hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
大腸癌組織浸潤・肝転移における間質組織の果たす役割の分子生物学的検討

:日本ロッシュより供与されたPD-ECGF cDNAを用いてRNA probeを作成、進行大腸癌組織を用いた、in situ hybridyzationを行った。2.Invasion factor:MMP-2,9cDNAを用いて,Northern blot analysisを行った【結果】A:蛋白質発現(1)大腸腺腫におけるPD-ECGF発現:炎症性及び過形成性ポリープにおいて発現は認めなかった。間質の線維芽・形質細胞及び大腸腺腫,carcinoma in adenomaの一部で発現を認めた。(2)VEGF発現:炎症性・過形成性ポリープ・大腸腺腫では、VEGF発現は認めなかった。carcinoma in adenoma及び大腸癌においてのみ発現が観察された。(3)PD-ECGF発現は、Ki-67発現と統計学的に有意な正の相関を示した。B:mRNA発現進行大腸癌組織を用いた検討で、PD-ECGF mRNAは組織間質の形質細胞に発現が認められた。また、その発現は腫瘍周囲のTAM(tumor associated macrophage)に強く認められた。また、浸潤因子であるMMPは、癌組織において正常粘膜より高度に発現を認めた。本年度は"大腸癌の浸潤・血管新生・転移の成立には、正常組織成分である間質組織、特にマクロファージが重要な役割を果たしている"との仮説のもとに、本年度は悪性腫瘍と間質細胞との相関関係を臨床検体を用いて血管新生について検討した。【対象及び方法】1.対象:1996年7月より1998年2月の間、手術施行された原発性大腸癌28例を対象に検討した。18例に対しサイトカイン誘導物質であるPSKの術前投与(3g/日x 7日間)を行い、非投与群10例とPD-ECGF活性に及ぼす影響を検討した。2.PD-ECGF蛋白:ホルマリン固定パラフィン切片を用いてPD-ECGF蛋白発現を検討した。1次抗体として抗ヒトPD-ECGF抗体を使用、ABC法で免疫染色を行った。3.PD-ECGF mRNA:ヒトPD-ECGF cDNAより作成したcRNA Probe(500bp)を用いてin situ hybridizationを施行した。4.PD-ECGF酵素活性:術前及び執刀時に癌部及び非癌部組織を採取。抗ヒトPD-ECGF抗体を用いたELISAにて活性を測定した。【結果】1.PD-ECGF蛋白:PD-ECGFは、細胞質および細胞膜に瀰漫性に認められた。腫瘍細胞間質及び最進部周囲間質に過剰に認められた。主体は線維芽細胞及びリンパ球由来の細胞であった。2.PD-ECGF mRNA:PD-ECGF mRNAは、腫瘍細胞及び間質に認められたが、主に腫瘍間質のマクロファージに高度発現を認めた。3.PD-ECGF酵素活性(unit/mg protein):術前PD-ECGF活性は癌部:55.6±26.7,非癌部:52.0±15.7であった。術前のPSKの投与により癌部の酵素活性値はPSK投与群で有意に上昇(術前53.3±29.9、術後85.8±44.2)を認めたが、非投与群では明らかでなかった。【結論】大腸癌血管新生に主要間質成分である線維芽細胞及び単核細胞であるマクロファージ細胞が、癌細胞以上に重要な働きをしていることを、臨床材料を用いた実験により明かにした。
「日本道」関連渤海遺跡の考古学的調査

ロシア沿海州の東南端、ポシェット湾沿岸に位置するクラスキノ土城が、古代国家渤海の「日本道」に関連する遺跡であるという意見が提出されてからすでに40年ほど経過した。1980年以来、ロシア側の研究者がクラスキノ土城の発掘調査を継続しているが、それは主として、城内西北隅に位置している寺院跡に対するものである。本研究の代表者である田村は1992年以来、沿海州における渤海関連遺跡の踏査や発掘などを実施してきた。今回、この一連の調査の最終段階として、平成11・12年度の2年にわたり、すでに田村が中心となって平成10年度に行なったクラスキノ土城の考古学的調査を継続することにした。平成11年度は東門の甕城部分の調査、東側城壁に設定されたトレンチ部分の調査、及び城壁南側の測量調査などを実施した。平成12年度は、まず45月に城内一帯と西壁の測量を実施した。また9月中旬には、まだ踏査していない海岸地帯の遺跡を歩くこととし、チュグエフカ土城、パブロフカ土城などを踏査した。3月の遺物調査は極東研究所に保管してある、ロシア側の調査資料、とくに瓦類の調査をおこなった。これらの成果は報告書にて報告する。過去2回にわたる発掘調査の際、われわれは常に台風の襲来や湧き水などよって悩まされ、渤海時代の文化層まで発掘調査を及ぼし得なかった。これはおそらく、この地域一帯の地盤沈下によるものと思われる。このような状況のなかで知り得た大きな成果は、城壁がかなり後代になって修復されていること、東門の甕城部分の構築が、最初の土塁構築よりも遅い時期のものであるということであった。われわれの調査では、日本道を証明するものは一つも発見されなかったが、今後の渤海文化層の発掘に期待するものである。本年は本研究の1年目にあたるが、発掘調査そのものは、昨年、田村が代表者となって行なったクラスキノ土城の発掘を継続して行なうものであった。クラスキノ土城の発掘は東門地区と城壁トレンチ地区に分かれ、あわせて城壁の南門周辺地区を測量した。東門地区では、昨年設定した調査区の軸線のブレを修正して、発掘グリッドの造り替えを行い、その上で発掘区全体の掘り下げと、東門と城壁の接合部分の掘り下げを行なった。すなわち、東門南壁と城壁東壁の接点の発掘である。ところが、この場所に近代初期、この城内に住んでいた朝鮮系の人の墓が存在することが判明し、これの処理に時間をとられ、肝心の接合部分の調査を十分に行なえなかった。しかしながら、調査範囲のなかでの結果、やはり城壁東壁は赤色岩で表面が飾られているが、東門南壁の表面にはそれが認められないらしいことが明らかになった。この点はさらに次年度の調査で明らかにしたい。城壁トレンチ地区では、昨年のトレンチの西端近くで発見された遺構の性格を明らかにするため、トレンチを北に延長したが、攪乱がはなはだしく、明確な遺構を確認することはできなかった。なお、トレンチ地区の掘り下げは一部に止まっているので、ここも次年度の調査を必要とする。なお、帰途において、関連遺跡跡査として、クラスノヤールスク土城、アナニエフカ土城を踏査した。後者は特に東夏国の東部とされているところである。本研究は古代国家渤海の五道のうち、「日本道」に関連する遺跡に対する考古学的調査の実施を目的とする。その主たる対象遺跡は、ロシア沿海州の東南端、ポシェット湾沿岸に位置するクラスキノ土城である。今回は平成11・12年度の2年にわたり、すでに田村が中心となって平成10年度に行なった発掘を継続することが主たる目的であった。

