hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
新時代の日米関係を規定する要因の解明-史的展開と国内政治過程からの総合的分析-

まず、昨年度に引き続き、日米関係の諸問題を理解し最先端の研究成果に触れるために、金沢大学にて5月13・14日に外部の専門家を招いての合宿を開催した。報告は(1)服部龍二(中央大学)「ワシントン体制下の国際政治」、(2)高原秀介(京都産業大学)「ウィルソン政権の対日政策」、(3)中西寛(京都大学)「戦後日米関係の概観」、(4)柴山太(愛知学院大学)「ローズベルト大統領の戦後太平洋構想とその崩壊-アジアでの冷戦の起源と関連して」であった。各報告について報告者による討論と全体での討論を行った結果、国際環境や戦前・戦後の通史的観点から日米関係について、より理解を深めることができた。その後、150年の歴史を約10年ごとに区切り、各時期の担当者がそれぞれ調査研究を進めた。なお、日米双方の政策決定を等しく分析するため、どの時期についても原則2人の担当者を充てている。また出版に際し、本科研の正規メンバーに留まらず、日本政治外交史やアメリカ外交史、国際政治学を専門とする研究者の参加を求めることにした。各担当者には、先行研究の成果をふまえつつ、可能なかぎり原資料や二次資料を用いて、担当時期の日本の対米外交、もしくはアメリカの対日政策の特徴を明らかにし、全体として当該時期の日米関係を意義づけることが求められた。その上で、各研究成果を持ち寄っての研究合宿を9月1日3日(戦前編)と1月68日(戦後編)の2回にわたって開催し、それぞれの報告に対して全参加者がさまざまな観点から幅広く議論した。こうした個別研究と研究合宿を通じて、150年の日米関係史を重層的に、かつ広い視野に立って理解できた。現在、各メンバーは原稿の執筆に取りかかっており、来年度中には有斐閣からの刊行が予定されている。本年度は、引き続き、日米関係のそれぞれ国内、そして二国間の歴史(関係史)を研究することを目標とし、とくに、執筆活動および発表の研究会を中心に研究活動を行った。昨年度行った研究や発表に基づき、さらに研究を発展した。まず定期的に研究会を開き、そして二つの合宿を実施した。本年度も引き続き、日米の150年の歴史を約10年ごとに区切り、各時期の担当者がそれぞれ調査研究を行い。また出版に際し、本研究の正規メンバーにとどまらず、日本政治外交史やアメリカ外交し、国際政治学を専門とする研究者の参加を求めることにした。各担当者には、先行研究の成果を踏まえつつ、可能なかぎりにし、全体として当該時期の日米関係を意義づけることが求められた。その上で、各研究成果を持ち寄っての研究合宿を二つ開催し、徹底議論を行なった。一回目の合宿は、7月19-22日、二回目が1月5日-7日であった。いずれの場合、数多くの外部の専門家を招き、二回ともに併せて15以上の報告や議論が行なわれた。各報告について報告者による討論と全体で討論を行った結果、国際環境や戦前・戦後の通史的観点から日米関係について、より理解を深めることができた。現在、研究成果に基づいて、各原稿の完成や、『日米関係の150年間』と仮題の本の刊行にむけて準備を進んでいる。有斐閣出版社より来年度(2008年中)に刊行する予定されている。
フェノバルビタール型薬物代謝酵素誘導機構の新規仮説：モデルとメカニズム検証

本研究では、フェノバルビタールによる薬物代謝酵素誘導の新規仮説の検証を目指している、これまで、モルヒネ抱合活性に関与するマウス肝臓の主要UDP-グルクロン酸転移酵素(Ugt)分子種としてUgt2b36を同定した。モルヒネ抱合活性は、フェノバルビタール誘導性の活性として知られることから、重要な情報と位置づけられる。平成29年度も、フェノバルビタールによる薬物代謝酵素誘導の新規仮説の検証を目指して研究を進めてきた。当初予定の、シトクロムP450欠損マウスの入手が困難な状況に鑑み、マウスの肝臓の全UDP-グルクロン酸転移酵素(Ugt)分子種に関する研究を進めて来た。包括的特性評価により、フェノバルビタール誘導性と考えられているUgt1a1が、抗がん剤イリノテカン活性代謝物のSN-38の抱合に関わる主要な分子種であることを突き止めた。また、平成29年度は、特定のシトクロムP450の欠損細胞を構築することを目指した検討も行っており、平成30年度の構築を目指している。フェノバルビタール誘導性のマウスのUgt分子種の特性評価を既に行うことが出来ている。また、特定のシトクロムP450分子種の欠損細胞の樹立に向けた取り組みも進めていることから。マウス肝臓のUgt分子種の特性評価を継続するとともに、フェノバルビタールによる薬物代謝酵素誘導の新規機構に関与する分子の同定を目指した取り組みを引き続き行って行く。フェノバルビタールによる新規遺伝子発現調節機構を明らかにする一環として、本研究の端緒となった、発現変動のあったUDP-グルクロン酸転移酵素(Ugt)について検討を行った。マウス肝臓に発現するすべてのUgt分子種について、昆虫細胞を用いたバキュロウイルス発現系を用いて、各々の分子種を発現させた。細胞から、さらにミクロゾーム分画を得て、包括的に特性評価を行った。これまで、マウスの肝臓のUgtについては、個々の分子種の機能を詳細に調べた例がない。これは、フェノバルビタールにより発現変動する分子種が分かったとしても、その生体影響を理解するのが難しいことを意味する。発現させたいずれのUgt分子種も4-メチルウムベリフェロン(4-MU)抱合活性を有しており、いずれも機能を保持した形で発現していると考えられた。本研究では、特にUgt2bサブファミリーについて検討を行った。エストラジオールの17-beta位水酸基の抱合活性は、高基質濃度では多くの分子種に認められたが、低基質濃度では、Ugt2b1および2b5のみに著しく高く、これらの酵素が生体内で17beta-ステロイド代謝に関与することが強く示唆された。クロラムフェニコールの抱合活性もこれら二つの分子種に高く、他の分子種には全く認められなかった。一方、エストラジオールの3位水酸基に対する抱合活性は、Ugt1aサブファミリー、特にUgt1a1に活性が高かった。医療麻薬モルヒネの抱合活性については、複数の分子種に認められたものの、マウスの主要なモルヒネ抱合酵素はUgt2b36であることが示唆され、これがヒトUGT2B7の対応分子種であると推定された。フェノバルビタールによる調節を受けるUgtについては、すでに報告があったが、これらの機能はほとんど分かっていなかった。本研究を通じて、マウスのUgtの特性評価が進んでおり、フェノバルビタールによる薬物代謝酵素誘導の新規誘導機構の解明につながると考えられるため。まずは、マウスの全Ugt分子種の機能を評価し、ここまでのデータと併せて、包括的に評価、考察を行う。また、in vitroおよびin vivoでの検討を通して、フェノバルビタールによる薬物代謝酵素誘導の新規機構に関与する因子を同定し、検証していく。平成28年度には、動物舎での感染事故が起こり動物実験に制約があった。その実験の分に係る経費が平成29年度使用額として生じたため。購入した量の細胞培養用の血清で研究が十分実施出来たため。
相互転座ヘテロシステムによる染色体異常と胚の発生能の解析

