hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
幼・小の「接続」の幼児教育課程論的研究-幼小の「段差」の視点からー

紙調査の結果を、調査協力自治体担当者に概要として報告した。*同じく、同成果を日本乳幼児教育学会の『乳幼児教育学研究』に投稿したところ、採択され掲載された。*また、同成果を、愛知県立大学文学部の教員養成GP『小学校への見通しをもった幼稚園教員養成』の<特別公開授業>「幼稚園と小学校の接続を考える-幼稚園長への調査・インタビューから考えたこと-」として報告した。2.今年度の調査実施*大阪府内の2幼稚園にて、観察調査と面接調査の予備調査を行った。*その結果(カリキュラム方針の3類型)をふまえ、大阪府・長野県の公立幼稚園各3園(質問紙調査の類型分類に基づいて典型的と思われる園を抽出)、大阪府・鳥取県の私立幼稚園各3園(前者同様)に依頼し、年長クラスの担任と園児の相互交渉の観察調査(複数の調査者による観察)と、園長の運営方針に関する面接調査を合計12園で行った。*上記調査結果の論文化をすすめるとともに、19年度の調査(検証的調査)の準備を行った。3.資料や文献の収集と検討*訪問園の実践記録、教育課程などを収集した。*諸外国の幼児期から児童期にかけての移行円滑化にかかわる文献を検索し、収集した。*移行円滑化に関する研究を精力的に行っているR.C.Piantaの著書を集めて検討を行った。平成19年度は、最終年度に当たるので、平成17年度に実施したアンケート・平成18年度に実施した臨床研究(インタビュー・観察・資料収集)のまとめを実施し、予定通り報告書を作成した。1、報告書の作成2つの調査を中心としてアンケートによる統計的手法を大枠として採用しつつ、臨床的な手法を方法論的に確かめるため、資料の整理を行い、分析の会議をもち検討した。その結果を報告書として作成した。2、成果検討発表会以上の報告書を作成して、長野・鳥取・大阪の関係者に呼びかけて成果発表の会を持った。その中で、幼少接続をカリキュラム論から言うとおのおのの独自性の下幼少接続のパターンを検討しており、PQRのタイプにおいても多様なアプローチがあることが検討された。
血漿・関節液・尿・唾液中マイクロRNAを用いた骨軟骨・靭帯損傷の診断と病態解析

本研究では骨折を有する患者の血漿にて変化しているマイクロRNAを網羅的に検索し6種類の血漿中マイクロRNAが健常人と比して有意に変化していることを見出した。このうち血漿中miR-Dは骨折の受傷後24時間で血中濃度が健常人より有意に低下していた。miR-Dの抑制が骨折の治癒に関与するかを明らかにするために、miR-Dの発現を抑制する核酸を骨折モデルマウスに全身投与したところ、仮骨形成と血管新生が有意に増加し骨折治癒が促進した。これらの結果は、骨折の治癒過程におけるマイクロRNAの新たな役割を明らかにすると同時に、血漿中マイクロRNAの骨折へのバイオマーカーとしての有用性および新たな骨折治療の可能性を示す。マイクロRNAは哺乳類に存在する内在的機構で、アポトーシスや細胞分化、発生、癌などの多様な生命現象を制御している。血漿中にはマイクロRNAが安定な形で存在する事が報告され、特に癌の分野では癌特異的なマーカーとして有用である事が示されている。我々は血漿だけでなく関節液中にもマイクロRNAが安定した形で存在し、関節リウマチおよび変形性関節症のバイオマーカーとして有用であることを示した。一方で、骨折や軟骨損傷、靭帯損傷における分泌マイクロRNAの報告は少ない。本研究はマイクロRNAの骨関節疾患の病態への関与を解明することで、新たな診断や治療につなげることを目的とし研究を行った。申請者らは骨折を有する患者の血漿にて変化しているマイクロRNAを網羅的に検索し6種類の血漿中マイクロRNAが健常人と比して有意に変化していることを見出した。このうち血漿中miR-Dは骨折の受傷後24時間で血中濃度がさらに低下していた。また骨折部局所への核酸投与でも同様の結果を得た。現在までのところ骨折治癒期間の短縮は様々な方法で困難であり、本研究の臨床応用が期待される。miRNAは哺乳類に存在する内在的機構で、アポトーシスや細胞分化、発生、癌などの多様な生命現象を制御している。RNA分解酵素の存在にもかかわらず血漿中にはmiRNAが安定な形で存在する事が報告され、特に癌の分野では癌特異的なマーカーとして有用である事が示されている。我々は血漿だけでなく関節液中にもmiRNAが安定した形で存在すること、関節液miRNAは血漿より関節局所の状態を反映していること、関節液・血漿中miR-16, miR-132, miR-146a, miR-155 and miR-223は関節リウマチおよび変形性関節症のバイオマーカーとして有用であることを示した。一方で、骨折や軟骨損傷、靭帯損傷における血漿・関節液中miRNAの報告はまだない。また、非侵襲的に採取可能な唾液・尿中のmiRNAを用いたこれらの疾患の診断についても同様である。申請者は骨折を有する患者の血漿にて変化しているマイクロRNAを網羅的に検索し、検索した768種類中13種類の血漿中マイクロRNAが健常人と比して変化していることを見出した。唾液や尿中のマイクロRNAを測定したところマイクロRNA自体は測定可能であったが、血漿の検索にて見出したマイクロRNAは唾液や尿中に検出不可能であった。一方で骨折モデルにてマイクロRNAを制御することで骨治癒の促進が生じることを見いだしている。現在までのところ骨折治癒期間の短縮は様々な方法でも困難であり、本研究の成果が期待される。本研究では当初の計画通り骨折患者の血漿にて変化している血漿中マイクロRNAを同定した。さらにマイクロRNA制御による骨折治癒の促進を見出しており、計画通りの達成度にあると考える。上記のように予定通りの成果を得ており、今後も引き続き骨・軟骨・靭帯関連疾患の分泌マイクロRNAの発現解析、およびこれらが骨・軟骨・靭帯関連疾患の病態機序へ果たす役割を研究する。次年度も引き続き骨・軟骨・靭帯関連疾患の分泌マイクロRNAの発現解析、およびこれらが骨・軟骨・靭帯関連疾患の病態機序へ果たす役割を研究するため、これらに必要な核酸分離や測定、細胞培養関連等の消耗品に研究費を使用する。
PD-1/PD-L1が関与する重症外傷病態の解明および新規治療法の開発

