hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
スクレーピーマウス・BSE血清・尿中逸脱蛋白質の網羅的解析と早期診断への応用

本研究の目的は,1.スクレーピーマウスの血液や尿中に脳神経組織細包から逸脱する特異蛋白質を網羅的に解析・同定することと,2.イギリスのウェブリッジ中央獣医学研究所より分与されたBSE50頭と正常50頭(合計100頭)の血清を同様に解析し,スクレーピーマウスで見つけた特異蛋白質が検出されるかどうか明らかにすることの2つである。血清蛋白質の網羅的解析には,2次元電気泳動を用いて行ない,蛋白質の特定にはMALDI-TOF-MSを使用した。また,抗体の検出にはWestern Blotting法を用いた。1)スクレーピーマウス血清中の特異蛋白質ハムスターのプリオン遺伝子を押入したTg20マウスに,異常プリオンを感染させたマウス脳ホモジネートを注入した。およそ2ケ月後,このマウスは脱水症や異常行動を示した(発症)。この時点での血液を採取し,血清分離を行った後に,2次元電気泳動で非感染マウスのそれと比較した。下方の矢印で示したスポットがスクレーピーマウスで検出され,このスポットから蛋白質を抽出し,MS解析したところ,:Fasに対するモノクローナル抗体のFab部分のアミノ酸の配列と一致した(特許2004-216510)。2)BSE血清中の蛋白質スクレーピーマウスで検出された特異蛋白質は抗体蛋白質であったので,BSE血清中にも同様の蛋白質があるかどうかを,血清を1次抗体,ウシIgGに対する抗体を2次抗体としてWestern Blottingを行った。その結果,神経組織に特異的に40-60kDa付近にポジティブバンドが検出された。現在,この蛋白質抗原の精製を行っている。すなわち,スクレーピーマウス同様,BSEにおいても血清中に自己抗体が表れてきていることが本研究で判明した。本研究は、北海道立畜産試験場に飼育されているBSE疑似患畜牛の血液・尿を用いて同様の解析を行い、BSE感染後、血清や尿検査による早期診断に応用する事である。現在、スクレーピーマウスの血清から特異蛋白質のスポットを一つ既に検出できている。異常プリオン以外も含めた血液・尿蛋白質を網羅的に解析し、脳神経への異常プリオン感染信号を総合的に検出するものであり、安全な早期診断法を開発できる所にある。<検出の可能性>スクレーピーマウスにおいて、異常プリオンが感染した時、アルツハイマー病で見られる様に、神経細胞内でプリオン凝集に対するリソソーム動員による分解反応などの防御反応がある事が知られている。また、スクレーピーマウスの脳組織でアポトーシスが生じ関連蛋白質が検出されている。本研究は、その防御反応の結果として、血液や尿中に逸脱してくるプロテアーゼや抗体などの各種蛋白質を2次元電気泳動で網羅的に分離検出し、かつマススペクトルにより高感度に分析するものである。これまでは、血液や尿中にある微量蛋白質は多量に存在する主蛋白質に妨害され、分離検出できなかった。しかし、最近、高分離能を持つ二次元電気泳動法が開発され、網羅的に検出できるようになった。さらに蛋白質の高感度解析・同定を可能にしたマススペクトル法を用いてアミノ酸配列を明らかにし、データーベース検索により蛋白質を同定する事が出来るようになった。さらに最近、脳神経組織疾患で逸脱した蛋白質や抗体が血液脳関門を越えて末梢血で検出される報告もある。<結果>スクレーピーマウス脳神経細胞から血液や尿中に逸脱した蛋白質を上記高分離分解法によって検出できる可能性が高い。事実、われわれの予備的実験結果では、スクレーピーマウスの血清中に特異蛋白質のかすかなスポットをすでに確認している。

昨年度、スクレーピー感染マウスの血液から、3種類の自己抗体蛋白質を検出することに成功した。個体によって増減はあったが、この検出率は感染マウスの8割を超していた。昨年イギリスのウエブリッジ研究所に、上記研究成果を基に、BSEの血液50頭分と正常牛血液同じく50頭分を分与していただき、今年度は血液中越脱蛋白質の検出と金属の測定を行った。BSE血液10頭分の中から、ウエスタンブロッチングにより神経特異蛋白質が血液中た逸脱する事を発見し、さらに10頭分の金含量を調べたところ、明らかに正常牛10頭のそれとは異なる結果を得た。このような神経特異蛋白質の逸脱と重金属の増減が、予測される機序から生前の血液に現れる可能性が高く、生前検査に応用できる可能性が示された。しかしながら、この方法は異常プリオンを直接測定するものではないために、上記二つの成果を基に直ちには確定的診断法に発展できない。今後は、1.BSEの血液どれにも逸脱しているか?2.BSE発症前にこのような特徴的結果が得られるか?3.BSE以外の疾患でも自己抗体や金属イオンのバランスの変化はあり得るので、正常牛および他の疾患牛を含めて1000頭分の血液中の濃度を明らかにする必要がある。そのために、今後200頭分のBSE血液を分与して頂き、もれなく逸脱する神経特異蛋白質の同定と重金属測定の両方面から安全で確実な検出法を開発して行く必要がある。
味覚と嗅覚の相互関係の神経回路学的研究

これまで味覚の脳内神経線維投射を検索してきたが、本研究では味覚と嗅覚の脳内での線維連絡を解明を意図したもので、とくに嗅覚系からのアプローチを行った。350400gのラットで末梢からの一次入力部位である主嗅球と副嗅球(main and accessory olfactory nucleus)にWGA-HRPまたはbiotinylated dextran amine (BDA)を、先端径4070μmのガラス電極で電気泳動注入して、その脳内投射を検討した。主嗅球に注入した時に見られた標識神経終末は、前脳皮質では前嗅核AON、蓋ヒモTT、背側脚皮質DPC・背側海馬痕DHR、嗅結節Tu外側皮質では梨状葉皮質Pir、扁桃核周囲皮質AACo、扁桃周囲皮質PeCo、内嗅皮質Entで,脳内核では外側嗅索核NLOT、視索上核Supraoptic nucl.であった。また標識神経細胞は、皮質では前嗅核AON、背側脚皮質DPC・背側海馬痕DHR、内嗅皮質Ent、脳内核では外側嗅索核NLOT、対角帯DBMnR、背側縫線核DR、青斑核LCに見られた。副嗅球に注入した時に見られた標識神経終末は、皮質では扁桃体内側核Me、後皮質扁桃核PCo、脳内核には分界条床核BST、副嗅索核BAOTであった。また標識神経細胞は、前嗅核内側部AONm、副嗅索核BAOT、対角帯DB、外側前視神経核LPO、背側縫線核DR、青斑核LCに見られた。ほとんどのデータが従来と同様の結果を示し、発表には至らなかったが、分界条床核には副嗅球から、主嗅球から投射を受ける外側嗅索核から、また味覚の回路から投射を受ける扁桃核部から、投射を受ける可能性を見出し、分界条床核両感覚共通の投射部位として今後の研究の基礎データを得ることができた。味覚回路と嗅覚回路との脳内神経線維連絡の相互関係を探索することを目的に、本年度はラットを用いて、嗅覚の入口である嗅球に順行性および逆行性トレーサー(WGA-HRP、BDA)を注入した。注入後12日後に灌流固定し、脳の凍結連続切片を作成し、順行性および逆行性標識を暗視野・明視野照明下で観察した。注入は電気泳動法(positive,2μA,4Hz,10min)ないし手動注入法(3%HRP or WGA-HRP,0.1μl)で行った。標識神経細胞細胞は同側の蓋ヒモ(tenia tecta)付近、嗅結節のカレジャの島(islands of Calleja)、対角帯、外側嗅索核の第2層、中脳レベルの内側縫線核、背側縫線核橋レベルの青斑核に、また反対側では前嗅核にみられた。標識神経線維は嗅球から旧・原皮質の表面の第1層)に通過線維ないし終末部として観察された。主嗅球への注入では原・旧皮質の外側部を、また副嗅球への投射では内側部を中心として投射する傾向が見られた。しかし、注入部位を、いわゆる嗅覚の入力部位である主嗅球とフェロモンなど生殖との関連性が指摘されているJacobson器官の入力部位である副嗅球に厳密に限局する事は難しく、両嗅球の上記の大脳皮質への出入力(投射)を区分することは困難であった。

