hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
鼻性NK/T細胞リンパ腫におけるEBウイルス膜蛋白の制御機構と機能解析

鼻性NK/T細胞リンパ腫は非常に予後が悪いEBV発癌リンパ腫である。LMP1はEBV由来の癌原性蛋白であり、以前の検討にてIL?2,10,15などのサイトカインがLMP1の調節因子であることを報告した。今回は本腫瘍株においてケモカイン、特にIP-10(Interferon gamma-induced protein-10)産生がLMP1によって増強されること、そのIP-10が細胞浸潤能の増強因子であることを見いだした。さらにIP-10により単球が引き寄せられ、膜型IL-15を介した細胞接着により腫瘍細胞の増殖やLMP1発現増強が促されるすることを見いだした。従って、LMP1はIP-10や単球の仲介により本リンパ腫にて腫瘍増殖、浸潤に関与している可能性が示唆された。鼻性NK/T細胞リンパ腫細胞株SNK6は、IL-10,15刺激にて著名なLMP1発現亢進を、IL-2、INF-γでは中程度の発現亢進を認めた。また、他のEBV陽性NK細胞株であるSNK1やKAI3でも同様なLMP1の発現調節が認められた。またSNK6はINF-γやIL-10を産生し、その中和抗体存在下で著名にSNK-6のLMP1発現が低下した。またサイクロヘキサマイド(CHX)の検討にてINF-γやIL-10は直接的にLMP1の発現を亢進することが判明したが、IL-2に関しては間接的な関与であった。更なる検討にて、IL-2によりINF-γやIL-10の発現が亢進し、中和抗体を使用すると同様にLMP1の発現が低下した。従ってIL-2はINF-γやIL-10の介在においてLMP1の発現を増強している可能性が示唆された。LMP1の機能においてはIL-10刺激により細胞増殖能は亢進しなかった。しかし、Bリンパ球由来EBV陽性細胞株においてLMP1により発現が増強されることが知られるCD25やCD54の発現がIL-10刺激にて亢進することが判明した。この現象はEBV陰性NK細胞株では認められないため、これらの発現亢進はLMP1を介している可能性が示唆された。CD25はIL-2の感受性を亢進させることが知られており、本細胞株においても同様の作用を持つ可能性が示唆された。鼻性NK/T細胞リンパ腫の病理学的な特徴として、腫瘍細胞は細胞集塊をつくらずび漫性に浸潤し、周囲に炎症細胞が混在していることが挙げられる。種々ある炎症細胞の中でも好中球と単球が有意に浸潤しており、我々は鼻性NK/T細胞リンパ腫細胞株と好中球あるいは単球を共培養することにより浸潤炎症細胞が腫瘍細胞にどのように関与しているか検討を行った。その結果、好中球との共培養では細胞株に変化は認められなかったが、単球との共培養により細胞株の細胞増殖能亢進とLMP1の発現亢進が認められた。これらの亢進はトランスウェルを用いた検討にて細胞間接着が必要であることが明らかとなった。単球はその細胞表面上に膜型IL-15を発現することが知られており、我々の以前の検討にてIL-15が本細胞株の増殖亢進とLMP1発現亢進を促すことが判明していたため、膜型IL-15の発現を検討した。その結果、培養後の単球上に膜型IL-15の発現が認められ、IL-15の阻害抗体を用いた検討にて増殖能、LMP1発現亢進が抑制された。このことから、LMP1の発現亢進因子は以前我々が見いだしたIL-2、IL-10、IL-15などの液性因子だけではなく、単球などの細胞接着も関与している可能性が示唆された。また昨年報告したLMP1によって発現が亢進するIP-10(Interferon gamma-induced protein-10)は単球遊走能を亢進させる作用があり、単球、IP-10を介したLMP1のpositive feedback loopが存在する可能性が示唆された。
心筋細胞内calpain活性動態の計測

心筋細胞は、細胞内Ca濃度が著しく上昇すると障害されることが報告されており、虚血・再潅流障害の重要なトリガーになっていると考えられている。しかし、細胞内Caオーバーロードがどの酵素を活性化し、細胞障害に至るのかについて未だ明らかにされていない。平成5年度、6年度、7年度科学研究費の補助を受け、虚血・再潅流時の心筋障害時に、Zバンド周辺の構造蛋白が障害されていること、この変化は、再潅流時のCa濃度の上昇に起因していること、プロテアーゼ阻害剤が抑制に部分的効果があることを明らかにした。このことより、細胞内プロテアーゼ、特にcalpainが関与している可能性が考えられる。しかし、in vitroの実験では、calpainの活性化に必要なCa濃度は短時間の虚血再潅流時に到達するそれより高いこと、細胞内には、細胞内阻害蛋白であるcalpastatinが豊富に存在することことが知られている。そこで、心筋細胞内でのcalpainの活性動態を調べるために、平成8年度、9年度科学研究費の補助を受け、単離心筋細胞の系を用い、Ca indicatiorであるfura redと、calpainの蛍光基質であるBoc-Leu-Met-CMACを同時に細胞に取り込ませ、発生する蛍光を分離測定する系を作成した。その結果、心筋細胞内では、in vitroの結果よりはるかに低いCa濃度でcalpainが活性化されることが明らかとなった。そこで、今年度は、この系を用い、アシドーシス(細胞外液pH=7.0)、プロテアーゼ阻害剤(1eupeptin.calpain in hobotor I)の影響を調べた。その結果、いずれの阻害物質によってもcalpainの活性化は完全には抑制できないことが観察された。これらの阻害物質の細胞内calpain活性化への影響をより厳密に評価するためには、定量的評価が必要であり、今後の課題と考えらた。stunned myocardiumにおける収縮不全の発生に細胞内Caオーバーロードが重要な役割を担っていることが知られており、その過程にcalpainが関与する可能性が示されてきた。しかし、in vitroで知られるcalpainの活性化に必要なCa濃度は、細胞内のそれに比しはるかに高く、また、心筋には、calpainの内因性阻害蛋白であるcalpastatinが十分量存在し、calpainの活性が完全に抑制されている可能性がある。そこで、単離心筋細胞を用いて、細胞内Ca濃度とcalpain活性を同時に計測する系を開発し、心筋細胞内でcalpain活性化に必要なCa濃度を計測した。calpain活性は、Boc-Leu-Met-CMACにより、Ca濃度は、fura redにより計測し、これらを同時に心筋細胞内に導入し、その励起蛍光を分離して計測した。細胞外をNa free液で灌流し、細胞内Caオーバーロードを誘発したところ、Caが増加開始して160秒遅れてcalpainが活性化された。この時のfura redの値は、1.39+0.14(コントロールに対する比)であった。この値から細胞内Ca濃度を推定するために、fura2、またはfura redを心筋細胞に導入し、代謝ブロック、Na free灌流、Ca ionophore、EGTA添加により段階的に細胞内Ca濃度を変化させ、fura2とfura redの蛍光強度の関係を求めた。この関係式からcalpain活性化時のCa濃度を推定したところ、287(156-604)nMであった。以上より、細胞内では、in vitroの結果と異なり、はるかに低いCa濃度でcalpainは活性化され、短時間の虚血再灌流時のCaオーバーロードによりcalpainが活性化され得ることが示された。
エボラウイルスの初期標的細胞と病原性発現メカニズムの解明

