hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
身体動作を伴う伝統芸能のアーカイブ化と博物館展示支援

主に身体動作を伴う伝統芸能について、モーションデータ、超高精細映像などのアーカイブ化を行い、身体動作を活用したシステムとして、少林寺拳法の単独演武作成システムと舎利容器のインタラクティブコンテンツを開発した。また、身体動作による入力インタフェースとして、Kinectなどを用いたジェスチャ入力手法について検討した。さらに、博物館展示支援システムを開発し、2つの博物館で実際に運用を行った。寺院を対象とした特別展ではVRゴーグルと襖配置システム、歴史をテーマにした企画展では江戸時代のすごろくの遊び支援システムと蒔絵万年筆のVRシステムを展示し、有用性を確認した。本研究では、身体動作を伴う伝統芸能のアーカイブ化および博物館における展示支援を目的とし、初年度は、練り供養の4K映像アーカイブ化、身体動作による入力インタフェースの検討、映像コンテンツ制作による博物館の展示支援を行った。1.身体動作を伴う伝統芸能のマルチメディアアーカイブ化として、5月に行われた當麻寺の練り供養の4K映像を撮影した。特に前年度に撮影が困難であった娑婆堂での所作を中心に収録し、既に撮影済みの映像と合わせて練り供養を紹介する映像を制作した。身体動作の計測については、モーションキャプチャソフトウェアを購入し、動きが速い動作の計測や複数人のアクターによる計測などを試みた。2.身体動作による入力インタフェースとして、Kinectを用いたジェスチャ認識手法について検討した。さらに、これまでに開発した仮想試着システムや群舞シミュレーションシステムを応用し、モーションデータ検索システムと3D空間ウォークスルーシステムを試作した。モーションデータ検索システムは、入力した人体姿勢からモーションデータを直感的に検索し、他のメニューなども全てジェスチャで操作できるように実現した。また、3D空間ウォークスルーシステムは、両腕を開くジェスチャで3D空間の襖を開けるなど、わかりやすいジェスチャに対応したインタラクションを実現した。3.博物館における展示支援として、寺院の襖のCG再現を行い、龍谷ミュージアムの特別展におけるパネル展示およびシアター映像の一部として実際に使用した。現在の襖の配置や大きさの記録および襖絵の静止画撮影を行い、学芸員や専門家の意見を参考に過去の襖の配置を再現し、4K解像度によるCGアニメーションを制作した。本年度は、主に博物館の展観内容に合わせた展示支援システムの開発、博物館における体験プログログラムの実施および評価を行った。また、モーションキャプチャによる伝統芸能のアーカイブ化と、身体動作を用いたシステムの開発も行った。1.寺院を対象とした博物館展示を支援するため、体験型システムとしてVRゴーグルおよび襖配置システムを開発した。VRゴーグルはCGで再現された寺院の部屋の全周囲を見渡すことができる。スマートフォンを用いた携帯型システムと、インタラクション可能な対話型システムを開発した。襖配置システムは、過去の配置や新たな配置のシミュレーションを可能にするため、タッチ操作で襖の画像を移動させて3DCGで確認できるようにした。2.開発した体験型システムを、龍谷ミュージアムの特別展に合わせた体験プログラムとして3日間展示し、評価実験を行った。システムは実物の襖がある展示室の入口に設置し、博物館の実物展示と併せて展示した。来館者152名によるアンケートの結果、操作性や部屋の理解などに関して全体的に良い評価が得られた。また、実物展示では見ることができない襖や部屋の様子を見ることができてよかったという意見が多く得られた。3.身体動作を伴う伝統芸能のアーカイブ化として、當麻寺の練り供養の所作および少林寺拳法の単独演武のモーションデータ収録を行った。さらに、CGおよびVR技術を活用し、練り供養のモーションデータを用いた行列シミュレーションシステムと、ジェスチャ認識による神社参拝体験システムの開発を行った。博物館の実物展示と併せた体験プログラムや来館者による評価実験などを既に実施している。モーションキャプチャによる身体動作のアーカイブ化やシステム開発も順調に行っているが、博物館の展示テーマとの関連により、実際の展示支援には活用できていない。本年度は、国立歴史民俗博物館の企画展に合わせた体験型システムとして、蒔絵万年筆のVRシステムと江戸時代のすごろくの遊び支援システムを開発し、企画展における運用実験を行った。また、伝統芸能のモーションデータを用いたものとして、少林寺拳法の単独演武作成システムの開発も行った。1.蒔絵万年筆のVRシステムは、ペン型デバイスを万年筆に見立てて操作することで、VR空間に再現した万年筆の3DCGを操作することができる。HMDを装着した状態で万年筆の切り替えを可能にするため、鑑賞する万年筆を頭の向きで選択できるようにした。2.江戸時代のすごろくの遊び支援システムは、マイクロコンピュータを搭載したサイコロ型デバイスを振ることで、すごろくを電子的に進行することができる。さらに、実物のすごろく盤上に進行状況をプロジェクタで投影することにより、現在地のマスや次の行き先の候補を示すことができる。また、サイコロにLEDを搭載し、プレイヤーごとに決められた色に発光させることで自分の手番を知らせるようにした。3.開発した二つのシステムを、国立歴史民俗博物館の企画展において常設展示し、運用実験を行った。平日は無人で稼働させるため自動で起動・終了するようにし、土日祝日は展示補助スタッフを配置し、サイコロ型デバイスやHMDを用いてインタラクティブな体験ができるようにした。4.少林寺拳法の学習と演武の作成支援を目的とし、モーションキャプチャを用いた少林寺拳法の単独演武作成システムを開発した。モーションキャプチャで取得した8個の基本動作の中から6個を自由に組み合わせて演武を作成し、3DCGアニメーションで再生することができる。作成する演武に大会ルールを適用するため、選択できる基本動作や演武終了時の身体方向を制限した。

