hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
世界最高水準のモバイルICT環境を実現する次世代情報通信基盤と応用実証

本申請の研究開発項目として以下を設定してきた。基盤技術として、(1)無線通信履歴の取得、(2)無線通信履歴を活用した通信品質予測、(3)品質予測に基づく適応配信制御と最適経路探索。拡張技術として、(4)クラウド拡張、セキュリティ、センサー活用、新無線技術、QoE評価、(5)アプリケーションの具体化とプロトタイプ実装。(1)では、初年度から継続して無線通信品質の計測・収集を行い、後述する深層学習の学習データとしても活用した。(2)では、深層学習を活用した通信品質予測と移動手段予測の提案を行った。それぞれの研究成果を国際学会で発表するとともに、論文誌への投稿も行い、採択された。(3)では、通信品質予測の結果を活用し、予測可能区間のQoE評価式を最大化する適応配信制御の提案と評価を行った。研究成果は、国際学会で発表を行うとともに、論文誌投稿を行い、採択された。また、無線LANや車車間通信のための通信制御方式の提案、UHD映像、360度映像などの配信実験も行い、それぞれ学会発表を行った。(4)では、研究室内のパーソナルクラウドと学外の商用クラウドから成る階層システムを構成し、センサーデータやマルチメディアデータを分散処理するプロトタイプを試作した。また、トラヒックモデルの類似性に基づくマルウェア分析に関する成果発表を行った。また、ゲーム理論を活用した省電力通信、全二重通信を活用したマルチホップ通信、等に関する研究成果を国際学会論文誌に投稿し、採択された。QoEに関しては、バイオセンシングに基づく映像視聴者の行動分析や感情推定に関する評価を行い、学会発表を子なった。(5)に関しては、階層化クラウドを用いた適応分散処理のぷトロタイプシステムや、UHD映像を無線リンク上で送受信し、行動推定や心拍推定を行うプロトタイプの試作を行った。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。本申請の研究開発項目として以下を設定している。基盤技術として、(1)無線通信履歴の取得と無線信号マップの作成、(2)無線通信履歴を活用した通信品質予測、(3)品質予測に基づく適応配信制御と最適経路探索、拡張技術として、(4)システムの大規模化、セキュリティ確保、センサー活用、新無線技術対応、QoE評価、(5)アプリケーションの具体化とプロトタイプ実装。基盤技術に関しては、まず(1)として、無線通信品質を収集するスマートフォンアプリを開発して大学周辺の無線信号マップを取得し、(3)として、スループットを最大化する経路探索を行い、MPEG-DASHを組合せた映像配信実験として、提案方式の有効性を確認した。また、(1)と(3)の組合せとして、複数人が同時に経路探索を行う場合の問題の定式化と相互作用に関する基礎検討を行った。また、(2)として、隠れマルコフモデル、ならびに線形予測分析を活用した無線通信品質の予測アルゴリズムに関する検討を行い、それぞれについて実測データに基づく性能評価を行い、有効性を確認した。(3)に関しては、スマートフォンの電力消費の計測結果に基づく消費電力モデルを作成し、映像データをバースト的に送信することで省電力化を図る映像配信技術に関する検討も行った。拡張技術に関しては、まず(4)として、商用クラウドを用いた評価実験システムの整備、マイコンボードを用いたセンサー活用環境の整備、スモールセルとマクロセルの組合せによる同時配信、人体計測機器を用いた映像品質評価などに関する検討を進めた。また、(5)として、無線LAN環境とLTE環境において、MPEG-DASHを用いた4K/8K映像配信実験を実施し、バッファ制御の影響に関する調査を行った。このほか、次世代ネットワークと映像配信に関する招待講演も行った。本研究課題はおおむね順調に進展している。(1)無線通信履歴の取得と無線信号マップの作成は、スマートフォンアプリを開発し、大学付近における無線通信品質の収集を行っている。(2)無線通信履歴を活用した通信品質予測は、機械学習と線形予測の二手法について、実用上は困らない推定精度が得られる目処を付けた。(3)品質予測に基づく適応配信制御と最適経路探索に関しては、実機実験として、通信品質の向上に有効に機能する目処を付けた。(4)システムの大規模化他については、初年度は主に環境整備に務め、二年目以降の本格活用の目処を付けた。(5)プロトタイプ実装に関しては、現状は映像データのプリエンコードを行ったり、4K/8K映像の表示は行わない通信実験に留めるなど、実時間性は実現できていないが、4K映像表示が可能なスマートフォンを手配するなど、最新の機器環境の整備を進めている。事前に設定した研究開発課題において、ほぼ想定通り(課題によっては想定以上)の成果が得られているため、本年度前期の進捗によっては研究開発のスケジュールを早め、研究費の前倒し利用も活用しつつ、研究開発を加速することも検討している。(1)では、初年度に開発したスマートフォンアプリを使用し、大学周辺の無線通信品質計測を進めている。この時、移動手段や時間情報による場合分けも進めている。(2)では、初年度から継続して隠れマルコフモデルと線形予測分析を併用したスループット予測の検討を進めており、国際学会発表を行うと共に、論文誌投稿を準備している。

(3)では、通信品質履歴を活用し、スループットを最大化、もしくは消費電力を最小化する移動経路を提示し、実機実験によって有効性を実証し、国際学会で成果発表を行った。(4)でば、クラウド拡張として、研究室内にパーソナルクラウド、学外に商用クラウドを配し、携帯端末情報をエッジ処理する階層化クラウド環境を整備した。セキュリティに関しては、マルウェア対策のためのトラヒック分析に関する成果発表を行った。センサー活用に関しては、可視光カメラ、赤外線カメラ、測距センサーなどを配した実験環境を構築し、イベント検知に基づく適応配信制御に関する成果発表を行った。無線技術に関しては、5Gを想定した実験環境の情報収集と整備を開始した。QoE評価に関しては、新指標の構築を目指した注視点計測等の成果発表を行った。(5)では、高効率・省電力映像配信アプリケーション、家庭内の8K映像再配信、各種IoTデバイスを用いたセンサーアプリケーション、などのプロトタイプ実装を進めた。これらに加え、次世代ネットワークや無線LANの効率的な制御技術に関する招待講演も行った。本研究課題はおおむね順調に進展している。また、昨年度は研究費の前倒し申請を行い、研究開発の加速に役立てた。(1)では、初年度に開発したスマートフォンアプリを活用し、大学周辺の無線通信品質の計測を進めている。また、アプリ拡張として、ダウンロードに加えてアップロード時の省電力化を図る工夫を加えている。(2)では、現状の隠れマルコフモデルと線形予測分析によるアプローチに加え、機械学習を活用した方式検討の準備を進めている。(3)では、実機実験評価として提案方式の有効性を確認し、論文誌投稿の準備を開始した。(4)では、クラウド拡張では、OpenStackによるパーソナルクラウド構築をほぼ完了し、次年度以降の通信実験、ならびに応用実験の目途を付けた。セキュリティでは、研究成果の論文誌投稿の準備を進めている。センサー活用では、上記クラウド拡張と連携し、エッジコンピューティングも活用した効率的かつ柔軟な応用開発を目指している。無線技術は2020年の5G実用化を想定した実験準備を開始し、シミュレーション評価、実機評価実験の二面から準備を進めている。QoE評価に関しては、観測可能な変数(瞬断時間など)からのQoE推定式も活用した評価実験を進めている。(5)のアプリケーション開発では、各種のプロトタイプ実装と評価に加え、上記クラウド拡張とセンサー活用を統合した今後の新規なプロトタイプ実装の準備を進めている。本申請の研究開発項目として以下を設定している。基盤技術として、(1)無線通信履歴の取得、(2)無線通信履歴を活用した通信品質予測、(3)品質予測に基づく適応配信制御と最適経路探索。拡張技術として、(4)クラウド拡張、セキュリティ、センサー活用、新無線技術、QoE評価、(5)アプリケーションの具体化とプロトタイプ実装。
血栓溶解療法と新規神経保護薬リチウム

