hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
道具使用に伴う感覚・運動・認知機能の統合

道具使用時の感覚と運動の統合作用を解明するため、動物実験ガイドラインに沿って行った3頭のニホンザルのピンセット(P)使用の学習過程の動作解析を行った。Pの先端を、左に置いた餌に向けて取り易い位置に置くとPを右手に取って餌を摘まめるまで訓練されている。新しい課題(Pの先端を逆方向に向ける等)に直面するとサルは対応を拒否する。しかし、3頭ともにPの向きに拘わらず個々に独創的な解決方法を創出し自由に使うようになった。Pを初めて提示された時に遡り四方向からの映像をフレーム毎に精査した結果、各個の解決は単に反復によるのでは無く、独自の経験を積極的に活かし独創的な解決法に結びつけている事が明らかになった。物を手にする時、ヒトは一番持ち易い様に手を伸ばし、手指を使って摘んだり、握ったりする。しかしもしその物が“道具"であれば、どのように使うかその機能を考え、持ち方を変える。たとえアプローチが難くとも、目的に適った、最終的に使い易いような取り方をする。本課題ではサルにピンセットを使わせ、その学習過程の運動・感覚・認知の統合を明きらかにしようとするものである。“サルがもしピンセットを道具として認識するならば、どのようにピンセットが置かれていても先々を予期した運動プログラムが構築され、機能的に手にとるはずである"との仮定の基で、初年度にピンセットで物を摘むことが出来るように訓練されたニホンザル2頭で次の実験を行った。ピンセットの向きを初期学習時から180度回転させて設置したところ、二匹共に同じような経過をたどりピンセットを機能的に握るようになった。まずはじめはピンセットから目を背け、ピンセットを取りに行くことを拒否する。もしピンセットを単に物として見ているならこのような事は起こらず勝手に握り手にとるはずである。試行を重ねると、手首を強く回転してピンセットを機能的に持とうとする動作がみられるが、十分手首を内転させることが出来ず諦める。ピンセットに触るが取れない時、偶然ピンセットが回転する事があるが1日目はそのまま諦める。しかし、この事象が数度重なった4日目からは、自分でピンセットを指で回転させる方法を使うようになった。その後、一度ピンセットを逆に持ち、手を代えて持ち直し、さらに元の手に渡し機能的に持ち直す事を自発的にするようになった。ちょうど、ヒトと同じような扱い方である。以上の学習過程を通して、ニホンザルでも先を予見した運動プログラムを構築できること、さらに、ピンセットを単なる物では無く、物を挟む“道具"として認識していることが明らかとなった。本課題はサルにピンセット(P)を使わせ、学習過程の運動・感覚・認知の統合を明らかにし、それを基にヒトの特性を解明しようとするものである。“サルがPを道具として認識するなら、どのようにPが置かれていてもヒトと同じように先々を予期した運動プログラムが構築され機能的にとるはずである"との仮説を設定し、学習過程を解析した。手で取れる所にある餌を、物(P)使って取る行動は、今までnon-human primateではほとんど報告されていない。狭いwork spaceでピンセットを操作させて得た今までの二頭のデータを解析した。新たな三頭目では、Pを置くテーブルを広くし動作の自由度を拡げた。全てのサルで最終的には人工物のPを機能的に自在に使えるようになった。これは繰り返し課題をさせることによる連合学習の結果によるものか、Pの機能を認識したための結果なのかをビデオ映像で学習過程を精査した。学習の途中経過は異なってはいるが、三頭のデータから解決に至るまでに2つの規則性明らかになった。similarity ruleとefficiency ruleである。前者では、一度修得した課題に近い状況の時(置く向きが近い時)、既得の運動を修正して使うやり方で、全てのサルで観察された。一方、後者は、similarity ruleでは解決出来ない事を自身が確認すると、今までに見せたことの無いやり方で解決する。一頭目は、自分でピンセットを指で回転させ既存の運動パターンを使う。二頭目は、ピンセットを放り投げ取りやすい向きに置き換える。三頭目では、ピンセットを広いスペース内で機能的に取れる所まで動かす方策をとった。この様に後者では個体差が出てくる。その主たる要因は、それまでにどのような経験をたどったか、実験者がそれまでにどのような課題をさせたかに依存し、その影響が順次次の学習に反映されていることが示唆された。道具使用は他の霊長類には見られないヒトに特有な、感覚ー運動ー認知の統合された活動である。

本研究課題では、道具使用時の感覚ー運動ー認知の関連性を明かにするため、ニホンザルの道具使用の運動学習過程を解析しヒトの特徴との差異を解明する。正常成人であれば、物を道具として手にするとき、end-state comfort effect、すなわちたとえ初めは難しいアプローチであろうと、最終の目的にかなった取り方をすることが報告され、道具使用時にend-state comfort effectが出現するか否かを明らかにすることで、被験者が道具というものをどのように理解し先々を見通した運動プランが出来るか否かを判定できる(Rosenbaum)。本課題の設定は一定の向きに置いてあるピンセットを自分で手に持ち、それで餌を取ることが出来るようになったニホンザルが、ピンセットをヒトと同じように道具として理解することが可能か否かを検討した。ピンセットで餌を取る動作を繰り返し練習したことによる、単なる連合学習による運動の可能性があるのではないか、という疑問にも答えるためである。次の課題を3頭のニホンザルに行わせビデオで撮影し、動作解析を行った。まず、細長い餌を色々な向きに置き、右手素手で取らせた。すると、時計盤1時の方向すなわち作業平面で、およそ水平から60度の角度までに傾いた餌は右上から、それ以上の傾きの時は手前左下からアプローチする。この動作は生得的なものと考えられる。次に、ピンセットを色々な向きにおく。すると、3時から1時までは、長い餌と同じ取り方をするが、それを越えると、さらに手首を内転して取ろうと努力し、上手くいかないと動作を停止する。しかし、ピンセットを取る時は、餌を取る時とは明らかに異なった操作方法をする事実は、ニホンザルもピンセットを道具と見なしている可能性が明らかになった。道具を日常的に使用するのはヒトの特徴である。道具使用には、道具を自分の身体の一部に組み込む新たな身体図式の構築が必要となる。本課題では、道具使用の神経基盤の解明をめざし、二ホンザルの道具使用学習過程の運動・感覚・認知の連繋過程を解析した。椅子に座らせた無拘束の3頭のニホンザルを使った。2頭は本課題を開始するまでに、実験者のガイドの基で一定方向に向けて置いたピンセット(P)を手に取って使えるまで学習済みでその結果は既に報告した(Hirai et al, 2010)。本課題では、Pを使ったことのない一頭を加え、三頭がどのように置かれたPでも自発的に手に取って餌を摘まむようになるまでの運動学習過程を前左右上方から撮影した映像をもとに動作解析をした。Pを自由に使えるまでの過程で三者に共通していることはsimilarilty ruleとefficiency ruleに則っている事である。前者は一度修得した課題に近い状況の時(置く向きが近い時)、既得の運動を修正して手に持つやり方である。後者は、それでも解決出来ない時(例えば形態学的制約)、Pを巧みに操作して取り易い向きに変えてから手に取る解決法である。自己の運動能力では直接達成できないと判断した時、最終目的のため補助的な運動を前もってプランする能力があることを示すと考えた。最終年度はこのような新しい、しかも三頭異なった解決方法(一頭目はPを指で回転させ、二頭目はPを放り投げ取りやすい向きに置き換える。
サーマルサイクル後の水硬性仮封材の硬度、辺縁漏洩への消毒液の影響

