hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
遺伝子組換え技術と遺伝子発現の理解のための参加型公開実験ワークショップ手法の研究

ヤマトシロアリ(Reticulitermes speratus)ワーカーを材料として唾液腺セルラーゼの無細胞発現系を構築した。すなわちヤマトシロアリワーカー(働きアリ)全虫体よりオリゴdTセルロースによるアフィニティ法によりmRNAを精製し、これを鋳型として第1アンカー配列を5'端に接続したオリゴdTプライマーと第2アンカー配列を5'端に接続したスイッチングテンプレートを加えたMMLV由来逆転写酵素系によるfirst strand cDNA合成をおこなう。得られたmRNAを鋳型としてヤマトシロアリ唾液腺セルラーゼ(GenBank AB008778)の成熟タンパクゴード領域のN末端に特異的塩基配列の5'端にウサギ網状赤血球無細胞発現系での発現に必要な転写開始配列を加えたプライマーおよびC末端特異的塩基配列および終止コドンの相補配列によるプライマー間で唾液腺セルラーゼcDNAを特異的に増幅し、それを鋳型としてウサギ網状赤血球無細胞系でヤマトシロアリ唾液腺セルラーゼが発現する系を構築した。唾液腺セルラーゼの発現はシロアリ内源性セルラーゼに特異的な抗血清による免疫反応とセルラーゼ活性の両方で確認した。(以上平成26年度研究成果、27年度は研究費の申請自粛、28年度は研究課題の廃止により実施していない)本研究はヤマトシロアリを材料として,野外でのサンプルの採集,mRNAの抽出と逆転写反応,目的cDNA(セルラーゼ)の増幅とそれを鋳型としたタンパク生産の一連の流れを組換え体の管理が必要ない無細胞発現系を活用して非研究分野の受講者に有用タンパクの組換え生産を体験していただくことを目的としている。初年度(本年度)はウサギ網状赤血球無細胞発現系のうちPCR産物を直接鋳型とできるプロメガ社製キットを使用した。ヤマトシロアリ唾液腺セルラーゼ成熟タンパクコード領域のN末端側配列5'側に発現用プロモーター配列を付与したプライマーとC末端プライマーで既存のヤマトシロアリ唾液腺セルラーゼcDNAを増幅し,これを鋳型として上記キットで発現を行ったところ,発現系溶液中にセルラーゼ活性が生ずることを確認した。発現反応後の溶液をSDS-PAGEで展開し抗シロアリセルラーゼ抗血清を反応させたところ予想されるサイズのバンドが抗血清と反応した。結果,ヤマトシロアリ唾液腺セルラーゼをこの無細胞系で発現することを確認した。(以上平成26年度研究成果、27年度は研究費の申請自粛、28年度は研究課題の廃止により実施していない)シロアリ唾液腺セルラーゼの発現生産に適した発現系を各種無細胞発現系から選択する予定であったが,最初に試したPCR産物を鋳型に使用できることをうたったプロメガのキットが非常に好適であることが短期間で確認できた。またPCR産物の精製は全く必要なく(むしろ精製すると発現量が格段に低下した)さまざまなキットを試す必要がなかった。ヤマトシロアリ生体から実際にmRNAを抽出し逆転写反応を行い,生成したファーストストランドcDNAをテンプレートに27年度に設計したプライマーを使って唾液腺セルラーゼcDNAを増幅し,ウサギ網状赤血球無細胞発現系での発現と電気泳動活性染色によるセルラーゼ活性確認までの実験系を作成し,29年度には作成したキットを実際に非研究分野の被験者に試していただくようにする。(※残念ながら諸般の事情により本プロジェクト自体が中止になりそうである)入札による試薬の割引などにより当初の想定より試薬類が安価に納入されたため。次年度に合わせて必要な消耗品を購入する。
イギリス造船機械産業における管理革新・標準化の試みとその日本への影響に関する研究

本研究は、イギリス造船・機械産業において世紀転換期に一連の管理・組織面の革新と標準化・規格化が試みられたが、定着しなかった理由を以下のとおり解明した。第1は革新を必要とした客観的な状況で、当該産業の経営者たちは19世紀前半までに確立したクラフト的規制状況の中に安住していたため、労働者に求められる能力・資質を客観的に記述して養成することができなかっただけでなく、現場の統括者たる職長にいかなる権限と職務を付与すべきかも明瞭にできず、現場の労務管理と生産管理が職長に委ねられた状態では、効率化を達成することができなかった。第2は革新をもたらした主体形成で、職長たち自らが、経営者と労働者の中間に立つ者のとしての自己をengineer(技術者)としてアピールしようとしたが、そのことは技師層の自己覚醒と組織化を促す効果をもち、19世紀第4四半期には各地の地方技師協会を舞台に、技術者的合理性を現場にもたらそう(当時の語では科学の成果を実践に応用しよう)とする志向性を持ち始め、効率化のための労務管理、賃金制度、工業簿記、標準化、電化等さまざまな経営革新を試みた。そして、第3がこれら革新の制約要因としての労使関係で、クラフト的な状況において労働組合と闘争できる強力な機能を備えた使用者団体は、経営革新の担い手になるどころか、むしろ冷淡で、20世紀初頭になっても労組との敵対が主たる機能であった。これは職長による成り行き管理という点でアメリカでテイラーらの科学的管理運動が直面したのと同じ状況だが、第3の点が異なり、経営革新と標準化は追求されても未熟なままにとどまった。当初の研究計画に即して今年度の研究実績を述べるなら大略以下のとおりである。まず史料調査については、以下のものを閲覧・収集した。(1)ヴィッカーズ社バロウ造船所の機構改革(191213年)に関する一連文書、(2)技術者団体文書としては、リーヅ機械技師協会(Leeds Association of Engineers)の成立期から第1次大戦期までの文書、および北東部沿岸機械技師・造船技師協会(North-East Coast Institution of Engineers and Shipbuilders)のおもに成立期の文書を、(3)同時代日本側のイギリス観察記録としては、191113年に巡洋戦艦金剛がヴィッカーズ社バロウ造船所で建造されていた時期に造船監督官等の名目で同地に派遣された日本人技師・職工らの出張報告書類(東京大学史料室所蔵平賀文書および三菱重工業株式会社長崎造船所史料館所蔵文書)。当初予定していたバロウ機械技師協会(Barrow and District Association of Engineers)の年次報告書とアームストロング社の工場増設等に関する文書については、現地文書館の受け入れ態勢不備のため今年度は断念し、次年度に回すこととし、その代わりにリーヅ機械技師協会文書を前倒しで今年度収集した。第2に、産業史、技術史、労務管理史等の分野の最新の研究を渉猟し研究状況を整理した。殊に学内所蔵の確認できない書籍数点については、研究費を支出して購入した。第3に、ヴィッカーズ社バロウ造船所の191213年の機構改革関連文書を用いた第1次草稿の作成を開始した。文書そのものが膨大で、記載内容の再確認等に手間取っているため、第1次草稿は完成していないが、労務管理史研究会等で報告し、関連分野研究者との研究交流に努めるとともに、労務管理史・労働史の方法について有益な示唆を得た。なお、史料(3)を用いた予備的な考察としては「日英間武器移転の技術的側面-金剛建造期の意味-」(奈倉・横井編著2005所収)を執筆して発表した。第2に、造船業史・機械産業史、技術史、労務管理史、技術者団体史等の分野の最新の研究を渉猟し研究状況を整理した。

