hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
カテプシンK-Notch signal 経路 とサルコペニアに関する研究

当該研究において、CatKがNotch1の活性化を介して筋肉再生を促進するとした当初の仮説が覆され、障害後骨格筋でのCatK発現の上昇がむしろ筋肉再生を阻害する要因であることが明らかとなったことから、現在多くの疾患で臨床的にも問題となっているカヘキシアによる骨格筋萎縮と、CatKとの関係をマウスのカヘキシアモデル(C57BL/6Jにマウス肺癌細胞株(Lewis lung carcinoma, LLC,1×10 6個)を背部皮下に移植し、移植28日後にサンプリングする)を作成し、下肢筋肉の評価、ならびに運動機能評価を行った。移植28日後に摘出した腫瘍組織重量は両群で有意差を認めず、腫瘍組織重量を除いた体重の変化率はコントロール群(C57BL/6J)に比較し、LLCを移植したカヘキシアモデル群で有意に低下し、筋重量も有意に減少した。筋線維サイズはコントロール群に比較し有意に減少し、さらにカヘキシアモデル群で握力の有意な低下を認めた。また、サンプリングした筋細胞(腓腹筋)の生化学的検査を実施したところ、ユビキチンプロテアソーム系(Atrogin-1,MuRF,FOXO1,FOXO3)の遺伝子発現がカヘキシアモデル群で有意に高くなっていた。同様に、LLCをカテプシンK遺伝子欠損マウスに移植し、下肢筋肉の評価ならびに運動機能評価を行ったところ、CatK-KO+カヘキシアモデル群ではカヘキシアモデル群で認めた体重減少および筋重量の低下を認めず、筋線維サイズの有意な増加を認めた。運動機能評価についてもCatK-KO+カヘキシアモデル群では握力低下を認めなかった。CatK-KO+カヘキシアモデル群においてユビキチンプロテアソーム系(Atrogin-1,MuRF,FOXO1,FOXO3)の遺伝子発現は低下し、p-Aktタンパク質発現が増加していた。以上より、カヘキシアモデルにおいてCatKのサルコペニア抑制効果が示唆された。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。我々はカテプシンK (Cat-K)がNotchシグナル活性化を介して、障害後の骨格筋再生を促進させるのではないかとの仮説を立てて実験を進めた。野生型マウス(9週齢,雄, C57BL/6J)の片側下肢骨格筋に心臓毒(Cardiotoxin、CTX, 10μm/0.2ml)を投与による骨格筋障害モデルを作成し、経時的に骨格筋を採集し、Cat-Kの発現ならびに組織学的に検討した。さらに、Cat-K選択的阻害剤を使用し、CTXによる障害後の組織リモデリングを検討した。研究結果は予測していた結果と異なるものであった。すなわち、Cat-KはCTXによる骨格筋障害後に発現が著しく増強するが、Cat-Kの特異的阻害剤の使用により、CTXによる骨格筋障害(アポトーシス)が抑制され、さらに炎症が抑制され、筋肉再生が増強(改善)する結果であった。これらの結果は必ずしもCat-KがNotch活性化を誘導し、骨格筋再生を促す、という当初の仮説を否定するわけではないが、その前のCTXによる骨格筋障害自体をCat-Kがレギュレートしているという、大変興味深い新事実が明らかになった。すなわちCat-Kを阻害することによりCTXによる筋障害が抑制されるということである(Cat-KがCTXによるアポトーシスを増強している)。使用した阻害剤はCat-K特異的とはいえ、さらにこの結果を深く検証するため、Cat-K遺伝子欠損マウスを使用した実験が必要である。1.野生型マウスを使用したCTXによる下肢骨格筋障害モデルの作成ならびに各種mRNA、タンパク発現の検討は計画通りに実施できた。2.さらにCat-Kの特異的阻害剤の上記障害モデルへの効果も組織学的生化学的に計画通りに遂行できた。3.また、筋芽細胞株であるC2C12をH2O2などで障害(アポトーシス)を誘導するとCat-Kの阻害剤でこの障害が抑制されることも確認した。4. Cat-K遺伝子欠損マウスを使用した研究が遅れたが現在進行中である。遅れた理由はこの遺伝子欠損マウス(継続して飼育中)の繁殖の問題で手間取ったためである。またNotchシグナルの解析が遅延したため、平成28年度に実施したい。加齢による筋肉再生不良に関するNotch1シグナルの役割は既に報告があるが、サルコペニアへのNotchシグナルの関与に関しては明らかでない。最近Cat-KがNotch1受容体の細胞内ドメインを切断しNotch1活性化に重要な役割を果たしていることを明らかにし、その下流のHes1-Hey1/2発現とVEGF/ R1-PI3K /Aktシグナル経路の活性化を介して血管新生に関与することを報告した。そこで、心臓毒素による骨格筋障害におけるカテプシンK遺伝子欠損(CatKKO)の骨格筋細胞の保護作用(平成28年成果)の機序を一段と明らかにするために、障害された三日目の骨格筋組織を採集し、定量PCRとWestern Blotting法に解析をおこなった。その結果、CatKKOマウス骨格

筋組織におけるcleaved-caspase-8, cleaved-Nothc1, Akt, Hes-1, Hey1,ならびにHey-2蛋白発現ならびにBAX/Bcl-1比の低下、腫瘍壊死因子(TNF-α)、単球走化性タンパク質-1(MCP-1)やToll様受容体-2/-4(TLR-2/-4)の遺伝子発現低下、マトリックス・メタロプロテイナーゼ-2/-9(MMP-2/-9)の遺伝子発現と活性低下、炎症性白血球とマクロファージの浸潤の著明な低下が認められた。障害された14日目の組織学解析においてCatKKOによる障害された骨格筋間質線維化の有意な低下とラミニン構造の有意な保持が明らかになった。さらに、トレッドミル運動能力テストで垂直方向への仕事量を測定し、小動物握力測定装置にて四肢握力測定を行った。結果、障害後3と7日目において仕事量と四肢握力改善がCatKKOマウスで認められた。この結果から、骨格筋のリモデリングと再生においてCatKがNotch1活性化を介して大きく関与している可能性が考えられた。ただ、当初はCatKがNotch1の活性化を介して筋肉再生を促進するとした仮説は覆された。すなわち当初考えていた逆の効果、すなわちCatKの(過度な)存在はむしろ筋肉の再生を抑制することが明らかとなった。研究代表者は、実験計画書の通りに研究を進め、2年目の計画通り成果を収めた。1)野生型マウス(9週齢,雄,C57BL/6J)とCatKKOマウス(9週齢,雄,C57BL/6Jバックグラウンド)の片側下肢骨格筋に心臓毒(Cardiotoxin(CTX), 1.3mmol/kg・day)を投与する方法で、骨格筋障害(アポトーシス)モデルを作成し、障害された3日目の骨格筋組織を採集し、定量PCRとWestern Blotting法による解析をおこなった。その結果、CatKKOマウス骨格筋組織におけるcleaved-caspase-8, cleaved-Nothc1, Akt, Hes-1, Hey1,ならびにHey-2蛋白発現ならびにBAX/Bcl-1比の低下、腫瘍壊死因子(TNF-α)、単球走化性タンパク質-1(MCP-1)やToll様受容体-2/-4(TLR-2/-4)の遺伝子発現低下、マトリックス・メタロプロテイナーゼ-2/-9(MMP-2/-9)の遺伝子発現と活性低下、炎症性白血球とマクロファージの浸潤の著明な低下が認められた。2)障害された14日目の組織学解析においてCatKKOによる障害された骨格筋間質線維化の有意な低下とラミニン構造の有意な保持が明らかになった。3)トレッドミル運動能力テストで垂直方向への仕事量を測定し、小動物握力測定装置にて四肢握力測定を行った。4)カテプシンK阻害剤投与により障害された骨格筋の機能改善が観察されたので、詳細な機序解明を次年度継続して行う。*特許申請中で、現段階では、一部の結果を公表することを控える。取得後に研究成果を即時に開示する。我々はCat-KがNotch1受容体の細胞内ドメインを切断しNotch1活性化に重要な役割を果たしていることを明らかにした。その結果よりCat-KはNotch活性化を介して骨格筋の再生を促し、老化マウスにおける障害後の筋肉再生に関与するのみならず、サルコペニアに対しても保護的に働くのではないか、との仮説を立て、平成27年度から研究を実施した。
冷戦後東アジア国際関係の構造変動と秩序形成の総合的研究-パワーと歴史認識の交錯-

