hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ディープニューラルネットワークによる静止画像からの動画像生成手法の開発

前年度に引き続き、単一の静止画像から動画像を生成することを目的として、ディープニューラルネットワークによる動画生成手法の開発を実施した。2018年度の主な進捗としては、前年度よりも大規模なデータに対しても写実的な動画生成が可能なモデルの改良を検討したことが挙げられる。具体的な本研究の主要なアイディアは、提案手法では動画中のアニメーションを動きと色の変化の2つの要素に分解して扱い、2種類のニューラルネットワークモデルにこれらを別々に学習させる点である。さらに、各モデルには画像を直接生成させるわけではなく、入力画像を変換するための色変換マップと流れ場を予測させ、これらに正則化をかけることで、モデルの汎化性能を向上させている。これにより、既存手法よりも格段に高解像度で、長く滑らかなアニメーションを生成できることを確認した。今後更なる有効性の検証が必要なものの、現段階で得られた結果から判断しても世界的に見て例がない品質と考えており、その学術的価値および実用性は顕著であると思われる。実際にここまでの成果をまとめた論文をCVIM・CGVI・DCC合同研究会において発表し、二つの賞を受賞した。他方で、深層学習による画像生成モデルの研究の一環として、人物画像の再照明用画像生成の研究も分担で遂行してきた。本成果は国内最大規模の査読付きシンポジウムや、世界トップレベルの国際会議に採択されており、その学術的価値は極めて高いものと思われる。以下の点から、研究はおおむね順調に進展していると考える。1)前年度のモデルをさらに改良し、規模の大きいデータセットを用いた評価実験により有効性を確認した点。2)上記得られた成果を研究会において発表し、複数の賞を受賞した点。3)上記検討の過程で他の深層学習による画像生成タスクの研究を遂行し、国際会議採択や学術誌採録につながった点。2019年度は、まず現状の提案手法の有効性を徹底的に検証するために、さらなる実験および評価データの収集を実施する必要がある。具体的には複数の最先端手法と比較、ユーザスタディによる定量評価、複数データセットに対する一般化可能性を検証し、これらの結果を論文にまとめて、国際会議や論文誌への採択を目指す。その後提案手法によって生成される動画のさらなる品質や汎用性の向上を目指し、敵対的損失を利用した学習やattention構造を持つモデルの利用などを視野に入れながら、さらなる手法の改良に取り組む予定である。一枚の静止画像から動画像を生成することを目的として、ディープニューラルネットワークによる生成手法の開発に着手した。平成29年度の実施計画では、動画の多様な変化を扱うために、画素値の変化量を制限した複数のネットワークモジュールによって、色味とテクスチャのような変化の度合いが異なる要素に分けてモデリングすることを予定していた。実際に、動画中の色味あるいはテクスチャの変化を学習させるために、畳み込み層のエンコーダデコーダからなる次フレーム画像生成ネットワークと、特殊な正則化を利用した学習手法を開発した。特定のシーンに絞った小規模の学習データセットで予備実験を実施したところ、ベースラインの手法よりも質の高い結果を生成できることを確認しており、現在はさらに大きなデータセットを用いた評価実験を進めている。良好な結果が得られ次第、国際会議や学術誌への投稿を進めていきたい。また平成30年度以降の計画としてあげていた、長期間の予測が可能なモデルへの拡張方法も並行して検討した。Convolutional LSTMや3D畳み込み処理を組み込んだネットワークを検討して、予備実験を実施したものの、現状は高品質な結果の生成には至っておらず、今後さらなる手法の改良を進めていきたい。他方で、ここで検討するモデルは、動画像に限らず他の2Dや3Dデータを扱える汎用的なものであるため、本研究課題の促進を図り類似タスクの応用研究も推進した。具体的には画像の高階調化や領域分割手法も開発し、これらの成果は「Deep Reverse Tone Mapping」や「Transferring pose and augmenting background for deep human-image parsing」などのタイトルで国際会議や論文誌に採択されている。1)当該年度の実施計画に従い基礎となるモデルを開発し、大規模な実験は行えていないものの、簡易データセットによる実験で一定の有効性を確認した点。2)次年度の計画である長期間の予測についても若干の検討を進めた点。3)上記検討の過程で他の類似タスクの研究を遂行し、国際会議採択や学術誌採録につながった点。

他方で、深層学習による画像生成モデルの研究の一環として、人物画像の再照明用画像生成の研究も分担で遂行してきた。本成果は国内最大規模の査読付きシンポジウムや、世界トップレベルの国際会議に採択されており、その学術的価値は極めて高いものと思われる。以下の点から、研究はおおむね順調に進展していると考える。1)前年度のモデルをさらに改良し、規模の大きいデータセットを用いた評価実験により有効性を確認した点。2)上記得られた成果を研究会において発表し、複数の賞を受賞した点。3)上記検討の過程で他の深層学習による画像生成タスクの研究を遂行し、国際会議採択や学術誌採録につながった点。今後の課題として、まず(1)多様なシーンを含む大規模な動画データセットを実験用に構築する必要がある。Webからデータを収集し、ノイズとなるデータやフレームを、手作業あるいは何らかの自動化された方法で取り除く。次に(2)検討中のモデルに対する実験を実施し、現状の問題点を洗い出す必要がある。特定のシーンに限定された小規模データでは比較的良好な結果が得られているものの、モデルの汎化性能には限界があるため、現状のモデルでどの程度のバリエーションを学習可能かを明確にする。この段階で、学術的に価値のある結果が得られれば国際会議や学術誌に投稿する。また、現状のモデルの制約として扱えない動きが存在することが既に明らかであるため、(3)生成される動画の表現の幅を広げるためにモデルや学習手法のさらなる改良が課題となる。このためにadversarial lossを使った学習や、前述のLSTMや3D畳み込みにもとづくさらなる改良を検討していく。2019年度は、まず現状の提案手法の有効性を徹底的に検証するために、さらなる実験および評価データの収集を実施する必要がある。具体的には複数の最先端手法と比較、ユーザスタディによる定量評価、複数データセットに対する一般化可能性を検証し、これらの結果を論文にまとめて、国際会議や論文誌への採択を目指す。その後提案手法によって生成される動画のさらなる品質や汎用性の向上を目指し、敵対的損失を利用した学習やattention構造を持つモデルの利用などを視野に入れながら、さらなる手法の改良に取り組む予定である。
ヒト化SCIDマウスによるヒト同種移植の慢性拒絶反応における血管病変に関する研究

