hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
敗血症モデル肺におけるアドレノメデュリンの病態生理学的意義

アドレノメデュリン(AM)は、リポポリサッカライド(LPS)や、TNF-α、IL-1βによって誘導され、敗血症患者の血中AM濃度は健常人の数十倍に至ることが知られている。AMは、非常に強い降圧作用を持つことから、敗血症における低血圧性ショックを惹起する一因である可能性が示唆された。一方で、AM投与モデルや過剰のAM発現を誘導したトランスジェニックマウスでは、AMが、肝臓などの主要臓器血流量を増加させ、かつそれらの臓器のうっ血を阻止し、臓器保護作用を持つ可能性も報告されている。このように、AMの敗血症での病態生理学的意義は、未だ混沌としており、治療への展開も含めて広く詳細に解析を行う必要性がある。申請者は、まずイヌ敗血症モデルにおけるAM遺伝子の発現変化を臓器、血管を主体に検討した。さらに、マウスにおいて、AM容体構成因子であるCRLR(calcitonin receptor-like receptor)およびRAMP(receptor activity modifying Protein)familyの遺伝子発現を検討した。AMの受容体は、核となる7回膜貫通蛋白であるCRLRに、1回膜貫通蛋白であるRAMP2またはRAMP3のいずれかが共発現して形成される。すなわちAMの受容体には2つのサブタイプが存在する。マウス敗血症モデルにおいて、これらAM受容体構成物質の遺伝子発現が、臓器特異的に大きく変化することが明らかとなった。これらの研究から、AMおよびAM受容体は、敗血症モデルから摘出した肺において、下記のような変化を示す可能性が示唆された。肺は、血中AMのクリアランスを担う臓器であり、また敗血症モデルでは、AMの産生増加臓器の一つとして知られている。1、CRLR、RAMP2遣伝子の経時的減少およびRAMP3遺伝子の経時的増加を認め、受容体サブタイプの転換の可能性が示唆された。2、肺膜分画のAM結合サイト数は、病態前期に著明な減少を認めたが、後期には変化を認めなかった。3、肺に特異的な現象として、動脈血酸素分圧を上昇させることで、AM遺伝子の発現レベルは減少した。以上のように、肺では、AMのみならずAM受容体の遺伝子発現変化も明らかとなった。肺は、AMのクリアランス臓器であるとともに、AMの気管支拡張作用や肺血管拡張作用などの標的臓器でもある。この多様性は、複数の受容体サブタイプの存在による。正常肺に多数存在するAM受容体は、AMのクリアランスを担い、敗血症での減少は、血中AM濃度の上昇を助長すると考えられる。本研究の目的は、敗血症におけるAMの肺での病態生理学的意義を明らかにすることである。そのために、二つの課題を設定した。第一は、肺でのAM受容体の発現量解析およびその発現細胞の同定により、AMの作用を明らかにし、第二はAMの転写調節への酸素の関与を明らかにする。この課題に沿って、以下のように研究を遂行している。

1.敗血症モデル肺におけるAM受容体の解析。2.LPS投与によるAM遺伝子の発現増加と酸素との関連を検討する培養細胞株を決定する。3.AMおよびAM受容体の遺伝子は、肺のどの細胞に発現しているかを解析する。4.AMの酸素による転写因子を同定する。AMの敗血症における標的臓器を特定するために、受容体の分布を検討した。その結果、肺をはじめとするいくつかの臓器で受容体遺伝子の発現量が変化することをノーザンブロットによって発見した。肺では、受容体サブタイプの転換が示唆され、先の酸素分圧によるAMの制御と併せて、敗血症におけるAMの主たる病態学的意義は、肺に求められると予想した。次に、受容体の変化を蛋白レベルで解析するために、binding assayを行った。敗血症モデルマウスから肺膜分画を調整し、放射性標識をしたAMを結合させ結合部位数を解析した。AM結合部位数が経時的に減少する傾向を捉えている。この現象は、受容体構成蛋白のRAMP 2およびRAMP 3の遺伝子発現量に伴うと考えられる。現在、肺を構成する気管上皮や肺毛細血管内皮のヒト初代培養細胞などを用いて、AM受容体の発現部位を検討している。アドレノメデュリン(AM)は、リポポリサッカライド(LPS)や、TNF-α、IL-1βによって誘導され、敗血症患者の血中AM濃度は健常人の数十倍に至ることが知られている。AMは、非常に強い降圧作用を持つことから、敗血症における低血圧性ショックを惹起する一因である可能性が示唆され、一方で、AM投与モデルや過剰のAM発現を誘導したトランスジェニックマウスでは、AMが、肝臓などの主要臓器血流量を増加させ、かつそれらの臓器のうっ血を阻止し、臓器保護作用を持つ可能性も報告されている。このように、AMの敗血症での病態生理学的意義は、未だ混沌としており、治療への展開も含めて広く詳細に解析を行う必要性がある。申請者は、まずイヌ敗血症モデルにおけるAM遺伝子の発現変化を臓器、血管を主体に検討した。さらに、マウスにおいてAM受容体構成因子であるCRLR (calcitonin receptor-like receptor)およびRAMP (receptor activity modifying protein)familyの遺伝子発現を検討した。AMの受容体は、核となる7回膜貫通蛋白であるCRLRに、1回膜貫通蛋白であるRAMP2またはRAMP 3のいずれかが共発現して形成される。すなわちAMの受容体には2つのサブタイプが存在する。マウス敗血症モデルにおいて、これらAM受容体構成物質の遺伝子発現が、臓器特異的に大きく変化することが明らかとなった。これらの研究から、AMおよびAM受容体は、敗血症モデルから摘出した肺において、下記のような変化を示す可能性が示唆された。肺は、血中AMのクリアランスを担う臓器であり、また敗血症モデルでは、AMの産生増加臓器の一つとして知られている。1、CRLR、RAMP2遺伝子の経時的減少およびRAMP3遺伝子の経時的増加を認め、受容体サブタイプの転換の可能性が示唆された。
ロトカ・ヴォルテラ方程式における拡散効果の研究

