hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
炎症関連因子―血管平滑筋脱分化を標的とした肺動脈性肺高血圧の新規治療法の開発

肺動脈性肺高血圧(PAH)は、特発性ないし先天性心疾患、膠原病などに二次性に発症する難治性疾患で、新たな治療法開発には更なる病態解明が重要である。最近、ヒトPAH類似の特徴的な組織病変を有する動物モデルが開発され、病変の進展と退縮における血管平滑筋の形質転換と炎症細胞の関連を報告してきた。そこで本モデルの網羅的遺伝子発現プロファイルからの炎症関連因子の同定、局在性の評価と培養平滑筋細胞の形質転換モデルでの細胞生物学的評価を行い、in vivoでの病変の進展と退縮効果と分子細胞機序を解明し、肺高血圧の新たな治療標的を見いだす事が本研究の全体構想である。最近、ヒトPAH類似の特徴的な組織病変を有する動物モデルが開発され、病変の進展、退縮における血管平滑筋の形質転換と炎症細胞の関連を報告してきた。そこで本モデルの網羅的遺伝子発現プロファイルからの炎症関連因子の同定、局在性の評価と培養平滑筋細胞の形質転換モデルでの細胞生物学的評価を行い、in vivoでの病変の進展、退縮効果と分子細胞機序を解明し、肺高血圧の新たな治療標的を見いだす事が本研究の全体構想である。そこで本モデル肺で発現亢進し、Macitentanで抑制する遺伝子の網羅的遺伝子解析を行った所、興味ある事に炎症、細胞分化関連因子遺伝子発現の有意変化(52 genes)を認めた。その中で、炎症と細胞の未分化維持に関わり得るMCP-1の病変での発現を確認し、他の因子も含めて検討した。目的:エンドセリン受容体拮抗薬macitentanと別に候補薬剤を選定したMCP1(CCL2)阻害剤(RS504393)を用いて、血行動態、組織病変抑制効果を検討し、炎症関連遺伝子プロファイル、血管平滑筋脱分化への影響を検討する。研究実績:macitentanにより、肺高血圧、右室肥大、閉塞性肺血管病変はリバースし、炎症性因子、細胞分化関連因子が調節された。CCL2阻害剤の効果を検討したところ、病変のリバース効果、予防効果に関して、有意な結果を得なかった。そこで、それらを抑制する他の因子の遺伝子欠損動物を作成してその影響を見ることとした。現在、その因子の遺伝子欠損動物を作成中である。エンドセリン受容体拮抗薬macitentanにより、肺高血圧、右室肥大、閉塞性肺血管病変はリバースし、炎症性因子、細胞分化関連因子が調節された。これは、薬剤が生体内で十分有効でない可能性があり、より有効な他の方法で検証する必要があると考えた。それに従い本年度は以下の検討を行った。1ヒト肺動脈性肺高血圧類似ラットモデルにおいて、早期治療(3ー5週)と後期治療(5ー8週)の2つの治療プロトコールでエンドセリン受容体拮抗薬の投与を行い、網羅的遺伝子解析を行った。その結果、一つの遺伝子産物が、早期治療で病変と連動し、免疫組織学的検討から、内膜平滑筋細胞に局在した。そこで、上記阻害剤を投与し、肺動脈圧の低下、肺血管閉塞性病変の改善効果を検討した。しかし、阻害剤投与では、肺高血圧と血管病変の改善効果は乏しかった。2そこで、その標的因子の受容体の欠損動物を作成した。現在、作成に成功しており、現在同モデルの病変進展効果を検討している。現時点では、肺動脈圧の抑制傾向、右室肥大抑制傾向、閉塞性肺血管病変の改善傾向を認めている。preliminaryな結果を踏まえて、有意な肺高血圧抑制効果の有無とその機序を検討している。

本研究の学術的特徴は、新規ヒトPAHモデルを用いて、我々の先行研究で認めた血管平滑筋の脱分化、炎症反応に着目し、網羅的遺伝子解析の結果に基づいて、MCP1他の炎症、細胞分化に関わる遺伝子から治療標的の同定を試みる点である。さらに我々が従来検討してきた内皮機能、平滑筋の形質転換、炎症細胞、プロテアーゼに関わるPAHの機序の仮説と関連する点、ラットのin vivo評価系(遺伝子導入システム使用を含む)、網羅的発現解析、in silico解析を用いる点である。今後の研究の推進方策:1炎症、細胞分化を制御する因子の遺伝子改変動物を作成し、肺動脈圧、右室肥大、肺血管病変への影響を検討する。2平滑筋の脱分化に着目し、それをノックイン動物の作成により直接検討する生体の系を確立し、肺高血圧モデルを作成し、肺動脈圧、右室肥大、肺血管病変への影響を検討する。小児科学実験に用いる遺伝子改変動物を現在作成中であるが、その費用の支払いを次年度支払う事となった為。実験に用いる遺伝子改変動物を現在作成中であるが、その費用の支払いが次年度支払いする。
硫黄酸化物大気汚染の改善の効果に関する疫学的研究

四日市地域における硫黄酸化物大気汚染の改善効果を判定するために種々の疫学調査を行ってきた。1.国民健康保険のレセプトを使用した受診率および新規発生率の調査:1991年までの国民保健保険の支払い明細書を使用して,慢性閉塞性呼吸器系疾患(気管支喘息,慢性気管支炎,肺気腫)の受診率および新規発生率を調査した。受診率は,四日市で二酸化硫黄が環境基準を満たすようになってから10年以上を経過した現時点でも汚染地域(旧公害健康被害補償法の指定地域)の方が対照地域のもに比べて2倍以上高率であった。一方,新規発生率をみると,全年令層の気管支喘息では1980年まで,40才以上の慢性気管支炎では1979年までは汚染地域の方が高率であったが,その後汚染の改善に対応して両疾患とも対照地域のレベルにまで低下した。肺気腫はその発生率が低く,年度間の変動も大きいので疫学調査の指標としては不適当であった。2.呼吸器系症状の有症率:1963年よりB.M.R.C.の質問調査票を簡略化したアンケート用紙を用いて,汚染地域内の40才以上の全住民を対象にして慢性気管支炎と喘息様発作の有症率を調査してきた。過去には両症状とも汚染度が高い行政地区ほど有症率は高率であった。慢性気管支炎の有症率は二酸化硫黄が環境基準を満たすまでは各地区とも上昇し,その後汚染の改善に対応して低下した。現時点では汚染の最も著しかった地区を除いて対照地域のレベルにまで低下した。喘息様発作の有症率は汚染の改善により敏感に反応し,1地区を除いて対照地区のレベルにまで改善した。3.慢性閉塞性呼吸器系疾患の死亡率:1963年より1992年まで20年以上にわたって慢性閉塞性呼吸器系疾患の死亡率を調査してきた。汚染地域では二酸化硫黄が環境基準を満たすようになってから45年遅れて,対照地域のレベルにまで改善した。1.国民健康保険のレセプトを使用した受診率および新規発生率の調査:1989年までの国民健康保険の支払い明細書を使用して、慢性閉塞性呼吸器系疾患(気管支喘息、慢性気管支炎、肺気腫)の受診率および新規発生率を調査した。受診率は、四日市で二酸化硫黄が環境基準を満たすようになってから10年以上を経過した現時点でも汚染地域(旧公害健康被害補償法の指定地域)の方が対照地域のものに比べて2倍以上高率であった。一方、新規発生率をみると、全年令層の気管支喘息では1980年まで、40才以上の慢性気管支炎では1979年までは汚染地域の方が高率であったが、その後汚染の改善に対応して両疾患とも対照地域のレベルにまで低下した。肺気腫はその発生率が低く、年度間の変動も大きいので疫学調査の指標としては不適当であった。2.呼吸器系症状の有症率:1963年よりB.M.R.C.の質問調査票を簡略化したアンケ-ト用紙を用いて、汚染地域内の40才以上の全住民を対象にして慢性気管支炎と喘息様発作の有症率を調査してきた。慢性気管支炎の有症率は二酸化硫黄が環境基準を満たすまでは各地区とも上昇し、その後汚染の改善に対応して低下した。

