hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
メダカの発生過程におけるリンパ管と神経の相互作用の解明

本研究により、遺伝子組み換え技術を用いて、生きたままリンパ管が緑色に、神経が赤色に光るメダカの開発に成功した。そして、このメダカを蛍光実体顕微鏡や共焦点レーザー顕微鏡などのイメージング機器を用いて詳細に観察した結果、リンパ管と神経における解剖学的な走行の類似性を明らかにすることができた。これまで、魚類で末梢神経束の走行とリンパ管の走行の類似性を明らかにした報告はなく、本研究結果によりリンパ管と神経の相互作用の可能性という新たな研究分野を開拓する一歩となった。さらに、このメダカの発生過程をin vivoイメージングにより観察したところ、神経束の走行形成より先にリンパ管形成が進むことが示唆された。計画当初の予想では、血管が神経によりガイダンスを受けるのと同様にリンパ管が神経によりガイダンスを受けると考えていたが、本研究結果から神経がリンパ管によりガイダンスを受ける予想とは逆の可能性が示唆された。24年度が最終年度であるため、記入しない。リンパ管は体液の恒常性の維持・脂肪の吸収・免疫に必須であり、病理面では癌や浮腫あるいは様々な炎症性疾患で重要な役割を果たす事が知られる。このことからは、リンパ管形成に関する理解は、リンパ管が関与する様々な生命現象の真実に迫るとともに、新たな治療戦略の開発につながることを意味する。しかし、リンパ管内皮細胞が増殖・進展しながら個体内の隅々まで、そのネットワーク構造を形成していく機構については不明なことが多い。血管の形成過程においては、血管内皮細胞は体節由来や神経由来の遺伝子によりガイダンスを受けており、リンパ管でも同様の機構の存在が考えられる。そこで、本研究ではメダカを用いたin vivoイメージングと末梢神経の走行操作、神経由来ガイダンス遺伝子の発現操作により、末梢神経がリンパ管形成に与える影響とその機構を明らかにする。本年度の成果として、まず、応募者が既に独自に作製したリンパ管可視化TGメダカと末梢神経束可視化TGメダカを交配し、得られたダブルTGを用いリンパ管の走行と末梢神経束の走行の類似性を解剖学的に明らかにした。中でも、外側リンパ管と後側線神経束の主幹は左右体表面の正中線付近を併走していることが分かった。次に、走行に類似性が見られた外側リンパ管と後側線神経束について、ダブルTGの発生時におけるリンパ管内皮細胞の動態を共焦点レーザー顕微鏡を用い経時的に観察することに成功した。その観察結果から、後側線神経の発生後、それを追うように外側リンパ管が形成されていることが明らかになった。また、次年度実施予定である末梢神経束由来の血管のガイダンスとして知られる遺伝子を本来の発現パターンと異なる領域に発現させ、リンパ管形成にどの様な影響を与えるか明らかにするための実験準備として、血管ガイダンス遺伝子であるSDF1のメダカホモログのクローニングにも成功した。作製したリンパ管可視化トランスジェニックメダカの国際誌上での第一報となる論文の査読において、想定以上のやや理不尽とも思える追加実験を要求され、その追加実験実施の準備と実施に時間が取られたため。やや遅れているが巻き返せる程度であるので当初の計画通りに遂行する。
精神科看護師のリフレクションを活用した教育プログラム構築に関する基礎的研究

精神科看護師5名から、提示された「気がかりな出来事」の記述と面接内容を分析した結果、参加者は【気がかりを覚える】と、【気がかりを確かめる】【状況の解釈を試み仮説を立てる】【関わりを吟味し試みる】【関わりながら観察し評価する】【状況を再解釈する】の段階を行きつ戻りつしながら状況に取り組んでいた。そして【自分と向き合う】ことが状況によりコミットすることとなり、リフレクションを深化させていた。継続教育においてリフレクションが促進されるためには、ファシリテーターの育成が望まれる。ファシリテーションを学ぶためには、ファシリテーターとしての実践をリフレクションするための体験学習的プログラムが必要である。本研究は精神科看護師の継続教育におけるリフレクションを用いた研修のファシリテーター育成プログラムの構築に関する検討を行うことを目的とした基礎的研究である。研究参加者は精神科臨床経験510年程度の看護師5名である。参加者に23か月毎に「気がかりな出来事」を記述してもらい、その記述に基づいて半構成的面接を5回実施した。参加者に提示された「気がかりな出来事」の記述と面接によって、「気がかりな出来事」を詳細に再構成し、質的に分析した。その結果、参加者は【気がかりを覚える】と、【気がかりを確かめる】【状況の解釈を試み仮説を立てる】【関わりを吟味し試みる】【関わりながら観察し評価する】【状況を再解釈する】の段階を行きつ戻りつしながら状況に取り組んでいた。この定期的に行われた面接によるリフレクションによって、参加者が自身の傾向に気づく、患者理解が深まる、状況を再解釈して実践を評価し、新たな関わりの糸口を見出していたことが伺えた。このことから実践についてのリフレクションが促進されるためには、「対話」が有用であることが示された。ファシリテーター育成プログラム構築にあたっては、ファシリテーター自身がリフレクティブであることを重視し、そのためのプログラムを検討する必要がある。まずは、定期的に自身の実践についてリフレクションする場や機会をセッティングすることが重要であり、そのプロセスの中で、リフレクションに必要とされる基礎的スキルを高めていくことが求められる。さらに、他者のリフレクションに携わった経験をリフレクションする場や機会をセッティングするなどのプログラムが必要と考えられた。
ルビジウム82心筋PETによる虚血性心疾患の早期診断法の開発

