hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
染色体分配装置のダイナミクス

本研究の目的は原核細胞および真核生物における姉妹染色体の分離・分配の分子機構を明らかにすることである。本研究において、細胞内の特異的DNAやタンパク質を可視化する技術が開発され、原核細胞においても細胞生物学的解析が可能となり、これらの技術を使って次のことが明らかになった。プラスミドのコードする2種のタンパク質とプラスミド上の特異的DNA領域によって制御されているプラスミドの分配機構は、プラスミドDNAを1/4と3/4の細胞内部位に位置付ける機構である。染色体の複製起点oriCは細胞の中央で複製し、複製した姉妹染色体は、複製の終期頃まで互に結合したままである。この結合は複製終期頃に解除され、その後oriCコピーはそれぞれ核様体の両端に移動し、一方、複製終点領域のコピーは細胞分裂面に存在する。半メチル化新生DNAに結合するSeqAタンパク質の細胞内局在性の解析結果は、大腸菌における「複製装置の転座」モデルを支持する。大腸菌のMukF-MukE-MukBタンパク質複合体や枯草菌のSmcタンパク質は姉妹染色体の分離・分配や染色体の折り畳み構造の維持に必須である。複製の再開始を抑制する三種類の機構が明らかになった。DNAポリメラーゼIIIによるDnaAタンパク結合ATPの加水分解、半メチル化oriC DNAとDnaAタンパク質の結合におけるSeqAタンパク質による競合的阻害作用、および多量なDnaAタンパクのdatA領域への捕捉である。一方、ヒト染色体の動原体のDNA-タンパク質複合体の構造を明らかにし、染色体分配に含まれる特異的タンパク質やM期の開始に含まれるタンパク質キナーゼを発見した。1.平賀らは大腸菌染色体の分配に必須なMukF,MukE,MukB蛋白質を精製し、免疫共沈実験によりこれらの蛋白質が相互作用をすることを証明した。また新たに開発した免疫蛍光法を使って、大腸菌細胞において膜会合性の細胞骨格様構造体を発見し、Membrane Associate Cytoskeleton-like Structure(MACS)と命名した。この構造体はペプチド伸長因子EF-Tu及び染色体分配に必須なMukE蛋白を含み、細胞の長軸に添って細胞の片側周縁部にフィラメント状に分布し、細胞分裂期には細胞中央の隔壁形成部位に局在する。更にこの構造体の分布変動に伴い外膜蛋白のいくつかが同じように移動することを発見した。2.加藤らは先に発見した大腸菌トポイソメラーゼIVのサブユニットの2つの遺伝子の1つparCの優性変異株を多数分離し解析を行い、DNA再結合の過程に欠損を持つ変異株とDNA切断の過程に欠損を持つ変異株を明らかにした。3.松澤らは西村らの分離した高温感受性フィラメント形成変異株205株の中から31株を選び、それらの変異を相補するプラスミドを分離するために大腸菌染色体DNAライブラリーを検索し、fts-715変異株はhscA遺伝子であることを明らかにした。HscA蛋白はDnak蛋白とホモロジーがあり、細胞分裂における機能の解析が期待される。4.小椋らは膜結合型ATP依存性メタロプロテアーゼであるFtsH蛋白が大腸菌では転写因子σ^<32>の崩壊のみでなく、リン脂質とリポ多糖の量的バランスにも関与していることを明らかにした。さらに枯草菌の胞子形成を制御するSpoVM蛋白とFtsH蛋白の関連を解析しつつある。5.永井らは新たに見いだしたヒストン様蛋白質についてHF-Iをコードするhfq遺伝子を破壊し、HF-Iが細胞分裂に必須なftsZ遺伝子の発現を負に制御していることを明らかにした。1.大腸菌染色体に必須なMukF、MukE、MukB蛋白質の相互作用を解析し、この3者はCa^<2+>存在下で複合体を形成することを明らかとにした。

MukF蛋白質はCa^<2+>結合蛋白質であること、MukBのC末球状ドメインにMukFとMukEが結合することがわかった(平賀)。2.メチル化DNAに結合するSeqA蛋白質が大腸菌細胞内では14個の蛍光焦点として存在することを免疫蛍光顕微鏡法で発見した。このSeqA複合体は細胞周期に依存して倍加後、細胞中心から細胞長の1/4、3/4の位置に規則正しく移動する。しかしMukB欠失株ではSeqA複合体の分布が異常になる(平賀)。3.大腸菌のoriCDNAおよびterDNA領域の細胞内分布をin situヘイブリダイゼーション法で解析し、oriCDNAは新生細胞において核様体の1端に存在し、terDNAは他端に存在しており、複製後oriCコピーの1つは他端に速やかに移動することが明らかになった(平賀)。4.ミニFプラスミドDNAは新生細胞では細胞中心にあり、複製後1/4、3/4の位置に移動する。一方sopABCを欠失したミニFプラスミドDNAは細胞端のサイトゾール領域にランダムに存在する(平賀)。5.枯草菌のSpo0J蛋白質は細胞の両端に蛍光焦点として局在するが、Smc蛋白の欠失株ではSpo0J蛋白質の分布は比較的ランダムとなり、染色体分配にも異常が見られた(守家)。6.細菌の染色体分配過程を特異的に阻害する薬剤を発見することを目的に放線菌やカビ約5000株の培養液をスクリーニングして、活性のある数株を見つけ現在解析中である(和地)。9.ヒト染色体セントロメアのα21-I領域を導入した人工ミニ染色体はヒト培養細胞内に安定に保持されるが、α21-II領域を導入した人工ミニ染色体は保持されない(岡崎)。10.ヒトセントロメアに結合するCENP-A蛋白の大量発現系の確立に成功し、いくつかのCENP-Aに対するモノクローナル抗体を分離した(依田)。1.染色体上の多数のDNAプローブを使ったFISH法の解析によって、大腸菌の染色体DNAは細菌内で太い環状になっていることがわかった。免疫蛍光顕微鏡法で染色体複製調節に関与するSeqA蛋白の細胞内分布を種々の高温感受性複製変異株において解析し、その結果を総合して新しいモデルを提出した(平賀)。2.ミニFプラスミドの安定保持ができなくなった大腸菌の変異株の解析から、DnaAと相同性を持つ新規遺伝子hdaを見つけた(加藤)。3.枯草菌smc欠損変異株では染色体分離が異常になると共に複製開始領域の細胞内分布がランダムになる。Smcの大量発現系を作りsmcの精製を試みている(守屋)。4. muk変異株を用いたスクリーニングによって、染色体の分配過程を特異的に阻害する多数の化合物を発見した。その中の多くはDNAジャイレースやトポイソメラーゼを阻害した(和地)。5.免疫共沈実験によりヒトCENP-AとCENP-Bとがヌクレオゾーム構造レベルで極めて近傍に存在し、DNAを介して複合体を形成していることがわかった(依田)。6.ヒトへテロクノマチン蛋白質HP1とGFPの融合蛋白質は細胞内にヘテロクロマチン様「ドット」として局在し、また中央体にも局在した。CENP-C、CENP-B、アルフォイドDNAのゲノム上での視覚化に成功した(杉本)。
電気化学的酸化及び還元でエレクトロクロミズムを発現する液晶分子の創製と挙動

