hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
骨髄osteoblastic-zoneにおける多能性幹細胞の心筋分化の解析

骨髄皮質のnicheから単離したBMECは、in vitroで特定の刺激により骨・脂肪・筋細胞といった間葉系細胞に分化する多能性を有する。BMECの生体内での役割・動態についてはまったく解析されておらず、当研究では主に傷害心筋におけるBMECの関与について中心に解析を行った。GFPでlabelingしたBMECを致死量放射線照射したマウスの頸骨骨髄内に直接注入したGFP-BMEC骨髄移植マウスを作成し、そのマウスに開胸下で冠動脈を絞拡することで広範な心筋梗塞を作った。心筋梗塞作成後、10日間GCSFを連日投与したところ、心臓超音波検査・カテーテル検査上、心機能の改善を認めた。引き続き免疫組織学的解析を行ったところ、心筋組織の間質にGFP陽性の線維芽細胞様の形態を呈した細胞を数多く認めることができた。BMECから明らかに心筋細胞に分化したと考えられるGFP陽性cardiac-actinin陽性の心筋細胞はごくわずかであるが認めることができた。BMEC由来の心筋細胞の分化機構についてあきらかにするため、全身にCre蛋白を発現させた遺伝子改変マウスに、loxP-βgeo-loxPEGFPのコンストラクトをもつ遺伝子改変マウスからBMECを採取し骨髄移植を行った。そして再度同様のプロトコールで心筋梗塞モデルマウスを作成し、免疫組織学的解析を梗塞心筋について行ったところ、細胞融合の機構で出現したと考えられるGFP陽性BMEC由来心筋をごくわずか認めることができたが、βgal陽性心筋細胞は同定できなかった。このモデルではBMEC由来心筋細胞自体の数が必要充分ではなかったため、分化機構の評価は困難と考える』現在、BMEC採取・骨髄移植をより高率にできる条件や他の心筋障害モデル(心肥大、薬剤性心筋症)について再度検討を行っている。骨髄皮質側(osteoblastic zone)における多能性幹細胞(bone marrow extracted cells : BMEC)を、骨髄皮質を酵素処理した後、間葉系幹細胞に発現していると考えられる表面抗原をもとにフローサイトメトリーで単離し、in vitroにて骨・脂肪・筋細胞に分化させ、多能性を有することを確認した。全身にGFPを発現した遺伝子改変マウスからBMECを単離し、それらを致死量放射線照射したC57BL/6マウスに骨髄内移植するとともに、野生型マウスの骨髄細胞も造血系の支持を目的として尾静脈より注入した。移植後2ヶ月の時点で末梢血を採取しフローサイトメトリーにてGFP陽性細胞が存在することを確認した。作成したBMEC骨髄移植マウスについて、まず負荷を加えない状況のまま移植後2ヶ月で免疫組織学的解析を行った。心臓を含めた全身の組織にGFP陽性細胞が僅かながら存在し、それらの多くは組織の間質に認められた。現在、それらの細胞のcharacterの同定を免疫染色にて行うとともに、近傍組織と同様の細胞に分化しているGFP陽性細胞がないか検索している。BMEC骨髄移植マウスに心筋梗塞を作成し、その後G-CSF投与を連続10日間行った。心筋梗塞作成後2ヶ月の時点で、心機能評価のため心臓超音波検査と心臓カテーテル検査を施行したところ、有意に心機能の改善を認めた。検査後、BMEC骨髄移植・心筋梗塞マウスから梗塞心を摘出し、形態評価したうえで、組織切片を作成した。梗塞巣の免疫組織学的解析を現在行っている。
紫式部日記本文の研究

『紫式部日記』本文の校本を作成するための、基礎作業をおこなう。これまで、宮内庁書陵部蔵黒川家旧蔵本、肥前島原松平文庫本、版本の扶桑拾葉集所収の本文の翻刻と、字母レベルでの比較をおこなう本を作成した(『紫式部日記本文資料集』)。今回は、版本の群書類従本、紫式部日記傍注本と、写本の神宮文庫本を翻刻、字母レベルでの比較ができるものを作成する予定である。字母レベルでの本文比較が可能なツールを作成することは、その本文同士の関係などを、より明らかにする。これまで、『紫式部日記』の本文は、黒川本が良いとされてきたが、諸本の関係を明らかにした上で、あらためて黒川本や松平本の位置をとらえなおすことが可能である。今回は、版本と神宮文庫本を対照としたが、目的としているところは、黒川本の本文史上の位置をどのように測定しなおすか、ということである。また、江戸時代に出版された三種類の版本の『紫式部日記』は、どのような関係にあるのか、その本文上の関係なども明らかにしていきたい。『紫式部日記』のみならず、平安時代の文学作品が、江戸時代にどのように受容されたのかも視野に入れて、本文をめぐる文化状況なども考察の対象とする。版本の群書類従本、紫式部日記傍注本は、翻刻が終わっている。今は神宮文庫本の翻刻に取りかかっている。神宮文庫本の読解に手間取っている。また、研究者も体調を崩したため、出張に行けない期間があった。まずは、神宮文庫本の翻刻作業を終わらせ、次に、群書類従本、紫式部日記傍注本の字母採集をおこなう。体調を崩したために、旅費を使えなかった。今は体調も戻ってきたので、調査のための出張をしたいと考えている。今後、古典籍の研究書などを購入していきたい。
日本語版マンガ分析の英語教育導入：役割語分析のアカデミックライティングへの応用

