hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
写像類群における不変量の間の関係について

この研究の成果は小さなdilatation左もつ穴あき円板上のpA写像の族が,magic manifoldのモノドロミーの族として現れることであった(平成20年度の実績),曲面が穴あき円板に限られるとはいえ,小さなdilatationをもつpA写像の族が,たった1つの3次元多様体から得られるということは興味深い.この研究が終わった頃,Farb-Leininger-Margalitは次の結果を発表した:ある有限個の円周上の曲面束が存在し,小さかdilatationをもつ任意のpA写像(曲面は何でもよい)は,この有限個の中の,ある曲面束をDehn fillingしてえられる多様体が許容するファイバー上のモノドロミーとして実現できる.(彼らの結果には,どのような有限個の多様体がこの性質を持つのかは示されていないことを注意しておく.)本年度は,magic manifoldのDehn fillingから得られる閉曲面上のpA写像の研究を行った.この研究の中で,小さいdilatationをもつ種数gの閉曲面上のpA写像がmagic manifoldのDehn fillingから得られ,その結果,種数gの閉曲面上のpA写像の最小のdilatation(これを1_gと表す)の上からの評価を得た.また1_gの漸近的挙動に関してある知見を得た.さらに種数7の閉曲面上のorientable stable foliationをもつpA写像の最小のdilatationを決定することが出来た.曲面上の写像類群は擬アノソフ型,周期型,可約型の3つのタイプに分類される.この3つのタイプの中で最も一般的であるのが擬アノソフである.擬アノソフ写像類の不変量としてエントロピーがある.曲面Sを固定するときS上の擬アノソフのエントロピー全体には最小値1(S)が存在することが知られている.種数gの閉曲面上のこのような最小エントロピーを1_gとおく.最小エントロピー1_gは漸近的に1/gのように振る舞うことが知られている.Farb-Leininger-Margalitは近年次を示した.「ある有限個の円周上の曲面束が存在し,小さなエントロピーをもつ任意の擬アノソフはこの有限個の中の1つをDehn fillingしてえられる多様体が許容する,あるfibrationのモノドロミーである.」つまり小さなdilatationを持つ擬アノソフを調べるためには,ある有限この多様体のfibrationのモノドロミーを調べればよいというわけである.しかしこの結果からは具体的にどの多様体がこの性質を持つのか不明である.最近の私の研究によって,マジック多様体が上の有限集合に属し,さらに知られている例の中でエントロピーが最も小さく,1(S)を実現する候補の写像類達は,マジック多様体の,あるfibrationのモノドロミーであることがわかった.本年度の実績は以下の通り.(1)1_gの漸近的挙動を明らかにした.これはPennerによる先行研究の精密化である.(2)n個の穴あきトーラスをS_nとする.1(S_n)の漸近的挙動を明らかにした.これはTsaiによる先行研究の精密化である.曲面の写像類群の元,すなわち写像類は,擬アノソフ型,周期型,可約型の3つのタイプに分類される,この中で最も一般的であるのが擬アノソフである,擬アノソフ写像類の不変量としてエントロピーという量がある.曲面Sを固定するときS上の擬アノソフのエントロピー全体には最小値1(S)が存在することが知られている。種数gのn個の穴あき曲面S(g,n)に対する最小エントロピーを1(g,n)とおく,2010年,Tsaiは与えられたg>1に対して1(g,n)のオーダーはlog n/nであることを示した.これはg=0,1の場合と対照的な結果である,(g=0,1の場合は,1(g,n)のオーダーは1/nである.)
分布型触覚センサを用いたマニピュレーションシステムに関する研究

現在,ロボットは工業のみならず,高度な作業を行う介護・福祉機器などに活躍の場が広がることが期待されている.ロボットの適用分野の拡大に伴い,ロボットのエンドエフェクタとして人の手を模擬した多指ハンドが注目されている.ロボットハンドの操作には,物体を損傷させることなく,かつ滑らないように安定した状態で把持するなど,きめ細やかなマニピュレーションが必要であり,様々な研究が行われている.きめ細やかなマニピュレーションを行う場合,ロボットハンドの指先には触覚が必要不可欠である.しかし,これまで様々な触覚センサの研究,開発が行われてきたが,実用的なものはまだ完成されていない.そこで,本研究では,小型化でき,3軸方向の力が計測可能なセンサ素子を提案し,そのセンサ素子の性能向上を目的とした構造の最適化を行うことで,高性能なロボット指用分布型触覚センサを開発した.そして,開発した分布型触覚センサを多指ロボットハンドに搭載し,物体把持制御系の構築を図った.その結果,以下の結論を得た.1.滑りに応じて変化する可変剛性に基づく把持力制御により,把持物体の質量変化に対応可能な把持制御系を構築した.2.本研究で試作した試作した分布型触覚センサを搭載したロボットハンドにより,物体把持を実現した.よって,本センサ,および,本研究で開発した触覚情報処理アルゴリズムはロボット指用触覚センサとして有効であることが示せた.現在,ロボットは工業のみならず,高度な作業を行う介護・福祉機器などに活躍の場が広がることが期待されている.ロボットの適用分野の拡大に伴い,ロボットのエンドエフェクタとして人の手を模擬した多指ハンドが注目されている.ロボットハンドの操作には,物体を損傷させることなく,かつ滑らないように安定した状態で把持するなど,きめ細やかなマニピュレーションが必要であり,様々な研究が行われている.きめ細やかなマニピュレーションを行う場合,ロボットハンドの指先には触覚が必要不可欠である.しかし,これまで様々な触覚センサの研究,開発が行われてきたが,実用的なものはまだ完成されていない.そこで,本研究では,小型化でき,3軸方向の力が計測可能なセンサ素子を提案し,そのセンサ素子の性能向上を目的とした構造の最適化を行うことで,高性能なロボット指用分布型触覚センサを開発した.そして,開発した分布型触覚センサを多指ロボットハンドに搭載し,物体把持制御系の構築を図った.その結果,以下の結論を得た.1.滑りに応じて変化する可変剛性に基づく把持力制御により,把持物体の質量変化に対応可能な把持制御系を構築した.2.本研究で試作した試作した分布型触覚センサを搭載したロボットハンドにより,物体把持を実現した.よって,本センサ,および,本研究で開発した触覚情報処理アルゴリズムはロボット指用触覚センサとして有効であることが示せた.
振動スペクトル法によるヘム酵素酸素錯体の電子構造と反応性の研究

