hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
M2型マクロファージを介した慢性腎疾患（CKD）進展機序の解明と制御法の確立

慢性腎疾患の進展機序における抗炎症型活性化マクロファージ(M2)の機能およびその制御法について、腎生検標本を用いた免疫組織学的手法およびヒト単球由来マクロファージを用いたin vitro実験系を用いて検討した。その結果、M2は腎病変の局所において抗炎症作用を発揮する一方で、腎組織の慢性病変の形成に関与する可能性を見出した。さらに、腎疾患治療で汎用されるステロイド薬はM2作用を増強するが、慢性病変の進行を助長する可能性があり、CKD治療におけるM2制御には、ステロイドによるM2活性化の抑制効果を有する代謝拮抗薬等の免疫抑制薬の併用が有用と考えられた。本研究は、全てのCKDの終末像である糸球体硬化、間質線維化の形成に関与するM2型活性化マクロファージ(Mφ)の機能解析とその制御法を目的とし、臨床材料(腎生検組織)、動物モデルおよびin vitroの解析系を用いて解析を進めている。これまでに、ステロイド抵抗性の難治性ネフローゼ症候群の患者にLDLスカベンジャー受容体(CD36, CD204)陽性のM2型活性化Mφ浸潤が、ステロイド感受性の患者に比べて優位に多いことを明らかしている。また、ヒト単球由来のMφを用いたin vitroの解析系から、ステロイド薬および酸化LDLによりCD36陽性M2の直接的な活性化が起こること、また、これらの刺激により線維化促進因子であるTGF-β、FGF-2、EGFの発現、あるいは線維化とともに腎組織障害に強く関与することが知られているレニンーアンジオテンシン系(RA系)因子のうちレニンやACEの産生が更新することを見出している。さらに、すでに動脈硬化などの高脂血症が重要な因子となる病態でその関与が知られているmTORのシグナル伝達機構が、本研究対象となる難治性ネフローゼの病態にも関与している可能性を考え、現在その解析を進めている。本研究は、世界的に増加を続け大きな社会的問題となっている慢性腎疾患(CKD)について、これまで申請者が明らかにしてきたCKD増悪因子としてのマクロファーシ(Mφ)、特に慢性化病変の形成ならびに進展に寄与するM2型(抗炎症型)活性化マクロファージ(M2)に注目し、全てのCKD進展過程に共通するM2関連病態の解明およびその制御法を確立することが目的である。申請者らは、これまでに高脂血症を伴うステロイド抵抗性ネフローゼ症候群患者に、LDLスカベンジャー受容体(CD36, CD204)陽性Mφの糸球体浸潤が有意に増加することを突き止めている。さらに、正常ヒト単球を培養して誘導したMφにデキサメサゾン(DEX)もしくは酸化LDL(ox-LDL)をそれぞれ単独もしくは併用して添加する培養系を用いた網羅的なDNAアレイ解析により、DEX, ox-LDL併用時にのみFGF-1, FGF-2、angiotensinogenなどの線維化促進因子の発現が増強されることの他、IL-25やIL-33などのアレルギー疾患に関わるサイトカインの産生が増強することを見出し、現在これらサイトカインが腎疾患の難治化との因果関係を解析中である。本研究は、世界的に増加を続け大きな社会的問題となっている慢性腎疾患(CKD)について、これまで申請者が明らかにしてきたCKD増悪因子としてのマクロファージ(Mφ)、特に慢性化病変の形成ならびに進展に寄与するM2型活性化Mφに注目し、全てのCKD進展過程に共通するM2関連病態の解明およびその制御法を確立ことを目的としたものである。これまでに、小児ネフローゼ症候群(NS)の腎生検標本を用いた検討から、ステロイド抵抗性を呈するNS患児において、LDLスカベンジャー受容体を発現するM2型Mφの糸球体への浸潤が、ステロイド感受性患児と比較して有意に多いことを明らかにしている。今回さらに、ヒト単球由来Mφのin vitro実験系を用いたRNA発現の網羅的解析により、NS治療で用いられるステロイドおよび酸化LDLの刺激は、MφのM2型活性を誘導・助長し、FGF1, FGF2などの線維化促進因子の発現が有意に増加することを突き止めた。これらの結果から、ステロイドに代表される腎疾患治療薬は、ネフローゼ状態に伴う高コレステロール血症と相まって、糸球体へ浸潤するMφのM2活性を促し、線維化因子の産生を介した糸球体病変の形成が、治療抵抗化を生じる一要因となる可能性を見出した。腎生検検体を用いた解析ならびにin vitroの解析は順調に進行しているが、予定している動物実験の準備が動物施設使用上の時間的制約などにより遅れている。小児腎臓病学動物実験を行う上の実験計画の承認はすでに得られているが、時間的な制約により準備が遅れている。一方、新規に同定された腎疾患難治化に関わるいくつかの因子についてin vitroの実験系により解析を進める方針である。研究1年目に予定していた、臨床材料を用いた解析はほぼ予定通り進行している。

動物モデルの作成に用いる分担者用研究費が、動物実験の実施の遅れのために次年度計画に持ち越したため。その後、ラットの高脂血症下ネフローゼ症候群モデルを用いたin vivoでの解析により、in vitro実験結果を検証するとともに、治療法の検討を行う予定である。すでに、本学新動物施設における研修は済み、実験計画書の承認も得ている。動物実験の遂行に伴い使用予定であるが、動物実験の遂行が困難と判断した場合には、in vitro実験の消耗品費用として使用予定。H25年度末(H26年3月)購入分の物品の支払いが、H26年4月に経常されたため。H26年3月の時点で、物品(消耗品)は購入済みであり、残額はゼロとなっている。
フラックスによる固体酸化鉄精錬法の開発