第3に、バロウ造船所機構改革問題について、草稿の前半部分を完成し、2月28日に開催された比較労務管理史研究会にて発表し、貴重な助言と指摘を得た。イギリス造船・機械産業の19世紀末20世紀初頭における管理革新・標準化の試みについて、平成18年度は前年度までに収集されたヴィッカーズ社、アームストロング社、北東部造船業技師協会、バロウ機械産業技師協会、北西機械産業技師協会等の文書を駆使して、大略以下の点を解明した。第1に、ヴィッカーズ社の191013年のバロウ造船所組織調査は、おもに製図室技師および製図工の主導で開始されたが、その調査項目は現場の作業慣行、賃金支払い実態、入職や養成の制度、労働組合規制力と職長層の現場管理機能の関係など多岐にわたり、造船所組織の技術的な不合理性や非効率性を、従来になかった制度で認識する最初の機械となった。特に、現場監督者層選任の問題や製図室・現図場間の意思疎通の不全など経営側に起因する弱点が露呈し、それ以前の定型であった労働組合主因論が大幅に後退したことは、この時期の問題認識の深化度合いを示している。第2に、こうした新しい問題認識に導いた背後に地域技術者団体における管理、原価、標準化等に関する活動の成果が作用していると推論し、地域技術者団体の講習内容とバロウ造船所組織調査の問題設定との同型性を検出した。第3に、同時期(以降)の日本における管理実践との関係など、同時代的な国際比較については、申請者が主宰する比較労務管理史研究会を通じて、多面的かつ重層的に進め、管理問題が発見されるにいたる過程の類型化が試みられた。191013年バロウ造船所組織調査を、日本向け装甲巡洋艦の造船監督官等の資格で現地にて見聞した大量の日本人技術者・職工の報告書類は、数点を新たに発見し、また、本研究課題に関わる研究文献十数点を入手し、それらの批判と分析を試みた。まず、当該時期の汽罐製造工組合(United Society of Boilermakers and Iron and Steel Shipbuilders)文書をはじめとして、これまでに収集した史料を整理してインデクスを作成した。また、地域別技術者団体文書、および同時代の日本人技術者・職工による調査報告書類について若干の補足的な史料収集を行った。第2に、これまでに作成してきた本研究課題に関わる草稿類および、研究会等での報告資料を元に、本研究全体の総括にとりかかった。当初の計画にしたがって、(1)管理革新・標準化の企業別の実態解明、(2)それを支えた技術者集団の特性、(3)管理革新・標準化の試みの技術的および経営的合理性の検証の三点に加え、(4)管理問題が発見され、主観的に構造化される型について、他国との比較を踏まえて考察した。そこでは、同時期のアメリカにおけるテイラーら科学的管理運動とは異なる文脈、すなわちクラフト的規制を前提にした状況において、管理問題が発見されたとの結論に達した。また、(5)19世紀末以降の技師層を中心とする管理問題の発見が、造船機械産業における職長の組織化(186070年代)とそこでの「科学」を標榜した自己認識との連続性が解明された。
口腔顔面領域におけるカルレチニン含有神経線維の分布とその由来

カルレチニンを含む神経線維(以下、CR線維と略す)は、ラット臼歯歯髄・歯肉・口唇粘膜・鼻粘膜に豊富に観察されたが、顔面皮膚にはほとんど観察されなかった。根部歯髄において、CR線維は、平滑なものと念珠状のものとが観察された。これらの線維は、根部歯髄内を上行し、髄室へと進入し、天蓋付近や髄角部における象牙芽細胞下層付近で、枝分かれしていた。象牙芽細胞下層におけるCR線維は、ほとんど全ての念珠状となり、それらの一部は、象牙芽細胞層に侵入していた。しかし象牙前質・象牙質には、CR線維は、認められなかった。根部歯髄及び象牙芽細胞層における全ての念珠状のCR線維及び象牙芽細胞下層における一部の念珠状のCR線維は、タキキニンも含んでいた。しかし、タキキニンのみを含む線維も歯髄には、豊富に観察された。歯肉においても、CR線維は、平滑なものと念珠状のものとが、観察されたが、付着上皮・内縁上皮・外縁上皮付近においては、念珠状のCR線維しか認められなかった。特に、付着上皮においては、微細なCR線維が、上皮内で、密な神経線維網を形成していた。歯肉における念珠状のCR線維もタキキニンを含んでいた。口唇粘膜・鼻粘膜の粘膜上皮下の固有層においても、CR線維を含む神経線維束が、観察され、それらの一部は上皮内に侵入していた。これらのCR線維の由来を調べるため、歯髄や鼻粘膜にFast Blue或いはfluorogoldを注入し、三叉神経節において、それぞれのtracerの蛍光とCRの免疫反応について調べた。その結果、鼻粘膜を支配する三叉神経節細胞の18%に、また、歯髄を支配する三叉神経節細胞のうち、ごくわずかの細胞にCRの免疫反応が認められた。
肺損傷・肺線維症の新たな病因としてのユビキチン・プロテアソームシステム

1.肺損傷・線維化におけるユビキチン・プロテアソームシステムヒト肺線維症の生検組織において、ユビキチン及びmultiubiquitinの発現亢進が認められた。又、肺上皮細胞にアポトーシスが認められる。ブレオマイシン肺臓炎においては、上皮細胞にmultiubiquitinが検出された。肺上皮細胞はproteasome inhibitorによってアポトーシスに陥り、その際にmultiubiquitinが検出される。肺生検組織のWesternblotによってもmultiubiquitinは検出される。これらのことから、ヒト及びマウスの肺損傷、肺線維化には、上皮細胞のアポトーシスが関与し、その一因として、ユビキチン・プロテアソームの機能異常が関与していることが示唆された。2.肺損傷・線維化におけるp53,MDM2,SUMO1の相互作用肺線維症の上皮細胞にはP53,MDM2,SUMO1の発現亢進が認められる。肺組織のhomogenateのwestern blotでも確認された。また、マウス・ブレオマイシン肺線維症でも同様の所見が認められた。MDM2はp53のE3 ligaseでありubiquitinationによってp53を不活化する。SUMO-1はMDM2のself-ubiquitinationを制御する。p53,MDM2,SUMO1のお互いの結合が認められ、degradationが生じ、その過程にubiquitin-proteasome systemが関与していることを見いだした。P53による上皮細胞のアポトーシスにubiquitin-proteasome systemが関与していると考えられた。1.肺損傷、肺線維症におけるユビキチンープロテアソームシステム肺損傷や線維化の様々な過程において、ユビキチン、プロテアソームの発現が変化するか否か、ヒト肺線維症・マウス肺線維症モデルを用いて、免疫電気泳動、免疫組織染色によって細胞による違いも含め検討中である。2.肺損傷、肺線維症におけるp53,MDM2,SUMO-1の相互作用肺線維症の肺上皮細胞にはp53の発現が亢進している。線維化の過程における発現とubiquitinationを検討している。3.肺胞上皮細胞のアポトーシスにおけるユビキチンープロテアソームシステムヒト・マウス肺上皮細胞を用いて、Fasligand, TNF, reactiv oxygen speciesによるアポトーシスの過程における促進因子と抑制因子の発現とubiquitination、およびproteasome inhibitor投与による影響を検討している。また、proteasome inhibitorそのものによるアポトーシス関連因子の発現を検討している。2.肺損傷・線維化におけるp53,MDM2,SUM01の相互作用肺線維症の上皮細胞にはP53,MDM2,SUM01の発現元進が認められる。MDM2はP53のE3 ligaseでありubiquitinationによってp53を不活化する。

