hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
談話の構造的・文体的特徴の分析に基づく供述調書の信用性鑑定手法の開発

法廷証言者の逐語的な発話データにおける証言特性分析のインデックスとしての「動作主行為単位」が、供述調書など証言者本人の発話が他者(取調官など)によって整理、要約されたデータの分析においっても基本的な分析装置として機能することを、いくつかの供述資料の実践的分析によって明らかにした。つづいて、この知見の実用性を検討するために、大橋靖史(淑徳大学)と共同で都内で発生した強盗未遂事件における2名の被疑者および2名の目撃証言者の供述を分析し、鑑定書として裁判所に提出した。つづいて、ここまでの実証的研究の成果に基づいて、談話の構造的、文体的特徴の分析に基づく供述調書の信用性鑑定手法の理論的側面の強化を試みた。具体的には現事象に直接的なアクセスが可能な状態における記憶、想起研究を可能にするためのコミュニケーションモデルに関して理論的研究をおこなった。その結果、体験記憶をめぐる談話の分析に際して用いられるコミュニケーションの基本的なモデルを情報伝達ないしは表象の共同構築・共有という枠組みで構成するのではなく、話者間の縮減不可能な差異を基盤にコミュニケーションを把握するM.M.Baktinの「対話理論」を援用して構成する必要があることが判明した。この成果の一部は“Joint Forgetting of Personal Experience in Japanese Courtroom"という題目でデンマーク、オーフス大学で7月に開催されたFourth Congress of the International Society for Cultural Research and ActivityTheoryにて報告された。また10月に開催された日本心理学会第62回大会においても「供述心理学の視点(1):「原事象へのアクセス不可能性」を前提として想起研究」という題目で報告された。[予備的分析]福井で発生した女子中学生殺人事件に関して、弁護士が事件関係者に事件当日の状況についてインタビューを行った録音テープを入手し、それを逐語的データベース(カード型データベースソフトを利用)化し、分析をすすめた。その結果、過去の想起を中心とした会話における誘導の有無の鑑定を行う際、「誘導的発話」と「誘導の効果」を区別して分析することが効果的であることが明らかになった。また、誘導的発話を「強要」「直接的誘導」「間接的誘導」に区分する必要も明らかになった。こうした分析基準を設定することによって、聞き手による露骨な誘導的発話があった場合でも実際的な誘導の効果がみられないケース(実質的に誘導の存在しないケース)を容易に発見することが可能になった。[海外研究者からの意見(助言)聴取][国内研究者・法曹関係者からの意見(助言)聴取]1997年11月14日に開催された目撃証言研究会で上記福井での事件に関する分析について報告し、弁護士、心理学者から助言をうけた。
肺癌組織および末梢血中のEGFR変異存在比とEGFR阻害剤治療効果との関連性検討

平成27年度は非小細胞肺癌の組織検体、および末梢血検体での超高感度EGFR遺伝子変異測定系の構築を行った。この結果はEGFR遺伝子変異の定量化をより低侵襲な検査で実現する上で意義のあることであり、今後のEGFR遺伝子変異を含めた体細胞遺伝子変異を含めた体細胞遺伝子変異のクローン/サブクローンの優越性による薬剤の効果を評価してゆくために重要である。平成28年年度は非小細胞肺癌の組織検体より次世代シークエンサーでの体細胞遺伝子変異を評価した。その結果は、今後の末梢血からの網羅的遺伝子異常の解析を実現する上で意義のあるデータとなると考えられる。また、バイオインフォマティクスにもとづいた手法を用いて腫瘍のサブクローナリティーによるEGFRチロシンキナーゼ阻害剤などの治療法の効果を評価してゆく。平成29年度は活性型EGFR遺伝子変異とその耐性遺伝子(T790M)の評価に加え、新規耐性遺伝子(C797S等)への対応が必要と判断し、新規耐性遺伝子の細胞株を樹立しその後、測定系の構築を進めてゆく。平成30年度は耐性症例で見つかった新たな遺伝子変異について、培養細胞株を用いた分子生物学的検討を行い、その変異のEGFR-TKI耐性化への関与について検討する。また、関与が確認された場合は、その耐性機序を克服するための併用療法について検討を行う。平成27年度の研究計画において組織検体、および末梢血検体での超高感度EGFR遺伝子変異測定系の構築を予定した。当院で進行・再発の非小細胞肺癌と診断され、組織または細胞診でEGFR遺伝子変異陽性が確認された患者を対象として、2013年10月から2014年3月の間にEGFR-TKI治療前あるいは治療後に末梢血検体を採取し、QuantStudioTM 3D Digital PCR Systemを用いたEGFR遺伝子変異測定系を構築し、組織検体中と末梢血検体中のEGFR遺伝子変異の感度・特異度につき評価した。対象遺伝子は、EGFR遺伝子変異であるエクソン21のL858R、エクソン20のT790M、エクソン19欠失の3つとした。検出感度検定については、Horizon社のヒトゲノムをreferenceとして使用し、ターゲット遺伝子を野生型のEGFR遺伝子を用いて50%, 10%, 5%, 1%, 0.5%, 0.1%, 0.05%, 0.01%へ希釈し検定を行い、カットオフは野生型で検出された平均値+3SDとした。実測の変異頻度と予測変異頻度の間には強い相関を認め、検出感度0.1%までは安定的に検出できると考えられた。組織検体中の結果を真の結果とした際の血漿中エクソン19欠失とエクソン21のL858Rの感度/特異度はそれぞれ70.6%/93.3%, 66.7%/100%であった。この結果はEGFR遺伝子変異の定量化をより低侵襲な検査で実現する上で意義のあることであり、今後のEGFR遺伝子変異陽性肺がんの治療経過における末梢血中のEGFR遺伝子変異の経時的にモニタリング、EGFR遺伝子変異クローン/サブクローンの優勢性によるEGFRチロシンキナーゼ阻害剤の治療効果の層別化とそのカットオフ値を評価してゆくために重要であると考えられる。平成27年度に計画していた内容はおおむね順調に進展していると考えられる。本年度の研究実績をまとめ、英文誌(Journal of molecular diagnostics)に投稿中である。この結果はEGFR遺伝子変異の定量化をより低侵襲な検査で実現する上で意義のあることであり、今後のEGFR遺伝子変異を含めた体細胞遺伝子変異のクローン/サブクローンの優越性による薬剤効果を評価してゆくために重要である。平成28年度は非小細胞肺癌の組織検体より次世代シークエンサーでの体細胞遺伝子変異を評価した。平成27年度に計画していた内容の研究実績は平成28年度に英文誌(Lung Cancer)に掲載された。平成28年度に計画した内容も、研究実績をまとめ国際学会での発表を予定している。

