hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ラット膀胱蓄尿期におけるRho-kinaseの役割

本研究では、伸展刺激によるRho-kinase(ROK)径路の活性化が、膀胱平滑筋トーヌスを維持することにより、膀胱コンプライアンスに関与することを証明した。したがって、ROK阻害剤は膀胱コンプライアンスを増加することで、過活動膀胱などの膀胱蓄尿障害の治療に役立つと思われる。静止張力を負荷した膀胱切片にRho-kinase(ROK)阻害剤Y-27632、HA-1077、ニフェジピンを投与すると、その張力は容量依存性に低下した。一方、アトロピン(抗コリン拮抗薬)、PPADS(抗プリン拮抗薬)を投与するも、膀胱切片の張力は変化しなかった。これらの結果から、静止張力を負荷された膀胱切片ではROKが活性化して膀胱緊張に寄与していること、その緊張には細胞外のCa^<2+>が関与していることあることが示唆された。また、ROK活性化の機序は、伸展刺激によって放出される膀胱上皮からのアセチルコリンやATPなどが受容体を刺激するというもの(autocrines作用)ではなく、Ca^<2+>自体によるROKの活性化(Ca^<2+>-induced Ca^<2+>-sensitization)もしくはそれ以外の径路を介するものであることが示唆された。次に、Western blottingでMYPT1(ROKの標的であるMLCPのサブユニット)のリン酸化率を測定することで、膀胱切片は静止張力負荷時にROK活性が増強し、その活性化はY-27632で抑制されることを確認した。この結果から、膀胱切片は伸展刺激によりROK活性が増加し、そのトーヌスが増加することが示唆された。また、Ca^<2+>非存在下の膀胱切片においても伸展時のMLCPのリン酸化を測定したが、結果はCa^<2+>存在下の膀胱切片と同様に伸展時にROK活性が増加した。よって、伸展刺激によるROKの活性化はCa^<2+>非依存性であることが示唆された。膀胱は蓄尿により伸展するため、伸展時の膀胱トーヌスを維持するメカニズムの解明には意味があると思われる。静止張力を負荷した膀胱切片にRho-kinase (ROK)阻害剤Y-27632、HA-1077、ニフェジピンを投与すると、その張力は容量依存性に低下した。これらの結果から、静止張力を負荷された膀胱切片ではROKが活性化して膀胱緊張に寄与していること、その緊張には細胞外のCa^<2+>が関与していることが示唆された。また静止張力負荷時のROK活性化の機序は、伸展刺激によって放出される膀胱上皮からのアセチルコリンやATPなどが受容体を刺激するautocrines作用ではなく、Ca^<2+>自体によるROKの活性化(Ca^<2+>-induced Ca^<2+>-sensitization)もしくはそれ以外の径路を介することが示唆された。次に、Western blottingで協PT1(ROKの標的であるMLCPのサブユニット)のリン酸化率を測定することで、膀胱切片は静止張力負荷時にROK活性が増強し、その活性化はY-27632で非伸展時よりも抑制されることを確認した。この結果から、膀胱切片では内因性のROK活性が存在し、その活性は伸展刺激により増加することでトーヌスが増強することが示唆された。Whole bladderstudyでは、ROK阻害剤が実際に膀胱コンプライアンスを増加させることを確認した。膀胱は蓄尿により伸展することでROKが活性化し、膀胱緊張を維持するメカニズムが考えられ、このメカニズムは膀胱蓄尿障害の治療のターゲットになりうると思われる。
突然変異体と三次元細胞系譜解析とを用いた性分化過程細胞相互作用解析

細胞系譜を解析した結果、前年度にメダカ卵巣のニッチ構造と予期される組織構造を見いだした。メダカで発現するnanos遺伝子ファミリーを体系的に解析したところ、そのうちのひとつがニッチ構造の特定生殖細胞に発現していることが見いだされた。その細胞が生殖幹細胞であるかを特定するために、BrdU取込み実験を行ない、分裂の遅い幹細胞の特徴を持つ細胞であることが判明した(Aoki, et.al., Zool. Sci.2009)。また、生殖細胞に発現する3種の遺伝子産物(TUDOR, NANOS3, OLVAS)の局在を調べ、その局在様式の違いにより生殖細胞の分化状態を識別可能であることを見いだした。全ての段階において、生殖顆粒に3つの蛋白質は局在していたが、生殖腺に入るまではリング用構造をとり、生殖腺に入ってからは球状構造に変化していた。さらに生殖細胞がシスト分裂を始めると局在位置が核膜に近づき、減数分裂期になると核膜に接する大きな顆粒として存在した(Aoki, et.al. Dev. Dyn. 2008)。異なる遺伝子導入メダカを作製、少なくとも3つの細胞系譜を蛍光により識別することが可能となった。これらの細胞が構成する構造を三次元的に解析することにより、脊椎動物で今まで所在が全く不明であった、卵巣生殖幹細胞の存在するニッチ構造の存在が強く示唆された。また生殖細胞を、生殖を構成する1つの細胞系列とみなし、生殖細胞の性分化過程での役割を解析したところ、生殖細胞欠損メダカでは身体全体の性が遺伝的性に関わらず雄化すること判明した。このことは、生殖細胞が雌化にきわめて重要であることを意味し、従来の「生殖細胞は性分化過程には深く関与しない」という定説を覆すこととなった(Kurokawa, et al., PNAS 2007)。また細胞学的解析により、生殖細胞がないと体細胞系列は自律的に雄化を示すことも明らかとなった。一方で、生殖細胞が異常増殖し、かつ遺伝的性に関わらず雌へ性転換する突然変異体メダカ,hotei,の原因遺伝子を同定(amhrII)に成功した(Morinaga, et al., PNAS 2007)。この遺伝子は、哺乳類では生殖付属器官の発達に必要であることが示されていたが、生殖腺そのものの性分化過程での関与は脊椎動物を通じて不明であった。今回の結果、生殖細胞の増殖制御を通じて性分化に関わることが明らかとなった。また生殖細胞の少なくなる突然変異メダカ,zenzai,は、生殖細胞維持の分裂が停止してしまうことが表現型解析により明らかとなり、その原因遺伝子も特定された(Saito, et al., Dev.Biol.2007, Saito, et al., Manuscript in Prepatation)。
高分解能イメージングソーナーによる海中捜索支援技術の開発

