hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
トルコギキョウの高密度RADマーカーの開発による優性八重咲き遺伝子の解析

トルコギキョウにおいてみられる優性の八重咲き性形質と連鎖するDNAマーカーを単離することを試みた.八重咲きと一重咲き系統間のF2世代では,ホール数が2以上の八重のほか,花器官に異常がみられる奇形花が見られた.八重咲きの分離比から,八重咲き性には少なくとも2遺伝子以上が関与している可能性を示した.両系統間において,総計80万のRADマーカー配列を決定し,その中に10万SNPsがあった.これらを用いて,八重咲き性についての連鎖解析をおこなった.トルコギキョウにおいてみられる優性の八重咲き性形質と連鎖するDNAマーカーを単離することを試みた.八重咲きと一重咲き系統間のF2世代では,ホール数が2以上の八重のほか,花器官に異常がみられる奇形花が見られた.八重咲きの分離比から,八重咲き性には少なくとも2遺伝子以上が関与している可能性を示した.両系統間において,総計80万のRADマーカー配列を決定し,その中に10万SNPsがあった.これらを用いて,八重咲き性についての連鎖解析をおこなった.1.八重咲き形質の評価八重咲きと一重咲きの数品種のトルコギキョウを栽培し,花の形態を比較した.八重咲き品種では,一重咲き品種に比べ花器官数の増加が見られた.花弁数が2倍以上となったほか,雄蕊数,心皮数もやや増加していた.一重咲きでは花弁数,雄蘂数いずれも5であるが,八重咲きでは雄蘂数が56,花弁数は雄蘂数のほぼ倍数となる規則性がみられたy.しかし,雄蕊,雌蕊に形態的な変化が見られるものの,無限に花器官が形成されるのではなく,有限性を維持していた.したがって,トルコギキョウにおける八重咲きは,雄蕊,雌蕊が奇形化するCクラス遺伝子の欠損とは表現形質が異なった.また,顕微鏡観察の結果,八重咲きにおける花弁数の増加は,花分裂組織の拡大によるのではなく,ホールの発生期間が延長して,複数の花弁ホールが形成されることによって起きたと思われた.2.F2世代の育成.八重咲き形質の系統'620'と一重咲き形質の系統'503'とを親系統に用いた.これら交配して得られたF1は八重咲きとなり,八重咲き形質が優性であることを示した.さらに,F1の自家交配によりF2種子を得た.3.一重咲き系統と八重咲き系統間で多型のみられるSSRマーカーおよびCAPSマーカーの開発複数の品種由来のRNAを次世代シークエンサーにより解読し,得られた60万リードの塩基配列データを解析したところ,SSRマーカーおよびCAPSマーカーの候補配列が数百種類みつかった.そこで,これらのマーカーを検出できるPCRプライマーを設計し,異なる品種間で多型があるかを調べた.これらのマーカーのうち数パーセントにおいて異なる品種間で多型が認められたが,親系統'620'と'503'間で多型のみられる十分な数のマーカーは得られなかった.1.花器官形成に関与する遺伝子群の解析次世代シークエンサーにより得られたEST配列データを元に,花器官の形成に関与する遺伝子を単離した.Aクラス遺伝子を2つ,Bクラス遺伝子を4つ,Cクラス遺伝子を2つ,Eクラス遺伝子を4つ得た.これらの花器官における発現を調べたところ,シロイヌナズナにおけるABCモデルと一致する発現パターンを示した.2.F2世代の形質評価F2世代では,ホール数が明らかに2以上の八重と,ホール数は増えず花弁数が数枚増える花とが見られた.花弁数7以上のものを八重咲きとしてカウントすると八重咲きと一重咲きの個体数は53:35であった.この比率は3:1とは有意に異なり,少なくとも2遺伝子以上が関与している可能性を示した.しかし,八重咲き性は,温度条件の影響を受けるので,適温でないために一重となった株もあった可能性もあった,F3世代以降を採種し,温度範囲を広げてより正確な形質を評価することが必要と考えられる.3.一重咲き系統と八重咲き系統間におけるDNA多型RADマーカーとは,制限酵素サイト近傍の配列におけるSNP多型を利用したマーカーであり,ゲノム情報を予め必要とせずに開発することができる.本研究においては,八重咲き系統'620'と一重咲き系統'503'のゲノムDNA塩基配列を,次世代シークエンサーを用いて40Gbずつ解読した.これらの配列について,アセンブルを行うとともに,制限酵素サイト近傍のSNPの検索を行った.また,RADマーカーのライブラリを作成し,次世代シークエンサーによって配列を網羅的に決定し多型マーカーを開発することも行っている.これらについてはデータ解析中である.
