hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
実験最慢性ウイルス性心筋炎に関する基礎的研究

(はじめに)拡張型心筋症の2030%は慢性ウイルス性心筋炎が原因ではないかと推測されれている。しかし、慢性ウイルス性心筋炎がどのような経緯で拡張型心筋症に移行していくか、また、急性ウイルス性心筋炎から慢性心筋炎に移行するメカニズムはまだ明らかではない。本研究では上記メカニズム解明のための動物実験を行った。(方法)生後1、2日のSD、Wistar、FisherラットにコクサッキーB3ウイルス(CVB3)を腹腔内投与、接種後3日、14日、6ヶ月の時点で、ペントバルビタール麻酔下で心臓及び他臓器を摘出、以下の実験を行った。1.ホルマリン固定を行った臓器から組織切片を作製、Masson trichrome染色後光顕にて観察。2.凍結切片に抗CD4、抗CD8、抗MHC classI、class IIモノクローナル抗体を用いて免疫組織学的検索を行った。3.rapid in situ hybridizationを用いたウイルスゲノムの検出。(結果)接種後3日、14日ではrapid in situ hybridization法で心臓、腎臓、胸腺にCVB3ウイルスゲノムを認めた。一方6ヶ月の時点ではCVB3ウイルスゲノム検索では陰性であった。また、病理組織学的には心臓の心内膜直下に線維化がみられるのみで心筋細胞の脱落、置換性線維症は見られなかった。免疫組織化学的検索ではCD4、CD8陽性細胞が数個単位で集まっているのがみられた。MHC class Iはコントロール群と同様ほとんど陰性であったが、class IIはコクサッキーB3投与群でわずかに陽性を示した。(まとめ)ラットに対するコクサッキーB3腹腔内接種後2週以内の急性期ではウイルスゲノムは臓器に存在するが、6ヶ月(慢性期)の時点ではあきらかな心筋炎の持続は認められなかった。(はじめに)ラットはウイルス感染に強い抵抗性を有するため、これまで動物実験でのウイルス性心筋炎にはマウスがもちいられている。しかし、ラットは免疫組織学的にヒトと共通抗原性を有することから、ラットで実験的ウイルス性心筋炎を発症させることができればそれを検討することによってヒトでの変化を推測できるという意義がある。本研究ではコクサッキーB3ウイルス(CVB3)感染ラットの作製と、それが急性期の心筋炎モデルとして用いることが可能かどうかを検討した。(方法)生後1-2日のSD、Wistar、Fisherの三種類のラット各12匹を用い、それぞれ対照群(C)とCVB3腹腔内接種(10^6PFU)群(B)の2群に分け、生後3,5,7,14日目にペントバルビタール麻酔下で心臓、肝臓、胸腺、脾臓、腎臓を摘出した。これらに10%ホルマリン固定を行い、パラフィン包埋後5umの切片を作製し、HE染色、Masson trichrome染色を行い、さらにrapid in situ hybridization法を行って、病理組織学的に観察した。(結果)生後3日目のSD,Wistarラットにおいてすべての臓器で光顕的には明らかな変化は見られなかったが、rapid in situ hybridization法で心筋、腎臓の糸球体、近位尿細管、胸腺にCVB3ウイルスゲノムを認めた。これは生後14日目においても同様に認められた。一方、心臓における光顕的変化は生後8日目から認められた。Fisherラットは他2者に比べて組織学的変化、ウイルスゲノム陽性の程度は軽い傾向にあった。(まとめ)今回の研究は急性期の心筋炎の検討であるため、今後はさらにコクサッキーウイルス投与後長期モデルの作製と、ウイルス接種の方法を検討する予定である。(はじめに)

拡張型心筋症の20-30%は慢性ウイルス性心筋炎が原因ではないかと推測されている。しかし、慢性ウイルス性心筋炎がどのような経緯で拡張型心筋症に移行していくかということはまだ不明である。その前に、急性ウイルス性心筋炎から慢性心筋炎に移行するメカニズムもまだ明らかではない。本研究では動物実験において慢性心筋炎成立のメカニズムと、それが拡張型心筋症に移行し得るか否かを検討した。(方法)生後1-2日のSD、Wistar、Fisherの三種類のラットにコクサッキーB3ウイルスを接種、2週以内に心臓、肝臓、胸腺、腎臓を観察。慢性期も病理組織学的観察、また、in situ hybridization法による検討を行った。組織学的観察はホルマリン固定を行った心臓から5μmの厚さの切片を作り、HE染色、マッソン染色を行い、光学顕微鏡にて観察。心筋内ウイルスの検出は従来のin situ hybridizationに比べて短時間かつ安定性のあるビオチン標識オリゴヌクレオチドをプローブとして用いたrapid in situ hybridizationによって検索した。心臓をホルマリン固定後、パラフィン包埋した組織から厚さ3μmの切片を作製してウイルスゲノムの検索を行った。(結果)生後数日より、心臓、腎臓、胸腺にコクサッキーB3ウイルスゲノムが認められたが、肝臓、大脳、肺、大腸、小腸ではみられなかった。慢性期は心内膜直下に線維化がわずかに観察されたが、他臓器には変化がなく、ウイルスゲノムも陰性であった。(まとめ)慢性期の観察では心筋炎の後遺症はみられなかった。今後さらにウイルスの接種量や方法を検討する必要がある。(はじめに)慢性心筋炎と心筋症との関連が推測されているが、慢性ウイルス性心筋炎がどのような経緯で拡張型心筋症に移行していくかというメカニズムはまだ不明である。急性ウイルス性心筋炎から慢性心筋炎に移行するメカニズムもまだ明らかではない。(方法)生後1-2日のSD、Wistar、FisherラットにコクサッキーB3ウイルスを腹腔内投与、対照僻(コントロール)とともに6ケ月飼育、ペントバルビタール麻酔下で心臓を摘出、以下の実験を行った。1.ホルマリン固定を行った心臓から心筋切片を作製、Masson trichrome染色後光顕にて観察。2.凍結心筋切片に抗CD4、抗CD8、抗MHC class I、抗MHC class IIモノクローナル抗体を用いて免疫組織学的検索を行った。3.rapid in situ hybridizationを用いた心筋内ウイルスゲノムの検出。(結果)病理組織学的には心臓の心内膜直下に線維化がみられるのみで心筋細胞の脱落、置換性線維症は見られなかった。コクサッキーB3ウイルスゲノム検索では陰性であった。免疫組織化学的検索ではCD4、CD8陽性細胞が数個単位で集まっているのがみられた。
インデックス・ファンドの構成とその性質の解明

