hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ミトコンドリア局在型セリンプロテアーゼ、Omi/HtrA2の生理的機能の解明

アポトーシス阻害タンパク(Inhibitor of Apoptosis Protein : IAP)は種を越えて構造と機能がよく保存されているアポトーシス抑制因子である。ヒトIAPの一種であるXIAP, c-IAP1, c-IAP2はアポトーシスの実行に中心的な役割を担うCaspase-3, -7, -9を阻害し、筋萎縮性側索硬化症(ALS)などの神経変性疾患モデルマウスで観察される神経細胞死を含めた様々な細胞死を抑制する。我々は、XIAP結合タンパク質としてHtrA2/Omiを同定した。HtrA2はミトコンドリア膜間腔に局在するセリンプロテアーゼで、細胞死誘導刺激により細胞質に放出され、XIAPを含むIAPに直接結合することにより、IAPの抗Caspase活性を阻害する。また、HtrA2はセリンプロテアーゼ活性依存的な細胞死誘導能を有しており、Caspase非依存的細胞死への関与が示唆されている。我々は、HtrA2の生理機能を解明するために、HtrA2の基質タンパク質のスクリーニングを行い、IAP自体がHtrA2基質タンパク質であることを明らかにした。引き続きスクリーニングを行い、数種類のHtrA2基質タンパク質の細胞死に対する影響を調べた結果、顕著な細胞死抑制能をもつ新規タンパク質AMORを同定した。AMOR mRNAおよびタンパク質はヒトおよびマウスのほぼ全組織に発現しており、細胞内では主に細胞核と、膜画分に局在していた。siRNAを用いて内在性AMORタンパク質の発現を抑制すると、ある種のストレスに対して細胞死感受性が増すことから、AMORは細胞死抑制遺伝子であると考えられる。これらの結果から、HtrA2がいくつかの細胞死抑制因子を分解し、不活性化することにより細胞死を誘導する可能性が示唆された。ヒトIAPの一種であるXIAP, c-IAP1, c-IAP2はアポトーシスの実行に中心的な役割を担うCasPase-3,-7,-9を阻害し、筋萎縮性側索硬化症(ALS)などの神経変性疾患モデルマウスで観察される神経細胞死を含めた様々な細胞死を抑制する。我々は、XIAP結合タンパタ質としてHtrA2/Omiを同定した。組換え型HtrA2により切断された組換え型XIAPは、最終的にはCaspase阻害活性を失うことから、HtrA2はIAPに結合するだけでなく、IAPの分解も促進し、IAPの細胞死抑制活性を阻害すると考えられた。また、HtrA2は未知の基質タンパク質を切断し、ミトコンドリア外膜の透過性を亢進させ、細胞死の進行を促進させることも見出した。引き続きスクリーニングを行い、数種類のHtrA2基質タンパク質の細胞死に対する影響を調べた結果、顕著な細胞死抑制能をもつ新規タンパク質Aを同定した。
棘皮動物の前後軸・背腹軸形成の研究

棘皮動物の多くは前後軸が不明瞭であり、成体は五放射の体制をとる。Hoxクラスター遺伝子は、多くの動物門では、前後軸に沿った発現領域とクラスター構造にコリニアリティーがある。本研究では、棘皮動物の祖先型形質を保持するウミユリ類のニッポンウミシダと、前後軸が明瞭に存在するナマコ類のマナマコを用い、Hoxクラスター遺伝子の発現パターンを解析した。その結果、五放射状の成体ウミシダではHoxクラスター遺伝子の発現はコリニアリティーがないこと、ナマコでは前後軸に沿った発現のコリニアリティーがあることが示された。このことから、棘皮動物門内においても、Hoxクラスター遺伝子の役割が大きく異なることが示された。従来はウニに偏っていた棘皮動物の体制の研究を、棘皮動物の祖先型を継承するウミシダ、二次的に背腹軸を獲得したナマコに広げ、前後軸・背腹軸形成に関連する遺伝子の発現パターンを解析した。1ウミシダの体軸関連遺伝子:棘皮動物の成体は、前後軸が不明瞭である。ウニでは、Hoxクラスター構造に大規模な変動があることが示されており、前後軸が不明瞭な原因と考えられている。当研究では、祖先型棘皮動物のニッポンウミシダのHoxクラスター構造を検証し、棘皮動物の進化を理解することを目的の一つとしている。単離した9種類のHox遺伝子をプローブとして、ゲノムBACライブラリーをスクリーニングし、4つのコンティグを得た。しかし、今年度はクラスター全域にわたってクローンを連結するには至らなかった。そこで、ゲノムfosmidライブラリーを作成し、スクリーニングを行って8つのコンティグを得た。現在は、連結の作業を行なっている。2ウミシダの神経系に関する研究:ウミシダ類は棘皮動物の中でも祖先的な成体神経系をもつが、その詳細な構造および形成過程についての知見は乏しい。当研究では、卵から成体までのニッポンウミシダの神経系を、組織化学的手法および各種神経マーカーを用いて解析している。本年度は、抗シナプトタグミン抗体を用いて成体神経系の全体構造を明らかにするとともに、座着幼生期のESTを作成して、神経形成に関わる各種マーカー遺伝子のホモログの探索を行った。3マナマコの体軸関連遺伝子:ナマコは棘皮動物でありながら形態学的に明瞭な前後軸、背腹軸をもち、幼生と成体いずれにおいても左右相称の体制を呈する。本研究では、神経伝達物質クビフリンにより産卵誘起が可能なマナマコを実験動物として、前後軸パターニングおよび背腹軸決定に関わる遺伝子の単離と発現解析を行った従来はウニに偏っていた棘皮動物の体制の研究を、祖先型を継承するウミシダ、ナマコに広げ、前後軸に関連する遺伝子の発現パターンを解析した。1ウミシダの体軸関連遺伝子:ニッポンウミシダの発生過程におけるHoxクラスター遺伝子の発現パターンを解析しHoxクラスター遺伝子の役割について考察した。浮遊幼生期ではOjHox7、OjHox8、OjHox9/10、OjHox11/13aが、前後軸に沿って発現し、変態して五放射相称になると、OjHox11/13a、OjHox5、OjHox1が五放射の反口側環状神経と、環状神経から腕に伸びる神経索で領域特異的に発現することが示された。しかし、反口側神経系におけるOjHox2、OjHox4、OjHox8、OjHox9/10、OjHox11/13aの発現はなく、軸に沿ったコリニアリティーはない。このことから、成体ではHoxクラスター遺伝子は、軸に沿ったパターニングにはかかわらないが、神経系の領域化には関わることが示唆される。ニッポンウミシダに於いても、大規模なHoxクラスター構造の変化が起きていると予想される。2ウミシダの神経系に関する研究:幼生および成体の神経系の構造解析を行った。座着幼生期のESTより得られた配列情報をもとに、EmxおよびGbxのクローニングと発現解析を行い、脊椎動物などで頭部神経の領域化に働くこれらの遺伝子が、ニッポンウミシダ浮遊幼生では幼生神経以外の外胚葉および内中胚葉性組織で発現することを明らかにした。3マナマコの体軸関連遺伝子:ナマコは棘皮動物でありながら形態学的に明瞭な前後軸、背腹軸をもつ。ナマコでは成体においても、Hoxクラスター遺伝子は消化管におい前後軸に沿った発現のコリニアリティーが見られた。五放射の発現はなかった。

