hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
痴呆性老人に対する家族の初期対応と初期サポートニーズの実態

痴呆性老人のケアにおいて、介護負担や在宅生活継続破綻に要因が介護者の認識やサポートの不備にあるという指摘が見られる。混乱を招くことの多い痴呆性疾患発症初期において介護する介護者の、特に配偶者の認識をとおして家族の初期対応やサポートニーズを明らかにした。対象は研究の協力を得られた妻8名、夫が3名の11名である。研究の倫理的配慮をした上で介護者に半構成面接をし、面接内容をデータとして質的に分析をした。結果と考察:1)介護者の気づき:気づきには極初期的段階から確定的段階がみられ、受診までの期間は病型により違いが見られた。2)配偶者が罹患したことの認識:介護者は予想もしない運命等と認識し、また老後の生活を不安に陥れられた等と認識していた。3)痴呆性疾患に着いての認識:「厭な病気」「徘徊する病期」「不可解な病期」等と認識し、4)罹患した配偶者に対する認識:苦痛を感じる存在の認識と共に、伴侶として在宅生活を継続したい存在という認識が見られた。5)介護者としての認識:夫婦としての生活を再評価しつつ介護について覚悟をし、子供には託せず夫婦役割とせて介護役割を引き受ける認識が見られた。6)介護者の対処行動:受診後、介護者なりの情報収集と「治療」を行っていたが、次第に夫婦としての情緒的関係性を大事にした意識的なケアが見られた。そして、子供や親族のサポートを期待せず、保健や福祉の多様なサポートを得、そのサービスの関係者との接点を持っていた。7)デイサービス利用の認識:閉鎖的な夫婦生活にはない外部的刺激を求め、介護者の負担軽減ばかりでなく罹患した配偶者にとって肯定的影響をもたらすメリットの存在が利用に認識がみられていた。結論:発症初期において介護者には痴呆性老人のケアに影響する様々な認識が見られた。家族の初期のサポートには、一般に、問題行動に対応するケア技術等に向けられがちだが、介護者の様々な認識を理解し、介護者の特性を十分理解した心理的サポートの充実が求められることを示唆した。1.研究方法:テーマに関した先行文献の検討を行い、あわせて研究手法であるグランデッドセオリーについて、講師を招へいしその活用の実際について指導を受け研究方法を検討した。2.データー収集:(1)事例の対象条件については、年齢は本人、家族共に「70才前半まで」、被面接者の続柄は「配偶者」に限定し、「医療機関の診断を得ている」「受診から35年以内」を主な要件とした。(2)対象の把握方法:事例の紹介は札幌近郊の市町村および札幌市の保健婦に依頼し協力を得た。(3)インフォームドコンセント:対象者に対しては保健婦による説明で承諾を得た後、直接研究メンバーから研究趣旨を説明し承諾を得、更に面接時に説明をし承諾を得た。(4)データ収集方法と内容:対象者からインタビューのテープ録音について了解を得られた内容はテープおこしをし、その記録をデーターとした。録音の了解を得られなかった内容はその場で記述し、面接終了後記述を整理したものをデーターとした。主なインタビュー内容は、気づきから現在までの症状の変化と対応、介護、医療機関受診、サービス利用等の経過および配偶者としての思いや認識を聴いた。3.第一段階の分析,対象者の概要:インタビューの実施は16件、うち5件が対象条件を満たさなかったため除外し、11件を研究対象とした。

配偶者は全て主介護者であり妻が8人、夫が3人であった。殆どが専門医療機関で痴呆疾患の診断を受けていたが受診時期は多様であった。痴呆性疾患のタイプはアルツハイマー型が5人、脳血管型が5人、タイプ不明が1名であった。またサービスは比較的早期に活用されていた。配偶者はいずれも初期の混乱期を経過し、現在は比較的穏やかな状態にある配偶者が多かった。4.今後の分析の方向性:配偶者の立場から初期における疾病認識と対応、配偶者のサポートと認識、サービス利用ニーズとサービスが支える生活認識等についてデーターを詳細に分析する。平成11年度は事例分析およびまとめを行い、成果を学会に報告し報告集を作成した。1.配偶者の初期対応気づきから受診までの期間は痴呆性疾患の病型により違いが見られた。医療機関を受診し診断名の告知を受けた配偶者は強い「驚き」と「否定」の感情に陥ると同時に医学の未解明な現実に「苛立ち」を覚え、家族による「原因探し」や配偶者による「治療」が行われてきた。また、痴呆性性疾患を「周囲にはわかりにくい病気」、「子供や親族には知らせたくない、関わらせたくない病気」として捉え、子供や親族のサポートを得るよりは保健や福祉の外部サポートを比較的早期に受容し、利用することで初期の介護困難に対処していた。2.痴呆性疾患に罹患した配偶者に対する認識発症初期においてアルツハイマー型痴呆の配偶者に対する妻の認識を分析した。罹患した配偶者に対する妻の認識は「苦痛に感じられる存在としての認識」と「共に暮らし続けたい存在としての認識」が併存し、これらの認識の強弱が配偶者としての伴侶性と在宅生活の継続に影響を与えていた。3.サービス利用に対する介護者の認識発症早期からデイケア・デイサービス活用のニーズとサポートがあり、配偶者にとってデイケア・デイサービスは、介護負担軽減の効果のみならず、痴呆性疾患に罹患した配偶者の新たな肯定的側面を気づかせてくれる効果や、またプログラムや得られる情報から在宅生活における夫婦の関係性に潤滑油的材料を提供してくれる効果等をもたらしてくれるものとして認識していたことが明らかになった。初期の痴呆性老人ケアにおける介護者のサポートニーズは、症状や問題行動への対応にのみ向けられているのではなく、介護者の「痴呆性疾患に対する認識」や「介護対象者に対する認識」有りようにも向けられており、介護者と痴呆性老人の関係性をとりまく様々な認識の理解が介護者においても重要なニーズであることが明らかになった。
前立腺潜在癌の顕性化

