hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
肝移植の臨床応用に関する総合的研究

1.臓器摘出、臓器保存に関して:臓器摘出前ドナーの栄養状態が肝グラフトに与える影響を検討した結果、低栄養が肝類洞内皮障害の原因となりミトコンドリアのATP産生能を障害することを明確にした(里見,田中)。ドナー手術管理における低体温の導入意義の見直し、および初期潅流での至適流量の決定を行った(平)。保存肝機能評価法として、針生検組織を用いた肝蛋白合成能解析による高次機能評価法、おび肝血管床内保存液中の解析法を開発した(磯野、杉町)。心停止ドナーからのグラフト肝障害機構を解明し、その対策として人工心肺潅流装置を用いたcore cooling法などを検討した。(内野、里見)。肝虚血再潅流障害の予防法として、プロスタグラディンI2類似体とトロンボキサン合成酵素阻害剤の効果を明らかにした(深尾)。2.肝臓移植手術に関して:肝移植ネットワークの構築にあたり、適応疾患と緊急度の客観的基準試案を作成した(太田)。又、適正な肝移植登録プログラムの開発を目的として、現登録者の経過を詳細に分析した(杉町)。非A非B激症肝炎の移植適応基準として利用しうる予後予測式を検討した(谷川)。3.肝移植後の管理に関して:生体部分肝移植臨床例においてグラフトサイズマッチングの関機能に及ぼす影響およびFK506による免疫抑制の問題点を明らかにした(山岡)。免疫制御法の新たな展開として、drug-delivery systemを考慮に入れた免疫抑制剤修飾法、ドナー抗原投与による免疫不応答性の誘導、遺伝子導入による免疫制御(アデノウイルスベクターを用いたCTLA-Ig遺伝子導入)、新免疫抑制剤(Bactobolamine)の検討を行った(土肥,門田,高木,冨川)。4.異種移植の研究:近縁異種移植における免疫応答制御法の開発として、ドナー骨髄の移入やドナー抗原のMMC処理の有用性を確認した(土肥,門田)。遠縁異種移植における超急性拒絶反応の抑制法として、レトロウイルス法によるヒト補体制御因子遺伝子導入に成功した(高木)。(内野、里見)。1)脳死ドナーの管理に関しての研究では、ブタを使った肝移植実験において、死戦期での栄養管理は肝グリコーゲン貯蓄の多寡が移植成績の向上に大きく関与していることを明らかにした(折田)。多臓器同時摘出法として、腹腔内冷却低体温からの灌流法と常温からの急速冷却灌流法とでは差を認めなかった(平)。また人工心肺による心停止後の肝臓再酸素化により肝実質細胞は機能的構造的に改善したが、類洞内細胞障害は防止できず移植成績は不良でもう一段の工夫が必要である(森)。ラットのモデルでも類洞内皮細胞の保護手段を加えることで再灌流障害防止に成功した(杉町)。その他にも雑種成犬虚血再灌流モデルで、再灌流後の顆粒球内エラスターゼ活性の上昇(深尾)や、マウスへの抗好中球接着分子抗体(抗Mac-1抗体)投与により再灌流障害抑制に効果を認めた(内野)ことより再灌流障害機構の一因として白血球の関与の重要性が再認識された。肝グラフト移植前機能と蛋白合成能(HPS)が相関する事をラット肝移植(冷保存)モデルで示した(磯野)。

公正な臓器分配法として全国を5ブロックに分割し、各ブロックセンターとこれらを結ぶネットワークセンターにより全国の情報を統合する「日本臓器移植ネットワークセンター」構想に肝移植のためのネットワークをすりあわせ、より公平性、機動性の高いネットワークの準備を進めている(太田)。2)生体部分肝移植症例において、近赤外光分析を用いた肝組織への酸素供給と代謝負荷を検討した結果、生体部分肝移植の成人症例への適応拡大の可能性が示唆された(山岡)。3)免疫抑制を中心とした術後管理に関する研究では、ラット肝移植モデルにおいて、経門脈的ドナー抗原移入による免疫抑制の誘導(門田)や、ドナー抗原と抗接着分子抗体の投与による免疫寛容の誘導(内田)が可能であった。またウイルス肝炎患者の移植後の再感染が約80%に認められる。新しい抗ウイルス剤(Lamivudine)が,HBV増殖抑制に有効であることが慢性肝炎患者で示された(谷川)。4)異種移植に関しては、レトロウイルス法によるヒト補体制御因子遺伝子導入(高木)に成功している。また、近縁異種動物間(ハムスター→ラット)での膵移植モデルがFK506と脾摘の併用により確立されたので、膵を異種移植モデルでの検討を始める(土肥)。1.ネットワーク:肝移植の適応疾患は肝移植研究会のネットワーキンググループの案に拠る事、緊急度の客観的判断基準の整備が必要と考えられた(太田)。2.臓器摘出、保存:1)ドナー臓器の摘出に関する研究;心停止ドナーに人工心肺装置を用いた酸素化灌流を行う事で、肝臓のviabilityは改善するが、今後更に検討を要すると考えられた(里見)。ブタモデル腹部多臓器移植で、移植後のグラフト機能に与える影響は低流量灌流より高流量灌流の方が優れている事が判明した(平)。2)肝虚血再灌流障害の抑制に関する研究:tyrosine kinase inhibitorは肝組織エネルギー代謝を改善し、組織保護効果を持つ可能性が認められ(磯野)、プロスタグランジン12誘導体及びトロンボキサン合成酵素阻害剤は組織障害の軽減をもたらした(深尾)。又、postreperfusion syndrome(PRS)はトロンボキサンの合成酵素阻害剤の使用により抑制可能であることが示され(折田)、肝阻血再灌流障害におけるCa組織内流入の関与について検討した(内野)。3.肝移植後の管理:1)B、C型肝炎、肝細胞癌と肝移植に関する研究;ラット肝癌モデルで、切除不能進行肝癌に対する肝移植は有意な延命効果を認めるが早期再発をきたし(土肥)、C型肝硬変患者の肝移植後の問題点は肝炎再発による肝障害が高頻度である事が判明した(杉町)。2)免疫抑制法に関する研究;新免疫抑制剤バクトボラミンの有効性とFK506との相乗効果をラット肝移植モデルにて確認した(内田)。ドナ脾細胞の移植前投与で胸腺でのchimerismの消失は拒絶反応の進行と相関する可能性が示唆された(門田)。臨床生体肝移植において、FK506は免疫抑制効果からも副作用発生率からも有効性が確認された(山岡)。4.異種移植の研究:異種移植ドナーとして期待されるブタのα-Ga1抗原性を除去する検討では、α1-2FT導入ヒト血清による細胞被障害に対する抵抗性が増大した(高木)。1.臓器摘出、臓器保存に関して:肝摘出前のドナー栄養管理において、低栄養が肝類洞内皮障害の原因となりミトコンドリアのATP産生能を障害することを明確にした(里見)。また、栄養管理法として経口投与より経静脈投与の方が有利であることが判明した。(田中)。臓器摘出における初期冷却灌流至適流量は30ml/
摂餌潜水を行う海棲哺乳類におけるエネルギー収支に関する研究