東アジアにおける歴史和解の促進にとって有益な知見を得ることを目指した。第一に、長期的には、市民社会レベルの交流が拡大するなかで東アジアに形成されつつある公共空間にその可能性を見出すことができるのではないかということである。その公共空間を構成する規範的要素とは何かを問い、新たな知見を提供することができた。第二に、過去の出来事についての歴史認識のギャップを埋める努力は必要だが、加害-被害の視点を踏まえながらも、当事者同士が恩恵をえられるような秩序を未来志向で創造していくことが不可欠だとの知見を得た。第三に、政府レベルの歴史対話にくわえて、市民社会内の歴史対話、トランスナショナルな市民社会相互の歴史対話が必要で、それぞれのアクターが歴史漁解という共通の目標に向って努力することが不可欠だとの結論に達した。本共同研究の目的は,パワーと歴史認識の交錯という視点から,冷戦後東アジアの国際関係の構造変動と歴史摩擦が地域秩序の形成におよぼす影響を多面的に分析することを目指す。07年度は初年度でもあり,研究分担者と知見提供者の発表と討論を通して,問題意識の共有化と,それにもとつく各研究分担者の研究課題の設定,資料収集に力点をおいた。4回の研究会を開催したが,研究活動および研究の進捗状況は以下の通りである。(1)第一回研究会(07年7月1日,九州大学六本松キャンパス)。研究プロジェクトの趣旨説明,各分担者のテーマに関する説明と確定。今後の日程と海外研究協力者、国内知見提供者についての協議。(2)第二回研究会(07年9月29,30日,大阪大学中之島センター)。分担者の土佐弘之,李弘杓の両名および知見提供者生井英考(共立女子大学)および高原明生(東京大学)による報告と討論。(3)第三回研究会(07年1月3,4日,南山大学)。分担者初瀬龍平,海外研究協力者の李元徳(韓国国民大学),歩平(中国社会科学院近代史研究所),知見提供者としてハーバート、ビックス(ビンガムトン大学),高嶋伸欣(琉球大学)による報告と討議。(4)第四回研究会(07年3月10日,一橋大学)海外研究協力者ロバート、マクマン(オハイオ州立大学)による報告と討論,および参加による今後の研究会の進め方についての意見交換。くわえて,(5)分担者の李が米国を訪問し,資料収集とインタビューを行った。また,代表者の菅も米国を訪問し,資料収集にあたり,また海外研究協力者との意見交換を実施した。その他,(6)本研究のホームページを作成し,研究会に出席できなかった分担者のために,研究会の報告内容が把握できるように努めた。同様のホームページを英文でも作成し,海外研究協力者との情報交換にも配慮した。本年度4回の研究会の活動を通して,研究分担者のテーマの確定を終わり,2年次以降の残された研究課題も明らかになった。したがって,2年次の第一回研究会では,報告者は分担者3名とし,残りの時間は分担者全員による研究の進捗状況を示す報告(23頁)を提出してもらい,全員で協議し,さらに問題意識の共有化と研究枠組みに関する共通認識の形成を目指すことにしている。また,本研究が歴史摩擦に関する研究を主要課題としている関係上,第二回目の研究会は中国社会科学院で開催し,中国側参加者との意見交換のための準備を歩平氏と行っている。なお,11月の第三回研究会にはプロジェクトの進捗状況の中間評価をしてもらうためにブルース、カミングス(シカゴ大学)による研究会への参加をお願いし,出席の確約を得ている。また,11月の研究会にはクリストファー、ヒューズ(ウォーリック大学)も参加し,報告することになっている。全体として,研究は計画通りの成果を挙げ,海外研究協力者との連携も順調に進んでいる。本共同研究の目的は、パワー、ナショナリズム、歴史認識の交錯という観点から、冷戦後東アジアの国際関係の構造変動と歴史摩擦が地域秩序の形成におよぼす影響を、ナショナルおよび市民社会双方のレベルにおいて、多面的に分析することを目指す。1. 08年度は、研究分担者と知見提供者の発表と討論を通して、問題意識の共有化と問題点の整理に力点を置いた。そのため、分担者全員に研究の進捗状況を示す報告をお願いした。2.中国社会科学院近代研究所とのあいだでワークショップを開催し、歴史認識をめぐる諸問題で相互理解を深めた。研究活動は以下の通りである。(1)第一回研究会(08年7月5、6日、北九州市立大学)。森實の他、分担者の鄭、石田による報告と討論。参加者全員による研究経過報告および今後の研究の進め方、残された課題について協議。

