hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
中世後期における上層民家史の研究

わが国の住宅建築のうち、中世における上層民家を研究し、それが発達した場所である中世都市の発達過程を分析する方法を発見した。上層民家に住む地頭や富裕な商工業者は、経営のための接客を行うデイと呼ばれる部屋を必要としたが、それが座敷(和室)に進化したのとは別に、板敷の出居を中心的な部屋とする住宅形式が上層民家の特徴であることが判明した。また、中世都市において町家が発達したが、両者はともに「間」と呼ばれる測定寸法を使用し、「間」は7尺から6尺へ短くなった。このことから、中世に形成された都市街区は、測地尺を分析することで造成時期を推定することが可能であることが判明した。本年度は、研究開始の年に当たるので、PCや関係図書の購入など研究調査環境の整備と、来年度行う現地調査の準備を行った。準備した調査は、1、滋賀県の葛川明王院の政所、2、広島県廿日市市宮島の町家、3、広島県福山市の鞆浦の町家、である。1は中世の在地領主住宅に関係が深い建物であり、2は吹き抜けになったオウエという居室をもつ中世後期の町家の形態を残す町家であることから調査対象とした。3も、宮島門前町と同様に中世後期の民家の様相を残す町家群である可能性があることから、都市史的調査を行い、中世港湾都市部を把握することを今年度の目標とした。1、明王院政所については、村田信夫氏を調査協力者に撰定し、彼を通じて葛川明王院の所有者である延暦寺の副執行に調査許可を申請し、村田氏に事前調査(略平面図の作成と史料所在地の確認)を依頼した。2、宮島の町家調査については、武蔵大学研究所の中尾七重氏を調査協力者に撰定し、放射性炭素測定による建造年代測定の方法について事前打ち合わせを行った。また、古いと推定される町家3件について、廿日市市を通じて資料採取依頼をかけ、調査日程を調整中である。3、鞆の浦の町家調査については、高原健一郎氏を調査協力者に選定し、元禄時代の地割復原図の作成を依頼した。元禄時代の地割が復原されたので、これを基にして来年度の調査範囲を検討中である。今年度は、中世の上層民家に関連する建築遺構として、滋賀県にある葛川明王院(延暦寺所轄)の政所の調査と、オウエをもつ町家の事例として広島県廿日市市の宮島にある町家の調査を行った。葛川明王院の政所は、中世の庄園を管理する政所遺構のうち、現存する貴重な事例であり、その内容と建造年代を調査した。調査には、滋賀県の古建築調査の経験が豊富な村田信夫氏に委託して図面作成、痕跡調査を行い、建造年代を示す史料を捜した。その結果、元禄時代の建物であることが判明し、政所の特徴がいくつか判明した。政所は、中世の上層民家と極めて親近性が高い建造物なので、中世の上層民家を推測する上で貴重な所見を得た。つぎに宮島の町家については、飯田家作業所と田中家住宅の2棟について、部材から計10点の資料を採取し、その放射性炭素量をパレオ・ラボに分析してもらった。その測定結果から各建物の部材伐採年代は一七世紀後半の可能性が高いことが判明した。それをもとにして宮島の他の町家の編年を見直したところ、一七世紀の町家が他にもあることや、一六世紀に遡る可能性がある遺構が一棟あることが判明したので、宮島の町家遺構群から中世における町家の形成過程を推測することが可能である見込みを得ることができた。今年度は委託調査が2件あり、放射性炭素分析の費用が高額であることから、研究の進行は以上にとどまったが、この結果をもとに来年度は中世後期の上層民家史を検討する予定である。本研究は、中世の上層民家を研究するものであり、上層民家とは領主層の住居のことである。既往の研究では、領主層の住宅形式として寝殿造りと書院造りが知られているが、それらは社会的な上層集団がつくりだした住宅様式であり、地頭や富裕層など社会的中位に位置づけられる人々の居住形式は、必ずしもそれらと同じではなかった。そこで、社会的中位に位置し、通常の民家居住者である社会的下位層とは異なる居住形式をとっていたと考えられる人々の居住形式を研究し、もって上位層の住宅様式と下位層の住宅様式の関係をも明らかにすることを目的としている。当初、「デイ」をキーワードにして、接客空間である出居をもつ住居の形式を探ることを目的として、政所建築や書院造りに属さない接客空間の研究を進めた。前者として明王院政所を調査し、後者として吉水神社書院を調査した。双方とも座敷ではなく、デイの形状を良く残す。

一方、富裕層の住宅研究では、町家の成立過程を研究し、安土桃山時代の町家の形状を推定できる資料・遺構を収集したが、その過程で中世の町家の規模と1街区の規模に関係があること、それらに「間」という測地尺の成立過程が関わっていることを発見し、中世からの港湾都市である福山市鞆の浦地区で、街区の測地尺を検討してみたところ、それぞれの街区が造成された時期を測地尺の違いから見分ける手法を発見した。この測地尺による中世都市の分析を次の研究課題にすることにした。.
新規がん遺伝子GRWD1によるp53抑制機構の包括的解析