本研究は大学生を対象とした英語のライティングに漫画に使用される役割語の分析を導入することで(1)学習意欲を高め(2)英語表現力向上をはかり(3)アカデミックライティングスキルの習得を試みる研究である。平成30年度は(3)を中心に全項目の達成を試み、特に英語論文執筆の際引用文に必要な間接話法の習得を目標とした。大学3、4年生を対象に漫画の言語(役割語)分析と漫画ナレーション描写をを通してアカデミックライティングの基礎習得を目指したproject-based learningを実施した。漫画に使われている日英役割語を分析し言語学的特徴を学んだ後、地元への観光客誘致のための日英漫画をグループで作成した。漫画のナレーション作成を通じて引用に必要な間接話法等アカデミックライティングスキル向上に併せ、グループワークによるコミュニケーションスキル、論文執筆に不可欠な著作権の遵守などを学ぶことが期待された。被験者はグループでお薦め飲食店を選択し、外国人観光客に紹介する日英版漫画を作成した。まず役割語分析を導入し、様々なキャラクターに合わせた表現を学び、語彙や表現の幅を広げた。その後グループで役割語を生かした漫画を作成し、間接話法を用いたナレーションを書いた。学期のはじめに直接・間接話法のプレテストと学習動機等の調査を行い、学期末には同様のポストテストとアンケートを実施し、本研究がどのようにアカデミックライティングと学習動機に影響したか調査した。現在結果の分析中であるが、学習動機に好影響が見られた。被験者達は共同作業に肯定的になり、作品を公開することにも積極的で全員が資料の著作権を遵守した。ライティングへの変化はナレーションにおける直接話法が減少し、間接話法中の代名詞の混乱もやや改善した。しかし一部の被験者はポストテストで不必要な情報の詳細を過剰に描写する現象がみられた。本研究の被験者が所属する大学のカリキュラム変更に伴い、実験とデータ収集の実施が平成30年11月末となり、当初の予定より遅れた。そのため平成31年3月現在、11月に得たデータの詳細な分析が進行中であり、まとめとしての学会および論文発表、漫画・ポップカルチャーを通した語学教育のワークショップ開催が行われていない。しかしながら部分的な結果の発表と平成29年度のデータ結果の発表は継続して行い、平成30年度は5つの国際学会、1つの国内学会で成果の報告を行った。本研究は、大学生を対象とした英語のライティングに、漫画に使用されるヴァーチャル言語の分析を導入することで、(1)学習意欲を高め、(2)英語表現力向上をはかり、(3)最終的にアカデミックライティングのスキルを身につけることを試みる研究である。平成28年は3年計画の1年目であり、(1)と(2)の達成を試みた。平成28年度は、大学3、4年生を対象とした選択英語科目"Language in Manga"に役割語の言語学的分析とコミッククリエーターでの漫画作成を導入し、言語感覚と表現力を養い、それが英語力にどう反映されるか調査した。具体的には単調な文章と単語の繰り返しを避け、新しい文型や語彙を積極的に使用することを目指した。また、教材に漫画を使用することで英語学習動機の向上を図った。受講前と後に同一の語彙テスト、漫画翻訳、アンケートを実施し、単語力、表現力、学習動機等の変化を調べた。漫画の登場人物の言葉遣いが日本語版と英語版でどのような特徴を持っているのか比較分析し、その特徴を反映させて英語で漫画作成を行った。語彙力と表現力を向上させるために漫画登場人物の性格に合う表現や単語を意識的に使用させた。研究実践の結果、語彙力は受講前より向上し、p<0.0001の有意差が見られた。文章表現にも変化が見られ、特に付加疑問、命令文、感嘆文、強調表現を意識的に使うようになった。またアンケートの結果、役割語の効果として「直訳を避けるようになった」「新しい単語、文型、表現を使うことを心がけた」という意見が多く挙げられ、「英語が好き」と答えた学生も増加した。研究結果の一部は平成29年1月Hawaii International Conference on Educationにて発表され、詳細は7月にSymposium on Second Language Writingにて発表される。3年計画1年目における目標として掲げた「英語の学習意欲を高める」「英語の表現力を向上させる」は、計画通り選択英語科目にて実施できた。またプレ・ポストテスト、アンケート調査の結果からも実践の肯定的な成果がみられ、経過は順調である。プレ・ポストテストのライティングデータの量が多いため現在も分析中であるが、研究結果の一部はすでにHawaii International Conference on Educationを含む複数の学会で発表されており、追加データを加えた成果も平成29年度内に発表される予定である。このことからも進捗状況はおおむね順調であると考えている。本研究は、大学生を対象とした英語のライティングに漫画に使用される役割語の分析を導入することで、(1)学習意欲を高め、(2)英語表現力向上をはかり、(3)最終的にアカデミックライティングのスキルを身につけることを試みる研究である。平成29年度は大学1年生を対象に(2)と(3)の段階的達成を試みた。大学1年生を対象とし、日本語のパラフレーズ(役割語の応用)と視覚情報としてイラストを用いた英語ライティングの指導法を導入した。英語のライティングでは、母国語の使用を避け、直接英語で書くことが理想とされている。

しかしながら語学力の低い学習者を対象とした場合、母国語でプレライティングをした後、外国語で書くことの有効性も認められている。平成29年度は英語力が低い学生を対象とし、簡単な和文英訳をライティングの練習として行い、日本語を用いたプレライティングと視覚情報の効果を調査した。英語力が低い学生はしばしば日本語を単語ごとに英訳して並べたり、日本語文章そのままを直訳する傾向がある。その結果、完成した英語は意味をなさないことが多い。本研究においては日本語的な表現をまず日本語でパラフレーズすることで、より自然な英訳に繋がるかどうかを調査した。また、日本語文のパラフレーズと併せ、日本語文を描写するイラストを提示し、視覚情報を用いることでより自然な英訳に結びつくかどうか調査した。調査の結果、日本語のパラフレーズを行わなかったグループと行ったグループでは、不自然な直訳の頻度に違いがあった。特に視覚情報としてイラストを提示されたグループは、比較群との結果に統計的有意差が見られた。研究結果の一部は平成30年4月に台湾にて開催されたThe 2018 International Conference on Applied Linguistics & Language Teachingにて発表された。3年計画の2年目における目標として「英語表現力向上」と段階的な「アカデミックライティングのスキルを身につける」を掲げ取り組んだ結果、おおむね計画通り1年生対象の英語科目にて達成できた。役割語を応用したパラフレーズを用いた結果、直訳を避け、正しい英語表現を使えることが実証され、アカデミックライティングへの一歩と繋がった。研究結果の一部はすでにThe 2018 International Conference on Applied Linguistics & Language Teachingで発表されている。しかしながらデータ量に限りがあり、さらなる信憑性のために追加データを加えた再実験が必要と思われる。進捗状況はおおむね順調であると考えているが、30年度にデータ量を増やして再調査する必要がある。本研究は大学生を対象とした英語のライティングに漫画に使用される役割語の分析を導入することで(1)学習意欲を高め(2)英語表現力向上をはかり(3)アカデミックライティングスキルの習得を試みる研究である。平成30年度は(3)を中心に全項目の達成を試み、特に英語論文執筆の際引用文に必要な間接話法の習得を目標とした。大学3、4年生を対象に漫画の言語(役割語)分析と漫画ナレーション描写をを通してアカデミックライティングの基礎習得を目指したproject-based learningを実施した。漫画に使われている日英役割語を分析し言語学的特徴を学んだ後、地元への観光客誘致のための日英漫画をグループで作成した。漫画のナレーション作成を通じて引用に必要な間接話法等アカデミックライティングスキル向上に併せ、グループワークによるコミュニケーションスキル、論文執筆に不可欠な著作権の遵守などを学ぶことが期待された。
テクスチュアルな詩篇挿絵のイメージ変換に関する総合的研究