サブミクロン領域の超微粒度吸着剤を用いた高速前処理をともなう膜分離

MF膜処理は,設置面積が小さく,バクテリア等の懸濁物がほぼ確実に除去できる優れた特徴を有するが,自然由来有機物(NOM)や臭気物質のような溶存性物質に対しての効果が低いという弱点も有する.そこで,溶存性物質の除去率を高めるために凝集処理や活性炭処理を前処理とした複合MF膜処理が提案されている.ところが,凝集により微粒子を膜孔径以上の大きさにするために要する時間は極めて短い反面,活性炭吸着に要する時間が長いため,MF膜処理の利点である設置面積の省スペース性と相容れない.研究では,粒径1μm以下のサブミクロンサイズまで超微粉化した活性炭により吸着速度を飛躍的に増加させ,高速度運転が可能な吸着・MF膜複合処理法を検討した.サブミクロンサイズまで超微粒度化した活性炭をMF膜の前処理に用いることによって,NOM除去に必要な添加濃度と接触時間の大幅な削減が可能であることを示した.活性炭接触時間としては2.4秒で十分であり,さらに添加量も従来の粉末活性炭に比べて75%削減できることがわかった.この理由は,超微粒度化は粒子外表面の比表面積の増加みならず活性炭内部のメソ孔の増加による活性炭自体の吸着容量と活性炭粒子内の細孔拡散係数をも増加する効果があることを見出した.さらに,臭気物質のジェオスミンとその生成原因藻類であるアナベナの除去について検討しとところ,サブミクロン粒度まで微小化した微粉炭は,少添加量,短時間で吸着が進行し,市販粉末活性炭に比べてジェオスミン除去性が格段に優れていることが分かった.膜の前処理としての微粉炭の添加は,薬品洗浄までの長期的膜問間圧上昇のみならず逆洗浄までの短期的膜間差圧上昇の抑制にも効果的なことが分かった.本研究より,分離膜への流入途中に超微粉化活性炭を添加するだけで処理水質が向上することが示唆された.MF膜処理は,設置面積が小さく,バクテリア等の懸濁物がほぼ確実に除去できる優れた特徴を有するが,自然由来有機物(NOM)や臭気物質のような溶存性物質に対しての効果が低いという弱点も有する.そこで,溶存性物質の除去率を高めるために凝集処理や活性炭処理を前処理とした複合MF膜処理が提案されている.ところが,凝集により微粒子を膜孔径以上の大きさにするために要する時間は極めて短い反面,活性炭吸着に要する時間が長いため,MF膜処理の利点である設置面積の省スペース性と相容れない.研究では,粒径1μm以下のサブミクロンサイズまで超微粉化した活性炭により吸着速度を飛躍的に増加させ,高速度運転が可能な吸着・MF膜複合処理法を検討した.サブミクロンサイズまで超微粒度化した活性炭をMF膜の前処理に用いることによって,NOM除去に必要な添加濃度と接触時間の大幅な削減が可能であることを示した.活性炭接触時間としては2.4秒で十分であり,さらに添加量も従来の粉末活性炭に比べて75%削減できることがわかった.この理由は,超微粒度化は粒子外表面の比表面積の増加みならず活性炭内部のメソ孔の増加による活性炭自体の吸着容量と活性炭粒子内の細孔拡散係数をも増加する効果があることを見出した.さらに,臭気物質のジェオスミンとその生成原因藻類であるアナベナの除去について検討しとところ,サブミクロン粒度まで微小化した微粉炭は,少添加量,短時間で吸着が進行し,市販粉末活性炭に比べてジェオスミン除去性が格段に優れていることが分かった.膜の前処理としての微粉炭の添加は,薬品洗浄までの長期的膜問間圧上昇のみならず逆洗浄までの短期的膜間差圧上昇の抑制にも効果的なことが分かった.本研究より,分離膜への流入途中に超微粉化活性炭を添加するだけで処理水質が向上することが示唆された.MF膜処理は,設置面積が小さく,バクテリア等の懸濁物がほぼ確実に除去できる優れた特徴を有するが,白然由来有機物(NOM)のような溶存性物質に対しての効果が低いという弱点も有する.そこで,溶存性物質の除去率を高めるために凝集処理や活性炭処理を前処理とした複合MF膜処理が提案されている.ところが,凝集により微粒子を膜孔径以上の大きさにするために要する時間は極めて短い反面,活性炭吸着に要する時間が長いため,MF膜処理の利点である設置面積の省スペース性と相容れない.研究では,粒径1μm以下のサブミクロンサイズまで超微粉化した活性炭により吸着速度を飛躍的に増加させ,高速度運転が可能な吸着・MF膜複合処理法を検討した.サブミクロンサイズまで超微粒度化した活性炭をMF膜の前処理に用いることによって,添加濃度と接触時間の大幅な削減が可能であることを示した.活性炭接触時間としては2.4秒で十分であり,さらに添加量も従来の粉末活性炭に比べて75%削減できることがわかった.この理由は,超微粒度化は粒子外表面の比表面積の増加みならず活性炭内部のメソ孔の増加による活性炭自体の吸着容量と活性炭粒子内の細孔拡散係数をも増加する効果があることを見出した.また,超微粉化活性炭を使用することによる顕著な膜間差圧の上昇が起こらないことも示された.本研究より,分離膜への流入途中に超微粉化活性炭を添加するだけで処理水質が向上することが示唆された.

かび臭対策として,粉末活性炭により浄水処理を行っている浄水場では,長期化した場合,粉末活性炭の使用量増大によるコスト増だけでなく,排水処理施設への負荷の増大による浄水処理への影響など大きな課題がある.また,十分な接触時間をとれないことから,粉末活性炭の注入率を高めることによって対応するなど,吸着能力を有効活用できていないという課題も抱えている.オゾンや粒状活性炭による高度浄水処理においても,臭素酸など解決すべき課題を抱えており,新たな処理方法の解決が求められている.本研究では市販の粉末活性炭より遥かに粒径の小さい微粉炭を膜処理の前処理として用いた処理システムにおけるジェオスミンとその生成原因藻類であるアナベナの除去について検討した.その結果,以下のことがわかった.1)MF前処理として微粉炭は接触時間4分,添加濃度2mg/Lでジェオスミン除去率96%以上(残留率4%以下)であった.これに対し,同一条件で市販炭は除去率65%以下(残留率35%以上)であった.3)藻体内ジェオスミンは活性炭無添加でもMF膜で分離可能であったが,おそらくモジュール内圧力上昇のため膜ろ過水ジェオスミン濃度はろ過時間と共に増加した.しかし,微粉炭/MFシステムでは膜ろ過水のジェオスミン濃度の時間上昇は見られなかった.4)微粉炭添加は,膜ろ過運転に伴う長時間の膜間差圧の上昇のみならず(非可逆的ファウリング),逆洗浄サイクル毎の差圧の上昇(可逆的ファウリング)をも低減させる効果があることが分かった.
