hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
日本人、日系人、非日系人を対象とした食物・遺伝要因に関する乳がんの症例対照研究

乳がんの症例対照研究のデータを用いて、緑茶、カルシウム、ビタミンD摂取と乳がんリスクの関連の検討、およびこれらの食品に関連する遺伝子多型を用いて遺伝環境交互作用を検討した。その結果、緑茶摂取と乳がんリスクの間に有意な関連は見られず、また緑茶ポリフェノール類の代謝および作用機序に関連する遺伝子多型との間に有意な交互作用も観察されなかった。一方、カルシウム・ビタミンD摂取の多い群でリスク低下が示唆され、現在、ビタミンD受容体遺伝子多型、血中ビタミンD濃度に関連する遺伝子多型を用いて交互作用の検討を行っている。環境および遺伝要因の分布と乳がんリスクの異なる3つの集団(日本人、日系人、非日系人)を対象とした乳がんの症例対照研究のデータ(長野県内4病院における症例対照研究:日本人405ペア、ブラジルのサンパウロ市内8病院における症例対照研究:日系人83ペア、非日系人389ペア)を用いて、食物栄養要因を中心とする環境要因と乳がんリスクとの関連、および環境要因と遺伝要因の交互作用の検討を行っている。今年度は日本人のデータセットを用いて、緑茶摂取と乳がんリスクとの関連、ホルモン受容体別の乳がんリスクとの関連、緑茶ポリフェノール類の代謝および作用機序に関連する遺伝子の多型を用いた遺伝環境交互作用について検討した。緑茶摂取量が1日120ml未満の群を基準にした、1日120ml以上600ml未満、1日600ml以上の群のオッズ比(95%信頼区間)は、それぞれ0.86(0,53-1.41)、1.27(0.75-2.14)であり、有意なリスク低下は見られなかった。また、ホルモン受容体別の解析でもリスク低下を示すサブタイプは観察されなかった。交互作用の検討として、緑茶ポリフェノール類の代謝に関与するCOMT遺伝子の多型、ポリフェノールがアロマターゼの活性を下げる可能性が指摘されているためCYP19A1遺伝子の多型、さらに先行研究において交互作用が検討されているMTHFRの遺伝子多型について、緑茶摂取との間の交互作用を検討したが、いずれも交互作用を示唆する結果は得られなかった。カルシウム・ビタミンD摂取と乳がんリスクについて遺伝要因との交互作用を検討するため、ビタミンD受容体遺伝子多型および血中ビタミンD濃度に関連する遺伝子多型のタイピングを開始した。同時に、Genome wide association studyにより明らかになった約15の遺伝子多型についてもタイピングを開始した。乳がんの症例対照研究のデータ(長野県内4病院における症例対照研究:日本人405ペア、ブラジルのサンパウロ市内8病院における症例対照研究:日系人83ペア、非日系人389ペア)を用いて、食物栄養要因を中心とする環境要因と乳がんリスクとの関連、および環境要因と遺伝要因の交互作用の検討を行っている。今年度は、カルシウム・ビタミンD摂取、ビタミンD受容体遺伝子多型(3 SNPs)および血中ビタミンD濃度に関連する遺伝子多型(6 SNPs)と乳がんリスクとの関連を予備的に検討した。まず長野の日本人のデータとブラジルの日系人と非日系人を合わせたデータの2つのデータセットを個別に解析したところ、長野では閉経後女性においてカルシウム摂取が多い群で有意なリスク低下が見られたが、ブラジルでは閉経前後にかかわらず有意なリスク低下が観察された。ビタミンD摂取は、長野では関連が見られなかったが、ブラジルでは摂取量の多い群で有意なリスク低下が見られた。ビタミンD受容体遺伝子多型のうち、長野ではrs2228570のAアレルを持つ群で有意なリスク低下が見られ、ブラジルでは有意ではないが閉経後女性においてリスク低下の傾向が観察された。また長野ではrs1544410のAアレルを持つ群で有意なリスク上昇が見られたが、ブラジルでは関連が見られなかった。そのほか、rs731236はいずれの集団においても関連が見られなかった。さらに血中ビタミンD濃度に関連する6つの遺伝子多型と乳がんリスクとの関連を検討したが、いずれの集団においても有意な関連は観察されなかった。今後はこれらの多型とカルシウム・ビタミンD摂取との交互作用を検討する予定である。これ以外に、Genome wide association studyにより明らかになった約15の遺伝子多型についてもタイピングを終えた。
前立腺癌組織の三次元解析による腫瘍分布の検索と腫瘍発生・進展に関する研究

前立腺癌は組織内に様々の形態の腫瘍が発生したり、多発性に生ずることが多い。三次元構築ソフトウエアによって腫瘍間の連続性・非連続性を検討した上で、この差異が遺伝子的に説明しうるかをDNAマイクロアレイ法で解析したところ、候補遺伝子群が認められた。これらの遺伝子群の中に術前に得られた生検標本から多発性であるか否かを予測できるマーカー遺伝子が存在する可能性があると考えられた。本研究は前立腺癌の立体構築を解析することで、前立腺癌の組織多様性と多発性について検討することを目的としている。そこで、三次元再構築ソフトウエアを用い、前立腺癌全摘症例を解析した。前立腺におけるGleason grade別の癌組織の分布を示す立体画像をこれまで計9症例(新たに4症例追加)作製した。結果、gradeの高い病巣について、denovoに発生する箇所と、よりgradeの低い領域と連続しておりgradeの低い病巣からのprogressionがうかがえる箇所を選別した。臓器内に多発する各病巣の立体的形状を捉えやずいように、比較的各病巣の広がりが隈局している早期め症例を選択したたあか、grade別に有意に特徴的な病巣の立体的形状は確認できなかった。その他、二次元・三次元下でともに多発していることが確認された病巣以外に、二次元切片では連続性と考えられた病巣が実際には単発性の多発病巣であったり、多発していると考えられた病巣が一部連続していた箇所を新たに確認した。特に"二次元切片では連続性と考えられた病巣が実際は単発性の多発病巣であった"領域につき、多数の癌病巣間で核配列の乱れを伴った不規則に拡張するPIN様の腺管の介在が目立つ症例を認めた。現在、これらの各部位からtotal RNAを抽出し、DNA microarray法を用いて遺伝子変異を網羅的に検索中で、変異パターンが単発病変と連続病変でどのような差異がみられるかに焦点を絞って解析してゆく予定である。9例の前立腺癌全摘症例を用いて、三次元再構築ソフトウエアで解析したところ、gradeの高い病巣について、de novoに発生する箇所と、gradeの低い領域と連続してprogressionがうかがえる箇所を選別した。しかし、grade別に有意に特徴的な病巣の立体的形状は確認できなかった。また、二次元切片では連続性と考えられた病巣が実際には単発性の多発病巣であったり、多発していると考えられた病巣が一部連続していた箇所を新たに確認した。特に二次元切片では連続性と考えられた病巣が実際は単発性の多発病巣であった領域については、多数の癌病巣間で核配列の乱れを伴った不規則に拡張するPIN様の腺管の介在が目立っ症例を認めた。これらの病変について、染色体6qのLORを検討したが、単発と連続性病変を識別しうる有意の領域は見出されなかった。代表的な2症例を用いて、標本ブロックから単発腫瘍巣の1ヶ所と連続病変の異なる部位である2ヶ所を採取してtotal RNAを抽出した後、DNA microarray法により遺伝子変異を網羅的に解析した。解析した遺伝子群はホルマリン固定後の標本を用いたため、凍結標本から得られる情報よりはるかに減少していたものの、連続病変の異なる2ヶ所における遺伝子変異は共通しているものが多く、単発性病変とは変異パターンが異なっていた。差異のある遺伝子群は87種あり、発癌に関わるものは、71遺伝子あり、免疫組織学的に抗体が利用できる遺伝子は5種であった。今後、これらの遺伝子が単発、多発に関わるか否かの解析を行ってゆく。
数理物理学に関連する位相幾何学の研究と数式処理の研究

