hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
投資協定の多様化とその締結要因

この指摘に答えるために、国際制度論における本研究の位置づけを明らかにする作業に時間がかかったため、上記の(2)と(3)の作業を終えることができなかった。本研究の目的は、近年その締結が増加している投資協定の締結要因を明らかにすることにある。投資協定とは、海外で投資活動を行う投資家やその財産の保護、現地における投資環境の自由化などを目的とする条約である。この協定に関する先行研究の大半は、2000年代以前の投資協定を分析対象としており、投資協定の規律内容はどの国・時代のものでも均一であるとした上で、その締結要因を途上国の域内・域外政治だけから見ている。これに対して本研究は、近年の投資協定が多様化していること、そしてその規律内容を決定づけているのが先進国であるという点に注目している。昨年度は、投資協定の締結数は1990年代前半に急増したものの、後半以降の年間締結数の増加幅は格段に鈍っており、投資協定を新たに制定するよりも既存の投資協定を改定する動きが盛んになっていること、そして、投資協定の保護対象となる「投資」の範囲の限定、投資協定の規律から外れる例外条項の拡大などの規定を導入することによって、外国企業の投資活動に対する受入国政府の規制権限を強化する動きが盛んになっていることを明らかにした。これは、自由な投資活動の制限につながる動きであり、投資財産の保護や投資環境の自由化を目指す従来の投資協定とは真逆の方向性を示している。今年度は、このような投資協定の変容の要因を探った。米国や日本における投資協定の制定や活用をめぐる政治過程の分析を通して、同協定に含まれる紛争仲裁手続(ISDS)を多用する先進国企業とその国の政府との間の選好の不一致が、その変化の要因として挙げられることを明らかにした。現在は、分析の対象国として欧州諸国を加え、投資協定の制定過程や仲裁判例の双方の分析を進めている。今年度は職場が新しくなり予想以上に授業準備に時間が必要となったことに加えて、妊娠のため(2019年3月出産)、体調が優れず、研究に十分な時間を費やすことができなかった。本研究は(1)投資協定のISDS手続を利用する企業の業種、提訴理由、相手国との競争関係等に関するデータベースを作成すること(説明変数の抽出)、(2)2000年代以降の変化を踏まえた上で、投資協定の分類を示すこと(被説明変数の整理)、(3)上で抽出した説明変数と被説明変数を計量的に分析し、投資協定の締結要因を明らかにすること、(4)投資協定の締結・改定にをめぐる政治過程の定性的な実証分析、を予定しているが、現段階では、(2)と(4)についてある程度の成果は得られているものの、(1)と(3)に着手するに至っていない。今後は、研究上の位置づけを早急に済ませた上で、二年目の前半までに投資協定のISDS手続を利用する企業に関するデータベースの作成及び投資協定の締結要因(説明変数)の抽出と仮説の提示を進める。その上で、2014年末時点までに締結された3000件以上の投資協定の規律内容に関するデータベース作成に関する作業に着手する予定である。昨年度末から今年度初頭にかけて産休に入り、体調は戻ったものの、育児に多大な時間が必要となることが予想される。このため、事業期間の延長を申請し、今年度は研究を中断する予定である。研究再開後は、これまでの研究の成果をまとめて早期に発表する。またデータベースの作成や計量分析を急ぐ。
創傷治癒をシステムで理解する：間質細胞の傷害刺激感知から血管新生増強まで

増加した間質細胞の表面抗原プロファイルを検討するため、傷害刺激後に経時的(0,1,3,7日後)に採取した皮下脂肪からSVFsを単離し、細胞表面抗原染色によるフローサイトメトリーで細胞の構成を解析した。その結果、CD45の割合が移植後7日目に有意に増加したが、一方でCD45(-)/CD31(-)の割合は相反し、間質細胞の活性化が推察された。マクロファージは移植後7日目に有意に増加したが、M1(F4/80(+)/CD11c(+)/CD206(-))/M2(F4/80(+)/CD11c(-)/CD206(+))の割合に変化はみられなかった。CD34の割合は移植後3日目に有意に減少したため、脂肪線維化と脂肪前駆細胞への関与を調べるために、CD9とCD140A(PDFGRalpha)の割合を測定したが、どちらか一方への関与は認められなかった。増加細胞の構成細胞集団のうちマクロファージと活性化線維芽細胞の役割に注目して研究を進め、その後、各細胞をセルソーターで経時的に単離して、追加でマイクロアレイ解析を行う予定であった。しかし、マイクロアレイ解析を実施するために必要なデータが整わず、今年度内に実施することができなかった。早急にマイクロアレイ解析を実施するために必要なデータを整え、外部委託にてマイクロアレイ解析を実施する予定である。臓器間質細胞は傷害刺激を感知して、骨髄より炎症細胞を動員することで創傷治癒を活性化する。その過程は複数の細胞集団がダイナミックに構成を変化させる複雑なもので、詳細については不明な点が多い。我々は既に、皮下脂肪に予め傷害刺激を与えると、脂肪重量あたりの皮下脂肪Stromal Vascular Fractions(SVFs)が増加し、細胞数あたりの血管新生能が増強されることを見出している。我々はこの現象を「創傷治癒プライミング」と名付た。予備検討にて、創傷治癒プライミングに伴う遺伝子発現変化をマイクロアレイによりプロファイリングした結果、傷害刺激を受けて増加したSVFsでは、低酸素シグナル(Hypoxia)とToll-like受容体(Toll-like Receptor)シグナルが活性化することを確認しており、我々はこれらを傷害刺激のセンサーシグナルと推察している。本年度は、傷害刺激によるSVFsの増加と下肢虚血モデル移植後の血管新生増強を創傷治癒プライミングの指標とし、in vivoで創傷治癒プライミングに必要な傷害刺激の必要性について検討した。その結果、鼠蹊部皮下脂肪組織の栄養血管切断(Hypoxia Signaling)と脂肪組織裁断(Toll-like Receptor Signaling)のどちらか片方の傷害刺激では、移植後に血管新生は改善されないことが明らかとなった。また、創傷治癒プライミングで起きる細胞構成変化を組織学的に把握するため、各種細胞表面抗原染色による免疫染色を実施した。傷害刺激を受けて増加した皮下脂肪Stromal Vascular Fractions(SVFs)の細胞構成を組織学的に把握するための、各種免疫染色条件の確立に時間を要したため。増加した皮下脂肪Stromal Vascular Fractions(SVFs)についての分析がやや遅れているため、細胞表面抗原染色によるフローサイトメトリーで時系列アトラスを解析し、放射線照射による細胞枯渇試験により、増加細胞の由来を分析することを優先的に進める。増加した皮下脂肪Stromal Vascular Fractions(SVFs)についての分析がやや遅れているため、次年度にフローサイトメトリー測定用の各種抗体や放射線照射による細胞枯渇試験のための試薬等を購入予定である。今年度は、増加細胞の構成細胞集団のうちマクロファージと活性化線維芽細胞の役割に注目して研究を進め、その後、各細胞をセルソーターで経時的に単離してマイクロアレイ解析を行う予定であった。そのため、マイクロアレイ解析の外部委託費用として1,000,000円の予算を計上して申請していた。
金属ナノ粒子による細胞内分子イメージング