現時点では汚染の最も著しかった地区を除いて対照地域のレベルにまで低下した。喘息様発作の有症率は汚染の改善により敏感に反応し、1地区を除いて対照地区のレベルにまで改善した。3.慢性閉塞性呼吸器系疾患の死亡率:1963年より1990年まで20年以上にわたって慢性閉塞性呼吸器系疾患の死亡率を調査してきた。汚染地域では二酸化硫黄が環境基準を満たすようになってから45年遅れて、対照地域のレベルにまで改善した。四日市地域における硫黄酸化物大気汚染の改善効果を判定するために種々の疫学調査を行ってきた。1.国民健康保険のレセプトを使用した受診率および新規発生率の調査:1990年までの国民健康保険の支払い明細書を使用して、慢性閉塞性呼吸器系疾患(気管支喘息、慢性気管支炎、肺気腫)の受診率および新規発生率を調査した。受診率は、四日市で二酸化硫黄が環境基準を満たすようになってから10年以上を経過した現時点でも汚染地域(旧公害健康被害補償法の指定地域)の方が対照地域のものに比べて2倍以上高率であった。一方、新規発生率をみると、全年令層の気管支喘息では1980年まで、40才以上の慢性気管支炎では1979年までは汚染地域の方が高率であったが、その後汚染の改善に対応して両疾患とも対照地域のレベルにまで低下した。肺気腫はその発生率が低く、年度間の変動も大きいので疫学調査の指標としては不適当であった。2.呼吸器系症状の有症率:1963年よりB.M.R.C.の質問調査票を簡略化したアンケ-ト用紙を用いて、汚染地域内の40才以上の全住民を対象にして慢性気管支炎と喘息様発作の有症率を調査してきた。過去には両症状とも汚染度が高い行政地区ほど有症率は高率であった。慢性気管支炎の有症率は二酸化硫黄が環境基準を満たすまでは各地区とも上昇し、その後汚染の改善に対応して低下した。3.慢性閉塞性呼吸器系疾患の死亡率:1963年より1991年まで20年以上にわたって慢性閉塞性呼吸器系疾患の死亡率を調査してきた。1.国民健康保険のレセプトを使用した受診率および新規発生率の調査:1991年までの国民健康保険の支払い明細書を使用して、慢性閉塞性呼吸器系疾患(気管支喘息、慢性気管支炎、肺気腫)の受診率および新規発生率を調査した。2.呼吸器系症状の有症率:1963年よりB.M.R.C.の質問調査票を簡略化したアンケート用紙を用いて、汚染地域内の40才以上の全住民を対象にして慢性気管支炎と喘息様発作の有症率を調査してきた。
人工口蓋床による唇裂術前治療効果の定量的評価

口唇口蓋裂患者では披裂による筋肉の断裂の影響等から外鼻に大きな変形が見られる。近年われわれの施設では、手術前の外鼻形態矯正の目的で、外鼻形態矯正装置(nasal stent :以下ステント)を付与したホッツ型人工口蓋床を装着して手術前治療を行っている。本研究ではその治療効果の評価を試みた。その結果ステント付与前と口唇形成術術前の時期に顔面計測を行い、治療効果の検討を行った。ステント治療により鼻柱の傾斜の減少、鼻柱の長さの増大、鼻孔の高さの増大が認められ、口唇形成術による外鼻の形態改善に有用と考えられた。口唇口蓋裂患者の治療においては、機能的な改善はもちろんであるが審美的な回復の要求も強い。最近は変形した外鼻形態に対する変形に対して手術による改善だけでなく、受診後早期から外鼻形態を矯正する試みがなされている。そのアプローチの一つとしてホッツ型人工口蓋床に外鼻形態矯正装置(以下nasal stent)を付与した方法を採用し良好な結果が得られている。しかし一方で術前顎矯正の効果に関してrandomized trialを行った結果、発育状態、術後の顔貌や上顎の形態、母親の満足度においても有意な差は見られないという報告もあり、術前顎矯正の治療効果を客観的に判定することが必要と考えられる。これまでの治療効果の判定は、初診時および口唇裂形成術直前に撮影した顔面写真を口腔外科専門医が主観的に判断していたが、治療効果は定量的に評価するための研究である。本年度は計測システムの核となるレンジファインダー(非接触型3次元座標計測装置)をもちいた顔面計測方法の確立を試みた。レンジファインダー装置に関してはVIVID700を研究協力者の了承を得て当施設に移管した。同装置を運用するコントロールプログラムを作動させるため、パーソナルコンピュータを購入しポリゴンエディティングツールの更新を行った。さらにレンジファインダーで得られたデータをもとに治療前後の形状の解析を行うためのソフトウェアとして3D-Rugle(メディックエンジニアリング)を導入した。これらの環境をもとに形状を分析するためのlandmarkを設定し、自動抽出を確立するための定義づけとアルゴリズムの作成を行った。同装置を運用するコントロールプログラムを作動させるため、パーソナルコンピュータを購入しポリゴンエディティングツールの更新、またレンジファインダーで得られたデータをもとに治療前後の形状の解析を行うためのソフトウェアを導入した。これらの環境をもとに形状を分析するためのlandmarkを設定し、自動抽出を確立するためのアルゴリズムの作成を行っている。またレンジファインダーを用いた臨床データの収集も行っている。そのアプローチの一つとしてホッツ型人工口蓋床に外鼻形態矯正装置(以下nasalstent)を付与した方法を採用し良好な結果が得られている。本年度は計測システムの核となるレンジファインダー(非接触型3次元座標計測装置)を用いた顔面計測方法の確立を試みた。同装置を運用するコントロールプログラムを作動させるため、パーソナルコンピュータを購入しポリゴン

エディティングツールの更新、またレンジファインダーで得られたデータをもとに治療前後の形状の解析を行うためのソフトウェアを導入した。これらの環境をもとに形状を分析するためのlandmarkを設定し、自動抽出を確立するためのアルゴリズムの作成を行った。またレンジファインダーを用いた臨床データの収集も行った。
低酸素応答性エピジェネティクスの制御機構と低酸素性乳癌の悪性化の分子機構の解明