3D収集の82Rb心筋PETデータは心室内腔から心筋へ血液放射能の混入が多い。これを補正し心筋血流を定量するため、心室内放射能曲線を荷重関数とした血液成分補正法を開発した。正常例24名に82Rb心筋ダイナミックPET検査を3D収集で施行し、さらに15O-H2O心筋ダイナミックPET検査を行った。各例の左室心筋内に16箇所の関心領域を設定した。左室内腔放射能曲線を荷重関数とした最小自乗法、および荷重関数を使わない従来法でコンパートメントモデル解析を行い、局所心筋血流量を算出した。82Rbと15O-H2Oから得た局所心筋血流量の相関係数は、荷重関数を用いた場合、R=0.76で、荷重関数を用いない場合の、R=0.63と比べ有意に改善を認めた(p<0.01)。特に血液放射能の混入が多い中隔側での誤差が減少した。3D収集の82Rb心筋PET検査データで心筋血流を定量する方法として、心室内腔放射能曲線を荷重関数とした血液成分補正法を開発した。試験用の低放射能ルビジウム82(82Rb)ジェネレータを購入し、臨床検査の実施に適切な82Rb投与法を確立した。20ml生理的食塩水をシリンジに封入し輸液ポンプで20ml/分の投与速度で1分間ルビジウム82ジェネレータに注入し、その出力放射能曲線を計測した。この方法で投与開始60秒付近にピークを持つ緩やかな時間放射能曲線が得られることを確認した。このデータを基に、適切な心筋血流測定が可能なプログラム開発を実施した。1年前に既に収集されていたルビジウムPETデータを、開発したプロ,グラムで解析を行い、心筋血流測定値が過去の報告例と比較して適切であり、再現生も良好であることを確認し、結果を論文発表した。Manabe O, Yoshinaga K, Katoh C, Naya M, deKemp RA, Tamaki N. Reueatability of rest and hyperemic myocardial blood flow measurements with82Rb dynamic PET. J Nucl. Med. 50(1) ; 68-71, 2009.さらに心筋血流計測の安定性を図るために、新しい解析アルゴリズムとして、非線形最小二乗法を繰り返し実施する手法を開発し、ルビジウムPETデータから局所心筋血流量を安定して測定できるプログラムを開発し、21年度の学会発表および論文発表の準備を行っている。さらに並行して、今後被検者として予定している人に超音波検査を実施し、早期動脈硬化指標である動脈壁肥厚の測定データの収集を実施した。【目的】サイクロトロンが不要な82Rbを用いた心筋血流定量PET検査法を開発しているが、投与放射能量の低減と3D収集専用装置でも実施可能な検査になることを目指して、3D収集においても2D収集と同程度の安定した局所心筋血流値の算出が可能になるよう、定量値を安定化させる最小二乗法の改良を試みた。【方法】健常例12名に15O-H2Oによる2D、10分間のダイナミック収集による心筋血流量定量PETを実施し、さらに82Rbによる6分間のダイナミック収集を2Dおよび3D収集にて行った。82Rbの投与量は、2D収集では1500MBq、3D収集では500MBqとした。左室内腔と心筋全体の3次元関心領域と16箇所の局所心筋関心領域を自動設定し各々の時間放射能曲線を求めるプログラムを作成した。シングルコンパートメントモデルにて局所心筋のK1、k2、血流量、および心室内腔からのスピルオーバーを非線形最小二乗法で求める際に、計算を安定化させるために各変数の初期値をさらに最小二乗法で推定する2重の最小二乗法アルゴリズムを考案した。【結果】15O-H2Oと2D収集82Rbでの局所心筋血流量の相関係数は、r=0.79(p<0.01、n=192)、15O-H2Oと3D収集82Rbでの局所心筋血流量の相関係数は、r=0.73(p<0.01、n=192)で、3D収集で有意な相関の低下は認めなかった。

82Rbでの局所心筋間の血流量のばらつき(偏差平均)は、2D収集では0.04±0.01(mL/min/g)、3D収集では0.05±0.02(mL/min/g)で、3D収集において有意な領域間の血流量のばらつき増加は認めなかった。【結論】82Rbを用いた心筋血流定量PET検査において、3D収集においても2D収集と同程度の安定した局所心筋血流値の算出が可能となるアルゴリズムを開発した。サイクロトロンが不要な82Rbを用いた心筋血流定量PET検査法の開発において、投与放射能量の低減と3D収集専用装置でも実施可能な検査になることを目指して、3D収集においても2D収集と同程度の安定した局所心筋血流値の算出が可能になるよう、定量値を安定化させる最小二乗法の改良を試みた。【方法】健常例12名に15O-H2Oによる2D、10分間のダイナミック収集による心筋血流量定量PETを実施し、さらに82Rbによる6分間のダイナミック収集を2Dおよび3D収集にて行った。82Rbの投与量は、2D収集では1500MBq、3D収集では500MBqとした。左室内腔と心筋全体の3次元関心領域と16箇所の局所心筋関心領域を自動設定し各々の時間放射能曲線を求めるプログラムを作成した。シングルコンパートメントモデルにて局所心筋のK1、k2、血流量、および心室内腔からのスピルオーバーを非線形最小二乗法で求める際に、計算を安定化させるために各変数の初期値をさらに最小二乗法で推定する2重の最小二乗法アルゴリズムを考案した。【結果】15O-H2Oと2D収集82Rbでの局所心筋血流量の相関係数は、r=0.79(p<0.01、n=192)、15O-H2Oと3D収集82Rbでの局所心筋血流量の相関係数は、r=0.73(p<0.01、n=192)で、3D収集で有意な相関の低下は認めなかった。
保健教育におけるエイズ予防教材の開発に関する研究

本研究は、保健教育における児童・生徒のエイズ予防教育のために有効な教材・教具が具備すべき条件を明らかにし、それに基づき保健教育におけるエイズの典型教材の創出を意図したものである。そのため、(1)従来開発されているエイズ予防教育のための教材・教具を分析・検討すると共に、(2)児童・生徒のもつエイズに関する認識の構造を調査で明らかにし、(3)生徒の認識の実態をふまえて、エイズ予防教育のための教材・教具が具備すべき条件を解明し、(4)それに基づき、エイズ予防教育の教材・教具の具体的なモデル開発を行った。その結果、1、従来のエイズ教材・授業を分析した結果、A病気の解説(普通の生活ではうつらない)、B病気の解説+差別しない、C患者・感染者の生活・願い(病気の解説あるいは学習)、D患者・感染者の生活・願い(共感・共生)>病気の学習活動という4つのタイプに分類できた。2、中学校の保健体育担当教師が、小・中・高で指導が必要だと考える内容をみると、小学校で指導すべき内容としては「エイズとは」「偏見や差別」を、中学校では「エイズの現状」「エイズとは」「性的接触による感染」「偏見や差別」を、高校では、「性的接触による感染」「エイズの予防(性的接触、血液による感染、母子感染)、「偏見や差別」「コンドーム」が指導すべき内容として多くみられた。3、児童・生徒への認識調査で、児童・生徒が知りたい内容は、「病気の知識」に加えて、社会におけるエイズへの対応の実情についてであり、学年が進むほど社会生活との関連で知りたいという要望が強かった。4、エイズの教材モデルとして「病者・社会の学習」モデルを提示し、エイズをめぐる「相反する二つの事実」を核に教材・授業づくりを行い、矛盾した二つの事実をつなぐ学習のための具体的「発問」を開発した。本研究は、保健教育における児童・生徒のエイズ予防教育のために有効な教材・教具の必要な条件を明らかにし、それに基づき有効な教材・教具を開発することにある。そのため本年度は、児童・生徒のエイズについての認識の構造とその問題点をとらえると共に、従来のエイズ予防教育の問題点を明らかにし、その開発モデルの検討を行った。その結果、1、児童・生徒のエイズについての認識構造の研究では「エイズに関する認識調査」から、エイズに対する児童・生徒の知識の正誤の判断とその内容把握の実態の間にずれがみられ、認識が正誤の現象把握にとどまっており、原因理解による本質的把握とはいえないことが推測された。2、従来のエイズ予防教育についての研究では、エイズ及び性教育関連図書にみられる「エイズ指導案」や国・都道府県発行の「エイズに関する指導の手引き」及び各学校で開発された「エイズ指導案」等とエイズ教育用市販ビデオなど視聴覚教材や教具の分析から、その多くが解説中心の情報伝達型であることが明らかになった。3、エイズ教材モデルの検討では、その教育内容として「概念地図」の手法を用いた分析がなされた。また、ライアン、ジョナサン等「人物教材」のもつ意味が検討され、エイズ教育の中に「病者理解」を含めての「病気教育」をどう具体化して教材を開発するかが次年度の課題となっている。本研究は、保健教育における児童・生徒のエイズ予防教育のために有効な教材・教具が具備すべき条件を明らかにし、それに基づきエイズの典型教材の創出を意図したものである。

