hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
野菜に含まれるシァン配糖体の安全性について

またSCN^-が甲状腺腫を起こすためには血中SCN^-が810mg/dlという高濃度で長期間続く必要があることから、普通の食事から摂取する野菜量では影響はないと思われるが、偏食の強い人や、菜食主義といわれる人では注意する必要がある。ダイコン、キャベツ、カイワレを用いてラットの甲状腺及び他の臓器への影響について調べた結果、十字花科野菜の摂取により、体重増加、甲状腺の萎縮、組織像からは濾胞腔の縮少、濾胞上皮細胞の肥厚が認められた。血液検査からは血中脂質の増加、肝臓の組織像からは脂肪変性などの他の臓器への影響も認められた。本年度は、もっとも影響の大きかったカイワレ大根を用い、ヨ-ド添加群としてコンブを飼料に混入した場合の甲状腺の回復状況について検討した。(カイワレ250g/kg Powder Feed)コンブ(320mgI_2/100g)を飼料(g/kg Powder)にOg(B)、1g(C)、5g(D)、10g(E)をそれぞれ添加した。各群56匹を54日間育後解剖し、各組織について検鏡また血液検査を行った。C、D、E群については、甲状腺の大きさ(重量、長径、短径)にコントロ-ルに比ベ小さい傾向が認められた。全ての飼料はKI無添加であり、60回程度の飼育により甲状腺はコントロ-ルにおいてもやや肥大傾向にあるので、コンブの添加により小さくなったものと思われる。組織像についても異常は認められず、血液検ホルモン検査についても大きな差は認められなかった.みた他の臓器についても形状、組織像に異常は認められなかった。これらのことから、コンブを添加することにより、十字花科野菜摂取による甲状腺機能障害は改善されると考えられる。添加するコンブの量であるが、添加群に大きな差はなく、C群(1g/kg powder)で用いた量で十分であると思われる。日本においてはヨウ素欠乏症よりも、過剰症が問題になっているが、食生活の多様化、欧米化により引き起こされる可能性の欠乏症についても十分注意する必要があると思われる。
過渡的複合体の解析を可能にするケージド化合物の設計と合成

(1)高い光反応性を持つケージド化合物:1光子励起および2光子励起で高い光反応性が期待される新規ケージド化合物を設計・合成した。生細胞内で任意のタンパク質をラベル化可能な,新しいケージドフルオロフォアとして,Bhcmoc-fluorescein-Haloの合成に成功した。(2)核酸のケージド化合物の高機能化:任意の遺伝子の機能発現または機能抑制を,高い時空間分解能で光制御する手法開発を目的に研究を行った。あらかじめ調製したプラスミドDNAやmRNAを,適切に設計したケージング試薬との反応でケージド化合物に変換できれば,実用的な実験手法になりうると期待される。そこで,様々な機能を容易に導入できる核酸のケージング試薬を新たに開発して従来法の問題点の解決を図った。精製用のビオチンタグ付きのケージング試薬Bio-Bhc-diazoを利用して,ケージングしたdsDNAを精製できること,紫外光照射でBio-Bhc基を脱保護できることを確認した。さらに,Bio-Bhc-caged dsDNAを用いて,哺乳動物培養細胞内で,遺伝子の機能発現を光制御できることを明らかにした。(3)過渡的複合体の時空間動態を光制御する多機能性ケージド化合物:ケージド化合物の有用性を高めるため,多様な機能を容易に導入可能なケージンググループを開発した。また,グルコース修飾したケージドパクリタキセル2'-Glc-paBhcmoc-PTXは水溶性と光反応性が大きく向上することを明らかにした。アラキドン酸のケージド化合物paBhcmoc-arachidonic acidは,DGKの細胞内動態を光制御可能であることも明らかにした。25年度が最終年度であるため、記入しない。1.任意のタンパク質をラベル化できる新規ケージドフルオロフォアの合成と光反応性任意のタンパク質を選択的にラベル化でき、高い効率で2光子励起可能なケージドフルオロフォアの開発を目的として研究を行った。350 nm付近に吸収極大をもち、高い光反応効率で活性化できると期待されるBhc-ケージドフルオロフォア(1)を設計合成した。化合物1はHaloTagタンパク質をラベル化できる部位も持っている。Bhcmoc-caged fluorescein (2)は、338 nmに吸収極大(epsilon = 21,000 M-1cm-1)を持ち、生理的条件を模した緩衝溶液中、350 nm光照射によって定量的にpropargyl fluorescein (3)を生成することを明らかにした。このときの量子収率は0.026で、光反応効率(epsilon X phi)は500で、2-ニトロベンジル基を持つケージド化合物より10倍程度効率が良いことも判明した。2.多様な機能を付与可能なケージング試薬の開発光分解性保護基であるBhcmoc基をパクリタキセル(PTX)に導入した分子を合成し、350 nm光照射でPTXを放出すること、放出したPTXがチューブリンの重合を安定化する事を確認した。この結果を基に光反応性を維持しつつ様々な機能を付与できるケージドPTXを合成した。コンセプトを確認する実験として、単糖であるグルコースを導入して水溶性の向上を図った。その結果,パクリタキセルの600倍以上高い水溶性を持ち,さらに,Bhcmoc-PTXより光反応性も向上した新規ケージドパクリタキセルGlc-Bhcmoc-PTXを開発することに成功した。研究項目1の「高効率で2光子励起できる新しいケージドフルオロフォアの開発」として,当初の予定通り,任意のタンパク質をラベル化できる新規ケージドフルオロフォアであるBhc-ケージドフルオロフォアを設計合成することができた。

研究項目2の「多様な機能を付与可能なケージング試薬の開発」に関しても,様々な機能を付与できるケージドPTXを合成し,パクリタキセルの600倍以上高い水溶性を持ち,さらに,Bhcmoc-PTXより光反応性も向上した新規ケージドパクリタキセルGlc-Bhcmoc-PTXの合成に応用できることを示した。平成24年度の研究を継続しながら,当初計画を推進する。25年度が最終年度であるため、記入しない。
メダカ排卵後の迅速な組織修復、残留濾胞組織の分解・除去機構の解明