仮封材には口腔での過酷な環境に耐え感染を防ぐ性質、除去しやすいという相反する性質を求められ仮封における失敗は特に抜随後の感染をおこす危険性があるものの、その重要性に反して疑問や検討を持たれないまま受け入れられてきた。今回の研究では仮封材についてpH、膨張など仮封材の性質、消毒液による影響を検討することができた。次回治療までの感染を最小にする手法を検討し、歯の喪失の抑制に通じるものと示唆した。仮封材には口腔での過酷な環境に耐え感染を防ぐ性質、除去しやすいという相反する性質を求められ仮封における失敗は特に抜随時、感染を医原的に引き起こす危険性があるものの、その重要性に反して疑問や検討を持たれないまま受け入れられてきた。しかし,根管に用いた水酸化カルシウム材が,水硬性仮封材の硬化を妨げることや口腔内において,水硬性仮封材の深層は十分に硬化しない可能性もある.我々の先行研究では消毒綿球を置くことにより内部から水分を与えることで硬度の促進するという結果を得た。我々の先行研究では消毒綿球を置くことにより内部から水分を与えることで硬度の促進するという結果を得た。そこで本研究では仮封材について次回治療までの感染を最小にする手法について検討した。実験には,ポリエチレンテレフタラート製チューブ(外径10 mm,内径8 mm,長さ4 mm)100本を用いる.チューブは2本1組として使用する.すなわち,一方のチューブに水硬性仮封材(Caviton®,GC)を填塞し,4種類(次亜塩素酸ナトリウム、エタノール水酸化カルシウム材蒸留水)と乾燥綿球(コントロール)の被験材料(各10本)を含有した綿球(φ=5 mm)および乾燥綿球を封入し,両チューブを接合する.試料はサーマルサイクルを行い,その後,硬度試験機(EZ-TEST,島津製作所)にて,試料の被験材料側の水硬性仮封材の硬度を測定する.すなわち,測定針を1 mm/sで被験材料側から刺入し,測定硬度が20 Nを示すまでの刺入距離を3回測定した。エタノール、蒸留水が漏洩が少なく仮封材の硬化が促進された。また有意差はなかったがpHの違いにより硬化阻害を起こす可能性があった。水分による影響はあるが性質の違いについて,さらなる臨床に近い状況下での研究が必要であると示唆された。しかし、根管に用いた水酸化カルシウム材が、水硬性仮封材の硬化を妨げることや口腔内において、水硬性仮封材の深層は十分に硬化しない可能性もある。そこで本研究では仮封材について次回治療までの感染を最小にする手法について検討を行った。実験には、ポリエチレンテレフタラート製チューブ(外径10 mm、内径8 mm、長さ4 mm)100本を用いた。チューブは2本1組として使用し。すなわち、一方のチューブに水硬性仮封材(Caviton®,GC)を填塞し、他方には以下に示す4種類の被験材料(各10本)を含有した綿球(φ=5 mm)および乾燥綿球を封入し、両チューブを接合して試料を作成した。試料はサーマルサイクルを行い、その後、硬度試験機(EZ-TEST、島津製作所)にて、試料の被験材料側の水硬性仮封材の硬度を測定した。すなわち、測定針を1 mm/sで被験材料側から刺入し、測定硬度が20 Nを示すまでの刺入距離を3回測定を行った。水分を含んだ試料において硬度に有意な差はなかったが、薬剤の種類によって硬度の差があったことから性質による影響がある可能性が示唆された。今後の研究においてはpHの水硬性仮封材の硬化、辺縁漏洩への消毒液の影響についてpHによってどの程度性質は変化するのか。またそれらは仮封材の下の綿球に薬剤を浸すことで緩和することができるのか。緩衝溶液(PBS)を用いて精密なpH測定下で仮封材の硬化させた後、辺縁漏洩試験、および硬度試験を行う。平成23年3月31日までには主な発表は行っていないが、平成24年4月に海外の学会において発表を2回行っており、今後は論文を作成予定である。実験方法は多岐に渡るが、臨床において有益なデータが徐々にでてきており、今後においても良好な結果を得られる可能性を有している。従って、おおむね順調であるといえる。今後の研究においては、pHによってどの程度性質は変化するのか。緩衝溶液(PBS)を用いて精密なpH測定下で仮封材の硬化させた後、辺縁漏洩試験、および硬度試験を行い。

pHの水硬性仮封材の硬化、辺縁漏洩への消毒液の影響について検討を行いたいと考えている。900,000円を物品費として使用する計画である。(ストレインアンプ、特注治具、実験器具、マイクロCT消耗品、薬品類記録メディアを購入予定。)300,000円を成果発表を行うための旅費として使用する計画である。{国内旅費(日本歯科保存学会)、外国旅費(米国歯内療法学会)}
病的血管リモデリングの発症機転と質的変換機構の解明に対する挑戦的病態解析の試み

