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初期キリスト教仮現論とイスラームにおけるその変容

これにより、イスラーム的仮現論の諸相に今後新たな光が当たることが期待される。2.次に、主要課題に取り組む過程で派生的に展開した一連の研究についても述べておきたい。先に述べたように、仮現論と「主の僕」神学には密接な関係があることが想定されるが、実際、後者を巡る洞察は、前者の問題にいわば「裏側から」アプローチすることにつながる。ユダヤ教・キリスト教・イスラームにおける「主の僕」としてのメシアのイメージの解明を通じて、特殊な異端としての仮現論理解を超出した包括的視野を得ることができるだろう。現段階では、特に『トレドート=イェシュ』とユダ=ハレヴィ著『クザリ』に関連して、革新的なテクスト解釈の可能性を発見した。3.最後に、より宗教哲学的研究の側面を持った研究展開として、アブラハム宗教における掟ー仮象ー救済という星座的布置の解明という探求的展望が開けたことを付記しておく。本研究の成果はそのための土台の役割を果たすことになるであろう。採用初年度に当たる本年は、主として資料の収集・読解に精力的に従事するとともに、今後の研究について、一定の方向性を確立するように努めた。また、若干の研究成果を発表することにも成功した。本年度の最初の5ヶ月(四月から八月)は、研究の構想を膨らませることに意識的に時間を割いた。この間、様々な着想やアイディアが得られたが、それらを具体的にどのように実証していくかという問題が課題として残った。日本においてアクセスできる資料が限られていたため、体系的な調査を直ちに開始することは困難であったが、手元にある文献を基に、問題点を抽出することに留意した。また、本研究のテーマに対するアプローチをより広いパースペクティブの下に置くため、心理学・社会学・人類学・哲学といった周辺人文学諸領野についても見識を深めた。本年度の後半(九月から三月)は、ドイツのハイデルベルク大学神学部に滞在し、原典や研究文献の収集・読解に専念した。これについては一定の成果が挙がったものの、研究遂行に当たって、事前には予期できなかった状況が生じたため、研究計画を練り直すことを余儀なくされた。すなわち、ハイデルベルクに到着後、現地での受入研究者に相当するProf. Winrich Loehrより、2018年刊行予定の初期キリスト教仮現論に関する論文集が目下編纂中であるという事実を教示されたため、研究計画書において素描していた一連の個別的研究のうち、上記の論文集で直接的には扱われないと予想されるトピックに精力を傾注するという戦略を採ることにした。とはいえ、最新の研究動向を積極的に反映させたアップデートであるという意味では、こうした軌道修正をあながち否定的に評価する必要性はないものと思われる。以上を総括すると、本研究課題はおおむね順調に進展しているといえるだろう。1イスラーム伝統において、アラビア語の単語mi`rajが預言者ムハンマドの神秘的天界上昇を表すのに用いられる理由が、(a)天国と地上が宇宙的階梯によって結ばれているという世界観(b)預言者ムハンマドによるvisio Deiの可能性、という二つの神学的トポスを背景にしてのみ理解可能であることを示した。
土壌環境、土壌微生物群集機能、植物生理の相互動態に基づく生態系資源獲得構造論

本研究は、土壌生態系中の物質動態を、土壌環境、土壌微生物機能、植物の反応を包含した生態系の資源獲得の構造として類型化しようとする試みである。フィールドにおける物質動態の定量評価(有機物動態・酸動態)によれば、強酸性森林土壌においては、有機物の分解が抑制されるとともに(有機物分解速度定数の低下)、下層土への水溶性有機物フラックスの生じることが明らかとなった。これらはいずれも、酸性土壌中への有機物蓄積を促進する契機となることから、有機物動態において重要な位置を占めるものと判断される。また異なる森林・耕地土壌を用いて土壌微生物によるセルロース分解活性を解析した結果、微生物バイオマスは土壌有機物量によって決まるが、セルロース分解速度は微生物活性によって決まり、その活性は地温とpHという環境要因により規定されることがわかった。また模擬生態系に植物を導入すると、植物は土壌酸性化の促進と易分解性有機基質の付加という異なる機構により土壌有機物動態に影響を及ぼすと推察された。これまで考案された土壌有機物動態モデルの多くでは、一定範囲の分解率を持つと仮定されたいくつかの土壌有機物プールの増減を予測する。本研究の結果からはむしろ逆のアプローチ、すなわち測定可能な有機物プールの分解速度の規定要因を、土壌環境、酸性動態、微生物活動、植物生理と絡めてパラメーター化することが有効であることが示された。土壌の性質の違いが微生物の活動をどのように制限あるいは助長するか調べるため、異なる気候条件下の森林・耕地土壌を用いて、セルロース分解活性の推移を追跡した。その結果、微生物バイオマスは土壌有機物量によって一元的に決まるが、セルロース分解速度は微生物の活性によって決まり、その活性は地温とpHによって規定されている事がわかった。また、森林は土壌有機物量も多く微生物バイオマスも多いが、比較的低い地温とpHのために活性が抑制され、分解速度は小さくなり、高い土壌有機物量を維持する系になっていると考えられる。一方耕地は、土壌有機物量も微生物バイオマスも少ないが、比較的高い地温とpHのために活性は抑制されず分解速度が大きくなり、有機物を消費する系になっていると考えられる。以上を踏まえ、特殊な場合を除いてセルロース分解は土壌呼吸による有機物分解を代表しており、セルロース分解速度から土壌呼吸速度-現地で実測されるもの-を推定できる事がわかった。これまで土壌有機物の動態を記述するモデルは数多く考案されているが、多くは一定の分解率を持つと仮定されたいくつかの土壌有機物プールの増減を予測する構造となっている。本研究の結果からはむしろ逆のアプローチ、すなわち測定可能な有機物プールの分解速度の規定要因を模索することが有効であることが示された。このようなアプローチは、これまで著名なモデルの有効性が森林あるいは草地・耕地に限定されがちだった欠点を克服しうる可能性を持つと考えられる。また本課題で目標とする土壌/微生物/植物間の相互関係を記述する際にも、動的な要素-この場合有機物プールよりその分解速度定数-を変数として考察する手法が有効であると思われる。今後、ここで有効性が示されたセルローステストを併用しながら、植物を加えたミクロ模擬生態系における物質動態を調べていく予定である。
結晶構造に基づいたFERキナーゼの生理作用と制御メカニズムの解明

