hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ラット背部皮下埋入モデルを用いた抜去歯歯根膜に対する各種成長因子の影響

得られたパラフィンブロックから厚さ約4μmの連続切片を作製し、HE染色を行い、歯根および歯根膜組織の状態を病理組織学的に観察した。7日、14日群の全ての歯根で破歯細胞の出現と歯根吸収が観察され、その頻度は14日群で多かった。また、セメント質の表面にヘマトキシリンに濃染する部分が観察された。次にrhbFGF(10ng/ml)、rhBMP-2(100ng/ml)を添加した培地で培養期間を96時間に延長(48時間で培地交換)した歯根を作製し、移植せずに固定、脱灰後、病理組織学的に観察したが、歯根膜細胞はほとんど死滅していた。そこで今後の実験には歯根膜細胞の生存を確認している48時間培養の歯根を用いることにした。α-MEMにrhBMP-2を1μg/mlおよび5μg/ml添加した培地で歯根を48時間培養後、ラット背部皮下に移植し、7日および14日後に周囲の皮下結合組織とともに採取し、前述の通りに連続切片を作製しHE染色を行い、歯根および歯根膜組織の状態を病理組織学的に観察した。7日、14日群の全ての歯根で破歯細胞の出現と歯根吸収が観察され、その頻度は14日群で多かったという結果は、以前に抜去歯根を未処置のまま背部皮下へ移植した実験結果と同じであるが、rhBMP-2添加培地で培養した歯根の周囲を取り囲む細胞の数は、未処置の歯根周囲の細胞よりも多かった。これらの細胞の種類に関しては、現在のところ明らかではない。また、新生セメント質などの明らかな硬組織の形成は認められなかった。
地方公会計情報を基礎とした将来計画に基づく地方財政の改善方法に関する研究

地方公共団体が企業会計の手法により作成している地方公会計情報を活用して有効な将来計画(総合計画、財政収支見通し)を策定し、その計画を基礎として中長期的な視点から予算編成等を行うことで、財政の状況を改善し得る具体的な方法を明らかにする。研究手法としては実地に収集した資料と地方公共団体の現場担当者との対話を重視し、協力が得られた団体において試験的な取り組みも具体的に行う。研究成果はインターネット等を通じて広く発信する。
ネスファチン‐オキシトシン系による摂食・代謝・リズム制御と生活習慣病介入基盤

ラット視床下部室傍核のNesfatin-1発現は明期に上昇する概日リズム変動を示し、これが摂食概日リズムを駆動する。Nesfatin-1リズム障害は摂食リズム障害と過食・肥満の成因となり、Nesfatin-1補充が治療に有効である。室傍核Nesfatin-1ニューロンは、食事誘導性のグルコースとインスリン及び光誘導性神経ペプチドPACAPにより直接活性化され、効果系として室傍核オキシトシンニューロンに情報伝達する。高脂肪食誘発肥満(症)マウスで、オキシトシン末梢投与は過食・肥満・高血糖・脂肪肝を顕著に改善し、求心性迷走神経を介した中枢伝達が関与し、ヒト肥満(症)治療の基盤を提供する。(1)正常ラットにおける視床下部室傍核(PVN)Nesf mRNA発現上昇の摂食調節における役割を調べる方法として、Nesf (NUCB2)のshRNA発現AAVベクターを作成し、PVNへの局所投与の技術を確立した。(2)肥満モデルZucker fatty(ZF)ラットにおいて、正常ラットで見られるPVN Nesf mRNAの明期の発現上昇が障害されており、明期ならびに24時間の累積摂食量が増加していることを見出し、明期のNesf発現上昇の障害が過食・肥満の成因として関与する可能性が示唆された。2.末梢投与Oxtの中枢情報伝達と抗肥満効果高脂肪食負荷による肥満マウスに2週間末梢Oxt投与(皮下および浸透圧ポンプ)すると、延髄とPVNが活性化され、摂食抑制・エネルギー消費亢進による抗肥満効果を示し、内臓脂肪蓄積・脂肪肝・高血糖を改善し、抗メタボリックシンドローム効果を示すことを明らかにした。1.視床下部室傍核(PVN)Nesfatin-1(Nesf)による摂食概日リズム調節:AAVウイルスベクターでNesf shRNAを正常ラットPVNに局所投与してNesf mRNA発現を低下させると、明期選択的な過食を生じ摂食概日リズム障害を呈する。2.Nesfの上流制御系:食事因子のグルコースとインスリンおよび神経因子のPACAPがPVN Nesfニューロンを直接活性化することを明らかにした。1.PVN Nesfリズムによる摂食調節:正常WistarラットにおいてAAVウイルスベクターでNesf shRNAをPVNに局所投与してNesf mRNA発現を低下させると摂食が亢進することを見出した。2.Nesf、Oxtの上流、下流伝達系:(1)満腹物質のレプチンがPVN Nesfニューロンを直接活性化することを見出した。(2)Oxtニューロン軸索突起が弓状核(ARC)のPOMCニューロン細胞体に近接することを形態学的に見出した。定説を塗り替える、二次中枢PVNから一次中枢ARCへのシグナル伝達の存在が示唆された。3.末梢投与Oxtの効果の雌雄差と中枢伝達経路:(1) Oxtの末梢投与による摂食抑制作用が雌マウスでは雄マウスに比べて弱いことを見出した。(2)末梢Oxtによる求心性迷走神経Nodose Ganglionニューロン活性化をパッチクランプ法によっても証明し、活性化の濃度依存性の詳細をCa2+イメージングにより明らかにした。高脂肪食負荷による肥満ラットでの摂食異常とPVN Nesfリズム異常との相関の検討が未着手である以外は全て予定通り進行している。25年度が最終年度であるため、記入しない。研究体制は整備されており、研究の主目的であるPVN Nesfリズムによる摂食調節およびNesf、Oxtの上流/下流伝達系の解析は当初の計画通り進んでいる。1.Nesf (NUCB2)のshRNA発現AAVベクターを用いてPVN Nesfの摂食調節作用の解析を進める。2.末梢Oxtの中枢へのシグナル伝達機構について解析を進める。特に、Oxtの求心性迷走神経Nodose Ganglion Neuronへの作用を検討し、Oxt応答細胞の神経伝達物質を同定する。(1)ZF肥満ラットで、NesfmRNA発現が低下している時刻にNesfを投与してリズムを修復し、摂食リズム障害と過食が改善するかを検討する。(2)神経毒素共役型Oxtを脳室内投与してARC POMCニューロンが脱落するか、またOxtが単離ARC POMCニューロンを活性化するかをCa2+イメージングで調べる。(3)レプチンの作用がPVN Nesfを介するかを明らかにするために、Nesf shRNAを用いてPVN Nesf mRNA発現を低下させたマウスにレプチンを脳室内投与し、レプチンの摂食・代謝に対する効果が如何に修飾されるかを調べる。(4)Oxtの末梢投与の糖代謝への効果の雌雄差を明らかにする。