本研究では、互いに競争関係にある2種の生物個体群の挙動に対する2種の移動能力の影響を考察することを目的として、ロトカ・ヴォルテラ型の反応拡散方程式系の解の挙動を数学的に解析する。特に、2種の拡散効果を本質的に際立たせるために、2種の競争力を拮抗させて次の問題を設定する:「一方の種が他方よりも至る所で多いような初期分布から始めたら、必ず少ない方の種が絶滅するのか?」もしも2種とも拡散しなければ、必ず「少数派」の種の方が絶滅してしまうことは、ロトカ・ヴォルテラ(常微分)方程式に対する理論的な解析の結果として知られている。それでは、2種が等しい拡散係数で拡散する場合はどうなるのか?この場合、2種の移動能力が等しいと見なせるから、やはり「少数派」の種の方が絶滅しそうである。そこで、まず数値実験を行い、2種の拡散係数が等しいという条件のもとで、「一方の種が他方の種よりも至る所で多い」ようなさまざまな初期分布に対して、その解の時間発展の様子を調べてみた。たいていの場合にはやはり少数派が絶滅するのだが、中には、「多数派」の方が絶滅してしまう不思議な例も少なからず見られた。この不思議な現象が起こる理由を突き止めるために、拡散項の無いロトカ・ヴォルテラ方程式のセパラトリクスの形状を理論的に調べてみた結果、ロトカ・ヴォルテラ型の2種競争系ではセパラトリクスが常に凸な曲線になっていることを証明できた。この事実と2種競争系に対する比較原理をうまく組み合わせることにより、上記の不思議な現象が起こることを証明することに成功した。特に、2種の拡散効果を本質的に際立たせるために、2種の競争力を拮抗させて次の二つの問題を設定する。1。2種が棲み分けて「縄張り争い」する場合に最後に勝つのはどちらの種か?2。一方の種が他方よりも至る所で多いような初期分布から始めたら、必ず少ない方の種が絶滅するのか?本年度は、これらの問題を手がける準備として、1に対しては、2種競争系と良く似た挙動を示すアレン・カーン方程式の解の内部遷移層の運動を解析し、2に対しては、主に数値計算によって状況を詳細に観察した。アレン・カーン方程式は二つの安定な定数状態をもち、拡散係数を小さくするとこの二つの状態を狭い範囲でつなぐ内部遷移層を伴った解が現れる。この内部遷移層が競争系における2種の縄張りの境目に相当するものと考えて、内部遷移層の動き方と拡散効果の関係を拡散係数が一様でない場合まで込めて調べた。拡散係数を十分小さくした特異的な状況を漸近的に解析することにより、拡散係数の勾配と平均曲率に従って運動する曲面で内部遷移層を近似できることがわかった。さらに、この研究の副産物として、非一様な拡散係数をもつアレン・カーン方程式の全空間における安定な定常解として内部遷移層を伴うものを構成できた。一方、2の数値計算からは、初期に多い方の種が拡散の影響によって絶滅してしまうという逆転現象が起き得ることが示唆され、逆転が起きるような初期分布のタイプの見当がついてきた。次年度に向けてこの逆転現象を理論的に検証中である。
リ一環とその応用

1.本研究はリ一環とその応用の研究であり,特にKacーMoodyのリ一環を代表とする無限次元リ一環について,関連する問題・対象の研究を進めることを目的とした。具体的には,リ一環の構造・表現の研究,対応する群の研究,応用として組合せ論との関係,対称空間を中心とした幾何学との関連を研究しようとしたものである。2.リ一環の構造・表現については,従来より研究を続けていた頂点(Vertex)作用素についていくつかの結果を得,Rao氏,Moody氏との共著論文として投稿した。頂点用素はアフィンリ一環の基本表現の構成に用いられて以来,数学の種々の分野とかかわっていることが知られているが,ここでは頂点作用素の代数のなかに,ワイル群の元に対応するものを実現し,ル-ト構造,アフィンワイル群等との関連を論じている。頂点作用素の応用については,さらに研究を進める必要があると考える。3.群論・組合せ論の面では,筱田助教授により,有限古典群に対し,その巾等元gであって,gー1の核が与えられた部分空間になるようなものの個数を示す公式が得られ,マニラで行われた国際シンポジウムで報告された。4.幾何学との関連では,長野教授・全行教授等によって新しい結果が得られている。長野教授は,Kε型とよばれる対称空間と,コンパクト対称空間のtotallyーgeodesicな部分多様体との間の対応の説明を出発点とし,複素半単純リ一環の可換なinvolutionの組の性質を調べている。(Tokyo J.Mathに発表)。また金行教授は,ある種のアフィン対称空間と有限対称領域の関係について論じ,エルミ-ト型実単純リ一環に対応するKε型の対称空間を構成している。(Hokkaido Math.Jに発表)5.沢田秀樹氏は,代数群の基礎に関する講義録を完成し,Essen大学より出版された。代数群のリ一環についても述べられている。
博物館資料の潜在的価値の顕在化－海を渡った植物標本からの生物多様性情報の発掘－

本研究は、江戸明治時代に外国人により採集された植物標本のうち、主に海外の標本庫に所蔵されているジェネラルコレクションを調査することにより、生物多様性の証拠という面から、博物館資料の潜在的な学術的価値を顕在化させることを目的としている。2018年度は、『神奈川県植物誌2018』(神奈川県植物誌調査会編, 2018)の編纂作業と神奈川県のレッドデータ植物の選定作業の成果を受け、重点的に探索すべき植物を選定した。また、首都大学東京の牧野標本館に所蔵されているシーボルト標本を調査した。この標本情報はWEB上にも公表されているものであるが、一部ではあるがシーボルト標本の実態が理解できた。従来より知られていることであるが、シーボルトの標本のラベルには、詳細な採集地等の採集情報が記されていないが、一部(特にコレクションに含まれる他の採集者の標本)には、明記されている例が見出された。また、2017年度の研究過程で、調査が必要であると確認された台湾大学(台北)の標本庫(TAI)においての標本調査を実施した。その結果、サガミメドハギLespedeza hisauchiiの原記載(Nemoto & Ohashi, 1999)で引用されている標本(Hayama, Sagami, 7 Oct. 1933 K.Hisauchi)は、もとはオオバメドハギL. davuricaとされていた標本がサガミメドハギと同定とされたものであることが再度確認された。神奈川県に現在分布するオオバメドハギは帰化したものとされ、古い記録の扱いについては検討が必要であったが、台湾大学、東京大学、国立科学博物館等に所蔵されている標本は、すべてサガミメドハギと同定されており、古い時代に採集されたオオバメドハギの標本は見出せていない。当初の調査目的としていたシーボルト標本を所蔵する標本庫の改修工事が予定より、長期間に及んでいる。ただし、代替として、台湾大学の標本調査を実施した。前述のようにやや遅れているが、2019年度は、シーボルトの標本を所蔵しているライデンの標本庫の調査に替え、マキシモヴィッチの標本を所蔵するサンクトペテルブルグの標本の調査を優先することを計画している。研究開始初年度は、主に1調査対象となる植物種を選定すること、2調査対象標本庫の追加等について検討すること、3シーボルトのコレクションについての調査を実施するなどを計画していた。上記のうち、1については神奈川県を事例に、これまで文献上の記録のみがあり、標本情報が得られていない種についてのリストづくりを進めた。また、研究がやや遅れている要因ともなった「神奈川県植物誌2018」の編纂の過程において、標本情報による植物相に関する情報が収攬でき、探索すべき標本情報が確認できた。2については、ウプサラ、ライデン、パリ、サンクトペテルブルク、ボストン、ニューヨークの標本庫のほか、ロンドン(キュー)や台北の標本庫などの調査も重要であることが再確認できた。3については、実際にライデンのシーボルドのコレクションを実施する予定であったが、初年度は、国内に所蔵されている重複標本の一部を確認するに留まった。ただし、従来より知られていることであるが、シーボルトの標本のラベルには、詳細な採集地は記されていないこともあり、地域的な生物多様性情報の証拠として生かすには困難であると思われる。当初の研究計画よりやや遅れている。別途進めている地方植物誌である「神奈川県植物誌2018」の編纂業務にエフォートを傾けざるを得なかった影響が大きい。とは言え、神奈川県の事例においては、その編纂過程で、標本情報による植物相に関する情報が収攬でき、探索すべき標本情報が確認できた。