平成29年度は活性型EGFR遺伝子変異とその耐性遺伝子(T790M)の評価に加え、新規耐性遺伝子(C797S等)への対応が必要と判断し、新規耐性遺伝子の細胞株を樹立しその後、測定系の構築を進めてゆく。平成27年度に計画していた内容の研究実績は平成28年度に英文誌(Lung Cancer)に掲載された。平成28年度に計画した内容も、研究実績をまとめ国際学会での発表を予定している。平成29年度に計画した内容に関しては、現在細胞株樹立中であり、今後の学会発表や論文化を予定している。平成27年度は非小細胞肺癌の組織検体、および末梢血検体での超高感度EGFR遺伝子変異測定系の構築を行った。この結果はEGFR遺伝子変異の定量化をより低侵襲な検査で実現する上で意義のあることであり、今後のEGFR遺伝子変異を含めた体細胞遺伝子変異を含めた体細胞遺伝子変異のクローン/サブクローンの優越性による薬剤の効果を評価してゆくために重要である。平成28年年度は非小細胞肺癌の組織検体より次世代シークエンサーでの体細胞遺伝子変異を評価した。その結果は、今後の末梢血からの網羅的遺伝子異常の解析を実現する上で意義のあるデータとなると考えられる。また、バイオインフォマティクスにもとづいた手法を用いて腫瘍のサブクローナリティーによるEGFRチロシンキナーゼ阻害剤などの治療法の効果を評価してゆく。平成30年度は耐性症例で見つかった新たな遺伝子変異について、培養細胞株を用いた分子生物学的検討を行い、その変異のEGFR-TKI耐性化への関与について検討する。また、関与が確認された場合は、その耐性機序を克服するための併用療法について検討を行う。デジタルPCRによる末梢血中のEGFR遺伝子変異の定量、並びにEGFR遺伝子変異のclonalityの評価もすすめてゆく予定である。デジタルPCRによる末梢血中のEGFR遺伝子変異の定量、ならびにEGFR遺伝子変異を含めた体細胞遺伝子変異の多様性(サブクローナリティー)の評価もすすめてゆく予定である。EGFR遺伝子変異陽性非小細胞肺癌の治療戦略の変化に対応し、活性化EGFR遺伝子変異のみならず、耐性遺伝子(T790M)や新規耐性遺伝子(C797S等)の末梢血検体での測定系を構築し、デジタルPCRによる遺伝子変異を定量化し遺伝子変異の多様性(サブクローナリティー)の程度によるEGFR阻害剤の効果の層別化の評価を予定している。平成27年度の研究計画でデジタルPCRによるEGFR遺伝子変異測定系の構築を行った。当初は末梢血中EGFR遺伝子変異の検出が困難であることも予想されたが、QuantStudioTM 3D Digital PCR Systemを用いた末梢血中EGFR遺伝子変異検出の感度・特異度は他のデジタルPCRの測定系と比較しても同様な結果であった。そのため、末梢血循環遊離DNAでのEGFR遺伝子変異検出が困難な場合に予定していた末梢血中エキソソーム由来のcfDNAの解析を現時点では行っていないために次年度使用額が生じたと考えられる。当初予定した末梢血循環遊離DNAでのEGFR遺伝子変異検出が困難な場合に予定していた末梢血中エキソソーム由来の遺伝子解析を現時点では行っていないために次年度使用額が生じたためと考えられる。当初予定していた末梢血中エキソソーム
近世ドイツにおける信仰統一化と臣民形成

報告者は、本研究課題につき昨年度までに以下のことを明らかにした。ひとつは、為政者が都市部の臣民の主体性や価値観を十分に取り入れた上で、市政や教区の運営を行い、領邦国家形成に努力していた点である。もう一つは、農村部について教区聖職者の人的繋がりを分析した結果、彼らが領邦君主よりもむしろ地方貴族と強い結びつきをもち、領邦君主主導の領邦国家形成に障害が存在した点である。本年度はこうした結果を踏まえて、農村部における領邦君主ー地方貴族ー教区聖職者の関係を整理しようとしたが、史料上の制約もあり、都市部と農村部の中間に位置する小都市の検討をすることにした。ブランデンブルク選定侯領には、小都市として選定侯が当初から領主であった直属都市、ある時点で選定侯が領主となった都市、地方貴族が領主でありつづけた非直属都市がある。未だ検討中なので最終的な結論ではないが、それぞれにおけて領邦君主ー地方貴族ー都市住民の関係は一様ではないものの、地方貴族・市参事会と住民が対立する中で、領邦君主が住民寄りの仲裁者として登場し、影響力を行使していることが確認できた。各まとまりにおいて、君主と教区聖職者、教区聖職者と臣民との関係が再度検討を要する課題として残されていると考える。また当領邦では、17世紀以降領邦君主と地方貴族以下の臣民と信仰が異なったため、特にベルリンにおいて大量のユグノーが受け容れられた。そこで、フランス人教区の改革派臣民と既存教区のルター派臣民との関係も考察する必要が生じた。この点についても最終的な結論を避けるが、領邦君主は前者を政治面・経済面・文化面において優遇すると同時に、後者を排斥するのではなく彼らの価値観を尊重した上で譲歩できるところは最大限に譲歩し、領邦国家としての一体性を保持しようとしていたことが確認された。都市部の臣民に関して、これまでに報告者は、一枚絵を為政者と市民との接点として分析し、臣民の持つ価値観は必ずしも抑圧されたものではなく、為政者が考慮し社会のありように反映させなければならないものであった、との結論を得ていた。さらに本研究においては、神学的な教義に対してではなく慣習としての宗教儀式の変更に対して激しく反抗する市民と、こうした動きに対応せざるを得す市民の主体性と価値観に対して一定の譲歩を示した為政者の措置を分析することで、同様の構図を見いだすことができた。次に、農村部の臣民については、商品としての一枚絵の広がりと臣民自身の手による史料の残存が期待できないことから、臣民と為政者との媒介と考えられる教区聖職者の教区内での人的繋がりを検討した。これについては地域差が激しく一つの結論を導き出すのは困難であるが、概して宗教改革後1世代の段階では旧来の共同体及び為政者たちとの繋がりを確認することは困難であった。しかし、2世代以降徐々に牧師の家系が登場してくることから、彼らが共同体の中で安定した地位を確保していったことが容易に推定できる。彼らは招聘の経緯から、必ずしも領邦君主との関係はなく、1590年代をピークに宗教改革以降も説教壇・洗礼盤・聖杯の寄進、教会建設を行っていた地方貴族の意向をくんで活動していたと考えられる。しかしながら、地方貴族は、従来考えられていたよりも、アウグスブルクの和議の決定に反して自らの宗派選択に主体性を示しているケースが多く、地方貴族と聖職者との関係がすぐに領邦君主の領邦化に反映されたとは考えにくい。したがって、領邦君主ー地方貴族ー教区聖職者三者の関係を今一度整理した上で、それぞれと臣民との関係を考察することが今後の課題となる。そうすることによって、領邦国家の中の農村、そして臣民の位置、社会のありようが明らかになると考える。