病的血管リモデリング発症進展の病理について、動脈硬化の早期病変は、定説とされてきたマクロファージの壊死や平滑筋細胞(SMC)の増生ではなく、SMCの分散であることが示唆された。また進展の転帰については、内膜内の非酵素化学的産物(Dアミノ酸、AGE)の生成蓄積が、血管の正常性を失わせるエラーとして、細胞外基質の瓦解や石灰化に関連し、血管の病的リモデリングの機転としてその後の病変進展の鍵となる事が示唆された。ヒトアテローム動脈硬化の初期病変(び漫性内膜肥厚(DIT)、initial lesion、Foam cell lesionから前粥腫病変に至る過程)の病理について、内膜の平滑筋細胞(SMC)が密度低下する事を明らかにしてきた。この事象が、SMCの病変内分散によるのかバランスのとれた細胞増殖と細胞死の上に成立つのか明らかにするため、細胞増殖・細胞死関連マーカーの出現様式を検討した。その結果、MIB-1はごく稀に陽性細胞を認めるものの全てマクロファージ(MΦ)であり、SMCの積極的な増殖のエビデンスを認めなかった。一方細胞死関連で、BAXはMΦ(25.335.3%)、SMC(0.030.17%)、LC3Bは、MΦ(陰性)、SMC(1.04.2%)であったが、いずれも陽性率は病変グレードによる有意な相関は無く、またすべてTUNEL陰性で細胞死には直結していなかった。以上から、硬化内膜のSMC密度の低下は、積極的な増減平衡でなく既存SMCの肥厚巣での分散によることが示唆された。また内膜の脂質沈着は、脂質プール内での弾性線維の存在や、血漿タンパクさらにはプロテオグリカン類との共局在性により、壊死等による細胞溶解成分や膜リン脂質ではなく、血漿脂質に由来し、プロテオグリカンにより内膜内に滞留することで脂質プールを形成し、SMC密度の低下に寄与することが示唆された。動脈硬化の進展病変の病理について、前粥腫病変以降のAdvance lesionの脂質プール内の細胞外基質にDアスパラギン酸の陽性所見を検出し、ラセミ変換といった非細胞生物的反応による物性変化が、脂質滞留などに影響し、進展病変の運命決定の一因を担う可能性が判明した。また血管病変の非破壊的イメージング解析と病理組織像の相互理解に、膠原線維、弾性線維を総括したEVG・MT染色が近似することを見出した。前粥腫病変から臨床的にも問題となる粥腫病変(アテローマ)に至る進行・進展機転について、剖検症例を用いて酵素によらない生体化学反応産物の局在様式を解析した。硬化の進行病変を脂質プール主体病変、石灰化病変、壊死巣を有するものに分類し、ラセミ変換アミノ酸であるDアスパラギン酸(D-Asp)、および終末糖化産物(AGEs)として、カルボキシメチルリジン、カルボキシメチルアルギニン、カルボキシエチルリジン、GA-ピリジン、AGE-3、3DGイミダゾロン、ペントシジン修飾の局在を検討した。D-Aspは、初期病変では陰性であり、粥腫病変の脂質プール内の細胞外基質や脂質プール外では病巣底部に斑状に陽性を認めた。一方、こうした所見は石灰化病変の有無とは、相関なく、ラセミ変換によるタンパクの荷電や構造変化によるカルシウム沈着への影響はないものと推測された。なお本年度のD-Aspの所見については、一部に血清に由来するバックグランドの影響も想定されるが、これを考慮しても、非細胞的反応による物性変化が、進展病変での何らかの役割担う可能性は示唆された。一方AGEsは、進行病変の石灰化部分に一致して認められ、硬化内膜での糖化修飾産物の蓄積は、病変の石灰沈着への運命付けに大きく関わることが示唆された。ただし、フォンコッサ染色によるカルシウム沈着の検出には、微小病変部での一部不一致も観察され、糖化修飾が石灰化沈着に先立って起こる「発症要因」なのか、進展を亢進させる「促進要因」なのかについての結論には至っていない。なお、D-Asp、AGEsといった構造変化や化学修飾は、その染色パターンから膠原繊維を主体とする可能性が高く、膠原繊維は代謝の半減期の長いタンパクとして知られるため、長期にわたる修飾の蓄積とその様式が進展病変の転帰に影響しうることが示唆された。・抗Dアスパラギン酸抗体を用いた動脈硬化進展病変の検出にあたり、当初解析に使用していた抗体の血清への非特異的反応が想定されたため、人体には存在しないヘモシアニンのDアスパラギン・コンジュゲートを抗原にした抗体による再解析を行っている。・終末糖化産物(AGE)の検出に関しては、想定される主な修飾体に対する抗体の染色条件の決定を終え、パラフィン標本の解析を行っている。病的な血管リモデリングである粥腫病変(アテローマ)の成立機転と、その後の病態転帰について解明するため、剖検症例の冠状動脈の硬化内膜の物性病態、特に非細胞的化学変化との関りを探る視点から、アミノ酸のラセミ体(Dアミノ酸)の存在蓄積状況について解析した。指標に構造的に変換が起きやすいとされるDアスパラギン酸(D-Asp)を対象に、進行病変を脂質プール主体病変、壊死巣を有するものに分類し、またそれぞれ石灰化病変の有無に留意しつつ、その局在状況を検討した。

昨年までの解析では、血漿由来抗原に対する陽性反応があり、厳密に特異反応の病理学的意義を解析考察する目的で、本年度はKLHをハプテンとする抗D-Asp抗体によって追証も行った。その結果、D-Aspは、初期病変段階の内膜硬化巣は総じて陰性であり、前粥腫病変(AHA III型に該当)症例で12.5%、粥腫病変の脂質プール主体病変症例で66.7%(石灰化なし60.0%、石灰化有77.8%)、壊死巣を有する症例では81.8%(石灰化なし81.3%、石灰化有82.4%)に、内膜内の存在を確認した。D-Aspは、(1)硬化内膜の細胞外基質や病巣底部に斑状に陽性であること、(2)基本的には石灰化領域とは独立した領域に陽性であり、(3)壊死巣含有病変ではその周囲により顕著に陽性を認めた。以上より、D-Aspは、石灰化ではなく、前粥腫病変からアテローマへの進展と相関しており、細胞外基質タンパクの構造異型などを招来することで、脂質の沈着の促進あるいは壊死巣形成といった病態の変遷・転帰に影響している可能性が示唆された。病的血管リモデリング発症進展の病理について、動脈硬化の早期病変は、定説とされてきたマクロファージの壊死や平滑筋細胞(SMC)の増生ではなく、SMCの分散であることが示唆された。また進展の転帰については、内膜内の非酵素化学的産物(Dアミノ酸、AGE)の生成蓄積が、血管の正常性を失わせるエラーとして、細胞外基質の瓦解や石灰化に関連し、血管の病的リモデリングの機転としてその後の病変進展の鍵となる事が示唆された。・平滑筋細胞の増減動態平衡の影響因子について、一定の解析を終了した。・石灰化病変を含む組織標本では、脱灰による抗原性保持など検討すべき要素もあるが、Dアスパラギン酸に関しての条件検討を終え、計画に基づき解析を進めており、概ね作業仮説に想定する結果を得つつある。・組織の膠原線維、弾性線維を総括してイメージングした病理像で捉える手段としてEVG・MT改変染色が有望であるとの見解を得ている。蓄積している剖検パラフィン標本の症例数を増やし、データの信頼性を増すほか、抗体の非特異性反応の検証を複数抗体のクローンを用い排除を図る。これに加え、加温による解析への影響を想定し、凍結切片での追証を行う方針である。医歯薬学これまでに得られた結果を基に、動脈硬化硬化の進行病変の非細胞生物的な化学変化の影響についての研究進める。具体的には、ラセミ変換で生成するDアスパラギン酸に加え、AGEs(終末糖化産物)の検討を行う。特に糖化修飾の官能基の検出については、現在各種の抗体・染色条件を速やかに終え本解析に入る予定である。また、石灰化を含む標本の扱いについては、ダメージを最小限にするため、標本ブロックの表面脱灰にとどめた処理による抗原性保持への影響をチェックし評価を行う。イメージングに関しては、染色色素の改変などによる像について、実際に画像解析による定量評価をおこない、組織像とイメージング像の科学的近似性について評価を行う。(未使用額が発生した状況)動脈硬化内膜での成分の化学修飾の局在態様を検討してきたが、特異性の検証過程で、結果に血漿成分に対する非特異的反応が含まれることが判明したことから、計画の延長を申請し別の抗体での追検証を行うこととしたため、未使用額が生じた。進行病変の解析結果は、一部標本の抽出による解析条件の検討と中間評価であり、予定している標本の全症例の解析に至っておらず、それに伴い抗体や標本作成や染色抗体といった消耗品の消費が抑制されたものである。(次年度における未使用額の使途内容)次年度に別クローンの購入及び新規抗体の調整を計画の上、免疫組織化学的解析を行うこととし、未使用額はその関連経費に充てる。
バナジウム系水素透過合金膜の機能活用による革新的アンモニア合成法の創成