生体膜の平坦な部分からチューブ状膜構造が陥入する現象は、膜小胞輸送やオルガネラの形成過程など、よく見られる膜のダイナミックな動きである。バードメイン二量体のバナナ型の構造は、膜をチューブ状に変形させるように特化した膜結合タンパク構造である。Fer/Fesバードメインは、そのC-末側にコイルドコイル(CC)ドメインがあり、例外的に膜結合・変形能が非常に弱い。本研究では、FerのN-端半分の結晶構造を決定し、バードメインとCCドメインが一体となって、バナナ型の二量体を作っていることを明らかにした。CCドメインは膜結合表面に干渉する位置にはなかった。しかし、既知のバードメインとの構造比較から、膜結合に関与しない位置にあるが、進化的に保存されている2つのアミノ酸残基に気づいた。この2つがFer/Fesでは保存されておらず、逆に、この2つを保存されているアミノ酸に変異させると効率的にチューブ形成が起こった。これは、バードメインの膜変形機能の全く新しい知見である。本研究ではN-末にBARドメインを持つ特異なチロシンキナーゼFERの結晶構造を決定し、それに基づきFER N-末の機能およびキナーゼ活性調節への関わりを調べ、FERの基本的性質を明らかにすることを目的とする。FERのBARドメインの特徴として、そのC-末側にコイルドーコイル(CC)ドメインを持つことがあげられる。CCドメインはp120カテニンとの結合部位であることが報告されており、Ferの細胞接着制御活性や細胞内局在に深く関与していると考えられていた。20年度予定のN-末の構造決定を本研究の最初の目標として取り組み、成功した。構造を基に多数の変異体を作製し、その細胞内分布やp120カテニンとの結合、キナーゼ活性などを調べた。驚いたことに、p120カテニンとの結合は全く再現できず、さまざまな実験の結果から、この報告は誤りであるとの結論を出さざるを得なかった。そのため方針転換をし、FerがなぜBARドメインタンパク質としては例外的に細胞質の可溶性分画に存在するかを明らかにする実験に取り組んだ。その結果、BARドメインに進化的に保存されているたった2個のアミノ酸残基が変化したことにより、脂質膜への親和性が大きく減弱していることを示唆する結果を得た。昨年度の成果はBARドメインの構造および機能の多様性を明らかにする意義を持つものである。20年度にN-末の構造決定に取り組み、ほぼ成功したが、きわめてセルが長く対称性も高いため信頼性に疑問が残った。21年度に最終決定し、BARドメインとCCドメインの関係を明らかにすることができた。引き続き、構造を基に多数の変異体を作製し、その細胞内分布やp120カテニンとの結合、キナーゼ活性などを調べた。昨年報告したように、p120カテニンとの結合は全く再現できず、この報告は誤りであるとの結論に至った。しかし、FERがなぜBARドメインタンパク質としては例外的に細胞質の可溶性分画に存在するかを明らかにできた。すなわち、CCドメインがBARドメインの機能を阻害するように働くのではなく、BARドメインに進化的に保存されているたった2個のアミノ酸残基が変化していることにより、脂質膜への親和性が大きく減弱しているのである。BARドメインの変異により、人為的に脂質膜結合性と膜変形能を付与したFERのリン酸化活性は2倍以上に上昇し、膜移行が活性調節に重要であることを示唆する結果を得た。昨年度の成果はBARドメインの構造および機能の多様性とFERのキナーゼ活性調節機構を明らかにする意義を持つ。本研究はN-末にBARドメインを持つ特異なチロシンキナーゼFerの結晶構造を決定し、それに基づきFerN-末の機能およびキナーゼ活性調節への関わりを調べ、Ferの機能的特異性を明らかにすることを目的として行われた。

BARドメインは脂質膜に結合し、膜の変形を起こすドメインとして注目されている。FerのBARドメインの特徴として、そのC-末側にコイルドーコイル(CC)ドメインを持つことが知られている。CCドメインはp120カテニンとの結合部位であることが報告されており、Ferの細胞接着制御活性や細胞内局在に深く関与していると考えられていた。21年度末にN-末の構造を決定し、BARドメインとCCドメインの関係を明らかにすることができた。結晶構造をもとに変異体を設計・発現させ、その機能解析を行った結果、p120カテニンとの結合は全く再現できず、この報告は誤りであるとの結論に至った。21年度に引き続き、22年度も結晶構造を基にした多数の変異体を作製し、その細胞内分布やキナーゼ活性などを調べた結果、Ferがなぜ脂質膜結合性BARドメインタンパク質としては例外的に細胞質の可溶性分画に存在するのかを、更に明確にすることができた。一方、以前に報告されていたキナーゼ活性化変異体で、変異部位が今回明らかにしたN-末構造に含まれるものについても詳細な検討を加えた。これらもp120カテニン結合と同様、再現性が全くとれずアーティファクトと結論したが、論文投稿上困難を抱えることになった。しかし、BARドメインの変異により、人為的に脂質膜結合性と膜変形能を付与したFerのキナーゼ活性は2倍以上に上昇し、膜移行が活性調節に重要であることを示唆する結果を得た。これらの成果を論文として公表するための仕事を進めている。
ブラシノライド合成酵素の植物の栄養および生殖成長における役割の解明