GRWD1 (glutamate-rich WD40 repeat containing 1)はがん抑制性リボソーム因子RPL11、あるいはRPL23と結合して機能を抑制し、その結果、腫瘍抑制因子p53を抑制し、がん遺伝子として機能する。本研究は、質量分析法によってGRWD1結合が同定されたRPS17およびRPL22に着目している。RPS17およびRPL22はがん抑制性に関与している可能性があるが、その実態は不明である。本研究は、1それらとGRWD1結合の意義やがん抑制活性を持つのかなどを明らかにし、さらには2GRWD1が直接p53の転写活性化能を制御する可能性についても明らかにすることを目的としている。1については、in vitro多段階発がんモデル(HFF2/T/E7/KRAS細胞)において、RPS17あるいはRPL22を発現抑制したところ、RPS17の発現抑制によって大型のコロニー形成が認められた。一方、RPL22の発現抑制ではそのような結果は得られなかった。この結果は、RPS17ががん抑制活性を持つ可能性を示唆している。次に、同細胞をsiRNAで処理し、その後アクチノマイシンD処理によって核小体ストレスを与え、p53とその下流因子であるp21の誘導量を調査した。その結果、RPS17の発現抑制によりp53およびp21が過剰誘導された。つまり、RPS17はp53およびp21非依存的にがん抑制活性を示すことが示唆された。RPS17のがん抑制活性のメカニズムを明らかにするため、結合因子の同定を行った。現在は、同定されたRPS17結合因子候補とRPS17との結合の意義を調査しているところである。2については、GRWD1はp53と直接結合することでp53の転写活性化能を抑制し、発がんを促進することが示唆された。この内容については論文投稿中である。1RPS17のがん抑制活性の検討:RPS17を発現抑制させたHFF2/T/E7/KRAS細胞を軟寒天コロニー形成試験に供した結果から、RPS17はがん抑制活性を持つことが示唆された。別のリボソーム因子RPL11はMDM2の機能抑制を介してp53量を正に制御することでがん抑制的に働く。RPS17についても同様なのかを調べるため、免疫沈降を行ったところ、わずかながらRPS17とMDM2との細胞内結合が認められた。一方、核小体ストレス時に誘導されるp53の安定化は、RPL11の発現抑制によって阻害されたが、RPS17の発現抑制では阻害されなかった。これらの結果から、RPS17はRPL11とは異なり、MDM2-p53経路非依存的ながん抑制活性を有することが示唆された。RPS17によるがん抑制活性の実態を探るため、RPS17に結合する因子を質量分析法により同定し、複数の興味深い因子が同定された。それらの因子との関連については次年度調査する予定である。2RPL22のがん抑制活性の検討:RPL22を発現抑制させたHFF2/T/E7/KRAS細胞を軟寒天コロニー形成試験に供したところ、大型のコロニー形成は認められなかった。一方、RPL22の発現抑制によってRbレベルが低下した。代表的な細胞がん化の経路としては、p53経路のほか、Rb経路が挙げられる。そこで次年度以降は、Rb経路にRPL22が関与する可能性を調査することで、RPL22もがん抑制活性を有するのかを明らかにしたい。3GRWD1によるp53転写活性化能の抑制の検討:GRWD1はp53標的遺伝子のプロモーター上で直接p53と結合することでその転写活性化能を抑制することが示された。本内容は、現在学術雑誌に投稿中である。1RPS17のがん抑制活性の検討:結合因子のうち、がん抑制に関わることが報告されている因子との関わりを調査する。まずは物理的相互作用を調査する。その後、RPS17の発現抑制、あるいは過剰発現が当該因子のレベルや細胞内局在などに与える影響を調査する。さらに、当該因子との結合部位を欠損したRPS17はがん抑制活性が失われるのかを調べるため、in vitro多段階発がんモデルを利用し、軟寒天コロニー形成試験およびヌードマウスにおける腫瘍形成試験を行う。2RPL22のがん抑制活性の検討:ここまでに利用してきたin vitro多段階発がんモデル(HFF2/T/E7/KRAS細胞)を一部改変し、HFF2/T/E6/KRAS細胞に対してRPL22の発現抑制を行い、軟寒天コロニー形成試験を行うことで、RPL22がRb経路に関わることでがん抑制活性を持つのかを調査する。これが達成されたのち、RPS17と同様、RPL22結合因子の網羅的同定を行い、がん抑制活性のメカニズムを明らかにする。

本研究は、1それらとGRWD1結合の意義やがん抑制活性を持つのかなどを明らかにし、さらには2GRWD1が直接p53の転写活性化能を制御する可能性についても明らかにすることを目的としている。1については、in vitro多段階発がんモデル(HFF2/T/E7/KRAS細胞)において、RPS17あるいはRPL22を発現抑制したところ、RPS17の発現抑制によって大型のコロニー形成が認められた。一方、RPL22の発現抑制ではそのような結果は得られなかった。この結果は、RPS17ががん抑制活性を持つ可能性を示唆している。次に、同細胞をsiRNAで処理し、その後アクチノマイシンD処理によって核小体ストレスを与え、p53とその下流因子であるp21の誘導量を調査した。その結果、RPS17の発現抑制によりp53およびp21が過剰誘導された。つまり、RPS17はp53およびp21非依存的にがん抑制活性を示すことが示唆された。RPS17のがん抑制活性のメカニズムを明らかにするため、結合因子の同定を行った。現在は、同定されたRPS17結合因子候補とRPS17との結合の意義を調査しているところである。2については、GRWD1はp53と直接結合することでp53の転写活性化能を抑制し、発がんを促進することが示唆された。この内容については論文投稿中である。1RPS17のがん抑制活性の検討:RPS17を発現抑制させたHFF2/T/E7/KRAS細胞を軟寒天コロニー形成試験に供した結果から、RPS17はがん抑制活性を持つことが示唆された。別のリボソーム因子RPL11はMDM2の機能抑制を介してp53量を正に制御することでがん抑制的に働く。RPS17についても同様なのかを調べるため、免疫沈降を行ったところ、わずかながらRPS17とMDM2との細胞内結合が認められた。一方、核小体ストレス時に誘導されるp53の安定化は、RPL11の発現抑制によって阻害されたが、RPS17の発現抑制では阻害されなかった。これらの結果から、RPS17はRPL11とは異なり、MDM2-p53経路非依存的ながん抑制活性を有することが示唆された。RPS17によるがん抑制活性の実態を探るため、RPS17に結合する因子を質量分析法により同定し、複数の興味深い因子が同定された。それらの因子との関連については次年度調査する予定である。2RPL22のがん抑制活性の検討:RPL22を発現抑制させたHFF2/T/E7/KRAS細胞を軟寒天コロニー形成試験に供したところ、大型のコロニー形成は認められなかった。一方、RPL22の発現抑制によってRbレベルが低下した。代表的な細胞がん化の経路としては、p53経路のほか、Rb経路が挙げられる。そこで次年度以降は、Rb経路にRPL22が関与する可能性を調査することで、RPL22もがん抑制活性を有するのかを明らかにしたい。3GRWD1によるp53転写活性化能の抑制の検討:GRWD1はp53標的遺伝子のプロモーター上で直接p53と結合することでその転写活性化能を抑制することが示された。本内容は、現在学術雑誌に投稿中である。1RPS17のがん抑制活性の検討:結合因子のうち、がん抑制に関わることが報告されている因子との関わりを調査する。まずは物理的相互作用を調査する。その後、RPS17の発現抑制、あるいは過剰発現が当該因子のレベルや細胞内局在などに与える影響を調査する。
タイリング工学：目標図形近似タイルの計算法とその応用

