hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
エコリテラシーにもとづく環境教育と芸術教育の融合の可能性

本研究では、G.ベイトソンのコミュニケーション論を理論的な基礎に据えて、エコリテラシーの考え方も踏まえながら、環境教育と芸術教育の融合した教育実践の可能性を探っていくことを目的として考察を行った。ベイトソンは、自然、生物、人、社会を含めた私たちの生きた世界を、精神プロセスを含み込み且つそこに美的な感覚や聖なるものが存在するシステムとして捉えていくことにより、二元論的思考を超えていくエコロジカルな思想を提起した。そして、ベイトソンの思想を基にF.カプラが展開したエコリテラシーの考え方は、自然の生態系のシステムの諸原理や知恵に倣って私たちの生きた世界のあり方を捉えていこうとしており、体験的に感性と理性の双方を総合的に身につけていくことをめざしたものである。環境教育と芸術教育を融合していく実践の意義と可能性を見出すことができた。本研究では、グレゴリー・ベイトソンのコミュニケーション論を理論的な基礎に据えて、エコリテラシーの考え方も踏まえながら、環境教育と芸術教育の融合した教育実践の豊かな可能性をさぐっていくことを目的として考察を行った。持続可能な社会を目指して環境教育や自然体験学習、食育といった実践が、学校教育内外で盛んに行われるようになる中で、感性の部分も同時に深めていく思想が重要ではないかと考える。そして、私たちの生きた世界のつながりや意味を、頭、手、心、精神を使って総合的に理解していくためにも、環境教育と芸術や美との統合という視点からの考察は、私たちの学習や生き方をより豊かにしていくものになりうると考えた。本年度は、私たちの生きた世界の「結び合わせるパターン」に注目し、二元論的な思考を乗り超えようとしていたG.ベイトソンが、そのエコロジカルな思想の中で美学や芸術をどのように捉えようとしていたのかを考察した。「科学」と「芸術」は、"科学的"と"非科学的"な世界として捉えられがちな中で、「美的(aesthetic)」な感覚を共通の接点として見出し、両者に存在する溝を架橋していく一元論的な認識世界の可能性を拓こうとしたことが改めて確認された。また、環境教育や小学校の「総合的な学習の時間」を中心とした実践の中で、自然との関係、美術教育との関係がどのように捉えられていこうとしているのかについての学びを深めた。問題解決的な学習への繋がりや学びの"総合性"の意義についても多くの示唆を得ることができた。今後の研究活動の中でさらに深めていきたい。本年度は、ベイトソンのエコロジカルな思想についての研究を深めた。ベイトソンのエコロジーに対する考え方は、自然環境との関わりだけではなく、ひとやものなど私たちを取り巻く世界全体との関わり方や認識の仕方それ自体を関係のネットワークを前提としたシステムとして問いなおすものであり、「科学」の埒外に置かれてきた領域をも統合した認識の必要性を提起するものであったことが改めて確認された。また、小学校の図工教育において環境との関わりを意識した総合的な学習の実践を通じて、感性と理性を総合させていくことの意義や、図工や美術教育がもつ総合的な学びの可能性についての示唆を得ることができた。さらに、持続可能な開発のための教育(ESD)や環境保全活動等への取組みについて学び、主体的に関わり領域横断的に取組むことの意義のみならず、場や地域に根差した活動の意味について再認識することができた。また、エコリテラシーは、自然の生態系のシステムのネットワークの諸原理や知恵に倣って、私たちの生きた世界のあり方を捉えていこうとするところに特徴があり、体験的に感性と理性の双方を総合的に身につけていくことをめざしている。本研究を通して、分化した領域を前提として繋いでいく思考ではなく、関係のネットワークを前提として認識していく思考の重要性を確認できたとともに、環境教育と芸術教育を融合していくことにより二元論的発想を超えていく実践の可能性も見出すことができたと考える。成果発表については、期間内に十分に行うことができなかったが、今後さらに研究を深めて反映させていきたい。
全身性強皮症の皮膚硬化・血管障害におけるノルエピネフリンの役割

全身性強皮症は、皮膚および内臓臓器の線維化、血管障害、免疫異常を特徴とする発症機序不明の全身性疾患である。我々はノルエピネフリンが線維芽細胞上のβ受容体と結合し、p38のチロシンリン酸化を介して、IL-6産生や、増殖能の増加を引き起こすことと、これらの反応が強皮症由来線維芽細胞では亢進することを明らかにした。また、β受容体阻害剤や、p38阻害剤によってノルエピネフリンによるIL-6産生が抑制されたことや、ブレオマイシン誘導皮膚線維化マウスの皮膚硬化を抑制する傾向がみられたことより、β受容体阻害剤やp38阻害剤が強皮症の線維化の治療に応用できる可能性が示唆された。寒冷刺激やストレスによって生じるノルエピネフリンが皮膚線維芽細胞上のアドレナリンβ受容体に作用してIL-6を過剰産生させて皮膚線維化に関与することを明らかにした。これらの成果をふまえて、マウスの皮膚線維化モデルにおける寒冷刺激の影響について検討を行っている。また、皮膚線維化モデルマウスを用いて、βアドレナリン受容体阻害薬やp38阻害剤の皮膚への局所注射、もしくはマウスに内服させて線維化抑制効果が得られるかどうか検討を行っている。予定していた研究を順調に行っているため。寒冷刺激やストレスによって生じるノルエピネフリンが皮膚線維芽細胞上のアドレナリン受容体に作用してIL-6を過剰産生させて皮膚線維化に関与することを明らかにした。これらの成果を踏まえて、マウスの皮膚線維化モデルにおける寒冷刺激の影響について検討を行っている。皮膚の病理組織を作成し皮膚の厚さを測定した。線維化に関わるとされているサイトカインであるIL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ、TGF-β1、TNF-α、CTGFなどの発現量についても、皮膚から抽出したRNAを用いたリアルタイムPCR、免疫染色によって評価している。血管量や血管異常の有無についても組織学的に検討した。血清中の自己抗体についてもELISA法にて比較検討した。また、皮膚線維化モデルマウスに対してアドレナリン受容体阻害薬を皮膚へ局所注射ないし内服させて、その線維化抑制効果について検討を行っている。さらに、p38阻害剤がノルエピネフリン刺激によるIL-6産生を抑制することも明らかにした。そこで、p38阻害剤の皮膚への局所注射、もしくはマウスに内服させて線維化抑制効果が得られるかどうか検討を行っている。ノルエピネフリンによる皮膚硬化、線維化の病態を分子レベルで解明することによって、全身性強皮症の線維化の発症予防および治療応用の可能性を見いだし、全身性強皮症に合併する肺線維症や肺高血圧症、食道蠕動障害などの皮膚以外の線維化病変の病態解明、治療につながる可能性が期待できる。予定した研究を順調にすすめているため。これまでに、強皮症の血管障害とノルエピネフリンとの関係については知られているが、強皮症の皮膚線維化におけるノルエピネフリンの役割は明らかになっていない。そこで、本研究では強皮症の皮膚線維化におけるノルエピネフリンの役割を解明することを目的とした。IL-6は、強皮症の皮膚硬化や病勢を反映するといわれており、強皮症患者の血清、皮膚組織におけるIL-6発現量は、正常人より増加しており、特に早期の強皮症で上昇している。また、培養線維芽細胞では、強皮症由来線維芽細胞は、正常由来線維芽細胞よりIL-6の発現が多く、IL-6は線維芽細胞の分化、増殖を誘導し、線維化を亢進させると考えられている。我々は、ノルエピネフリンが線維芽細胞上のβ受容体と結合し、p38のチロシンリン酸化を介して、IL-6産生や、増殖能の増加を引き起こすことと、これらの反応が強皮症由来線維芽細胞では亢進することを明らかにし、ノルエピネフリンが強皮症の線維化に関与することが示唆された。また、β受容体阻害剤であるプロプラノロール処理や、p38の阻害剤であるSB203580によってノルエピネフリンによるIL-6産生が抑制されたことや、ブレオマイシン誘導皮膚線維化マウスの皮膚硬化を抑制する傾向がみられたことより、プロプラノロールやSB203580が強皮症の線維化の治療に応用できる可能性が示唆された。これらの結果より、寒冷やストレスを防ぐことが末梢血管障害の予防だけではなく、皮膚硬化の予防にもつながることや、強皮症の皮膚硬化が寒冷刺激を受けやすい四肢末端より始まる原因としてこれらの機序が関与する可能性が示唆された。