来年度は、両嗅球の投射部位の厳密な区分の確定と、主嗅球の主要な投射線維束である外側嗅索の投射部位である外側嗅索核の出入力と味覚の関連部位である視床味覚野(後内側腹側核内側部VPMgu)および島皮質の投射部位である扁桃核との線維連絡的関連性を探索したい。本研究は味覚の脳内神経線維投射を検索してきた。昨年度は主嗅球からの投射を中心に検索し、今年度は性行動等に関係が深いとされる副嗅球からの投射を中心に研究を進めた。350400gのラットの副嗅球(accessory olfactory nucleus)にWGA-HRPないしbiotinylated dextran amine(BDA)を、先端径4070μmのガラス電極で電気泳動注入して、その脳内投射を検討した。副嗅球に注入した時に見られた標識神経終末は、皮質では扁桃体内側核Me、後皮質扁桃核PCo、脳内核には分界条床核BST、副嗅索核BAOTであった。また標識神経細胞は、前嗅核内側部AONm、副嗅索核BAOT、対角帯DB、外側前視神経核LPO、背側縫線核DR、青斑核LCに見られた。主嗅球注入時に投射線維がみられた部位にはほとんど投射は無かったが、標識細胞がみられた部位の共通部位は対角帯DB、背側縫線核DR、青斑核LCであった。ほとんどのデータが従来と同様の結果を示し、発表には至らなかったが、分界条床核へは、副嗅球から直接に、また主嗅球MOBから投射を受ける外側嗅索核NLOTからの、また味覚の回路から投射を受ける扁桃核部(特に扁桃体中心核および外側核背側部)からの、投射を受ける可能性を見出し、分界条床核が両感覚の共通の投射部位として見出され、今後の研究の基礎データを得ることができた。
小腸移植における小腸粘膜増殖因子の免疫学的ならびに栄養学的効果

基礎的な小腸移植実験にはラットが用いられることが多い。その理由は取り扱いが比較的容易であることと、系が明らかであることが挙げられるが、反面その小ささのためモデル作成のためには手術手技の習熟にかなりの時間を必要とする。我々も今回の研究に当たりモデル作成手技の習熟に時間がかかり、当初の研究計画の部分的な変更を余儀なくされた。しかし、最終的にラット小腸移植手技は一応の完成を見、graftからの糖および水分吸収に際し、Epidermal growth factor(EGF)が及ぼす効果について知見を得ることができたので報告する。小腸移植において拒絶は現存する重大な問題である。Graftを可能な限り短縮することは拒絶の面から見れば有利であるが、栄養の吸収面から見れば不利である。以前からEFGは小腸大量切除などの被侵襲消化管に対し、腸適応の促進効果があることが報告されていた。そこで今回我々はEGFの腸適応促進効果が部分移植小腸片における吸収能に対しても促進効果を持つかどうかを明らかにするための研究を行った。レシピエントラット(Lewis)の遠位小腸80%を切除した後、切除部位にグラフトを置換しレシピエントの小腸と連続させた。術後EGF(30μg/kg/day)または生食を3日間腹腔内に投与した。7日後、ラットを再開腹し組織学的検討と機能的検討のための吸収試験、およびsodium glucose cotransporter 1(SGLT1)誘導について評価した。EGFを投与したラットでは絨毛高、陰窩細胞増殖、糖および水分吸収、SGLT1誘導で有意な増加を認めた。しかし術後の体重変化、陰窩長では明らかな差は認められなかった。これらの結果から、EGFは移植小腸片に対して組織学的にも機能的にも腸適応を増進させることが明らかとなった。そしてこのことはEGFの臨床応用の可能性を示唆するものであると考えられた。donorとしてBrown-Norwayラット,recipientとしてLewisラットを設定し,両者間の小腸移植モデルを作製,移植片は2週間空置した後,その20%を残してdonor全小腸と置換した。その後,粘膜増殖因子としてグルタミンを投与してcontrol群(20%短小腸Lewisラット)との比較を行なったが,明らかな有意差を得るには至らなかった。その原因の一つとして2週間という移植片の空置期間があげられる。食物の通過がまったくないため,この間に移植片の粘膜の萎縮が進行し,グルタミンの効果が不充分であったような結果がでたものと思われる。また,controlの設定にも問題があり,空置や免疫抑制剤の影響を考慮して,同系移植ないし異系移植のグルタミン非投与モデルを作成するべきであった。グルタミンについてはepidermal growthfactor(EGF)との関係が論じられており,すでに1988年にはJacobsがグルタミンとEGFの併用による効果の増強について報告している(Surgery vol.104,p.358)。しかし,両者の作用機序の比較はまだ不充分であった。そのため我々は、両者の作用機序が異なるとの仮説のもとにまずグルタミンによる実験を行なった。しかし,1993年にTienらがEGFの作用機序についてグルタミンを介するものと介さないものがあることを報告した(Surgery vol.114,p.147)。すなわち,グルタミンのみによる効果よりも,EGFのみによる効果やEGFとの併用効果の方が強いことが推測される。

