hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
音声リズムにおける「らしさ」の解明と外国語教育への応用

・ドイツ語では、初級者と上級者の発音の相違は韻律単位の長さの違いであり、挿入母音の量的・音質的相違が関与することが新たに明らかになった。初級者では音節構造保持のために日本語母音が挿入されるのに対し、上級者では言語に共通する普遍的な母音が挿入され、母音の無声化といった傾向がみられた。・フランス語は、母音と子音の長さに強さを取り込んで、両要素が如何に関係しながら表出されるかという分析を行った。結果は、文末の音節については、フランス語母語話者は「長く・弱く」発音しており、機能語については、母語話者は「短く・弱く」発音していることが分かった。最後に、「子音+半母音+母音」「子音+母音+母音」「子音+母音+半母音+母音」の連続に関しては、母語話者は「短く・弱く」発音していることが分かった。
初期胚における光応答機構の分子基盤

今日,体外で生産した初期胚を利用して産子を得る受精卵移植技術は,畜産分野では優良家畜の増産や家畜改良に,医療分野(産婦人科領域)では不妊治療に欠かせない技術となっている。しかしながら,体外における初期胚の人為的操作は,初期胚の品質(生存性,活力)の低下,さらには受胎成績の低下にもつながることから,初期胚の品質を改善させるための技術開発が急務となっている。最近,申請者らは近赤外光が初期胚の品質を改善する働きがあることを明らかにした(Yokoo and Mori. 2017)。しかし,その詳細なメカニズムは未だ明らかになっていない。初期胚における光応答機構を明らかにすることができれば,エビデンスに基づく新しい初期胚の品質改善技術を確立することができ,家畜生産や不妊治療に及ぼす波及効果は極めて大きく,これらの分野の発展に大きく貢献することが期待される。平成30年度においては,昨年度に引き続き,マウス胚のミトコンドリア機能に及ぼす近赤外光の影響について詳しく解析を行った。その結果,近赤外光を照射した直後では,ミトコンドリア膜電位やATPなどのミトコンドリア機能に大きな変化はなく,近赤外光の効果は一定時間が経過してから現れることが明らかとなった。予定していた網羅的遺伝子解析による光応答因子の探索は,当初検討していた解析ポイントでは初期胚のミトコンドリア機能に変化が少ないことから,次年度において再度検討することとした。引き続き,初期胚のミトコンドリア機能に着目して解析を遂行する予定である。網羅的な遺伝子発現解析についても改めて検討し,初期胚における光応答機構の解明に努める。これまでの研究成果から,近赤外光の作用は初期胚のミトコンドリア機能に関連することが示唆される。そこで,近赤外光が初期胚の発生能を制御する分子基盤を明らかにするために,平成29年度においては,マウス胚のミトコンドリア機能に着目して解析を行った。その結果,ミトコンドリアの細胞内分布については大きな変化は確認できなかったものの,近赤外光が初期胚のミトコンドリア活性を向上させることを初めて明らかにすることができた。なお,当初計画のあった初期胚の吸光特性の解析は,予定を変更して,次年度に実施することとした。一部予定していた研究内容を変更したものの,概ね計画していた研究を実施することができた。引き続き,マウス胚のミトコンドリア機能に着目した解析を行うとともに,初期胚の吸光特性について解析し,最適照射条件を分析する計画である。英文校閲費分として寄せていたが,年度内に研究成果を原著論文として国際誌へ投稿するまでに至らなかった。

平成30年度中に投稿予定としているので,平成30年度予算と合わせて使用する計画とする。当初計画していた研究の一部が実施できなかったため。最終年度においてミトコンドリア機能解析の費用として使用して,近赤外光照射の至適条件を検討する計画である。
情報漏洩に強く実用的な検索可能公開鍵暗号方式に関する研究

誤り訂正符号を用いた秘密分散法を使用することによって、情報漏洩を防ぐ暗号が構成できることを示した。また本手法に基づいて構成された確定論的な暗号(Deterministic Encryption)が、ある種の情報漏洩を防ぐ性質を持つ、すなわち、秘密鍵の分散化によって部分的な情報漏洩に耐性を持たせることができる、ことを証明した。本確定論的な暗号をPrivate Information Retrieval(PIR)のデータベース検索技術に応用することで、検索速度等において、従来法よりも暗号化されたデータを効率的に検索できることを示した。本研究では、大規模データベースのサービスの提供における管理者の不注意による情報漏洩や管理者自身の内部犯行に対処する耐情報漏洩、かつ実用に検索可能公開鍵暗号方式を提案する。今年度は暗号の安全性を中心に研究を行って、特に以下の二点について成果をあげました。(1)既存の攻撃方法に対する耐情報漏洩性の評価および対処策に関する研究:格子理論および符号理論ベースの公開鍵暗号構成法に対する部分情報漏洩攻撃方法を洗い出し、攻撃に必要な情報、計算量、並びに解読の程度(秘密鍵の完全解読、秘密鍵の部分解読、平文の完全解読、平文の部分解読)等を評価した。攻撃をかわす方法に関しては,暗号化の事前処理に誤り訂正符号を用いて秘密分散を付け加えることで安全性を向上させる手法を提案した。その方式も確定論的な暗号として使用できることが証明または検証した。(2)確定論的な暗号の情報検索の効率性に関する研究:耐情報漏洩暗号技術の設計に関し、これまでに符号理論に基づく公開鍵暗号技術を構成するために得られた知見を使用することで、より安全かつ効率いい方式の実現を目指すことにある。さらに、新たなセキュリティ概念である確定論的な暗号に適用し、実用に向け検索可能な暗号を提案した。本研究の独創的な点では、データ保護と検索などデータベースの高度な機能の両立を可能とする暗号方式の研究を行うことにある。この初年度の研究成果が、次のステップでの最強な能動攻撃における情報漏洩対策の提案に有効になることが示されている。これから、その安全性についても数学上の難問に帰着できる方法も考え始める。本研究により、情報漏洩防止対策とデータベースの効率的な検索が両立されれば、公開鍵インフラ構成要素として世界に広まる可能性がある。情報サービスの利便性およびプライバシー保護を満たすアウトソーシングの実現に大きく貢献できる。本研究の目的は、大規模データベースにおける管理者の不注意による情報漏洩や管理者自身の内部犯行に十分に対処できない問題に対し、耐情報漏洩(Leakage-Resilience)性質を満たし、かつ実用的な検索可能公開鍵暗号方式を構築することにある。H21年度で研究した基礎方式を用いて、公開鍵暗号の耐情報漏洩安全性証明を示すに関する研究を行うが、処理の高速化・効率化も含めて研究を進める。具体的には、誤り訂正符号を用いた秘密分散方法を直接に本研究に使って、情報漏洩を防ぐことができる以外、それに基づいた確定論的な暗号(Deteministic Encryhption)の研究が情報漏洩防止につながることがわかりました。数学的な証明によると、誤り訂正符号を用いた確定論的な暗号は、秘密鍵の分散化によって、部分的な情報漏洩に耐えられる。さらに、IEEE Globecom 2010で発表された結果"Practical Searching Over Encrypted Data By Private Information Retrieval"はPrivate Information Retrieval (PIR)のデータベース検索技術を用いて、秘密分散法を使用した情報検索技術は暗号化されたデータを効率的に検索できることが示された。また、計算速度が早いため、従来よりいい性能も得られた。これらの結果を見て、耐情報漏洩暗号技術がより現実になる。そして、暗号の秘匿性をたもつまま、検索することも可能である。
未利用海洋生物資源に由来する「刺胞」からの新規機能性分子の創出

