hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
中国語圏における漫画文化の研究

今後は台湾漫画研究に取り組む為、今年は台湾にいって、研究者、編集者との交流を行い、台湾漫画の動向と出版状況を調べ、作家や作品のデータ収集を行い、漫画産業のありさまを調査し、日本との出版業界の違いなどについても調べることとするが、その計画を立て、各学生に分担させ、作業を行う予定である。これまでの成果をふまえ、15年度は台湾・中国での漫画批評・評論を各雑誌から集めて翻訳し、本として纏める作業を行うこととする。15年度にまとめた『中国漫画評論』は、現在中国・台湾で発行されている漫画に関する批評・評論文を収集・翻訳したものである。特に新聞の社説などは、今の中国政府が行っている「漫画文化政策」がよくわかるものを選んで翻訳した。これによって、外部からは判り難い、中国の文化政策の特殊性(排他的・独善的・思想教育偏重)の実態が明らかになると思われる。ようやく大衆消費文化が発達し始めた中国では、外国製のボップカルチャー(映画・音楽・マンガ・アニメ・ゲーム)の氾艦が種々の混乱をまねいており、政府がそれへの対応に苦慮しているのが、現状であるが、中でもしばしば槍玉に挙げられるのが日本のマンガである。中国政府は質・量ともに圧倒的な力を誇る日本マンガに対抗するため、漫画文化振興の一大プロジェクトをたちあげるが、結局無残な失敗に終わる。それら一連の動きが読み取れるように配置したが、この点だけをみても日本と中国の文化の質の差を読み取ることができるであろう。『中国漫画評論』ではその他にも、台湾漫画界の専門家による漫画評論(多くは日本漫画に関するもの)を収めるが、それによって、アジアにおける日本の大衆文化(マンガ・ゲーム・アニメ・テレビドラマ・音楽)の評価の高さ、影響の根強さをうかがい知ることができるだろう。台湾では日本文化輸入禁止後も、60年代すでに日本マンガの海賊版は出回っており、青少年に支持されていた。ここで紹介した台湾漫画人(編集者・作家・出版業)の人々はその頃のマンガに魅了されて子供時代を過ごした人であり、マンガへの感性も成熟している。そのため、我々の側にも参考になる優れた評論が多いのが特徴である。こういった外国の漫画評論をまとめて翻訳・出版する試みはわが国ではまだ極めて少なく、アジア関係では皆無といえる。そういう意味でも、これらの成果はこれからの漫画文化研究に資するところが少なくないと自負している。さらに13年から15年にかけて研究代表者が発表した論文は4本、いずれもマンガ研究関係のものである。これらの論文がアジアにおける漫画文化研究の発展に、いくばくかの貢献ができれば幸いである。これからも引き続き、韓国・マレーシアなども視野に入れた研究を続けてゆきたいと計画している。
一過性運動のタイプが心身の状態・認知機能に及ぼす影響

本研究は運動タイプの違いが心身の状態と認知機能に与える影響について検討した.比較した条件は,歩行,レジスタンス運動,オープンスキル運動のバドミントン,座位安静(コントロール)であった.主要な結果は,1)バドミントンはレジスタンス運動よりも快気分を増加させる,2)心理的覚醒度と自律神経系活動はレジスタンス運動による影響を強く受ける,3)バドミントンは歩行とレジスタンスよりも認知機能を向上させる可能性がある,であった.これらの結果より,一過性の複雑なオープンスキル運動は,単純な運動タイプよりも,気分と認知機能に対して効果を有する可能性が示唆された.本研究は,一過性運動のタイプが認知機能,神経系,心理状態の変化におよぼす影響を検討することを目的としている.具体的には,一過性運動のタイプを1歩行,2レジスタンス運動,3バドミントン(他者との運動種目として),4コントロール(座位にてスマートフォンの操作)と設定し,各タイプの運動前後での気分(快気分,覚醒度),神経機能(脳波のα波優勢率,心拍変動によるスペクトル解析),呼気ガス諸量(%VO2max,呼吸数,呼吸交換比),認知機能(ストループ検査による抑制)を比較する.本研究が完遂することにより,運動タイプが心身の状態,認知機能あるいは神経機能に与える影響が明らかとなり,健康づくりのための運動処方に新たな知見を得ることができる.平成27年度の計画では,予定した全被験者(N = 48)の半分を測定する予定であった.結果として,予想よりも多い30名の実験を終えることができた.また,計画では運動前後の安静時脳波を測定項目としていたが,現状のデータを分析した結果,実験条件に対する鋭敏性が低く,測定項目として不適切であるため,実験途中から測定項目から除外した.現状のデータは,研究仮説を支持する傾向の結果が得られており,順調に計画を遂行できている.また,順調な進捗状況のため,計画当初にはなかった学会発表(日本体育学会第66回大会.測定評価領域)も行うことができ,実験データの一部を口頭発表として行うことができた.発表内容は同領域から高く評価され,優秀発表を受賞した.平成28年度は引き続き,実験データの収集を行う予定である.平成27年度は,予定した全被験者(N = 48)の半分を測定する予定であったが,結果的に30名の被験者の被験者を測定することができた.また,当初,成果報告の予定はなかったが,データ収集が順調であったことから,結果の一部を学会発表として報告することができた.測定項目の一部(安静時脳波)に測定項目としての妥当性が低いという問題があったが,全体として当初の計画以上に進めることができている.本研究は,一過性運動のタイプが認知機能,神経系,心理状態の変化におよぼす影響を検討することを目的としている.具体的には,一過性運動のタイプを1歩行,2レジスタンス運動,3バドミントン(他者と行うレジャー種目として),4コントロール(座位でのスマートフォンの操作)と設定し,各タイプの運動前後での気分(快気分,覚醒度),神経機能(心拍変動),呼気ガス諸量(%VO2max,呼吸数,呼吸交換比),認知機能(ストループ課題による情報処理速度と抑制機能)を比較する.本研究が完遂することにより,運動タイプが心身の状態,認知機能あるいは神経機能に与える影響が明らかとなり,健康づくりのための運動処方に新たな知見をもたらすことができる.平成28年度の計画では,予定していた全被験者(N = 48)の測定を完了させることであった.実験遂行中に機器の故障というトラブルがあったものの,予定していたスケジュールよりも早く全ての実験を終えることができた.現在は,主要なデータ分析も終了し,学会発表および学術論文での報告を準備中である.また,順調に計画が進んでいるため,当初の予定にはなかった学会発表(日本体育測定評価学会第16回大会)も行うことができ,実験データの一部を口頭発表として報告することができた.また,実験データの主要な部分について, The 2017American College of Sports Medicine (ACSM)annual meetingの学会発表に投稿し,受理され,5月31日に発表予定である.平成29年度は,より多くの国内外の学会および学術誌で成果報告を行う予定である.平成28年度は,全被験者(N = 48)の測定を完了する予定であった.結果として,全ての測定(全240実験)を完了させることができ,データ処理を予定よりも早く順調に進めることができた.そのため,主要な結果については,国際学会で発表することが決まり(査読制度あり),学術団体への論文投稿も順調に進んでいる.以上,全体として当初の計画以上に順調に進めることができている.本研究は,一過性運動のタイプが認知機能,神経系,心理状態の変化におよぼす影響を検討することを目的とした.具体的には,一過性運動のタイプを1歩行,2レジスタンス運動,3バドミントン(他者と行うレジャー種目として),4コントロール(座位安静)と設定し,各タイプの運動前後での気分(快気分,覚醒度),神経機能(心拍変動),呼気ガス諸量(%VO2max,呼吸数,呼吸交換比),認知機能(ストループ課題による情報処理速度と抑制)を比較した.運動タイプが心身の状態,認知機能あるいは神経機能に与える影響が明らかとなれば,健康づくりのための運動処方に重要な知見を提供できる.得られた研究成果は以下の通りである.成果1)レジャースポーツとして実施したバドミントンは,コントロール(座位安静)よりも有意に気分と認知機能を向上させる,成果2)レジスタンス運動の気分に対する効果は他の運動タイプより小さい,成果