エボラウイルスの主要標的細胞はマクロファージや樹状細胞であるとされているが、エボラウイルスが感染した宿主体内で実際にマクロファージや樹状細胞でどのように増殖しているのか、また致死的病態にどのように関与しているのかは未だ不明である。本課題ではエボラウイルス病の病原性発現メカニズムを明らかにするために、エボラウイルスの初期標的細胞を同定し、病態形成に重要な宿主応答を解明することを目的とした。これまでの研究において作出したマクロファージや樹状細胞特異的に増殖が抑制された組換えウイルスと親株となるマウスに致死的病原性を示すマウス順化株をマウスに腹腔内感染した。感染初期における腹腔内細胞の解析により、感染1日後から少ないものの感染細胞が検出された。感染3日後、5日後には感染は腹腔内細胞から全身臓器に広がっていた。感染細胞をフローサイトメトリー等を用いて解析した結果、その多くがF4/80陽性のマクロファージ細胞であることがわかった。一方で、マクロファージや樹状細胞特異的に増殖が抑制された組換えウイルスの腹腔内でのウイルス増殖は親株に比較して増殖が抑制されていることが確認された。臓器におけるウイルス増殖を比較したところ、マクロファージや樹状細胞特異的に増殖が抑制された組換えウイルスは親株と比較して明らかに減弱したウイルス増殖が確認された。すなわち、エボラウイルスはマクロファージ系細胞に非常に感受性が高く、マウス腹腔内に摂取されたエボラウイルスは腹腔内でマクロファージで増殖することで効率よく全身臓器に伝播していくことが示唆された。概ね計画通りに進展したが、一部解析結果が出ていない実験や追試があるため。現在進めている解析を完了し、論文等にまとめて課題を終了する予定である。エボラウイルスの主要標的細胞はマクロファージや樹状細胞であると言われているが、エボラウイルスが感染した宿主体内で実際に初めにマクロファージや樹状細胞で増殖しているのか、また致死的病態にどのように関与しているのかは未だ不明である。本研究ではエボラウイルス病の病原性発現メカニズムを明らかにするために、エボラウイルスの初期標的細胞を同定し、感染により誘導される病態形成に重要な宿主応答を解明することを目的とした。本年度はレポーター遺伝子を組込んだウイルス様粒子(trVLPシステム)の構築を試みた。本システムはリポーター遺伝子を組み込んだウイルス様粒子で、複製に必要なウイルス遺伝子を持たないため日本国内のBSL2実験室で安全に使用することが可能である。日本国内で組換え許可を得ているtrVLPシステムを構築するとともに、年度途中より同時に進行中である課題により渡米する機会を得たため、テトラシストロニックtrVLPシステムとの比較を行った。テトラシストロニックtrVLPシステムはtrVLPシステムに加えて、遺伝子プラスミドにリポーター遺伝子とともにエボラウイルスの構造蛋白質の遺伝子の一部を持つことによりリポーター遺伝子のみの場合よりも効率よくtrVLPを作出できる。また作出したtrVLPを細胞に接種することで一過性にリポーターの発現を検出できることを確認できた。本年はまた検出システム構築のためエボラウイルスタンパク質に対するペプチド抗体を作出し、より多角的に感染細胞からウイルスが検出できるよう準備を進めた。当初の研究計画では、初年度は日本国内で感染初期におけるエボラウイルスを検出するシステムを構築する予定であったが、渡米により日本国内におけるシステム構築は若干予定より送れることとなった。一方で、既にシステムを使用している施設であることから、システム構築後に比較予定であった検出方法の比較検討を先に行うことができた。また同時に検討予定であった組換え水疱性口炎ウイルスの作成については十分な検討ができなかったため、次年度以降連携研究者の吉田博士の協力のもと検討を進める予定である。このように本年度は若干予定より進捗状況は遅れることとなったが比較検討したシステムを日本国内での解析に導入することで、翌年度以降より効率よく課題が進むものと考えている。本研究ではエボラウイルス病の病原性発現メカニズムを明らかにするために、エボラウイルスの初期標的細胞を同定し、病態形成に重要な宿主応答を解明することを目的とした。本年度は米国の共同研究施設に長期滞在中であったことから、BSL4施設を使用する研究を先行して実施した。これまでの研究において作出したマクロファージや樹状細胞特異的に増殖が抑制された組換えウイルスと親株となるマウスに致死的病原性を示すマウス順化株をマウスに腹腔内感染し、感染初期におけるウイルス接種部位でのウイルス増殖を解析した。ウイルス接種部位における感染細胞を同定するため、腹腔内を洗浄して腹腔内細胞を回収し、フローサイトメトリー法を用いて感染細胞の同定を試みた。まず腹腔内細胞にはエボラウイルスの主要標的細胞であるマクロファージや単球を含む、T細胞、B細胞、好酸球、樹状細胞などの種々の免疫細胞が検出できることを確認した。ついで回収された細胞数を比較したところ、親株を感染させたマウスでは組換えウイルスを感染させたマウスと比較して感染後継時的に腹腔内細胞総数が増加していることがわかった。感染1日後では両ウイルス共にごくわずかに感染細胞が検出されたのみであったが、感染3日後、5日後には親株は腹腔内細胞の半数以上に感染が広がっていることがわかった。

