hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
位相空間上の連続関数の拡張問題への集合論の応用の研究

本研究は,トポロジーのキー・ワードの1つである連続写像の拡張に関する研究である。特に,位相空間上の連続関数の拡張問題を集合論を応用することによって研究する。位相空間の任意の閉集合の可算局所有限開被覆が全体空間の可算局所有限開被覆に拡張可能であるためには,任意のσ-局所コンパクト距離空間との直積が矩形正規であることが必要十分であることを証明して,T.C.Przymusinskiによって1983年に提起された問題を肯定的に解決した。1.位相空間上の連続関数の拡張理論に関して,位相空間Xの次の性質を持つ部分空間Aの位相的特徴付けを与えた。位相濃度がκ以下の任意のσ-局所コンパクト距離空間Mに対して,直積A×M上の任意の実数値連続関数はX×M上に連続に拡張される。この結果は,1983年にT.C.Przymusinskiが証明なしで発表して以来,その証明が知られていなかった次の定理を精密化するものである。定理:位相空間Xが可算Katetov空間であるためには,任意のσ-局所コンパクト距離空間Mに対して,直積X×Mが矩形正規であることが必要十分である。系として,位相空間Xの部分空間Aに対して,次の主張(1)-(3)は同値であることが導かれる。(1)任意のσ-局所コンパクト可分距離空間Mに対して,A×MはX×MでC-埋蔵である。(2)有理数の空間Qに対して,A×QはX×QでC-埋蔵である。(3)Aの余零集合からなる可算局所有限被覆は,Xの余零集合からなる可算局所有限被覆に拡張される。2.任意の自己稠密可分距離空間が独立部分基底を持つかというH.Tsuikiの問題に肯定解を与えた。その1つの結果として,正則T_1空間Xが自己稠密可分距離化可能で被覆次元がn以下であるためには,Xが次元n以下の独立部分基底を持っことが必要十分であることが導かれる。独立部分基底は実数のグレイコード展開を任意の距離空間に一般化することを目的に導入されたが,もう1つの一般化である標準部分基底について,標準部分基底を持つ距離空間を特徴付ける問題は未解決であり,今後の課題である。位相空間から単位閉区間への関数列{f_n}が定値関数0に点ごとに収束するとき,f_n→0と書く.位相空間Xが性質(USC)を持つとは,任意の上半連続関数列{f_n}に対し,もしf_n→0ならば,連続関数列{g_n}でf_n≦g_n(n∈N)かつg_n→0を満たすものが存在することを言い,性質(USC)_sを持つとは,任意の上半連続関数列{f_n}に対し,もしf_n→0ならば,Nの部分列{n(i)}と連続関数列{g_n(i)}でf_n(i)≦g_n(i)(i∈N)かつg_n(i)→0を満たすものが存在することを言う.これらの定義で「上半連続」を「下半連続」に置き換えることによって,性質(LSC),(LSC)_sの定義を得る.Bukovsky(1991)によるwQN空間の位置付けと開集合の組み合わせ論的性質S_1(Г,Г)に関するScheepers予想(1999)「任意の完全正規wQN空間は性質S_1 (Г,Г)を持つ」に関連して,次の研究成果を得た.1.定義から関係(USC)=>(USC)_sが得られるが,逆が成立しない例が実数空間の部分空間の中に存在する.2.性質(LSC)と(LSC)_sは互いに同値であり,これらの性質を持つ非可測濃度の空間は離散空間である.また,これらの性質を持つ可測濃度の空間で離散でないものが存在する.3.完全正規空間が(USC)を持つための必要十分条件は,σ-集合であることである.4.任意の完全正規QN空間は(USC)を持つ.5.任意の完全正規wQN空間が(USC)_sを持つならば,Scheepers予想は成立する.6.性質(USC)_sを持つ空間は至るところ第1類である.Z.Balogh(1996)によるDowker空間Xの性質に関して,次の結果を得た。1.空間Xの閉集合からなる可算交差性を持つ任意の極大フィルターは収束する。2.空間Xの第二座標が0または1である点全体からなる部分空間Yは族正規でない。結果1に関して,X上の零集合からなる可算交差性を持つ任意の極大フィルターが収束するかどうか,すなわち,Xが実コンパクトであるかどうかという問題が自然に生じるが,それは未解決である。

もしこの問題の解答が否定的であれば,結果1よりX上のベール測度で正則なボレル測度に拡張できないものが存在することが分かる。これは空間XがMarik空間であるかどうかというD.H.Fremlinの問題を解決する。一方,結果2の部分空間Yは,族正規でない正規空間の新しいタイプの簡明な例を与えるものである。本研究代表者は,さらに空間Yの任意の部分空間上の任意の点有限開被覆は局所有限細分を持っと予想している。もしこの予想が正しいことが証明されれば,Gutev-Ohta-Yamazaki(2003)による問題が通常の集合論の公理系において解決する。以上のように,Z.BaloghによるDowker空間は種々の未解決問題に対する反例の有望な候補として期待されるが,その構造の解明はまだ始まったばかりである。また,この空間はその構成の主要部分が,十分に大きな濃度κに対する集合H(κ)のelementary submodelを経由している。それが解明を困難にしている原因の1つであるので,elementary submodelを使わない構成方法を構想しているところである。なお,Z.BaloghによるDowker空間の構成方法とelementary submodelに関する解説をホーム・ページ(本報告書末尾)上で公開している。
国際標準を目指した物理則ベースの船舶復原性評価手法の構築

