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霊的世界と医学の交錯点―古代から近世における心身観をめぐって―

二つの研究の柱を設けて研究を進めた。一つ目は医学に於ける「鬼」病の研究である。日中の医学では「鬼」などの霊的なものを病因と考え、それに医学的対処が可能であるとすることがあった。また医学が呪術を取り入れることもあった。「鬼」病に医学的対処が可能であったのは、「鬼」の物質化とでもいうべき発想が背景にあったことが挙げられる。また、『医談抄』について、上古からの権威的医療である脈診や鍼の有効性を、衰退史観を言い立てることによって否定していること、説話として治療事例を引用することによって医療のあり方を説くという性格があることを明らかにした。前近代においては、人間の生霊や死霊、狐などの動物、呪符などによる呪いが人間の身の不調の原因とされることが少なくなかった。本年度は、そのような病症に対する医学及び医学者のあり方について、基礎的な資料を収集、整理、分析し、研究の基礎的なデータを整備する作業を行った。具体的には、月例の研究会を、研究代表者、精神医学者の長谷川雅雄南山大学名誉教授、人類学者のペトロ・クネヒト南山大学元教授と共に行った。さまざまな問題・資料を取り扱ったが、特に集中して議論したのは、以下の2つである。ひとつは、「蠱」と呼ばれる虫を使って行われるまじないによって起こる病症である。そのまじないの方法や、対処の方法などについての言説を、学際的な観点から分析・検討を行った。もうひとつは、近代的な視点からは、純粋な医薬というより、呪薬という側面が強いと捉えられる「竜骨」についてである。その素材や薬効がどのようなものと考えられてきたか、その議論の歴史を日中の医書を中心に検討し、霊的な力が見出しやすい薬が、どのような病にどのような思考を背景に用いられたのかを考えた。如上の作業と並行して、本年度は鎌倉時代の医学書である『医談抄』の研究を行い、『医談抄』が、成立当時の医学的な環境をどのように捉え、どのような提言を行っているのかを考えた。『医談抄』は衰退史観で医にかかわる環境を捉えており、時代が悪くなった今ではもはや、よき時代であった上古と同様の医術を行うことはできないことを説いている。このことが、前時代よりは病への霊的な見方が後退したように見える鎌倉時代に於いて、このような時代観があったことは、本研究のテーマである霊物が原因とされた病への向かい方と深く関わるという見通しを持つことができる。「研究実績の概要」欄に示したように、資料の収集・分析は進んでいるが、中国医学書の読解には予想以上に時間がかかり、論文としてまとめるに至らなかった。資料の集積・分析については順調に進んでいる。今年度も、日本古典文学専攻の代表者、研究協力者で、医学研究者の長谷川雅雄、同じく文化人類学者のペトロ・クネヒトによる定例の研究会を開催し、研究題目にかかわる文献資料の収集・分析に努めた。その過程で、さまざまな問題が浮上してきたが、その一つに「竜骨」の問題がある。「竜骨」は、霊的な側面をも持っており、霊的な原因で起こる病にも効くとされた。その正体が何か、本当に竜の骨であるのかどうか、竜骨がどのような病に効くかについては中国でも日本でもさまざまな議論があり、それを追うことで、霊的な世界と医学のかかわりがどのように考えられていたのかを、中国、日本両方に於いて追っていくことができる見通しを持った。この他にも、従来から着目している「虫」や「蠱」についての資料を引き続き収集・分析した。以上の成果については、2017年度中に論文として発表する予定である。また、前年度に引き続き庚申信仰についてのフィールドワークを行い、いくつかの知見を得た。この他、文献資料の発掘調査のため、年度末に武田科学振興財団杏雨書屋、京都大学附属図書館富士川文庫に赴き、未翻刻の資料の発掘を行った。その分析は2017年度に行う。