hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ゲノム安定性維持に関わるユビキチンリガーゼＣＲＬ４‐Ｃｄｔ２の活性制御機構の解析

本研究は、ゲノム安定性維持に重要なユビキチンリガーゼCRL4-Cdt2が、どのようにS期のクロマチン上でのみ機能するか、その分子機構の解明を目指し、PCNAのDNAへのローディングがCRL4-Cdt2や基質の集合とユビキチン化活性を制御する可能性を検証してきた。今年度は、1.DNA結合PCNAへのCRL4-Cdt2、基質Cdt1の分子集合過程を詳細に解析し、2.他の活性制御因子の探索を行った。1. Cdt2のC末端にPIPボックスが見つかったので、CRL4-Cdt2(PIP変異体)を精製し、DNAビーズを用いてプルダウンした。その結果、Cdt2のPIP変異体ではDNA結合PCNAへの結合が抑制された。また、Cdt2のDNA結合PCNAへの結合は、基質の有無で変化しなかった。これまで、Cdt2はN末端のWD40リピートを介して基質-PCNA複合領域を認識すると考えられてきたが、Cdt2のPIPボックスを介したPCNAへの結合によって、基質-PCNAの結合を必要としないことが明らかとなった。また、DNAなしではCdt2はPCNAとほとんど結合しなかったことから、PCNAのDNAへのロードが、基質とCdt2の集合に必須の過程であることが示された。2.特異的E2がCRL4-Cdt2のポリユビキチン化能を促進する可能性を検討するため、32種の精製E2を購入し、in vitroユビキチン化反応でスクリーニングした。その結果、これまで使用してきたUbcH5cより活性が高いE2候補をいくつか得た。現在、細胞内で基質分解に関与するかをsiRNAによって検討している。本研究では、PCNAのロードが基質、Cdt2がDNA上へ集合、ユビキチン化するために必須であることを直接証明した。加えて、さらなるユビキチン化促進因子の可能性も見出した。27年度が最終年度であるため、記入しない。ユビキチンリガーゼCRL4-Cdt2は細胞周期制御因子(Cdt1, p21, Set8他)をPCNA依存的に分解し、正確な複製とゲノム安定性維持に働く。どのようにしてS期クロマチン上でのみCRL4-Cdt2分解系が作動するのかについて、精製タンパク質を用いたユビキチン化反応の再構成からアプローチしている。PCNAはS期にPCNAローダーによってDNA上ヘロードされて複製を進行させ、複製後はDNAから離れる。PCNAのDNA結合とCRL4-Cdt2によるユビキチン化の連係を解析するために、PCNAをDNA上ヘロードする系の構築を行った。PCNAローダー(Rfcq-RFC複合体及びCtf18-RFC複合体)を精製し、Rfc1-RFCが環状ニックDNAへPCNAをロードすることを確認した。この系を用いて、CRL4-Cdt2によるCdt1のin vitroユビキチン化反応を行うと、Rfcl-RFCの添加によりユビキチン化が促進される傾向が見られた。DNA結合型PCNA、あるいはRfc1-RFCが、CRL4-Cdt2によるユビキチン化反応を支えていると考えられる。この傾向をより明確にするために、また、この機構を詳細に解析するために、DNAビーズの作製を行っている。PCNAローディングを促進するRPAタンパク質の精製も完了した。以上のように、平成25年度は本研究の基礎を確立することができた。精製タンパク質を用いたCRL4-Cdt2ユビキチン化反応系では、高効率のポリユビキチン化が未だ報告されていない。本研究が進展すれば、CRL4-Cdt2が機能するための最小必要因子を決定でき、その制御からゲノムが安定に維持される機構の理解に貢献できると考えられる。昨年度までに精製CRL4-Cdt2複合体、基質Cdt1、PCNA、直鎖上ニックDNAを用いたin vitroユビキチン化反応において、DNAとPCNAがCdt1のポリユビキチン化を促進する結果を得ていた。今年度は、PCNAのDNAへの結合がCRL4-Cdt2の活性を制御する可能性を検証するために、環状ニックDNAビーズを作製しRfc1-RFCによってPCNAをロードさせ、CRL4-Cdt2によるユビキチン化反応を行った。しかしこの系においては、DNA結合PCNAはCdt1のユビキチン化に影響しなかった。ユビキチン化反応後、DNAビーズ上にPCNA、Cdt1、さらにCRL4-Cdt2が集合していたことから、DNA上に基質-PCNAからなるPIPデグロンは形成されていることを確認した。ユビキチン鎖伸長のためには特異なDNAの構造もしくは未知の機構が関わる可能性が考えられる。DNAビーズへのPCNAローディング反応系の確立によりユビキチン化反応だけでなく相互作用解析が可能になったため、どのようにDNA上にPCNA、Cdt1、CRL4-Cdt2、PCNAローダーが集合し基質を認識するかについて詳細に調べた。その結果、Cdt2は基質がなくてもPCNAに直接結合するという新たな結果が得られた。