これまに得た成果を発展させて、予定していた研究を遂行する。現段階で得られている成果を基に予定の計画を遂行する。皮膚科学予定していた予算に基づき使用していたが、未使用の予算が生じたため。当初の予定より研究計画が順調に進行したため。予定している研究を遂行するための物品の購入に使用する。次年度に予定している研究の遂行のために使用する。
非定常固液混相流の流動と伝熱機構

血液の流れが工業的に応用できる可能性があるかどうかを検討するため、円板状粒子を含んだ固液混相流を脈動流として流し、その流動様式、圧力損失および伝熱速度に対する円板直径と管径との比、脈動の振幅および周波数党の影響を明らかにすることを目的として実験を行い、下記の結果を得た。1.円径550mmのガラス製円管内に直径約5mm、厚さ約0.1mmのゴム製小円板(模擬赤血球)とシリコン油(模擬血漿)の混合物を定常流として流して圧力損失を測定し、圧力損失に対する小円板濃度(ヘマクリット値)、小円板と菅の直径比および流体の速度(レイノルズ数)の関係を求めた。2.小円板の速度を写真撮影法により測定し、小円板の速度と流体の速度との差に対するヘマクリット値およびレイノルズ数の影響を求めた。3.ガラス製円管を銅製の加熱円管に変更して伝熱速度を測定し、伝熱係数とヘマクリット値およびレイノルズ数との関係を求めた。4.流体の速度に正弦波状の脈動を与えた場合について上記と同様の実験を行い、圧力損失、小円板と流体との速度差および伝熱係数についてヘマクリット値およびレイノルズ数の影響を求めた。血液の流れが工業的に応用できる可能性があるかどうかを検討するため、円板状粒子を含んだ固液混相流を脈動流として流し、その流動様式、圧力損失および伝熱速度に対する円板直径と管径との比、脈動の振幅および周波数等の影響を明らかにすることを目的として実験を行い、下記の結果を得た。1.円径550mmのガラス製円管内に直径約5mm、厚さ約0.1mmのゴム製小円板(模擬赤血球)とシリコン油(模擬血漿)の混合物を定常流として流して圧力損失を測定し、圧力損失に対する小円板濃度(ヘマクリット値)、小円板と管の直径比および流体の速度(レイノルズ数)の関係を求めた。3.また、管内における小円板の濃度と混合平均濃度との比に対するレイノルズ数の影響を求めた。4.ガラス製円管を銅製の加熱円管に変更して伝熱速度を測定し、伝熱係数とヘマクリット値およびレイノルズ数との関係を求めた。1.まず、圧力損失を測定し、これに対する小円板濃度(ヘマクリット値)、小円板と管の直径比および流体の速度(レイノルズ数)の影響を明らかにした。2.小円板の速度を写真撮影法により、流体の速度を染料を注入し同じく写真撮影法により測定し、両者の速度差に対する小円板濃度とレイノルズ数の影響を明らかにした。3.以上の結果を基に、固液混相脈動流の流動機構を小円板濃度および流体の速度の領域に分けて考察した。4.ガラス製円管をジャケット付円管に変更し、伝熱速度を測定し、これに対する小円板濃度等の影響を明らかにした。
遷延性意識障害者の意識レベル改善をもたらす背面開放端座位ケアの検討

1.在宅療養中の遷延性意識障害者1名(40歳代、女性)を対象とし、家族に承諾を得た上で研究を開始した。測定用具として遷延性意識障害度スケール(広南スコア)とデジタルカメラ及びデジタルビデオカメラでの撮影を行った。背面開放端座位ケア導入後、約1年半となるが、導入前63点だった広南スコアが導入約200日目を境にして1点ずつだが低下し始め、約489日目にて55点にまで改善した。これは呼びかけに対して目の動きが認められたこと、表情が穏やかになり微かな笑顔が認められたこと、唾液を嚥下する動作が認められたことが点数低下に繋がった。また広南スコアでは評価できない変化として目つきの変化が認められた。一方、日々の背面開放端座位ケア前と最中の広南スコアには変化がなかった。これらの事から毎日のケアの中で瞬時には変化は認められないが、日々ケアを重ねていく中で少しずつ変化が認められていったと考えられる。この広南スコアにおける変化の様相は、先行研究結果を支持する内容であった。2.療養型病床群及び脳神経外科病棟をもつ計3施設にて研究承諾を得、2施設において研究を開始した。現段階では療養型病床群において3名の患者のデータが収集できている。3名のデータ結果は以下のように3様であった。1.日々の背面開放端座位ケア前・中のスコアにおいて、ケア前より明らかにケア中の方が点数が低く、日数を重ねるごとにケア前・中とも点数が低下していく事例、2.日々のケア前・ケア中のスコアには変化はないが、日数を重ねていくにつれて点数が僅かながら低下していく事例、3.日々のケア前・ケア中のスコアに変化もないが日数を重ねたスコアにも変化がない事例が認められた。背面開放端座位ケアの導入により在宅療養者、入院患者を合わせた4例中3例は、広南スコアの視点から何らかの意識レベル改善を認めた。更に今後例数を増やし、導入によって遷延性意識障害者の意識レベルがどのような形で改善していくか、その様相をタイプ別に分析することと、ビデオカメラ撮影のデータも今後分析する予定である。
扁桃における活性酸素・フリーラジカルとその病態生理