そのため、本年度は、中学校におけるエイズ教育の実際を調査すると共に、従来開発されているエイズ予防教育のための教材・教具を分析・検討し、前年度の調査で明らかとなった児童・生徒の認識の実態をふまえて、エイズ予防教育のための教材・教具が具備すべき条件を解明し、それに基づき、エイズ予防教育の教材・教具のモデル開発を行った。その結果、1、児童・生徒への認識調査で、児童・生徒は知りたい内容は、「病気の知識」に加えて、社会におけるエイズへの対応の実情についてであり、学年が進むほど社会生活との関連で知りたいという要望が強かった。2、中学校の保健体育担当教師が、小・中・高で指導が必要だと考える内容をみると、小学校で指導すべき内容としては「エイズとは」「偏見や差別」を、中学校では「エイズの現状」「エイズとは」「性的接触による感染」「偏見や差別」を、高校では、「性的接触による感染」「エイズの予防(性的接触、血液による感染、母子感染)」、「偏見や差別」「コンドーム」が指導すべき内容として多くみられた。3、従来のエイズ教材・授業を分析した結果、A病気の解説(普通の生活ではうつらない)、B病気の解説+差別しない、C患者・感染者の生活・願い(病気の解説あるいは学習)、D患者・感染者の生活・願い(共感・共生)→病気の学習活動という4つのタイプに分類できた。4、エイズの教材モデルとして「病者・社会の学習」モデルを提示し、エイズをめぐる「相反する二つの事実」を核に教材・授業づくりを行い、矛盾した二つの事実をつなぐ学習のための具体的「発問」を開発した。
食感のバイオメカニクス

食感を客観的に評価するためには,官能評価に対応する食物咀嚼時の物理的特性が必要になる.本研究では,材料力学的観点からスナック菓子のミクロレベルの材料特性を測定し,マクロレベルの値に比べて5700倍大きいことを示した.次にスナック菓子の構造的特徴と咀嚼時の擬音語の関係について調査し,二つの関係を説明可能な数理モデルによる表現を試みた.また,食物咀嚼時の顎運動を分析し,食物の種類によって運動軌跡が異なることを示した.食感を客観的に評価するためには,官能評価に対応する食物咀嚼時の物理的特性が必要になる.本研究では,材料力学的観点からスナック菓子のミクロレベルの材料特性を測定し,マクロレベルの値に比べて5700倍大きいことを示した.次にスナック菓子の構造的特徴と咀嚼時の擬音語の関係について調査し,二つの関係を説明可能な数理モデルによる表現を試みた.また,食物咀嚼時の顎運動を分析し,食物の種類によって運動軌跡が異なることを示した.心地よい食感を有する食品は、消費者の嗜好に適合し強い商品価値を生み出す。本研究では、加工食品の微細構造および生地の材料特性を明らかにすることで、食感の特徴と生成メカニズムを解明することを目的とする。今年度は微細構造を有する加工食品を研究対象としてミクロレベルでのヤング率と材料強度を測定した。まず、微細構造を有する5種類の棒状スナック菓子を対象として、申請者の研究室で所有しているX線CT装置で断層画像を撮影した。撮影にはスナック菓子の一部を取り出し、試験片を製作した。次に、断層画像から三次元画像を構築した。そして、三次元画像から加工食品の構造的特徴(サイズ、平均密度、分散、構造的偏り)を求めた.一方,以下の手順で荷重試験を実施した。まず、ミクロレベルの荷重が測定可能な圧縮試験器を製作した。圧縮試験機は、申請者がこれまで開発した装置に入出力まわりの改良を加えた。この装置を用いてX線CT撮影で用いた加工食品の荷重履歴を計測した。次に、X線画像データを基に有限要素をボクセルを基準として有限要素モデルを作成し、圧縮試験機で得た荷重特性を境界条件として与え、有限要素解析を行うことでミクロレベルの材料特性(ヤング率および材料強度)を算出した。解析結果は、見かけ上(マクロレベル)のヤング率と比べてミクロレベルのヤング率は5700倍大きい値となり、ミクロレベルの材料特性に注目する意義が示された。両者の手順で得られた結果を比較・考察することにより、加工食品の微細構造と食品の機械的特性の関係を考察した。食感を客観的に評価するためには,官能評価に対応する食物咀嚼時の物理的な特性が必要である.この観点からスナック菓子の材料力学的および構造力学的観点に注目して研究を行った.まず平成25年度は、材料力学的観点からスナック菓子を構成する生地のミクロレベルでのまのめヤング率および材料強度を小型微小計測装置を開発して測定した。その結果、従来マクロレベルで計測されているテクスチャー試験機の値よりも5700倍大きいことが示された。次に平成26年度では、食感を数理モデルで表現するためにいくつかの構造力学的特徴量で食感を表現することを試みた.日本語には,擬音語が豊富であり,食物咀嚼時の音を忠実に表現する言葉が多数使用されている.そこで,スナック菓子の咀嚼音の言葉として,「さくさく」,「かりかり」,「ぱりぱり」,「がりがり」の言葉と構造的特徴量の関係について調査した.これまでの筆者らの研究では,棒状のスナック菓子に着目して調査したが,かりかり感やぱりぱり感と深く関連する特徴量を見いだせなかった.その理由はこれまでの数理モデルでは,菓子の太さや生地の充填率などの菓子全体をおおまかに見た指標しか用いられておらず,菓子内部の微細構造の幾何的特徴に注目した情報が含まれていないためである.そこで本研究では,菓子内部の微細構造の幾何的特徴(厚さ,幅)に注目し,新たな特徴量を導入した.統計分析的手法を用いて数理モデルの係数を求めたところ,従来モデルよりも食感をうまく表せることを示した.平成26年度はバイオメカニクス的観点から食物の性状による顎運動についても調査した。筆者らが開発した顎運動表示システムにおいて画像性能を向上させ、歯列の接触状態を解析した。その結果、食物の種類によって顎運動軌跡および歯列の接触状態に違いが現れることを初めて示した。バイオメカニクス加工食品、特にスナック菓子は種類によって種々の微細構造をしており、それが食感に影響を与えていると予想し、ミクロレベルの計測実験を行い、材料定数を算出した。算出した結果は、マクロレベルの見かけ上のヤング率とは大きく異なる値が得られ、本手法の意義が示された。微細構造に関する機械特性の知見に加えて、人体の骨伝導に関する力学解析を行い、人体特性と食感の関係を調べる。食感は、官能評価を実施し日本語の擬音語(「さくさく」、「がりがり」、「パリパリ」、「かりかり」)との関係を統計分析的手法で表現することを試みる。これにより物理量と食感の関係を明らかにしたい。さらにスナック菓子の微細構造をこれまで提案した評価とは別の表現式を提案して食感表現に関する数理モデルの向上を目指したい。

