。本年度は、海馬の神経回路の中で普段頻繁に使用されている神経回路の可視化の手始めとして、以下3つの項目を行って来た。1)活性化されたGC-CA3細胞の活性化神経細胞マップの作製。c-fosP.-tTAマウスと自作や譲渡されたTRE-GFPマウスとを交配し、これらのマウスでのGFP発現レベルの解析を行った。ホームケージ飼育でもGFPは検出されたが、弱く、活動レベルの高い神経と低い神経との差が少なく、電子顕微鏡での解析にまでは発展させられないと判断した。そこで、より高いGFP発現が見込め、神経活動による遺伝子発現誘導も大きい遺伝子改変動物の作製が重要と考えた。2)同定された活動神経細胞間の神経線維連絡を光顕・電顕両レベルで解析し、GC-CA3活性化神経回路網マップを作製する。上記の様な理由で本項目は新たな遺伝子改変動物を得てから行うことにした。3)遺伝子改変マウスの作製新たなtTA発現マウスを譲り受ける研究者と共同研究を始めることを合意した。また、より高いGFP発現を実現するために共同研究者からレポーターマウスを譲り受け、交配を開始した。自作のレポーターマウスの作製も行い、10月に産仔を得た。今後、実験の目的合った系統を選別して行く。年度中ほどで名古屋大学に異動したが、実験環境や実験動物の整備に予想以上に手間取ったため。

24年度が最終年度であるため、記入しない。利用するマウスの再検討を行うことになり、23年度に予定していた実験項目の一部が遂行出来なかった。しかし、共同研究先からのマウス供与や申請者が作製した動物も直ぐに利用可能になる手はずを整えたので、出来次第利用を開始することで遅れを取り戻したい。
メチシリン耐性黄色ブドウ球菌に作用する新しい抗菌ペプチドの開発

本研究の目的はメチシリン耐性黄色ブドウ球菌に作用する新しい抗菌ぺプチドの開発であった。私共は黄色ブドウ球菌の主要オートリシンATL遺伝子をクローニングし、その遺伝子産物が菌体クラスターの分離に関与することを明らかにした。また、黄色ブドウ球菌のオートリシンパターンが増殖時期により変化することを見出し、ATLが分泌された後にプロセシングを受けることを示唆するデータを得た。また、免疫電子顕微鏡観察によりATLが菌体表層に局在していることを明らかにし、ペニシリンによる特異な溶菌像との比較からATLが黄色ブドウ球菌の自己溶解に必須であると考えた。これらの成果に基づいてATLの貯留配列と考えられるアミノ酸配列を基にオリゴペプチドを合成し、ペプチドによるATLの貯留に及ぼす影響、黄色ブドウ球菌の溶菌の誘導について検討した。低イオン強度下で、ペプチド番号A10,A11,A14およびA16は黄色ぶどう球菌細胞縣濁液の濁度の急激な変化とともに生細胞数の減少をひきおこすことが明らかになった。濁度の変化を観察することによって、A10とA14は自己溶解に対して阻害的に、A11とA16は自己溶解を誘導することが明らかとなった。これらの全体的な電荷はリジンを含むために陽性で、アッセイ系に50mMNaClを添加することでペプチドの生物学的活性を失わせることができることが分かった。透過型電子顕微鏡によってA11,A16によって自己溶解が誘導された細胞の切片を観察した結果、細胞の次期隔壁形成部(分裂部)でATLが局在していると考えられる部位に細胞壁、細胞膜の欠損が認められた。一方、A10では溶菌像は認められなかったが、各所での細胞膜の断裂が認められた。以上のことから、これらのペプチドはATLの貯留メカニズムを妨害することで生物活性をあらわすことが強く示唆された。研究者らは黄色ブドウ球菌RN450株からトランスポゾンTn551変異により作成した自己溶解欠失株RUSAL2をもとにトランスポゾン挿入部位に138kDaの蛋白に相当する遺伝子配列があることを見出した。黄色ブドウ球菌が産生する菌体外溶菌酵素、51kDa endo-beta-N-acetylglucosaminidase(GL)、62kDA N-acetylmuramyl-L-alanine amidase(AM)のN端シークエンスから、この遺伝子は2つの酵素活性ドメインを持つ溶菌酵素前駆体、ATLであることが明らかにされた。