当研究室で独自に開発した相互転座へテロのチャイニーズハムスターを用いて、その戻し交配の方法(相互転座ヘテロシステム)により染色体異常と胚の発生能との関係を明らかにすることが本研究の目的である。相互転座ヘテロ接合の個体は、その転座に関わる染色体の過不足(部分的なものも含むダイソミーまたはナリソミー)を伴う特定の異常を有する配偶子を形成する。したがって、これらと正常配偶子との受精により特定染色体の異常(トリソミーまたはモノソミー)の胚が得られる。今回用いた11種類の相互転座,T(2;3)1Idr,T(2;3)3Idr,T(1;4)4Idr,T(2;8)5Idr,T(1;3)7Idr,T(1;3)8Idr,T(1;2)9Idr,T(1;4)10Idr,T(1;5)17Idr,T(4;8)18IdrおよびT(1;6)19Idr,をそれぞれ有するチャイニーズハムスターの系統の交配により、Nos.7と9を除くすべての常染色体の部分的または染色体全部のトリソミーとモノソミーの胚が得られる。これらについて、1細胞期から胚盤胞期までの各分割段階の詳細な調査によって発生能について検討した。その結果、No.2染色体の部分モノソミー胚は2細胞期で分割,発生を停止し、淘汰されることが判明したのに続いて、No.1染色体の部分モノソミー胚は8細胞期前後で、またNo.4染色体のモノソミー胚は8細胞期から桑実胚期の間で淘汰されることが分かった。これに対してトリソミー胚の多くは、少くとも着床まで正常と変らない分割,発生をすることが確かめられた。モノソミー胚については異なる相互転座の系統を用いてモノソミー部分の異なる胚の発生能を比較してみた結果、発生停止に関与する染色体部分はかなり限定され、その欠失によって胚の初期発生に決定的な障害を及ぼす遺伝子(群)がその染色体部分に存在することが示唆された。マウスモノソミー胚の最近の知見を合わせると、初期発生に関与する遺伝子(群)は哺乳動物でかなり共通のものであることが考えられる。
小分子を用いたほ乳類の生物時計制御機構の解明

生物時計は睡眠や覚醒などの一日のリズム(概日リズム)を制御しており、その機能障害は睡眠障害や代謝疾患の原因となりうる。近年概日リズムを変える分子(生物時計制御分子)が化合物スクリーニングにより発見され始めており、時計遺伝子の関与する生物現象を理解する分子ツールや様々な疾患の治療薬のリード化合物となることが期待されている。しかしながら現段階において発見された分子は、構造活性相関研究がほとんどなされておらず、作用機序を生物時計制御分子で決定した報告も未だ数例にとどまっている。本研究では、生物時計制御分子の誘導化を行い、小分子によるほ乳類生物時計の制御および機構解明に挑戦した。当研究室では、これまでに新たな生物時計制御分子GO289の標的タンパク質の同定および作用機序の解明を実施し、概日リズムの長周期化だけでなく、がん細胞増殖の抑制効果を示すことを明らかにした。本年度は、GO289の生体内における活性評価を目指した。これまでの研究で見いだしたドラッグライクネスを向上させたGO289誘導体をグラムスケールで合成し、マウスを用いた薬物動態試験を実施した。化合物の投与後に血中濃度を測定したところ、GO289誘導体はマウスの体内に吸収され各臓器へ分布されることが明らかとなった。そのため、GO289誘導体は末梢組織における抗がん剤としての応用が期待される。また時計タンパク質に直接作用する小分子の構造活性相関研究では、高活性分子の創製に成功した。さらに光スイッチ骨格を導入することで光の照射による生物活性の制御を可能とした。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。当研究室では、これまでに新たな生物時計制御分子GO289の構造活性相関研究およびアフィニティプローブへの誘導化、合成したプローブ分子によるアフィニティ精製を行うことで、リン酸化酵素CK2がGO289の標的タンパク質であることを明らかにしている。本年度は、GO289の作用機序の詳細を明らかにするためにGO289とCK2の共結晶化およびX線構造解析を実施し、その結合様式の解明を目指した。本研究は大阪府立大学の木下グループとの共同研究のもと行った。得られた結晶構造からGO289はCK2のATP結合部位に結合することがわかり、その結合様式についても明らかとなった。これまでCK2は生物時計への関与が示唆されるのみであったが、本分子をプローブとして用いることでその機構解明への貢献に期待できる。ほ乳類の生物時計制御分子GO289とその標的タンパク質であるリン酸化酵素CK2の共結晶化およびX線構造解析に取り組んだ。その結果、GO289の結合部位・結合様式の解明に成功した。また得られた結晶構造を参考にし、医薬品リード候補化合物の合成も達成していることから、今年度の研究進歩状況は期待以上のものであったと言える。さらに大阪府立大学の木下グループとの共同研究によりGO289とCK2の共結晶化およびX線構造解析にも成功している。本年度は、GO289の医薬品への応用を志向し、生体内における活性評価を目指した。製薬会社との共同研究のもと、GO289とその誘導体のin vitroにおける薬物動態試験を実施した。さらなる構造活性相関研究から溶解性、代謝安定性を向上させた化合物を見いだし、in vivo試験を行う化合物を決定した。生体内試験の実施により生物時計制御分子の医薬品への応用が飛躍的に発展することが期待される。また、化合物スクリーニングからこれまで報告例が少ない時計タンパク質に直接作用する小分子の同定に成功し、構造活性相関の解明に取り組んだ。計画通りほ乳類の生物時計制御分子GO289のADMEスクリーニングを実施し、生体内試験を行う化合物を決定している。現在、化合物のグラムスケール合成の検討を行っており、準備が整い次第、動物を用いた活性評価を行う予定である。