低酸素応答は恒常性の維持に重要な機構だが、癌の微小環境もしばしば低酸素であり、その生存、悪性化にも働いていることが知られている。乳癌の約4割は低酸素状態と報告されており、それが悪性化に関与している可能性が考えられる。加えて悪性の乳癌では高頻度でDNAのメチル化異常が報告されている。しかしながら乳癌の低酸素による悪性化とDNAメチル化異常の関係は明らかにされていない。申請者は、エピジェネティック制御に働くDNA脱メチル化酵素の一つ、TET2が、48h以上の長期の低酸素暴露でカスパーゼ依存的に分解されることを乳癌細胞で見出した。また、TET2ノックダウン乳癌細胞をヌードマウスへ移植したところ、コントロールと比較して有意な腫瘍の増大が観察された。これはTET2が乳癌細胞において、癌の悪性化に抑制的に働くことが示唆された。この結果を踏まえ、TET2が制御する遺伝子探索を実施した。公共データベースを利用してTET2が結合するDNA領域を探索し、次にTET2ノックダウン細胞を用いてRNA-seqを実施し、コントロールと比較して増減している遺伝子を同定した。これらの結果から、TET2が制御している可能性のある遺伝子候補とこれまで癌に関与されている遺伝子とを照らし合わせ、乳癌の悪性化に関与する遺伝子候補を見出すことが出来た。今後は同定したTET2制御遺伝子候補が、実際に乳癌の悪性化に関与するかを調べ、低酸素による癌悪性化とDNAメチル化異常の関係性を明らかにしていく。
LLコンドライト隕石の形成初期におけるアルカリ分別過程とその年代の解明

LLコンドライトの中には、K,Rbなどのアルカリ元素が通常のコンドライトの数十倍も濃集した火成岩組織を示す岩片(K-rich岩片)を含むものが見つかっている。これらのK-rich岩片は、もともと主にカンラン石、輝石、カリ長石からなるコンドライト質物質が一旦溶けて急冷してできたものと考えられている。このようなアルカリに富むコンドライト物質がいつ、どのようにしてできたのかという問題は、太陽系惑星物質の進化を記述するうえで興味深い事柄であるが、詳細は明らかになっていない。本研究では、LLコンドライト隕石物質に見られるアルカリ元素分別の起こったの正確な年代を決定するために、微量試料のRb-Sr系を分析する設備・方法を確立したうえで、南極産LLコンドライトY-74442の年代測定を行った。約1.5gの試料から取り出したアルカリに富む25個の暗色岩片(1-10mg)の1つ1つについて^<87>Sr/^<86>Sr同位体比、RbおよびSr含有量を固体質量分析計により測定して求めた内部アイソクロンから、4516±28Maの年代と0.70025±0.00168の^<87>Sr/^<86>Sr同位体初生比が得られた。この年代は、これまで得られているRb-Srアイソクロン年代としては最も精度が高いものの一つであり、分析上の問題が指摘されているKrahenberg隕石を別にすすると、LLコンドライトとしては最も古い年代を示す。この結果からアルカリ元素分別が惑星物質形成過程のきわめて初期の段階で生じたことが明らかになった。おそらくこのアルカリ分化はLLコンドライト母天体の集積過程において生じたと思われる。太陽系惑星物質の形成初期過程の詳細を解明するうえでの一つの重要な知見が得られたと言える。これまでに、LLコンドライト隕石物質にみられるアルカリ元素分化の正確な年代を決定すめために、南極産LLコンドライトY-74442の年代測定を行った。約1.5gの試料から取り出したアルカリに富む11個の暗色岩片(1-10mg)の1つ1つについて^<87>Sr/^<86>Sr同位体比、RbおよびSr含有量を固体質量分析計により測定して求めた内部アイソクロンから、4557±8Maの年代と0.6981±0.0013の^<87>Sr/^<86>Sr同位体初生比が得られた。この年代は、これまで得られているRb-Srアイソクロン年代としては最も精度が高いと同時に、これまで見つかっている太陽系固体物質として最も始源的と考えられているCaとAlに富む包有物の示す年代に一致する。この結果からアルカリ元素分化が惑星物質形成過程の極めて初期の段階で生じたことが明らかになった。したがって、このアルカリ分化がLLコンドライト母天体形成の集積過程あるいはそれ以前の凝縮過程において生じた可能性があり、太陽系惑星物質の形成初期過程の詳細を解明するうえでの一つの重要な知見が得られたと言える。現在、この隕石についての補足的な分析を行っているが、今年度中にその成果を論文化する予定である。また、本研究をすすめるにあたり、岡山大学において微量試料のRb-Sr系を分析する設備・方法を確立するとともに、Y-74442コンドライトの始源的年代を比較・検証するために別の隕石試料の年代測定を行う必要があった。そこで本研究の一環として、Alleganコンドライトについて同様の方法による年代測定を行い、その成果を論文として公表した。

LLコンドライト隕石物質にみられるアルカリ元素分化の正確な年代を決定するために、カリウムに富む南極産LLコンドライトY-74442の年代測定を行った。約1.5gの試料から取り出したカリウムに富む19個の暗色岩片(1-10mg)の1つ1つについて^<87>Sr/^<86>Sr同位体比、RbおよびSr含有量を固体質量分析計により測定して求めた内部アイソクロンから、4514±22Maの年代と0.7016±0.0024の^<87>Sr/^<86>Sr同位体初生比が得られた。この年代は、これまで得られているLLコンドライトの全岩アイソクロン年代(4493±18Ma)と誤差範囲内で一致するものの、これよりやや古い。このことは、Y-74442に見られるアルカリ分化がLLコンドライト母天体形成後の二次的過程(変成作用、衝突過程)で起こったものとは考えにくいことを示している。また、ここで得られた^<87>Sr/^<86>Sr同位体初生比が、コンドライト隕石の始源的な値に比べて高い値であることから、このアルカリ分化が生じた時期はさらに遡る(4550Ma)ものと考えられる。即ち、LLコンドライト物質におけるアルカリ元素分化が惑星物質形成過程の極めて初期の段階で生じたことが明らかになった。これらのの結果から、このアルカリ分化がLLコンドライト母天体形成の集積過程あるいはそれ以前の凝縮過程において生じた可能性が示され、太陽系惑星物質の形成初期過程の詳細を解明するうえでの一つの重要な知見が得られた。
東南アジア・東アフリカの地域社会における紛争処理と多元的法秩序生成に関する研究

