hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
胞巣状軟部肉腫病態の検討:ASPL-TFE3キメラ遺伝子の役割

胞巣状軟部肉腫で特異的に認められるキメラ遺伝子ASPL-TFE3が転写因子であることを証明し、肉腫特異的遺伝子発現制御への関与を示した。また、胞巣状軟部肉腫症例におけるASPL-TFE3転写標的遺伝子の高発現を確認し、胞巣状軟部肉腫の分子生物学的態度にキメラ遺伝子が深く関わることを示唆した。本研究より、胞巣状軟部肉腫の病態におけるASPL-TFE3の重要性が明示され、今後の更なるキメラ遺伝子機能解析の必要性が推察された。本研究は、胞巣状軟部肉腫特異的キメラ遺伝子ASPL-TFE3の分子機能を解析し、胞巣状軟部肉腫の病態を明らかにすることを目的とする。本年度は、キメラ遺伝子を発現する胞巣状軟部肉腫症例の検索および全長ASPL-TFE3キメラ遺伝子cDNAのクローニングを行い、以下の成果を得た。1、ASPL-TFE3キメラ遺伝子を発現する胞巣状軟部肉腫症例をえた。当施設及び研究関連施設より胞巣状軟部肉腫症例のパラフィン包埋材料および凍結材料を収集した。RT-PCR法によりキメラ遺伝子を発現する検体を検索した結果、ASPL-TFE3キメラ遺伝子(type1)を発現する胞巣状軟部肉腫症例1例をえた。Gene Bankデータベース上のASPL(AF324220)およびTFE3(NM_006521)配列を参考にして全長ASPL-TFE3配列を推定した。1で得られた胞巣状軟部肉腫症例の凍結組織よりRNAを抽出し、cDNAを2つの断片に分け、RT-PCRでcDNAを増幅した。(2)シークエンス解析により単離したcDNA断片がASPL-TFE3であることを確認した。(1)で得られたcDNA断片のシークエンス解析を行った。その結果、変異のないASPL-TFE3断片が得られており、全長ASPL-TFE3 cDNAのクローニングに成功した。今後は、得られたASPL-TFE3 cDNAを培養細胞に導入して局在を解析するとともに、キメラ遺伝子産物の機能を生化学的に解析する予定である。本研究の目的は、胞巣状軟部肉腫特異的キメラ遺伝子ASPL-TFE3の分子機能を解析し、胞巣状軟部肉腫病態との関連を明らかにすることである。本年度は、胞巣状軟部肉腫症例より単離したASPL-TFE3キメラ遺伝子cDNAを培養細胞株に導入し、その分子機能の解析を行った。1、ASPL-TFE3キメラ遺伝子cDNAを培養細胞株に導入し、局在を明らかにした。昨年度に単離したASPL-TFE3cDNAをGFP(Green fluorescence protein)との融合蛋白質とし、培養細胞株に導入し、共焦点顕微鏡で局在を解析した。その結果、ASPL-TFE3キメラ遺伝子は細胞の核に局在することが確認され、転写因子として機能することが示唆された。2、ASPL-TFE3キメラ遺伝子の転写因子としての機能解析を試みた。ASPL-TFE3キメラ遺伝子の転写因子としての機能を解析するため、TFE3の標的遺伝子(IRS2プロモーター)および全長TFE3cDNAのクローニングを試みた。その結果、IRS2プロモーターおよび全長TFE3cDNAのクローニングに成功した。現在、ASPL-TFE3キメラ遺伝子の転写活性能についてレポータージーンアッセイを用いた解析を行っている。以上の結果より、ASPL-TFE3キメラ遺伝子は転写因子として機能し、胞巣状軟部肉腫特異的な遺伝子発現をもたらすことが推測された。今後は、ASPL-TFE3キメラ遺伝子の転写活性能を正常TFE3と比較し、キメラ遺伝子が腫瘍特異的遺伝子発現に及ぼす影響を明らかにしていく予定である。昨年度までの研究により、胞巣状軟部肉腫特異的キメラ遺伝子ASPL-TFE3は細胞の核に局在し、転写因子として機能する可能性が示唆された。本年度は、ASPL-TFE3の転写活性能および、胞巣状軟部肉腫特異的遺伝子発現への影響について解析を行い、以下の研究成果を得た。1、ASPL-TFE3キメラ遺伝子が転写活性化能を持つことを明らかにした。ASPL-TFE3の転写活性化能をルシフェラーゼアッセイにより解析した結果、ASPL-TFE3存在下ではTFE3標的配列の転写活性が10倍程度上昇し、ASPL-TFE3が転写活性化能を持つことが証明された。2、ASPL-TFE3転写標的因子を同定した。ASPL-TFE3導入および非導入培養細胞におけるTFE3転写標的因子群の発現量をウエスタンブロット法により比較検討した。その結果、ASPL-TFE3導入によりサイクリンEの発現に変化が認められた。3、胞巣状軟部肉腫症例でASPL-TFE3標的因子の高発現を確認した。

ウエスタンブロット解析および免疫組織化学染色により、胞巣状軟部肉腫症例においてASPL-TFE3標的因子であるサイクリンEが高発現していることを見出した。以上より、ASPL-TFE3は転写活性能を有しており、転写因子として肉腫特異的遺伝子発現制御に寄与することが示された。本研究の成果より、胞巣状軟部肉腫病態におけるASPL-TFE3の重要性が示唆され、今後のさらなる機能解析の必要性が推察された。
トレオニン アルドラーゼによる光学異性体分子の識別機構

