hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
神経筋疾患におけるフリーラジカル関連物質の局在とその病態に関する検討

末梢神経,筋疾患の病態におけるフリーラジカル関連物質の関与を解明するためそれらの物質の局在や量的変化について以下のような検討した.1.ラット糖尿病実験モデルにおいて高血糖下における虚血・再灌流によって,末梢神経における組織過酸化脂質の上昇と組織学的変化の増加がみられた.高血糖により,虚血・再灌流によるフリーラジカル生成が増大し,酸化ストレスが末梢神経組織障害を引き起こしたと考えられる.3.Cardiotoxin筋注後のラット前脛骨筋壊死・再生過程においてβ-dystroglycan>α-sarcoglycan, dystrophin,α1-syntrophin,α-dystrobrevin-1>nNOSの順に再発現する傾向がある.したがって,筋再生は筋鞘膜からはじまり筋鞘膜内側へ進行し,筋細胞骨格の支持に関与するタンパクはシグナル伝達に関与するタンパクより再発現が速い.また,nNOSの発現は再生過程においても筋線維typeに依存し,type2B線維に優位に発現する.末梢神経,筋疾患の病態におけるフリーラジカル関連物質の関与を解明するためそれらの物質の局在や量的変化について以下のような検討した.1.ラット糖尿病実験モデルにおいて高血糖下における虚血・再灌流によって,末梢神経における組織過酸化脂質の上昇と組織学的変化の増加がみられた.高血糖により,虚血・再灌流によるフリーラジカル生成が増大し,酸化ストレスが末梢神経組織障害を引き起こしたと考えられる.3.Cardiotoxin筋注後のラット前脛骨筋壊死・再生過程においてβ-dystroglycan>α-sarcoglycan, dystrophin,α1-syntrophin,α-dystrobrevin-1>nNOSの順に再発現する傾向がある.したがって,筋再生は筋鞘膜からはじまり筋鞘膜内側へ進行し,筋細胞骨格の支持に関与するタンパクはシグナル伝達に関与するタンパクより再発現が速い.また,nNOSの発現は再生過程においても筋線維typeに依存し,type2B線維に優位に発現する.(1)ヒト骨格筋におけるフリーラジカルおよびアポトーシス関連物質の局在(2)実験的筋崩壊・再生モデルを用いたジストロフィン,NOS,SODの局在の検討カルジオトキシンを用いたラットの実験的骨格筋壊死再生過程におけるdystrophin(DYS),αsarcoglycan(αSG),α1 syntrophin(α1S),神経型NOS(nNOS)の動態を免役組織化学的に検討した.再生筋の筋形質膜においてDYS,αSGが最も早く3日後に形態学的に発現し、ついでα1Sが5日後に、nNOSが最も遅く10日後に発現した.発現開始時期および全ての再生線維が陽性化する時期を検討すると、DYS,αSG,α1Sは筋線維のtype1,type2への分化前に発現が終了したが、nNOSはtype1,type2への分化とともに発現する特徴を認め、再生筋線維のタイプ分化と関連していること見いだした.カルジオトキシンを用いた骨格筋壊死再生モデルにてdystrophin (DYS), αsarcoglycan (αSG), α1 syntrophin (α1S),神経型NOS (nNOS)の動態を検討した.免疫組織学的には再生筋形質膜において,DYS,αSGが3-5日後に発現し,α1Sが5日後,nNOSが10日後に発現した.Western blot法にて各蛋白を定量的に解析すると,αSG(25%再生日→50%再生日→90%再生日):3.5日→5.1日→6.5日.dys:4.2日→5.5日→7日.α1S:5.2日→6.5日→14日.nNOS:11.5日→16日→20日であった.再生過程ではαSG→dys→α1S→nNOSの順に出現・増加し,ジストロフィン及びその関連蛋白の再生開始・終了は筋鞘膜側から筋鞘膜内側へ進むことが示唆された.nNOSは再生筋線維のtype1, type2への分化に関連し発現することを示した.(2)ヒト骨格生検筋における壊死およびアポトーシス関連物質の局在:(1)多発筋炎ではアポトーシス関連物質の有意な染色性はみられなかった.しかし,細胞外マトリックス蛋白であるテネイシン染色にて,筋炎全般に壊死筋線維周囲に局所性に発現した.さらに,皮膚筋炎では多数の筋線維周囲にびまん性網状に特異的に染色され,炎症性変化に加え,虚血性変化が示唆された.(2)ミトコンドリア脳筋症のRagged-red fibers(RRF)ではBax, Apaf-1, caspase3,8,9は筋鞘膜直下および筋線維内に染色された.ミトコンドリア膜上のBaxが活性化され細胞質内で活性型Apaf-1が発現し活性型caspase9を誘導しcaspase3を活性化するミトコンドリアを介したアポトーシス伝達経路の関与を示唆する.また,RRFでFas, Fas-L, caspase3,8が発現しており,Fas/Fas-Lを介したcaspase8の活性化によるcaspase3を活性化する経路の存在も示唆された.(1)糖尿病ラット末梢神経の虚血再環流モデルにおけるフリーラジカルの影響とその機序一般に神経系の虚血再環流において酸化ストレスによりフリーラジカルが発生し,その結果神経系に傷害を起こす.糖尿病の末梢神経系における酸化ストレスによる末梢神経障害の機序を明らかとするため実験的

糖尿病ラット末梢神経組織における形態学的検討およびフリーラジカル産生物であるthiobarituric acid-reactive substances(TBARS)を測定をおこなった.糖尿病ラットの虚血再環流モデルでは正常ラットに比して形態学的には初期のミエリンの崩壊を示唆する"loose myelin"と軸索変性の初期変化を示唆する"dark axon"の所見が強くみられた.また,浸潤細胞の免疫組織染色では糖尿病ラットにCD4,CD8,ED1陽性細胞の浸潤がみられた.さらに,TBARS測定でも糖尿病ラットでは正常ラットに比し優位に増加していた.これらを総合すると糖尿病ラットでは虚血再環流における酸化ストレスをより強くうけ,それらが糖尿病性末梢神経障害の1つの要因となると考えられた.(2)実験的筋崩壊・再生モデルを用いたnNOSおよびジストロフィン結合タンパク質の発現
減数分裂・体細胞分裂細胞間の中心体移植による中心体の微小管形成能の検定