本研究成果報告書は、東南アジア・東アフリカの地域社会における紛争処理と多元的法秩序の生成に関する法人類学的共同研究の成果の一部である。研究代表者(宮本勝)、研究分担者(清水芳見、堤和通、森正美)、研究協力者(石田慎一郎)の計5名は、4年にわたり、マレーシア、ブルネイ、フィリピン、ケニアで、文献資料・裁判記録の収集に重点をおいた紛争処理と多元的法秩序生成に関する実態調査を実施してきた。以下のとおり、当初の研究目的に即したインテンシブな調査研究を実施し、貴重な研究資料を得た。宮本勝は、マレーシア・サバのカダザン社会の固有法の実態調査ならびに原住民裁判所の審理記録の分析に基づいて、原住民裁判所における慣習法運用の諸特徴と慣習法標準化の展開を明らかにした。清水芳見は、ブルネイにおける非公式の寄合ならびにイスラーム法裁判所の実態調査に基づき、ブルネイ法文化における訴訟回避行動の社会的背景を明らかにした。堤和通は、マレーシア・サバの原住民裁判所と通常裁判所における法運用の実態調査に基づき、手続法と実体法との両面において原住民裁判所の比較的特徴を明らかにした。森正美は、フィリピン・パラワン島での実態調査にもとづき、地域社会の紛争処理の特徴を、文化的、社会的、宗教的諸側面から明らかにした。石田慎一郎は、ケニア中央高地イゲンベ社会における実態調査にもとづき、地域社会の非公式紛争処理から通常裁判所の公式紛争処理に至る多元的法体制の全体像を明らかにした。また、本報告書には、宮本と共同で調査を実施したジュデス・ジョン・バプティストがロトゥッド固有法における法前提の一側面を究明した調査報告論文を所収している。国内外で研究成果を開示するため、本報告書は、全編英文で作成した。今後、本報告書の内容を全面的に改訂し、単行書として出版する予定である。東南アジアのマレーシア、ブルネイ、フィリピン、および東アフリカのケニアにおいて、紛争処理と多元的法秩序生成に関する調査研究を開始した。本年度は4年計画の初年度にあたるため、下記のとおり文献資料・裁判記録の収集に重点をおいた広域調査を実施して、研究環境の整備と調査研究の基礎固めを行なった。宮本勝(研究代表者):マレーシアのサバ州を中心に、原住民裁判所に関連する基礎資料を検索・収集し、裁判記録の整理・英訳およびデータベースの作成に着手した。フィリピンでは、マニラ首都圏のバランガイ法廷に関する面接調査と資料収集を行なった。清水芳見:ブルネイの首都バンダル・スリ・ブガワンでイスラーム裁判所の調査に着手し、ムアラ県とトゥトン県で紛争処理に関する調査を実施した。マレーシア・サバ州では原住民裁判所を視察した。堤和通:マレーシア・サバ州で、原住民裁判所に関する法令およびマレーシア法制史に関する文献資料を検索・収集し、ペナンパン行政区にて原住民裁判所の視察、裁判記録の閲覧を行なった。森正美:フィリピンのマニラ首都圏で、バランガイ法廷関連の文献資料の収集と、タギッグ地区のムスリム・コミュニティにおける紛争処理に関する法人類学的実態調査に着手した。パラワン島では、バタラサ郡のムスリム地域においてバランガイ法廷の裁判記録の閲覧と審理の傍聴を行なった。石田慎一郎:ケニアのナイロビ首都圏で慣習法に関する文献資料の収集を行なった。ニャンベネ県では、土地行政局において年次報告を閲覧し、イゲンベ・サウスイースト郡における慣習法の運用と土地紛争処理に関する法人類学的実態調査に着手した。4年計画の2年度目にあたる本年度は、マレーシア・ブルネイ・フィリピン・ケニアにおいて、紛争処理と多元的法秩序生成に関するインテンシブな実態調査を実施し、調査終了後に中央大学で研究会を実施した。宮本勝(研究代表者)は、マレーシア・サバ州において原住民裁判所の審理を傍聴し、かつコンピュータ入力による裁判記録のデータベース作成を行った。

また、地域社会における慣習法運用のインテンシブな実態調査、高等裁判所における審理傍聴、弁護士・裁判官のインタビューを実施した。清水芳見は、ブルネイ・ムアラ県のマレー・ムスリム村落における紛争処理についてインテシブな実態調査を行った。ブルネイ王国大学では、司法制度の歴史に関する文献資料を検索・収集するとともに、多元的法秩序形成について王国大学の研究者と情報交換を行った。堤和通は、マレーシア・サバ州における州政府主導の慣習法編纂についての聞き取り調査、原住民裁判所と高等裁判所における審理傍聴、原住民裁判所職員と職業法曹のインタビューを実施した。ブルネイでは、法政策・司法制度に関する文献収集と研究者との意見交換を行った。森正美は、フィリピン・パラワン島におけるバランガイ法廷の裁判記録閲覧と審理傍聴を実施した。マニラではバランガイ法廷関連資料の収集とムスリムの紛争処理に関する実態調査を行った。マレーシア・サバ州では、原住民裁判所に関する聞き取り調査のほか、イラヌン集落の視察を行った。石田慎一郎(研究協力者)は、ケニア・ニャンベネ県の地域社会において土地紛争処理に関する慣習法運用の実態調査を実施した。ナイロビでは、国立公文書館においてイギリス植民地時代の裁判記録を閲覧した。マレーシア・サバ州では、原住民裁判所において裁判記録を閲覧した。3年度目にあたる本年度は、マレーシア・フィリピン・ケニアにて、紛争処理と多元的法秩序生成に関するインテンシブな実態調査を継続し、調査終了後に中央大学で研究会を実施した。宮本勝(研究代表者)は、マレーシア・サバ州の原住民裁判所にて、審理傍聴と裁判記録のデータベース化を継続した。ペナンパン行政区の裁判所では、慣習法運用を伴う複数の裁判事例(男女関係をめぐる紛争等)を観察・記録した。また、州経済企画庁からの要請で、サバの法文化に関する講演を行った。クアラルンプール市では、総理府経済企画庁と国立博物館にて、調査成果の報告と研究打ち合わせを行った。清水芳見は、前年度に収集した調査資料(ブルネイ・ムアラ県のムスリム地域の紛争処理とバンダル・スリ・ブガワンのイスラーム法裁判所の資料)を中央大学で整理・分析した。堤和通は、マレーシア・サバ州の通常裁判所にて、文献調査とインタビューを実施した。比較分析により、裁判所手続きにおける英米法的特徴(当事者主義など)の所在が明らかになりつつある。また、サバ州の原住民裁判所で審理傍聴を継続し、国家法と慣習法との並存状況についての調査、法意識の比較分析を実施した。森正美は、フィリピン・パラワン島のバランガイ法廷におけるインタビューと裁判資料の収集を継続した。ルポン(調停者)の役割や選出過程に着目し、調停者資格を得るための諸条件や、調停者研修を担う自治省の取り組みについて実態調査を行った。また、鉱山開発に伴う法改正が地域社会に与える影響等について調査を実施した。石田慎一郎(研究協力者)は、ケニア・ニャンベネ県にて、家庭内暴力・性犯罪に対する伝統的制裁を観察・記録した。
高性能結晶シンチレーターの残留放射能低減による低エネルギー稀崩壊現象の探索