一定の収益を保証し最小のリスクを与える市場ポートフォリオや、ベンチマークとしての日経225に類似した挙動を示す構成銘柄数が少ないインデックス・ファンドを従来研究とは異なった基準(最小2乗誤差)を用いて実現した。さらに、その性質を数学的に検討して解明した。研究成果は合計3編の論文としてまとめられ、その2編は公刊、残る1編は査読付きの雑誌に採択されて印刷中である。(1)本研究で新たに得られた成果ベンチマークの収益率と2乗誤差の期待値を最小にするインデックス・ファンドの諸性質について考察し、両者の間の相関係数について新たな知見を得た。すなわち、ベンチマークが効率的フロンティア上にない場合、基準を最小にするフロンティア上のポートフォリオとの間の相関係数が最大になることを導いた。さらに、ベンチマーク・ポートフォリオが効率的フロンティア曲線上にあるか否か応じて、基準を最小にするインデックス・ファンドの期待収益率間の大小関係を導出した。以上の結果は伝統的な基準のもとで得られた諸結果とも類似していることを確かめた。さらに、本研究で得られた結果を大学院学生の博士論文の材料として活用し、目標計画法を適用した現実により近い投資問題を解明するのに有力な武器になることを確かめた。(2)今後の研究本研究では、求めるべきインデックス・ファンドのユニバースに含まれる銘柄は既知であると仮定したが、実務的にはそれらを求める効率的で大規模な問題を解決するアルゴリズムの開発が残された研究課題の1つである。市場ポートフォリオのようなベンチマークと同程度のリスクと収益を与え、かつ、構成銘柄数がそれよりもはるかに少ないインデックス・ファンドの構成法を従来研究されているのとは異なった基準(トラッキングエラー)である最小2乗誤差を採用し、数学的分析を加えた結果、以下の研究成果を得た。その成果は2編の論文としてまとめ、その1編は公刊され、残る1編は雑誌に採択されて印刷中である。(1)本研究で新たに得られた成果ベンチマークの収益率と2乗誤差の期待値を最小にするインデックス・ファアンドの諸性質について考察し、両者の間の相関係数について新たな知見を得た。(2)今後の研究今までに得られた結果では既存の論文と同様に求めるべきインデックス・ファンドのユニバースに含まれる銘柄は既知であると仮定したが、実務的にはそれらを求めることが重要な問題である。そのための効率的なアルゴリズムの開発は極めて難解であろうが、今年度の残された研究課題の1つである。(1)本研究で新たに得られた成果ベンチマークの収益率と2乗誤差の期待値を最小にするインデックス・ファンドの諸性質について考察し、両者の間の相関関係について新たな知見を得た。すなわち、ベンチマークが効率的にフロンティア上にない場合、基準を最小にするフロンティア上のポートフォリオとの間の相関関係が最大になることを導いた。さらに、ベンチマーク・ポートフォリオが効率的にフロンティア曲線上にあるか否か応じて、基準を最小にするインデックス・ファンドの期待収益率間の大小関係を導出した。

さらに、本研究で得られた結果を大学院学生の博士論文の材料として活用し、目標計画法を適用した現実により近い投資問題を解明するのに有力な武器になることを確かめた。(2)今後の研究本研究では、求めるべきインデックス・ファンドのユニバースに含まれる銘柄は既知であると仮定したが、実務的にはそれらを求める効率的で大規模な問題を解決するアルゴリズムの開発が残された研究課題の1つである。
高気圧酸素療法による放射線感受性増感メカニズムの解明