海上保安庁の特殊な海中捜索活動を迅速かつ安全に実施し,捜索活動のより一層の効率化・精度化を図ることを目的に,高分解能の前方監視型イメージングソーナー(Forward Looking Sonar)を有効に活用し,海中捜索に最適化した支援技術の開発を行った.具体的には,全国11カ所の管区海上保安本部に配備されたR2Sonic2022をFLSとして有効に活用することを想定し,R2Sonicシステムを船体に取り付けるための治具等の試作および海中捜索支援のために必要とされるソフトウェアの要素技術の開発を行った.また,実海域で取得したソーナーデータを用いてこれらソフトウェアの動作確認を行った.海難事故、災害時における海上保安庁の海中捜索、救助業務は、人命救助の観点からも緊急性が求められ、また海中の状況が未確定であっても潜水捜索を実施せざるを得ない危険性を伴う過酷で特殊なオペレーションである。このような海上保安庁の特殊な海中捜索オペレーションを迅速かつ安全に、しかも限られた現勢力の中で効率的に行うためには、高い視認性を持つ水中音響映像技術で海中の状況をその現場であるいは予め把握し、得られた画像を物理的な空間情報として可視化・数値化を行い、その情報を基に海中捜索、救助活動を行うのが有効となる。本研究では、海上保安庁の特殊な海中捜索オペレーションを迅速かつ安全に実施し、捜索活動のより一層の効率化、精度化を図ることを目的に、先の文部科学省科学技術振興調整費によるプロジェクト研究(平成17年度平成19年度)で開発された高分解能のイメージングソーナーを有効に活用し、海中捜索に最適化した新たな技術的な開発を行う。初年度の平成25年度においては、海上保安庁の特殊な海中捜索のための最適な実施形態の策定を行うと共に、突発的な事案にも対応できる新たな船体取り付け専用治具の設計・製作、および海中捜索のための基本システムの試作を行った。また、海上保安大学校の実習艇「いつもり」を用いた運用試験を呉湾周辺海域において実施し、船体取り付け治具を含めたソーナーシステム全体の動作確認を行うと同時に、次年度以降のソフトウェア付加機能の開発に向けてソーナーの基礎データの取得を行った。海難事故、災害時における海上保安庁の海中捜索、救助業務は、人命救助の観点からも緊急性が求められ、また海中の状況が未確定であっても潜水捜索を実施せざるを得ない危険性を伴う過酷で特殊なオペレーションである。本研究では、海上保安庁の特殊な海中捜索オペレーションを迅速かつ安全に実施し、捜索活動のより一層の効率化、精度化を図ることを目的に、高分解能のイメージングソーナーを有効に活用し、海中捜索に最適化した新たな技術的な開発を行う。次年度においては、高分解で船舶への艤装等も容易となる極めて高度化・小型軽量化された新たな機種(R2 Sonic 2024/2022)をソーナーヘッドとして使用する事に方針変更し、当機を使用した海中捜索の支援システムに必要とされるソフトウェアの要素技術の開発を行った。具体的には、捜索時のリアルタイム機能としてR2 Sonic 2024/2022を使用したソーナー画像の海図上または航空写真上への表示機能の開発、後処理機能として広域捜索モザイク画像の作成機能の開発を行った。また、実際の海域において船舶にシステムを搭載して実証試験を実施し、海中捜索支援のためのソフトウェアの動作確認を行うと同時に、今後の捜索支援技術全体の改善を図るための実海域でのソーナーデータの取得を行った。本研究では、海上保安庁の特殊な海中捜索オペレーションを迅速かつ安全に実施し、捜索活動のより一層の効率化、精度化を図ることを目的に、高分解能のイメージングソーナーを有効に活用し、海中捜索に最適化した新たな技術的な開発を行った。次年度(平成26年度)以降は、高分解で船舶への艤装等も容易となる極めて高度化・小型軽量化された新たな機種(R2Sonic2024/2022)をソーナーヘッドとして使用する事に方針変更し、海中捜索の支援システムに必要とされるソフトウェアの要素技術の1つである、捜索時のリアルタイム機能としてソーナー画像の海図上または航空写真上への表示機能の開発、および後処理機能として広域捜索モザイク画像の作成機能の開発を行ってきた。最終年度(平成27年度)においては、停船時においても前方の海中、海底の状況がリアルタイムの映像として即座に得られるという前方監視型のイメージングソーナーの最大の特徴を活かし、ダイバーによる潜水捜索時の後方支援機能等の開発を行った。

実海域でのダイバー試験を実施し、水中ダイバーの動きを音響映像としてリアルタイムにどこまで撮像できるかを確認すると共に、後方支援時においてソーナー映像からのダイバーの見逃しを防ぐためのダイバートラッキング機能の開発を試みた。海上保安庁の特殊な海中捜索活動を迅速かつ安全に実施し,捜索活動のより一層の効率化・精度化を図ることを目的に,高分解能の前方監視型イメージングソーナー(Forward Looking Sonar)を有効に活用し,海中捜索に最適化した支援技術の開発を行った.具体的には,全国11カ所の管区海上保安本部に配備されたR2Sonic2022をFLSとして有効に活用することを想定し,R2Sonicシステムを船体に取り付けるための治具等の試作および海中捜索支援のために必要とされるソフトウェアの要素技術の開発を行った.また,実海域で取得したソーナーデータを用いてこれらソフトウェアの動作確認を行った.当初、海中捜索支援に使用するソーナーとして、先の文部科学省科学技術振興調整費によるプロジェクト研究(平成17年度平成19年度)で開発された高分解能のイメージングソーナー(SeaBat7123)を有効に活用することで研究計画を策定していた。しかしながら、近年、海底地形探査や水深測量のためのナローマルチビーム測深機として、高分解で船舶への艤装等も容易となる極めて高度化・小型軽量化された新たな機種(R2 Sonic 2024/2022)が開発され、当機が測深、測量の現場で主流となりつつある。海上保安庁においても各管区海上保安本部のすべてのナローマルチビーム測深機がR2 Sonic2024(測量船船底艤装用)および2022(測量船搭載艇用または測量船のない管区本部については傭船用)に更新、配備された。測深機と前方照射型のイメージングソーナーは、送波ビームの方向、計測方法等が幾分異なるものの基本的には同じで、条件を整えればいずれの使い方も可能となる。以上の様な最近の技術的・政策的動向などから、次年度(平成26年度)以降においては海中捜索を行うソーナーヘッドとしてR2 Sonic 2024/2022を使用することに方針変更し、当機を使用した海中捜索の支援技術の開発を行う事とした。この方針変更を年度の早い段階で行ったため、ある程度の成果が得られている。27年度が最終年度であるため、記入しない。海洋音響工学最終年度(平成27年度)においては、停船時においても前方のリアルタイムの映像が即座に得られるというイメージングソーナーの最大の特徴を活かし、ダイバーによる潜水捜索時の後方支援機能等の要素技術の開発を行う。また、捜索現場においてより使いやすいものにするため、目標物捜索時の位置情報およびソーナー画像の保存機能、海図上への海中異物マーカー表示および呼び出し機能、広域捜索モザイク画像の作成後の海中落下物等のラベリング機能、形状・大きさ等の各種測定および表示機能などの付加機能の開発を行う予定である。更に、これまでの要素技術を海中捜索支援システムとして統合、PCへのソフトウェアの組み込みを行い、海上保安大学校の実習艇の他、実際の船舶に搭載して海中捜索支援技術の検証、改善を図ってゆく。場合によっては、海上保安庁の全国管区内の現場海域において実際に発生した事故、事件の現場へ当システムを適用し、海中捜索支援技術としてのより実際的な有効性を確認する。
「沖縄フェミニズム」と平和構築―軍事占領と性暴力