4種類のヘム酵素の酸素および一酸化酸素錯体の電子構造を振動スペクトル(赤外および共鳴ラマン)法により解析し,それらの結果の相互の比較からチトクロムP450camの酸素活性化機構の解析を試みた.1)有機基質のエフェクターとしての機能;トリプトファンニ原子酸素添加酵素との比較から,基質カンファーはヘム鉄に結合した配位子と相互作用する位置に結合しヘム鉄に結合した配位子に立体障害を与えること,その結果配位子間の結合が弱まることが判明した.2)酸素化型P450cam中のO-O伸縮振動;赤外及びラマン分光法による解析からO-O伸縮振動は1141cm^<-1>に位置している事が判った.この値はミオグロビンのそれと大差なく,その電子構造はFe^<3+>-O^-_2と記述される.なおミオグロビンと異りP450camの酸素錯体は一種類の構造(conformer)をとるものと思われる.3)プチダレドキシンのエフェクター効果;電子伝達蛋白質であるプチダレドキシン(Pd)はP450camと化学量論的に結合し,ヘム鉄に結合した配位子の伸縮振動を低下させた.この結果は,その結合により酸素などの配位子の配位子間(O-O)の結合が弱まること,言い換えるとPdの結合に伴い配位子は活性化されるものと思われる.上記1)と3)の結果は青酸(CN-)複合体を用いた^5NNMR法による解析からも示持された.4)チトクロムP450の真の反応中間体としてペルオキシダーゼのcompound I及びIIと同様な構造を持つ中間体の生成が示唆されている.しかしペルオキシダーゼについてすら中間体の構造は不明のまま残されていた.我々はヘム置換,金属置換酵素のcompound IIの構造をラマン分光により解析し,その構造はFe(IV)-OHではなくFe(IV)=Oであることを確証した.今後はチトクロムP450camの真の中間体の検出,酸素化型酵素に及ぼすPdの効果を検討する予定である.4種類のヘム酵素の酸素および一酸化酸素錯体の電子構造を振動スペクトル(赤外および共鳴ラマン)法により解析し,それらの結果の相互の比較からチトクロムP450camの酸素活性化機構の解析を試みた.1)有機基質のエフェクターとしての機能;トリプトファンニ原子酸素添加酵素との比較から,基質カンファーはヘム鉄に結合した配位子と相互作用する位置に結合しヘム鉄に結合した配位子に立体障害を与えること,その結果配位子間の結合が弱まることが判明した.2)酸素化型P450cam中のO-O伸縮振動;赤外及びラマン分光法による解析からO-O伸縮振動は1141cm^<-1>に位置している事が判った.この値はミオグロビンのそれと大差なく,その電子構造はFe^<3+>-O^-_2と記述される.なおミオグロビンと異りP450camの酸素錯体は一種類の構造(conformer)をとるものと思われる.3)プチダレドキシンのエフェクター効果;電子伝達蛋白質であるプチダレドキシン(Pd)はP450camと化学量論的に結合し,ヘム鉄に結合した配位子の伸縮振動を低下させた.この結果は,その結合により酸素などの配位子の配位子間(O-O)の結合が弱まること,言い換えるとPdの結合に伴い配位子は活性化されるものと思われる.上記1)と3)の結果は青酸(CN-)複合体を用いた^5NNMR法による解析からも示持された.4)チトクロムP450の真の反応中間体としてペルオキシダーゼのcompound I及びIIと同様な構造を持つ中間体の生成が示唆されている.しかしペルオキシダーゼについてすら中間体の構造は不明のまま残されていた.我々はヘム置換,金属置換酵素のcompound IIの構造をラマン分光により解析し,その構造はFe(IV)-OHではなくFe(IV)=Oであることを確証した.今後はチトクロムP450camの真の中間体の検出,酸素化型酵素に及ぼすPdの効果を検討する予定である.赤外スペクトル法,共鳴ラマン散乱法および電子スペクトル法を用いてへム酵素の酸素錯体並びに類似の錯体の電子構造を解明し下記の結果を得た。1.西洋ワサビペルオキシダーゼcompound【II】の電子構造と反応性:天然のプロトヘムを種々の人工ヘム(ジアセチルヘムおよびマンガンプロトポルフィリン【IX】)で置換した西洋ワサビペルオキシダーゼを用いて共鳴ラマン散乱法により解析し,従来議論のあったcompound【II】の構造がFe(【IV】)=0であることを最終的に証明した。次に共鳴ラマン散乱スペクトルのpH依存性の解析等からその反応性が酸素原子と蛋白中アミノ酸残基との間に存在する水素結合の強弱により支配されていることを見い出した。J.Biol.Chem.,261,8371-8382。2.シトクロムP450の酸素錯体の電子構造:通常のヘム蛋白質(Hb,Mb,カタラーゼ,ペルオキシダーゼ等)が,その第5配位子にイミダゾール基

由来のN原子を持つのに対しシトクロムP450は第5配位子に電子供与性のより強いチオレートアニオン(【S^-】)を持つ為,その酸素錯体の電子構造は通常の酸素錯体の構造と大幅に異なることが予想された。この点を明らかにする為シトクロームP450cam中のヘムをジアセチルヘムで置換した標品を用いてその酸素錯体を安定化し,赤外スペクトル法により酸素錯体中の0-0の伸縮振動数を我々が開発した高速掃引型赤外分光装置を用いて解析した。その結果0-0伸縮振動は1078【cm^(-1)】に存在し通常のヘム蛋白と殆んど変らぬことを見い出した。その詳細な原因については現在追求中である。3.ペルオキシダーゼCO錯体の電子構造:上記2.の研究の一貫としてより安定なCO錯体の電子構造を共鳴ラマン散乱法により追求した結果,西洋ワサビペルオキシダーゼのCO錯体は少なくとも2種類の互いに異なる構造を持つcomformerより成り立っていることを見い出した。J.Biol.Chem.,262,inpress。
口腔ミレリレンサ球菌の起炎作用

