hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
女性農林漁業者の社会参画をめぐる地域の「壁」に関する経験的研究

高知調査では、高知県農政部及び6次化支援のNPO法人への聞き取りによって、高知県内の農村女性リーダーネットワークの状況や6次産業化の現状、林業女子会の定例会への参加及び役員女性への聞き取りによって、林業の現場に女性が参入する上での課題、農村女性リーダー及び農業女子プロジェクト参加女性への聞き取りによって、地域社会とのかかわり方や経営のあり方を把握した。沖縄県八重山調査では、世代の異なる女性農業者への聞きとりによって、家族経営内での役割分担や地域とのかかわり方、とりわけ与那国においては自衛隊基地反対運動後の住民の動向・意識について把握した。北海道調査では、道庁農政部、北海道農業会議での聞きとりによって北海道農業の概要、女性農業委員の就任状況、きたひとネットフォーラムへの参加や空知地域の女性地方議員への聞き取りによって、女性農業者の政治参画について把握した。長野調査では、松本市を中心に女性農業者の動向、NAGANO農業女子の集まりに参加し、新規参入した次世代農業者の活動指向について把握した。以上の調査研究によって、研究課題に迫る方法論の検討、トピックスの選定、調査対象の開拓ができ、次年度に実施すべき調査研究の計画につながった。「今後の研究の推進方策」に記したように、計画時においては予期していなかった事態として、とりわけ質問紙調査の対象予定であった組織・団体を対象にできないことが明らかとなったが、北海道農業委員約1000人を対象とする質問紙調査の実施見込みがたち、研究課題の解明につながる統計解析が可能となった。また、予備調査的位置づけにあったフィールドにおいて、北海道きたひとネット関係者、北海道農業会議、各県農業関連部署、農協をはじめ、インフォーマントからのスノーボール方式により、フィールド調査におけるインタビュー調査対象者を適切に開拓できた。とくに高知県においては林業女子会にアプローチでき、男性優位の産業の現場における社会参画以前の女性の動向を探ることが可能となった。さらに、研究年度が時宜にかなったため、地域イッシューへの関与という方法論の有効性について検討する機会を得ることができた。与那国における自衛隊基地反対運動のその後や、石垣市における自衛隊基地反対運動及び市議会議員等選挙運動への女性の参加のあり方、北海道等の地方議員の活動のあり方、統一地方選挙への女性の立候補等を対象とすることが、有効な方法論であるという目処がたち、研究課題に迫る可能性を高めることとなった。1年目から本調査に入ることができたフィールドがあったことから、問いを明らかにするための適切な方法論は何か、どこを焦点化するかという課題が各班から寄せられている。各班の議論、研究会における議論によって、2020年度前半期には、方法論の確立、調査ポイントの明確化を目指す。フィールド調査においては、フィールドとして岡山県の女性の地域おこし協力隊が入っている地域を予定していたが、インフォーマントの状況により調査が困難になると見込まれたため、移住した新規就農女性を含む農協女性部・フレッシュミズ部会、おかやま農業女子で代替することとした。質問紙調査については、当初計画にあがっていた調査対象である北海道の「きたひとネット」を調査対象からはずすこととした。
触覚センサによる義歯床下圧測定とNaF-PETを用いた床下骨代謝動態に関する研究

有床義歯装着に伴う力学的負荷による義歯床下骨組織の経時的な骨代謝回転の様相をNaF-PET/CTを用いて検討した.下顎遊離端欠損を有する被験者2名に実験義歯を装着し,装着前後に3 4回PET撮像を行い,義歯床下骨のSUVとCT値の経時的変化を検討した.両被験者ともCT値に変化はみられなかったが, SUVは装着4 6週まで増加し, 13週後に下降に転じた.このことは,従来のX線検査などの研究手法では捉えられなかった義歯装着直後の床下骨組織の機能的変化をNaF-PETにより捉える事が出来たことを示している.また,義歯装着に伴う力学的負荷により,義歯床下骨組織の代謝回転が亢進しリモデリングが積極的に進むことが示唆された.有床義歯装着に伴う力学的負荷による義歯床下骨組織の経時的な骨代謝回転の様相をNaF-PET/CTを用いて検討した.下顎遊離端欠損を有する被験者2名に実験義歯を装着し,装着前後に3 4回PET撮像を行い,義歯床下骨のSUVとCT値の経時的変化を検討した.両被験者ともCT値に変化はみられなかったが, SUVは装着4 6週まで増加し, 13週後に下降に転じた.このことは,従来のX線検査などの研究手法では捉えられなかった義歯装着直後の床下骨組織の機能的変化をNaF-PETにより捉える事が出来たことを示している.また,義歯装着に伴う力学的負荷により,義歯床下骨組織の代謝回転が亢進しリモデリングが積極的に進むことが示唆された.本研究は,義歯床下圧力動態をヒトにおいて生体内測定するとともに,義歯床下骨組織の骨代謝動態を分子イメージング的方法;NaF/PET画像解析により定量評価することで,その両者の関連を検索し,義歯床下における力と顎堤骨組織の反応の詳細を明らかにすることを目的として行い,以下の結果および成果を得た.(1)PETの撮像条件:通常の全身PET撮像はNaF5.0mCiを用い2030分の撮像時間を要するが,顎骨部のみで撮像時間を20分にまで延長することにより,NaF1.0mCiの投与で,鮮明な画像を得た.この方法により1回の撮像における被ばく量を抑え,同一被験者において経時的に複数回撮像することが可能となった(2)骨代謝の経時的測定:下顎にKennedy I級の遊離端欠損(抜歯後1年以上経過)を有する被験者3名に,実験用遊離端義歯を適用し,義歯装着前,および装着後経時的に顎骨部のPET/CT撮像を行った.その結果,抜歯後同部に義歯装着経験の無い2名では,全13週間の実験期間を通して,CT値の変化はみられなかったが,SUV値は,実験義歯装着4から6週間後まで経時的に上昇し,13週後では下降に転じた.これらのことから,義歯装着により,義歯床下骨組織の骨代謝回転が亢進し,リモデリングが積極的に進むことが示唆された.一方,抜歯直後から同部の義歯経験のある被験者1名では,実験義歯装着後,CT値・SUV値共に変化は認められなかった.これらの結果から,抜歯後の有床義歯補綴経験の有無により,実験義歯装着後の床下骨代謝動態が異なるものと推察される.本研究は,義歯床下圧力動態をヒトにおいて生体内測定するとともに,義歯床下骨組織の骨代謝動態を分子イメージング的方法; NaF/PET画像解析により定量評価することで,その両者の関連を検索し,義歯床下における力と顎堤骨組織の反応の詳細を明らかにすることを目的として行い,以下の結果および成果を得た.1. PETの撮像条件:通常の全身PET撮像はNaF5.0mCiを用い2030分の撮像時間を要するが,顎骨部のみで撮像時間を20分にまで延長することにより,NaF1.0mCiの投与で,鮮明な画像を得た.この方法により1回の撮像における被ばく量を抑え,同一被験者において経時的に複数回撮像することが可能となった2.骨代謝の経時的測定:下顎にKennedy I級の遊離端欠損(抜歯後1年以上経過)を有する被験者3名に,実験用遊離端義歯を適用し,義歯装着前,および装着後経時的に顎骨部のPET/CT撮像を行った.その結果,抜歯後同部に義歯装着経験の無い2名では,全13週間の実験期間を通して,CT値の変化はみられなかったが,SUV値は,実験義歯装着4から6週間後まで経時的に上昇し,13週後では下降に転じた.これらのことから,義歯装着により,義歯床下骨組織の骨代謝回転が亢進し,リモデリングが積極的に進むことが示唆された.一方,抜歯直後から同部の義歯経験のある被験者1名では,実験義歯装着後,CT値・SUV値共に変化は認められなかった.これらの結果から,抜歯後の有床義歯補綴経験の有無により,実験義歯装着後の床下骨代謝動態が異なるものと推察される.
電気牧柵用避雷器の開発