一方で組換えウイルスは感染3日後、5日後でも感染の伝播は抑制されていることが確認された。フローサイトメトリー法により感染細胞を同定したところ、その多くがF4/80陽性のマクロファージ細胞であることがわかった。本年度はBSL4施設においてエボラウイルスを用いた感染実験を行う準備が整ったことから、マウスを用いた感染実験を先行して進めることができた。感染実験によりマウスモデルにおいては感染初期には、マクロファージおよび一部の単球と推察される細胞が感染していることが確認された。帰国後はウイルスを用いないin vitroの実験系においてマウス以外の動物細胞における感染効率等を調べるためのシステムの構築をすすめるなど、順調に課題が進んでいると思われる。エボラウイルスの主要標的細胞はマクロファージや樹状細胞であるとされているが、エボラウイルスが感染した宿主体内で実際にマクロファージや樹状細胞でどのように増殖しているのか、また致死的病態にどのように関与しているのかは未だ不明である。本課題ではエボラウイルス病の病原性発現メカニズムを明らかにするために、エボラウイルスの初期標的細胞を同定し、病態形成に重要な宿主応答を解明することを目的とした。これまでの研究において作出したマクロファージや樹状細胞特異的に増殖が抑制された組換えウイルスと親株となるマウスに致死的病原性を示すマウス順化株をマウスに腹腔内感染した。感染初期における腹腔内細胞の解析により、感染1日後から少ないものの感染細胞が検出された。感染3日後、5日後には感染は腹腔内細胞から全身臓器に広がっていた。感染細胞をフローサイトメトリー等を用いて解析した結果、その多くがF4/80陽性のマクロファージ細胞であることがわかった。一方で、マクロファージや樹状細胞特異的に増殖が抑制された組換えウイルスの腹腔内でのウイルス増殖は親株に比較して増殖が抑制されていることが確認された。臓器におけるウイルス増殖を比較したところ、マクロファージや樹状細胞特異的に増殖が抑制された組換えウイルスは親株と比較して明らかに減弱したウイルス増殖が確認された。すなわち、エボラウイルスはマクロファージ系細胞に非常に感受性が高く、マウス腹腔内に摂取されたエボラウイルスは腹腔内でマクロファージで増殖することで効率よく全身臓器に伝播していくことが示唆された。概ね計画通りに進展したが、一部解析結果が出ていない実験や追試があるため。今後は、比較検討したtrVLPシステムおよび組換え水疱性口炎ウイルスベクターを用いてウイルス感染細胞の同定と初期免疫応答を解析していく。作出したtrVLPもしくは組換え水疱性口炎ウイルスを培養細胞に接種してリポーターの検出を試みる。レポータータンパク質の検出系の確認とともに、qRT-PCRやin situ PCR法などの接種した細胞からのレポーターやウイルス遺伝子の検出法を検討する。培養細胞での結果をもとに作出したtrVLPおよび組換えウイルスをマウスやハムスターなどの実験動物に接種し、ウイルス感染細胞を同定する。
マレーシア、サラワク州における在地の社会関係と観光開発に関する研究

マレーシア、サラワク州における主にエスニック・ツーリズムに関する観光の特徴を、複数の民族集団や地域集団同士の関係といった、在地の社会関係の中に位置づけて把握することを試みた。特にサラワク州における先住民による手工芸品の制作や、都市部における販売、エキゾチックなイメージを消費する外国人ツーリストによるそれらの購入や、それとは異なる脈絡での現地の住民による手工芸品の利用といった様々な状況に関する現地調査を行った。さらにこのようにして得た知見を東南アジアの他地域の事例と比較し、その特徴の把握を目指した。2012年度は日本国内での文献研究と資料収集を行った。特にマレーシア研究、サラワク研究といった地域研究に関する先行研究や関連資料の収集に加え、文化人類学、観光人類学、観光社会学、トランスナショナリズム研究等の関連分野の先行研究の収集および整理を行った。その結果、東南アジアにおける伝統的な在地の民族集団や地域集団の相互関係とそれを通した商品連鎖は、現代的な観光に関する土産物の取引や観光客の在地コミュニティへの訪問といった現象の中にもある程度反映されていることが明らかになった。同時に観光土産物の制作や販売、およびエスニック・ツーリズムにおける観光客の少数民族コミュニティの訪問に関しては、地域社会におけるミドルマンの存在や州政府、連邦政府等が果たす役割が大きいこと、従来の観光人類学や観光社会学、エスニック・ツーリズム研究や先住民観光研究が強調してきたように、必ずしも国外から到来する観光客が在地の文化や社会、アイデンティティ等に影響を与えるとは限らず、それ以上にマレーシア国内の人々、特に西マレーシアの都市住民や観光客からの影響や、在地社会の住民も観光土産物として手工芸品を作成すると同時に、それらを自分たちの婚姻儀礼等で使用していることが明らかになった。また2012年8月から9月にかけてマレーシアを訪問し、現地大学および研究機関での資料収集と現地研究者との交流、およびフィールドワークを行った。そしてその成果は国内外の学会での研究発表および学術論文の執筆により公表した。最終年度はマレーシアでの観光開発と在地の社会関係の接合様式に関する補足的な現地調査および文献資料収集に従事した。現地調査以外にも日本国内での資料収集や先行研究の整理に従事し、その成果を学術論文としてまとめた。また国内および国外の学会で研究成果に関する研究発表を行った。本研究プロジェクトでは研究期間を通じ、サラワク州の州都クチン、ビントゥル省、ミリ省、カピット省におけるエスニック・ツーリズムや手工芸品の制作・販売といった活動が、在地の社会関係の中にいかにして接合されているのか、をテーマとした調査を行った。特に狩猟採集民や焼畑耕作民、華人、マレー人といった多様な民族集団がいかにしてエスニックかつエキゾチックなイメージが付与されがちであるサラワク州の観光に参与しているのか、そしてこれらの民族集団ごとの相互関係がいかにして当地のエスニック・ツーリズムや手工芸品の制作・流通・販売を特徴づけているのかに関する地域的な特徴を明らかにした。またサラワクを越え、マレー半島やその周辺地域でサラワクの手工芸品がいかにして販売されているのかに関する調査も行った。結果として、サラワク州におけるエスニック・ツーリズムは、「エスニック」や「エキゾチック」なイメージが付与されているものの、現地の人々や現地の観光業従事者の文化的自画像と、外来の観光客がサラワクを訪問する際の期待には齟齬が存在しがちであること、およびエスニックな手工芸品は必ずしも外国人や都市住民を対象として制作・販売されるだけでなく、現地の人々の婚姻をはじめとする各種の儀礼の際にも用いるために制作・販売されていることが明らかになった。2011年度は日本国内での研究活動とおよびマレーシアでの現地調査を行った。日本での研究活動は主に関東および関西での大学や研究機関での資料収集や他の研究者との研究交流、学会や研究会での研究成果の中間発表、学術論文の執筆である。特にマレーシアを中心とする東南アジア各地の観光人類学的な研究成果の収集と整理を行い、それを踏まえサラワク州の在地の社会関係に観光開発がいかにして接合されたのかを理解することを試みた。そのためにサラワク州をはじめとするマレーシア各地の複数の民族集団や地域集団相互の経済活動や通婚、養子慣行といった相互関係に関する先行研究を検討し、比較的伝統的な在地の社会関係のパターンの理解を試みた。またマレーシアでの現地調査では、首都クアラルンプールの大学や研究所、サラワクの州都クチンの大学や博物館、関連する行政機関を訪問し、現地の研究者との研究交流や統計資料、報告書等を入手した。また州都クチンおよびその周辺地域、ビントゥル省、カピット省、ミリ省の都市部および内陸部で主に華人と先住民との相互関係に焦点を当てたフィールドワークを行った。