そこで,平成6年にはEGFによる研究を行ない,その結果いかんによってはグルタミンのみ,あるいはグルタミンとEGFの併用による研究を行なう方針である。本研究はラットにおける同所性異系部分小腸移植において、小腸粘膜増殖因子を用いてどこまで短小腸の移植で栄養学的に生存可能かをみるものである。ラット小腸移植モデルの作成は、donorにBrown-Norway雄性ラット、recipientにLewis雄性ラットを用いた。平成5年度では移植手技の予備実験として、全小腸を切除し同時に全小腸移植片で置換する同種におけるモデルを作成した。しかし最長16日の生存例を得るにとどまり、ラットの長期生存がほとんどなく、グルタミン投与による効果もみられなかった。このため平成6年度からは移植片を空腸の約10cmを採取する方法に変更した。この手技についてはさらに田口らのlong pedicleを作成する方法を採用しており、任意の長さの小腸が採取できる。移植片はまずThiry-Vella loopとして、一旦腹壁にstomaとして空置するが、2週後にはrecipientの小腸を切除して、移植片と端端吻合を行う。この手技の習熟におりdonor ratからの移植片の採取についてはほぼ一定の良好な成績が得られるようになってきた。しかしrecipient ratへの移植手技、移植中の全身管理などにまだ問題点が残されている。移植生着率の向上に平成7年度にラットの術中輸液ポンプ、手術用顕微鏡の助手用アダプターを申請した。これらによって生着率はさらに向上し、平成7年には長さの異なる移植片で、グルタミン、EGF、両者併用による成績が出せるものと思われる。移植手技の安定により、移植腸管の口側を一期的に吻合する群を設定することによって、粘膜増殖因子の作用が移植腸管空置の有無でどのように変化するかなど、さらに興味ある成績が付け加えられるものと考える。研究目的は報告したとおり同所性累系部分小腸移植において、粘膜増殖因子(ECFなど)が小腸移植片の粘膜増殖能、吸収能に及ぼす影響をみるものである。小腸移植モデルにはdonorにBrown-Norway雄性ラット、recipientにLewis雄性ラットを用いた。また対照群としてdonor、recipientともにLewis雄性ラットを用いた同系部分移植モデルを作成した。モデル作成手技は田口らの方法に準じ20cmのドナー空腸を採取し二期的に移植を行った。移植モデル作成成績は昨年度購入したシリンジ注入ポンプの使用、二期的に移植を行う方法に切り替えたこと、さらに田口らのモデル作成手技をより安全に行えるよう工夫、改善したこと、助手用顕微鏡による手術補助、などにより長期生存が得られる安定したものとなった。基礎データとして小腸広範囲切除モデルのEGF投与、非投与各群で経時的にみた。EGFは腸吻合直後よりEGF10μg/kgを含む生食1mlを、非投与各群では生食のみ1mlを計9回腹腔内投与した。体重を術前体重に対する比(%)でみるとEGF非投与群ではPOD-2、7、14、の順に84.0%、77.0%、63.9%、EGF投与群では順に88.9%、80.8%、86.6%、であった。
ライマン・アルファ輝線銀河の性質の解明と宇宙再電離過程の究明

赤方偏移z=7銀河をケック望遠鏡の分光装置DEIMOSで観測したデータを解析した.その結果を論文にまとめ,国内外の研究会で発表した.宇宙再電離がいつどのように起きたかは,現代天文学に残された謎の一つである.宇宙マイクロ波背景放射やクエーサーの観測結果から,宇宙再電離はz=6-11に起きたとされている.さらにz=6-7では,中性水素によって強く吸収を受けるLya輝線の強い銀河の個数密度進化を追う方法で調べられている.その結果,z=6から7にかけて,宇宙の中性度が大きくなったことが示唆されている.しかしこの方法では,銀河進化による効果を切り分けるのが難しいと考えられている.そこで本研究は,Lya輝線を強く放射している銀河の割合(f_Lya)をプローブにした.f_Lyaは,紫外連続光が明るいという遷択基準で時代ごとに選んだ銀河を分光観測することで求められる.宇宙がほぼ完全電離されているz=4-6におけるf_Lyaは先行研究で報告されており,その時間変化は銀河進化による影響を反映していると考えられる.その結果をz=7まで外挿したものと,z=7銀河の観測結果とを比較することで,z=6から7にかけての宇宙の中性度進化の有無を調べることが出来ると期待される.申請者はz=7銀河の分光データを解析し,当時最大のサンプルからz=7のf_Lyaを求めた.その結果,z=6から7にかけ,f_Lyaが有意に小さくなっていることを発見した.これは,宇宙の中性度がz=6から7にかけて大きくなったことを示唆している.また,紫外連続光の暗い銀河ほどf_Lyaの減少幅が大きいことが分かった.このことから,z=7では暗い銀河の周囲の方が宇宙の中性度が大きいと考えられる.この研究の特に重要な点は,宇宙再電離の時期にとどまらず,その進行過程にまで考察を深めた点である.赤方偏移z=7銀河をケック望遠鏡の分光装置DEIMOSで観測したデータを解析した.その結果を論文にまとめ,国内外の研究会で発表した.宇宙再電離がいつどのように起きたかは,現代天文学に残された謎の一つである.宇宙マイクロ波背景放射やクエーサーの観測結果から,宇宙再電離はz=6-11に起きたとされている.さらにz=6-7では,中性水素によって強く吸収を受けるLya輝線の強い銀河の個数密度進化を追う方法で調べられている.その結果,z=6から7にかけて,宇宙の中性度が大きくなったことが示唆されている.しかしこの方法では,銀河進化による効果を切り分けるのが難しいと考えられている.そこで本研究は,Lya輝線を強く放射している銀河の割合(f_Lya)をプローブにした.f_Lyaは,紫外連続光が明るいという遷択基準で時代ごとに選んだ銀河を分光観測することで求められる.宇宙がほぼ完全電離されているz=4-6におけるf_Lyaは先行研究で報告されており,その時間変化は銀河進化による影響を反映していると考えられる.その結果をz=7まで外挿したものと,z=7銀河の観測結果とを比較することで,z=6から7にかけての宇宙の中性度進化の有無を調べることが出来ると期待される.申請者はz=7銀河の分光データを解析し,当時最大のサンプルからz=7のf_Lyaを求めた.その結果,z=6から7にかけ,f_Lyaが有意に小さくなっていることを発見した.これは,宇宙の中性度がz=6から7にかけて大きくなったことを示唆している.また,紫外連続光の暗い銀河ほどf_Lyaの減少幅が大きいことが分かった.このことから,z=7では暗い銀河の周囲の方が宇宙の中性度が大きいと考えられる.この研究の特に重要な点は,宇宙再電離の時期にとどまらず,その進行過程にまで考察を深めた点である.
量子色力学におけるθ真空およびその位相幾何学的性質を起源とする諸現象の研究