中心体が分裂装置の形成と細胞質分裂の誘導に果たす役割を、おもに顕微操作法を用いて調べた。イトマキヒトデの成熟分裂の中心体として極体と卵割の中心体を様々な時期に移植して、中心体の相違を検討した。卵割期に移植した成熟分裂、卵割どの時期の中心体も内在の分裂装置星状体の他に余分に一つ星状体を形成して、第一卵割後3割球になった。いっぽう、第一次、第二次卵母細胞に移植した、どの時期の中心体も余分な星状体を形成したが、第一、第二成熟分裂の極体放出は正常のままであった。しかしながら、第一卵割の星状体に比べて,第一成熟分裂の星状体は小さく、卵母細胞の第一成熟分裂期に卵割の中心体を移植して形成した星状体も小さい。また、核分裂は起こすが細胞質分裂は起こさない程度にColcemid処理をした卵の第一卵割分裂装置では、星状体の大きさは成熟分裂の星状体以下の大きさであった。つまり、成熟分裂で余分の星状体による細胞質分裂誘導が起こらないのは、星状体が小さいことが要因であると結論した。さらに、第一極体中の中心体の微小管形成能の変化を調べた。1-メチルアデニンで減数分裂再開後、微小管安定剤であるヘキシレングリコール(HG)で処理すると、形成する第一極体が大きくなって、分裂するようになり、分裂装置も認められた。いっぽう、正常発生では、第一極体は分裂しないし、分裂装置も形成されない。しかし、卵割期に極体を移植して中心体の活性を調べたところ、形成直後の第一極体は卵内で星状体を1個つくるのに対し、形成後1時間後には星状体を2個つくる能力を持つようになった。このことは、極体の中心体は卵母細胞中のものと同様二つに分離し微小管形成能を失わないが、卵母細胞中と異なり、極体中では何らかの原因で微小管が形成されず、細胞分裂を阻害されているが、大きな極体ができたときは余分の卵細胞質によって細胞分裂の能力が再活性化されると考えられた。成熟分裂(減数分裂)と卵割(体細胞分裂)で利用される中心体の相違が、分裂様式の相違の誘因となる可能性を検討するため、イトマキヒトデAsterina pectiniferaを用いて、様々な時期に成熟分裂の中心体として第一極体あるいは第二極体を、また卵割の中心体も移植して、移植された中心体による星状体形成と細胞質分裂の誘導について調べた。卵割期に中心体を移植した場合、成熟分裂、卵割どの時期の中心体も内在の分裂装置星状体の他に余分に一つ星状体を形成して、第一卵割後3割球になった。いっぽう、第一次、第二次卵母細胞に中心体を移植した場合、どの時期の中心体も余分な星状体を形成すること、さらには、内在の核および中心体と共同して、3極の分裂装置をも造ることがあったが、第一、第二成熟分裂の極体放出は正常に起こった。しかしながら、星状体の大きさを5% Hexylene

glycol海水で安定化して測定すると、第一卵割の星状体の半径が20.4μmであるのに対して、第一成熟分裂の星状体のそれは14.4μmと小さいことや、卵母細胞の第一成熟分裂期に卵割の中心体を移植したのちに形成した星状体3個の大きさもそれぞれ小さいことがわかった。それゆえ、星状体の大きさを決めるのは分裂期の細胞内環境であって、中心体の由来には関係しないと考えられる。また、核分裂は起こすが細胞質分裂は起こさない程度にColcemid処理をした卵の第一卵割分裂装置では、星状体の大きさは成熟分裂の星状体以下の大きさであった。以上のように移植した中心体によって造られる余分な星状体を検討した結果、成熟分裂で星状体が形成されるにもかかわらず極体放出が正常に起こる、つまり余分の星状体による細胞質分裂誘導が起こらないのは、星状体が小さいことが要因であると結論した。イトマキヒトデ卵母細胞の第一減数分裂の際、形成される第一極体中の中心体の微小管形成能を調べた。1-メチルアデニンで減数分裂再開後、微小管安定剤であるヘキシレングリコール(HG)で処理すると、形成する第一極体が大きくなることが知られている。正常発生では、第一極体は分裂しないが、大きくなった極体は分裂するようになった。このとき、HGの濃度が増加すると極体は大きくなり、細胞分裂の頻度も増加した。このことは極体中で中心体が分離し、分裂装置を形成することを示している。抗チュープリン抗体による蛍光抗体法で分裂装置が認められた。いっぽう、正常発生における小さい極体では分裂装置が形成されない。このことから正常の極体中の中心体が時間とともに不活性化して、星状体などの微小管形成能がなくなったと考えられた。しかし、卵割期のイトマキヒトデ卵に極体を移植して中心体の活性を調べたところ、形成直後の第一極体は卵内で星状体を1個つくるのに対し、形成後1時間後には星状体を2個つくる能力をもつようになった。以上の研究により、極体の中心体は卵母細胞中の中心体と同様二つに分離し微小管形成能を失わないが、卵母細胞中と異なり、極体中では何らかの原因で微小管が形成されず、細胞分裂を阻害されているが、大きな極体ができたときには入り込んだ余分の卵細胞質によって細胞分裂の能力が再活性化されると考えられた。今後、極体における細胞分裂阻害の機構、あるいは卵細胞質の中心体活性化機構を解析することを検討中である。
現代精神医療倫理におけるラカン派精神分析思想の位置づけと意義に関する研究