オランダの版画家エッシャーが創始したタイリングアートの二つのスタイルを対象として、天才的ひらめきがなくても創作できるアルゴリズムを開発した。1種類のタイルによるタイリングについては、望みの図形に最も近いタイリング可能図形を探索する研究代表者らの手法を改良し、図形の特徴をよりよく反映する計算法へ性能を高めた。[空と水」風タイリングについては、図地反転に基づく2種類のタイルの交差構造を、3種類のタイルの交差構造へ拡張した。さらに、エッシャーが提案した場所による図地反転を、見る方向による反転へ拡張することによって、タイリングアートの新しいスタイルを開拓した。本研究の目的は,今まで熟練した人の勘に頼って作られてきたタイリングパターンを計算機支援型の設計法に置き換え,タイリングを芸術から工学へ昇華することであった,この目的に沿って次のような研究実績を上げることができた.単一タイルによる平面分割に関しては,1種類の入力図形が与えられ,その図形にできるだけ近い図形によるタイリングを求めるエッシャー化タイリング問題に関して,小泉と杉原の手法に数学的および計算実験による再考察を行い,さらなる改良について検討を行った.提案した手法のひとつに,入力図形を多角形によって近似する際に,多数の近似多角形を考えることで,より良い解を目指す手法がある.ここで,入力図形の近似多角形は無数に存在するが,幾何的な条件による候補の絞り込み,局所探索にもとづく効率的な探索,類似の行列に対する固有値計算の際の計算効率の向上といったアイデアを組み込むことで,計算効率と解の精度の両面で優れた解法を設計した.計算実験によって提案手法を評価したところ,実用的な計算時間で,既存解法と比較してさらに良質のタイリングを生成できることを確認した.図地反転タイリングパターンに関しては,すでに開発済みのエッシャーの「空と水」風のパターンの自動生成法を,グラデーションがなくても図地反転ができるように改良し,多くのタイリング作品を試作した。その一部は,数学分野の商業雑誌の表紙パターンとしても採用されるに至っている.さらに格子パターンの上をタイルが等速直線運動するだけであるにもかかわらず変形しているように見えるという錯視(これの基本パターンは約10年前にAnstisが発見し,フットステップ錯視とよばれている)を,新しい錯視アートの創作へ利用する方法も見つけた.この方法で作った作品「満月のこうもり」は,日本基礎心理学会主催の第3回錯視コンテストで入賞することもできた.本研究の目的は,今まで熟練した人の勘に頼って作られてきたタイリングパターンを計算機支援型の設計法に置き換え,タイリングを芸術から工学へ昇華することであった.この目的に沿って次のような研究実績を上げることができた.入力図形が与えられ,その図形にできるだけ近い図形によるタイリングを求めるエッシャー化タイリング問題に関して,小泉と杉原の手法に数学的および計算実験による再考察を行い,さらなる改良について検討を行った.提案したアイディアに,入力図形を多角形によって近似する際,多数の近似多角形を考えるものと,タイリング可能という制約条件の再考察によるタイリングの質の向上がある.計算実験によって提案手法を評価したところ,実用的な計算時間で,既存解法と比較してさらに良質のタイリングを生成できることを確認した.また,本研究を拡張することで,2種類の入力図形に対するエッシャー化タイリングの生成法も提案した.この研究は,日本オペレーションズ・リサーチ学会の2013年学生論文賞(川出静,2種類の図形によるタイリング生成-図形の接合を用いたアルゴリズムの構築-,指導教員今堀慎治)を受賞した.図地反転タイリングパターンに関しては,開発済みのアルゴリズムを用いてさらに多くの作品を作った.その一部は,本年度も,数学分野の商業月刊誌の表紙画として採用された.格子パターンの上をタイルが等速直線運動するだけであるにもかかわらず変形しているように見えるフットステップ錯視については,平行運動にもかかわらず回転が見えてくるという新種を発見した.これは,5月にフロリダで行われた第9回ベスト錯覚コンテストで1位を獲得した.タイリングアートの制作作業を、だれにでもできる工学技術に昇華させるという目的に沿って、本年度は次のような実績を上げることができた。[1]図地反転タイリングに関しては、エッシャーの「空と水」に代表される2種類のタイルによるタイリングを、3種類のタイルによるものへ拡張する前年度からの作業を継続した。[2]特定の加工を施したタイルとその鏡像をそれぞれグループにして平面上の二つの領域に配置すると、全体が一つの静止図形であるにもかかわらず、二つのグループのタイルが別々の動きをするように見えるという錯視図形の簡易な作り方を、描画ルールとしてまとめた。これは、すでに知られている錯視図形の作り方を、視覚情報を処理する脳の神経細胞に関する知見と照らし合わせて、再整理したものである。[3]二つの方向から見たとき異なる形に見えるという性質を持つ多義立体の例を創作した。従来の図地反転タイリングは、タイルが空間的に変形して図と地が入れ替わるのに対して、この立体を回転させたときに生じる一方から他方への連続な変形の知覚は、図地反転タイリングの時間版とみなすことができる。これは、当初の研究計画では想定していなかった新しいタイリングアートの発展方向であり、その数理的性質を解明し、自動創作アルゴリズムを構成することは、新しい研究課題として浮かび上がった。[4] 1種類の図形によるエッシャー風タイリングに関しては、入力図形の特徴を保持したタイリングを実現するために、点の重みを導入した重み付きエッシャー風タイリングを考案し、これを計算するアルゴリズムを提案した。

[5] 2種類の図形によるエッシャー風タイリングに関しては、タイリングという観点での図形の相性に着目し、相性の良い2つの図形によるタイリングを生成した。「空と水」風タイリングアートの拡張については,エッシャーの本来の作品で採用されている場所による図地反転のほかに,見る方向による反転,時間変化による反転という二つの新しい視覚効果が可能であることを発見し,その作品例を作った.これは,2次元画像には奥行きの情報がないために,二つの方向から見たとき,それぞれ望みの形に見える一つの空間曲線が作れることを利用したものである.その結果,見る方向による反転は,タイリングの後ろに鏡を置いて二つの方向から同時に見るという呈示方法によって実現し,時間変化による反転では,タイルを回転させることによって実現した.入力図形にできるだけ近い図形によるタイリングを求めるエッシャー化タイリング問題に関しては,小泉と杉原の手法に数学的および計算実験による再考察を行い,さらなる改良について検討を行った.従来の手法では,入力図形を多角形によって近似し頂点のずれの二乗和で解の質を評価していたが,この手法に頂点の重みを導入することで,図形の特徴を保存するタイリングを求める問題の提案を行い,効率的なアルゴリズムの開発に成功した.この研究は,日本オペレーションズ・リサーチ学会の2015年学生論文賞(川出静,エッシャー風タイリング自動生成法の改良と応用,指導教員今堀慎治)を受賞した.また,果物の表皮模様に最もよく合う一般化ボロノイ図を当てはめる手法を開発し,タイリングアートを平面から曲面へ拡張するための一つの基礎を作ることができた.さらに,タイリング図形が静止図形であるにもかかわらず,領域ごとにふらふら異なる動きをしているように見えてくる錯視アートについても,強い視覚効果を生み出すタイリングパターンをいくつか発見して,それに基づいて新しい作品例も作った.これにより,新しいタイリングアートの可能性を追求するための基礎作りもできた.オランダの版画家エッシャーが創始したタイリングアートの二つのスタイルを対象として、天才的ひらめきがなくても創作できるアルゴリズムを開発した。1種類のタイルによるタイリングについては、望みの図形に最も近いタイリング可能図形を探索する研究代表者らの手法を改良し、図形の特徴をよりよく反映する計算法へ性能を高めた。[空と水」風タイリングについては、図地反転に基づく2種類のタイルの交差構造を、3種類のタイルの交差構造へ拡張した。さらに、エッシャーが提案した場所による図地反転を、見る方向による反転へ拡張することによって、タイリングアートの新しいスタイルを開拓した。図地反転タイリングアートについて、当初はエッシャーの作品[空と水」に代表される平面に敷き詰めたタイルの変形パターンのみを研究対象としていたが、立体を回転させたとき知覚される形状の時間的変化という新しいクラスも追加することができた。これは、当初の計画時点では予想していなかった新しい研究成果であり、当初の計画以上に進展しているとみなすことができる。
共振器対を用いた半導体レーザの周波数安定化