米軍による性暴力の問題に取り組んできた基地・軍隊を許さない行動する女たちの会を沖縄フェミニズムの中核と位置付け、検討した。会は米軍が長期駐留する韓国や、米国本土、国連などで市民社会でのトランスナショナル・ネットワーク構築を目指す傾向が強くなってきている。そこでは新たな基地建設に抵抗する連帯とともに、基地の移設ではなく脱軍事化が追求されている。軍事占領下での米軍の性暴力については、沖縄県立公文書館で資料を見つけ、1945年以降の沖縄での米兵による性犯罪の年表を改訂した。国際的な平和構築政策に関しては、紛争下の性暴力が軍隊組織の問題という視点がさらに後退していることが明らかになった。平成26年度の研究活動においては主に以下について調査を行った。1沖縄でのフェミニスト平和運動の動向、2沖縄県の公文書館で米軍の性暴力に関する資料収集、3アジア太平洋地域と米国本土、プエルト・リコの米軍駐留地域の女性団体が中心となって形成されている軍事主義を許さない国際女性ネットワークの活動に関する資料収集、4国連女性の地位委員会年次総会期間中にニューヨークの国連本部と周辺で開催される各国代表部とNGOによるサイド・イベントやNGOによるパラレル・イベントで軍隊と性暴力をめぐる各国の政策とそれらへのロビー活動などの市民社会による活動に関する資料収集。さらに米国のアジアにおける外交政策、「アジア回帰(Asia Pivot)」に関して、沖縄の活動家とともに、フィリピン、韓国、米国の活動家や研究者と交流を進め、アジア回帰政策下での米軍の展開の変化と駐留地域への影響について議論する機会を得た。沖縄での研究活動では、公文書館で米軍統治下での米軍による性暴力・性犯罪に関して、まだ十分に検証されていない米軍側の新たな資料を入手した。また、現在も続いている名護市辺野古での米軍基地建設計画に反対する市民運動において、沖縄のフェミニスト平和運動が担っている役割と抵抗運動の実践のジェンダー分析について研究を進めた。これらを通し、ジェンダーと脱植民地の視点からの安全保障概念と国連のジェンダーと安全保障関政策に関連する提言についての研究を進め、さらに武力紛争下だけでなく、軍事占領と外国軍長期駐留と性暴力の関連について考察を行った。2015年度は主に沖縄における軍隊と性暴力に関して、「従軍慰安婦」制度と米軍による性暴力の2点について研究を進めた。「従軍慰安婦」制度に関しては、慰安所の実相に関する調査だけでなく、日本国内の他の地域よりも多数の慰安所が沖縄県に設置された背景をより明らかにするために、明治以降の日本政府による沖縄の同化政策や近代化政策をジェンダーの視点から分析する作業を行った。また沖縄県内で、引き続き、慰安所に関する資料をフィールド調査も含めて収集した。これらについては、女性・戦争・人権学会で研究発表を行った。米軍の性暴力に関しては、沖縄県内での文献資料収集を中心として調査を進めた。国外でのフィールド調査では、最近設立されたフェミニスト平和運動の国際的ネットワークで、朝鮮半島の問題に取り組むWomen Cross DMZ (Demilitarized Zone)を新たな研究対象に加えた。1953年に休戦協定が締結されたままの状態が続いている朝鮮半島の紛争を終結させようと主張し、さらにその和平プロセスに女性の参加を求めるフェミニスト平和活動家のトランスナショナル・ネットワークだが、北東アジア地域にとどまらず、30カ国にまたがる幅広いネットワークであり、「軍事主義を許さない国際女性ネットワーク」とのつながりも深い。またリベリアでの平和構築の経験などを有するメンバーが参加していることなどから、軍隊の性暴力の問題と平和安全保障政策への女性の参加がどのように関連付けられているか、どのようなアプローチを取っているかについて、参与調査による資料収集を行った。ジェンダー正義の確立、脱軍事化、脱植民地化を目指す沖縄フェミニズムの理論の精緻化をはかり、さらに国際的な平和構築政策という文脈に位置づけるために、トランスナショナルなフェミニスト平和運動の近年の動向について調査を進めることができた。当初、フィリピンでの調査を予定していたが、草の根の運動でありながら、国連安保理決議1325号「女性・平和・安全保障」の実施を目指す国際女性NGOとも連携をもつWomen Cross DMZが沖縄のフェミニスト平和運動との連帯が構築されたことから、武力紛争下の性暴力と長期駐留軍による性暴力との連続性について、また平和構築政策に関するのフェミニスト平和運動の取り組みをより明らかにするための足がかりができた。本研究の主な目的は、沖縄のフェミニストが発信してきた沖縄フェミニズムについて明らかにし、また沖縄のフェミニスト平和運動が取り組んできた米軍による性暴力の実態、特に軍事占領下である米軍の統治下での性暴力の実態についての研究をさらに進め、そこから、今後の平和構築政策にどのような貢献が可能か検討することである。沖縄フェミニズムの中核をなしているのは、性暴力を問題としてきたフェミニスト運動であり、主に基地・軍隊を許さない行動する女たちの会の活動を検討した。基地・軍隊を許さない行動する女たちの会は、在沖縄米軍基地に反対する平和運動においても女性たちの活動の中心的役割を担っているフェミニスト平和運動である。平和を志向するフェミニストの緩やかなネットワークである基地・軍隊を許さない行動する女たちの会の活動は沖縄や日本本土だけでなく、同じように米軍が長期駐留する韓国や、米国本土、国連などに広げられ、特に市民社会でのトランスナショナル・ネットワークの構築を目指す傾向がより強くなってきていることがわかった。このようなネットワークでは、米軍駐留の実態や新たな基地建設に抵抗する連帯が築かれるとともに、基地の移設ではなく脱軍事化が追求されている。