本研究は、フランスの精神分析家ジャック・ラカンの60-70年代の理論、およびその後のラカン派精神分析の理論について、その倫理的意義を明確にした。特に歴史的文脈を明確にすることで、ラカン思想が、社会的な管理に貢献する限りでの精神医療の関心と異なり、そうした社会とは別の生き方を探る実践をめぐるものであることが明らかになった。また、現在の発達障害臨床の理解にも貢献するものであると考えられた。本研究の目的は、後期近代の精神医療体制における倫理的課題との関係から、ラカン派精神分析理論を読解・整理し、その位置づけと意義を明らかにすることである。このために平成27年度には、第一に、60-70年代ジャック・ラカンの精神分析理論の読解作業を行った。まず60-70年代のエピステモロジー思想の潮流との関連から、論理学や数学への関心を深めた後期ラカン理論の内実を解明した。また、構造主義の枠組みの内部におけるストア派哲学への関心という共通点を手掛かりとして、ラカンと同時代の哲学者ドゥルーズとの理論的照応関係を明らかにする作業を行った。これらの研究から、後期ラカン理論における「真理」概念の重要性、またこの概念が「症状」概念とのあいだに持つ強い関係が明らかになった。さらにラカン理解の促進という面からは現代アメリカの分析家ブルース・フィンクによるラカン解説書の翻訳を行い刊行したほか、解説としてアメリカ・日本における60-70年代のラカン受容の捉え返しも行い、これまで光の当たらなかったラカン受容史の一幕を明らかにした。第二に、ラカン没後のラカン派精神分析の理論発展にかかわる調査を実施した。そのために、現代において注目すべき病理としての「自閉症」論に着目して、その一般的な歴史を整理すると同時に、ラカン派精神分析内部でのその後の議論発展について調査した。このテーマのもと年度内に2度の研究会を行い、自身と招待研究者とによる研究報告および討論を行った。そこでは代表者は、70年前後における病理パラダイムの変化という論点を確認し、その上でラカン派精神分析の身体論的側面を深めることの重要性が明確化された。また資料調査のための渡仏では、ラカンが所属した幾つかの組織の機関紙や、70年代以降のラカン派精神分析の雑誌など、ラカン理論の現代的意義の解明にとって貴重な資料を手に入れることができた。初年度の計画にあった後期ラカンの理論整理と、ラカン以後の理論発展にかかわる資料調査については、可能な範囲で申し分なく進めることができた。ただし、入手した雑誌資料などに基づいた体系的な整理と考察についてはまだ行き届かない点が残った。他方、その代りに、二年目に行う予定の自閉症研究を先取り的に遂行することができたため、計画全体としては、概ね順調に進んでいると言える。平成28年度は第一に、ラカンの60年代-70年代の理論における享楽理論の展開についての解明を行った。享楽の概念はラカンにおいて50年代の半ばから言及されてきたが、66年前後を機にはっきりと身体及び生命との関連が強調されるようになる。この理論的展開を明らかにするために、当時の科学的医学の進展という文脈を考慮に入れた上で、それに関するラカンの考察に影響を与えている、ユクスキュル-ハイデガーの環世界論との関わりを明らかにするよう努めた。さらにその点から後期ラカンのシニフィアン理論の展開について解明した。この成果は、これまでの一連のラカン読解の研究成果と合わせて、『ラカン真理のパトス』と題する単著にまとめ刊行した。第二にラカン派精神分析の現代的な議論の展開という観点から二つの活動を実施した。まず前年度より引き続き、現代のラカン派精神分析における精神病理理論の輪郭を明らかにするための研究会を実施した。そのうち自閉症論については、『発達障害の時代とラカン派精神分析』と題する論集として刊行の準備を整えた。さらに後期ラカンの病理概念として重要性が議論される「サントーム」について検討の場を設けた。また、70年代以降のラカン派精神分析の制度的実相を明らかにするために、フロイトの大義派の図書館を訪問し、当時の雑誌を中心に資料収集を実施した。最後に、精神分析を現代の政治哲学と関連づける試みの端緒として、フロイトの集団理論とJ.ランシエールの政治哲学との比較を実施し、両者において「平等」のモチーフが政治的局面を構成する契機を考察した。これについては国際「精神分析と政治」学会にて発表を行った。平成28年度は、主に64年から73年までのラカン理論について、その制度的・思想史的背景を踏まえた理論的意義の総括を行い、単著として刊行することができた。また現代のラカン派精神分析の観点における自閉症論について、共同研究を経て一つの視点を提示する論集を準備することができた。この二つの仕事を実施できた点で、本研究は大きく進展したと考えられる。さらにその上で、73年以降のラカン理論を同様の視角から読む作業に向けて、すでに必要な資料調査と基本的文献の読解の一部に着手することができたことから、続く29年度の研究の継続的実施のための極めて良好な条件が整った。最終年度となる2017年度は、研究計画における二つの課題を進めた。第一には、前年度までに進めた「自閉症」・「発達障害」に関する研究をまとめ、論集『発達障害の時代とラカン派精神分析』として出版した。

そこでは自身の研究としては、現代のラカン派精神分析家エリック・ロランの自閉症論を取り上げ、その意義を、発達障害の医療史の整理の上に位置づけるよう試みた。また編者として、各寄稿者の領域横断的なアプローチを整理し、そのまとめを行っている。第二には、精神分析的な主体性のモデルを、現代の政治思想との関連から位置づける試みを実施した。これについては、まず研究計画に即して、フーコーの哲学とラカン派精神分析との関わりを明らかにする試みを実施した。それにより、フーコーの50年代から70年代初頭にかけての狂気論の論点の移動について、その内実を明らかにし、またそうした移動にラカン派精神分析が与えた影響について明るみに出すことができた。さらに、政治思想としては、ランシエール、ドゥルーズ、ラクラウといった、70年代から現代に活躍した哲学者たちの政治的主体論について、著作の翻訳や原典読解を通じて解明し、さらにこれをラカン派精神分析の観点から吟味する研究を行った。その成果として、70年代以降、主体性をめぐる社会的前提が大きく変化したことが改めて強く認識され、この変化を精神分析の思想-実践、とりわけ「女の享楽」概念との関連においていっそう精密に解明していく必要が確認された。また、この70年代以降のラカン思想の解明という点に関しては、パリで活躍するラカン派精神分析家E.ロランに、60年代以降のラカン派精神分析の歴史、および現代における精神分析の意義について尋ねるインタビュー調査を実施した。以上を通じて、本年度は主にラカン派精神分析の臨床と実践の転回点としての70年代の意義の確認を行った。本研究は、フランスの精神分析家ジャック・ラカンの60-70年代の理論、およびその後のラカン派精神分析の理論について、その倫理的意義を明確にした。特に歴史的文脈を明確にすることで、ラカン思想が、社会的な管理に貢献する限りでの精神医療の関心と異なり、そうした社会とは別の生き方を探る実践をめぐるものであることが明らかになった。また、現在の発達障害臨床の理解にも貢献するものであると考えられた。今後の研究の進め方としては、今年度と同じく、ラカンおよびその後のラカン派精神分析理論に関する資料調査と読解・整理を通じて、ラカン理論の現代的倫理的意義の解明を行っていく。当初の計画では二年度目に、行動主義との関係に取り組むはずであったが、すでに開始した自閉症論との関わりから、最終年度に予定していたラカンにおける環境概念に関わる研究を先取りして行う。また当初の予定にはなかった国際学会での発表を実施するために、研究計画の部分的な先取りを行って、現代的「発話」状況の理論(特にランシエール)と精神分析との関わりに関する研究を行っておく。以上を年度の前半に行い、後半から最終年度にかけて、ラカン以降の理論家の議論の体系的な整理に着手していくこととしたい。29年度は、主に73年以降のラカンの精神分析思想について、背景の精神医療制度や政治状況・思想史との関連から解明する作業を継続する。そのために当時の雑誌などの文献に当たるほか、73年以降に思想的転回を観察できる哲学者、特にミシェル・フーコーとジャック・ランシエールに注目して、ポスト73年の問題系の解明を遂行することとする。また精神医療制度の関連からは、現代の認知科学と関連も深い行動主義心理学の展開を考慮に入れつつ、ラカンの精神分析理論の倫理的意義の検討を行っていく。思想史・精神分析
色素幹細胞の運命決定機構から解明する老化と癌の関係性