平成11年度は東門の甕城部分の調査、東側城壁に設定されたトレンチ部分の調査、及び城壁南側の測量調査などを実施した。平成12年度は、まず45月に2週間、草が成長していない時期をえらんで城内一帯の測量、ならびに西壁の測量を実施した。しかしまだまだ寒さが厳しく、測量調査は予定の半分ほどしかできなかった。しかしながらロシア測研究者の主張する南門から城内を縦断するような低地帯のあることは確認できた。これが、いわゆる中央大街に該当するかどうか、極めて注目される。89月の現地での発掘調査は、ロシア側の事情で招待ビザの発行に難行し、直前になって観光ビザしかおりないことが判明したので、観光ビザで一ヶ所での長期な調査は、万一の事故の場合に対応に苦慮するおそれがあることから、発掘調査はとりやめ、急遽、9月中旬の小人数での踏査旅行と、3月にウラジオストックでのクラスキノ土城出土遺物の調査を行なうことに切り替えた。9月の踏査旅行は、これまでまだ踏査を行なっていなかった海岸地帯の遺跡を歩くこととし、チュグエフカ土城、パブロフカ土城などを踏査した。3月の遺物調査は極東研究所に保管してある、ロシア側の調査資料、とくに瓦類の調査をおこなった。これらの成果は報告書にて報告する。
藩世界と公儀-九州地方を中心に-

本研究は、「藩世界」を総体として捉えるため、特に公儀意識を重視し、公儀意識がどのようなレヴェルでどのように形成され、諸集団間にどのような関係を築かせていくか、そしてどのような社会秩序、政治秩序を形成させるのかを、九州地方をフィールドとして追求した。2005-07年度の研究期間に九州各県を調査し、対馬藩・大村藩・島原藩・佐賀藩・平戸藩・柳川藩・久留米藩・人吉藩・臼杵藩・高鍋藩・鹿児島藩および長崎奉行所について関連史料の調査・撮影による収集を行った。これらの調査を踏まえ、さらに「徳川実紀」「続徳川実紀」を用いて、九州地方の全ての大名について、幕初から幕末にかけての参勤交代の有り様をデータベースとして構築した。さらに、研究課題へアプローチするため、朝鮮と対馬・琉球と薩摩の交易、大名家の相続と幕府との関係、長崎聞役と長崎奉行所との関係、勅使下向などの通行をめぐる作法、幕藩領主と政治思想の問題、隠れキリシタンの存在の問題、訴訟と法意識の問題、大名家をはじめとする武家や地域民衆の政治意識の形成の問題、村社会と藩権力との関係などについて検討を行った。それらの成果の一部は、『対馬調査報告集』(2007年3月)としてまとめたほか、「九州近世史」における藩世界と公儀(深谷克己)、朝鮮通信使の接待役と大名(紙屋敦之)、対馬藩田代領における宝暦期「宗意心得違」一件(大橋幸泰)、肥後人吉藩相良家の仮養子史料(大森映子)、佐賀藩「御裁許書抜」(島善高)、対馬藩宗家記録のなかの忠臣蔵関係史料(堀新)、「太平記読み」の享受者たち(若尾政希)、「御馳走役」にみる大名家の苦難(久保貴子)、近世琉球における「御家流」と「唐字」(深瀬公一郎)、対馬藩田代領における「禁足」(斉藤悦正)、海禁体制と参勤交代(泉正人)として研究成果報告書(冊子)にまとめた。研究課題に迫るため、将軍・天皇・大名権威と公儀、宗教的権威と公儀、大名権威と公儀、境界意識・日本国王権威・中国皇帝権威と公儀、法秩序と公儀、政治意識と公儀など、いくつかの小課題を設定し、役割分担した。それに基づき、九州全域の調査を計画し、2005年8月、12月、2006年3月の3回にわたり、長崎県・佐賀県について集中して調査を行った。具体的には、対馬藩・大村藩・島原藩・佐賀藩についてである。対馬藩については対馬歴史民俗資料館の宗家文庫、大村藩については大村市立史料館の大村家文書等、島原藩については松平文庫・本光寺の島原藩関係史料などで、藩庁史料・大名家文書を中心に地方史料も目配りして調査を行い、必要に応じてデジタルカメラにより写真撮影して史料を収集した。同時に、対馬藩の城下町厳原や島内各地の巡見、17世紀前期の天草・島原一揆の関連史跡(原城)の見学など、現地フィールドワークを行った。3年間の研究期間で、九州諸藩にわたる参勤交代、大名家の相続手続き、藩主の官位叙任・昇進願書と幕府からの返答、朝鮮通信使の通行儀礼など、種々のデータベースを構築する計画である。今年度は、対馬藩・大村藩・島原藩・佐賀藩について関連史料を収集し、データベース化に着手した。

合わせて、朝鮮と対馬・琉球と薩摩の交易、長崎聞役と長崎奉行所との関係、勅使下向などの通行をめぐる作法、東照宮の祭礼、幕藩領主と政治思想の問題、隠れキリシタンの存在の問題、訴訟と法意識の問題、村社会における訴訟と内済などを追求するため、収集史料の講読を行い、「藩世界」と公儀との関係について考察を進めている。分析を進める中で、補足調査の必要性が指摘されてきている。来年度には、その点や東京に保存されている諸藩の史料調査も含め、九州地方の中・南部の地域について史料調査を実施したい。研究課題に迫るため、将軍・天皇・大名権威と公儀、宗教的権威と公儀、大名権威と公儀、境界意識・日本国王権威・中国皇帝権威と公儀、法秩序と公儀、政治意識と公儀など、いくつかの小課題を設定し、役割分担した。それに基づき、昨年度に引き続き九州諸藩の調査を行った。2006年8月、2007年2月、3月に、長崎県・佐賀県・福岡県・熊本県・大分県・鹿児島県について調査を行った。具体的には、対馬藩・平戸藩・佐賀藩・柳川藩・久留米藩・人吉藩・臼杵藩・薩摩藩および長崎奉行所の史料調査と関連史跡の現地フィールドワークである。対馬歴史民俗資料館の宗家文庫、平戸市立図書館蔵の藩士家史料、佐賀県立図書館寄託の鍋島家文庫、柳川古文書館の立花家文書、久留米市立図書館の有馬家文書、熊本県立図書館の相良文書、臼杵市図書館の稲葉家文書などの藩庁史料・大名家文書・藩士家文書を中心に、地方史料にも目配りして調査を行い、必要に応じてデジタルカメラにより写真撮影して史料を収集した。同時に、天草・島原一揆の関連で天草の現地フィールドワークを行った。また、東京大学史料編纂所の対馬藩宗家文庫についても調査し、必要に応じて写真撮影を依頼して史料を収集した。今年度も昨年度に引き続き収集史料の講読を行い、朝鮮と対馬・琉球と薩摩の交易、長崎聞役と長崎奉行所との関係、勅使下向などの通行をめぐる作法、幕藩領主と政治思想の問題、隠れキリシタンの存在の問題、訴訟と法意識の問題、村社会における訴訟と内済などの問題を通じて「藩世界」と公儀との関係について考察を進めている。また、3年間の研究期間で、九州諸藩にわたる参勤交代、大名家の相続手続き、藩主の官位叙任・昇進願書と幕府からの返答、朝鮮通信使の通行儀礼など、種々のデータベースを構築する計画で、今年度は、一部のデータベースについて、具体的なデータ入力を始めた。それに基づき、2005・06年度に引き続き九州諸藩の調査を行った。2007年8月に、鹿児島県・宮崎県・佐賀県について調査を行った。具体的には、鹿児島藩・高鍋藩・佐賀藩の史料調査と関連史跡の現地フィールドワークである。鹿児島大学の玉里文庫、宮崎県立図書館の諸家文書、高鍋町立図書館所蔵の高鍋藩の文書などの藩庁史料・大名家文書・藩士家文書を中心に、地方史料にも目配りして調査を行い、必要に応じてデジタルカメラにより写真撮影して史料を収集した。今年度も、2005・06年度に収集した史料をはじめ、8月に調査収集した史料の講読を行い、朝鮮と対馬・琉球と薩摩と幕府の問題、大名家の相続と幕府との関係、大名家と武家故実の問題、高鍋藩と参勤交代の問題、長崎を中心とする対外関係の緊張の高まりと九州諸藩との関係、幕藩領主と政治思想の問題、訴訟手続きと法意識の問題、大名家をはじめとする武家や地域民衆の政治意識の形成の問題、村社会と藩権力との関係等々を通じて「藩世界」と公儀との関係について考察を進めた。また、九州諸藩の参勤交代について、江戸時代初期から幕末にかけて、参勤時期、就封時期を中心に、参勤時期の変更、参勤免除、長崎警備との関係に留意しながらデータベースを作成した。
西欧中世における説教史料の基礎研究