トレオニンアルドラーゼは、ピリドキサールリン酸を補酵素としてトレオニンをグリシンとアセトアルデヒドに分解する反応(アルドラーゼ反応)を触媒する酵素である。トレオニンの光学異性体およびメソ体それぞれに対して基質特異性をもつ複数の酵素が現在までに報告されているなかで、D-トレオニンを基質とするArthrobactersp. DK-38由来のD-トレオニンアルドラーゼ(DTA)は、2価の金属であるマンガンを反応に必須とする。このDTAの光学異性体認識と2価金属による活性制御の機構は非常に興味深く、そこでX線結晶構造解析をおこなうことでこれらの機構を明らかにしようと試みた。大腸菌で大量発現させ精製したDTAを用いて結晶化を試み、空間群P2_12_12_1格子定数a=88.3Å,b=129.6Å,c=62.3Å,α=β=γ=90°の結晶を得た。まずは分子置換法による位相決定を試みるため、DTAに相同性のある酵素を検索した。L-トレオニンを基質とするトレオニンアルドラーゼ(LTA)の立体構造が昨年報告されたが、LTAとDTAの一次構造には同じ反応を触媒する酵素ながら全く一次構造の相同性が見られないため、モデル構造としては使用できなかった。検索の結果、Alanine Racemaseが弱いながらも部分的にDTAに対する相同性が見られた。Alanine Racemaseはα/βバレル構造を持つピリドキサールリン酸を補酵素としてD-アミノ酸を基質とする酵素で、この分子をモデル構造に用いて分子置換法をおこなったが、解は得られなかった。そこで続いて重原子誘導体の作成を試みた。この結晶はソーキング時に格子定数が容易に変化するため、非常に多くの条件で測定を行い、その中から格子定数が一致する組み合せのみを使用することにした。今までにThiomerosal(Hg)誘導体を得ることができ、さらにKAu(CN)_2誘導体が有望であることを見いだした。今後KAu(CN)_2誘導体のデータ測定を行い、位相決定をおこないつつある。トレオニンアルドラーゼは、ピリドキサールリン酸を補酵素としてトレオニンをグリシンとアセトアルデヒドに分解する反応(アルドラーゼ反応)を触媒する酵素で、トレオニンの2つの光学異性体(_<L->,_<D->体)およびそのメソ体を基質とする基質特異性の異る複数の酵素が報告されている。そのなかで、_<D->トレオニンを基質とするArthrobacter sp.DK-38由来の_<D->トレオニンアルドラーゼ(DTA)は、2価の金属であるマンガンを反応に必須とする。このDTAの光学異性体認識と2価金属による活性制御の機構は非常に興味深く、そこでX線結晶構造解析をおこなうことで明らかにしようと試みた。まず、大腸菌で大量発現させ精製したDTAを用いて結晶化条件の検索・最適化を試みた。その結果、20mg/mlの蛋白試料溶液を使い0.1M Tris/HCl,0.2M MgCl_2,12%w/v PEG#4000,pH8.0の溶液の条件で基質アナログである20mM S-3-hydroxy-butylate存在させてsitting drop/vapor diffusion法でmacro seedingをおこなうことにより、1.0x0.4x0.2mm^3の透明黄色柱状の結晶を再現良く得ることが出来た。この結晶は、空間群P2_12_12_1で格子定数a=88.3Å,b=129.6Å,c=62.3Å,α=β=γ=90°で非対称単位中に2分子を含んでおり、現在までにこの結晶を用いて2.6Å分解能のデータを得ることが出来ている。続いて位相決定を行なうために、Seleno-methionine置換酵素の作成と重原子誘導体の検索を試みた。Seleno-methionine置換酵素は大腸菌B834株を用いることで行ない、野生型酵素と同様に精製結晶化をおこなった。現在、位相決定に適当な重原子誘導体の検索を進めている。

Alanine Racemaseはα/βバレル構造を持つピリドキサールリン酸を補酵素としてD-アミノ酸を基質とする酵素で、この分子をモデル構造に用いて分子置換法をおこなったが、解は得られなかった。そこで続いて重原子誘導体の作成を試みた。この結晶はソーキング時に格子定数が容易に変化するため、非常に多くの条件で測定を行い、その中から格子定数が一致する組み合せのみを使用することにした。今までにThiomerosal(Hg)誘導体を得ることができ、さらにKAu(CN)_2誘導体が有望であることを見いだした。今後KAu(CN)_2誘導体のデータ測定を行い、位相決定をおこないつつある。
急性肝不全における肥満細胞セリンプロテアーゼ(キマーゼ)の役割

マウス急性肝不全モデルを用いて肥満細胞セリンプロテアーゼ(キマーゼ)の役割を検討した。リポポリサッカライド(LPS)とD-ガラクトサミン(D-Gln)(LPS+Galn)の投与直後に肝臓のキマーゼ活性が増加した。LPS+Galn投与7時間後にMMP-9、TNF-α、MPOは増加したが、LPS+Galn投与1時間後のキマーゼ阻害薬投与でこれらは有意に低下し、生存率の有意な増加に繋がった。キマーゼは急性肝不全の発症において重要な役割を担い、その阻害薬は急性肝不全を予防した。急性肝不全における肥満細胞セリンプロテアーゼ(キマーゼ)における役割を解明するため、マウスにリポポリサッカライド(LPS)の4μg/kgとD-ガラクトサミン(Galn)の600 mg/kgを腹腔内に投与することで急性肝不全モデルを作製し、LPS+D-Galn投与後の血液および肝臓組織を解析した。また、生存率についても評価した。LPS+D-Galn投与後1時間の時点で、血液中の炎症誘発物質であるTumor necrosis factor (TNF)-αが著明に増加し、LPS+D-Galn投与後7時間の時点では血液中のASTとALTが共に有意に増加した。肝臓組織切片の解析より、LPS+D-Galn投与後3時間の時点より好中球などの炎症細胞浸潤が明らかに増加し、LPS+D-Galn投与後7時間の時点では明らかな肝細胞の壊死がびまん性に見られた。LPS+D-Galn投与後8時間より死亡する例があり、LPS+D-Galn投与後24時間の時点では生存率が15%(20匹中3匹が生存)になった。この24時間の時点で生存したマウスは、その後死亡することなく回復した。血液中の肥満細胞セリンプロテアーゼであるキマーゼの活性は確認できなかったが、肝臓組織抽出液中のキマーゼ活性は、LPS+D-Galn投与後1時間の時点から有意に増加し、7時間まで高値を示した。そして、肝臓組織中のTNF-αおよびキマーゼの遺伝子発現もLPS+D-Galn投与後1時間の時点から有意に増加していた。一方、ミエロペルオキシダーゼの遺伝子発現は、LPS+D-Galn投与後1時間では低値で3時間より有意に増加し、7時間で更に増加した。これらの結果より、LPSの4μg/kgとD-Galnの600 mg/lgを腹腔内投与することにより、急性肝不全が形成されることが確認できた。また、急性肝不全の病態解析に必要な血液よび肝臓組織中の各パラメーターの測定方法も確立できた。そして、急性化不全モデルにおいて肥満細胞セリンプロテアーゼであるキマーゼが肝臓組織中で著明に増加してくることが確認できた。平成27年度は、平成26年度に確立したマウス急性肝不全モデルを用いてキマーゼ阻害薬前投与による急性肝不全予防効果を検討した。本マウス急性肝不全モデルでは、リポポリサッカライド(LPS)の4μg/kgとD-ガラクトサミン(Galn)の600 mg/kgを腹腔内に投与した後1時間の時点で、血液中の炎症誘発物質であるTumor necrosis factor (TNF)-αが著明に増加し、肝臓組織中のキマーゼ活性も有意に増加した。肝臓組織切片の解析より、LPS+D-Galn投与後7時間より好中球などの炎症細胞浸潤が増加し、血液中ASTとALTの有意な増加を認め、肝臓組織の壊死が見られた。生存率はLPS+D-Galn投与後24時間の時点で25%(20匹中5匹が生存)であった。このモデルに対してキマーゼ阻害薬であるTY-51469の1、3、10 mg/kgをLPS+D-Galn投与前1時間に投与した。LPS+D-Galn投与した後1時間に増加してくるキマーゼ活性がキマーゼ阻害薬1、3 mg/kgの濃度では低下傾向を示したが、有意差を認めなかった。一方、キマーゼ阻害薬10 mg/kgの濃度で有意に低下した。LPS+D-Galn投与後1時間で増加したTNF-αもキマーゼ阻害薬1、3 mg/kgの濃度では有意な低下を認めなかったが、10 mg/kgで有意に低下した。LPS+D-Galn投与後1時間の時点で、キマーゼによって活性化されるマトリックスメタロプロテアーゼ(MMP)-9は増加したが、キマーゼ阻害薬の10 mg/kgでのみ有意に低下した。血液中のASTとALTもキマーゼ阻害薬の10 mg/kgで有意に抑制された。LPS+D-Galn投与後24時間の生存率は、1、3 mg/kgのキマーゼ阻害薬では有意な生存率に対する影響がなく、10 mg/kgで生存率がプラセボ群に比して有意に改善し、生存率は85%(20匹中17匹が生存)になった。これらのことより、LPS+D-Galn投与前に10 mg/kg以上のキマーゼ阻害薬を前投与することによりLPS+D-Galn投与による急性肝不全の予防効果と生存率を改善できることが示唆された。今年度は平成26年度に確立したマウス劇症肝炎モデルに対するキマーゼ阻害薬前投与による肝障害予防効果と生存率に対する影響の解析を目標とした。