また、咀嚼時の顎運動、特に食物をすりつぶす際の上下歯の運動も食感に大きく関与していると考えられるので、食物咀嚼時の歯列運動を計測し、バイオメカニクス的観点からも考察を行い「食のバイオメカニクス」に発展させる礎としたい。平成26年度の研究予算に使用した方が、よい研究成果が得られると判断されたため。国際学会発表のための海外出張費も必要となったため。顎運動計測用ビデオカメラの購入国際学会参加渡航費,滞在費,学会参加費に使用。
植物の可変的な器官プランの分子的基礎

平成6年度から平成9年度まで実施された重点領域研究『植物の可変的な器官プランの分子的基礎(略称;植物器官プラン)』では、植物個体成長過程での代謝機能発現や形態形成に関わる制御因子遺伝子を、従来の手法に加えてモデル植物での分子遺伝学的手法を積極的に導入して同定単離し、機能と形作りの制御機構を突然変異株や制御因子遺伝子のトランスジェニック植物を用いて解析し、多くの成果を挙げてきた。成果の一端は主催公開シンポジウムや各種学会等での共催シンポジウムで公開し、平成9年度には「大学と科学」公開シンポジウム「植物の生長-遺伝子から何が見えるか-」において広く一般にも公開した。本研究では、研究成果を今後のこの領域の一層の進展に最大限生かすために、4年間の活動とそこで得られた研究成果を、重点領域研究『植物器官プラン』の幹事会を構成した総括班研究代表者、研究班代表者と主な研究分担者の計6名が中心となって点検総括し、終了ヒアリングに望んだ。また、関連研究者を招いて討論会を実施し、領域研究で得られた研究成果を取りまとめて、発表論文リスト、主要発表論文別刷りを含む研究成果報告書の形で印刷作成し、班員および関連した研究者に広く配布した。従来、植物器官の代謝機能発現の形態形成に関する研究は、それぞれ別の分野として発展し、分子レベルで結びつけられることはほとんどなかった。植物器官の代謝機能や形態形成は、転写制御因子や情報伝達因子などを介した制御ネットワークで結び付けられた多数の遺伝子の働きによって決められているが、こうした遺伝的な制御ネットワークや重要な制御因子の遺伝子はほとんど明らかにされていない。本重点領域研究『植物器官プラン』では、器官に特有な代謝機能の発現や器官の文化や形態形成に関わる遺伝的制御のネットワークを、アラビドプシスなどモデル植物の分子遺伝学的研究やトランスジェニック植物を使った遺伝子機能の個体レベルの解析などを積極的に導入して解析し、これらプロセスの中で重要な役割を担う制御遺伝子を同定・単離して、器官形成過程での形態形成と代謝機能発現の連動、器官分化の制御といった植物の成長における高次の調節機構を探る分子的基礎を得ることを目的としている。本総括班では、こうした研究を重点領域として推進することで最大限の相乗効果が得られるような研究環境の整備を行うことを目的としており、平成6年度には班員の全員参加による研究計画発表会と研究成果報告会を1回づつ開催し、またニュースレター「Plant Organ Plan ResearchNetwork」をNo.1からNo.5までの5号発刊して班員間の情報交流を積極的に推進した。さらに、本年度は重点領域研究に関わり深い特定領域についての討議を深めて共同研究を推進するためのワークショップとして『植物の転写制御因子』を開催し、また若手の育成のために若手ワークショップを開催した。その他、日本分子生物学会においては本重点領域研究主催のシンポジウムを開催して成果の一端を公開すると共にこの新しい研究領域の参画を促した。従来、植物器官の代謝機能発現と形態形成に関する研究は別の研究分野として発展し、分子レベルで結びつけられることはほとんどなかった。植物器官の代謝機能や形態形成は、転写制御因子や情報伝達因子などを介した制御ネットワークで結びつけられた多数の遺伝子の働きによって決められているが、重要な制御因子の遺伝子や遺伝的制御ネットワークが明らかにされた例はまだ僅かである。本重点領域研究『植物器官プラン』では、器官に特有な代謝機能の発現や器官の分化や形態形成に関わる遺伝的制御のネットワークを、モデル植物の分子遺伝学的研究やトランスジェニック植物を使った遺伝子機能の個体レベルでの解析などを導入して解析し、器官形成過程での形態形成と代謝機能発現の連動、器官分化の制御といった植物の成長における高次の調節機構を探る分子的基礎を得ることを目的としている。本総括班では、こうした研究を重点領域として推進することで最大限の相乗効果が得られるような研究環境の整備を行うことを目的としている。平成7年度には班員の全員参加による4日間に渡る全体会議を開催して集中的な討議を行うと共に、ニュースレター「Plant Organ Plan Research Network」をNo.6からNo.9までの4号発刊して班員間の情報交流を推進した。さらに本重点領域研究に関わりの深い特定領域についての討議を深めて共同研究を推進するためのワークショップとして『植物のプロテインキナーゼとシグナル伝達』を開催し、また重点領域研究「植物ホルモン機構」との合同ワークショップ『植物の形づくり』を開催して研究交流を深めた。また若手育成のための若手ワークショップは、多数の参加者を得て活発な会となった。