排卵は受精可能となった卵母細胞が卵巣腔へと放出される過程である。この過程は、濾胞組織と卵巣最外層組織の分解を伴う組織破壊現象と捉えることもでき、毎日排卵するメダカの場合、排卵後、直ちに組織修復が開始され、さらに、卵巣内に残留した濾胞組織も迅速に分解され、翌日の排卵に備える必要がある。本研究では、迅速に進行するこの過程の分子機構を解明することを目的に研究を行った。その結果、卵巣開口部の修復にカドヘリンタンパク質の関与を示唆する結果が得られた。また、在留濾胞組織の分解にゼラチナーゼBやプラスミンが関与する結果を得た。今回の研究で得られた成果をもとに、今後も組織修復の分子機構の解明に取り組む。排卵は、受精可能な卵母細胞が卵巣腔へと放出される過程を指す。この現象は、卵巣を覆う被膜(卵巣上皮細胞層)と卵母細胞を包む被膜(濾胞膜)の溶解を伴う組織破壊現象である。排卵後のメダカ卵巣では、排卵に伴いできた開口部の修復と卵巣内に取り残された濾胞膜の分解が開始される。本研究の目的は、開口部の修復と濾胞膜の分解機構を分子レベルで解明することである。開口部の修復機構については、まず細胞接着に関与するN-cadherinとE-cadherinについて抗体を作製し、発現解析を行った。N-cadherinのみnative proteinを特異的に認識する抗体を作製できたので、この抗体を用いて免疫組織化学染色を行った。N-cadherinは開口部を含む排卵後の濾胞膜全体において発現が確認されたことから、開口部の修復に関与することが示唆された。E-cadherinについては、in situ hybrizidation解析により、排卵後の開口部付近にはその発現が確認できなかったことから、開口部への関与の可能性は低いと考えられる。濾胞膜の分解機構については、プロテアーゼ(MMPやplasminなど)の関与が示唆されていたことから、その酵素の内在の阻害因子であるTIMPおよびPAIについて解析を行った。TIMPについては、mRNA、タンパク質ともに排卵後の濾胞膜において発現を確認できなかった。一方、PAI-1 mRNAは、排卵後の濾胞膜に発現していた。PAI-1は、plasminogenの活性化因子であるuPAを阻害する因子であることから、PAI-1が濾胞膜分解を調節している可能性があることが示唆された。当初予定していた研究計画に沿って概ね順調に研究が進んでいると考えるが、解析に必要な抗体のうち、いくつかの抗体の作製が難航しているため、抗体作製を早急に進める必要がある。受精可能な卵母細胞が卵巣腔へと放出される過程が排卵である。排卵が起こるためには、卵巣の最外層にある被膜と濾胞膜と呼ばれる卵母細胞を包む被膜の分解が必要となる。排卵後、分解された最外層被膜の修復が開始され、その後、排卵により卵巣内に取り残された濾胞膜の分解が進行する。本研究では、メダカ卵巣を用いて被膜の修復と濾胞膜の分解機構を分子レベルで解明することを目的に研究を行っている。昨年度の解析から、N-cadherinが開口部の修復に関与することが示唆されたので、卵巣培養系にN-cadherinの特異的抗体を添加し、開口部の修復の有無を確認したが、開口部の修復は阻害されなかった。今後は、細胞接着因子の阻害剤や細胞分裂を阻害する阻害剤を添加し、開口部の修復の有無を確認する予定である。排卵1時間後の卵巣を、1272時間の範囲で器官培養した後、卵巣内の残存濾胞膜の有無を組織切片で確認した。その結果、予想に反して72時間培養した卵巣内でも残存濾胞膜の存在が確認された(in vivoでは、排卵20時間後には残存濾胞膜の消失が確認されている)。そこで、黄体形成ホルモンLHが作用した後の卵巣(排卵8時間後)を器官培養し、残存濾胞膜の有無を組織切片で確認したところ、その消失が確認された。以上の結果から、残存濾胞膜の分解には、LHで誘導される何らかの因子が関与することが示唆された。今後は、LHによって誘導され、残存濾胞膜の分解に関与する因子の探索を行うとともに、昨年度の解析から残存濾胞膜分解に関与することが示唆されたPAI-1やplasminogenなどについて、それらの特異的抗体を器官培養系に添加することで、これらの因子の関与の有無を調査する予定である。昨年度の遅れのため、今年度もやや遅れが生じている。また、研究計画と異なる研究結果が得られたため、若干の方向修正を行う必要が生じたことから、年次計画より多少の遅れが生じている。排卵は、卵巣の最外層にある被膜と濾胞膜と呼ばれる卵母細胞を包む被膜が分解され、受精可能となった卵母細胞が卵巣腔へと放出される過程である。メダカの場合、排卵後、分解された被膜(卵母細胞が通り抜けた穴の部分)の修復が開始され、続いて、排卵により卵巣内に取り残された濾胞膜は卵巣中心部へ引き込まれながら徐々に分解が進行し、20時間後にはほぼ分解が完了する。本研究では、メダカ卵巣を用いて最外層被膜の修復と濾胞膜の迅速な分解機構を分子レベルで解明することを目的に研究を行っている。

最外層被膜(開口部)の修復に関与する因子の探索を目的として、卵巣培養系にEGTA(カルシウムイオンのキレート剤)を添加し修復の有無を調査したところ、修復は阻害された。この結果は、カルシウムイオン要求性の因子が関与していることを示唆している。N-cadherinの関与を含めて、cadherinの可能性について再検討する必要があると考えられる。また、排卵直後の卵巣において、いくつかの成長ホルモン関連因子の誘導が確認されたことから、これらの因子の関与についても検討する必要がある。卵巣内に取り残された濾胞膜の分解時期を特定するためにIn situ zymography法を行った。その結果、排卵直後から卵巣内に取り残された濾胞膜周辺にゼラチン分解活性が見られ、これらの活性はEDTAとロイペプチンの両方が存在する時、阻害されることが明らかとなった。この結果は、排卵後の濾胞膜の分解にgelatinase Bとplasminの両方が関与していることを示唆している。今後は、両因子の特異的抗体を用いて、活性阻害が可能かどうか検討する。排卵は受精可能となった卵母細胞が卵巣腔へと放出される過程である。この過程は、濾胞組織と卵巣最外層組織の分解を伴う組織破壊現象と捉えることもでき、毎日排卵するメダカの場合、排卵後、直ちに組織修復が開始され、さらに、卵巣内に残留した濾胞組織も迅速に分解され、翌日の排卵に備える必要がある。本研究では、迅速に進行するこの過程の分子機構を解明することを目的に研究を行った。その結果、卵巣開口部の修復にカドヘリンタンパク質の関与を示唆する結果が得られた。また、在留濾胞組織の分解にゼラチナーゼBやプラスミンが関与する結果を得た。今回の研究で得られた成果をもとに、今後も組織修復の分子機構の解明に取り組む。本年度予定していた研究計画の一部については着手できなかったため、次年度の計画と共に進める予定である。また、抗体作製については、早急に進める予定である。研究計画の一部の変更に伴い、着手できなかった本年度予定分の研究計画については、次年度の計画に先立って実行する予定である。首尾よく研究が進行したら、次年度の計画にも着手する。生殖生物学当初予定していた消耗品の使用量よりも少ない使用量で研究を進めることができたため、消耗品の購入が少なかった。また、学会参加についても予定より少ない参加回数であった。研究計画の一部変更に伴い、当初予定していた解析等を一部実施しなかったため。また、予定していたよりも学会への参加回数が少なかったため。外注での抗体作製および受託での次世代シークエンス解析に充当する。次年度分は、当初の予定通りに使用する予定である。変更後の研究計画に必要な解析に使用する。
電気刺激による食肉の低分子画分と核酸関連物質の消長