(5)求心性迷走神経ニューロン活性化がOxtの摂食抑制作用を仲介するかを明らかにするために、Oxt摂食抑制作用に対する求心性迷走神経遮断の影響を調べる。
日本製造業におけるサプライヤー・システムの国際比較研究

本研究の成果は主に以下3つの点に集約できる。第一に,日本自動車メーカーにおけるサプライヤー・システムをドイツメーカーのシステムと比較し,日本メーカーの優位性は,製品バラエティ構造の差異をベースとして成立していることを明らかとした。第二に,新興国における日本自動車メーカーにおけるサプライヤー・システムは,長期的観点からのサプライヤーの育成によって支えられている一方で,そのような方式は短期的な便益を犠牲とする,という点を明らかにした。第三に,新興国における中小2-3次サプライヤーの支援という日本自動車メーカーにおける今後の課題を明らかとした。2013年度は,2回にわたるインドでの海外調査,2回にわたる国際学会での報告という点において大きな成果を残すことができた。以下順に成果を報告していく。2回目のインド調査は2014年2月16から22日の1週間において実施された。バンガロールでBosch Indiaの訪問と,現地研究者との情報交換を行った後に,プネを訪問し,Tata Motors,Behr India,YoonWoo Automotive,Volkswagen Indiaといった現地系・外資系企業4社に対する訪問を行った。また現地自動車部品工業会ACMAへの訪問も実施し,インドにおける自動車・同部品産業の実態についての一般的な情報収集も行った。2012年度は,国内調査,海外調査,研究成果発表という点において大きな成果を残すことができた。国内調査については,自動車・同部品産業におけるサプライチェーンマネジメントの歴史と実態について調査を展開した。具体的にはトヨタ堤工場,トヨタ元町工場,デンソー高棚工場,デンソー技研センター,トヨタロジスティック管理者へのインタビュー,日本板硝子元副社長へのインタビュー,TPMコンサルタントへのインタビューなどを実施した。海外調査については,まず8-9月においてブラジル・リオデジャネイロ,サンパウロを訪問し,現地研究機関と連携を図りつつ,ドイツを中心とする欧州系と日系現地企業の比較研究を実施した。訪問企業としては,ホンダディーラー,日産ディーラー,ブラジルホンダ,ブラジルTSテック,G-TKBブラジル,日信ブレーキブラジル,ピルキントンブラジル,メルセデスブラジル,ボッシュブラジル,PSAブラジルなどがある。2月には,イギリスを訪問し,現地自動車・部品企業のサプライチェーンマネジメントについての実態調査を行った。訪問企業としては,トヨタUK,ジョンソンコントロールUK,デンソーUKなどがあり,合わせてイギリス自動車産業の業界団体であるSMMTを訪問し,今後の連携可能性について話し合った。研究成果発表としては,まずは以下2つの国際学会報告を実施した。6月にはアムステルダムで開催された4th Joint World Conference on Production & Operations Managementに参加・報告し,9月にはイギリス・カーディフで開催されたBritish Academy of Managementで参加・報告を行った。論文としては,9月の調査結果をまとめた論文を経営論集で発表したほか,2つの国際ジャーナルへの掲載が確定した。2014年度は,インドでの実態調査,日本国内での実態調査,3回にわたる国際学会での報告という点において大きな成果を残すことができた。インド調査は,2014年9月1日から9月5日の1週間に渡って展開された。まずはバンガロール市周辺において,トヨタとその関連企業を調査し,それからプネを訪問した。プネでは,タタ関連企業やACMA-ATCなどを訪問し,それからインドの首都であるデリーを訪問した。デリーでは,インド自動車産業の全体像を理解すべく,インド自動車工業会,NMCC,ACMAヘッドオフィス,CIIなどを訪問した。合計9の自動車関連組織を訪問することで,途上国自動車産業におけるサプライチェーン・マネジメントに関する理解を深めることが可能となった。国内調査としては,5-6月において自動車・同部品企業9社を訪問した。本調査では,OEM,1次サプライヤー,2次サプライヤーとサプライチェーン横断的にサンプル企業を選別し,そこから海外展開と人材開発について平均2時間にわたるインタビュー調査を展開した。ここからOEMや大手1次サプライヤーは海外研修や海外ビジネススクールと提携したグローバル・タレントマネジメントを積極的に活用している一方,中小2次サプライヤーにおいては,海外展開と人材開発について資源やノウハウの不足といった大きな解決すべき問題があることが確認できた。研究成果発表としては,まずEGOS,AoMなど3つの国際学会で研究報告を実施した。また論文としては,国内調査の結果をまとめた論文を明治大学の『経営論集』で発表したほか,国際ジャーナルInternational Journal of Production Economicsからサプライチェーン・マネジメントの日独比較研究の成果が出版された。経営学当初の計画においては,2013年度では国内調査,海外調査,最低2回の国際学会報告,海外研究協力者との共同論文の国際ジャーナルへの投稿が主な目的とされていた。国内調査にいては,ホンダ,日信工業,住友スリーエムなど関連大手メーカーに対してグローバル戦略についてのインタビューを実施した。海外調査については,上で述べたように計2回のインドでの現地実態調査を通して12社からインタビュー・データを得ることができた。このような実態調査を展開する一方で,Journal of Operations Management, International Journal of Production Economicsといった関連国際ジャーナルからリーン,サプライチェーン,カイゼンといったトピックに関わる多くの論文を収集し,精力的な文献レビューも実施した。