半導体レーザは小型,軽量,変調が容易である等の点から光通信方式に広く用いられている.しかし,一方僅かな電流や周囲温度の変化で発振周波数が変動し,コヒーレント通信など今後の高度な通信においてはその周波数の安定化が必要である.従来は,周波数基準として一枚のファブリペロ共振器を用いていたが,共振のQの値が低く十分な特性ではなかった.そこでまず最初に,共振周波数の近い二枚のファブリペロ共振器を一組とし共振曲線が交差するようにして一対の共振回路を構成し,共振出力の大きい方を弁別回路で取り出すようにした.この共振曲線の交点を安定化周波数とすることにより,一枚のファブリペロ共振器と比較して6倍ほど高い周波数弁別特性を得る事が出来た.次にこの共振器対を用いて,出力の大きい方をそのまま取り出す尖頭値方式と,出力の極性を反転して取り出す反転方式の2種類の安定化方式について検討した.尖頭値方式では,回路構成は簡単であるが安定化の引き込み範囲が狭い欠点がある.一方,反転方式では回路構成が多少複雑になるが安定化の引き込み範囲が広く実用的であると考えられる.この共振器対を用いて実際に半導体レーザの発振周波数の安定化を行なった.その結果,二枚のエタロンを用いた場合には一枚のエタロンを用いた共振器と比較して,安定化時のアラン分散の平方根が一桁程良好になる結果を得た.また,温度特性,角度特性についても検討したが,実用上はほぼ差し支えない事を確認した.半導体レーザは小型,軽量,変調が容易である等の点から光通信方式に広く用いられている.しかし,一方僅かな電流や周囲温度の変化で発振周波数が変動し,コヒーレント通信など今後の高度な通信においてはその周波数の安定化が必要である.従来は,周波数基準として一枚のファブリペロ共振器を用いていたが,共振のQの値が低く十分な特性ではなかった.そこでまず最初に,共振周波数の近い二枚のファブリペロ共振器を一組とし共振曲線が交差するようにして一対の共振回路を構成し,共振出力の大きい方を弁別回路で取り出すようにした.この共振曲線の交点を安定化周波数とすることにより,一枚のファブリペロ共振器と比較して6倍ほど高い周波数弁別特性を得る事が出来た.次にこの共振器対を用いて,出力の大きい方をそのまま取り出す尖頭値方式と,出力の極性を反転して取り出す反転方式の2種類の安定化方式について検討した.尖頭値方式では,回路構成は簡単であるが安定化の引き込み範囲が狭い欠点がある.一方,反転方式では回路構成が多少複雑になるが安定化の引き込み範囲が広く実用的であると考えられる.この共振器対を用いて実際に半導体レーザの発振周波数の安定化を行なった.その結果,二枚のエタロンを用いた場合には一枚のエタロンを用いた共振器と比較して,安定化時のアラン分散の平方根が一桁程良好になる結果を得た.また,温度特性,角度特性についても検討したが,実用上はほぼ差し支えない事を確認した.半導体レーザは小型,軽量,変調が容易であるなどの点から光通信方式に広く用いられている.しかし,一方僅かな電流や,温度の変化により発振周波数が変動し,コヒーレント通信など今後の高度な通信においてはその発振周波数の安定化が必要となる.現在まで,半導体レーザの発振周波数の安定化の基準としては分子や原子の吸収線を利用した方式が研究されてきたが,分子や原子の吸収線は安定度の点では他のものでは達成できない特長があるが,吸収線の周波数が一定であり任意の周波数に於いて安定化を行うのが困難であった.一方ファブリペロ共振器を用いれば共振器の厚さを調節するか,光の入射角を変えることにより任意の周波数に於いて周波数基準として用いられる。しかし,この場合共振のQの値が分子等の吸収線に比較して低いため安定基準として問題があった.そこで,本研究では2枚のファブリペロ共振器を一組として一対の共振回路を構成し周波数基準とした.その結果,1枚のファブリペロ共振器では達成できないような高い周波数弁別特性を得ることができた.そこで,これを利用して半導体レーザの発振周波数の安定化の基礎実験を行った結果,1枚のファブリペロ共振器に比較して5倍程度の安定度を達成できる見通しを得た.半導体レーザは小型,軽量,変調が容易である等の点から光通信方式に広く用いられている.しかし,一方僅かな電流や周囲温度の変化で発振周波数が変動し,コヒーレント通信など今後の高度な通信においてはその周波数の安定化が必要である.従来は,周波数基準として一枚のファブリペロ共振器を用いていたが,共振のQの値が低く十分な特性ではなかった.そこで昨年度は,二枚のファブリペロ共振器を一組として一対の共振回路を構成し,一枚のファブリペロ共振器と比較して6倍ほど高い周波数弁別特性を得る事が出来た.今年度はこの共振器対を用いて,尖頭値方式と反転方式の2種類の安定化方式について検討した.尖頭値方式では,回路構成は簡単であるが安定化の引き込み範囲が狭い欠点がある.一方,反転方式では回路構成が多少複雑になるが安定化の引き込み範囲が広く実用的であると考えられる.この共振器対を用いて実際に半導体レーザの発振周波数の安定化を行った.