電気刺激は死後硬直を短時間に終らせ、肉質等の熟成・軟化などに有効といわれ、これにはタンパク質分解活性の高いことが考えられる。1、本研究の高速液体クロマトグラフィ-により分析で、電気刺激したものは対照区によりも、筋漿タンパク質の分解の程度が強く、高分子の3つピ-クは減少し、低分子のミオグロビンの分子量である1.7万付近のものが増加した。ペプチド画分のピ-クを見ると、電気刺激をしたものではタンパン質の分解により、高分子のペプチドおよび低分子のペプチド(オリドペプチド)の割合が増加し、特に味や風味に関する低分子のペプチドが多かった。2、肉のタンパク質分解に関与するカテプシンBおよびL活性やカルパイン活性について調べてみると、電気刺激したものではカテプシン活性は対照区よりもいくぶん高かった。また肉ホモジネ-トにカルシウムを添加してカルパイン活性を調べて見ると、電気刺激をしたものは高い傾向にあった。二つの酵素を阻害するロイペプチンを肉ホモジネ-トに添加してもペプチド及びアミノ酸量はかなり増加するので、これらの酵素以外にも食肉のタンパク質分解に関与しているものの存在が考えられた。3、電気刺激はまたATPを早期に分解するので、核酸関連物質、特に旨味に関与するイノシン酸含量について分析した。その結果と殺2日目の場合には対照区とくらべて差は見られなかったが、5日目以降21日目まで電気刺激したものは対照区よりも高い値で、両者間に0.6ー1.0μmoles/gの差があった。食肉の呈味性に関与する成分として、遊離アミノ酸、ペプチドおよびイノシン酸などがあるが、電気刺激したものはこれらの含量は高く、食肉の熟成・軟化に有効に作用している事が確認された。
GABA(B)受容体を介した気管支喘息誘発機序の解明

気管平滑筋におけるGABA_B受容体の発現は確認されていたものの、その役割については不明であった。そこで、GABA_B受容体が、G_q蛋白共役型受容体(bradykinin受容体など)により制御を受けるホスホリパーゼC(PLC)及びイノシトール3リン酸(IP_3)生成を介して、気管平滑筋を収縮させるかについて検討を行った。その結果、ヒト気管平滑筋細胞のGABA_B受容体刺激により遊離したG_<βγ>サブユニットが、PLCを介してIP_3生成及び一過性の細胞内Ca^<2+>濃度上昇をもたらすことが示唆された。本年度は気管平滑筋におけるGABA_B受容体を介した気管平滑筋収縮機構を中心に研究を行った。1.モルモット気管平滑筋は、GABA_B受容体作動薬(baclofen)により収縮した。以上の結果は気管平滑筋上のGABA_B受容体がG_i蛋白及びPLCを介して細胞内Ca^<2+>濃度及びIP_3合成量を増加させ、気管収縮をもたらす可能性を示唆するものである。次年度は上記の結果を元に,さらに詳細な細胞内シグナリング機構の解明を行う予定である。本年度も気管平滑筋におけるGABA_B受容体を介した気管平滑筋収縮機構を、IP_3合成量及び細胞内Ca^<2+>濃度調節機構の観点から研究を行った。2.ヒト気管平滑筋細胞においてGABA_B受容体作動薬(baclofen)投与により生じる、IP_3合成増加作用、及びtransient phaseの細胞内Ca^<2+>濃度の増加作用は、GABA_B受容体拮抗薬(CGP35348)投与により抑制される。この前年度の結果をもとに、今年度は別のGABA_B受容体拮抗薬(CGP55845)を用いて、その作用を再確認した。その結果、細胞内Ca^<2+>濃度の増加作用、及びIP_3合成増加作用は、GABA_B受容体拮抗薬(CGP55845)投与によっても有意に抑制された。3.ヒト気管平滑筋細胞へのbaclofen投与により生じるIP_3合成量増加作用は、G蛋白βγサブユニットシグナリング阻害剤(Gallein)前投与により有意に抑制された。4.ヒト気管平滑筋細胞へのbaclofen投与により生じる、transient phaseの細胞内Ca^<2+>濃度の増加作用は、IP_3受容体遮断薬(Xestospongin C)前投与により有意に抑制された。以上の結果及び前年度の結果は、気管平滑筋上のGABA_B受容体がG_i蛋白のβγサブユニット、PLC、及びIP_3受容体を介して細胞内Ca^<2+>濃度及びIP_3合成量を増加させ、気管収縮をもたらす可能性を示唆するものである。
奈良仏教者に関する伝承研究

奈良仏教者に関する伝承研究を進捗させるために、本研究では天平期に足跡を残した行基を研究対象に据えた。行基研究をめっぐっては、律令政府によって弾圧され続けたのか、ないしは天平17年に大僧正に任ぜられたことをもって、きわめて篤く処遇され民衆から隔絶した高僧となってしまったのかとの論議がある。こうした論議をふまえて、全国各地の寺院の縁起を具に見ていくと、弘法大師空海に匹敵するほどに行基の名を留めている。その数は、四国八十八所巡礼寺院に代表される弘法大師信仰にたいして行基伝承と称することが許されるほどである。民衆の信仰でもある大師信仰をも視野にいれての空海の研究が進捗しているように、行基に関しても行基伝承を視野にいれての研究の必要性が感ぜられ、行基伝承の分布調査を主眼にして研究を進捗させてきた。その結果、従来、競合していないとされてきた東北地方南部に伝播している徳一や北陸地方に伝播している泰澄等の高僧伝承と行基伝承は、一部の地域では競合していることがわかった。これは古代以降、行基伝承が、何らかの信仰集団によって伝播され、既存の信仰集団によって担われてきた泰澄など高僧伝承と結果的に競合したことを物語るのではないかと想定したい。今後の課題として、こうした競合の事例を検討していくことによって、奈良仏教者の歴史的特質が一層解明できるのではないかと考えている。奈良時代の仏教者に関する伝記的研究を、彼らにかかわる伝承史料までも視野に入れて進捗させようというのが、本研究の主題である。こうした主題に沿う仏教者として、全国の寺社の縁起にその名を留めているのが行基である。行基に関わる伝承史料を伝存・所蔵している寺院は全国で千数百カ寺にのぼっている。本研究の代表者は、これまでにこうした趣旨にそって基礎的史資料の収集につとめてきた。今回の研究にあたっては、従前の成果をふまえて幾つかのテーマを設定して、史資料の収集にあった。今年度は、開基伝承・墓所開創伝承・巡礼寺院というテーマを設定して、山口県防府市・長崎県長崎市周辺・岐阜県大垣市周辺・和歌山県熊野市・大阪府大阪市等の各地域で史資料収集の調査を実施した。その結果、開基伝承に温泉や湧水にかかわる信仰(例えば温泉薬師)や時には巨石や巨岩に関する信仰をともなっていることを物語る史資料を収集しえた。これらの史資料が作製された年代の比定については、慎重を期すことは言うまでもないが、行基と同時代に作製されたものではないことは明らかである。それが中世にしろ近世にしろ、行基への信仰なり追慕の念が奈良時代だけではなく後代にいたるまで醸成されていったということは言えよう。この点からも行基伝承の研究の意義が明確となったと言えよう。また、地域の観音信仰とかかわりを持ちつつミニ巡礼寺院を形成していた長崎市を中心として点在する肥前七観音は、行基伝承を中核としていることが明らかとなった。こうした事例は、東京都豊島区周辺(行基七仏・江戸六阿弥陀)・静岡県静岡市周辺(駿河七観音)の各地域にも所在している。こうした点をも考慮にいれて、次年度も行基伝承に関する史資料を収集し、奈良仏教者に関する伝承研究を進捗させていきたい。奈良仏教者に関する伝承研究を進捗させるために、本研究では天平期に足跡を残した行基研究対象に据えた。