脳梗塞に対する新規神経保護薬リチウムの組織プラスミノーゲン・アクチベーター(t-PA)との併用療法について検討するため、よりヒトに近い動物モデルの確立を行った。種々の条件を検討した結果として、t-PAにより血栓溶解を起こし脳虚血の改善が得られ、かつ脳虚血からある程度の時間が経過した場合には逆に脳出血を含めたt-PAの副作用により脳虚血性障害が増悪する、といったヒトでの脳塞栓に近い状態をできるだけ再現することに成功した。また局所脳虚血モデルへの炭酸リチウム投与はアポトーシスによる神経細胞死を抑制したが、この保護効果は従来報告されているAktの活性化を介していないことが示唆された。本研究は新規神経保護薬としてのリチウムについて、脳梗塞急性期の血栓溶解療法として用いられる組織プラスミノーゲン・アクチベーター(t-PA)の神経傷害作用を軽減する効果について検討した。リチウムはt-PAの血管障害作用抑制の他、アポトーシス抑制作用により神経保護的に作用すると考えられる。我々はまず、ラット遠位中大脳動脈閉塞モデルに対し虚血後にリチウムを腹腔内投与し、脳梗塞の縮小効果を確認した。さらにこの脳組織において、リチウムが直接阻害するGSK3βを調節するタンパクであるAktのリン酸化が亢進していないことを見いだした。さらにリチウムによる治療効果を示すため、自家血栓を用いたラット脳塞栓モデルおよび、このモデルに対するt-PAの治療効果と出血性合併症を安定して再現することが前提として必要であった。虚血時間、自家血栓の量、t-PA投与量など様々な条件設定の最適化を行った結果、自家血栓による安定した梗塞体積が得られた。さらにt-PAの脳虚血2時間後の投与で血栓溶解による梗塞体積の縮小効果を示し、また脳虚血4時間後のt-PA投与では出血性合併症の増加と死亡率の増加を示すという、きわめてヒトの脳塞栓症に対してのt-PAの治療効果と副作用をよく再現するモデルの作成に成功した。このような動物モデルは手技上の難しさから未だ使われる報告は少なく、本モデルの確立は今後の本研究、ないし異なる薬剤を標的とした研究を行うにあたり大きな優位点と考えている。引き続き本モデル動物を使用し炭酸リチウムの腹腔内投与を行い神経保護作用について現在検討中である。また、ラット中大脳動脈遠位閉塞モデルを使用し、リチウムの作用機序の1つとされるGSK3βおよびβカテニンのリン酸化について検討中である。このような動物モデルは手技上の難しさから未だに使われる報告は少なく、本モデルの確立は今後の本研究、ないし異なる薬剤を標的とした研究を行うにあたり大きな優位点と考えている。引き続き本モデル動物を使用し、リチウムの腹腔内投与を行い神経保護作用について現在検討中である。また、ラット中大脳動脈遠位閉塞モデルを使用し、リチウムの作用機序の1つとされるGSK3βおよびβカテニンのリン酸化について検討し、「Aging and Disease」誌に発表した。

本研究結果は2012年Aging and Disease誌(査読有り)にて論文発表した。動物モデル手術が環境要因のために十分な数施行できなかったため。24年度が最終年度であるため、記入しない。ひきつづき同様の方針でリチウムの神経保護効果とそのメカニズムについて検討を続ける。
セメント系材料における超音波伝播挙動に基づく凝結硬化過程の連続モニタリング

本研究では,セメントペーストを対象として,AE計測システムを活用した超音波計測により,特に材料の粘性の観点から凝結硬化過程の評価手法について検討した。実験では凝結遅延剤を用いて,検討ケースにバリエーションを設けた。単一円筒形回転粘度計により粘度測定を行い,超音波伝播特性値との関連性について検討した。また,参考として,プロクター貫入抵抗試験結果との比較も行った。以下に本研究で得られた結論を示す。1)本実験の範囲内では,超音波伝播速度の増分が変化する変曲点の時刻や伝播速度に着目することにより,遅延剤の作用による凝結性状の違いを評価できる。2)回転粘度計により測定される見掛け粘度は,貫入抵抗試験により判定される始発以前の状態にあるセメントペーストのせん断応力に対する抵抗性の程度と対応しているものと考えられる。3)最大振幅値の経時変化は,見掛け粘度の挙動とかなり近いことが明らかとなった。これによって,最大振幅値は,セメントペーストのせん断弾性率の変化を適確に捉えることができる。4)周波数分布は,セメントペーストの硬化に伴い変化する伝播特性値であり,超音波伝播速度および最大振幅値では感度の低下する領域においても,凝結硬化過程を把握できる可能性がある。今年度は,コンクリートとセメントペーストの硬化挙動とが密接な関係にあるということに基づき,基礎研究としてセメントペーストのみを実験の対象にした。実験では,試料に対して超音波の計測を実施し,評価パラメータとして伝播時間,波形の最大振幅値および周波数分布を用いて,短時間に変化する材料の硬化挙動を捉えることを主眼とした検討を行うこととした。以下に,今年度に得られた結果の概要を示す。1)独自に工夫した超音波計測システムを活用することにより,フレッシュ状態から硬化過程におけるセメントペーストにおいて,超音波を連続的に計測することができた。2)本実験の範囲内では,伝播速度は,プロクター貫入抵抗試験により判断した始発から終結までの範囲において,セメントペーストの状態変化を把握するための指標として,感度の良好なパラメータと考えられる。3)最大振幅値は,セメントペーストにおける粘性の増大に起因して変化するパラメータと考えることができ,評価指標としては,凝結過程における適用範囲は伝播速度よりも小さい。4)周波数分布は、硬化後の水和物の生成状況と対応して変化する指標と考えられ,伝播速度および最大振幅値では感度の低下する領域においても,硬化挙動を把握できる可能性がある。現時点では,セメントペーストの硬化挙動を超音波パラメータである伝播時間や受振波最大振幅値および周波数分布から定性的に示すにとどまっている。今後はコンクリートについても同様の検討を行い,凝結と超音波透過開始点や伝播速度および最大振幅値の初期勾配,頭打ちの開始点などの物理的意味を明確にし,コンクリートの硬化挙動を定量的に把握する手法に発展させる予定である。
ホヤ胚の遺伝子発現情報の網羅的解析:データベース構築とクラスタリング解析