本研究計画では、細胞内分子イメージングのための「3次元・ナノ・分析・光学」の顕微鏡開発を目的としており、昨年度には下記の4つの項目を達成した。1、機能性・高感度な金属ナノ粒子プローブの開発機能性金属ナノ粒子として、細胞内でのタンパク質-ATPの相互作用を利用したATPのセンシングのための機能性金属ナノ粒子の開発を行った。ガラス基盤上で単分散した機能性ナノ粒子からのATPの濃度依存的なSERS強度変化の検出に成功した。また、SERSをより高感度に検出するためにサテライト状に凝集させたナノ粒子プローブを開発した。細胞内に導入し、その空間情報及び細胞内環境・生体分子・薬剤の時間変化の観察に成功した。2、顕微鏡システムの自動化細胞内でのタンパク質相互作用や、薬剤の金属ナノ粒子への結合の検出、またその周囲の物理的、科学的環境を同時に検出するために、顕微鏡システムの自動化を行なった。ラマンイメージングと明視野像(または、位相差像・暗視野像・蛍光像)を自動で同時且つ経時的に観察できるように改良し、薬剤投与などによる時間応答する細胞の形態的な変化と細胞内部分子の変化を同時に観察することが可能になった。3、非線形分光の導入による分子選択性、空間分解能の向上前年度までに得られた金属ナノ粒子の非線形な分光特性を利用し、生体試料内の空間分解能の向上に成功した。生体組織の内部に金のナノ粒子を導入し、非線形な散乱光強度を検出することで、回折限界を超えた空間分解能での顕微観察が行えることを示した。また、金属ナノ粒子における高調波発生により微小紫外光源の形成に成功した。4、アプリケーション開発細胞内環境(pH)センシング機能を有する金属ナノ粒子プローブの開発を行い、細胞内の局所領域でのpHのセンシングを行なった。小胞輸送の過程、および細胞のアポトーシス過程において、pHの変化を数十ナノメートルの空間精度で測定することに成功した。また、細胞の内部でトルクを得て回転するナノ粒子の利用と観察方法を新たに見出した。機能性金属ナノ粒子をプローブとして用いた細胞内ナノセンシングイメージング技術の基礎技術を開発し、本研究課題の目標達成に向け順調に研究が進んでいる。細胞内の生体分子の応答とそれに係わる物理化学的な条件の測定といった、複数の指標を同時に計測するプローブの開発も進んでおり、従来の細胞解析、分析では不可能であった、細胞内化学応答をナノスケールで可視化するというゴールが見えてきた。具体的には、細胞内pHのセンシングに成功した。また、in vitroにおいてATPセンサータンパク質を修飾した機能性ナノ粒子を用いたATPのセンシングに成功している。金属ナノ粒子の最適化、および高感度、高速イメージングのための装置開発も順調に進んでいる。それによって得られるデータは以前にも増して情報量の増加が見込まれるが、目的となる指標・標的分子を効率よく抽出するためのアルゴリズムの開発も終了している。開発してきた解析ソフトの計測装置への実装も進んでおり、膨大なスペクトルデータを利用して細胞内の分子応答を解析する準備も整っている。今後は、新たな機能性金属ナノ粒子の開発や、細胞内の薬剤検出方法などを検討し、さらなるアプリケーションの開発に取り組む。金属ナノ粒子による細胞内部での非線形散乱効果の検出にも成功し、細胞内局所計測の新たな技術開発に繋がる成果を得た。また、細胞の内部でトルクを得て回転するナノ粒子の利用と観察方法を新たに検討している。トルクを得る方法は流体や、光圧など、様々な方法を検討中であるが、エバネッセント場で誘起されるトルクに関しては金属ナノ構造の回転駆動が可能であるという計算結果を示した。これらを利用して細胞内の新たな物理量を計測することが可能になり、細胞内部の分子ダイナミクスの理解に大きく寄与すると考えられる。細胞内タンパク分析イメージング技術の確立を試みる。これまでに得られた成果に踏まえ、細胞内タンパク分析イメージング技術の基盤技術を確立する。特に、以下のアプリケーション開発を通じて、様々な応用測定に耐えうるよう、ハードウェアを調整し、分析・可視化可能なソフトウェアを洗練させる。機能性ナノ粒子プローブについても、今後は単分散した機能性ナノ粒子を用いて細胞内でのATPセンシングを実現すると共に、複数の環境プローブ(ATP, pH)を有する機能性ナノ粒子の開発を行い、それを用いて細胞内イメージングに応用する。加えて、アプリケーションの開発も引き続き行う。細胞内ナノ分析イメージング技術の応用面でのデモンストレーションに適したアプリケーションの開発を行う。抗がん剤などの細胞内の挙動がよく知られている薬剤分子とタンパク質との相互作用や、細胞内の位置や環境に応じたその作用効率の変化の検出について本手法の有用さを調査する。また、細胞内におけるタンパク質のスペクトルを、その時間情報、位置情報とともに記録、分析することで、細胞の状態変化や、各種刺激に応答する応答を分子レベルで可視化を試みる。本研究計画では、細胞内分子イメージングのための「3次元・ナノ・分析・光学」顕微鏡を開発することを目的としており、昨年度には下記の4つの研究実績を達成した。1、細胞内ナノ分析顕微鏡の開発細胞内の分子検出、および局所環境を分析するために、ラマン分光画像計測、暗視野分光画像計測、蛍光画像計測を融合させたシステム構成を設計した。現在、設計案に従い装置の試作を進めている。金属ナノ粒子と光との相互作用を評価するための装置開発も行い、可視から紫外域での超短パルス光が金属表面で生じる非線形な光学効果の検出が可能となった。2、金属ナノ粒子の作製