国際海事機関で検討中の物理則ベースの船舶復原性評価法の案とすることを目的に、パラメトリック横揺れ、追波中復原力喪失現象、ブローチング、デッドシップ状態の復原性という4つのモードごとに、規則波中の簡易推定法と不規則波中の直接時間領域シミュレーションを組み合わせる手法を構築し、模型実験などによりその妥当性を検証し、許容できる危険確率のレベルを提案するとともに新船型による解決の可能性を示した。船舶の主要転覆シナリオ(デッドシップ・ブローチング・パラメトリック横揺れ)について、物理則ベースの安全性評価法の構築を試みた。デッドシップ状態の復原性については、区分線形近似による転覆確率推定理論を従来以上に厳密に誘導し、モンテカルロ法による数値実験でその検証に成功した。その数学モデルに含まれる、横漂流に伴う流体反力の着力点高さについては、3船型についての模型実験とCFD計算を行い、近似推定式を得た。また、メルニコフの方法で減衰力が微小という仮定を用いない新理論も構築した。ブローチングについては、メルニコフの手法を一般化することで波乗りに当たる大域的分岐限界を求める解析的理論を導き、その実験的検証に成功した。そして、波乗り領域外に発生するブローチングについて検討するとともに、不規則波中におけるブローチングによる危険確率推定に与える船規模の影響について調査し、それらを考慮した安全性評価法ついて考察した。さらに新形式船ではブローチング運動の推定が不十分となっていた問題については、これまでの4自由度数学モデルを6自由度モデルに拡張し、舵露出影響も考慮することで自由航走実験結果とのより良い一致を実現した。パラメトリック横揺れについては、実際に事故を起こしたコンテナ船について模型実験を行い、その危険性を定量化するとともに、平均法および3自由度数値シミュレーションでその推定が概略可能であることを示した。さらには、群波の理論と平均法を組み合わせることで、パラメトリック横揺れによる危険確率を推定した。2012年に国際海事機関(IMO)で世界標準として策定されようとしている、波浪中船舶の復原性の物理則ベースの評価法を、我が国から発信提案するため、船舶の主要転覆シナリオ(パラメトリック横揺れ、追波中復原力喪失現象、デッドシップ状態の復原性、ブローチング)について、評価手法の提案とその検証に取り組んだ。まず、パラメトリック横揺れについては、波浪中復原力計算を要しない簡易評価法、等価規則波中平均化法を用いた準簡易評価法、不規則波中の時間領域シミュレーションによる直接評価法の3段階のセットを提案し、実際に事故を起こしたコンテナ船を例にとりその評価法間相互関係を定量化した。そして、模型実験によりその検証を行った。また、パラメトリック横揺れに与える波浪抵抗増加の影響を理論計算により明らかにした。次に、追波中復原力喪失現象について、波浪中復原力計算を要しない簡易評価法、等価規則波中復原力計算を用いた準簡易評価法、不規則波中の時間領域シミュレーションによる直接評価法の3段階のセットを提案し、高速カーフェリーを例にとりその評価法間相互関係を定量化した。そして、デッドシップ状態の復原性については、数値シミュレーション・モデルの改良により、一定風および不規則波中の物理模型実験と転覆確率のレベルでも良い一致を得ることができた。さらに、ブローチングについては、その必要条件である波乗りの不規則波中での発生確率推定理論を、高速カーフェリーについて数値シミュレーションにより検証した。現在、国際海事機関(IMO)で世界標準として策定されようとしている、波浪中船舶の復原性の直接評価の仕組みを、我が国から発信提案するため、船舶の主要転覆シナリオ(パラメトリック横揺れ、追波中復原力喪失現象、デッドシップ状態の復原性、ブローチング)について、物理則ベースの評価手法の創出とその検証を、確率論的、非線形力学的、制御工学的理論と模型実験により取り組んだ。まず、パラメトリック横揺れについては、複数の船型について試計算を行い、昨年度提案した、波浪中復原力計算を要しない簡易評価法、等価規則波中平均化法を用いた準簡易評価法、不規則波中の時間領域シミュレーションによる直接評価法の3段階のセットを考え、その間の安全レベル(転覆確率)の整合性について検証した。次に、追波中復原力現象について、自由航走模型実験を行い、昨年度提案した不規則波中の時間領域シミュレーションモデルを改良し、その結果を反映した基準案を検討した。そして、デッドジップ状態の復原性については、昨年度の一定風および不規則波中の物理模型実験に続き、不規則風および不規則波中の物理模型実験を行い、区分線形近似法による横波横風中の転覆確率推定理論および不規則風波中の時間領域シミュレーションによる直接評価法の検証を行った。さらに、ブローチングについては、複数の船型について模型実験を行い、昨年度提案した、船速と長さのみによる簡易推定法、波乗り確率による簡易推定法について、実験的検証を行った。そのうえで、望ましい安全レベル(転覆確率)の設定を行った。これらの検討をもとに、4つのモードの復原性評価法案を提案した。
ヒト口腔内感染部位における偏性嫌気性グラム陽性桿菌の多様性とその病原因子

ヒト口腔内の偏性嫌気性グラム陽性桿菌の多くは、その生育に厳しい条件を必要とし、培養が極めて困難であったため、従来の細菌培養方法では検出されないことが多く、長い間その存在や分布は見落とされてきた。本研究では、厳密に管理された嫌気グローブボックスや新しい細菌検出方法を用いる事によって、ヒト口腔内の種々の感染病巣部位から、これまでの報告に無い、未同定の偏性嫌気性グラム陽性桿菌が、多数且つ多種類生息していることが明らかにした。また、これらの偏性嫌気性グラム陽性桿菌をマウスに投与した場合、T細胞を介する液性免疫及び細胞性免疫が誘発される事が明らかになり、これらの細菌種が歯周疾患の発現に大きく関与している事が示唆された。1:ヒトロ腔内の種々の部位から、生存する細菌株を分離・培養し、従来の方法では同定できない(未同定/同定不能)偏性嫌気性グラム陽性桿菌の幾つかの菌株については、大量培養し、その菌体を得た。2:その菌体や既報細菌種の標準株から全DNAを抽出・精製し、各DNAのG+C含量を定量した。その結果、未同定菌株のG+C%は5051%、4446%、4241%の3群に区別された。3:それぞれのDNAプローベを作成し、RIラベルのメンブラン法によるDNA-DNAハイブリダイゼーションを行い、DNA-DNA相同性(%)を検討した結果、未同定菌株の何れもが、既報の細菌属及び種には属さないことが判明した。4:各菌株の全DNAからPCR法にて、16S-rDNAを増幅・精製後、5:ダイデオキシ法にて各菌株の16S-rDNAのシークエンスを明らかにした。6:得られた16S-rDNAシークエンスデータと、ジーンバンクから入手出来る既報のデータを使い、これら未同定細菌株の系統発生学的相違を検討した結果、既存の細菌種とは明らかに異なることが確認された。(上記の文中、1:6:は、本研究の科学研究費交付申請書「本年度の研究実施計画」と対応)本研究の科学研究費交付申請書「本年度の研究実施計画」と対応1:未同定株菌体や標準株から、そのDNAを抽出し各DNAのG+C含量を定量し相互に比較検討した。2:前記のDNAを用いDNA-DNAハイブリダイゼーション法により、菌株相互のDNA-DNA相同性(%)を明らかにした。3,4:PCR法に続くアガロース電気泳動法で、各菌株の16S-rDNAを得、そのシークエンスを明らかにした。5:得られた16S-rDNAシークエンスデータと、ジーンバンクから入手出来る既報のデータを使い、未同定偏性嫌気性グラム陽性桿菌相互の系統発生学的相違を明らかにした。今後は、これまで得られ研究成果を総括し、2001年3月の米国歯科研究学会(AADR)にて報告し、米国バージニア大学のDr.Moor等の関連研究者のレビューを受け、平成13年度における本研究遂行の効率化を図りたい。トロ腔内の偏性嫌気性グラム陽性桿菌の多くは、その生育に厳しい条件を必要とし、培養が極めて困難であったため、従来の細菌培養方法では検出されないことが多く、長い間その存在や分布は見落とされてきた。また、16S-rDNA sequenceのデータを用い、Mogibacterium属細菌種を特異的に検出するためのPCR primerを構築した。更に、これらの偏性嫌気性グラム陽性桿菌をマウスに投与した場合、T細胞を介する液性免疫及び細胞性免疫が誘発される事が明らかになり、これらの細菌種が歯周疾患の発現に大きく関与している事が示唆された。
経済性と相乗効果を持つ環境調和型ロジスティクスシステムの設計と評価