(1)まず,調和写像の空間のトポロジーに関連してラベル付きの粒子の配置空間(labelled configuration space)のトポロジーとそれに関連した写像空間のトポロジーを研究した。以前にM.Guest氏・A.Kozlowski氏との共同研究で重複度がn未満の次数dのモニック多項式f(z)∈C[z]の空間SP^d_n(C)のトポロジーの研究を行ない,これに関するホモトピー型に関する結果を得たが,この類似が実根の重複度がn未満の次数dのモニック多項式f(z)∈C[z]の空間P^d_n(C)についても同様な結果が成り立つことを,A Kozlowski氏との共同研究で得た。これにより,モース理論的原理(Smale-Hirsh原理)がこれらの場合に(無限次元でも)成立することが示せた。またこれに関連する様々な研究も行なった。たとえば,重複度の大きさによってリーマン球から複素射影空間への正則写像のなす空間に自然なフィルトレイションがはいるが,それらフィルトレイションそれぞれにたいしてもモース理論的原理が成り立つことがわかった。以上の結果については,J.Math.Soc Japan(2000),Quart.J.Math.Oxford(2001)で発表(予定)である。(2)非特異射影多様体上の豊富なベクトル束について、数値的半正値(nef value)の観点から研究を行ない,以前よりも,より小さい値での分類を得ることができた。(3)4次元球面に埋め込まれた曲面に沿う手術によってホモトピー球面を構成する試みと予想に関して,射影平面の場合と球面の場合を比較する研究を行なった。(1)まず、調和写像の空間のトポロジーに関連してラベル付きの粒子の配置空間(labelled configuration space)のトポロジーとそれに関連した写像空間のトポロジーを研究した。具体的には、まずM.Guest氏・A.Kozlowski氏との共同研究で重複度がn未満のdのモニック多項式f(z)∈C[z]の空間SP^d_n(C)のトポロジーの研究を行い,これに関するホモトピー型に関する結果を得た。(これに関する結果は、雑誌Fund.Math.(1999)に発表した.これにより、モース理論的原理がこれらの場合に(無限次元でも)成立することが示せた。またこれに関連する様々な研究も行った。とくに、そこで得られた結果を利用して,K=R,Cに対して実根の重複度がn未満の次数dのモニック多項式f(z)∈K[z]の空間P^d_n(K)のホモトピー型の分類に、n>3で成功した。またこれらと類似の性質が、G.Segalの有理関数の空間の研究と関連して得られることも証明できた。(これらは、A.Kozlowski氏との共同研究で、近く雑誌J.Math.SocJapanに掲載予定である。)さらに、n=2の場合はまだ解決していないが、その場合にdが奇数の場合には別の方法で成功した。(この結果は、J.Math.Kyoto Univ.(1999)で発表した。)(2)コンパクトリー群Gの自己写像のなす半群のトポロジーを考察した。とくに、G=SO(4)の場合にその部分的結果を得たので、それをHiroshima Math.J.(2000)に発表した。(3)非特異射影多様体上の豊富なベクトル束について、数値的半正値(nef value)の観点から研究を行ない、以前よりも、より小さい値での分類を得ることができた。(4)4次元球面に埋め込まれた局面に沿う手術によってホモトピー球面を構成する試みと予想に関して、射影平面の場合と球面の場合を比較する研究を行なった。

(1)まず,調和写像の空間のトポロジーに関連してラベル付きの粒子の配置空間(labelled configuration space)のトポロジーとそれに関連した写像空間のトポロジーを研究した。以前にM.Guest氏・A.Kozlowski氏との共同研究で重複度がn未満の次数dのモニック多項式f(z)∈C[z]の空間SP^d_n(C)のトポロジーの研究を行ない,これに関するホモトピー型に関する結果を得たが,この類似が実根の重複度がn未満の次数dのモニック多項式f(z)∈C[z]の空間P^d_n(C)についても同様な結果が成り立つことを,A Kozlowski氏との共同研究で得た。これにより,モース理論的原理(Smale-Hirsh原理)がこれらの場合に(無限次元でも)成立することが示せた。またこれに関連する様々な研究も行なった。たとえば,重複度の大きさによってリーマン球から複素射影空間への正則写像のなす空間に自然なフィルトレイションがはいるが,それらフィルトレイションそれぞれにたいしてもモース理論的原理が成り立つことがわかった。以上の結果については,J.Math.Soc Japan(2000),Quart.J.Math.Oxford(2001)で発表(予定)である。またこれらに関連してmod p版ラベル付きの粒子の配置空間(Mod p labelled configuration space)のトポロジーについても研究した。(2)コンパクトリー群Gの自己写像のなす半群のトポロジーを考察した。とくに,G=SO(4)の場合にその部分的結果を得たので,それをHiroshima Math.J.(2000)に発表した。(3)非特異射影多様体上の豊富なベクトル束について、数値的半正値(nef value)の観点から研究を行ない,以前よりも,より小さい値での分類を得ることができた。(4)4次元球面に埋め込まれた曲面に沿う手術によってホモトピー球面を構成する試みと予想に関して,射影平面の場合と球面の場合を比較する研究を行なった。
抗結核ワクチンの新戦略:潜伏感染、再燃を制御するワクチンの研究