生命倫理学における徳倫理学的アプローチの可能性と限界について

本研究は、現代の生殖補助医療技術の利用に関連する倫理的な諸問題に対して、徳倫理学的な視点から分析を加え、わが国におけるこれらの技術の利用や規制の在り方について検討し、加えて生命倫理学における徳倫理学的アプローチの体系化を試みることを目的としている。この全体の研究計画の中で、平成30年度は1「個別の生殖補助医療技術に対する徳倫理学的な観点からの検討」と、2「生殖補助医療の倫理における徳倫理学的議論の体系化」、3「生命倫理学上の徳倫理学的議論の特徴を整理し、徳倫理学的な行為論について従来の研究を批判的に検討」に関する研究を行った。1、2については、引き続きゲノム編集のELSIに関わる問題について、検討しており、その成果は2019年度に『法の理論』に掲載されることが決定している。また、ミトコンドリア病の可能性を持つ受精胚に対するミトコンドリア置換技術の利用に関して、2016年に発表した日本語の論文を英語に翻訳したものが、CBEL Report誌に掲載された。併せて、第30回日本生命倫理学会で行われた国際セッションにおいて、"Mitochondria Replacement and “Tri-Parents" Baby - Normative and Practical Challenges-"という発表を行った。同シンポジウムでは、前年度より研究の協力を仰いでいた豪州モナッシュ大学のJ. Oakley准教授も登壇しており、彼も含めて国内外の多くの研究者と本分野における意見の交換を行った。3については、本年は生命倫理全般に対する徳倫理学的アプローチの有効性について検討した。具体的には、日本看護倫理学会において、看護実践においてロボットを導入することの是非について徳倫理学的アプローチを交えながら分析を加えた内容について発表を行った。この成果については、現在論文化している途中である。従来の計画では、平成30年度は、1「個別の生殖補助医療技術に対する徳倫理学的な観点からの検討」と、2「生殖補助医療の倫理における徳倫理学的議論の体系化」の研究について主に取り組む予定となっていた。この点について、平成30年度では1、2に関して、いくつかの成果の論文化を行うとともに、過去の成果を英文化して広く国内外に問うことができた。加えて、同内容について学会における国際セッションでの発表も行い、研究の協力者でもある豪州モナッシュ大学のJ. Oakley准教授らと議論することで、研究の内容について一層深めることができたものと考える。一方で、当初の研究計画では主に平成30年度(2019年度)に研究の実施を予定していた3「生命倫理学上の徳倫理学的議論の特徴を整理し、徳倫理学的な行為論について従来の研究を批判的に検討」の内容についても部分的に着手し始めることができた。具体的には生殖補助医療の文脈に限定せず、看護実践の問題に関して、徳倫理学的な視点から分析を加えることで、より普遍化された徳倫理学的アプローチの一つの試金石にすることができたと考える。この点においては、従来の研究計画以上の進展があったと言える。平成30年度(2019年度)は、研究の最終年であるため、これまでの研究成果を引き継ぎながら最終的な研究の完成を目指す。特に、3「生命倫理学上の徳倫理学的議論の特徴を整理し、徳倫理学的な行為論について従来の研究を批判的に検討」について主として取り組んでいくこととなるが、本研究課題を遂行中にも次から次へと生殖補助医療に関わる倫理問題は新しく出現しているため、1「個別の生殖補助医療技術に対する徳倫理学的な観点からの検討」と、2「生殖補助医療の倫理における徳倫理学的議論の体系化」の研究についても引き続き個別の課題ごとに取り組みを続けていく。具体的には、ロザリンド・ハーストハウスに代表されるような徳倫理学的な行為論を(仮想上の)有徳な行為者に結びつけて論じるような理論とマイケル・スロートに代表されるような行為論を実際の行為者の動機や性格特性に結びつけるような理論、および、行為論をあまり重要視しない徳倫理学的な理論をそれぞれを分析・検討する。そのうえで、それらの利点や欠点を明らかにしつつ、理論的な統合、あるいは、それらを乗り越えるような「徳倫理学的な行為論」の理論化を目指していく。本研究の遂行に当たっては、若手の生命倫理学研究者のグループのメンバー、および、生命倫理学と徳倫理学の第一人者である豪州モナッシュ大学のオークリー准教授らとの議論を通じ、理論を批判的に吟味していく。また、最終年度であるため、ここまでの成果をまとめていき、広く国民全体へと還元していくために、研究成果の出版についても進めていくこととする本研究は、現代の生殖補助医療技術の利用に関連する倫理的な諸問題に対して、徳倫理学れきな視点から分析を加え、わが国におけるこれらの技術の利用や規制の在り方について検討し、加えて生命倫理学における徳倫理学的アプローチの体系化を試みることを目的としている。この全体の研究計画の中で、平成28年度は「個別の生殖補助医療技術に対する徳倫理学的な観点からの検討」を行った。とりわけ、近年、国内外で議論が盛んな2つの生殖補助医療技術(1ゲノム編集技術、2ミトコンドリア病患者の卵子や受精卵に対するミトコンドリア置換技術)の倫理的な問題について取り組んだ。本研究では、若手の生命倫理学領域の研究者や医科学技術者のコミュニティーとも協調しながら、これらの問題に取り組んでいる。実際の成果としては、1ゲノム編集に関しては、他の若手研究者1名と協力し、ゲノム編集技術をわが国に導入する場合の倫理問題を、1)基礎研究段階、2)臨床研究段階、3)それ以上の段階の3つに分けて検討した。

本研究結果については、現在投稿中であり、平成29年度には成果として公表されることになっている。2ミトコンドリア置換の倫理に関しては、ミトコンドリア病研究の第一人者でもある国立精神・神経医療研究センターのメディカル・ゲノムセンターの後藤雄一センター長から医学的観点についての助言などもいただきながら、ミトコンドリア置換に対する倫理問題について網羅的に論点を収集し、分析を加えた。とりわけ、ミトコンドリア置換技術に関しては、「3人の遺伝的親」の問題がしばしば強調されるが、そのことだけでこの技術の利用が一切否定されるべきというわけではないことを示した。本研究の成果は、すでに学術誌『生命倫理』上で公表されたが、わが国で初めてのミトコンドリア置換のリン的問題を体系的に論じた論文であったと言える。当初の研究計画によれば、平成28年度の研究計画は、「現在社会的に問題となっているような生殖補助医療についての徳倫理学的な検討についての研究から着手する。具体的には、現在、国内外において議論となっている以下の二つの問題について、現在の国内外の議論を踏まえたうえで、徳倫理学の観点も含めた分析を加える:1)ゲノム編集技術の倫理的問題、2)ミトコンドリア病患者(保因者)の卵子に対するミトコンドリア置換の倫理的問題」となっている。1)の研究については、現在、その成果の一部をまとめた論文を生命倫理学領域の研究者との共著で投稿中であり、すでに掲載が決定している。2)については、その成果について、学術誌『生命倫理』に投稿し、すでに掲載されている。このため、当初の研究計画に記載した2つの研究について、すでに論文投稿、および、その受理が決定しており、成果の公表という点において平成28年度の研究計画は順調に進捗したと言える。また、本研究では遂行上の工夫として、生命倫理学領域の若手研究者との共同研究、および、医科学研究者との協力をすることをあげている。