hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
虚血性心疾患患者における冠動脈内血流の検討

ドップラ-カテ-テル血流速計を用いて20例で冠血流速度波の検討を行なった。まず左前下行枝に狭窄を有する虚血性心疾患患者10例で冠血流を測定した。更に、ニトログリセリンあるいはジピリダモ-ルを静注しその冠動脈予備能を測定し、5例の左前下行枝に狭窄を有しない患者と比較検討した。その結果、安静時には、両群間に差を認めないが、ニトログリセリン負荷時は、血流速の増加が対照群に比較して少なく、波形で囲まれた時間積分値も同様な傾向が見られた。収縮期と拡張期の最高流速比は、負荷の前後で余り変化が認められなかったが、全時間積分値に対する拡張期時間積分値比は、虚血性心疾患患者群で負荷後に低下した。ジピリダモ-ル負荷では、両群の症例で血流速の増加が見られたものの症例数が少なく、一定の傾向は得られなかった。1例においてPTCAの前後で血流を測定したが、PTCA後に血流速と時間積分値の増加とパタ-ンの変化が認められた。この他、右冠動脈、左回旋枝の冠血流測定を9例にも行なった。以上のことより虚血性心疾患患者において冠動脈予備能が低下していることが考えられ、胸痛等の臨床的な虚血性症状の出現に深い関与があることが示唆された。虚血性心疾患患者の安静時及び運動負荷時の冠血流パタ-ンを検討した。対象は左冠動脈前下行枝Seg7に有意の狭窄を有する1枝病変患者。心臓カテ-テル終了後にミラ-社製カテ先ドプラ血流計をSeg6まで挿入し安静時の冠血流を測定。続いて自転車エルゴメ-タ-による運動負荷をSymptom Limitedで行い直後に同部位での血流パタ-ンを測定。心拍数、収縮期血圧、拡張期血圧、肺動脈契入圧、心拍出量についても負荷前後で測定した。さらに正常冠動脈の対照群10例についても同様に測定し比較検討した。(結果)現在までに上記プロトコ-ルを終了した虚血性心疾患例は4例であり以下の結果を得た。負荷により心拍数の増加、収縮期及び拡張期血圧の上昇、脈圧の増大、肺動脈契入圧の上昇、心拍出量の増大を認めた。冠血流パタ-ンでは正常者に比べ虚血性心疾患患者で全血流に占める収縮期血流の割合(S/S+D比)が大であり狭窄が強い程大なる傾向であった。運動負荷によりS/S+D比は増大傾向であった。以上の結果は尚症例数が少なく統計学的な解析までには至っていない。今回運動負荷としてエルゴメ-タ-による方法を試みたが本法では運動中のカテ先の動きや10数分間という測定時間の問題もあり施行した10例中実際に測定できたのは4例のみであった。現在従って負荷法として薬物負荷による方法へ変更し試行中である。さらに今後は経皮的冠動脈形成術前後での冠血流パタ-ンの変化も検討予定である。虚血性心疾患患者で,カテ先ドプラ血流計を用いて、冠動脈の血流波について検討を行った。対象としては、冠動脈造影にて左前下行枝のSeg7に有意の狭窄を有する一枝病変患者とした。心臓カテ-テル及び冠動脈造影を終了後にミラ-社製カテ先ドプラ血流計をSeg6まで挿入し,安静時のこの部の冠血流波を記録した。続いて、臥位のまっ足こぎのエルロメ-タ-でsymptom limitedで行い,この時の同部の冠動脈血流波の変化を記録した。また,この際,心拍数,収縮期血圧,拡張期血圧,肺動脈楔入圧,心拍出量について,負荷前後で測定した。さらに、コントロ-ルとして,正常冠動脈例7例についても同様の測定を行った。(結果)現在迄,上記のプトコ-ルにより測定し得た虚血性心疾患例は8例であり,以下の結果を得た。

運動負荷により心拍数は増加し,収縮期及び拡張期血圧は上昇,脈圧の増大,肺動脈楔入圧の上昇,心拍出量の増大がみられた。冠血流波形は,正常例では収縮期の小さなS波と拡張期の大きなD波がみられた。各症例で収縮期のS波の下の面積Sと拡張期のD波の下の面積Dをプラニメトリウムで測定し,全血流に占める収縮期血流の割合(S/S+D)を求めた。虚血性心疾患患者では,S/S+D比は,正常者に比べ大であり,狭窄が強い程,大なる傾向がみられた。運動負荷後の変化については,運動中はカテ先ドプラ血流計の先端が動いたり,血管壁に触れたりして,現在の所一定した良好な記録例が少ないため,結論を言えるデ-タは得ていない。この運動負荷時の記録については,現在測定方法その他について考慮し,改良中である。
先天性心疾患(CATCH22,ウイリアムズ症候群)の原因遺伝子の解析