前立腺潜在癌は高齢男子の約20%に認められるが、顕性化するものはその1%であり、欧米に比しきわめて低率である。この理由を解明するため、多方面より検討された。1.潜在癌の臨床的進展前立腺癌以外の剖検などで見出された潜在癌は徴小、高分化のものが多く、臨床癌として摘除された前立腺癌は比較的大きく分化度が低下している。これより臨床癌は潜在癌の一部が以前に変化をおこした結果であり、多段階発生をうかがわせる。生前に診断出来る潜在癌に相当する徴小病変として偶発癌がある。これは多くが内側域発生であるため、外側域にある剖検潜在癌と比較した。偶発癌は後者より徴小、高分化傾向にあり、これからの臨床癌進展が少ないと推測され、臨床的観察をうらづけた。2.潜在癌の性状偶発癌はras p21の発現が少なく、臨床癌では増加する。核内好銀部位から偶発癌は臨床癌より増殖能が低いことをうかがわせた。外側域の潜在癌はこの中間であった。3、潜在癌の疫学症例対照研究の結果、潜在癌の顕性化に関与する因子として、低学歴、社会経済的に低地位、性的活動の発現遅延とその後の活発化、があげられた。4、アンドロゲン誘導性成長因子マウス・アンドロゲン依存癌であるシオノギ癌115を用いて、アンドロゲンに誘導されるFGF様ペプタイドにより自己制御されること、非依存癌に進行する例としてがん遺伝子発現増強によって成長因子の変化がおこるためであることが見出された。
遠隔在宅支援システムの有用性に関する研究-無作為化比較試験

平成30年度の研究計画書に従い、下記の研究内容を遂行した。1本無作為化比較試験のためのIDMC(独立データモニタリング委員会)およびデータセンターを設置。データセンターの設置は研究支援組織「日本がん治療研究機構」(NPO)に依頼した。2本無作為化比較試験のサンプル数を算出するために、埼玉医大病院救急センターのデータ・ベース(23,206人/2013年-2017年)を解析し、救急搬送患者(65才以上9,381人)の転帰を解析した。解析結果は次のとおり。・2013年は65歳以上が38,4%であったが高齢者は年々増加し、2017年には44,2%となっていた。・2017年、65歳以上の転帰は帰宅は47,4%、入院は47,9%であった。・2017年の65歳以上の再搬送率は23,8%、75歳以上の再搬送率は26,2%であった。・2013年の65歳以上の再搬送率は7,6%であり、高齢者の再搬送率は急増していた。・2017年、65歳以上の再搬送患者における初回搬送時の転帰は、帰宅が61,6%、入院が36,8%であり、帰宅患者の方が入院患者よりも統計学的有意に再搬送されていた。3本無作為化比較試験に導入する戦略的情報プラットホームを選択した。4本無作為化比較試験の試験プロトコールを完成させた。5無作為化比較試験のEDC (Electric Data Capture:電子的臨床情報収集)システムを構築した。研究実績の概要で報告したとおり、初年度は遅れなくことなく研究が進んだが、試験プロトコールが未だ倫理審査の申請にまで到達していない。試験プロトコールの倫理審査申請準備を迅速に進め、倫理委員会の承認を得て感化登録を開始する。
東アジア史における文化伝播と地方差の諸相

従前より継続してきた富山大学における「出土文物研究会」を活用しつつ,上記の研究課題を研究,討論し,つぎの結論をえた.1.中国の歴史家や日本における中国研究者のなかには,中国文化の偉大さや特殊性を強調するあまり,中国史における外部世界からの影響,刺激を過小評価するきらいがある.しかし私の考えは逆である.中国世界は「地大物博」の優利さにくわえ,外部とのさかんな分析文化交流,貿易によって発展し,一方で中国固有の伝統文化を向上させる力をもえたのであると.もし中国が歴史上孤立を守っていたとするならば,すでに衰退にむかっていたはず.東西文化交流史の観点を中国史研究にもっととりいれる必要を痛感する.2.桑原隲蔵「歴史上より観たる南北支那」(原著1915年)は中国史上における南北地方差を明快にといた古典的論文である.中国文化,経済の発展が北(黄河流域)からはじまって,しだいに南(楊子江流域)に重心をうつすことを,多くの例証をあげて説明し,中国の歴史は一面からすると「漢族文化の南進の歴史」といいきる.この主旨は,中国史の流れとして大筋では正しいが,しかし中国および東アジアの社会,文化を「憂愁な漢族文化」という単一文化の視点でとらえてしまう危険性がある.「漢字文化圏」という表現で,そのなかに生きつづける方言や周辺民族言語の地方文化を無視しがちなのと似る.(1)は世界史規模の文化交流史の観点であり, (2)は東アジア世界内における南北,あるいは東西の文化交流史の観点である.総じていえることは,地域の固有文化の存在と,それらがお互いの有無を通じあうところに,総体的な歴史発展が生れるというみかたである.詳しくは研究成果報告書を参照されたい.従前より継続してきた富山大学における「出土文物研究会」を活用しつつ,上記の研究課題を研究,討論し,つぎの結論をえた.1.中国の歴史家や日本における中国研究者のなかには,中国文化の偉大さや特殊性を強調するあまり,中国史における外部世界からの影響,刺激を過小評価するきらいがある.しかし私の考えは逆である.中国世界は「地大物博」の優利さにくわえ,外部とのさかんな分析文化交流,貿易によって発展し,一方で中国固有の伝統文化を向上させる力をもえたのであると.もし中国が歴史上孤立を守っていたとするならば,すでに衰退にむかっていたはず.東西文化交流史の観点を中国史研究にもっととりいれる必要を痛感する.2.桑原隲蔵「歴史上より観たる南北支那」(原著1915年)は中国史上における南北地方差を明快にといた古典的論文である.中国文化,経済の発展が北(黄河流域)からはじまって,しだいに南(楊子江流域)に重心をうつすことを,多くの例証をあげて説明し,中国の歴史は一面からすると「漢族文化の南進の歴史」といいきる.この主旨は,中国史の流れとして大筋では正しいが,しかし中国および東アジアの社会,文化を「憂愁な漢族文化」という単一文化の視点でとらえてしまう危険性がある.「漢字文化圏」という表現で,そのなかに生きつづける方言や周辺民族言語の地方文化を無視しがちなのと似る.(1)は世界史規模の文化交流史の観点であり, (2)は東アジア世界内における南北,あるいは東西の文化交流史の観点である.総じていえることは,地域の固有文化の存在と,それらがお互いの有無を通じあうところに,総体的な歴史発展が生れるというみかたである.詳しくは研究成果報告書を参照されたい.最近出版の中国孝古学関係誌ならびに『中国石窟』,『中国方志叢書』,『石刻史料』などを資料として、前近代東アジアにおける地域差と文化伝播についての調査研究をおこなった。研究分担者のあいだで、月一回の研究会をひらき、上記の作業で得られた知見を紹介し検討した。その結果、つぎのようなことが確認できた。1.中国東北、とくに赤峰から凌源にかけての遼西地方に、最近あいついで内容ゆたかな新石器時代遺跡が発見され、紅山文化の名称でよばれるが、それと黄河中流域の仰韶文化,北方草原の細石器文化などとがどう関連するかが目下の課題。2.中国古代の都市城壁と古代西アジア,インドのそれと比較すると、とくに女墻(ひめがき)や防禦法にいちじるしい類似があり、早くに西アジアの都市文明が東アジアに伝播影響した可能性がある。3陝西省鳳翔県で発掘中の奏都雍城および隣接する墓葬は、多数の殉葬者をともなうなど、春秋戦国時代における地域差をよく提示する。4.前漢帝王陵の構造は都市構造と関連しており、ここにも地方差がみとめられる。5.甘粛省炳霊寺石窟の第169窟には、西暦420年の墨書銘をともなう中国初期仏教美術(塑像,壁画)が多数残存することが確認されているが、そこにはインド,中央アジアからの美術様式と中国内地の大乗仏教信仰とが交流し、いわば涼州様式といえるものが形成されている。6.清代に普及した善会,善堂は中国各地で、いちじるしい地方格差がみられ、また西洋医学が普及するに際しても、特定のルートが存在した。次年度には上記の成果をふまえつつ、より豊富な事例研究と総括をおこないたい。
遺伝的高血圧モデルラットの食塩感受性は腎依存性か：腎交換移植による検討