3)運動後の自律神経系の活動(心拍変動)は,安静時と異なり,認知機能の変化と関連しない.最終年度である平成29年度の計画では,国内外の学会(論文・発表)で成果報告を行うことを目的とし,国内外の学会大会で発表を行い,学術誌への投稿準備を行う予定であった.これまでに本研究の成果は,国内学会発表5回,国際学会発表1回で報告され,国内学会発表の1つは日本体育学会第66回大会測定評価領域において「優秀発表」を受賞した.また,学術誌への投稿は,1編を投稿し,審査中(1回目の査読結果は「修正再審査」.現在revise中)である.また,平成30年5月時点で別の投稿論文1編を投稿する予定である.本研究は運動タイプの違いが心身の状態と認知機能に与える影響について検討した.比較した条件は,歩行,レジスタンス運動,オープンスキル運動のバドミントン,座位安静(コントロール)であった.主要な結果は,1)バドミントンはレジスタンス運動よりも快気分を増加させる,2)心理的覚醒度と自律神経系活動はレジスタンス運動による影響を強く受ける,3)バドミントンは歩行とレジスタンスよりも認知機能を向上させる可能性がある,であった.これらの結果より,一過性の複雑なオープンスキル運動は,単純な運動タイプよりも,気分と認知機能に対して効果を有する可能性が示唆された.今後は計画通りデータ収集,分析を進めていく予定である.今後は計画通り,学会発表と論文投稿により成果を報告する予定である.体育測定評価,スポーツ心理学次年度使用額がプラス(9.941円)になった主な理由は,計画当初よりも1実験あたりの験者(測定者)が少数でデータ収集可能であったこと,多くの被験者が謝金の受け取りを辞退したことである.また,申請金額から減額されたことにより,測定機器の一部(心拍変動計)の購入を見送った点も理由の一つである.次年度使用額がプラス(34,081円)となった主な理由は,前年度に当初の計画よりも多くの実験を進めることができ,本年度分の実験数が計画よりも減少したことである.また,計画当初よりも1実験あたりの験者(測定者)が少数でデータ収集可能であったこと,多くの被験者が謝金の受取を辞退したことである.当初の計画から大きな変更は予定していない.今後は,次年度使用金額分を考慮しつつ,計画通り進めていく予定である.当初の計画から大きな変更は予定していない.ただし,研究の進捗状況が良好なため,計画より多くの成果報告(学会発表,論文投稿)ができる可能性がある.次年度は,次年度使用金額分を考慮しつつ,計画通りに進めて行く予定である.
PAF受容体トランスジェニックマウスを用いた気管支喘息発症メカニズムの解明

PAFR-Tgマウスを交配させ得られたマウスを生後3週目にゲノム解析し、PAFR-Tgマウスか否かを判別した。PAFR-Tgマウスのlitter mateで、PAF受容体遺伝子発現が正常であるものをコントロールとして実験に使用した。PAFR-Tgマウス及びコントロールマウスに、PAFをiv投与し生理学的指標を比較検討したところ、PAFR-Tgマウスのみにおいて、著明な気道収縮を認めた。また両群にメサコリン(MCh)の吸入投与を行い、PAF受容体遺伝子過剰発現と気道過敏性との関係について検討したところ、PAFR-Tgマウスにおいて気道過敏性亢進を認めた。このPAFR-TgマウスにおけるPAFまたはMCh誘発性気道収縮は、ロイコトリエンD4及びトロンボキサン阻害薬の前処置投与により、有意に抑制された。PAFR-Tgマウスにおいて、気道、心筋、大血管系に著明なPAF受容体遺伝子過剰発現を認めた。(EMBO J 16:133-142、1997)PAFR-Tgマウスは、気管支喘息の動物モデルとなり得る可能性があり、本研究の成果は、気管支喘息発症の病態解明に寄与をなすものと考えられる。
高性能複合材料の斬新成形技術に関する研究

本研究ではCFRPおよびCFRTPのジュール加熱による成形を試みた。1.炭素繊維/エポキシ樹脂プリプレグを用いたCFRPのジュール加熱成形を現有の簡易オートクレーブを用いて行った。板厚方向の通電は技術的に極めて難しいものであった。長手方向の通電は相対的に成形が容易で、通常のオートクレーブ成形板の90%以上の性能のものが成形できた。成果はAdvanced Composite Materials誌Vol.3,No.2,pp.153-161に掲載された。2.本補助金により試作したCFRTP成形装置を用い、炭素繊維織物/ナイロン樹脂プリプレグを用いたCFRTPの成形を試みた。成形は、(1)ロールを成形温度に加熱し、連続成形を行うものと、(2)プリプレグに直接通電し、ジュール加熱により成形するものの2種類を行った。(1)の方法では、幅25mm、長さ100mmといった小さいものではあるが、プリプレグ210層の積層板の連続成形ができるようになった。ただし、現有の成形装置では、加圧のコントロールができず、また材料の最適送り速度の確定には至っていないなど、今後さらに検討を要する課題も残されている。(2)の方法では、板厚方向への通電と、幅方向への通電を試みたが、板厚方向の通電は技術的に極めて困難であった。幅方向の通電は、試作したCFRTP成形装置がその目的に作られておらず、プリプレグのセットに工夫を要したが、通電自体は比較的容易であった。以上の成形板をショートビーム法により層間せん断強さ試験を行った。結果は、ホットプレスで正常に作られたものよりは劣り、改良の余地が残されている。本年度の研究成果は以下のとおりである。(1)現有の簡易オートクレーブに若千の改造を行い、CFRPのジュール加熱成形ができるようにした。既存の装置は、加熱したアルミ板に成形材料であるプレプレグ(繊維に樹脂を合浸させた薄いシート)を密着させ、熱伝導により加熱させる方法であったが、カーボンプリプレグに直接通電し、ジュール熱を発生させるようにした。(2)炭素繊維およびそのプリプレグの電気抵抗を測定し、ジュール加熱成形の可能性を検討した。(3)熱硬化性のCFRP(T300/エポキシ)の成形を行い、成形品の評価試験を行った。成形にあたっては、プリプレグと導線の接触抵抗が問題となり、各種結線方法を検討し、最適条件を探した。成形品については、電気容量の関係で、50mm×150mm程度の大きさのものしかできていない。またこのジュール加熱のためには、炭素繊維の電気抵抗はやや小さすぎ、瞬時に発熱するため、電源のon-off装置にかなり無理がきた。成形品の評価は曲げ試験によって行ったが、まだ特性は安定していない。しかし良好な成形品はオートクレーブ成形品に比べ、ヤング率で97120%、強さで7890%であった。まだ不十分ではあるが、CFRPのジュール加熱成形の可能性は一応見出されたと考える。成果は投稿準備中である。(4)熱可塑性のCFRTPの成形装置の設計を行い、完成した。現在性能試験中で、本格的な実験は来年度になる。熱可塑性のプリプレグは、現在候補を選定中で、一部は発注した。本年度の研究成果の概要は以下のとおりである。(1)現有の簡易オートクレープを用いたCFRP(炭素繊維/エポキシ樹脂)のジュール加熱成形の成果をAdvanced Composite Materials誌に投稿し、受理された。近々刊行の予定である。