海棲哺乳類は海洋生態系における高次捕食者であり、多くの水産資源を消費することから、その消費量を把握し、彼らのエネルギー収支バランスを知ることは、人類の持続可能な水産資源利用を管理する上で重要である。エネルギー収支は、rエネルギー獲得量』と『エネルギー消費量』を定量化することで推定できる。本研究では、海棲哺乳類のエネルギー収支を解明するため、動物搭載型記録計を用いた手法を新たに考案し、その定量化を目的として研究を行っている。平成24年度における研究では、エネルギー消費量の新たな推定法として、初年度と第2年度に取得した野生のアシカ科のデータを用いて潜水行動情報の1つである『速度』によるエネルギー消費量の推定法を確立し、その成果を国内学会にてポスター発表と口頭発表を行った。従来の手法である二重標識水法と比較した本手法のメリットは2点あげられる。まず、従来の手法では、動物の再捕獲が消費量推定のために不可欠であったが、本手法では、遠隔切離し装置によって記録計を回収するため再捕獲の必要がなく、再捕獲の困難な種にも適応可能な手法となった。また、従来の手法では、最初の捕獲時と再捕獲時の期間の消費量推定のみが可能であったが、本手法では、時系列データを用いた推定法のため、より時間分解能が高い消費量推定が可能となった。・時系列データに加えて、生理学的手法によるエネルギー消費量の定量化として、新たに開発した動物搭載型採血装置を用いた予備実験をセントアンドリュース大学(スコットランド)の海棲哺乳類研究施設との共同研究で行った。その結果、水中の鰭脚類から血液サンプルを取得する手法を確立できたので、今後、血中情報を用いたエネルギー消費量の推定や潜水生理を解明することに繋がると考えられる。海棲哺乳類と人類の関係は、水産資源利用における競合相手と位置付けることができる。しかし、海棲哺乳類の多くは水中で摂餌を行うため、実際にどれだけの量の魚を捕食しているのか、また、肺呼吸動物が生活の多くを水中で過ごすというのは、どれだけのエネルギーを消費しているかは不明である。本研究では、エネルギー収支を解明するために下記の2点を明らかにすることを目的とする。1.<エネルギー獲得-水中摂食量の定量化>申請者は、修士課程において飼育環境下にあるアザラシを用いて、水中摂餌行動を探知するための新しい手法を開発した。しかし、まだ自然環境下での検証は行われていないので、映像記録を用いて本手法の実用性と摂餌量の定量化を自然環境下のアザラシを用いて立証する。2.<エネルギー消費-水中行動量とエネルギー消費量の関係>修士課程における予備実験によって、飼育環境下にあるアシカを用いて水中での行動量を定量化することに成功した。今後は、追加実験によってエネルギー消費量と行動量との関係を明らかにし、自然環境下でのエネルギー消費量の定量化を目的とする。平成22年度における研究では、『2.<エネルギー消費量>』に関する調査として、野生のアシカを対象としたフィールド調査を行ってきた。飼育環境下と野生個体を扱う場合では、解析に必要なデータを記録する計測機器の装着から回収に至るまで、すべての方法に大きな違いがあるため、まずはその手法の確立に取り組んだ。ウェットスーツ生地を加工した土台を用いて計測機器を装着し、それと同時に防水性の遠隔切り離し装置を併用することによって再捕獲の必要なく機器を回収することに成功した。海棲哺乳類は海洋の生態系における高次捕食者であり、多くの水産資源を消費することから、その消費量を把握し、彼らのエネルギー収支バランスを知ることは、人類の持続可能な水産資源利用を管理する上で重要である。エネルギー収支は、『エネルギー獲得量』と『エネルギー消費量』を定量化することで推定できる。しかし、海棲哺乳類の摂餌行動はその多くが水中で行われ。実際にどれだけの量の魚を捕食しているのかを直接見ることは難しい。また、エサを取るために、どれだけのエネルギーを消費しているのかも明らかにされていない。本研究では、海棲哺乳類のエネルギー収支を解明するための手法を新たに考案し、その定量化を目的として研究を行っている。平成23年度における研究では、初年度に確立した野生のアシカ科を対象としたデータ取得方法を用いたフィールド調査を行った。初年度においては、手法の確立には成功したが、良質なデータを獲得するには至らなかった。しかし、平成23年度における調査で良質なデータを得ることにも成功した。エネルギー獲得量の定量化に関しては、エサ獲得時に伴う突発的な動きに注目することで定量化に成功し、その成果を国内シンポジウムにてポスター発表を行った。エネルギー消費量の定量化に関しては、今回得られた良質なデータから得られる潜水行動に関するデータと文献によって得られる生理学的情報から理論的に定量化する手法に取り組んでいる。今後は、上述のエネルギー獲得量とエネルギー消費量の定量化に関する2つの手法を組み合わせることで、摂餌潜水におけるアシカ科のエネルギー収支を定量化する手法を確立する。将来的には、本手法を他の海棲哺乳類においても適用していくことで、対象種ごとに摂餌潜水における海棲哺乳類のエネルギー収支を推定することが可能となるので、人類の持続可能な水産資源利用を管理していく上で必要不可欠な知見を提供できるであろう。

本研究では、海棲哺乳類のエネルギー収支を解明するため、動物搭載型記録計を用いた手法を新たに考案し、その定量化を目的として研究を行っている。平成24年度における研究では、エネルギー消費量の新たな推定法として、初年度と第2年度に取得した野生のアシカ科のデータを用いて潜水行動情報の1つである『速度』によるエネルギー消費量の推定法を確立し、その成果を国内学会にてポスター発表と口頭発表を行った。従来の手法である二重標識水法と比較した本手法のメリットは2点あげられる。まず、従来の手法では、動物の再捕獲が消費量推定のために不可欠であったが、本手法では、遠隔切離し装置によって記録計を回収するため再捕獲の必要がなく、再捕獲の困難な種にも適応可能な手法となった。また、従来の手法では、最初の捕獲時と再捕獲時の期間の消費量推定のみが可能であったが、本手法では、時系列データを用いた推定法のため、より時間分解能が高い消費量推定が可能となった。・時系列データに加えて、生理学的手法によるエネルギー消費量の定量化として、新たに開発した動物搭載型採血装置を用いた予備実験をセントアンドリュース大学(スコットランド)の海棲哺乳類研究施設との共同研究で行った。その結果、水中の鰭脚類から血液サンプルを取得する手法を確立できたので、今後、血中情報を用いたエネルギー消費量の推定や潜水生理を解明することに繋がると考えられる。初年度に確立した野生のアシカ科からのデータ取得方法を用いた野外調査を行うことで良質なデータの取得に成功した。また,目的を達成するためには2つの手法が必要となるが、その内の1つに関しては2年目に考案した手法で成果が出ている。また、もう1つの手法に関しても、2年目の後期に取得した良質なデータを用いることで目処が付いているので、本研究はおおむね順調に進展していると判断した。2年目に行った調査から良質なデータが取得できている。また、研究の目的を達成するために必要な手法の2つに関しては、どちらも一定の目処が立っているので、今後は解析を更に進めていくことで国際的にも認められる形として原著論文を投稿し、本研究の目的を達成する予定である。
口腔癌EMT関連分子の機能的探索による新規診断・治療法の開発