ハブクラゲChironexyamaguchiiの刺胞からペプチド毒素の単離に成功した。本毒素はスジエビに対する致死活性を有していた。我が国のクラゲからペプチド毒素を単離したのは本研究が初めてである。各種クラゲのもつ刺胞の刺糸(毒針)の長さを比較検討した結果、毒性が強いとされるクラゲは毒針がより長いことが認められた。刺胞動物に広く存在する新規化合物cnidarin類を単離し、その構造決定を行った。クラゲ類の持つ刺胞毒については、これらの毒素のほとんどが分子量1万以上の大きなタンパク質毒素であることが示されている。ところで、クラゲ類の持つ分子量数千以下のペプチド毒素については、その存在自体は近年報告されているものの、毒素本体が単離、構造決定された例は未だない。そこで今回、クラゲ刺胞由来の分子量数千以下のペプチド毒素について単離ならびにその構造解明を目的とした。研究対象としたクラゲは、我が国においてもっとも激しい刺傷事例で知られるハブクラゲChironex yamaguchiiである。2012年8月に沖縄県にてハブクラゲの触手(約700 g)を採集し、採集後すぐに1.5リットルの100%エタノールに浸した後、ー30°Cで保存した。今回採用したエタノール浸漬法は、刺胞内のペプチド毒素を効率よく抽出できることが判明した。エタノール抽出物をフィルターろ過したものを粗抽出液とした。甲殻類であるスジエビに対する致死ならびに麻痺活性を化合物単離の指標とした。エタノール溜去後、残渣を0.15 M NaCl-0.01Mリン酸緩衝液(pH 7.0)で再溶解させてスジエビ毒性試験を行ったところ、全粗抽出液中に15,000 U(1Uは3匹中2匹以上が麻痺と定義)の毒性が確認された。濃縮した粗抽出液の一部をTSKgel ODS-120Tカラムを用いた逆相HPLCに供し、アセトニトリルの直線的濃度勾配法により毒成分を溶出・分画した結果、一つの画分から1,050 U /2 mlのスジエビ麻痺活性が確認された。そこで、同カラムにて本画分について再度単離・精製操作を行った。その結果、ペプチド毒素の単離に成功した。クラゲはその刺胞という毒を持つ小器官により、相手を攻撃する。近年、大量発生が問題となっているエチゼンクラゲであるが、その駆除時に漁業者が刺傷被害をうけていることが報告されている。しかし、現在までにエチゼンクラゲ刺傷原因毒素の詳細についてほとんど明らかになっていない。そこで、本年は将来的にエチゼンクラゲ刺症に対する特異的な治療方法を確立するため、エチゼンクラゲの刺胞がもつ毒素の作用と化学的性質を明らかにすることを目的とした。エチゼンクラゲの触手から刺胞を単離し、Mini-beadbeaterを用いて刺胞内液を抽出した。その抽出液を硫安分画およびイオン交換クロマトグラフィー(Toyopearl DEAE-650S)に供し、甲殻類致死ならびに麻痺活性を指標に有毒成分の精製を行った。また、刺胞内抽出液のプロテアーゼ活性について検討した。さらに、各精製段階において有毒成分の活性を保持する方法についても検討を行った。エチゼンクラゲの刺胞抽出液から甲殻類致死ならびに麻痺活性を指標として精製操作を行ったところ活性本体は陰イオン交換体に吸着することから酸性タンパク質であることが判明した。HPLCにおける麻痺活性物質の分離状況から、活性成分は少なくとも3つ以上存在することが示された。また、刺胞内抽出液はプロテアーゼ活性を持たないことが判明した。しかし、HPLCによる精製後の有毒成分は極めて短時間のうちに活性を消失することが判明した。刺傷被害をほとんど引き起こさないミズクラゲと、比較的被害の軽いアカクラゲ、重度の刺傷被害を引き起こすハブクラゲ、アンドンクラゲの刺胞を単離し、触手1 gあたりに含まれる刺胞の個数とその刺糸長100マイクロメートルごとの階級分布を作成して種間の比較を行った。その結果、刺傷被害の程度の重いクラゲほど、長い刺糸を多く持つことが示された。以上の事から、刺傷被害の程度の差と刺糸長との間には正の相関があることが示唆された(論文投稿中)。刺胞動物の刺胞からcnidarin類と名付けた環状ペプチド群を見出し、cnidarins 4A, 4B, 4Cについてこれらの絶対立体を含む化学構造を明らかにした。これらは全て天然から初めて得られた化合物であった。また、これらcnidarin類はキレート活性を持つことを明らかにした(特許申請中)。カミクラゲSpirocodonsaltatorはキュウリ様の特有なにおいを有するが、それらに関する研究は見当たらなかった。そこでこのクラゲの特異なにおいを分析し、(E)-2-nonenal、(E,Z)