従来はウニに偏っていた棘皮動物の体制の研究を、棘皮動物の祖先型を継承するウミシダ、二次的に背腹軸を獲得したナマコに広げ、前後軸・背腹軸形成に関連する遺伝子の発現パターンを解析した。また、ウミシダのHoxクラスターの構造を明らかにする目的で、これまでに構築していたBACライブラリーに加え、BACクローン間をつなぐフォスミドライブラリーを構築した。1.ウミシダの体軸関連遺伝子ウミシダの体の中央にある神経節が、頭部に相当するかを評価するため、頭部中枢神経マーカー遺伝子ホモログの発現パターンを解析した。その結果、体軸の前端部分で発現する頭部中枢神経系マーカーのSix3はウミシダの反口側神経系にある神経節で発現するが、Pax6, Otxは発現しないため、ウミシダの神経節を含む部分は頭部と相同ではないと考えられた。一方、Six3, Pax6, Otxは口側神経系で発現するため、環状神経を含む口側神経系が中枢の役割を担っており、体軸の前部に相当する可能性がある。Hox1,5,7,9/10,11/13cは冠部から腕にかけて、領域特異的に五放射に発現していることが明らかになった。コリニアリティーはないが、Hoxクラスターは冠部の中央から腕の先端に向かう軸のパターン形成にかかわっている可能性が示唆された。2.マナマコの体軸関連遺伝子Hoxクラスター遺伝子、chordin、BMP2/4をRT-PCRにより単離し、幼生期における発現パターンを解析した。Hoxクラスターはウニの幼生期の発現パターンと大きく異なり、消化管に沿ったコリニアリティーが見られた。chordin、BMP2/4は口側(腹側)で発現し、BMP2/4は反口側(背側)でも発現が見られた。成体における発現パターンの解析には至らなかったが、ウニとは異なり、ナマコでは体軸関連遺伝子の発現が保存されていることが予想された。1ニッポンウミシダのHoxクラスター構造:Hoxクラスター全域をカバーするクローンが得られていない。BACライブラリーの質とクローンの数に問題がある可能性があり苦戦している。2ニッポンウミシダの神経節:抗シナプトタグミン抗体を用いて、座着幼生および幼体の神経系の全体構造を明らかにした。従来、成体の各腕には1本の反口側神経が入るとされてきたが、本研究によって、腕の反口側神経は主に2列の神経細胞列からなることが明らかになった。一方、神経前駆細胞および各種神経細胞のマーカー遺伝子の候補を探索するため、座着幼生のESTを作成し、Ncamなどの汎神経マーカー遺伝子、Emxなどの神経発生に関わる各種転写因子、Musashiなどの神経前駆細胞マーカー遺伝子などの配列情報を得て、ニッポンウミシダのホモログ遺伝子をクローニングした。3マナマコの体軸: 8種類のHoxクラスター遺伝子をクローニングしWhole-mount in situhybridization(WISH)を行った。Hoxクラスター遺伝子は幼生期と成体期に、独立して2回発現し、発現パターンは腸管に沿ったコリニアリティーが認められた。幼生期における腸管に沿ったHoxクラスター遺伝子の発現パターンは、近縁のウニでは見られずナマコに特異的と考えられる。また、成体の腸管においても、Hoxクラスター遺伝子が前後軸に沿ったパターン化にかかわることが示された。背腹軸に関しては、後生動物の背腹軸形成で保存された機能をもつchordin、BMP2/4のマナマコのホモログのクローニングを行い、WISHによる発現解析を行った。
顔と音声の視聴覚統合における社会的環境要因の効果について

本研究は、顔と音声の視聴覚統合の発達における「顔の人種」の影響を明らかにすることを目的とする。本研究では親の人種を視覚環境、使用言語を音声環境と定義し、日本や欧米の乳児、ならびに成人を対象とする多文化比較アプローチを用いる。研究1では、行動指標を用いて視聴覚統合の発達メカニズムを明らかにし、研究2ではその脳内機構の発達的変化を検討する。さらに研究3では、親子間コミュニケーションを含む、様々な社会的環境要因について、フィールド実験の手法を参考に調査し、文化間の共通性と差異を明らかにすることを試みる。
中世後期における諏訪信仰の総合的研究