現在、この結合様式、意義について解析を進めている。本研究は、ゲノム安定性維持に重要なユビキチンリガーゼCRL4-Cdt2が、どのようにS期のクロマチン上でのみ機能するか、その分子機構の解明を目指し、PCNAのDNAへのローディングがCRL4-Cdt2や基質の集合とユビキチン化活性を制御する可能性を検証してきた。今年度は、1.DNA結合PCNAへのCRL4-Cdt2、基質Cdt1の分子集合過程を詳細に解析し、2.他の活性制御因子の探索を行った。1. Cdt2のC末端にPIPボックスが見つかったので、CRL4-Cdt2(PIP変異体)を精製し、DNAビーズを用いてプルダウンした。その結果、Cdt2のPIP変異体ではDNA結合PCNAへの結合が抑制された。また、Cdt2のDNA結合PCNAへの結合は、基質の有無で変化しなかった。これまで、Cdt2はN末端のWD40リピートを介して基質-PCNA複合領域を認識すると考えられてきたが、Cdt2のPIPボックスを介したPCNAへの結合によって、基質-PCNAの結合を必要としないことが明らかとなった。また、DNAなしではCdt2はPCNAとほとんど結合しなかったことから、PCNAのDNAへのロードが、基質とCdt2の集合に必須の過程であることが示された。2.特異的E2がCRL4-Cdt2のポリユビキチン化能を促進する可能性を検討するため、32種の精製E2を購入し、in vitroユビキチン化反応でスクリーニングした。その結果、これまで使用してきたUbcH5cより活性が高いE2候補をいくつか得た。現在、細胞内で基質分解に関与するかをsiRNAによって検討している。本研究では、PCNAのロードが基質、Cdt2がDNA上へ集合、ユビキチン化するために必須であることを直接証明した。加えて、さらなるユビキチン化促進因子の可能性も見出した。計画通り、DNAビーズを作製し、Rfc1-RFCによりPCNAをロードする系を確立した。これにより、DNAに結合したPCNAにCdt1とCRL4-Cdt2が結合することを確認し、基質Cdt1へのポリユビキチン化への影響を検討することができた。また、Cdt2のPCNAへの直接結合を精製タンパク質を用いて初めて示すことができた。27年度が最終年度であるため、記入しない。CRL4-Cdt2の活性制御に、DNA結合PCNAだけでなく、PCNAローダー(Rfc1-RFCとCtf18-RFC)が関与する可能性について検討する。さらに、DNA構造やCRL4-Cdt2の修飾、E2などを含めた促進因子を探索することで、CRL4-Cdt2が機能するための最小必要因子を示す。相互作用について、特にCdt2とPCNAの結合に焦点をおき、その結合様式と意義を生化学的に解析する。この結果を踏まえて、DNA結合PCNAへ基質、CRL4-Cdt2がどのように集合し、ユビキチン化のための安定な複合体を形成するのか明らかにしたい。本研究に必要な精製タンパク質全て(E1酵素、E2酵素、CRL4-Cdt2、基質Cdt1及びp21、PCNA、Rfc1-RFC及びCtf18-RFC、RPA)を整え、DNAビーズの作製も進んでいる。さらに、PCNAのローディング活性、CRL4-Cdt2によるユビキチン化活性も確認し、解析に重要な基盤は整った。まもなく活性制御や相互作用の解析が可能になると考えられる。
北海道南西部における異民族間交流史の民俗学的研究

近世期の和人地と蝦夷地を区分していた内浦湾沿岸の境界に着目し、民族の居住を振り分ける境界線が近代になくなるまでの神社祭祀の変遷をまとめた。また、近世期に蝦夷地と隣接していた日本海沿岸の檜山地方を対象に神社祭祀の過程を明示した。そのうえで、渡島半島の東西の神社祭祀のデータを基に、分水嶺をはさんで渡島半島の東西に流れる河川流域に祀られた神社の祭祀形態を対比させ、信仰面から和人とアイヌとの境界域の習俗の抽出を試みた。本研究は、近世期以降における北海道南西部(渡島半島)の民俗をとりあげて、異民族間交流や地域間交流を経て成立した生活文化の変遷過程を明らかにすることを目的としている。具体的には、少なくとも17世紀から現在まで日本海沿岸の檜山地方で伝承されている鹿子舞の頭のひとつが、20世紀初頭において渡島半島を東西に分断する背骨状の山々を越えて、内浦湾沿岸に居住するアイヌ民族に受け継がれていた事例を中心に据えながら、民族や地域を超えて再利用されてきた民俗資料群を提示し、日本の北辺において形作られた民俗事例について考察するものである。さらに、19世紀の和人地と蝦夷地を区分した境界線の移動に着目し、異民族間交流や地域間交流を経て成立した生活文化について調査を行うものである。当該年度は、北海道南西部、特に汐首岬から山越へと和人地の範囲が拡大する18世紀末から、廃仏毀釈に至る19世紀後半までの神社祭祀について調査を実施し、研究紀要にまとめた。さらに、渡島半島の東西地域の主要な河川と離島に祀られている神社の祭祀形態と、それを取り巻く集落において聞き取りを実施した。あわせて函館市内の博物館や郷土資料館を中心に、河川や異民族間交流に係わる物質資料についても調査を実施した。また、北海道西南部における民俗の伝承に大きな影響を与えた地域の比較調査として、熊野本宮を取りあげて、松前城下の七社のひとつである熊野神社との関係について調査するとともに、北前船に係わる神社祭祀について調査を行った。さらに、19世紀の和人地と蝦夷地を区分した境界線の移動に着目し、異民族間交流や地域間交流を経て成立した生活文化について明らかにすることにある。本年度は、北海道西南部の神社祭祀について調査を進めるとともに、当該地域の民俗の伝承に大きな影響を与えた道外地域の調査を実施した。道内においては、特に汐首岬から山越へと和人地の範囲が拡大する18世紀末から、廃仏毀釈に至る19世紀後半までの神社祭祀について調査を継続して実施した。また、比較資料の収集を目的に、道外では、1に熊野本宮を取りあげて、松前城下の七社のひとつである熊野神社との関係について調査を実施した。2には、北前船に係わる神社祭祀の関係を明らかにするために、近江八幡の神社祭祀と祭礼についても調査を行った。本年度は、北海道西南部の神社祭祀について継続して調査を進めるとともに、当該地域の民俗の伝承に大きな影響を与えた道外地域の調査を実施した。道内では、近世期には西蝦夷地であった檜山北部の神社祭祀について調査を実施した。さらに、道外では、菅江真澄が記した18世紀末のアイヌの伊勢参りの実態を明らかにするため、伊勢神宮、名古屋市、岡崎市で関係する寺社を取材した。

また、研究成果を調査地域に還元するため、7月には江差町教育委員会と、9月には知内町教育委員会と協力し町民講座を実施した。江差町では、江差町文化会館小ホールにおいて国立民族学博物館研究戦略センターの笹原亮二教授を講師に招いて実施した研究会「鹿子舞-その芸能と伝承-」を公開した。知内町では、知内町公民館において宮城学院女子大学の菊池勇夫教授を招いて実施した研究会「菅江真澄の旅からみる松前東在の暮らし・松前と箱館の間」を公開した。本研究は、近世以降の北海道南西部の民俗をとりあげ、異民族間交流や地域間交流を経て成立した生活文化の変遷過程を明らかにするものである。本研究の主な調査対象地域は、渡島半島の東西地域の主要な河川に祀られている神社と、それを取り巻く集落とした。調査方法は、聞き取りを主眼においたフィールドワークであるが、あわせて博物館や郷土資料館において、河川や異民族間交流に係わる物質資料についての調査を実施した。ここで調査対象に渡島半島の東西地域の神社信仰を取り上げた理由は、神社の奉納物や祭祀を示す棟札など由来や奉納年が明確なものが多く、信仰形態を時系列で示すことが可能と判断した。分水嶺で比較する河川は、遊楽部川と見市川、野田生川と姫川、落部川と厚沢部川に加えて、近世期から交通の便が整っていた天の川と大野川についても取り上げて、東西の河川に祀られている神社祭神について比較した。また、民俗資料群のデータ収集としては、調査対象地域における民俗の伝承に大きな影響を与えた、北前船など物資の移動や菅江真澄など人的交流で培った民俗事例について調査を行った。研究成果の公表について、北海道博物館協会道南ブロック連絡協議会の知内町郷土資料館の郷土資料館ゼミナール「知内学のすすめ」と連携して、研究会を2回にわたって開催した。初回には、秋田県立博物館の松山修学芸主事を講師に招き、菅江真澄の記録から18世紀末の北海道南西部の状況について報告を受けた。また2回目には、研究代表者が北海道南西部における河川の祭祀状況など研究成果の一端を報告した。北海道南西部の神社祭祀調査を予定どおり実施し、残りの地域は渡島半島北部の噴火湾側だけとなっている。また、これまで懸案としていた調査地への研究成果の公開を、江差町と知内町の博物館および教育委員会と連携して実施することができた。24年度が最終年度であるため、記入しない。北海道南西部の神社祭祀と民俗芸能の調査を継続して実施し、異民族間交流や地域間交流を経て成立した生活文化を抽出したいと考える。さらに、北海道南西部の博物館および教育委員会と連携して、本研究課題の研究成果の一端を公開する。
触媒的不斉アシル化を機軸とする環状キラルビルディングブロックの創製