この点についても最終的な結論を避けるが、領邦君主は前者を政治面・経済面・文化面において優遇すると同時に、後者を排斥するのではなく彼らの価値観を尊重した上で譲歩できるところは最大限に譲歩し、領邦国家としての一体性を保持しようとしていたことが確認された。
中枢シナプスにおけるプロスタグランジンE受容体EP_3サブタイプの分布と機能の解析

アラキドン酸代謝産物であるプロスタグランジン類の中でもプロスタグランジンE_2は特に広汎な生理活性を有している。PGE受容体は薬理学的にEP_1EP_3のサブタイプにぶんるいされるが、我々は昨年度このうちのEP_3受容体のクローン化に成功した。本年度はこれを発展させ、EP_1、EP_2サブタイプのクローン化を行ない、さらに、PGFおよびPGI受容体のクローン化にも成功した。また、ウシ副腎髄質のEP_3には4種のアイソフォームが存在し、それぞれの情報伝達機構が異なるということを見出した。また、in situハイブリダイゼーション法によりEP_3受容体mRNAの脳内分布について検討し、視索前野、視床下部、外側乳頭体核、黒質緻密部、青斑核、背側縫線核等に強いシグナルが観察されることを明らかにした。以上の分子生物学的研究結果をもとに、EP_3受容体mRNAの主要な分布核の一つである背側縫線核におけるEP_3受容体の機能を検討する目的で、ラット脳の薄切スライス標本を用いてパッチクランプ法による解析を行なった。この結果、背側縫線核のセロトニン性細胞はEP_3受容体活性化により興奮性の調節を受け、この興奮はカチオンの透過性亢進によるということを明らかにした。EP_3受容体による興奮性の調節機構は、中枢神経系のカテコーラミン産生細胞一般について成り立つと考えられる機構であり、プロスタグランジンの中枢における機能解明のために多大な貢献をするものとおもわれる。
高選択的炭素一炭素結合生成反応の開発

生物活性物質をはじめとする有機化合物の基本骨格を形成する炭素一炭素結合生成反応の開発を中心に研究を行ない、医科の高選択的合成手法を開拓することができた。1.トリメチルシリルトリフラ-トの存在下、2価スズエノラ-トにキラルジアミンを配位させ、引き続きα、β-不飽和ケトンを作用させると、エナンチオ選択的マイケル反応が進行する。さらにこの反応を2価スズエンチオラントを用いる触媒的不斉マイケル反応に応用した2.触媒量の塩化トリメチルシランあるいは塩化トリチルと塩化スズ(II)、科学量論量の過塩素酸リチウムの存在下、活性オレフィンあるいは1,1-2置換オレフィンにアセタ-ルを作用させると、対応する付加体が高収率で得られることを見いだした。上記触媒系にアルコキシシランを添加すると、アルデヒドとオレフィンのプリンス型反応も円滑に進行することも明らかにした。3.触媒量の塩化スズ(IV)、とスズ(II)トリフラ-ト、化学量論量の過塩素酸リチウムの存在下、1-0-アセチルリボ-スにシリル化求核剤を作用させると、対応する1,2-シスリボフラノシドの高収率で立体選択的に得られることを見いだした。4.新しい反応触媒としてジホスホニウム塩を見いだし、これを用いるシルリエノ-ルエ-テルとアルデヒド、アセタ-ルのアルド-ル反応、αβ-不飽和ケトンのマイケル反応、イミンへのケテンシリルアセタ-ルの付加反応を開発することができた。5.触媒量の〔Rh(COD)Cl〕の存在下、シリルシアニド(TMSCN)にアセタ-ルを作用させると、対応する付加体が高収率で得られる。また〔Rh(COD)cl〕_2-TMSCNがシリルエノ-ルエ-テルとアセタ-ルのアルド-ル反応の有効な触媒になることを明らかにした。生物活性物質をはじめとする有機化合物の基本骨格を形成する炭素-炭素結合生成反応の開発を中心に研究を行ない、以下の高選択的合成手法を開拓することができた。1.トリメチルシリルトリフラートの存在下、2価スズのエノラートにキラルなジアミンを配位させ、引き続きα,β-不飽和ケトンを作用させると、エナンチオ選択的マイケル反応が進行することを見いだした。2.触媒量の2価スズトリフラートとキラルなジアミンを用いることにより、2価スズのエンチオラートとα,β-不飽和ケトンと不斉触媒的マイケル反応をより不斉収率で実現することができた。3.触媒量の塩化トリメチルシランあるいは塩化トリチルと塩化スズ(II)の存在下、3,4-ジヒドロ-2H-ピラン、スチレンなどの活性オレヒィンにアセタールを作用させると、対応する付加体がより収率で得られることを明らかにした。4.触媒量のTrClO_4の存在下、1,2-ベンゾキノンにシリルエノールエーテルを作用させると、位置選択的に付加反応が進行し、対応するホモアシルパイロカテコール誘導体が高収率で得られた。5.触媒量のTrSbCl_6の存在下、シンナルアルデヒドジメチルアセタールにシリルエノールエーテルあるいはケテンシリルアセタール、トリメチルシリルアジドを連続的に作用させると、対応するγ,δ-不飽和-β-アジドカルボニル化合物がよい収率で得られた。6.触媒量の塩化トリチルあるいは塩化トリメチルシランと塩化スズ(II)の存在下、ケテンジチオアセタールにアリルメチルエーテルあるいはα,β-不飽和オルトエステルを作用させると、アリル基あるいはアルコキシカルボニルエチル基が置換したケテンジオチオアセタールがより収率で得られることを見いだした。

昨年度に引き続き、炭素ー炭素結合生成反応の開発を中心に研究を行ない、以下の合成手法を開発することができた。1.昨年度開発したTMSClーSnCl_2ーLiClO_4触媒にアルコキシシランを添加することにより、アルデヒドとオレフィンのプリンス型反応が円滑に進行することを明らかにした。2.新しい反応触媒としてジホスホニウム塩を見いだし、これを用いるシリルエノ-ルエ-テルとアルデヒド、アセタ-ルのアルド-ル反応、シリルエノ-ルエ-テルウとα、βー不飽和ケトンのマイケル反応、イミンへのケテンシリルアセタ-ルの付加反応によるβーアミノエステル類の簡便な合成法を開発することができた。3.触媒量の塩化スズ(IV)とスズ(II)トリフラ-ト、化学量論量の過塩素酸リチウムの存在下、1ー0ーアセチルリボ-スにシリル化求核剤を作用させると、対応する1、2ーシスリボフラノシドが高収率で立体選択的に得られることを見いだした。4.触媒量の〔Rh(COD)Cl_2〕の存在下、トリメチルシリルシアニドにアセタ-ルを作用させると、対応する付加体が高収率で得られる。また、〔Rh(COD)Cl_2〕ートリメチルシリルシアニドを組合わせ用いると新たな触媒活性が発現し、シリルエノ-ルエ-テルとアセタ-ルのアルド-ル反応の有効な触媒になることを明らかにした。5.〔1、2ーベンゼンジオラト(2ー)ーO,O'〕オキソチタニウムが、シリル化求核剤とカルボニル化合物の反応の有効な触媒となることを見いだした。同触媒は、これまで全く例のない新しいタイプのものであり、今後、不斉源の導入による不斉触媒としての働きが期待される。
複数例示による先進的インターフェース構築法の研究

