hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
積極的NKT細胞活性化による自己免疫性ぶどう膜炎の抑制

NKT細胞は免疫反応の要所に活躍する細胞で、自己免疫疾患の抑制へ関わりが示唆されている。今回我々は、自己免疫性ぶどう膜炎の発症への関与を明らかにするため、マウス実験的自己免疫性網膜ぶどう膜炎(EAU)においてNKT細胞の役割について検討した。CD1ノックアウト(CD1KO)マウス、Ja281ノックアウト(JaKO)マウスはいずれもNKT細胞の機能が失われたマウスである。C57BL/6(ワイルドタイプ)とCD1KOマウス、JaKOマウスをヒト視細胞間結合レチノイド蛋白ペプチドで免疫してEAUを惹起したところ、ワイルドタイプに比べて、CD1KOマウス、JaKOマウスいずれにおいても優位にEAUの重症化がみられた。また、NKT細胞を活性化させるリガンドとして知られるalpha-garactoceramide(aGalCel),またはaGalCel由来のNKT細胞を選択的にTh2タイプへ活性化させる合成糖脂質(OCH)を投与することによるワイルドタイプのEAUの抑制について検討した。ところがaGalCelの投与、OCHの投与を行ってもEAUの抑制はみられなかった。以上のことから、NKT細胞はEAUの発症抑制に関与していると考えられるが、NKT細胞を積極的に刺激活性化しても自己免疫疾患であるEAUの抑制はできないことが示唆される。NKT細胞は近年注目されている細胞群であり、今までの研究により多彩な機能を持ち合わせている細胞群であることが分かってきた。自己免疫疾患の制御もその一つの機能であると考えられており、NKT細胞に対してTh2タイプの刺激のみを選択的に与えるα-GC由来の合成糖脂質により実験的自己免疫性網膜ぶどう膜炎(EAU)の抑制をこころみた。計画当初は、NKT細胞の機能不全のマウス(Jα-281ノックアウトマウスまたはCD1ノックアウトマウス)を用いて実験的自己免疫性網膜ぶどう膜炎の誘導を行い、自己免疫疾患の抑制に関するNKT細胞の重要性について検討する予定であったが、充分なマウスの数、週齢をそろえることができなかった。そのため、まずα-GC由来の合成糖脂質(OCH)によるEAUの抑制実験を行なった。C57BL/6マウス10匹に対しEAU惹起ペプチドを免疫しOCHの腹腔内投与を連日おこない、コントロールとしては同じくC57BL/6マウス10匹に対しEAU惹起ペプチドを免疫しPBSを腹腔内投与を行なった。結果は、期待した抑制効果はみられずコントロールと同等のぶどう膜炎がみられた。今後は、投与の方法を経口投与とする、投与量を増量するなどを行なう予定である。また、NKT細胞のノックアウトマウスを充分に週齢をそろえて手に入れ、EAUの実験を引き続き行なう予定である。
超高速・超大容量情報処理を実現する光電子集積三次元LSIの研究

本研究では光デバイスと電子デバイスが集積されたLarge Scale Integrated circuits (LSI)を積層し、光電子集積三次元LSIを実現することで、需要が伸び続けるスーパーコンピュータやデータセンター用サーバーを高性能化、低電力化することを目的としている。このためには、電気-光信号変換デバイスである光変調器の小型・低消費電力化が必要である。そこで今年度は、光変調器を小型・低消費電力化する技術として研究代表者が提案したNRR光変調器(Nonreciprocal Resonator based optical modulator)の研究を行った。現在、マイクロリング光変調器が超小型・低消費電力光変調器として注目されている。しかし、従来のマイクロリング光変調器は共振波長変調型のデバイスであるため、厳密な共振波長制御が必要となり実用化が困難であった。これに対しNRR光変調器は、世界初の光強度変調型のマイクロリング光変調器である。このため、小型・低消費電力という特性を持つと同時に共振波長制御が必要ないという特長も持ち、実用的なマイクロリング光変調器として非常に有望である。今年度はNRR光変調器の設計指針を作成するとともに最適化を行った。その結果、当該デバイスの有用かつ汎用的な設計指針を示せたとともに、直径5μm程度の小型光変調器で消光比10dB程度を達成できることがわかった。また、消費電力を算出した結果、35.9fJ/bitと非常に低電力な光変調を実現できることもわかった。これらの値は既存の小型・低消費電力マイクロリング光変調器と同等である。このように、NRR光変調器は実用的であるとともに十分に小型・低消費電力化することが可能であることを定量的に明らかにできた。NRR光変調器は、高性能かつ低電力なスーパーコンピュータ、データセンター用サーバーを実現するキーデバイスとなりえる。(抄録なし)本研究では光デバイスと電子デバイスが集積されたLSIを積層し、超高速・超大容量情報処理を可能とする光電子集積三次元LSIを実現することを目的としている。この目的に向けて以下の研究を実施した。(1)積層LSI間光接続技術の開発積層LSI間の光接続を実現するため、シリコン貫通光配線と平面光導波路を結合する光結合器が必要となる。この光結合器には光を90度曲げる機能が必要となる。しかしながら従来の光結合器では50%以上の結合効率を実現することが困難である。本研究では新しい光結合器としてUDOC(Unidirectional Optical Coupler)を提案し、検討・試作・評価を行った。UDOCの結合効率をシミュレーションにより計算した結果、85%程度と非常に高いことが分かった。試作したUDOCの結合効率評価においても良好な特性が得られた。また、既存の半導体技術を用いてUDOCを作製することにも成功した。このためUDOCは電子デバイスと親和性が高く、また、高効率な光結合も実現できるため、光電子集積三次元LSIに用いるデバイスとして非常に優れている。よって、UDOCは次世代の高性能情報処理システムを実現するためのキーデバイスになると考えられる。(2)LSIに集積可能な光変調器と受光器の開発光変調器の検討、および受光器の試作を行った。光変調器については従来のリング変調器の課題を克服する新しい光変調器を考案した。リング変調器は非常に小型、低消費電力である。よってその課題を克服した新しい光変調器は、光電子集積三次元LSIのみならず、その他の光電子集積システムや光通信においても重要なデバイスになると考えられる。また、光電子集積三次元LSIに集積するための受光器の試作も行い、その基本的な動作を確認した。高効率な光結合器の考案

・試作・評価を行うことができ、概ね良好な特性を得ることに成功しているためである。また、研究実施計画に掲げた目標を達成し得る光変調器を考案したためである。光結合器の評価は完了していないため、評価を継続し基本特性の取得を完了する。その後、基本的な光電子集積三次元LSIの試作として、シリコン貫通光配線、光結合器、平面光導波路を有するLSIを作製・積層する。試作した光電子集積三次元LSIを用いて、三次元LSI内部の光通信の評価を行う。また、平成24年度に考案した光変調器を実際に試作するため、材料・作製技術の観点から基礎研究を進めデバイスの試作・評価を行う。(抄録なし)
大規模大気波動に伴う物質輸送とその季節変動・年々変動

