hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
病院情報システムのデータ活用方法の確立とメディカルデータマイニングの創成

病院情報システムには日々の診療に伴って膨大なデータが蓄積されているが、直接の診療以外にはほとんど有効に2次利用されていない。この潜在的に極めて有用と考えられるデータを、医学研究に活用するための方法を、具体的課題の解析によって示した。特に、長期にわたる検査値データの変動補正、検査診断特性の網羅的解析、血球検査データの検査診断特性パターンによる疾患診断、検査値時系列の計算知能による特徴抽出と予測、などについて成果を得た。病態推移予測肝硬変患者におけるChEデータを対象として、検査データ時系列予測の研究をおこなった。解析用データウェアハウスに記録されているデータは、定期的な検査データではないため、Artificial Neural Networkによるモデル化を行い、一定間隔の検査データを生成し、欠損値を補間することで解決した。モデル化データの変動量に注目して比較を行った。肝硬変患者においてChE値が低下している期間の変化量パターンの分類を行い、そのパターン及び各患者におけるChE値に基づき、低下量を予測するアルゴリズムを構築した。実際の検査データ及び予測データとの誤差が18.4であることを確認し、構築したアルゴリズムの有効性を確認した。画像情報を用いた病態分類病院情報システム上に蓄積されているメタデータが付与されていないDICOM形式の超音波検査画像を撮影部位毎に分類を行うアルゴリズムを構築した。医療画像のフォーマットであるDICOMは仕様の更新が行われ、撮影部位などのメタデータを付与することが可能になっているが、古い仕様の画像には患者IDのみデータしか付与されていない。これらの画像にはオペレータが指示したマーカーが画像に描写されている。本アルゴリズムは、このマーカーを自動抽出することで分類を行う。実際に蓄積された60万枚の画像に対し分類を行い、提案アルゴリズムの有効性を確認した。クラスタリング技術の診療情報への適用とその可能性本研究では、クラスタリング技術の一種であるSOM(Self-Organizing Maps)などの方法を利用して、検査依頼のパターン解析や、白血球粒度パターンの症例検索のための類似画像の高速検索システムに応用し、この分野の知識発見の補助ツールとして開発した。これによりクラスタリング技術の適用は、診断支援や医学知識の発見の補助に極めて有用であることを示した。・多数の症例の時系列情報を事前確率とし、Bayesの定理を適用して個別症例の検査値時系列予測値を事後確率として求める手法において、個別症例の検査値時系列を確率過程として扱う方法が有望であることがわかった。・アジア圏の健常者3000人のデータから、約100項目の検査値を測定し、性差、年齢差、地域差に関する探索を行っている。これらの基礎データから、健常人での加齢による時系列変化を基準に、高知大学総合医療情報システムに蓄積された各疾患群の長期時系列変化について正確に予測を行う解析法を検討している。・血液検査データにおける分類解析および予測アルゴリズムを開発し、病態推移の記述や予測に役立てることを目指している。今年度は、ファジィ推論により代謝性アルカローシスの度合いを評価した。各種度合いを評価した後、他の血液検査データを参照することで、異常原因の推定を行う。・フローサイト法によるCBC検査から得られる血球粒度情報について、計測したすべての細胞のデータと高知大学総合医療情報システムに蓄積された診療情報との関係を明らかにする研究を実施している。これまで、好中球の桿状核球と分葉核球の定量、数日後のCRP量の推定、赤血球形体の識別が可能などの成果を得ている。この方法による抗菌剤使用パターンと治療の効果の関係を評価することなどを目指している。・キャピラリー電気泳動分析から得られる波形データから、100項目程度の臨床検査値を推定し、これらと高知大学総合医療情報システムに蓄積された診療情報との関係の解明を行っている。これまでの研究で、糖尿病の診断やNST活動に必要な客観的な指標を提供できる可能性が後ろ向き研究で判明しており、前向き研究により立証する研究計画を立案中である。【長期間にわたる検査値データの変動補正】長期間の検査データにおいて生ずる、検査方法変更に伴う検査値変動の影響を補正するためには、検査方法変更前後の検査値の分布をそれぞれBOX-COX変換によって正規分布に直し、平均値が変更前後で連続になるよう接続し、逆変換によって元に戻すという方法が有効であることを確認した。【検査診断特性の網羅的解析】病名歴と検査歴に対してROC解析の手法を用いて網羅的解析を行い、その結果を知識データベース化することにより、ある病名の診断に適した検査の検索や、ある検査で診断可能な病名、ある患者の検査値のセットから考えられる病名をリストアップすることなどが可能になった。【CBC検査データの検査診断特性パターンによる疾患診断】これまで蓄積されたCBC検査データを網羅的に精査することにより、血液学分野以外にも、数多くの良好な検査診断特性を示すパターンが存在することを明らかにした。例えば、胃癌の診断がROC分析で感度=74%,特異度=88%,AUC=0.85と,良好な検査診断特性を示す結果が示された。

また、多次元的なパターンによる解析手法を確立し、早期胃癌を含む胃癌のパターンは小児や妊娠期に類似したパターンを示すが、独立したパターンであるととを発見した。【状態空間モデルによる病態推移予測】「内部モデルである脂質代謝モデルによって糖代謝モデルが影響を受け、その結果HDL、HbA1cが観測モデル結果として得られる。」という「状態空間モデル」の構築を行った。このモデルを粒子フィルタ法によって実装し、経口ブドウ糖魚荷試験によって耐糖能の程度が明ちかな116人の患者のデータに対して、予測HbA1c値と観測HbA1c直の比較を行い、診療データの予測方法として適切であることを確認した。
サクラ類こぶ病に対する抵抗性を光で誘導する条件と生理的メカニズムの解明