食塩感受性の低い高血圧モデルラットSHRと、SHRに食塩感受性の高いラットの遺伝子存在領域を移し、食塩感受性の高くなったラットSHRpch1_18の間で腎移植を行い、食塩感受性遺伝子が腎機能を介して血圧を上げているかどうかを検討することを目的に実験を行った。移植に際して数々の課題がわかり、これを解決するための術式改良を行った。これによって、移植の成功率が向上し、食塩負荷実験の例数を集めているところである。Stroke-prone spontaneously hypertensive rat (SHRSP)は重篤な高血圧を発症し、それに伴って脳卒中を高頻度で起こす遺伝的モデル動物である。これまでの研究で、SHRSPの持つ脳卒中感受性遺伝子がラット第1、18染色体上に存在することが明らかとなっており、さらに、SHRSPと脳卒中抵抗性の高血圧ラットであるSHRとの間でこの染色体領域を入れ替えたコンジェニックラットにおいて、食塩負荷時の血圧上昇の程度が異なることが明らかになった。食塩感受性血圧上昇に重要な役割を果たすもっとも重要な臓器が腎であることから、本研究では、このコンジェニックラットとSHRの間で片腎摘出と腎移植を行い、第1、18染色体に起因する食塩感受性が腎機能を介するものであるかどうかを検討することを目的とした。本年度は、SHRとコンジェニックラットを用いた片腎摘出による対照実験を進めると同時に2つの系統間での腎移植技術の確立を目指した。腎移植では手術時間、麻酔深度の調整と、尿管の縫合に予想以上の困難を伴い、数十例試みて1例のみの成功にとどまっている。現在、より手術時間を短縮できるよう手術手技の改善に継続的に取り組んでいる。片腎摘出による対照実験では、食塩負荷により、SHRに第1、18染色体のみをSHRSPから移したコンジェニックラットにおいて、より高度の腎障害がみられることが、組織学的な評価により確認できた。現在、腎線維化や炎症反応、酸化ストレスなどにかかわる種々のパラメータの測定を行い、そのメカニズムの検討を実施している。Stroke-prone spontaneously hypertensive rat(SHRSP)は重篤な高血圧を発症し、それに伴って脳卒中を高頻度に起こす遺伝的モデル動物である。これまでの研究で、SHRSPの持つ脳卒中感受性遺伝子がラット第1,18染色体上に存在することが明らかとなっており、さらに、SHRSPと脳卒中抵抗性の高血圧ラットであるSHRとの間でこの染色体領域を入れ替えたコンジェニックラットにおいて、食塩負荷時の血圧上昇の程度が異なることが明らかとなった。食塩感受性血圧上昇に重要な役割を果たすもっとも重要な臓器が腎臓であることから、本研究では、このコンジェニックラットとSHRの間で片腎摘出と腎移植を行い、第1、第18染色体に起因する食塩感受性が腎機能を介するものであるかどうかを検討することを目的とした。腎移植では手術時間、麻酔深度の調整と尿管の縫合に困難を伴ったが、腎移植と非移植腎の摘出を別途行うことで手術時間の短縮を達成し、移植の成功率をあげることに成功した。しかし、非移植腎摘出後1,2週でラットの死亡が相次ぎ、本格的な実験が遅れている。片腎摘出による対照実験では、腎線維化や炎症反応、酸化ストレスなどにかかわる種々のパラメータの測定を行い、そのメカニズムの検討を実施している。腎移植の手技の改善は達成できたが、移植したラットの予後が不良であり、その原因の精査を現在行っている。一部水腎症を起こしていること、腎血流が良くない可能性があることが推察されており、それに対する対処法の検討を行っている。Stroke-prone spontaneously hypertensive rat (SHRSP)は重篤な高血圧を発症し、それに伴って脳卒中を高頻度に起こす遺伝的モデル動物である。これまでの研究で、SHRSPの持つ脳卒中感受性遺伝子がラット第1, 18染色体上に存在することが明らかとなっており、さらに、SHRSPと脳卒中抵抗性の高血圧ラットであるSHRとの間でこの染色体領域を入れ替えたコンジェニックラットを用いた比較実験において、食塩感受性血圧上昇がこの染色体領域がSHR型かSHRSP型かによって異なることが明らかとなった。食塩感受性血圧上昇に重要な役割を果たすもっとも重要な臓器が腎臓であることから、本研究では、このコンジェニックラットとSHRの間で片腎摘出と腎移植を行い、第1、第18染色体に起因する食塩感受性が腎そのものの遺伝的機能異常によるものであるかどうかを検討することを目的とした。前年度までの検討で、腎移植、片腎摘出術後のラット生存率が極端に悪かったため、術後死亡したラットの腎の状態について検索したところ、腎盂の拡大と腎実質の萎縮がみられ、水腎症の状態になっていることが明らかとなった。移植術自体は成功していたが、尿管を繋ぐのに用いたチューブがうまく機能していないためと考えられたため、尿管を腎盂に直接繋ぐ術式に変更するとともに、さまざまな工夫により手術時間の短縮に努めた。その結果現在、漸く2例の移植例で1ヶ月の食塩負荷実験を成功させることができた。現在ペースを上げて例数を増やすように実験を進めている。