本研究では、環境調和型ロジスティクスシステムの設計のために、環境負荷低減と利潤追求が調和した新物流パラダイム提言のための基礎的研究を行った。主な成果として、トラック燃料計-ICタグ連携システムを開発し、物流プロセスにおけるCO_2排出量の動的な把握とその可視化の基礎的方法を得た。また、市場から受け入れられるシステム設計のために環境マーケティングの視点から、購買単価・燃料費とCO_2排出量の関係を調べ、企業が採るべき戦略についてのシナリオ分析を行った。本研究では経済性・環境配慮両立型グリーン物流を対象に,(1)サービス向上と在庫削減を狙いとするサプライチェーンの観点,(2)CO2排出等の環境問題の観点という経済性と環境問題の双方の視点から研究を行い,企業の利益面で効果をもたらしながら環境負荷を低減させるための新たな物流パラダイムを提案するとともに,企業の詳細な実地調査にもとついてその評価を行うことを目的としている。本年度の主な成果は次の通りである。第一に,実際の企業のフィールド分析(実地調査)に基づき,直面している課題について体系的整理を行った。具体的には,グリーン物流のための管理指標の整備,モーダルシフトの効果に関する検討,トラックの走行データとCO2排出量の分析,エコポイント方策の検討,並びに,顧客単価の向上施策分析を行った。第二に,最新のリアルタイム燃料消費量装置について,開発企業と共同で運搬時の燃料消費量の把握方法を検討し,同装置の改良を行った。これにより,次年度以降,積荷の状況と連動した形で,トラックの走行データが取得でき,様々な分析のための土台が構築されたと言える。第三に,実地調査に基づき,冷凍品と冷蔵品の2商品の実際の物流プロセスを取り上げ,作業フローを定義して商品1点あたりCO2排出量の把握と算定の方法を提案し,定量的な比較を行った。これにより,冷凍品と冷蔵品の物流における環境負荷の特徴の差異が明らかとなり,また従来明らかにされていた青果物との比較を行った。成果の一部については国内外で研究発表を行うとともに,大学・企業間でネットワークを築いて産学で連携した研究会の運営を行った。以上の結果より,次年度以降,さらに研究を深めるための基礎的な知見が得られると共に,研究上の土台が築かれたと考えられる。本研究では、経済性・環境配慮両立型グリーン物流を対象に、(1)サービス向上と在庫削減を狙いとするサプライチェーンの観点、(2)CO2排出等の環境問題の観点という経済性と環境問題の双方の視点から研究を行い、企業の利益面で効果をもたらしながら環境負荷を低減させるための新たな物流パラダイムを提案するとともに、企業の詳細な実地調査に基づいてその評価を行うことを目的としている。第一に、トラック走行時のCO2排出量を荷物ごとに把握するために、CO2排出量の適切なリアルタイム算定・按分法を組み込んだ、「トラック燃料計」と「ICタグシステム」を連携させたシステムのプロトタイプを開発した。このシステムにより、物流過程における荷物ごとのCO2排出量を実際に把握・表示できるようになり、物流事業者にとっては運行ごとの環境対策の効果を定量的に測定でき、また消費者にとっては運搬された商品の物流過程における実際のCO2排出量を知ることが可能になった。第二に、環境境配慮型ロジスティックスを積極的にマーケティング活動へ結びつけるために、環境マーケティングの視点から顧客の購買単価といった経済効率と、配送時のCO2排出量という環境効率の両者の関係についてモデル化を行い、シミュレーションを行って両効率を同時に向上させるための取るべき施策を分析・提案した。さらに、消費者の環境配慮型商品の購買について行動分析を行い、消費者が同商品の購買を抑制してしまう要因を明らかにした。研究成果の一部については国内外で研究発表を行うとともに、大学や連携企業と共同で検討を重ねた。本研究では、環境調和型ロジスティクスシステムを対象に、「サービス向上と在庫削減を狙いとするサプライチェーンの観点」と「CO_2排出や資源節約等の環境問題の観点」という二つの視点、すなわち利潤追求という企業経営的側面と環境負荷低減という社会貢献的側面を考慮し、持続社会の実現という人類の要求を満足するための新たな物流パラダイムを提案することを目的とし、以下の研究を行った。1.昨年度開発したトラック燃料計-ICタグ連携システムを用い、物流プロセスにおけるCO_2排出量の動的な把握とその可視化の活用方法を検討した。これによって、商品のライフサイクル、特に物流過程におけるCO_2排出量を把握・按分して消費者に周知し、それを購買の判断材料にするというパラダイム実現のための基礎的方法を得た。2.CO_2排出量削減のモーダルシフト促進のために、トラック・鉄道・船舶を対象に海陸一貫の輸送手段選択を支援するシステム開発を行い、コストと環境に配慮した意思決定支援システムを構築した。また、CO_2吸収とも強く関連する木材の活用とその流通過程について、国産・輸入材の両流通過程で生ずるCO_2排出量の現状を調査し、CO_2排出量を削減する林業のマネジメントモデルを提案してその効果を示した。

3.環境配慮型ロジスティクスについて、宅配やレストラン事業の物流サービス事例に着目して環境マーケティングの視点から分析を行った。顧客の購買単価と配送過程で生じるCO_2排出量の関係性や、物流サービスにおける顧客・従業員らのベネフィットについて分析を行った。これらの研究は、連携する企業と大学間の共同によって検討を重ねた。成果の一部については、書籍執筆・国内外の研究発表を行うとともに論文誌への投稿を行った。
発光相関法による短波長領域フェトム秒光パルスの時間幅測定法の開発

