hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
近世の飢饉に関する民衆生活史的研究

近世奥羽の社会では凶作・飢饉がたびたび襲い民衆を苦しめた。飢饉のなかでも、とりわけ天明の飢饉は、餓死者をたくさん出しただけでなく、人肉さえ食べたといわれるような「餓鬼道の世」を現出させていた。本研究は、奥羽地方の飢饉に関する史料をひろく調査・収集しながら、民衆生活のなかに飢饉を位置づけることを目的とした。研究期間中、文献史料の収集はほぼ所期の成果を達成できたと考えているが、論文としては施行小屋(御救小屋、非人小屋)に関する論文をまとめるにとどまっている。施行小屋の問題をまず取り上げたのは、飢饉によって飢えた人々に対して領主権力がどのように対応したのか具体的に検討してみたかったからである。その場合、単に為政者による救済事業というとらえかたに終わるのではなく、飢人をめぐる民衆と権力の関係のあり方に注目した。弘前藩、盛岡藩、仙台藩など奥羽各藩の天明の飢饉下における施行小屋の実態をあきらかにすることで、そうした課題に迫ってみた。近世社会は共同体を基礎とした村請・町請によって、領主と人民の関係が成り立っており、飢人が発生しても原則的には村・町が扶助すべきとされていた。しかし、村・町の救済機能が破綻したときはどうなるのか。飢人の乞食・非人化が促進されるが、ここに領主権力による施行小屋の設置という対策がでてくる仕組みになっていた。ここで注意しておくべきことは、施行小屋といっても、それは領主の乞食・非人に対する温情的救恤観と治安対策視が色濃く投影したものであった。しかも、民衆自身の乞食に対する差別感情が餓死収容所と化した施行小屋の有り様を許容していたことも見逃せない。飽食の時代にあって、飢えの民衆体験を振り返ってみることの重要性を再認識したい。本研究は、おもに東北地方における天明・天保の飢饉に関して民衆生活史的観点から分析を行い、従来の幕府・大名の政策史的研究をのりこえようとするものであるが、そのためにはこれまでよく使われてきた飢饉史料だけでは不十分であり、ひろく関係史料を調査・収集し、史料の集積において満足が得られる必要がある。三か年計画のうち初年度はまず史料の収集に全力を注ぎ、国立国会図書館、国立公文書館、福島県立図書館、宮城県図書館、山形県立図書館、岩手県立図書館、秋田県立図書館、青森県立図書館、市立弘前図書館、といった主に国立・県立レベルの図書館が所蔵している飢饉関係史料の収集に努めた。県史・市町村史誌や近世の藩政・農村史料がおもな対象である。これらの図書館の収蔵史料の閲覧も短期日のため未見・見落としの史料が少なくないと思われるが、それでも想像を上回る多数の史料を複写・フィルムのかたちで集めることができた。地方史誌類の編纂事業の進展による恩恵といえるが、それだけに今日の飢饉研究の水準がこれらの新史料の紹介を救い上げるにはいたっていない現状を痛感させられた。史料収集にあたっては、文書・記録といった文献史料にとどまらず、飢饉供養塔といった類の「もの」資料や、民話・伝説等の伝承資料にも留意し、それらに関する文献から拾い出す作業も合わせて進めている。これまた集積してみる価値の手ごたえを感じている。本年度の活動はこのように史資料の収集とその整理に費やされた感がある。次年度では史資料の調査・収集をさらにおしすすめ、まだ訪れていない資料館・図書館を調査するとともに、「もの」資料の実地調査も試みたい。また、本格的な史資料の分析に入り、人喰などにみられる「餓鬼道」の実相、乞食と非人小屋、打ちこわし・騒動にみられる制裁行為、ムラの機能、権力の対応、都市への影響、供養・魂の救済など、いくつかの視座を設定して考察してみたい。

今年度は3ケ年計画の2年目にあたり、引き続き飢饉史料の収集を中心に研究活動を行った。八戸市立図書館,大館市立粟盛記念図書館,市立会津図書館といった市立図書館レベルの郷土資料に当たって飢饉関係文献を集めたほか、昨年度予算の関係で複写できなかった国立国会図書館,国立公文書館(内閣文庫),東京都立中央図書館(加賀文庫など)所蔵の飢饉書・救荒書の類を多数入手することができた。さらに盛岡中央公民館所蔵の盛岡南部家史料を閲覧することができ、分析に貴重な史料が得られた。とりわけ,今回江戸藩邸の「御在府留」に天明飢饉に関する大名間・幕藩間のやりとりが詳しく記されているのは大きな収穫であった。飢饉史料を所蔵する訪れてみたい機関は他にも何ケ所かあるが,2年間にわたる調査で所期のテ-マを考察するに足る史料がほぼ集められたといえるだろう。もの資料については、八戸市対泉院の飢饉供養塔など若干を実見できたにすぎない。単独の実地調査には限界があり,今回は文献による所在確認にとどまらざるをえないと思われる。不十分ながら現在までにかなりの数の供養塔がリストアップできている。飢饉伝承も重要と考えるが,『岩手民話伝説事典』などにはそうした伝承が結構収められており参考となった。飢饉に関する研究論文も徐々に集めているが,本格的に飢饉を論じたものが以外と少ない印象である。以上のこれまでに収集した史資料について,現在,簡単な解題を付したリストを作成中であり,来年度の報告書に掲載する予定である。また史資料を整理しながら,どのように分析を進めていったらよいか来年度に向けて試行的な作業をおこなっている段階である。今年度は当初アルバイト代を3万円計上していたが,史料複写費が不足したのでこれに充当したことを付け加えておく。史料複写費がもっと欲しいところである。三年計画の最終年度にあたる今年度は、まず飢饉史料の収集を継続的にすすめ、遠野市立図書館、一関市立図書館、鶴岡市郷土資料館、酒田市立光丘図書館、市立米沢図書館、八戸市立図書館、および岩手県立図書館において、おもに藩政史料を中心に史料収集した。こうした三年間にわたる調査によって、東北地方における主要な文献史料蔵機関はかなり歩いたことになり、複写によって収集した史料のリストは、研究成果報告書に掲載した。また、飢饉供養塔などのもの史料の実地調査は、本研究の期間内におこなうのは不可能であったので、文献による所在確認にとどめ、このリストも研究成果報告書に載せた。今年度の後半は、研究成果報告書をまとめる作業が中心となり、上記リストのほか、「飢饉のなかの民衆と領主権力一天明飢饉下の施行小屋を中心にー」と題する研究論稿を執筆し、報告書に掲載した。この論稿は、民衆の生活史のなかに飢饉・飢餓を位置づけてみる、あるいは飢饉・飢餓をとおして近世の社会をとらえなおしてみるという関心から、とりわけ餓鬼道の世を現出させた天明の飢饉を例にとりながら、飢えて流浪した民衆に焦点をあて、従来為政者の救恤事業として触れられてきた施行小屋をとりあげたものである。奥羽各藩の施行小屋の実態をできるだけ具体的に示しながら、施行小屋の機能、特質を飢人と領主権力をめぐる政治的ないし社会的関係のなかで論じている。報告書には掲載しなかったが、同様の関心で、宝暦の飢饉時の盛岡藩における施行小屋についても執筆を終えており、刊行予定の論集に収録されることになっている。
グリカンPIーアンカ-によるアルカリ性ホスファタ-ゼ分子の修飾と病態分析への応用