`染井吉野'挿し木発根苗の作成に成功し、人工気象室内での接種実験に供試可能で十分量の枝葉を持つ苗が得られた。また、野外植栽された`染井吉野'について光条件の異なる各新梢への接種試験結果から、野外環境下においても光誘導抵抗性現象が起きていることが確認された。光誘導抵抗性の詳細条件について解明を試みたところ、事前の光照射による順化処理の効果は明瞭ではなく、実験手法上必ずしも行う必要がないこと、白色光下での抵抗性の発揮は、LED光源に比べて蛍光管光源の方が優れたことから、帯域を持つ光源が重要であること、可視光以外の影響として紫外光の付加的照射よって、より強い抵抗性が発揮されたことから、野外環境で認められる`染井吉野'の強い抵抗性には、可視光が一定強度以上必要であるが、これに加えて紫外光も必要であることなどが分かった。紫外光の中ではUVB領域の効果が優れ、解剖観察においても病巣組織と細胞の壊死範囲が縮小し、抵抗性が強く現れていることが裏付けられた。次に、生理的メカニズムについて、既知の生理的阻害剤や抵抗性誘導剤の処理下での接種試験から解明を試みた。光合成阻害剤処理による抵抗性の低下がこぶの増大として暗所、明所の両条件下で現れ、光合成のエネルギーが抵抗性の発揮に最低限必要である事が分かった。一方で、タンパク合成阻害剤処理によって、こぶ増大の明所と暗所の差が縮小し、抵抗性の発揮に新規のタンパク合成が関与していることが推定された。この結果を受けて行ったサリチル酸処理によって、明所でこぶが発達するという負の効果が現れたことから、サリチル酸とクロストークするジャスモン酸の関与が疑われた。ジャスモン酸処理による抵抗性の増大が確認されたことから、細菌性こぶ病に対する光誘導抵抗性にジャスモン酸によるシグナル伝達機構が寄与していると推定された。ソメイヨシノのこぶ病に対する抵抗性は光量不足により崩壊する(強光下で誘導される)ことが、実験的に確認されているが、摘葉処理でも抵抗性の崩壊が起こるため、現象の詳細解明には、葉の数等、苗の状態を一定に保ちながら解析する必要があった。そこで、挿し木発根苗の作成を試み、接ぎ木2年生苗同様、光量不足で抵抗性が崩壊するか調べた。その結果、ソメイヨシノ挿し木の発根は発根促進剤の添加や緑枝をミスト挿しすることで達成されるが、オオヤマザクラに比べて育成温度を高く保った方が、発根と芽の伸長共に良好であり、光量管理下の接種実験を行うのに適した、コンパクトな供試苗の生産が可能となった。作成したコンパクト挿し木苗は、光量が不足した条件下でこぶ病菌を接種したところ、こぶ病患部が増大する傾向があったことから、抵抗性が崩壊していることが確認され、現象解明に向けて種々の実験、解析へ利用可能なことが分かった。次に抵抗性崩壊時のこぶ病患部組織の変化について、人工気象室内でソメイヨシノ接ぎ木苗にこぶ病菌を接種した後、強、中間、弱の強度の異なる白色光下または、中間の強度の青色光下で生じた病患部に対して解剖学的観察を実施したところ、中間または弱い強度の白色光下で生じたこぶ病患部の大きさは、強い強度の白色光下や中間の強度の青色光下のそれらよりも大きく、前者では、接種部以外の枝組織全体に細胞の壊死が広がり、また、こぶの増大につれ、カルス化細胞数も増大した。これに対して後者では、組織の壊死が接種部とその周辺に限定され、こぶの大きさも小さくなった。後者で細胞の壊死が広がらなかったのは、過敏感反応によりプログラムされた細胞死が起こって、病原細菌の封じ込めに成功したからと考えられる。異なる光強度、光質でこのような違いが生じたことから、光条件が本病の発生とこぶの発達に大きく影響していることが示された。初年度の計画にあったコンパクト実験系の確立と解剖による組織変化の観察の2つの項目において必要十分な結果が得られたから。抵抗性誘導条件の詳細解明のため、関与が疑われる紫外線の影響について、ソメイヨシノ接ぎ木苗に対して紫外線を付加的に照射しながら、こぶ病菌を接種し、発現する病徴を計測・調査した結果、紫外線の存在によってより強い抵抗性が発揮されること、野外環境下のソメイヨシノの強い抵抗性を再現するためには、可視光線が一定強度以上必要であり、これに加えて紫外線照射も必要であることが分かった。紫外線ではナローバンドのUVB領域紫外線の付加照射が最も効果が優れ、解剖観察においても病巣組織や細胞の壊死範囲が縮小したことから、抵抗性がより強く現れていると考えられた。加えて、UVA領域とUVB領域の紫外線を個別に総時間として長く照射した場合、逆に接種部位が肥大し、発揮されるはずの抵抗性を喪失する現象が認められた。このことは、過剰な紫外線がソメイヨシノのこぶ病への抵抗性を崩壊に導く可能性を示唆している。抵抗性誘導条件として、可視光以外の高エネルギー放射である紫外光の関与を新らたに明らかに出来た。この中で過剰な紫外光がソメイヨシノのこぶ病への抵抗性を崩壊に導く可能性が示唆されたことは予想外の結果で関連分野における研究知見も乏しいことから、新しい研究への端緒を開くものとして評価される。基本条件が解明されたことで、阻害剤実験も着手できるめどが立ち、2年目の目標をほぼ達成出来た。`

染井吉野'挿し木発根苗の作成に成功し、人工気象室内での接種実験に供試可能で十分量の枝葉を持つ苗が得られた。また、野外植栽された`染井吉野'について光条件の異なる各新梢への接種試験結果から、野外環境下においても光誘導抵抗性現象が起きていることが確認された。光誘導抵抗性の詳細条件について解明を試みたところ、事前の光照射による順化処理の効果は明瞭ではなく、実験手法上必ずしも行う必要がないこと、白色光下での抵抗性の発揮は、LED光源に比べて蛍光管光源の方が優れたことから、帯域を持つ光源が重要であること、可視光以外の影響として紫外光の付加的照射よって、より強い抵抗性が発揮されたことから、野外環境で認められる`染井吉野'の強い抵抗性には、可視光が一定強度以上必要であるが、これに加えて紫外光も必要であることなどが分かった。紫外光の中ではUVB領域の効果が優れ、解剖観察においても病巣組織と細胞の壊死範囲が縮小し、抵抗性が強く現れていることが裏付けられた。次に、生理的メカニズムについて、既知の生理的阻害剤や抵抗性誘導剤の処理下での接種試験から解明を試みた。光合成阻害剤処理による抵抗性の低下がこぶの増大として暗所、明所の両条件下で現れ、光合成のエネルギーが抵抗性の発揮に最低限必要である事が分かった。一方で、タンパク合成阻害剤処理によって、こぶ増大の明所と暗所の差が縮小し、抵抗性の発揮に新規のタンパク合成が関与していることが推定された。この結果を受けて行ったサリチル酸処理によって、明所でこぶが発達するという負の効果が現れたことから、サリチル酸とクロストークするジャスモン酸の関与が疑われた。ジャスモン酸処理による抵抗性の増大が確認されたことから、細菌性こぶ病に対する光誘導抵抗性にジャスモン酸によるシグナル伝達機構が寄与していると推定された。(1)現在、抵抗性崩壊(誘導抵抗性)の現象面での詳細解明を進めており、引き続き、この解明を行う。(2)解剖による組織変化の観察について、更に詳細な変化の観察を行う。(3)コンパクト実験系を活用した、阻害剤処理下における抵抗性誘導実験を行い、シグナル伝達の可能性について検討する。(4)抵抗性を示す感染組織内で起きている遺伝子発現等の解析可能性について検討を開始する。抵抗性誘導時における阻害剤試験、抵抗性誘導組織内でRNA発現解析、予想される抵抗性誘導関連物質の生成の確認等を行い、生理的メカニズムの推定を行う。なお、抵抗性誘導組織内で生じている現象の生理的解明に資するため、新たにRNA発現解析を行うこととし、専門研究者を研究分担者に追加する。新たにUVを含めた太陽光由来電磁波を計測する装置の導入の必要性が判明したが、当該年度内に機器の選定、購入が間に合わず、次年度に再検討する事になったため。購入予定であった紫外線センサーは、可視光域での測定も必要であることが判明したため、また、サクラ苗を購入しようとしたが、欠品であったため、次年度使用額が生じた。次年度は、計画を見直して紫外線センサーの購入に代えて、可視光域に重点を置いた分光器の購入またはレンタルをしてデータを収集する経費に充てる。また、欠品のため購入できなかったサクラ苗を購入する。ほぼ全額を光・UV等の発生装置と計測装置の購入に使用予定である。
ネパールにおけるマラリアに対する文化的・生物学的適応に関する調査・研究