今年度は、昨年度までに報告されたホヤのドラフトゲノム配列を用いて具体的に解析作業をおこなった。また研究成果の発表や、共同研究者との今後の解析作業のための議論や情報収集のため、短期間の海外研究機関への渡航をおこなった。研究の成果と、渡航先での研究内容およびその期間等は次のとおり。<研究成果>ホヤのドラフトゲノム中にコードされる細胞周期関連遺伝子について、その遺伝子発現制御等について調べ、これらについて1報の論文としてまとめ、2003年度のDGEに掲載された。ホヤの網羅的なESTデータをデータベース化し、クラスタリング作業を行った結果についてはその1部を1報の論文としてまとめ、2003年度のDGEに掲載された。またクラスタリング解析時における重複遺伝子の発現パターンの特徴などについては、2003年10月にフランスのマルセイユで行われた"International Urochordate meeting 2003"において、口頭発表をおこなった。<海外研究機関への渡航時における、滞在期間とその研究内容>2003年度は7月と9月の2回、米国カリフォルニア州にある共同ゲノム研究所へ滞在した。2003年度7月(7/11-7/19)の渡航ホヤのドラフトゲノム配列の決定とアノテーションにおいて共同研究機関であった共同ゲノム研究所に滞在し、日本産カタユウレイボヤのゲノム配列の比較方法等について情報収集をおこなった。2003年度9月(9/18-9/27)の渡航同じく米国の共同ゲノム研究所に滞在し、日本産カタユウレイボヤの配列決定と比較解析を実際に行った。本研究の目的は、ホヤゲノムをもちいて、遺伝子発現制御メカニズムの一端を明らかにすることにある。これまでの2年間は、日米の三つの研究機関(京都大学、国立遺伝学研究所、JGI)を中心として行われているカタユウレイボヤゲノムプロジェクトに参加してきたが、本年度においてドラフトゲノム配列の公開にいたった。その間、計算機を用いたデータ解析作業の一端を分担し、またアノテーション作業も行うことで、情報生物学的な技術面で貢献してきた。本年度における具体的な実施内容は、以下のとおり。1、カタユウレイボヤのESTデータを、ドラフトゲノム配列と比較し、ホヤゲノム中にコードされるユニークな遺伝子の数とその発現パターンについて、解析した。(論文投稿中)2、ホヤゲノム中にコードされる遺伝子((1)によってユニークなグループに分けられたもの)のうち、他生物種で細胞周期に関連する遺伝子群と塩基配列に相同性のある複数の遺伝子について、分子系統学的な解析を行った。(第25回日本分子生物学会にて発表、論文投稿中)(1と2は、京都大学、分子・進化発生研、佐藤矩行教授との共同研究)ドラフトゲノムのデータと、1および2の結果から、ホヤゲノムが脊椎動物ゲノムと比較して、シンプルな特徴を持つ反面、ホヤで独立に生じた重複遺伝子を多くもつことが明らかとなってきた。来年度以降は、ホヤゲノム中のこれらパラログ遺伝子どうしの遺伝子発現の違いなどについて、情報生物学的な技術をもちいて解析する予定である。
リンパ管増殖とリンパ節転移の分子機構の解明と臨床応用に関する研究

本研究ではVEGF-CおよびVEGF-D産生胃がん細胞株におけるリンパ管増殖誘導能をin vitroおよびin vivoの実験系で検討し、胃がん組織におけるVEGFとその受容体の発現とリンパ管増殖やリンパ節転移との関連性を検討することを目的とする。本年度、胃がん10株を含む21種のヒト培養細胞のVEGF-A、-Cおよび-Dの発現を調べた結果、VEGF-Aは19株、VEGF-Cは5株(胃がんAZ521、TMK-1、線維肉腫HT-1080、前立腺がんPC-3、線維芽細胞KMST-6)に発現が見られたが、VEGF-Dの発現は全く認められなかった。臨床胃がん組織でも約50%にVEGF-Cの発現は認められたが、VEGF-Dの発現は約10%に過ぎず、VEGF-AやVEGF-Cとは異なり、VEGF-Dはがん細胞以外の間質組織または炎症性細胞により産生されることが示唆された。さらに、HT-1080よりVEGF-Aと-C、ヒト肺がんよりVEGF-DのcDNAをクローニングし、作製したVEGF発現ベクターをヒト胃がん細胞(KKLS、MKN-28)に導入した。これらのVEGF過剰発現細胞を用いて受精鶏卵漿尿膜法、ヌードマウス皮下移植および胃漿膜下同所移植系における腫瘍の増殖性をコントロールベクター導入細胞と比較したところ明らかな差は認められなかった。しかし、MKN-28のVEGF-CとVEGF-D発現細胞の皮下腫瘍では血管新生の亢進が認められ、同所移植した腫瘍組織ではリンパ管造成に関与するVEGF受容体の一つであるマウスVEGFR-3遺伝子の発現が増強していた。また、同所移植腫瘍ではヒトVEGF-A遺伝子の発現増強が認められ、VEGF-Cあるいは-Dの過剰発現はパラクリンシステムによりVEGFR-3やVEGF-Aの発現を間接的に亢進することでリンパ管のみならず血管新生も誘導する可能性が示された。結果1)recombinatVEGF-Cは受精鶏卵CAMに4日目でリンパ管および血管を新生させた。電子顕微鏡でみると基底膜のない幼弱なリンパ管はCAMの間質に新生していた。またCAMの上にヒト胃癌継代培養細胞株6株をのせ培養後、BrdUで標識し、抗BrdU抗体で免疫染色すると、リンパ管内皮細胞の標識像が散見された。さらにVEGF-C産生株では有意にリンパ管数の増加が認められた。新生リンパ管はCAMと癌との境界部に多数みられ、その部位では血管の数も増加していた。結果2)ヒト胃癌継代培養細胞株8株ではNKPS, TMK-1, AZ521, MKN-45でVEGF-C mRNAの産生がみられた。一方、VEGF-D mRNAはKATOIII, MKN-7で発現しており、VEGF-C mRNAとは逆の発現パターンを示した。VEGF-C, VEGF-Dの受容体であるVEGFR-3mRNAは胃癌ではKKLSで発現しているのみであった。臨床材料でみてみるとVEGF-C,-Dはがん組織から高率に発現がみられたが、その受容体であるVEGFR-3 mRNAは胃癌組織でも正常粘膜でも発現を認めた。免疫組織学的にみてみるとVEGF-C, VEGF-Dはがん細胞の細胞質に局在しているが、正常粘膜や間質の線維芽細胞でも発現がみられた。一方、VEGFR-3は胃癌組織や正常粘膜のリンパ管内皮細胞に限局して発現していた。とくにVEGF-CおよびVEGF-Dを発現している胃癌組織ではVEGFR-3陽性のリンパ管数が有意に増加していた。さらに注目すべき点はVEGF-C, VEGF-Dともに産生している胃癌ではいずれも産生していない癌にくらべリンパ管数が増加していただけでなく、リンパ節転移も有意に多く出現した。以上の事実からVEGF-Cはリンパ管新生に重要なかかわりを有しており、癌組織のVEGFR-3陽性のリンパ管を増加させ、結果的にリンパ節転移増加するものと考えられた。