前年度とは異なる博物館を対象とし、展示内容に合わせたシステムの開発と運用実験を実施している。身体動作を伴うシステムの開発も行っているが、システムの評価や研究成果の公表ができていない。本年度は、主に開発したシステムの運用実験および来館者による評価実験を行った。また、身体動作を伴う伝統芸能を対象としたシステムの開発および学会発表、伝統芸能のモーションアーカイブの拡充と映像コンテンツの公開を行った。1.国立歴史民俗博物館の企画展「デジタルで楽しむ歴史資料」において、江戸時代のすごろくの遊び支援システムと、HMDとWiiリモコンを用いた蒔絵万年筆の閲覧システムを8週間展示し、運用実験を行った。各システムは動作ログを取得できるように改良し、コンテンツの種類やインタフェースの違いによる分析を行った。また、3日間に渡って博物館の来館者による聞き取り調査を実施し、システムの有用性の評価を行った。2.身体動作を伴う伝統芸能を対象としたシステムとして、舎利容器の舞人の動作をCGアニメーションで表現したインタラクティブコンテンツを制作した。舎利容器のレプリカの舞人の画像をマーカーとし、タブレット端末のカメラでマーカーを認識すると、対応する舞人のCGアニメーションを重畳表示するようにした。舞人のCGアニメーションにはモーションキャプチャで取得した雅楽の動作を適用した。評価実験により、舎利容器の興味喚起や理解支援に対する有用性を確認した。3.伝統芸能のモーションデータの活用例として、昨年度に開発した少林寺拳法の単独演武作成システムの評価実験を行い、国際会議で発表を行った。さらに、琉球舞踊のモーションデータの計測を行い、伝統芸能のモーションアーカイブの拡充を行った。また、過去に取得したクラシックバレエの古典作品や練供養の行列などのCG表現結果を映像コンテンツとして公開した。主に身体動作を伴う伝統芸能について、モーションデータ、超高精細映像などのアーカイブ化を行い、身体動作を活用したシステムとして、少林寺拳法の単独演武作成システムと舎利容器のインタラクティブコンテンツを開発した。また、身体動作による入力インタフェースとして、Kinectなどを用いたジェスチャ入力手法について検討した。さらに、博物館展示支援システムを開発し、2つの博物館で実際に運用を行った。寺院を対象とした特別展ではVRゴーグルと襖配置システム、歴史をテーマにした企画展では江戸時代のすごろくの遊び支援システムと蒔絵万年筆のVRシステムを展示し、有用性を確認した。博物館展示支援として、寺院の襖の配置をCGで再現した映像を制作し、実際の博物館のシアターで上映するなど、当初の計画を前倒しして実施している。
ラット脳室内出血モデルにおける神経損傷の機序と治療法の開発

脳室内出血が引き起こされると、大量の血液が凝結して、赤血球のヘモグロビン内から鉄イオンが遊離される。脳内はもともと高脂質環境であり、鉄イオンと反応して活性酸素種が産生されて、細胞膜損傷が引き起こされる。この細胞障害の機序が脳室内出血による神経細胞障害に影響を及ぼしていることが想定されるが、詳細な研究はまだ行われていない。鉄イオンが関与した神経細胞障害の存在を明らかにして、治療法の開発を本研究で行った。出血により赤血球内のヘモグロビンと3価鉄イオン(Fe^<3+>)の結合が崩壊すると、電荷的に不安定な2価鉄イオン(Fe^<2+>)が遊離する。これが脳内の高燐脂質環境においてFenton反応を介して・OHを発生させ、細胞膜損傷を起こすことが報告されている。我々は脳室内出血の際においても、この機序による神経細胞の二次性障害が病態悪化に影響を及ぼしているものと想定している。この機序を明らかにするため、自家血脳室内注入による実験的脳室内出血モデルを今後行う予定であるが、血腫から遊離した鉄イオン単独の神経毒性を確認する必要がある。そこでFe^<2+>をmini osmotic pumpを用いて側脳室内に持続投与する脳室内鉄イオン投与モデルを作成して、鉄イオンにより引き起こされる神経細胞損傷について検討した。雄性Wistar ratをisofluraneで麻酔し、stereotaxic frameに頭部を固定して、mini osmotic pumpから脳室内に鉄イオンを注入するための小孔を当頭蓋骨に作成した。Iron(II) chloridetetrahydrate(5mmol/l)溶液を充填したmini osmotic pump(infusion rate;0.5μl/hr)のneedleを頭蓋骨上の小孔から側脳室まで刺入固定して、鉄イオン脳室内持続投与モデルを作成した。7、14日後に4%paraformaldehydeで灌流固定後、脳を摘出し、脳室周囲に位置する海馬での細胞脱落をCresyl violet染色を用いて観察した。同部位での鉄の同定にはprussian blue染色(鉄染色)、酸化ストレスにより傷害を受けた細胞の同定に8-hydroxy1-2'-deoxyguanosine(8-OHdG)に対する免疫染色を行った。鉄イオン注入側での海馬CA1領域での神経細胞の脱落が認められた。鉄染色では注入した脳室周囲組織への鉄の存在が確認された。特に神経細胞脱落が認められた海馬CA1では、脱落した神経細胞層に一致して鉄の沈着が認められた。この他には脳室上衣細胞に鉄の沈着が著明であった。7日後のCA1細胞層で酸化ストレスを受けた細胞を現す8-OHdG免疫染色の陽性細胞を認めた。この結果から鉄イオンの脳室内投与モデルで海馬CA1での神経細胞脱落が引き起こされることが確認できた。またその発生機序としてoxygen freeradicalsの関与が強く示唆された。今後、自家血脳室内注入による実験的脳室出血モデルを行うにあたり、今回の結果と比較することで鉄イオンによる神経毒性を明らかにしていくことができるものと考える。これまでに脳室内に鉄イオンの持続投与モデルを作成して、海馬CA1領域に鉄イオンによる酸化ストレスの関与した神経細胞脱落が引き起こされることを明らかにした。(1)脳内の鉄代謝ではoligodendrocyteから分泌されるferritinが鉄イオンの貯蔵や分布において重要な役割を果たしている。そこで鉄の過剰状態がoligodendrocyteの脱落を引き起こし、ferritinを減少させた結果、神経細胞脱落が引き起こされるのか検討した。(2)またこのモデルが脳室内出血における神経損傷の機序として観察されるか自家血脳室内注入による脳室内出血モデルを作成して鉄イオン投与実験と比較、検討した。【方法】(1)昨年と同様にIron(II)chloride tetrahydrate(50 mmo1/1)を充填したosmoticpumpの注入針を側脳室まで刺入して、鉄イオン脳室内持続投与モデルを作成した。ferritinを分泌するoligodendrocyteを観察するためCNPase染色を行った。(2)大腿動脈より採血した自家血を脳定位固定装置上で脳室内にmicroinfusion pump(the infusion rate; 4μ1/min)を用いて注入(15μ1)して脳室内出血モデルを作成する。【結果】(1)注入側の脳室周囲組織では対側と比較して、CNPase陽性細胞であるoligodendrocyteが減少していた。(2)脳室内出血において鉄イオン投与実験と同様に海馬CA1と脳室上衣細胞に鉄の沈着と海馬CA1での神経細胞脱落が観察された。【結論】鉄イオンの脳室内投与モデルにおける海馬CA1での神経細胞脱落には鉄過剰状態により引き起こされたoligodendrocyteの脱落が関与していると考えられる。この神経細胞脱落は脳室内出血においても関与していることが示唆された。【背景】これまでに脳室内出血に対する脳神経外科医が行う治療は、水頭症の改善を目的とした脳室ドレナージ術である。