ブラシノステロイドは植物必須のステロイド性生長促進ホルモンである。研究代表者らは、最も活性の強いブラシノステロイドであるブラシノライドの生合成の最終段階を触媒するシトクロムP450酵素の発見に成功した。その研究によって、トマトではブラシノライド合成酵素(CYP85A3)は生殖生長期に、その前駆体であるカスタステロンの合成酵素(CYP85A1)は栄養生長期に働いていると推測された。そこで、ブラシノライドの植物生長における役割について分子生物学的手法を駆使して明らかにすること目的として研究を行った。1、35S恒常的発現プロモーターによりCYP85A3遺伝子を過剰発現させたトマトの形質転換体を作出した。その結果、CYP85A3過剰発現により茎葉の生長が促進されたことから、ブラシノライド合成酵素は生殖生長期だけでなく栄養生長期においても機能することが明らかとなった。2、エンドウより単離した二つのカスタステロン合成酵素遺伝子(CYP85A1、CYP85A6)のうち、CYP85A6遺伝子に変異をもつ媛性変異体1keを発見した。その矮性は弱いことからCYP85A1酵素と栄養生長期における役割が重複していると考えられた。3、トマトのCYP85A1とCYP85A3のアミノ酸配列は高い相同性をもつ。ブラシノライド合成の最終反応であるバイヤー・ビリガー反応に必要な配列を同定するため、CYP85A1/CYP85A3キメラタンパク質を酵母で発現させて酵素活性を調べた結果、その反応に必要なアミノ酸を数ヶ所に絞り込むことに成功した。本研究により、P450酵素CYP85Aファミリーは植物種において独立的に重複し、そして進化してきたことが示された。植物の多様性を理解する上で、CYP85A酵素の多様性を明らかにすることは重要であると考えられる。研究代表者らは、最近、最も活性の強いブラシノライドの生合成の最終段階を触媒する酵素の発見に成功した。その研究によって、トマトにおいてブラシノライド合成酵素(CYP85A3)は生殖生長期に、その前駆体であるカスタステロンの合成酵素(CYP85A1)は栄養生長期に働いていると仮定された。そこで、本研究ではブラシノライドの果実生産における役割について分子生物学的手法を駆使して明らかにすること目的としている。本年度の主な研究成果は下記の4つである。1、CYP85A3過剰発現体において果実肥大効果などが現れるかを調べるために、35S恒常的発現プロモーターにCYP85A3遺伝子を結合させたベクターを構築し、トマトの形質転換を行った。この研究はロンドン大のGerard Bishop博士の協力で行われた。2、CYP85A3遺伝子の発現を精査することにより、ブラシノライドが働く場所を突き止めるために、CYP85A3遺伝子のプロモーター領域の単離を試みた。3kbの候補遺伝子断片を単離したので、レポーター遺伝子と結合させ、トマトに導入する予定である。3、CYP85A1とCYP85A3のアミノ酸配列は85%の高い相同性をもつ。15%の相同性の違いにブラシノライド合成の最終反応であるバイヤービリガー酸化に必要な配列が存在している。そこで、CYP85A3配列をもとにCYP85A1に点変異を導入し、そのタンパク質を酵母で発現させて酵素活性を調べた。この研究は東大の久城哲夫助手の協力で行われた。4、エンドウより単離された二つのCYP85A遺伝子を酵母において発現させ、その酵素機能を調べた。これらの酵素もトマトのCYP85A酵素と同様にブラシノステロイドのC-6位酸化酵素であることを明らかにした。

本研究により、P450酵素CYP85Aファミリーは植物種において独立的に重複し、そして進化してきたことが示された。植物の多様性を理解する上で、CYP85A酵素の多様性を明らかにすることは重要であると考えられる。
日本国憲法における平等権の解釈

本研究は、研究課題である「日本国憲法における平等権の解釈」のもと、憲法上の平等権概念を明らかにすることを目的とし、二年目の昨年度は、「間接差別」に焦点をあて、平等権の内実の一端を明らかにした。間接差別とは、「文面上一見中立な法律が、結果として不均衡な割合で特定の事由を有する集団の構成員に不利益を与えるもの」である。この間接差別が、日本国憲法第一四条第一項が規定する「法の下の平等」の保障範囲に含まれるか否かが主たる研究課題であった。これまで、同条項をめぐっては様々な解釈がなされてきたが、通説的見解は、原則として形式的平等を保障しており、実質的平等の実現までは義務付けていないというものである。すなわち、各人に平等な機会を与えることこそが平等であり、結果における平等はあくまで例外とするのである。このような「結果の平等」を例外であると解する支配的立場において、法律が直接規定した区別それ自体ではなく、法律のもたらす結果を重視する間接差別禁止法理(以下、「間接差別法理」とする)を、憲法の平等権概念から直接導き出すことは難しい。しかし、差別構造が複雑な現代社会においては間接差別も問題となってきており、間接差別を憲法の平等権概念の中にどのようにして位置づけるのかという検討は避けられないはずである。以上のような問題意識のもと、本研究では、まず、比較対象であるカナダにおける平等権概念を整理し、カナダ連邦最高裁及び学説の見解は、争われている法律が適用された「結果」、原告に対してどのような不利益をもたらしたのかという観点から平等権条項の保障範囲を論じていることを明らかにした。次に、このような実質的平等権概念は、平等権とは法律がもたらす「結果」を重視するものであり、このような解釈に従えば、間接差別法理を憲法上位置付けることを要請すると提起した。そこで、実質的平等権概念から浮かび上がる間接差別法理についてカナダにおける事例を分析し、間接差別法理独自の論点を挙げ、検討を加えた。その上で、ここまで検討してきたカナダにおける間接差別法理及びそれを含む実質的平等権概念が、我が国にどのような示唆を与え得るのか検討した。具体的には、我が国が労働法の分野で間接差別を認識し、近年それに関する法改正が行われたことを踏まえ、その現状と問題点を指摘した。次に、判例上、我が国がいまだ憲法上の問題として間接差別を正面から認めていないことを踏まえ、これまでのカナダにおける議論をもとに、間接差別に該当するという意味での平等権違反事例としてそれらの再構成を試みた。その結果、我が国の憲法問題に関する判例では実質的に間接差別法理を採用し、その判断枠組みも、カナダにおける議論と重なる点が多いことを指摘し、間接差別法理を日本国憲法においても適用可能--もしくは、既に適用されている状態にある--と解することができるのではないかと結論づけた。本研究は、カナダ憲法との比較を通じて、カナダにおいて判例・学説上採られている実質的平等権概念を素材に、我が国の平等権概念の内実を明らかにすることを試みるものである。カナダにおける実質的平等権概念とは、法律のもたらす「結果」または「影響」に着目する概念であり、差別の典型例である直接差別のみならず、間接差別までをも差別類型に包摂するものである。(ここにいう間接差別とは、法律の文面上一見すると中立の規定が、その適用の結果、不均衡な割合で不利益を一方に及ぼす差別を意味する。)このような間接差別の問題は、従来、我が国では労働法の分野において検討されてきた。もっとも、間接差別は憲法上の問題としても当然に生じ得ることから、間接差別法理をいかに憲法上の平等権概念と接合させるべきかという問題提起が-わずかではあるが-指摘されてきた。そこで、本研究では、この間接差別法理を憲法上の平等権概念に取り込んでいるカナダ憲法を参考に、間接差別を憲法上いかに捉えるべきか、いくつかの論点をもとにその検討を行った。また、近年、我が国の男女雇用機会均等法において間接差別法理が法制化されたことを踏まえ、間接差別に対する我が国の現状及び問題点についても検討を加えた。そして、以上のような検討から、過去の憲法上の諸事例において間接差別が正面から議論されてこなかったものの、それらを間接差別の観点から再度捉え直すことで、間接差別法理と憲法上の平等権概念との接合が図れるものではないかとの着想に至った。今年度は、以上の点を踏まえて、日本国憲法の平等権概念に間接差別法理が組み込まれる可能性について更に検討を行っていく予定である。