これらのフィールドでは複数の民族集団や地域集団が、伝統的な河川での移動手段が陸路に変更したことや、1970年代以降の森林伐採の隆盛や近年のアブラヤシ・プランテーションの流行により、社会経済的な活動様式が変化し、それにより相互の社会関係も変容を遂げていること、またそれが外部社会からの観光客の訪問パターンや、手工芸品等の制作や販売にも影響を与えていることが明らかになった。所属大学における夏季休暇中および休日中に行う必要がある業務のため、当初予定していただけの期間を現地調査に充てられず、文化人類学的なフィールドワークを行うために十分な期間が確保できなかった。そのため必要とされる密度の調査を行うことができなかった。だが日本国内での資料収集や先行研究の収集に力を入れることにより、計画している研究の遂行に尽力した。また研究の途中経過を国内外の学会で研究発表した。2011年度は主に日本国内および国外での文献資料収集と先行研究の整理、国外でのフィールドワーク、および研究成果の中間報告を行った。文献資料収集と先行研究の整理に関しては国内では基本的な作業を行っているが、現地の文献資料や統計資料は引き続き収集・整理を行う必要がある。また特に一次資料の収集と整理に関しては最終年度まで継続する必要があるため今後も行う予定である。またフィールドワークに関しては、当初予定していた調査協力者から調査に協力してもらうことに関する同意を得た。またこれまで断続的に訪問してきた調査地で今後も調査できることが明らかになった。これ以外にも、新たにビントゥル省やカピット省で新たに先住民と華人との相互関係に関する調査や、手工芸品の作成や販売に携わる人々を対象とした調査、州都クチンでの手工芸品やツバメの巣に代表される森林産物や漢方薬等の取引や販売の調査を開始した。また当初はサラワク域内の在地の民族間関係や地域社会間関係に外部社会起源の観光がいかにして接合されるかの研究を計画していたが、本年度の調査の結果、森林産物や手工芸品がサラワク域外、特に半島部マレーシアやシンガポール、香港、中国といった東・東南アジアの他地域にももたらされ、それが無視できない状況となっていることが明らかになったため、商品連鎖網と言う観点を導入することにより研究計画を若干修正する必要が生じた。2013年度は当初の予定通り、マレーシア、サラワク州および周辺地域やエスニックツーリズムや手工芸品の生産・流通・販売が在地の社会関係の中にいかにして取り込まれているかという研究テーマと関連のある地域での現地調査を計画している。また同時に日本国内での資料収集と分析を引き続き行う予定である。さらに研究成果を国内外の学会や会議、研究会等で公表することを計画している。今後の研究の方向性及び計画としては、2011年度に引き続き日本国内および国外での文献資料や統計資料等、一次資料と二次資料の収集とその整理、国外での文化人類学的なフィールドワークの実施、それらの調査によって得られたデータの整理、研究成果の中間報告を予定している。文献資料及び統計資料は引き続き国内外の研究機関及び行政機関で収集するが、今年度は特に観光開発関係の統計資料や政府報告関係の資料の収集を予定している。またマレーシアでは2000年代からツバメの巣に代表される特産品が域外にももたらされるようになり、それに伴いサラワク域内の経済活動や、伝統的な民族間の生業の分業や社会関係、経済関係にも多大な影響を与えている。
細胞内構造の可視化と画像解析を用いた植物細胞の分裂・分化および環境適応の解析

本研究では液胞や細胞骨格などの細胞内構造をGFPなどにより可視化した可視化観察系を確立し、それらの実験観察系を用いて以下のように細胞周期や環境応答などの状況下で、細胞内構造の動態を生細胞で経時観察し、画像情報処理による解析を行った。以下に主な成果を記す。「2重可視化系の確立と高等植物の分裂機構の解析」微小管と細胞核・染色体の2重可視化BY-2細胞を用いて細胞分裂中期後期の解析を行い、後期の紡錘体伸長を測定し、高等植物細胞では紡錘体伸長による染色体移動への寄与(後期B)が約40%であることを明らかにした。「液胞の動態および細胞板の発達におけるアクチン繊維の機能解析」アクチン繊維を可視化したBY-2細胞の液胞膜および細胞板をFM4-64により生体染色し、その動態をタイムラプスイメージングを基に画像解析して、液胞の動態および細胞板の発達におけるアクチン繊維の機能解析を行った。その結果、液胞の動態は高等植物では微小管ではなくアクチン繊維に依存すること、また細胞板の発達についても娘核近傍から細胞板の方向に向かうアクチン繊維の出現と細胞板への縁取りが明らかになった。「気孔の開閉に伴う液胞と細胞骨格の構造・機能解析」気孔開閉時の孔辺細胞の制御機構について検討し、サイトカイニンおよびオーキシンはエチレンの合成を介してABAによる気孔閉鎖を阻害することを見出した。また、液胞構造を可視化したシロイヌナズナを用いて、立体再構築による定量解析を行い、気孔開閉における液胞の寄与を明らかにした。一方、気孔の開閉に関するアクチン繊維の機能解析を行うべく、アクチン繊維を可視化したシロイヌナズナ形質転換体を作出し、その共焦点像からアクチン繊維の配向を定量的に解析する手法を考案し、表層アクチン繊維の配向と気孔開閉の関係を解析した。本研究室では、これまでに細胞内構造の観察系として、各構造の構成タンパク質とGFPの融合タンパク質を恒常的に発現するタバコBY-2細胞などの形質転換株を確立すると共に、連続光学切片から立体再構築を試み、これらの動態を解析してきた。本年度は、既に確立した細胞骨格などの可視化系に加えて、以下のような実験観察系を新たに確立して細胞内構造の解析を行った。生細胞での細胞内構造の2重可視化系の確立:従来の細胞骨格、液胞膜などの可視化細胞に加えて、細胞内構造間の相互作用の解析を行うべく、微小管、アクチン繊維、液胞、小胞体、細胞核・染色体などを2重に可視化した細胞株の確立を行った。微小管と細胞核・染色体の2重可視化細胞を用いて細胞分裂中期後期の解析を行ったところ、高等植物細胞では不明確であった「後期B」の過程の存在が明らかになった。液胞の成長と分化の解析:BY2細胞のミニプロトプラストは、培地の植物ホルモン組成により、細胞伸長のみを誘導することができる。この液胞の再形成・発達過程において、細いチューブ状の液胞が連結した網状液胞を経て巨大液胞への分化・再生過程を経時的に観察することができた。これらの液胞構造の発達や維持には細胞骨格とともに液胞膜型アクアポリンの関与が考えられ、タバコBY-2液胞膜型アクアポリン遺伝子(NtγTIP)を同定し、これを恒常的に発現する形質転換BY-2細胞(BY-GG)を作成して、上記の過程における発現解析等を行った。