小腸アルカリ性ホスファタ-ゼ(ALP)を除く本酵素のC末端アミノ酸には、エタノ-ルアミンを含むグリカンホスホイノシト-ル(GPI)が結合している事が知られている。これに関し、ヒト胎盤ALPは細胞膜よりホスファチジルイノシト-ル特異的ホスホリパ-ゼC(PIPLC)によって遊離するが、ラット小腸ALPはこの処理で遊離してこないといわれる(Seetharam,B.et al.:Arch.Biochem,Biophys.,253:189ー198,1987)。このことは、これらのALPのGPIが異なる様式で結合していることを示唆する。我々は、先づストレプトゾトシンで誘発した糖尿病ラットを用いた時、血清中に検された主たるALPは小腸型であった。In vitroの実験系で、十二指腸のALPはPIPLCにより遊離したが、回腸のALPは遊離せず、ラット血清ALPの特性は回腸ALPに似ていた。つまり血流中のALPは、回腸由来と考えられ、ラット小腸ALPは丁度IgG receptorの如く、ペプチド型とGPI型のanchor或いはヒトコリンエステラ-ゼの様に、回腸由来ALPはアシル化型GPIであるのかも知れない。他方、ヒトは異なり兎腎は、小腸ALPを主成分とし、本酵素はラット十二指腸ALPの如く、PIPLC処理で遊離した。精製した小腸ALPの化学分析の結果、パルミチン酸、ステアリン酸、イノシト-ルをサブユニット当り各1分子持つことがわかった。興味深いことに、ラットをメチルニトロソウレアで誘発した癌組織中の小腸ALPには、ステアリン酸のみがサブユニット当り2分子に増加していた。又、癌組織中の小腸ALPは、PIPLC処理に対し耐性となっていた。この結果は、小腸ALP分子中のGPI部位の修飾によりPIPLCに対する感受性が変化するものと推定された。生体膜に局在する酵素は、生体膜に滞まるため一般に疎水性アミノ酸配列を持つとされていたが、近年、アルカリ性ホスファタ-ゼ(ALP)を始めとする膜酵素には前記配列が無く、かわりに糖脂質様膜アンカ-(GPIーアンカ-)がこれに置き換えられている。但しALPの一部、特に小腸型ALPにはGPIーアンカ-を含まないというSeetharamらの報告(Arch.Biochem.Biophys.253,189,1987)もある。本研究では先づ、ラットに実験的糖尿病を起こさせると血清中ALP活性が著明に上昇したが、この際血中に出現してきたALPが可溶性の小腸ALPであることを証明できた。つまり小腸ALPもGPIーアンカ-を持ち、その後特定のリパ-ゼで遊離して血流中へ分泌されるものと考えられた。次に、正常兎の腎及び肝ALPは、他の動物では臓器非特異型を産生しているのに対し、小腸型ALPを産生していた。そこで兎腎及び肝の小腸様ALPの性状を調べてみると、ヒトの肝硬変や肺癌で産生される小腸様ALP(Kasaharaアイソザイム)と近似し、このALPもGPIーアンカ-を持つことがわかった。更に、ヒト肝硬変並びに肝癌で産生される小腸様ALPは、特に癌化に伴ってGPIーアンカ-部分がphosphatidylinositolーspecific phospholipase C (PIPLC)処理に対して感受性が低くなっていた。

これは、癌化に伴ってGPIーアンカ-の構造が変化している可能性が高い。前年度の成績から、実験的糖尿病を起こさせたラット血清中のアルカリ性ホスファタ-ゼ(ALP)は、小腸型であったことから、その由来を調べた。In vitroの実験系で、ラット十二指腸のALPはホスファチジルイノシト-ル特異的ホスホリパ-ゼC(PIPLC)により遊離したが、回腸のALPはこの処理によって遊離せず、酵素学的にラット血清中の主たるALPは回腸型に類似していた。つまりラット回腸のALPは、従来の如くペプチドanchorもしくはヒト赤血球コリンエステラ-ゼの如く、GPI部位がアシル化されている可能性が考えられた。一方、正常組織より精製した小腸ALPの化学分析の結果、本酵素はパルミチン酸、ステアリン酸、イノシト-ルをサブユニット当り各1分子持つことがわかった。更に、メチルニトロソウレアで実験的発癌を起こさせた胃癌組織中の小腸ALPは、他の成分は同一であるのに比し、ステアリン酸含量が2倍に増加していた。従って、小腸ALP分子中のGPI部位の脂肪酸の修飾によりPIPLCに対する感受性が異なることが示唆された。興味深いことに、ラット小腸のALPの内、PIPLC処理で遊離してこないALPは、パパイン処理で遊離することがわかった。この成績は、ラット小腸ALPは丁度IgG receptorの如く、ペプチドとGPIーanchorの2種のALPがあるのかも知れない。
熱帯湖および珊瑚礁水域における魚類の種間関係の比較研究

珊瑚礁およびタンガニイカ湖沿岸域に生息する魚類の種間関係に関する野外調査をスキュ-バ潜水により行った。幸田は高知県柏島の珊瑚礁において,タカノハダイとササノハベラの混群形成および種間攻撃について調査し,隨伴行動が様々な種の組合せ起ることを認めている。また宇和海においても同様の調査を行い,両種に排他的な関係のあることを明らかにし,体長依存の種内・種間順位関係の存在することを明らかにした。さらに,隠れ家をめぐる魚類の種間競争について明らかにするため,複数種のベラ類の摂餌場所と寝ぐらの場所に関する予備調査も行った。山岡は,珊瑚礁の藻食性魚類の摂餌生態及び形態の多様性と共存機構を明らかにするため,高知県及び沖縄県の珊瑚礁魚類の観察と採集を行った。摂餌行動から7科12属23種を3つの摂餌様式に分類した。顎歯の交換方式から,メジナ科メジナ属のクロメジナとオキナメジナに差異が認められ,これらが両種の摂餌行動に関与することを明らかにした。クロメジナはBrowser,オキナメジナはGraserであり,同属内でも形態学,生態学的に明確な差異のあることを明らかにした。柳沢は,タンガニイカ湖のカワスズメ科魚類の繁殖様式の多様性を明らかにするための調査を行い,Xenotilapia flavipinnisの種内における繁殖様式の多様性を明らかにした。名越は,タンガニイカ湖調査でこれまでに得られた資料に基づき,繁殖様式の多様性と共存機構についての検討を行った。現在,これらの調査,検討資料の解析を行っており,今後逐次論文としてまとめる予定である。
消化器癌におけるMesothelinおよびCA125発現の検討