SUMO-1はMDM2のself-ubiquitinationを制御する。P53,MDM2,SUMO1のお互いの結合が認められ、degradationが生じ、その過程にubiquitin-proteasome systemが関与していることを見いだした。P53による上皮細胞のアポトーシスにubiquitin-proteasome systemが関与していると考えられた。
トレハラーゼ阻害剤の昆虫生理に及ぼす影響と害虫制御への利用に関する研究

昆虫は体液中に高濃度存在するトレハロースをエネルギー源としているため、トレハロース代謝阻害は昆虫の生存に重大な影響を与えると考えられる。本研究ではトレハロース分解酵素トレハラーゼの特異的かつ強力な阻害剤であるバリドキシルアミンA(VAA)によって昆虫に誘起される異常の観察とその原因の解明を通して、トレハラーゼ阻害剤の害虫制御剤としての可能性を検討した。鱗翅目幼虫(ヨトウガ、ハスモンヨトウ)では、終令初期にVAAを処理すると体節筋の弛緩、背脈管膊動数の減少等が観察され、最終的には蛹化異常によって死亡する。^1H-および^<13>C-NMRによる分析から昆虫組織においてトレハラーゼが阻害され、トレハロース利用が妨げられていることが明らかにされ、組織改変のために急激にエネルギーを消費する蛹化時に致命的影響が現れたものと考えられる。飛翔エネルギーとしてトレハロースを主に利用している昆虫(ワモンゴキブリ、イエバエ、センチニクバエ)ではVAA処理により飛翔等の活動性が抑制されたが、この原因も筋肉組織におけるトレハロース分解の阻害であることが判明した。しかし、脂質も飛翔エネルギーに利用できる昆虫(オオクロバエ、トノサマバッタ)ではトレハラーゼ利用はVAAにより阻害されるが、飛翔活動には影響を受けなかった。トレハラーゼ阻害剤は昆虫の卵巣発育を妨げる作用をもつことも明らかになりつつあり、害虫制御剤となり得ることは明らかである。しかし、VAAそのものは昆虫表皮透過性が乏しいために即実用になる化合物ではない。この点を改良するために、VAAの化学的修飾を施して作用を試験したが、結果は未だ十分ではない。表皮透過性を備えた化合物の探索が今後の課題である。トレハラ-ゼ阻害剤、バリドキシルアミンA(VAA)の昆虫に対する影響に関して以下の結果を得た。1.ケブカクロバエ成虫に5ug/虫のVAAを注射すると、全体の活動が鈍り、継続した飛翔ができなくなる。同様に、ワモンゴキブリの飛翔がVAA投与によって抑制された。2.クロバエ、ニクバエ成虫の体液を核磁気共鳴法(NMS)で測定した結果、VAA投与により体液中トレハロ-ス濃度が高まることが明らかになり、トレハロ-ス利用が阻害されると推測された。一方、イエバエ成虫の体液中にはトレハロ-スが極めて低濃度で、VAA投与によってもその濃度が変化せず、グリセロ-ル量に影響を与えたことから、イエバエの糖代謝が上記のハエと異なるものであると考えられた。3.ヨトウムシ、カイコの終令幼虫初期に1ug/虫以上のVAAを注射すると、処理虫の活動が抑制され、蛹化が正常に行なわれずに死亡することが明らかになった。今後トレハラ-ゼ阻害剤の活性を検定する材料としてヨトウムシ幼虫が適当と考えられる。4.上述の処理幼虫の体液中での糖代謝をNMSにより追跡した結果、VAAの影響はトレハロ-ス利用系にのみ現われ、他の異常は認められなかった。このことは、筋肉の運動が正常に行なわれないために蛹化行動に異常を来たしたと推測される。今後はこの点について詳しく調べる。1.トレハラーゼ阻害剤バリドキシルアミンAのハエ類に及ぼす影響バリドキシルアミンA(VAA)の注射により、イエバエ、センチニクバエ、オオクロバエの体液トレハロース濃度が顕著に上昇するが、他の体液成分には殆んど影響しないことが明らかになった。また、VAA注射によりイエバエ、センチニクバエでは活動が鈍り、死亡する個体も現われたが、オオクロバエでは飛翔行動が活発になる傾向が認められた。

2.鱗翅目昆虫に及ぼす影響カイコ、ヨトウ、ハスモンヨトウ幼虫ではVAA投与により体節筋の弛緩や背脈管膊動の低下が起こり、蛹化脱皮時に各種の異常が現われて死亡する。これらの昆虫でも、VAA投与により体液トレハロース濃度が上昇することから、VAAによりトレハラーゼが阻害された結果、各種の影響が現われたと考えれる。しかし、VVV投与後12日の間には、トレハロース合成活性や他の代謝には殆んど異常が見られなかった。VAAが特異的にトレハラーゼだけに作用していると推定される。3.他の昆虫が及ぼす影響ワモンゴキブリ、トノサマバッタにおいても、VAA投与により体液トレハロース濃度が異常に高まった。ワモンゴキブリの飛翔はVAA投与により抑制されることから、筋肉トレハラーゼが阻害されてトレハロース利用不能に陥ったものと考えられる。4.VAA関連化合物のスクリーニングヨトウ幼虫を用いてVAA関連化合物の中から、昆虫表皮透過性のある化合成のスクリーニングを開始した。トレハロース定量法の検討:ワモンゴキブリの体液トレハロース濃度をNMR法とHPLC法とによる定量値を比較した結果、後者でやや高い値を与えたが、NMRによる定量が信頼できることを確認した。さらに、NMR法によれば、体液の主要成分を同時に測定でき、同じサンプルを数種の核種により分析できる利点もあることがわかった。VAA処理によるヨトウガ幼虫死亡原因:体液中のトレハロースおよび他の成分の、幼虫から蛹にかけての変動、ラベル化合物を使った糖代謝、およびそれらに及ぼすVAAの影響を分析した結果、死亡原因は、蛹への急激な組織構築がエネルギー代謝異常により不完全になるためであると推測された。VAAによるワモンゴキブリ飛翔の抑制:VAA投与によってゴキブリの筋肉トレハラーゼが阻害され、体液中のトレハロースを取り込み代謝することができなくなることが飛翔抑制の原因であるが、この昆虫が他のエネルギー源である脂質などを飛翔エネルギーとして利用できないことが、その背景となっている。VAAのトノサマバッタに対する影響:バッタではVAA投与によりトレハラーゼが阻害されて、エネルギー代謝が抑制されるが、飛翔は影響を受けないことが明らかになった。しかし、卵巣の発育が強く阻害され、ほとんど産卵しなくなることが観察された。VAAを害虫制御に利用するための標的として、致死作用や飛翔抑制と同じように生殖機能の阻害を考えることも重要である。VAA関連化合物のスクリーング:ヨトウガとチカイエカの幼虫を用いてVAA関連化合物の表皮透過性のスクリーニングを行なった。VAAの有機スルホン酸塩や直鎖脂肪酸を導入した化合物の中に表皮透過性に関して若干改良されたものが見いだされたが、未だ、実用につながる化合物は得られなかった。
高度分子変換を指向したキラル金属アルコキシド触媒の開発

