hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
組織組み替え実験による前立腺特異抗原の機能解析

良性ヒト前立腺上皮細胞を初代培養し、SV40 large T antigenにより不死化したBPH-1細胞はアンドロゲン受容体を有していないため、前立腺特異抗原(PSA)を産生・分泌していない。今回、PSA発現レトロウィルスベクターをBPH-1細胞へ導入し、前立腺の腺構造構築におけるPSAの役割を検討した。組織組み替え実験は、I型コラーゲン中にてBPH-1細胞とラット泌尿生殖洞間充識細胞を混合し、免疫不全ヌードマウスの腎被膜下へ移植することにより遂行した。移植してから4週間後に、25mgテストステロン錠および5mgエストラジオール錠を皮下に埋め込み、8週間の処理後、マウスを屠殺し、得られた前立腺組織を病理学的、免疫組織学的に検討した。ステロイドホルモン非投与群において、PSAタンパク質非産生BPH-1細胞(n=27)が正常腺管を形成する割合が約30%であったのに対し、PSAタンパク質発現BPH-1細胞(n=24)では約50%と有意に高かった。次いで、ステロイドホルモン投与群では、PSAタンパク質非産生BPH-1細胞(n=26)の約75%で癌が発生するのに対し、PSAタンパク質発現BPH-1細胞(n=26)では約50%と低値を示した。昨年度の検討より、PSAタンパク質発現BPH-1細胞が形成する前立腺は、連続した基底細胞の発現を認め、より正常に近いヒト前立腺の腺構造を構築できることが明らかとなっている。今年度は、PSAタンパク質発現BPH-1細胞が形成する前立腺は、PSAタンパク質非産生BPH-1細胞に比較して正常腺管である割合が高いことを明らかにした。さらに、ステロイドホルモン誘発性の発癌実験において、PSAタンパク質発現BPH-1細胞が形成した正常腺管はステロイドホルモンの影響を受けにくく、その結果、発癌率が有意に低い結果となった。本研究により、PSAはヒト前立腺上皮細胞内のシグナル伝達経路に影響し、さらに、間質由来パラクラインシグナルの存在下では細胞分化を制御する可能性が示唆された。良性ヒト前立腺上皮細胞を初代培養し、SV40 large T antigenにより不死化したBPH-1細胞はアンドロゲン受容体を有していないため、PSAを産生・分泌していない。検討2)I型コラーゲン中にて、BPH-1細胞とラット泌尿生殖洞間充識細胞を混合し、免疫不全ヌードマウスの腎被膜下へ移植した(組織組み替え実験)。4週間および12週間後にマウスを屠殺し、得られた前立腺組織を病理学的、免疫組織学的に検討した。その結果、PSAタンパク質発現BPH-1細胞が形成した前立腺では、サイトケラチン14(CK14)の発現を特徴とする基底細胞の存在を認め、より正常に近いヒト前立腺の腺構造を構築できることが明らかとなった。BPH-1細胞は腺上皮由来であるため、間充識細胞からのパラクラインシグナルと、PSA発現によるBPH-1細胞内のMARKシグナルの活性化が、腺上皮細胞を基底細胞へとtransdifferentiationさせたと考えられた。
源流域における同位体を用いた水循環プロセスの研究

茨城県十王町近郊の花崗岩源流域および栃木県日光市近郊の流紋岩源流域において,水文観測および渓流水・湧水の無機溶存成分,同位体分析を実施した.花崗岩流域においては,湧水のトリチウム分析を実施し,これを基に地中水のピストン流モデルを構築し対象流域における地中水の平均滞留時間を推定した.その結果滞留時間は,平均で約20年と見積もられた.一方,流域の土層構造も併せて測定しその結果を基に,地中水収支から見積もられた滞留時間は,約1.3年であった.異なる2つの手法によって推定された地中水の滞留時間が異なるのは,以下の理由によるものと推定される.すなわち,地中水の挙動が,土層中のみならず基盤岩中にも及んでいること,また基盤岩中も含めた地中水の流動が存在するため,地形的な流域内に地中水の流動が閉じないことによるものと思われる.さらに,降水,湧水,渓流水,土層中の土壌水における各種溶存成分の分析を行った.その結果,浸透-降下浸透-流出という水循環過程において,湧水の水質は深度約250cmの土壌水とほぼ一致することが認められた.すなわち比較的土層の厚い流域において湧水・渓流水の水質は,深度250cm程度までの浸透過程で決定されることが示唆された.一方,流紋岩流域では,3つの流域において,渓流流量を中心とした水文観測が実施された.その結果,降雨に伴う渓流水の流出は,細かい降雨ピークに応答しつつ,徐々に遅れた流出応答が基底流量を増加させるような効果を持ち,そのため,降雨の進行とともに流出が全体的に高くなる傾向がみられた.また総降雨量が100mmを超える降雨イベントでは,100mm以下のそれと比較し,降雨に対するピーク比流量が約10倍高くなる傾向が認められた.すなわち当地域においては,降雨量100mmという値が流域全体の水貯留機能の閾値になっていることが示唆された.本結果は,山地流域の降雨流出過程に及ぼす山体貯留の効果を把握する上で,基盤岩も含めた評価を行うことが重要であることを示した.茨城県十王町近郊の花崗岩源流域および栃木県日光市近郊の流紋岩源流域において,水文観測および渓流水・湧水の無機溶存成分,同位体分析を実施した.花崗岩流域においては,湧水のトリチウム分析を実施し,これを基に地中水のピストン流モデルを構築し対象流域における地中水の平均滞留時間を推定した.その結果滞留時間は,平均で約20年と見積もられた.一方,流域の土層構造も併せて測定しその結果を基に,地中水収支から見積もられた滞留時間は,約1.3年であった.異なる2つの手法によって推定された地中水の滞留時間が異なるのは,以下の理由によるものと推定される.すなわち,地中水の挙動が,土層中のみならず基盤岩中にも及んでいること,また基盤岩中も含めた地中水の流動が存在するため,地形的な流域内に地中水の流動が閉じないことによるものと思われる.さらに,降水,湧水,渓流水,土層中の土壌水における各種溶存成分の分析を行った.その結果,浸透-降下浸透-流出という水循環過程において,湧水の水質は深度約250cmの土壌水とほぼ一致することが認められた.すなわち比較的土層の厚い流域において湧水・渓流水の水質は,深度250cm程度までの浸透過程で決定されることが示唆された.一方,流紋岩流域では,3つの流域において,渓流流量を中心とした水文観測が実施された.その結果,降雨に伴う渓流水の流出は,細かい降雨ピークに応答しつつ,徐々に遅れた流出応答が基底流量を増加させるような効果を持ち,そのため,降雨の進行とともに流出が全体的に高くなる傾向がみられた.また総降雨量が100mmを超える降雨イベントでは,100mm以下のそれと比較し,降雨に対するピーク比流量が約10倍高くなる傾向が認められた.すなわち当地域においては,降雨量100mmという値が流域全体の水貯留機能の閾値になっていることが示唆された.本結果は,山地流域の降雨流出過程に及ぼす山体貯留の効果を把握する上で,基盤岩も含めた評価を行うことが重要であることを示した.本年度は,茨城県十王町近郊の花崗岩源流域および栃木県日光市近郊の流紋岩源流域において,水文観測および渓流水・湧水の無機溶存成分,同位体分析を実施した.花崗岩流域においては,湧水のトリチウム分析を実施し,これを基に地中水のピストン流モデルを構築し対象流域における地中水の平均滞留時間を推定した.その結果滞留時間は,平均で約20年と見積もられた.一方,流域の土層構造も併せて測定しその結果を基に,地中水収支から見積もられた滞留時間は,約1.3年であった.異なる2つの手法によって推定された地中水の滞留時間が異なるのは,以下の理由によるものと推定される.すなわち,地中水の挙動が,土層中のみならず基盤岩中にも及んでいること,また基盤岩中も含めた地中水の流動が存在するため,地形的な流域内に地中水の流動が閉じないことによるものと思われる.一方,流紋岩流域では,3つの流域において,渓流流量を中心とした水文観測が実施された.