口蓋扁桃は,外来抗原に対する一連の防御反応や,免疫反応を行ううえで重要な役割を担うとともに,細菌感染の標的器官でもある.一方,細菌感染巣には,好中球などが遊走し,活性酸素の産生が始まるということも知られており,その産生過剰によりもたらされるであろう扁桃炎臨床の病態生理を知ることによって,その日常臨床への応用を検討すべく行った.習慣性扁桃炎,および,病巣性扁桃炎症例より摘出された扁桃からリンパ球を分離し,Eロゼット沈降法にてBリンパ球とTリンパ球とに分け,各々のSOD活性について測定を行った.その結果,Tリンパ球のSOD活性はBリンパ球のそれよりも高値の傾向を認め,末梢リンパ球のSOD活性についての過去の報告と同様の結果となった.習慣性扁桃炎,および,病巣性扁桃炎における末梢血好中球を採取し,その好中球の産生する活性酸素をチトクロームC法にて測定し,その症例の臨床検査所見との相関を検討した.臨床検査には,CRP値,末梢血白血球数,ASO値,扁桃炎罹患回数をとりあげた.また,同一症例において,扁桃炎急性期と,寛解期とにおける末梢血好中球活性酸素産生能についても検討を加えた.その結果,ASO値と好中球活性酸素産生能との間に,統計学的に有意な負の相関を認めた.また,溶血連鎖球菌感染による扁桃炎における活性酸素の作用動態を知るため,溶血連鎖球菌培養上清とともに培養した健常人末梢血好中球の活性酸素産生能を測定したところ,培養上清の蛋白濃度に依存性に活性酸素産生能が抑制される傾向を認めた.今後,溶血連鎖球菌培養上清中のいかなる成分が活性酸素産生能に影響を及ぼしているのか,また,扁桃なる免疫臓器のリンパ球との関わりにつき知る必要があると認められた.口蓋扁桃は,外来抗原に対する一連の防御反応や,免疫反応を行ううえで重要な役割を担うとともに,細菌感染の標的器官でもある.一方,細菌感染巣には,好中球などが遊走し,活性酸素の産生が始まるということも知られており,その産生過剰によりもたらされるであろう扁桃炎臨床の病態生理を知ることによって,その日常臨床への応用を検討すべく行った.習慣性扁桃炎,および,病巣性扁桃炎症例より摘出された扁桃からリンパ球を分離し,Eロゼット沈降法にてBリンパ球とTリンパ球とに分け,各々のSOD活性について測定を行った.その結果,Tリンパ球のSOD活性はBリンパ球のそれよりも高値の傾向を認め,末梢リンパ球のSOD活性についての過去の報告と同様の結果となった.習慣性扁桃炎,および,病巣性扁桃炎における末梢血好中球を採取し,その好中球の産生する活性酸素をチトクロームC法にて測定し,その症例の臨床検査所見との相関を検討した.臨床検査には,CRP値,末梢血白血球数,ASO値,扁桃炎罹患回数をとりあげた.また,同一症例において,扁桃炎急性期と,寛解期とにおける末梢血好中球活性酸素産生能についても検討を加えた.その結果,ASO値と好中球活性酸素産生能との間に,統計学的に有意な負の相関を認めた.また,溶血連鎖球菌感染による扁桃炎における活性酸素の作用動態を知るため,溶血連鎖球菌培養上清とともに培養した健常人末梢血好中球の活性酸素産生能を測定したところ,培養上清の蛋白濃度に依存性に活性酸素産生能が抑制される傾向を認めた.今後,溶血連鎖球菌培養上清中のいかなる成分が活性酸素産生能に影響を及ぼしているのか,また,扁桃なる免疫臓器のリンパ球との関わりにつき知る必要があると認められた.口蓋扁桃は炎症臓器であるとともに免疫臓器であり、それを構成するマクロファ-ジ、好中球、リンパ球によりさまざまな免疫活動が営まれている。末梢血マクロファ-ジや好中球はス-パ-オキサイド(以下、O^-_2)産生細胞であり、その産生が抗原やサイトカインの存在下でさらに増加することはなく知られている。またリンパ球はサイトカイン産生細胞であるとともに、EBウイルス感染下でのス-パ-オキシサイド産生も報告されている。これらの点から考えると、ウイルスや細菌などのさまざまな抗原の宝庫である陰窩を有する口蓋扁桃でO^-_2産生がなされていることは疑いない。そしと急性扁桃炎、慢性扁桃炎をはじめとする疾患の成立や遷延化に扁桃局所でのO^-_2の産生やそのための組織障害が関与していることが強く疑われる。事実、扁桃炎の憎悪を繰り返す回数が多い症例ほど扁桃リンパ球の産生する好中球活性化因子が高い傾向のあることが報告されている。しかし現在までのところ口蓋扁桃でのO^-_2の産生の実際についての報告はほとんどみうけられず、リンパ球の産生する好中球活性化因子とサイトカインとの関連性についても不明な点が多い。そこで、現在、扁桃リンパ球(Whole cell)のO^-_2受生能、および扁桃リンパ球培養上清中に含まれる産生物質のヒト好中球O^-_2産生能におよぼす影響について検討中である。扁桃リンパ球培養上清は10^7cell/ml濃度で用いた。O^-_2測定はチトクロ-ムC法によった。

