hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
時間軸を考慮した顎顔面形成におけるmicroRNAの機能解析

顎顔面ほど複雑な構造と機能を有する部位は他にない。そのため、発生期における形成過程も複雑を極める。しかし、先天奇形の3分の1には顎顔面に異常が認められることから、その顎顔面の発生メカニズムは内外の変化によって簡単に破綻するほど脆弱であることも意味する。そのような極めて厳格な制御が求められる形成過程を、セントラドグマ(DNA→RNA→タンパク質)というシンプルな機構のみで、制御しているとは考えにくい。そこで本研究では、組織特異的欠損Cre-LoxPシステムにERTを導入することにより、microRNAを好きな時期に欠損させることで、顎顔面発生メカニズムにおけるmicroRNAの機能の把握を目指す。しかし、先天性疾患の3分の1に顎顔面に異常が認められることは、その顎顔面の発生メカニズムが内外の変化によって簡単に破綻するほど脆弱であることも意味する。タンパクをコードしないmicroRNAは、ターゲットのメッセンジャーRNAと結合することによりタンパクへの翻訳を阻害し、タンパク量を調節する分子群である。microRNAの欠損は、顎顔面のほとんどを欠損させることが報告されており、microRNAが顎顔面形成のメインプレーヤーの一つである事を示している。しかし、顎顔面がほとんど形成されないという表現形は、重篤すぎて機能解析には適さない。顎顔面の発生は、半日単位での継時的な変化を大きな特徴とするため、重篤すぎる表現形への対応は、任意の時期で遺伝子を欠損させるような時間軸を考慮した研究デザインにより回避できる。そこで本研究では、組織特異的欠損Cre-LoxPシステムにERを導入することにより、microRNAを好きな時期に欠損させることで、顎顔面発生メカニズムにおけるmicroRNAの機能の把握を目指す。ERの導入されたDicer欠損マウスの作成に着手した。本研究に必要なDicerfl/flマウスやER-Creとのコンパウンドマウスが、母親マウスの飼育放棄や食殺行為のため、予定していた数に達するまで、予定していたよりも多くの時間を要し、実験の進捗に大きく影響した。繁殖の規模を増やすことにより、十分な数のマウスをすでに確保しており、今後は予定通りの研究遂行が可能と思われる。次年度は、様々な時期においてDicerを欠損させた際における表現型の相違を、詳細に把握する。さらに、表現型の認められたDicer欠損マウスでは、分子変動をマイクロアレイ、in situ hybridization,免疫染色、などで検索する。特に、器官発生に重要な役割を担うことが知られているShh, Fgf, Wnt, Tgfなどのシグナル経路の活性の検索には注意を払う。
膜電位感受性色素-Ca指示薬-光散乱の組み合せによる脳シナプス過程の光学的測定

個体発生の初期過程における中枢神経系のシナプス伝達系の形成過程の追跡は中枢神経系の基本的機構を解析するうえで重要な戦略となる得る。そこで、われわれは、膜電位感受性色素を用いたニュ-ロン活動の光学的超多チャネル同的記録法を用いて、従来の電気生理学的手法による測定が困難であった発生初期の脳幹のシナプス活動の光学的測定を行い、それを記録することに成功した。メロシアニン・ロ-ダニン系膜電位感受性色素NK2761をポテンシャル・プロ-ブとして用い、ふ卵8日の鶏胚脳幹で迷走神経線維の電気刺激によって誘発されるニュ-ロン応答を色素の吸光シグナルとして128ケ所から同時記録した。さらに記録部位を移動することにより、脳幹内の最高1000ケ所以上から光学的シグナルを記録し、そのマッピングをおこなった。記録された光学的シグナルは二相性を示し、刺激電流パルスから数msec以内に立ち上がるスパイク状の時間経過の速いシグナルと、それに続いて1秒以上持続する時間経過の遅いシグナルが記録された。この二種のシグナルはともに膜電位変化にともなう色素特有の波長依存性を示すが、遅いシグナルは連続刺激に対して徐々に減衰する特徴があり、低Ca^<2+>液やCd^2やMn^<2+>を含む液中で遅いシグナルのみが選択的に抑制されることなどから、速いシグナルは刺激によって直接誘発されたニュ-ロンの活動電位に対応し、遅いシグナルは刺激で興奮したニュ-ロンからシナプスを介して伝達された興奮性シナプス電位(EPSP)であることが明らかになった。そのEPSPの伝達物質は各種のブロッカ-を用いた薬理学的検索でグルタミン酸であることが同定された。さらにEPSPの発現する部位は脳幹の刺激側のやや外側、横断面でみると背側面近くに限局しており、この部分に孤束核に対応すると考えられる感覚性の神経核が機能的に形成されつつあることが明らかにされた。
プロテインチナ-ゼの活性調節の異常による神経細胞孔に関する研究

神経細胞の分化,成長の過程に一致して神経細胞内では蛋白質リン酸化活性が急速に高まり,シナプスが形成されると高い活性を保ちつづける。蛋白質リン酸化反応は神経情報伝達機構と密接に関連している。一方,カルモデュリン依存性プロテインキナ-ゼII(キナ-ゼII)は脳神経系で非常に高い活性をもち,神経機能の調節,例えば,神経伝達物質の合成と分泌,細胞内情報伝達,シナプスの可塑性などに中心的な役割を果すと考えられている。これらの点を生化学的に解析するために,培養神経細胞にキナ-ゼII cDNA,および,3の変異cDNAを導入し,酵素を発現させ,機能解析を行うことが1つの解決策であると考えられる。神経細胞にcDNAを導入することは,最初は困難であったが,導入条件とプロモ-タ-を検討することにより,キナ-ゼII分子を発現する細胞を得ることに成功した。導入細胞のキナ-ゼ活性はコントロ-ル細胞の2ー3倍であった。キナ-ゼIIに対するモノクロ-ナル抗体を用いて調べると,細胞管に強い反応性を示し,また,核周囲および内部にも点状の陽性斑が認められた。細胞は継代直後の浮遊した状態ではほゞ球状を量した。cDNA導入細胞はコントロ-ル細胞が形態変化を示さない継代直後30分時に,すでに全体の50%が偏平化し,一部に突起形成が認められた。細胞の増殖率や接着率に関してはキナ-ゼ発現による影響はなかった。従って,神経細胞におけるキナ-ゼIIの発現が細胞の形態変化と突起形成に密接に関係することが明らかとなった。一方,キナ-ゼIIの変異cDNAを用いた機能解析を行ったところ,Ca^<2+>およびカルモデュリンによる調節を受けず,常に活性化された酵素を産生するcDNAを細胞に導入した場合には,細胞の増殖が抑制され,細胞死が起ることが見出された。このことは,キナ-ゼIIの活性異常により細胞内の情報伝達系が影響を受けるためと考えられ,その分子メカニズムを今後明らかにする。
慢性動脈閉塞症における循環動態の質的量的解析と適切治療に関する研究