光学効果の増強に適した材料、形状をもつ金属ナノ粒子の作製に向け、球状、星状、シェル状、花びら状の形をもつ金属ナノ粒子を作製した。また、作製した金属ナノ粒子によるラマン散乱の増強効果を確認した。金属ナノ粒子の生体適合性を評価するため、エレクトロポレーションを用いた金属ナノ粒子の導入法の検討と細胞内でのラマン散乱増強効果の確認を行った。3、機能性分子の探索機能性分子として、pH、酵素活性、ATPの検出を可能とする分子の探索を行った。pHに関してはpMBA、酵素活性については5-プロモー4-クロロ-3-インドリルーβ-D-ガラクトビラノシド(X-gal)の評価を行い、それぞれ周囲のpHの変化、代謝物生成を増強ラマン散乱スペクトルにより確認できた。また、ATP計測に関してはATP合成酵素のεサブユニットの利用を検討している。4、スペクトル分析・画像構築技術の開発多次元でのスペクトル情報を解析するために主成分分析、クラスタリング、スペクトル間の相関をベースとする解析ソフトウェアの開発を行った。実際に細胞内を移動する金属ナノ粒子からの増強ラマン散乱スペクトルに主成分分析、相関解析を適用した結果、増強ラマン散乱は通常のラマン散乱計測に比べて多くの情報を与えること、増強ラマン散乱スペクトルからは分子の運動や細胞内環境を示す特徴的なラマン散乱ピークを抽出できることが示された。本研究計画では、細胞内分子イメージングのための「3次元・ナノ・分析・光学」顕微鏡を開発することを目的としており、昨年度には下記の4つの研究実績を達成した。1、細胞内ナノ分析顕微鏡の開発初年度に試作した単一金属ナノ粒子をプローブとした細胞内ナノ分析顕微鏡に蛍光画像計測を融合させたシステムを構築した。単一金属ナノ粒子からの増強ラマン散乱光を追跡しつつ、細胞内構造の蛍光画像計測により空間情報を補うことで、細胞内の分子検出および局所環境の分析を進めている。また細胞全体に変化を起こす生命現象や薬剤送達による細胞応答を分析するため、細胞全体を観察可能な多粒子並列計測システムの設計、試作も行った。2、金属ナノ粒子の作製、および選定高い増強効果をもつ銀ナノ粒子を細胞内環境で使用するために、銀ナノ粒子を金薄膜で覆った構造をもつハイブリッドナノ粒子を試作した。また初年度に作製した金属ナノ粒子も含め、ラマン分光計測による選定実験を進めたところ、当初予定していた波長域よりも短い波長域での励起によりさらなる増強効果が得られる可能性を見出した。3、環境センシングにおける検出対象および機能性分子の探索増強ラマン散乱スペクトルの計測による、pH、ATP、代謝生成物の検出を行った。pHに関してはpMBAおよびECCP、ATPについてはATP合成酵素のεサブユニット、酵素活性についてはそれぞれセンサー分子として用いた。また代謝生成物に関しては、プリンヌクレオチド代謝経路における各生成物を、増強ラマン散乱スペクトルから識別可能であることを確認した。4、スペクトル分析・画像構築技術の開発
代数多様体の構造とユニポテント幾何

アフィン代数多様体上のベクトル場や3次元アフィン代数多様体上のA^1-ファイブレーションやA^1_*-ファイブレーションの性質を加法群Gaや乗法群Gmの作用と関連付けて研究し成果を上げた.また,特異点をもつ正規アフィン代数曲面の特異点の性質を調べた.これらの研究成果によって、3次元アフィン代数多様体の構造を変形理論を通して研究する新しい分野が見えて来た。アフィン代数多様体上に代数群,とくにユニポテント代数群が作用する場合,または,ベクトル場が存在する場合に,代数群またはベクトル場による商多様体の特異点や商多様体の幾何学的性質を調べることを目的として次のような活動を行った.(2)2009年7月6日7月10日にオランダNijmegen大学で開催された研究集会「Automorphisms ofaffine spaces」において,研究代表者はジャコビアン予想の一般化がアフィン平面に相似するアフィン曲面で成立するかどうかに関する考察について講演を行なった.(3)2009年9月3日6日の期間,関西学院大学大阪梅田キャンパスの施設を利用して「アフィン代数幾何学研究集会」を開催し,研究代表者は「Affine Mumford Theorem」という講演を行なった.また,9月1日9月15日の2週間香港大学のJie-Tai Yu(余解台)教授を研究分担者の増田佳代とともに日本に招待し,研究交流を図るとともに,この研究集会と埼玉大学で講演をしてもらった.(4)2010年1月19日1月22日に国立台湾大学数学教室で開催された「代数学研究集会」に研究分担者と共同で「Vector fields and invariant theory」という講演を3回行なった.3.さらに,正標数の代数曲面に関する論文1篇と永田雅宜の追悼論文1篇を公表した.4.学会の組織や講演に関する活動のうち主なものは次のとおりである.(3)信州大学で開催の2011年度日本数学会秋季総合分科会で9月30日に「ホモロジー平面と関連する話題」について企画特別講演を行った.(これは2011年3月開催予定分の繰越である.)3.学会や研究集会で次のような招待講演を行った.(3)信州大学で開催の2011年度日本数学会秋季総合分科会で9月30日に「ホモロジー平面と関連する話題」について企画特別講演を行った.
地域包括ケアシステム推進下における介護系NPOの役割

地域包括ケアシステムの推進に伴う1介護系NPO(介護保険事業及び制度外の生活支援サービスを両立している特定非営利活動法人)に期待される社会的役割と課題を明らかにし、2相談援助と制度外サービスの活性化に向けたソーシャルワーカー(社会福祉士)に求められる技能を明らかにする。本研究では、主に1アンケート調査結果の分析、2先駆的活動に取り組む介護系NPOの事例研究を通じて、仮説の検証を試みる。
現代語文法形式から同じ意味の古典語文法形式を引く『現古文法対照辞書』の作成