Epithelial-Mesenchymal Transition(EMT)は、正常細胞における初期発生時の原腸陥入や心臓弁形成、あるいは創傷治癒における細胞運動能の獲得等の局面で発生するとされており重要な生物現象の一つとされている。一方で癌細胞においては、上皮系形質を有する癌細胞が間葉系の形質を有する癌細胞へ変化することで浸潤・転移能を獲得し、放射線治療や抗癌剤治療に対する抵抗性を獲得することが近年多数報告されており、現在の癌研究の主要なテーマとなっている。本研究は、癌の進展過程において生じるEMTに着目し、独自の機能的スクリーニング手法を用い、特に口腔扁平上皮癌でのEMT発生に関する分子を同定し、さらに詳細な分子機序を明らかにすることにより、癌細胞がいかにして浸潤能、転移能などの悪性形質を獲得することを解明する、また見出した分子の臨床的応用法を開発することを目的としている。これまでに、Taqman法による発現解析とCOBRA法、Bisulfite Sequence法によるDNAメチル化解析を組み合わせた独自のスクリーンング法によって、Gene Xを選出した。選出した遺伝子の機能解析を進めるにあたり、これまでに報告されている遺伝子の機能等などから、EMTにいかにして関与するか、その遺伝子の持つ機能と癌の悪性化との関連性について仮説を立案し解析を進めた。平成30年度は、見いだしたGene Xの機能解析をin vitroで行った。具体的には、miR-200familyを用いたEMT induction assayでEMTが誘導された際のGene Xの発現変化を分析し、Gene Xの発現量と細胞の運動能の相関に関してmigration assayを用いて行った。また口腔癌臨床検体を用いて、Gene XのDNAメチル化ステータスを癌部と非癌部間で比較し、臨床病理学的因子との相関の有無を分析した。同時に文献的な考察を行ながら、成果報告準備を行った。本研究では癌の進展過程において生じるEMTに着目し、独自の機能的スクリーニング手法を用いて特に口腔扁平上皮癌でのEMT発生に関与する分子を同定し、詳細な分子機序を明らかにすることにより癌細胞がいかにして浸潤能、転移能等の悪性形質を獲得し、さらには治療抵抗性を獲得するのかを解明すること、また見出した分子の臨床的な応用法を開発することである。本研究課題では、口腔癌の癌腫において以下の項目の実現を目指す。平成27年度はまず、過去の解析で使用した細胞株の中で上皮系口腔癌細胞株と間葉系口腔癌細胞株数種類を対象とし間葉系口腔癌で発現低下するEMT関連遺伝子群のスクリーニングを行い、機能的な解析を行う前にDNAメチル化解析を加えた絞り込みによって癌にとって不利な、すなわち癌にとってより重要な遺伝子の選別を行っている。過去の解析で使用した細胞株の中で上皮系口腔癌細胞株と間葉系口腔癌細胞株数種類を対象とし小規模な実験系において間葉系口腔癌で発現低下するEMT関連遺伝子群のスクリーニングを行い、機能的な解析を行う前にDNAメチル化解析を加えた絞り込みによって癌にとって不利な、すなわち癌にとってより重要な遺伝子の選別を行い、複数の遺伝子を候補として選出している。本研究は、癌の進展家庭において生じるEpithelial-Mesenchymal Transition(EMT)に着目し、独自の機能的スクリーニング手法を用い、特に口腔扁平上皮癌でのEMT発生に関する分子を同定し、さらに詳細な分子機序を明らかにすることにより、癌細胞がいかにして浸潤能、転移能などの悪性形質を獲得することを解明する、また見出した分子の臨床的応用法を開発することを目的としている。平成28年度は、Taqman法による発現解析とCOBRA法、Bisulfite Sequence法によるDNAメチル化解析を組み合わせた独自のスクリーンング法によって、過去に報告した分子に加えて、あらたな候補遺伝子を選出した。選出した遺伝子の機能解析を進めるにあたり、これまでに報告されている遺伝子の機能等などから、EMTにいかにして関与するか、その遺伝子の持つ機能と癌の悪性化との関連性について仮説を立案し解析を進めている。具体的には、口腔扁平上皮癌のうち上皮系の性質を有する細胞株で発現し、間葉系の性質を有する細胞株で発現低下する遺伝子をまず絞りこみ、絞り込んだ遺伝子のうち、Exon1上流にCpGアイランドを有する遺伝子において、COBRA法を用い、それぞれの遺伝子が発現低下している細胞株の対応するCpGアイランドのメチル化の程度を評価した。発現の低下とメチル化が相関する、すなわち候補遺伝子の発現低下があり、かつ、プロモーター領域がメチル化されている遺伝子については、Bisulfite Sequense法で、ゲノム上のメチル化シトシンの部位を精査した。引き続き、絞り込んだ遺伝子の詳細な機能解析と、間葉系形質の癌細胞で発現低下する意義について検討していく予定である。いくつかの分子については立案した仮説を裏付けるような結果を見いだせず、新たな候補分子についてin vitroの解析を進めている。本研究は、癌の進展過程において生じるEpithelial-Mesenchymal Transition(EMT)に着目し、独自の機能的スクリーニング手法を用い、特に口腔扁平上皮癌でのEMT発生に関する分子を同定し、さらに詳細な分子機序を明らかにすることにより、癌細胞がいかにして浸潤能、転移能などの悪性形質を獲得することを解明する、また見出した分子の臨床的応用法を開発することを目的としている。平成29年度は、Taqman法による発現解析とCOBRA法、Bisulfite Sequence法によるDNAメチル化解析を組み合わせた独自のスクリーンング法によって、過去に報告した分子に加えて、あらたな候補遺伝子を選出した。

