hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
MEMS展開のためのマイクロスケール熱流動科学の構築

マイクロスケールにおいては,流体が連続体であると仮定して展開されてきた既存のマクロスケール伝熱技術をそのままで適用することはできない.本研究は,マイクロ流路を対象とし,代表寸法が小さくなることに伴う流体の希薄化とそのような条件下での複雑流れ場を理論的・数値解析的および実験的に検討し,その熱流動特性を明らかにすることを目的としている.実験的には,管径に比して流路長さが長いマイクロチャネルをシリコン基板をエッチングすることにより,また,流路長さが比較的短いマイクロスケールノズルを放電加工により作成し,それらを通過する流れの圧力損失と流量を測定する事により流動特性について検討した.特に本年度はマイクロチャネルにドライエッチングを複数回行うことにより,チャネル底面に規則的な凹凸面を作成し,これが流動場に与える影響について検討した.これは,凹凸面でチャネル表面粗さを模擬することを試みるものである.その結果,凹凸の高さが増すほど摩擦定数の値が大きくなる一方で,凹凸の流れ方向の幅が摩擦定数に与える影響は小さいことなどが明らかになった.数値解析的には,既存の有限体積法によって支配方程式を数値的に解く計算プログラムを利用した検討を昨年度に引き続いて行うと共に,本年度は新たにDSMCによる計算プログラムを作成し,これを上記の実験に対応する凹凸壁面を有するチャネルについて適応した.計算資源の制約から計算は現象の二次元性を仮定して行ったが,摩擦定数に対する凹凸部高さと幅の影響に関しては,実験結果と定性的に一致する結果が得られた.またこれとは別に差分による直接数値解析(DNS)プログラムを作成し,壁面にすべり境界条件を課したチャネル乱流の計算を昨年度に引き続き行った.クヌッセン数の増大に伴い壁面でのすべり速度が大きくなると壁面近傍における主流方向とスパン方向の乱れ強さはともに大きくなるが,その影響が大きい領域は壁面近くに限定されることなどがわかった.マイクロスケールにおいては,流体が連続体であると仮定して展開されてきた既存のマクロスケール伝熱技術をそのままで適用することはできない.本研究は,マイクロ流路を対象とし,代表寸法が小さくなることに伴う流体の希薄化とそのような条件下での複雑流れ場を理論的・数値解析的および実験的に検討し,その熱流動特性を明らかにすることを目的としている.実験的には,管径に比して流路長さが長いマイクロチャネルをシリコン基板をエッチングすることにより,また,流路長さが比較的短いマイクロスケールノズルを放電加工により作成し,それらを通過する流れの圧力損失と流量を測定する事により流動特性について検討した.特に本年度はマイクロチャネルにドライエッチングを複数回行うことにより,チャネル底面に規則的な凹凸面を作成し,これが流動場に与える影響について検討した.これは,凹凸面でチャネル表面粗さを模擬することを試みるものである.その結果,凹凸の高さが増すほど摩擦定数の値が大きくなる一方で,凹凸の流れ方向の幅が摩擦定数に与える影響は小さいことなどが明らかになった.数値解析的には,既存の有限体積法によって支配方程式を数値的に解く計算プログラムを利用した検討を昨年度に引き続いて行うと共に,本年度は新たにDSMCによる計算プログラムを作成し,これを上記の実験に対応する凹凸壁面を有するチャネルについて適応した.計算資源の制約から計算は現象の二次元性を仮定して行ったが,摩擦定数に対する凹凸部高さと幅の影響に関しては,実験結果と定性的に一致する結果が得られた.またこれとは別に差分による直接数値解析(DNS)プログラムを作成し,壁面にすべり境界条件を課したチャネル乱流の計算を昨年度に引き続き行った.クヌッセン数の増大に伴い壁面でのすべり速度が大きくなると壁面近傍における主流方向とスパン方向の乱れ強さはともに大きくなるが,その影響が大きい領域は壁面近くに限定されることなどがわかった.
アウタースペース／インナースペース／インタースペース・アートの美学

理論研究/事例研究に分けて説明する。理論研究:1生命・自然班/2映像班/3知覚・脳科学班のうち、1生命・自然班については、8月開催の研究報告会においてバイオ/メディア/アートの結びつきをめぐり、戦後の言説的系譜を取りまとめ、以後、メディア論を軸にしながら、引き続き最新の言説の整理へ向かう方向と、逆に生物学の起点(19世紀初頭)へ向かう方向の可能性が議論された。2映像班では、同じく8月の報告会で、宇宙映画を素材にしながら無重力を重力下で表象化する方法について議論を行なった。3知覚・脳科学班では、8月の報告会では宇宙服のもたらす知覚の問題について議論をし、3月の報告会では、宇宙空間で視点を喪失する状態から逆に地上での幽体離脱的な反重力的視点を捉え直す議論を行ない、さらに2009年に開催の『宇宙と美術と人体と』展の作家へのインタビューをもとにした報告を素材に議論を進めた。また、本科研メンバーの真下/森によるドローンを使った作品制作の経過報告についても脳科学の観点から意見を交換した。なお、生命自然班では、定期的に(年4回)バイオアートとメディア論に関する言説整理と文献消化の作業も行い、その一部を翻訳出版するプランも立ち上がっている。事例研究では、8月に早稲田の先端生命医科学センターおよびBioClub、筑波宇宙センターでの調査を行い、それぞれの分担者がオーストラリアのバイオアーティスト、オロン・カッツのラボ視察、アルスエレクトロニカの巡回展、佐賀宇宙科学館などの視察を行い、上記の研究会で意見交換を行った。西オーストラリアのSimbioticAでの学会には岩城・増田がそれぞれバイオアート、スペースアートについて報告を行い、各国の研究者と意見交換を行った。生命・自然班、映像班、知覚・脳科学班のうち、今年度明確になったのは、以下のポイントである。映像班と知覚・脳科学班の連携のための結節点は、第一に、重力/無重力表象であるが、一方で現在の最新の撮影装置を使用した映画をめぐる考察と、他方でVRを素材にしたアーティストによる地上での重力および視点の分裂性をめぐる考察を引き続き各々検討していく必要のあることがわかった。生命・自然班については、第一に、さらに言説を遡及的に検討していく必要があり、自然哲学から生物学が分岐する地点に照準することが今後の作業の上で不可欠であることが判明した。第二に、宇宙生物学や宇宙生命科学との結節点を見出すためには、生命一般に議論を拡大し、対象を網羅するよりも前に、限界生物を中継地点として考察を今後進めていく必要のあることがわかった。事例研究としては、各関係機関(バイオアートおよびメディアアート関連)を調査しているが、バイオアートについてはアートフェスティバルで短期間展示されることもあり、タイミングよく視察する難しさがあったが、各国で開催される展覧会およびシンポジウム情報を交換することで引き続き調査に当たりたい。また、無重力の視覚を実際に作品制作のプロセスを素材にしながら議論することが各分担者にとってきわめて有意義であった。基本的には当初の計画に基づき進めていくが、3つの班をどのように収斂させていくかを計画よりも具体化しなければならない論点はある。1生命・自然班については、一方で生物学の起点から現在を捉えなおす作業に着手していくが、他方で、3との宇宙生物学/宇宙生命科学との交差点となる具体的な生物事例を巡っての議論、同時に人間を中心に据えた宇宙での無重力環境下での環境形成と脳科学や知覚(論)との議論を行う必要がある。2映像班は、これまでと同様、宇宙表象を見る体験から議論する枠組みを構築していくが、他方で、アートの実践へとこうした枠組みをつないでいく議論も、同時に必要になってくると思われる。以上のプランをすべて同時進行で進めていくが、今年度前半には、1の生物学の起点に、2の宇宙表象としての映画に、3の宇宙環境下の論点に力点を置く(生物事例についても意見交換を行う)。年度後半には、それぞれの収斂点の進度を考慮しながら、相互につながる三つほどの結節点を明確にしたい。なお、作品制作のプロセスが年度を通じて進行させ、適時コメントや議論を行いながら、最終的には何らかの形で展示および講評を行いたい。以上、中規模以上の研究集会を2回、それ以外にもその準備報告会を数回開催し、作業を進めていくことにしている。理論研究:1生命・自然班/2映像班/3知覚・脳科学班のうち、1生命・自然班では、バイオアートおよび宇宙生物学/宇宙生命科学の成果を蓄積・集約する作業を行った。2映像班は、6月に日本映像学会共催シンポジウム「宇宙×映像」(6月3日、於神戸大学)を開催し、JAXAからの関係者も招聘し、宇宙を見る技術と映像の根本的な関わりを検討し、いくつかの論点を提起した。また、1月には映像研究者(渡邉大輔)と美術批評家(土屋誠一)を研究会に招き、広くモビリティーズ(移動性)という観点から写真映像の帯びる問題を検討した(1月27日、於神戸大学)。3知覚・脳科学班では、11月の定期的な会合で2と3の接続可能性を検討するとともに(11月26日、於同志社女子大学)、1月には重力に関する身体感覚をめぐる作品制作の展覧会(「between:connection in sensory space」、1月7日21日、於ARTZONE)とそれに関するトーク