しかし、MKN-28のVEGF-CとVEGF-D発現細胞の皮下腫瘍では血管新生の亢進が認められ、同所移植した腫瘍組織ではリンパ管造成に関与するVEGF受容体の一つであるマウスVEGFR-3遺伝子の発現が増強していた。また、同所移植腫瘍ではヒトVEGF-A遺伝子の発現増強が認められ、VEGF-Cあるいは-Dの過剰発現はパラクリンシステムによりVEGFR-3やVEGF-Aの発現を間接的に亢進することでリンパ管のみならず血管新生も誘導する可能性が示された。
強力な軟骨細胞分化能を示すペプチドW9の作用機序解明とそれに基づく新規薬剤の創製

軟骨細胞の初期分化に対して強い促進効果を示すことが確認された、特定の修飾を施したW9ペプチドを用いてプルダウンを行い、W9ペプチドと相互作用している分子の同定を試みた。光応答性のビオチン修飾法、あるいはW9で刺激したマウス軟骨細胞由来ATDC5細胞から粗膜画分を調製してサンプルを濃縮的に回収し、フーリエ変換型の質量分析計を用いてタンパク質の網羅的な同定を行ったところ、W9刺激サンプルで再現性良く検出されるタンパク質が数種類得られた。これらのタンパク質をコードする遺伝子の発現をshRNAを用いて抑制し、その条件下でW9による刺激を行うと、複数の遺伝子の発現抑制下で軟骨細胞の分化が阻害されることが分かった。軟骨細胞の初期分化を促進する作用が知られるTGFb1での刺激に対しては影響を与えないことも確認され、いくつかの分子がW9の結合標的であることが示唆された。一方で、種々の阻害剤を用いた検討から、W9による軟骨細胞分化作用はTGFb1経路に対する阻害剤で抑制がかかり、W9の標的分子の下流シグナルとTGFb1経路とのクロストークが想定される。様々なシグナル分子のリン酸化状態をウェスタンブロット法、また、より網羅的なリン酸化プロテオミクスの手法で探索を行うと、ERKを始めとした複数のシグナル分子がW9刺激によって活性化することが観察された。今後、これらの詳細を解析することで、非常に強く軟骨細胞の分化を促進するW9ペプチドの作用機序の解明を試みる。概ね当初の計画通りに進展している。結合標的分子の同定や細胞内シグナル経路の活性化プロファイルの解析に必要となるプロテオミクス、リン酸化プロテオミクスの手法も構築されており、今後の解析に向けて支障はない。初年度に同定されたW9との結合標的分子候補に関して、その寄与をより厳密に検証するためにCRISPR/Cas9を利用したゲノム編集法の準備も進んでおり、一連の解析を進めることでW9によるシグナル入力機構の解明に繋がることが期待される。最終的に、物性の問題から全身への投与が困難なW9ペプチドに代わる、その活性を再現したアゴニスト型の抗体分子の開発に関しても、標的分子さえ決定されれば抗体の作出から親和性の改善までの手法はすでに確立できており、当初の計画以上に進捗が得られていると考えられる。初年度での解析で、修飾したW9分子を用いたプルダウンとその相互作用分子群のショットガン・プロテオーム解析による一斉解析により、複数の候補分子がW9ペプチドと結合しうることが確認された。一連の遺伝子をshRNAを用いてノックダウンし、W9ペプチドによる軟骨細胞分化に対する影響を確認したところ、数種類の遺伝子ではW9による作用選択的にその活性が低下することが確認された。本年では、それらの遺伝子の関与をより厳密に検証するため、CRISPR-Cas9を利用したゲノム編集によってマウス軟骨細胞株であるATDC5をホストにノックアウト細胞を樹立し、修飾W9ペプチドによる分化促進作用が完全に消失すること、また当該遺伝子を再導入し、その活性が回復するか否かを検証する。この検証でW9による分化促進作用への関与が確認された場合には、やはりCRISPR-Cas9でのKOマウスの作出を行い、in vivoでの表現型解析を計画する。また、W9による結合標的分子が複数にまたがる可能性も想定しており、特定の分子をハブとして複合的なシグナルソームを形成している場合には、上記の検証のみではW9の作用機序解明が十分に達成できない。試薬存在下で多量体を形成可能なタグ配列を利用し、W9結合分子候補の細胞外領域にこれらを付与したキメラ遺伝子を発現させたATDC5細胞を試薬で刺激し、W9と同様の分化促進が観察される組み合わせを探索する。同時に、異なる分子を同時に認識可能なバイスペシフィック型抗体等も作成を進め、同様の検討を実施する。

結合標的分子の同定や細胞内シグナル経路の活性化プロファイルの解析に必要となるプロテオミクス、リン酸化プロテオミクスの手法も構築されており、今後の解析に向けて支障はない。初年度に同定されたW9との結合標的分子候補に関して、その寄与をより厳密に検証するためにCRISPR/Cas9を利用したゲノム編集法の準備も進んでおり、一連の解析を進めることでW9によるシグナル入力機構の解明に繋がることが期待される。最終的に、物性の問題から全身への投与が困難なW9ペプチドに代わる、その活性を再現したアゴニスト型の抗体分子の開発に関しても、標的分子さえ決定されれば抗体の作出から親和性の改善までの手法はすでに確立できており、当初の計画以上に進捗が得られていると考えられる。初年度での解析で、修飾したW9分子を用いたプルダウンとその相互作用分子群のショットガン・プロテオーム解析による一斉解析により、複数の候補分子がW9ペプチドと結合しうることが確認された。一連の遺伝子をshRNAを用いてノックダウンし、W9ペプチドによる軟骨細胞分化に対する影響を確認したところ、数種類の遺伝子ではW9による作用選択的にその活性が低下することが確認された。本年では、それらの遺伝子の関与をより厳密に検証するため、CRISPR-Cas9を利用したゲノム編集によってマウス軟骨細胞株であるATDC5をホストにノックアウト細胞を樹立し、修飾W9ペプチドによる分化促進作用が完全に消失すること、また当該遺伝子を再導入し、その活性が回復するか否かを検証する。この検証でW9による分化促進作用への関与が確認された場合には、やはりCRISPR-Cas9でのKOマウスの作出を行い、in vivoでの表現型解析を計画する。また、W9による結合標的分子が複数にまたがる可能性も想定しており、特定の分子をハブとして複合的なシグナルソームを形成している場合には、上記の検証のみではW9の作用機序解明が十分に達成できない。試薬存在下で多量体を形成可能なタグ配列を利用し、W9結合分子候補の細胞外領域にこれらを付与したキメラ遺伝子を発現させたATDC5細胞を試薬で刺激し、W9と同様の分化促進が観察される組み合わせを探索する。同時に、異なる分子を同時に認識可能なバイスペシフィック型抗体等も作成を進め、同様の検討を実施する。
グルクロン酸抱合酵素転写調節領域の変異解析による体質性黄疸発症要因の解明