いくつかのキンノ部位ービチオフェン部位を含むエレクトロクロミック材料を開発した。その内2種は,液晶性を示した。これらの液晶相の挙動はPOM観察,DSC測定,XRD測定によって決定した。これらから液晶相は,ラメラ相であることがわかった。これらの電気化学的挙動を検討した。これらは還元側で可逆な酸化還元反応を示した。一方酸化側では、明確なピークは観測されず、ラジカルカチオンが不安定であることが示唆された。次いで、ITO電極を塗布したセルに調製溶液を挟み、負電荷-2.0 Vに電圧を印加し,その色の挙動を観察した。さらに酸化側の色の変化を観るために,3.0 Vの電圧を印加し,その色の挙動を観察した。昨年度実施した研究の継続として、電気化学的な酸化をビチオフェン部位、還元をアントラキノン部位で行なう液晶化合物に関して、再度、それぞれ中間相の同定を行った。しかしながら、いずれの中間相も液晶相特有のX線による回折パターンを示していないため、これらの化合物は液晶相を発現していないと結論づけた。そこで再度、分子構造の見直しを行い液晶化合物の合成を行った。前回までは、ビチオフェンユニットにそれぞれ液晶相発現のためのユニットであるジアルコキシベンゼンユニットを導入していたが、今回は直接ビチオフェンに2ヶ所アルキル鎖を有するユニットを2つアントラキノンに導入を行った。今回合成した化合物の偏光顕微鏡観察からは、この化合物が中間相を示しているか詳細がわからなかったものの、135°CでのXRDから詳細な液晶相構造が確認できた。この構造は、スメクチック相と類似したもので約2.95nmの層を成していることがわかった。また昨年同様、ITO電極を塗布したセルを用いた素子を作ったが、良好な結果を得ることはできなかった。しかしながら、この化合物を溶液に溶かし、それに電解質を加えた素子を昨年同様作成し、エレクトロクロミズムを調べた結果、-2.0 Vの電圧を印加すると、黄色から赤色への色の変化が観られ、さらにこれを0 Vに戻すと、赤色から黄色へと可逆な色の変化を示した。また、酸化側の色の変化を観るために、3.0 Vの電圧を素子に印加すると、黄色から青緑色への色の変化が観られたものの、これを還元しても可逆な色の変化は観られなかった。ラジカルカチオンの安定性を図るために2ヶ所以上ビチオフェンユニットを導入する予定である。また、これまで溶液を使ったエレクトロクロミズムであったので、イオン性の液晶化合物と今回合成した化合物を混ぜ合わせ素子形成を行う予定である。昨年度実施した研究の継続として、本年度もビチオフェン部位、アントラキノン部位を持つ液晶化合物の合成と電気化学的挙動に関して研究を行った。昨年まで、化合物は中心にアントラキノン部位、両隣にビチオフェン部位を有する化合物であり、対称性等の関係で液晶温度に達するまでの温度が高く、その範囲が狭い等の原因が問題として挙げられてきた。そこで、化合物自体の対称性を下げるためにアントラセンービチオフェン(1:1)から成る液晶性エレクトロクロミック材料の開発を行った。対称性の面から考えていた融点の降下に関しては、これらの設計でアントラセンービチオフェン(1:2)と比較し、2030°Cほど低い温度で融点となったものの、その液晶性は、現在、観られていない。側鎖構造の改良等で液晶性を発現するか検討している。アントラセンービチオフェン(1:1)に関しての電気化学的特性に関して検討した。サイクリックボルターメトリーにおける酸化還元においては、酸化側のシグナルは不可逆なシグナルとして+1.0V(vs Fe/Fe+)が観察された。また、還元側のシグナルは、-0.95Vと-1.35V(vs Fe/Fe+)の2種の可逆なシグナルが得られた。これらの結果は、これまで合成してきたアントラセンービチオフェン(1:2)と類似のシグナル挙動であることがわかった。また、酸化側のシグナルが不可逆であることから、酸化における色の寡婦逆性は期待できないことが予想できた。今後、酸化側の因子であるビチオフェン部位をターチオフェンやテトラチオフェン部位に換えることで酸化側の安定性を図る予定である。さらにITO電極を用いた色の変調をアントラセンービチオフェン(1:1)について行う予定であったが、溶解性の問題で、濃い濃度での溶液を作れず断念した。併せてこれまで合成したエレクトロクロミズム材料を溶液中でなく、イオン性液晶化合物と混ぜ合わせ、混合物の液晶性に関して検討を行った。