Na_2OーB_2O_3系フラックスを用いて,鉄鉱石中の不純物をフラックス浸出法(850950^OC)または再結晶法(14001450^OC)により除去する実験を行った。フラックス浸出法で除去されるのは遊離および鉱石表面の不純物であった。再結晶法はさらに鉱石内部に存在する介在物の除去にも有効であった。8501450^OCの温度範囲において,温度上昇に伴ってSi,Al,Ca,Mg,MnおよびVの各濃度が減少した。この傾向は,温度上昇に伴う鉄鉱石の細粒化と凝固過程での晶出酸化鉄の割合の増加によって説明された。再結晶法によるαーFe_2O_3の高純度化における不純物の挙動を理解するためには,αーFe_2O_3結晶とNa_2OーB_2O_3フラックスの間の微量元素の分配係数に関する知識が不可欠であることがわかった。そこで,αーFe_2O_3結晶とフラックスの間のMn,AlおよびTiの分配係数を温度およびフラックス組成の関数として求めた。その際,αーFe_2O_3結晶の成長は,Fe_2O_3微粒子の凝集ではなく,Ostwald熟成機構によることがわかった。結晶成長において,Mn,AlおよびTiはαーFe_2O_3表面に平衡濃度を保ちながら取込まれることが明らかになった。また,これら元素の結晶中での拡散は,本実験では認められなかった。1000^OCにおけるαーFe_2O_3結晶ーNa_2O・2B_2O_3フラックス間のMn,AlおよびTiの分配係数はそれぞれ0.8,0.02および1であった。分配係数の温度依存性は,Mnについては負であったが,AlおよびTiについては正であった。MnはαーFe_2O_3結晶中でMn^<3+>として存在した。また,フラックス中でFeとMnはそれぞれFe^<3+>およびMn^<2+>として存在した。Na_2O-B_2O_3系フラックスによる鉄鉱石中の不純物の除去挙動とその機構を、フラックス浸出法と再結晶法を用いて検討した。Na_2O-B_2O_3系フラックス(Na_2O/B_2O_3モル比=1/42/1)と粉砕した鉄鉱石の混合物を、フラックス浸出法では850950°Cで、再結晶法では14001450°Cで加熱処理し、鉄鉱石中のSi、Al、Ca、Mg、Ti、V、Na、およびBの各不純物の挙動を調べた。その結果、以下の結論を得た。1)フラックス浸出法で除去されるのは遊離および鉄鉱石表面の不純物であり、不純物除去率と鉄歩留りの点でNa_2O・B_2O_3と2Na_2O・5B_2O_3の各フラックスが優れている。再結晶法はさらに鉄鉱石内部の介在物除去にも有効である。2)フラックスとしてNa_2O・2B_2O_3を用いた場合、8501450°Cの範囲で、温度上昇にともなってSi、Al、Ca、Mg、Mn、Vの各濃度が減少した。この傾向は、温度上昇にともなう粉鉱石の細粒化と凝固過程での晶出酸化鉄の割合の増加によって説明される。

さらにNaとBの濃度は1200°C付近で極大値を示し、Ti濃度は処理温度にほとんど依存しなかった。3)MBRテ-ブル精鉱をNa_2O・2B_2O_3フラックスを用いてW_<Flux>/W_<Ore>=1で処理した時の鉄歩留りは、両処理法とも約80%であった。本研究におけるフラックス法によれば、塩化鉄焙焼酸化鉄のような比較的純度の高い原料のみならず、ロメラル鉱石のような低品位の鉄鉱石を原料とした場合にも、高純度な酸化鉄を得ることが出来るということが明らかになった。Na_2OーB_2O_3系フラックスとFe_2O_3間のMn,AlおよびTiの分配比を8001100°Cで求めた。実験はNa_2O・2B_2O_3とB_2O_3をNa_2O/B_2O_3(モル比)=1/21/4になるように秤量混合し,これにFe_2O_3粉末(各温度におけるFe_2O_3溶解度の約1.5倍量)およびMnO_2(0.33%),Al_2O_3(0.35%)またはTiO_2(0.53%)を加え,Ptるつぼ中でPt棒により攪拌しながら848時間保持した。その後,試料を水中急冷し,フラックス中およびFe_2O_3結晶中のMn,Al,Ti濃度をEPMAおよび湿式分析により求めた。希硝酸によりフラックス分のみを溶解除去した後のFe_2O_3結晶は,Na_2O/B_2O_3(モル比)=1/2の場合は六角板状,1/3および1/4の場合は丸味を帯びた多面体であった。フラックス中のFe_2O_3濃度が実験時間に依存せず一定であるのに対し,これら結晶は時間と共に大きくなった。このことから,Fe_2O_3結晶合長機構は,小さい結晶が溶解し大きな結晶が成長するOstwald熟成機構であることがわかった。結晶の断面についてEPMAによりMnの線分析を行ったところ,結晶中にMnは均一に固溶していた。初期にMnを入れずに結晶を成長させ,1時間後にMnO_2を添加して24時間保持した実験で得られたFe_2O_3結晶断面の線分析では,中心部にMnを含まない領域が存在していることが判った。固相中でのMnの拡散は非常に遅く,Mnは拡散によってFe_2O_3中に入ったとは考えられず,固液間の平衡分配比を保ちながら結晶成長面に取込まれたと考えられた。AlおよびTiについても同様であった。Fe_2O_3結晶ーフラックス間のMn分配比(結晶中の全Mn濃度/フラックス中の全Mn濃度)は1000°CにおいてNa_2O/B_2O_3=1/2では1,1/4では0.8であった。いずれのフラックス組成においても低温ほど大きい値となった。また,Fe_2O_3結晶中にMnはMn^<3+>として存在することがわかった。一方,1000°C,Na_2O/B_2O_3=1/2において,AlおよびTi分配比はそれぞれ0.02および1であり,高温ほど高い値となった。つまり,Fe_2O_3の純化を考えれば,Mnは高温での,Al,Tiは低温での再結晶法が望ましいことになる。Si,B,Ca,Mg等についても温度依存性を求める必要がある。高温でフラックス中にFe_2O_3を完全に溶解し,急冷してガラスとした後,再加熱してFe_2O_3を晶出させるガラス結晶法により,鉄鉱石の純化を行うことが今後の課題である。
全方位カメラを用いたアイソセンタ定点式精度管理システムの構築