本研究では、当初の研究計画にしたがい、まず以下の2点のレファランス書を購入し、これらを十分使いこなせるように習熟に努めた。当初の予定ではこの2点のレファランス書の使用に習熟した上で、原史料及び研究書に基づいて説教史料利用マニュアルを作成する予定であったが、この作業は予想以上に時間がかかり、現在も進行中である。しかしこれに準ずるものを、次のような形で作成することができた。1「研究成果実績報告書」の第1部をなす「文字のかなたにー15世紀フィレンツェの筆録説教ー」は、説教史料を用いた個別研究であり、本研究の成果の一つであるが、これの第2章は説教史料の諸類型とその特徴を概観している。この第2章の本文と注によって、西欧中世における説教史料のおおまかな見取り図がえられるはずである。2「研究成果実績報告書」の第2部をなす「史料選集」は、さまざまな説教史料類型の中から、代表的なものを選んで抄訳したものである。これを第1部・第2章の記述と照合しながら通読することによって、説教史料の具体的イメージがつかめるように資料を選択・配列した。本年度は当初の研究計画にしたがい、まず以下の2点のレファランス書を購入し、これらを十分使いこなせるよう努めた。T.Kaeppeli,Scriptores Ordinis Praedicatorum Medii Aevi,Roma,1970- (刊行中、既刊4冊)これらは現存説教史料の目録であり、史料の所在と著者、著作年代、写本の外形的特徴など一般の史料目録と共通する情報のほかに、当該説教のジャンル・主題・展開法についても摘記している。本年度はこれらの目録を精査することにより、以下の2点に主力を注いだ。1私が関心をもつ個別主題(経済思想、商業・商人観、民間信仰)に関係する説教史料の探索とマイクロフィルムによるそれらの入手。2説教のジャンル・主題・展開法に関する記述は、この2書のように大量に収集された場合、それ自体が貴重な史料であり、説教活動の時代的・地域的趨勢や説教内容・方法の変化を統計的に追うことを可能にしてくれる。今年度は、12-14世紀間の托鉢修道会に関してこうした調査を試み、いくつかの全体的傾向を見出そうと努めた。以上の研究は現在も進行中であり、成果を発表するには至っていない。本研究では、当初の研究計画にしたがい、まず以下の2点のレファランス書を購入し、これらを十分使いこなせるよう習熟に努めた。これを第1部・第2章の記述と照合しながら通読することによって、説教史料の具体的イメージがつかめるように史料を選択・配列した。
筋萎縮性側索硬化症(ALS)における皮膚および脊髄の架橋結合に関する研究

最終年度は次の研究をおこなった。正常人6例の骨髄C5、Th2、L4の前角、錐体路、術索の各部位をドライアイスで凍結したまま約200mgを取出し、0.015モルのTES bufferで洗浄後、凍結乾燥した。次にN_2を35分間フラッシュした後、115°C、24時間、6規定のHClで水解し、個々のsampleをアミノ酸分析機にかけハイドロキシプロリン(Hyp、hydroxyproline)を測定した。Hypの量はC5においては前角が8.48nmol/mg、錐体路が6.45nmol/mg、後索が15.8nmol/mg、Th2では前角が8.48nmol/mg、錐体路が6.98nmol/mg、後索が17.2nmol/mg、L4では前角が8.26nmol/mg、錐体路が7.21nmol/mg、後索が17.4nmol/mgとHypの量はC5、Th2、L4いずれにおいても後索が前角、錐体路に比較して有意に多かった(p<0.02)。Hypは膠原線維の特異的な構成アミノ酸であり、Hypの量はすなわち膠原線維の量を反映している。従って本研究の結果は運動ニューロンにおいて膠原線維の量は感覚ニューロンにおけるよりもはるかに少ないことを示しており、このことは筋萎縮性側索硬化症(ALS)の発症機序に膠原線維の変化が関与しているとする筆者の仮説を強く支持するものである。一方、グリコサミノグリカンは膠原線維の架橋結合に大きな影響を与えることが知られているが、ALS患者の皮膚および尿においてヒアルロン酸が対照群と比較して著明に増加しており、かつALSの経過と有意の正の相関がみられることが明らかになった。しかし、コンドロイチン硫酸、デルマタン硫酸など他のグリコサミノグリカンはALSと対照群との間で差はみられず、このことはALS患者にみられる膠原線維の変化はヒアルロン酸と密接な関係のあることを示している。筆者のこれまでの研究より筋萎縮性側索硬化症(ALS)患者の皮膚の膠原線維には病理学的、生化学的に特異的な変化のみられることが明らかになった。従って本研究の目的は、このような皮膚にみられた所見が病変の主座である脊髄にみられるかどうか確認することにある。平成5年度では以下のような研究をおこなった。正常人6例の脊髄C5、Th2、L4の前角、錐体路、後索の各部分をドライアイスの中で凍結したまま約200mg(wet weight)を取りだし、0.015モルのTES bufferで洗浄後、凍結乾燥した。次にN_2を35分間あてた後、115°C、24時間、6規定のHClで水解し、個々のsampleをアミノ酸分析機にかけハイドロキシプロリン(hydroxyproline,Hyp)を測定した。その結果、いずれの部分にも程度の差はあるがHypが証明された。Hypは膠原病線維の特異的な構成アミノ酸であり、このことは脊髄にも膠原線維が存在することを示している。筆者が当初予想したのとは異なり、Hypの量は錐体路、前角、後索の間で有意な差は得られなかった。この理由の1つとして例数が少ないことも考えられるので、今後例数を増やす予定である。