この文献研究と実態調査の結果は,海外研究協力者との共同論文の作成として具体化されている。1つは,Kaizen initiative through vertical supply networks in emerging economiesとのタイトルでAoM 2014のプロシーディングスとして投稿され,アクセプトされている。もう1つは,Institutionalization of effective production networks in India: Different types of strategies for filling institutional voidsとのタイトルでEGOS 2014のlong abstractとして投稿され,これもアクセプトされている。これら2つの論文は,審査コメントを受けて国際ジャーナル投稿に向けて書き直しをしている最中である。当初の計画においては,2012年度では「国内での意見交換と文献研究,海外研究者との共同研究などを行いつつ海外実態調査の理論的土台を構築することに努める」ということが主な目的とされていた。まず国内活動については,自動車サプライヤー研究会への参加を通した国内研究者間での意見交換をほぼ2カ月に1回開催し,意見交換を図るとともに東京大学MMRCや早稲田大学自動車部品産業研究会と強固なネットワークを構築することが可能となった。また「企業活動のグローバル化と日本のもの造り企業」という講座を半期14回開講し,トヨタ,ホンダ,日産関係者との意見交換も実施した。国内実態調査については,トヨタ,デンソーなどトヨタ系企業への訪問・インタビューを展開することができ,成果報告については,ブラジル調査の結果を『経営論集』で報告することが可能となった。海外活動については,当初予定していたブラジル実態調査を展開することが可能となった。ブラジルホンダ,フォルクスワーゲンブラジルなどの自動車メーカー,ピルキントンブラジル,ボッシュブラジルなどの自動車部品メーカー,さらには現地自動車ディーラーなど合計10以上のインタビュー調査が展開された。
高エネルギー粒子線による模擬星間物質からのアミノ酸生成機構の解析

隕石中に検出されているアミノ酸などの有機物が分子雲中で生成する可能性を検証するため,模擬星間物質への高エネルギー粒子線照射実験を行った。一酸化炭素,メタノール,アンモニア,水などの混合物に陽子線(東工大タンデム加速器)や重粒子線(放医研HIMAC)を照射したところ,高分子態のアミノ酸前駆体の生成が確認され,それは照射により直接生成することが示唆された。また,核酸塩基やイミダゾールの生成も確認された。より実際の星間塵環境での有機物生成を確認するため,デジタル加速器(高エネ研)からの重粒子線を用いる実験の準備を行い,実験に必要な照射チャンバとガス混合器を作成し,デジタル加速器の調整も進めた。1.星間物質中の主要な炭素源は一酸化炭素,窒素源はアンモニアである。そこで種々の混合比の一酸化炭素・アンモニア,もしくは一酸化炭素・アンモニア・水蒸気の混合気体に,タンデム加速器(東京工業大学)からの2.5 MeV陽子線を照射し,生成物中のアミノ酸を定量した。生成物を加水分解すると,いずれの系でもアミノ酸が生成し,特にグリシンの生成量が多かった。前者では一酸化炭素:アンモニア比が2:1の時にグリシン(前駆体)が最も多く生成した。2.1.の生成物中のアミノ酸以外の生成物の分析を行った。LC/MSにより,一酸化炭素・アンモニア・水の混合気体から,ウラシル,アデニン,グアニンが同定された。また,MALDI質量分析法によりイミダゾールが検出された。これらは遊離体で生成したものが多いことが示唆された。3.星間での宇宙線照射により,高分子態のアミノ酸前駆体のほか,複素環化合物が生成することから,宇宙線(およびその二次粒子)により,多数のラジカルやイオンが生成し,それらの急冷により高分子態有機物や,安定な環状化合物が生成することがわかった。4.より高エネルギーの粒子線による有機物の生成を調べるため,KEK内にデジタル加速器を用いる準備を行い,また,低温実験のためのクライオスタットの整備を進めた。次年度にはこれらを用いた実験が開始できる見込みである。5.星間でのアミノ酸(前駆体)生成機構の解明のため,その場観測に加え,計算によるシミュレーションの可能性の検討を開始した。さらに,実際の宇宙環境を用いた有機物生成実験の可能性についても検討を開始した。1.分子雲中でのアミノ酸前駆体の生成機構を探るための実験装置(クライオスタットおよびガス混合装置)のデザインを行った。一酸化炭素,メタノール,アンモニア,水蒸気の混合比を精密に設定した上でその混合気体をつくる装置を作成した。これとクライオスタットを結合し,さらに本年度購入した四重極質量分析計を取り付けることにより,次年度,上記の混合気体を凍結した「模擬星間塵アイスマントル」に高エネルギー加速器機構で準備中のデジタル加速器からの重粒子線の照射を行う予定である。2.模擬星間塵アイスマントルへの粒子線の予備実験として,模擬星間物質(気体)への粒子線照射を行い,アミノ酸前駆体の生成を詳細に調べた。一酸化炭素・アンモニア,もしくは一酸化炭素・アンモニア・水蒸気の混合気体に,タンデム加速器(東京工業大学)からの2.5 MeV陽子線を照射したところ,照射中に気相中でもや(固体有機物)が生成した。また,その生成物中のアミノ酸を定量したところ,主要生成物であるグリシンの生成量は,照射電気量(吸収エネルギー量)に比例することがわかった。これらのことは,アミノ酸前駆体が,従来考えられていたように,中間体小分子(シアン化水素など)の反応により生じるのではなく,気相中で直接生じていることを強く示唆する。3.2.と同様に,模擬星間物質としてメタノール・アンモニア・水の混合物を作成し,これに重粒子加速器(HIMAC,放医研)からの炭素線やアルゴン線を照射した。生成物を加水分解し,アミノ酸の生成量を精密に測定中である。4.粒子線と光子の化学進化における役割の比較を行うため,アミノ酸やアミノ酸前駆体に重粒子線(HIMAC)および軟X線(NewSUBARU)の照射を行った。有機物の変成に対しては,重粒子線よりも軟X線の方がより効果的であることがわかった。模擬星間塵アイスマントルへの粒子線照射を行い,その場でのアミノ酸前駆体生成を調べる本実験計画の中で,(1)デジタル加速器の整備(分担者の高山が担当),(2)模擬アイスマントル作成装置のデザイン,(3)他の加速器を用いた混合気体への粒子線照射によるアミノ酸生成機構の推定,(4)星間での有機物生成・変成におよぼす高エネルギー光子の役割に関する実験などが予定どおり進行した。

これらをもとに,平成25年度は,模擬アイスマントルへのデジタル加速器からの重粒子線照射という,世界初の実験の遂行が期待できる。平成25年度は,まず,デジタル加速器からの粒子線を模擬星間物質に照射実験を行い,アミノ酸前駆体の生成に関して,前年度のタンデム加速器を用いた実験との比較を行い,デジタル加速器およびそれにより発生させた高エネルギー重粒子線の評価を行う。次に,前年度作成したガス混合機,購入した四重極質量分析計を,デジタル加速器のビームラインに設置したクライオスタットにとりつけ,その場での模擬アイスマントルを作製し,さらにそれへの重粒子線照射によるアミノ酸前駆体の生成について詳細に調べる。生成機構を調べるための赤外分光計は,連携研究者の田村(国立天文台から東大へ移籍)が準備する予定である。該当なし
潰瘍性大腸炎に合併する大腸腫瘍の発生進展に関する分子病理学的研究