ネパールにおいて、マラリアに対して文化的適応をおこなってきた集団と、生物学的(遺伝的)適応をおこなってきた集団について、両者の遺伝学的な差の検出およびそのマラリア感染との関係を検討するのが、本研究の主目的である。これにむけて、平成12年度は2000年9-10月(雨季あけ)および2001年3月(乾季)、平成13年度は2001年8月(雨季)および2002年2月(乾季)の計4回、カブレパランチョーク郡マハデブスタン村の一集落で、村民の協力をえて調査をおこない、サンプルを収集した。この結果、住民にはα+サラセミア、ヘモグロビンE、グルコース6リン酸脱水素酵素(G6PD)欠損症がみられ、文化的適応をおこなってきた集団については、これらが低頻度かまったくみられず、生物学的適応をおこなってきた集団にでは、いずれもみられるが、とくにα+サラセミアが高頻度であることが判明した。これまで、文化的適応をおこなってきた集団としては、タマンについてしか充分なサンプルが得られていなかったが、ネパールの主要民族集団であるパルバテにくわえ、ネワールについてもかなりのサンプルが得られた。くわえてダフィー抗原の(-/-)型および楕円赤血球症の検査もおこなったが、発見されなかった。これに並行して、マラリア感染に関する検査を塗沫標本およびDNA診断によりおこなっている。その結果、感染は子どもに多いことのほか、α+サラセミアのキャリアーでは、感染時のヘモグロビンのレベル低下が正常者にくらべて小さい傾向が認められた。なお、上記にくわえ、フィラリアおよび腸管寄生虫の検査をおこない、いずれも感染率が高いことが判明した。また現地産の魚より、多数の肝吸虫のメタセルカリアを発見し、感染実験をおこなったが成功しなかった。今後はのこりのサンプルの分析を急ぐとともに、上記の成果を国際的学会誌に発表したい。ネパールにおいて、マラリアに対して文化的適応をおこなってきた集団と生物学的(遺伝的)適応をおこなってきた集団についての遺伝的な差の知見にもとづき、マラリアのDNA診断法により、そのマラリア感染を追跡するのが本研究の主目的である。これにむけて2000年9月10月および2001年3月の2回、Kabhrepalanchok郡、Mahadevsthan村で住民の協力をえて調査をおこない、サンプルを収集した。この分析の結果、まず住民にはα+サラセミア、HbE、G6PD欠損症のほか、楕円赤血球症も見られることがほぼ確実となった。ダフィー抗原についても検討したが、三日熱マラリア(P.vivaxに感染しない(-/-)型はみられなかった。2000年9月10月収集のサンプルでは,マラリア感染が検査対象の約13%についてみられ、とくに9歳から15歳の年齢に集中していることが注目される。塗沫標本での検査では、この半数からしかマラリア原虫は捕捉できなかった。頻度の高いα+サラセミアとの関係を見ると、このホモ接合型でも、マラリア感染が確認された。上記二回の調査時期はいずれも乾季であり、また現地では最近になって熱帯熱マラリア(P.falciparum)が外部より侵入したといわれ、来年度の雨期の調査結果が注目される。なお、上記調査にあわせてフィラリア感染の検査もおこなったところ、血中抗原では約20%、尿中抗体では50%以上が陽性と判定され、今後も調査を継続することとした。

ネパールにおいて、マラリアに対して文化的適応をおこなってきた集団と、生物学的(遺伝的)適応をおこなってきた集団についての遺伝学的な差の検出およびそのマラリア感染との関係を検討するのが、本研究の主目的である。これにむけて、平成12年度にひきつづき、本年度は2001年8月(雨季)および2002年2月(乾季)の2回、カブレパランチョーク郡マハデブスタン村の-集落で、村民の協力をえて調査をおこない、サンプルを収集した。この結果、住民にはα+サラセミア、ヘモグロビンE、グルコース6リン酸脱水素酵素(G6PD)欠損症がみられ、文化的適応をおこなってきた集団については、これらが低頻度かまったくみられず、生物学的適応をおこなってきた集団にでは、いずれもみられるが、とくにα+サラセミアが高頻度であることが判明した。これまで、文化的適応をおこなってきた集団としては、タマンについてしか充分なサンプルが得られていなかったが、ネパールの主要民族集団であるパルバテにくわえ、ネワールについてもかなりのサンプルが得られた。これに並行して、マラリア感染に関する検査を塗沫標本およびDNA診断によりおこなっている。その結果、感染は子どもに多いことのほか、α+サラセミアのキャリアーでは、感染時のヘモグロビンのレベル低下が正常者にくらべて小さい傾向が認められた。現在のこりのサンプルの分析を急いでいるところである。なお、上記にくわえ、フィラリアおよび腸管寄生虫の検査をおこなった。また、1998年の調査により、この地域の住民には低頻度ながら肝吸虫の感染者がいることが判明しており、こころみに現地産の魚を検査したところ、肝吸虫のメタセルカリアが発見された。今後はのこりのサンプルの分析を急ぐとともに、上記の成果を国際的学会誌に発表したい。
アブラハヤの排卵に伴う吻部伸長における生殖腺刺激ホルモンの役割

