hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
北米先住民の「記憶の場」構築に関する史的考察：ノーザン・シャイアンの史跡化営為

現地フィールド調査、インタビュー調査、史資料調査を通して、1)歴史性に訴えて先住民が土地保全を図る方策には一定の有効性が認められる、2)部族の精神性、宗教性に関わる記憶は歴史という文脈に容易に収まらない、3)史跡化により部族の記憶は国史に一旦は従属させられるものの、史跡管理の過程において出来事の解釈を巡る議論・対話は継続する、ことが明らかとなった。史跡化は部族主権の原点に関わる記憶を継承し、時間的奥行きをもって近代部族自治を捉えることに繋がることが確認された。平成26年度は、予定していた現地調査、及び史資料調査をほぼ予定通り実施することができた。現地視察調査からは、国定史跡となった地所の維持管理は部族歴史保存委員会委員と、国立公園局との連携によってなされている様が窺えた。保留地東隣接地に位置するウルフマウンテン国定歴史名所近郊では、現在鉄道敷設、及び石炭開発が検討されているが、保留地近隣住民、環境保護団体、及び開発によって影響を受ける他部族が、共同してこれに反対する運動を展開していることが確認された。資料調査においては、1)1980年代、憲法修正第一条信教の自由に訴えて先住民が聖地保護を試みた事案、2)2000年代、国教樹立禁止条項をもとに、先住民聖地保護への政府関与が問われた事案を検討することで、先住民部族が史跡化を術として聖地保護、土地保全、記憶継承を目指すようになった経緯を明らかにした。当初予定では平成26年度にはワシントンDC、国立公園局国定文化資源センターにおいて、国定史跡の認定条件等について調査を行う予定であったが、平成25年度国立公園局インターマウンテン地域事務局での調査において、大方の情報を得られたためこれを中止し、代わりに保留地を持たない先住民の歴史・記憶の在り様について、カリフォルニア州立バークレー校、サンフランシスコ州立大学にて調査を行った。人文学平成27年度は、部族が祖先の埋葬地であると主張する保留地東隣接地オッタークリークの状況を視察するとともに、モンタナ州政府主導の下、現在進行中である石炭開発計画、及び関連鉄道建設計画の全体像を把握する。具体的には、オッタークリークに近接するウルフマウンテン国定歴史名所が、土地保全のインセンティブとしてどのような効力を発揮しうるのかについて検討を進める。現地インタビュー調査では部族歴史保存委員会委員、部族政府文化委員会委員、及び伝統儀式を司るキットフォックス・ソサエティのメンバーに、部族にとってのオッタークリークの重要性について聞き取りを行う。同時に、石炭開発推進派の部族政府関係者にも聞き取りを行う。オッタークリーク周辺を取り巻くカスター国立森林局関係者には、石炭開発によって引き起こされる環境への影響について聞き取りを行う。研究最終年度となる平成27年度は、オッタークリークにおける開発立地紛争の検討を通して、史跡化を基とした部族の土地保全営為の有効性と限界について考察する。平成25年度は、予定していた現地調査、及び史料調査をほぼ予定通りに実施することができた。サウス・ダコタ州のブラックヒルズ、デビルズタワー、ベアビュート、及びワイオミング州ディシュミット湖の現地視察調査からは、先住民の聖地が州の観光資源となっている様が伺えた。
社会不安を低減する向社会的行動に関する国際比較研究

本研究の目的は,比較文化的な手法を用いて,本邦における向社会的行動の特徴と機能を記述し,それらの行動が社会不安に与える影響を検討することであった。実験室において初対面の人との会話場面を再現し,日本と比較対照国のイギリスで生じる行動レパートリーを比較した。その結果,イギリスにおいてはパフォーマンスの流暢さが社会不安に影響するのに対して,日本では相手との関係性を構築する行動が重要であることが示唆された。【研究目的】本研究の目的は,比較文化的な手法を用いて,本邦における向社会的行動の特徴と機能を記述し,それらの行動が社会不安に与える影響を検討することであった。今年度は,日本と比較対照国のイギリスにおいて頻繁に経験される社会的場面の選定を行い,その場面を実験室で再現するためのシナリオを作成することを目的とした。【研究方法】はじめに,日本の大学生458名と,イギリスの大学生438名を対象に,(1)Social Phobia Scale(2)Social lnteraction Anxiety Scale(3)Taijin Kyofusho Scale(4)過去一週間中に体験した社会不安場面に関する自由記述課題(5)(個人の文化的背景に関する質問を含む)フェイス項目から構成される質問紙調査を実施した。その後,社会不安を喚起する程度が国ごとに大きく異ならず,かつ両国を通じて経験頻度の高い場面を選定し,その場面に関するシナリオを作成した。シナリオの場面を実験室で再現・ビデオ録画し,複数名の社会不安障害の専門家による生態学的妥当性の確認を行った。【研究成果】調査の結果,社会不安場面を表すほとんどの項目で日本の大学生がイギリスの大学生よりも有意に高い不安得点を示した。しかし,「他の人に見られている時,震えてしまうのではないかと心配になる」などに代表される身体症状に関する項目と,「よく知らない人と付き合うのは緊張する」などに代表される初対面の人との交流に関する項目では,両国の社会不安得点がほぼ同等であることが確認された。自由記述の結果から,特に初対面の人との交流場面に関する不安が列挙される頻度が高かったため,初対面の人との会話場面に関するシナリオを作成し,実験室場面で再現した。再現された場面は十分な生態学的妥当性を有することが確認された。今年度は,初対面の人との会話場面を実験室で再現し,日本と比較対照国のイギリスにおいて生じる行動レパートリーを比較し,それらの行動が社会不安に及ぼす影響を評価した。【研究方法】日英の大学生各20名を対象に,初対面の人と15分程度の会話を維持する実験を行った。実験協力者は,実験室に入室後,社会不安の高さを測定する調査票に回答した。その後,生理機器を装着し,心拍と血圧を2分間隔で測定した。測定と同時に,主観的不安の度合を0-100で記録用紙に記入した。5分間の安静期の後,実験補助者が入室した。互いに自己紹介を行い,時間終了の合図があるまで会話が続けられた。相互作用の様子はビデオに録画された。実験終了後,3名の評定者がビデオ映像を用いて行動レパートリーのチェックを行った。主観的評定・行動評定・生理指標に基づき,向社会的行動と社会不安の連関が日英間で比較された。【研究成果】実験の結果,主観的不安は日本人対象者で有意に高かったが,生理指標では明確な差は見られなかった。行動評定においては,視線の使い方や笑いなどに顕著な差が見られ,それぞれの行動が,両国間で社会不安の低減に異なる効果を及ぼしていることが示された。このことから,社会的スキル訓練等の介入を行う際には,文化的背景を十分に考慮し,有効な行動を選択する必要があることが示唆された。
胎子肝臓マクロファージの分化と運命に関する細胞形態・超微組織化学研究