大腸癌およびdysplasia(DS)における遺伝子変異を明らかにすることを目的とした。癌およびDSについて、5番染色体長腕、17番染色体短腕、さらに8番、18番、22番染色体の欠失(LOH)およびMSI(Microsatellite Instability)を検討した。LOHの頻度は、5番染色体長腕36%(4/11)、17番染色体短腕67%(8/12)、8番染色体短腕59%(10/17)、18番染色体長腕0%(0/3)、22番染色体長腕0%(0/3)に認められた。MSIは17病変何れにも認められなかった。以上の結果から、潰瘍性大腸炎合併大腸癌およびDSでは、17番染色体短腕および8番染色体短腕のLOHの頻度が高く認められ、17番染色体短腕のLOHからは、潰瘍性大腸炎合併大腸腫瘍において、腫瘍形成にp53遺伝子が関与している可能性が考えられた。癌、DSともにMSIを呈した病変は存在せず、潰瘍性大腸炎の腫瘍形成においてMSIが関与している可能性は高くないものと考えられた。次に、潰瘍性大腸炎の癌、DS、腺腫における免疫染色による、p53蛋白過剰発現の頻度については、p53蛋白過剰発現は、浸潤癌で89%、high-grade DSで70%、Low-grade DSで57%、腺腫では0%であった。DSと腺腫との識別にp53蛋白発現解析を用いることにより、臨床上、早期腫瘍の診断および治療上応用可能であることが示された。潰瘍性大腸炎の癌・dysplasia・腺腫におけるp53蛋白過剰発現の頻度について,東京大学第1外科実験室にて行った.p53蛋白発現の検討には抗p53蛋白モノクローナル抗体PAb1801(Oncogene Science,200倍希釈)を用い,自然乾燥後,micro-wave処理した薄切切片に,SAB法にて行った.p53免疫染色結果は,以下の4つ,びまん性陽性・diffuse(+++):陽性細胞が病変全体にびまん性にみられるもの(400倍視野で最低30%,ほとんどの場合70-80%以上),集簇性陽性・nested(++):病変の一部にp53陽性細胞が連続性に集合して,巣状集簇性に出現しているもの,散在性陽性・scattered(+):散在性にみられるもの,陰性・negative(-):陽性細胞が全くみられないもの,に分類した.p53蛋白過剰発現は,筆者らの今までの成績に従って,びまん性陽性または集簇性陽性のものとした.この結果,p53蛋白過剰発現は,浸潤癌で89%,high-grade dysplasiaで70%,low-grade dysplasiaで57%,腺腫では0%,indefinite for dysplasiaで0%,negative for dysplasiaで0%であった.腫瘍の診断,およびdysplasiaと腺腫の鑑別にp53蛋白過剰発現を検討することが大変役立つことが証明され,これを日本大腸肛門病会誌(『潰瘍性大腸炎癌化例の診断におけるp53染色』51巻,1101-1108,1998)に投稿し,評価を得た.潰瘍性大腸炎の癌・dysplasia・腺腫におけるp53蛋白過剰発現の頻度について東京大学第一外科にて検討した。P53蛋白過剰発現にはP53モノクローナル抗体PAb1801(On cogene Science)を用い自然乾燥後SAB法にて行った。P53免疫染色結果は、びまん性陽性・diffuse(+++);集簇性陽性,rested(++)、散在性陽性scattered(+)陰性negative(-)に分類した。P53蛋白過剰発現は、びまん性陽性のものと集簇性陽性のものとした。

この結果P53蛋白過剰発現は、浸潤癌で89%、high-grade dysplasiaで70%、Low-grade dysplasiaで57%、腺腫では0%であった。dysplasiaと腺腫との鑑別にP53蛋白発現は役立ち、これを臨床の場で応用し、多くの早期腫瘍を診断し治療に役立てている。潰瘍性大腸炎の癌、dysplasia、腺腫におけるp53蛋白過剰発現の頻度について東京大学第一外科にて検討した。p53蛋白過剰発現にはp53モノクローナル抗体PAb1801(Oncogene Science)を用い自然乾燥後、SAB法にて行った。p53免疫染色結果は、びまん性陽性diffuse(+++)集簇性陽性nested(++)散在性陽性scattered(+)陰性negative(-)に分類した。p53蛋白過剰発現はびまん性陽性のものと集簇性陽性のものとした。この結果p53蛋白過剰発現は、浸潤癌で89%、high-grade dysplasiaで70%、Low-grade dysplasiaで57%、腺腫では0%であった。dysplasiaと腺腫との識別にp53蛋白発現は役立ち、これを臨床の場で応用し、多くの早期腫瘍を診断し、治療に役立てている。更に発癌に関する詳細な機序を明らかにするため、APC遺伝子の存在する5番染色体長腕とp53遺伝子の存在する17番染色体短腕の欠失(LOH)をそれぞれD5S346及びTP53のマーカーを用いて検索中である。潰瘍性大腸炎に合併した大腸癌に対して手術施行された12症例を対象として、大腸癌およびdysplasia(DS)における遺伝子変異を明らかにすることを目的とした。癌およびDSについて、5番染色体長腕(APC遺伝子)、17番染色体短腕(p53遺伝子)、さらに8番、18番、22番染色体の欠失(LOH)を検討した。Microsatellite makerとして、(D5S346, (AC)10,Mfd27, TP53, NEFL, D8S254, D18S55, IL2RB)を用いた。更に、これらのマーカーおよびBAT26にてMSI(Microsatellite Instability)を評価した。LOHの頻度は、5番染色体長腕36%(4/11)(癌50%,DS 29%)、17番染色体短腕67%(8/12)(癌80%,DS 57%)、8番染色体短腕59%(10/17)(癌71%,DS 50%)、18番染色体長腕0%(0/3)(DS 0%)、22番染色体長腕0%(0/3)(癌0%,DS 0%)に認められた。MSIは17病変何れにも認められなかった。以上の結果から、潰瘍性大腸炎合併大腸癌およびDSでは、17番染色体短腕および8番染色体短腕のLOHの頻度が高く認められた。LOHは何れもDSよりも癌の方が高率であった。17番染色体短腕のLOHからは、潰瘍性大腸炎合併大腸腫瘍において、腫瘍形成にp53遺伝子が関与している可能性が考えられた。また、8番染色体短腕LOHに関しては、これまでに報告は少なく、今後の検討が必要と考えられる。癌、DSともにMSIを呈した病変は存在せず、潰瘍性大腸炎の腫瘍形成においてMSIが関与している可能性は高くないものと考えられた。
コリン作動系によるリンパ球機能の制御に関する分子薬理学的研究