鎌倉時代の医事説話集である『医談抄』の研究については、かなり進展し、論文の発表および研究発表を行うことができた。その注釈的研究については完成に近づくところまで進めることができたが、写本における誤写、原著作者による出典の誤読が疑われる箇所などについては難解で、未だ解読には及んでいない箇所が残っている。勤務先では2017年度よりクォーター制が実施されるが、2016年度は学科・大学院の時間割担当に研究代表者が当たっていた。クォーター制の開始にあたっては学内・学科内にさまざまな検討事項が山積し、事務的作業量も例年に比べて膨大であった。この負担が予想していた量を超えたので、その分研究計画が遅延した。2017年度は、クォーター制の開始に伴って研究に集中する期間が増えること、時間割の担当から外れることで、研究の遅れは取り戻せるものと考えられる。本年度は、研究計画年度の最終年度なので、研究成果をまとめるべく、共同研究者達との研究会を定期的に開催し、資料の整理と読解、研究論文の執筆に努めた。

その結果、霊的世界と医学の交錯点という本研究課題について、かつては「鬼」を病因とする病が日中において広く考えてられており、それに対して、宗教的・呪術的治療がなされるだけではなく、薬や鍼灸のような医学的治療がなされ、しかもそれらの治療がれっきとした医学書の中で医師によって主張されていたという点が、かつての身体観を分析する重要な手がかりが隠れていると考えるに至った。如上の観点から日中の「鬼」病にかかわる言説を収集・整理し、共同研究者と共に論文を執筆した。同論文は長編となったため、学内の紀要に連載する予定である。年度内に執筆したが、年度内に於ける発表はかなわなかったため、2018年度初頭に印刷・発表の予定である。また、本研究にかかわる重要な資料である『医談抄』について、説話によって医学を説くという同書のコンセプトの意味を考えた研究発表を4月に開催された説話文学会のシンポジウムで行った。本研究における資料の収集、捜索については前年度から引き続いて行ったが、代表者が校務上出張しにくい役職についたこともあり、訪書については十分行えず、活字資料の収集・整理にとどまった。この他『太平広記』にまとまった「鬼」についての記載があるので、先行研究も踏まえながら医学という視点からの分析を行った。二つの研究の柱を設けて研究を進めた。一つ目は医学に於ける「鬼」病の研究である。日中の医学では「鬼」などの霊的なものを病因と考え、それに医学的対処が可能であるとすることがあった。また医学が呪術を取り入れることもあった。「鬼」病に医学的対処が可能であったのは、「鬼」の物質化とでもいうべき発想が背景にあったことが挙げられる。また、『医談抄』について、上古からの権威的医療である脈診や鍼の有効性を、衰退史観を言い立てることによって否定していること、説話として治療事例を引用することによって医療のあり方を説くという性格があることを明らかにした。夏期休暇など、研究に集中できる期間を利用して論文の執筆に当たる予定である。資料の集積・分析については進んでいるが、民俗例の調査などを精力的に進めていきたい。また鎌倉時代の医書『医談抄』と『医家千字文註』の注釈的研究と分析を進めて、日本中世に於ける身体観・医学観の研究を進めて、当研究課題への一助としたい。定例の研究会については、今後もできるだけ頻度を多く開催する。2016年度までは研究の基礎になる情報の収集に努め、それは充分に集積されたものと思われる。また、それを論文化するための議論も熟している。2017年度はそれらを成果としてアウトプットすべく、夏期休暇を中心に研究を進める。国文学購入予定であった書籍の一部が、中国からの取り寄せが必要であったり、品切れであったりして年度内に購入できなかった。次年度使用額は約65000円であるが、年度末に研究に要した費用の支出の都合によるものであり、問題ないものと考える。取り寄せが必要な書物については今年度早々に発注し、品切れの書物については古書店などでの購入を試みる。年度末の資料の写真撮影の費用などに充当する。