各種大気力学モデル開発・利用して,対流圏一成層圏領域に卓越する大規模大気波動の非線型な動態とこれらに伴う物質輸送過程を調べた.また,モデルによる長期間数値積分データと観測データを総合的に解析することにより,波動の動態の季節依存性や年々変動,経年変化の特性を明らかにした.1.モデル開発さまざまなジオメトリ上の地球流体方程式をスーパーコンピューター上で効率良く解くための数値計算ライブラリの整備を行った。また、その応用として、2次元球面上の減衰性乱流や、浅水方程式での重力波の射出問題などに関する研究を行った。2.プラネタリー波の力学物理過程を簡略化した全球大気循環モデルで赤道域帯状平均帯状流のQBO強制を与えた実験を行ない,冬半球におけるプラネタリー波の動態と循環場の応答を明らかにした.また,1950年以降のNCEP再解析データを使って,南半球成層圏の季節進行の年々変動に関する統計解析を行なった.さらに,冬季成層圏極域での水平混合および輸送障壁の力学を調べるために,現実の成層圏の4次元同化データ9年分を用いて等温位面上でのラグランジュ的移流計算や局所的リアプノフ安定性解析を行ない,年々変動の定量的な評価を行なった.3.傾圧不安定波の力学大気大循環モデルで様々に理想化した海面水温分布(SST)を与えて長時間積分を行ない,ストームトラックが局在化する力学的要因を探った.中緯度域におけるSST分布の南北勾配の東西非一様性が最も重要であることが明らかになった.4.赤道域重力波の力学メソスケール気象モデルを高度100kmまで伸ばしたシミュレーションにより,積雲対流により励起されるメソスケール重力波が上方伝播して中間圏界面付近で砕波する過程を,世界で始めて再現した.また,熱帯の積雲対流から励起される波動を,静止衛星の赤外観測に基づいて推定する方法を研究した.各種大気力学モデル開発・利用して,対流圏一成層圏領域に卓越する大規模大気波動の非線型な動態とこれらに伴う物質輸送過程を調べた.また,モデルによる長期間数値積分データと観測データを総合的に解析することにより,波動の動態の季節依存性や年々変動,経年変化の特性を明らかにした.1.モデル開発さまざまなジオメトリ上の地球流体方程式をスーパーコンピューター上で効率良く解くための数値計算ライブラリの整備を行った。2.プラネタリー波の力学物理過程を簡略化した全球大気循環モデルで赤道域帯状平均帯状流のQBO強制を与えた実験を行ない,冬半球におけるプラネタリー波の動態と循環場の応答を明らかにした.また,1950年以降のNCEP再解析データを使って,南半球成層圏の季節進行の年々変動に関する統計解析を行なった.さらに,冬季成層圏極域での水平混合および輸送障壁の力学を調べるために,現実の成層圏の4次元同化データ9年分を用いて等温位面上でのラグランジュ的移流計算や局所的リアプノフ安定性解析を行ない,年々変動の定量的な評価を行なった.3.傾圧不安定波の力学大気大循環モデルで様々に理想化した海面水温分布(SST)を与えて長時間積分を行ない,ストームトラックが局在化する力学的要因を探った.中緯度域におけるSST分布の南北勾配の東西非一様性が最も重要であることが明らかになった.4.赤道域重力波の力学メソスケール気象モデルを高度100kmまで伸ばしたシミュレーションにより,積雲対流により励起されるメソスケール重力波が上方伝播して中間圏界面付近で砕波する過程を,世界で始めて再現した.また,熱帯の積雲対流から励起される波動を,静止衛星の赤外観測に基づいて推定する方法を研究した.各種大気力学モデルを用いて,対流圏-成層圏領域に卓越する大規模大気波動の非線形な動態とこれらに伴う物質輸送過程を調べた.また,モデルによる長期数値積分データと観測データを総合的に解析することにより,波動の動態・物質輸送の季節依存性や年々変動,経年変化の特性を明らかにした.1.モデル開発:効率的な球面浅水スペクトルモデルを開発した.回転球面浅水系での減衰性乱流実験を高解像度で行い,赤道域に自発的に西向き又は東向きジェットが形成されることを見出した.後者はこれまで認識されていなかった新しい結果である.2.プラネタリー波の力学:成層圏循環の季節内変動および年々の変動傾向を把握するために,3次元モデル実験およびNCEP再解析データの解析を行なった.季節進行がプラネタリー波強制の大きさに依存していることを定量的に評価した.3.傾圧不安定波の力学:山岳のない大気大循環モデルで,理想化された海陸分布とSST分布を仮定して長時間積分を行うことにより,熱帯におけるSST分布が,対流圏上層における亜熱帯ジェットの東西非一様性を形成する最も重要な熱的強制力であることを明らかにした.4.中間規模波の力学:中間規模波動は中緯度対流圏界面付近に捕捉された中立的な波動と考えられるが,放射,粘性等の減衰から振幅を維持するため増幅機構が存在するはずである.この点に着目し,wave activityフラックス解析を行なった.5.赤道波の力学:大気大循環モデルにおける低緯度の波動による輸送を研究する上で基礎となる波動そのもの特性が,様々なモデルの間でどう異なるかを調べた.

このため各国の代表的な大気大循環モデルの比較を行い,低緯度の鉛直伝播性波動は積雲パラメタリゼーションに大きく左右されることを示した.各種大気力学モデルを用いて,対流圏-成層圏領域に卓越する大規模大気波動の非線型な動態とこれらに伴う物質輸送過程を調べた.また,モデルによる長期数値積分データと観測データを総合的に解析することにより,波動の動態の季節依存性や年々変動,経年変化の特性を明らかにした.1.モデル開発:球面・周期境界平面・チャネルの各領域での浅水方程式系のスペクトルモデルを開発した.それらを用いて,回転球面浅水系での乱流からの赤道ジェット形成過程,および,順圧不安定な帯状ジェットからの重力波射出問題に関して研究を行っている.2.プラネタリー波の力学:南半球の客観解析データ使用して,成層圏循環の季節進行と年々変動について解析した.1980年代後半以降,極渦の崩壊時期が遅くなっているのに対し,冬季半ばの極夜ジェットはむしろ弱まっているなどの特徴を見いだした.また,とくに春季の変動について,赤道QBO・太陽活動との関係を調べた.さらに,等温位面上での粒子群追跡モデルを開発し,南半球周極渦内の物質混合過程の年々変動について定量的な解析を行なった.3.傾圧不安定波の力学:AGCMで海陸分布やSST分布を様々に仮定して長時間積分を行うことにより,対流圏で低気圧活動が活発な領域であるストームトラックの力学を調べた.ストームトラックを局在化させる要因と考えらている,下層の傾圧性や亜熱帯ジェットなどの時間平均場の東西非一様性は必ずしも重要でないことを見い出した.4.赤道波の力学:世界の代表的な中層大気大循環モデルにおける赤道域の波動の相互比較を行ない,モデル間で大きな違いがあること見出した.この違いは主にモデル中の降水を計算する積雲パラメタリゼーションの違いに起因することを明らかにした.さらに観測との比較に基づく評価を行った.各種大気力学モデルを用いて、対流圏-成層圏領域に卓越する大規模大気波動の非線型な動態とこれらに伴う物質輸送過程を調べた.また、モデルによる長期数値積分データと観測データを総合的に解析することにより、波動の動態の季節依存性や年々変動、経年変化の特性を明らかにした.1.モデル開発:さまざまなジオメトリ上の地球流体運動をスーパーコンピューター上で効率良く解くための数値計算ライブラリの開発・整備を行っている.今年度は2次元周期境界条件の平面上の流体方程式のためのプログラムをベクトル計算機向けに高速化した.現在は3次元流体方程式のためのプログラムを開発中である.2.プラネタリー波の力学:1950年2000年のNCEP再解データを使って、南半球成層圏の季節進行の年々変動をEOF解析した結果,対流圏上層の亜熱帯ジェットの変動と関連する極夜ジェットの変動と,QBOの位相と連動した春先の極夜ジェットの変動を抽出できた.また。簡略化した3次元全球大気循環モデルで赤道東西風強制をパラメータとして,冬季固定条件下で長時間積分を繰り返し。対流圏-成層圏結合系大気大循環の変動に対する赤道QBOの影響を調べた.3.傾圧不安定波の力学:大気大循環モデルで様々に理想化した海面水温(SST)分布を与えて長時間積分を行った.対流圏ストームトラックが東西方向に局在化する原因として、中緯度域におけるSST分布の南北勾配の東西非一様性が重要であることが分かった。
判別分析における多重共線性問題に対する分析安定化手法の総合的研究