その結果,二枚のエタロンを用いた場合には一枚のエタロンを用いた共振器と比較して,安定化時のアラン分散の平方根が一桁程良好になる結果を得た.また,温度特性,角度特性についても検討したが,実用上はほぼ差し支えない事を確認した.
ナノテクノロジーを駆使したインスリン依存性糖輸送システムの統合的解析

蛍光ナノ粒子Q-dotで標識可能な遺伝子改変型GLUT4 (myc-GLUT4-ECFP)を恒常的に発現する培養脂肪細胞を用いて、Q-dotによりGLUT4分子を標識し、インスリン刺激に依存したGLUT4分子挙動の変化を1分子レベルで正確にとらえ生物物理学的に解析した。共焦点顕微鏡を用いて、GLUT4貯蔵エンドソームからの運搬過程について、インスリンの効果と細胞分化に伴う変化を解析した。【実績1】(1)インスリン刺激がないとGLUT4分子自体が「何らかの未知の機構」によりGLUT4貯蔵エンドソームに抑留されていること。(2)一方インスリン刺激により、活発に挙動するGLUT4分子(およびGLUT4含有小胞)が増加すること(GLUT4分子の抑留からの解放)。(3)そして、これらのGLUT4分子挙動制御系は細胞分化に伴い成熟していくこと(インスリン反応性ナノシステムの細胞分化に伴う成熟)をはじめて明らかにした。全反射顕微鏡をもちいて、GLUT4小胞が最終的に膜融合する過程について、インスリンの効果を解析した。【実績2】インスリンの刺激により、(1)GLUT4小胞の細胞膜への接近の確率が約3.75倍に増加すること、(2)さらに飛来したGLUT4小胞が細胞膜直下(あるいは細胞膜に)停留する時間が数倍に延長されることを明らかにした。これまでとらえることができなかった微細な生命反応(GLUT4分子挙動の制御)を最先端のナノ材料と視覚化技術により高精度で解析することに成功した。そして、インスリン受容体シグナルの作用点として、少なくとも2カ所(GLUT4貯蔵庫からの放出と開口放出前の繋ぎ止め過程)存在することをはじめて明らかにした。インスリン依存性糖取り込み亢進(糖輸送担体GLUT4のトランスロケーション)の過程をナノディバイス(蛍光ナノ粒子Quantum(Q)dotおよびFRETグルコースナノセンサー)を用いて、生細胞(培養脂肪細胞)のリアルタイムイメージングにより正確にとらえ生物物理学的に解析するを目的としている。【計画1】インスリン受容体刺激により誘導されるGLUT4のトランスロケーションの過程を蛍光性ナノ粒子(Qdot)で標識したGLUT4蛋白の挙動を1分子レベルで正確に測定して、生物物理学的に詳細に解析する。【実績1】遺伝子工学的にタグを導入したmyc-GLUT4-ECFPを恒常的に発現する脂肪細胞株(3T3L1)を樹立し、QdotによるGLUT4標識とその挙動解析に成功した。この画期的な独自の方怯論によって、インスリン刺激はGLUT4の分子の(1)運動/静止の比率を顕著に増加させ、(2)運搬経路への移行を促進することをはじめて明らかにした。【計画2】FRETを用いたグルコースナノセンサー(FLIP-glu600□)をGLUT4のC末端に融合させ(GLUT4-FLIP)、実際にGLUT4を介して細胞内へ取り込まれるグルコースの濃度変化を測定し解析する。【実績2】(1)FRET解析に必要な顕微測定系を完成させた。(2)遺伝子工学的にGLUT4-FLIP発現ベクターを作製した。現在、恒常発現系へと発展させており、GLUT4-FLIPを恒常的に発現する脂肪細胞株を作製中である。
心不全治療戦略としての運動療法実用化に向けた総合的研究

高血圧は心不全のリスクファクタである。高血圧の治療戦略として運動療法が有効である。運動療法は一定の治療効果が期待できる一方で、高血圧患者が運動を行う際には、健常人と比較して、過度な循環応答が惹起されるという問題が報告されている。運動時における骨格筋からの感覚情報は循環中枢である延髄弧束核(NTS)に投射される。NTSでの神経活動は-酸化窒素(NO)、NO合成酵素(NOS)によって調節されている。また、NTSにおけるNO動態は病態において活性される活性酸素種(ROS)によって修飾を受ける。そこで、本年度は、高血圧患者に観察される運動に対する過度な循環応答が、NTSにおけるNO、NOS、およびROSによる修飾の変化によって惹起されるという作業仮説を検証することを目的とし、安全な運動療法の開発を目指した。まず、高血圧患者における過度な循環応答が、運動昇圧反射を介した交感神経活動の過剰亢進によって惹起されるという仮説を検証した。除脳した高血圧ラット(SHR)と正常血圧ラット(WKY)を対象に、静的筋収縮した際の血圧応答、および腎臓交感神経活動(RSNA)を記録した。その結果、SHRにおける血圧反応はWKYと比較して有意に高値を示した。また、SHRにおけるRSNAの増大もWKYと比較して高値を示した。次に、RSNAを介した過剰な循環応答が、NTSにおけるROSによって調節されているという仮説を検証した。下腿三頭筋へのカプサイシン局所投与に対する血圧応答に及ぼすROS除去剤tempolのNTSへの微量投与の影響を検討した。その結果、SHRにおいて、tempol投与後における血圧応答は減弱した。この結果は、高血圧患者に観察される過剰な循環応答に、NTSにおけるROSが関与している可能性を示唆する。
神経・内分泌・免疫軸を利用した慢性関節リウマチの新しい治療戦略