本研究は、不斉アルドール反応などの不斉炭素-炭素結合生成反応において、反応後、系中に添加したアルコールにより再生できる、キラルなスズメトキシドを初めとする全く新しいタイプのキラル金属アルコキシド触媒の開発および、それらを用いた高度分子変換反応の開発を目的とする。昨年度の研究において、アルケニルトリクロロアセテートを用いる不斉アルドール反応で、3, 3'位に4-t-ブチルフェニル基が置換したビナフチル骨格を持つ、キラルなスズジブロミド錯体から系中で発生させたキラルなスズメトキシド錯体を触媒に用いた場合に、良好な触媒活性と不斉誘導が見られた。そこで本年度は、メタノールで再生可能な不斉触媒として、3, 3'位に様々な嵩高い置換基を持つ光学活性ビナフトールから誘導されるキラルなスズジブロミド錯体を合成し、アルケニルトリクロロアセテートとアルデヒドとの不斉アルドール反応において、その不斉触媒能について検討を行った。その結果、4-t-ブチルフェニル置換基を持つキラルスズブロミドメトキシド触媒をプロピオフェノンから誘導したアルケニルトリクロロアセテートに作用させた場合に、最高で94%eeのエナンチオ選択性が生じる事がわかった。さらに、イミン類を求電子剤とする不斉マンニッヒ型反応においては、2, 4-ビストリフルオロメチルフェニル基を持つキラルスズ触媒が高い不斉誘導を起こす事を見出した。また、本触媒システムをマイケル受容体やニトロソベンゼンに適用することによって、ジブチルスズジメトキシドを触媒とするアルケニルトリクロロアセテート類のマイケル付加反応やN-ニトロソアルドール反応も見出した。一方で、アルデヒドやイミン類のシアノ化触媒として関連する二臭化ジブチルスズが有効である事も突き止めた。昨年度の研究において、アルケニルトリクロロアセテートを用いる不斉アルドール反応で単純なビナフチル骨格を持つキラルなスズジブロミド錯体から反応系中で発生させたキラルなスズジメトキシド錯体を触媒に用いた場合に、明白な触媒活性と不斉誘導が見られた。そこで本年度は、メタノールで再生可能な不斉触媒として、3,3'位に嵩高い置換基を持つ光学活性ビナフトールから誘導される錯体を含め、様々なキラルなスズジメトキシド錯体を合成し、アルケニルトリクロロアセテートとアルデヒドとの不斉アルドール反応において、その触媒活性および不斉触媒としての性能について検討を行った。その結果、3,3'位に4-t-ブチルフェニル基を有するキラルスズジメトキシド触媒を反応系中で発生させ、本アルドール反応に適用してみたところ、目的とする付加体がアンチ選択的に得られ、そのアンチ体に最高で59%eeのエナンチオ選択性が生じる事がわかった。さらに、アキラルなジブチルスズジメトキシド触媒にキラルホスフィン・銀(I)錯体を不斉触媒として組合わせる事により、アルケニルトリクロロアセテートとアルデヒドとの不斉アルドール反応が円滑に進行することも見出した。本反応では芳香族アルデヒドのみならず、α,β-不飽和アルデヒドや脂肪族アルデヒドも適用することができ、対応する光学活性β-ヒドロキシケトン体が良好な光学純度で得られた。
酵素法によるアトロプ選択的ビアリールカップリング反応の開発

アトロプ選択的ビアリール合成法としてUllmanカップリング、銅アミン錯体等に加え、最近horseradish peroxidaseを用いたアトロプ選択的ビアリール合成法が報告されその選択性について疑問視する論文も出る等世界中でhorseradish peroxidaseを使った合成法が着目されている。一方申請者は茶のペルオキシダーゼ活性がhorseradlsh peroxidaseに比べ非常に高いことを報告しており今回各種植物ペルオキシダゼを用いアトロプ選択的ビアリール合成法の開発を行い以下の知見が得られた。各種植物培養細胞を用い検討した結果、茶培養細胞が高いペルオキシダーゼ活性を有することを見い出した。茶培養細胞を用い、2-ナフトールのアトロプ選択的カップリング反応に関する検討を行った結果、アトロプ選択性発現因子として、過酸化水素添加量と濃度が大きな影響を及ぼすことを見い出した。さらに置換基効果、固定化培養細胞を用いたアトロプ選択性発現に及ぼす効果及び細胞育成条件の影響についても検討を行った。各種2-ナフトール誘導体にて実験を行った結果、2-ナフトールでは、収率46.7%,不斉収率58.6%にてアトロプ選択的にビアリールカップリング反応が進行しR体を、6-ブロモ-2-ナフトールでは、収率28.3%,不斉収率36.2%にて,7-メトキシ-2-ナフトールでは、収率33.6%,不斉収率15.8%にて、それぞれいずれもS体が得られた。2-ヒドロキシ-3-ナフトエ酸メチルでは、反応は進行せず原料回収であった。一方申請者は茶のペルオキシダーゼ活性がhorseradish peroxidaseに比べ非常に高いことを報告しており今回各種植物ペルオキシダーゼを用いアトロプ選択的ビアリール合成法の開発として以下の項目について検討した。各種植物培養細胞(茶、タバコ、ニンジン、日々草)においてペルオキシダーゼ活性を測定した結果、茶培養細胞が非常に高い活性を示した。2)より高いペルオキシダーゼ活性を有す茶品種の探索やぶきた、おくひかり、山の息吹き、さやまかおり、かなやみどり、するがわせの各品種を用いペルオキシダーゼ活性を測定した結果、やぶきた、さやまかおり、かなやみどり、するがわせにおいて高い活性を示すことが判明した。3)茶培養細胞を用い2-ナフトールのアトロプ選択的酸化的カップリング反応に関する検討アトロプ選択的カップリング反応の条件検討として過酸化水素添加量と濃度がアトロプ選択性に影響を及ぼすことが判明し不斉収率に大きな影響をもたらした。高いペルオキシダーゼ活性を示す茶培養細胞を用い2-ナフトールのアトロプ選択的ビアリールカップリング反応の反応条件を以下の項目について検討を行った。1)アトロプ選択性発現の至適pH2)アトロプ選択性発現過酸化水素の添加時期3)アトロプ選択性発現過酸化水素添加量と濃度各種検討を行った結果1)-3)の項目はアトロプ選択性発現に大きく寄与することが判明し、アトロプ選択性を発現させる反応操作は、茶培養細胞(pH5.4,16ml)中に30%過酸化水素0.18mlを添加し20分間反応させた後、エタノールに溶解した2-ナフトール20mgを添加し15分間反応させ、酢酸エチルにて抽出する方法であることを見い出した。以上の知見に基づき下記に示す2-ナフトール誘導体にて実験を行った結果、2-