冊子体の「現古対照文法辞典」を制作した。総ページ数93ページ。1,000部印刷。体裁:分類番号、見出し、現代語訳、古典語対応形式、古典原文、出典、所在。総項目数、約450。日本語能力試験出題基準の機能語一覧の語彙(見出し)を、古典語による11の文学作品の現代語訳によって調査し、それに対応する古典原文を用例とともに一覧したものである。語彙レベルでの現代語に相当する古典語を探し出す辞書は「現古辞典」ほか多くあるのに対して文法形式で現代語に対応する古典語を探し出す手段がなかったのを補ったものである。現代語使用の場でそれに対応する古典語の言い回しがどうであったか知りたいときに用いることができる。日本語能力試験出題基準に取り上げられている現代語文法形式の中で、古典文学作品の現代語訳にもちいられている現代語文法形式が原文のどのような文法形式を翻訳したものであるかを調査し、現代語文法形式から古典語文法形式を引く『現古文法対照辞書』を作成するという目的を達成するために、本年度は以下の研究を行った。1日本語能力試験出題基準1、2級に取り上げられている文法形式のうち必須な項目を選定し、それに基づいて古典語文法形式をさがすための、現代語機能語のリストを作った。それにより、日本語能力試験出題基準以外の機能語一覧の研究との関連づけをすることができ、機能語のバリエーションや体系にも目がゆきとどき、辞書の見出しの作成にも見通しを得ることができた。また、最終的に辞書形式に整理するために、収集作業の結果をどのようなフォーマットで記録すると集約可能になるかを検討した。2古典文学作品とその現代語訳を検討し、古典作品として何を選定するかを決定し、それに基づいて現代語機能語をさがすため、21種類の古典の現代語訳の電子化ファイルを作成した。36種類の古典文学作品において、原文と現代語訳の関連付けの方法をさぐるためパイロット的調査を行った。その結果、従属接続詞的な機能語については、現代語に相当する古典語がそれぞれ見出されるのに対して、述語補助接辞的な機能語については、古典語には相当する形式が存在しないばあいがおおいことがわかった。1、所定の「入力用フオーマット」(分類番号、現代語見出し、現代語訳、古典語の形式、古典原文、作品名、用例の所在)により、各自分担資料(竹取物語、落窪物語、うつほ物語、源氏物語、枕草子、蜻蛉日記、栄花物語、夜の寝覚め、浜松中納言物語、宇治拾遺物語、平家物語、徒然草)に基づいて「現代語機能語に対応する古典語形式の一覧」をつくった。その際、「現代語機能語に対応する古典語形式の一覧」はその作成に於て以下の作業をした。出典はの分担資料の略号でしるした。また、用例は新編全集にしたがい、その所在のページ数を付した。また、見出しのもとに、対応する有力な古典語の形式をいくつか(出現数が多いものから、13例ぐらい)選び、出現数が少なくとも古典語らしい表現と考えられるものについては、古典語語の形式ごとに、現代語機能語をふくむ現代語訳と、それに対応する古典語をふくむ古典原文を1例ずつつけた。ただし、名詞に続く場合と動詞に続く場合があるような時は、両方とものせた。形容詞や形容動詞などに続く場合や、動詞の否定形、推量形などに続く場合のように続き方にヴァリエーションがあるときは用例の多寡によって判断した。2、「現古機能語辞典の本文」の作成分担を、高橋雄一・須田善治氏作成の機能語一覧の章分けにしたがって、つぎのように決めた。(提示ー山崎;対象ー杉山;状況ー石井;時間ー斎藤;因果ー安部;条件ー鈴木;可能ー津留崎;義務ー津留崎:認識ー須田淳一;説明ー山本;表出ー山本)今年度は、合宿研究会の開催が分担者の都合で遅れため、各作品ごとの「現代語機能語に対応する古典語形式の一覧」の作成に全体としてやや遅れがでている。ただ、今後の努力によって十分とりかえすことが可能な範囲である。《現古文法対照辞書》の一般公開の方針をつぎのように決定した。1.《現古文法対照辞書》の見出し語の配列順は意味分類順とし、見出し語の表記については、ひらがな/漢字両様ありうるものについては、ひらがな優先し、漢字しかないものは漢字表記とする。2.《現古文法対照辞書》の見出し語のバリエーションは、規模がおおきなものになってしまいすぎないようにするため、見出し語には立てないが、古典語においては典型的対応形式だけでなく、そのバリエーションも積極的に採用する。また、現代語機能語の項目名を検討し、意味用法が判然とはわかれない項目の統一、適切な意味分野への移動、古典語対応形式の出現しない項目の削除をおこなう。3.《現古文法対照辞書》の古典語対応形式のしめし方で、いわゆる連用形は、第一中止形、第二中止形のようにする。また、条件形は確定条件形、仮定条件形と注記する。4.《現古文法対照辞書》の古典語対応形式は、条件形の「ば」のように、かならずしも独立しない形式であっても、辞書としての便宜のため、対応型式とみとめる。その際、用例において古典語と現代語の対応部分はすこし長めに下線をひく。

5.《現古文法対照辞書》の記号のつかいかたの統一の方針、日本語能力試験出題基準の3、4級に該当する基本的な機能語のあつかいの方針を検討し、付録としての見出し語と古典語対応形式との一覧と50音順の現代語機能の一覧の作成をすることを決定した。研究代表者が、年来の約束で、最終年度後半に、中国上海の大学での教育のため渡航を余儀なくされ、十分に最終的な研究集約の時間がとれなかったため。古典語も潜在的な日本語であるから、現代語使用の現場で、この言い回しは古典語でどういったか気になるとき、それを知る手がかかりがあれば、古典語を現代に新たな意味で再生させることができる。その気づきを、語彙の面からだけではなく文法の面からも補佐することができれば現代語を古典語に翻訳することもそれほど難しくなくなる。そこで、古典語でかかれた文学作品につけられた現代語訳について、そこにみいだされる現代語の文法機能を表す要素が古典語の原文ではどのような形式で表されているかをしらべ、現代語の機能語からそれに対応する古典語形式をさがす辞書『現古対照文法辞典』を作成することを目的とした。本辞典では、『日本語能力試験出題基準』(2002)に付帯される現代語の機能語リストに基づき、450の項目をさだめ、古典の11の文学作品につけられた現代語訳で、それに対応する相当する古典語の形式をさがし、それを用例とともにかかげた。その成果報告書『現古対照文法辞典』を1,000部印刷し、関係方面に公開するとともに、その使用の具合についての感想の表明を依頼した。また、同報告書には見出し項目がどのような意味・機能であるかを知るために、現代語としてどのような意味であるかをしめす「現代語機能一覧」を付帯した。同報告書の重要性は次のような点にある。第一に作歌等の文学活動、古典語の教育と習得、翻訳実務等に有効に用いられるはずであり、さらには現代語の表現形式と古典語の表現形式の違いを明かにするとともに、古典語の機能別に集約することにも有効なはずである。冊子体の「現古対照文法辞典」を制作した。総ページ数93ページ。1,000部印刷。体裁:分類番号、見出し、現代語訳、古典語対応形式、古典原文、出典、所在。総項目数、約450。日本語能力試験出題基準の機能語一覧の語彙(見出し)を、古典語による11の文学作品の現代語訳によって調査し、それに対応する古典原文を用例とともに一覧したものである。語彙レベルでの現代語に相当する古典語を探し出す辞書は「現古辞典」ほか多くあるのに対して文法形式で現代語に対応する古典語を探し出す手段がなかったのを補ったものである。現代語使用の場でそれに対応する古典語の言い回しがどうであったか知りたいときに用いることができる。1日本語能力試験出題基準に取り上げられている1、2級の文法形式のリストが作成できた。同時に他の機能語一覧の別の研究との関連づけをすることができた。2調査検討する古典作品として何を選定するかを決定し、以下の現代語訳ファイルを作成することができた。竹取物語、落窪物語、うつほ物語、蜻蛉日記、枕草子、堤中納言物語、紫式部日記、源氏物語、栄花物語、大鏡、今昔物語集、更級日記、讃岐典侍日記、夜の寝覚、狭衣物語、浜松中納言物語、方丈記、徒然草、宇治拾遺物語、保元物語、平治物語、平家物語3うつほ物語、枕草子、源氏物語、今昔物語集、夜の寝覚、平家物語の6種類の古典作品において、パイロット的調査ができ、原文と現代語訳の関連付けの方法に一定の目安がついた。4収集作業の結果を効率的に集約することのできるフォーマットの検討ができた。1、「現代語機能語に対応する古典語形式の一覧」をヤフーボックスに分担者ごとにアップする。
東アジアのアワ在来品種の遺伝的多様性と歴史的変遷に関する学際的研究