本研究では実験材料としてタバコBY-2細胞,シロイヌナズナ植物体などを用い,液胞や細胞骨格をはじめとする様々な細胞内構造を蛍光タンパク質などにより可視化した,可視化観察系を確立した。それらの実験観察系を用いて,細胞形態が大きく変化する状況において,細胞内構造の動態を生細胞で経時観察した。この細胞内構造の経時観察には,スピニングディスク式共焦点レーザー顕微鏡(SD-CLSM)と高感度撮像系による多数の共焦点像の高速取得システムを用い,観察対象とする細胞内構造について経時的,立体的に撮像し,画像解析を行った。本年度の主な成果としては,1)微小管と細胞核,染色体の2重可視化細胞BY-GTHRを用いて細胞分裂中期後期の解析を行い,後期の紡錘体伸長を測定し,高等植物細胞では紡錘体伸長による染色体移動への寄与(後期B)が約40%であることを明らかにした。2)タバコBY-2液胞膜型アクアポリン(NtTIP1;1)の過剰発現細胞BY-TIGP細胞のミニプロトプラストは,培地の植物ホルモン組成による細胞伸長の誘導時においてコントロールのBY-GVに比べ,液胞の発達,細胞体積の増加,分裂頻度が著しく亢進しており,NtTIP1;1の関与と考えられた。3)アクチン繊維を可視化したBY-GF細胞の細胞板をFM4-64により生体染色し,両者の動態をタイムラプスイメージングを基に画像解析して,細胞板の発達におけるアクチン繊維の機能解析を行った。4)気孔の開閉は孔辺細胞の体積の増減により行われるが,液胞および細胞骨格に着目し,これらを可視化したシロイヌナズナの孔辺細胞を用いて画像解析を行い,その制御機構に関する新知見を得た。
真矛盾主義とアジア思想：分析アジア哲学の国際研究拠点形成

「空」の論理を中心とする分析アジア哲学の国際共同研究を推進した。具体的には、研究代表者と海外連携研究者(G. Priest, J. Garfield, R. Sharf)が、数次の国際ワークショップを通じて、老荘思想・東アジア仏教思想(「維摩経」・三論思想・天台思想・禅思想・道元)・西田幾多郎の後期哲学等において見られる東アジアの空の論理の系譜の中に「真なる矛盾」へのコミットメントを読み取る共同研究を行い、その成果をまとめて英文共著What Can't Be Saidを執筆した。同書は現在、オックスフォード大学出版会から出版準備中である。また研究代表者は、2017年6月に研究分担者・海外連携研究者に加え、国内外の研究者を結集し、現代哲学・論理学的観点からのアジア思想の再解釈をテーマとする国際会議を開催し、その会議での発表をもとに、現在、英文論文集を編集中である。同論文集には、チベット仏教思想(ツォンカパ)・ジャイナ思想論理・四句(テトラレンマ)・ハイデガーと京都学派の比較研究・西田幾多郎の後期哲学等に関する論考が収録される予定である。以上のような研究活動を通じて、90年代後半に英語圏で始まった分析アジア哲学の研究潮流は、研究代表者が所属する研究機関を一つのハブとして、いまやアジアを含めた世界の他地域に広がる一方、新たな展開を見せつつある。具体的には、本科研研究を契機として、東アジアや欧米圏のみならず、東南アジアやメソアメリカの研究者との研究交流が活性化されるとともに、「自己」をテーマとする分析アジア哲学の新たな展開が開始されているのである。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。ジャイナ教思想・清弁(ヴァーヴィベーカ)の否定概念・三論思想・天台思想・道元の哲学・京都学派(西田幾多郎・西谷啓治)の哲学を対象とする分析アジア哲学的分析を進めるとともに、真矛盾主義とパラコンシスタント論理をより強化・洗練する作業に取り組んだ。また研究成果を発信する英語ホームページの構築や、国際研究ネットワークを更に展開する試みも行なった。具体的には、研究代表者・出口と分担者・大森による清弁の否定概念を現代論理学の非古典的否定概念を用いて分析する国際ワークショップ招待発表(5月)と国際会議発表(8月)を行なった。また出口は海外研究協力者・Graham Priest, Jay Garfield, Robert Sharfとの共著研究を引き続き進め、四者による共著の三論思想・天台思想・西田の後期哲学に関する諸チャプターの執筆を進めるとともに、天台思想に関する英文論文を公刊した。この共同研究の一環として、12月中旬にカリフォルニア大学バークレー校で共同討議を行なった。研究分担者・大西はジャイナ教の論理に対する現代論理的分析、藤川は西田・西谷の哲学に対する現代形而上学的分析を試み、その成果を国際会議で発表した(8月)。研究代表者が研究代表を兼務する『課題設定による先導的人文学』「道元の思想圏:分析アジア哲学的アプローチ」プロジェクトが2月から開始されたことに伴い、同プロジェクトとの共催で道元思想の研究にも取り組み、3月に二回にわたる国際読書会と講演会一回を開催した。真矛盾主義とパラコンシスタント論理の研究の一環として、二回にわたって国際ワープショップを開催するとともに(10月・2月)、F.Berto教授(アムステルダム)・Z.Weber教授(オタゴ)・M.Carrara教授(パドヴァ)・D.Szmuc氏(ブエノスアイレス)らを招き共同討議を行なった。課題研究全般において当初の計画以上の進展があった。まず上記「道元の思想圏」プロジェクトが新たに開始されたことにより、同プロジェクトとの共催研究会等が可能となり、アジア思想研究がより加速・強化された。さらに国際ネットワーク構築に関しても予想以上の進展があった。具体的には、分析アジア哲学をテーマとし、研究代表者を受け入れ先研究者とする台湾の若手研究者派遣プロジェクトが5月に採択され、9月から10月にかけて台湾の二人の若手研究者が来日し、分析アジア哲学研究に加わった。またこの派遣プロジェクトに伴い、台湾からの研究者(王文方・国立政治大学教授)が1月から2月にかけて来日し、分析アジア哲学に関する共同討議を行うことができた。一方、エディンバラ大学における台湾や香港の研究者との研究討議(5月)や南洋工科大学(シンガポール)の研究者・シンガポール国立大学の研究者との共同討議(11月・2月)に加え、当初の予定には入っていなかったタイやミャンマーの諸大学(チュラロンコーン大学・マヒドン大学・ダゴン大学・ヤンゴン大学)の研究者との共同討議(2月)を行なうことができ、分析アジア哲学の国際研究ネットワークが東南アジア大陸部に展開する足がかりをうることができた。その後は、この会議を踏まえ、英文論文集発刊のための研究・編集作業を進めた。発表を審査した上で、一定の基準を満たした発表者に対して原稿執筆依頼を行なう一方、外部の執筆者にも寄稿を依頼し、2017年12月から2018年3月にかけて提出された論文について、現在、査読作業を進めている。出版計画が予定以上に順調に進んでいる。具体的には、海外協力研究者との共著What Can't Be Saidは、Oxford University Pressへの原稿送付後、極めて短期期日のうちに編集会議で企画が認められ、現在、査読作業が進行中であり、早ければ2018年度中の出版も見込まれる状況となっている。また分析アジア哲学の研究ネットワーク構築も予想以上に進展した。