【目的】本研究では胃癌、大腸癌及び肝外胆管癌の臨床検体を用いて、Mesothelin発現と病理学的因子との相関を解析し、さらにリンパ管侵襲の機序をinvitroにて解明した。【方法】免疫染色にてMesothelinの発現の局在(膜発現)と、病理学的因子との相関を検討した。さらにMesothelin強制発現大腸癌細胞を用いてリンパ管侵襲との関連を解明した。【結果】Mesothelin膜発現は胃癌及び肝外胆管癌において予後不良因子(胃癌;p<0.001,肝外胆管癌;P=0.017)であり、大腸癌においてはリンパ管浸潤(P=0.009)と相関を認め、リンパ節転移陽性症例において予後不良因子であった(P=0.033)。また膜発現型Mesothelinの強制発現大腸癌細胞株WiDrには、リンパ管内皮浸潤実験にて有意な浸潤能の亢進が認められた。【考察】Mesothelin膜発現は消化器癌領域の診断・治療への応用が期待される新たなバイオマーカーになりうる。(BrJCancer.2012,IntJOncol.2012,JGastroenterol.2013)【目的】ERC/Mesothelinは種々の癌で発現が認められているが、本研究では胃癌110例、大腸癌91例及び肝外胆管癌61例の臨床検体を用いて、ERC/Mesothelin発現と病理学的因子、患者予後との相関を解析し、さらにリンパ管侵襲の機序をin vitroにて解明した。【方法】免疫染色にてERC/Mesothelinの発現レベル・局在(膜発現)と、臨床病理学的因子・予後との相関を検討した。さらにERC/Mesothelin強制発現大腸癌細胞を用いてリンパ管侵襲の機序を解明した。【結果】ERC/Mesothelin膜発現は胃癌及び肝外胆管癌において種々の病理学的因子と相関し、予後不良因子(胃癌; p<0.001,肝外胆管癌;P=0.017)であり、大腸癌においてはリンパ管浸潤(P=0.009)と相関を認め、リンパ節転移陽性38症例において予後不良因子であった(P=0.033)。また膜発現型ERC/Mesothelinを強制発現させた大腸癌細胞株WiDrは、リンパ管内皮浸潤実験にて有意な浸潤能の亢進が認められた。【考察】ERC/Mesothelin膜発現は、臨床病理学的悪性度、特にリンパ管侵襲及び患者予後と相関し、消化器癌領域の診断・治療への応用が期待される新たなバイオマーカーとなることが示された。(Br J Cancer. 2012, Int J Oncol. 2012, J Gastroenterol. 2013)【目的】本研究では胃癌、大腸癌及び肝外胆管癌の臨床検体を用いて、Mesothelin発現と病理学的因子との相関を解析し、さらにリンパ管侵襲の機序をinvitroにて解明した。(BrJCancer.2012,IntJOncol.2012,JGastroenterol.2013)Mesothelinは中皮細胞の分化関連抗原で、正常組織での発現は胸膜、腹膜の中皮に限られる一方、悪性中皮腫、膵癌など多くの癌で発現が認められる。Mesothelinをターゲットとした分子標的治療は現在Phase2の段階で、今後の結果が期待されている。我々は、膵癌の免疫染色においてMesothelin発現および、リガンドであるCA125発現が強力な予後不良因子であることを報告した。また胆道癌、胃癌においても同様にMesothelin発現が予後不良因子であることを明らかにしており、消化器癌においてMesothelin発現が癌悪性度の重要な指標と成りうることを見いだした。膵管内乳頭状粘液産生腫瘍(IPMN)は癌化の過程でadenoma-carcinoma sequenceの関与が示唆されている疾患であるが、これらの免疫組織学的検討では、Mesothelinはadenomaの段階から徐々に発現を認めている。一方、CA125はadenomaの段階では発現を認めないが、微小癌浸潤癌の過程で、発現が増強してくることが明らかとなった。また、Mesothelinの細胞内での局在は、細胞膜発現型と、細胞質発現型が存在し、胃癌、胆管癌においては、細胞膜発現型が病理学的悪性度と相関し、予後不良であった。このことから、Mesothelinの発現部位が腫瘍の悪性度に関与することが示唆された。

しかしながら、、消化器癌におけるMesothelin発現の生物学的意義に関してはほとんど解析されておらず、本研究ではMesothelin発現と癌化および悪性度との関連を分子生物学的に明らかにする。また、抗Mesothelin抗体の臨床応用に向けた基礎実験を行う。それぞれの過剰発現ベクターにおけるアッセイを行う。大腸癌において、Mesothelinの発現が、リンパ節転移、リンパ管浸潤と有意差を認めたことから、Mesothelin発現を認めた大腸癌細胞株において、リンパ管内皮細胞との相互作用をみるため、リンパ管内皮細胞を購入し、invasion assayおよび、接着アッセイを行う。平成23年度交付分の未使用が生じた背景は、消耗品等の使用が予想より少なくて済んだ。平成24年度分の使用予定は、大腸癌切除検体および、リンパ節におけるMesothelin発現の免疫染色を行う。また、Mesothelinがリンパ節転移と相関する可能性があるため、リンパ管内皮細胞、その培養のためのMediumを購入する。得られたDataの学会発表費用に当てる。また、論文のDeviceの追加免疫染色のための費用とする。
ヒト肺がんの個性解明と個別的分子診断・治療への展開

