hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
蛋白質内プロトン・イオン移動反応と局所・全体構造変化の連動機構の解明

生体機能を調節する膜蛋白質(例えばロドプシン)の機能は「水素イオンのポンプ」、「イオン輸送」など多岐に渡る。この膜蛋白質の中で、1)水素イオンポンプ機能を有しているバクテリオロドプシン(bR)、2)陽イオンを輸送するチャネルロドプシン(ChR)はG蛋白質のモデル蛋白質として、さらにはプロトン移動反応のモデル蛋白質として、非常に重要な蛋白質である。本研究では申請者が開発したPaCS-MD(蛋白質の状態間を接続することができる画期的な計算技術)を利用する。ロドプシンファミリー蛋白質を例にとって「小さな局所的構造変化が、蛋白質により増幅され、数十オングストローム規模で伝播し、(大きな)反応を誘起する機構」を明らかにし、機能と構造の連動性を解明することを主目的としている。本年度はbRを用いてプロトン移動と蛋白質の大規模構造変化の連動性・レチナールの異性化による蛋白質への影響を明らかにする。具体的には、既知の構造変化をPaCS-MDを使用して接続することを目標とした。本年度開始した研究であるため、現段階ではあまり解析が進んでいない。これまで報告されている多くの構造解析データに関して、現在構造情報を精査中の状況である。一方で、今後の研究に必要な情報である力場の作成に取り組んでおり、有用な力場を完成させている。今後、これらのデータが融合されることによって、蛋白質内プロトン・イオン移動反応と局所・全体構造変化の連動機構が明らかにする予定である。27年度が最終年度であるため、記入しない。
細胞内分子架橋法を利用した新たな機能的遺伝子クローニング法の開発

本研究では、細胞内分子架橋を用いることによる新たなシグナル伝達分子検索法の開発を試みた。本研究では、細胞外CD8分子や変異型エストロジェンレセプターやFK結合タンパクとのキメラ分子が産生されるような新たなレトロウイルスcDNAライブラリー用ベクターを開発し、ライブラリーから産生されたキメラ分子が、架橋刺激によって正常に活性化されるかを検討し、本法が可能かどうかを明らかにする。本方法では、キメラ分子のライブラリーの作製が必要なため、cDNAライブラリーのサイズや質が非常に重要な要因となる。そこで、まず、CD8分子とのキメラライブラリーに対してcDNAのサイズを最適化したライブラリーの作製を行なった。その結果、新たなB細胞活性化分子として、NFAM1をクローニングした。NFAM1のトランスフェクタントやトランスジェニックマウスを用いることにより、NFAM1はB細胞の活性化や分化に重要な機能を担っている分子であることが明らかになったと同時に、本法が、シグナル伝達分子の解明に非常に有用な方法であることが判明した(Ohtsuka et al.Proc.Natl.Acad.Sci USA 2004)。さらに、最適化したcDNAライブラリーを用いて、シグナル伝達分子の検索を行なったところ、4回膜貫通型の新規分子をクローニングし、B細胞の生存に関与していると思われた(Suenaga et al.投稿中)。以上のように、CD8キメラライブラリーを用いた細胞内架橋によるシグナル伝達分子は、ポストゲノムの時代において、重要な機能的遺伝子検索方法であることが明らかになった。私どもは、新たな機能的遺伝子クローニングシステムとしてNACS法(NFAT Activating Molecule Cloning System)を開発した。本研究では、NACS法の応用法を開発することによって、新たな細胞活性化機構、細胞分化機構の解明を目指し、それを基にヒト疾患遺伝子を明らかにすることを目的としている。NACS法では、ランダムプライマーで作成したcDNAライブラリーとCD8分子の細胞外領域とのキメラが作られるライブラリーを作製することになるため、cDNAライブラリーの質が、決定的に重要である。そこで、本年度ではまず、cDNAライブラリーの質を高めるために、cDNAの合成条件を検討した。今までのライブラリーでは、cDNAの合成長が長過ぎるために、翻訳開始点より上流からCD8とのキメラになっているクローンが多く、そのために、目的の遺伝子がクローニングできない欠点が認められた。そこで、cDNA合成の際に、ランダムプライマーの濃度を通常の50倍程度にすることにより、比較的小さいサイズのCD8キメラライブラリーを作成することに成功した。実際、新たに作成したライブラリーでスクリーニングすることにより、今までにクローニングできなかったCD3ζ等の既知のITAMを有する分子のほか、新たな4回膜貫通型の活性化制御分子をクローニングすることに成功した。そこで、次年度では、今回確立した、ライブラリー作成方法を基に、エストロジェンレセプターとのキメラライブラリーを作成することにより、転写因子等のをクローニングできる細胞内分子架橋法を利用した新たな機能的遺伝子クローニング法の確率を目指す。
異形の近世注釈の系譜学