具体的には東南アジアの研究者との研究連携が進展し、上記の2017年6月の国際会議にタイの研究者が参加したことに加え、研究代表者がタマサート大学(タイ)の大学院生の指導嘱託を受けることとなり、同大学での分析アジア哲学の次世代研究者の育成にも参画することとなった。また研究代表者はWhat Can't Be Saidに収録される予定の一章の補遺的な研究を2017年6月、京都大学で開催された国際会議「高橋里美国際研究会」で発表し、北米の道元研究者やメキシコの日本哲学研究者と共同討議を行なったが、これを契機として、両者との共同研究が開始されることとなった。前者とは2018年1月に京都大学において再び研究討議を行い、同年10月にもニューヨーク市立大学で共同討議を行なう予定である。また後者からは招待講演の依頼を受け、2018年6月にメキシコ自治大学で分析アジア哲学に関するセミナーを開催する予定である。さらに上記2017年6月の国際会議に参加した香港城市大学の研究者の招きを受け、同年11月に同大学を訪問し、分析アジア哲学に関する講演を行なった。加えて、同11月には国立台湾大学を訪れ分析アジア哲学に関する連続講演を行ない、同大学と継続的な共同研究を行なうことに合意した。台湾大学との共同研究は、その後、2018年3月と4月に実施され、今後も継続される見通しである。「空」の論理を中心とする分析アジア哲学の国際共同研究を推進した。具体的には、研究代表者と海外連携研究者(G. Priest, J. Garfield, R. Sharf)が、数次の国際ワークショップを通じて、老荘思想・東アジア仏教思想(「維摩経」・三論思想・天台思想・禅思想・道元)・西田幾多郎の後期哲学等において見られる東アジアの空の論理の系譜の中に「真なる矛盾」へのコミットメントを読み取る共同研究を行い、その成果をまとめて英文共著What Can't Be Saidを執筆した。同書は現在、オックスフォード大学出版会から出版準備中である。また研究代表者は、2017年6月に研究分担者・海外連携研究者に加え、国内外の研究者を結集し、現代哲学・論理学的観点からのアジア思想の再解釈をテーマとする国際会議を開催し、その会議での発表をもとに、現在、英文論文集を編集中である。同論文集には、チベット仏教思想(ツォンカパ)・ジャイナ思想論理・四句(テトラレンマ)・ハイデガーと京都学派の比較研究・西田幾多郎の後期哲学等に関する論考が収録される予定である。以上のような研究活動を通じて、90年代後半に英語圏で始まった分析アジア哲学の研究潮流は、研究代表者が所属する研究機関を一つのハブとして、いまやアジアを含めた世界の他地域に広がる一方、新たな展開を見せつつある。具体的には、本科研研究を契機として、東アジアや欧米圏のみならず、東南アジアやメソアメリカの研究者との研究交流が活性化されるとともに、「自己」をテーマとする分析アジア哲学の新たな展開が開始されているのである。昨年度は、上記の「道元の思想圏」プロジェクトや台湾の若手研究者派遣プロジェクトの採択に加え、海外協力研究者F.Casati氏が研究代表者を受け入れ研究者とする学振外国人特別研究員に採用されるなど、本研究の推進を後押しするプロジェクト採用が国内外で相次いだ。
移植マウス乳癌細胞が放出するMicrovesiclesは癌の転移を促進する