我々の多角的な研究は、ヒト肺腺癌が遺伝子発現プロファイルに基づいて臨床病態の異なる2群に大別できることや、末梢肺の発生・分化を担うTTF-1がリネッジ特異的生存シグナルを担うことを明らかとした。また、外科切除後の再発の高精度予測が可能な、遺伝子及び蛋白発現シグネチャーを同定するとともに、予後不良とmTORに集約するパスウェイの脱統御との関連性を明らかとした。さらに、let-7やmiR-17-92マイクロRNAの肺癌における異常を発見し、その機能的役割を明らかとした。わが国のがん死亡原因の第1位である肺がんを対象とし、その分子病態について多面的で詳細な検討を展開することによって夫々のがんが持つ個性を特徴付ける基盤を解明し、もって個別的分子診断・治療法の開発へとつなげ、最終的にオーダーメイド医療を実現に寄与することを目指して研究を進めた。その結果、以下の成果を得た。(1)治癒が見込める外科的切除を受けた149症例のヒト肺非小細胞がん腫瘍組織における18,175遺伝子の網羅的遺伝子発現プロファイル情報に基づいた詳細なバイオインフォマティクス解析を進めた。現行の形態学的分類では不明な、遺伝子異常や臨床病態と密接に関連する2群の肺腺がん存在を明らかとし、さらに外科切除後の分子標的薬治療が特に有用と思われる患者群の同定にも成功した。(2)174症例のヒト肺がん外科切除例のMALDI-TOF-MS解析とそのバイオインフォマティクス解析を通じて、再発関連死亡と密接に相関する蛋白発現シグネチャーを同定し、再発・死亡を病期に関わらず極めて正確且つ個別的に予測できるモデルの構築に成功した。完全に独立した58症例を用いたバリデーションにおいても、再発関連死亡シグネチャーを持つ症例はほぼ全例の再発・死亡が観察された。(3)ヒト肺がんにおいてしばしば遺伝子増幅を伴って過剰発現を示すmiR17-92マイクロRNAクラスターを同定するとともに、このマイクロRNAクラスターの過剰発現による肺がん細胞株の増殖促進を明らかとした。ヒト肺癌のオーダーメイド医療実現に寄与することを目指して研究を進め、本年度は以下の成果を得た。(1)網羅的遺伝子発現解析によって存在を明らかとした、遺伝子異常や臨床病態に有意な差異を示す2群の肺腺癌の一方に、末梢肺の発生・分化にlineage specificに関わるTTF-1遺伝子の特徴的高発現と、遺伝子コピー数の増加をみいだした。さらに、末梢気道上皮細胞の癌化によって生じる肺腺癌がTTF-1に依存性を示すことを明らかとした。これらの成果は肺癌細胞におけるlineage addictionの存在を支持する貴重なエビデンスであるとともに、TTF-1の分子標的としての有用性を示唆する。現在さらに、TTF-1によって活性化される遺伝子ネットワークの解析を進めつつある。(2)我々が樹立した高転移性ヒト肺癌細胞亜株NCI-H460-LNM35とヒト肺癌腫瘍組織の統合的な網羅的発現解析を通じ、転移に関連するGene Ontology termの一つとしてmorphogenesisを抽出した。更に、LNM35株の親株であるN15株の低転移性や肺癌外科切除例における良好な予後と関連する分子として、homeobox蛋白を規定するDLX4遺伝子をみいだし、その転移抑制能を明らかとした。(3)ヒト肺癌における遺伝子増幅を伴う過剰発現の存在を明らかとしたmiR17-92マイクロRNAクラスターに属する7種類のマイクロRNAのうち、とくにmiR-17-5p及びmiR-20aの抑制が肺癌細胞株に細胞死を惹起することを明らかとした。また、mRNA及び蛋白の網羅的発現解析済みのコホートを用いてマイクロRNAの網羅的発現解析を開始した。すでに80例からマイクロRNA解析に適したRNAの再抽出を終了し、順次マイクロアレイ解析を進めつつあり、来年度にはその統合的バイオインフォマティクス解析を予定する。ヒト肺癌のオーダーメイド医療実現に寄与することを目指した研究を遂行し、以下の成果を得た。(1)これまで肺腺癌の多様性の描出とその統合的理解を試みてきた。本年度はさらに、外科切除後の予後予測モデルの構築を進めた。まず、60例の学習用データセットにおいて、100回の無作為再区分を伴う10-foldクロスバリデーションを組み入れた予測モデルの構築と評価を行うとともに、さらに全く独立した27例の検証用データセットを用いた汎用性の確認を行った。学習用及び検証用データセットのいずれにおいても、高危険度判定群の術後5年以内の無再発生存は僅か10%にも満たず、早期の1期症例にも極めて予後不良な一群が含まれることが明らかとなった。(2)ヒト肺癌における高頻度の発現異常と、癌抑制遺伝子或いは癌遺伝子としての役割を示してきたlet-7とmiR-17-92マイクロRNAの標的遺伝子として、let-7自身を含むマイクロRNAの生成に必須のDicerと、癌化と深く関わるHIF1αをそれぞれ同定した。

いずれにおいても、マイクロRNAとその上流及び下流(標的)の蛋白を規定する遺伝子との間に、精緻な発現制御フィードバックループが存在することが明らかとなり、その乱れが癌化に深く関わっている可能性が示唆された。(3)ヒト肺癌における種々のチェックポイント異常の存在をこれまで報告してきたが、本年度はS期チェックポイント異常について検討を進めた。その過程でDNAダメージチェックポイントに深く関わるNBS1遺伝子の異常を日本人において初めて同定し、その新規変異について機能的解析を行った。さらに、1743例の肺癌を含む各種癌患者と2348例の対照非癌健常人群の解析を通じて、同定した新規NBS1遺伝子変異のヘテロ接合性が、胃癌や大腸癌発症の有意な危険因子であることを示した。ヒト肺癌のオーダーメイド医療実現に寄与することを目指した研究を遂行し、以下の成果を得た。1) gene set enrichment analysis(GSEA)とconnectivity map(C-MAP)解析という二つの独立したバイオインフォマティクス解析を用いて、肺腺癌外科切除症例の予後を規定する遺伝子群について検討を加えた。その結果、アミノ酸やグルコースの飢餓状態への適応を含むmTORに集約する複数のパスウェイに関連した遺伝子セットに、特徴的な発現プロファイルの差異を検出するとともに、mTORに集約する複数パスウェイの阻害活性を持つ既知及び未知の薬剤が、肺癌細胞株の発現プロファイルを再発群類似から治癒群類似へと変化させ得ることを明らかとした。さらに、そのような薬剤のいずれもが、抗腫瘍活性を有することを明らかとした。2)我々が肺小細胞癌における過剰発現を世界に先駆けて報告したmiR-17-92マイクロRNAクラスターに関する研究において、同クラスター中のmiR17-5pとmiR-20aが標的遺伝子であるE2F1等を抑制することによって、肺小細胞癌のほぼ全例に検出されるRB遺伝子の不活化によって生じる過度のDNA損傷を低減しており、結果的に構成的なゲノム不安定性の誘導を通じて癌の発生・進展に寄与している可能性を示唆する結果を得た。3)我々が樹立した高転移性ヒト肺癌細胞亜株NCI-H460-LNM35を用い、その網羅的発現解析を通じて同定した新規転移関連遺伝子(CIM)産物が小胞体に存在しており、転移形成時の微小環境において癌細胞が晒される小胞体ストレスに対するレスポンスに、重要な役割を担っていることを明らかとした。極めて多様性に富む肺癌を一つの『疾患』として総合的に理解し、その成果を個別的分子診断・治療法開発へと還元するための基盤を構築することを目指して、以下の研究を進めた。1)肺腺癌は、特に多様性が高くWHOの組織型分類にも多くの課題を抱える。470種のマイクロRNAに対応したマイクロアレイを用い、76例の肺腺癌外科切除腫瘍検体と5例の正常肺組織の網羅的発現解析を行い、マイクロRNAの発現プロファイルに基づいて肺腺癌が、術後再発に有意な差を示す4つのクラスターに分類可能なことを示した。最も予後の良いクラスターは正常肺組織に極めて類似した発現プロファイルを示した。
規則配列したπ電子系結晶空間が示す協同的発光増幅現象