その結果,降雨に伴う渓流水の流出は,細かい降雨ピークに応答しつつ,徐々に遅れた流出応答が基底流量を増加させるような効果を持ち,そのため,降雨の進行とともに流出が全体的に高くなる傾向がみられた.また総降雨量600mmの台風通過時には,3つの流域において小規模な土石流が発生したものと判断された.この土石流は3流域とも,積算降雨量250280mmの段階で発生した.このことから,積算降雨量250280mmが土石流発生に対し一種の閾値である可能性がある.茨城県十王町近郊の花崗岩源流域および栃木県日光市近郊の流紋岩源流域において,水文観測および渓流水・湧水の無機溶存成分,同位体分析を実施した.花崗岩流域においては,湧水のトリチウム分析を実施し,これを基に地中水のピストン流モデルを構築し対象流域における地中水の平均滞留時間を推定した.その結果滞留時間は,平均で約20年と見積もられた.一方,流域の土層構造も併せて測定しその結果を基に,地中水収支から見積もられた滞留時間は,約1.3年であった.異なる2つの手法によって推定された地中水の滞留時間が異なるのは,以下の理由によるものと推定される.すなわち,地中水の挙動が,土層中のみならず基盤岩中にも及んでいること,また基盤岩中も含めた地中水の流動が存在するため,地形的な流域内に地中水の流動が閉じないことによるものと思われる.さらに,降水,湧水,渓流水,土層中の土壌水における各種溶存成分の分析を行った.その結果,浸透-降下浸透-流出という水循環過程において,湧水の水質は深度約250cmの土壌水とほぼ一致することが認められた,すなわち比較的土層の厚い流域において湧水・渓流水の水質は,深度250cm程度までの浸透過程で決定されることが示唆された.一方,流紋岩流域では,3つの流域において,渓流流量を中心とした水文観測が実施された.その結果,降雨に伴う渓流水の流出は,細かい降雨ピークに応答しつつ,徐々に遅れた流出応答が基底流量を増加させるような効果を持ち,そのため,降雨の進行とともに流出が全体的に高くなる傾向がみられた.また総降雨量が100mmを超える降雨イベントでは,100mm以下のそれと比較し,降雨に対するピーク比流量が約10倍高くなる傾向が認められた.すなわち当地域においては,降雨量100mmという値が流域全体の水貯留機能の閾値になっていることが示唆された.本結果は,山地流域の降雨流出過程に及ぼす山体貯留の効果を把握する上で,基盤岩も含めた評価を行うことが重要であることを示した.
I型糖尿病の膵β細胞障害におけるFas抗原とapoptosisの関与の検討

私どもはこれまでにI型糖尿病のβ細胞障害にβ細胞自体が産生するTNF-αが関与している可能性を示してきた。TNF-αはIFN-γと同時に膵島細胞に作用させるとMHC抗原を誘導し、細胞障害をもたらす。しかしこの細胞障害が細胞膜障害によるnecrosisであるのか核障害によるapoptosisであるのかは不明である。最近、apoptosisの誘導にはTNF受容体familyの1つであるFas抗原が関与していることが示され、細胞障害における意義が注目されている。そこで、今回マウス膵島細胞およびcell lineにおけるFas抗原の発現を検討し、さらにサイトカインによる膵島細胞DNA鎖切断も検討した。非刺激状態の正常膵島細胞においてはPCRによってもFas抗原mRNAは検出されなかったが、IL-1β,IFN-γ,TNF-α添加後12時間でいずれもFas抗原mRNAが誘導され、特に3者を併用すると強い発現が見られた。transgenic mouse由来のβ-cell line(βTC1),α-cell line(αTC1)はいずれも非刺激状態でFas抗原mRNAを弱く発現しており、サイトカインの3者併用により増強された。またサイトカイン添加後膵島細胞cell lineにおいてapoptosisに特徴的な現象であるDNA鎖切断が起こるかどうかを抗DNA、抗histon抗体を用いたELISA法、agalose gel電気泳動で検討したところ3時間後からサイトカイン3者併用により両cell lineでDNA鎖切断が認められ、βTC1においてより顕著であった。膵島細胞においてサイトカイン刺激によりFas抗原mRNAが発現しDNA鎖切断が誘導されたことから、I型糖尿病におけるβ細胞破壊にapoptosisの機序が関与している可能性があると考えられた。
融合蛋白質を利用した膜貫通性蛋白質の配向性および組み込み機構の解析

ペルオキシソーム膜の70kDa蛋白質(PMP70)の局在化シグナルを明らかにするため、PMP70の部分配列をアミノ末端側に、一方大腸菌のジヒドロ葉酸還元酵素(DHFR)の配列をカルボキシル末端側にもつ融合蛋白質を遺伝子工学的に構築した。この蛋白質をコードする遺伝子をチャイニーズハムスター卵巣来細胞(CHO)に導入して発現させ、作られた蛋白質の細胞内局在性を、抗DHFR抗体を用いた二重蛍光染色法によって調べた。その結果、PMP70の局在化にはアミノ末端側約220残基があれば十分であることがわかった。一方、やはりアミノ末端側にペルオキシソーム局在化シグナルをもつ3-ケトアシル-CoAチオラーゼについて調べた。すでにこの酵素の前駆体のアミノ末端延長ペプチドにシグナル活性が存在することを明らかにしていたので、今年度はこのシグナルのアミノ酸配列依存性を検討した。延長ペプチド部分をDHFRのアミノ末端に結合させた融合蛋白質をCHO細胞に発現させ、前述と同様の方法で分布を調べた。プロセシング部位から上流に向って17番目の残基であるヒスチジンを他のアミノ酸に置換したところ、グルタミンでは弱いながらも局在化活性を保持していた。しかし塩基性アミノ酸のリジンまたはアルギニンに置き換えると、ペルオキシソーム局在化活性は失われ、かわりに弱いミトコンドリア局在化活性が現れた。疎水性アミノ酸に置き換えても同様の結果が得られた。一方、中性の親水性アミノ酸あるいは酸性アミノ酸では、どちらのオルガネラへも輸送されなかった。これらの結果は、チオラーゼ延長ペプチドの局在性シグナルとしての機能が、少くとも問題のヒスチジン残基に関する限り厳密な配列依存性をもち、かつ正の電荷は活性に関与しないことを示している。チオラーゼのシグナルは、従来から知られているSKL型シグナルとは、異なる認識機構によって受容されると考えられる。
生体反応検出用多機能性無機ナノ粒子の作製と応用