-2,6-nonadienalの二つの化合物が特有なにおい形成に関与していることを明らかにした(論文作成中)。海洋天然物化学生理活性物質を単離するために欠かせない生物試料の大量採集に成功した。今まで、その存在が報告されていなかったハブクラゲ刺胞中からペプチド毒素の存在を見出し、その単離に成功した。以上の理由から、順調に進展していると判断した。エチゼンクラゲについては、冷凍サンプルからのその刺胞の単離法を確立することに成功した。これにより、エチゼンクラゲ刺胞のもつ毒素の研究に取り掛かることが可能となった。そして、単離した刺胞からの毒素の抽出、精製を行った。概要にも記したように、エチゼンクラゲの毒素は酸性タンパク質が活性本体であることが明らかにされた。また、エチゼンクラゲ毒素は、粗毒溶液においても甲殻類に対して麻痺を引き起こすこと、細胞毒性ならびに溶血活性を示さないことが示された。これは、以前に性状解明に成功しているいくつかのクラゲ類の毒素とは異なる生理活性を有していることが判明した。また、エチゼンクラゲの刺胞由来粗毒溶液中には最低でも3種類以上の有毒成分が存在することも明らかにされた。このように、今まで未知であったエチゼンクラゲのもつ有毒成分について一定の理解ができるだけの情報を本研究により引き出すことができた。これは、今後エチゼンクラゲ毒素解明の大きな下地になると考えられる。これらのことより、現在までの本研究はおおむね順調に進展していると判断した。ハブクラゲ刺胞から単離されたペプチド毒素の構造解明に向けて進めていく。また、ハブクラゲ刺胞中には未知の数多くの生理活性物質の存在が明らかになってきた。これらについても単離ならびにそれらの性状解明を目指していく。各種刺胞動物からの刺胞の単離を行っていく。さらに、その単離した刺胞内から有毒成分を含む各種化合物についてそれらの性状解明を行っていく。現在の研究対象生物は、今回の研究でも記したエチゼンクラゲ、またヒトに対して極めて激しい刺傷を引き起こすことで知られるハブクラゲ、ウンバチイソギンチャクなどの刺胞動物である。該当なし
三次元構造制御を鍵とした分子設計に基づく機能性ペプチドの開発

本研究の最終目標は、細胞の中にある、疾病に関わるタンパク質同士の相互作用を制御可能な、新たなペプチド創薬方法論を確立することである。一般的に鎖状ペプチド分子は、構造的な自由度が高く、代謝安定性や膜透過性などに問題があることから、そのまま医薬ツール分子として用いることは難しい。そこで本研究では、ペプチド分子の主鎖骨格の形(=三次元構造)を制御することによって、代謝安定性・膜透過性を備えた機能性ペプチド分子を創製する。
十代の人工妊娠中絶の予防教育モデルの開発に関する研究

1.研究目的十代の望まない妊娠を予防し、人工妊娠中絶軽減のための教育モデルを検討する。2.研究方法1)養護教諭を対象に、学校における性に関する教育・相談など質問紙調査を実施した。2)高校生およびその保護者を対象に、学校における性教育に関する意識など質問紙調査を実施した。3)2つの調査結果をふまえ、人工妊娠中絶を軽減する性教育の展開について検討した。3.結果1)学校における性教育について、以下のことが明らかとなった。(1)避妊に関する集団指導の実施率は42%である(2)養護教諭の71%は性に関する個別相談を行い、31%は妊娠した生徒に対応したことがある(3)在校生の望まない妊娠を予防するために、「養護護教諭の個別相談強化(57%)」と「思春期保健に関する教職員の研修(52%)」が実現可能である。2)高校生およびその保護者の性教育に関する意識について、以下のことが明らかとなった。(1)高校生の男子90%・女子94%は避妊法を一つ以上知っているが、セックス経験者の中で「いつも避妊」は男子59%・女子54%である(2)高校生の56%は学校の性教育は役に立つと認識し、18%は「セックス」について知りたいと思っており、40%は「コンドームの無料配布」を希望している(3)母親の98%は、学校で性教育をしてほしいと考えており、教育内容は「エイズ」「妊娠」「避妊法」が高い。また、46%は「わかりやすいパンフレットによる情報提供」を希望している。4.考察地域保健における思春期保健の重視という時代に、人工妊娠中絶を軽減するためには、科学的根拠に基づいた保健対策の実践と思春期保健活動のシステム化が課題である。その解決には、(1)十代のニーズを把握した上で、「望まない妊娠を予防できる」技術が習得できる性教育の実施と評価(2)養護教諭や他の教職員の質的向上を図る研修の実施と評価などが急務である。本研究の目的は、地域保健における思春期保健対策推進のための方策として、十代の人工妊娠中絶を予防する教育モデル及び教材を開発することである。研究期間は2年間で、初年度である平成15年度は、(1)中高校の養護教諭を対象に、性教育への参画や性に関する個別相談などについての質問紙調査(2)中高校生およびその保護者を対象に、避妊や性教育に対する意識などについての質問紙調査を行った。(1)の調査結果では、k府内中高校における避妊指導の実施率は48%で、性教育の実施状況には学校格差が著しいこと、生徒の望まない妊娠を予防するために実現可能な取組みは「養護教諭の個別相談強化(71%)」「思春期保健に関する教職員研修(65%)」「保健指導の充実(54%)」が高率で、養護教諭の年齢や経験年数・現任校の勤務年数・学校種および学校の設置者によって取組み内容に有意差が認められた。また、80%が性に関する個別相談を経験している。学校行政における現任教育として養護教育の相談技術の向上や教職員の思春期保健に関する理解を深める研修の重要性が示唆された。(2)については、データ入力を終え、中高校の性行動を規定する要因、性教育に対する要望などを分析中である。また、調査協力者に対する結果の報告方法を含めて、生徒の実態に即した性教育の実施に向けて関係機関との調整を行っている。

平成16年度は、(1)中学生を対象に、科目「総合的な学習の時間」に、通年で養護教諭が行う授業(2)高校生及び保護者を対象に、科目「保健」の1単元で体育科教諭が行う授業をモデル的に実施し、家庭と学校・保健所が連動した性教育の展開方法並びに関係者の連携システムの構築についても検討する。なお、生徒や保護者、開業産婦人科医の参画による教育実践を目標とする。1.研究目的十代の望まない妊娠を予防し、人工妊娠中絶軽減のための教育モデルを検討する。2.研究方法1)養護教諭を対象に、学校における性に関する教育・相談など質問紙調査を実施した。2)高校生およびその保護者を対象に、学校における性教育に関する意識など質問紙調査を実施した。3)2つの調査結果をふまえ、十代の人工妊娠中絶を軽減する性教育の展開について検討した。3.結果1)学校における性教育について、以下のことが明らかとなった。(1)避妊に関する集団指導の実施率は42%である(2)養護教諭の71%は性に関する個別相談を行い、31%は妊娠した生徒に対応したことがある(3)在校生の望まない妊娠を予防するために、「養護教諭の個別相談強化(57%)」と「思春期保健に関する教職員の研修(52%)」が実現可能である。2)高校生およびその保護者の性教育に関する意識について、以下のことが明らかとなった。(1)高校生の男子90%・女子94%は避妊法を一つ以上知っているが、セックス経験者の中で「いつも避妊」は男子59%・女子54%である(2)高校生の56%は学校の性教育は役に立つと認識し、男女とも18%は「セックス」について知りたいとし、40%は「コンドームの無料配布」を希望している(3)母親の51%は男女交際や性について、子どもに話したことがある(4)母親のほぼ全員が学校で性教育をしてほしいと考え、教育内容は「エイズ」「妊娠」「避妊法」で、「わかりやすいパンフレットによる情報提供」を希望している。4.考察地域保健における思春期保健の重視という時代に、十代の人工妊娠中絶を軽減するためには、科学的根拠に基づいた性教育の実践と思春期保健活動のシステム化が課題である。解決策として、(1)十代のニーズを把握した上で、「望まない妊娠を予防できる」知識と技術が習得できる性教育の実施と評価(2)養護教諭や他の教職員の研修の実施と評価などが急務である。
知的障害のある児童生徒の働く意欲を喚起し、職業的自立を可能とするキャリア教育