五年計画の三年目にあたる平成30年度は、当該課題に関して通時的(歴史的)アプローチと共時的(同時代的)アプローチの両面から研究を進めることができた。そもそも「異形の近世注釈の系譜学」は主に近世後期において、ポスト宣長という観点からユニークな古典注釈とされる研究を通時的・共時的に位置づけようとするものである。それゆえ、歴史的位置づけと同時代的位置づけを両方とも行うことが眼目である。まず、通時的アプローチとしては宣長国学が近代、とりわけ昭和戦争期の教育現場でどのように教えられていたのかということを実証した。特に小学校の教科書に掲載された宣長国学の言説に注目して、敗戦をはさんでそれがいかに変容したかということを追究した。その結果、国語・国史・修身の三科目において、戦時中から宣長国学が扱われていたが、国語は戦後、宣長国学の教材が消滅し、国史は戦後、尊王論の文脈から近世学問の文脈へのパラダイムシフトが行われ、修身は戦後、教科そのものが消滅し、宣長国学ももろともに闇に沈んだ、という結論を得た。次に、共時的アプローチとして宣長が『玉くしげ』を執筆した年(天明八年)における同時代的状況について追究した。同年1月末に発生した京都火災(天明の大火)をはさんで、「古代」という概念がクローズアップされるという出来事があった。歌人は失われた都に思いを馳せ、国学者は古代を復興させるべく論陣をはり、政治家は大政委任論を唱える一方で寛政の改革を断行した。それらをすべて同時代現象として考えると、共時性(シンクロニシティ)という概念を想定せざるを得ない。以上、二つの方向性で研究成果を得ることができた。三年目の折り返しとしては、それなりに成果と実績を積むことができた。上記の通時的アプローチには可能性を感じている。次年度以降も、この方面からのアプローチを続行する予定である。五年計画の一年目にあたる平成28年度は、申請した一年目の計画に基づいて研究を遂行した。すなわち、ポスト本居宣長の一人として、富士谷御杖(17681823)を取り上げ、その事跡を調査し、その業績について資料収集した。その結果、以下の知見を得た。まず、御杖の「言霊倒語説」は表現論としてスタートしつつ、解釈学へと傾倒していき、独特の古典学をうち立てるに至った。つまり、歌人としての「詠歌」と歌学者としての「歌論」がともに一つの統一された理論によって説明できることを立証したのである。このことは活字化して、鈴木健一編『江戸の学問と文藝世界(仮題)』(森話社、平成29年度刊行予定)に掲載されることが決定している。次に、御杖の解釈学(表裏境説)について検討した。当該説は言霊倒語説を補完する関係にある概念であるが、それは必ずしも御杖のオリジナルの思考法ではなく、先行する学説を批判的に受容することによって成立したものであると推定した。第三として、御杖解釈学の要ともいうべき「灯」概念の変容について検討した。『百人一首灯』を濫觴として、掉尾の『万葉集灯』に至る、一連の古典注釈書「○○灯」が、表現論としての「言霊倒語説」や解釈学としての「表裏境説」を理論的根拠としつつ、実際の古典文学作品に即して応用されていく過程で、強固にしてしなやかな注釈法を見出していったことを実証した。以上の三点について調査分析をし、考察論証した。ポスト本居宣長という観点から富士谷御杖の古典学を見るという視角を設定し、これについて主に『新編富士谷御杖全集』に収録された作品によって検討を進めた。その結果、当初設定した三つの観点について、おおよその見通しを得ることができた。五年計画の二年目にあたる29年度は、ポスト本居宣長の一人である富士谷御杖について、考察したことを論文に発表した。鈴木健一編『江戸の学問と文藝世界』(森話社、平成30年2月)に収録された「言霊倒語説の形成ー表現論から解釈学へ」がそれである。御杖の「言霊倒語説」は、心を言葉にすると災いが生じるという言霊信仰を表現論に応用した学説で、和歌や物語の表現として構築された説である。それが和歌や物語を解釈するために編み出された「表裏境」説に発展的に融合し、独自の解釈学を構築する過程について、御杖の履歴を背景にして考察した。また、宣長の国学がはらむ問題(いわゆる「宣長問題」)について、佐伯孝弘他編『古典文学の常識を疑う』(笠間書院、平成29年5月)の中に「国学における実証性と精神性」と題して検討した。宣長の国学は客観的・科学的で緻密な実証主義と主観的・神懸かり的で粗雑な自国中心主義が混在する複雑な構造を有している。これについて、前近代としての近世の「知」が持つ矛盾あるいは逆説という観点から論じた。その他に、宣長の「をかし・おかし別語説」に関する口頭発表、宣長の現代的価値についての口頭発表、「面従腹背ー村田春海」と題して発表をおこなった。

これらの発表は、ポスト宣長という観点をより明確にするために、本居宣長そのものに立ち返って、その特徴を追究したものや、宣長と同時代の相弟子である真淵門弟の村田春海との関係を追究することにより、次世代の宣長観を先取りするさまをあぶり出した発表である。当該年度の後半は、所属先の変更という不測の事態もあり、新たなテーマのためのパイロット調査が十分にできなかった。五年計画の三年目にあたる平成30年度は、当該課題に関して通時的(歴史的)アプローチと共時的(同時代的)アプローチの両面から研究を進めることができた。そもそも「異形の近世注釈の系譜学」は主に近世後期において、ポスト宣長という観点からユニークな古典注釈とされる研究を通時的・共時的に位置づけようとするものである。それゆえ、歴史的位置づけと同時代的位置づけを両方とも行うことが眼目である。まず、通時的アプローチとしては宣長国学が近代、とりわけ昭和戦争期の教育現場でどのように教えられていたのかということを実証した。特に小学校の教科書に掲載された宣長国学の言説に注目して、敗戦をはさんでそれがいかに変容したかということを追究した。その結果、国語・国史・修身の三科目において、戦時中から宣長国学が扱われていたが、国語は戦後、宣長国学の教材が消滅し、国史は戦後、尊王論の文脈から近世学問の文脈へのパラダイムシフトが行われ、修身は戦後、教科そのものが消滅し、宣長国学ももろともに闇に沈んだ、という結論を得た。次に、共時的アプローチとして宣長が『玉くしげ』を執筆した年(天明八年)における同時代的状況について追究した。同年1月末に発生した京都火災(天明の大火)をはさんで、「古代」という概念がクローズアップされるという出来事があった。歌人は失われた都に思いを馳せ、国学者は古代を復興させるべく論陣をはり、政治家は大政委任論を唱える一方で寛政の改革を断行した。それらをすべて同時代現象として考えると、共時性(シンクロニシティ)という概念を想定せざるを得ない。以上、二つの方向性で研究成果を得ることができた。三年目の折り返しとしては、それなりに成果と実績を積むことができた。おおむね研究計画に沿って遂行できると思われるが、随時発生する問題点については適宜解決の方向性を探りつつ、研究を推進していきたい。今後は橘守部・平田篤胤・萩原広道について、それぞれの特徴をポスト宣長という観点から、それぞれ追究し、論じる予定である。上記の通時的アプローチには可能性を感じている。次年度以降も、この方面からのアプローチを続行する予定である。研究を始める年度に研究環境インフラとしてPCとプリンターを購入することを想定していたが、以前から使用しているPC等にまったく問題がないので、それらに支出する額を繰越額とした。前記「理由」に記載したPC等に不具合が出た段階で、次年度以降に支出することとしたい。
鉱物無機結晶データベース利用システムの開発