薬物代謝酵素の構造遺伝子解析は体質別治療法導入に当たって有用な情報をもたらすが、個体の薬物代謝(解毒)能は薬物の服用時また病態時には健常時と異なる、即ち酵素遺伝子発現状態(発現誘導、抑制)に差があることから、転写調節領域の遺伝子解析並びに転写調節因子の解析の重要性が指摘されている。本研究では、ビリルビングルクロン酸抱合酵素UGT1A1に着目し研究を進めた。UGT1A1代謝異常により体質性黄疸が発症するが、我々が同定した本酵素のプロモーター領域に変異を起した異常遺伝子を世界で初めて発見し、日本人に多く見いだされるこの異常遺伝子保有者(ヘテロ接合体)はUGT1A1酵素活性が低く、体質性黄疸を発症し易いことを明らかにした。経験上、臨床現場では酵素誘導活性を持つ催眠薬フェノバルビタールを治療薬として使用してきたが、その強力な催眠作用は患者QOL面で問題があった。恒久的服用を必要とし、患者QOLを高め、より安全な治療方法の開発が待望されていることから、本研究ではさらに酵素誘導作用を有する食品・植物成分をレポーター活性を指標に探索を進めた。その結果、クリシン、バイカレイン等の5位、7位に水酸基をもつフラボンがUGT1A1の強力な転写亢進作用をもつこと、これらフラボンがフェノバルビタール応答エレメントPBREMに結合しその遺伝子転写が亢進する機序を明らかにした。変異PBREM保有者もまたこれらフラボンが転写亢進作用を示したことから、先天的本酵素低活性者の持つ薬物副作用発症防止作用をもつことが強く示唆された。これらの知見は対質性黄疸の治療法の開発、抗がん剤イリノテカン等の薬物副作用の防止、核内受容体を標的とした医薬品の開発に貢献できるものである。先天的にUDP-グルクロン酸転移酵素UGT1A1活性が低い患者に抗がん剤イリノテカンの副作用が強く発現し、重篤な副作用が現れ死に至るなど、21世紀の医療に導入されつつあるテーラーメード医療即ちSNPsに基ずく体質別治療法に結びつく酵素の一つである。また一方UGT1A1は細胞毒性の強いビリルビンIXαをグルクロン酸抱合し無毒化する酵素でもあり、体質性黄疸発症の原因酵素としても知られている。黄疸症状軽減の治療薬としてフェノバルビタール(PB)が有効であることに着目し、UGT1A1酵素が薬物代謝酵素CYP2BのPB誘導メカニズムと同様の機序で誘導される可能性を考え研究を進めた。UGT1A1遺伝子のエクソン1上流にPB応答エレメントgtPBREMを同定するとともに、核受容体Constitutive Androstane Receptor(CAR)/レチノイドXレセプター(RXR)ヘテロ2量体がこのPB応答エレメントに結合することにより転写が活性化されることを明らかにしている。本研究において、UGT1A1遺伝子のPB応答エレメント内のCAR/RXR結合部位gtNR1とは異なる調節領域NR3の一塩基変異が酵素誘導を抑制することを初めて明かにし、Gilbert症患者にこの変異遺伝子の出現頻度が有意に高い知見が得られ、gtPBREM等の転写調節に関与する遺伝子変異が体質性黄疸発症原因となっていることが強く示唆された。さらにwild-typeのgtPBREMではNR3部位に核内受容体CARやPXRが結合し、NR3部位もまた転写調節に重要な役割を果たしていることを明かにした。これらの知見は体質性黄疸の治療法の開発、抗がん剤イリノテカン等の薬物副作用の防止、核受容体を標的とした医薬品の開発に貢献できるものである。

薬物代謝酵素の構造遺伝子解析は体質別治療法導入に当たって有用な情報をもたらすが、個体の薬物代謝(解毒)能は薬物の服用時また病態時には健常時と異なる、即ち酵素遺伝子発現状態(発現誘導、抑制)に差があることから、転写調節領域の遺伝子解析並びに転写調節因子の解析の重要性が指摘されている。ビリルビングルクロン酸抱合酵素UGT1A1代謝異常により体質性黄疸が発症するが、申請者は本酵素のプロモーター領域に変異を起した異常遺伝子を世界で初めて発見し、日本人に多く見いだされるこの異常遺伝子保有者(ヘテロ接合体)はUGT1A1酵素活性が低く、体質性黄疸を発症し易いことを明らかにした。経験上、臨床現場では酵素誘導活性を持つ催眠薬フェノバルビタールを治療薬として使用してきたが、その強力な催眠作用は患者QOL面で問題があった。恒久的服用を必要とし、患者QOLを高め、より安全な治療方法の開発が待望されていることから、本研究では、酵素誘導作用を有する食品・植物成分をレポーター活性を指標に探索を進めた。その結果、クリシン、バイカレイン等の5位、7位に水酸基をもつフラボンがUGT1A1の強力な転写亢進作用をもつこと、これらフラボンがフェノバルビタール応答エレメントPBREMに結合しその遺伝子転写が亢進する機序を明らかにした。変異PBREM保有者(ヘテロ接合体)もまたこれらフラボンが転写亢進作用を示したことから、先天的本酵素低活性者の持つ薬物副作用発症防止作用をもつことが強く示唆された。本研究の成果は高いQOLを目指した体質性黄疸の治療法の開発、抗がん剤イリノテカン等の副作用の防止、核内受容体を標的とした医薬品の開発の基盤研究として役立つものと期待される。
薬物動態モデルの簡素化による安定かつ高精度な受容体濃度解析手法の開発