また新たな生物時計制御分子の同定に成功しており、構造活性相関の解明に達成していることから今年度の研究進歩状況は期待以上のものであったと言える。生物時計は睡眠や覚醒などの一日のリズム(概日リズム)を制御しており、その機能障害は睡眠障害や代謝疾患の原因となりうる。近年概日リズムを変える分子(生物時計制御分子)が化合物スクリーニングにより発見され始めており、時計遺伝子の関与する生物現象を理解する分子ツールや様々な疾患の治療薬のリード化合物となることが期待されている。しかしながら現段階において発見された分子は、構造活性相関研究がほとんどなされておらず、作用機序を生物時計制御分子で決定した報告も未だ数例にとどまっている。本研究では、生物時計制御分子の誘導化を行い、小分子によるほ乳類生物時計の制御および機構解明に挑戦した。当研究室では、これまでに新たな生物時計制御分子GO289の標的タンパク質の同定および作用機序の解明を実施し、概日リズムの長周期化だけでなく、がん細胞増殖の抑制効果を示すことを明らかにした。本年度は、GO289の生体内における活性評価を目指した。これまでの研究で見いだしたドラッグライクネスを向上させたGO289誘導体をグラムスケールで合成し、マウスを用いた薬物動態試験を実施した。化合物の投与後に血中濃度を測定したところ、GO289誘導体はマウスの体内に吸収され各臓器へ分布されることが明らかとなった。そのため、GO289誘導体は末梢組織における抗がん剤としての応用が期待される。また時計タンパク質に直接作用する小分子の構造活性相関研究では、高活性分子の創製に成功した。さらに光スイッチ骨格を導入することで光の照射による生物活性の制御を可能とした。合成した医薬品リード候補化合物の溶解性や代謝安定性の評価を行い、その結果を反映させて再度構造活性相関研究を実施し、よりドラッグライクな構造へと変換する予定である。最終的には動物実験を行い、生体内における化合物の活性評価を実施する。GO289誘導体の生体内における化合物の活性評価を実施する。また新たに見いだした時計タンパク質結合分子の機能解析を行う。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。
現代俳句の有用性：日本の現代俳句研究の国際化と英語教育における活用

初年度は、仏教を含めた日本の思想により詳しい注釈を加える体制を整えた。このチームにより現代俳人のインタビュー動画を作成し、英語字幕を付加して彼らの作品と共にデータベース化し、オンライン版の公開準備を整えた。また、米国にて招待講演を行い文献調査を行った。さらに、文学部の演習型授業「英作文」において抄訳を行い、英語教育用のテキストに向けて整えた。二年目は、3会の招待講演を米国で行った。さらに、書籍を米国で出版し受賞した。最終年度は、研究成果の発表を中心に行った。まず、米国で6件の招待講演を行った。査読付きの論文は2編発表した。書籍に関しては2冊は執筆中、1冊は米国で出版した。6人の翻訳チーム(研究代表者:Richard Gilbert、連携研究者:堀正広、研究協力者:伊東裕起、David Ostman、フランツ幸雲、トレーシー・フランツで活動を行った。2013 7月22日から30日まで、研究代表者が米国バーモント州マールボロ大学図書館にて文献調査を行った。また、コロラド州ボウルダーにて8月3日に、また6日にはコロラド州のThe Shambhala Mountain Center (SMC)で招待講演を行った。また、同地で2日間のワークショップを主催し、俳句の理論について議論を交わした。9日にはナローパ大学にてGiovannina Jobsonと会談し、2014年度8月および9月に招待講演および招待ワークショップの依頼を受けた。8月10日から14日にかけてModern Haiku Pressの編集者と出版計画について会合を行った。また、8月15日にカリフォルニア州ロングビーチで開かれたHaiku NorthAmerica 2013にて招待講演を行った。さらに、3月17日にはカリフォルニア州バーバンクのAmerican School of Martial Artsにて招待講演を行った。現代俳人(川名つぎお、前田弘、池田澄子、大井恒行、森須蘭、高遠朱音)のインタビュー動画を作成し、英語字幕を付加してオンライン版を公開した。平成24年度後期開講の文学部学部3、4年生および修士1年生向けの演習型授業「英作文」において行った、嵐山光三郎の『芭蕉紀行』の抄訳を米国のイリノイ州のKon Nichi Haiku Pressに原稿を入稿し、モノグラフとして出版する準備を整えた。4名(研究代表者:Richard Gilbert、連携研究者:堀正広、研究協力者:伊東裕起およびDavid Ostman)で構成されていた翻訳チームを6名に拡充した。フランツ幸雲(曹洞宗僧侶・アラスカ大学専任講師)を研究協力者に加えることで、仏教を含めた日本の思想により詳しい注釈を加える体制を整えた。また、トレーシー・フランツ(神田外語大言語教育コンサルトセンター(設置:崇城大学)講師)を加えることで、言語学習への知見を加えた。この翻訳チームにより現代俳人(川名つぎお、前田弘、池田澄子、大井恒行、森須蘭、高遠朱音)のインタビュー動画を作成し、英語字幕を付加して彼らの作品と共にデータベース化し、オンライン版の公開準備を整えた。また、北カリフォルニアのHaiku Poets of Northern California (HPNC)シンポジウムにて招待講演を、Southern California Haiku Study Groupにて講演を行った。また、テキサス大学図書館およびカリフォルニア大学図書館で文献調査を行った。また、1編の論文をジャーナルに、1編の論文を論文集World Haiku Anthology on War,Violence and Human Rights Violationに収めた。平成24年度後期開講の文学部学部3、4年生および修士1年生向けの演習型授業「英作文」において嵐山光三郎の『芭蕉紀行』の抄訳を行った。それはイリノイ州のModern Haiku Pressからモノグラフとして出版予定である。平成26年度は、研究成果の発表を中心に行った。書籍は3冊、米国で出版した。うちの1件は、継続的に行ってきた大学院生の英作文講座における成果である。それを検索機能をもつ電子書籍という媒体で出版することによって、教材としても用いることができる形に仕上げた。また、継続的な科研費プロジェクトとして継続発展させている、日本の現代俳句のインタビュー動画の英語・ドイツ語字幕付きアーカイブ化の作業も進めた。昨年度に続き、今年度は新たに2人のインタビュー動画を作成した。異文化研究としての現代俳句(理由)「英作文」の授業にて行った、芭蕉に関する俳文を米国の出版社から出版する際の手続きに、予想以上の労力を費やした。また、6人に拡充した翻訳チームにより、インタビューの字幕翻訳を精査した。この作業にも時間がかかってしまった。そのため、新たな俳人のインタビューを行うことができなかった。(理由)研究成果を国際的な学術的コンテクストにおいて発表することに専念するため、および前回までの科研費プロジェクトにおけるリソース整理を効率よく行うための準備に時間と労力を費やした。