本研究の研究目的は、判別分析においてしばしば問題となる多重共線性が存在する場合に、その多重共線性の影響を取り除き分析結果の信頼性を高める方法を、実際問題への適用の観点から検討し提唱することにある。多重共線性は、判別分析のみならず、一般的の多変量解析においても解析上の障害となる問題である。具体的には、標本の大きさに比べて変数の個数が多い場合や、類似の変数が含まれている場合、変数間の相関が高くなり、解析結果の信頼性が問題となる。この多重共線性による解析の不安定性の主な原因は、分散共分散行列の逆行列推定に起因する。この問題の対策として、(1)変数選択を行なう方法、(2)主成分情報を用いる方法、(3)分散共分散行列の縮小推定量を用いる方法が提案されている。(1)と(2)の方法は次元縮小を行なうアプローチであるが、得られた情報の一部分のみを利用しているということから、情報の利用効率の面で問題が残る。本研究においては、安定化手法の確立を目指し、これらの三つの手法の総合的観点から研究を行なったが、特に従来の研究で未開発要素の多い(3)の分散共分散の縮小推定量の方法に重点を置き、特にその中でも縮小パラメーターの決定方法の確立を中心的課題とした。分散共分散行列の縮小推定量を用いた線形判別関数の、変動の測度(漸近平均二乗誤差)を導出した。導出に際し、多変量正規性を仮定した漸近展開により、母集団のパラメータと標本の大きさで表された式を求めた。実際の誤判別率と漸近平均二乗誤差の二つの評価基準を対象として,縮小パラメーターの決定問題を、数値実験を通して検討を加えた。本研究により、縮小推定量を用いる場合の傾向および特徴のいくつかを明かにすることができた。
自家同種混合培養表皮の早期提供限界と表皮再構成機転に関する検討

自家モデルとしてDA近郊系ラット(MHC:RT1av1),同種モデルとしてWistar系ラット(MHC:RT1u)を用い躯幹より採取した皮膚からそれぞれの表皮細胞を得た.各細胞の混合比率を調整して播種し自家表皮細胞比率の異なる各種細胞浮遊液を作成後Dulbecco-Vogt modification of Eagle's mediumおよびHam's F-12mediumを3:1の比率で混合したこれに牛胎児血清,hydrocortisone,insulin,transferrin,triiodo-thyronine,choleragen,adenineを補足した培地で培養し、培養3日目以降は更にepidermal growthfactor(を添加した培地を使用した。培養7日後、十分重層化の得られたところで培養表皮シートを7週齢のDAラット背部に作成した直径2cmの全層皮膚欠損創に移植し,移植後は経時的に組織を採取し組織学的,免疫組織化学的に自家および同種培養皮膚細胞の動向ならびに創の上皮化について検討した.その結果自家表皮細胞率が50%のモデルでは炎症性細胞浸潤が顕著となり,更に自家表皮細胞率を25%まで落とした場合は移植後10日目の像で基底層の乱れや表皮細胞の空泡化が認められた.しかし移植後20日目には表皮基底層は再構成され移植後70日迄の観察では自家培養表皮と差を認めなかった.また免疫組織化学的検討では自家表皮細胞の増殖に伴い同種表皮細胞が移植後10日目頃から徐々に表層に押しのけられるように脱落し最終的には自家表皮細胞に完全に置き換わっていた.今後更に自家表皮細胞率を減少させ同様の評価が必要であると考えられた.自家モデルとしてDA近郊系ラット(MHC:RT1av1),同種モデルとしてWistar系ラット(MHC:RT1u)を用い躯幹より採取した皮膚からそれぞれの表皮細胞を得た.各細胞の混合比率を調整して播種し自家表皮細胞比率の異なる各種細胞浮遊液を作成後Dulbecco-Vogt modification of Eagle's mediumおよびHam's F-12mediumを3:1の比率で混合したこれに牛胎児血清,hydrocortisone,insulin,transferrin,triiodo-thyronine,choleragen,adenineを補足した培地で培養し、培養3日目以降は更にepidermal growthfactor(を添加した培地を使用した。培養7日後、十分重層化の得られたところで培養表皮シートを7週齢のDAラット背部に作成した直径2cmの全層皮膚欠損創に移植し,移植後は経時的に組織を採取し組織学的,免疫組織化学的に自家および同種培養皮膚細胞の動向ならびに創の上皮化について検討した.その結果自家表皮細胞率が50%のモデルでは炎症性細胞浸潤が顕著となり,更に自家表皮細胞率を25%まで落とした場合は移植後10日目の像で基底層の乱れや表皮細胞の空泡化が認められた.しかし移植後20日目には表皮基底層は再構成され移植後70日迄の観察では自家培養表皮と差を認めなかった.また免疫組織化学的検討では自家表皮細胞の増殖に伴い同種表皮細胞が移植後10日目頃から徐々に表層に押しのけられるように脱落し最終的には自家表皮細胞に完全に置き換わっていた.今後更に自家表皮細胞率を減少させ同様の評価が必要であると考えられた.
ヒト歯根膜細胞特異的な既知あるいは未知のフェノタイプマーカーの探索