QCDの位相幾何学的な側面と深い関係性をもつ回転系の物理では、未だ不明瞭な点が多い。こうした現状に対して本年度は以下の2つのテーマにおいて、回転系における境界の効果に注目した研究を遂行してきた。(1)回転系の真空と境界の効果回転する粒子に対しては相対論的因果律のために熱力学的極限が正当化されない。したがって粒子の運動量は典型的には系のサイズスケールで離散化され、有限の赤外のエネルギーギャップを持つ。一方で回転の効果は理論に有効的な化学ポテンシャルとして導入される。すなわち通常の有限密度系における質量閾値と化学ポテンシャルと同様に、このエネルギーギャップと有効化学ポテンシャルの競合を通じて、回転の効果が決定される。本研究では、フェルミオンに関する境界条件を課すことで、ゼロ温度極限における熱力学量には回転の効果が現れないという極めて重要な事実に至った。これによって我々は、Jingfeng氏らによる「回転の効果のみによって1次カイラル相転移が誘発される」という結論を完全に否定した。以上の内容はすでに論文誌において発表済みである。(2)磁場が印加された回転系と境界の効果有限サイズ効果が大きくなるとLandau量子化は実現せず、修正されたスペクトルが得られる。したがって回転系において、磁場は必然的に不完全なLandau準位を形成する。このことから、とりわけ磁気的触媒効果と呼ばれる外部磁場によって誘発されるカイラル対称性の破れに対して、有限サイズ効果の考察が非常に重要であることが窺える。現在までのところ、回転の印加されていない系においてこの「不完全Landau準位」を導いている。同様に波動関数の空間的な振る舞いを調べ、低エネルギーモードがスピンの向きによって系の中心部と境界近傍に局在することが分かった。今後はこれらの解からフェルミオンの動力学的質量と境界の効果について調べていく。28年度が最終年度であるため、記入しない。重イオン衝突実験を中心として、近年カイラルフェルミオンのトポロジカルな側面に注目が集まっている。その中でも回転の物理はこのQCDのトポロジーと強い関わりを持つ。しかしその一方で相対論的な多体問題において回転が齎す影響は、十分に議論されておらず、実際に回転由来のトポロジカル輸送現象に関しても不明瞭な点が残っている。そこで本研究では「回転系のQCD」の基本的な側面に着目した研究を行った。こうした考察は、重イオン衝突のみならず中性子星という現実の回転する系を対象としているQCD物性研究において、極めて重要である。特に本年度は、QCDの基本的概念であるカイラル対称性に対する回転の効果を調べた。カイラル対称性の破れは、背景場の効果によって様々な応答を示すことが知られており、例えば有限密度系では自発的に破れたカイラル対称性が磁場の増加に伴って回復する。ここで回転が有効的な密度効果に見なされることに着目すると、回転と磁場の存在下では新奇のカイラル構造が実現されることが期待できる。本研究では、曲がった時空のDirac方程式から量子化条件や分散関係等を求め、NambuーJona-Lasinio模型に基づいて構成子クォーク質量を計算した。その結果、一定の回転が加わると磁場によってカイラル対称性が回復することが明らかになり、この新たな現象を「Rotational Magnetic Inhibition」と名付けた。この結果において注目すべきは、QCDスケールに比べて無視できるほど小さいはずの角速度が、有効的な化学ポテンシャルとして理論に導入されることで、多体系に有意な効果をもたらすという点である。これは中性子星の自転がその内部構造に大きな影響を及ぼしている可能性を示唆しており、本研究は今後の中性子星の研究に対しても新しい方向性を与えた。LHCやRHICでの非中心重イオン衝突実験においてΛ粒子の大域的な偏極が観測されたことで、衝突後のクォーク・ハドロン物質中で渦度が生成されていることは疑いのない事実となっている。これによって、ここ数年ではカイラル渦糸効果(CVE)等のPおよびCP-oddな輸送現象をはじめとして、渦度の効果に由来するQCDの位相幾何学的な現象が理論側から盛んに調べられてきた。しかし、重イオン衝突実験の本来の主題であるQCD相構造に対しては、こうした回転の効果が明らかになっていない。むしろ重イオン衝突のみならず中性子星という回転系を多く扱う現代のQCD研究においては、このような回転系の解析は明らかに火急の課題である。これに対して、申請者は大域的な回転の効果が与えるQCD相転移への影響を初めて議論した。こうした議論はQCDの深層に根付く普遍的な物理に関連しており、渦度由来のトポロジカルなQCD現象に対しても、その根本を理解する上で非常に重要な研究結果となっている。実際に我々が回転の効果を議論したことによって、近年回転に関する性質に再度注目が集まっており、同様に現在投稿中の論文誌の査読者からも、大変興味深い結果であるというコメントも受けている。さらに磁場中のQCD真空の性質は長らくQCD物性の主軸を成すテーマであるため、磁場と回転という新たな環境下におけるカイラル相転移の構造を明らかにしたことは大きな成果である。以上の事実から客観的に見ても、現在の研究は概ね順調に進んでいると言える。

(1)回転系の真空と境界の効果回転する粒子に対しては相対論的因果律のために熱力学的極限が正当化されない。したがって粒子の運動量は典型的には系のサイズスケールで離散化され、有限の赤外のエネルギーギャップを持つ。一方で回転の効果は理論に有効的な化学ポテンシャルとして導入される。すなわち通常の有限密度系における質量閾値と化学ポテンシャルと同様に、このエネルギーギャップと有効化学ポテンシャルの競合を通じて、回転の効果が決定される。本研究では、フェルミオンに関する境界条件を課すことで、ゼロ温度極限における熱力学量には回転の効果が現れないという極めて重要な事実に至った。これによって我々は、Jingfeng氏らによる「回転の効果のみによって1次カイラル相転移が誘発される」という結論を完全に否定した。以上の内容はすでに論文誌において発表済みである。(2)磁場が印加された回転系と境界の効果有限サイズ効果が大きくなるとLandau量子化は実現せず、修正されたスペクトルが得られる。したがって回転系において、磁場は必然的に不完全なLandau準位を形成する。このことから、とりわけ磁気的触媒効果と呼ばれる外部磁場によって誘発されるカイラル対称性の破れに対して、有限サイズ効果の考察が非常に重要であることが窺える。現在までのところ、回転の印加されていない系においてこの「不完全Landau準位」を導いている。同様に波動関数の空間的な振る舞いを調べ、低エネルギーモードがスピンの向きによって系の中心部と境界近傍に局在することが分かった。今後はこれらの解からフェルミオンの動力学的質量と境界の効果について調べていく。強磁場の極限では粒子の波動関数が強く局在化するため、境界の影響がさほど大きくない。この考えに基づき、現在までの計算では系の境界の効果を簡単化した形で取り入れた計算を行っている。したがって現状の結果は、外部磁場が強い場合のみ妥当な結果であると言える。またこうした境界の効果を無視した計算では、系は近似的に並進対称性を持ち、空間的に一様な熱力学ポテンシャルを用いた議論を行っている。しかし通常の多体問題とは異なり回転の効果を議論する場合は、系の境界における相対論的因果律のために、熱力学極限をとることは厳密には正当化されていない。したがって特に磁場がQCDスケールに比べて大きくない状況では、境界の効果が大きく効くと予想される。また系の非一様性も顕著になるはずである。こうした問題に対して我々は現在、フェルミオンに対する有限サイズの円筒系での適切な境界条件の設定方法を模索している。一般に相対論的量子力学の枠組みにおいても、スカラー粒子であれば境界におけるDirichlet条件が有効である。しかしスピノル波動関数は異なる4成分から構成されるため、このような容易な境界条件の設定が可能でない。したがって波動関数自身ではなく、これらの積で与えられるスカラー量やベクトル量に対する境界条件が必要となるであろう。適切に境界条件が与えられると系には非一様性が生じる。
夜行高速バス運転士の夜間作業と車中仮眠に関する研究