協同的発光現象であることが示唆されている(チオフェン/フェニレン)コオリゴマー(TPCO)結晶から得られるパルス型遅延発光の発生起源を明らかにするため、以下の研究を行った。(1) TPCO誘導体単結晶の成長と微細加工: TPCO単結晶が示すパルス型遅延発光が、結晶の形状やサイズ、分子配向よって、スペクトル分裂や遅延時間がどのように変化するかを調べるため、これまでパルス型遅延発光が得られたBP1T-OMeとは対称性の異なるBP2T-OMeと、分子末端にシアノ基をもつBP1T-CNを用いて単結晶を作製した。その結果、BP2T-OMeはBP1T-OMeと同じ斜方晶系の薄板状結晶に成長したのに対して、BP1T-CNはこれまでのTPCOとは異なる三斜晶系に属する針状および薄板状の結晶に成長した。これらの結晶構造の違いは、分子間における末端基の水素結合とクーロン相互作用に起因していることを明らかにした。また、フォトリソグラフィと反応性イオンエッチングを用いてBP1T多結晶膜を幅10 μmのマイクロキャビティ構造に微細加工することに成功した。(2) TPCO単結晶の時間分解発光測定:(1)で作製した2種のTPCO誘導体単結晶を用いて、Ti:Sパルスレーザー励起による時間分解発光測定を行った。その結果、レーザー発振の励起閾値前の励起密度において、BP2T-OMe結晶からは80 ps、BP1T-CNからは50 psの遅延時間を伴ったパルス型遅延発光を観測した。これらの遅延時間はこれまでにBP1T-OMe結晶から得られた300 psより短いことから、結晶面内での遷移双極子の配向の違いが協同的発光増幅現象に影響しており、遷移双極子の一軸配向性が高いほど遅延時間が長くなることが示唆された。24年度が最終年度であるため、記入しない。(チオフェン/フェニレン)コオリゴマー(TPCO)の低次元単結晶において、協同的発光現象であると予想されるパルス型遅延発光と誘導共鳴ラマン散乱の発生起源を明らかにするため、短パルス光源を用いた時間分解分光実験を行い、以下の研究成果を得た。TPCO分子として、分子鎖両末端にメトキシ基を有する2,5-bis(4'-methoxy-biphenyl-4-yl)thiophene(BPlT-OMe)を用いた。X線結晶構造解析により、BPIT-OMeはこれまでの無置換のTPCOの単斜晶系とは異なり、分子軸が結晶面に対して完全に直立した斜方晶系の薄板状結晶を形成することがわかった。この結晶を、Nd:YAGパルスレーザーで光励起した結果、500nm付近の0-2帯が増幅した自然増幅発光(ASE)スペクトルに重なって、結晶の両端面がファブリーペロー(F-P)共振器として働いたレーザー発振が観測された。このとき、ASE閾値以下の励起密度において、発振モードを伴った明瞭なスペクトル分裂が観測された。その起源を調べるため、フェムト秒パルスレーザーを用いた時間分解分光実験を行った結果、弱励起密度においては寿命1 ns程度の自然蛍光の特徴を示したのに対して、スペクトル分裂が観測される励起密度範囲において時間原点から最大300ps遅延したパルス型発光が観測された。さらに励起密度を上げていくと、パルス状のピーク幅が減少しながら時間遅れが短くなった。このようなパルス型遅延発光は、これまでに無置換TPCOの単斜晶系結晶においても観測されてきたが、今回は300psに達する最も長い遅延時間が得られた。BP1T-OMe結晶中では、すべての分子が結晶面に対して直立したH会合体構造を有しており、完全一軸配向した分子配列により励起子の緩和過程において分子間に長距離相関が生じている可能性があることが示唆された。

これらの遅延時間はこれまでにBP1T-OMe結晶から得られた300 psより短いことから、結晶面内での遷移双極子の配向の違いが協同的発光増幅現象に影響しており、遷移双極子の一軸配向性が高いほど遅延時間が長くなることが示唆された。24年度が最終年度であるため、記入しない。今回、分子鎖両末端にメトキシ基を有するBPIT-OMeの単結晶を作製して時間分解分光測定を行った結果、これまでで最大の遅延時間をもつパルス型発光を観測し、他のTPCO結晶とは異なる斜方晶中でのH会合体形成による分子相関が協同的発光現象に影響を及ぼしていることを示唆する重要な知見が得られた。BP1T-OMe単結晶を用いた誘導共鳴ラマン散乱の観測も進めており、結晶中でのコヒレーントな分子振動が励起状態の位相緩和に関与している可能性が示されつつある。今年度、分子末端に置換機を導入したTPCOの新しい単結晶において、パルス型発光の発生起源を解明する重要な知見が得られたので、今後さらに異なる置換基や対象性をもつTPCO分子を用いて同様の実験を進め、結晶構造や結晶内での分子パッキングおよび分子配向がパルス型遅延発光と誘導共鳴ラマン散乱に及ぼす影響を詳細に調べる。また、TPCO単結晶の次元性や結晶サイズも長距離分子相関による協同的発光現象に影響を与えることが予想されるので、気相成長や真空蒸着等の他の結晶成長法を検討するとともに、結晶のへき開やレーザー加工による結晶形態とサイズの制御を試みる。
サル連合野ニューロン相互の情報統合と時間特性の研究