山間部にある田畑を取り囲む電気柵は,周囲に落雷すると強い誘導雷サージを受け故障しやすいため,これに用いる避雷器を開発した.避雷器はギャップ放電式(高い電圧が加わったら,電極間で放電して大地に電流を逃がす方法)とした.しかしながら放電式避雷器では,高い電圧がかかってから放電が開始するまでにわずかな時間のずれが生じ,これにより電気柵の機器へサージが流入することがある.本研究では,避雷器にコイルを付加することでこの問題を解決した.このコイルには,独自に開発した磁性材料を用いることで,インダクタンスをあまり大きくすることなく,サージの流入を遅らせることができ,機器の故障率を低減することが出来る.【目的】雷サージによる電気柵の電源装置の故障率を低減するために,電気柵に誰でも簡単に設置可能なように工夫した避雷器を試作する.【方法】誘導雷サージの周波数スペクトルには個体差はあるものの,おおむね直流から数十kHzに分布し,それより高い成分は周波数と共に急激に減衰することが分かっている.そのため,約30kHz以下の周波数成分を除去できれば,サージの波高峻度を緩和することになる.こうしてサージの高い周波数分を取り除いた後,ギャップ式避雷器に組み合わせれば,応答時間の遅れによる牧柵器へのサージ流入を押さえることが出来ると考えた.このため,低い周波数で高透磁率,高い周波数で低透磁率となるコイル材を作製する.このような数10kHz以下での損失が大きくなるような材料の研究は,ほとんどなされていないため,本研究では低い周波数で損失が大きくなるような磁性材料の開発を行う.【実施内容】磁気損失が大きくなるようにニッケルと鉄をベースにし,ホウ素を添加した磁性材料の試作を行った.金属磁性材料は,酸化すると磁気的特性が大きく損なわれるため,これまでは水素4%の還元雰囲気中で焼成していたが,やはり酸化の影響は免れない.また,直径2cmまでのコアしか焼成できないため,より高品質で大径の材料の作製が必要であった.そこではじめに5cm程度の大径試料の真空焼結炉による作製と,評価を行った.平成27年10月にこのための真空焼結炉を導入し,大径試料の試作を開始した.平成28年3月にはこの焼結炉で作製した材料の磁気損失測定を大分県産業技術センターにて実施し,これまでと同様の損失を有する材料が作製できたことを確認した.真空焼結炉の導入に際して競争入札の手続きが必要となり,装置導入が平成27年10月末と遅くなった.また,平成28年4月の熊本地震で被災し,装置の点検が必要となった.これを記入している5月中旬時点も余震が続いているため,実験が中断されている.雷サージの被害,特に田畑を害獣より守るための電気柵の被害が増加している現状から,電気柵用の避雷器を開発した.避雷器は大容量のサージが侵入してくることを想定して,放電ギャップ式とした.放電ギャップ式避雷器は,サージ侵入から放電開始までにタイムラグが生じるため,サージの避雷率が低下する.そこで,サージの峻度を緩和する目的で,磁気損失の多い磁性材料を用いたコイルを付加することでこの問題を解決した.始めに磁気損失の多い磁性材料の作製を行った.ニッケルと鉄の合金は,透磁率と飽和磁束密度が大きく,損失の少ない磁性材料として知られている.これににホウ素を添加することで,透磁率と飽和磁束密度は大きいままで,磁気損失が大きくなることを見出した.この材料は空気中で焼結すると酸化し,脆くなるため,穴あけなどの機械加工がしにくいという問題がある.そのため今回新たに真空焼結炉を導入し,真空中で焼結することで,機械加工可能な材料が安定して作製できることになった.作製した磁性体の磁気損失は,大分県産業科学技術センターにて測定し,空気中で焼結した場合と同等の磁気損失を有することを確認した.次に放電ギャップ式避雷器を試作した.ステンレス製球体と針状電極で0.5mmのギャップ放電器を作製し,放電の可否並びに高損失磁性体を用いたコイルを付加した場合の放電波形の変化を観測した.雷サージ試験は長崎県工業技術センターにて実施した.比較のために低損失の磁性体を用いたコイルを用意し,両者の放電波形を比較したところ,高損失のコイルを付加した場合,20μs程度の放電遅れが生じることが分かった.現在は本装置の実際の避雷器としての効果を確認するため,実際に電気柵に取り付けて雷被害の低減か可能かどうかを検討中である.これには実際に雷害が発生してみないと効果の有無は確認出来ないため,今後長期にわたる検証を行っていく予定である.山間部にある田畑を取り囲む電気柵は,周囲に落雷すると強い誘導雷サージを受け故障しやすいため,これに用いる避雷器を開発した.避雷器はギャップ放電式(高い電圧が加わったら,電極間で放電して大地に電流を逃がす方法)とした.しかしながら放電式避雷器では,高い電圧がかかってから放電が開始するまでにわずかな時間のずれが生じ,これにより電気柵の機器へサージが流入することがある.本研究では,避雷器にコイルを付加することでこの問題を解決した.このコイルには,独自に開発した磁性材料を用いることで,インダクタンスをあまり大きくすることなく,サージの流入を遅らせることができ,機器の故障率を低減することが出来る.