生化学研究や医療診断に用いられている有機色素に替わる次世代プローブとして、(1)近赤外蛍光、(2)近赤外蛍光+MR造影、の2つの機能をそれぞれ有する無機ナノ粒子の作成を試みた。母体として光学結晶として利用されているYAGに着目し、(1)の場合はYb^<3+>を、(2)の場合はYb^<3+>とGd^<3+>をトーパントとしてそれぞれ有するYAGナノ粒子をグリコサーマル法により合成した。金属原料を1,4-ブタンジオールに投入して密閉容器中で加熱することにより、一次粒子径が約10nmのYAG:Yb^<3+>ナノ粒子を得た。作製された粒子は、近赤外レーザー(λ=940nm,1W)の照射によりYb^<3+>のf-f遷移に帰属される近赤外蛍光を発した。また、純水に分散させたYAG:Yb^<3+>ナノ粒子に対し近赤外レーザーを2h連続照射しても発光強度は低下せず、有機色素の持つ光退色の問題を解決した。このようにして合成したYAG:Yb^<3+>ナノ粒子に対して酢酸Gdを添加し、再度オートクレーブ処理を行うことにより、Gd-YAG:Yb^<3+>ナノ粒子を合成した。Gd添加による粒子径の増大、副生成物の生成は確認されず、作製した粒子は純水によく分散した。さらに、近赤外レーザーの照射により近赤外発光を示すだけでなく、アガロースゲルに分散させて行ったMRIではT_1短縮効果を示し、マルチモーダルイメージング用プローブとしての可能性を示唆した。(1)の近赤外蛍光は生体透過性が高く、かつ、自家蛍光が抑制できるため、全身イメージングや検出感度の高いイメージングに利用できる。また(2)のような多機能性ナノ粒子は複数の分析装置の検出端として利用でき、各々の装置より得られた情報を相補的に取り扱うことで包括的な分析や診断を可能とする。
硫化物・硫酸塩を含む試料中の微量有機物・軽元素同位体比分析法の確立

海底や河床の堆積物中の有機物の元素組成・安定同位体比組成を調べることにより、その堆積物ができた当時の環境や、堆積物の続成過程を推定するための重要な情報を得ることができます。そのため堆積物試料の軽元素分析は多くの研究室で盛んにおこなわれています。しかし、堆積物試料の中には、硫化物や硫酸塩を多量に含むものがあり、分析時に妨害成分が発生するため、正確で再現性のある分析を安定的に行うことが困難です。この困難を克服し有益な分析値を得るため、硫黄除去能のある試薬を合成し、既存の元素分析機器に組み込むことにより、硫黄を大量に含む化合物の軽元素の元素分析・安定同位体分析を可能にすることを目指しています。
プログラム学習用教材の開発を支援するデータベースシステム

プログラム学習教材またはCAI学習教材を開発するにあたって、教材制作者が1問(1フレーム)の単位で作成する問題文または解説文をセット、モジュール名、フレーム番号をキーとして、問題文のデータベースに登録する。問題文は、日本語ワードプロセッサを使用して記述し、その結果できあがる文書ファイルをそのまま汎用コンピュータに転送することができるので、特別に入力する手数は省略できる。一方、問題文のデータベースとは別に登録された各フレーム(問題または解説文)を、学習者にどのような順序で提示していくかを考えて、その情報はプログラム学習構造データベースに登録しておく。システムは、以上の2つのデータベースを参照しあって、スクランブル形式に編集したテキストを印刷したり、マイクロ・コンピュータを使用して、画面に問題を表示してCAI学習を進めさせる。問題文や解説文の修正はフレーム単位で行なうことができるし、フレームの追加も順序には関係なくフレーム単位で行なったうえ、学習構造データベース中の該当する部分で次に学習すべきフレームの番号を変更し、新しいフレームに関する情報をつけたしておけば自動的に修正される。コンピュータのプログラミングにはほとんど知識を持たない教官でも、フレーム単位で教材を制作し、その提示順序をきめていけば、自動的にマイクロ・コンピュータによるCAI学習プログラムが作動することが、本研究の狙いとするところである。なお、現在作動するシステムはMELCOM・COSMO700とM8510日本語ワードプロセッサを使用してデータベースを作っているが、マイクロ・コンピュータはMS/DOSとLEVEL2/COBOLコンパイラの使用できる機種であれば、機種を問わず実行することができる。
MBEにより作製した磁性薄膜の構造と特性に関する研究

MBE装置によりPt/Co人工格子膜を作製した。成膜中の"in situ"RHEED分析により、膜構造に与える成長速度・基板温度の影響を評価し、最適成膜条件を決定した。シリコン(111)基板上に成膜する条件として、バッファ層に473Kで成膜したPt層20nmが最適であることを見出した。AFMにより薄膜表面形状の精密測定を行い、作製した膜の界面歪、整合性を評価した。薄膜X線回折装置により、膜の構造を精密評価し、人工格子膜としての積層の質の定量化を試みた。MBE装置と超高真空トンネルで連結されたXPSによる組成分析では、膜面垂直方向にnmオーダーで組成変調が形成されたことを確認した。VSMによる磁気特性測定の結果により、膜の人工格子周期、成膜条件による磁気特性の変化を論じた。MFMによる膜表面の磁区構造観察では、Co層周期が大きくなるほど、磁区サイズが減少することを見出した。これは、磁気エネルギーを静磁気エネルギーと磁壁ネルギーの総和で評価することにより説明された。MFMの測定結果は90度磁壁と45度磁壁で囲まれた磁区による静磁場ポテンシャルを境界要素法で計算したものと比較検討することにより、人工格子膜の磁区構造を議論した。申請により購入したホール測定装置を改良し、±5kOeの磁界中でホール特性だけでなく巨大磁気抵抗効果を計測可能なものとした。界面構造の変化により磁気特性が大きく変化することを確認し、MBE法だけでなく、スパッタ法で作製した膜でも検討を進め、グラニュラー構造の薄膜での磁気特性も論じた。燒鈍により界面構造を変化させたときの磁気特性、X線回折構造測定を行い、傍証とした。MBE装置による、Pt/Co人工格子簿膜を作製した。成膜中でのRHEED観察により、膜構造に与える、成長速度、基板温度の影響を評価し、最適成膜条件を決定した。Si(111)基板に成膜する場合、バッファ層として473Kで作製したPt層20nmが最適であることを見出した。AFMにより薄膜表面の精密測定を行い、作製した膜の海面歪み、整合性を評価した。薄膜X線回折装置により、膜の構造を評価し、人工格子膜としての質の定量化を試みた。MBE装置と超高真空トンネルで連結されたXPSによる組成分析では、膜面垂直方向にnmオーダーで組成変調がにあることを確認した。VSMによる磁気特性測定の結果により、膜の人工格子周期、成膜条件による磁気特性の変化を論した。MFMによる膜表面の磁区構造観察では、Co層周期が大きくなるほど、磁区サイズが小さくなることを見出した。これは、磁気エネルギーを、静磁気エネルギーと磁壁エネルギーの総和で評価することにより説明された。MFMの測定結果は、90度磁壁と45度磁壁で囲まれた磁区による静磁場ポテンシャルを境界要素法で計算したものと比較検討することにより、人工格子膜の磁区構造を議論した。本年度申請のホール測定装置を立ち上げ、磁気抵抗効果を測定できるシステムを構築した。コイル部分の残留磁化による効果が測定結果に影響を与えることを見出し、今後の改良課題とした。

