hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
彫刻におけるデジタル立体造形の可能性と新たな表現法の研究と応用

芸術分野における立体表現の視点から、現代の「彫刻の美」について考察を行ない、コンピュータを活用した3Dデータの美術研究活用を主に彫刻表現の可能性についてアナログとデジタル両面の造形研究を行なった。研究1、本校大学美術館に収蔵資料を題材とし、イタリア人彫刻家ラクーザの彫刻作品「日本婦人像」(重要文化財)についてコンピュータと3Dスキャナーによるデータ研究を行う。また、明治時代とヨーロッパにおける造形表現の特性を現地調査によって探り、日本におけるラクーザ彫刻とイタリアにおける表現の差異を明確にし、「日本婦人像」を3D造形システムによって欠損部分を復元する実験を行なった。研究2、コンピュータ造形システムによる各入力プロセスの造形表現を研究として、数字入力と感覚的手動入力、実素材制作のスキャナーデータ入力など立体出力までの新しい制作方法と表現関係を探究し、これまでの制作法ではできなかったフォルムを研究3のシステム応用により彫刻表現における新たな可能性を研究した。研究3、セラミック鋳造研究として、研究1、2の実験出力したワックス造形からブロンズ彫刻としての鋳造の効率を高める研究を行なった。セラミックブロンズ鋳造の応用研究として、コンピュータから出力するデジタルフォルムをワックスにより立体出力し、ワックス造形からブロンズ彫刻としての鋳造効率を高める研究を行い、セラミック鋳造と彫刻の関係性について可能性を探る研究を行なった。研究目的1)コンピュータ造形システムによる各入力プロセスの造形表現を研究し、数字入力と感覚的手動入力、実素材制作のスキャナーデータ入力など立体出力までの新しい制作方法と表現関係を探究し、教育システムとしての応用と彫刻表現における可能性を探る研究を行う。研究概要コンピュータにおける造形システムによる各入力プロセスの造形表現を研究し、感覚を生かした手動入力と数字入力実験を行い、仮想空間内で制作される表現法について、実際の彫刻制作を進めるプロセスにおけるアナログ的な造形表現とデジタル造形表現と対比して研究をした。スケッチなどの初期段階におけるイメージ作成や素材に対する計画や展開など立体造形制作のための流れを3Dデジタル造形表現による方法とクロスし、新しい表現展開の可能性について研究しデータを作成した。2)考古収蔵品のデジタルデータ化における彫刻・修復応用研究。本校大学美術館に収蔵されている資料から明治時代に制作された作品についての彫刻研究を行う。明治初期イタリア人彫刻家ラクーザの彫刻(重要文化財)日本婦人像について造形プロセスと空間概念について研究を行う。また、アーカイブとしての立体芸術作品の可能性を探る。実素材制作による彫刻作品から非接点によるレンジファインダー方式のスキャナーデータ入力によって作品データを構築する。・大学美術館収蔵品の近代彫刻の代表的作品「日本婦人像」(重要文化財)からのデジタルデータの作成3)、2)の研究に重ね大学美術館収蔵品の修復応用実験研究とデータによって得られる彫刻の新たな考察について研究をした。明治初期イタリア人彫刻家ラクーザの彫刻(重要文化財)日本婦人像を大学美術館から借用し(大学美術館内)、立体デジタルデータを取得し、石膏原形から当時の造形プロセスと空間概念について研究を行う。また、美術史的考察を加え、彫刻家の視点から表現と時代について研究する事で、日本における彫刻史の新しいラクーザ彫刻について探求する。研究1本校大学美術館に収蔵資料を題材とし、イタリア人彫刻家ラクーザの彫刻作品「日本婦人像」(重要文化財)についてコンピュータと3Dスキャナーによるデータ研究を行う。また、明治時代とヨーロッパにおける造形表現の特性を現地調査によって探り、日本におけるラクーザ彫刻とイタリアにおける表現の差異を明確にし、「日本婦人像」を3D造形システムによって欠損部分を復元する実験を行う。研究2コンピュータ造形システムによる各入力プロセスの造形表現を研究として、数字入力と感覚的手動入力、実素材制作のスキャナーデータ入力など立体出力までの新しい制作方法と表現関係を探究し、これまでの制作法ではできなかったフォルムを研究3のシステム応用により彫刻表現における新たな可能性を研究した。研究3セラミック鋳造研究として、研究1、2の実験出力したワックス造形からブロンズ彫刻としての鋳造の効率を高める研究を行なった。
ライブイメージングと「くっつきアッセイ」～心皮合着過程の新しい解析手法の開発