腎移植の手技が予想以上に難しく、手術時間短縮、手技の改善に取り組む必要がある。より多くの症例を集中して行うことで、手技確立を目指す。片腎摘出実験は順調に進んでおり、現在、集めたサンプルの解析を進めている状況である。腎臓内科学より多くの症例を集中して行うことで、手技確立を目指す。片腎摘出実験は順調に進んでおり、こちらは27年度中にデータをまとめて発表することを目指す。本年度は、SHRとコンジェニックラットを用いた片腎摘出による対照実験を進めると同時に2つの系統間での腎移植技術の確立を目指した。しかしながら腎移植では手術時間、麻酔深度の調整と尿管の縫合に予想以上の困難を伴った。そのため、本実験に使用予定の試薬・消耗品等の調達を見合わせたため。しかしながら腎移植では手術時間、麻酔深度の調整と、尿管の縫合に予想以上の困難を伴い、数十例試みて1例のみの成功にとどまっている。そのため、当初予定してい実験計画に遅れが生じており、購入予定であった試薬・消耗品等の購入を見合わせたため現在、移植ラットの予後改善に継続的に取り組んでおり、徐々に成果が見られている。これに伴い、購入を見合わせていた試薬・消耗品等を早急に手配し、実験計画を実現する予定である。現在、より手術時間を短縮できるよう手術手技の改善に継続的に取り組んでおり、徐々に成果が見られている。これに伴い、購入を見合わせていた試薬・消耗品等を早急に手配し、実験計画を実現する予定です。
細胞の増殖と分化におけるRas類似G蛋白質の役割と作用機構

細胞増殖および分化の制御におけるRas類似G蛋白質の作用機構の解析を行い以下の結果を得た。GTP結合型のR-Rasをマトリックスに固定化してアフィニティカラムクロマトグラフィーを行い、R-Rasの標的蛋白質の同定を試みた。その結果、牛大脳からGTP-R-Rasに結合する分子量約10万の蛋白質(p100)を分離精製できた。この蛋白質はGDP結合型のR-Rasには結合せず、標的蛋白質結合領域に変異を導入したGTP結合型のR-Rasにも結合しなかった。また、GTP結合型のH-RasとRhoには結合しなかった。したがって、この蛋白質はR-Rasの標的蛋白質のひとつであると考えられる。この蛋白質の部分アミノ酸配列からcDNAをクローニングしたところ、Ras GAPとホモロジーがあることが判明した。2.Rhoの標的蛋白質の同定GTP結合型のRhoをマトリックスに固定化してアフィニティカラムクロマトグラフィーを行い、Rhoの標的蛋白質の同定を試みた。その結果、牛大脳からGTP-Rhoに結合する分子量約12万と14万、16万、18万の蛋白質(p120,p140,p160,p180)を分離精製できた。これらの蛋白質はGDP結合型のRhoには結合せず、標的蛋白質総合領域に変異を導入したGTP結合型のRhoにも結合しなかった。また、GTP結合型のH-RasとR-Rasには結合しなかった。したがって、これらの蛋白質はRhoの標的蛋白質であると考えられる。以上本年度の研究計画はほぼ達成することができたと考えている。
DNAマイクロアレイを用いた抗癌剤選択のための遺伝子検査法の開発と臨床応用

癌の治療において治療抵抗性すなわち耐性は重要な課題である。耐性機構を知るには、特定の抗癌剤に特異的な分子薬理的機構、癌の発病・進展に重要な遺伝子など、多くの遺伝子の発現を解析する必要がある。本研究では、治療反応性の指標となりうる新たな耐性遺伝子のスクリーニングのため、株化培養白血病細胞における遺伝子発現プロファイルをDNAマイクロアレイ(DNAチップ)法で解析した。マイクロアレイは、630個の癌関連遺伝子のcDNAをアレイ上に張り付けたHuman Cancer CHIP version 3.0 (TAKARA)を用いた。蛍光色素(Cy3またはCy5)標識cDNAは、それぞれの細胞から抽出したRNAから逆転写反応にて作製した。精製したcDNAは、アレイのスポット上のプローブと競合的にハイブリダイゼーションし、各スポットからのシグナルイメージは、自動蛍光検出器Scan Array 4000 (General Scanning社)にてスキャン後コンピュータ解析した。その結果、trimetrexate耐性白血病細胞MOLT-3において、多剤耐性遺伝子MDR1とともにataxia telangiectasiaなどDNA修復や転写に関係した遺伝子発現亢進が明らかとなった。また、anthracyclin系薬剤のidarubicinに耐性の株化培養白血病細胞MOLT-3にてトポイソメラーゼIIαの低下とGS3855 protein (putative serine/threonine kinase)発現亢進が明らかになった。これら遺伝子発現異常はノーザンブロットにて確認された。これら新規の耐性遺伝子発現は、耐性化した細胞の検出の指標となり、また新たな治療標的とした耐性克服剤など治療法の開発につながると期待される。耐性機構を知るには、特定の抗癌剤に特異的な分子薬理学的機構、癌の発病・進展に重要な遺伝子など、多くの遺伝子の発現を解析する必要がある。マイクロアレイは、630個の癌関連遺伝子のcDNAをアレイ上に張り付けたHuman Cancer CHIP version 3.0(TAKARA)を用いた。耐性細胞として、trimetrexate(TMQ)に200倍耐性化した株化培養ヒトリンパ性白血病細胞MOLT-3/TMQ200を用い、対照として親株細胞を用いた。MOLT-3/TMQ200細胞は、多剤耐性の形質とmethotrexate交差耐性を獲得し、その分子機構としてMDR1発現およびDHFRの遺伝子変異を有する。精製したcDNAは、アレイのスポット上のプローブと競合的にハイブリダイゼーションし、各スポットからのシグナルイメージは、自動蛍光検出器Scan Array 4000(General Scanning社)にてスキャン後コンピュータ解析した。その結果、MOLT-3/TMQ200細胞において、低発現の遺伝子を除外し136個の遺伝子発現の変化が確認され、その内、15遺伝子の発現量が相対的な比が1以上、MDR1を含む4遺伝子が相対的な比が2以上を示した。MDR1以外にDNA修復や転写因子関連の遺伝子発現増加が明らかになった。新規の耐性遺伝子発現は、耐性化した細胞の検出の指標となり、また新たな治療標的とした耐性克服剤など治療怯の開発につながると期待される。現在、新規の耐性遺伝子発現の機能分析中である。

マイクロアレイは、630個の癌関連遺伝子のcDNAをアレイ上に張り付けたHuman Cancer CHIP version 3.0(TAKARA)を用いた。蛍光色素(Cy3またはCy5)標識cDNAは、それぞれの細胞から抽出したRNAから逆転写反応にて作製した。精製したcDNAは、アレイのスポット上のプローブと競合的にハイブリダイゼーションし、各スポットからのシグナルイメージは、自動蛍光検出器Scan Array 4000(General Scanning社)にてスキャン後コンピュータ解析した。その結果、trimetrexate耐性白血病細胞MOLT-3において、多剤耐性遺伝子MDR1とともにataxia telangiectasia発現亢進が明らかとなった。anthracyclin系薬剤のidarubicinに耐性の株化培養白血病細胞MOLT-3にてトポイソメラーゼIIαの低下とGS3955 protein(putative serine/threonine kinase)発現亢進が明らかになった。これら遺伝子発現異常はノーザンブロットにて確認された。これら新規の耐性遺伝子発現は、耐性化した細胞の検出の指標となり、また新たな治療標的とした耐性克服剤など治療法の開発につながると期待される。
ツバルにおける気候変動への危機意識の形成と歴史的知識の記録化に関する人類学的研究

