hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
テキストと画像を統一的に扱える概念的情報検索の定式化とそのポータルサイトの構築

商用の画像サーチエンジンとユーザの間に画像検索ポータルサイトを設置して,文献検索と同様,キーワードによる質問と概念的にマッチする画像がWWWから取り出せるようにするのが目的である。質問が与えられると,ポータルサイトのデータベースからとWWWからとの画像をマージした形で結果を出力する。後者の画像には十分な注釈が付けられていないことが多いが,その場合には,質問をしたユーザに注釈を付けてもらい,これを画像と共にポータルサイトのデータベースに蓄積することで,以後の概念的検索に役立たせるようにした。ユーザによる画像への注釈付けの枠組みでは,写真術を参考に求めた画像のタイプ(4種)ごとに注釈付けフォームを定めておき,注釈付けの際には画像のタイプに応じたフォームを提示して,そこでのスロットの中に思いつくキーワードを入力してもらうようにした。スロット名は入力すべきキーワードが属する概念の名前を示す。スロットの数は最大でも4つしかない。不適当な入力キーワードは,概念的フィルタリングで整理される。注釈付けフォームと概念的フィルタリングの効果は,画像検索エンジンGoogleへの100の質問に対して得られた適合画像を対象に調べた。概念的フィルタリングを使うと,キーワードの出現頻度に注目するよりも,より適切なキーワードが得られることを実験的に確かめた。ここでの画像検索ポータルサイトの実現には,注釈付け支援に加えて,質問と概念的に見合う画像をポータルサイトのデータベースから取り出す仕組み,および商用のサーチエンジンと協同して働く仕組みが必要である。前者に関しては,ウェブディレクトリをもとにして編集したウェブディレクトリ辞書を用いる概念的マッチング法を定式化し,その有効性を種々の実験を通じて確かめた。また,後者に関しては,サーチエンジンExcite,Yahoo!ならびにGooと協同で働く仕組みを実現した。キーワードによる質問で,望みのテキストあるいは画像を含む日本語ホームページが取り出せる検索手法を確立することが主目的である。必要な処理は,テキストからのキーワード抽出,画像へのキーワード付与,不要なキーワードの除去,キーワードの概念見出し語への置換およびテキストや画像の概念的ランキングである。本年度の実績を以下にまとめる。加えて,検索ポータルサイト構築の準備も行った。「テキストの扱いに関して」(1)キーワードの抽出:テキストのキーワードとしては,名詞句のうち,相対的出現頻度の重み順に従う上位20個までを抽出すればほぼ十分であると分かった。(2)キーワードの概念見出し語への置換と概念的ランキング:ウェブサイトYahooやGoogleの概念体系をもとに,中の概念見出し語それぞれに同義語を加えて拡張した概念辞書を編集した。この概念辞書を用いてキーワードを概念見出し語に変換した後,質問との概念的な類似性に従いホームページをランキングするとすると,検索効率が上昇することを確認した。「画像の扱いに関して」(1)キーワードの付与:画像に対するキーワードは,多数のユーザが協調して付与するようにした。付与を容易にする仕組みに特徴がある。具体的には,キーワードを付与しようとする画像をタイプ分けし,この情報をもとに既にそのタイプに属させられている画像のキーワードを概念的にまとめて提示するようにした。画像タイプとして5種類を考えれば十分であることが分かった。(2)不要キーワードの除去:多数のユーザによる付与からくる雑音を除去するため,EDR電子化辞書を利用した概念的フィルタリング法(頻度高く生じる概念見出し語を生まないキーワードを除去する)を定式化し,その有効性を実験的に確かめた。(3)概念見出し語への置換と概念的ランキング:画像のキーワードをもとに,テキストと同様に扱うようにした。商用の画像サーチエンジンとユーザの間に画像検索ポータルサイトを設置して,キーワードによる質問と概念的にマッチする画像がWWWから取り出せるようにするのが目的である。

後者の画像には十分な注釈が付けられていないことが多いが,その場合には,質問をしたユーザに注釈を付けてもらい,これを画像と共にポータルサイトのデータベースに蓄積することで,以後の概念的検索に役立たせるようにする。昨年度の研究では,ユーザが画像への注釈付けを容易にできるよう支援する枠組みを作り上げた。具体的には,4種に分けた画像のタイプごとに注釈付けフォームを定めておき,注釈付けの際には画像のタイプに応じたフォームを提示して,そこでのスロットに思いつくキーワードを入力してもらうようにするというものである。スロット名は入力すべきキーワードが属する概念の名前を示す。スロットの数は最大でも4つしかない。不適当な入力キーワードは,概念的フィルタリングで整理される。本年度は,WWW上の画像を対象にしたとしても,提案した注釈付けフォームを有効に利用でき,また,概念的フィルタリングを使うと不適切なキーワードが除去されることを実験的に確認した。ここでの画像検索ポータルサイトの実現には,これら注釈付け支援の仕組みに加えて,質問と概念的に見合う画像をポータルサイトのデータベースから取り出す仕組み,および商用のサーチエンジンと協同して働く仕組みが必要である。前者に関しては,ウェブディレクトリをもとにして編集したウェブディレクトリ辞書を用いる概念的マッチング法を定式化し,その有効性を確かめた。また,後者に関しては,サーチエンジンExcite, Yahoo!ならびにGooと協同で働く仕組みを実現した。
西アフリカにおける重症マラリア発生機序のアミノ酸インフォマティクス解析