HumanizedSCIDマウスに同種ヒト腸間膜細動脈を移植し、短期間の免疫抑制によりこれを生着させた後、徐々にこれを解除することで細動脈内での慢性拒絶モデルを作成した。このモデルを用いて同種移植の慢性拒絶反応における血管病変の成立機序を解明することが本研究の目的である。ヒト末梢血リンパ球を移植したSCIDマウス(hu-PBL-SCID)はその血流中にヒト免疫グロブリン、ヒトTリンパ球の存在を認めたことより、humanized(ヒト化)SCIDマウスを確立し、マウス内でヒト免疫環境を再現する事に成功した。提供者より充分なインフォームド・コンセントを得た同種ヒト腸間膜細動脈をヒト化SCIDマウスの大動脈にマイクロ・サージリーにより移植し、その血流の維持を直視下に確認した。短期間の免疫抑制によりこれを生着させ、徐々にこれを解除することで細動脈内での慢性拒絶モデルの作成した。それに浸潤するヒトT細胞の存在がモノクローナル抗体を用いた免疫組織検査にて認められた。これらGIL(graft-infiltrating lymphocytes)をin vitroに戻すことによりcell lineの作成を試みたが、免疫抑制療法の維持と解除のタイミングおよび至適レジメを決定することが非常に困難を極めこれらの細胞だけを選択し培養細胞として樹立することは不可能であった。また、血管内皮細胞へのヒトリンパ球の吸着像が免疫組織法にて認められ、これら細胞は主に、ヒトCD3&CD4陽性細胞であった。慢性拒絶反応における血管病変については特に種々のサイトカイン及び局所における蛋白産生が関与していることが示唆されているため、摘出した細動脈試料を用いたPCRによりTNF-α、IFN-γ、等の局所でのサイトカインmessengerの発現は認められたが、特異的な細胞遊走等に関わると考えられ因子については特定できなかった。humanizcd(ヒト化)SCIDマウスを確立し、マウス内でヒト免疫環境を再現する事に成功した。このhu-PBL-SCIDマウスはその血流中にヒト免疫グロブリン、ヒトTリンパ球の存在を認めた。充分なインフォームド・コンセントにより提供者より頂いた同種ヒト腸間膜細動脈をヒト化SCIDマウスの大動脈にマイクロ・サージリーにより移植し、その血流の維持を直視下に確認した。短期間の免疫抑制(シクロスポリンorタクロリムス)を使用することによりこれを生着させた。その後、徐々にこれを解除することで細動脈内での慢性拒絶モデルの作成を試みているが、免疫抑制療法の維持と解除のタイミングおよび至適レジメを決定することが非常に困難である。今後、このモデルが完成し病理学的な拒絶反応を確認した時点において、免疫組織法あるいは蛍光抗体法を用いてその拒絶反応に関わるヒト免疫担当細胞をcharacterizeする。慢性拒絶血管病変については特に種々のサイトカイン及び蛋白産生が関与していることが示唆されている。特に、サイトカイン産生あるいは細胞接着因子の発現等についてはRT-PCR法およびReal-Time PCR法により、各mRNAにつき検討する予定である。同種移植の慢性拒絶反応における血管病変の成立機序を解明することが本研究の目的であり、本研究でより現実に近い実験系においてこれらが実際に解明される可能性は充分に期待できるものと考えられる。本研究結果の一部を臨床データと併せて泌尿器科紀要誌(48巻、691-695頁、2002)に投稿し、受理された。ヒト末梢血リンパ球を移植したSCIDマウス(hu-PBL-SCID)はその血流中にヒト免疫グロブリン、ヒトTリンパ球の存在を認めたことより、humanized (ヒト化)SCID

マウスを確立し、マウス内でヒト免疫環境を再現する事に成功している。提供者より充分なインフォームド・コンセントを得た同種ヒト腸間膜細動脈をヒト化SCIDマウスの大動脈にマイクロ・サージリーにより移植し、その血流の維持を直視下に確認した。短期間の免疫抑制(シクロスポリンorタクロリムス)を使用することによりこれを生着させた。その後、徐々にこれを解除することで細動脈内での慢性拒絶モデルの作成した。それに浸潤するヒトT細胞の存在がモノクローナル抗体を用いた免疫組織検査にて認められた。これらGIL (graft-infiltrating lymphocytes)をin vitroに戻すことによりcell lineの作成を試みているが、免疫抑制療法の維持と解除のタイミングおよび至適レジメを決定することが非常に困難である。今後、このモデルが完成し病理学的な拒絶反応を確認した時点において、免疫組織法あるいは蛍光抗体法を用いてその拒絶反応に関わるヒト免疫担当細胞をcharacterizeする。特に、慢性拒絶反応における血管病変については特に種々のサイトカイン及び蛋白産生が関与していることが示唆されている。サイトカイン産生あるいは細胞接着因子の発現等については、今後RT-PCR法およびReal-Time PCR法により各mRNAにつき検討する予定である。ヒト末梢血リンパ球を移植したSCIDマウス(hu-PBL-SCID)はその血流中にヒト免疫グロブリン、ヒトTリンパ球の存在を認めたことより、humanized(ヒト化)SCIDマウスを確立し、マウス内でヒト免疫環境を再現する事に成功している。また、血管内皮細胞へのヒトリンパ球の吸着像が免疫組織法にて認められ、これら細胞は主に、ヒトCD3&CD4陽性細胞であった。ヒト血管内皮細胞(樹立細胞株)を用いたrepeated stimulationではこれらヒト細胞のcloningは不可能であった。今後、免疫組織法あるいは蛍光抗体法を用いてその拒絶反応に関わるヒト免疫担当細胞をcharacterizeする。
胃癌抑制分子αGlcNAcを生合成する糖転移酵素α４GnTの発現制御機構の解明