また、死後剖検までの時間が症例間で異なっていたためとも考えられるので、死後剖検までの時間がほぼ同一の症例を用いる予定である。脊髄には今まで膠原線維は存在しないとされており、本研究の結果はALSの病態には膠原線維の異常が関与しているとする筆者の考えを支持するものである。筆者のこれまでの研究より筋萎縮性側索硬化症(ALS)患者の皮膚の膠原線維には病理学的、生化学的に特異的な変化のみられることが明らかになった。従って本研究の目的は、このような皮膚にみられた所見が病変の主座である脊髄にみられるかどうか確認することにある。平成6年度では以下のような研究をおこなった。正常人6例の脊髄C5、Th2、L4の前角、錐体路、後索の各部分をドライアイスの中で凍結したまま約200mg(wet ewight)を取りだし、0.015モルのTES dufferで洗浄後、凍結乾燥した。次にN_2を35分間あてた後、115°C、24時間、6規定のHClで水解し、個々のsampleをアミノ酸分析機にかけハイドロキシプロリン(hydroxyproline,Hyp)を測定した。その結果、いずれの部分にも程度の差はあるがHypが証明された。Hypは膠原病線維の特異的な構成アミノ酸であり、このことは脊髄にも膠原線維が存在することを示している。一方、glycosaminoglycanは膠原線維の架橋結合に大きな影響を与えることが知られているが、ALS患者の皮膚および尿においてヒアルロン酸が対照群と比較して著明に増加しており、かつALSの経過と正の相関がみられることが明らかになった。しかし、他のglycosominoglycanはALSと対照群との間で差はみられず、このことはALS患者にみられる膠原線維の変化はヒアルロン酸と密接な関係にあることを示している。著者のこれまでの研究より筋萎縮性側素硬化症(ALS)患者の皮膚の膠原線維には病理学的、生化学的に特異的な変化のみられることが明らかになった。従って本研究の目的は、このような皮膚にみられた所見がALSの病変の主座である脊髄にみられるかどうか確認することにある。しかし、コンドロイチン硫酸、デルマタン硫酸など他のglycosominoglycanはALSと対照群との間で差はみられず、このことはALS患者にみられる膠原線維の変化はヒアルロン酸と密接な関係のあることを示唆している。
プラウトゥスの喜劇の劇作技法に関する研究

プラウトゥスの喜劇作品について,とくに多様なイメージの駆使,および,劇作そのものを主題とするような表現意図に着目,そこから発した技法を研究することを目的とし,(1)関係研究文献の収集・整理;(2)CD-ROM検索によるテキスト分析;(3)(1),(2)を踏まえ,個々の文脈に即した解釈に基づくプラウトゥスの劇作技法の抽出,という研究手順をとった.(3)ではとくに,(a)比喩的イメージの効果;(b)独白,傍白,立ち聞き,観客への呼びかけ等,劇的虚構と絡んだ手法についての劇的効果,という二点に焦点を当てた.その結果,(1),(2)に関しては,図書購入を含めた文献・資料収集,検索専用コンピューターを設置してのデータ集積と,それぞれ所期の目標を果たした.(3)については,裏面の研究発表の項に記載の論文に加え,「プラウトゥスの「型破り」」と題する口頭発表(京都大学西洋古典研究会:1996年12月)において成果を発表した.論文「『プセウドルス』の策略と芝居」は最終幕に見られる筋の不整合を検討,登場人物による策略を芝居に見立てる作品展開の上に,筋や人物造形の一貫性よりも個々の場面に織りなされるイメージ表現がこの策略=芝居の正否を左右していることを観察,不整合は,型にはまった展開を予想する観客を驚かすように,『プセウドルス』という作品が仕組んだ策略の一部として解されることを論じた.さらに,口頭発表はこの論文から引き出された問題,プラウトゥスの喜劇に特徴的な役柄「狡猾な奴隷」の代表とも言えるプセウドルスが見せる失敗の意味について考察,ギリシア新喜劇以来の伝統も含めて,どのようなものであれ喜劇の決まった型に対して諧謔を加える点にプラウトゥスの劇作の一つの特色を認めて,これを『バッキス姉妹』『捕虜』などの作品に観察した.以上,本年度の計画はほぼ予定どおり達成できたと考えるが,この成果を踏まえ,ギリシア・ローマ演劇全般へのより広い視野の中での問題を掘り下げ,また,以後のラテン文学への影響を検討することが今後の課題である.プラウトゥスの喜劇作品について,とくに多様なイメージの駆使,および,劇作そのものを主題とするような表現意図に着目,そこから発した技法を研究することを目的とし,(1)関係研究文献の収集・整理;(2)CD-ROM検索によるテキスト分析;(3)(1),(2)を踏まえ,個々の文脈に即した解釈に基づくプラウトゥスの劇作技法の抽出,という研究手順をとった.(3)ではとくに,(a)比喩的イメージの効果;(b)独白,傍白,立ち聞き,観客への呼びかけ等,劇的虚構と絡んだ手法についての劇的効果,という二点に焦点を当てた.その結果,(1),(2)に関しては,図書購入を含めた文献・資料収集,検索専用コンピューターを設置してのデータ集積と,それぞれ所期の目標を果たした.(3)については,裏面の研究発表の項に記載の論文に加え,「プラウトゥスの「型破り」」と題する口頭発表(京都大学西洋古典研究会:1996年12月)において成果を発表した.論文「『プセウドルス』の策略と芝居」は最終幕に見られる筋の不整合を検討,登場人物による策略を芝居に見立てる作品展開の上に,筋や人物造形の一貫性よりも個々の場面に織りなされるイメージ表現がこの策略=芝居の正否を左右していることを観察,不整合は,型にはまった展開を予想する観客を驚かすように,『プセウドルス』という作品が仕組んだ策略の一部として解されることを論じた.さらに,口頭発表はこの論文から引き出された問題,プラウトゥスの喜劇に特徴的な役柄「狡猾な奴隷」の代表とも言えるプセウドルスが見せる失敗の意味について考察,ギリシア新喜劇以来の伝統も含めて,どのようなものであれ喜劇の決まった型に対して諧謔を加える点にプラウトゥスの劇作の一つの特色を認めて,これを『バッキス姉妹』『捕虜』などの作品に観察した.以上,本年度の計画はほぼ予定どおり達成できたと考えるが,この成果を踏まえ,ギリシア・ローマ演劇全般へのより広い視野の中での問題を掘り下げ,また,以後のラテン文学への影響を検討することが今後の課題である.
水酸化プロリン異性体，誘導体の栄養生理学的解析