CATCH22は,染色体22q11.2領域(2Mb)の欠失による複合隣接遺伝子症候群であると言われている.本研究の目的は,表現型と欠失領域の違いを欠失領域における多数のコスミドプローブを用い,詳細に検討することにより,表現型にそれぞれ対応する原因遺伝子を発見する一助とすることである.我々は,Oncor社N25DGCRプローブを用いたFISH法にて欠失を確認した散発性円錐動脈幹異常顔貌症候群(CAFS)126例,家族性CAFS17家系,散発性DiGorge症候群/奇形(DGA)18例について,2Mbの欠失領域内に存在する平衡転座の切断点(ADU)近傍におけるマイクロサテライト多型およびコスミドプローブによるFISH法にて,責任領域内の欠失の有無の検討を行った.その結果,CAFS 4例,DGA 1例の5例ではこの部分の欠失が認められなかった.これらの症例について,さらに欠失領域内の13種類のプローブを用いてFISH法を行い,欠失領域と表現型との関係を検討した.その結果,22q11.2欠失症候群の責任領域は,2Mbより短い(<0.5Mb)ことが判明した.またこれら5例のうち欠失領域がより短い2例は知能発達遅延が認められなかった.22q11.2領域に欠失を認めたCAFSおよびDGAは全例,円錐動脈幹異常顔貌を伴っていた.現在,欠失領域内に存在する遺伝子の塩基配列の決定を行うため,BACクローンのスクリーニングを行っている.Williams症候群(WS)は,妖精様顔貌,精神発達遅延,心疾患(大動脈弁上狭窄,末梢肺動脈狭窄)などを特徴とし,染色体7番11q23にあるエラスチン遺伝子を含む辺縁遺伝子の欠失(モノソミ-)により生ずる.我々は,Oncor社WSCRプローブを用いFISH法を行い,その結果欠失の認められなかったWSの1例と家族性大動脈弁上狭窄11例に対し,エラスチン遺伝子およびその近傍の欠失の有無を検索するため,UCLAのKorenberg博士よりもらいうけた3つのプローブ(1148G3:エラスチン遺伝子を含む100Kb,363B4:エラスチンよりテロメア約100Kb,PAC117G:エラスチンの隣接遺伝子であるLIMK1遺伝子の全長を含む)によりFISH法を施行した.結果はいずれの症例でもこれらのプローブでは欠失は認められなかった.このため現在エラスチン遺伝子の点突然変異と微少欠失の検索を行っている.またWSの1例においてWSCRプローブにて染色体1番と7番の相互転座を認めた.さらにWSのうち顔貌が典型的でなく精神発達遅延もごく程度な症例では,Korenberg博士よりの1184P84(エラスチン隣接遺伝子を含む)プローブにより欠失の範囲が他より小さいことが確認された.CATCH22は,染色体22q11.2領域(2Mb)の欠失による複合隣接遺伝子症候群であると言われている.本研究の目的は,表現型と欠失領域の違いを欠失領域における多数のコスミドプローブを用い,詳細に検討することにより,表現型にそれぞれ対応する原因遺伝子を発見する一助とすることである.我々は,Oncor社N25DGCRプローブを用いたFISH法にて欠失を確認した散発性円錐動脈幹異常顔貌症候群(CAFS)126例,家族性CAFS17家系,散発性DiGorge症候群/奇形(DGA)18例について,2Mbの欠失領域内に存在する平衡転座の切断点(ADU)近傍におけるマイクロサテライト多型およびコスミドプローブによるFISH法にて,責任領域内の欠失の有無の検討を行った.その結果,CAFS 4例,DGA 1例の5例ではこの部分の欠失が認められなかった.これらの症例について,さらに欠失領域内の13種類のプローブを用いてFISH法を行い,欠失領域と表現型との関係を検討した.その結果,22q11.2欠失症候群の責任領域は,2Mbより短い(<0.5Mb)ことが判明した.またこれら5例のうち欠失領域がより短い2例は知能発達遅延が認められなかった.22q11.2領域に欠失を認めたCAFSおよびDGAは全例,円錐動脈幹異常顔貌を伴っていた.現在,欠失領域内に存在する遺伝子の塩基配列の決定を行うため,BACクローンのスクリーニングを行っている.Williams症候群(WS)は,妖精様顔貌,精神発達遅延,心疾患(大動脈弁上狭窄,末梢肺動脈狭窄)などを特徴とし,染色体7番11q23にあるエラスチン遺伝子を含む辺縁遺伝子の欠失(モノソミ-)により生ずる.我々は,Oncor社WSCRプローブを用いFISH法を行い,その結果欠失の認められなかったWSの1例と家族性大動脈弁上狭窄11例に対し,エラスチン遺伝子およびその近傍の欠失の有無を検索するため,UCLAのKorenberg博士よりもらいうけた3つのプローブ(1148G3:エラスチン遺伝子を含む100Kb,363B4:エラスチンよりテロメア約100Kb,PAC117G:エラスチンの隣接遺伝子であるLIMK1遺伝子の全長を含む)によりFISH法を施行した.結果はいずれの症例でもこれらのプローブでは欠失は認められなかった.

このため現在エラスチン遺伝子の点突然変異と微少欠失の検索を行っている.またWSの1例においてWSCRプローブにて染色体1番と7番の相互転座を認めた.さらにWSのうち顔貌が典型的でなく精神発達遅延もごく程度な症例では,Korenberg博士よりの1184P84(エラスチン隣接遺伝子を含む)プローブにより欠失の範囲が他より小さいことが確認された.
消化器癌の浸潤・増殖に対する生体の低免疫応答性の実態解析とその解消

1)胃癌の原発巣、転移巣(癌性胸・腹水)にCostimulatory分子[B7-1(CD80),B7-2(CD86)]発現の程度をFACS解析を行った。その結果、B7-1,B7-2分子共に正常胃粘膜、癌の原発巣にはconstitutivelyに発現しているが、転移巣ではB7-2分子は良く発現しているが、B7-1分子はほとんど欠如している事が判明した。この事実は癌の浸潤・増殖に対する低免疫応答性の一因となっていると想定された。2)消化器癌の原発巣、転移巣(癌性胸・腹水)にCD44splicing variants,v6,v9分子の発現に付き検討を加えた。その結果、CD44v6は胃癌などの腺癌には発現しておらず、食道癌などの扁平上皮癌に発現が認められた。同様に培養細胞株でも胃癌では発現しておらず、食道癌細胞株のみに発現していた。CD44v9分子は胃癌、食道癌共に発現しており、特に転移巣にてoverexpressionしていた。食道癌に発現が認められるCD44v6分子は放射線治療により有意に減少したが、CD44v9分子は変化せずその機能の面から注目される。3)消化器癌の原発巣、転移巣(癌性胸・腹水)において、アポトーシス関連分子であるFasR(CD95)およびFasL(CD95L)分子の発現につき癌細胞、及び浸潤リンパ球(TIL)上の発現を検討した。その結果、FasRは正常胃粘膜上皮、胃癌原発巣、転移巣の癌細胞上においてほとんどその発現を認められなかった。しかしながら、FasLは正常胃粘膜上皮、胃癌原発巣の癌細胞にconstitutivelyに発現しており、特に転移巣の癌細胞上には有意に高い陽性細胞比率が認められた。TILのFasRおよびFasL発現の検索では胃癌原発巣ではほとんど両分子とも発現が認められなかったが、転移巣(癌性胸・腹水)のTILではFasR,FasLともに49.5%,26.2%と高い陽性細胞比率を示した。さらにTunel法にてTILのアポトーシス細胞数を算定した。その結果、転移巣(癌性胸・腹水)のTILでは原発巣のそれに比べ約6倍と高く、転移巣の癌細胞に強く発現されているFasL分子はTILをcounterattackしtumor immune evasionに有利に働いているものと考えられた。2.進行胃癌患者の癌細胞から癌細胞増殖因子EGF,TGF α産生され、その結果癌細胞表面膜にはEGFレセプター(EGFR)が高頻度で発現している。特に、癌性胸・腹水より得た転移癌細胞には強くoverexpressされていることが判明した。食道癌細胞に発現しているEGFR分子は放射線治療によりその発現が有意に減少した。3.消化器癌の原発巣、転移巣にcostimulatory分子[B7-1(CD80),B7-2(CD86)]、CD44v6,CD44v9分子発現の程度をFACS解析にておこなった。その結果、B7-1,B7-2分子共に正常胃粘膜、食道粘膜細胞、及び癌原発巣にはconstitutivelyに発現しているが、転移巣(癌性胸・腹水)ではB7-2の発現は認めるものの、B7-1分子は欠如していることが判明した。4.消化器癌の原発巣、転移巣にCD44 splice variants,v6,v9分子の発現につき検討を加えた。その結果、CD44v6分子は胃癌などの腺癌には発現しておらず、食道癌などの扁平上皮癌に発現が認められた。食道癌に発現が認められるCD44v6分子は放射線治療により有意に減少したが、CD44v9分子は変化せず、その機能の面から注目される。3)消化器癌の原発巣、転移巣(癌性胸・腹水)において、アポトーシス関連分子であるFasR(CD95)およびFasL(CD95L)