2018年度は、これまでの研究成果を取り纏め、今後の研究方針を明らかにするため、『諏訪信仰の歴史と伝承』(二本松康宏編、三弥井書店、2019年1月、A5版260頁)の執筆と公刊に取り組んだ。中世神話の奔流から諏訪信仰を鳥瞰し、新たな「諏訪学」を問う。研究代表者および研究分担者による論攷は以下のとおりである。研究代表者:二本松康宏「諏訪縁起の再創生ー『伊那古大松原大明神縁起』の情景ー」、研究分担者:中澤克昭「『広疑瑞決集』と殺生功徳論」、永松敦「諏訪信仰における野焼きと集団狩猟」、二本松泰子「『諏訪信重解状』の新出本と『諏方講之式』ー大祝家文書の中の諏訪縁起ー」。上記の4名以外にも、柳川英司「遺跡と寺院創建伝承にみる中世前期の諏訪地方」、村石正行「細川氏内衆丹波上原氏と諏訪信仰ー諏方同名氏族の一族分業論」、石井祐一朗「『諏訪大明神絵詞』成立についての試論ー室町幕府奉行人諏訪円忠の絵巻制作ー」の論攷を掲載している。また、新出資料として諏訪市博物館所蔵大祝家文書『神氏系図』の影印を紹介し、二本松康宏による解題を掲載した。上述のように『諏訪信仰の歴史と伝承』の刊行を契機として、これまでの研究テーマについてはほぼ予定通りに進展した。また、本研究課題によって、たとえば諏訪市博物館等が所蔵する大祝家文書をはじめとして、これまでに知られた資料群にも再精査・再検討が必要であることが判明してきた。とくに系譜や縁起についてはその必要性が高く、本研究課題としての組織的な取り組みを始めたいと考えている。二本松康宏と永松敦は南九州地方における「諏訪縁起」の調査・研究に具体的に着手し、中世諏訪信仰の地方展開について研究を進める予定である。また、二本松は単独においても信州と上州をつなぐ中世諏訪信仰の“道"に関する研究にあたる。中澤克昭は中世史の観点から諏訪信仰と中世城郭に関する研究を展望する。二本松泰子は諏訪市博物館所蔵の大祝家文書等の再検討に入った。本年度は、諏訪市博物館に寄託されている矢島家文書の調査を中心に行った。矢島家は諏訪上社の権祝を務めた氏族で、諏訪市博物館には、当家から寄託された文書がおよそ2000点現存している。その中から中世後期に遡る情報を含んだ文書をいくつか取り上げ、その記述内容について検討を進めた。具体的な考察内容と主な研究成果は以下の通り。1矢島家伝来の権祝本『諏訪大明神画詞』の本文について、翻刻および諸本との異同に関する比較検討を行った。従来『諏訪大明神画詞』の権祝本といえば、守矢家文書に含まれる写本が主な研究対象とされてきた。それは、『諏訪史料叢書第二巻』に所収されたのをはじめとして、比較的早くから翻刻文が公刊されてきたためである。しかし、本研究において矢島家伝来の権祝本の本文精査を行ったところ、当該本も部分的に古態を残す善本であることが明らかになった。2中世後期近世において上社で制作された数種類の『物忌令』の写本群について、本文を翻刻し、鎌倉時代の成立とされる『諏訪上社物忌令』との比較などを通して、その叙述内容の特性を分析した。3矢島家の由緒を記した系図類について取り上げ、当家の由来にまつわる諏訪縁起の言説を検討した。その結果、それらの叙述には『諏訪大明神画詞』の文言をベースにしつつ、矢島家所縁の地域における在地伝承などを積極的に取り込んでいることが明らかになった。4諏訪盛條が奉納した『諏訪縁起』について、その叙述内容を分析した。その結果、当該文書に見える諏訪縁起の言説は、『諏訪大明神画詞』の叙述を踏まえて成立していることが確認できた。これによって、当該文書が『画詞』の享受の事例として重要であることが判明した。研究代表者(二本松康宏)と共同研究者(永松敦、中澤克昭、二本松泰子)を中心として「中世後期諏訪信仰研究会」を立ち上げ、年に数回の研究会を実施する予定であったが、各人の予定が合わず、実現することができなかった。しかしながら、諏訪市博物館での文献調査が予想以上に進捗し、中世後期の諏訪信仰にまつわる文化事象のうち、諏訪の縁起伝承に関する研究を予定以上に進めることができた。上記の4名以外にも、柳川英司「遺跡と寺院創建伝承にみる中世前期の諏訪地方」、村石正行「細川氏内衆

丹波上原氏と諏訪信仰ー諏方同名氏族の一族分業論」、石井祐一朗「『諏訪大明神絵詞』成立についての試論ー室町幕府奉行人諏訪円忠の絵巻制作ー」の論攷を掲載している。また、新出資料として諏訪市博物館所蔵大祝家文書『神氏系図』の影印を紹介し、二本松康宏による解題を掲載した。上述のように『諏訪信仰の歴史と伝承』の刊行を契機として、これまでの研究テーマについてはほぼ予定通りに進展した。また、本研究課題によって、たとえば諏訪市博物館等が所蔵する大祝家文書をはじめとして、これまでに知られた資料群にも再精査・再検討が必要であることが判明してきた。とくに系譜や縁起についてはその必要性が高く、本研究課題としての組織的な取り組みを始めたいと考えている。まずは、性急に「中世後期諏訪信仰研究会」を立ち上げ、1年に3回以上の例会を実施することにする。それによって、中世後期諏訪信仰の実像について、歴史学及び民俗学の分野からのアプローチを進展させる予定である。また、引き続き権祝矢島家文書の調査を進めて、上社における中世後期諏訪信仰の諸相についての考察を進めてゆく。同じく上社の大祝家についても調査を進めるべく、諏訪市博物館に寄託されている大祝家文書のうち、中世後期以降のものを対象として、考察を試みる。それと同時に、下諏訪地域の調査も開始して、中世後期の下社に関する情報を記載した文献類を蒐集してゆく。さらに、夏休みなどの長期休暇を利用して、南九州地域(宮崎県・鹿児島県)における諏訪信仰のフィールド調査も実施する。具体的には、御射山祭を中心とする当該地域の諏訪社の神事を実地調査するほか、当地に伝わる甲賀三郎伝承について、在地のテキストを中心に考察を進めてゆく。これらの研究成果については、逐次公刊論文として発表してゆく。二本松康宏と永松敦は南九州地方における「諏訪縁起」の調査・研究に具体的に着手し、中世諏訪信仰の地方展開について研究を進める予定である。また、二本松は単独においても信州と上州をつなぐ中世諏訪信仰の“道"に関する研究にあたる。中澤克昭は中世史の観点から諏訪信仰と中世城郭に関する研究を展望する。二本松泰子は諏訪市博物館所蔵の大祝家文書等の再検討に入った。本年度は、研究代表者及び研究分担者が主催する「中世後期諏訪信仰研究会」の例会を実施する機会がなかったため、ゲストスピーカーとして招く講師への謝金が残余してしまった。研究例会を年度中に1度しか開催しなかったため、永松敦11,970円、中澤克昭11,355円が余剰した。次年度には長野県諏訪市にて研究例会を開催し、その旅費として執行する予定である。
DNAシーケンサーを用いての高精度塩基配列決定法の開発

DNAシーケンサーによる塩基配列決定の精度を向上させるために,ラムダファージDNAの種々の部位にトランスポゾンを挿入し,PCRと磁気ビーズを用いる方法(Kasai et al.,1992)により,多量の塩基配列の生データを収集し,解析した。ラムダファージDNAの全塩基配列はすでに既知なので,得られたデータについて各塩基の間の間隔(ピークの時間間隔)を測定し統計処理を行ない,3'末端から10,20および30塩基の配列中のそれぞれの塩基の含量と電気泳動時のピーク間隔との関連を調べ,塩基配列と電気泳動の易動度の特色に関するデータベースを構築し,それに基づいて,電気泳動データを塩基配列データに変換する,base-callerプログラムの変更を行い,従来のbase-callerに比較してどの程度の塩基配列決定の精度の向上が見られるかを解析した。さらに,これまでに得られている大腸菌の複製終結点付近の領域の多量の生データについて,この新しいbase-callerを用いての解析を進めるとともに,多数のデータの中からストップやコンプレッションのある塩基配列データを選び出し,確立した新しい方法で塩基配列決定を試み,その精度を検討した。その結果,配列精度については実験データによってかなりのふれはあるものの,従来のbase-callerに比較して塩基配列決定の精度の向上が見られ,300塩基までの配列決定では97-100%,また400塩基までの配列決定についても94-98%の精度で決定できるようになった。ただし,400塩基以上については必ずしも配列決定の精度の向上は見られず,試料やゲルの調整などに大きく依存することがわかった。実際のゲノム解析プロジェクトにこの方法を応用したときの評価も通常400塩基まで程度が限界であり,これ以上の精度の向上はゲル担体など,他の改良に依存することがわかった。ラムダファージDNAの種々の部位にトランスポゾンを挿入し,PCRと磁気ビーズを用いる方法(Kasai et al.,1992)により,多量の塩基配列の生データを収集した。ラムダファーシDNAの全塩基配列はすでに既知なので,得られたデータについて各塩基の間の間隔(ピークの時間間隔)を測定し統計処理を行なうとともに,3′末端から10,20および30塩基の配列中のそれぞれの塩基の含量と電気泳動時のピーク間隔との関連を調べ,塩基配列と電気泳動の易動度の特色に関するデータベースを構築した。現在,このようにして作製したデータベースをもとにして,電気泳動データを塩基配列データに変換する,通常base-callerと呼ばれているコンピュータープログラムの作製・変更にとりかかり,従来のbase-callerに比較してどの程度の塩基配列決定の精度の向上が見られるかを解析すれための準備を進めている。さらに,これまでに得られている大腸菌の複製終結点付近の領域の多量のデータについて,この新しいbase-callerを用いての解析を進めるとともに,多数のデータの中からストップやコンプレッションのある塩基配列データを選び出し,確立した新しい方法で塩基配列決定を試み,その精度を検討する。それによって、現在進行中の実際のゲノム解析プロジェクトにこの方法を応用したときの評価を得られるようにしつつある。昨年,ラムダファージDNAについて得た多量の塩基配列の生データについて,得られたデータをデータベース中の既知データと比較し,これまでの日立SQ3000のbase-callerプログラムによる配列決定の精度とその問題点を検討した。その結果,配列精度については実験データによってかなりのふれはあるものの,決定塩基数が300塩基までについては,95-98%の精度で決定できるが,400塩基までとすると90-96%の精度に低下し,さらに500塩基までになるとこの精度は試料によって大きな差異を生じ,高々90%程度まで低下することがわかった。