民衆の信仰でもある大師信仰をも視野にいれての空海の研究が進捗しているように、行基に関しても行基伝承を視野にいれての研究の必要性が感ぜられ、行基伝承の分布調査を主眼にして研究を進捗させてきた。その結果、従来、競合していないとされてきた東北地方南部に伝播している徳一や北陸地方に伝播している泰澄等の高僧伝承と行基伝承は、一部の地域では競合していることがわかった。これは古代以降、行基伝承が、何らかの信仰集団によって伝播され、既存の信仰集団によって担われてきた泰澄など高僧伝承と結果的に競合したことを物語るのではないかと想定したい。今後の課題として、こうした競合の事例を検討していくことによって、奈良仏教者の歴史的物質が一層解明できるのではないかと考えている。
骨の力学的負荷により生ずるひずみと骨形成との関係の解明

実験1[方法]6カ月齢のrat(retired breeder)を用い,骨負荷(+)と骨負荷(-)の2群に分けた.骨負荷(+)群には脛骨曲げ装置(スチール製の4点バ-によりin vivoで負荷を加える)を用いて右脛骨に31N(36cycle,2Hz)の機械的負荷を3週間にわたり1日おきに加えた後,calceinでラベリングを施行し,屠殺した.骨負荷(-)群には機械的負荷は加えず、同様にラベリングの後、屠殺した。脛骨骨幹部にて皮質骨を、脛骨骨幹端部にて海綿骨を骨形態計測を用いて評価した.骨形態計測のパラメータは骨形成の指標としてformation surface(FS),mineral apposition rate(MAR),bone formation rate(BFR)を用いて検討した.[結果](1)歪み(in vivo):脛骨皮質骨の切片を用い,慣性モーメントを算出した.これに基づき算出した歪は1305.1±243.5μεであった.(2)皮質骨の計測結果:FSは脛骨外側,内側両面にて両群間に差は認めなかった。しかしながら発生した歪とFSとは有意な正の相関があった。MAR,BFRは外側面にて両群間に有意な差が見られた.実験2[方法]実験1と同様に,卵巣摘出群(OVX),卵巣非摘出群(SHM)の2群に分けて、右脛骨に機械的曲げ負荷を加えた。[結果]FSは脛骨内側面にてOVXの効果が認められ,BFRは脛骨内側面でOVXの効果がみられたが、骨負荷の効果は両群間で差がなかった.海綿骨の計測結果では脛骨骨幹端部の海綿骨部の骨量はOVXにより著明に低下していた.実験3[方法]実験1,2と同様に正常カルシウム摂取群(NCA)と低カルシウム摂取群(LCA)の2群に分けて、実験1と同様に右脛骨に機械的曲げ負荷を加えた。解析は脛骨のsoft X-rayを撮影し、脛骨・腓骨の仮骨の有無を検討した。[結果]soft X-rayの解析では脛骨・腓骨の仮骨形成はNCAで57%、LCA群で86%と両群間で有意な差はなかった。まとめ以上の実験結果から以下の結論が得られた。(1)rat脛骨に約30Nの力を加えることで約1300μεの歪みを生じ、骨形成が促進した。(2)卵巣摘出はこの骨形成の促進に影響を与えなかった。(3)カルシウムの不足はこの骨形成の促進に影響を与えなかった。
天然物ケミカルバイオロジーの研究

本研究では、新学術領域研究「天然物ケミカルバイオロジー」の成果を世に問うことを目的として、新学術領域「天然物ケミカルバイオロジー」では、生物活性物質の標的同定に関する基礎研究を中心に研究を行った。領域から多くの標的決定に関する成果が得られたと同時に、様々な方法論のscope&limitationに関する知見を得ることが出来た。また、天然物のような多官能基性生物活性物質の多くが複数の標的をもつこと、天然物の立体化学異性体や不斉中心を削除した誘導体などの立体化学ライブラリーには、非常に高い確率で標的選択性の変化した誘導体が含まれること、またそれらのツールとしての利用などに著しい成果が得られた。本領域で得られた成果は、天然物化学、生化学、創薬科学、基礎生物学の幅広い研究分野において、天然物を始めとする生物活性リガンドの利用が、今後重要な地位を占めることを示すものである。このため、本研究では成果の取りまとめと発信を行った。具体的には、成果報告書の刊行と成果取りまとめ公開シンポジウムを開催し、ホームページを活用した情報発信を行った。計画班員・公募班員の採択期間内における研究成果を各班員2ページ程度でまとめ、発表論文、学会発表などを網羅する。これに代表的論文や報道発表なども纏めた成果報告書は領域で得られた成果の集大成であり、関係分野研究者に送付することで、成果の通知と活用に付した。また、成果報告シンポジウムは、製薬企業など多くの一般参加者を含む200名以上の参加者を集め、計画班員全員の成果を班長が報告した後に、代表的成果について、班員自身による成果発表を行った。28年度が最終年度であるため、記入しない。
CR16によるN-WASPを介した神経円錐とシナプス機能の制御機構の解明