(1)複数例示による対話的GUIプログラミングのインターフェースとその一般的構築法:我々は、(i)ユーザの高度なデータ抽象化の宣言を可能にし、アプリケーション内部のデータの複雑な意味的性質をシステムが推論に利用でき、(ii)システムがその時点での推論の結果を例を通じてユーザーに示し,その例を修正することによってユーザーは新しい例をシステムに示すようにする「例示の修正によるGUIプログラミング」の枠組みを提唱した。(2)宣言的アニメーションインターフェース:我々は、「絵・抽象的データ間の宣言的双方向変換の枠組」を時系列方向に拡張したモデルを提案し、宣言的記述でアプリケーション内のデータの動的挙動をアニメーション化する枠組みを確立した。具体的には(i)従来のアニメーションで用いられている動画表示の技法を宣言的に指定し、システムが自動生成する技術を開発し、さらに(ii)3次元のアニメーション表示が可能なTRIP3Dを構築した。(3)成約解消系における一般化局所伝播法(Generalized Local Propagation)の理論:我々は、階層的成約解消系における動的な制約の連立が可能な一般化局所伝播法を提案し、その理論を体系的に確立した。まず、A.Borningらによる階層制約系の再定義をより精密におこなった。次に、解消系の局所的な単調性大局的準単調性などの重要な性質を調べ、局所伝播法で解の正当性に関する必要十分条件を得、従来の様々な提案された階層制約における制約解消系のクラス分けをこの理論に基づき行った。さらに、制約解消系Detailの開発を行い、ユーザインターフェースシステムへの適合性を調べた。(4)ペンによる描画システムの新しいインターフェースとその構築法:局所的な構造の相互のインタラクションと、そのパラメタの学習により認識を行う「Link Model」を提唱した。さらに人間の一般的な計算機を用いた描画時の操作に関する認知的なモデルを提唱し、その有効性を検証する実験を行った。さらにその実験に基づき、描画時の認知的な負荷を本質的に減らす描画インタラクションを装備した描画システムPegasusを開発した。システムは高速な制約解消系を用いることにより、ユーザの描画操作に対し複数の解釈可能な解を導出し、それをユーザが簡便でかつ自然な操作で選択することによって、描画動作を高速化する。(5)3-Dアニメーションインターフェースにおける半影の利用によるインタラクション:3-D空間の物体間の相互関係をユーザに対してより積極的にかつ自然に提示する手法として、Interactive Penumbraeと呼ばれる、一種の(現実にはない)半影を用いる手法を提案し、その高速な描画アルゴリズムを開発した。これらの成果は、複数の海外の国際会議で発表され、特に(2)の研究成果はIEEE Visual Laguage Symposium '94のベストペ-パ-賞を受賞した。また、研究代表者の松岡は、国際学会のプログラム委員としても活躍し、我が国のこの分野の発展に貢献した。

これらの成果は、複数の海外の国際会議で発表され、特に(2)の研究成果はIEEE Visual Laguage Symposium '94のベストペ-パ-賞を受賞した。また、研究代表者の松岡は、国際学会のプログラム委員としても活躍し、我が国のこの分野の発展に貢献した。本研究の目的は、三次元、アニメーション、マルチメディアなどを複合した先進的GUIのための高度な構築法の斬新的なソフトウェアパラダイムを確立することにある。特に、プログラミングの専門家ではないGUIのデザイナが、ソフトウェアシステムの高度な支援を通じてその構築を容易に行うことを可能にする枠組みと、ソフトウェア基盤技術を開発・評価することを研究対象とする。本年度の具体的な成果は、以下の通りであるが、全般的にシステムの開発が当初の研究予定より進んでおり、その分今年度の開発用の謝金や打ち合わせ額が増えている。(1)複数例示による対話的GUIプログラミングのインターフェースとその一般的構築法の確立:非プログラマによるGUIプログラミングの有効な手法として、「例による視覚的プログラミング」の研究が盛んであるが、先進的GUIの複雑な挙動を表わすのには不十分であった。それに対し、我々は、(i)ユーザの高度なデータ抽象化の宣言を可能にし、アプリケーション内部のデータの複雑な意味的性質をシステムが推論に利用でき、(ii)システムがその時点での推論の結果を例を通じてユーザーに示し、その例を修正することによってユーザーは新しい例をシステムに示すようにする「例示の修正によるGUIプログラミング」の枠組みを提唱し、そのプロトタイプシステムIMAGEをSparcStation20-502システムでCommon Lisp上で作成した。(2)宣言的アニメーションインターフェースの確立:CGアニメーションの一般のGUIへの適用は開発コストが高く、あまり活用されていない。我々は、「絵・抽象的データ間の宣言的双方向変換の枠組」を時系列方向に拡張したモデルを提案し、宣言的記述でアプリケーション内のデータの動的挙動をアニメーション化する枠組みを確立した。本年度は、構築したシステムOZUにより、従来のアニメーションで用いられている動画表示の技法(ボールが壁に跳ね返る際、形状が過剰に変化など)を宣言的に指定し、システムが自動生成する技術を開発した。次年度ではさらに、データの並列的な挙動変更を、アニメーションとして表示する枠組みを開発する。その予備実験のために、4プロセッサの並列計算機SparcStation20-514を導入した。(3)局所伝播法に基づく動的な制約連立が可能な高速制約解消アルゴリズム・システムの開発:宣言的GUI構築のためのソフトウェア基盤技術では、GUIの特性に特化した高速制約解消系が不可欠である。
新規なアルミニウム表面技術の開発に関する研究