このATLは36個のアミノ酸配列のシグナルシークエンスをもった溶菌酵素前駆体蛋白で菌体内で合成され、分泌された後、プロセッシングを受け、AMとGLになって上清中に放出されることが強く示唆された。また、菌体外のAMとGLはクラスター分散活性を有し、両者が同時に働くことで相乗作用があることが示された。またAM、GLに対する抗体を用いた免疫電顕の観察から、ATLあるいはそのプロセッシング産物が菌体表層にリング状に分布局在していることを見出した。以上のことから、これらの酸素は黄色ブドウ球菌の菌体分裂後の分離に働く酵素と考えられた。ATLの中に認められる繰り返し配列をもとに合成ペプチド(各20mer)を作成し、液体希釈法によって抗菌力を測定したがMICはすべて1mM以上であった。平成8年度に行うことを計画した研究は1)polyanethole sulphonic acidを用いて、細胞が産生するlipoteichoic acidの合成に及ぼす影響についての研究

2)polyanethole sulphonic acidを用いて、ATL前駆体を電荷に及ぼす影響についての研究3)ATLのタンパク中に現れる繰り返し配列部位に相当するペプチドを合成し、ペプチドによるATLの貯留に及ぼす影響、黄色ブドウ球菌の溶菌の誘導についての研究であった。このうち、実際に成果が得られたものは3)である。私たちはATLのThr432-Lys610に存在する繰り返し構造(1)に基づいて10から30残基のオリゴペプチドを合成した。低イオン強度下で、ペプチド番号A10,A11,A14およびA16は黄色ブドウ球菌細胞懸濁液の濁度の急激な変化とともに生細胞数の減少をひきおこすことが明らかになった。濁度の変化を観察することによって、A10とA14は自己溶解に対して阻害的に、A11とA16は自己溶解を誘導することが明らかとなった。これらの全体的な電荷はリジンを含むために陽性で、アッセイ系に50mMNaClを添加することでペプチドの生物学的活性を失わせることができることが分かった。透過型電子顕微鏡によってA11,A16によって自己溶解が誘導された細胞の切片を観察した結果、細胞の次期隔壁形成部(分裂部)でATLが局在していると考えられる部位に細胞壁、細胞膜の欠損が認められた。一方、A10では溶菌像は認められなかったが、各所での細胞膜の断裂が認められた。以上のことから、これらのペプチドはATLの貯留メカニズムを妨害することで生物活性をあらわすことが強く示唆された。今後、さらにこれらのペプチドを用いてATLの活性化機構、貯留機構を明らかにし、ペプチドの抗菌作用を明らかにする必要がある。
民間非営利団体の介護福祉サービスの運営に関する日中比較研究

本研究は利用者主体や市民参加という新し連帯意識とアジア独自な福祉文化との関連を検討する上で、福祉改革の一環として取り始めた非営利組織(NPO)の福祉サービス参入のあり方に関する日中比較研究である。研究の手法は現実の福祉問題だけにとどまらず、歴史、文化も視野に入れ、その福祉サービスの参与に影響する歴史的、文化的な要因を解明すると共に、福祉民営化の方向性や参与のあり方を明示しようと試みた。研究は、歴史と現実の二段階に沿って進めている。中国近代国家成立後に、協同組合思想が中国に伝わってきたと言われている。その背景で近代化意味での非営利組織は急速に形成、発展した政策的、社会的動因を歴史的観点から分析した。または1940年代の中国で影響力を持っていた非営利組織「中国福利基金会」の実践活動を取り上げ、その組織の構成、福祉サービス、募金活動などを解明すると共に、中国福祉非営利組織の独自性とは何なのかを追究した。そしてこれらを論議の土台にして、焦点を社会改革の現実社会にまわし、福祉NPOの新たな勃興が福祉改革との連動性及び歴史上の非営利組織との連続性を解明しようと試みた。