前の報告時までに、CR16遺伝子ヘテロノックアウトマウスを作製しており、それらを用いたCR16遺伝子発現のプロファイリング及びホモ遺伝子ノックアウトマウスの解析を行った。また、ノックアウトマウスの臓器ライセート等を用いたin vitro実験を行った。ヘテロ遺伝子ノックアウトマウスのLacZ活性解析により、CR16遺伝子が海馬錐体・顆粒細胞のみならず精巣においても発現していることが判明し、免疫学的手法によってCR16遺伝子がセルトリ細胞で発現し、セルトリ細胞の細胞質に存在していることを明らかにした。また、ホモ遺伝子ノックアウトマウスを得てその表現型の解析を行った結果、ホモ遺伝子ノックアウトマウスでは、精子形成不全による雄性不稔を示すことが明らかになった。また、ホモ遺伝子ノックアウトマウスでは、アクチン細胞骨格制御異常によるセルトリ細胞-精子細胞間ジャンクションの形成不全が生じていることを明らかにし、それが精子形成不全の原因であると考えられた。さらに、分子生物学的なメカニズムの解析にも取り組み、ホモ遺伝子ノックアウトマウスでは、細胞間接着部位にN-WASPタンパク質が局在しないことを明らかにし、N-WASPタンパク質の正しい局在にCR16タンパク質が必要であることを明らかにした。一方、海馬におけるCR16タンパク質の機能を明らかにする目的で、CR16遺伝子ノックアウトマウスの行動解析(Passive Avoidance Test)を行ったが、野生型との有意な差は認められなかった。現在までには、CR16タンパク質の海馬における機能について明らかにはできなかったが、充分にバッククロスを行った遺伝子ノックアウトマウスを作製したのち、詳細な解析を行いたい。以上、これまでの研究成果について博士課程の学位論文としてまとめ発表した。まず、前年までに作製した、マウスCR16遺伝子をβ-ガラクトシダーゼ遺伝子に置換するノックアウトベクターをマウスES細胞にエレクトロポレーション法で遺伝子導入した。この細胞をネオマイシン耐性遺伝子用いて薬剤選択し、組み換えベクターがES細胞ゲノムに組み込まれた細胞を得た。得られた200個の細胞群をサザンプロット法でスクリーニングした結果、4つの細胞クローンで正しくCR16遺伝子がゲノムに組み込まれたことを確認した。このES細胞をマウス胚盤胞にインジェクションし、キメラマウス(オス)を得た。キメラマウスを野生型B6マウス(メス)と交配させ、これまでに延べ200匹以上の仔を得た。その結果、一匹のみCR16KOヘテロマウス(オス)得た。一般に考えられるよりもヘテロマウスが得られる確率が低いと思われたが、CR16遺伝子のノックアウトによる影響なのか、それとも胚盤胞にインジェクションしたES細胞の状態がよくなかったのかは現在のところ不明である。このCR16ノックアウトヘテロマウス(オス)は外見上また行動上の特異な変化は認められず、また生殖能力がありB6野生型マウス(メス)との交配で、メンデル側にしたがってヘテロマウスの仔(オスならびにメス)を得ることができる。これまでに9匹(オス5匹・メス4匹)のヘテロマウスを得ており、これらを交配する事でCR16ノックアウトホモマウスを得ることができる見込みである。次に、CR16遺伝子を神経細胞に導入することと組み替えCR16タンパク質を得ることを目的として、CR16遺伝子を発現するアデノウイルスベクターを作製し、それを完成させた。
トルコにおけるプレ-ト衝突境界の地球化学的研究ー日本における沈み込み帯との比較ー

本研究は昭和62年度の予備調査、昭和63年度の本調査、平成元年度の総括と3年間にわたって行われた。予備調査では、本調査の打ち合せ及び調査地域の下見と予備試料の採集が目的であった。トルコ東方のVan湖の北側に並ぶ第四紀の火山と中央部の火山地帯から約30個の岩石試料と約15個の水・ガス試料を採集した。本調査では北部のアナトリア断層地域、西部の地熱地帯からは水・ガス試料を中心に、また中央部、北部にかけて岩石試料を中心にほぼトルコ全域から、計約100個の水・ガス試料と約150個の岩石試料を採集した。予備調査、本調査で得られた試料は日本に持ち帰り、岩石試料については薄片の顕微鏡観察、主成分元素・微量元素成分、Sr同位体比、KーAr年代、また、水・ガス試料については希ガス及び炭素・水素・窒素の同位体比が測定された。これらの生デ-タは“Initial Report on Geochemical Data"のPart IとPart IIとして関係者に配付された。本成果概要に添付した冊子体の成果報告書はこれらのデ-タの集大成である。これらSr同位体比や希ガス及び軽元素の同位体比などの地球化学的研究から、テクトニクスに関係したトルコ各地域での地下構造が明らかになった。東部地域はアラビアプレ-トがユ-ラシアプレ-トに衝突しているところであり、Karacadagはアラビアプレ-ト上にある。Sr同位体比は0.7033ー0.7039と比較的低く、マントルの値に近い。マグマの発生時にマグマ、地殻間の相互作用が少なかったことを示している。さらに東方にはプレ-ト境界上に並ぶAraratやNemurutなどの新しい火山があるが、これらのSr同位体比は火山毎に非常に異なっている。例えばAraratでは他の火山よりも低い値になるが、Nemurutでは0.7035ー0.7083という大きなばらつきを示す。またSr同位体比とシリカ量に正の相関があり、このことから地殻の混入の程度がマグマの同位体比を決定しているように思われる。これら東部火山の線上分布に対してKーAr年代は系統的な相関がなく、ほぼ独立的に不均質なマグマ群からこれらの火山が形成されたことを示唆している。この地域のHe同位体比は全ての試料で大気のHeより高い値を示し、マントルHeの存在が明らかである。また、その上限値は島弧の火山にみられるHe同位体比の上限値に等しいことから、沈み込み帯と衝突帯で希ガスからみると同様のマントル構造を持っていることが示唆される。一方、この地域におけるバブルガスはCO_2が主成分でありδ^<13>C値は1±1〓の比較的高い値を示すことから、海成炭酸カルシウムが広く存在することがわかる。中央部地域はアフリカプレ-トにトルコマイクロプレ-トが沈み込んでいるところであり、ErciyesやHasanなどの火山がある。Sr同位体比は0.7038ー0.7058であり、世界のプレ-ト沈み込み帯での火山と同様の値になっている。ただ、He同位体比は東部より高い値になっており、東部の火山よりも地殻物質の影響が大きい。Erciyesについては約2m.y.前からのKーAr年代が得られており、東部のAraratやNemurutよりも早い時期に火山活動があったことが示唆される。北部地域のアナトリア断層沿いではHe同位体比が大気の値と同程度か4倍程度の高さのものがあり、大規模な断層や若い火山活動によりマントル起源のものが大規模に放出されているのがわかる。炭素同位体比も-2±2〓の値であり、火山性である。西部地域はアフリカプレ-トがエ-ゲ海プレ-トに沈み込んでいるところであり、Kulaがエ-ゲ海島弧の延長上にあるところである。KulaのSr同位体比は0.7030ー0.7035であり、エ-ゲ海島弧の火山岩と比べても非常に低い。また、He同位体比、炭素同位体比共にKulaについてはマントル起源の存在を示唆している。炭素同位体比は-5.5ー-6.6〓の低さである。しかし、その他の西部の地熱地帯からは大気よりも低いHe同位体比が得られており、全体的には多量の地殻起源の放射性Heが存在することを示している。この地域が、エ-ゲ海島弧とどの様につながっているのかは大変に興味のあるところであり、Kulaの特殊性とも併せて今後のギリシャ地域での調査の必要が急務であると思われる。