近年、脳室内出血に対して積極的に内視鏡下血腫除去術を行う施設が増えてきた。しかし、その効果判定は転帰や画像にのみ行われ、詳細な組織学的検討はなされていない。本研究の中で脳室内に鉄イオンの持続投与モデルを作成して、海馬CA1領域に鉄イオンによる酸化ストレスの関与した神経細胞脱落が引き起こされ、この神経細胞脱落には鉄過剰状態により引き起こされたohgodendrocyteの脱落が関与していることを明らかにした。【目的】脳室内出血においてもこの細胞損傷の機序が関与していると考え、ラットの脳室内に自家血を注入して鉄イオン投与モデルと同様に神経損傷が引き起こされるか検討した。【方法】Wistar Ratをハロセン麻酔下に大腿動脈より自家血を採血し、脳定位固定装置上で脳室内にmicroinfusion pump(the infusion rate ; 4μl/min)を用いて注入(15μl)子、脳室内出血モデルを作成する。14日後、灌流固定後し、神経細胞の脱落を観察するためNissl' s染色を行い、鉄沈着の同定にはPrussian blue染色を用いて観察した。酸化ストレスマーカーとして8-OHdG免疫染色を行った。【結果】自家血注入側での脳室周囲組織への鉄の沈着が確認され、海馬CA1領域での神経細胞の脱落が認められた。神経細胞脱落が認められたCA1細胞層で8-OHdG免疫染色の陽性細胞を認めた。【結論】脳室内出血がおこると鉄過剰環境に陥り、酸化ストレスを介した神経細胞脱落が引き起こされた。このことから内視鏡下脳室内血腫除去術によって積極的に脳室内血腫を除去することで、水頭症の改善効果だけではなく、iron-induced meurotoxicityの軽減も期待することができると考えられる。
非ホロノミック視覚サーボ系の幾何学的構造の解析

1.視覚サーボ系の制御理論的定式化・・・作業環境とロボットの位置・姿勢の関数として画像特徴量を記述し,特徴量の時系列として作業を定義した.この定義により,カメラによる観測は「ロボットと環境の相対的位置・姿勢を特徴量に写す非線形写像」と解釈できる.一方,ロボットが非ホロノミックな拘束を受けるとき,その拘束は不可積分であるため状態を低次元化することはできない.したがって,作業のモデルを非ホロノミック拘束つきの非線形微分方程式で表現した.2.幾何学的構造の解明・・・1.で得られた微分方程式の拘束条件の幾何学的構造を解析することを試みた.まず,ロボットの運動に課せられる非ホロノミック拘束を特徴量の動きに変換した.特徴量の動きにかかる拘束の幾何学的意味を解明することはできなかったが,画像平面内でフィードバックループを閉じる制御系,すなわち,ロボットの位置・姿勢を計測せずに完全に画像フィードバックのみで制御するロボット制御系を構成することが可能となった.3.幾何学的構造に基づく制御系設計・・・制御対象の幾何学的構造に着目し,幾何学的構造を積極的に利用するフィードバック制御器を設計する計画であったが,幾何学的構造の意味を明確にできなかったため,従来の非ホロノミック系に対する制御系設計法を画像ベースの視覚サーボ系に適用するにとどまった.しかし,ロボットにデッドレコニングの機能を与える必要がないので,完全な画像ベースの制御系を構成した意義は大きい.1.視覚サーボ系の制御理論的定式化...作業環境とロボットの位置・姿勢の関数と画像特徴量を記述し,特徴量の時系列として作業を定義した.作業はロボットと環境の相対的関係により定義される.ロボットの運動は6次元多様体上の点の運動であり,環境の変化も適当な次元の多様体上の点の運動である.カメラによる観測は「ロボットと環境の相対的関係を特徴量に写す非線形写像」である.一方,ロボットが非ホロノミックな拘束を受けるとき,その拘束は不可積分であるため状態を低次元化することはできない.したがって,作業のモデルを非ホロノミック拘束つきの非線形微分方程式で表現した.2.幾何学的構造の解明...1.で得られた微分方程式の拘束条件の幾何学的構造を解析し,その意味を明らかにした.ロボットの運動に課せられる拘束が非ホロノミックであるため,作業に遂行に滑らかなフィードバック制御則を用いることができない.非ホロノミックシステム理論では開ループの軌道設計と閉ループのフィードバック制御の二つの流れがあるが,前者のアプローチにより拘束条件の幾何学的構造を考察し,その結果を用いてフィードバック制御器を設計した.3.幾何学的構造に基づく制御系設計...制御対象の幾何学的構造に着目し,環境変動の認識・推定機構とフィードバック制御器の設計を行なう計画であったが,環境を観測するためのカメラの視野が狭く,大域的な情報を時系列として得られなかったため,局所的な変動の推定のみしか実現できなかった.1.視覚サーボ系の制御理論的定式化・・・作業環境とロボットの位置・姿勢の関数として画像特徴量を記述し,特徴量の時系列として作業を定義した.この定義により,カメラによる観測は「ロボットと環境の相対的位置・姿勢を特徴量に写す非線形写像」と解釈できる.一方,ロボットが非ホロノミックな拘束を受けるとき,その拘束は不可積分であるため状態を低次元化することはできない.したがって,作業のモデルを非ホロノミック拘束つきの非線形微分方程式で表現した.2.幾何学的構造の解明・・・1.で得られた微分方程式の拘束条件の幾何学的構造を解析することを試みた.まず,ロボットの運動に課せられる非ホロノミック拘束を特徴量の動きに変換した.特徴量の動きにかかる拘束の幾何学的意味を解明することはできなかったが,画像平面内でフィードバックループを閉じる制御系,すなわち,ロボットの位置・姿勢を計測せずに完全に画像フィードバックのみで制御するロボット制御系を構成することが可能となった.3.幾何学的構造に基づく制御系設計・・・制御対象の幾何学的構造に着目し,幾何学的構造を積極的に利用するフィードバック制御器を設計する計画であったが,幾何学的構造の意味を明確にできなかったため,従来の非ホロノミック系に対する制御系設計法を画像ベースの視覚サーボ系に適用するにとどまった.しかし,ロボットにデッドレコニングの機能を与える必要がないので,完全な画像ベースの制御系を構成した意義は大きい.
運動学習モデルによるバーチャルリアリティ片麻痺上肢訓練システムの開発と効果検証