ヒトT細胞系白血病細胞株を用いて以下の研究を行った.1.各ACh受容体サブタイプに選択的なsiRNAの構築M_3およびM_5ムスカリン性アセチルコリン受容体(mAChR),あるいはα7ニコチン性アセチルコリン受容体(nAChR)発現を効率良く抑制するsmall interfering RNA(siRNA)を構築して,ヒトT細胞系白血病細胞CCRF-CEMに導入した.これらのsiRNAによりCCRR-CEM細胞における各遺伝子発現量は対照群の約40-50%にまで減弱した.各受容体ノックアウト細胞において,mAChRあるいはnAChRを介する細胞内Ca^<2+>シグナルが選択的に減弱したことから,M_3およびM_5 mAChR,およびα7 nAChRを介する細胞内Ca^<2+>シグナル伝達機構の存在が明らかとなった.現在さらにα5 nAChRに選択的なsiRNAの影響を検討中である.抗CD11a抗体により,ヒトT細胞系白血病細胞株MOLT-3においてコリン作動系活性が上昇した.この上昇作用はスタチン系薬simvastatinにより抑制された.すなわち,スタチン系薬の免疫抑制作用の一部に,CD11aを介するT細胞コリン作動系の活性調節の関与が示唆された.3.アセチルコリン(ACh)合成酵素コリンアセチルトランスフェラーゼ(ChAT)cDNAおよび抗親和性コリントランスポーター(CHT1)遺伝子の導入:各ヒトChAT mRNA(R,N1,N2,Mタイプ)およびCHT1をコードするcDNAをヒトT細胞系細胞株に導入して,発現量をRT-PCR法およびウェスタンブロティング法により検討した.現在,cDNA導入効率が20%程度と低かったために,解析が困難であった.現在50%以上の導入効率を目指して,cDNA導入条件について再検討中である.ヒトT細胞系白血病細胞株を用いて以下の研究を行った.1.各ACh受容体サブタイプに選択的なsiRNAの構築M_3およびM_5ムスカリン性アセチルコリン受容体(mAChR),あるいはα7ニコチン性アセチルコリン受容体(nAChR)発現を効率良く抑制するsmall interfering RNA(siRNA)を構築して,ヒトT細胞系白血病細胞CCRF-CEMに導入した.これらのsiRNAによりCCRR-CEM細胞における各遺伝子発現量は対照群の約40-50%にまで減弱した.各受容体ノックアウト細胞において,mAChRあるいはnAChRを介する細胞内Ca^<2+>シグナルが選択的に減弱したことから,M_3およびM_5 mAChR,およびα7 nAChRを介する細胞内Ca^<2+>シグナル伝達機構の存在が明らかとなった.現在さらにα5 nAChRに選択的なsiRNAの影響を検討中である.抗CD11a抗体により,ヒトT細胞系白血病細胞株MOLT-3においてコリン作動系活性が上昇した.この上昇作用はスタチン系薬simvastatinにより抑制された.すなわち,スタチン系薬の免疫抑制作用の一部に,CD11aを介するT細胞コリン作動系の活性調節の関与が示唆された.3.アセチルコリン(ACh)合成酵素コリンアセチルトランスフェラーゼ(ChAT)cDNAおよび抗親和性コリントランスポーター(CHT1)遺伝子の導入:各ヒトChAT mRNA(R,N1,N2,Mタイプ)およびCHT1をコードするcDNAをヒトT細胞系細胞株に導入して,発現量をRT-PCR法およびウェスタンブロティング法により検討した.現在,cDNA導入効率が20%程度と低かったために,解析が困難であった.現在50%以上の導入効率を目指して,cDNA導入条件について再検討中である.ヒトT細胞系白血病細およびB細胞系株細胞株を用いて以下の研究を行った.1.各ACh受容体サブタイプに選択的なsiRNAの構築M3サブタイプムスカリン性アセチルコリン受容体(mAChR)およびα7型ニコチン性アセチルコリン受容体(nAChR)サブユニット発現を効率良く抑制するsiRNAを構築して,T細胞系白血病細胞CCRF-CEMに導入した.これらのsiRNAによりCCRR-CEM細胞における各遺伝子発現量は対照群の約50%にまで減弱した.mAChRあるいはさらに,mAChRおよびnAChRを介する細胞内カルシウムシグナルを画像解析の手法により解析したところ,減弱した.すなわち,M3mAChRサブタイプおよびα7型nAChRを介する細胞内シグナル伝達機構が明らかとなった.現在さらにM5 mAChRあるいはα5型nAChRに選択的なsiRNAの影響を検討中である.2.アセチルコリン(ACh)合成酵素コリンアセチルトランスフェラーゼ(ChAT) cDNAの導入:各ヒトChAT mRNA (R, N1,N2,Mタイプ)をコードするChAT cDNAをT細胞系細胞株MOLT-3およびCCRF-CEM細胞に導入して,発現するChAT mRNAタイプをRT-PCR法およびウェスタンブロティング法により検討した.現在,cDNA導入効率が20%程度と低いため,T細胞に構成的に発現している主なRタイプChATとの区別が十分にできなかった.現在50%以上の導入効率を目指して,cDNA導入条件について再検討中である.ヒトT細胞系白血病細胞株を用いて以下の研究を行った.1.各ACh受容体サブタイプに選択的なsiRNAの構築M_3およびM_5ムスカリン性アセチルコリン受容体(mAChR),あるいはα