慢性動脈閉塞症の血流改善前後の血行動態の変化をDoppler法やMercury Strain gauge法を用いて解明し、さらに虚血肢の血流や重症阻血肢の四肢切断レベルを組織酸素分圧(pto_2)や乳酸代謝面さらにThermoyraphyなどを用いて検討し、重症阻血肢の安全切断レベルはPtO_2が40mmHgの所であることが判明した。更にプロスタグランディンE_1あるいは1_2などはきわめて有効に皮膚血流量を増加させ、皮膚温の上昇をきたすことが多いが、症例によると大腿部に血流がstealされ、足背の温度は却って低下するものがある事も明らかになった。下肢慢性動脈閉塞症における病態と血行再建術による治療効果をより正確に把握するため、20MHxドプラ-血流計を用い、閉塞部より中枢のnative動脈の血流プロフィルと閉塞部より末梢の開存しているnative動脈の血流プロフィルを術前により把握した上でバイパス手術を行い、そのバイパス血管を通る血流プロフィルが如何様な状態である場合に罹患肢にとって最もよい結果が得られるかも検討した。臨床例(大伏在静脈を用いたバイパスに限る)において、閉塞部より中枢native、グラフト中枢、グラフト中央、グラフト末梢、末梢吻合部、可能なかぎり末梢の開存native動脈の血流プロフィルを直接測定したが、中枢nativeの整流が、グラフト中枢から中央にかけて乱れ、再び中央から末梢にかけて整流になる傾向員ある。末梢吻合部ではずり応力による血流の乱れが生じ、再び末梢に向うに従って整流になることが判明した。これらの事は臨床例においてしばしば見られるグラフト中央の内膜肥厚による狭窄、末梢吻合部の狭窄発生に関与するものと思われた。また下腿3分枝のうち、1本の開存血管にバイパスを施行した場合でも、そのグラフトおよび末梢吻合部での血流プロフィルが良好で整流に近ければ、グラフト開存性は良好であることも判明した。従来より慢性動脈閉塞症の血流改善前後の血行動態の変化をDoppler法やmercury strain gauge法を用いて解明につとめた.昭和62年度は虚血肢の血流や重症阻血肢の四肢切断レベルの決定を組織酸素分圧や乳酸代謝面から検討し,酸素吸入時組織酸素分圧40mmHgの箇所が一応安全な切断レベルであることが判明した.またさらに既存の機器や新しい方法を用いてProstaglandin Izの虚血肢におよぼす血流動態,特に微小循環の変化を組織酸素分圧の面から解明しようと試みた.PGIzを虚血肢を有する患者に投与した場合,確かに虚血肢の皮膚温は上昇するが,症例によっては健側肢あるいは大腿筋の血流がstealされ,かえって虚血肢の皮膚温が低下する場合があることも解った.このような症例にはα-ブロッカーを前もって投与しておくとPGIzの虚血肢に対する効果が有効であることが判明した.昭和62年度の研究により慢性動脈閉塞による重症虚血肢を切断する場合にその切断肢の一期的治癒が期待し得る切断レベルは酸素吸入時の組織酸素分圧40mmHgの部位であることが判明した.しかし,切断のレベルをさらに末梢にし,患肢を少しでも長く温存するために補助的な血行再建術あるいは,薬物療法などを行うことが望ましい.その際の再建血管が,どの位の期間開存性が得られるか,再建血管として何を使用するのが最適か,また自家静脈を用いた場合,静脈弁は温存して順流性がよいか,弁を破壊して逆流性に用いるのがよいか,さらにまた薬物効果がどの位あるかなどをさらに別の方法,たとえばレーザードプラー血流波形計測などにより血流プロファイルを知ることも必要であると痛感させられた.なおThermographyは無侵襲的に薬効の判定には有用であるが,実際の血流の増減量などの判定には,さらによい計測機器の開発と総合的な判定が必要と思われた.慢性動脈閉塞症の血流改善前後の血行動態の変化をDoppler法やMercury Strain gauge法を用いて解明し、さらに虚血肢の血流や重症阻血肢の四肢切断レベルを組織酸素分圧(pto_2)や乳酸代謝面さらにThermoyraphyなどを用いて検討し、重症阻血肢の安全切断レベルはPtO_2が40mmHgの所であることが判明した。

これらの事は臨床例においてしばしば見られるグラフト中央の内膜肥厚による狭窄、末梢吻合部の狭窄発生に関与するものと思われた。また下腿3分枝のうち、1本の開存血管にバイパスを施行した場合でも、そのグラフトおよび末梢吻合部での血流プロフィルが良好で整流に近ければ、グラフト開存性は良好であることも判明した。従来から慢性動脈閉塞症の血流改善前後の血行動態の変化をDoppler法やMercury strain gauge法を用いて解明し、さらに虚血肢の血流や重症阻血肢の四肢切断レベルを組織酸素分圧や乳酸代謝面さらにThermographyなどを用いて検討してきた。今回は末梢動脈の血行再建を行う場合にその血行再建が罹患肢の血流態にどのような影響をもたらすかを、20MHzドプラー血流計を用い、直接血流プロフィルを測定することで解明しようとした。即ち、下肢慢性動脈閉塞症の病態とその治療効果をより正確に把握するためには、罹患肢における閉塞脈の病態と治療に用いたバイパス血管の血流動態を知る必要がある。そのため閉塞部より中枢のnativeの動脈における血流プロフィルと閉塞部より末梢のまだ開存しているnative動脈の血流プロフィルを術前によく把握したうえでバイパス手術を行い、そのバイパス血管を通る血流プロフィルが如何様な状態である場合に罹患肢にとって最もよい結果が得られるのか、さらにバイパス血管として使用する人工血管、自家静脈、人臍帯静脈などにより、それぞれ血流プロフィルは異なることも明確にしようとした。現在のところ臨床(大伏在静脈を用いたバイパスに限る)においては、閉塞部より中枢native、グラフト中枢、中央、末梢と可能なかぎり閉塞部末梢nabiveでの血流プロフィルを測定したが、中枢nativeの整流がグラフト中枢で乱れ、再び中央から末梢にかけて整流になる傾向がある。また、動物実験での各種代用血管、(人工血管、自家静脈、人臍帯静脈)における血流プロフィルでは、自家静脈グラフトがより整流に近い傾向にあり、コンプライアンスとの関連が示唆された。今後、症例及び実験を重ねて、プロフィルのパターン化による血行再建の予後推測と、血流面からの代用血管選択の指標を確立していこうと思う。従来から慢性動脈閉塞症の血流改善前後の血行動態の変化をDoppler法やMercury Strain gauge法を用いて解明し、さらに虚血肢の血流や重症阻血肢の四肢切断レベルを組織酸素分圧や乳酸代謝面さらにThermographyなどを用いて検討してきた。下肢慢性動脈閉塞症における病態と血行再建術による治療効果をより正確に把握するため、20MHzドプラ-血流計を用い、閉塞部より中枢のnotive動脈の血流プロフィルと閉塞部より抹梢のまだ開存しているnative動脈の血流プロフィルを術前によく把握したうえでバイパス手術を行い、そのパイパス血管を通る血流プロフィルが如何様な状態である場合に羅患肢にとって最もよい結果が得られるのかを今回検討した。現在までのところ臨床例(大伏在静脈を用いたバイパスに限る)においては、閉塞部より中枢native、グラフト中枢、グラフト中央、グラフト末梢、末梢吻合部と可能なかぎり末梢の開存native動脈の血流プロフィルを20MHzドプラ-血流計で直接測定したが、中枢nativeの整流が、グラフト中枢から中央にかけて乱れ、再び中央から末梢にかけて整流になる傾向がある。さらに末梢吻合部ではずり応力による血流の乱れが生じ再び末梢に向うに従って整流となる。これらの事は臨床例においてよく見られる。
羊膜由来上皮細胞を用いたハイブリッド型小口径人工血管に関する研究