(2)第二回研究会(08年9月27日29日、中国社会科学院近代史研究所)。ワークショップの開催(北京)。日本側からは、分担者の初瀬、李、藤本、菅、滝田、秋田が、中国側からは歩平、汪朝光がそれぞれ報告した。(3)第三回研究会(08年11月1、2日、大分大学旦野原キャンパス)。知見提供者として劉傑教授に報告をお願いした。その他、分担者の伊藤、中野、菅、海外研究協力者クリストファー・ヒューズ教授による報告と討論。くわえて、今後のプロジェクトのあり方、各論文の位置づけに関する協議をおこなった。以上の他、09年2月5日8日にかけて菅、初瀬、李、秋田の4名でソウルを訪問し、次年度のソウルワークショップ開催に関する打ち合わせをおこなった。本共同研究の目的は、パワー、ナショナリズム、歴史認識の交錯という観点から、冷戦後の東アジアの国際関係の構造変動と歴史摩擦が地域秩序の形成に及ぼす影響を、ナショナルおよび市民社会双方のレベルにおいて、多面的に考察することを目指すものである。1.09年度は最終年度であるため、海外研究協力者も含め、分担者全員にペーパーを提出してもらい、研究会での報告をお願いし、問題点の整理を行い、問題意識のさらなる共有化に力点を置いた。2.韓国の梨花女子大学および東北亜歴史財団との間でワークショップを開催し、歴史認識をめぐる相互理解を深めた。研究活動は以下の通りである。(1)第一回研究会(09年7月4、5日、一橋大学)。海外研究協力者であるマイク・モチヅキ、ロバート・マクマン、林満紅、鄭美愛による報告と討論。(2)ソウル・ワークショップ(第二回研究会)(09年9月21、22日、梨花女子大学、9月23日、東北亜歴史財団)。日本側からは、分担者の伊藤、秋田、初瀬、鄭、土佐、滝田が報告。梨花女子大学からは、朴仁輝(梨花女子大学副教授)、鄭乗峻(梨花女子大学教授)による報告と4名の討論者(權五信・江原大学校教授、李玉順・西江大学校教授、徐輔赫・梨花女子大学研究教授、金佑俊・延世大学校研究教授)、東北亜歴史財団からは、金〓奎、李成制の2名が報告。(3)第三回研究会(09年10月31日、11月1日、北九州市立大学)。知見提供者として川島、定形両氏の報告の他、分担者の中野、藤本、石田による報告。以上の報告と討論を踏まえて最終ペーパーを提出してもらい、報告書を作成した。また、これらのペーパーは、凱風社からの出版が決まり、目下出版に向けた作業を行っている。
ヒトにおける発生毒性に関する感受性の推定方法

環境因子に対する未分化な胎生組織の感受性をヒトとラットの間で比較するため、双方の胎児から得た四肢原基をヌードマウスの皮下へ移植し、各種化学物質に対する移植片の感受性を調べた。妊娠14日のWistar系ラット胎仔の上肢原基を細切してヌードマウスへ移植した後、7,9,11日目にヌードマウスへ諸種の化学物質を投与し、移植後20日目に移植片を摘出して検索した。その結果、シクロホスファミド、5-フルオロウラシル、ヒドロキシウレア、シクロヘキシミド、プロスタグランディンは、いずれも用量に応じて移植片の発育と組織分化を抑制し、アスピリンおよびカフェインによっては軽度の抑制が見られた。この実験における毒性発現用量は、in vivoにおけるラットの催奇形用量に近い値を示した。一方、サリドマイド投与によっては、移植片の発育と分化は障害されなかった。すなわち、移植されたラット四肢原基は、化学物質に対して、in vivoの発生毒性をよく反映する感受性を示し、器官原基の移植実験法が発生毒性検出系の一つとして有用であることが確かめられた。次に、人工流産によって得られたヒト胎芽(推定受精齢67週)の四肢原基をヌードマウスの皮下へ移植し、そのヌードマウスヘシクロホスファミドを数回にわたって投与した。その結果、シクロホスファミド(120mg/kg)投与群における移植片の発育と分化は、非投与対照群との間に差がなく、このことから、ヒトの四肢原基はラットのそれに比べて、本剤に対する感受性が低いと推定された。なお、移植下におけるヒト胎児組織の分化は、ラットの組織に比べてかなり遅く、移植原基の分化速度が、ヒトとラットの間で異なることが示された。このことが、両種組織の感受性が異なる理由の一つである可能性が示唆された。
嚥下造影検査画像と頚部嚥下音を用いた嚥下動態のコンピュータ解析

摂食・嚥下という行動は人が生きる上で重要な行動であり,現在これらの障害が非常に注目されている.食塊を咽頭へ移送する舌・咽頭運動を中心とした嚥下の評価法としては,従来からX線透視検査法(Video fluorography : VF検査法)やX線映画法がgold standardになっている.しかしながら,これらの験査は被曝の問題を残している.そこで,我々は咽頭期における嚥下音に着目した.嚥下音は非常に複雑な機構が混在した超短音である.嚥下音と嚥下運動との関係は未だ明らかにされておらず,検者の経験的な主観評価によって行っている.そこで,コンピュータを使いVF画像上の舌や舌骨,咽頭,喉頭の可動域や加速度変化について解析し,それと嚥下音とを同期させる.これにより,嚥下運動から作り出される嚥下音との関係を見いだす事ができると推測した.今回の調査では,咽頭で発生する嚥下音の発生源および嚥下障害因子を探るため,コンピュータにて頭頸部癌患者のVF検査画像における咽頭後壁の動態所見を解析する方法を構築した.その結果,手術により咽頭後壁の動態パターンが変化する事が示唆され,嚥下障害との関連があることが示唆された.平成15・16年度科学研究費若手研究(B)「頚部聴診音響解析による嚥下機能評価法の開発」で行った頸部郭清術後患者の嚥下音解析の結果と関連があると思われる.今回構築した方法によって解析した結果の解析者内および解析者間での一致率の検定では,それぞれκ=0.76,κ=0.89であった.以上より,VF動画画像のコンピュータ解析方法による嚥下評価において高い再現性が確認できた.この解析方法により時間軸での咽頭後壁動態を評価することができ,他施設で行われたVF検査画像において他の解析者が解析しても同じ動態変化が捉えられる事が立証された.外科的な侵襲により,咽頭後壁の隆起のタイミングが術前と術後で変化している症例が認められ,咽頭収縮筋の機構バランスが,嚥下音に影響している可能性が示唆された.摂食・嚥下という行動は人が生きる上で重要な行動であり,現在これらの障害が非常に注目されている.特に舌は口腔内で食塊形成を行い,それを咽頭へ移送する.舌・咽頭運動を中心とした嚥下の評価法としては,従来からX線透視検査法(Video fluorography:VF検査法)やX線映画法がgold standardになっている.しかしながら,これらの検査は被曝の危険性を伴うために問題を残している.そこで,我々は咽頭期における.嚥下音に着目した嚥下音は非常に複雑な機構が混在した超短音である.嚥下音と嚥下運動との関係は未だ明らかにされておらず,検者の経験的な主観評価によって行っている.そこで,コンピュータを使いVF画像上の舌や舌骨,咽頭,喉頭の可動域や加速度変化について解析し,それと嚥下音とを同期させる.これにより,嚥下運動から作り出される嚥下音との関係を見いだす事ができると推測した.本年度の段階で,咽頭で発生する嚥下音の発生源および嚥下障害因子を探るため,頭頸部癌患者の術前と術後のVF検査画像における咽頭後壁の動態所見を分析した.その結果,術前はほとんどの症例で,咽頭後壁の最大厚のタイミングは時間経過とともに上方から下方へ順次移動しているパターンであり,術前と術後においてほとんどパターンの変化は認めなかった.しかし,術後嚥下障害が認められる症例では,この移動パターンに変化が認められた.平成15・16年度科学研究費若手研究(B)「頚部聴診音響解析による嚥下機能評価法の開発」で行った頸部郭清術後患者の嚥下音解析の結果と関連があると思われる.以上より,外科的な侵襲により,咽頭後壁の隆起のタイミングが術前と術後で変化している症例が認められ,手術により咽頭収縮筋の機構バランスに変化が生じ,嚥下音にも影響がある可能性があることが示唆された.摂食・嚥下という行動は人が生きる上で重要な行動であり,現在これらの障害が非常に注目されている.食塊を咽頭へ移送する舌・咽頭運動を中心とした嚥下の評価法としては,従来からX線透視検査法(Video fluorography : VF検査法)やX線映画法がgold standardになっている.しかしながら,これらの験査は被曝の問題を残している.そこで,我々は咽頭期における嚥下音に着目した.嚥下音は非常に複雑な機構が混在した超短音である.嚥下音と嚥下運動との関係は未だ明らかにされておらず,検者の経験的な主観評価によって行っている.そこで,コンピュータを使いVF画像上の舌や舌骨,咽頭,喉頭の可動域や加速度変化について解析し,それと嚥下音とを同期させる.これにより,嚥下運動から作り出される嚥下音との関係を見いだす事ができると推測した.今回の調査では,咽頭で発生する嚥下音の発生源および嚥下障害因子を探るため,コンピュータにて頭頸部癌患者のVF検査画像における咽頭後壁の動態所見を解析する方法を構築した.