花を咲かせる植物群である被子植物では、心皮と呼ばれる器官が合着(がっちゃく)により融合し、袋状の雌しべを形成する。袋状の雌しべは内部にある種子を保護するために優れた構造であり、被子植物の生存と生殖に有利にはたらく特徴であると考えられる。本研究では、この心皮合着の分子メカニズムを明らかにするために、モデル植物であるシロイヌナズナを用いて合着部位を観察するための基本的な手法を確立した。また合着する部位の細胞の性質の詳細を明らかにした。心皮の接着のアッセイ法を確立するため、FAA固定、エタノール酢酸固定、および無固定の三種類の条件で調整した野生型サンプルについて臨界点乾燥を行い、金属蒸着処理後、Quanta 250電子顕微鏡の高真空モードを用いて観察を行ったところ、接触部の細胞が互いにひっばられたような形状を示した。また、金属蒸着処理を行わないサンプルでも同様の画像が得られたことから、この像は蒸着された金属によるアーティファクトではないことが明らかになった。さらに、この引っ張られた形状が細胞壁の何らかの成分を介した相互作用に夜ものかどうかを明らかにするため、固定前に心皮をPectolyase (Y-23)で処理した。処理後のサンプルと未処理のサンプルそれぞれについて臨界点乾燥・金属蒸着を行って高真空モードで観察したところ、処理したサンプルでは細胞同士がひっぱっられるような像がほとんど見られなくなった。一方、細胞同士が引っ張り合う形状は、本来の接着がおこらないがく片同士や、茎頂分裂組織とがく片の間、さらに心皮と雄蘂原基の間でしばしば観察され、その程度は若い組織であるほど大きくなっていた。このことは、細胞同士の引っ張りあう形状が、固定操作以後のどこかの段階で生じた可能性を示している。さらに心皮融合部のライブイメージングを行うため、pATML1::NLS:3xEGFPおよびpATML1::CYCB1-N::NLS:3xEGFPの二種類のマーカーを用い、多光子レーザー顕微鏡(Leica SP5)を用いてイメージングを行った結果、接触部の良好な蛍光画像を得ることに成功した。心皮の接着時における表皮細胞の性質の変化を明らかにするため、表皮の運命決定を支配する転写因子ATML1の発現解析を行った。ATML1の転写活性およびタンパク質の蓄積をモニターする二種類のレポーター遺伝子を含む形質転換体を用い、それぞれの植物体から切除した雌しべを寒天で包埋して観察を行ったところ、いずれの場合でも良好な蛍光画像が得られた。雌しべの接触部と非接触部でシグナルを比較したところ、転写活性のレポーターではシグナルに違いは見られなかったが、タンパク質の蓄積レベルをモニターするレポーターでは、接触部でのシグナルが有意に低下することが分かった。また、ATML1のターゲット遺伝子であるPDF1の発現を解析したところ、やはり接触部で発現が低下することが分かった。以上から、心皮の接着には転写因子ATML1の発現低下が伴うことが明らかになった。さらに接触部位の微細構造と細胞壁の組成についても解析を行った。組織切片を作製して電子線トモグラフィー解析を行ったところ、接触部の細胞表面にはクチクラ様の構造と中葉に類似した構造がともに観察された。クチクラの染色剤であるオーラミンを用いた染色から、接触部にクチクラが存在することが支持された。一般にクチクラは表皮細胞どうしの接着を防ぐ役割を持つことから、心皮の接着にはクチクラの消失または変成が伴う可能性が示唆された。一方、中葉は隣り合う細胞の間に存在するペクチンに富んだ構造で、細胞どうしの接着を促進すると考えられている。そこで、ペクチンを特異的に認識する二種のモノクローナル抗体を用いて免疫染色行ったところ、いずれの抗体でも接触面においてシグナルが観察された。このことは、心皮の接着においてもペクチンを介した細胞接着が関与する可能性を示している。当初予定していた臨界点乾燥法による心皮接着判定法(くっつきアッセイ)の確立に関しては、計画策定当初は想定していなかったアーティファクトが判明したため、この方法では判定できないことが分かった。そこで、実験計画を変更して、接着部位の細胞壁組成の解析を行うことで、心皮接着に伴う細胞の性質変化を明らかにする実験を進めることにした。その結果、表皮細胞特異的遺伝子の発現パターンおよび細胞壁の特徴が明らかとなり、期待以上の進展が見られた。心皮は被子植物に特有の生殖器官であり、これらが互いに合着することで袋状に閉じた一本の雌しべが形成される。本研究では心皮合着の制御機構を明らかにすることを目的として、シロイヌナズナのライブイメージング技術・レーザーアブレーションによる細胞間相互作用解析・心皮合着のアッセイ系の確立を目指した。ライブイメージング技術の確立のため、表皮細胞特異的マーカー遺伝子であるATML1-GFPを用いて、多光子レーザー顕微鏡Leica SP5を用いて観察を行った結果、心皮接触部の良好な蛍光画像を得ることに成功した。そして心皮の接触に伴って、表皮特異的なATML1の発現がタンパク質レベルで減少することを明らかにすることができた。次に臨界点乾燥法と走査型電子顕微鏡を組み合わせることにより心皮表面の接着の程度を評価する「くっつきアッセイ法」の確立を試みたが、表面の細胞壁の接着の有無に関わらずに引っ張り構造が観察されることが明らかになり、この方法では接着の評価が困難であることが分かった。

そこで方針を変更し、走査透過型顕微鏡(STEM)と電子線トモグラフィーを組み合わせた方法による接着部位の微細構造の解析を行ったところ、心皮の接触部位における細胞壁表面には接着を防ぐクチクラと、接着を促進するペクチンの両方が存在することが示唆された。これらの成分の存在は、特異的抗体を用いた免疫染色法および組織染色剤により指示された。以上から、心皮の接着に関わることが予想される細胞壁成分を明らかにすることができた。今後は表皮特異的転写因子ATML1の活性や、クチクラおよびペクチンの蓄積を人為的に操作することで、心皮接着過程におけるこれらの因子の役割を明らかにできると期待する。花を咲かせる植物群である被子植物では、心皮と呼ばれる器官が合着(がっちゃく)により融合し、袋状の雌しべを形成する。袋状の雌しべは内部にある種子を保護するために優れた構造であり、被子植物の生存と生殖に有利にはたらく特徴であると考えられる。本研究では、この心皮合着の分子メカニズムを明らかにするために、モデル植物であるシロイヌナズナを用いて合着部位を観察するための基本的な手法を確立した。また合着する部位の細胞の性質の詳細を明らかにした。くっつきアッセイについて細胞同士が引っ張られるような像が、Pectolyase処理によって消失することを示すことで、このような細胞の形状が細胞壁の成分に依存しておこることを明らかに出来、実際に細胞の接着の有無のアッセイとして利用できる見通しが開けた。また、pATML1::NLS:3xEGFPのマーカーを用いて、心皮接着部位の良好な共焦点画像を得ることが出来た。今後は接着の分子メカニズムを明らかにするため、クチクラやペクチンに関連した突然変異体の表現型解析を行う。また、接着に関わる分子を同定するために、遺伝学的スクリーニングや、接着部位と非接着部位のトランスクリプトームを比較する研究も重要だと考えられる。さらに、接着が起こらない突然変異体について、表皮細胞表面のATML1発現解析、細胞表面の微細構造の解析、細胞壁成分の解析を行うことも有効であろう。植物発生学くっつきアッセイにおいて、心皮の接触部以外での接着を抑制するため、これまでと異なる固定方法(グルタルアルデヒドーオスミウム酸による固定)を検討する。また、蛍光染色による生組織を用いたくっつきアッセイ法も新に試みる。臨界点乾燥法による心皮接着判定法の確立を進めていたが、実験計画を作成した当初は想定していなかったアーティファクトが判明したため、この方法では接着が判定できないことがわかった。そこで計画を変更し、接着部位の細胞壁組成と遺伝子発現の解析を行うことで、心皮接着に伴う細胞の性質変化を明らかにする実験を進めることにした。これにより、研究遂行に想定以上に時間がかかった。追加実験(微細構造の解析・突然変態の表現型解析)のための試薬と消耗品、植物育成用の消耗品、学会発表の旅費、論文投稿料として使用する。
ヒトiPS細胞を用いた気管軟骨再生のための基盤技術開発

ヒトiPS細胞由来細胞移植による軟骨組織再生を確認し、上気道臓器の軟骨再建はもとより他臓器における軟骨組織再生にも応用することで、革新的な治療法開発を図る。1ヒトiPS細胞から神経堤細胞、間葉系幹細胞を介して軟骨細胞に分化誘導する至適条件を検討する。2ラットを用いて気管内腔粘膜を温存した軟骨のみの欠損モデルを作製する。3欠損部へ分化誘導した細胞を移植し、生着や軟骨組織再生効果を確認する。
デフォルト危機下のユーロ圏での金融政策と財政政策:内生的デフォルトモデルでの検討