そこで,各塩基の間の間隔(ピークの時間間隔)を測定し統計処理を行ない,3'末端から10,20および30塩基の配列中のそれぞれの塩基の含量と電気泳動時のピーク間隔との関連を調べ,塩基配列と電気泳動の易動度の特色に関して構築したデータベースをもとに,各電気泳動レーン間の各塩基の間のピークの時間間隔を測定し,それによって補正を図るようにbase-callerを変更した。それによって,従来のbase-callerに比較して塩基配列決定の精度の向上が見れられ,300塩基までの配列決定では97-100%,また400塩基までの配列決定についても94-98%の精度で決定できるようになった。ただし,400塩基以上については必ずしも配列決定の精度の向上は見られず,試料やゲルの調製などに大きく依存することがわかった。実際のゲノム解析プロジェクトにこの方法を応用したときの評価も通常400塩基まで程度が限度であり,これ以上の精度の向上はゲル担体など,他の改良に依存することがわかった。
オープニング・スイッチを用いた超伝導マグネット巻線短絡現象の研究

近年、超伝導技術の電力分野への適用が試みられるようになり、中でも超伝導マグネットを用いたエネルギー貯蔵システム(SMES)は、系統のロードレベリングなどに有効であることから注目されている。SMESに使用されるような大型超伝導マグネットでは、エネルギーの充・放電やクエンチ発生に伴い、数数十kVの内部電圧が発生する。巻線間での絶縁破壊と短絡は最終的にアーク放電に移行し、貯蔵エネルギーの大部分がここで消費され、マグネットは修復不能な損傷を被ることとなる。したがって、クエンチ時のマグネット保護の観点から、アーク放電発生時のマグネットの挙動を調べることが必要である。本研究では、低温条件下で作動可能なオープニングスイッチと超伝導マグネットを用いた巻線短絡の模擬実験を行い、特にアーク放電消弧に伴うマグネット内部電圧特性について検討した。以下に得られた主な結果を記す。1.機械式オープニングスイッチを用いた超伝導マグネットからのエネルギー転送過程において、スイッチの開放時にアーク放電が発生することを確認した。2.スイッチ間のアーク放電の消弧に伴い、マグネット端子間には振動性の異常電圧が発生する。この振動電圧発生メカニズムの定量的な解析を行った結果、その特性はアーク消弧直前におけるアーク電流と抵抗の変化特性および外部回路のインピーダンスに強く依存することが明らかになった。3.上記の結果に基づき、振動電圧の抑制法として負荷にキャパシタンスを並行接続する方法を提案し、その有効性を実験により確認した。
視床下部特異的SIRT1を指標とした脳・口腔相関の解明

咀嚼を担う重要な器官である歯は、齲蝕や歯周病などさまざまな原因で喪失し、加齢に伴い減少する傾向にある。一方、脳、特に視床下部は老化・寿命制御の上位中枢として機能する。その中で特にNAD+依存性脱アセチル化酵素サーチュイン1(以下SIRT1)は、睡眠の質や老化に伴う生理学的変化を制御する。しかし、視床下部のSIRT1が歯の喪失や口腔細菌叢の変化とどのような関係にあるかは未だ明らかになっていない。そこで本研究は、歯の喪失による視床下部への影響について若齢および老齢マウスの抜歯群と非抜歯群の視床下部を中心として解析し、歯の喪失とSIRT1との因果関係を明らかにすることを、分子生物学的に解析する。
高分子ニトリルオキシドを用いた分子連結法の開発と精密高分子合成への応用