障害者の就労に関する様々な問題に対応するため特別支援学校等ではキャリア教育に取り組んでいるが、その効果や成果が十分には実証されていない。また、特別支援学校等でのキャリア教育は高等部での実践が多く、より早い学校段階からの系統性を持たせた実践に向けた教育課程の編成には至っていない現状がある。そこで本研究は知的障害特別支援学校や小中学校の特別支援学級におけるキャリア教育について、小学部から高等部までの12年間、あるいは小中学校9年間を見通した一貫性のある教育課程を編成し、継続的なキャリア教育の実践を実現するために、調査研究や実践研究を行う。
活性型ビタミンDによって誘導されるマクロファ-ジの融合の二段階機構の解明

我々は、活性型ビタミンD〔1α,25(OH)_2D_3〕がマウス肺胞マクロファ-ジ(Mφ)の融合を促すことを見いだして以来、破骨細胞の形成機序を調べるモデル系として、Mφの融合機構の解明を目視して研究を進めてきた。本研究では、融合に伴い、Mφで合成される蛋白質の解析、及び融合過程におけるカルシウムイオンの関与の解明を目的として実験を計画し、下記の重要な知見を得た。1.1α,25(OH)_2D_3によるMφの融合にはスペルミジンの合成が必須であり、これに依存して融合に特異的な3種の蛋白質(98,78,50OK)合成が亢進していた。また、インタ-ロイキン4(1L-4)によってもMφの融合が起こり、この現象にもこれらの3種のスペルミジン依存正蛋白が関与することが明らかとなった。2.Mφの融合過程は、1α,25(OH)_2D_3とCa^<2+>の依存正の点から、初期のプライミング期(0-18hr)と後期のプログレッション期(18-72hr)に分けられた。プライミング期には1α,25(OH)_2D_3が必須でありCaの依存性はないこと、プログレッション期にはmMオ-ダ-のCaの存在が必須であることが判明した。また、プログレッション期におこる融合に際しては、細胞内Ca^<2+>よりもむしろ細胞外のCa^<2+>が重要であった。3.1α,25(OH)_2D_3と1L-4によるMφの融合に先立ち、Ca依存性酵素であるトランスグルタミナ-ゼ(TGase)の合成がスペルミジン合成に依存して亢進した。更に、TGaseの阻害剤であるシスタミンにより融合が阻害された。以上の結果より、1α,25(OH)_2D_3と1L-4によるMφの融合過程において、先ずプライミング期にはスペルミジンの合成が亢進し、これに依存してトランスグルタミナ-ゼが誘導されること、更にプログレッション期には本酵素の関与のもとに細胞融合が進行するが、その際、細胞外のCa^<2+>が重要な役割を担うことが明らかになった。1.活性型ビタミンDによる肺胞マクロファージの融合に関与するタンパク質の解析活性型ビタミンDがマウス肺胞マクロファージの融合を促進する際、ボリアミン合成に関与するSAMDCの阻害剤であるMGBGの添加によりタンパク合成と融合が同時に阻害される現象を利用し、融合に伴って発現するタンパク質を電気泳動法により解析した。その結果、スペルミジンに依存して合成される3種のタンパク質(分子量:98K,78K,50K)が融合に関与することが明らかとなった。これらのタンパク質はマクロファージの活性化のみを発現させるビタミンA酸やLPSによっては合成されず、融合を促す活性型ビタミンDとインターロイキン-4に共通して24時間以内に合成が促進された。

2.マクロファージの融合過程を二段階に分け、カルシウムイオンによる制御の機構を解析マクロファージの融合過程を特異的タンパク質の合成に必須な前段階(0-18時間)と融合の進行過程(18-72時間)の二段階に分け、1α,25-(OH)_2D_3の作用点ならびにカルシウム依存性について解析した。その結果、1α,25-(OH)_2D_3は前段階のタンパク質合成期に必須である一方、融合の進行過程はカルシウムイオノホアA23187やC-キナーゼ活性化剤であるTPAによって代用され得ることが明らかとなった。また、0.15mMの低Ca培地を用いた検討より、融合の進行期はカルシウム依存性を示し、低Ca培地では融合が全く促されないことが示された。さらに、その融合の阻害は培地へのCaの補充によって速やかに回復した。以上の結果より、1α,25(OH)_2D_3によって特異的に合成されたタンパク質の関与の下で膜融合が開始し、その進行にはカルシウムイオンが必須であることが明らかとなった。平成元年度の研究課題として、1.マクロファ-ジの融合に必須な蛋白質の同定並びにその性質の解明、2.融合過程における細胞内カルシウム濃度の変動、3.融合に対するTGaseの関与の解明を挙げたが、これらの課題に対して下記の知見が得られた。1.活性型ビタミンD[1α,25(OH)_2D_3]によるMφの融合に先立ち、スペルミジンの合成を介して3種類の蛋白質(50、78、98K)が特異的に合成される。そこで、これら蛋白を同定するために、Ca結合蛋白を^<45>Caーbloting法で、また抗Cーキナ-ゼ抗体、抗チュブリン抗体等を用い検討を行ったが、何れの蛋白とも異なっていた。2.Mφを低Ca培地(0.13mM)で1α,25(OH)_2D_3存在下で48時間培養しても融合は全く起こらないが、その後Ca濃度を1.85mMに上げると、融合が速やかに誘導された。この際の細胞内Ca^<2+>濃度を測定したところ、低Ca下では116nMであったのに対し、培地のCaを1.85mMに上げても細胞内濃度は144nMであり、有意な変化は示さなかった。また、Ca ionophoreを添加すると細胞内Ca^<2+>濃度は440nMに上昇したが融合は起こらなかった。3.トランスグルタミナ-ゼ(TGase)は細胞骨格蛋白等の修飾を行い、その活性発現にはCa^<2+>を必要とする酵素であるが、1α,25(OH)_2D_3添加後、Mφの融合に先立ち、TGaseの活性の上昇がみられた。この活性上昇は、スペルミジンの合成を介したTGase蛋白の合成亢進による事が明らかとなった。更に、Mφの融合は、TGaseの阻害剤であるシスタミンの添加により抑制された。更に、ILー4の添加によっても、TGaseが誘導された。以上の結果より、1α,25(OH)_2D_3とILー4によるMφの融合に先立ち、TGaseが誘導され、本酵素が融合過程に重要な役割を担うこと、更に融合の進行には細胞内よりもむしろ細胞外のCa^<2+>が関与することが明らかとなった。
超臨界水酸化雰囲気における触媒作用