PET薬物動態解析において、動脈採血を経ることなく、また、薬剤投与直後からの経時的撮像ではない投与一定時間後からの撮像を可能とするモデルを構築し、実装・評価を行った。本手法はLoganplotで代表されるグラフ解析法の一種で、投与から一定時間経過後の時間放射能曲線を3本の指数関数の線形和で示される新しいモデルを構築した。また、ラゲール多項式近似で推定した速度定数から、総分布容積および受容体結合能を算出する手法についても考案した。提案手法は無雑音の状況下では速度定数の推定が良くできているものの、雑音を含む系に対しては推定分散が著しく大きくなった。PET動態撮像において、薬物速度論に立脚した神経受容体結合能推定モデルを、標的とする受容体以外が過渡平衡に達するまでの期間に取得されたデータを排除した、いわゆるグラフ解析法を基にして、構築した。具体的には、一定期間後の入力である血漿の放射能濃度を2本の指数関数、受容体との結合解離を1本とした指数関数モデルで、ラゲール関数群(基底)より直交展開を行い、ラプラス変換後の周波数空間で、指数関数とラゲール関数の関係から、速度定数を推定するものである。不等時間隔で実測されたPETデータから基底への配分は、基底関数を同様に不等時間隔で分割・平均し、最小二乗法により係数の算出を行った。また、基底の数(次元)は、ラゲール関数の位相成分に着目し、(主成分分析のように)撮像データに依存することなく、撮像前に設定する時間間隔によって決定できるようにした。平成25年度の研究では、モデル構築と速度定数の安定推定が主目的であったため、PETデータは、動態解析ソフトウェアPMOD(ペットテクノロジーサプライズ社)のデモデータ及び関連する研究の文献より取得した。また、目標とする解析法の実装はMATLAB(マスワークス・ジャパン社)上で実施した。さらに、本研究は線形処理の組合せで成立しており、高速処理を一つの利点として持ち、推定した速度定数を画素毎に計算表示できる能力を有している。この評価および臨床データを用いた評価に先立つ検討として、4D-XCATファントム(Duke大学)を用いて、数値シミュレーションを実施した。PETデータに雑音が付加されていない場合は、最初に与えた速度定数に近い値が得られるものの、PET画像が持つであろう雑音レベルに対しては推定分散が著しく大きくなる結果となった。本手法はLoganplotに代表されるグラフ解析法の一種で、体内の薬物動態のうち、非特異的結合が目的受容体への特異的結合に比べ早期に平衡状態に達するとの発想の下、血漿成分および平衡状態に達した非特異的結合の和を2本の指数関数和で、受容体への特異的結合を1本の指数関数で薬剤分布の時間的変化を表現した新しいモデルを構築した。また、新しい手法で推定される3本の指数関数が持つ速度定数から、従来から用いられている定量指標である総分布容積および受容体結合能を算出する手法についても考案した。本手法は動脈採血が無く、参照領域を別に設定する必要性も無いことから、採血後の計測における放射能濃度の統計的誤差や参照領域の設定によるバイアスが掛からないより安定した手法であると考えられた。実測データへのモデルのフィッティングについては、局所解に陥らないよう、また反復演算の少ないスペクトル解析法に区分されるラゲール多項式近似とそのラプラス変換を利用し、自己回帰モデルを用いて速度定数推定を行った。先行研究においてラゲール多項式を用いた手法は既に報告されているが、主目的が血漿成分と薬剤解離・流出による減衰の時間的変化のたたみ込みを積に変えるとこであり、本提案手法の指数関数近似のための使用とは一線を画す。また、事前に指数関数群を準備し順次フィッティングさせていく手法も存在するが、提案手法の場合は連続的な取扱いが可能となる点で有利である。また、検討を通じて、規定した雑音モデルと実際の画像での雑音に差異があることが認められた。核医学,医用画像工学先行研究と比較した場合の本研究の特色は、薬物速度論に立脚したパラメトリックモデルであり、今後、臨床現場等で安心して使用できるような方法論の構築を目標としている。そのため、直交展開時の次元設定にも根拠を求め、安易にベイズ推定などの枠組みを組み入れることも避けるよう努めてきた。これらの検証・確認が遅れの原因となっており、臨床使用を申し出るに至っていない。しかしながら、方法論であるため、手法が確立した時点で臨床例の評価を行えばよく、手法の比較対象は、商用で広く用いられているPMODのツールで賄う事が可能である。

そのため、やや遅れていると判断した。平成26年度が最終年度に相当することより、方法論の確立は必須としている。PETデータに雑音が付加されることで、推定が著しく不安定になることより、これを抑える手だてを試行する。具体的にはベイズ推定の枠組みを薬物速度論を崩さない形で盛り込む。これと平行して、実測のPETデータの借用を、共同研究の関係にある、東京都健康長寿医療センター研究所神経画像研究チームに申請、論文化の際に必要となる臨床例を、提案手法および比較手法を用いて比較評価する。なお、使用データは受診者の採血データ(放射能濃度曲線)とPET画像のみであるが、ヒトを対象とする研究であることより、本学および使用先の倫理委員会への申請も実施する。平成26年度末を持ってしても、雑音の問題が十分に解決しない場合には、完成形では無いものの、薬物動態解析の線形化の一手法として論文発表し、線形化された本モデルを基に、雑音低減そのものを画像再構成側に組み込む四次元画像再構成などに発展させる。3万円弱であり、物品購入・旅費共に使用するには些少であったため。臨床データ使用のための環境構築、論文化の際の英文校正料などの一部として使用する。
生体膜脂肪酸環境の感知機構および恒常性維持機構の解明