高転移性マウス乳癌細胞ではVEGF-Cの発現が強く、低転移性乳癌細胞では低いことを報告した。2種類の細胞培養上清より得たmicrovesicles (MVs)にはVGF-C前駆体が含まれていた。MVsの伝播実験において、VEGFR3 (VEGF-C受容体)を発現している内皮細胞は2種類のMVsを取り込んで管腔形成が促進、リン酸化Aktが発現亢進するなど、内皮細胞の増殖に作用することが確認された。転移性の異なる2種類の乳癌細胞が分泌するMVsに含まれるVGF-C前駆体は内皮細胞に同じように作用した。しかし、高転移性乳癌細胞はVEGFR3を発現しており、自己の増殖に作用していた。近年、種々の細胞からmicrovesicles (MVs)が放出されることが知られている。MVsには受容体タンパク、タンパク分解酵素、miRNA、mRNAなどが含まれる。ドナー細胞からMVsが標的細胞へ伝播され標的細胞に様々な機能変化をもたらす。われわれは、高い転移性をもつマウス乳癌細胞株(BJMC3879)ではmature VEGF-Cの発現が強く、BJMC3879と同系であるが低い転移性の乳癌細胞株(BJMC338)ではmature VEGF-Cの発現が低いことを報告した。これらの乳癌細胞株を移植した乳癌で、BJMC3879乳癌の周囲にはリンパ管が多数形成されリンパ行性転移の要因となった。今回、培養上清よりMVsをexosomes(直径50-100nm)とshedding vesicles(直径100nmより大)に超遠心分離後、フィルターにて精製した。NANOsightにてサイズ測定を行うと両MVsは平均して約150nmで有意差はなかった。また、得られたタンパクにおけるVEGF-Cの発現をWestern blotで検討すると両者のMVsにはmature VEGF-Cの発現がほとんど認められなかったが、precursor VEGF-Cの発現は両細胞株において認められ、特にexosomes分画で強かった。MVsの伝播実験において、VEGFR3(VEGF-C受容体)を発現している内皮細胞は両細胞株のexosomesを取り込むことが確認された。そこで、取り込まれたprecursor VEGF-Cが内皮細胞で機能するか検討した。マトリゲルを用いたTube formation assay、増殖率assayについて両MVsを添加すると無添加のコントロールよりも有意に増強したが、両MVsについては有意差が認められなかった。すなわち、MVsに含まれるprecursor VEGF-Cについてはリンパ管形成能に差がないと考えられた。MVsには受容体タンパク、タンパク分解酵素、miRNA、mRNAなどが含まれ、ドナー細胞からMVsが標的細胞へ伝播され標的細胞に様々な機能変化をもたらす。われわれは以前、高転移性乳癌細胞株(BJMC3879)ではVEGF-Cの発現が強く、低転移性乳癌細胞株(BJMC338)では低いことを報告した。VEGF-Cは産生後多段階のプロセッシングを受け中間型を含む多段階の型で細胞外に分泌されることが知られているが、各々の細胞培養上清より得たMVsにはprecursor VEGF-Cが含まれていた。MVsの伝播実験において、VEGFR3(VEGF-C受容体)を発現している内皮細胞は両細胞株のMVsを取り込んでtube formationが促進、またphospho-Aktが発現亢進するなど、VEGF-C/VEGFR3系が機能することが確認された。すなわち、転移性の異なる2種類の乳癌細胞が分泌するMVsに含まれるprecursor VEGF-Cは内皮細胞に同じように作用し、両細胞のMVsで差は認められなかったので今回は高転移性乳癌細胞におけるautocrine作用を検討した。その結果、高転移性乳癌細胞はVEGFR3を発現しており、自らが分泌したmicrovesiclesを取り込み、増殖が亢進した。すなわち、precursor VEGF-Cをautocrineにより利用していると考えられた。乳癌のリンパ行性転移にはリンパ管の形成が重要である。microvesicles特にexosomesにリンパ管増殖因子のVEGF-Cのprecursorが含まれていたことは当初の予想どうりである。しかし、高転移性と低転移性の乳癌でこれらVEGF-Cのprecursorの内皮細胞に対する作用は同じであった。すなわちVEGF-Cのprecursorの標的細胞が他に考えられる。乳癌細胞自体がオートクラインで自らが標的ではないかと考えている。現在、免疫染色とwestern blotで高転移性の乳癌細胞はVEGFR3を高発現しているのに対して低転移性ではほとんど発現していないことを確かめている。

医学1.乳癌細胞を抗VEGFR3の中和抗体で処理してから培養し、増殖率を比較する。2.低酸素下で乳癌細胞を培養、microvesiclesに変化がないか調べる。Microvesiclesのサイズ計測が可能な機器がないために、2種類のMicrovesiclesを比較するのに時間がかかったが、おおむね計画通りに進んでいる。高転移性株と低転移性株のMVsで比較しているが、MVsに含まれるprecursorVEGF-Cはlymphangiogenesisについて差がないことがわかった。差が生まれるには1)MVsの分泌環境2)MVsを受け取る細胞に差があることが考えられる。について。腫瘍内の環境は低酸素であることが知られているので、低酸素下で培養したときに分泌されるMVsについて検討する。ある種の癌細胞はVEGF-Cの受容体VEGFR3を発現していることが知られている。すなわち、オートクライン的に乳癌細胞自体に作用すると考えられる。本研究では、電子顕微鏡的な解析を多く使用している。透過型電顕の試料作製にはダイヤモンドナイフが不可欠である。使用していたダイヤモンドナイフは刃がダメージを受けており、再研磨が必要となった。その期間が2か月近くかかり、決算時期に間に合わなかったため。ダイヤモンドナイフについては、再研磨に出してから使用する。実験は上記の今後の方策の通りに進める。1)低酸素下で乳癌細胞を培養し、MVsを回収して、両MVsについて昨年度と同様に比較検討する。これに必要な器具、酸素ボンベ、抗体を購入する。2)通常の培養条件下と低酸素下での培養でVEGFR3の発現を比較する。乳癌細胞にMVsを伝播させる。
東部ユーラシア諸言語の動態的音韻研究―音声産出・知覚実験を軸に―