(1)紫ー青色領域波長可変ピコ秒レ-ザ-の発振とパルス幅短縮化:モ-ド同期cw NdーYAGレ-ザ-(Antares 76s、出力25W)の第3高調波(出力500ー600mW)による同期励起色素レ-ザ-発振特性の測定を行なった。色素としてスティルベン3を用い出力100ー150mW、可変波長範囲410ー460nmのパルス光を得た。パルス幅測定は、高速スキャンマイケルソン干渉計とBBO結晶を使用した第2高調波発生法(自己相関法)により1ー1.4psの値を得た。この同期励起色素レ-ザ-に可飽和色素を併用することによりパルス時間幅の短縮化を試みた。可飽和色素にNK557(日本感光色素製)あるいはクマリン7を用いた場合1ps以下のパルスが得られた。出力強度は1/3程度に減少した。しかしながら長時間安定性のみならず、個々のパルスの強度変動、位置変動が無視できない等出力安定度が極めて低い。(2)発光相関法に使用する高精度の高速スキャンマイケルソン干渉計を新たに製作した。この干渉計は、Arレ-ザ-励起R6G色素レ-ザ-のフェトム秒パルス光の時間幅測定で検討した結果、2レ-ザ-ビ-ム間の干渉パタ-ンが測定可能な精度をもっていることが判明している。(3)またこの干渉計を使用し、発光相関法による相関波形の測定を試みた。試料としては、分子線エピタキシ法により成長したZnSe薄膜とCdSバルク結晶を使用した。その結果何れの試料においても第2高調波発生自己相関波形と同様な発光相関波形が得られた。しかしながら、主にレ-ザ-出力安定度が極めて低いため、両者の詳細な比較検討が可能な精度をもつ結果を得ることは非常に困難であることが判明した。したがって今回試みた発光相関法による測定は、BBO結晶等の非線形結晶が適用できないような短波長域の光パルス幅の目安になるとは言えよう。(1)紫ー青色領域波長可変ピコ秒レ-ザ-の発振とパルス幅短縮化:モ-ド同期cwNdーYAGレ-ザ-(Antares 76s、出力25W)の第3高調波(出力500ー600mW)による同期励起色素レ-ザ-発振特性の測定を行なった。色素としてスティルベン3を用い出力100ー150mW、可変波長範囲410ー460nm、パルス時間幅1ー1.4psの波長可変パルス光を得た。しかしながらYAGレ-ザ-本体の熱的設計に問題があり、出力安定度が極めて悪かった。この点を解決することにより現在は数時間にわたり安定な出力が得られている。可飽和色素にNK557(日本感光色素製)を用いた場合1ps以下のパルスのが得られた。出力強度の減少は1/3止りであった。また可飽和色素にクマリン7を使用したときも同様の結果を得た。今後可変波長域拡大を目指して、種々の色素による発振も試みる予定である。

この干渉計は、Arレ-ザ-励起R6G色素レ-ザ-のフェムト秒パルス光の時間幅測定で検討した結果、2レ-ザ-ビ-ム間の干渉パタ-ンが測定可能な精度をもっていることが判明している。上記レ-ザ-光のパルス幅測定には、この干渉計とBBO結晶を使用し、第2高調波発生法(自己相関法)を用いた。今後エピタキシャル成長したZnSe薄膜結晶、あるいはバルクCdS結晶等を用いて発光相関信号の測定を行ない、自己相関法によるレ-ザ-パルス波形との比較検討を行なう。モ-ド同期cw NdーYAGレ-ザ-(Antares 76s、出力25W)の第3高調波(出力500ー600mW)ポンプによる同期励起色素レ-ザ-光(色素:スティルベン3、出力100ー150mW、可変波長範囲410ー460nm)に対して、高速スキャンマイケルソン干渉計とBBO結晶を使用し、第2高調波発生法(自己相関法)によるパルス時間幅測定を行ない1ー1.4psの値を得た。またこの干渉計を使用し、発光相関法による相関波形の測定を試みた。試料としては、分子線エピタキシ法により成長したZnSe薄膜とCdSバルク結晶を使用した。その結果何れの試料においても第2高調波発生自己相関波形と同様な発光相関波形が得られた。しかしながら、両者の詳細な比較検討が可能な精度をもつ結果を得ることは非常に困難であることが判明した。その原因としては、本システムではArレ-ザ-励起R6G色素レ-ザ-と比較して出力安定度が極めて低い(長時間安定性のみならず、個々のパルスの強度変動、位置変動が無視できない)。また自己相関波形から類推するに、得られたパルス波形もトランスフォ-ムリミテッドには程遠いもの考えられる。したがって今回試みた発光相関法は、BBO結晶等の非線形結晶が適用できないような短波長域の光パルス幅の目安になるとは言えよう。なお、本年度に入り第3高調波発生用BBO結晶の破損、レ-ザ-ヘッドであるランプハウスの破損等思わぬトラブルが続き、十分な結果が得られなかったことを反省し、また付記しておく。
東方教父における神化－ニュッサのグレゴリオスにおける人間理解をめぐって－

原典に基づいてニュッサのグレゴリオスにおける神化思想の内的構造及び教父に先行する他思想との影響関係を検証する研究を遂行した。追究された内容は日本宗教学会での発表において成果が示された。神化の内的構造を追究するために、徳(アレテー)の概念に改めて焦点を当て、古代ギリシャ思想との比較を通して、グレゴリオスにおける徳の位置づけを検証した。N.グレゴリオスは、人間の完成をアレテーによって特徴づけており、ギリシャ以来受け継がれてきたこの概念を受容・変革しつつ、キリスト者としての生の中核に位置づけて論じている。アレテーは、人間が善なるものを宿し、自らの自由意志と神の恩寵との協働によって「神の似姿」になってゆく神化のプロセスを担うものと考えられ、とりわけ『モーセの生涯』など晩年に至るにしたがい言及されることの多くなってくる概念である。ヘレニズム文化を吸収したキリスト教の教父であるグレゴリオスにおいて、ギリシャに由来するアレテーという概念がいかに受容され同時に変容されているのかの様相を見極めるために、先の学会発表・論文においては、グレゴリオスの論じる「敬虔に即した徳」についての記述を検討の起点に据え、彼の指し示す徳の射程を考察した。本論において特に強調した点は、ソクラテス的な愛智の精神との共鳴点を有しつつも、グレゴリオスにおいては人間知性の否定の契機が徳の形成に重要であると考えられている点である。更に、こうしたキリスト教神秘主義的な知に支えられた徳は、見えざる超越者の具体化として捉え直された人間の善への道程が、自己と神のあいだのみならず、倫理的視野(自己と他者の関係)を有するという点についても言及した。27年度が最終年度であるため、記入しない。本研究は、主に四世紀のギリシャ教父ニュッサのグレゴリオスのテキストを中心に、知的・修道的活動の中で成熟していった教父の神化思想を通して、西欧近現代以降に主流をなすようになった人格把握に対して、新たな人間観と一視点を提示することを目的とするものである。2013年度は計画書に記したとおり、1、神化の内的考察2、思想形成を促したものについての考察、の二つを基調に行った。1のための必須の作業として、ニュッサのグレゴリオスによる『マクリナの生涯』(VIITA S. MACRINAE)、『完全性について』(DE PERFECTIONE)などの原典講読を行った。未だ邦訳のないこれらの文献を講読の主な材料とし、キリスト教における修道精神が、受肉や神化といった教理的側面といかに結びついているのかの検討を目指した。2では、四世紀における正統教理の構築過程を考察対象とし、哲学的思弁の中で高度に展開された神学議論の焦点を探ることが目指された。本研究では、ギリシャ的教養の受容によって当時のキリスト教世界にもたらされた、揺らぎ(異端的見解)と定式化のせめぎ合いの過程を、「ウシア」「ヒュポスタシス」「エネルゲイア」などの概念に着目しつつ考察し、これら闊達な神学議論がキリストの神人性への問いを軸に展開されてきたことを確認した。また、ここからキリスト教に特異な教義である三位一体論、聖霊論が形成・発展していった経緯を把握するよう努めた。教父たちは母語であるギリシャ語と高度な古典の教養でもって、キリスト教の素朴な教えを普遍化しようとした。その際教理の定式化に寄与したのが哲学の諸概念であったが、翻ってそれが別様の仕方で聖書解釈に援用されると異端的見解の誕生ともなり得る。四世紀の教会史は正統と異端を巡る争いともなったが、正統派は合理性の枠を用いて非合理なものを含み持つ宗教の教えを説明し尽くすことはなかったと言える。人間理性を絶対視するのでもなく、かといって盲信へ偏ることも良しとしなかった教父たちの知的営為は、非合理なものをいかに知解するのかという問題への取り組みであったと同時に、信ずること(信仰)の本質に迫る手がかりを与えてくれるものでもあると思われる。本研究は、四世紀のギリシャ教父ニュッサのグレゴリオスのテキストを中心に、知的・修道的活動の中で成熟していった教父の神化思想を通して、西欧近現代以降に主流をなすようになった人格把握に対して、新たな人間観と一視点を提示することを目的とするものである。昨年からのテーマを引き継ぎ、グレゴリオスにおける神化思想の内的構造を検証する基礎的な研究を行った。本年度は、グレゴリオスの擁したキリスト教的人間観がいかに哲学的思索との絡み合いの内に構築されたものであるのかを、古典ギリシャ思想との比較検討を通して考察した。キリスト教において人間は神の像として造られたと考えられているが、そうした神の像への成長・変遷過程を説くにあたって、グレゴリオスは単に聖書の記述やキリスト教内部の伝承に基づいて論じるのみならず、ギリシャ由来の諸概念を、それらの概念が伝統的に意味してきた内実を深く理解し吸収したうえ積極的に使用している。そうした彼の哲学的思索の一端を明らかにするために考察の軸とされたのは、ピュシス概念である。ギリシャの先人たち、「哲学」にとっていわば関心の中核に据えられていたとも言えるこの概念を、初期のキリスト教会の父であるグレゴリオスは、自らの宗教・信仰の内へと批判的に受容している。本研究では、古代ギリシャ世界におけるピュシスの意味内容を概観したうえで、それがキリスト教の源泉たるヘブライに由来する無からの創造の観念と衝突する面を持つ点に着目した。