ニュートリノレス・ダブルベータ崩壊や低エネルギー太陽ニュートリノ反応などの稀現象検出をめざしてガドリニウム・シリケイト(GSO)等のシンチレーターの基礎研究を行った。各種試料の残存放射能の比較,試料中の微量不純物U, Th系列核種の崩壊連鎖の検出方法,中性子とガンマ線に対するGSO出力波形の差異, GSO試料外部の装置から発生する線源の同定と除去法,宇宙線由来の雑音の除去法等を検討すると共に,中型GSO結晶を用いてニュートリノレス・ダブルベータ崩壊の新しい下限値の到達可能性について検討を行った。1.高性能結晶シンチレーターの候補の一つとしてGSO (Gd2SiO5:Ce)をとりあげ、結晶内部に微量存在する放射線源の調査をGe半導体検出器によって行った。その結果、ウラン系列の214Biが0νダブルベータ崩壊の関心エネルギー領域に影響を与えるバックグラウンド源であることを確認した。今後、Ge検出器の検出能力を向上させるため、より厳密な検出器周りの遮蔽を行い、他のバックグラウンド源の有無についても精査する。2.稀崩壊現象を検出するには、求める信号事象(結晶外部から飛来する太陽ニュートリノや結晶内部から発生する0νダブルベータ崩壊などの事象)に対して、バックグラウンドとなる放射線を識別・除去する必要がある。このために、試験体となる大型結晶の周りに配置する鉛・無酸素銅遮蔽の検討と予備実験を行った。ここで、10cm厚の鉛と5cm厚の無酸素銅を用いることで87%のバックグランドを除去できることを確認した。さらに、GSO結晶を包むようにベトーカウンター(プラスチックシンチレーター)を配置する準備を行っており、バックグラウンド除去効果を確認する予定である。3.結晶中に微量含まれる214Biからの崩壊によるバックグラウンド事象を除去する方策として、214Biからの系列崩壊による2つの連続崩壊事象を利用し、測定電子回路による論理判定でのバックグラウンド除去の試みを実施中である。4.結晶シンチレーター大型化の一環として、GSO大結晶にビーム照射した実験データーの解析を行い、大型結晶性能の評価を実施した。その結果、結晶の両端からの光電子増倍管読み出しを行うことで、信号強度の位置依存性は約6%以内で、これは発生位置を両端からの信号情報を用いて補正することにより更に低減できることが分かった。また、エネルギー分解能は位置によらず6%(σ)になり、結晶内部にできる亀裂の影響は無視できることを確認した。1.GSO結晶内部に混入している放射性不純物の確認シールド内のGso結晶からの信号を読み出し、その中のトリウム系列崩壊の一部である212Bi→212Po→208Pbの連続崩壊連続崩壊事象を確認した.この崩壊の半減期を実験的に導出したところ304±20nsの値が得られ、299nsという文献値より連続崩壊を同定できた.2.光電子増倍管からのバックグラウンドGe半導体検出器を用いて光電子増倍管からのバックグラウンドを測定したところ、40Kの寄与が最も大きいことが判明した.この光電子増倍管を低バックグラウンド用(R6233)に交換することで88%のPMT寄与のバックグラウンドの低下が期待できることがわかった.3.宇宙線ベトーカウンターの効果プラスチックシンチレーターをベトーカウンターとして使用し、結晶外部に設置したところ、全体で11.5%、ダブルベータ崩壊のQ値付近で4%のバックグラウンド低減の効果が認められた.4.両側読み出しによる読み出し光量の増加PMTによる読み出しを両側で行うことで、読み出し光量は1.23倍向上し1%程度のエネルギー分解能の改善が認められた.5.FADC読み出しの試み500MHzFADCを設置し、信号読み出しを行った.また、GSO結晶からの波形による事象弁別を試みたところ、ガンマ線(ベーター線)とアルファ線による平均パルス波形において、立ち上がり時間及び減衰時間の違いを認めた.個別のパルスでの事象弁別にはさらに検討が必要である.稀現象反応物質として主にGSO結晶の検討を進め,バックグラウンド発生源(GSO結晶の外部由来および結晶内部に含まれる放射性不純物)の評価および抑制方法の検討を、連携研究者小林正明氏(高エネルギー加速器研究機構・名誉教授)と共に行なった。1.宇宙線由来バックグラウンド事象のシミュレーション解析を実際の実験装置に当てはめて行ない、鉛ブロックなどの遮蔽体との反応まで含めた,外部由来バックグラウンドの予測値求めた。実験値に良い一致が見られ、バックグラウンドの理解が進んだ。2.宇宙線由来バックグラウンドを効率的に除去するため、大型プラスティックシンチレーターを鉛遮蔽体の内外に設置して予想通りのよい結果を得た。3.低バックグラウンドPMTをライトガイドを介して接合し,その効果を実験的に評価した。4.昨年度判明したGSO内部での放射性不純物からの連続崩壊事象を効率的に除去するため、FADCによるGSO内部崩壊バックグラウンド事象の除去について実験的に確認を行なった。また,GSOパルス波形による入射粒子の弁別の検討も同時に進めた。

5.稀現象測定の結晶シンチレーターの開発として、GSO結晶シンチレーター以外の新しいシンチレーター(Inを含む結晶)の開発を試みて、その発光を確認した。6.GSOを用いたダブルベータ崩壊実験におけるバックグラウンドの総合評価のために、種々の方法を適用して、長期データ収集を実施中である。7.現在成果報告をまとめる作業を行なっている。
音声特徴抽出手法の高度化に関する研究

本年度は、(1)相互情報量に基づく音韻性抽出、(2)非定常態を対象とした特徴抽出、(3)生成モデルに基づいた特徴抽出、(4)聴覚における時系列信号の特徴抽出、(5)音響的特徴の音韻環境依存性、(6)深い意味理解に必要な音響的特徴の抽出精度、の6点をテーマとして研究を行なった。(1)では、個々のフレームにおける音響的情報を多角的に把握し、それらを用いて音韻コンテキストを考慮した音韻性の特徴抽出を実現するために、特徴量相互の情報量を基準とした音韻性抽出手法について検討した。ここでは、複数の音響的特徴量を階層的に用いることにより、音響的類似性に基づいた分類、時系列的な出現パタンによる分類を行い、音韻性の記述は、まずフレーム単位に音韻候補及びその確からしさを示しさらに確実性のある音韻候補情報を用いて不確実な音韻候補の修正を行うことで実現した。(2)では、有声音を対象として、非定常波形の分析・特徴抽出を行なう構造モデルについて検討した。二連インパルス応答からなる非定常波形にPSE分析を適用したとき現われるFMスペクトルにスペクトル(ホルマント)の変化の方向性の情報が折り込まれていることが示された。(3)では、AbS型の調音パラメタ推定法を対象としてアルゴリズムの並列化を行なった。(4)では、人工内耳の基礎研究から、モルモットおよび重度難聴者の聴神経における時系列刺激の応答を調べ、人工喉頭の基礎研究から母音波形のゆらぎが音声の自然性にどのように寄与しているかを明確にした。(5)では、音響的特徴量が前後の音韻コンテキストから受ける影響について、数量化理論を非線形に拡張したモデルを用いて検討した。(6)では、地口の解釈を含む「深い意味理解」を実現するという高度な枠組みの中で必要とされる音響的特徴の抽出精度について検討した。
消化器がん抗原とTリンパ球受容体の解析