本研究では、ヒト歯根膜細胞特異的な既知あるいは未知のフェノタイプタイプマーカーを探索することを最終目的として、以下に示す研究成果を得た。培養ヒト歯根膜細胞における各種細胞マーカー分子の発現パターンとその継代による変化の検討:初代培養ヒト歯根膜細胞(HPDLC)における各種細胞マーカー陽性細胞率は、幹細胞マーカー;CD105,CD44,CD29、インテグリン;CD49c,CD49eは高く,一方インテグリン;CD49d,CD49f、造血幹細胞マーカー;CD117、神経幹細胞マーカー;AC133、造血系細胞マーカー;CD34,CD45は低く、またこれらの発現頻度の継代による顕著な変化は認められなかった。培養ヒト歯根膜細胞中における各種間葉系細胞前駆細胞の存在の確認:ヒト骨髄由来間葉系幹細胞(HBMSC)と同様にHPDLC中にも間葉系幹細胞マーカーを発現する細胞が多く存在していた。しかし、HPDLCはHBMSCと同等の骨分化誘導能(ALP・osteopontin発現の上昇,石灰化結節の誘導)を示したのに対して、脂肪細胞へ分化能(oll-red Oで染色される細胞の増加,LPL・PPARγ発現の上昇)は低く、軟骨細胞への分化(type II collagen発現の誘導)は認められなかった。したがって、HPDLC中には多数の骨芽細胞前駆細胞と少数の脂肪前駆細胞が存在するものの、軟骨前駆細胞は存在しないあるいは著しく少ないと考えられる。そこで、HPDLC中のALP低発現の細胞集団(ALP-HPDLC)を分取し、この細胞集団における多分化能を検討したところ、脂肪前駆細胞はむしろALP-HPDLCに多く存在していた。したがって、HPDLC中には、骨芽細胞様細胞が多数存在しているが、脂肪前駆細胞も少数存在しており、この脂肪前駆細胞はALP陰性の細胞集団に多く含まれていると考えられる。本研究では培養歯根膜細胞とその細胞からソーティングした間葉系幹細胞との比較により、ヒト歯根膜細胞特異的な既知あるいは未知のフェノタイプタイプマーカーを探索することを目的として、本年度は以下に示す研究成果を得た。(1)培養ヒト歯根膜細胞における間葉系幹細胞を含めた各種細胞マーカー(細胞表層分子)の発現パターンとその継代による変化の検討初代ヒト培養歯根膜細胞における各種細胞マーカー陽性細胞率は、間葉系幹細胞マーカー;CD105(65%),CD44(82%),CD29(60%)、インテグリン;CD49c(45%), CD49e(82%)は高く,一方インテグリン;CD49d(2%),CD49f(1.1%)、造血幹細胞マーカー;CD117(0.02%)、神経幹細胞マーカー;AC133(1.5%)、side cell populationマーカー;ABCG2(0.7%)、造血系細胞マーカー;CD34(1.9%),CD45(1.9%)は低く、またこれらの発現頻度の継代による顕著な変化は認められなかった。(2)培養ヒト歯根膜細胞の多分化能検討ヒト歯根膜細胞(HPDLC)とヒト骨髄由来間葉系幹細胞(HMSC)は共にほぼ同程度に骨芽細胞へ分化したが、脂肪細胞への分化はHPDLCと比較してHMSCで顕著であった。また、ALP^<Low>のHPDLCはALP^<High>のHPDLCと比較して骨芽細胞へ分化能は低く、脂肪細胞への分化は高い傾向性を示した。一方、軟骨細胞への分化はHMSCのみにおいて確認された。

これらの結果は、現在、HPDLC中には骨芽細胞と脂肪細胞へ分化しえる前駆細胞が存在していることを示している。現在、ALP, STRO-1+,ABCG2を指標としてHPDLCからより高い多分化能を有する間葉系幹細胞の分離を試みている。本研究では培養歯根膜細胞とその細胞からソーテイングした間葉系幹細胞との比較により、ヒト歯根膜細胞特異的な既知あるいは未知のフェノタイプタイプマーカーを探索することを目的として、以下に示す研究成果を得た。培養ヒト歯根膜細胞中における各種間葉系細胞前駆細胞の存在の確認:培養ヒト歯根膜細胞(HPDLC)とヒト骨髄由来間葉系幹細胞(HMSC)中には共にCD45^-,CD90^+,CD105^+,CD146^+,STRO-1^+細胞が高頻度に存在しており、これらの割合はHPDLCとHMSCで差は無く、また継代により変化しなかった。このことは、HMSCと同様にHPDLC中にも間葉系幹細胞マーカーを発現する細胞が多く存在することを示している。しかし、HPDLCはHMSCと同等の骨分化誘導能(ALP・osteopontin発現の上昇,石灰化結節の誘導)を示したのに対して、脂肪細胞へ分化能(oil-red Oで染色される細胞の増加,LPL・PRARγ発現の上昇)は低く、軟骨細胞への分化(tyPe II collagen発現の誘導)は認められなかった。したがって、HPDLC中には多数の骨芽細胞前駆細胞と少数の脂肪前駆細胞が存在するものの、軟骨前駆細胞は存在しないあるいは著しく少ないと考えられる。そこで、HPDLC中のALP低発現の細胞集団(ALP^- HPDLC)を磁気ビーズ法で分取し、この細胞集団における多分化能を検討したところ、脂肪前駆細胞はむしろALP-HPDLCに多く存在していた。したがって、培養歯根膜細胞はヘテロな細胞集団で、骨芽細胞前駆細胞が多数存在しているが、脂肪前駆細胞も少数存在しており、この脂肪前駆細胞はALP陰性の細胞集団に多く含まれていると考えられる。
歯槽骨再生に及ぼす歯根膜の関与に関する基礎的研究

歯周病により破壊された骨欠損にGTR法を応用した場合、新生セメント質を伴う結合組織性付着の獲得はみられるものの、骨の再生は非常に少ないことが分かってきた。これに対して、インプラント周囲の骨欠損や歯槽堤形成術においてGBR法を応用した場合には、十分な骨再生がみられることが報告されている。両者間でこのような骨再生の違いかなる理由により生じるかについては、骨が再生するスペースや、骨欠損形態が関与するのではないかという報告があるがいまだ明確な答は得られていない。そこで我々は、歯周組織再生過程で歯根膜の存在の有無が歯槽骨の再生に影響を与えているのではないかという仮説を立て、その仮説を明確にすることを目的とした実験を考案して検討を進めてきた。その結果、犬を用いて歯根膜存在群と歯根膜除去群とのそれぞれの歯槽骨再生に対する影響を観察すると臨床所見並びにエックス線所見においては、一部の標本で歯根膜除去群が歯根膜存在群に比べて骨形成量の多い傾向が認められたが、ほとんどの標本では両群間で差は認められなかった。組織学的所見においては、いずれの犬においても歯根膜存在群では新生骨骨頂まで歯根膜の再生が認められたのに対し、歯根膜除去群では著名な歯根吸収ならびに歯根と歯槽骨とのアンキロ-シスが認められた。両群ともに分割歯根の歯冠側端まで新生骨の形成が認められ、両群間で差は認められなかった。また、免疫組織化学的検索においても両群間で差は認められなかった。歯根膜存在群、歯根膜除去群から新生肉芽組織を採取し、それらの生化学的検索およびDiffusion Chamberを用いたそれらの石灰化形成能の検索については、現在組織切片等の作成中である。現在までの結果より考察すると、歯根膜の存在は歯槽骨再生にあまり影響しない可能性のある事が考えられるが、進行中の実験も含め今後更なる検討を加える予定である。
熱ショック応答を利用した新規メラノーマ治療法開発への基礎的研究