脳卒中片麻痺上肢の機能訓練法として、効果的かつ日常的に実施可能な訓練法が求められている。今回、ミラーニューロンシステムによる運動学習モデルを用いた訓練装置を作成し、上肢訓練の遂行を画面上のバーチャルな模擬手の動きに合わせて行なうことにより効果的な機能回復を図ることを目的とした。健常者、脳卒中片麻痺患者を対象とし、訓練システムを用いた動作解析、使用感の検証を行ない、効果的な動作を分析した。本年度の研究成果として、片麻痺上肢の機能訓練を目的としたバーチャルリアリティ技術による効果的な訓練システムを開発した。これは、保険診療における訓練時間の制約や訓練意欲低下などの問題に対し、患者が自主的に取り組むことが可能な装置を作成することにより、診療の補助となることを目指すものである。また、脳科学の知見を活かし、模倣学習を中心とした運動学習モデル課題を導入したことが特徴となる。訓練装置は、座位となり机上に麻痺側上肢を置き、眼前のディスプレイに提示された指示によって所定の動作することによって行なうものである。上肢動作のモニター方法として、3次元動作センサーにより手動作、カメラにより平面座標を取得し、机上でのリーチ動作、前腕回外・回内動作、手背屈底屈動作をモニターする。画面に提示される訓練内容は、インストラクターによる手動作の模倣を中心に複数設定した。訓練意欲向上の観点から、課題施行中の支持的奈コメントの表示機能を設け、また娯楽性の高い専用ゲームも作製した。また拡張性の観点からPC上の入力装置としても利用が可能とし、マウス操作、ボタン操作が上肢動作により制御可能である。次年度の臨床研究の準備として、健常人によるシステムの動作チェックを行うとともに、片麻痺患者による動作テスト、操作性テストを行なった。また、片麻痺患者における動作チェックは既存の3次元動作解析装置を用いて、各動作の軌道等を分析し、麻痺gradeと課題難易度の評価、システムのセンサーとの相関を評価した。昨年度に製作したシステムを利用し、被検者を用いた実施テストを行ない即時効果の検討を行なった。対象は、脳卒中片麻痺患者Brunnstrom stage III以上とした。訓練内容は、画面上に提示されるバーチャルな手の動きに対応し、被検者の麻痺側上肢により動作の模倣を机上にて行なうものである。遂行動作は、ターゲットへの到達動作、手関節の背屈・底屈動作、肘関節の回内・回外動作を要求される。画面上の提示内容としては、1種類の模倣動作、複数の動作の組み合わせ、記憶に基づく動作を設定した。この他に、モグラたたきゲームを実施した。1回の訓練は10分程度で被検者のペースで行なった。画面上の模擬手がある場合、無い場合での比較を行なったところ、わずかに模擬手がある場合の方が動作はスムーズとなる傾向が見られた。課題の組み合わせ方による比較は明らかな差が無かった。訓練前後による動作評価では明らかな差がなかった。課題遂行上の問題点として、片麻痺stageの低い患者ほど上肢の屈曲パターンが誘発され、長時間の課題実施が困難であると共に、体幹動作による代償を要した。屈曲パターンの誘発は、動作範囲を小さくすることによって減少した。また、長時間の訓練は疲労のため行えなかったが、モグラたたきゲームに関しては、繰り返し行える傾向があった。今回は、長期的な訓練効果の検証が出来ず単回の即時効果の評価にとどまったが、バーチャルリアリティ技術を用いた模擬手の提示により上肢動作が容易に行える可能性が示唆された。またゲーム要素を取り入れることにより、長時間の実施が可能であることが考えられた。今後、訓練要素のさらなる検討と長期介入効果を検討する必要がある。日常診療で導入できる簡便な片麻痺上肢の訓練システムにおいて、模倣動作による訓練効果の可能性を示した。
「メンブレントラフィック-分子機構から高次機能への展開」の取りまとめ

メンブレントラフィックは細胞が正常な生命活動を営むために必須なばかりでなく、神経伝達物質の放出やインスリン分泌をはじめとする調節性分泌、あるいは免疫応答におけるマクロファージ・樹状細胞による病原微生物などの取り込みと抗原提示など、高等多細胞生物の高次機能を支える基本的活動としても重要である。したがってその破綻は遺伝病をはじめとする種々の疾患に直結しており、メンブレントラフィックの研究は、基礎生物学の研究であると同時に、遺伝病や感染症の病態を理解し、その治療法の確立にも繋がる医科学研究でもある。本研究は、特定領域研究「メンブレントラフィック-分子機構から高次機能への展開-」(略称:トラフィック)(平成15-19年度)の終了に伴い、その取りまとめを行うために助成を受けた。特定領域研究「トラフィック」は、計画研究10課題(総括班を除く)と公募研究(平成17-18年度51課題、平成18-19年度46課題)からなり、平成15-19年度の5年間の研究期間で行われた。平成20年9月24日に事後評価のヒアリングを受け、結果はA^+という最高のランクであった。平成21年1月29日には、文部科学省科学研究費補助金新学術領域研究「細胞内ロジスティクス:病態の理解に向けた細胞内物流システムの融合研究」と合同で終了シンポジウム(一般公開)を、航空会館(東京・新橋)7階大ホールにて開催した。127名の参加を得て、両研究領域より計10名の研究代表者が演者としてそれぞれの研究成果を発表した。また3月には、5年間の当特定領域研究の業績をまとめた成果報告書を刊行する。本研究は特定領域研究「メンブレントラフィック-分子機構から高次機能への展開-」の総括班として、領域の運営と評価を円滑かつ効率的に行うことにある。本特定領域は本年度より発足したものであるため、発足直後の平成15年7月29日に第1回総括班会議を開催し、研究代表者・分担者全5名および、本領域担当の文部科学省研究振興局学術調査官・高橋伸一郎博士が出席した。そこでは、吉森が世話人となり第1回全体班会議を16年1-2月に開催すること、大野が責任者となり領域ホームページを作製すること、また今後の連絡用に総括班メーリングリストおよび研究代表者メーリングリストを立ち上げること、などが決められた。また公募研究の審査員推薦リストを作製した。2つのメーリングリストはその後すぐに立ち上げられ、またホームページも仮のページは8月中に、正式なものも11月には公開した。またこれに併せて「メンブレントラフィック・メーリングリスト」を立ち上げ、領域外の研究者にも広く参加頂き意見・情報交換の場として提供した。これらの電子媒体のみでなく広く領域の活動を広報する目的で、ニューズレターを定期的に刊行することに決め(責任者・吉森)、平成16年1月の全体班会議に合わせて第1号を刊行した。第1回全体班会議は平成16年1月30-31日に開催され、計画研究代表者が研究経過の報告および今後の研究計画について発表した。引き続き、総括班のメンバーおよび全体班会議にも出席頂いた領域評価委員(5名中4名)および領城アドバイザーの出席を得て第2回総括班会議を開催した。本年度の各計画研究は概ね順調に進んでいるとの講評を得た。また、平成16年度の全体班会議は公開シンポジウムと連続して9月中旬後半に大野が世話人となり開催する計画とした。本年度は平成16年9月28日午後-30日午前にわたり、山梨県・小淵沢(リゾナーレ小淵沢)にて全体班会議を行った。計画研究および公募研究代表者が一堂に会し、研究進捗状況の発表および質疑応答が行われた。公募研究代表者にとっては初めての班会議であり、活発な討論が交わされた。その後引き続き、領域評価委員、領域アドバイザーおよび担当学術調査官の臨席の元、計画班会議を行い、全体班会議の講評、国際シンポジウムの準備状況の報告と打ち合わせ、次年度以降の班会議の開催方法や世話人の選定などについて協議した。国際シンポジウムは、京都大学・芝蘭会館にて平成17年3月2日・3日に行った。海外よりVolker Haucke, Linda Hicke, Miguel Seabra, Helen Yin博士の4名を演者として招き、国内からは泉、大野、竹居、中野、中山、吉森の6名の計画研究代表者が演者として発表した。領域内外から約150名の参加者があり、質疑応答も活発に行われた。領域ニューズレター3号に加え、公募研究代表者を加えた班員名簿を刊行した。領域の研究の外部に向けた発信として、第57回日本細胞生物学会大会シンポジウム「Sorting and Selection in Membrane Trafficking」(中野・吉森)、第77回日本製か学会大会シンポジウム「タンパク質細胞内輸送とオルガネラ形成制御の分子基盤」(中野)、第27回日本分子生物学会年会ワークショップ「オルガネラ輸送の分子モーターミオシンVのすべて」(五十嵐・福田)などを領域の研究代表者がオーガナイズした。本研究の目的は、平成15年度発足特定領域研究「メンブレントラフィック-分子機構から高次機能への展開-」の運営と評価を円滑かつ効果的に行うことにある。本年度は下記のような活動を展開した。1.全体班会議平成17年11月15日-18日に群馬県ホテルヴィレッジにて行った。今回は従来の計画・公募研究代表者による研究成果