余震がある程度治まり,真空電気炉の点検と転倒防止措置により安全が確認され次第実験を再開する.当初予定したギャップ式避雷器の試作を平行して行い,最低でもサージ試験による動作確認までは平成28年度内に実施したい.近隣には被災した農家も多いので,申請段階で平成28年度に実施を予定していた実地試験は,年度内の実施は難しいと思われる.電気工学差額は僅かであるが,28年度で研究期間が終了するため,27年度中に1円単位まで使い切ることはしなかった.平成28年度が終了年となるため,予算の計画的な使用を確実に行います.
ERMタンパク質によるリンパ球の動態制御機構の解明

リンパ球はリンパ節や脾臓などの二次リンパ組織を循環し、そこで抗原情報を受容し免疫応答を開始する。リンパ球のリンパ臓器への移入(ホーミング)のメカニズムの理解に比較して、リンパ臓器からの移出については不明な点が多い。私たちは最近、ERMタンパク質ファミリーメンバーのmoesinを欠損するマウスでは、末梢のリンパ球が著明に減少するのに対し脾臓は腫大し濾胞リンパ球が増加すること、養子移入したmoesin欠損リンパ球は時間の経過とともに脾臓に貯留することを見いだした。したがって、moesinがリンパ球の末梢での恒常性の維持やリンパ臓器を介するトラフィッキングに関与することが示唆される。本年度は、moesin欠損マウスの胸腺では、T細胞の産生や分化には変化はないが成熟T細胞が貯留することを見いだした。このことから、moesinがT細胞の胸腺からの移出を制御することが示唆された。また、B細胞は骨髄で産生され、未熟B細胞の段階で骨髄から脾臓に移動し、そこで成熟B細胞となるが、moesin欠損マウスでは、未熟B細胞の骨髄実質から類洞への移動が障害されていることを示した。さらに、moesin欠損リンパ球は、脾臓だけでなくリンパ節からの移出も遅延することを見いだした。胸腺やリンパ節、骨髄からのリンパ球の移出は、sphingosine 1-phosphate(S1P)とその受容体S1PR1により制御されることがこれまでに報告されている。野生型リンパ球をS1Pで刺激すると著明な細胞膜ラッフリングを認めたが、moesin欠損リンパ球では、S1P刺激による細胞や膜の形態変化がほぼ欠如していた。このことから、moesinを介するシグナルがリンパ球のリンパ臓器からの移出に重要な役割をもつことが示唆された。リンパ球のリンパ節を介する移出入のメカニズムの理解に比較して、脾臓を介する移出入については不明な点が多い。私たちは最近、ERMタンパク質ファミリーメンバーのmoesinを欠損するマウスでは末梢のリンパ球が著明に減少するのに対し脾臓は腫大し濾胞リンパ球が増加すること、養子移入したmoesin欠損リンパ球は時間の経過とともに脾臓に貯留することを見いだした。したがって、moesinがリンパ球の末梢での恒常性の維持やリンパ臓器を介するトラフィキングに関与することが示唆される。リンパ球のリンパ臓器を介する移出入は、ケモカインや脂質メディエーターにより制御されることが知られている。そこで、種々のケモカインや脂質メディエーターのなかで、moesin欠損リンパ球において特異的にシグナルが変化するものを、ケモタキシスを指標に探索した。その結果、moesin欠損リンパ球ではCCL21, CXCL12, CXCL13などの恒常的ケモカインに対する反応は野生型と同様であったが、特定の脂質メディエーターに対するケモタキシスが亢進することを見いだした。また、これらのメディエーターの受容体はGタンパク質共役受容体であるが、moesinが受容体の細胞内局在を制御する可能性が示唆された。さらに、moesin欠損リンパ球は末梢での維持に異常があることから、moesinがリンパ球の末梢での恒常性維持に重要な役割を果たすことが示された。
酵母人工染色体を用射た遺伝性早期老化症の研究

平成元年度は酵母人工染色体を用いた遺伝性早期老化症とりわけコケイン症侯群とアルツハイマ-病、ダウン症に関わる21番ヒト染色体に関する基礎研究を行なった。(1)遺伝性早期老化症の一つコケイン症侯群の脳病理と細胞保存コケイン症侯群兄弟例を経験した。その線維芽細胞を培養株として樹立。この2例はUV感受性、コロニ-形成能、RNA合成回復能および標準各型との細胞融合相補性テストによりA群と診断した。このうち15才でくも膜下出血をおこし、手術約1年後、肺炎にて死亡した兄の脳腫瘍を検討させて頂けた。広範な皮質萎縮、脳室拡大あるも血管組織には特変なし。大脳後郎の皮質、髄質とも強いグリオ-シスを示し、神経細胞と軸索の著しい減少があった。小脳では顕粒層プルキンエ細胞が減少。ダウン症・アルツハイマ-病と異なりアミロイド、タウ蛋白蓄積はなかった。一般に16才では認めない老人脳と共通するCaやFeの沈着を認めた。線維芽細胞はDNA研究のため凍結保存した。(2)神経伝達物質;サブスタンスKのレセプタ-遺伝子座位と巨大DNAの解析牛cDNAサブスタンスKレセプタ-遺伝子(pSKR56)からヒトゲノム同遺伝子断片をクロ-ニングした。(16B6)この断片を用いin situ hybridizationにて遺伝子座位を決定した。その結果ヒト1番染色体短腕の特定部位にオ-トラジオグラフイ-の銀粒子集中をみた。更にヒトリンパ球DNAのNotI断片をパルスフィリルド電気泳動にかけ、16B6断片と相補性をもつ断片が2.0Mb以上の巨大DNAであることを示した。現在この近傍に座位を推定された遺伝子群もあり、相互の位置関係も解析できよう。また、21番染色体由来の酵母人工染色体クロ-ンも共同研究で得られており、このマッピングなど今後も継続を行う。既に21q21由来1ケ確認した。
口腔癌におけるdynamic MRIを用いたリンパ節転移の評価

シーケンスの改良を行い、顎顔面領域に発生した病変撮影した。dynamic MRIにより撮像された、連続画像から関心領域の造影効果を既設のワークステーション上で処理し、経時的な造影効果をプロットしたTime Contrast Index Curve(CI curve)を作成した。作成したCI curveの各々パラメーター(最大値,最大増加値,最大値に達する時間等)を求め、比較検討した結果、唾液腺病変については診断に有用であることが示されたので、学術雑誌Oral Oncology(in press)に報告した。リンパ節におけるCI curveには患者間の差が大きく絶対的評価が困難である傾向を得た。しかし、同一患者の原発巣と転移リンパ節のCI curveに類似傾向があり、転移が無いリンパ節とは異なる傾向が示された。病理組織学および免疫組織学的検討(此内浩信、浅海淳一)外科的に摘出された症例については、病理標本から所属リンパ節転移の有無を評価し、上記dynamic MRIデーターと比較検討し、上記傾向が示されたが症例が少ないため統計学的検討に至っていない。また、VEGF、PCNA、MB-1などの増殖因子の免疫学的検討も行っているが、同様に統計学的検討に至っていない。引き続き調査していく予定である。エコーによる所属リンパ節転移の有無を評価(近藤誠二)頚部郭清が行われなかった症例や経過観察症例にはドップラーエコーを行い、新たな転移の有無を評価しているが、こちらも統計学的検討に必要な症例数を得ていない。静脈から注入された造影剤の到達時間が患者ごとに異なるため、造影剤1mlを用いて到達時間を事前に計ったほうがより正確なデータが取れるため、健常ボランティア6人で検討した。また、その造影剤1mlによる造影効果が後の造影検査に影響を与えないかをあわせて検討し、影響を与えない結果を得、Eur J Radiol.に報告した(in press)。今回は広範囲の高速撮影シーケンスを作成することが必要であるが、我々が持っている既存の方法で、範囲の比較的狭い顎骨内病変を対象にcontrast enhanced-MRIの有用性について検討し、造影検査の有用性が認められたのでOral Oncologyに報告した(in press)。広範囲の高速撮影シーケンスをいくつか作成したが、範囲、速度、解像度の点でどれも完全に満足いくものが得られておらず、さらに検討中である。dynamic MRIのデータ処理と解析(此内浩信、久富美紀、柳文修)dynamic MRIデータと病理組織学・免疫組織学データの比較検討(此内浩信、浅海淳一、久富美紀)dynamic MRIは病変内の血行状態を反映しているため、病理標本上で病変内の血管数を計測した。計測には今回購入したデジタル顕微鏡システムを用いた。比較結果は検討中のdynamic MRIのデータと正の相関傾向を得ているが、適切なシーケンスが決定していないため、来年度に最終データを出す予定である。