平成7年と8年の2カ年にわたる研究によって得られた新たな知見は次の通りである.1.胎子肝臓マクロファージは血管腔マクロファージに由来する.肝臓造血開始以前の卵黄嚢血管や胚子の循環血液細胞を超微形態レベルで観察し,卵黄嚢造血期には成熟動物と異なって,スカベンジャーマクロファージが循環血液に含まれ,胚子内を循環することを明らかにし,超微形態的名特徴と造血組織の時間的な発生経過から,肝臓マクロファージの起源を解析した.2.類洞のスカベンジャーマクロファージは肝細胞間へ移動し,赤芽球島中心マクロファージへと分化する.超微レベルの形態学的な観察に加え,肝細胞,マクロファージ,造血細胞それぞれの細胞表面の糖を超微組織化学的に観察し,肝臓に形成される赤芽球島マクロファージが類洞腔マクロファージに由来することを観察した.3.肝臓マクロファージの食作用の対象は,肝臓造血の推移を反映する.肝臓造血開始期,恒久性赤血球生成期,造血衰退期で異なり,老化原始赤血球,放出された赤芽球核,変性多形核白血球が肝臓造血の推移と関連して,肝臓マクロファージに取り込まれ除去される.4.生後の肝臓ではマクロファージは類洞内にのみ,残存する.赤芽球島中心マクロファージは肝臓造血の終息とともに細胞死にいたり,胎生期類洞マクロファージは生後ライソゾームは急速に発達し,類洞腔に残存する.平成7年と8年の2カ年にわたる研究によって得られた新たな知見は次の通りである.1.胎子肝臓マクロファージは血管腔マクロファージに由来する.肝臓造血開始以前の卵黄嚢血管や胚子の循環血液細胞を超微形態レベルで観察し,卵黄嚢造血期には成熟動物と異なって,スカベンジャーマクロファージが循環血液に含まれ,胚子内を循環することを明らかにし,超微形態的名特徴と造血組織の時間的な発生経過から,肝臓マクロファージの起源を解析した.2.類洞のスカベンジャーマクロファージは肝細胞間へ移動し,赤芽球島中心マクロファージへと分化する.超微レベルの形態学的な観察に加え,肝細胞,マクロファージ,造血細胞それぞれの細胞表面の糖を超微組織化学的に観察し,肝臓に形成される赤芽球島マクロファージが類洞腔マクロファージに由来することを観察した.3.肝臓マクロファージの食作用の対象は,肝臓造血の推移を反映する.肝臓造血開始期,恒久性赤血球生成期,造血衰退期で異なり,老化原始赤血球,放出された赤芽球核,変性多形核白血球が肝臓造血の推移と関連して,肝臓マクロファージに取り込まれ除去される.4.生後の肝臓ではマクロファージは類洞内にのみ,残存する.赤芽球島中心マクロファージは肝臓造血の終息とともに細胞死にいたり,胎生期類洞マクロファージは生後ライソゾームは急速に発達し,類洞腔に残存する.1.マウス胎子肝臓造血の推移にともなうマクロファージ食作用の変化(1)造血発生初期肝臓原基の類洞腔内には,卵黄嚢原始赤血球が大量に含まれる.原始赤血球の核は異染色質が核膜に沿った半月状に凝集するなど,アポトーシス様の変化を呈し,最終的に小型の核遺残体となる.マクロファージは細胞死の兆候を呈する原始赤血球を活発に取り込む.原始赤血球核はTUNEL法で陰性である.(2)恒久性赤血球生成期類洞より肝細胞索内に移動したマクロファージを中心に,赤芽球島が形成される.肝臓マクロファージは恒久性赤血球生成における好酸赤芽球から放出された赤芽球核(TUNEL法陽性)を活発に取り込む.<結論>胎子肝臓のマクロファージははじめ卵黄嚢で産生された短命な赤血球の処理にあたり,のちにその一部が赤芽球島中心マクロファージへと分化,肝臓における恒久性赤血球生成に重要な役割を演ずる.2.肝臓造血終末期の造血細胞・造血構造の変化出生直後の肝臓には2種類のマクロファージが含まれる.すなわち,赤芽球島中心マクロファージと類洞腔ないし類洞内皮細胞間に存在するスカベンジャーマクロファージで,門脈を介して肝臓に大量に流入する乳脂粒滴に対していずれも活発な食作用を呈する.この時期に酸フォスファーターゼを含有するライソゾーム性の顆粒がマクロファージ細胞質内に増加することが電顕組織化学的に観察できる.赤芽球島マクロファージの食作用はその後低下し,赤芽球が中心マクロファージから離脱,中心マクロファージは細胞死にいたる.類洞マクロファージでは酸フォスファターゼを含むライソゾームは発達して,迂曲小管複合体を形成する.<結論>肝臓スカベンジャーマクロファージから分化した赤芽球島中心マクロファージは肝臓造血の終末期に細胞死にいたり,類洞腔にスカベンジャーマクロファージが残る.この細胞とクッパー細胞との詳細な対応は,ライソゾームの形態的な特徴や組織化学的な観察と併せて今後の課題の一つである.
工芸の展開ー美術鋳物の色沢と熱処理の関係