マラリア原虫は、増殖に必要なアミノ酸の一部を感染動物の血漿中に依存するため、その中に含まれる遊離アミノ酸について、マラリア原虫の寄生成立において重要な役割を担うことが示唆されていた。本研究では、タイのマヒドン大学病院に入院した重症マラリア患者の血液を用いた解析から、マラリア原虫感染による血中アミノ酸組成の顕著な変化、および血中アミノ酸とマラリア重症化との関連性を見出した。熱帯熱マラリア患者は、適切な処置が行われない場合、重症貧血や脳性マラリアなどの重篤な症状を呈する。マラリア原虫は、赤血球内にて分裂・増殖を繰り返す際、感染宿主から様々な栄養素を取り込む。マラリア原虫は大半のアミノ酸合成経路を欠いているため、アミノ酸源をヘモグロビンおよび血漿中の遊離アミノ酸に依存している。このことから、熱帯熱マラリア患者の病態と、アミノ酸群の血中動態との関連が予想された。そこで我々は、アミノ酸濃度とその変化をパラメータ化し、ヒトの臨床検体および齧歯類モデルを用いた解析を実施することにより、マラリア重症化とアミノ酸群の相互作用の検証を実施した。タイのマヒドン大学にて重症熱帯熱マラリアと診断された患者血清に関して、遊離アミノ酸およびその誘導体(計35種類)について、網羅的な濃度パターン(アミノグラム)を測定した。その結果、患者血清アミノグラムは治療前後において顕著な差を有することが明らかとなった。同データをtwo-wayクラスター解析およびスピアマンの順位相関分析に供した結果、アミノグラムとマラリア重症化との間に相関関係が認められた。さらに、実験的脳性マラリアのモデルマウスを用いて、アミノグラムと脳性マラリアとの相互作用解析を行った。その結果、アミノグラムを変化させたマウスにおいては、原虫の増殖動態に変化は認められないままに生存率が上昇した。網羅的な宿主アミノ酸情報(アミノ酸インフォマティクス)を解析パラメータとしたこれらの実験結果は、一部のアミノ酸群がマラリアの重症化に関与する仕組みを示唆した。マラリア原虫は、大半のアミノ酸合成経路を欠いている。ヒトヘモグロビンに含まれていないイソロイシン(Ile)など一部のアミノ酸は、マラリア原虫の赤血球内での増殖時に血漿中から取り込まれる。通常、血漿に含まれる遊離アミノ酸の濃度組成(血漿アミノグラム)は、恒常性を維持する範囲で一定に保たれている。我々は、マラリア原虫の赤血球への感染率上昇に従って、マウスの血漿アミノグラムが顕著に変化することを明らかにした。この宿主血漿アミノグラムは、アミノ酸配合率を調節した合成食によって人為的に誘導することが可能である。そこで我々は、食餌に含まれるアミノ酸含量がマラリアへ与える影響の検証を実施した。マラリア原虫の増殖率が異なる3系統のマウスについて、感染前後の血漿アミノグラムを解析したところ、Ileを含む一部のアミノ酸群の濃度に、原虫増殖率と比例する動態が認められた。そこで、Ile欠損食を与えたマウスにマラリア原虫を感染させたところ、原虫赤血球感染率が有意に減少することが明らかとなった。次に、タイにおいて重症マラリアと診断された患者血清のアミノグラム解析を実施した。その結果、一部のアミノ酸と重症マラリアの定義因子に関連が認められた。脳性マラリアのモデルマウスを用いた解析において、Ile欠損食を与えることによりマウスの生存率が向上することを明らかにした。栄養学的知見に基づいたこれらの結果は、マラリア制御におけるアミノ酸摂取量調整の有効性を示唆するものである。マラリア原虫は、その生命活動に必須なアミノ酸源を、赤血球内のヘモグロビン分解に加え、宿主血液中の遊離アミノ酸に依存する。アミノグラム解析の結果から予測されたイソロイシンの貢献度から、食餌性にマラリア原虫の増殖を制御できることが明らかになり、概ね順調に進展していると考えられる。マラリアは、毎年40万人以上の死者を出し続けており、AIDSや結核とともに世界三大感染症に分類されている疾病である。我々はこれまでに、網羅的なアミノ酸濃度パターンであるアミノグラムを解析パラメータとし、齧歯類特異的マラリア原虫感染モデルを中心とした、宿主血中遊離アミノ酸情報(アミノ酸インフォマティクス)の解析を実施している。マラリアの諸症状の中で最も重症度が高いものとして、脳性マラリアが挙げられる。脳性マラリアは、マラリア原虫感染赤血球の脳毛細血管への付着および集積による脳血管の塞栓により発症するため、脳の原虫集積量は間接的に脳性マラリアの重症度と見なすことが出来る。我々はこれまでの研究から、イソロイシン欠損食(Ile(-)食)の給餌によって、C57BL/6Jの生存率が上昇する結果を得ている。本研究において我々は、Ile(-)食を給餌したC57BL/6Jに齧歯類特異的マラリア原虫P. bergheiを感染させ、脳性マラリアを発症する感染6日後のマウスから外科的に脳を取り出し、in vivo imaging system (IVIS)を用いて同臓器におけるマラリア原虫の集積動態を解析した。その結果、予想外に、脳における原虫量に有意な差は認められなかった。感染赤血球の血管壁への接着は、赤血球後期ステージのマラリア原虫が関与するため、我々はこの後期ステージのみにおいてルシフェラーゼを発現するマラリア原虫株(P. berghei/LUC)を用いて、IVISによる同ステージ原虫の集積動態解析を実施した。

その結果から、Ile(-)食の給餌によって脳における同ステージ原虫の集積が顕著に増加していることを明らかにした。これらの結果は、Ile(-)食の給餌が、マラリア原虫存在下においても脳性マラリアを発症しない、すなわちマラリアトレランス能を感染宿主に付与することを示唆する。マラリア原虫は、増殖に必要なアミノ酸の一部を感染動物の血漿中に依存するため、その中に含まれる遊離アミノ酸について、マラリア原虫の寄生成立において重要な役割を担うことが示唆されていた。本研究では、タイのマヒドン大学病院に入院した重症マラリア患者の血液を用いた解析から、マラリア原虫感染による血中アミノ酸組成の顕著な変化、および血中アミノ酸とマラリア重症化との関連性を見出した。マラリア原虫は、その生命活動に必須なアミノ酸源を、赤血球内のヘモグロビン分解に加え、宿主血液中の遊離アミノ酸に依存する。マラリア原虫感染患者における網羅的アミノ酸濃度パターン(アミノグラム)研究から、マラリア発症宿主の重症化にアミノ酸を介する原虫との相互作用が存在すること等が明らかになり、概ね順調に進展していると考える。27年度の研究成果をもとに、宿主血中アミノグラムを解析パラメータとし、健常人の血中遊離アミノ酸情報(アミノ酸インフォマティクス)とマラリア原虫増殖能との相関解析を実施することにより、新規の病原体ー宿主間相互作用の解明を引き続き促進する。28年度が最終年度であるため、記入しない。寄生虫学26年度の研究成果をもとに、宿主血中アミノグラムを解析パラメータとし、マラリア患者の宿主血中遊離アミノ酸情報(アミノ酸インフォマティクス)の解析を実施することにより、新規の病原体ー宿主間相互作用解析を引き続き推進する。イソロイシンを用いた給餌によるマラリア原虫増殖制御研究が予想以上に進展し、それを主に据える研究計画細目を重点的に実施した。その結果、研究計画の実施順序を一部変更し、物品費(消耗品)および人件費の大部分を使用する健常人血清を用いたマラリア原虫増殖能解析関連の研究計画細目を次年度以降に実施することにしたため。タイの熱帯熱マラリア感染患者血清を用いたアミノグラム解析が予想以上に進展し、それを主に据える研究計画細目を重点的に実施した。その結果、研究計画の実施順序を一部変更し、物品費(消耗品)および人件費の大部分を使用する齧歯類マラリアモデルおよび培養関連関連の研究計画細目を次年度以降に実施することにしたため。物品費(消耗品)および人件費を活用し、健常人血清を用いたアミノグラム解析と原虫側等当の解析等を実施する。物品費(消耗品)および人件費を活用し、齧歯類マラリア感染モデルにおける宿主側環境要因および原虫側応答の解析、および熱帯熱マラリア原虫培養系における同アミノ酸作用の解析を実施する。
複合遺伝子変異マウスを用いたがん化・転移シグナルの解明