・進捗状況の口頭発表(発表15分・質疑5分)に加え、領域外からの参加者を募ることにより、本研究領域の活動を領域外にも広報し、またより活発な議論を行うために、領域外からの公募も含むポスター発表69題も併せて行った。また、全体班会議の期間中に総括・計画班会議を開催し、領域評価委員・アドバイザーから領域の運営ならびに研究発表内容に関して評価・アドバイスを受けた。2.公開シンポジウム平成17年12月21日、虎ノ門パストラルにおいて「メンブレントラフィックと感染・免疫」というタイトルで公開シンポジウムを開催した。シンポジストは領域内の研究代表者から5名、領域外の研究者から5名の計10名にお願いし、134名の参加者を得て、活発な議論が展開された。3.ニュースレター領域の活動を広く広報する目的でニュースレターを刊行している。内容は、領域研究者の研究内容の紹介・研究室紹介、関連学会・研究会・シンポジウムの内容報告などである。そのほか、ホームページによる領域の広報や、メーリングリストによる情報の共有なども行っている。本研究の目的は、平成15年度発足特定領域研究「メンブレントラフィック-分子機構から高次機能への展開-」の運営と評価を円滑かつ効果的に行うことにある。本年度は下記のような活動を展開した。1.全体班会議平成18年11月22日-25日に香川県・リゾートホテルオリビアンにて行った。今回も昨年同様、従来の計画・公募研究代表者による研究成果・進捗状況の口頭発表(発表15分・質疑5分)に加え、より多くの研究者の参加を得ることにより、本研究領域の活動を領域外にも広報し、またより活発な議論を行うために、領域外からの公募も含むポスター発表49題も併せて行った。また、全体班会議の期間中に総括・計画班会議を開催し、今後の活動方針について討議すると共に、領域評価委員・アドバイザーから領域の運営ならびに研究発表内容に関して評価・アドバイスを受けた。その結果、来年度(最終年度)の班会議は、国際シンポジウムとの同時開催という形で平成19年11月25日-28日に兵庫県淡路夢舞台国際会議場で行う予定とした。2.合同公開シンポジウム平成18年6月2日、千里ライフサイエンスセンターにおいて特定領域研究「核ダイナミクス」との共催で合同公開シンポジウム「細胞内のダイナミックネットワーク-前進するオルガネラ研究-」を開催した。122名の参加者を得て、活発な議論が展開された。本研究の目的は、平成15年度発足特定領域研究「メンブレントラフィックー分子機構から高次機能への展開-」の運営を円滑かつ効果的に行うことにある。1.国際シンポジウム兼全体班会議平成19年11月27日-29日に淡路夢舞台国際会議場にて行った。国外からの9名に加え、計画・公募研究代表者から最近の業績を参考に16名(うち1名は研究代表者ではなく領域アドバイザー)のシンポジストを選出し、シンポジウムが行われた。
過活動膀胱における神経伝達物質受容体特性の解析と創薬

本研究は過活動膀胱における病因を膀胱における神経伝達物質受容体異常の面から検証し、その有効かつ安全な薬物療法を確立することを目的とするもので、当該期間で以下の研究成果を得た。1)背椎損傷ラットモデルにおいて、過活動膀胱の徴候である膀胱の不随意収縮波形及び膀胱重量の有意な増大が認められた。2)背椎損傷ラット膀胱への[3H]NMS特異的結合Bmax値の有意な増加が認め、この増加は、膀胱機能曲線の不随意収縮曲線波形における振幅と発現頻度(過活動膀胱の程度)と良好に相関した。3)テストステロン投与による前立腺肥大症モデルラット膀胱において、重量の有意な増加と[3H]NMS特異的結合Bmax値の有意な増加が認められた。以上の結果から、背椎損傷ラットおよび前立肥大ラットの両過活動膀胱モデルにおいて、膀胱ムスカリン性受容体異常が認められ、本病態における抗コリン薬の有効性が示唆された。5)トルテロジン(Tol)は経口投与により膀胱mAChRに結合し,その結合様式はOxyと比べ緩徐かつ持続的であった。またTolの唾液分泌抑制作用は,オキシブチニン(Oxy)と比べ有意に減弱することが示された。以上の結果より、TolはOxyよりヒトにおいて口渇の副作用が減弱することが示唆された。本研究は、過活動膀胱における病因を膀胱における神経伝達物質受容体異常の面から検証し、その有効かつ安全な薬物療法を確立することを目的とする。本年度は、過活動膀胱の病態モデルを作成し、その病態の進行に伴う膀胱平滑筋のムスカリン性受容体の性質を調べ、正常ラットの場合と比較した。1)ラットから膀胱を摘出し、そのホモジネートにおいて、[3H]N-メチルスコポラミン(NMS)を標識リガンドとするラジオレセプターアッセイ法によるムスカリン性受容体測定法を確立し、これより[3H]NMS特異的結合のスキャッチャード解析から、解離定数(Kd)および最大結合部位数(Bmax)を算出した。2)背椎損傷ラットモデルを作成し、本ラットにおける膀胱内圧曲線を測定したところ、過活動膀胱の徴候である膀胱の不随意収縮波形が観察された。この背椎損傷ラット膀胱重量の有意な増大が認められた。3)背椎損傷ラット膀胱への[3H]NMS(0.011.5nM)特異的結合を測定したところ、Kd値は対照群と差異がなかったが、Bmax値の有意な増加が認められた。このBmax値の増加は、膀胱機能曲線の不随意収縮曲線波形における振幅と発現頻度(過活動膀胱の程度)と良好に相関した。4)ヒト前立腺肥大症患者において過活動膀胱症状が認められることから、テストステロン投与による前立腺肥大症モデルラットにおける膀胱ムスカリン性受容体を測定した。テストステロン投与ラットにおいて、膀胱重量は対照ラットより有意に増加した。この膀胱における[3H]NMS特異的結合を測定したところ、Kd値は対照ラットと差異がなかったが、Bmax値の有意な増加が認められた。以上の結果から、背椎損傷ラットおよび前立肥大ラットの両過活動膀胱モデルにおいて、膀胱ムスカリン性受容体異常が認められた。本結果から、これらの病態における抗コリン薬の有効性が示唆された。本年度は、ATP受容体及びムスカリン性受容体(mAChR)を測定し、mAChRサブタイプの分布、膀胱及び顎下腺(ヒトでは耳下腺)mAChR受容体結合活性を調べた。また、ヒトの正常および過活動膀胱の各受容体に対する結合活性も検討した。(2)下部尿路および唾液腺におけるmAChRサブタイプの局在を明らかにする目的で、野性型(WT)およびmAChRサブタイプ欠損(KO)マウスの末梢組織mAChRを測定した。下部尿路および唾液腺においては、mAChRのM_2もしくはM_3サブタイプが高密度に局在することが示された。