選出した遺伝子の機能解析を進めるにあたり、これまでに報告されている遺伝子の機能等などから、EMTにいかにして関与するか、その遺伝子の持つ機能と癌の悪性化との関連性について仮説を立案し解析を進めている。具体的には、口腔扁平上皮癌のうち上皮系の性質を有する細胞株で発現し、間葉系の性質を有する細胞株で発現低下する遺伝子をまず絞りこみ、絞り込んだ遺伝子のうち、Exon1上流にCpGアイランドを有する遺伝子において、COBRA法を用い、それぞれの遺伝子が発現低下している細胞株の対応するCpGアイランドのメチル化の程度を評価した。発現の低下とメチル化が相関する、すなわち候補遺伝子の発現低下があり、かつ、プロモーター領域がメチル化されている遺伝子については、Bisulfite Sequense法で、ゲノム上のメチル化シトシンの部位を精査した。以上の手法によって、Gene Xを候補遺伝子として選出し、口腔癌の悪性形質獲得との関連性に関して分析をすすめた。候補遺伝子Gene Xを選出し、現在機能解析を行っているが、仮説を裏付けるようなデータがまだ得られておらず、l追加の解析を行っているため。Epithelial-Mesenchymal Transition(EMT)は、正常細胞における初期発生時の原腸陥入や心臓弁形成、あるいは創傷治癒における細胞運動能の獲得等の局面で発生するとされており重要な生物現象の一つとされている。一方で癌細胞においては、上皮系形質を有する癌細胞が間葉系の形質を有する癌細胞へ変化することで浸潤・転移能を獲得し、放射線治療や抗癌剤治療に対する抵抗性を獲得することが近年多数報告されており、現在の癌研究の主要なテーマとなっている。本研究は、癌の進展過程において生じるEMTに着目し、独自の機能的スクリーニング手法を用い、特に口腔扁平上皮癌でのEMT発生に関する分子を同定し、さらに詳細な分子機序を明らかにすることにより、癌細胞がいかにして浸潤能、転移能などの悪性形質を獲得することを解明する、また見出した分子の臨床的応用法を開発することを目的としている。これまでに、Taqman法による発現解析とCOBRA法、Bisulfite Sequence法によるDNAメチル化解析を組み合わせた独自のスクリーンング法によって、Gene Xを選出した。選出した遺伝子の機能解析を進めるにあたり、これまでに報告されている遺伝子の機能等などから、EMTにいかにして関与するか、その遺伝子の持つ機能と癌の悪性化との関連性について仮説を立案し解析を進めた。平成30年度は、見いだしたGene Xの機能解析をin vitroで行った。具体的には、miR-200familyを用いたEMT induction assayでEMTが誘導された際のGene Xの発現変化を分析し、Gene Xの発現量と細胞の運動能の相関に関してmigration assayを用いて行った。また口腔癌臨床検体を用いて、Gene XのDNAメチル化ステータスを癌部と非癌部間で比較し、臨床病理学的因子との相関の有無を分析した。同時に文献的な考察を行ながら、成果報告準備を行った。
アデノウイルス眼感染症の治療薬剤の開発と臨床への導入法に関する研究

アデノウイルスは流行性角結膜炎の原因ウイルスであり,毎年流行を繰り返している。近年新型が出現し,その眼科的臨床像が変化してきている。複数の新型アデノウイルス臨床株に対して,スタブジンの増殖抑制作用をin vitroで検討した。既知の4型,64型と同様に,53型,54型および56型に対して,スタブジンは濃度依存的抑制作用がみられた。現在わが国で流行を生じているアデノウイルスに対してもスタブジンは有効であることが示された。54型アデノウイルス結膜炎の臨床所見を解析したところ,若年齢群の臨床スコアは成人群よりも有意に高く,年齢的な相違が認められ,臨床的に注意を要する。アデノウイルスは今世紀に入ってから従来の分離中和法による血清型ではなく,PCR法に基づいたウイルスDNAシークエンスの直接解析による分類法が広く行われるようになり,それによって52型以降の新型が相次いで報告されるようになった。新型の中にはキメラウイルスの53型,8型変異株とされていた54型(Ishiko H, et al: J Clin Microbiol 46: 2002-8, 2008)。また最近,国内の結膜炎から分離され,D種に属する15/29型間の組み替え型である56型(Kaneko H, et al: J Clin Microbiol 49: 484-90, 2011)などがある。そこで,分離された新型アデノウイルス株を用いて,アデノウイルス増殖抑制薬への反応性を検討した。対象薬剤はアデノウイルス増殖抑制効果が確認されたザルシタビン,スタブジン,インターフェロンアルファ及びガンマ用いた。これらに増殖抑制効果が見られるかをin vitroで検討した。MTS法によって,薬剤の培養細胞への細胞毒性であるCC50を測定してから,薬剤を一定時間細胞へ作用後に定量PCR法でアデノウイルスDNAを測定して,EC50の算出を行いその効果を比較した。用いたアデノウイルスはそれぞれの53, 54および56型の臨床分離株である。その結果,ザルシタビン及びスタブジンはいずれの型にも濃度依存性の増殖抑制効果が見られた。しかし,インターフェロンについては,アルファは54型と56型には有意な増殖抑制作用があったが,53型にはなく,ガンマは54型にのみ、濃度依存性の抑制作用がみられた。これらの結果からD種に属するこれら国内で感染を生じている新型アデノウイルスに対して,抗HIV薬には既報と同様の有効性がみられたが,インターフェロンには限定的な作用がみられ、これらには差があることが明らかとなった。当該年度の計画にあった新型アデノウイルスに対する、各種薬剤の増殖抑制作用の比較研究は,53,54及び56型という各年度の代表的な流行性角結膜炎起炎型の臨床分離株を用いることによって、薬剤への反応と、型間の作用の相違がわかり、十分な成果を得ることができたと考えられている。新型アデノウイルスは52型以降数が年々増加しており、これら以外にもキメラウイルスとされるD種の64型,70型,C種の57型などの最近結膜から分離されている新型がいくつかあるが,これらについては、標準株も含めて株の入手ができずに、今回は抗ウイルス作用の対象に含めることができなかった。これからの研究で可能ならばさらに比較をしたいと考えている。アデノウイルスは2000年までに51の血清型が報告され,類縁性からAからFの種に分類されていた。しかし,今世紀に入ってから従来の分離中和法による血清型ではなく,PCR法に基づいたウイルスDNAシークエンスの直接解析による分類法が広く行われるようになり,それによって52型以降の新型が相次いで報告されるようになった。これらの新型は中和法による分類ではないので「型」ということになったため,それまでの血清型のように分類と生物学的な相違が一致しない状況になっている。新型の中では53型はいわゆるキメラウイルスであり,わが国で散発的に結膜炎から検出され,D種に属す(Walsh MP, et al: PLoS One 4 : e5635, 2009)る。54型は8型変異株として,わが国で継続的に検出されたD種のウイルスである(Ishiko H, etal: J Clin Microbiol 46: 2002-8, 2008)。さらに最近,国内の結膜炎から新型として56型が分離され,D種に属する15/29型間の組み替え型であることがわかっている(Kaneko H, et al: J Clin Microbiol 49: 484-90, 2011)。これらは実際に国内で感染を生じており,そのウイルス学的な特徴は把握する必要がある。そこで,本施設ならびに協力研究施設の市中感染症例から分離された新型アデノウイルスに属する株を用いて,これらのアデノウイルス増殖抑制薬への反応性を検討するのが本研究の主たる課題である。対象薬剤はアデノウイルス増殖抑制効果が確認されたザルシタビン,スタブジン,インターフェロンアルファ及びガンマ用いる。これらに増殖抑制効果が見られるかをin vitroで検討することにしている。平成28年度にはアデノウイルス治療薬の点眼製剤における保存性及び有効性の解析を行った。薬剤としては抗アデノウイルス作用があり,臨床使用が可能なスタブジン,インターフェロンgammaおよびalfa,ガンシクロビを用いた。