また、VEGF、PCNA、MB-1などの増殖因子の免疫学的検討も行っているが、同様に統計学的検討に至っていない。引き続き調査していく予定である。エコーによる所属リンパ節転移の有無を評価(近藤誠二)頚部郭清が行われなかった症例や経過観察症例にはドップラーエコーを行い、新たな転移の有無を評価しているが、こちらも統計学的検討に必要な症例数を得ていない。
パーキンソン病における自然免疫を介したグリア細胞の神経毒性分子機構の解明

神経変性疾患における異常アストロサイトによる神経変性分子機構の解明を目的とし、2016年度はパーキンソン病患者由来アストロサイト様細胞(iA細胞)を用い、自然免疫系の関与に着目して以下の研究を遂行した。(I)PARK2変異iA細胞のミトコンドリア動態解析対照およびPARK2変異神経幹細胞よりiA細胞を誘導し、遺伝子発現解析を行った。その結果、PARK2変異iA細胞において炎症に関連するGO termが多く濃縮された。さらに、免疫細胞化学により、神経幹細胞におけるミトコンドリア長に差は見られなかった一方で、iA細胞誘導後のPARK2変異細胞においてのみ、ミトコンドリアの断片化が明らかとなった。(II)PARK2変異iA細胞における自然免疫系の活性化次に、免疫細胞化学によりミトコンドリアおよびインフラマソーム構成タンパクの局在について検討した結果、PARK2変異iA細胞においてインフラマソームの活性化を示唆する像が観察された(III)PARK2ノックアウトiA細胞におけるミトコンドリア動態と自然免疫系の活性化パーキンソン病患者由来iA細胞の表現型がPARK2変異によるものであることを確認するため、CRISPR/Cas9系を用い対照株PARK2遺伝子を破壊し、免疫細胞化学によりミトコンドリア動態および自然免疫系活性の解析を行った。その結果、PARK2ノックアウト株由来iA細胞においても(II)と同様の結果が得られた。その他、ヒトiPS細胞からの高効率神経分化誘導法の開発を行い、iA細胞との共培養のための技術基盤を整備した。翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。
内在的な幾何構造の特異性とそのローレンツ時空の曲面・超曲面への応用

全平面で定義されたグラフで表されるような極小曲面は平面に限ることを主張するBernsteinの定理は,現代の微分幾何学の基礎をなす結果の1つである.しかし,ミンコフスキー時空の混合型曲面の場合にはBernstein型の定理が成り立たないような反例が存在することが知られている.とくに,混合型曲面の空間的領域と時間的領域の境界の点,光的点は誘導計量の特異点とみなされるが,平均曲率零とは限らない一般の混合型曲面の光的点の研究はあまりされていない.本研究の目的は,特異点を持つ曲面や混合型曲面を,計量の特異点という観点から統一的に取り扱うことができるような理論を確立することである.全平面で定義されたグラフで表されるような極小曲面は平面に限ることを主張するBernsteinの定理は,現代の微分幾何学の基礎をなす結果の1つである.しかし,ミンコフスキー時空の混合型曲面の場合にはBernstein型の定理が成り立たないような反例が存在することが知られている.とくに,混合型曲面の空間的領域と時間的領域の境界の点,光的点は誘導計量の特異点とみなされるが,平均曲率零とは限らない一般の混合型曲面の光的点の研究はあまりされていない.本研究の目的は,特異点を持つ曲面や混合型曲面を,計量の特異点という観点から統一的に取り扱うことができるような理論を確立することである.
ユビキチン系による選択的基質識別メカニズム

ユビキチン修飾系は基質タンパク質を選択的に識別してユビキチンを付加することで、タンパク質の機能を制御する。本研究ではユビキチンリガーゼのユビキチン化した基質タンパク質の遊離メカニズム、新生不良タンパク質のプロテアソームへの運搬機構、新規ユビキチン鎖による細胞制御機構について研究を進め、ユビキチン修飾系によるタンパク質機能制御機構の解明を進めた。ユビキチンープロテアソーム系は、時空間的な特異性を持って基質タンパク質を識別して次々ユビキチンを付加してポリユビキチン鎖を形成し、形成されたポリユビキチン鎖がプロテアソームの識別シグナルとなって、基質タンパク質を分解に至らしめる。本研究では基質ユビキチン化からプロテアソームによる分解へと至る経路の解析を進めている。ユビキチン修飾系は、E1/E2/E3(ユビキチンリガーゼ)の3種の酵素群の働きで、E3が識別する標的タンパク質にユビキチンを結合させることによって、修飾したタンパク質の機能を制御する翻訳後修飾系であり、数多くの生命現象を制御していることが知られている。しかしながら、E3の活性および機能制御メカニズムに関しては未解決な問題点が数多く存在している。本研究では我々が樹立した、精製タンパク質を用いたガン抑制遺伝子産物pVHLを含んだcullin型の多サブユニットRING-E3(CRL)である、VBC-Cu12による低酸素応答性転写因子HIF-2αのユビキチン化反応のin vitro完全再構成系をモデル系としてE3の活性制御機構を解析した。まず、Nedd8修飾系はCRLの活性増強作用することから、HIF-2αのin vitroユビキチン化反応系でそのメカニズムを検索したところ、Cu12のNedd8化は基質に結合するポリユビキチン鎖が伸長することが明らかとなった。さらに、COP9/シグナロソーム(CSN)は脱Nedd8化活性を有する複合体であるが、CRLの活性を増強させることが知られている。そこで、そのメカニズムを検索したところ、CSNはユビキチン化された基質のE3からの解離を促進することで、ユビキチン化されるHIF-2α量の増加させると考えられる結果を得た。そこで、SiRNAでCSN2、CSN5の発現を抑制したHeLa細胞においては対照に比してVBC-Cu12に結合するユビキチン化HIF-αの量が増加したことから、CSNは細胞内においてもユビキチン化された基質とCRLの解離を促進していると考えられ、CSNがユビキチン化された基質タンパク質をCRLから解離させる作用を有することで、CRLを活性化させることが明らかとなった。ユビキチン修飾系は,E1/E2/E3(ユビキチンリガーゼ)の3種の酵素群の働きで,E3が識別する標的タンパク質にユビキチンを結合させてタンパク質の機能を制御する翻訳後修飾系であり,数多くの生命現象を制御していることが知られている。しかしながら,E3の活性および機能制御メカニズムに関しては未解決な問題点が数多い。そこで,昨年度に引き続き,我々が樹立した精製タンパク質を用いたガン抑制遺伝子産物pVHLを含んだCullin型の多サブユニットRING-E3(CRL)である,VBC-Cul2による低酸素応答性転写因子HIF-2αのユビキチン化反応のin vitro完全再構成系を用いて,COP9/シグナロソーム(CSN)のCRLの活性亢進メカニズムを解析した。CSNはCRLの活性化を促進するCullinのNedd8修飾を切断する,脱Nedd8化活性を有するため活性化機構の詳細は不明であった。まず,CSNはユビキチン化された基質のE3からの解離を促進することで,CRLを活性化させることを示した。本年度はその分子メカニズムの解析を中心に研究を進めた。そして,CSNが基質に結合したポリユビキチン鎖とNedd8の両者を識別してCRLと結合したあと,ユビキチン化基質をVBCとともにCRLから解離させ,その後cullin-Nedd8結合を切断してCRLの活性増強から遊離すること,その結果としてユビキチン化されていない基質を結合しているVBCとCul2との結合を促進してCRLがユビキチン化する基質の分子数を増大させることでCRLを活性化させる可能性を示唆する所見を得た。また,研究者らが新規に同定した直鎖状ポリユビキチン鎖を形成するE3であるLUBAC複合体の解析も進.め,同E3複合体がTNF-αによるNF-kBの活性化に関与するとの知見も得ている。本研究ではCullin型ユビキチンリガーゼ(CRL)を中心に、基質ユビキチン化からプロテアソームによる分解へと至る経路の解析を進め、COP9/シグナロソーム(CSN)によるCRLの活性亢進メカニズムを解析した。