グレゴリオスはピュシスのギリシャ的用法を基本的な意味において押さえつつ、造られた存在者である人間のピュシスとその超出性についての洞察を示すことで、この概念を人間が神へ向かってゆく契機を語る際のひとつの人間的根拠として用いている。尚、上記の研究結果から得られた成果は、学会での口頭発表、学会誌への投稿・掲載というかたちで実現された。原典に基づいてニュッサのグレゴリオスにおける神化思想の内的構造及び教父に先行する他思想との影響関係を検証する研究を遂行した。追究された内容は日本宗教学会での発表において成果が示された。神化の内的構造を追究するために、徳(アレテー)の概念に改めて焦点を当て、古代ギリシャ思想との比較を通して、グレゴリオスにおける徳の位置づけを検証した。N.グレゴリオスは、人間の完成をアレテーによって特徴づけており、ギリシャ以来受け継がれてきたこの概念を受容・変革しつつ、キリスト者としての生の中核に位置づけて論じている。アレテーは、人間が善なるものを宿し、自らの自由意志と神の恩寵との協働によって「神の似姿」になってゆく神化のプロセスを担うものと考えられ、とりわけ『モーセの生涯』など晩年に至るにしたがい言及されることの多くなってくる概念である。ヘレニズム文化を吸収したキリスト教の教父であるグレゴリオスにおいて、ギリシャに由来するアレテーという概念がいかに受容され同時に変容されているのかの様相を見極めるために、先の学会発表・論文においては、グレゴリオスの論じる「敬虔に即した徳」についての記述を検討の起点に据え、彼の指し示す徳の射程を考察した。本論において特に強調した点は、ソクラテス的な愛智の精神との共鳴点を有しつつも、グレゴリオスにおいては人間知性の否定の契機が徳の形成に重要であると考えられている点である。更に、こうしたキリスト教神秘主義的な知に支えられた徳は、見えざる超越者の具体化として捉え直された人間の善への道程が、自己と神のあいだのみならず、倫理的視野(自己と他者の関係)を有するという点についても言及した。先に挙げた基礎研究を基にまとめられた論文を、1学会や研究会等での口頭発表、2学会誌への投稿というかたちで達成することができたため。27年度が最終年度であるため、記入しない。本研究のテーマである「神化」に関わりがありそうに思われる他の概念にも着目し、教父における哲学受容、および信仰と理性の関係について理解を深めてゆくことが求められる。ほぼ計画書に記したとおりの手順で研究を行っている。ギリシャ教父とギリシャ古典の比較、および教父と異端・異教の比較についてのより詳細な検討を行うために、主に計画の2に関して、今後はグレゴリオス自身のテキスト(主に教理的著作)とつき合わせての追究が必要であると思われる。
マイコバクテリアの細胞壁生合成に関わる候補遺伝子の機能解析

マイコバクテリアの免疫回避機構として、脂質に富む細胞壁の糖脂質群が重要な要因の一つとして示唆されている。それら糖脂質の生合成に関わるとされる酵素の活性を下降制御したマイコバクテリア変異株を用いて、防御機構における糖脂質群の生理学的な意義を明らかにする。本研究では、LM/LAMの生合成に関わる酵素の遺伝子改変をおこなったマイコバクテリア変異株を作成し、宿主の免疫に対する防御機構に関わるとされるLM/LAMについて、細胞壁の構造における役割を調べた。【目的】結核菌の脂質に富む細胞壁によって人の体内で免疫を防御されることが、結核の感染成立する主要因の一つと考えられている。免疫反応を防ぐのに重要な役割を担っている細胞壁構成成分としてGPIアンカー型糖脂質、phosphatidylinositol mannosides(PIM)とlipomaman(LM), lipoarabinomannan(LAM)があり、生合成経路について、その詳細が解明されつつある。しかし、生合成に関わるとされているいくつかの酵素については機能が未解明であり、その究明を行う。1、「細胞壁生合成に関わる酵素、Pmhの発現低下する変異株の作成」菌体のPIM/LM/LAMの生合成経路において生存に必須な遺伝子発現を任意に制御することにより、生菌にて直接的に生合成へ影響を与えて未解明な酵素の機能を検証する。成果として、PIM/LM/LAMの生合成に関わるPmh4-6の内、結核菌による免疫回避機構において重要な因子のLM/LAMの生合成に関わる酵素、Pmh6について発現下降制御株の構築を行った。獲得した変異株を用いて生化学的検証を開始した。2、「PIMの生合成に関わる酵素であるAcylT及びPimB'の局在の解明」これらの酵素は予想される膜貫通領域が無く、どのように細胞膜に局在しているのかは明らかではない。これらの酵素が膜貫通領域を有しないのに、どのような作用機序にて細胞膜に局在しているのかについて検証する。成果として、AcylT及びPimB'の過剰発現株の構築を行った。獲得した変異株についてショ糖密度勾配遠心法を用いて局在する細胞膜画分を採取し、生化学的検証を開始した。免疫反応を防ぐのに重要な役割を担っている細胞壁構成成分としてGPIアンカー型糖脂質、phosphatidylinositol mannosides(PIM)とlipomannan(LM),lipoarabinomannan(LAM)があり、生合成経路について、その詳細が解明されつつある。「細胞壁生合成に関わる酵素、MSMEG-4241(Pmh6)の発現低下する変異株の作成」菌体のPIM/LM/LAMの生合成経路において生存に必須な遺伝子発現を任意に制御することにより、生菌にて直接的に生合成へ影響を与えて未解明な酵素の機能を検証する。成果として、結核菌による免疫回避機構において重要な因子のLM/LAMの生合成に関わる酵素、Pmh6について発現下降制御株の構築を行った。獲得した変異株を用いた生化学的検証により、LM/LAMの生合成が抑制され、LM様産物の生合成が確認された。興味深いことにMiddlebrook 7H9で培養すると、増殖に影響はなかったが、PPLO複合培地では、発現制御された株と野生株を比較すると増殖に差が生じた。現在、培地組成の違いが菌体増殖に影響を与えているのか、あるいは別の要因が関わっているのか検討している。
味覚の敏感さを利用した新たなカリエスリスク判定法の可能性