口腔常在のStreptococcus milleri群が、口腔ばかりでなく全身の感染症の原因菌になりうる事を示唆する多数の報告がある。そこで、このレンサ球菌群の病原作用の一端を明らかにするために標記の研究を行った。手始めに、ムラミルジペプチド(MDP)を前投与したマウスに、テスト菌体を投与して代表的な炎症性サイトカインである腫瘍壞死因子(TNF-α)とインターロイキン(IL)-6誘導作用と、アナフィラキシ-様反応惹起作用を調べた。なおこの実験システムでは、種々の菌体成分がサイトカイン誘導作用を示し、ある種のリポ多糖(LPS)がアナフィラキ-様反応を惹起する事が報告されている。具体的には、ヒトの口腔(特にデンタルプラーク)あるいは全身の感染症より分離されたS.milleri群の50余株(S.anginosus18株、S.constellatus14株およびS.intermedius19株)の凍結乾燥標品(500μg)をMDP(100μg)を予め投与したC_3H/HeNマウスに静注したところ、供試した殆どの菌株が、10-15分後にアナフィラキシ-様反応を惹起して、半数以上の菌株が、少なくとも1匹のマウスを1時間以内に死亡させた[致死活性を示したのはS.anginosus9株(50%)、S.constellatus7株(50%)、S.intermedius13株(68%)]。さらに生残したマウスの血清中のサイトカインレベルを測定したところ、ほぼ全てのマウスで高レベルのTNF-αとIL-6が認められた。しかし、アナフィラキシ-誘導活性とサイトカインレベルは必ずしも相関せず、TNF-αとIL-6レベルの間にも必ずしも平行関係は認められなかった。今後、さらに菌株を増やして検討を進めるとともに、強い活性を示した菌株について、種々の菌株表層成分を調製して、それぞれの活性を担う構造を明らかにしたいと考えている。さらに、得られた菌体成分の生物活性を種々のin vitro実験系でも検討して、S.milleri群の全身感染症との係わりを追及したいと考えている。
癌抑制に関与するクロマチン転写制御機構と口腔癌における制御異常

組織や細胞の個性や可塑性は、塩基配列の変化を伴わずに遺伝子の発現を活性化したり不活性化したりする後生的修飾(エピジェネティクス)によって決定されている。本研究は、核マトリクス結合タンパク質(ARID3)のノックダウンとDNA脱メチル化剤などを併用することにより、体細胞核を人為的に再プログラミングさせることを目指して研究をおこなった。本年度の実績は以下の通りである。昨年度まで解析で、siRNAを用いたARID3ファミリータンパク質の発現抑制(ノックダウン)によって、核染色によるクロマチン構造の変化が認められること、重要な核内構造の一つであるPML核ボディの機能が著しく抑制されることを見出している。より詳細な解析のため、導入効率に優れたshRNAを発現するアデノウイルスベクターを作成し検討をおこなったが、ARID3の十分なノックダウン効果が得られなかった。原因として、ARID3タンパク質が非常に安定なタンパク質で半減期が長いことが考えられた。体細胞核を人為的に再プログラミングさせるために必要と思われる期間、内在性ARID3の発現を抑制するため、現在、長期間の発現に優れたレンチウイルスベクターに使用するベクターを変更して解析をおこなっている一方、本研究の遂行過程で、癌抑制遺伝子p53の制御におけるARID3の機能について多くの新たな知見を得た。DNA障害で誘導された内在性p53が内在性ARID3と結合することを見出し、p53とARID3がin vitroで直接結合する知見を得た。さらに代表的なp53標的遺伝子の一つであるp21遺伝子プロモーターに存在するARID3結合配列あるいはp53結合配列のどちらに変異を導入してもプロモーターの活性化が著しく低下することを見出した。以上の結果から、ARID3が重要な癌抑制遺伝子の一つであるp53の転写制御において重要な役割を担っていることが明らかとなった。本研究は、核マトリクス結合タンパク質(ARID3)のノックダウンとDNA脱メチル化剤などを併用することにより、体細胞核を人為的に再プログラミングさせ、将来の歯科医療における組織再生へ応用を目指すことを目指している。細胞のクロマチンDNAは、核マトリクスと結合し、クロマチンループを形成しており、その結合を担うのが核マトリクス結合タンパク質である。このようなループ構造は、時空間的に独立した遺伝子発現を行う構造的な基盤を提供し、DNAのメチル化やヒストンの修飾とともにエピジェネティクスに重要な役割を果たしていると考えられている。そこで本年度は、核マトリクス結合タンパク質(ARID3)をノックダウンすることにより、遺伝子の発現調節にどのような変化が生じるかを解析した。(1)まず、ARID3の転写制御における役割を明らかにするため、癌抑制遺伝子p53の転写制御機構に焦点を当てて解析をおこなった。ゲルシフト法、クロマチン免疫沈降法および定量RT-PCR法による実験の結果、ARID3がp53の標的遺伝子(p21、Noxa、p53AIP1など)のプロモーター領域に結合し、転写活性化に重要な役割を果たしていることを明らかにした。(2)ARID37ファミリータンパク質に特異的なsiRNAを用いたノックダウン実験の結果、DRIL1の抑制によってp53蛋白質の翻訳後修飾(リン酸化およびアセチル化)が著しく抑制されることが明らかになった。p53蛋白質の修飾には核内構造の一つであるPML核ボディとの相互作用が重要であることが明らかにされている。したがって、以上の結果からARID3ファミリータンパク質がクロマチンDNAと核内構造との機能的な相互作用に重要であることが示唆された。(3)クロマチンDNAの後生的修飾(エピジェネティクス)にDNAのメチル化が重要であることから、siRNAによるARID3のノックダウンとDNA脱メチル化剤(5-アザシチジン)の処理を同時におこなうことを試みた。しかしながら、ヒト正常繊維芽細胞に対しては十分なsiRNA導入効率が得られなかった。さらにsiRNAによる抑制効果が長時間持続しないという問題点が明らかになった。そこで現在導入効率に優れたshRNAを発現するウイルスベクターの作成をおこなっている。またヒト正常細胞より調整が容易なマウス由来の正常細胞を用いる目的で、マウスのARID3を抑制するsiRNAおよびshRNAについての検討をおこなっている。本年度は、ARID3をノックダウンする系を確立し、DNA脱メチル化剤と併用することにより、クロマチン構造および遺伝子の発現調節にどのような変化が生じるかを明らかにすることを目的とした。(1)昨年度の結果でヒト正常繊維芽細胞に対しては十分なsiRNA導入効率が得られず、siRNAによる抑制効果も長期間持続しないという問題点が明らかになった。そこでsiRNA導入効率に優れたshRNAを発現するアデノウイルスベクターを作成した。ヒト正常繊維芽細胞に導入したところ、内在性ARID3蛋白質が効率的にノックダウンされることを確認した。さらに長期間の持続的抑制効果に優れたレンチウイルスベクターを用いるため、テトラサイクリンにより発現誘導可能なshRNA発現ベクターの構築をおこなっている。