Rbがん抑制遺伝子ヘテロ型欠損マウスを中心に、様々な複合遺伝子変異マウスを作製し解析した。Rb不活性化時に、Ras依存的なDNA損傷応答と細胞老化シグナルが誘導され、がんの悪性化に拮抗することを証明した。また、Rbが、E2FとSREBP依存的に、Ras蛋白質等のイソプレニル化を制御することを見いだした。一方、Rasの拮抗的下流遺伝子RECKが、MMP-2依存的に、β1-integrinシグナルとEGFRシグナルを制御することを見いだした。がん抑制遺伝子Rbは、多くのヒトがんで失活する。Rbをヘテロ型で欠くマウスは、甲状腺C細胞由来良性腺腫(以下アデノーマ)を発症する。我々は、Rbヘテロ型の遺伝学的背景に加え、N-ras、Ink4a、ARF、Suv39hl、ATMのそれぞれを同時欠損するマウスを解析することによって、Rbを欠損するとDNA損傷応答と細胞老化(以下セネセンス)がN-Ras依存的に誘導され、Rb欠損アデノーマ細胞のがん化に拮抗することを証明した。Rb失活によって、E2F依存的にSREBPとその下流遺伝子のファルネシル2リン酸合成酵素、種々のイソプレニル化関連酵素群の発現が誘導されるため、N-Rasの膜輸送と活性が中等度に亢進し、p130依存的なセネセンスを引き起こすことも判明した。この場合、Rbに代わってp130がSuv39hlとのヒストンメチル化複合体を形成する。同時に、がん原性(恒常的活性化型)突然変異を有するN-Rasの存在下では、p130とSuv39hlの複合体が形成されないためにセネセンスが誘導されないことも判明した。更に、Rbは、N-Rasだけでなく、CAAXモチーフを有する多くの蛋白質の膜輸送と活性化を制御する可能性も示された。一方、Rbによるセネセンス制御を更に解析するため、shRNA発現ライブラリーをRb-/-MEFに導入、Rb欠損に追加して不活性化が起きたとき(セカンドヒット)にセネセンス回避を誘導するshRNAをスクリーニングし、陽性クローン約50を得、約10種類の標的遺伝子を同定した。今後も、これらの知見をもとにRbの多様な機能の理解を深め、ヒト臨床癌の克服に役立てる。また、Rbと低分子GTP蛋白質の間の相互拮抗的相互作用が、細胞周期の制御においていかなる役割を果たすのか追求する。Rbがん抑制遺伝子ヘテロ型欠損マウスを中心に、様々な複合遺伝子変異マウスを作製し解析してきた。Rb不活性化時に、Ras依存的なDNA損傷応答と細胞老化シグナルが誘導され、がんの悪性化に拮抗することを遺伝学的に証明した。また、その機序として、Rbが、E2FとSREBP依存的に、Ras蛋白質等のイソプレニル化を制御することを見いだした。このことの臨床的意義を追求している。本年度は更に、胚性幹細胞・がん幹細胞におけるRb-Ras経路の役割に注目した。Rb-N-rasあるいはRb-Ink4a両欠損マウス胚繊維芽細胞(MEF)は、Rb単独欠損MEFよりも細胞老化を逸脱する能力が高い。ところが、Rb-N-ras両欠損マウスMEFは、Rb単独欠損MEFよりも高い分化能力を持つ。この現象の意味はなんだろうか?Rb-N-ras両欠損マウスMEFは、特殊な条件下で長期間培養すると、Nanog+/Oct-3/4+/Sox-2+の胚性幹細胞様の細胞塊を形成する。この活性は、Rb単独欠損MEFでも観察されるが、N-ras追加欠損によって約100倍効率が上昇する。また、Rb-N-ras両欠損マウスMEF由来の細胞塊は、免疫不全マウスの特定のニッチに導入すると、腫瘍を形成する。Rb不活性化は、様々な固形がんの悪性進展時において頻繁に観察される。様々な系を用い、固形がんのがん幹細胞の成立にRbとRasの関係が関わる可能性があるかを追求している。一方、Rasの拮抗的下流遺伝子RECKの標的シグナル経路を、いくつかの複合遺伝子変異マウス・細胞を用いて同定した。RECKが、MMP-2依存的に、β1-integrinシグナルとEGFRシグナルを制御することを見いだした。
歯周炎・膠原病のリスク遺伝子多型分類に基づくRNA発現とタンパク同定

本研究では、歯周病と膠原病の感受性に関わる共通遺伝子を解明し、感受性に関連した歯肉組織中のRNA発現と好中球におけるタンパクを同定することを目的とした。解析の結果、歯周炎・膠原病患者のFc受容体、インターロイキン1,6の関連が明確となり、また好中球産生タンパクとしてシトルリン化変換酵素タンパクの発現亢進、さらに歯周炎歯肉組織での共通変動遺伝子発現が同定された。1インフォームド・コンセントが得られ、米国リウマチ協会の基準により関節リウマチと診断された歯周炎患者97名を対象に歯周診査および血液採取を行った。サンプルおよび診査結果は匿名化し、ゲノムDNAを抽出後-80・Cに保存した。多型解析を行いIL-1RA+2018の関連性が認められ、さらに現在、35SNPの解析中である。2健常者6名の好中球に、P. gingivalis外膜タンパク抗原に対するヒトIgGl抗体で刺激し、SYPRO Rubby染色による二次元電気泳動を行ない、ゲル上のスポット濃度を画像解析ソフトにて定量比較した。その結果、ヒト抗体刺激で計11スポット、FcレセプターIIIb遺伝子型で計9スポットが、候補タンパクとして検出された。質量分析の結果、前者の一部は血管拡張関連リン酸タンパクやグリセロ燐酸転移酵素の一種、後者の一部はカルシウム結合性タンパクの一種が同定された。3重度歯周炎患者2名、歯肉増殖症患者1名より病変部と非病変部の2ケ所より歯肉組織を採取しtotal RNAを抽出した。その後良好なRNAであることを確認後cDNA合成を行い、Affimetrix社のGenechipR Human Genome U133 Puls2.0マイクロアレイにて網羅的遺伝子発現解析を行った。その結果、各サンプルにおいて発現量に2倍以上の差がある遺伝子をピックアップしたところ、2例の歯周炎の場合はcathepsinZ、IL-6、IL-8、IL-16、selectinL、collagen typeIV、など酵素、サイトカイン系、細胞接着分子などの遺伝子が上昇していた。またkeratinなどの細胞骨格関連遺伝子が有意に低下の傾向を示した。1例の増殖症の場合はSPN、MYLC2PL、TGF-β1、KRT23、SOCS3、CSF3といった遺伝子群が有意に増加を示した。本年度の研究において、歯周炎・膠原病患者においてインターロイキン1-B(IL-1B)+3954の関連が明確となり、また歯肉増殖歯肉組織での共通遺伝子発現が同定され論文発表がなされた。1歯周炎・膠原病患者の遺伝子多型解析関節リウマチを伴う歯周病患者137名を対象に遺伝子多型解析および血清サイトカイン濃度測定を行った。その結果、インターロイキン1-B(IL-1B)+3954 Tアリル保有者は、血清腫瘍壊死因子濃度が非保有者と比べて5倍以上高く、同疾患感受性に有意に関与することが認められた。2 FcレセプターIIIb遺伝子型の違いによる好中球産生タンパク健常者6名の好中球をPorphyromonas gingivalis外膜に対するヒト抗体での刺激時に誘導されるタンパク同定を行った。その結果ヒト抗体刺激では4スポット、遺伝子型で3スポットが検出された。ヒト抗体刺激では、カルシウム結合タンパク、熱ショックタンパクなどが同定され、一方、FcレセプターIIIb遺伝子型では、ラクトフェリン、脱イミノ化活性タンパクなどが同定された。3歯周炎と歯肉増殖症歯肉における共通変動の遺伝子発現重度歯周炎患者3名、歯肉増殖症患者4名より病変部と非病変部の2ヶ所より歯肉組織から、マイクロアレイにて網羅的遺伝子発現解析を行った。結果、歯周炎における有意な共通変動遺伝子としてMMP-2、IL-1beta、ITGB2、APP、CIQA、Rac2、CXCL12、CXCR-4などが上昇、DSC1、DSG1、Connexin、Nestinなどが減少した。一方、歯肉増殖症においては、被検者間で遺伝子発現に大きな違いがみられ4例に共通する変動遺伝子は検出されなかったが、α2integrin、TIMP-1、CathepsinL、TGF-β、MMP-1が候補遺伝子として示された。本年度の研究において、歯周炎・膠原病患者のインターロイキン1,6の関連が明確となり、また好中球産生タンパクとしてシトルリン化変換酵素タンパクの発現亢進、さらに歯周炎・歯肉増殖歯肉組織での共通変動遺伝子発現が同定された。1歯周炎・膠原病患者の遺伝子多型解析:関節リウマチを伴う歯周病患者88名と歯周病患者22名の遺伝子多型と血清炎症性サイトカイン測定を行った。その結果、インターロイキン1-B(IL-1B)+3954に有意差があった。また、RA活動度と血清中のインターロイキン6、腫瘍壊死因子、歯周ポケット内炎症レベルとの間に有意な関連が認められた。