本年度も、本重点領域研究主催の公開シンポジウム『植物の生長プログラム:器官の形成と機能のダイナミズムへの遺伝子からのアプローチ』のみならず、日本植物生理学会でのシンポジウムを共催して、本領域研究の中間段階での成果の一端を公開して、一般への啓蒙のみならず広く助言を仰いだ。従来、植物器官の代謝機能発現と形態形成に関する研究は別の研究分やとして発展し、分子レベルで結びつけられることはほとんどなかった。植物器官の代謝機能や形態形成は、転写制御因子や情報伝達因子などを介した制御ネットワークで結びつけられた多数の遺伝子の働きによって決められているが、重要な制御因子の遺伝子や遺伝的制御ネットワークが明らかにされた例はまだ僅かである。本重点領域研究『植物器官プラン』では、器官に特有な代謝機能の発現や器官の分化や形態形成に関わる遺伝的制御のネットワークを、モデル植物の分子遺伝学的研究やトランスジェニック植物を使った遺伝子機能の個体レベルでの解析などを導入して解析し、器官形成過程での形態形成と代謝機能発現の連動、器官分化の制御といった植物の成長における高次の調節機構を探る分子的基礎を得ることを目的としている。本総括班では、こうした研究を重点領域として推進することで最大限の相乗効果が得られるような研究環境の整備を行うことを目的としている。平成8年度には班員の全員参加による4日間に渡る全体会議を開催して集中的な討議を行うと共に、ニュースレター「Plant Organ Plan Research Network」をNo.10からNo.14までの5号発刊して班員間の情報交流を推進した。さらに、本重点領域に関わりの深い特定領域についての討議を深めて共同研究を推進するためのワークショップとして本年度は『植物の発生とプログラムされた細胞死』を開催し、また若手育成のための若手ワークショップも例年通り活発な会となった。多くの班員が日本分子生物学会、日本植物学会、日本農芸化学会、日本植物生理学会などでの関連シンポジウムにオ-ガナイザーや演者として本領域研究の成果の一端を公開し、一般への啓蒙のみならず広く助言を仰いだ。本重点領域研究『植物器官プラン』では、器官に特有な代謝機能の発現や器官の分化や形態形式に関わる遺伝的制御ネットワークを、モデル植物の分子遺伝学的研究やトランスジェニック植物を使った遺伝子機能解析などを導入して解析し、形態形成と代謝機能の連動、器官分化の制御といった植物の成長における高次調節機構を探る分子的基礎を得ることを目指した。本総括
IgA腎症におけるmucosal immune systemの病因的役割

本研究では、IgA腎賞の成因を追究するために、“IgA腎症では消化管または呼吸気道を介する感染性あるいは食餌性抗原が発症の引き金になっており、それらの粘膜における免疫学的反応が発症に関与している"という仮説をたて、この仮説に基づき消化管粘膜の役割に注目し経口抗原による実験モデルの作成に取り組んだ。真菌由来のmycotoxinであるnivalenol(NIV)の12ppm 8週間継続投与により腎糸球体へのIgA沈着や血清IgAレベルの上昇、メサンギウムへのelectron dense depositの沈着などIgA腎症様の病態をマウスに誘発することができた。しかもNIVを使ったモデルは再現性がよくstrainに関係なく病態を誘発できるなど極めて有用である。NIV 6 ppmの6ヶ月ないし12ヶ月の長期投与では投与期間に平行して腎へのIgA沈着や血清IgAレベルが増加した。また、NIVを12ppm 8週間投与後普通餌に戻し8週後に検討したマウス(中止実験)ではIgAの沈着や血清IgAレベルは軽減していた。以上より、NIVモデルは粘膜免疫仮説と決して矛盾せず、NIVによる持続的刺激が病態の発現・維持に重要であることがわかった。NIVに対するモデルマウス血清IgAのaffinityをcompetitive ELISAで検討したところ正常コントロールよりもaffinityが強く、モデルマウスのIgAはある程度NIVに特異的であると言える。また、モデルマウスの脾臓リンパ球をコントロールマウスにi.pするとrecipientの血清IgAが上昇し同モデルの成立にリンパ球が関与していることが明らかになった。NIVモデルでは有意な尿所見の変化が認められない点が今後の課題であり、さらに消化管粘膜においてNIVがどう作用しているのか、gut-associated lymphoid tissueがどう反応しているか等、よりミクロな視点から分析を行う予定である。【目的と方法】“IgA腎症は消化管または呼吸気道を介する感染性あるいは食事性抗原が発症の引き金になっており消化管の粘膜等における免疫学的反応が発症に関与している"という仮説をたて、IgA腎症における消化管粘膜の免疫病理学的異常を検討するためまず外因性経口抗原によるモデル作成を試みた.マウスは68週齢のC3H/HeN,C3H/HeJ,Balb/c雌マウスを用いferritinを1mg/mlの濃度で飲水に混ぜて4週間飲ませたほか、真菌由来の環境汚染毒素であるnivalenol(NIV)を6ppmまたは12ppm固形飼料に混ぜて4週ないし8週間投与し、腎の病理組織学的検討とELISAによる血清イミュノグロブリン測定を行った.なお高濃度NIVの影響もみるためC3H/HeNとC3H/HeJには30ppm投与も試みた.【結果と考察】NIV12ppm8週間投与によりすべてのstrainにおいて例外なく有意なIgA沈着が腎糸球体内に認められた(P<0.001)ほか、C3H/HeNで25,584±6,300、C3H/HeJで13,118±2,360mug/ml(コントロールでは各々619±58,643±116)(P<0.001)とヒトのIgA腎症に類似して血清IgAの著明な上昇が認められ、優れた実験モデルと考えられた.30ppm投与マウスはtoxicityが強いのか2週間以内に死亡した.ferritin投与では糸球体への有意なIgA沈着や血清IgAレベルの上昇が無く再現性に乏しかった.【結語】