この点についてもすでに若手生命倫理研究者との研究会を複数回開催して、研究の内容について意見の交換を行っている。また、医科学研究者との意見の交換についても、特にミトコンドリア置換の倫理に関してはすでに当該分野の専門家からの助言を仰ぎながら研究を遂行している。そのため、研究体制の構築という点からも、平成28年度の研究は順調に遂行できたものと考える。本研究は、現代の生殖補助医療技術の利用に関連する倫理的な諸問題に対して、徳倫理学的な視点から分析を加え、わが国におけるこれらの技術の利用や規制の在り方について検討し、加えて生命倫理学における徳倫理学的アプローチの体系化を試みることを目的としている。この全体の研究計画の中で、平成29年度は1「個別の生殖補助医療技術に対する徳倫理学的な観点からの検討」と、2「生殖補助医療の倫理における徳倫理学的議論の体系化」に関する研究を行った。1については、近年、国内外で議論が盛んな生殖補助医療技術の内、ゲノム編集技術の倫理的な問題について取り組んだ。本研究では、若手の生命倫理学領域の研究者や医科学技術者のコミュニティーとも協調しながら、これらの問題に取り組んでいる。
自動車排出ガス触媒から遊離した環境中の白金,パラジウム及びロジウムの分離定量

環境試料として,幹線道路(国道8号線)沿道付近(中央分離帯)及びトンネル(国道8号線の倶利伽藍峠のトンネル,国道157号線の手取ダム近くの桑島隧道等)の車道周辺の土壌及び車道沿いに生育し表面にススを付着しているコケ植物等を採取した。採取試料は,電気乾燥機で80110°Cで乾燥後,マイクロ波分解装置を用いて湿式分解を行い,フレームレス原子吸光法で定量した。結果は,国道8号線の地点(金沢市今町付近)では,コケ植物から,微量のPd(2959ng/g),Rh(1534ng/g)が検出されたが,Ptは<8ng/g(検出限界)であった。一般に車道から1m内にPdとRhが検出された。このことは,貴金属粒子は比較的に重く,自動車の排気管から遠くへ移動せず,道路脇に落ちていることを示している。国道8号線の地点(北陸自動車道西インター付近)では,コケ植物(ギンゴケ)から1,270ng/gのPdが検出され,また土を含むギンゴケから2,950ng/gのPdが検出され,コケの表面を蒸留水で洗うとPdが検出限界以下となることから,Pdはコケの表面に他の固形のダストと共に付着していると思われる。国道8号線の倶利伽藍トンネル(石川県と富山県の県境)の出口と入り口では,自動車道の白線から1m内の土壌とコケ植物のPd, Rh及びPtは検出限界以下であった。この原因としては,自動車道の舗装が定期的に掃除されているためと思われる。国道157号線の地点(手取ダム付近の東二口隧道)では,トンネル内部の歩道の土(出入り口から150m,自動車白線から6595cm,車道からの高さ22cm)からは微量(5780ng/g)のPd及び歩道の隅にたまった泥から微量(290ng/g)のRhが検出され,トンネル内壁(地上から約1m)のススから微量(1,700ng/g)のRhが検出されたが,Ptは<8ng/g(検出限界)であった。また,国道157号線の地点(手取ダム付近の桑島隧道)では,トンネル内部の歩道の土(出入り口から1130m,自動車白線から1090cm,車道からの高さ022cm)からは微量(2684ng/g)のPd及び歩道の隅にたまった泥から微量(230ng/g)のRhが検出されたが,Ptは<8ng/g(検出限界)であった。このように,環境中から微量のPdとRhが検出され,Ptは検出限界以下であったが,環境中での動態については不明な点も多く,今後の研究課題である。

自動車排出ガス中の一酸化炭素,窒素酸化物及び炭化水素等の大気汚染物質を浄化するための三元触媒(白金・パラジウム・ロジウム系)は,4001000°Cという過酷な条件下で使用されている。それゆえ,自動車の走行距離が5万kmを越えると触媒劣化を生じ,排ガス浄化触媒の貴金属が遊離放出されて環境汚染を引き起こし,大気微粒子と共に人間の肺に吸入されると呼吸器の癌や喘息の一因となる可能性がある。そこで,まず中古車及び廃車の車種,年式及び走行距離,三元触媒の位置から排気管出口までの距離等を考慮して,排気管及びマフラーの内壁に付着しているススを採取し,排ガス浄化触媒から遊離したスス中の貴金属について調べた。スス試料は,電気乾燥機で80110°Cで乾燥後,超音波による硝酸-過塩素酸,過酸化水素等による湿式分解を行い,0.110M塩酸溶液とした。試料溶液中の各種金属成分は,フレーム及びフレームレス原子吸光法,誘導結合プラズマ発光法で直接または標準添加,抽出分離濃縮等により定量した。スス中の貴金属の含有量(Pt:1132ppm, Pd:7.019ppm, Rh:2.125ppm)は,自動車の走行距離に比例して噌加し,排気管では三元触媒に近い側から貴金属が多く検出される傾向が見られた。ロジウムは窒素酸化物の還元触媒,パラジウムと白金は一酸化炭素及び炭化水素等の酸化触媒として働くものであるが,一般に,軽自動車ではロジウムとパラジウム,普通乗用車ではロジウムと白金が検出された。これは,三元触媒が長時間酷使されるにつれて徐々に熱劣化(アルミニウム単体の相転移に伴う劣化,酸化物固相反応による劣化等)して飛散し,マフラー及び排気管の内壁にススと共に付着したと考えられる。また,ススの無機成分として,貴金属以外には,Na, Ca, Fe, Zn>Al>Si>Mg, Mn, Ni>Ce>V, Zrなどが10.75440ppmほど検出されたが,Ba, Co, La, Moは検出限界以下であった。これらの成分は,三元触媒の熱的安定向上剤,触媒の酸素貯蔵能付与剤及びガソリンなどのオイルへの燃焼改良添加剤等に起因し,大気汚染の一因になっていると思われる。環境試料として,幹線道路(国道8号線)沿道付近(中央分離帯)及びトンネル(国道8号線の倶利伽藍峠のトンネル,国道157号線の手取ダム近くの桑島隧道等)の車道周辺の土壌及び車道沿いに生育し表面にススを付着しているコケ植物等を採取した。採取試料は,電気乾燥機で80110°Cで乾燥後,マイクロ波分解装置を用いて湿式分解を行い,フレームレス原子吸光法で定量した。結果は,国道8号線の地点(金沢市今町付近)では,コケ植物から,微量のPd(2959ng/g),Rh(1534ng/g)が検出されたが,Ptは<8ng/g(検出限界)であった。一般に車道から1m内にPdとRhが検出された。このことは,貴金属粒子は比較的に重く,自動車の排気管から速くへ移動せず,道路脇に落ちていることを示している。国道8号線の地点(北陸自動車道西インター付近)では,コケ植物(ギンゴケ)から1,270ng/gのPdが検出され,また土を含むギンゴケから2,950ng/gのPdが検出され,コケの表面を蒸留水で洗うとPdが検出限界以下となることから,Pdはコケの表面に他の固形のダストと共に付着していると思われる。国道8号線の倶利伽藍トンネル(石川県と富山県の県境)の出口と入り口では,自動車道の白線から1m内の土壌とコケ植物のPd,Rh及びPtは検出限界以下であった。この原因としては,自動車道の舗装が定期的に掃除されているためと思われる。国道157号線の地点(手取ダム付近の東二口隧道)では,トンネル内部の歩道の土(出入り口から150m,自動車白線から6595cm,車道からの高さ22cm)からは微量(5780ng/g)のPd及び歩道の隅にたまった泥から微量(290ng/g)のRhが検出され,トンネル内壁(地上から約1m)のススから微量(1,700ng/g)のRhが検出されたが,Ptは<8ng/g(検出限界)であった。