本研究は、国際共同研究であり、「アルミニウム表面処理に関する新技術開発」のため、日本とベルギーとの間でおこなったものである。日本側から高橋英明、坂入正敏(北海道大学)および清水健一(慶応義塾大学)が参加し、ベルギー側からH.terrynおよびJ.Vereecken(Frije Universiteit, Brussels)が参加した。北海道大学では、レーザー照射、AFMプローブ加工などによるマイクロ・ナノパターンの形成および複合酸化物皮膜形成による新規電解コンデンサーの開発の研究を進め、慶応大学では、アルミニウム合金のアノード酸化皮膜の構造の精密解析と制御に関する研究を行った。また、ベルギーにおいては、アルミニウムの化成処理、ACエッチング、ACアノード酸化、アノード酸化のさいの熱移動に関する研究を進めた。これらの研究を進める上で相互に意見交換を行うとともに、アドバイス・アイディアに基づいて更なる研究の進展を測った。また、アノード酸化皮膜構造の精密計測に関して相互に助け合い、新しい測定手法の開発などにつながった。研究費のほとんどは、相互に研究室を訪問し、討論・測定などを通じて知識および情報の交換を行うのに用いられた。訪問の記録は、以下の通りである。H.11:高橋英明、坂入正敏、清水健一が、ベルギーを訪問。Prof.Terrynが札幌、大阪、東京を訪問。H.12:坂入正敏がベルギーを訪問。Prof.Vereeckenが札幌、東京を訪問。H.13:坂入正敏、清水健一がベルギーを訪問。Prof.Terrynが札幌、東京を訪問。国際交流の成果は、充分に挙がり、今後のアルミニウム表面技術の研究の進展に大きな足跡を残したと考えられる。本研究課題は、国際共同研究プロジェクトであり、本年度はプロジェクトの初年度にあたる。初年度には、相互に訪問して情報交換し、次年度以降の共同研究に向けての準備を行った。以下の交流を行った。日本側から、高橋、清水および坂入が、ベルギーを訪問し、H.TerrynおよびJ.Vereecken教授と意見交換を行った。また、日本ーベルギーシンポジウムを開催し、相互の最近の研究成果について発表した。高橋らは、ベルギー訪問の後、ジュッセルドルフ(ドイツ)にScultze,Lohrengel教授を訪ね、またパレルモ(イタリア)にde Quato教授を訪ねてそれぞれ講演を行なった。Terryn教授が、日本を訪問。北海道大学にて、高橋、瀬尾、成田、大塚、魚崎、大澤、金野、古市の各研究室を見学、意見交換を行った。北大滞在後、大阪大学、慶応大学を訪問、柴田、清水研究室を訪問した。その後、表面技術協会の101回講演大会に出席し、特別講演を行った。本研究課題は、国際共同研究プロジェクトであり、本年度はプロジェクトの2年目にあたる。2年度には、実験試料を携えてベルギーを訪問するとともに、札幌にも来ていただいて共同研究を遂行した。活動は、以下の通りである。坂入正敏が、大学院DC2の渡辺惠司君を帯同してブリュッセル自由大学に滞在し、波長分光エリプソメーターを用いて、日本側で行っているアルミニウム複合酸化物皮膜の構造解析を行った。高橋、清水、坂入が、イギリス・マンチェスターで開かれた第2回アルミニウム表面の科学と工学に関する国際会議に出席、ブリュッセル自由大学から出席のH.Terryn教授をはじめ、各国の研究者と討論を交わした。Vereecken教授が、来日、5日間札幌に滞在し、高橋研究室の教官および学生と討論を交わすとともに、瀬尾、成田、大塚、金野の各研究室を訪問して意見を交換した。また、アルミニウム表面のキャラクタリゼーションについての講演を御願いした。札幌滞在後、大阪大学において柴田俊夫教授と討論をするとともに、慶応大学の清水健一教授を訪ねて意見交換を行った。本研究課題は、国際共同研究プロジェクトであり、本年度はプロジェクトの3年目にあたる。平成13年度には、以下の交流活動を行った。高橋英明教授が、ブリュッセル自由大学にH.Terryn教授を訪ね、本年度の交流および報告書のまとめ方について討論を行った。

H.Terryn教授が、北海道大学を訪れ、アルミニウムのアノード酸化皮膜生成時における熱移動について講演を行うとともに、アノード酸化皮膜の新機能について討論をした。その後、慶応大学を訪れ、清水健一教授とアノード酸化皮膜のキャラクタリゼーションについて討論した。坂入正敏助手および清水健一教授が、ブリュッセル自由大学にH.Terryn教授およびJ.Vereecken教授を訪ね、講演するとともに、アノード酸化皮膜の構造と機能とに関して議論した。坂入はその後、ノルウエーのProf.NisanciogluおよびドイツのProf.Plieth教授を訪ね、意見を交わした。また、清水は、イギリスのProf.Thompsonを訪ねた。
半導体ナノ結晶の二光子誘起電子移動の評価と微細加工技術への応用

半導体ナノ結晶の高い二光子吸収特性に着目し、二光子吸収色素として種々の光増感反応への応用を提案した。また、その基礎研究として、CdTeナノ結晶の励起状態について詳細な解析を行った。CdTeナノ結晶はイオン液体と複合化することにより強発光を示し、低温では発光量子収率ほぼ1を示す。そこで、極低温において発光寿命解析を行うことで、励起状態における微細なエネルギー分裂とそのサイズ依存性、および電子アクセプター存在下における電子移動特性について明らかにした。半導体ナノ結晶は量子閉じ込め効果によりバルクとは異なる性質を示す近年注目を集める材料の一つである。本研究では、CdTeナノ結晶が高い吸光特性と二光子吸収特性を有することに着目し、二光子重合の増感剤としての利用を提案する。本年度は、CdTeナノ結晶から電子アクセプターである有機分子への光誘起電子移動のダイナミクスについて評価した。半導体ナノ結晶は、イオン液体をマトリックスとすることで、低温で高い発光効率を示し、また、極低温での分光分析から、その励起状態が明るい励起子と暗い励起子にエネルギー分裂することを見出した。高温状態では、主に明るい励起子に励起状態が分布するのに対し、50K以下の低温では暗い励起子が支配的となる。また、その励起状態の分裂のエネルギー幅が量子閉じ込め効果により、サイズ依存することを見出した。さらに、電子アクセプターへの電子移動が、この励起状態の性質に依存するかどうかを評価するため、電子アクセプター存在下における発光寿命の温度依存性を評価した。その結果、暗い励起子から電子アクセプターへの電子移動速度が、明るい励起子から電子アクセプターへの速度に比べ、大幅に小さくなることを見いだした。最近、半導体ナノ結晶の発光特性を利用したセンサーが提案されているが、その多くは半導体ナノ結晶と被検体間のエネルギー移動または電子移動によるナノ結晶の発光変化を検出原理とするものである。しかし、通常の有機分子と異なり半導体を構成要素とする量子ドットの励起状態は複雑であり、量子ドットの励起状態の効率的な利用にはその正しい理解が必要である。我々は、イオン液体を低温マトリクスとすることでCdTeナノ結晶の発光効率が100%まで向上することを見い出し、その低温発光特性からCdTeナノ結晶の励起状態における微細なエネルギー分裂(ΔE)を明らかにした。すなわち、スピン交換相互作用によりCdTeナノ結晶の最低励起状態はbright excitonとdark excitonに分裂する。さらに、そのエネルギー分裂(ΔE)はサイズに依存することが理論的に示されているが、実験的に初めてΔEのサイズ依存性を実証した。次に、dark excitonとbright excitionを考慮したCdTeナノ結晶の電子移動機構を考察するために、イオン液体を低温マトリクスに用いてCdTeナノ結晶-アクセプターシステムの低温発光測定を行った。その結果、電子移動速度が温度減少とともに遅くなることが分かった。すなわち、bright excitonとdark excitonからの電子移動速度定数をK_<ET-B>ならびにK_<ET-D>とするとK_<ET-B>>>K_<ET-D>であり、K_<ET-D>は放射速度K_Dと同程度である。従って、dark excitonが支配的になる低温状態においては、アクセプターの消光効果は弱まる。このように、イオン液体を低温マトリクスとした測定から、励起子微細構造を考慮したCdTeナノ結晶からの電子移動機構を世界で初めて提案することができた。
肝細胞アポトーシスの制御機序解明と肝疾患治療への応用