急性肝不全モデルの作製には、LPSの4μg/kgとD-Galnの600 mg/kgを投与した1時間で、血液中の炎症マーカーのTNF-αをELISAにて測定し、有意に増加することが確認できた。肝臓組織中のキマーゼ活性は、キマーゼ活性測定用の合成基質にて測定した結果、LPS+D-Galn投与後1時間で有意に増加した。キマーゼにより活性化されるMMP-9もLPS+D-Galn投与後1時間で増加していた。血中のASTとALTは、LPS+D-Galn投与後7時間の時点で有意に増加した。摘出した肝臓を用いて好中球の発現指標として用いられるミエロペルオキシダーゼ(MPO)の遺伝子発現をTaqManプローブ法を用いたリアルタイムPCRにて定量した結果、LPS+D-Galn投与後7時間で有意に増加していた。また、肝臓組織切片をヘマトキシリン-エオジン染色して炎症細胞浸潤の集積と肝細胞の壊死が確認できた。また、抗MPO抗体を用いた免疫染色で有意に好中球の集積が増加していることも確認できた。キマーゼ阻害薬であるTY-51469の10 mg/kgの前投与により、LPS+D-Galn投与後1時間後のキマーゼ活性が有意に抑制された。また、キマーゼにより活性化されるMMP-9が抑制されたのはキマーゼ阻害によると考えられる。MMP-9は、細胞外マトリックスを分解し、炎症細胞浸潤を促進することより、そのMMP-9の低下が結果としてTNF-αの抑制や炎症細胞浸潤の抑制、肝障害の軽減に結びついたと考える。また、LPS+D-Galn投与後24時間における生存率もキマーゼ阻害薬前投与により有意に改善した。今年度の目標であった急性肝不全モデルに対するキマーゼ阻害薬前投与による肝障害軽減効果と生存率の改善が確認できたことより概ね今年度の目標は達成できたと考える。平成26年度にリポポリサッカライド(LPS)の4μg/kgとD-ガラクトサミン(Galn)の600mg/kgを腹腔内に投与することでマウス急性肝不全モデルを確立し、平成27年度はキマーゼ阻害薬の前投与によりLPS+D-Galn投与後の著増する血液中の炎症誘発物質であるTumor necrosis factor (TNF)-αが抑制され血液中のASTおよびALTの抑制と肝組織の壊死面積が有意に抑制されることを示した。平成28年度はリポポリサッカライドとD-ガラクトサミンの腹腔内投与後1時間にプラセボもしくはキマーゼ阻害薬(10 mg/kgのTY-51469)を背部皮下に投与して急性肝不全に対する影響を解析した。プラセボ投与群ではLPS+D-Galnの投与後1時間において血液中のTNF-αが著しく増加し、肝臓組織中のキマーゼ活性およびキマーゼによって活性化されるマトリックスメタロプロテアーゼ(MMP)-9が有意に増加した。LPS+D-Galn投与後7時間より血液中のASTとALTの有意な増加を認め、肝臓組織切片の解析より肝臓への炎症細胞浸潤(好中球)の増加と壊死面積の増大を認めた。LPS+D-Galn投与後24時間の生存率は25%(20匹中5匹生存)であった。一方キマーゼ阻害薬投与群ではTNF-αが著増し肝臓組織中のキマーゼ活性およびMMP-9活性が上昇するLPS+D-Galn投与後1時間においてキマーゼ阻害薬を投与することでLPS+D-Galn投与後7時間における血液中のASTとALTをプラセボ投与群に比して有意に抑制し肝臓への好中球の集積抑制と壊死面積の有意な減少を認めた。LPS+D-Galn投与後24時間の生存率は75%(20匹中15匹生存)でプラセボ投与群に比して有意に上昇した。これらのことより急性肝不全が惹起されたLPS+D-Galn投与後であっても発症急性期にキマーゼ阻害薬を投与することによりLPS+D-Galn投与による急性肝不全の症状を軽減し生存率の改善できること示した。
栄養評価による廃用症候群のリスク管理と機能訓練プログラム