インフレ抑制政策はデフォルトの長期化を通じてインフレ率やGDPギャップの変動を増幅させ厚生コストを高める一方、危険資産と安全資産の利子率を定常状態の値で一致させる政策はデフォルトを速やかに収束させると同時にインフレ率やGDPギャップの変動を抑制し厚生コストを減じる、という結果が得られた。小国においては税収減をもたらすようなショックに際して一時的に公債残高を減少させる政策はデフォルトを長期化させインフレ率やGDPギャップの変動を高め厚生コストを高める一方、一時的に公債残高を上昇させる政策はデフォルトを生じさせる一方インフレ率やGDPギャップの変動を抑制し厚生コストを減じる、という結果が得られた。De Paoli (2006)を共通通貨圏の仮定に拡張しさらに内生的デフォルトの可能性を導入したモデルを導出した上で共通通貨圏における最適金融政策を理論的に分析した。つまり、De Paoli (2006)のモデルを2国モデルに変形し、かつ共通通貨圏の仮定に拡張した。ここで両国の政府の予算制約には横断条件が課され、一方の国にはデフォルトの可能性が存在しないもののもう一方の国にはデフォルトの可能性が存在すると仮定した。このデフォルトの可能性が存在する国こそが内生的デフォルトのメカニズムが導入される国である。中央銀行は線形化されたモデルを制約として効用関数の2次近似より得られた損失関数を最小化、つまり厚生コストを最小化するように金融政策を運営することを仮定した。モデルの陽表的な解析解を得ることはきわめて困難なため高性能PCおよび行列演算ソフトを用いたSensitivity Analysisが行った。次にFerrero (2009)に従い(近似的)最適金融政策ルールを合理的期待均衡を満たす範囲内で高性能PCおよび行列演算ソフトを用いてグリッドサーチで求めた。最後にグリッドサーチで得られた最適金融政策ルール、テーラールールおよび固定利子率ルールそれぞれについてSensitivity Analysisを行い、それぞれの政策がもたらすマクロ経済変数の動学の特徴を確認した上で厚生コストを効用関数の2次近似から得られた損失関数に従い計算した。ここで、最適金融・財政政策ルールの下ではインフレ率、GDPギャップの変動が小さいことおよびデフォルトが生じるものの1期もしくは短期で収束することおよび厚生コストがきわめて小さいことを確認した。本年度は平成25年度の理論分析を実証する。まず、平成25年度に構築されたモデルにアドホックな金融政策ルールを導入した上で欧州通貨圏のデータを用いて構造パラメータを高性能PCおよび行列演算ソフトを用い推定した。次いで得られた構造パラメータを所与に平成25年度の理論分析で得られた最適金融政策ルールの下でのマクロ経済変数のパスをシミュレーションで求めそこから推計される厚生コストと、実績値から推計される厚生コストとを比較し、最適金融政策ルールがより低い厚生コストをもたらすことを確認した。推定とシミュレーションはDSGEモデルへのベイズ推定の応用を提案しているSmets and Wouters(2003)、Lubik and Schorfheide (2004)に従った。得られた結果は予測されたものと同一であった。パラメータの推定結果はおおむね先行研究と同一で矛盾する事は無く、シミュレーションの結果得られたマクロ経済変数のボラティリティは理論分析で予測されたものときわめてよく似たものであった。理論分析では設定が根案であった一部のカリブレーションバリューは実証分析で明示されたのは大きな成果で有った。またこの値は理論分析で用いた値と酷似しておりますます理論分析の正当性が高まった。グリッドサーチによって最適政策ルールも明らかにすることができた。最適政策ルールがもたらすマクロ経済変数のボラティリティはシミュレーションと矛盾することはなかった。平成25年度に得られたモデルを小国開放経済およびその他世界で構成される共通通貨圏の仮定に変更したモデルを導出した上で共通通貨圏を構成する小国開放経済の最適財政政策を理論的に分析した。グリッドサーチで得られた最適財政政策ルール、Bohn (1998)の財政政策ルール、固定利子率ルールそれぞれについてSensitivity Analysisを行い、それぞれの政策がもたらすマクロ経済変数の動学の特徴を確認した上で厚生コストを効用関数の2次近似から得られた損失関数に従い計算した。なお、小国開放経済は金融政策を運営することができないが財政政策は運営可能なため危険資産たる自国の国債のオペレーションを通じて固定利子率ルールは実施可能であることに触れておく。最適財政政策ルールと固定利子率ルールのマクロ経済変数の動学的性質が似通っていること、つまりインフレ率、GDPギャップの変動が小さいことおよびデフォルトが生じるものの1期もしくは短期で収束することおよび厚生コストがどちらも似通っておりきわめて小さいこと、Bohn (1998)のルールの下ではインフレ率、GDPギャップの変動が大きくデフォルトが長期にわたり生じることおよび厚生コストが最適金融政策ルールと固定利子率ルールよりも大きいことを確認した。つまり、デフォルトの可能性をはらむ共通通貨圏で採用されるべき財政政策は固定利子率ルールであることを示した。さらに実証分析に取り組んだ。まずアドホックな金融政策ルールを仮定した上でユーロ圏のデータを用いて構造パラメータをベイズ推定し、この構造パラメータを所与に固定利子率ルールおよび平成27年度前半の理論分析で得られた最適金融政策ルールの下でのマクロ経済変数のパスをシミュレーションした。

小国においては税収減をもたらすようなショックに際して一時的に公債残高を減少させる政策はデフォルトを長期化させインフレ率やGDPギャップの変動を高め厚生コストを高める一方、一時的に公債残高を上昇させる政策はデフォルトを生じさせる一方インフレ率やGDPギャップの変動を抑制し厚生コストを減じる、という結果が得られた。パラメータの推定とシミュレーションまで問題なく実行することができた。グリッドサーチによる最適政策ルールのファインディングまで達成したので順調に進展している。国際マクロ経済学引き続きシミュレーションと最適政策ルールの導出に取り組む。最適金融・財政政策ルールの下ではインフレ率、GDPギャップの変動が小さいことおよびデフォルトが生じるものの1期もしくは短期で収束することおよび厚生コストがきわめて小さいことが確認できた。また成果が学術誌において発表された。予定通り本年度は実証分析をすすめていく。
高酸素欠損組成を基軸とする新規イオン導電体の探索

無機固体電解質は固体酸化物形燃料電池の特性向上の鍵を握る.しかし,基礎ではイオン導電機構の解明が,応用では実デバイス特性の研究開発が行われ,デバイス特性の飛躍的な向上を誘起する新物質探索はほとんど顧みられていない.イオン導電率に秀でた理想的な無機固体電解質を実現することが,安全性/コストに優れた低温作動型SOFCの実用化に繋がると期待される.本研究では高酸素欠損組成を基軸としたドーパントを用いないイオン導電体探索を継続して行ない,酸化物イオン導電体に加えて,酸素欠損に水酸基を導入したプロトン導電体の探索を行なう.無機固体電解質は固体酸化物形燃料電池の特性向上の鍵を握る.しかし,基礎ではイオン導電機構の解明が,応用では実デバイス特性の研究開発が行われ,デバイス特性の飛躍的な向上を誘起する新物質探索はほとんど顧みられていない.イオン導電率に秀でた理想的な無機固体電解質を実現することが,安全性/コストに優れた低温作動型SOFCの実用化に繋がると期待される.本研究では高酸素欠損組成を基軸としたドーパントを用いないイオン導電体探索を継続して行ない,酸化物イオン導電体に加えて,酸素欠損に水酸基を導入したプロトン導電体の探索を行なう.
窒素酸化物によって誘発されるDNA塩基損傷の突然変異発生機構とその修復機構の解明