結核菌が潜伏期特異的に発現する蛋白質群(DosR蛋白質群およびRpf蛋白質群)についてマウスで免疫原生を検討し、C57BL/6およびBALB/cの両系統においてT細胞応答を誘導できる抗原を7種類、同じく抗体産生を誘導できる抗原を3種類同定した。樹状細胞による抗原の取り込みを促進する新規ワクチン技術として、糖鎖被覆リポソームおよび分子融合型ワクチン(熱ショック蛋白質70またはケモカインMIP-1αと結核防御抗原との融合分子)を開発した。結核菌感染に対するワクチンとしては、BCGが60年以上前から用いられている。しかし、BCGの乳幼児粟粒結核に対する有効性は確認されているが、成人の肺結核に対する有効性は疑問視されている。そこで本研究は、結核菌が潜伏期/再燃時特異的に発現する遺伝子産物を標的抗原として、結核菌の再燃を抑制する新規ワクチンの開発を計画した。BCGを初回免疫に、抗体潜伏期ワクチンを追加免疫に用いることで、成人の肺結核をも抑制できるワクチン戦略を樹立することを目的としている。今年度の成果としては、潜伏期の結核菌が発現するDosR regulon蛋白(48種類)および結核菌の再活性化に関与するResuscitation promoting factor蛋白(5種類)を候補抗原として、DNAワクチン・ライブラリーの作製を完了した。また、免疫応答測定に用いる抗原蛋白を調製するため、抗原遺伝子の蛋白産生用ベクターへの組み込み作業を現在遂行中である(約6割を終了)。これまでに準備できた試料を用いて、一部の候補抗原についてはマウスに免疫を施してスクリーニングを開始したが、これまでに強い免疫応答を惹起できるものを得るには至っていない。上述したワクチン候補抗原の探索と平行し、将来同定できた候補抗原蛋白を用いて、より効率良く免疫応答を誘導すべく、新たな抗原デリバリーシステムとしてオリゴマンノース被覆リポソームを開発した。結核に対するワクチンとしては、生菌ワクチンであるBCGが現在も用いられているが、その成人肺結核に対する防御効果は否定的であり、潜伏感染患者を始めとする成人用新規ワクチンの開発が急務とされている。我々は成人結核のほとんどが内因性再燃に起因することに着目し、結核菌の再燃を抑制する新規ワクチンの開発を目的として、その候補抗原を検索中である。潜伏期の結核菌が発現するDosR regulon蛋白(48種)および結核菌の再活性化に関与するResuscitation promoting factor(Rpf)蛋白(5種)を候補抗原として、DNAワクチン・ライブラリーを作製した。現在、これらの候補抗原に対するT細胞応答と抗体産生について、2系統のマウスを用いて検討中である。32種類についてT細胞応答のスクリーニングを終えた時点で、C57BL/6で9種類、BALB/cで12種類の抗原がT細胞応答を誘導し、そのうち7種類が両系統でT細胞応答を誘導することができた。加えて一部の抗原について抗体産生を検討したところ、少なくともC57BL/6で2種類、BALB/cで11種類の抗原が抗体産生を誘導できた(2種類が両系統で抗体産生を誘導)。また、同一系統で両方の免疫応答を誘導できた抗原はC57BL/6で1種類、BALB/cで7種類であった。その中でも、Rv3132(dosS/desS)は両系統のマウスでT細胞応答と抗体産生を共に誘導でき、有望な候補抗原であると考えられた。成人結核のほとんどが内因性再燃に起因することに着目し、結核菌の再燃を抑制する新規ワクチンの開発を目的として、その候補抗原の検索を行った。潜伏期の結核菌が発現するDosRregulon蛋白質(48種)および結核菌の再活性化に関与するResuscitation promoting factor (Rpf)蛋白質(5種)を候補抗原として、DNAワクチン・ライブラリーを作製し、これらに対するT細胞応答と抗体産生について、2系統のマウスを用いて検討した。その結果、C57BL/6で9種類、BALB/cで12種類の抗原がT細胞応答を誘導し、そのうち7種類(Rv0079、Rv1998c、Rv2031c、Rv2032、RV2623、Rv2624c、Rv3132c)が両系統でT細胞応答を誘導することができた。またC57BL/6で3種類、BALB/cで13種類の抗原が抗体産生を誘導し、3種類(Rv2029、Rv2626c、Rv3132c)が両系統で抗体産生を誘導できた。

また、同一マウス系統で両方の免疫応答を誘導できた抗原は、C57BL/6で1種類(Rv3132c)、BALB/cで9種類(Rv0079、Rv1738、Rv1998c、Rv2031c、Rv2623、Rv2624、Rv2626、RV3131、Rv3132c)であった。特にRv3132(dosS/desS)は両系統のマウスでT細胞応答と抗体産生を共に誘導でき、有望な候補抗原であると考えられた。
アンドロゲン誘導性癌増殖因子のクローニング

アンドロゲン依存性癌増殖の分子機構を明らかにするため、アンドロゲン依存性マウス乳癌(シオノギ癌115)から培養細胞株(SC-3細胞)を樹立した。SC-3細胞は無血清培地中でテストステロン刺激により細胞増殖が著増した。同時にc-fosやβ-actinのmRNA含量も著増した。テストステロン存在下で培養したSC-3細胞は、培地中に増殖因子を分泌することが明らかとなった。この増殖因子は蛋白分解酵素で失活し、ヘパリン結合能を持った蛋白性因子であった。非変性の条件下でのゲルロ過にて分子量39Kであった。この増殖因子をヘパリンセファロースカラム、ヘパリンカッパーアフィニティーカラム、ヘパリンセファロースカラムで精製した後、SDS pageで分析すると、16Kと15.5Kの二本の銀染色陽性バンドとして確認された。この精製増殖因子は、細胞増殖のみならず、細胞形態を敷石様から紡〓様に変化させる能力を合わせ持っていた。更に、これらの活性は抗bFGF抗体により中和された。一方既知の増殖因子のうちのFGFとbFGFのみが増殖刺激活性を持っていたが、その活性はテストステロンによる最大刺激活性の約30%しかなかった。しかしこのアンドロゲン誘導性増殖因子は、細胞表面に存在するFGFレセプターと結合し得ることが[^<125>I]FGFレセプターのクロスリンキングによる解析から明らかとなった。またSC-3細胞はTGF-βにも応答性を示し、テストステロン依存性細胞増殖はTGF-βにより抑制された。以上の結果より、アンドロゲン誘導性増殖因子はFGF様蛋白であり、FGFレセプターに結合し得るが、生物活性や物理化学的性格をFGFとは異にすることが明らかとなった。そこでテストステロン刺激下のSC-3細胞からmRNAを描出し、λgt-10とpcDL-SRα296をベクターとしてcDNAライブラリーを作成した。bFGFhst Int-2をプローブとしてcDNAを検索し数個の陽性コロニーを得た。
貿易政策への支持に個人の行動経済学的特性が与える影響に関する計量実証研究