慢性扁桃炎、病巣性扁桃炎(掌蹠膿疱症)、睡眠時無呼吸症候群患者より得た口蓋扁桃について検討中であるが、現在のところ疾患群ごとの特異性は明らかではない。今後、症例を増やし検討するに加え、扁桃構成細胞分画別の検討を行っていく予定である。免疫能力を持つ扁桃が生体膜の障害による影響やフリーラジカルの産生過剰によりもたらされるであろう扁桃炎臨床の病態生理を知ることにより、その日常臨床への応用を検討すべく行った。習慣性扁桃炎、および病巣性扁桃炎における末梢血好中球を採取し、その好中球の産生する活性酵素をチトクロームC法にて測定し、その症例の臨床検査所見との相関を検索した。臨床検査には、CRP値、末梢血白血球数およびASO価をとりあげた。また、同一患者において扁桃炎急性期と寛解期とにおける末梢血好中球フリーラジカル産生能についても検索を加えた。その結果、炎症の急性期に異常値となるCRP値および白血球数、またASO価と、好中球フリーラジカル産生能との間に有意となる相関関係は得られなかった。習慣性扁桃炎、および病巣性扁桃炎症例に口蓋扁桃摘出術を施行、得られた扁桃よりリンパ球を分離し、扁桃リンパ球とSOD活性をチトクロームC法にて検索した。扁桃リンリンパSOD活性と年齢との相関については、若年者群においてSOD活性が高値の傾向が認められたが、若年者の扁桃は、睡眠時無呼吸症候群などの単純性扁桃肥大の症例が多く、扁桃炎との関連性についてはこれからの課題である。また、扁桃リンパ球をEロゼット沈降法にてBリンパ球とTリンパ球とに分離し、各々のSOD活性について測定を行った。その結果、Tリンパ球におけるSOD活性はBリンパ球のそれよりも高値の傾向を認め、末梢リンパ球のSOD活性についての過去の報告と同様の結果となった。今後、扁桃における活性酵素が扁桃の病態生理を考えるとき、扁桃なる、臓器が免疫と関連してどんな動的な性格持っているかを知る必要があることが認められた。免疫臓器として知られる扁桃の病態生理を考える際,種々の炎症を引き起こすといわれるフリーラジカルが,扁桃炎に対する媒体としてどのように介在し,臨床免疫学的にいかなる役割を演じているかを掘り下げる目的で検討を行った。習慣性扁桃炎,および,病巣性扁桃炎症例より末梢静脈血を採取し,デキストラン沈降法にて好中球を分離し,その好中球の産生するフリーラジカル・活性酸素をチトクロームCの還元量をもとに測定を行った。また同時に,血清CRP値,末梢血白血球数,血清ASO値,扁桃炎罹患頻度について,また,同一症例において,扁桃炎急性期と,寛解期とにおける好中球活性酸素産生能の相違について検討を行った。その結果,好中球活性酸素産生能と血清ASO値との間に,統計学的に有意な,負の相関を認めた。一方,ASO値との相関が認められたことより,溶血連鎖球菌感染による扁桃炎における活性酸素の作用動態を知るため,S.pyogenes T4(WHO4990),S.pyogenes T12(WHOSF42)の培養上清とともに培養した健常人末梢血好中球の活性酸素産生能を測定したところ,培養上清の蛋白濃度に依存性に活性酸素産生能が抑制される傾向を認め,血清ASO値と当該患者の好中球活性酸素産生能との負の相関性が認められた結果となんらかの因果関係の存在を示唆している。今後,扁桃炎の起炎菌である溶血連鎖球菌の培養上清中,いかなる成分が活性酸素産生能に影響を及ぼしているのか,また,扁桃なる免疫臓器のリンパ球との関わりにつき知る必要があると認められた。
肝疾患における薬物代謝動態の変動について-P4502E1 genotypeとの関連-

肝は薬物代謝の主要臓器であり、障害肝では薬物代謝動態にも変化が生ずると考えられる。肝疾患における薬物代謝能の判定には、肝障害の程度と薬物代謝酵素に関与する遺伝的背景の両面からの評価が必要である。そこで、本研究では健常者とアルコール性肝障害(ALD)患者について、肝障害の進行度とP4502E1(2E1)の遺伝子型を分析し、これらの成績と2E1で特異的に代謝されるacetaminophen(acet)の代謝動態を比較検討した。対象は、ALD患者15例で内訳は微小変化群2例、脂肪肝1例、アルコール性肝線維症8例、肝硬変4例で、対照として非飲酒家の健常人10名についても同様に検討した。2E1の遺伝子型は、Hayashiらの方法に準じてA型、B型およびC型に判定した。Acet代謝は1gを経口投与後経時的に血中濃度を測定し、血中半減期(T1/2)とclearanceを算定し、(clearance/体重)を代謝率として算出した。Acet代謝の検討は禁酒直後に行ったが、一部の症例では、禁酒46週後にも測定し、禁酒に伴う代謝動態の変化についても検討した。健常者でのacet代謝についてみると、T1/2は2E1の遺伝子型による差はなかったが、acetの代謝率はC型で有意に高値であった。ALD患者での、2E1遺伝子型は、微小変化群と肝線維症の各1例がA型で、他はB型であった。Acet代謝はA型ではT1/2、代謝率ともA型の健常人とほぼ同じ値で、B型の非肝硬変例では、A型よりT1/2は短く、代謝率は高い傾向がみられ、B型の健常人との比較でも同様の傾向であった。肝硬変例ではB型およびA型の非肝硬変およびB型の健常人よりT1/2が長く、かつ代謝率が低い傾向が認められた。禁酒により、A型の微小変化群ではacet代謝に大きな変化はみられなかったが、B型では肝硬変の1例を除きT1/2の延長と代謝率の低下傾向がみられた。以上のごとく、健常人での検討から2E1の遺伝子型によりacetの代謝量が異なると考えられ、ALD患者では2E1の遺伝子型による2E1の誘導の差がacet代謝に反映されていると考えられた。
非アルコール性脂肪性肝炎の病態における核内レセプターPXRとCARのクロストーク

非アルコール性脂肪性肝炎(NASH)の病態における核内レセプターPXR・CARの役割とクロストークを検討した。メチオニン・コリン欠乏食によるNASHモデルで、CARはROS(活性酸素)産生を亢進させ、肝障害・肝線維化を増悪させた。PXR KOマウスでは、WTマウスと有意な差はみられなかった。NASHモデルでの発癌実験で、CARは細胞増殖を亢進させることにより発癌に関与していることが示唆された。PXR及びCARノックアワト(KO)マワスを用いた解析マウスは系統問で、非アルコール性脂肪性肝炎(NASH)の疾患感受性に差があり、C57BL/6NとC3H/HeN間での疾患感受性の違いを検討し報告した。疾患感受性の強いC57BL/6Nに、PXR及びCARKOマウスの系統を替えた。さらにC57BL/6N系でPXR、CAR double KOマウスを作成した。これらのマウスで、実験的NASHモデルの作成に用いられているメチオニンコリン欠乏(MCD)食を用い、NASHマウスモデルを作成中である。平成21年度は、マウス間でNASHの違い(生化学的、組織学的比較)や肝臓組織中の過酸化脂質やCytochromeP450の発現の違いを比較する。CARKOマウスでは、野生型(WT)マウスに比べNASHが有意に軽かったが、同様のことがPXR KOマウスやdouble KOマウスで起こっているかを確認する。また、CARKOマウズでは、長期飼育の結果として、肝臓の線維化がWTに比べ軽いことを確認しているが、同様にPXRKOマウス、double KOマウスでの、線維化マーカー(TIMP、MMP、Collagen1α1)の変化などを比較する予定である。ケトン体(ヒドロキシ酪酸)の濃度がMCD食投与群で上昇し、ヒドロキシ酪酸を腹腔内投与することにより、WTマウスではCARの核内移動が起こることを見出した。平成21年度は、ケトン体(ヒドロキシ酪酸)のCAR、PXR及び薬物代謝酵素群の転写制御に及ぼす影響をin vitroで検討する予定である。本研究は、非アルコール性脂肪性肝炎(Non alcoholic steatohepatitis,NASH)の病態における核内レセプターPXRの意義、並びにレセプターCARとのクロストークの詳細を明らかにすることを目的としている。本年度は、主にノックアウト(KO)マウスを用いた動物実験を行い、以下の研究成果を得た。マウスは系統間で、NASHの疾患感受性に差がある。我々の保有しているC3H/HeN系のKOマウスから、NASHに疾患感受性のあるC57BL/6N系ヘマウスをバッククロスし、C57BL/6N系を背景としたPXR KOマウス、CAR KOマウスを作成した。3.各KOマウスのMCD食によるNASHモデルでの比較検討本研究は、非アルコール性脂肪性肝炎(Non alcoholic steatohepatitis,NASH)の病態における核内レセプターPXR及びCARの意義、両レセプター間のクロストークの詳細を明らかにすることを目的としている。1.メチオニン・コリン欠乏食(MCD食)によるNASHモデルでの比較検討マウスは系統間で、NASHの疾患感受性に差がある。NASHに疾患感受性のあるC57BL/6N系を背景としたPXR KOマウス、CAR KOマウスを作成した。MCD食を投与し、実験的NASHモデルを作成した。各群で、8週、16週間MCD食を投与した後、解剖し、血液、肝臓を採取した。CAR KOマウスでは、野生型マウス(WT)に比較し、MCD食事によるNASHが有意に軽かった。PXR KOマウスでは、WTマウスと比較し有意な差はみられなかった。PXR、CARダブルノックアウトマウスで、MCD食によるNASHモデルを作成、解析中である。2.CAR KOマウスを用いたMCD/NASHモデルでの発癌実験CAR KOマウスでは、MCD食による肝障害がWTと比較し有意に軽かったことから、NASHからの発癌におけるCARの役割を検討するため発癌実験を行った。Diethylnitrosamine(DEN)を投与した後、MCD食で長期飼育した。発癌は、WTでは、KOマウスに比べ有意に発癌が亢進していた。CARは細胞増殖を亢進させることにより発癌に関与していることが示唆された。本研究は、非アルコール性脂肪性肝炎(Non alcoholic steatohepatitis,NASH)の病態における核内レセプターPXR及びCARの意義、両レセプター間のクロストークの詳細を明らかにすることを目的としている。ノックアウト(KO)マウスを用いた動物実験を行い、以下の研究成果を得た。1.メチオニン・コリン欠乏食(MCD食)によるNASHモデルでの比較検討