窒素酸化物によって生じるグアニンの脱アミノ生成物であるキサンチン(Xan)、オキザニン(Oxa)、およびその二次的付加生成物のモデル分子であるオキザニン-スペルミン複合体(Oxa-SP)の生物影響を検討するため、これら損傷を部位特異的に含有する基質DNAに対するDNAポリメラーゼの伸長活性および挿入活性を観察した。大腸菌NAポリメラーゼIの損傷鋳型に対する伸長活性はG(1)>Oxa(0.19)>Xan(0.12)>AP(0.088)>Oxa-SP(0.035)であった。挿入塩基対合性は、Xanに対しTMP(16%)、dGMP(14%)、Oxaに対しdTMP(49%)で、Oxa-SPは極めて高い伸長阻害反応を示した(dAMP;13%)。以上の結果から、これらの損傷が高い頻度で複製エラーを誘発し、重篤な生物影響を示すことを明らかにするとともに、その生物影響の表出機構は、各損傷で異なることが分かった。これまで、よく分かっていなかったOxaおよびその付加生成物の修復機構について検討を行った、はじめに大腸菌およびヒト由来の精製DNAグリコシラーゼおよびHeLa核抽出物のOxa除去活性を検討したが、ほとんど活性が認められなかった。そこで精製UvrABC複合体およびHeLa核抽出物のOxa-SP含有基質に対する活性を検討し、ヌクレオチド除去修復(NER)活性が認められた。以上の結果は、Oxaが生体内で速やかに付加体損傷に変換し、NERによって修復されることを示している。本年度は以下のような結果を得た。オキザニン(Oxa)を部位特異的に含むオリゴヌクレオチドを合成し,DNA鎖中のOxaと生体分子との反応機構について検討した。5'端を^<32>Pラベルし,相補鎖とアニールした25merのOxa含有オリゴヌクレオチドを,種々のタンパク質と反応させ,付加体生成をゲルリターデーションアッセイで解析した。その結果,DNAグリコシラーゼであるFpg, hOGG1,AlkA, Endo VIIIで速い付加体形成が認められた(<60min)。一方,核内タンパク質であるヒストンとは遅い反応性を示した(>36h)。これは細胞内においても同様の付加体形成が生じることを示唆しており,実際HeLa細胞粗抽出液との反応でもシフトバンドが出現した。(2)オキザニン付加体損傷の修復機構について(論文投稿中)Oxaのアミンとの反応性を考えると,細胞内では速やかに付加体を形成し,付加体損傷として認識されている可能性がある。そこで,Oxa付加体損傷を含む60merのオリゴヌクレオチドを基質として用いて,付加体損傷の修復に関与するヌクレオチド除去修復(NER)酵素の活性を検討した。付加体形成にはスペルミン(Sp)を用いた。このDNA基質とBacillus cardotenaxのUvrABCを反応させ,PAGE解析により,切断生成物を観察した。その結果,損傷から5'側7ntの部位で切断された生成物が検出され,Oxa-Sp付加体がUvrABCにより除去されることが分かった。その切断効率はフルオレセイン基質の50%であった。またUV照射によりSOS誘導をかけた大腸菌粗抽出液によっても切断バンドが検出された。このことはOxaが生体内で速やかに付加体損傷に変換し,NERにより除去,修復される可能性を示唆している。窒素酸化物によって生じるグアニン脱アミノ生成物に対するDNAポリメラーゼの活性を検討した。大腸菌DNAポリメラーゼIに対し,キサンチン(Xan),オキザニン(Oxa),その二次的付加体損傷(Oxa-SP : Oxa-スペルミン複合体)を含んだオリゴDNAをテンプレートとしてDNA合成反応を行い,伸長活性および塩基対合性を検討した。伸長活性はG(1)>Oxa(0.19)>

Xan(0.12)>AP(0.088)>Oxa-SP(0.035)であった(Gはグアニン,APは脱塩基部位)。挿入塩基対合性は,Xanに対しdTMP(16%),dGMP(14%),Oxaに対しdTMP(49%)で,Oxa-SPは極めて高い伸長阻害反応を示した(dAMP;13%)。以上の結果は,これらの損傷が高い頻度で複製エラーを誘発することを示している。これまでの研究によりグアニン脱アミノ生成物のうちXanはAlkAにより修復されることが分かっているが(Terato et al.,2002),Oxaとその付加体損傷については不明のままであった。まず,大腸菌およびヒト由来の精製DNAグリコシラーゼおよびHeLa核抽出物のOxa除去活性を検討したところ,ほとんど活性が認められなかった。そこで精製UvrABC複合体およびHeLa核抽出物のOxa-SP含有基質に対する活性を検討したところ,ヌクレオチド除去修復(NER)活性が認められた。よって,Oxaは生体内で速やかに付加体損傷に変換し,NERによって修復されることが示唆された。
シリコーンゴムを支持体とするニュートラルキャリヤ型イオン感応膜の高性能化と実用化