また、軍事占領下での米軍の性暴力については、沖縄県立公文書館にこれまで公にされていない資料があることがわかり、新たな資料をもとに、これまで作成してきた、1945年以降の沖縄での米兵による性犯罪の年表を改訂した(13版)。国際的な平和構築政策においては、武力紛争下の性暴力が戦術の一環であることは国連などの政策でも認められてはいるが、軍隊組織の問題という視点はさらに後退していることが明らかになった。この点について、「女性の平和構築への参加」を性暴力被害者のエンパワーメントという視点からの検討について考察した。米軍による性暴力の問題に取り組んできた基地・軍隊を許さない行動する女たちの会を沖縄フェミニズムの中核と位置付け、検討した。会は米軍が長期駐留する韓国や、米国本土、国連などで市民社会でのトランスナショナル・ネットワーク構築を目指す傾向が強くなってきている。そこでは新たな基地建設に抵抗する連帯とともに、基地の移設ではなく脱軍事化が追求されている。軍事占領下での米軍の性暴力については、沖縄県立公文書館で資料を見つけ、1945年以降の沖縄での米兵による性犯罪の年表を改訂した。国際的な平和構築政策に関しては、紛争下の性暴力が軍隊組織の問題という視点がさらに後退していることが明らかになった。沖縄での調査、国際市民社会の調査、米軍駐留地域の女性ネットワークの調査はほぼ順調に進んでいる。ワシントンの公文書館での資料収集を予定していたが、沖縄の公文書館での資料収集を優先させることとしたため、その点について研究計画に変更を加えた。引き続き、沖縄フェミニズム理論の精緻化を勧める。特に脱植民地化と脱軍事化がどのように理解されているか、平和構築政策におけるジェンダー平等・正義の確立と脱植民地化の必要性を、沖縄の米軍による軍事占領だけでなく、さらに日本による同化政策と近代化政策のジェンダー分析から明らかにする作業を継続する。また現代の軍隊の性暴力について、米軍内での性暴力の問題に取り組む被害者/サバイバーと支援者の活動を調査する。次年度は最終年度となるため、成果発表の準備も同時に進める予定である。それにあたっては、代表者が所属する同志社大学でフェミニスト・ジェンダー・セクシュアリティ研究センターが2015年度に発足したことから、国際的な研究発表や今後の共同研究を進める拠点とすることができる。ジェンダー沖縄における米軍による性暴力に関する資料をさらに収集し、基地・軍隊を許さない行動する女たちの会がまとめてきた『米兵による沖縄における性暴力』年表(現在、第11版)に加えるとともに、米軍側の資料の分析、年表の分析を進める。沖縄、韓国、フィリピン、グアム、ハワイなどの駐留地域の女性運動において、ジェンダーの視点と脱植民地の視点の関連がどのように理解されているか、「軍事占領」という概念がどのように理解されているか、インタビューや資料収集を進める。
広津柳浪作品分析を中心とした明治三十年代文学の鳥瞰

平成27年度は明治三十年代文学における大衆性の根源に関する考察と、広津柳浪の明治二十年代末から三十年代の分析、さらには明治文学と朝鮮との関わり、以上3点について考察を進めた。明治三十年代の家庭小説等に著しい大衆性や娯楽性を考えるとき、そもそもそれらがどのような脈絡で発生したかという点に注目した。その点を、新聞が明治社会に広く読まれ、新聞連載小説が力を持ち始めた明治二十年代の文学に探った。特に、半井桃水『胡砂吹く風』(一八九一年一〇月二日一八九二年四月八日まで「東京朝日新聞」全一五〇回)に焦点を当て、その大衆性がいかに表れているか、その特徴は何か、小説の技法について明らかにし、論文にまとめた。(『大衆文化とナショナリズム』所収二〇一六年五月森話社)『胡沙吹く風』の大衆性については、まずは実用性と娯楽性を兼ね備えた点、また、それらが物語内容を規制する点などを論じたが、大衆性獲得のもう一つの要素として、この小説が単に勧善懲悪にとどまらず、立身出世物語である点を明らかにした。さらに、明治文学と朝鮮との関わりについても、『胡砂吹く風』が日本人の父と朝鮮人の母を持つ人物を主人公として設定している小説である点を掘り下げた。先行研究は、作者半井桃水の朝鮮経験に着眼し、おそらく当時の新聞記者・文学者の中ではどの人物より朝鮮通で朝鮮語を流暢に話したことに言及し『胡砂吹く風』に表れた作者半井桃水の朝鮮認識や政治的見解の分析を中心とする実証的で詳細な研究成果を挙げている。この成果を踏まえ、この小説の素材や舞台となった朝鮮像に関しても併せて分析し、当時の明治社会と朝鮮との関係が文学にどのように反映されているかを確認した。明治三十年代文学を研究する上で、広津柳浪の作品を中心としつつ同時代の文学、家庭小説等にも注目し、その大衆性という特徴を分析してきた。その上、日本近代文学史上の大衆性の流れに注目し、新聞が社会に流布し始め、新聞連載小説が大衆に読まれ発行部数に影響を与え始めた時、作品に込められる情報提供としての実用性や娯楽性、勧善懲悪というテーマ等様々な要素を探っていくことで、大衆性の在処を分析し続けている。また、一方、もう一つの研究目標であった明治文学と朝鮮との関係に関しても昨年度同様研究を進めることができた。研究の三つの課題のうち、その一つ目である広津柳浪の小説に関しては、『紫被布』(明治三二年三月「文芸倶楽部」)その八ヶ月後に発表された続編の『二人やもめ』(明治三二年一一月「文芸倶楽部」)に注目する予定である。小説の冒頭で、主人公が結婚そして離婚を一七回以上繰り返し、またもや出戻りとなり実家に帰る「浮気な女」として登場するが、社会のモラルに囚われず次から次へと気ままに夫を替えていく人物造形と同時代小説の登場人物形象を比較考察したい。また、明治三十年代末に台頭する日本近代文学史上写実主義の完成とみなされる自然主義文学の登場に柳浪小説がどのように反応しているか、その影響を受けているのか等にも具体的に触れたい。いずれにしても今年度同様、学術論文等で公に発表する予定である。今年度は、長期休みを利用し調査旅行を予定通り実行する計画である。平成26年度は明治三十年代における広津柳浪作品と同時代の社会性との関連に対する分析と、同じく明治三十年代に興隆をほこった所謂「家庭小説」考察、さらには日本統治期の朝鮮におけるその受容、以上三つの方向から研究を進めた。柳浪作品に描かれた同時代の社会性分析については、1900(明治三三)年『ニ六新報』に発表された『乱菊物語』を取り上げ、発表の二年前である1898(明治三一)年に施行された明治民法の影響下にあること、特に婚姻と離婚の条項が細部に至るまで具体的に制定されたことが作品世界に大きな影響を与えている点を明らかにした。また明治三十年代に隆盛を極めた「家庭小説」からは、「家庭小説」の代表的な作品と目される菊池幽芳『己が罪』(18991890(明治三二三三)年『大阪毎日新聞』)について、小説の「型」やキリスト教思想の用いられ方を分析した。さらに、日本統治下の朝鮮で、同作品が趙重桓により『双玉涙』という題名で翻案・発表されている点にも考察を進め、その詳細なテキスト分析と共に『己が罪』と『双玉涙』の、それぞれ自国の文学史における位相を分析した。(『大衆文化とナショナリズム』所収二〇一六年五月森話社)