がん性胸腹水局所より、腫瘍特異的Tリンパ球の存在を証明し、それが使用するT細胞受容体について解析できた。以上のことは、腫瘍局所に特異的T細胞が存在すること、それはある特定のT細胞受容体を使用している可能性、局所免疫療法によって、重要なT細胞受容体を有するリンパ球を誘導可能であることを示している。
タンパク質の構造と機能の予測のための計算資源提供型広域計算

分子動力学計算は,タンパク質の構造と機能の解析及び予測のための手法として期待されているが,その膨大な計算量が実用化の障害となっている。特に,二体相互作用求値の計算量が問題となる。本研究の目的は,分子動力学計算のための強大な専用計算資源を有するサイトを構築し,その計算パワーを遠隔地の科学者に提供するような計算グリッドのプロトタイプを制作することである。これまでに制作してきた二体相互作用計算プログラムなどをもとにして,本年度は,分子動力学計算専用のサーバ/クライアント型広域分散計算システムを開発した。具体的には,相互作用提供型と単一MD提供型の二つのシステムを開発した。相互作用提供型は,Ninf-GのGridRPC機構を利用して,原子座標などを受け取り,力などの計算結果を戻すという形式のものである。原子数約5万の分子系での性能検証結果によると,1ステップの実行に平均7.1秒を要した。このうち4.5秒が通信に費やされており,計算パワーの伝達において,ある程度のロスがみられた。ただし,将来的には,より高い通信帯域をクライアント/サーバ間に確保できることが見込めるため(この実験では実効6.5Mbps),このようなオーバーヘッドは大幅に減弱する可能性が高い。一方,単一MD提供型システムは,1個の分子動力学(molecular dynamics)ジョブ全体を実行し,その結果を返送するものである。このシステムは,Globus Toolkitの各種バンドルのAPIを用いて実装した。特に,今年度は,通信と計算のオーバーラップによる効率化を重点的に行った。前述の分子系の1ステップの実行は平均1.6秒で完了し,オーバーヘッドは3%程度であった。また,通信と計算のオーバーラップにより,低めに見積もっても,トラジェクトリ転送時間の81%以上を隠蔽することができた。
ヒストン修飾エピゲノムを介したほ乳類性決定の分子基盤

体細胞性物の発生・分化は、各種細胞に固有な遺伝子発現プロファイルの制御の上に成り立っている。遺伝子が時空間的に正しく発現するためには、ヒストン修飾やDNAメチル化に代表されるエピジェネティック制御が必須である。私たちは、ヒストン脱メチル化酵素のひとつJmjd1aが、マウス胎児においてY染色体上性決定遺伝子Sryを発現を誘導することを以前報告した。本研究では、この「哺乳類の性がエピゲノムに制御される」という知見の更なる発展を目指して、1)H3K9脱メチル化酵素Jmjd1ファミリーによる共同的なSry発現制御の解明と、2) Sry遺伝子座の新規制御因子の探索、を行った。計画2: Sry遺伝子座に特徴的なヒストン修飾と制御因子の探索性決定に関与する新規因子を探索する目的で、セルトリ前駆細胞(E11.5日にSryを発現する細胞)の精製を試みた。すなわち、Sf-LNGFRTgマウスを用いて転写因子Sf1を強く発現する細胞と弱く発現する細胞に分画した後、これらの間でSry mRNAの発現量を比較した。結果、Sry発現はSf1を強発現細胞のみで見られたことから、Sf1-LNGFR Tgマウスを用いてSf1強発現細胞を分画することで、セルトリ前駆細胞を濃縮精製することが可能となった。研究計画通りに遺伝子改変マウスを樹立し、Jmjd1a/Jmjd1bの2つが重複的にマウスの性決定に関与するデータを得た。また新規Sry制御因子探索の予備実験として、セルトリ前駆細胞を濃縮精製する方法を確立した。計画I:生殖線特異的なJmjd1a/bDKOマウスに引きおこされる性転換の原因を解明する目的で、性決定期E11.5日の生殖腺体細胞に着目して以下の4つの実験を行った。1) FACSにより生殖腺体細胞のH3K9me2レベルを定量する。2)生殖線のSryとSox9発現変化を組織免疫染色により明らかにする。3)精製した生殖腺体細胞を用いてRNA-Seqを行い、Sry上流経路の遺伝子発現変動の有無を明らかにする。4) Sry Tgマウス用いてJmjd1a/b DKOマウス性転換のレスキュー実験を行い、Jmjd1a/bがSry下流の性分化経路を制御する可能性を検証する。以上の一連の実験の結果を統合し、以下の2点が明らかにとなった。i)Jmjd1a/bが相補して制御する性決定関連遺伝子はSryであること。ii)生殖腺体細胞のH3K9me2脱メチル化とSryの発現制御に関して、Jmjd1aがドミナントに作用しJmjd1bが補助的に働くこと。今後はJmjd1a/bが直接Sryを制御することを検証するため、ChIP法によりJmjd1a/b DKO生殖腺体細胞におけるSry遺伝子座のH3K9me2動態を明らかにし、Jmj1a/bのSry遺伝子上への局在を検証する必要がある。上記に加え、Sry発現制御におけるJmjd1aとメチル化酵素G9a/GLPとの間の拮抗作用を示し発表した。計画II:セルトリ前駆細胞(Ad4bp/Sf1強発現細胞)に強く発現する遺伝子として約150個を抽出した。この中には既知の性決定関連遺伝子の大部分(Jmjd1aを含め計11個)が含まれており、その他にはメチル代謝の関連酵素や新規lncRNAなどエピゲノムとの関連を予想させる興味深い遺伝子が複数ふくまれていた。今後はこれらの遺伝子の欠損マウスの作成解析を通して、新たな性決定関連遺伝子の発見が期待される。引き続きJmjd1a/Jmjd1b DKOマウスの解析を進める。DKOマウスにおいて、性決定期(胎生11.5日)のSry発現とSry遺伝子座のH3K9メチル化の変動を明らかにする。Sf1-LNGFR Tg胎生10.5-11.5日胎児から精製したSf1高発現細胞からRNA-seqにより遺伝子発現データを取得する。同様にSf1低発現細胞からデータを取得し、両者の比較からSf1高発現細胞に特異に発現する遺伝子を新規Sry制御因子の候補として取得する。分子生物学遺伝子改変マウスの樹立が当初の見込みよりも円滑に進行した。よってマウスの作製に関わる試薬等と飼育費用が抑えられた結果、次年度使用額が生じた。次年度使用額を遺伝子改変マウスの作製・飼育関連の費用にあてることで、研究計画全体の更なる円滑な進行をはかる。
文法の近似学習理論と遺伝子情報解析への応用