研究内容は大きく基礎研究と臨床研究から成る。基礎研究ではマウスを用いた1熱傷モデル2多発外傷モデル3頭部外傷モデルの3つのモデルを用いて外傷後の免疫細胞のPD-1/PD-L1発現変化、損傷形態によるPD-1/PD-L1発現の相違、PD-1/PD-L1阻害による細菌除去能、臓器不全、死亡率、PD-1/PD-L1阻害の至適タイミングを明らかにする。臨床研究では、実際に北海道大学病院に搬入された重症外傷患者に対し、搬入時と第1・3・5病日の計4回検体を採取し、PD-1/PD-L1の発現と重症度、各種測定結果との相関を評価する。現在、研究代表者は本研究の指導にあたる教官とともに準備を進めているが、その予定は大幅に遅れてしまい実験を開始することはできていない。その理由は、基礎研究・臨床研究いずれにも使用する検体保存のための冷凍庫が、既存の-80°Cの冷凍庫では不十分であることが判明し、液体窒素タンクが必要であるとわかったが、想定外に高額であり選定・購入に時間を要していることや、臨床研究を北海道大学病院で行うに当たって病院内の倫理委員会の審査を通す必要があったがその課程に時間を要したことなどが挙げられる。液体窒素タンク以外の必要物品については、ほぼ購入済みであり、臨床研究についての学内の倫理委員会の審査も通ったため、データを集積する準備は整いつつある。基礎研究・臨床研究いずれにも使用する検体保存のための液体窒素タンクが予定外に高額であり選定・購入に時間を要していることや、臨床研究を北海道大学病院で行うに当たって病院内の倫理委員会の審査を通す必要があったがその課程に時間を要したことなどが挙げられる。必要物品が揃えば、教官の指導を受けながら基礎研究および臨床研究を順次開始し、結果を解析する。情報収集などしながら論文作成に取り掛かる。得られた結果をもとに論文作成だけではなく国内外の学会発表も予定している。実験の準備が整わず、研究計画が当初よりも大幅に遅れたことにより初年度に実際に使用した金額が少なかったことから、次年度にまとめて物品を購入したり、学会へ参加したりする予定のため。
等質空間上の概複素構造と共形幾何学的構造についての研究

複素多様体論において,ケーラー構造の研究は中心的なテーマである。局所的にケーラー構造に共形な「局所共形ケーラー構造(LCK構造)」の研究として,コンパクト等質LCK多様体の構造定理「コンパクト等質LCK多様体は旗多様体上の1次元複素トーラスをファイバーとする正則ファイバーバンドルである」を示した。さらに,これらはすべてVaisman型であること,すなわち,LCK構造に付随するリー1形式がリーマン計量に関して平行であることを示した。研究活動の一環として,国際研究集会「複素幾何学とリー群」を,平成25年6月16日20日,トリノ,イタリア,および,平成28年3月22日26日,奈良,にて主催した。研究活動のだいじな一環として,第3回研究集会「Complex Geometry and Lei Groups,2014年6月16日20日,トリノ,イタリア,を開催し,世界各国から70名ほどの参加者があり,講演,研究交流を通して関連する研究分野の発展に大いに寄与できたと考える。[論文1]において,長谷川(研究代表者)と神島(研究分担者)は「コンパクト等質LCK多様体は旗多様体上の1次元複素トーラスバンドルである」ことを示した。また,[論文2]において,4次元ユニモジュラーLie環の分類とその上にLCK構造を持つものを決定し,等質または局所等質LCK構造をもつ複素2次元コンパクト多様体の分類を完成させた。[論文3]においては,神島(研究分担者)Alekseevsky(研究協力者)およびCortes(研究協力者)とともに,Lie群の場合を含め,コンパクトとは限らない等質および局所等質LCK多様体に関して研究し,簡約型の等質多様体上のLCK構造について,アイソトロピー群の正規化部分群がコンパクトならば,Vaisman型であることを示した。これはコンパクト等質多様体に関する[論文1]の結果の一般化である。さらに,簡約型の等質リー群上のLCK構造でVaisman型でないものの例を構成した。国際研究集会「複素幾何学とリー群」平成28年3月22日26日,奈良,を主催し,約50名の参加者があった。「研究実績の概要」に述べた様に,コンパクト等質局所共形ケーラー多様体の場合の,複素多様体としての構造の決定,およびエルミーと多様体としてVaisman型であること,の結果に基づき,非コンパクトな場合,特にLie群の場合および局所等質多様体の場合に結果を部分的に拡張,発展させることができた。研究会「複素幾何学とLie群」を第1回(2007年6月,新潟),第2回(2010年9月,湯沢)に引き続いて,今回,第3回(2014年6月,トリノ,イタリア)をトリノ大学のFinoおよび大阪大学の後藤氏の協力のものに,国際的な研究会に発展させることができた。複素幾何学等質ケーラー多様体の分類問題の解決,ケーラー構造を許容するコンパクト可解多様体の決定問題の解決,に伴って,非ケーラー複素多様体の研究対象としての複素等質多様体に関する研究論文が多くなって来ている。実際に,この分野における新たな結果が次々に得られている一方で,未解決の問題や興味ある問題もまた多く存在しています。「研究実績の概要」に述べた,等質または局所等質・局所共形ケーラー多様体に関する決定問題,等質または局所等質・Vaisman構造に関する決定問題など。また,複素構造に関する問題として,コンパクト可解(冪零)多様体M=G/D,ここでDはGの離散部分群,上の複素構造に関して,G上の左不変な複素構造は,冪零群の場合は複素アファイン空間と双正則同値になるか,可解群の場合はどうか。コンパクト冪零多様体の場合には,第1チャーンクラスが消えることが知られているが,コンパクト可解多様体の場合にはどうか。M=G/D上の左不変な複素構造の変形はまた左不変になるか。これは可解多様体の場合には反例がある。また,M=G/Dのある構造(複素構造,コホモロジー群など)を保ったままで標準的な形G'/D'で表す改変(Modification)の問題など。今後はこの分野の研究者との研究交流を通じてこれらの諸問題に取り組んで行きたい。その研究活動の一環として,第4回国際研究会「複素幾何学とLie群」を,2016年3月20日28日,奈良ー大阪,にて予定しています。この分野のさらなる発展を期待しています。