テクスチュアルな詩篇挿絵は中世を通じて散見されるが、ある程度時間的な枠を絞って考察する方法論の構築を試みた。『ユトレヒト詩篇』を中心に、西欧中世のテクスチュアルな詩篇挿絵の研究状況の把握に努力した。1999年10月4日6日にバンベルクで開催された詩篇挿絵の学会に参加し、幅広い知見を得、また近接分野の研究者と意見交換をすることが出来た。テクストの章句と挿絵モティーフの関係については、幾度かディスカッションされたが、より精度の高い分析を行う可能性を確信した。2000年にヴァティカン図書館、ヘルツィアーナ図書館で調査を行い、『バリー詩篇』、『バルベリーニ詩篇』、『ギリシャ語1927番詩篇』の実地調査と資料収集を行った。2001年にグラスゴーで『ヨーク詩篇』の実地調査を行った。この間、既存のカードファイルや蓄積された調査結果をデジタルにまとめ、西欧のテクスチュアルな詩篇の一覧表を完成した。『シュトゥットガルト詩篇』について、その特異な「リテラリスム」の分析を試みた。セント・オールバンス詩篇に関して、全体を通して再検討の必要が認められた。詩篇挿絵研究と平行して、『ユトレヒト詩篇』の感化を受けた後期カロリング朝を代表する『サン・パオロの聖書』扉絵の装飾プログラムについて検討を進め、2001年5月にその成果を美術史学会で発表した。今年度は、西欧中世のテクスチュアルな詩篇挿絵の研究状況を把握することに努力した。特に、最も関心を寄せているユトレヒト詩篇をめぐっては、1996年の展覧会を経て、さらに関心が深まりつつあり、近年も重要な成果が現れている。それらを検討し、評価し、問題提起を行う段階にある。また1999年10月4日6日にバンベルクで開催された詩篇挿絵の学会に参加し、幅広い知見を得、また近接分野の研究者と意見交換をすることが出来た。テキストの章句と挿絵モティーフの関係については、幾度かディスカッションされたが、より精度の高い分析を行う可能性を確信した。データ整理に関しては、環境整備が難航し、データベースを構築しつつある。章句とモティーフの対応関係を整理し始めている。既存のカードファイルを活用しつつ、効率の良い方法を模索している。シュトゥットガルト詩篇については、その特異な「リテラリスム」の分析に着手した。セント・オールバンス詩篇に関して、全体を通して再検討の必要が認められるだろう。テクストに密着した詩篇挿絵は中世を通じて散見されるが、ある程度時間的な枠を絞って考察すべく、方法論を構築しつつある。今年度は、西欧中世のテクスチュアルな詩篇挿絵の実地調査をヴァティカン図書館で行い、バリー・セント・エドマンズ詩篇(アングロ・サクソン、11世紀)、バルベリーニ詩篇(ビザンティン、11世紀)、ギリシャ語1927番(ビザンティン、11世紀)を調査した。写本の実地調査は、保存上の問題など、さまざまな制約がつきものであるが、ヴァティカン図書館のスタッフによる親切な対応が、調査を実り多いものにしたことを感謝したい。調査の現場で、これまでに作成してあったテクスチュアルな詩篇挿絵の一覧表を確認しつつ、充実させた。調査した3写本は、いずれもリテラリスムについて興味深い様相を呈示している。新たに得られたデータを整理し、考察の作業に入りつつある。ユトレヒト詩篇で培われた画面構築の手法を生かした、サン・パオロの聖書への理解を深めるため、まず関連する先行研究を整理して、今後検討すべき問題点を絞り込んだ。今年度は、ユトレヒト詩篇で培われた画面構築を生かした『サン・パオロの聖書』の装飾プログラムを本格的に検討した。トゥール派大型聖書から継承した旧約と新約の照応が、「原初から終末」、「八大書」、「ダヴィデとソロモン」、「迫害と布教」の4系列に再編され、西欧中世の聖書装飾の方向を定めたことを検証した。

この成果を「『サン・パオロの聖書』扉絵の装飾プログラムについて」と題し、第54回美術史学会全国大会(2001年5月27日、神戸大学)で発表した。9月にグラスゴー大学図書館で『ハンター詩篇』(12世紀イングランド)の実地調査を行った。この作品は『セント・オールバンス詩篇』荷台表される物語イニシャルタイプである。調査に際し、図書館スタッフから適切な支援を受けたことに感謝したい。『シュトゥットガルト詩篇』のリテラリスムの特性とメカニズムを検討し、絵画化のモードに着目して分析した。これに先立ち、蓄積したデータを電子化して、迅速な検索に対応させた。同様の作業を他のテクスチュアルな詩篇挿絵について行い、ユトレヒト詩篇挿絵との対照表を電子データの形で作成した。
時空間情報システムでつなぐ過去と現在-タイ国東北部の居住史と現代農村社会-

研究期間中に主に以下を行った。1.居住史データベースの整備(1)アナログ図面資料のデジタル画像化:Srisakra Vallibhotama所蔵資料を中心に、航空写真約550枚、地形図約250枚を対象。航空写真の位置決め作業に難渋した。(2)居住史に関する知見の整理:Srisakraのこれまでの調査記録など約1,000地点を、経緯度情報を付加して整理。SrisakraならびにWalailak Songsiriを招聘して集中的に行った。2.寺院登記簿データの整備:登記簿にある寺院の所在地を各種資料を用いて同定した結果を設立年代等の関連情報とともにNETVISへ統合した。3.現地調査及び基礎データの補充:東北タイ南部のクメール遺跡や井堰灌漑遺構に関して現地調査を行った。また、現代農村社会に関して社会経済調査データベース最新版ならびに農作業の進行に関する農業普及局の記録を入手した。EcoNETVISへの有効な統合は今後の課題である。4.EcoNETVISの開発:Webページで居住史データベースを閲覧する仕組みとして開発した。地形図・航空写真と記述テキストが連動する。テスト運用時から順次必要な改良を行ってきたが、改善の余地は多く残る。5.EcoNETVISの公開:成果還元と今後の発展を狙い、2003年2月にタイ国バンコクで一般市民も対象とするセミナーを開催しWebページ(http://pladaek.media.osaka-cu.ac.jp/econetvis/)を紹介した。現地ではこれまでにない形の学術情報の公開として大きな反響があった。本研究では最終的な目標として農村社会動態の分析を謳っているが、その前段階の時空間情報システムの整備充実に力を注いだため、不充分であった。今後も時空間情報システムEcoNETVISの充実を継続しながら取り組んでいきたい。研究計画初年度として(1)居住史データベースの整備、(2)寺院登記簿データベースの整備、(3)現地調査、(4)時空間情報システムEcoNETVISの設計を行った。居住史データベースの整備では、Srisakra Vallibhotama所蔵の資料のうち、航空写真約300枚、地形図75枚のデジタル画像化を行った。膨大なデジタル画像(現在約60GB)の運用、保管のために、RAIDハードディスクユニットやDATバックアップ装置を購入したほか、作業用コンピュータの能力改善のためにコンピュータ関連部品を購入した。寺院登記簿データベースの整備では、登記簿記録にある寺院の所在地をNETVISや5万分の1地形図を用いて同定した結果を設立年代などの関連情報とともにNETVISへ統合した。また現地調査では、東北タイ南部のクメール遺跡に関する調査や、井堰灌漑遺構に関する調査などのフィールド調査を行ったほか、NETVISに関連して、社会経済調査データベースの最新版ならびに農作業の進行に関する農業普及局の記録データの入手を行った。さらに時空間情報システムEcoNETVISの設計では、1枚300MB前後になる地形図や1枚36MB前後になる航空写真の画像を、記載された文字などが判別できる高解像度を保ったまま圧縮しインターネット上で配信する手法について、数点の画像圧縮技術を利用した実験を行った。今年度の主な活動は(1)居住史データベースの整備、(2)現地調査、(3)時空間情報システムEcoNETVISの開発を行った。居住史データベースの整備では、Srisakra Vallibhotama所蔵資料などから、地形図約80枚のデジタル画像化を行った。また、Srisakra Vallibhotama氏、Walailak Songsiri氏をそれぞれ4週間招聘し、昨年度デジタル画像化を行った航空写真の撮影位置を決める作業や、航空写真中にみられる居住遺構に関する記述整理を彼らの現地調査記録などに基づいて行った。