神奈川県に現在分布するオオバメドハギは帰化したものとされ、古い記録の扱いについては検討が必要であったが、台湾大学、東京大学、国立科学博物館等に所蔵されている標本は、すべてサガミメドハギと同定されており、古い時代に採集されたオオバメドハギの標本は見出せていない。当初の調査目的としていたシーボルト標本を所蔵する標本庫の改修工事が予定より、長期間に及んでいる。ただし、代替として、台湾大学の標本調査を実施した。前述のようにやや遅れているが、今年度はライデンに所蔵されているシーボルドの標本について調査を行うことを第1の目的とし、合わせて、調査対象とすべき標本庫の追加について、検討するとともに、次年度以降の調査計画について、再検討を進める。前述のようにやや遅れているが、2019年度は、シーボルトの標本を所蔵しているライデンの標本庫の調査に替え、マキシモヴィッチの標本を所蔵するサンクトペテルブルグの標本の調査を優先することを計画している。計画していたライデンのシーボルトコレクションの調査を実施できなかったため、次年度使用額が生じた。ただし、情報収集のための国内学会などの参加、国内標本庫の調査のために旅費を使用している。今年度は、研究初年度に実施予定であったライデンの調査を計画し、当初計画をやや遅らせて実施の予定である。ライデンの標本庫の標本調査が実施できていないことが大きな原因である。2019年度以降、サンクトペテルブルグの標本庫における調査を優先するなどの対応により、計画的な執行としたい。
オ-ストラリアにおける社会性昆虫類の生態学・分類学的研究(第2次)

本研究は、ハチ、アリ、シロアリなどの真社会性昆虫の社会性の進化のル-トおよびそのメカニズムを考察するために、これらの原始的な種類を多数かかえているオ-ストラリアにおいて生態学的・分類学的な調査を行ったものである。昭和61年度より63年度にかけての第一次調査に引き続いて平成1年度と2年度に第二次調査を行った。なお、平成2年度は全体の総括作業に重点をおいた。以下、一連の研究成果の概要を各昆虫群ごとに記述する。(1)狩りバチ類に関しては、特にチビアシナガバチ属の5種の社会構造および社会行動の比較研究を行った。その中で特筆すべき発見は、Ropalidia pleianaにおけるコロニ-増殖法であり、これは創設直後に巣を分割して行うという特異的なものである。このような増殖法に関しては、従来は社会性昆虫においてまったく知られていなかったものであり、国際的に大変注目された。このハチは、橋や岩の下に数百にもなる巨大な巣集団を形成する。それらは極めて密な集団であるのだが、個々の巣は独立した存在で、それぞれを占有しているメスたちは、別の巣に移ることはほとんどない。そこで、このような特異的な営巣様式の適応的な意味を知るために、一つの巣集団の中の個々の巣の生存率と繁殖メスの生産率を継続調査した。すると巣の生存率は極めて高く、古い巣、新して巣ともに90%にも達していた。そして、1コロニ-・サイクルの間における繁殖メスの数は11倍にも増加していた。本種におけるこのような巣集団の形成様式は、高い増殖率を実現させる上でたいへん有利であると考察された。(2)アリ類に関しては、系統学的な観点から重要ないくつかの下等な種類を取り上げて研究した。キバハリアリ類は世界でオ-ストラリアのみにしかいない興味深いものであるが、各地のトビキバハリアリを調査した結果、極めて特異的な染色体多型が発見された。このアリは、従来はただ1種のみと考えられていたのであるが、染色体、形態、生態の面からいくつかの新種に分けられるべきものであり、染色体進化と種の分化との関係の問題に大きな手掛かりを与えてくれるものとして、重要なものであることが分かった。生態学的な調査としては、キバハリアリの1種であるMyrmecia brevinodaの巣を堀り、その全コロニ-を調べあげた。全部で257匹のワ-カ-がいて、それらは体の大きさの大小2型を示しており、小ワ-カ-は巣の下部の方に、大ワ-カ-は上部の方に多く分布していた。そして、小ワ-カ-は主に内部で巣作りを、大ワ-カ-は外部に出て狩猟・防衛・巣作りなどを行っていることを見つけた。一方、シロアリの塚の中に生息している8種のアリ類の調査をし、それらとシロアリ類の生態学的な関係を考察した。これらのアリ類は、塚を作るシロアリに対して大きな捕食者であるIridomyrmex sunguineaに立ち向って攻撃する。そのために結果として、これらのアリとシロアリの間には、相互扶助的な共生関係が成立していると考察された。(3)シロアリ類に関しては、生態学的な調査として、山地熱帯多雨林におけるシロアリ群集の種類組成、生活様式、個体群密度、現存量などを調べた。全部で6種のシロアリが発見されたが、そのうち5種は下等なもので、東南アジア、アフリカ、南アメリカなどの熱帯多雨林でのシロアリ群集と比較すると、オ-ストラリアにおいては種類が極端に少なく、特に下等な種の割合が高いことが他の地域とは大きく異っていることが分かった。(4)ゴキブリに関しては、シロアリ類の真社会性の起源を考察するため、それらの祖先的な生活をしていると考えられる食材性のオオゴキブリ属について調査を行った。全部で4種に関してコロニ-の組成について詳しいデ-タを取ったが、いずれも親と子が共存している家族を形成していた。そして、その親子関係は長期間続くものと考えられる。一方、従来その野外生態がほとんど知られていなかったヨロイモグラゴキブリの調査を行い、その生活様式が詳細に明らかにされた。このゴキブリは地中に営巣して家族を形成し、その生息密度の大きさ、体が巨大なこと、リタ-食者であることを考えると、社会進化を考える上で大変注目されるものであった。