または、実証的な視点で独自な現地調査のデータに基づき、日本の現状を照らしながら中国における福祉NPOの定義、類型、財政の基盤を分析し、行政補完型・公民協調型・住民互助型に類型化した福祉NPOの福祉サービス参入のあり方を提示した。最後に、近年中国政府で公布されたNPOに関する法律条例を整理、翻訳して、資料として添付した。報告書の目次第1章歴史的視点から見る中国の非営利組織第2章1940年代における中国非営利組織の実践活動第3章中国社会福祉改革とNPOの勃興第4章介護施設の実態とNPOの福祉課題第5章福祉NPOの類型及び経営活動の評価基準本研究は利用者主体や市民参加という新し連帯意識とアジア独自な福祉文化との関連を検討する上で、福祉改革の一環として取り始めた非営利組織(NPO)の福祉サービス参入のあり方に関する日中比較研究である。報告書の目次第1章歴史的視点から見る中国の非営利組織第2章1940年代における中国非営利組織の実践活動第3章中国社会福祉改革とNPOの勃興第4章介護施設の実態とNPOの福祉課題第5章福祉NPOの類型及び経営活動の評価基準本研究の課題は介護福祉サービスにおける民間非営利団体の参与の日中比較である。これを解明するために、本年度には、主に中国の上海、武漢を中心に、文献資料調査と実態調査を行った。文献調査:40年代初頭、孫文の夫人である宋慶齢が創立された民間組織の「中国福利基金会」は、中国の上海、南京、武漢などの南方地域に強い影響力を持っていた。福利基金会は地域に根ざし、セルツメントを初めとした欧米社会福祉の援助方法を持ち、南方地域にさまざまな福祉活動を行った。福利基金会の民間団体福祉活動としての運営方法は、今なお、中国の社会福祉活動に影響がおよんでいる。このような文献調査を通して、現実における民間非営利団体の福祉施設経営の社会的な基盤及びその理念、ノウハウを追求してきた。このような趣旨の下で『福祉に生きる-宋慶齢-』という本を書き下ろした。本研究の中間報告の一環として、位置つけたい。実態調査:調査期間:場所:2000年8月?日9月6日、中国の上海、武漢調査の目的:社会主義的土壌に生まれた中国の民間非営利団体の形態及び福祉サービス提供に対する評価基準を考察する。調査方法:上海、武漢両地域の民間非営利団体が運営するモデル福祉施設を選び、経営の実態及び施設評価の基準を聞き取り調査する。調査の内容:1民間非営利団体経営の福祉施設の形態(1)行政補完型-上海羅山市民会館(1996年設立)日本モデル(2)公民協調型-天津鶴童介護施設(1995年設立)ドイツ・香港モデル(3)住民互助型-上海黄浦区「792」老人ホーム中国伝統モデル2民間非営利団体経営の福祉施設に対する総合評価の基準(1)非営利性(2)運営組織と民主管理(3)効率化3考察の結論

(1)中国の南北地域における市場メカニズムの浸透に格差があり、経済発展レベルや地域文化などにより施設の性格が異なっている。今後、民間非営利団体の福祉施設の運営形態に関して、各所在地域の文化と経済発展レベルなどの要因を視野に入れる必要がある。また、多様な運営形態を認める必要性がある。(2)評価の基準は利用者の権利・生活の質を擁護する意識が欠落している。民間非営利団体の成り立ちは民主主義制度の整備との関連が、今後の課題として課されている。この実態調査の研究結果は、2000年日本社会福祉学会第48回全国大会に研究発表をした。それを基づいてより充実した論文を専門雑誌に投稿する予定である。1.研究の目的・課題本研究は、日本と中国における、福祉改革の一環として取り始めた非営利組織(NPO)の福祉サービス参入のあり方に関する日中比較研究である。前年度は、歴史的な視点で中国の非営利組織の特質を追究するために、1930年代から現在まで中国の非営利組織はどのようにたどってきたか、諸国と比較すればどのような特質をもっているか、これからの行方がどうなるかについてまとめました。今年度の研究は、現地の実態調査を重点において、研究計画設定した調査範囲より幅広く調査を行った。