「研究実績の概要」に述べた様に,等質局所共形ケーラー多様体の研究に関いてはコンパクト等質局所共形ケーラー多様体の構造定理の証明の完成まで何度か困難にも遭遇したが,新しい手法を考案したり別の視点から捉え直したり,また研究の枠を広げるなど今後の研究にも繋げことの出来る研究成果が得られた.共同研究の枠を国際的なものに出来たこともひとつの大きな成果であると考える.第3回研究集会「複素幾何学とLie群」2014年6月,トリノ,イタリア,開催のための資金が当初の予定より少なくて済んだ。来年度以降の研究活動にあてることとした。等質局所共形ケーラー多様体の研究に関して,今までは主に簡約Lie群(reductive Lie groups)およびベキ零Lie群(nilpotent Lie groups)の場合を研究して来たが,今後の課題として可解Lie群(solvable Lie groups)の場合の研究を本格化したい.特に,Vaisman構造について,その決定問題とともに変形理論やcohomology群との関係等,未解決の問題が多々あり,今後の研究課題としたい.別の関連する研究課題として,局所等質コンパクトケーラー多様体や局所等質コンパクト局所共形ケーラー多様体の研究がある.また等質空間上の概複素構造に関する研究に関して,単連結ベキ零Lie群上の左不変な複素構造は複素アファイン空間と双正則である,という予想,またそれらの複素変形は左不変な複素構造になる,という予想問題があり,最近関連する研究が盛んになって来ていて,部分的な結果もいくつか知られている.これらの予想は単連結可解Lie群の場合はすでに「Small deformations and non -left-invariant complex structures on six-dimensional compact solvmanifolds, Differential Geom. Appl., 2010」においてその反例を示している.また複素構造をもつ可解Lie環のDolbeault cohomology群に関する研究も最近盛んになって来ていて,興味ある結果もいくつか知られている.なお,平成26年6月にはイタリアのトリノにおいて第3回「複素幾何学とLi群」研究会を開催する準備を進めている.この研究会を通じて関連する研究分野のさらなる発展を期待したい.第4回国際研究会「複素幾何学とLie群」2016年3月20日28日,奈良ー大阪,の開催するにあたり,研究者の招聘等に使用する。平成26年度に国際研究集会の開催を企画した.期間は平成26年6月16日20日,開催場所はイタリアのトリノ大学,参加者は平成26年4月1日時点で50名,うち講演者数は30名はすでに決定している,講演者招聘,および若い研究者の旅費の資金援助の為に,当該年度の助成金の一部を次年度にあてることとした.
イオン導電性固体薄膜を用いた全固体電池の研究

本研究は、民生用に広範囲で利用可能な固体電解質電池、とくに全固体リチウム二次電池を開発しようとするものである。この種の電池は、昔からその実現が望まれていたが実用に供するものは開発されていなかった。その大きな理由は、十分に高い導電性を有するリチウム固体電解質が発見されていなかった事による。しかし、数年前、松下電池の近藤グループで開発されたリチウムカルコゲン化ガラスLi_2S-SiS_2-Li_3PO_4は、室温で10_<-3>S/cmオーダーの高い導電率を示し、この全固体リチウム二次電池の電解質に十分使用できるものであった。そこで、申請者等によって提案された電解質-電極材複合電極を電極に用い、この電解質と組み合わせたリチウム固体電池を開発しようとしたのであった。まず、バルク試料でLi/Li_2S-SiS_2-Li_3PO_4/LiCoO_2の様な電池を組みその特性研究をおこなった。負極の可逆性はリチウム極にIn合金を使い、電解質と陽極をうまく混合することで、溶液電解質に勝る特性を得ることが出来た。つまり、電流密度(1mA/cm^2以上)、サイクル特性(100サイクル以上、100%)、安定性(この電解質の分解電圧は5V以上、充電反応以外複反応がない)、過充電に対する安全性(3.7Vの定電圧保持すると、充電末期で電流値は10^<-8>A/cm^2以下となり残余電流はほとんど流れない)など、どれをとっても非水溶液電池より有利と思われた。無機固体電解質が数々の優れた特性を有するにもかかわらず、シート状に加工することが困難であった。我々は昭和62年11月松下電器産業、日本合成ゴムの共同研究によって開発された高分子バイダーを用いたテープキャスティング法を用いて電解質および電極を薄膜化を検討した。このような複合化によって、室温で10^<-4>S/cmのイオン導電率が確保された。実際厚さ数十ミクロンで、大表面積を有する電解質シート、電極シートが作成できた。これは安全かつ高信頼性のリチウム二次電池実現の可能性を大いに期待させるものである。1.固体電解質評価用の電極としては現在もっとも広く検討されているLiCoO_2あるいはLiNiO_2を適用することが液体電解質系との比較も容易に行える点で都合がよいと考え、まずLiCoO_2の検討から始めることとした。電池反応の評価は交流インピーダンス法によって行うことができるのでLi_XCoO_2の挙動を正確に捉えられる測定システムの構築を試みた。その結果3極式セルを用いてきわめて広い周波数範囲で分析が行える条件を確立した。このシステムを用い、かつxの値を変えることによって電荷移動反応抵抗や、ワールブルグインピーダンス等の定量的議論が可能になり、インターカレーションのメカニズムを解明できるものと考えている。また導電助剤として使用しているアセチレンブラックが低周波数側でインピーダンス応答に大きく干渉するため特に拡散定数を求めるような場合にはこれを使用すべきでないことが新たに判明した。さらにリチウムをデインターカレートさせる手段として化学的な方法を用いたところ電気化学的な場合とは異なる相が発現することを発見した。この相についても今後詳しく検討する予定である。2.硫化物系固体電解質については双ローラー法による合成法を確立することができた。

またこの材料の粒界効果を含まないバルク効果のみを議論するため非破壊で分析する手段も確立させた。即ち上記方法で作成した薄膜にIn-Ga電極を塗布しエポキシ中に包埋することで長時間安定に種々の測定に供することができるようになった。これにより正確な導電率や分解電圧の測定が行え、バルク導電率は室温で10^<-3>Scm^<-1>と極めて高いことが確認できた。現在はこれに様々な金属をド-ピングし、さらなる導電率の向上を試みているところである。またLiCoO_2と組み合わせて電極・電解質界面の解析及び最適化を行う予定である。本研究は、より安価で民生用に広範囲で利用可能な固体電解質電池とくに全固体リチウム二次電池を開発しようとするものである。この種の電池はいまだ実用に供するものは開発されていない。現段階では十分に高い導電性を有するリチウム固体電解質が発見されていない。しかし、その中では松下電池で開発された室温で10^<-3>S/cmオーダーの高い導電率を示すリチウムカルコゲン化ガラスLi_2S-SiS_2-Li_3PO_4は電解質に使用した。薄膜ではないがLi/Li_2S-SiS_2-Li_3PO_4/LiCoO_<>の様な電池を組みその特性研究をおこなった。負極の可逆性はリチウム極にIn合金を使い、電解質と陽極をうまく混合することで、溶液電解質に勝る特性を得ることが出来た。つまり、電流密度(1mA/cm^2以上)、サイクル特性(100サイクル以上、100%)、安定性(この電解質の分解電圧は5V以上、充電反応以外複反応がない)、過充電に対する安全性(3.7Vの定電圧保持すると、充電末期で電流値は10^<-8>A/cm^2以下となり残余電流はほとんど流れない)など、どれをとっても非水溶液電池より有利と思われた。薄膜化することでさらに容量の大きい、大電流が取り出せる電池となろう。問題は電解質が硫化物で吸湿性であるため取り扱いに注意を要することである。現在薄膜化へむけて、高分子バイダーを用いたデ-プキャステング法を用いて電解質および電極を薄膜化しようとしている。本研究は、民生用に広範囲で利用可能な個体電解質電池、とくに全個体リチウム二次電池を開発しようとするものである。数年前、松下電池の近藤グループで開発されたリチウムカルコゲン化ガラスLi_2S-SiS_2-Li_3PO_4は、室温で10^<-3>S/cmオーダーの高い導電率を示し、この全個体リチウム二次電池の電解質に十分使用できるものであった。そこで、申請者等によって提案された電解質-電極材複合電極を電極に用い、この電解質と組み合わせたリチウム固体電池を開発しようと試みた。前年度までに、バルク試料でLi/Li_2S-SiS_2-Li_3PO_4/LiCoO_2の様な電池を組みその特性研究をおこなった。
疲労骨折の予防を目的としたトレーニングの開発－下肢筋力に着目して－