それらは極めて密な集団であるのだが、個々の巣は独立した存在で、それぞれを占有しているメスたちは、別の巣に移ることはほとんどない。そこで、このような特異的な営巣様式の適応的な意味を知るために、一つの巣集団の中の個々の巣の生存率と繁殖メスの生産率を継続調査した。すると巣の生存率は極めて高く、古い巣、新して巣ともに90%にも達していた。そして、1コロニ-・サイクルの間における繁殖メスの数は11倍にも増加していた。本種におけるこのような巣集団の形成様式は、高い増殖率を実現させる上でたいへん有利であると考察された。(2)アリ類に関しては、系統学的な観点から重要ないくつかの下等な種類を取り上げて研究した。キバハリアリ類は世界でオ-ストラリアのみにしかいない興味深いものであるが、各地のトビキバハリアリを調査した結果、極めて特異的な染色体多型が発見された。このアリは、従来はただ1種のみと考えられていたのであるが、染色体、形態、生態の面からいくつかの新種に分けられるべきものであり、染色体進化と種の分化との関係の問題に大きな手掛かりを与えてくれるものとして、重要なものであることが分かった。生態学的な調査としては、キバハリアリの1種であるMyrmecia brevinodaの巣を堀り、その全コロニ-を調べあげた。全部で257匹のワ-カ-がいて、それらは体の大きさの大小2型を示しており、小ワ-カ-は巣の下部の方に、大ワ-カ-は上部の方に多く分布していた。そして、小ワ-カ-は主に内部で巣作りを、大ワ-カ-は外部に出て狩猟・防衛・巣作りなどを行っていることを見つけた。一方、シロアリの塚の中に生息している8種のアリ類の調査をし、それらとシロアリ類の生態学的な関係を考察した。これらのアリ類は、塚を作るシロアリに対して大きな捕食者であるIridomyrmex sunguineaに立ち向って攻撃する。そのために結果として、これらのアリとシロアリの間には、相互扶助的な共生関係が成立していると考察された。(3)シロアリ類に関しては、生態学的な調査として、山地熱帯多雨林におけるシロアリ群集の種類組成、生活様式、個体群密度、現存量などを調べた。全部で6種のシロアリが発見されたが、そのうち5種は下等なもので、東南アジア、アフリカ、南アメリカなどの熱帯多雨林でのシロアリ群集と比較すると、オ-ストラリアにおいては種類が極端に少なく、特に下等な種の割合が高いことが他の地域とは大きく異っていることが分かった。(4)ゴキブリに関しては、シロアリ類の真社会性の起源を考察するため、それらの祖先的な生活をしていると考えられる食材性のオオゴキブリ属について調査を行った。全部で4種に関してコロニ-の組成について詳しいデ-タを取ったが、いずれも親と子が共存している家族を形成していた。そして、その親子関係は長期間続くものと考えられる。一方、従来その野外生態がほとんど知られていなかったヨロイモグラゴキブリの調査を行い、その生活様式が詳細に明らかにされた。このゴキブリは地中に営巣して家族を形成し、その生息密度の大きさ、体が巨大なこと、リタ-食者であることを考えると、社会進化を考える上で大変注目されるものであった。
高いFET特性の発現を目指した新規へテロπ共役系化合物の設計と合成

5員環が2、4、6個からなるオリゴ(チエニルフラン)を合成し、その電子的性質について対応するオリゴチオフェンおよびオリゴフランと比較した。その結果、オリゴ(チエニルフラン)のHOMO準位はオリゴチオフェンよりも高くオリゴフランとほぼ同等であること、およびHOMO-LUMOギャップはオリゴフランより小さくオリゴチオフェンと同程度であることが明らかとなった。X線結晶構造解析では、オリゴ(チエニルフラン)はオリゴチオフェンよりも密なパッキング構造をもつことが示された。これらの知見はOFETに応用した際にホール輸送を有利にするものである。さらに両末端にチオフェン環を有する5および7個のヘテロ環からなるオリゴ(チエニルフラン)およびそれらのα,α'-位にエチル基またはヘキシル基をもつオリゴマーを合成し、電子的および構造的性質を解明した。さらに真空蒸着法およびスピンコート法によりこれらのオリゴ(チエニルフラン)の薄膜を作成し、FET特性と薄膜形態との相関関係を詳細に検討した。金電極と有機層の間のキャリア輸送性について、上記で合成した一連のオリゴ(チエニルフラン)を用いて、末端アルキル基の有無および長さへの依存性を検討した。transfer line法、(TLM)を用いて電極と有機層の寄生抵抗を見積もることによって、有機層が本来有しているFET特性を明らかにした。その結果、寄生抵抗はアルキル基には依存せず、一様にTLMを用いない場合の1.3-2倍程度の移動度の上昇が観測された。また一連のオリゴ(チエニルフラン)の大部分がOFETとしての特性を示し、特にヘキシル基をもつ5個のヘテロ環の連結したものではμ=0.042cm^2V^<-1>s^<-1>という比較的良好なFET移動度をもつことを見出した。
高血圧・動脈硬化症の動脈におけるストレス蛋白質の役割の検討