作業を進めるに連れて、1950年代の航空写真の正確な位置決めが容易ではないことが判明したが、Walailak Songsiri氏と研究協力を要請した星川圭介氏の作業により、徐々に解決に向かっている。また現地調査では、東北タイ南部のクメール遺跡に関する調査や、井堰灌漑遺構に関する調査などのフィールド調査を行ったほか、地図局での古い地形図の所蔵状況について調査を行い、長期的な活用方策について検討を行った。さらに時空間情報システムEcoNETVISの開発では、インターネットを用いてWebで地形図・航空写真の大容量画像を効率よく閲覧できるような仕組みを整え、また、記述テキストと連動をはかっている。記述テキストから地形図・航空写真へのリンク方法には改善の余地があり、来年度の課題のひとつである。今年度の主な活動は、(1)居住史データベースの整備(2)現地調査(3)時空間情報システムEcoNETVISの改良(4)時空間情報システムEcoNETVISの公開、である。居住史データベースの整備では、継続的な作業として海外共同研究者所蔵資料などから地形図約40枚、航空写真約400枚のデジタル画像化を行った。また、Walailak Songsiri氏を4週間招聘し、昨年度に引き続き居住遺構に関する記述整理を継続し、記述は約1,000地点に及んだ。1950年代の航空写真の正確な位置決めは当初容易ではなかったが、インデックス地図を入手できたことで飛躍的に容易になった。現地調査では、東北タイ南部のクメール遺跡に関する調査や、井堰灌概遺構に関する調査などを継続した。EcoNETVISの改良では、居住史データベースの整備充実を受けWebページで閲覧する仕組みを以下のような点で大幅に強化した。閲覧する記述地点がデジタル画像図面(地形図、航空写真)中で必ず中心部に位置するようにした、航空写真画像の方位を概ね北向きに揃えた、代表的なキーワードによるインデックスを付加した、等である。EcoNETVISの公開では、研究成果の還元と今後の継続的な共同研究活動に資することを目的に、2003年2月にタイ国バンコクで一般市民も多数参加するセミナーを開催しWebページ(http://pladaek.media.osaka-cu.ac.jp/econetvis/)を紹介した。タイ国ではこれまでにない形の学術情報の公開として大きな反響があった。本研究課題では最終的な目的として農村社会動態の分析を謳っているが、その前段階の時空間情報システムの整備充実に力を注いだため、充分に着手できていない。今後も時空間情報システムEcoNETVISの充実を継続的に計りながら取り組んでいきたい。
地域医療と「芸術の臨床」をめぐる相互作用に関する総合的研究

「芸術の臨床」が地域医療およびコミュニケーションとどのような関係にあるかというテーマについて、実際の臨床やアートプロジェクトの事例を通して考察した。その結果、コミットメントの前後に、参加者(患者あるいは他者)とプログラム(治療者あるいは自己)の間にある、イメージをめぐるルールの変更がメタ・コミュニケーション的に行われることがプロジェクトの必要条件となることを論じた。芸術表現の機会創出(アートプロジェクト)の場、あるいは医療の現場(臨床)において発揮されている技芸(アート)そのものを「芸術の臨床」と位置づけ、地域基幹病院をプロジェクト実践の本拠に据え、地域の医療施設と既成の原理を超えた、その実践的方法論を開発研究する目的で、以下の実践研究を行った。1.医療面接における治療者の継時的撮影・編集・解析に関しては、約14回の精神科面接において、治療者の映像と音声を撮影、録音し、その集められたナラティブからプレリミナリーに、formalでprivateな相互作用について検討した。しかしながら、クラスター分析、要素分析を詳細に行うためには、さらなる撮影が必要であった。2.アートプロジェクト企画・調整および実践に関しては、地域医療の中核となっているメンタルクリニックのデイケア施設において、写真撮影のワークショップを継続的に行い、現在は、新たにビデオ撮影のワークショップを開始している。今後も、それらを継続し、その結果をまとめて検討する他、さらにはコミュニティ・ケアへ発展していけるようにその方法を検討中である。3.比較研究とその評価に関しては、現在までに、海外、国内において行われてきた、芸術と臨床のコラボレーションを概観し、2本の総説として投稿、出版した。4.研究会の開催とドキュメンテーション(アーカイヴ設計)および成果発表に関しては、独自のWEBサイトを作成した。また、前述の総説が、学会誌、大学紀要として出版された。3.比較研究とその評価に関しては、現在までに、海外、国内において行われてきた、芸術と臨床のコラボレーションを概観し、1本の新規論文を投稿中である。4.研究会の開催とドキュメンテーション(アーカイヴ設計)および成果発表に関しては、モロッコにおける世界社会精神医学会にてEthno-practice for Clinical Psychiatry and Art Projectのタイトルで発表を行った。さらには現在、最終年度に向けて「セルフドキュメンタリー」の手法に基づく、革新的な映像記録の実験を進行している。本研究は芸術表現の機会創出(アートプロジェクト)の場、あるいは医療の現場(臨床)において発揮されている技芸(アート)そのものを「芸術の臨床」と位置づけてきた。最終年度の今年度にあっては、「セルフドキュメンタリー」の手法に基づく、革新的な映像記録の実験を進行し、実証的な実践研究を行った。その実験とは、過去二年間のワークショップ等で信頼関係が確立していて、さらには映像表現に高い関心をもつ統合失調症の病歴をもつ協力者数名にビデオカメラを貸与し、彼らの日常を彼らなりの手法(ビデオカメラの操作方法だけを教授し内容に関しては一切関知しない方法)で映像表現するという「セルフドキュメンタリー」という手法を確立した。本研究では、それも映像メディアを介した、ひとつのNBM(Narrative Based Medicine)のひとつと考えている。現在は撮影だけであるものの、さらには編集技術を習得するという段階で現在までに編集からパッケージ化の道を探り、ひとつの方法論として確立しつつある。現在公開の方法を、関係者の利害調整も含めて検討している。また研究計画にはなかったが、東日本大震災の発生に伴い、急性精神疾患に現地で対応する盛岡晴和病院の智田文徳医師へのインタビューを行うなど、現地調査を行い映像によるインタビューを収録し、その成果の一部はせんだいメディアテーク(宮城県仙台市)「331をわすれないセンター」に寄贈された。
HIV Tatの機能解析と酵母を用いた標的蛋白遺伝子のクローニング