これに合わせて文献調査にも力を入れた。調査範囲が広がりすぎてまとめにくいという反省点があったが、今後の研究に役立つと確信することもあった。2.実態調査の実態北京大学、精華大学、国務院経済計画委員会アメリカワシントンDCにある全米退職協会などを訪ね、この機関に所属しているNPO研究センターや研究グループと意見交換を行いながら資料、データ収集を行った。また、上記の研究機関が主催したシンポジウム、研究会で研究成果を発表した。3.実態調査研究の意義についてアジア地域におけるNPOに関するテーマの研究はまだ不十分と言わざるを得ない。本研究は利用者主体や市民参加の新しい連帯意識とアジア独自な福祉文化との関連を検討する上で、福祉民営化の方向性を提示することを主なねらいにしたいと考えている。このような調査及び報告会を通して、日中両国の情報を伝達する役割だけでなく、現場と研究の間に連動関係をも結ばれている。この橋渡る比較研究の成果は中国政府らのNPOに関する政策に反映できる可能性が十分にあると言え、日本に対しても有益な影響を与える。この実態調査の研究結果は、ぞくぞく専門雑誌に投稿する予定がある。
妊婦の心理社会的ストレスと早産発生率の関連-神経内分泌免疫学の観点から-

[研究概要]平成17年度までの調査において,神経内分泌免疫学の観点からストレス対処能力と妊娠経過に何らかの関連がある可能性が示唆された。そこで平成18年度はストレス対処能力と妊娠経過との関連をさらに追及した。ストレス対処能力の指標にはSense of Coherence(以下SOC)を用い,妊娠前期,妊娠後期において同一対象者に調査を行った。[結果・考察]70名の妊婦に依頼したところ全員から同意が得られた。妊娠前期,妊娠後期において継続調査が可能であった対象者のうち,早産リスク因子のある妊婦を除外した55名を分析対象とした。妊娠36週までの経過において早産であった者(早産群)は2名,切迫早産の治療を受けた者(切迫群)は15名であり,妊娠経過に異常がなかった者(正常群)は38名であった。SOCは時期別で有意差はなく強い正相関があった(r=0.78,p<0.01)。そこで妊娠経過別に妊娠前期のSOCを比較したところ,正常群143.2±16.8に比較し切迫群および早産群では128.6±16.8であり,SOC得点が有意に低かった(p<0.01)。さらにSOCカットオフポイントで妊娠経過を比較した結果,SOCが低い群では高い群に比べ切迫早産や早産の割合が高かった(p<0.05)。つまりストレス対処能力が低いことが妊娠経過に影響している可能性が示唆され,SOCが低い妊婦に対するストレス軽減ケアの重要性が示された。また,平成17年度までの結果におけるSOCとストレス関連物質との関連から,生体侵襲のない方法として,SOCによりストレス対処能力が低い妊婦をスクリーニングできる可能性も示唆された。[結論]SOCが低い群では高い群に比べ切迫早産や早産の割合が高く,心理社会的ストレス反応に影響するストレス対処能力と妊娠経過との関連が明らかとなった。[実施内容]研究の目的は神経内分泌免疫学的観点から,妊婦の心理社会的ストレス反応を生理学的指標で客観的に評価し,ストレス反応と早産発生率の関連を検討することである。国内外の研究において,妊産褥婦を対象としストレス関連物質を測定した研究は非常に少ない。そこでストレス関連物質の基礎的資料を得ることおよび早産群との比較を行うため,本年度は資料収集および正期産が期待できるローリスクの妊婦に(1)心理尺度を含む質問紙調査と(2)ストレス関連物質[コルチゾール,クロモグラニンA,分泌型免疫グロブリンA,副腎皮質刺激ホルモン放出ホルモン(以下CRH)]の測定を行った。[結果]正期産群におけるストレス関連物質の基礎的データを得ることができた。対象者のうち,早産となったものが一部みられ,正期産群に比較しCRHがやや低値であった。またCRHが低値であるものはストレス対処能力の尺度としたSOCが低かった。