分子触媒による不斉合成が最近大きな注目を集めているが、我々の研究室でも、キラルな1,2-ジアミンを分子触媒として用いるアルコール類の高エナンチオ選択的不斉アシル化を見出した。キラルな1,2-ジアミンは(S)-プロリンから簡便に誘導され、分子量200程度の小さな分子触媒で、反応には金属を一切用いない環境調和型(グリーン)触媒である。このキラルな1,2-ジアミンを用いる触媒的不斉アシル化は種々のアルコール基質に広く適用できることをこれまで明らかにしてきた。ラセミ第一級および第二級アルコールの不斉アシル化による速度論的分割および、種々の対称1,2-および1,3-ジオールの不斉アシル化による非対称化がそれぞれ高効率かつ高エナンチオ選択的に進行することを明らかにした。さらに不斉誘導がより一層困難と予想される遠隔対称ジオールである環状1,4-ジオールに対しても、基質に対してわずか200分の1当量のキラルジアミンを用いるだけで、オキシラン環、シクロプロパン環、アジリジン環などを有する対称1,4-ジオールを高エナンチオ選択的に非対称化することに成功した。これらの非対称化生成物は、種々の有用な天然有機化合物の環状キラルビルディングブロックとなる。このような高効率・高エナンチオ選択的不斉アシル化の反応機構を解明するために、遷移状態、あるいは中間体を明らかにする計算も現在進行中である。現時点では、塩化ベンゾイルとキラルな1,2-ジアミンがアシルアンモニウム塩を形成し、これがアシル活性種となっていることを示唆している計算結果が得られている。今後さらに詳細な計算を行う予定である。今回は、不斉誘導がより一層困難と予想される遠隔対称ジオールである環状1,4-ジオールに対して、キラルな1,2-ジアミシ触媒存在下、塩化置換ベンゾイルとの反応を検討した。その結果、基質に対してわずか200分の1当量のジアミンを用いるだけで、オキシラン環、シクロプロパン環、アジリジン環などを有する対称1,4-ジオールを高エナンチオ選択的に非対称化することに成功した。さらに、この触媒的不斉アシル化の実用性をより一層高める研究も行っている。アキラルなアシル化剤である塩化ベンゾイルをポリマーに固定化したものを合成することができた。このポリマー固定化アシル化剤を用いて、アシル化生成物の分離・精製が簡便なアルコールの不斉アシル化を現在、詳細に検討中である。
わが国の過疎地域における低次中心地に関する研究

本年度は低次中心地における公共的サービス供給の変化と人口変化との関係について明らかにした。本研究によって得られた新たな知見は以下の通りである。1.低次中心地におけるサービス供給の数量的変化市場メカニズムにのりにくい教育,医療,文化施設,交通などの供給状況を数量的に把握した。具体的には,国や県が主体となって行った調査資料や職業別電話帳などを用いて,中国地方5県に立地する低次中心地の公共施設(教育,医療・福祉,文化施設)の立地件数,立地年次,分布状況などを明らかにした。この結果,近年に近づくにつれ,低次中心地への公共施設の立地は増加していることが明らかになった。一方で,教育機関を中心として公共施設の廃止もみられた。また,低次中心地の中でも公共施設の立地は役場集落への集中化が進み,旧町村役場所在地であった中心地は相対的にその機能を低下させていることをつきとめた。2.公共的サービス供給と中心性との比較1で明らかとなった公共的サービス供給の地域的差異と人口変化,中心性,民間事業所の集積度などとの対比を行った。この結果,公共的サービスは市町村を単位として一律的に行われているのに対して,人口集積度や中心性の変化は地帯的に構造をなし,両者の関係が必ずしも密接であるとはいえないことが明らかになった。3.島根県における低次中心地を中心とした集落システムの実態把握と地図化デジタルデータの地形図とGISソフトを用い,低次中心地周辺における集落の社会・経済的データを地図上に示し,集落システムの実態把握に努めた。この結果,低次中心地から遠距離にある集落と低次中心地の内部において人口減少率が高いことが明らかになった。本年度は全国における低次中心地の分布と盛衰の客観的把握を行った。研究によって得られた新たな知見は以下の通りである。1.国内外における農山村地域・過疎地域に関する研究動向の把握近年の農山村地域・過疎地域は社会・経済的に都市の支配下にあるばかりか,世界的な都市を中心とした核心地域へ従属する傾向にある。この結果,従来の過疎地域における低次中心地が果たす役割が喪失し,社会・経済的地位が他の過疎地域と同等になりつつあることが明らかとなった。2.国内における低次中心地の設定と基本統計による動向把握通勤・通学流動から市町村を単位として低次中心地の設定作業を行った結果,国内には約500の低次中心地が存在していることが明らかとなった。これらの低次中心地は経済的中心地であるばかりでなく行政的中心地としての機能が高い傾向にあった。低次中心地の盛衰は1970年以降の工業化への対応に左右される傾向にあることも明らかとなった。この結果,低次中心地から遠距離にある集落では人口減少が著しく,依然として過疎化傾向にあることが認められた。以上の結果から,マクロレベルでは農山村地域・過疎地域が中心地域へ徐々に従属していく中で,低次中心地の機能喪失がすすんでいることが指摘できた。一方で,ミクロレベルでは伝統的に経済的,政治的集積を有する低次中心地の存在意義は依然として大きく,集落システムからみた場合の結節点として作用していることが明らかとなった。
神経栄養因子アネキシンVの認識するニューロン表面の糖鎖リガンド