本研究の目的は、「味覚の敏感さを利用した、簡便で侵襲性も低いカリエスリスク判定法」の実現可能性を検証することにある。ショ糖は「う蝕発生に最も影響を及ぼす食物」と考えられており、これを頻回もしくは多量に摂取するとカリエスリスクが高まることは衆知の事実である。しかしながら「その摂取量や頻度はどう決定されているのか?」という点に関しては未だ不明な点が多い。実は先天的な味覚の敏感さが摂食行動に影響している事は以前から報告されていた(例:味覚の敏感な子供は、味の濃い食べ物を好まない、等)。また、近年では苦味や甘味に鈍感な子供は、ショ糖の摂取回数および頻度が高く、結果的にカリエスリスクが高まる可能性があることが報告されている。このような背景から、「味覚に対する敏感さを調べることにより、カリエスリスクを判定する」可能性を検証する。まずは研究対象者を「PROP test」という方法により、「Super-taster」(=味覚がとても敏感な人)、「Medium-taster」(=同じく中程度の人)および「Non-taster」(=敏感ではない人)の3群に区分する。その上で、各群における研究対象者のう蝕歯数およびDMFT指数をカウントした。得られた結果は統計学的検討を行った。すなわち、「味覚がとても敏感」である群ではう蝕が少なく、敏感でなくなるにつれ、う蝕が増加する可能性が確認された。ただし、現時点ではまだ予定サンプル数に達していない。ゆえに、次年度においても検証の継続が必要と考えられる。研究開始に先立ち、学内研究倫理審査委員会への研究申請を行い、承認を得たが、約3ヶ月を要した。平成30年度の当初計画は以下の通りであった。《(1).学内疫学研究倫理審査委員会への研究申請》(担当:荒川)《(2).研究対象者への研究協力依頼ならびに臨床診査。なお、目標症例数は100例とした。調査方法:まず最初に、「Super-taster」(=味覚がとても敏感な人)、「Medium-taster」(=同じく中程度の人)および「Non-taster」(味覚が敏感な人(Taster)と敏感ではない人(Non-taster)を区分し、各々の存在比率を調べる。その上で、両者間における以下の違いを調べる。1DMFT/dmf 2飲食回数甘味の摂取頻度(食生活に関する問診表に対し、回答を得る)3唾液中におけるS.Mutansレベル4全身疾患5プラークインデックス(PII) 6フッ化物利用状況7唾液分泌能および緩衝能。同時にカリエスリスク判定ソフト"Cariogram"を利用して、将来的なう蝕発生の可能性を算出する(担当:荒川、金子)。《(3).データの解析》得られたデータは個人名を匿名化したのちに、統計解析する(担当:金子)。(1).については、上述の通り約3ヶ月を要したものの承認を得た。(2).については、研究対象者への研究協力依頼を行った。その結果、現時点で約四十数名から研究協力への快諾を得ることができた。また初年度の臨床審査を既に済ませた。(3).については、現時点ではまだ予定サンプル数に達していないため、最終結果は未定である。【平成31年度以降】《1前年度の総括》平成30年度の研究成果を総括し、診査調査手法等に問題点があれば改善する。《2前年度結果との比較》本研究の対象被験者には、継続して口腔内の管理にあたることが可能な者を想定している。ゆえに、研究開始時点より1年後(=平成31年度)および2年後(=平成32年度)における追跡を行う。また、前年度にCariogramにて算出したう蝕発生の可能性と、現実のう蝕発生率を比較、検討する(担当:荒川、金子)。《3研究の継続》引き続き目標症例数に達するまで研究を継続する。《4味覚の敏感さを利用した新たなカリエスリスク判定法の実現に関する最終報告書の作成》学会発表および論文発表を行う(担当:荒川、金子)。

ただし、現時点ではまだ予定サンプル数に達していない。ゆえに、次年度においても検証の継続が必要と考えられる。研究開始に先立ち、学内研究倫理審査委員会への研究申請を行い、承認を得たが、約3ヶ月を要した。平成30年度の当初計画は以下の通りであった。《(1).学内疫学研究倫理審査委員会への研究申請》(担当:荒川)《(2).研究対象者への研究協力依頼ならびに臨床診査。なお、目標症例数は100例とした。調査方法:まず最初に、「Super-taster」(=味覚がとても敏感な人)、「Medium-taster」(=同じく中程度の人)および「Non-taster」(味覚が敏感な人(Taster)と敏感ではない人(Non-taster)を区分し、各々の存在比率を調べる。その上で、両者間における以下の違いを調べる。1DMFT/dmf 2飲食回数甘味の摂取頻度(食生活に関する問診表に対し、回答を得る)3唾液中におけるS.Mutansレベル4全身疾患5プラークインデックス(PII) 6フッ化物利用状況7唾液分泌能および緩衝能。同時にカリエスリスク判定ソフト"Cariogram"を利用して、将来的なう蝕発生の可能性を算出する(担当:荒川、金子)。《(3).データの解析》得られたデータは個人名を匿名化したのちに、統計解析する(担当:金子)。(1).については、上述の通り約3ヶ月を要したものの承認を得た。(2).については、研究対象者への研究協力依頼を行った。その結果、現時点で約四十数名から研究協力への快諾を得ることができた。また初年度の臨床審査を既に済ませた。(3).については、現時点ではまだ予定サンプル数に達していないため、最終結果は未定である。【平成31年度以降】《1前年度の総括》平成30年度の研究成果を総括し、診査調査手法等に問題点があれば改善する。《2前年度結果との比較》本研究の対象被験者には、継続して口腔内の管理にあたることが可能な者を想定している。ゆえに、研究開始時点より1年後(=平成31年度)および2年後(=平成32年度)における追跡を行う。また、前年度にCariogramにて算出したう蝕発生の可能性と、現実のう蝕発生率を比較、検討する(担当:荒川、金子)。《3研究の継続》引き続き目標症例数に達するまで研究を継続する。《4味覚の敏感さを利用した新たなカリエスリスク判定法の実現に関する最終報告書の作成》学会発表および論文発表を行う(担当:荒川、金子)。物品費および旅費については本学の「学内個人研究費」を充てることが可能であったため。
ケミカルバイオロジー的方法論を活用した『人工ビオチン』誘導体の開発と応用