このような「結果の平等」を例外であると解する支配的立場において、法律が直接規定した区別それ自体ではなく、法律のもたらす結果を重視する間接差別禁止法理(以下、「間接差別法理」とする)を、憲法の平等権概念から直接導き出すことは難しい。しかし、差別構造が複雑な現代社会においては間接差別も問題となってきており、間接差別を憲法の平等権概念の中にどのようにして位置づけるのかという検討は避けられないはずである。以上のような問題意識のもと、本研究では、まず、比較対象であるカナダにおける平等権概念を整理し、カナダ連邦最高裁及び学説の見解は、争われている法律が適用された「結果」、原告に対してどのような不利益をもたらしたのかという観点から平等権条項の保障範囲を論じていることを明らかにした。次に、このような実質的平等権概念は、平等権とは法律がもたらす「結果」を重視するものであり、このような解釈に従えば、間接差別法理を憲法上位置付けることを要請すると提起した。そこで、実質的平等権概念から浮かび上がる間接差別法理についてカナダにおける事例を分析し、間接差別法理独自の論点を挙げ、検討を加えた。その上で、ここまで検討してきたカナダにおける間接差別法理及びそれを含む実質的平等権概念が、我が国にどのような示唆を与え得るのか検討した。具体的には、我が国が労働法の分野で間接差別を認識し、近年それに関する法改正が行われたことを踏まえ、その現状と問題点を指摘した。次に、判例上、我が国がいまだ憲法上の問題として間接差別を正面から認めていないことを踏まえ、これまでのカナダにおける議論をもとに、間接差別に該当するという意味での平等権違反事例としてそれらの再構成を試みた。その結果、我が国の憲法問題に関する判例では実質的に間接差別法理を採用し、その判断枠組みも、カナダにおける議論と重なる点が多いことを指摘し、間接差別法理を日本国憲法においても適用可能--もしくは、既に適用されている状態にある--と解することができるのではないかと結論づけた。
レーザーマイクロダイセクションを用いたCAGリピートの不安定化機構の研究

CAGリピート病の病態を解明する上で極めて重要な課題である、「リピートが不安定化する分子機構」を解明するためにmeiotic instabilityとmitotic instabilityについて今年度研究を行った。まず、meiotic instabilityに関しては、当初DRPLA、Huntington病(HD)の剖検例の精巣について、Laser capture microdisection(LCM)を用いて生殖細胞系の各分化段階の単一細胞のCAGリピート数の解析を行っていたが、解析に充分な数が確保できなかった。そこで現在、HDのexon1のreplacement mouse(藤田保健衛生大学の石黒ら)について、ホモマウスとヘテロマウスの生殖細胞系のどの分化段階でリピートの不安定性が生じるのか?、その程度に差があるのか?、さらにリピートの不安定性にagingの影響があるのか?などをLCMを用いて単一細胞レベルで検討中である。ヒトにおけるmeiotic instabilityの例として、SCA6の親子で正常リピート数(16あるいは19リピート)が異常リピート数(20リピート)に増大した症例を見いだした。現在、16と19のどちらのalleleが増大したのかを検討中である。この例は、CAGリピート病のなかでも安定していると考えられていたSCA6において、比較的長い正常リピートは病的範囲に増大しうることを示しており、不安定性に関与するcisやtransのfactorについて検討を進めている。次にmitotic instabilityに関しては、MJD患者の小脳3例について、LCMを用いて皮質(分子層、Purkinnje細胞層、顆粒層)、白質、脊髄前角の細胞群のCAGリピート数の解析を行った。その結果、Purkinnje細胞層は他に比し、0.1-0.9リピート短いことが初めて判明した。これまで小脳皮質は白質に比べて、リピート数が短いことが報告されていたが、これはpurkinnje細胞層の影響であろうと考えられた。さらに、MJD・DRPLA・HD患者の貴重な臍帯が入手できたので、生下時のリピート数と20-40年後の末梢血由来DNAのリピート数を比較解析した。その結果、時間経過におけるmitotic instabilityの可能性が考えられ、現在さらに検討を加えている。
普遍的なDNA組換えにおけるDNAヘリカーゼの役割

昨日度に、バクテリオファージT4の普遍的DNA組換えに遺伝子41(DNAヘリカーゼ)が関与することを明らかにした。本年度は精製した遺伝子41タンパクを用いて他の組換えタンパクとの相互作用を明かにするための解析を進めた。精製した遺伝子59タンパクを共有結合させたアガロースをカラムマトリックスとしてT4の組換えや複性に関与する11種タンパクのアフィニティタンパクが特異的な親和性を示した。また、約50塩基の相補的配列をもつ、環状M13mp18DNAとDNaselの作用によって直線状にしたM13mp19DNaとを1対1で対合させた2量体DNAを基質として、遺伝子41タンパクのDNAヘリカーゼ活性に与える遺伝子32および遺伝子59タンパクの影響を調べた。DNAヘリカーゼは基質2量体DNAを2分子の1量体DNAに変換するしかし、この時遺伝子59タンパクを共存させておくことにより、この抑制効果は完全に取り除かれたのみならずDNAヘリカーゼ活性の強い促進がみられた。この結果と関連して、合成した24mer単鎖DNAを結合基質としたポリアクリルアミド電気泳動によりゲルバンドシフト実験から、遺伝子32タンパクが協同的結合によってあらかじめ単鎖DNAを覆っている場合でも遺伝子59タンパクは速やかに侵入し複合成形成できることがあきらかとなった。これらの結果は、遺伝子32、41、59タンパク間に相互作用と協同DNAを効率良くめ生産するためのタンパク装置を構成している可能性を予期させるものである。
p53類似遺伝子p51の活性化機構の解析と脱腫瘍化への応用