実行中のソフトウェアを発展させる基本機構の研究

本研究では、昨年度の本研究の研究成果であるライブラリ関数のバージョン管理機能を発展させ、オブジェクトの動的バージョン管理による実行中のソフトウェアの発展機構を実現した。オブジェクトのバージョン管理を実現するにあたっては、オブジェクトのバージョンをrevisionとvariationの2種類に分類して実現方式を検討した。Variationの実行時のバージョン管理の方式として、代理オブジェクトを用いたメカニズムを考案し実現した。本方式では、複数のバージョンを持つオブジェクトを使用するユーザプログラムを、そのオブジェクトの特定のバージョンと直接リンクするわけではなく、代理オブジェクトとリンクする。その代理オブジェクトが、ユーザプログラムからの要請に応じて、必要なオブジェトのバージョンをアクセスし、その結果をユーザプログラムに返す。これにより、オブジェクトが複数のバージョンを持つことが可能となり、それらを実行時に選択して使用することが可能となった。Revisionのバージョン管理では、基本的には、variationの切り替えと同様に代理オブジェクトを用いた。さらに、オブジェクトの新バージョンを作成する時に、既存のバージョンの状態、すなわちインスタンス変数の値を受け継ぐために、Derivationをもとにしたメカニズムを考案し実現した。本方式では、既存のオブジェクトに変更を加えたい場合には、新バージョンのオブジェクトを表すクラスを、既存のオブジェクトのクラスの導出クラスとして定義する。さらに、オブジェクトの新バージョンを、既存のバージョンを親オブジェクトとする導出クラスのインスタンスとして生成する。これにより、既存のバージョンの状態を失うことなく、新バージョンへ切り替えることが可能となった。
糖尿病による末梢神経の酸化ストレスおよび栄養血管退行に対する運動療法の効果検証

糖尿病の合併症に末梢神経障害があり、その予防は重要な課題である。糖尿病患者は運動することを推奨される。本研究は糖尿病による末梢神経障害に対する運動療法の効果を検証することを目的に実験を進めた。ラットを対照群、糖尿病群、糖尿病+運動群の3群に分け実験を行った。糖尿病+運動群のラットには5週間の運動負荷を実施した。神経伝導速度を測定するため、坐骨神経と脛骨神経を刺激し、第2骨間筋より筋電位を得た。神経の刺激開始から筋電位が得られるまでの時間を算出し神経伝導速度を測定した。神経伝導速度は対照群に比べ、糖尿病群と糖尿病+運動群で有意に低下した。しかし、糖尿病+運動群の神経伝導速度は糖尿病群よりも有意に速く、運動が糖尿病による末梢神経障害を予防する可能性が示唆された。そのメカニズムを探るため、坐骨神経を摘出し、抗酸化酵素であるカタラーゼ、グルタチオンペルオキシダーゼ、スーパーオキシドジスムターゼ活性を測定した。その結果、対照群に比べ糖尿病群と糖尿病+運動群でカタラーゼ活性が低下、スーパーオキシドジスムターゼ活性が上昇する傾向が認められた。しかしながら、糖尿病群と糖尿病+運動群の間でカタラーゼ活性とスーパーオキシドジスムターゼに有意な差は認められなかった。このことより、糖尿病では末梢神経の抗酸化酵素活性が変化し、酸化ストレスが変化していること、運動は糖尿病の末梢神経の抗酸化酵素活性に効果を認めず、酸化ストレスを軽減しないことが示唆された。本実験で最も手技が難しい神経伝導速度の測定において、刺激電極を作成したことで、測定が順調に実施できたためである。運動療法が糖尿病の末梢神経障害を予防するメカニズムを探るため、末梢神経の毛細血管に着目して実験を行う。毛細血管に蛍光色素を環流させ、毛細血管の3次元像を構築し、毛細血管の構造を解析する。併せて、血管新生に関わるタンパク質を分析し、形態学的、生化学的に運動療法の糖尿病性末梢神経障害予防効果のメカニズムを探る予定である。
動物の記憶に関する生理・薬理心理学的研究