予備調査、本調査で得られた試料は日本に持ち帰り、岩石試料については薄片の顕微鏡観察、主成分元素・微量元素成分、Sr同位体比、KーAr年代、また、水・ガス試料については希ガス及び炭素・水素・窒素の同位体比が測定された。これらの生デ-タは“Initial Report on Geochemical Data"のPart IとPart IIとして関係者に配付された。本成果概要に添付した冊子体の成果報告書はこれらのデ-タの集大成である。これらSr同位体比や希ガス及び軽元素の同位体比などの地球化学的研究から、テクトニクスに関係したトルコ各地域での地下構造が明らかになった。東部地域はアラビアプレ-トがユ-ラシアプレ-トに衝突しているところであり、Karacadagはアラビアプレ-ト上にある。Sr同位体比は0.7033ー0.7039と比較的低く、マントルの値に近い。マグマの発生時にマグマ、地殻間の相互作用が少なかったことを示している。さらに東方にはプレ-ト境界上に並ぶAraratやNemurutなどの新しい火山があるが、これらのSr同位体比は火山毎に非常に異なっている。例えばAraratでは他の火山よりも低い値になるが、Nemurutでは0.7035ー0.7083という大きなばらつきを示す。またSr同位体比とシリカ量に正の相関があり、このことから地殻の混入の程度がマグマの同位体比を決定しているように思われる。これら東部火山の線上分布に対してKーAr年代は系統的な相関がなく、ほぼ独立的に不均質なマグマ群からこれらの火山が形成されたことを示唆している。この地域のHe同位体比は全ての試料で大気のHeより高い値を示し、マントルHeの存在が明らかである。また、その上限値は島弧の火山にみられるHe同位体比の上限値に等しいことから、沈み込み帯と衝突帯で希ガスからみると同様のマントル構造を持っていることが示唆される。一方、この地域におけるバブルガスはCO_2が主成分でありδ^<13>C値は1±1〓の比較的高い値を示すことから、海成炭酸カルシウムが広く存在することがわかる。中央部地域はアフリカプレ-トにトルコマイクロプレ-トが沈み込んでいるところであり、ErciyesやHasanなどの火山がある。Sr同位体比は0.7038ー0.7058であり、世界のプレ-ト沈み込み帯での火山と同様の値になっている。ただ、He同位体比は東部より高い値になっており、東部の火山よりも地殻物質の影響が大きい。Erciyesについては約2m.y.前からのKーAr年代が得られており、東部のAraratやNemurutよりも早い時期に火山活動があったことが示唆される。北部地域のアナトリア断層沿いではHe同位体比が大気の値と同程度か4倍程度の高さのものがあり、大規模な断層や若い火山活動によりマントル起源のものが大規模に放出されているのがわかる。炭素同位体比も-2±2〓の値であり、火山性である。西部地域はアフリカプレ-トがエ-ゲ海プレ-トに沈み込んでいるところであり、Kulaがエ-ゲ海島弧の延長上にあるところである。KulaのSr同位体比は0.7030ー0.7035であり、エ-ゲ海島弧の火山岩と比べても非常に低い。また、He同位体比、炭素同位体比共にKulaについてはマントル起源の存在を示唆している。炭素同位体比は-5.5ー-6.6〓の低さである。しかし、その他の西部の地熱地帯からは大気よりも低いHe同位体比が得られており、全体的には多量の地殻起源の放射性Heが存在することを示している。この地域が、エ-ゲ海島弧とどの様につながっているのかは大変に興味のあるところであり、Kulaの特殊性とも併せて今後のギリシャ地域での調査の必要が急務であると思われる。
虚血耐性海馬のBcl-2による細胞内Ca^<2+>調節

スナネズミに短時間の前脳虚血をかけると海馬CA1での遅発性神経細胞死がみられる。一方、虚血前に非致死的な虚血を与えておくと、3分5分の虚血負荷による遅発性神経細胞死が著しく軽減され、この現象は虚血耐性と呼ばれる。この時期には細胞内カルシウム濃度上昇抑制機構に変化が起きていることをカルシウムイメージング実験から確認した。細胞内カルシウム濃度上昇抑制機構について、Bcl-2の関与を考え、transgenic mouseでの虚血負荷後の細胞内カルシウム濃度上昇をwild tyupeと比較したが有意差は認められなかった。しかし、アデノ随伴ウイルスのBcl-2を組み込んだベクター(AAV-bcl-2)を作成し、虚血負荷による遅発性神経細胞死抑制効果を調べたところ、Bcl-2過剰発現部位での虚血負荷後の遅発性神経細胞死は有意に抑制され、Bcl-2の虚血精神系細胞死抑制効果は確認された。また、短期虚血負荷後の神経細胞以外の変化として海馬および大脳皮質でのアストロサイトーシスをしらべたところ、虚血に最も脆弱なCA1領域で顕著であり、非致死的虚血負荷でも有意に増加することが判った。虚血負荷での反応性アストロサイトの特徴としてはグルタミン酸トランスポーター(GLT-1)の発現が少なく反対に熱ショック蛋白27(HSP27)の発現が増加していることがわかった。一方、虚血負荷による遅発性神経細胞死後の海馬では、虚血負荷後3週間以降にCA3錐体細胞からCA1の生き残った細胞に向けて軸索発芽が起ることが免疫組織化学的実験から判明した。スナネズミに短時間の前脳虚血をかけると海馬CA 1での遅発性神経細胞死が見られる。一方、虚血前に非致死的な虚血を与えておくと3分5分の虚血負荷による遅発性神経細胞死が著しく軽減されることが知られている。この現象は虚血耐性と呼ばれ、我々は虚血負荷による細胞内カルシウム濃度上昇抑制機構に変化が起きていることを海馬スライスでのカルシウムイメージング実験から確認した。我々は細胞内カルシウム濃度上昇抑制機構について、その候補の一つであるBcl-2の関与を考え、transgenic mouseでの虚血負荷後の細胞内カルシウム濃度上昇をwild tyupeと比較したが有意差は認められなかった。しかし、アデノ随伴ウイルスにbcl-2を組み込んだベクター(AAV-bcl-2)を作成し、虚血負荷による遅発性神経細胞死抑制効果を調べたところ、Bcl-2過剰発現部位での虚血負荷後の遅発性神経細胞死は有意に抑制され、Bcl-2の虚血性神経細胞死抑制効果は確認された。さらに、虚血負荷1時間後の投与もBcl-2過剰発現による遅発性神経細胞死抑制効果が認められた。Bcl-2過剰発現までのタイム・コースは約1日であることから、遅発性神経細胞死後期過程にも作用が考えられ、Caspase抑制などからのBcl-2過剰発現による虚血性神経細胞死抑制の検討を始めている。一方、虚血負荷による遅発性神経細胞死後の海馬CA1を長期に渡って観察したところ、虚血負荷後3週間以降にCA3錐体細胞からCA1の生き残ったさいぼうに向けての軸索発芽が起ることを免疫組織化学的実験から確認した。海馬は虚血に最も脆弱な部位として知られている。スナネズミに短時間の前脳虚血をかけると海馬CA1領域に限局した遅発性神経細胞死が見られ、この死はアポトーシス様の過程をたどる。虚血負荷前にアポトーシス抑制分子であるbcl-2をアデノ随伴ウイルスベクター(AAV-bcl-2)で海馬に過剰発現させておくと神経細胞死が有意に抑制され、さらに、虚血負荷後のAAV-bcl-2投与も虚血性神経細胞死抑制に有効であった。