(2)(1)で構築したshRNA発現ベクターを用いてARID3のノックダウンし、クロマチンDNAと核内構造どの機能的な相互作用におけるARID3の役割を解析する予定であったが、ウイルスベクターの作成が予想上に困難を極めたため、この実験は来年度におこなうことになった。同様の理由で、ARID3のノックダウンとDNA脱メチル化剤(5-アザシチジン)処理を併用する実験も来年度におこなうことになった。(3)ヒト正常細胞より分化形質の変化および解析が容易なマウス由来の正常細胞を用いる実験を開始した。(1)で述べたレンチウイルスshRNA発現ベクターの構築が終了したら、マウスのARID3に対するshRNAを導入する予定である。組織や細胞の個性や可塑性は、塩基配列の変化を伴わずに遺伝子の発現を活性化したり不活性化したりする後生的修飾(エピジェネティクス)によって決定されている。本研究は、核マトリクス結合タンパク質(ARID3)のノックダウンとDNA脱メチル化剤などを併用することにより、体細胞核を人為的に再プログラミングさせることを目指して研究をおこなった。本年度の実績は以下の通りである。昨年度まで解析で、siRNAを用いたARID3ファミリータンパク質の発現抑制(ノックダウン)によって、核染色によるクロマチン構造の変化が認められること、重要な核内構造の一つであるPML核ボディの機能が著しく抑制されることを見出している。より詳細な解析のため、導入効率に優れたshRNAを発現するアデノウイルスベクターを作成し検討をおこなったが、ARID3の十分なノックダウン効果が得られなかった。原因として、ARID3タンパク質が非常に安定なタンパク質で半減期が長いことが考えられた。体細胞核を人為的に再プログラミングさせるために必要と思われる期間、内在性ARID3の発現を抑制するため、現在、長期間の発現に優れたレンチウイルスベクターに使用するベクターを変更して解析をおこなっている一方、本研究の遂行過程で、癌抑制遺伝子p53の制御におけるARID3の機能について多くの新たな知見を得た。DNA障害で誘導された内在性p53が内在性ARID3と結合することを見出し、p53とARID3がin vitroで直接結合する知見を得た。さらに代表的なp53標的遺伝子の一つであるp21遺伝子プロモーターに存在するARID3結合配列あるいはp53結合配列のどちらに変異を導入してもプロモーターの活性化が著しく低下することを見出した。以上の結果から、ARID3が重要な癌抑制遺伝子の一つであるp53の転写制御において重要な役割を担っていることが明らかとなった。
化学反応制御に向けた高輝度超短パルス波長可変レーザー増幅技術の確立

原子や分子運動の完全制御に向けた多波長・広帯域レーザー増幅技術の確立を目的とし、超広帯域光パラメトリックチャープパルス増幅器(OPCPA)の開発を行った。これより、中心波長800nmの近赤外領域から8.6mmの中赤外領域にわたる波長可変レーザーの増幅を実現した。光による化学反応制御や分子マニピュレーションへの実現に向けて、強光子場(>10^<15>W/cm^2)を維持しつつ、広範囲(紫外赤外)で波長可変できる光パラメトリックチャープパルス増幅技術を確立することを目的とし、今年度は下記2項目について研究開発を実施した。(1)超広帯域種光源の発生:超広帯域OPCPA用の種光(信号光)には波長600nmから2000nmにおよぶスペクトル幅が必要となるため、本研究項目では、高非線形性を有する合成石英板(厚さ10mm)に対物レンズを用いてモード同期発振器からの帯域幅17nmのレーザー光を集光し、波長600nmから1400nmにおよぶスーパーコンテニュームの発生に成功した。波長1400nm以上では、有意な信号が観測できなかった。今後、近赤外領域における光パラメトリックチャープパルス増幅器の開発においては、光パラメトリック過程でポンプ光からシグナル光へのエネルギー変換によってシグナル光を増幅する際に二つの光の波長差に伴って発生するアイドラー光を利用する予定である。(2)広帯域光パラメトリックチャープパルス増幅器の開発(中心波長600nm帯):本研究項目で開発する中心波長600nm帯の光パラメトリック増幅器の励起光源には、Yb:YLFレーザー光の4倍波(波長255nm)光による励起が必要となる。そこで平成20年度は、紫外域で吸収が少なく、高い光耐力性を有するBBO結晶(TYPE I,厚さ10nm)を準備し、すでに得られている2倍波光から4倍波光に変換する実験を開始した。パルス幅2ps,最大強度50GW/cm^2でBBO結晶に入射することにより、変換効率10%で波長255nmのレーザー光が得られた。今後レーザー強度および結晶厚の最適化を行い、より高い変換効率で4倍波光を発生し、中心波長600nm帯の光パラメトリック増幅器の励起試験を行う予定である。(1)近赤外領域における広帯域光パラメトリックチャープパルス増幅器の開発近赤外領域で吸収が少なく、高い光耐力性を有するBBO結晶(有効サイズ10mmx10mm,厚さ10mm)を光パラメトリック増幅器として用い、光パラメトリック過程で発生するアイドラー光を用いて光パラメトリック増幅を行った結果、中心波長2300nm、最大エネルギー150μJのアイドラー光が得られ、当該年度目標である近赤外領域における光パラメトリック増幅が可能であることを実証した。(2)光パラメトリック増幅光の特性評価得られた光パラメトリック増幅光の位相情報を測定するために、エタロンによって生成される2波長のチャープパルスと被計測光との周波数シェアリング干渉を計測する位相計測装置を構築した。これによって光パラメトリック増幅光の4次までのスペクトル位相を測定することが可能になり、光パルスの特性評価をリアルタイムで行うことが可能となった。光による化学反応制御や分子マニピュレーションへの実現に向けて、強光子場(>10^<15>W/cm^2)を維持しつつ、広範囲(紫外赤外)で波長可変できる光パラメトリックチャープパルス増幅技術を確立することを目的とし、今年度は下記項目について研究開発を実施した。(1)中赤外領域における広帯域光パラメトリック増幅器の開発より長波長域(>2,000nm)での光パラメトリック増幅試験を行い、中赤外領域での波長可変レーザー光源の開発を行った。本実験では中赤外光の発生に光パラメトリック発振器(OPO)を用いた。OPOの励起光源には,Q-スイッチNd:YAGレーザー(波長:1064nm、繰り返し数:10Hz)を用いた。OPOの共振器は平面の誘電体多層膜出力ミラーとシルバーコーティングの金属ミラーで構成し、共振器長は25mmに設定した。また、LHnSe2結晶(5mm x 7mm x 20mm、φ34度、タイプ2)をOPOの非線形結晶に用い、発振波長のチューニングには本結晶の角度を調整することにより、シグナル光として1213nm1302nm、アイドラー光として5.8μm8.7μmの波長可変中赤外レーザー光の発生に成功した。
植物の表皮形成を阻害する低分子化合物の探索と作用点の解明