イベント(「ー6°:地上で体感する宇宙」(司会:松谷容作、登壇者:古賀一男、真下武久)を開催し、また同じ1月にはフランスから『アートマシーン』編者でも知られるアンヌ・ソバニャルグを招き、メディアとアートに関する議論を行った。さらに研究代表者および研究分担者の5名(岩城、増田、岩崎、松谷、前川)が海外の研究会で関連する成果の報告や講演を行っている。事例研究:各研究会・学会に応じて資料を恒常的に蓄積し、これを整理する作業を行い、宇宙開発技術に関わる関係機関への視察も行った。そのうち代表的なものが、第一に種子島宇宙芸術祭、種子島宇宙センターほか(鹿児島県種子島(10月))であり、第二に飛行士記念館、全ロシア博覧センター、冷戦博物館地下シェルター、Marsセンターほか(ロシア・モスクワ(3月))である。2映像班では、観測技術の系譜と映像研究を交差させることに十分な意義が見いだせることが6月開催の日本映像学会シンポジウムで明らかになった(司会:前川、登壇者:古賀一男(北野圭介×畠山宗明×細馬宏通、柳川孝二))。もちろん、引き続き映像の視覚経験と重力経験(平衡感覚)との関わりを掘り下げていく必要もある。次のステップとして3知覚班との接続可能性を検討する準備も順調に進めている状況である。1生命班・自然班では、宇宙生命科学/宇宙生物学(アストロバイオロジー)の成果の検討と、生命概念の系譜学的検討というふたつの作業領域を順調に進めているところである。ただし、生命概念・生物概念に、具体的に切りこむための現象をもう少し精査してあらためて照準する必要があることも明らかになった。3知覚・脳科学班については、まずは有人宇宙実験の成果の集約を行い、それを踏まえて実際に身体への重力の作用を変数とする作品を展示、考察することができた(作品制作も視野に入れた展開は今後も続ける予定である)。3を1と接続する準備も進めているところである。3つの班のうち、1生命・自然班での資料のさらなる検討と整理、焦点の先鋭化がもっとも急がれる課題である。それ以外はきわめて順調に展開している。理論研究/事例研究に分けて説明する。理論研究:1生命・自然班/2映像班/3知覚・脳科学班のうち、1生命・自然班については、8月開催の研究報告会においてバイオ/メディア/アートの結びつきをめぐり、戦後の言説的系譜を取りまとめ、以後、メディア論を軸にしながら、引き続き最新の言説の整理へ向かう方向と、逆に生物学の起点(19世紀初頭)へ向かう方向の可能性が議論された。2映像班では、同じく8月の報告会で、宇宙映画を素材にしながら無重力を重力下で表象化する方法について議論を行なった。3知覚・脳科学班では、8月の報告会では宇宙服のもたらす知覚の問題について議論をし、3月の報告会では、宇宙空間で視点を喪失する状態から逆に地上での幽体離脱的な反重力的視点を捉え直す議論を行ない、さらに2009年に開催の『宇宙と美術と人体と』展の作家へのインタビューをもとにした報告を素材に議論を進めた。また、本科研メンバーの真下/森によるドローンを使った作品制作の経過報告についても脳科学の観点から意見を交換した。なお、生命自然班では、定期的に(年4回)バイオアートとメディア論に関する言説整理と文献消化の作業も行い、その一部を翻訳出版するプランも立ち上がっている。
世界石油産業の現段階-「スーパー・メジャーズ」の形成とその歴史的意義について