研究代表者は、ケミカルバイオロジー研究に汎用されるビオチン・(ストレプト)アビジンシステムの更なる高機能化を目的として、約16万に及ぶ低分子化合物ライブラリーの中から新規(ストレプト)アビジン結合分子の探索を行った。その結果、1μMオーダーで目的タンパク質と結合する新規化合物を得ることに初めて成功した。更に、X線結晶構造解析やドッキングシミュレーションにより新規リガンドとタンパク質との結合様式について知見を得た。平成24年度は、平成23年度に実施したスクリーニングの結果を基に以下の実験を行った。1.ストレプトアビジン結合分子の探索・・・23年度の検討では卵白アビジンを用いて評価を行ったが、生物応用を考えると非特異的な結合が起こりにくいとされるストレプトアビジンを用いるほうが望ましい。そこで、前年度得られた化合物群に対してストレプトアビジンとの結合試験を行い、天然ビオチンとは異なる骨格を有する新規ストレプトアビジン結合分子を見出した。ここで得た分子について蛍光偏光法ならびにSPRにより乖離定数を求めたところ、強いものでは1マイクロM程度であった。2.ドッキングモデルの作成・・・東京大学創薬オープンイノベーションセンターの多田幸雄研究員と協力して、既報のX線結晶構造解析の結果を基に新規結合分子とタンパク質との相互作用様式をシミュレーションした。これにより結合に重要と思われる部位が同定され、誘導体の設計に対する一定の指針が得られた。3.新規結合分子とストレプトアビジンとのX線結晶構造解析・・・大阪大学大学院理学研究科の杉山成准教授と共同で、得られた新規結合分子とストレプトアビジンとの複合体X線結晶を取得した。この結晶をSpring8で解析することで、化合物が確かに天然ビオチンと同一の結合ポケットに入っていることを証明した。また詳細な結合様式の解明により、更に強力な結合分子を合成するための明確な設計指針が得られた。期間全体の成果について述べると、本研究において研究代表者らは、ケミカルバイオロジー研究に汎用されるビオチン・アビジンシステムの更なる高機能化を目的として、16万に及ぶ化合物ライブラリの中から新規(ストレプト)アビジン結合分子の探索を行った。その結果、1マイクロMオーダーで目的タンパク質と結合する新規化合物を得ることに初めて成功した。更に、その結合様式についても明らかにした。平成23年度は、アビジン結合分子の探索に向けた評価系の開発とスクリーニングを実施した。以下、それぞれの概要について説明する。1.蛍光偏光法を用いた評価系の開発研究代表者らによる予備的検討の結果タンパク質のビオチン結合ポケットに弱く結合することが見出されているdiMe-biotinに対してリンカーを介して蛍光団(fluorescein)を修飾した化合物を合成した。続いて、アビジン存在下において化合物の蛍光偏光が上昇すること、およびビオチン添加によりこの上昇が抑制されることを確認した。更に、スクリーニングへの展開を念頭において化合物濃度やタンパク質濃度、インキュベーション時間、DMSO濃度など様々なパラメータを変化させ、384穴プレートにおける最適な評価条件を設定した。2.化合物ライブラリーを用いたハイスループットスクリーニング1.の結果を受け、東京大学創薬オープンイノベーションセンターから提供された化合物(およそ160000)を用いて、アビジン結合小分子の一次スクリーニングを行った。この実験においては得られる測定データが膨大であったため、コンピュータにより自動で適切なデータ処理を行うプログラムを作成した。一次スクリーニングの結果、平均値より4SD以上の変化を示した化合物をヒットと判定し、再現性試験へと進めた。ここで再現性が得られた化合物に関しては濃度依存性試験を行い、およその結合定数を決定した。これらの実験の結果、当初の狙い通りアビジンに対して結合能を有する天然ビオチン以外の骨格を取得することに成功した。今後の構造変換により、目標である「ビオチン添加により溶出可能な"程良い"結合力を有する人工ビオチン」や「光や酵素などの刺激存在下においてのみ複合体が形成される"機能性"人工ビオチン」の創製が可能になると期待される。当初の計画通り、「評価系の開発」ならびに「化合物ライブラリーを用いたスクリーニング」を実施した。蛍光偏光アッセイ用のプローブ分子の開発は非常に順調に進行した一方で、384穴プレートを使った大規模スクリーニングは、研究代表者らにとって経験が浅い分野であったこともあり条件検討に想定以上の時間がかかった。また、化合物ライブラリーの他の利用者と機器を共有している問題から、必ずしも研究代表者の希望通りのスケジュールでアッセイが実施できるとは限らなかった。しかしながら、結果的には上記の困難を克服してスクリーニングを年度内に無事に終了できたため、全体としてみればおおむね順調な進捗状況と判断されよう。更に、23年度の最大目標であった「新規アビジン結合分子の発見」を達成できたことは、24年度以降の研究につながる重要な研究成果であった。今後はまず、得られた化合物が(ストレプト)アビジンに対して特異性を有しているかを確認すると共に、構造活性相関の精査を通じてより優れた化合物の設計と合成を目指す。具体的には、細胞ライセートや血清中での結合試験、ライブラリー内にある構造類似体に対するアッセイなどを行う。

また、(ストレプト)アビジンについては代表者ら自身の研究によって化合物結合時の立体構造が明らかになっているため、コンピュータによるドッキングモデルの作成やX線結晶構造解析による結合様式の解明と、その知見に基づく論理的な分子設計も積極的に導入していく方針である。これらの実験の結果、nM以下のオーダーで特異的に結合する誘導体が得られれば、阻害剤として知られている薬剤を結合させてアフィニティー精製へと応用したり、蛍光団を導入して抗体染色へと応用することで、従来の天然ビオチンに対する新規分子の優位性を示していきたい。24年度は、ヒットとして得られた分子の誘導体合成、および、X線結晶構造解析(大阪大学、SPRING-8との共同実験)やSPRによる結合様式の解明を行う計画である。従って、研究費の用途としては「有機合成試薬」、「生化学実験消耗品」、「共同実験のための旅費」、「成果発表・情報収集のための学会参加費」が主になる予定である。ここで、23年度において「次年度使用額」が生じたのは、必要な消耗品費、特に化合物の購入費用が当初の想定よりも若干少なかったためと、共同研究の打ち合わせをメール等で行った場合が多かったことにより旅費が少なかったためである。なお、これは金額として大きなものではないため、24年度の使用計画に影響を与えるものではない。
マンノース6-燐酸非依存性のリソソーム酵素の識別機構