陸上植物の地上部はクチクラと呼ばれる疎水性の保護膜により覆われている。クチクラは地上部の表皮と外界の境界部分に形成され、体内の水分の保持や、葉状器官の形態形成などに重要な機能を担っている。植物のクチクラの主成分はワックスやクチンなどの脂肪酸派生物であり、これまでの研究により、クチクラの形成に関与する脂質修飾酵素や、輸送体が同定されている。本研究では、クチクラの形成を阻害する39種の新規の化合物について、分子マーカーを用いて作用点の解明を試みた。その結果、輸送体の発現を阻害する化合物と、合成系因子の発現をかく乱する可能性のある化合物の候補が得られた。高等植物のクチクラは表皮細胞の外界側に形成され、水分の保持や形態形成に必須の役割を担っている。クチクラ形成には表皮細胞がクチクラ合成酵素の遺伝子群を適切に発現し、細胞の外界側のみにクチクラ関連物質を排出することが必要であると考えられる。しかし、クチクラ合成酵素の発現制御機構は断片的にしか理解されておらず、クチクラ形成の空間的制御の分子機構はほとんど明らかになっていない。本研究ではクチクラ形成の新規阻害剤を単離し、その作用点についての情報を得ることで、クチクラ形成の分子機構の一端を解明することを目標とする。シロイヌナズナのクチクラ形成を阻害する薬剤として同定した化合物について、クチクラ形成に関わるABCトランスポーターであるABCG11の局在に対する影響を解析し、2つの化合物がGFP-ABCG11の細胞膜局在を乱すことを見いだした。また、これらの化合物はシロイヌナズナの芽生えの根の生長も阻害することがわかった。この表現型を指標として耐性変異体のスクリーニングを行い、約10,000系統相当のライブラリーから2系統の耐性変異体の候補を単離した。また、クチクラ形成に関わるタンパク質の分布を可視化するためのマーカーを作出し、研究材料の整備を進めた。本年度はクチクラ形成に関わるBDG-YFPを発現する形質転換シロイヌナズナ(pBDG::BDG-YFP)を作成し、芽生えの地上部の表皮細胞での発現を確認した。2つの新規クチクラ形成阻害剤の作用に関する新しい知見が得られたため。陸上植物のクチクラは地上部の表皮と外界の境界部分に形成され、体内の水分の保持や、葉状器官の形態形成等に重要な役割を担っている。これまでの研究により、クチクラ形成には表皮細胞が適切に分化し、脂肪酸の修飾に関わる種々の酵素をコードする遺伝子群が適切に働くことが必要であることが明らかになってきている。しかし、クチクラ合成酵素の発現制御機構は断片的にしか理解されておらず、また表皮の分化の制御系についても十分に解明されていない。本研究では、これまでの分子遺伝学的アプローチを補完する可能性のあるアプローチとして、クチクラの形成を阻害する阻害剤の解析を行った。スクリーニングにより単離した阻害剤候補について、クチクラの異常を簡便に視覚化する手法であるTB法を用いて表皮の表面の性質に異常を引き起こすかどうかを調べ、阻害効果を確認した。適切にクチクラが形成されるためには、表皮においてクチクラ関連遺伝子群が適切に発現し、機能する必要があることから、これらの素過程に関わる因子を用いたマーカーの整備を行った。地上部において表皮で優先的に発現することが知られていた3種類の遺伝子について、GUSレポーターを確立した。また、クチクラの合成や輸送に関わる5種類の因子の蛍光蛋白質融合レポーターを作出した。これらのなかで、安定にシグナルが検出されたABCG11、ACR4、GDSLに着目して阻害剤の効果を解析したところ、ABCG11については2種類の化合物(#38, #39)によりシグナルが減少することがわかった。また、別の化合物(#35)ではGDSLのシグナルが減少した。これらの結果から各種阻害剤がクチクラ形成の異なる素過程に作用することが示唆された。阻害剤耐性変異体の候補について、原因遺伝子のマッピングと遺伝子クローニングを進める。ABCG11以外のクチクラ関連遺伝子に対する阻害剤の効果の解析も進める。植物科学効果が認められた阻害剤に耐性を示す変異体のスクリーニングを優先したため、H27年に購入し、効果を解析する予定であった新規化合物を翌年度に購入することとした。技術補佐員を雇用するための人件費と新規化合物の購入、消耗品費、旅費などに使用する。
X染色体ヒト精巣腫瘍感受性遺伝子の同定とX染色体不活化機構の関与についての研究

れわれは精巣腫瘍における染色体異常としてX染色体の増加に着目して研究を進めているが、X染色体には正常女性核型XXにみられるようにXISTを介したX染色体不活化機構(X inactivation)が存在しいわゆる余剰Xの不活化というユニークな機能が存在する。さらに男性XYにおいても精巣胚細胞にだけはXISTの発現がみられる。しかし精巣におけるXISTの生物学的意義については不明である。これらX染色体の倍数体とそれを不活化するXISTの存在というX染色体をとりまく複雑な制御機構を考えるとX染色体におそらく存在すると思われる精巣胚細胞腫瘍の感受性遺伝子がgene dosageにしたがって働く癌遺伝子的分子なのかまた癌抑制遺伝子的分子であるのかは極めて興味深い問題点であると考えられる。今回の申請ではこの点を明らかにすることに特に力点を置き研究を進めた結果以下の新しい知見を得ることが出来た。精巣胚細胞腫瘍(Testicular germ cell tumor :: TGCT)においてはセミノーマ、非セミノーマの如何を問わずX染色体の増加が恒常的にみられることが確認された。精巣腫瘍でも特にセミノーマにおいて高頻度にXISTの発現がみられることが判明した。また、精巣腫瘍および精巣胚細胞におけるXISTの転写産物は女性XXにおける不活化Xとは異なり、X染色体遺伝子(GPC3,FMRおよびAR遺伝子)のメチル化を介した不活性化には繋がっていないことを明らかにした。このことから精巣腫瘍におけるX染色体の増加はXISTの発現にも関わらずInactivationを受けないことが想定され、精巣腫瘍におけるXISTの発現は女性XXにおける余剰X染色体の不活化(いわゆるcounting mechanism)とは異なるものと考えられた。すなわち精巣腫瘍における余剰X染色体はXISTの発現にも関わらずすべて非メチル化であり活性型X染色体であると考えられた。次にX染色体上の遺伝子プロフィールで精巣腫瘍ではXISTの発現の如何にかかわず、またセミノーマ、非セミノーマの如何を問わず非メチル化に制御されているというわれわれのデータにもとづき、精巣腫瘍では他の常染色体上の遺伝子でも非メチル化状態が維持されているのではないかとの仮説を立て以下の検索を行った。すなわち他の癌腫において高頻度にaberrant methylationの報告されている常染色体上の9個の癌関連遺伝子(E-cadherin, p15, p16, BRCA1, Rb, VHL, RASSF1A, RARβ, GSTP1)のCpG islandsについて体細胞由来の癌である精巣悪性リンパ腫と比較しながら検討を行った。その結果、精巣悪性リンパ腫ではE-cadherin, RASSF1A, RARβのメチル化が高頻度にみられるのに対し、精巣胚細胞腫瘍ではセミノーマ、非セミノーマの如何を問わずメチル化は認められなかった。このことは病理学的に時に鑑別診断を要するセミノーマと悪性リンパ腫の識別にこれら遺伝子のメチル化が応用可能であることを示唆するものと考えられた。