p51(p63)遺伝子は、がん抑制遺伝子p53のファミリー遺伝子として最近同定されたが、その活性化因子は未だ同定されていない。本研究においては、p53と機能的に類似性が高く、細胞周期停止、アポトーシスを誘導するp51(p63)の発現を誘導するサイトカインを検索し、その活性化機構を解析し、p53の機能をp51(p63)により代償させる脱腫瘍化誘導法の開発を目指した。1.p53欠損肝がん細胞株および骨髄細胞株、温度感受性変異p53(p53^<Val-135>)を発現する赤白血病細胞株をTGF-β1で刺激し細胞増殖抑制、アポトーシスを誘導すると、また、筋芽細胞株をプロスタグランジンJ_2で刺激し筋分化を誘導すると、p51(p63)の発現がmRNAレベル、蛋白質レベルで著しく活性化されることをsemi-quantitative RT-PCR法、抗p51(p63)抗体を用いたウエスタンブロッティング解析により見出した。2.p57(p63)プロモーターをルシフェラーゼ遺伝子の上流につないだレポーターコンストラクトを用いてルシフェラーゼ解析を行い、TGF-β1のシグナル伝達分子であるSmad転写因子とAP-1転写因子の過剰発現により、また、プロスタグランジンJ_2の核内受容体であるPPARγの過剰発現により、p57(p63)プロモーターの転写が活性化されることを予備的に見出した。3.p53欠損細胞株においてSmad、AP-1の機能をドミナントネガティブ型変異Smad、AP-1の発現により阻害すると、TGF-β1によるp51(p63)の発現活性化が抑制され、細胞増殖抑制、アポトーシスが誘導されなくなることを明らかにし、TGF-β1のがん化抑制機能をp51(p63)が担っている可能性を示唆した。4.細胞増殖抑制、アポトーシス誘導に必須のp53ドメイン領域に対応する領域を欠失させた変異p51(p63)を過剰発現させると、TGF-β1依存性細胞増殖抑制、アポトーシスが著明に阻害されることを見出した。
非平衡状態下で相関電子系の示す新奇物性の理論的研究

量子ホール効果は、1980年代から二度にわたりノーベル賞を受賞した物性物理の中心的テーマの一つであり、最近では抵抗の標準となるほど日常的にも重要であるが、量子ホール効果を示す半導体に強いレーザー光を当てると、「光学的量子ホール効果」と呼ぶべき新現象が発生することを理論的に予言した。この効果は、近年発展が著しいテラヘルツ光領域におけるレーザー光学技術により観測可能であることが見積もられる。また、ポスト・シリコン材料として現在脚光を浴びているグラフェンにおいても、「偏光(ファラデー回転)で見る微細構造定数」という新奇な光学的量子ホール効果を予言した。量子ホール系の特徴はdcホール伝導度がトポロジカルに量子化されることであるが、ac領域に行ったときにホール伝導度がどう振舞うかには興味がもたれる。2DEGおよびグラフェン量子ホール系の光学ホール伝導度を不純物存在下で数値的に求め、ホール伝導度におけるプラトー構造が、量子化値はもたないもののac領域でもアンダーソン局在によってrobustに残ることを見出した。この効果は実験的にも池辺らによって、THz光によるファラデイ回転の測定によって観測された。特に今年度は、ac領域におけるアンダーソン局在の効果を詳しく調べるために、ホール伝導度と縦伝導度の2パラメータダイアグラムの繰り込みの流れを議論した。また2層グラフェンや3層グラフェンもそれぞれに特異な低エネルギー有効理論が実現しており興味が持たれるため、多層グラフェンのファラデイ回転について議論した。・AC領域における2 parameter flowダイアグラム、・多層グラフェンにおけるファラデイ回転について研究をおこなうことができたため。グラフェン量子ホール系の光学応答について研究をすすめてきたが、今後はトポロジカル絶縁体などの光学応答についても研究をおこなっていきたい。静的な性質である量子ホール効果は微分幾何的な理解が可能であるが、このようなトポロジカルな性質は光でゆさぶると壊れそうに思えるのに、意外なことに、階段状のホール伝導度が光学ホール伝導度に現れることが分かった。これは波動関数のアンダーソン局在の効果によると考えられる。段の高さは量子化からはずれるものの、光で見る量子ホール効果は磁気伝導効果の分野に新たな方向性を与える。実験的には、ファラデー回転の大きさが磁場もしくは系の電子密度を変えると、階段状に飛び移っていく効果として観測されることが予想される。光は、最近の物性物理のキーワードの一つであるが、本研究は、今後発展の期待される量子ホール系の光学応答の分野に、確かにおもしろい現象が待ち構えているということを示した。今後のレーザー光技術の発展、グラフェン物性の深化により、本研究の実験的検証および関連した新現象が探索されることが期待される。アンダーソン局在の性質はスケーリング解析をすることが必須となるが、ac応答に対してはこれは動的スケーリング問題となるので、光学ホール伝導度の動的スケーリングによる解析を理論的に行った。2DEGの最低ランダウレベル(LL)及びグラフェンn=0LLに対して、プラトー転移の幅のスケーリング解析を行った。その結果、どちらの系でも動的スケーリングがよく成り立ち、動的スケーリング指数z2が得られた。このことから、周波数を上げていくと、系のサイズLがWを支配する静的な領域から、周波数で決まる有効的な長さが系を支配する動的領域へクロスオーバーすることを見いだした。この結果は実験的に観測されたTHzホール効果の物理に対して局在という観点からの理解を可能にするものである。

この効果は、近年発展が著しいテラヘルツ光領域におけるレーザー光学技術により観測可能であることが見積もられる。また、ポスト・シリコン材料として現在脚光を浴びているグラフェンにおいても、「偏光(ファラデー回転)で見る微細構造定数」という新奇な光学的量子ホール効果を予言した。量子ホール系の特徴はdcホール伝導度がトポロジカルに量子化されることであるが、ac領域に行ったときにホール伝導度がどう振舞うかには興味がもたれる。2DEGおよびグラフェン量子ホール系の光学ホール伝導度を不純物存在下で数値的に求め、ホール伝導度におけるプラトー構造が、量子化値はもたないもののac領域でもアンダーソン局在によってrobustに残ることを見出した。この効果は実験的にも池辺らによって、THz光によるファラデイ回転の測定によって観測された。特に今年度は、ac領域におけるアンダーソン局在の効果を詳しく調べるために、ホール伝導度と縦伝導度の2パラメータダイアグラムの繰り込みの流れを議論した。また2層グラフェンや3層グラフェンもそれぞれに特異な低エネルギー有効理論が実現しており興味が持たれるため、多層グラフェンのファラデイ回転について議論した。・AC領域における2 parameter flowダイアグラム、・多層グラフェンにおけるファラデイ回転について研究をおこなうことができたため。グラフェン量子ホール系の光学応答について研究をすすめてきたが、今後はトポロジカル絶縁体などの光学応答についても研究をおこなっていきたい。
肢形成におけるホメオボックス遺伝子の共役因子及び下流遺伝子の探索・機能解析