マウスは系統間で、NASHの疾患感受性に差がある。NASHに疾患感受性のあるC57BL/6N系を背景としたPXR KOマウス、CAR KOマウスを作成した。MCD食を投与し、実験的NASHモデルを作成した。各群で、8週、16週間MCD食を投与した後、解剖し、血液、肝臓を採取した。CAR KOマウスでは、野生型マウス(WT)に比較し、MCD食によるNASHが有意に軽かった。CARは、MCD食によるNASHモデルにおいて、ROS(活性酸素)の産生を亢進させ、肝障害・肝線維化を増悪させた。PXR KOマウスでは、WTマウスと比較し有意な差はみられなかった。2,CAR KOマウスを用いたMCD/NASHモデルでの発癌実験CAR KOマウスでは、MCD食による肝障害がWTと比較し有意に軽かったことから、NASHからの発癌におけるCARの役割を検討するため発癌実験を行った。Diethylnitrosamine(DEN)を投与した後、MCD食で長期飼育した。発癌は、WTでは、KOマウスに比べ有意に発癌が亢進していた。CARは細胞増殖を亢進させることにより発癌に関与していることが示唆された。
活性金属中の不純物の直接除去を目的とした新しい精錬プロセスの開発

チタン、イットリウムなどの活性金属中の不純物、なかでも侵入型元素位置に固溶するガス元素は熱力学的に極めて安定であるため、それらの不純物の除去は一般に困難で、現在のところ有効な工業プロセスは確立されていなかった。本研究では、(1)新しい精錬プロセスの探査として、電気化学的手法を用いた脱酸法がチタンやチタン合金以外のどのような活性金属に対して有効かを既存のデータベースを活用して検討し、同時に実験的に検証した。(2)酸素以外の侵入型不純物についても、電気化学的手法がどの程度有効か検討し、新プロセスとしての可能性を追求した。具体的には、本研究ではイットリウムを主要対象として希土類元素中の酸素の除去を目的とした基礎研究を以下の手順に従って進めた。1.活性金属中の有害不純物の化学ポテンシャル情報処理の整備を行った。2.活性金属・溶融塩・電極の相平衡、熱力学的安定性、電気化学的特性の検討した。3.最適電気化学セルの設計および電気化学的手法による実験を行った。4.試料の分析・評価および他のプロセスとの比較を含む本プロセスの評価した。この結果、本研究手法が希土類の脱酸に有効であることが分かった。
テキストマイニングとの融合による高度オープンドメイン質問応答の実現