経済理論では自由貿易の利益が示されているにも関わらず、現実社会では様々な貿易制限措置が講じられている。このため、行動経済学的特性も考慮して、人々が輸入自由化に反対する要因について、我が国で1万人を対象とした調査の個人データを主に利用して分析した。その結果、リスク回避や現状維持バイアスが保護主義への支持に有意な影響を与えていることなどが見出された。この結果は、職業、業種等の標準的な経済変数を制御した後にも確認されており、所得補償等の伝統的な経済対策だけでは輸入自由化への支持が広がらないおそれがあり、個々人の心理的側面に配慮したより広範な対策が求められていることを示唆している。貿易政策に対する支持に個々人の特性が与える影響について、収集したデータを用いて分析を行った。本研究の中心課題である行動経済学的特性についても端緒的な分析に一部着手したが、今年度においては、まず研究期間全体の初年度として、基本的な個人特性との関係を記述統計的に整理することを主眼とした。その結果、農林水産業に従事する者で輸入自由化に強く反対する者の割合が際立って高いことが確認されたが、他の業種の間では統計的に有意で貿易依存度と系統的な関係は見られなかった。また、職種については、管理的職種についている者には輸入自由化を支持する者の割合が高いことが明らかになった。この他、高所得者、高学歴者、男性に輸入自由化支持者の割合が高いことも観察された。総じて、標準的な貿易理論あるいは欧米における先行研究と整合的な結果と位置付けられる。年齢の効果については、65歳以上において輸入自由化への支持が相対的に高いことから、引退の影響も示唆された。農林水産業の場合には現在就業している業種の影響が強いが、それ以外では必ずしも伝統的な貿易理論で注目されている職種や教育といった個々人の労働市場的特性だけでは個人の政策選好が説明し尽くされておらず、今後は、相互に相関を持って絡み合う要因を的確に分解する計量的分析を加え、伝統的な要因の影響から分離された行動経済学的要因の影響を抽出する段階に分析を深めていく。こうした分析によって、貿易自由化への支持を広めるための政策を議論する際の基礎となる計量的情報を整備するとともに、貿易政策への行動経済的アプローチの可能性を探っていく。貿易政策、特に輸入自由化政策に対する支持に個々人の特性が与える影響について、収集したデータを用いて分析を深めた。今年度においては、以下の2テーマを特に取上げて研究を行った。まず、輸入自由化を自国が一方的に実施しても支持するという者と、輸入自由化には他国も自由化するという条件が互恵的に必要だする者との比較を取上げた。分析の結果、我が国で輸入自由化に強硬に反対している農林水産業従事者の間では互恵主義の支持が強い傾向が見られた。これは、貿易自由化交渉に互恵性が求められていることを意味し、交渉への支持を拡大することが難しいことを示す一方で、保護主義への支持が絶対的ではないことも示唆していると受け取れる。また、地域特性の影響についても分析を行った。その結果、自分自身が農林水産業に従事していなくても農業に従事する者の比率が高い地域に居住する場合には輸入自由化に反対する傾向があることが見出された。地域の経済・産業連関を通じた影響とも、社会における外部性的な効果とも解釈が可能であろう。また、貿易政策に影響を与える近年における国際貿易の変化に関連した研究も並行して深めた。貿易自由化に対する選好等について日本の約1万人に調査したデータを引続き用いて、個人特性との統計的関係を分析する研究を行った。平成27年度においては、特に、狭義の個人特性だけでなく個人が居住する地域の特性(就業者の産業構造など)の影響に着目した。また、貿易自由化について、一方的自由化と互恵的自由化を区別した分析も行った。我が国においては、工業製品の輸入障壁が総じて低いのに対して、農産物の輸入自由化が政策的課題となっているため、農業従事者に輸入自由化に反対する者が多いことが確認されているが、こうした二つのテーマを考えることでどのような変化が生じるのかについて研究を深めた。まず、地域特性の影響については、本人が農業に従事していなくても、農業従事者の比率の高い地域に居住する者は、輸入自由化に反対する傾向が有意に強いことが明らかになった。このことは、農業従事者が人口に占める割合が低いにも関わらず農産物の輸入自由化への反対が広く先進国で見られることと整合的である。個人自らの賃金・就業機会だけでなく地域経済の相互連鎖や住民間の外部性が影響している可能性があると考えられる。研究代表者が平成27年度途中で所属研究機関を異動し、研究体制の整備に時間を要したため。経済理論では自由貿易の利益が示されているにも関わらず、現実社会では貿易自由化に困難が伴う。特に、リーマン・ショック以降、貿易制限措置の新たな導入も世界的に見られる。こうした根強い動きの背景には、職種や業種だけでなく、標準的な経済学では想定されていない要因、特に近年発展した行動経済学で明らかにされた種々の行動バイアスが個々人の貿易政策への支持に影響しているのではないかと考えられる。そこで、日本全体の「縮図」となる1万人を対象としたアンケート調査結果の個人データを活用して、個人の行動経済学的特性が貿易政策に対する選好に与える影響に関する計量実証研究を行った。

その結果、輸入保護産業(日本の場合は農業)への従事が強い影響を与えることが確認されただけでなく、リスク回避だけでなく現状維持バイアスも統計的に有意な影響を及ぼすことが見出された。この結果は、貿易自由化への支持を拡大するためには、所得補償や保険だけでなく広範な政策的取組みが重要であることを示唆していよう。また、貿易自由化といっても互恵的か一方的かにより支持に違いがあること、個人の特性だけでなく農業従事者比率等の地域の特性も個人の政策選好に影響することなども明らかになった。経済理論では自由貿易の利益が示されているにも関わらず、現実社会では様々な貿易制限措置が講じられている。このため、行動経済学的特性も考慮して、人々が輸入自由化に反対する要因について、我が国で1万人を対象とした調査の個人データを主に利用して分析した。その結果、リスク回避や現状維持バイアスが保護主義への支持に有意な影響を与えていることなどが見出された。この結果は、職業、業種等の標準的な経済変数を制御した後にも確認されており、所得補償等の伝統的な経済対策だけでは輸入自由化への支持が広がらないおそれがあり、個々人の心理的側面に配慮したより広範な対策が求められていることを示唆している。これまでに論文を研究メンバーによる共著によりディスカッション・ペーパーの形式でとりまとめているなど、研究はほぼ順調に進捗していると評価できる。本研究に用いたデータを今後の研究に活用できるよう整理するとともに、これまでの研究成果を学術論文にまとめ国際学術査読誌に投稿する。具体的には、貿易政策の個々人の支持に関する個別データは利用許可を要するものだが、その分析を行う上で重要な地域変数(就業者に占める農業従事者の比率、失業率等)を今後の分析に活用できるよう整理しておく。また、地域特性の影響に関する研究、貿易自由化における互恵性の重視の関する研究、貿易自由化と比較した移民に対する支持に関する研究について、それぞれ論文としてとりまとめ、研究発表を行い関連分野の研究者のコメントを受け、国際学術査読誌に投稿し掲載を目指す。国際経済学来年度は研究最終年度に当たることから、研究成果を論文にとりまとめ学術専門誌に投稿し掲載を目指すとともに、残された課題を整理する。今回の研究テーマは、行動経済学に関連するテーマを取り扱うなど先進的要素を含んでいるので、特に今後の研究につながるようデータや問題点の整理に注力していく。データ整理、分析、論文とりまとめの進行等、概ね計画に従って研究が進行している。研究代表者が平成27年度途中で所属研究機関を異動し、研究体制の整備に時間を要したため。新たにデータを独自に収集するため調査を今年度に実施する計画を当初立てていたが、類似の情報が他の調査により利用可能となったこと、既存の公開資料を収集し関連する情報が確保できたこと、個人情報を収集する調査の実施は必要最小限にとどめるべきことなどから、新規調査の実施については時間をかけて慎重に再検討することとしたため。研究に用いたデータを整理するとともに、研究発表を行い研究者のコメントも求めつつ、研究成果を学術論文にとりまとめ国際査読誌に投稿する。このため、データ整理に必要があれば適切な人材の確保が可能となった時点でリサーチ・アシスタントを雇用することを計画する。また、研究会・コンファレンスに出席して研究発表を行うため、出張関連費用が支出される。
北海道江差町における祭礼の研究-北前船のルートから-