その結果、精巣悪性リンパ腫ではE-cadherin, RASSF1A, RARβのメチル化が高頻度にみられるのに対し、精巣胚細胞腫瘍ではセミノーマ、非セミノーマの如何を問わずメチル化は認められなかった。このことは病理学的に時に鑑別診断を要するセミノーマと悪性リンパ腫の識別にこれら遺伝子のメチル化が応用可能であることを示唆するものと考えられた。われわれは精巣腫瘍における核型異常の中で特にその頻度の高いX染色体に主眼をおいて研究をすすめた。その理由としてX染色体上には1)X linked Ichthyosis(責任遺伝子STS)をはじめとする精巣腫瘍に比較的高感受性を示す疾患群の責任遺伝子がいくつか存在していること、2)XXY核型を示すKlinefelter syndromeで胚細胞腫瘍の発生頻度が高いこと3)Cancer Testisantigensなど精巣特異的抗原がX染色体上にはクラスターとして数多く存在すること、4)Xq27上に家族性精巣腫瘍の候補遺伝子座(TGCT1)がXq27にマッピングされたこと(Rapley et al.,Nature Genetics 2000)があげられる。これらの事象は精巣腫瘍発生におけるX染色体の関与を強く裏付けるものと考えたが、平成13年度の研究では以下のことがさらに明らかとなった。X染色体には正常女性核型XXにみられるようにXISTを介したX染色体不活化機構(X inactivation)が存在しいわゆるcounting mechanismによる余剰Xの不活化というユニークな機能が存在するが、男性XYにおいても精巣胚細胞にだけはXISTの発現がみられる。しかし精巣胚細胞におけるXIST発現の役割は不明であった。われわれは精巣腫瘍および精巣胚細胞におけるXISTの転写産物は女性XXにおける不活化Xとは異なり、X染色体遺伝子(GPC3,FMRおよびAR遺伝子)のメチル化を介した不活性化には繋がっていないことを明らかにした。このことから精巣腫瘍におけるX染色体の増加はXISTの発現にも関わらずInactivationを受けないことが想定された。したがって精巣腫瘍における余剰X染色体はXISTの発現にも関わらずすべて非メチル化であり活性型X染色体であると考えられた。従って精巣腫瘍におけるX染色体上に存在する精巣腫瘍発生に関わる感受性遺伝子は癌抑制遺伝子よりは癌遺伝子的な分子を検討していくべきと考えられ(投稿準備中)。この中でXq27の侯補遺伝子座として癌遺伝子MCF2に着目し変異の有無を精巣腫瘍組織、細胞株で検討したが現在のところ明らかな変異は同定されていない。平成14年度は広範な精巣腫瘍のメチレーションプロフィールを明らかにするとともにmale germ cell tumorにおけるXIST発現の意義をさらに明らかにしたいと考えている。さらに精巣腫瘍のメチル化プロフィールが圧倒的に低メチル化であることを利用して新たなDNAマーカーを作成し臨床応用への応用を試みている(投稿中)。
画像定量解析による永久歯および乳歯のミネラル密度ゴールドスタンダードの確立

新潟大学医歯学総合病院にて治療上の理由から抜歯に至った健全歯のうち,患者が廃棄処分を希望したものを試料として用いた.永久歯および乳歯の全歯種を対象とした.(新潟大学歯学部倫理審査承認番号:26-R-60-3-20)0.25 g/cm3および0.75 g/cm3のハイドロキシアパタイト(以下HAp)ファントムをキャリブレーション基準として用いた.るよう配慮した.また低エネルギーエックス線除去のため1 mmアルミニウムフィルタを用いた.前述のマイクロCT撮影条件下にて永久歯全歯種の歯冠から歯根までを撮影し,ミネラル密度の解析を行った.エナメル質の切縁を0 %,セメント-エナメル境を100 %とし,この間の計測部位をエナメル質エリアと定義した.また象牙質も同様に切縁側エナメル-象牙境を0 %,根尖を100 %とし,この間の計測部位を象牙質エリアとした.本年度までに試料準備,キャリブレーション基準ファントムの条件設定,マイクロCT撮影条件の確立,ミネラル密度への変換式および画像定量解析法の確立,永久歯のマイクロCT撮影および解析までを遂行し,おおむね順調に進展している.最終年度は乳歯のマイクロCT撮影および解析,まとめおよび成果発表を行う予定である.新潟大学医歯学総合病院にて治療上の理由から抜歯に至った健全歯のうち,患者が廃棄処分を希望したものを試料として用いた.永久歯および乳歯の全歯種を対象とした.(新潟大学歯学部倫理審査承認番号:26-R-60-3-20)0.25 g/cm3および0.75 g/cm3のハイドロキシアパタイト(以下HAp)ファントムをキャリブレーション基準として用いた.マイクロCT(Skyscan1174; Bruker-Micro CT, Kontich, Belgium)を用い,管電圧50kV,管電流800μA,ピクセルサイズ32μmとした.再構成にはNRecon(Ver 1.6.6.0, Bruker-Micro CT, Kontich, Belgium)およびOsiriX(Ver 7.0 Pixmeo, Gineva, Switzerland)を用いた.ビームハードニング補正はアーチファクトが最小となるように設定した.再構成後の解像度は1024 x 1024ピクセル,ピクセルサイズ32μm,16bitのTIFFとし,再構成による解像度の低下を避けるよう配慮した.また低エネルギーエックス線除去のため1 mmアルミニウムフィルタを用いた.本年度までに試料準備,キャリブレーション基準ファントムの条件設定,マイクロCT撮影条件の確立までを遂行し,おおむね順調に進展している.新潟大学医歯学総合病院にて治療上の理由から抜歯に至った健全歯のうち,患者が廃棄処分を希望したものを試料として用いた.永久歯および乳歯の全歯種を対象とした.(新潟大学歯学部倫理審査承認番号:26-R-60-3-20)0.25 g/cm3および0.75 g/cm3のハイドロキシアパタイト(以下HAp)ファントムをキャリブレーション基準として用いた.るよう配慮した.また低エネルギーエックス線除去のため1 mmアルミニウムフィルタを用いた.前述のマイクロCT撮影条件下にて永久歯全歯種の歯冠から歯根までを撮影し,ミネラル密度の解析を行った.エナメル質の切縁を0 %,セメント-エナメル境を100 %とし,この間の計測部位をエナメル質エリアと定義した.また象牙質も同様に切縁側エナメル-象牙境を0 %,根尖を100 %とし,この間の計測部位を象牙質エリアとした.本年度までに試料準備,キャリブレーション基準ファントムの条件設定,マイクロCT撮影条件の確立,ミネラル密度への変換式および画像定量解析法の確立,永久歯のマイクロCT撮影および解析までを遂行し,おおむね順調に進展している.今後は,MDへの変換式および画像定量解析法の確立,永久歯のマイクロCT撮影および解析,乳歯のマイクロCT撮影および解析を行う予定である.最終年度は乳歯のマイクロCT撮影および解析,まとめおよび成果発表を行う予定である.本学現有のマイクロCT装置を使用したためコストが低く抑えられたことで当初想定していたよりも下回ったことから,次年度使用額が生じた.翌年度分と請求した助成金と合わせ,研究計画書に従い研究を遂行する本学現有のマイクロCT装置を使用したためコストが低く抑えられたことで当初想定していたよりも下回ったことから,次年度使用額が生じた.翌年度分と請求した助成金とを合わせ,研究計画書に従い研究を遂行する.
NP型問題に対するテストデータ生成手法の研究