2018年度は、本研究の主要な研究課題である「阻害音の有声性と帯気性」に関する分析を行った。まずはモンゴル語ハルハ方言のVOTの特徴をまとめ、雑誌『音声研究』に投稿した(前年度に投稿し、査読、修正を経て2018年8月号に掲載)。次に、2018年5月に行ったフィールドワークにおいて、内蒙古方言と中国語のデータを収集し、前年に集めたハルハ方言のデータと併せ、各言語・方言のVOTを比較した。その結果、内蒙古方言の有気音のVOTは中国語とハルハ方言の中間的な特徴を持つこと、その要因として中国語との言語接触および二言語併用の影響が指摘できることが明らかになった。さらに、モンゴル系の言語である土族語(民和方言)のVOTの分析を行い、土族語はモンゴル系の言語でありながらVOTが長い点、そして語中でも前気音(preaspiration)ではなくVOTで有気/無気が対立している点で、モンゴル語と著しく異なる特徴を持つことを明らかにした。この一連の成果は、言語間・方言間における音声的特徴の差異を明らかにするとともに、差異が生じる要因についても考察している点で、本研究が目指す「動態的音韻研究」において非常に重要な成果である。また、阻害音の帯気性の対立に関わる音響的特徴としてインテンシティーに着目し、モンゴル語ハルハ方言では、阻害音に後続する母音の開始時におけるインテンシティーが、有気音では低く、無気音では高いことを指摘した。この成果は、これまであまり述べられてこなかった、帯気性の対立におけるインテンシティーの特徴を整理した点で意義がある。2019年3月には、モンゴル科学技術大学において知覚実験を実施し、モンゴル語の阻害音の帯気性の知覚に関するデータを収集した。知覚実験は、音声産出実験と並び本研究の重要な手法であるため、このデータは非常に重要なものとなる。本研究の目的は、東部ユーラシア諸言語の「声(voice)」に関わる現象を取り上げ、その音声的特徴や音韻的機能を明らかにするとともに、その結果を言語間・方言間で対照することによって、言語接触の影響など音韻現象の動態的な側面を明らかにすることである。現在までに、「声(voice)」に関わる現象のうち主要なテーマである「阻害音の有声性・帯気性」に関して、voice onset time (VOT)や基本周波数(F0)、インテンシティーなどの音声的・音響的特徴の記述、分析を行い、各種学会や論文で発表してきた。また、東部ユーラシア諸言語のうち、モンゴル系諸言語(モンゴル語ハルハ方言、内蒙古方言および土族語民和方言)と中国語を対象に、言語間・方言間での対照を行い、成果を挙げている。とりわけ、モンゴル語ハルハ方言と内蒙古方言、中国語の対照では、言語接触や二言語併用の影響を明らかにするなど、音韻現象の動態的側面にも迫ることができている。これまでのところ、東部ユーラシア諸言語のうちロシア語やブリヤート語の調査は実現していないものの、土族語や、モンゴル語を母語とする日本語学習者の日本語のデータを得ることができている。土族語は中国国内で話されているモンゴル系の言語であり、中国語の影響が大きいこと、そして日本語学習者の日本語は、第二言語習得の観点から言語接触の影響を観察できることから、これらのデータはいずれも本研究に寄与する見込みがある。本研究の軸となる音声産出実験と知覚実験は、ともにモンゴル国においてフィールドワークを行うことにより、計画通り実施できている。以上の理由から、現在までの進捗状況はおおむね順調であると言える。阻害音の有声性と帯気性という課題に対しては、音声産出実験および知覚実験によって得られたデータを詳細に分析し、阻害音の対立に関わる音響的特徴を整理する。特に、気息の有無がどのような音響特徴として実現するか、阻害音の弁別にどのような音響的特徴がどの程度用いられているか、という点を明らかにする。そして、音声産出実験と知覚実験の結果を統合し、阻害音はどのような音韻素性を持ち、それがどのようなプロセスを経て実際の音声として実現するのかという、音韻と音声のマッピングに関する考察を行う。さらに、阻害音の対立と他の音韻現象との関係に注目する。例えば、モンゴル語の/l/は、音韻的には流音とされるが、音声的には無声側面摩擦音で実現することが多いという事実があり、流音と阻害音との関係にも注目する必要がある。/l/の音声的特徴を音声産出実験によって詳しく観察したのち、阻害音の有声性・帯気性の対立と対照させながら、/l/の音韻素性と音声実現とのマッピングについて検討する。音声産出実験および知覚実験は、モンゴル科学技術大学高専留学プログラムの学生を対象に行う。なお、モンゴル科学技術大学ではこれまで複数回にわたって調査研究を行った実績があり、今後の調査に対しても了承を得ている。また、内蒙古方言に関しては、内蒙古大学で調査を行うことを検討しているとともに、モンゴル国在住の内蒙古方言話者にも調査協力を依頼する予定である。調査および分析によって得られた成果の発表については、国際学会Soul International Altaistic Conference (SIAC)での発表が決定しているほか、学会誌『言語研究』『音韻研究』『日本モンゴル学会紀要』等への論文の投稿や、日本音声学会等での口頭発表を予定している。平成29年度は、本研究の研究課題である「声(voice)」に関わる現象のうち、主に「モンゴル語の阻害音の有声性と帯気性」に焦点を当て、その音声的特徴と音韻的機能について分析を進めた。具体的には、平成29年8月9月にモンゴル国においてフィールドワークを行い、モンゴル語ハルハ方言

話者を対象に、語頭阻害音の対立に関する音声産出実験を行った。そして、Voice Onset Time (VOT)、基本周波数(F0)、第1フォルマント周波数(F1)といった音響的特徴を詳細に分析、記述した。VOTに関しては、音韻的に「有声音」とされる系列においてもVOTがマイナスの値を取ることは非常に稀であり、音声的には「無声無気音」として現れること、および阻害音の調音位置によってVOTの値が異なることを明らかにした。この研究は、これまできちんと整理されていなかったモンゴル語のVOTのデータを整理し、調音位置によるVOTの値の差、およびそれに伴う音声実態と音韻論的解釈とのずれを指摘した点で重要な研究となる。F0およびF1に関しては、おおむね有声音の直後で低く、無声音の直後で高いという傾向が見られ、これが他の言語において観察されている傾向と一致することが確認された。こちらも、阻害音の弁別に関わる可能性のある音響的特徴を具体的な数値によって示したという点で意義がある。これらの成果は学会にて発表し、そこでの議論によって得られた知見を反映させる形で研究論文にまとめた。なお、研究論文は平成30年度に学術雑誌に掲載される予定である。また、研究課題のうち「母音や共鳴音の無声化現象」および「ピッチ」に関連して、モンゴル語の母音の諸特徴に関する研究を進め、国際学会での発表および研究論文の投稿を行った。本研究は主に、(i)阻害音の有声性と帯気性、(ii)母音や共鳴音の無声化現象、(iii)ピッチの3つの現象を扱う。この中で、平成29年度は主に(i)阻害音の有声性と帯気性についての研究を進め、上述のような成果を得た。その研究の中で、阻害音の対立には基本周波数(F0)が一定の割合で関わっていることが明らかになった。F0は声の高さ、すなわちピッチの指標であることから、(iii)ピッチが音韻的にどの程度関わっているか、というテーマとも関連がある。つまり、阻害音対立とピッチについて一定の成果が得られたということになる。また、本研究の手法の特色として音声産出と知覚の両面から「声(voice)」に関する現象の音声・音韻的特徴を明らかにすることが挙げられる。平成29年度の段階では音声産出実験のみが行われたが、音声産出実験と音響分析によって得られたデータをもとに知覚実験のモデルの構築および刺激音の作成を行っており、知覚実験を行うための基盤が整いつつある。なお、音声産出実験によって得られたデータを知覚実験の刺激音にすることに対しては、既にインフォーマントから同意を得ている。平成29年度は中国(内蒙古自治区)でのフィールドワークは行わず、内蒙古方言や中国語のデータを得ることは叶わなかったものの、前回のモンゴル国での調査において、モンゴル国在住の内蒙古出身者とコンタクトを取ることに成功した。彼らは中国語とのバイリンガルであるため、言語接触・二言語併用の状況も併せて調査可能であるという見込みがあり、言語間・方言間の対照を行うという本研究の目的に沿った進展が期待される。以上のことから、研究はおおむね順調に進展していると言える。2018年度は、本研究の主要な研究課題である「阻害音の有声性と帯気性」に関する分析を行った。
銀河系ハビタブルゾーン: 化学進化からのアプローチ

本研究では、我々の最新のダスト進化モデルを銀河系円盤に適用し、銀河系円盤のハビタブルゾーンの評価を精密化することを目指す。このため、銀河系円盤の化学進化を(1)解析的な半径依存性を考慮した化学進化モデル、(2)銀河円盤形成シミュレーションという2通りの方針で扱い、ダスト進化理論を組み込む。これらを通じて、より強固な理論的基礎に基づく惑星形成確率の空間分布、その延長としての銀河系ハビタブルゾーンについての予言を与えることが目的である。