1、ニッチ因子が様々なゲノムストレス下にある色素幹細胞に与える影響を解析した。まず、各ゲノムストレスを負荷したマウスから色素幹細胞のニッチ細胞をK15(Hi)/ITGA6(Hi)/ScaI(-)を指標にFACSにより回収し、マイクロアレイ解析を行った。まずは色素幹細胞の枯渇による白髪に着目し、マイクロアレイの結果、候補としてスクリーニングされたニッチ因子に関して、ニッチ細胞特異的なプロモーター(K15, K14)を用い遺伝子欠損マウスと過剰発現マウスを作製した。このマウスに色素幹細胞枯渇性のストレスを負荷したところ、遺伝子欠損マウスにおいて色素幹細胞の枯渇が促進的に見られ、一方で過剰発現マウスにおいては色素幹細胞の枯渇が抑制された。2、上記のマイクロアレイにより、発癌性のゲノムストレスにより早期に発現が上昇するニッチ因子に着目した。申請者らは、色素細胞特異的に遺伝子変異を導入する系を用い、色素幹細胞からメラノーマを発症するモデルマウスの確立に既に成功している。そこで、このメラノーマのモデルマウスを用い、ニッチ因子がメラノーマ発症に先立ちメラノーマの環境を作り出すことで、メラノーマのオリジンとなりうる色素細胞をより優位に増殖させている可能性を検証した。まだ検討段階ではあるが、メラノーマモデルマウスに阻害剤を投与し、ニッチ因子の働きを阻害した際にはメラノーマの初期発生が阻害され、一方で、ニッチ因子が過剰に働くことで、メラノーマの初期発生が促進的に見られることを明らかにした。1、マイクロアレイによりスクリーニングされたニッチ因子の候補が、枯渇性のゲノムストレス下にある色素幹細胞の運命制御に決定的な役割を担っていることをin vivoの系で示すことに成功した。当初の計画通り、研究は順調に進んでいると考えている。2、発癌性のゲノムストレスにより早期に発現が上昇するニッチ因子に着目し、このニッチ因子がメラノーマの初期発生に与える影響の解析を進めている。十分な数のメラノーマモデルマウスを得るのに時間がかかっており、まだ検討段階ではあるが、ニッチ因子とメラノーマの初期発生の関係性を示すデータが出ている。期待通りの実験結果が得られ、研究はおおむね順調に進展している。1、マイクロアレイによりスクリーニングされたニッチ因子が、ゲノムストレス下にある色素幹細胞の運命制御に重要な役割を担っていることがin vivoの系で明らかとなった。そこで、このニッチ因子が誘導される分子メカニズムとこのニッチ因子が色素幹細胞の運命制御において、どのような分子メカニズムで機能しているのかを今後明らかにする必要がある。まずは、ニッチ因子が色素幹細胞に与える影響を分子レベルで解析する。2、発癌性のゲノムストレスにより早期に発現が上昇するニッチ因子とメラノーマの初期発生に着目した研究を継続し、統計的に有意な結果が得られるかを検証する。
放射線照射後に再生してくる胸腺における上皮細胞の役割の解明

放射線照射後に再生してくる胸腺における再生の機序を形態学的、あるいは各種のサイトカインのメッセージの変化をくわしく調べることによって明らかにすることを研究の目的としている。研究実施計画で述べた以下の4点について実績を述べる。(1)胸腺の重量変化と形態学的変化の解析放射線量については高線量の4、6及び8Gy照射についての影響を検討してきたので低線量(2Gyや0.5Gy)についてその影響を検討する。この点については2Gyによって胸腺組織は3日目に最低となり、その後急速に回復することを確認した。0.5Gy照射については胸腺重量変化には著しい変化はみられないが他の高い線量でみられる胸腺細胞数の減少や照射後3日目から5日目に胸腺にマクロファージの相対的増加をみるなど線量が低くても高線量でみられる典型的な変化をとることが確認できた。(2)胸腺細胞や胸腺上皮細胞の免疫細胞化学的解析高線量(4,6および8Gy)照射についてのデータはすでに得ているので2Gyや0.5Gyについて照射後の胸腺細胞のCD4やCD8の発現を解析した。これらの低線量でも高線量照射後に見られた特徴的変化であるCD4^+CD8^+ (double positive)細胞群の減少とCD4^-CD8^- (double negative)細胞群の相対的増加が3日目から5日目に観察され以後回復がみられた。免疫組織化学的染色においてもマクロファージに特異的な抗体であるED2に陽性の細胞が照射後3-5日に相対的に増加していることが2Gyや0.5Gyについても高線量照射後と同様に観察された。(3)胸腺でのサイトカインメッセージの発現の変化すでに6Gy照射における発現の変化を解析し報告している。8Gy照射後の回復時における各種サイトカインメッセージの発現の変化について解析を完了した。昨年度の報告書でも、一部のデータを国際学会で発表したことを報告したが、今回完成したデータを国際学会誌に投稿した。(4)初代培養胸腺上皮細胞に対する放射線の影響ラットの胸腺上皮細胞の初代培養細胞を作製した。6Gyと8Gyを照射した培養胸腺上皮細胞について、未熟な胸腺細胞との共培養を行い、胸腺細胞の増殖・分化についての影響を解析している。現在までのところ8Gy照射後の方に胸腺細胞の増殖・分化支持能力の低下の強いことが観察されているが、更に詳細な解析を必要としている。本年度の研究実施計画では次の(1)(3)の3点に重点を置くことを計画したのでそれぞれについて実績を述べる。