低栄養が廃用症候群のADL予後に影響を与えるか検討した。対象は65歳以上廃用症候群の入院患者176人。リハ科併診時の栄養状態はMNA-SF(Mini Nutritional Assessment-Short Form)、BMIで評価した。ADLの予後は改善と不変・悪化の2群に分類した。MNA-SFでは153人(87%)が低栄養、23人(13%)が低栄養のおそれありで、栄養状態良好は0人であった。MNA-SFの得点が低いほどADLの予後が悪い傾向にあった(p=0.07)。BMIが低いほどADLの予後が有意に悪かった(p=0.03)。低栄養状態が廃用症候群のリハの帰結に与える影響を後向きコホート研究で検討した。対象は2006年6月から2007年3月と2008年8月から10月に当院リハ科に併診があり、リハ科医師が廃用症候群と診断した入院患者223人。低栄養状態は、併診時にBMI18.5未満、ヘモグロビン(Hb) 10g/dl未満、アルブミン(Alb) 3g/dl未満、総リンパ球数(TLC) 1200未満のいずれかに該当と定義した。リハの帰結は、併診時と退院時のADL自立度の変化で、改善もしくは不変・悪化に分類した。年齢、性別、入院から併診までの期間、併診時のBMI、Hb、Alb、TLC、小野寺の栄養学的予後指数(PNI : Alb×10+TLC×0.005)、Barthel Ihdexを評価し、これらとADLの変化との関連を検討した。平均年齢67.5歳。男性136人、女性87人。入院から併診までの中央値17日(25%値11、75%値27)。202人(91%)に低栄養状態を認めた。BMI18.5未満は56人(25%)、Hb10g/dl未満は115人(52%)、Alb3g/dl未満は163人(73%)、TLC1200未満は198人中103人(52%)に認めた。PNIは平均32.9(±7.1)で、198人中122人(62%)が35未満であった。ADLの変化は改善135人(61%)、不変・悪化88人(39%)であった。年齢(p=0.18)、性別(p=0.11)、入院から併診までの期間(p=0.71)による差は認めなかった。低栄養状態の患者は、ADLの改善が有意に悪かった(低栄養:改善118人、不変・悪化84人、正常栄養:改善17人、不変・悪化4人、リスク比2.18、p=0.04)。Hb10g/dl未満(リスク比1.82、p=0.001)、TLC1200未満(リスク比1.46、p=0.03)、PNI35未満(リスク比1.64、p=0.01)の場合、ADLの改善が有意に悪かった。BMI18.5未満(p=0.78)、Alb3/dl未満(p=0.08)は有意差を認めなかった。以上より廃用症候群の患者では低栄養状態を認めることが多く、中等度から重度の低栄養状態は廃用症候群のリハの帰結に影響を与える可能性がありリスク管理を要することが明らかになった。平成22年度は前向きコホート研究を行う。低栄養状態をMNA-SFで評価し原因を飢餓、侵襲、前悪液質に分類して、それぞれが廃用症候群のリハの帰結に与える影響を検討する。入院患者における廃用症侯群の低栄養の有無と原因を検討した。対象は2010年4月から11月に当院リハ科に併診があり、リハ科医師が廃用症候群と診断した入院患者127人。平均年齢72.6歳、男性79人、女性48人。入院から併診まで平均22日。訓練開始場所はベッドサイド73人、機能訓練室54人。リハ科併診時の栄養状態をMNA-SF(Mini Nutritional Assessment)で評価した。低栄養の原因は、飢餓(1日エネルギー摂取量がHarris-Benedict式の基礎エネルギー消費量以下)侵襲(急性疾患や手術などの有無)、前悪液質(悪液質の原因となる慢性疾患の存在、6ヶ月以内に5%以上の体重減少、慢性・再発性の全身炎症反応、食思不振の4項目全てに該当)に分類して評価した。

栄養投与経路、BMI、ヘモグロビン、アルブミン、総リンパ球数、小野寺の栄養学的予後指数(PNI)も評価した。MNA-SFでは107人(84%)が低栄養、20人(16%)が低栄養の恐れありで、栄養状態良好は0人であった。飢餓を57人(45%)、侵襲を107人(84%)、前悪液質を37人(29%)に認めた。栄養投与経路は経口摂取78人、経管栄養30人、静脈栄養80人。各平均値はBMI20.7、ヘモグロビン9.52、アルブミン2.61、総リンパ球数935、PNI30.7であった。訓練開始場所による低栄養の有無と原因の違いに有意差を認めなかった。以上より廃用症候群の入院患者の多くは低栄養で、低栄養の原因として侵襲が最も多かったが、飢餓や前悪液質も少なくなかった。訓練開始場所にかかわらず、廃用症候群のリハでは低栄養の考慮が必要である。平成23年度は前向きコホート研究のデータ分析を行う予定である。低栄養が廃用症候群入院患者のADLの予後に影響を与えるか検討する。対象は2010年4月から2011年3月に当院リハ科に併診があり、リハ科医師が廃用症候群と診断した65歳以上の入院患者176人。リハ科併診時の栄養状態はMNA-SF(Mini Nutritional Assessment-Short Form)、BMI、ヘモグロビン、アルブミン、総リンパ球数、CRPで評価した。ADLはBarthel Indexをリハ開始時と終了時に評価した。ADLの予後は改善(Barthel Index点数がリハ中に増加)と不変・悪化の2群に分類した。リハ科併診時のMNA-SF、BMI、検査値とADLの予後をマンテル検定で検討した,結果は平均年齢78.6歳、男性102人、女性74人。入院から併診まで中央値13日。併診から退院まで中央値20日。訓練開始場所はベッドサイド123人、機能訓練室53人。MNA-SFでは153人(87%)が低栄養、23人(13%)が低栄養のおそれありで栄養状態良好は0人。Barthel Indexの中央値はリハ開始時37.5点(5、57)、終了時56(26.5、77)点で、ADLの予後は改善95人、不変・悪化81人であった。MNA-SFの得点が低いほどADLの予後が悪い傾向にあったが、統計学的有意差は認めなかった(カイ2乗値3.26、p=0.07)。BMIが低いほどAPLの予後が有意に悪かった(カイ2乗値4.65、p=0.03)。ヘモグロビン、アルブミン、総リンパ球数、CRPとADLの予後には統計学的有意差を認めなかった。MNA-SFとBMIに強い相関を認めた(r=0.70、p<0.001)。廃用症候群入院患者の大半は低栄養であり、低栄養の中でもMNA-SFの得点が低いほどADLが改善しにくい可能性がある。廃用症候群ではリハと同時に適切な栄養管理の実施が重要と考える。
中世東国宗教と文芸伝承の綜合的研究―唱導、縁起、物語を視座として