夜行高速バス運転士の夜間作業の実態を把握し、過労運転を防止する夜間車中仮眠の有効性について調べるために、質問紙調査と心拍測定調査を行った。その結果、夜行高速バス運転士によって睡眠の質に違いが見られ、夜間に車中でとる仮眠中の心拍数は、宿泊所でとる昼間の睡眠中よりも低くなることが分かった。眠気防止や疲労回復のためには、睡眠は必要不可欠なものであることから、質の高い睡眠をとることができる環境を整備するための基礎的研究を行った。文献・ヒアリング調査と質問紙を用いた調査を研究スケジュールの通りに行った。特にヒアリング調査に重点を置き、高速バス運転士の夜勤と睡眠に関する実態について調べることができた。質問紙を用いた調査では、夜間運転における労働と健康について、夜勤交代勤務を行うバス運転士40名に質問紙を用いた調査を実施した。この調査質問紙は、事前の文献調査とヒアリング調査で得られた知見をもとに作成された。とくに、夜勤体制に関する詳細については、調査協力機関の意見を参考にした。質問項目は、夜勤における夜行高速勤務時の緊張・疲労感の比較や運転疲労、夜行高速勤務における作業の単調・緊張感、仮眠状況、疲れ・眠気・身体疲労の出現時期に関する項目、夜勤の睡眠に関する項目、夜勤明けの就寝時刻に関する項目、夜行高速勤務における健康状態から構成された。解析の結果、85.0 %の運転士は車中キャビン内の仮眠室であるにもかかわらず、夜間の仮眠時間中にある程度の睡眠はとることができており、その効果は疲労回復よりも、眠気防止の方が大きいことが分かった。また、運転士の昼間の睡眠時間については、自宅よりも出先の方が短く、出先の宿泊施設では自宅と同じような睡眠をとることが難しい要因があることが分かった。眠気防止や疲労回復のためには、睡眠は必要不可欠なものであり、質の良い睡眠をとることができる環境を整備すれば、運転士の心身負担を軽減できる可能性があると考える。高速バス運転士に対して、夜間運転作業中とそれ以外の作業、そして夜間仮眠中、昼間睡眠中の心拍測定を研究スケジュールの通りに行った。とくに、車中における夜間仮眠中と宿泊所における昼間睡眠中の心拍データについては、予定していた以上の被験者に実施することができた。また、高速バス運転士の比較データとして、夜間運転業務を行うタクシー乗務員についても、蓄積疲労徴候を評価できるCFSIテストを実施することができた。高速バス運転士の勤務スケジュールの違いによっては、睡眠の質に違いが見られた。また、データ解析の結果、夜間仮眠中の心拍数は、昼間睡眠中の心拍数よりも低くなる傾向があり、車内仮眠室の睡眠環境を改善すれば、仮眠の休養効果がさらに高まることが予想される。これらの結果は、初年度に実施した睡眠状況を評価するためのアンケート調査とも合致している点が多い。また、CFSIテストを用いたタクシー乗務員のデータとの比較では、自覚症状の少ない慢性疲労の蓄積度合いに差が見られた。最終年度には、初年度と次年度の調査で疑問が残る点を明らかにした上で、夜行高速バス運転士の睡眠環境を整えるための研究を行う。睡眠の質を向上させる対策について考察し、過労防止運転に対する安全管理に寄与できる研究成果をまとめることができると考える。近年の長距離バスの大事故によって、運転士の疲労蓄積が安全なバスの運行に支障をきたしていることが心配されている。本研究では、限られた休息時間を効率よく取るための基礎となる研究を行い、眠気防止と疲労回復のための質の良い夜間仮眠と昼間睡眠をとることができる環境について研究することを目的とした。本研究では、質問紙調査と心拍数測定を行った。質問紙は、夜勤と睡眠、夜間作業における労働と健康に関する項目から構成された。心拍測定調査では、バス乗務時(運転・業務・睡眠・余暇)の心拍を連続測定し、それぞれの行動を遂行するための負担度を測定した。質問紙調査の結果、運転中に眠気を感じることがある運転士は全体の7割おり、その眠気の出現時刻の最頻値は34時頃であった。各バス会社では、運転士の眠気防止や疲労回復のために、二人乗務制をとっている。一人が運転をしている間、もう一方はバス車中で休息(仮眠)をとるようにしている。車中休養中、85.0 %の運転士はある程度の睡眠がとれており、その効果は疲労回復よりも眠気防止の方が高かった。心拍数の測定調査では、車中の夜間仮眠時と宿泊所の昼眠時の心拍数を測定した。その結果、昼眠時は仮眠時よりも心拍水準が高く、その差は統計的に有意であった。心拍水準に著しい個人差はあるが、仮眠時より昼眠時に心拍数が高くなる傾向は、1名の運転士を除いて全ての運転士に共通していた。睡眠の質に関する調査では、車中での夜間仮眠時と宿泊所での昼間睡眠時の運転者の心拍数を比較した。前者が後者より有意に低い水準を示したことは、仮眠時の方が宿泊所での睡眠時よりも深い睡眠を運転士にもたらしたことを示している。深夜勤は、日勤に比べて心身の負担が重く疲労を蓄積させやすい。本研究で得られた調査結果を踏まえて、1車内仮眠室の環境改善、2出先宿泊所の睡眠環境の整備、3夜勤適性の診断に関する提案をまとめた。