全方位カメラを用いてアイソセンタ定点式精度管理システム構築に向けてソフトを作成した。画像の歪み補正が困難であったが、放射線照射装置の回転中心というアプローチに変更することによりこれを解決した。カメラの設置位置が頭尾方向、左右方向、背腹方向へそれぞれ2 mm程度のずれであれば、中心位置座標へは影響を与えなかった。これにより画像歪みの影響、カメラの設置誤差をほぼ受けずにガントリー回転中心とレーザーとの関係性を検証できるシステムを構築できた。またレーザの位置同定の際も、距離を変えた複数点とすることにより精度を向上させた。従来の手法では専用の固定ツールを使用して定性的にしか評価できなかったメカニカルアイソセンタを定量的に検証することを可能にした。今後はコリメータアイソセンタや寝台のアイソセンタに関しても同様の手法により検証していくこととする。またプラスチックシンチレーションを使用したビーム位置同定システムに関しても進めていくこととする。全方位カメラの画像に歪みが存在することは当初から想定していたが、実際にその歪みを補正するために多くのパターンの画像取得が必要で、さらにその補正が複雑であった。その対応として回転中心を利用することで、メカニカルアイソセンタに関しては問題を解決できたが、そこへ至るまでのソフトウェア作成に要する時間が予想より長くなってしまったため、研究機関を1年延長することとした。今後はコリメータアイソセンタや寝台のアイソセンタに関しても今回開発したシステムにより検証していくこととする。全方位カメラを用いてアイソセンタ定点式精度管理システム構築のため、まずは全方位カメラを1台購入した。全方位カメラの画像は付属のソフトによって展開されるが、そこで展開される画像がどのように処理されたものであるかは不明のため、画像上の各座標が、実際の位置に対してどのような変形となっているかの検討を行うこととした。放射線照射装置の寝台にカメラを設置し、概ねメカニカルアイソセンタに中心と思われる位置を合わせた。カメラの設置誤差による位置補正も考慮し、ガントリ回転時の写真を左右、頭尾、背腹方向の3軸方向へそれぞれ1, 2, 5, 10 mmずらした写真を取得した。次にその画像を処理するソフトウェアの作成を行った。全方位カメラによって取得される画像の基礎特性を解析するため、カメラ位置が移動することに伴い、各座標がどのように変化していくかの評価を行なった。座標が変化することにより画像の歪みが強く出てくるため、各座標における画像の修正システムを検討中である。また作成したソフトウェア上における画像上のガントリ中心位置から、任意のガントリ位置におけるガントリ角度がどの程度かの計算を行えるようにした。ただし画像の歪み補正と合わせて検討する必要があるため、もう少し全方位カメラ画像の基礎特性を検討していく必要がある。基礎特性の解析を終えれば、幾何学的な検証を順次進めることが可能であるため、残りの期間で従来の手法とは異なる視点のQAシステム構築を進めていく。そのためソフトウェア作成に要する時間が予想より長くなってしまった。ソフトウェア作成後、実際に臨床現場で行なっている幾何学的な検証項目を全て評価し、既存の検証結果との比較検討を行う。

同時にプラスチックシンチレーションを用いて出力評価を同時にできるよう検討を行う。今後はコリメータアイソセンタや寝台のアイソセンタに関しても今回開発したシステムにより検証していくこととする。またプラスチックシンチレーションを使用したビーム位置同定システムに関しても進めていくこととする。研究進捗が遅れており、予定購入物品や予定していた出張が先送りされたため。全方位カメラの画像に歪みが存在することは当初から想定していたが、実際にその歪みを補正するために多くのパターンの画像取得が必要で、さらにその補正が複雑であった。その対応として回転中心を利用することで、メカニカルアイソセンタに関しては問題を解決できたが、そこへ至るまでのソフトウェア作成に要する時間が予想より長くなってしまったため、予定していた論文投稿や学会発表が先送りとなってしまった。
現代諸学にまつわる問題解決のためにクザーヌスの「無学者の思想」を活用する試み

本研究課題「現代諸学にまつわる問題解決のためにクザーヌスの『無学者の思想』を活用する試み」についての研究は、以下の点を明らかにした:2018年5月初旬にドイツで開催された学会で、'Naturphilosophie in Japan'と題する研究発表をして本研究課題を提示するとともに、ヨーロッパでは既に現代を「新人世」Anthropoceneと捉えることが定説化しているという知見を得た。これは、自然科学ならびにこれと密接に関わるテクノロジーとが、放射性物質などの人工物質および自然破壊等によって、地球上の地質年代に残る大きな影響を人間が作り出しているという認識である。この「新人世」という理解は、研究代表者が「現代諸学にまつわる問題性」として捉えてきたものと共通する点が多いので、この研究課題の現代的意義を確認できた。また、2019年1月下旬には、“Die Aktualitaet der Figur des Laien"というワークショップを開催し、Prof. SchwaetzerならびにDr. Zeyerと共に本研究課題を深めた。その際には、現代社会ではほとんどの成人が、一定分野における専門家として社会を担いつつも、その他の分野では「素人」「無学者」であるという構造をもっていることを指摘して、とりわけ専門性が強調される自然科学およびテクノロジーの分野での、「無学者」の視点の果たしうる可能性を提示した。さらに、2019年3月下旬には、ドイツで開催されたシンポジウムに参加して、「無学者の思想」の視点から自然を捉えることの重要性を指摘する研究発表を行い、「人新世」における自然科学およびテクノロジーの問題性に論及すると共に、その問題性をクザーヌスの「無学者の思想」、とりわけ人が<驚き>を尊重することによって克服する方策を提起した。本研究課題「現代諸学にまつわる問題解決のためにクザーヌスの『無学者の思想』を活用する試み」についての八巻和彦(研究代表者)自身の研究は、上記のような成果をもたらしつつ、ほぼ計画通りに進捗している。事前の計画よりも遅れ気味である点は、ドイツ以外の諸外国の同僚から本研究課題について協力を得る体制の構築である。Kim氏(米国)は、2019年9月までは自身のテニュアの審査を受けるための準備に集中したいとのことであり、またGuozzo氏(イタリア)ならびにBocken氏(オランダ)も、本務校での任務に目下忙殺されているとのことで、未だこの三氏も含めて一堂に会する集中討議が実現できていない。2020年2月までには実現したいと考えている。もし一堂に会しての討議が不可能である場合には、事前に八巻和彦の研究を送付した上で、自身がイタリア、オランダ、米国に出張して意見交換をするとか、書面での意見交換によって研究課題を深めることも考えている。研究代表者自身の日常的研究以外の推進方策は以下の点を予定している。2019年8月に佐々木力氏、吉見俊哉氏を訪問して、現代における学問研究にまつわる問題性について教示を受ける。2019年11月末にはドイツに出張して、Goettingenで開催されるAPHINのシンポジウムにおいて本研究課題に関わる研究発表をして、その学会に集う自然科学者ならびに技術者に意見を求める。その出張の際に、これまでの研究展開で重要な協力者の役割を担ってくれているProf. Schwaetzerと下記のワークショップについても相談して、準備を整える。2020年2月ごろに、ドイツで小さなワークショップを開催して、本研究課題を深めると共に、研究成果のまとめを展望する。