北海道地域社会の生活文化の態様は、道南および海岸辺りの津軽海峡文化圏域の生活文化と開拓移住村の生活文化とに大別される。江差町は津軽海峡文化圏域に属し、その生活文化は形成過程の歴史が長いだけに、各文化要素の複合化が進行していることから、地域社会内部の生活文化は画一化し、類似している。江差町の生活文化は、もともと隣接する青森県をはじめとする東北地方の生活文化がそのベースとなつていたが、北前船が就航するようになってからは、上方や北陸地方、中でも能登半島の石川県珠洲市からの移住者が多数を占めるようになり、明治以降においては、異なる都府県からの移住者がもたらした生活文化が複合化した重層構造がみられる点に特徴がある。今回の能登半島調査は、その重層構造を祭礼行事の視点からの解明を意図した調査研究であった。口能登の民俗芸能には獅子舞が多数みられるが、これは隣接する加賀・越中からの影響を受けている。北海道におけるこの系統の獅子舞は、江差町をはじめとする道南の伝統的社会においては、むしろ希薄であり、明治以降の道央・道北地方の開拓村においてみられる点に特徴がある。更に、能登半島の中能登から奥能登にかけてキリコとか奉燈とかと呼ばれる大きな燈籠を飾りたてる祭りがあるが、これらの行事は、道南の伝統的社会や明治以降の開拓村においても希薄である。こうみてくると、北海道江差町の姥神大神宮例祭において盛大に繰り広げられる神興や13基にに及ぶ山車を中心とする祭礼の形態は、能登の門前町において同一系統の山車がみられるものの、その淵源を能登半島に特定することはできないと思う。むしろ、上方を淵源とし上方から日本海をめぐり下北半島に及ぶ広範な地域に濃厚にみられる。以上のことから、江差町の生活文化の特徴を珠洲市からの影響に拘泥することなく、青森県や北前船の就航各地との比較研究が今後の課題となろう。
アポトーシス誘導新規前立腺癌遺伝子治療と放射線療法併用に関する基盤的研究

新規癌抑制遺伝子REICによる抗腫瘍効果はこれまでに報告されているが、今回新たに放射線治療との併用による相乗効果を検討した。REIC遺伝子療法と放射線療法の併用により、正常細胞に比べてヒト前立腺癌細胞では増殖が顕著に抑制され、これはアポトーシス誘導による効果であることが判明した。REIC遺伝子療法と放射線療法との併用用療法は前立腺癌治療の新たな選択肢となり得る可能性がある。REIC/Dkk-3遺伝子導入と放射線療法の併用による相乗効果を明らかにするため、まずIn vitroにおけるREIC/Dkk-3と放射線の併用療法による腫瘍増殖抑制効果について検討を開始した。最初に、Adeno vector-REIC/Dkk-3のコントロールであるAdeno Lac-Zを用いて、癌株化細胞における導入効率を検討した。数種類の癌株化細胞において、実験継続に支障のない導入効率を確認できた。引き続き、併用療法による前立腺の正常細胞・癌株化細胞数種の細胞増殖抑制効果をMTSで解析した。がん細胞において、Adeno vector-REIC/Dkk-3単独、放射線療法単独のものに比べ、併用した群では細胞増殖の抑制効果が顕著に見られた。また、Tunnel法を用いて併用療法による前立腺の正常細胞・癌株化細胞数種のアポトーシス誘導能を検討した。正常細胞ではTunnel陽性を示す細胞は低頻度であったのに対し、がん細胞においてはAdeno vector-REIC/Dkk-3単独群、放射線療法単独群ともにアポトーシスが誘導されていた。さらに両者の併用群では単独群に比べてさらに高いアポトーシス誘導能が確認された。これらの結果より、REIC/Dkk-3と放射線の併用療法はIn vitroにおいて腫瘍増殖を抑制し、アポトーシスを効率よく誘導して局所の腫瘍抑制効果を示すことが確認された。現在、Adeno vector-REIC/Dkk-3と放射線療法の併用療法による癌細胞の転移能抑制効果を検討するため、癌細胞の浸潤能、遊走能をinvasion assay確認するための予備実験、併用療法の効果をIn vivoで確認する予備実験を行っている。昨年度までの研究により、癌細胞において、Ad-CAG-REIC単独、放射線療法単独の群に比べ、併用した群では細胞増殖の抑制効果が顕著に見られた。本年度は、Ad-REIC投与と放射線治療の併用療法を臨床的に実現するための予備実験を行った。現在、臨床利用されているREIC発現アデノウイルスベクター製剤、Ad-CAG-REICの性能をさらに改善するため、増殖能力を持つ野生型ウイルスの発生を抑制し、生産コストを削減する目的でプロモーターを改変したAd-CMV-REICの有用性の検討を行った。Ad-CMV-REICは、全長REIC/Dkk-3 cDNAをCMVプロモーターを含むpShuttleプラスミドベクターに導入し、その後、Adeno-X expression kitを用いて、アデノウィルス作製用コスミドに全長REIC/Dkk-3をCMVプロモーター領域と共に組み込むことにより作製した。具体的には、Ad-CMV-REICを用いて前立腺癌細胞における抗腫瘍効果(癌特異的アポトーシスの誘導作用)の検証の為の実験を行った。その結果、in vitroにおいて、ヒト前立腺癌PC3細胞におけるAd-CMV-REIC添加後のREICタンパク質の発現がウエスタンブロット法により証明され、100MOIでトランスフェクション後48時間でのPC3細胞でのアポトーシス誘導率は平均値で50%を超えていた。この値は、従来のAd-CAG-REICと同等であり、今後、Ad-CMV-REICの前立腺癌治療での有用性、また放射線治療との併用療法の確立が期待される。
中国古典文献に描かれる井戸・門・橋についてーー境界としての「場」とその周辺ーー