大規模なドキュメントから人の情報要求に適合する情報を効率よく獲得するための技術として、オープンドメイン質問応答が期待されている。本研究では、従来の手法では対象外であった発掘型質問について、実際のQAデータベースの調査を行い、そこで得た知見を利用して質問応答システムの開発を行った。また、質問応答の精度向上のための手法や、他言語で記述されたテキストや音声データを対象とするための手法を開発した。本研究で対象とする発掘型質問の調査のため,Web上の質問サイトに投稿された質問を調査した。技術,社会,学問,生活,趣味などの質問カテゴリそれぞれからランダムに質問を調べ,一つの文書に答がそのまま掲載されているのではなく,複数の文書に記述された情報を統合することで答が導きだせるという基準に基づき,質問を選択し分類を行った。その結果,(1)比較・最上級を問う質問,(2)初出を問う質問,(3)経緯、軌跡を問う質問,(4)2つ以上の事項の関連性を問う質問,の4つに分類できることが分かった。次に,これらの質問文を意味表現に構造化し,これらの質問に答えるために必要な要素を特定した。現在,質問文から,ここで表現した意味表現へと変換する意味解析器を構築中である。一方,実世界質問全般に回答するユニバーサル質問応答への対応のため,従来の質問応答システムの拡張・性能改善も行った。factoid型質問応答の発展型として,従来型の「短い答」ではなく,回答周辺に存在する情報を付加し,かつその回答自身が言語として適切な表現となっているような「詳解」を抽出するシステムの実装を行った。また,質問文とは異なる言語で記述された文書から答を抽出する言語横断質問応答として,統計的機械翻訳に基づくパッセージ検索手法を検討しているが,利用する翻訳モデルの改善を行った。評価実験により単語重要度の利用が有効であることが分かった。ニュース音声・学会講演音声などの音声データを音声認識して得られる音声ドキュメントを対象とする質問応答では,認識誤りに頑健な回答タイプ推定法に加え,認識候補から正解テキストを翻訳モデルで予測して検索を行う,認識誤りに頑健な音声ドキュメント検索手法を開発し,実装を行った。発掘型質問を対象とする質問応答システムについて、前年度の調査結果に基づき、入力質問文字列から各タイプの意味表現を抽出する質問文解析器を構築した。解析器は、正規表現パターンによる人手で作成した規則に基づいて実装を行った。また、ルールベースの手法では多様な入力質問文字列に対応するには限界があると考え、質問データベースの類似質問との類似度に基づく事例ベースの質問解析手法も実装した。一方、調査結果の質問例について、新聞記事を対象に回答候補抽出法について検討を行った。検索結果には間違った情報が多く含まれるため、それらの選別・統合方法が今後の課題である。実世界質問全般に回答するユニバーサル質問応答については、非factoid型の質問応答の拡張・性能改善を行った。特に、入力質問と回答候補の間の、予測される回答タイプの一致の判定に利用する特徴量抽出法について検討を行った。従来は特徴量として機能語と品詞化した内容語を利用していたが、さらに質問に現れる内容語を他の内容語と区別して抽象化した特徴量を考案し、その利用による性能の向上を確認した。ニュース音声・学会講演音声などの音声ドキュメントを対象とする質問応答では,昨年度開発した認識誤りに頑健な翻訳モデルに基づく検索手法に加え、文脈を利用した文書拡張手法、言語モデルに基づく検索手法を利用することを試み、それらの併用による検索性能の向上を確認した。発掘型質問について、新聞記事を対象とした回答抽出法を具体化した回答タイプ毎の回答抽出ルールを作成した。前年度に構築した質問文解析器と組み合わせて、質問応答システムの実装を行った。ただし、抽出結果にはまだ誤りが多く、精度の向上に課題が残されている。ユニバーサル質問応答については、前年度に検討した特徴量を用いた、オンライン機械学習による回答抽出法の検討を行った。しかし、従来の人手でチューニングした評価式を用いる手法を改善するには至っておらず、更なる検討が必要である。以上、これまでに開発した事実型、非事実型、発掘型の質問応答の質問入力部を統合し、すべての回答タイプに対応する質問応答システムの仮実装を行った。また、開発した質問応答システムについて、ニュース音声・学会講演音声などの音声ドキュメントを対象とするための技術開発を行った。テキストを対象とする場合と異なり音声データを対象とする場合には、(1)音声データから検索語の出現位置を検出する技術、(2)検出した検索語を手がかりに回答を含む音声区間を週出する技術、が必要である。(1)について、距離空間上の索引を用いる全く新しい音声ドキュメントからのキーワード検索手法を開発した。従来法と比べて、閾値を使わずに尤もらしい候補から検出するという特長がある。(2)について、音声ドキュメントの可変長音声区間を対象とする内容検索手法を複数検討し、評価実験により有効な手法を検証した。
インターネットを利用して視覚障害者が図書の予約・貸出を音声で行うシステムの研究

平成10年度は、音声入力ソフトをボイスタイプデクテーションからバージョンアップし、ViaVoice98とし、認識率を向上させた。しかし、以前以上に音声入力のための訓練が長くなり、視覚障害者にとっての問題点を抱えている。また音声出カソフトも『おしゃべりメイト』をやめ、ViaVoice98の音声出力と95リーダ、IBMホームページリーグに切り替えた。今年度は、ホームページにデータベースを埋め込んだ。サーバOSはFreeBSDで、データベースエンジンはPostgreSQLである。ユーザ登録により検索のみの人、登録・削除のできる人と区分けが出来るため、ホームページ上でのデータベース修正も可能となった。しかし、Unix上でのデータベースのため音声組み込みに一部支障が出ている。今後視覚障害者の評価を待ちたい。ホームページのキーボード対応は、検索エンジンにおいては、まだ可能となっていない。視覚障害者・健常者両用のホームページは作成できた。動画像やメールアドレスの貼りつけも可能となった。視覚障害者用の検索エンジンはまだだれも研究されていないようである。このような研究は新規技術ではなく、既存の技術で視覚障害者に応用するという研究のため、研究発表する場がなくて残念であった。平成9年度の目標の音声ホームページ作成はだいたい達成できた。ホームページまでの誘導は、95リーダ、IBMホームページリーダとボイスタイプデクテーションの組み合わせで音声入力と音声出力を繰り返しながら、ブラウザに到達する。その後、ホームページを開くと、内容を音声で読み上げ、画像や図形は説明文を読み上げる。ホームページ作成は、HTMLとJavaScriptを用いて行った。Javaは研究を行ったが、実動させるまでには達しなかった。また、音声出力ソフトの『おしゃべりメイト』も用いて音声出力を行ってみた。しかし英語が読めない、固有名詞が読めない、ドラッグアンドドロップをしなければ読まないなどの欠点も多く、今後使用するかどうか未定である。このホームページは、WindowsであってもMacであっても稼動することができた。しかし、プラグインソフトでMIDIなどの音声ソフトが組み込まれていると、MIDI用の画面となり、スタートボタンを押したり、画面を元に戻すことが必要であったので、ここは検討が必要である。また、音声入力のボイスタイプデクテーションは、声の波長を覚えさせて認識を行うので、訓練が必要である。来年度は、このホームページにデータベースを埋め込み、データ検索をさせる予定である。また、ホームページにメールアドレスや動画像の貼り付け、リンクをさせ、ホームページのネットサーフィンなども可能か検討中である。また音声出力ソフトも『おしゃべりメイト』をやめ、ViaVoice98の音声出力と95リーダ、IBMホームページリーダに切り替えた。
工場制と産業集積:産業発展の比較制度分析