臨床試験ではGBMにおける高気圧酸素療法を併用した放射線治療が有効であるが、その分子機序は解明されておらず、本研究では異種移植動物モデルを作製し腫瘍内における遺伝子発現が放射線単独照射群と高気圧酸素療法併用群で相反して上昇した遺伝子について放射線感受性への影響を検討した。腫瘍細胞株U87-MG細胞のTet-on発現誘導株を構築し、スフェロイド形成後に遺伝子発現誘導を行っても、低酸素マーカーであるピモニダゾール陽性となった。高気圧酸素療法併用群と放射線単独照射群において相反して上昇した遺伝子が低酸素の脱却に関わるのではなく放射線感受性の亢進に寄与していることが示唆された。グリオブラストーマ細胞株を異種移植した腫瘍における網羅的遺伝子解析の結果、放射線単独照射群と高気圧酸素療法併用群で相反した遺伝子についてTet-ON Advancedsystemを用いた薬剤依存的高発現細胞株の樹立に着手した。まずTet-ON3Gタンパク質発現細胞株を得るため、U87-MG細胞にpEF1-Tet3Gプラスミドをトランスフェクションし、G418による薬剤選択により数系統の細胞株を樹立した。発現量解析の結果、相反した2遺伝子をそれぞれTREプロモーターの下流に挿入したプラスミドを構築するためそれぞれの遺伝子をPCRによりクローニングし配列を確認した。得られた遺伝子配列を、TREプロモーター配列の下流に組み込んだプラスミドを構築した。完成した2遺伝子のプラスミドをそれぞれ樹立した細胞株にトランスフェクションしたのち、薬剤選択にてそれぞれの遺伝子におけるTet-ON細胞株を樹立途中である。並行してグリオブラストーマ細胞株をスフェロイド培養するための条件検討を行った。増殖因子のEGFおよびNGFの濃度を変化させて至適濃度を決めた。培養条件により作成したスフェロイドを細胞用高気圧酸素チャンバーに入れ、培養時間および気圧を変化させ酸素化度をピモニダゾール処理と抗ハイポキシプローブ抗体を用いて検討している。スフェロイドの組織染色はパラフィン固定に難航し、固定化の条件検討に時間を費やした。初年度に計画していた、高発現細胞株の樹立において、遺伝子クローニングとプラスミドの構築は順調に進み、Tet-ON3Gタンパク質発現細胞株は樹立した。TREプロモーターの下流にそれぞれの遺伝子を組み込んだプラスミドを樹立した細胞にトランスフェクションし樹立間近であるため。また、細胞用高気圧チャンバーの条件検討およびスフェロイド細胞魂の組織染色法についても至適条件をつかむことができた。Tet-onシステムを用いた発現誘導細胞株の樹立を27年度から引き続き行った。遺伝子発現解析により放射線単独照射群と高気圧酸素併用放射線照射群で相反して変動した2遺伝子についてテトラサイクリン誘導発現細胞株を得るため薬剤選択で単離を試みた。しかしながら、1遺伝子は発現量の異なる細胞株が樹立できたが1遺伝子について幾度もトランスフェクションや培養の条件を変えて実験したが、細胞死を起こすか薬剤により淘汰されてしまい樹立にはいたらなかった。樹立できた遺伝子の細胞株をテトラサイクリン誘導によるタンパクの発現をウェスタンブロッティングにて確認した。発現量の異なる3株をスフェロイド培養し通常酸素および高気圧酸素下にて培養を行った。低酸素マーカーであるピモニダゾール染色により通常酸素下でコントロール細胞のスフェロイド中心部は低酸素状態であるが高気圧酸素処理したスフェロイドの中心部位は酸素化されていることが確認できた。高気圧酸素併用群で発現上昇した遺伝子をテトラサイクリンで高発現させたところ、発現量が異なる細胞株のどれもがスフェロイドの中心部位は通常酸素化ではピモニダゾール陽性細胞が多くコントロールのスフェロイドと同様に低酸素細胞が多いことが明らかになった。遺伝子誘導だけでは低酸素細胞から脱却できないことが明らかになったため高気圧酸素療法による放射線感受性に物理的な酸素化とは別のメカニズムの存在が示唆された。遺伝子発現解析により放射線単独照射群と高気圧酸素併用放射線照射群で相反して変動した2遺伝子についてテトラサイクリン誘導発現細胞株を薬剤選択での単離を試みたが、1遺伝子は樹立できたが1遺伝子について何度も培養したが樹立にいたらなかった。この細胞株の樹立に多大な時間を要したため。悪性脳腫瘍グリオブラストーマの放射線化学療法において高気圧酸素療法を併用することにより放射線の感受性を増感させることがマウスへのグリオブラストーマ細胞の異種移植モデルにより明らかとなった。腫瘍の組織学的解析により増感効果はグリオブラストーマに特徴的な壊死部の辺縁に広がる放射線抵抗を示す低酸素細胞の柵状配列が放射線により腫瘍全体に散在するのに対し高気圧酸素療法併用群では散在した低酸素細胞が酸素化され放射線の影響を受けやすくなることが示された。本研究は高気圧酸素療法併用による放射線増感効果の分子メカニズムの解明を目的として網羅的遺伝子解析にて変動のあった遺伝子に着目し解析を進めた。昨年の研究結果から、高気圧酸素併用群で発現が上昇した遺伝子をテトラサイクリンを用いてグリオブラストーマ細胞株をスフェロイドに形成後に発現誘導させても、低酸素マーカーであるピモニダゾール陽性となりコントロールのスフェロイドと同様に低酸素細胞であり1遺伝子誘導だけでは低酸素細胞からの脱却はできないことが明らかになったため、複数遺伝子の組み合わせの可能性が示された。そこでこれまでの遺伝子発現解析結果は2.5気圧100%酸素条件だけであったため、本年度は1.0気圧通常酸素、1.0気圧100%酸素、1.5気圧100%酸素、2.5気圧100%酸素、1.0気圧100%酸素+放射線照射、2.5気圧100%酸素+RT放射線照射したグリオブラストーマ細胞株の網羅的遺伝子発現解析を行った。

その結果、どの気圧においても高酸素条件で培養することによってサイトカイン受容体関連因子、ガン関連miRNA、嗅覚シグナル経路、代謝関連遺伝子、JAK-STATシグナル経路、PI3K-AKTシグナル経路の遺伝子群の発現変動が濃縮していることが示された。臨床試験ではGBMにおける高気圧酸素療法を併用した放射線治療が有効であるが、その分子機序は解明されておらず、本研究では異種移植動物モデルを作製し腫瘍内における遺伝子発現が放射線単独照射群と高気圧酸素療法併用群で相反して上昇した遺伝子について放射線感受性への影響を検討した。腫瘍細胞株U87-MG細胞のTet-on発現誘導株を構築し、スフェロイド形成後に遺伝子発現誘導を行っても、低酸素マーカーであるピモニダゾール陽性となった。高気圧酸素療法併用群と放射線単独照射群において相反して上昇した遺伝子が低酸素の脱却に関わるのではなく放射線感受性の亢進に寄与していることが示唆された。H28年度は樹立した高発現細胞株のテトラサイクリンによる発現検討を行い、高発現、低発現株を決定しスフェロイド培養およびヌードマウスへの異種移植を行い検討する。具体的には(1)樹立した細胞をスフェロイド培養し通常酸素および高気圧酸素環境にて培養し酸素化度、放射線感受性を検討、(2)樹立した細胞をヌードマウスの臀部皮下に異種移植し放射線療法を行う際にテトラサイクリンをマウスに投与し放射線感受性への影響を検討する。樹立した細胞をマウス臀部に異種移植し腫瘍を200立方センチメートルまで増殖させた後にテトラサイクリン配合飼料を摂取させ放射線照射療法を行い放射線感受性の効果を検討する。スフェロイドの培養実験からの物理的な酸素化とは別の放射感受性増感作用メカニズムの存在が示唆されたため、遺伝子発現解析で高気圧酸素療法により相反した以外の遺伝子について検討を行う。脳神経外科組織染色用の抗体を購入しようとしたが、当該年度内に納入が不可能となったため次年度の会計にて購入することになった。論文投稿(掲載)費用として予定していたが28年度にacceptされなかったため。購入予定だった抗体を購入する。引き続き論文の投稿(掲載)費用として使用する予定。
映画が辿るアルツハイマー型認知症の40年間1973～2012年