疲労骨折は、一度発症すると完治までに2-3ヶ月を要するため、スポーツ選手にとっては予防が重要な障害の一つである。これまでに我々は、疲労骨折を発症した選手の膝関節伸展屈曲筋力が低いことを明らかにした。膝関節伸展屈曲筋力が弱いと、骨にかかる衝撃の吸収作用が弱くなってしまう。さらに、骨吸収マーカーであるTRACP-5bが疲労骨折を発症しやすい選手で高いことも明らかにしている。そこで、本研究では膝関節伸展屈曲筋力が高い選手ほどTARCP-5bが低いのではないかとの仮説を立証するため、膝関節伸展屈曲筋筋力と疲労骨折の発症しやすい選手で高いTRACP-5bの関係を明らかにすることを平成30年度の目的とした。大学女子長距離選手10名(20.2±1.2歳)を対象とし、骨代謝マーカーは、骨形成マーカーとしてTotalP1NP、骨吸収マーカーとしてTRACP-5bを測定した。筋力は膝関節伸展・屈曲筋筋力を短縮性収縮下角速度60・180・300度/秒(CC60・180・300)、伸張性収縮下角速度60・180度/秒(EC60・180)で測定した。また膝関節60度屈曲位での等尺性筋力(IM)を測定し、最大トルク(PT)、最大仕事量(PW)を評価した。これらの結果から、膝関節伸展・屈曲筋筋力が低い選手ほど骨形成および骨吸収マーカーが高く、高回転型の骨代謝動態である可能性が示された。平成30年度に計画していた、骨代謝マーカー(特にTRACP-5b)と下肢筋力の関係について計画通り実験を進めることができた。さらに、そこから得られた結果は当初の仮説とは少し異なっていたが、新たな発見を確認できた。研究分担者が研究機関が変更したことにより、平成30年度と同様の被験者を確保することができないことになった。そのため当初、令和元年度に予定していた計画を進めることが困難になることが考えらえる。そこで、研究分担者を追加することで、被験者の確保に関する問題を解決する。さらに、これまでに使用していた測定器も使用することができないため、使用可能な機器を用いて、実験を改めて行う。さらに、平成30年度は女子選手を対象に行ったが、令和元年度は男子選手での実験を行う予定である。採血による検査費が予定していた金額より安かったため、一部次年度使用額が生じた。この額は令和元年の研究時に検査費代として使用する予定である。
脂肪細胞内eNOSの発現、活性調節機構と新たな役割の解明

脂肪細胞から放出される遊離脂肪酸は、Metabolic Syndrome (MetS)の基盤となるインスリン抵抗性を惹起するが、そのメカニズムは完全には解明されていない。昨年度では、脂肪細胞ではPPARγの調節のもとにeNOSが発現しており、そのeNOS由来の内因性NOは、S-ニトロシル化を介して脂肪分解を抑制することにより、Met'sの病態形成に抑制的に働いている可能性があることを報告した。本年は、脂肪分解に対する脂肪細胞内eNOS/NOの役割を、動物を用いてより生理的な作用を明らかにすることを目的とした。eNOS KOマウスならびにwild-type (WT)マウスに対し、14週間に渡って高脂肪食(HFD)負荷を行った。結果、eNOS KOではWTに比較して脂肪細胞のサイズ、体重、皮下脂肪量において著明に増加し、有意な高血糖、高TG血症、高コレステロール血症、高インスリン血症、さらにインスリン抵抗性の増悪も認めた。また、in vivoにおいてもeNOSの欠如が脂肪分解を増加させるか否かについて検討を行った。腹腔内へのイソプロテレノールの注入で脂肪分解を促進させたところ、投与前後の血清FFAの値の変化量がeNOS KOでは有意に増加しており、in vitroで確認されたeNOSの脂肪分解抑制作用がin vivoにおいても確認された。また、内臓脂肪量がeNOS KOではWTより有意に減少していたこともeNOS KOにおける脂肪分解の亢進を示唆している。また、脂肪分解において放出されたFFAは門脈を介して肝臓に流入し、沈着するため、肝臓における変化を検討した。eNOS KO(HFD)では、WTに比較して約1.5倍の肝重量の増加、肝臓内貯蓄TGの約2倍もの増加など、著明な脂肪肝への変化を認めた。また、血中のASTの上昇や肝臓組織における線維化の増加、マクロファージや炎症細胞の増加、酸化ストレスマーカーの増加などから、NASHを呈していると考えられた。以上から、eNOSの欠如により脂肪分解が亢進し、その結果としてNASHが誘導され、高インスリン血症を来すのではないかと考えられた。今後、PPARγ関連薬剤を用いて治療介入が可能であるかの検討を行う予定である。脂肪細胞から放出される遊離脂肪酸は、Metabolic Syndrome(MetS)の基盤となるインスリン抵抗性を惹起するが、そのメカニズムは完全には解明されていない。今までの結果から、脂肪細胞においてeNOSが発現しており、そのeNOS由来の内因性NOは、脂肪分解を抑制することにより、脂肪内eNOSがMet'sの病態形成に抑制的に働いている可能性があることが示唆されている。本年は、脂肪細胞におけるeNOSの活性、発現制御機構を中心に脂肪分解における役割について検討した。特に、脂肪細胞内eNOSの由来NOが脂肪分解に対してどのように抑制的に作用するのか、その分子メカニズムについての検討を行った。脂肪細胞内eNOS由来NOは古典的なcGMP経路ではなく、S-ニトロシル化を介していた。脂肪分解にかかわる酵素であるホルモン感受性リパーゼや脂肪トリグリセリドリパーゼであるATGLとの関連について検討を行う予定である。また、脂肪細胞におけるeNOS発現の制御機構は全く不明である。そこで、3T3-L1細胞系を用いてこの事を検討した。脂肪細胞内eNOSはPPARγアゴニストによってその発現が抑制され、PPARγによる発現調節の可能性が示唆された。今後、eNOS遺伝子を用いたルシフェラーゼアッセイにより転写調節因子の検討を行い、脂肪細胞内eNOS発現を増強させうる薬物、方法についての検討を行う予定である。