東国の宗教文芸を解明する上で重要な安居院唱導資料の研究のうち、特に歴博本『転法輪鈔』については共同で翻刻と解題作成を行い、国立歴史民俗博物館の研究報告書にまとめることができた。その過程で重要な研究対象となった『融通念仏縁起』の研究は、国内外で諸本調査を積み重ね、鎌倉時代後期の正和本から、南北朝・室町時代の良鎮による勧進本の成立と展開の諸相を明らかにするとともに、勧進状絵巻としての比類無い独創性を解明し、その成果を国内外に広く発信することができた。中世の宗教文芸・寺社縁起の体系のなかで重要なジャンルをなす融通念仏縁起について、資料の採訪調査ならびに分析的研究を進めることができた。融通念仏縁起は、これまで主に美術史研究の側から研究が進められてきたが、そこに文学研究の研究方法を導入し、絵巻の成立と展開に関する重要な特色を本文の分析的研究からうかびあがらせた。それを通して、絵巻の制作が、南北朝から室町時代にかけての公武政権と、絵巻制作の中心にいた勧進聖良鎮との巧みな連携のもとにあったことを、絵巻そのものから明らかにし得たことは、中世における融通念仏の社会的意義の解明の上からみても大きな意義があった。その研究成果は、説話文学会50周年記念シンポジウム(6月、立教大学)において、招待発表として報告を行った。また、本研究課題を通して得た研究の成果は、学会のみならず市民向けの公開シンポジウムや講演会のかたちで、地域社会に発信することもできた。たとえば平成25年2月には、伊豆山神社で、新出の御神影を紹介し近世における伊豆山権現復興の歴史について報告した。その活動は地元新聞にも取り上げられ、紹介されている(熱海新聞)。さらに、名古屋市博物館で催された「大須観音展」(平成24年12月1日平成25年1月14日)では、イラストレーターと協同し、子供向け冊子を刊行することができた(『かのんちゃんとまめおにくんと行く大須観音の宝物ガイド』)。これは、名古屋市博物館並びに真福寺大須文庫調査研究会に集う国文学、歴史学、仏教学、思想史研究者との連携研究の成果を文化創造・表現活動の域にまで到達させた試みとして、特筆しておきたい。今年度は、『融通念仏縁起』絵巻に関する調査と研究が中心になった。前年度の米国シカゴ美術館蔵の調査(正和本上巻)に引き続き、米国クリーブランド美術館にて正和本下巻を精査したほか、大念仏寺蔵義尚本、吉井家蔵俊直本について調査を行った。また関連資料として、理圓『融通念仏勧進状』(恩頼堂文庫本、津・西来寺蔵本、三千院円融蔵本)の調査を開始したほか、『融通大念仏亀鐘縁起』絵巻(大阪・西光寺本、大念仏寺本)の調査も行った。更に、正和本に関連する絵巻作品として東京国立博物館蔵『不動利益縁起』の調査も行った。これらをもとに融通念仏縁起絵巻の成立と展開について探究を深め、融通念仏運動における画期をなす正和本絵巻の成立意義を多面的に示すため、論文「結縁する絵巻」(加須屋誠編『図像解釈学』)「中世メディアとしての融通念仏縁起絵巻」(説話文学会編『説話から世界をどう解き明かすのかー説話文学会設立50周年記念シンポジウム[日本・韓国]の記録』)を発表した。また融通念仏宗総本山大念仏寺において講演を行い、資料集『融通念仏縁起絵巻の成立と展開』を編集・配布して、研究成果の社会還元にも努めた。米国イリノイ大学での国際研究集会に参加し、宗教とパフォーマンスという視点から融通念仏縁起と能「百万」との関係について報告を行い、新たな知見を得ることができた。唱導・物語に関しても研究を進め、安居院唱導資料『上素帖』研究の展開としての歴博本『転法輪鈔』関白家仏事に関する研究成果は、26年度刊行の報告書に掲載される予定である。また正和本『融通念仏縁起』絵巻と説話絵巻である『不動利益縁起』絵巻の引用関係の再発見から、絵巻を介した縁起と説話の交流について、美術史学と共同して東京国立博物館において研究集会を開催し、報告を行った。このほか、涅槃講式の研究や念仏行者の事蹟の追跡など、宗教文化の研究を多方面に展開した。本年度は、中世宗教文芸の探究の上で重要なテクストの分析的研究を進めた。1,安居院唱導文献の研究歴博本『転法輪鈔』について、国立歴史民俗博物館との共同研究(「中世における儀礼テクストの綜合的研究」H2022、代表阿部泰郎)をもとに、研究メンバーと研究を進め、翻刻・解題・論考原稿を作成し、平成24年度中の公刊態勢を整えることができた。またその経験を金沢称名寺聖教『上素帖』の本文データの作成に生かすことができた。2,中世宗教文芸の研究

真名本『曽我物語』の宗教的基盤をなす伊豆・箱根二所権現の縁起研究では、研究成果を学術論文として公刊するだけでなく、平成23年9月サンクト・ペテルブルグ東洋大学において「日本文化・古典文学サマーセミナー」を共同開催し「絵巻で見る温泉の神様」と題しワークショップを行ったり、平成24年1月山北町(神奈川県)の文化講演会で講演を行うなど、国内外において成果発信と社会教育活動につとめることできた。そのうち伊豆山神社での活動(画家・書道家との協同による平成の縁起絵巻の制作奉納(「走湯山秘訣絵巻」の詞書の文を作成)及び縁起についてのレクチャー等)は、熱海新聞(H23.9.20、H24.2.21)と伊豆毎日新聞(H23.9.20)、静岡新聞(H23.11.27)に紹介されている。また、『融通念仏縁起』の研究は、「大画面説話画の総合研究」(代表佐野みどり)の共同研究との相乗効果により、自らの研究を大きく推進することができた。具体的には、美術史、歴史学研究者との連携のもとで国内外での調査研究が進んだうえ、平成23年5月ロンドン大学(SOAS)での国際研究集会や、平成24年3月シカゴ美術館での原本調査に伴う研究報告など、国内外で研究発表を行い、着実に成果を積み重ねている。本年度は、科研期間中に蓄積を重ねた『融通念仏縁起絵巻』の調査と研究の成果を踏まえての綜合的研究に取り組んだ。その集大成として、10月にアメリカ・ハーバード大学で開催された「人類の思想的営みとしての宗教遺産の形成に関する総合的研究」研究成果報告シンポジウで発表を行った。その際、土台となる資料や論文をまとめた資料集(A4版80頁)を作成し、最新の研究成果を国内外の研究者に提供しつつ、本絵巻が日本における特筆すべき宗教遺産であることを提示して、高い評価を得ることができた。これを経て3月に再びハーバード大学を訪れ、ハーバード大学美術館本『融通念仏縁起絵巻』の調査と研究報告を行ったほか、学習院大学で開催された国際シンポジウム「Frames and Framings in a transdisciplinary perspective枠、枠組みの文化論ー」でも発表を行い、融通念仏縁起絵巻の成立と展開を中世社会における勧進という行為から問いなおす試みを行った。『融通念仏縁起絵巻』の研究は、安居院唱導資料『上素帖』の研究を通じて行った中世東国宗教と文芸伝承の綜合的研究のなかで最優先課題として浮上したものである。諸本調査を含む綜合的研究は、本絵巻の成立と展開をめぐる運動全体について、あらたな知見と課題を見いだすことに繋がり、従来定説化していた重要伝本の位置付けを見直す契機となり、想定していた以上の成果を得ることができた。また共同で取り組んできた国立歴史民俗博物館蔵『転法輪鈔』の研究ならびに富士市博物館所蔵六所家資料のうち旧東泉院聖教の悉皆調査の成果は、『国立歴史民俗博物館研究報告』(2015年刊行予定)と富士市博物館編『六所家総合調査報告書聖教』(2015年3月)に結実した。これらの成果は、唱導や縁起が生成し機能する宗教儀礼空間の解明において重要で、今後継承発展させたい。人文学(日本中世文学)本研究の中核をなす、安居院唱導資料の研究は、歴博本『転法輪鈔』の分析的研究をはじめ順調に進んでいる。特筆すべきは、『上素帖』の研究を通して見いだされた『融通念仏縁起絵巻』の研究の進展である。その成果は説話文学会シンポジウムで報告を行ったほか、広く社会に発信するための論文化を積み重ねることができた。それらは平成25年度には説話文学会50周年記念論集や美術史論集等において刊行される予定である。諸本調査の成果も蓄積されつつある。
80種類のさわれる体験型簡単科学実験を理科教育の好奇心向上に活用する方法の研究