本研究は,世界石油産業の現段階の構造と特質を探ることを目標として,そのための作業の一部を試みた。検討対象,分析範囲等を大きく限定し,スーパー・メジャーズとして最大企業のエクソンモービル社を対象として,1990年代初頭から2003年末までのアメリカのメキシコ湾の大水深海域,旧ソ連邦諸国,西アフリカにおける原油と天然ガスの生産活動を考察した。研究から得られた結論は以下の通り。第1に,これら新規進出の地域・海域での活動は,2003年までには原油の生産に結実した。エクソンモービル社の今後の生産を持続可能とするひとつの基本条件を構成したと考えられる。第2に,大水深と呼ばれた深海域での活動は,1990年代初頭頃からの原油と天然ガスの探鉱,開発技術などの飛躍的な発展に支えられ,かつこれと相伴って進展した。第3に,旧ソ連邦での活動は,油・ガス田の存在がすでに明らかな地域・海域を対象として事業を開始することで試掘に伴うリスクの回避を図った。第4に,西アフリカは,カスピ海とその周辺域とともにやがて北海に代替するヨーロッパ市場向けの有力生産拠点として位置づけられており,2003年頃までにはこれに応える成果が見られた。第5に,本研究が対象とした諸地域・海域は,巨額の事業費を要した。エクソンモービルは費用の削減,投資の回収にむけて多くの努力や工夫を試みた。最後に,エクソン社にとってモービル社を買収したことが,これら新開地域・海域での活動を飛躍させる契機となった。本年は本研究の初年度であり,1998年以降の企業合同(「スーパー・メジャーズ」の形成)の先鞭をつけたBP社,および「スーパー・メジャーズ」の中で最大企業の位置にあるエクソン・モービル社を対象として,基本資料の収集と分析を行った。その結果,以下の諸点を主たる要点として挙げることが出来る。(1)BP社とアモコ・アルコ両社との合同(BPp.1.c.の形成),およびエクソン社とモービル社との合同(エクソン・モービル社の形成)の最も重要な目的は,ともに原油および天然ガスの生産事業(upstream)の強化に求めることが出来よう。(2)BP社の場合,1990年代に入り,中東などの産油国,旧ソ連邦などが,自国の石油・天然ガス資源の開発,生産に外国資本の導入を図ったことが合同に向かう一つの大きな背景要因になったと考えられる。国際石油資本の中では企業規模等で中位・下位に属した同社は,他社との合同によって事業規模,資金力などを一挙に拡充し,これら地域での利権(鉱区)獲得競争に応える主体的な条件の強化を図ったのである。(3)1990年代初頭頃から,油田・天然ガス田の探索,開発,生産に技術面で大きな飛躍があり,国際石油資本にとって,鉱区の選択的な取得と活用が戦略的な重要性を獲得したことである。BP,エクソン両社は,鉱区の将来性,採算性に対する科学的な評価能力の向上を踏まえて,将来性の低い既存の鉱区を大胆に処分する一方,他社との合同によってより有望な鉱区の取得を図ったのである。(4)1990年代末以降ほぼ同時期に大規模合同が展開した自動車産業,鉄鋼業,金融業などと同様に石油産業の場合も,事業の相互補完の実現,相乗効果(シナジー)の追求などが合同を促す共通要因となった。経済のグローバル化と世界的な規模での競争の深化が、従来の単独での活動に転機を促したものと思われる。本年度は,世界石油産業界の主導企業エクソン社(1999年末以降はエクソンモービル社)の活動を,前半期に1920年代初頭から1960年代末まで,後半期には1990年代について,それぞれ検討した。前者については,これまでの研究と合体し,2004年2月に公刊した著書『ニュージャージー・スタンダード石油会社の史的研究-1920年代初頭から60年代末まで』(北海道大学図書刊行会,

全体486頁)にその成果を結実させた。本書では,第1に,1970年代初頭以降のエクソン社(1972年まで社名はニュージャージー・スタンダード石油)によるヴェネズエラ,中東・北アフリカでの原油と油田の支配権の喪失について,これを招来せしめた要因のひとつが同社の1960年代末までの投資行動それ自体に胚胎されたこと,第2に,1970年代初頭ないし前半以降になされた同社による事業規模の量的拡張路線からの転換について,1960年代における西ヨーロッパ,日本などアメリカ以外の主要製品市場での低収益,欠損がその歴史的要因になったこと,などを明らかにした。本年度後半期の1990年代についての研究では,エクソン社の原油と天然ガスの生産事業(Upstream)について分析した。同社によるモービル社の買収は,原油と天然ガスの発見費用の削減に大きな成果をもたらした。エクソン社の1999年の発見費用は年平均で1バレルあたり(天然ガスについては石油に換算)1.2ドルであったが,買収後の2000年には65セントへほぼ半減し,その後も低下をたどった。この要因のひとつは,エクソン社が鉱区の選択的な活用,つまりモービル社の買収により鉱区全体が一挙に拡大したことを踏まえ,より優良な地域での探索に活動を重点化させたことに求められるであろう。なお、本年度も昨年に引き続きアメリカの国立公文書館において資料(主として国務省所管文書)の収集を行った。本年度は,まず,6月25日にイギリス経営史学会・全国大会(ノッティンガム大学)において"Standard Oil Company(New Jersey)in the U.K.market from the end of World War II through to the end of the 1960s"を報告し,第2次大戦終了以降1960年代末までのイギリスにおけるニュージャージー・スタンダード石油会社(1972年末以降エクソン社,1999年末以降はエクソンモービル社)の活動を検討した。その主たる要点は,第1に,同社の在英子会社エッソ石油による戦後活動の主要な特質の一つが,石油製品の流通機構の再編成・刷新にあったこと,第2に,1960年代半ばまでエッソ石油が発電用重油の最大の販売企業と考えられ,如上の流通機構の改革がその優位性を支えた要因の一つであったこと,である。次に,1990年代初頭から今日までのエクソン社(エクソンモービル社)の原油と天然ガスの生産事業を分析した。その要点は以下の通り。第1に,90年代初頭における同社の主要な生産拠点は北アメリカとヨーロッパであり,これが今日においてもなお基本的に維持されている。第2に,しかし,90年代に旧ソ連邦,西アフリカが同社の新たな生産拠点に組み込まれ,特に後者の西アフリカ(ナイジェリア,赤道ギニアなど)での原油生産は急進展を遂げた。近い将来,西アフリカは原油ではヨーロッパ(北海)を凌ぐ拠点へ転ずるものと考えられる。第3に,これら新興の生産拠点における生産増は,1999年のモービル社の買収によって可能となった面が大きく,エクソン社はこれら地域における他の国際石油資本に対する劣勢をモービル社の買収によって打開したと考えられる。第4に,大水深海域(今日は水深500m以深)での探鉱,開発,生産の成功が90年代初頭以降の重要な特徴である。アメリカのメキシコ湾,西アフリカにおいて顕著な進展があった。
酵母チアミン応答と代謝制御ネットワークの情報伝達機構解析