本研究にてコラーゲンプレクロッテングに加え人工血管内腔面にヒト羊膜由来上皮細胞のseedingを行ったヒト羊膜由来上皮細胞のハイブリッド型人工血管(ポリウレタン)を作製し、ウサギ頸動脈に移植し、2週間および6週間後に同人工血管の評価を行った.当初20週後に評価予定であったが、10から20週での脱落例(死亡例)が非常に多いため、2週間および6週間後で評価を行う方針とした.評価までの期間が短くなり、吻合部内膜肥厚については評価不能となった.ヒト羊膜上皮細胞が人工血管内腔面に接着し増殖することを確認し、ヒト羊膜由来上皮細胞のハイブリッド型人工血管の作製に成功した.さらに移植したヒト羊膜上皮細胞の増殖がFGF-2とEGFのgrowth factorにより活性化されることを確認した.移植後2週間および6週間に摘出した人工血管は、コントロール群に比し血栓形成・平滑な内腔面形成にて明らかに優れていることを確認したものの、開存率では移植群とコントロール群で有為差は得られなかった.移植後2週間および6週間の移植群にて電子顕微鏡にで細胞の存在が確認され、さらにAhti-human Ki-67抗体を用いた免疫蛍光染色にて同細胞がヒト羊膜由来上皮細胞であることを確認した.しかし、移植後経時的に同人工血管内腔面の細胞数は明らかに低下しており動脈圧のsheer stressに対するヒト羊膜由来上皮細胞の人工血管内腔面への接着の維持が大きな問題となっているもの考えられた.この問題点につき今後さらに検討を要する。しかし、この問題点が解決されれば将来、ヒト羊膜上皮細胞は、内腔面を上皮細胞を用いcoatingしたハイブリッド型人工血管におけるcoatingcellとして有用であることが期待されるものと考えられる.今後さらに、ヒト臍帯由来上皮細胞を用いたハイブリッド型人工血管の可能性を探る方針である.本研究にてコラーゲンプレクロッテングに加え人工血管内腔面にヒト羊膜由来上皮細胞のseedingを行ったヒト羊膜由来上皮細胞のハイブリッド型人工血管(ポリウレタン)を作製し、ウサギ頸動脈に移植し、2週間および6週間後に同人工血管の評価を行った.当初20週後に評価予定であったが、10から20週での脱落例(死亡例)が非常に多いため、2週間および6週間後で評価を行う方針とした.評価までの期間が短くなり、吻合部内膜肥厚については評価不能となった.ヒト羊膜上皮細胞が人工血管内腔面に接着し増殖することを確認し、ヒト羊膜由来上皮細胞のハイブリッド型人工血管の作製に成功した.さらに移植したヒト羊膜上皮細胞の増殖がFGF-2とEGFのgrowth factorにより活性化されることを確認した.移植後2週間および6週間に摘出した人工血管は、コントロール群に比し血栓形成・平滑な内腔面形成にて明らかに優れていることを確認したものの、開存率では移植群とコントロール群で有為差は得られなかった.移植後2週間および6週間の移植群にて電子顕微鏡にで細胞の存在が確認され、さらにAhti-human Ki-67抗体を用いた免疫蛍光染色にて同細胞がヒト羊膜由来上皮細胞であることを確認した.しかし、移植後経時的に同人工血管内腔面の細胞数は明らかに低下しており動脈圧のsheer stressに対するヒト羊膜由来上皮細胞の人工血管内腔面への接着の維持が大きな問題となっているもの考えられた.この問題点につき今後さらに検討を要する。しかし、この問題点が解決されれば将来、ヒト羊膜上皮細胞は、内腔面を上皮細胞を用いcoatingしたハイブリッド型人工血管におけるcoatingcellとして有用であることが期待されるものと考えられる.今後さらに、ヒト臍帯由来上皮細胞を用いたハイブリッド型人工血管の可能性を探る方針である.
水素吸蔵合金膜の溶融塩中からの直接電解製造とその特性

二元系水素吸蔵合金膜を作製するために,溶融金属塩からの溶融塩電解と,電析金属と基板金属との合金化を利用した二元系あるいは三元系水素吸蔵合金膜の生成を検討した。La,Ca,Ti,MgをNi,Fe,Cu基板上に溶融塩電解し,水素吸蔵合金であるLaNi_5,CaNi_5,TiFe,Mg_2Ni,Mg_2Cuの作製した。電解条件とくに電解温度,電解電流密度によって生成合金相が変わる。目的とした水素吸蔵合金が単相で生成した場合もあるが,他の金属間化合物との混合相として生成したもの(Ca-Ni系,Mg-Cu系)もあった。作製した水素吸蔵合金膜の特性評価としてアルカリ水溶液中で水素吸蔵・放出試験,サイクル試験を行った。また,作製した合金膜は,水素吸蔵合金が単相で生成していたり,他の金属間化合物との混合相であったりするため,これらの生成状態の違いが水素吸蔵特性に与える影響についても考察した。本研究で作製した水素吸蔵合金膜の中で,常温アルカリ水溶液中において良好は水素吸蔵特性を示したのは,La-Ni系で,1023Kにおいて電流密度0.1Acm^<-2>,電析時間0.4ksでLaをNi上に電析して作製した約25μmのLaNi_5であった。La-Ni系において,活性化処理をしない状態では,市販のインゴットより本研究で作製したLaNi_5合金膜のほうがサイクル特性において優れていることがわかった。市販のLaNi_5インゴットからは合金の微粉化による剥離が多く観察されたのに対し,LaNi_5膜の場合は,剥離はある程度見られたがインゴットほどではなかった。合金の一成分が基板であることから密着性が向上し,水素吸蔵・放出サイクル時に生じる微粉化を緩和することができたと考えられる。一方,Ni基板上へ溶融塩電析によりLaとCoを同時析出させ,基板と合金化させた.Coを1%程度添加されたLaNi_5合金膜が形成できることが明らかとなった.この膜の水素吸蔵・放出はサイクル寿命が向上することがわかった.二元系水素吸蔵合金膜を作製するために,溶融金属塩からの溶融塩電解と,電析金属と基板金属との合金化を利用した二元系あるいは三元系水素吸蔵合金膜の生成を検討した。一方,Ni基板上へ溶融塩電析によりLaとCoを同時析出させ,基板と合金化させた.Coを1%程度添加されたLaNi_5合金膜が形成できることが明らかとなった.この膜の水素吸蔵・放出はサイクル寿命が向上することがわかった.溶融塩電解法を用いて,La,MgをNi基板上に電析させ,基板と電析金属を反応させることにより,膜状の水素吸蔵合金LaNi_5,Mg_2Niを生成させた.さらに,これらのLa-Ni系,Mg-Ni系合金について,電気化学的手法による合金化機構の解明を試みた.La-Ni系,Mg-Ni系ともに,電解条件により,生成物が異ることがわかった.Mg-Ni系の場合,目的とする水素吸蔵合金の融点よりも高い温度で電解を行った場合には,目的金属(Mg_2Ni)よりもさらに融点の高い合金(MgNi_2)が優先的に得られることがわかった.融点よりも低い温度で電解した場合,主に,(MgNi_2)が得られた.また,断面分析した結果,合金が基板表面から電析物相方向に生成していくことが明らかとなった.