胃の腺粘膜液には、ピロリ菌から胃粘膜を防御している糖鎖構造であるαGlcNAcを有するO-グリカンが存在する。当研究室で、胃と十二指腸で、αGlcNAcの生合成を担う唯一の糖転移酵素であるヒトα4GnTを単離した。全てのA4gntノックアウト(KO)マウスは、ピロリ菌非存在下でも胃の幽門部に分化型腺癌が発生し、αGlcNAcは、分化型腺癌の発生を抑制していた。マウスの胃におけるα4GnTの発現量を経時的に観察することは、マウスのみならず、ヒトでも同様の機構で発癌が制御されると考えられ、重要である。αGlcNAcが結合するムチンコアタンパク質MUC6、そして、MUC6と結合し、胃癌との関連が報告されているTFF2やTFF1に関しても同様の実験を行い、比較、検討した。また、これら分子の局在変化も合わせて調べた。胃腺癌細胞はスルホムチンを分泌するが、腫瘍形成におけるそれらの役割は不明であった。当研究室では、スルホムチンが発癌に関与する可能性を考え、A4gnt KOマウスに、スルホトランスフェラーゼGlcNAc6ST-2が欠損しているChst4 KOマウスを交配させ、A4gnt / Chst4ダブルノックアウト(DKO)マウスを作製した。予想に反して、DKOマウスは、胃腺癌を発症した。しかしながら、DKOマウスは、3週齢で重度のびらんが発生し、加齢と共に嚢胞性胃深部肥厚(GCP)が生じた。この病因に関与している因子を明らかにするために、定量的RT-PCRを行った。具体的には、炎症性ケモカインCXCL1、CCL2、およびCXCL5、炎症誘発性サイトカインIL-1βおよびIL-11、ならびに成長因子であるHGFやFGF7の発現レベルを調べた。また、これら分子の特異的受容体であるCXCR2、CCR2、IL1R1/IL1R2、IL11RA1、MET、FGFR2も同様に調べた。胃癌抑制因子αGlcNAcの生合成に関与する唯一の糖転移酵素α4GnTが、マウス発生のどの段階から発現しているかは、いまだ明らかではない。α4GnTKOマウスの胃の幽門粘膜では、ピロリ菌非感染でも、5週齢で過形成が観察されることから、α4GnTの発現は胎児期に始まっていると考えられた。そこで、野生型マウス胎児の胃から抽出したRNAを用い、定量的RT-PCR法によって、α4GnT発現レベルを測定、比較した。この結果、α4GnT発現はE(embryonic day)13.5から始まり、E19.5にかけてその発現量は急激に増加することが明らかになった。また、MUC6、TFF1、TFF2は、E15.5から発現上昇が見られ、発現量は急激に増加していった。HIK1083抗体によるαGlcNAcの蛍光免疫組織染色も行ったが、E15.5から胎児の腺粘液細胞と思われる部位に強い局在が見られた。α4GnT発現が見られたE13.5より後でαGlcNAcの局在も見られ、α4GnTがαGlcNAcを生合成する唯一の糖転移酵素ということから考えても妥当な結果である。次に、過形成と重度のびらんを示す5週齢のA4gnt / Chst4 DKOマウスの胃粘膜において、Cxcl1、Cxcl5、Ccl2、およびCxcr2の発現は、過形成を示した同週齢のA4gnt KOマウスと比較して、有意に増加した。しかしながら、これらの発現増加は、高度異形成/腺癌およびGCPを示す50週齢のDKOマウスでは消失した。さらに、Cxcl1およびCxcr2に関して、腺癌のみを示す50週齢A4gnt KOマウスと比較して、DKOマウスでは減少した。これらの結果は、スルホムチンは、間接的に、5週齢で炎症関連遺伝子、Cxcl1、Cxcl5、Ccl2、およびCxcr2を一過性に調節することによって、胃癌の発症に関連することを示す。現在までに、野生型マウス胎児の胃発生におけるα4GnTおよびその関連分子の発現を定量的RT-PCR法により経時的に観察した。α4GnTはE13.5でその遺伝子発現を開始し、MUC6、TFF1、TFF2はE15.5から発現し始め、その発現量は発生が進むに従って著しく増加した。また、蛍光免疫組織染色法により、αGlcNAcの胎児胃の腺粘液細胞における局在はE15.5から始まることを確認した。この時期でのα4GnT発現上昇が、胃の上皮細胞の異常な増殖を抑制すると考えられる。そのため、α4GnTの欠損により、各種関連遺伝子の発現開始のタイミングや発現量に、どのような変化が見られるのかを明らかにするため、A4gnt KOマウスを用いて同様の実験を行う。また、A4gnt KOマウスで各種関連遺伝子の発現パターンに変化が見られた場合、これら分子の転写に関わる因子の発現やその分子局在に影響するのかも、同様の手法で調べたいと考えている。現在は、A4gnt KOマウスを繁殖させ、各胎生日齢の胎児胃サンプルを集めている。令和元年度中に学会発表および論文発表を行う予定である。

また、粘膜の中層から深層にかけて存在する副細胞、幽門腺細胞、噴門線細胞からなる腺粘液細胞から分泌される腺粘液の中にMUC6と結合したαGlcNAcは存在するが、蛍光免疫組織染色法により、これらの細胞のマーカー分子に対する特異抗体を用いて共局在を調べ、発生段階で変化するのかを明らかにしたい。また、MUC6と結合することが知られているTFF2と、αGlcNAcの共局在が野生型マウス発生段階において変化するかどうかも、蛍光免疫組織染色法により詳細に調べる予定である。胃の腺粘膜液には、ピロリ菌から胃粘膜を防御しているN-アセチルグルコサミン(alphaGlcNAc)を有する糖鎖O-グリカンが存在するが、当研究室で、O-グリカン生合成を担うヒトalpha1,4-N-アセチルグルコサミン(alpha4GnT)を単離した。A4gntノックアウトマウスの胃粘膜液と十二指腸粘膜ではalphaGlcNAcが消失しており、alpha4GnTはalphaGlcNAcの生合成に関わる唯一の糖転移酵素であることが分かった。全てのA4gntノックアウトマウスは、ピロリ菌非存在下で胃の幽門部に分化型腺癌が発生するが、alphaGlcNAcは、ヒトでも分化型腺癌の発生を抑制しているため、マウスでのalpha4GnTの発現や、その関連分子との相互作用を調べることは、マウスのみならず、ヒトでも同様のメカニズムで分化型腺癌が制御されると考えられ、重要である。A4gntノックアウトマウスの胃の幽門粘膜では、ピロリ菌非感染でも、5週齢で過形成が観察され、このような早い週齢から野生型との差が見られることから、alpha4GnT発現は胎児期に始まっていると考えられた。しかしながら、alpha4GnTがマウス発生段階のどの時期から発現しているかは、いまだ明らかになっていない。胎児胃でのalpha4GnT発現と合わせて、alphaGlcNAcが結合するムコチンコアタンパク質MUC6や、胃で発現するもう1種類のムコチンコアタンパク質MUC5AC、また、MUC6やMUC5ACと結合し、癌との関連が報告されているTFF(Trefoil factor family)2やTFF1に関しても、リアルタイムPCR法により発現量を測定し、発現開始時期を明らかにした。同時に、胎児胃の凍結切片も作製し、HIK1083抗体によるalphaGlcNAcの染色も行い、局在開始時期も調べた。胃癌抑制因子alphaGlcNAcの生合成に関与する唯一の糖転移酵素alpha4GnTの発現開始時期は、いまだ明らかになっていない。A4gntノックアウトマウスは、5週齢から胃の過形成が観察されるため、野生型マウスでは、この時期以前からalpha4GnTが発現すると考えられた。よって、マウス胎児の胃原器が形成されるE(embryonic day)11から出生前のE19までの胎児の胃を用いてalpha4GnTの遺伝子発現とalphaGlcNAcの局在を確かめた。まずは最初に、膣スメア染色から判断した適切な性周期の雌マウスを雄マウスと掛け合わせた後に、プラグ確認と膣スメアチェックで妊娠マウスを確定し、お腹の膨らんでいない状態でも雌マウスが妊娠しているか否かを判断出来るようにした。合わせて、蛍光免疫組織染色法を行うにあたり、使用抗体の固定条件および染色条件の検討も行った。実験条件を確定した後に、野生型マウス胎児胃から抽出したRNAを逆転写してcDNAを作製し、TaqManリアルタイムPCR法によって、alpha4GnT発現レベルを定量的に測定、比較した。この結果、alpha4GnT発現はE13.5から始まり、E19.5にかけてその発現量は急激に増加することが明らかになった。
情報ユニットからみた英語音声の分析とリスニング効率の研究