(2)昨年度に完成したCFRTP成形装置を用い、炭素繊維織物と熱可塑性樹脂(ナイロン)を用いたCFRTPの成形を試みた。成形は、【.encircled1.】ロールを成形温度に加熱し、連続成形を行うものと、【.encircled2.】プリプレグに直接通電し、ジュール加熱により成形するものの2種類を行った。【.encircled1.】の方法では、幅25mm、長さ100mmといった小さいものではあるが、プリプレグ26層の積層板の連続成形ができるようになった。ただし、現有の成形装置では、加圧のコントロールができず、また材料の最適送り速度の確定には至っていないなど、今後さらに検討を要する課題も残されている。【.encircled2.】の方法では、まずプリプレグ自体がナイロン樹脂で完全に覆われており、そのままでは通電できないことが明らかとなり、これはロールを予加熱することで解決できた。次に電流の制御が十分にできず、ある時点で電流が急激に流れるため、連続成形は現装置のままでは難しいことが明らかになった。そこで、本年度は連続成形を中断し、局所的に接合させるスポット接合を試み、プリプレグ2層では可能となった。成形板の強さ等、力学的な評価は次年度に残されたが、接合面を引きはがし、電子顕微鏡による観察を行った結果では、接合状態は外から熱を加える方式とジュール加熱方式との間に大きな差はなく、定性的ではあるがむしろジュール加熱の方が接合状態はよいと判断された。本年度の研究成果の概要は以下のとおりである。2.一昨年度に完成したCFRTP成形装置を用い、炭素繊維織物と熱可塑性樹脂(ナイロン)を用いたCFRTPの成形を試みた。成形は、(1)ロールを成形温度に加熱し、連続成形を行うものと、(2)プリプレグに直接通電し、ジュール加熱により成形するものの2種類を行った。(1)の方法では、幅25mm、長さ100mmといった小さいものではあるが、プリプレグ210層の積層板の連続成形ができるようになった。(2)の方法では、板厚方向への通電と、幅方向への通電を試みた。板厚方向への通電では、ロールを回転しないで、スポット溶接的な接合は可能であった。また、ロールを回転する連続成形は装置が不十分な点もあり、成功するに至らなかった。幅方向の通電は、試作したCFRTP成形装置がその目的に作られておらず、プリプレグのセットに工夫を要したが、通電自体は比較的容易であった。以上の成形板をショートビーム法により層間せん断強さ試験を行った。結果は、ホットプレスで正常に作られたものよりは劣るが、一応の値が出せた。また、金属顕微鏡により側面の観察を行い、プリプレグ同士の接合状態を観察した。
幼児期の感情理解における「わからない」反応の発達：「表情」と「会話」に着目して

本研究は,幼児期の子どもを対象に,「他者の感情はわからない」ことがわかる発達的変化を検討した。その際,(1)状況からの推測,(2)表情からの推測,(3)日常会話,に着目した。(1)について,5歳ごろより,ある状況では他者の感情は「わからない」という回答を行うこと,(2)について,表情を理解する際は「わからない」という回答が少なくなること,(3)について,子どもがやりとりを行う相手が時期と年齢によって違うので,誰との会話に着目するのかが重要であること,がそれぞれ明らかとなった。これらの知見は,「他者の感情がわからない」認識は推論の手がかりにより異なる発達プロセスを経ることを示唆している。本年度は、1、これまでの研究の論文化、2、予定した研究の実施、3、研究成果の学会発表、の3つの研究成果が得られた。1に関して、申請者の研究の基礎となる「他者感情理解」に関する知見を論文化した。具体的には、幼児が他者感情を推測する際、他者についての情報量によって、他者と認識することに変化があるのかを検討した。その結果、4・5歳段階から具体的な他者(友達)の感情を認識し、5・6歳段階から一般的な他者(架空の他者)の感情を認識し出すことが示唆された。また、指さしといった行為による回答と、言語による回答の間にも発達的な変化が見られた。この知見は「心理科学」に掲載された。2に関して、申請した研究計画のうちの1つである「表情」に関する実験を実施した。3歳6歳の子どもを対象に、様々な表情をカメラの前で作ってもらった。また、成人および自分の表情についての理解も検討した。データ解析を行い、現在論文化の作業を行っている。3に関して、申請者の研究と関連する「他者感情理解における「わからない」反応」に関する研究知見を学会にて発表した。他者についての情報量を変化させた場合、他者感情推測において「わからない」反応が変化するのか、また反応時間といった非言語指標において不確実性を認識した反応を示すのか、を検討した。その結果、5・6歳段階より、言語・非言語指標の両方で他者感情推測における不確実性を認識した反応を示していた。この知見は「日本発達心理学会第28回大会」にて発表した。これまでの研究を論文化し、かつ申請した研究の実施が行えた。実施した研究も論文化の作業が進んでおり、投稿できる状態になりつつある。また、29年度に計画している研究についても、研究器具が準備されており、研究実施が可能な状態にある。以上の理由から、予定している通りに研究が進んでいる状況であると言える。本年度は,以下の4つの研究成果が得られた。(1)他者の不確実性に関して暗黙的に認識する水準について検討した。具体的には,36歳児を対象に,他者感情の「わからなさ」を言語的に説明できるか,および他者感情推測における反応時間を検討した。その結果,明示的・暗黙的水準の両方で他者の不確実性を認識するのは6歳ごろからであることが示唆された。(2)表情理解における「わからない」反応についての知見を得た。具体的には,36歳児を対象に,自己と他者の表情理解を行う課題を行った。その結果,いずれの年齢群でも,自己・他者にかかわらず,「わからない」反応を行うことはほとんどないことが示された。この知見は,日本発達心理学会で発表した。(3)幼児期の内的感情を示さない表情表現の発達についての知見を得た。具体的には,36歳児を対象に,「変な顔」の表現を検討した。その結果,幼児期の子どもは目や口の部分を用いて「変な顔」を表現すること,3・4歳児よりも5・6歳児のほうが,女児よりも男児のほうが,初対面よりも顔見知りのほうが,それぞれ「変な顔」をより表現することが示唆された。この知見はBPS Developmental Annual Conferenceおよび日本発達心理学会で発表した。(4)子どもの会話での「わからない」反応を検討する基礎データとして,子ども同士のやりとりの実態を調査した。3歳・4歳・5歳クラスを5月7月の3カ月間観察し,子どもが誰とやりとりを行っているのかを検討した。その結果,5月期よりも7月期のほうが子ども同士のやりとりが多くなること,3歳ごろは「先生」と,45歳ごろにかけて「友だち」とやりとりを行うようになること,45歳にかけて異性の「友だち」とやりとりすることが少なくなること,が示唆された。今後の研究として、1、28年度に行った研究の論文化、2、29年度に計画している観察研究の実施、の2つを行う予定である。