これらの挙動は,合金化機構に,基板と電析物との拡散が関係しているためと考えられる.生成合金と電位との関係を調べたところ,La-Ni系では,1023Kで電析直後,試料を溶融塩中に浸漬保持した状態での電位の経時変化は,時間の経過とともに高くなり,電析前のNiの自然浸漬電位付近に達するまでに5カ所のプラトー電位が確認された.さらにMg-Ni系でも,同じ条件で電析したもので同様な電位変化が見られ,電析前のNiの自然浸漬電位付近に達するまでのプラトー電位は3カ所であった.このプラトー電位は合金(金属間化合物)の平衡電位に相当することを示した.二元系水素吸蔵合金膜を作製するため,溶融金属塩からの溶融塩電解と,電析金属と基板金属との合金化を利用した二元系水素吸蔵合金膜の生成を検討した。La,Ca,Ti,MgをNi,Fe,Cu基板上に溶融塩電解し,水素吸蔵合金であるLaNi_5,CaNi_5,TiFe,Mg_2Ni,Mg_2Cuの作製を試みた。電解条件とくに電解温度,電解電流密度によって生成合金相が変わる。目的とした水素吸蔵合金が単相で生成した場合もあるが,他の金属間化合物との混合相として生成したもの(Ca-Ni系,Mg-Cu系)もあった。作製した水素吸蔵合金膜の特性評価としてアルカリ水溶液中で水素吸蔵・放出試験・サイクル試験を行った。また,作製した合金膜は,水素吸蔵合金が単相で生成していたり,他の金属間化合物との混合相であったりするため,これらの生成状態の違いが水素吸蔵特性に与える影響についても考察した。本研究で作製した水素吸蔵合金膜の中で,最も良好は水素吸蔵特性を示したのは,La-Ni系で,1023Kにおいて電流密度0.1Acm^<-2>,電析時間0.4ksでLaをNi上に電析して作製した約25μmのLaNi_5であった。La-Ni系において,活性化処理をしない状態では,市販のインゴットより本研究で作製したLaNi_5合金膜のほうがサイクル特性において優れていることがわかった。市販のLaNi_5インゴットからは合金の微粉化による剥離が多く観察されたのに対し,LaNi_5膜の場合は,剥離はある程度見られたがインゴットほどではなかった。合金の一成分が基板であることから密着性が向上し,水素吸蔵・放出サイクル時に生じる微粉化を緩和することができたと考えられる。二元系水素吸蔵合金膜を作製するために,溶融金属塩からの溶融塩電解と,電析金属と基板金属との合金化を利用した二元系あるいは三元系水素吸蔵合金膜の生成を検討した。La,Ca,Ti,MgをNi,Fe,Cu基板上に溶融塩電解し,水素吸蔵合金であるLaNi_6,CaNi_5,TiFe,Mg_2Ni,Mg_2Cuの作製した。作製した水素吸蔵合金膜の特性評価としてアルカリ水溶液中で水素吸蔵・放出試験,サイクル試験を行った。本研究で作製した水素吸蔵合金膜の中で,常温アルカリ水溶液中において良好は水素吸蔵特性を示したのは,La-Ni系で,1023Kにおいて電流密度0.1Acm^<-2>,電析時間0.4ksでLaをNi上に電析して作製した約25μmのLaNi_5であった。
サルコペニアに対する全身麻酔薬の影響：オートファジー不全の分子機構に着目した解析

長時間手術・集中治療管理における全身麻酔薬・鎮静薬の使用は、サルコペニア患者に周術期合併症増加や予後悪化をもたらす。サルコペニアの病態には、ミトコンドリア機能不全、活性酸素分子産生増加、オートファジー不全も大きく関与する。一方、全身麻酔薬は酸化ストレスや炎症、免疫、オートファジーに対し強い影響を与える。本研究は、サルコペニア病態における全身麻酔薬の効果についてオートファジーの分子機構から解明することを目的とする。更にサルコペニア病態と相関するバイオマーカーとなりうる分子を網羅的解析から同定する。本研究は基礎研究だが、この機序の解明によって周術期合併症低下や予後の改善に役立つことが期待される。
ニホングリの組織培養に関する研究

ニホングリ`丹沢'、`銀寄'、`筑波'及びチュウゴクグリとニホングリの雑種`利平'について接木苗より萌芽した新梢より,えき芽を採取し、殺菌後、無機成分(基本培地)や植物調整物質(サイトカイニン類)について種々の濃度や組み合わせを設定した培地に植え付け、生存率等を調査した。実験に供誌した基本培地7種(MS、MS(1/2N)、WPM、DKW、SH、BTM及びBW)の中では、BW培地での生長が最も優れ、継代中の枯死も他の培地に比べて少なかった。またサイトカイニン類4種(ゼアチン、BA、4PU-30及びチジアズロン)の中では、ゼアチン添加の培地での生長が最も優れた。植え付け時のタンニン溶出に伴う自己中毒回避のために、2日おきに植えかえるという操作を行なったが、外植体の生存率に影響を及ぼさなかった。また外植体を植え付けた際のコンタミネーションの発生を回避するために、1年生枝や丸太を実験室内で水差しして萌芽した新梢のえき芽を外植体として用いると、コンタミネーションの発生は減少したものの、植え付け後の生長が悪く、継代23回目で枯死するものが多かった。他品種と比較して生長の優れていた`丹沢'のシュートを用いて、シュート伸長に及ぼす基本培地やサイトカイニン類の影響を調査したが、最適培地は植え付け時の培地と同じで、BW基本培地にゼアチンを110μM添加した培地でシュートの生長が優れていた。しかしながらその最適培地においてでさえも、シュートの増殖率は低かった。一方、培養中に突然枯死刷る個体も多く、増殖率の低さと相まって、発根実験に供試できる程のシュート数を得ることができず、発根処理に関する実験は行えなかった。今後は、シュートが突然死する原因を解明すると同時に、効率的な増殖方法を検討して行きたい。
インターネットを用いた建築音響マルチメディア教育データベースに関する国際共同研究