2 FcレセプターIIIb遺伝子型の違いによる好中球産生タンパク:健常者10名の好中球を対象に、歯周病原細菌に対する抗体の刺激で誘導されるタンパク発現についてFcレセプターIIIb遺伝子型(NA1,NA2)ごとに調べた。その結果、計6スポットが検出され同定したところ、NA1タイプでは好中球機能に関わるタンパクが強く発現し,NA2タイプでは関節リウマチの病原因子で自己免疫応答に関与すると考えられるシトルリン化変換酵素タンパクの発現亢進が見られた。3歯周炎と歯肉増殖症歯肉における共通変動の遺伝子発現:重度歯周炎患者17名、歯肉増殖症患者14名、健常者24名の歯肉組織から、マイクロアレイとrt-PCRにて網羅的および定量的遺伝子発現解析を行った。結果、歯周炎における増加遺伝子としてITGB2、MMP-2、CXCL12、CXCR-4、Rac2が、減少遺伝子としてConnexin、DSC1、DSG1、Nestinが見出された。一方、歯肉増殖症においては、被検者間で遺伝子発現に大きな違いがみられが、MMP-1、MMP-12、Cathepsin Lが増加遺伝子、Keratin-10、TGF-β1が減少遺伝子として示された。
Toll様受容体に注目した三叉神経領域の病態痛発生メカニズムの解明

Toll-like receptor 4(TLR4)、炎症性サイトカイン及び細胞内シグナル伝達系に着目して、オトガイ神経切断後の顎顔面領域異所性疼痛の発症メカニズムの解明を行った。また、ウシ由来ラクトフェリンによる顎顔面領域異所性疼痛への応用についても検討した。オトガイ神経切断後、小膠細胞TLR4活性後がp38MAPK細胞内伝達を駆動し、これにより誘導されIL-18がオトガイ神経切断後の異所性疼痛に重要な役割を果たすことが示唆された。また、ウシ由来ラクトフェリンは、p38 MAPKのリン酸化とIL-18の産生を抑制し、鎮痛効果を発揮すると考えられた。実験動物として8週齢Sprague-Dawley系雄性ラットを用いた。最初に、異所性疼痛モデルとしてラットオトガイ神経を切断した。麻酔下にて左側オトガイ神経を露出し4-0号絹糸で結紮した後、神経遠位側を切断した。異所性疼痛としての有用性を検証するため、von Freyfilamentを用いてwisker pad(ヒゲ部)における機械的疼痛逃避行動テストを行い、疼痛閾値を評価した。次に、哺乳動物由来タンパクXを投与した。コントロールとしてアルブミンを投与した。その結果、以下のことが明らかとなった。1オトガイ神経切断24時間後から異所性疼痛を生じ、8週間経過しても疼痛閾値の低下が続いた。2オトガイ神経切断7日後にタンパクXを投与すると、疼痛閾値の上昇が24時間以上持続した。一方、アルブミンを投与しても疼痛閾値の上昇は認められなかった。すなわち、タンパクXの異所性疼痛に対する鎮痛効果が認められた。異所性疼痛モデルとしてラットオトガイ神経を切断した。von Freyfilamentを用いてwisker pad(ヒゲ部)における機械的疼痛逃避行動テストを行い、疼痛閾値を評価した。次に、哺乳動物由来のタンパクXを投与した。その結果、以上のことが明らかとなった。2オトガイ神経切断7日後にタンパクXを投与すると、疼痛閾値の上昇が48時間持続した。一方、アルブミンを投与しても、疼痛閾値の上昇は認められなかった。3そこでタンパクXの鎮痛作用を分子レベルで解明することにした。オトガイ神経切断後1週間後、三叉神経脊髄路核において細胞内シグナル伝達系であるp38とNFKappa-βのリン酸化が引き起こされるが、タンパクXを投与するとこのリン酸化が抑制された。4p38は炎症性サイトカインであるTNF-α産生をに関与していることが知られている。タンパクXを投与するとオトガイ神経切断後のTNF-α増加が抑制された。5NFKappa-βのリン酸化阻害薬を投与すると、異所性疼痛の抑制が認められた。1.オトガイ神経切断後、長期にわたるリン酸化p38MAPKとIL-18の増加が認められた。また、リン酸化p38 MAPKは小膠細胞に発現していた。2.TLR4アンタゴニストであるLPS-RSを髄腔内投与すると、p38 MAPKのリン酸化とIL-18産生が抑制され、異所性疼痛も抑制された。3.p38MAPKのインヒビターであるSB203580を髄腔内投与すると、p38 MAPKのリン酸化とIL-18の産生が抑制され、異所性疼痛も抑制された。4.タンパクXを髄腔内投与すると、リン酸化p38及びIL-18の産生と異所性疼痛の抑制が認められた。また、中枢神経におけるタンパクXの受容体が確認された。さらに、ウシ由来ラクトフェリンは、髄腔内投与後、細胞内に担体輸送され、tumor necrosis factor receptor associated factor 6 (TRAF6)と結合することが確認された。5.IL-18Binding Proteinを髄腔内投与すると、異所性疼痛が抑制された。以上の結果より、オトガイ神経切断後、小膠細胞に発現するTLR4が活性化され、p38 MAPKのリン酸化とIL-18の産生が増加することにより異所性疼痛を誘発することが示唆された。また、タンパクXはTRAF6と結合することにより、p38 MAPKのリン酸化とIL-18の産生を抑制し、鎮痛効果を発揮すると考えられた。オトガイ