また、血中のASTの上昇や肝臓組織における線維化の増加、マクロファージや炎症細胞の増加、酸化ストレスマーカーの増加などから、NASHを呈していると考えられた。以上から、eNOSの欠如により脂肪分解が亢進し、その結果としてNASHが誘導され、高インスリン血症を来すのではないかと考えられた。今後、PPARγ関連薬剤を用いて治療介入が可能であるかの検討を行う予定である。
宇宙放射線の重粒子成分が誘発するクラスターDNA損傷の解析と生物影響

宇宙放射線被ばくでは,実効線量として生物学的効果比の高い重粒子線の寄与が大きくなる。重粒子線はLETが高く,高密度に損傷を含むクラスターDNA損傷が生物影響に関わっている可能性が指摘されているが,実験的にはその証拠や損傷密度に関する知見は得られていない。本研究では,重粒子線誘発クラスター損傷の性状を原子間力顕微鏡(AFM)で解析するとともに,塩基除去修復酵素によるクラスター損傷の不成功修復(abortive repair)の影響を調べ,重粒子線の生物影響メカニズム解明に取り組む。プラスミドに誘発されるクラスター損傷分析のため,pUC19 DNAをX線で照射した。DNAをDNAグリコシラーゼ(Endo III+OGG1)で処理後,脱塩基部位をbiotin,avidin標識した。DNAのAFM観察を行った結果,孤立損傷に加え,クラスター損傷としてDNA二本鎖切断(DSB,損傷多重度=2),塩基損傷/塩基損傷(Base/Base,損傷多重度=2),DSB末端の塩基損傷(DSB+Base,損傷多重度=3)が観察された。一方,X線と同様な酸化損傷を誘発する過酸化水素で処理したプラスミドでは孤立損傷のみが観察された。現在,鉄イオン線照射したDNAのAFM観察を行っている。酸化ピリミジングリコシラーゼ(Nth1)および酸化プリングリコシラーゼ(Ogg1)の両者をノックアウトしたマウス胚性繊維芽細胞(nth1-/- ogg1-/-)を用いて不成功修復の影響を検討した。X線に対する生存率をコロニー形成法で調べた結果,僅かであるがダブルノックアウト細胞は野生型細胞に比べ高い生存率を示した。両グリコシラーゼが関与する不成功修復の影響がノックアウト細胞では緩和された可能性が考えられる。一方,過酸化水素で処理した場合は,ダブルノックアウト細胞と野生型細胞は同じ生存率を示した。29年度が最終年度であるため、記入しない。惑星探査ミッション等で長期間宇宙に滞在する場合,実効線量として生物学的効果比の高い重粒子線の寄与が大きくなる。重粒子線は線エネルギー付与(LET)が高く,高密度に損傷を含むクラスター損傷が生物影響に関わっている可能性が指摘されているが,実験的にはその証拠や損傷密度に関する知見は得られていない。本研究では,重粒子線誘発クラスター損傷の性状を原子間力顕微鏡(AFM)で解析するとともに,塩基除去修復(BER)酵素によるクラスター損傷の不成功修復(abortive repair)の影響を調べ,重粒子線の生物影響メカニズム解明に取り組む。クラスター損傷の性状については,損傷部位をbiotin-avidin標識し,AFMで可視化分析する方法を検討した。モデルクラスター損傷で2つの損傷が3塩基離れているDNAについてAFM観察を行い,約60%の損傷が分離して観察された。この結果から,放射線誘発クラスター損傷でも,個別損傷の可視化分析が可能であると考えた。次に,プラスミドに誘発されるクラスター損傷分析のため,pUC19 DNAをX線およびFeイオン線で照射した。DNAをDNAグリコシラーゼで処理後,脱塩基部位をbiotin-avidin標識した。現在,DNAのAFM観察を行っている。クラスター損傷の不成功修復については,BER再構成系を用いてクラスター損傷修復を検討した。トップおよびボトム鎖にそれぞれ1つずつ8-oxoguanine (8-oxoG)を導入したDNA基質をOGG1+APE1+PolβとインキュベートしDSBを調べた。一つめの8-oxoG除去は効率良く起こるが,二つめの8-oxoG除去効率は,損傷の位置関係やBER酵素の修復反応の影響を受け,クラスターのタイプによりDSB生成量が変化することが分かった。原子間力顕微鏡(AFM)によるクラスター損傷の性状解析の準備が整い,塩基除去修復(BER)酵素によるクラスター損傷の不成功修復についてもin vitroおよびin vivoのデータが得られつつある。

両グリコシラーゼが関与する不成功修復の影響がノックアウト細胞では緩和された可能性が考えられる。一方,過酸化水素で処理した場合は,ダブルノックアウト細胞と野生型細胞は同じ生存率を示した。これまでの研究計画に従い,クラスター損傷の性状解析と不成功修復について研究を進める。29年度が最終年度であるため、記入しない。
バセドウ病の疾患感受性遺伝子の同定と機能解析、及び臨床像との関連

バセドウ病は、TSHレセプター自己抗体によって複数の遺伝因子と環境因子によって引き起こされる臓器特異的自己免疫性疾患である。我々はこれまでに、多因子性疾患の一つであるバセドウ病の遺伝的素因について検討してきた。候補遺伝子アプローチとして、自己抗原であるTSHレセプター遺伝子と免疫制御分子であるCTLA遺伝子を検討し、多型マーカーとの有意な相関を得た。また、ランダムスクリーニングによるポジショナルクローニングアプローチを行い、5q23-33に有意な連鎖を認めた。そこで、今回の研究においては、1)候補遺伝子の一つであるTSHレセプター遺伝子のSNPを用いて、Blockの存在と同病との関連の検討を行った。2)5q23-q33において、免疫関連遺伝子を中心として候補遺伝子をpick upし、SNPによる関連解析を行った。TSHレセプター遺伝子内のSNPを用いての関連解析:Genotype別の解析でバセドウ病において2つのSNPで関連が有り、Allele別の解析ではAITDで1つ、バセドウ病で3つ、橋本病で2つのSNPにおいて弱い関連有った。これらのSNPを用いての連鎖不平衡解析によって、Exon 1から10の領域は3つのBlockに分割された。それぞれのブロック内のハプロタイプ解析においてBlock1で橋本病との関連、Block2でバセドウ病との関連、Exon10のSNPを含むBlock3で両方の疾患との関連、が示唆された。Ch5q23-33領域の解析では、D5S2115以外にD5S2117、D5S2110付近にも比較的強い関連が認められ、疾患感受性領域の存在が示唆された。この領域におけるCytokine Cluster・免疫関連遺伝子のSNPを用いて関連解析では、IRF1、GM-CSFにおいてバセドウ病との関連があった。
味覚嫌悪学習の脳内神経機構の電気生理学的・行動薬理学的研究