アネキシンはリン脂質/カルシウム結合性タンパク質ファミリーで、現在までに哺乳類では10数種類が見い出されている。我々はアネキシンIV、V、VIがカルシウム存在下でシアロ糖タンパク質やグリコサミノグリカンに結合するレクチンであること明らかにした。アネキシンVは神経栄養活性を持つことが最近明らかにされ、アネキシンVが神経調節を行うためにニューロン上の糖鎖をリガンドとして認識している可能性が示唆された。本研究ではアネキシンVのブリコサミノグリカン結合特異性を調べ、中枢神経系における内在性リガンドの同定を行うための基礎的研究を目的とした。(1)アネキシンVのグリコサミノグリカン結合特異性種々のグリコサミノグリカン(ヘパリン、ヘパラン硫酸、コンドロイチン硫酸、コンドロイチン、ヒアルロン酸)を結合させたセファロースゲルを用いてアフィニティークロマトグラフィーを行い、アネキシンVの特異性を調べたところ、アネキシンVはヘパリン/ヘパラン硫酸に強く結合したが、コンドロイチン硫酸とも弱い相互作用がみられた。(2)アネキシンV発現細胞の同定ウシアネキシンV対するポリクローナル抗体を使って、ウシ組織切片を免疫組織化学的に染色したところ、アネキシンVは脳では神経細胞には発現しておらず、神経膠細胞にのみ発現していることが明かになった。
森林再生の初期段階における外生菌根菌感染源の移入経路の解明

襟裳岬海岸部の樹木がいまだ定着していない場所において、感染源の供給元から離れた場所でも、複数種の外生菌根菌が活性を保持したまま土壌中に存在していること、また、それらの菌はエゾシカやエゾヤチネズミがきのこを採食し糞を排泄する過程で、感染源の運搬要因として働くことにより維持されている可能性が示された。森林の維持を考える際、植物、菌、動物の三者間の相互関係は、重要であると考えられる。多くの木本植物にとって、外生菌根菌から得られる養分吸収やストレス耐性の促進効果は、新たな立地に定着し生育を開始する際、重要な役割を担っている。そのため、植物と菌がうまく巡り会い共生系を確立できるか否かが、植物定着の鍵となる。一方で、植物が新たな生育地に定着する際に、植物の定着が先に起こるのか、共生菌の定着が先に起こっているのかは、植生の再生や維持機能を考える上で興味深い。本研究では、海岸砂丘でいまだに宿主樹木の定着がない場所において、どのような外生菌根菌が感染力を保って存在するのかを明らかにすること、また、その菌がどのように侵入しているのか明らかにすることを目的としている。平成20年度の北海道えりも岬の海岸砂丘での調査の結果、海に近い植生の全く無い場所を含め、外生菌根性の植物が生育していない場所の砂中においても、複数種の外生菌根菌の存在が確認された。植生の乏しい海側で主に出現した外生菌根菌は、シーケンスによる同定の結果、ショウロやチチアワタケなどであった。一方、同調査地で海岸部にて採取した野生シカの糞中から外生菌根菌を検出した結果、実験に用いた糞の30%以上から、4種の外生菌根菌が検出された。その内、チチアワタケが全体の約15%の糞から出現した。このように海岸砂丘において、外生菌根性の樹木が侵入する前から、感染力を保持した外生菌根菌が潜在的に土壌中に存在している可能性が示された。また、野生のシカが菌の子実体を食べ海岸部で糞排泄することで、これら植生回復前の海岸部土壌への外生菌根菌の感染源の運搬要因の1つとして働いている可能性が示された。多くの木本植物は発芽定着の際に、根系において相性の良い共生菌と巡り会い菌根共生を確立できるか否かが重要な鍵となる。新たな生育地に定着の際に、植物定着が先に起こるのか、共生菌定着が先に起こっているのかは、植生の再生や維持機能を考える上で興味深い。平成20年度の北海道えりも岬海岸部での調査の結果、樹木の定着前からショウロを中心とする多くの共生菌が土壌中に存在すること、その周辺に散在する野生のシカの糞中にこれらの共生菌が存在することが示された。しかし、シカの糞中には土壌中に最も多く存在したショウロは多く見られなかった。そこで、21年度はシカの糞の調査を継続するとともに、ネズミに注目して研究を継続した。ネズミの調査は同調査地でトラップを仕掛けて捕獲した個体から糞を採取し、その糞の菌感染源の有無を調べて行った。その結果、春の採取ではネズミを捕獲できなかったが、秋の採取では捕獲と糞の採取に成功し、その糞中から30%を超える頻度で活性を持ったショウロの存在が確認出来た。また、シカの糞中からも低い頻度ではあるがショウロが検出された。以上から、樹木の共生菌の感染源運搬にシカとネズミの存在が関わっており、森林の拡大に貢献している可能性があることが示された。多くの木本植物は新たな生育地での発芽定着の際に、その根系で相性の良い共生菌と巡り会い、菌根共生を確立できるか否かが、以後の健全な生育の重要な鍵となる。本研究では、海岸砂丘で未だに樹木の生育がみられない場所において、どのように共生菌類が侵入し、その後樹木と共生関係を成立しているのかを明らかにする。22年度は、共生菌感染源の移動経路推定の手がかりとするため、共生菌の作るきのこ発生地からの距離の異なる場所3箇所で、宿主樹木と共生せずに土壌中に存在する共生菌の量・質の違いを調査し比較した。その結果、きのこの発生地から距離が遠くなると、当調査地域での優占菌であることが示されているショウロ属菌を中心にして、土壌からの出現数が減少することが示された。また、シカの糞の調査と、ネズミのトラップによる捕獲と糞の採取調査を、継続して行った。その結果、シカの糞に関しては、様々な可食性のきのこを中心とした菌が検出され、本年度はこれまで出現しなかった優占菌のショウロ属菌も一部で検出された。

これまでのシカの糞からの菌の検出頻度は、全87サンプル中の17サンプルから6種の共生菌が検出されたことになる。一方、ネズミの糞に関しては、本年度の捕獲個体より採取した糞からは樹木の共生菌を検出することは出来なかったが、昨年度分とあわせると約27%の頻度で、優占菌のショウロ属菌のみが検出された。以上から、樹木の共生菌の感染源運搬に、シカとネズミの存在が関わっていること、特にシカは広範な菌の種の運搬に、またネズミは、優占的なショウロ属菌の感染源運搬に多く関わっている可能性が示された。きのこを捕食する野生哺乳類による共生菌の感染源の運搬が、海岸部の森林形成に大きな役割を果たしている可能性が高いと言えるだろう。
遺伝子タギングによるフザリウム病原菌の病原性機構の解析