本研究は、気候変動による伝統文化の消滅という危機意識を背景に、ポリネシア・ツバルで実施されてきた歴史の記録化について考察することを目的とする。2014年度は、これまで行ってきた研究を踏まえながら、それが現在、どのようなかたちで展開しているのかについての最新状況を明らかにするべく、関連する諸資料の収集・分析を行った。その結果、以下のことが明らかになった。これまでの研究で、ツバルの人びとの危機意識の形成においてはマスメディアによる影響が色濃く見られることを指摘してきたが、近年ではインターネット空間で流通する情報が大きな意味を持ちつつあることが明らかになった。さらに、インターネットの普及などの情報を得るチャンネルの多様化に呼応するかのように気候変動をめぐる見方もまた近年とみに多様化しており、気候変動が必ずしも伝統文化の消滅という危機意識を形成しないような状況へと変化しつつあることがわかった。また、ツバルの人びとによってこれまで行われてきた歴史の記録化は一定程度、成果を残してきたが、近年では多様な意見をまとめることがより一層困難になり、その活動が停滞しはじめてきていることが明らかになった。この背景のひとつには、気候変動をめぐる意見が多様化し、必ずしも危機意識と結びつかなくなってしまったことがあげられる。他方、こうした状況に対して、現在では、何が記録化すべき「真実」の歴史なのかを、超自然的な存在によって明らかにしようとする動きもみられるようになった。この点は、気候変動の危機意識に端を発した歴史の記録化の動きが、現地社会の伝統的な概念と結びつきながら、新たな展開をとげていることを示唆するものである。26年度が最終年度であるため、記入しない。本研究は、人類学的なフィールドワークと文献調査を通じて、気候変動による伝統文化の消滅という危機意識を背景にツバルで展開している歴史の記録化について研究することを目的とする。この目的を達成するため、2012年度では記録化の活動をローカルな社会的文脈に位置づける視野を獲得するべく、オセアニアの歴史実践をめぐる既存の研究に関しての文献調査を集中的に進めていった。具体的には、オセアニアの他の地域で展開している歴史の記録化や共有化を目指す運動の特徴と展開過程についての研究動向をレビューし、それを基にツバルの事例の特徴を明らかにしていった。調査の結果、広くオセアニア諸社会における伝統復興運動において、自社会の歴史の記録化が叫ばれることが多いものの、ツバルの事例のように、記録化の動きが自生的に展開し、かつ極めて詳細に記録化が進んでいるケースはかなり稀であることがわかった。これには、20世紀初頭から識字率が高かったこと、植民地支配や人類学者を始めとする様々な学術研究者によって伝統文化を記録化するという活動が知られていたことなどが社会・文化的な背景としてあると考えられる。さらに、直接的には、合意やコンセンサスを形成することを尊ぶ文化的な背景が強く作用していたことが明らかになった。ツバルでは、島の意見が一つになることが強く望まれているが、現状では、すべての人々が合意する歴史認識を形成することができていないというジレンマを抱えている。こうした状況に対して、多様な意見の中から共通性を見出していくことで問題解決が図られてきており、その結果、詳細な歴史記録がつくりだされていったと考えられる。本研究は、気候変動による伝統文化の消滅という危機意識を背景に、ポリネシア・ツバルで展開している歴史の記録化について考察することを目的とする。この目的を達成するために、2013年度においては、1「気候変動による危機意識の形成」、および2それを背景にしてツバル・ナヌメア環礁にて展開中の「歴史の記録化の動き」についてそれぞれ調査・分析を進めた。また、比較の視座を得るために、ニュージーランド在住のツバル人を対象にした調査を実施した。調査・分析の結果以下のことが明らかになった。1「気候変動による危機意識の形成」に関しては、近年、急速に普及しているインターネット空間でやりとりされる情報が人々の危機意識の形成に重要な意味を持ちつつあるが、そこでは既存のマスメディアで流布していた「沈みゆく島」というイメージがそのまま継承されていた。2「歴史の記録化の動き」に関しては、事例としてとりあげたナヌメア環礁における「憲章委員会」の活動では、当初の目的は歴史の記録・保存であったのだが、次第に移住先のコミュニティや将来世代において有用な「ハンドブック」の作成へと発展してきたことがわかった。この理由として、気候変動によってツバルの人々が他国へと移住せざるを得なくなった際に自らの文化を守るために必要であるためと説明されており、気候変動に対する危機意識が記録化という歴史実践をより未来志向で実用的なものにするよう作用してきたことを示唆するものである。

さらに、インターネットの普及などの情報を得るチャンネルの多様化に呼応するかのように気候変動をめぐる見方もまた近年とみに多様化しており、気候変動が必ずしも伝統文化の消滅という危機意識を形成しないような状況へと変化しつつあることがわかった。また、ツバルの人びとによってこれまで行われてきた歴史の記録化は一定程度、成果を残してきたが、近年では多様な意見をまとめることがより一層困難になり、その活動が停滞しはじめてきていることが明らかになった。この背景のひとつには、気候変動をめぐる意見が多様化し、必ずしも危機意識と結びつかなくなってしまったことがあげられる。他方、こうした状況に対して、現在では、何が記録化すべき「真実」の歴史なのかを、超自然的な存在によって明らかにしようとする動きもみられるようになった。この点は、気候変動の危機意識に端を発した歴史の記録化の動きが、現地社会の伝統的な概念と結びつきながら、新たな展開をとげていることを示唆するものである。26年度が最終年度であるため、記入しない。10月に現地調査を行うことを計画していたが、同時期に大規模な会議が一ヶ月ほど開かれることになり、かなりの混乱が予想されるため、現地調査をすることができなかった。ただし、本年度は文献調査が主であり、かつ同調査も現状把握に関する予備的なものであったため、本研究の大枠には影響しなかった。2013年10月にニュージーランドにて現地調査を行うことを計画していたが、受け入れ先の都合によって2014年2月に延期した。そのため、調査データの詳細な分析は来年度に持ち越さざるをえなかったが、今年度はこれまで得た民族誌的資料の再分析や文献研究により一定の成果を収めることができた。今後は、気候変動による伝統文化の消滅という危機意識が記録化の作業や内容にどの程度、影響を与えているのかについて集中的に分析していく。そのために、まずは海面上昇や干ばつなどの気候変動に起因する具体的問題と危機意識に関する諸民族の状況に関する情報を収集・分析し、それを今年度の研究成果と照らし合わせて考察することで、歴史の記録化という実践をグローバルかつ今日的な問題系に位置づけることを試みる。こうした作業を通して、記録化というナヌメア島民による歴史実践を事例に、気候変動という不確定な将来に直面し、危機感を募らせている島嶼民が、いかに過去や現在を(再)定義し、未来への実践を紡ぎだしているのかを明らかにしていく。これまでの調査研究を深化させていくのはいうまでもなく、今後は、ニュージーランド在住のツバル人移民の調査結果の分析を進め、ホームランドであるツバルでの状況を移民コミュニティのものと比較検討していく。ホームランドと移民コミュニティを対照させることで、どのような状況で気候変動に関する危機意識が形成され、そしてそれが歴史の記録化とどのように結びついていくのかについてより明確なかたちで示していく。
プライバシー保護データマイニングを用いたコンテキストベース位置情報サービス