その結果,手術により咽頭後壁の動態パターンが変化する事が示唆され,嚥下障害との関連があることが示唆された.平成15・16年度科学研究費若手研究(B)「頚部聴診音響解析による嚥下機能評価法の開発」で行った頸部郭清術後患者の嚥下音解析の結果と関連があると思われる.今回構築した方法によって解析した結果の解析者内および解析者間での一致率の検定では,それぞれκ=0.76,κ=0.89であった.以上より,VF動画画像のコンピュータ解析方法による嚥下評価において高い再現性が確認できた.この解析方法により時間軸での咽頭後壁動態を評価することができ,他施設で行われたVF検査画像において他の解析者が解析しても同じ動態変化が捉えられる事が立証された.外科的な侵襲により,咽頭後壁の隆起のタイミングが術前と術後で変化している症例が認められ,咽頭収縮筋の機構バランスが,嚥下音に影響している可能性が示唆された.
線虫感染に伴うマスト細胞の増殖とE-カドヘリン,インテグリンαEに関する研究

線虫感染に伴い小腸粘膜で増加するマスト細胞は旋毛虫や糞線虫などの排除や感染防御に深く関わっており、即時型アレルギーの病態形成や炎症・免疫反応においても重要な役割を演じている。本研究は小腸粘膜上皮内マスト細胞(粘膜型マスト細胞:MMC)のin vitroモデルとして骨髄細胞を増殖因子(IL-3+IL-4)で培養したマスト細胞(BMMC)を使用し、種々の接着分子発現と機能を解析した。結果は上皮系細胞に発現する接着分子E-カドヘリンとその細胞内結合蛋白であるα-,β-,p120-カテニンが発現していた。マスト細胞に発現するE-カドヘリンはマスト細胞前駆細胞からマスト細胞への分化・増殖過程に関与しE-カドヘリンを介した接着能を有していることが抗体および合成ペプチドを用いた実験により明らかになった。近年、粘膜型マスト細胞に発現するプロテアーゼ(mMCP-1)が旋毛虫の排除に関与することが報告され、骨髄細胞に増殖因子としてIL-3,SCF,1L-9,TGF-β1を加え短期間(2週間)培養するとMMCにより近いプロテアーゼの発現パターン(mMCP-1陽性)を示すマスト細胞が得られる。そこで、MMCにより近い性状を有する上記増殖因子添加培養マスト細胞を用い、種々の接着分子発現をmRNA,蛋白レベルで解析した。培養粘膜型マスト細胞にはE-カドヘリンおよびそのヘテロリガンドであるインテグリンαEβ7が同時に発現しているユニークな特徴が認められた。粘膜型マスト細胞は小腸粘膜上皮細胞間に存在し上皮細胞はE-カドヘリンを発現することから、粘膜型マスト細胞は上皮細胞とE-カドヘリンおよびインテグリンαEβ72つの分子を介し接着し局在することが示唆された。線虫をげっ歯類に感染させると感染1014日後、小腸において粘膜型マスト細胞の急激な増加が認められる。in vitroで生体内マスト細胞と同様な期間で分化・増殖が認められるマスト細胞増殖因子を調べた。マウス骨髄細胞(1×10^7)を11日間IL-3とSCF(+S BMMC)又はSCF,IL-9,TGE-β1(+SIT BMMC)を加え培養すると1×10^8、97%以上のマスト細胞が得られた。この培養系を使用し、マスト細胞のE-カドヘリン、αE(CD103),β7インテグリン、粘膜型マスト細胞にdominantなマスト細胞プロテアーゼMMCP-1、マスト細胞のマーカーとしてc-kitレセプター、FcεRIの発現をRT-PCR,免疫組織化学,FACS等により解析した。RT-PCRで+SIT BMMCは+S BMMCと比較してE-カドヘリン、β7インテグリン、c-kitレセプター、FcεRI、MMCP-1のmRNA発現が有為に増加していること、CD103は+SIT BMMCで発現が認められたが、+S BMMCでは検出されなかった。この2群のマスト細胞のMMCP-1を抗MMCP-1抗体を用いた免疫組織化学で陽性マスト細胞の割合を算出した結果、+SIT BMMCで97±1%、+S BMMCでは20%以下であった。FACSによりE-カドヘリン、CD103を解析した結果RT-PCRと同じくE-カドヘリンは2群で発現が認められ、CD103は+SIT BMMCで発現が認められたが+S BMMCでは認められなかった。

以上の結果からマスト細胞はその前駆細胞から分化・成熟する過程で増殖因子により発現する接着分子・マスト細胞プロテアーゼが異なること、骨髄細胞に増殖因子としてSCF,IL-9,TGF-β1を添加し得られたマスト細胞は粘膜型マスト細胞により近い性質を持つことが示唆された。線虫感染に伴い小腸粘膜で増加するマスト細胞は旋毛虫や糞線虫などの排除や感染防御に深く関わっており、即時型アレルギーの病態形成や炎症・免疫反応においても重要な役割を演じている。本研究は小腸粘膜上皮内マスト細胞(粘膜型マスト細胞:MMC)のin vitroモデルとして骨髄細胞を増殖因子(IL-3+IL-4)で培養したマスト細胞(BMMC)を使用し、種々の接着分子発現と機能を解析した。結果は上皮系細胞に発現する接着分子E-カドヘリンとその細胞内結合蛋白であるα-,β-,p120-カテニンが発現していた。マスト細胞に発現するE-カドヘリンはマスト細胞前駆細胞からマスト細胞への分化・増殖過程に関与し、E-カドヘリンを介した接着能を有していることが抗体および合成ペプチドを用いた実験により明らかになった。近年、粘膜型マスト細胞に発現するプロテアーゼ(mMCP-1)が旋毛虫の排除に関与することが報告され、骨髄細胞に増殖因子としてIL-3,SCF, IL-9,TGF-β1を加え短期間(2週間)培養するとMMCにより近いプロテアーゼの発現パターン(mMCP-1陽性)を示すマスト細胞が得られる。そこで、MMCにより近い性状を有する上記増殖因子添加培養マスト細胞を用い、種々の接着分子発現をmRNA,蛋白レベルで解析した。培養粘膜型マスト細胞にはE-カドヘリンおよびそのヘテロリガンドであるインテグリンαEβ7が同時に発現しているユニークな特徴が認められた。粘膜型マスト細胞は小腸粘膜上皮細胞間に存在し上皮細胞はE-カドヘリンを発現することから、粘膜型マスト細胞は上皮細胞とE-カドヘリンおよびインテグリンαEβ7 2つの分子を介し接着し局在することが示唆された。
松かさ燐片構成を応用した空間造形の研究　－環境に呼応するバイオミミクリ空間－