本年度ではニトロアルカン開始剤を用いたリビング重合による高分子ニトリルN-オキシドの合成とクリック反応よる高分子連結を主に検討した。ニトリルN-オキシドの前駆体となるニトロアルカン構造をもつ重合開始剤(もしくはモノマー)を用いた重合反応とそれに続くニトリルオキシド化によって高分子ニトリルN-オキシド合成した。水酸基を有するニトロアルカン開始剤を合成し、有機分子触媒を用いたラクトン及びラクチドのリビング開環重合によってポリエステル型の高分子ニトリルN-オキシドが良好な収率で得られた。これらのリビング重合系を応用することジブロック型や分岐型の高分子ニトリルN-オキシドを得るまでに至った。また、リビングラジカル重合の一つである原子移動ラジカル重合(ATRP)にもこの合成法は適用可能であり、重合後にニトリル-N-オキシド化する手法を用いてビニルモノマー主鎖の高分子ニトリル-N-オキシドや高分子多官能ニトリル-N-オキシドの合成も行った。これらの結果は、ニトロアルカンが各種重合条件において安定に存在し、ニトリル-N-オキシドが前駆体として有用であることを示している。また本手法は、脱水反応の試薬との副反応に注意すれば、リビング重合が許容するモノマー構造由来の高分子ニトリル-N-オキシドが得られる点で非常に意義深く、今後のクリック反応剤としての発展が期待される。加えて、合成した高分子ニトリル-N-オキシドは無触媒クリック反応により高効率なブロックコポリマー、グラフトコポリマー合成への応用が可能であった。特に一番分子量の高いものでは数平均分子量10000のものから60000以上の分子量を持つ構造明確なスターポリマーが定量的に得られ、ニトリルN-オキシドの高反応性を示すことができたと言える。28年度が最終年度であるため、記入しない。安定ニトリルオキシドを用いたクリック反応は新規分子連結法として大きな可能性を秘めており、申請者は種々の重合法で得られた高分子鎖の末端ニトリルオキシドを導入する手法を確立することで様々な性質を有する高分子ニトリルオキシドの合成が可能となり、従来の合成法より簡便かつ高収率で精密な機能性高分子が構築できるという着想に至った。初年度はニトリルオキシドに様々な原子団や置換基を導入するため、アルコキシドなどのヘテロ原子求核剤からニトリルオキシドの安定な前駆体であるニトロアルカンを経由することで新規安定ニトリルオキシドを合成した。この合成法の確立により、重合開始種となる水酸基を有するニトロアルカンだけではなく、原子移動ラジカル重合(ATRP)開始剤、メタクリレートモノマーも合成することができた。またヘテロ原子の導入によりニトリルオキシドの電子状態が変化し、その反応性に違いが生じることを見出した。次にニトロアルカン構造を導入したリビング重合開始剤からポリマー鎖を成長させ、全ての高分子鎖末端にニトロアルカンを導入し、高分子反応によってニトリルオキシド化することで高分子末端ニトリルオキシドを高収率で合成した。この手法により、リビング開環重合、ATRPからポリラクチド、ポリスチレン等の様々な主鎖構造の高分子ニトリルオキシドの合成に成功した。さらにこの高分子ニトリルオキシドと末端アルケン化合物との無触媒、無溶媒下でのジブロックコポリマー、スターポリマー、グラフトポリマーを高転化率、高収率で合成した。またこの反応は無溶媒中でも効率的に進行し、溶媒中の反応に比べて短時間で反応が完結するという利点も見られた。またこれらの反応はいずれも高分子末端の反応にも関わらず非常に高転化率で進行することから、ニトリルオキシドのクリック反応としての高い反応性を表した系であると言える。当初の計画では、初年度は高分子ニトリルオキシド合成を対象とし研究を行う予定であった。しかしながら本研究において用いたニトリルオキシドの前駆体であるニトロアルカンは官能基受容性が非常に高く、一部の酸、塩基触媒及びラジカル存在下においても安定であったため、様々なリビング重合系に適用可能であった、そのため予定よりも迅速に研究が進み、様々な主鎖構造の高分子ニトリルオキシドを早期に合成することができた。その結果2年目の計画である特殊構造高分子の合成に着手することができ、ジブロックコポリマー、スターポリマーの簡便な合成法を見出すに至った。

また本手法は、脱水反応の試薬との副反応に注意すれば、リビング重合が許容するモノマー構造由来の高分子ニトリル-N-オキシドが得られる点で非常に意義深く、今後のクリック反応剤としての発展が期待される。加えて、合成した高分子ニトリル-N-オキシドは無触媒クリック反応により高効率なブロックコポリマー、グラフトコポリマー合成への応用が可能であった。特に一番分子量の高いものでは数平均分子量10000のものから60000以上の分子量を持つ構造明確なスターポリマーが定量的に得られ、ニトリルN-オキシドの高反応性を示すことができたと言える。今後は計画の通り、これまで合成した高分子ニトリルキシドを用いて特殊構造高分子の合成を検討する。初年度ではブロックコポリマーとスターポリマーの合成において高分子ニトリルオキシドの高い反応性を見出したため、さらに複雑な特殊構造高分子の合成について精査する。具体的にはABAトリブロック、ABCトリブロック、ABCDテトラブロックコポリマーなどのシーケンス制御されたブロックポリマーや、ミクトアームスターポリマーやリニア-スターポリマー等の一般的に合成の困難とされる高分子を重合法の異なる、すなわち主鎖構造の極端に異なる高分子同士の連結によって合成する。場合によっては他のクリック反応を併用する。研究のポイントとしては、物性を左右する高分子ニトリルオキシドの選択と反応後の生成物の単離であるが、分取GPC、沈殿分別法、透析法を駆使してこれを達成する予定である。28年度が最終年度であるため、記入しない。
周期行動と内部状態の共振から創発される行動制御

四脚動物やゾウリムシの行う周期的な行動と内部状態についての数理モデルを作成し、数値計算を行った。その結果、四脚動物の歩容遷移については減衰振動子を仮定することにより、再現可能であることがわかった。この減衰振動子は神経振動子でも再現可能であるが、物理的な相互作用のみでも創発可能である。この結果を基に東北大学石黒章夫研究室にて、物理的な相互作用のみで自発的にウォーク・トロットの歩容遷移を行うロボットの作成を行った。また、ゾウリムシの容器形状記憶実験については数理モデルを構築した。現在は、はこだて未来大学中垣俊之研究室において実験を行ってもらい、実際の生物との相関性を調べている四脚動物やゾウリムシの行う周期的な行動と内部状態についての数理モデルを作成し、数値計算を行った。現在は、はこだて未来大学中垣俊之研究室において実験を行ってもらい、実際の生物との相関性を調べている本研究は生物の内部状態と周期運動の共振現象に着目したモデルを用い、研究を推進するものである。本年度は特に四脚動物の歩容遷移に対しての数値計算及び実機製作を行った。馬等の四脚動物は歩行・走行の速度によってその歩容をウォーク・トロット・ギャロップというように変化させる。一方でラクダ等の四脚動物はトロット歩容の代わりにペース歩容を行い、速度と共にウォーク・ペース・ギャロップと歩容を遷移させる。このような歩容遷移時にはDuty比と呼ばれる脚の動き1周期内での支持脚期の比率も変化することが観測されている。すなわち、低速時には安定性が重要であるためDuty比が高く、高速時では低くなっている。この歩容遷移という現象に対し、共振という観点から数理モデルをたて、シミュレーションを行った。申請書の段階では重心の左右のぶれ・腰の捻り・背骨の屈折の3つの内部状態を仮定して数理モデルを構築し、ペース・トロット・ギャロップの歩容遷移を再現していた。特にウォーク歩容は脚の倍振動数によって共振をさせていたが、その後の研究で重力による影響に着目することにより倍振動数を仮定することなくウォーク歩容を再現する事が可能であることがわかった。このように身体特性を変えることなく、脚の角速度のみで実際の四脚動物の歩容遷移が再現できたわけである。このように歩容遷移が全て再現できただけでなく、Duty比も再現できており自発的に安定な歩容が得られるメカニズムの解明に成功した。これらの理論を基に東北大学石黒章夫研究室との共同研究で脚間の神経相互作用の無いロボットの製作を開始し、安定したウォーク歩行が得られた。本研究は生物の内部状態と周期運動の共振現象に着目したモデルを用い、研究を推進するものである。本年度は特に四脚動物の歩容遷移に対しての数値計算及び実機製作と、ゾウリムシの容器形状記憶についての数値計算を行った。四脚動物は歩行・走行の速度によってその歩容をウォーク・トロット(ペース)・ギャロップというように変化させる。前年度までの研究で脚の角速度のみで歩容遷移が再現可能であることがわかった。これまでは重心の左右のぶれ・腰の捻り・背骨の屈折の3つの内部状態を仮定して数理モデルを構築したが、23年度では身体のロール方向の回転・腰の捻り・身体のピッチ方向への回転についても同等の結果が得られることが確認された。その後、との結果を基に一般的な固有モードに対しての数理モデルに改良することにより、より複雑な構造に対しても理解が可能となった。これらの理論を基に東北大学石黒章夫研究室との共同研究で脚間の神経相互作用の無いロボットの製作を開始し、安定したウォーク歩行に加え、ウォーク・トロット間の歩容遷移が実機にて確認できた。また、ゾウリムシの容器形状記憶についての数値計算を行った。本研究は1935年にFritz Bramstedtが行った、ゾウリムシが容器の形状を記憶するという実験に基づいている。だが、本論文では詳しいデータが少ないため、はこだて未来大学中垣俊之教授の研究室にてテトラヒメラによる追実験を開始し、それと共に数理モデルの改善を行っているところである。本研究は真正粘菌変形体が外部からの周期的刺激に対して予測や記憶・想起を持つという研究をもとにしたものである。これは外部から周期刺激を与えると生物内部の隠れた振動子が共振した結果、単細胞生物であっても予測や記憶・想起といった知的活動を行う事ができるというものである。一方で生物は歩行などの周期的な動作をする。これらは生物の内部状態に様々な影響を及ぼし、周期的な刺激となる。その結果、生体内の隠れた周期が発現し、生物の行動制御に影響を与える。本研究では、単細胞生物の知的な行動制御や四足歩行動物の歩容遷移現象に対し周期動作と内部状態の共振に着目し、生物のタスク遂行を数値・実機実験により理解するものであった。