目的:理科教育への関心の低さは、幼少時の科学的原体験の不足と感じて、子ども達の科学的好奇心を触発させる80種類もの、興味と驚きに満ちた実験を体得することで、何故だろう、不思議だな、よく見てみようと言う科学的素養を身に付け、学校教育における理科教育への好奇心の向上を目的とした研究。(1)新潟長岡市、木造校舎、生徒数24名の中野俣小学校の長い廊下に常設のミニエクスプロミュージアムを子供たちと一緒に製作し完成させた。(2)明治図書の理科教師向け月刊雑誌「楽しい理科授業」表紙裏グラビアページに「理科室を子供のミュージアムにしよう」とミニエクスプロ実験の製作方法を毎月2頁連載掲載した。(3)大分県豊後高田市桂陽小学校で開催。到着前に小学校教諭らだけで8割の実験を展示用意できた。隣の宇佐市教育委員会も視察来校。さらに1か月間理科室に展示し学校子供サイエンスミュージアムになった。全校生徒のアンケートの絵で抜群の科学吸収力が確認できた。(4)湯河原中学では中学生30人が理科室ミュージアムの設営にも協力した。さらに1ヶ月間第2理科室はサイエンスミュージアムを継続した。中学生が科学への関心を取り戻した。(5) 8月韓国光州での韓国科学の祝典に6日間参加。科学工作4種類を4千人に指導した。10種類のミニエクスプロ実験も好評だった。韓国では小中学生が先生役にもなっている。(6)平成13年信州大学農学部の学生9人と始めた60種類の手つくり実験ミュージアムであるが、7年ぶり開催が農学部になったので進化した100種類の実験で4千人に開催した。(7) 1989年ソニーエクスプロラトリアム展での65種類の実験を元にした子供が製作できる実験普及活動であるがその原点、サンフランシスコのエクスプロラトリアムを活動メンバーと共に6日間、Bartels館長、Dr.Kua氏、ベテランのSteve氏ら8名のスタッフと科学実験ノウハウを交換できた。未発表の実験を数多く紹介された。地域の教諭への理科実験教育なども把握した。館常設700種類の実験からもノウハウ獲得できた。日本の子供の科学に役立てられる実験ヒントを多く得られた。こちらからは子供達との状況をビデオ紹介した。
マクロライド抗生物質の線維芽細胞に対する影響についての検討

線維芽細胞は外来受診時あるいは手術時に摘出した鼻茸より分離培養した。6人の患者は術前に薬物治療は受けていなかった。他の6人は術前にロキスロマイシン(RXM)300mg/dayを一ヵ月間服用していた。またRXM一ヵ月間投与前後で同一患者より鼻茸を採取し線維芽細胞を単離した。実験には46継代の線維芽細胞を使用した。術前に薬物治療されていない6人の患者の鼻茸から単離した6種類の線維芽細胞をRXM(1,5,25,50μg/ml)とともに72時間培養し,RXMの線維芽細胞増殖能に対する直接の影響を検討した。次に術前にRXM治療を受けた鼻茸から単離した線維芽細胞と未治療の鼻茸から単離した線維芽細胞の増殖能の差を検討した。さらに同一患者のRXM治療前後に採取した鼻茸それぞれから単離した線維芽細胞の増殖能の比較を行った。線維芽細胞の刺激には血清を用いた.増殖力の指標としては細胞増殖曲線と^3H-thymidineの取り込みによるDNA合成能で評価した。RXMは血清刺激に対する線維芽細胞の増殖を量依存的に抑制した。マクロライドを一ヵ月間使用された鼻茸から分離された線維芽細胞は,マクロライド未使用の鼻茸の線維芽細胞と比較して増殖能が低下していた。マクロライドが線維芽細胞の増殖能に対して抑制効果を示したことは気道病変の線維化の過程を抑制する可能性が示唆される。
膀胱癌の腫瘍マーカーの検索および遺伝子治療

本研究は膀胱腫瘍に対する新規腫瘍マーカーの発見を目的としている。実験は(1)候補遺伝子の抽出(2)候補遺伝子の絞込み(3)候補遺伝子の検討の作業から成り立っており、昨年度はまず(1)の候補遺伝子の抽出を行なった。候補遺伝子抽出の方法としは遺伝子を網羅的に解析することが可能であるマイクロアレイ法を使用することにした。前年度の検討で、尿中から採取したRNAでは量・純度ともにマイクロアレイ解析に供することが困難であると考えられたので、候補遺伝子を絞り込むための陰性コントロールとして正常者の膀胱洗浄液を用いて検討したところ、解析可能量のRNAを抽出することが出来た。そこで、膀胱腫瘍の細胞株であるRT4、T-24を陽性コントロール、正常患者の膀胱洗浄液から採取したRNAを陰性のコントロールとしてマイクロアレイ解析を施行した。解析はaffymetrix社のHuman Genome Focus Array(8500遺伝子)を用いた。現在までに、陽性コントロールで発現し、陰性コントロールで発現していない遺伝子を選択し125の候補遺伝子を選択することができた。候補遺伝子の中で2つの具体例を挙げると、すでに膀胱腫瘍の尿中腫瘍マーカーとして有用であると報告されているautocrine motility factor receptorや腫瘍マーカーとしての検証はなされていないものの、すでに膀胱腫瘍での増幅が知られ悪性度や浸潤度にも関与しているといわれているMYC遺伝子も候補遺伝子として選択されてきており、今後その他123遺伝子の検討を行なうことにより新しい尿中腫瘍マーカーが発見できるものと考えている。実験は(1)候補遺伝子の抽出(2)候補遺伝子の絞込み(3)候補遺伝子の検討の作業から成り立っており、本年度はまず(1)の候補遺伝子の抽出を行うことを目標とした。候補遺伝子抽出の方法としては遺伝子を網羅的に解析することが可能であるマイクロアレイ法を使用することにした。まず陽性コントロールである膀胱腫瘍の細胞株(T24,RT-4)を培養しRNA抽出を施行した。また陰性コントロールとして使用する正常者の尿からのRNA抽出を試みた。尿中の正常細胞数は非常に限られており、また大量の溶媒に溶解しているためにRNA抽出は可能であり、RT-PCR法にてβactinが十分に検出することは可能であることから、今後の候補遺伝子の検討の作業で行う予定であるRT-PCRによる遺伝子の検討が行えることが確認できたが、マイクロアレイ解析を行うには十分な量のRNAを抽出することができなかった。検体の量を増やすなどの工夫を行ったがやはり十分量のRNA抽出はできず今後、良性泌尿器科疾患で手術を受ける患者から洗浄にて膀胱からの尿を採取しより多くの細胞数を得られるようにする予定である。洗浄により膀胱内から多くの細胞を採取することが可能になると同時に、尿ではなく洗浄液である生理食塩水を溶媒とするためにRNA抽出の効率も上がり、より純度の高いRNA抽出が行えるものと考えられる。
超高精細動画像信号の高圧縮可逆符号化に関する研究