メラノーマ細胞株MeWoに、HSFIに対するshort hairpin RNAを発現するアデノウイルス(HSFIshRNAアデノウイルス)を感染させ、HSF1をノックダウンし、ノックダウン効果はRT-PCR、Western blot法を用いて確認した。HSF1をノックダウンしたメラノーマ細胞株MeWoをDNAマイクロアレイ解析し、HSF1発現低下により1.3倍以上低発現する遺伝子群を網羅的に同定した。さらに、HSF1をノックダウンしたがん細胞株(HeLa、HSC-2)も同様にDNAマイクロアレイ解析し、共通して発現が低下する8つの遺伝子を同定した。現在はその8つの遺伝子に絞って、抗腫瘍効果を解析中である。・メラノーマ、母斑細胞母斑組織献体の収集メラノーマ原発巣およびリンパ節転移巣の手術切除検体、母斑細胞母斑の手術切除検体を採取し、液体窒素で凍結し-80°Cで保存している。採取にあたっては十分な説明の上に患者の同意を得、同意書を取得しながら採取を進めている。・メラノーマ組織、母斑細胞母斑組織におけるHSF1の発現量の検討手術検体から得た組織を用いて免疫染色を行い、メラノーマ細胞および母斑細胞母斑細胞でHSF1の発現を解析している。メラノーマ細胞ではHSF1の発現が増加しており、母斑細胞母斑では発現が増加していないことを確認した。年齢(60歳以上or未満)、性別、発生部位、病型(結節型、表在拡大型、末端黒子型、悪性黒子型)、Breslowthickness、Claraksatage、潰瘍の有無、リンパ節転移の有無、遠隔転移の有無、生死とHSF1の発現量(免疫染色にて陽性細胞率を0%:-、1-25%:+、26-50%:2+、51-100%:3+とする)との相関を検定にて解析し、HSF1の発現量がメラノーマの独立した予後因子となり得るかを検討中である。
悪性リンパ腫にみられる転座プロミスキュイティーの発生機序と臨床病理学的意義

AMLやALL、二次性白血病にみられる11q23転座の切断点に存在するMLL遺伝子は、様々な遺伝子と相互転座するpromiscuousな特性をもつが、悪性リンパ腫の特定の亜型発生にかかわるALKとBCL6も転座プロミスキュイティーを示す。転座プロミスキュイティーを示すALKとBCL6遺伝子の関わった相互転座を有する悪性リンパ腫症例を多数例解析し、臨床病理学的に共通の遺伝子異常と病態を有する症例群を亜型化して分類することを目的として、リンパ節生検によりALCLおよびDLBLと診断されたNHL98症例について、本研究ではBCL6転座パートナー遺伝子を解析した。その結果、18/98例でBCL6遺伝子再構成を認め、うち14/18例で5'-partner gene/BCL6-3'融合転写産物の発現が確認できた。IgH以外のパートナー遺伝子としてはMHC class II transactivator(CIITA)、eukaryotic initiation factor 4AII(eif4AII)、ikaros、pim-1およびTFRRの新規パートナー遺伝子を同定した。5'RACE法により転座パートナー遺伝子が検出できた14検体について、LA-PCRを行いゲノム切断点の同定を試みたところ、11例においてBCL6ゲノムの切断点を含むDNA断片を増幅できた。切断点近傍の塩基配列を詳細に調べたところ、(1)BCL6の切断点は体細胞突然変異が起こるとされている領域にほぼ一致すること、(2)切断点近傍にVDJ組換えのシグナル配列であるヘプタマー・ノナマー様シグナル配列やカイ様配列がないこと、(3)IgH以外の遺伝子と転座している検体ではパートナー遺伝子のゲノム切断点近傍の塩基配列にスイッチ領域とのホモロジーが見られないこと、(4)相互転座が確認できた例では、生じた融合遺伝子中に体細胞突然変異時にも起こると報告された塩基配列の欠失や重複があること、(5)新たな転座の機構を示唆するような認識配列は確認できなかったことなどが明らかになった。以上の結果より、BCL6の関わる転座がBCL6遺伝子の体細胞突然変異の過程でのエラーによって生じている可能性が示唆された。パートナーとして検出された遺伝子は、細胞の増殖や分化、さらには癌化に関わるとされる遺伝子であったことから、これらの遺伝子発現の脱制御が悪性リンパ腫発症に関与している可能性がある。また、5'-BCL6/partner gene-3'融合転写産物の発現によるパートナー遺伝子の脱制御機構の関与も否定できない。BCL6転座を介したリンパ腫発症機構を解明し、共通遺伝子異常と病態を有する症例群を亜型分類するためには、今後これらの融合転写産物についての生物学的な機能解析が必要であると思われる。
人工酸素運搬体を用いた摘出肺保存時間の延長と虚血再灌流障害の防止

<体外での肺保存とその評価>我々は肺移植時の肺保存液としての早稲田と共同開発中である人工赤血球溶液(hemoglobin vesicle HbV(リポゾーム内包型ヘモグロビン小胞体))の有用性について研究中である。予備実験では対照群であるEP40液による保存と人工酸素運搬体を有するヘモグロビン濃度10g/dlのHbVでP50が30Torrの細胞外液型保存液による24時間浸積保存の間には保存肺の病理学的変化、組織内NADPH/NADH濃度、細胞内Na-K-ATP活性、細胞内カルシウム濃度測定により、人工酸素運搬体を有するHbVにBioavailabilityの有意差を認めた。しかしながら、人工酸素運搬体を有する保存液間でのヘモグロビン濃度(0,5、5,0、10,0mg/dl)、それぞれの場合のP50(5、15、30torr)間での有意差を同定することはできなかった。平成15年度は、雄性日本白色家兎を用い測定系の精度安定に努め、人工酸素運搬体を含有する細胞外液型保存液として人工血液(リポゾーム内包型ヘモグロビン小胞体(HbV))と対照の細胞外液型保存液EP40を用いて体外での24時間浸積保存をおこなったが測定値にばらつきが大きかった。このため16年度はwistar ratをもちいて昨年にひき続き肺保存に至適なヘモグロビン濃度、P50の決定に努めたが、雄性日本白色家兎と同様に測定値に大きなばらつきがあり、至適なヘモグロビン濃度、P50の決定には至らなかった。考えられる原因として動物の個体差、血液の残存、フラッシュの手技のばらつき、含気量の違いがある。「体外での肺保存とその評価」人工酸素運搬体を含有する細胞外液型保存液として人工血液(リポゾーム内包型ヘモグロビン小胞体(HbV))を使用した。保存液のヘモグロビン濃度は0.5、5.0、10.0g/dlと変化させ、また、HbVのP50を5,15,30Torrと変化させた溶液とした。対照の肺保存液として細胞外液型肺保存液EP40を用いた。雄性日本白色家兎(2kg)108羽を用い、開胸して換気を維持しながら上大静脈、下大静脈を結紮切離し、大動脈をクランプし左房切開を行った。肺動脈より細胞外液型保存液あるいは人工酸素運搬体を含有する保存液でフラッシュした後、心肺を摘出し肺静脈からも逆行潅流を行った。気管より20%O2にて肺の含気を保ったまま気管を結紮切断した。摘出肺を氷温の生理食塩水中で24時間浸積保存を行った。0.5、1、3、6、24時間後に肺静脈よりフラッシュ液を採取した。また、浸積保存後、肺組織はステープラを用いて3,6,24時間後に採取した。フラッシュ液より血液ガス、HbV濃度、Hbのメト比率、乳酸値、溶液ATP濃度、末血、生化学分析を測定した。浸積保存を行った肺は、A.病理組織学的変化、B.組織内NADPH/NADH濃度、C.細胞内ATP,ADP濃度およびNa-K ATP活性D.細胞内カルシウム濃度を測定し,保存肺のBioavailabilityを評価した。現在、対照群であるEP40液による保存を行った臓器を用い測定系の精度安定に努めている。血液の残存、含気量の違いにより測定値にばらつきがあるので条件を一定にするよう調整を行っている。
インドネシアに散発する家族内集積若年糖尿病患者の遺伝子解析