申請者は本科研費補助金の成果から肝硬変研究過程で肝実質細胞が大量のOPNを分泌することを初めて見出した。それでは、OPN-KOマウスは大分肝切除(70%切除)後肝臓再生するスピードが野生型マウスより速いことが示唆した。肝臓再生機構を解明するため、OPN欠損マウス及び野生型マウスから肝灌流により肝実質細胞を分離しOPN欠損マウス(OPN-KOマウス)由来肝実質細胞が野生型マウス由来肝実質細胞より小型であることが分かった。OPN-KOマウス由来肝実質細胞が野生型マウス由来肝実質細胞より増殖スピードが速いことが示唆された。OPN-KOマウス及び野生型マウス由来伊東細胞のI型コラーゲン(mRNA)産生能力を比較したところ、OPN-KO伊東細胞は野生型伊東細胞より弱いことが分かった。伊東細胞は肝線維化に深く関与する主役として、大きな注目を浴びるようになった。OPN-KOマウス慢性肝障害が持続すると壊死に伴い線維化は野生型マウスより軽減することが示唆された。以上の研究結果よりオステオポンチンは肝再生に深く関わっていることが示唆された。オステオポンチン(OPN)は、分子量約41kDaの分泌型酸性リン酸化糖タンパク質である。肝実質細胞は、肝小葉の機能的な外分泌細胞であり、また内分泌細胞でもある。種々のサイトカインは肝細胞の代謝に影響を与えることも知られている。近年、肝炎(劇症及び慢性)、肝硬変の病態に、OPNが深く関与していることが示唆されている。申請者は肝硬変研究過程で肝実質細胞が大量のOPNを分泌することを初めて見出した。それでは、肝実質細胞から大量産生されているOPNは如何に肝実質細胞の機能を制御しているのか?本科研費補助金の成果からOPN欠損マウス及び野生型マウスから肝灌流により肝実質細胞を分離して分離直後及び培養後細胞の形態を観察及び直径を測定した。OPN欠損マウス(OPN-KOマウス)由来肝実質細胞が野生型マウス由来肝実質細胞より小型であることが分かったし、OPN-KOマウス由来肝実質細胞が野生型マウス由来肝実質細胞より増殖スピードが速いことが示唆された。この結果が肝再生機構に繋がる。OPN-KOマウスは大分肝切除(70%切除)後肝臓再生するスピードが野生型マウスより速い傾向があった。慢性肝障害が持続すると壊死に伴い肝実質細胞の増殖は起こるものの線維化も伴い、著しい場合は肝硬変となる。細胞構成群の中でも伊東細胞は肝線維化に深く関与する主役として、大きな注目を浴びるようになった。オステオポンチン(OPN)は、細胞外マトリックスとしての性質と同時に種々のTh1型サイトカインの上流に位置するサイトカインの制御因子としての性質がある。申請者は本科研費補助金の成果がら肝硬変研究過程で肝実質細胞が大量のOPNを分泌することを初めて見出した。肝臓再生機構を解明するため、OPN欠損マウス及び野生型マウスから肝灌流により肝実質細胞を分離しOPN欠損マウス(OPN-KQマウス)由来肝実質細胞が野生型マウス由来肝実質細胞より小型であることが分かった。OPN-KOマウス由来肝実質細胞が野生型マウス由来肝実質細胞より増殖スピードが速いごとが示唆された。OPN-KOマウス及び野生型マウス由来伊東細胞のI型コラーゲン(mRNA)産生能力を比較したととろ、OPN-KO伊東細胞は野生型伊東細胞より弱いことが分かった。

伊東細胞は肝線維化に深く関与する主役として、大きな注目を浴びるようになった。OPN-KOマウス慢性肝障害が持続すると壊死に伴い線維化は野生型マウスより軽減することが示唆された。以上の研究結果よりオステオポンチンは肝再生に深く関わっていることが示唆された。
環境責任論の憲法学的考察――人権理論と国家理論に基づく原因者責任