当研究課題に関連した3研究について以下の成果を得た。i)蛋白間相互作用を酵母内で検出する系を用いTatとTatの間の相互作用の検出に成功した。この相互作用の程度はSRF-SAP1のそれよりも低いが、明らかに有意であった。この系及びGAL4との融合蛋白を用いる系を併用することによって、現在Tatに相互作用する数個の候補クローンを得て解析中である。ii)転写活性化反応において、DNA結合性蛋白と基本因子とを結ぶ因子SNF2の2つのヒトホモログをクローン化した。これら(hSNF2α,-β)はエストロゲンリセプター、レチノイドリセプターとの協調的に転写を活性化した。(論文投稿中)iii)酵母転写因子YAP1は酸化ストレス応答に重要な因子であり、酵母細胞が過酸化物に抵抗性を示すためにはYAP1によるTRX2(チオレドキシン)遺伝子の発現誘導が必須であることが明らかとなった。
リモートセンシングデータを用いたモンゴル草地における草地劣化分布の把握

本研究ではモンゴル草地を撮影するMODISデータとの同期調査を行い,バイオマスとMODISデータからの植生指数との相関を解析する.この結果を基に,バイオマス推定式を求め,MODISデータを用いたバイオマス分布図(2000年ー2006年)を作成した.次に,家畜統計データから家畜頭数や構成割合を求め,バイオマスと家畜頭数の関係から過放牧地域を求めた.また,放牧圧が強いヤギについて,その構成割合が多い地域を求めた.最後に,草地劣化地域を抽出するため,過放牧かつヤギの構成割合が多い地域を求めた.その結果,土地被覆が草地から沙漠に変化する植生遷移帯に位置する19郡が草地劣化状態にあることが示された.過放牧などによる草地劣化地域の拡大が懸念されているモンゴル草地において,計画的な放牧を行うために草地劣化地域の分布把握が急務である.本研究ではモンゴル草地を撮影するMODISデータとの同期調査を行い,バイオマス(牧草量)とMODISデータからの植生指数との相関を解析する.この結果を基に,バイオマス推定式を求め,MODISデータを用いたバイオマス分布図を作成する.次に家畜頭数の統計データを用いてバイオマスと家畜頭数の関係を調査し,草地劣化状態にある地域を抽出する.平成24年8月に,モンゴルの首都ウランバートル近郊において現地調査を行った.各調査地において坪刈りによるバイオマス計測を行った(全15か所).次に,計測したバイオマスとMODISデータから得られたNDVI(正規化植生指数)およびLAI(葉面積指数)の値との相関を求めた.その結果,LAIの方がNDVIよりもバイオマスとの相関が強かったことから,LAIを説明変数としたバイオマス推定式(Biomass=48.70e0.82LAI R=0.62)を考案した.バイオマス推定式をMODIS-LAIデータに適用し,2000年から2006年のバイオマス分布図を作成した.次に,同時期の家畜統計データによる郡別(全347郡)の家畜頭数や構成割合を求め,バイオマスと家畜頭数の関係から過放牧地域を求めた.その結果2000年と2001年において,寒害による家畜の大量死が起きたため2002年には過放牧地域は減少した.また,放牧圧が強く今後も増加が懸念されるヤギについて,その構成割合が多い地域がモンゴル全土に拡大していることが明らかとなった.最後に,草地劣化地域を抽出するため,過放牧かつヤギの構成割合が多い地域を求めた.その結果,土地被覆が草地から沙漠に変化する植生遷移帯に位置する19郡が草地劣化状態にあることが示された.本研究ではモンゴル草地を撮影するMODISデータとの同期調査を行い,バイオマスとMODISデータからの植生指数との相関を解析する.この結果を基に,バイオマス推定式を求め,MODISデータを用いたバイオマス分布図(2000年ー2006年)を作成した.次に,家畜統計データから家畜頭数や構成割合を求め,バイオマスと家畜頭数の関係から過放牧地域を求めた.また,放牧圧が強いヤギについて,その構成割合が多い地域を求めた.最後に,草地劣化地域を抽出するため,過放牧かつヤギの構成割合が多い地域を求めた.その結果,土地被覆が草地から沙漠に変化する植生遷移帯に位置する19郡が草地劣化状態にあることが示された.現地調査はモンゴルの首都ウランバートル近郊,約15カ所において行った.本年の降水量は例年よりかなり多く,ヨモギを主とした家畜の嗜好性が低い広葉植物が分布している地域を新たに発見することは困難であった.また,調査を行った地点においても家畜の嗜好性が高いイネ科の植物が繁茂していた.本年のような降水があるのはまれであることから,調査地では1m四方の方形区を作成し,坪刈りを行うことでバイオマスを測定した.また,各調査地に有占している植物のピュアスペクトルも収集した.結果として,過去の調査においてもバイオマス測定を行っていたことから,現地観測データを基にMODIS-LAI画像からバイオマス分布を求めるための推定式を算出した.解像度の高いLANDSAT画像の利用を試みたが,LANDSATから計算可能であるNDVIよりも植物体の構造を考慮したLAIの方がバイオマス推定式の精度が高いことから,MODIS-LAIデータを用いた.次に,スペクトル特性を用いた広葉植物の抽出については手法が確立しておらず,分類手法の提案を試みているところである.現地観測点は増えたが,ヨモギやアカザが大規模に繁茂している地域が少なかったため,十分な現地データが収集できていない.そのため,草地タイプの分類手法が確立できていない.引き続き,ヨモギの広葉植物の分類手法考案を試みる.現地調査の準備も入念に行い,草地劣化地域を特定する.仮にヨモギの分布が明確にならなくても,バイオマスと土壌水分分布から,牧草の生育しにくい地域を特定する予定である.該当なし
環境変化に応答したペプチドの人工制御とその機能に関する研究