本年度は,19世紀末から20世紀初頭のアメリカと日本における絹織物業の生産組織を解明するために,資料調査と分析を進めた.その成果として,日本の絹織物業の生産組織における効率性について,従来の研究とは異なる新たな成果を得ることができた.従来の研究における想定とは異なり,1890年代から1900年代にかけての桐生の織元にとって技術進歩の要点は織布工程ではなく,染色,意匠,組織などの革新によるデザインの多様化にあった.織元は新たなデザインの先染織物を柔軟かつ迅速に市場に投入することによって利益をあげようとしたのである.そこで求められる効率的な生産組織は大規模な工場制ではなかったが,不熟練の賃機を短期間組織する問屋制も不適当であった.複雑な意匠の織物の生産には高度な製織技術が必要だったからである.問屋制の実態もまた,従来の想定とは異なっていた.有力な織元は熟達した複数の機業家と1030年に及ぶ賃業取引を継続しており,それらの基幹的な賃機はしばしば専業であった.こうした長期的な取引においては,しばしば言及されてきた,怠業や原料横領などの賃機の「不正」は問題とはならなかった.「不正」を訴えていたのは,こうした問屋制を組織することのできなかった不良な織元経営であったと推測される.さらに問屋制の利益とは,従来指摘されてきたような,事業規模を伸縮する自由度や副業賃機の低賃金労働などではなく,熟達した機業家をはじめ,桐生に集積している多様な賃業者との取引関係を構築することによって達成される「柔軟な専門化」こそがその核心であったと思われる.産業集積の利益を最も効率的に引き出す生産組織が問屋制であり,これに,近代的な意匠,染色,組織の技術が組み合わされ,多様な織物が生産された.それが,出現しつつあった豊かな大衆の需要を獲得したと考えられる.このように,1900年代の桐生絹織物業に見られた,都市大衆消費需要を標的とした生産の拡大は,問屋制を中心とする柔軟な生産組織による多品種少量生産によって可能となったと考えられる.本年度は,19世紀末から20世紀初頭のアメリカと日本における絹織物業の生産組織を解明するために,資料調査と分析を進めた.その成果として,日本の絹織物業の生産組織における効率性について,従来の研究とは異なる新たな成果を得ることができた.従来の研究における想定とは異なり,1890年代から1900年代にかけての桐生の織元にとって技術進歩の要点は織布工程ではなく,染色,意匠,組織などの革新によるデザインの多様化にあった.織元は新たなデザインの先染織物を柔軟かつ迅速に市場に投入することによって利益をあげようとしたのである.そこで求められる効率的な生産組織は大規模な工場制ではなかったが,不熟練の賃機を短期間組織する問屋制も不適当であった.複雑な意匠の織物の生産には高度な製織技術が必要だったからである.問屋制の実態もまた,従来の想定とは異なっていた.有力な織元は熟達した複数の機業家と1030年に及ぶ賃業取引を継続しており,それらの基幹的な賃機はしばしば専業であった.こうした長期的な取引においては,しばしば言及されてきた,怠業や原料横領などの賃機の「不正」は問題とはならなかった.「不正」を訴えていたのは,こうした問屋制を組織することのできなかった不良な織元経営であったと推測される.さらに問屋制の利益とは,従来指摘されてきたような,事業規模を伸縮する自由度や副業賃機の低賃金労働などではなく,熟達した機業家をはじめ,桐生に集積している多様な賃業者との取引関係を構築することによって達成される「柔軟な専門化」こそがその核心であったと思われる.産業集積の利益を最も効率的に引き出す生産組織が問屋制であり,これに,近代的な意匠,染色,組織の技術が組み合わされ,多様な織物が生産された.それが,出現しつつあった豊かな大衆の需要を獲得したと考えられる.このように,1900年代の桐生絹織物業に見られた,都市大衆消費需要を標的とした生産の拡大は,問屋制を中心とする柔軟な生産組織による多品種少量生産によって可能となったと考えられる.
メチル化異常によるインプリンティング疾患においてヒドロキシメチル化の果たす役割

本研究は、メチル化異常に起因する小児のインプリンティング異常症においてヒドロキシメチル化が病態にどのように関与しているかを解明することを目的とする、ヒト臨床検体を用いた世界初の包括的な5-ヒドロキシメチル化シトシン(5hmC)の解析研究である。不可逆的なゲノム配列の異常とは対照的に、メチル化をはじめとするエピゲノムは可塑性を持ち、治療の標的となる可能性がある。この観点から、5hmCが脱メチル化の中間代謝物であることに注目し、そのダイナミックな挙動と制御機構を明らかにすることで、新しい診断方法やメチル化・脱メチル化を制御することによるエピゲノム治療法を開発する基盤となる成果を目指す。
フィールドで応用可能な指先の作業負担評価方法の開発

清掃作業に従事する8名の被験者の協力を得てごみ積み込み実験を行い指先への影響を検討した。表面筋電図は右母指球筋、左母指球筋、右総指伸筋、右三角筋、右増帽筋、右腰部体幹起立筋、右大腿外側直筋の7チャンネルから誘導し、心電図も同時に記録した。また圧センサーにより各指の圧を連続測定するとともにBorgスケールを用いて自覚症状を評定した。実験条件として、第1実験としてごみの重さ、積み込みの速さ、積み込む位置の高さ、ごみを置く位置の高さの4条件をさまざまに変化させて、手指への影響を評価した。第2実験として1Kgから10kgまで10段階のごみを10秒間保持させて、また持ち方を変えて同様の手指への影響を検討した。データは解析中であるがこれまでの中間的な分析結果から、総指伸筋にかかる負荷はごみ重量とともに増大するが特に重量が大きくなると最大筋力比の増大率も高くなる。一方、母指球筋においてはごみの重量が増すことによる増大率には個人差やごみの持ち方による差が大きい傾向が見られた。三角筋及び増帽筋ではごみ重量とその増大に伴い最大筋力比はほぼ直線的に増大する。一方、大腿外側直筋ではごみ重量が8、9kgを越えると急激に負荷がかかる傾向が認められた。これはごみの重量増大に伴って全身の筋が動員されることによると思われる。以上より、ごみ収集作業において主として表面筋電図法を用いて手指及びその他の部位の筋への負荷の掛かり方について現場実験的に評価を行った。
移植臓器に対する液性免疫反応評価のための新規免疫モニタリング法の開発