本研究は、生物をモチーフにした、独創的空間の意匠と構造のデザインを提示することがテーマである。松かさなどの植物に見られる多重螺旋のパターンを出発点に、作品の制作を重ねた。制作した作品は、いずれも小さな部材を組み合わせてできる構造体である。木質構造の特性を活かすことに注力した。「錐体卍格子構造」と銘打つ木質構造がその成果の1つである。また、構造と意匠を考える建築教育ワークショップのツールの制作にも取り組んだ。本研究では、松かさ観察による多重螺旋配列の平面表記法の考察から、新たな空間デザインを探求している。形態分析・プログラミング・実空間の制作・形態的評価の4つの手順で進む。平成23年度の報告では、制作した空間についての特徴とともに、シームレスに形態変化する立体造形に可能性を指摘した。平成24年度は、以下の取り組みを行った。年度毎に1つの制作を計画していたが、よりスピーディに形態的な可能性を探求するため、3つの試作に取り組むこととした。1シームレスに形態変化する立体の試作・・・多種の植物にも、前述の配列パターンを確認した。タンポポの花から綿毛へと至る過程では、このパターンを維持しながら平面的な構成から球体へと姿を変えている。このことに着目し、平面・半球から徐々に2重のカテナリードームへと形を変える立体作品を制作した。ゼンマイばねを用いた装置であり、生物の成長過程をメタフォリカルに示すものである。2形態変化する建築空間の試作・・・先の立体作品を、建築家アントニ・ガウディのサグラダ・ファミリアの構造模型同様に、天地反転させた構造模型と見立て、形態変化する空間造形を模型で検証した。多重螺旋配列を基にボロノイ多角形の伏図を描く梁を構成し、ジャッキ状の柱で上下する構造体である。ジャッキ柱が伸びると荷重を周囲が負担するドームとなり、ジャッキ柱を下げるとメッシュ状の梁が柱として屋根を支える。3ドロネー図を基にした構造体の試作・・・前述の2つの状態を対比的に捉え、安定した構造体を考察することとした。多重螺旋配列を用いたドロネー図が梁伏図とし、多種の三角柱を組み合わせた構造体であり、2と同じ断面形を描く。1m×2m×高さ2.5mほどの小作品を制作した。研究成果は、展示により逐次公開した。また、平成23年度の成果についても学術研究発表などで報告している。平成23年度は木質ドームの制作に取り組み、平成24年度はシームレスに平面から立体へと形態変化する構造物を構想し試験体を制作した。この経緯のもと、平成25年度の活動は主に以下の2つのことに注力した。1つは、これまでの試作体の再評価である。とくに、平成23年度の木質ドームは2度にわたり改修して組み立て直し、構造上と施工上の課題点の整理に努めた。また平面パターンとの対応関係を再度確認するため、基本図形を用いたドームの床板を制作した。もう1つは、異種の動植物の造形に関する考察である。具体的には、魚の鱗、タンポポ、草の根、蟻の巣、ロマネスコ、葉脈、貝殻、蜂の巣がある。対数螺旋・枝分かれ・多角形の空間充填(空間分割)・フラクタルなどのパターンを抽出し、本配列パターンとの関連性と可能性を考察した。その後、自己相似性という観点でフラクタル幾何学などを応用した立体造形の計画をはじめている。これは、現時点ではまだスタディ段階であり、平成26年度に予定する制作物に活かすことを目指している。また、研究成果については随時の発表を行った。日本建築学会建築デザイン発表会にて、平成24年度の成果について報告した。また、日本建築学会「アーキニアリングデザイン展」にて、平成25年度の活動の中間発表として作品展示を行った。平成23年度は、平面表記で得た多重螺旋配列を3次元サーフェイスに転写し、木質構造のドームを制作した。研究成果は、展示・学術研究発表で逐次公開している。はじめに、研究・制作の過程を記す。松かさの全体形状を参考に、甕形の立体サーフェイスに先の配列パターンを転写した。その配置を基に、ドロネー図・ボロノイ図を描く。ドロネー図の線と余白の図と地を反転し、互いに隙間のあるパネル面を構成する。パネル間をT字型ジョイント材で繋ぎ、パネル外殻にボロノイ分割された空間領域を描く計画である。パネルに構造用合板、T字型ジョイント材に集成材を採用し、面積約15m^2・高さ約3mの実作品を制作した。次に、本作品の特徴を記す。(1)多重螺旋配列の形態特性:球体上の多重螺旋配列の各点は、ほぼ近似的に等しい領域(面積)を構成し得る。ネットワークと領域を象徴した、多重螺旋の構成とした。(2)全体性としなやかさを有する木質構造:構造体自体が空間をカタチづくり、部材全てが相補的な構造を成す。(3)再生可能なセルフビルドの空間:荷重による変形や施工誤差を考慮した部材の相欠き加工、インパクトドライバーのみで行う現場での組み立て、再利用可能な解体の手順を実践している。