本研究では,まず,テストデータ生成問題の理論的な研究に関する枠組を作り上げ,その上で,どのようなNP型問題の,テストデータ生成が難しいのか,あるいはどのような点が難しいのかを明確にした.主要な成果としては,タイル詰め問題TILEとよばれるNP型問題のテストデータを,ある特定の確率分布(これは一様分布に近い)μに従って、生成することが,最も本質的であることをつきとめた.より正確にいうと,もし(TILE,μ)のテストデータ生成ができれば,すべてのNP探索問題とすべての妥当な入力分布に対して,テストデータ生成をすることができることを証明した.以上の成果は論文[1]にまとめられている.こうして得られた理論的な枠組と,技術的な知見のもとに,個々のNP型問題に対するテストデータの生成手法を研究した.具体的には,代表的なNP型問題である,理論式の充足可能性問題(SAT)に対して,テストデータ生成法の原理を考え,その有効性を理論的に示した.さらに,その有効性をワークステーション上の実験により検証した.以上の成果は,現在論文にまとめている最中である.一方,テストデータの生成手法の研究から発展して,その背景である平均時計算量の研究も行なった.その中で,NP探索問題とNP最適化問題の間に,かなりの隔たりがあることがわかってきた.しかも,その違いを,テストデータの生成の難しさの違いによって特徴つけることができた.この成果は以下の論文[2]にまとめられている.本研究では,まず,テストデータ生成問題の理論的な研究に関する枠組を作り上げ,その上で,どのようなNP型問題の,テストデータ生成が難しいのか,あるいはどのような点が難しいのかを明確にした.主要な成果としては,タイル詰め問題TILEとよばれるNP型問題のテストデータを,ある特定の確率分布(これは一様分布に近い)μに従って、生成することが,最も本質的であることをつきとめた.より正確にいうと,もし(TILE,μ)のテストデータ生成ができれば,すべてのNP探索問題とすべての妥当な入力分布に対して,テストデータ生成をすることができることを証明した.以上の成果は論文[1]にまとめられている.こうして得られた理論的な枠組と,技術的な知見のもとに,個々のNP型問題に対するテストデータの生成手法を研究した.具体的には,代表的なNP型問題である,理論式の充足可能性問題(SAT)に対して,テストデータ生成法の原理を考え,その有効性を理論的に示した.さらに,その有効性をワークステーション上の実験により検証した.以上の成果は,現在論文にまとめている最中である.一方,テストデータの生成手法の研究から発展して,その背景である平均時計算量の研究も行なった.その中で,NP探索問題とNP最適化問題の間に,かなりの隔たりがあることがわかってきた.しかも,その違いを,テストデータの生成の難しさの違いによって特徴つけることができた.この成果は以下の論文[2]にまとめられている.テストデータ生成問題の理論的な研究に関する枠組を作り上げ,その上で,どのようなNP型問題の,テストデータ生成が難しいのか,あるいはどのような点が難しいのかを明確にしてきた.主要な成果としては,タイル詰め問題TILEとよばれるNP型問題のテストデータを,ある特定の確率分布(これは一様分布に近い)μに従って,生成することが,最も本質的であることをつきとめた.より正確にいうと,もし(TILE,μ)のテストデータ生成ができれば,すべてのNP探索問題とすべての妥当な入力分布に対して,テストデータ生成をすることができることを証明した.昨年度までの研究で,テストデータ生成問題の理論的な研究に関する枠組を作り上げ,その上で,どのようなNP型問題の,テストデータ生成が難しいのか,あるいはどのような点が難しいのかを明確にしてきた.本年度は,そうした枠組の中で,具体的なNP型問題に対するデータの生成手法を研究した.これに関しては,代表的なNP型問題である.論理式の充足可能性問題(SAT)に対して,テストデータ生成法の原理を考え,その有効性を理論的に示した.さらに,その有効性をワークステーション上の実験により検証した.以上の成果を,現在論文にまとめている最中である.なお,当初予定していた他の問題(例えば,グラフに関する問題)に関しては,導入的な研究しか行なえなかった.一方,テストデータの生成手法の研究から発展して,その背景である平均時計算量の研究も行なった.その中で,NP探索問題とNP最適化問題の間に,かなりの隔たりがあることがわかってきた.しかも,その違いを,テストデータの生成の難しさの違いによって特徴つけることができた.この成果は以下の論文にまとめられている.
アスピリン起因性胃粘膜傷害におけるピロリ菌病原因子の存在意義の解明