酵母S.cerevisiaeのチアミン生合成や取り込みに関与する酵素群(THI genes)の発現はチアミン欠乏下で誘導される(THI調節系)-。本調節系の細胞内シグナルはチアミンピロリン酸(TPP)であり、3種のタンパク質Thi2p、Thi3p、Pdc2pがTHI genesの発現に必要な調節因子として同定されている。Thi2pとPdc2pはDNA結合活性を持つことが示唆され、Thi3pはTPPセンサーとしての役割も持っている。本研究では、各調節タンパク質の機能を解析し、酵母がチアミンに応答して転写制御するまでの情報伝達経路を決定することとを目的としている。前年度の結果から、Pdc2pには転写活性化活性とThi3pと結合する活性が存在し、いずれの作用もチアミン欠乏条件下で上昇することが明らかになった。そこで、種々の領域が欠失したPdc2pタンパク質を作製し、Pdc2pの機能領域の同定を試みた。その結果、Pdc2p(926aa)の407-581aaが転写活性化領域、581-889aaがThi3pとの相互作用に必要な領域であることが酵母one-hybrid法ならびにtwo-hybrid法によって示唆された。また、Pdc2pの転写活性化活性thi3破壊株で低下したが、Thi3pとの相互作用領域を除くとこのthi3欠損による影響は消失した。さらに、組み換えPdc2p(407-581)とPdc2p(407-926)タンパク質に唯一存在するTrp-450残基の蛍光を利用したアクリルアミドによる消光減衰実験では、582-926aa領域が除かれることでTrp-450が溶媒に接触しやすくなることが観察された。以上より、Thi3pと結合することでPdc2pの構造変化がおこり、その転写活性化領域がタンパク質表面に露出するものと考えられた。酵母S.cerevisiaeのチアミン生合成や取り込みに関与する酵素群(THI genes)の発現はチアミンが欠乏すると誘導される(THI調節系)。Thi2pとPdc2pはDNA結合活性を持っことが示唆され、Thi3pはTPPセンサーとしての役割も持っている。また、Thi2pとThi3pは複合体を形成し、その相互作用はTPPによって減少する。一方、Pdc2pは解糖系酵素ピルビン酸デカルボキラーゼ遺伝子PDC1、PDC5の発現にも関与している。本研究では、各調節タンパク質の機能とそれに及ぼすTPPの影響を解析することで、酵母がチアミンに応答して転写制御するまでの情報伝達経路を決定することとを目的としている。先ず、ADH1プロモーターを5'上流に配置したPDC1遺伝子を染色体に組み込ませることでPdc2p非依存的にPDC1を発現する株を予め作製し、次いでPDC2遺伝子を破壊した。このpdc2欠損株でのTHI2およびTHI3の発現誘導は消失することがプロモーター活性の測定で示された。しかし、pdc2破壊株でTHI2、THI3を同時に強制発現させても、THI調節系遺伝子であるPH03の酸性ボスファターゼ活性は誘導されなかった。また、two-hybrid法でThi3pはPdc2pとも結合することが検出された。

その相互作用はThi3p-Thi2p間のそれよりも10倍強く、しかも培地のチアミンでより鋭敏に阻害された。また、pull-down法でもThi3pとPdc2pの結合を確認した。以上の結果より、これら3種の調節因子は複合体を形成して酵素遺伝子群の発現を誘導し、その相互作用はThi3pに結合したTPPによって阻害されることが示唆された。酵母S. cerevisiaeのチアミン生合成や取り込みに関与する酵素群(THI genes)の発現はチアミン欠乏下で誘導される(THI調節系)。本調節系の細胞内シグナルはチアミンピロリン酸(TPP)であり、3種のタンパク質Thi2p、Thi3p、Pdc2pがTHI genesの発現に必要な調節因子として同定されている。Thi2pとPdc2pはDNA結合活性を持つことが示唆され、Thi3pはTPPセンサーとしての役割も持っている。本研究では、各調節タンパク質の機能を解析し、酵母がチアミンに応答して転写制御するまでの情報伝達経路を決定することとを目的としている。前年度の結果から、Pdc2pには転写活性とThi3pと結合する活性が存在し、いずれの作用もチアミン欠乏条件下で上昇することが明らかになった。そこで、種々の領域が欠失したPdc2pタンパク質を作製し、Pdc2pの機能領域の同定を試みた。その結果、Pdc2p(926aa)の407-581aaが転写活性化領域、581-889aaがThi3pとの相互作用に必要な領域であることが酵母one-hybrid法ならびにtwo-hybrid法によって示唆された。また、Pdc2pの転写活性はthi3破壊株で低下したが、Thi3pとの相互作用領域を除くとこのthi3欠損による影響は消失した。さらに、組み換えPdc2p(407-581)とPdc2p(407-926)タンパク質に唯一存在するTrp-450残基の蛍光を利用したアクリルアミドによる消光減衰実験では、582-926aa領域が除かれることでTrp-450が溶媒に接触しやすくなることが観察された。以上より、Thi3pと結合することでPdc2pの構造変化が生じ、その転写活性化領域がタンパク質表面に露出するものと考えられた。
偽文書からみた日本近世社会の合意形成と心意統治システム

本年度は、年度当初に計画した実施計画に基づき、以下のような調査・研究をおこなった。(1)まず、科研費の旅費を活用して、全国各地において史料調査を実施し、基礎資料となる古文書を採訪した。調査を実施したのは、長野県長野県立歴史館・東京都東京大学史料編纂所・東京都国立公文書館内閣文庫・東京都国立国会図書館古典籍資料室、岡山県成羽町図書館、松江市である。(2)調査方法は、大学図書館や博物館、史料保存機関では、古文書の閲覧と必要史料の複写を依頼し、データ収集に努めた。個人の所蔵者宅では、古文書の現状記録作業と目録編成、必要史料のマイクロ撮影、デジタル情報の収集作業をおこなった。(3)つぎに古文書の画像情報を、科研費で購入したデジタルカメラにデジタル化し、パーソナルコンピュータに入力した。こうして構築したデータベースを基礎に、古文書の真偽鑑定を試みた。主にデーベース化の作業をおこなったのは、戦国大名武田氏や徳川氏の印判状の、印鑑および筆跡に関する情報である。(4)鑑定の結果、いわゆる偽文書が作成される経緯・目的・作成時期について様々な情報を得ることができた。とくに国立国会図書館や東京大学史料編纂所の調査では、画像処理した印鑑の比較検討から偽文書作成の時代性を明らかにすることができた。以上の成果をもとに、いくつかの学術論文を公表した。調査を実施したのは、長野県長野県立歴史館・山梨県山梨県立図書館甲州文庫・山梨県南都留郡河口湖町三浦雄家文書・東京都東京大学史料編纂所・東京都国立公文書館内閣文庫・岡山県岡山大学附属図書館池田家文庫・宮城県東北大学附属図書館狩野文庫である。(4)鑑定の結果、いわゆる偽文書が作成される経緯・目的・作成次期について様々な情報を得ることができた。とくに山梨県立図書館の調査では、画像処理した印鑑の比較検討から、偽文書が山梨県内の人間が、19世紀の初頭におこなったことが判明した。また偽文書作成業者を2名ほど発見することができた。(5)以上の成果をもとに、いくつかの学術論文を公表した。
回転クライオスタットによる量子液体の実験研究