分子の発現につき癌細胞、及び浸潤リンパ球(TIL)上の発現を検討した。その結果、FasRは正常胃粘膜上皮、胃癌原発巣、転移巣の癌細胞上においてほとんどその発現を認められなかった。しかしながら、FasLは正常胃粘膜上皮、胃癌原発巣の癌細胞にconstitutivelyに発現しており、特に転移巣の癌細胞上には有意に高い陽性細胞比率が認められた。TILのFasRおよびFasL発現の検索では胃癌原発巣ではほとんど両分子とも発現が認められなかったが、転移巣(癌性胸・腹水)のTILではFasR,FasLともに49.5%,26.2%と高い陽性細胞比率を示した。さらにTunel法にてTILのアポトーシス細胞数を算定した。その結果、転移巣(癌性胸・腹水)のTILでは原発巣のそれに比べ約6倍と高く、転移巣の癌細胞に強く発現されているFasL分子はTILをcounterattackしtumor immune evasionに有利に働いているものと考えられた。1)胃癌の原発巣、転移巣(癌性胸・腹水)にCostimulatory分子[B7-1(CD80),B7-2(CD86)]発現の程度をFACS解析を行った。その結果、B7-1,B7-2分子共に正常胃粘膜、癌の原発巣にはconstitutivelyに発現しているが、転移巣ではB7-2分子は良く発現しているが、B7-1分子はほとんど欠如している事が判明した。この事実は癌の浸潤・増殖に対する低免疫応答性の一因となっていると想定された。2)消化器癌の原発巣、転移巣(癌性胸・腹水)にCD44splicing variants,v6,v9分子の発現に付き検討を加えた。その結果、CD44v6は胃癌などの腺癌には発現しておらず、食道癌などの扁平上皮癌に発現が認められた。同様に培養細胞株でも胃癌では発現しておらず、食道癌細胞株のみに発現していた。CD44v9分子は胃癌、食道癌共に発現しており、特に転移巣にてoverexpressionしていた。食道癌に発現が認められるCD44v6分子は放射線治療により有意に減少したが、CD44v9分子は変化せずその機能の面から注目される。3)消化器癌の原発巣、転移巣(癌性胸・腹水)において、アポトーシス関連分子であるFasR(CD95)およびFasL(CD95L)分子の発現につき癌細胞、及び浸潤リンパ球(TIL)上の発現を検討した。その結果、転移巣(癌性胸・腹水)のTILでは原発巣のそれに比べ4.6倍(11.2%陽性細胞比率)と高く、転移巣の癌細胞に強く発現されているFasL分子はTILをcounterattackしtumor immune evasionに有利に働いているものと考えられた。
岩石風化における亀裂ネットワーク変化のマルチフラクタル解析による評価

本年度は、平成15年度に採取した稲田花崗岩と黒石山斑糲岩の風化試料を対象に、共焦点レーザー走査型顕微鏡を使用した蛍光法で亀裂画像を撮影しマルチフラクタル解析を行った。また、新鮮な稲田花崗岩と黒石山斑糲岩を硫酸溶液あるいは熱で処理し、人工的に風化させることで発生した亀裂の観察を行った。マルチフラクタル解析では、各解析画像に含まれるピクセルの輝度値の和を一定とする規格化処理を行うことで風化に伴う輝度値の変化を一般化次元スペクトルに反映させることが可能となり、風化程度と一般化次元スペクトルの関係が改善された。稲田花崗岩と黒石山斑糲岩の両方で風化が進行した試料ほど規格化一般化次元が減少し、不連続構造が不均質となっていることが明らかとなった。同程度の不連続構造の不均質化が生じた場合、一軸圧縮強度の低下は黒石山斑糲岩よりも稲田花崗岩で大きい。稲田花崗岩は黒石山斑糲岩と比較して風化耐久性が高いと考えられている鉱物を多く含むにもかかわらず、このような風化特性を示すのは組成および組織と密接に関連して発達する不連続構造の特徴によるものであることを明らかにした。マルチフラクタル解析は、有効間隙率のような量的指標では特徴づけることができない構造の不均質さに関する特徴づけが可能で、有効な不連続構造の定量化手法であることを示した。本研究では最も基本的な物性値の一つである一軸圧縮強度と一般化次元スペクトルの関係を明らかにしたが、不均質さの影響が大きい特性に対する不連続構造の影響を考慮する場合などに、マルチフラクタル解析で得られる一般化次元スペクトルはさらに有効な指標となりうることが示唆された。風化した斑糲岩と花崗岩をそれぞれ福島県小野町と茨城県笠間市から採取した。試料数は10個ずつで、新鮮なものから風化が進行したものまでできるだけ幅広い風化程度の試料をサンプリングした。斑糲岩試料は角閃石斑糲岩で、新鮮な状態でも構成鉱物の緑泥石化が顕著に見られることが特徴的である。花崗岩試料はいわゆる稲田花崗岩で、黒雲母花崗岩である。採取した試料の空隙に関する物性値を得るため、浸水法による比重・有効間隙率測定を行った。斑糲岩試料では肉眼的に最も新鮮なものから風化が進んだものまで見かけの強制乾燥状態比重で3.062.83、有効間隙率で0.57%4.45%の値を示す。花崗岩では同様に見かけ比重は2.622.55、有効間隙率は0.77%3.00%という結果が得られた。風化による岩石試料の鉱物学的・化学的変化のキャラクタリゼーションのために、以下のような検討を行っている。薄片と研磨薄片の偏光顕微鏡観察から岩石組織と風化による影響の記載を行った。また、全岩不定方位試料と各種処理(未処理、エチレングリコール処理、100°C・400°C加熱処理、Mg-グリセロール処理)を施した定方位試料のX線回折分析から詳細な鉱物組成を得た。さらに、X線蛍光分析で化学組成を求め、特に大型試料については現在EPMAによる組成分析を行っている。風化した試料では粘土鉱物の生成が認められ、化学組成のデータを基に化学的風化指標(WIなど)を算出した。風化過程で生じる亀裂パターンの抽出と解析のために、大型試料の蛍光剤入り薄片を作成した。蛍光剤入り薄片は試料の異方性を考慮できるように直交方向で各試料2枚ずつ作成した。また、亀裂抽出は紫外線の照射で空隙部分の蛍光剤を発光させる蛍光法で行っている。購入した画像解析アプリケーションへのマルチフラクタル解析マクロの移植を現在進めており、完成し次第解析に移る予定である。昨年度採取した風化花崗岩と風化斑糲岩を検討試料として亀裂パターンのマルチフラクタル解析を行うとともに、偏光顕微鏡を用いた岩石組織の記載、EPMAによる鉱物変質評価とモード測定を行った。さらに、一軸圧縮試験、弾性波速度測定を行った。また、北海道大成町より花崗閃緑岩を採取し、現在花崗岩試料、斑糲岩試料と同様の分析を進めている。花崗岩試料は主に石英、Na斜長石、カリ長石、黒雲母からなり、わずかな角閃石と緑泥石を含む。蛍光剤入り薄片の顕微鏡観察では粒界亀裂や、長石および石英中の粒内亀裂、黒雲母の劈開などが認められ、風化の進行に伴って長石粒子内部のマイクロクラックが著しく増加する。一方、斑糲岩試料はCa斜長石、緑色・褐色普通角閃石、カミングトン角閃石、黒雲母、磁鉄鉱、イルメナイト、FeMg緑泥石およびFe緑泥石からなり、花崗岩試料と同様、風化による不連続構造の発生は斜長石粒子で顕著である。マルチフラクタル解析では、蛍光顕微鏡を用いて蛍光法で亀裂画像を撮影し、各薄片それぞれ25枚ずつ撮影した亀裂画像を貼り合わせた画像の解析を行った。これら解析用画像は各薄片を代表する仮想的な亀裂パターンと考えることができる。また、各画像の並べ方が解析結果に影響を与えないように解析用マクロのボックスサイズが設定されている。