糖尿病および肥満発症関連遺伝子の多型をPCR-RFLP法を用いてインドネシアと近隣のパプアニューギニアの住民を対象として解析した。その結果(A)インドネシアにおいては(1)UCP-1遺伝子の-112A→C多型は肥満と関連しなかったが、Cアレル頻度はバリ島原住民よりジャワ人に高く、日本人の頻度に匹敵した。(2)PPARγ2遺伝子のPro12Ala多型頻度は欧米人の1/2以下であり、特にバリ島原住民では皆無であった。(3)ミトコンドリアDNAの3243A→G変異は皆無であった。(4)adiponectin遺伝子のSNP45T→G多型はバリ島原住民において肥満との関連がみられた。耐糖症との間にも関連があった。SNP276には関連がなかった。(5)UCP-3遺伝子の-55C→T多型はバリ島およびイリアンジャヤ原住民において肥満との関連がみられ、また耐糖能とも相関した。以上の結果から、インドネシアやパプアニューギニアでも、欧米や日本で報告されている遺伝子多型がみられるが、その頻度は地域、民族により異なることが判明した。また、これらの国々の糖尿病有病率の最近の著しい上昇は急激な西欧化による生活環境・習慣の変化のみならず、遺伝子上発症素因を有していることによると考えられた。糖尿病関連遺伝子の多型性とその糖尿病発症への寄与率をインドネシアの糖尿病患者において明確化するために、平成12年度は共同研究チームを結成して平成12年7月8月及び12月にインドネシアに渡航し、以下の成果を得た。【成果】1.目的地域であるジョグジャカルタ市のみならず、スラバヤ、スマラン、バンドン、ジャカルタ、マカサル市の各国立大学病院の代謝・内分泌専門医師からの血液試料の提供を依頼した。その結果、ジョグジャカルタ市のGadjah Mada大学は勿論のこと、スマラン市のDjokomoelijanto教授及びマカサル市のAdam教授から試料提供に前向きな回答を得た。2.Gadjah Mada大学において内科医にDNA抽出方法技術を指導し、研究方法の統一をはかった。4.現在までに得られている少数の試料での結果では、ミトコンドリア遺伝子の3243変異の頻度は日本人糖尿病患者に比べて少なく、インドネシアの糖尿病遺伝子背景が日本のそれとやや異なる可能性が示唆されている。【今後の研究の展開に関する計画】1.更に多数の試料提供が必要であるので、引き続き各研究機関を訪れ、協力依頼をする。2.インドネシアにおける糖尿病関連遺伝子の糖尿病発症への意義を考察するために諸民族の比較検討が必要であり、アジアはもとより世界各地のDNA試料を得るように努める。3.見い出された遺伝子背景をもつ耐糖能異常者群への発症予防や、疾病の進展予防の介入を遺伝子解析と平行して平成13年度から進める。インドネシア糖尿病患者における糖尿病関連遺伝子の多型性とその糖尿病発症への寄与率を明らかにするために、他地域の糖尿病患者との比較が重要と考え平成13年度は5月に中国、6月にボリビアを訪ね、試料採取の要請を行った。また、インドネシアのイリアンジャヤ州、スラウェシ島、バリ島での試料入手のための訪問も施行した。さらにインドネシアの隣国のパプアニューギニア住民の肥満・糖尿病関連遺伝子多型について第11回日韓糖尿病シンポジウム(韓国釜山市)にて発表した。[成果]1.試料収集のため上記の地域を訪問し、前向きの回答を得た。また、イリアンジャヤ州ではDNA分析のための試料を入手した。ジョグジャカルタ市でも昨年度に引き続き血液試料を入手した。2.イリアンジャヤ州の試料は神戸大学医学部研究室に持ち帰り、genomic DNAを調整した。3.ジョグジャカルタ市の試料は神戸大学医学部研究室でDNA抽出中である。4.インスリン抵抗性の指標の一つとして、BMI、及び携帯型内臓脂肪計による内臓脂肪量の測定を行い、遺伝子多型との関連を知るためのデータを得た。5.パプアニューギニア島民におけるDNA解析では、インスリン抵抗性を生じる肥満とUCP-3遺伝子の-55C→T変異やUCP-

1遺伝子の-112A→C変異とは関連がなかったが、PPARγ2遺伝子のPro12Ala変異頻度はミクロネシア住民より低く、肥満・糖尿病への遺伝素因を有することが示唆されている。[今後の研究の展開に関する計画]1.インドネシアにおける糖尿病関連遺伝子の意義を検討するために諸民族の比較検討が必要であり、引き続き世界各地のDNA試料を収集するため諸研究機関を訪れ、協力依頼する。2.得られた試料のDNA解析を行い、インドネシア住民における糖尿病関連遺伝子と糖尿病発症との関連を考察し、本課題研究のまとめを行う。昨年度の調査で収集したサンプルからゲノムDNAを抽出し、糖尿病及び肥満に関連する遺伝子多型を解析した。本年度は糖尿病発症に抵抗すると考えられているperoxisome proliferator-activated receptor-γ2 (PPARγ2)遺伝子のPro12Ala多型およびエネルギー消費に関係する脱共役蛋白質(uncoupling protein : UCP)のうち、褐色脂肪に存在するUCP-1遺伝子の翻訳開始点から112塩基上流にあるA→C多型をPCR-RFLP法により解析した。対象は、バリ島、ジャワ島(スラバヤ、ジョグジャカルタ)の3地域である。PPARγ2遺伝子のPro12Ala多型の解析によりこの多型はバリ島には全く存在しないことが明らかになった。スラバヤ及びジョグジャカルタではヘテロ変異がそれぞれ15.6%、2.5%認められ、ジャワ島全体としては4.6%であった。本多型はバリ島よりもジャワ島に多く、ジャワ島内ではジョグジャカルタよりもスラバヤに多いことが明らかになった。このことはバリ島の集団は2型糖尿病易発症傾向にあること、またジャワ島内でも地域により頻度が異なることを示した。次に、UCP-1遺伝子A→C多型を地域別で比較すると、この多型もバリ島よりもジャワ島で変異アレル頻度が高く、ジャワ島内ではジョグジャカルタよりもスラバヤの方が、変異アレル頻度が有意に高かった。従ってUCP-1遺伝子のA→C変異は、インドネシアにおいて地域差があると考えられた。またBMIにより非肥満群、軽度肥満群、中・高度肥満群の3群に大別し、BMIとUCP-1遺伝子のA→C多型の関連を解析したが、有意な相関は認められなかった。(この結果は日本糖尿病学会学術集会で発表予定である。)
保型形式論からみた離散系列表現の球関数の研究