ウィスター系雄ラットに開腹手技のストレスを加え、経時的に屠殺し各臓器におけるストレス蛋白質(熱ショック蛋白質:HSP)の変動をみた。方法としては、腹部大動脈・副腎・腎臓を摘出し、蒸留水中でホモジナイズし、18000Gの遠心にてその上清を採取し検体とした。これを5μg蛋白質/20μlに調節し、SDSポリアクリルアミド電気泳動で展開した。さらにニトロセルロース膜に転写後、Westernblotアッセイを行った。一次抗体にはHSP70と90に対するポリクロナル抗体を用い、二次抗体には抗家兎IgG抗血清を用い、ケミノルミネッセンス法にて検出した。腹部大動脈では開腹ストレスを加えて2日目にHSP90が若干増加傾向を示した。HSP70には1、2、3日目で有意の変動を認めなかった。腎臓ではHSP70/90共に有意の変動がみられなかった。副腎においてもHSP70/90に有意な変動をみなかったものの、HSP72に対する抗血清で検討したところ、開腹ストレス2日目に有意な増加を認め、3日目にも若干の増加傾向が認められた。今回の実験よりストレスに対して腹部大動脈のHSP90が応答する可能性が示唆された。より明確な結論を得るためにはHSPのmRNAの定量化が必要と考え、現在competitivePCRを検討中である。最近、動脈の内皮細胞では虚血ストレスによって誘導される蛋白質は従来報告されているHSPとは異なるものであるとの報告があり、動脈内でもその構成細胞によっては異なるストレス応答がみられる可能性が示唆される。この点も今後の検討項目であると考えている。
歯肉溝滲出液マトリックス成分の呈色による歯槽骨破壊活性の検討

アルシアンブルー染色によって硫酸化グリコサミノグリカン(S-GAG)を検出する方法を改良した。従来の方法と異なって、pHを低くすること、高塩濃度にすること、界面活性剤を用いることにより、DNA,タンパク質、ヒアルロン酸などの高分子陰性荷電物質の染色を最小限にし、S-GAG染色の特異性を高めた。S-GAG(コンドロイチン4硫酸、コンドロイチン6硫酸、デルマタン硫酸、ヘパラン硫酸)溶液をセルロースアセテートストリップに貼付し、0.05M MgCl_2,0.4Mグアニジン塩酸、0.002M硫酸、0.25%TritonX-100を含む0.2%アルシアンブルー(pH1.5)で染色した。それぞれのS-GAGのアルシアンブルーとの結合力には差があり、コンドロイチン4硫酸が最も強くヘパラン硫酸が最も弱かった。標準品である牛DNA,牛血清アルブミン、睾丸ヒアルロン酸と染色剤の結合は無視できる程度であった。コンドロイチン4硫酸を基準として染色剤とS-GAG複合体をスキャンニングデンシトメーターを用いて測定した結果、300ngまで直接関係を示した。本法を用いてヒト生体液(膝関節液、血清、唾液)を前処理することなく直接測定した結果、生体液に含有される他の高分子陰性荷電物質の影響を受ける事無くS-GAGの測定が可能であった。また、ヒト歯肉溝滲出液S-GAGの測定に応用した結果、歯周病炎患部から得られた単位時間あたりの滲出液S-GAG量(71.41±20.04ng)は歯肉炎患部位(10.53±4.28ng)、正常部位(7.83±2.21ng)から得られた量より高かった(p<0、0001)。ngオーダーの硫酸化グリコサミノグリカン(S-GAG)をアルシアンブルーで染色し、S-GAG-アルシアンブルー複合体を画像解析処理を行って定量した。コンドロイチン4硫酸を試料とした標準曲線は20250ngの範囲で直線関係が得られた。検討したS-GAGはすべて染色され、その濃さはコンドロイチン4硫酸>デルマタン硫酸とコンドロイチン6硫酸>軟骨プロテオグリカン>ヘパラン硫酸の順であった。ヒアルロン酸ならびにDNA、牛血清アルブミンは殆ど染色されなかった。歯肉溝滲出液のS-GAG測定時に阻害物質と考えられるヒト全唾液、ヒト血清も殆ど呈色が見られなかった。次に生体材料としてヒトリウマチ性関節液ならびにヒト歯肉ホモジネート上清のGAGを抽出したサンプルについて、電気泳動法により各GAGを分離定量し、その結果と本法のそれと比較検討した。その結果、電気泳動法により分離定量したS-GAGの和と本法で得た結果は同様の値を示した。ヒトの歯肉溝滲出液を採取するために、歯肉溝に3×12mmのセルロースアセテートストリップスを挿入し滲出液を採取し、染色、画像解析を行った。その結果、健康な歯肉を有するものと歯肉炎に罹患しているものから得られたS-GAG値はいずれも20ng以下であったが、画像解析値は歯肉炎患者から得られた値は健康者のそれより高い値を示した。本法は1)S-GAGの微量定量が可能であること、2)S-GAGの特異性が高いこと、3)サンプルの処理を要しないこと、4)極めて簡単であること、などの臨床応用に有利なことが分かった。

平成9年度ヒトの歯肉溝滲出液を採取するために歯肉溝に3×12mmのセルロースアセテートストリップスを30秒間挿入した。得られたストリップスを5分間染色液に浸漬、その後20分間末反応の染色剤を脱色し、乾燥した。これを画像処理装置によって解析し、S-GAG量をコンドロイチン4硫酸相当量として表した。歯肉溝滲出液は健常(14例)、歯肉炎(10例)、歯周炎(23例)の部位から採取したものを用いた。歯肉炎の部位から採取した歯肉溝滲出液に含有する採取単位時間当たりのS-GAG量(71.41±20.04ng/30秒)であるのに対して、健常、歯肉炎からのそれはそれぞれ(7.83±2.21、10.53±4.28ng/30秒)であり、約7-9倍の値(p<0.001)を示した。一方、採取単位液量当たりのS-GAG量は歯肉炎部位(45.01±23.89ng/μ1)であるのに対し健常、歯肉炎部位(10.18±5.52、9.01±5.08ng/μ1)であり、単位液量当たりにおいても歯周炎から採取した歯肉溝滲出液含有S-GAG量は健常、歯肉炎から採取したそれの約4-5倍(p<0.01)であった。一方、生体試料(歯肉ホモジネート上清)を用いて電気泳動法と本法によるS-GAG量の測定値比較を行った。抽出したGAGを試料とした時には本法による測定値は電気泳動法による値の約53%であったが、精製したGAGを試料とした時には両方法による値はほぼ同様であった。
慢性腎不全における高レムナント、低HDL血症の解明-安定同位体を使った新しいアポ蛋白代謝研究法による検討