CSNが基質に結合したポリユビキチン鎖とNedd8の両者を識別してCRLと結合した後、ユビキチン化基質をCRLから解離を促進する。基質がCRLから解離した後で、CRLはCullin-Nedd8結合を切断してCRLから遊離することを明らかにした。CSNはCRLの活性化を促進するCuliin-Nedd8結合を切断するため、そのCRL活性化機構の詳細は不明であった。本研究の結果、CRLへのNedd8結合が基質へのポリユビキチン鎖形成を促進し、それに引き続く、Nedd8を指標としたCSNのCRLへの結合が、ポリユビキチン化された基質をCRLから解離させ、CRLがユビキチン化する基質の分子数を増大させることでCRLを活性化させること、すなわち、Nedd8とCSNは相互補完的な形で基質タンパク質のユビキチン化を促進させることが明らかになった。さらに、研究者らが新規に同定した直鎖状ポリユビキチン鎖を形成するE3であるLUBAC複合体の解析も進め、同E3複合体はIKK複合体の構成成分の1つであるNEMOをシグナル依存的に直鎖状ポリユビキチン化することによって、TNF-α、IL-1βによるNF-κBの活性化に関与することを明らかにした。ユビキチン修飾系は、時空間的な特異性を持って基質タンパク質を識別して次々ユビキチンを付加することでポリユビキチン鎖を形成し、タンパク質の機能を制御する。生体には種々のポリユビキチン鎖が存在し、ポリユビキチン鎖の種類によりタンパク質の制御様式が異なることが明らかになっているが、ポリユビキチン鎖生成機構は明確ではない。そこで本研究では、研究者らが新規に同定した直鎖状ポリユビキチン鎖を形成するE3であるLUBAC複合体をモデル系に、ポリユビキチン鎖の生成機構の解析を進めている。これまで、LUBACはポリユビキチン鎖の遠位端のユビキチンを識別して、そのユビキチンのN末端に別のユビキチンを結合させることで直鎖状ポリユビキチン鎖を選択的に生成することを示してきた。本年はLUBACのユビキチン結合領域のユビキチン識別機構の解析を進め、LUBACはユビキチンの2番目のアスパラギン、16番目のグルタミン酸を含む部分を認識してユビキチンと結合して、直鎖状ポリユビキチン鎖を生成することを明らかにした。また、ポリユビキチン化されたタンパク質のプロテアソームへの輸送機構についても解析を進め、BAG6と呼ばれる分子がユビキチン化タンパク質のプロテアソームへの輸送に関与することを明らかにした。さらに、BAG6は新たに合成されたタンパク質を選択的にプロテアソームへ輸送することが強く示唆された。新規に合成されるタンパク質の中で、合成中に誤ったアミノ酸が組み込まれたり、適切にフォールディングされないタンパク質は分解されるが、そのプロテアソームへの輸送機構は未解明である。これらタンパク質由来のペプチドはDRiPsと呼ばれ、ウイルス抗原の提示に関与すると言われているので、DRiPs生成へのBAG6の関与に関して解析を進める予定である。生体には種々のポリユビキチン鎖が存在し、ポリユビキチン鎖の種類によりタンパク質の制御様式が異なることが明らかになっている。
歯科再生医療のための磁性マイクロビーズ使用マイクロ流路型バイオチップの開