本研究の目的は、環境保護に関する責任を憲法学の視点から解明し、そこから環境法政策への示唆を見出すことである。その目的達成へ向けては、憲法学における人権理論と国家理論に基づく基礎・応用を探究する。特に考察対象として、汚染者負担原則ないし原因者責任原則が法原則として適切か否か精査し、この原則を憲法学の人権理論と国家理論から基礎づける。そして、以上から、具体的には例えば、リスク責任、原子力をめぐる責任、拡大生産者責任、環境損害責任などの法政策を提言することをねらいとしている。2018年度は、先行研究を踏まえつつ、いわゆる汚染者負担原則・原因者負担原則よりも法的責任を重視した原因者責任原則を検討し始めた。特に日独の憲法学に立ち返って、〈自由な自己決定と自己責任〉の原理・原則の基礎や問題を、諸学説を分析しつつ、追究した(「原因者責任原則の憲法学的基礎づけ(2)(3)」を公表)。その際、例外や対立原則にも留意した。それらを踏まえ、憲法学における〈自由な自己決定と責任〉の原理・原則から、(危険・リスクの原因となる者は責任を負うとする)原因者責任原則を基礎づけようとしてきた。なお、本研究の応用となる責任論を一部含む「原子力規制ー憲法と環境法の原則からみた現状と課題」についても公表した。そこでは、原子力をめぐる権利論と国家の決定と責任についても論及した。以上の理論・実践の先駆的なドイツ語圏と比較すべく、持続性・気候政策研究所所長〔ライプツィヒ〕(ロストック大学教授)のフェリックス・エカートを訪問し、憲法学・哲学の視点からの持続性理論や原因者原則について質疑・情報収集を行なった。また、大学図書館・弁護士からも、原因者責任、リスク論における責任、原子力法における責任、環境情報などについて文献収集・情報収集をすることができた。そして、以上から、具体的には例えば、リスク責任、原子力賠償責任、拡大生産者責任、環境損害責任などの法政策を提言することをねらいとしている。初年度は、まず、本研究と関連する環境リスクに対する事前配慮責任や(論証責任を含む)「立証責任」を加筆したこれまでの研究成果をまとめ公表した。そこでは、人格権(精神も関わる生命権・身体権)をめぐる三段階審査、特に比例原則を重視した(いわゆる環境比例原則ではなく)。とりわけ、原子力法政策の、目的審査における違憲性のある目的、手段審査における必要性審査(他の発電手段リスクの必要最小限性の予測)、均衡性審査批判を論じた。また、本研究の基礎となる国家理論上の責任を探究すべく「現代ドイツ憲法学における国家目的「自由」「安全」「生命」」について執筆した(印刷中)。そこでは「国家なき国法学」に抗する立憲国家目的「自由」が重視された。さらに、概説ではあるが、原因者責任を一部含む「環境と未来への責任」について執筆した(印刷中)。そこでは、実質的意味の環境憲法についても鳥瞰した。憲法基礎理論における責任の解明については、考察を1歩進め、初年度のうちに一部を執筆することができた。それゆえに、初年度としては、おおむね順調に目的を達成していると自己評価できる。2017年度は、先行研究を踏まえつつ、いわゆる汚染者負担原則・原因者負担原則よりも法的責任を重視した原因者責任原則を検討しようと取り組み始めた。諸学説における種々の根拠論を概観したうえで、特にドイツの有力説に着目した(「原因者責任原則の憲法学的基礎づけ(1)」を公表)。それらを踏まえ、日独の憲法学における〈自由な自己決定と責任〉の原理・原則から、原因者責任原則を基礎づけようとする今後の研究へつながる。なお、本研究の基礎となる国家理論上の責任を探究すべく「現代ドイツ憲法学における国家目的「自由」「安全」「生命」」について公表した。また、概説ではあるが、原因者責任を一部含む「環境と未来への責任」について公表した。原因者責任原則の分析については、考察を1歩進め、予定より早く2年目のうちに一部を執筆・公表することができた。もっとも、ドイツでの調査研究が日程の事情により、実施を延期せざるをえなかった。総じて、2年目としては、おおむね順調に目的を達成していると自己評価できる。

特に考察対象として、汚染者負担原則ないし原因者責任原則が法原則として適切か否か精査し、この原則を憲法学の人権理論と国家理論から基礎づける。そして、以上から、具体的には例えば、リスク責任、原子力をめぐる責任、拡大生産者責任、環境損害責任などの法政策を提言することをねらいとしている。2018年度は、先行研究を踏まえつつ、いわゆる汚染者負担原則・原因者負担原則よりも法的責任を重視した原因者責任原則を検討し始めた。特に日独の憲法学に立ち返って、〈自由な自己決定と自己責任〉の原理・原則の基礎や問題を、諸学説を分析しつつ、追究した(「原因者責任原則の憲法学的基礎づけ(2)(3)」を公表)。その際、例外や対立原則にも留意した。それらを踏まえ、憲法学における〈自由な自己決定と責任〉の原理・原則から、(危険・リスクの原因となる者は責任を負うとする)原因者責任原則を基礎づけようとしてきた。なお、本研究の応用となる責任論を一部含む「原子力規制ー憲法と環境法の原則からみた現状と課題」についても公表した。そこでは、原子力をめぐる権利論と国家の決定と責任についても論及した。以上の理論・実践の先駆的なドイツ語圏と比較すべく、持続性・気候政策研究所所長〔ライプツィヒ〕(ロストック大学教授)のフェリックス・エカートを訪問し、憲法学・哲学の視点からの持続性理論や原因者原則について質疑・情報収集を行なった。また、大学図書館・弁護士からも、原因者責任、リスク論における責任、原子力法における責任、環境情報などについて文献収集・情報収集をすることができた。引き続き、日本とドイツの環境法の原因者責任の理論的・実証的分析を行う。特に、危険・リスクの原因となる者は責任を負うとする原因者責任原則を憲法学的に考察する。関連して、原子力規制の研究についても取り組む。ドイツでの調査研究も実施する。関連して、原子力規制の研究についても公表を予定している。平成29年度(2017年度)に海外調査を日程の事情により実施できなかったため、平成30年度(2018年度)に実施することを計画している。それに伴う理由から、使用額に変更が生じることになった。
『紫明抄』を中心とした源氏物語注釈史の研究

素寂の源氏物語注釈書『紫明抄』については、従来京都大学本が最善本として専ら使用されてきたが、他にも内閣文庫に三種類など、約十本の伝本がある。今回これらを総合的に調査した結果、内閣文庫蔵三冊本(内丙本)の特異な形態が浮び上がった。その特性を一言で言えば、京大本などが整備された再稿本(精稿本)的存在であるのに対して、内丙本は初稿本的位置にあるということである。例えば、内丙本には、源氏物語の難解な本文部分を引用して注釈を意図しているものの、具体的に勘注を記すに至らない箇所がかなり存する。それらは今日の注釈書でも解答を見出せない。解釈の困難な部分が多く含まれている。従ってその箇所を指摘したという点において、内丙本の注釈書としての水準の高さが窺えるのである。一方、京大本にはこれらの箇所が存しないのである。考察を重ねた結果、満足のいく解答を得られなかったために、最終的には項目自体が削除されたのであろう。他に補強的な材料もあり、内丙本は初稿本と再稿本との関係にあると断じてよい。
新生児慢性肺疾患動物モデルにおけるヒアルロン酸プロテオグリカン結合蛋白質の重要性

申請者らは、高濃度酸素がマウスの肺胞発達遅延を引き起こすことを示し、酸素暴露後肺内発現が上昇する遺伝子hyaluronan and proteoglycan link protein 1(HAPLN1)を同定、HAPLN1遺伝子欠損(KO)胎仔マウスの表現型を解析してきた。本研究では、条件付き(時間的空間的特異的)HAPLN1 KOマウスを用い、新生仔期肺傷害修復過程おけるHAPLN1の重要性を検討する。また、新生児慢性肺疾患(CLD)患児のHAPLN1一塩基多型(SNP)解析も行う。
新たな小胞体調節因子PecanexのNotchシグナル活性化における機能の研究