血液透析中の慢性腎不全患者は動脈硬化性疾患のリスクが高いといわれるが高脂血症がその原因の一つと言われている。高脂血症の病態解明を目的として、安定同位体でラベルしたアミノ酸を使った新しいトレーサー実験を血液透析中の慢性腎不全患者5名(HD群)と健常対象者4名(対象群)に実施した。GC-MSを使ってVLDL、IDL、LDLアポ蛋白B-100とアポ蛋白A-I、A-IIのtracer/tracee ratiosを測定しさらにmulticompartmental model(SAAMII)にあてはめ代謝パラメーター(異化、産生速度)を算出した。アポ蛋白Bの異化は遅延しており特にIDLにおいては対象群の70%と著明な遅延を認めた。VLDL、IDLでは産生速度も同様に低下していたため異化の遅延を産生低下が相殺してリポ蛋白濃度は正常に保たれていた。IDLは産生の低下を異化遅延が上回り血中濃度の増加を認めた。HD患者では、IDLのdirect uptakeは認めず、LDLへのconversionにも障害を認めた。腎不全患者では肝性リパーゼの活性低下とアポ蛋白C-IIIの増加が報告されているがアポ蛋白C-IIIがアポ蛋白Eを介したIDLのuptakeを阻害するとともに肝性リパーゼ活性阻害に働いているものと考えれられる。またLDLの異化障害の原因LDL受容体活性の低下が考えられるが、LDL粒子の受容体に対する親和性の低下の可能性も否定できない。HDLについては、アポ蛋白A-IIの産生低下が認められたものの、有意な異化亢進は認めなかった。VLDL産生低下の原因は不明だが、腎不全患者では肝臓でリポ蛋白合成と分泌にかかる時間が延長(1.1h vs 0.5h)していた点、またアポ蛋白A-IIの産生低下していたことから肝臓での蛋白合成分泌系自体に何らかの障害が生じているものと推察された。正脂血症の腎不全患者(HD)5名を対象にD3-Leucineを使ったアポ蛋白代謝実験を施行した.VLDL,IDL,LDLアポ蛋白B-100のtracer/tracee ratiosをmulticompartmental modelにあてはめ,代謝パラメーター(異化,産生速度)を算出した.アポ蛋白Bの異化は遅延しており,特にIDLにおいて著明であった.産生も同様に減少しており,異化の遅延を産生低下が相殺してそれぞれのリポ蛋白濃度が正常に保たれていた.これらの結果から,腎不全患者では脂質濃度が正常の状態からリポ蛋白代謝異常が存在することが明らかになった.高脂血症を合併したHD患者を対象にした過去の研究では,産生低下が消失し異化遅延だけが残っている点から,異化遅延がHD患者のリポ蛋白代謝異常の基盤であることが示唆される.ただし,放射性同位元素を使ったVLDL,IDLだけの代謝実験という点で過去の報告は不完全なものであるので,今後は高脂血症合併のHD患者を対象に同様の代謝実験を行い,さらにHD患者のリポ蛋白異常症の解明を進めたい.血液透析中の慢性腎不全患者は動脈硬化性疾患のリスクが高いといわれるが高脂血症がその原因の一つと言われている。

GC-MSを使ってVLDL、IDL、LDLアポ蛋白B-100とアポ蛋白A-I、A-IIのtracer/tracee ratiosを測定しさらにmulticompartmental model(SAAMII)にあてはめ代謝パラメーター(異化、産生速度)を算出した。濃度異化産生濃度異化産生濃度異化産生濃度異化産生濃度異化産生HD群5.7 5.5 11.1 6.2 2.5 6.1 74 0.31 9.2 91 0.22 7.9 15 0.130.77対象群4.5 8.8 15.1 3.9 8.1 9.9 70 0.48 13.4 128 0.18 8.9 27 0.12 1.28アポ蛋白Bの異化は遅延しており特にIDLにおいては対象群の70%と著明な遅延を認めた。VLDL、IDLでは産生速度も同様に低下していたため異化の遅延を産生低下が相殺してリポ蛋白濃度は正常に保たれていた。IDLは産生の低下を異化遅延が上回り血中濃度の増加を認めた。HD患者では、IDLのdirect uptakeは認めず、LDLへのconversionにも障害を認めた。腎不全患者では肝性リパーゼの活性低下とアポ蛋白C-IIIの増加が報告されているがアポ蛋白C-IIIがアポ蛋白Eを介したIDLのuptakeを阻害するとともに肝性リパーゼ活性阻害に働いているものと考えれられる。またLDLの異化障害の原因LDL受容体活性の低下が考えられるが、LDL粒子の受容体に対する親和性の低下の可能性も否定できない。HDLについては、アポ蛋白A-IIの産生低下が認められたものの、有意な異化亢進は認めなかった。VLDL産生低下の原因は不明だが、腎不全患者では肝臓でリポ蛋白合成と分泌にかかる時間が延長(1.1h vs 0.5h)していた点、またアポ蛋白A-IIの産生低下していたことから肝臓での蛋白合成分泌系自体に何らかの障害が生じているものと推察された。
金属微粒子援用エッチングによるポーラスシリコンの作製とその構造制御