本研究は3年度にわたり鉱物結晶データベース利用システムの開発を行ってきた.初年度は主にハードウェアのシステム確立とプログラム改定および開発を行い,最終年はこれらの使用説明書の作成に主力をそそいだ.本研究は東大大型計算機センターにあるユーザデータベースとしての鉱物無機結晶データベースを利用する際に必要な応用プログラムの開発と改良を行い,このデータベースの利用および入力が有効に行われるシステムを確立することを目的とした.そのデータも地球・惑星構成物質として関心のある天然物質および無機工業材料として利用価値のある人工物質など各ユーザの関心のある物質のデータを合せて一つのものとした研究利用中心のオープンデータベースであるので,そのような特色を生かすことを目標として利用システムの充実をはかった.データベースより検索した結晶についてただちにカラー結晶構造図を書かせるプログラムが開発され,その使用説明書の作成を行った.現在もっともよく使われているNECのPC9801型端末で使用でき,グラフィック端末上のカラー図形を熱転射型カラーハードコピープリンターに出力できるプログラムが完成した.これは結晶図の回転,改定,多面体表示なども物質同定コードを入力するだけでできるので,研究および教育上有効に利用されることが期待できる.パーソナルコンピューター間および大型センターとの交信のためPC-UXの利用を試みたが,現段階では上記プログラムの直接利用の方が容易である.現在東大大型電子計算機センターのユーザデータベースとして利用されているMINCデータベースをパソコンの汎用リレーショナルデータベースで利用するための入力形式の確立,大容量の変換について検討し, dBASE IIIプログラムとのデータ交換の方式およびテストデータベースが確立された.本研究は3年度にわたり鉱物結晶データベース利用システムの開発を行ってきた.初年度は主にハードウェアのシステム確立とプログラム改定および開発を行い,最終年はこれらの使用説明書の作成に主力をそそいだ.本研究は東大大型計算機センターにあるユーザデータベースとしての鉱物無機結晶データベースを利用する際に必要な応用プログラムの開発と改良を行い,このデータベースの利用および入力が有効に行われるシステムを確立することを目的とした.そのデータも地球・惑星構成物質として関心のある天然物質および無機工業材料として利用価値のある人工物質など各ユーザの関心のある物質のデータを合せて一つのものとした研究利用中心のオープンデータベースであるので,そのような特色を生かすことを目標として利用システムの充実をはかった.データベースより検索した結晶についてただちにカラー結晶構造図を書かせるプログラムが開発され,その使用説明書の作成を行った.現在もっともよく使われているNECのPC9801型端末で使用でき,グラフィック端末上のカラー図形を熱転射型カラーハードコピープリンターに出力できるプログラムが完成した.これは結晶図の回転,改定,多面体表示なども物質同定コードを入力するだけでできるので,研究および教育上有効に利用されることが期待できる.パーソナルコンピューター間および大型センターとの交信のためPC-UXの利用を試みたが,現段階では上記プログラムの直接利用の方が容易である.現在東大大型電子計算機センターのユーザデータベースとして利用されているMINCデータベースをパソコンの汎用リレーショナルデータベースで利用するための入力形式の確立,大容量の変換について検討し, dBASE IIIプログラムとのデータ交換の方式およびテストデータベースが確立された.本研究は東大大型計算機センターにあるユーザデータベースとしての鉱物無機結晶データベースを利用する際に必要な応用プログラムの開発と改良を行い、このデータベースの利用および入力が有効に行われるシステムを確立することを目的としている。このデータベースは地球・惑星構成物質として関心のある天然物質および無機工業材料として利用価値のある人工物質など、各ユーザの関心のある物質のデータを合せて一つのものとした研究利用中心のオープンデータベースであるので、そのような特色を生かすことを目標とした。また研究教育目的のため、結晶構造図が物質同定コードを入力するだけでカラー表示されるようなプログラムの開発も行っている。本年度はこれまで開発してきた利用システムのうち、とくに結晶構造図の図形出力を行うプログラムを変更,改良し、大型計算センターのコンピューターだけでなく、PC-9801などパーソナルコンピューターでも利用できるように開発を行ってきた。またグラフィック端末画面上にカラー図示されたものをカラーハードコピーがとれるように出力装置を検討購入した。現在プログラムはディバッギングの段階にある。同じく結晶外形も図示するプログラムの開発改良も行った。最近普及している16ビットパソコンと大型計算機との利用形式の違いが、鉱物結晶データベースの利用普及をおくらせているので、両者に共通した利用形式を探すため、PC-9801にも利用できるUNIXシステムの利用を検討している。これはまたパソコン間通信の利用にも役立つものである。大型センターでの検索プログラムはTOOL-IRオリオンを使っているが、現在d BASE【III】などパソコン用のリレーショナルデータベースのよいのが市販されているので、これも利用できるようなシステムを検討し、ファイル転送によりパソコンのハードディスクにもデータベースが入るような方法を検討している。本研究は東大大型計算機センターにあるユーザデータベースとしての鉱物無機結晶データベースを利用する際に必要な応用プログラムの開発と改良を行い、このデータベースの利用および入力が有効に行われるシステムを確立することを目的としている。このデータベースは地球・惑星構成物質として関心のある天然物質および無機工業材料として利用価値のある人工物質など各ユーザの関心のある物質のデータを合せて一つのものとした研究利用中心のオープンデータベースであるので、そのような特色を生かすことを目標とした。また研究教育目的のため、結晶構造図が物質同定コードで入力するだけでカラー表示されるようなプログラムの開発も行っている。昨年度に続き本年度は利用システムのうちの結晶構造図の図形表示出力を行うプログラムを汎用のパーソナルコンピュータ端末で使用できるようプログラム開発を行い完成をみた。

現在もっともよく使われているNECのPC9801型端末で使用でき、グラフィック端末上のカラー図形を熱転射型カラハードコピープリンタに出力できるようになった。これは結晶図の回転,改定,多面体表示なども物質同定コードを入力するだけでできるので研究および教育上有効に利用されることが期待できる。現在東大大型電子計算機センターのユーザデータベースとして利用されているMINCデータベースをパソコンの汎用リレーショナルベータベースで利用するための入力形式の確立、大容量の変換について検討し、αBASE【III】プログラムとのデータ交換の方式およびテストデータベースが確立された。来年度は大容量のデータを変換し実用データベースを完成できる見込である。研究結果を出力して出版にそのまま利用できるシステムの研究もハードディクスをベースとして進行している。
Ｉｎ　ｖｉｖｏナノイメージングによる心筋興奮収縮連関のメカニズムの解明