IgA腎症の発症機序を考えるうえで極めて有用なNIVモデルを新しく作成したが、今後さらに粘膜免疫と発症との関係を詳細に検討する予定である.本研究ではIgA腎症の成因を追究するために、“IgA腎症では消化管または呼吸気道を介する感染性あるいは食餌性抗原が発症の引き金になっており、それらの粘膜における免疫学的反応が発症に関与している"という仮説をたて、この仮説に基づき消化管粘膜の役割に注目し経口抗原による実験モデルの作成に取り組んだ.真菌由来のmycotoxinであるnivalenol(NIV)の12ppm8週間継続投与により腎糸球体へのIgA沈着や血清IgAレベルの上昇、メサンギウムへのelectron dense depositの沈着などIgA腎症様の病態をマウスに誘発することができた。しかもNIVを使ったモデルは再現性がよくstrainに関係なく病態を誘発できるななど極めて有用である.NIV6ppmの6カ月ないし12カ月の長期投与では投与期間に平行して腎へのIgA沈着や血清IgAレベルが増加した.また、NIVを12ppm8週間投与後普通餌に戻し8週後に検討したマウス(中止実験)ではIgAの沈着や血清IgAレベルは軽減していた.以上より、NIVモデルは粘膜免疫仮説と決して矛盾せず、NIVによる持続的刺激が病態の発現・維持に重要であることがわかった.NIVに対するモデルマウス血清IgAのaffinityをcompetitive ELISAで検討したところ正常コントロールよりもaffinityが強く、モデルマウスのIgAはある程度NIVに特異的であると言える.また、モデルマウスの脾臓リンパ球をコントロールマウスにi.p.するとrecipientの血清IgAが上昇し同モデルの成立にリンパ球が関与していることが明らかになった.NIVモデルでは有意な尿所見の変化が認められない点が今後の課題であり、さらに消化管粘膜においてNIVがどう作用しているのか、gut-associated lymphoid tissueがどう反応しているか等、よりミクロな視点からの分析を行う予定である.
母集団スルファメトキサゾール動態パラメータに基づく予防投与での個別化療法の確立

【研究目的】スルファメトキサゾール(SMX)-トリメトプリム合剤(ST合剤)は、ニューモシスチス肺炎等の感染予防として、主に移植領域で用いられている。SMXの体内動態に及ぼすCYP2C9およびNAT2遺伝子多型の影響を検討し、Rapid acetylater (RA)は、Intermadiate acetylater (IA)およびSlow acetylater (SA)より高い血中濃度推移を示すことを明らかにしてきた。一方、予防投与における血中濃度至適レベルは明らかにされておらず、用法用量も施設間で異なっているのが現状である。今回、予防投与で用いられるSMX薬物動態パラメータとNAT2遺伝子多型の関係、有害事象との相関を比較検討した。【研究方法】移植患者161名の腎移植患者を用いた。投与14日目のST合剤(1日用量1g)服用後9ポイントの血中濃度を採血しSMXの体内動態を解析した。CYP2C9(^*3)およびNAT2(^*5, ^*6, ^*7)遺伝子多型をRFLP法を用い解析し、NAT2 RA, IAおよびSAに分類した。有害事象(WBC、RBC、血小板、CCr)はST合剤投与開始時および投与後3か月後を評価した。【結果】AUC_<0-24>を目的変数とする多変量解析の結果、CYP2C9(^*1/^*1 : n=153), (^*1/^*3 : n=8)遺伝子多型による差は観察されず、NAT2 SA群およびCCrがSMXの体内動態に影響を及ぼす要因であることが観察された(p=0.002およびp=0.004)。NAT2遺伝子多型RA (n=75)+IA群(n=65)とSA群(n=21)でWBC、RBC、血小板およびCCrに有意差は観察されなかった。腎移植領域におけるST合剤予防投与の結果、カリニ肺炎発症は観察されず、ST合剤投与終了前後で顆粒球減少などの有害事象は観察されなかった。
純膵液分析による膵疾患診断法の開発とその臨床的意義に関する研究

内視鏡下至乳頭的に採取した純膵液において,通常のパラメーターに加えて,我々の開発したEIA法によりlactoferrin(LF)を測定し, protein plug(PP)の有無との関連など多方面より分析した.さらに,最近開発された各種癌関連粘液糖鎖抗原を膵液で測定し,また,膵疾患においてこれらの免疫組織化学的検討を行った.得られた成績は,以下のように要約される.1)膵液中LF濃度は慢性膵炎(CP)で46%に異常上昇がみられ,石灰化の有無で検討すると,非石灰化群で37%であるのに対し,石灰化群で82%と明らかにLFの陽性率は高かった.膵管像の異常度との関連では,膵管像の変化が高度になるにつれ, LF値も上昇した.以上より,膵液LF値はCPの重症度を反映することが示唆される.2)膵液中PPはCPで55%にみられたが,膵癌(PC)8%に認められる以外,他疾患ではみられず, CPに比較的特異性が高い.3)PPは非石灰化CPで48%に対し,石灰化群で82%と高率にみられた.しかし, PPの有無で膵管像や外分泌機能の異常度には明らかな差異は認められなかった.4)LF濃度とPPの有無との関係では, LFの平均値とその異常上昇率はPP(-)群に比して, PP(+)群で高い傾向にあった.5)膵液中CA19-9値はPCのみならずCPでも著明に高く,その異常率はPCで92%, CPで85%であり,腫瘍マーカーとしての有用性は乏しいが,膵障害を反映する鋭敏なマーカーになりえると考えられる.6)膵液中ST-489とSLXはPCのみで明らかな上昇がみられ,前者で57%,後者で40%が陽性であり,陽性率はそう高くないが,特異性は非常に高い.7)I型糖鎖に属すCA19-9とCA-50はPCで強く発現するが,特異性が乏しい. II型糖鎖のCSLEX-1とSLXは特異性は高いが, PCでの発現は弱い. ST-439とDU-PAN-2はPCでの発現が強く,特異性も比較的優れている.8)CPでは小膵管の増生部を中心にCA19-9の発現が高度となり, CPでの膵液中CA19-9の上昇として反映されるのであろう.内視鏡下至乳頭的に採取した純膵液において,通常のパラメーターに加えて,我々の開発したEIA法によりlactoferrin(LF)を測定し, protein plug(PP)の有無との関連など多方面より分析した.さらに,最近開発された各種癌関連粘液糖鎖抗原を膵液で測定し,また,膵疾患においてこれらの免疫組織化学的検討を行った.得られた成績は,以下のように要約される.1)膵液中LF濃度は慢性膵炎(CP)で46%に異常上昇がみられ,石灰化の有無で検討すると,非石灰化群で37%であるのに対し,石灰化群で82%と明らかにLFの陽性率は高かった.膵管像の異常度との関連では,膵管像の変化が高度になるにつれ, LF値も上昇した.以上より,膵液LF値はCPの重症度を反映することが示唆される.2)膵液中PPはCPで55%にみられたが,膵癌(PC)8%に認められる以外,他疾患ではみられず, CPに比較的特異性が高い.3)PPは非石灰化CPで48%に対し,石灰化群で82%と高率にみられた.しかし, PPの有無で膵管像や外分泌機能の異常度には明らかな差異は認められなかった.4)LF濃度とPPの有無との関係では, LFの平均値とその異常上昇率はPP(-)群に比して, PP(+)群で高い傾向にあった.5)膵液中CA19-9値はPCのみならずCPでも著明に高く,その異常率はPCで92%, CPで85%であり,腫瘍マーカーとしての有用性は乏しいが,膵障害を反映する鋭敏なマーカーになりえると考えられる.6)膵液中ST-489とSLXはPCのみで明らかな上昇がみられ,前者で57%,後者で40%が陽性であり,陽性率はそう高くないが,特異性は非常に高い.7)I型糖鎖に属すCA19-9とCA-50はPCで強く発現するが,特異性が乏しい. II型糖鎖のCSLEX-1とSLXは特異性は高いが, PCでの発現は弱い. ST-439とDU-PAN-2はPCでの発現が強く,特異性も比較的優れている.8)CPでは小膵管の増生部を中心にCA19-9の発現が高度となり, CPでの膵液中CA19-9の上昇として反映されるのであろう.本年度では、各種膵疾患を中心として、内視鏡下径乳頭的に純膵液を採取し、重炭酸,amylase,総蛋白などの通常のパラメーターに加えて、我々の開発したRIA法によりlactoferrin(LF)を測定し、さらに最近開発された癌関連粘液糖鎖抗原であるCA19-9,DU-PAN-2,CA-50,ST-439,CA-125をも測定し、分析を加え、以下の成績を得た。1.口膵液中CA-125とDU-PAN-2値は各疾患群で明らかな差異はみられず、診断のパラメーターとはなりえないと思われる。