マルチフラクタル解析で得られた一般化次元スペクトルでは、強度の大きい試料の方がq<0で大きく、q>0で小さな一般化次元を示したり、q<0およびq>0の領域で一般化次元スペクトルの大小関係が逆転する例が認められた。これらは解析用画像が亀裂パターン以外の情報(亀裂部分以外に面状に散乱する蛍光や薄片深部で発生した蛍光など)を含んでいることや亀裂解析で評価しにくい弱構造(例えば癒合した亀裂)の存在などに起因していると考えられ、今後は焦点以外から発生する蛍光を除去できる共焦点レーザー顕微鏡を使用して亀裂画像の撮影を行う。本年度は、平成15年度に採取した稲田花崗岩と黒石山斑糲岩の風化試料を対象に、共焦点レーザー走査型顕微鏡を使用した蛍光法で亀裂画像を撮影しマルチフラクタル解析を行った。また、新鮮な稲田花崗岩と黒石山斑糲岩を硫酸溶液あるいは熱で処理し、人工的に風化させることで発生した亀裂の観察を行った。マルチフラクタル解析では、各解析画像に含まれるピクセルの輝度値の和を一定とする規格化処理を行うことで風化に伴う輝度値の変化を一般化次元スペクトルに反映させることが可能となり、風化程度と一般化次元スペクトルの関係が改善された。稲田花崗岩と黒石山斑糲岩の両方で風化が進行した試料ほど規格化一般化次元が減少し、不連続構造が不均質となっていることが明らかとなった。同程度の不連続構造の不均質化が生じた場合、一軸圧縮強度の低下は黒石山斑糲岩よりも稲田花崗岩で大きい。稲田花崗岩は黒石山斑糲岩と比較して風化耐久性が高いと考えられている鉱物を多く含むにもかかわらず、このような風化特性を示すのは組成および組織と密接に関連して発達する不連続構造の特徴によるものであることを明らかにした。マルチフラクタル解析は、有効間隙率のような量的指標では特徴づけることができない構造の不均質さに関する特徴づけが可能で、有効な不連続構造の定量化手法であることを示した。本研究では最も基本的な物性値の一つである一軸圧縮強度と一般化次元スペクトルの関係を明らかにしたが、不均質さの影響が大きい特性に対する不連続構造の影響を考慮する場合などに、マルチフラクタル解析で得られる一般化次元スペクトルはさらに有効な指標となりうることが示唆された。
敗血症治療に向けた自然免疫系のTLR受容体のタンパク質のX線構造解析

自然免疫系のMD-2タンパク質は細菌のリポ多糖(LPS)を認識し,細胞表面の受容体のToll-Like Receptor 4(TLR4)に認識情報を伝達する共受容体である。細菌感染による重篤な敗血症ショックは,このLPSへの過度の応答により惹起される。研究では,これらタンパク質によるLPS応答の構造的な要因をX線結晶構造解析により明らかにするため,MD-2の発現,精製,性状解析,結晶化とX線解析などを行った。ヒトとマウスのMD-2について,大量発現,精製,結晶化を行った。ヒトMD-2の結晶は双晶または混晶の兆候を示したが,単結晶を得てX線回折データを測定した。その結果,ヒトMD-2単体およびリピッドIVaとMD-2の複合体の結晶について,高分解能での三次元構造の解析に成功した。リピッドIVaは,エンドトキシンであるLPSの骨格部を成すリピッドAの前駆体であり,ヒトではアンタゴニスト,マウスではアゴニストとして働く。MD-2の疎水性ポケットに結合しているリピッドIVa複合体の三次元構造から,エンドトキシンの認識に関する詳細な構造知見を得た。また,ヒトMD-2単体の結晶では,3分子脂肪酸様の分子を見出すことができた。エンドトキシンのアゴニストは,MD-2とTLR4の受容体系を活性化することから,ヒトTLR4の細胞外ドメインの大量発現系の構築に向けて,昆虫細胞由来の宿主などを用いて研究を進めた。また,リピッドAなどのアンタゴニストとヒトMD-2との複合体の共結晶化と,結晶のX線回折法による評価も行った。研究により得た三次元構造の知見は,LPS応答を遮断する敗血症治療薬の開発に有効な構造知見をもたらすと期待される。細菌感染による敗血症ショックは,自然免疫系のMD-2タンパク質が細菌のリポ多糖(LPS)を認識し,細胞表面の受容体Toll-Like-Receptor(TLR)4に認識情報を伝達することにより惹起される。研究では,これらタンパク質によるLPS認識応答の構造的な要因などをX線結晶構造解析によって明らかにするため,これらタンパク質の発現,性状解析と結晶化を行った。ヒトMD-2については,メタノール資化性酵母Pichia pastorisにより大量のタンパク質を発現でき,付加されているヘテロなN結合型糖鎖を均一に短鎖化し,高純度に精製した。精製試料のゲル濾過クロマトグラフィーでは,排除限界付近に溶出する高分子量画分が大部分で,単量体に相当する溶出画分は1%程度と少なかった。マウスMD-2についても発現させたが,その性状はヒトのもと同じであった。単量体画分は,LPSやリピッドAなどのリガンドと結合すること,また,LPSを認識してTLR-4を細胞レベルで活性化することなどを確認した。ヒト試料の結晶化を重点的に進め,十分なX線回折能を有する単結晶を得ることができた。重原子同型置換結晶の調製・探索を経て,結晶のX線回折強度データを収集した。ヒトTLR-4については,細胞外ドメインの全長(約610アミノ酸残基)の発現を目指した。細胞内発現と細胞外分泌発現のためのコンストラクトを各種作製したが,P.pastorisでは発現は認められなかった。そこで,MD-2と相互作用すると考えられるアミノ末端側の領域を発現させることとした。その結果,アミノ末端側54番目の残基までと203番目までの残基までのポリペプチド鎖を発現させることができた。今後は,異なる真核細胞発現系での全長体発現を試行すると伴に,これらアミノ末端側領域タンパク質の性状解析を行う計画である。