LDAの消化管粘膜傷害は内服時の血小板機能ではなく、胃内pH値に依存することが明らかになった。胃内pHが5以上で、pH4以下の時間割合が40%以下への抑制時には、食道粘膜傷害を予防可能であった。また、クロピドグレルとの併用では、H. pylori感染者で特に粘膜傷害程度が高度となることが示唆された。薬物代謝の検討では、LDA内服かつSLCO1B1 (rs4149056)TT型はCアレル保持者と比較して消化性潰瘍のリスクが高く、LDA内服時には、SLCO1B1 (rs4149056)の遺伝子多型を測定することにより、消化管粘膜傷害の高危険群を囲い込みが可能と考えられた。本研究は、胃粘膜内へのHelicobacter pylori(HP)感染における上部消化管疾患(胃潰瘍、十二指腸潰瘍、胃癌など)の多様性を規定する因子の一つとして考えられているレニン-アンジオテンシン(renin-angiotensin, RA)システムの胃粘膜内における生理活性メカニズムを、胃癌細胞株あるいは動物スナネズミモデルにHPを感染させることによって解明することを目的としている。更に、近年増加するNSAIDsや低用量アスピリン(LDA)内服者の消化管粘膜傷害の発症にかかわると考えられるHPの病原因子(cagA, vacA, oipA, dupAなど)の影響についても同時に解明する計画をたてている。その中で、RAシステム阻害薬であるアンジオテンシ変換酵素(ACE)阻害薬とアンジオテンシン受容体拮抗薬(ARB)投与することで、胃粘膜内の抗炎症作用や化学発癌予防効果についても評価し、高齢者社会を迎える中での同薬剤投与による胃癌発癌予防の可能性を探ることも目的として立案された。本研究では、HP非感染スナネズミと感染スナネズミで、RAシステムの各因子の発現が有意に異なり、その発現レベルも感染後の経過により異なることが示された。それは、病理組織学的に胃粘膜内の単核球を含めた炎症細胞浸潤の程度とも明らかに相関をしており、胃粘膜内の炎症性サイトカイン値とも有意に相関していた。また、同時にNSAIDsや低用量アスピリン(LDA)に関連した胃粘膜傷害を引き起こしうる宿主側の因子として考えられる薬理遺伝学的な遺伝的な因子を同定し、最適な予防方法を構築することも調査も行っており、その候補遺伝子としてLDA内服中のSLCO1B1 (rs4149056) TT型が、消化管粘膜傷害の危険を増加させる遺伝子である可能性が示された。今後は、LDA投与中の胃粘膜内での炎症所見や粘膜傷害の程度とHP感染との相関を明らかにするとともに、HP病原因子の影響も検討する予定である。現在、HP病原因子のノックアウト菌の作成を行っており、作製が完成した後より実験を開始予定である。本研究は、胃粘膜内へのHelicobacter pylori(HP)感染における上部消化管疾患の多様性を規定するレニン-アンジオテンシン(RA)システムの胃粘膜内における生理活性メカニズムを、胃癌細胞株あるいは動物スナネズミモデルにHPを感染させることによって解明することを目的の一つとしている。

更に、近年増加するNSAIDsや低用量アスピリン(LDA)内服者の消化管粘膜傷害の発症にかかわると考えられるHPの病原因子の影響についても同時に解明するとともに、実臨床におけるLDAやクロピドグレルなどの抗血栓薬の上部消化管粘膜への影響(食道/胃粘膜傷害)も調査する計画をたてている。その中で、動物モデルには、アンジオテンシン受容体拮抗薬(ARB)投与することで、胃粘膜内の抗炎症作用や化学発癌予防効果があるか否かにについても評価することも目的に立案された。本研究では、HP非感染スナネズミとHP感染スナネズミで、アンジオテンシンII受容体の発現が時間経過とともに有意に異なることが示された。それは、胃粘膜内の単核球を含めた炎症細胞浸潤の程度とも明らかに相関し、胃粘膜内のIL-8を含めた炎症性サイトカイン値とも有意に相関していた。LDAの胃粘膜傷害はHP陰性若年者でも1週間の短期間での内服で約80%の症例で胃粘膜傷害の新規病変を認め、クロピドグレルの併用で消化管粘膜傷害の出現に対して相加作用を認めた。更に、HP陽性者でその影響が顕著となり、食道粘膜傷害も同様の傾向を認めた。消化管粘膜傷害の予防には酸分泌抑制剤によって胃内pHを上げることが重要であることも証明した。同時にNSAIDsやLDAに関連した薬剤性胃粘膜傷害を引き起こしうる宿主側の因子として考えられる薬理遺伝学的な遺伝的な因子を同定し、最適な予防方法を構築することも調査も行い、候補遺伝子としてLDA内服中のSLCO1B1のTT型が、消化管粘膜傷害の危険を増加させる遺伝子である可能性が示した。消化器内科前述のごとく、HP非感染スナネズミと感染スナネズミで、RAシステムの各因子の発現が有意に異なり、その発現レベルも感染後の経過により異なるこ、そして病理組織学的に胃粘膜内の単核球を含めた炎症細胞浸潤の程度とも明らかに相関をしている事を示したが、HP病原因子のノックアウト菌の作成、同菌の培養、LDA投与の用量設定、化学発癌効果が期待できるRAシステム阻害剤の用量設定に難渋をしている。一方、薬剤性粘膜傷害を来しうる宿主側の遺伝子多型の関与を探る検討では、LDA内服者で消化性潰瘍の既往がある症例の場合に、SLCO1B1 (rs4149056) TT型の症例は、LDA(+)/消化性潰瘍(-)と比較し、頻度が高いことが判明した。また、LDA内服かつSLCO1B1 (rs4149056)TT型はCアレル保持者と比較し、3倍以上も消化性潰瘍のリスクが高いことが明らかとなった。このことから、LDA内服時には、SLCO1B1 (rs4149056)の遺伝子多型を測定することにより、消化管粘膜傷害の高危険群を囲い込み、初期治療時より酸分泌抑制薬を投与することで粘膜傷害の発症を予防できる可能性が考えられ、SNPにおける検討は十分な達成度がえられたものと思われる。前述のごとく、HP非感染スナネズミと感染スナネズミで、RAシステムの各因子の発現が有意に異なり、その発現レベルも感染後の経過により異なること、そして病理組織学的に胃粘膜内の単核球を含めた炎症細胞浸潤の程度とも明らかに相関をしている事を示したが、HP病原因子のノックアウト菌の作成、同菌の培養、LDA投与の用量設定、化学発癌効果が期待できるRAシステム阻害剤の用量設定に難渋をしている。現在は実験協力者と協議を行いながら問題点の解決策の模索を行うとともに、今後の実験の方向性について話し合いを続けているところである。LDAを内服させたスナネズミモデルにHP 7.13のwild typeとともに合計4種類のHP