多細胞生物において、Notchシグナル伝達は細胞の運命決定を制御しており、ヒトでNotchシグナル伝達が失われると、ガンなどの疾患が発症します。pecanex (pcx)はNotchシグナル伝達の構成遺伝子です。私の研究から、Pcxが小胞体に局在し、小胞体の形態形成に必要であることがわかりました。そこで、pcxの調節遺伝子を網羅的に探索し、これまでに、Notchシグナル伝達の既知の構成遺伝子を4遺伝子と、その他、膜融合に必要なATPaseであるNsf2、転写因子をコードするjim lovellを同定しました。これらの調節遺伝子が、pcxと確かに遺伝的相互作用することを示しました。Notchシグナル伝達系は、多細胞生物の発生過程で細胞の運命決定に機能しています。私のこれまでの研究から、ショウジョウバエPecanex (Pcx)は、小胞体に局在して、Notchの活性化に必要であることがわかりました。さらに、Pcxが小胞体の形態形成に必須であることもわかってきました。このことから、Pcxは小胞体の構造や機能で働いており、これがNotchシグナル伝達に必要である、という仮説を立てました。そこで、pcxの分子機能を理解するため、Pcxの調節因子を網羅的に探索することにしました。私の研究から、母性効果を欠いたpcxヘテロ接合体胚(pcx/+胚)が温度感受性致死を示すことを発見しました。pcx/+胚は、18°Cで胚性致死、25°Cで蛹性致死を示しますが、28°Cでは成虫まで生存し生殖も可能です。この特性を利用した、ユニークな探索を行いました。すなわち、第2または第3染色体の任意の領域を欠失したpcx/+胚を作成し、これを25°Cと28°Cでそれぞれ飼育することで、pcx/+胚の示す温度感受性致死を変化させる遺伝子を同定するという手法です。その結果、1つのpcx抑制性調節因子、Nsf2と、3つのpcx促進性調節因子、Big brain、Delta、Neuralizedを同定することができました。このうちのBig brain、Delta、NeuralizedはNotchシグナル伝達の既知の構成因子であり、これらが同定されたことから、まだ同定されていない領域内にNotchシグナル伝達の新規構成因子が含まれている可能性が期待されます。ショウジョウバエPecanex (Pcx)は、Notchシグナル伝達の構成因子であり、小胞体の形態形成に関与することが知られています。私は、pcxを介した小胞体とNotchシグナル伝達との関連について研究を行っています。これまでに、pcxと遺伝的に相互作用する調節遺伝子を6遺伝子同定しており、1遺伝子については未同定です。平成26年度における研究では、未同定な1遺伝子を、3遺伝子(CG4269、CG4294、RpS16)まで候補を絞ることができました。これら3遺伝子の中に既知のNotchシグナル伝達構成遺伝子が含まれないことから、新規構成遺伝子を同定できる可能性が期待されます。また、これまでに得られたpcx調節遺伝子の中の1つ、小胞体の形態形成に関与すると報告されるNsf2に関して、ATPase活性のみを欠失した突然変異体を用いて調べたところ、pcxとNsf2の相互作用にATPase活性が必要であることがわかってきました。さらに、pcxが発生過程におけるどのNotchシグナル伝達に必要であるのかを調べました。pcx突然変異体は胚性致死を示しますが、pcx突然変異細胞クローンのモザイク個体を作製することにより、サナギの時期におけるpcxのNotchシグナル伝達への影響の有無を調べることが可能です。その結果、pcxは初期胚のNotchシグナル伝達や小胞体の形態形成にのみ必要であることがわかってきました。このことは、Nsf2がショウジョウバエ初期胚で発現する報告とも一致しています。また、これらの結果から、発生過程の時期によってオルガネラの性質が変化し、それによって制御されるシグナル伝達も変遷する、という仮説を考えることができました。細胞生物学25年度における研究では、pcxと遺伝的に相互作用する調節因子の探索において、新たに2つの調節因子を同定することができました。pcx抑制性調節因子としてBrother of Bearded Aを、pcx促進性調節因子としてJim lovellを得ました。これにより、25年度に掲げた目標の1つを達成することができました。Brother of BeardedAは、Beardedファミリーの構成因子として報告があり、BeardedファミリーはNeuralizedを抑制することによってNotchシグナル伝達を抑制しています。このことは、Brother of Bearded Aがpcxの抑制性調節因子として同定されていることと一致しています。

また、pcx促進性調節因子としてNeuralizedが同定されていることから、Brother of Bearded AとNeuralizedとの相互作用にpcxが関与している可能性が期待されます。さらに、Brother of Bearded Aが単体としての機能を示唆する結果はこれまでに報告がなく、新たな知見が得られるのではないかと考えています。一方、Jim lovellは転写因子であることが報告されていますが、Notchシグナル伝達との直接的な関連についてはまだわかっておらず、Notchシグナル伝達における新たな制御機構が解明できるのではないかと考えています。また、小胞体の形態形成に関して新たな知見を得ることができました。pcxの機能を失った胚では小胞体が形態異常を示すことから、小胞体の形態形成を詳細に観察しました。その結果、野生型胚において、初期胚と後期胚で分裂様式が異なることを発見しました。このような知見はこれまでになく、細胞分裂という普遍性の高い現象に、新たなメカニズムを導入できるのではないかと期待しています。今回、新たにpcx抑制性調節因子として得られたBrother of Bearded Aとpcx促進性調節因子として以前に得たNeuralizedとの相互作用について、pcxがどのように関わっているのかを調べます。Neuralizedは、NotchのリガンドであるDeltaが細胞内へ取り込まれることに機能しており、Deltaの活性化に必須です。Beardedファミリーは、Neuralizedを抑制します。そこで、pcxの機能を失った胚でDeltaの輸送に異常が生じるか、neuralizedやBrother of Bearded Aの突然変異体胚におけるDeltaの輸送異常がpcxの影響によって変化するか、調べたいと考えています。また、pcxが促進性調節遺伝子であるjim lovellの上流で機能しているか下流で機能しているかを調べます。さらに、pcxの機能を失った胚における小胞体の形態形成を観察します。25年度の研究で明らかとなった、初期胚と後期胚で異なる小胞体の分裂様式が、pcxの機能を失った胚ではどのような影響を受けるかについて、着目したいと考えています。25年度における研究において、pcxと相互作用する小胞体形成遺伝子の網羅的探索を計画しました。しかしながら、条件検討に時間を要したため、申請した予算を次年度へ繰り越すこととなりました。大規模な網羅的探索は、26年度に行う予定です。pcxと相互作用する小胞体形成遺伝子の網羅的探索を遂行するため、数多くのRNA干渉系統の購入費と、それらの維持費、またこれらに対する抗体染色の試薬類の購入費に繰り越した予算を使用したいと考えております。また、25年度の研究により、小胞体の形態形成に関して新たな知見を得ることができました。そこで26年度では、pcxがどのようにして小胞体の形態形成に関わっているのか、詳細に調べていく必要があります。そのためには、イメージングに特化した研究室との共同研究を行う必要があり、共同研究費や小胞体ライブイメージングに必要な試薬の購入等に本助成金を使用したいと考えています。