今年度は、前年度に得られた、ショウジョウバエの成虫肢形成過程におけるホメオボックス遺伝子Barの下流と思われる遺伝子について更に解析を続けた。Barは3齢幼虫後期には第5附節で強く、第4附節で弱く発現し、第3附節では発現せず、このBarの発現量の違いによって各附節が決定されている。細胞接着因子であるカドヘリンの一種をコードするdachsous(ds)の機能欠損型変異体やGAL4/UASの系を用いてdsを異所的に発現させた固体では、附節間の境目の構造であるジョイントが正常に形成されなかった。この事から、Barはdsの様な細胞接着因子をコードする遺伝子の発現を制御する事によって、各附節間の境目を形成している事が明らかになった。Barの発現領域に隣接するすぐ先端側の領域(先附節)で発現している遺伝子については遺伝子の構造解析から、脊椎動物のLim1のホモログであるLIM-ホメオドメイン・蛋白質をコードしていることが分かった。この遺伝子(dlim1)をアフリカツメガエルの卵で異所発現させてやると、脊椎動物のLim1と同様に二次軸を形成したことから、その機能も保存されていることが示唆された。dlim1の機能欠損型変異体では、dlim1とほぼ同じ領域で発現しているホメオボックス遺伝子aristaless(al)の発現が消失もしくは減衰しており、また、alの弱い機能欠損型変異体との二重変異体ではBarの異所発現が先附節領域において見られた。この事から、dlim1はalと協調的に働き、Barの発現を抑制していると思われる。よって、alとdlim1がBarによって負に制御されていることと合わせて考えると、al、dlim1とBarの互いに排他的な発現抑制機構によって、先附節と附節領域の分離が行われることが明らかになった。今年度は、Baf遺伝子の肢形成におけるco-factor及び下流遺伝子の探索・単離を目標とし、ディファレンシャル・ディスプレイ法やyeastのtwo hybridの系を用いた実験及び、エンハンサー・トラップ系統のスクリーニングを行った。上記二つの実験では、残念ながら目的に沿うような遺伝子は得られなかった。しかしエンハンサー・トラップ系統の探索では、いくつか興味深いものが得られた。1つの株は細胞接着因子であるカドヘリンの1つをコードするdachsous(ds)のエンハンサー・トラップ系統であった。dsの発現パターンを調べた結果、Barの発現領域とほぼ同じ領域で発現していた。Bar^-のモザイク解析やBarを異所発現させる実験から、dsは確かにBarによって発現が正に制御されていることが分かった。もう1つの株は未知の遺伝子をトラップしていた。その発現は、Barの発現領域に隣接するすぐ先端側の領域で認められた。Bar^-のモザイク解析やBarを異所発現させる実験から、この遺伝子の発現はBarによって負に制御されていることが分かった。この遺伝子の変異体をP因子の再転移により作成したところ、この遺伝子が発現している先附節領域に異常が認められた。更にP因子近傍のゲノム領域をクローニングし、mRNAに対するin situハイブリダイゼーションを行い、約10kbにわたって転写単位が存在することがわかった。このゲノム領域の塩基配列を決定して、データーベースに対して検索したところ2つのESTクローンを得た。更に、もう1系統興味深いものが得られており、それはやはり細胞接着因子をコードしているcapricious(caps)遺伝子をトラップしていた。この遺伝子はBarの発現領域のより先端側で発現していることが分かった。この様に、今年度はBarの下流遺伝子と思われる遺伝子を3つ得ることが出来た。
摂食と情動を制御する分子基盤の解明

本研究では、モデル魚種の摂食行動と情動行動に及ぼす神経ペプチドやモノアミン類などの影響について精査した。その結果、オレキシンAとコレシストキニンは摂食調節作用のみならず、不安様行動を増強する作用を有することを見出した。さらにキスペプチンについて検討したところ、生殖制御機能に加えて情動行動に影響を及ぼす可能性が見出された。モノアミン類のドーパミンとセロトニンおよびGABAが摂食行動や情動行動に影響を与えることが判った。遺伝子改変動物の行動観察についても研究を進めた結果、ステロイドホルモン受容体遺伝子改変魚種の行動が変化することを定量的に観察した。動物にとって、個体の生命を維持する上で摂食行動と情動行動は必要不可欠な本能行動である。申請者は魚類の摂食・情動行動を評価できる実験系を開発・確立して実験を進めたところ、摂食行動と情動行動が密接に関係する可能性を見出した。しかし、魚類も含めて脊椎動物における摂食と情動の制御に働く脳のしくみに関する情報は非常に希薄である。そこで、本研究ではモデル魚種の特徴を活かして、魚類の摂食と情動を制御する神経基盤を明らかにするための研究を展開しつつある。国内外にこの取り組みのような研究は無く、本研究は摂食と情動を制御するニューロンや脳内分子の解明に初めて道を切り開くことができる。平成25年度では、モデル魚種の摂食行動と情動行動に及ぼす神経ペプチドやモノアミン類について検討した。また、摂食行動と情動行動に関係する脳部位を特定するため、c-fos抗体による免疫染色を試みた。その結果、種々の神経ペプチドmRNAが生理状態を反映して増減すること、神経ペプチドのオレキシンAとコレシストキニンが摂食行動のみならず情動行動にも深く関与することを新たに見出した。また、情動行動に及ぼすセロトニンとGABA作動薬及び阻害薬の影響を観察した。c-fos抗体による形態観察では染色特異性の問題から、抗体の吟味に時間を要しており計画当初のとおり進まなかった。動物にとって、摂食行動と情動行動は個体の生命を維持する上で必要不可欠な生得的行動である。申請者らは、モデル魚種の利点を生かて、魚類の摂食と情動を制御する分子・神経基盤の解明を目指した研究に展開してきた。国内外にこの取り組みのような研究は希薄であり、本研究は摂食と情動を制御する脳機構の解明に道を切り開くことができると考えられた。平成26年度では、前年度の成果と問題点を踏まえて、モデル魚種の摂食行動と情動行動に及ぼす神経ペプチドやモノアミン類の影響について精査した。その結果、オレキシンAには摂食亢進作用のみならず、不安様行動を増強する作用を有することを証明した。また、コレシストキニンが摂食抑制作用に加えて情動行動に影響を及ぼすことを突き止めた(論文投稿準備中)。モノアミン類については、ドーパミンとGABAが摂食行動に影響を与えることが判った(論文投稿準備中)。遺伝子改変動物の行動観察についても研究を進めた結果、ステロイドホルモン受容体遺伝子改変魚種(岡山大より入手)の行動が変化することを定量的に観察した。平成26年度後半より神経ペプチド遺伝子の改変魚種の作出にも取り組み始めた。比較神経内分泌学研究計画(1)と(2)について、c-fos抗体の吟味に時間を要しており、計画通りに進まなかったが、他に掲げた点では概ね研究が進展した。平成26年度では、平成25年度に未完であった点、特にc-fos抗体による中枢部位の特定を急いですすめ、平成26年度の研究計画に沿って実験を進める。平成25年度購入予定であった試薬類の購入ができなかったため平成26年度に購入し、実験に充てる。
赤血球産生における微小環境の検討―膜通過性Eph受容体の機能解析―