1)ラット培養幼若心筋細胞のZ線にAcGFPを発現させ、収縮の最小単位であるサルコメアの長さ変化を細胞内Ca濃度変化と同時にnm精度で解析できるシステムの構築に成功した。2)ラット培養幼若心筋細胞において、約38°C以上の条件下、高速(10 Hz)のサルコメア振動(HSOs)が生じることを見出した。3)マウスin vivo心臓において、心筋細胞内ナノ分子情報を抽出できる新たな顕微システムを構築し、サルコメアの動きを高空間・時間分解能で捉えることに成功した。4)Frank-Starling機構について解析し、その程度が細いフィラメントの"on-off"平衡に依存していることを見出した。H.23年度は、in vivo心筋興奮収縮連関の創成に向け、基盤技術の構築を行った。心筋細胞を使った実験にラットの幼若心筋細胞のZ線にGFPを発現させ、サルコメアの自励振動現象(SPOC)の特性を解析した。単一サルコメア長の計測精度は10nmである(カメラ速度:30fps)。イオノマイシン処理した幼若心筋細胞にSPOC溶液(pCa 6.0;10mM EGTA)を加えると、周期13Hzの自励振動が観察された。SPOC中のサルコメア振動は、ゆっくりとした短縮相と素早い伸展相から成る鋸波であった。また、インタクトの幼若心筋細胞に電気刺激を加え、波形解析を試みた。刺激頻度が低い場合(1Hz)、収縮にともなうサルコメア長変化はSPOCと逆位相であり、素早い短縮相とゆっくりとした伸展相が観察された。ところが、刺激頻度を生理的なレベル(35Hz)に上げると、伸展速度の著しい上昇とともに短縮/伸展の位相が変化し、波形がイオノマイシン処理細胞におけるSPOCに類似していた。よって、生理的な拍動条件下、心筋細胞においてSPOCが駆使されていることが示唆された。In vivo心臓を使った実験:ラットを麻酔下に開胸し、心臓と心嚢膜の間にFuGENE-HDとαアクチニン抗体-量子ドット複合体を導入した。心臓を摘出して蛍光観察すると、2.00μm周期の横紋様構造が確認された。また、遺伝子発現を利用することによって、in vivo心臓において単一サルコメア長を計測した。すなわち、α-actinin-GFP発現組み換えアデノウイルスベクターを作製し、マウスの心臓に投与した。ADV投与23日後、GFPの蛍光が観察され、静止時のサルコメア長が2.00μmであることが判明した。量子ドット、GFPいずれの場合も単一サルコメア長の計測精度は10nmであった。細胞、個体の両面から研究を行った。心筋細胞:ラットの幼若心筋細胞のZ線にAcGFPを発現させ、サルコメアの自励振動現象(SPOC)の特性を解析した。単一サルコメア長の計測精度は3 nmであり(カメラ速度:50 fps)、Gアクチン分子の直径(5 nm)よりも小さな値であった。イオノマイシン処理した幼若心筋細胞にSPOC溶液(pCa 6.0; 10 mM EGTA)を加えると、自励振動が観察された(cell-SPOC)。Cell-SPOC中のサルコメア振動は、ゆっくりとした短縮相と素早い伸展相から成る鋸波であった。刺激頻度が低い場合(1 Hz)、収縮にともなうサルコメア長変化はSPOCと逆位相であり、素早い短縮相とゆっくりとした伸展相が観察された。ところが、刺激頻度を生理的なレベル(35 Hz)に上げると、伸展速度の上昇とともに短縮/伸展の位相が変化し、波形がイオノマイシン処理細胞におけるcell-SPOCと類似した。よって、生理的な拍動条件下、心筋細胞においてSPOC特性が駆使されていることが示唆された。In vivo心臓:マウス心臓において、単一サルコメアの動きを共焦点下に観察した(カメラ速度:100 fps)。すなわち、α-actinin-AcGFP発現組み換えアデノウイルスベクター(ADV)を作製し、これを麻酔・開胸したマウスの心臓に投与した。ADV投与23日後に心臓を摘出し、表面から共焦点観察すると、横紋構造が確認された。摘出した心臓における心筋細胞内単一サルコメア長の計測精度は20 nmであり(カメラ速度:100 fps)、拡張期から収縮期へのサルコメア長変化を捉えることに成功した。また、マウスより心臓を摘出し、Ca蛍光指示薬を用いて心臓の表面から心筋細胞内Ca動態を観察することに成功した。In vivoにおける心筋興奮収縮連関のイメージングを実現するため、細胞、個体の両面から研究を行った。

(I)幼若心筋細胞を用いた実験:ラットの幼若心筋細胞のZ線にAcGFPを発現させ、サルコメアの動態解析を行った。サルコメア長の測定精度は3 nmであった(50 fps)。これらの細胞をCaイオノフォアにて処理し、さらにCaポンプ機能を阻害した上で低濃度のCa溶液に暴露すると、サルコメアの鋸波状の自励振動(Cell-SPOC)が観察された。次に、様々な頻度で細胞に電気刺激を加え、波形解析を試みた。刺激頻度を生理的なレベル(35 Hz)に上げると、伸展速度が上昇し、波形がCell-SPOCに類似した。(II)In vivoマウス実験:In vivoマウス心臓において、単一サルコメアの動きを共焦点下に観察した(カメラ速度:100 fps)。すなわち、α-actinin-AcGFP発現組み換えアデノウイルスベクター(ADV)を作製し、これを麻酔・開胸したマウスの心臓に投与した。ADV投与23日後に心臓を摘出し、表面から共焦点観察を行った。静止時のサルコメア長は2.0 μmであった。単一サルコメアの長さの測定精度は10 nmである。マウスを人工呼吸下、開胸してサルコメア長を計測すると、短縮相、拡張相において平均で1.7 μm、2.0 μmという値が得られた。心臓拍動にともなうZ軸方向の動きは、対物レンズにピエゾを設置することによって克服した。さらに、マウスから摘出した心臓をCa感受性色素であるFluo-8にて灌流し、心臓表面からの観察によって心筋細胞内Ca動態(Caウエーブ)を高精度で捉えることに成功した。Caウエーブは各細胞でランダムに生じているが、電気刺激の負荷によって同調し、一つの大きなCaトランジェントが生み出されることが明らかになった。本研究の目的は、最先端のナノ計測技術を駆使することによって、心筋細胞の興奮・収縮と心臓のポンプ機能との関係を分子レベルで明らかにすることである。H26年度、以下の研究を行った。1)In vivoマウス心臓において、心筋細胞内のナノ分子情報を3次元的に抽出できる顕微システムを完成させた。このシステムを駆使し、左心室表面の心筋細胞内の単一サルコメアの動きを高空間(20 nm)・時間(100 fps)分解能で捉えることに世界で初めて成功した(論文投稿中)。このシステムは、左心室内圧が低い場合だけでなく、高い場合にも、単一サルコメアの動きを正確に計測することができることから、今後、様々な病態解析に応用できるものと期待される。心電図や左心室内圧は一定のリズムを示していても、サルコメアの動きはそれらのマクロパラメータとは同調しないケースが健常マウスにおいても見いだされた。この事実は、リズム破綻を始めとする心疾患の病態メカニズムを紐解く鍵となる可能性がある。また、心筋細胞膜の脱分極に続いて生じる初期細胞内Ca発火、その後の拡散について、心臓レベルで解析する方法を開発した(論文作成中)。この方法を応用することによって、T管近傍で生じるCaスパークを、in vivo心臓において解析することが可能になるものと期待される。2)心筋サルコメアは、中間活性化条件(pCa 6.0)において自発的に振動する(SPOC)。
顎・顔面領域における新しい人工神経管を用いた神経再生に関する研究