Kim氏(米国)は、2019年9月までは自身のテニュアの審査を受けるための準備に集中したいとのことであり、またGuozzo氏(イタリア)ならびにBocken氏(オランダ)も、本務校での任務に目下忙殺されているとのことで、未だこの三氏も含めて一堂に会する集中討議が実現できていない。2020年2月までには実現したいと考えている。もし一堂に会しての討議が不可能である場合には、事前に八巻和彦の研究を送付した上で、自身がイタリア、オランダ、米国に出張して意見交換をするとか、書面での意見交換によって研究課題を深めることも考えている。研究代表者自身の日常的研究以外の推進方策は以下の点を予定している。2019年8月に佐々木力氏、吉見俊哉氏を訪問して、現代における学問研究にまつわる問題性について教示を受ける。2019年11月末にはドイツに出張して、Goettingenで開催されるAPHINのシンポジウムにおいて本研究課題に関わる研究発表をして、その学会に集う自然科学者ならびに技術者に意見を求める。その出張の際に、これまでの研究展開で重要な協力者の役割を担ってくれているProf. Schwaetzerと下記のワークショップについても相談して、準備を整える。2020年2月ごろに、ドイツで小さなワークショップを開催して、本研究課題を深めると共に、研究成果のまとめを展望する。海外出張の経費を節約したこと。図書ならびに備品の購入を節約したこと。
遺伝素因による発癌病態の解明と癌予防に向けた創薬開発

癌は我が国において、死亡原因第一位であり、世界的にも増加している。癌の罹りやすさに関わり、新しい抗癌薬の治療標的になる遺伝的要因を見つけるために、日本人の肺癌患者でゲノムワイドの癌関連遺伝子探索を行い、肺癌の発生に関係する遺伝子を複数発見した。新薬を開発するためのスクリーニング法を構築するために、これらの遺伝子を安定的に発現する細胞を作製し、癌進行における遺伝子の機能解析を行った。これらの知見は、癌の罹りやすさに関わる遺伝的多様性を標的とした新薬の開発に貢献するものと考えられる。個人ゲノム情報に基づく癌の分子病態研究の急速な展開、例えば一塩基多型(single nucleotide polymorphism: SNP)を用いた各種癌の多数の患者DNAのゲノムワイド関連解析により、これまでの手法では同定されなかった癌関連遺伝子の構造的多様性を介した癌の遺伝素因が明らかになると期待されるが、一方で、その機能検証に必要となる遺伝子のゲノム構造異常等を迅速かつ正確にヒト体細胞を用いた実験系で再現できる手法は存在しない。そこで本研究は、(1)複数の遺伝子異常の同時解析に利用可能な正常細胞における遺伝子組み換え技術を開発して、ゲノム構造異常や遺伝子多型(遺伝素因)に起因する癌発生機構の解明を行うこと、そして(2)この技術を応用して、新規癌関連遺伝子を標的とした癌予防に向けた創薬開発手法を確立することを目的としており、その第1段階の解析として、前年度に解析基盤(技術・試料)の確立を行うため、複数の細胞株やヒトの肺由来の正常細胞(気道上皮)における肺癌関連遺伝子(TERT, TP63)の遺伝子多型を確認した上で、遺伝子導入条件を検討した。あわせて遺伝子導入に影響を与えるgeneticbackgroundの検証を行うため、細胞ストレス下での肺癌関連蛋白・遺伝子やDNA修復に関わる蛋白・遺伝子の発現を検討し、複数の遺伝子導入株候補を選定した。当該年度は、第2段階として、ゲノムワイド関連解析(GWAS)で同定した肺癌関連遺伝子等のリスク多型をもたない複数の細胞株に当該遺伝子を導入した細胞を作製して、癌の遺伝素因に起因する発癌病態の解明と癌予防に向けた創薬モデル構築の基盤を確立した。そこで本研究は、(1)複数の遺伝子異常の同時解析に利用可能な正常細胞における遺伝子組み換え技術を開発して、ゲノム構造異常や遺伝子多型(遺伝素因)に起因する癌発生機構の解明を行うこと、そして(2)この技術を応用して、新規癌関連遺伝子を標的とした癌予防に向けた創薬開発手法を確立することを目的としている。前年度までに解析基盤(技術・試料)として複数の細胞株やヒトの肺由来の正常細胞(気道上皮)における遺伝子導入条件を検討した。あわせて遺伝子導入に影響を与えるgenetic backgroundの検証を行うため、肺癌関連蛋白・遺伝子やDNA修復に関わる蛋白・遺伝子の発現を検討し、複数の遺伝子導入株候補を選定した。さらに、肺癌関連遺伝子を導入した細胞を作製して、癌の遺伝素因に起因する発癌病態の解明と癌予防に向けた創薬モデル構築の基盤を確立した。当該年度は、作成した細胞を用いて細胞の形態、増殖、浸潤能について野生型細胞と比較しながら経時的に解析した。これらの知見から肺癌関連遺伝子に起因する発癌分子経路を標的とした創薬スクリーニング系の探索基盤となる情報を取得した。本研究は、(1)複数の遺伝子異常の同時解析に利用可能な正常細胞における遺伝子組み換え技術を開発して、ゲノム構造異常や遺伝子多型(遺伝素因)に起因する癌発生機構の解明を行うこと、そして(2)この技術を応用して、新規癌関連遺伝子を標的とした癌予防に向けた創薬開発手法を確立することを目的としており、その第1段階の解析として、遺伝子組み換え法を用いた発癌機構再構築系の確立と独自に同定した2個の肺癌関連遺伝子(TERT, TP63)をモデルとした癌予防に向けた創薬法の確立に向けた基盤的解析を以下の手順で進めた。解析基盤(技術・試料)の確立を行うため、複数の細胞株やヒトの肺由来の正常細胞(気道上皮)における2個の肺癌関連遺伝子(TERT, TP63)の遺伝子多型を確認した上で、遺伝子導入条件を検討した。あわせて遺伝子導入に影響を与えるgenetic backgroundの検証を行うため、細胞ストレス下での肺癌関連蛋白・遺伝子やDNA修復に関わる蛋白・遺伝子の発現を検討した。これにより複数の遺伝子導入株候補を選定した。肺癌関連遺伝子等のリスク多型をもたない細胞株に当該遺伝子を導入した系が構築され表現型解析の基盤ができたため。