(3)ラットにオキシブチニン(Oxy)を経皮投与することにより,膀胱及び顎下腺mAChR受容体への有意な結合が認められ,顎下腺受容体結合は経口投与の場合より減弱した。また、ソリフェナシン(Sol)は経口投与により膀胱受容体に有意に結合し,その作用はOxyの場合より緩徐に発現し,且つ持続的だった。尿失禁・頻尿治療におけるOxyの経皮投与及びSolの有用性が示唆された。(4)トルテロジン(Tol)は経口投与により膀胱mAChRに結合し,その結合様式はOxyと比べ緩徐かつ持続的であった。またTolの唾液分泌抑制作用は,Oxyと比べ有意に減弱することが示された。(5)ヒト膀胱および耳下腺の受容体標品において、[^3H]NMSの特異的結合が認められた。両組織における[^3H]-NMS特異的結合は飽和性および高親和性を示した。これより、[^3H]NMSは両組織mAChRを選択的に標識することが明らかになった。Oxy及びTolはいずれも膀胱と耳下腺への[^3H]NMS特異的結合を濃度依存的に抑制しのmAChR結合親和性は耳下腺で高い傾向を示したが、Tolの親和性は膀胱において耳下腺より約2倍高かった。また、ラット及びマウスにおけるTolの唾液分泌抑制作用は、Oxyに比べ有意に弱かった。以上の結果より、TolはOxyよりヒトにおいて口渇の副作用が減弱することが示唆された。
脳虚血におけるONOO^-生成に関する検討

Peroxynitrite生成の指標としてONOO^-とL-tyrosineとが反応して生じる3-nitro-L-tyrosine(NO_2-Tyr)を用い、脳虚血再灌流後のNO_2-Tyrの生成を部位別・経時的に測定し、更にaminoguanidine(AG)および7-nitro indazole(7-NI)投与により、NO_2-TyrがいかなるNOS由来で生成されたのかを検討した。【方法】ラットないしマウスは2時間の左中大脳動脈閉塞後再灌流0、1、6、24、48、72時間後に断頭した。更にAGおよび7-NI投与後、前述の虚血モデルを作製しNO_2-Tyr生成への影響を検討した。脳は非梗塞部、梗塞周辺部、皮質梗塞部、基底核梗塞部に分割し、酸加水分解後HPLCでNO_2-Tyr量を検出し、NO_2-Tyr生成率を算出した。【結果】NO_2-Tyrは血管閉塞直後より再灌流48時間後まで経時的に増加し、72時間後には減少傾向を示した。NO_2-Tyrの生成を部位別に見ると、脳梗塞周辺部、皮質梗塞部、基底核梗塞部の順序で増加していた。AG投与により主に再灌流24、48時間でNO_2-Tyrの生成が抑制された.一方、再灌流0.5時間後の7-NI投与によりNO_2-Tyrの生成が抑制された。【考察】以上の結果より、ONOO^-の生成の時間的および部位的変化は、再灌流後時間経過と共にiNOSが誘導されたこと、梗塞周辺部ほど多量のO_2^-が産生されたことを反映していると推察された。ONOO^-の生成の起源は、虚血再灌流早期ではnNOS由来のNOが、亜急性期ではiNOS由来のNOが関与していると考えられた。Peroxynitrite生成の指標としてONOO^-とL-tyrosineとが反応して生じる3-nitro-L-tyrosine(NO_2-Tyr)を用い、一過性2時間局所脳虚血再灌流後のNO_2-Tyrの生成を部位別・経時的に測定し、更にaminoguanidine(AG)投与の影響について検討した。【方法】雄SD rat 107匹を用い2時間の左中大脳動脈一過性閉塞および同側総頚動脈閉塞を行った。ラットは12群に分け、再灌流0、1、6、24、48、72時間群および各々の時間におけるAG投与群とした。脳を非梗塞部、梗塞周辺部、皮質梗塞部、基底核梗塞部に分割し、酸加水分解後HPLCでNO_2-Tyr量を検出し、NO_2-Tyr生成率を算出した。一方、虚血再灌流後に生成されたNO_2-Tyrがいかに代謝分解されるかを解明するため、2時間閉塞+24時間再灌流を負荷後L-NMMA 50mg/kgを腹腔内投与してNO_2-Tyr値の推移を経時的に測定した。AG投与により主に再灌流24、48時間群でNO_2-Tyrの生成が抑制された。【考察】

以上の結果より、ONOO^-の生成の時間的および部位的変化は、再潅流後時間経過と共にiNOSが誘導されたこと、梗塞周辺部ほど多量のO_2^<・->が産生されたことを反映していると推察された。なお、虚血再灌流後に生成されたNO_2-TyrはT_<1/2>=2.25時間で代謝分解されたことより、経時的に測定したNO_2-Tyr値は虚血直後からのNO_2-Tyrの蓄積を示しているのではなく、測定数時間前に産生されたNO_2-Tyrのみを反映していると考えられた。本研究ではPeroxynitrite生成の指標としてONOO^-とL-tyrosineとが反応して生じる3-nirto-L-tyrosine(NO_2-Tyr)を用い、一過性局所脳虚血再灌流早期におけるNO_2-Tyr生成の起源としてnNOSが関与しているか否かを解明することを目的とした。すなわち中大脳動脈2時間閉塞後0.5時間再灌流したモデルを用い、7-nitro indazole(7-NI)を腹腔内投与しNO_2-Tyr生成にいかなる影響があるかを検討した。【方法】雄C57Black/6J mice19匹を用いクリップによる2時間の左中大脳動脈一過閉塞を行い再灌流0.5時間後に断頭した。マウスは3群に分け、血管閉塞15分前に7-NI 25mg/Kg i.p.を投与した群、Vehicleを投与した群、およびSham-operation群とした。なおphysiological parameterとして、血圧、直腸温、血液ガス、血糖、ヘマトクリットを測定した。再灌流0.5時間後に断頭した脳は非梗塞半球、梗塞半球に分割し、酸加水分解後HPLCでNO_2-Tyr量を検出し、NO_2-Tyr生成率を算出した。【結果】1)7-NI投与群、Vehicle投与群、およびSham-operation群の3群間で、physiological parameterに有意な差を認めなかった。2)NO_2-Tyrは脳梗塞半球において7-NI投与群で0.10±0.07%、Vehicle投与群で0.18±0.05%、Sham-operation群で0.0±0.0%であり、7-NI投与によりNO_2-Tyrの生成が統計学的に有意に抑制された。なお、非脳梗塞半球においては3群間では差がなかった。【考察】以上の結果より、虚血再灌流早期のONOO^-の生成に関しては、nNOS由来のNOが関与していると考えられた。
イネにおけるジャスモン酸非依存性病害抵抗性発現機構の解明