本研究は顎骨内での神経再建を目指す研究である。顔面損傷、特に交通事故外傷及び腫瘍摘出等により実質的な顎、顔面組織を欠損した患者は三叉神経末枝の切断や切除により、口腔内の諸組織及び顔面皮膚の感覚が喪失し、様々な痛みや麻痺感、またそれらを伴う不定愁訴に悩まされていた。さらに、知覚のみならず運動機能の障害により発音や嚥下、摂食障害も招来されている。これらを解決するために今回、我々の研究する顎、顔面領域における神経再生実験を行うことにより、従来高等動物では再生が不可能とされてきた中枢神経に最も近接した知覚及び運動神経を再生組織工学の手法で再生させることを目指す。すでに当研究室では大型動物(イヌ)において80mm欠損の坐骨神経再生を成功させており、本研究はそれらを発展させ、さらに微細で繊小な顎、顔面領域での神経再生が可能かどうかを試みるもので、世界的にも他に例を見ない実験である。下顎神経再生実験後、12ヶ月長期経過症例に関して(3例)、神経生理学的検証、病理組織学的検査、サーモグラフィーによる検証を行い、下顎神経再生が良好に起こっていることを確認した。このことにより、ヒトへの臨床応用に関しても問題がないことが確認されたと思われる。人への臨床応用が可能となることにより、事故外傷や脳腫瘍切除等による外科的損傷等で下顎神経麻痺を起こした患者に応用でき、下顎神経麻痺等により招来しているC.R.P.S様症状を緩和し、それらの患者のQ.O.L.向上に貢献できるのではないかと期待される。顎、顔面領域において知覚を司る三叉神経の末枝である下顎神経を、新しく開発した合成高分子+コラーゲン複合材料(人工神経管)と再生組織工学的手法を用い、再生させ得るかを大型動物を用いな動物実験で解明し、口腔外科領域の特殊な条件下で使える新しい神経管を開発した。この部の感覚機能が再生すれば、これまで下顎神終の障害が原因で起きていた神経因性疼痛に対する新たな治療法に結びつき、歯科口腔科領域で大きな臨床的な波及効果があると思われる。1.ビーグル犬の下顎骨頬側部を下顎管走向部上部で一部切除及び若木骨折により骨扉を作成し、下顎神経を露出させた。2.電気生理学的手法を用い、下顎神経走向部の正常な状態を評価した。(歯及び歯肉)を含め評価した。)3.このビーグル犬の下顎神経を約10mm切除し、人工神経管で切除部を連結し、対側を対照側とした。4.またこの実験と同時に、顔面神経、および舌下神経の再生実験も開始した。顔面神経は知覚及び運動をつかさどる混合性の神経で頭蓋底を出て内耳孔より骨中に入り下顎後窩より前方に出て表情筋を支配する。また舌下神経は運動を司る神経で、その走行部位は丙頸動静脈に沿って舌根部よ互舌筋に分布する。これはやはり部位的に非常に難易度の高い部位となるため、既存の人工神経管をさらに強度を増しかつ細い材質が必要となる。このための人工神経管も作製し実験に用いた。これらのイヌを3ヶ月後、6ヶ月後、10ヶ月後、12ヶ月後の4群に分け、電気生理学的に評価した後、病理組織学的検討をして再生の状況を確認した。
精神病者による危険な犯罪の要因と、その予防策についての研究

重大な犯罪を犯した精神分裂病者320例を、事件記録に基づいて調査し、犯行の要因の分析と犯罪予防策についての検討を試みたが、その成果の概要は、次の通りである。1.同居家族がいながら治療を受けられずに犯行に及ぶものが多いが、家族の無理解や患者の拒否が問題となる。2.単身で生活し、強い再犯傾向を示す一群の者達が、強盗と傷害犯及び殺人犯の一部に認められる。3.頻回の逮捕歴を有する危険な患者は、総数の10%程度を占めるが、彼らは、犯罪生活歴の違いによって、“人格主導型"と、“疾病主導型"の二群に分けられる。犯罪予防策を考える場合、後者は現行の医療体制の拡充によって防止可能と思われるのに対し、人格要因が主役を演じる前者についてはそれでは限界がある。4.入院中の犯行例においては、医療者の注意の不足や医療体制の不備によるものが少なくない。頻回の暴力犯罪を繰り返してきた2例については、むしろ、一般の患者と一緒に収容すること自体に問題があると言える。5.不起訴処分を受けて精神病院に収容された事例の多くが、比較的短い期間で退院している。医療上の決定が、再犯危険性をしばしば無視して為されることも、再犯率を高める要因の一つとなっている。6.再犯要因としては、(1)問題行動の反復(前歴、暴力傾向)、(2)治療上の障害(難治性、処遇困難性、易医療中断性)、(3)反社会的人格特徴、(4)環境不全(職・住の不全、家族関係の希薄さ)の八要因が重要である。7.医療の枠組みの中での改善策として、地域に設置する「集中治療病棟」を核とし、これを「地域・ケア施設ネットワ-ク」と「専門病院」とが補う、三層の管理構造を基本とする案を提出した。しかし、犯罪を頻回反復する一部の事例については、医療の枠内での対応には限界があり、保安処分制度の必要性についても指摘した。1.資料の収集と整理昭和55年1年間にわが国で見出された963例の精神障害犯罪者についての資料を整理し、さらに、このうちの、重大犯罪をなした320例の精神分裂病犯罪者については、事件記録の閲覧によって得た、より詳細に亘る資料を整理し、これらのデータをコンピュータに入力した。2.資料の分析上記320例の精神分裂病犯罪者について、罪種ごとに、あるいは犯人や犯行の特色に着目して、順次データを分析し、その成果の一端を日本犯罪学会総会等において発表した。(1)危険な犯罪を反復する事例の分析。過去に4回以上の逮捕歴を有する36例の分析により、発病時期と犯罪歴との関係によって、"疾病先行型"の7例と、"犯罪先行型"の29例を区別し、とくに後者の再犯危険性の強さと、処遇困難性について指摘した。(2)入院中の事例による犯行の分析。精神病院入院中に殺人等の重大犯罪をなした20例(うち院内での犯行12例、院外8例)の分析により、院内での犯行に予測、予防の可能なものが含まれていること、一部に、周到な計画にもとづいて凶悪な犯行をくり返している者がいること、などを明らかにした。3.予後調査患者の人権、医師の守秘義務等の問題もあって、実施に困難が生じており、まだ、比較的少数の事例についての資料しか入手していない。4.処遇制度と処遇施設これまでの調査結果は、精神障害犯罪者に対する新たな処遇制度、処遇施設の必要性を示している。モデルとして、イギリスおよび西ドイツの制度と施設に注目し、資料を収集中である。

しかし、犯罪を頻回反復する一部の事例については、医療の枠内での対応には限界があり、保安処分制度の必要性についても指摘した。本年度は、収集した資料、とくに精神分裂病犯罪者320例について種々の分析を行い、また、文献調査、施設調査などを通して、犯罪予防策について検討した。1.資料の分析精神分裂病犯罪者の罪種別、およびその他種々の特色ある主題別の分析を試み、次のような所見を得た。(1)殺人と放火には、病的体験に直接動機づけられた犯行や、自殺の意図を伴う犯行が多いなど、幾つかの共通点が認められる。(2)強盗と傷害には、逮捕歴を有する単身居住者など、再犯傾向の強い者が多く見られた。(3)無理心中の形をとった拡大自殺未遂例が21例あり、患者を円滑に治療に導入することの必要性とともに、被害者となりうる障害者の子供への配慮の必要性を指摘した。(4)5年間の追跡調査から、この間に再犯を犯していた45例の精神分裂病犯罪者をとりあげ、再犯要因について検討し、問題行動(前歴、暴力傾向)、治療上の障害(難治性、処遇困難性、易医療中断性)、反社会的人格特徴、環境不全(職、住の不全、家族関係の希薄さ)の、4項目8因子が、とくに重要であることを見出した。2.犯罪予防策について医療の枠組みの中での改善を図るのであれば、地域に設置する「集中治療病棟を中核とし、これを「地域ネットワ-ク」と「専門病院」が補う、三層の管理構造を基本とするのが最善と考え、私案を提示した。しかし、危険な犯罪を頻回反復する事例に対しては保安処分の適用が必要と考え、あわせて、西ドイツにおいて近年成果をあげている、行状監督制度の、我が国への導入の必要性をも指摘した。
ヒト体外培養系での胚内部細胞塊分裂の実体検証：より生理的な胚盤胞培養系の基礎検討