味覚嫌悪学習の脳内神経機構について、ラットを用いて電気生理学的・行動薬理学的研究を行った。ラット大脳皮質味覚野ニューロンの条件味刺激に対する味応答性を経時的に記録・比較したところ、条件づけ操作前後によって、応答に増強性変化を示すニューロンを認めた。応答性の経時的変化パターンには、条件づけ操作30分後から獲得されていた増強性応答が条件づけ操作の6時間後まで維持されていた群と、30分後前後に獲得されていた増強性応答が60分後には減弱し、90分後以降認められなくなった群であった。前者を長期的増強型ニューロン(6/122)と、後者を短期的増強型ニューロン(8/122)と、各々呼ぶこととする。すべての長期的増強型ニューロン(6/6)は、キニ-ネに最大の味応答を示す(キニ-ネベスト)ニューロンであった。短期的増強型ニューロンには、塩ベスト(3/8)、塩酸ベスト(4/8)、キニ-ネベスト(1/8)があった。味覚嫌悪学習に関わる脳部位の中で、扁桃体・大脳皮質味覚野における細胞内情報伝達系を調べるため、条件づけ操作の中のさまざまな時期に蛋白リン酸化酵素C(PKC)の活性阻害剤をそれらの脳部位に微量注入した。条件味刺激であるサッカリンをラットに摂取させた後、PKC阻害剤を扁桃体や大脳皮質味覚野に注入し、30分後に無条件刺激として塩化リチウムを腹腔内投与した。翌日、サッカリンを再呈示すると、阻害剤注入群のラットは、溶媒注入群のラットに比べて有意に多くのサッカリンを摂取した。PKC阻害剤を条件づけ操作の4時間後、もしくは、サッカリン再呈示の30分前にそれぞれの部位に注入した群におけるテスト時のサッカリンの摂取量と、溶媒注入群のサッカリン摂取量と間には有意差を認めなかった。つまり、条件づけ操作時にのみ扁桃体や大脳皮質味覚野におけるPKCを不活性化すると、味覚嫌悪学習の獲得が障害されることがわかった。味覚嫌悪学習獲得時には、扁桃体や大脳皮質味覚野での条件味刺激に対する応答性が変化するが、この変化は両部位におけるPKC活性化に依存したシナプス可塑性に起因し、その変化は味覚嫌悪学習獲得に必要である可能性がある。
パンルヴェ方程式の漸近解析とモノドロミ問題

q-パンルヴェ方程式を解くことを考え、| q|=1の場合に、第1,第2q-パンルヴェ方程式は無限遠の回りで収束する解を持つことを示した。特にqが1のべき根の時は超幾何函数で表されることを示した。また、q-超幾何函数の退化図式を構成して、7つの異なる方程式が得られることを示した。さらに、パンルヴェ方程式の漸近展開の収束性を調べつつある。また、モノドロミ非保存変形について不確定特異点の場合に調べた。本研究では、複素領域における線型常微分・差分方程式のモノドロミをパンルヴェ方程式の解析を用いて決定することを目標とした。本年度め研究テーマとして、とくにq-差分方程式の接続問題を主テーマに掲げた。本年度は、q-第1パンルヴェ方程式において、qの絶対値が1の時には、無限遠でのべき展開が収束する解が存在すること、さらに、qが1のべき根の場合は、特殊解が超幾何函数で表示されることを示した。q-第1パンルヴェ方程式はqが一般の値の時は、すべての解が超越的(1階差分方程式の解には帰着されない)ことがわかっており、この解はq-第1パンルヴェ方程式で厳密に求められた特殊解の最初の例になっている。同様の解はほかのq-パンルヴェ方程式でも(計算は複雑になるが)構成することは可能であり、おもしろい役割りを果たすと期待される。この研究結果は、夏に英国ケンブリッジで開かれた研究で発表した。本年度の後半では、モノドロミ非保存変形について研究した。何年かに一度、アルファン系の方程式を研究してきたが、今年度は不確定特異点を持つ場合のアルファン系の方程式が、モノドロミ非保存変形になることを示した。もともとのアルファン系が超幾何函数で解けるのに対して、退化系は同じように合流超幾何函数などで解ける。これらの方程式も、不確定特異点を持つ線型方程式のモノドロミ非保存変形として表される。この研究結果は、3月に仏国レンヌでの幾何解析セミナーにおいて発表した。昨年度に引き続いて、q-パンルヴェ方程式の研究、特に特殊解の構成に力を注いだ。昨年度、第一q-パンルヴェ方程式に対して、qが1のべき根の場合について代数解を構成したが、今年は第二q-パンルヴェ方程式に対して同様の結果を出した(9月のギリシャ・ロードス島での研究会で発表して、そのプロシーディングに掲載ずみ)。この調子で先へ進んでも、さほど面白くはないと思っているが、将来的には漸近展開への布石になるであろうと予想している。後半は方向を転じて、q-パンルヴェ方程式の超幾何解との関連を探るべく、超幾何型q-差分線型方程式の統一理論を展開した。q-特殊函数については、古典型の特殊函数と異なり、統一的な始点による研究が少ないため、とりあえずラプラス型について分類すると、基本超幾何函数の合流として7つのタイプがあることがわかった。古典的な場合だと5つだが、エアリーとベッセルに対応する場合がともに2つあるためである。q-エアリー函数が第三q-ベッセル函数の特殊化として得られることを示したこと、さらに、2つのq-エアリー函数がシェアリング変換で移り合うことは大きな発見であろう。さらに、修士1年の森田健君が接続問題を解いたことで、2つのq-エアリー函数の関係が完全に明らかになった。また、リーマン・スキームのq-類似の構成など、q-差分線型方程式を考察するうえでの基本的な道具立てを整備できた点も、今後の研究に役立つと思われる。この分類によって、q-パンルヴェ方程式の超幾何解との関連も明確になり、本研究の大きなテーマの一つであった、q-パンルヴェ方程式に対するモノドロミ(正確には接続係数)可解な解への研究へ一歩を踏み出した。この研究結果は、2月に行われたストラスブールでの日仏研究会で発表した。本年度は、1.パンルヴェ方程式とカルタン幾何との関係2.パンルヴェ方程式の漸近解析の2点について調べた。1.では、パンルヴェ方程式のパラメタがカルタンの射影微分幾何の不変量になることに注目して、特に特殊な形の2階の正規形微分方程式を座標変換して、第1パンルヴェ方程式になる条件などを求めた。この方法は、ガンビエの分類のある一部分を明示したものといえる。同様の手法によって、第1、第2,第4パンルヴェ方程式に関しては、カルタンの(擬)不変量とパンルヴェ方程式との対応関係が決定できると期待している。2.においては、ここ20年来、混乱しているパンルヴェ方程式の漸近解析を徹底的に整理して、べき級数型の漸近解と楕円型の漸近解の各々について調べた。アブロビッツ・シーガー解など指数型の漸近展開もべき級数型の特殊ケースとして扱うことが出来る。