『胡沙吹く風』の大衆性については、まずは実用性と娯楽性を兼ね備えた点、また、それらが物語内容を規制する点などを論じたが、大衆性獲得のもう一つの要素として、この小説が単に勧善懲悪にとどまらず、立身出世物語である点を明らかにした。さらに、明治文学と朝鮮との関わりについても、『胡砂吹く風』が日本人の父と朝鮮人の母を持つ人物を主人公として設定している小説である点を掘り下げた。先行研究は、作者半井桃水の朝鮮経験に着眼し、おそらく当時の新聞記者・文学者の中ではどの人物より朝鮮通で朝鮮語を流暢に話したことに言及し『胡砂吹く風』に表れた作者半井桃水の朝鮮認識や政治的見解の分析を中心とする実証的で詳細な研究成果を挙げている。この成果を踏まえ、この小説の素材や舞台となった朝鮮像に関しても併せて分析し、当時の明治社会と朝鮮との関係が文学にどのように反映されているかを確認した。明治三十年代文学を研究する上で、広津柳浪の作品を中心としつつ同時代の文学、家庭小説等にも注目し、その大衆性という特徴を分析してきた。その上、日本近代文学史上の大衆性の流れに注目し、新聞が社会に流布し始め、新聞連載小説が大衆に読まれ発行部数に影響を与え始めた時、作品に込められる情報提供としての実用性や娯楽性、勧善懲悪というテーマ等様々な要素を探っていくことで、大衆性の在処を分析し続けている。また、一方、もう一つの研究目標であった明治文学と朝鮮との関係に関しても昨年度同様研究を進めることができた。広津柳浪の明治三十年代発表の小説の中で先行研究ではほぼ手つかずの作品を対象にするという当初の予定通り、先行研究がきわめて少ない「乱菊物語」を初出(『二六新報』)から取り上げ、入念なテキスト分析を行うことができた。また、同時代の文学状況の研究として今年度は「家庭小説」を扱う計画であったので、まず、家庭小説の濫觴とも代表的作品とも言われる『己が罪』分析にも取りかかった。小説の型や明治社会の諸相との関連、特に、キリスト教的思想がモチーフとしてどのように用いられているか等を明らかにすることができた。その上で、日本統治期の朝鮮における変容の様相にも視野を広げた。広津柳浪作品分析と同時代文学の研究、および朝鮮での翻案作品についての研究、という3つの分野においてほぼ初年度の計画通り研究を進めることができた。研究の三つの課題のうち、その一つ目である広津柳浪の小説に関しては、『紫被布』(明治三二年三月「文芸倶楽部」)その八ヶ月後に発表された続編の『二人やもめ』(明治三二年一一月「文芸倶楽部」)に注目する予定である。小説の冒頭で、主人公が結婚そして離婚を一七回以上繰り返し、またもや出戻りとなり実家に帰る「浮気な女」として登場するが、社会のモラルに囚われず次から次へと気ままに夫を替えていく人物造形と同時代小説の登場人物形象を比較考察したい。また、明治三十年代末に台頭する日本近代文学史上写実主義の完成とみなされる自然主義文学の登場に柳浪小説がどのように反応しているか、その影響を受けているのか等にも具体的に触れたい。いずれにしても今年度同様、学術論文等で公に発表する予定である。まず、広津柳浪作品分析については、今後も先行研究ではほとんど顧みられなかった作品を掘り出し書誌事項研究から詳細なテキスト分析まで実施する。一方で同時代文学の研究だが、それらに示される大衆性や娯楽性を考察する上で、明治三十年代のみならず遡って二十年代に大流行した大衆的小説にも注目する必要性があると判断した。そうすることで、一連の傾向を通時的にとらえ、大衆性と娯楽性の系譜を分析することが可能と考える。次年度以降はこの作業を加えていく予定である。なお、いずれとも研究成果を今年度同様、学術論文等として公に発表する計画である。
甲状腺ホルモン受容体とオーファン受容体相互作用への環境化学物質の影響

1.RORによるTR作用活性化機構の解明:コレステロールシグナリングに関連した核内ホルモン受容体RORのホルモン応答配列に対する影響及び、環境化学物質の影響を解析した。環境化学物質の脂質シグナルへの影響を解析することで、環境化学物質の脳発達に対する影響が解明されることが期待される。この目的のために、多くの神経細胞で共発現しているTRとRORの相互作用をRORE及び甲状腺ホルモン応答配列(TRE)を用いて解析した。レポータージーンアッセイではR/TREの系に対してRORはコアクチベーター的に作用し、一般の核内ホルモン受容体に見られるドミナント・ネガティブ効果ではなかった。転写活性なfull length TR(fTR)はfRORと相加的に活性化するが、RORsg(スタグラータイプの変異)では活性化を示さない。In vitro結合アッセイでは、fTRはfRORともRORsgともりガンドに関係なく直接結合した。TR-ligand binding domain (LBD)はRORと結合しなかった。また、ROR-LBDもTRとは結合しなかった。以上からTRとRORは直接結合し、転写活性にはLBDではなく比較的長い領域が必要であることが示唆された。2.臭化物化合物のTR-TRE系への影響:レポータージーンアッセイ、Liquid Chemi-luminescent DNA pull down法(LCDPA)、ラットPurkinje初代培養細胞を用いて環境化学物質のTRへの影響の解析を進めた。臭化物化合物ではTRに対して弱い転写抑制効果を示したが、その程度は構造から予測することはできなかった。また、この抑制はコファクターとの相互作用の変化というよりむしろ、TR-TREの部分的解離が原因であることがLCDPAから示唆れた。以上から、新たなスクリーニング系の開発が望まれた。特に、脳発達毒性の評価を行う目的で我々はin cellのスクリーニング系としてPurkinje初代培養細胞を用いた系立ち上げ、現在評価できる環境が整った。また、蛍光免疫組織法を用いて生細胞におけるTRの動態を観察できる環境が整ったので、今後TRがTREから解離した後の動きなどもリアルタイムで観察する予定である。1.ROR-TR相互作用:コレステロールシグナリングに関連した核内ホルモン受容体RORのホルモン応答配列に対する影響及び、環境化学物質の影響を解析し、転写活性は野生型TRはRORと相加的に活性化されたが、RORsg(スタグラータイプの変異)では活性化を示さないという結果を得た。当研究室の別のプロジェクトでは、TRを介する転写を抑制する作用のあるPCB投与マウスでは雄にのみ小脳の行動異常が起こる。そこで、TRに加えアンドロゲン受容体(AR)もしくは、エストロゲン受容体(ER)加えて解析したところ、ARとERでは異なる結果を得た。そこで、脳内に発現するタイプのアロマターゼの遺伝子プロモーター領域を含むレポーターを作成し解析する予定である。リアルタイムPCR法で発現を解析する準備を整え、一部解析した。2.胎児期に発現するコファクターの解析:胎児期に多く発現するsynovial sarcoma translocation(SYT)の細胞内での動態をレーザー共焦点顕微鏡を用いて解析を行った。SYTがグルココルチコイド受容体と共に核内に共発現することが示された。また、胎児期脳のライブラリーから同定したB-ReMに対する抗体を作成し正常脳発達における局在を免疫組織法で解析する準備を整え一部実験を行った。3.臭化物化合物のTR-TRE系への影響:転写の解析の結果から、新たなスクリーニング系の開発が望まれたが、特に、脳発達毒性の評価を行う目的で我々はin cellのスクリーニング系としてPurkinje初代培養細胞を用いた系を立ち上げた。臭化物化合物を添加すると転写抑制によく一致した樹状突起の伸長抑制反応が認められた。この作用は過剰量の甲状腺ホルモンにより完全には回復しなかったことからTR系以外の機構が関与することが示唆された。1.臭素化合物のTR-TRE系の:転写への影響の解析から、脳発達毒性の評価を行う新たなスクリーニング系としてPurkinje初代培養細胞を用いた系を樹立した。この系では生後1日目のラット小脳を取り出し、17日間リガンドを加えて培養し、抗原抗体反応を行い蛍光物質のFITC融合-抗体でPutkinje細胞を標識しレーザー共焦点顕微鏡で観察する。臭素化合物Polybrominated Diphenylethers(PBDEs),Hexabromocyclododecane(HBCD),polybrominated biphenyl mixture(PBB)であるBP-6を添加すると転写抑制によく一致した樹状突起の進展抑制反応が認められた。一方、TRを介する転写を活性化する化合物ではT4が低用量のとき進展促進反応を認めた。抑制作用は過剰量のT4により完全には回復しなかったことからTR系以外の機構が関与することが示唆された。そこで、小脳顆粒細胞における環境化学物質の影響を解析するため、新規アッセイ系を樹立した。この系では生後7日のラットから顆粒細胞のみをパーコール密度勾配法を用いて分離し培養するため、顆粒細胞への影響を評価することができる。TRを介した転写を抑制する物質では神経突起の進展が抑制された。この抑制は過剰量のT3では回復しなかったがBDNFにより完全に回復した。また、T3では神経突起の長さと太さを増進させたが、BDNFでは網目状の進展を呈した。