本研究は平成2年度より3カ年計画で、ミリケルビンの超低温領域で量子液体に制御された回転運動を与える回転クライオスタットを建設し、これを用いて量子液体特有の性質を研究しようとするものである。この種の装置は我が国では初めて建設されるものであり、限られた時間と予算で成果を上げるべく研究課題と技術的特徴とを検討した(H2年度)。即ち、研究対象として多孔質媒体中の超流動薄膜を選び、単量子渦の生成に必要な10^<-4>rad/secから充分な渦密度を実現する6.2rad/sec以上の回転角速度を安定に実現するよう設計を進めた。初年度、仕様策定から物性研地階にビットを掘り電磁シールドを施し、この内部に特注仕様の回転機構の備え付けまでを行った。次いで回転機構を支える空気ベアリングのための圧搾空気系を整備し、回転機構の調整を行うと共に回転稀釈冷凍機の製作に第2年度に取り掛かり、第3年度周辺気体分配盤及びポンプ類の設備を完成させた。本年この様に大がかりなプロジェクトではあるが初期の仕様を達成し、現存する世界の回転クライオスタットの中で最高の回転速度を冷凍機の連続運転中に実現した。引き続き低温での精密実験の準備を行なっている。また、多孔質中のヘリウム薄膜について理論的検討を進め、2次元多孔質で作った弱接合で位相がnπ(n:integer)だけ変化する事を見出した。これは3次元弱接合での2nπの位相変化に対比させられる。この様な系を実験的に実現するための多孔質ガラス膜の作成とそのメゾスコピックな加工について検討を進めた。本研究はミリケルビン以下の超低温で量子液体に回転運動を与える回転クライオスタットを建設し、これを使って渦の量子化など量子液体特有の性質を研究しようとするものである。本年度は,多孔質ガラス表面につくった単原子層以下の液体^4He薄膜の超流動転移の孔径依存性の研究が白浜らによって捻り振子法を使って進められHe薄膜の渦対の相関長についての知見がまとまった(文献1、2)。これはHe薄膜の超流動弱接合を考案する上で重要な知見である。一方、回転状態で作動する希釈冷凍機を建設する上で重要な、新しいタイプの希釈冷凍機技術の開発が大幅に進展した(文献3,4)。こうした知見をもとに超低温での回転クライオスタットによる実験を成功させるための主要な設備の設計を行った。これにはまず物性研究所A棟地下に装置を設置するための営繕工事(大型ピット、約3.2m*2m*2m一部3.5m)を行い、その完成後にこれに合わせて回転クライオスタットの設計をする必要があった。80dBの電磁シ-ルドル-ムも床ピットに合わせて製作設置した。回転機構についても様々な角度から技術的検討を行った。長さ約1mの回転軸を2つの高精度空気ベアリングで支え、この下部にクライオスタットを吊り下げる形式とした。回転駆動にはエンコ-ダ-を内蔵したダイレクトドライブ(DD)モ-タ-を用い高精度の回転速度コントロ-ルを可能とした。また計測装置のいくつかはクライオスタットの上部に位置し、同期して回転する独立な円盤上に置かれ、その出力がスリップリングを通して静止系に取り出される。大幅に削られた予算のため回転状態で働く希釈冷凍機は次年度に自作することになる。本研究はミリケルビン程度以下の超低温までの温度領域で、量子液体に制御された回転運動を与える回転クライオスタットを建設し、これを使って量子化した回転流など量子液体特有の性質を研究しようとするものである。本年度は、実験サイドでは初年度に設置した空気浮上精密回転機構のミクロン精度での芯出し調整と、回転状態で作動する希釈冷凍機用のヘリウム3循環回路の建設を行うと共に、冷凍機本体の製作を進めた。

まず高精度を活かすため電気系統や空調等実験環境の整備を行い、空気浮上回転機構の運転と調整のためには4001/minの空気圧縮機及び空気清浄化装置系を設置した。回転状態で漏れのないヘリウム3ガスの循環回路をつくるネックは、回転真空シ-ル部である。当初Oリングによるシ-ルを試みたが必要なトルクが大きくなり過ぎて高精度の空気ベアリングの特性が活かせなくなる恐れが見い出され、磁気シ-ルへの変更を検討している。回転制御機構のコントロ-ルに使用する計算機を科学研究費で購入した。冷凍機本体などはすべて自作である。一方研究の対象となる多孔質中のヘリウム薄膜の超流動について、理論、実験の両面から検討を進めている。多孔質硝子中のヘリウム薄膜の臨界速度、量子化する渦の絶対値、を多孔質硝子を液体ヘリウムで満たした場合と対比させることによって、また、孔径を広範囲に変えることによって2次元と3次元を結ぶ超流動現象を解明したい。(文献参照)本研究は3カ年計画でミリケルビンの超低温域で、量子液体に制御された回転運動を与える回転クライオスタットを建設し、これを用いて量子液体特有の性質を研究しようとするものである。最終年度である本年度は、実験サイドでまず、自作の回転稀釈冷凍機本体を完成させ、静止架台での試験を行い、約20mKまでの性能を調べた。H4年(1992年)秋季低温工学会にて上野がこの結果を報告。引き続きこれまで整備してきた回転架台に冷凍機本体を設置。室温で0-0.1rad/secの滑らかな回転のテストを行うと共に最初の実験として、制御された多孔質中の、4He薄膜の超流動実験の準備を進めている。これはこれまでの研究発表(論文)にあるように、捻り振り子法によって求まった超流動転移温度TCが2次元渦対の相関長によって決まっている事が明らかとなったのに対して、"それでは多孔質中の薄膜3次元性はどこに現れるのだろうか?"と、制御された巨視的な回転流を制御された多孔質の中に作り、臨界流速の測定からこの手がかりを得ようとするものである。現在回転稀釈冷凍機に捻り振り子をセットし、調整を行っている。この実験を成功させるには、低温運転中の光空間伝送(デーテ通信用に複数のパソコン使用)など、実験の進行と共に解決しなければならない課題が未だ残されており、これらを一つづつ解決してゆかなければならない。理論サイドでは多孔質媒質中の4He薄膜の超流動の二次元相関長と3次元秩序の関連を微視的に解明しつつある。(論文)
プロテインホスファターゼ2CによるMAPキナーゼ系の制御機構

研究目的細胞の増殖、分化や細胞死に関わるシグナル伝達の制御機構の解明を目的に、COS7細胞での発現システムを用いて、MAPK(ERK,JNKおよびp38)システムに対するPP2Cの影響について検討した。方法と結果COS7細胞内での共発現システムを用いた実験により、アニソマイシン処理や、NaCl処理によるp38の活性化が、PP2CalfaまたはPP2C beta-1の発現により抑制されることが判明した。次に、ERKの上流のMKK1、JNKの上流のMKK4およびp38の上流のMKK3、MKK6の活性化に対するPP2Cの影響を調べたところ、PP2CalfaとPP2C beta-1は、血清刺激によるMKK1の活性化には影響を与えなかったが、ストレス処理によるMKK4、MKK3およびMKK6の活性化を抑制した。また、PP2Cのドミナントネガティブ型の発現はMKK3,MKK4およびMKK6のリン酸化をさらに冗進させた。考察PP2Cの作用がJNKおよびp38システムに特異的であること、および、PP2Cのドミナントネガティブ型の発現がMKK3,MKK4およびMKK6のリン酸化をさらに亢進させたことから、PP2CがSAPKシステムの生理的な制御因子とし機能することが示唆された。我々は既に、PP2Calfaが特異的に細胞内でリン酸化されること、および、PP2C betaが誘導性のプロモーターによって発現制御を受けることを明らかにしており、これらの事から、PP2C自身も上位からのシグナルを受けつつ、下流のSAPKシステムの制御に関わっているものと考えられる。
大腸菌染色体分配機構:染色体特定領域の細胞周期依存的な挙動の解明