1に関しては8月までに行う予定である。2に関しては、8月までに研究協力園と打ち合わせをし、89月にかけて順次データ収集を行っていく予定である。29年度が最終年度であるため、記入しない。発達心理学29年度が最終年度であるため、記入しない。
医薬価値に優れた骨形成促進人工ペプチドの創製とその骨代謝疾患治療への展開

前年度に、TNFαとRANKLに対して、数億種類もの多様性を有するファージペプチドライブラリを構築し、その濃縮方法や検出方法を設定した。当該年度は、TNFαやRANKLの受容体領域を模倣したペプチド(W9、OP3-4)を鋳型とし、これらと比較して結合力の向上した候補クローン探索した。W9、OP3-4を鋳型としたペプチドライブラリ提示ファージを約2.0 x 10 13 cfuずつ混合したライブラリを用いた。ファージは、非特異的な結合を示すことが多いため、タンパク質非固相化チューブを用いネガティブセレクションを行った。次に、その上清液を、ビオチン化TNFα、RANKL(100 pmol)を予めビーズにコーティングしたチューブに加え、結合させた。その後、ビーズに結合しないファージを洗浄し、結合ファージを回収する操作を繰り返し、TNFα、RANKLと結合するペプチド提示ファージを濃縮した。鋳型ペプチドと比べ結合力の増強したペプチド提示ファージを絞り込むために、培養上清中のファージを用いELISAを行った。その結果、鋳型ペプチドと比較し結合力が増強したと考えられるペプチド提示ファージを各々8種類同定した。本結果は、ファージ産生量が個々のサンプルにより異なる可能性が考えられたため、次に、絞り込んだクローンのファージ量を揃えELISAを行った。各ファージを精製し1x10 10 cfuに合わせ、TNFα、RANKL固相化プレート、および非特異的な結合を評価する目的でherceptin固相化プレートを用いた。その結果、herceptinと結合せず、鋳型ペプチドと比べ結合性が向上した候補ペプチド提示ファージを数種類同定した。また、その結合性の上昇効率は、最も高いもので約10倍であった。以上、本申請研究では、鋳型ペプチドと比較しTNFαやRANKLに対する結合性が向上した候補クローンを同定すると共に、低親和性であるペプチドを提示したファージライブラリから高親和性の候補クローンを探索するための基盤情報を収集した。27年度が最終年度であるため、記入しない。本申請課題の目的は、重度の骨粗鬆症など、骨量減少を伴う難治性骨疾患に対する新たな骨形成促進薬を開発することである。本年度は、ファージペプチドライブラリ構築後に親和性の向上したクローンを検出するための条件設定を目的に、鋳型であるW9・OP3-4提示ファージを用い各種条件を評価した。また、W9・OP3-4の一部の配列に対して網羅的に変異を導入し、数億種類もの多様性を有するファージペプチドライブラリの構築も試みた。まず、骨形成のシグナル伝達に関与する破骨細胞分化因子RANKLに結合性を示すペプチド(W9・OP3-4)を提示したファージを作製し、RANKLをプレートに直接固相化した際に、ファージを検出できるかをELISAにより評価した。その結果、ファージの検出が認められなかったことから、次に、RANKLをビオチン化して、ストレプトアビジンプレートへ間接的に固相化し同様にELISAにより評価した。その結果、ファージが検出できたことから、候補クローンの探索に向けた条件設定が確立したと考えられた。そこで次に、RANKLに対して親和性の向上したペプチドを探索するために、鋳型ペプチドの配列のうち、どの部位に変異を導入するかについてライブラリのデザインを試みた。過去の点突然変異法による先行研究や、鋳型ペプチドの基となった受容体タンパク質とRANKLとの複合体構造による情報から、更なる活性増強の余地が残されていると考えられる残基部位3-7アミノ酸に対し網羅的な変異を導入したライブラリをデザインした。各遺伝子をコードしたファージミドベクターを大腸菌(TG1)に形質転換しモノクローン化しライブラリサイズを評価したところ、数億種類のサイズであることが確認された。また、シークエンス解析の結果、塩基配列も異なっていたことから、数億種類の多様性を有するファージペプチドライブラリを構築できたことが考えられた。各ファージを精製し1x10 10 cfuに合わせ、TNFα、RANKL固相化