(4)環境に呼応する空間性:部材間のスリットが風を誘導し多重螺旋の光を呼び込み、夜間は周囲の敷地に多重螺旋の光と影を描く。また、次の段階への準備を進めた。先の多重螺旋配列を、正円・円錐・半球・円筒にプロットし、領域とネットワークという観点で比較した。ここで、正円から円錐に至るシームレスな形態変化に焦点を絞り、ゼンマイばねを用いて動きのある立体造形を試みている。本研究では、松かさ燐片の多重螺旋配列の平面表記法を検討し、新たな空間デザインを探求している。平成23年度は木質ドームの制作に取り組み、平成24年度は平面から立体へと連続的に形態が変化する構造物を構想し試験体を制作した。平成25年度は、これまでの試作体の再評価と異種の動植物の造形に関する考察を行った。この経緯のもと、平成26年度の活動は主に以下の2つのことに注力した。1つは、平成25年度の成果から、新たな木質構造を考案し試作体を制作することである。これまでの試作体は、部材全てが異なる形をしていたが、部材の共通化を図り、小さな部材で冗長性のある構造形式を考えることとした。その成果として、「錐体卍格子構造」と銘打つ木質構造をあみ出し、実空間としての作品の制作に至った。325mm×70mm×厚9mmの木板を用い、床・壁・屋根全てを同様の構造形式で空間を立ち上げることができた。研究計画で謳っている通り、本研究は学生の演習授業という教育的側面を有することに特徴がある。成果の一端が、日本建築学会主催学生グランプリなどで評価を得ることができた。もう1つは、コンピュテーショナル・デザインとデジタル・ファブリケーションの技術を用いた、デザインの実験である。そこで、Rhnocerosとそのグラフィカル・アルゴリズミック・エディターであるGrasshopperを活用し、多重螺旋配列を基本図形にした構造体をつくり、3Dプリンターでダイレクトに造形を出力することにした。前者は部材の共通化・標準化を徹底した構造体を目指すものであり、後者はパラメトリックなデザイン手法で標準化の対極を目指すものである。一方の優位性を検証することが、目的ではない。後者を経て、前者の可能性を再評価したいと考えた。そのまとめが、今後の課題である。本研究の目的は、生物の造形から新たな空間デザイン・建築構造を創出することである。松かさ燐片の多重螺旋配列を出発点に、植物の造形と木質構造の可能性を探求し、作品の制作を重ねた。平成23年度は多重螺旋のモチーフを用いた木質ドームの制作、平成24年度は同モチーフが平面から立体へと連続的に形態が変化する構造物を構想し立体作品の制作を行った。その後、これまでの試作体の再評価と異種の植物的モチーフに対する考察を経て、自己相似性を有する形態、小さな部材で互いを支えあう冗長性の高い構造物の開発に取り組んだ。その成果の一つが、「錐体卍格子構造」と銘打つ木質構造である。325mm×70mm×厚9mmの木板を、釘や金物を使わずに部材同士の噛み合わせのみで互いに繋ぎとめ、床・壁・屋根全てを同様の構造形式で立ち上げた。また、「持ち合い構造」の特性を活かした立体制作ワークショップの道具の考案にも取り組んだ。
タイ国における日本脳炎の疫学的研究

北部タイの自然的及び社会的環境を異にする3村を主な調査対象地とし、媒介蚊調査を毎月行った。その結果、媒介蚊発生を稲作と関連させて説明し得る合理的な水域分類に成功した。水域は、水利と水管理を軸に5大別するのが妥当である。内4水域は水田で、水稲二期作に畑作をも行う湛水率の高い水田地帯、乾季水稲作は時々の水回りと景気で実施、不実施を決める水田地帯、乾季は畑作に転ずる二毛作水田地帯、水回りが悪く一期作で乾季には放置され干上がる水田地帯である。この4水域は上述順に年間湛水期間が短くなる事実を定量的に確かめた。溝、沼沢地化した放置水田や窪地等が第5水域で、水質、水量ともに比較的安定的に推移したので、媒介蚊の安定的供給源になっていると評価した。各々の水域に固有な幼虫の種類構成と季節消長を認めた。媒介蚊密度の季節変化は、稲作暦と大きく関わる雨季、乾季の変わり目に顕著であることを確かめた。蚊の群集構造の変化を、乾季の後半(2-4月)、雨季の前半(5-7月)、雨季の後半(8-10月)、乾季の前半(11-1月)に分けて分析した結果、以下が明らかとなった。乾季の後半は優占種は明確ではなく地域固有の種類構成を示す。雨季の前半(5-7月)はコガタアカイエカとCulex vishnuiが優占種となり、地域間の種構成は類似する。雨季の後半には類似化は進み種構成は単純化する。乾季の前半に再び優占種が明確でなくなり、地域固有の種類構成へと回帰する。発生種の遷移は水質の経時的変化と関連している。成虫採集は、豚舎でのライトトラップによる終夜採集、豚囮を用いた蚊帳採集とトラックトラップ採集の3方法によった。採集個体数はライトトラップが最も多く、数種の媒介蚊種の季節的消長が明らかに出来た。成虫の季節的消長がその地域の幼虫個体群の推移を反映する。ライトトラップ以外の採集方法では、誘引源への飛来状況を解析する手がかりが得られた。媒介蚊季節的発生パターンを患者発生数と参照すると、蚊の密度が高くとも患者の発生が見られない時期もあった。豚のHI抗体保有率上昇の速度は媒介蚊の季節消長とは比較的うまく合ったが、地域間にはあまり顕著な差を認め得なかった。ウィルスも3村の蚊個体群からそれぞれ分離に成功したが、地域差や蚊種による違いを評価出来る量は得られなかった。タイ国全体の各地域における日本脳炎媒介蚊成虫の季節的発生消長も2年間にわたり調査した。北部、東北部、中央部、南部の6つの県において、それぞれ3地区の豚舎にライトトラップを設置し、月1回終夜運転して蚊を採集した。媒介蚊の採集数は、種類により、季節により、県により、また県内の場所により大きく異なっていた。媒介蚊の中では、どの県でもコガタアカイエカがもっとも多く、本種がタイ国の主要な日本脳炎媒介蚊であることが明らかとなった。コガタアカイエカの採集数は、その発生源である水田に近い豚舎で多かった。また、コガタアカイエカの季節的発生消長に影響する要因としては、それぞれの地域における雨量と稲作慣行がきわめて重要であることもわかった。各県における媒介蚊の季節的消長と日本脳炎報告患者の季節的発生状況の間には、多くの場合かなり高い関連性が認められた。タイ国の北部地方の県の媒介蚊の密度は、他の地方の県よりも一般に高かった。これらの調査結果と、月別患者発生数、飼育豚数、水田面積その他の統計資料、さらには日本などにおける流行様相の年次変化を起こした要因とから、初期の3つの研究目的に対し、次のように一応結論した。(1)1970年頃から多数の患者が発生するようになったのは、主として北部で森林を伐採して水田化したことも関係している。(2)患者が北部に多く南部に少ないのは、媒介蚊の密度の違いによる。(3)急速な近代化に伴う生活様式の変化から考えて、今後は低流行に向うことが予想される。