Fusarium oxysporumは、各種作物に萎ちょう性病害を引き起こす重要病原菌であるが、その病原性機構についてはほとんど明らかにされていない。研究代表者らは、形質転換ベクターによる遺伝子タギング法を用いて、メロンつる割病菌(F.oxysporum f.sp.melonis)から43株の病原性変異株を分離した。本研究では、5株の変異株における変異遺伝子、すなわち病原性遺伝子を同定した。さらに、形質転換体から胞子形成変異株を選抜し、胞子形成遺伝子を単離した。1.病原性関連遺伝子先に分離した病原性変異株におけるベクター挿入領域の構造と機能を解析し、5つの病原性関連遺伝子(ARG1、FOW1、FOW2、FOW3およびFOW4)を同定した。これら遺伝子は、他の病原糸状菌からは報告されていない新規な病原性関連遺伝子であり、ARG1はアルギニノコハク酸リアーゼ(アルギニン生合成酵素)、FOW1はミトコンドリア運搬体タンパク質、FOW2はZn(II)2Cys6転写制御因子、FOW3はCys2His2転写制御因子、FOW4はフォスフォエノールピルビン酸カルボキシキナーゼ(糖新生)をそれぞれコードすると推定した。2.転写制御因子Fow2によって制御される遺伝子の単離野生株とfow2変異株のcDNAサブトラクションによって、fow2変異株で発現しなくなった遺伝子、すなわちFow2が制御する遺伝子を探索し、F2R1を単離した。f2r1変異株を作出したところ、その病原性は若干低下した。一方、fow2変異株は病原性を完全に失うことから、Fow2は複数の病原性遺伝子の発現を制御し、F2R1はその一つであることが示唆された。3.胞子形成関連遺伝子形質転換体から小型胞子および大型胞子を欠損した変異株を選抜した。この変異株におけるベクター挿入領域の構造と機能を解析し、胞子形成関連遺伝子REN1を同定した。Fusarium oxysporumは、各種作物に萎ちょう性病害を引き起こす重要病原菌であるが、その病原性機構についてはこれまでほとんど明らかにされていない。先に申請者らは、形質転換ベクターによる遺伝子タギング法を用いて、メロンつる割病菌(F.oxysporum f. sp. Melonis)から43株の病原性変異株を分離した。本研究では、これら変異株における変異遺伝子を同定し、本菌の病原性機構の具体的な解明を目指す。本年度は、6株の変異株におけるベクター挿入領域を同定し、そのうちの3株について病原性関連遺伝子(ARG1、FOW1およびFOW2と命名)を特定した。病原性が著しく低下したFMMP95-1株がアルギニン要求性であることを見出すとともに、その変異遺伝子としてARG1を同定した。ARG1はアルギニン生合成の最終段階を触媒するアルギニノコハク酸リアーゼをコードすることが明らかとなった。病原性が著しく低下したB60株からFOW1を同定した。Fow1は酵母のミトコンドリアキャリアータンパク質と有意な相同性が認められた。緑色蛍光タンパク質との融合タンパク質を用いて、Fow1がミトコンドリア局在性であることを確認した。これまで、ミトコンドリアタンパク質をコードする遺伝子が病原性に関与するという報告はなく、FOW1が最初の例である。病原性を完全に失ったB137株からFOW2を同定した。Fow2は糸状菌に特徴的なZn(II)2 Cys6ファミリーの遺伝子発現制御因子と相同性が認められた。現在、FOW2が制御する遺伝子群の探索を進めている。

Fusarium oxysporumは、各種作物に萎ちょう性病害を引き起こす重要病原菌であるが、その病原性機構についてはこれまでほとんど明らかにされていない。研究代表者らは、形質転換ベクターによる遺伝子タギング法を用いて、メロンつる割病菌(F. oxysporum f. sp. melonis)から43株の病原性変異株を分離した。これら変異株における変異遺伝子を同定し、本菌の病原性機構の具体的な解明を目指した。本年度は、2株の変異株におけるベクター挿入領域の構造と機能を解析し、2つの病原性関連遺伝子(FOW3およびFOW4と命名)を同定した。さらに、形質転換体から胞子形成変異株を選抜し、胞子形成関連遺伝子(REN1と命名)を同定した。病原性が著しく低下した変異株X20-17のベクター挿入領域から、FOW3遺伝子を同定した。FOW3がコードするタンパク質は、Cys2His2ドメインを持つ転写制御因子と相同性が認められ、病原性に直接関与する遺伝子(群)の転写制御因子であると推定した。病原性を完全に失った変異株X20-36のベクター挿入領域から、FOW4遺伝子を同定した。FOW4がコードするタンパク質は、糖新生に関与するフォスフォエノールピルビン酸カルボキシキナーゼをコードすることを明らかにした。先に分離した形質転換体から胞子形成変異株を選抜し、小型胞子および大型胞子を欠損した変異株(rensa変異株)を分離した。さらに、rensa変異株のベクター挿入領域から、REN1遺伝子を同定した。REN1は、先に単離されているAspergillus nidulansとMagnaporthe griseaの胞子形成関連遺伝子medAおよびACR1と低いながらも有意な相同性が認められた。
回転場におけるマランゴニ対流に関する研究

地球物理の分野で従来から行なわれてきた地球大気模擬実験と同様に回転場において二重円筒液槽を用い、内外円筒壁の液面近傍のみを加熱・冷却して自由表面に温度勾配を与え、マランゴニ対流が卓越した流れを発生させる実験を行なった。また、この現象に関与する物理量の次元解析および支配方程式から導出されたロスビー数に関するオーダーの検討も合せて行ない、次の結果を得た。なお実験では試験液に動粘度1または10センチストークスのシリコンオイルと純水を用い、流れをアルミ粉で可視化し、実験装置と共に回転する糸から写真撮影することによって流れの様子を観察した。試験液と加熱・冷却部の接触高さを小さくして密度差対流を非常に抑制した場合でも、密度差対流を扱った地球大気模擬実験で観察されている幾何学的な多角形型の流れが観察され、したがってマランゴニ対流が卓越した流れにおいても多角形型の流れが実現されうることを確認した。他の実験条件の場合も含め本実験で観察された流れは、地球大気模擬実験の場合と同様に次の3種類に分類されることがわかった。すなわち、(1)多角形型の定常波動流(2)うずまき状の定常軸対称流(3)乱れたような不規則波動流である。そして定常波動流において生ずる波数まで考えると、シリコンオイルの場合の結果はマランゴニ数を用いてよく整理され、マランゴニ対流が流動様式に対し、強い影響を与えていることがわかった。これに対し純水の場合の結果はレーリー数を用いるとよく整理された。なお純水にはある種の特殊性があると過去に報告されており、本実験でも回転させない場合の観察から、純水ではマランゴニ対流が顕著に発生しているとは思えず、少なくとも本実験条件内では密度差対流が流動様式に強い影響を与えていると考えられる。今後、各流動様式の発生限界および定常波動流の発生のメカニズムを探る必要があると思われる。
環北太平洋における動物皮革加工の文化人類学的研究