本年度実施した当研究の成果としは、電気化学的な酸化をビチオフェン部位、還元をアントラキノン部位で行なう液晶化合物を2種合成し、それぞれの液晶性と電気化学的な色の変化について検討した。1つは、降温時120°Cで樹状組織を観察した。これは、テトラゴナルのディスコチック液晶相の発現の可能性が示唆されるが、XRD測定からも詳細な同定はできていない。さらに解析を進める予定である。またもう一方は、降温時6041°Cでモザイク組織を観察した。このことからスメクチック相を発現している可能性が示唆されるが詳細なXRD測定による同定には至っていないため、今後の課題である。これら2種の化合物は塩化メチレン溶液において還元側で半波電位E1/2 -1.07 V, -1.54 Vで可逆な酸化還元反応を示した。これはアントラキノン部位のラジカルアニオン、ジアニオンの生成に伴う2段階の還元による挙動だと考えられる。一方酸化側では、明確なピークは観測されず、ラジカルカチオンが不安定であることが示唆された。次いで、ITO電極を塗布したセルに、今回合成した溶液を挟み、-2.0 Vの電圧を印加すると、黄色から赤色への色の変化が観られた。そして、これを0 Vに戻すと、赤色から黄色へと可逆な色の変化を示した。さらに酸化側の色の変化を観るために、3.0 Vの電圧を印加すると、黄色から青緑色への色の変化が観られた。しかし、これを中性状態にするため0 V電位を戻しても色は戻らず不可逆な色の変化のみを示した。この結果は、ラジカルカチオンの安定性が今後の課題と言えるだろう。昨年度、合成した化合物に関して中間相の解析を詳細に行った。解析結果後、これらは何らかの高次の中間相を取っているものの液晶相と言いづらい。再度、分子設計し、合成した化合物のDSC、XRDの解析により、エレクトロクロミズムを発現できる可能性を持つ液晶化合物を得ることができた。また前年度予算申請で購入した電気化学的アナライザーと紫外可視装置の組み合わせにより、前年度まで不確かであった吸収波長のシフト位置を確認することができた。また、ここで得られた吸収波長より、色を発現している化学種の特定を分子化学計算と併せて予想している。今回までの試みは、溶液中でしかエレクトロクロミズムを確認できなかったが、今後イオン性の液晶化合物との組み合わせ、アンモニウム等のユニットを液晶分子骨格に導入していく予定である。今回、合成した化合物の安定性はよいものの、液晶性についての解析が遅れているのは確かである。若干の設計の見直し等が必要である。また、電気化学的な点では、今回の予算申請で購入して電気化学的アナライザーの導入により、化合物の電気化学的な還元酸化の傾向とそれぞれの化学種の安定性を見ることはできたものの、次年度導入予定のU紫外可視装置が無いため、電気化学的な還元、酸化における化学種を目視による観察のみにとどまっている。しかし、電気化学的な還元においては、化学種が安定であることを証明した。今回の試みは、溶液中におけるものだけであったので、液晶状態での色の変化を次年度以降に行なうとともに、アンモニウム等のユニットを分子骨格に導入することが必要不可欠となってくる。今回合成した化合物とイオン性の液晶化合物の組み合わせにおける素子形成によるエレクトロクロミズムの発現の確認を行うとともに、アンモニウム等のイオン性部位を分子設計に取り入れ、液晶分子の合成を見直す。
磁場効果によるラジカル反応の制御

二官能基性鎖状分子の光酸化還元反応について、外部磁場効果を研究した。用いた化合物は、p-O_2N-C_6H_4-O(OH_2)_<12>-NBzC_6H_5(Bz=*CX_2C_6H_5,*C=^<12>Cまたは^<13>C,X=HまたはD)である。窒素原子と隣接するメチレン基およびベンジル位において、分子内光酸化還元が起こる。ベンジル位酸化体とメチレン鎖酸化体を与える分子内反応は、かご内過程である。ベンジル位酸化体が主生成物である。今回研究に用いた系では超微細相互作用が重要な役割を果たしているので、かご内生成物収量に対する磁場効果の現われ方からビラジカル前駆体のスピン多重度を推定できる。外部磁場(0.64T)印加による生成物収量の変化を次の表に示した。ベンジル位酸化体メチレン鎖酸化体^<12>C-ベンジル体0.86±0.02 0.92±0.03^<13>C-ベンジル体0.85±0.020.88±0.02Dーベンジル体0.86±0.02 0.93±0.02かご内反応収量の低下から、3重項ビラジカルの関与していることが結論される。一方、ベンジル位の同位体(^<13>C,D)置換により、ベンジル位酸化とメチレン基酸化の分岐比(Rb)の変化することがわかった。ベンジル位酸化生成物とメチレン鎖酸化生成物の収量比(Rb)の値は次の通りである。^<12>C-ベンジル体2.67±0.032.87±0.02^<13>C-ベンジル体2.51±0.032.60±0.02Dーベンジル体2.06±0.032.23±0.03Rb(0)およびRb(H)は、それぞれ零磁場と0.64Tの磁場存在下の分岐比を表わしている。以上のように、外部磁場効果と同位体置換を組み合わせることによって、ビラジカルを経由する反応のかご内生成物収量を制御できた。従来、外部磁場効果によりかご内生成物と散逸生成物の収量比を変える研究例が知られていたが、今回の実験の特色はかご内過程の分岐比に磁場の影響を見出した点にある。
多言語間コミュニケーション高信頼化のためのデータセントリック価値創出に関する研究