点眼製剤として複数濃度を調整し,ウイルスはアデノウイルス3,4,8,19a及び37型の標準株を使用し,0日,7日以後1週間間隔でウイルス浮遊液に作用させ,1週間A549細胞を培養後にウイルス力価をreal-time PCR法で定量した。その結果,いずれの薬剤も,4週間までは,十分な興亜でのウイルス作用が認められた。しかし,インターフェロン製剤は5週以降には有効性が低下した。スタブジンは7週間まで,ガンシクロビルは8週間まで,型による差はあったが増殖抑制効果が見られた。これらの結果は製剤化した場合の調整法などへの示唆が得られ,長期的な有効性には限界があることがわかった。また,新型アデノウイルス感染症においてみられる,角膜病変の重症化の機序を解析するために,3Dモデル培養系におけるアデノウイルス接種後の細胞形態の経時的な変化を検討した。アデノウイルスは3型,5型および8型を用い,3Dモデルに濃度を調整して,接種し,毎日立体構造の変化が見られるかを検討した。8型は最も早く感染兆候が見られ,細胞浮遊傾向が生じていた。3型はそれよりも変化が緩徐で,5型はさらに遅れて生じていた。これはアデノウイルス種間の角膜細胞への親和性の差を表すものと考えられ,この結果がアデノウイルス結膜炎における角膜病変の頻度の違い,また最近しばしば見られる遷延性角膜上皮障害の病態の解明に対して有効であると考えられた。実験動物系における結膜アデノウイルスレセプターの差異の解析アデノウイルスによる結膜炎には確立された動物モデルはなく,Gordonらが白色家兎と用い,金子らはラットモデルを報告しているが,これらは発症確率が低率か臨床症状を欠くものであり,ヒトへの直接の応用が容易ではない。一方呼吸器感染系のアデノウイルス動物モデルは存在している。その理由は,B種アデノウイルスは咽頭,上気道粘膜への親和性が高いが,結膜炎を生じるD種はシアル酸がアデノウイルスレセプターとして使用されていることとの関連があるのではないかと考えられる。したがって,結膜炎を確実に発症させるモデルの確立には,D種,B種のいずれにも適合したレセプターを豊富に発現している組織を有する動物の選択が必要である。そこで,本研究では呼吸器モデルにすでに使用されているマウスとラットの結膜組織を検体として,免疫組織化学的解析を行い,インテグリン,CAR(coxackie and adenovirus receptor)及びシアル酸など結膜炎起炎性型のレセプターが組織にどの程度局在しているかの比較解析を行った。実験は本学臨床研究審査委員会の承認を得て,適切な動物の取り扱いを行い,ヘルシンキ宣言に従って,プロトコールに沿って研究を進めた。その結果複数のマウス及びラットの実験モデルについて、結膜における既知のアデノウイルスレセプターで免疫組織化学的検索が可能なものを検索したが、陽性の所見は得られなかった。このことから、ヒトアデノウイルスの感染モデルとしてはこれらの動物は適当ではないことが示された。アデノウイルスは流行性角結膜炎の原因ウイルスであり,毎年流行を繰り返している。近年新型が出現し,その眼科的臨床像が変化してきている。複数の新型アデノウイルス臨床株に対して,スタブジンの増殖抑制作用をin vitroで検討した。既知の4型,64型と同様に,53型,54型および56型に対して,スタブジンは濃度依存的抑制作用がみられた。
謙遜と自己高揚の普遍性に関する１３ヶ国比較研究：脳生理学的基盤の検討を含めて

謙遜についての比較文化的研究を行い、21カ国の国民を対象にした調査及び実験的な研究により、謙遜が文化に共通した価値であることを確認した。より具体的には、謙遜の目的が低い自己評価の提示ではなく、謙虚であることを示すことにあることが、確認された。さらに、一方では、実験研究により、謙遜の程度や仕方には、文化差があることを示す結果が得られた。同じように謙遜しているといっても、文化により、その謙遜が意味する自己卑下の程度が異なっていることがわかった。本年度は、謙遜の意味について確認するために、自由記述の質問紙を日本、韓国、香港、インドネシア、オーストラリアの各国において配布し、その回答を調べた。その結果、どの国でもすくなくともある程度は謙遜をしていることが確認された。このことから、謙遜についての比較文化的な研究を行う共通基盤が確認されたといえる。とくに、個人主義的な文化と考えられるオーストラリアで謙遜の現象が確認されたことは重要である。謙遜をするのは集団主義的な国で対人関係に配慮する場合だけではないということを意味しているからである。次に、日本人を対象にして、謙遜について実験的な研究を行った。謙遜の興味深いところは、実際の自己評価とは異なる低い自己評価を表明するということである。つまり、謙遜している者は自分の表明した自己評価を相手に信じてもらうことを必ずしも望んでいない、ということが想像される。一方では、どの文化でも人は嘘をつくのはよくないことである、と教えられるのが通常である。したがって、どの文化でも人は通常は嘘をついていない、つまり、おおむね正直に自分の意見を表明している、と考えられる。このように、自分の正直な意見とはことなる意見や評価を表明することは、印象管理として扱われてきたが、これまでの研究では自己高揚が相手に高い評価を与えるための印象管理手法として欧米で研究されてきた。一方、日本などのアジア文化圏では、自己高揚は相手に否定的な印象を与える恐れが強く、謙遜がより強く用いられてきたわけである。実験では、このような対立する傾向についての知見を得るために、日本人学生を被験者として、質問紙を配布し、どのようにして謙遜に動機づけられているかについて尋ねた。その結果、今後諸外国で行うための質問項目を確定することができた。本年度は、質問紙法、IAT(implicit association test)、ERP(event related potential)による三つの手法を用いて、引き続き実証研究を行った。質問紙実験では、日本、韓国、米国、ニュージーランド、オーストラリア、インドネシアなどにおいて、謙遜にかかわる動機付けおよびそこで果たしている自尊心の役割について、Rosenbergの自尊心尺度、Caiらの謙遜尺度という個人差尺度も用いて、データを収集あるいは収集中である。これまでのところ、どの文化でも少なくともある程度は謙遜を行うこと、また、相手が謙遜していることを理解して対応することが一般的であることがわかった。また、IAT実験では、自己と肯定性、自己と謙遜、謙遜と肯定性について、それぞれの潜在的意識レベルでの連合の強さを測定した結果、潜在的意識のレベルでは自己と謙遜以外との連合の方が強いことがわかった。このことは、潜在的意識のレベルでは、実験に参加した日本人被験者にとって、自分と謙遜とが非謙遜よりも結びつきにくいことを意味している。これは、必ずしも日本人が自分を謙虚とは思っていないこと、そして、謙遜しているときでも、本心から謙遜しているわけではないことを示唆している。さらに、自分の謙遜についての顕在指標との相関を見ると、謙遜を他者から良い印象を得るための道具であると捉える戦術的謙遜の得点が高いほど、謙遜を潜在的に否定的に捉えていることが明らかになった。このことも、日本人の謙遜が本心からのものではないことを示唆している。なお、ERPについては、予備実験を行い、測定の安定度を高めるようにした。本年度も、質問紙法、IAT(implicit association test)、ERP(event related potential)の三つの手法を用いて、実証研究を行った。これにくわえて、10数か国において、謙遜に関する質問をインターネット上で行った。これまでの諸国に加えて、オーストラリアでもデータを収集中であり、現在これらのデータ収集の完了を待っている段階である。これまでの諸研究と同様に、得られたデータはどの文化においても謙遜が存在することを示している。とくにIAT実験では引き続き、自己と肯定性、自己と謙遜、謙遜と肯定性などについて、それぞれの潜在的意識レベルでの連合の強さを測定したところ、潜在的意識のレベルで、自己と謙遜の連合が、自己と謙遜以外の連合よりも強い、という結果と、謙遜と肯定的の連合が、謙遜と否定的の連合よりも強い、という結果が得られた。これは日本のような謙遜規範の強い文化で期待される結果であった。さらに、安定した高自尊心者ほど、潜在的に謙遜との連合が強い可能性についても検討したが、そのような結果は得られなかった。そのかわり、謙遜IATの得点が最も高かったのは、潜在的自尊心高群で、かつ顕在的自尊心低群であるという結果が得られた。つまり、顕在的自尊心は謙遜を反映するが、潜在的自尊心は謙遜によって低下しないことを意味すると考えられる。以上のように、顕在的自尊心と潜在的な自尊心は謙遜の異なった側面と関連していることが明らかになった。