位置情報サービスの普及に伴い,各種デバイスにセンサーを搭載することで,より正確かつ詳細な「位置情報・環境情報・操作行動履歴・プロファイル等」のデータに基づくコンテキストベースの情報サービスが可能になりつつある.本研究では,プライバシー保護データマイニング(Privacy Preserving Data Mining)技術を用いて,位置情報サービスプロバイダにおけるデータセキュリティを担保した上で,より高精度なコンテキストベースサービスを提供するデータマイニングアルゴリズムの研究を行っている.現在,スマートフォンなどにより記録される行動履歴データ,SNSを用いて交換されるリアルタイム情報,自治体などが提供するオープンデータ等から得られる複数の分散環境下のデータベースを用いたソーシャルアプリケーション構築を行う上で,安全性を確保する分散処理アルゴリズムの提案・実装ならびに評価を目指している.提案アルゴリズムを利用する具体例の一つとして,過年度の研究指導テーマとして取り組んだ「ランドマークを用いたバリアフリー経路探索システム」や「交差点における複数ランドマークを用いた経路推薦システム」などのアプリケーションが考えられ,ソーシャルフィルタリングを応用した的確な経路推薦や経路探索を実現するアルゴリズムとなると考えている.第二年度は,分散データベース環境におけるプライバシー保護アルゴリズムの高速化に関する研究調査を進めた.特に,複雑な演算処理を含むアルゴリズムとなる情報プライバシー保護データマイニングの研究調査を進めた.また,プライバシー保護データマイニングアルゴリズムの実験環境整備を進めつつある.初年度はデータ処理環境の再構築を行なったが,二年度の途中で,クライアント側の機器故障が発生し,修復が不可能となったため,新たな機器導入と環境修復を行うための作業時間が発生した.一昨年度に引き続き,実験環境の再構築が生じたため,データ処理環境の導入に遅れが出ている.ただし,クライアント側の機器導入は,本研究予算から支出していない.第二年度に,実験環境の再構築が円滑に進まなかったため,初年度に予定した機器購入計画を遅らせ,第三年度の導入を予定する.そのため,初年度の予算執行残額相当を,第三年度予算として持ち越している.今年度は,導入が遅れたデータ処理環境の構築を進める予定である.また,オープンデータを利用し,分散データベース環境におけるコンテキストベース位置情報サービスに必要なプライバシー保護データマイニング(Privacy Preserving Data Mining)アルゴリズムの調査研究をさらに進める.加えて,分散環境下におけるプライバシー保護データマイニングのプロトタイプ実装に着手し,研究成果の発表計画を立てている.最終年度までに,計画通り,提案アルゴリズムを実装し,その検証と性能評価に関する研究成果としてとりまとめる予定である.位置情報サービスの普及に伴い,各種デバイスにセンサーを搭載することで,より正確かつ詳細な「位置情報・環境情報・操作行動履歴・プロファイル等」のデータに基づくコンテキストベースの情報サービスが可能になりつつある.本研究では,プライバシー保護データマイニング(Privacy Preserving Data Mining)技術を用いて,位置情報サービスプロバイダにおけるデータセキュリティを担保した上で,より高精度なコンテキストベースサービスを提供するデータマイニングアルゴリズムの研究を行っている.具体的には,携帯デバイスによる行動履歴データ,都市高速道路において蓄積されている交通データウェアハウス,プローブ機能を備えた車両から得られる複数データベースを用いて,アルゴリズムの提案・実装ならびに評価の実施を目指している.初年度は,プライバシー保護アルゴリズムの高速化に関する研究調査を進めた.特に,位置情報・加速度情報・渋滞情報などを含む行動履歴データに基づくコンテキストベース位置情報サービスの基礎となるデータマイニングアルゴリズムに関する研究調査を行なった.加えて,より複雑な演算処理を含むアルゴリズムとなる情報プライバシー保護データマイニングの研究調査も進めた.さらに,プライバシー保護データマイニングアルゴリズムを実装したプロトタイプシステムの実験環境整備を進めた.なお,過年度の研究で対象としてきた交通データウェアハウスやプローブカーデータ以外に,スマートフォンなどを用いた行動履歴データとして蓄積されているオープンデータの利用検討を進めている.開始年度前年の年度末に,過年度までデータ処理実験環境を構築してきた機器にトラブルが生じた.そのため,年度開始当初に,機器修理などに1カ月程度を要した.その後,実験環境の再構築作業が生じており,実験を円滑に進めることができず進捗の遅れが出た.伴って,研究発表にも遅れが生じている.なお,機器修理の費用は,本研究予算から支出していない.位置情報サービスの普及に伴い,各種デバイスにセンサーを搭載することで,より正確かつ詳細な「位置情報・環境情報・操作行動履歴・プロファイル等」のデータに基づくコンテキストベースの情報サービスが可能になりつつある.本研究では,プライバシー保護データマイニング(Privacy Preserving Data Mining)技術を用いて,位置情報サービスプロバイダにおけるデータセキュリティを担保した上で,より高精度なコンテキストベースサービスを提供するデータマイニングアルゴリズムの研究を行っている.現在,スマートフォンなどにより記録される行動履歴データ,SNSを用いて交換されるリアルタイム情報,自治体などが提供するオープンデータ等から得られる複数の分散環境下のデータベースを用いたソーシャルアプリケーション構築を行う上で,安全性を確保する分散処理アルゴリズムの提案・実装ならびに評価を目指している.提案アルゴリズムを利用する具体例の一つとして,過年度の研究指導テーマとして取り組んだ「ランドマークを用いたバリアフリー経路探索システム」や「交差点における複数ランドマークを用いた経路推薦システム」などのアプリケーションが考えられ,ソーシャルフィルタリングを応用した的確な経路推薦や経路探索を実現するアルゴリズムとなると考えている.第二年度は,分散データベース環境におけるプライバシー保護アルゴリズムの高速化に関する研究調査を進めた.特に,複雑な演算処理を含むアルゴリズムとなる情報プライバシー保護データマイニングの研究調査を進めた.