英語のリスニングについて、短期記憶の支配する領域に限定し、学習者の習熟度を変数にとってリスニング効率が向上する過程を段階的に明らか二することを目指し、日本人英語学習者を被験者にとり音声再生テストを行った。昨年度の実験データを再考察し、文レベルで聞き取れる単語数のchannel capacityとユニット数のchannel capacityを特定した。学習者の習熟度が上がるにしたがって、単語をユニットにまとめて知覚することによって情報処理量を増やすメカニズムが明らかになった。次に、情報ユニットを画する音声マーカーの代表的なものとしてポ-ズを取り上げ、ポ-ズの長さ(0ms、250ms、700ms)、種類(無声vs有声)、出現箇所(文法的・意味的区切りvs内容語の前)をコントロールしたテストセンテンスを作成し、どのようなポ-ズを挿入した文が学習者のリスニング効率を最も向上させるかを実験した。その結果、習熟度の高い学習者では700msのポ-ズに向上効果が現れないこと、様々なポ-ズ出現箇所に柔軟に対応できることが分かった。一方習熟度の低い学習者では長いポ-ズによる情報処理時間の確保がリスニング向上に寄与すること、文法的・意味的区切り箇所のポ-ズが最も効果的であることが分かった。習熟度が高くなるにしたがって句から文にholisticな聞き取りレベルが移行していくことを裏付けている。
寄生虫感染と宿主応答

蠕虫を感染させると、Th2/IgE応答が誘導され、これらの応答で排除が起こる。しかし、何故、蠕虫感染でTh2/IgE応答が誘導されるのかは不明である。本研究から、好塩基球はMHC class II,CD80/86を発現しており、ナイーブT細胞をTh2細胞に分化させることが明らかになった。更に、好塩基球を欠損したマウスにStrongyloides venezuelensis (Sv)を感染させたところ、正常なマウスに比して排虫が顕著に遅れることから、好塩基球が腸管寄生線虫排除に重要な細胞であることも明らかになった。最後に、蠕虫を感染させると、Th2/IgE応答が誘導されるが、このTh2/IgE誘導に蠕虫成分のキチンがTh2アジュバントとして作用することも明らかとなった。また、キチンがIL-33の産生を誘導し、次に、IL-33が自然型2型ヘルパー細胞を刺激してIL-5とIL-13の産生を誘導することが明らかとなった。既に、マクロファージに感染するLeishmania major(L.major)がTh1応答で排除され、一方、腸管に寄生する線虫がTh2応答で排除されることが明らかとなっている。そこで本研究では宿主応答に及ぼすIL-27とIL-33の影響と、好塩基球のTh2応答に対する作用を解明する。(1) BALB/cにL.majorを感染させるとTh2優位の免疫応答が誘導されマウスは感染死する。本研究ではIL-27を投与することでTh1/Th2バランスがどの様に変化するか、また宿主の防御力が向上するか等を解明する(2)好塩基球は腸管寄生線虫を感染させたマウスで増加する。本研究では、IL-33の好塩基球に対する活性化作用と、好塩基球の有するTh2応答に対する増強作用を解明する。Leishmania major(L.major)に感染した宿主は、Th1宿主応答を発動することで原虫を排除する。一方、Strongyloides venezuelensis(Sv)の様な蠕虫感染に対しては、宿主はTh2応答を発動することで排除する。このように、病原体の種類によって、全く異なる宿主応答を展開する。昨年度は新規サイトカインであるIL-27を感染宿主に投与して、これらの病原体に対する排除効果を検討した。BALB/cマウスの足踵にL.majorを感染させると、Th2優位の宿主応答が起こり、感染部位の進行性の腫脹が起こり、やがて肝臓・脾臓まで感染が拡大しマウスは悪液質で死亡する。我々はL.majorを感染させたBALB/cマウスにIL-12+IL-18投与することで、Th2応答を抑制するとともにTh1応答を誘導して、病原体を排除できることを報告している。本課題において我々は、IL-27をL.major感染BALB/cに一週間投与することによって、Th2応答を抑制するばかりか、Th1応答を誘導することを見いだした。更に、IL-27を過剰に発現するTransgenic mouseを作製し、このマウスにL.majorを感染させるとTh2応答が起こらず専らTh1応答が起こるため、L.major感染に対して抵抗性を発揮できることを明らかにした。このように、IL-27はそれ単独でTh1応答を誘導し、Th2応答を抑制する。一方、IL-27を過剰に発現させたマウスにSvを感染させても、Th2応答が起こらないため、Svの排虫が著明に抑制されることを明らかにした。今回の実験から、IL-27はそれ単独でTh1応答を誘導し、同時にTh2応答を抑制することから、細胞内寄生病原体感染症あるいはアレルギー疾患の治療に有効な生物製剤となる可能性が示唆された。Th2細胞の誘導機序の解明:(1)虫体成分は、抗原であるとともに、adjuvantとして作用すると考えられる。そこで、Th2を誘導する代表的なadjuvantであるAlum(水酸化アルミニウム)のDCに対する影響を調べた。Alumで刺激されたDCの細胞表面マーカーを調べたが特に変化はなかった。一方、サイトカインの産生は、Alumの作用でcaspase-1が活性化され、その結果、前駆型のIL-1βとIL-18が活性型に変換され、分泌されたが、IL-12の産生は誘導されなかった。