CRHは胎盤機能を反映する指標であることから,神経内分泌免疫学的観点からは,ストレス対処能力が低いことは,妊娠中の様々な心理社会的ストレスに対するストレス反応としての胎盤機能の低下を引き起こし,それが早産の関連因子となっているのではないかと考えられた。[来年度の課題]早産群のサンプル数が非常に少ないために,CRHが早産の予測指標となるかについては今後サンプル数を増やし検証していくことが課題である。またストレス対処能力とストレス反応の関連についても検討を要する。その他関連した結果として,妊娠末期にストレス対処能力が低い群では免疫能が抑制されており,産後うつ傾向にあるという結果が得られた。これは妊娠末期のストレス対処能力が産後の心理的健康にも影響する可能性があるという新たな視点での示唆といえる。また様々な年齢層の女性を対象に心理尺度を用いた研究を行うことにより,妊産褥婦に適切な尺度の検討を行っている。[実施内容]昨年度はストレス関連物質の基礎的資料を得ることおよび早産群との比較を行うため,正期産が期待できる妊婦に(1)心理尺度を含む質問紙調査と(2)ストレス関連物質の測定を行った。その結果,正期産群に比較し早産群では副腎皮質刺激ホルモン放出ホルモン(以下CRH)がやや低値であった。またCRHが低値であるものはストレス対処能力の指標としたSOCが低い傾向にあった。CRHは胎盤機能を反映するといわれていることから,神経内分泌免疫学的観点からはストレス対処能力が低いことは,妊娠中の様々な心理社会的ストレスに対するストレス反応として胎盤機能の低下を引き起こし,それが早産の関連因子となっているのではないかと示唆された。しかし,妊婦を対象としたストレス対処能力とストレス反応さらに妊娠経過との関連は明らかになっていないため,今後の課題として残された。そこで今年度は妊婦のストレス対処能力と妊娠経過の関連を明らかにするため,妊娠初期から縦断的に調査を行った。[結果]現時点で,対象者のうち過去に流産歴はないが,今回の経過で流産となった者が数名いた。さらに流産群と正常経過群でストレス対処能力を比較した結果,流産群ではストレス対処能力が低い傾向にあった。さらに流産群では何らかのストレスを認知していた。また流産群の中には,流産症状出現の数週間前より不眠・過敏性といったストレス症状の出現を認めた者がいた。よってストレス対処能力が低いことと妊娠経過に何らかの関連がある可能性が示唆された。[来年度の課題]

最終年度では,今年度の縦断的調査を継続し,ストレス対処能力とストレス反応の関連をさらに追及することで,本研究の主目的である心理社会的ストレスと早産発生率の関連を検討する。さらに早産の予測指標となるストレス関連物質の提示や,生体侵襲のないストレス評価方法提案の可能性についても検討する。[研究概要]平成17年度までの調査において,神経内分泌免疫学の観点からストレス対処能力と妊娠経過に何らかの関連がある可能性が示唆された。そこで平成18年度はストレス対処能力と妊娠経過との関連をさらに追及した。ストレス対処能力の指標にはSense of Coherence(以下SOC)を用い,妊娠前期,妊娠後期において同一対象者に調査を行った。[結果・考察]70名の妊婦に依頼したところ全員から同意が得られた。妊娠前期,妊娠後期において継続調査が可能であった対象者のうち,早産リスク因子のある妊婦を除外した55名を分析対象とした。妊娠36週までの経過において早産であった者(早産群)は2名,切迫早産の治療を受けた者(切迫群)は15名であり,妊娠経過に異常がなかった者(正常群)は38名であった。SOCは時期別で有意差はなく強い正相関があった(r=0.78,p<0.01)。そこで妊娠経過別に妊娠前期のSOCを比較したところ,正常群143.2±16.8に比較し切迫群および早産群では128.6±16.8であり,SOC得点が有意に低かった(p<0.01)。さらにSOCカットオフポイントで妊娠経過を比較した結果,SOCが低い群では高い群に比べ切迫早産や早産の割合が高かった(p<0.05)。つまりストレス対処能力が低いことが妊娠経過に影響している可能性が示唆され,SOCが低い妊婦に対するストレス軽減ケアの重要性が示された。また,平成17年度までの結果におけるSOCとストレス関連物質との関連から,生体侵襲のない方法として,SOCによりストレス対処能力が低い妊婦をスクリーニングできる可能性も示唆された。[結論]SOCが低い群では高い群に比べ切迫早産や早産の割合が高く,心理社会的ストレス反応に影響するストレス対処能力と妊娠経過との関連が明らかとなった。