イネの代表的な病害抵抗性反応であるファイトアレキシン生産へ至るシグナル伝達は、ジャスモン酸(JA)依存性経路とJA非依存性伝達経路で制御されている。本研究では、様々なストレスによるファイトアレキシン生産において、JA非依存性経路が機能しており、JA非依存性経路においては二次シグナル物質としてサイトカイニン(CK)が機能している可能性を示した。また、ファイトアレキシン生産においてJAとCKが相互に抑制的に機能していることも明らかにした。以上のようなCKの機能を確認するため、現在、CRISPR-Cas9を用いたゲノム編集の手法を用いてCK生合成変異体の作製を試みている。イネの代表的な病害抵抗性反応の一つであるジテルペン型ファイトアレキシン生産は、JA依存性のシグナル伝達により制御されることが示されてきたが、最近、私の研究グループでは、JA非依存性のシグナル伝達経路によっても同等のジテルペン型ファイトアレキシンの生産誘導が起こることを発見した。そこで、本研究では、JA非依存性シグナル伝達において機能する二次シグナル物質を単離同定するとともに、当該シグナル伝達系で機能する鍵転写因子の同定を行い、それらの防応答における機能を病害抵抗性、防御遺伝子の発現誘導作用の両面から解明することを目的とした。本年度は、まず、JA非依存性のシグナル伝達に関与する二次シグナル物質の単離を目指し、ファイトアレキシンを誘導する重金属エリシターである塩化銅処理したJA欠損変異体イネcpm2の葉身に存在する活性物質を探索した。塩化銅で48時間処理したcpm2の葉身のメタノール抽出物をイオン交換カラムを用いて分画したところ、酸性区がファイトアレキシン誘導活性を示すことが明らかになった。また、JA非依存性のシグナル伝達において機能する鍵転写因子の単離を目指し、野生型株とcpm2の葉身をそれぞれ塩化銅処理した後、経時的にサンプリングし、得られた植物材料からRNAを抽出精製し、マイクロアレイを用いてトランスクリプトーム解析を行った。その結果、JA非依存的シグナル伝達経路で野生型株と同等に機能すると考えられる6026遺伝子が同定され、その中には塩化銅処理後2時間以内に誘導される、約50個の早期応答性転写因子の存在が明らかになった。イネにおいて病原菌感染に応答して生産されるジテルペン型ファイトアレキシンは、ジャスモン酸(JA)依存性と非依存性のシグナル伝達経路により誘導される。本年度は、昨年度に引き続き、ジャスモン酸非依存的にジテルペン型ファイトアレキシンを誘導するシグナル物質の探索を行った。また、イネにおいてファイトアレキシン生産を誘導することが知られているUV-C照射で機能する情報伝達系についてもJA非依存性情報伝達系が機能しているかどうかについて解析した。野生型とJA欠損変異体cpm2を用いたファイトアレキシン誘導活性検定により、植物ホルモンの一つであるサイトカイニンが、野生型でもcpm2においても同等にジテルペン型フィトアレキシンを誘導することを明らかにした。また、病原菌感染と同様にイネに病害抵抗性反応を誘導する塩化銅処理により、サイトカイニン生合成酵素遺伝子LOGのホモログが処理後早期に誘導されることも示した。今後、塩化銅処理したイネ葉身におけるサイトカイニン内生量の分析を行うとともに、前年度行ったマイクロアレイで同定した、塩化銅誘導性転写因子のサイトカイニン応答性についても解析する予定である。また、いもち病菌から同定されたセレブロシドエリシターがcpm2においても野生型イネにおける誘導レベルと同等のジテルペン型ファイトアレキシンを誘導することを示した。さらに、UV-C照射により、野生型イネにおいてはJA生合成が誘導されJA依存型のファイトアレキシン生産も誘導されるが、cpm2においては野生型と同等以上にジテルペン型ファイトアレキシンが誘導されることも分かった。こうして、JA非存性のファイトアレキシン生産は、様々なストレスによって誘導され、JA依存性のストレス応答を補完する機能を有することが強く示唆された。イネにおいて病原菌感染に応答して生産されるジテルペン型ファイトアレキシン(DP)は、ジャスモン酸(JA)を介したシグナル伝達経路(JA依存性経路)とJAを介さないシグナル伝達経路(JA非依存性経路)により誘導される。本研究は、JA非依存性経路において機能する二次シグナル物質や鍵転写因子を単離し、その生理機能を解明することを目的としたものである。まず、野生型イネとJA生合成変異体イネであるcpm2を用いて、DPを誘導するシグナル物質の探索を行ったところ、野生型、cpm2両方において植物ホルモンの一つであるサイトカイニン(CK)の生産が誘導されることが示された。また、CKが、野生型でもcpm2においても同等にDPを誘導することやファイトアレキシン生産に至るシグナル伝達において、JAとCKが相互に抑制的に機能していることも明らかになった。さらに、cpm2においては、Cu2Cl2処理(病原菌感染と同様にイネに病害抵抗性反応を誘導する)により、CKが野生型イネ以上のレベルで生産誘導されることも示された。イネ葉身において、Cu2Cl2処理により誘導されるCK生合成酵素を分子生物学的手法により探索したところ、LOGL9とIPT3がCu2Cl2誘導のCK生合成において鍵酵素として機能している可能性が示された。現在、ストレス誘導的なCK合成が起こらない変異体の取得を目指し、LOGL9とIPT3の遺伝子破壊株の作製をCRISPR-Cas9を用いたゲノム編集の手法を用いて試みている。