バナジウム(V)は窒素に対する解離触媒能を有している。また、水素透過金属膜は原子状活性水素を連続的に供給する機能がある。これらの2つの機能活用により、バナジウム系水素透過合金膜を用いた新規アンモニア合成法の可能性について検討した。水素透過試験の結果、V系合金膜を用いた水素透過には1次側だけでなく2次側にもPd被覆が必要であることが分かった。水素透過しながら窒素ガスを吹き付けアンモニア合成試験を行ったところ、二次側表面にPdを格子状に被覆させたV系水素透過金属膜を用いることで、アンモニアが合成できる可能性が示された。また、Vと窒素の親和性に及ぼす合金効果を計算により明らかにした。水素透過金属膜には、膜の低水素圧側(2次側)表面に活性な水素原子を連続的に供給する機能がある。また、バナジウムには窒素分子の解離能があると考えられている。従って、バナジウム系水素透過合金膜について、水素透過をさせながら膜の2次側表面に窒素を供給することで、透過してきた水素原子と解離した窒素原子が反応し、アンモニアが生成することが期待される。本研究では、バナジウム系水素透過合金膜の2つの機能を活用したアンモニア合成法の可能性について検討した。実験には直径12mmのV-10mol%Fe膜試料を用いた。試料表面へのPd-Ag合金の被覆形態を変えた3つの試料について、水素透過試験およびアンモニア合成試験を行った。各試験は、温度623K、水素の1次圧0.4MPa、2次圧0.1MPaの条件にて行った。アンモニア合成試験では、水素を透過させながら2次側に大気圧の窒素を吹きつけた。この時、窒素の流量は透過水素流量に対して1:1となるよう調節した。発生するオフガスを蒸留水にバブリングし、その溶液にネスラー試薬を加えることでアンモニアの検出を行った。水素透過試験およびアンモニア合成試験を行った結果、V系合金膜を用いた水素透過には1次側だけでなく2次側にもPd被覆が必要であることが分かった。ネスラー試薬を用いたアンモニア検出の結果、Pdを格子状に被覆させたV系水素透過金属膜を用いることで、アンモニアが合成できる可能性が示された。当初の目標である、バナジウム系水素透過膜の機能活用による新規アンモニア合成法の可能性を確認した。しかしながら、アンモニアの生成量は微量であった。バナジウムは窒素に対する解離触媒能を有している。また、水素透過膜は原子状活性水素を連続的に供給する機能がある。本研究では、これらの2つの機能活用により、従来のハーバー・ボッシュ法とは異なる、バナジウム系水素透過合金膜を用いた新規アンモニア合成法の可能性を検討することが目的である。昨年までの研究により、V-10Feからなる水素透過膜の二次側表面にPd-Ag合金を格子状に被覆し、水素透過させながら2次側表面に純窒素を吹き付けることで、定性的ながらもアンモニアが合成できることを確認した。しかしながら、アンニア合成の収率は低かった。本年度は、さらに、V-Ru2元系合金、V-Pd2元系合金について、V-10Feと同様にPd-Agを格子状に被覆してアンモニア合成を試みた。しかしながら、いずれも合金膜でも収率が極めて低かった。また、Pd-Ag合金を格子状に被覆させた試料について、水素透過試験およびアンモニア合成試験を行った後に、その2次側表面をXPS分光装置を用いて分析したところ、試料2次側表面付近では窒素のシグナルはほとんど確認出来なかった。さらに、第1原理計算により、バナジウム中の合金元素と窒素原子との相互作用に及ぼす合金効果を系統的に調べた。反応場の圧力条件や温度条件、Pd表面被覆の形態およびバナジウム合金膜への添加元素などの影響や、窒素原子および酸素原子との親和性、反応律速段階等に関する調査により反応効率の向上を目指す必用がある。合成されたアンモニアの収率が低い原因として、吸着した窒素原子とバナジウム原子の相互作用が強すぎることが原因の一つとして考えられる。またバナジウムが酸化しやすいことも問題である。そこで、アンモニア合成の収率向上を目指して、窒素および酸素との親和力が弱い合金元素の探索を行う。具体的には、第1原理計算により、窒素および酸素との結合力が小さい合金元素について調査を行う。そして、これらの合金元素を添加したバナジウム合金膜を作製しアンモニア合成試験を実施する。水素分離金属膜バナジウム系水素透過合金膜を用いた新規アンモニア合成法の可能性を確認した。しかし、アンモニアの生成量は微量であった。その原因として、吸着した窒素原子とバナジウムの相互作用が強すぎることが原因の一つとして考えられる。そこで、研究期間を延長してアンモニア合成の収率向上を目指した追加実験を実施する。

窒素原子および酸素原子との親和力が弱い合金元素の探索を行う。具体的には、第1原理計算により、窒素および酸素との結合力が小さい合金元素の候補を選定する。そして、これらの合金元素を添加したバナジウム合金膜を作製し、アンモニア合成の追加試験を実施する。
水稲の節位別・次位別分げつの子実生産力に関する研究