ニュートラルキャリヤ型イオンセンサーの感応膜材料としてのシリコーンゴムやゾル-ゲルガラスは、可塑剤不要性や生体適合性など様々な利点を有しながらも、実用化に至っていない。本研究では、ニュートラルキャリヤ型シリコーンゴム(およびゾル-ゲルガラス)感応膜の高性能化を検討し、イオン感応性電界効果トランジスターやイオン選択性電極などのイオンセンサーへの応用、さらに、臨床分析での実用化を目指した。ニュートラルキャリヤとしては、優れたナトリウムイオノフォアであるカリクス[4]アレン誘導体を主に用いた。得られた研究成果は以下のように要約できる。1)感応膜材料であるシリコーンゴムへの分散性(溶解性)を向上させるために、非対称構造とシロキサン残基を含むカリクス[4]アレンイオノフォアを分子設計した。2)長寿命で、低毒性、生体適合性を備えるニュートラルキャリヤ型イオン感応膜を創製するために、カリクサレンイオノフォアを化学結合によりシリコーンゴムに固定化した。3)ニュートラルキャリヤ化学結合型シリコーンゴム型感応膜でしばしば認められる。高い膜インピーダンスや遅い応答などの欠点を軽減するために、カリクサレンイオノフォアを側鎖に有するジメチルシロキサンオリゴマーを設計・合成した。4)バリノマイシンやビス(12-クラウン-4)などの汎用ニュートラルキャリヤをゾル-ゲルガラスに包埋し、イオンセンサー用の感応膜として検討した。5)アルコキシシリル基を持つニュートラルキャリヤを用いて、ニュートラルキャリヤ化学結合型ゾル-ゲルガラス感応膜を創製した。6)本研究で得られたニュートラルキャリヤ型ナトリウムイオンセンサーは、優れたセンサー特性、耐久性および生体適合性を示し、また、血清や尿などの人体液中のナトリウムイオン定量(臨床分析)において、高い実用性を有することが証明された。ニュートラルキャリヤ型イオンセンサーの感応膜材料としてシリコーンゴムは、可塑剤不要や生体適合性など様々な利点を有しながらも、実用化に至っていない。本研究では、ニュートラルキャリヤ型シリコーンゴム感応膜の高性能化を検討し、各種イオンセンサーへの応用、さらに、臨床分析での実用化を目指した。すなわち、ナトリウムイオノフォアを用いるシリコーンゴム膜型ナトリウムイオンセンサー(電解効果トランジスター、イオン電極)について検討した。1)カリクサレンイオノフォアをはじめとする高分散性ナトリウムイオンニュートラルキャリヤの分子設計を試みた。その結果、カリクサレン分子にシロキサン残基を導入することによって、架橋ポリシロキサンであるシリコーンゴムに対する親和性が増大し、このカリクサレンイオノフォアのシリコーンゴム膜への分散性が劇的に向上し、優れた性能のシリコーンゴム膜型ナトリウムイオン電界効果トランジスタを得ることができた。2)シロキサン型カリクサレンイオノフォアを含むシリコーンゴム型感応膜をナトリウムイオン選択性電極に応用した。その結果、本感応膜は、応答感度、応答速度およびイオン選択性において、従来の可塑化ポリ塩化ビニル膜に匹敵するイオン電極性能を示し、生体に優しい毒性の少ないニュートラルキャリヤ型イオン選択性電極として有望であることが判明した。3)ゾル-ゲルガラスを感応膜材料とするニュートラルキャリヤ型イオンセンサーの検討を行った結果、ニュートラルキャリヤをゾル-ゲルガラスに包埋した感応膜は、イオンセンサー用感応膜として機能することが予備実験で確かめられた。現在、その再現性を確かめている。

本研究では、ニュートラルキャリヤ型シリコーンゴム感応膜の高性能化を検討し、各種イオンセンサーへの応用、さらに、臨床分析での実用化を目指した。すなわち、ナトリウムイオノフォアを用いるシリコーンゴム膜型ナトリウムイオンセンサー(電解効果トランジスター、イオン電極)について検討した。1)究極のニュートラルキャリヤ型イオン感応膜である、ニュートラルキャリヤ化学結合型シリコーンゴム膜を作製し、イオンセンサー応答を調べた。すなわち、架橋ポリジメチルシロキサン(シリコーンゴム)合成過程でアルコキシシリル基を有するイオノフォアを共存させせ、イオノフォアを化学結合によりシリコーンゴム膜に固定化した。イオノフォアとしては、16-クラウン-5誘導体ならびにカリクス[4]アレン誘導体を用いた。その結果、イオノフォアが化学結合により固定化されているにも関わらず、優れた電極性能を示した。すなわち、応答感度、イオン選択性および応答速度において、従来のイオノフォア分散型のシリコーンゴム感応膜に匹敵する性能を得た。また、人血清中のナトリウムイオン定量を行い、その高い実用性を確かめた。2)ゾル-ゲルガラスを感応膜材料とするニュートラルキャリヤ型イオンセンサーの検討も行った。ニュートラルキャリヤをゾル-ゲルガラス化学結合して得られるイオン感応膜のイオン感応性電界効果トランジスターへの応用に関して、予備実験を行った結果、本系についても良好なセンサー特性が得られた。ニュートラルキャリヤ型イオンセンサーの感応膜材料としてシリコーンゴムやゾル-ゲルガラスは、可塑剤不要性や生体適合性など様々な利点を有しながらも、実用化に至っていない。本研究では、ニュートラルキャリヤ型シリコーンゴム(およびゾル-ゲルガラス)感応膜の高性能化を検討し、各種イオンセンサーへの応用、さらに、臨床分析での実用化を目指した。1)平成8年度の研究において、ニュートラルキャリヤをシリコーンゴムに化学結合することにより、膜インピーダンスの上昇やイオンセンサー応答速度の低下をもたらしたが、本年度は、ニュートラルキャリヤの化学結合による移動度の低下を軽減するために、ニュートラルキャリヤのシロキサンオリゴマーへの化学結合を行い、シリコーンゴム感応膜への分散を検討した。その結果、このカリクス[4]アレンオリゴマーを含むシリコーンゴム型ナトリウムイオン選択性電極は、広いナトリウムイオン活量範囲においてネルンスト応答を示した。また、応答速度においても、従来の化学結合型イオン選択性電極よりも優れた結果が得られ、血清中のナトリウムイオン定量に有望であることが判明した。2)さらに、シリコーンゴム型イオン感応膜から一歩進んで、ニュートラルキャリヤを含むゾル-ゲルガラス型イオン感応膜のイオンセンサー(ISFET)への応用の可能性も検討した。テトラエトキシシランとジエトキシジメチルシランを出発原料とするゾル-ゲルガラス感応膜に、バリノマイシンやビス(クラウンエーテル)などのニュートラルキャリヤを包埋して得られる感応膜では、従来の可塑化ポリ塩化ビニル感応膜と比べて全く遜色のないセンサー性能が得られ、加えて、優れた生体適合性が認められた。
塩基修飾と次世代シーケンサを用いたクロマチン構造のゲノムワイド単一分子解像度解析