複数の細胞株やヒトの肺由来の正常細胞(気道上皮)における2個の肺癌関連遺伝子(TERT, TP63)の遺伝子多型を確認した上で、遺伝子導入条件を検討し、あわせて遺伝子導入に影響を与えるgenetic backgroundの検証を行うため、細胞ストレス下での肺癌関連蛋白・遺伝子やDNA修復に関わる蛋白・遺伝子の発現プロファイルを検討した結果、2個の肺癌関連遺伝子(TERT, TP63)を導入する細胞株が選定されたため。平成24年度に得られた結果を基にして、第3段階として、癌の遺伝素因に起因する発癌病態の解明と癌予防に向けた創薬モデルの構築を行う。作製した肺癌関連遺伝子等の導入細胞を用いて細胞の形態、生理、生化学的表現型について野生型細胞と比較しながら解析し、リスク多型をノックインした場合の細胞レベルでの変化を観察する。さらに細胞ストレス条件下でのリスクアレル機能の解析を各種の分子生物学的手法を用いて検討し、これらの知見から肺癌関連遺伝子等のリスクアレルに起因する発癌分子経路を標的とした創薬スクリーニング系を検討する。平成23年度に得られた結果を基にして、第2段階として、TERTおよびTP63遺伝子導入細胞の樹立を行う。我々がこれまでにゲノムワイド関連解析(GWAS)で同定した2個の肺癌関連遺伝子(TERT, TP63)等のリスク多型をもたない複数の細胞株にTERTとTP63それぞれを導入(Knock-in)した遺伝子組み換え細胞を樹立すして、癌の遺伝素因に起因する発癌病態の解明と癌予防に向けた創薬モデル構築の基盤を確立する。次年度の研究費は、本研究計画の第3段階で必要となる遺伝子導入試薬、細胞培養試薬、遺伝子発現検出試薬、シークエンス試薬等およびそれに関連する消耗品費として使用する。次年度の研究費は、本研究計画の第2段階で必要となる遺伝子導入試薬、細胞培養試薬、遺伝子発現検出試薬、シークエンス試薬等の消耗品費として使用する。
カメラを持たないビジョン技術への挑戦

ユーザがカメラを持ち歩く代わりに監視カメラ等の既設の固定カメラを利用し、その映像とユーザの行動を結びつけることでビジョン技術を活用するための基盤技術を開発している。本年度は主に、固定カメラを利用してユーザの位置・姿勢を推定する手法について検討した。具体的には、実世界に対応した俯瞰マップを用意し、動画像上の座標をマップ座標に変換をすることで位置推定を行う。動画像中の人物位置を、物体検出手法を応用することで検出する。物体検出には、ニューラルネットワークを用いた手法を採用し、学習によって精度を向上させる。そして、その人物の足元の座標を座標変換により求め、立っている位置を特定する。さらに、人物の視線を知るために、頭部方向を推定する。そのためにウェアラブルセンサの出力を用いる。メガネ型デバイスを用い、このデバイスに内蔵されているセンサの出力により人物の異動の加速度および角速度を推定し、頭部の方向を推定する。そして、実際に研究室内の環境で測定を行い、位置推定および頭部方向推定がある程度可能であることを確認した。また、これとは別に、環境中の文字認識を利用した情報提供アプリケーションのためのウェアラブルシステムについて検討した。認識結果の提示方法、ユーザインタフェース、どのようなアプリケーションがユーザにとって有益かなどについて、主観評価実験を行い評価した。その結果、ユーザに提示する情報およびユーザインタフェースの設計についてある程度の見通しを得た。人物位置の特定および頭部方向の推定について、一定の成果が得られた。人物位置の特定方法および頭部方向の推定方法については、さらなる高精度化について検討する。一方で、固定カメラを用いた環境中のテキスト情報の抽出やユーザの視線の先にあるテキストを特定する手法の開発を開始する。本年度は既存の機器を用いた検討にとどめていたため物品費が発生しなかった。次年度以降は実際にウェアラブル機器や開発用ワークステーション等を購入して本格的に技術の開発を進めるほか、成果を発表するための旅費を支出する予定である。
放射線による潜在的致死障害からの回復(PLDR)とアポトーシスの関連についての実験的研究

当科で樹立したyolk sac tumor由来の細胞株(放射線感受性株:NMT-1,抵抗性株:NMT-1R)を用いて,放射線による潜在的致死障害からの回復(以下,PLDR)と放射線感受性ならびに薬剤併用による回復阻害とアポトーシスの関連についてin vitroで検討した.薬剤としてはエトポシド(VP-16)とカフェイン(CAF)を用いて行い,照射後にそれぞれ1時間接触させた.回復阻害の評価としてrecovery rayio(以下,R.R)を算出した.これは,回復に与える薬剤の影響を考慮するため,併用時の生残率を薬剤単独の生残率で割って補正して照射単独時との比をとったもので,1以上が阻害なし,1以下が阻害ありと判断した.感受性株と抵抗性株の放射線単独でのR.Rは,それぞれ2.2,3.7と抵抗性株で大きい傾向が認められ,照射後のincubation timeとの関係では抵抗性株は3時間ですでに大きな回復がみられるのに対して,感受性株では6時間でピークを示した.薬剤の併用は抵抗性株で行った.VP-16併用では,0.1μg/mlでは阻害効果はなく1μg/mlで阻害効果がみられた.また,CAF併用では10mM以上の濃度で阻害効果が認められた.両薬剤の併用はVP-16,CAFの順で接触させ実験を行った.結果は両薬剤単独では阻害効果のない0.1μg/mlおよび5mMの併用で阻害効果がみられ,CAFのVP-16に対する増感効果と考えられた.同条件でflowcytometryで細胞周期の解析を行ったところ,VP-16単独ではG2 blockがみられるが,CAFを併用するとG2ピークの低下があり,ブロックの解除を起こしていることが示唆され,これが増感効果の原因と考えられる.アポトーシスの発現を検討するために,ladder formationを検討したが,抵抗性株では現在までにladderは放射線単独また薬剤併用でも認められていない.現在も実験進行中である.当科で樹立したyolk sac tumor由来の細胞株(放射線感受性株:NMT-1,抵抗性株:NMT-1R)を用いて,放射線による潜在的致死障害からの回復(以下,PLDR)と放射線感受性ならびに薬剤併用による回復阻害とアポトーシスの関連についてin vitroで検討した.薬剤としてはエトポシド(VP-16)とカフェイン(CAF)を用いて行い,照射後にそれぞれ1時間接触させた.回復阻害の評価としてrecovery rayio(以下,R.R)を算出した.これは,回復に与える薬剤の影響を考慮するため,併用時の生残率を薬剤単独の生残率で割って補正して照射単独時との比をとったもので,1以上が阻害なし,1以下が阻害ありと判断した.感受性株と抵抗性株の放射線単独でのR.Rは,それぞれ2.2,3.7と抵抗性株で大きい傾向が認められ,照射後のincubation timeとの関係では抵抗性株は3時間ですでに大きな回復がみられるのに対して,感受性株では6時間でピークを示した.薬剤の併用は抵抗性株で行った.VP-16併用では,0.1μg/mlでは阻害効果はなく1μg/mlで阻害効果がみられた.また,CAF併用では10mM以上の濃度で阻害効果が認められた.両薬剤の併用はVP-16,CAFの順で接触させ実験を行った.結果は両薬剤単独では阻害効果のない0.1μg/mlおよび5mMの併用で阻害効果がみられ,CAFのVP-16に対する増感効果と考えられた.同条件でflowcytometryで細胞周期の解析を行ったところ,VP-16単独ではG2 blockがみられるが,CAFを併用するとG2ピークの低下があり,ブロックの解除を起こしていることが示唆され,これが増感効果の原因と考えられる.アポトーシスの発現を検討するために,ladder formationを検討したが,抵抗性株では現在までにladderは放射線単独また薬剤併用でも認められていない.現在も実験進行中である.
人工呼吸器の早期離脱に向けた熟練看護師の内在知識と援助に関する研究