内科疾患における心のケアに関する実証的研究

バセドウ病、橋本病、甲状腺腫という3種の甲状腺疾患患者のパーソナリティを、神経症群とも対照させつつ、質問紙、バウム・テスト、半構造化面接によって比較した。従来から心身症と考えられているバセドウ病患者はむしろ神経症に近く、橋本病、甲状腺腫の方が、感情の乏しさや、自分を守る境界の弱さなど、心身症特有のパーソナリティがあることがわかった。また治療によってホルモン値が正常化した群では、心理指標も改善していた。心理的な要因が大きいことが指摘されている甲状腺疾患で受診する人を、初診、6ヶ月後、1年後に調査して、カウンセリングを受けたり、心理的なものに開かれている人と、そうでない人を比較しようというものである。隈病院の初診300人に対して、1.質問紙NEO、2.バウム・テスト、3.半構造化面接を行った。6ヶ月後に再来した人に関しても同じ調査を継続中である。調査は途中であるが、以下のような結果がわかってきている。1.バセドウ病、橋本病、腺腫によって、パーソナリティーの違いが見られた。これまで心身症と考えられてきたバセドウ病が、最も神経症に近く、アレクシサイミア的でなかった。逆に問題視されてこなかった腺腫の病態水準が重い。2.心理的な問題や訴えをする人は多くても、実際にカウンセリングに移行する人はほとんどなかった。カウンセリングを受けるのには、主治医の要因が大きいと考えられる。またカウンセリング受診群の比較については、カウンセリングに関心の高い人で代用せざるをえない。バウム・テストを用いての、カウンセリング群と非カウンセリング群の比較、および様々な甲状腺疾患の比較に関しては、心理臨床学会および甲状腺学会で発表した。また関連するこれまでの研究は、『心療内科』に掲載され、研究代表者の編によるこのテーマの著書も刊行された。前年度に引き続き、心理的な要因が大きいことが指摘されている甲状腺疾患で受診する人を、初診、6ヶ月後、1年後に調査して、カウンセリングを受けたり、心理的なものに開かれている人と、そうでない人を比較しようというものである。継続調査に関しては途中であるが、以下のような結果がわかってきている。1.質問紙によっては、結果が見られなかった。これは、いわゆる心身症が、言語レベルでも問題を呈しにくいというこれまでの知見を裏付けている。2.バウム・テストによると、バセドウ病、橋本病、腺腫によって、パーソナリティーの違いが見られた。3.半構造化面接では、バセドウ病が人間関係などに埋没していて、橋本病が対人的に距離を取る傾向が見られたのに対して、結節性甲状腺腫患者は,場に対する意識が低く社会的疎通性が低いという結果になった。バウム・テストについては、甲状腺学会で発表した。また半構造化面接の結果に関しては、京都大学こころの未来研究センターの外部報告会で発表した。論文としては、執筆・投稿中である。甲状腺疾患は、古くから心身症の1つとして挙げられ、その心理的側面の重要性はこれまでも指摘されてきた。前年度の研究を引き継ぎつつ、バウム・テストと半構造化面接を用いて、バセドウ病(機能亢進)、慢性甲状腺炎(機能低下)、結節性甲状腺腫の間を比較しつつ、今年度はさらに対照群として神経症群のデータをとった。神経症群との比較によって、3つの甲状腺疾患患者のパーソナリティがより明らかになった。1.描画テストによると、バセドウ病が一番水準がよくて、比較的神経症に近く、これまで心身症と考えられてこなかった慢性甲状腺炎と結節性甲状腺腫の患者の方が、病態水準が悪く、いわゆるアレキシサイミアの特徴を呈することが示唆された、2.半構造化面接によると、バセドウ病の人が一番心理的な問題に近く、また関係性に生きていて、慢性甲状腺炎は隠れた形での関係性が重要、結節性甲状腺腫では社会的疎通性が欠け、場の意識が希薄ということがわかった。さらに、縦断的研究においては、バセドウ病においてホルモン値が正常化された人では描画テストによると自我境界の改善が見られたのに対して、ホルモン値が正常化されない難治性の人では自我境界の改善が見られず、ホルモン値の変化と、心理的指標の関連が認められた。従来心理的問題が関連していると考えられてきた身体疾患よりも、むしろ純然たる身体疾患と考えられてきたものの方が、こころからの解離という意味では重篤であることが示唆される。
口腔疾患とペルオキシソーム

動物パルオキシソームの機能は主に脂質の代謝,グリオキシル酸の解毒,プリン代謝,アミノ酸の代謝などである.これらの機能は主に肝臓のペルオキシソームで研究された.肝臓,腎臓以外の組織では小型でカタラーゼ活性を含有するマイクロペルオキシソームが存在し,その機能はほとんど不明である.一方口腔領域におけるペルオキシソームに関する知見は全くない.ペオキシソームに含まれるカタラーゼが活性酸素の一つであるH2O2を消去することやアスピリンをはじめとする抗炎症剤が肝ペルオキシソームを増殖させることからペルオキシソームは口腔領域においても歯固病やう蝕や口腔癌などの口腔疾患と密接な関係があると考えられる.口腔領域のペルオキシソームの構造と機能を明らかにする目的で以下の実験行った.ラットの口腔組織のうち,歯髄,歯根膜,歯固組織及び唾液腺(耳下腺,舌下腺,顎下腺)について,等張溶液でホモジナイズし,庶稽密度勾配遠心法により細胞を分画しペルオキシソームの有無,形態及び諸性質を調べた.いずれの組織においても密度1.231.25のところにカタラーゼ活性が検出されたが尿酸オキシダーゼの活性は検出されなかった.また電顕微的には結晶構造物(コア)を含まない小型のペルオキシソームであった.これらはマイクロペルオキシソームであることが示唆された.またラットの口腔に実験的にう蝕をつくり,上記の各組織におけるペルオキシソームの分布,形態,数について正常のラットと比較したが,いずれも著しいちがいは認められなかった.現在,ウサギの上顎洞癌(VX_2カルシノーマ)の組織について実験中である.動物パルオキシソームの機能は主に脂質の代謝,グリオキシル酸の解毒,プリン代謝,アミノ酸の代謝などである.これらの機能は主に肝臓のペルオキシソームで研究された.肝臓,腎臓以外の組織では小型でカタラーゼ活性を含有するマイクロペルオキシソームが存在し,その機能はほとんど不明である.一方口腔領域におけるペルオキシソームに関する知見は全くない.ペオキシソームに含まれるカタラーゼが活性酸素の一つであるH2O2を消去することやアスピリンをはじめとする抗炎症剤が肝ペルオキシソームを増殖させることからペルオキシソームは口腔領域においても歯固病やう蝕や口腔癌などの口腔疾患と密接な関係があると考えられる.口腔領域のペルオキシソームの構造と機能を明らかにする目的で以下の実験行った.ラットの口腔組織のうち,歯髄,歯根膜,歯固組織及び唾液腺(耳下腺,舌下腺,顎下腺)について,等張溶液でホモジナイズし,庶稽密度勾配遠心法により細胞を分画しペルオキシソームの有無,形態及び諸性質を調べた.いずれの組織においても密度1.231.25のところにカタラーゼ活性が検出されたが尿酸オキシダーゼの活性は検出されなかった.また電顕微的には結晶構造物(コア)を含まない小型のペルオキシソームであった.これらはマイクロペルオキシソームであることが示唆された.またラットの口腔に実験的にう蝕をつくり,上記の各組織におけるペルオキシソームの分布,形態,数について正常のラットと比較したが,いずれも著しいちがいは認められなかった.現在,ウサギの上顎洞癌(VX_2カルシノーマ)の組織について実験中である.