一方、ファイトアレキシン生産を誘導するUV-C照射やセレブロシド処理により、cpm2において野生型と同等、あるいはそれ以上にDPが誘導されることも分かった。こうして、JA非依存性のファイトアレキシン生産は、様々なストレスによって誘導され、JA依存性のストレス応答を補完する機能を有することが強く示唆された。イネの代表的な病害抵抗性反応であるファイトアレキシン生産へ至るシグナル伝達は、ジャスモン酸(JA)依存性経路とJA非依存性伝達経路で制御されている。本研究では、様々なストレスによるファイトアレキシン生産において、JA非依存性経路が機能しており、JA非依存性経路においては二次シグナル物質としてサイトカイニン(CK)が機能している可能性を示した。また、ファイトアレキシン生産においてJAとCKが相互に抑制的に機能していることも明らかにした。以上のようなCKの機能を確認するため、現在、CRISPR-Cas9を用いたゲノム編集の手法を用いてCK生合成変異体の作製を試みている。H25年度の研究で、塩化銅処理したcpm2において検出されたファイトアレキシン誘導物質は超微量で単離同定は困難と考えられたが、以前より病害抵抗性誘導に関与することが示唆されていたサイトカイニンがJA非依存的にジテルペン型ファイトアレキシンを誘導することを発見した。また、セレブロシドエリシターもJA非存的にジテルペン型ファイトアレキシンを誘導することが確認された。これらは、JA非存的シグナル伝達系で機能する、転写因子を含むシグナル因子の同定のための有用な情報として活用できると考えている。また、農業生物資源研究所の森らとの共同研究で、JA依存性、および非依存性のジテルペン型ファイトアレキシン生産において、鍵転写因子DPFが機能していることが明らかになっているが、DPF遺伝子のプロモーター解析も試みており、全体として、JA非存性シグナル伝達経路の解明は着実に進展しているものと考えている。農学サイトカイニンやセレブロシドエリシターにより、JA非存性シグナル伝達経路が活性化されることが明らかになったことから、当該シグナル伝達系で機能する転写因子の同定と生物学的機能を解明することを目指す。具体的には、当該シグナル伝達系でDPFの上流で機能する転写因子の同定と当該転写因子過剰発現体の作製を行う。また、ゲノム編集によりサイトカイニン生合成変異体の作製も目指したい。平成25年度の研究により、JA非依存性シグナル伝達経路で機能する二次シグナル物質の存在が強く示唆され、また、JA欠損変異体と野生型イネを用いたマイクロアレイ解析により、JA非依存性シグナル伝達で機能すると考えられる転写因子が同定されるなど研究開始時における研究仮説はほぼ妥当なものであることが示された。本研究は順調に進捗しているものと考えられ、次年度は、さらに多くの成果が得られることが期待される。次年度も遺伝子発現解析や変異体の作製等で、研究補助者の協力を必要としている。次年度使用額はほぼ全額を研究補助者の賃金に充当する予定である。研究の方向性は、25年度の研究により確かなものとなった。今後は、ファイトアレキシン誘導活性を有する二次シグナル物質の存在の再確認実験を行うとともに、多量の実験材料を調製し当該シグナル物質の単離・構造決定を試みる。
ロシア東洋学院における日本学の研究

19世紀後半20世紀初頭の日本学を背景に、極東ロシアの最初の大学であった東洋学院(1899-1920)における日本学的研究及び日本語教育の特殊性を解明し、E.G.スパルヴィンをはじめとする東洋学院日本研究者の主な著作を分析することにより、ロシアの日本学への寄与を評価し、ロシアの東洋学史における東洋学院の意義と役割、国立極東大学(1920-1939)等の後継組織との関係を明らかにした。研究分担者の生田はウラジオストクで開催された第21回日露学術シンポジウムで、江戸時代の日露交渉について報告し、モルグン氏などのロシアの研究者と知見交換した。サンクト・ペテルブルグのロシア科学アカデミーで、スパルヴン関連の史料やペテルブルグ大学と東洋学院のつながりを示す史料を閲覧し、研究協力者のクゥィチャーノフ博士と意見を交換した。クラスノヤルスクでは、クラスノヤルスク市立文書館と国立文書館で日本学関連の史料を閲覧し、ダツィシェン氏と情報を交換した。研究分担者のヨコタ村上は、第21回日露学術シンポジウムでロシアのディアスポラ文学について報告し、研究課題について意見を交換した。ウラジオストクで極東国立大学図書館、ゴーゴリ名称ウラジオストク公立図書館で、東洋学院の日本学に関する資料を閲覧した。国内では関連資料の購入を進め、主に、二葉亭四迷とスパルヴィンの関係、マトヴェーエフ一家と東洋学院のつながりを調査した。研究分担者の藤本は、第21回日露学術シンポジウムで、日露関係史について報告し、ウラジオストクでは極東大学出身の通訳者と日本語教育についての意見交換を行い、モスクワでは外務省付属国際関係大学を訪問、日本語専攻学生に対し講演した。また同大学における日本語教育の歴史に関する討論と現状の視察を行った。研究代表者ディボフスキーは、第21回日露学術シンポジウムで、日本の学生のロシア観について報告し、ロシア科学アカデミー考古学歴史民俗学研究所、極東国立大学、沿海地方公文書保管所で、東洋学院についての資料を閲覧し、ウラジオストクの東洋学院研究者(E.Ermakova,A.Khamatova,Z.Morgun諸氏)と知見を交換し、スパルヴィン関連論文集出版、日露研究会「東洋学院における日本学」(2006年5月6日大阪大学言語文化研究科で開催)実施についての打ち合わせをしてきた。ロシアにおける日本学の歴史を背景に、ロシアと日本の古文保管書、東洋学院通報、XX世紀初頭の雑誌・新聞などに基づいてラトビアのリガ、ウラジオストク、サンクトペテルブルグ、東京、京都、ハルビンなどでのロシア帝国の極東における初の大学である東洋学院の優れた教育者、日本研究家であるE.スパルヴィン教授の人生についての多種多様な資料を分析し、その教育、研究、政治、出版活動を明らかにし、スパルヴィンと、ロシアの極東での日本語新聞『浦潮日報』の編集長和泉良之助、作家二葉亭四迷(長谷川辰之介)、東洋学院の初の日本語講師前田清治などの日本の人物との関係とその運命をたどり、特にスパルヴィンによる学術論文と数々の日本語教科書を分析し、スパルヴィン教授の日本語教育システムを究明してきた。それと同時に20世紀前半の複雑な日露交流を背景に東洋学院(1920年以降、国立極東大学の中の東洋学部、1939年閉鎖、1962年極東国立大学での日本語講座再開設)後の日本研究家の運命を明らかにし、現代の極東国立大学における東洋学院の学術・教育的伝統の伝承を検討し、2006年の5月6日大阪大学・大学院言語文化研究科において国際シンポジウム「東洋学院における日本学」を開催し、研究結果を"Issues of Japanology"(2006年10月サンクトペテルブルグ)などの国際シンポジウムで発表し、E.スパルヴィンについての論文集を編成してきた(2007年5月にロシア極東国立大学の出版局で出版予定)。ウラジオストク、サンクトペテルブルグ、東京、京都、ハルビンの図書館や文書史料舘などにおいて、東洋学院の教授であり、ロシアの著名な日本学者であるE.スパルヴィン教授の人生や著作活動及びその人的な繋がりや露日関係への寄与などを研究しつづけ、旧東洋学院(1899-1920)における日本語教授法や日本の地理、経済、政治、軍事、文学芸術などに関わる教材や論文を分析し、旧東洋学院の教育システムを明らかにし、その教官、学生や聴講生、卒業生による日本学の研究著作リストを作成した。東洋学院閉鎖後(1920年以降国立極東大学の東洋学部(1939年閉鎖)1962年極東国立大学での日本語講座再開設、1970年東洋学部復興、1994年東洋学院復興)の日本研究家の運命をたどり、その著作を分析し、日本研究リスト(1900-2007)を作成し、2007年7月に、Eスパルヴィンと東洋学院についての論文集『ロシアの初のプロフェッショナル日本学者-ラトビア・ロシア・日本の研究者によるE.G.スパルヴィンの人生と活躍の研究の試み-』(ロシア極東国立大学出版局、188ページ、原文露語)を出版した。ロシア科学アカデミー極東支部と関西の研究者との歴史経済学