四脚動物の歩容遷移現象については、物理的な相互作用のみで歩容遷移現象を引き起こす数理モデルを構築し、その内容について東北大学石黒章夫研究室と共同で実機実験を行った。その結果、予想どおりウォーク・トロットの遷移を自発的に引き起こすロボットの製作に成功した。ギャロップについてはロボットの駆動力・耐久性の問題から実現しておらず、今後の課題として残っている。単細胞生物の知的制御である容器形状記憶実験についても数理モデル・数値計算は概ね完成しており、現在はこだて未来大学の中垣俊之研究室にて実験を行っている。円形の容器形状を記憶する結果は得られており、正多角形の記憶実験を行う予定である。四脚動物の歩容遷移についての数理モデル・解析はかなりまとまり、現在論文にまとあている。ゾウリムシ(テトラヒメラ)の容器形状記憶についても数理モデルはかなりまとまり、連携研究者による実験データが集まるのが律速となっている。このような状態であるため、研究は順調に推進しているということができる。24年度が最終年度であるため、記入しない。上記のように順調に進展しているため、特に問題はない。今後については以下のように研究を推進する。四脚動物の歩容遷移、1、数理モデルやその解の分岐の解析・証明2、実機によるギャロップへの歩容遷移ゾウリムシの容器形状記憶1、実験データとのフィッティング、2、数理モデルの解析24年度が最終年度であるため、記入しない。
漢字文化圏におけるカント哲学の翻訳・受容の影響作用史の研究

本研究は、次のような研究成果を挙げた。第一に、日本、韓国、中国・台湾の漢字文化圏におけるカント哲学の翻訳・受容の現状と課題を解明した。第二に、日本、韓国、中国・台湾におけるカント哲学研究の国際的なネットワークを構築することができた。第三に、日本、韓国、中国・台湾におけるカント哲学の翻訳・受容の影響作用史の課題を解明することができた。最後に、本研究の一部は、すでに『東アジアのカント哲学』に発表された。研究2年目は、第一に中国における代表的なカント研究者・北京大学哲学系の韓水法教授との聞き取り調査を実施した。第二に、韓教授との共同討議を実施して、中国版のカント主要著作及び主要文献の現状と課題について、翻訳・受容の影響作用史の共同研究を実施した。第三に、韓国では韓国カント学会元会長の朴遠澤・東義大学教授との聞き取り調査を行い、韓国版のカントの主要著作及び主要文献の現状と課題について、翻訳・受容の影響作用史の共同研究が実現した。それによって、研究課題実施2年目の主要研究課題であるカント批判期哲学における三批判書を中心にしたカント哲学の重要概念の解釈上の論争点の所在が確認できるようになった。第四に、台湾では、当地の第一級のカント研究者である李明輝・台湾中央研究院中国文哲研究所教授との共同研究が実現した。その結果、中国・台湾、韓国、そして日本におけるカント研究者の最新の研究状況や重要な研究資料及び情報を入手することができた。特筆すべきことは、台湾中央研究院における昨年4月から5月における研究代表者の二つの講演及び本年3月における講演による共同研究の成果にある。これらの三つの研究代表者の講演は、参加した台湾大学のカント研究者を含めて大きな刺激を与えた。そこで、目下、その共同研究の成果を論文集として刊行する計画が進んでいる。本年度は、そのための準備として優れた研究文献の翻訳も一定程度進めることができた。この点のさらなる具体化は、次年度の研究課題に属することになる。初年度は、第一に中国での研究目的としては、中国語版カント著作全集の編集者・訳者である李秋零・中国人民大学教授への聞き取り調査を実施した。第二に、李秋零・中国人民大学教授と中国語のカント主要文献及び主要関連文献について、カント哲学の文献の翻訳・受容の影響作用史の共同研究を実施した。第三に、韓国においては、韓国カント学会会長の金珍・蔚山大学教授、柳志漢・東義大学教授への聞き取り調査を実施し、韓国語版のカント哲学の主要著作及び主要関連文献について討論の場を設定して、翻訳・受容の影響作用史の共同研究を実施した。それによって、初年度の主要な研究課題であるカント批判期哲学における三批判書を中心にしたカント哲学の重要概念の訳語対照表の作成が開始可能になった。さらに台湾における研究としては、当地での第一級のカント研究者である彭文本・台湾大学教授、李明輝・中央研究院中国文哲研究所教授への聞き取り調査を実施した。その結果、台湾での最新の研究状況や重要な研究資料も入手することができた。これは、今後の研究の進展にとって重要な成果である。さらにこれらの調査及び研究によって入手した中国語及び韓国語の文献の日本語訳にも着手しており、近くそれに基づく研究の成果の公表も可能になった。本研究の目的は、平成24年度から平成26年度までの三年間に及ぶ漢字文化圏におけるカント哲学の翻訳・受容の影響作用史の研究にあった。この研究目的を有効かつ効率的に実現するために、本研究代表者は、日本、韓国、中国・香港・台湾等のカント哲学文献の翻訳及び受容の状況の調査や資料収集及び上記の諸国・諸地域のカント研究者のインタビュー、そして共同研究や発表の場を設定した。本研究は、初年度から最終年度まで、非常に順調に研究課題を遂行することができた。初年度には、関連諸国・諸地域のカント哲学文献の翻訳書や研究書の収集が順調に進んだ。二年目には当初の研究目的の計画以上に関連する研究者との情報交換や相互の研究交流が進んだ。その結果、日本のカント哲学における翻訳及び受容の歴史と、影響作用史に関する研究上の課題が共有できるようになった。最終年度の平成26年度は、香港中文大学の研究者の尽力により、香港におけるカント哲学の翻訳・受容史と漢字文化圏の影響作用史を研究することができた。韓国ソウル大学哲学系白琮鉉教授との共同研究も実現した。さらに台湾中央研究院中国文哲研究所との共同研究や討議の機会を継続することができた。その結果、漢字文化圏におけるカント哲学の影響作用史に関する日本、韓国、中国・台湾の研究者による論文集を日本語、韓国語、中国語で刊行することになり、2014年7月に韓国語版の論文集が刊行され、2015年3月には、本研究代表者による大幅な加筆・修正を加えた日本語版論文集『東アジアのカント哲学日韓中台における影響作用史』(本研究代表者編、法政大学出版局刊行)が刊行された。