環北太平洋地域において、動物皮は保温・防水性に優れ、加工しやすいという特長を有していることから、大小様々な道具の素材として活用されてきた。利用にあたっては時間を浪費し、手間のかかる製革処理が事前に必要となる。北方民族の製革技術に関するこれまでの研究は、ツングース系の複雑な技術が、より単純なパレオアジア系の技術の上に覆い被さったという、二項対立的で単純な性格のものであった。ひとたび確立した製革技術がそのまま変化しなかったと考えるのには無理がある。また、脳漿なめしや燻煙などを用いた複雑な技法やそれに伴ない発達した道具類は、ツンドラ地域でも見られ、どの皮をどの用途に用いるかによっても一様ではなく、単純な技術と複雑な技術の組み合わせの例も珍しくない。毛皮の加工技術は、特定の文化領域や自然環境に限定される固定的なものではなく、民族接触や欧米列強の進出に伴なって拡大した、市場・商品流通経済や製品分業化システムに巻き込まれることによって柔軟に変化したことが裏付けられた。また、毛皮収奪を目的とする国策会社の政策にも配慮しながら、近代的市場価値が高かったビーバーとラッコの皮革処理や流通にも焦点をあてた。ヨーロッパや中国市場での毛皮需要の高まりに対応し、先住民による飛躍的な毛皮生産の伸びが認められ、より効率的な技術の導入が図られるようになったのは、まさにこうした高級な毛皮を有する小型毛皮獣の製革技術においてであった。特定地域の大型動物種に適応した、古い伝統的な技術にのみ注意を払ってきたこれまでの保守的な研究の欠点を浮き彫りにするとともに、各地域を個別に論じるのではなく、環北太平洋全体を視野におさめることによって、かえって地域ごとの特徴を明確にすることができた。1、皮なめしは、季節を考慮した動物の捕獲、皮剥ぎ、除毛、肉や脂肪の除去、なめし媒材の塗布、乾燥、燻煙などの複雑な工程を経る。これらの工程には、通常、民族ごとの技法の相違が反映され、これまで重要な研究対象とされてきたが、技法の相違を特徴付けるのは民族差だけにとどまらない。したがって、本年度は具体的ななめし技法の体系とその技法を選択した理由、使用する道具類の詳細を明らかにすることを調査の主眼とした。2、国内調査としては、アイヌ・ウイルタ・ニブフ・ウリチ・オロチ・ウデへ民族について過去に様々な研究者によって実施された既存の聞き取り調査レポートの中から、皮なめしに関する部分の分析と要約を実施し、あわせて動物皮の特徴・季節ごとの品質の相違・獲得手段の差異についての検討を実施した。3、国外調査としては、サハリン、千島で、人類学調査を実施し、近代以降に先住民を利用して帝政ロシアや日本が行っていたオットセイなどの海獣や高級な毛皮を提供するラッコ、キツネ、クロテン、カワウソなどの小型毛皮獣なめし活動の技術的・経済的な側面を明らかにした。また、ロンドンの人類博物館、大英図書館、オックスフォードのピットリバース博物館等で環北太平洋諸民族が実際に使用した皮なめし関連物資文化資料の調査を行い、同時に近代国家が積極的にバックアップした国策会社の植民地経営にかかわるドキュメントの分析から、世界経済における毛皮の重要性が一気に増大した過程を明らかにした。毛皮交易の発展と皮革加工技術の進展には相関関係がある。当年度は物質文化と文献資料の側面から、下記のように国内外の調査を実施した。国外調査:北東アジア以外の事例として2001年11月から12月にかけて、カナダ・アルバータ州のアルバータ州立博物館とカルガリー大学の極北研究所において、平原インディアンのバッファローなめし技術を具体的にとりあげ、その技術的な変遷と毛皮交易史の概要を掌握することにつとめた。国内調査:近世の日本社会とアイヌ社会との関わりは、幕府の外交システムとして、松前藩を仲介して実施されたという側面を持っている。

18世紀以降、本州商人による請負経営の展開にともなう進出や開発の結果、アイヌの漁業労働者化が進み、ロシアの南下という外圧の危機管理に対応して、蝦夷地幕領化や内国編入が制度的に飛躍的に進行する。その結果、18世紀以降の蝦夷地生産物としてラッコ皮、アザラシ皮、ネフツ、コヒツノ、アモシヘ、オットセイ、タケリ、クジラ、魚油、干鱈など、多種多様な品目が松前、江差、箱館を経由し、本州に回漕され、対外貿易にも利用されるようになっていく。それに付随して、中国市場への毛皮交易の主要産品として急速に重要性を増大させた北太平洋のラッコについては、とくに移性者と先住民双方の技術革新によって、その捕獲方法だけでなく、なめし加工処理の効率化がはかられていたことを確認し、その成果の一部を国際シンポジウム「北太平洋における先住民交易と工芸」(2001年10月1-5日於国立民族学博物館)の席上、発表した。本年度は、種々の事情により代表者自らによる海外調査は実施できなかったが、来日したカナダ・アルバータ州立博物館研究者と博物館における毛皮資料の保存、管理の方法について有益な情報交換を行なうことができた。皮革処理の工程に関しては、2002年の夏に北海道開拓記念館の研究職員が実施した人類学調査によって収集された、現代のニブフが実施しているアザラシの皮なめしに関するデータの分析を行なった。あわせて、2000年にカムチャッカで実施された人類学調査時に収集された、現代のエヴェンによるトナカイの皮なめしに関する資料と既存資料の比較検討を行なった。これら最新の調査成果の一部は、本研究成果報告書に盛り込むほか、紋別市の北海道立オホーツク流氷科学センターにおける第11回企画展「この海のむこうに」でカラー冊子、写真パネルおよび実物資料によって一般に還元した。海外に保管されているN.G.マンロー収集アイヌ文化資料が里帰りしたことに鑑み、アイヌの皮革加工に使用する道具を含む、北海道開拓記念館が所蔵するマンローアイヌコレクションとの詳細な対比を行なった。その過程で平成14年4月9月にかけて来日したスコットランド国立博物館・オックスフォードピットリヴァース博物館・大英博物館研究者らと、これら資料の性格に関する活発な討論を行なった。その成果は単行本『海を渡ったアイヌの工芸』として刊行した。世界経済に統合される前後のラッコを対象とした近世以降の商品獲得・利用・流通の実態を、網走で開催された第17回北方民族文化シンポジウム『北太平洋沿岸の文化-資源利用のあり方-』において「千島列島におけるラッコ猟とグローバル経済」というタイトルで発表した。
日本・中国間加工貿易によって結ばれる相互依存関係に関する国際産業連関的な実証研究