ナフトールでは、収率46.7%,不斉収率58.6%にて、6-ブロモ-2-ナフトールでは、収率28.3%,不斉収率36.2%にて,7-メトキシ-2-ナフトールでは、収率33.6%,不斉収率15.8%にて、それぞれアトロプ選択的にビアリールカップリング反応が進行しいずれもR体が得られた。2-ヒドロキシ-3-ナフトエ酸メチルでは、反応は進行せず原料回収であった。高いペルオキシダーゼ活性を示す茶培養細胞を用い2-ナフトールのアトロプ選択的ビアリールカップリング反応の反応条件を以下の項目について検討を行った。1)アトロプ選択性発現に及ぼす置換基効果2)固定化茶培養細胞を用いたアトロプ選択性発現に及ぼす効果3)固定化培養細胞を用いたアトロプ選択性発現に及ぼす細胞育成条件の影響4)各種固定化植物培養細胞を用いたアトロプ選択的ビアリールカップリング反応について各種検討を行った結果、置換基としてBr基、COOCH_3基が存在した場合、無置換に比べていずれも化学および光学収率が減少した。固定化培養細胞を用いた場合、過酸化水素の添加が困難なため、いずれも化学および光学収率が減少したが、過酸化水素の添加がなくても反応が進行したことは評価できる。さらにCOOCH_3の場合・固定化培養細胞のみにおいて反応が進行し、不斉収率が30%に達した。また、有機溶媒中でも反応が進行したことは興味深い。ペルオキシダーゼ活性を高める細胞育成条件で反応を行ったが、化学収率はいずれも上昇したが、不斉収率は減少した。各種植物を使い同様の実験を行ったが、茶培養細胞が一番優れていた。
国文学電子化テキストの異本同定プロトコルに関する研究

インターネットの爆発的普及により,電子化テキストの複製が加速し,様々な課題を生み出している。特に,1つの作品に対して数多くの異テキストが生み出され,電子化テキストの氏素性を確かめることが困難になってきている。氏素性の不確かなものは学術研究には使えない。すなわち,作品テキストの典拠(Authentication)が不可欠である。古典文学作品の電子化テキストを同定するための試みとして,TEIヘッダの記述を拡張し,かつ通信システム環境で異本の同定を制御するプロトコルを考えている。今年度は補助事業最終年度の研究成果のとりまとめを行い,研究成果報告書を作成した。なお,今年度から国文学研究資料館の情報システム環境が大きく変わり,超高速館内LANによる分散型情報システムが導入された。実験システム環境もこれに合わせた調整をはかった。一方,日本古典文学大系本文データベースから,韻文,散文,戯曲の代表作品を選定し,SGMLからXML記述を試み,DTD定義,およびデータ記述を完成させた。さらに,TEIヘッダの記述を進め,複数作品についての具体的なデータ記述を行い,検証した。とくに,古今和歌集についてはほヾ完成することができた。これらを基に,別途研究開発中のDublin Coreに基づくメタデータによる日本文学情報資源の標準化と統合を進め,デジタル資料館システムの構成に寄与した。利活用の方式として,人文科学系大学共同利用機関との連携を念頭とし,Z39.50方式などによる標準型情報検索システムの検討を進めた。インターネットの爆発的普及により、電子化テキストの複製が加速し、様々な課題を生み出している。とくに、1つの作品に対して数多くの異テキストが生み出され、電子化テキストの氏素性を確かめることが困難になってきている。すなわち、作品テキストの典拠(Authentication)が不可欠である。古典文学作品の電子化テキストを同定するための試みとして、TEIヘッダの記述を拡張し、かつ通信システム環境で異本の同定を制御するプロトコルを考えている。研究の初年度である本年度は、まず研究課題の分析と整理を行い、研究計画を策定した。また、国文学研究資料館設置のLANやワークステーションなどの情報資源を活用して、通信システムの実験環境整備をはかった。以下の様な研究を行った。(1)日本古典文学本文データベースから伊勢物語などの数作品を選び、TEIによるデータ型定義を行った。とくに、そのTEIヘッダの完全記述を進め、諸本同定情報の種類、記述方式の検討を開始した。さらに、テキストの系譜としての情報構造を把握するための作品の系譜モデルを検討した。(2)系譜モデルに基づく異本同定のための方法についての研究を行い、複数の案を作成し、それぞれの実現可能性を評価を開始した。大別して、通信システム環境におけるプロトコルとして実装する場合、WWWを想定した認証システム方式による場合、TEIヘッダの拡張による記述仕様による場合などである。(3)TEIは国際標準であり、日本語テキストでの実装が望まれている。TEIヘツダの機能追加や拡張については、TEIの推進母体である欧米の研究機関、研究者との密接な連絡調整を行っている。昨年度策定した研究計画に従って、研究を実施した。まず国文学研究資料館設置のLANやワークステーションなどの情報システム環境を活用し、研究基盤の確立をはかった。(1)日本古典文学本文データベースから文体の異なる作品を数点選び、TEI(SGML)によるデータ型定義(DTD)を策定した。TEIヘッダによる諸本同定情報の種類、記述方式の検討を開始した。