本研究では、コラーゲンを構成するアミノ酸である水酸化プロリンに注目し、その誘導体や誘導体を含む低分子ペプチドに特殊な生理機能がないか検討した。水酸基が数が通常より多いジヒドロキシプロリン、および水酸化プロリンを脱水した構造をN末端に有するトリペプチドの生理活性評価を行った。これらの分子について生化学的評価を行ったところ、ジヒドロキシプロリンには脂質過酸化を抑制する活性が認められた。またピロールカルボン酸構造をアミノ末端に持つトリペプチドにも同程度の抗酸化活性が認められた。以上の結果より、新たな抗酸化ペプチドや線維症などの疾病の早期診断マーカーの開発に向けて有効な情報が提出できた。本研究ではアミノ酸の一種である水酸化プロリン(ヒドロキシプロリン)の機能に着目し,その構造異性体や誘導体の生理機能を探索する事を目的としている.ヒドロキシプロリンは,近年サプリメントとして注目されているコラーゲンの主要構成アミノ酸でもあり,これまでの研究から抗酸化性や,脂質代謝改善効果などが明らかとなってきていた.そこで,本研究では,水酸基の位置や立体配座が異なる異性体を用い,これらの生理活性に差異があるか検討する.更に,水酸基を複数有するジヒドロキシプロリンを合成する,あるいは珪藻から分離精製し,その生理活性を測定する.本年度は,異性体の解析に集中し,計4種類の異性体に関して,抗酸化活性の測定を行った.具体的な測定項目としては,リノレン酸酸化抑制アッセイ,ラジカル補足アッセイ,そしてサイクリックボルタンメトリーによる酸化還元電位の計測を行った.その結果,異性体間に若干の抗酸化性の差異は認められるものの,有意差を認めるまでには至らなかった.特に電気化学的な測定においては,従来より天然に最も多く存在し,コラーゲンに主に含まれる異性体に抗酸化性の優位性が認められた.これらの結果は,ヒドロキシプロリンに関しては,水酸基と他の官能基の立体的な距離や配置によっては,電気化学的な特性に大きな変化がない事を示す.従って,これらの異性体の昨日は,コラーゲン等の蛋白質の構造に与える影響が主であると考えられた.ジヒドロキシプロリンに関しては,有機合成が進行中であり,現在保護基が付加した化合物の合成までに至っている.今後,合成を完了し,また珪藻ちゅうから天然のジヒドロキシプロリンを精製し,その生理活性を解析する.本研究では、コラーゲンを構成するアミノ酸である水酸化プロリンに注目し、その誘導体や誘導体を含む低分子ペプチドに特殊な生理機能がないか検討した。特に最終年度に重点化して行ったのは、通常水酸基の導入がひとつである水酸化プロリンに対して、さらに水酸基が導入されたジヒドロキシプロリンの抗酸化活性の評価と、水酸化プロリンを脱水した構造をもつピロールカルボン酸をN末端に有するペプチドの生理活性評価である。昨年度はこれらのアミノ酸の有機合成をおこない、これらを用いた。ジヒドロキシプロリンについては、サイクリックボルタンメトリーによる電気化学的な解析と脂質酸化抑制アッセイ、ラジカル補足アッセイを行った。プロリンに比べ、水酸化プロリンはいずれのアッセイにおいても強めの抗酸化活性が認められていたため、このアミノ酸にはより強い活性が期待された。しかし、いずれのアッセイにおいてもプロリンと同等、あるいはそれ以下の活性しか認められなかった。以上より、水酸基が二つ存在することは、必ずしも活性を高める効果を誘引しないことが明らかとなった。この結果は、活性測定をする際のpHを弱酸性(pH6)から弱塩基性(pH8)の範囲において複数条件下で検討しても同様であった。以上より、ジヒドロキシプロリンには強い抗酸化活性は認められないと判断した。一方で、従来研究により強い抗酸化活性が認められていたトリペプチド(OGP:hydroxyprolyl-glycyl-proline)のアミノ末端を脱水した誘導体型のペプチドには一定の抗酸化活性が認められた。OGPペプチドの代謝経路を考えた際に、アミノ末端の脱水は起きやすい反応であるため、この結果はOGPペプチドの抗酸化性のメカニズム解明に向けて基礎的な情報を提供したことになる。また、今後このような活性のつよいペプチドを作成するための基盤的な情報を得られたと考えられる。本研究では,ヒドロキシプロリンの異性体の抗酸化性と,ジヒドロキシプロリンの抗酸化性の解析を中心的な目標としている.このうち,異性体の解析に関しては当初の予定分をほぼ遂行した.結果は必ずしも新たな強力な生理活性の発見には至ってはいないが,ジヒドロキシプロリンの解析に向けての対照として,意味のある結果と考える.また,この解析に向けて,サイクリックボルタンメトリーの立ちあげや各種生化学アッセイの確立もおこない,いずれも信頼性の高いレベルでも実験系構築に至った.また,ジヒドロキシプロリンの合成も順調に進行しており,類縁体の生化学解析も開始している.

今夏までに珪藻の培養系も確立できる見込みであり,ジヒドロキシプロリンの取得にも一定のめどが立った.以上より,研究の目的に照らして,おおむね計画通りに進行していると判断する.生物化学今後はジヒドロキシプロリンの取得と,その生化学的な解析に集中する.生化学的な解析に関しては,既に確立済みなのでこれを用いる.これらに合わせて,皮膚や脳神経系の幹細胞の増殖や分化に関してもこれらの異性体や,ジヒドロキシプロリンの影響を解析する.
メラトニン受容体の遺伝子多型と夜勤時の光の生体影響

不規則な生活が強いられる夜勤・交代制勤務への従事は、睡眠障害や生活習慣病のリスクを高める。ゲノムワイド関連研究においてメラトニン受容体遺伝子の近傍にある一塩基多型が交代制勤務者の疲弊度と関連があることが明らかにされている。しかし、この遺伝子多型が夜勤にともなう光曝露などによって生じる概日リズムの位相後退やメラトニン分泌の抑制および、断眠によって生じる眠気の増加やパフォーマンスの低下とどの程度関連するかは不明である。そこで、本研究では、実験室にて光曝露を伴う模擬的な夜勤実験を実施し、メラトニン受容体遺伝子に関連する遺伝子多型と夜勤への適応度の関連について明らかにする。
100Sリボソームの構造とその形成に関与する蛋白因子の機能の解析