本年度は、これまで得られた知見を元に、非天然型アミノ酸であるα,α-ジ置換アミノ酸を利用し細胞膜透過性ペプチドの設計・合成ならびにその応用として、siRNAデリバリー機能評価を行った。ペプチドの合成は、Fmoc固相合成法により行い、膜透過性評価のためにペプチドのN末端にはカルボキシフルオレセインを導入した。合成した6種類のペプチドの二次構造解析・膜透過性評価、ペプチド/siRNA複合体の物性評価を行った。CDスペクトルによる二次構造解析の結果、高い細胞膜透過性を有したペプチドが他のペプチドの比較し、α-ヘリックス性が高いことがわかった。遺伝子ノックダウン効果に関しては、ルシフェラーゼを恒常発現しているHuh-7-Luc細胞を用い、ルシフェラーゼに対するsiRNA、スクランブル配列のsiRNAを用いて評価を行った。非天然型アミノ酸であるジプロピルグリシンを含有するペプチドのみがノックダウン効果を示し、Lipofectamine 2000と比較して、高いノックダウン効率を示した。ペプチド/siRNA複合体濃度ペプチド濃度を0.25 uM/10 nMまで下げても高いノックダウン効率が維持されていた。また、ペプチド/siRNA複合体の物性評価により、siRNAと安定な複合体を形成することが高いノックダウン効果に繋がっていることが示唆された。本研究により、siRNAを細胞内に高効率にデリバリーする膜透過性ペプチドに関する有用な知見が得られた。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。本年度は、ジ置換アミノ酸及びペプチドの合成、ペプチド二次構造解析を中心に研究を行った。環状ジ置換アミノ酸として側鎖に環状アセタール構造を有するアミノ酸Hms(ヒドロキシメチルセリン)(Ipr)、Hms(c-Hex)を用い、L-Leu(ロイシン)シークエンス中に導入したペプチドを設計した。環状ジ置換アミノ酸はペプチド中でも低pH条件下で加水分解され、鎖状ジ置換アミノ酸Hms含有ペプチドを与えた。合成したペプチドをFT-IR、CDスペクトル、NMRを用いて溶液中での構造解析を行い、X線構造解析にて結晶状態の構造解析を行った。環状ジ置換アミノ酸Hms(Ipr)含有オクタペプチドならびにHms(c-Hex)含有オクタペプチドの溶液中での二次構造解析より右巻きの310-ヘリックス構造を取っている事が示唆された。また、X線結晶構造解析により、Hms(Ipr)含有オクタペプチドは、右巻きのa-ヘリックス構造をとっていることが明らかになった。一方で、鎖状ジ置換アミノ酸Hms含有オクタペプチドは溶液中において、ランダム構造を取っていることがCDスペクトルの結果から分かった。この理由として、アミノ酸側鎖構造の環状から鎖状への変化と極性の変化、さらに水素結合供与体の生成の3つの要素があると考える。以上より、アセタール構造を有する環状ジ置換アミノ酸をペプチドに導入することで、低pHに応答した二次構造の人工制御が可能であることを証明することができた。独自に設計・合成した非天然型アミノ酸を利用し、ペプチドの人工制御を達成することができたことから、研究は順調に進行していると考えている。本研究では、アセタール構造を側鎖保護基に用いているが、ペプチド上での側鎖修飾ができなかったこと及び低pH感受性が低いことが課題として上げられ改善の余地があった。このような課題を改善するために側鎖保護としてボロンエステル構造をもちいた新規ペプチドの創製を行なった。一般に、ボロン酸はジオール部位を有する化合物と可逆的なエステル形成により結合することが知られている。このような構造的特徴を生かし、微弱な酸や糖のようにジオール構造を有する化合物を認識して側鎖構造が変化するアミノ酸ならびにその含有ペプチドの創製を目的とした。ボロン酸エステル構造を側鎖に持つアミノ酸を含有したペプチドを合成し、二次構造が溶液中でヘリックス構造をとっていることが示唆された。合成したペプチドのpH感受性の検討および側鎖修飾について検討する予定である。また、得られたペプチド二次構造に関する知見を元に、膜透過性ペプチドへの応用を行なっていく予定である。
G蛋白質によるカリウムチャネル制御機構の構造生物学的および電気生理学的研究

NMR法を用いて、GβγによるGIRK開閉機構の立体構造の観点からの解明をさらに進めた。具体的には、GIRK-Gβγ間相互作用のNMR解析に必要なGIRK細胞内領域の主鎖アミドプロトンの帰属を進めることにより93%の帰属を完了し、データベースに登録した(BMRB accession number:11067)。帰属に基づき、転移交差飽和実験と化学シフト摂動(CSP)実験結果より、GIRK上のGβγ結合部位および結合に伴う構造変化領域の同定を行った。その結果、GβγはGIRKのT238,E240,G241,E242,F243,L333,K339,E350を含む分子側面のサブユニット境界面に結合し、サブユニット間の相対配置を変化させることにより、Gβγ結合面から離れたβH-βIストランド間に位置するGループを含む細胞内ポア表面やN末端領域に構造変化を誘起することが明らかとなった。全長構造中においてGループは膜貫通領域のinner helixと近接し、N末端領域はouter helixに連結していることから、これらの部位に生じた構造変化は膜貫通領域に伝播し、ゲートの開口に寄与し得ると判断した。生体内におけるGPCR-G蛋白質-GIRK複合体形成機構の解明によるGIRK制御機構解明に向けて、Gα_<i3>とRGS4を調製し、(1)RGS4(2)Gα<i3>(3)Gα_<i3>-RGS4(4)Gαβγについて、GIRK細胞内領域を観測対象としたCSP実験を行った。その結果、(1)RGS4(2)Gα_<i3>(3)Gα_<i3>-RGS4において相互作用を示す結果を得たが、(4)Gαβγにおいて相互作用を示す結果は得られなかった。このことは、活性化時にGα_<i3>やRGS4、Gα_<i3>-RGS4がGIRK近傍に集積することを示唆しており、この局在は不活性化したGα_<i3>がGβγを迅速に回収することを可能とするため、チャネル活性の解除に寄与すると考えられる。一方、本研究においてGαβγとGIRKの相互作用は検出されなかったが、両者の相互作用はGIRKの素早い活性化に重要と考えられており、本研究に含まれないGIRKの領域やGα_<i3>の脂質修飾などが関与する可能性があるため、さらなる解析が必要である。主にNMR法を用いて、GβγによるGIRK開閉機構を立体構造の観点から解明することを目指した。まず、GβγとGIRK細胞内領域の相互作用のNMR解析に向けて、GIRK細胞内領域の主鎖アミドプロトンの3重共鳴測定による帰属を行い、観測可能な主鎖アミドプロトン200残基の57%に相当する113残基の帰属を完了した。一方、GIRK細胞内領域との相互作用解析を行うためのGβγの発現コンストラクトを検討し、高純度に精製でき、NMR解析に用いる100μM以上の濃度においても安定なコンストラクトである、GγのN末端にヒスチジンタグを付加し、脂質修飾をなくした変異体:Gβγ(His-C68S)を用いることに決定した。以下、Gβγ(His-C68S)をGβγと記す。GIRK細胞内領域とGβγの相互作用は、表面プラズモン共鳴法により100μM以上の解離定数であることを明らかとした。さらにNMRを用いた転移交差飽和(TCS)実験と化学シフト摂動(CSP)実験により、GIRK上のGβγ結合部位および結合に伴う構造変化領域の同定を行った。各NMR実験において観測されたスペクトル変化を・現在までの帰属結果と照らし合わせて解釈すると、GβγはGIRK細胞内領域4量体のサブユニット境界面に結合し、サブユニット間の相対配置を変化させることにより、Gβγ結合界面から離れたGIRK上のループ部位にも構造変化を引き起こすと考えられる。今後、全ての残基の帰属を完了することにより、GIRK細胞内領域上のGβγ結合部位とGβγの結合に伴う構造変化部位の全貌をアミノ酸残基レベルにて明らかとできる。