本研究は「日本のアルツハイマー映画」に着眼し、つぎの2つの成果をあげた。まず、1973年の第1号作品(豊田四郎監督『恍惚の人』)から今日までのアルツハイマー映画において、「アルツハイマー患者と介護者の人物造形」と「彼らを取り巻く社会環境」を検証したこと。これによって、日本のアルツハイマー型認知症の「映像表象史」が構築できた。つぎに、2000年代に入って盛んに制作されている「外国」のアルツハイマー映画をパースペクティヴに入れ、「日本」のアルツハイマー表象と比較考察を行い、日本独自のアルツハイマー表象を浮き彫りにすることができた。日本のアルツハイマー映画に着眼して、アルツハイマー映像表象史を構築することが、本研究の目的である。2年目の平成24年度には、前年度に日本映画に関して実践した「アルツハイマー患者と介護者」(高齢者と周囲の人)の関係分析を、外国映画へと広げていった。アルツハイマー映画制作がさかんな6カ国(米国、英国、カナダ、中国、韓国、インド)の映画を選択し、「アルツハイマー患者と介護者」の関係を明らかにしていった。外国映画の場合、アルツハイマー映画の歴史と呼びうるものは、2000年代の10年間そこそこである。したがって、日本と外国のアルツハイマー表象の比較分析は、40年間(日本)と10年間(外国)の比較になるが、歴史の長短も比較要素のひとつとなった。外国映画におけるアルツハイマー型認知症の出現は、中国映画だけ例外的に1995年という早い時期に『女人、四十』によってスタートをきったが、それは日本人を母にもつアン・リー監督が日本の『恍惚の人』を模倣したものであった。ほかの国の映画におけるアルツハイマー表象も、日本映画が提示する多様な「患者と介護者」の関係のいずれかのパターンに当てはまることが明らかになった。日本映画のアルツハイマー表象は、グローバルな影響を与えてきたのである。2年間で完了した本研究は、外国の例を頭におきながら、日本のアルツハイマー映像表象史を構築した。合計2篇の論文を研究成果として発表した。今後は、本研究の成果を基盤に、「老年学」に参与する方向へ進んでいく計画である。老年学は医学、生物学、社会学、福祉学、心理学などが協力し合った学際的研究領域であるが、「映画研究」はこれまで参与した実績がなかった。しかし、アルツハイマー型認知症は映画表象の考察を抜きにしては片手落ちと言えるほど、日本の映画関係者たちが意欲的に取り組んできた。本研究の成果をもって、老年学に参与していきたい。初年度の平成23年度には日本のアルツハイマー映画を収集することから、研究が開始された。収集が終わると、映画の1本ずつに「ショット分析」をほどこしながら、「アルツハイマー患者と介護者」の関係の変化に関するデータを検出した。初期の映画では、アルツハイマー患者はいつも高齢の男で、介護者はいつも女(義理の娘)という関係だったことが、明らかにできた。さらに、1980年代の終わりから患者と介護者の関係が変化しはじめ、患者は「女」になり、介護者は「男」(老いた夫)に変化したことも、明らかにできた。患者と介護者の関係が変化しただけでなく、彼らを取り巻く社会環境も変化したこともわかってきた。そこで、社会環境の一要素としての「福祉施設」に注目して、その機能の変化を明らかにした。初期の映画から今日にいたるにつれて、福祉施設のもつ意味は、個人の束縛というネガティヴな意味から、個人の解放というポジティヴな意味へと大きく変化を遂げたことを明らかにした。初期には、患者をベッドに縛りつけ、鬼のような仕打ちをする恐怖の空間が出現したが、今日では患者の個性を尊重し、潜在能力を引き出そうとするデイケア施設が登場するのである。このように、ジェンダー論を展開しながら、また社会環境(福祉施設)に注目しながら、40年におよぶ日本のアルツハイマー映像表象史を構築したことが、平成23年度の成果であった。計画どおりの研究が実施されており、論文も順調に執筆されつつあるため。2年目は、外国映画に目を向け、1年目に日本映画で実践した「アルツハイマー」データの検出を、今度は外国映画に実践する。そして、日本と外国のアルツハイマー表象「比較論」を展開することが、主な研究内容となる。考察の対象となる外国映画として、アルツハイマー映画制作がさかんな6カ国の映画が選んである。

それらをグループ(1)のアメリカ、イギリス、カナダの映画と、グループ(2)の中国、韓国、インドの映画に分類するが、それはアルツハイマー表象に関してグループ間に有意な差が見られる、という仮説を立てているからである。グループ(2)の映画は、日本で未公開のものが多いが、インド映画の『私はガンディーを殺していない』(日本語字幕なし)を入手したように、輸入業者を通じて購入するルートが確保してある。外国映画の場合、アルツハイマー映画の歴史と呼びうるものは、2000年代の10年間そこそこである。したがって、日本と外国のアルツハイマー表象の比較分析は、40年間(日本)と10年間(外国)の比較になるが、歴史(時間)の長短も比較要素のひとつである。2年目の研究経費として、外国映画ソフトを購入したり、映画関連文献を購入したりするための物品費として50万円、資料収集および成果発表のための旅費として60万円が見込まれよう。映画関連文献として、日本のものは『映画芸術』『キネマ旬報』『国際映画新聞』『日本映画』『映画旬報』『映画ストーリー』『日本映画論言説体系』などを購入する予定であり、外国のものはCamera Obscura, Cineaste, Film Criticism, Film Culture, Film and History(以上はグループ(1)関連)、『大衆電影』『電影藝術』『電影新作』『電影雙週刊』『SCREEN』(英語圏のほうではなく、韓国映画月刊誌のほう)『Inter+view』『FILMFARE』『STARDUST』(以上はグループ(2)関連)を購入する予定である。日本と外国の「アルツハイマー映像表象」を比較して得られる成果は、国内外の会議で発表し、また学術雑誌に英語論文を投稿する計画である。この英語論文では、本研究のしめくくりとして、外国映画との違いに言及しながら、日本のアルツハイマー映像表象の40年史を提示したいと考えている。なお、F-6-1(収支状況報告書)で次年度使用額となっている研究費については、映画におけるアルツハイマー型認知症の資料を収集するための物品費として、すでに支出が確定している。
肺癌細胞の分子生物学的特性に基づいた治療法の開発