「改革・開放」の過程で沿海部の「来料加工」を中心とする日系企業は雇用創出の面で間接的に中国の重化学工業化に貢献し,日本からの輸入を増加させ,中国からの輸出をも増大させた。経済構造の違いがあったため,上海とその他地域の日本経済に与える影響は異なった。産業部門別の分析結果については,上海との貿易はむしろ商業や運輸サービス業で日本国内の付加価値や雇用を増大させた。一方で,貿易の拡大は日本の「紡績業」衰退の要因ともなっていた。つまり,2007年日中国際・地域間産業連関分析により,日中貿易の拡大が日本全体の労働生産性を上昇させ,産業構造転換を促進するような大きな要因であったと捉えることもできる。本研究は3年を予定している。本研究の研究目的は、新しい国際産業連関モデルを援用して現在の日中貿易構造の特徴を明らかにし、上海など特定地域を拠点とする中国に進出した日系企業の生産活動によってもたらされた日中両国経済への影響を分析することである。初年度(平成25年度)においては、『2007年日中国際産業連関表』と『2007年上海市産業連関表』の特徴を検討したうえで、本研究のための『2007年日中地域・国際産業連関表』(仮称)の表章形式の開発などに力点を置いて研究を進めてきた。また、一定の研究成果をあげている。平成25年度における主な研究成果は以下の3点ある。1王在喆・山田光男(2014)「上海・中国・日本の国際産業連関構造に関する一考察ー2007年日中国産産業連関表によるー」『経済学季報』第63巻第4号pp73-118、立正大学経済学会。2王在喆・山田光男(2013)「上海・中国・日本の国際産業連関構造に関する一考察ー2007年日中国際産業連関表によるー」中京大学経済学部2013年度第5回計量分析研究会、2013年12月21日。3王在喆(2013)「2007年日中国際産業連関表を用いた応用分析ー上海・中国・日本の産業連関関係についての一考察」環太平洋産業連関分析学会第24回(2013年度)大会報告論文(中京大学、2013年10月26日)。本研究プロジェクトは3年間を予定している。研究目的は、新しい国際産業連関モデルを援用して現在の日中貿易構造の特徴を明らかにし、上海など特定地域を拠点とする中国に進出した日系企業の生産活動によってもたらされた日中両国経済への影響を分析することとである。平成26年度は本研究の2年目である。本年度においては、日本と中国を2地域に分割した3地域間産業連関表の作成方法についての理論モデルを提示し、そして2007年日中国際産業連関表および中国地域産業連関表をもとに、上海市をはじめとする沿海地域を中心とした8地域をそれぞれ独立した3地域間表(77部門表および41部門表)を推計し、そのうえでそれぞれの地域と日本との産業・地域の連関構造の特徴について実証分析を行った。本年度における主な研究成果は以下の通りである。1、王在喆・山田光男・宮川幸三(2014)「中国東部沿海地区和日本的産業関連ー基於2007年中国地区表以及中日国際投入産出表的実証分析ー」中国投入産出学会2014年研究セミナー報告論文(中国・河北省・承徳市、2014年8月24日)。2、王在喆・宮川幸三・山田光男(2014)「日本と中国沿海地域の産業連関的経済関係についてー国際・地域間産業連関分析モデルによる実証分析ー」、日本地域学会第51回(2014年)年次大会報告論文(麗澤大学、2014年10月4日)。3、山田光男・王在喆・宮川幸三(2015)「中国東部沿海地域と日本との国際産業連関構造ー2007年中国地域産業連関表および日中国際産業連関表による実証分析ー」、『中京大学経済学論叢』26号pp.13-57、中京大学経済学部。本研究の研究目的は,新しい国際産業連関モデルを援用して日中貿易構造の特徴を明らかにし,上海など沿海地域を拠点とする中国に進出した日系企業の生産活動によってもたらされた日中経済への影響を分析することである。平成27年度は本研究の最終年度である。今年度においては,まず,研究目的に合わせて沿海部に進出した日本企業,とりわけ「来料加工」など加工貿易に従事している日系企業が中国の「改革・開放」の下で果たした主な役割について,現地調査の結果を参考に検討を行った。次に,日中両国の統計実務家の意見を参考にしながら,これまで試作した2007年日中国際・地域間産業連関表の精度向上に努めた。さらに,分析モデルを改善したうえで,2007年日中国際・地域間産業連関表を用いて,日系企業が大きく貢献した日中貿易の拡大による両国の経済,特に日本経済への波及効果について,生産・付加価値・雇用の側面から計量分析を行った。