申請者は、造血前駆細胞からdegenerative PCR法により、HTK(後にEphB4と改名)受容伝型チロシンキナーゼをクローニングし、抗体を作成し、その発現を検討した。その結果、EphB4は赤血球系にのみ発現し、しかも赤血球系前駆細胞(BFU-eからCFU-e)の分化段階にのみ特異的に発現することを見いだした(赤芽球や赤血球には発現しない)。一方、膜通過型結合因子の一つであるHTK Ligand(ephrinB2)は、ストローマ細胞に発現していることを明らかにした。この発見をもとに、本萌芽的研究では、「ephrinB2・EphB4が、赤血球産生の微小環境分子である」という仮説を検証し、以下の成果を収めた。1)エリスロポイエチン存在下に、ephrin B2を発現させたストローマ細胞上では、造血前駆細胞からの赤血球産生のみが亢進するという結果を得た。これは、EphB4陽性赤血球前駆細胞がephrinB2陽性ストロマ細胞の上で反発作用を受けて接着できず、分化が促進されるためと考えている、2)EphB4受容体・ephrinB2リガンドはそれぞれ静脈系血管内皮細胞・動脈系血管内皮細胞に特異的に発現していることを確認し、赤血球産生と動脈内皮の連関が示唆された。3)エリスロポイエチン受容体とephrinB2・EphB4のシグナルの間のクロストークは明らかにできなかったが、ephrinB2・EphB4のシグナルが、細胞接着・解離の現象を引き起こすことは明らかになった。4)ephrinB2・EphB4が赤血球産生に関わることを生体内で明らかにするため、それぞれの遺伝子破壊マウスを用いて解析を進めたが、胎生期出血死するため赤血球産生への作用を解明するに至っていない。今後、ephrinB2・EphB4を赤血球特異的に発現する個体改変マウスにおいて解析を進める予定である。
軽石の発泡構造からみたプリニアン噴火プロセス

本研究ではプリニアン噴火のプロセスを噴出軽石中に保存されている発泡構造から明らかにすることを目指した.十和田火山の中セリ(5千400年前)、南部(8千500年前)という典型的なプリニアン噴火を取り上げて2つの噴火の類似点、相違点を発泡構造、噴火プロセスの観点から研究した.野外調査、及びえられた試料の解析から1)噴火シークエンスに応じた見かけ密度、サイズ分布の測定、2)バブルのサイズ分布の噴火シークエンスに応じた変化の決定が本研究で新たに得られた結果である.以下の点が明らかになった.類似点:噴火の主要部分は比較的短時間の均質な噴火であり、後期に火山灰を噴出するステージがあり、軽石の密度は増加した.噴火の開始直後は密度は高く、主要部分へ至るにつれて減少していく.相違点:全堆積物サイズ分布では中セリは細粒成分がおおく、南部では粗粒成分が多い.また軽石の表面構造は両者は異なり、南部の軽石はより平面的である.電顕による軽石の発泡構造においては南部はバブルサイズが大きく、均質であるのに対し、中セリではサイズ分布が小さな所から大きなところまで均等に含んで居り発泡プロセスが異なっていることを示している.両者の違いは温度、化学組成の違いによる粘性の差を反映している可能性がある.発泡からfragmentationまでの期間の長短がこのような差を生み出したと解釈した.すなわち発泡の開始からfragmentationまでの期間が短いと核形成、成長が同時に進行するために幅広いサイズ分布をもつバルブが形成されるのに対しfragmentationまでの期間が長いと成長が卓越し、均質な大きさサイズのバブルが形成される.発泡の開始は揮発性成分の量によって決まるがfragmentationを決める過程が何であるのか明らかではなく将来の興味深い課題である.本研究ではプリニアン噴火のプロセスを噴出軽石中に保存されている発泡構造から明らかにすることを目指した.十和田火山の中セリ(5千400年前)、南部(8千500年前)という典型的なプリニアン噴火を取り上げて2つの噴火の類似点、相違点を発泡構造、噴火プロセスの観点から研究した.野外調査、及びえられた試料の解析から1)噴火シークエンスに応じた見かけ密度、サイズ分布の測定、2)バブルのサイズ分布の噴火シークエンスに応じた変化の決定が本研究で新たに得られた結果である.以下の点が明らかになった.類似点:噴火の主要部分は比較的短時間の均質な噴火であり、後期に火山灰を噴出するステージがあり、軽石の密度は増加した.噴火の開始直後は密度は高く、主要部分へ至るにつれて減少していく.相違点:全堆積物サイズ分布では中セリは細粒成分がおおく、南部では粗粒成分が多い.また軽石の表面構造は両者は異なり、南部の軽石はより平面的である.電顕による軽石の発泡構造においては南部はバブルサイズが大きく、均質であるのに対し、中セリではサイズ分布が小さな所から大きなところまで均等に含んで居り発泡プロセスが異なっていることを示している.両者の違いは温度、化学組成の違いによる粘性の差を反映している可能性がある.発泡からfragmentationまでの期間の長短がこのような差を生み出したと解釈した.すなわち発泡の開始からfragmentationまでの期間が短いと核形成、成長が同時に進行するために幅広いサイズ分布をもつバルブが形成されるのに対しfragmentationまでの期間が長いと成長が卓越し、均質な大きさサイズのバブルが形成される.発泡の開始は揮発性成分の量によって決まるがfragmentationを決める過程が何であるのか明らかではなく将来の興味深い課題である.
ネットワーク上の通信スケジューリングの分散アルゴリズム