【具体的内容】インビトロにおいてIgM/IgG型メモリーB細胞を対象とした薬剤感受性試験を施行した。実際の臨床における,免疫抑制療法プロトコールに従って免疫抑制剤の組み合わせ,投与量の設定を行った。またIgM型メモリーB細胞においてはIgM型形質細胞への分化とIgG型メモリーB細胞へのクラススイッチにおける各分化過程とIgG型メモリーB細胞においてはIgG型形質細胞への各分化過程における薬剤感受性試験を施行した。つまり,IgM型メモリーB細胞のIgM/IgG型形質細胞への分化をより効率的に抑制可能な免疫抑制療法を検討した。【意義】従来のプロトコール化された,免疫抑制療法においては十分にIgM/IgG型抗ドナーHLA抗体の産生が抑制されていない可能性が示唆され、より個人差と病態を考慮した免疫抑制療法の導入が必要であることが明らかになった。またエベロリムスなど効果的な投与法が明らかにされていない薬剤においては従来の投与法と異なり,より臓器移植後早期に内服を開始することでIgM/IgG型抗ドナーHLA抗体の産生が抑制され,移植臓器に対する,液性免疫反応を介した傷害の阻害にも効果的である可能性が示唆された。よって液性免疫反応を対象とした,免疫抑制療法の再考も重要であると考えられた。【重要性】T細胞を対象とした薬剤感受性試験はすでにアッセイ系が確立されており、免疫抑制療法の開発などに利用され、T細胞性拒絶反応の制御に大きく貢献してきた。一方で抗体関連型拒絶反応は移植長期予後に関与しており,制御法の確立が待たれている。よって本研究でメモリーB細胞と対象とし,アイソタイプごとにおける薬剤感受性試験系を確立したことで抗体関連型拒絶反応制御に有効な免疫抑制療法の開発につながることが期待される。実際の臨床検体を用いてインビボにおける,抗ドナーHLA抗体に対応したIgM型メモリーB細胞の臨床的意義の検討を開始している。すでに移植後不定期に採血したサンプルを用いて検討を行い、免疫抑制療法のプロトコール化された急激な減量が抗ドナーHLA抗体特異的IgM型メモリーB細胞のIgG型へのクラススイッチを誘導し、抗体関連型拒絶反応の発症に関与している可能性を明らかにしている。よって実際にサンプリングを行う時期、必要な臨床情報の決定などに役立っている。本研究では移植直後の免疫抑制療法減量期(ー1ヶ月)では移植直後から1週間毎にそれ以降は1ヶ月毎にサンプル(末梢血単核球,血漿)の採取を行っている。よって従来の診断法(腎機能,尿検査,腎組織生検結果など)との抗体関連型拒絶反応発症診断における、迅速性,正確性、侵襲性などの比較検討を行っていきたい。またプロトコール化された免疫抑制療法の急激な減量以外にも抗ドナーHLA抗体特異的IgM型メモリーB細胞の分化、クラススイッチを誘導する因子【補体活性化,サイトカイン(IL-4,TGF-Βなど)の産生】などの同定も試みる予定である。またインビボにおいてT細胞,炎症細胞などの細胞間コンタクトを介した,関与あるいはドナーHLA抗原刺激下での免疫抑制療法の感受性の確認も施行する。以上より,抗ドナーHLA抗体特異的IgM型メモリーB細胞の抗体関連型拒絶反応早期診断法としての有用性のインビボでの確認とその他に考慮すべき因子の検討,抗体関連型拒絶反応発症予防に有効な免疫抑制療法の確認などを引き続き行う。今年度は末梢血中を循環する、ドナー抗原特異的メモリーB細胞のアイソタイプの存在比とドナー抗原に対する液性免疫反応の賦活化との関連性を解明し、各メモリーB細胞の臨床における検出意義を明らかにした。結果、ドナー抗原に対する抗体反応の活性化と末梢血中でのドナー抗原特異的IgM/IgGメモリーB細胞の存在比が関連しており、B cell receptorを介した抗原抗体反応の賦活化とともにドナー抗原特異的IgMメモリ-B細胞のIgGへのクラススイッチが促進されることが示唆された。上記にもとづいて病態の進展に応じてより個別化された、免疫抑制療法を確立するためにIn vitroでIgM型メモリ-B細胞のIgM型形質細胞への分化とIgGメモリ-B細胞へのクラススイッチを介してIgG型形質細胞への分化を誘導するアッセイ系を確立した。これらのアッセイ系にてエベロリムス,セルセプト,タクロリムス,シクロスポリン,プレドニゾロンの各分化段階における感受性の確認を施行した。結果、メモリ-B細胞の各分化増殖段階により、各免疫抑制剤の感受性が異なること、現在のプロトコールに従った免疫抑制療法ではドナー特異的IgM型メモリーB細胞のIgG型形質細胞への分化が十分に抑制されていない可能性が示唆された。以上より、現在のT細胞を標的とした免疫抑制療法はさらに個別化される必要があり、ドナー特異的IgM型メモリ-B細胞のIgM/IgG形質細胞への各分化段階に応じた免疫抑制療法の確立が必要であることが明らかになった。今年度の研究費は主にIn vitroアッセイ系の確立のための試薬類の購入、臨床検体の解析に費用をあてた。またこれらの結果を移植免疫の分野にて論文発表をおこなった。当初の研究計画にもとづき、In vitroにおいてはIgG/IgM型メモリーB細胞を抗体産生細胞まで分化誘導可能なアッセイ系を確立することで末梢血中を循環する、ドナー特異的IgG/IgM型メモリーB細胞の抗原抗体反応に関連した病態との関係を明らかにした。

つまり、培養上清からのIgM型ドナー特異的抗体の検出が病態進展の予測因子としての意義を有すること、IgG型抗体とともに解析することでより、詳細にドナー抗原抗体反応の活性化レベルが評価可能なことが示唆された。さらにIn vivoにおいても臨床検体をretrospectiveに解析することでドナー特異的IgM型メモリーB細胞の抗体関連型拒絶反応の早期診断法としての可能性を明らかにすることができた。また現在の免疫抑制療法においてはT細胞関連型拒絶反応はほぼ制御されているがドナー抗体に関連した抗体関連型拒絶反応は移植長期予後にとり、移植臓器廃絶の原因である。よってより,ドナー抗体産生に直接関与するメモリ-B細胞分化増殖系における薬剤感受性試験が必要と考えられる。我々は先述のIn vitroアッセイ系を用いてメモリ-B細胞各分化段階における、各免疫抑制剤の感受性の違い、T細胞を介さない直接作用について比較検討した。よってin vitroの結果より、IgM/IgG型ドナー抗体を効率よく産生を予防可能な免疫抑制療法が明らかになった。以上より、ドナー特異的IgM型メモリーB細胞の抗体関連型拒絶反応早期診断のためのバイオマーカーとしての役割とIn vitroにおける薬剤感受性の結果より、IgM/IgG型ドナー抗体産生予防への効果が期待される、個別化免疫抑制療法を明らかにすることができた。【具体的内容】インビトロにおいてIgM/IgG型メモリーB細胞を対象とした薬剤感受性試験を施行した。実際の臨床における,免疫抑制療法プロトコールに従って免疫抑制剤の組み合わせ,投与量の設定を行った。またIgM型メモリーB細胞においてはIgM型形質細胞への分化とIgG型メモリーB細胞へのクラススイッチにおける各分化過程とIgG型メモリーB細胞においてはIgG型形質細胞への各分化過程における薬剤感受性試験を施行した。つまり,IgM型メモリーB細胞のIgM/IgG型形質細胞への分化をより効率的に抑制可能な免疫抑制療法を検討した。【意義】従来のプロトコール化された,免疫抑制療法においては十分にIgM/IgG型抗ドナーHLA抗体の産生が抑制されていない可能性が示唆され、より個人差と病態を考慮した免疫抑制療法の導入が必要であることが明らかになった。またエベロリムスなど効果的な投与法が明らかにされていない薬剤においては従来の投与法と異なり,より臓器移植後早期に内服を開始することでIgM/IgG型抗ドナーHLA抗体の産生が抑制され,移植臓器に対する,液性免疫反応を介した傷害の阻害にも効果的である可能性が示唆された。よって液性免疫反応を対象とした,免疫抑制療法の再考も重要であると考えられた。【重要性】T細胞を対象とした薬剤感受性試験はすでにアッセイ系が確立されており、免疫抑制療法の開発などに利用され、T細胞性拒絶反応の制御に大きく貢献してきた。一方で抗体関連型拒絶反応は移植長期予後に関与しており,制御法の確立が待たれている。よって本研究でメモリーB細胞と対象とし,アイソタイプごとにおける薬剤感受性試験系を確立したことで抗体関連型拒絶反応制御に有効な免疫抑制療法の開発につながることが期待される。実際の臨床検体を用いてインビボにおける,抗ドナーHLA抗体に対応したIgM型メモリー