2.ROR-TR相互作用:核内ホルモン受容体RORのホルモン応答配列に対する影響及び、環境化学物質の影響を解析し、転写活性は野生型TRはRORと相加的に活性化されたが、RORsg(スタグラータイプの変異)では活性化しない。ここに環境化学物質を添加するとTR単独の時と同様の結果を得た。リアルタイムPCR法で発現を解析し、in vivoでも相応する結果を得た。3.胎児期に発現するコファクターの解析:胎児期に多く発現し、胎児期脳のライブラリーから同定したB-ReMに対する抗体を作成し正常脳発達における局在を免疫組織法で解析した。
高感度近赤外マルチチャンネルラマン分光システムの開発と実用化

浜松ホトニクスによって新しく開発された、InP/InGaAsP光電面のマルチチャンネル光検出器と、Nd : YAGレーザーの1.06μmの発振線を用いた卓上型近赤外マルチチャンネルラマン分光計のプロトタイプを製作した。この装置は、従来のFT-ラマン装置に比較して少なくとも1桁以上高感度であり、十分に実用に耐える性能を有している。装置の開発と平行して、近赤外ラマン分光でのみ可能な新しい実験に挑戦し、数多くの極めて興味深い結果を得た。1)ヒト組織のラマン測定:これまで行っていたヒト組織標本の測定をさらに発展させ、手術直後の切除片をホルムアルデヒドで処理することなくそのまま測定した。正常および癌化肺組織のラマンスペクトルが顕著に異なることを確認し、すでに得られていた標本による測定結果が、ホルムアルデヒド処理の影響を受けていないことを示した。近赤外ラマン分光による癌の臨床診断の実用化を目指して、光ファイバー光学系を設計中である。2)酵母生細胞の時空間分解ラマン測定:He-Neレーザーを用いた顕微測定装置により、生きた酵母の細胞のin vivoラマンスペクトル測定に成功した。蛋白質、リン脂質、多糖類などに由来する多数のラマンバンドを明瞭に観測し、細胞内の部位によってラマンスペクトルが大きく異なること、またそれらが細胞周期によって顕著に変化することを見い出した。このような細胞周期に伴う物質変化を、in vivoかつ分子レベルで観察したのは本研究が初めてである。3)蛋白質、核酸試料の蛍光除去ラマン測定:蛋白質や核酸試料のラマン測定では、試料中の夾雑物からの蛍光に妨害されて、スペクトルを得ることが困難な場合がしばしばある。近赤外ラマン分光を用いればこの蛍光による妨害を回避することができる。上記のプロトタイプ分光計を用いて、いくつかの典型的な蛋白質や核酸の測定を試み、高いS/N比のスペクトルを得ることができた。とくに、薬物と核酸の相互作用による核酸の構造変化の様子を、ラマンスペクトルにより極めて明瞭に捕らえることができた。以上の実績から、本研究によってラマン分光の生物学、医学への応用のポテンシャルが格段に高まったと結論することができる。高感度近赤外マルチチャンネルラマン分光システムの開発に向けて、1)マクロサンプル系測定装置、2)顕微測定装置を並列的に開発した。マクロサンプル系測定装置では、まず光電子増倍管による光子計数法用いたシングルチャンネル方式により、光源部、試料部、分光器部の最適化を行った。つぎに、最適化した光源部、試料部、分光器部に、浜松ホトニクスが試作した近赤外マルチチャンネル検出器を接続し、約500波数の領域でマルチチャンネルラマン測定が可能な装置を組みあげた。装置の性能を確認するために、慶応大学医学部から提供された種々のヒト組織検体を測定し、従来のシングルチャンネル方式では数時間を要した測定が僅か数分で行えることを実証した。続いて正常および癌組織の多数の検体を測定し、正常組織と癌組織のラマンスペクトルが顕著に異なることを見い出した。また、同じ癌組織でも原発性と転移性のものではスペクトルが異なる可能性を示すデータを得た。このような研究は、マルチチャンネル測定により、短期間に多数のスペクトル測定が可能となったことにより、初めて実現したものである。