原核細胞の染色体DNAは複製後に娘細胞へと正確に分配されている。本研究では蛍光in situハイブリダイジェーション(FISH)法を用いて染色体上の特定のDNA領域、複製起点と複製終点領域が細胞分裂時に細胞内でどのように挙動しているのかを初めて明かにすることができた。複製起点領域は分裂直後の細胞では核様体の一端に局在していた。複製起点領域は複製後に倍加するとそのコピーの一つが反対側の核様体の端に移動した。移動後は細胞が分裂する間、それぞれの複製起点領域は核様体の端に局在する。一方、複製終点領域もまた分裂直後の細胞では核様体の一端に局在していた。二重標識方法によって複製起点、複製終点領域の細胞内の分布を同時に観察したところ、新生細胞では複製起点、複製終点領域は常に対局して核様体のそれぞれの端に位置していた。原核細胞内においても細胞分裂周期に応じた特定の染色体領域の動的な局在化が見られることから、原核細胞独自の染色体分配装置があるものと考えられる。さらに大腸菌の染色体上、約240kbp間隔毎の染色体DNA領域を蛍光in situハイブリダイゼーション法のプローブとして用い、それぞれの染色体領域が細胞分裂周期の間にどのような細胞局在性を示すか明らかにした。約1Mbpに渡る染色体領域はよく似た細胞内局在性を示した。染色体複製起点を含む領域では、染色体複製起点に代表されるような局在性を示す。一方、環状の大腸菌染色体上で複製起点とは対称に位置する複製終点を含む約1Mbpの染色体領域においても、やはりこの広範囲な領域で終点領域に特徴的な局在性があることがわかった。これらの結果から原核細胞の環状染色体は順序よく、遺伝子のならびにしたがって折りたたまれているらしいこと、また折たたまれた染色体には複製起点または終点領域を含む2ヶ所の機能ドメインがあり、これらが局在性や移動にかかわることが明らかになった。染色体の逆位変異の実験結果からも複製起点と終点領域がそれぞれ次の独自の局在機構を持つことが示唆された。本研究では蛍光insituハイブリダイジェーション(FISH)法を用いて染色体上の特定のDNA領域、複製起点と複製終点領域が細胞分裂時に細胞内でどのように挙動しているのかを初めて明かにすることができた。複製起点領域は複製後に倍化するとそのコピーの一つが反対側の核様体の端に移動した。また、最寄りの細胞の長軸極からそれぞれの複製起点領域までの距離は細胞長に関らず細胞分裂の間はほぼ一定の距離に保たれていることを明らかにした。細胞分裂周期の進行の伴い複製終点領域は核様体の端から細胞の真ん中へと移動する。そして、染色体DNAが完全に倍化してから最後にそれぞれの娘細胞へと分かれていく。

このため、分裂面に近い核様体の端には複製終点領域が局在し、反対の核様体の端には複製起点が位置することになる。したがって新生細胞で分極化した核様体をもっているということである。以上のように原核細胞内においても細胞分裂周期に応じた特定の染色体領域の動的な局在化が見られることから、原核細胞独自の染色体分配装置があるものと考えられる。また大腸菌染色体上の複製起点の近くには染色体分配に関してシスに機能する領域、すなわちセントロメアに相当する領域が存在していることが今回の結果から強く示唆される。さらに複製終点付近にもまたその局在化に関与する領域が存在するものと考えられる。大腸菌の染色体上、約240kbp間隔毎の染色体DNA領域を蛍光in situハイブリダイゼーション法のプローブとして用い、それぞれの染色体領域が細胞分裂周期の間にどのような細胞局在性を示すか明らかにした。約1Mbpに渡る染色体領域はよく似た細胞内局在性を示した。染色体複製起点を含む領域では、染色体複製起点に代表されるような局在性、すなわち複製後にすみやかに細胞のそれぞれの端に移動し細胞分裂が完了するまでそこに局在する。一方、環状の大腸菌染色体上で複製起点とは対称に位置する複製終点を含む約1Mbp染色体領域においても、やはりこの広範囲な領域で終点領域に特徴的な局在性があることがわかった。これらのことから原核細胞の環状染色体は順序よく、遺伝子のならびにしたがって折りたたまれているらしいこと、また折たたまれた染色体には複製起点または終点領域を含む2ヶ所の機能ドメインがあり、これらが局在性や移動にかかわることが明らかになった。染色体の逆位変異により終点領域が複製起点に近接した変異株が分離されている。この株における複製起点、終点領域の細胞内局在性を調べ、終点領域は複製起点領域とは別にこの領域に特異的な細胞内局在性をとることを明らかにした。このことからも終点領域に独自の細胞内移動と局在性にかかわる機構があることが実証された。おもしろいことに、この逆位変異株では20数%という高頻度で無核細胞が出てくる。分裂直前の細胞で複製起点が分裂面(細胞中央)に位置するといった異常な局在性がみられ、一方の娘細胞に染色体DNAが偏って他方は無核であった。これはこの変異株で複製起点と終点領域がそれぞれ独自の局在性をとったとき、逆位の結果短くなった複製起点と終点領域の間の染色体領域が折れたたまれ縮み、この力により複製起点または終点領域が引きもどされたためと考えられ、これもまた、複製起点と終点領域がそれぞれ次の独自の局在機構を持つ結果によるものと思われる。
象牙芽細胞の分化におけるエピジェネティック制御機構の解析