微小電子機械システム技術で作製するマイクロ流路チップと、研究を進めている細胞捕集用磁性マイクロビーズシステムを合体させて、歯科再生医療に役立つ磁性マイクロビーズ使用マイクロ流路型バイオチップの開発を試みた。標的細胞に特異的なビオチン標識抗体と開発中のストレプトアビジン固定磁性ビーズの結合効率を調べた。試作バイオチップ中に抗体標識細胞懸濁液と磁性ビーズ懸濁液を流し、細胞の磁性回収に部分的な成功を納めた。(1)マイクロ流路PDMSチップには市販のY字式混合チップ(フルイドウェアテクノロジー社)と試作の蛇腹式混合チップ(バイオコズム社)(混合流路は14の4種類)を用いた。送液にはピエゾ式マイクロポンプ(SDMP302、高砂電機工業)2台を用い、1.5mlエッペンチューブに入れた溶液をプラスチックチューブ(内径0.79mm、外径2.38mm)でチップに送液した。ポンプの出力は概ね50%とした。混合試験の2液にはリン酸緩衝溶液(PBS(-))(無色)とトリパンブルー染色液(有色)を用いた。送液はY字の2先端の穴から行い、受液をY字の1先端穴から行った。混合の程度を肉眼判定した。その結果、2液の混和はY字式混合チップと試作蛇腹式混合チップ14すべてで成功した。また、マイクロポンプの出力を下げ、送液量(圧力)を下げると、Bの流路の長い蛇腹式混合試作チップ使用時に、2液体(細胞液と磁性ビーズ液)の混合効率が高まると考えられた。(2)ビオチン標識CD14抗体を結合させた(THP-1細胞)(1000万個)を緩衝液に懸濁させた。また、ストレプトアビジン付き磁性ビーズ(多摩川精機)を所定濃度で緩衝液に懸濁させた。ビオチン標識THP-1細胞とストレプトアビジン付き磁性ビーズのマイクロ流路を用いた混合は、Y字式混合チップと蛇腹式混合チップの2チップの直接使用時には、送液スピードが早すぎ、かつ混合時間が短いため、混合効率が高くなかった。標識THP-1細胞と磁性ビーズの混合には、本実験の初期混合後、別の独立した混合装置(振動式のハイブルくん(フルイドウェアテクノロジー社))に移し、機械混和することが有効であった。(3)磁性ビーズを用いたマウス骨髄からの間葉系幹細胞の回収では、血液造血幹細胞をネガティブ回収で除去後、特異抗体を応用したポジティブ回収法を採用するのが妥当と判断された。1.ポリジメチルシロキサン高分子にフィトリゾグラフィー法によって流路を付けたバイオチップを外注によって試作した。流路中に2つの入り口から入った液体成分が十分混合攪拌される領域をとぐろ状に作製し、出口を1つにした後、磁性分離を行う領域を別に設けた。流体を押し流すポンプには超小型ピエゾ型ポンプとハミルトン型マイクロシリンジを連結したポンプを用いた。いずれのポンプを用いても赤色と青色の染料を入れた流体の混合について十分満足できる結果が得られた。片方の液をTHP-1細胞懸濁液、もう片方の液をナノ磁性ビーズ懸濁とした場合も流体の混合は成功した。その際、適切な流体速度と液の粘性(適正条件)が存在することが示唆された。混合後の細胞の磁性捕集については研究を継続中である。2.1企業より提供されたストレプトアビジン付きナノフェライト粒子配合GMA共重合体磁性マイクロビーズを用いてマウス骨髄細胞から間葉系幹細胞(MSC)の分離回収を試みた。ストレプトアビジンは活性化エステル法によって結合した。その際、骨髄細胞から血球系細胞をMACSシステムのネガティブセレクション法によって除去し、残存細胞をアビジン標識Sca-1やCD44抗体に結合させ、上述の試作磁性マイクロビーズを用いてMSCの分離回収を試みたところ、既存の磁性ビーズよりも優れたMSCの回収効率が得られた。試作マイクロビーズは粒子径が200nmと小さく、マイクロ流路を有する試作バイオチップにも障害無く流すことが可能であった。1.試作マイクロバイオチップの入手が2月と遅れたため必要なデータの入手が遅れた。試作品は形状が複雑で価格も高価(50万円弱)でかつ設計・製作に時間がかかったため入手が遅れた。2月以前は別の既製品のマイクロ流路入りチップを用いて細胞懸濁液を流す研究を行ない、流体測定に関するデータを多く得た。2.また、初年度は、別の重要な研究課題である磁性マイクロビーズを用いた細胞回収の研究に注力した。1.バイオチップに付加する磁気分離ユニット反応槽の試作を試みる。磁石を流路の外側で移動させ、磁力によって吸引された磁気標識細胞のみ移動でき回収できるように工夫する。あるいは、磁石によって標識細胞を保持し、時間差を付けて標識細胞を捕集するユニットの試作を試みる。

2.試作した磁性マイクロビーズ使用マイクロ流路型バイオチップを用いてマウスの循環血と骨髄から間葉系幹細胞を分離する。その際、幹細胞に特異的な抗体(例えば、マウス間葉系幹細胞であればSca-1、CD44、c-kit等)を標識した磁性マイクロビーズを使用する(直接法)。あるいはストレプトアビジン結合磁性マイクロビーズを使用し、マウスのビオチン標識1次抗体を使用して幹細胞の分離を行う(間接法)。血液については非回収細胞をマウスの体内に戻す流路回路の設計を試み、実器を製作して実際に血液の循環を確認する。循環血中の間葉系幹細胞が少ないことに配慮する。3.2.で採取した幹細胞を体外で培養し、足場材料中で増殖・分化させた後、マウスに実験的に作製した組織欠損部(口腔領域での骨欠損等)に戻し修復の程度を検討する。4.これらの研究を総括して、磁性マイクロビーズ使用マイクロ流路型バイオチップのヒトへの歯科再生治療への応用と実現性について検討を加える。1.備品:流体速度の計測にノートパソコンを1台(11.8万円)購入する。2.消耗品:マイクロ流路計1台(6.5万円)、化学薬品(合計8.5万円)、細胞培養用培地・試薬(合計6.7万円)、実験動物(マウス、合計7.6万円)、論文別刷代(合計9.5万円)に使用する。3.旅費:国内学会発表1件(福岡、2泊3日)(12.4万円)に使用する。4.謝金:英文校正代(合計8.7万円)に使用する。5.その他:MEMS用流路作製費(外注)(合計28.8万円)に使用する。
マウス歯胚の分化過程における細胞膜シアリダーゼの局在

細胞膜シアリダーゼは、動物由来のシアリダーゼの一種で、細胞を生化学的に分画すると細胞膜画分に酵素活性が認められることから、このように命名された。本研究課題では、本酵素の局在を形態学的に検証するとともに、生物学的な意義を追究した。酵素の局在が細胞膜にあることについては、本酵素のウシcDNAを強制発現させたCOS細胞と、ヒトcDNAを発現させたトランスジェニックマウスの骨格筋細胞を用い、免疫細胞化学的手法により確認できた。生物学的な意義については、トランスジェニックマウス(前述)の切歯歯胚が野生型マウスのそれと比べどのような影響を受けるかを組織学的に検討した。組織学的に良好な構造を保持するために環流固定を施し、麻酔下で動物の左心室から血管系へ固定液(4%パラホルムアルデヒドを含むリン酸緩衝液)を注いた。しかし、構造の保持が不良で、遺伝子が強制発現された影響を特定できなかった。組織標本の固定が不十分であることが原因と考え、環流固定の方法を改良した。改良の肝要は、開胸して固定液を左心室へ注ぐ手術を簡便にし、手術時間を短縮することにあった。それは、持続硬膜外麻酔用カテーテル(トップ社製)として使われるポリエチレン製の細管に金属製の注射針(26ゲージ)を装着して達成された。固定液を心室内へ導くため、細管の一端にある注射針を左心室の筋層へ突き刺して心室内へ挿入し、細管の他端から固定液をペリスタポンプで注いだ。刺し込んだ針が心臓から抜けないよう、適量の外科用アロンアルファを針の刺し込み口付近へ塗布した。改良によって野生型マウスで良好な組織標本が得られたが、研究期間内にトランスジェニックマウスに適用し組織学的な検討をすることはできなかった。(研究目的)動物由来のシアリダーゼの生物学的な役割を解明するため、その一環として歯胚の分化過程における細胞膜シアリダーゼの関わりを明らかにする。平成13年度は、ヒト本酵素のcDNAをマウスに導入し(トランスジェニックマウス)、その歯胚の分化過程を検討する目的で、ヒト本酵素に対するモノクローン抗体の特異性をウェスタンブロット法と免疫組織化学的手法により確認する。(研究結果)まず、トランスジェニックマウスの組織のうち、本酵素が強く発現し、量も多く採取できるという理由から、骨格筋を試料とした。ウェスタンブロット法により2種のモノクローン抗体の特異性を証明した。免疫組織化学的手法によりその骨格筋組織を染色した。骨格筋における染色性は2種の抗体とも良好であった。電子顕微鏡下で、本酵素がその定義の如く遺伝子導入後も細胞膜に局在することを明らかにした。その局在は、細胞膜の中でも核に近接する部位に頻度が高い傾向を示した。光学顕微鏡下では、本酵素の発現量の変化を染色の濃淡として観察するため、抗体の標識化合物を検討した。その結果、蛍光標識に比べ西洋ワサビ過酸化酵素が適することがわかった。(考察、結論)骨格筋組織における結果から、抗体の特異性を証明し、抗体による染色の至適条件を明らかにできた。来年度は研究課題の観察対象となる歯胚を試料として、本酵素の局在と、細胞分化に伴う酵素発現の変化を検討する。なお、本年度の研究実施計画では、当初、ワイルドマウスにおける本酵素の遺伝子発現を検討する予定であった。しかし、トランスジェニックマウスの利用が可能になったので、研究実施計画を一部変更し、遺伝子導入後のマウス歯胚を研究対象として、本研究課題の目的を達成することにした。(研究目的)