(2)系譜モデルに基づく異本同定のための方法についての研究を行い、複数の案を作成し、それぞれの実現可能性について検討を行った。すなわち、(1)通信システム環境におけるプロトコルとして実装する場合、(2)WWWを想定した認証システム方式による場合、(3)TEIヘッダの拡張による記述仕様による場合などである。(3)TEIは国際標準である。TEIヘッダの機能追加や拡張については、TEIの推進母体である欧米の研究機関、研究者との密接な連絡調整を行っている。インターネットの爆発的普及により,電子化テキストの複製が加速し,様々な課題を生み出している。とくに,1つの作品に対して数多くの異テキストが生み出され,電子化テキストの氏素性を確かめることが困難になってきている。氏素性の不確かなものは学術研究には使えない。すなわち,作品テキストの典拠(Authentication)が不可欠である。古典文学作品の電子化テキストを同定するための試みとして,TEIヘッダの記述を拡張し,かつ通信システム環境で異本の同定を制御するプロトコルを考えている。策定した研究計画に従って,研究を実施した。まず国文学研究資料館設置の新しい超高速ギガビットイーサネットによるLANや超高性能基本サーバなどの情報システム環境の応用によるシステム確立を図った。1.日本古典文学本文データベースから散文(源氏物語など)を中心とする作品を選び,詳細なDTDをTEI(SGML)により,検討した。TEIヘッダによる諸本同定情報の種類,記述方式の検討を行った。テキスト系譜の情報構造を把握するための作品の系譜モデルを検討した。2.系譜モデルに基づく異本同定のための方法についての研究を行った。すなわち,(A)通信システム環境におけるプロトコルとして実装する,(B)WWWを想定した認証システム方式による,(C)TEIヘッダの拡張による記述仕様によるケースである。3.TEIは国際標準である。TEIヘッダの機能追加や拡張については,TEIの推進母体である欧米の研究機関,研究者との密接な連絡調整を行った。最終年度は研究成果のとりまとめを行い,研究成果報告書を作成した。今年度から国文学研究資料館の情報システム環境が大きく変わり,超高速館内LAN(ギガビットイーサネット)による分散型情報システムが導入された。実験システム環境もこれに合わせた調整を行っている。一方,試行情報サービスとして実施した日本古典文学本文データベースは順調に利活用が進んでいる。データ記述
世界最初の触媒機能を有する酵素型亜鉛フィンガー蛋白質の創出

天然亜鉛フィンガー蛋白質を鋳型にして、触媒機能を示す酵素型亜鉛フィンガー蛋白質の設計を行った。人工設計したHis4型亜鉛フィンガー蛋白質を遺伝子工学的手法で創製した結果、本蛋白質はDNAを加水分解する能力を持ち、世界で初めて触媒機能を持つ酵素型亜鉛フィンガー蛋白質の創出に成功した。本研究では、ヌクレアーゼやプロテアーゼ類似の触媒機能を持つ世界最初の酵素型亜鉛フィンガー蛋白質を設計・創製し、その生物学・医学領域への展開を目指してきた。本年度は、酵素機能を有する新しい亜鉛フィンガー蛋白質の設計・創製および活性評価に関する実験を実施する。先ず申請者らの基礎研究から、His_4型亜鉛フィンガードメインがアミノ酸エステルやリン酸エステルの加水分解を有することを見出したので、このドメインを触媒作用部位として活用することを計画した。DNA塩基配列特異的結合能を持つ天然Cys_2His_2型亜鉛フィンガー蛋白質にHis_4型亜鉛フィンガードメインを連結させた新規混合亜鉛フィンガー蛋白質を遺伝子工学的手法を駆使して作製した。この新しい亜鉛フィンガー蛋白質は、DNA結合部位とDNA切断部位とを併せ持ち、制限酵素類似の触媒作用を示した。亜鉛フィンガーは、モジュール構造と非対称なDNA認識コードという特徴を持っており、自由な長さと塩基配列のDNAを認識する制限酵素様分子の設計には最適のターゲット蛋白質と考えられる。既に申請者らは、915塩基対を特異的に認識できる亜鉛フィンガー蛋白質やAT塩基対に富んだ塩基配列を認識できる亜鉛フィンガー蛋白質の創製に成功しているので、これら亜鉛フィンガー蛋白質に上記His_4型触媒ドメインを結合することを試みている。本研究においては、天然亜鉛フィンガータンパク質の構造型亜鉛を機能型亜鉛に変換して、世界最初の触媒機能を有する酵素型亜鉛フィンガータンパク質を設計・創出することを目指している。平成23年度は、新しく創製したHis4型人工亜鉛フィンガータンパク質のDNA塩基配列選択的切断を明らかにするため、天然3フィンガードメイン間にHis4亜鉛フィンガードメインを挿入した7フィンガータンパク質を遺伝子工学的に作製した。この新規亜鉛フィンガータンパク質を用いて、GCボックスDNAとランダム配列DNAに対する切断反応を詳細に追究したところ、顕著にGCボックスDNAに対する切断が促進されており、配列選択的なDNA切断が認められた。本結果は、亜鉛フィンガーを利用した任意の配列を切断できる人工制限酵素の創製に大きな可能性を与えていると考えられる。また、3フィンガードメイン間にセリウム結合ペプチドを挿入した新規亜鉛フィンガータンパク質の設計・創製についても順調に展開されている。他方、新規亜鉛フィンガータンパク質のプロテアーゼ様機能については、自己分解のため計画通りには進展していない。本年度は、高効率なDNA塩基配列選択的切断能を有する新規亜鉛フィンガータンパク質の説計・創製として、6個の(Cys2His2)型亜鉛フィンガーモチーフの真ん中に(His4)型亜鉛フィンガーモチーフを導入したマルチ7亜鉛フィンガータンパク質を遺伝子工学を駆使して作製・精製を行った。また、本新規マルチ亜鉛フィンガータンパク質のDNA切断能、すなわちヌクレアーゼ機能について、電気泳動法を用いて定量的に評価した。その結果、触媒中心である(His4)型亜鉛フィンガーモチーフの前後のそれぞれ3つの(Cys2His2)型亜鉛フィンガーモチーフによって認識されたDNA塩基配列の間のDNA配列が切断されていることが明らかになった。それ故、任意の塩基配列を(Cys2His2)型亜鉛フィンガーモチーフによって認識・結合させ、次いで塩基配列の近傍を(His4)型亜鉛フィンガーモチーフによって切断する新しい塩基配列切断能を有するヌクレアーゼの分子設計が達成されることが示された。本亜鉛フィンガータンパク質は、ペプチド結合を切断するぺプチダーゼ機能を持っていることは明白であるが、残念ながら詳細な科学的追求は十分できなかった。交付申請の段階で目指していた新規His4型亜鉛フィンガータンパク質による塩基配列選択的なDNA切断に関しては、期待通りの研究成果が得られているが、プロテアーゼ様機能に関しては、タンパク質自身が攻撃を受けるため、目下、その防止策を練っている。24年度が最終年度であるため、記入しない。構造型亜鉛から機能型亜鉛への変換に成功し、目的とした触媒機能を有する亜鉛フィンガータンパク質を創出し、加水分解的にDNAを切断することを示した。今後は、より効率的に機能を持つタンパク質のデザインに励むとともに、ペプチド核酸を基質としてプロテアーゼ様機能の証明や新しいセリウム部位を導入した亜鉛フィンガータンパク質を設計・創製し、そのDNA加水分解について検討する予定である。
免疫反応の多様性を演出する活性化B細胞分化制御機構ーミトコンドリアとB細胞分化ー