カオス力学系における不安定周期解の統計的性質

本年度は前年度に引き続いて,カオス解をもつ力学系の不安定周期軌道を数値的に検出し,得られた周期軌道に沿った物理量の軌道平均値を求め統計的に検討した.従来の研究から,同程度の長さの周期をもつ不安定周期軌道による軌道平均値の分散は,周期依存性が非常に小さいことを見出していたが,小さな系においてこの結果を確認する数値計算を行うとともに,Kuramoto-Sivashinsky方程式のカオス解に対しても実行し,同じ性質を示すことを見出した.また乱流シェルモデルのカオス解に対して,最近Ginelliらが提案した共変リヤプノkフ解析を実行した.この解析は解軌道上の点における安定多様体と不安定多様体の方向を決定し系の双曲/非双曲性の程度の判別を可能にするため,比較的低次元で物理的性質を反映する乱流のシェルモデルに適用して,双曲/非双曲性と物理的性質の関連を調べた.その結果,解の間欠性にともなうバーストの発生が安定多様体/不安定多様体が接触(あるいはほとんど接触)する点の通過後に発生することを示唆する結果が得られた.この結果も含め,リヤプノフベクトルの構造と乱流の物理的構造の関連,また偏微分方程式系など大自由度カオスにおける双曲/非双曲性の構造は本研究計画後の研究課題である.今年度はまず,数値計算を実行する準備として,計算機センターの計算機使用と結果解析のためのコードを含む環境整備作業とともに,乱流シェルモデルとβ平面の流体方程式について予備的な計算を行った.また不安定周期軌道に沿う物理量の軌道平均値とカオス軌道に沿うカオス平均値の関係について少数自由度の写像系における振る舞いを調べるため,1次元写像系および2次元写像系について,多くの周期軌道を求め検討した.1次元写像については理論的にも支持されるように軌道平均値とカオス平均値は分布関数形において一致の傾向を見せるが,2次元写像系では必ずしもそうではなくこのような振る舞いはいずれも,少数自由度常微分方程式系のものと異なっている.これまでの予備的計算によると,常微分方程式系では,軌道平均値とカオス平均値は分布関数形に違いがあるものの分布の期待値(平均値の平均)には一致が見られており,このような違いが写像系と微分方程式系の性質の違いによるものかどうか,さらに検討を進めている.またβ面上の流体方程式については,スペクトル法による少数自由度切断を行い,低いカオス次元のもとでの不安定周期軌道を求めて,それらに沿う軌道平均値をカオス軌道平均値と比較することを検討している.本年度は前年度に引き続き,カオス系において不安定周期軌道の数値的検出を実行し,得られた周期軌道に沿う諸量の軌道平均値を求めそれらの統計的性質を調べた.これまでいくつかの微分方程式系のカオスにおいて,同じ程度の大きさの周期をもつ不安定周期軌道に沿う軌道平均値の統計分布は,軌道周期を大きくしてもほとんど変化しないという結果を見出していたが,この性質を確認する計算を行った.さらに,これらの数値データを整理することによって,種々の量の軌道平均値同士の間に線形関係が成り立つことを数値的に見出した.この線形関係は多くの量の間に成り立つが,これは,不安定周期解の空間的配置について,周期軌道の近傍に相対的に長い周期を持つ周期軌道軌道が位置するという入れ子的構造を想定することで説明できることを見出し,いくつかのカオス系でそのような構造を示唆する数値結果を得てその性質を調べている.この線形関係は周期軌道の入れ子的構造を支持するものであるが,ここではさらに直接的に,数多くの周期軌道の数値的情報を利用し,それらの相空間における幾何学的配置を詳細に見ることでこの構造を調べる研究を行っており,次年度に継続する予定である.また,カオス系における共変リヤプノフ解析をシェルモデル乱流系に用いて,波数空間における乱流構造と安定多様体・不安定多様体の配置構造の間の関係,特に乱れの間欠性の波数依存性と双曲/非双曲構造の関係を中心に数値解析を実行しておりこれも次年度に継続する予定である.本年度は前年度に引き続いて,カオス解をもつ力学系の不安定周期軌道を数値的に検出し,得られた周期軌道に沿った物理量の軌道平均値を求め統計的に検討した.従来の研究から,同程度の長さの周期をもつ不安定周期軌道による軌道平均値の分散は,周期依存性が非常に小さいことを見出していたが,小さな系においてこの結果を確認する数値計算を行うとともに,Kuramoto-Sivashinsky方程式のカオス解に対しても実行し,同じ性質を示すことを見出した.また乱流シェルモデルのカオス解に対して,最近Ginelliらが提案した共変リヤプノkフ解析を実行した.この解析は解軌道上の点における安定多様体と不安定多様体の方向を決定し系の双曲/非双曲性の程度の判別を可能にするため,比較的低次元で物理的性質を反映する乱流のシェルモデルに適用して,双曲/非双曲性と物理的性質の関連を調べた.その結果,解の間欠性にともなうバーストの発生が安定多様体/不安定多様体が接触(あるいはほとんど接触)する点の通過後に発生することを示唆する結果が得られた.この結果も含め,リヤプノフベクトルの構造と乱流の物理的構造の関連,また偏微分方程式系など大自由度カオスにおける双曲/非双曲性の構造は本研究計画後の研究課題である.