プレート、および非特異的な結合を評価する目的でherceptin固相化プレートを用いた。その結果、herceptinと結合せず、鋳型ペプチドと比べ結合性が向上した候補ペプチド提示ファージを数種類同定した。また、その結合性の上昇効率は、最も高いもので約10倍であった。以上、本申請研究では、鋳型ペプチドと比較しTNFαやRANKLに対する結合性が向上した候補クローンを同定すると共に、低親和性であるペプチドを提示したファージライブラリから高親和性の候補クローンを探索するための基盤情報を収集した。ファージペプチドライブラリ構築後に、RANKLに対して親和性の向上した候補クローンを同定する際、ペプチド提示ファージの検出が必要である。これまで我々は、抗体やタンパク質を提示させたファージライブラリから、目的のタンパク質に対して高親和性のクローンを単離してきた実績を有している。しかしながら、ペプチドは、一般的に低親和性であることから、RANKLに対する親和性が向上していたとしても、その強さが十分でないために、結合したとしても検出が困難な可能性が考えられる。そこでまずは、鋳型ペプチド提示ファージを用い、ELISAでの検出ができるかを評価したところ、ファージの検出は認められなかった。プレートや膜に固定化されたタンパク質の中には、物理的な影響を受けて立体構造が変化するものがあることが知られている。上記ELISAは、従来までと同様に、タンパク質をプレートへ直接固相化して行っていたことから、RANKLの配列の内、ペプチドと相互作用する部分に影響が生じた可能性が考えられた。そこで、RANKLを間接的に固相化した結果、ペプチド提示ファージとRANKLとの結合を検出できるようになり、候補クローンの探索に向けたペプチド提示ファージの条件設定を確立することができた。従って、本年度予定していたファージペプチドライブラリを用いてのスクリーニングまでは至らなかったものの、候補ペプチド提示ファージの検出条件を設定し、以降の検討を進めるための用意は整ったことから、本年度は、予定内容のうち、おおむね達成できたと考えている。27年度が最終年度であるため、記入しない。本年度は、ファージペプチドライブラリの構築、および、ペプチド提示ファージの検出条件の設定ができたことから、次年度では、RANKLに対して親和性の向上したペプチドのスクリーニングを行う。ファージELISAにより鋳型ペプチドと比較して吸光度の高い候補クローンを見出し配列の解析をした後、ペプチドを合成するとともに、合成の間に、ペプチドの安定性向上を目的としたFc領域融合ペプチドの作製を進め、RANKLとの親和性をELISAやBiacore等により精査していく。また、鋳型ペプチドと比較して親和性の向上した候補ペプチドに関しては、マウス由来前骨芽細胞や骨芽細胞株(MC3T3-E1細胞など)の分化・成熟作用(骨形成の評価)を指標とした生物活性評価を行い、骨再生ペプチドとしての有用性を解析する。本ペプチドの骨形成促進作用は、骨芽細胞上に発現している膜型のRANKLを介したシグナルにより発揮されることが明らかとされており、このシグナルは、RANKL結合ペプチドがオリゴマー化(凝集)することで、活性が強くなることが示唆されている。
ケロイドにおけるCOMPの発現と役割について

ケロイドは、正常皮膚細胞と異なり、創傷治癒後にも、COMPとコラーゲンを継続的に細胞外に分泌していることを証明した。TGF-β1により創傷治癒の初期を再現し、ケロイドと正常細胞のCOMPの発現量がほぼ同じであることを示した。これらの結果から、COMPそのものがコラーゲンの生成を促進してはいないと推測し、COMPのmRNAを細胞内に導入してそのmRNAを増加させ、COMPのmRNAが、コラーゲンの生成量を調節すること発見した。本成果は、ケロイド固有の生化学的回路の一部を世界で初めて明らかにした。同一個体からケロイド線維芽細胞(KF)と正常皮膚線維芽細胞(NF)を得、両者のマイクロアレイ解析の結果、KFではcartilage oligomeric matrix protein (COMP)が48.5倍と2番目に多く増加していた。2つの既知の知見、「ケロイド組織では、コラーゲンの不規則で過剰な蓄積が認められる。」「COMPはコラーゲンのfibril formationを促進する」を踏まえ、COMPはケロイド形成に関与すると推測した。そこで、以下の実験を行った。1、皮膚組織内のCOMPの存在を調べるため、免疫組織染色を行った。その結果、ケロイド組織(KT)では15例中10例でCOMPが検出されたが、正常皮膚組織(NT)では6例全例で検出されなかった。2、同一個体由来のKTとNT、KFとNFのペアサンプルを用い、Western Blot法でCOMP量を計測した。COMP量はKT>NTであり、KF>NFであった。培養線維芽細胞のCOMP産生能は、由来組織の性質を継承することを確認した。3、KFにおいて、COMPの抑制がコラーゲン生成を抑制し得るかについて調べた。COMPsiRNAによりCOMP mRNA生成が阻害され、COMPタンパク生成量は減少した。このとき、Western Blot法と免疫細胞蛍光染色でタイプIコラーゲン生成の減少が確認された。また、RT-PCR法によりタイプIコラーゲンのmRNAも減少がみられた。以上より、平成22年度の目標であった(A)ケロイド組織における、COMPのin vivoでの発現の確認、(B)COMPの発現量とコラーゲン合成量の関係、の2点を明らかにすることができた。本研究は、ケロイドにおいてCOMPの減少がコラーゲン生成量を減少させうることを初めて明らかにした点で新規性があり、ケロイドの病態解明に寄与したといえる。ケロイドにおけるCOMPの過剰発現の持続は、正常皮膚ではみられない。そこで、ケロイドにおけるCOMPの過剰発現は、(1)腫瘍的、(2)創傷治癒のover-reaction、あるいは(1)と(2)の両方であるのかを検討した。正常皮膚線維芽細胞(NF)とケロイド線維芽細胞(KF)にTGF-β1(創傷治癒過程のトリガー)を添加し、COMPの生成量をWestern Blot法で調べた。NF、KFともに、TGF-β1添加により、COMP生成量は増加した。H22年度の本研究では、KFでのCOMP mRNAの発現抑制により、コラーゲンタイプI mRNAの生成量が減少した。そこで、COMPの増加が、タイプIコラーゲン生成量を増加させうるかを検討した。細胞外COMPをNFおよびKFに添加したところ、沈着するプロコラーゲンが増加した。次に、COMP mRNA発現プラスミドをNFとKFに導入し、real time PCR法でタイプIコラーゲン(COL1A2)mRNA量を計測した。その結果、NFではCOL1A2 mRNAに変化はなく、KFではCOL1A2 mRNAが48時間後に増加した。以上の結果より、COMPの一時的な発現増加は、正常な創傷治癒の過程であると考えられた。ケロイドにおけるCOMPの過剰発現の持続は、腫瘍的であるといえる。COMP mRNAによるコラーゲンタイプI mRNAの調整は、KFではオンになり、NFではオフになっている。さらに、COMP mRNAの増加に遅れてCOL1A2 mRNAが増加するため、COMP mRNAによるCOL1A2の転写調節は、直接的とは考えにくい。ケロイドと正常皮膚との主要な差異は、COMPの過剰発現を持続させる因子と、COMP mRNAによるCOL1A2 mRNAの転写調節のオン・オフをコントロールする因子であると推測できた。
単光束ICP発光分析における同時バックグラウンド補正