鋳銅品の表面の着色法について熱処理を施し検証した。主に朱銅を発生させることや硫黄を使用して鋳肌を荒らす技法のもとに110個以上の色見本を作製した。作製については、合金の種類、加熱方法、加熱時間と温度、仕上げ方法、薬品処理等によるそれぞれの違いを比較しながら安定した着色法を探った。この研究に於いて、特に朱銅を安定的に表出させる内容を獲得できたことは大きな成果であった。平成24年度は、鋳銅品の再調査を実施し、また、基本プランの再作成、表面処理、熱処理の基に鋳銅品の着色を実施した。具体的には、青銅(BC6)をベースとし、黒味銅を1%加えたもの、黒味銅を1%と銅10%を加えたもの、黒味銅を1%と銅20%を加えたもの、黒味銅を1%と銅30%を加えたもの、黒味銅を1%と銅40%を加えたものの各種サンプルを鋳造した。その鋳造サンプルを基本とし、素焼における朱銅の発生実験を試みた。鋳銅品の加熱燃料として、基本的に短期間での発熱量の多い松炭と長時間高温を維持できる備長炭で実施した。結果としては、銅の含有量の多いものの方が朱銅の発生状況は良好であったが、銅20%の含有量のものでも朱銅が多く発生したものがあった。また、松炭による短時間の加熱(40分程度)においては、朱銅の形状が単純明快なものが多く、備長炭による長時間(1時間30分以上)の加熱の方は朱銅の形状が複雑になるものが多かった。加熱温度は、最初、900°C前後まで昇温することを心掛けたが、鋳銅品が熱による変形を起こす場合が多いため、850°Cに設定し直して実施し、良好な結果が得られた。焼成後、研磨、煮色、おはぐろを実施し、サンプルを50個程度完成させた。特におはぐろ着色の実施により、朱銅の色彩が明快になることを確認できた。今年度の熱処理による朱銅の発生については、銅の含有量、加熱温度、加熱時間、着色処理方法について実践的な方法について確認することができた。美術鋳物の着色効果についてこの3年間の最終研究を実施した。調査に関しては、過去2年間で東京藝術大学に所蔵されている鋳銅着色見本の調査や、調査地としては、国内では富山県高岡市、新潟県での調査を実施し、また、国外においてはイタリアのレッジョで、古代ブロンズ像の調査を実施したが、本年度は、これらの調査を基に鋳銅見本百数十個の着色工程までの実作を行った。実製作の内容は、直径8cm程度の円盤状の形態を基本形とし、合金の割合、熱処理の方法、仕上げ方法、着色の方法等の区別をして、その過程での状況、最終的効果を検証した。合金の割合については、熱処理を念頭に置いて、基本的には、BC6種のブロンズに、純銅を10%、20%、30%、40%にそれぞれ変化させて加えて鋳造した。鋳造方法は、生型鋳造法で実施した。熱処理の方法は、素焼、ミソ焼を各種展開した。素焼については、焼成時間、焼成方法、焼成温度、焼成燃料の炭の種類に留意し、各種見本の作成を行い、それぞれについて検証した。仕上げ方法、着色方法については、東京藝術大学で実施されている内容と、今回各地域で得られた調査内容や文献をベースとして熱処理を施した各種鋳銅品を対象に実施した。結果として、特に素焼においてその焼成温度、焼成内容での再現性の有効範囲の獲得ができたことが成果であった。また、素焼で発生する朱銅も合金の比率を変えることで発生しやすい状況を把握することができた。その朱銅をより効果的に発色する方法も今回の成果としてあげられる。ミソ焼においては、合金比率、硫黄の混合比の変化での比較検討を行った。これによる肌の荒れかたにある程度の法則性を見いだすことができ、その後の着色処理での効果を計算できる内容が把握できた。全体を通し、技法に習熟した作家以外でも目安となる指標のようなデータを獲得できたことは本研究の主な事項の目的の達成となった。古代の鋳銅品から現代の鋳銅作品の色沢の調査を実施するために、国内では富山県高岡市、新潟県で調査した。高岡市は、世界の鋳造技術が集中しており、鋳銅品の種類も多く、多種の調査を実施できた。また、着色所の調査においては、具体的な着色法を見学でき、多くの着色法を把握できた。新潟県は鋳金作家が多く、作家による具体的な着色法を調べることができた。海外では、イタリアのレッジョにあるカラーブリア修復研究所において、古代ギリシャブロンズ像のリアーチェの戦士像を調査する機会を得た。この像は国宝級のブロンズ像で、海中から引き揚げられたものであり、表面に付着していた貝等はきれいに除去され修復はほぼ完了していた。

海中で地面に接していた部分は貝等の付着も少なく、時間をかけて自然に表面の色沢が定着しており、美しい緑青を獲得していた。このブロンズ像を調査できたことは大きな収穫であった。他に文献による調査を実施した。明治期に金属の着色法に関する文献が発行されており、それらを軸に調査した。主に彫金系の着色法の文献が多かったが、鋳銅品に共通する部分もあり、実制作に向けて調査できたが、熱処理に関する資料はあまり多くはなく、今後も調査を継続していく。次年度からは、実制作に入るため、鋳物肌、色沢面、技法面ごとに分類し、調査内容をデータ化する準備を実施した。また、鋳金作家によるそれぞれ展開している鋳銅品の着色技法に関しては、まだまだ発掘できる可能性があるので今後も聞き取り調査を展開していく。美術工芸の分野における鋳金(鋳物)の着色効果について研究を継続しているが、その中でも熱処理を伴った鋳物独特の着色の下地処理の安定した行程の把握については、今回の研究の大きな目標である。現在のところ、以前の研究で明快な発生が確認できなかった朱銅の発生については、銅の含有量、加熱温度、加熱時間、着色処理方法を基にこれの発生について実践的な方法による展開を確認することができた。これらについては、鋳銅作品の着色を計画的に安定して創作する上でとても重要なことであり、本研究の目的のひとつである。今後の展開では、他の熱処理による下地づくりの確認と、それによる着色効果の確認を実施し、多種にわたる鋳銅品の着色技法の安定した行程を把握していく。朱銅の発生確認が良好に得られたことから、今年度まではある程度目的が達成されたと判断する。初年度における基礎資料のまとめや調査に関しては、概ね実施できた。特に鋳銅品の熱処理による着色変化については個人の作家から貴重な意見も収集でき、次年度の研究計画の基本部分の構築ができた。今後は、鋳銅品の熱処理による下地づくりのまだ実施していない技法の展開と、その安定した行程の把握を展開する。具体的には、ミソ焼の硫黄の含有量、添加物の違い等による下地の変化の確認等になる。また、以前研究を展開した鋳銅品の着色法で明快な反応が確認できなかった事柄についても再度着色法の展開を試み、曖昧な部分の消化をしていく。具体的には、緑青による着色、アンモニアガスによる着色等である。最終年度にあたるため、着色技法を熱処理を中心として、各種着色実験のデータを基に項目を立てて、確認や獲得できた行程について作家の制作の立場から具体的に内容をまとめていく。現在までに得た資料を基に今年度は、鋳銅色見本の作成に入る。鋳銅品の熱処理を基本とし、その多岐にわたる技法を検証しながら、実際に鋳造をしてそれを基に熱処理の効果を確認していく。また、求める色見本が得られなかった場合、それらの技法の再調査を含め、重層的に展開し、結果を出す。主に下記の内容で研究費を使用する計画である。鋳銅サンプルの鋳造費鋳銅品の仕上げ加工用具の購入鋳銅品の仕上げ加工謝金完成サンプルの撮影関連費着色技法の確認のための旅費その他まとめた資料等の印刷費その他基本的には、鋳銅色見本作成に関わる費用を研究費で実施する。主に、鋳銅品の材料費、それに関わる人件費、また随時発生する再調査費、鋳銅品の分析に関わる費用等が主な支出となる。
自己名に対する自動的反応の時系列解析と脳機能評価への応用