象牙質は骨と同様の細胞外基質を分泌するものの、骨のようにリモデリングが生じな点で大きく異なる。象牙質に症状が現れる先天性疾患の理解や、歯の再生医療を現実化させるためにも、象牙芽細胞分化に関わる分子機構の解明は重要である。しかし、象牙芽細胞の分化に関わる分子機構はいまだ明らかにされていない。本研究は、エピゲノムが象牙質の形成と維持に果たす役割を明らかにすることを検討した。その結果、エピジェノミックな修飾に関与する塩化リチウムが象牙芽細胞の分化に影響を及ぼすこをと明らかにした。この所見は、治療・再生医療への基盤となることから、学術的なだけでなく臨床的にも非常に意義が大きい。歯の先天性欠如や形成不全の原因を解明し、将来的には歯の再生医療を実現していくために、象牙芽細胞の分化機構の詳細を知ることは非常に重要である。象牙芽細胞は、歯原性上皮との上皮間葉相互作用によって分化誘導されることが知られているが、それのみならず、周囲の微細環境によって複雑に制御されているため、いわゆるゲノム遺伝子によってコントロールされる機序だけではなく、細胞外部の環境変化等がゲノム遺伝子発現自体を変化させるエピジェネティクス(塩基配列に左右されない後天的な遺伝子発現制御)について着目した。まず、マウス象牙芽細胞様株mDP細胞を培養し研究に使用した。培養日数に従って、未分化な細胞から分化した細胞へ形質転換する際に、DSPP、AXIN2をマーカーとしてこれらの発現が最も亢進するステージを探索した。分化を誘導するファクターとしては、リチウムクロライドおよびクロレートを使用した。歯の先天性欠如や低形成の原因を解明し、再生医療を実現するためにも、象牙芽細胞分化の分子機構の解明は重要である。象牙芽細胞の分化は歯原性上皮との間で生じる上皮間葉相互作用によって空間的、時間的に極めて精密に制御・維持されていることが大きな特徴である。細胞はゲノムDNAの塩基配列で規定された情報をもとに分化・増殖し、機能を果たす。しかしながら、上皮間葉相互作用を介し、細胞の足場や細胞周辺の微小環境で複雑に制御される象象牙芽細胞の分化を、ゲノムの塩基配列のみから説明をすることは困難である。そこで、本実験では、塩基配列によらない、細胞外部の環境変化等の後天的な遺伝子発現制御機構であるエピゲノムに着目するという発想に至った。一方、histone deacetylase (HDAC)を阻害すると、象牙芽細胞の分化が制御されることは知られている。最近、塩化リチウムはhistone deacetylaseを阻害することが報告されていることから、塩化リチウムが象牙芽細胞の分化に及ぼす影響をin vivoでも検討を行った。その結果、塩化リチウムを投与すると象牙芽細胞の分化が促進することが明らかになり、エピジェネティックな修飾が象牙質形成に関与する間接的な所見を得た。Faire法によるエピジェネティック修飾の解析から、予想した結果が得られていない。実験条件を変更しなければならない。一方、最近、塩化リチウムが象牙芽細胞分化にin vivo, in vitroの両方で、影響することを見出した。一方、この塩化リチウムがHDACを制御することから、塩化リチウムがHDACを制御して象牙芽細胞分化を制御する可能性を示す所見が得られた。象牙質に症状が現れる先天性疾患の理解や、再生医療における歯の再生を現実化させるためにも、特に象牙芽細胞分化に関わる分子機構の解明は重要である。しかし、その分子機構の多くは依然明らかにされていない。象牙芽細胞の分化には、歯原性上皮組織と神経堤由来歯原性間葉組織の間で生じる上皮間葉相互作用を介した細胞周囲の微小環境が非常に重要であり、細胞固有の安定した形質維持は、ゲノムの塩基配列に規定されずエピジェネティックな遺伝子制御が重要な役割を果たしていると考えられる。本研究は、歯髄幹細胞の維持と象牙芽細胞分化におけるエピジェネティック修飾の動態を解析し、エピゲノムが象牙質の形成と維持に果たす役割を明らかにすることを目的とした。

当初の予定通り象牙芽細胞様株mDP細胞を培養し、分化誘導と遺伝子発現の解析は行ったが、FAIRE法でオープンクロマチン領域の解析を行うには至っていない。Faire法による解析では、現在のところ予想した結果が得られていない。その場合は、昨年度、見出いた、塩化リチウムがHDACを介したエピジェネティックな影響を検討する。矯正歯科学mDP細胞培養の手順には習熟し、分化誘導をスムーズに行う条件も明らかとなった。今後はエピゲネティクス解析に移行して、象牙芽細胞分化に関わる新たな遺伝子発現について解析を進める。試薬購入時に安価なものに変更したため少し誤差が生じた。来年度の試薬購入に組み入れる予定である。
慢性甲状腺炎に伴う自己免疫性橋本脳症の臨床免疫学的検討

慢性甲状腺炎(橋本病)に伴い,自己免疫的機序で様々な精神・神経徴候を呈する疾患が橋本脳症として近年注目されている.本研究代表者らは,本疾患に特異的な診断マーカー(抗NAE抗体)を見出し,初めて血清による診断が可能となった.現在までに, 1350件以上の解析を行い,臨床・免疫学的特徴を明らかとし,早期診断と治療に寄与してきた.また,この抗体を含む血清や髄液が及ぼす小脳のシナプス伝達やプロテオーム(蛋白質)の変化などの病態を明らかとした.慢性甲状腺炎(橋本病)に伴い,自己免疫的機序で様々な精神・神経徴候を呈する疾患が橋本脳症として近年注目されている.本研究代表者らは,本疾患に特異的な診断マーカー(抗NAE抗体)を見出し,初めて血清による診断が可能となった.現在までに, 1350件以上の解析を行い,臨床・免疫学的特徴を明らかとし,早期診断と治療に寄与してきた.また,この抗体を含む血清や髄液が及ぼす小脳のシナプス伝達やプロテオーム(蛋白質)の変化などの病態を明らかとした.平成21年度は,慢性甲状腺炎に伴う自己免疫性橋本脳症の臨床スペクトラムを明らかにすることを目的とし,国内外より多数例の橋本脳症の症例の集積と橋本脳症の診断マーカーである抗NAE抗体,臨床徴候・検査所見・画像情報の収集・解析を行った.(a)多数症例の臨床像と免疫学的背景の検討:平成21年度は,総数249件,学内15件,学外232件,海外2件の抗NAE抗体の解析を行い,解析数の累積総数は700件を超し,橋本脳症の詳細な臨床・免疫学的特徴を解析した.世界的にも最も橋本脳症の症例の情報が集積していると考えられる.(b)血清希釈法により自己抗体の力価も新たに検討し,臨床病型や治療との関連を検討した.(c)臨床スペクトラムの解析結果:多数症例の解析から,抗NAE抗体陽性脳症で頻度の高いものとして,(1)亜急性に発症,(2)意識障害,幻覚・妄想などの精神症状を呈する,(3)脳波の徐波化がみられる,(4)免疫療法に良好な反応性を有する,ことが特徴として判明した.また,自己抗体の力価の解析から急性脳症型では5120倍20480倍の高力価群と,320倍1280倍の低力価群が存在する傾向がみられた.さらに,失調型は急性脳症型と比較して有意に高力価である傾向が認められた(p<0.05).以上の結果をもとに,症例を今後も集積することによって,新たな橋本脳症の臨床診断基準が設定され,早期診断・治療に結びつく.慢性甲状腺炎に伴う自己免疫性橋本脳症の症例を国内外より集積し,橋本脳症の診断マーカーである抗NAE抗体,臨床徴候・検査所見・画像情報の収集・解析を行った.本年度は,橋本脳症の中でも小脳失調型に焦点を置き,臨床的特徴を明らかとするとともに,抗NAE抗体を含む患者血清の培養細胞への添加によるプロテオームの変化を検討した.(a)多数症例の集積:平成22年度は,総数400件(累積総数1100件)の抗NAE抗体の解析を行った.その内で,約1割に小脳失調を主徴とする病型が見出された.(b)小脳失調型の橋本脳症は,脊髄小脳変性症と類似した臨床像を呈するが,眼振を欠き,脳波の徐波化を伴い,頭部MRIで小脳の萎縮が乏しいという特徴を有することが明らかとなった.(c)患者血清の培養細胞添加によるプロテオーム変化の解析:ヒト由来培養細胞に抗NAE抗体陽性の小脳失調型橋本脳症血清と対照血清を24時間添加し,それぞれ蛋白質を抽出し,プロテオーム変化を蛍光標識二次元ディファレンス電気泳動(2D-DIGE)法,MALDI-TOF MS法にて解析した.その結果,エネルギー代謝やロイシン代謝に関与する酵素蛋白の一つであるmethylcrotonoyl CoAcarboxylaseの発現に有意な減少が認められた.以上の結果から,小脳失調型の橋本脳症の臨床的特御と病態の一部が解明された.慢性甲状腺炎に伴う自己免疫性橋本脳症の症例を国内外より集積し,橋本脳症の診断マーカーである抗NAE抗体,臨床徴候・検査所見・画像情報の収集・解析を行った.本年度は,橋本脳症の中でも小脳失調型に焦点を置き,臨床的特徴を明らかとするとともに,抗NAE抗体によるシナプス伝達に対する影響を生理学的に検討した.(a)多数症例の集積:平成23年度は,総数約250件(累積総数1350件)の抗NAE抗体の解析を行った.その内で,約16%に小脳失調を主徴とする病型が見出された.(b)小脳失調型の橋本脳症は,脊髄小脳変性症と類似した臨床像を呈するが,眼振を欠き,脳波の徐波化を伴い,頭部MRIで小脳の萎縮が乏しいという特徴を有することが明らかとなった.(c)東京医大の三苫博らとの共同研究により,NAE陽性小脳失調患者の髄液をラット小脳スライスに反応させることでプルキンエ細胞のシナプス伝達が阻害されることをパッチクランプ法で生理学的に示した.これによって,抗NAE抗体は,橋本脳症の診断マーカーであるばかりでなく,機能的に影響を及ぼす可能性が初めて示された.
泡沫細胞形成機構における血管平滑筋細胞と内皮細胞及びマクロファージの相互作用の役割