コスミック教育の今日的意義と幼稚園・小学校・家庭及び教員養成機関における展開

コスミック教育は、あらゆる事物は宇宙の一部で、一つの全体的調和を形成するよう相互に結びついていることを発達段階に応じて学習、認識するよう促す教育である。まず、研究の第一人者C.M.トルードゥーの業績研究をもとに、今日的意義をキャリア教育やESDと関連づけて検討した。加えて、幼稚園における2年間の実践研究から、命の誕生や持続のために必要な要素を感じ、興味・関心をもち、コミュニケーションを図りながら協同して学び合えるコスミック教育の実践方法を導きだした。モンテッソーリ教育におけるコスミック教育に焦点を当て、研究の第一人者であるTrudeau,C.M.の業績と環太平洋地域のMontessori Schoolにおける実践に関する調査を基に、本教育の今日的意義を探ることを目的とした本研究は、以下の4つを研究の柱として実施している。平成24年度の研究成果は以下の通りである。1.Trudeau,C.M.の業績:平成23年度に終えたTrudeauに関する考察から得た方法により、ノートルダム清心女子大学附属幼稚園の年長児を対象にしたコスミック教育を計画し、実践に至ることができた。2.日米両国のコスミック教育に関する資料収集と考察:米国で開催のAmerican Montessori Society 2012 Annual Conference(平成24年3月)で収集した資料と、日本保育学会65回全国大会(5月)及びモンテッソーリ学会45回全国大会(8月)において収集した資料を基に、日米のコスミック教育について検討しているところである。日本のモンテッソーリ教育が乳幼児期中心であるのに対して、米国では学童期においても盛んであり、コスミック教育をめぐる両国の差が明らかとなった。3.幼稚園・小学校・家庭・地域でのコスミック教育実践の検討:本学附属幼稚園での実践から、幼児によって興味や関心の抱き方が異なること、加えて教師の取り組む姿勢によっても幼児らの活動に差がでることが明らかとなった。小学校レベルでの実践に関しては検討中であるが、NPO法人連塾が岡山県や地域と協働で開催している小学生対象のキャリア教育の場である「連塾寺子屋」の中で実践できる見通しを得た。4.コスミック教育の視点を生かした教師や次世代の親の育成の検討:本教育において教師の果たす役割の重要性が明らかになったことを受け、具体的なカリキュラムの作成と実践を次年度の課題としたい。モンテッソーリのコスミック教育に焦点を当て、研究の第一人者であるTrudeau, C. M.の業績と環太平洋地域での教育実践に関する調査をもとに、今日的意義を探ることを目的とした本研究は、以下の4つを柱として実施してきた。1) Trudeau, C. M.の業績:資料やインタビュー調査及びフィードバックから、系統化された教具を用いたモンテッソーリ教育だけでなく、コスミック教育理念に基づく各国の文化的背景に沿った教育を展開すべきとの主張が明らかとなった。米国カリフォルニア州、フィリピン、日本を中心に、コスミック教育展開の土台を築いた業績は大きい。2)日米両国のコスミック教育:日本のモンテッソーリ教育の対象が乳幼児であるのに対し、米国では学童期から青年期へと継続していく。想像力が発達する学童期にこそ本教育は重要であり、米国のMontessori Schoolでは、小学校レベルのコスミック教育の教材が充実し、積極的に実践されている。一方で日本においても、就学前の5歳児を対象に「創造のおはなし」による実践は可能であり、そこには主体的かつ協同して取り組めるテーマが豊富にあることがわかった、3)幼稚園・小学校・家庭・地域でのコスミック教育実践の検討:附属幼稚園における教育実践の考察に加え、小学校5・6年生を対象に官民協働で展開している「おかやまイングリッシュビレッジ事業」において、コスミック教育と理念が共通するESD(持続可能な開発のための教育)の視点から活動内容を検討し実践に至ることができた。4)コスミック教育の視点を生かした教師や次世代の親の育成:平成23、24年度の教育実践の比較から、教師の考え方や取り組み方により、幼児らの活動の展開が大きく変わることが明らかとなった。コスミックな視点をもつ教師養成に関する具体的なカリキュラムは今後さらに検討すべきである。モンテッソーリ教育におけるコスミック教育に焦点を当てて、研究の第一人者であるTrudeau,C.M.の業績と環太平洋地域のMontessori Schoolにおける実践に関する調査を通して、本教育の今日的意義を探ることを目的とした3年間の研究の初年度である本年度は、次の3点について研究を進展させることができた。1.モンテッソーリのコスミック教育に関する理論研究:国内外の文献資料をもとに考察した結果、「宇宙全体には統一的計画が存在しており、生物の多様な形態の存在のみならず、地球そのものの発展進化もそれに依存していることを学習し認識する」コスミック教育の理念は、キャリア教育やESD(持続可能な社会のための教育)の理念ともつながり、本教育には今日的意義があることを導くことができた。

2. Trudeau,C.M.の業績に関する研究:日本とアメリカにおけるTrudeauの論文や講習・講演資料をもとに考察した結果、「創造のおはなし」を通したコスミック教育は幼稚園の年長児から可能で、協同的な学習活動にもつながることが明らかとなった。さらに平成24年3月にサンフランシスコで開催されたAmerican Montessori Society 2012 Annual Conferenceに出席し研究発表を行うとともに、本教育に先進的に取り組んでいるアメリカでの実践例や研究成果について広く知見を得ることができた。加えて、オークランドに住むTrudeauを本学元教授の奥山氏と共に訪ねインタビューを実施し、Trudeauのコスミック教育観を知るとともに本教育に関する情報収集ができた。3.幼稚園におけるコスミック教育の実践研究:本学附属幼稚園の蜂谷・岡本両氏の協力を得て、平成24年2月下旬から3月上旬までの間の7日を選び、「創造のおはなし」をもとにしたコスミック教育の実践に至ることができた。1.Trudeau,C.M.の業績:平成23年度に実施したTrudeauへのインタビュー結果と収集した日米両国の資料を基に考察し、その研究成果を日本カトリック教育学会、日本モンテッソーリ協会(学会)、日本保育学会それぞれの全国大会において口頭発表するとともに、機関誌への論文掲載に至れたことから、目的は達成できているといえる。2.