本研究では静止画像の可逆符号化方式として原理的に優れた方式であるマルコフモデル符号化を動画像信号の符号化に適用する際の問題点を明らかにし,これを解決することにより,超高精細動画像信号の高圧縮可逆符号化方式を開発した。具体的には,従来の手法に加え,動き補償予測ベクトルも利用してマルコフモデル符号化の参照画素を決定し,高圧縮可逆符号化を実現した。本研究では,マルコフモデルを用いた超高精細動画像信号の高圧縮可逆符号化についての検討を行っている。研究初年度である本年度は,超高精細動画像信号に対してマルコフモデル符号化を適用する際に解決しなければならないいくつかの問題点を明らかにし,これらの課題のうち以下の4点について検討し,その解決を図った。課題1.膨大な計算量,処理の高速高機能化,膨大な必要メモリ空間の必要性による実現の困難性課題2.マルコフテーブルがスパースになることによる統計量ベース符号化の困難性課題3.初期テーブルの設定問題とマルコフテーブルの動的構成化問題課題4.マルコフモデルエントロピー実現のためのエントロピー符号構成の問題まず,課題1.は,本研究申請者らが参画している,本学における重点推進研究テーマである「次世代アプリケーションのための高性能計算機システム」における研究課題にもなっており,超並列処理,自己最適化,演算高速化による解決を検討した。この問題については,次年度の継続課題でもある。課題2.は,符号化画素数に比べ,コンテキストの出現可能種類数が多いことから生じる問題であるが,超高精細動画像信号を対象にした場合には統計ベース符号化が成立する可能性が高くなることを明らかにした。さらに,同一シーンの間は,各状態の要素の集中度は大きくなることが予想され,マルコフモデル符号化の実現可能性は静止画像の場合に比べはるかに高くなることが考えられることから,統計的性質を調査しマルコフモデル符号化の実現可能性を明らかにした。課題3および課題4については,われわれがこれまで静止画像の可逆符号化問題で培ってきた知見をベースに問題点を明らかにし,その解決策を提案した。具体的には,算術符号の動的適応化を検討し効率の高い符号を提案した。本研究では,超高精細動画像信号の高圧縮可逆符号化の検討を行った。本年度は研究期間の最終年度であり,前年度に検討し明らかにした課題について解決策を図るとともに,超高精細動画像信号に対する高圧縮可逆符号化方式としてマルコフモデル符号化(MMC)を用いた方式の実現可能性を明らかにした。以下,本研究で明らかにした点について述べる。1.膨大な計算量,処理の高速高機能化,膨大な必要メモリ空間の必要性の問題:この問題については,本研究申請者らが参画している,本学重点推進研究テーマである「次世代アプリケーションのための高性能計算機システム」における研究課題にもなっており,超並列処理,自己最適化等による解決を検討した。2.マルコフテーブルがスパースになることによる統計量ベース符号化の問題:これは,符号化画素数に比べ,コンテキストの出現可能種類数が多いことから生じる問題であるが,超高精細動画像信号を対象にした場合には統計ベース符号化が成立する可能性が高くなることを明らかにした。さらに,同一シーンの間は,各状態の要素の集中度は大きくなることが予想され,MMCの実現可能性は静止画像の場合に比べはるかに高くなることが考えられることから,統計的性質を調査しMMCの実現可能性を明らかにした。3.マルコフテーブルの初期設定問題と動的構成化およびエントロピー符号構成の問題:符号化の実現にあたっては,マルコフテーブルの初期設定および符号構成が大きな問題となるが,算術符号の動的適応化を検討し効率の高い符号を提案した。上記の考えのもとに実画像について符号化シミュレーションを行い,開発した方式の性能を評価した。なお,動画像シーケンスに対する符号化シミュレーション実験は必ずしも十分とは言い難く,この研究課題について今後も,継続して研究を進めていく予定である。
ES細胞の心筋細胞分化過程における心筋特異的GATA4複合体の解析

(1)GATA4結合蛋白の機能解析前年度、同定したGATA-4結合蛋白73個のうち、特にP-TEFbに着目した。P-TEFbはCdk9とCyclin Tという2つのサブユニットからなり、そのキナーゼ活性により転写伸長を促進する。まず最初に、GATA-4/p300とCdk9/Cyclin T1の結合を確認するために、上記GATA-4発現HeLa細胞およびMockのHeLa細胞それぞれから核蛋白を抽出し、免疫沈降-ウエスタンブロットにて結合の確認を行った。次にGATA-4/p300による心筋特異的遺伝子ET-1、ANFの活性化に対するCdk9/Cyclin T1の役割を検討するために、CDK9のドミナント・ネガティブ体(DN-CDK9)およびCDK9の阻害剤であるDRBを用いて、転写活性をルシフェラーゼ活性にて測定したところ、この転写活性の亢進は、DN-CDK9およびDRBにより用量依存的に抑制された。さらに、p300によって活性化されるGATA-4のアセチル化をDN-CDK9およびDRBは抑制した。CDK9による心筋細胞分化における役割を検討するために、TSA刺激にてES細胞を心筋細胞分化する系にDRBを加えて検討を行った。TSAを用いる事によりマウスES細胞は8%心筋細胞に分化するが、DRBを投与するとその分化は有意に抑制された。結論以上より、ES細胞から心筋細胞への分化の過程において重用な役割を果たしているGATA-4/p300の新たな結合蛋白CDK9/Cyclin T1がその転写活性を亢進し、心筋分化に関与していることが示された。今後、GATA-4/p300-P-TEFb経路をターゲットとして、心筋細胞分化方法の開発につながる可能性が示された。(1)マウスES細胞における心筋分化に関するGATA4複合体の精製心筋細胞分化におけるES細胞内の心筋特異的転写因子GATA4の機能的コンプレックスの精製を目的として、N末あるいはC末にFLAG-HAの二重タグの付いたマウスGATA4のcDNAをレトロウイルスを用いてES細胞に発現させることに成功した。しかし、ESが未分化を維持するためにはサイレンシングなどの機構により、蛋白レベルを調節していることはよく知られているが、その詳細なメカニズムは不明である。この未知のメカニズムのために、細胞を継代していくうちにGATA4の発現量が減少していき、GATA4複合体を精製するには、十分量なタンパク量を得ることができず、現在、誘導をかけてGATA4をES細胞に発現させる方法などを検討している。(2)GATA4結合蛋白の機能解析GATA4複合体を網羅的に解析するために、FLAG-HAの二重タグの付いたマウスGATA4のcDNAをレトロウイルスを用いてHeLa細胞に発現させ、核蛋白を抽出した。その後、FLAGとHAの抗体をもちいて、GATA-4複合体のタンデム・アフィニティー精製をおこない、結合蛋白をCBB染色にて確認した。マススペクトメトリーと蛋白データーベースから、GATA4複合体を構成する蛋白を網羅的に解析し、73個の結合蛋白を同定した。現在、興味有る結合蛋白の発現量、GATA4との結合の変化、心筋細胞特異的マーカーの発現や心筋特異的転写因子(βミオシン重鎖、エンドセリン1、ANP(Aタイプ利尿ペプチド)など)のプロモーターの転写活性の変化をルシフェラーゼアッセイにて測定している。結合蛋白の野生型やさまざまな変異体のリコンビナント蛋白を昆虫細胞や大腸菌を用いて作成中で、その結合が直接的なものか他の因子を必要とするかを検討し、ドメインマッピングも行う予定である。(1)GATA