本研究において,EGFRチロシンキナーゼ・インヒビターの非小細胞肺癌における抗腫瘍効果とその作用機序およびFDG-PETスキャンを用いたゲフィチニブの治療効果判定について以下の成果を得た.1)ヒト肺癌細胞株6株において,ERαおよびβの蛋白発現の測定とゲフィチニブの抗腫瘍効果の検討を行った.全6株で種々の程度でERβの発現が認められたが,ゲフィチニブの抗腫瘍効果と蛋白発現強度に相関は認められなかった.また各細胞株を種々の濃度のゲフィチニブで刺激したが,容量依存的にも時間依存的にもERβの発現の変化は認められなかった.2)前年度の研究から引き続き,肺癌細胞株における,ゲフィチニブ単剤,タモキシフェン単剤,ゲフィチニブとタモキシフェンの同時併用での抗腫瘍効果の検討を行った.タモキシフェン単剤ではいずれの細胞株においても抗腫瘍効果は認められず,ゲフィチニブ+タモキシフェンでも抗腫瘍効果の相加作用は認められなかった.しかし培地中のestradiol濃度を増加させることにより,感受性株(PC-9)では変化が認められなかったが,低感受性株(A549)ではゲフィチニブの抗腫瘍効果の増加傾向が認められた.3)FDG-PETスキャンを用いてゲフィチニブの治療効果判定を行い,その有用性について検討した.対象となった12例中3例(25%)において,CTではSDであったがPETスキャンではPRと判定された.CT, PETスキャンともにPRと判定された症例においても,PETスキャン上の効果発現がより早期に認められる傾向があった.以上より,FDG-PETスキャンを用いたゲフィチニブの効果判定は,従来の画像診断法に比べてより精確な評価が可能であった.本研究において,EGFRチロシンキナーゼ・インヒビターの非小細胞肺癌における抗腫瘍効果とその作用機序およびFDG-PETスキャンを用いたゲフィチニブの治療効果判定について以下の成果を得た.1)ヒト肺癌細胞株6株において,ERαおよびβの蛋白発現の測定とゲフィチニブの抗腫瘍効果の検討を行った.全6株で種々の程度でERβの発現が認められたが,ゲフィチニブの抗腫瘍効果と蛋白発現強度に相関は認められなかった.また各細胞株を種々の濃度のゲフィチニブで刺激したが,容量依存的にも時間依存的にもERβの発現の変化は認められなかった.2)前年度の研究から引き続き,肺癌細胞株における,ゲフィチニブ単剤,タモキシフェン単剤,ゲフィチニブとタモキシフェンの同時併用での抗腫瘍効果の検討を行った.タモキシフェン単剤ではいずれの細胞株においても抗腫瘍効果は認められず,ゲフィチニブ+タモキシフェンでも抗腫瘍効果の相加作用は認められなかった.しかし培地中のestradiol濃度を増加させることにより,感受性株(PC-9)では変化が認められなかったが,低感受性株(A549)ではゲフィチニブの抗腫瘍効果の増加傾向が認められた.3)FDG-PETスキャンを用いてゲフィチニブの治療効果判定を行い,その有用性について検討した.対象となった12例中3例(25%)において,CTではSDであったがPETスキャンではPRと判定された.CT, PETスキャンともにPRと判定された症例においても,PETスキャン上の効果発現がより早期に認められる傾向があった.以上より,FDG-PETスキャンを用いたゲフィチニブの効果判定は,従来の画像診断法に比べてより精確な評価が可能であった.平成14年度は主に,1)非小細胞肺癌細胞株における,分子標的治療薬ZD-1839と抗癌剤の併用効果とその作用機序.2)非小細胞肺癌患者における分子標的治療薬gefitinib (ZD-1839)の効果とサロゲート・マーカーとしてのFDP-PETスキャンの有用性.について研究を行なった.1)については,非小細胞肺癌細胞株8株においてEGF-receptorの発現とZD-1839のin vitroにおける抗腫瘍効果を検討し,さらに従来の抗癌剤(carboplatin, cisplatin, paclitaxel, docetaxel, gemcitabine, navelbine)との併用効果とその機序などについても検討を行なった.これらの成果の一部は,「第43回日本肺癌学会総会(平成14年11月,福岡市)」において発表した.現在,ZD-1839と従来の抗癌剤の併用タイミングによる抗腫瘍効果の変化について検討中であり,これらの成果は,「第6回アジア臨床腫瘍学会(平成15年6月,韓国,ソウル市)」において発表予定である.2)については,再発非小細胞肺癌患者12人において,gefitinib (ZD-1839)の投与を行ない,従来のCTスキャンなどとFDG-PETスキャンとの効果判定を比較した.その結果,CTスキャンなどに比較しFDG-PETスキャンでは,より早期に効果発現を捕らえることができる可能性が示唆される結果を得た.この成果は,「第10回世界肺癌会議(平成15年,8月,カナダ,バンクーバー市)」において発表予定である.平成15年度は,ゲフィチニブの作用機序,およびFDG-pETスキャンを用いたゲフィチニブの治療効果判定について以下の成果を得た.

1)前年度の研究から引き続き,肺癌細胞株における,ゲフィチニブ単剤,タモキシフェン単剤,ゲフィチニブとタモキシフェンの同時併用での抗腫瘍効果の検討を行った.タモキシフェン単剤ではいずれの細胞株においても抗腫瘍効果は認められず,ゲフィチニブ+タモキシフェンでも抗腫瘍効果の相加作用は認められなかった.しかし培地中のestradiol濃度を増加させることにより,感受性株(PC-9)では変化が認められなかったが,低感受性株(A549)ではゲフィチニブの抗腫瘍効果の増加傾向を認めた.これらの結果より一部の肺癌細胞ではestradiolがゲフィチニブの感受性に関与している可能性が示唆された.2)FDG-PETスキャンを用いてゲフィチニブの治療効果判定を行い,その有用性について検討した.対象となった12例中3例(25%)において,CTではSDであったがPETスキャンではPRと判定された.CT,PETスキャンともにPRと判定された症例においても,PETスキャン上の効果発現がより早期に認められる傾向があった.以上より,FDG-PETスキャンを用いたゲフィチニブの効果判定は,従来の画像診断法に比べてより精確な評価が可能であった.このことより,分子標的治療薬の開発において,FDG-PETスキャンを用いた効果判定が,有用なツールの一つとなる可能性が示唆された.
エピジェネティクス制御に基づく新たな脳卒中運動療法の探索