自己名は、生涯を通じて個人・社会の両面から極めて重要な刺激であり、ごく初期の発達過程から特徴的な脳内処理が行われるものと推察される。本研究は、自己名の情報処理について事象関連電位を用いて検証することで、自己名に対する自動的反応の時系列解析を行い、脳機能評価への応用を目指すための基盤を構築することを目的とした。その結果、人工音声の刺激としての適切性、単一刺激法とオッドボール法の差異、音声の違いによる効果とその被験者間差異、自動的な自己名の検出の漸進性、自己名があたかも自然と(自動的に)標的刺激となることおよびその個人差等が明らかにされた。平成25年度は、自由度が高く容易な刺激作成のために、安価もしくはフリーの人工音声ソフトの中から、簡便性、明瞭性、呼びかけ刺激としての適切性を重視して候補を絞り、スピードやピッチの変更が可能であり、基礎的データ取得の際にも生かせるものを当初段階として活用することにした。単一刺激パラダイム(single-stimulus paradigm)は、各セッションごとに同一の刺激を適宜時間間隔を設定し呈示する方法である。複数の種類の刺激を呈示し、刺激間の間隔も通常比較的短いオッドボールパラダイム(oddball paradigm)とは対照的である。自己名や他者名に対するERP反応に特徴的な振る舞いが見られれば、各手法における自動的な概念処理の特色に関する知見が得られる可能性がある。さらには、単一刺激の方法では測定時間を短縮できる可能性があり、心的機能計測の負担軽減の面からも利用可能性の検討が望まれる。実験状況としても、ほぼ一定のペースで様々な名前が呈示されるオッドボールパラダイムの不自然さを多少改善できる可能性がある。これらの観点から、単一刺激パラダイムを用いて、自他名の対比とセッション間進行の効果を検討した。その結果、手持ちのデータにあるオッドボールパラダイムを用いたときよりも、自他名のコントラストは明瞭ではないものの、全般にN2、P3のピークがより明瞭になることがわかった。また、500ms程度以降の緩やかな陰性電位はセッションの進行にともない減衰傾向を示した。同一の名前のピッチのバリエーションの効果は顕著ではなかった。また少数事例ながら、同じ人工音声作成法を用いてオッドボールパラダイムを用いた検討の結果、手持ちのデータとも一貫性のあるデータを得た。いずれも、両手法の処理特性の違いを反映するものと考えられ、今後は双方の特徴を考慮しながら、検討を進める必要があることがわかった。平成26年度は、昨年度選定した人工音声に加え、特色のある人工音声を刺激として用いた実験を実施した。手法はこれまでのものを踏襲し、被験者は視覚課題(ゲーム)に集中し、呈示される音声は無視するものであった。音声は自己名と他者名およびモノの名前とし、自己名の出現確率を1/8とした。これらの刺激をオッドボールパラダイムの様式で呈示し、脳波を記録した。被験者全体の結果は、荒生他(2012)で報告したデータと比較的よく似ており、前頭・前額部を中心に、自己名に対してより陰性方向の電位変動がみられた。過去のデータと今回のデータとでは、実験場所および記録システムが異なっているが、類似の結果が得られたことになる。このことは、実験の再現性・安定性の面で有用な情報であり、旧型アンプを活用した以前の実験においても十分な精度で測定可能であったことが間接的に示された点でも有用といえる。さらに重要なことには、類似のパラメータと実験状況を用いると、当パラダイムにより、研究機関や機材を問わず、同様の結果が得られる可能性が高いことが考えられる。できるだけ高い再現性・安定性を確保することは、本手法に基づく臨床応用技法を開発するうえで重要であり、これらのデータ取得が貴重なステップとなったと言える。なお、被験者個別にデータを視察すると、被験者により、どのタイプの音声の際に自己名と他者名のコントラストが生じやすいかが異なる傾向が見受けられた。引き続き、被験者ごとの個人差の問題あるいは測定誤差の問題も想定したうえで、自己名認識過程の検討とその臨床応用を考慮する必要がある。平成26年度9月には、国際学会(17th World Congress of Psychophysiology)において、これまでのデータをとりまとめ、シンポジウム発表を実施した。平成27年度は、選定を行ってきた妥当な人工音声を用いて、さらに「自己名に対する自動的反応」の性質について明らかにする実験を行った。とりわけ、視覚課題に集中している際に提示された自己名に対する自動的反応が、時系列のどの段階で生じるのかを明らかにする実験を実施した。「ひろし」を自己名とすると、自己名と最初の数モーラが同一であるものの他者名である「ひろむ」(類似自己名)や、最初のモーラから異なる「たけし」等の他者名による刺激セットを用意し、この問題にアプローチした。被験者の課題は、これまでと同様に視覚的刺激に注意を向け、聴覚刺激として提示される名前は無視するものとした。その結果、事象関連電位の潜時200ms前後より、自己名と類似自己名に対する反応は、他者名に対する反応と異なることが示された。その後は、潜時500ms前後より、自己名は、類似自己名(および他者名)とも異なる反応となることが示された。

つまり、視覚課題に集中し、聴覚刺激を無視している場合であっても、自己名や自己名と類似のものが検出される、いわば、「怪しきを検出する」仕組みが働き、その後の段階でさらに、自己名のみに対して特異的な反応を生む仕組みとなっていることが示された(自動的な自己名の検出の漸進性)。これまでの一連の実験では、被験者の注意は視覚的課題に向け、聴覚刺激は無視する状況であったが、被験者が聴覚刺激に注意を向け、自己名以外の名詞(ターゲット)にのみ反応する実験を実施した。その結果、自己名は非ターゲットであるものの、反応対象のターゲットと類似の反応をはじめとする特徴的な反応を示した。それらの反応は、自己名への自動的な注意配分および反応抑制の過程と結び付けて解釈可能である。これらの新たな個別の成果およびそれらも含めた全体的な成果について、各学会や学術誌等への発表を行う準備を進めた。自己名は、生涯を通じて個人・社会の両面から極めて重要な刺激であり、ごく初期の発達過程から特徴的な脳内処理が行われるものと推察される。本研究は、自己名の情報処理について事象関連電位を用いて検証することで、自己名に対する自動的反応の時系列解析を行い、脳機能評価への応用を目指すための基盤を構築することを目的とした。その結果、人工音声の刺激としての適切性、単一刺激法とオッドボール法の差異、音声の違いによる効果とその被験者間差異、自動的な自己名の検出の漸進性、自己名があたかも自然と(自動的に)標的刺激となることおよびその個人差等が明らかにされた。これまでの成果をもとに、国際学会シンポジウムにおいて2件の発表を実施したほか、昨年度選定した人工音声を中心とした新規実験において、新たなデータを取得している。新規データについても、これまでとの整合性を確認できる部分に加え、音声の種類等の効果など新たな着眼点を得ることができた。実験心理学これまでに実施してきた実験データを統合して取りまとめつつ、補足および新規の実験を実施し、事象関連電位にあらわれる自己名検出に関わる処理についての知見を整理する。特に、それが実験パラダイムに依存すること、感情や音声の効果とどのように相互作用するか等がハイライトになると考えられる。さらに、これらの情報をもとに各手法の長所短所を洗い出し、臨床応用に資する「自己名検出過程に関する事象関連電位指標」の効果的な取得法について検討を進める。これまでの主だった実験では、名前を発声したものを録音し、編集することより、実験刺激を作成していたが、今年度は、各種の人工音声の簡便性、明瞭性、刺激としての適切性を検討し、当面の目的に適うものを選定することができた。なお、現在では人工音声にも幅広い選択肢が存在しており、バリエーションの問題や、生声との対比の問題、感情を取り入れる場合の問題については、継続して考慮する必要がある。今年度は選定した人工音声を用いて、新たに単一刺激パラダイムを用いた検討や、同一音節から始まる名前や物体名を用いた実験的検証に着手し、パラダイムごとの特性の違いを反映した事象関連電位の傾向や、これまでのデータと類似点や相違点に関する知見を得ることができた。平成25年度の成果として、単一刺激とオッドボールの手法の違いにより反応が異なることが示された。今後は相互の特色を考慮しながら、当初の目的に沿って自他名の効果や、音節や音声の類似性の効果等について順次検証を進める。単一刺激の方法では、セッション進行の効果が明瞭にみられたため、今後はこの効果を手法ごとに検証することも課題になるであろう。
糖鎖発現解析による腎移植後慢性拒絶反応の新規診断法の開発