MBE装置と超高真空トンネルで連結されたXPSによる組成分析では、膜面垂直方向にnmオーダーで組成変調が形成されたことを確認した。VSMによる磁気特性測定の結果により、膜の人工格子周期、成膜条件による磁気特性の変化を論じた。MFMによる膜表面の磁区構造観察では、Co層周期が大きくなるほど、磁区サイズが減少することを見出した。これは、磁気エネルギーを静磁気エネルギーと磁壁ネルギーの総和で評価することにより説明された。MFMの測定結果は90度磁壁と45度磁壁で囲まれた磁区による静磁場ポテンシャルを境界要素法で計算したものと比較検討することにより、人工格子膜の磁区構造を議論した。申請により購入したホール測定装置を改良し、±5kOeの磁界中でホール特性だけでなく巨大磁気抵抗効果を計測可能なものとした。界面構造の変化により磁気特性が大きく変化することを確認し、MBE法だけでなく、スパッタ法で作製した膜でも検討を進め、グラニュラー構造の薄膜での磁気特性も論じた。燒鈍により界面構造を変化させたときの磁気特性、X線回折構造測定を行い、傍証とした。
SCO X-1からの重力波の重力波 - X線望遠鏡を用いたマルチ-メッセンジャー観測

系外天体のうち最も強いX線を放射する低質量X線連星であるScoX-1とターゲットとしてマルチメッセンジャー観測を行い、重力波を新しい方法で探査した。重力波の放出にはX線等の電磁波、宇宙線が伴うことに着目して、アメリカの重力波望遠鏡LIGOとNASAの高時間解像度を持つX線望遠鏡RXTEを用いてScoX-1を観測した。両方の時系列データを用いたコインシデンス解析を行った。その結果重力波は検出されなかったが、重力波データとRXTEデータからコインシデンスイベントが5つ検出された。研究期間内にはできなかったが、そのイベントを用いて、SCOX-1からの重力波-X線同時放射モデルの制限を行っていく予定である。22年度は重力波源の有力候補である低質量X線連星Sco X-1からの重力波を探査するデータ解析パイプラインを構築し、データ解析を行った。本研究では主に、今まで行われてこなかったバースト性重力波の検出である。モデルとして、蓄積された伴星からの降着ガスによって外殻が崩壊した際に生じる星震で生じるバースト性重力波などがある。重力波の放出にはX線等が伴うことに着目して、アメリカの重力波望遠鏡LIGOとNASAの高時間解像度を持つX線望遠鏡RXTEのデータを用いたコインシデンス解析を行った。本研究では重力波の初検出およびモデルの観測的な制限をつける事を目標とする。解析パイプラインはRXTEデータ用とLIGOデータ用の大きく2つに分かれる。RXTEデータはバースト性信号の検出に標準的に用いられている、時間周波数空間上でエネルギーが閾値よりも高い領域を検出するExcess power methodを用いた。LIGOデータは複数の重力波望遠鏡のデータをSco X-1の方向に最適な検出効率になるように結合するソーストラッキング手法を開発した。RXTEデータからのイベント候補リストとLIGOデータからのイベント候補リストを用いてコインシデンス解析を行い、重力波イベント候補リストを作成した。開発したパイプラインの性能は人工的に作った重力波信号、X線信号を両データにソフトウェアインジェクションして解析シミュレーションを行って検出効率を評価し、期待する性能が出ている事を確認した。4月1日から5月17日までと、8月18日から12月1日まで、ドイツのハノーファにあるマックスプランク研究所でRXTEのデータ解析を行っている研究者と共同研究を行った。系外天体のうち最も強いX線を放射する低質量X線連星であるScoX-1からの重力波を新しい方法で探査する。重力波の放出にはX線等の電磁波、宇宙線が伴うことに着目して、アメリカの重力波望遠鏡LIGOとNASAの高時間解像度を持つX線望遠鏡RXTEを用いたマルチメッセンジャー観測を行う。両方の時系列データを用いたコインシデンス解析を行い、信頼性の高い重力波の初検出または上限値決定を行う。また、起源が分かるX線トランジェントが検出された場合、重力波観測と合わせてモデルの制限を行う。以上が本研究の目的である。23年度は、X線衛星RXTEのSCO-X1の観測データと重力波望遠鏡LIGOのデータを解析するパイプラインのソフトウェアの細かな修正を行うと共に、その解析結果について統計的な考察を行った。現段階でX線トランジェントイベント候補と重力波トランジェントイベント候補がコインシデンスしているイベント候補は5つ見つかっており、その5つのイベントのバックグラウンドからのsignificanceを評価し、その結果検出されたコインシデンスイベントが重力波発見となるだけのsignificanceを有していないことが分かった。そこで、我々のサイエンスターゲットはScoX-1の伴星からの降着ガスが積み重なることによって主星の外殻が崩壊し、解放される重力エネルギーによってX線と重力波が同時に放射されるというモデルの制限と定めて、解析を推進して行く。重力波とX線データの同時解析による制限は世界初であり、重力波を用いたマルチメッセンジャー観測の基礎を築くという意味でも、本研究はサイエンスにとって重要である。本研究の目的は、系外天体のうち最も強いX線を放射する低質量X線連星であるSco X-1からの重力波を新しい方法で探査することである。具体的には重力波の放出にはX線等の電磁波が伴うことに着目して、アメリカの重力波望遠鏡LIGOとNASAの高時間解像度を持つX線望遠鏡RXTEを用いたマルチメッセンジャー観測を行った。前年度までに、我々はRXTEのX線時系列データと、LIGOの重力波データを解析するパイプラインを構築し、解析パイプラインをデータに適用した。本年度は解析パイプラインの詳細をさらに精密にして、データ解析結果を正確に解釈できるようにつとめた。