哺乳動物胚の体外培養系での連続観察(タイムラプス撮影)にてはじめて確認された胚盤胞形成期における内部細胞塊様の細胞の不自然な分離に関しての検討である。この挙動が凍結融解後の胚に多く認められること(JRD,2016)、ギャップジャンクションの機能阻害下においても認められること(JARG,2015)を明らかにした。さらにこの挙動が認められた胚はその発育能が低い可能性が考えられた。これらの検討によりヒト体外受精の臨床に普遍的に導入されている凍結融解操作が胚発育挙動およびその質に影響を与えていることが明らかになった。さらに、胚発育の連続観察により胚評価の新しい科学的な指標が派生する可能性が考えられた。平成25年度は研究計画書に記入した下記2項目に関して遂行した。ヒト胚盤胞は使用できるものがすくなく、免疫染色においてはマウス胚をもちいた予備実験を十分におこない染色条件等を確認ののちヒトマテリアルをもちいた。1:体外培養後同一胚内に複数認められる形体的胚盤胞の性状の検討体外培養で得られた胚盤胞内に複数存在する形態的内部細胞塊を分離し、内部細胞塊マーカーの発現および内部細胞塊形成に機能する転写因子の発現を検討し、それぞれの細胞塊構成細胞の特質を検討する。また、超微形態観察を行い細胞間のギャップ結合の状況の観察およびそこで機能するタンパクの発現を検討する。(分離はまだ行っていないが胚性マーカーおよびギャップ結合のタンパクの胚盤胞内での局在は明らかになった)2:内部細胞塊分裂時に認められる「ストランド現象」発生時の細胞相互作用の検討胚発育をオンタイム連続観察し、「ストランド現象」が観察された時点で胚を固定し、内部細胞塊が分裂する瞬間での細胞の形態およびそれらの相互作用を1と同様の手法で検討する。(ストランドを呈したヒト胚盤胞を固定染色することに成功した)昨年度はギャップ結合阻害剤添加下で培養されたマウス胚は無添加群と比してタイムラプスビデオ観察下で有為に多くの胚で{ストランド現象}をみとめ、内部細胞塊の分裂した胚も多く認められた。ここまでの知見をまとめて雑誌発表をした。(Togashi et al. Journal of assistedreproduction and genetics, 32 969-976. 2015)本年度はこの「ストランド現象」が凍結融解後の胚に多く認められることに着目し、体外培養系における不自然な胚発育挙動に関しての検討をすすめた。マウス新鮮胚および凍結融解後胚の発育をタイムラプス下にハッチング(孵化)の段階まで観察した。凍結融解後群において胚盤胞期に胞胚腔の著名な縮小をともなう胚全体の収縮運動(強収縮)が約半数に認められ、それが認められた胚は完全孵化への到達率が低下していた。また、強収縮が認められた胚はストランド現象が顕著に認められる傾向があり、それらの胚の細胞運動、電解質移送などに関わる遺伝子発現が低下する傾向も認められた。以上の結果をままとめて雑誌発表をした。(Shimoda Y etal, Journal of Reproduction and Development 22;62:187-93. 2016)哺乳動物胚の体外培養系での連続観察(タイムラプス撮影)にてはじめて確認された胚盤胞形成期における内部細胞塊様の細胞の不自然な分離に関しての検討である。産婦人科学予備的な検討を含めて順調に進行していると考えます。胚盤胞の固定、染色、観察の基礎的な手技に関しては確立しています。あとは、使用可能なヒト胚盤胞の確保が問題になるとおもいますが今後の経過をみて、必要であれば他施設からのマテリアルの使用を、(倫理的に適切な準備ができるよう慎重に配慮しながら)検討する必要性は生じる可能性もあると思います。分担者配分で調査・研究旅費を申請しておったが、実験優先のため、一部支出せず。実験の進捗状況を見て、調査・研究のため、学会等に参加し、消耗品購入を考えている。
セロトニンを取り込む細胞株を用いた抗腫瘍効果促進のための新規治療法の開発

胞巣型横紋筋肉腫は予後不良で、治療抵抗性を示し臨床上苦慮することが多い。胞巣型横紋筋肉腫より細胞株NUTOSを樹立し、セロトニンが特異的に細胞内に取り込まれることを発見した。NUTOS自身のセロトニンレセプターの有無をPCRで検討を行ったところ5HT-1A,5-HT2、5-HT6が存在していた。さらにELISAにてcAMPが上昇していた。またエンドサイトーシスによって細胞内の取り込まれることが明らかになった。NUTOS細胞を用いて、セロトニンと抗癌薬を結合させ、横紋筋肉腫腫瘍細胞内へ特異的に取り込ませる新規DDSを発見した。1受容体を介したセロトニンの作用NUTOS細胞にどのセロトニン受容体(5-HT1から5-HT7)が存在しているかをPCRおよびELISAにて確認した。PCRでは5HT-1AのmRNA蛋白の発現を認めたが、その他の受容体は未検出であった。ELISAにおいてはcAMPが上昇していた。2エンドサイトーシスによるセロトニンの取り込み細胞内の取り込みについて検証するため、エンドサイトーシスをブロックしNUTOS細胞内にセロトニンが取り込まれるか否かを確認したところ、濃度依存的にセロトニンの取り込みがなくなった。このことからエンドサイトーシスで細胞内に取り込まれると示唆される結果が得られた。本研究の目的は、浸潤・増殖能が高く、リンパ節、骨、肺に転移を示すことが多い胞巣型横紋筋肉腫に対し、NUTOS細胞(舌由来胞巣型横紋筋肉腫細胞株)を用いて、セロトニンと抗癌薬を結合させ、横紋筋肉腫腫瘍細胞内へ特異的に取り込ませる新規DDS(Drag Delivary System)の可能性を検討することであった。初年度ではNUTOS自身のセロトニンレセプターの有無をRT-PCRで検討を行ったところ5HT-1Aのみ存在していた。最終年度にはin vivoでのセロトニンの取り込みをマウスで確認する予定であったが、担癌ヌードマウス作成に時間を要しin vivo実験は未達成となった。しかし波及させアポトーシス実験を行ってみたところ、各種口腔由来癌細胞に白血球抗原とNK細胞を作用させると、NK単独で作用させた場合により多くアポトーシスが誘導されるという結果を得た。我々が樹立した横紋筋肉腫細胞株NUTOSはセロトニンを特異的に細胞内に取り込む。これまでセロトニンが細胞内に取り込まれることでDDSとして機能する報告は認めていない。セロトニンは精神面に大きく作用する神経伝達物質のため、取り込み経路や作用に関し今後さらなる検討が必要である。しかしこのDDSを使用する事で治療に難渋している疾患に対し、より良い治療効果が上げられる可能性が示唆され、有用な治療法の1つとして確立するよう今後も検討していく予定である。平成26年度はNUTOS細胞内にセロトニンが取り込まれる過程を確認することであった。前述の様に研究計画のとおり遂行され、NUTOS細胞には5HT-1A受容体が存在し、セロトニンの取り込み過程はエンドサイトーシスによって生じていることが確認できた。しかし予定していたセロトニンの取り込み過程の動画撮影は、現在遂行中であることから上記達成度とした。口腔外科平成26年度は主にNUTOS細胞にセロトニンが取り込まれる仕組みについて研究を行ったが、平成27年度はin vivoを中心とした生体の副反応について行っていく予定である。おおむね計画の通りに行えていることから、当初の研究計画に沿い推進していく予定である。学会発表および論文投稿を予定していたが発表に至らなかったため、当該年度支出予定に達しなかったと考えられる。当該年度到達しなかった学会発表および論文発表分はそのまま次年度にて使用する予定。
光応答型生体内機能性触媒の創製