本研究はネットワーク上の通信スケジューリングのアルゴリズムをグラフ理論、特に彩色アルゴリズムの応用により研究開発するものである.ネットワーク上の通信グラフにモデル化する.グラフ上の各点はコンピュータセンターに,多重辺はコンピュータセンター間の通信要求に対応する.各コンピュータセンターuは同時に通信できる最大数f(u)が定められており,各コンピュータセンターu,w間には同時に使用できる回線の最大数g(uw)が定められているとする.このときf(u),g(uw)の条件を満足し、同時に通信可能な辺を同一色で塗る。このようにしてグラフをなるべく少ない色数で彩色することは通信要求を満足する効率のよいスケジューリングに相当する。本年度は、上記のモデル上で各コンピュータセンターの通信負荷が常にほぼ一定となるようなスケジューリングアルゴリズムを開発した.通信負荷がほぼ一定であるということは、通信負荷をなるべく時間的に均一に分散させ、その計算機を他の目的にも使用するとき、処理能力の変動をすくなくするということであるので望ましい性質である.また、これまでに得られた主な研究成果を論文としてまとめ、電子情報通信学会論文誌で発表することができた.しかし、現実の問題では通信のスケジューリングは各コンピュータがそれぞれ独立に行うのが望ましく、全てのスケジューリングを集中管理することは非現実的である.よって、来年度は通信スケジューリングの分散アルゴリズムの研究開発にとりくむ.本研究はネットワーク上の通信スケジューリングのアルゴリズムをグラフ理論、特に彩色アルゴリズムの応用により研究開発するものである.ネットワーク上の通信グラフにモデル化する.グラフ上の各点はコンピュータセンターに,多重辺はコンピュータセンター間の通信要求に対応する.各コンピュータセンターuは同時に通信できる最大数f(u)が定められており,各コンピュータセンターu,w間には同時に使用できる回線の最大数g(uw)が定められているとする.このときf(u),g(uw)の条件を満足し、同時に通信可能な辺を同一色で塗る。本年度は、上記のモデル上で各コンピュータセンターの通信負荷が常にほぼ一定となるようなスケジューリングアルゴリズムを開発した.通信負荷がほぼ一定であるということは、通信負荷をなるべく時間的に均一に分散させ、その計算機を他の目的にも使用するとき、処理能力の変動をすくなくするということであるので望ましい性質である.また、これまでに得られた主な研究成果を論文としてまとめ、電子情報通信学会論文誌で発表することができた.しかし、現実の問題では通信のスケジューリングは各コンピュータがそれぞれ独立に行うのが望ましく、全てのスケジューリングを集中管理することは非現実的である.よって、来年度は通信スケジューリングの分散アルゴリズムの研究開発にとりくむ.
石山寺旧蔵金光明最勝王経古訓点の研究

九州大学附属図書館所蔵、春日政治・和男文庫所蔵石山寺本金光明最勝王経十巻(奈良時代書写)について、前年度に引き続き、研究資料の収集と整理、及び諸情報のコンピュータ入力を鋭意推進した。また、スキャンした画像データをもとに、その仮名点・ヲコト点等に基づいた訓読文の作成を推進した。その際、訓読の史的変遷を念頭に、春日政治『西大寺本金光明最勝王経古点の国語学的研究』の訓読文と対照させる形で行い、現在巻三までほぼ完成させている。併せて、九州大学大学院人文科学府の講義「日本古代語史研究IIIー古代語の研究ー」の一環として大学院生とともに当該資料を読み進め、古代日本語の音韻や日本漢字音の諸問題について種々討議し、見解を深めた。また、そこでの討議を踏まえつつ、日本近代語研究会における講演(「「うむの下濁る」の終焉ーもう一つの近代語化ー」2018年10月12日、於岐阜大学サテライトキャンパス)において、古代語と近代語とを分かつ、清濁の弁別的特徴の変化をめぐる見解を公表し、また、「「字余り法則」小考」(『語文研究』126号、2018年12月発行)において、古代日本語の韻律構造に関する先行研究を批判的に検証するとともに、あらたな見解を示すことができた。春日政治・和男文庫のうち、九州大学文学部高山倫明研究室に別置している和本・洋装本・ノート類の目録を完成させ、重複本の整理等を行った。九州大学国語学・国文学講座初代教授の蔵書であり、大学史、講座史の貴重資料として長く保存されることを目指している。ほぼ当初計画通りに進展している。訓読文の完成に向けて検討を推進する。併せて文学部高山倫明研究室に別置している春日政治・和男文庫の洋装本・ノート類の設置場所につき、附属図書館と協議を進める。九州大学附属図書館春日政治・和男文庫所蔵の石山寺本金光明最勝王経を高画質画像を作成し、平安中後期のヲコト点・仮名点の鮮明化処理を行った上で、それに基づいた訓読文の作成を推進した。巻一を終了し、巻二もほぼ終了している。併せて、春日政治・和男文庫のうち文学部に別置している洋装本・ノート類を分類整理し、目録の作成を推進した。ヲコト点のうち、朱点の解析に手間取っているが、なんとか概ね順調に進展している。ヲコト点のうち、朱点の解析に手間取っているため、今後、画像処理の精度を高める必要がある。今夏のキャンパス移転を控え、図書整理のスピードアップを図っている。入力作業アルバイトの予備費としてとっておいたが、結果的に必要がなくなった。来年度別途作業で必要となるため、そちらに実施する予定である。全10巻の訓読文作成には時間的な困難があり、引き続き進めていく予定。
タンパクの核移行におけるRanBP2機能の解析

本年度は下記の計画で共同研究を行いその成果を次年度に論文としてまとめる計画であったが、研究代表者が申請していた特別推進研究が受理された。このため、特別推進研究に専念することになり、本国際共同研究はPante、Abe博士らとの共同研究の打ち合わせをした段階で断念することになった。このため、特に成果はない。1。RanBp2の各ドメインに対する抗体を作成する。既に、Zinc-fingerドメインのペプタイド、及びZinc-fingerドメインの半分と第二、第三のRan結合ドメインを含むペプタイドに対する抗体、そして全く、RanBP2のドメインとは無関係な領域のペプタイドにたいする抗体はある。2。これらの抗体を用いて免疫沈降を行ない、特異的に沈降するタンパクを同定しそのアミノ酸配列を決定する。3。また、yeastを用いたtwo-hybrid法を用いて夫々の領域と結合するタンパクを同定する。4。RanBP2/p340は核膜孔から細胞質に延びたフィラメントであることがPanteにより明らかにされているが、ある種の抗体は核膜孔の外のみならず内側も染める。つまり、核膜孔の核質側にもRanBP2がある可能性がある。この点を新たに分離された抗体を用いて、Panteは詳細に調べる。5。分離された抗体やサイクロフィリンに結合するサイクロスポリンAがタンパクの核移行に与える影響についてGerace博士等が開発した方法を用いて、Geraceと共同して調べる。1。2。3。4。5。