東アジアを中心としたアワ在来品種についてさまざまなDNAマーカーを用いて遺伝的多様性の調査を行った。この中でもトランスポゾンディスプレーでは特に高い多型が検出されユーラシア全体のアワの系譜が明確となった。rDNAでも地理的な変異が明らかとなった。これらの結果は現在までの2本の論文として国際誌に投稿中である。また、他の分野の資料と合わせて総説を執筆した。アワ在来品種の多様性評価のためのマーカーのスクリーニングを行なった。マーカーのひとつはSSRマーカーであり,Jia, et. al.(2007;Genetic Resources and Crop Evolution54:233-236)に報告されている4つのマーカーを用いてユーラシア各地の代表的な品種200品種について調査を行なった。各プライマー組み合わせについてフラングメント長を分析したところいずれもきわめて多様であることが明らかとなった。本研究については2008年春の明治大学における日本育種学会大会において発表済みである。また,もうひとつのマーカーはトランスポゾン・ディスプレーである。これまで我々が発見したアワ由来のトランスポゾンの配列を用いてトランスポゾン・ディスプレーを行い,上記SSR解析に用いた200品種について系統解析を行なったところ,地理的に明瞭な分化がみとめられ,これまでのRFLPなどの分析の結果(Fukunaga, et. al.2002Genetic Resources and Crop Evolution49:95-101)と同様な傾向を示した。この結果については現在投稿準備中である。また,これまで既に開発済みのrDNA遺伝子間スペーサーの配列や欠失によるタイピング(Fukunaga et a1.2005.Heredltasl42:38-44,Fukunaga, et. al.2006.Theoretical and Applied Genetics113:261-269)を東アジア隣接のパキスタンの品種に応用し,まとまったデータを得ておりこれについても投稿準備中である。アワはユーラシアで古くから栽培されている作物であり、様々な品種が知られている。また、近年ゲノム解析なども行われている。本研究ではアワ在来品種についての遺伝的多様性を調べる目的で、SSR多型や機能を有する遺伝子のSNPsなどの検出をしてマーカー化するとともに、ゲノムワイドマーカーについても開発を行った。SSRについては前年度学会発表済みである。SNPsについては、モチ・ウルチを制御するWaxy遺伝子についてシークエンスレベルの解析を行い、多型を検出している。SNPs以外にもイントロンにindelなども検出されている。ユーラシア全体で60品種ほどについて解析したところ、ウルチがモチより多型性が高いことや変異に地域性があることなどを見だしている。今後学会発表を行う予定である。また申請者がこれまでに解析してきたrDNA(Fukunaga et al. 1997, 2005, 2006)についても東アジアの隣接するパキスタン、アフガニスタンの品種についての解析を行い学会発表を行った(福永ら2009)。現在他の遺伝子についてもPCR増幅に成功しており多型を調査しようとしているところである。ゲノムワイドなマーカーとしてはトランスポゾンディスプレイを行っている。これについては、申請者らが見出したトランスポゾン(Fukunaga et al. 2002, Kawase et al. 2005)をもとにプライマー設計して行っており既に400品種以上について解析済みであり、学会でも発表している(平野ら2008)。また、これに基づきアワ遺伝資源のコアコレクション作成も試みた(平野ら2009)。また、考古学や品種についての文献資料も収集しており、歴史的な変遷についても検討している。ユーラシアで古くから重要な穀類であったアワ在来品種の遺伝的多様性と地域品種間の系統関係について、遺伝的なマーカーを使って調査するとともに、農学・考古学・民俗学文献などの収集・調査を行った。遺伝的マーカーについてはEST-SSR、rDNA,トランスポゾンディスプレー、ワキシー遺伝子の塩基配列多型などについて調査を行った。いずれのマーカーでも多様性に富んでおり、地理的な分化が認められた。rDNAについてはPCR-RFLPに基づき、アフガニスタン・パキスタンの在来品種について詳細な調査を行ってきたが、ユーラシア全域についてPCR-RFLP法を用いてユーラシア全域のアワ在来品種についてより詳細な調査を行った。遺伝的マーカーについてはトランスポゾンディスプレーについては、国際誌に投稿中、アフガニスタン・パキスタンのアワについても国際誌Genetic Resources and Crop Evolutionに近く投稿する予定である。近くアワゲノムシークエンスが米国ジョージア大学のグループにより公表される予定であり、今後の研究のために、これら遺伝資源の多様性について明らかにしておくのは重要なことであったと考えられる。また、考古学などの成果などをふまえた、アワをはじめとした雑穀類の起源については、Plant Breeding Reviewsに執筆依頼があり、既に執筆済みである。おそらく来年に出版される見込みである。また、日本作物学会から出版される予定の作物栽培学体系のアワの章は執筆中であり、来年にでも出版される予定である。本科研費の成果、それによって収集した資料が生かされる予定である。
耐震補強後に20年経過したコンクリート橋脚の耐震安全性再評価と地震時損傷評価