これより、Bcl-2遺伝子導入による虚血性神経細胞死抑制の可能性をアメリカ及び日本遺伝子治療学会で発表した。更に、CA1領域でのAAV-bcl-2 transfectionのtime courseの解析からBcl-2はCa^<2+>調節以外にも複数の神経細胞死抑制機能を持ち、遅発性神経細胞死の後期過程にも作用することを北米神経科学年会で発表した。一方、短期虚血負荷による神経細胞以外の変化として海馬及び大脳皮質でのアストロサイトーシスをしらべたところ、アストロサイトーシスは虚血に最も脆弱なCA1領域で顕著であり、細胞死の起らないごく短期間の虚血負荷でも有意に増加することを確認した。さらに、虚血負荷により発現したアストロサイトの特徴としてグルタミン酸トランスポーター(GLT-1)の発現が少なく反対に熱ショック蛋白27(HSP27)の発現が増加していることを発見し、日本神経科学年会で発表した。
イネの葉におけるショ糖合成の制限要因の解明

植物において、葉で光合成によって同化された炭素はショ糖として他器官に転流し、植物体の成長や子実の生産に利用される。作物の葉におけるショ糖合成は、転流効率の制御を通じて作物の生産性に重要な役割を果たしている。申請者はこれまでに、イネの葉におけるショ糖合成の制限要因と考えられてきたショ糖リン酸合成酵素(SPS)が制限要因ではない可能性を示す結果を得た。本研究では、イネ変異体の作出・解析を通じて、イネの葉におけるショ糖合成の真の制限要因の解明を目指す。
救急領域における終末期ケアに対する看護師の態度とその実践に関する研究

救命が成し得ず死の転帰をとる患者やその家族に対する終末期のケアは非常に重要であるが、救命を第一義とする救急領域でのその看護実践は困難であるともいわれる。そこで本研究では、救急領域での終末期ケアのあり方を検討する基礎資料として、救急看護師が終末期ケアを実践するときに抱く葛藤に焦点をあて明らかにした。救急看護師は、救命することを使命としながら多くの患者を看取る現実に葛藤を抱いていた。また患者の尊厳を守るため、望ましいと考えるケアとのはざまで様々な葛藤を抱く一方、生死が繰り返される現実が日常となる自分自身への葛藤も抱いていた。本研究の目的は、救急領域における終末期ケアの在り方を検討する基礎資料として、終末期ケアに携わる救急看護師の態度とその実践を、救急看護師としての役割葛藤に焦点をあて明らかにすることである。平成26年度は、本研究のテーマについてWalker & Avantの手法を用いて概念分析を行い、その結果、終末期ケアを実践する救急看護師の役割葛藤を、「患者・家族・医療チームにおける矛盾・対立したケアの要求や実践、役割遂行に対して抱く負の感情」と定義した。次に、実態調査として、救急看護に従事する看護師で、救急患者の終末期ケアを実践した体験を有し、本研究参加に同意を得られた看護師11名を対象に、実践した終末期ケアや実践するときに抱く価値や葛藤について、半構造化面接を実施した。面接で得られたデータから逐語録を作成し、救急看護師が終末期患者に実践する整容ケアに焦点をあて、ケアに対する看護師の認識を明らかにすることを目的に質的帰納的に分析を行った。結果として、救急看護師は患者の整容ケアを通して【意思表示できない患者の望みを推し量りその人らしい最期を迎えられるようにする】【無念の死の中に家族が救われる一瞬をつくる】ケアを実践していたことが明らかになった。また【救急看護師として死に立ち会うものの責任を果たす】意思をもつ一方、【救急という特殊な環境での多様な背景と家族の反応に戸惑う】という感情を抱きつつ、【みえないケアへの評価に自分なりの答えを見つける】行動をしていたことが明らかになった。次年度は、実態調査の結果から、救急看護師が終末期ケアを実践するときに抱く葛藤に焦点をあてて再度分析を進め、質問紙調査を実施する。平成27年度は、救急看護師が終末期ケアを実践するときに抱く葛藤の様相を明らかにするために、救急患者の終末期ケアを実践した体験を有し、本研究参加に同意を得られた看護師11名を対象に実施した半構造化面接の結果について、救急看護師が終末期ケアを実践するときに抱く葛藤に焦点を当て、質的帰納的に分析を行った。結果として、救急看護師は【重症患者の救命を第一義とする状況での看取りであるため終末期ケアを実践しにくい特殊な環境にある】なか【救急という特殊な環境での終末期ケアの実践に負の感情がつのる】体験をし、それらは、【患者の意思を第一と考えるために生じる葛藤】【ケア環境に関する葛藤】【望ましいケアとのはざまで生じる葛藤】【死を敬うことができない自分への葛藤】【医療者間での価値観の相違で生じる葛藤】【限りある命や医学の限界への葛藤】につながっていた。しかし救急看護師は【救命と看取りという相反する役割期待のなかで救急看護師としての存在価値をもつ】【葛藤を伴う救急での終末期ケアの現実に自分なりに対処する】ことで、さまざまな葛藤を抱きつつも【看護師として死に立ち会うものの責任を果たすため看護ケアを実践する】ことをしていた。救急看護師は、特殊な環境のなか求められる終末期ケア実践に葛藤を抱きつつも、その葛藤に適切に対処することで、終末期ケアに価値をもって実践していた。救命がなしえず死の転帰をとる患者やその家族への終末期ケアの質がさらに向上するためには、救急看護師が終末期ケア実践に対して抱く葛藤に疲弊することなく、適切に対処することができるような看護師への支援を検討する必要性が示唆された。平成26年度は、面接調査によって救急看護師の終末期ケアの様相を明らかにすることができた。今後、救急看護師が終末期ケアを実践するときに抱く葛藤に焦点をあて再度分析を進める必要があると考えている。臨床看護学平成26年度の研究から得られた救急領域における終末期ケアに対する看護師の葛藤について、その影響要因や因果関係について明らかにするために質問紙調査を実施する。初年度に計上していたデータ入力、分析のための統計ソフトは、最新のデータ処理能力があるソフトが必要であると考え、次年度に繰り越したため。次年度の研究費の使用は、調査票郵送費、成果発表のための交通費、報告書作成のための印刷費等である。
学校教師のメンタルヘルスと参画的教育相談(PEC)に関する臨床教育学的研究