汚泥の超臨界水酸化処理において、酢酸・アンモニウムイオンが、難分解性中間体として残存するため、高温(870K)での処理を必要とする。そこで本研究では、触媒を加えることにより反応温度の低下を目的とした実験を行い、無触媒のものと比較した。実験には回分式反応器としてステンレススチール製カラム(内容量2.53.5cm^3)を用いた。原料として、下水処理場の余剰濃縮汚泥ならびに反応中間体である酢酸及びアンモニウム、触媒は二酸化チタンおよびルテニウム-アルミナ、酸化剤には過酸化水素水を使用した。原料、水、触媒、過酸化水素水が入った反応容器を密閉し、昇温しておいてアルカリ溶融塩炉中に入れ、一定温度で所定時間が経過したあと、炉から取り出して冷水で急冷却した。反応後の液相の生成物について、総有機炭素量(TOC)の測定、残存する有機酸およびアンモニウムイオンの分析で行った。酢酸とアンモニウムを用いて実験(温度648-673K、圧力27.4-30MPa、反応時間10分)したところ、残存量は、二酸化チタンを触媒としたときには酢酸への効果はなかったが、アンモニアは12%以下にまで減少した。一方、ルラニウム-アルミナを触媒としたときには、残存率はアンモニアは33%、酢酸は1%未満と酢酸に大幅な減少が見られた。これらの実験を基に、汚泥を用いて実験を行った。まず、触媒の有機酸に対する効果はいづれの触媒を使っても、無触媒の時に比べて減少しており、特にコハク酸・酢酸に対して使用していることがわかった。次に、触媒のアンモニウムイオンに対する効果を調べた。ルテニウム-アルミナ、二酸化チタンともに無触媒の時に比べてアンモニウムの濃度が減少しており、アンモニアでの実験結果と同様に二酸化チタンの効果が、ルテニウム-アルミナよりも大きいことがわかった。以上のことから、超臨界水酸化法に触媒を加えることによって、残存する有機酸・アンモニウムイオンを減少させることが可能であり、操作温度の緩和が期待できる。
先端神経画像法を駆使したアルコール性前頭葉傷害発生機構の解明

アルコール依存症の認知機能障害の基盤に、前頭葉における神経傷害、白質の軸索走行異常、活性化ミクログリアの増加が示唆されている。本研究では、アルコール依存症患者の生体における前頭葉傷害の詳細を明らかにする目的で、現在断酒中のアルコール依存症患者10名と対照10名を対象に、拡散テンソル画像法、ポジトロン断層法による活性型ミクログリアの分子イメージング、同じくポジトロン断層法による脳神経活動イメージングを行い、認知心理学検査バッテリーにより評価される前頭葉機能との関連性について検討した。その結果、いずれの画像所見においても患者群と対照群との間に有意な差を認めなかった。今後、更に例数を増やし、再検討することが必要と考えられる。アルコール依存症は不可逆性の認知機能障害を生じ、それによる社会機能の低下が大きな問題となっている。アルコール依存症では前頭葉を中心とする軸策走行の異常が拡散テンソル画像(DTI)によって示され、また依存症の死後脳では脳内に神経炎症が確認されている。一方、遺伝子で規定されるアルコール代謝酵素(ALDH2)活性の違いが、その重症度に影響を与えていることが分かっている。これらの証拠から、アルコール起因性脳内神経炎症と、素因としてのALDH2遺伝子型が相乗的に作用し、脳神経活動や軸策走行異常を惹起し、その結果認知機能障害を引き起こすという、アルコール性認知機能障害の病態仮説を想定した。本研究では、遺伝子解析、DTI、ポジトロン断層画像(PET)、認知評価バッテリーを同一対象に行い、アルコール性認知機能障害の発生機序を一元的に解明する。名古屋市の絋仁病院アルコール専門病棟に入院中のアルコール依存症患者で、入院までの3年間に寛解状態のなかった者からDSM-IVのI軸、II軸で他の診断を満たす者、重篤な身体疾患やウェルニッケ脳症やコルサコフ症候群を合併する者は除外した。現在のところアルコール依存症患者4名と、年齢性別を一致させた健常対照3名について活性型ミクログリアのPET撮像、MRI撮像、認知機能評価が終了している。今後さらに20例ずつまで評価を増やす計画である。現在のところアルコール依存症患者8名と、年齢性別を一致させた健常対照6名について活性型ミクログリアのPET撮像、MRI撮像、認知機能評価が終了している。平成24年に被験者のリクルートをすべて終了した。

アルコール依存症群10名(年齢48.7±7.2歳)と、年齢性別を一致させた健常対照群10名(47.2±7.4歳)について活性型ミクログリアのPET撮像、MRI撮像、認知機能評価が終了し、現在これらのデータを解析中である。現在のところアルコール依存症患者8名と、年齢性別を一致させた健常対照6名について活性型ミクログリアのPET撮像、MRI撮像、認知機能評価が終了している。24年度が最終年度であるため、記入しない。今後さらに20例ずつまで評価を増やす計画である。
内軟骨性骨化におけるレプチンの役割に関する細胞生物学的研究