出穂期がほぼ等しい生態型および草型を異にする水稲中生品種(合計5品種)を供試して、葉齢4.5前後の苗を約1/1000aポットに1株1本植で4株移植した.そして。無処理区と一次分げつをそれぞれ第5、8、11節まで除去する区(分1、分2、分3区)を設けて、分げつ確保節位が節位別・次位別分げつ穂重および株当りの生育と収量関連形質に及ぼす影響を調べた.【結果】1.無処理区の初発分げつは第2あるいは第3節1次分げつであり、分1、2、3区の初発分げつ日はそれぞれ無処理区の分げつ初期、分げつ盛期、分げつ終期最高分げつ期に相当した。2.主稈の節位別分げつ穂重は、各品種とも処理に関わりなく主として穂数の差により下位節ほど優ったが、各処理区では無処理区にくらべて株当り穂重に占める最下位節穂重の割合が高くなり、それより2節以上の節位の割合が低下した.また、同一節位の分げつ穂重は分げつ除去期間が長いほど優った.主稈の節位別の次位別分げつの平均1穂重は高次分げつほど劣り、また節位の上昇に伴う低下程度が大きかった.そして、同一節位の各次位別分げつの平均1穂重は分げつ除去期間が長いほど優る傾向がみられた.3.各品種とも分げつ除去期間が長くなるに伴って株当りの最高分げつ数、穂数は減少し、平均1穂重は増加する傾向がみられた.しかし、この株当り平均1穂重の増加程度には著しい品種間差異がみられ、分げつ能力に優れる穂数型品種での増加が大きかった.その結果、穂数型品種の株当りの穂重は分げつ除去期間に関わりなく無処理区にくらべて大きく減少せず、いく分増収する場合がみられたが、穂重型品種では1穂重の増加が小さく、除去期間が長くなるに従って減収する傾向がみられた.とくに、この移植後の分げつ除去に伴う増収効果は、分げつ出現から出穂期まで日数の多少と密接に関係しており、日数が多く確保される早植栽培で大きく認められた.出穂期がほぼ等しい生態型および草型を異にする水稲中生品種(合計5品種)を供試して、葉齢4.5前後の苗を約1/1000aポットに1株1本植で4株移植した.そして。2.主稈の節位別分げつ穂重は、各品種とも処理に関わりなく主として穂数の差により下位節ほど優ったが、各処理区では無処理区にくらべて株当り穂重に占める最下位節穂重の割合が高くなり、それより2節以上の節位の割合が低下した.また、同一節位の分げつ穂重は分げつ除去期間が長いほど優った.主稈の節位別の次位別分げつの平均1穂重は高次分げつほど劣り、また節位の上昇に伴う低下程度が大きかった.そして、同一節位の各次位別分げつの平均1穂重は分げつ除去期間が長いほど優る傾向がみられた.3.各品種とも分げつ除去期間が長くなるに伴って株当りの最高分げつ数、穂数は減少し、平均1穂重は増加する傾向がみられた.しかし、この株当り平均1穂重の増加程度には著しい品種間差異がみられ、分げつ能力に優れる穂数型品種での増加が大きかった.その結果、穂数型品種の株当りの穂重は分げつ除去期間に関わりなく無処理区にくらべて大きく減少せず、いく分増収する場合がみられたが、穂重型品種では1穂重の増加が小さく、除去期間が長くなるに従って減収する傾向がみられた.とくに、この移植後の分げつ除去に伴う増収効果は、分げつ出現から出穂期まで日数の多少と密接に関係しており、日数が多く確保される早植栽培で大きく認められた.草型を異にする日本稲2品種[黄金錦(穂重型)、中生新千本(穂数型)]、および日印交雑稲(水原258号)、半矮性インド稲(IR36)、長稈インド稲(タズカン)各1品種を供試し、5月下旬に稚苗を約1/1000aポットに4株(1株1本植)移植した。そして、各品種について対照(無処理、C)区と主稈の第5節、第8節、第11節分げつ(1次分げつ)までを除去する区(それぞれI、II、III区、各区2ポット)の4区を設け、主稈、1次分げつおよび株当りの一般的な生育調査を定期的に行った。また、1次分げつの出現日と止葉展開日、出穂日等を調査した。

穂揃期以降に、一部の品種について処理に伴う生理的変化を知るために止葉および止葉下2枚目の葉身の葉緑素含有量(SPAD値)を測定するとともに、光合成速度を測定した。成熟期には各品種の全株を抜き取り、主稈の節位別・次位別分げつの収量と収量構成要素を調査した。【結果】(1)処理に伴う分げつ抑制期間はI、II、III区でそれぞれ14.015.4、23.727.8、33.340.0日であり、1次分げつ出現節位はC区の2(3)8節に対して、I、II、III区ではそれぞれ613、915、1217節であった。分げつ抑制期間の長さに応じて各品種とも出穂期は遅延したが、その程度は分げつの抑制期間にくべて短かった。(2)分げつ抑制期間が長いほど穂揃期後の葉身の葉緑素含有量が高く、光合成速度も高く推移した。(3)分げつ抑制期間が長くなるに伴い最高分げつ数、穂数は少なくなった。しかし、一穂籾数は増加する傾向にあり、株当り籾数の処理間差は穂数にくらべて小さく、タズカンのI区、IR36のIIII区ではC区を凌駕した。また、登熟歩合はタズカンを除き、分げつ抑制期間の長い区ほど優る傾向があり、株当り精籾収量はタズカン、黄金錦ではI区、IR36ではII区、水原258号と中生新千本ではIII区で最大となり、籾/わら比もC区を上回った。穂数型品種中生新千本(N)と穂重型品種黄金錦(K)を供試し,葉齢約4.5の中苗を5月上旬(作(1)),5月下旬(作(2)),6月中旬(作(3))の3作期にわたって,約1/1000aポットに1株1本値で4株移値した.そして、両品種とも各作期で無処理区(C区)と1次分げつを第5,8,11節まで除去する区(分I,分II,分III区)の4区を設け,移植後一定節位まで1次分げつを除去し,分げつ確保節位を変動させた場合の生育と収量への影響を作期移動と関連させて検討した.【結果】両品種のC区の初発分げつ(第3節分げつ)日は作期により移植後4.36.0日目(N),5.17.6日目(K)であり,各処理区の残存最下位節分げつ出現日は,作期が遅いほど短く,分I区1420日目(C区の分げつ初期),分II区2634日目(同分げつ盛期),分III区3652日目(同最高分げつ期)となった.両品種の各作期の主稈葉数は分III>分II>分I>C区の順に多くなり,1次分げつ節位は,C区第29節,分I区第611節,分II区第915節,分III区第1217節となり,1次分げつ数はC区に比べ13本少なくなった.また,移動日から出穂期・成熟期迄日数は,分III>分II>分I>C区の順に作期が早いほど長くなったが,初発分げつ日出穂期迄日数はNで8442日,Kで8333日と逆に分III>分II>分I>C区の順に作期が遅いほど短くなった.最高分げつ数と穂数は,両品種とも作期の早いほどC>分I>分II>分III区の順に多くなった.一方,1穂重はKの作(3)分III区を除き,両品種とも各処理区がC区と同等かそれ以上の値を示し,特にKに比べNで著しかった.株当り穂重は,主として穂数に支配され両品種とも作期の遅いほど,また分げつ除去期間の長いほど劣る傾向にあったが,この程度はK>Nであり,Nの分I区はC区と同等かわずかに増加した.
マウス胚保未分化細胞での効率より遺伝子トラップ法の開発

マウス変異ES細胞ライブラリーの作成を念傾にES細胞でのジーントラップ法の開発を行った。(1)マーカー遺伝子導入体の中でジーントラップを起していないものの頻度を減少させるためのメガティブ選別ベッターの開発を行い、ポリAゲット等によりその頻度を40%に高めることが出来た。(2)マーカー遺伝子としてのβ-Galの発型特異性を指標に神経系で特異的に発現するジーントラップクローンの同定を進めた。同定したクローンについては子孫マウスを作成し、また5'RACE法による押入部位遺伝子産物の同定を行った。(3)マーカー遺伝子導入体中でのジーントラップ体を3'RAEE法により富便に同定し得ることを明らかにした。本法によればマーカー遺伝子の発現検索によらずジーントラップ体をES細胞の段階で同定し得る。同定したクローンについて子孫マウスの作成、遺分子構造の氾守を行った。
インド・イスラーム世界における「聖遺物」信仰の詩学と政治学