そのため、実践的な英語教育教科書作成のための準備はやや遅れているしかし代替案としてはじめた、俳句のみではなく散文も織り交ぜた、芭蕉に関する俳文を翻訳する試みは新たな知見をもたらしている。一咋年度に引き続き、現在保持する現代俳人のインタビューから言語データを抽出して精査しつつ、動画を作成し公開する。それにより、英語教材の充実を図る。また、今後の研究につなげる新たな視点として、海洋文学としての俳句の文化的コンテクストも重要視する。一咋年度の「英作文」の授業における英語俳句の授業のフィードバックを行い、教材のブラッシュアップを行う。そのブラッシュアップした英語教材を演習型授業「英作文」において引き続き用いる。また研究結果を国際学会で発表を行うほか、論文にして発表する。前年度に引き続き、現代俳人のインタビュー翻訳と動画作成を行い、それより言語データを抽出して精査する。前年度後期の「英作文」の授業における英語俳句の授業のフィードバックを行い、教材のブラッシュバックを行う。ここにおいて、古典俳句に関する現代俳文スタイルの翻訳を織り交ぜる試みがフィードバックされる。また、そのブラッシュアップした英語教材を演習型授業「英作文」において引き続き行う。また、研究結果を国際学会で発表を行うほか、新たに俳人インタビューを行うことも視野にいれている。平成24年度分の人件費・謝金を繰り越しているため、その分の余剰金が発生している。最終年度となる次年度は、英語学習教材の出版を行う。そのための出版費用や学会発表のための研究渡航に予算を多く用いる。繰越分の人件費もこれらの費用に充てることを考えている。当初予定していた人件費・謝金を支出する必要がなくなったうえ、旅費を節約できたため、296,633円の未使用額が生じた。これは、2014年3月に予定している学会発表の旅費および、海外での調査に充てる予定である。
小児悪性固形腫瘍におけるβ-カテニン、および関連遺伝子の発現と意義について

【目的】小児悪性固形腫瘍におけるβ-cateninの関与を明らかにすることを目的とした。【対象】1982年から2004年の当科自験小児悪性固形腫瘍54例(神経芽腫29例、肝芽腫10例、腎芽腫12例、大腸癌1例、胆管癌1例)を対象とした。【方法】免疫組織学的手法を用いβ-cateninタンパクの発現解析を行った。各腫瘍組織のパラフィン包埋ブロックより5μmの切片を薄切りし、抗β-cateninマウスモノクローナル抗体を用いたSAB法による免疫染色を行い、腫瘍細胞の核および細胞質での染色を発現異常として検討した。【結果】神経芽腫症例では29例全例とも腫瘍細胞の核および細胞質いずれにも異常集積を認めなかった。肝芽腫症例では、10例中、核および細胞質に強い染色を認めたものは6例(60%)で、細胞質のみに染色を認めたものは2例だった。腎芽腫症例では12例中3例(15%)に細胞質に集積を認めたが、核内への集積は全例で認められなかった。大腸癌症例、胆管癌症例はいずれも腫瘍細胞の核および細胞質に異常集積を認めなかった。【考察】明らかなβ-catenin発現異常を示したものは肝芽腫のみであった。発現異常を認めた6例の病期は、stage I 1例、stage IIIA 3例、stage IV 2例で、進行症例に多い傾向を示した。今回対象とした肝芽腫10例中、生存例は6例で、そのうち発現異常を認めたものは5例、死亡例は4例で、発現異常を認めたものは1例であり、βカテニン発現異常は腫瘍形成に関与してはいるものの、予後に関連しないことが示唆された。神経芽腫はβ-catenin発現異常と関連が認められなかった。腎芽腫では核内への集積が認められず、発現異常との関連は低いと考えられた。大腸癌症例、胆管癌症例は症例が少なく、今後の検討が必要と考えられた。近年、小児悪性固形腫瘍のうち肝芽腫についてβ-cateninが細胞核内へ異常集積することが報告されていますが、本研究ではその他の小児腫瘍を含め、小児腫瘍におけるβ-cateninの関与を、関連する接着蛋白、Wnt系における周辺遺伝子の発現や異常を含めて追跡することにより明らかにすることを目的とします。β-catenin以外の接着因子(cadherin、α-catenin、γ-catenin)などの発現についてβ-catenin発現傾向と何らかの関連が見出せれば、そのoncogenesis、あるいはbiologyにそれらの因子が関連している可能性が示唆され、また、Wnt系においては、この異常β-cateninが周辺遺伝子であるcyclinD1、c-mycを活性化し、oncogenesisを促進する方向に関与しているとすれば、その発現量は各々の遺伝子がparallelに発現しているのではないかと考えられます。それらを免疫組織学的手法、あるいは分子組織学的手法(DNA解析direct sequencing、real time RT-PCR法によるm-RNA定量など)により明らかにしたいと考えております。現在までに神経芽腫凍結検体75例、腎芽腫8例についてそれぞれDNA抽出、RNA抽出、RNAよりcDNA作成までを終え、β-cateninの定量的RT-PCRを行う準備を行っています。

また、β-cateninの免疫染色についてはパラフィンブロックより未染のプレパラートを作成し、現在、染色の条件設定を行っている途中です。【目的】小児悪性固形腫瘍におけるβ-cateninの関与を明らかにすることを目的とした。【対象】1982年かち2004年の当科自験小児悪性固形腫瘍54例(神経芽腫29例、肝芽腫10例、腎芽腫12例、大腸癌1例、胆管癌1例)を対象とした。【方法】免疫組織学的手法を用いβ-cateninタンバクの発現解析を行った。各腫瘍組織のパラフィン包埋ブロックより5μmの切片を薄切りし、抗β-cateninマウスモノクローナル抗体を用いたSAB法による免疫染色を行い、腫瘍細胞の核および細胞質での染色を発現異常として検討した。【結果】神経芽腫症例では29例全例とも腫瘍細胞の核および細胞質いずれにも異常集積を認めなかった。肝芽腫症例では、10例中、核および細胞質に強い染色を認めたものは6例(60%)で、細胞質のみに染色を認めたものは2例だった。腎芽腫症例では12例中3例(15%)に細胞質に集積を認めたが、核内への集積は全例で認められなかった。大腸癌症例、胆管癌症例はいずれも腫瘍細胞の核および細胞質に異常集積を認めなかった。【考察】明らかなβ-catenin発現異常を示したものは肝芽腫のみであった。発現異常を認めた6例の病期は、stage I 1例、stage IIIA 3例、stage IV 2例で、進行症例に多い傾向を示した。今回対象とした肝芽腫10例中、生存例は6例で、そのうち発現異常を認めたものは5例、死亡例は4例で、発現異常を認めたものは1例であり、βカテニン発現異常は腫瘍形成に関与してはいるものの、予後に関連しないことが示唆された。神経芽腫はβ-catenin発現異常と関連が認められなかった。腎芽腫では核内への集積が認められず、発現異常との関連は低いと考えられた。大腸癌症例、胆管癌症例は症例が少なく、今後の検討が必要と考えられた。
油処理剤の水中散布における噴射条件と分散性能に関する研究