ラットの作業記憶の様相とその中枢メカニズムを明らかにするために,昨年度ひきつづいて扁桃核の損傷効果について検討した.さらに,加齢にともなって作業記憶が減退するかどうかという点を検討するために,老齢ラットの遅延見本合せ学習を若齢ラットのそれと比較した.それらの結果の概要は以下のとおりである.1.大脳辺縁系の海馬を損傷すると作業記憶は著しく阻害されるが,扁桃核の損傷によってはほとんど阻害されなかった.2.老齢ラットの作業記憶は,遅延見本合せ学習でみる限り若齢ラットに比べて著しく劣ることはなかった.ラットの作業記憶(working memory)の様相とその中枢メカニズムを明らかにするために, T型迷路における遅延見本合せおよび非見本合せ反応を指標にして,生理,薬理心理学的な検討を行い,以下の知見を得た.1.遅延見本合せ課題と遅延非見本合せ課題の正選択率は,前者よりも後者の方が高かった.これは,ラットが持つ自発的交替という傾性が,後者により有利に働いたためであると考えられる.2.遅延時間を段階的に延長しながら訓練を重ねていくと, 20分間という長時間の遅延を置いても,正選択率がランダムレベルよりも有意に高かった.すなわちこのパラダイムを用いると,従来考えられていたラットの記憶可能な時間よりも,かなり長い時間の記憶保持能力がラットに認められた.3.フィゾスチグミンの長期投与によって脳内のコリン受容体数を減少させると,この作業記憶は阻害された.さらに,抗コリン薬のスコポラミンの投与によっても作業記憶が阻害された.末梢性の抗コリン薬は阻害効果を示さなかったので,上の阻害効果は中枢性の効果であると考えられる.4.この作業記憶は大脳辺縁系の海馬を損傷すると阻害され,扁桃核損傷によっては阻害されなかった.5.加齢にともなって作業記憶が減退するかどうかを検討するために,老齢ラット(21カ月齢)に遅延見本合せ学習を行わせたところ,若齢ラットと成績に差は認められなかった.以上の結果から,作業記憶は海馬のコリン作動系によって司どられているということが示唆された.ラットの作業記憶の様相とその中枢メカニズムを明らかにするために,昨年度ひきつづいて扁桃核の損傷効果について検討した.さらに,加齢にともなって作業記憶が減退するかどうかという点を検討するために,老齢ラットの遅延見本合せ学習を若齢ラットのそれと比較した.それらの結果の概要は以下のとおりである.1.大脳辺縁系の海馬を損傷すると作業記憶は著しく阻害されるが,扁桃核の損傷によってはほとんど阻害されなかった.2.老齢ラットの作業記憶は,遅延見本合せ学習でみる限り若齢ラットに比べて著しく劣ることはなかった.ラットの作業記憶(working memory)の様相とその中枢メカニズムを明らかにするために、まずラットに適した実験パラダイムを開発した。すなわちこのパラダイムでは、T型迷路においてまず左右いずれかの目標箱にのみ入れるようにして目標箱で報酬を与えた(見本走行)。その後一定の遅延時間を置いた後に、今度は左右いずれの目標箱にも入れるようにして、ラットに目標箱を選択させた(選択走行)。この時見本走行時と同じ目標箱に入れば正選択とする場合を「遅延見本合せ課題」、異なる目標箱の選択を正選択とする場合を「遅延非見本合せ課題」とし、両者の比較および生理・薬理学的な検討を行い、以下のような結果を得ている。1.遅延見本合せ課題と遅延非見本合せ課題の正選択率は、前者よりも後者の方が高かった。これは、ラットが持つ自発的交替という傾性が、後者により有利に働いたためであると考えられる。2.遅延時間を段階的に延長しながら訓練を重ねていくと、20分間という長時間の遅延を置いても、正選択率がランダムレベルよりも有意に高かった。すなわちこのパラダイムを用いると、従来考えられていたラットの記憶可能な時間よりも、かなり長い時間の記憶保持能力がラットに認られた。3.フィゾスチグミンの長期投与によって脳内のコリン受容体数を減少させると、この作業記憶は阻害された。さらに、抗コリン薬のスコポラミンの投与によっても作業記憶が阻害された。末梢性の抗コリン薬は阻害効果を示さなかったので、上の阻害効果は中枢性の効果であると考えられる。4.この作業記憶は大脳辺縁系の海馬を損傷すると阻害され、扁桃核損傷によっては阻害されなかった。以上の結果から、作業記憶は海馬のコリン作動系によって司どられているということが示唆された。