さらに、OVAとAlumでパルスされたDCを正常マウスの足底に投与したところ、同側の膝窩リンパ節にTh2細胞が誘導されていた。(2)腸杯細胞の誘導と腸管寄生線虫Nippostrongylus brasiliensis (Nb)排虫:正常マウスにIL-33を腹腔内投与すると、腸管のIL-13mRNA発現が上昇し、杯細胞は増加・肥大化して大量のムチンを産生した。この現象はST2とMyD88を介して産生されたIL-13が杯細胞誘導に必須であった。次に、IL-33投与でムチン産生が亢進したマウスにNb成虫を外科的に十二指腸に移入し、小腸粘膜に定着しているNb数を測定した。その結果、IL-33投与マウスでは著しくNbの数が減少していた。この排虫はIL-13KOではみられないことから、この排虫はIL-13依存性であることが明らかとなった。これまでNbの排虫はT細胞依存性のメカニズムだけが注目されてきたが、今回のIL-33の杯細胞誘導作用から、生体にはT細胞非依存性のNb排除機構の存在が考えられる。最近、IL-33がクローニングされ、orphan recepterであるST2のリガンドであることが明らかとなった。C57BL/6マウスにIL-33を単独投与すると著明な杯細胞の活性化が誘導された。この様な現象はRAG2KOマウスでも認められた。即ち、T/B細胞を欠損したマウスにIL-33を投与した場合でも同様に杯細胞からのムチン産生が誘導された。一方、IL-33をIL-13KOマウスに投与したところ、このようなムチン産生は全く誘導されなかった。この実験結果から、T/B細胞の不在下であっても、T、B細胞以外の細胞がIL-33の標的となってIL-33の刺激を受け、IL-13を産生することが強く示唆された。次にIL-33の受容体であるST2KOマウス、さらにIL-33のシグナル伝達に関わるMyD88を欠損したマウスにIL-33を投与したところ、予想どおりどちらのマウスにおいても、杯細胞が誘導されなかった。これらの実験から、生体内においてもIL-33のシグナルはST2/MyD88依存的に伝達され、IL-13の産生を介して杯細胞からのムチン産生を誘導されることが確実となった。そこで次に、IL-33を投与したマウスに経胃的(外科的)にNb成虫を投与したところ、24時間以内に完全な排虫が認められ、移入したNb成虫は排泄されていた。最後にNb感染に伴い内因性のIL-33が誘導されるか否かを検討したところ、腸絨毛の陰窩の周囲にある細胞でIL-33産生が認められた。即ち、腸管寄生線虫が感染すると、Th2細胞が誘導されるとともに、同時に腸組織でIL-33の産生が誘導された結果、Th2細胞由来のIL-13と、IL-33の刺激を受けた細胞由来のIL-13の作用とで、腸上皮細胞に杯細胞が誘導されることで、強力なNbの排除効果が得られるものと考えられた。今後は、IL-33の標的細胞を同定していきたいと考えている。蠕虫の外皮成分であるキチンを正常マウスの腹腔内に投与すると、腹腔内に著明な好酸球の集積を認めた。一方,IL-33受容体(ST2)を欠損したマウスに同様の処置を施すと、好酸球の集積は正常マウスのそれと比較して、約1/3に低下していた。このことからIL-33の関与が示唆された。実際キチンを腹腔内に投与するとIL-33の産生が誘導された。今後はIL-33がどの様なメカニズムで好酸球の集積を誘導するか検討する。次に蠕虫感染時に認めるTh2細胞の誘導機構を解明する為に好塩基球の約割りを検討した。
１９世紀後半以降のドイツ語圏音楽学史研究―音楽作品の内と外を巡る問題系の解明―

本年度は、音楽学者グィド・アドラー(18551941)の音楽学構想および様式概念を対象にした思想史研究を論文にまとめた。ドイツ語圏の音楽学史を記述することを目的とする本研究にとって、近代音楽学成立の立役者であるアドラーの思想を解明することは、彼以後の音楽学の発展を考察する際の指針となる最重要課題のひとつである。彼の思想を概括し、代表的ラベルを付与するという方法ではなく、むしろ彼のテクストと他の隣接諸学問のテクストとの内的連関を析出し、諸概念(様式、内容、形式等)の用法に注目したテクスト間ネットワークを構築するという基本方針のもと、とくにアドラー思想と美学、美術史学、心理学との関わりに言及した。これによって、ヴィーンの学問環境と強く結びついたアドラー思想のあり様が明らかになるとともに、置かれるコンテクストによって同一用語であっても意味内容は変化するという、具体的分析はいまだ十分ではない(語用論的)側面からの思想史研究を実践することができた。また、アドラー思想から派生して、他の音楽学者たちの学説の相互関連についても見取り図的に把握することができ、音楽学史執筆に向けて今後の見通しがたった。すなわち、ヘルマン・クレッチュマーおよびアルノルト・シェーリングによる音楽作品への解釈学的アプローチ、エルンスト・クルトの音楽心理学、さらにリヒャルト・ヴァラシェクの音楽美学といった諸学説の相関関係が用語レヴェルで具体化しつつある。また本研究の終着点と想定しているカール・ダールハウスの音楽史方法論の分析に着手し、ダントーの分析的歴史哲学との接点を考察することができた。これらに加えて、19世紀後半から音楽学のみならず様々な「科学/学問(Wissenschaft)」が急速に成立・発展したことの重要性を再認し、学問の「近代化・科学化」という科学史的サブテーマへの知見が開けたことも大きな進展であった。グィド・アドラーを対象にした思想史研究に関して、大きな区切りをつけることができた。特に、思弁的・観念論的美学から経験的・科学的美学への移行をテクストに即して具体的に検証し、またその移行の内部で起こった諸概念・用語の変容プロセスをアドラー・テクストに関して跡付けることができた。また、アドラー思想と美術史学との関係についても考察をまとめ、論文化することができた。さらに、他の音楽学者に対するアドラーの応答を導きの糸とすることで、彼以後の諸学説を読解する際の焦点が定まった。アドラーを中心とする「ヴィーン学派」とヘルマン・クレッチュマーを中心とする「ベルリン学派」(仮称)について、両者の表面上の異同のみならず、両学派に通底する問題系を把握しつつある。ただし他方で、当初二次的と思われたいくつかの問題が重要度を増し、次年度以降の重要な課題となった。まず、アドラー研究から派生して、ブレンターノ学派と音楽研究との関わりが次年度以降の最重要課題のひとつとなった。アドラーと並んで近代音楽学成立に重要な貢献をしたフーゴー・リーマンを扱うことは当初から見込んでいたが、彼の思想を立体的に把握し、さらに音楽学におけるヴィーン学派とのつながりを記述する際の要となるのがブレンターノ学派の思想である。また、フェヒナー以来の経験美学の系譜も考察する必要がある。大きくまとめれば、音楽作品への諸種の心理学的アプローチを用語レヴェルで詳細に分析する課題が生じている。なお、音楽学の展開を考察するにあたり、音楽作品の「内容」を巡る議論が重要な考察対象であることは言わずもがなであるが、やや時代錯誤的な議論であることは否めない。しかし、再度この議論を取り上げる意義、考察の発展可能性を再認することができたのに加え、その可能性を取り出す研究方法がより具体化した。したがって「おおむね順調に進展している」とした。次年度は、美学、心理学、(現在でいう)認知科学等が交差するヴィーンの音楽美学者リヒャルト・ヴァラシェクの思想を思想史上に位置づけることを第一課題とする。アドラーと同時代に活躍した彼の美学思想を解明することで、ハンスリック以来の音楽美学の流れを科学との接点という観点から記述することができると思われる。ヴァラシェクについては2019年度中の公表を目指す。また、クレッチュマーら「ベルリン学派」の系譜を記述することも同時に課題とする。これについても2019年度中に公表することが望まれる。また他方で、ヴィーン現地での資料調査も必要である。ヴィーン大学の教授会議事録等は、学問観の対立を浮き彫りにする史料として貴重であり、大学制度があってこその学問の近代化・科学化であるから、大学運営に関わる社会制度面への考察にも着手することが望まれよう。これらに加えて、ブレンターノ学派や経験美学の系譜を理解し、歴史記述するために、科学史・科学哲学の知識を補充・拡張する必要がある。これは上記の論文化作業と並んで喫緊の課題である。2020年度には、実際にフーゴー・リーマンを対象とした研究に取り組む必要があることから、早急に対処したい(二次文献は手元に準備できている)。なお、リーマンが考察した対象は多岐にわたる。音楽学史記述のための視点の一貫性を鑑みて、彼の思想全体というよりも、特に美学思想に分析を限定することになるだろう。もちろんその場合でも、彼の思想の概略をつかんでおくことは前提条件である。また、戦後のドイツ語圏音楽学界に関しては、すでにカール・ダールハウスの著作の考察に着手している。ダールハウスと(ヴィーン学派の系譜にあると思われる)