まず第一に、IAT(implicit association test)と同時にERP(event related potential)の測定を行っているが、これまでノイズの影響が十分に排除できないため、明確な結果が得られないでいる。また、一部の国での倫理申請などに時間がかかったために、データ収集が開始できないでいる。さらに、質問紙実験において、詳細な質問項目を加えた上で、追加実験を行う必要が生じてきたが、シナリオの文化間での共通性を保つための配慮が必要であり、そのために、予定よりも全体の進行にやや遅れが出ている。謙遜についての比較文化的研究を行い、21カ国の国民を対象にした調査及び実験的な研究により、謙遜が文化に共通した価値であることを確認した。より具体的には、謙遜の目的が低い自己評価の提示ではなく、謙虚であることを示すことにあることが、確認された。さらに、一方では、実験研究により、謙遜の程度や仕方には、文化差があることを示す結果が得られた。同じように謙遜しているといっても、文化により、その謙遜が意味する自己卑下の程度が異なっていることがわかった。さらに、謙遜を行った際には、自分の能力は相手に低く評価されることなく、自分が謙虚な人物であると評価されたときに謙遜がうまく行ったと考えることが明らかになった。このことは、どの文化においても、謙遜を行う際には、自己呈示的な動機が共有されていることを意味する。一方、IATの結果及びERPの結果からは、謙遜に関して明確な結論を導けるようなものではなかった。質問紙法における実験は、順調に進行しており、現在比較文化的な研究を進めているところである。IATについては、すでに日本での実験を終了し、比較文化的なデータ収集の準備をしているとこである。ERP実験については、まだ日本においての予備実験にとどまっているが、全体としては、おおむね順調に進展している、と考えている。今後は、実験室の環境を整備してさらにERP測定の際のノイズを排除するように試みる。また、オーストラリアにおいて倫理申請についてはすでに行っており、間もなくデータ収集が開始できるはずである。また、その他の国でのデータ収集は完了し、これからデータ分析を行っていく予定である。さらに、次の段階の実験については、シナリオの調整中であり、これも間もなくシナリオを確定し、データ収集を開始する予定である。今後はデータ収集と並行して、これまでに得られたデータを分析し、総合的な解釈を行う予定である。28年度が最終年度であるため、記入しない。社会心理学本年度は、質問紙実験については、すでに他文化におけるデータ収集が開始されている。
人為的生態系操作による湖沼水質改善手法の開発に関する研究

アオコが発生する白樺湖の浄化のため、人為的に生態系を操作してアオコの発生しにくい生態系にすることを計画した。これは魚食魚を放流しプランクトン食魚を減らし、アオコの天敵といわれる大型ミジンコ(ダフニア)を増やそうというものである。そのため、19972000年に白樺湖の水質と生態系の調査をした。また、魚とミジンコとの間系、ミジンコとアオコとの関係等を調べるため実験的な解析も行った。その結果、1)白樺湖の最高水温は約22°Cで、冷水性のサケ科魚類の生息に適していること、2)湖の水は5月10月に成層し、深水層に貧酸素層が形成されること、3)水中の全窒素濃度と全リン濃度はそれぞれ500600ugN/L、2030ug/Lであり、湖は強い富栄養状態ではないこと、4)アオコを形成するラン藻のアナベナ(Anabaena)とミクロキスティス(Microcystis)の現存量は夏に最大となること、5)動物プランクトン群集は小型中型ミジンコのゾウミジンコ、ホロミジンコが優占し、水質浄化に効果の高い大型ミジンコのダフニアが湖には生息していないこと、6)白樺湖では14属16種の魚が確認され、その中でオオクチバスとワカサギが、それぞれ中大型魚、小型魚の優占種であること、7)魚の食性解析の結果、ワカサギは動物プランクトンやユスリカ類を主に食べており、オオクチバスはワカザギを主要な餌としていたこと、8)ワカサギはより大型のミジンコ、ホロミジンコを選択的に捕食し、ホロミジンコの個体群動態に大きな影響を与えていたこと、9)隔離水界実験で、ダフニアが増えるとラン藻の発生が抑えられること、が明らかになった。これらの結果から、白樺湖では生態系操作が効果的な水質浄化対策であると考えられ、白樺湖にダフニアとすでに放流実績のある魚食性のニジマスを放流し、実際の生態系操作が始めらた。本研究プロジェクトの1年目である1998年にはバイオマニピュレーションの実行を考えている白樺湖の基礎調査として、4月11月に同湖の水質とプランクトン群集の調査を行った。この湖では最大水温が約22°Cとなり、バイオマニピュレーションに利用する予定の冷水性サケ科魚類の生息に適した水温環境であることがわかった。夏には水深4m付近に顕著な水温躍層が発達し、深水層の溶存酸素濃度が極端に低下した。これは白樺湖が富栄養化しており、アオコが発生しやすい状況にあることを示している。実際、植物プランクトン群集では珪藻のメロシラが優占することが多かったが、アオコ形成藻類であるラン藻のミクロキスティスやアナベナが夏に増えた。動物プランクトン群集ではホロミジンコとゾウミジンコが優占した。個体群解析から、ミジンコに対しては魚の捕食圧が高いことが示唆された。これらの結果から、白樺湖はバイオマニピュレーション手法を用いて水質浄化を行うのに適した湖であるものと考えられる。また、動物プランクトン群集の調査から、白樺湖にはバイオマニピュレーションに有効な大型ミジンコのダフニアが生息しないことがわかった。