ヒト脳波の研究では、随意運動発現や認知など高次の脳機能に伴い20Hz以上の比較的高い周波数帯域でのオシレーションが増加する。動物実験によるニューロン活動解析やフィールド電位の解析でもガンマ帯域(20-70Hz)のオシレーションが記録され、周期的活動による多数の細胞活動の同期化の仮説が提唱されている。一方、スライス実験によれば、ラット大脳皮質内にはガンマ帯域のオシレーションを起こす膜特性をもったニューロン・タイプ(FRBニューロン)が存在する。そこで、FRBニューロンが大脳皮質内のガンマ帯域オシレーションの担い手である可能性を考え、学習課題遂行中のサルの前頭葉からニューロン活動を記録し、FRBニューロンの特徴(2-3ミリ秒の短く安定したスパイク間隔のバーストとその繰り返し)を持つニューロン活動を検索した。その結果、無麻酔のサルでもFRBニューロンの特徴を示す細胞が存在し、しかもこのタイプのニューロンの一部は、記憶学習課題遂行の特定のイベントのときに集中してバーストを起こすことが明らかになった。さらに、1本の電極からFRBニューロンと同時に記録したあるバーストしない細胞(Regular Spiking Neuron、RSニューロン)はFRBニューロンのバーストの後に必ず活動電位を出しており、FRBニューロンが興奮性のニューロンである可能性を示唆していた。このニューロンは対連合課題における特定の手掛かり刺激呈示の後半でガンマ帯域の繰り返しバースト発火を示しており、この結果は、学習課題遂行の特定の処理過程に関連するニューロン群がFRBニューロンによって同期的に活動する可能性を示すものと思われる。
核内巨大酵素複合体による転写制御機構の解明

本研究で私達は、同複合体の詳細な転写活性化機構を解明することを目的とした。その結果、(1)RHAの転写活性化最小領域領域(MTAD)を50アミノ酸に決定し同領域を介してPol IIと複合体を形成すること、その結合および転写活性化にはトリプトファン残基が重要であることを見いだした。また同領域は種を越えて保存された重要な機能をもつドメインであると考えられ、その解析は様々な因子の転写活性化機構の解明にもつながる可能性がある(ArataniらMol. Cell. Biol.2001)。(2)さらに、本研究ではMTADを介した転写活性化メカニズムの解析を目的としたトリプトファン残基の作用機構の解析MTDAと結合因子の相互作用および転写活性化におけるトリプトファンの作用機構を明らかにするため、MTDA内のトリプトファンを疎水性のロイシン、ベンゼン環をもつフェニルアラニンにそれぞれ置換した変異体を作製し転写活性化能への影響を検討した。トリプトファンをアラニン、ロイシンに置換した変異体は転写活性化能が低下していたが、フェニルアラニンに置換した変異体では影響が見られなかった。またフェニルアラニンに置換した変異体のみがPol II結合能を有していた。これらのことからMTADを介したPol IIのリクルートおよび転写活性化にはトリプトファン残基のベンゼン環が重要であることが示唆された(ArataniらInternational Journal of Molecular Medicine 2003)。(3)MTADの個体レベルでの機能解析(4)RHA複合体の構成因子としてメチル化DNAに結合し、エピジェネティックに遺伝子発現をコントロールする主要分子であるメチル化DNA結合因子2a(MBD2a)が得られ、RHA/MBD2a複合体の生物学的意義を証明した(FujitaらMolecular and Cellular Biology 2003)。これらの結果は、RHA複合体の生物科学を越えた普遍的意義を実証したこととなり、今後も同複合体の基盤研究を強く推進していきたい。わたしたちはCREB結合タンパク質(CBP)に代表される転写統合装置と呼ばれる分子群の解析をしている。特に、RNAヘリケースA(RHA)がRNAポリメラーゼII(pol II)をリクルートすることにより、CBPの転写活性化に必要であることを証明した(Cell 1996 & 1997,G&D 1997)。すなわち、アセチル基転移酵素(CBP)/ATPase・ヘリケース(RHA)/RNAポリメラーゼ(pol II)の酵素複合体が核内に存在することを発見した。本複合体の生物学的意義を検証することにより主として以下の成果が得られた。RHAの転写活性化領域(pol II結合領域)を生化学的に同定し、CREB依存的転写系での関与を検討した結果、その転写活性化領域が331-380番目の50アミノ酸から成り、中でも線虫からヒトまで完全に保存されているトリプトファン残基が非常に重要であることを見出した。HIVの発現調節領域TARにRHAはそのRNA結合モチーフを介して結合することが明らかになった。また、同モチーフの236番のリジン残基をグルタミン酸に置換した変異体(K236E)ではTARに対する親和性が有意に低下していることも証明された。さらに、野生型RHAはHIVウイルス発現を転写レベルで活性化するが、K236E変異体、およびATPase活性の欠損した変異体ではこの作用が認められなかった。これらの結果をもとに、RHAをATPase/ヘリケース様因子としては最初のTARを介したHIV発現にかかわる宿主因子であることを報告した。

一方、RHAは核と細胞質を行き来するシャトリング因子であるが、最近このRHAの核移行シグナルを同定した(投稿中)。核移行能を欠失させたRHAの1アミノ酸置換変異体は細胞質に局在し、CREB依存的プロモーターを用いたレポーターアッセイでは遺伝子発現の活性化能を失っていた。ところが、TAR RNAの相補領域を含むHIV LTRプロモーターを用いたレポーターアッセイでは、核内で作用できないにもかかわらず、遺伝子発現の活性化能が認められた(未発表データ)。これまでRHAの作用点は主に遺伝子発現の転写段階にあると考え、実際にそれを証明してきた。しかし今回の結果によりRHAが転写後の遺伝子発現系にもかかわっている可能性が示唆された。エピジェネティクスとは、遺伝情報を選択的に活用するために、DNAのメチル基修飾、DNA・RNAやタンパク質の分子間相互作用によって遺伝子が活性化または不活性化される巧妙な仕組みであり、転写、発生分化、発癌、複製、変異と修復、ゲノムの安定性などの多様な基本生命活動において重要である。近年、DNAメチル化酵素、メチル化CpG結合タンパク質、などの新規な分子・複合体が相次いで発見され、種々の基本生命活動が分子論的に解明されつつある。DNAメチル化は、これまで転写の不活性化に密接に関与することが示されていた。実際、発生過程ではDNAのメチル化が動的に変化して細胞の分化能が決定される一方で、多くの腫瘍では癌抑制遺伝子のプロモーターが高度にメチル化され、転写が抑制されていることが報告されている。近年、このメチル化されたDNAに結合し転写を抑制する因子として、Methyl-CpG binding protein 1(MeCP1)が得られた。MeCP1は、Methyl-CpG bindingdomain protein 2(MBD2)やヒストン脱アセチル化酵素からなる複合体である。MBD2には同一遺伝子から生じるMBD2a, MBD2bの二つのアイソフォームが存在しMBD2bはMBD2aに比べてN末端の152アミノ酸が欠失している。本研究にてMBD2a, MBD2bはともにメチル化されたCREの転写を抑制した。一方で、予想に反して、MBD2aのみがメチル化していないCREからの遺伝子発現を活性化した。結合実験により、MBD2aはCREB転写装置の構成因子であるRNAヘリケースA(RHA)と選択的に結合し、さらに、MBD2aとRHAは協調的にCREB依存的な転写を活性化した。また、RHAと結合しているMBD2aは、転写コリプッレサーであるHistone deacetylase 1とは複合体を形成していなかった。以上の結果から、MBD2aは転写抑制複合体と相互作用して転写を抑制するだけでなく、転写活性化複合体としても作用しうる可能性が示された。
戦後日本の統治構造改革史に対する総合的研究