(1)胸腺の重量変化と形態学的変化の解析放射線量については高線量の4、6及び8Gy照射についての影響を検討してきたので低線量(2Gyや0.5Gy)についてその影響を検討する。この点については2Gyによって胸腺組織は3日目に最低となり、その後急速に回復することを確認した。0.5Gy照射については胸腺重量変化には著しい変化はみられないが他の高い線量でみられる胸腺細胞数の減少や照射後3日目から5日目に胸腺にマクロファージの相対的増加をみるなど線量が低くても高線量でみられる典型的な変化と類似の変化をとることが確認できた。(2)胸腺細胞や胸腺上皮細胞の免疫細胞化学的解析高線量(4,6および8Gy)照射についてのデータはすでに得ているので2Gyや0.5Gyについて照射後の胸腺細胞のCD4やCD8の発現を解析した。これらの低線量でも高線量照射後に見られた特徴的変化であるCD4^+CD8^+(double positive)細胞群の減少とCD4^-CD8^-(dlouble negative)細胞群の相対的増加が3日目から5日目に観察され、以後回復がみられた。免疫組織化学的染色においてもマクロファージに特異的な抗体であるED2に陽性の細胞が照射後3-5日に相対的に増加していることが2Gyや0.5Gyについても高線量照射後と同様に観察された。(3)胸腺でのサイトカイン発現のRT-PCR法による解析放射線照射後に再生してくる胸腺における再生の機序を形態学的、あるいは各種のサイトカインのメッセージの変化をくわしく調べることによって明らかにすることを研究の目的としている。本年度の研究実施計画では次の(1)(3)の3点に重点を置くことを計画したのでそれぞれについて実績を述べる。(1)胸腺上皮細胞の免疫組織化学的解析-p63抗体を用いてDA系9週令の雌ラットに6Gyまたは8Gyの放射線を照射した場合にみられる変化を経時的に解析した。p63はp53遺伝子のホモローグとして見つけられた遺伝子で細胞の増殖分化などに関わると考えられている。p63分子に対する抗体を用いて免疫染色をすると胸腺では胸腺上皮細胞が染色されることが報告されているが、我々の実験結果では特に未熟な胸腺上皮細胞に特異的と思われた。6Gyと8Gyの照射回復時にp63陽性の細胞が増えていることが観察され、胸腺上皮細胞の再生が起こっていることが示唆された。(2)胸腺でのサイトカインメッセージの発現の変化すでに6Gy照射における発現の変化を解析し報告している。8Gy照射後の回復時における各種サイトカインメッセージの発現の変化について解析を完了した。昨年度の報告書でも、一部のデータを国際学会で発表したことを報告したが、今回完成したデータを国際学会誌に投稿した。(3)初代培養胸腺上皮細胞に対する放射線の影響ラットの胸腺上皮細胞の初代培養細胞を作製した。6Gyと8Gyを照射した培養胸腺上皮細胞について、未熟な胸腺細胞との共培養を行い、胸腺細胞の増殖・分化についての影響を解析している。現在までのところ8Gy照射後の方に胸腺細胞の増殖・分化支持能力の低下の強いことが観察されているが、更に詳細な解析を必要としている。
リジッド幾何学と数論への応用

研究分担者,連携研究者の協力の下,リジッド幾何学の基礎付けを研究した.特に, EGA IIIより一般の枠組みで形式幾何学を展開している.基礎付けの応用としてスキームおよび代数空間の永田コンパクト化の構成など,代数幾何学での基本的な定理がある.また,可換環の完備化の理論の(非ネーター環を含む)再構成等でも新たな見方を提示しており,形式スキームとしてのネーター性がなくてもリジッド空間としてのネーター性があれば十分であることを発見した.これは特にR. Huberによるadic spaceの理論が成立する枠組みを明快にするものである.基礎付け一般の結果は加藤文元(京都)との共著として発刊する予定である.研究分担者,連携研究者の協力の下,リジッド幾何学の基礎付けを研究した.特に, EGA IIIより一般の枠組みで形式幾何学を展開している.基礎付けの応用としてスキームおよび代数空間の永田コンパクト化の構成など,代数幾何学での基本的な定理がある.また,可換環の完備化の理論の(非ネーター環を含む)再構成等でも新たな見方を提示しており,形式スキームとしてのネーター性がなくてもリジッド空間としてのネーター性があれば十分であることを発見した.これは特にR. Huberによるadic spaceの理論が成立する枠組みを明快にするものである.基礎付け一般の結果は加藤文元(京都)との共著として発刊する予定である.数理物理学と関係が深いMirror対称性予想が私の以前からの,リジッド幾何学における研究と関連が深いことが明らかになってきたため、この見通しの下で主としてリジッド幾何学を研究している.以下がその一部である。1.Novikov環を含むような非ネーター的形式スキームの一般論の構成(ネーター的な場合はGrothendieckによるEGA IIIの内容に相当).2.形式スキームに双有理幾何学の手法を適用し,リジッド幾何学の基礎を構成.特に平坦化定理,固有射に対する有限性定理,導来圏の比較定理を含むGAGA型定理,固有射の特徴付け,代数空間に対するGAGA関手の構成,代数空間に対する永田型埋め込み定理を含む.1,2は主として加藤文元氏(京都大学)との共同研究によるものである.枠組みの提供,基礎の建設を目指しているため,新しい結果が多々含まれるものの,論文形式ではなく著書(Foundation of Rigid Geometry(仮題))としての出版を目標としている.現在,本の内容がほぼ固まってきたところである.現在までの原稿に基づき,内容の大枠については2004年度京都大学で行われた国際研究集会での講演を始めとして,成果を公開しつつ本の完成にむけ準備中である.特に本年度の研究成果を踏まえ,講演内容を下敷きとしたサーベイ論文「Rigid geometry and its applications」(論文リスト参照)を完成させ,成果の公表に努めている.また,理論の応用として,Kontsevich-SoibelmanのK3曲面のMirror partnerの構成プランが実現できるかどうかも検討している.前年報告したリジッド幾何学め基礎研究,また応用の研究を続けている.既に報告した通り,加藤文元氏(京都大学)との共同で基礎研究を進めている.主内容である1.Novikov環を含むような非ネーター的形式スキームの一般論の構成(ネーター的な場合はGrothendieckによるEGA IIIの内容に相当).2.形式スキームに双有理幾何学の手法を適用し,リジッド幾何学の基礎を構成.特に平坦化定理,固有射に対する有限性定理,導来圏の比較定理を含むGAGA型定理,固有射の特徴付け,代数空間に対するGAGA関手の構成,代数空間に対する永田型埋め込み定理を含む.については論文形式ではなく著書(Foundation of Rigid Geometry(仮題))としての出版を目標としている.現在,相当量の原稿(400ページほど)ができているが,未完成である.新しい結果を含むため慎重に内容をチェックする必要もあり,現在も引き続き作業を進めている.さらに,今年度は新たな方向の進展があり,研究代表者が以前より続けている非可換類体論への応用も進んでいる.2次元ガロア表現の剰余表現が可約である場合に,その(nearly ordinaryな)不変変形環がどのようなものになるか,従来明確な予想がなかった.代表者はこの問題を取り上げ,明確な予想の定式化を与えた.予想の定式化にはリジッド幾何学の考え方,定式化が使われる.特にこの予想は,剰余表現が標数0の既約表現に持ち上げられるための条件と深く関係しているが,特別な場合に持ち上げの存在を示した.この予想,及びその証拠となる結果については2006年9月に京都大学で行われた国際研究集会で招待講演を行った.詳細については準備中である.りジッド幾何学の基礎研究,また応用の研究を続けている.加藤文元氏(京都大学)との共同で基礎研究を進めている内容であるが,昨年度までに完成している分を1章および2章とし、出版に向けた校正を行っている。Kielの意味の固有射と,Raynaudの意味の固有射の同値を示すためのenlargementの存在,形式スキームに対するflattening theorem, formal algebraic spaceから作ったrigid spaceの圏とformal schemeから作ったrigid spaceの圏が同値になるというequivalepce theoremの証明も完成しているが3章以降に含む予定である.2章までで500ページを超えているが,出版社との交渉等,準備を進めており,平成20年度には区切りがつくように努力している.内容の詳細なチェックも海外の研究者との交流を含め,協力体制を築き進めている.