7ニコチン性アセチルコリン受容体(nAChR)発現を効率良く抑制するsmall interfering RNA(siRNA)を構築して,ヒトT細胞系白血病細胞CCRF-CEMに導入した.これらのsiRNAによりCCRR-CEM細胞における各遺伝子発現量は対照群の約40-50%にまで減弱した.各受容体ノックアウト細胞において,mAChRあるいはnAChRを介する細胞内Ca^<2+>シグナルが選択的に減弱したことから,M_3およびM_5 mAChR,およびα7 nAChRを介する細胞内Ca^<2+>シグナル伝達機構の存在が明らかとなった.現在さらにα5 nAChRに選択的なsiRNAの影響を検討中である.抗CD11a抗体により,ヒトT細胞系白血病細胞株MOLT-3においてコリン作動系活性が上昇した.この上昇作用はスタチン系薬simvastatinにより抑制された.すなわち,スタチン系薬の免疫抑制作用の一部に,CD11aを介するT細胞コリン作動系の活性調節の関与が示唆された.3.アセチルコリン(ACh)合成酵素コリンアセチルトランスフェラーゼ(ChAT)cDNAおよび抗親和性コリントランスポーター(CHT1)遺伝子の導入:各ヒトChAT mRNA(R, N1,N2,Mタイプ)およびCHT1をコードするcDNAをヒトT細胞系細胞株に導入して,発現量をRT-PCR法およびウェスタンブロティング法により検討した.現在,cDNA導入効率が20%程度と低かったために,解析が困難であった.現在50%以上の導入効率を目指して,cDNA導入条件について再検討中である.
傾斜機能化による高性能熱電変換材料の創製に関する研究

本年度は、低温用熱電材料であるBi_2Te_3系および中温用PbTe系の傾斜機能化に関して以下の結果を得ることができた。(1)キャリア濃度の異なるn形Bi_2Te_<2.85>Se_<0.15>単結晶をブリッジマン法によって育成し、ホール係数、磁気抵抗、熱電能の異方性のキャリア濃度依存性について調べた。これらの異方性は、キャリア濃度の減少とともに小さくなった。このことから、Bi_2Te_3系化合物では複雑なバンド構造を反映し、キャリア濃度の増減に伴うフェルミ準位の位置と支配的に寄与する伝導帯によって、電気的および熱電気的パラメータの異方性が変化することを明らかにした。(2)キャリア濃度傾斜型n形PbSnTe系化合物の合成・結晶育成とその熱電気的特性評価を行った。PbTe-SuTeの固溶体化が格子による熱伝導率低減に有効であることを明らかにした。また、一方向性凝固法によって成長方向に沿ってキャリア濃度が傾化したn形PbSnTe系育成結晶を得ることができた。0.4wt%PbI_2添加Pb_<0.95>Sn_<0.05>Teでは、全長50mmの育成結晶の成長開始部と終了部のキャリア濃度はそれぞ、1.27×10^<18>、3.61×10^<19>cm^<-3>であった。また、0.4wt%PbI_2添加Pb_<0.90>Sn_<0.10>Teでは、成長方向に沿って伝導形がn形からp形に連続的に変化していた。これらの育成結晶の組成分析の結果、SnおよびIの濃度が成長方向に沿って増加していることを明らかにした。
分子間水素結合を介した振動増感による化学反応エネルギー共役

研究代表者が最近見出した「液相中で選択的な分子間水素結合を介して他分子に余剰振動エネルギーを伝達し新たな化学反応を誘起する」モデル反応について詳細に検討した。具体的にはアミノアントラキノン類への光照射により生成した電子励起状態からの分子間水素結合による無輻射失活の詳細と無輻射失活に共役した過酸化物の分解反応について検討した。1)分子間水素結合による無輻射失活2-アミノアントラキノン(2AA)、2-ピペリジノアントラキノン(2PA)の励起一重項からの失活について新たに15種類のアルコール類、ヒドロペルオキシド類を用いその消光挙動を検討した。蛍光極大波長は消光剤の種類によらず濃度が増大するに従い長波長シフトした。消光定数についてもヒドロペルオキシド類はアルコール類と類似の挙動を示した。両者とも分子間水素結合相互作用による同様の機構で消光すると結論できる。最も消光能の高いメタノールはほぼ拡散律則で消光した。構造の違いによる消光能の変化については立体要因として分子中の水酸基露出表面積および基底状態アミノアントラキノンとの水素結合生成定数に強い相関が見られた。2)過酸化物の増感分解反応機構2AAおよび2PAによるクメンヒドロペルオキシドの可視光増感分解について蛍光消光、寿命測定、速度論的検討などから反応機構を明らかにした。増感分解生成物の量子収率測定から求めたkr/kd、蛍光消光のKsv、寿命測定からのKsvは良く一致した。励起一重項状態に於ける分子間水素結合相互作用による無輻射失活に共役して過酸化物の酸素-酸素結合が切断後、クミルオキシラジカルの生成を経由してアセトフェノンおよび2-クミルアルコールが生成すると考えられる。増感分解の限界量子収率から見積もった水素結合による消光後の振動エネルギー移動効率は2AA、2PAについてそれぞれ4%、5%と非常に大きい値となっている。
腫瘍循環器データベースの構築と抗がん剤による心毒性の評価および分子機序の解明