A重油と油処理剤の混合試料を水深3mの水槽の底部から流出させる実験を行い、沈船からの流出油に対する油処理剤の水中散布の分散性能は、油粒の粒径の減少による浮上速度の低下及び拡散量の増加で表現することができた。特に、流出速度と流出ノズルの内径を代表長さとして求めたRe数やWe数と浮上速度の関係、あるいは粘性力係数(We数/Re数)と浮上速度との相関について明らかにした。さらに、浮上する油に対抗して油処理剤を噴射させ、接触率を増すために広口の筒状容器を用い、良好な分散性能を確認した。平成24年度の研究目標は、タンクの設計、製作と油処理剤散布実験データを取得して、油と油処理剤との接触効率を現象面で把握し、油処理剤の分散性能の定義を確立することであった。油処理剤の水中散布に関する実験施設(角型タンク:1辺0.8m、高さ3m、油処理剤散布タンクは現象が可視化できるように3面はガラス張り)を製作し、実験計測のための油処理剤散布水中タンク、油タンク、油処理剤タンクからなる油の挙動計測装置を整備した。実験では、予め種々の割合で油と油処理剤を混合させた試料を作製し、理想的な散布状態として水中に放出した際の挙動を観測した。その結果、分散性能と密接に関連する要素として、高解像度カメラを用いた画像計測データを濃度変位解析及び濃度相関解析によって噴流の拡散面積及び浮上速度を求めた。今後、これらの指標に着目して分散効率の向上を図る手法について開発する予定である。油処理剤を水中散布した場合の分散性能評価指標を明確にするために、物理的及び化学的な観点から分散化した油の粒度分布計測及びガスクロマトグラムによる成分分析を実施し、その分析結果より理想的な分散効率と認められる条件を確認した。また、このような油と油処理剤を理想的な混合状態にするために、撹乱エネルギーを簡易に与えて分散性能を評価するシステムを考案して特許出願した。さらに、油と油処理剤の挙動モデルの開発について、流出油には分散、溶解、蒸発、乳化などの様々な風化現象が発生するが、分散剤は分散、溶解を助長し、分散剤適用の有無で油の移流・拡散の様相は大きく変化する。海中流出油の移流・拡散現象に関するモデル、流出油及び分散剤の混合物に関する風化モデルを調査し、拡散解析過程のメインプロセスを完成させた。平成24年度において、新たに製作した大型油処理剤散布実験水槽を使用して、油と油処理剤の混合試料の噴出後の浮上速度及び拡散面積に着目し、分散効率の指標として詳細な解析を行った。平成25年度は、引き続き高解像度カメラを用いた画像計測データによって浮上速度、油粒径を解析し、その関係を実験的に明らかにした。また、粒度分布分析装置を使用して、ビーカー試験及び水中散布実際で所得したサンプルの粒度分布を計測し浮上速度の推定に応用した。大型油処理剤散布実験装置(0.8m×0.8m×3.0m)を改造して、油と油処理剤の混合割合を変化させた試料(0%、5%、9%、13%、20%)を水中へ噴出後分散化した油粒を捕捉した。油粒径及び浮上速度の解析は、PTV(粒子追跡法)及びPIV(画像相関法)によって実施した。分布形状をRosin-Rammlerの式に当てはめ分布の広がりを表すパラメータの比較、ウェーバー数を含む最大粒径を推定する式から粒径と浮上速度の関連を求めた。また、粒径の推定式における実験定数について、過去の研究者の実験室データ及び実海域データとも比較した。油と油処理剤の挙動モデルの開発については、分散剤は分散、溶解を助長し、分散剤適用の有無で油の移流・拡散の様相は大きく変化する。海中流出油の移流・拡散現象に関するモデル化における界面張力の低下が及ぼす油粒の浮上速度の推定式を提案した。油処理剤水中散布大型タンク(0.8m×0.8m×3m)を用いて、水槽下部に設置したノズル(口径:3種類)からA重油及びA重油ー油処理剤混合試料を水槽の底部から噴出させる実験を実施し、PTV(粒子追跡法)及びPIV(画像相関法)等のビデオ解析手法によって得られた粒子浮上速度と、濃度の異なる油処理剤とA重油の界面張力を計測し、流出速度と流出ノズルの内径を代表長さとして求めたWe(ウェーバー数)、Re(レイノルズ数)、及び粘性力係数(We/Re)との相関を明らかにした。これらの諸係数を用いて、粒径を表現する数式における実験定数を求めた。次に、油処理剤を浮上する油に対抗して噴射させる実験を試みた。油処理剤と油の接触率を向上させるため、4種類の広口円筒状の反応ダクトを製作して水槽中に設置し、油の分散化促進効果の違いを調査した。

その結果、油処理剤と油が反応する部分の体積を縮小することにより、油処理剤と油が接触する頻度が増加し油粒化が進み浮上速度が減少することがわかった。浮上した油粒を水槽上部で採取し、粒度分布計測装置を使用して分析して実際の油粒径及び分布形状を確認した。また、水深1m、直径0.3mの小型の水槽を製作し、ノズル付近のより詳細な挙動を調査した。さらに、模型実験で得られた物理現象を基に、海底から流出する油に対して油処理剤を散布した場合のシミュレーション計算ツールを開発し、東京湾をモデルに沈船等からの流出油への油処理剤散布時の挙動を示した。26年度が最終年度であるため、記入しない。索の動力学船舶海洋構造物の運動海洋汚染防止26年度が最終年度であるため、記入しない。研究1年目の研究については、3面観測ガラス付油処理剤水中散布実験タンクの建造、実験データの取得、解析方法の検討を実施できたので、研究計画通り進んでいると判断できる。特に、油と油処理剤の混合物の濃度変位及び浮上速度を油処理剤の分散性能に関連する主要素と定義して解析を進め成果を得た。(理由)研究2年目の研究については、油処理剤によって分散化した実際の油粒分布の計測を行うことができたとともに、画像解析によっても油粒径と浮上速度の関連を求めることができた。これにより、油と油処理剤の挙動モデルに実験定数を取り入れることができより精度の高いシミュレーション計算が可能となる。今後の研究方策としては、分散性能を表現する指標として初年度に規定した浮上速度及び拡散面積について、分散効率という面で定量的なデータの取得に努める。このために、実験タンクを改良することにより、分散化した油粒径のサンプリングを可能にして、油及び油処理剤の接触効率に絡むこれらの流量を正確に把握して分散効率向上の手法を追究する。また、流出油及び分散剤の混合物に関する風化モデルの構築と試行プログラムを作成する。今後の研究方策としては、油に対する油処理剤の散布条件を種々に変化させて、分散化効率を計測する。この際、浮上速度及び拡散面積を分散化性能の指標とする。また、流出油及び分散剤の混合物に関する風化モデルの構築と挙動プログラムを完成させる。当初の計画よりも実験タンクの製作寸法を小さくしたために予算の余剰が生じた。この〓用はオーバーフロー機能、各種タンクの流量及びゲージ圧の計測などの装備等の実験タンクの改良に充てる。25年度の使用は計画通りで、24年度の水槽及び解析装置の購入余剰金がそのまま残っっている状況である。沈船からの流出油に対する油処理剤の散布を想定した模型を製作する費用に充当する。
気相化学反応による超微粒子生成の評価および制御