さらに、光ファイバーを用いたラマン照射/集光系を製作し、ヒト生体組織(手のひら)のin vivo測定に成功した。この結果は、近赤外マルチチャンネルラマン分光による臨床病理診断に向けた重要な第一歩となる。一方、顕微測定装置に関しては、近赤外領域に特化した顕微分光装置を特注し、検収を終えた。He-Neレーザーを用いて、生きた酵母の細胞のラマンスペクトル測定を試みたが、未だ良好なスペクトルを得るに至っていない。光電面を改良した検出器を用いて、前年度に製作した近赤外マルチチャンネルラマン分光システムのさらなる高感度化を実現した。慶応大学医学部から提供されたヒト肝臓の正常および癌組織の約100検体のラマンスペクトルを測定し、正常組織と癌組織のスペクトルが顕著に異なることを見い出した。これらのスペクトルを統計処理することにより、91%以上という極めて高い適中率で癌の判定ができることを明らかにした。これらの結果は、2つの論文にまとめて現在投稿中である。また、並行して行っている「イオン液体の基礎物理化学的研究」との関連で、合成した(可視励起では強い蛍光を示し測定が不可能である)イオン液体のラマンスペクトル測定に本研究で開発した近赤外マルチチャンネルラマン分光システムを用いたところ、蛍光に全く妨害されない良質のラマンスペクトルを得ることができた。この結果が示すように、本システムには、医学、生物学的応用のみならず多岐にわたる産業的応用が期待される。He-Neレーザーを用いた顕微測定装置により、生きた酵母の細胞のin vivoラマンスペクトル測定に成功した。35002500cm-1および1800400cm-1の領域で、蛋白質、リン脂質、多糖類などに由来する多数のラマンバンドを明瞭に観測し、細胞内の部位によってラマンスペクトルが大きく異なること、またそれらが細胞周期によって顕著に変化することを見い出した。さらに、それぞれのラマンバンドによるマッピングを行うことにより、生きた細胞内のオルガネラを色素による染色なしに顕微鏡像として観察することに成功した。マッピングに要する時間は、約1時間であり、酵母の細胞分裂周期の各状態における細胞ダイナミクスを分子レベルで捉えることが十分に可能である。前年度までに製作したシステムのさらなる高感度化を実現し、InP/InGaAsP光電面のマルチチャンネル光検出器と、Nd : YAGレーザーの1.06μmの発振線を用いた卓上型近赤外マルチチャンネルラマン分光計のプロトタイプを製作した。この装置は、従来のFT-ラマン装置に比較して少なくとも1桁以上高感度であり、十分に実用に耐える性能を有している。装置の開発と平行して、近赤外ラマン分光でのみ可能な新しい実験に挑戦し、数多くの極めて興味深い結果を得た。1)ヒト組織のラマン測定:これまで行っていたヒト組織標本の測定をさらに発展させ、手術直後の切除片をホルムアルデヒドで処理することなくそのまま測定した。正常および癌化肺組織のラマンスペクトルが顕著に異なることを確認し、すでに得られていた標本による測定結果が、ホルムアルデヒド処理の影響を受けていないことを示した。近赤外ラマン分光による癌の臨床診断の実用化を目指して、光ファイバー光学系を設計中である。
乳房超音波画像診断におけるコンピュータ支援診断システムの開発と有用性の臨床評価

本研究では,医師が乳房超音波画像診断で着目している病変形態を形態的特徴量として定量化する手法を確立し,その形態的特徴量に基づいて,病理組織型の可能性を評価するコンピュータ支援診断(CADx)システムを開発した.そして,そのCADxシステムの解析結果を医師が参考にすることにより,医師の鑑別診断能が大幅に向上することを観察者実験で確認した.本研究の目的は,乳房超音波検査における病変の鑑別診断を支援するコンピュータ支援診断(CADx: Computer-aided Diagnosis)システムの開発の基礎研究を行い,その臨床応用への可能性を検討することである.本研究では,まず,病変形態(画像特徴)を定量化する手法の確立において,9病変形態に対する医師の主観的印象の基礎データ(01)を得るために,3名の医師が参加した観察者実験(6を実施した.そして,各病変形態において複数の定量化手法を定義し,医師3名の主観的印象データの平均と形態的特徴量の相関が最も高くなる定量化手法を選択した.65病変に対する主観的印象データと形態的特徴量の相関値を求めた結果,0.700.88が得られた.次に,9形態的特徴量を用いた重判別分析により,病変を4病理組織型(浸潤がん,非浸潤がん,線維腺腫,嚢胞)に識別するアルゴリズムを構築した.形態的特徴量の基礎データを得るために使用した65病変とは異なる298病変を用いて,分類実験を実施した結果,浸潤がん88.4%(76/86),非浸潤がん80.6%(29/36),線維腺腫86.0%(92/107),嚢胞84.1%(58/69)の正答率が得られた.乳房超音波画像診断において,病理組織型の可能性を提示することの有用性を評価するために,医師7名が参加した観察者実験を実施した.sequential-test methodによるROC分析により,観察者実験結果を評価した結果,すべての観察者のROC曲線下の面積(AUC)は,CADxを使用することにより向上した.そして,全観察者のAUCの平均は,CADxを用いない場合の0.716から,CADxを用いることにより0.864に増加し(P = .006),その有用性が示唆された.本研究では,医師が乳房超音波画像診断で着目している病変形態を形態的特徴量として定量化する手法を確立し,その形態的特徴量に基づいて,病理組織型の可能性を評価するコンピュータ支援診断(CADx)システムを開発した.そして,そのCADxシステムの解析結果を医師が参考にすることにより,医師の鑑別診断能が大幅に向上することを観察者実験で確認した.本研究の目的は,乳房超音波検査における腫瘤病変の鑑別診断を支援するコンピュータ支援診断(CADx: Computer-aided Diagnosis)システムの開発の基礎研究を行い,その臨床応用への可能性を検討することである.本年度は,医師が鑑別診断で着目している病変形態を形態的特徴量として定量化する手法を確立し,その形態的特徴量に基づいて,病理組織型の可能性を評価するアルゴリズムを構築した.また,画像診断において病理組織型の可能性を提示することの有用性を評価するための観察者実験を実施した.まず,病変形態(画像特徴)を定量化する手法の確立において,8画像特徴に対する医師の主観的印象の基礎データ(0.01.0)を得るために,3名の医師が参加した観察者実験(30症例)を実施した.そして各画像特徴において,主観的印象データの平均と定量化された形態的特徴量の相関が最も高くなる定量化手法を選択した.これまでに30腫瘤病変に対する8画像特徴において,相関値0.910.68が得られている.次に,8形態的特徴量を用いたArtificial Neural Networkにより,腫瘤病変を4病理組織型(浸潤がん,非浸潤がん,線維腺腫,嚢胞)に識別するアルゴリズムを構築した.390腫瘤病変を用いて,Leave-one-out testing methodに基づく評価実験を実施した結果,各病理組織型の正答率92.2%78.8%が得られた.最後に,病理組織型の可能性を提示することの有用性を評価するために,7名の医師が参加した観察者実験(100症例)を実施した.その結果,病理組織型を提示する前の医師のReceiver Operating Characteristic (ROC)曲線下の面積平均0.714が,病理組織型の可能性を参照することにより0.889まで向上し,その有用性が示唆された.本年度の研究として,●医師が鑑別診断で着目している病変形態を形態的特徴量として定量化する手法の確立,●その形態的特徴量に基づいて,病理組織型の可能性を評価するアルゴリズムの構築,の2項目を計画していた.本年度はこれらの項目を予定通り進めるだけでなく,更に,画像診断において病理組織型の可能性を提示することの有用性を評価するため観察者実験を実施し,その有用性を示すことができた.