本研究は,耐震補強箇所の経年劣化が生じたRC橋脚を対象にして,i)巻立補強箇所の経年劣化診断と耐震性の再評価,およびii)地震後の既設部の内部損傷診断と余震等に対する安全性評価を検討する.今年度は項目ii)を重点的に検討し,以下の研究実績が示された.(1)供試体実験:模擬空隙を埋め込んだSRCはり供試体を作製し,小型加振器を用いた局所振動試験を行った.その結果,鋼材比に依らず,構造物内部の空隙によって共振周波数が低下することが確認できた.さらに,供試体諸元や空隙パターンを変化させた実験データを整理することにより,共振周波数を指標とした空隙寸法の算定式を導出した.そして,過去の実験供試体のデータを合わせて,共振周波数の実験値と算定値の比較/統計分析を行い,提案式の算定精度を示した.(2)数値シミュレーション:FiniteDifference Time Domain(FDTD)法による波動解析プログラムを作成し,空隙周りの波動伝搬挙動をシミュレーションした.その結果,共振時に,空隙周りに波の回折が生じることによって伝搬距離と時間が増加するし,共振周波数が低下するメカニズムを説明できた.上記(1)(2)の成果の一部は,国際共著論文として,海外ジャーナルに掲載された.さらに,今年度の成果をベースにした海外ジャーナルの論文1編と,国際会議での発表1件も予定しており,現在,これらの準備を着実に進めている.本研究では,i)巻立補強箇所の経年劣化診断と耐震性の再評価,およびii)地震後の既設部の内部損傷診断と余震等に対する安全性評価を検討している.このうち,項目ii)については,プログラムの作成がうまくいったため,当初の予定以上の成果を得ることができた.一方,項目i)については,期待していた進捗/成果にはならなかった.今年度の検討結果を踏まえると,項目i)については,研究の新規性や有用性の観点から検討内容の修正が必要であると感じている.一方,項目ii)については期待以上の成果が得られたため,次年度も引き続き,供試体実験による非破壊試験の開発,数値シミュレーションによるメカニズムの解明,非破壊試験の点検データの活用と構造物の安全性評価の高度化について重点的に取り組む.さらに,次年度からは構造物の安全性評価に人工知能(AI)を取り入れることも検討する.これにより,煩雑な構造計算を必要とせずに,膨大な点検データを参照して,構造物の健全性を効率的に評価できることが期待される.本研究は,耐震補強箇所の経年劣化が生じたRC橋脚を対象にして,i)巻立補強箇所の経年劣化診断と耐震性の再評価,およびii)地震後の既設部の内部損傷診断と余震等に対する安全性評価を検討する.今年度は項目ii)を重点的に検討し,以下の研究実績が示された.(1)供試体実験:模擬空隙を埋め込んだSRCはり供試体を作製し,小型加振器を用いた局所振動試験を行った.その結果,鋼材比に依らず,構造物内部の空隙によって共振周波数が低下することが確認できた.さらに,供試体諸元や空隙パターンを変化させた実験データを整理することにより,共振周波数を指標とした空隙寸法の算定式を導出した.そして,過去の実験供試体のデータを合わせて,共振周波数の実験値と算定値の比較/統計分析を行い,提案式の算定精度を示した.(2)数値シミュレーション:FiniteDifference Time Domain(FDTD)法による波動解析プログラムを作成し,空隙周りの波動伝搬挙動をシミュレーションした.その結果,共振時に,空隙周りに波の回折が生じることによって伝搬距離と時間が増加するし,共振周波数が低下するメカニズムを説明できた.上記(1)(2)の成果の一部は,国際共著論文として,海外ジャーナルに掲載された.さらに,今年度の成果をベースにした海外ジャーナルの論文1編と,国際会議での発表1件も予定しており,現在,これらの準備を着実に進めている.本研究では,i)巻立補強箇所の経年劣化診断と耐震性の再評価,およびii)地震後の既設部の内部損傷診断と余震等に対する安全性評価を検討している.このうち,項目ii)については,プログラムの作成がうまくいったため,当初の予定以上の成果を得ることができた.一方,項目i)については,期待していた進捗/成果にはならなかった.今年度の検討結果を踏まえると,項目i)については,研究の新規性や有用性の観点から検討内容の修正が必要であると感じている.一方,項目ii)については期待以上の成果が得られたため,次年度も引き続き,供試体実験による非破壊試験の開発,数値シミュレーションによるメカニズムの解明,非破壊試験の点検データの活用と構造物の安全性評価の高度化について重点的に取り組む.さらに,次年度からは構造物の安全性評価に人工知能(AI)を取り入れることも検討する.これにより,煩雑な構造計算を必要とせずに,膨大な点検データを参照して,構造物の健全性を効率的に評価できることが期待される.
『源氏物語』の表現世界と現代語訳の創意の交渉に関する研究

最終年度にあたる今年、漸く谷崎の創作と『源氏物語』の翻訳とがどのように関わるのかという問題を、第一の訳〈旧訳〉を手掛けていた三年半の間で執筆した唯一の小説、『猫と庄造と二人のをんな』の中から検証した。現在は投稿・査読中であるため、詳細は省くが、三年かけてようやく谷崎が三度にわたり『源氏物語』を訳し続けたことの意義について論じるという入り口に立ったことになる。研究員着任直後に。中古文学の手法からのアプローチが作家の翻訳の検証に必ずしも有効に機能しないことが判明したため、より合理的に目的を遂行できるよう、谷崎の創作との連関を検証する方向に研究計画を変更し、創作と翻訳との連関を、國學院大學蔵『谷崎潤一郎新訳源氏物語』草稿から発見するいう成果を得た。26年度が最終年度であるため、記入しない。本研究のねらいは、作家・谷崎潤一郎による「源氏物語』訳(以下谷崎源氏)の草稿の調査、分析を通して、谷崎作品に少なからず影響を与えたと思しき訳出体験の意義を検証することにある。谷崎源氏は、戦前に発表された旧訳、戦後に発表された新訳、谷崎の晩年に発表された新々訳の三種とされる。新訳草稿は唯一現存する草稿にあたる。旧訳と新訳との間は、ですます調の採用、旧訳で削除された箇所の補遺といった、大幅な変革が認められる。草稿には、谷崎と、校閲者山田孝雄、協力者玉上琢彌ら京都大学国文学者グループらの書き入れが散見され、新訳が出来上がってゆく過程が残されている。資料の量が膨大であるため、初年度は、草稿に目を通し、問題となる箇所を洗い出すことに終始した。本年度の成果として、大きくは以下の二点である。旧訳は従来、天皇への不敬に当たる文脈を悉く取り去った不完全な翻訳と位置づけられている。しかし、実のところ旧訳は頭注を活用して光源氏の藤壺思慕を匂わしており、時代に躁躙された訳文という評価を見直す必要がある。また、新訳は序文において原文に「肉迫」する完全な翻訳と謳われている。しかしながら、谷崎は「若紫」巻、北山の垣間見の場面では、敬語過多とされる旧訳を引き継ぐ形で若紫に原文と違えた丁寧な言葉を使わせている。この点について玉上と考えが対立したことが草稿から伺える。つまり、新訳が本質的には旧訳の「余臭」を捨てきれていないことも分かってきた。その過程で、谷崎が谷崎源氏について「現代語訳」ではなく、「翻訳」、乃至『源氏物語』の「現代」への「移植」という表現を用いている点に着目した。旧訳は序文において、「原文の色、匂、品位、含蓄等を伝へようとする文学的翻訳」であると位置づけられている。これは、谷崎が旧訳に着手する7年前、昭和2年11月に「中央公論j編集主幹であった嶋中雄作が、日本の作家の手を通して外国文学を翻訳する企画を打ち出した、次号予告の表現と酷似している。谷崎源氏に外国文学の翻訳という発想から始発している点を指摘した。次年度以降は、『源氏物語』の海外での翻訳をも視野に入れ、検証を続けたい。1創作と翻訳とはどのように交渉しているかという問題の検証従来、谷崎源氏の研究は、源氏訳以後の創作行為にどのようにつながったかという点ばかりが検証されている。本年度は〈旧訳〉と、同時期に執筆された小説『猫と庄造と二人のをんな』に着目し、当時の編集者宛書簡と〈新訳〉草稿の書き入れとをもとに、翻訳と創作とが双方向の営為として互いに作用しあっていることを検証した。この点は表現世界と現代語訳の創意を論じる上で「交渉」をキーワードとする本研究が看過することのできない問題であった。成果は近々に活字化してゆきたい。2現代語訳試案の作成「研究実施計画」に掲げていた現代語訳試案を作成した。受け入れ研究室である白百合女子大学において、室城秀之教授、大学院生たちとともに「蓬生」巻を輪読し、その成果を同大学の紀要に発表した。3近代文学という領域における古典受容の検証--与謝野晶子の場合昨年、当初の研究計画調書を大きく変更せざるを得なかったのは、ひとえにこれまで取り組んできた中古文学という領域と近代文学という領域との方法論があまりにかけ離れており、研究計画調書のやり方では近代文学の領域に切り込めないという課題とぶつかったためである。本年度は、近代文学を御専門とする國學院大學の上田正行教授のゼミに参加した。ゼミでは『みだれ髪』を中心とした与謝野晶子・鉄幹研究を扱った。晶子は『源氏物語』の愛読者として知られ、創作活動においても『源氏物語』の表現や筋書きを活かしたと知られる。こと、『みだれ髪』の詠みぶりは「源氏ぶり」とも呼ばれる。ゼミでの発表を経て、國學院大學院友学術振興会後期総会研究報告(2014年1月25日(土)於國學院大學院友会館)において「与謝野晶子の古典受容に関する一考察ー『みだれ髪』冒頭歌を中心として」という論題で発表した。この成果もまた、ただいま活字化している最中である。以上が本年度の研究実施状況の概略である。