自然免疫系のMD-2タンパク質は細菌のリポ多糖(LPS)を認識し,細胞表面の受容体Toll-Like-Receptor 4(TLR4)に認識情報を伝達する。細菌感染による重篤な敗血症ショックは,このLPS認識の過度の応答により惹起される。研究では,これらタンパク質によるLPS認識応答の構造的な要因などをX線結晶構造解析によって明らかにするため,これらタンパク質の発現,性状解析と結晶化,X線解析を進めた。ヒトMD-2については,メタノール資化性酵母に大量のタンパク質を発現でき,付加されているN結合型糖鎖を均一に短鎖化し,高純度に精製した単量体画分から結晶を得た。先に得られた結晶は双晶の兆候を示したが,最終的に単結晶を得て,X線回折データを測定した。エンドトキシンであるLPSの骨格部はリピッドAであり,リピッドAとその前駆体リピッドIVaなど,各種リガンドとMD-2との結合を調べた。その結果,アンタゴニストであるリピッドIvaとMD-2との複合体の共結晶を得ることができた。MD-2のみのネーティブ結晶の構造を多重重原子同型置換法で,リピッドIVa複合体の結晶構造を同型置換法で,それぞれ分解能2.0Åと2.2Åで解析した。その結果,MD-2は大きなポケット状の疎水性cavityを持つこと,cavityにはネーティブ体ではミリスチン酸が,複合体ではリピッドIVaが結合していることが明らかになった。これら知見は,LPS応答を遮断する敗血症治療薬の開発に有効な構造知見をもたらすものである。ヒトTLR-4については,新たに,細胞外ドメインの全長(約610アミノ酸残基)を昆虫細胞で発現させることとし,大量発現のための系の構築を行った。蛋白質の発現を確認できたので,次年度に精製,結晶化とX線解析を進める計画である。自然免疫系のMD-2タンパク質は細菌のリポ多糖(LPS)を認識し,細胞表面の受容体のToLL-LikeReceptor4(TLR4)に認識情報を伝達する共受容体である。細菌感染による重篤な敗血症ショックは,このLPSへの過度の応答により惹起される。研究では,これらタンパク質によるLPS応答の構造的な要因をX線結晶構造解析により明らかにするため,MD-2の性状解析,結晶化とX線解析などを行った。ヒトMD-2については,得られた結晶は双晶または混晶の兆候を示した。しかし,試料調製を工夫することにより単結晶を得て,X線回折データを測定した。その結果,MD-2単体およびリピッドIVaとMD-2の複合体の結晶について,高分解能での三次元構造の解析に成功した。リピッドIVaは,エンドトキシンであるLPSの骨格部を成すリピッドAの前駆体であり,ヒトではアンタゴニスト,マウスではアゴニストとして働く。リピッドIVa複合体の三次元構造から,エンドトキシンの認識に関する詳細な構造知見を得た。エンドトキシンのアゴニストは,MD-2とTLR4の受容体系を活性化することから,ヒトTLR4の細胞外ドメインの大量発現系の構築に向けて,昆虫細胞由来の宿主などを用いて研究を進めた。また,リピッドAなどのアンタゴニストは受容体の構造またはその会合状態を変化させることが想定されたことから,MD-2と各種アンタゴニストとの共結晶化と,それら結晶のX線回折法による評価も行った。
世代間交流を促す「祖父母と孫の回想法」の開発-祖父母の自己語りと自我同一性の関連

本研究の目的は、(1)大学生の孫とその祖父母の世代間交流がどのように行われているのかを把握し、(2)祖父母と孫の世代間交流を促す回想法の開発を試み、その効果を検討することである。(1)祖父母と孫の世代間交流については、大学生を対象とした質問紙調査(N=278)を行い、世代間交流と自我同一性、基本的信頼感の関連を検討した。その結果、世代間交流尺度では、5つの因子(安全基地、干渉・期待への負担感、成長の見守り、時間的展望促進、世代継承性の確認)を抽出し、尺度の有用性が確認された。大学生の祖父母との世代間交流は「成長の見守り」「時間的展望促進」「世代継承性の確認」の得点が高く、肯定的であるが間接的な交流が多い。また、自我同一性・基本的信頼感との関連では、「干渉・期待への負担感」は弱い負の相関が認められ、「成長の見守り」では弱い正の相関が認められた。(2)「祖父母と孫の回想法」については、研究協力者9組18名(祖父母9名と孫である大学生9名)に「祖父母の孫の回想法」を行ってもらい、その効果を検討した。その結果、回想法を行うことで心身の不調を訴える協力者はなかった。祖父母のPGCモラール・スケール、孫の自我同一性尺度では、実施前後の得点に有意差は認められなかった。しかし、祖父母のバウムテストと自由記述、孫の自由記述の分析からは、回想法が、祖父母にとっては、自尊心の向上、ライフレビューの機会、世代継承の感覚などと関連し、孫にとっては、親密性の感覚、ライフレビューの機会、時間的展望などと関連する可能性が示された。急速な高齢化にともない、高齢者の心理を理解し、高齢者の生活の質を高める方法を開発することは急務の課題である。一方、青年期の問題として、自我同一性をめぐる問題が指摘されている。これらの高齢者・青年期の問題について、祖父母と孫の交流が時間的展望を促すという知見もあり、祖父母と孫の世代間交流は両者の発達を促進する可能性が考えられる。そこで、本研究では祖父母と孫の関係に注目し、高齢者の心理的援助として注目されている回想法(Butler,1963)を用いて、祖父母と孫の世代間交流を促す回想法の開発を試みる。また、祖父母が孫に人生を語る世代間交流にはどのような意義があるのかを検討する。まず、今年度は孫である大学生を対象として、祖父母と孫の世代間交流の把握する尺度を作成し、世代間交流の様相を把握し、世代間交流と自我同一性・基本的信頼感の関連を検討した。質問紙の配布は313名、回収は289名であり、278名分を分析した。その結果、5因子(安全基地、干渉・期待への負担感、成長の見守り、時間的展望促進、世代継承性の確認)からなる世代間交流尺度の有用性が確認された。また、自我同一性・基本的信頼感との関連では、「干渉・期待への負担感」は負の相関が認められ、「成長の見守り」では正の相関が認められた。これらのことから、否定的な交流を含めた世代間交流尺度の意義が確認された。また、わが国における回想法の動向についてまとめ、祖父母と孫の回想法の位置づけを検討した。