生体内におけるGPCR-G蛋白質-GIRK複合体形成機構の解明によるGIRK制御機構解明に向けて、Gα_<i3>とRGS4を調製し、(1)RGS4(2)Gα<i3>(3)Gα_<i3>-RGS4(4)Gαβγについて、GIRK細胞内領域を観測対象としたCSP実験を行った。その結果、(1)RGS4(2)Gα_<i3>(3)Gα_<i3>-RGS4において相互作用を示す結果を得たが、(4)Gαβγにおいて相互作用を示す結果は得られなかった。このことは、活性化時にGα_<i3>やRGS4、Gα_<i3>-RGS4がGIRK近傍に集積することを示唆しており、この局在は不活性化したGα_<i3>がGβγを迅速に回収することを可能とするため、チャネル活性の解除に寄与すると考えられる。一方、本研究においてGαβγとGIRKの相互作用は検出されなかったが、両者の相互作用はGIRKの素早い活性化に重要と考えられており、本研究に含まれないGIRKの領域やGα_<i3>の脂質修飾などが関与する可能性があるため、さらなる解析が必要である。
中枢神経ループス患者髄液中のサイトカインを規定する因子に関する研究

本年度は、最終目的としていた本研究に関する論文投稿を行っており、現在査読者のコメントに従い改訂作業中である。本論文(すなわち本研究)では抗NR2抗体と抗U1RNP抗体との相加効果を検討した。脳脊髄液(CSF)-抗NR2抗体陽性はCSF-IL-6上昇と相関したが、CSF-抗U1RNP抗体陽性はIL-6と直接的な関係はなかった。しかし両抗体が同時に存在する患者(DP)では抗NR2抗体単独陽性(aNR2)患者より、CSF-IL-6はさらに高濃度になっていた。この結果は、抗U1RNP抗体は抗NR2抗体の併存下においてのみ、IL-6の上昇に関与する可能性を示唆している。一方で、抗NR2抗体と異なりCSF-抗U1RNP抗体陽性はCSF-IL-8濃度と関係し、aNR2よりもDPでより高濃度となっていた。CSF-IL-6がCSF-抗NR2抗体と強く相関することから、IL-8がBBBの透過性を亢進させ抗NR2抗体の血清からCSFへの移行を誘導する可能性を考えた。実際、DPとaNR2とを比較した場合、BBBの透過性や抗NR2抗体価に統計学的な有意差は検出できなかったものの、DPで亢進するあるいは高値となる傾向があり、BBBの透過性とCSF-IL-8の間には明らかな相関関係があった。以上の結果からCSF-抗U1RNP抗体は、抗NR2抗体と異なり直接的に脳障害を起こす可能性は明らかでないが、髄腔内でIL-8の産生を誘導しBBBの透過性を亢進させて抗NR2抗体の直接的な病原性(髄腔内でのIL-6上昇)を強めている可能性がある。今後、同様の研究を行っている他施設と共同して、本邦におけるNPSLEコホートを整備し、自己抗体をマーカーとしたNPSLEのサブセットを明確にできるよう研究を継続する。昨年度検討した結果で、髄液中(CSF)-抗U1RNP抗体と抗NR2抗体陽性のNPSLE患者(DP, n=9)において、両者陰性(DN, n=36)、抗NR2抗体単独陽性(n=14)、抗U1RNP抗体単独陽性(n=9)の患者に比し、CSF-IL-6が有意に高濃度であった。本年は、この機序に関して検討を加えた。CSF-抗U1RNP抗体陽性の場合、同抗体陰性に比しCSF-IL-6は高濃度にならない。すなわち、上記は抗NR2抗体存在下でのみCSF-抗U1RNP抗体に関連してCSF-IL-6上昇が見られるということになる。ここで、CSF-抗U1RNP抗体陽性の場合、ケモカインであるMIGがCSF中で高濃度になることが昨年度判明した。このCSF-MIGの濃度と、血液脳関門(Blood Brain Barrier, BBB)の透過性亢進の指標であるalbuminquotientは明らかな相関がある(r =0.44, p =0.0003)ため、最も考えられる仮説は、CSF-抗U1RNP抗体がMIG産生を中枢神経系で刺激するため、BBBの透過性亢進により抗NR2抗体がよりCSFに移行し、IL-6を上昇させる、という機序である。CSF-抗NR2抗体がBBBの透過性亢進に依存し、かつCSF中のIL-6と平行することはわれわれのデータからも明らかであるため、その抗体濃度をCSF中でさらに高めていると考えられる。当初IFN-αによるBBB透過性の亢進も考えたが、われわれのデータからは十分な根拠が得られなかった。上記の仮説を検証するため、MIGと、CSF-抗NR2抗体価との相関あるいはIL-6との相関などをさらに検証する予定である。またMIGやIFN-αなどが刺激する中枢神経系の細胞に関しても明らかにすることを計画している。臨床的な検討は十分できているが、in vitroにける実験結果がまだ乏しい。データはそろっており、その点では順調と言える。一方、内容は論文化しつつあるが、まだ投稿に至っていない点が足りない点である。