平成20年度は、これまでの現地調査および文献調査の際に収集した情報・文献・資史科のデータベース化を試みるとともに、西北インド(ラージャスターン州アジュメール市)に位置するインドで最も有名なムスリム聖者廟、ムイーヌッディーン廟において現地調査を実施した。同廟の参道には「聖遺物」をモチーフとした護符・御守を売る露天や店舗がいくつも確認できた。また、同廟では毎年、預言者祭に同廟が保管する「預言者の髪の毛」2本が別々の場所で同時に一般公開される。廟の関係者にそれらの来歴を訊ねたところ、一方はずいぶん長い歴史をもつが、他方は数年前に同聖者廟の関係者が寄進を受けたものであることが分かった。アジュメールならびにデリーでは、ラージャスターン州のイスラームやムスリムに関する文献・資史料を収集し、新しく収集した情報とともにそれらのデータもデータベースに追加した。以上の現地調査、文献調査、情報・文献・資史料の整理・分析の成果は、「日本文化人類学会第42回研究大会分科会侵犯する身体・増殖する身体(代表:田中雅一、2008年5月31日、京都大学)」にて「拡散するイスラームの聖遺物と聖地:あるいは分有された預言者の身体」として、また「東京外国語大学アジア・アフリカ言語文化研究所・共同研究プロジェクトムスリムの生活世界とその変容:フィールドの視点から(代表:大塚和夫、2008年10月18日、東京外国語大学アジア・アフリカ言語文化研究所)」にて「マテリアル・イスラームの人類学:聖遺物とその「複製品」をめぐって」として、それぞれ口頭による発表をおこなった。さらに、研究論文のかたちでは「イスラームの聖遺物信仰とフェティシズム」(田中雅一編『フェティシズム研究2越境するモノ』京都大学学術出版会、近刊)として成果を一般に公開した。平成18年度は、これまでにインド・パキスタンを中心として収集してきたイスラームの「聖遺物」に関する情報と文献・資史料の整理をおこなうと同時に、それらのデータベース化を試みた。また、新しい情報と文献・資史料の収集のために、関連図書を購入するとともに、国内他大学の附属図書館等で文献調査をおこなった。この過程で、インド・パキスタンで流通している「聖遺物」の護符・御守の図柄が、トルコのトプカプ宮殿宝物殿所蔵の「聖遺物」を手本としているらしいことが分かってきた。そのため、9月上旬にイスタンブールに出張し、トプカプ宮殿宝物殿の「聖遺物」を拝観するとともに、巡礼者・観光客に対して聞き取り調査をおこなった。巡礼者・観光客のなかにはインド人・パキスタン人のムスリムの家族やグループがおり、非常に有益な情報を得ることができた。「聖遺物」信仰および「聖遺物」を象った護符・御守に関する事例の現時点での研究成果は、6月にアンマンで開催された第2回世界中東研究会議(Second World Congress for Middle Eastern Studies)で口頭発表(Pohtics, Poetics and Pop in the Succession of Holy Relics : Examples from South Asian Muslim Society.)をするとともに、日本オリエント学会の英文雑誌Orient誌上で公開した(Pohtics, Poetics and Pop in the Succession of Holy Relics:Examples from South Asian Muslim Society. Orient Vol.XLII2007.pp.71-93)。平成19年度は、これまでにインド・パキスタンを中心として収集してきたイスラームの「聖遺物」に関する情報と文献・資史料の整理をおこなうと同時に、それらのデータベース化を試みた。この過程で、インド・パキスタンで「預言者ムハンマドの子孫」であることを主張する「サイヤド」と呼ばれる人々が、イラン東部の都市、マシュハドのイマーム・リザーの墓廟と、そのマシュハド近郊の町、ニーシャープールにあるイマーム・リザーの足跡廟を重要な巡礼地とみなしていることが分かった。そのため、9月上旬にイランに出張し、マシュハドのイマーム廟とニーシャープールの足跡廟を参拝するとともに、巡礼者・観光客による参拝行為の観察をおこなった。こうした調査研究の成果は、「接触領域としての「聖遺物」信仰:南アジア・ムスリム社会の事例から」(『コンタクト・ゾーン』1,京都大学人文科学研究所人文学国際研究センター,pp.60..71.)や、「聖者信仰と聖遺物:インド・イスラーム世界を中心に」(『世界史の研究』212,山川出版社,pp.1-14)のような専門家向けの学術的な雑誌だけでなく、「預言者ムハンマドの「遺品」信仰:南アジア・イスラーム世界の聖遺物」(赤堀雅幸編『民衆のイスラーム:スーフィー・聖者・精霊の世界』山川出版社)というかたちで一般読者を対象とした書物においても公表した。

アジュメールならびにデリーでは、ラージャスターン州のイスラームやムスリムに関する文献・資史料を収集し、新しく収集した情報とともにそれらのデータもデータベースに追加した。以上の現地調査、文献調査、情報・文献・資史料の整理・分析の成果は、「日本文化人類学会第42回研究大会分科会侵犯する身体・増殖する身体(代表:田中雅一、2008年5月31日、京都大学)」にて「拡散するイスラームの聖遺物と聖地:あるいは分有された預言者の身体」として、また「東京外国語大学アジア・アフリカ言語文化研究所・共同研究プロジェクトムスリムの生活世界とその変容:フィールドの視点から(代表:大塚和夫、2008年10月18日、東京外国語大学アジア・アフリカ言語文化研究所)」にて「マテリアル・イスラームの人類学:聖遺物とその「複製品」をめぐって」として、それぞれ口頭による発表をおこなった。さらに、研究論文のかたちでは「イスラームの聖遺物信仰とフェティシズム」(田中雅一編『フェティシズム研究2越境するモノ』京都大学学術出版会、近刊)として成果を一般に公開した。
骨系細胞分化と炎症性疾患でのリソソーム転写因子の役割