実半単純Lie群の離散系列表現の最小のK-タイプに付随する球関数の明示的公式の研究,及びそれのFourier変換の非零集合と放物型概均質ベクトル空間の関係の研究,更にp-進簡約可能Lie群のsupercuspidal表現についても同様の研究を行った.簡約可能な実Lie群を具体的に扱うための道具としてJordan三重系を用いた.実半単純Lie群の離散系列表現に付随する球関数のFourier変換の非零領域を関連する放物的部分群に付随する概均質ベクトル空間の開軌道と関係付ける実半単純Lie群の離散系列表現の最小のK-タイプに付随する球関数の明示的公式の研究,及びそれのFourier変換の非零集合と放物型概均質ベクトル空間の関係の研究,更にp-進簡約可能Lie群のsupercuspidal表現についても同様の研究を行った.簡約可能な実Lie群を具体的に扱うための道具としてJordan三重系を用いた.離散系列表現に付随する保型形式の次元公式に応用するために基礎として,離散系列表現の球関数,放物的部分群に付随する冪零軌道と概均質ベクトル空間の構造について研究した.特に保型形式の基礎のために新たな著書「保型形式とユニタリ表現」の執筆を行った.必ずしも複素構造をもたない対称領域をJordan三重系で表示することにより,有界対称領域上で正則離散系列表現を構成したのと同様に非正則離散系列表現を構成し,特にその球関数の明示的な公式を求めることが来年度以降の課題である.特に正則離散系列の球関数を全実な部分領域に制限してできる球関数が実際に離散系列の球関数になる場合を特定したいこのような離散系列表現は高橋礼司氏により最初に構成された非正則離散系列表現の一般化であると思われる.また,その球関数が非常に簡単なかたちをしているので,我々の作業仮説を検証するための良いモデルを提供すると期待される.その他の研究活動として・2008年8月18日21日:千葉県幕張にて整数論サマースクールにて保型形式に付随したL-関数の井パン論について研究した.・2008年9月11日15日:長野県白馬村にて整数論オータムワークショップにて保型表現の一般論およびGSp(4)の場合の研究・2009年1月19日23日:京都大学数理解析研究所にて保型形式研究集会に出席し,離散系列表現及び付随する球関数について研究した.さらに研究室のコンピュータ環境を改善するために,パーソナルコンピュータ及び必要な周辺機器を購入した.離散系列表現に付随する保型形式の次元公式に応用するために基礎として,離散系列表現の球関数,放物的部分群に付随する冪零軌道と概均質ベクトル空間の構造について研究した.特に保型形式の基礎のために著書「入門;保型形式とユニタリ表現」、及び保型形式を表現論的に扱うための基礎として著書「表現の小道;群と環の表現をめぐって」の執筆を行った.必ずしも複素構造をもたない対称領域をJordan三重系で表示することにより,有界対称領域上で正則離散系列表現を構成したのと同様に非正則離散系列表現を構成し,特にその球関数の明示的な公式を求めることが来年度以降の課題である.特に正則離散系列の球関数を全実な部分領域に制限してできる球関数が実際に離散系列の球関数になる場合を特定したい.その他の研究活動として・2009年8月17日21日:京都市アピカルイン京都にて第17回整数論サマースクール「1進表現とガロア変形の整数論」に参加し、討論、研究連絡を行った、・2009年9月14日17日:東京大学数理科学研究科にて「織田孝之還暦記念研究集会」に参加し、討論、研究連絡を行った、・2010年1月18日22日:東京大学数理科学研究科にて「保型形式・保型表現およびそれに伴うL-関数と周期の研究」に出席し,討論,研究連絡を行った,さらに研究室のコンピュータ環境を改善するために,パーソナルコンピュータ及び必要な周辺機器を購入した.離散糸列表現に付随する保型形式の次元公式に応用するために基礎として,離散系列表現の球関数,放物的部分群に付随する冪零軌道と概均質ベクトル空間の構造について研究した.特に保型形式の基礎のために著書「入門;保型形式とユニタリ表現」,及び保型形式を表現論的に扱うための基礎として著書「局所コンパクト群とBanach環の表現論序説」の執筆を行った.第一著書は現在,編集委員による査読中であり,第二著書は岩波書店にて出版検討中である.必ずしも複素構造をもたない対称領域をJordan三重系で表示することにより,有界対称領域上で正則離散系列表現を構成したのと同様に非正則離散系列表現を構成し,特にその球関数の明示的な公式を求めることが来年度以降の課題である.