近年ハイテクノロジーとの関連で注目を集めている粒径が約0.1μm以下の超微粒子に関して、純度の高い生成物が期待できる気相化学反応による超微粒子の効果的な製造法および粒子生成過程の理論的予測に関連して研究を進めた。実験的には、チタンのアルコキシド(チタンテトライソプロポキシド)蒸気を、約1500°Cまで制御できる5段の管状型反応炉に導入し、酸化チタン粒子の生成を、蒸気の流量、加熱炉の温度および温度勾配、キャリアガスの種類を窒素もしくはヘリウムガスと変えて行ない、つぎの結果を得た。(1)酸化チタンは、球形で比較的よく揃っており、粒径は約0.1μm以下の超微粒子である。(2)蒸気濃度が高くなると、粒子の平均径が大きくなる。(3)反応に、シード粒子を蒸気とともに導入して、シード粒子の成長を調べたところつぎのことがわかった。(1)シード粒子の個数濃度が蒸気の反応により新たな粒子の生成を抑制する最も重要な因子である。(2)蒸気の濃度が低いほど、反応温度が低いほど、新たな粒子の生成が抑制された。一方、理論的には、気相化学反応による超微粒子の生成過程が、反応によるモノマーの発生、発生したモノマーのブラウン凝集による粒子の生成と考え、新しい簡略化反応-凝集モデルを提案した。そして、管内を層流で流れる蒸気の反応による粒子生成を明らかにするために、粒子の生成を考慮した拡散方程式を数値計算した。得られた計算結果を実験結果と比較したところ、両者はよく一致するという興味深い知見が得られた。この結果より、本研究で展開された理論的アプローチは、種々の場での粒子の生成を明らかにするのに有効であるといえる。粒径が0.1ミクロン以下の超微粒子に関して,純度の高い粒子が期待できる気相化学反応法による超微粒子の効果的な製造法および粒子生成過程を理論的に検討した.とくに本研究では,比較的低温で粒子が生成されるチタン金属アルコキシドの高温蒸気の熱分解反応による酸化チタンの微粒子の生成について,つぎのように研究を進めた.まず,実験的には,(1)約1200°Cまで制御できる5段の管状型加熱炉を製作し,炉内の温度分布を測定し,一定,上昇,下降の温度分布など,任意の温度分布に設定した.(2)チタンのアルコキシド蒸気を発生させ,これを電気炉に導入し,混合比,炉温度,炉温度分布,炉内ガス滞留時間などを変え,微粒子の生成実験を行った.(3)発生した微粒子の粒度分布を静電分級器および凝縮核計数器で,ガスの濃度をガスクロマトグラフで,粒子の形状を電子顕微鏡で分析した.一方,理論的には,(1)アルコキシド蒸気の熱分解反応による酸化チタンモノマーの発生,酸化チタンのクラスターおよび微粒子の生成を表わす基礎式をSRC(Simplified Reaction ( oagulation)モデルに基づいて導出し,広範な条件下で電子計算機により数値的に解いた.(2)蒸気モノマー,酸化チタンモノマーおよび粒子濃度の時間的変化が求められた.以上の理論的・実験的考察より以下のことが明らかとなった.(1)粒子の平均径は0.1μm以下で,チタンアルコキシド蒸気の濃度の0.40.6乗,電気炉の温度に比例して大きくなる.(2)また,粒子の一次粒子の平均径は,反応温度とは逆相関になり,滞留時間に依存しない.(3)粒子の分布は対数正規分布で,幾何標準偏差は,ほぼ1.41.6に入る.(4)実験結果の傾向は,理論計算結果でよく説明できた.近年ハイテクノロジーとの関連で注目を集めている粒径が約0.1μm以下の超微粒子に関して、純度の高い生成物が期待できる気相化学反応による超微粒子の効果的な製造法および粒子生成過程の理論的予測に関連して研究を進めた。CVD法による超微粒子の生成法は、高純度の微粒子を得ることができ、反応条件を変化させることで、比較的容易に微粒子を制御できるという特徴を持つ。

とくに、反応ガスとともに外部微粒子、すなわち、シード粒子が存在すると、シード粒子の成長により粒径の揃った粒子が得られたり、またシード粒子に後から反応で生成された物質が覆うことによりコーティング粒子が得られたりする。そこで本年度の研究では、前年度検討したチタンテトライソプロポキシド蒸気の熱分解反応による酸化チタンの超微粒子の生成実験において、シード粒子が存在する場合の粒子生成について、理論的、実験的に検討した。まず、実験的検討においてはは、シード粒子を導入せずに、すなわち、気相化学反応により生じた反応生成物の均一核生成による粒子状物質の粒度分布および粒子個数濃度の変化を、凝縮核計数器および微分型静電分級器によって測定した。つぎに、シード粒子をアルユキシドの蒸気と混合して反応炉に送り、出口での粒子の性状を調べたところ、蒸気濃度が低く、熱分解反応が遅いほど、またシード粒子の濃度が高く、粒径が大きくなるほど、シード粒子の成長が均一核生成を抑制することが明らかとなった。以上の実験結果は、気相化学反応による粒子の生成を化学反応によるモノマーの発生およびモノマーの凝集による粒子への成長と想定し、これを拡散方程式に導入し、これを数値的に解き、シード粒子が存在する場合の粒子生成を求めた。得られた数値計算結果を実験値と比較したところ、実験結果の傾向がよく説明できた。
卵子成熟時に獲得する哺乳類初期胚でのアポトーシス回避機構の解析