がん治療関連心機能障害(CTRCD)に関して、心機能障害が潜在的である段階で検出する指標について心機能および心筋バイオマーカーであるBNP、トロポニンI(TnI)の関連性について、血液腫瘍の造血幹細胞移植前後での検討を行った。血液腫瘍に対する造血幹細胞移植には移植前に集中した化学療法と全身の放射線照射が行われ、心臓への負担も大きく、腫瘍循環器医による介入が必要となる。心機能障害の早期検出は早期治療介入に結びつくため重要であり、今回、心毒性の早期発見に有効という報告がある左室心筋ストレイン(global longitudinal strain, GLS)に着目し、心機能およびGLS、心筋バイオマーカーの関係について解析した。対象は2017年から2018年に当センターで血液腫瘍(急性白血病、慢性白血病、悪性リンパ腫など)に対して造血幹細胞移植を施行した31症例について患者背景、造血幹細胞移植前と移植1ヶ月後の心エコー図検査データ、BNP、TnIを分析した。アントラサイクリン抗がん剤の平均累積投与量は179.4±114.7 mg/m2、全身放射線照射は26例に施行されていた。心エコー検査による左室駆出率(LVEF)は移植前63.6±5.5%、移植後1ヶ月64.7±4.6%と著変なかったが、GLSは移植前-19.3±0.7%から移植後1ヶ月-18.8±0.8%と有意な低下を認めた。BNP(移植前14.9±13.4 pg/ml、移植後1ヶ月68.1±96.8 pg/ml)、TnI(移植前0.010±0.002 ng/ml、移植後1ヶ月0.016±0.014 ng/ml)といずれも有意に上昇していたが、GLSの変化率とTnIの変化率には相関は認められなかった。これらの結果から、造血幹細胞移植前後において、LVEFに変化が認められない早期からGLSは低下を示すことが示唆された。腫瘍循環器データベースより、その治療が心臓への大きな負担となると考えられる血液疾患を抽出し、がん治療関連心機能障害(CTRCD)における心機能と心筋バイオマーカーBNP、トロポニンI(TnI)の関連性について解析し、抗がん剤によるCTRCDの早期検出について心機能の一つの指標として注目されているGLSについてその可能性を示すことが出来た。この結果は国際会議であるGlobal Cardio-oncology summit 2018でポスター発表し、国内では第1回日本腫瘍循環器学会学術集会、第83回日本循環器学会学術集会、第22回日本心不全学会学術集会でも発表することができた。現在、本研究を論文化している。今回は、GLSの低下とTnIやBNPの変化に相関は認められなかったが、GLSが潜在的な心機能障害を検出している可能性があり、引き続きこれらの患者の心機能(LVEF、GLS)、心筋バイオマーカー(BNP、TnI)をさらに追跡し、GLSの心機能低下の予後予測因子である可能性について引き続き検討している。さらに、腫瘍循環器データベースから抽出した症例、あるいは症例群について同様の検討を行っていく予定である。がん治療の進歩は高い治療効果をもたらす一方で、がん治療における心血管系の副作用(心毒性)は治療の大きな支障となるため、腫瘍循環器による介入が不可欠となっている。しかし、化学療法、特に分子標的薬による心毒性の発現の詳細やその機序についてはまだ十分解明されていない。本研究は大阪国際がんセンター腫瘍循環器科に受診するがん治療患者のデータベース化を進めることによって、がん治療に伴う心毒性のリアルワールドを明らかにし、分子標的薬の適正使用の基盤となることを目指すとともに、分子標的薬による心血管系への影響を様々な角度から解析し、心毒性の発症機序を解明することを目指している。昨年11月から12月に当センター腫瘍循環器科に新患としてがん診療科から紹介受診した患者は合計102名であり、引き続き登録、解析を進めているが、単施設ではデータ量は限られている。欧米の動向から腫瘍循環器領域において早急に多くのデータを集積する大きな組織が必要と考え、わが国の主要ながんセンターの循環器内科医による日本腫瘍循環器学術ネットワーク(Japan Onco-Cardiology Educational and Academic Network)を組織した。当センター腫瘍循環器科では、昨年11月から12月にがん診療科から新患として紹介受診した心血管疾患患者は合計102名であった。しかし、年度末に大阪府立成人病センターから大阪国際がんセンターへの新築移転等があり、データの集積、解析、基礎研究が滞ってしまった時期があり、やや遅れ気味と判断した。本研究は大阪国際がんセンター腫瘍循環器科を受診するがん治療患者のデータベース化を進めることによって、がん治療に伴う心毒性のリアルワールドを明らかにし、分子標的薬の適正使用の基盤となることを目指すとともに、分子標的薬による心血管系への影響を様々な角度から解析し、心毒性の発症機序を解明することを目指している。平成29年度は当センター腫瘍循環器科に新患としてがん診療科から紹介受診した患者の登録、解析を進めている。その中で、血管新生阻害薬によると考えられる大動脈解離および心機能障害を発症した症例を見いだし、英文論文として発表し(Takada M, Oka T, et al. Int Heart J. in press)、日本

循環器学会近畿地方会で発表することができた。さらに、乳がん患者に対するHER2阻害薬による心機能障害、がん患者における心房細動の割合と抗凝固薬の効果と安全性について着目し、観察研究を進めている。海外の腫瘍循環器の調査のためヨーロッパ心臓病学会学術集会(バルセロナ)、Global Cardio-Oncology Summit 2017(ロンドン)、Advancing Cardiovascular Care of the Oncology Patient(ワシントンDC)に参加し、海外の医師、研究者との交流を積極的に行っている。大阪国際がんセンター腫瘍循環器科においてがん診療科から新患として紹介受診した心血管疾患患者の登録を行っている。平成29年度は当センター腫瘍循環器科に新患としてがん診療科から紹介受診した患者の登録、解析を進めている。その中で、血管新生阻害薬によると考えられる大動脈解離および心機能障害を発症した症例を見いだし、英文論文として発表し(Takada M, Oka T, et al. Int Heart J. in press)、日本循環器学会近畿地方会で発表することができた。データベースおよび個々の症例を注意深く観察しながら集積していく過程で、抗がん剤による心血管毒性を示す貴重な症例や心毒性の特徴を捉えることが出来ると考えており、引き続きデータベースを構築するとともに、情報発信を行っていきたい。すでに、乳がん患者に対するHER2阻害薬による心機能障害やがん患者における心房細動の割合と抗凝固薬の効果と安全性について着目し、観察研究を進めており、近い将来新しい情報を発信したいと考えている。がん治療関連心機能障害(CTRCD)に関して、心機能障害が潜在的である段階で検出する指標について心機能および心筋バイオマーカーであるBNP、トロポニンI(TnI)の関連性について、血液腫瘍の造血幹細胞移植前後での検討を行った。血液腫瘍に対する造血幹細胞移植には移植前に集中した化学療法と全身の放射線照射が行われ、心臓への負担も大きく、腫瘍循環器医による介入が必要となる。心機能障害の早期検出は早期治療介入に結びつくため重要であり、今回、心毒性の早期発見に有効という報告がある左室心筋ストレイン(global longitudinal strain, GLS)に着目し、心機能およびGLS、心筋バイオマーカーの関係について解析した。対象は2017年から2018年に当センターで血液腫瘍(急性白血病、慢性白血病、悪性リンパ腫など)に対して造血幹細胞移植を施行した31症例について患者背景、造血幹細胞移植前と移植1ヶ月後の心エコー図検査データ、BNP、TnIを分析した。アントラサイクリン抗がん剤の平均累積投与量は179.4±114.7 mg/m2、全身放射線照射は26例に施行されていた。心エコー検査による左室駆出率(LVEF)は移植前63.6±5.5%、移植後1ヶ月64.7±4.6%と著変なかったが、GLSは移植前-19.3±0.7%から移植後1ヶ月-18.8±0.8%と有意な低下を認めた。
イオン結晶表面の水の吸着