本研究は行政資料の発掘とオーラルヒストリーに、既存の先進諸国の統治構造改革の比較研究を組み合わせることで、戦後日本の統治構造改革史の特性を部分的に明らかにした。第1に、調整と独立の諸機関、第2に、内政・国際・財務の政策ネットワークの並立、第3に、政策のアイディアを構想する諸機関、の3層によって、統治構造改革は特徴付けられる。戦後日本においては、占領期の独立機関強化、高度経済成長下の財務ネットワークの優位、1980年代以後の国際ネットワークの充実、冷戦終結後の改革による独立機関の強化、そして2009年以後の行政中枢の肥大化による官邸の各省行政の吸収という改革の変遷が検出できるのである。第1に企画運営体制の構築を図った。全体統括のオーラル・ヒストリー班をまずは組織し、聞き取りの選定を行った。加えて、総務省自治大学校が所蔵していた戦後自治史関係資料の分析班を組織し、分析に取り組んだ第2に、オーラル・ヒストリーについては、人事院総裁経験者と第一次地方分権改革の主要な推進者へのプロジェクトを立ち上げ、聞き取りを開始した。前者については、戦後の統治機構改革にさまざまな形で関わった実務家であり、いくつかのポストに関して前任者へのオーラル・ヒストリーをすでに行っているために、改革がどう継承されたかを検討するにふさわしい話し手である。したがって、26年度以降聞き取りの記録を比較検討する研究に着手する。後者については、地方分権改革が戦後の統治構造改革の枢要な柱であり続けたことから、改革の起源、構想の変容、第一次分権改革、その後についてこれまで発表されたさまざまな記録とのクロスチェックを行いつつ進めている。第3に、戦後自治史資料集の分析である。これについては、占領期の内務省関係者によって22回にわたって開催された前後自治史座談会記録を講読し、これと関係する文書を分析する研究会を開催した。ここでは、一部未収録史料があるものの、他省庁の政策回顧座談会を意識したものであり、他の内務省関係研究・ノンフィクションと記述が重なるなど、これまで一部では閲覧利用されていた史料であることが判明した。さらに、制度記述と人物叙述では相当程度発言の雰囲気が異なり、冷静な制度論とチームワークあふれる人物論とが併存していることが内務官僚の特質であることも了解された。また警察改革では斎藤昇国家地方警察本部長官の証言の中には、これまでの戦後改革史の中で正面からとりあげられていない情報が警察情報として出されており、今後の検討を続けることとなった。第1に、オーラル・ヒストリーについては、人事院総裁経験者と第一次地方分権改革の主要な推進者へのプロジェクトを立ち上げ、聞き取りを継続した。前者については、戦後の統治機構改革にさまざまな形で関わった実務家であり、いくつかのポストに関して行った前任者へのオーラル・ヒストリーと対照させつつ、聞き取りを進めている。後者については、地方分権改革が戦後の統治構造改革の枢要な柱であり続けたことから、改革の起源、構想の変容、第一次分権改革、その後についてこれまで発表されたさまざまな記録とのクロス・チェックを行いつつ進めている。第2に、戦後自治史資料集の分析である。とりわけ地方自治法制定過程について、既発表の資料との重複がどの程度かについて検証を行った。第3に、オーラル・ヒストリー方法論については、大森政輔氏、黒野匡彦氏のオーラル・ヒストリー記録を編集し、その記録をもとに、適切な聞き取りと編集のあり方について検討を行った。内閣法制局長官、運輸事務次官を務めた行政機関幹部の記録であるため、組織文化と行政的リーダーシップのあり方を検討するにはきわめて適切な記録であり、その検討は今後の行政機関幹部クラスの人材への聞き取りにおいて、極めて重要であった。また、前者については、裁判所と内閣法制局でキャリアを蓄積しており、関連資料と合わせて、これら二組織の独立性の比較検討作業を行った。オーラル・ヒストリーについては、内閣官房・人事院等での執務経験者、政治改革後の政界再編時代の政治家、地方分権改革の有識者を中心に、継続的な聞き取りを行った。これによって、1980年代以降の統治構造改革の課題と成果を析出することが可能となった。戦後改革における内務省資料の解析を終え、これが1960年代以降の地方制度を中心とした改革、1980年代の改革へと連続する知的系譜を部分的にではあるが達成した。また、統治構造改革については、個別研究のモノグラフのサーヴェイを行い、現段階では、アメリカを中心に政策決定を制約する制度要因が指摘されていることが明らかになった。そして、本年は、これまで蓄積したオーラル・ヒストリーの手法について、関係者を集めたシンポジウムを開催した。ここでは、第1に若手による技法習得の方法が検討され、第2にこれまで行ってきたオーラル・ヒストリーが「成熟化」するとともに、普及したことによる「大衆化」が生じたこと、第3に、現在行われているオーラル・ヒストリーでは、電子記録による発話が増えるとともに、2000年を境とした制度変化が語りの前提を変えていることが指摘された。オーラル・ヒストリーの方法は、統治構造改革による制度変化とともに変わらざるを得ない。聞き手は、変化を念頭に発話を読み取る必要がある。これは過去の談話記録にも当てはまることが共有された。オーラル・ヒストリーは相当程度進行しており、貴重な情報を得ることができた。