蚊の群集構造の変化を、乾季の後半(2-4月)、雨季の前半(5-7月)、雨季の後半(8-10月)、乾季の前半(11-1月)に分けて分析した結果、以下が明らかとなった。乾季の後半は優占種は明確ではなく地域固有の種類構成を示す。雨季の前半(5-7月)はコガタアカイエカとCulex vishnuiが優占種となり、地域間の種構成は類似する。雨季の後半には類似化は進み種構成は単純化する。乾季の前半に再び優占種が明確でなくなり、地域固有の種類構成へと回帰する。発生種の遷移は水質の経時的変化と関連している。成虫採集は、豚舎でのライトトラップによる終夜採集、豚囮を用いた蚊帳採集とトラックトラップ採集の3方法によった。採集個体数はライトトラップが最も多く、数種の媒介蚊種の季節的消長が明らかに出来た。成虫の季節的消長がその地域の幼虫個体群の推移を反映する。ライトトラップ以外の採集方法では、誘引源への飛来状況を解析する手がかりが得られた。媒介蚊季節的発生パターンを患者発生数と参照すると、蚊の密度が高くとも患者の発生が見られない時期もあった。豚のHI抗体保有率上昇の速度は媒介蚊の季節消長とは比較的うまく合ったが、地域間にはあまり顕著な差を認め得なかった。ウィルスも3村の蚊個体群からそれぞれ分離に成功したが、地域差や蚊種による違いを評価出来る量は得られなかった。タイ国全体の各地域における日本脳炎媒介蚊成虫の季節的発生消長も2年間にわたり調査した。北部、東北部、中央部、南部の6つの県において、それぞれ3地区の豚舎にライトトラップを設置し、月1回終夜運転して蚊を採集した。媒介蚊の採集数は、種類により、季節により、県により、また県内の場所により大きく異なっていた。媒介蚊の中では、どの県でもコガタアカイエカがもっとも多く、本種がタイ国の主要な日本脳炎媒介蚊であることが明らかとなった。コガタアカイエカの採集数は、その発生源である水田に近い豚舎で多かった。また、コガタアカイエカの季節的発生消長に影響する要因としては、それぞれの地域における雨量と稲作慣行がきわめて重要であることもわかった。各県における媒介蚊の季節的消長と日本脳炎報告患者の季節的発生状況の間には、多くの場合かなり高い関連性が認められた。タイ国の北部地方の県の媒介蚊の密度は、他の地方の県よりも一般に高かった。これらの調査結果と、月別患者発生数、飼育豚数、水田面積その他の統計資料、さらには日本などにおける流行様相の年次変化を起こした要因とから、初期の3つの研究目的に対し、次のように一応結論した。(1)1970年頃から多数の患者が発生するようになったのは、主として北部で森林を伐採して水田化したことも関係している。(2)患者が北部に多く南部に少ないのは、媒介蚊の密度の違いによる。(3)急速な近代化に伴う生活様式の変化から考えて、今後は低流行に向うことが予想される。小地域での詳細調査を北部タイの3村で開始した。今年度中に実施出来た調査項目は,(1)水田稲作の形熊,(2)煤介蚊の発生の発生状況,(3)蚊発生水域の生物群集,(4)囮子豚によるHI抗体価上昇のモニタリング,(5)郡単位の患者発生数の推移である。煤介蚊虫密度の季節的消長に地固有の稲作運営の影園を認め,二期作水田地帯では2山型のパターンが現れた。周年比較的安定した水域であった水田周辺の溝,堀,沼沢地からの蚊の発生様相は,個体群の安定維持という点から注目された。水域面積のより定量的な把握による発生指数の割り出しが今後の課題である。成虫は,豚舎でのライトトラップ,豚囮を用いた蚊帳採集,トラックトラップにより調査中である。個体数はライトトラップで最も多く,数煤介蚊種の季節的消長が明らかに出来た。成虫の消長も地域単位で異なる傾向が窺われた。
地域在住高齢者に「閉じこもり」状態をもたらす要因の究明と介入プログラムの確立

平成17年度にA市在住の要介護認定を受けていない高齢者311人に,「閉じこもり」に関する実態調査を行った。「閉じこもり」者は,77人(24.8%)であった。閉じこもりの要因として,日常生活自立度が低い,老研式活動指標が低い,交通の便が悪い,外出に介助が必要,高年齢,高SDS,低主観的健康度,外出後の疲労感の8要因が認められた。単変量でみた場合,閉じこもり群は膝や腰の痛み,頻尿や尿失禁の不安,視力低下,難聴,外出後の疲労感,差恥心,転倒不安,趣味がない,友達が少ない,一人で食事が高値であった。この結果から「閉じこもり」予防・改善の介入ポイントとして,(1)体力の維持,(2)自己肯定・自己効力感の強化,(3)人と交わる機会の確保をあげた。地域保健事業では多くの取り組みがされている。その中で,高齢者が役割の変化や疎外感等から自信を失い社会活動から退き閉じこもることに対して,高齢者自信が社会の大切な一員であることを再認識し,自信をもって社会活動に参加できるための支援の不足が明らかになった。この重要性から本研究では,「高齢者が元気に生きるための教室」と名付け,コーチングを組み込んだ2ヶ月間,1回2時間、全5回の「閉じこもり」予防・改善プログラムを作成した。このプログラムを、閉じこもっている人として抽出した人のうち同意が得られた14人を協力者として実施した。介入前後でセルフ・エスティーム尺度とZUNGのうつ尺度を用いて調査し、参加に関する意見を聞いた。実施前後ともにデータが得られた者は7人と少なく,統計的処理はできなかったものの,うつ尺度は全員が改善した。セルフ・エスティームは実施後で得点が増した者4名,減じた者3名であった。参加に関する意見として,楽しかった,元気が出た,自信がついたと述べており、否定的意見はなく、本プログラムの有効性が示唆された。「閉じこもり」に関する第1回目の実態調査を行うにあたり、既存の調査紙で信頼性、妥当性が確認されている老研式活動指標、日常移動能力、SF-36(QOL)等について、必要性の検討を行った。また、それ以外の質問項目を抽出し、調査内容には(1)基本情報:性別、年齢、居住年数、家族構成、(2)身体的情報:健康状態・保健行動・ADL、(3)心理的情報:主観的健康観、生きがい、楽しみ・趣味、心理状況、(4)社会環境情報:対人交流・日常生活状況、社会活動状況、主観的経済状況を含めることとし、調査紙を作成した。実際の調査にあたっては、予定していた調査地域の町村合併に重なり、行政上の煩雑を伴うことから協力を得ることが困難になったが、急遽、調査地域の変更を行い、協議・調整を進めた結果、協力を得られるに至った。しかし、「閉じこもり」という研究課題の特殊性から冬季の調査実施は好ましくないため、実施は来年度に延期することにした。また、調査地域の変更に伴い、来年度に予定している調査結果に基づく介入方法については修正が必要となり、このことについても地域保健師と検討を行った。平成17年6-8月に「閉じこもり」に関する第1回目の実態調査を行った。調査対象は、A市在住の要介護認定を受けていない高齢者462人である。