金属微粒子の置換析出とHFエッチという、いずれも湿式化学プロセスにより、簡便に構造制御ポーラスシリコンを作製する方法の確立を目的として下記の検討を行った。(1)シリコン(Si)上への金属微粒子担持方法の確立HFを含む金属塩水溶液にSiウェーハを浸す無電解置換析出法について、白金・パラジウム・ロジウムの白金族金属は析出粒子数密度が比較的低く、シリコンの前処理の違いによって変化すること、一方、金・銀・銅の貨幣金属は粒子数密度が高く前処理に鈍感なことが明らかとなった。(2)ポーラスSiの作製と構造制御法の検討金属微粒子を担持したSiウェーハをHF水溶液に浸した後、試料表面と断面を電子顕微鏡観察した。エッチング時の光照射によって、得られるポーラス層の構造が大きく異なり、暗所では金属微粒子と形成される孔のサイズがほぼ等しいことが分かった。また、銀、金、銅、ロジウム、パラジウムなどでも金属微粒子援用HFエッチングが進行することを確認した。これらの金属の種類によって得られる多孔質シリコンの構造が変化し、微粒子が微細な銀では他の金属よりも微細なマクロボアが形成されるとともにその形状が比較的直線的でシリコン表面に対して垂直方向と水平方向に形成されやすいこと、パラジウムでは多孔質層が形成されず均一エッチングが比較的高速で進行することが分かった。特に、パラジウムを用いた場合には、他の金属とはエッチングの機構が異なっていることが判明した。(3)ポーラスSiのパターニングについてマスクを用いた真空蒸着による大きな金属薄膜パターンやFIB法(研究協力者R.Schlaf博士担当)よるサブミクロン金属ドットをシリコンにっけてエッチングを試みた。局所エッチングが進行し、金属の大きさや量によって得られるシリコンの構造が異なっていた。本研究では、金属超微粒子を担持したシリコンを化学エッチングすることで、発光素子や多孔質センサー材料あるいはSOIデバイス形成用の基板として注目されている多孔質シリコンいわゆるポーラスシリコンを作製している。溶液に浸すだけの単純な化学的処理のみにより、外部バイアス無しに、微視的にも巨視的にもその構造を制御しながら、ナノおよびマクロポーラスシリコンを作製することを最終的な目的としている。平成17年度は、金属微粒子の置換析出とHFエッチという、いずれも湿式の化学的方法により、簡便に構造制御ポーラスシリコンを作製する方法の確立を目指すとともに、ポーラスシリコンのパターニングについて下記のような基礎的な検討を行った。(1)シリコン(Si)上への金属微粒子担持方法の確立のために、HFを含む金属塩水溶液にSiウェーハを浸す無電解置換析出法について詳しく検討した。白金・パラジウム・ロジウムの白金族金属は析出粒子数密度が比較的低く、シリコンの前処理の違いによって変化すること、一方、金・銀・銅の貨幣金属は粒子数密度が高く前処理に鈍感なことが明らかとなった。また、いずれも析出初期に核発生が起こりその後は粒子の成長反応が主に進行していることが分かった。(2)ポーラスSiの作製と構造制御法を検討するために、金属微粒子を担持したSiウェーハをHF水溶液に浸した後、試料表面と断面を走査型および透過型電子顕微鏡観察した。(3)ポーラスSiのパターニングを試みるために、マスクを用いた真空蒸着による大きな金属薄膜パターンやFIB法(研究協力者R. Schlaf博士担当)よるサブミクロン金属ドットをSiにつけて、局所エッチングが起こるとの予備的な結果を得た。

本研究では、金属超微粒子を担持したシリコンを化学エッチングすることで、発光素子や多孔質センサー材料あるいはSOIデバイス形成用の基板として注目されている多孔質シリコンいわゆるポーラスシリコンを作製している。溶液に浸すだけの単純な化学的処理のみにより、外部バイアス無しに、微視的にも巨視的にもその構造を制御しながら、ナノおよびマクロポーラスシリコンを作製することを最終的な目的としている。平成18年度は、前年度に引き続き、金属微粒子の置換析出とHFエッチという、いずれも湿式の化学的方法により、簡便に構造制御ポーラスシリコンを作製する方法の確立を目指すとともに、ポーラスシリコンのパターニングについて下記のような検討を行った。(1)シリコン上に担持する金属微粒子の種類と、得られる多孔質層の構造について従来の白金だけではなく、銀、金、銅、ロジウム、パラジウムなどでも金属微粒子援用HFエッチングが進行することを確認した。これらの金属の種類によって得られる多孔質シリコンの構造が変化し、微粒子が微細な銀では他の金属よりも微細なマクロポアが形成されるとともにその形状が比較的直線的でシリコン表面に対して垂直方向と水平方向に形成されやすいこと、パラジウムでは多孔質層が形成されず均一エッチングが比較的高速で進行することが分かった。特に、パラジウムを用いた場合には、他の金属とはエッチングの機構が異なっていることが判明した。(2)多孔質シリコンのパターニングについてマスクを用いた真空蒸着による大きな金属薄膜パターンやFIB法(研究協力者R.Schlaf博士担当)よるサブミクロン金属ドットをシリコンにつけてエッチングを試みた。金属の大きさや量によって得られるシリコンの構造が異なっていた。
生存donorより摘出した部分肝の同所性移植における移植肝の生着に関する研究

本年度はdonor、recipient、輸血用に各々1頭ずつ、計3頭を1組として、5組15頭の日本猿をもちいて、生体部分肝移植の実験を行った。前年度に報告した方法を用いてdonorの肝左葉を右葉から冷温潅流しながら摘出し、back table operationで肝静脈、肝断端を形成した。recipientはポリウレタン製、ヘパリンコ-ティングの下大静脈貫通型の静脈静脈バイパスを用いて肝全摘を行いdonorの左葉を同所性にdonorに移植した。donorもrecipientも生存させ、donorは2週間後に解剖して残存肝の再生の状態を検討した。recipientは術後cyclosporineとmethylprednisoloneによる免疫抑制療法を行い血液、尿、胆汁を採取し、これの生化学的な検査を行った。死亡時に肝脾、腎、膵、消化管の組織を検索した。donorは1頭は術後2日に死亡した。4頭は2週目に解剖した。解剖時、肝切断面に周囲組織が癒着していた。肝の再生はこの時点では認められなかった。recipientは4例は各々252,60,110,72時間生存したが、1例は24時間以内に死亡した。24時間以内死亡例の死因は肝切断面よりの出血であった。48時間以上生存例の死因は、肝静脈の血流不全、下大静脈内の血栓、拒絶反応、であった。この結果より、1)我々の考察した下大静脈貫通型の静脈静脈バイパスは有効であった。2)冷温潅流により肝左葉を切断することにより、グラフトのバイアビリティ-が保たれる。3) donorの手術は安全に行われる。以上の事が確認された。実験動物を雑種犬から猿に変更して生体部分肝移植の実験を行った。体重平均約8kgの猿をdonorに、約5kgの猿をrecipientとし、輸血のための採血用の猿と合わせて計3頭を1組として台湾猿7組、日本猿9組の計16組、48頭の猿を用いた。donorの肝左葉を切断し、recipientに同所性に移植した。実験開始当初から12組目までは、recipientは全例術後24時間以内に死亡した。死因は殆どが肝切断面よりの出血と移植肝のacut liver non functionであった。しかし、その後の4例は生存時間が各々58、64、68、242時間と延長した。この4例の死因は、各々、liver nonfunction、左肺の無気肺による呼吸障害、事故、移植肝の拒絶反応であった。donorは術後採血用に犠牲死させた3例を除くと1週以内の死亡3例、1-2週の死亡3例、2週以上の生存7例と最近の実験では、他に合併症の無い猿は全例2週以上生存してる。recipientの生存時間が延長したのは、手術術式、術後管理、においていくつかの工夫を行ったことに起因する。術後の工夫は以下4項目である。(1)肝の血液をすべて保ったままdonorの肝左葉を右葉から分離切断し、門脈から4°cの冷ハルトマン液で左葉を灌流し始めると同時に肝動脈と肝静脈を切断することによりdonorに影響を与えること無しに、移植肝を冷却灌流する。(2)recipientの肝全摘において我々が考案した下大静脈灌流型非強制的静脈バイパスを使用し、安全に肝全摘を行った。(3)肝移植に際し、移植肝の左肝動脈をマイクロサ-ジェリの手術技術を用いて吻合した。(4)移植肝をrecipientの下大動脈の右側に予め180度回転させて置き肝動脈と下大静脈を端側に吻合する事により肝静脈のout flow blockを防止した。術後管理の工夫は以下の3項目である。(1)術後48時間はrecipientの気管チュ-ブを挿管したまま筋弛緩剤を用いて呼吸管理した。(2)recipientをクベ-ス内で管理し、低体温に備えた。(3)特注の猿の抑制椅子を用いて管理した。今後は免疫抑制法を工夫してより長期の生存を目指す方針である。