コイ科魚類のアブラハヤ雌が排卵時に吻部が伸長し潜砂行動により産卵を行い、その現象には生殖腺刺激ホルモン(GTH)が関与する可能性をin vivoおよびin vitro投与実験によって示した.吻部の上皮組織内の結合組織は、繊維芽細胞と非定形物質で構成され、排卵雌の繊維芽細胞の密度は低くなり、結合組織に占める非定形物質の割合が高くなることが判明した.吻部の含水率の測定より、組織中の水分が増加していることからこの非定形物質は水分を主成分としていることが示唆された.以上のことから、排卵時に分泌されるGTHが直接吻部に作用し、吸水現象を介して吻部の伸長を促していることが明らかとなった.GTH受容体のcDNAと遺伝子のクローニング:アブラハヤの排卵前および排卵後のメス個体の卵巣から全RNAをISOGEN法により抽出した.これを鋳型として一本鎖cDNAを合成し、真骨類のLH受容体の構造比較に基づいて、保存性の高い領域で作成した縮重プライマー(SP1,SP2,SP3およびASP1,ASP2,ASP3)を用いてPCRを行い、アガロース電気泳動によりPCR増幅cDNAの鎖長を確認した.その結果、アブラハヤ排卵前のメスにおいて、SP1とASP3の組み合わせで予想される約250bpのcDNA断片が増幅した.このPCR増幅cDNAをサブクローンして塩基配列を解析したところ、262塩基の配列が決定でき、相同性検索を行ったところ、キンギョCarassius auratusの自己抗原mRNAと97%一致していた.今後はプライマーの組み合わせを変え,より多くの塩基配列を解析することにより、GTH受容体cDNAをクローニングすることができると考えられる.魚類の繁殖は、他の脊椎動物と同様に視床下部ー下垂体ー体組織系のペプチドホルモンの強い支配下にある.生殖腺の発達と成熟は下垂体生殖腺刺激ホルモン(GTH)の影響を受けていることがよく知られているが、産卵に伴う他の生理現象におけるGTHの機能については不明点な点が多い.申請者らは、コイ科魚類のアブラハヤ雌が排卵時に吻部が伸長し潜砂行動により産卵を行い、その現象にはGTHである黄体形成ホルモン(LH)が関与する可能性をin vivoおよびin vitro投与実験と組織学的解析によって示した.アブラハヤの卵成熟誘起ホルモン(MIH)は17α,20β-ジヒドロキシ-4-プレグネン-3-オン(17,20β-P)であることが判明したが、17,20β-Pは吻部の伸長には関与しないことが示された.アブラハヤの卵巣からLH受容体cDNAをクローニングしたが、吻部でのLH受容体遺伝子の発現解析には至らなかった.吻部伸長における吻部の上皮組織内の結合組織は、繊維芽細胞と非定形物質で構成され、排卵雌の繊維芽細胞の密度は低くなり、結合組織に占める非定形物質の割合が高くなることが判明した.この非定形物質は、吻部の含水率が増加していることから、水分を主成分としていることが示唆された.以上のことから、アブラハヤの排卵時に分泌されるLHは、卵巣のみならず吻部にも作用し、結合組織の吸水を介して吻部の伸長を促していることが判明した.本研究により魚類の配偶子形成におけるGTHの新しい生理的調節機構の一端が明らかとなった.コイ科魚類のアブラハヤ雌が排卵時に吻部が伸長し潜砂行動により産卵を行い、その現象には生殖腺刺激ホルモン(GTH)が関与する可能性をin vivoおよびin vitro投与実験によって示した.吻部の上皮組織内の結合組織は、繊維芽細胞と非定形物質で構成され、排卵雌の繊維芽細胞の密度は低くなり、結合組織に占める非定形物質の割合が高くなることが判明した.吻部の含水率の測定より、組織中の水分が増加していることからこの非定形物質は水分を主成分としていることが示唆された.以上のことから、排卵時に分泌されるGTHが直接吻部に作用し、吸水現象を介して吻部の伸長を促していることが明らかとなった.昨年度は、アブラハヤの排卵時に分泌される生殖腺刺激ホルモン(GTH)サージが吻部伸長に直接関与することを証明するために、河川における排卵個体の捕獲と生殖腺刺激ホルモン(GTH)のin vivoおよびin vitro投与実験と組織学的解析を重点的に行い、下記の知見を得た。1)アブラハヤの卵成熟誘起ホルモン(MIH)の同定と作用:排卵時の血中ホルモン量の測定および排卵前の卵を用いたin vitro最終成熟誘起実験より、アブラハヤのMIHは17α,20β-ジヒドロキシ-4-プレグネン-3-オン(17,20β-P)であることが判明した。しかし、この17,20β-Pを排卵前の吻部とともに培養しても、吻部の伸長を促さなかったことから、MIHは吻部の伸長には関与しないことが示された。2)吻部伸長における成分と組織変化:吻部の上皮組織内の結合組織は、繊維芽細胞と非定形物質で構成され、排卵雌の繊維芽細胞の密度は低くなり、結合組織に占める非定形物質の割合が高くなることが判明した。また、GTHのin vivoおよびin vitro投与実験により吻部伸長を誘起された個体においても同様な現象が見られた。さらに吻部の成分分析より、組織中の水分が増加していることからこの非定形物質は水分を主成分としていることが示唆された。以上のことから、排卵時に分泌されるGTHが直接吻部に作用し、吸水現象を介して吻部の伸長を促していることが明らかとなった。