2.膵液中CA19-9値は椁性膵炎(CP)群でも対照(C)群に比して著明な高値を示し、PC群とかなりオーバラップするものがみられた。C群を基準にすると、PC群100%,CP群62%が異常高値と判定された。血清CA19-9測定の有用性に比較すると、腫瘍マーカーとしてあえて膵液中のものと測定する利点はないかもしれないが、CPでもC群に比して、著明に高いので、膵障害を反映する指標として鋭敏なパラメーターになるように思われ、今後、免疫組織学的検討も加え、その意義を明らかにしていく予定である。3.膵液中ST-439値についてみると、C群で殆ど検出されないが、PC群では78%,CP群では15%に検出された。しかし、CP群ではいずれも低値で、カットオフ値を考慮すると、CPでは総て陰性で、PCでは60%が異常高値と判定された。膵液中ST-439の測定は、PCに特異性が高く、鑑別診断にも有用であると思われ、今後、免疫組織化学的検討も加え、その意義を解明したい。4.膵液中LF濃度はCPI群で46%,CP【II】群で20%に異常高値がみられた。一方、石灰化の有無で検討すると、石灰化群で91%,非石灰化群で37%が異常高値を示した。膵液中LF測定は当初期待していたような軽症のCP診断には有用性は乏しいと思われるが、症例を増やして、各種臨床病理的所見と対比し、その病態生理的および臨床的意義を解明していく予定である。本年度は,内視鏡的に純膵液を採取する症例を増やし,昨年度からの重炭酸,anylase,蛋白,lactoferrin(LF),CA19ー9,STー439などに加えて,SLX,CAー50をも新たに測定し,plugの有無との関連などについても分析した.さらに,膵疾患を中心に上述の各種糖鎖抗原の免疫組織化学的検討を行い,膵液中糖鎖抗原の変動の意義を明らかにしようとした.得られた成績は以下のように要約される.1.膵液中LF濃度は慢性膵炎(CP)I群で46%,CPII群で20%の異常上昇がみられた,石灰化の有無で検討すると,非石灰化で37%に対し,石灰化群で91%と明らかにLFの陽性率は高かった.また,膵管線の異常度との関連では,高度膵炎で65%に,中等度膵炎で32%にLFの異常上昇がみられ,高度なCPでよりLFの上昇する頻度が高かった.2.膵液中LF濃度とplugとの関係をみると,plug(+)群で52%,(-)群で40%にLFの上昇がみられ,plug(+)群でLFの上昇する頻度の高い傾向がみられた.3.plugの有無と膵管像の異常度との関連についてみると,高度膵炎で60%,中等度膵炎で26%にplugがみられ,高度な膵炎でより頻繁にplugが認められた.4.各疾患群の膵液中CA50値は対照群と有意な差異はみられず,その測定の意義は認められなかった.5.膵液中SLXは分泌相で判定すると膵癌のみで38%の異常上昇がみられたが,排出相では疾患特異性はみられず,その測定の有用性は乏しい. 5.各種糖鎖抗源の膵組織における免疫組織化学的検索では,I型糖鎖抗原のCA19ー9やCAー50は非癌膵組織でも高率に染色され,癌特異性は低い.しかし,慢性膵炎では小膵管の増生部を中心にCA19ー9の染色性が高度となり,膵液中CA19ー9の上昇として反映され,その病理学的背景になると考えられた,6.SLXとSTー439は非癌膵組織ではほとんど発現せず,癌特異性は非常に高いが,膵癌における陽性率はI型糖鎖群よりも一般に低い.
本州東方沖に出現する仔稚魚の形態と分類に関する研究