本研究は腎移植患者のリンパ球表面の糖鎖発現解析を行い、全く新しい拒絶反応を予測する糖鎖バイオマーカーを同定し、さらに拒絶反応の治療への応用を検討することを目的とする。これまでの実験の概要は1.腎移植患者の末梢血リンパ球単離2.高密度レクチンマイクロアレイを用いた網羅的な移植前後における1.で分離したリンパ球の糖鎖修飾解析を行うことである。腎移植後患者をGroup1 (腎移植前)、Group2 (腎移植後、腎機能安定)、Group 3 (腎移植後、腎機能安定、腎生検で慢性活動性抗体関連型拒絶なし)、Group 4 (腎移植後、腎機能悪化、慢性活動性抗体関連型拒絶あり)に分類することに決めた。当院で平成28年度に行われた腎移植レシピエントは15名おり、それぞれのレシピエントに対し腎移植前の血液サンプルをGroup1として収集した。現時点では1例を除き全例、術後腎機能は安定していることからGroup2に相当している。また、腎機能悪化などで、移植後生検を行った症例は1例あり、その時の組織標本を保存している。この症例はヘマトキシリン・エオジン染色およびC4d染色において明らかな慢性活動性抗体関連型拒絶は認められず、腎機能悪化、慢性活動性抗体関連型拒絶なしの群に相当し、新たにGroup 6として追加した。産総研の協力の下、産総研が独自に開発した96種類のレクチンで糖鎖全体の約80%を網羅的に解析可能な高密度レクチンマイクロアレイを用いて網羅的な糖鎖修飾解析を行うことを予定しているが、本年度はその準備として、高密度レクチンマイクロアレイの精度確認を行った。高密度レクチンマイクロアレイで得られたデータはデータマイニングソフトウェアであるGeneSpringを用いて解析し、そのGeneSpringsは筑波大学磯田研究室のものを使用することになった。実験の概要は1.腎移植患者の末梢血リンパ球単離2.高密度レクチンマイクロアレイを用いた網羅的な移植前後における1.で分離したリンパ球の糖鎖修飾解析3.個別レクチンの移植腎生検組織における拒絶反応有り無しの糖鎖発現変化の解析4.低コストで迅速診断が可能な新しい拒絶反応診断用新規レクチンアレイの開発5. in vitroでのレクチンアレイによる層別化による免疫抑制薬の治療効果の検討を行う。1.腎移植後患者の末梢血からのリンパ球の単離本研究の同意を得た腎移植後で外来通院中の患者および、今後腎移植を予定している患者から末梢血を採取してリンパ球を単離。2. Group14の患者の高密度レクチンマイクロアレイを用いた網羅的な糖鎖修飾解析を行い、データを評価検討し腎移植後の慢性拒絶反応の診断に有用と思われるレクチンを数個に絞り込んだ。3.移植腎生検組織を用いてレクチン染色を行い、個別の糖鎖発現を組織上で確認した。4.明らかになった糖鎖修飾の発現プロファイリングから、スクリーニング診断および拒絶反応ハイリスク診断に有用と思われるレクチンを数個に厳選し、低コストでのスクリーニング検査を実現した。5. in vitroで特異的レクチンにより層別化したヒトリンパ球細胞に各種免疫抑制剤の投与を行い、拒絶反応に対しての治療効果を比較検討した。平成29年度に、筑波大学附属病院およびマイクロアレイによる解析で提携している産業総合研究所の倫理委員会の承認を受けることができた。腎移植後患者をGroup1 (腎移植前)、Group2 (腎移植後、腎機能安定)、Group 3 (腎移植後、腎機能安定、腎生検で慢性活動性抗体関連型拒絶なし)、Group 3 (腎移植後、腎機能安定、腎生検で慢性活動性抗体関連型拒絶あり)、Group 4 (腎移植後、腎機能悪化、慢性活動性抗体関連型拒絶あり)に分類した。当院で平成28,29年度に行われた腎移植レシピエントは20名おり、それぞれのレシピエントに対し腎移植前の血液サンプルをGroup1として入手した。

現時点では全例、術後腎機能は安定していることからGroup2に相当し、同じく血液サンプルを入手し、保存している。産総研の協力の下、産総研が独自に開発した96種類のレクチンで糖鎖全体の約80%を網羅的に解析可能な高密度レクチンマイクロアレイを用いて網羅的な糖鎖修飾解析を行い、高密度レクチンマイクロアレイの精度確認を行った。現時点で、拒絶反応を認めた症例がないため、腎移植術後の糖鎖の変化について調べた。高密度レクチンマイクロアレイで得られたデータはデータマイニングソフトウェアであるGeneSpring&reg;を用いて解析した。Group 1、Group 2、およびGroup 6のサンプルを高密度レクチンマイクロアレイを用いて網羅的な糖鎖修飾解析を行うことを予定している。この結果を筑波大学磯田研究室にGeneSpringを用いて解析する予定である。レクチン染色に関しては96種類それぞれ確立された染色法はなく、我々が先行研究で行っている手法に基づいて統一して行い、評価する予定である。現時点ではまだ1例であるため、サンプルがもう数例集まった段階で免疫染色を行いたいと考えている。高密度レクチンマイクロアレイで明らかになった糖鎖修飾の発現プロファイリングからスクリーニング診断および拒絶反応ハイリスク診断に有用と思われるレクチンを数個に厳選する。これらレクチンの組み合わせたマイクロチップを作成し、スクリーニング検査を確立することを目指す。さらに特異的レクチンにより層別化したリンパ球細胞に各種免疫抑制剤の投与を行い、高密度レクチンマイクロアレイを用いた糖鎖修飾の発現プロファイリングをもとに、拒絶反応に対しての治療効果を検討することを予定している。現時点での問題点として、症例数が少ないために、レクチンマイクロアレイで出てきた結果に対する統計的な有意差をつけることが難しいことが予想される。この問題点を解決するために、他施設の移植希望患者の紹介を要請することで、症例数を増やす。平成28.29年に入手したGroup1、Group 2のサンプルを高密度レクチンマイクロアレイを用いて網羅的な糖鎖修飾解析を行うことを予定している。この結果を、筑波大学磯田研究室にGeneSpring&reg;を用いて解析する。現時点では拒絶反応を呈した症例がないため、移植前後での糖鎖変化についての解析を行う。引き続き、拒絶反応を呈した症例があった場合には、そのサンプルを元に、高密度レクチンマイクロアレイで明らかとした糖鎖修飾の発現プロファイリングからスクリーニング診断および拒絶反応ハイリスク診断に有用と思われるレクチンを数個に厳選する。平成29年度も腎移植を行う予定であり、今後も症例が増える予定である。さらなる患者検体サンプルは採取および保存をする。
放射線被ばくによる構造異常発生率の推定法開発