6月に1週間ほどイギリスのカーディフ大学の共同研究者であるChris Messengerを訪問し、RXTEグループメンバーのDuncan Gallowayを交えて議論した結果、X線のデータのキャリブレーション精度に問題がある事がわかりその部分の修正に多くの時間を割いた。その後改良した解析パイプラインを用いて再びX線トランジェントと重力波トランジェントとのコインシデンスイベントを5つ発見した。その結果を2012年9月にローマで行われたLIGO-Virgoコラボレーションミーティングで報告し、その際、ミーティング参加者と結果の解釈について議論を行った。結果として重力波と見なせるイベントは検出できなかったが、重力波とX線の同時放射イベントに関するアッパーリミットはつけられる結果を得た。今後はアッパーリミットに関して正確な値を求めてゆく。RXTEのデータを解析するために開発したソフトウェアのvaridationを行うのに、RXTE MITチームのメンバーの協力を得て進めている。その際、同一データの同一の処理を行うパートについて結果を比較しているのだが、担当者が忙しいこともあり、期待するほど進んでいない。またコラボレーション内で、私が行った解析結果のレヴューを行う手続きが順調に進んでいない。24年度が最終年度であるため、記入しない。解析結果のコラボレーション内でのレビューを受けられるように、積極的に働きかけることが非常に重要になる。基本的には解析は終了しているが、解析の詳細な部分での正当性をさらに示していくことを推進してゆく。
変態時の特定タンパク合成に対するエクジソンとJHの作用

はじめに、変態時のエクジソンとJHの分泌量の変動を正確に知るため、それぞれの抗体をつくり、ラジオノムノアツセイにより測定した。とくにJHについては簡便な方法を開発した。翅原基中のエクジソン結合体量の成長にともなう変動を測定したところ、5令4日目、造繭直前および蛹化時にピークをもつが、作用しない5令初期にも存在することがわかり、エクジソンの作用時かそうでないかに関係なく、エクジソンによる合成誘導のないことがわかった。翅成虫原基から結合蛋白を分離・精製したところ、25KDと60KDに、強いエクジソン結合活性をもつ物質が得られた。その解離恒数は4nMレベルで、ショウジョウバエのエクジソン結合体と比較すると、分子は小さいが、結合力はほとんど同じことがわかった。カイコのレクチン様蛋白は、ほぼ体液中のエクジソンと同様に変動し、蛹化前にはエクジソンにその合成が誘導されることがわかった。その蛋白の精製と特性解析は、温度処理、酵素処理、SDS電気泳動、抗体作製などにより進められた。高温による不活化や、トリプシン処理による不活化はカイコレクチンがタンパクであることを示している。アフィニティクロマトグラフは、糖処理による不活化が、グルクロン酸ガラクツーロン酸、アンノース、ブドー糖、果糖の順に好くなることから、グルクロン酸をリガンドとした。アフィニティークロマトで分離したタンパクは、88KDと90KDで、硫安沈澱と加マグネシウムイオンバッファーで流出させた。DEAEカラムで分離した、血球凝集活性をもつ350KDのタンパクと共通抗原性をもつことから、88KDと90KDのポリペプタイドの4量体であると推定される。この他ニクバエの休眠蛹と非休眠蛹を誘導する条件で飼育した幼虫のエクジソン代謝を調べ、その違いを指摘した。今年度は,カイコの体液中のレクチン様蛋白と,翅成虫原基中のエクジソン結合蛋白の分離精製と,得られた蛋白のcharacterizationを中心に研究を行った.レクチン様蛋白については,グルタールアルデハイド処理した緬羊赤血球の凝集反応を指標として,硫安塩析, 2価カチオン存在下での種々のカラムクロマトでの分離,糖をリガンドとしたアフィニティークロマト, SDS電気泳動などによって精製した.その結果,この蛋白は分子量約330,000, 77,00083,000の4量体と考えられる.4令から5令蛹化直前までの幼虫の体液中の,この蛋白のタイターの変動を調べたところ,エクジソンのタイターの変動につれて上下することが分った.しかし, 5令幼虫にエクジソンを与えると, day 4まではその合成が抑制されて,タイターが低下するが,その後は,逆に合成が促進されてタイターが上昇する.自身のエクジソンが分泌されるようになると,そとからエクジソンを与えても影響がなくなる.なお,この蛋白の抗体を作ることに成功している.エクジソン結合蛋白については, 5令幼虫から翅成虫原基を取出し,ホモジェネイトした後,一部をとって総蛋白量を測定,残りをエクジソンをリガンドとしたアフィニティークロマトにかけ精製した.放射性エクジステロイドを用いて結合性を調べた結果,分子量約25,000と60,000の2種の蛋白に強い結合能のあることが分った.解離恒数はそれぞれ4.1および4.3nMで87%は核中にあることが分った.

4令5令蛹化直前までの幼虫期の原基中のエクジソン結合蛋白量を24時間おきに測ったところ,日毎に変動するが,とくに蛹化コミットメントの前後にも大きな変化がなく,幼虫脱皮後の5令day 0でも,総蛋白量あたりでは,蛹分化中のday 78の時期のものとも変わり無いことが分った.カイコのレクチン様タンパクの精製とその特性解析については、電気泳動で分離したバンドから得た少量の、しかしかなり純粋なタンパクを抗元として抗体を作り、その血球凝集作用の阻害効果から、レクチン様タンパクの分子量は、350KD、88KDと90KDのペプチド2個ずつからなる4量体と考えられる。エクジソンのタイターの上昇にともなって体液中に増加し、JHとは直接関係はない。この血球凝集作用は、糖によって阻害されるがグルクロン酸がもっとも作用が強く、次いでガラクツーロン酸、マンノース、ブドウ糖、果糖の順に弱くなる。このタンパクの特性をさらに追求するため、現在モノクロナール抗体を作っている。すでに50以上の強く血球凝集阻害を示す抗体をつくるバイブリドーマを得ており、それを用いて、体液中からアフィニティークロアトで、このタンパクを多量に分離することともに、細胞内の所在、遺伝子解析に用いる予定である。エクジソン結合タンパクについては、結合能の高いポナステロンAの放射活性ラベルのものが必須であるので、20-ヒドロキシエクジソンより、スタキステロンCを合成、NEN社にトリチウム還元を依頼、現在還元物より、放射比活性の高いポナステロンを精製、エクジソン結合タンパクの特性を解析中である。このタンパクの遺伝子を解析するため、ステロイドホルモン受容体タンパクの共同のDNA接着ドメインのCDNA断片をつくり、これをプローブとして、遺伝子の分離を計画し、すでに、CDNA、およびカイコの遺伝子ライブラリーを作っている。このほか、ニクバエの休眠蛹と非休眠蛹を誘導する光周条件で飼育すた幼虫のエクジソンタンターの変動と成虫原基の分化を調べた。また、カイコ体液中のJHのタイターを正確に測定するラジオノムノアッセイの方法を確立した。
将来の重力波検出実験で探る初期宇宙物理