同定したMAPK経路は、高温環境への適応に重要である昨年度までに同定していた、線虫の生体膜脂肪酸環境変化時(PUFA欠乏時)に活性化するMAPK経路について、その生理的意義を明らかにするため、これまで報告のあるPUFA欠乏下における熱耐性増大の表現型とMAPK経路の関係を調べた。その結果、PUFA欠乏下での熱耐性増大には、MAPK経路の活性化が重要である事が分かった。さらに、Wild-typeの熱耐性においても調べた所、このMAPK経路は、獲得熱耐性という高温環境への適応機構に重要である事が分かった。また、既知の熱ストレス応答因子であるdaf-16,hsf-1とMAPK経路の関係について調べた所、熱ストレス時の遺伝子発現誘導、および熱耐性の獲得の両方において、これらが独立に寄与している事が明らかになった。同定した膜タンパク質分子群は、PUFA欠乏時および熱ストレス時にMAPK経路の上流で機能する昨年度までに、MAPK経路の上流で機能している可能性の高い膜貫通型タンパク質(生体膜環境センサーの最有力候補分子)として、Na+チャネル様分子TUM-1(Transmembrane protein Upstream of MAP2K)、TUM-2,TUM-3を同定していた。これら3分子は、遺伝学的に同一経路で機能しており、形質膜に局在し、複合体を形成することも示唆されている。そこで、これらの発現抑制下で、MAPK経路下流で制御されるレポーター遺伝子の熱ストレス時の発現を調べたところ、レポーター遺伝子は全く誘導されなかった。このことから、TUM-1,2,3は、PUFA欠乏状態および熱ストレス時に、MAPK経路の上流で機能している事が示唆された。今後の詳細な解析により、動物細胞における生体膜環境変化に対する応答機構が分子レベルで解明されることが期待される。当初の目的通り、MAPK経路の上流で機能する膜タンパク質(生体膜環境センサーの最有力候補分子)を同定し、さらにこの経路の生理的意義についても明らかにすることができた。これらの成果は、本研究の目的に十分に適うものである。ただし、生体膜環境変化の感知およびシグナル伝達の詳細な分子メカニズムの解析については、今後の重要な課題である。同定した生体膜環境センサーの、膜環境の感知機構について解析を行なう。具体的には、Na+チャネル様分子であるTUM-1のチャネル活性、および膜貫通型キナーゼ様分子であるTUM-2,3のキナーゼ活性について評価し、PUEA欠乏時や熱ストレス時にこれらの活性が変化するかどうかを解析する。この解析は、最終的にはin vitroの再構成系において実施することを目指す。また、TUM-1は哺乳動物まで保存されているfamily分子に属する分子であるので、哺乳動物に機能的に相同な分子があるかどうかを検証する。具体的には、培養細胞系においてTUM-1の相同分子となりうる候補遺伝子の過剰発現系、発現抑制系を構築し、膜環境を変化させる刺激を加えた時のMAPK経路の活性化や熱ストレス耐性についての評価を行なう。網羅的RNAiスクリーニング私は修士課程において、線虫の高度不飽和脂肪酸欠損株で高発現する遺伝子のうちの一つについて、そのプロモーター下にGFP(緑色蛍光タンパク質)を融合したコンストラクトを線虫に導入し、遺伝子発現誘導に関わる分子の網羅的RNAi(RNA干渉)スクリーニングを行なっていた。博士課程でもこのスクリーニングを継続して行ない、線虫全ゲノムを網羅したRNAiライブラリー内の全ターゲット遺伝子(約18000遺伝子)を対象としたスクリーニングが完了し、この遺伝子の発現誘導に関わる分子として約230の候補遺伝子を同定した。これらの候補遺伝子についてさらに再現性を数回にわたって確認した結果、このうち105遺伝子についての再現性が得られた。この中には、膜脂肪酸環境を感知するセンサー分子またはその関連分子である可能性が高いと考えられる膜貫通型分子として、機能未知の2回膜貫通型キナーゼをはじめとした11遺伝子が含まれていた。生体膜環境センサーの同定遺伝子発現誘導に関わるシグナル経路として一連のMAPK経路構成分子をこれまですでに同定していたが、このうちMAP2Kについて恒常活性化型のコンストラクトを作製・導入し、実際に線虫生体内で恒常的に活性化する事が確認できた。現在、これを利用して105の候補遺伝子についての遺伝学的な上下関係を明らかにするための2次スクリーニングの実験系を構築中である。生体膜環境センサーの同定これまで、線虫の高度不飽和脂肪酸(PUFA)欠乏による生体膜脂肪酸環境変化時の遺伝子発現誘導に関わるシグナル経路として、一連のMAPK経路構成分子を同定していた。このうち、MAP2Kについて恒常活性化型のコンストラクトを作製・導入し、実隙に線虫生体内で恒常的に活性化する事が碓認できていた。そこで、これを利用し、昨年度行なった1次スクリーニングで挙がってきた105の候補遺伝子について、MAPK経路の上流・下流のどちらで機能しているかを明らかにするための2次スクリーニングの実験系を構築し、スクリーニングを行なった。その結果、上流で機能している可能性の高い膜貫通型タンパク質(生体膜環境センサーの最有力候補分子)として、Na+チャネル、およびNa+/H+交換輸送体が挙がってきた。これらは、下等動物から哺乳動物まで広く保存されている。現在、これらがどのように生体膜環境を感知し、MAPK経路を活性化しているのかについて、解析中である。生体膜脂肪酸環境の恒常性維持機構の解明これまでに、PUFA欠乏下でMAP3Kを欠損すると、胚致死性の表現型が増強する事が分かっていた。

PUFA欠乏下でのMAPK経路活性化の生理的意義を明らかにするため、このとき、それ以外にどのような表現型を示すかを調べた。その結果、見た目の表現型(成長速度、動きや形態の異常など)に変化は見られず、PUEA欠乏下で見られる表現型(上皮組織の形成異常など)のMAPK分子の欠損による増強も認められなかった。現在、MAPK経路が特に活性化していることが判明している、上皮組織・腸における表現型解析を進行中である。また、当研究室ではPUEA欠乏状態で発現抑制すると著しい異常を示す遺伝子を多数同定しており、これらの分子が膜環境センサー下流のシグナルにより制御されているかどうかを解析中である。同定したMAPK経路は、高温環境への適応に重要である昨年度までに同定していた、線虫の生体膜脂肪酸環境変化時(PUFA欠乏時)に活性化するMAPK経路について、その生理的意義を明らかにするため、これまで報告のあるPUFA欠乏下における熱耐性増大の表現型とMAPK経路の関係を調べた。その結果、PUFA欠乏下での熱耐性増大には、MAPK経路の活性化が重要である事が分かった。さらに、Wild-typeの熱耐性においても調べた所、このMAPK経路は、獲得熱耐性という高温環境への適応機構に重要である事が分かった。また、既知の熱ストレス応答因子であるdaf-16,hsf-1とMAPK経路の関係について調べた所、熱ストレス時の遺伝子発現誘導、および熱耐性の獲得の両方において、これらが独立に寄与している事が明らかになった。同定した膜タンパク質分子群は、PUFA欠乏時および熱ストレス時にMAPK経路の上流で機能する昨年度までに、MAPK経路の上流で機能している可能性の高い膜貫通型タンパク質(生体膜環境センサーの最有力候補分子)として、Na+チャネル様分子TUM-1(Transmembrane protein Upstream of MAP2K)、TUM-2,TUM-3を同定していた。これら3分子は、遺伝学的に同一経路で機能しており、形質膜に局在し、複合体を形成することも示唆されている。そこで、これらの発現抑制下で、MAPK経路下流で制御されるレポーター遺伝子の熱ストレス時の発現を調べたところ、レポーター遺伝子は全く誘導されなかった。このことから、TUM-1,2,3は、PUFA欠乏状態および熱ストレス時に、MAPK経路の上流で機能している事が示唆された。今後の詳細な解析により、動物細胞における生体膜環境変化に対する応答機構が分子レベルで解明されることが期待される。当初の目的通り、MAPK経路の上流で機能する膜タンパク質(生体膜環境センサーの最有力候補分子)を同定し、さらにこの経路の生理的意義についても明らかにすることができた。これらの成果は、本研究の目的に十分に適うものである。ただし、生体膜環境変化の感知およびシグナル伝達の詳細な分子メカニズムの解析については、今後の重要な課題である。同定した生体膜環境センサーの、膜環境の感知機構について解析を行なう。
プロティノス美学におけるアイステーシスの位置づけ―受容と把握の機能をめぐって―