クロマチン動態の理解を深めるには、ヌクレオソームや転写因子とDNAの相互作用イベント間の連鎖・相関を把握することが重要である。そのために、我々はDNA切断ではなくて塩基修飾の導入と次世代シーケンサによるその網羅的検出を基盤とするゲノムワイドクロマチン解析法の開発を試みた。同様の手法NOME-Seqが報告されたが、我々独自のバイサルファイトシーケンス技術PBATの併用によって、実用的で高感度な解析を実現できる目途が立った。クロマチン動態の理解を深めるには、ヌクレオソームや転写因子の結合部位を同定するのみならず、各結合イベント間の関連性(相関)を把握することが重要である。しかし、ヌクレアーゼに依拠する現行の解析法では、各結合部位が独立の結合断片またはフットプリントとして検出されるために、結合イベント間の関連性に関する情報が失われ、集団全体の平均像しか得られない。そこで我々は、出芽酵母をモデル系に、DNA切断ではなくて、塩基修飾の導入(Cのメチル化と脱アミノ化)と次世代シーケンサによるその網羅的検出を基盤とするゲノムワイドクロマチン解析法を開発する。こうして得られるデータの単一分子解像度を活用して、クロマチン構造に関する集団構造や結合イベント間の関連性を把握し、クロマチン動態の本質の理解に迫る新しい研究スタイルの開拓を目指す。M.SssIによるシトシンのメチル化を利用する方法については、基礎条件検討を進めていたが、所期の成果を得るに至らないうちに、類似手法NOME-Seqが報告されてキットも市販されることになった。よって、メチル化部分についてはこのキットを用いることにして、バイサルファイトシーケンスの部分では我々が開発に成功した高感度技術PBATを利用することで、高感度計測を行うことにした。シトシンの脱アミノ化については、AIDの酵母細胞内での発現を行なって、変換率の評価を進めたが所期の成果を得るには至らなかった。以上から、後者については今後も検討の必要があるが、前者については市販キットも利用しながら実用的な手法としての今後の活用の基盤は概ね整備されたと考えている。M.SssIによるシトシンのメチル化を利用する方法については、単離核のメチル化を行うための基礎条件検討として、単離した酵母ゲノムDNAのメチル化を行なった上で、全ゲノムバイサルファイトシーケンスを行って、評価を行った。しかしながら、メチル化率は数十%程度に留まり、所期の効果を得られなかった。酵素標品間での大きな違いを示すデータも得られており、メーカーを変更する等の検討を進めている。一方、AIDについては、ヒトのcDNAを入手して、酵母細胞内での発現を行った。FLAGとGFP融合型にして発現したが、核への移行がよくなかったために、核移行シグナルの付加を行うことでこれを改善した。しかしながら、カナバニン耐性による効率推定では所期の効率が得られなかった。そこで様々な検討を加えたところ、FLAGもGFPも付加しないものが最も効率がよいことが分かった。今後、これらの検討の結果に基づいて、条件を更に至適化した上で、次世代シーケンシングによる検討を行う予定である。(1)基礎条件の検討・試料調製と(2)次世代シーケンサによる解析を今年度中に行う予定であったが、(1)が予想外に難航した。また、(2)については当初は外部機関に委託して大型次世代シーケンサによる解析を行うことを想定していたが、本研究のスケールに適した小型次世代シーケンサが新たに登場し当研究室に導入されることになったため、それを用いた解析を行う方向で計画を修正した。しかしながら、当該シーケンサの導入は、輸入手続きの遅れ等の影響で大きく遅れた。そのため、当初の予定よりも遅れが生じている。終了年度を延長したことと次世代シーケンシングの自由度が高まったことを踏まえて、基礎検討を更に慎重に進めた上で解析を行ない、この方法の有用性に関する見極めを行う。主として次世代シーケンシング関連の経費に充てることとしたい。
BCL10遺伝子変異の分子メカニズム

BCL10遺伝子はt(1;14)(p22;q32)をもつmucosa associated lymphoid tissue(MALT)lymphoma症例の転座切断点近傍から今年単離された(Cell,96,35,1999;Nature Genet.,22,63,1999)。当初は転座によってもたらされるBCL10の構成的過剰発現がlymphomagenesisに重要と考えられたが、その後転座の有無に関わらずそのopen reading frame(ORF)内にpointmutationが高頻度に発見された。しかもしばしばframeshiftmutationによりC末の欠失したtruncated productが発現すること、さらにfull length BCL10はrat embryo fibroblast(REF)に過剰発現するとapoptosisを誘導するのに対して、C末の欠失したtruncated productはapoptosis誘導能を失い、逆にREFをtransformする形質を獲得することが示された(Cell,96,35,1999)。さらに注目されたことはこれらのmutationがMALTlymphomaだけでなく、精巣腫瘍、悪性中皮腫、大腸癌、肺癌などの固形腫瘍でも認められたことである。一方、その後、これらの腫瘍ではゲノムDNAにmutationが見られないとの報告もあり、議論がある(Cell,97,683,1999)。私は、BCL10 mutationのメカニズム明らかにしたいと考え、以下のようなprelimilaryな結果を得た。BCL10truncated proteinの発現を解析する目的で、バーキットリンパ腫細胞株,Ramos,Bjab;T細胞株,Molt4,Jurkat;大腸癌細胞株,Colo201;食道癌細胞株,TE1;胃癌細胞株,MKN28ならびに正常扁桃よりmRNAを抽出してfull length ORFをカバーするようにRT-PCRを行った。この際、forwardprimerの5'側にT7-promoterとKozak配列をもつリンカーを付加した。このprimerを使うとPCR productにpromoterとKozak配列を付加でき、直接in vitro translationに導入すればBCL10蛋白質を合成できる。そこで、[^<35>S]-methionineでラベルしたin vitro translationproductを抗BCL10抗体で免疫沈降して解析したところ、それぞれの細胞で発現しているtruncated BCL10 proteinが複数のバンドとして検出された。PCR産物をクローニングし、シーケンスしたところ、特定のframeshift mutationによるものであることが判明した。これらのmutationは正常扁桃でも検出されたことから、BCL10mutationは正常細胞でも起こっていることを発見した。さらに驚いたことにゲノムDNAにはmutationが見られず、mutationが転写後何らかのメカニズムにより導入されていることが示唆された。
遺伝子改変による多剤耐性を担うMDR蛋白の機能と解析と耐性克服への応用

ヒトMDR1遺伝子は、培養細胞の多剤耐性を担っているだけでなく、腎臓癌などにおける自然耐性や獲得性多剤耐性に関係していることが解明されつつある。耐性を克服するためには、この現象へのMDRI遺伝子の関与をさらに明らかにするとともに、MDR1遺伝子のコードするPー糖蛋白質の機能を解明すること、MDR1遺伝子の発現制御機構を解明することが必要である。そのために本年度は次のことを行なった。1.種々の欠失および挿入変異によって改変したMDR1遺伝子を、ヒト、マウス培養細胞で発現させた。C末端20アミノ酸を欠失させると細胞を耐性にする活性が非常に減少した。また前半半分だけあるいは後半半分だけでもPー糖蛋白質は機能しなかった。Pー糖蛋白質が薬剤運搬ポンプとして機能するためには分子内重複をした完全な構造が必要であることが示唆された。2.前半後半それぞれ半分を酵母内で発現させた結果、アジドピンは主に後半に結合する基礎的結果を得た。3.ヒト副腎より新たに単離したPー糖蛋白質cDNAは、コルヒチン選別多剤耐性細胞から単離したcDNAと比べて2つのアミノ酸置換を持っていた。前半に位置する185番のアミノ酸置換は、コルヒチンに対する耐性度を大きく変化させた。この部位が薬剤認識に関与していることが示唆された。4.さらに機能の解明を進めるため、MDR1遺伝子とbetaーガラクトシダーゼ遺伝子を融合させ酵母内で誘導発現させることによって種々の改変Pー糖蛋白質精製を試みた。5.ヒト正常組織から発現制御部位を単離し構造解析した結果、ストレス誘導遺伝子に存在する配列が存在することがわかった。この配列の役割およびMDR1遺伝子の発現制御の解析を進めている。
コンパクトリー群の随伴作用に関する同変K群の表現論的および位相幾何学的研究