多言語間コミュニケーションの方法として,機械翻訳を用いる方法と用例対訳を用いる方法がある.本研究では,多言語間コミュニケーションの高信頼化のために,折り返し翻訳の高信頼化に関する研究,多言語用例対訳の高信頼化に関する研究を行った.さらに,上記の研究成果を応用した,医療分野および教育分野を対象とした多言語支援ツールの構築に関する研究を行った.多言語間コミュニケーションの方法として,機械翻訳を用いる方法と用例対訳を用いる方法がある.本研究では,多言語間コミュニケーションの高信頼化のために,折り返し翻訳の高信頼化に関する研究,多言語用例対訳の高信頼化に関する研究を行った.さらに,上記の研究成果を応用した,医療分野および教育分野を対象とした多言語支援ツールの構築に関する研究を行った.本年度の具体的な研究成果は下記の3点にまとめられる.1.機械翻訳を用いた多言語間会議支援において,複数人による協調作業支援(All for one型支援)手法を提案した.複数人による協調作業支援は,同一人数による協調なしの支援よりも,会議内容の網羅性および各人の作業量の低減において,効果が高いことを明らかにした,また,入力競合の低減のために,リアルタイム入力状況提示機能および利用者の識別可能なテレポインター機能を提案し,競合防止に効果があることを示した.2.対面環境における機械翻訳を用いた多言語情報提供支援において,Webから多言語情報(テキスト,画像)を提示する手法を提案した.会話中の発言を利用した関連情報を多方面から提供することは,対話活性化の効果が高いことを明らかにした.また,音声入力およびタッチ入力は,リアルタイム対面環境での操作が可能であることを示した.3.多言語用例対訳における不正確用例抽出のために,Web上の検索エンジンを用いた正確性判定手法を提案した.提案手法は,正確性判断の自動化のための指標となり得ることを明らかにした.また,不正確単語(スペルミスや存在しない語句)および不正確文法(個々の単語は正確だがつながりが不正確)の抽出を目的とした適切な閾値を設定することで,精度の向上が可能であることを明らかにした.本研究成果は,機械翻訳やWeb上のデータに対して「人による支援」を適切に介在させる多言語間コミュニケーションの高信頼化手法と知識抽出手法を提案した点,さらに,その実現方法と効果を,実問題を通じて明らかにした点である.本研究成果は,精度が不十分な機械翻訳やWeb上のデータに対して,人の力を効果的に関与させ,幅広い状況で利用可能な応用システムに橋渡しをする点で,重要な意味を持つ.本年度は,主に下記の4点に取り組み,下記の成果を出した,1.機械翻訳を介したコミュニケーションにおける齟齬の発生原因の要因の発見折り返し翻訳の精度確認手法としての妥当性の検証を行った結果,対象言語翻訳文が不正確であるにもかかわらず,折り返し翻訳文が正確であるという状況が発生することがわかった,これは,意思疎通を困難にする可能性が高く,不一致が発生した際の対応が必要となる.そこで精度不一致が発生した文についての分析し,発生要因として,6種類の要因があることを発見した.2.不正確情報の提示がユーザに及ぼす影響分析正しい精度(本来の精度)を提示した場合,提示した精度との一致率が最も高くなり,隣接した評価値を既判定精度として提示した場合,本来よりも高い隣接評価値との一致率の方が,本来よりも低い隣接評価値との一致率よりも高い傾向があることを明らかにした.3.Web上から精度の高い用例の抽出Web検索を利用して,用例作成の際に手がかりとなる用例の収集の可能性について,特に「人が想起しにくい用例」を検索する手法の構築し,評価した.本手法を用いることで,約26%の割合で「そのまま使用できる用例」をWeb上から抽出できた.また,約91%の割合で「用例を作成する手がかりとなる用例」をWeb上から抽出できた、特に,本手法を用いることで,想起しにくい用例を抽出できることを示した.4.翻訳リペア作業におけるルール提示の効果ユーザが効率よく翻訳リペア作業をするためには,ある程度の書き換え方針やルールが必要である.そこで,被験者が手動で日本語の書き換えを行い,翻訳結果に与える影響について検証した.その結果,分かち書きのスペース,単語の簡略化,情報の欠落が翻訳結果に影響を及ぼしている可能性を明らかにした.また,従来の折り返し翻訳よりもコストが掛かることを明らかにした.今後,ルール提示の高精度化に対して,この結果を応用する.本年度は,下記の研究成果をあげた.1.多言語用例対訳の管理方法の実現:多言語間コミュニケーション支援を目的とした多言語用例対訳共有システムにおける共有対象の用例対訳は,各言語間で1対1に対応する必要があるが,用例対訳には各言語間で1対1に対応しない言葉の組合せが存在している.このような多言語間の言葉の多様性への対応が求められているが,単純な用例間の意味のつながり情報のみでは対応することができていなかった.そこで,本研究では,1対多,多対多の関係にある用例対訳グラフを提供可能な用例対訳とするために,メタノード作成手法を実現した.2.多言語用例対訳共有システムの構築:従来の用例対訳作成においては,(1)新たな用例対訳の追加が難しい,(2)翻訳者1人あたりの負担が大きい,(3)用例対訳の利用現場で求められている用例を収集することが難しい,という問題が存在していた.

そこで本研究では,用例対訳の作成の基盤となる場を用例対訳作成環境に提供し,円滑に正確な用例対訳の収集を行うことを目的とした,多言語用例対訳共有システムを提案し,構築し,実利用に供した.3.精度不一致検出サービスの提案:機械翻訳を介したコミュニケーションでは,翻訳精度が低い場合,十分な相互理解ができない可能性が高い.対象言語翻訳文と折り返し翻訳文の精度の同等性に関する検証の結果,対象言語翻訳文が不正確であるにもかかわらず,折り返し翻訳文が正確であるという状況(精度不一致)が発生する場合があることが明らかになっている.そこで本研究では,複数翻訳機を利用した精度不一致の検出手法について検討し,約71%の精度不一致を検出できることを示した.4.多言語問診表入力手法の実現:用例対訳や機械翻訳を利用可能な多言語問診表入力手法の実現し,病名や症状を含む正確性と状況説明などの付与情報を含む網羅性を確保した多言語問診表入力手法の実現した.本研究では,下記の5つの課題を挙げていた.研究課題5の「価値創出の体系化」以外の部分については,これまでの2年間で成果を出している,「価値創出の体系化」については,最終年度の課題として取り組む.研究課題1:Web上のデータを用いたフィルタリング手法の研究研究課題2:コミュニケーションプロセスの分析とユーザインタフェースの研究研究課題3:データ収集と推薦手法の研究研究課題4:Web上のデータを用いた多言語のフィルタリング手法の研究AbO研究課題5:システム公開と価値創出の体系化24年度が最終年度であるため、記入しない。各研究課題とも,おおむね順調に進展している.最終年度は,各課題のそれぞれの精度向上を「価値創出の体系化」を行う.精度向上に関しては,それぞれの課題において,手法はある程度確立しているが,今後は,利用言語数の拡充に加え,精度が向上しない部分に関する調整やデータ蓄積よる手法の改良を行うことを考えている.24年度が最終年度であるため、記入しない。
応用偏微分方程式の数値シミュレーション

(1)岡田は小澤と共に分岐のある非線形LC回路を伝播する電位によって表される格子リリトン波が,分岐点においてどのようにふるまうのか数値実験によって示した。振幅の小さい場合は非線形性が弱いので線形波動方程式の場合に得られている理論解にほぼ一致することがわかった。振幅が大きい場合は非線形回路では分岐点中心にして局在振動が励起され,安定であるように見える。線形の回路では,それは急減衰することがわかった。この局在振動の存在は差分ラプラシアンの点スペクトルの存在に対応しているが,連続変数ラプラシアンと離散変数ラプラシアンの差違が明らかになったことは興味ある事だと考えられる。局在振動の安定性など残された問題も考察したが,まだ研究途中である。他に,雑音の影響についていくらかの知見が得らつつある。(2)石毛は多孔質媒質における拡散モデルである非線形熱方程式の初期値問題が解けるための一つの十分条件を与えた。それは拡散係数がどの程度まで増大してもよいか,についてシャープな条件になっている。方法は積分に対してくわしい不等式を証明することによっている。(3)内山は2進面積関数を最大関数に関するウェイトつきの精密な不等式を証明した。これはウィルソン予想の部分的解決になっている。(4)大野と浦川はグラフ上の差分ラプラシアンの最小固有値の評価を,さまざまな幾何的モデルにおいて調べた。これは(1)岡田の研究における点スペクトルの研究にも関連した研究である。(5)内田は拡大体の正則表現の方法を用いると,符号理論に見通しがよくなることを示した。即ち与えられた有限体上の符号が検査記号を同時に作れ,しかも自己双対性も保存される。(6)望月は実半空間に於けるフレット-クランの定理を複素半空間上に拡張した。
昭和・平成期における南部杜氏の育成方法と就職斡旋方法についての研究