ヒストンアセチル化は神経細胞の生存、分化、可塑性にとって重要な神経栄養因子の発現を増強させることが期待される。初年度は正常マウスを対象に代表的なHDAC阻害剤と運動の併用が運動機能、認知機能に関する行動評価と大脳皮質運動関連領野における神経栄養因子とその受容体、シナプス受容体等のシナプス可塑性因子の発現に与える効果について検証を行った。HDAC阻害剤として神経疾患に対して臨床試験が行われ、動物実験においても機能改善が多く報告されているsodium butyrate (NaB)を用いた。当初検討していたsuberoylanilidehydroxamic acid (SAHA)の効果については否定的な報告が散見されることから、同様のHDACを標的とするNaBの使用を優先した。成体マウスをHDAC阻害剤投与と運動の2要因により4群に群分けし、4週間の介入を行った。先行研究において機能改善が報告されている投与量(1.2g/kg)のNaBを1日1回腹腔内投与した。また、運動として1日60分のトレッドミルを用いた走行運動(10m/分)を課した。以上の介入を4週間実施した。運動機能評価として、Rotarod test、Wire hang testを実施し、認知機能評価としてY字迷路試験、ステップスルー型受動回避試験を実施した。4週間の介入によってこれらの行動評価におけるHDAC阻害、運動の有意な主効果は認められなかった。一方、リアルタイムPCR法を用いた大脳皮質運動関連領野における遺伝子発現の定量において、HDAC阻害は神経栄養因子であるNGFとその受容体であるp75の発現を増強した。運動はシナプス受容体であるNMDA受容体およびアセチルコリン受容体サブユニットの発現を低下させ、GABAA受容体サブユニットの発現を低下させる傾向を示した。初年度における生化学的分析として、1神経栄養因子とその受容体のリアルタイムPCR法による遺伝子発現とELISA法による蛋白発現の定量、2エピジェネティクス制御に関するヒストンアセチル化レベル、HAT、HDAC活性の定量、3BDNFの作用による細胞内シグナル伝達(MAPキナーゼカスケード活性)の定量等を計画していた。このうち、実施できた分析はリアルタイム法におけるmRNA発現の定量に留まり、抽出総蛋白、ヒストンを用いたその他の分析については、サンプルの抽出までに留まり、最終データを得るには至らなかった。引き続き抽出サンプルをもとに蛋白レベルでの分析を進める予定である。このため、本研究の進捗状況はやや遅れている。初年度における生化学的分析において実施できた分析はリアルタイム法におけるmRNA発現の定量に留まり、抽出総蛋白、ヒストンを用いたその他の分析については、最終データを得るには至らなかった。平成31年度は先ずこれらの抽出サンプルを用いた蛋白レベルでの精査を進める。即ち、1エピジェネティクス制御に関するヒストンアセチル化レベル、HAT、HDAC活性の定量、2BDNFを含む神経栄養因子の作用による細胞内シグナル伝達(MAPキナーゼカスケード活性)の定量について検証を進める。前年度、mRNA発現におけるHDAC阻害と運動の相互作用は認められなかったが、サンプル採取が介入後24時間以降であることが要因として考えられる。運動に依存したmRNA発現の増強は運動終了後数時間後に限局されることが報告されている。これに対し、蛋白レベルでの長期的修飾はこれまでの研究においても多く報告されている。また、平成30年度は予備実験的な位置付けから正常マウスを用いたため、行動評価においては天井効果により介入の効果が生じていないことが推察された。以上を鑑み、今後は蛋白レベルでの精査を進め、その成果をもとに、本研究の目的である脳卒中モデル動物を対象とするHDAC阻害と運動の相乗効果について検証を進める。脳卒中片麻痺モデルラットを作成し、これまでの研究プロトコールに基づき2週間の介入を行う。前年度同様の行動評価、生化学的分析に加えて、片麻痺の神経学的評価、虚血・ペナンブラ領域の組織化学的分析を行い、脳卒中モデル動物におけるHDAC阻害剤投与による運動療法効果の要因について検証を行う。以上を総括し、HDAC阻害下における運動療法が大脳皮質BDNF発現と運動学習効果の増強することを検証し、新たな脳卒中運動療法の可能性を検証する。

一方、リアルタイムPCR法を用いた大脳皮質運動関連領野における遺伝子発現の定量において、HDAC阻害は神経栄養因子であるNGFとその受容体であるp75の発現を増強した。運動はシナプス受容体であるNMDA受容体およびアセチルコリン受容体サブユニットの発現を低下させ、GABAA受容体サブユニットの発現を低下させる傾向を示した。初年度における生化学的分析として、1神経栄養因子とその受容体のリアルタイムPCR法による遺伝子発現とELISA法による蛋白発現の定量、2エピジェネティクス制御に関するヒストンアセチル化レベル、HAT、HDAC活性の定量、3BDNFの作用による細胞内シグナル伝達(MAPキナーゼカスケード活性)の定量等を計画していた。このうち、実施できた分析はリアルタイム法におけるmRNA発現の定量に留まり、抽出総蛋白、ヒストンを用いたその他の分析については、サンプルの抽出までに留まり、最終データを得るには至らなかった。引き続き抽出サンプルをもとに蛋白レベルでの分析を進める予定である。このため、本研究の進捗状況はやや遅れている。初年度における生化学的分析において実施できた分析はリアルタイム法におけるmRNA発現の定量に留まり、抽出総蛋白、ヒストンを用いたその他の分析については、最終データを得るには至らなかった。平成31年度は先ずこれらの抽出サンプルを用いた蛋白レベルでの精査を進める。即ち、1エピジェネティクス制御に関するヒストンアセチル化レベル、HAT、HDAC活性の定量、2BDNFを含む神経栄養因子の作用による細胞内シグナル伝達(MAPキナーゼカスケード活性)の定量について検証を進める。前年度、mRNA発現におけるHDAC阻害と運動の相互作用は認められなかったが、サンプル採取が介入後24時間以降であることが要因として考えられる。運動に依存したmRNA発現の増強は運動終了後数時間後に限局されることが報告されている。これに対し、蛋白レベルでの長期的修飾はこれまでの研究においても多く報告されている。また、平成30年度は予備実験的な位置付けから正常マウスを用いたため、行動評価においては天井効果により介入の効果が生じていないことが推察された。以上を鑑み、今後は蛋白レベルでの精査を進め、その成果をもとに、本研究の目的である脳卒中モデル動物を対象とするHDAC阻害と運動の相乗効果について検証を進める。脳卒中片麻痺モデルラットを作成し、これまでの研究プロトコールに基づき2週間の介入を行う。前年度同様の行動評価、生化学的分析に加えて、片麻痺の神経学的評価、虚血・ペナンブラ領域の組織化学的分析を行い、脳卒中モデル動物におけるHDAC阻害剤投与による運動療法効果の要因について検証を行う。以上を総括し、HDAC阻害下における運動療法が大脳皮質BDNF発現と運動学習効果の増強することを検証し、新たな脳卒中運動療法の可能性を検証する。
TRPチャネルによる心筋細胞肥大・細胞死の制御