本研究の目的は、学校教師という職能(学校というシステムにおける生活指導や学習指導の専門的職能)に伴う葛藤・不安に特有な心理構造を、関係性のシステムや社会文化的状況から多元的に分析し、精神的苦悩を抱えている教師たちへの危機介入及び日常的実践参画支援のプログラムを、具体的事例を臨床的に考察することをとおして、理論的に総括していくことであった。第一の実績は、現職教員8名に、それぞれの世代が抱える不安・葛藤に関するナラティヴ・インタビューを実施し、理論的にコード化し、それを臨床教育学の視座から概念化したことである。この成果は、本年度以降の全国学会等で公表する予定である。第二の実績は、広島県と北海道の小学校における参画的教育相談活動(PEC)を実施しながら、日常的実践のなかでの教師の不安や葛藤を分析し、それに基づく治療的・支援的実践を行い、それらを事例ごとにメンタルヘルスケアの視点から概念化したことである。第三の実績は、これらの取り組みを理論的背景を確かなものにするために、日本教育学会特別課題研究委員会「教師教育の再編と教育学の課題」プロジェクトに参加し、現代学校教師への聴きとり調査やライフヒストリー研究の方法論的基礎とデータ収集を行ったことである。第四の実績は、本研究課題の国際的な位置づけを探るために、ヴィゴツキーの発達援助学の現代的展開を精査し、国内の臨床教育学の研究チームと、フィンランドとカナダに渡航し、教師のメンタルヘルス支援や教師教育の研究動向を調査できたことである。これらの調査実績にもとついて、今後は、学校教育相談における危機介入事例を、いくつかの学会・雑誌・紀要論文として公開したい。これらを整理したものを、日本教育学会や、日本生活指導学会等で発表する予定である。今日、学校教師としてのアイデンティティーの危機にさらされている教員が少なくない。現代社会の諸矛盾を具現化している児童・生徒の実態に対応できず、不適応やバーンアウト(燃え尽き)に瀕している教師たちも少なくない。その多くは、学級経営に困難を抱え、いわゆる学級崩壊や授業崩壊に直面し、その生存をも脅かすような激しい苦悩、葛藤、不安を抱え込んでいる。それが放置され、あるいは適切な対応が遅れることから、少なくない教師が、精神疾患を伴う病気休養や、退職や生存の危機に追い込まれていることは、昨今の各県教委レベルでの調査等でも明らかになりつつある。この研究の目的は、こうした学校教師という職能(学校というシステムにおける生活指導や学習指導の専門的職能)に伴う苦悩、葛藤、不安に特有な心理構造を、関係性のシステムや社会文化的状況から多元的に分析し、精神的苦悩を抱えている教師たちへの危機介入及び日常的実践参画支援のプログラムを、具体的事例を対象化しながら臨床的に考察していくことである。初年度は、内外の研究資料の収集・整理及び教育相談を試験的に実施した。まず、学校教育相談(教育学)に関する内外の研究文献の収集・整理し、武庫川女子大学、東京学芸大学等への資料収集の出張を行った。学校教育現場での事例検討会議(カンファレンス)を月例で実施し、VTR記録とactive interviewを試行した。そのさい児童・生徒及び学級構造分析と、生活指導・授業構想へも参加し、この過程でclinicalinterventionを実施した。また、臨床心理士資格を保有する学校カウンセラーと複数の学校教師と申請者によるVTR記録を媒介した多声的事例カンファレンスを実施し、本研究の基盤整備を行うことができた。15年度の目的は、学校教師という職能(学校というシステムにおける生活指導や学習指導の専門的職能)に伴う葛藤・不安に特有な心理構造を、関係性のシステムや社会文化的状況から多元的に分析し、精神的苦悩を抱えている教師たちへの危機介入及び日常的実践参画支援のプログラムを、具体的事例を対象化しながら臨床的に考察していくことであった。

第一の実績は、現職教員5名に、それぞれの世代が抱える不安・葛藤に関するナラティヴ・インタビューを実施し、それをコード化する基礎作業を行ったことである。この基礎作業は、最終年度における研究報告や学会発表で詳しく分析したものを公表する予定である。第二の実績は、広島県と北海道におけるいくつかの困難を抱えた小学校における参画的教育相談活動(PEC)を実施しながら、教師のメンタルヘルスケアに関わる治療的・支援的実践を行ったことである。そのプロセスも、最終年度の研究報告や学会発表等で公開する予定である。第三の実績は、これらの取り組みを理論的に支えるために、日本教育学会特別課題研究委員会「教師教育の再編と教育学の課題」プロジェクトに参加し、現代学校教師への聴きとり調査やライフヒストリー研究の方法論的基礎を固めたことである。第四の実績は、本研究課題の国際的な研究動向における位置づけをさぐるために、臨床教育学の研究チームとともにフィンランドに渡航し、発達援助学(DWR)や教師教育の研究動向を調査したことである。これらの調査を基に、最終年度は、学校教育相談における危機介入事例(学級崩壊や授業不成立への危機介入や、暴力的児童・生徒への危機介入、不登校児童・生徒事例への危機介入など)が、その思想とともに、教育学に固有な<臨床知>として総括する予定である。最終年度の目的は、学校教師という職能(学校というシステムにおける生活指導や学習指導の専門的職能)に伴う葛藤・不安に特有な心理構造を、関係性のシステムや社会文化的状況から多元的に分析し、精神的苦悩を抱えている教師たちへの危機介入及び日常的実践参画支援のプログラムを、具体的事例を臨床的に考察し、それを理論的に総括していくことであった。第一の実績は、現職教員8名に、それぞれの世代が抱える不安・葛藤に関するナラティヴ・インタビューを理論的にコード化し、それを臨床教育学の視座から概念化したことである。この成果は、最終年度における研究報告や全国学会で公表する予定である。第二の実績は、広島県と北海道におけるいくつかの困難を抱えた小学校における参画的教育相談活動(PEC)を実施しながら、教師のメンタルヘルスケアに関わる治療的・支援的実践を行い、それを事例ごとに概念化したことである。これも、全国学会誌等で公開する予定である。第三の実績は、これらの取り組みを理論的に支えるために、日本教育学会特別課題研究委員会「教師教育の再編と教育学の課題」プロジェクトに参加し、現代学校教師への聴きとり調査やライフヒストリー研究の方法論的基礎とデータ収集を行えたことである。第四の実績は、本研究課題の国際的な研究動向における位置づけをさぐるために、臨床教育学の研究チームとともにカナダに渡航し、教師のメンタルヘルス支援や教師教育の研究動向を調査したことである。これらの調査を基に、最終年度である今年度は、学校教育相談における危機介入事例を、いくつかの学会・雑誌・紀要論文として公開した。これらを整理したものは、日本教育学会や、日本生活指導学会等で発表する他、最終報告書として総括公開する予定である。