夜行高速バス運転士の夜間作業の実態を把握し、過労運転を防止する夜間車中仮眠の有効性について調べるために、質問紙調査と心拍測定調査を行った。その結果、夜行高速バス運転士によって睡眠の質に違いが見られ、夜間に車中でとる仮眠中の心拍数は、宿泊所でとる昼間の睡眠中よりも低くなることが分かった。眠気防止や疲労回復のためには、睡眠は必要不可欠なものであることから、質の高い睡眠をとることができる環境を整備するための基礎的研究を行った。高速バス運転士の車中夜間仮眠中の心拍数を測定することができた。初年度の研究結果と合わせて、夜間作業と睡眠の関係についてまとめることができた。最終年度のための必要データを解析する作業は、90 %以上消化することができた。人間工学夜間長距離バス運転士の心身負担を軽減するための研究を行う。初年度に実施したアンケート調査の結果と、本年度に実施した心拍測定のデータとを総合的に分析する。また、夜間仮眠時以外の業務(運転中やその他)や出先宿泊所における昼間睡眠中の心拍数も測定する計画をしている。その他、バス以外の職業運転者についても、比較データとして同種の調査を行いたい。研究成果の発表については、最終年度で積極的に行う予定である。初年度に、高速バス運転士の夜間運転業務における夜勤と睡眠に関する情報を整理することができ、次年度に実施する実測測定調査のための条件設定を決定することができた。夜勤と睡眠に関する実態調査は、ほぼ85%以上予定を消化することができた。ほぼ予定通りに使用することができた。夜間仮眠(車中仮眠)中や昼間睡眠(出先宿泊所睡眠)中の心拍数から、休養(疲労回復)の必須条件である睡眠の評価を行う。評価の方法として、夜行高速バスの乗務時(運転・業務・睡眠・余暇)の心拍を連続測定し、心拍数の増減傾向を分析し、それぞれの行動を遂行するための負担度を推定する。また、交代システムの生活時間に及ぼす影響を明らかにするために、行動記録調査も同時に行う予定である。消耗品購入に使用する。研究成果の学会発表の旅費に対する費用であった。初年度の研究成果を関係学会で発表する予定であったが、一部追加の解析の必要がでてきたため、期間内に準備が間に合わなかった。初年度に発表する予定であった研究成果を、国内外の学会で発表するための旅費費用にする。
舗装路面の移動式たわみ測定装置の開発と健全度評価

高速で移動しながら連続的にたわみを計測する試験機は,各国で開発が進められており,それを用いて舗装の支持性能を評価した結果は,舗装の維持管理に活用されつつある。このような試験機の開発にあたり,高速で移動する車両により計測されるたわみの特性を把握することを目的として,既存の車両に変位計を取り付け,いくつかの試験路において連続たわみの測定を行った。また,収集したデータを用いて舗装の健全性を評価する方法について検討を行った.本研究では,載荷位置直下のたわみと載荷位置から45cm離れた位置のたわみの差を用いて,舗装表面付近の健全性を評価する方法を提案し,比較的たわみの大きい健全な舗装に対してFWD試験で得られるたわみと相関の高い結果が得られることを確認した。舗装も他の構造物と同様に新設から維持管理の時代に移行しており,迅速で的確な健全度評価が求められている.舗装の健全度評価ための非破壊試験機としてFWD試験機が広く利用されているが,その都度静止して計測しなければならないため,連続的に計測できないだけでな.FWD試験は試験時の安全性を確保するため交通規制が必要となり,そのため計測に時間がかかり,わが国の主要道路網を定期的に計測するには膨大な時間と経費が必要となる.そこで,通常の他車両と同じ速度で走行しながら舗装の構造を評価できる試験機の開発が,舗装を合理的に維持管理する上で最重要課題である.そこで,21年度のおける勉強会の折に行った予備実験のデータを分析した結果を踏まえ,22年度の研究では試験車両として(独)土木研究所所有の荷重車を改造して試験車を開発することとした.この車両の後輪前後にレーザ変位計を取り付け,車両走行時の舗装たわみを連続的に計測できる走行型たわみ測定装置の試作をした.この車両には走行時の車両の挙動を測定するため車両の数カ所に加速度計を設置している.平成23年2月8日に土木研究所構内の剛性の異なる3ヶ所の舗装道路において試験を行った.これらの試験サイトでは,試験車両走行時にその振動誘起の原因となる路面の凹凸を測るための路面性状調査と,舗装の剛性を評価するためのFWD試験,舗装に埋設した加速度計による舗装の振動特性の測定をしている.現在,この実験で収集した膨大なデータの分析中である.舗装も他の構造物と同様に新設から維持管理の時代に移行しており,迅速で的確な健全度評価が求められている.舗装の健全度評価ための非破壊試験機としてFWD試験機が広く利用されているが,その都度静止して計測しなければならないため,連続的に計測できないだけでなく,試験時の安全性を確保するため交通規制が必要となる.そのため,わが国の主要道路網を定期的に計測するには膨大な時間と経費が必要となる.そこで,通常の他車両と同じ速度で走行しながら舗装の構造を評価できる試験機の開発が,舗装を合理的に維持管理する上で最重要課題である.平成23年度では,平成23年2月8日に土木研究所構内の剛性の異なる3ヶ所の舗装道路において実施した走行試験結果を踏まえ,(1)厚さ2mのマスコンクリート上でレーザ変位計のゼロ点調整を行い,測定たわみの精度を向上させる,(2)レーザ変位計取り付け架台の加速度計数を4つに増やし走行中のレーザ変位計の挙動を正確に把握する,(3)計測距離を伸ばして解析区間長が変化した場合の影響を把握することとし,平成23年10月27日に土木研究所構内にて再度走行試験を行った.あわせて,平成22年度と同様に舗装の剛性を評価するためのFWD試験を実施した.その結果,当該研究で開発した移動式たわみ測定装置の車輪直下のたわみと,FWDによって測定した載荷直下のたわみは概ね一致することがわかった.なお,構造解析を行うにはたわみ形状を把握する必要があるため,載荷点前後のたわみ測定値から,たわみ形状を推定する方法について現在検討中である.舗装は,交通荷重の繰り返し作用や環境作用により,健全性が低下していく。また,地震動のような偶発的な作用や地下水の影響により,路盤や路床,路体に空洞や不等沈下といった変状をもたらすこともある。したがって,舗装の構造に起因する健全度を効率的に評価することは重要である。現在,舗装の支持力評価には,重錘を落下させたときの衝撃荷重と路面のたわみを同時に計測する非破壊機械であるFWD(Falling Weight Deflectometer)が広く活用されている。

しかし,FWDは静止して調査を行うため,交通規制が必要となる上に,試験を実施するまでに多少の時間を必要とするだけでなく,試験位置から離れた位置に空洞などの局所的な変状がある場合には,それらを把握できない可能性を否定できない。このため,舗装の合理的な維持管理を行うためには,高速で移動しながら連続的に舗装の支持力を評価できる方法の開発が急務である。本研究では,日本国内で走行可能なトラックタイプの車両に高精度レーザ変位計を設置した架台を取り付け,走行しながら舗装路面のたわみ速度を計測する「移動式たわみ測定装置」を試作するとともに,(独)土木研究所つくば中央研究所内のアスファルト舗装において走行試験を実施し,舗装の支持力評価の主流を成しているFWD試験機との比較を行い,その測定精度と測定データを用いた健全度評価法について検討を行った。その結果,センサ架台の振動抑制方法については今後の課題として残されたが,センサ架台の高周波領域の振動の影響を移動平均による信号処理によって抑制できることがわかった。また,移動式たわみ測定装置とFWDの載荷位置直下のたわみと載荷位置から450mm離れた位置のたわみの差を用いて両試験結果を比較したところ,評価区間を100mとした場合には,両試験結果は高い相関性があることを確認した。計測車走行中に微小な路面凹凸によって発生するレーザ変位計取付架台の振動が予想以上に計測データに影響を及ぼし,計測精度向上の対策に時間がかかったため.24年度が最終年度であるため、記入しない。土木研究所構内に敷設されている各種舗装において走行試験を実施し,計測データを蓄積するとともに,たわみ形状推定法について検討し,舗装各層の弾性係数の逆解析を行う予定である.24年度が最終年度であるため、記入しない。
ドイツ近現代文学における「神義論的思考」の変遷