我々は既に、形式言語理論の枠組を援用した、核酸配列の構造、あるいは蛋白質の構造を表現するための形式的なモデルを提案してきた。しかし、実際の応用においては、目標とする遺伝子文法が、種々の抽象化やノイズの影響のため、設定した仮説空間に含まれない場合が多い。従って、学習目標とする遺伝子文法が仮説空間に含まれない場合でも、その目標文法の近似文法を学習させる必要性が生じ、そのような近似学習を取り扱える基礎理論を構築することが第一に重要である。従来の学習理論の枠組では、確率文法の近似的学習など、確率的要素を取り入れた枠組が主流であるが、本研究では、いっさい確率的な要素を組み入れない近似文法学習理論を提案した。特に、我々は、概念の近似理論として近年注目を集めている、ラフ集合理論を文法学習に組み入れ、目標概念を含む最小の仮説、または目標概念に含まれる最大の仮説を極限同定するための必要十分条件を示した。また興味深いことに、そのような近似学習の枠組においては、正データからの学習能力が完全データからの学習能力に等しくなることが示された。一方、従来から提案してきたRNAの二次構造表現のモデルとしてのTAG^2_<RNA>の構文解析アルゴリズムの効率化にも成功した。従来の木文法をRNA二次構造表現に目的を絞り込むことによって、O(n^6)からO(n^4)への効率化を達成した。そして、開発したアルゴリズムを実装し、長さ100程度のシュードノットを含むような二次構造の予測に対しても十分対応できることを実験的に検証した。高速な構文解析は効率の良い学習にとっても有効であると考えられ、今後は、RNA二次構造の同定・特徴抽出問題を、上記の近似学習理論のもとで定式化した上で、近似学習アルゴリズムを開発・実装して、構造予測システムを構築してく予定である。
マイクロ電子ビ-ムを用いた半導体表面上の金属の電気移動の研究

マイクロ電子ビ-ムを用いた観察手段としては、UHVーSEM(超高真空ー走査電子顕微鏡),μ-RHEED(μ-反射高速電子回折),μ-probeオ-ジェ電子回折等の手段を用いた。これらは現有の装置を用いることによって実現した。下地半導体として,Si(111)ウエハ-を用い,超高真空中で,ウエハ-を加熱清浄化して7×7表面を出現させた。その後,下地表面全面にIn金属を約1ML(原子層)蒸着後,加熱することにより4×1ーIn表面を得た。この4×1ーIn表面はSi(111)面上のIn金属電気移動の中間層と考えられている。この中間層の上に,直径100μmの穴を有するマスクを被せ,Inを1MLから4ML蒸着し,中間層上に微小In金属薄膜を形成させ,この微小薄膜の電気移動の様子を上に述べたマイクロ電子ビ-ムを用いた観察手段により観察した。これらの観察により以下のような結果を得た。1下地Siウエハ-の抵抗値を変えて電気移動の観察を行うことにより,電気移動の駆動力は電流ではなく電界であることが強く示唆された。2電気移動を起こす部分を詳細に観察すると,移動部は全体としては移動せず,消滅と生成を繰り返すことによって物質移動が起きていることが分かった。3移動部先端に発生するIn-Islandにおいても同様に,消滅と生成を繰り返すことによって物質移動が起きていることが分かった。4上記を説明する電気移動のメカニズムについて考察した。
遺伝子情報を用いた新規経口抗凝固薬の出血性副作用予測マーカーの同定

本研究は、当院の脳梗塞患者に用いた直接阻害型経口抗凝固薬(DOAC)の出血性副作用の有無を明らかにすること、欧米の先行研究でダビガトランとの関連が明らかとなった代謝酵素:CES1およびP糖蛋白:ABCB1の一塩基多型(SNP)の遺伝子型との関連を明らかにすることを目的に行った。当院脳卒中センターに入院しDOACを開始した患者の臨床データベースを構築した。SNP:CES1(rs2244613)、ABCB1(rs4148738他3箇所)の遺伝子型を直接塩基配列解析で検出するプライマー、PCR条件を確立し、遺伝子型の解析を行った。これまで解析した22名(年齢76±9歳、男性12名、女性10名)の入院時疾患は、心原性脳塞栓症:14名、脳血栓症:2名、奇異性脳塞栓症:2名、ラクナ梗塞:2名、その他脳血管障害2名であった。何れも心房細動もしくは深部静脈血栓症を伴う。16例ではヘパリン治療終了後、DOACに切り替えた。切り替え時に伴う出血症例は無し。開始したDOACはダビガトラン300mg:5名(65±6歳)、リバーロキサバン10mg:5名(84±2歳)、同15mg:5名(76±5歳)、エドキサバン30mg:6名(80±5歳)、同60mg:1名(62歳)。CES1:rs2244613の遺伝子型はCC:5、CA13、AA4名で、対立遺伝子頻度は、C:0.52、A:0.48。ABCB1:rs4148738の遺伝子型はGG:1、GA:11、AA:10名で、対立遺伝子頻度はG:0.3、A:0.7とAの頻度が高かった。DOAC開始後の出血例はないが、薬剤変更が2例あった(ABCB1 rs4148738:GAの86歳、AAの69歳)。内服経過後にPT-INR高値を示す症例があり、今後も経過を追って、出血性副作用と遺伝子型との関連を検討していく。1.直接経口抗凝固薬(DOAC*)内服患者の臨床データベースの構築脳卒中患者は、緊急入院が主体である。予期不可能な緊急入院患者に対応できるよう、登録患者の通常の採血と同時にDNA抽出用の血液検体を提出可能な体制を整備し、DNA抽出までスムーズに運用できるシステムをまず確立した。そして、当院脳卒中センターの入院患者データベースを基盤として、本研究の登録患者用の臨床データベースを構築した。登録項目として、入院時に脳卒中発症リスクのスコア:CHADS2、CHA2DS2-VASc、抗凝固療法における出血リスクスコア:HAS-BLEDを登録するとともに、経時的に凝固機能・肝機能・腎機能を含めた血液検査結果の登録を行う。DOAC内服開始前後での出血性副作用の有無、血液検査結果をデータベース化し、出血に関する臨床的予測因子を洗い出せるシステムを構築した。現在、患者登録を進めている。[*注:新規経口抗凝固薬(NOAC)は、現在、直接経口抗凝固薬(direct oral anticoagulant: DOAC)と呼ばれる.]2.DOACの薬理効果・出血性副作用に関与する遺伝子多型の検出方法の確立1.DOAC内服患者の臨床データベースの構築DOAC内服患者の臨床データベースの基盤を構築することができた。登録患者の臨床情報および血液検査の推移について、データの蓄積を開始した。2.DOACの薬理効果に関与しうる遺伝子多型の解析DOACの薬理効果への関与が考えられる計5箇所のSNPを検出するプライマー・PCR条件を確立した。今後、登録患者を増やし、多型解析を進めていく。1.直接経口抗凝固薬内服患者(DOAC)の臨床データベースの構築緊急入院患者に対応できるよう、登録患者の通常の採血と同時にDNA抽出用の血液検体を提出可能な体制を整備し、DNA抽出までスムーズに運用できるシステムを確立した。登録項目として、入院時に脳卒中発症リスクのスコア:CHADS2、CHA2DS2-VASc、抗凝固療法における出血リスクスコア:HAS-BLEDを登録するとともに、経時的に凝固機能・肝機能・腎機能を含めた血液検査結果の登録を行っている。これまで、12例の登録がある。登録症例は75±10歳。男性7名、女性5名である。入院の契機となった病態は心原性脳塞栓症が8名を占め、8例全例で入院時に心房細動もしくは発作性心房細動の所見を認めた。心原性脳塞栓症以外で、DOACを導入した症例は、脳梗塞で入院後、超音波検査にて下肢深部静脈血栓症が明らかとなった症例3例、心房細動でワルファリンを内服していたところ小脳出血を呈して入院となった症例1例であった。心原性脳塞栓症の症例については、入院後ヘパリンを用いて抗凝固療法を行い、DOAC内服開始と同時にヘパリンを中止としているが、DOAC導入後1週間以内に新たな出血事象や脳梗塞の再発は生じず経過した。2.遺伝子多型の解析解析対象としている5箇所の一塩基多型(single nucleotide polymorphism: SNP)について解析方法を確立した。DOACのうちのダビガトランにおいて、血中濃度に関与するSNPとして報告されているCES