分子量16kDaのレプチンは主に白色脂肪細胞より産生・分泌され、視床下部にあるレプチン受容体を介して摂食抑制、体脂肪減少などの抗肥満作用を有しているホルモンと考えられてきた。近年、レプチンが胎盤、胎児の骨・軟骨、骨格筋など脂肪組織以外からも産生・分泌され、造血機能や生殖機能に影響を与えるなど、肥満抑制作用以外にも多彩な作用を示すことが報告されている。また、レプチンが骨形成に対しても何らかの生理的作用を有している可能性を示唆する報告もあるが、骨組織におけるレプチンの局在およびその役割については解明されていない。そこで、本研究では内軟骨性骨化過程におけるレプチンの役割を明らかにすることを目的に、細胞生物学的検討を行った。得られた結果は、以下の通りである。1)生後1週齢、雄性ICRマウスの大腿骨の二次骨化中心および成長板の新生血管に近接する肥大軟骨細胞および骨芽細胞に強くレプチンが発現していた。また、マウス軟骨細胞株(MCC-5)およびマウス骨芽細胞株(MC3T3-E1)がレプチンを産生・分泌することを確認した。2)ヒト血管内皮細胞(Huvec)には機能的レプチン受容体が存在していた。また、Huvecの増殖能、遊走能、管腔形成能およびMMP-2活性はレプチンにより有意に促進された。3)db/dbマウス(レプチン受容体欠損マウス)の大腿骨の長さは正常型マウスに比較していずれの週齢においても約13%短く、また二次骨化中心への血管侵入も約2日遅延した。4)生後5週齢ICR雄性マウスの右側第8肋骨を骨折させ、その治癒過程におけるレプチンの発現をRT-PCRおよび免疫組織化学的手法で検索した。骨折治癒に伴い、レプチンの発現は徐々に上昇し、骨折治癒部に形成された軟骨へ血管侵入が認められる時期(骨折後14日目)に最高値を示した。その後、骨折の治癒に伴い、骨折前の発現レベルまで低下した。5)レプチン欠損マウス(ob/obマウス)およびレプチン受容体欠損マウス(db/dbマウス)の骨折治癒過程を正常型マウスと比較検討したところ、骨折治癒部に形成された軟骨から骨への置換時期が遅延されていた。以上のことより、内軟骨性骨化において、レプチンが血管新生を活性化することにより、骨格成長を促進していることが示唆された。さらに、レプチンが骨折治癒を促進している可能性も示唆された。

近年、レプチンが胎盤、子宮、骨格筋など脂肪組織以外からも産生・分泌され、胎児の成長や生殖機能に影響を与えるなど、肥満抑制作用以外にも多彩な作用を示すことが報告されている。また、レプチンが骨形成に対しても何らかの生理的作用を有している可能性を示唆する報告もあるが、骨組織におけるレプチンの局在およびその役割については解明されていない。そこで、本研究では内軟骨性骨化過程におけるレプチンの役割を明らかにすることを目的に、細胞生物学的検討を行った。本年度の研究結果から明らかになったことは以下のとおりである。1.生後1週齢、雄性ICRマウスの大腿骨の二次骨化中心および成長板の新生血管に近接する肥大軟骨細胞および骨芽細胞に強くレプチンが発現していた。また、マウス軟骨細胞株(MCC-5)およびマウス骨芽細胞株(MC3T3-E1)がレプチンを産生・分泌することを確認した。2.ヒト血管内皮細胞(Huvec)には機能的レプチン受容体が存在していた。また、Huvecの増殖能は0.1100ng/ml、遊走能は0.1100ng/ml、管腔形成能は100ng/ml、およびMMP-2活性は0.1100ng/mlのレプチンにより有意に促進されることが明らかとなった。3.db/dbマウス(レプチン受容体欠損型マウス)の大腿骨の長さは正常型マウスに比較していずれの週齢においても約13%短く、また二次骨化中心への血管侵入も約2日遅延した。これらのことより、内軟骨性骨化過程において、レプチンが血管新生を活性化することにより、骨格成長を促進している可能性が示唆された。分子量16kDaのレプチンは主に白色脂肪細胞より産生・分泌され、視床下部にあるレプチン受容体を介して摂食抑制、体脂肪減少などの抗肥満作用を有しているホルモンと考えられてきた。昨年度(平成13年度)の実験結果より、レプチンが血管新生を促進することにより骨格成長期における内軟骨性骨化を促進することが示唆されていた。本年度は、さらに臨床的応用を目指すために、口腔外科学領域で頻繁に遭遇する疾患のひとつである骨折の治癒過程(内軟骨性骨化)におけるレプチンの役割について検討を行った。得られた結果は以下の通りである。1.生後5週齢ICR雄性マウスの右側第8肋骨を骨折させ、その治癒過程におけるレプチンの発現をRT-PCRおよび免疫組織化学的手法で検索した。骨折治癒に伴い、レプチンの発現は徐々に上昇し、骨折治癒部に形成された軟骨へ血管侵入が認められる時期(骨折後14日目)に最高値を示した。その後、骨折の治癒に伴い、骨折前の発現レベルまで低下した。2.レプチン欠損マウス(ob/obマウス)およびレプチン受容体欠損マウス(db/dbマウス)の骨折治癒過程を正常型マウスと比較検討したところ、骨折治癒部に形成された軟骨から骨への置換時期が遅延されていた。これらのことより、骨折治癒過程における内軟骨性骨化においても、レプチンが分泌され、骨折の治癒に対して促進的に作用している可能性が示唆された。
MAPキナーゼ及びG2サイクリンと相互関係を示す染色体分配異常突然変異の解析

我々が単離したショウジョウバエのGp99の突然変異は卵割期に核分裂後期の染色体分配異常を示した。Gp99突然変異の表現型が、MAPキナーゼシグナル伝達系の活性型突然変異(Dsor1,Dsor3)により抑圧され、G2サイクリン(cyclinA,cyclinB)の機能欠損突然変異により優性に増強される。このことからGp99はMAPキナーゼシグナル伝達系とG2サイクリンを結びつける染色体分配の制御因子だと解釈された。しかし、クローニングしたその遺伝子が新種の蛋白質をコードしてたことから、その生化学的な作用機構は不明である。当初単離したGp99対立遺伝子(allele)はトランスポゾンが非翻訳領域に挿入された機能減少型の突然変異であり、細胞周期におけるGp99遺伝子の機能を正確に把握するためには機能完全欠損型の突然変異の解析が不可欠であった。しかし、新たに単離された2つのGp99機能完全欠損型の突然変異は細胞致死性(cell.lethality)を示し、多細胞生物であるショウジョウバエの表現型の解析は困難であった。そこで単細胞生物である出芽酵母においてGp99とアミノ酸配列の相同性がある遺伝子を解析することを試みた。出芽酵母のGp99類似遺伝子は4種類あり(仮称SC-1,2,3,4)、相同性は約150アミノ酸の領域に限定され、それらの遺伝子機能は判明していなかった。ショウジョウバエGp99との相同性が一番高く、150アミノ酸の相同領域で40%のアミノ酸の一致を示すSC-1遺伝子を破壊し出芽形成が開始される前のG1期で細胞周期が停止していることが判った。このことから出芽酵母SC-1遺伝子は細胞周期制御に働くという点でショウジョウバエGp99遺伝子と機能が進化的に保存されていることが判明した。次に、SC-2、SC-3のそれぞれの遺伝子を破壊したところ、それらが必須遺伝子でないことが判明した。さらに、SC-4遺伝子を破壊したところ、増殖に遅れがありながら、生存には必須ではないことが判明した。しかし、作出した2倍体株では胞子形成が起こらず、DAPIでDNA染色した結果から胞子形成が第一減数分裂以前の分化段階で停止していることが判り、SC-4遺伝子が減数分裂の細胞周期制御に関与していることが示唆された。
コーチゾルを指標とした新生児の泣き声に及ぼすストレスの影響について