実際、DPとaNR2とを比較した場合、BBBの透過性や抗NR2抗体価に統計学的な有意差は検出できなかったものの、DPで亢進するあるいは高値となる傾向があり、BBBの透過性とCSF-IL-8の間には明らかな相関関係があった。以上の結果からCSF-抗U1RNP抗体は、抗NR2抗体と異なり直接的に脳障害を起こす可能性は明らかでないが、髄腔内でIL-8の産生を誘導しBBBの透過性を亢進させて抗NR2抗体の直接的な病原性(髄腔内でのIL-6上昇)を強めている可能性がある。今後、同様の研究を行っている他施設と共同して、本邦におけるNPSLEコホートを整備し、自己抗体をマーカーとしたNPSLEのサブセットを明確にできるよう研究を継続する。概要にも書いたが、DP群で、CSF-IL-6が最も高くなる機序として、もう一つの仮説はCSF-抗U1RNP抗体がCSF-抗NR2抗体に依存せず無関係にCSF-IL-6を高めている可能性である。昨年のわれわれのデータから、CSF-抗U1RNP抗体単独陽性であってもCSF-IL-6は高くならないが、他のサイトカイン(IFN-αやMIGなど)はCSF中高濃度となる。CSF-抗NR2抗体により、中枢神経において海馬の細胞は直接的に傷害されることが知られているが、それにより初めて自己抗原(=U1RNP抗原)がCSF中に供給され、抗U1RNP抗体と免疫複合体を作ることができる可能性がある。すなわち、CSF-抗NR2抗体存在下ではじめて抗U1RNP抗体-免疫複合体が形成され、それが他のサイトカインを誘導することで何らかの細胞を刺激し、その結果としてIL-6の濃度が高くなるという仮説である。上記の仮説を検証するため、MIGと、CSF-抗NR2抗体価との相関あるいはIL-6との相関などをさらに検証する予定である。またMIGやIFN-αなどが刺激する中枢神経系の細胞に関しても明らかにする予定である。早急に論文化し、投稿する。当研究室のHPはあるが、本研究の詳細を記載したページはない
滑膜肉腫に対する分子標的治療の開発

FGF受容体阻害薬SU5404により5種の滑膜肉腫細胞株のすべてで増殖が抑制された。5種の滑膜肉腫細胞株に対する1%血清添加培地でのIC50(μmol/L)はYaFuSSで11.4、HS-SY-IIで4.9、SYO-1が8.6、Fujiが25.3、1273/99で29.9であった。この時滑膜肉腫細胞ではFGFR3のリン酸化が抑制されていた。FGF受容体阻害薬に感受性のあるYaFuSS、HS-SY-II、SYO-1においてSU5402によりERK1/2のリン酸化が完全に阻害されたがp38のリン酸化は影響を受けなかった。ERK1/2リン酸化を担うと考えられるMAPKKの阻害薬であるU0216によっても滑膜肉腫細胞の増殖の抑制とERK1/2リン酸化の抑制が認められた。YaFuSS細胞株にSU5402を作用させると細胞周期のG1とsubG1分画が増加していた。ヌードマウス皮下で造腫瘍性を示すSYO-1細胞株をマウス背部皮下に接種し腫瘍を形成させた後、FGF受容体阻害薬PD166866を腹腔内に0.1mgあるいは0.5mg注射すると用量依存的に腫瘍増殖抑制効果が認められた。滑膜肉腫細胞および滑膜肉腫腫瘍組織はneurofilamentやmicrotubuleassociated proteinなどのニューロン関連遺伝子を発現していた。滑膜肉腫細胞はレチノイン酸、レチノイドX受容体を発現しており、1部の細胞株でレチノイン酸結合タンパク1(CRABP1)を発現していた。全トランス型レチノイン酸(ATRA)投与により滑膜肉腫細胞において複数の神経関連遺伝子の発現が亢進すると共に形態が変化し増殖が抑制された。FGF受容体阻害薬およびレチノイン酸が滑膜肉腫の治療薬となる可能性が示唆された。5種のヒト滑膜肉腫細胞株(YaFuSS、SYO-1、1277/99、HS-SY-II、Fuji)の全てにおいてはFGF2、8、9、11、18が発現していた。この発現パターンは悪性神経症腫細胞株NMS-2と類似しており細胞起源が近縁であることが示唆された。骨肉腫細胞株においては全く発現パターンが異なっている一方で、大腸癌細胞株と同様、通常間葉系細胞では発現のないFGF3、18の発現が認められた。またこれらFGF蛋白も培養上清中に分泌されていることが確認された。受容体はFGFR1、FGFR2C、FGFR3、FGFR4が滑膜肉腫細胞すべてにおいて発現していた。またFGF2、8、9、11、18および全てのFGF受容体の発現がほとんどのヒト滑膜肉腫組織においても認められた。滑膜肉腫細胞株培養下に組み換えFGF8蛋白の培地への添加により全ての滑膜肉腫細胞で用量依存的に細胞増殖刺激効果が認められた。またこのFGF刺激によりMAPKシグナル伝達分子のERK1/2、p38MAPKのリン酸化が誘導されいることが確認された。これらの結果から滑膜肉腫細胞がFGFとその受容体を発現しており、autocrine-paracrine機構、MAPK経路を介して増殖刺激を受けていることが示唆された。5種のヒト

滑膜肉腫細胞株において滑膜肉腫にFGF2、8、9、11、18が発現しており、FGF受容体ではFGFR1、FGFR2C、FGFR3、FGFR4が滑膜肉腫細胞すべてにおいて発現していた。FGF8を培養細胞に添加するとMAPKシグナル伝達分子のERK1/2、p38MAPKのリン酸化が誘導され、細胞増殖が刺激された。FGF受容体の特異的阻害剤であるSU5402を培地中に添加すると5種の滑膜肉腫細胞株のすべてで用量依存的に細胞増殖の指標であるBrdUの取り込みが低下し、この増殖抑制効果は悪性神経症種、線維肉腫、骨肉腫など他の肉腫細胞に比較して強かった。またSU5402により細胞内のERK1/2のリン酸化が抑制されていたが、p38のリン酸化は変化していなかった。細胞周期解析ではG1期細胞周期停止が誘〓されていた。造腫瘍性の高いSYO-1をヌードマウス背部皮下に接種し腫瘍を形成させFGF受容体阻害剤であるPD166866を腹腔内に投与すると、用量依存的に生体内での増殖抑制効果が認められた。またこの時腫瘍内ERK1/2のリン酸化が低下しており、腫瘍増殖マーカーであるPCNAの発現が低下している事を確認した。これらの事からFGFシグナルは滑膜肉腫の増殖に一定の役割を果たしており、このシグナル伝達を阻害することにより滑膜肉腫の増殖が抑制可能であることが明らかになった。FGFシグナル阻害剤が滑膜肉腫の治療薬として実用化される可能性がある。