建築系の学生に建築音響に対する興味を喚起させるには、音や映像を活用した講義を行うことが有効であろうとの観点から、本研究は、建築音響の講義に用いるマルチメディア教育データベースを構築することを目的とした。データベースに最新情報を取り入れため、国内外の複数の教官で研究メンバーを組織し、分担してデータベースを構築した。データベース作成に際して、(a)目に見えない音響現象を分かりやすく、(b)できるだけ具体的に、(c)学生の目で内容を考える、(d)基礎学力が高くない学生にも理解できるように、ということを基本方針とした。マルチメディアデータの取り扱いが容易であり一般性があるという点から、データベースはMicrosoft社製のPowerPointのスライドとし、内容は学部学生の「建築音響」の講義で使う標準的な図や表とすることにした。すなわち、内容は、音響物理、聴覚と音響心理、音の測定と評価、音の伝搬と予測、騒音の防止、室内音響、吸音・遮音・床衝撃音で構成した。スライドは、一般的な教科書に掲載されているものだけでなく、本研究メンバーが講義で使いたいオリジナルな図表をできるだけ作成するよう努めた。また留学生への対応を考えて、日本語版と英語版の2種類を作成した。PowerPointは、スライドの追加、修正、並べ替えなどが容易であるので、各自が講義で用いる際には、本データベースを基に各々の講義内容に沿ったスライドの編成を行うことができる。スライドは、視認性(図表や文字の大きさ)、配色、レイアウト、データベースのロゴ、系統的スライド番号などに配慮して全体的統一感を出すとともに、PowerPointの利点を生かした動画や音を含むスライドの動的表示に工夫した。建築系の学生に建築音響に対する興味を喚起させるには、音や映像を活用した講義を行うことが有効であろうとの観点から、本研究は、そのような講義に使うためのマルチメディア教育データベースを構築しようとするものである。最新情報を取り入れたデータベースにするため、国内外の複数の教官で研究メンバーを組織し、分担してデータベースを作成することにした。初年度(平成11年度)はデータベースの基本設計を行った。基本設計は、データベースの有効性を左右する重要なポイントであるので、E-mailを積極的に活用して日本人分担者全員で十分な討議を行うとともに、藤本(九州大学)がベルギーGent大学を訪問し、Gent大学で現在進行している教育データベースの研究を視察して貴重な情報を得るとともに、Botteldooren教授とデータベースの基本方針について協議した。また、大鶴(大分大学)がアメリカ合衆国で開催されたinter-noise99に参加し、Stanford大学遠隔授業プロジェクトなどの関連研究の動向を調査し資料を収集するとともに、Kentucky大学を訪問し、Seybert教授と合衆国における音響数値解析技術の講義法並びに本研究への協力について討議した。その結果、本研究で目指す教育データベースの基本設計を概ね完了した。以上のように、本年度は具体的なデータベース作成には至っていないため、研究成果を発表しなかったが、今年度の成果に基づいて来年度データベースを作成した後には、国内あるいは国際学会にて本研究成果を公表する予定である。前年度はデータベースの基本設計を行ったが、平成12年度は実際のデータベースの作成を行った。

すなわち、内容は、音響物理、聴覚と音響心理、音の測定と評価、音の伝搬と予測、騒音の防止、室内音響、吸音・遮音・床衝撃音で構成した。スライドは、一般的な教科書に掲載されているものだけでなく、本研究メンバーが講義で使いたいオリジナルな図表をできるだけ作成するよう努めた。また留学生への対応を考えて、日本語版と英語版の2種類を作成した。PowerPointは、スライドの追加、修正、並べ替えなどが容易であるので、各自が講義で用いる際には、本データベースを基に各々の講義内容に沿ったスライドの編成を行うことができる。スライドは、視認性(図表や文字の大きさ)、配色、レイアウト、データベースのロゴ、系統的スライド番号などに配慮して全体的統一感を出すとともに、PowerPointの利点を生かした動画や音を含むスライドの動的表示に工夫した。
高速分子動画法によるタンパク質非平衡状態構造解析と分子制御への応用

生命現象を支えているタンパク質の機能やその機構を理解するためには、タンパク質の中で実際におこっている化学変化や構造変化を追跡することが不可欠である。X線自由電子レーザーを用いて、タンパク質の中で起こる非常に早い化学反応等を他の手法では全く考えられない時間分解能と空間分解能を併せ持った“分子動画"として観察する手法の開発を推進する。本法を多種多様なタンパク質に適用できる汎用的技術として確立するために分野融合的に開発を進め、光によるタンパク質のスイッチ機構の解明やユニークな反応を触媒する酵素の反応機構等の解明を目指し、分子制御への応用も展開する。総括班はそれら研究推進の核として研究活動を牽引する。
源氏物語古注釈書総合索引の研究