明代雅楽思想の研究―朱載イクを中心に

本研究は中国明代の朱載〓を取りあげ、楽律学・楽器論・楽舞論・暦学・数学・経学に渡る彼の幅広い学術に貫通する思想的連関とその変遷を分析し、儒学における楽のあり方を提示することを目的とした。本年度は、特に四つの方向から研究を行った。第一に、朱載〓に至るまでの明代雅楽の沿革や明代思想家の楽論を分析した。特に、張〓・李文利・李文察・劉濂の四人を取り上げ、朱載〓の発明した十二平均律との関連を論じた。第二に、朱載〓の律暦合一思想を分析した。これまで、彼の楽律学と暦学はそれぞれの分野で研究されてきたが、本研究では彼の学術を「律暦合一」の観点から捉え、律暦の間にある思想的連関を考察した。まず『律暦融通』の構造を明らかにし、彼の制作した暦の背景にある理論を分析した。次に、朱載〓がいかにして「数」を利用し律暦合一をはかったかを検討し、彼の楽律学と暦法計算の最も基礎的最階には、『河図』・『洛書』の数理が取り入れられていることを示した。さらに、律暦を媒介する存在としての「気」に対する朱載〓の理解を、何〓らの議論をふまえ考察した。特に伝統的な理論である「候気の法」「卦爻配日術」に関する理論を取り上げ詳細に論じた。第三に、朱載〓の理論をより詳細に論じるため、彼に大きな影響を与えた朱熹と蔡元定の音楽論を分析した。特に両者の陰陽論・琴論・度量衡論に着目し、後世の朱子学者たちにどう理解されたのかという視点を加えて分析した。後世、『律呂新書』という著作は、蔡元定の易学理論と関連付けながら読まれ、また現在の研究でも蔡元定の術数学の一環と、当然のように見なされているが、朱熹と蔡元定は、楽律学と術数学の結合に対し、かなり警戒している点を指摘した。第四に、『六代小舞譜』『霊星小舞譜』などに見られる朱載〓の舞踏学を分析した。朱載〓は舞踏の練習過程を詳細に論じ、舞踏を重要な「修養」の一つと位置づけていることを証明した。
触媒的非対称化によるメソ型基質のキラル資源化と活用

シクロペンタジエンとベンゾキノンより大量かつ容易に合成できるメソ型対称性ジオール,およびその誘導体を基質とするオレフィンの不斉異性化反応を検討した.その結果,基質としてジオールを,触媒としてキラルBINAPを配位子とするカチオン性ロジウム錯体を用いた場合は定量的に異性化したケトンが得られたが,その光学収率は43%e.e.であった.しかし,ビスシリルエーテルを基質とした場合には不斉異性化反応がほぼ定量的な化学収率および光学収率で進行することを明らかにすることが出来た.その際,(1)シリルエーテルの大きさは光学収率には影響を与えないこと,(2)他のアルキルエーテルでは高い光学純度を持ったケトンは得られないこと,(3)ジエステルでは全く反応が進行しないこと,(4)オレフィンの異性化の方向はジオールとビスシリルエーテルでは逆である,という興味ある結果も得ることが出来た.さらに,異性化したケトンから各種天然物全合成の出発原料になっている光学的に純粋な4-hydroxy-2-cyclehexenoneの簡便な合成も達成できた.基質の構造をより単純にした7員環のメソ型エンジオールビスシリルエーテルに対しても本反応を適用したところ,若干の光学収率の低下が観察されたが,好収率でオレフィンが異性化したケトンを得ることに成功した.さらに,ここで得られたケトンから3工程でトロパンアルカロイドであるphysopervineの最初の不斉合成を行うことが出来た.