シングルチャンネル型ICP発光分光分析装置においては光束も受光部も一つであるので,バックグラウンド補正はピーク波長での測光値からバックグランド波長における測光値を差し引く二回の測定を必要とした.本研究では従来波長の微少移動に用いられていた石英屈折板を高速矩形波で振動させて,ピークとバックグラウンドの二波長における測光を交互に行う,高速時分割測光方式により,連続噴霧時はもとより微少量の溶液を断続的に噴霧する一滴法測定のような短時間で終ってしまうスパイクシグナルに対してもバックグラウンド補正を可能とした.一滴法ICPシグナルをA/Dコンバーターを通した後,パーソナルコンピューターに取り込み,フロッピーディスクに記憶する,自動トリガー付の高速ディジタルシグナル記録システムを作成した.これにより時分割測定におけるサンプリング周波数がピーク高さ及び面積測定の正確度と再現性に及ぼす影響を検討し,比較的遅い150msおきのサンプリングでも, 99%以上の正確さ, 1%以下の再現性で測定できることを確認した.波長シフト用2mm厚の石英板をガルバノメータースキャナーに載せた高速ビームシフターをその駆動回路と共に作成しICP装置内に組み込み,測定プログラムも同時バックグランド補正用に変更した後,標準溶液を用いて注入液量50, 100及び200μlでの一滴法測定を行い当初の目的どおりの正確さと精度を得た.国立公害研の標準試料の一つであるリョウブ中の鉄とアルミニウムをこの装置を用いて一滴法により定量し,報告値と一致する分析結果を得た.鉄の分析線には近接線もなく補正は要しないが,アルミニウムは共存するカルシウムによるバックグラウンドがありその補正なくしては正しい定量値は得られなかった.シングルチャンネル型ICP発光分光分析装置においては光束も受光部も一つであるので,バックグラウンド補正はピーク波長での測光値からバックグランド波長における測光値を差し引く二回の測定を必要とした.本研究では従来波長の微少移動に用いられていた石英屈折板を高速矩形波で振動させて,ピークとバックグラウンドの二波長における測光を交互に行う,高速時分割測光方式により,連続噴霧時はもとより微少量の溶液を断続的に噴霧する一滴法測定のような短時間で終ってしまうスパイクシグナルに対してもバックグラウンド補正を可能とした.一滴法ICPシグナルをA/Dコンバーターを通した後,パーソナルコンピューターに取り込み,フロッピーディスクに記憶する,自動トリガー付の高速ディジタルシグナル記録システムを作成した.これにより時分割測定におけるサンプリング周波数がピーク高さ及び面積測定の正確度と再現性に及ぼす影響を検討し,比較的遅い150msおきのサンプリングでも, 99%以上の正確さ, 1%以下の再現性で測定できることを確認した.波長シフト用2mm厚の石英板をガルバノメータースキャナーに載せた高速ビームシフターをその駆動回路と共に作成しICP装置内に組み込み,測定プログラムも同時バックグランド補正用に変更した後,標準溶液を用いて注入液量50, 100及び200μlでの一滴法測定を行い当初の目的どおりの正確さと精度を得た.国立公害研の標準試料の一つであるリョウブ中の鉄とアルミニウムをこの装置を用いて一滴法により定量し,報告値と一致する分析結果を得た.鉄の分析線には近接線もなく補正は要しないが,アルミニウムは共存するカルシウムによるバックグラウンドがありその補正なくしては正しい定量値は得られなかった.
音声基本周波数の制御機構における声門下腔共鳴の影響

音声基本周波数は,主として声帯筋と輪状甲状筋の筋収縮によって調節されているが,声門下圧も調節に関与している.単位声門上下圧差あたりの音声基本周波数の変化率(dF/dP)は200Hz付近で最小になり,それより低い周波数でも高い周波数でもdF/dPが大きくなりV字のグラフを形成する.この時dF/dPの最小値が負の値,つまり声門上下圧差が小さくなったにもかかわらずFoが上昇するという現象がみられることがあったが,この原因については声帯筋と輪状甲状筋の調節や声門下圧の影響だけでは説明が困難であった.今回の研究で地声の範囲での周波数制御の変換点における声道の共鳴の影響について検討した.実験方法はシャッターバルブを装着したマウスピースをくわえた状態で持続発声をした場合とシャッターバルブを用いない状態でマイクロフォンに向かって持続発声をした場合で第1フォルマント周波数がどのように変化するかを検討した.その結果,マイクロフォンでの第1ホルマント周波数が700Hz付近であったのに対し,シャッターバルブ装着時の第1ホルマント周波数は200Hz付近にあった.シャッターバルブ装着時の第1ホルマント周波数は200Hz付近にあり,dF/dPが最小となる周波数と近似していた.また,声道の長さを17cmとし,シャッターバルブを装着した状態での声道を40cmとして単一断面積音響管での第1ホルマント周波数の理論値を計算するとそれぞれ500Hz,218Hzとなる.以上よりV字の谷にあたる周波数域では声道の共鳴が声帯振動に影響を及ぼしている可能性がある.音声基本周波数は,主として声帯筋と輪状甲状筋の筋収縮および声門下圧によって調節されているが,本研究では地声の範囲での周波数制御の変換点における声道の共鳴の影響を検討する事を目的としている.実験方法は被検者にシャッターバルブを装着したマウスピース内に持続発声を行ってもらい,発声の途中で急速にシャッターバルブを開閉している.この時得られた音声基本周波数,声門上下圧差から単位声門上下圧差あたりの音声基本周波数の変化率(dF/dP)を計測する.dF/dPは200Hz付近で最小になり,それより低い周波数でも高い周波数でもdF/dPが大きくなりV字のグラフを形成する.本年度の研究では,声帯振動に声道の共鳴特性が影響するとの考えからマウスピースの長さを変化させることにより,声道の共鳴の影響を検討した.その結果,地声の範囲内でdF/dPの最小値がマウスピースを延長することにより低い周波数側へ移動することが分かってきた.V字の谷は声道の第1フォルマント周波数に強く影響されると考えられる.現在第1フォルマント周波数の解析を行っているところであるが,シャッターバルブの開閉の前後で第1フォルマント周波数は変化し,シャッターバルブの開放時に比べ閉鎖時の方が第1フォルマント周波数は上昇することがわかった.dF/dPの最小値が負の値をとることがあり,これは声帯筋と輪状甲状筋の調節や声門下圧の影響だけでは説明が困難であった.声道の共鳴特性が声帯振動に影響を与えるためではないかと考えている.音声基本周波数は,主として声帯筋と輪状甲状筋の筋収縮によって調節されているが,声門下圧も調節に関与している.単位声門上下圧差あたりの音声基本周波数の変化率(dF/dP)は200Hz付近で最小になり,それより低い周波数でも高い周波数でもdF/dPが大きくなりV字のグラフを形成する.この時dF/dPの最小値が負の値,つまり声門上下圧差が小さくなったにもかかわらずFoが上昇するという現象がみられることがあったが,この原因については声帯筋と輪状甲状筋の調節や声門下圧の影響だけでは説明が困難であった.今回の研究で地声の範囲での周波数制御の変換点における声道の共鳴の影響について検討した.実験方法はシャッターバルブを装着したマウスピースをくわえた状態で持続発声をした場合とシャッターバルブを用いない状態でマイクロフォンに向かって持続発声をした場合で第1フォルマント周波数がどのように変化するかを検討した.その結果,マイクロフォンでの第1ホルマント周波数が700Hz付近であったのに対し,シャッターバルブ装着時の第1ホルマント周波数は200Hz付近にあった.シャッターバルブ装着時の第1ホルマント周波数は200Hz付近にあり,dF/dPが最小となる周波数と近似していた.また,声道の長さを17cmとし,シャッターバルブを装着した状態での声道を40cmとして単一断面積音響管での第1ホルマント周波数の理論値を計算するとそれぞれ500Hz,218Hzとなる.以上よりV字の谷にあたる周波数域では声道の共鳴が声帯振動に影響を及ぼしている可能性がある.
地球磁場逆転過程の記録媒体を大量発見する方法