コンスタンティン・フローロスとの論争の分析を、ここまで記述してきた音楽学史に接続することで本研究はひとまず完了すると思われる。本年度は、音楽学者グィド・アドラー(18551941)の音楽学構想および様式概念を対象にした思想史研究を論文にまとめた。ドイツ語圏の音楽学史を記述することを目的とする本研究にとって、近代音楽学成立の立役者であるアドラーの思想を解明することは、彼以後の音楽学の発展を考察する際の指針となる最重要課題のひとつである。彼の思想を概括し、代表的ラベルを付与するという方法ではなく、むしろ彼のテクストと他の隣接諸学問のテクストとの内的連関を析出し、諸概念(様式、内容、形式等)の用法に注目したテクスト間ネットワークを構築するという基本方針のもと、とくにアドラー思想と美学、美術史学、心理学との関わりに言及した。これによって、ヴィーンの学問環境と強く結びついたアドラー思想のあり様が明らかになるとともに、置かれるコンテクストによって同一用語であっても意味内容は変化するという、具体的分析はいまだ十分ではない(語用論的)側面からの思想史研究を実践することができた。また、アドラー思想から派生して、他の音楽学者たちの学説の相互関連についても見取り図的に把握することができ、音楽学史執筆に向けて今後の見通しがたった。すなわち、ヘルマン・クレッチュマーおよびアルノルト・シェーリングによる音楽作品への解釈学的アプローチ、エルンスト・クルトの音楽心理学、さらにリヒャルト・ヴァラシェクの音楽美学といった諸学説の相関関係が用語レヴェルで具体化しつつある。また本研究の終着点と想定しているカール・ダールハウスの音楽史方法論の分析に着手し、ダントーの分析的歴史哲学との接点を考察することができた。これらに加えて、19世紀後半から音楽学のみならず様々な「科学/学問(Wissenschaft)」が急速に成立・発展したことの重要性を再認し、学問の「近代化・科学化」という科学史的サブテーマへの知見が開けたことも大きな進展であった。グィド・アドラーを対象にした思想史研究に関して、大きな区切りをつけることができた。特に、思弁的・観念論的美学から経験的・科学的美学への移行をテクストに即して具体的に検証し、またその移行の内部で起こった諸概念・用語の変容プロセスをアドラー・テクストに関して跡付けることができた。また、アドラー思想と美術史学との関係についても考察をまとめ、論文化することができた。さらに、他の音楽学者に対するアドラーの応答を導きの糸とすることで、彼以後の諸学説を読解する際の焦点が定まった。アドラーを中心とする「ヴィーン学派」とヘルマン・クレッチュマーを中心とする「ベルリン学派」(仮称)について、両者の表面上の異同のみならず、両学派に通底する問題系を把握しつつある。ただし他方で、当初二次的と思われたいくつかの問題が重要度を増し、次年度以降の重要な課題となった。まず、アドラー研究から派生して、ブレンターノ学派と音楽研究との関わりが次年度以降の最重要課題のひとつとなった。アドラーと並んで近代音楽学成立に重要な貢献をしたフーゴー・リーマンを扱うことは当初から見込んでいたが、彼の思想を立体的に把握し、さらに音楽学におけるヴィーン学派とのつながりを記述する際の要となるのがブレンターノ学派の思想である。
リチウムイオン伝導体を用いた新規な炭酸ガスセンサの開発