これらの高齢者・青年期の問題について、祖父母と孫の交流が時間的展望を促すという知見もあり、祖父母と孫の世代間交流は両者の発達を促進する可能性が考えられる。そこで、本研究では祖父母と孫の関係に注目し、高齢者の心理的援助として注目されている回想法(Butler,1963)を用いて、祖父母と孫の世代間交流を促す回想法の開発を試みる。また、祖父母が孫に人生を語る世代間交流にはどのような意義があるのかを検討する。2年目である今年度は、(1)実際に「祖父母と孫の回想法」について、大学生用に、「祖父母の語りを聞くためのマニュアル」を作り、研究協力者(孫である大学生)に、そのマニュアルを用いるための説明を行い、マニュアル内容について検討を行った。マニュアルを用いた回想法を実施することに、特に、問題はなかった。(2)マニュアルを用いて、「祖父母と孫の回想法」を研究協力者18名(祖父母9名と孫である大学生9名)に行ってもらい、その効果を検討した。その結果、回想法を行うことで心身の不調を訴える協力者はなかったが、祖父母のPGCモラール・スケール、孫の自我同一性尺度に実施前後の差は認められなかった。現在はバウムテストや自由記述欄の質的分析を行っている。急速な高齢化にともない、高齢者の心理を理解し、高齢者の生活の質を高める方法を開発することは急務の課題である。一方、青年期の問題として、自我同一性をめぐる問題が指摘されている。そこで、本研究では祖父母と孫の関係に注目し、高齢者の心理的援助として注目されている回想法(Butler, 1963)を用いて、祖父母と孫の世代間交流を促す回想法の開発を試みた。また、祖父母が孫に人生を語る世代間交流にはどのような意義があるのかを検討した。最終年度である今年度は、17年度に行った質問紙調査と18年度に行った効果研究の結果について、質的な検討をおこなった。具体的には、(1)「祖父母と孫の世代間交流と自我同一性・基本的信頼感」の調査について、世代間交流のあり方と孫である大学生が抱く祖父母イメージがどのように関連するのかを質的に分析した。その結果、自我同一性や基本的信頼感の高低と祖父母イメージには関連は認められないが、世代間交流が密な場合は祖父母イメージが肯定的であった。(2)「祖父母と孫の回想法」を研究協力者18名(祖父母9名と孫である大学生9名)に行ってもらい、事例ごとに検討した。その結果、祖父母と孫の回想法で、祖父母は人生を語ることによって、語ったことに沿うように、家族関係に変化をもたらす可能性があると考えられた。
アルタ-ナリア病歯の植物感染機構:非宿主抵抗反応と宿主特異的毒素によるその制御

宿取特異的毒素(HST)依存のアルタ-ナリア病にみられる宿主識別・感染機構を、1)病原菌による信号因子(HST)の放出、2)宿主に特異的に存在あるいは機能する受容体(レセプタ-)による病原信号の選択認識、ついで、3)宿主細胞内における精報伝達に基づく侵入菌受容化体制の醸成という想定図に基づき,分子レベルで解析して、寄生性における基本的和性成立に係わる諸因子を具体的に提示した。まず最初に、動的抵抗要因を分析して、糸状菌胞子発芽液中に放出される抵抗反応誘導因子(Inducer)を単離し、それが40、000ダルトンの多糖で、低濃度で植物の非特異的防御機構の発現を誘起することを明らかにした。続いて、化学的防御因子として、従来から広く知られているphytoalexinとは抗因性の認められない点で明確に異なる化学物質の介在を証明し、その生物性の特徴から「感染阻害因子、Infectionーinhibiting factor、IIFと略す」と呼称することを提案し、その定義を与えた。次に、受容体制化機構は、"InducerーIIF系"に代表されるような一般的、動的抵抗反応HSTによる宿主特異的抑制・発動停止であることを立証した。さらに、構造未決定であったACT毒素IおよびIIの構造解析の結果は、それが既知のAK,AF両毒素との構造同族体であることを明らかにするとともに、有機化学密度でもって生産菌系の病原性あるいは寄生性を決定する因子の化学基盤を実に見仕事に提示し、宿主識別に関与する病原信号因子としてのHSTの役割を確固たるものにした。また、細胞壊死を伴わない宿主識別因子の化学的実体にも迫った。最後に、毒素作用過程の分析から、感染誘発は宿主細胞の壊死それ自身と無関係におこることを立証し、HSTに依存するAlternria感染を、いわゆるnecrotrphic parasitismとする通説を否定する新説を樹立した。宿主特異的毒素に依在するアルターナリア病にみられる宿主選択・感染成立の分子機構の解析を始めた。1.病原信号因子の受容体の探索:ナシ黒斑病菌の生成するAK毒素の受容体が感受性品種の原形質膜画分に特異的に存在することを明かにした。また、毒素が受容体結合後から感染誘発や細胞壊死に至る過程を、SH修飾剤や代謝阻害剤などの化学的処理や、光処理によって分析した。その結果、感染誘発には壊死過程は必要でなく、毒素結合後に起こたる原形質膜機能の変調が重要であることを明かにした。2.胞子発芽時に防出される抵抗反応誘導因子:アルターナリア胞子発芽液から抵抗反応誘導因子をConA-Sephnose4B,Sephacryl S-300カラムクロマイトグラフィーによって単離した。本因子はマンノースを主成分とし複数の単糖からなる分子量約40,000の多糖であった。生物活性にはα-マンノースおよびβ-グルコースからなる構造が関与していると考えられた。誘導活性に要する最低濃度は5ug/mLであった。調査したかぎりでは、植物種非特異的に抵抗性を誘導した。3.感染阻害因子の単離と生物活性:誘導性抵抗反応の化学的実体として、感染阻害因子が検出され、単離された。この因子はファイトアレキシンや抗菌物質と異なって、病原菌の胞子発芽、発芽管伸長、付着器形成には影響しないが、付着器から生ずる侵入菌糸形成を特異的に抑制する。