昨年度までの研究で、「亀ヶ岡の火山噴出には地磁気エクスカーションが記録されている」と結論はしたので、エクスカーション時の地球磁場変動の詳細を求めることを今年度の研究目的とした。(A)調査・岩石採集:2008年度に岩石試料を求めた標高90mのNM35-1層準の下部から海面までの溶岩層の9層と、標高150mでやや離れた地点の溶岩層(NM50)について、古地磁気研究のために試料採取をおこなった。(B)古地磁気学:溶岩層の10層準について熱消磁と交流消磁を行ない、岩石の残留磁化を測定した。海抜0mのNM41,NM44は偏角=170度、伏角=-35度の逆帯磁を示した。標高20mのNM47でも偏角=170度、伏角=-35度の逆帯磁を示し、亀ヶ丘の最下郎は安定した逆磁極期であることがわかった。標高150mのNM50では、偏角=110度、伏角=38度と正帯磁であるものの、標高90mの溶岩層と同様の異常な磁化方向を求めることができた。亀ヶ丘の中腹部は、エクスカーションの時期にあたることがわかった。(C)過去3年間の古地磁気学と年代学から、亀ヶ丘の連続溶岩に記録されたエクスカーションを次のようにまとめることができる。[あ]6.5Maころのエクスカーションである。[い]8層準の溶岩層に、偏角=110度、伏角=38度から偏角=21度、伏角=77度の方向を示す異常な磁場変動を示した。[う]磁場方向から磁極を求めると、エクスカーションの期間、磁極は経度310度上を移動している。[え]亀ヶ丘のクスカーションの間の磁極移動経路は、従来世界の堆積物に記録されているエクスカーションの経路と一致する。(D)この研究から、成層火山を対象として古地磁気学と年代学の研究を行えば、エクスカーションの記録を手に入れることができると、結論することができた。野間岳周辺から枕崎市に分布する安山岩溶岩層を含む南薩層群について古地磁気学、岩石磁気学、年代学および層序学的検討をおこなった。(1)古地磁気学:前年度までに採取していた南薩層群の最上部層から海水準面までの溶岩層の21層についてについて熱消磁を行ない、岩石の残留磁化を測定した。測定には、神戸大学の超伝導磁力計とスピナー磁力計とを用いた。Upper lavaの層準の磁極は正帯磁、Lower Lavaの層準は逆帯磁を示した。Upper lava層には一層準に、Lower Lava層には7層準において、エクスカーションあるいは地球磁場反転起源の異常な方向を見出した。(2)岩石磁気学:Thellier法によって溶岩の温度がキュリー温度より低下したときの地球磁場を求めるための、基礎実験をおこない、溶岩層の磁気的安定性を検討した。(3)年代測定:南薩層群のUpper lavaの岩石試料NM01、NM02ならびにLower LavaのNM19、NM20の4試料について年代学的研究を行った。これらの岩石試料から鉱物分離をおこない,plagioclaceを分離した。これらの鉱物について,岡山理科大学・自然科学研究所において、Arはガス質量分析計をもちいてKは炎光分析によって測定をおこない、年代を求めた。それぞれ、5.58±0.40Ma、、5.82±0.34Ma、4.83±0.31Ma、4.91±0.33Maであることがわかった。層序学ではUpper lavaとLower Lava分類されているにもかかわらずLower Lavaが若い年代を示した。(4)層序学的検討:今回の年代学と古地磁気学の結果をふまえ、野間岳周辺から亀ヶ岡に分布する南薩層群の安山岩溶岩層の噴出の順番を決定する試みをおこない、来年度の調査の計画を立案した。昨年度の結果にもとづき、野間岳と亀ヶ岡の火山噴出時期には1M.Y.の時代の差があることがわかったので、今年度は亀ヶ岡だけに研究の焦点をあて、亀ヶ岡の頂上から海面までに分布する溶岩層を連続に採取し、古地磁気と年代の測定を行うことを研究戦術とした。(A)調査・岩石採集:逆帯磁が観察できる山頂部の溶岩層NM13から道沿いに溶岩層を採取して、海岸の溶岩層NM36まで、全12層準で古地磁気学と年代学のための岩石試料を採取した。(B)古地磁気学:溶岩層の12層準について熱消磁を行ない、岩石の残留磁化を測定した。山頂部NM13と海岸部のNM36は、偏角=160度、伏角=-40度の逆帯磁を示した。中間部のNM32-3層からは、偏角=21度、伏角=77度と正帯磁であるものの異常な方向を見出した。NM32層からNM35-1層の7層準で、異常な磁化方向の連続的な変動を見ることができた。(C)年代測定:NM31,NM32,NM33,NM35,NM36の5層準から採取した岩石試料について年代学的研究を行った。

これらの鉱物について,岡山理科大学・自然科学研究所において、Arはガス質量分析計をもちいてKは炎光分析によって測定をおこない、年代を求めた。それぞれ、6.3±1.2Ma、、6.6±0.94Ma、6.9±0.7Ma、6.8±0.7Ma、6.0±08Maであることがわかった。カリ成分がすくないので、やや大きな誤差があらわれた。しかし、亀ヶ岡の火山噴出は6.5Maころの一連の活動で生成されたことがわかった。(D)議論:今回の年代学と古地磁気学の結果をふまえ、亀ヶ岡の火山噴出には地磁気エクスカーションが記録されていると、結論とした。昨年度までの研究で、「亀ヶ岡の火山噴出には地磁気エクスカーションが記録されている」と結論はしたので、エクスカーション時の地球磁場変動の詳細を求めることを今年度の研究目的とした。(A)調査・岩石採集:2008年度に岩石試料を求めた標高90mのNM35-1層準の下部から海面までの溶岩層の9層と、標高150mでやや離れた地点の溶岩層(NM50)について、古地磁気研究のために試料採取をおこなった。(B)古地磁気学:溶岩層の10層準について熱消磁と交流消磁を行ない、岩石の残留磁化を測定した。海抜0mのNM41,NM44は偏角=170度、伏角=-35度の逆帯磁を示した。標高20mのNM47でも偏角=170度、伏角=-35度の逆帯磁を示し、亀ヶ丘の最下郎は安定した逆磁極期であることがわかった。標高150mのNM50では、偏角=110度、伏角=38度と正帯磁であるものの、標高90mの溶岩層と同様の異常な磁化方向を求めることができた。亀ヶ丘の中腹部は、エクスカーションの時期にあたることがわかった。(C)過去3年間の古地磁気学と年代学から、亀ヶ丘の連続溶岩に記録されたエクスカーションを次のようにまとめることができる。[あ]6.5Maころのエクスカーションである。[い]8層準の溶岩層に、偏角=110度、伏角=38度から偏角=21度、伏角=77度の方向を示す異常な磁場変動を示した。[う]磁場方向から磁極を求めると、エクスカーションの期間、磁極は経度310度上を移動している。[え]亀ヶ丘のクスカーションの間の磁極移動経路は、従来世界の堆積物に記録されているエクスカーションの経路と一致する。(D)この研究から、成層火山を対象として古地磁気学と年代学の研究を行えば、エクスカーションの記録を手に入れることができると、結論することができた。
各種の直交関数系に関係した調和解析