電子照射されたイオン結晶表面の水の吸着形態と摩擦力の関係を走査型フォース顕微鏡で調べた。電子照射される前の表面の吸着状態は数時間にわたって複雑な様相を示すのに対し、電子照射された表面の水の吸着形態は、短時間で島状から一様な膜への成長に変化した。これは、電子照射によって表面にFセンターがつくられた後、水の解離吸着により形成されたOHセンターに起因している。結局、電子照射された表面ではVolmer-Weberメカニズムによる吸着形態を示した。アルカリハライド結晶表面の負荷に対する摩擦力を摩擦力顕微鏡で調べた。単原子接触をもつ数nNの低負荷領域では、表面結晶格子を反映した周期的ステックスリップが観測され、摩擦力は一定の値を示した。さらに、負の摩擦も同時に観測された。負荷を増加していくと、表面の歪がおこり摩擦力がさらに増加するが一定の値を示した。さらに、増加すると急激な摩擦力の増加が起こりその後また一定の値を示した。結局、負荷に対し摩擦力は階段状に増加するがわかった。走査方向を変えると異なる摩擦力で階段状に増加することもわかった。これは、負荷の増加によって、チップ-表面間の接触面積の離散的増加がおこり、走査に必要なチップ表面間の切断力が離散的になることに起因している。つまり、単突起接触による低摩擦領域で、摩擦力(せん断力)の離散化、量子化がみられた。従来知られてきた巨視的摩擦を多突起接触による摩擦ととらえ直すと、摩擦力顕微鏡で観測された結果と巨視的摩擦の関係は、単突起接触と多突起接触の問題として関係づけられことになった。さらにC_<60>分子のナノサイズ摩擦特性を調べた。探針の負荷に応じて摩擦特性が急激に変化した。これは、負荷の増加に応じて接触領域が単分子から数分子に増加したためである。単分子接触になることによる急激な摩擦力の減少は、C_<60>分子の回転が生じたことによる。これは、電子照射によって、表面にFセンターがつくられた後、水の解離吸着により形成されたOHセンターに起因している。しかしながら、電子照射された表面の周期的構造に大きな変化は見られなかった。このことは、表面の周期的構造を変えずに水の吸着形態の制御が可能なことを意味する。ここで、見ている水の吸着は水分子12層の吸着であり、境界潤滑として重要な摩擦特性の制御を可能にする。単原子接触を持つ数nNの低負荷領域では、表面結晶格子を反映した周期的ステックスリップが観測され、摩擦力は一定の値を示した。

これは、負荷の増加によって、チップ-表面間接触面積の離散的増加がおこり、走査に必要なチップ-表面間の切断力が離散的になることに起因している。つまり、単突起接触による低摩擦領域で、摩擦力(せん断力)の離散化、量子化がみられた。このような結果は、世界的に報告されていない。従来知られてきた巨視的摩擦を多突起接触による摩擦ととらえ直すと、摩擦力顕微鏡で観測された結果と巨視的摩擦の関係は、単突起接触と多突起接触の問題として関係づけられる。電子照射されたイオン結晶表面の水の吸着形態と摩擦力の関係を走査型フォース顕微鏡で調べた。電子照射される前の表面の吸着状態は数時間にわたって複雑な様相を示すのに対し、電子照射された表面の水の吸着形態は、短時間で島状から一様な膜への成長に変化した。これは、電子照射によって表面にFセンターがつくられた後、水の解離吸着により形成されたOHセンターに起因している。結局、電子照射された表面ではVolmer-Weberメカニズムによる吸着形態を示した。アルカリハライド結晶表面の負荷に対する摩擦力を摩擦力顕微鏡で調べた。単原子接触をもつ数nNの低負荷領域では、表面結晶格子を反映した周期的ステックスリップが観測され、摩擦力は一定の値を示した。さらに、負の摩擦も同時に観測された。負荷を増加していくと、表面の歪がおこり摩擦力がさらに増加するが一定の値を示した。さらに、増加すると急激な摩擦力の増加が起こりその後また一定の値を示した。結局、負荷に対し摩擦力は階段状に増加するがわかった。走査方向を変えると異なる摩擦力で階段状に増加することもわかった。これは、負荷の増加によって、チップ-表面間の接触面積の離散的増加がおこり、走査に必要なチップ表面間の切断力が離散的になることに起因している。従来知られてきた巨視的摩擦を多突起接触による摩擦ととらえ直すと、摩擦力顕微鏡で観測された結果と巨視的摩擦の関係は、単突起接触と多突起接触の問題として関係づけられことになった。さらにC_<60>分子のナノサイズ摩擦特性を調べた。探針の負荷に応じて摩擦特性が急激に変化した。これは、負荷の増加に応じて接触領域が単分子から数分子に増力したためである。単分子接触になることによる急激な摩擦力の減少は、C_<60>分子の回転が生じたことによる。
転移型・進行非小細胞肺癌治療のための新規ウイルス製剤および投与法の開発

肺癌特異的転写システムにより肺癌内で有意に増殖できる増殖型アデノウイルスを作製した。当該ウイルスは肺腺癌細胞株にて特異的細胞死を誘導する一方ヒト正常肺繊維芽細胞での細胞死は低値であった。当該ウイルスの経気管投与は進行非小細胞肺癌モデルマウスにおいて腫瘍増殖抑制効果を示しさらにこの効果は肺胞サーファクタントを混和することで増強された。これらの検討により、肺癌特異的増殖するアデノウイルス製剤と肺胞サーファクタントの併用による進行肺癌に対する新しい治療法の有効性が示された。肺癌は最も予後不良な癌の一つで、その5年生存率は1214%に過ぎない。本邦におけるその死亡者数は男女とも一貫して増加しており、1998年以降胃癌死亡を抜いて癌死亡原因の第1位となっている。該疾患が難治性癌である理由として、転移を起こしやすい点が挙げられ、我々は本研究においてこのような手術不能進行非小細胞肺癌に対する転移巣を含めた新しい治療法の開発のため肺癌特異的増殖型アデノウイルス作製を行い、平成20年度に以下の検討を行った。ICRマウスにおよびAdenoviral vector : Ad-CMV/LacZを用いた検討において、肺胞サーファクタントはAd-CMV/LacZ経気管投与後の肺内におけるLacZ遺伝子の発現領域および強度ともに顕著に増強させることが可能であった。一方で肺胞サーファクタント未使用群では、遺伝子発現領域および強度は制限された。上記の検討により、肺癌特異的転写システムを用いたアデノウイルス製剤および肺胞サーファクタントの併用、さらに必要時にウイルスの機能を遮断できるDexamethazoneを使用することで、安全性の高い新規肺癌治療法の開発が可能となることが示唆された。上記の検討により、肺癌特異的に目的遺伝子を発現できるアデノウイルス製剤および肺胞サーファクタントの併用療法は、KRas変異型肺癌に抗腫瘍効果を誘導でき、さらに白金系抗癌剤による併用効果が得られ、dexamethazoneによる抑制コントロールが可能であることが示された。