4結合蛋白の機能解析前年度、同定したGATA-4結合蛋白73個のうち、特にP-TEFbに着目した。P-TEFbはCdk9とCyclin Tという2つのサブユニットからなり、そのキナーゼ活性により転写伸長を促進する。まず最初に、GATA-4/p300とCdk9/Cyclin T1の結合を確認するために、上記GATA-4発現HeLa細胞およびMockのHeLa細胞それぞれから核蛋白を抽出し、免疫沈降-ウエスタンブロットにて結合の確認を行った。次にGATA-4/p300による心筋特異的遺伝子ET-1、ANFの活性化に対するCdk9/Cyclin T1の役割を検討するために、CDK9のドミナント・ネガティブ体(DN-CDK9)およびCDK9の阻害剤であるDRBを用いて、転写活性をルシフェラーゼ活性にて測定したところ、この転写活性の亢進は、DN-CDK9およびDRBにより用量依存的に抑制された。さらに、p300によって活性化されるGATA-4のアセチル化をDN-CDK9およびDRBは抑制した。CDK9による心筋細胞分化における役割を検討するために、TSA刺激にてES細胞を心筋細胞分化する系にDRBを加えて検討を行った。TSAを用いる事によりマウスES細胞は8%心筋細胞に分化するが、DRBを投与するとその分化は有意に抑制された。結論以上より、ES細胞から心筋細胞への分化の過程において重用な役割を果たしているGATA-4/p300の新たな結合蛋白CDK9/Cyclin T1がその転写活性を亢進し、心筋分化に関与していることが示された。今後、GATA-4/p300-P-TEFb経路をターゲットとして、心筋細胞分化方法の開発につながる可能性が示された。
インターネットにおける口コミ効果の国際比較

本研究は、インターネットから消費者発信情報を収集してデータベース化し、消費者発信情報と製品・サービスの市場における実績との関係を定量的に把握する方法論の確立を目指した。日米国際比較研究の面では、共通指標化を可能にする日英判別辞書の作成という難題を克服できず、研究は継続中である。しかし、日本市場におけるスマートフォン・アプリに関する研究においては、浸透度、安定度・セキュリティー・リスク、ダウンロード数予測、相補的・相殺的関係抽出アルゴリズム等に関して新たな知見を拓き、実用研究として優れた成果を挙げた。また、開発された方法論を、全く異なる分野のビッグ・データ解析に適用し、その有効性を実証した。本研究では、1)デジタルカメラ、2)映画、3)スマートフォンの応用ソフト、という3つの市場を対象に、e-WoMを具体的に収集した上でデータベース化し、データマイニング・判別アルゴリズム・統計的手法等、多様な分析道具を用い、e-WoMと製品・サービスの市場実績との関係を定量的に把握する新たな方法論の確立を目指している。1)と2)に関しては、情報収集、分析方法論の確立、日米比較分析の研究が進められており、本年度中に論文として纏め、国際学会での発表を目指している。3)に関しては、研究は順調に進められており、昨年度中に、メインテーマに沿った論文として3本、分析手法の確立に関連する論文3本を執筆し、すべて国際学会での発表が予定されている。本研究は、1)デジタルカメラ、2)映画、3)スマートフォン・アプリという3つの市場を対象に、e-WOM (e-Word-of-Mouthインターネット上の口コミの意)を具体的に収集してデータベース化し、データマイニング・判別アルゴリズム・統計的手法等、多様な分析道具を用いて解析し、e-WOMと製品・サービスの市場における実績との関係を定量的に把握するための方法論の確立を目指すプロジェクトとして展開されてきた。1)2)に関しては、前年度までに成果を挙げて多くの論文発表を行ってきており、また、3)に関するデータが豊富に入手できる環境が整ったこともあり、当該年度では、特にスマートフォンの応用アプリの研究に力を入れた。2本の論文を学術論文誌へ投稿した結果、その出版が受託され、また、4本の論文の査読付き国際学会論文誌への出版・発表を実現した。これらの論文において、a)各デバイスに対し、スマートフォン・アプリが少なくとも一度はダウンロードされたか否かに関する月次時系列バイナリー・データを蓄積し、b)直近6カ月のバイナリー・ベクトルを構造化することにより、成熟型、成長型、衰退型、変動型、等に類型化し、c)浸透度、安定度、ユーザーにとっての情報潜在リスク等を指標化し、d)各指標の間の関係を統計的に解析する方法論を確立した。また、ARIMAモデルとマルコフ連鎖を組み合せたダウンロード数を予測するアルゴリズムを開発し、多くのスマートフォン・アプリに対して相対誤差を小さく抑えることに成功した。さらに、スマートフォン・アプリXをダウンロードするYもそうする傾向にあるといった相補的関係、逆にXをダウンロードするとYを消去するといった相殺関係を表現する指標を確立し、多くのスマートフォン・アプリ間の関連相関図を抽出するアルゴリズムも開発した。本年度は、本研究の最終年度に当たり、昨年度までに達成された成果を、より一般的なビッグデータに対して適用し、その有効性を検証することを目指した。具体的には、前年度までに、1)デジタルカメラ、2)映画、3)スマートフォン・アプリという3つの市場を対象に、それぞれの代表的なSNSからe-WOMを具体的に収集してデータベース化した上で、データマイニング・判別アルゴリズム・統計的手法等、多様な分析道具を用いて解析し、日米を中心とする国際比較分析を行うと同時に、e-WOMと製品・サービスの市場における実績との関係を定量的に把握するための方法論を開発した。本年度は、その成果を踏まえ、協力企業から入手した家設備(バスタブ・トイレ・サッシ等)市場の実データに基き、1)営業分析、2)コールセンターで集積されるVOC(Voice Of Customers)の内容分析、3)ホームページのアクセスログ分析、の3つをテーマとするビッグデータ解析に取り組んだ。成果としては、6本の論文を執筆し、そのうちの3本の論文は査読付き国際学会論文誌への出版・発表を実現し、残りの3本も査読付き国際学会論文誌に投稿中である。営業分析では、どのような製品の組合せをどのように営業要員を配置して販売すれば売上を向上させると同時に失注を防げるかを主要テーマとし、VOC分析では、独自の単語・文章のスコア化アルゴリズムを開発、売上に結びつく潜在可能性の高いVOCとネガティブな内容を持つVOCを高い確度で自動抽出するアルゴリズムの開発に成功した。アクセスログ分析では、ページアクセスの経路分析を通してコンバージョンに結びつくアクセスの特徴を把握するアルゴリズムを開発した。全体として、前年度までに開発されたプロファイル・ベクターに基づく多様なビッグデータ解析ツールが、他のデータに対しても有効であることを実証した。