神岡鉱山で建設中の大型低温重力波望遠鏡KAGRAをはじめ、世界中で重力波の初検出を目指す取り組みが進められようとしている今、宇宙を重力波で検証できる時代は着実に近づいている。本研究では将来の重力波直接検出実験を見据え、宇宙論起源の重力波に関する理論研究を行った。様々な起源の重力波を取り扱いながら、将来観測で検出された場合に宇宙理論に与えられるインパクトを検証した。当該年度は宇宙磁場起源の重力波について取り組んだ。磁場の影響を含んだ重力波の発展方程式を半解析的な形で解くことで、磁場の生む重力波のスペクトルの計算を可能にした。この結果に基づいて将来の重力波検出実験における検出可能性を議論した。本研究の成果は現在論文としてまとめているところである。また、2013年3月にPlanck衛星により宇宙背景放射(CMB)の最新の観測結果が得られたことを受け、Planck衛星のデータを用いて様々なインフレーション(宇宙初期の加速膨張)の制限に取り組んだ。まずは単一場のインフレーションモデルに関してPlanckのデータ解析チームが扱っていないモデルを含めて網羅的に検証し、様々なモデルに対して現時点で最も強い観測的制限を与えることに成功した。また、インフレーション期の重力の振る舞いが異なるブレーンワールド模型と非可換時空の影響下でのモデルへの制限にも取り組み、多くのモデルが観測的に棄却されることを示した。さらに、将来の重力波検出実験におけるインフレーションと再加熱のモデルパラメータの決定精度をを調べる研究も行った。BICEP2実験がインフレーション理論の予言する重力波の痕跡と思われるCMBのBモード偏光を観測したことで、直接検出への期待が一気に高まりつつある。本研究はそういった直接検出に向けて詳細な理論予言を提供し、今後の方針に役立つものである。また、連星系が放出する重力波に関する研究にも取り組んだ。連星系のブラックホール周辺にダークマターが密に分布する場合、ダークマターが作る重力ポテンシャルにより重力波波形が変化する。それが将来実験で十分検証可能であること、さらにダークマターの密度分布を探るのに役立つことを明らかにした。さらに、ダークマターによる動的摩擦が波形に大きな影響を与えることも突き止め、現在新たな論文を執筆中である。当該年度は宇宙ひもからの重力波に関する研究に取り組んだ。初期宇宙に生成される可能性がある宇宙ひもは生成後、衝突を繰り返しつなぎかわっていくことで、ループ状になるとともにカスプやキンクと呼ばれる特異な形状をひも上に持つようになる。これらの構造から放出される重力波は振幅が大きく幅広い周波数に渡るため、多種の将来実験で検証できる可能性がある。本研究ではまず数年後に稼働予定の次世代型地上重力波検出実験を用いて、宇宙ひもに関してどのような情報を得ることができるかを調べた。本研究の特色は宇宙ひも起源の重力波に単発で検出されるバースト重力波とバーストが重なり合って作られる背景重力波の2種類があることに着目した点にある。同じ重力波検出器から得られる2つの異なる観測量は宇宙ひもに関して独立な情報を持ち、異なる情報を得られることを示した。さらに、その理由は2種の観測量が異なる時代の宇宙ひもの情報を持つことに起因することを明らかにした。続いて、宇宙ひも探索には直接検出実験の他にも宇宙背景放射の温度揺らぎや偏光、またパルサータイミング実験による重力波の間接検出があることを踏まえて、各種実験の情報の相補性を調べた。その結果、これらの実験がそれぞれ異なる周波数の重力波を見ることで、異なる時代の宇宙ひもの情報を得られる点を明らかにした。以上の研究により、多面に渡る宇宙ひもの観測的検証を統括的に調べることで、各種将来実験を宇宙ひもの制限に役立ていくための明確な指針を示した。また、重力が質量を持つmassive gravity理論の研究にも取り組み、この理論の枠組み内ではインフレーション起源の重力波が特徴的なスペクトルの形を持つことを明らかにした。本研究の目標は「宇宙ひも」と「宇宙磁場」を起源とする重力波に対し、将来観測を見据えた理論予言を行うことにある。二年という期間のうち、当該年度では宇宙ひも起源の重力波に関する研究を予定としているところまで全て終えることができたため、研究は順調に進展していると言える。また、宇宙磁場起源の重力波に関しても関連する先行研究の調査や基礎的な計算手法の構築はすでに終え、次年度で残り半分の研究を進める準備は十分に整っている。次年度は宇宙磁場起源の重力波に関する研究に取り組む。まずは、宇宙磁場が生成する重力波をグリーン関数を用いた解析的な手法で大まかに見積もり、先行研究との整合性を調べる。必要であれば数値計算を用いてより詳細なスペクトルを計算する。最終的には将来実験における重力波の検出可能性を調べ、初期磁場生成の物理に関してどのような情報につながるかを議論する。最終年度となる次年度の研究費は主に研究成果の発表のための出張費に用いる。前年度の成果だけでなく、次年度の研究も成果が出次第、順次国内外の学会や研究会で報告を行う。また、新たに数値計算が必要な場合、有料ソフトウェアの更新費に用いる。
発達障害からみた算数能力の統合的検討