本研究は、人工呼吸器が早期にはずれるための熟練看護師の内在知識(人間特性や過去の経験から得た情報)と援助を明らかにすることを目的とする。熟練看護師は、無意識に実践している部分もあるため、看護師自身の自覚の有無にかかわらず意識を反映するものとして視線計測装置とビデオカメラを用いて分析する。対象は新人看護師と熟練看護師とし、状況設定した場面における看護師の視線と行動を記録し、新人看護師と熟練看護師との差異を抽出することにより、熟練看護師の認知的な行動特性を明らかにする。またインタビューによっても内在知識と援助を明らかにする。
シスプラチン誘発急性腎不全におけるアポトーシスの役割とその誘導機序の検討

本研究ではシスプラチン誘発急性腎不全発症期におけるアポトーシスの役割とその調節機序に関して検討した。本研究では抗酸化剤、酢酸ウラニウム前処置、グリシン投与、などによってシスプラチン誘発急性腎不全の程度を軽減させたときにアポトーシスの程度が軽減すること、腎傷害の程度とアポトーシスの程度に有意な正の相関がみられることを示した。このことは急性腎不全発症期にみられるアポトーシスによる細胞死が腎傷害の程度の決定に重要な役割を果たしている可能性があることを示している。本研究ではさらにアポトーシスと細胞周期調節やDNA修復との関係を明らかにするため、細胞周期のGI/S期のマーカーであるp21とDNA修復に関与するPCNAとの発現を検討した。さらにPCNAの発現が細胞増殖によるものかDNA修復によるものかを区別するため細胞分裂のマーカーであるBrdUの取り込みを同時に検討した。その結果、急性腎不全発症期にみられるアポトーシスの発現と一致してp21とPCNAの発現が見られること、PCNAの発現にもかかわらずBrdUの取り込みは増加せずこの時期のPCNAの発現がDNA修復反応を表現している事、などを示唆する結果を得た。これらの結果からシスプラチンによって傷害を受けた細胞は細胞周期をGI期に停止させDNA修復を行い、修復できない場合にはアポトーシスに進ませていることが示唆された。さらに急性腎不全発症期におけるp21とp53の発現の経過が一致することから、p21の発現はp53を介する可能性が示唆された。シスプラチン誘発急性腎不全においてアポトーシスが傷害の程度を決めることが明らかとなり、アポトーシスの誘導の機序が明らかになることは、シスプラチン誘発急性腎不全の予防法の開発に重要な手がかりを与えてくれるものと考えられる。シスプラチンはin vitroの検討でアポトーシスによる細胞障害を引き起こすことが知られている。本研究では、ラットでのシスプラチン誘発急性腎不全モデルにおいて1)アポトーシスが誘導されるがどうか、2)アポトーシスがシスプラチンによる腎機能障害や尿細管細胞障害に重要な役割を果たすか否か、を検討した。シスプラチン6mg/Kgを静脈内に投与して急性腎不全を惹起したが、この急性腎不全モデルでは投与後5日目をピークとした血清クレアチニン値の上昇と尿細管細胞障害をみとめた。5日目には尿細管細胞のアポトーシスを電子顕微鏡で確認できた。さらに腎組織のDNA電気泳動でladder patternを認めた。以上からシスプラチン誘発急性腎不全モデルでのアポトーシスの出現をin vivoで確認した。TUNEL,法で確認したアポトーシス細胞数の変化を検討すると、アポトーシス細胞数は血清クレアチニン値や尿細管細胞障害の経過と並行して変化した。ついで、シスプラチンの急性腎不全を軽減する方法としてシスプラチンを投与する14日前に酢酸ウラニウム5mg/Kgを腹腔内に投与した。酢酸ウラニウムの投与もまた急性腎不全を惹起したが、その回復期の14日目には腎組織にアポトーシス抑制蛋白であるBC12の発現を認めた。腎組織にBC12が発現したラットにシスプラチンを投与すると、シスプラチンによる血清クレアチニン値の上昇と尿細管細胞障害の程度は有意に軒減された。以上の結果から、シスプラチン誘発急性腎不全においてアポトーシスの程度と腎障害の程度が強く相関する事が示された。急性腎不全における尿細管細胞死の一部がアポトーシスであることが近年知られるようになった。アポトーシスの増加は障害尿細管細胞数を増加させ尿細管障害の増悪に関与すると考えられるが、一方ではアポトーシスの細胞死は壊死と異なり、周辺細胞への影響が少ないことからアポトーシスの相対的増加は壊死によるものと比較し、組織障害軽減に働く可能性もある。