タイトルは「Foundations of rigid geometry」を予定しているが,内容についても既に問い合わせがあり,我々と独立に得られたConrad-Temkinによるseparated algebraic spaceに対するGAGA functorの構成(Journal of algebraic geometryに出版予定)でも我々の結果に言及されている.また,加藤がユトレヒトにおいて関連する結果を講演するなど,交流を進めている.志村多様体への応用については,現在研究を進めている.保型形式をp-進的に補間して作られるeigenvarietyはリジッド空間であり,岩沢主予想との関連が深い.また,研究代表者のユニタリ志村多様体に対するJacquet-Langlands対応の幾何学的実現を使い,eigenvarietyの対応を示すことが期待されでいる.これらの点の解明も進めている.今年度は最終年度であり,引き続きリジッド幾何学の基礎を研究した.特筆すべき点としては,9月に研究代表者と連携研究者の加藤文元(京都)がIHESで短期の研究を行ったが,IHESのO. Gabberとの連携が進み,基礎付けに必要であった座標環についての仮定を大幅に緩くできることがわかった.これは従来のネーター環論においてArtin-Reesの補題が演じていた役割を置き換え,可換環の完備化の理論を単純化するものである.この可換環論における成果については現在共著論文にまとめている.従来得られていたリジッド幾何学での結果もほぼこの緩い枠組みで成立するため,対応した書き直しを行っている(R. Huberのadic spaceの理論も一般化される).また,上述のように非常に基礎的な部分から見直しを行っているため,原稿も大部となっている.そのため,書籍としての準備が若干遅れているが,現在500ページ強の原稿を第一部として非常に近い将来の出版,成果公開を目指している.また,同時に代数幾何学への応用として代数空間の永田型のコンパクト化を得ていたが,方法を簡易化してコンパクトの境界がスキームになるように作れるようになった.代数空間のコンパクト自体,「Folklore theorem」であり,公刊された証明はなく,確定しているものとは言いがたい面がある.今回の研究がそれらの疑問点を払拭するものになることを期待している.この成果については2009年1月に東京大学で行われた国際シンポジウムArithmetic Algebraic Geometry Related to Moduli Spacesで講演した.この結果については論文としての公刊を目指している.
脳覚醒中枢のメカニズムに迫る―オレキシン細胞による麻酔導入から覚醒への制御機構―

オレキシンには、食欲増進作用のみならず覚醒の維持に重要な役割を果たしていることが知られている。オレキシン細胞は種々の神経線維により支配されていることが知られており、特に覚醒に関連のあるノルエピネフリンを伝達物質とする青斑核を起源とする神経線維やアセチルコリンを伝達物質とする橋脚被蓋核を起源とする神経線維がオレキシン細胞に至っている。このオレキシン細胞がこれらの神経伝達物質によりどのように支配されているかについては、in vitroの研究しかない。しかし、これらの研究では10^<-4>Mの高濃度ノルエピネフリンまたはアセチルコリンを使用している。また、従来のわれわれの研究ならびに他の研究者の報告では、大脳皮質におけるアセチルコリン放出が覚醒にとって重要な役割を果たしていることが知られている。本年度は、オレキシン細胞がどのように制御されているかどうかについて、reverse microdialysisの手法を用いてオレキシン細胞の存在する部位にノルエピネフリンまたはアセチルコリンを用量依存的に投与し、大脳皮質からのアセチルコリンの放出および脳波を測定した。Microdialysisプローブガイドカニューレ先端の位置はPaxinos & Watsonのラット脳地図によって、視床下部(Bregma-3.0mm,外側1.5mm、深さ6.2mm)、大脳皮質(Bregma-4.0mm,外側5.0mmから30度の角度で、深さ0.9mm)とし、実験57日前に留置した。アセチルコリンまたはノルエピネフリン濃度は10^<-8>、10^<-7>、10^<-6>Mとし、1時間毎に段階的にマイクロダイアリシスプローブ(膜長:2mm)を灌流して大脳皮質からのアセチルコリンの放出および脳波を測定した。視床下部へのアセチルコリン投与は濃度依存的に大脳皮質からのアセチルコリンの放出を抑制し、脳波もそれに伴って徐波化した。一方、視床下部へのノルエピネフリン投与は二相性の変化を示したにもかかわらず、脳波は徐波化した。以上の結果より、ノルエピネフリンおよびアセチルコリンの視床下部への投与は共に脳波は徐波化するが、大脳皮質からのアセチルコリンの放出には相違があることがわかった。
南米型トリパノソーマ感染による宿主アポトーシスおよびオートファジー抑制機構の解析