算数能力の高い人は自閉症傾向が高く,また自閉症者には,数に対する特別な関心が見られるというこれまでの先行研究(Baron-Cohen他,2001)を踏まえ,前年度までの研究において,自閉症特性と数的志向性(非公式な場面でも数や数学へ注意・関心を払う傾向),算数能力との関連性を検討し,数学に対する日常的な関心度と自閉症特性との関連性を明らかにした.H24年度は,そのような問題意識をもとに,(1)工学部と文学部の大学生を対象に,日常的な関心度を測る質問紙を用い,いずれの興味・関心領域が,算数能力の高さと自閉症特性の高さにつながっているかどうかを検討した.結果として,理数関心型の人が算数能力尺度においても高得点を示し,対人関心型の人が自閉症特性が低く,対人的な自閉症傾向が見られないと示されたことは,今回の興味関心度尺度の妥当性を示唆する。ただし,本研究において予測していた「理数領域に対する日常的な関心」と自閉症特性との関連性はみられなかった.次に,(2)数学の得意な社会人の養育者を対象に就学前の「文字・数・他者への興味関心」調査を行った.12名の数学の得意な社会人の保護者を対象に,就学前に「文字・数字・算数・言葉・他者への興味関心がどのようであったか,12項目からなる調査票と,自由記述によって検討した.その結果,数学が得意な社会人は,就学前に文字に対しても数字同様に関心を持っている傾向が高いことが分かった.算数能力の高い人は自閉症傾向が高く,また自閉症者には,数に対する特別な関心が見られるというこれまでの先行研究(Baron-Cohen他,2001)を踏まえ,本研究では,自閉症特性と数的志向性(非公式な場面でも数や数学へ注意・関心を払う傾向),算数能力との関連性を明らかにし,算数が得意な人の認知基盤を解明することを目的としている.H22年度は,そのような問題意識をもとに,(a)数的志向性を測る質問紙および(b)数学能力を測る質問項目を新たに作成し,さらに(c)既存の自閉症特性を測る質問紙を翻訳したうえで,理工学部および文学部に通う大学生を対象に「数的志向性」「数学能力」「自閉症特性」の関連性を検討する一連の調査研究を行った.まず,数的志向性を測る質問紙について因子分析(主因子法・プロマックス回転)を行い,その結果,日常的な数への関心の方向性として,(1)数学への志向性と(2)数字への志向性の2種が考えられることがわかった.さらに,「数学能力」と「自閉症特性」との関連を分析した結果,結論として,(a)数学への志向性(日常的に数学的事象に対して関心を向ける傾向)の高い人は,数学能力も高く,コミュニケーションの困難を除く自閉症特性も高い傾向があった.(b)他方,数字への志向性は,数学能力や多くの自閉症の諸特性と関連が見られなかった.このことから,数字への志向性(ナンバープレートや時刻表など,身の回りの数字に対して強い関心を向ける傾向)については,全般的な自閉症特性を持つ人とともに,自閉症特性を持たない人たちにも広く共有される認知特性であることが本研究の結果から推測された。算数能力の高い人は自閉症傾向が高く,また自閉症者には,数に対する特別な関心が見られるというこれまでの先行研究(Baron-Cohen他,2001)を踏まえ,本研究では,自閉症特性と数的志向性(非公式な場面でも数や数学へ注意・関心を払う傾向),算数能力との関連性を明らかにし,算数が得意な人の認知基盤を解明することを目的としている.H23年度は,そのような問題意識をもとに,昨年度に引き続き,(a)数的志向性を測る質問紙,(b)数学能力を測る質問項目,(c)既存の自閉症特性を測る質問紙を用い,理工学部および文学部に通う大学生を対象に「数的志向性」「数学能力」「自閉症特性」の関連性を検討する調査研究を継続して行った.さらに,発達障害を持つ小中高生を対象に,就学前後の興味関心の分野が,後の数学能力や自閉症特性と関連があるか検討するために,新たに「興味関心領域調査票」を作成した.30項目からなる興味関心領域を提示し,保護者に自分の子どもの就学前と小学生の頃について,興味関心の程度を5件法(人より全く関心なし人より強い関心あり)で回答してもらった.あわせて,現在の子どもの数学能力を測る質問項目と自閉症特性を測る質問紙を実施した.その結果,就学前・就学後のいずれにおいても,数学や数字,文字,記号に対する興味の程度は後の数学能力と関連が見られなかった.それに対し,就学前からの物理的事象,化学的事象,説明文(図鑑カタログなど)に対する関心の高さと,数学能力との関連は見られた.算数能力の高い人は自閉症傾向が高く,また自閉症者には,数に対する特別な関心が見られるというこれまでの先行研究(Baron-Cohen他,2001)を踏まえ,前年度までの研究において,自閉症特性と数的志向性(非公式な場面でも数や数学へ注意・関心を払う傾向),算数能力との関連性を検討し,数学に対する日常的な関心度と自閉症特性との関連性を明らかにした.H24年度は,そのような問題意識をもとに,(1)工学部と文学部の大学生を対象に,日常的な関心度を測る質問紙を用い,いずれの興味・関心領域が,算数能力の高さと自閉症特性の高さにつながっているかどうかを検討した.結果として,理数関心型の人が算数能力尺度においても高得点を示し,対人関心型の人が自閉症特性が低く,対人的な自閉症傾向が見られないと示されたことは,今回の興味関心度尺度の妥当性を示唆する。

ただし,本研究において予測していた「理数領域に対する日常的な関心」と自閉症特性との関連性はみられなかった.次に,(2)数学の得意な社会人の養育者を対象に就学前の「文字・数・他者への興味関心」調査を行った.12名の数学の得意な社会人の保護者を対象に,就学前に「文字・数字・算数・言葉・他者への興味関心がどのようであったか,12項目からなる調査票と,自由記述によって検討した.その結果,数学が得意な社会人は,就学前に文字に対しても数字同様に関心を持っている傾向が高いことが分かった.年度の計画は前後しているが,一般の大学生や発達障害を持つ子どもたちを対象とした研究については,計画通りに進んでいるから.一般の中高生,大学生を対象とした諸研究について,未実施の部分があるため,当初の研究計画実施に向けて,引き続き研究を遂行する.
オーストラリアにおける映像コンテンツ政策の有効性に関する研究