本研究は、室温でも高いリチウムイオン導電性を有する固体電解質を用いて、小型の炭酸ガスセンサブロ-ブを開発することを目的としている。固体電解質として、LiTi_2(PO_4)_3+0.2Li_3PO_4焼成体を、検出極としてLi_2CO_3を、参照極としてCaCO_3を用いた濃淡電池型センサを構成し、種々の炭酸ガス濃度に対する起動力変化を測定した。80ppmから1%の濃度範囲で実測値と計算値は良く一致した。また、応答時間は数分以内であった。このセンサを排煙中等に実装する際に、種々のガスに遭遇するが、これの影響を調べた。NO_2を約100ppm450ppm共存させても起電力に影響はなかった。これは操作温度である650°Cでは硝酸リチウムが分解してしまうためであると思われる。これに対しSO_2では20ppmですでに起電力は低下し、影響があらわれる。これは硫酸リチウムが生成するためである。次に水蒸気の影響であるが、絶対温度0220r/m^3では1000ppm1%の炭酸ガスは再現性良く、検出できるが1000ppm以下では起電力は低下した。これは水分と炭酸リチウムとが反応し、水酸化リチウムを生成したためである。動作温度を650°Cから下げるために、電極物質の検索を行った。Li_2CO_3ーK_2CO_3ーHa_2CO_3共融混合物を用いた場合、350°Cで炭酸ガス濃度100ppmから1%まで検出可能であった。リチウムイオン伝導体を用いた炭酸ガスセンサの固体電解賃として気密性を高めるためにLi_3PO_4等をLiTi_2(PO_4)_3固体電解質中に混合するなど固体電解質自体の改良、ならびに、素子の改善によりCO_2濃度80ppmー1%と広い範囲において測定できる知見が得られた。また、排ガス中での検出を踏まえ、排煙中に存在する代表的なガスである硫黄酸化物(20ppm)、窒素酸化物(100ppm)を炭酸ガスとともに共存させて炭酸ガス検出能を調べた。その結果、窒素酸化物に関しては全く影響されず、また、硫黄酸化物に対しては20ppmまでは悪影響を受けず、脱硫処理後後排ガス中のCO_2検出が十分可能であることがわかった。さらに、排煙ガス中には燃焼により水蒸気が存在する。そこで、水蒸気の影響を調べるため、水蒸気を含んだ空気と炭酸ガスを高温で種々の割合で直接混合し、種々の濃度で水蒸気が存在しているときのこのセンサの炭酸ガス検出能を調べた。絶対湿度220g/m^3まで水蒸気濃度を変えて測定したところ、1000ppmから1%までの炭酸ガス濃度では起電力値はほとんど変化せず、選択的に炭酸ガスを検知することがわかった。一方、炭酸ガス濃度が1000ppm以下の低濃度範囲では水蒸気量が増えるほど起電力値は低下した。これは検出側のリチウム種と水蒸気との反応により水酸化リチウム等が生成し、炭酸リチウムの生成を妨げ、このことが低濃度での起電力値低下に影響を与えたものと考えられる。また、CO_2検出下限が80ppmであったのは素子と無機接着剤部分での徴小なマイクロクラック発生により、ガス漏れを生じ、CO_2濃度80ppmに相当する計算起電力値からはずれたものと考えられ、これらの改善が今後の課題である。本研究は、室温でも高いリチウムイオン導電性を有する固体電解質を用いて、小型の炭酸ガスセンサプロ-ブを開発することを目的としている。固体電解質として、LiTi_2(PO_4)_3+0.2Li_3PO_4焼結体を、検出極としてLiCO_3を、参照極としてCaCO_3を用いた濃淡電池型センサを構成し、種々の炭酸ガス濃度に対する起動力変化を測定した。

80ppmから1%の濃度範囲で、実測値と計算値はよく一致した。また応答時間は数分以内であった。このセンサを排煙中等に実装する際に、種々のガスに遭遇するが、これの影響を調べた。NO_2を約100ppm450ppm共存させても起電力に影響はなかった。これは操作温度である650°Cでは硝酸リチウムが分解してしまうからであると思われる。これに対し、SO_2では20ppmですでに起電力は低下し、影響があらわれる。これは硫酸リチウムが生成するためである。次に水蒸気の影響であるが、絶対温度0220g/n^3では1000ppm1%の炭酸ガスは再現性良く、検出できるが1000ppm以下では起電力は低下した。これは水分と炭酸リチウムとが反応し、水酸化リチウムを生成したためである。動作温度を650°Cから下げるために、電極物質の検索を行なった。Li_3CO_3-K_2CO_3-Na_2CO_3共融混合物を用いた場合、350°Cで炭酸ガス濃度100ppmから1%まで検出可能であった。
イタリアルネサンス期における都市史の研究

都市史については、様々なアプロ-チが試みられよう。今回は、「ダンテの時代における南イタリア」と題する研究をまとめあげ、その中でいくつかの都市にふれた。そもそもイタリア半島に散在する都市の数は百を超え、それぞれが自治都市としての古い伝統を保持して今日にいたっている。一昨年自費でアブルッツォ地方の中心都市ラクィラをはじめ、スルモナおよびその周辺、さらにカンパ-ニャのナ-ポリを訪れた。そのときの実地踏査を生かしながら、文献を利用して、それらの都市がいかなる役割を演じたかについて考えてみることにした。フィレンワェを例にとれば、われわれは都市とルネサンス文化とのかかわりに目を奪われるため、同時代もしくはそれに先立つ時代の他の都市の存在をないがしろにしがちである。アブルッツォ地方は、南イタリアを支配したナ-ポリ王国の最北端を占めて、教会領と境を接している。山岳地帯が多く、ラクィラは交通の要衝に位して栄えた。13世紀末ナ-ポリ国王カルロ2世は、その地方の隠者として名高い人物を教皇に推挙し、その結果ケレスティヌス5世が選出された。当時宗教界の腐敗を刷新しようとする運動がこの地方に芽生えたとき、ラクィラやスルモナには教団が組織され、教会が建設されて、その運動が盛んになった。またナ-ポリは王国の首都であり、政治・経済・文化の各方面にわたって都市の役割を果した。14世紀初めに地方都市アナ-ニで事件がおこった。この都市は教会領にあり、教皇にゆかりのある都市ではあるが、決して大都市ではない。その都市がヨ-ロッパ史に一新時代を画する事件の舞台となったごとき例は、数多くはないが、イタリア史の場合を加えれば、少なくはない。そのような面からの都市史の重要さが、あらためて再認識された。
プロスタグランジンによる脊椎動物に共通の排卵誘導機構の解明