日米両国のコスミック教育に関する資料収集と考察:日米のConferenceや全国大会に参加し、収集した資料を基に日米両国のコスミック教育について検討しているところである。交付申請当初は日本のモンテッソーリ園におけるアンケート調査を計画していたが、理論や実践面から多くの資料が収集できたため、計画を変更し、資料の分析と研究成果発表を重点的に続けたいと考える。本研究目的に関してはやや遅れている。3.幼稚園・小学校・家庭・地域でのコスミック教育実践の検討:ノートルダム清心女子大学附属幼稚園において、2年間に渡ってコスミック教育の実践研究をし、成果と課題を導き、全国大会での研究発表及び機関誌への実践報告の掲載へと至れた点から順調に進展しているといえる。また、小学校レベルのコスミック教育に関しては資料収集に留まっているが、平成25年3月にアメリカのダラスで開催されたTESOL International ConferenceにおいてWorld Englishesという新しい視点を得ることができた点と、岡山市において家庭や地域協働のキャリア教育実践研究の場を得ることができた点は計画以上の進展であるといえる。4.コスミック教育の視点を生かした教師や次世代の親の育成の検討:具体的なカリキュラムの作成と実践が次年度の課題となっている。この点は当初の計画通りといえる。本研究では4つの目的を設定しており、それぞれの達成度とその理由については以下の通りである。1.コスミック教育に関する文献研究とTrudeauについての資料分析及びインタビューについて:American Montessori Society 2012 Annual Conferenceに出席し情報収集をするとともに、Trudeauを訪ねインタビュー調査を実施することができた。
心筋におけるストレス適応から破綻への分子生物学的メカニズムの解明と治療への応用

(1)ASK1活性抑制が心不全進展に対する抑制効果を持ちうるのか否かを検討するために、心筋症ハムスターに対してASK1ドミナントネガティブ変異体をアデノウイルス随伴ベクターにクローニングし、経冠動脈的に遺伝子導入を行った。ASK1ドミナントネガティブ変異体をアデノウイルス随伴ベクター導入群では心筋細胞アポトーシスが有意に減少しており、左室径の拡大や左室径短縮率の低下が有意に抑制された。また血行動態的にも心機能の低下が抑制された。すなわちASK1活性の抑制が心不全進展に対して抑制効果を持つことが示された。(2)Two-hybrid法によるASK1結合蛋白質同定を行うためのASKΔNをベイトとするコンストラクトを作成し、ASK1下流分子の同定を行った。多数の候補分子が同定され、それらについて心筋細胞死誘導能を指標に機能解析を行った。(3)オートファジーとは酵母から哺乳類まで普遍的に備わる細胞内分解システムである。オートファジーは日常的な細胞内浄化作用に加え、飢餓状態で強く誘導されるためエネルギー供給機構と考えられてきた。その一方で細胞死とオートファジーの関連が注目されているが、細胞死や臓器障害に対して促進的、若しくは抑制的どちらに働いているのかについては議論が分かれてきた。オートファジー必須遺伝子であるAtg5の心筋特異的ノックアウトマウスを作製し、オートファジーが心臓において恒常的な心機能維持ならびにストレス応答時の適応機構として働いていることを明らかにした。(1)Cre-loxPシステムを用いて、Creリコンビナーゼ誘導性にASK1恒常活性体(ASKΔN)を発現するコンストラクトから、ASKΔNトランスジェニックマウスを作成した。同マウスをタモキシフェン誘導性心筋特異的Creリコンビナーゼ発現マウスと交配し、薬剤誘導性活性型ASK1発現マウスを作成した。このマウスはタモキシフェン投与後3日目から活性型ASK1の強発現が認められ投与後2週間以上経過しても発現は持続的に認められた。さらにASK1下流のp38、JNKの活性化も認められた。心臓超音波法による心機能評価においては、左室拡大と左室駆出率の著明な低下を来たしており心機能低下が認められた。組織学的検討において著明な線維化を認めたほか、TUNEL陽性心筋細胞すなわち心筋細胞アポトーシスの増加も確認された。これらの結果はASK1ノックアウトマウスが心不全刺激に対して耐性を有するという以前の結果を裏付けるものであった。以上より心筋細胞における活性型ASK1の発現が心筋細胞死を伴う心臓リモデリングの原因となりうることが明らかとなった。(2)Two-hybrid法によるASK1結合蛋白質同定を行うためのコンストラクトを作成した。ASK1下流分子ならびに上流分子の同定目的のためのコンストラクトをそれぞれ作成した。(3)ASK1活性抑制が心不全進展に対する抑制効果を持ちうるのか否かを検討するために、心筋症ハムスターに対して遺伝子導入実験を行うための、ASK1ドミナントネガティブ変異体をアデノウイルス随伴ベクターにクローニングし、ウイルスの増幅ならびに濃縮を行った。(1)Cre-loxPシステムを用いて、Creリコンビナーゼ誘導性にASK1恒常活性体(ASKN)を発現するコンストラクトから、ASKΔNトランスジェニックマウスを作成した。さらにASK1下流のp38,JNKの活性化も認められた。これらの心臓組織と血漿を用いて、経時的なプロテオーム解析を現在行っている。多数の候補分子が同定され、それらについて心筋細胞死誘導能を指標に機能解析を開始した。(3)ASK1活性抑制が心不全進展に対する抑制効果を持ちうるのか否かを検討するために、心筋症ハムスターに対してASK1ドミナントネガティブ変異体をアデノウイルス随伴ベクターにクローニングし、経冠動脈的に遺伝子導入を行った。

(2)Two-hybrid法によるASK1結合蛋白質同定を行うためのASKΔNをベイトとするコンストラクトを作成し、ASK1下流分子の同定を行った。多数の候補分子が同定され、それらについて心筋細胞死誘導能を指標に機能解析を行った。(3)オートファジーとは酵母から哺乳類まで普遍的に備わる細胞内分解システムである。オートファジーは日常的な細胞内浄化作用に加え、飢餓状態で強く誘導されるためエネルギー供給機構と考えられてきた。その一方で細胞死とオートファジーの関連が注目されているが、細胞死や臓器障害に対して促進的、若しくは抑制的どちらに働いているのかについては議論が分かれてきた。オートファジー必須遺伝子であるAtg5の心筋特異的ノックアウトマウスを作製し、オートファジーが心臓において恒常的な心機能維持ならびにストレス応答時の適応機構として働いていることを明らかにした。