これまでにTrypanosoma cruzi感染細胞では宿主オートファジー経路が抑制されることを明らかにした。オートファジーは、まず隔離膜が伸長し、閉環してオートファゴソームとなり、さらにリソソームと融合してオートリソソームが形成され不要物が分解される。原虫感染細胞では、オートリソソーム形成が抑制されることがわかっているため、その前段階のオートファゴソーム形成について解析した。オートファゴソーム形成にはLC3と呼ばれるタンパク質がAtg4により修飾されLC3-Iとなり、Atg7、Atg3を介し、最終的にホスファチジルエタノールアミン(PE)が結合してLC3-IIとなることが重要である。この反応経路の中で、アポトーシス抑制因子c-FLIPがAtg3とLC3の結合を抑制することが報告されていることから、T. cruzi感染細胞におけるLC3-II形成について検討した。まず、LC3のN末端にGFPタグを付加したGFP-LC3細胞を樹立した。GFP-LC3細胞にT. cruziを感染させ、経時的に細胞を回収し、抗GFP抗体を用いてpull downアッセイを行った。感染細胞および非感染細胞で、LC-3と共にAtg3がpull downされたが、Atg7は検出できなかった。その理由としては、Atg7はLC3-Iに結合するとすぐにAtg3に置換してするためと考えられた。T. cruzi感染9時間後まででは、c-FLIPはLC3-Iとpull downされなかった。これまでの結果で、感染細胞におけるc-FLIPタンパク質の上昇は感染2日、3日後で順次増加することがわかっている。そのため、感染後のさらに培養しc-FLIPがLC3-Iに結合するかどうか検討する予定である。Trypanosomacruzi感染細胞では宿主オートファジー経路が抑制されることがわかっている。オートファジーはmTORが活性化されその下流へとシグナルが伝わるカノニカル経路と、エンドサイトーシスなどにより病原体を取り囲んだ膜を介する経路がある。原虫感染によりmTOR、オートファジー経路の上流が活性化されているかどうか調べる目的でAtg13のリン酸化について調べたところ、感染細胞でAtg13リン酸化抗体に反応するバンドがみられ、本経路はカノニカル経路であると推察された。これまでの結果で、感染細胞におけるc-FLIPタンパク質の上昇は感染2日、3日後で順次増加することがわかっているため、この時点でのLC-3とc-FLIPの相互作用を調べる予定である。Trypanosomacruzi原虫自身にもオートファジーの機構が備わっており、オートファジー関連タンパク質が見つかっている。その中でTcAtg8.1およびTcAtg8.2はLC3とホモロジーがあり、原虫の形態変化に機能していると考えられている。また、TcAtg3はAtg3のホモグとして知られており、本タンパク質が感染細胞内で宿主オートファジー経路に影響を及ぼす可能性があるか検討する。そこで、原虫のTcAtg8.1、TcAtg8.2およびTcAtg3をKOした原虫作製を行う。ゲノム編集技術CRSP/CAS9を用いて、これらの遺伝子をKOした際の表現系、形態変化への影響、宿主への感染について調べる。すでにTcAtg8.1とTcAtg8.2については、CRSP/CAS9に必要なgRNAを作製しており、原虫へのトランスフェションの条件検討を行っている。原虫感染によるc-FLIPタンパク質は感染3日後で高くなるため、その時期に抗GFP抗体を用いてpull downアッセイを行う。c-FLIPの関与が認められない場合には、宿主オートファゴソーム形成が正常に進行しているかを確認する。具体的にはウエスタンブロット法によりLC3-IからLC3-IIの変換を調べる。また、アポトーシス阻害剤を添加したときに、原虫感染細胞のオートファジーが抑制されるかを観察するとともに、逆にアポトーシスを誘導したときの変化についても調べる。

オートファゴソーム形成にはLC3と呼ばれるタンパク質がAtg4により修飾されLC3-Iとなり、Atg7、Atg3を介し、最終的にホスファチジルエタノールアミン(PE)が結合してLC3-IIとなることが重要である。この反応経路の中で、アポトーシス抑制因子c-FLIPがAtg3とLC3の結合を抑制することが報告されていることから、T. cruzi感染細胞におけるLC3-II形成について検討した。まず、LC3のN末端にGFPタグを付加したGFP-LC3細胞を樹立した。GFP-LC3細胞にT. cruziを感染させ、経時的に細胞を回収し、抗GFP抗体を用いてpull downアッセイを行った。感染細胞および非感染細胞で、LC-3と共にAtg3がpull downされたが、Atg7は検出できなかった。その理由としては、Atg7はLC3-Iに結合するとすぐにAtg3に置換してするためと考えられた。T. cruzi感染9時間後まででは、c-FLIPはLC3-Iとpull downされなかった。これまでの結果で、感染細胞におけるc-FLIPタンパク質の上昇は感染2日、3日後で順次増加することがわかっている。そのため、感染後のさらに培養しc-FLIPがLC3-Iに結合するかどうか検討する予定である。Trypanosomacruzi感染細胞では宿主オートファジー経路が抑制されることがわかっている。オートファジーはmTORが活性化されその下流へとシグナルが伝わるカノニカル経路と、エンドサイトーシスなどにより病原体を取り囲んだ膜を介する経路がある。原虫感染によりmTOR、オートファジー経路の上流が活性化されているかどうか調べる目的でAtg13のリン酸化について調べたところ、感染細胞でAtg13リン酸化抗体に反応するバンドがみられ、本経路はカノニカル経路であると推察された。これまでの結果で、感染細胞におけるc-FLIPタンパク質の上昇は感染2日、3日後で順次増加することがわかっているため、この時点でのLC-3とc-FLIPの相互作用を調べる予定である。
教育行動の機能的役割とその神経基盤の解明

本研究課題の目的は、大人から子どもへの教育行動が、学習者としての子どもの知識表象の獲得の支援といった利他的側面を越えて、教育者の大人自身の知識表象の再帰的強化といった互恵的側面を持っているという仮説を、認知神経科学的アプローチにより検証することである。教育者の教育行動は学習者の模倣行動と同等に累積的な文化進化の維持・革新にとって重要な役割を担っているが、従来の理論的枠組みでは、自己に何らかのコストを負いながら他者に利益を与える利他的行動であるとされてきた。これまでの申請者研究や関連研究を統合しながら、本研究課題では教育能力の新たな機能的役割(可能性)を探究することを目指すものである。
子宮体癌の代謝プロファイル異常の解明と治療への応用

多くの腫瘍では、好気条件下にもかかわらず、酸化的リン酸化を抑制し、乳酸生成に向かう糖代謝(解糖系)およびアミノ酸合成を亢進させている。子宮体癌は疫学的に肥満・インスリン抵抗性・耐糖能異常がリスク因子で、発癌・増殖に糖・アミノ酸代謝異常が関与している可能性があるが、明らかではない。本研究は、子宮体癌培養細胞株に代謝関連遺伝子のsgRNAライブラリーを導入し、in vivoでゲノム編集を用いた機能喪失スクリーニングを行い、子宮体癌の増殖に関連する代謝プロファイル異常を同定する。さらに、メトホルミンや酸化的リン酸化阻害剤との相互作用を明らかにし、癌局所代謝をターゲットにした新たな治療戦略を構築する。
多様な生理活性を有する化合物の全合成と活性分離