したがって,「当初の予定以上に進展している」と評価できると考える.今後の研究として,まず,類似画像を検索するアルゴリズムの構築に取り組む.そこで,医師の類似に関する主観的な印象の基礎データを得るために,大きさと形状に基づく層化無作為抽出法により選択された腫瘤病変を用いて,観察者実験を実施し医師に各ペアに対する主観的な類似の印象を0.0(全く異なる)1.0(完全に同じ)の範囲で数値化(主観的類似度)を依頼する.次に,●形態的特徴量空間におけるユークリッドの距離に基づく客観的類似度,●2つの病変に対する医師の主観的類似度とそれらの形態的特徴量の関係を学ばせたArtificial Neural Networkの出力値に基づく心理物理的類似度,を組み合わせた類似画像検索アルゴリズムを構築する.そして,病理組織型の可能性の評価アルゴリズムと類似画像検索アルゴリズムを備えたCADxシステムのプロトタイプを本学附属病院の病院情報システムに繰り返し組み込みながら"CADxシステムの評価"と"CADxシステムの改良"を実施する.ここでは,CADxシステムの問題点の検証を重ね,ユーザニーズを繰り返しフィードバックすることにより,臨床で有用なCADxシステムを効率的に確立していく.最後に,本学附属病院の病院情報システムにCADxシステムを組み込んだ臨床評価試験により,その有用性を評価する.ここでは,本学附属病院の複数名の乳腺外科医が参加し,以下の流れで評価試験を進める.次年度の研究費は主に,これまでの研究成果および今後の研究成果発表のための旅費,またシステムを開発するためのMatlabソフトの保守管理費として使用する計画である.次年度6月に開催される国際学会参加費を前年度に支払う予定であったが,支払い手続きが間に合わなかったため,その参加費分を次年度に繰り越し,支払う予定である.
ラット海馬切片におけるてんかん発作期異常波モデルのGABA介在神経細胞の関与

われわれが開発したてんかん発作期モデルを用いて、γアミノ酪酸(GABA)介在抑制機能の関与を検討した。ラット海馬スライスCA1野の放線層に1秒間100Hzの高頻度刺激を10分間隔で繰り返し加え、発作期律動波類似の後発射を発展的に誘発した。われわれは、このモデルに対するGABA_A受容体拮抗薬の効果を検討した研究より、GABA_A受容体介在性抑制機能の活性が後発射の発生に不可欠であることを明らかにし、従来の脱抑制仮説の修正を提唱してきた。本研究において、このモデルのてんかん発作期モデルとしての妥当性について検討した。後発射に対して、海馬てんかんに有効である抗てんかん薬フェニトインとカルバマゼピンは、臨床的有効濃度と一致する濃度で抑制したが、海馬てんかんに無効である欠神発作の抗てんかん薬エトスクシミドは臨床的有効濃度では無効で、むしろ高濃度で促進的に作用した。以上の抗てんかん薬の効果に関する有効濃度と選択性より、このモデルが海馬てんかんのモデルとして妥当であることが証明された。加えて、このモデルにおいて、高頻度刺激の反復により抑制性シナプス後電位がいかに変化するかを細胞内記録法を用いて検討した。高頻度刺激により、後発射は発展的に誘発される一方、単一電気刺激で誘発されるGABA_A受容体介在性抑制性シナプス後電位の振幅は、高頻度刺激前と比較して増大した。また、高頻度刺激により後発射が安定的に誘発されたスライスの約1割で、単一刺激によっても後発射が記録された。この後発射は、GABA_A受容体とGABA_B受容体介在性抑制性シナプス後電位の間で誘発された。この所見は、上記のGABA_A受容体拮抗薬を用いた研究から示唆されたてんかん発作波の誘発に対してGABA_A受容体介在性抑制機能活性が重要な役割を担うとする仮説を支持している。ラット海馬スライスCAI野放線層に100Hz、1秒間の高頻度刺激を10秒間隔で反復して加えることにより、てんかんの発作期異常波のモデルであるキンドリンと類似の後発射の発展的誘発を錐体細胞層から場の電位で記録した。この後発射の発作期モデルとしての妥当性を検証するために、抗てんかん薬の効果を調べた。側頭葉てんかんに有効であるカルバマゼピンとフェニトインが治療有効濃度と一致する用量で後発射の発生を抑制したが、側頭葉てんかんに無効であるエトサクシミドは後発射の発生に影響しなかった。以上の所見より、われわれの海馬スライス後発射モデルが、側頭葉てんかんの発作期モデルとして有効であることが示唆された。加えて、細胞内電位記録をCAI野の興奮性錐体細胞から記録した。高頻度刺激の反復により後発射が発展的に誘発された海馬スライスにおいて、GABA介在抑制性シナプス後電位は保持された。さらに、場の電位で記録された後発射に一致して多数の活動電位が重畳する脱分極が誘発されたが、この脱分極にGABA介在性と推定される過分極が先行して誘発された。GABA拮抗薬であるビククリン投与により、GABA介在性の過分極は焼失し、場の電位で記録される後発射とそれに一致する脱文極も抑制された。以上より、発作期異常波がGABA機能の抑制(脱抑制)によって誘発されるのではなく、GABA機能の保持が発作発生に関与する可能性が示唆された。ラット海馬スライスCA

1野の放線層に1秒間100Hzの高頻度刺激を10分間隔で繰り返し加え、発作期律動波類似の後発射を発展的に誘発した。われわれは、このモデルに対するGABA_A受容体拮抗薬の効果を検討した研究より、GABA_A受容体介在性抑制機能の活性が後発射の発生に不可欠であることを明らかにし、従来の脱抑制仮説の修正を提唱してきた。本研究において、このモデルのてんかん発作期モデルとしての妥当性について検討した。後発射に対して、海馬てんかんに有効である抗てんかん薬フェニトインとカルバマゼピンは、臨床的有効濃度と一致する濃度で抑制したが、海馬てんかんに無効である欠神発作の抗てんかん薬エトスクシミドは臨床的有効濃度では無効で、むしろ高濃度で促進的に作用した。以上の抗てんかん薬の効果に関する有効濃度と選択性より、このモデルが海馬てんかんのモデルとして妥当であることが証明された。加えて、このモデルにおいて、高頻度刺激の反復により抑制性シナプス後電位がいかに変化するかを細胞内記録法を用いて検討した。高頻度刺激により、後発射は発展的に誘発される一方、単一電気刺激で誘発されるGABA_A受容体介在性抑制性シナプス後電位の振幅は、高頻度刺激前と比較して増大した。また、高頻度刺激により後発射が安定的に誘発されたスライスの約1割で、単一刺激によっても後発射が記録された。この後発射は、GABA_A受容体とGABA_B受容体介在性抑制性シナプス後電位の間で誘発された。この所見は、上記のGABA_A受容体拮抗薬を用いた研究から示唆されたてんかん発作波の誘発に対してGABA_A受容体介在性抑制機能活性が重要な役割を担うとする仮説を支持している。