「改革・開放」の過程で沿海部の「来料加工」を中心とする日系企業は雇用創出の面で間接的に中国の重化学工業化に貢献し,日本からの輸入を増加させ,中国からの輸出をも増大させた。経済構造の違いがあったため,上海とその他地域の日本経済に与える影響は異なった。産業部門別の分析結果については,上海との貿易はむしろ商業や運輸サービス業で日本国内の付加価値や雇用を増大させた。一方で,貿易の拡大は日本の「紡績業」衰退の要因ともなっていた。つまり,2007年日中国際・地域間産業連関分析により,日中貿易の拡大が日本全体の労働生産性を上昇させ,産業構造転換を促進するような大きな要因であったと捉えることもできる。平成26年度における当初の計画では、『2007年日中地域・国際産業連関表』(仮称)を試作し、新しい国際産業連関モデルを開発することである。「研究実績の概要」に記した本年度の研究実績からもわかるように、本年度においては日本と中国の2地域に分割した3地域間産業連関表の作成方法についての理論モデルの開発に成功した。また、その理論モデルに基づく国際・地域間産業連関表の表章形式を明らかにし、2007年上海市をはじめとする沿海地域を中心とした8地域をそれぞれ独立した3地域(日本・中国その他地域・上海など8地域))間表を推計することにも成功した。さらに、それぞれの地域と日本との産業・地域の連関構造の特徴について実証分析を行った。「研究実績の概要」には記さなかったが、本年度においては、中国進出した「来料加工」に従事する日系企業の操業パターンについても理論分析を行ったうえで、「来料加工」の日中国際産業連関表における取扱いについて数値シミュレーションを試みた。これは「来料加工」に従事する日系企業を如何にして国際産業連関分析モデルで明示的に取り扱うかに関する研究でもある。したがって、本年度の研究は当初の計画以上に進展があったといえる。中国経済論平成27年度は本研究プロジェクトの最終年度である。平成27年度においては、引き続き統計資料や現地調査を通じて上海など特定地域に進出した「来料加工・進料加工」に従事する日系企業の生産活動の特徴を把握し、その特徴が反映できるような日中国際産業連関表の構築を試みる。その際に平成26年度に開発した3地域間産業連関表のフレームワークの活用を考える。つまり、平成27年度においては、可能な限り日系企業の「来料加工・進料加工」の特性を数量的に取り扱うことができる「日本・中国その他地域・中国特定地域」の国際・地域間産業連関表を構築し、そのうえで日系企業生産活動の経済的影響を実証分析する。また、研究成果を研究叢書や研究論文などによって国内外に広く発信していくことも計画している。当初の予定としては、初年度において『2007年日中国際産業連関表』および2007年の中国・上海など特定地域の地域産業連関表について、産業部門の概念や部門分類などの相違点に力点をおいて検討し、本研究プロジェクトのための『2007年日中地域・国際産業連関表』(仮称)の表章形式についての研究を進めることであった。以上でまとめた初年度の研究実績からも分かるように、初年度において本研究はおおむね順調に進展しており、当初計画通りに初年度の研究目標が達成されている。また、当初の年度計画に予定されていなかった研究成果もあった。それは『2007年日本・中国・上海地域国際産業連関表』(仮称)の試作表に基づいて上海地域の生産変化が日中経済及ぼす産業連関的影響について数量分析を行われたことである。したがって、本年度の研究は当初の計画以上に進展があったことも言える。当初は論文の翻訳料として支出を予定していた。しかし、専門内容や字数などの関係によって請求された翻訳料は「次年度使用額」(84,561円)を超えてしまったので、平成26年度での支出ができなかった。
下肢動脈カルシウムスコアとPAD治療予後に関する前向きコホート研究

冠動脈カルシウムスコアは虚血性心疾患に対するPCI (percutaneous coronary intervention)の治療予後の予測因子となることが多くの研究で明らかになっているが、下肢動脈カルシウムスコアとPAD治療予後の関連は十分検討されていない。PAD患者200症例について、治療前の下肢CT画像から下肢動脈カルシウムスコアを算出し、ステント開存率・下肢切断率などのPAD治療予後(短期中期予後)との関連を前向きコホート研究として検討する。また本学でこれまでに800例の治療前下肢動脈CT画像とPAD治療予後のデータを有しており、後ろ向きコホート研究として関連を検討する。
精巣上体・前立腺の上皮細胞間クロストークの解明と雄性不妊マウスの解析

本研究計画の目的は、男性不妊や前立腺がんの基盤となる精巣上体や前立腺を構成する上皮細胞の発生・分化や細胞間調節(クロストーク)の仕組みを明らかにし、上皮細胞の分化動態や生理機能などの未解決の基礎的な問題を細胞・組織個体レベルで解決することである。平成30年度は、G-タンパク共役型ホルモン受容体LGR4遺伝子の男性生殖器官における発現解析と機能解析を行う目的で、LGR4の発現が著しく低下した変異雄マウス(LGR4Gt/Gt)について詳細な形態学的解析を行った。その結果、成熟期の変異マウスでは精巣上体管の低形成及び精巣上体頭部の管腔拡張を認めた。そこで、幼若期における精巣上体管の伸長・分化と細胞増殖との関連について増殖細胞マーカーを用いて解析したところ、変異マウスの精巣上体管上皮および間質(間葉)を構成する細胞のマーカー陽性率が顕著に減少していることを見出した。この結果から、精巣上体の低形成は分化途上の構成細胞の増殖低下に起因することが示唆された。また、男性生殖管の水分吸収に関与するエストロゲン受容体の発現パターンを調べた結果、野生型マウスでは出生時成熟期に強い発現を認めた。これに対し、変異マウスでは出生時にすでに発現低下しており、その後さらに減弱し消失することを見出した。この結果から、LGR4の減少が精巣分泌液の吸収を制御する重要な因子の発現に影響を与え、変異マウスで観察された精巣上体管の拡張は、精巣分泌液の再吸収阻害に起因することが示唆された。一定の研究成果を挙げ、学会発表を行うことができた。目標達成に向けて当初の計画を遂行する。男性不妊や前立腺がんの患者数は年々増加しており、その発症機序の解明が急務となっている。しかし、その基盤となる精巣上体や前立腺を構成する上皮細胞の発生・分化や細胞間調節(クロストーク)の仕組みは分かっていない。そこで本研究では、男性生殖器官で発現する細胞表面受容体や細胞間シグナル分子の分布・局在について主に免疫組織学的解析を行う。ならびに遺伝子改変・雄性不妊マウスを用いて、上皮細胞の分化動態や生理機能などの未解決の基礎的な問題を細胞・組織個体レベルで解決することを目的とする。平成29年度は、G-タンパク共役型ホルモン受容体LGR4遺伝子の男性生殖器官における発現解析と機能解析を行う目的で、Hoshii et al.(2007)が遺伝子トラップ法を用いて作製したLGR4の発現が著しく低下したマウスの凍結胚を融解後、レシピエントマウスの卵管内に移植して個体復元を行った。作出された変異雄マウスを解析し、以下の結果を得た。1)LGR4遺伝子の発現は、ヘテロ接合体(LGR4+/Gt)の3週齢雄マウスにおけるβ-geo発現組織をX-gal染色により検出した。その結果、陽性反応は精巣、精巣上体、前立腺などに認めた。今後は、各器官の分化段階における組織レベルでの遺伝子発現解析と特異抗体を用いたタンパク発現解析を行う予定である。2)ホモ接合体(LGR4Gt/Gt)の成熟マウスでは、精細管や精巣上体管の低形成及び管腔の拡張等を認めた。今後さらに詳細な表現型解析を行い、LGR4変異マウスの形態学的異常を明らかにしていく計画である。研究協力者である大学院生1名が中途退学したため。目標達成に向けて、当初の計画を遂行する。理由:旅費その他を他財源で補填したため。使用計画:繰越金は翌年度分と合わせて効率的に使用する。(理由)旅費その他を他財源で補填したため。(使用計画)繰越金は次年度分と合わせて効率的に使用する。