4.感染阻害因子の構造と定量法:抵抗性が誘導されたナシ葉から複数の感染阻害因子が単離され、ハイドロキノン、カフェオイルアルブチンが同定された。それらの微量定量法もHPLCを利用して確立された。5.構造未決定の毒素:純化と構造解析を継続中である。昭和63年度に引続き、宿主特異的毒素に依存するアルタ-ナリア病に見られる宿主選択・感染成立の分子機構の解析を展開した。1。病原信号因子の受容体の探索:水性2層分配法によってナシ幼果実細胞の原形質膜画分を得、^3H標識AK毒素の結合能を調査したところ、感受性品種に特異的な結合と非特異的な結合が認められた。この特異的毒素受容体の純化と特性解明が今後の課題である。また、AK毒素は原形質膜ATPaseに対する直接的阻害効果を示さないことから、毒素受容体での分子認識からin vivoのプロトンポンプ阻害や膜機能変調に至る信号伝達過程の分析が極めて重要な意味をもってきた。一方、高度感受性りんご葉に対するAM毒素の初期作用には葉緑体の関与が強く示唆され、受容性誘導には原形質膜機能変調が介在するらしい。中程度抵抗性品種では膜機能変調が重要で、しかも特異な誘導性毒不感受化機構を備えているらしい。2。感染阻害因子の単離と生物活性:Pー4と称してきた感染阻害因子が単離され、その構造が3、5ージカフェオイルキナ酸と決定された。クロロゲン酸やコ-ヒ酸と異なり抗菌活性は無いが、感染菌糸の形成を抑制する。感染サイトでの病理的役割について詳細な調査が必要である。3。3、5ージカフェオイルキナ酸の微量定量法(HPLC)を確立した。4。構造未決定の宿主特異的毒素の構造決定:カンキツbrown spot病菌の毒素ACT-toxin IとIIの構造が解明された。AK毒素やAF毒素と同族体で、今後の「選択毒性活性ー構造相関研究」に絶好のモデルとなる。前年度に引き続き、毒素依存の宿主選択・感染成立の分子機構を解析した。1)新規宿主特異的毒素の単離:タバコ赤星病菌の生成する宿主特異的AT毒素をHPLCを利用して純度の高い毒素を単離した。構造解析研究が進行中である。また、鳥取砂丘のラッキョウ栽培地域で発生する灰色かび病菌の胞子発芽液に宿主特異的感染誘発因子の存在を確認し、それを単離した。本因子は壊死毒性を全く示さないにも拘らず、ラッキョウとタマネギの組織に選択的に,腐生性Alternariaの感染誘発をもたらす。病理学的には感染場面で宿主識別因子の役割を演ずる。2)毒素の作用過程:感受性カンキツや感受性日本ナシ(二十世紀)に対するACT毒素Ib,IIbの作用過程を時間解剖の方法で調査したところ、初期作用点は原形質膜上に存在することが支持された。しかし、細胞壊死過程はカンキツと日本ナシで著しく異なり、Ib,IIbによるナシ葉組織の黒変壊死過程はAK毒素によるそれに酷似していたが、Ibによるカンキツの褐変壊死過程は、SH基修飾剤、蛋白合成阻害剤、銅酵素阻害剤、光などに対する反応性に於いて大きく異なっていた。3)感染阻害因子の作用特性:3、5ージカフェオイルキナ酸の用量ー反応分析の結果は、有効濃度が500μg/mlであり、一方、ナシ葉組織に誘導・生成される濃度は比較的高く、感染サイトへの局部的蓄積量の超微量定量が今後の課題となった。また、ラフレモン葉に誘導される感染阻害因子Pー2a,2bを単離した。4)構造解析:ラッキョウ灰色かび
連続体の基数不変量とその応用

本研究では、連続体の基数不変量と反復強制法の理論の関係及びその代数学への応用についての研究を行った。研究の概略は以下のとおりである。1.iteration alonga template。Shelahがδ<aの無矛盾性を証明するために発明したiteration alonga templateという技法を公理的接近法によって改善し、いくつかの新しい結果を得た。例えば、最小のmaximal cofinitary groupの濃度をa_gで表すとき、a_g>max{a, non(M)}が無矛盾であることを証明した。さらにaの共終度が可算になることの無矛盾性も示した。3.完全集合公理。濃度がκ以上であり、実数部分集合族Γに属する任意の集合に対して、完全部分集合が存在することを、PSP(κ,Γ)が成り立つという。G_<N1>を濃度がN_1以下である開集合族の共通部会の族とする。連続体仮説を仮定し、countable supportを用いる反復法でSacks実数をN_2個付け加えると、generic拡大でPSP(N_2,G_<N_1>)が成り立つことを証明した。4.Evasionとpredictionに関する基数不変量。b_2をconstant prediction numberとし、bをunbounding numberとするとき、b≦b_2を示し、加茂の問題に答えた。又、Shelahとの共同研究で、異なるkに対するk-constant prediction numberが異なる値をとることが無矛盾であることを証明している。3.完全集合公理。平成12年度は、基数不変量と反復強制法の理論の関係及びその代数学への応用についての研究を行った。特に、A.Blassが発展させたevasionとpredictionという組み合わせ論的概念に関する基数不変量を調べた。研究の概略は以下の通りである。平成13年度は、反復強制法を用いて連続体の基数不変量を調べ、さらにそれらの代数学への応用についての研究も行った。特に、S.Shelahが創造したiteration alonga templateという反復法を改良し、またshattered iterationという新しい技法を開発させた。
寝床環境中の細菌叢は褥瘡感染を引き起こすか：感染発症メカニズムの新パラダイム

本研究では、寝床環境中の細菌叢に着目し、「創傷感染バイオマーカーの開発及び慢性創傷感染抑制ケア方法の確立」を目指す。現在の感染制御は抗菌薬や消毒薬などにより褥瘡部の細菌を死滅させる姑息的な方法であり、感染の原因となる細菌の根本を絶つ方策は確立していない。すなわち、創部の細菌そのものへのアプローチではなく、細菌の由来である寝床環境へのアプローチが看護ケアとして重要といえる。そこで、創傷感染予防ケア介入確立のために、寝床環境の細菌叢が創傷感染を発症させるメカニズムを解明することを目的に本研究を実施する。本研究はこれまで研究対象となってこなかった、細菌叢形成の主要な場としての寝床環境に着目し、宿主と微生物の共生関係の破綻が引き起こす創傷感染メカニズムの解明を目指す。平成30年度は褥瘡と寝床環境の間に最近の伝播が起こっているのかを検証した。褥瘡、寝床環境、皮膚から採取した細菌叢サンプルをメタ16S解析に供した。非加重結合法に基づきサンプルを3つのクラスタに分類し、同一患者内での相違を調査した。分類の妥当性評価のために主座標分析を行った。対象創部10例中、8例で創部と寝床環境のサンプルが同一のクラスタに分類され、そのうち4例では皮膚サンプルも同一クラスタに分類された。主座標分析で同一クラスタのサンプルは近くにプロットされたことから、創部と寝床環境中の細菌叢の関連が示唆された。さらに、得られたシークエンスの100%一致するものをoperational taxonomic unitsに割り当てることで、株レベルで細菌を同定し、患者内の異なる部位で伝播が起こっているのかを検証したところ、95.5%の創部で少なくとも一種類の細菌株を複数の部位で共通して有していた。共通して保有している細菌株の種類の中央値は98であり、多くの細菌が伝播していることが示された。平成30年度は、創傷領域ではこれまで全く着目されてこなかった寝床環境からの細菌叢サンプルの採取からメタ16S解析までを実施し、創部との細菌の伝播を示すことで本研究のオリジナリティである寝床環境から創部への細菌の曝露の事実を明らかにすることができた。サンプル採取方法や解析法について多くの試行錯誤を実施し得られた結果であり、これ以降に続く研究の基盤を構築できたことから、おおむね順調に経過していると判断した。寝床環境と創部の細菌叢の関連が明らかになったことから、臨床での褥瘡管理において課題となっている多くのリサーチクエスチョンについて、平成30年度に取得したデータの二次データ解析の実施および、褥瘡感染発症メカニズムについて細菌叢の観点から検証を進める。