南部杜氏協会会員を対象として,聞き取りとフィールド調査,資料収集に基づいて酒造労働従事者(蔵人)の人材育成方法および昭和期における就職斡旋の方法について調査するとともに,酒造労働における熟練の一般的特徴について調査・検討した.その結果,現在多くの酒蔵においては各蔵人が担当工程における個別作業を遂行する上で必要とする熟練や知識だけではなく,全体の工程やリズムの中に自分をあてはめこむことができるようになることが必須となっている,ということを見出した.南部杜氏協会会員を対象として,聞き取りとフィールド調査,資料収集に基づいて酒造労働従事者(蔵人)の人材育成方法および昭和期における就職斡旋の方法について調査するとともに,酒造労働における熟練の一般的特徴について調査・検討した.その結果,現在多くの酒蔵においては各蔵人が担当工程における個別作業を遂行する上で必要とする熟練や知識だけではなく,全体の工程やリズムの中に自分をあてはめこむことができるようになることが必須となっている,ということを見出した.(1)昭和期における蔵元への杜氏斡旋の主体としては,杜氏をさらに束ねる存在としての「大杜氏」が挙げられる.本研究ではまず,大杜氏からの就職斡旋がどのような形でなされていたのかという点について,現役杜氏および引退した杜氏への聞き取り調査を実施し,さらにそれを裏付ける支部会計簿等の資料を収集することに努めた.昭和期における大杜氏による就職斡旋は,協会からのそれとともに一つの有力な斡旋方法であったということが明確にされた.(2)杜氏をはじめとする蔵人の持つ熟練技能の一般的特徴を解明するために,今年度は複数の杜氏への聞き取り調査を実施した.各杜氏のこれまでのキャリアについて聞き取りを行うとともに,特に熟練が必要とされる浸漬(限定吸水)および製麹工程において,どのような点に特に留意しながら各種操作を実行しているのか,各操作の際の判断基準等についての聞き取りを行った.杜氏によっては判断基準等について明確な言葉として述べることが難しいとする者も少なくないが,各種操作に際しては考慮に入れるべき要素が複数存在し,かつこれらが環境によって変化しやすいということが明らかになった.(3)関西の大手酒造メーカー複数社を比較対象として,機械化の進展に伴って必要とされる技能・熟練,分業のあり方は中小の酒造メーカーとどのように異なっているか,またどのような方法で人材育成に取り組んでいるか,という点についてフィールド調査および聞き取り調査を実施した.ここでは相対的に監視業務の要素が強くなっている場合があるものの,複数のメーカーにおいては機械化の進展した工場で働く従業員を,あえて定期的に手造りの要素が残存する工場へ配置換えする等の方法によって酒造りに関するノウハウを現場に蓄積させようと試みていることが明らかになった.成果としては大きく以下の3点にまとめられる.第一に,酒蔵での参与観察および蔵人への聞き取り調査に基づき,酒造労働の具体的内容および必要とされる熟練の一般的特徴を明らかにしたことである.清酒製造における熟練ないし技能が一種の暗黙知に相当するものであるということは先行研究においても指摘されているが,本研究ではさらに議論を進めてなぜそれらが暗黙的なままに留まっていることがしばしばありうるのか,という点について複数の杜氏への聞き取りに基づき考察した.これに加え,これまでの酒造労働における研究では触れられることのなかったタイプの熟練としての「協業のための熟練」(蔵の中にある各種の情報から各工程の進捗状況を把握し清酒製造という工程全体の流れに自分を当て嵌めこむことができるようになること)を見出した.第二に,聞き取り調査に基づいて前述の「協業のための熟練」概念をより精緻に考察したことである.この協業のための熟練を獲得する過程とは,工程の流れやリズムに自分の作業を同期化させることができるようになる過程であるとともに,自己の置かれている物理的・社会的位置を理解してゆく過程でもある.さらに,協業のための熟練を獲得するためには,蔵内の各種の情報を利用したり作業のペースを理解したりすること以上に,酒蔵における労働のあり方を規定する中心的存在である杜氏と感性を共有し『阿吽の呼吸』をもって作業に従事する必要があるということを参与観察と複数の蔵人・杜氏への聞き取りに基づき明らかにした.第三に,昭和24年から現在までの南部杜氏協会北上支部歴代会員全員の就職状況と勤務地に関するデータを『南部杜氏協会北上支部八十八年史』における資料部分および座談会部分としてまとめた.以上3点が本研究を通して得られた主な研究成果である.
Lumicanの細胞増殖因子制御による膵臓癌増殖抑制効果の検討

Lumicanは小型ロイシンリッチプロテオグリカンの一種で、カルチノイド腫瘍、乳癌、大腸癌、神経内分泌癌、子宮頸癌、膵臓癌などにおいて、その過剰発現が報告されている。乳癌組織において癌周囲のlumican発現が組織学的分化度、エストロゲン受容体の発現や発症年齢と関連し、進行大腸癌においては、lumicanの癌細胞における発現が158例中99例(62.7%)に認められ、リンパ節転移の広がりや癌の深達度と関連する傾向があることが明らかとなった。膵臓癌培養細胞系(PANC-1,MIAPaCa-2,KLM-1,Capan-1,PK-1,PK-8)において、lumican mRNAとlumicanタンパクの発現がみられた。膵臓癌細胞内のlumicanタンパクは分子量37-100kDであったが、培養液中のlumicanは主に60-70kDであった。膵臓癌組織ではlumicanは53例中30例(57%)の癌細胞に局在がみられ、53例中36例(68%)の間質組織に局在が認められた。膵臓癌細胞にlumicanが陽性の症例では、臨床病理学的因子との関連はみられなかったが、陰性例に比べ予後が良い傾向がみられた。一方、間質組織のlumicanの局在と女性、進行度、後腹膜浸潤、十二指腸浸潤、切断端での癌陽性には有意な関連がみられ、間質にlumicanが局在している症例では間質のlumican陰性例に比べて予後が悪い傾向がみられた。これらの結果より膵臓癌においては、癌細胞内におけるlumicanと癌周囲の間質組織におけるlumicanは異なった糖鎖を有しており、間質内の60-70kDの分子量を示すlumicanが癌細胞の浸潤や予後に重要な役割を果たしている可能性が示唆された。Lumicanは小型ロイシンリッチプロテオグリカンの一種で、角膜などの創傷治癒過程や各種の癌組織で豊富に発現している。乳癌組織においてlumicanは間質の線維芽細胞で産生され、癌周囲のlumican発現が乳癌の組織学的分化度、エストロゲン受容体の発現や発症年齢と関連していることが報告されている。進行大腸癌においては、lumicanの癌細胞における発現が、158例中99例(62.7%)にみられていた。大腸癌細胞におけるlumicanの発現はリンパ節転移の広がりや腫瘍の深達度と関連する傾向があり、lumican発現症例は予後が悪いことが明らかとなった。膵臓癌培養細胞系(PANC-1,MIAPaCa-2,KLM-1,Capan-1,PK-1,PK-8)においてはlumican mRNとlumicanタンパクの発現がみられた。組み換えlumicanタンパクをMIAPaCa-2に添加したところ、高濃度で増殖抑制効果が認められた。正常膵臓組織では免疫組織化学染色においてlumicanは膵島のα細胞に局在していた。膵臓癌細胞にlumicanが陽性の症例では陰性例に比べ予後が良い傾向がみられた。一方、間質組織のlumicanの局在と後腹膜浸潤、十二指腸浸潤には関連がみられ、間質にlumicanが局在している症例ではlumican陰性例に比べて予後が悪い傾向がみられた。