慢性的心圧負荷の病態では、TRPC1,-C3,C6の発現上昇がpositive feedback現象としておこり、それが心肥大・心不全発症進展に重要な役割を果たすことsildenafilはそれら発現上昇を抑制することで、心肥大を防止することが明らかとなった。また、TRP依存性Ca流入の修飾分子STIM-1のノックアウトマウスを用いた検討から、STIM-1の心肥大における促進的役割も明らかとなり、TRPCs/STIM-1シグナルが肥大から心不全にいたる一連の過程を、制御・支配しているシグナル分子であることが示唆された。本研究では、心筋細胞が慢性心負荷状態でたどる「代償性心筋細胞肥大から細胞死」という一連の細胞挙動を統合的にとらえ、Ca流入性TRPチャネルによる心筋細胞の運命制御について検討することを目的とする。本年度はおもにTRPチャンネルの細胞内セカンドメッセンジャーであるSTIM1の動態について詳細に検討した。STIM1ノックアウトマウスに大動脈縮窄手術を行い,4週間後に心肥大の形成度を検討した.いずれも10週齢体重25g程度のオスで縮窄度が98%前後と確認できたものを用いて解析をおこなった.野生型では心体重比(mg/g)が4.0から5.9まで増加したのに対し,STIMIノックアウトマウスでは4.6から4.7とほぼ変化を認めなかった.心肥大の指標であるBNP発現量,ANF発現量においても同様の傾向を認めた.以上からSTIM1ノソクアウトマウスでは野生型に比べ心肥大がおきにくい性質があることを見出した,今後は,独自のCa^<2+>流入経路であるストア作動性チャネルの構成因子およびその活性化機序に焦点を当て,心肥大形成から細胞死に至るまでの分子メカニズムにおけるTRPチャンネルの関与を明らかにする.本研究では、心筋細胞が慢性心負荷状態でたどる「代償性心筋細胞肥大・リモデリングから細胞死」という一連の細胞挙動を統合的にとらえ、Ca流入性TRPチャネルによる心筋細胞の運命制御について検討する。平成23年度は22年度に引き続き、TRPC1の細胞内シグナル物質であるSTIM1のノックアウトマウスに大動脈縮窄(TAC)により圧負荷をかけ、その心筋細胞への影響(心筋細胞肥大、線維化、アポトーシス、オートファジー)について検討した。その結果STIM1ノックアウトにおいて圧負荷にともなう心筋細胞肥大と線維化、特に心筋線維化が強く抑制されることが明らかになった(論文作成中)。さらに、ノックアウトマウスTACモデルにおいてDNAアレイ解析を行ったところ、心筋線維化と関連のあるX遺伝子の強い発現亢進が認められた。この結果はPCR解析によっても確認された。これらの結果は、TRPチャンネル→STIM1→X遺伝子のカスケードが心筋細胞・心線維芽細胞に存在し、それが心線維化・リモデリングに強く係わっている可能性を示唆する。今後、このカスケードについて詳細に検討することにより、「代償性心筋細胞肥大・リモデリングから細胞死」という心筋の一連の細胞挙動を明らかにしてゆく。慢性の心負荷がかかると心筋細胞は「代償性心肥大→代償性の破綻→細胞死」という運命をたどる。本研究では、これら一連の細胞挙動を統合的にとらえTRPCチャネルタンパクによる心筋細胞の運命決定制御について検討する。平成24年度は昨年に引き続き、TRPC1関連タンパクSTIM1のノックアウトマウス(同マウスではTRPC1をかいしたストア作動性Ca流入が低下している)に大動脈縮窄による圧負荷をかけ、心筋細胞への影響を検討した。その結果、対照群では心肥大後期に心筋細胞肥大・細胞死に加え線維化が顕著に現れたが、K.O.マウスでは心筋細胞肥大のみならず線維化も著明に抑制されていた。そのメカニズムとして、TRPC1/STIM1→TIMPsのシグナルが働いている可能性を示し、TRPC1/STIM1系は慢性心負荷後の一連の細胞挙動で中心的役割を果たしていることを明らかにした。また、TRPC1をターゲットとした新しい心不全治療を開発するため、その抑制薬の検討をおこなった。これまで、pyrazole誘導体以外ではsildenafilがTRPC6抑制作用を持っていることが報告されていたが、他のTRPCに対する作用は不明であった。私たちはラット心筋細胞にエンドセリンを投与した肥大細胞モデルを用いて、sildenafilがTRPC6抑制作用を介してTRPC1の発現を制御、心筋細胞のストア作動性Ca流入を減少させ、結果的に心筋細胞肥大を抑制することを明らかにした。これらの結果は、心肥大とその後のリモデリングにおいてTRPC1/STIM1系が主要な分子として働くことを示唆し、これら分子を治療標的とした新しい心不全治療開発につながるものと考えられる。1)STIM1ノックアウトマウスの解析により新しい知見が得られたこと。2)DNAアレイ解析により心筋線維化と関連のあるX遺伝子の代償性心筋細胞肥大・リモデリングへの関与を示唆するデータが得られたこと24年度が最終年度であるため、記入しない。

TRPチャンネル→STIM1→X遺伝子、というカスケードについて詳細に検討することにより、「代償性心筋細胞肥大・リモデリングから細胞死」という心筋の一連の細胞挙動を明らかにしてゆく。24年度が最終年度であるため、記入しない。
GeVガンマ線観測を基軸とした多波長観測による星間ガスの定量