そこで、今後バイオマニピュレーションによって魚群集の構造を変えたときにダフニアが増えるように、1998年の秋に室内培養で増やしたダフニア(Daphnia pulex)を白樺湖に放流した。このダフニアが耐久卵を残してくれれば、白樺湖にダフニアが増えるポテンシャルを与えたことになる。さらに、バイオマニピュレーションに有効なサケ科魚類選定のため、白樺湖内に設置した網いけすの中に4種の魚(サクラマス、マスノスケ、スチールヘッド、カットスロートマス)を放流し、その成長を解析した。どの魚種も比較的よく成長し、白樺湖の水質や餌としてのプランクトンが稚魚の成長に適していることが示された。白樺湖の生態系の現状を理解するために410月に隔週で調査を行い、物理・化学的要因(水温、pH、溶存酸素、各種栄養塩濃度等)と動植物プランクトン群集の変動を調べた。1999年は前年度より透明度が上昇して水質がよくなったが、これには前年に増え始め当年に大繁殖した水生植物コカナダモによる浄化効果の結果と考えられた。白樺湖の定期調査によりコカナダモの浄化効果を評価することができた。白樺湖に隔離水界を設置して栄養塩を投入し植物プランクトン群集の変動を観察し、アオコが発生しやすい栄養塩環境を調べた。その結果、窒素とリンの比が5のときアオコが最もよく発生することがわかった。次に全ての隔離水界に窒素とリンをそれらの比が5になるように投与しアオコを発生させ、その後大型ミジンコ(Daphnia pulex)を投入しミジンコによる水質浄化効果を調べた。その結果、このミジンコが増えると植物プランクトン総量の減少とともにアオコが消滅し、ミジンコがアオコの発生を抑え高い水質浄化能力を持つことが確かめられた。網いけすを設置し、そこに白樺湖の浄化に有効と考えられるサケ科魚食魚の稚魚を放流して成長を調べた。放流した稚魚はスチールヘッド、カットスロート、ブラウンマス、サクラマス、アヤメマスで、どの魚種も成長は良好で、白樺湖はこれらの魚の成長には良質の水質を持っていることが確認された。2000年は例年の定期調査(3調査地点における4月11月の間の隔週の調査)を行い、白樺湖の水質・プランクトン群集の動態を解析した。この年は、それに加えて以下の調査・実験を行った。(1)前年秋に堰の工事のために湖の水が抜かれた。これにより湖底泥が乾燥し、また大繁茂していた水草のコカナダモが枯死した。2000年春に湖には再び水がはられたが、これによりいったん乾燥した湖底泥から栄養塩が溶出し易くなり、また枯死したコカナダモからも栄養塩が溶出すると考えられた。そのため、これらからの栄養塩の溶出を評価するために、水が抜かれた冬季に採った湖底泥を用いた栄養塩溶出実験、および枯死したコカナダモの湖水中での分解実験を行った。その結果、どちらでも比較的多い窒素の溶出が見られ、湖の水抜きという行為は湖の窒素濃度上昇に寄与することがわかった。(2)魚の採集と胃内容物の解析を行った。採集された魚ではワカサギとオオクチバス(ブラックバス)が多かった。ワカサギは7月までは中型のホロミジンコを主に捕食しており、それ以後は小型のゾウミジンコを多く捕食していた。湖水中の動物プランクトン群集組成と比較してワカサギの選択指数(Selective index)を算出したところ、湖水中にホロミジンコが多いときにはホロミジンコに対する指数が高く(つまり、ワカサギはホロミジンコを好んで積極的に捕食していたことになる)、ゾウミジンコのそれは低かった(ゾウミジンコをむしろ避けられていた)。しかし、ワカサギの捕食でホロミジンコが姿を消すと、今度はワカサギはゾウミジンコを積極的に食べるようになったことがわかった。一方、オオクチバスはワカサギを主な餌として食べていた。
Intergenerational impacts and resilience of transmigrant communities in the outer islands of Indonesia

このプロジェクトでは、スマトラの4カ所にて長期に渡り定住した移住コミュニティの回復力を調査した。研究目的は適応と回復力について明白な要因を特定することである。データは、230世帯の調査、フォーカスグループインタビュー、住宅調査、政府村落統計データ、移住者および主要情報提供者へのインタビューにより得た。顕著な知見としては土地保有と所得は一般的に人生満足度と相関していた。一般的に、移住者が農作物生産をアブラヤシやゴムに転作すると収入が増加し、家の再建や拡大、施設の整備が可能になる。コミュニティは様々な課題に直面したにもかかわらず、すべて時間の経過とともに高いレベルのコミュニティの回復力を示した。研究初年度である平成27年度は、1事例調査実施地域の選定と第一次調査、および2インドネシアにおける移住政策の変遷と現状ならびに政策評価についての基礎情報収集を実施した。1に関し、2015年9月に2回(西スマトラ州、ジャンビ州および中部ジャワ州)、11月(西スマトラ州)、2016年2月(ジャンビ州および中部ジャワ州)の計4回の現地調査を実施して各地区における移住の経緯と世帯状況、作物生産や近隣コミュニティとの関係についての聞き取りを行い、1)西スマトラ州シティウン地区、2)ジャンビ州リンボブジャン地区、3)同クンペ地区、4)同スンガイバハル地区の計4ヵ所を精査地区として選定した。このうち1)において100軒の測量調査、71世帯の住居環境調査を実施し、また3)4)の2地区において調査票による世帯調査を実施してそれぞれ57件、55件の回答を得た。また、対象地区における多くの移住者の出身地である中部ジャワ州ウォノギリ県において、1970年代からのダム建設に伴う村落移転および外島移住の経緯について県移住局で聞き取り、資料収集を行うとともに、島外移住に参加せず域内移転を選択した住民コミュニティへの聞き取りを実施した。2に関しては、2016年2月にジャカルタの後進地域・移住省研究開発訓練部との会合を開き、同省における政策立案・実施状況と利用可能な各種データについての知見を得るとともに、今後の研究協力について協議を行った。当初の研究計画どおり、スマトラ島の複数のトランスミグラシ村落で予備調査を実施、移住の経緯や生業形態の異なる4地区を選択し、うち2地区について調査票による精査を開始するとともに、1地区において居住環境の実測調査に着手した。また、移住者の出身地であるジャワ島中部の村落において、ダム建設による移転が実施された当時の状況や、移住を選択せず近隣に残留した村民からの聞き取りを実施することができたため、移住世帯やコミュニティのレジリエンスをより多角的に評価するための知見が得られた。平成28年度は、精査対象の残り2地区において聞き取りおよび調査票による現地調査を実施し、前年度調査実施地区と併せてデータ入力・分析を進める。その成果に基づき、コミュニティ・レジリエンスの観点から移住政策を評価するための指標群とその定量的・定性的評価手法の検討を進める。さらに、国および州レベルでの移住政策について、その基本方針や実施様態の変遷、プランテーション企業との連携等を精査し、インドネシアにおけるトランスミグラシの位置付けと地域、コミュニティへの影響を評価する。29年度が最終年度であるため、記入しない。総合教育・続可能な開発のための教育29年度が最終年度であるため、記入しない。
人絨毛ゴナドトロピンベータサブユニット産生能に着目した卵巣癌治療戦略に向けた検討