老研式活動指標、モラール、自己評価式抑うつ尺度、日常移動能力、人口動態情報、身体的・心理的・社会的環境情報を含む89項目の質問紙を作成した。応答者は女性249人、男性62人(計311人)、平均年齢77±6.9歳であった。本研究で「閉じこもり」と定義した「週に1回以下の外出、かつ一日外出せず、家の中または敷地内にいることが多い」と答えた者は、77人(24.8%)であった。閉じこもりと非閉じこもりの比較では、主観的健康度、日常生活自立度、外出介助、膝や腰の痛み、頻尿や尿失禁の不安、視力低下、難聴、外出後の疲労感、羞恥心、転倒不安、趣味、友達、一人での食事、交通量、交通便、年齢、老研式活動指標、SDSにおいて有意差が認められた。閉じこもりの要因として、重回帰分析で日常生活自立度、老研式活動指標、交通便、外出介助、年齢、SDS、主観的健康度、外出後の疲労感の8要因があげられた。今回の結果から、加齢とともに身体的な衰えや健康に自信が持てないこと、家族や友人などの人的環境、交通機関などの社会的環境が誘因となり閉じこもる傾向があることが分かった。また、これらの誘因から買い物や預貯金の出し入れなど、日常生活における技能とも言うべき活動を行なうことができないといった特徴があげられた。身体機能の向上だけではなく、趣味や友人を持つことで外出の意欲や機会を増やすことがうつ状態の予防にもなり、閉じこもりの防止に繋がると考えられる。平成17年度にA市在住の要介護認定を受けていない高齢者311人を対象に,「閉じこもり」に関する実態調査を行った。「閉じこもり」者は,77人(24.8%)であった。閉じこもりの要因として,日常生活自立度が低い,老研式活動指標が低い,交通便が悪い,外出に介助が必要,高年齢,高SDS,主観的健康度が低い,外出後の疲労感の8要因が認められた。単変量でみた場合,この他に閉じこもり群は膝や腰の痛みがある,頻尿や尿失禁の不安がある,視力低下,難聴,外出後の疲労感,羞恥心,転倒不安,趣味がない,友達が少ない,一人で食事,などがあがった。この結果から,加齢とともに身体的な衰えや健康に自信が持てないこと,家族や友人などの人的環境,交通機関などの社会的環境が誘因となり閉じこもる傾向があることが分かった。この結果より,「閉じこもり」予防,改善介入ポイントとして,身体的に(1)体力維持,心理的に(2)自己効力感の強化,社会的に(3)人と交わる機会をあげた。地域保健事業で多くの取り組みがされている中で,高齢者が身体的衰退を感じ,心理的・社会的には役割変化・疎外感等から自信を失い閉じこもることに対して,高齢者が社会の大切な一員であることを再認識し活動できる自信をもつことの重要性から,(2)自己効力感の強化プログラムに取り組んだ。具体的には,同意が得られた協力者16人にコーチング1回2時間を2ヶ月間に5回行い,実施前後でセルフ・エスチームとZUNGのうつ尺度の調査と参加に関する意見を聞いた。実施前後ともにデータが得られた者は7人であり,統計的処理はできなかったものの,うつ尺度は全員が改善した。セルフ・エスチームは実施後で得点が増した者4名,減じた者3名であった。参加に関する意見として,楽しかった,元気が出た,自信がついたが選択され,否定的意見を選んだものはいなかった。
統合失調症における補体制御因子機能とシナプスプルーニング機構解析

統合失調症の病態生理には依然として不明な点が多いが、最近の遺伝学研究から補体制御因子が関与している可能性が示された。一方、細胞生物学や免疫神経科学の進歩により、補体活性化がマウスの脳発達期におけるシナプスプルーニングに関与していることが示された。これらの発見から、新たな統合失調症病態モデルとして補体制御因子異常に基づくシナプスプルーニング障害を想定し、研究を行った。iPS細胞を用いた培養系モデルにおいて、統合失調症患者および非発症双生児同胞由来神経細胞では、健常者に比べて補体制御因子の発現量が低く、さらに統合失調症患者ではシナプス形成が低下していることが明らかとなった。ヒトcsmd1及びcsmd2に対するshRNAを作製し、統合失調症患者及び健常者iPS cells由来神経細胞におけるcsmd1及びcsmd2発現を抑制し、免疫組織学的及び電気生理学的手法によりシナプス形成につき解析している。統合失調症と補体関連因子の関係を研究すべく、唾液から得られたDNAサンプル(健常者200名、統合失調症患者200名)の解析を計画したが、コーケイジアンで認められる多型が、日本人には存在しないことが判明したため、適切な解析法を再検討している。補体関連因子のマウス脳における発現パターンを知るため、C1q及びcsmd1の抗体を用い、免疫組織学的法により検討したが、驚くべきことにC1qとcsmd1は神経細胞上で排他的に発現していた。この結果から、csmd1がC1qの発現を阻害していることが示唆された。csmd2ノックアウトマウスの行動解析もプレリミナリーながら施行した。現在コンジェニックマウスを作製中であるが、本年はSvEvマウスとC67BL/6マウスのmixed strainのマウスを用い、オープンフィールドテスト、尾懸垂テストを行った。オープンフィールドでは、コントロールマウスに比べ、csmd2ノックアウトマウスでは移動量に差はなかったものの、オープンフィールドの中央に侵入する割合が増加していた。また、尾懸垂テストでは、コントロールマウスに比べ、csmd2ノックアウトマウスでは、無働時間が減少しており、より意欲的である様子が観察された。この行動実験の結果は予想外であり、統合失調症というよりは、注意欠如多動性障害のような表現型であった。次年度は、C57BL/6のマウスを用い、より網羅的な行動解析を行う予定である。統合失調症における補体関連因子の関与を研究するべく、統合失調症患者140名、健常者208名のDNAサンプルにおいて、補体関連因子CUB and Sushi multiple domains(CSMD)1の遺伝子多型(rs10503253, rs2554585, rs2740931)及びCSMD2の遺伝子多型(rs911213)を解析したが、群間の比較では有意な差は認められなかった。マウス脳における補体制御因子の発現パターンを抗C1q抗体および抗Csmd1抗体を用いた免疫組織学法により調べたところ、補体C1qと補体制御因子Csmd1とはマウス神経細胞上で排他的に発現していることがわかった。次に、ヒトiPS細胞由来神経細胞を用いた培養系で、統合失調症患者1名およびその非発症双生児同胞1名と健常者1名の計3名のサンプルを用いて解析した。qRT-PCR法による解析では、興味深いことに、CSMD1の発現量が統合失調症患者および非発症双生児同胞由来神経細胞で低下している傾向にあることがわかった。また、健常者由来神経細胞では、qRT-PCR法で継時的にシナプス前蛋白質であるSynapsin1の発現量増加が認められたが、統合失調症患者由来神経細胞ではこの増加が低い傾向にあった。Csmd2ノックアウトマウスにおいて、オープンフィールドテスト、尾懸垂テストを行った。オープンフィールドテストでは、コントロールマウスに比べてCsmd2ノックアウトマウスで中央に侵入する割合が増加していた。全体の移動量には差がなかった。また、尾懸垂テストでは、コントロールマウスに比べてCsmd2ノックアウトマウスでは無動時間が減少しており、より意欲的である様子がうかがえた。以上の結果から、補体制御因子であるCSMD1の発現と、シナプス形成には何らかの相関がある可能性が示唆された。精神医学ノルウェーにおける遺伝子解析が予想以上に遅れ、その影響が出た。またヒトcsmd1、csmd2抗体の作製にも時間を要した。マウスのcongenic化が遅れており、行動評価が予定通り進んでいない。csmd1及びcsmd2の遺伝子解析が終了し、ヒトcsmd1及びcsmd2抗体の作製も終了し、iPS細胞由来神経細胞等のサンプルも準備が整ったため、速やかに結果を出していく所存である。

マウスの網羅的行動評価DNA解析遺伝子解析結果を得るのが遅れ、それ以後の実験が当初の予定よりも遅れているために、次年度の費用が必要となった。分子生物学的・免疫組織学的・電気生理学的実験用の試薬類マウス管理費用抗体等の試薬