100SリボソームにはRMF以外にも定常期特異的に発現する蛋白質が数種類結合している。その中で特に興味深いのがHPF(hibernation promoting factor)である。この蛋白質はRMFと同様に100Sリボソームにだけ結合している。このことからHPFが100Sリボソームに何らかの関与をしていることが予想される。そこで、大腸菌のHPF欠損株を作成し、蔗糖密度勾配遠心で100Sリボソームの形成状態を調べた。その結果、HPF欠損株では100Sリボソームがほとんど形成されず、このとき存在する70sリボソームにはYfiAという蛋白質が通常より多く結合していた。このYfiAも定常期特異的に発現する蛋白質として同定されたものの一つであり、HPFと約40%のアミノ酸配列の相同性を持っている。次に、YfiA欠損株を作成して調べてみた。すると、100Sリボソームの形成量が増加し、HPFの結合量も増加していた。これらの事実から、HPFとYfiAはリボソーム上に重複する結合部位を有して競合関係にあり、100Sリボソームの形成をHPFは促進し、YfiAは逆に阻害することが分かった。そして、HPFを持たないリボソームはRMFが結合しても沈降係数が約90Sの不安定な二量体しか形成できず、HPFが結合して初めて安定した100Sリボソームが形成される2段階の過程を経ることを明らかにした。また、翻訳を終了したリボソームが次の翻訳サイクルに向かうにはInitiation factor3(IF3)が30Sサブユニットに結合して30Sと50Sに解離することが必要である。一方、定常期においてRibernation stageに向かうにはRMFがリボソームに結合して二量体化することが必要である。従って、「翻訳を終了したリボソームが再び翻訳サイクルに向かうのか、翻訳活性を失って休止するのか」の決定には、IF3とRMFの競合が関係していると考えられる。この競合がどの様に行われ、どのように蛋白質合成活性の制御が行われているのかを明らかにするために、リボソームにIF3あるいはRMFを添加するin vitro実験を行った。その結果、対数期のリボソームを用いたときと定常期のリボソームを用いたときでIF3とRMFの活性が異なることを明らかにした。大腸菌の生育が飢餓などにより定常状態に入ると、RMFという蛋白が発現し、70Sリボソームの大部分が二量体化して100Sリボソームへと変換される。この100Sリボソームの形成に対して、RMFと同じく定常期で発現してリボソームに結合するYhbHとYfiAという蛋白がどの様に関与しているのかを調べた。まず、そのためにYhbHとYfiA、およびこれら両方の大腸菌欠損株を作成した。そして、それぞれの遺伝子の欠損効果を蔗糖密度勾配遠心でリボソーム粒子の状態を観察することにより調べた。その結果、YhbH欠損株では100Sリボソームが減少し、YfiA欠損株では100Sリボソームが増加した。また、両方の欠損株では100Sではなく、90Sという沈降係数のリボソーム二量体が観測された。以上の事実より、YhbHは100Sリボソームの形成を促進又は安定化するのに対して、YfiAは逆に70Sダイマーの形成を阻害することを明らかにした。更に、RMFのみによって形成される70Sダイマーは未成熟な90S粒子であり、これにYhbHが結合することによって、初めて成熟した100S粒子に移行することも明らかにした。これらの結果により、100Sリボソームは二段階で形成されることが示され、100Sリボソームの形成機構をさらに詳細に明らかにすることができた。我々は、これらの機能から、YhbHをhibernation promoting factor (HPF)と名付け、データベースに登録した。これらの成果はカナダで行われたRNA学会で発表され、「Genes to Cells」に掲載された。

そして、HPFを持たないリボソームはRMFが結合しても沈降係数が約90Sの不安定な二量体しか形成できず、HPFが結合して初めて安定した100Sリボソームが形成される2段階の過程を経ることを明らかにした。また、翻訳を終了したリボソームが次の翻訳サイクルに向かうにはInitiation factor3(IF3)が30Sサブユニットに結合して30Sと50Sに解離することが必要である。一方、定常期においてRibernation stageに向かうにはRMFがリボソームに結合して二量体化することが必要である。従って、「翻訳を終了したリボソームが再び翻訳サイクルに向かうのか、翻訳活性を失って休止するのか」の決定には、IF3とRMFの競合が関係していると考えられる。この競合がどの様に行われ、どのように蛋白質合成活性の制御が行われているのかを明らかにするために、リボソームにIF3あるいはRMFを添加するin vitro実験を行った。その結果、対数期のリボソームを用いたときと定常期のリボソームを用いたときでIF3とRMFの活性が異なることを明らかにした。
電子機器のプリント基板上の電流分布の可視化

14年度では時間領域差分法を用いた誘電体基板上の電流分布を推定する方法を確立し,シミューレーションにより電子機器のプリント基板上の電流分布を可視化する可能性を示したことに続き,15年度では以下のような研究実績を得ている.1.可視化システムの作成近傍電磁界め測定システムを構築し,時間領域差分法を用いた誘電体基板上の電流分布の推定アルゴリズムと組み併せて,アンテナ上の電流分布及び,電子機器のプリント基板上などの電流分布の可視化システムを作成した.2.可視化システムの評価完成した電磁波可視化システムを用いて,アンテナ上の電流分布及びプリント基板上の電流分布を可視化し,システムの評価を行なった.電流分布の展開関数の配置方法や,電界の測定の走査範囲,電界プローブの電気特性などの測定パラメータが可視化の精度に与えた影響を明らかにし,これらのパラメータの最適化の指針を与えた.3.可視化システムの高性能化時間領域差分法の数値計算アルゴリズムを改善することにより,高速化を図った.その結果,従来電流分布の展開関数の数だけ,時間領域差分法の数値計算を繰り返ななければならなかったことに対して,1回の計算で済むことになった,また,本システムの電磁界走査の高速化を実現するために,リアルタイムで多数の地点における電磁波が測定可能な変調散乱素子を用いた測定法を開発し,測定システムを構築した.さらに,本システムの高精度化を図るため,変調散乱素子を用いて被測定電磁界分布を乱さないような無浸襲で近傍電磁界の測定法も提案しており,基礎実験を行ない,良好な結果を得た.本研究は近傍電磁界の測定と誘電体基板に適用できるブロックモデルのモーメント法を用いて,電子機器のプリント基板上の電流分布を推定する方法を確立することを目的としており,今年度はブロックモデル法とガラーキン法を組み合わせたモーメント法を用いた波源推定アルゴリズムの数値シミュレーション及び可視化システムの作成を計画している.ブロックモデル法とガラーキン法を組み合わせたモーメント法を用いた方法は収束性などの問題点がまだ残っているため,シミュレーションまでには至らなかったが,その代わりに,時間領域差分法を用いた誘電体基板上の電流分布を推定する方法の確立ができ,シミュレーションも可能となった.この方法は複雑な3次元の伝送線路パターンを有する誘電体基板にも解析できるため,適用範囲がモーメント法より広いことがシミュレーションの結果から分かった.また,可視化システムの作成については,新たに変調散乱素子を用いた電磁界の測定システムを構築し,同時に複数の地点から電磁界の測定が可能になった.現時点では,3素子の変調散乱素子を使って,同時に3ヶ所の観測点における電磁界の測定の動作確認を行った.本システムは,プリント基板から発生される瞬時性のあるランダムの電磁波ノイズを多数の観測点において測定することができ,ノイズの発生源の推定に役に立つものである.14年度では時間領域差分法を用いた誘電体基板上の電流分布を推定する方法を確立し,シミューレーションにより電子機器のプリント基板上の電流分布を可視化する可能性を示したことに続き,15年度では以下のような研究実績を得ている.1.可視化システムの作成近傍電磁界め測定システムを構築し,時間領域差分法を用いた誘電体基板上の電流分布の推定アルゴリズムと組み併せて,アンテナ上の電流分布及び,電子機器のプリント基板上などの電流分布の可視化システムを作成した.2.可視化システムの評価完成した電磁波可視化システムを用いて,アンテナ上の電流分布及びプリント基板上の電流分布を可視化し,システムの評価を行なった.電流分布の展開関数の配置方法や,電界の測定の走査範囲,電界プローブの電気特性などの測定パラメータが可視化の精度に与えた影響を明らかにし,これらのパラメータの最適化の指針を与えた.3.可視化システムの高性能化時間領域差分法の数値計算アルゴリズムを改善することにより,高速化を図った.その結果,従来電流分布の展開関数の数だけ,時間領域差分法の数値計算を繰り返ななければならなかったことに対して,1回の計算で済むことになった,また,本システムの電磁界走査の高速化を実現するために,リアルタイムで多数の地点における電磁波が測定可能な変調散乱素子を用いた測定法を開発し,測定システムを構築した.さらに,本システムの高精度化を図るため,変調散乱素子を用いて被測定電磁界分布を乱さないような無浸襲で近傍電磁界の測定法も提案しており,基礎実験を行ない,良好な結果を得た.
外国人女性の「子育て」に関する研究ー日本社会への適応と母文化継承の間で