これらの結果より膵臓癌組織においては、癌細胞内におけるlumicanと癌周囲の間質組織におけるlumicanは異なった役割を果たしていると考えられた。Lumicanの膵臓癌細胞の増殖動態に対する役割を、lumicanのsiRNAを用いて今後さらに検討する予定である。カルチノイド腫瘍、乳癌、大腸癌、神経内分泌癌、子宮頸癌、膵臓癌などにおいて、小型ロイシンリッチプロテオグリカンの一種であるlumicanの過剰発現が報告されている。乳癌組織において癌周囲のlumican発現が組織学的分化度、エストロゲン受容体の発現や発症年齢と関連し、進行大腸癌においては、lumicanの癌細胞における発現がリンパ節転移の広がりや癌の深達度と関連する傾向があることが明らかとなった。膵臓癌培養細胞系(PANC-1,MIAPaCa-2,KLM-1,Capan-1,PK-1,PK-8)において、lumican mRNAとlumicanタンパクの発現がみられた。膵癌細胞内のlumicanタンパクは分子量37-100kDであったが、培養液中のlumicanは主に60-70kDであった。この分子量の違いは、結合する糖鎖の違いによることが糖鎖切断酵素による解析で明らかとなった。膵臓癌組織ではlumicanは53例中30例(57%)の癌細胞に局在がみられ、53例中36例(68%)の間質組織に局在が認められた。膵臓癌細胞にlumicanが陽性の症例では、臨床病理学的因子との関連はみられなかったが、陰性例に比べ予後が良い傾向がみられた。一方、間質組織のlumicanの局在と女性、進行度、後腹膜浸潤、十二指腸浸潤、切断端での癌陽性には関連がみられ、間質にlumicanが局在している症例では間質のlumican陰性例に比べて予後が悪い傾向がみられた。これらの結果より膵臓癌においては、癌細胞内におけるlumicanと癌周囲の間質組織におけるlumicanは異なった糖鎖を有し、間質内の60-70kDのlumicanが癌細胞の浸潤や予後に重要な役割を果たしている可能性が示唆された。
輸入野菜急増下における青果物流動の地理的パターンおよびその変動

研究成果は以下に大別できる。すなわち,国内の青果物流動体系に関するもの,対日青果物貿易を踏まえたアジアの輸出国の青果物流動に関するもの,および,両者を踏まえた国際比較に関するものである。第1の点に関しては,野菜輸入の急増する1990年代以降の野菜生産出荷統計のデータの検討から,大産地と大消費地を結ぶ体系が機能する反面,中小の産地が後退し,全体としての農業生産が後退するというpolarization現象が認められた。また,青果物卸売市場調査報告のデータ分析からは,このような現象の進行する過程で大都市と地方都市,中小都市間での卸売市場格差が顕在化していることも明らかになった。また,対日青果物貿易に関してはアジアの比重の拡大,特に量的な側面からは中国の,付加価値の側面からは韓国や東南アジア諸国の動向が特筆された。加えて,代表的な対日青果物輸出国としての中国と韓国の青果物卸売市場の検討からは,両国においてもわが国同様の国家的なスケールの青果物流通体系が機能していることが明らかになった。その際,わが国の大量の青果物輸入の背景として輸出国との経済的格差を指摘できるとともに,輸出国内の地域間格差も無視しえない事項であった。すなわち,国際間格差と同様に各国の地域間格差がこれらの地域全体の青果物流動の検討の上で重要である。最後に,上記の2つの観点からの検討を踏まえ,日韓,および中国,インドをも加えたアジアの青果物流通の国際比較を行った。一方で広大な国土を持つ中国と他方で国土の小さな韓国の状況は,わが国の青果物流通と貿易を展望する上でも示唆に富むものである。輸入青果物の増加はわが国の国内青果物流動体系にも少なからぬ影響を与えているが,同時に輸出国を含めたスケールの中で,経済的なポジションの相対的に高い大消費地のみに特化するのではない,多様性を持った供給体系の模索が求められる。1990年代以降の外国産青果物の輸入が増加する中で,わが国の青果物流動体系がどのような空間的再編成を遂げつつあるのかを解明するために調査や資料収集を行った。1県庁都市や人口10万人程度の地方の小都市を対象とした検討からは以下の諸点が明らかになった。まず,岡山市などの有力な青果物産地を県内に持つ都市においても,輸入品を含め,東日本などの全国産地からの青果物の入荷が広く認められること。また,山口県内では小都市のレベルでも,卸売市場の淘汰の傾向などがうかがえた。これらは,いずれも広域的な青果物流動の結果もたらされたものと考えられる。その一方,東京や大阪などの大都市において,極めて地域的な青果物の流通体系が機能していることが観察された。地元産の生鮮野菜が付加価値を高める形で販売されているケースである。1つの動きとして注目したい。2海外からの青果物輸入の動向に関する検討については,特に中国の動向に焦点を当てた。その結果,中国の対日青果物輸出と,中国国内の青果物流動体系との間に興味深い対比が認められた。例えば,対日輸出の代表的品目であったネギは,中国国内では長距離輸送があまり行われていないことなどである。これらのことから中国の対日青果物輸出の背景には両国の経済環境の違い,特に経済的な格差が強く影響していることがうかがえた。また,この他にもニュージーランドからのキウイフルーツの輸入動向や日本への出荷戦略についての知見も得た。3統計資料の収集と分析に関しては,「青果物卸売市場調査」をはじめとする各種統計を入手し,大規模市場と中小規模の市場,大都市の市場と地方都市の市場の対比に焦点をあてて検討を行った。