卵子形成時には胚発生能が獲得されるが、卵子成熟培養系の向上にはその獲得機構の解明は非常に重要な課題である。既にBDF1雌マウス17日齢由来卵子と24日齢由来卵子を体外成熟させ、体外受精、体外培養を行なうと胚発生能(具体的には胚盤胞形成能)に有意な差があることを見いだしている。そこで、この発生能の差異を利用して、卵子形成時における胚発生能関連遺伝子の検索を行なった。17および24日齢のBDF1雌マウス16匹ずつより得られた体外成熟卵子(それぞれ、538個と531個)より得たRNAからcDNAライブラリを作成し、遺伝子発現パターンの違いをDifferential display法により調べた。17日齢由来卵子と24日齢由来卵子との間でPCRによる増殖量に差があるPCR産物58個を単離し、サンガー法によってPCR産物のDNA配列を直接決定出来たものは15個であった(現在も配列決定を継続中)。その内、既知の配列は8個で、残りは未報告、もしくは未同定配列(配列は決定されているが遺伝子の性質は未知)であった。卵子で発現することが知られているGDF-9のほか、増殖因子のHDGF、細胞分裂関連遺伝子のEg5等が見られた。ただし、現時点では候補を見いだしたに過ぎず、これらの遺伝子が真の差異発現遺伝子かどうかは、今後ノーザン解析やReal-Time PCR等により、正確に定量する必要がある。前年度報告したようにBDF1においてはB6SJLF1に比べ胚発生時のアポトーシスの関与は現れにくいと思われるが、BDF1卵子においてアポトーシス時に働くcaspaseの基質となりうるdynein light chain遺伝子の差異発現が検出され、卵胞成熟にアポトーシス関連遺伝子の発現が関与する可能性が示された点は非常に興味深いと思われる。近交系のC57BL/6マウスを用いて卵子発育における発生能獲得の進行を調べた。生後18および24日齢の雌マウス各32匹より体外成熟で得られた卵核胞崩壊(GVBD)卵子(それぞれ684個、975個)のうち、胚盤胞期に達した胚の比率はそれぞれ2%、12%とともに低く、今後の解析が困難と判断した。そこで体外操作に強い交雑系のB6D2F1マウスの卵子を用い、生後16、17、18および24日齢の雌マウス各12匹より得たGVBD卵子(それぞれ253個、392個、408個、356個)のうち、胚盤胞期に達した胚の比率はそれぞれ3%、9%、50%、69%で、発生能の点で17日齢以前と18日齢、そして24日齢という3群に区分できた。しかし、18日齢と24日齢の差は有為ではあるものの20%程度であり、両者間で遺伝子発現の比較をするのは困難であると考えられたため、発生性に明確な差はあるが卵子収集率には差のない17日齢と24日齢の比較により発生能獲得に関与する遺伝子を検索した。17および24日齢のB6D2F1雌マウス16匹より得られたGVBD卵子(それぞれ、538個と531個)よりRNAを抽出し、遺伝子発現パターンの違いをDifferential display法により調べた。24日齢由来卵子には、17日齢由来卵子には見られないバンドが電気泳動像上に見られ、遺伝子発現の差異が確認できた。マウス卵胞内卵子の発生能獲得過程は系統差が大きく、予備データ収集時に用いたB6SJLF1も含めた解析が必要であると思われる。今後は、B6D2F1とB6SJLF1の2系統を用いて更に解析を進めるべきであろう。次年度では、differential displayで得られた特異的発現遺伝子の同定をsubtraction法も併用して行い、発生能獲得とアポトーシス関連遺伝子の関与を検討する予定である。

前年度報告したようにBDF1においてはB6SJLF1に比べ胚発生時のアポトーシスの関与は現れにくいと思われるが、BDF1卵子においてアポトーシス時に働くcaspaseの基質となりうるdynein light chain遺伝子の差異発現が検出され、卵胞成熟にアポトーシス関連遺伝子の発現が関与する可能性が示された点は非常に興味深いと思われる。
骨肉腫細胞におけるメソトレキセート耐性の機序に関する基礎的研究

本研究の目的は骨肉腫の抗癌剤耐性、特に治療体系の主体となるメソトレキセート(MTX)に対する薬剤耐性の機序を明らかにすることにある。一般的に悪性腫瘍の薬剤耐性としては能動的薬剤排泄機構である細胞膜上のp等蛋白が想定されているが、我々はMTX耐性に限ってはその標的であるdihydrofolate reductase (DHFR)の誘導による細胞内DHFR活性の増加を考えた。用いた細胞株はヒト骨肉腫株NOS-1とマウス骨肉腫株Dunnである。Dunnは高感受性株であった。当初NOS-1を低濃度のMTXに暴露することにより耐性株を作成しようと考えたが300代を越える長期継代培養の結果NOS-1はすでに耐性となっていることが分かった。NOS-1はMTX 5μg/mlでわずかに増殖が抑制されるものの再増殖によりコントロールと変わらない増殖を示した。50μg/mlの高濃度では増殖が抑制され形態的には核の腫大を認め、フローサイトメトリーを用いた核DNA量の測定ではG_2ブロックによりS期細胞の増加を認めた。Dunn骨肉腫細胞はMTX 5μg/mlの濃度で完全に死滅した。それぞれの細胞を回収し、凍結融解と超音波処理により細胞を破壊、細胞抽出液を作成した。この抽出液を分光光度計を用いてヤトロン社製MTX測定キット中のDHFR標準液の酵素活性と比較することにより細胞内DHFR活性を測定した。その結果1回の測定ではNOS-1がDunnの2倍の酵素活性を示したが、再現性に乏しく、また希釈により得られる理論値からも大きくはずれる結果であったので現在再度細胞を抽出しキットも変えて測定中である。またキット内の試薬も再検討している。今後は細胞よりRNAを抽出しPCR法でDHFRのmRNAを増幅し発現量を比較する予定である。また現在細胞内MTX濃度を経時的に測定することで能動的MTX排泄の可能性を検討している。骨肉腫患者ではの30%程度の抗癌剤耐性症例があるといわれているがその機序は明らかにされていない。本研究の目的は骨肉腫科学療法の主要薬剤であるMTXの耐性機序を解明することであり、我々は耐性機序として細胞内のdihydrofolate reductase(DR)活性の誘導を考えた。平成6年度は、ヒト骨肉腫培養細胞株NOS-1でMTX耐性株を作成することを目標とした。方法は細胞株NOS-1に5μg/m1(低濃度)のMTXを持続的に加え続けることによって当初高感受性であったNOS-1を耐性株とするものである。この結果培養初期にはMTX5μg/m1で増殖が抑制されたNOS-1が5μg/m1では増殖が抑制されず、50μg/m1の高濃度でも再増殖が見られるようになった。このMTX添加後の増殖能力の変化はdye exclusion法による生細胞数測定でも、BrdUを用いた比色定量法でも確認された。比色定量法には本科学研究補助金にて購入したマイクロブレートリーダを用いた。MTX耐性細胞として、当初ヒト内分泌細胞癌株であるECC4とECC12を予定していたが、MTX処理によるNOS-1でMTX耐性株が得られたのでこれを用いることにした。次に対照とするMTX高感受性細胞出あるが、我々は培養初期のNOS-1細胞を考えていた。しかし、マウス骨肉腫細胞であるDunn骨