特に、第5パンルヴェ方程式の楕円漸近解は、ブートルーはじめ先行する研究でも見過ごされていたが、初項だけは決定した。べき級数型については、すでに岩野の定理および80年代の高野・下村・吉田で収束が示されていたが、その後の研究の中で忘れ去られていたので、パンルヴェ方程式のべき級数型漸近解析のタイプを完全に分類することで、その収束がすべて高野・下村・吉田の結果に、ベックルント変換によって決定できることを示した。本研究では、パンルヴェ方程式の漸近解析を主目的の一つに掲げたが、3年目の最後で将来につながる結果を出すことができた。カルタン幾何との変換論も、本研究の一つの方法論として考えていた微分ガロア理論につながるものと思われる。
市場経済への移行のための経済政策体系の実証的、理論的研究および政策類型比較

先行して市場経済への移行過程を徹底した形で進めた東独を観察すると、2つの特徴的な事実が浮かび上がる。第1に、負の遺産の重さである。この点は特に西側(ないし先進側)からより多く着目され、生産性と技術の低さ、産業構造の歪み、インフラストラクチャの遅れ、経済マインドの欠如、市場諸制度の欠如などが指摘され、さも焼け跡に立つが如くに描写される。第2に、移行過程の破壊性である。この点は主に東側インテリが着目し、市場経済移行過程が「ラディカル」すぎて、工業も農業も壊滅的となり、失業が大量化し、犯罪が増え、拝金主義が横行する、と批判する。これらはいずれも重要な事実であるが、しかし私の観察では、第3の重要な側面がある。新たな発展の開始である。ある種の清算過程を経た農業では西欧で実現するには(現在の年間平均経営規模拡大率から計算すると)200年はかかろうかという規模拡大を実現した1000ha規模の近代的農場が形成された。工業では日本から発進し米国を経て西欧に入りつつある生産様式が西欧よりも容易に導入されつつある。無論技術装備の一新も進み、工業投資は高い成長率を示している。インフラはすでに大幅に改善された。これらのことは上記の第2の観察が一面的であることを示す。重要なことは、西独人の協力もあるとはいえ、これらの新発展の主要部分を東独自体の人的資源が支え推進していることである。労働力の一般的教育水準の高さは、経営指導部を含む多くの分野で確証された。従って遺産は負ばかりではなかったのであり、上記の第1の観察も一面的であることを示す。この側面をいかに育てるかが経済政策の柱の1つであるべきであり、そのためには産業政策拒絶という伝統イデオロギーが一新されなければならない。過去の清算と分解、その中からの新発展への挑戦の形成、これが現在の過程であり、他の旧ソ連東欧諸国も各国の条件に応じて異なる程度ではあるが、第1、2の側面のみではなく第3の側面も顕著に観察される。
ウミガメ類におけるヒ素の蓄積及び代謝機構の解明

本研究は、タイマイとアオウミガメを対象に組織中のヒ素化合物を高速液体クロマトグラフィー/誘導結合プラズマ質量分析計(HPLC/ICP-MS)で定量した。本年度は両種におけるヒ素の年齢蓄積、生物濃縮、代謝能力について解析した。甲長を年齢の指標とし、タイマイとアオウミガメのヒ素の年齢蓄積性について検証したところ、タイマイでは正の、アオウミガメでは負の相関関係が認められた。タイマイは成長するほど肉食性になり、逆にアオウミガメは肉食性から草食性にシフトする。動物プランクトンや魚類はアルセノベタイン、藻類はヒ素糖を高蓄積しているが、ヒ素糖は動物に摂取されても蓄積されないことが知られている。以上のことから、タイマイおよびアオウミガメの年齢蓄積性に摂取する餌の変化、すなわち両種ともに肉食性の成長段階のときはヒ素を高蓄積するが、草食性になるとヒ素を体内に保持しないため、このようなヒ素濃度の変動が生じたと予想された。タイマイ、アオウミガメ共に組織に比べて胃内容物のアルセノベタイン濃度は低濃度であった。アルセノベタインの生物濃縮係数は他の海棲動物の中でも極めて高く、タイマイおよびアオウミガメは、体内にアルセノベタインを保持する機構があるものと推察された。また胃内容物から未同定ヒ素化合物がいくつか検出されたが、おそらくヒ素糖であると考えられた。肝サイトゾルを用いた亜ヒ酸の代謝試験では、両種とも亜ヒ酸をモノメチルアルソン酸に代謝した。しかし生成したモノメチルアルソン酸の量はアオウミガメよりもタイマイの方が高かったことから、その代謝効率はタイマイの方が優れていると推察された。生態系においてヒ素は様々な化学形態で存在し、その毒性や挙動は形態によって大きく異なることが知られている。近年の分析技術の進展により、海洋低次生物におけるヒ素化合物の分布・形態は明らかにされつつあるが、高次生物に関する研究はきわめて少ない。本研究グループは、これまでにイルカやアザラシ、アホウドリ等の海棲高次生物を調査し、ウミガメ類のヒ素濃度が相対的に高いことを明らかにした。本研究は、タイマイ(Eretmochelys imbricata)とアオウミガメ(Chelonia mydas)を対象に組織中のヒ素化合物を分析し、ヒ素の蓄積特性についてより詳細に解析した。沖縄県石垣島で捕獲されたタイマイとアオウミガメの組織(筋肉、肝臓、腎臓、心臓、脾臓、肺、胃、腸、眼球)を化学分析に供試した。総ヒ素濃度は、組織を酸分解した後、水素化物発生原子吸光光度計(HG-AAS)で測定した。また、ヒ素化合物は、組織からメタノール/水で抽出し、高速液体クロマトグラフィー/誘導結合プラズマ質量分析計(HPLC/ICP-MS)で定性・定量した。タイマイとアオウミガメにおける総ヒ素の組織分布を解析したところ、両種において筋肉が最も高濃度を示した。また、タイマイの組織中総ヒ素濃度はアオウミガメよりも有意に高く、低次生物に匹敵するレベルであった。組織中のヒ素化合物は、両種ともにアルセノベタインが主成分であった。興味深いことに、タイマイからはトリメチルアルシンオキサイドが検出された。以上のことから、タイマイは特異的なヒ素の蓄積・代謝機構をもつことが示唆された。
in vivoにおいてミクログリアが示す神経回路修飾機構