ドイツ近現代文学の展開の中に、「神義論的思考」が恒に、しかし形を変えて存在することを指摘し、それを系譜的に跡づけた。「神義論的な問い」とは、悪や苦しみの意味を問う宗教的な問いであるが、近現代となり世俗化が進むなかでも、人生の意義を問う問いとして、構造を等しくする問いが文学作品の中に受け継がれていることを、修辞の問題として明らかにし、修辞の伝統の内に具体的に跡づけた。成果として公にした著書の一冊で日本詩人クラブ詩界賞を受賞した。(1)本研究は広義の「神義論的思考」をドイツ近現代文学史という歴史のスパンの中で具体的に指摘し、その変遷を系譜的に跡づけていく。(2)一方で、宗教や伝統によって培われた比喩形象やトポス、その修辞・文体様式を整理する作業を併行して行い、それらをこの「神義論的」目的論的構図と突き合わせ、秩序づけていく。(3)最終的に、ドイツ近現代文学を「修辞」と「批評」という縦糸・横糸によって織り出されてゆく織物、すなわち伝統の批判・継承の深化を映す図として描き出すことを目指す。(4)そのようにして、古典主義、ロマン主義、写実主義、自然主義という風に通常の文学史が採る固定的叙述から自由な、独自の修辞論的文学史を形作る。本年度は研究のライトモチープとしての「神義論」、すなわち作品を統括する目的論的自己同一性としての「神義論的思考」を厳密に定義づけ、研究の方法論的妥当性を確保することに努めた。特に、概念としての「神義論」の認識を深めておくことが不可欠な毅階となる。その為に、まず「神義論」の術語を導いたライプニッツの著作に始まり、この概念を楽観的に打ち出す啓蒙主義時代の物理神学思想(ダーハム)や、修辞的共同体におけるその典型的表現形式となった宗教的抒情詩(プロッケス、ゲレルト、ハラー)などを考察の対象として据えた。これらの詩人たちについては、詩人と作品の全体像を獲得するために、著作集の他にも、その当時の作品出版の背景をなす諸事情の記録などを参照する必要がある。そのためイェーナのヘルダー学会参加の機会に当地の図書館、文書館などを訪れて資料の収集・参照にあたった。あわせて、会議参加者と本研究のテーマについて意見交換を行った「神義論」は元来神学の術語であるが、その内包する思考の変遷を跡づける為には、やはりその用いられる修辞的文脈を広範に辿り、ある程度網羅的に秩序づけねばならない。その内実を覆う言説は文学・思想に限られず、説教などの記述や民間の説話に及ぶ広大な裾野を有している。その言説を文脈も含めて収集、検証するという予備作業も一部行ったが、その際にもイェーナ出張の機会を用い、ある程度の成果を収めることができた。「崇高なる存在」としての神の叙述が、中世からルターに至るまで保たれていた「聖なる神の尊厳」への畏敬をかえって希薄なものとし、世俗化の時代における「裏返された神義論」をやがて来るべきものとして準備することを、この段階でも検証しておく必要がある。そのために、同時代のイギリス詩をも比較考察することに努めた。この年度は平成20年度の研究をひきつぎ、資料収集を重ねつつその分析を行った。1.敬虔主義や覚醒運動など、近代各時代の人々が死生観や苦しみの理解を表明する際の比喩の伝統などを、文体の側面から見直したが、その際に、そうした伝統形成の背景を培ってきた宗教改革から19世紀に至る範囲の神学論争なども検討しつつ、神義論的問いの兆す場を跡づけた。ヨハン・フランク、ヨハン・ヘルマン、パウル・ゲルハルトなど30年戦争時代の詩人たちを中心とする賛美歌集に収められた苦難の受容を歌う詩篇を分析したが、なかでもがヨハン・レオンの「死」を中心に据えて検証し、「神義論」を思想や神学の独占概念から切り離し、文学共同体の修辞的伝統全体のなかに跡づける作業を行った。2.この段階から、本研究の要となる「裏返された神義論」への転換を正面に据えて、跡づけていった。18世紀後半から19世紀全般におよぶ歴史発展への楽観論、ユートピア志向をレッシング、ヘルダー、ラーヴァターなどの思想家や、初期ロマン派の詩人たちにその先駆形態を見て、彼らの著作の個々の修辞、比喩形象を一旦解体し、目的論的再神話化としてのその言説の総体を価値づけていった。3.文献を参照するための出張調査を今年度も行った。夏期休暇中にレーゲンスブルク大学の図書館、讃美歌学関係の資料の豊富な同大学の人文科学図書館において、その方面の資料収集にあたった。