動物由来シアリダーゼの生物学的な役割を解明すること。その一環として歯胚の分化過程における細胞膜シアリダーゼの関わりを明らかにする。平成14年度は、継続課題の2年目にあたり、本酵素のヒト由来cDNAを導入したトランスジェニックマウスの切歯歯胚について、以下の3点を検討した。(1)本酵素の局在を、免疫組織化学的手法により電子顕微鏡レベルで検討した。(2)本酵素の発現量が、歯牙形成過程の各ステージで相違するか否かを、免疫組織化学的手法により光学顕微鏡レベルで検討した。(3)ヒト由来の本酵素を強制発現させたことにより、歯牙形成にどのような影響が出るか、パラフィン切片を用いて組織学的に検討した。(研究結果)(1)の透過型電子顕微鏡による観察結果から、本酵素が細胞膜と近接する膜構造に局在することを確認した。しかし、標本の化学固定が不良なため、微細構造の保存が悪く、結果は明確さに欠けていた。その原因は、トランスジェニックマウスの発育がワイルドタイプのマウスの発育に比べ不良なため、心臓からの固定液の環流が十分できなかったためと考えられる。(2)の歯牙形成過程における本酵素の発現量も、標本の固定が悪くて結果が明確でなく、経時変化の有無について十分な検討をできなかった。(3)では歯牙形成に影響が出ていたが、標本の固定が悪いことによる組織像の変形を考慮すると、強制発現にともなう変化を確定することはできなかった。(考察、結論)微細構造や組織像の保持を良好にするため、標本の化学固定の方法を工夫し、再検討する必要がある。その上で、今回の結果を評価すべきであると考えた。研究目的動物由来シアリダーゼの生物学的な役割を解明する一環として細胞膜シアリダーゼのヒト由来cDNAをマウスに発現させ、その影響を切歯歯胚の分化過程において組織学的に検討した(平成14年度)。しかし、その影響を特定するに到らなかった。その原因が組織標本の不十分な化学固定にあると考え、原因の解消と本研究課題の再検討を目的とした。研究結果組織の化学固定を良好にするため、環流固定を用いた。環流固定では、固定剤が心臓から血管経由で体の隅々へ短時間に達し、組織学的な構造の保存が大きく改善された。しかし、環流固定は、マウスの体が小さいため技術的に難しく、成功率も低かった。手術の簡略化と成功率の向上を目指し、方法や器具を工夫した。その結果、成功率が、生後4週令以上のマウスで100%と、飛躍的に向上した。固定剤を心臓へ注ぐ方法の概略を以下に示す。カテーテル(持続硬膜外麻酔用、外径0.9mm)を長さ約10cmに切り、その一端の管内に26ゲージの注射針の針管を押し込んで接続する。カテーテルの他端へはコネクターとルアーテーパー式フィッティングを介してシリコンチューブの一端を接続する。シリコンチューブをペリスタポンプに装着し、チューブの他端を固定剤に沈める。固定剤は、ポンプの力でチューブ内に吸い込まれ、カテーテル経由で注射針の先端から出てくる。麻酔下で心臓を露出し、左心室へ注射針を突き刺す。アロンアルファで針を心臓表面に付着させ保持する。考察、結論マウスにおける環流固定が簡便かつ確実になり、トランスジェニックマウスやノックアウトマウスを対象とした組織学的な研究が進展する。その点で今年度の成果は意義深い。
サッカーのインサイドキックの正確性に関するバイオメカニクス的研究