神経切断後、小膠細胞TLR4活性後がp38MAPK細胞内伝達を駆動し、これにより誘導されIL-18がオトガイ神経切断後の異所性疼痛に重要な役割を果たすことが示唆された。また、ウシ由来ラクトフェリンは、p38 MAPKのリン酸化とIL-18の産生を抑制し、鎮痛効果を発揮すると考えられた。オトガイ神経切断後にタンパクXを投与したところ異所性疼痛が抑制された。分子レベルで疼痛抑制メカニズムの検討を行ったところ、三叉神経脊髄路核における細胞内シグナル伝達系と炎症性サイトカインの抑制が確認できた。口腔解剖学培養細胞実験系ではタンパクXはTLR4に作用することが知られている。予備実験として本実験モデルにTLR4拮抗薬を投与すると異所性疼痛が抑制された。そこで、免疫沈降を行い本実験モデルでのタンパクXとTLR4の相互作用について解析するつもりである。また、NFKappa-βが異所性疼痛を引き起こすメカニズムを詳細に検討するつもりである。オトガイ神経切断後の三叉神経脊髄路核におけるMAPKと炎症性サイトカインの発現をWestern blotにより検討したが、現在のところ良好な結果を得られていない。H26年度は当初の計画より一部実験が進んだ。そこで前倒し請求を行い、次年度に予定していた追加実験の前倒しを計画した。追加実験の重要な部分は順調に進んだが、大学後期の教育業務(解剖実習等)に追われて全ての追加実験を終了することが出来なかった。現在、Western blottsの一次抗体の選択・希釈濃度、ブロッキング剤の検討を行っており、良好な結果が得られつつある。タンパクXは、in vitroの実験系でTLRシグナル伝達系を阻害することが報告されている。今後は、タンパクXの投与後の三叉神経脊髄路核におけるMAPKと炎症性サイトカインの発現を検索することにより、タンパクXの鎮痛メカニズムを明らかにする。実験用消耗品の購入に充てる実験動物としてラットを使用したが、行動実験の結果が予想以上に良好で、余分な動物を購入する必要がなくなったため。免疫染色用のラットを購入する予定である。
高血圧自然発症マウスの責任遺伝子座解析

本研究は、15系統近交系マウスの収縮期血圧(SBP)と拡張期血圧(DBP)の検討とマウス高血圧量的形質遺伝子座(QTL)解析の実施である。15系統のマウスSBPとDBPは、NZO/HIJで最大値(132.4mmHg)、C3H/HeJで最小値(100.5mmHg)を示した。次に、NZOにおける高血圧形質を遺伝学的に解析するため、NZOとC3Hを交配しF2を224個体作製した。NZOは肥満やインスリン抵抗性を伴うII型糖尿病、を呈することが知られており、高血圧との関連が推測される。そこで、SBPに加えてBody MassIndex(BMI)、さらに血漿中インスリンおよびレプチン濃度を測定した。BMIとレプチン、レプチンとインスリン間において相関関係が認められ、肥満とインスリン抵抗性が連鎖していることが確認された。しかしながらSBPとBMI、レプチンおよびインスリン間においては相関関係が見られなかった。肥満やインスリン抵抗性は高血圧発症に関わると考えられているが、NZOの高血圧遺伝子は肥満やインスリン抵抗性とは独立し存在する可能性が示唆された。高血圧自然発症NZOマウスにおける高血圧原因遺伝子座を同定するため、我々はNZOとC3HマウスのF2子孫において交配方式を共変量とした血圧QTL解析を実施した。我々はSBPとDBPに関わる3つのMain QTLを検出した。さらにSBPとDBPから算出したprinciplecomponent(PC1)についてもQTL解析を実施した。結果、新たに1つ合計4つのmain QTL(Chr 1,3,4,8)が同定された。Simultaneous searchではPC1においてsignificant epistaticQTLペアーが2つ(Chr 1と4、Chr 4と8)同定された。最終的なMultiple regression解析において、先の2つのepistaticなQTLペアーが血圧分散の29%を説明することが明らかとなった。本研究の結果は、血圧異常にエピスタシスな相互関係を持った遺伝子がネットワークを構築し関わっていることが示され、高血圧発症には階層的な遺伝構造が複雑に関与することが示唆された。ヒト高血圧の9割は原因不明の本態性高血圧である。その原因は環境因子と遺伝因子が作用する多因子疾患であり、それら複数の遺伝子間、または遺伝子と環境間の相互作用によって高血圧が生じると考えられている。従来、高血圧自然発症ラットでの原因遺伝子探索は行われていたが、マウスでの研究は十分でない。そこで、15系統の近交系マウスにおいて収縮期血圧(SBP)と拡張期血圧(DBP)を検討し、マウス高血圧に関連する遺伝子のQTL解析の可能性を検討した。15系統のSBPとDBPの両形質は、NZO/HIJで最大値(132.4±3.1mmHg)、C3H/HeJで最小値(100.5±3、2mmHg)を示し、その他の系統はこの2系統の間で連続的に分布しており、SBPとDBPは多遺伝子た支配されている可能性が示唆された。次に、NZOにおける高血圧形質を遺伝学的に解析するため、NZOとC3Hを交配し、F1個体を作製、F1同士の交配でさらにF2を224個体作製した。