リソソームの可溶性酵素はマンノース6-燐酸受容体によって認識され、また、膜蛋白質のあるものはC末端のTyr含有ペプチドが移行シグナルとなり、リソソームへ輸送される。グルコセレブロシダーゼ/β-グルコシダーゼ(GC)はこれらいずれの機構にもよらず、第三の識別機構が存在すると考えられる。GCは生合成途中より膜結合型となり、また、糖鎖付加阻害剤ツニカマイシン存在下でも正しく選別される。そこで、今年度は膜結合に関与するGCの構造解析と結合蛋白質について検討した。GCのcDNAより、末端や内部配列を欠損した変異型を作成し、プラスミドに挿入後、cRNAを調製した。これを兎網状赤血球系で翻訳させ、対応する各種^<35>S-標識変異型GCを作成した。膜標本はHepG2細胞より得たミクロソーム画分をpH10.6-0.2%サポニンで処理したものを用いた。全長の^<35>S-GCと膜との結合はpH5.5で最大を示し、ヒト胎盤GCで阻害された。しかし、変異型GCはどれも明確なピークを示さず、また、拮抗阻害も見られなかった。これらの事実は、結合には特定の部位だけではなく、一定の三次構造も必要であることを示唆している。更に、胎盤GCを結合した膜をトリトンで可溶化し、抗GC抗体とプロテイン-Aゲルにより、GCに会合する蛋白質をSDS-PAGEで調べると、57kDaの蛋白質がpH5.5でのみ共沈した。また、膜蛋白質を可溶化後、SDS-PAGEにかけ、ニトロセルロース膜へ転移させ、全長の^<35>S-GCを用いてリガンドブロッテイングを行なうと、pH5.5で55-59kDaにバンドが出現するが、pH8では検出されなかった。これらのことから、57kDa蛋白質がGCに結合し、その選別輸送に関与している可能性が考えられ、今後、さらに追究して行きたい。
高速度ビデオシステムによる癌細胞のリンパ管壁への接着機序の解析

平成7年度はマイクロマニュピュレーターを移動ステージ上に乗せて、ラット腸間膜内の細動脈、毛細管細静脈、リンパ管内にAH130肝癌細胞を注入して、各脈管内での運動を高速度ビデオで記録解析する予定であった。しかし移動ステージ上にマイクロマニュピュレータを搭載することが技術的に無理であった。そのため平成6年度と同様、AH130を頸動脈から大動脈内に注入する系を用い、無処置群を対照としてヘパリン投与、プロスタグランジンE1,I2(PGE1,PGI2)投与別に各脈管内でのAH130の運動を観察した。無処置群では赤血球、白血球のSluggingがすぐに起こり、AH130はそれらの血球の間に閉じこめられてしまう。ヘパリン、PGE1,PGI2投与群では白血球の細動脈壁への膠着は起こるが、赤血球の流れはスムースでAH130は細動脈内をひっかかりながらも通過していく像が記録された。毛細管後細静脈、リンパ管内のAH130の運動を記録しようと、小腸壁内、パイエル板内にAH130を注入したが、AH130が漿膜面へ漏出してしまうためきれいな画像が得られなかった。腸間膜リンパ節内へ注入すればリンパ管内の観察が出来ると考えたが、厚い脂肪組織に透過光が遮られ、観察は不可能であった。血小板凝集抑制作用のある薬剤で癌細胞の細動脈内での停滞を防止できることは確認したが、生体での転移経路である静脈、リンパ管内での運動の解析はまだ出来ていないのが現状である。癌細胞の微小血管、リンパ管内での動態を高速度ビデオで観察し、内皮との接着態度を解析することを目的とした。ラット、ハムスター、マウスと動物を変えて腸間膜、肝臓の微小循環を観察し、再現性のある観察システムの確立をめざした。その結果、ラット腸間膜での観察系では化学発癌細胞由来のAH130頚動脈から大動脈へ注入すると細動脈を流れることは記録ができたが、後毛細管静脈ではなかなか観察できなかった。実際の転移では癌組織から逸脱した細胞は基底膜を破壊して静脈あるいはリンパ管へ入るわけであるから、なかなか静脈系へ流入してこない細胞を待っているのでは解析ができないと判断した。そのため静脈系、リンパ管系での癌細胞の流れ方を観察するため、マイクロマニュピレーター使用下に毛細管、リンパ管内へガラス針を刺入して癌細胞を注入する系の確立を試みた。しかし腸間膜の漿膜の弾力性のため、このガラス針の刺入が思ったより難しかった。また刺入に成功しても、顕微鏡の視野幅の点から脈管の下流まで観察できない欠点も明らかになり、現在観察系の改良中である。また肝転移モデルのため肝臓での微小循環を観察した。ラット肝臓の辺縁で門脈から中心静脈への血流は観察されるが、脾注した癌細胞は顕微鏡の視野に出てくるより、はるか上流の門脈で塞栓を起こしてしまう。蛍光染色した癌細胞を注入したときは視野の奥の方で蛍光が光って血流が途絶えてしまうだけであった。そのため癌細胞の注入の仕方なども検討中である。以上、本年度は基礎的な観察系の改良に時間がかかったので、予定の脈管内皮の接着分子と癌細胞の動態の観察解析は次年度に持ち越すことになった。平成7年度はマイクロマニュピュレータを移動ステージ上に乗せて、ラット腸間膜内の細動脈、毛細管後細静脈、リンパ管内にAH130肝癌細胞を注入して、どの脈管内での運動を高速度ビデオで記録解析する予定であったが、技術的に移動ステージ上にマニュピュレータの搭載が無理であった。そのため平成6年度と同様、ラットにAH130肝細胞癌を頚動脈から大動脈内に注入して腸間膜で各脈管内でのAH130の運動を観察した。

無処置ラットでは赤血球、白血球のSludgingがすぐに起こり、癌細胞は細動脈内でそれらの血球の間に閉じこめられてしまう。ヘパリン投与群では白血球の細動脈内壁への膠着は起こるが、赤血球の流れはスムーズで、AH130は細動脈内をひっかかりながらも通過していく像が記録された。PGE1,PGI2投与群でも細動脈内でのAH130の運動はほぼ同様であった。毛細血管後細静脈、リンパ管内のAH130の運動を記録しようと、小腸壁内、パイエル板内に癌細胞を注射したが、癌細胞が漿膜面へ漏出してしまうためにきれいな画像が得られなかった。腸間膜リンパ節へ注入すればリンパ管内の観察ができるかとも考えたが、実際には厚い脂肪組織に透過光が得られず、観察は不可能であった。血小板凝集抑制作用のある薬剤で癌細胞の細動脈内での停滞を防止できることは確認したが、生体での転移経路である静脈、リンパ管内での運動はまだできていないのが現状である。