平成17年度においては、道東沖から東北沖にかけての親潮域、および移行域の調査海域から得られたハダカエソ科魚類の分類学的研究とチゴダラ科魚類2種の稚魚に関する研究を中心に行った。ハダカエソ科魚類の分類学的研究については、日本初記録種となるLestidiops ringensを移行域から採集し、魚類学雑誌において新和名キタナメハダカを与えて記載した。また、ヤセハダカエソの分類学的再検討により、本種の分布域は北太平洋に限られていることが明らかとなった。現在これらの結果は、本種の仔稚魚の形態と分布特性に関する結果と併せて、投稿中である。チゴダラ科魚類の稚魚については、1989年のサンマの移行域調査から採集された標本であり、改めて種の査定と形態的特徴を精査した。その結果、カナダダラとチゴダラの2種であることが判明した。この2種はともに初期生活史に関する知見が乏しく、稚魚期の標本はこれが初めての報告になる。カナダダラは成魚の吻端が極めて突出しているという特徴を持っているが、稚魚期では吻は丸くなっていた。おそらく体長10センチ未満のサイズから吻部の発達がはじまると推測された。チゴダラに関しては、下顎のひげと腹部の発光器が顕著で、腹鰭が糸状に長く伸長するなどの特徴を有していた。これら2種の稚魚に関しては、外部形態と内部骨格系の形態を含めて、論文を作成中である。平成15年度においては主に薩南海域から道東沖にかけての広範囲にかけて出現するデメエソの仔稚魚について調査を行った。その結果、本種は脊椎骨数が多く本邦産同属他種と識別可能、変態期は体長約9cmであることが判明した。分布特性については水深0-500m層で、前屈曲期から屈曲期にかけての小型仔魚が黒潮域に出現し、後屈曲期から変態期にかけては移行域から親潮域に出現した。また採集時期については冬期の黒潮域に小型仔魚が多く、移行域では個体数密度が春期にピークを向かえていた。これまでデメエソの成魚は主に移行域から親潮域が主な分布域とされていたため、典型的な亜寒帯種の仔魚が黒潮域で採集されることは魚類の生態的知見の中でも極めて興味深い事例である。これは冬に黒潮上流域で産卵された卵が孵化し、海流の北上によって仔魚は成長しながら輸送され、春に移行域へ達すると推測される。この時期の移行域は植物プランクトンのブルームが発生し、餌料となる動物プランクトンも豊富になると考えられる。本種は体長約4cmで稚魚となり、変態期を経て成魚になるまでには主に移行域から親潮域で成長し、成熟個体は産卵のために黒潮上流域へ産卵回遊を行うと推測された。このような生活史を送る魚類は水産上重要魚種とされるサンマ、マイワシが挙げられる。ただしこれらの魚類は表層から亜表層を生息域としている種であり、デメエソは成魚が500-1000mに分布する中深層性魚類である。このことから生息層が異なる様々な魚類にとって、本州東方沖の移行域は仔稚魚の餌場として大変重要であることが明らかになった。平成16年度においては主に道東沖から薩南海域にかけて出現するハダカエソ科の仔稚魚に関する研究を行った。特にこれまで仔魚期の形態や出現場所が全く不明であったヤセハダカエソについてのその詳細を明らかにした。その結果、小型仔魚は冬期の黒潮域に出現し、稚魚期になると春の移行域に達することが明らかとなった。本種の、成魚の主分布域は北西太平洋において親潮の影響をうける亜寒帯域であることから、黒潮域に産卵回遊を行っている可能性が示唆された。同時に、これまで本種の新参シノニムとされていたニュージーランド産のSlemonosudis molestaについてタイプを含む標本を精査したところ、脊椎骨数や側線上の鱗の形態が明らかに異なり、両タイプは別種であると判断した。これらの仔稚魚期に関する結果と、カリフォルニア産の標本との比較を検討しており、今後、まとめて投稿する予定である。また本年度の調査で親潮域の中深層に最も多く出現するハダカエソ科魚類はヤセハダカエソであった。これらの出現種の組成についての調査を行ったところ、9月の調査航海において、クロナメハダカ属の一種、Lestidiops ringensの標本、1個体を得ることが出来た。本種は、吻部が短いこと、臀鰭条数が少ないこと、発光腺を持たないことなどで、ほかのハダカエソ科魚類から識別できる。これまで北東太平洋を主分布域とし、西部では千島列島沖で僅かに報告があるだけであった。この標本の出現は日本近海で明確な標本に基づく初あての記録であり、日本産初記録種として新称を与える論文を作成中である。

また、ヤセハダカエソの分類学的再検討により、本種の分布域は北太平洋に限られていることが明らかとなった。現在これらの結果は、本種の仔稚魚の形態と分布特性に関する結果と併せて、投稿中である。チゴダラ科魚類の稚魚については、1989年のサンマの移行域調査から採集された標本であり、改めて種の査定と形態的特徴を精査した。その結果、カナダダラとチゴダラの2種であることが判明した。この2種はともに初期生活史に関する知見が乏しく、稚魚期の標本はこれが初めての報告になる。カナダダラは成魚の吻端が極めて突出しているという特徴を持っているが、稚魚期では吻は丸くなっていた。おそらく体長10センチ未満のサイズから吻部の発達がはじまると推測された。チゴダラに関しては、下顎のひげと腹部の発光器が顕著で、腹鰭が糸状に長く伸長するなどの特徴を有していた。これら2種の稚魚に関しては、外部形態と内部骨格系の形態を含めて、論文を作成中である。
植物SRY遺伝子:ナデシコ科雌雄異株植物ヒロハノマンテマのY染色体特異的遺伝子

本研究の目的は、ヒロハノマンテマ(9,400Mb)のY染色体(860Mb)の雄性決定領域とそこにコードされた雄性決定遺伝子(植物のSRY遺伝子)を同定することにある。このため、雄ゲノムを用いたBACライブラリーの構築を進めている。ヒロハノマンテマのY染色体STSマーカー(ScD05)に類似した配列を含むBACクローン断片を得た。この断片には蕾で優先的に発現している遺伝CCLS96.1が存在しており、雄では葉より蕾において転写産物の蓄積が多く、雌の蕾では蓄積がほとんどないことがわかった。ただし、CCLS96.1は、non-coding RNAで、タンパク質をコードしていないことが示唆された。ヒロハノマンテマの染色体末端には、特徴的なサテライトDNA(S1-distal-satDNA)が、常染色体では8対の両腕と3対の片腕に局在し、性染色体てはX染負体の両碗とY染色体の下腕に局在する。構築中のBACライブラリーからS1-distal-SatDNAの繰り返し構造を含む11個のBACクローンを単離した。各クローンの繰り返し単位(約310bp)の塩基配列を決定し、近隣結合法を用いて無根系統樹を作成したところ、11個のBACクローンより得られた繰り返し単位は4つのクラスター(SacI, KpnI, E, Fファミリー)を形成した。染色体上の分布を調べるため、KpnIファミリーとSacIファミリーの配列をプローブとしてマルチカラーFISHを行ったところ、KpnIファミリーは7番染色体に存在することを見出した。KpnIファミリーを含むBACクローン(#15B12)にはKpnIファミリー約450個からなるストレッチがほぼ完全に含まれているが、このストレッチに隣接する領域はY染色体短腕末端に相同性があることが示唆されている。この領域付近でY染色体特異的遺伝子の探索を続行している。