最終年度にあたる今年、漸く谷崎の創作と『源氏物語』の翻訳とがどのように関わるのかという問題を、第一の訳〈旧訳〉を手掛けていた三年半の間で執筆した唯一の小説、『猫と庄造と二人のをんな』の中から検証した。現在は投稿・査読中であるため、詳細は省くが、三年かけてようやく谷崎が三度にわたり『源氏物語』を訳し続けたことの意義について論じるという入り口に立ったことになる。研究員着任直後に。中古文学の手法からのアプローチが作家の翻訳の検証に必ずしも有効に機能しないことが判明したため、より合理的に目的を遂行できるよう、谷崎の創作との連関を検証する方向に研究計画を変更し、創作と翻訳との連関を、國學院大學蔵『谷崎潤一郎新訳源氏物語』草稿から発見するいう成果を得た。26年度が最終年度であるため、記入しない。当初の研究計画においては、「好色」というキーワードと関わる単語(「好き心」「好き」など)を摘出し、谷崎源氏でどう訳出されているかを通して、訳出の際に谷崎が最も重んじた「物語の色気」の内実を検証しようとした。しかし、本年度の調査を通して、光源氏の藤壺思慕などの禁忌性のある場面を、谷崎が頭注を用いて巧妙に訳出していることに気付いた。単語単位ではなく、もう少し大きな視点で捉えなくてはならない。方向性はそのままに、方法論を再検討するにつき、進捗に影響が出ている。谷崎源氏を古典のみならず近代の領域で論じてゆく方法がつかめてきた。また、翻訳と創作とは、一方向の影響下にあるのではなく、互いに交渉しあって成立しているのではないかという本研究のねらいと直結するテーマを扱うことが出来た点において、有意義な成果を挙げることが出来た。上記の通り、訳文について、「原文における「好色」のニュアンスをもつ表現を認定し、訳文から摘出する」という作業を機械的に行うことが困難であることが分かってきた。そのため本年度は、谷崎が最も危険なところと規定した「空蝉」に関する登場場面をテクストデータ化し、原文、旧訳、新訳とを比較し、その差異から、谷崎の重んじた「物語の色気」について検証する方法に変更する。本年度の成果を学会誌等に投稿し、批判を浴びたい。また、調査をする過程で、『源氏物語』の文体で特に谷崎は「帚木」に注目していることが改めてわかったので、「帚木」の訳出にどのような工夫が凝らされているかという点を重点的に検証してゆきたい。
虚血再灌流傷害に対する心筋保護および血管新生療法の効果判定における核医学の有用性

エリスロポイエチンによる再灌流時心筋保護療法に関しては、データが集積されつつあり、非投与例に比し、心筋リモデリング、心機能低下を抑制する効果があると報告されている。しかし、抗アポトーシス効果を持つ薬剤による治療だけで、慢性期心機能は心不全に陥らない程度に維持されるのか、予後の改善は十分なのか、薬剤の至適投与量、投与のタイミング等、未だ十分解明されていない事項が多かった。そこでわれわれは、研究実施計画に基づいてまず至適投与量、タイミングについての実験を行った。結果としては、エリスロポイエチンの量が200U/kgが最も低容量で虚血再灌流傷害を最もよく抑制しており、投与タイミングは、再灌流直前に静脈内投与を行うのが最も効率よく虚血再灌流を抑制でき、臨床的な条件にも合致していると考えられた。^<99m>Tc-Annexin Vにより虚血再灌流傷害に陥った心筋細胞およびエリスロポイエチンによって十分これが抑制されている様子がよく描出されていた。また、心エコーにて確認したところ、エリスロポイエチンによって虚血再灌流傷害が抑制され、^<99m>Tc-Annexin Vの集積が軽度なグループにて4週間後のリモデリングは、エリスロポイエチンを投与していないグループに比べ軽度であり、^<99m>Tc-Annexin Vによって治療効果および梗塞後心筋のリモデリングの予後推定が可能であった。現在虚血再灌流傷害の予防として臨床応用されている薬剤はなく、さらに虚血再灌流の程度を評価できるデバイスもないため、今後非常に発展が期待される結果であると考えられた。現在までに、心筋虚血再灌流モデルにおける心筋傷害部位がエリスロポイエチンの投与によって著明に縮小される様子を、^<99m>Tc-Annexin Vを用いて良好に描出できることをすでに確認している。この手法を用いて、エリスロポイエチンの至適投与量、至適投与タイミングについての検討を終了し、エリスロポイエチンの造血作用による副作用が出現しない最小限の投与量を決定している。また、^<14>C-FLTにより増殖細胞の存在を評価可能か検討するため、トレーサの集積程度を心筋虚血再灌流モデルに対して骨髄単核細胞を用いた血管新生治療を併用したモデルにて検討したが、^<14>C-FLTによる評価は困難であった。この結果を踏まえ、現在、99mTc-Annexin Vを用いたエリスロポイエチンによる心筋保護療法の効果判定が正しいかどうかの評価を行うために、TUNEL染色を用いた組織学的検討により裏付けを行っている。また、エリスロポイエチンの短期的投与が予後に関連する長期的な心筋リモデリングや心機能を改善するかを、同じプロトコールで作成した心筋虚血再灌流モデルに対して心臓超音波を用いて4週間評価を行う予定である。エリスロポイエチンの短期的投与によって、長期の改善効果を得られることが可能ならば、^<99m>Tc-Annexin Vによる虚血再灌流傷害に対する心筋保護効果の効果判定は、長期的な予後の推定にも有用であると考えられ、さらに臨床的意義が高まるものと考えられる。現在までの結果では、組織学的な裏づけが完了していないことに加え、心臓超音波を用いた長期予後に関するデータを現在採取中であるため、本年度において、上記のデータ採取を早期に完了し、英文雑誌への論文投稿を予定している。
E群連鎖球菌表層抗原と遺伝子型に関する研究