10週齢でのF1雄のSBPを測定した結果、その平均はNZOとC3Hの中間(CNF1:115±4、NCF1:117±5mmHg)に位置した。またF2雄において、SBPに対する個体数のヒストグラムは、連続的な正規分布を示した。したがって、この高血圧形質は多遺伝子による支配を受けていると考えられた。さらに、NZOは肥満やインスリン抵抗性を伴うII型糖尿病を呈することが知られており、高血圧との関連が推測された。そこで、SBPに加えて12週齢でのF2個体の体重・体長を測定し、Body Mass Index(BMI)(g/cm^2)を算出して、さらに血漿中インスリンおよびレプチン濃度を測定した。その結果、BMIとレプチン、レプチンとインスリン間において相関関係が認められ、肥満とインスリン抵抗性が連鎖していることが確認された。しかしながらSBPとBMI、レプチンおよびインスリン間においては相関関係が見られなかった。肥満やインスリン抵抗性は高血圧発症に関わると考えられているが、NZOの高血圧遺伝子は肥満やインスリン抵抗性とは独立し存在する可能性が示唆された。これらの結果よりNZOとC3H子孫は、高血圧QTL解析に有用であり、ヒト本態性高血圧の解明に貢献すると考えられる。現在QTL解析を実施中である。無拘束による観血式連続血圧測定によるNZO/HIJの血圧動態解析NZO/HIJの高血圧形質について生理学的に理解を深めるため、埋め込め式のトランスドゥサーを利用したテレメトリーシステムにより長期的にわたり無拘束の状態にて連続的血圧、心拍数、運動活性を検討した。結果、NZO/HIJの血圧形質は、非観血式測定形質と同様、C3H/HeJと比較し有意に高い血圧形質を示すこと、血圧形質には日内変動があり、昼夜とはず高血圧を呈していることが明らかとなった。遺伝型検定Muse Genome Informatics database (http://www.inforamtcs.jax.org)の情報をもとに、第1染色体から第19染色体とX染色体まで15cM間隔にてスペースできるように両系統において多型性を示す100種類のマーカーを決定した。遺伝型検定には各表現型において下位に分布する20%と上位に分布する20%の個体に重要な遺伝情報が存在することが予測されるが、5種類(収縮期血圧・拡張期血圧・血漿レプチン、血漿インスリン、血漿グルコース)の表現型の検査を同時に行うとほぼ全ての個体のタイピングを実施した。SSLPを用いPCR解析より各個体のゲノムワイドな遺伝型を決定した。統計学的な解析QTL解析の最初のステップとして、我々はゲノム全体を2-cMステップにてlogarithm of the odds ratio (LOD)をパソコンにて計算することにより表現形質と連鎖するMain QTLを同定した。QTL解析の第2ステップとして、ペアー解析のためSimultaneous search (http://WWW.jax.org/research/churchill)を行うことによって表現形質と連鎖する遺伝子座ペアーを同定した。本研究は、15系統近交系マウスの収縮期血圧(SBP)と拡張期血圧(DBP)の検討とマウス高血圧量的形質遺伝子座(QTL)解析の実施である。
市民への心肺蘇生法普及に関する教育効果の研究

I.小学生の心肺蘇生法については投稿準備中であるが、明らかとなったことなどを示す。心肺蘇生法講習(座学・実習)を福岡市内小学校5年生2クラスの児童に対し実施し、その講習1週間後、3ヶ月後、6ヶ月後に同一の力試し(筆記試験8問:複数選択式あるいは手順の並び替え)を施行し、知識の保持力を検討した。また、講習会当日にはアンケートも施行した。●結果及び考察1)テストの点数は1週間後では性差・クラス差などを認めなかったが、3ヶ月後、6ヶ月後では、性差・クラス別成績に一部有意差を認め、1週間後と6ヶ月後のクラス別成績は、記憶力のよいと考えられる小学生でもやはり後者の方が悪かった。2)採点結果から出題した問題内容が高度であったと考えられるが、The chain of survivalの概念である「119通報」、「そばに居合わせた人の心肺蘇生」についての理解は、半年後でも全体の8割以上が正解しており、初動については実習と結びついて十分に記憶されているものと考えられる。3)細かい手順に関しては、既に1週間後から記憶が曖昧になる傾向が認められた。●その他講習を通して明らかになったこと、気づいたこと1)実施アンケートからは、児童が総合学習のなかで心肺蘇生法教育を受けることが十分に意義があることが伺われた。2)受講時期については、小学校の理科で体のしくみなどとの履修時期との調整を行うなどの検討も必要性がある。3)第二次成長期にあたり、蘇生用人形の性別なども考慮するなどの必要性も感じられた。II.自動体外式除細動器:AED講習に関する研究意義は、現在、政府レベルで非医療従事者によるAEDの使用のあり方について検討されるに至り、あまりなくなったと考えられる。上記検討委員会では、一部で講習会の簡素化などの意見もあるようだが、福岡市周辺の応急手当普及員に試験的に今回実際に講習会を行った限りでは(アンケートは集計中)その必要性を感じている方が多いような印象であった。・心肺蘇生法に関する研究消防機関ならびに日本赤十字社などのわが国で一般市民に心肺蘇生法を啓蒙教育する主機関において、新しい心肺蘇生法ガイドラインに沿った指導の開始が平成14年の4月からと大きくずれ込んだ。本研究の根幹をなす心肺蘇生法実習に関しては、研究計画調書ならびに交付申請書に予め断っていたように、研究途中で指導内容を変更することは研究上不適切であり、指導者側ならびに受講者に混乱を起こすことが強く予想されたため、開始していない.心肺蘇生法実習研究を開始する準備として、本研究に対する協力していただける小学校2校を確保し、総合学習のなかで行うことで、同意を得ている段階である。また、研究デザインは、小学校の内部事情を考慮し、対象を小学生5年生あるいは6年生に対して行うこととした.なお、本研究の準備にあたって、指導者として応急手当普及員の確保する必要がある.本研究の直接的成果ではないが、付加的成果として、応急手当普及員を支援するNPO法人立ち上げの準備が福岡市消防局主導のもとに始まった.・一般市民による除細動器使用に関する研究本研究の最終目標は、わが国でも米国や欧州諸国のように自動除細動器を用いた一般市民による早期除細動実現(PAD)に寄与することである。研究計画調書ならびに交付申請書には気づいていなかったのだが、医師にも、除細動器の使用適応および使用に対する低抗感を示す者が意外と多いことを痛感した。このため、一般市民による除細動に関しては、技術的なこともさることながら、心肺停止者に対して自動除細動器を抵抗なく使用できるかどうかの意識調査をまず行う必要があると考えた。現在、福岡市消防局とともに支援している応急手当普及員に対して、法的整備が整ったらという仮定のもと、自動除細動器を抵抗なく使用できるかどうかの意識調査を開始したところである.1.心肺蘇生法に関する研究本研究では、小学校における心肺蘇生法教育プログラム開発という視点から、研究デザイン決定そのものも一つの目的としている。(1)平成14年7月に福岡市内の2つの小学校において、心肺蘇生法の座学および蘇生用人形を用いたシミュレーション実習を施行した。西長住小学校では6年生児童(2クラス、75名)を対象にし、1時限(45分)の座学は校長先生が行い、実習は1時限(45分)で行った。千早小学校では5年生児童(2クラス、61名)を対象とした。座学は約30分、実習は1時限で施行し、いずれも実習の最後には、実習の学習効果を判定する「力だめし」を施行した。実習はいずれも少グループ制で行い、グループ編成は西長住小学校では、一部父兄との合同編成とした。一部ではチェクリストを用いて、児童の蘇生法の技術評価も試みた。また、各々の小学校において、講習の3ヶ月後、6ヶ月後にペーパーテストを施行し、心肺蘇生法に関連する知識の経時的変化を調査した。上記の結果については、現在集計、解析中である。(2)インターネット上で閲覧可能な、小学生に心肺蘇生法の内容を理解してもらうために肺や心臓の働きなども説明する内容のソフト試作を行った。これは蘇生法講習の際や講習会後にも自習可能なものである。次年度においては、これのソフトの効果の評価と内容の見直しを検討する予定である。2.市民への自動体外式除細動器教育に関する検討予備調査として、消防機関の応急手当普及員の資格を持つ「福岡応急手当て普及の会」会員に対して、1回の講習会を施行(15年3月に2回施行予定)した。