デンドリティックな配位子にキャップされた硫化カドミウムナノ粒子や分子クラスターの化学的、物理的性質には興味が持たれる。我々は、キャップ配位子として新規水溶性デンドロンチオールを設計し、段階的合成法により、対応する第一(G1)から第三世代(G3)デンドロンチオールの合成に成功した。これらを配位子交換反応に用いた、デンドロンチオール修飾硫化カドミウム分子クラスターの構築を検討した。本研究課題の究極の目的は、半導体CdSナノ粒子の上に幾つかの機能を担う有機化合物を積み上げることで、生体中で動作する光応答型機能性触媒を創製することにある。平成20年度は、最外殻部がカルボン酸であるデンドロンチオラートG1-G3(SNa,Co2Na)の設計・合成を行った。これらは、生体内投与に必要な水溶性を有する化合物である。まず、比較的合成が容易と考えられる、第一世代のデンドリマーG1(S-S,CO2H)の合成を行った。カルボエトキシ基を有するアルコールG1(OH,CO2Et)を四臭化炭素とトリフェニルボスフィンで処理して得たブロミドG1(Br,CO2Et)に、チオ尿素を作用させて塩G1(thiourea,CO2Et)とした後、6%NaOH:水溶液中で加熱した。その結果、チオラートG1,(SNa,CO2Na)へ導くことができた。次に、より困難と予想される第二、第三世代のチオラートG1-G3(SNa,CO2Na)の合成も検討した。世代の伸長はフェノール性水酸基の反応性を利用して行ない、トリオールG1(OH)とプロミドG1(Br,CO2Et)を縮合させアルコールG2(OH,CO2Et)とした。臭素化して得られたプロミドG2(Br,CO2Et)に対しチオ尿素を作用させることで、塩G2-(thiourea,CO2Et)を得た。これを6%NaOH水溶液中で加熱すると、チオラートG2(SNa,CO2Na)へ導くことができた。第三世代では、トリオールG1(OH)とプロミドG2(Br,CO2Et)を縮合させたアルコールG3(OH,CO2Et)に、上記の反応を行なって塩G3(thiourea,CO2Et)とした。加水分解を様々な反応条件で検討した結果、20%KOH水溶液中での加熱が最適条件と判明した。なお、得られたチオラートG1-G3(SNa,CO2Na)を酸性条件下で酸化すると、比較的安定に保存可能なデンドリマージスルフィドG1-G3(S-S,CO2H)へ導けることもわかった。今後、金属クラスターならびに半導体ナノ粒子へのチオラートG1-G3(SNa,CO2Na)の自己組織化を検討し、デとドロン被覆ナノ粒子の光物性解明へと発展させる。本研究の究極の目的は、半導体CdSナノ粒子の上に幾つかの機能を担う有機化合物を積み上げることで、生体中で動作する光駆動型触媒を創製することにある。上記生体内触媒を創製するためには、多光子捕捉能を持つデンドリマー(デンドロン)の供給が不可欠である。また、このデンドリマー(デンドロン)には、CdS粒子に自己組織化可能な部位と、生体内投与に必要な水溶性が含有されなければならない。このような観点から設計したデンドリマー(デンドロン)の合成を行ない、これまでに第一世代から第二世代のデンドロンチオールG1G2(SH,R=H)、ならびにデンドリマージスルフィドG1G2(SS,R=H)の合成法を確立している。しかしながら第三世代では、G3(SH,R=H)への加水分解、G3(SS,R=H)への酸化反応ともに不十分な結果となってしまい、それらの単離・精製には至っていなかった。そこで今年度はG1G2の効率的供給を行うとともに、上記加水分解・酸化反応の最適条件の検討を種々行なった。その結果,前者では20%KOHを用いての12時間加熱環流、後者ではDMF中ヨウ素10当量・室温1日の条件が最適であることがわかった。さらに、トリオールG1(30H)とブロミドG3(Br,R=Et)を炭酸カリウム存在下で加熱環流することで世代を伸長させ、第四世代G4(OH,R=Et)を合成した。得られたデンドリマーG1(SS,R=H)、デンドロンG1(SH,R=H)、G2(SH,R=H)の水溶性について評価したところ、蒸留水に対してはいずれも不溶であった。一方、5%炭酸水素ナトリウム水溶液に対しては、比較的高い水溶性を示した[G1(SS,R=H)):>10g/L、G1(SH,R=H):>10g/L、G2(SH,R=H):4g/L]。