骨芽細胞は骨基質合成を活発に行うため、分解系であるリソソームの機能は殆ど解析されていなかった。そこで本研究ではTFEB発現変化による骨芽細胞、脂肪細胞、軟骨細胞への分化への影響を解析した。TFEBをノックダウンすると骨芽細胞の分化は抑制され、逆にTFEBを過剰に発現させると骨芽細胞の分化は促進した。その際に、小胞体ストレス応答に関与するATF4及びCHOPが負の制御を行っていることも見出した。これらの知見からTFEBは骨芽細胞分化で発生する小胞体ストレスの緩和に必要な因子と考えられる。TFEBは脂肪細胞分化への関与について最近リソソームの新しい機能として、低栄養状態と富栄養状態を認識して、種々のシグナルを発することが知られている。リソソーム内の低いアミノ酸レベルを認識するV-ATPaseは、Ragタンパク質を経由して、栄養センサーであるmTORC1へとシグナルが伝達し遊離状態となるこの時にTFEBが遊離して核内で転写され活性化する。しかし、富栄養状態ではmTORC1は活性化したままでRagと複合体を形成する。この状態ではTFEBの転写は起こらない。未分化間葉系細胞は骨芽細胞、脂肪細胞、軟骨細胞へ分化すること、さらに富栄養状態が続くと骨芽細胞が減少し、脂肪細胞が増加することを考えれば、TFEBが制御するリソソームの富栄養と低栄養状態の認識機構が直接的に骨芽細胞と脂肪細胞の分化誘導に関与するのではないかと考えられた。TFEB過剰発現による脂肪細胞への分化への影響TFEBの過剰発現細胞を用いてマウス胎仔由来の線維芽細胞3T3-L1あるいは骨髄細胞を脂肪細胞と分化誘導した。分化誘導試薬(インシュリン・3-イソブチル-1-メチルキサンチン・デキサメタゾン)分化培地を用意した。(血清を含むDMEM培地10 mlに対し添加試薬(1)インシュリン100 μlと(2)デキサメタゾン50 μlと(3)イソブチルメチルキサンチン10 μlを添加した)2. 100 %コンフルエンス状態になった2日後に分化培地に交換し、48時間(2日)培養した。3.分化培地を除去した後、必要であれば維持培地(血清を含むDMEM培地10 mlに対し添加試薬(4)インシュリン100 μl添加)に交換して5 10日間培養した。予想通り、TFEB過剰発現細胞により脂肪細胞への分化することが分かった。今後は分子メカニズムについて解析する予定である。TFEBの過剰発現細胞の構築は骨芽前駆細胞での経験から容易であった。マウス胎仔由来の線維芽細胞3T3-L1を用いてを作成し、脂肪細胞と分化誘導した。予想通り、TFEBを過剰発現させるとコントロール細胞と比べて脂肪細胞への分化した。種々のマーカー遺伝子も殆ど過剰発現細胞で増大していた。1.TFEB過剰発現細胞による軟骨細胞への分化への影響ラット鼻中隔軟骨から分離した初代軟骨細胞を用いた。本細胞にアデノウイルスベクターを用いてTFEBを発現させる実験系を確立した。成熟軟骨細胞は、コラーゲンType II、IX、XIやプロテオグリカンなどの細胞外マトリクスを産生する。軟骨細胞の細胞外マトリクスを染色するAlcian Blueによって分化の程度を比較した。またリアルタイムPCR法によって軟骨細胞分化マーカーであるALP、Col2α、Col10α1、VEGF、MMPsを用いて過剰発現細胞はマーカー遺伝子のレベルが増大していることを確認できた。TFEBを過剰発現させた軟骨細胞は分化が進んでいることが分かった。今後はその詳細なメカニズムについて解析する予定である。2. TFEBに関するマクロファージから破骨細胞(免疫系細胞)への分化機構TFEBを過剰発現させたマクロファージ系細胞RAW-D細胞にRANKLとMCSFを加えて34日間培養し破骨細胞へ分化させた。破骨細胞の分化・成熟は酒石酸耐性酸性ホスファターゼ(TRAP)による観察と定量によって行った。また破骨細胞のマーカー遺伝子であるRANK、c-fms,integrinβ3、CTR、DC-STAMP、OC-STAMP、Src、カテプシンKなどの各種マーカー遺伝子の発現レベルについて、リアルタイムPCRを用いて定量した。今後はさらにTFEB過剰発現細胞による軟骨細胞への分化への影響を解析する。具体的にはラット鼻中隔軟骨から分離した初代軟骨細胞を用いる(コスモバイオ社)。本細胞にアデノウイルスベクターを用いてTFEBを発現させる実験系を確立する。軟骨細胞の細胞外マトリクスを染色するAlcian Blueによって分化の程度を比較する。

またリアルタイムPCR法によって軟骨細胞分化マーカーであるALP、Col2α、Col10α1、VEGF、MMPsを用いて過剰発現細胞はマーカー遺伝子のレベルが増大していうことを確認する。29年度が最終年度であるため、記入しない。歯学矯正学29年度が最終年度であるため、記入しない。
高周期１４族元素配位子の感応性挙動を鍵とする不活性分子変換反応の開発

本研究の目的は,高周期14族元素-遷移金属間結合の感応性挙動を触媒機能として活用した新しい分子変換反応を開発し,感応性化学種による新しい触媒化学・合成化学を切り拓くことである。種々検討した結果,独自に開発したPSiN-ピンサー型配位子を用いることで,白金触媒によるアレーン類の炭素-水素結合ボリル化応を実現した。本反応は,電子不足アレーン類について円滑に進行する。また,基質のフルオロ基を利用した位置選択性の制御が可能であることから,合成化学的有用性も高く,また従来のIr触媒系とは異なる新しいボリル化反応として大きな意義を持つ。さらに,独自に開発したPGeP-ピンサー型配位子を持つパラジウム錯体を触媒とすることで,ギ酸塩を二酸化炭素源かつ還元剤とするアルケン類のヒドロカルボキシル化反応を開発することに成功した。本反応は様々なスチレン誘導体のみならず,ビニルスルホンやアクリル酸エステル誘導体にも適用可能であり,対応する飽和カルボン酸を高収率で得ることができた。本反応は,金属還元剤を必要としない実用的二酸化炭素固定化反応として,合成化学的有用性が非常に高い。興味深いことに,本反応は対応するケイ素配位子やスズ配位子錯体では進行しなかったことから,ゲルマニウム配位子の感応性化学種としての有用性を示した結果として意義深い。以上の成果は,遷移金属触媒化学におけるケイ素やゲルマニウムといった高周期14族元素の感応性化学種としての有用性と実用性を実証した結果として大変意義深く,本研究領域の進展に大きく寄与するものである。28年度が最終年度であるため、記入しない。本研究の目的は,高周期14族元素-遷移金属間結合の「感応性挙動(動的挙動)」を触媒機能として活用することで,不活性分子の新規分子変換反応を開発することである。そのための分子設計として,従来の対称型PSiP-ピンサー型配位子に代わって,非対称PSiN-ピンサー型配位子を新たに設計し,これを持つ様々な錯体合成と,それらを用いた触媒反応開発に取り組んだ。その結果,PSiN-ピンサー型配位子をもつ白金錯体を触媒として用い,ビスピナコラートジボロンをホウ素源として用いることで,フルオロアレーンをはじめとする電子不足アレーン類の炭素-水素結合の直接ホウ素化反応が進行することを見出した。本反応は,白金錯体を触媒とする初めての炭素-水素結合ホウ素化反応である。また興味深いことに,現在汎用されているイリジウム触媒を用いる反応系とは,そのホウ素化の位置選択性がことなることも明らかとなった。この特徴を利用することで,これまでホウ素化が困難だった,立体的に混み合ったアレーン類のホウ素化反応が可能となった。これらの結果は,非対称型の高周期14族元素含有ピンサー型配位子という新たな配位子設計が不活性結合活性化反応に有効であることを実証したものとして大きな意義を持つ。非対称PSiN-ピンサー型配位子を持つ白金錯体を用いることで,電子不足アレーン類の炭素-水素結合の直接ホウ素化反応の開発に成功し,論文発表することができたから(Chemical Communications, 2015, 51, 17762)。本結果は,当初想定したとおり,非対称型の配位子設計が不活性結合活性化反応に有効であることを示し,また高周期14族元素配位子の有用性を実証したものであり,本新学術領域の進展に大きく寄与するものである。PSiN-ピンサー型白金錯体による炭素-水素結合ホウ素化反応をさらに発展させるべく,基質適用範囲の拡大に努めるとともに,白金以外の金属(ニッケル,パラジウムなど),あるいはケイ素以外の高周期14族元素配位子(ゲルマニウム,スズなど)について検討を行う。