これらを基に、次年度の研究デザインを決定する。I.小学生の心肺蘇生法については投稿準備中であるが、明らかとなったことなどを示す。心肺蘇生法講習(座学・実習)を福岡市内小学校5年生2クラスの児童に対し実施し、その講習1週間後、3ヶ月後、6ヶ月後に同一の力試し(筆記試験8問:複数選択式あるいは手順の並び替え)を施行し、知識の保持力を検討した。また、講習会当日にはアンケートも施行した。●結果及び考察1)テストの点数は1週間後では性差・クラス差などを認めなかったが、3ヶ月後、6ヶ月後では、性差・クラス別成績に一部有意差を認め、1週間後と6ヶ月後のクラス別成績は、記憶力のよいと考えられる小学生でもやはり後者の方が悪かった。2)採点結果から出題した問題内容が高度であったと考えられるが、The chain of survivalの概念である「119通報」、「そばに居合わせた人の心肺蘇生」についての理解は、半年後でも全体の8割以上が正解しており、初動については実習と結びついて十分に記憶されているものと考えられる。3)細かい手順に関しては、既に1週間後から記憶が曖昧になる傾向が認められた。●その他講習を通して明らかになったこと、気づいたこと1)実施アンケートからは、児童が総合学習のなかで心肺蘇生法教育を受けることが十分に意義があることが伺われた。2)受講時期については、小学校の理科で体のしくみなどとの履修時期との調整を行うなどの検討も必要性がある。3)第二次成長期にあたり、蘇生用人形の性別なども考慮するなどの必要性も感じられた。II.自動体外式除細動器:AED講習に関する研究意義は、現在、政府レベルで非医療従事者によるAEDの使用のあり方について検討されるに至り、あまりなくなったと考えられる。上記検討委員会では、一部で講習会の簡素化などの意見もあるようだが、福岡市周辺の応急手当普及員に試験的に今回実際に講習会を行った限りでは(アンケートは集計中)その必要性を感じている方が多いような印象であった。
移行期正義の社会的影響に関する比較社会学的研究

本研究は、各国で行われてきた移行期正義(TJ)プログラムに対して、社会学的なアプローチから新たな知見を提供することを目的として遂行された。とりわけアフリカ・アジアにおけるTJの実証データの検討を通じて、(1)当該移行期社会の条件を反映させるTJ認識の必要性と、(2)これまで「TJの失敗」と評されてきた事例に並行して、当該社会の多様なアクターが比較的自律的な活動を、場合によってはTJプログラムの不十分な遂行を補足するかのように展開する実態が頻繁に確認されるという事実が明らかになった。体制転換あるいは紛争終結により民主化した社会は、包括的な社会秩序の再建に取り組むことになる。その際に実施されるさまざまな制度・活動は移行期正義と総称され、これまでアジア・アフリカ各地で行われてきた。本研究は、そのような移行期正義の事例評価を、政策として掲げられる際の公式目標ではなく、社会的影響の観点から比較検討することを目的としている。平成26年度の計画は、真実和解委員会活動後の南アフリカにおける社会統合のあり様を批判的に把握することと、カンボジアにおけるクメール・ルージュ特別法廷に対する社会的反応を国内NGOによる活動の補てんという観点から考察することであった。これらに対し、イギリスでの資料収集・関連研究者との意見交換、およびカンボジアにおける聞き取り調査を実施した。南アフリカに関する課題は、近年の移民政策と移民ネットワークというテーマで、南アフリカ人研究者との共著論文を執筆し、関連媒体に投稿した。また、カンボジアでは、ローカル・メディアにおける特別法廷報道の傾向をフォローしつつ、活動の長期化を受けて展開するNGOの被害者支援の現状を把握し、そうした現在進行形のデータを取り入れた論文を執筆した。これについては、複数の関連研究者による英文論文集という形ですでに出版社へ提出している。南アフリカとカンボジアそれぞれに対するケース・スタディを以上のように行う一方で、移行期正義の理論的課題ーつねに失敗していると評価されてきているーに着目した論文を執筆し、本研究における理論的方向性を明確化した。体制転換後または武力紛争終結後の社会では、その社会再建策の重要課題として過去の不正あるいは加害・被害関係に公的に対応する必要に迫られる。これまでおおよそ30年に渡る国際的な取り組みの中で移行期正義というカテゴリーが確立してきた。しかし、その実施に伴うさまざまな問題点は、依然として十分に把握されていない。本研究では、社会学的な観点からこうした問題点を分析することを目的としている。平成27年度は、移行期正義政策の中でもとりわけ紛争記憶の公的表象、すなわち紛争被害の公式の意味づけに焦点をあてた現地調査を行うと同時に、社会的な文脈・歴史的な背景を異にする複数の移行期正義プログラムを包含する理論的枠組みの整理に取り組んだ。まず、従来、多様な個々のプロジェクトー国際法廷、真実委員会、公職罷免、(象徴的・物的・金銭的)補償、各種制度改革等ーをどこまで移行期正義のカテゴリーに含めるかという点から行われがちであった定義を、移行期正義が行われる「移行期社会transitional society」の条件・特徴を反映する形で行い、そこからの偏差によって個別のプロジェクトの性格を認識できるという立場を採用した。次に、移行期正義研究全般にわたる傾向として、どのプロジェクトに対しても否定的な評価が下される点に着目し、それがどのような理由によって生じているのか、検討した。結果として、移行期正義プログラムを構成する主要な4要件、すなわち公的なアナウンス、動員、公的イベントにおける共通体験、ネーションビルディングのそれぞれの不十分な実施状況が、各プログラムに対する否定的評価の基本的形式であるとの視点を得た。この分析は英文書籍原稿としてまとめ、年度内に出版社へ送付し、現在査読審査中である。移行期正義分野に対する体系的な社会学的アプローチを提出するという目標に対して、とくに理論的な側面からの検討が順調である。公刊へ向けての準備も現在の時点では当初の計画通り進んでいる。本研究は、従来、法学・政治学を中心として研究が蓄積されてきた移行期正義(TJ)プログラムに対して、社会学的なアプローチから新たな知見を提供することを目的として遂行された。とりわけ、これまでの研究動向を通覧する中で、実施国を問わず、TJに対する批判的な評価が大多数を占める点に注目し、政策評価とは異なる観点からTJを理解するフレームワークを模索することを出発点とした。その際には、1.TJが実施される文脈としての移行期社会の社会学的な認識と、2.TJ実施に伴う社会的反応の社会学的な分析、を具体的な方向性として調査計画を立案した。最終年度は、南アフリカおよびカンボジアで、ポストTJの社会状況という観点から現地調査を行った。研究期間を通じて明確になったことは、(1) TJの分析は移行期社会の条件を反映させる形で行う必要があるということと、結果として(2) TJの分析が当該移行期社会の分析になるという認識である。この点に関して、本研究の調査を通じて明らかになったのが、従来「TJの失敗」と評されてきた現実と並行して、ローカル社会の直接・間接のアクターが、比較的自律的な活動を、場合によってはTJプログラムの不十分な遂行を補足するかのように展開させる実態が頻繁に確認されるという事実である。これは、TJプログラムの成否に視野を絞っていると認識の対象外とされる事例であるが、移行期社会という枠組みから位置づけることで、その性格を同定できるようになる。