欠失を主とした構造異常を数えることで放射線影響を測定しようとする研究である。放射線被ばくにより50ヶ所/グレイ照射(これまでの常識的推定値)の二本鎖切断が生じるのに対し,放射線誘発性の二本鎖切断はいくつ残るのか不明である。本研究では,この50ヶ所/グレイ照射の修復エラー(>比較的大きな欠失として細胞に刻印されると推察している)を検出したい,というのが基本構想である。培養による人工的構造異常導入が排除できるかが研究上の制約となる。本研究により,構造異常を放射線被ばく指標と出来るか,実際に構造異常がどれくらいの率で惹起されるか・残るかを正確に把握しようとする研究である。
生体特異的認識機能を有するペプチド系材料の開発

本研究では,バイオシグナル分子,特に細胞接着ペプチドや細胞増殖因子を合成高分子膜上に固定化して,高分子膜上への細胞の接着と増殖による組織形成を導き,生体適合性材料や細胞分離用デバイスの開発を目的とした.細胞接着ペプチド, Arg-Glg-Asp-Ser(RGDS),を固定化したシリコーン膜を合成した.RGDS固定化シリコーン膜への繊維芽細胞の接着数は, RGDSの固定化量とともに増加し, 4.24×10^<-6>mol/cm^2の固定化量で(2.66±0.25)×10^4個/cm^2の接着数が得られた.細胞接着蛋白質フィブロネクチンを吸着させた膜の場合,細胞接着数は(2.20±0.3)×10^4個/cm^2であった.フィブロネクチン1分子中にRGDS配列は1個所だけであるから,膜表面のRGDS量は0.79×10^<-8>1.86×10^<-7>mol/cm^2となる.この結果は,フィブロネクチンの1/10から1/100の細胞接着活性をもつRGDSを, 10100倍モルという高密度に固定化することにより,接着蛋白質と同程度の機能を獲得したことを示すものである.ポリエチレンテレフタレート(PET)やポリメタクリル酸メチル(PMMA)膜の表面を加水分離,クエン酸処理として,ウシインシュリン,ヒト上皮細胞成長因子(EGF),マウストランスフェリンなどの細胞増殖因子を固定化した.マウス繊維芽細胞STOを37°Cで48h培養したところ,インシュリン固定化PET膜上では,無血清培地の場合でも細胞成長の促進が観測され,トランスフェリンやEGFを加えると, 2倍近くまで細胞増殖が促進された.インシュリンをPMMA膜に固定化した場合には, PET膜に固定化した場合よりさらに大きい効果が得られた.トランスフェリン固定化PET膜も同様に細胞成長促進作用を示した.これらの結果は,増殖因子が固定化によりendocytosisを受けず,分解されないまま情報を伝達しつづける結果,非固定化因子が分解されて, down-regulationを受ける場合に比べ,大きい増殖促進促進効果をもつことを示したものと考えられる.本研究では,バイオシグナル分子,特に細胞接着ペプチドや細胞増殖因子を合成高分子膜上に固定化して,高分子膜上への細胞の接着と増殖による組織形成を導き,生体適合性材料や細胞分離用デバイスの開発を目的とした.細胞接着ペプチド, Arg-Glg-Asp-Ser(RGDS),を固定化したシリコーン膜を合成した.RGDS固定化シリコーン膜への繊維芽細胞の接着数は, RGDSの固定化量とともに増加し, 4.24×10^<-6>mol/cm^2の固定化量で(2.66±0.25)×10^4個/cm^2の接着数が得られた.細胞接着蛋白質フィブロネクチンを吸着させた膜の場合,細胞接着数は(2.20±0.3)×10^4個/cm^2であった.フィブロネクチン1分子中にRGDS配列は1個所だけであるから,膜表面のRGDS量は0.79×10^<-8>1.86×10^<-7>mol/cm^2となる.この結果は,フィブロネクチンの1/10から1/100の細胞接着活性をもつRGDSを, 10100倍モルという高密度に固定化することにより,接着蛋白質と同程度の機能を獲得したことを示すものである.ポリエチレンテレフタレート(PET)やポリメタクリル酸メチル(PMMA)膜の表面を加水分離,クエン酸処理として,ウシインシュリン,ヒト上皮細胞成長因子(EGF),マウストランスフェリンなどの細胞増殖因子を固定化した.マウス繊維芽細胞STOを37°Cで48h培養したところ,インシュリン固定化PET膜上では,無血清培地の場合でも細胞成長の促進が観測され,トランスフェリンやEGFを加えると, 2倍近くまで細胞増殖が促進された.インシュリンをPMMA膜に固定化した場合には, PET膜に固定化した場合よりさらに大きい効果が得られた.トランスフェリン固定化PET膜も同様に細胞成長促進作用を示した.これらの結果は,増殖因子が固定化によりendocytosisを受けず,分解されないまま情報を伝達しつづける結果,非固定化因子が分解されて, down-regulationを受ける場合に比べ,大きい増殖促進促進効果をもつことを示したものと考えられる.
PMCA法を用いた視床型クロイツフェルト・ヤコブ病の病態解明に関する研究