また,プライバシー保護データマイニングアルゴリズムの実験環境整備を進めつつある.初年度はデータ処理環境の再構築を行なったが,二年度の途中で,クライアント側の機器故障が発生し,修復が不可能となったため,新たな機器導入と環境修復を行うための作業時間が発生した.一昨年度に引き続き,実験環境の再構築が生じたため,データ処理環境の導入に遅れが出ている.ただし,クライアント側の機器導入は,本研究予算から支出していない.初年度に,実験環境構築が円滑に進まなかったため,初年度の機器購入の計画を遅らせ,平成30年度の導入を予定している.また,今年度は,前年度までに蓄積した位置情報データやオープンデータを用いて,コンテキストベース位置情報サービスに必要なプライバシー保護データマイニング(Privacy Preserving Data Mining)アルゴリズムを提案する.可能であれば,プロトタイプ実装に着手する予定である.翌年度以降は,提案するプライバシー保護データマイニングアルゴリズムをプロトタイプ環境に実装し,提案アルゴリズムの検証と性能評価を進める予定である.再来年の最終年度までには,計画通り,処理速度の高速化を含む各種課題解決を進め,研究成果をとりまとめる予定である.第二年度に,実験環境の再構築が円滑に進まなかったため,初年度に予定した機器購入計画を遅らせ,第三年度の導入を予定する.そのため,初年度の予算執行残額相当を,第三年度予算として持ち越している.今年度は,導入が遅れたデータ処理環境の構築を進める予定である.また,オープンデータを利用し,分散データベース環境におけるコンテキストベース位置情報サービスに必要なプライバシー保護データマイニング(Privacy Preserving Data Mining)アルゴリズムの調査研究をさらに進める.加えて,分散環境下におけるプライバシー保護データマイニングのプロトタイプ実装に着手し,研究成果の発表計画を立てている.最終年度までに,計画通り,提案アルゴリズムを実装し,その検証と性能評価に関する研究成果としてとりまとめる予定である.進捗状況に記述した通り,研究開始前年度の3月末に,過年度までデータ処理を行なっていた実験機器にトラブルが生じたため,実験環境の再構築作業が生じた.その結果,本研究予算で構築予定の実験環境構築に要する機器購入を翌年度に延期することとした.そのため,次年度使用額が生じることとなった.進捗状況に記述した通り,第二年度にクライアント機器が故障し修復不能となった.研究開始前年度末の処理
Switching Mechanismからみた双極性感情障害の時間病態生理

Switchingの機序の解明のために、これまでの臨床報告の文献から、Bipolar Disorderに投与されている代表的な薬物(炭酸リチウム、バルプロ酸ナトリウム、サートラリン、クロミプラミン)のラットサーカディアンリズムに対する影響を検討した。また、Switching現象は、病相の頻回化の現象と平行して、病歴の長さ、加齢によってその程度と頻度が増加していくという臨床報告が多数あることからクロミプラミン、炭酸リチウム、バルプロ酸の行動リズムに与える影響は、老年ラットにおいても検討し、加齢によるそれらの影響についても検討した。実験には、Wistar系雄性ラット(若年ラット9W、老齢ラット60W)を用いた。行動リズムの計測には摂食摂水が可能な側室を持つ回転かごを用い、5分間隔でコンピューターに取り込んだ。それぞれの薬物を飲料水にまぜて、投与した。リズムの解析には、x自乗ペリオドグラムを用いた。その結果、ラットのサーカディアン周期は、炭酸リチウム、サートラリンの投与で延長し、バルプロ酸、クロミプラミンの投与で短縮した。セロトニン再取込み阻害剤であるサートラリンは、ラットの行動量を増加させた。また、バルプロ酸、リチウム、クロミプラミンの投与による、行動リズムの周期の変化は、老齢ラットが若年ラットに比較して大きかった。従って、三環系抗うつ薬とSSRIは、時間生物学的に異なった作用を有しており、うつ病期から急激にそう状態に移行するSwitching現象は、セロトニン再取込み阻害作用以外の三環系抗うつ剤の有する作用で惹起される可能性が示唆された。また、加齢によって今回使用した薬物の影響が大きくなることから、Switching現象は加齢によるセロトニン神経の脆弱性と、シナプス前トランスポーター以外の三環系抗うつ剤の作用によることが示唆された。
関西中小企業のアジアにおけるバリューチェーン立地戦略とその政策的支援に関する研究

中小企業の海外進出の多様化が、グローバルなサプライチェーンの変化に重要な役割を果たしており、そうした中で関西中小企業の東南アジア進出の立地戦略をバリューチェーンの視点から明らかにする必要がでてきた。また、中小企業の海外展開にはリスクが高いため、地方自治体による産業政策としての中小企業の海外展開支援の実態を解明も重要である。こうした研究目的を達成するため、海外進出している中小企業へのアンケート調査と、進出先でのヒアリング調査から傾向と実態を明らかにすることを目指している。
明代の科挙制度と出版に関する研究

本年度は、郷試と会試のそれぞれ第二場で出題された「論」題と第三場で出題された「経史策」題、さらには最終段階の殿試で出題された「制策」題の受験対策のためにどのような受験勉強が必要となって、それに伴ってどのような書物が出版され、利用されたのかという点について考察した。「論」、「策」の学習には、『性理大全』をはじめとする「性理学」の著作、『通鑑』類の歴史書や三蘇の「文集」をはじめとする「古文」が多く読まれたことから、これらの関連の書物を中心に前年度と同様、『千頃堂書目』、『明史』「藝文志」、『四庫全書総目提要』、『経義考』、杜信孚編著『全明分省分県刻書考』等の記述を手がかりにして、特色のありそうな書物を抽出し、『四庫全書存目叢書』『続修四庫全書』等所収のものを中心に調査を行うとともに、内閣文庫その他の機関に蔵される関連書籍の調査も行ってきた。さらに、上記の研究に加えて、前年度の課題との関連で、尊経閣文庫所蔵の「制義」類の総集についても調査を行ってきた。これの研究は現在も継続中である。なお、今年度は上記研究の遂行と同時に、「明代の科挙制度と出版」という観点を基礎に据えた上で、調整班の課題である「出版政策」の問題に関連する研究も行った。具体的には、明代の科挙制度に関連して出版された官撰の書物の中心をなす「登科録」についての研究である。現存のもので閲覧が可能な「登科録」を広く調査し、その内容的な特色を明らかにした上で、出版に際して明朝政府がいかなる関与を行ったのかという問題について考察を行った。研究論文については、下記参照。また研究発表として、「明代における「試録」の「程文」をめぐる問題について」(特定領域研究(「東アジア出版文化の研究」)(B)(E)班合同研究会2004年10月31日於キャンパスプラザ京都)がある。明代科挙における第一段階の試験である郷試と第二段階の会試それぞれの第一場で出題された「四書義」「五経義」の受験のために、受験生にはどのような学習が必要となったのか、また、それに伴ってどのような書物が出版され、利用されたのかという点を中心に考察した。主な方法としては、明代士大夫の年譜をはじめとする伝記資料に記載された科挙試験の受験勉強に関わる読書の記録を調査することで、「四書義」「五経義」対策のためにどのような書物が読まれていたのかという点について考察を行った。そして、それと並行して、「四書」「五経」関連の著作の出版状況を調査し、それぞれの文献が明代科挙の「四書義」「五経義」の試験勉強にどう役立てるために作成されたものであるかという点についても考察を行った。前者については、特に、明代の科挙においてとりわけ重視された朱子学的教養を養成するための読書カリキュラムとして知られる元・程端礼撰『程氏家塾読書分年日程』が、明代の科挙試験の受験教育の場において一体どの程度の影響力を有して利用されたのかという点を手がかりに、明代士大夫の儒教的教養の形成過程における本音と建て前の実態について考察した。また、後者については、嘉靖年間から万暦年間以降に出版物の数が飛躍的に増大していった状況において、中でもいわゆる「八股文」の模範答案集が大量に出回るようになった状況下にあって、士人達の読書の傾向がどのように変わったのかという点について考察した。