本研究は、外国人子育て家庭、特に移民第一世代の母親に注目し、異国である日本社会で生活基盤を築き「子育て」をするとはどういうことなのか、彼女らの視点や解釈からの「子育て」の経験を明らかにすることを目的としている。平成29(2017)年度は、(1)先行研究の整理、理論的枠組みの検討を進め、(2)外国人住民、教育、保育等の実務を担っている関係者への聞き取り調査を実施した。(1)については、外国人、女性、子ども、移住・国際移動、子育て、教育・保育、多文化共生等のキーワードに係る文献、資料等を収集、閲読した。また関連するシンポジウムやワークショップ等にも参加し、特に神奈川県内において、外国人(家庭)を支援する行政、関連団体、並びにそれらの組織(個人)間のネットワーク等についても学ぶことに努めた。(2)については、(1)の活動の中で知り合った関係者等を訪れ、外国人住民の概況、行政サービス、市民活動等について幅広く把握するための情報収集を行った。その中で、近年、神奈川県内の外国人子育て家庭の多様化が進んでいること、ムスリムを両親に持つ(特に母親の滞在年数が浅く日本語を話さない)家庭が増えていること、従来の支援の枠組みでは外国人母親(家庭)に効果的にサービスを提供できない例が多くあることがわかった。平成30(2018)年度は、上の(1)、(2)に加え、(3)外国人母親への質問内容の検討及び精査、継続的・半構成的なインタビューのためのメモ・ガイドラインを作成し、(4)外国人母親に調査協力を依頼、実際に(5)聞き取り調査を開始した。スリランカ、タイ、ネパール及びベトナムの出身、また共働き、専業主婦、滞在年数の長い、短いなど、異なるバックグラウンド、環境下にある母親にインタビューをすることができている。平成30(2018)年度には、当初の予定とおり、(5)外国人母親への聞き取り調査を開始、継続的に実施し、本研究をおおむね順調に進展させることができた。外国人母親の視点や解釈については、まだ十分に分析、考察することができていないが、聞き取り調査の結果、外国人母親としての日本社会での「子育て」という共通体験についてより具体的に描くこと、さらに研究活動の方向性もより具現化することもできた。令和2(2020)年度、研究再開後は、(1)の先行研究の整理、理論的枠組みの検討、及び(2)の外国人住民、教育、保育等の実務を担っている関係者からの情報収集、を踏まえ、(5)の外国人母親らへの聞き取り調査で収集したデータを分析、整理し、考察する。必要であれば、外国人母親への聞き取り調査も実施する。そして、その結果を踏まえ最終的に、外国人母親としての日本社会での「子育て」という共通体験について包括的に議論することを目指す。研究成果は、学会や論文にて積極的に発表することも検討したい。また、外国人母親への聞き取り調査の実施に向け、準備を進めている。そこで、「ムスリム」「スリランカ」「タミル」を本研究の新たなキーワードとして位置付け、調査を開始した。平成30(2018)年度には、外国人母親への聞き取り調査も実施し、その結果を踏まえ最終的に、外国人母親としての日本社会での「子育て」という共通体験について包括的に議論することを目指す。初年度である平成29(2017)年度には、上の(1)、(2)に加え、(3)外国人母親への質問内容の検討及び精査、継続的・半構成的なインタビューのためのメモ・ガイドラインを作成、並びに(4)外国人母親への調査協力の依頼を計画していた。(1)及び(2)については、おおむね順調に進展しているが、(3)及び(4)については、開始したばかりであり準備を加速する。外国人母親の視点や解釈についてはまだ十分に調査、分析することができていないが、他方、(1)及び(2)を実施することで、外国人母親を対象としたサービスや支援の現場の実態の把握、特に日本人・日本社会側が認識、指摘している課題や論点を整理することができた。さらに、神奈川県内の外国人子育て家庭をめぐる「ムスリム」「スリランカ」「タミル」という新たなキーワードを定め、研究活動の方向性をより具体化することもできた。