オーストラリアの映像コンテンツ政策について、(1)人材育成、(2)財政支援、(3)環境整備支援、3つの側面について、行政資料、統計データ、新聞雑誌記事、文献等を渉猟し、関係者への聞き取り調査をして検証した結果、その有効性が確認された。連邦政府の支援策が州政府、民間の支援策を生みだすといった連鎖反応を呼び、効果をあげており、オーストラリアがデジタル技術を駆使した映像コンテンツの領域で大きな存在感を示すようになっていることが判明した。オーストラリア政府のコンテンツ政策を検証するため、日本で情報を収集し、日本でも関心の高いオンラインコンテンツ規制に対するオーストラリア政府の取り組みを考察した。その結果、オーストラリア政府が国益という観点からもコンテンツ規制に関与しようとしていることが推察された。これは論文の形にまとめることができた。次に、11月下旬に開催されたACMA(Australian Communications and Media Authority)の年次大会に出席し、オーストラリア政府の映像コンテンツ政策、放送コンテンツ政策を把握することを試みた。会場ではAFC(Australian Film Commission)、ABC(Australian Broadcasting Corporation)、ACMAの政策担当者に会うことができ、情報交換をするとともに、そこで話題となった字幕放送について把握しておく必要を感じた。そこで、ACMAの政策担当者、字幕担当者に聞き取り調査を行った。さらに、民間でその業務を積極的に推進しているMAA(Media Access Australia)代表に聞き取り調査を行い、オ」ストラリアの字幕放送の現状を知ることができた。以上については雑誌に発表した。11月下旬にオーストラリアを訪れた際、現地でしか入手できない映像コンテンツ関連の雑誌を読み、そこで、政府の助成制度がオーストラリアの映像コンテンツ制作状況を必ずしも向上させてはいないという意見があることを知った。政府の助成については本年度の研究目標でもあったため、AFCに対してこの記事についてのコメントを求めたが、回答は得られなかった。その後、日本で情報を収集しようとしたが、限度があったため、2007年3月上旬に再度、オーストラリアを訪れた。メルボルンの図書館で字幕に関する資料を入手できたこと、オーストラリアが積極的な映像コンテンツ戦略を展開しようとしていることなどが現地で推察された。これについては今後、逐次、まとめていく予定である。18年度の活動はオーストラリアのコンテンツ政策の中でもとくに、オンライン、放送コンテンツ、映像コンテンツについて幅広く情報を収集することを目的に展開したが、シドニー、キャンベラ、メルボルンを訪問して関係者に聞き取り調査を行い、成果を得ることができた。今後の活動に生かしながら、研究を深化させたい。18年度に実施した聞き取り調査の結果をまとめた。特に映像コンテンツの流通に深く関与すると思われる字幕についての情報を中心にまとめ、逐次、雑誌に発表した。その一方で、映像クリエーターの育成に関する情報を収集し、19年度の現地調査の準備を行った。その結果、ブリスベンのグリフィス大学が積極的にクリエーターを育成しようとしていることが判明した。同校は4月にフィルムスクールを開校し、オーストラリアで初めて高度映像技術者としてのアニメーターの学位を授与できるようにしていた。9月、ブリスベン・フィルムフェスティバルの一環として、グリフィス大学出身のアニメーターで同年、アカデミー賞を受賞した『ハッピーフィート』の製作に貢献したアニメーターのダミアン・グレイの講演が開催された。そこで、その講演会に参加し、製作過程についての報告を聞き、簡単なインタビューを実施した結果、映像表現の領域でデジタル技術が駆使されており、新たな表現の地平が切り開かれつつあることを知った。と同時に、クィーンズランド州政府が映像コンテンツ製作に意欲的な取り組み姿勢を示していることも知った。とくに、グリフィス大学のフィルムスクールの開校に際しては当時のピーター・ビーティ首相が支援しており、将来への布石を打っていたこともわかった。グリフィス大学フィルムスクールで聞き取り調査を行った日、バスをチャーターして見学に訪れていた中国人の一行を見かけた。高度な映像技術者の育成が急務になりつつあることが示唆されていた。その後、メルボルンにも出かけてみたが、ブリスベンで経験したような映像コンテンツ製作への期待と実践を目にすることはできなかった。日本に帰国してから関連する種々の情報を収集し、映像コンテンツ製作、とくに3Dアニメーションについてブリスベンで聞き取り調査をした結果を踏まえ、雑誌に発表した。映像コンテンツ製作は映画ばかりかテレビ、ゲーム、広告業界で必要とされており、高度な映像技術者の育成は今後ますます重要になることを確認することができた。19年度に実施した聞き取り調査および文献調査の結果をまとめるとともに、20年度も日本での情報収集に加え、シドニーとメルボルンに出かけ、聞き取り調査及び文献資料の渉猟に努めた。以下の2側面に焦点を当てて聞き取り調査及び資料収集を行った。(1)映像コンテンツ普及の背景としてのメディア改革、(2)映像コンテンツ普及の要因となる字幕に関する取り組み、現地での文献および資料収集をするとともに、字幕活動を積極的に展開しているMAA(Media Access Australia)に聞き取り調査を行った。そこで明らかになったのは、海外での普及促進のため字幕を付与することが結果として聴覚障害者にも大きなメリットになることであった。

オーストラリア政府はアクセス保障の観点から映像コンテンツに字幕付与を義務づけているが、テレビドラマについては外国人にもメリットがあることが判明した。一方、メルボルンを舞台にしたテレビドラマをはじめ、国産のテレビドラマの質が向上し、コンテンツ促進政策が一定の成果をあげていることが明らかになった。
唾液腺癌浸潤を制御するインテグリン分子の機能解析

腺様嚢胞癌は他の悪性腫瘍と比較し、インテグリン分子の機能がより選択的であることが予想されている。そこで本研究では本腫瘍の細胞外基質選択的浸潤能がインテグリンによるリガンド認識機構に起因するのか、インテグリンを介した細胞内シグナル伝達機構に起因するのかを明らかにし、さらには機能発現に直接関与するインテグリン関連分子を明らかにすることを目的としている。腺様嚢胞癌に対する対照細胞株として口腔扁平上皮癌細胞を使用し、インテグリンの発現、細胞外基質に対する遊走性を検討したところ、これらの細胞株は各クラスのインテグリン発現レベルに全く差異を認めないにもかかわらず、腺様嚢胞癌細胞株はI型及びIV型コラーゲンに対する遊走性が特異的に強いことが明らかになった。しかし、adhesion assayでは細胞外基質に対する接着能には両細胞群で差は認められなかった。以上より腺様嚢胞癌細胞株ではインテグリンからのシグナル伝達経路に差があると考えられた。そこで各細胞群の細胞外基質接着によるチロシンリン酸化を検討したところ、腺様嚢胞癌細胞株では基質の存在にかかわらず常に数種の蛋白質がリン酸化されていることが明らかになった。この結果は腺様嚢胞癌細胞株の特異的なシグナル伝達機構の存在を示唆するが基質特異的な遊走などの現象を説明できない。そこでインテグリン結合蛋白に注目しスクリーニングを行ったところ、ウロキナーゼレセプター(uPAR)の発現が腺様嚢胞癌細胞株で特異的に高発現していることが明らかになった。uPARは各種のインテグリンと複合体を形成していることが報告されている。現在uPARとインテグリン分子が免疫沈降で共沈することを確認中であるとともにアンチセンスuPARの導入による細胞動態の変化を検討中である。そこで本研究では本腫瘍の細胞外基質選択的浸潤能がインテグリンによるリガンド認識機構に起因するのか、もしくはインテグリンを介した細胞内シグナル伝達機構に起因するのかを明らかにし、さらには機能発現に直接関与するインテグリン関連分子を明らかにする事を目的としている。腺様嚢胞癌細胞に対する対照細胞として口腔扁平上皮癌細胞株を使用し、細胞外基質に対する遊走性を検討した。検討を行ったI型コラーゲン、IV型コラーゲン、フィブロネクチン、ラミニンの内、扁平上皮癌細胞はI型コラーゲンに対し強い遊走性を示したが、他の基質に対する遊走は極めて弱かった。これに対し、腺様嚢胞癌細胞はI型コラーゲンの他にIV型コラーゲンに対しても強い遊走性を示した。しかも、両細胞の間にインテグリン発現レベルに全く差異は認められなかった。さらに各基質上でadhesion assayを行ったが両細胞群の基質に対する親和性は差がみとめられなかった。各細胞群の細胞外基質によるチロシンリン酸化を検討したところ、腺様嚢胞癌細胞株では細胞外基質の存在の有無にかかわらず、常に数種の蛋白質がリン酸化されていることが明らかになった。この結果は腺様嚢胞癌が細胞外基質結合によるシグナリングに特異性を持つという考えを支持するがIV型コラーゲンに対する特異的な遊走の現象を説明できない。以上の結果は腺様嚢胞癌ではインテグリン分子からのシグナリングがインテグリン関連分子によって修飾されていることを示す。近年インテグリン結合分子が報告されており、シグナル伝達における機能が示唆されてる。今後インテグリン結合蛋白の機能解析を予定している。