1990年代以降の外国産青果物の輸入が増加する中で,わが国の青果物流動体系がどのような空間的再編成を遂げつつあるのかを解明するために調査や資料収集を行った。1県庁都市や人口地方の小都市を対象とした検討からは以下の諸点が明らかになった。山口県下の主要都市や広島市,福岡市,北九州市などの卸売市場の分析から,大都市と中小都市,地方都市の間にはなお価格差が存在すること,これらの価格差の背景には主要産地と消費地問の距離が影響していることなどであり,都市間格差の背景には主要産地が特定地域に集中することが想定された。これらについては学会誌などに成果を発表した。2海外からの青果物輸入の動向に関する検討については,東アジア,特に韓国の動向に焦点を当てで検討を行った。東アジアについてはわが国の野菜輸入地域の変化の他に,日中韓の3カ国間での経済格差と野菜貿易との関係について検討した。韓国プサンを中心とする青果物流通がわが国と比較してローカルなスケールで機能していることなどを検討した。なお,これらについては2004年夏に英国スコットランドで開催された国際地理学会議及びそのプレコングレスで発表した。これらについては,学会誌等において掲載,また,一部は掲載予定である。3統計資料の収集と分析に関しては,「野菜生産出荷統計」をはじめとする各種統計を入手し,大規模市場と中小規模の市場,大都市の市場と地方都市の市場の対比に焦点をあてて検討を行った。4以上の諸点をふまえて,わが国の青果物流通全般の変化についての検討を行い,カナダのトラフトンが示した「polarization(極化)」の概念の援用の可能性についても言及した。なお,これについては2004年秋の人文地理学会で発表した。本年度は3年間の研究期間の最終年度であるため,前年度に引き続いて資料収集や調査,およびその分析を行う一方で,成果の取りまとめについても注力した。研究目的である1990年代以降の青果物輸入の増加のもとでのわが国の青果物流動体系の変貌を解明するために,以下の側面からのアプローチを試みた。1国内の流動パターンの変化そのものについては,野菜生産出荷統計に基づいた分析により1970年代以降のパターンを具体的に描き出した。その際,カナダの農業地理学者トラフトン教授の研究を踏まえて,Polarization現象の進行を指摘した。2次にわが国への青果物輸入を中心にした国際的な流動パターンについては,農畜産業振興機構のデータをもとに対日野菜輸出の地理的パターンの変化を具体的に描き出した。その結果,近年のわが国の野菜輸入においては中国産品の顕著な量的拡大がみられた。そうした中で,韓国や東南アジア産品は特定の高価格の品目に特化することで独自性を発揮していることが明らかになった。3さらに対日野菜輸出を行う各国の状況に関する検討も行った、例えば韓国の近年の青果物流通の実態を明らかにするとともに,日韓の比較も行った。同様の観点から,中国やインドについての例証も行い,国家間,地域間の経済格差との関わりから,共通点と相違点について考察した。4以上を踏まえた理論的検討についても取り組み、経済地理学会や日本地理学会などにおいて,関連するテーマでのシンポジウムなどを開催した。
ウイルスの細胞間移行機構の解明-移行タンパク質の分解系の解析-

植物ウイルスの移行タンパク質(movement protein ; MP)は原形質連絡(plasmodesmata ; PD)を介してウイルスゲノムを感染細胞から非感染細胞へ伝播する役割を担っていると考えられている。しかし、そのウイルスの移行機構については詳細な解析がなされていない。そこで私はウイルスのコードするMPが宿主細胞内で翻訳後修飾を受けタンパク自身の安定性や局在性を変化させていることに着目し様々なアプローチを試み新規の成果が得られた。先ずMPは他のウイルスタンパク質である複製酵素タンパク質や外皮タンパク質と比べて安定性の低いタンパク質であり、その分解は二つの翻訳後修飾すなわちMPのリン酸化が間接的に安定をもたらし、直接的にはMPのユビキチン化によるユビキチン-プロテオソーム系で行われていることが近年報告された。そこで私はMPのユビキチンサイトの決定を試みた。MPはリン酸化を受けて安定化することからMPのリン酸化サイト・37セリン残基の近傍にユビキチンサイトがあると予想しMPの欠失変異体を作成し解析を行ったところ34,38そして41番目のいずれかのリシン残基がユビキチンのターゲットサイトであることが分かった。また、この近傍への修飾によりタンパク質の局在が決定されていることも明らかにした。また、マルチホトン・共焦点顕微鏡を用いたtime-lap解析により感染細胞におけるウイルスの細胞間移行機構を明らかにした。ウイルスは先ず始めに小胞体(ER)の膜の上にウイルス核酸とMPからなる複合体を感染中期(14hpi)までに確立しアクトミオシン運動系により細胞内を移動し細胞の表面に移行した。その後ゆっくりと細胞膜上を移行してPDに到達する。PDに到達したウイルス複合体はゆっくり時間を懸けてPDを押し広げながら隣接細胞へ通り抜けウイルスの細胞間移行を感染後期(18hpi)に確立していることを明らかにした。ウイルスの感染過程をリアルタイムで観察を行ないウイルスの動的機構を明らかにしたのは新規の発見である。
山東京伝の吉原文化圏に関する研究－柳沢米翁の俳諧交友と大名の茶道交流の解明