本研究では、E群連鎖球菌(GES)の表層抗原の特性を解析するため、本菌の血清型II,IV及びVに対する単クロン抗体(MAbII-T,IV21,V16)を作製し、それらによる認識抗原の免疫化学的性質を調べた。MAb II-TはS.porcinusに属する37株のうち血清型IIとVの菌株とのみ反応した。この結果は、これらの2株が共通の抗原決定基を有し、血清学的に同一であることを示す。IV21は血清型IV菌に特異的に反応した。一方、V16は全てのGESと反応するので、GESの群抗原を認識している可能性が大きい。本抗体により認識される抗原はハプテン阻害実験よりグルコースアミン類似構造を有することが判明した。これらの抗体の認識する抗原を精製するため、血清型IIまたはIV菌体よりオートクレーブ処理により粗抗原を抽出し、更に陰イオン交換、及びゲル濾過クロマトグラフィーを行った。MAb II-Tの精製抗原は糖98.6%、蛋白質1.4%で構成される多糖体であることが判明した。また、V16の精製抗原は、最終的に糖濃度418μg/ml、蛋白質濃度34.3μg/mlの濃縮標品として得られた。IV21の抗原については現在精製中である。更に本菌群の血清型と遺伝子型の関係を調べるため、標準株6株(6血清型)と臨床分離株3株よりDNAを抽出、精製し、GC含量を測定すると共に相同性試験(DNA-DNAハイブリダイゼーション)を行った。GC含量は、用いた全ての菌株について36-38%の値であり、異なる血清型間では差がなかった。また血清型II型菌より得たDNAをプローブとしてハイブリダイゼーションを行ったところ、血清型V菌より得たDNAのみが100%の相同性を示したのに対し、他の菌のそれは56-76%であった。この結果は、単クロン抗体によって認識される血清型と遺伝子型との間の強い相関関係を示唆している。今後は、更に精密なDNA分析法であるRibo-typing法を駆使して、遺伝子型と血清型との関係を解明すると共に菌株間の詳細な比較を行う予定である。本年度申請備品である標準クロマトグラフィー装置一式が予定通り購入され、E群連鎖球菌と反応する単クロン抗体及び抗体と反応する抗原の精製に大いに役立ち、研究が効率よく進展した。本年度の計画実施はE群連鎖球菌の表層抗原に対する単クロン抗体を得ること及びその抗体が認織する抗原の性質を調べることである。本菌群の血清型II又はVの全菌細胞で免疫したマウスより得た脾細胞とミエローマ細胞を細胞融合した後、酵素抗体法(EIA)で抗体産生ハイブリドーマ(Hyb)を選別した。更に、限界希釈法により3回のクローニングを行い安定なHyb-II-T及びV7が得られた。これらのHybより得られる単クロン抗体(MAb-II-T、V7)のアイソタイプは各々IgG1及びIgMであった。これらの抗体は共にEIAで、本菌群の標準株(6血清型)を含む37株のうち、IIとV血清型菌とのみ反応することが判明した。

MAb-II-Tについてはマウス腹水より親和性クロマトグラフィーにより精製標品を得ると共に、抗体が反応する抗原の性質を調べた。本抗体はII及びV血清型菌体より生食中で120°C、20分間オートクレーブ処理することにより抽出した粗抗原とゲル内沈降反応を生じた。この粗抗原をイオン交換及びゲル濾過クロマトグラフィーにより精製したところ、糖98.6%、蛋白質1.4%で構成される多糖体であることが判明した。更に本菌群の遺伝子型と血清型の関係を調べるために、標準株6株(6血清型)および臨床分離株3株よりDNAを抽出・精製し、予備的にDNA-DNAハイブリダイゼーションを行った。血清型IIの菌より得たDNAをプローブとしてハイブリダイゼーションを行うと、血清型Vの菌のDNAのみが100%の相同性を示したのに対し、他の菌株のそれは56-76%であった。この結果は、単クロン抗体により認識される血清型と遺伝子型の間に強い相関性のある事を示唆しており、平成5年度の計画遂行に大いに期待が持たれる。本年度は当該研究の最終年度に当たるので設備品としては購入予定がない。本年は新たに、単クロン抗体IV21およびV16を単離することができた。前者は一部のE群連鎖球菌としか反応しないが、後者は全てのE群連鎖球菌と反応するので、本菌の同定試薬として有望である。V16により認識される抗原はハプテン阻害実験よりグルコースアミン類似構造を有することが判明し、過去に単離した単クロン抗体S-39と同じである可能性が高い。これらの抗体の認識する抗原を精製するため、血清型IV菌体より得たオートクレーブ処理抽出物を陰イオン交換、及びゲル濾過クロマトグラフィーを行った。V16の精製抗原は、最終的に糖濃度418μg/ml、蛋白質濃度34.3μg/mlの濃縮標品として得られた。しかし、IV21の抗原については現在精製中である。更に本菌群の血清型と遺伝子型の関係を調べるため、標準株6株(6血清型)と臨床分離株3株よりDNAを抽出、精製し、GC含量を測定すると共に相同性試験(DNA-DNAハイブリダイゼーション)を行った。GC含量は、用いた全ての菌株について36-38%の値であり、異なる血清型間では差が見られなかった。また血清型II型菌より得たDNAをプローブとしてハイブリダイゼーションを行ったところ、血清型V菌より得たDNAのみが100%の相同性を示したのに対し、他の菌のそれは56-76%であった。この結果は、単クロン抗体によって認識される血清型と遺伝子型との間に強い相関関係のあることを示唆しており、非常に興味深い。全体的に当初の研究目的を概ね達成したとは言え、本実験のみでは必ずしも十分とは言い難い。今後は、更に精密なDNA分析法であるRibo-typing法を駆使して、遺伝子型と血清型との相関関係を解明すると共に菌株間の詳細な比較を行う予定である。