だが、インタビューの性格上、残り数回を残した上で、報告書作成に取りかかる時間が本年度は不足していたため、当初の計画以上とはならなかった。また、内務省資料による戦後改革の分析についても、研究計画に沿って座談会部分を中心に分析を終えている。統治構造改革史については、第二次安倍政権までを視野に入れた構図を描くことができた。さらに、オーラル・ヒストリーの方法論についての、シンポジウムも開催し、これまでの方法論の再検討と21世紀という新しい時代に即した方法について、理解を深めることができた。以上から、研究計画に沿って進展したと考えられる。オーラル・ヒストリーについては前年度から引き続いて継続的に実施し、内閣官房・内閣府・人事院等での執務経験者、政治改革後の政界再編時代の政治家、地方分権改革の有識者等を対象とした。いくつか追加的な聞き取りを実施しつつ、省庁再編の関係者の聞き取りの記録を報告書形式に取りまとめた。また国際比較については、東アジア日本研究者協議会第1回国際学術大会で、セッション「オーラル・ヒストリーと日本政治」を組織して、政権交代、省庁再編について複数の報告を行い、韓国の外交官オーラル・ヒストリーの成果との比較や、台湾における日本語教育関係者へのオーラル・ヒストリーとの方法論的差異について討論し、東アジア諸国との比較を試みた。またオーラル・ヒストリー方法論については、主としてオーラル・ヒストリーの記録作成の諸問題について掘り下げた検討を行った。そこでは、第1に、聞き取りの音声データを記録作成者が「一次記録」とする際に、いかなる編集が行われているかについて共通認識を得て、第2に、それをよりよく改善するには、記録作成者とオーラル・ヒストリーの参加者との間で、どのようなコミュニケーションが望ましいか、について検討を続けた。本プロジェクトを通じて、戦後日本の統治構造改革では、第1に、戦後改革が占領期から1950年代まで15年ほど継続した後、高度経済成長と石油危機後の安定成長を経て確定したこと、第2に、1980年代以降の新保守主義改革が1990年代の冷戦終結後の改革と連続しつつ現在に至っていること、第3に、調整の強化と独立性の強化という2000年代までの特質は、2009年の政権交代後に調整と中央からの統制の強化によって新しく特徴づけられ始めていることが確認された。本研究は行政資料の発掘とオーラルヒストリーに、既存の先進諸国の統治構造改革の比較研究を組み合わせることで、戦後日本の統治構造改革史の特性を部分的に明らかにした。第1に、調整と独立の諸機関、第2に、内政・国際・財務の政策ネットワークの並立、第3に、政策のアイディアを構想する諸機関、の3層によって、統治構造改革は特徴付けられる。戦後日本においては、占領期の独立機関強化、高度経済成長下の財務ネットワークの優位、1980年代以後の国際ネットワークの充実、冷戦終結後の改革による独立機関の強化、そして2009年以後の行政中枢の肥大化による官邸の各省行政の吸収という改革の変遷が検出できるのである。研究計画に掲げた項目を着実に推進しており、「おおむね順調に進展している」と評価できる。第1に、オーラル・ヒストリーについては、予定通り独立機関の関係者への聞き取りを円滑に推進することができた。
染色体の分子構成

堀内らは複製終結点(terminus;ter)を識別するter結合蛋白を精製し、この蛋白によって大腸菌の3種のヘリカーゼ、DnaB,UvrD,Rep蛋白のの活性が阻害されることを明らかにした。加藤・鈴木らは大腸菌parC遺伝子(染色体地図65分)はDNAジャイレースのAサブユニット(GyrA蛋白)と高い相同性を示す蛋白をコードし、parEはDNAジャイレースのBサブユニットと高い相同性を示すす蛋白をコードすることを発見した。平賀らは、染色体の分配機構に異常があるため無核細胞を放出する変異株を解析し、mukA変異(66分)は膜蛋白をコードするtolC遺伝子の変異であることを明らかにした。また染色体上の21分に存在する染色体分配に関する新しいmukB遺伝子を単離解析してこの遺伝子は、約180KDの蛋白をコードすることを明らかにした。西村(昭)らは大腸菌の高温感受性異株コレクションの中から未同定の細胞分裂異常fts変異株410株を選びだし、これらのfts変異株の地図を完成させた。ftsl遺伝子によってコードされるペニシリン結合蛋白(PBP3)は、膜へ組み込まれるときプロセッシングを受けるが、鈴木、原、鈴木昭憲らは、このプロセッシングはN末端領域の切断ではなく、C末端側のVal^<577>Ile^<578>間で切断されること明らかにした。松橋らは大腸菌の細胞膜、細胞分裂機構に関する遺伝子群のうち主要な4つのmra,mrb,mrd,mre群について、これたに含まれる遺伝子の塩基配列および発現制御機構について解析した。小椋らはpbpA遺伝子の高温感受性変異を解析し、pbpA遺伝子は細胞の桿状形態の維持に必須であるばかりでなく、細胞分裂に必須であることを明らかにした。柳田らは分裂酵母S,Pombeの染色体分配の分子機構の変異株を解析し、disZ変異はI型のプロテインホスファターゼであることを明らかにした。
糖尿病の分子病理学的診断

5D-4モノクローナル抗体は、膵ラ氏島と反応する厳密に言うとラ氏島にある30kDa,50kDa抗原(タンパク)を認識する。Aspc-1膵癌株から30kDa抗原を、電気泳動,HPLCにより抽出,精製した。精製抗原をABI社製のペプチドシークエンサーにかけて、アミノ酸配列を決めようとした。N末の10ケのアミノ酸配列と、途中のアミノ酸15ケが配列決定された。これから、合成塩基を得て、プライマーとして使用した。このプライマーとAspc-1由来mRNAを用いてRT-PCRを施行した。わずかにシグナルが認められた。今後、この増幅したバンドからDNAシークエンサーにより塩基配列を決定する予定である。すい癌細胞株から膜分画分を作製し、免疫して、マウスモノクローナル抗体を得た。IgMクラスに属し、50kDaと30kDaの糖タンパクと反応した。この抗体を用いて1型糖尿病、2型糖尿病、続発性糖尿病の免疫診断を行った。この抗体は、1型糖尿病のすいとは殆ど反応せず、2型糖尿病とは弱く、続発性糖尿病由来のすいとは強く反応した。この抗体を用いると糖尿病の鑑別診断が可能であった。この成果は投稿中である。更に、ウエスタン・ブロット法を行い、50kDaと30kDaの糖タンパクを抽出、精製した。純品3μgkとれたので、今、アミノ酸配列を決定中である。5D-4モノクローナル抗体は膵臓のう氏島と反応する。厳密に言うと、う氏島にある30kDa,50Dhの抗原(おそらくタンパク)を認識する。Aspc-1膵癌株から30kDa抗原を、電気泳動、HPLCにより抽出、精製した。精製した抗原をABI社製のペプチドシークエンサーにかけて、アミノ酸配列を決めようとした。N末の10ケのアミノ酸配列、と途中のアミノ酸15ケが配列決定された。これから合成塩基を作製し、プライマーとして用いた。このプライマーとAspc-1由来mRNAを用いてRT-PCRを行った。今後、この増幅したバレドからDNAシークエンサーにより塩基配列を決定する予定である。