東日本大震災により損失した凍結組織サンプルの再採集および学部移転および新棟完成に伴う引越しと実験環境の整備に時間を要したことから本計画が大幅に遅れている。今年度は、当初の計画を絞って集中的に進める。当初の計画では、昨年度中にアブラハヤの排卵時の吻部伸長におけるGTHおよびその受容体遺伝子のクローニングを行い、生殖腺の発達に伴うGTHおよび受容体遺伝子の局在変化まで終了する予定であった。しかし、東日本大震災の影響を受け、それまでに収集した解析用の冷凍サンプルが停電により腐敗してしまい、再度排卵個体の採集の必要性に迫られた。また、本学部の関東移転に伴う新たな実験環境の立て直しに、時間と労力が費やされたことにより本計画が大幅に遅れる状況に至った。現在、新たに収集した下垂体およびGTHの標的器官(卵巣、吻部)からRNAを抽出し、一連の操作から得られたcDNAの構造を元に遺伝子の5'上流領域のクローニングを急ピッチで進めている。アブラハヤのGTH受容体遺伝子のクローニングにより得られた情報を元に、逆転写PCRによって吻部におけるGTH受容体遺伝子の有無を確認するとともに、in situハイブリダイゼーション法によるGTH受容体遺伝子の局在から、卵巣と同様に吻部がGTHの標的器官であることを明らかにする.次に、生殖腺の発達に伴うGTH受容体遺伝子の発現量をリアルタイム逆転写ポリメラーゼ反応法により定量する.さらに既知のコイのGTHcDNAの塩基配列から演繹されるGTHペプチドを用いて、GTHに対する特異抗体を作成する。得られた特異抗体を時間分解蛍光免疫測定法に活用することにより、吻部伸長時における血中GTH量を決定する.以上の結果を総合して、排卵時の吻部伸長に対する内分泌機構を明らかにする。本年度は、アブラハヤのGTHおよびその受容体遺伝子のクローニングで得られる成果を活用し、生殖腺の発達に伴う吻部におけるGTH受容体遺伝子の局在から、卵巣と同様に吻部がGTHの標的器官であることを証明する。さらに、成熟に伴う脳下垂体におけるGTH遺伝子発現量および吻部におけるGTH受容体遺伝子発現量の変化から、排卵時の吻部伸長に対する内分泌調節機構を明らかにするために、下記の実験を実施する。1)生殖腺の発達に伴うGTHおよび受容体遺伝子の局在変化cDNAクローニングにより得られた情報を元に、標識アンチセンスcRNA,および対照実験用の標識センスcRNAを調製し,in situハイブリダイゼーションを行う.試料にはGTH用に脳下垂体を、GTH受容体用に繁殖期を含む様々な発達段階の卵巣と吻部を用いる。これにより,下垂体でのGTHと様々な発達段階の生殖腺と吻部でのGTH受容体の発現動態の関連を明らかにする。また、吻部の遺伝子レベルで発現するGTH受容体細胞を同定し,前述の免疫組織によるGTH受容体が発現する細胞と同一であるか比較検討を行う。2)GTH遺伝子発現およびGTH受容体遺伝子発現と吻部伸長繁殖期前後のアブラハヤ雌を河川から定期的に捕獲し、脳下垂体をサンプリングする。脳下垂体におけるGTH遺伝子発現量をリアルタイム逆転写ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)法により定量する。また、GTHが作用する組織・器官を同定するために、生殖腺および吻部をサンプリングし、GTH受容体の有無を逆転写PCRによって調べるとともにGTH遺伝子発現量をリアルタイム逆転写ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)法により定量する。該当なし来年度の研究計画に基づいて、主に下記の消耗品に使用する。
ラム波理論を用いた超高周波共振器に関する研究

本研究は情報機器のクロック周波数を高周波化し、温度特性の優れたラム波形共振器を探索するため、ラム波理論を用いて理論および実験的に検討を行った。その結果、次のことを明らかにした。1.ラム波型基板の波動解析を行い、任意カットの水晶基盤を伝搬するラム波の位相速度、電気機械結合係数および周波数温度特性について理論および実験的検討を行った。水晶基板の弾性定数、圧電定数および誘電率の3次までの温度係数を考慮した数値解析を行った。その結果、高周波動作が可能であり、またラム波励振用電気機械結合係数も十分大きいことが分かった。2.500MHz帯の発振器作成:ラム波型高周波共振器をコルピッツ回路に組み込み発振に成功した。発振周波数511MHzで短期安定度は±0.03ppmである。この発振周波数は同一警乗の水晶振動子の動作周波数の約4倍、弾性表面波共振器動作周波数の約2倍の高周波である。3.ATカット水晶基板を用いて温度特性解析結果の実験的確認:温度特性の計算結果の確認のため、ATカット水晶基板を用いて実験を行った。X軸方向とY軸方向伝搬ラム波の温度特性について理論的実験的検討を行った結果、両者の非常に良い一致を見た。4温度特性の計算と最適カットの探索:ラム波の周波数温度依存性を解析した。三つのオイラー角を0.5°間隔で任意に変化させ最適カットの探索を行った。その結果、デバイス使用温度範囲(-20°C80°C)において周波数偏差がそれぞれ、0.7ppm、1.4ppm、1.24ppmと非常に優れた新カットを見出した。これらのカットはいずれも電気機械結合係数が大きくラム波基板として有望である。基礎実験によって、温度係数が優れていることを確認している。励振電極面の裏面に薄膜(SiO2,Au, Ta2O5)を設けた場合のラム波伝搬特性について検討を行い,弾性波速度の遅い薄膜を設けると電気機械結合係数が増大すること,速度分散性により周波数微調整が容易に行えることを明らかにした。実験により金薄膜を設けた場合について検討を行い、膜厚0.03μm(波長10μm)の金薄膜を設けると電気機械結合係数が計算値より10倍増大することを示した。本研究は情報機器のクロック周波数を高周波化し、温度特性の優れた共振器を探索するため、ラムは理論を用いた超高周波共振器について検討を行った。その結果、次の4点を明らかにした。1.ラム波位相速度の解析と実験:運動方程式と圧電基本式とを境界条件の基で数値解析し,ラム波の位相速度を求めた。その結果、従来のバルク波型振動しに比べて約10倍、弾性表面波に比べて23倍の高周波で動作することを理論と実験により明らかにした。2.水晶素板の極薄化:ラム波の特長を最大限に引き出す為に,水晶結晶の厚さを極限値まで薄くする技術の確立が必要である。ウエットエッチング法で53μmまで薄く研磨するエッチング液の成分比を探し、両表面が平坦で平行なエッチング条件を求めた。その結果、1.3μmまで薄く加工できることが分かった。