本研究では,これまでに科学的な解明が進んでいないサッカーのインサイドキックを対象として,正確に蹴ることとそれに付随するメカニズムを明らかにすることを目的とした.平成17年度は,前年度に実施した実験(被験者30名)で獲得したデータの分析と研究成果の報告に主眼をおいて研究を進めた.本研究はこれまでに,インサイドキックの精度を高めるためには,インパクト角度の再現性を高める必要があり,そのためには骨盤と軸足方向の安定化を図るのが有効であることを明らかにした.しかしながら,近代サッカーではパススピードに対する要求が高まっており,インサイドで強く蹴るためのメカニズムを解明することも重要な課題と考えられた.そこで次に,経験者7名と非経験者8名のインサイドキック動作をバイオメカニクス的に比較した.この結果,インサイドで強く蹴るためには,キック動作局面の前半に大きな股関節屈曲力を発揮することが最重要であることが分かった.本研究成果は,海外関連雑誌に原著論文として投稿し,現在審査中である.上記の研究によって,インサイドで「正確に」蹴るためと「強く」蹴るためのメカニズムを明らかにしたが,一般に動作のスピードと正確性は相反的関係にある(speed-accuracy trade-off).そこで,これまでの統合研究として,インサイドキックにおけるspeed-accuracy trade-offの影響をバイオメカニクス的に検討した.本研究の結果,インサイドキックは一般にはspeed-accuracy trade-offの原理に従うものの,その影響度の大きさにはスキルレベルによる相違があり,サッカー経験者は,インパクトスキルが巧みであるため,スピードを重視する状況でもより高い水準で正確性を維持できることが分かった.本研究成果は国内関連学会で公表を終え,現在,国内論文誌による条件付き受理の状況である.本研究では,これまでに科学的な解明が進んでいないサッカーのインサイドキックを対象として,バイオメカニクス的手法と統計数理的手法を用いてそのメカニズムを明らかにするとともに,インサイドキックのモーションデータをデータベース化した上で,理想のインサイドキックモデルを構築することを目的としている.平成16年度においでは,正確なインサイドキックを遂行するための下肢の運動学的要点を解明することを目的として,被験者10名を対象とした3次元動作解析実験を実施した.この結果,インサイドキックの精度は,インパクト時の蹴り足角康の再現性にきわめて強く依存し,この再現性を向上するためには,骨盤および軸足方向の安定化を図ることが有効であることが示唆された.本研究成果は,国内の2学会において学会発表するとともに,論文として国内学会誌に公表した.以上の成果に加え,平成16年度においては,インサイドキック動作の運動学的ならびに運動力学的データをデータベース化することを目的として,被験者30名×左右脚の計60サンプルを対象として動作解析実験を実施した.本実験では,1.正確性を重視した場合,2.スピードを重視した場合,3.動いているボールを蹴る場合など,様々な条件下において,モーションキャプチャシステムを用いてモーションデータを,フォースプレートを用いて軸足の地面反力を計測した.本実験で獲得したデータは現在分析中であるが,熟練者は非熟練者と比較して,インサイドキックの際に,軸足の踏み込みを中心として生み出した体幹の回旋トルクを有効に利用している点など,巧みなインサイドキックの科学的要点が明らかになりつつある.平成17年度においては,平成16年度に獲得したデータの分析を進めるとともに,研究成果を国際論文等において公表する予定である.本研究では,これまでに科学的な解明が進んでいないサッカーのインサイドキックを対象として,正確に蹴ることとそれに付随するメカニズムを明らかにすることを目的とした.平成17年度は,前年度に実施した実験(被験者30名)で獲得したデータの分析と研究成果の報告に主眼をおいて研究を進めた.本研究はこれまでに,インサイドキックの精度を高めるためには,インパクト角度の再現性を高める必要があり,そのためには骨盤と軸足方向の安定化を図るのが有効であることを明らかにした.しかしながら,近代サッカーではパススピードに対する要求が高まっており,インサイドで強く蹴るためのメカニズムを解明することも重要な課題と考えられた.そこで次に,経験者7名と非経験者8名のインサイドキック動作をバイオメカニクス的に比較した.この結果,インサイドで強く蹴るためには,キック動作局面の前半に大きな股関節屈曲力を発揮することが最重要であることが分かった.本研究成果は,海外関連雑誌に原著論文として投稿し,現在審査中である.上記の研究によって,インサイドで「正確に」蹴るためと「強く」蹴るためのメカニズムを明らかにしたが,一般に動作のスピードと正確性は相反的関係にある(speed-accuracy trade-off).そこで,これまでの統合研究として,インサイドキックにおけるspeed-accuracy trade-offの影響をバイオメカニクス的に検討した.本研究の結果,インサイドキックは一般にはspeed-accuracy trade-offの原理に従うものの,その影響度の大きさにはスキルレベルによる相違があり,サッカー経験者は,インパクトスキルが巧みであるため,スピードを重視する状況でもより高い水準で正確性を維持できることが分かった.本研究成果は国内関連学会で公表を終え,現在,国内論文誌による条件付き受理の状況である.
国連安全保障理事会に対するアカウンタビリティ・メカニズムの解明

本研究は、安全保障分野のグローバル・ガバナンスにおけるアカウンタビリティ向上という問題に着目し、事例研究の対象として、国連による平和と安全の維持の要となる役割を果たしている国連安全保障理事会(以下、安保理)を取り上げた。すなわち、国連憲章第7章下の強制措置発動の権限をはじめとして強大な権力が憲章上付与されている安保理による権力の濫用をどのようにして阻止し、アカウンタビリティを向上させることができるかを解明することを目的としている。研究期間は5年間に設定しており、最初の3年間(平成30-32年度)は、安保理に対し作用しうる多様なアカウンタビリティ・メカニズムの解明を実証的に分析することを目指している。初年度である2018年度は、とくに安保理に関するアカウンタビリティの社会的関係の解明ーすなわち、誰がどのようにして安保理に対しアカウンタビリティを要求しうるかーを中心課題として設定し探究した。その際に、各アカウンタビリティ・メカニズムの権限行使者となるアクターの多様性や、各メカニズムが行使される際、安保理に強いることのできるコストに着目し分析した。ここでいうコストとは、具体的には、安保理に対する活動の制約や安保理の評判の低下等を示唆する。考察対象期間は、国連創設時の1945年前後から、国連創設70周年記念首脳会合が開催された2015年前後までとした。なお、本研究においては、ディンワースらの問題提起に従い、意図せざる相互作用の結果としての秩序の形成も考察の対象に包含し分析した。初年度の2018年度には、加盟国によるイニシアティブに着目し、2015年の国連創立70周年記念会合において拒否権行使の抑制や安保理の作業方法改善などを要求した、ACT(Accountability, Coherence, Transparency)グループの動きなどを中心に調査・分析を行った。初年度である2018年度は、とくに安保理に関するアカウンタビリティの社会的関係の解明を中心課題として設定し探究することを目的としていた。具体的には、加盟国によるイニシアティブに着目し、2015年の国連創立70周年記念会合において拒否権行使の抑制や安保理の作業方法改善などを要求した、ACT(Accountability, Coherence, Transparency)グループの動きなどを中心に調査・分析を行うことを目指していたが、それらに関しては、概ね順調に進捗している。2015年の国連創立70周年の世界首脳会合にて、拒否権行使の抑制や安保理の作業方法改善などを要求した、ACT(Accountability, Coherence, Transparency)グループは、2016年の国連事務総長選挙の透明化も主導していたが、次年度(2019年度)の研究においては、その成功に至った要因も調査対象に含めたいと考えている。また近年、強力な(robust)平和維持活動の設置の増加に伴い、質量ともに負担が増している要員派遣国に関しても、安保理のアカウンタビリティー向上を要求しうるアクターとして着目し分析を行う予定である。その際には、平和維持活動のマンデートの起草や更改に際し、要員派遣国の関与を高めるため、どのような安保理の作業方法の改善の要求を行っているかなども調査対象に含めるとする。

2015年の国連創立70周年の世界首脳会合にて、拒否権行使の抑制や安保理の作業方法改善などを要求した、ACT(Accountability, Coherence, Transparency)グループは、2016年の国連事務総長選挙の透明化も主導していたが、次年度(2019年度)の研究においては、その成功に至った要因も調査対象に含めたいと考えている。また近年、強力な(robust)平和維持活動の設置の増加に伴い、質量ともに負担が増している要員派遣国に関しても、安保理のアカウンタビリティー向上を要求しうるアクターとして着目し分析を行う予定である。その際には、平和維持活動のマンデートの起草や更改に際し、要員派遣国の関与を高めるため、どのような安保理の作業方法の改善の要求を行っているかなども調査対象に含めるとする。当初、初年度にはパソコンを2台(デスクトップ型とノートパソコン型のそれぞれ一台)購入する旨計上してたが、他の財源から新規パソコンを1台購入することが可能になり、本財源からは一台購入するにとどまった。その分を海外フィールド調査実施の際の費用にあてたいと考えている。