本研究は『源氏物語』古注釈書の総合的な索引(固有名詞+一般語彙)を作成し、かつ、フロッピィディスク化することが目的であった。平成四年度は、公刊されている古注釈書の再検討、および公刊されていない古注釈書の発掘をめざして、資料蒐集を行った。特に最重要と考えられる『河海抄』は底本の再検討と本文校訂の必要があり、できるかぎりの写本を点検すべく、紙焼の蒐集と現地調査を行ったのだが、その分量が厖大であり、予算も限られていることから、蒐集しえたのはほんの一部分にすぎなかった。『校本河海抄』の作成とそれに基づく索引作りは一、二年でできることではなく、また、並大抵の予算ではなしえないことが判明。一方、統一的採択基準作りも予想外の難問であることが判明した。平成五年度は諸資料に蒐集と調査を続けつつ、『異本紫明抄』宮内庁本と黒川本を対校。黒川本を例として固有名詞・主要述語などのカード化と採択基準の検討を行った。1.データ入力・検索用ハードウェアの購入、及び、データ入力・ソート用アプリケーションソフトの選定(1)従来、パーソナルコンピューターのなかった研究代表者の勤務先に32ビットパソコン・ハードディスク・出力用レーザープリンタを導入し、データ入力のための下準備や操作に熟練する事に努めた。(2)データ入力・検索用アプリケーションソフトとして、下記を決定した。μCOSMOS V4.0 REV1.07*(株)日本オフィス機器発売、市場版=平成4年11月発売[選定の理由](1)MS-DOS汎用アプリケーションソフトである事(共同研究にとって必須の条件)(2)レコード数に上限がない事(レコード数の事前予測不可能)(3)データ形式がテキストファイルである事(データの共用)2.一次資料の書誌調査と蒐集*平成4年度新規調査分のみ記載(1)京都大学文学部図書館蔵『和漢字源通釈抄』*書誌調査・写真撮影(完了)、川島担当(2)尊経閣文庫蔵『河海抄』諸本*書誌調査・写真撮影(部分完了)、武井担当(3)名古屋市蓬左文庫蔵『河海抄』諸本*書誌調査・写真撮影(1点完了)、武井担当(4)宮内庁資料部蔵『異本紫明抄』*書誌調査・写真撮影(完了)、武井担当(5)国文学研究資料館蔵マイクロフィルム*源氏古注関連の総合的調査、川島・武井担当3.データの試験的入力(1)異本紫明抄の件名索引用データ*入力途中(1)前年度に引き続き『河海抄』諸伝本の総合的調査を行った。平成5年度は佐賀大学鍋島文庫蔵本・学習院大学附属図書館蔵本・三手文庫今井似閑本・熊本大学北岡文庫本等の伝本の調査・写真撮影を行い、可能な限り紙焼を入手。『校本河海抄』を作るべく、基礎的な構想を固めた。ただし、膨大な資料であるため、早急に取りまとめることは不可能であり、長期計画となるであろう。(2)本年度は総合索引作成の全段階として、試験的に黒川本『異本紫明抄』の索引作りに着手。固有名詞・主要術語などを抜き出し、カード化の予備作業を行った。その作業の過程で、漢文の取り扱いや人名の採択基準等に関し、一般的基準の定め難さが問題として残った。各古注釈書それぞれの質の違いも存在する。総合索引としては、採択基準が異ならないようにすべきである。今後、出た採択基準を厳格に見極めねばならないだろう。黒川本『異本紫明抄』の固有名詞・主要術語索引は、出来るだけ速やかに研究成果報告書として取りまとめたい。(3)将来的に公開予定のMS-DOS汎用データベースソフトの使用案をほぼ固めたが、これは、ソフトウェア開発業者と共に開発・試験運用する必要がある。最終的目標である、『源氏物語古注釈書総合索引』の検索ツールとして、まず実用に耐え得るものとしたいが本年度は不可能であった。
浅い湖沼におけるメタンの底生生物食物網への寄与

成層しない浅い湖伊豆沼においても堆積物中に生息するユスリカ幼虫は、餌資源のマーカーとして使える炭素の安定同位体比がきわめて低い値を取ることが確認できた。巣穴のある深さのメタン濃度が高くなる季節に安定同位体比の値が低下することから、生物的に生成されたメタンを酸化する細菌が餌資源として寄与していることが示唆された。餌資源のもう一つマーカーである脂肪酸組成の分析結果も細菌の寄与が高いことを示した成層しない浅い湖伊豆沼においても堆積物中に生息するユスリカ幼虫は、餌資源のマーカーとして使える炭素の安定同位体比がきわめて低い値を取ることが確認できた。餌資源のもう一つマーカーである脂肪酸組成の分析結果も細菌の寄与が高いことを示した浅い湖沼である宮城県伊豆沼において、メタン由来の底生生物食物連鎖への寄与を検討するために、メタン濃度、メタン酸化細菌群集構造、底生生物の炭素・窒素安定同位体比の季節変化を明らかにすることを目的にしている。1.堆積物のコアーを採集して、深さ別に堆積物中のメタンをヘッドスペース法によって気相に追い出して、ガスクロマトグラフィーによってメタン濃度を測定した。堆積物中の深さ1021cmの層では、一年中高いメタン濃度を維持したのに対して、深さ56cmの層では、7月から秋にかけて濃度が高くなるが、そのほかの季節は低い濃度であった。また、堆積物表層ではほとんどメタンは検出されなかった。2.堆積物中より環境DNAを抽出し、メタン酸化細菌のメタンモノオキシダーゼ遺伝子をターゲットにしてPCR増幅を行い、これを変性剤濃度勾配ゲル電気泳動法によってメタン酸化細菌の群集構造解析を行った結果、堆積物の深さや季節による群集構造の違いはほとんど見られなかった。3.採集したオオユスリカ幼虫の炭素・窒素安定同位体比を測定した結果、夏から秋にかけて炭素安定同位体比の値に個体間で大きなばらつきがみられ、メタン酸化細菌を主に餌としていると考えられる非常に低い値の個体も出現した。4.オオユスリカ幼虫の炭素安定同位体比に低い値が見られる月は、オオユスリカ幼虫の巣穴が存在する深さ5-6cmの層のメタン濃度が高かくなる傾向がみられた。以上より、成層しない浅い富栄養湖では、ユスリカの巣穴が存在する層にメタンの供給が多くなると、メタン細菌群集は変化しないものの、巣穴周辺の細菌現存量が増えることにより、メタン食物連鎖の寄与が大きくなることが示唆された。浅い湖沼である宮城県伊豆沼において、メタン由来の底生生物食物連鎖への寄与を検討するために、メタン濃度、メタン酸化細菌群集構造、底生生物のオオユスリカの炭素安定同位体比の季節変化を明らかにすることを目的にしている。堆積物中よりオオユスリカ幼虫を採集して炭素安定同位体比を測定した結果、ユスリカ幼虫の炭素安定同位体比は堆積物や粒状有機物のそれらと比べると低い値を示し、個体間でばらつきも大きかった。特に、8月や9月ではユスリカ幼虫の炭素安定同位体比は平均で約-40‰のきわめて低い値を示した。堆積物中のメタンをヘッドスペース法によって深度毎に採集して、ガスクロマトグラフィーによってメタン濃度を測定した結果、深さ56cmの層のメタン濃度とユスリカの炭素安定同位体比の間に有意な負の相関がみられた。以上より、ユスリカ幼虫の巣穴が存在する層にメタンの供給が多くなると、炭素安定同位体比が低い値を持つメタン酸化細菌が巣穴周辺に増える、ユスリカ幼虫はこれらをエサとしているために、ユスリカ幼虫も低い炭素の安定同位体比を持つことが示唆された。高メタン条件下においてメタン酸化細菌の群集構造が影響を受けるか実験的に調べるため、ガスタイトなバイアルビンに堆積物を入れ、メタンを注入することによりメタン濃度の異なる培養系を作成した。これらの培養系からメタン酸化細菌のメタンモノオキシダーゼ遺伝子をターゲットにしてPCR増幅を行い、これを変性剤濃度勾配ゲル電気泳動法によってメタン酸化細菌の群集構造解析を行った結果、高濃度を維持した培養系においてもメタン酸化細菌の群集構造はほとんど変化しなかった。このことから、メタン濃度が高く、ユスリカ幼虫の炭素安定同位体比が低くなる時期は、メタン酸化細菌の種組成が変化するのでなく、現存量が増加することが示唆された。浅い湖沼である宮城県伊豆沼において、メタン由来の底生生物食物連鎖への寄与を明らかにするために、メタン濃度、オオユスリカChironomus plumosus幼虫の炭素安定同位体比(δ^<13>C)と脂肪酸組成、メタン酸化細菌群集構造の季節変化を解析した。オオユスリカ幼虫の餌候補であるPOM(浮遊懸濁有機物)および堆積物のδ^<13>Cは,それぞれ-27.8±1.3‰、-27.8±0.1‰であった。一方、オオユスリカ幼虫のδ^<13>Cは、-50.9-27.5‰と個体間で大きく異なり、特に夏期のユスリカ幼虫のδ^<13>Cは平均で約-40‰のきわめて低い値を示した。また、堆積物中のメタン濃度を測定した結果、深さ56cmの層のメタン濃度とユスリカのδ^<13>Cの間に有意な負の相関がみられた。