3.ラム波型共振器の為の励振電極と反射器の設計と実験:ラム波は弾性表面波励振に使用されている"すだれ状電極"を用いて励振出来る。そこで,励振部とラム波の反射器の構造を設計し,ホトマスクの作製と共振器の作製を行ない、アドミッタンスの測定値からラム波の電気機械結合係数を、また共振特性から反射器の反射係数を求めた。これらの測定値はそれぞれ計算値とよく一致し、ラム波の電気機械結合係数はバルク波を使用するので大きいこと、反射係数が弾性表面波モードより約100倍と非常に大きいことを確認できた。4.温度係数の計算と最適カットの探索:ラム波の周波数温度依存性を解析した。オイラー角を任意に変化させ、温度依存性を計算したところ、1次TCF=0を示す数十のカットを見つけることができた。一例として,オイラー角(0,125.25,96)で1次TCF=0,2次TCF=0.031(ppm/(°C)^2)と良好なカットを見出した。本研究は情報機器のクロック周波数を高周波化し、温度特性の優れた共振器を探索するため、ラム波理論を用いた超高周波共振器について検討を行った。その結果、次の4点を明らかにした。1.ラム波型高周波共振器の解析と実験:運動方程式と圧電基本式とを境界条件の下で数値解析し,ラム波の位相速度と反射係数を求めた。その結果に基づき一端子型ラム波共振器を設計・試作を行った。励受信電極の対数157.5、反射器本数170本の共振器を設計した。この形状は同一仕様の弾性表面波共振器より反射器の本数が少なく、小型化が確認できた。2.500MHz帯の発振器作成:ラム波型高周波共振器をコルピッツ回路に組み込み発振に成功した。発振周波数511MHzで短期安定度は±0.03ppmである。この発振周波数は同一形状の水晶振動子の動作周波数の約4倍、弾性表面波共振器動作周波数の約2倍の高周波である。3.温度特性の計算と最適カットの探索:ラム波の周波数温度依存性を解析した。その中で、2次特性を示す良好なカットの一例を上げる。デバイス使用温度範囲(-40°C100°C)において周波数偏差が、30ppm,80ppm,100ppm,200ppm以下のカットを見出した。また、3次特性を示す良好なカットを数カット見つけることができた。デバイス使用温度範囲(-40°C100°C)において周波数偏差が、僅か4ppm,10ppm,12ppm,20ppm以下の非常に良好な温度特性を示すカットを見出した。4.ATカット水晶基板を用いた温度特性解析結果の実験的確認:温度特性の計算結果の確認のため、ATカット水晶基板を用いて実験を行った。X軸方向とY軸方向伝搬ラム波の温度特性について理論的実験的検討を行った結果、両者の非常に良い一致を見た。本研究は情報機器のクロック周波数を高周波化し、温度特性の優れたラム波型共振器を探索するため、ラム波理論を用いて理論および実験的に検討を行った。その結果、次の3点を明らかにした。1.ラム波型基板の波動解析を行い,任意カットの水晶基板を伝搬するラム波の位相速度、電気機械結合係数および周波数温度特性について理論および実験的検討を行った。水晶基板の弾性定数、圧電定数および誘電率の3次までの温度係数を考慮した数値解析を行った。
多波長X線画像計測に関するナノメートル電磁波の生体分光および散乱特性の研究

X線画像診断では、X線透過波強度による画像情報に関するX線分光・散乱特性を明らかにすることにより、詳細な生体情報が得られる。X線画像診断による新しい生理現象の解明方法の確立、および散乱雑音特性の検討により画像診断の精度向上を目的として、これまで殆んど検討されていないX線の生体組織における分光特性、散乱・透過特性の波長依存性、角度分布特性について検討を行った。透過X線より散乱効果をフィルタ分離し、吸収効果の情報を求めるための導波路型グリッドアレイを提案し、その特性を理論的に検討した。1.生体組織の統計電磁界理論およびコンピュータシミュレーションによる検討(宮崎、後藤、高橋)ランダムな生体組織中における、X線ビームの透過、散乱、吸収特性を統計散乱理論で解析した。X線の多重散乱、散乱角度特性を検討し、有限差分時間領域(FDTD)法と、妥当性を比較検討した。さらに、広領域における散乱拡散理論を検討し、FDTD法で解析するための、グリッドコンピュータによる並列計算を示した。2.多波長X線画像の信号、雑音特性の検討(宮崎、黄)生体組織中のX線の多重散乱による軸方向画像信号、散乱雑音特性、側面横方向の散乱特性を明らかにするため、X線多波長の依存性について電磁界統計理論およびコンピュータシミュレーションにより検討した。3.多波長X線分光特性および散乱特性の実験的検討軟X線発生装置およびX線CCDカメラを用いたX線画像計測システムを構築し、骨による透過・散乱波の実験的検討を行い、理論と比較した。4.導波路型空間グリッドフィルタの設計理論および多波長X線画像診断システムの検討(宮崎、後藤、高橋、黄)吸収効果を含む透過波を散乱波と分離し、高精度のX線画像診断を可能とするX線吸収性金属クラッド構成の導波路型グリッド空間フィルタを電磁界の導波路モード理論により、最適設計を求めた。X線画像診断において、受光X線画像の信号処理を向上するため、散乱波の空間フィルタ特性を基礎とした、画像処理システムの改善を検討した。本研究により、生体媒質中のX線の透過散乱特性を用いた、より精度のよいX線画像診断を発展させるために必要な散乱、波長分光特性が示され、生体画像システムの最適設計の基礎が与えられた。生体組織における多波長X線の分光および散乱特性を検討するため、生体媒質のモデルにおけるX線ビーム波の散乱・透過特性に関する解析的手法による理論的検討およびコンピュータシミュレーションによる検討を行うと共に、軟X線を用いたX線画像計測システムの構築を行い、以下の良好な成果が得られた。1.生体組織の多波長X線分光特性の計測システムの構築(宮崎、後藤、高橋)生体組織によるX線散乱・透過特性の分光特性を実験的に検討するため、軟X線発生装置およびX線カメラを用いた計測システムの構築を行った。X線カメラかちの検出出力はコンピュータにより画像処理が可能である。2.生体組織の多波長X線分光特性の理論的検討(宮崎)生体組織における構成原子および組織の違いによるX線減衰係数の波長特性を明らかにすると共に、ランダムな生体媒質中におけるX線の透過・散乱界の統計的性質を理論解析により明らかにした。3.X線分光機能素子、X線集束機能素子、X線反射機能素子の検討(宮崎、後藤)多波長X線ビームの制御および処理に重要となる分光機能素子、集束機能素子および反射機能素子の構成要素におけるX線の伝搬特性を理論的に検討した。4.生体組織のX線散乱特性のコンピュータシミュレーションによる検討(宮崎、黄、高橋)たんぱく質からなる生体組織をモデル化し、X線ビームに対する透過、散乱、吸収特性を有限差分時間領域(FDTD)法を用いたコンピュータシミュレーションにより解析を行った。また、波長に比べサイズの大きい生体組織におけるシミュレーションを行うため、領域分割による逐次計算手法および並列アルゴリズムに関して検討を行った。さらに、グリッドコンピューティングによる大規模領域の計算を行うための検討を行った。5.多波長X線画像の信号、雑音特性の検討(宮崎、黄、高橋)生体組織における多重散乱による軸方向画像新党、散乱雑音信号、側面横方向の散乱雑音特性を明らかにするため、コンピュータシミュレーションにより基礎特性を検討した。また、実験的計測システムの整備を行った。本研究で得られたX線透過、散乱特性の波長依存性を基に、さらに理論的、実験的に検討を行っていくことにより、多重波長を用いたX線画像診断の信号処理、情報処理に有効なX線機能素子およびシステム構築への展開が可能となる。2.多波長X線画像の信号、雑音特性の検討(宮崎、黄)