中国古典詩歌や文言小説などを題材として、中国において井戸や門、橋が如何なる空間と認識されていたかを考察し、以下の成果を上げた。(1)井戸・門・橋に関する資料ファイルの作成がおおむね終了した。(2)専門家の協力を得て、2014年7月から8月に中国(武漢)、2016年8月に韓国(金海)でフィールドワークを行い、井戸や門、橋、釣瓶を描いた漢闕や漢代画像石に関する文物資料調査を実施し、成果に反映させた。本研究は、中国古典詩歌を中心に、文言小説などの古典文献を題材として、中国古代に井戸や門、橋が如何なる空間と認識されていたかを考察することを目的としている。中国の井戸・門・橋に関しては、文言小説や史書などを用いた先行研究で、この世と異界を繋ぐ境界として描かれているとの指摘がある以外、ほとんど検討がなされていない。しかしこれらを題材にした文献は数多くある。中国古代において境界となる「場」にどのようなイメージが附されていたかを加味することで、作品の新たな風貌を明らかにし、そこに込められた感慨をより正確に理解出来るためである。平成26年度は「井戸観」および「門観」に関する研究を主として進め、具体的には以下の作業を行った。(1)井戸や門、橋、瓶(つるべ)を描いた漢闕や漢代画像石に関する研究を進めるべく、平成26年7月から8月に、二松学舎大学専任講師や青山学院大学非常勤講師らとともに武漢に赴いた。その際、孟華平湖北省博物館副館長・張成明研究員・劉徳銀荊州博物館副館長・韓楚文研究員らと面会し、現地考古文物に関して専門的理論や最新の研究現状を直接教授してもらう機会を得た。また、殷代の遺跡である盤龍城遺跡の現地調査や湖北省博物館所蔵の文物、荊州博物館所蔵の文物の分析を行った。(2)門に関する先行研究の検討、および、文献での描かれ方を検討し、データの一部を完成させた。(3)以前執筆した井戸観に関する論文2篇を加筆の上翻訳し、中国の学会誌に投稿した。現在査読審査中である。(4)明海大学教授、横浜国立大学専任講師らと共に、本課題でも利用している日本漢詩を題材にした共著を出版した。本書では、論文・訳注を担当した。本研究は、中国古典詩歌を中心に、文言小説などの古典文献を題材として、中国古代に井戸や門、橋が如何なる空間と認識されていたかを考察する。中国古代において境界となる「場」にどのようなイメージが附されていたかを加味することで、作品の新たな風貌を明らかにし、そこに込められた感慨をより正確に理解出来るのである。平成27年度は、「井戸観」「門観」の分析を主として進め、具体的に以下の作業を行った。(1)『國際漢學研究通訊』(査読付き)に論文が掲載された。これは以前日本で投稿した論文を加筆訂正し、中国語訳したものである。(2)門に関する先行研究、および文献における門の描かれ方について整理し、分析をすすめてデータを一部完成させた。本課題は、中国文学に留まらず、民俗学や比較文学、考古学などの資料を用いている。井戸に関しては数年前から収集した文献で、ある程度補うことが可能であったが、門・橋については、新たに文献を集め、分析を進めなければならず、資料の量も膨大であった。本年は主に門についての文献を主に収集した。これら調査を通じて収集した資料は、電子化(PDF・OCR化)した上でパソコン上で検索可能にし、作品読解の基礎作業の一助とした。(3)新たに井戸・門に関する論文を2本投稿した。現在2本とも査読審査中である。本研究のテーマの一部である「境界としての井戸」「境界としての門」を中心に、小説や唐詩、経書などを分析対象として、文献の整理を進めることができた。また、海外雑誌に投稿した論文が採用され、この領域の認知を高めることが出来たほか、2本の論文を投稿できた。以上を踏まえ、おおむね順調に進展していると判断した。中国古典詩歌を中心に、文言小説などの古典文献を題材として、中国古代に井戸や門、橋が如何なる空間と認識されていたかを考察する。最終年度である本年は、井戸・門・橋に関するデータ収集とフィールドワークなどを行い、具体的に以下の作業を行った。18月22日から8月25日まで大韓民国でフィールドワーク・資料調査を行った。8月23日は国立金海博物館にて井戸から出土した呪符木簡を調査したほか、高麗大学の朴賢淑先生と懇談、韓国の出土文物・文学研究の現状や展望について専門的な知見を得た。