本研究では、平成26年度の開始時において検討していた社会運動論に加えて、ドラマトゥルギー論のアプローチを採用することで、こうした「TJの意図せざる結果」を比較社会学的な観点から把握し、かつ今後のTJプロジェクトの分析に応用しうる知見として提示することができた。なお、これらの一連の考察・分析は英文書籍の原稿としてまとめ、現在出版申請中である。本研究は、各国で行われてきた移行期正義(TJ)プログラムに対して、社会学的なアプローチから新たな知見を提供することを目的として遂行された。とりわけアフリカ・アジアにおけるTJの実証データの検討を通じて、(1)当該移行期社会の条件を反映させるTJ認識の必要性と、(2)これまで「TJの失敗」と評されてきた事例に並行して、当該社会の多様なアクターが比較的自律的な活動を、場合によってはTJプログラムの不十分な遂行を補足するかのように展開する実態が頻繁に確認されるという事実が明らかになった。南アフリカにおけるよりインテンシブな調査が必要であるが、論文執筆等の成果発表に関しては、査読中のものも含め、当初の予定よりも順調に進んでいる。現地の状況により、渡航予定であった調査地(シエラレオネ)で1次データを収集できていない。この点について、当該社会に関する2次データの分量を増すことで対処する一方、社会条件の面から類比可能と思われる別の社会における現地調査を再検討する。また、理論的な独自性の強化を、移行期正義分野のみならず関連する社会学分野の研究者との意見交換を通じて推し進める必要がある。社会学本研究におけるこれまでのケース・スタディを比較検討するための、フィールドデータの収集をより展開させる必要がある。次年度使用額は現在の残額であり、ほぼ予定通り使用できたと考えている。年度後半に購入予定であった文献資料が在庫切れであったため、表記の残額が生じた。次年度使用額は現在の残額であり、ほぼ予定どおり使用できたと考えている。在庫調達の連絡が入り次第、当該文献資料を購入する予定である。文具その他の消耗品費として計上する予定である。
好酸球・好塩基球を標的とした慢性そう痒性アレルギー疾患治療と痒みの制御の研究

皮膚科領域にはいまだ難治性の皮膚疾患が多くみられ患者のQOLを下げている。本研究ではマウスの慢性皮膚炎症および掻破行動モデル、そしてヒトアレルギー性そう痒性疾患における病態解析を通じて、炎症抑制ならびに痒みの解析を行った。その結果、好酸球・好塩基球に発現されているプロスタグランジンD2(PGD2)の受容体の機能の重要性と治療標的として有用性が明らかになるとともに、好塩基球皮膚浸潤抑制のための治療標的候補としてセレクチンも有望であることが示された。1PGD2及びその受容体の機能解析:PGD2受容体欠損マウスを用いて慢性接触過敏反応を観察した。その結果、DP欠損マウスやDP/CRTH2両欠損マウスで反応増強がみられ、一方CRTH2欠損マウスでの炎症は減弱した。また反応は局所のIL-4, CCL11, CCL22産生量と相関していた。以上から慢性接触過敏反応においてDPシグナルは抑制的に、CRTH2シグナルは促進的に作用していることがわかった。このことからDPアゴニストおよびCRTH2アンタゴニストの投与が慢性炎症抑制に有効であると考えられた。2ヒト皮膚疾患における好塩基球の分布:各種炎症性疾患における病変部の好塩基球の分布や密度を観察した。アトピー性皮膚炎、痒疹、蕁麻疹において好塩基球浸潤が確認された。今後対象疾患を広げて研究を進める予定である。3 STAT6siRNAによる炎症、引っ掻き行動の抑制:STAT6はTh2型反応をつかさどる転写因子である。今回STAT6合成を特異的に抑制するSTAT6siRNAの核酸配列を決定し、これを用いて皮膚、鼻粘膜炎症に与える影響を観察した。するとSTAT6siRNAの投与により接触過敏反応、アレルギー性鼻炎反応いずれももが抑制された。特に鼻炎反応におけるくしゃみや鼻の引っ掻き行動は顕著に抑制された。将来的に外用薬や点鼻薬として効果が期待される。1.PGD2及びその受容体の機能解析:PGD2受容体欠損マウスを用いてIgE依存性慢性アレルギー炎症を観察した。DPの欠損は炎症反応に影響を与えなかった。一方、CRTH2単独欠損マウスやDP/CRTH2両欠損マウスでは反応減弱がみられた。これらのマウスでは局所のIL-4,CCL22産生が低下していた。CRTH2特異的拮抗薬によりIgE依存性慢性アレルギー炎症は部分的に抑制された。以上からIgE依存性慢性アレルギー炎症ではCRTH2が部分的に関与しており、CRTH2拮抗薬が治療薬として有用であると考えられた。2.ヒト皮膚疾患における好塩基球の分布:ヒト皮膚疾患24疾患における皮膚での好塩基球浸潤を解析した。その結果、痒疹、持続時間の長い蕁麻疹、類天疱瘡、好酸球性膿疱性毛包炎虫刺症などで多くの好塩基球浸潤が確認された。また痒疹や疱麻疹患者の末梢好塩基球のCD203c発現は健常人に比べて上昇しており、活性化されていると考えられた。3.好塩基球からのPGD2産生:好塩基球はマスト細胞と類似点が多いが、その中でPGD2産生をもたないことが大きな違いと長い間考えられてきた。しかし、今回の研究でマウスおよびヒト好塩基球は造血器型PGD合成酵素を発現しており、IgE刺激により明らかにPGD2を産生することが確認された。好塩基球にけるセレクチンリガンド機能解析IgE誘導性慢性アレルギー炎症(IgE-CAI: IgE-mediated chronic allergic inflammation)をセレクチンリガンド修飾酵素α(1,3) fucosyltransferases(FT)-IVまたは-VII欠損マウスで誘導した。その結果、FT-IV (-/-)/VII (-/-)マウスではIgE-CAIが完全に消失した。FTの単独欠損マウスではこの現象はみられなかった。さらにFT-IV (-/-)/VII (-/-)マウス由来の好塩基球はFcRγ鎖(-/-)マウスに移入してもIgE-CAIを引き起こすことができず、FT-IV/VIIによって機能調節されるセレクチンリガンドが好塩基球皮膚浸潤およびIgE-CAIの誘導に必須であることがあきらかになった。またその詳細な機序として好塩基球上のPSGL-1とL-セレクチンとの結合が重要なステップとなることが判明した。起痒物質によるマウス掻破行動対する各種外用薬の抑制効果ICRマウスを用いてヒスタミン、セロトニン、サブスタンスP、PAR-2 agonistといった起痒物質による搔破行動に対する外用薬の効果を評価した。10%