1遺伝子のSNP: rs2244613および、DOACの腎排泄への関与が推定されるABCB1遺伝子の4箇所の既知SNPについて、これらのSNPを検出するプライマー・PCR条件を確立した。登録症例について、遺伝子多型解析を行っている。当院脳卒中センターに脳卒中患者は多数入院するが、脳梗塞の二次予防として、新たにDOACを導入する患者は、経口摂取可能な患者に限られ、登録患者数が当初の計画に比べて少ないため。本研究は、当院の脳梗塞患者に用いた直接阻害型経口抗凝固薬(DOAC)の出血性副作用の有無を明らかにすること、欧米の先行研究でダビガトランとの関連が明らかとなった代謝酵素:CES1およびP糖蛋白:ABCB1の一塩基多型(SNP)の遺伝子型との関連を明らかにすることを目的に行った。当院脳卒中センターに入院しDOACを開始した患者の臨床データベースを構築した。SNP:CES1(rs2244613)、ABCB1(rs4148738他3箇所)の遺伝子型を直接塩基配列解析で検出するプライマー、PCR条件を確立し、遺伝子型の解析を行った。これまで解析した22名(年齢76±9歳、男性12名、女性10名)の入院時疾患は、心原性脳塞栓症:14名、脳血栓症:2名、奇異性脳塞栓症:2名、ラクナ梗塞:2名、その他脳血管障害2名であった。何れも心房細動もしくは深部静脈血栓症を伴う。16例ではヘパリン治療終了後、DOACに切り替えた。切り替え時に伴う出血症例は無し。開始したDOACはダビガトラン300mg:5名(65±6歳)、リバーロキサバン10mg:5名(84±2歳)、同15mg:5名(76±5歳)、エドキサバン30mg:6名(80±5歳)、同60mg:1名(62歳)。CES1:rs2244613の遺伝子型はCC:5、CA13、AA4名で、対立遺伝子頻度は、C:0.52、A:0.48。ABCB1:rs4148738の遺伝子型はGG:1、GA:11、AA:10名で、対立遺伝子頻度はG:0.3、A:0.7とAの頻度が高かった。DOAC開始後の出血例はないが、薬剤変更が2例あった(ABCB1 rs4148738:GAの86歳、AAの69歳)。内服経過後にPT-INR高値を示す症例があり、今後も経過を追って、出血性副作用と遺伝子型との関連を検討していく。今後は、登録患者を増やしていき、DOAC内服患者の臨床データベースに血液検査も含めた臨床データを蓄積していくとともに、遺伝子多型の解析を進める。脳梗塞の二次予防としてDOACの開始した患者には、研究協力を求めていく。年度末に患者登録があった場合に備え、検体のDNA抽出などにかかる解析費用を残しておいた。次年度使用額が生じた理由としては、学会参加費用が少なかったこと、平成29年度に購入予定の物品が平成30年度となったことがあげられる。平成30年度では、引き続き登録症例の遺伝子多型の解析を進めるとともに、データがまとまり次第、学会発表を行っていく。本年度の繰越金は、遺伝子多型の解析費用として次年度に使用する。
一方向凝固法によるAl_2O_3-Y_2O_3系共晶酸化物/炭化物系強化繊維の複合化

本研究では、酸化物共晶合金(Al203-YAG)とSiC(長繊維またはウィスカー)を溶融状態で複合化させ、超高温材料を製造することを最終目的としている。そのためには、溶融酸化物とSiCが共存する状態において互いに熱力学的に安定に存在することが必要である。これまでに、熱力学安定性を実験的、理論的に検討した。実験的には、酸化物共晶合金とSiCウィスカー粉末を混合、アーク溶解して複合化し、XRD,MDG(微小部エックス線回折),WDX,SEM,OPをもちいて反応式の検討を行った。この結果、アーク溶解によって液相の温度が上昇するとSiCは酸化物融液を還元し、一酸化炭素、または二酸化炭素を生成すると同時に金属Si相,Al相、また、Si,Yを含む炭化物相を生じることがわかった。反応の自由エネルギー計算を行った結果、2373Kにおいて、共晶酸化物融液とSiCの反応を防ぐためには、4.43atmの一酸化炭素分圧が必要であることが分かった。また、得られた複合材のビッカース硬度およびインデンテーションフラクチャー法によって常温靭性値番評価した。IF方による靭性値評価では、SiCウィスカーを体積率40%含む場合、9MPam0.5となり、複合化により2倍近い向上が見られた。次に、モリブデン製の坩堝に、SiC長繊維と共晶合金を挿入し高周波加熱を行った。その結果、共晶融液は、SiC繊維の束に自発的に浸透し、凝固後、複合材両組織を形成した。本研究では、酸化物共晶合金(Al203-YAG)とSiC(長繊維またはウィスカ-)を溶融状態で複合化させ、次世代超高温材料を一方向凝固法を用いて製造することを最終目的としている。平成9年度においては、熱力学安定性を実験的、理論的に検討した。実験的には、酸化物共晶合金とSiCウィスカ-粉末を混合、アーク溶解して複合化し、XRD,MDG(微小部エックス線回折),WDX,SEM,OPをもちいて反応式の検討を行った。この結果、アーク溶解によって液相の温度が上昇するとSiCは酸化物融液を還元し、一酸化炭素、または二酸化炭素を生成すると同時に金属Si相を生じることがわかった。また、アークの出力、および時間を短くすることで凝固後に酸化物とSiCを共存させることが可能であることがわかった。この試料(複合材料)をEPMA,SEM等で観察した結果、YAG初晶が多くみられ、SiCとの反応によってアルミナ成分が還元されたことを示唆した。また、得られた複合材のビッカース硬度およびインデンテーションフラクチャー法によって常温靱性値を評価した。現在、一方向凝固法による複合材料の製造とTEMによる酸化物とSiCの界面の微視的構造解析に取り組んでいる。