調査資料は、2で発表した。22017年12月、新典社より、「中日井戸異聞」と題して、中国・日本を中心とした東アジアにおける井戸のイメージと文献描写について発表した。1で得た成果物の一部を反映させている。3学会発表を今年度中には行えなかったが、2017年度の6月に、井戸に関する査読発表を行うことになっている。4門・橋についてはデータをまとめたが、本年度中の成果発表に至らなかった。ただし、2017年度中に訳注などでの発表を計画しており、2017年度から助成を受ける科研費と併せて研究を継続予定である。中国古典詩歌や文言小説などを題材として、中国において井戸や門、橋が如何なる空間と認識されていたかを考察し、以下の成果を上げた。(1)井戸・門・橋に関する資料ファイルの作成がおおむね終了した。(2)専門家の協力を得て、2014年7月から8月に中国(武漢)、2016年8月に韓国(金海)でフィールドワークを行い、井戸や門、橋、釣瓶を描いた漢闕や漢代画像石に関する文物資料調査を実施し、成果に反映させた。本研究のテーマの一部である「境界としての井戸」「境界としての門」を中心に、志怪小説や唐詩、経書、歴史書、仏典、日本の民俗調査等の幅広い資料を用いて、先秦から現代に至るまで通時的に整理する作業を行えた。また、この領域への一般的な認知度を高めるべく、日本で発表済みの論文を加筆訂正の上、海外の学会誌に投稿することが出来た(現在査読審査中)。以上より、おおむね順調に進展していると判断した。本年度は橋についての分析も進める。橋については、胡人と漢人が対戦する図を描いた「胡漢交戦図」のうち、平原での騎馬戦ではなく橋をはさんで胡人と漢人が戦いを繰り広げるモチーフが後漢晩期以降出現し、四川省博物館蔵の画像磚や新都県などからは、墓主車馬が橋を渡っている姿を描いた「車馬出行図」の画像磚が発見された。信立祥氏は、1「車馬出行図」に河と橋が描かれたのは、境界としての幽明両界説の影響を受けた結果である。2「胡漢交戦図」において漢人と戦う胡人は、北方にある地下世界を守る胡人と結びついたモチーフである。3「車馬出行図」は「胡漢交戦図」のモチーフを引き継いだもの、とする(中国漢代画像石の研究』所収「河、橋及び橋上交戦図の図像学的意義」同成社、1996年)。これを踏まえれば、橋は人間世界と地下の魂魄世界との間を隔てる境界であった。そこで、そこで、これらの先行研究の成果に加え、『古事類苑』『群書類従』『道蔵』『大蔵経』といった道教や仏教経典、東アジアや西洋での民話や旅行記などを資料として橋が書かれた文献を分析し、中国古典詩や文言小説解釈の一助とする。中国文学本年度からは、井戸に加えて、新たに門・橋を研究対象とし検討を行い、主として門に力点を置くこととしたい。扉が半分開いた「半開の扉」のモチーフは、例えば四川簡陽石棺では「天門」という文字を伴った闕の図像が発見されている他、四川省蘆山城から出土した王暉伯昭石棺には、玄武・白虎・青龍・名文と半開の扉が描かれ、一人の双髻・有翼・鱗身の人物が、半身を覗かせて片手を扉にあてている姿が見受けられる。「半開の扉」については、考古美術の見地から土居淑子氏の「中国古代の半開の扉」(『古代中国考古・文学論叢』所収、言叢社、1995年)などで言及されている。土居氏は、1前漢では門は閉じられていたが、後漢になって開かれた門扉が描かれた。2門扉には双闕の門扉と殿堂の入り口に当たる門扉がある。3殿堂の門は仙界の門であり不死の世界が広がっている、と指摘する。
活性酸素防御機構の遺伝的解析

酸素は生命活動に必須であるが、様々なストレスを引き起こす危険因子でもある。酸素は生体内で反応性の高い活性酸素(O2-、H2O2、・OH等)を生成し、それらが生体分子を攻撃することによって、各種成人病や老化の促進を引き起こすと考えられている。生物は酸素障害から免れるため、活性酸素を消去する仕組みをもち、また活性酸素によって損傷した生体分子を修復する機構を備えている。本研究は、活性酸素に対する防御機構を遺伝生化学的に明らかにするため、遺伝的解析の可能な線虫(Caenorhabditis elegans)を用いて、活性酸素の防御機構に関わる遺伝子を同定することを目標とする。線虫(C.elegans)を変異源処理し、活性酸素耐性変異体を5種類、高感受性変異体を7種類単離した。全ての変異体について、可視マーカー変異体との標準的な掛け合わせにより、原因遺伝子の座位する染色体を同定した。さらに、同定された染色体上に存在する別の可視マーカー変異体と、掛け合わせを行うことにより、原因遺伝子座を絞り込んだ(3因子交雑)。このような実験を複数のマーカー変異体を用いて繰り返し、ほぼ全ての変異体に関して原因遺伝子のマッピングを終了した。そこで、絞り込まれた染色体領域に存在するコスミドを変異体に導入する実験を開始した。現在のところ、相補活性を持つコスミドの同定には至っていないが、原因遺伝子の同定は間近であると期待している。新たに活性酸素感受性変異体の単離を試み、新たに90%酸素で生育できない変異体3株の取得に成功した。次いで、これらの変異体の表現型の解析を行った。まず、得られた90%酸素高感受性変異体の活性酸素放出剤であるメチルビオローゲンに対する感受性を測定した。卵を調製し、様々な濃度のメチルビオローゲンを含む培地(0.1-0.6mM)で生育させ、4-6日後に、親虫(adult)に生育した割合を求めた。7株の90%酸素高感受性変異体のうち2株は、メチルビオローゲンに対して高感受性を示した。残りの5株は野生株と比較して有為な差を示さなかった。この結果より、これら変異株の変異箇所が様々であることが想像される。次に、老化・寿命の観点より各変異体を解析した。卵を調製し、20°Cで培養し寿命を測定した。まだ、予備的な結果であるが、全ての活性酸素耐性変異体は野生株より長寿命の傾向を示した。一方、90%酸素感受性株の中の2株は野生株と比較して短寿命の傾向を示した。寿命は様々な因子の影響を受け、実験間における誤差も大きいため、実験結果を確かなものとするためには、さらに実験を慎重に繰り返す必要がある。最後に、DNAを損傷させるUVやX線に対する感受性を調べた。卵を調整し、UV(10、20、40J/m2)、X線(2.5、5、10krad)を照射した。2-3日後に、卵より孵化した虫の数を数え、無照射区に対する割合を求めた。その結果、ほとんどの変異株が野生株と同等の感受性を示した。現在これらの変異株の表現型の解析を行うとともに、原因遺伝子のマッピングを平行して行っている。原因遺伝子の同定により、酸化ストレスと寿命の間に興味ある結果が得られることを期待している。
SCIDマウス系における形質細胞腫発症機構の分子細胞遺伝学的研究

我々は、SCIDマウスに、マーカー染色体をもつBALB/c6.15マウス脾細胞を移入する実験系により、少なくともt(6;15)転座をもつ2例の形質細胞腫がSCIDマウス起源であることを見いだした。この知見は、t(6;15)転座型形質細胞腫の標的細胞は、propre-B段階にあるB細胞である可能性を強く示唆した。ところで、奇妙なことに、上記2例の形質細胞腫ABPC-SCID-IM-BおよびIM-Dは、いずれもアロタイプ“a"をもつIgA産生細胞であった。SCIDマウスは、そのIgH遺伝子領域がC57BL/Kaマウス由来の“b"アロタイプ型である以外、すべてBALB/c遺伝子型をもつ。また、本実験に用いられた、マーカー染色体をもつBALB/c6.15マウスは、AKR6.15マウスをBALB/cマウスに戻し交配して得られたもので、いくつかのAKRマーカーを残している。そこで、IM-B,IM-Dと、donor BALB/c6.15起源である形質細胞腫ABPC-SCID-IM-A,C,EとについてSSLP解析の比較を行った。(1)第12染色体の中心体より27cMに位置するSSLPマーカーD12Mit4では、IM-A,C,EがすべてAKRタイプであったのに対し、IM-B,IM-DはともにBALB/cタイプであった。SCIDマウスのD12Mit4は、BALB/cタイプである。(2)ところが、同染色体の中心体より50cMにあるD12Mit7では、IM-A,C,E,B,DすべてがBALB/cタイプであった。この位置、SCIDマウスではB6タイプである。(3)65cMに位置するIgh-C遺伝子は、得られた5例の形質細胞腫すべてについて、“a"アロタイプ(BALB/c型)であった。つまり、SCIDマウスに発症した形質細胞腫ABPC-SCID-IM-B,IM-Dでは、第12染色体の27より50cMの間で遺伝子組み換えが起こり、結果として“a"アロタイプをもつIgA産生細胞となったものと考えられた。
非ステロイド性抗炎症薬によるシスプラチン誘発性腎障害の悪化機序の解明