生体組織中のX線の多重散乱による軸方向画像信号、散乱雑音特性、側面横方向の散乱特性を明らかにするため、X線多波長の依存性について電磁界統計理論およびコンピュータシミュレーションにより検討した。3.多波長X線分光特性および散乱特性の実験的検討軟X線発生装置およびX線CCDカメラを用いたX線画像計測システムを構築し、骨による透過・散乱波の実験的検討を行い、理論と比較した。4.導波路型空間グリッドフィルタの設計理論および多波長X線画像診断システムの検討(宮崎、後藤、高橋、黄)吸収効果を含む透過波を散乱波と分離し、高精度のX線画像診断を可能とするX線吸収性金属クラッド構成の導波路型グリッド空間フィルタを電磁界の導波路モード理論により、最適設計を求めた。X線画像診断において、受光X線画像の信号処理を向上するため、散乱波の空間フィルタ特性を基礎とした、画像処理システムの改善を検討した。本研究により、生体媒質中のX線の透過散乱特性を用いた、より精度のよいX線画像診断を発展させるために必要な散乱、波長分光特性が示され、生体画像システムの最適設計の基礎が与えられた。
ラット顎骨における硬組織局所的損傷時における歯の移動促進効果の解析

硬組織の局所的な外科的侵襲により、矯正学的歯の移動が促進されるかを検討するために、7週齢のWistar系雄性ラットの上顎第一臼歯をNi-Ti系ワイヤーで規格的に作製した矯正装置を用いて21日間にわたる歯の移動を行った。歯の移動量および組織学的な検索を行った。硬組織の局所的な外科的侵襲の有無にかかわらず、歯の移動量に統計学的な有意差は認められなかった。また、組織学的な検討においても差は認められなかった。硬組織の局所的な外科的損傷により歯の移動が促進されるという仮説を検証するための予備実験として、ラットの骨損傷部位を検討した。骨損傷部位として、上顎の歯の移動を行うことを予定しているため、移動する歯により近り硬組織として頬骨に外科的損傷与えることを考えていたが、頬骨へのアプローチは手技的に非常に困難であることが予備実験から分かった。そのため、より骨損傷を与えやすく、移動する歯になるべく近い硬組織として頭頂骨を選択し、ラット頭頂部を切開し、頭皮および骨膜を剥離後、骨面を露出させ、頭頂骨に約1.5mmのホール状の骨欠損を与え、骨損傷モデルを作製した。また、ラット歯の移動モデルとして、五十嵐らの報告(Igarahi Kら(1994))で報告されている装置を当初考えていたが、装置が脱落しやすく、また、頬側への歯の移動では頬側の歯槽骨が喪失して組織学的な検索に不向きであることが分った。そのため、ラット第一臼歯の頬側へ0.012-inchのニッケルチタン系ワイヤーで作製した矯正装置を装着したところ、頬側への歯の移動よりも口蓋側へ歯の移動を行う方が組織的な評価を行う際に優れていることや装置の脱離がほとんどないことが予備実験より明らかとなった。また、装置装着後、ラットの体重変化に著しい変化は認められなかった。硬組織に局所的な外科的侵襲を与えた後に、歯の移動を開始することで、外科的矯正治療を大幅に短縮することができるという仮説を、ラットを用いた頭頂部骨損傷モデルを用いて検証した。7週齢のWistar雄性ラットを用いて、頭頂骨に直径1.5mmのホールを作製、硬組織へ外科的侵襲を与えた。外科的侵襲直後から21日間の矯正的歯の移動を行なった群を実験群とし、シャムオペを行い21日間の歯の移動を行なった群を対照群とした。手術は、全身麻酔下にて行なった。21日間の歯の移動は、ラット第一臼歯を口蓋側へ移動させるように0.012-inchのニッケルチタン系ワイヤーで作製した矯正装置を用いて行なった。歯の移動期間中、0,3,7,10,14,17および21日目にシリコーン印象剤にて上顎歯列の印象を採得した。採得した印象から超硬石膏を用い、上顎歯列模型を作製した。また、歯の移動期間中、両群のラットの体重に大きな減少は認められず、実験期間順調に増加した。歯の移動量の計測のために、1200pixel/inchの解像度にて、各上顎歯列模型の咬合面をスキャンし、上顎第一臼歯近心口蓋咬頭頂間距離を計測した。10倍に拡大した画像を用いてコンピューターを用いデジタル計測を行った。21日間の歯の移動期間中、07日目までは、対照群と比較し実験群の歯の移動量が大きかったが、その後対照群の歯の移動量が大きくなった。21日間の歯の総移動量は、実験群が0.859mm、対照群が0.868mmであった。重複測定-分散分析法: tow-wayrepeated measures ANOVAを用いて統計学的検討を行なったが、実験群と対照群の間に統計学的な有意差は認められなかった。また、Student's t-testを用いた各印象採得日における歯の移動量でも両群に統計学的な有意差は認められなかった。21日目のHE染色を施した組織学的所見において、実験群と対照群の間に定性的な差は認められなかった。
連続近赤外線分光測定装置による脳内ヘモグロビンの定量化に関する基礎的研究