我々は、活性化B細胞に起こる二つのイベント(クラススイッチ組換えと形質細胞分化)は、ミトコンドリアの機能的相違によって事前に方向付けられている事を見いだした。この時ミトコンドリア代謝産物の一つである『ヘム』がシグナル因子として機能している事も明らかにした(Nat. Communs.)。本研究では、クラススイッチ組換えと形質細胞分化を決定づける分子機構の詳細をさらに明らかにするために、ミトコンドリア状態の異なる細胞(クラススイッチ組換えと形質細胞分化それぞれに適したミトコンドリア状態の細胞)における遺伝子発現の変化を調べた。さらにミトコンドリアによる分化制御メカニズムの普遍性と、分化する細胞系列の違いによる分化決定メカニズムの違いを明らかにする事を目的として、活性化B細胞から分化する様々な細胞系列のミトコンドリアの状態を調べ、ミトコンドリア状態と分化との関係を検索した。さらに、これらの細胞における遺伝子発現や代謝産物の変化を調べることによって、ミトコンドリア状態変化に依存した分化制御機構の解明を目指した。クラススイッチする細胞と、形質細胞に分化する細胞で発現しているタンパク質を比較した実験から、それぞれに特徴的な遺伝子発現パターンを見出した。活性化B細胞から分化する様々な細胞系列におけるミトコンドリア状態を調べる実験では「記憶B細胞」、「長期生存形質細胞」、「制御性B細胞」の細胞集団中に性質の異なった亜集団が存在することが明らかになり、これらの細胞集団を単離する事に成功した。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。申請者は、活性化B細胞に起こる二つのイベント(クラススイッチ組換えと形質細胞分化)は、ミトコンドリアの機能的相違によって事前に方向付けられている事を見いだした。本研究では、この分化制御メカニズムの普遍性と分化する細胞系列の違いによる特異性を明らかにする事を目的として、活性化B細胞から分化する様々な細胞系列におけるミトコンドリアの状態の違いを調べ、さらにミトコンドリア状態の異なる細胞における遺伝子発現や代謝産物の変化を詳細に調べることを目指した。最初に「記憶B細胞」、「長期生存形質細胞」、「制御性B細胞」のミトコンドリア状況を調べることを行なった。これと並行して、クラススイッチする細胞と形質細胞に分化する細胞の代謝産物の網羅的解析を行なった。本研究は、まず活性化B細胞から分化する細胞集団(「記憶B細胞」「長期生存形質細胞」「制御性B細胞」)のミトコンドリア状態を調べるところから実験を開始した。しかし、この実験では以前の予備的実験で得られたデータを安定して得ることができなかったため、研究の遂行が遅れる一因となってしまった。コントロール可能な様々なパラメーターを調整しながら実験を繰り返した結果、ようやく一定の結論が得られそうな状況になったところである。結果が安定しない理由を突き詰めてゆく過程で、それぞれの細胞集団に中に性質のことなった亜集団が存在する可能性が明らかになってきた。クラススイッチする細胞と形質細胞に分化する細胞の代謝産物の網羅的解析では、あまりにも多くの因子が変化していたため、今後二次的スクリーニングを行う必要性があることが明らかになった。初期の実験では「記憶B細胞」、「長期生存形質細胞」、「制御性B細胞」のミトコンドリア状況を調べたが、以前得ていた予備的実験データと同様の結果を安定して得ることができなかった。そこでコントロール可能な様々なパラメーターを調整しながら実験を繰り返した結果、ようやく安定した結果が得られるようになった。結果が安定しない理由を突き詰めてゆく過程で、それぞれの細胞集団中に性質の異なった亜集団が存在する可能性が明らかになってきた。もともと想定していた細胞集団がさらに細分化されたことによって、当初の計画より実験の遂行が困難となった。解析を計画していた細胞の生体内での細胞数はかなり少なく、この細胞をさらに細分化する必要性が出てきたことから、細胞の調整に大量のマウスを用いた実験を行うことが必要となった。本年度は、これらの細胞集団を単離するために必要な予備実験まで終了した。複数のマウスを用いた実験においても目的とする細胞を安定して供給できる実験系を確立した。しかし、この実験では以前の予備的実験で得られたデータを安定して得ることができなかった。その後の解析から、実験が安定しない理由の一つとして、それぞれの細胞集団内にミトコンドリア活性の異なる亜集団が存在することも明らかになった。

このデータを得るためには、複数のマウスに同じように免疫することによって個体間のブレの少ない反応を誘導することが重要であるが、この実験は思った以上に細かいノウハウが必要であり、その技術的な習得に時間がかかってしまったことが研究の遅れを招いた原因である。我々は、活性化B細胞に起こる二つのイベント(クラススイッチ組換えと形質細胞分化)は、ミトコンドリアの機能的相違によって事前に方向付けられている事を見いだした。この時ミトコンドリア代謝産物の一つである『ヘム』がシグナル因子として機能している事も明らかにした(Nat. Communs.)。本研究では、クラススイッチ組換えと形質細胞分化を決定づける分子機構の詳細をさらに明らかにするために、ミトコンドリア状態の異なる細胞(クラススイッチ組換えと形質細胞分化それぞれに適したミトコンドリア状態の細胞)における遺伝子発現の変化を調べた。さらにミトコンドリアによる分化制御メカニズムの普遍性と、分化する細胞系列の違いによる分化決定メカニズムの違いを明らかにする事を目的として、活性化B細胞から分化する様々な細胞系列のミトコンドリアの状態を調べ、ミトコンドリア状態と分化との関係を検索した。さらに、これらの細胞における遺伝子発現や代謝産物の変化を調べることによって、ミトコンドリア状態変化に依存した分化制御機構の解明を目指した。クラススイッチする細胞と、形質細胞に分化する細胞で発現しているタンパク質を比較した実験から、それぞれに特徴的な遺伝子発現パターンを見出した。活性化B細胞から分化する様々な細胞系列におけるミトコンドリア状態を調べる実験では「記憶B細胞」、「長期生存形質細胞」、「制御性B細胞」の細胞集団中に性質の異なった亜集団が存在することが明らかになり、これらの細胞集団を単離する事に成功した。活性化B細胞から分化する細胞には、今まで分類されてきた細胞群をさらに細分化できる亜集団が存在する可能性を見出した。今回新しく見出した細胞の機能と、それぞれの細胞への分化制御機構を明らかにすることを目指す。クラススイッチする細胞と、形質細胞に分化する細胞の違いを見出すための網羅的解析を実施したが、あまりにも多くの因子に変化が見られたため、細胞分化に関わる本質的因子を同定するための二次的スクリーニングを行うことが必要になった。そこで今年度は、クラススイッチ組換えや形質細胞分化に影響を与えるパラメーターを検索し、その時に変化する因子を網羅的に調べることによって、細胞分化に関わる中心的因子の同定を試みる予定である。目的とする細胞集団を安定して供給できる実験系を確立したため、目的の実験を実施する。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。
市場における期待の異質性とフォワードルッキングなマクロ経済政策