本研究は、山東京伝の作品を解読する鍵となる吉原文化圏を明らかにすることを目的としている。山東京伝の文化圏に影響を与えた吉原文化が、大名子弟をパトロンとする江戸座俳諧と、その俳諧交友をもとにした茶道による大名と吉原者の交流であることから、山東京伝と深い繋がりを持った大名俳人柳沢米翁の俳諧交友活動を米翁の日記から調査し、大名の俳諧交友関係を江戸座俳諧との係わりの中で明らかにする。そして山東京伝のパトロン、松平雪川の兄松江藩主松平治郷(不昧)や姫路藩主酒井忠以(宗雅)ら大名の茶道具や、山東京伝の作品や吉原に係わる人々の所持した茶道具の調査・分析を行うことによって、京伝との係わりを解明していく。今年度は柳沢米翁の『宴遊日記』、『松鶴日記』、『美濃守日記』、息子の柳沢信復の『聞書』、『聞書番外』の調査・分析を行った。また今年は松平不昧没後二百年にあたり開催された「大名茶人松平不昧」展において、不昧が収集した茶道具の目録『雲州蔵帳』等に記載された書画・茶道具を実見し、不昧所持の茶道具と戯作の関係性について接点を発見することができた。このうち不昧お好み道具を製作していた蒔絵師羊遊斎は、姫路藩主酒井忠以弟酒井抱一の下絵をもとに蒔絵の制作をしており、大田南畝ら戯作者との係わりも持っていた。ここからも茶道での大名子弟と戯作界との一つの係わりを見出すことができた。これら松平不昧ら大名と茶道の係わりについて、『雲州蔵帳』、『古今名物類聚』、『遠州蔵帳図鑑』、『万宝全書』、『大正名器鑑』等の資料から分析を行い、京伝の吉原文化圏との係わりの一部について考察した。次年度以降も引き続き大名ら所持の茶道具と資料の分析を行い、山東京伝との係わりを解明してゆく。柳沢米翁の『宴遊日記』、『松鶴日記』、『美濃守日記』等の調査を行い、米翁と大名俳人、江戸座俳諧宗匠の交友関係の一部を調査・分析・データ化し、資料の翻刻・読解を行った。加えて江戸座俳諧の位置づけを明確にしていくため『東風流』の翻刻を行い、江戸座俳諧宗匠存義と春来の句風への考察を行った。さらに今年度は大名茶人松平不昧没後二百年祭にあたり、三井記念美術館、絲原記念館、手錢記念館等で行われた企画展から大名所持の茶道具と戯作との係わりを見出すことができた。加えて山東京伝のパトロンの一人であった松前藩主弟松前文京と関連して、蝦夷地探検家の松浦武四郎生誕二百年にあたり、武四郎から照射した松前藩や北海道に係わる大名や文人との文化交流についても考察を加えることができた。山東京伝と係わりの深い同時代の大名俳人柳沢米翁の俳諧交友関係の解明を引き続き行う。柳沢米翁の日記を中心に、マイクロフィルム、原資料にあたり資料調査を行ってゆく。米翁の俳諧関係の日記『宴遊日記』、『松鶴日記』、『美濃守日記』、加えて息子の柳沢信復の『聞書』、『聞書番外』から資料の翻刻・読解を行い、米翁の俳諧活動をまとめていく。そして、米翁の俳諧交友を江戸座俳諧、大名俳人との係わりの中で解明してゆく。加えて俳諧交友をもとにした大名子弟の茶の湯での交際を松江藩主松平不昧の『雲州蔵帳』、『古今名物類聚』、酒井抱一の兄酒井忠以(宗雅・銀鵞)の『逾好日記』、『玄武日記』等と山東京伝の係わりについても調査を進めてゆく予定である。

これら松平不昧ら大名と茶道の係わりについて、『雲州蔵帳』、『古今名物類聚』、『遠州蔵帳図鑑』、『万宝全書』、『大正名器鑑』等の資料から分析を行い、京伝の吉原文化圏との係わりの一部について考察した。次年度以降も引き続き大名ら所持の茶道具と資料の分析を行い、山東京伝との係わりを解明してゆく。柳沢米翁の『宴遊日記』、『松鶴日記』、『美濃守日記』等の調査を行い、米翁と大名俳人、江戸座俳諧宗匠の交友関係の一部を調査・分析・データ化し、資料の翻刻・読解を行った。加えて江戸座俳諧の位置づけを明確にしていくため『東風流』の翻刻を行い、江戸座俳諧宗匠存義と春来の句風への考察を行った。さらに今年度は大名茶人松平不昧没後二百年祭にあたり、三井記念美術館、絲原記念館、手錢記念館等で行われた企画展から大名所持の茶道具と戯作との係わりを見出すことができた。加えて山東京伝のパトロンの一人であった松前藩主弟松前文京と関連して、蝦夷地探検家の松浦武四郎生誕二百年にあたり、武四郎から照射した松前藩や北海道に係わる大名や文人との文化交流についても考察を加えることができた。山東京伝と係わりの深い同時代の大名俳人柳沢米翁の俳諧交友関係の解明を引き続き行う。柳沢米翁の日記を中心に、マイクロフィルム、原資料にあたり資料調査を行ってゆく。米翁の俳諧関係の日記『宴遊日記』、『松鶴日記』、『美濃守日記』、加えて息子の柳沢信復の『聞書』、『聞書番外』から資料の翻刻・読解を行い、米翁の俳諧活動をまとめていく。そして、米翁の俳諧交友を江戸座俳諧、大名俳人との係わりの中で解明してゆく。加えて俳諧交友をもとにした大名子弟の茶の湯での交際を松江藩主松平不昧の『雲州蔵帳』、『古今名物類聚』、酒井抱一の兄酒井忠以(宗雅・銀鵞)の『逾好日記』、『玄武日記』等と山東京伝の係わりについても調査を進めてゆく予定である。関西方面への書誌調査・資料調査を予定していたが、日程の都合で赴くことができず、次年度の出張調査にあてることとした。
赤芽球脱核のメカニズム解明に関する研究

方法:ヒト赤芽球のin vitro培養系を用い、培養7日目(CFU-E : Day7)から培養13日目(Day13)の脱核・網状赤血球に至るプロセスでの細胞形態変化と細胞内のATP量とATP産生に関係する分子(酵素など)の発現量を定量的に解析した。定量PCRとウェスタンブロット(WB)の内部コントロールは、それぞれ28SリボソームRNAとαチューブリンを用いた。結果: 1既報と同様に、Day7からDay13の脱核にむけて分化が進むとともに、細胞の小型化、核濃縮が観察され、Day13に脱核が観察された。2定量PCR法による低酸素誘導因子(hypoxia inducible factor α: HIFα)のmRNA及び蛋白質の相対量は、Day7から脱核に向けて上昇した。3ピルビン酸脱水素酵素(PDH)のリン酸化酵素(PDK)には4種類のアイソザイムが知られているが、ヒト赤芽球ではPDK1とPDK4がHIFαの上昇に伴って有意に上昇した。4抗PDH抗体及び抗PDHリン酸化部位特異抗体を用いて、赤芽球のPDHは脱核に至るまで相対的にリン酸化されている度合いが上昇した。この変化は、PDKの発現と一致していた。5細胞内ATP量は、Day7からDay13に向けて減少した。一方、GLUT1(グルコーストランスポーター)の発現は上昇した。6乳酸脱水素酵素アイソザイムLDHAの発現はmRNA及び蛋白質レベルで、Day13において増加の傾向が見られた。結論:以上の結果より、赤芽球では、骨髄の低酸素環境下(約7%)において常時産生されるHIFαの分解が抑制され、核内のHIFβと結合してPDK1及びPDK4を発現させることでPDHをリン酸化して、好気的なミトコンドリアでのATP産生を抑制し、嫌気的解糖系によりATPを合成・獲得していることが示唆された。骨髄の低酸素環境内では嫌気的解糖系により、エネルギーを得ていることが明らかになった。