これは、本研究代表者の個人的な負担による刊行である。なお、本年夏までには台湾から本論文集の中国語版が刊行される予定である。このようにして、本研究目的は、最終年度内に、予想以上の大きな成果を挙げることができた。人文学当初の研究計画では、研究課題の主要目的である中国・台湾、韓国におけるカント哲学の翻訳及び受容の歴史について、基礎文献の収集と聞き取り調査の継続及び共同研究を開始することであった。今年度、幸いにも、本研究目的は、基礎文献の収集や当該諸国のカント研究者の聞き取り調査の対象も拡大することができたので、当初の予想以上の多くの優れた研究者から有益な資料の提供や最新情報を入手できた。さらに共同研究や講演の機会も予想外に多く得ることができた。中国では、ドイツとの積極的な研究交流を行っている北京大学哲学系の教授との情報交換や共同研究の機会を得たことは大きな収穫であった。また、台湾中央研究院では、本年度、研究代表者はカント哲学にかんする三回の講演を実施することができた。さらに韓国でも、最新の研究資料や重要な情報を入手することができた。加えて、優れた研究文献の翻訳・紹介も予想以上に進んだ。これらは、いずれも、当初計画以上の研究の進展であり、予想外の成果を上げることができた。当初の計画では、本研究課題の主要目的である中国、韓国におけるカント哲学の翻訳及び受容の歴史について、カント哲学関係の基礎文献の収集に努め、同時に当該諸国のカント研究者の聞き取り調査及び共同研究を開始することであった。幸いにも、本研究目的は、カント哲学関連の基礎文献や関連文献の収集についても、当該諸国のカント研究者の聞き取り調査や共同研究についても、予想以上の研究成果を挙げることができた。中国語版カント著作全集の編者・訳者の李秋零・中国人民大学教授や韓国では、韓国カント学会会長の金珍・蔚山大学教授、柳志漢・東義大学教授等による調査協力や共同研究が予想以上に有効に機能した。その結果、まだ公刊されていない新たな資料や従来知られていなかった事実関係の発見もあり、今後のカント哲学研究の課題がいっそう明確になった。さらに当初の計画では予定していなかった台湾では、当地のカント研究者二名の聞き取り調査及び共同研究を開始することができた。その結果、台湾での最新のカント哲学研究の成果も入手することができただけでなく、それらの資料の翻訳作業や解読作業に着手することによって、中国語のカント文献の分析や理解が予想以上に進展している。来年度の研究の推進方策は、来年度が本研究計画の最終年度なので、以下の諸点にまとめるよう考慮した。第一に、本研究課題の主要課題に属するカントの主著『実践理性批判』や『判断力批判』を中心にして、カントの批判期の実践哲学・美学・目的論・歴史哲学等の思想を受容史及び翻訳史的観点から研究する。第二に、これまでの研究活動によって収集した重要な文献や有益な資料の分析・考察を、主として重要な概念・術語に即して進めることで、研究課題の集約に着手する。第三に、中国・台湾、韓国におけるカント哲学の翻訳・受容史と影響作用史について、日本におけるカント研究の翻訳・受容史を中心に据え比較考量しながら、漢字文化圏における日本、中国・台湾、韓国すべての国家・地域の研究状況の進捗状況をまとめる。
疾患細胞分化誘導技術を応用した線維筋痛症の疼痛機序解析と治療法の探索

線維筋痛症は全身の激しい疼痛を主症状とし、疲労感、うつ症状や睡眠障害といった様々な症状が併発する疾患である。原因は「脳」にあるのではないかと議論されているが、統一した見解が得られず、未だ原因が不明である。そこで、本研究課題では、線維筋痛症の病態を細胞生物学的に明らかにするために、線維筋痛症患者iPS細胞あるいは体細胞から、中脳ドパミン神経あるいは末梢知覚神経へと分化誘導し、細胞種横断的に、器質的あるいは機能的変化の網羅的比較解析を行う。さらには、同定した疾患関連分子を標的として、細胞種特異的に遺伝子組換えを行い、線維筋痛症動物モデルの作製を試みる。
樹木の導管・仮導管細胞の形成に与える環境ストレスの評価に関する研究