肉腫細胞がNOS-1よりはるかに高い感受性を示すことがわかったのでDunn骨肉腫細胞も対照とすることにした。これまでこれらの細胞に5μg/m1、50μg/m1の濃度でMTXを加え、1、6、12、24、48時間後に細胞を回収し細胞を破壊後、細胞中MTX濃度測定用資料として凍結保存した。現在MTXとDRの測定システムの最終調整に入っている。本研究の目的は骨肉腫の抗癌剤耐性、特に治療体系の主体となるメソトレキセート(MTX)に対する薬剤耐性の機序を明らかにすることにある。一般的に悪性腫瘍の薬剤耐性としては能動的薬剤排泄機構である細胞膜上のp等蛋白が想定されているが、我々はMTX耐性に限ってはその標的であるdihydrofolate reductase(DHFR)の誘導による細胞内DHFR活性の増加を考えた。用いた細胞株はヒト骨肉腫株NOS-1とマウス骨肉腫株Dunnである。Dunnは高感受性株であった。当初NOS-1を低濃度のMTXに暴露することにより耐性株を作成しようと考えたが300代を越える長期継代培養の結果NOS-1はすでに耐性となっていることが分かった。MOS-1はMTX 5μg/mlでわずかに増殖が抑制されるものの再増殖によりコントロールと変わらない増殖を示した。50μg/mlの高濃度では増殖が抑制され形態的には核の腫大を認め、フローサイトメトリーを用いた核DNA量の測定ではG_2ブロックによりS期細胞の増加を認めた。Dunn骨肉腫細胞はMTX 5μg/mlの濃度で完全に死滅した。それぞれの細胞を回収し、凍結融解と超音波処理により細胞を破壊、細胞抽出液を作成した。この抽出液を分光光度計を用いてヤトロン社製MTX測定キット中のDHFR標準液の酵素活性と比較することにより細胞内DHFR活性を測定した。その結果1回の測定ではNOS-1がDunnの2倍の酵素活性を示したが、再現性に乏しく、また希釈により得られる理論値からも大きくはずれる結果だあったので現在再度細胞を抽出しキットも変えて測定中である。またキット内の試薬も再検討している。今後は細胞よりRNAを抽出しPCR法でDHFRのmRNAを増幅し発現量を比較する予定である。また現在細胞内MTX濃度を経時的に測定することで能動的MTX排泄の可能性を検討している。
PETおよびMRIを用いた腫瘍内低血流域の特性評価

腫瘍内部の低血流域における低酸素以外の特性を、PETを中心とする画像を用いて評価した。FDGを用いたPETからブドウ糖代謝の情報を得た。原発性肝腫瘍においては、FDG集積亢進と血流低下との関連が、膵臓癌ではFDG集積亢進とMRIから得た拡散低下との関連が明らかになった。腫瘍内FDG集積の不均一性は、膵臓癌で血流と関連していることが分かり、食道癌では、化学療法に対する治療効果や手術後再発に対する予測に有用である可能性が示された。さらに、腫瘍内FDG集積に対するテクスチャ解析では、テクスチャ指標の中に腫瘍体積やFDG集積の程度に影響されない再発予測因子があることが明らかとなった。腫瘍内部の低血流域はしばしば低酸素域を伴い、抗癌剤や放射線などに対して治療抵抗性を示す。しかし、低血流域での低酸素以外の特性については、少なくとも画像を用いた手法では十分に評価されていない。生体下での低血流域に関する新たな知見は、より良い治療戦略に繋がる可能性があると考えられる。本研究の目的は、腫瘍内低血流域の特性、特に低酸素以外の特性評価を、PETおよびMRIの双方から得た機能・代謝画像により多角的に行うことである。初年度である本年は、これまでにFDG PET-CTと造影MRIあるいはCTが施行された原発性肝腫瘍患者において、両者の画像の比較を行った。造影MRIあるいはCTで多血性腫瘍を示唆する造影パターンの症例においては、多くで有意なFDG集積を確認できず、特に肝細胞癌症例ではほぼ全例でその傾向であった。また、乏血性腫瘍の造影パターンの症例では、ほとんどが強いFDG集積を示していた。FDG集積を示した多血性および乏血性腫瘍の比較では、後者の集積は前者よりも強かった。これらのことより、原発性肝腫瘍において、ブドウ糖代謝亢進と血流低下との関連が示唆された。この成果は、2013年の北米放射線学会で報告した。今後、腫瘍内での両者の関連をより詳細に求める予定である。また、膵臓癌の症例において、腫瘍内におけるFDG集積の強度とMRIから得た拡散強調像(細胞密度に関連)との比較を行った。FDG集積亢進と拡散低下との関連が観察されたが、これらと血流との関連を今後は検討の予定である。今年度は、腫瘍内低血流と関連のある、腫瘍内FDG集積の不均一性について検討した。我々は以前、FDG集積の程度とそれに対応する腫瘍体積との関連を用いて、腫瘍内不均一性に関する研究を行った。しかしその後、ソフトウェア等の進歩により、尖度や歪度といったMRIやCTで用いられている不均一性の指標がPETでも測定可能となったため、それらの実用性や有用性に関して検証した。術前化学療法を行った食道癌患者において、腫瘍内FDG集積の尖度および歪度を求め、腫瘍活動性の評価に用いられるstandardized uptake value(SUV)やmetabolic tumor volume(MTV)などの指標や我々が以前用いた不均一性の指標、治療効果やその後の再発との関連を調べた。それによると、尖度および歪度は、我々が以前用いた不均一性の指標と相関がある一方、SUVやMTVとは関連が乏しいことが明らかになった。尖度および歪度は、治療効果やその後の再発とも関連しており、我々が以前用いた不均一性の指標やSUV、MTVよりも優れた指標である可能性が示唆された。この成果は、2014年の北米放射線学会で報告した。内部構造の解析法であるテクスチャ解析が腫瘍内集積の不均一性評価にも応用可能であることが分かり、今後は内部血流との関連も含め、さらなる研究を進める予定にしている。1腫瘍に対して多方面の解析を行って、それらの結果を画素単位で比較する場合、比較そのものが正確に行われているか否かの検証が難しい。本研究の目的は、腫瘍内低血流域の特性、特に低酸素以外の特性評価を機能・代謝画像により多角的に行うことである。腫瘍内低血流と関連があると考えられている腫瘍内