シクロペンタジエンとベンゾキノンより大量かつ容易に合成できるメソ型対称性ジオール,およびその誘導体を基質とするオレフィンの不斉異性化反応を検討した.その結果,基質としてジオールを,触媒としてキラルBINAPを配位子とするカチオン性ロジウム錯体を用いた場合は定量的に異性化したケトンが得られたが,その光学収率は43%e.e.であった.しかし,ビスシリルエーテルを基質とした場合には不斉異性化反応がほぼ定量的な化学収率および光学収率で進行することを明らかにすることが出来た.その際,(1)シリルエーテルの大きさは光学収率には影響を与えないこと,(2)他のアルキルエーテルでは高い光学純度を持ったケトンは得られないこと,(3)ジエステルでは全く反応が進行しないこと,(4)オレフィンの異性化の方向はジオールとビスシリルエーテルでは逆である,という興味ある結果も得ることが出来た.さらに,異性化したケトンから各種天然物全合成の出発原料になっている光学的に純粋な4-hydroxy-2-cyclehexenoneの簡便な合成も達成できた.基質の構造をより単純にした7員環のメソ型エンジオールビスシリルエーテルに対しても本反応を適用したところ,若干の光学収率の低下が観察されたが,好収率でオレフィンが異性化したケトンを得ることに成功した.さらに,ここで得られたケトンから3工程でトロパンアルカロイドであるphysopervineの最初の不斉合成を行うことが出来た.3環性メソ型エンドシクロヘキセン-3,6-ジオールおよびそのビスシリルエーテルの二重結合がキラルBINAPを配位子とするカチオン性ロジウム錯体触媒により好収率かつ高選択的に不斉異性化し,対応する4-シリルオキシ-シクロヘキサンを与えることを見出した.本反応の一般性と反応機構について検討し,以下の興味ある結果を観察した.1)反応は触媒量の錯体の存在下で速やかに進行する2)溶媒はジクロロエタンが最も好結果を与える3)ジオールを基質とした場合は好収率で生成物を得ることが出来るが,それほど光学純度は高くない4)ビスシリルエーテルではシリル基上のアルキル基の大きさには関係なく高い光学純度で生成物を与える5)ジオールとビスシリルエーテルでの二重結合の異性化の方向は逆である6)重水素化実験により水酸基のα位の水素が1,3-移動をすること7)単環性のビスシリルエーテルでも良好な結果を与えることこの間の知見をシクロヘプテンビスシリルエーテルに適用し,トロパンアルカロイドの一種であるフィゾペルビンの最初の不斉合成を達成した.シクロペンタジエンとベンゾキノンより大量かつ容易に合成できるメソ型対称性ジオール,およびその誘導体を基質とするオレフィンの不斉異性化反応を検討した.その結果,基質としてジオールを,触媒としてキラルBINAPを配位子とするカチオン性ロジウム錯体を用いた場合は定量的に異性化したケトンが得られたが、その光学収率は43%e. e.であった.しかし,ビスシリルエーテルを基質とした場合には不斉異性化反応がほぼ定量的な化学収率および光学収率で進行することを明らかにすることが出来た.その際,(1)シリルエーテルの大きさは光学収率には影響を与えないこと,(2)他のアルキルエーテルでは高い光学純度を持ったケトンは得られないこと,(3)ジエステルでは全く反応が進行しないこと,(4)オレフィンの異性化の方向はジオールとビスシリルエーテルでは逆である,という興味ある結果も得ることが出来た.さらに,異性化したケトンから各種天然物全合成の出発原料になっている光学的に純粋な4-hydroxy-2-cyclohexenoneの簡便な合成も達成できた.

基質の構造をより単純にした7員環のメソ型エンジオールビスシリルエーテルに対しても本反応を適用したところ,若干の光学収率の低下が観察されたが,好収率でオレフィンが異性化したケトンを得ることに成功した.さらに,ここで得られたケトンから3工程でトロパンアルカロイドであるphysopervineの最初の不斉合成を行うことが出来た.