慢性関節リウマチ(Rheumatoid arthritis ; RA)の病態形成には免疫系のみならず、神経系、内分泌系も関与する。本研究ではRAの関節病変局所における神経ペプチドであるオピオイドペプチド(エンドルフィン、エンケファリン)、下垂体ホルモンのプロラクチンの役割を検討した。オピオイドペプチドに対してRA滑膜細胞株はμおよびδ鎖受容体を発現しており、その作用を受けることで、細胞内の転写因子cyclic AMP responsiveelement(CREB)の活性化の阻害して、RA滑膜細胞株の増殖能、IL-1、TNF-α、IL-6、IL-8などの炎症性サイトカイン、matrix metalloproteinase(MMP)sの産生を抑制作用を示すことが明らかになった。実際、CREBは病変局所のRA滑膜細胞はCREBを強く発現し、cAMP経路阻害剤Rp-cAMPによりやは増殖能やサイトカイン産生能の抑制を受ける。さらに、オピオイドおよびソマトスタチンの作用点はCREBの核内移行の阻害にあることが判明した。また、従来より神経・内分泌・免疫系に影響を与えることが知られているニコチンはオピオイドおよびソマトスタチン産生増強作用を持ち、RA滑膜細胞の異常増殖を抑制した。プロラクチンは病態を形成する滑膜細胞の異常活性化に関与するが、細胞内伝達経路としてJAK2-STAT5系に作用することが明らかになった。以上のように本研究により、神経ペプチドあるいはその化学的修飾物質、拮抗薬はRA滑膜炎症を抑制する薬剤として応用できる可能性がある。また、その作用点である細胞内刺激伝達経路の解析から、CREB、JAK2-STAT5経路が治療標的として有望であることが明らかになった。慢性関節リウマチ(rheumatoid arthritis;RA)の病態形成には免疫系のみならず、神経系、内分泌系も関与している。本研究ではRA関節病変局所における神経ペプチド、ホルモンの役割を検討した。まず、RA患者由来滑膜細胞におけるオピオイド受容体をRT-PCR法、放射線ラベルペプチドを用いた結合アッセイにより解析し、μおよびδ鎖受容体を発現することを見いだした。さらに、in vitroでエンケファリン、エンドロフィンは滑膜細胞株によるIL-1β、TNF-αなどの炎症性サイトカイン、metallomatrix proteinase(MMP)-9の産生を抑制した。このエンケファリン、エンドロフィンの作用はμ鎖受容体特異的阻害作用を持つナロキサンにより解除された。さらにこのオピオイドの作用には滑膜細胞内のcyclic AMP responsiveelement(CREB)の活性化阻害が関与していた。研究代表者らは先に滑膜細胞の細胞内刺激伝達系の解析から、TNF-α、MMPの産生機序にCREBの活性化が関与していることを報告し、その阻害剤が滑膜細胞の機能是正、ひいてはRA病態の改善を導き、新しい治療薬となる可能性を指摘した。この観点からオピオイドの抗炎症作用を中枢性作用と解離させることができれば、新たなRAの治療薬として期待できる。研究分担者(永渕)らは先にプロラクチンが滑膜細胞の活性化に働くことを示したが、本年度の研究により、その細胞内刺激伝達にはJAK2-STAT5が作用することを明らかにし、現在、この経路の治療標的としての妥当性を検討中である。本研究ではRAの関節病変局所における神経ペプチドの役割を検討した。昨年度、神経ペプチドのひとつであるオピオイドペプチド(エンドルフィン、エンケファリン)が転写因子cyclic AMP responsiveelement (CREB)の活性化を阻害することにより、RA滑膜細胞の増殖能、IL-1、TNF-α、L-6、IL-8などの炎症性サイトカイン、matrix metalloproteinase (MMP)sの産生を抑制することを報告した。

今年度、RA滑膜細胞のCREBの活性化と神経ペプチドの関連に焦点をあてて解析した。抗CREB抗体を用いた免疫組織染色によりRA患者関節病変の滑膜表層および表層下の細胞はCREBを強く発現していることが明らかになり、cAMP経路阻害剤Rp-cAMPが滑膜細胞のIL-6、IL-8、MMP-1の産生を抑制するという事実からもCREBがRA滑膜炎症に重要な転写因子であることが判明した。実際、オピオイドペプチドやソマトスタチンはRA滑膜細胞におけるCREBの核内移行の阻害することで、滑膜細胞の異常増殖、過剰なサイトカイン産生を抑制した。一方、神経ペプチドの産生、機能に修飾を及ぼすことが知られているニコチンは滑膜細胞によるオピオイドペプチドおよびソマトスタチの産生を増強し、RA滑膜細胞の異常増殖を抑制した。本研究の成績は、(1)RA滑膜炎症におけるCREBの位置付けを明らかにしたこと、(2)その機能阻害作用を持っオピオイドやソマトスタチンなどの神経ペプチドがRA滑膜炎症を是正しうること、(3)上記の神経ペプチドそのものあるいはその機能を制御するニコチンのような物質が新しい抗リウマチ薬として可能性があることを示唆している。
アングロ=ノルマン王国の統合と貴族社会の動向

日本学術振興会特別研究員最終年度にあたる今年度は、前半にこれまで収集解読してきた資料を利用し、また、総括としてこの3年間に行った研究を論文としてまとめ発表する作業を中心に行った。まず、研究課題として設定したアングロ=ノルマン貴族家系の行動指針とアングロ=ノルマン王国の構造を関連づけた研究については、ルマル家を対象とした論考を、京都大学人文科学研究所の論文集用に提出しており、現在編集作業中である。また、補足研究として、アングロ=ノルマン王国の研究史をまとめ、その問題点を考察する作業を行っている。また、この中心課題と密接に関連した研究対象である中世ヨーロッパの証書資料に関する研究は、アングロ=ノルマン王国の草創期であるウィリアム征服王時代証書における偽文書についての論考を西欧中世史研究会論文集に発表しており、現在編集中となっている。さらに、アングロ=ノルマン俗人貴族と証書との関係について研究した成果は、2002年7月にリーズ大学(イングランド)で行われた国際中世学会において発表された。さらに学会発表のために渡英する際、科学研究費補助金を利用し、イギリスとフランスで資料収集作業を行うことができた。この成果は、2002年12月、熊本大学教育学部紀要に英語論文として掲載された。その後、12世紀末に書かれたバトル修道院年代記を対象に具体的に証書史料がどのように利用されているかを研究した成果は、「史林」誌に掲載予定である。
一次元有機金属錯体における光伝導性の制御

擬一次元ハロゲン架橋金属錯体の中で,格子変形を起こさないNi錯体({Ni(chxn)_2Br}Br_2)について、良質な単結晶を作製し、光伝導度の温度変化および電場依存性を詳しく測定した.光伝導度は,電場にたいして線形な領域では,活性化エネルギー約0.1eVの熱活性化型で変化する.この結果を,光によって生成される格子緩和励起状態に固有の吸収(光誘起吸収)の温度変化と比較することによって,光キャリアが荷電ソリトンであり,それらが一次元鎖上をホッピング的に運動していることを明らかにした.また、100K以下の低温では、光キャリアの運動はホッピングからトンネリングに変化することがわかった.さらに、二分子的再結合モデルによって結果を定量的に解析することにより,ポーラロンおよび荷電ソリトンの生成効率を評価した.両者の生成効率は,励起エネルギーに依存する.ギャップ付近のエネルギーで励起した場合,キャリアは生成しないが,2eV付近より高エネルギー側で両者の生成効率は上昇する.このような励起エネルギー依存性は,この種の錯体に特有の大きな励起子効果(電子間相互作用)を起因している.以上のような光キャリアの挙動は、この種の一次元系ではじめて見いだされたものである.ハロゲンをBroらC1に変化させた錯体({Ni(chxn)_2Cl}Cl_2)についても光伝導および光誘起吸収の測定を行ったところ同様な傾向を示す結果が得られた.C1錯体では、光伝導の活性化エネルギーがBr錯体に比べ約2倍程度に増加した.これは、C1錯体において電子格子相互作用が増加することに起因している.擬一次元ハロゲン架橋金属錯体の中で,格子変形を起こさないNi錯体({Ni(chxn)_2Br}Br_2)について、良質な単結晶を作製し、光伝導度の温度変化および電場依存性を詳しく測定した.光伝導度は,電場にたいして線形な領域では,活性化エネルギー約0.1eVの熱活性化型で変化する.この結果を,光によって生成される格子緩和励起状態に固有の吸収(光誘起吸収)の温度変化と比較することによって,光キャリアが荷電ソリトンであり,それらが一次元鎖上をホッピング的に運動していることを明らかにした.また、100K以下の低温では、光キャリアの運動はホッピングからトンネリングに変化することがわかった.さらに、二分子的再結合モデルによって結果を定量的に解析することにより,ポーラロンおよび荷電ソリトンの生成効率を評価した.両者の生成効率は,励起エネルギーに依存する.ギャップ付近のエネルギーで励起した場合,キャリアは生成しないが,2eV付近より高エネルギー側で両者の生成効率は上昇する.このような励起エネルギー依存性は,この種の錯体に特有の大きな励起子効果(電子間相互作用)を起因している.以上のような光キャリアの挙動は、この種の一次元系ではじめて見いだされたものである.ハロゲンをBroらC1に変化させた錯体({Ni(chxn)_2Cl}Cl_2)についても光伝導および光誘起吸収の測定を行ったところ同様な傾向を示す結果が得られた.C1錯体では、光伝導の活性化エネルギーがBr錯体に比べ約2倍程度に増加した.これは、C1錯体において電子格子相互作用が増加することに起因している.
次世代進化・適応システムの基盤研究