我々が先行して実施したシスプラチン(CDDP)起因性腎障害(CDDP-induced nephrotoxicity ; CIN)に関する臨床研究において、化学療法導入時点での非ステロイド性消炎鎮痛薬(Non-Steroidal Anti-Inflammatory Drugs ; NSAIDs)の定期内服がCIN出現のリスク因子であることが明らかとなった。一方でラットを用いた研究ではシクロオキシゲナーゼ-2(COX-2)を選択的に阻害するセレコキシブがCINを軽減することが報告されている。実臨床ではがん性疼痛や腫瘍熱に対してはCOX非選択的阻害薬が用いられることが多く、実際、我々が実施した臨床研究で投与されたNSAIDsは全てCOX非選択的阻害薬であるロキソプロフェンであった。そのため、COXの阻害様式の差が試験結果の乖離を生じた要因と仮定し、COX非選択的阻害薬とCOX-2選択的阻害薬の投与がCINに与える影響を検討した。実験方法としては我々が投与法として確立したCDDP 2.5mg/kgの単回投与法を用いた。CDDPの投与に伴い、腎機能障害の指標として用いた血清クレアチニン値、腎Kidney injury morecule-1発現は有意に上昇しCINの出現が確認された。腎皮質におけるCOX-2のmRNA発現量はCDDPの投与に伴い有意に低下した。本検討ではCOX非選択的阻害薬としてロキソプロフェン、ジクロフェナクを、COX-2選択阻害薬としてセレコキシブを用いた。これら薬物をラットに用いた既報での投与量はヒトへの一般的な投与量と比較してかなり高用量であることから、現在両薬剤の至適投与量を検討中である。CINは急性かつ蓄積性に悪化することが知られており、今後はCDDP単回投与のみならず、反復投与時でのCOXの変動について検討することも想定し現在実験系を構築しているところである。
クエン酸添加透析液の肝細胞内エネルギー貯蔵効果による透析患者運動持久力の改善

透析液(AD)に添加される酢酸は生体適合性に問題がある。ADに比し代替のクエン酸添加透析液(CD)は透析後の倦怠感抑制効果がある。ヒト肝細胞(HHpC)に対するCDのグリコーゲン(Gly)合成への影響を分子生物学的に検討した。EMEM培地にADとCDを混和した溶液でHHpCを培養しGly量と代謝関連酵素の発現量を比較した。HHpCのGly量はAD/EM5.1±0.9μg/gTPに比しCD/EM5.8±0.8で有意に高値、さらに、CD/EMによるGYS2の発現量はAD/EMに比し1.2倍高値であった。CDはADに比し肝細胞のGly合成能を促進させ、透析患者の持久力を向上させ可能性が示唆される。血液透析(HD)患者は、体外循環ディバイスと血液との接触や透析液に含まれる酢酸(AA)の逆拡散による白血球刺激などで酸化ストレス亢進状態にあり透析アミロイドーシスなどの合併症を招きQOLが低下する。我々は透析液に添加されるAAの代替剤であるクエン酸(CA)が細胞内グリコーゲン合成や酸化ストレス抑制に寄与すると推測している。初年度は、AAまたはCAを透析液濃度に調整したE-MEM培養液でヒト肝癌細胞(HepG2)株を培養したところCA添加株の細胞内グリコーゲン量はAA添加株に比し低値となった。そこで平成25年度は、正常ヒト骨格筋細胞(SkMC)株を用い、透析液(AAおよびCA添加)と培養液を混和した溶液で培養実験を試み、細胞内グリコーゲン量の測定と解糖系、グリコーゲン合成系、ペントースリン酸系、脂質合成系など代謝関連酵素の遺伝子発現をDNAマイクロアレーの結果を基に定量RT/PCR法で測定した。その結果、CA透析液混和培養に比しAA混和培養は細胞内グリコーゲン量が20%高値且つグリコーゲン合成系酵素も25%程高値となった。さらに、ペントースリン酸系酵素とGSH合成酵素も同程度高値となりCA透析液の酸化ストレス抑制への関与を推測した。我々はHD患者の抗酸化療法とQOL改善の関連性について検討し、抗酸化処理透析膜がアルブミンの酸化修飾を抑制し且つSF-36によるQOL評価で全身健康感の改善に寄与することを明らかにし発表した。血液透析療法(HD)の透析液にpH調整剤として添加される酢酸(AA)は単球刺激など生体適合性の面で問題視されている。近年、AA添加透析液(AD)の代替としてクエン酸(CA)添加透析液(CD)が臨床応用され、HD後の疲労感抑制などQOL改善に関する報告が散見されるが科学的根拠は示されていない。我々は、CAが解糖系の律速酵素PFKを阻害し細胞に取り込まれたグルコース(Glc)がグリコーゲン産生系へ傾きHD後のエネルギー源として利用されると推測した。平成24年度は先ず、ヒト肝癌細胞(HepG2)株を用い、5%牛胎児血清(FBS)入りE-MEM培地へ各種酸(HCA、AA、CA)を透析液の終濃度と等量添加した培地で3時間培養し、細胞内のタンパク質1mg当たりのグリコーゲン(Gly)量を測定した。その結果、AA添加株:42±3(μg/mg protein)とCA添加株:35±6はHCA添加株:15±2に比し有意(p<0.01)に高値であった。次に、ヒト骨格筋細胞(SkMC)株でHepG2と同様、透析液終濃度と等量の酸(HCA:3mEq/L、AA:3mEq/L、CA:1mEq/L)を添加した培地で3時間培養した際のGlc消費量は3群(n=5)とも0.42μmol/mg proteinで有意差は無かった。また、乳酸(LA)の産生量においても0.43μmol/mg proteinで有意差は無かった。一方、細胞内Gly量はHCA添加株が23.2±2.7(μg/mg protein)に比しAA添加株41.7±16.7、CA添加株も30.9±5.4で共に有意(p<0.05)に高値であった。以上より、各種酸の肝癌細胞および骨格筋細胞への影響として、透析液に添加される濃度レベルのAAとCAはHCAに比しグリコーゲン産生を促進するが、CAはAAに比しグリコーゲン産生能は低くい事が判明した血液透析に用いた酢酸添加重炭酸透析液(A-BD)から代替のクエン酸添加重炭酸透析液(C-BD)に変更すると治療後のQOLが改善すると報告される。我々はC-BDのクエン