特に正則離散系列の球関数を全実な部分領域に制限してできる球関数が実際に離散系列の球関数になる場合を特定したい.その他の研究活動として・2010年9月6日10日:山中温泉河鹿荘ロイヤルホテルにて第18回整数論サマースクール「アーサー・セルバーグ跡公式入門」に参加し、討論、研究連絡を行った・2010年9月28目10月1日:東北大学大学院理学研究科・川井ホールにて研究集会「p-進佐藤理論と数論幾何」に参加し、討論、研究連絡を行った・2010年10月8日9日:東北大学大学院理学研究科・川井ホールにて研究集会「仙台整数論研究集会」に参加し,討論,研究連絡を行った・2011年1月17日21日:京都大学数理解析研究所にて研究集会「保型形式と関連する跡公式・ゼータ関数の研究」に出席し,討論,研究連絡を行ったさらに研究室のコンピュータ環境を改善するために,パーソナルコンピュータ及び必要な周辺機器を購入した離散系列表現に付随する保型形式の次元公式に応用するために基礎として,離散系列表現の球関数,放物的部分群に付随する羃零軌道と概均質ベクトル空間の構造について研究した.特に保型形式の基礎のために著書「入門;保型形式とユニタリ表現」,及び保型形式を表現論的に扱うための基礎として著書「局所コンパクト群とBanach環の表現論序説」の執筆を行った.第一著書は編集委員による査読が終了し,最終的な手直しの段階であり,第二著書は岩波書店より出版予定である.必ずしも複素構造をもたない対称領域をJordan三重系で表示することにより,非正則離散系列表現の球関数の明示的な公式を求めることが来年度以降の課題である.特に正則離散系列の球関数を全実な部分領域に制限してできる球関数が実際に離散系列の球関数になる場合を特定したい.その他の研究活動として1)2011年7月22日24日:千葉大学にて第19回整数論サマースクール準備の勉強会を子なった.2)2011年9月5日9日:第19回整数論サマースクール講師として出席し,重さ半整数のSiegelモジュラー形式とJacobi形式の関係について講演した.又,様々な保型形式の持ち上げについて討論した.3)2011年9月20日22日:東京大学数理科学研究科にて関口次郎教授還暦記念研究集会に出席し離散系列表現の球関数について研究,討論した.4)2011年1月16日17日:数理解析研究所の研究集会「保型形式と保型L-関数の研究」に出席し討論研究連絡をおこなった.5)2012年2月12日17日:横浜国立大学にてp-進群の表現論の研究集会に講師として出席し, Supercupidal表現について有益な情報を得た.半単純実Lie群上の離散系列表現について,1)その具体的な構成方法,2)最小のK-タイプに付随する球関数の明示的な公式,について研究した.特に正則離散系列表現については詳しいことが判っているので,それを部分群に制限したときに現れる離散系列表現を調べた.その際に,任意の複素有界対称領域はHermite型のコンパクトJordan三重系から生ずることに注目する.一般にコンパクトJordan三重系のHermite化としてHermite型コンパクトJordan三重系が得られるから,それに付随する半単純実Lie群上の正則離散系列表現を始めのコンパクトJordan三重系に付図する半単純実Lie Gに制限したユニタリ表現は,正則離散系列表現の最小のK$-タイプをGの極大コンパクト部分群に制限した表現からの誘導表現となることが知られているから,これにHotta-Parthasaratyの離散系列表現の構成法を適用する.現在の課題は,制限して得られたGの極大コンパクト群の表現の既約分解を具体的に知ることである.Hamilton四元数体上の行列からなるコンパクトJordan三重系の場合には,荒川により得られた離散系列表現の球関数が得られる.並行した問題をp-進群上でも研究した.特に標数0の非アルキメデス的局所体上の一般線形群の超尖点的既約表現についての研究結果はプレプリント``Ona spherical function of
免疫複合体組織障害に対する、CXCケモカインのin vivoにおける役割について

逆アルサス反応での炎症細胞の炎症部位への浸潤におけるケモカインの関与を解析する目的で、特にCXCR3とそのリガンドの一つであるIP-10に注目し、それぞれのノックアウトマウスを用いて免疫複合体による組織障害への関与を解析した。皮膚浮腫、紫斑について、コントロールに対してCXCR3ノックアウトマウス、IL-10ノックアウトマウス両者の有意差は得られなかった。また、白血球浸潤についても好中球、肥満細胞共に有意な差は得られなかった。しかし、アルサス反応を誘導した皮膚mRNAを用いてreal-time PCRにて測定したところ、TNF-αにおいては両者においての有意差は認められなかったが、IL-6についてはCXCR3ノックアウトマウスにおいてのみ11%の低下が認められた(p=0.046<0.05)。さらに、アルサス反応を誘導した皮膚におけるIP-10やMIG、I-TACのmRNA発現を上記と同様にreal time PCRにて測定した。これらについてはいずれも有意差を認めず、ケモカイン産生に与える影響はないと考えた。CXCR3ノックアウトマウス、IP-10ノックアウトマウスについては、それぞれ末梢血を用いたフローサイトメトリー、および採取したDNAをPCRにかけてCXCR3、IP-10の発現がないことを確認した。対象としては、12から16週齢の各ノックアウトマウスおよび野生型マウスであるC57BL/6マウスを各10匹程度用いた。皮膚アルサス反応の誘導についてはニワトリ卵白アルブミンに対するウサギIgG型抗体(2 mg/ml)および陰性コントロールとして精製ウサギIgG(2 mg/ml)をマウスの背部皮膚に各30μl皮内注射した。直後に抗原であるニワトリ卵白アルブミン(2 mg/ml)をマウス尾静脈から400μl静注し、皮膚にて免疫複合体を形成させ、炎症を惹起させた。皮膚浮腫を測定するため抗原には1% Evans blueを添加した。抗体および抗原投与4時間後、マウスの背部の皮膚を摘出し、Evans blueで染色された皮膚面積を測定することで皮膚浮腫の程度を定量化した。皮膚紫斑の測定については抗体および抗原投与8時間後、マウスの背部の皮膚を摘出し、紫斑の生じた皮膚面積を測定することで皮膚紫斑を定量化した。白血球浸潤の評価については、抗体および抗原投与4時間後、8時間後に回収した皮膚組織をHE染色により好中球浸潤の程度を確認した。また、肥満細胞浸潤の程度を評価するため、トルイジン・ブルー染色標本を行った。好中球と肥満細胞浸潤は組織全体の浸潤好中球数および肥満細胞数を数えることによって評価し、注射部位より10枚の連続切片の平均値をとった。皮膚浮腫、紫斑について、コントロールに対してCXCR3ノックアウトマウス、IL-10ノックアウトマウス両者の有意差は得られず、白血球浸潤についても好中球、肥満細胞共に有意な差は得られなかった。現在、投与量や判定時間等を変えて調整を行なっている。本課題は免疫複合体に対する新規治療の更なる可能性を明らかにするため、炎症・組織障害に対する、ケモカイン・ケモカイン受容体の役割を解明することを目的として、CXCR3ノックアウトマウス、IP-10ノックアウトマウスを用いて皮膚アルサス反応を誘導して研究を行なっている。判定時間については2時間24時間で振ってみたが、いずれにおいても有意差は認められなかった。しかし、アルサス反応による炎症機序の1つとして、浸潤する白血球から合成・放出されるTNF-αやIL-6などの前炎症性サイトカインが血管の障害を誘導したり、さらに白血球の浸潤を促進したりする可能性が指摘されているため、実際に皮膚の浮腫や紫斑などの有意差がみられなくとも、これら前炎症性サイトカインの産生減少についての違いが認められる可能性がある。そこで、アルサス反応を誘導した皮膚mRNAを用いてreal-time PCRにて測定したところ、TNF-αにおいては両者においての有意差は認められなかったが、IL-6についてはCXCR3ノックアウトマウスにおいてのみ11%の低下が認められた(p=0.046<0.05)。

また、CXCR3ノックアウトマウスにおいて、CXCR3の欠損によって、CXCR3と結合するケモカインである工P-10やMIG、1-TACの産生が変化する可能性が考えられる。そこで、CXCR3の欠損による、これらケモカイン産生に与える影響を検討するため、アルサス反応を誘導した皮膚におけるIP-10やMIG、1-TACのmRNA発現を上記と同様にreal time PCRにて測定した。これらについてはいずれも有意差を認めず、ケモカイン産生に与える影響はないと考えた。