本研究は、外国人子育て家庭、特に移民第一世代の母親に注目し、異国である日本社会で生活基盤を築き「子育て」をするとはどういうことなのか、彼女らの視点や解釈からの「子育て」の経験を明らかにすることを目的としている。平成29(2017)年度は、(1)先行研究の整理、理論的枠組みの検討を進め、(2)外国人住民、教育、保育等の実務を担っている関係者への聞き取り調査を実施した。(1)については、外国人、女性、子ども、移住・国際移動、子育て、教育・保育、多文化共生等のキーワードに係る文献、資料等を収集、閲読した。また関連するシンポジウムやワークショップ等にも参加し、特に神奈川県内において、外国人(家庭)を支援する行政、関連団体、並びにそれらの組織(個人)間のネットワーク等についても学ぶことに努めた。(2)については、(1)の活動の中で知り合った関係者等を訪れ、外国人住民の概況、行政サービス、市民活動等について幅広く把握するための情報収集を行った。その中で、近年、神奈川県内の外国人子育て家庭の多様化が進んでいること、ムスリムを両親に持つ(特に母親の滞在年数が浅く日本語を話さない)家庭が増えていること、従来の支援の枠組みでは外国人母親(家庭)に効果的にサービスを提供できない例が多くあることがわかった。平成30(2018)年度は、上の(1)、(2)に加え、(3)外国人母親への質問内容の検討及び精査、継続的・半構成的なインタビューのためのメモ・ガイドラインを作成し、(4)外国人母親に調査協力を依頼、実際に(5)聞き取り調査を開始した。スリランカ、タイ、ネパール及びベトナムの出身、また共働き、専業主婦、滞在年数の長い、短いなど、異なるバックグラウンド、環境下にある母親にインタビューをすることができている。平成30(2018)年度には、当初の予定とおり、(5)外国人母親への聞き取り調査を開始、継続的に実施し、本研究をおおむね順調に進展させることができた。外国人母親の視点や解釈については、まだ十分に分析、考察することができていないが、聞き取り調査の結果、外国人母親としての日本社会での「子育て」という共通体験についてより具体的に描くこと、さらに研究活動の方向性もより具現化することもできた。平成30(2018)年度は、外国人母親への聞き取り調査((3)及び(4))を実施するとともに、(1)及び(2)についても引き続き実施し、それらの結果とともに、外国人母親らの「子育て」の経験につき、整理、分析、考察する。特に、外国人母親たちがいかに母国とのつながりを維持、継承しているのか、その一方で、いかに日本社会・地域に適応しようとしているのか(していないのか)、できているのか(できていないのか)等に焦点をあてる。異なる価値観や習慣の狭間において、衝突、摩擦や葛藤があることは容易に予測できるが、それらにどのように対処しているのか、彼女たちが何を重視しながら「子育て」を実践し、またそのためにどのような情報、資源、ネットワークを吟味、選択、活用、駆使しているかについても、明らかにしていきたい。さらに、新しいキーワードとして「ムスリム」「スリランカ」「タミル」等にも注目し、関係者から協力を得られれば研究会等も開催し知見を広めたいと考えている。最終的に、外国人母親としての日本社会での「子育て」という共通体験について包括的に議論することを目指す。
血中マイクロRNAの測定による食道癌化学放射線療法の治療効果予測に関する研究

この研究では放射線化学療法を受ける食道癌の患者さんから治療前および治療開始後2週間時点での血液を採取し、そこに含まれるマイクロRNAの解析を行います。そして治療終了時点での治療効果と、血中マイクロRNAの解析結果との比較検討を行います。これにより放射線化学療法の効果を早期に予測し治療内容を調整する方法が確立されることが期待されます。さらにこの研究では、血液サンプルの解析で得られた候補のマイクロRNAを培養細胞に導入する実験を行い、マイクロRNAと放射線感受性との関連について細胞レベルでの検証を行います。本研究では化学放射線療法を受けた食道扁平上皮癌患者において、治療開始前及び開始後早期の血清サンプルを採取しそこに含まれるマイクロRNAを定量的に評価することにより、治療終了時点での治療効果を予測する手法を確立することを目的としている。まずは化学放射線療法を受けた食道扁平上皮癌患者の血清サンプルの採取および治療前後のCT検査による治療効果判定を行った。特に本年度は、東北大学病院倫理委員会の承認を受け、患者血清サンプルの収集を開始した。倫理委員会の承認に予定より時間がかかり症例登録の開始が約3ヶ月遅れたものの、登録開始後は予定のペースで症例集積が進んでおり、年度内には予定している12例のうち4例まで登録および検体採取が完了した。次年度前半には予定している症例数の登録・検体採取を完了し、CT検査をもとにした治療後の効果判定及び血清中マイクロRNAの定量測定を行って、これらの関連性の検討をおこなう予定である。また、血清サンプルのマイクロRNAの解析結果を踏まえて次年度に行う予定の細胞実験に用いる食道扁平上皮癌の細胞株2種類、細胞実験系の確立を行った。これに付随して細胞へのマイクロRNA導入や導入後の評価に必要な試薬類を購入・準備した。実際の導入実験は次年度以降となるが、本年度中に細胞実験の環境を整えることにより、患者サンプルからのマイクロRNAの解析が完了し次第速やかに細胞実験に入れる見通しを整えた。倫理委員会の承認に予定より時間がかかり症例登録の開始が約3ヶ月遅れた。その後は登録開始後は予定のペースで症例集積が進んでおり、年度内には予定している12例のうち4例まで登録および検体採取が完了した。現在のペースであれば次年度上旬には当初初年度内に予定していた血清マイクロRNAの測定が行える見込みである。またこれにより、患者血清のマイクロRNAの測定結果をもとに行う予定である細胞実験についても本年度中には開始できない見通しである。これについては本年度中に細胞株の入手など進められる範囲での進捗を図った。次年度も引き続き患者血清サンプルの収集を続け、早期に予定の12例の検体を確保することを目指す。血清中マイクロRNAの測定・解析実験については、登録スケジュールの遅れにより解析期間が十分に設けられない見込みであることから、マイクロRNAの測定を論文等で多数の採用実績のある外部機関に委託する方法に変更する予定とした。これにより解析期間の短縮やデータの信頼性の向上が期待できる。血清サンプルの解析により治療感受性に関連する可能性があるマイクロRNAが同定できた場合、これを食道扁平上皮癌の細胞株においてノックダウンあるいは強制発現させる実験を行う。これによる放射線感受性の変化を定量評価することにより、血清サンプルの解析から示唆されたマイクロRNAが実際に放射線感受性に影響を及ぼしているかどうかを検証することができると期待される。上記の実験遂行と並行して論文や学会での情報収集に努め、最新の知見を取り入れて適宜研究計画を最適化していく予定である。

その後は登録開始後は予定のペースで症例集積が進んでおり、年度内には予定している12例のうち4例まで登録および検体採取が完了した。現在のペースであれば次年度上旬には当初初年度内に予定していた血清マイクロRNAの測定が行える見込みである。またこれにより、患者血清のマイクロRNAの測定結果をもとに行う予定である細胞実験についても本年度中には開始できない見通しである。これについては本年度中に細胞株の入手など進められる範囲での進捗を図った。次年度も引き続き患者血清サンプルの収集を続け、早期に予定の12例の検体を確保することを目指す。血清中マイクロRNAの測定・解析実験については、登録スケジュールの遅れにより解析期間が十分に設けられない見込みであることから、マイクロRNAの測定を論文等で多数の採用実績のある外部機関に委託する方法に変更する予定とした。これにより解析期間の短縮やデータの信頼性の向上が期待できる。血清サンプルの解析により治療感受性に関連する可能性があるマイクロRNAが同定できた場合、これを食道扁平上皮癌の細胞株においてノックダウンあるいは強制発現させる実験を行う。これによる放射線感受性の変化を定量評価することにより、血清サンプルの解析から示唆されたマイクロRNAが実際に放射線感受性に影響を及ぼしているかどうかを検証することができると期待される。上記の実験遂行と並行して論文や学会での情報収集に努め、最新の知見を取り入れて適宜研究計画を最適化していく予定である。