本年度、研究課題名“各種の直交関数系に関係した調和解析"で行った研究によって得られた新たな知見は次の通りである。
鎖状および環状オリゴ糖の不斉認識

糖は自然界に最も多く存在する炭化水素であり、かつ不斉中心を豊富に分子内に有しているため、その高度な有効利用が期待される。本研究においてはこのような観点から、糖の不斉を利用したキラル選択的錯形成についての基礎的研究を実施した。その結果、以下のような興味ある現象が見い出された。(1)シクロデキストリン(CDx)および鎖状オリゴ糖は胆汁色素であるビリルビン(BR)と水中においても水素結合性錯体を形成し、この際BRに軸不斉が誘起される。BRはCDxの2級水酸基と水素結合を形成する。(2)トリメチルーβーCDxは、(S)ー1,1'ービー2ーナフト-ルとキラル選択に包接錯体を形成する。βーCDxそのものよりもトリメチルーβーCDxの方が高いキラル選択性を示すことより、かさ高いメチル基の不斉増幅が考えられる。(3)フルクト-スと核酸塩基を有するヌクレオシドは、BRと錯体を形成する際、BRの不斉を誘起する。多くの種類のヌクレオシドを用いた円二色性スペクトルニよる検討から、アデノシンの場合には、7位の窒素と2'あるいは3'位の水酸基が、BRと水素結合性錯直を形成することが、BRの不斉誘導には大切である。(4)2つのナフタレン発色団がメチレンで結ばれたパモン酸は溶液中ではアキラルであるが、γーCDxに包接されると(R)ーヘリックス体が主に系中に存在するようになる。パモン酸ーγーCDx錯体の異常な安定性(K=4100M^<ー1>)は、パモン酸のカルボキシラートアニオンとγーCDxの2級水酸基間の水素結合による。核磁気共鳴による検討から、パモン酸の1つのナフチル基はγーCDx空洞内に包接され、他のナフチル基は、γーCDxの1級水酸基側の空洞へり部に位置することが明らかとなった。これらの結果を基に拡張研究として、グルコリピッドの単分子膜についても研究を実施し、(5)グルコリピッドは単分子膜の水ー空気界面において、他リピッドの例えはカルボキシル基等と水素結合を形成し、分子配例を制御する事が分った。本年度は以下にあげる2つの研究テ-マを取りあげた。1)糖によるビナフチル誘導体の不斉認識。2)糖モデルとしてのヌクレオシドとビリルビン(BR)との不斉錯体。まず1)の研究成果を報告する。ビナフト-ルおよびその誘導体には軸キラリティ-を有するものがあり、不斉誘導触媒として重要である。本研究では1,1'-ビ-2-ナフト-ル、2,2'-ジメトキシ-1,1'-ビナフチル、および1,1'ビナフチル-2,2'-ジイルハイドロゲンホスフェトを選び、シクロデキストリン(CDx)およびパ-メチル化CDxによるこれらビナフト-ル誘導体の不斉認識につき、円二色性スペクトル、蛍光スペクトル等により検討した。

その結果、CDxそのものには不斉認識能は認められないが、CDxのOH基の全てをOCH_3基に変えたパ-メチル化CDxには強い不斉認識能があることを始めて見い出した。おそらく環状オリゴ糖の作る不斉環境がメチル化することにより増幅された結果と推定される。2)のテ-マでは、二糖のモデル化合物としてヌクレオシドを用い、BRとの不斉錯体形成につき、円二色性スペクトルにおける分裂型Cotton効果を観察することにより研究した。BR分子そのものにはキラリティ-はないが、二糖やヌクレオシドと分子錯体を形成すると不斉が誘導されることが明らかとなった。ほとんどのヌクレオシドは(R)-ヘリックスBRと錯体を形成したが、アラビノシド類とは(S)-ヘリックスBRが選択的に錯体を作るという興味深い結果が得られた。分裂型Cotton効果の強さに及ぼすヌクレオシドの構造の影響を調べることにより、N-7位の窒素と2'-OHとが、BRとの不斉錯体生成に重要な役割りをはたしているものと推論された。1)環状および鎖状オリゴ糖とジナフチルメタン類との不斉錯体パモン酸(4,4'ーメチレンビス[3ーヒドロキシー2ーナフタレンカルボン酸])は、2つのナフタレン発色団がメチレンで結合したアキラルな化合物であるが、環状オリゴ糖であるrーシクロデキストリン(rーCDx)に包接されると、(+)→(ー)の極めて強い分裂型Cotton効果に基づくCDスペクトルを与えた。このことは、(R)ーヘリックスパモン酸がrーCDx空洞内で選択的に形成されることを意味する。^1HNMR特にNOESY測定から、ゲスト分子であるパモン酸は、rーCDxの1級水酸基側からその空洞内に包接され、1つのナフチル基はrーCDxのC_8対称軸に長軸が平行にならび、他のナフチル基は、CDx空洞のヘリ部に位置するという構造をとることが明らかとなった。中性pH領域では、パモン酸のカルボキシラ-トアニオンがrーCDxの2級水酸基と水素結合していることも、他種類のシクロデキストリンを用いた結合定数の比較から明らかとなった。鎖状オリゴ糖とパモン酸との系においては、議論し得るほどの不斉誘導は認められなかった。2)化学修飾シクロデキストリンとビリルビンおよびビナフト-ル類との不斉錯体βーCDxの1級水酸基を水素で置換したヘプタキス(6ーデオキシ)ーβーCDx(HーβーCDx)とーNH^+_3Cl^ー基で置換したNH^+_3ーβーCDxとを合成した。HーβーCDxとビリルビン(BR)との錯体は、βーCDxと同様(ー)→(+)の分裂型Cotton効果を示し、このことより、βーCDxーBRキラル錯体は、CDxの2級水酸基との水素結合が関与することがわかった。一方NH^+_3ーβーCDxとBRとの錯体は逆のCotton効果を示す。ーNH^+_3とBRとの水素結合性錯体が示唆される。一方、1,1'ービナフチルー2,2'ジイルハイドロゲンホスフェ-トとHーβーCDxとの錯体は、βーCDxと同じキラル選択性を示した。