新生時期の脳障害の予防と管理には脳内血液量、酸素化の変化をモニターすることは非常に重要である。これまでの研究によって、近赤外線連続分光測定装置(fsNIRS)を利用し、2ポイントによる測定、拡散スペクトルの平坦化の補正、光路長の規格化により、脳組織内の酸素化Hb、脱酸素化Hb、酸素飽和度(SbO_2)、cytochrome c oxidaseのredox state、脳血液量をreal timeに測定することが可能であることを報告した。本研究において、これまでの方法を発展させ脳内血液量を定量的に測定できる新しい解析法を開発し、以下の成果を得た。(1)生体組織の2点測定による吸光度測定における光路長の補正として、多成分解析による光遮断効果定数(Base)での光路長補正を行なう方法(Base補正法)を考案し、脳内ヘモグロビンの定量化に関する新しい解析方法を確立した。(2)脳内ヘモグロビンの定量化に関するin vitroとin vivoの検討として、時間分解分光装置(TRS)とfsNIRSの同時測定を行った。脳組織の光拡散状態と近似している1%intralipidの懸濁溶液中の血液濃度が081.4μMの範囲では、TRSとBase補正法で算出した総Hb量に有意な正の相関(r=0.895,p<0.0001)を認めた。新生仔豚を用い濃厚赤血球の輸血および生理食塩水との交換輸血により血液中のHb濃度を変化させたが、TRSとBase補正法で算出した総Hb量とSbO_2に各々有意な正の相関(r=0.944,p<0.0001;r=0.858,p<0.0001)を認めた。また平均光路長とBaseとの間に有意な正の相関を認めた。これらの成績より近赤外線連続スペクトル測定に新しい解析方法であるBase補正法を組合せることで脳内ヘモグロビンを定量的に測定できることが証明された。我々は近赤外線領域の連続スペクトル測定装置(cNIRS)を用い、生体組織の光拡散効果による吸収スペクトルの平坦化を補正し、透過型スペクトルとして演算し、多成分解析時にbaseで光路長補正を行うことにより、ヘモグロビン(Hb)の一定光学的測定体積中の相対的濃度の算出を可能とした。Time Resolved Spectroscopy(TRS)システムのパルスレーザーは3波長(761,791と835nm)を用い、投光部受光部間距離を20mmで測定した時間分解波形により平筋光路長を計算し、更に光拡散方程式にfittingし散乱係数と吸収係数を求め、吸収係数より酸素化Hb、脱酸素化Hb、総HbとHb酸素飽和度(SO2)の絶対値を求め、これらをcNIRS測定の結果と比較検討した。cNIRSは大塚電子IMUC-7000を使用し、投光部reference間と投光部measurement間距離を10mm,20mmとした。

(1)1%intralipidを含む血液懸濁液によるin vitroの検討:窒素バブリング下で血液濃度が0.53%まで総Hb量は、TRSとNIRSの値に有意な正の相関を認めた。(2)新生仔豚を用いたin vivoの検討:吸入酸素濃度は一定とし、濃厚血液注入ないし生理食塩水での交換輸血による循環血液中のHb濃度を変化させる実験では、cNIRSとTRSで算出した脳内SO2は有意な正の相関を認めた。また両者で算出した総Hb量も、有意な正の相関を認めた。両実験で平均光路長は総Hbが増加するにつれ減少した。cNIRSとTRSで算出した脳内SO2や総Hbの絶対値が有意な相関を持つことより、cNIRSにより、in vivoでのHbが定量的に測定できることが明らかとなり、次年度にはcNIRSによる絶対値算出の検討を進めていく予定である。連続近赤外線分光測定装置(cNIRS)で実際のスペクトル測定時に、同時に時間分解分光装置を使用し、平均光路長を求め、測定スペクトルより得られたヘモグロビンの相対的濃度を絶対値として算出する方法を確立するために、in vitroおよびin vivoでのヘモグロビン(Hb)の定量的測定を検討した。Time Resolved Spectroscopy(TRS)システムのパルスレーザーは3波長(761,791と835nm)を用い、投光部受光部間距離を20mmで測定した時間分解波形により平均光路長を計算し、更に光拡散方程式にfittingし散乱係数と吸収係数を求め、吸収係数より酸素化Hb、脱酸素化Hb、総HbとHb酸素飽和度の絶対値を求めた。cNIRSは大塚電子IMUC-7000を使用し、投光部reference間と投光部measurement間距離を10mm,20mmとした。(1)血液懸濁液によるin vitroの検討:窒素バブリングおよび酸素バブリング下で血液濃度が0.53%まで総Hb量は、TRSとcNIRSの値に各々有意な正の相関を認めた。しかし酸素バブリング下では、cNIRSの値がTRSでの値より低くなる傾向が見られた。(2)新生仔豚における検討:濃厚赤血球の輸血および生理食塩水との交換輸血により血液中のHb濃度を変化させたが、cNIRSとTRSで算出した総Hb量は有意な正の相関を認めた。また吸入酸素濃度を100%から0%まで段階的に減少させ、酸素化Hb、脱酸素化Hbの濃度を変化させたところ、平均光路長は総Hbの増加および脱酸素化Hbの増加とともに減少し、baseとの間に有意な正の相関を認めた。以上の成績より、cNIRSによりin vivoでのHbが定量的に測定できることが明らかとなったが、より正確に測定するためには、今後更に検討する必要がある。
外来通院患者の医療ストレス、コーピング、コンプライアンスに関する研究

外来通院患者705名に対して,ストレッサー,コーピング,心理的ストレス症状,コンプライアンスを測定する尺度などを含む『外来通院患者に対する医療心理学的実態調査』と題した調査を施行した。分析が可能であったのは,7つの除外基準をクリアした有効分で,560名(79.4%)であった。ストレッサー項目30項目のうち,23項目について因子分析(主因子解法により抽出,斜交回転)を行なった。4つの因子が抽出され,これらの因子により全共通分散の42.6%が説明されていた。各因子は,「診断と治療」「医師との軋轢」「説明やインフォームド・コンセントの不足」「医療環境的負荷」を表わすものと解釈され,下位尺度として信頼性係数alphaが算出された。各下位尺度のalpha係数は,alpha=0.652(6項目),0.803(5項目),0.679(5項目),0.594(7項目)であった。ストレッサー尺度は,これら4つと「身体的苦痛」の計5つを下位尺度とした。コーピングについては,8通りのコーピング・パターンを設定し,それぞれの出現率をストレッサーのカテゴリー毎に算出した結果,「身体的苦痛」では,「受容」が32%,「要請・努力」が31%,「診療と治療」では,「受容」が44%,「受容」+「要請・努力」が28%,「医師との軋轢」では,「受容」が35%,「要請・努力」が22%,「説明やインフォームド・コンセントの不足」では,「受容」が41%,「医療環境的負荷」では,「受容」が59%,「受容」+「要請・努力」が22%となった。外来通院患者におけるストレッサーと問題行動との関係を重回帰分析(説明変数:ストレッサー尺度の5つの下位尺度得点,従属変数:4つの問題行動の有無得点)を用いて分析したところ,「服薬拒否」は「説明やインフォームド・コンセントの不足」と「医療環境的負荷」によって,「制限拒否」は「診療と治療」によって,「他病院受診」は「身体的苦痛」と「医師との軋轢」によって説明されていた。