この結果より、1)我々の考察した下大静脈貫通型の静脈静脈バイパスは有効であった。2)冷温潅流により肝左葉を切断することにより、グラフトのバイアビリティ-が保たれる。3) donorの手術は安全に行われる。以上の事が確認された。
ナノセンシング技術による食品汚れの固体表面に対する吸脱着過程の解析

食品製造機器の洗浄技術の省エネルギー・省資源ならびに高度・精密化の促進を図る上で、有用な知見を得ることができた。具体的には、ナノセンシング技術である水晶発振子マイクロバランス法により、固体表面に対する食品汚れの付着ならびに脱離の挙動把握が可能となった。また、仮想的なナノセンシング技術といえる分子動力学法により、食品汚れの付着メカニズムついての原子レベルの知見を得ることができた。平成20年度は、食品汚れとして、乳製品製造装置に付着する汚れの主成分である□-ラクトグロブリンを、また汚れの吸着する固体表面として、食品製造装置の素材として頻用されているステンレスをそれぞれ用い、水溶液中の汚れの吸着量を、QCM装置で精密に測定するための検討を主に行った。これまでにQCM装置を用いて、固体表面への物質の吸着量を測定した研究例は数多く存在するが、実用上きわめて重要であるにもかかわらず、ステンレス表面に対する吸着測定をQCMで行った例はほとんど存在しない。というのも、多くのQCM装置ではステンレスをコーティングした水晶振動子は標準で用意されていないためである。それゆえステンレス表面に対する食品汚れの吸着に関する詳細な検討は遅れていた。そこで、今年度ではステンレス表面を有する水晶振動子を特注製作し、実際にQCM装置を用いて吸着挙動を精密に測定するための検討を行った。ステンレス表面に対する実測例が絶対的に少ない手探り状態の中で、表面の予備洗浄法、水晶振動子の固定方法、試料の添加方法など事細かな手順に至るまで、かなりの試行錯誤を費やしたが、最終的にはステンレス表面に対するβ-ラクトグロブリンの吸着量を、QCMで再現性よく高精度に測定する実験系の構築に成功した。また、吸着等温線はLangmuir型の式で近似できること、同一条件での吸着量がこれまでのdepletion法とほぼ一致するなど、旧来の吸着量測定法であるdepletion法と同等の測定結果が得られ、本年度構築した実験系の正当さが裏付けられ、次年度以降に吸脱着量の経時変化測定を行うための実験的基盤が固まったと考えられる。平成21年度は前年度に引き続き、食品汚れとして、乳製品製造装置に付着する汚れの主成分である〓-ラクトグロブリンを、また汚れの吸着する固体表面として、食品製造装置の素材として頻用されているステンレス鋼をそれぞれ用い、QCM装置により種々の条件下における水溶液中の汚れの吸着および脱着過程の把握を試みた。その結果、以下の進展を得た。(1)タンパク質は不可逆的にステンレス鋼に吸着することを確認した。(2)タンパク質の吸着等温線は見掛け上、可逆的吸着を仮定したLangmuir型の式で近似できることから、タンパク質の吸着の初期段階は可逆的であり、時間経過とともに不可逆的に変化していくことが示唆された。(3)共存物質(クエン酸、リン酸、HEPES)の種類により、飽和吸着量が大きく変化することを確認した。また、Langmuirプロット解析からもとめられる見掛けの吸着係数と飽和吸着量は相関関係が見られた。このことは、吸着係数の値から、飽和吸着量の大小を予測できる可能性を示していると考えられた。(4)昨年度製作した水晶振動子に用いたステンレス鋼は一般食品設備・化学設備に広く用いられているSUS304であったが、より高温で運転される食品製造・加工装置(加熱殺菌装置等)で頻用されるステンレス鋼SUS316Lを用いた水晶振動子の試作に成功した。これにより、SUS316LとSUS304の素材の違いの影響を調べることが可能となった。最終年度である平成22年度は、引き続き食品汚れとして、乳製品製造装置に付着する汚れの主成分であるβ-ラクトグロブリンを、また汚れの吸着する固体表面として、食品製造装置の素材として頻用されているステンレス鋼をそれぞれ用い、QCM装置により種々の条件下における水溶液中の汚れの吸着および脱着過程の把握を試みた。さらに、仮想的かつ究極的なナノセンシング技術とでもいえる分子動力学法により、食品汚れの付着メカニズムについて、原子レベルの解明を試みた。1、リンス洗浄操作を行った際、ステンレス鋼表面に吸着していたβ-ラクトグロブリンが、除去されたと思われる様子をQCM法で観測することができた。また、その際リンス洗浄により、除去されずにステンレス表面にとどまっていると思われるβ-ラクトグロブリンの存在が確認されたことより、ステンレス鋼表面に付着したβ-ラクトグロブリンには、可逆的および不可逆的に付着している2種類のものが存在していることが示唆された。2、前年度までに共存物質の種類により、β-ラクトグロブリンのステンレス鋼表面への吸着量が変化することが実験的に明らかとなっていたが、あらかじめステンレスを特定の共存物質(クエン酸など)で前処理しておくことによっても、同様に吸着量が変化することが確認された。3、2の吸着量変化が生じる機構について、クエン酸前処理場合について、詳細な検討を行った。その結果、ステンレス鋼表面へのクエン酸吸着量とβ-ラクトグロブリン吸着量には、負の相関関係が認められたことより、クエン酸がステンレス表面に吸着することにより、β-ラクトグロブリンの吸着を抑制したことが示唆された。

4、分子動力学法によるβ-ラクトグロブリンの吸着状態のシミュレーションの結果、β-ラクトグロプリンは特定の部位を介して、固体表面に吸着することが示唆された。