1.進化計算に関する研究成果(1)非線形性・悪スケール性・多峰性をもった関数最適化問題に対してロバストな実数値GAとして,外挿的交叉EDX,交叉的突然変異ANSを提案した.(2)探索空間に大きな谷が複数存在して各谷に有力な局所解が存在する大域的多峰性下でGAが探索に失敗する現象を説明するUV構造仮説を提唱し,UV現象を回避する世代交代モデルISMを提案した.(3)稜構造に代表される悪スケール構造の一般化であるk-tablet構造に対応できる交叉LUNDX-mを提案した.(4)クラスタリング手法をベースにk-tablet構造を同定する方法を提案した.2.強化学習に関する研究成果(1)マルチエージェント強化学習における報酬共有の合理性について理論的に考察し,不合理な挙動を回避するための条件を明らかにした.(2)多数の行動を扱う強化学習の性能向上を図るために,確率的2分木の行動選択を用いたActor-Criticアルゴリズムを提案した.(3)actorの行動選択に正規分布を用いるアルゴリズムを提案し,8次元連続状態・連続行動の4足ロボットの歩行動作獲得問題に適用して,適切な歩行を効率よく学習できることを示した.(4)多段フローシステムを分散強化学習の枠組みで定式化したとき直面する2種類のトレードオフ(利己と利他,制約と性能)を適応的に調整する共有意思決定を提案した.1.進化計算に関する研究成果(1)非線形性・悪スケール性・多峰性をもった関数最適化問題に対してロバストな実数値GAとして,外挿的交叉EDX,交叉的突然変異ANSを提案した.(2)探索空間に大きな谷が複数存在して各谷に有力な局所解が存在する大域的多峰性下でGAが探索に失敗する現象を説明するUV構造仮説を提唱し,UV現象を回避する世代交代モデルISMを提案した.(3)稜構造に代表される悪スケール構造の一般化であるk-tablet構造に対応できる交叉LUNDX-mを提案した.(4)クラスタリング手法をベースにk-tablet構造を同定する方法を提案した.2.強化学習に関する研究成果(1)マルチエージェント強化学習における報酬共有の合理性について理論的に考察し,不合理な挙動を回避するための条件を明らかにした.(2)多数の行動を扱う強化学習の性能向上を図るために,確率的2分木の行動選択を用いたActor-Criticアルゴリズムを提案した.(3)actorの行動選択に正規分布を用いるアルゴリズムを提案し,8次元連続状態・連続行動の4足ロボットの歩行動作獲得問題に適用して,適切な歩行を効率よく学習できることを示した.(4)多段フローシステムを分散強化学習の枠組みで定式化したとき直面する2種類のトレードオフ(利己と利他,制約と性能)を適応的に調整する共有意思決定を提案した.今年度は以下の研究実績を得た。1.進化計算に関する研究成果・GAを用いて多目的最適化問題のパレート最適解集合を求める方法についての理論的考察を行い、従来手法が破綻する原因を解明するとともに、これを克服する新たな解法を提案し、その有効性を検証した。・並列二重倒立振子の振り上げ安定化問題について、ニューラルネットの重みを実数値GA(UNDX)によって最適化することにより、知識やモデルを利用することなく、振り上げ安定化の自動制御に成功した。・航空機スケジューリングの代表問題であるFlight Scheduling、Crew Paring、Crew Rosteringについて、GAによる実用的な解法を構築し、現場で使えるほどの性能を確認した。・X線回折から得られる電子密度マップからタンパク質の3次元構造を自動的に決定するGAべ一スの手法を構築し、実用化につながる大きな成果を得た。2.強化学習に関する研究成果・従来の強化学習理論の多くは割引期待報酬を前提としてきたが、金融工学などリスク回避が問題への適用を考慮して、報酬のばらつきを考慮した強化学習の理論と手法を提案した。・マルチエージェント強化学習における報酬共有の合理性について、理論的に考察し、不合理な挙動を回避するための条件を明らかにした。・多数の行動を扱う強化学習の性能向上を図るために、確率的2分木の行動選択を用いたActor-Criticアルゴリズムを提案し、その効果を確認した。・4足歩行ロボット及び環状ロボットの前進動作をモデルなし、知識なしのゼロベースから強化学習だけで実時間で獲得することが可能であることを示した。・非線形性・時間遅れを伴う上下水道系の制御問題をマルチエージェント強化学習によって定式化し、従来手法を凌駕する性能を示すことを確認した。(1)進化計算に関する研究成果・大域的多峰性を考慮した世代交代モデルの提案:探索空間に大きな谷が複数存在して各谷に有力な局所解が存在する大域的多峰性下でGA (Genetic Algorithms)が探索に失敗する現象を説明するUV構造仮説を提唱した。さらに、UV現象を回避する世代交代モデルISM (Innately Split Model)を提案した。・高次元k-tablet構造を考慮した隠れ変数上の交叉LUNDX-mの提案:稜構造に代表される悪スケール構造の一般化であるk-tablet構造の下では従来の実数値GAの交叉による探索効率が悪化することを指摘し、k-tablet構造に対応できる交叉LUNDX-mを提案してベンチマーク問題でその有効性を確認した。・実数値