昨年度、我々はシスプラチンによるラット急性腎不全モデルの尿細管にアポトーシスが起きていること、アポトーシス抑制因子であるBC12を発現させたラットではシスプラチンによる急性腎不全が軽減されることを報告し、アポトーシスがシルプラチンによる尿細管細胞障害に重要な役割を果たす可能性があることを報告した。本年度はシスプラチン誘発急性腎不全を軽減することが知られているglycineや活性酸素のスカベンジャーであるdimethylthioureaが急性腎不全の軽減と共にアポトーシスを軽減するかどうかを検討した。シスプラチン6mg/kgの静注により惹起される急性腎不全においてdimethylthioureaやglycineは腎組織障害と血清クレアチニン値の上昇をともに軽減した。同時に測定したTUNEL陽性細胞数は両薬剤で著しく軽減された。また、TUNEL陽性細胞数と腎組織障害の程度には強い正の相関があった。これらの結果は(1)従来シスプラチンによる急性腎不全の程度を軽減するとされてきたdimethylthioureaやglycineがシスプラチンによるアポトーシスを軽減すること、(2)尿細管細胞障害の程度はアポトーシスの程度と正に相関し、アポトーシスの程度が障害の程度を規定する一要因であることを示している。シスプラチン誘発急性腎不全において、アポトーシスが生じること、回復期においてみられるアポトーシスは過剰に増殖した尿細管細胞の間引きに関与する可能性があることなどが知られている。我々は平成10-11年度の本研究において、腎障害の発症過程においてもアポトーシスが重要な役割を果たす可能性があることを示した。アポトーシスがおこる過程では、傷害された細胞の修復や増殖と密接な関連にあることが予想される。本年度においては、これらの関係でキーになると思われるG1/S期に細胞周期をとどめるp21、およびDNA修復(PCNA)、細胞増殖(BrdU)や、アポトーシス(TUNEL)などのマーカーの出現とそれら相互の関係をシスプラチンによる急性腎不全の発症から回復期にかけて検討した。その結果、1)p21はシスプラチン投与後3日目と9日目に2回のピークを示して増加する、2)1回目のピークはp53とPCNA陽性細胞の増加を伴ったが、BrdU陽性細胞の増加を伴わなかったことからDNA修復に関係する可能性がある、3)2回目のp21の増加はp53陽性細胞の増加を伴わないことから、細胞分化に関係する可能性があることなどが明らかとなった。さらに、急性腎不全からの回復期にはシスプラチンの腎障害に抵抗性が生じることに着目し、シスプラチン投与14日目にシスプラチンを再投与した後の腎障害の程度、と前述のマーカーとの関連を検討したところ、再投与後のp21とPCNA陽性細胞の増加が増強されることが明らかとなった。このことは再投与後の腎障害の軽減がDNA修復の増加によることが示唆された。以上から、1)腎毒性物質により傷害された尿細管細胞はG1期で細胞回転が停止してDNA修復を行い回復に向かうこと、2)修復が困難な場合にはアポトーシスを起こすこと、3)このアポトーシスの程度が腎組織障害の程度を規定すること、などが明らかとなった。
鶏脂肪細胞分化シグナル制御因子の同定とその発現制御

脂肪過剰蓄積の実用的簡易制御法の確立を目標として、前駆脂肪細胞から脂肪細胞への分化機構とその制御因子を同定することにより、脂肪細胞数の調節・制御を試みることを目的とした。本年度は、分化制御シグナルタンパク質の同定、サブトラクションライブラリーからの分化制御遺伝子のクローニングおよび同定された因子の発現変動を観察した(1)鶏脂肪細胞の分化期におけるCa^<2+>結合性タンパク質の同定鶏前駆脂肪細胞を分化誘導させた後の脂肪細胞のCalmodulineカラム吸着画分に特徴的に観察された80kDaのタンパク質を酵素処理し、アミノ酸配列を確認したところ、FAT/CD36のホモログであると推定された。また、タンパク量としては多くはないものの、VLDLreceptor(LR8)がwestern blotより検出された。(2)鶏脂肪細胞の分化期に特徴的な遺伝子のサブトラクションLibraryからのスクリーニング前年度に作成したサブトラクションライブラリーから約60個のクローンを採取し、異なるサイズのクローンを25種選出し、シーケンスを行ない、未知のものについては全長を決定した。脂肪細胞の分化に関与すると報告されている遺伝子は検出されなかったが、既知のものではacidic phosphoproteinおよびLR8が、未知ではあるものの哺乳動物で配列が決定されているのもではLysosomal amino acid transfer protein 1(LAAT1)が検出された。一方、これまでまったく機能が推測されていない遺伝子が新たに3種検出された。未知遺伝子のなかの1種(WWE related proteinと命名)は、発生に関与するタンパク質の1つであるDeltexに存在するWWE domeinを持っていた。(3)分化シグナル制御因子の細胞生化学的追求(1)および(2)で検出されたFAT/CD36、LR8およびWWE related proteinの分化に伴う発現変動を観察した。半定量的RT-PCRにより各mRNAの発現量を測定したところ、いずれのmRNAも分化の進行に伴って発現の上昇が認められた。さらに、FAT/CD36およびLR8についてはWestern blotおよび細胞の免疫染色を行ない、分化した脂肪細胞で強く発現していることが観察された。本年度は、鶏脂肪細胞の分化期におけるCa^<2+>結合性タンパク質の分離と分化期に特徴的な遺伝子をスクリーニングするためのサブトラクションLibraryを作成した。(1)鶏脂肪細胞の分化期におけるCa^<2+>結合性タンパク質の分離10日齢鶏の脂肪組織から酵素法により前駆脂肪細胞を分離した。次に、調製した前駆脂肪細胞を5,000cells/cm^2の濃度で60もしくは90mmシャーレに播種し、10%FBSを含むM199培地でサブコンフルエントになるまで(45日)培養した。脂肪細胞への分化は、10%FBS,10mM Glucose,20μg/ml Insulin,250nM Dexamethason,33μM biotin,17μM pantothenae,250μM oleic acidを含んだM199を用いて行なった。分化誘導後6および72時間後に細胞を回収し、回収した細胞を界面活性剤(SDSもしくはTriton X-100)で可溶化し、SDS-PAGEに供試したところ、分化期に特徴的な150,70,40,38,30kDaのバンドの増加が確認された。さらに、細胞溶解画分をCalmodulineカラムに供試したところ、分化期に特徴的な80および42kDaのバンドが検出され、低分子画分にバンドは確認されなかった。しかし現在の所、タンパク量が少ないためN末端アミノ酸解析には至っていない。(2)鶏脂肪細胞の分化期に特徴的な遺伝子をスクリーニングするためのサブトラクションLibraryの作成鶏脂肪分化期の細胞(分化開始48時間後)よりmRNAを調製し、2本鎖cDNAを調製した。cDNAの両端にEcoRI/NotIアダプターをLigationした後、同様に調製した鶏脂肪前駆細胞mRNAの1本鎖cDNAをsolution hybridizationした後、pBluescript SK+にLigationして約5,000のサブトラクションLibraryを作成した。現在、コロニーを採取し、シーケンスを進めている。