:群、特にコンパクト・リー群は物事の対称性を記述するものとして数学の様々な場面に登場する非常に重要な研究対象である。コンパクト・リー群はそれ自身に対して随伴作用と呼ばれる標準的な作用を有しているが、これを研究することはコンパクト・リー群の積構造を理解するために重要であると考えられる。このコンパクト・リー群の随伴作用から定義される同変K群と呼ばれる代数的対象についての研究を行い、その構造についてのいくつかの知見を得た。Gをコンパクト連結Lie群で基本群が自由なものであるとする。R(G)をGの複素表現環とする。Gのそれ自身への随伴作用adによりGをG-空間と見なしたものをG_<ad>で表わす。このG-空間についての複素G-同変KコホモロジーK^*_G(G_<ad>)を考える。BrylinskiとZhangによると、環の包含関係Z⊂R(G)に関するGrothendieck微分のなす代数Ω^*_<R(G)/Z>(これはrank G個の生成元を持つR(G)上の外積代数と同型である)との同型φ:Ω^*_<R(G)/Z>〓K^*_G(C_<ad>)を構成することができる。さらにこの構成の過程においてΩ^*_<R(G)/Z>〓Ω^*_<R(T)/Z>^Wが示されている。ここでTはGの極大トーラス、WはGのTに関するWeyl群であり、Ω^*_<R(T)/z>^WはΩ^*_<R(T)/Z>へのWの自然な作用に関する不変元全体を表すものとする。したがってK^*_G(G_<ad>)〓K^*_T(T_<ad>)^Wである。ここでK^*_T(T_<ad>)^WはK^*_T(T_<ad>へのWの自然な作用に関する不変元全体であり、上の2つの同型は包含写像T→Gを用いて定義される。BrylinskiとZhangは上記定理の証明の本質的な部分において、Gを代数群と見なすことにより代数幾何学的な議論に帰着させ、証明を行っている。今年度の研究において、上記のBrylinBki-Zhangの結果のうち、K^*_G(G_<ad>)〓K^*_T(T_<ad>)^W(およびこれらがrankG個の生成元を持つR(G)上の外積代数と同型であること)について、位相幾何学的および表現論的な手法のみを用いた、直接的で自然な別証明を与えた。(この結果については現在投稿準備中である。)さらに次年度の研究に向けての基礎として、この別証明において用いた手法を利用することにより、GがU(2),Sひ(2),SU(3),Sp(2),G_2などの場合について、K^*_G(G_<ad>)上のAdams作用棄の計算のいくつかを具体的に行った。Gをコンパクト連結Lie群で基本群が自由なものとし、R(G)をG複素表現環とする。Gのそれ自身への随伴作用adによりGをG-空間と見なし、これをG_<ad>で表わす。このG-空間についての複素G-同変Kコホモロジ-K^*_G(G_<ad>)を考える。昨年度の研究において、既知の同型K^*_G(G_<ad>〓K^*_T(T_<ad>^W〓∧R(G)(q1, ..., ql), (l=rank(G)))について、表現論的な手法を用いた自然な別証明を与えた。ここでTはGの極大トーラス、WはGのTに関するweyl群である。さらにこの別証明において用いた手法を利用することにより、rank(G)が小さい場合について、K^*_G(G_<ad>)上のAdams作用素の計算をいくつか部分的に行っていた。今年度はまずこの計算の結果を踏まえて、K^*_G(G_<ad>)上のAdams作用素ψ^kを完全に決定するための方法を以下のようにまとめた。計算機の助けも借りてこの方法を実行することにより、rank(G)が低い場合のいくつかのGについてK^*_G(G_<ad>)上のAdams作用素を完全に決定することができた。現在この結果を取りまとめるとともに、さらに一般のGについてどのような関係式が生ずるかについての研究を継続中である。
脱メチル化ターゲット配列データベースの作成と共通モチーフの解明

神経幹細胞の分化系を用いてゲノムワイドなメチル化の解析をおこなった。マウスの11.5日胚からとりだした神経幹細胞は神経にしか分化することはできない。それに対し14.5日胚からとりだした神経幹細胞は神経にもアストロサイトにも分化することができる。一見同じようにみえる神経幹細胞にこのような違いがみられるのはエピジェネティクな違いであると考えられる。その根拠はGfapというアストロサイトの分化マーカー遺伝子はSTAT3という転写因子により活性化されることが知られているが、11.5日胚由来の神経幹細胞ではGfap遺伝子におけるSTAT3の結合サイトがメチル化されているのに対し、14.5日胚では脱メチル化されていることがわかっているからである。そこで我々は、Gfap以外の遺伝子においても同様にアストロサイトの分化に必要な遺伝子の脱メチル化が起こっているのではないかと考え、ゲノムワイドなメチル化のプロファイリングをおこなった。その結果、14.5日胚由来の神経幹細胞では11.5日胚由来の神経幹細胞と比較し脱メチル化がおこっている遺伝子が多くあることがわかった。これらの遺伝子の多くはアストロサイトにおいても脱メチル化されて発現が誘導されており、ゲノムワイドな脱メチル化はアストロサイトの分化に重要な働きをしていることがわかった。しかしながらこれらの遺伝子のオントロジーの解析をおこなったところ強い特徴はなかった。また保存されたSTAT3の結合配列もみられなかった。一方、14.5日胚由来の神経幹細胞においてメチル化される遺伝子はほとんどなかったが、最終的に分化したアストロサイトにおいてはメチル化される遺伝子が多く見られた。またおもしろいことにこれらの遺伝子のオントロジーの解析をおこなったところ発生、転写関連遺伝子が多いことがわかった。これは分化が終わった細胞においては分化に必要な遺伝子が不活性化し、細胞の分化状態を安定化しているのではないかと推測される。またこれまでの癌などのゲノムワイドなプロファイリングにおいてメチル化されている遺伝子においてやはり発生、転写関連が多かったことから、発生、転写関連遺伝子がDe novoのメチル化のターゲットとなっているのではないかと考えた。そこでDe novoのメチル化酵素の1つであるDnmt3aのノックアウトマウスで脱メチル化されている遺伝子、つまりDnmt3aによりメチル化される遺伝子をゲノムワイドにプロファイリングしたところ発生、転写関連遺伝子が多いことがわかり、我々の推測が正しいことが証明された。メチル化の変化は細胞分化など様々な過程で重要な役割を担っている。そこで本研究では網羅的なメチル化解析法であるMIAMI法(http://grc.dept.med.gunma-u.ac.jp/gene/)のを用いゲノムワイドに遺伝子のプロモーター領域のメチル化を調べた。この研究では特に脱メチル化遺伝子群において変化のなかった遺伝子群と比較して、その出現頻度が異なる、転写因子認識部位、マイクロRNAターゲット、未知のモチーフ等の検索をおこないその特徴を探った。分化の系としてまずP19細胞の神経分化モデルについてMIAMI法でメチル化の変化について調べた。その結果P19細胞の神経分化においておこる変化はほとんど脱メチル化であることがわかった。脱メチル化している配列のCpG含量を調べたところ有意に低いことがわかった。また脱メチル化配列のモチーフ解析をおこなったところOct-4遺伝子の脱メチル化において重要であることが知られているGA box様の配列に濃縮がみられた。これらの頻度を用いてSupportvector machineで教師付学習をおこなったところ高確率で脱メチル化配列を予測できるモデルを構築することができ、脱メチル化配列は特徴を持った配列であることがわかった。次にRNAi機構とDNAメチル化の関連性を検討した。近年、RNAi機構は細胞質におけるmRNAの分解や蛋白質の合成阻害だけでなく、核においてもピストンのメチル化やDNAメチル化といったエピジェネティクな機構に作用することがわかりつつある。しかし哺乳類においてRNAi機構の関与はあまりよくわかっていない。そこでRNAi機構のDNAメチル化への関与を調べるため、脱メチル化配列におけるmiRNAのターゲット配列の含有量について調べた。その結果はmiRNAのターゲット配列が有意に濃縮されており、RNAi機構のDNAメチル化への関与が示唆された。同様なことは肺癌と正常肺との比較においても観察された。以上のように分化、癌化のいずれにおいてもmiRNAターゲットの濃縮がみられ、エピジェネティクな変化のターゲットを決める機構としてRNAiが重要な役割をしていることが示唆された。