進行癌として診断されることが多い上皮性卵巣癌(卵巣癌)は、手術療法と抗癌化学療法が行われるが、再発の頻度が高く、再発治療に際しては抗癌剤に対する薬剤耐性の出現により未だに治療成績が不良であるのが現状である。われわれは、卵巣癌の発生母地となる不死化卵巣表層上皮細胞を用いた卵巣癌実験モデルシステムならびにヒト卵巣癌組織の解析により、妊娠時の胎盤が産生するhuman chorionicgonadotropin (hCG)のβサブユニットを卵巣癌細胞が自ら産生し、オートクライン機構により増殖を促進している可能性を見出した。これを阻止することにより、既存の抗癌剤に替わる治療への応用が期待される。上皮性卵巣癌における近年の分子生物学的解析法の発展で、種々の癌抑制遺伝子の不活化や癌原遺伝子の活性が報告されてきている。しかし、これらの遺伝子は生体内で重要な機能を有することより、これらをターゲットとした遺伝子治療には限界がある。われわれは、卵巣癌の絨毛ゴナドトロピン(hCG)βsubunitの産性能に着目した新規治療戦略に向けた検討を行う。患者の同意の下、医学的適応で摘出された正常卵巣より卵巣表層上皮(以下、ovarian surface epithelium:OSE)を採取し、SV40 1arge T抗原を導入することで、同一患者のOSEから、ヌードマウス腹腔内への投与で播種性の腫瘍を造る細胞株(OSE2b2)と腫瘍を造らない細胞株(OSE2a)が得られた。OSE2aは正常OSEでみられるLH/hCG受容体の発現を認めた。一方、造腫瘍能を有するOSE2b2はこのLH/hCG受容体の発現がみられた。われわれはLH/hCG受容体を発現するOSE2aにおいて、hCG刺激による足場非依存性増殖の亢進が認められ、LH/hCG受容体を介する増殖シグナルの活性化が確認された。また、このOSE2aとOSE2b2でhCGαとβsubunitの両者の発現ならびに産生がみられ、OSE2aではαsubunitが優位で、OSE2b2ではβsubunitが優位であった。また、primary OSEではhCGαsubunitのみの発現が観察され、βsubunitの発現は見られなかった。今回、ヒト卵巣癌組織において、RNAレベルにおいてhCGβsubunitの発現を検討したところ、多くの組織においてこの発現が確認された。しかし、OSE2b2においてhCG βsubunitの添加により、軟寒天培地でのコロニー形成能亢進の傾向が観察されたが、明らかな有意差は得られておらず、現在再度確認を行っている。上皮性卵巣癌における近年の分子生物学的解析法の発展で、種々の癌抑制遺伝子の不活化や癌原遺伝子の活性が報告されてきているが、いまだこれらをターゲットとした有効な分子標的薬は存在しない。患者の同意の下、医学的適応で摘出された正常卵巣より卵巣表層上皮(以下、ovarian surface epithelium:OSE)を採取し、SV40large T抗原を導入することで、同一患者のOSEから、ヌードマウス腹腔内への投与で播種性の腫瘍を造る細胞株(OSE2b2)と腫瘍を造らない細胞株(OSE2a)が得られた。また、このOSE2aとOSE2b2でhCG αとβsubunitの両者の発現ならびに産生がみられ、OSE2aではαsubunitが優位で、OSE2b2ではβsubunitが優位であった。また、primary OSEではhCG αsubunitのみの発現が観察され、βsubunitの発現は見られなかった。さらに、ヒト卵巣癌組織において、RNAレベルにおいてhCG βsubunitの発現を検討したところ、多くの組織においてこの発現が確認された。現在、タイムラプスを用いて、OSE2aへの培養液にhCGを添加して、細胞増殖パターンを検討している。しかし、これらの遺伝子は生体内で重要な機能を有することより、これらをターゲットとした遣伝子治療には限界がある。われわれは、患者の同意の下、医学的適応で摘出された正常卵巣より卵巣表層上皮(以下、ovarian surface epitheliam:OSE)を採取し、SV40large T

抗原を導入することで、同一愚者のOSEから、ヌードマウス腹腔内への投与で播種性の腫瘍を造る細胞株(OSE2b2)と腫瘍を造ちない細胞株(OSE2a)が得られた。OSE2aは正常OSEでみられるLH/hCG受容体の発現を認めた。一方、造腫瘍能を有するOSE2b2はこのLH/hCG受容体の発現がみられた。われわれはLH/hCG受容体を発現するOSE2aにおいて、hCG刺激による足場非依存性増殖の亢進が認められ、LH/hCG受容体を介する増殖シグナルの活性化が確認された。また、このOSE2aとOSE2b2でhCGαとβsubunitの両者の発現ならびに産生がみられ、OSE2aではαsubunitが優位で、OSE2b2ではβsubunitが優位であった。primary OSEではhCGαsubunitのみの発現が観察され、βsubunitの発現は見られなかった。37例のヒト卵巣癌組織におけるRNAレベル(RT-PCR)で、hCGαならびにβsubunitの発現を検討したところ、αsubunitの発現が32例(86.5%)、βsubunitの発現が35例(94.6%)に確認された。また、免疫組織学的検討においても、βsubunitが確認された。また、近年、他の癌腫において、hCG受容体を直接介さず、TGF-β受容体の発現を介する増殖シグナルが報告されており、OSE2aならびにOSE2b2においてこの受容体の発現を有することが確認された。