まずマウスを用い、ミクログリアの生理状態の基礎的性質について、電気生理やイメージングを駆使して解析した。その一環として、電位依存性プロトンチャネルがミクログリアの活性酸素産生に重要であることを明らかにした。またこれが加齢依存的に脳梗塞の病態に関わることを示した。次に、これらのミクログリアの重要性をin vivoで解析したいと考え、ゼブラフィッシュを用いた検討を行うことにした。CRISPR/Cas9により電位依存性プロトンチャネルの遺伝子を欠損したゼブラフィッシュを作製することに成功した。更にはゼブラフィッシュにおける活性酸素の測定系の確立にも成功し、今後の解析へと大きく前進することが出来た。本研究では、まず最初に脳内でミクログリア特異的に発現するとされる電位依存性プロトンチャネルに着目した。電位依存性プロトンチャネルの発現プロファイルは多くが哺乳類においてのみ知られていたため、ゼブラフィッシュにおけるその発現パターンを調べた。その結果、ゼブラフィッシュでも電位依存性プロトンチャネルはマウスと同様に貪食細胞に発現していることが明らかとなった。また、電位依存性プロトンチャネルの機能解析を進めるため、CRISPR/Cas9システムを用いて電位依存性プロトンチャネル遺伝子欠損ゼブラフィッシュの作成を試みた。これまでのところ、F1においてヘテロ個体が多数得られているため、次の世代でホモの個体を解析に使用できると考えられる。また、電位依存性プロトンチャネルの代わりにGFPを発現するノックインゼブラフィッシュの作成にも成功しており、これによってミクログリアにおける電位依存性プロトンチャネル欠損の影響を、細胞レベルで解析することが可能となると期待される。このほかにも現在は電位依存性プロトンチャネル以外の膜タンパク質の遺伝子欠損個体も作成を試みている段階である。ゼブラフィッシュは小型で胚が透明などの特徴があり、in vivoでの細胞機能の解析において非常に有効なツールである。その一方でノックアウト動物の作成は、近年CRISPR/Cas9システムの開発により爆発的に進んでいるものの、未だマウスから後れを取っている段階である。本研究で着目しているタンパク質に関しても、マウスにおいてノックアウトマウスが世界的に使用されているものの、ノックアウトゼブラフィッシュはこれまで存在していなかった。従ってこれらの動物の作成が、研究を進める最初の段階で重要となってくるが、比較的スムーズにこれらを遂行することが出来た。従っておおむね順調に進展しているといえる。まずマウスにおいて、初代培養ミクログリアを用いて各種イオンチャネル機能の解析を行い、更に膜電位イメージングやカルシウムイメージングなどによって活性酸素産生時などにおける生理的性質の変化を調べた。その一環として、電位依存性プロトンチャネルが、従来の報告とは逆にミクログリアの活性酸素産生を抑制する報告に作用することを明らかにした。このような制御には電位依存性プロトンチャネルを介したアクチン制御機構が関与している可能性が示唆された。またこれらの調節は、加齢状態など個体の生理状態に応じて異なることが示唆され、実際に脳梗塞実験において、電位依存性プロトンチャネルによる神経損傷への寄与には加齢による違いが認められた。しかし一つ問題として、培養時のミクログリアの性質はin vivoのものとは大きく異なるとされていることが挙げられる。そこでミクログリアの生理機能をより詳細にin vivoで解析するため、身体が透明なため解析が容易なゼブラフィッシュを用い、実験を進めることにした。分子生物学的手法及び電気生理学的手法による解析により、ゼブラフィッシュにおける電位依存性プロトンチャネルの発現パターンは、哺乳類と同様であることが示唆された。更に電位依存性プロトンチャネルの遺伝子欠損個体の作製や、ゼブラフィッシュにおける活性酸素の測定系の確立にも成功し、ゼブラフィッシュを用いたin vivoでの機能の検証へと大きく前進することが出来た。F1のヘテロまで確立された電位依存性プロトンチャネル欠損ゼブラフィッシュに関し、更に世代を進めることでホモ個体を得る。そしてin vivoにおけるミクログリアの形態変化、貪食能の変化、活性酸素産生量の変化などについて着目した研究を進める。また、電位依存性プロトンチャネル以外の膜蛋白質にも着目し、これらがin vivoにおいてミクログリアの機能に与える影響を解析する。生理学遺伝子改変動物の作成に当初の予定より少し時間を要したため、今年度中の解析に移ることが出来なかった。よって来年度以降に、これらの解析を進める予定である。遺伝子改変動物を用い、イメージング実験や生理学的な研究を推し進める。
17世紀英国古版本の無記名印刷者特定に関する研究

28年度は、今年度配分の全額をEarly English Books Online (EEBO)のアクセスライセンス購入にあてたため、英国図書館における実地調査が行えなかった。EEBO導入前の年度前半は、研究対象としている二人の印刷者の関与が疑われる無記名印刷本のファクシミリを収集し、それぞれの版本に使われている活字フォント、組版の規則性について調査を行った。組版の規則性に関する調査は、当該版本における分担印刷者の有無を判断する材料となる。これまでの調査で、English Short Title Catalogue上、ウィリアム・ウィルソンが印刷者として登録されている版本の複数ページに、別の印刷所で用いられた欠損活字、欠損装飾文字と同一のものが使われていることがわかっている。組版の規則性を調べることで、この版本が、登録されている人物とは別の印刷者の監督下で一貫して印刷されたものか、あるいは、問題の活字が見つかったページを含む一部のみ分担されたものであるかが判断できる。ファクシミリを用いた調査では活字の細部を見ることはできないが、各ページで用いられたフォントの違い、版面の文字および行数から、組版の規則性に検討をつけることが可能である。結果、別の印刷者が一貫して当該版本の印刷を担当したという結論に至った。また、EEBO導入後は、29年度に予定している印刷者不明の印刷物9点中の数点について、印刷者ウィリアム・ウィルソンの使用中に欠損した装飾文字が使用されていることを確認した。研究実績で述べた通り、28年度は稀覯本図書館における実物調査が行えていない。このため、活字や紙の詳細な調査が後回しとなっている。現地調査が行えなかった理由はEEBOのアクセスライセンス購入を優先したためである。ファクシミリを用いて行う調査に関しては、他大学に複写を依頼し、取り寄せる過程に時間がかかり苦心してきため、今回EEBO導入を見送ることはできなかった。EEBO導入により、ファクシミリを用いて行う研究に関しては、はるかに時間を短縮できるようになった。このため稀覯本図書館で現物調査を行うまでのファクシミリを用いた準備に関しては、年度計画によらず、遂行可能な仕事を先に進めることとする。