δ^<13>Cが高く、POMや堆積物と同様の値を示す個体はこれらの有機物を同化していると考えられるが、極端に低いδ^<13>Cを示す個体は、夏期にメタン濃度高くなる巣穴周辺に増えるδ^<13>Cの低いメタン酸化細菌を多く摂食しているためと考えられる。また、オオユスリカ幼虫の脂肪酸組成分析から、ユスリカ幼虫には珪藻や緑藻,藍藻起源の脂肪酸に比べ,細菌起源の脂肪酸マーカーが多く含まれており、細菌の餌資源としての重要性が示唆された。細菌起源の脂肪酸マーカーの一種であるi17:0含有率とオオユスリカ幼虫のδ^<13>cの間に有意な負の相関が認められたことから、i17:0は、メタン酸化細菌に由来する脂肪酸であることが示唆された。さらに、メタン酸化細菌の群集構造を変性剤濃度勾配ゲル電気泳動法によって解析を行った結果、明確な季節的変化見られなかったころから、メタン酸化細菌の種組成が変化するのでなく、現存量が増加することが示唆された。
唾液腺腫瘍の発生に関する組織化学的・遺伝学的研究

(方法)1)予備実験として、当科で治療を行った頭頚部悪性腫瘍24症例(喉頭腫瘍8例、舌口腔底腫瘍6例、下咽頭腫瘍6例、上咽頭腫瘍3例、中咽頭腫瘍1例)を対象とし、Glutathione-s-transferase(GST)の欠損について検討した。対象の血液よりゲノムDNAを抽出し、このゲノムDNAをテンプレートとした。このテンプレートを使用し、人において欠損型が存在するGSTM1とGSTT1遺伝子の欠損についてPCR法を用い検索した。2)唾液腺腫瘍症例(多形腺腫10例、唾液腺癌10例)を対象として1)と同様にGSTM1とGSTT1遺伝子の欠損についてPCR法を用い検索した。(結果)頭頚部悪性腫瘍24症例中、GSTM1は24例中12例に欠損が見られた。またGSTT1は24例中21例に欠損が見られた。(結諭)頭頚部腫瘍の発生にはGSTT1遺伝子の欠損が関係している可能性が示唆された。唾液腺腫瘍に関しては現在検討中である。唾液腺多形腺腫と唾液腺悪性腫瘍の遺伝子変異(p53癌抑制遺伝子、c-erbB-2癌遺伝子)を免疫染色法ならびにPCR法とin situハイブリダイゼーション法を使用し検索した。方法1.まず唾液腺多形腺腫と唾液腺悪性腫瘍をp53モノクロナール抗体とc-erbB-2モノクロナール抗体を使用し免疫染色した。2、1、と同様の組織についてp53癌抑制遺伝子とc-erbB-2癌遺伝子変異をPCR法を用いて検出した(p53はエクソン5から9のプライマーを使用)。3、1、と同様の組織をin situハイブリダイゼーション法を使用しp53癌抑制遺伝子とc-erbB-2癌遺伝子発現を見た。結果1、多形腺腫はp53モノクロナール抗体とc-erbB-2モノクロナール抗体で染色されなかったが、悪性腫瘍には両抗体で染色されるものが見られた。特に多形腺腫内癌が両抗体で強く染色され、多形腺腫内癌の多形腺腫部分にもc-erbB-2モノクロナール抗体で染色されるものが見られた。2、PCR法でp53癌抑制遺伝子とc-erbB-2癌遺伝子変異が唾液腺悪性腫瘍に見られたが、多形腺腫にはp53癌抑制遺伝子とc-erbB-2癌遺伝子変異は見られなかった。3、唾液腺悪性腫瘍はp53癌抑制遺伝子とc-erbB-2癌遺伝子プローブを使用したin situハイブリダイゼーション法で強く染色されたが、多形腺腫は染色されなかった。この結果より唾液腺悪性腫瘍の発生にp53癌抑制遺伝子とc-erbB-2癌遺伝子の関与が考えられたが、多形腺腫の発生に関与する遺伝子変異は検出されなかった。唾液腺多形腺腫と唾液腺悪性腫瘍の発生に関する遺伝子変異(p53癌抑制遺伝子、c-erbB-2癌遺伝子など)及びウイルスの関与について、免疫染色法ならびにPCR法とin situハイブリダイゼーション法を使用し検討した。方法1、唾液腺多形腫腺と唾液腺悪性腫瘍をp53モノクロナール抗体とc-erbB-2モノクロナール抗体を使用しABC法を使用し、免疫染色した。2、1の組織についてp53のエクソン5領域をPCR法を用いて増幅し、シーケンス法にてp53癌遺伝子変異を検出した。3、1の組織についてHPVに特異的なプローブを使用し、唾液腺多形腫及び唾液腺悪性腫瘍の発生にHPVが如何に関与しているかを、in situハイブリダイゼーション法で検討した。結果1、多形腺腫はc-erbB-2モノクロナール抗体で染色されなかったが、悪性腫瘍は両抗体で染色されるものが見られた。また多形腺腫の一部にはp53モノクロナール抗体で染色されるものが見られた。特に多形腺腫内癌が両抗体で強く染色され、多形腺腫内癌の多形腺腫部分にもp53とc-erbB-2モノクロナール抗体で染色されるものが見られた。2、PCR法でp53癌抑制遺伝子変異(エクソン5)が唾液腺悪性腫瘍に見られたが、唾液腺多形腺腫にはp53癌抑制遺伝子変異は見られなかった。3、唾液腺多形腺腫・唾液腺悪性腫瘍組織にin situハイブリダイゼーション法によってHPVの関与を示唆する結果は得られなかった。

またGSTT1は24例中21例に欠損が見られた。(結諭)頭頚部腫瘍の発生にはGSTT1遺伝子の欠損が関係している可能性が示唆された。唾液腺腫瘍に関しては現在検討中である。
自発的結社による市民的公共圏の形成-18〜19世紀コンパニョナージュと手工業社会