川崎市立多摩病院産婦人科の協力を得て、同病院で誕生した新生児20名を対象に泣き声を録音し、同時に唾液サンプルを採取した。新生児の覚醒時に1回10分の録音セッションを各被験者につき、計10回行い、各々のセッション開始時と終了時に綿棒により唾液を採取した。録音した泣き声は、ソナグラフによって分析を行い、基本周波数成分のピッチ・ピッチの変動幅等の合計13個のパラメーターの各セッションごとの平均値を算出した。同時にRI法により、唾液中のコーチゾル量を計量化して、その値と有意に相関を示す音響パラメーターを探索した。その結果、音そのものの高さと呼気が鼻から抜ける程度(nasality)という、二つのパラメーターだけが、有意に相関を示すことが、明かとなった。すなわちコーチゾル量が高いほど、音は高くなりかつnasalityの程度も増加する。また、同一被験者の音声ではあるが、コーチゾル量が異なる時期の泣き声を、成人に聞かせて評定を求め、乳児の生理的状態の変動を成人が泣き声を手がかりにして認知し得るか否かを検討したところ、コーチゾル量が高いときの泣き声ほど、成人はより緊急度の高い声であると判断することが判った。さらに、その判断の手がかりとしては,nasalityの方が音の高さより重要らしいことが、示唆された。鼻から大量に空気が出ていくような泣きは、聞くものに病的という印象を与える傾向が高いことが判明した。泣き声を支配している生理的メカニズムの、外界適応性がうかがえた。
アフリカ系アメリカ文学と視覚芸術における奴隷制度の表象

アメリカ合衆国における歴史的トラウマである奴隷制度は、過去の出来事を記憶する体験者や証言者がいなくなった世代のアフリカ系アメリカ人芸術家たちによって、どのように想像され表象されてきたのか。トニ・モリスン(ToniMorrison)とキャラ・ウォーカー(KaraWalker)という現代アメリカ文学・視覚芸術を代表する黒人女性芸術家に焦点をあて、共同体の歴史的トラウマをどのように次世代に伝えていくのかという現代的課題への取り組みを明らかにした。平成22年度前半は、Toni MorrisonとKara Walkerが取り組んでいる南北戦争以前の南部の神話、および人種・ジェンダー表象の書き直しについての草稿作成を行った。その際、これまでの研究成果に、Morrisonの最新作であるA Mercy(2008)(奴隷制度の萌芽期を舞台にし、白人奴隷所有者と黒人奴隷、白人年季奉公人、ネイティブ・アメリカンとの関係を描いた)の考察を加えるため、この作品に関する資料収集も行った。8月9月には、収集した資料の考察と分析を行い、1)二人の芸術家がアメリカ南部の神話および奴隷制度の歴史的アイコンとされてきたものをどのように書き換えているか、2)奴隷制度にまつわるトラウマ記憶をどのように表象しているか、さらには3)白人主流社会において性的・身体的存在として刻印されてきた黒人表象をどのように書き換えているのかを、歴史的・文化的にヴィジュアルな資料を追加していくことによって、より鮮明に浮かび上がらせていく作業を行った。その一部であるA Mercyについての草稿は、10月下旬の日本英文学会九州支部のシンポジアムにおいて発表した。11月上旬には、フランス(パリ)で開催されたToni Morrison学会において"Toni Morrison and Kara Walker : How to Represent Race and Genderin Reconstructing African-American History"という題目で発表した。この国際学会では、Morrison研究の最新の動向に触れ、著名な研究者と交流を深めることができ、大変有意義であった。3月には10日間という短い期間ではあったが、ニューヨーク市立図書館および同図書館ショーンバーグ分館において、黒人文化・歴史関連のより幅広い資料の調査・収集を行った。また、ニューヨーク現代美術館では資料調査だけではなく、Kara Walkerの講演を聴くことができた。平成22年度後半は、奴隷制度萌芽期についてアメリカで作成された映像資料や、20世紀のアフリカ系アメリカ文学と奴隷制度の表象について、Morrison以外の数人の作家のリサーチも行うことができた。研究成果は英語で原稿化することになったこともあり、出版は次年度になる予定である。平成23年度は、以下のような研究実績および成果をあげることができた。1)4月から7月にかけては、主としてOctavia Butler,Sherley Anne Williamsの文学テキストおよび関連文献を調査・精読した。2)6月にはオハイオ大学教授Amritjit Singh氏を招聘し、アフリカ系アメリカ人とアジア系アメリカ人の移住と市民権をめぐる講演会(英文学科主催)を開催した。この講演会は、アメリカの奴隷制度によるブラック・ディアスポラの経験が、アフリカ系アメリカ人のみならずマイノリティーの人々の共通体験として現代にまで続いてきたことを明らかにするもので、学科を超えて多数の出席者を得た。本研究のテーマである歴史的トラウマとしての奴隷制度の表象研究の現代的意義を確認する良い機会となった。3)8月から9月にかけては、平成22年度にパリで開催されたToni Morrison国際学会で発表したMorrisonとKara Walkerに関する英語論文の執筆と、掲載する画像の版権取得を行った。完成した論文は日本アメリカ学会の学会誌に投稿し受理された(2012年6月末出版予定)。4)10月にはグローバリゼーションと文学に関する批評書『世界文学史はいかにして可能か』(共訳)を出版した。これは、植民地主義による奴隷制度とアフリカ系アメリカ人の移住の問題が、現在のグローバリゼーションの問題とも深いかかわりがあることを確認する良い機会となった。5)また平成24年1月には、シアトルで開催された現代アメリカ言語学会(MLA)年次大会に参加し、関連テーマのセッションに出席すると同時に、書籍等の最新資料も入手することができた。MLA大会では、現代における奴隷制度表象の重要な小説『中間航路』の作家チャールズ・ジョンソン氏の講演を聞くという貴重な機会を得た。6)3月には1週間の日程でニュヨーク公立図書館ショーンバーグ分館にて関連資料を収集し、またアフリカ系アメリカ入の移住に関するノンフィクションで全米批評家賞を受賞したIsabel Wilkersonの講演会等に出席する貴重な機会を得た。平成24年度は以下のような研究業績および成果をあげることができた。2.5月下旬にサンフランシスコで開催されたAmerican Literary Associationにおけるアフリカ系アメリカ文学および視覚芸術関連のセッションに出席しさらなる情報収集と最新の関連文献を入手することができた。4.8月から10月にかけては、Toni Morrisonの文学テキストと黒人芸術家Jacob Lawrenceとの影響関係についての草稿執筆を行い、10月下旬の日本英文学会九州支部におけるシンポジウムにおいて発表した。5.12月上旬には韓国(釜山)で開催されたELLAKの国際大会のシンポジウムに招待され"Traumatizing Literary History in the Global Age"という題目で発表した。