これらの遺伝子の多くはアストロサイトにおいても脱メチル化されて発現が誘導されており、ゲノムワイドな脱メチル化はアストロサイトの分化に重要な働きをしていることがわかった。しかしながらこれらの遺伝子のオントロジーの解析をおこなったところ強い特徴はなかった。また保存されたSTAT3の結合配列もみられなかった。一方、14.5日胚由来の神経幹細胞においてメチル化される遺伝子はほとんどなかったが、最終的に分化したアストロサイトにおいてはメチル化される遺伝子が多く見られた。またおもしろいことにこれらの遺伝子のオントロジーの解析をおこなったところ発生、転写関連遺伝子が多いことがわかった。これは分化が終わった細胞においては分化に必要な遺伝子が不活性化し、細胞の分化状態を安定化しているのではないかと推測される。またこれまでの癌などのゲノムワイドなプロファイリングにおいてメチル化されている遺伝子においてやはり発生、転写関連が多かったことから、発生、転写関連遺伝子がDe novoのメチル化のターゲットとなっているのではないかと考えた。そこでDe novoのメチル化酵素の1つであるDnmt3aのノックアウトマウスで脱メチル化されている遺伝子、つまりDnmt3aによりメチル化される遺伝子をゲノムワイドにプロファイリングしたところ発生、転写関連遺伝子が多いことがわかり、我々の推測が正しいことが証明された。
精神科看護における退院支援評価指標を活用した退院支援技術の質的評価方法の確立

本研究の目的は、精神科看護師に求められる退院支援技術を確立し、その退院支援技術の質的評価に繋がるツールとして「精神科退院支援評価指標」を開発し、その評価指標を活用した退院支援技術の質的評価方法を確立することである。我々は、これまで、「精神科退院支援評価指標」の確立に向けた研究を継続してきた。初年度に当たる平成29年3月、日本精神科看護協会の全面的な協力を頂き、協会の会員施設である400の精神科病院に依頼し、その病院に勤務する看護師1,300名を対象とした質問紙調査を全国的に実施し、2年目に当たる平成29年度は、全国調査の結果の分析を進めた。回収された612票(回収率47.1%)の分析を行い、その結果を基に、「新・精神科退院支援評価指標」の醸成を図った。3年目に当たる平成30年度には、調査結果を報告書にまとめるべく検討したが、調査結果の分析の取り纏めが予定通りに進まず、報告書案の作成にとどまり、発刊までには至らなかった。しかし、調査の分析結果をまとめ、二つの専門学会において発表した。一方、「新・精神科退院支援評価指標」を活用したデルファイ法を実施する予定であったが、デルファイ法の実施に向けた調査票の作成、対象者の検討および実施方法の検討を進めるにとどまり、実施には至らなかった。最終年にあたる令和元年度は、「新・精神科退院支援評価指標」を活用したデルファイ法を実施する予定であり、その準備を進めている。また、本研究の成果を報告書にまとめ発刊し、本研究に協力頂いた関係機関および対象者の皆様に発送する予定である。各研究メンバーの勤務状況が過密となり、予定のエフォートが確保できなかったことに加え、それぞれの勤務地が遠隔であるため、日程調整が難しかった。そのため、計画していた研究を予定通りに推進することができなかった。調査成果報告書の原案はできているため、今後は内容を見直し修正後、印刷・配信ができる状況にある。また、予定していたデルファイ法実施に対しては、具体的な方法について検討しほぼ確定している。本研究の目的は、精神科看護師に求められる退院支援技術を確立し、その退院支援技術の質的評価に繋がるツールとして「精神科退院支援評価指標」を開発し、その「精神科退院支援評価指標」を活用した退院支援技術の質的評価方法を確立することである。その一環として、平成28年度には精神科病院に勤務する看護師を対象とした全国調査を実施した。本研究の初年度にあたる平成28年度は、精神科病院に勤務する看護師を対象とした全国調査の結果を基に、「新・精神科退院支援評価指標」を醸成し、その後臨床現場でデルファイ法による調査を実施するべく、準備を進めた。しかし、全国調査が予定通りに進まず、実施時期が遅くなってしまったため、「新・精神科退院支援評価指標」を醸成するに至らなかった。一方、「新・精神科退院支援評価指標」を活用した退院支援技術の質的評価方法の確立を目的とした新指標を用いたデルファイ法の実施に向けた準備を進めた。主な検討内容は、1対象者:精神科病棟に勤務する看護師200名であるが、勤務する病棟の選定にあたっては、当初予定の慢性期・解放病棟だけではなく、精神科医療の現状からすれば、急性期も対象とする方向に修正した。2デルファイ法実施の方法:3ヶ月間で4回実施を予定する。2年目にあたる平成29年度は、回収された全国調査の分析を深め、「新・精神科退院支援評価指標」を醸成し、デルファイ法の具体的な実施方法等について検討を進め、実施する予定である。全国の精神科病院に勤務する看護師を対象とした質問紙調査の実施が大幅に遅れたため、その後計画していた研究を推進することができなかった。その一環として、平成28年度には、日本精神科看護協会の全面的な協力を頂き、協会の会員施設である400の精神科病院に依頼し、その病院に勤務する看護師1,300名を対象とした質問紙調査を全国的に実施した。本研究の2年目にあたる平成29年度は、全国調査の結果分析を進めた。調査結果の分析から、概ね勤務する病棟の種類による違いは認められなかった。また、調査結果を報告書にまとめるべく検討したが、調査結果の分析が予定通りに進まず、報告書の発刊までには至らなかったものの、専門学会への発表を目指し、準備を行った。一方、「新・精神科退院支援評価指標」を活用した退院支援技術の質的評価方法の確立を目的としたデルファイ法の実施に向けた準備を進めたが、実施にまでは至らなかった。主な検討内容は以下の通りである。