脂肪細胞の分化に関与すると報告されている遺伝子は検出されなかったが、既知のものではacidic phosphoproteinおよびLR8が、未知ではあるものの哺乳動物で配列が決定されているのもではLysosomal amino acid transfer protein 1(LAAT1)が検出された。一方、これまでまったく機能が推測されていない遺伝子が新たに3種検出された。未知遺伝子のなかの1種(WWE related proteinと命名)は、発生に関与するタンパク質の1つであるDeltexに存在するWWE domeinを持っていた。(3)分化シグナル制御因子の細胞生化学的追求(1)および(2)で検出されたFAT/CD36、LR8およびWWE related proteinの分化に伴う発現変動を観察した。半定量的RT-PCRにより各mRNAの発現量を測定したところ、いずれのmRNAも分化の進行に伴って発現の上昇が認められた。さらに、FAT/CD36およびLR8についてはWestern blotおよび細胞の免疫染色を行ない、分化した脂肪細胞で強く発現していることが観察された。
SOMを用いたネゴシエーション支援システムの開発と感性商品購入支援の実用化

グループあるいはチームで複数代替案の中から合意案を決定する場合において,各メンバーの感性や嗜好が異なるため,合意案決定に困難が生じるあるいは多大な時間を要することがある。本研究では,このようなグループ意思決定問題に対して,代替案に対するメンバーの感性や嗜好をSOM(自己組織化マップ)に入力することによりメンバーの感性や嗜好を2次元マップに可視化するとともにメンバー相互の位置関係からシステムが各メンバーに適切な妥協案を提示し,メンバーがその妥協案に回答しながらインタラクティブに合意案を探索するグループ意思決定支援システム(GDSS)を構築した。また,家族4名による自動車の決定問題および友達同士の旅行先決定問題に適用し,本提案システムを使用しないときよりもメンバーが満足する代替案を探索することができることを明らかにした.さらに,メンバーの妥協結果からニッチ商品の開発にも有効であることを示した.グループあるいはチームで複数代替案の中から合意案を決定する場合において,各メンバーの感性や嗜好が異なるため,合意案決定に困難が生じるあるいは多大な時間を要することがある。また,家族4名による自動車の決定問題および友達同士の旅行先決定問題に適用し,本提案システムを使用しないときよりもメンバーが満足する代替案を探索することができることを明らかにした.さらに,メンバーの妥協結果からニッチ商品の開発にも有効であることを示した.感性工学では,感性評価は一般的にはイメージ形容詞を用いることが多い。この形容詞は人間特有の言語にもとづくあいまいさを含んでおり,従来のSOMでは扱うことができない。そこで,入力データとしてファジィデータを扱うことができるSOMを開発した。従来SOMのマップ作成手順における重み学習では,近傍領域はあらかじめ一定値に設定され,近傍領域内のノード(近傍ノード)の重みベクトルは入力ベクトルに近似するように更新される。この場合,入力ベクトルがあいまいさを有しないクリスプ値であることが重み学習における条件となる。しかしながら,本研究で扱うあいまいデータ入力はメンバーシップ関数(MF)で与えられるため,従来SOMでは近傍領域の学習が行うことができない。そこで,次のようなSOMを開発した。マップ作成手順は従来SOMと同じであるが,あいまいさを含む入力ベクトルのMFより算出される近傍領域ベクトルを導入し,近傍ノードの重みベクトルは近傍領域ベクトルの要素毎(次元毎)に入力ベクトルに近似するよう学習する。これは勝者ノードの近傍領域が入力ベクトルのあいまいさにもとづいて変化しながら重みベクトルの学習が進むことを意味している。開発したSOMを用いて街並みの感性評価可視化問題に適用した結果,マップの表現方法に問題はあるものの,ある程度満足のいく結果を得ることができた。一方,ネゴシエーション支援システムの対象となる乗用車の感性評価実験をWeb上で実施するシステムを構築した。感性を表現するイメージ形容詞は予備実験とその結果の統計的処理により26形容詞対とした。また,乗用車は市販されているものの中から購入価格200万円程度の28車種を決定した。被験者は20歳代,30歳代,40歳代,50歳代,60歳以上の計5世代,男性・女性ともに各世代20名とし,合計200名の乗用車に対する感性評価結果を得た。本研究では,このようなグループ意思決定問題に対して,各メンバーに適切な妥協案を提示しながらインタラクティブに合意案を探索するグループ意思決定支援システム(GDSS)を構築した。本システムは「感性商品データベース」「ネゴシエーションシステム」「自己組織化マップ(SOM)」から構成される。感性商品データベースは商品の感性を表現するのに適した形容詞を因子分析により適当数決定し,市販されている商品に対してSD法を用いてその商品の平均的な感性評価値を得て,データベース化する。ネゴシエーションシステムは,グループメンバーの理想とする商品の感性評価値にもとづいて各メンバーに対して適切な5選択肢を有する5感性妥協案を提示する。感性妥協案の選択結果よりメンバーの理想とする商品の感性評価値は再計算される。SOMには更新されたメンバーの感性評価値と感性データベースに格納された市販商品の感性評価値が入力され,それぞれの商品を配置されたマップが出力される。この出力マップより,各メンバーの理想商品がお互いに隣接して配置されれば,ネゴシエーションは終了し,理想商品に最も近い市販商品が最終的な代替案となる。もしメンバーの理想商品が隣接しなければ,再びネゴシエーションシステムシステムが稼働し,各メンバーに妥協案を提示する。本システムの応用例として,自動車購入のためのGDSSを構築した。12形容詞を用いて自動車の感性評価を行い,1グループ4名で各10グループが28台の市販自動車から1台を決定した。その結果,4人の理想自動車の感性評価値を単純平均して求めた市販車の満足度より本システムを利用して決定した市販車の満足度の方が高い値を示した。これより,本システムの有用性が明らかとなった。グループ意思決定問題において,各メンバーに適切な妥協案を提示しながらインタラクティブに合意案を探索するグループ意思決定支援システム(GDSS)の提案し,家族で購入する自動車の車種決定における本システムの有効性についての検証を行った.

また追加実験として,友人とともに行く旅行先決定にも適用し,その有効性を検証した.その結果,両問題においても提案システムを用いない場合よりも良好な結果を得ることができた.これらの結果を下記国内学会,国際会議で発表し,高い評価を得た.1.第24回ファジィシステムシンポジウムまた,研究成果と学会での質疑応答結果を参考にして,下記学会に論文を投稿した.現時点では,IJICICへの論文掲載が決定している.2.日本知能情報ファジ学会誌