この国際学会では奴隷制度のトラウマ表象に関して重要な研究をしているW.J.T. Mitchell教授の講演を聞くという貴重な機会を得た。また、平成25年度1月から3月にかけて、本研究の成果を6月の大学公開講座(一般社会人対象)で発表するための原稿執筆を行った。研究計画外ではあるが研究テーマに関連した翻訳の仕事に従事したこと、2012年6月末出版予定の英語論文に用いる画像の収集や版権取得等に時間と労力がかかったことなどが主な理由である。また、研究を進めるにつれて、取り扱う必要のある作家や芸術家が、当初想定していたよりもかなり幅広く存在していたことが明らかになり、資料収集等に十分な時間が取れなかったこと、視覚芸術関連の作品は所蔵図書館・美術館によっては容易に調査しがたいものもあること、さらにはアフリカ系アメリカ芸術関連の美術書等には入手困難なものもあることなどが理由としてあげられる。24年度が最終年度であるため、記入しない。資料収集時間の不足を補い、論文としての一定の研究実績をあげるため、今年度は取り扱う作家・芸術家をかなり絞り込む予定である。より包括的・発展的な研究成果は来年度以降に発表していく。
胆管内乳頭状腫瘍の分子病理学的解析

本研究では、胆管内乳頭状腫瘍(IPNB)の局在による分子病理学的特徴の差異をIPNB 27症例を用いて比較検討した。肉眼的には粘液産生を伴う嚢胞形態は肝外IPNBでは認められなかった(P<0.001)。免疫組織学的染色では、MUC5ACのみ有意差がみられたが(P<0.05)、KRASやPIK3CA、P53、P16についての有意差はなかった。予後にも有意差はみられなかった(P=0.899)。IPNBは局在による臨床分子病理学的に類似した疾患群であった。胆管内乳頭状腫瘍(IPNB)は予後良好な胆道腫瘍として近年提唱されたが、これまで診断されてきた乳頭腺癌との異同が不明確であるため、病理診断をする際のコンセンサスが一定ではないのが現状である。特に、これまでの研究結果から、発生部位による臨床病理学的相違点や肝外IPNBと浸潤性胆管癌(乳頭腺癌)の類似性が問題点として浮き彫りとなっている。本研究では、(1)肝内/肝外IPNBを同一疾患群として考えることの妥当性、(2)肝外IPNBと浸潤性胆管癌(乳頭腺癌)との違い、を分子病理学的に解明することを目的としている。以上の研究目的に対して、初年度から次年度にかけて、免疫組織化学染色、DNA抽出、Direct sequencing解析を順次進める事としたが、27年度(初年度)は「IPNBの症例収集」、「臨床病理学的の検討」、「遺伝子異常の評価」を予定通り進める事が出来た。特に、27症例(肝内IPNB 10症例、肝外IPNB 17症例)のIPNBを収集する事が出来き、統計学的検討が可能な症例群を形成する事が出来た。初年度で得られた結果は、肝内IPNBは肝外IPNBと比較し嚢胞型肉眼形態が有意に多く、胃型粘液(MUC5AC)を有する症例が有意差を持って多い事を証明する事ができた。一方で、KRAS遺伝子異常はIPNBでは少ない事が判明したため、他の遺伝子異常の調査を継続して行い、IPNBの診断・治療へ応用するための研究基盤の確立を目指す。本研究課題の進捗状況としては、稀な疾患として知られるIPNBを27症例収集できたことで、研究材料についての問題点は解消されている。また、予後も含めて臨床病理学的情報の整理が概ね終了し、統計学的検討についても検討できている。また、切除標本からのDNA抽出も問題なく進んでおり、KRAS遺伝子を含む遺伝子解析の結果も順調に判定されている。胆管内乳頭状腫瘍(IPNB)は胆管癌の前癌・早期癌病変として提唱されたが、IPNBの分子病理学的特徴が依然として明確に提示されていないのが現状である。特に、発生部位による臨床病理学的相違点や肝外IPNBと浸潤性胆管癌(乳頭腺癌)の類似性が問題点として浮き彫りとなっている。本研究では、当院で経験された肝内及び肝外IPNBを用いて、発生部位による臨床病理学的相違点を明らかにする事を目的とした。研究方法は、肝内IPNB 10症例と肝外IPNB 17症例を用いて、両群間の特徴を明らかにする事とした。免疫組織化学染色は、MUC1、MUC2、MUC5AC、MUC6、P53、P16染色を用いて評価し、遺伝子異常としてKRAS、BRAF、PIK3CA、GNAS遺伝子異常の確認を行った。結果は、肉眼的粘液産生は肝外IPNBではみられなかった(P<0.001)。組織学的浸潤に有意差はなく(P=0.584)、リンパ節転移症例は肝外IPNB 1症例のみ、再発例は肝内IPNB 1症例であった。生存期間も局在による有意差はなかった(P=0.899)。粘液形質は、MUC5ACのみ肝内IPNBで多くみられた(P<0.05)。遺伝子異常については、P53、P16免疫組織化学染色の発現について両群間に有意差はなく(P=0.637、P=0.118)、KRAS遺伝異常も有意差はなかった(P=0.529)。PIK3CA遺伝子異常は肝内IPNBでみられなかったのに対し、肝外IPNBでは6% (1/16)でみられた(P=0.663)。GNAS、BRAF遺伝子異常については、全例で認められなかった。本検討からは、肝内・肝外IPNBの間で肉眼形態やMUC5AC発現の違いは捉えられたが、遺伝子異常の差異はみられなかった。今後は、通常型胆管癌との相違点を中心に研究を進めたい。

今後の研究推進方策については、これまで本研究で得られた臨床病理学的因子、遺伝子異常の情報を総合的に評価する予定です。また、胆管腫瘍で生じると言われている遺伝子異常についての解析も加えて、今後は、それらの遺伝子異常の検索を進め、臨床病理学的因子と併せて総合評価を行う予定としている。最終的には、(1)肝内/肝外IPNBを同一疾患群として考えることの妥当性、(2)肝外IPNBと浸潤性胆管癌(乳頭腺癌)との違い、を分子病理学的に解明することを目指す。人体病理