また研究発表として、「明代における「試録」の「程文」をめぐる問題について」(特定領域研究(「東アジア出版文化の研究」)(B)(E)班合同研究会2004年10月31日於キャンパスプラザ京都)がある。
重油由来の多環芳香族炭化水素による免疫抑制が魚類感染症の発生に与える影響

申請者は、これまでに重油が魚類に免疫毒性を示し、感染症を誘発することを明らかにした。重油は多様な化学物質の混合物であり、その成分中では、多環芳香族炭化水素(PAHs)が免疫毒性を示すことが知られている。しかしながら、PAHsがどのようなメカニズムでその毒性を発揮するのかについての知見は乏しい。代表的なPAHであるベンゾ[a]ピレン(BaP)は水酸化酵素であるCYP1A1の発現を誘導し、免疫毒性を誘発すると推測されている。本酵素はBaPが受容体であるアリールハイドロカーボン受容体(AhR)に結合することで誘導されると考えられるが、魚類白血球においてAhRの存在そのものが明らかにされていない。そこで本研究では、魚類白血球におけるAhR2遺伝子の存在をin situ hybridizationで明らかにするとともに、BaP暴露後のAhR2α・β遺伝子の発現変化を調べた。ニジマスの頭腎および脾臓からフローサイトメーターで白血球を単離した。対照実験として、肝細胞を用いた。これらを培養し、0.1および1μMの濃度でBaPを24時間暴露した。その後、AhR2αおよびβを検出できるプローブを設計し、in situ hybridizationを行った。また、CYP1A、AhR2αおよびβ遺伝子を個別に検出できるリアルタイムPCRの系を確立し、その発現量を定量した。in situ hybridizationの結果、BaP暴露の有無に関わらず、肝細胞および白血球から特異蛍光が観察され、世界で初めて魚類白血球からAhR2遺伝子の検出に成功した。リアルタイムPCRの結果から、1μM暴露区のCYP1A遺伝子の発現量は、肝細胞および頭腎白血球で、対照区と比較して、それぞれ、28.6倍および5.6倍有意に増加した。AhR2αおよびβ遺伝子については、いずれの実験区においても有意差は認められなかったものの、肝細胞および頭腎白血球ではこれらの遺伝子の発現量が濃度依存的な増加傾向を示した。このことから、BaPの免疫毒性機構として、BaPがAhR2に結合することでCYP1Aが誘導され、その代謝物が免疫毒性を示していることが示唆された。最も重要な海洋汚染として,タンカー事故などによる重油汚染がある.本課題では,重油汚染が魚類感染症の発生にどのような影響を与えるのかを明らかにすることを目的とした.ヒラメにウイルス性出血性敗血症ウイルス(VHSV)を感染した後,重油暴露を行ったところ,3つの対照区(非感染・非暴露区,ウイルス感染区,重油暴露区)では斃死は認められなかったものの,複合ストレス区では,50%の斃死率が得られた.このことから,単独ストレスでは斃死を誘発しない濃度でも複合的なストレス下では,致死を誘発することが明らかにされた.その原因を明らかにするために,各区の心臓中のVHSV力価を調べたところ,複合ストレス区のウイルス力価は,10^510^<8.25>のTCID_<50>でウイルス感染区10^310^<6.8>TCID_<50>よりも高い傾向にあった.さらに,斃死した魚の大部分がウイルス性出血性敗血症(VHS)の症状を呈していたことから,斃死の原因は,VHSであることが示唆された.複合ストレス区の斃死の原因を解明するためにマイクロアレイを行ったところ,ウイルス感染区および複合ストレス区では,ウイルス感染に対する防御反応として,アポトーシス関連遺伝子群の発現量が他の2区よりも有意に高かった.しかしながら,興味深いことに,複合ストレス区では,ウイルス区と比較して,アポトーシス関連遺伝子が有意に低かった.特に,NK細胞がウイルス感染細胞にアポトーシスを誘導するために産生する酵素であるグランザイムおよびパーフォリンなどの重要な遺伝子の発現量が低下していた.ヒラメの斃死率,心臓中のウイルス力価およびマイクロアレイの結果を総合すると,ウイルス感染魚に重油が暴露されるとアポトーシス誘導活性が低下し,魚体内でウイルスの複製が盛んになることで,VHSが発症し,斃死することが強く示唆された.申請者は、これまでに重油が魚類に免疫毒性を示し、感染症を誘発することを明らかにした。

また、CYP1A、AhR2αおよびβ遺伝子を個別に検出できるリアルタイムPCRの系を確立し、その発現量を定量した。in situ hybridizationの結果、BaP暴露の有無に関わらず、肝細胞および白血球から特異蛍光が観察され、世界で初めて魚類白血球からAhR2遺伝子の検出に成功した。リアルタイムPCRの結果から、1μM暴露区のCYP1A遺伝子の発現量は、肝細胞および頭腎白血球で、対照区と比較して、それぞれ、28.6倍および5.6倍有意に増加した。AhR2αおよびβ遺伝子については、いずれの実験区においても有意差は認められなかったものの、肝細胞および頭腎白血球ではこれらの遺伝子の発現量が濃度依存的な増加傾向を示した。このことから、BaPの免疫毒性機構として、BaPがAhR2に結合することでCYP1Aが誘導され、その代謝物が免疫毒性を示していることが示唆された。