GAにおける景観分析法とレンズ系設計問題への適用:クラスタリング手法によりサンプル集合を谷ごとに分類、各谷のサンプル集合に対して主成分分析を行い、主成分ごとの寄与率の差異を分析することによりk-tablet構造を同定する方法を提案し、レンズ系設計問題の景観の複雑さを解明した。(2)強化学習に関する研究成果・強化学習による4足ロボットの歩行動作獲得:actorの行動選択に正規分布を用いるactor-criticの問題点を回避するアルゴリズムを提案し、8次元連続状態・連続行動の4足ロボットの歩行動作獲得問題に適用して、適切な歩行を効率よく学習できることを示した。・共有意思決定による協調型分散強化学習とその応用:多段フローシステムを分散強化学習の枠組みで定式化したとき直面する2種類のトレードオフ(利己と利他、制約と性能)を適応的に調整する新しいメカニズムとして共有意思決定を提案し、下水道制御への適用により有効性を確認した。・罰回避政策形成アルゴリズムの拡張とゲームヘの応用:最適性の代わりに、合理性を保証する強化学習の枠組みである罰回避政策形成アルゴリズムの性能を向上させることを目的に、緩和された罰概念に基づく改良版を提案し、オセロゲームで有効性を確認した。(1)進化計算に関する研究成果・GAによる大域的最適化:探索空間に大きな谷が複数存在する複雑な適応度景観の下でGAが探索に失敗する現象を説明するために前年度提唱したUV構造仮説を前提に適応度景観を分析した結果を探索に反映させることにより、大域的最適解を効率良く見出す手法を提案し、ベンチマークにより有効性を確認した。・交叉UNDXを用いたノンパラメトリックEM法:交叉を確率分布推定器として利用する観点に着目し、実数値GAの交叉UNDX-mをカーネル関数として利用したカーネル密度推定法とEM法を融合したノンパラメトリックEM法を提案し、文字認識問題への適用を通じて、高次元モデル推定問題において優れた推定能力を持つことを示した。・実数値GAの実問題への適用:本研究課題を通じて確立された実数値GAの有用性を検証するとともに、実問題で自動化が要請されていた一般の化学物質の粉末結晶及び蛋白質の単結晶に対するX線回折データから化学物質及び蛋白質の3次元構造への適用を試み、実用化に向けて重要な手がかりが得られた。(2)強化学習に関する研究成果・最適行動変化に追従できる実時間強化学習:実ロボットの学習では環境およびロボット自身の動特性が時間的に変化してしまう状況に直面する。この問題に対処するために、重み付けされた複数の正規分布を用いた政策表現を導入して最適行動変化に追従できる実時間強化学習を提案し、環状ロボットへの適用によりその有効性を示した。・α-domination戦略に基づく分散強化学習:多段フローシステムを分散強化学習の枠組みで定式化したとき直面する2種類のトレードオフ(利己と利他、制約と性能)を適応的に調整する新しいメカニズムとしてα-domination戦略に基づく分散強化学習を提案し、下水道制御への適用によりその有効性を確認した。・Profit Sharingの不完全知覚環境下への拡張:経験強化型強化学習のProfit Sharingの合理性定理の新たな解釈と拡張により、不完全知覚環境下で合理性を保証する政策を効率良く学習するアルゴリズムPS-r^*を
イヌから新しく検出したカリキウイルスのウイルス学的基礎研究

1.前年度にひき続き、獣医病院からの臨床検体を細胞培養法にてウイルス検索を試みたが、新たなウイルス株の収集はならなかった。2.マウスとモルモットで分離株No.48に対する高度免疫血清を作製し、ウイルス検出用ELISA法を開発し、基礎条件を設定後、野外イヌ下痢症例に応用を試みた。226例を検査したところ、34.2%をO.D.値が陽性(0.115)を示したが、細胞培養法によるウイルス再分離では陰性であった。3.このELISAを用いてネコカリシウイルス株との抗原性交差性を検討したところ、検査したネコカリシウイルス株はいずれも反応せず、イヌ分離株No.48とは抗原的関連性がないものと推察された。4.マウスを用いてウイルスに対するモノクローナル抗体作製を試みたところ、現在3クローンを得ているが、いずれも中和活性を有していなかった。さらに、作製進行中である。5.健康な子犬2頭を用いて病原性の再検討を試みたが、野外発症例の様な病状は再現できなかった。一頭の糞便中に僅かにウイルスが排泄されていることが確認された。6.ネコカリシウイルスとの比較、ならびにウイルス株の病原性相違のメカニズムを明らかにするために、現在、カプシド遺伝子のクローニングと遺伝子配列の決定を行っている。現在は、手を広げて研究をしていることろであるが、平成4年度の研究経過の主だったところは下記の6点である。1.1992年末までに国内数ケ所の家畜病院から依頼された約400症例についてイヌカリキウイルスの検出を試みたがoriginal分離症例1例(No.48株)以外の陽性例は見られていない。2.1例からネコカリキウイルスと共通抗原性を有するウイルスが検出された。このウイルス(Sapporo/283株)はUSA以外では初めての検出であるが、我々のin vitro分類法では呼吸器系のカリキウイルスと分類された。ネコからの種間伝播の可能性が示唆された。3.イヌカリキウイルスNo.48株はイヌに不顕性感染すると考えられ、病原性は弱いと推定される。4.糞便内ウイルス検出のためのELISA法を確立するために、モノクローナル抗体の作出を試みたが、適切な抗体は得られなかった。現在、再作出を行なっている。これは現在計画中のウイルスゲノム解析にも有用である。この目的のためのELISA法はpolyclonal血清を用いて、検討中である。5.イヌカリキウイルスNo.48株にはヒトのカリキウイルス株とNorwalkウイルス抗血清に対する反応性(ELISA)は認められなかった。6.抗イヌカリキウイルスNo.48株中和活性が5.5%(1:8-1:64倍)のヒト血中に検出された。特異性は検討中である。これからの予定として、イヌカリキウイルスとネコカリキウイルスのモノクローナル抗体による抗原性の比較解析と、ウイルスゲノムの比較解析を考えている。2.マウスとモルモツトで分離株No.48に対する高度免疫血清を作製し、ウイルス検出用ELISA法を開発し、基礎条件を設定後、野外イヌ下痢症例に応用を試みた。226例を検査したところ、34.2%のO.D.値が陽性(0.115)を示したが、細胞培養法によるウイルス再分離では陰性であった。4.マウスを用いてウイルスに対するモノクローナル抗体作製を試みたところ、現在3クローンを得ているが、いずれも中和活性を有していなかつた。

6.ネコカリシウイルスとの比較、ならびにウイルス株の病原性相違のメカニズムを明らかにするために、現在、カプシド遺伝子のクローニングと遺伝子配列の決定を行っている。