本研究では、様々な角度から期待の異質性を考慮して資産価格に関する研究を行った。第一に、日本の株式投資家が期待を形成する際,複数の戦略を用いており、それら戦略を時間を通じて使い分けている。この戦略の切替えが株価のファンダメンタル価格からの乖離を説明する上で重要である。第二に、先進国の住宅価格の国際的な連動性を考察するために、FAVARモデルを用いて分析を行い、国際的な金利動向が負に有意に効くのに加え、不確実性ショックが大事な役割を担っていることがわかった。第三に、アジア新興諸国における近年の株価連動性の高まりの要因が、主に先進国からの間接的な影響によることがわかった。1.昨年度までに実施した分析について、論文を英文査読雑誌と英文査読書籍に投稿し、一部は受理された。また、再投稿中の論文もある。2.新規の研究1を進めた。概要は以下の通り。(1)先行研究のサーベイ:クロスボーダーの金融取引が金融変数(特に経済の先行きに関する指標性を持つ株価などの資産価格)に与える影響に関する先行研究について、サーベイした。理論的には、取引量の増加が金融変数の世界的な連動性を生み出す場合もあれば、逆に連動性を低下させる可能性もある。しかし、データの不十分さなどもあり、実証的にはどちらの傾向が強いのかは一概に言えないことがわかった。(2)データセット構築:クロスボーダーの金融取引のデータ、また金融変数の国際的な連動性に影響を与えるとする各国の産業構造等のデータを取得し、大規模なデータセットを構築した。(3)実証分析の実施:データを用いた計量分析を行っている途中である。3.新規の研究2を進めた。概要は以下の通り。(1)先行研究のサーベイ:海外では日本に比べて高い水準の消費税が課されていることもあってか、消費税の引き上げ自体が経済分析において中心的トピックとは必ずしもなっていない。しかし、わが国に関しては3→5%の引き上げ時に景気が大きく落ち込んだこともあり、注目度が高い。そこで、丁寧に先行研究をレビューした。その結果、住宅にかかる消費税の経済に与える影響についてモデル化する必要性が高いことがわかった。(2)理論モデルの構築:現在、確率的動学一般均衡モデルを構築中である。特に、解放経済下で海外との資金取引が存在していることを考慮した分析は複雑となるため、その部分で様々な検討を行っているところである。1先行研究のサーベイ:グローバルに投資家の集まる米国の金融市場に関する先行研究の他、わが国の債券市場のように海外投資家が殆ど存在しない金融市場の研究についても先行研究をサーベイした。これは、理論モデルや実証モデル構築の基礎となる。想定していたとおり、差があっただけではなく、グローバル金融危機の前後で大きく変化が生じている可能性が見られた。2予測者(機関投資家)の特徴の分析、担当業務ごとの実際の予測の実情の調査とデータセット作成:1のサーベイを通じて米国については機関投資家毎の特徴を把握可能であるが、日本に関しては先行研究が限られることもあり、まずは実情把握に努めた。バイサイド・セルサイドといった担当業務に伴うスタンスの違い、市場分析をする際に注目するファクターの違い、経年的な変化に伴う予測特性の変化などを考慮し、データセットを作成した。3実証分析の実施:データを用いた計量分析を行った。4不確実性の定量化:研究を進めるにつれて、不確実性の役割の重要性が見えてきた。そこで、データを構築し、資産価格変動について不確実性の果たす役割について研究を行った。1.作成した3つ論文が英文査読誌に受理され、1邦語論文が刊行され、いくつかの論文を英文査読誌に投稿した(現時点では投稿中)。2.今年度は特にクロスボーダーの経済取引の変化に伴い、市場の期待形成が変化することを通じて、国際間での同経済変数間の相関にどのような影響が与えられるかを分析した。研究成果としてワーキングペーパー化した。特に、貿易取引だけではなく、証券投資が爆発的に増加している新興国間の株価の相関関係に特に注目した分析を行った。株価であれ、実質GDPであれ、経済変数のクロスカントリーでの相関を考える場合、国Aと国Bの間の相関はその両者と取引のある国Cからの影響を受ける。特に、経済的な意味で国Aと国Bが小国、国Cが大国であったとすれば、国Cからの影響を無視することは、本質を見誤ることとなる。この影響を踏まえた上で、相関関係の経年的変化が何によって説明できるかを明らかにした。基本的には、G7のような大国からの影響が支配的であることを明らかにした。3.消費税の影響に関しては、シミュレーション作業を少し行っているが、年度内にワーキングペーパー化することはできなかった。

その理由として、昨年4月の消費税引き上げ後の影響を再現できるようなパラメータ設定がスタンダードな定式化では難しく、日本経済の特徴をとらえたモデルを作る上では、もう少し、工夫が必要と考えられるためである。4.今回の一連の研究を踏まえ、新たな問題意識として、期待の役割を理解していく上で、もう少しディスアグリゲートしたレベルで連動性を考えていく必要があるという考えに至った。一つのアプローチとしては、企業レベルでのデータを使うことが考えられるが、もう少し、シンプルに業種別等での研究が有意義になると思われる。新年度以降の研究につながる知見だと考えている。応用経済学1.昨年度の研究を活かして作成した論文が査読雑誌と査読書籍に掲載された。2.新規の分析を進め、実証分析を進めつつある。3.それ以外にも既に分析が進み論文のプロトタイプがいくつか出来上がりつつある。わが国では消費税の増税が行われ、今後も引き上げが予想される。その短期的影響だけではなく、中長期的な影響について考えていくことが、期待の異質性とフォワードルッキングなマクロ経済政策について考えていく上で重要と考えており、最後の一年でその点について研究を進めていきたい。また、国内に限定せず、国際的な視点から市場の期待を反映する金融資産価格の動向について研究を行い、そこから得られる経済政策的意義を整理し、論文作成実証分析結果の解釈とそこから得られる経済政策上の留意点を整理していきたい。本研究が世界的にも認められる水準をクリアするように、欧米の大学、政策当局、国際機関での学会発表の場などでの意見交換を参考に論文を改善し、学術誌に投稿することを目標とする。これらの分析を通じて、学術的な貢献だけなく、実務的な貢献も果たしていきたい。わが国の投資家毎の期待の異質性の存在と異質性の要因を明らかにし、そこから得られる経済政策的意義を整理し、論文作成実証分析結果の解釈とそこから得られる経済政策上の留意点を整理していきたい。期待の異質性を踏まえて、金融資産価格の予測データが物価や景気に先行性を有する情報変数として活用できるかを実証的に検証し、論文作成経済政策運営に市場の期待のデータをどのように使えるかを実証的に提示することで、学術的な貢献だけなく、実務的な貢献も果たしていきたい。予定通り、学会発表等を中心に研究費を活用する予定である。また、在外研究で米国に滞在しているため、研究に必要な基本的な用品等を揃えるのにも活用する予定。