1マクロファージと平滑筋細胞相互作用β-VLDL(放射性コレステロールエステルでラベルしたもの)とマクロファージをインキュベートしそのメジウムを平滑筋細胞に作用させた時,平滑筋細胞内の放射活性はマクロファージを加えずにインキュベートしたメジウムに比較して約3倍の増加を示していた.同様にヒトIDL,マクロファージ平滑筋細胞の系においても同様の結果を得た.このメジウムの分析によりβ-VLDL又はIDLとマクロファージの反応において新たなLipid prtein particleが生成され,これがLOL-receptorとは異なった経路を介して取り込まれ平滑筋細胞にコレステロール,エステルを蓄積させることを明らかにした.このparticleはコレステロール,リン脂質に富みApoE.ApoAを含んでいた.2内皮細胞と平滑筋細胞の相互作用動脈硬化巣にみられる内膜肥厚を形づくる内膜の平滑筋細胞の性質を培養系を用いて検討した.内膜の肥厚は家兎の股動脈よりカニュレーションを行い,作成しその肥厚部の切片よりexplant法によりIntimal SMCを調整した.内膜平滑筋細胞はLDLとaLDLを共に取り込みコレステロールエステルを蓄積させていた.これらのことは内膜肥厚とその部位での平滑筋細胞由来の泡沫細胞の出現機構を一部説明していると推測した.このような内膜平滑筋細胞の性質発現制御について検討する目的で内皮細胞とのco-culturesystemを用いて検討した.中膜平滑筋細胞の増殖は内皮細胞により抑制されたが,内膜平滑筋細胞のそれは抑制されなかった.以上のように血管壁を構成する細胞群はそれ単独で機能するばかりではなく,そこを構成する種々の細胞間相互作用によりその代謝能を果すと共に病巣形成に関与する可能性が示唆された.1マクロファージと平滑筋細胞相互作用β-VLDL(放射性コレステロールエステルでラベルしたもの)とマクロファージをインキュベートしそのメジウムを平滑筋細胞に作用させた時,平滑筋細胞内の放射活性はマクロファージを加えずにインキュベートしたメジウムに比較して約3倍の増加を示していた.同様にヒトIDL,マクロファージ平滑筋細胞の系においても同様の結果を得た.このメジウムの分析によりβ-VLDL又はIDLとマクロファージの反応において新たなLipid prtein particleが生成され,これがLOL-receptorとは異なった経路を介して取り込まれ平滑筋細胞にコレステロール,エステルを蓄積させることを明らかにした.このparticleはコレステロール,リン脂質に富みApoE.ApoAを含んでいた.2内皮細胞と平滑筋細胞の相互作用動脈硬化巣にみられる内膜肥厚を形づくる内膜の平滑筋細胞の性質を培養系を用いて検討した.内膜の肥厚は家兎の股動脈よりカニュレーションを行い,作成しその肥厚部の切片よりexplant法によりIntimal SMCを調整した.内膜平滑筋細胞はLDLとaLDLを共に取り込みコレステロールエステルを蓄積させていた.これらのことは内膜肥厚とその部位での平滑筋細胞由来の泡沫細胞の出現機構を一部説明していると推測した.このような内膜平滑筋細胞の性質発現制御について検討する目的で内皮細胞とのco-culturesystemを用いて検討した.中膜平滑筋細胞の増殖は内皮細胞により抑制されたが,内膜平滑筋細胞のそれは抑制されなかった.以上のように血管壁を構成する細胞群はそれ単独で機能するばかりではなく,そこを構成する種々の細胞間相互作用によりその代謝能を果すと共に病巣形成に関与する可能性が示唆された.ヒトIDLとマクロファージのインキュベーションによるメジュウムから実質細胞(parenchymal cell(pc))への脂質蓄積についての検討ヒトIDLをコレステロールリノレイト(〔【^3H】〕-cholesterol-linoleate)でラベルし、これをマイクロファージに作用させた時容量依存的に取り込まれることを確認した。このメジュウムをSMCとインキュベートした時マクロファージ非存在下でインキュベートした、いわゆるIDLそのものと比較して、PC内の放射活性は2倍に増加していた。そのメジウムをZonal超遠心法で分析した結果新たに脂質蛋白複合体の存在を認めた。この画分(Fraction【III】)はコレステロール、リン脂質に富み、蛋白を含んでいた。蛋白にはアポ蛋白A-IとEが含まれていることを確認した。この画分のコレステロールエステルを放射性〔【^3H】〕-cholesteral-linoleateでラベルし、parenchymal cell(skin fibroblast)への取り込みを検討した。この画分は容量依存的に取り込みを促進し、細胞内にコレステロールエステル含量を増加させた。この画分の取り込み機構は、家族性高コレステロール血症ホモ型の実質細胞に取り込まれることからLDL受容体を介さないで取り込まれることを示していた。このような画分の高脂血症例の血中での存在を検討する目的で【III】型高脂血症患者血清を用いて検討し、比重では【HDL_2】画分に存在し、DEAE-celluloseカラムの分析で、正常者食後の対照血清には検出されない【HDL_2】-Bと名付ける新たな画分の存在することを確認した。この画分も上述と同様にLDL受容体を介さないで取り込まれ、コレステロールエステルを蓄積させることが明らかになった。以上のことから、血管内膜平滑筋細胞、既ち実質細胞の泡沫化には細胞間相互作用を介した新たな脂質蛋白複合体が介在している可能性を示した。