本研究の主対象である,高銀緯(すなわち近傍)の星間ガス雲の多波長観測では,カメレオン分子雲領域のFermi衛星(GeVガンマ線)およびPlanck衛星・NANTEN2望遠鏡・Parkes GASSサーベイ(電波)を用いた定量化を進めた。ガンマ線を星間ガスのロバストなトレーサーとして用いることで,Orion分子雲などで電波・サブミリ波で報告されていた非線形性(Roy et al. 2013)と類似の非線形性を見出した。ガンマ線データに基づいた解析を行うことで,従来多くの星間ガスの研究で見られた『HI雲のスピン温度が一定』という仮定によらない星間ガス・宇宙線の定量を行い,原著論文としてまとめて投稿した。また強いCO分子輝線の見られない原子雲領域の解析にも推し進めた。解析にあたってはOrion-Eridanus Superbubbleの影響を避けるため領域を適切に定義したうえで,全ガス柱密度(ガンマ線強度に比例)とダスト放射の間の非線形性やダスト温度依存性を詳細に見ており,その結果の一部を2018年のフェルミシンポジウムで報告・議論を行った。現在は論文として取りまとめている。これらガンマ線による個々の領域の解析と相補的な研究として,ガンマ線バーストのX線残光を用いた全天(高銀緯領域)星間ガスの測定も進めている。先行研究(Willingale et al. 2013)に比べてガンマ線バーストの数を約2倍に増やし,ダストマップとしてPlanck衛星の全天マップを用いて解析を進めている。本研究課題のひな形であるMBM 53-55分子雲領域で見られたのと定性的に同じ傾向(ダスト温度依存性)を見出すことができ,系統誤差の評価を進めている最中である。研究実績で述べたように,カメレオン分子雲領域の解析ではガスの柱密度とダスト放射の間の非線形性を露わに扱うことでHI雲のスピン温度の仮定によらない解析を進め,原著論文としてまとめて投稿した。近傍原子雲の解析やガンマ線バーストのX線残光を用いた全天(高銀緯領域)の星間ガスの評価はやや時間がかかっているようにも見えるが,前者は解析領域を適切に定義することでロバストな議論ができるようになり,後者はMBM 53-55分子雲で見られたのと定性的に同じ傾向(ダスト温度依存性)を見出すなど,論文化に向けて着実に研究を進めることができており,おおむね順調に進展していると考えている。本研究の主観測対象である高銀緯(すなわち近傍)星間ガス雲のうち,CO分子輝線の見られない原子雲領域の解析ではOrion-Eridanus Superbubbleの影響を避けるため領域を適切に定義したうえで,全ガス柱密度とダスト放射の間の非線形性やダスト温度依存性を詳細に見ており(2018年のフェルミシンポジウムで一部を報告),これを速やかに論文化する。その後はPegasus Loop領域の詳細解析(GALFA高分解能HIサーベイを利用)などを計画しており,これらを通じて近傍のガス密度分布を導出するとともに,ダスト放射-ガス密度比の較正の方法,ダスト放射とガス密度の間の非線形関係の検証,CO輝線強度と分子ガスの柱密度の比(いわゆるXco)の精度良い算出方法を確立させていく。合わせて近傍の宇宙線強度・スペクトルの議論も行う。MBM 53-55分子雲領域で見られたのと定性的に同じ傾向(ダスト温度依存性)を見出しており,系統誤差を評価したうえで本年度中に論文化して出版する。銀河面宇宙線加速源候補天体の解析も合わせてすすめる。最大の特徴はガスの柱密度とダスト放射強度の間の非線形性を露わに扱うようにしたことであり,GeVガンマ線とダスト放射(電波)のコリレーションから有意な非線形成が確認された。この成果は国際会議で発表するとともに,論文化を進め最終段階にある。また強いCO分子輝線の見られない原子雲領域の解析にも取り掛かり,国内外の研究会で発表し議論を深め,論文化を進めている。加えて,ガンマ線バーストのX線残光を用いた星間ガスの柱密度の測定と銀河面上の宇宙線加速源候補天体の解析も進めた。前者は先行研究に比べイベント数を約2倍と大きく増やし,また星間ガス解析の経験を生かしてPlanck衛星のダスト放射モデルをガスのデータに加えたのが特徴である。銀河面天体では広がったTeVガンマ線放射VER J2019+368のX線フォローアップ観測でパルサー星雲と考えられるX線放射を検出し,輝度分布とスペクトルを精度よく測ることで電子のスペクトル・伝播パラメタに制限を付けることができた。さらに分子雲と相互作用している超新星残骸候補CTB 37AのGeVガンマ線解析も進め,TeVとスペクトルがスムーズにつながらないこと(すなわち陽子加速の兆候)を見出した。これらはいずれも国内外の研究会で発表し,VER J2019+368のX線フォローアップ観測は学術論文として出版した。

研究実績で述べたように,近傍の星間ガスの多波長観測・ガンマ線バーストのX線残光を用いたガス柱密度の評価・銀河面宇宙線加速源候補天体の解析のいずれにおいても観測・解析を進め,それぞれ国内外の研究会で報告をした。このうちVER J2019+368のX線フォローアップ観測は学術論文として出版し,その他のテーマも論文化に取り組んでおり,概ね順調に進展していると考えている。本研究の主対象である,高銀緯(すなわち近傍)の星間ガス雲の多波長観測では,カメレオン分子雲領域のFermi衛星(GeVガンマ線)およびPlanck衛星・NANTEN2望遠鏡・Parkes GASSサーベイ(電波)を用いた定量化を進めた。ガンマ線を星間ガスのロバストなトレーサーとして用いることで,Orion分子雲などで電波・サブミリ波で報告されていた非線形性(Roy et al. 2013)と類似の非線形性を見出した。ガンマ線データに基づいた解析を行うことで,従来多くの星間ガスの研究で見られた『HI雲のスピン温度が一定』という仮定によらない星間ガス・宇宙線の定量を行い,原著論文としてまとめて投稿した。また強いCO分子輝線の見られない原子雲領域の解析にも推し進めた。解析にあたってはOrion-Eridanus Superbubbleの影響を避けるため領域を適切に定義したうえで,全ガス柱密度(ガンマ線強度に比例)とダスト放射の間の非線形性やダスト温度依存性を詳細に見ており,その結果の一部を2018年のフェルミシンポジウムで報告・議論を行った。現在は論文として取りまとめている。これらガンマ線による個々の領域の解析と相補的な研究として,ガンマ線バーストのX線残光を用いた全天(高銀緯領域)星間ガスの測定も進めている。先行研究(Willingale et al. 2013)に比べてガンマ線バーストの数を約2倍に増やし,ダストマップとしてPlanck衛星の全天マップを用いて解析を進めている。本研究課題のひな形であるMBM 53-55分子雲領域で見られたのと定性的に同じ傾向(ダスト温度依存性)を見出すことができ,系統誤差の評価を進めている最中である。研究実績で述べたように,カメレオン分子雲領域の解析ではガスの柱密度とダスト放射の間の非線形性を露わに扱うことでHI雲のスピン温度の仮定によらない解析を進め,原著論文としてまとめて投稿した。近傍原子雲の解析やガンマ線バーストのX線残光を用いた全天(高銀緯領域)の星間ガスの評価はやや時間がかかっているようにも見えるが,前者は解析領域を適切に定義することでロバストな議論ができるようになり,後者はMBM 53-55分子雲で見られたのと定性的に同じ傾向(ダスト温度依存性)を見出すなど,論文化に向けて着実に研究を進めることができており,おおむね順調に進展していると考えている。本研究の主な観測対象である,高銀緯(すなわち近傍)の星間ガス雲の多波長観測では,カメレオン分子雲領域の解析が論文化の最終段階にあり,これをすみやかに論文化する。加えて強いCO分子輝線の見られない原子雲領域の解析にも取り掛かっており,こちらもH30年度中の論文化を目指す。解析にあたってはより小さい領域に分けた上で,ガンマ線でトレースされる全星間ガスの柱密度とダスト放射の非線形関係(Roy et al. 2013, ApJ 763, 55など)およびダスト温度依存性(Mizuno et al. 2016, ApJ 833, 278など)を詳細に見ており,これらの解析を通じ星間ガス分布の導出と,ダスト放射-ガス柱密度比の較正の方法を確立させていく。