本研究ではアカマツの衰退後の光環境の改善にともなう亜高木個体の成長を説明するとともに、枯死アカマツバイオマスの推定を推定した。竜王山の全899個体のうち、アカマツ168個体、スギが105個体の他、広葉樹13種626個体(ヒサカキ・ネジキ・クロガネモチなど)が確認された。林冠種アカマツには樹高20m以上・直径40cm程度の個体もあったが、枯死率は90%近くにのぼり、その下層にスギ・コナラ・コシアブラ(15m以下)が、林床付近にはイヌツゲ・コバノミツバツツジ(1.5m以下)が見られた。枯死アカマツの樹齢は同定できなかったが、採取した現生個体は27年程度、スギは57年程度、広葉樹は30年程度と推定された。年輪幅の経年変化からは1994年の乾燥年に一様に狭くなっている現象のほか、亜高木の最近の年輪幅に増加傾向が見られた。広葉樹の場合、導管面積率も拡大していることから、伸長に必要な水分の吸引を効率化するためと推察された。しかし、小サイズの広葉樹の導管面積率には増加が認められないことから、成長に必要な光条件が制限要因になっていると考えられた。事実、晴天日の林外と林床の南中時の照度には約13倍の差があった。なお、樹幹ドリル抵抗値から林分の傾斜方向による材質の硬軟の違い(あて材)が検出された。松賀山で採取した現生アカマツの平均樹齢は約33年と若かったが、これも周辺の樹木による被圧の大小によって年輪幅が近年増加傾向になっているか、狭いままかに大別された。枯死率は竜王山と同様に約90%で、幹折れ・倒伏個体を含む枯死アカマツのバイオマスは最小で2204t/km^2、最大で10870t/km^2と推定された。気候ストレスや林分の変化に対する樹木の反応を細胞レベルで調べるため、初年度(平成11年度)は樹幹横断面の薄片試料の作製法を確立するとともに、広島県東広島市の西条盆地にある竜王山で毎木調査(50×50m^2)と樹幹試料の採取、樹幹横断面の年輪解析を行った。薄片試料の作製法は広葉樹を中心に検討した。試料の採取方法や顕微鏡からの反射・透過入力の方法によって異なるが、生木への損傷を最小限にするならば、成長錐によるコアサンプルを溝付きの角材にマウントして研磨する方法、伐採が可能な場合は丸のこ盤でチップ状にしてから角材に貼付して研磨する方法、またはチップから両面研磨による薄片の作製がよい。ミクロトーム法は切削面の精度の上では画像解析にもっとも望ましいが、大面積の樹幹試料では大量の切片を作製することになり、成長の履歴を追跡するには難がある。一方、現地調査を行った竜王山は国有林に指定されていて1980年頃からアカマツが枯死した林分であるが、林冠層(15m)を覆っていたアカマツが衰退したことによって光条件が改善し、亜高木層の広葉樹や50年前に植林されたヒノキの年輪幅が広くなっていた。導管レベルでは単位面積当りの導管面積率が増加し、被圧から解除された樹木が樹高(またはバイオマス)を拡大する際に必要な水分のポンプアップを急速に展開していることが伺えた。しかし、林内最下層の樹種にはその傾向が見られず、アカマツの枯死の影響は林床まで達していなかったと推察される。

枯死率は竜王山と同様に約90%で、幹折れ・倒伏個体を含む枯死アカマツのバイオマスは最小で2204t/km^2、最大で10870t/km^2と推定された。
脳室内出血における新規治療開発を目指した鉄イオン誘発神経細胞障害の機能解析

脳室内出血の予後不良因子は、1急性または遷延する水頭症、2それによる脳構造物の圧迫、3漏出した血液由来成分による神経組織障害、などである。1、2に対し水頭症解除目的の脳室ドレナージ手術が行われるが、術後脳室拡大が改善しているのに関わらず意識障害が遷延することがある。これは水頭症の病態以外に脳障害を引き起こす機序、すなわち上記3の関与が考えられる。具体的には出血した赤血球より遊離したhemoglobin内に含まれる鉄イオンが活性酸素種を発生し、細胞膜損傷を起こすとされている。近年、鉄キレート剤が鉄イオン誘発細胞障害を軽減させる報告もある。本研究はラット脳室内出血モデルを作成し、脳室近傍の神経組織における鉄イオン誘発細胞障害の分子機構の解明、かつ鉄キレート剤がその細胞障害に及ぼす影響を検討するものである。すなわち脳室内出血の治療として現行のドレナージという髄液循環障害の治療に加え、内視鏡下脳室内血腫除去といった血液成分除去目的の手術介入が必要か、あるいは鉄キレート剤が脳室内残存血腫による二次的脳損傷を抑制する新規薬剤となりうるかを追求するものである。脳室内出血により惹起される脳室上衣細胞や海馬神経細胞の障害を検証する目的で脳室内出血モデルラット作成を試みた。雄性Wister ratを、脳定位固定装置下で頭蓋骨を穿頭、尾静脈より採取した自己血を右側脳室内に注入、24時間後に脳を摘出、潅流固定後に連続切片を作成したが、元々の脳室容積が小さいが故、脳室内に血液が充満するような血液注入が困難で、自己血注入量を調整しても至適脳室内出血モデルラットの作成に至らなかった。本研究の初期段階であるモデルラット作成の段階で研究期間が終了、実験が完結できなかったが、本研究仮説の証明は現状より質の高い脳卒中治療の提供に寄与すると確信しており、引き続き良質なモデルラット作成を試みる予定である。脳室内出血の予後不良因子は、1急性または遷延する水頭症、2それによる脳構造物の圧迫、3漏出した血液由来成分による神経組織障害、などとされている。1、2に対し早期の水頭症の解除、すなわち脳室ドレナージ手術が外科治療として行われるが、術後脳室拡大が改善しているにもかかわらず意識障害が遷延することを日常臨床で経験する。これは水頭症の病態以外に脳障害を引き起こす機序、すなわち上記3の関与を示唆するものである。出血した赤血球より遊離したhemoglobin内に含まれる鉄イオンが活性酸素種を発生し、細胞膜損傷を起こすとされている。近年、鉄キレート剤(deferoxamine mesylate)が上記鉄イオン誘発細胞障害を軽減させる報告もある。本研究はラット脳室内出血モデルを用い、脳室内に近接する神経組織においての鉄イオン誘発細胞障害の分子機構を解明し、また鉄キレート剤がその細胞障害に及ぼす影響を検討するものである。すなわち脳室内出血の治療としてドレナージという髄液循環障害の治療に留まっている現行の治療に加え、それ以上に血液成分を除去する、例えば内視鏡下脳室内血腫除去といった積極的な外科的介入が必要か、あるいは、鉄キレート剤が脳室内残存血腫による二次的脳損傷を抑制するpromising neuroprotective agentとなりうるかを追及するものである。現在、脳室内出血により引き起こされる脳室上衣細胞や海馬神経細胞の障害を明らかにする目的でモデルラットを作成している。体重350-400gの雄性Wistar ratを用い、isoflurane麻酔下に脳定位固定装置上に静置、頭蓋骨を露出させ、burr holeを作成、尾静脈より100μlの自己血を採取後速やかに右側脳室内に注入、脳室内出血モデルを作成している。至適脳室内出血モデルラット作成に困難を呈している。脳実質内への血液注入と異なり、脳室が小さく、脳室内に血液を注入しにくい状況である。1、2に対し早期の水頭症の解除、すなわち脳室ドレナージ手術が外科治療として行われるが、術後脳室拡大が改善しているのに関わらず意識障害が遷延することを日常臨床で経験する。本研究はラット脳室内出血モデルを用い、脳室内に近接する神経組織に置いての鉄イオン誘発細胞障害の分子機構を解明し、また鉄キレート剤がその細胞障害に及ぼす影響を検討するものである。すなわち脳室内出血の治療としてドレナージという髄液循環障害の治療にとどまっている現行の治療に加え、それ以上に血液成分を除去する、例えば内視鏡下脳室内血腫除去といった積極的な外科的介入が必要か、あるいは、鉄キレート剤が脳室内残存血腫による二次的脳損傷を抑制するpromising neuroprotective agentとなりうるかを追求するものである。体重350-400gの雄性Wister ratを用い、isoflurane麻酔下に脳定位固定装置上に静置、頭蓋骨を露出させ、burr holeを作成、尾静脈より100μ