本研究では、プロティノスの美学思想における感覚の働きの特質を明確化にするために、感覚作用が知的作用に連係して哲学構造に組み込まれる積極的な面をもつことの解明を、把握という概念等に関わるテキストの読解と解釈を通じて行った。感性的領域から知性的領域への移行の様態を、移行の出発点自体の重要性を見定めることで理解することを試み、その際、受動的な感覚と能動的な把握と関係に着目しつつ、魂の機能についての議論の分析と考察を遂行した。プロティノスにおける感覚の理論が彼自身の哲学に不可欠なかたちで組み入れられている点を明確にするために、まずは第1論文「美について」、また加えて第53論文「生命あるものとは何か、人間とは何か」を考察対象として、原典テキストの分析・考察を遂行した。第1論文「美について」の解釈においては、美の概念の特質を、〈形〉(eidos)をめぐる感覚認識と知性認識の諸様相の解析のもとに考察し、感覚がプロティノスの思想において果たしている積極的な面を、肉体に宿る美を知性的領域の美の〈似像〉(eikon)や〈痕跡〉(ichnos)として認める魂の〈判断〉(krisis)の能力との関係で明確にするよう試みた。その成果を、ギリシア彫刻作品の特質を感じ取ることとの関連で、イタリアのパレルモで開催された学会で発表し、その内容を論文集の中の一論文として刊行することができた。また、感性的領域から知性的領域への移行としての〈逃避〉(phuge)の内実を、移行の出発点自体の重視も議論に見定めることで理解することを試み、その際、〈調和〉(harmonia)、〈類似〉(homoiotes)などの概念の扱われ方を同時に吟味しつつ、この議論の分析と考察を進めた。第53論文「生命あるものとは何か、人間とは何か」に関しては、魂と肉体の結合体としての「生命あるもの」における〈アイステーシス〉の働きの位置づけを明確にするため、魂による肉体の支配の様態を整理して、〈アイステーシス〉の機能の条件をより明確にするべく解釈を進めた。さらに、この論文においては、〈アイステーシス〉を二種類あるいは二段階に区別していると理解できる議論があり(7章と9章)、その区別の内実を、〈形〉や〈印影〉(tupos)の機能分析とともに考察した。研究初年度において、研究発表の機会をもつことができ、他の研究者との交流により、さらに考察を深めることができた。またその中で、プロティノスの感覚についての思想を、ギリシアの哲学の伝統のみではなく、現代の思想などとの関連でその意義を考察していく可能性を自覚することができた。昨年度の研究に引き続いて、プロティノスにおける感覚の理論が、彼自身の形而上学的な哲学思考の中に必然性をもって組み込まれていることを確認して、その思索の内実を捉えて美学的な意義についての考察を深めることを課題とした。今年度は、とりわけ「把握」(アンティレープシス)の概念がいかにプロティノス美学の中で、感覚(アイステーシス)の機能との関連で働いているかの考察に取りかかった。現代にも通じる美学的な意義については、フランスの哲学者のミシェル・アンリのカンディンスキー論との比較を学会において発表し、学会誌に掲載されることとなった。そこでは、プロティノスのエイドスの概念とそれに関係する感覚機能とをアンリの理論におけるフォルムの位置づけと対比しつつ考察し、プロティノスにおいても、アンリにおいても、見えないレヴェルと見えないレヴェルのエイドスとフォルムとの関連づけが感覚との関わりで議論されており、見えないエイドスやフォルムが見えるエイドスやフォルムに先行する点も強調した。その結果、プロティノス美学の創造性に関わる一側面を考察することができた。また、形の内在性の観点から日本の思想との比較も行なった。さらに、プロティノスが依拠しているプラトンの哲学思想との関係性について、フランスのトゥールーズの大学で発表の機会を得て、プラトンの思想に対応する思索展開がプロティノスの美の理論にあることを指摘して、プロティノスにおいて美を捉える働きとしての感覚(アイステーシス)が、肉体的・物体的な美を感覚するだけではなく、それとは区別されて、イデアのレヴェルの存在をその痕跡とともに把握する知性的働きに通じる側面ももつことを主張した。以上により、プロティノスにおける感覚機能の特質を知性的な働きとの関連で捉える考察を進めることができた。国内学会で1回、国際学会で2回の研究発表を行ない、またフランスの大学で発表の機会を得て、研究内容について多くの研究者と話し合うことができた。その結果、研究の意義と課題がより明確となった。昨年度までの研究に続いて、プロティノスにおける感覚(アイステーシス)にかかわる議論の読解と解釈を続行し、イメージを知覚する感覚的な受容の働きがいかに知性的な把握の働きに連動しているかという問題に関係すると思われるテキストの検討をもとに考察を遂行した。引き続き、第1論文「美について」、第53論文「生命あるものとは何か、人間とは何か」の分析・考察をより細かく進めるとともに、第27-29論文「魂の諸問題について」、第19論文「徳について」および第31論文「直知される美について」にも考察対象を広げた。その過程で、プロティノスの展開している議論をよりよく理解するためには、彼が大きく依拠しているプラトンの思想の把握も再度必要であることが強く意識されることになり、感覚対象と知性対象の関係についてのプラトン解釈の中でプロティノスにおいて発展的に取り込まれていくかという点に注意を払った。

また、それまでの成果の一部を、台湾で開催された学会で研究発表を行い、プロティノス美学における感覚の位置づけについて、「類似性」や、形自体の持つ主体的活動性を魂の働きに関係づけて知性的な働きにつながる機能を探る試みを行なった。その中で、このプロティノスの感覚的な表象機能と知性的な把握との関連性について考察が、芸術活動を理解するための一つの重要な基礎的な視座を提示しうることを主張した。これまでの、プロティノス美学における感覚の働きを知性的機能と結びつける研究の中で、プロティノスにおける「型」や「痕跡」の機能をより全体的な視点から彼の思想の中で位置づけて究明していく必要性を意識することとなった。本研究では、プロティノスの美学思想における感覚の働きの特質を明確化にするために、感覚作用が知的作用に連係して哲学構造に組み込まれる積極的な面をもつことの解明を、把握という概念等に関わるテキストの読解と解釈を通じて行った。感性的領域から知性的領域への移行の様態を、移行の出発点自体の重要性を見定めることで理解することを試み、その際、受動的な感覚と能動的な把握と関係に着目しつつ、魂の機能についての議論の分析と考察を遂行した。第1論文「美について」および第53論文「生命あるものとは何か、人間とは何か」の読解と分析をさらに進めて、そこで扱われた〈アイステーシス〉の機能の知的側面に関係する〈把握〉の機能とその意義にに関して、プロティノスの他の論文の用例と比較しつつ考察する。その結果を国際学会等で発表する。これまでの研究をさらに考察を深めて精度を上げた分析を行ない、成果をまとめるとともに、感覚と把握の機能を想像力の問題と結びつけてさらに考察を進める。美学使用した物品費と旅費の残余として、303円が残った。物品費とあわせて使用する。