本年度前半には自身の研究テーマと所属するCOEプログラムとの関連から、スティーブン・L・カプランらが編集し、18世紀から現代にいたるフランスのコルポラティスムを論じたLa France, malade du corporatisme?XVIIIe-XXe siecleの書評論文を執筆した。同書は、近代フランスにおいて個人と国家からなる二元的秩序が構想され、それが共和主義の政治文化の基盤とされた結果、現在も集団や結社を秩序維持の中心に据えるコルポラティスムに対する拒否感が根強く残っていることを指摘する。書評論文では、近代化・共和主義・社会集団の観点から同書の意義を評価するとともに、筆者の専門領域の観点から、フランス革命の意義と近世社団国家の位置づけについて疑問を提示した。後半には、昨年度および本年度に収集した史料を用いて、論文「18世紀前半におけるリヨン絹織物工業ギルドの秩序と社会の変容」を執筆した。本論文では、ギルドの社会的流動性・閉鎖性を論じた先行研究に対して、史料を用いて社会秩序の変更過程を明らかにするとともに、親方登録者数の変動を統計分析することで、批判的に検討し修正を試みた。リヨン絹織物工業ギルドにおいては、18世紀半ばに職人から親方への上昇過程に制度的変更が加えられた。その結果、親方の息子による親方身分の継承が困難になった。したがって、社会的閉鎖性の実態はギルドの外部に対する閉鎖性の強化ではなく、内部の階層秩序の変更によって親方織工とその息子が周縁化されていく過程としてあったと論じた。本論で明らかにできたことは、19世紀前半のリヨンにおける織工の蜂起や結社の形成を契機とする近代フランスにおける労働争議の進展について、フランス革命以前の社会関係の変化をふまえた長期的展望を可能にするものであると考える。本論の成果をふまえて、今後フランスにおける市民社会と結社に関する研究を深化させたい。本年度は18世紀フランスにおける同業組合制度に注目し、フランスでの史料収集・分析を行った。同時代のフランスにおける商工業の多くは、他のヨーロッパ諸国と同様、各都市ごとに同業組合を組織し、同じ業種に属する親方・職人・徒弟に対する統制や相互扶助をおこなっていた。本年度は特にリヨンの同業組合の規約を中心とする史料を収集し、制度面の分析を行うこととした。同業組合規約はその制度を明文化し、権力の承認・特権を得るために、同業者たちによって王権や市政体に提出されたものである。これら規約からは、権力機関と組合との関わりや、コンフレリを通じた宗教行事の運営のされ方、親方・職人・徒弟の階層区分と上昇方法、仕事・製品に対する統制など、同業組合制度の様々な側面を理解することができる。従来、同業組合は入会規制や階層性をもつ閉鎖的組織であり経済的自由主義を阻害するものとして、あるいは、かつては存在した雇用主と労働者の調和のとれた社会の象徴としてみなされてきたが、1970年代頃から、社会史の手法を用いたより実証的な歴史研究が進められてきている。また近年では特に、アンシャン・レジーム期から19世紀に至る、フランスのコルポラティスム(コーポラティズム)の歴史に関する議論の中で、分析対象とされている。同業組合の存在がかつてのフランス社会、特に都市の社会の編成の根幹に関わっていたことはこれまでも指摘されている点であるが、本研究では18-19世紀の手工業親方と職人との関係の変化を分析したいと考えており、この同業組合の存在をどのように理解するかは、今後の研究において重要な軸のひとつになると考える。今年度収集した規約を通じて同業組合の制度的な側面を分析し、さらに運営のなされ方などの実態面を把握することで、当時の同業組合の構造を明らかにしたいと考える。本年度は昨年度に引き続き、18世紀フランスのギルド制度に注目しながら、研究をすすめてきたが、特に都市リヨンにおけるそれに注目することで分析対象の明確化を図った。史料はリヨン市文書館での調査を通じて、各職種別のギルド規約や議事録、メモワール、違反者報告書、などを収集した。ギルドはアンシャン・レジーム期に、王権・領主・都市などの承認を受け、生産・取引の規制を行って親方間の競争を制限し、コンフレリの活動を通じて構成員間の相互扶助を行うなど、制度化された結社のひとつとして存在していた。また、承認を受けない自由ギルドも多数存在したが、自由都市リヨンの多くのギルドは都市の商人頭と市参事会員から成る市参事会の承認を受けた規制ギルドであり、王権から一定の距離を保っていたとされる。しかしながら、本研究が注目する18世紀には、リヨンの中心的産業である絹織物業に従事する者、および絹織物に関連する業種に従事する者が、都市住民の多数を占めており、この絹織物業ギルドは王権によって承認を受けた宣誓ギルドであった。本年度は、この絹織物業ギルドに特に注目し、他の業種のギルドと比較した上での絹織物業ギルドのリヨンにおける特殊性、および18世紀にその内部に社会階層間の分断が生じ、これが1830年代の絹織物工蜂起へとつながっていったことを千葉大学大学院における全体研究会で2回に分けて報告した。最終年度となる次年度は、絹織物業ギルド内の社会階層間の分断の結果、18世紀から19世紀にいかなる事態が生じていたのかを、違反者報告書の史料を中心に実証分析すること、および、所属するCOEプロジェクトテーマとの関連から、絹織物業者の社会におけるギルドとは異なる結社の生成とその運動に注目し、フランスの労働の場における自発的結社形成の展開と公共性をテーマにした研究成果を発表することを目指し、研究を深めていきたい。

本年度前半には自身の研究テーマと所属するCOEプログラムとの関連から、スティーブン・L・カプランらが編集し、18世紀から現代にいたるフランスのコルポラティスムを論じたLa France, malade du corporatisme?XVIIIe-XXe siecleの書評論文を執筆した。同書は、近代フランスにおいて個人と国家からなる二元的秩序が構想され、それが共和主義の政治文化の基盤とされた結果、現在も集団や結社を秩序維持の中心に据えるコルポラティスムに対する拒否感が根強く残っていることを指摘する。書評論文では、近代化・共和主義・社会集団の観点から同書の意義を評価するとともに、筆者の専門領域の観点から、フランス革命の意義と近世社団国家の位置づけについて疑問を提示した。後半には、昨年度および本年度に収集した史料を用いて、論文「18世紀前半におけるリヨン絹織物工業ギルドの秩序と社会の変容」を執筆した。本論文では、ギルドの社会的流動性・閉鎖性を論じた先行研究に対して、史料を用いて社会秩序の変更過程を明らかにするとともに、親方登録者数の変動を統計分析することで、批判的に検討し修正を試みた。リヨン絹織物工業ギルドにおいては、18世紀半ばに職人から親方への上昇過程に制度的変更が加えられた。その結果、親方の息子による親方身分の継承が困難になった。したがって、社会的閉鎖性の実態はギルドの外部に対する閉鎖性の強化ではなく、内部の階層秩序の変更によって親方織工とその息子が周縁化されていく過程としてあったと論じた。本論で明らかにできたことは、19世紀前半のリヨンにおける織工の蜂起や結社の形成を契機とする近代フランスにおける労働争議の進展について、フランス革命以前の社会関係の変化をふまえた長期的展望を可能にするものであると考える。本論の成果をふまえて、今後フランスにおける市民社会と結社に関する研究を深化させたい。