また,ホウ素以外の典型元素による炭素-水素結合の直接官能基化反応を試みる。例えば,アルミニウムやケイ素などの反応剤との反応を検討する。これらの検討によって,合成反応としての有用性を高めるとともに,高周期14族元素含有ピンサー型錯体の触媒機能の探求と研磨に努め,触媒設計における新指針として確立する。28年度が最終年度であるため、記入しない。
非ワルラス型価格決定メカニズムの理論と応用

本研究プロジェクトの当初の目的は、(1)月1回程度、各回2名程度の形式で、コンスタントに研究会を開催し、専門分野の知識を深めると共に、(2)研究代表者・分担者の単著・共著の論文・書籍を公刊することである。さらに、今年度から開始した課題として、(3)サーチ理論の発展と応用を、本プロジェクトの研究代表者・分担者の研究関心・成果と関連付ける形で概観する単行本を執筆中である。(1)平成17年度の研究会の実施状況は以下のようである。紙面の都合上、平成16年度については省略する。5月20日(金):安達裕之(東洋大学)、浅野貴央(大阪大学)9月15日(木):滝沢肇(IMF)10月21日(金):尾崎裕之(慶応大学)、松井彰彦(東京大学)11月18日(金):新豊直輝(琉球大学)、堀宣昭(九州大学)12月16日(金):堀井亮(大阪大学)、野坂博南(関西大学)3月24日(金)-25日(土):清水崇(関西大学)、工藤教孝(北海道大学)(2)研究代表者・分担者が、労働経済学、貨幣理論の分野で、様々な論文を公刊した。詳細は、次ページで。(3)サーチ理論の主たる応用分野は、マクロ経済学・労働経済学・貨幣理論である。これら諸分野への応用研究を概観する専門書『サーチ理論:発展と応用』を、現在共同執筆中である。詳細は、次ページで。研究会実施の詳細:平成16年度は、6月から3月にかけて研究会を行い、当プロジェクトの研究メンバーの他、以下のような国内外の若手トップ研究者が報告した。●神林龍(東京都立大学):日本におけるDirected Search理論の実証●石原秀彦(専修大学):分散型市場経済における均衡の非決定性についてなお、研究メンバーは、初の日本語による包括的なサーチ理論の解説書/研究書を刊行すべく、現在執筆を進めている。(1)今年度の研究会の実施状況は以下のようである。昨年同様、国内外の第一線の研究者たちの報告を受けた。詳細は、次ページで。
ADSCの骨芽細胞分化促進におけるエピジェネティクス修飾機構の研究

エピジェネティクス調節はDNA配列変化を伴わない、遺伝子発現制御機構である。幹細胞がより高分化する際には、エピジェネティクス調節により発言できない遺伝子領域が増え、分化した成熟細胞へと変化する。SVFおよびccdPAsにおいてエピジェネティクス解析を行った。CpGアイランドにおけるメチル化配列において、RUNX2,OPN,COL1,DLX5においては優位差を認めなかったが、ATF4およびBNP2において優位差を認めた。これに対し、ccdPAsではRUNX2発現やOPN分泌が高値であった。このことから、ATF4の影響下の結果、RUNX2の発現やOPN分泌が促進すると考えられた。幹細胞がより高分化な細胞に分化する際には、エピジェネティクス調節により発現できない遺伝子領域が増え、分化した成熟細胞へと変化する。脂肪組織由来幹細胞は骨芽細胞分化能を持つことがわかっている。ヒト腹部脂肪細胞より培養した、脂肪幹細胞(以下SVF)および天井培養由来脂肪幹細胞(以下ccdPAs)についての研究を行った。in vitroにおいて、骨分化誘導において、ccdPAsのほうがSVFにくらべ、アリザリン染色・ALP染色およびRNA解析にて、骨分化しやすいことがわかった。そのため、骨分化過程において、ccdPAsのほうがより高分化細胞でることが示唆された。加えて、以前から我々が報告してきた通り、ccdPAsは脂肪細胞への分化もよりしやすいことがわかっているため、今後の間葉系幹細胞研究の礎になる可能性がある。以上のことは、平成26年10月日本形成外科学会基礎学術集会において報告済みである。上記のことを、in vitroおよび、in vivoでも証明し、かつエピジェネティクス解析し、報告する予定である。in vitroにおいて、骨分化誘導においてccdPAsのほうがSVFに比べ、アリザリン染色・ALP染色およびRNA解析にて、骨分化しやすいことがわかった。そのため、骨分化過程において、ccdPAsのほうがより高分化細胞であることが示唆された。加えて以前から我々が報告してきた通り、ccdPAsは脂肪細胞への分化もよりしやすいことがわかっているため、今後間葉系幹細胞研究の礎になる可能性がある。以上のことは、平成26年10月日本形成外科学会基礎学術集会にて報告済みである。平成27年、SVFおよびccdPAsにおいてエピジェネティクス解析を行った。以上のことは、平成27年10月日本形成外科学会基礎学術集会にて報告済みである。平成26年度の研究内容についてヒト腹部脂肪細胞より培養した、脂肪幹細胞(以下SVF)および天井培養由来脂肪幹細胞(以下ccdPAs)についての研究を行った。また、エピジェネティクス調節の研究を行った。メチル化においてより優位な細胞の可能性があり、現在解析中である。これも今年度中に報告予定である。in vivoにおいても、マウスの側頭骨へSVFとccdPAsをsca-holdとともに移植した。それをマイクロCT解析および顕微鏡的評価にて、ccdPAsが骨分化しやすいことが示唆された。今後RNA解析を加えながら、報告予定である。マウスからcccdPAsの採取に成功すれば、上記と同様の研究を行いたいと閑雅ている。その他、予備実験として、骨分化に必要なmediumをそれぞれ個別に評価しており、その結果も別途報告予定である。形成外科エピジェネティクス調節の研究結果はほぼ出そろったため、今後解析し、追加研究が必要であれば、行う予定である。

また、平行してRNA解析も行い、上記研究の裏付けも行っていく予定である。in vitroでのccdPAsの骨分化は証明されたが、三次元培養での報告はないため、さらなる研究を加えていく予定である。ほぼ予定通りです。端数のみです。次年度必要研究費として使用予定です。平成27年度の消耗品費に含めて使用する。