プロスタグランジン(PG)は、多くの脊椎動物において排卵誘導作用を示す因子として知られているが、その分子機構については未だに明らかになっていない。そこで、本研究では排卵研究に適した生物であるメダカを用いて、PGによる排卵誘導の分子機構を明らかにすることを目的とする。これまでにPG合成酵素COX-2及びPGE2受容体EP4bの解析を行い、PGE2が排卵時にアクチン重合調節に関与していることを示唆する結果を得た。平成24年度ではPGE2シグナルによって働くアクチン重合の調節機構及び排卵への作用機構について調査し、以下の研究成果が得られた。1.アクチン重合を調節する因子であるRhoファミリーについて、メダカの排卵への関与をin vitro排卵実験系を用いて調査した。その結果、Rho阻害剤でのみ排卵が阻害された。さらに、Rhoの下流因子であるRhoキナーゼの阻害剤をin vitro排卵実験系に添加した場合においても排卵が阻害された。2.メダカのゲノムデータベースより、Rho遺伝子はRhoA, RhoB, RhoCの3種類が存在しており、排卵前濾胞における各Rho遺伝子の発現量を調べた。その結果、RhoAが最も高く発現していた。また、排卵前濾胞において活性型RhoAが検出された。3.メダカ排卵時における濾胞の収縮とPGE2の作用との関連について調査を行った。その結果、EP4bアンタゴニストによって濾胞の収縮が阻害された。また、EP4bアンタゴニストとRho活性化剤を添加し培養を行うと、何も添加していない場合と同程度まで収縮した。以上の結果より、メダカではPGE2が、EP4b-RhoA-アクチン重合調節の経路を介し、濾胞を収縮させることによって、排卵に寄与していると予想された。そこで、本研究では排卵研究に適したモデル生物であるメダカを用いて脊椎動物に共通のPGによる排卵誘導の分子機構を明らかにすることを目的とする。本年度において、以下の研究成果が得られた。1.排卵前濾胞においてPGE_2およびその合成酵素であるCOX活性が検出された。また、排卵周期におけるPGE_2レベル及びCOX活性の変動を調査したところ、排卵周期において変動は見られなかった。2.排卵前濾胞において最も高く発現しているPGE_2の受容体であるEP4bについてmRNAレベルでの解析を行ったところ、EP4bの発現は排卵時刻に向けて急激に上昇することが明らかになった。したがって、PGによる排卵誘導作用は受容体であるEP4bによって調節されている可能性があると考えられた。3.排卵前濾胞をin vitroで培養を行い、ホルモンによるEP4bの発現誘導について調査を行ったところ、排卵前濾胞におけるEP4bの発現上昇は黄体形成ホルモン(LH)によって誘導されることが示唆された。4.培養細胞にEP4b遺伝子を導入し、機能解析を行った。その結果EP4bはPGE_2と結合し、細胞内cAMP濃度を上昇させることが明らかになった。今後、排卵酵素との連動性および下流で誘導される因子の探索・同定を行い、排卵時におけるPGの効果について解析を進めていく予定である。平成22年度までにPG合成酵素であるCox-2及びPGE2受容体EP4bの解析を行ってきた。平成23年度において、主に以下の研究成果が得られた。1.PGE2受容体EP4bのアンタゴニストで排卵を阻害した時の濾胞のアクチン重合度を測定したところ、正常に排卵させた濾胞に比べて有意に減少していた。このことからPGE2は排卵時にアクチン重合の調節に関与していることが示唆された。2.アクチン重合の阻害剤をin vitro排卵実験系に添加することによって排卵が強力に阻害された。したがって、排卵時にはアクチン重合調節が関与していると考えられた。3.アクチン重合調節因子の一種であるRhoキナーゼの阻害剤をin vitro排卵実験系に添加することによって排卵が阻害された。この結果から、排卵時のアクチン重合調節にはRhoキナーゼの活性化が関与していると考えられた。以上の結果よりメダカではPGE2が、EP4b-Rhoキナーゼ-アクチン重合調節といった経路を介してPGが排卵に作用していると予想された。これまでに報告された排卵時におけるPGの役割は哺乳類に限定された機能についてであった。しかし、今回得られたPGがアクチン重合調節を介して排卵に寄与することを示唆する結果は、新規の知見であり、魚類から哺乳類に至る脊椎動物に共通したPGの排卵時における分子機構の解明に向けて大きく前進したと考えられる。

そこで、本研究では排卵研究に適した生物であるメダカを用いて、PGによる排卵誘導の分子機構を明らかにすることを目的とする。これまでにPG合成酵素COX-2及びPGE2受容体EP4bの解析を行い、PGE2が排卵時にアクチン重合調節に関与していることを示唆する結果を得た。平成24年度ではPGE2シグナルによって働くアクチン重合の調節機構及び排卵への作用機構について調査し、以下の研究成果が得られた。1.アクチン重合を調節する因子であるRhoファミリーについて、メダカの排卵への関与をin vitro排卵実験系を用いて調査した。その結果、Rho阻害剤でのみ排卵が阻害された。さらに、Rhoの下流因子であるRhoキナーゼの阻害剤をin vitro排卵実験系に添加した場合においても排卵が阻害された。2.メダカのゲノムデータベースより、Rho遺伝子はRhoA, RhoB, RhoCの3種類が存在しており、排卵前濾胞における各Rho遺伝子の発現量を調べた。その結果、RhoAが最も高く発現していた。また、排卵前濾胞において活性型RhoAが検出された。3.メダカ排卵時における濾胞の収縮とPGE2の作用との関連について調査を行った。その結果、EP4bアンタゴニストによって濾胞の収縮が阻害された。また、EP4bアンタゴニストとRho活性化剤を添加し培養を行うと、何も添加していない場合と同程度まで収縮した。以上の結果より、メダカではPGE2が、EP4b-RhoA-アクチン重合調節の経路を介し、濾胞を収縮させることによって、排卵に寄与していると予想された。当初の2年目の研究計画に該当する排卵時に作用するPG受容体の同定及び解析については論文を作成し、現在Molecular Cellular Endocrinology誌に査読中である。Rhoキナーゼが受容体を介して誘導される因子として予想される結果を得ることができた。また、当初の研究計画の3年目に該当したPG受容体とホルモン産生との関連についても平成22年度中に既に結果を得ており、上記の論文に発表予定である。9.研究実績の概要に記した結果を踏まえ、具体的に以下の課題について解決する。(A)排卵前濾胞においてPGはRhoキナーゼを活性化させるかメダカ排卵前濾胞においてRhoキナーゼ活性化に関わる因子Rho-GTPの検出を試みる。また、EP4アンタゴニストで排卵阻害させた濾胞についてもRho-GTPの検出を行う。さらにRhoキナーゼの下流因子の同定を行う。(B)アクチン重合調節がどのように排卵に寄与しているかEP4bを発現させたメダカ培養細胞を用いてPGE2添加によるアクチンフィラメントの挙動を観察する。また、その挙動が排卵前濾胞でも観察できるかどうか確認する。