このことは、ターゲット分子を構築する際にデンドロン部位をカルボン酸塩として用いることで、生体内投与が可能になることを示唆している。また、末端にイオン基が結合した分岐数nのデンドリマーは2^nの価数の超多価イオンであり、水溶液中での拡散、泳動などの輸送過程に興味が持たれる。これらの電離度について、基礎的な検討を行った。今後、固体表面、金属クラスターならびに半導体ナノ粒子へのチオラートGn(SNa,CO_2Na)の自己組織化を検討し、この複合系の電荷分離光機能、光補修機能についての検討を行う。本研究の目的は、半導体CdSナノ粒子の上に幾つかの機能を担う有機化合物を積み上げることで、生体中で動作する光駆動型触媒を創製することにある。上記生体内触媒を創製するためには、多光子捕捉能を持ち、CdS粒子に自己組織化可能な部位と生体内投与に必要な水溶性が含有されたデンドリマー(デンドロン)の供給が不可欠である。これまでに、第一世代から第三世代のデンドリマージスルフィドG1G3(SS,R=H)の合成法を確立している。CdSナノ粒子上に機能性有機物を自己組織化させるには、デンドロンチオールG1G3(SH,R=H)として効率的に供給されなければならない。そこで本年度は、デンドリマージスルフィドG1G3(SS,R=H)合成の各段階における最適条件の検討を行なうとともに、チオールの単離・精製法の確立を目指した。その結果、慎重な脱酸素条件下の加水分解において、デンドロンチオールG1G3(SH,R=H)が単離できることを見いだした。続いて、得られたデンドロンチオールのCdSに対する配位能力を評価した。分子量が規定されているCdS分子クラスターCd_<10>S_4(SPh)_<12>の配位子交換反応を利用することで、ベンジルメルカプタン修飾体Cd_<10>S_4(SCH_2Ph)_<12>の合成に成功した。本合成法はベンジルメルカプタン系CdSクラスターを構築する一般法であり、デンドロンチオールG1G3(SH,R=H)に対しても適応可能である。今後、本法を用いて固体表面、金属クラスターならびに半導体ナノ粒子複合系を構築し、これらの電荷分離光機能や光補修機能についての検討を行う。
旧韓国〜植民地朝鮮における「内地人」教育の実証的研究

前年度に引き続いて「内地人」学校の事例研究を重ね,都合11校(小学校3,中学校4,高等女学校・実業学校・師範学校・専門学校各1校)となった。資料不足のため,朝鮮における高等女学校の最高峰であった京城第一高等女学校を欠いたことは残念であったが,小学校から専門学校まで,代表的な「内地人」学校をほぼ網羅することができた。事例研究が一応まとまるたびに,これを当該校の卒業生(「連翹麹の会<旧京城公立小学校の会>」,「ニュー釜山会<旧釜山公立小学校の会>」の主要メンバー)に送付し,叱正を願った。その結果,表現を修正したことも少なくない。事例研究の蓄積を踏まえて,旧韓国時代から植民地期にかけての「内地人」学校の展開を概括し,これを研究の総論として位置づけた。報告書は,朝鮮における「内地人」教育史の集大成として,これまでの研究史の空白を埋めるものとなった。その構成は次のとおりである。第I部概説第1章旧韓国における居留邦人の教育第2章植民地朝鮮の「内地人」教育第II部「内地人」学校の事例研究第3章釜山第一小学校,第4章京城日出小学校,第5章釜山第六小学校,第6章京城中学校,第7章釜山中学校,第8章龍山中学校,第9章大田中学校,第10章平壌高等女学校,第11章釜山第一商業学校,第12章京城師範学校,第13章京城高等商業学校前年度に引き続いて「内地人」学校の事例研究を重ね,都合11校(小学校3,中学校4,高等女学校・実業学校・師範学校・専門学校各1校)となった。第I部概説第1章旧韓国における居留邦人の教育第2章植民地朝鮮の「内地人」教育第II部「内地人」学校の事例研究第3章釜山第一小学校,第4章京城日出小学校,第5章釜山第六小学校,第6章京城中学校,第7章釜山中学校,第8章龍山中学校,第9章大田中学校,第10章平壌高等女学校,第11章釜山第一商業学校,第12章京城師範学校,第13章京城高等商業学校福岡市内在住のかつての引揚者数人と会ううちに「連翹の会(旧京城公立小学校の会)」と「ニュー釜山会(旧釜山公立小学校の会)」の存在を知るに至り、両会の組織を通じて延べ30人以上と面接あるいは電話インタビューをすることができた。同時に、彼らが所有する京城・釜山「内地人」諸学校の同窓会誌や記念文集等を拝借し、コピーして資料を収集した。これと並行して、ソウル大学図書館で192040年代の『京城日報』を1週間にわたり閲覧、釜山光一初等学校(釜山第一・第七小学校の後身)では日本統治時代の遺物を集めた資料館を見学するなど、植民地朝鮮の教育・文化一般に関する実感の伴った基礎知識の集積に努めた。これを基に、「内地人」教育の全体像に接近する第一歩として、代表的な「内地人」学校の事例研究に着手した。「内地人」小学校の核であった京城日出小学校に関してはすでに論文を完成、名門中学として有名な京城中学校・龍山中学校、および海外日本人学校として最古の伝統を誇る釜山第一小学校についても、なんとか論文をまとめられるだけの資料のストックができた。旧「内地人」学校関係の印刷物(同窓会誌・記念文集など)の収集とインタビューを継続しながら「内地人」学校のケース・スタディーを積み重ねた。平成14年度は、京城日出小学校・京城中学校・龍山中学校といずれも京城(現ソウル)所在学校についてまとめたが、15年度は、地域的に釜山・大田・平壌へ、学校種別としても実業学校や専門学校へと範囲を広げた。具体的なケース・スタディー対象を挙げれば釜山第一小学校・釜山第六小学校・釜山中学校・大田中学校・平壌高等女学校・釜山第一商業学校・京城高等商業学校である。これによって初等教育から高等教育まで、小学校・中学校・高等女学校・実業学校・専門学校と代表的な「内地人」学校が一応揃い、各論が充実したということができる。内鮮別学であった小学校・中学校・高等女学校と内鮮共学をたてまえとした実業学校・専門学校の実態を比較することにより、植民地朝鮮の社会における「内地人」学校の位置づけが次第に明らかになってきた。最終(平成16)年度は、これを基礎として総論(全体像の概観)をまとめたい。

資料不足のため,朝鮮における高等女学校の最高峰であった京城第一高等女学校を欠いたことは残念であったが,小学校から専門学校まで,代表的な「内地人」学校をほぼ網羅することができた。事例研究が一応まとまるたびに,これを当該校の卒業生(「連翹の会<旧京城公立小学校の会>」,「ニュー釜山会<旧釜山公立小学校の会>」の主要メンバー)に送付し,叱正を願った。その結果,表現を修正したことも少なくない。事例研究の蓄積を踏まえて,旧韓国時代から植民地期にかけての「内地人」学校の展開を概括し,これを研究の総論として位置づけた。報告書は,朝鮮における「内地人」教育史の集大成として,これまでの研究史の空白を埋めるものとなった。その構成は次のとおりである。第I部概説第1章旧韓国における居留邦人の教育第2章植民地朝鮮の「内地人」教育第II部「内地人」学校の事例研究第3章釜山第一小学校,第4章京城日出小学校,第5章釜山第六小学校,第6章京城中学校,第7章釜山中学校,第8章龍山中学校,第9章大田中学校,第10章平壌高等女学校,第11章釜山第一商業学校,第12章京城師範学校,第13章京城高等商業学校