試薬の購入およびメタ16S解析解析外注の関係で約1万7千円の費用が未使用となったが、次年度の試薬購入費に充てて研究を実施する。
高分解能マイクロX線回折法による歪みシリコン基板の研究

本申請の研究に於いて本年度は、半導体デバイス基板を目的としたX線マイクロ回折光学計を開発し、その応用の第1段階として歪みシリコン基板の薄膜層の評価を行った。歪みシリコン基板とは、格子定数の大きなSi_<1-x>Ge_x層上に極薄Si層を形成して数%オーダーの引っ張り歪を加えることによりバンド構造を変調させ、キャリアの移動度の向上を実現する基板である。この技術は、半導体デバイスの微細化による高速化の限界を打破する手法として非常に注目を集めている。この歪シリコン技術の成功の鍵は、高品質の歪シリコン基板の開発にある。歪シリコン技術では数%オーダーの大きな歪を必要とするため、如何に無欠陥で均一性良く歪を導入できるかが移動度の向上に直結するためである。このため、歪みシリコン層の評価は非常に重要な課題である。そこで、本研究において歪シリコン層の歪をサブミクロンオーダーの空間分解能で定量することのできる評価法を開発した。本研究で選択した評価方法は、X線マイクロ回折である。X線マイクロ回折は、他の結晶歪み評価手法と比較して、歪みを直接測定できる、試料を非破壊で評価できるといった有効性がある。本研究で開発したX線マイクロ回折計は、集光素子としてゾーンプレートを利用することによりサブミクロンの空間分解能で歪を評価することが可能となった。実際に集光実験を行った結果、11keVのX線に対して集光X線のサイズは0.5μm(垂直)×1.6μm、角度発散は20arcsecを達成できた。本装置を用いて歪みシリコン基板のSiGe層の結晶性評価を行った。測定を行ったうちの代表的な結果について示す。60゚転位の導入により歪みが緩和されたSiGe基板では、ブロードな回折スポット中に数個のサブピークが観察された。これらは通常サイズのX線ビームを用いた回折測定では観察することが出来なかったものである。このようなサブピークの出現は、SiGe層中のモザイシティを反映している。その他様々な歪シリコンの歪層評価により、歪シリコン基板の高品質化に非常に有用な情報を提供できることを示すことができた。本研究で開発したX線マイクロ回折計は、集光素子としてフレネルゾーンプレートを利用することによりサブミクロンの空間分解能で歪を評価することが可能となった。実際に集光実験を行った結果、12keVのX線に対して集光X線のサイズは0.6μm(垂直)×2.6μm、角度発散は13arcsecを達成できた。これはシリコンの結晶の歪みに対して約2×10^<-5>の感度があることになる。このビームを用いて、歪みシリコン基板の歪み層の結晶性を評価した結果、歪み層内部にサブミクロンサイズの結晶領域がお互いに傾いて存在していることが明らかになった。これにより、歪シリコン基板の高品質化に非常に有用な情報を提供できるごとを示すことができた。

実際に集光実験を行った結果、11keVのX線に対して集光X線のサイズは0.5μm(垂直)×1.6μm、角度発散は20arcsecを達成できた。本装置を用いて歪みシリコン基板のSiGe層の結晶性評価を行った。測定を行ったうちの代表的な結果について示す。60゚転位の導入により歪みが緩和されたSiGe基板では、ブロードな回折スポット中に数個のサブピークが観察された。これらは通常サイズのX線ビームを用いた回折測定では観察することが出来なかったものである。このようなサブピークの出現は、SiGe層中のモザイシティを反映している。その他様々な歪シリコンの歪層評価により、歪シリコン基板の高品質化に非常に有用な情報を提供できることを示すことができた。
韓国三国時代前期の古墳に関する基礎的研究

(1)韓国の大学博物館、国立博物館、文化財研究所、その他調査研究機関等で刊行されている三国時代前期の古墳に関する発掘調査報告書をもとに、新羅・加耶・百済古墳のデータを収集した。データ収集は3世紀後葉から4世紀までの木榔槨墓、竪穴式石槨墓について行い、新羅・加耶古墳は全体の約90%、百済古墳は全体の80%が終了した。(2)収集した墳墓資料については、すべてデータベース化している。データベースの項目としては、所在地、調査年、墳丘(形状、規模)、埋葬主体部(型式、規模、主軸方向、頭位、構造)、築造年代、副葬品配置、副葬品種類(装身具、鏡、武器・武具、車馬具、農工具、金属容器、土器など)・形態、参考文献等を抽出し、データベース・ソフト(Microsoft Access2002を使用)への入力を行った。また、図面・写真等に関しては、墳墓ごとにカード化して、整理を行った。(3)データベース化した資料を地域ごとに検討し、副葬土器などに基づいて三国時代前期古墳の編年作業を行った。その結果、それぞれ、3世紀後葉、4世紀前葉、4世紀中葉、4世紀後葉5世紀初頭の四時期に編年でき、古墳の変遷過程を明らかにすることができた。さらに鉄製武器などから、地域間の時期的な併行関係を検討した。その結果、地域ごとに若干の違いはあるが、4世紀後葉に大きな画期があることを指摘できる。(3)階層分化の進行状況については、時期が下るごとに階層分化が進行するが、とくに新羅や加耶地域では4世紀後葉に急速に進行する現象が認められた。(4)本研究で作成したデータベースについては、今後も増加する資料を追加していき、Web上での公開を考えている。1.韓国の大学博物館、国立博物館、文化財研究所等で刊行されている三国時代前期の古墳に関する発掘調査報告書をもとに、新羅・加耶古墳のデータを収集した。データ収集は3世紀後葉から4世紀までの木槨墓、竪穴式石槨墓について行い、地域的には最も調査が進んでいる慶尚南・北道が中心となっている。全体の約60%が終了しており、来年度は百済古墳のデータ収集を行う予定である。2.収集した墳墓資料については、すべてデータベース化を行っている。データベースの項目としては、所在地、調査年、墳丘(形状、規模)、埋葬主体部(型式、規模、主軸方向、頭位、構造)、築造年代、副葬品配置、副葬品種類(装身具、鏡、武器・武具、車馬具、農工具、漆器、金属容器、土器)、参考文献等を抽出し、データベース・ソフトへの入力を進めている。また、図面・写真等に関しては、墳墓ごとにカード化して、整理を行っている。現在、これらの作業については全体の約40%が終了している。3.データベース化した資料を検討し、加耶前期古墳の編年作業を行った。その結果、3世紀後葉、4世紀前葉、4世紀中葉、4世紀後葉5世紀初頭の四時期に編年できることが明らかとなった。また、これらと合わせて加耶古墳の武器組成、および倭系遺物について検討し、それぞれ「嶺南地域の武器組成」(『古代武器研究』Vol.4)、および「韓国の倭系遺物」(『国立歴史民俗博物館研究報告』第110集)として発表した。