初期の目的であるすべての全合成を達成するとともに、構造-活性相関研究も行い医薬品のリード化合物となる類縁体を見いだした。以下の17以外に、抗HIV、幼根伸長阻害物質テルペスタシン類、神経系興奮抑制、増強活性物質カロポロシド類、貝類付着阻害、抗菌活性物質シデロキシロナール類および抗ピロリ菌活性物質なども含む。また、新反応も開発した。1.中枢神経活性作用と抗真菌作用を示す物質ES242類:構造-活性相関研究を行い、抗真菌作用と神経系に対する活性の分離を実現した。最も強力な中枢神経活性作用を示す化合物の工業的合成法を確立した。2.抗真菌作用、コレステロール低下作用および神経成長因子産生増強作用を有するカルビストリン類:カルボン酸類の細胞内シグナル伝達の阻害に対する構造-活性相関研究を行い、強力な活性をもつ化合物を合成した。NMRを用いる構造-活性相関研究法を開発した。3.抗菌活性と制がん活性をもつピラロマイシン類:糖質のみならずカルバ糖質を含む類縁天然物の全合成も完成した。アグリコン部分の構造-活性相関を明らかにし、抗真菌作用を見いだした。4.抗生物質テトラサイクリン類:発見後約50年ぶりに、光学活性な天然型のテトラサイクリンの全合成を完成した。さらに、制がん活性をもつ類縁体の全合成も行った。5インスリン受容体活性、制がん活性、抗HIV活性を示すアステリキノン類:デメチルアステリキノンの工業的合成法を確立した。インスリン活性の強力な類縁体も合成した。6.パラジウム触媒の特色ある反応性を利用した有機合成法の開発と応用:プレニルフェノール類の合成法の開発、カルボン酸からのアルデヒドおよびケトンの直接合成法の開発などを行った。7.光学活性なテトラヒドロフランおよびピランの新しい合成法の開発:抗腫瘍物質タキソールおよびウスチロキシンなどの合成研究を行い、新しい有効な合成法を開発した。多様な活性を有する、下記の天然生理活性物質について、第一目的である全合成研究を行い、初期の目的をほとんど達成することができた。1)抗エイズウイルス活性と植物の幼根伸長阻害活性を示すテルペスタシン:シクロペンテニル酢酸から適当な置換基と立体配置をもつシクロペンテノンを合成した。これにE,E-ファルネソールから得られるC_<13>の直鎖部分をMichael付加およびアルドール縮合的反応により導入し、5-15員縮環部分を構築した。最終的に、立体配置を整備してラセミ体の全合成を完成した。2)中枢神経活性作用と抗真菌作用を示す物質ES242類:糖質の一種であるL-ラムナールから得られるα,β-不飽和ラクトンに、オルト-メチルベンゾエート誘導体を連続するMichael付加反応およびDieckmann反応により縮環させ、ナフトピラン骨格を合成した。さらに、二量化の新規合成法を見いだした。3)抗真菌作用、コレステロール低下作用および神経成長因子産生増強作用を有するカルビストリン類:D-マンノースを原料にして得られるジエノールシリルエーテルの分子内Diels-Alder反応を経て、オクタヒドロナフトピラノン骨格を立体特異的に合成した。一方、側鎖部分のテトラエンジカルボン酸部分を、酵素的に得られる光学活性なヒドロキシカルボン酸から合成した。両者をエステル結合させ、カルビストリンAの全合成を完成した。

4)神経系に関与するphospholipase CおよびGABAreceptor ion channelの阻害物質であるカロポロシド類:D-マンノースを出発原料にしてスペーサー部分のヒドロキシカルボン酸を合成し、これにD-マンノースのチオグリコシド体を作用させて二糖類様マンノシルマンノニツク酸を得た。一方、サリチル酸からWittig反応を経て直鎖アルコール部分を合成した。両者をエステル結合させて、デアセチルカロポロシドの全合成を完成した。5)その他:タキソールなどの多環状化合物の不斉合成法の開発およびカルボン酸からアルデヒドへの新しい直接変換反応の開発を行った。多様な活性を有する、下記の天然生理活性物質について、初期の目的である全合成研究をほとんど達成することができたので、本年度から新たな全合成と構造-活性相関研究のための類縁体などの合成を行った。1)抗エイズウイルス活性と植物の幼根伸長阻害活性を示すテルペスタシン:既に確立したラセミ体の全合成の方法を活用して、天然型のテルペスタシンを全合成した。抗HIV活性を指標にして構造-活性相関を明かにするため、類縁体を数種合成した。2)中枢神経活性作用と抗真菌作用を示す物質ES242類: ES242類の効率の良い全合成を完成した。構造-活性相関研究を行い、抗真菌作用と神経系に対する活性の分離を一部達成した。3)抗真菌作用、コレステロール低下作用および神経成長因子産生増強作用を有するカルビストリン類:昨年度に確立した全合成法を用いて、オクタヒドロナフトピラノン骨格をもつ類縁物質の合成を行い、活性分離を試みた。また、構造ユニットの活性研究から発展させ、トリカルボン酸をもつスルホン酸アミド誘導体が新しい生理活性を示すことを見いだした。5)抗菌活性と海洋防汚活性をもつシデロキシロナール類:ヒドロキシイソプロピルフロログルシノールから系中で同時にo-D2キノンメチドとイソプロペニル体を生成させて環状付加反応を行い、基本骨格を合成した。6)抗菌活性と抗腫瘍活性をもつピラロマイシン類:アグリコン部分の合成法を確立した後、N-グリコシル化を行い、ピラロマイシン2cの全合成を完成した。7)その他:タキソールなどの多環状化合物の不斉合成法の開発およびカルボン酸からアルデヒドへの新しい直接変換反応の開発をさらに発展させた。多様な活性を有する、下記の天然生理活性物質について、初期の目的である全合成研究をほとんど達成することができた。本年度から新たな全合成と構造-活性相関研究のための類縁体などの合成も行った。1)中枢神経活性作用と抗真菌作用を示す物質ES242類:構造-活性相関研究を行い、抗真菌作用と神経系に対する活性の分離を検討した。最も強力な中枢神経活性作用を示す化合物の工業的合成法を確立した。2)抗真菌作用、コレステロール低下作用および神経成長因子産生増強作用を有するカルビストリン類:新たに展開されたカルボン酸類の細胞内シグナル伝達の阻害に対する構造-活性相関研究を行ない、強力活性をもつ化合物を合成した。大量合成法も確立した。3)神経系に関与するphospholipase CおよびGABA receptor ion channelの阻害物質であるカロポロシド類:中枢神経系に最も優れた活性を有する化合物の工業的合成法を確立した。4)抗菌活性と海洋防汚活性をもつシデロキシロナール