我々はヒト胎児腎細胞由来浮遊293細胞に大量発現させたヒト型リコンビナントPrPcを基質として用いるcell-PMCA (cPMCA)法により、孤発性クロイツフェルト・ヤコブ病(sCJD)のうち、視床型クロイツフェルト・ヤコブ病(sCJD-MM2T)のプリオンを高効率に増幅することに成功した。そこでこれまでsCJD-MM2Tについて解析することが困難であった解明すべき点の1つとして家族性プリオン病である致死性家族性不眠症(FFI)との関連について解析した。sCJD-MM2Tは致死性孤発性不眠症と呼ばれるなど非典型的かつFFIとよく似た病理像を示すため、cPMCA法における増幅プロパティの比較によってFFIプリオンと同一のプリオンであることを明らかにすることが目標の1つであった。この目標を達成するに当たり、まずFFIには病態の全く異なる2つのタイプがあることに着目した。当研究室におけるノックインマウスを用いた感染実験の結果により、この2つのタイプのFFIが全く異なる感染性を持つことが明らかとなっていたことから、cPMCA法による増幅効率の比較を行った。その結果、その増幅効率FFIのタイプはそれぞれ全く異なっており、増幅が可能であるのは病理学的に下オリーブ核に顕著な病変を持つFFIプリオンのみであることが明らかとなった。この結果をもとにsCJD-MM2T症例についてもcPMCA法による増幅を行ったところ、FFI同様下オリーブ核病変を有するsCJD-MM2T症例が顕著に増幅された。一方そのほかのsCJDプリオンは増幅されず、結果的に下オリーブ核病変を引き起こすプリオンのみが特異的に増幅されることが明らかとなった。予定していたFFIおよびsCJD-MM2T症例についてはすべての解析が終了し、下オリーブ核病変の有無がPMCAにおける増幅効率を決定する重要な因子であることが明らかとなった。本年度はそのほか我々の保有するCJD症例150例程度の増幅実験も並行して行ってきた。今後これらの症例はまだ増える予定である。その一方で、sCJDにおいてMM1やMM2CとMM2Tが併発している症例に関しての解析も進行しており、複数のプリオンが混在している状況下であっても、下オリーブ核病変を引き起こすsCJD-MM2Tプリオンが特異的に増幅される結果を得ている。また、FFIとsCJD-MM2Tプリオンには感染性、増幅効率の異なるプリオンが複数存在している可能性が示唆されるなど、当初予定していた以上に解析は進捗している。今後は下オリーブ核病変に着目し、孤発性のみならず遺伝性のMM2プリオンについてもcPMCA法による増幅を行い、下オリーブ核病変を引き起こすプリオンが広く併発している可能性について解析する。並行して、FFIおよびsCJD-MM2Tプリオンの脳内分布を明らかにするため、cPMCA法による定量的評価法の確立を目指す。現時点でFFIおよびMM2Tプリオンは、100万倍希釈した患者脳からもPMCA法で増幅、検出が可能であり、脳の部位によってその検出現界には差があることが明らかになりつつある。下オリーブ核や視床の病変が典型的なFFIおよびsCJD-MM2Tでは特徴的であるが、これまではその異常プリオンの蓄積量の少なさからウェスタンブロッティングでも検出はできなかった。今回PMCA法による高効率な増幅が可能となったことにより、脳の複数部位が入手できるFFIおよびsCJD-MM2T症例について、各部位ごとの検出限界の違いから異常プリオンタンパク質の量を比較できるかどうか検討する。現時点で3-4例、複数部位を使用できる症例を確認したので、順次これらの患者脳を用いて解析を進める。

本年度はそのほか我々の保有するCJD症例150例程度の増幅実験も並行して行ってきた。今後これらの症例はまだ増える予定である。その一方で、sCJDにおいてMM1やMM2CとMM2Tが併発している症例に関しての解析も進行しており、複数のプリオンが混在している状況下であっても、下オリーブ核病変を引き起こすsCJD-MM2Tプリオンが特異的に増幅される結果を得ている。また、FFIとsCJD-MM2Tプリオンには感染性、増幅効率の異なるプリオンが複数存在している可能性が示唆されるなど、当初予定していた以上に解析は進捗している。今後は下オリーブ核病変に着目し、孤発性のみならず遺伝性のMM2プリオンについてもcPMCA法による増幅を行い、下オリーブ核病変を引き起こすプリオンが広く併発している可能性について解析する。並行して、FFIおよびsCJD-MM2Tプリオンの脳内分布を明らかにするため、cPMCA法による定量的評価法の確立を目指す。現時点でFFIおよびMM2Tプリオンは、100万倍希釈した患者脳からもPMCA法で増幅、検出が可能であり、脳の部位によってその検出現界には差があることが明らかになりつつある。下オリーブ核や視床の病変が典型的なFFIおよびsCJD-MM2Tでは特徴的であるが、これまではその異常プリオンの蓄積量の少なさからウェスタンブロッティングでも検出はできなかった。今回PMCA法による高効率な増幅が可能となったことにより、脳の複数部位が入手できるFFIおよびsCJD-MM2T症例について、各部位ごとの検出限界の違いから異常プリオンタンパク質の量を比較できるかどうか検討する。現時点で3-4例、複数部位を使用できる症例を確認したので、順次これらの患者脳を用いて解析を進める。
フリードリヒ・シュレーゲルのロマン主義詩学思想における模倣概念の総合的探求

本研究では、ドイツの詩学・哲学思想の研究史において等閑視され続けてきた、ドイツロマン主義詩学と模倣概念との積極的な関係を究明するために、初期ロマン派の思想家フリードリヒ・シュレーゲルの批評理論の解明に取り組み、この理論の中に模倣の構造とモチーフが存在していることを明らかにした。その過程で、シュレーゲルの模倣思想の意義が異文化理解的な観点から検討され、さらに、彼の汎神論的な世界観と個体概念を基礎とした構想「文献学の哲学」の内容が探求された。また、彼の模倣的な批評の前提となっている歴史哲学の中で大きな役割を果たしている機知の概念の意味についても解明された。本研究における2016年度の具体的な成果としては、まず、日本独文学会の秋季研究発表会(於関西大学)での「汎神論と文献学ーフリードリヒ・シュレーゲルの個体の概念について」ならびに、ゲーテ自然科学の集いの年次総会(於慶應義塾大学)での「フリードリヒ・シュレーゲルの機知の概念について」という二つの研究発表が挙げられる。前者は、シュレーゲルの詩学思想の中にある模倣概念を直接扱ったものではないが、この模倣のモチーフの前提となっている彼の汎神論的世界観と芸術作品創出の理論との関係を考察した。また、後者で扱った機知の概念は、シュレーゲルの詩学の中で、その歴史哲学的な課題を実現する最も重要な能力であるばかりでなく、模倣における他者への移入のために不可欠な能力となっており、この移入における神秘主義的な変容について考察された。なお、後者の発表の内容は既に論文として完成され、雑誌『モルフォロギア』へと投稿し、現在、掲載の可否に関する審査を受けている最中である。加えて、研究代表者は以前より初期シュレーゲルの古代模倣の方法について異文化理解の観点からの考察を進めていたが、すでに論文としての執筆を終え、2017年度中に宮崎大学教育学部の紀要論文集に掲載される予定である。本研究助成は、批判版シュレーゲル全集の未所有の巻を初めとした、ロマン主義や周辺領域、模倣概念等に関わる文献の入手を可能とした。そのことによってヨーロッパ思想史の中にシュレーゲルの模倣思想を位置づけるための情報を獲得し、これまで以上に総合的な考察を進めることができた。また各学会での交流によって複数の研究者と新たな知己を得ることができ、こうした交流の中で近隣領域を専門とする研究者とのシンポジウムの計画が持ち上がり、現在、2018年度の開催に向けて準備が進んでいる。本研究に関係する資料の入手が進み、シュレーゲル詩学における模倣概念の探求を進めるために必要な環境が整いつつある。また、複数の研究発表会に参加し、研究者と交流することで関心領域を広げることができ、いくつかの新しい観点が獲得された。こうした状況の中で、予定されていた研究発表に加えて、さらにもう一つの研究発表を行うことが可能となった。前者は2016年度中に論文化して公表する予定であったが、当初より遅れて2017年度中に公表される予定である。さらにもう一篇の論文の執筆が当初の予定より早く進み、紀要論文として2017年度中に公表されることが確定している。2017年度の本研究の成果の一部は、前年度の発表等に基づいて執筆された「ドイツロマン主義における異文化理解の方法ー初期フリードリヒ・シュレーゲルが構想する古代模倣について」と「機知の思想家としてのフリードリヒ・シュレーゲルーロマン主義詩学における歴史哲学、そしてコスモゴニーとしての批評」という二つの論文として結実した。前者の論文では、初期シュレーゲルの古典古代研究が、近代人の他者としての古代ギリシア人の理解を目指したものであり、近代人がこの理解に基づいてギリシア人の精神的本質を習得することを模倣と呼ぶことで詩学的な模倣の新機軸が打ち出されているばかりでなく、この模倣の方法が優れて異文化理解の方法を示している点を明らかにした。後者の論文では、前年度に行ったゲーテ自然科学の集い年次総会での発表の内容に基づいて、シュレーゲルの機知概念が、喜劇的性格や笑いをもたらす修辞的表現という既存の内容ばかりでなく、近代そのものを改変するという彼の歴史哲学的構想に結び付いていることを明らかにし、この点を機知の認識機能に焦点を当てて分析した。2017年9月のドイツ出張ではマールバッハのドイツ文学資料館、ベルリンおよびフランクフルトの国立図書館にてシュレーゲルのロマン主義詩学思想とその周辺領域、そして模倣・ミメーシス全般に関わる資料を収集し、複写資料として手に入れた。滞在中にフランクフルトのゲーテハウスで開催されていた《ヴィルヘルム・シュレーゲル展》を観覧し、資料を収集したのに加えて、この展覧会のこけら落しとして同会場で開催された国際コロキウム《自然哲学と自然科学のコンテクストにおけるロマン主義の芸術》に参加し、今後の研究を進めるために有益な示唆と情報を得た。