年度半ばにこれまでの到達点までを『神への問い』という書物にまとめたが(ベルンハルト・ガイェック教授との共著)、その成果をふまえた上で滞在時にガイェック教授と打合せを行い、研究のさらなる進展を目指した。1.21年度の作業のうち、敬虔主義や覚醒運動など、近代各時代の人々が死生観や苦しみの理解を表明する際の比喩の伝統などを、文体の側面から見直していく作業を継続した。その際に、そうした伝統形成の背景を培ってきた宗教改革から19世紀に至る範囲の神学論争なども検討しつつ、神義論的問いの兆す場を跡づけた。説教集や賛美歌集なども検証し、「神義論」を文学共同体の修辞的伝統全体のなかに跡づける作業を行った。2.21年度の作業の内、本研究の要となる「裏返された神義論への転換」を正面に据えて跡づけていく作業へと重心を移し、全体を総括的にまとめるための本格的な作業を行った。修辞的伝統の系譜的研究が単なる懐古的叙述にとどまらないために、現代の表現の問題に関しても積極的な意義付けを行った。ヨッヘン・クレッパー、コンラート・ヴァイス、マリー・ルイーゼ・カシュニッツなどの作品を検証し、そこに先立つ時代と共通する比喩形象の提示を確認した。本来、希望の形象化である「予型論」が「神義論的思考」の変遷という時代の展開の中でも、死生観に関わる重要な比喩形象に留まることを取り上げた。近代初期から現代へと、伝統の批判や継承において文体や修辞の果たしてきた役割を、広く民衆に関わる様々な文献を俯瞰しつつ、明らかにした。3.9月にドイツのハレにおいて開催された「第10回国際ハーマン学会」において、これまでの成果をその場の打合せや討論に委ね、ドイツの研究水準に照らした評価を受けた。併せて会議の前後に、ハレで18世紀関係の文献、ことに日本では閲覧困難な資料を収集した。研究の協力者であるベルンハルト・ガイェック教授とは、本年は主として文書交換により、これまでの作業を見直し、その上で発展的に開かれる方向性についで討議を行った。本研究では広義の「神義論的思考」をドイツ近現代文学史という歴史のスパンの中で具体的に指摘し、その変遷を系譜的に跡づけることを目指してきた。その一方で、宗教や伝統によって培われた比喩形象やトポス、その修辞・文体様式を整理する作業を併行して行った。こうして、ドイツ近現代文学を「修辞」と「批評」という縦糸・横糸によって織り出されてゆく織物、すなわち伝統の批判・継承の深化を映す図として描き出すことを目指し、通常の文学史が採る固定的叙述から自由な、独自の修辞論的文学史を形作ることを目指した。23年度は22年度の作業のうち、敬虔主義や覚醒運動など、近代各時代の人々が死生観や苦しみの理解を表明する際の比喩の伝統などを、神義論的問いの兆す場として文体の側面から見直す作業をなおも継続した。また、近現代の現象としての「裏返された神義論への転換」を正面から跡づけていく作業を中心に、全体を総括的にまとめるための作業を行った。これまでの研究成果は、『神への問い-ドイツ文学における神義論的思考の由来と行方』『詩人イエス-ドイツ文学から見た聖書詩学・序説』など、そのつど執筆し成果として刊行してきた。現在は、本研究で行った作業方法で達成した成果を統一的俯瞰的に把握しようとしているが、文学史記述における知識社会学的視点の必要など、発展的に開かれた展望をも確認している。最終的には予型論・比喩形象を網羅的に整理し、到達点を『聖書詩学』(仮題)の表題のもとにドイツ近現代文学の変遷として書物に著すことを目指しているが、その過程でなお押さえておくべき課題などを、研究協力者のB・ガイエック教授他、関連分野の研究者と討議、意見交換を重ねている。「詩作品中の〈私〉」や「物語人称」といった文芸論的な研究を参照し、文学史研究における「二人称の問題」に注目しつつ、研究の現段階のまとめと新視点を加えた継続を志している。
ヒト肥満細胞の長期試験管内培養とその分化, 増殖機序に関する研究

ヒト肥満細胞の長期試験管内培養とその分化増殖機序の解明を目的に1.ヒトインターロイキンー3(IL-3), IL-4の骨髄由来ヒスタミン含有細胞(HCC)の増殖,長期維持効果の検討, 2.マウス肺肥満細胞のメチルセルロース培養, 3.ヒト肺肥満細胞の培養条件の検討を行った.結果:1.ヒト骨髄単核球をIL-3, IL-4の刺激下で液体培養したところ, IL-3は単独でHCCを濃度依存的に分化増殖させた. IL-4は単独では分化増殖能はなかったが, IL-3によるHCCの分化増殖を濃度依存的に亢進した.培養HCCは円形,分葉した核を持ち,顆粒はトルイジン青,アルシャン青染色陽性で,サフラニン染色陰性であった.電顕的にもelectron-denseな顆粒を認め,その性状はIL-3単独, IL-3+IL-4のいずれの方法で刺激したものも好塩基球に特異的な顆粒状で肥満細胞の顆粒を持つものはなかった.またIL-4は培養初期にのみ働らき, HCCは培養23週目を最高に以後減少し, HCCの長期維持は出来なかった.現条件ではマウスと異なり,骨髄より肥満細胞を培養するのは困難と考えられた. 2.成熟肥満細胞を直接培養すべく,まずマウス肺肥満細胞を酵素処理, Percoll遠心法で分離,濃縮メチルセルロース培養を行ったところ, Pokeweed mitogen刺激脾細胞上清の刺激で粘膜型肥満細胞が培養された.3.同様の方法でヒト肺より分離され肥満細胞をメチルセルロース培養法,液体培養法,線維芽細胞との混合液体培養法で, IL-3+IL-4の刺激下で培養した.現在までのところ,前二者の方法では肥満細胞の増殖を認めていない.混合培養法では長期維持は可能で,被刺激対照とは差があるものの, IL-3, IL-4によっても培養前値以上の肥満細胞数,ヒスタミン含有量を増加を見ていない.マクロファージ,線維芽細胞もIL-4受容体を持つことも知られており,より純化した肥満細胞を用いるなどの培養条件の検討をさらに進める予定である.ヒト肥満細胞の長期試験管内培養とその分化増殖機序の解明を目的に1.ヒトインターロイキンー3(IL-3), IL-4の骨髄由来ヒスタミン含有細胞(HCC)の増殖,長期維持効果の検討, 2.マウス肺肥満細胞のメチルセルロース培養, 3.ヒト肺肥満細胞の培養条件の検討を行った.結果:1.ヒト骨髄単核球をIL-3, IL-4の刺激下で液体培養したところ, IL-3は単独でHCCを濃度依存的に分化増殖させた. IL-4は単独では分化増殖能はなかったが, IL-3によるHCCの分化増殖を濃度依存的に亢進した.培養HCCは円形,分葉した核を持ち,顆粒はトルイジン青,アルシャン青染色陽性で,サフラニン染色陰性であった.電顕的にもelectron-denseな顆粒を認め,その性状はIL-3単独, IL-3+IL-4のいずれの方法で刺激したものも好塩基球に特異的な顆粒状で肥満細胞の顆粒を持つものはなかった.またIL-4は培養初期にのみ働らき, HCCは培養23週目を最高に以後減少し, HCCの長期維持は出来なかった.現条件ではマウスと異なり,骨髄より肥満細胞を培養するのは困難と考えられた. 2.成熟肥満細胞を直接培養すべく,まずマウス肺肥満細胞を酵素処理, Percoll遠心法で分離,濃縮メチルセルロース培養を行ったところ, Pokeweed mitogen刺激脾細胞上清の刺激で粘膜型肥満細胞が培養された.3.同様の方法でヒト肺より分離され肥満細胞をメチルセルロース培養法,液体培養法,線維芽細胞との混合液体培養法で, IL-3+IL-4の刺激下で培養した.現在までのところ,前二者の方法では肥満細胞の増殖を認めていない.混合培養法では長期維持は可能で,被刺激対照とは差があるものの, IL-3, IL-4によっても培養前値以上の肥満細胞数,ヒスタミン含有量を増加を見ていない.マクロファージ,線維芽細胞もIL-4受容体を持つことも知られており,より純化した肥満細胞を用いるなどの培養条件の検討をさらに進める予定である.