前年度までの研究に基づいて、今後はシュレーゲルの模倣概念を思想史の中に位置づけることに一つの重点を置く。まずは、アリストテレスの『詩学』におけるミメーシスの概念の内容とシュレーゲルのロマン主義詩学との比較的探求を進め、その成果を学会発表において公表する。同時に、海外出張等を含む形での資料の収集を進めながら、最も重要な活動として文献の読解を地道に継続する。さらに、学会や研究会の参加を通じて本研究に関連する情報や新たな視点の獲得に結び付く示唆や刺激を得る機会を積極的に持つように努める。29年度が最終年度であるため、記入しない。ヨーロッパ文学29年度が最終年度であるため、記入しない。
Tリンパ球ホーミング不全における免疫応答能の解析

pltマウスはマウス肝炎ウイルスに対する感受性が野生型マウスに比して著明に高く、50%致死量は野生型の約2000pfuに対して、pltでは約5pfuであった。肝臓と脾臓のウイルス量を感染5日後と7日後に測定した結果、pltマウスでは著明に多かった。肝臓を組織学的に観察したところ、感染5日後では炎症像が両者で同程度に観察されたが、7日後では、野生型は治癒されているのに対して、pltマウスでは肝臓全体に炎症像が観察された。血清中の肝炎マーカーGOT・GPT量も同様に、感染5日後では両者で高値を示したが、7日後では野生型は減少したにも拘らず、pltは高値を示した。以上の結果から、pltマウスではウイルスを効果的に排除できないために肝炎が進行し、死に至ると考えられた。リステリアを感染させた場合は、両マウスで明らかな差がなく、pltマウスの感染防御不全はウイルスに対してのみである可能性が示唆された。マウスにマウス乳癌ウイルス(FM株)を投与し、スーパー抗原特異的なT細胞レパートリーの陽性率を経時的に測定した。Vβ8.2陽性T細胞は、野生型・pltマウス共に増加した後、野生型マウスでは4日目をピークに徐々に減少したが、pltマウスでは減少せず、徐々に増加し続けた。ミエリン塩基性蛋白(MBP)で免疫して脳脊髄膜炎の発症を観察した結果、pltマウスでは発症率が低く、症状も軽減されていた。pltマウスのT細胞は、MBPや同じ蛋白抗原である卵白アルブミンに反応して増殖すると共に、IL-2,IL-4,IFN-γおよびTNF-β等のサイトカインを産生した。特に、脳脊髄膜炎発症に関与しているといわれるIFN-γとTNFの産生量は野生型マウスよりも多かった。以上の結果は、pltマウスではT細胞はMBPを抗原として認識して反応できるにも拘らず、病気の発症は抑制されていることを示しており、反応性T細胞が病巣へ浸潤できないなどの可能性が考えられた。BALB/cにplt遺伝子を導入したBALB/c-plt/pltコンジェニックマウスを作成した。以下の実験には、戻し交配が7代以上経過したものを用いた。2.各リンパ組織のT細胞亜集団の解析pltマウスのリンパ節及びパイエル板では、L-selectin陽性T細胞率が少なく、末梢血及び脾臓では逆に多かった。一方、CD44陽性率はpltマウスのリンパ節で多かった。この結果から、pltマウスのリンパ組織へはナイーブT細胞がホ-ミング出来ないことが示唆された。3.抗原に対する免疫応答能の検討(1)「抗原に対するT細胞の応答能」マウスをOVAで皮下及びfoot padに免疫した後、所属リンパ節中のT細胞の反応をin vitroで測定した。増殖反応及びIL-4,IFN-g及びTNF産生能を測定した。pltのT細胞はOVAに反応して増殖し、かつこれらのサイトカインを産生できた。しかし、in vitroでの刺激後24時間で非常に強い産生が見られたが、72時間後には急激な低下が観察され、T細胞の反応性に異常があることが示唆された。(2)「抗原提供能」脾臓由来のB細胞或いはマクロファージ/樹状細胞にOVA抗原をパルスし、OVA特異的T細胞クローンの反応を測定した結果、plt由来の抗原提供細胞の機能は正常マウスの場合と同程度であった。(3)「抗体産生能」OVA抗原に対するIgM及びIgG抗体産生量を測定した。pltマウスは、抗OVA抗体を産生出来たが、産生量は正常マウスに比して著明に低下していた。(4)「炎症反応」SRBCに対する遅発型炎症反応をfoot padの肥厚によって測定した。また、腹腔内にthioglycollateを投与し、浸潤マクロファージ及び好中球数を経時的に計測した。これらの実験では有意差は得られず、plt遺伝子野生型産物が炎症反応における細胞浸潤には必須ではないことが示唆された。

ミエリン塩基性蛋白(MBP)で免疫して脳脊髄膜炎の発症を観察した結果、pltマウスでは発症率が低く、症状も軽減されていた。pltマウスのT細胞は、MBPや同じ蛋白抗原である卵白アルブミンに反応して増殖すると共に、IL-2,IL-4,IFN-γおよびTNF-β等のサイトカインを産生した。特に、脳脊髄膜炎発症に関与しているといわれるIFN-γとTNFの産生量は野生型マウスよりも多かった。以上の結果は、pltマウスではT細胞はMBPを抗原として認識して反応できるにも拘らず、病気の発症は抑制されていることを示しており、反応性T細胞が病巣へ浸潤できないなどの可能性が考えられた。