肝細胞増殖因子(HGF)を用いた低コンプライアンス膀胱治療の研究

本研究は、肝細胞増殖因子(HGF)のもつ優れた臓器再生能力に着目したもので、HGFによる低コンプライアンス膀胱治療の可能性を検討しようという試みである.現在までの研究結果は以下の通りである.1)下部尿路通過障害モデルによる膀胱線維化の検討:膀胱壁過伸展による膀胱壁内のHGF、HGF受容体であるc-Met、およびTGF-βの変化をELISAおよびWestern Blot法にて検討した.最長10ヶ月まで観察した.膀胱壁の線維化の進行を確認した.急性期よりTGF発現の上昇を認め、慢性期においてはc-Metの減少または消失を認めた.慢性期に至るまで、TGFの高発現は継続した.2)HGFプラスミドの導入in vitro:ウイルスを用いない遺伝子導入法として超音波導入法を検討した.ルシフェラーゼDNAをヒト大動脈平滑筋培養細胞に導入しルシフェラーゼ活性の程度を検討した.更にヒトHGFを導入し、発現したHGFの濃度をELISA法で検討した.この基礎実験より、超音波導入法の最適条件を得た.3)HGFプラスミドの導入in vivo:ラット膀胱に対する超音波遺伝子導入法を検討した.In vitroにより得られた結果を参考に、ラット膀胱に対してヒトHGF-DNAを導入した.一定の条件下で、良好な遺伝子導入効率が観察された.なお、一部の結果は、2002・2003年第33国際尿禁制学会にて発表した.本研究は、肝細胞増殖因子(HGF)のもつ優れた臓器再生能力に着目したもので、HGFによる低コンプライアンス膀胱治療の可能性を検討しようという試みである。現在までの研究結果は以下の通りである。1)下部尿路通過障害(BOO)モデルによる膀胱線維化の検討:ラットBOOモデルを用いた。高圧環境下にある膀胱内のHGF、HGF受容体であるc-Met、およびTGF-βの変化をELISAおよびWestern Blot法にて検討した。最長10ヶ月まで観察した。急性期よりTGF発現の上昇を認め、慢性期においてはHGFおよびc-Metの減少または消失を認めた。慢性期に至るまで、TGFはその発現を維持した。2)HGFプラスミドの導入in vitro:ウイルスを用いない遺伝子導入法として超音波導入法を検討した。ルシフェラーゼDNAをヒト大動脈平滑筋培養細胞に導入しルシフェラーゼ活性の程度を検討した。更にヒトHGFを導入し、発現したHGFの濃度をELISA法で検討した。この基礎実験より、超音波導入法の最適条件を得た。3)HGFプラスミドの導入in vivo:ラット膀胱に対する超音波遺伝子導入法を検討した。In vitroにより得られた結果を参考に、ラット膀胱に対してヒトHGF-DNAを導入した。一定の条件下で、良好な遺伝子導入効率が観察された。以上の結果をもとに、今後、HGFの線維化膀胱への治療効果について検討して行く予定である。本研究は、肝細胞増殖因子(HGF)のもつ優れた臓器再生能力に着目したもので、HGFによる低コンプライアンス膀胱治療の可能性を検討しようという試みである.現在までの研究結果は以下の通りである.1)下部尿路通過障害モデルによる膀胱線維化の検討:膀胱壁過伸展による膀胱壁内のHGF、HGF受容体であるc-Met、およびTGF-βの変化をELISAおよびWestern Blot法にて検討した.最長10ヶ月まで観察した.膀胱壁の線維化の進行を確認した.急性期よりTGF発現の上昇を認め、慢性期においてはc-Metの減少または消失を認めた.慢性期に至るまで、TGFの高発現は継続した.2)HGFプラスミドの導入in vitro:ウイルスを用いない遺伝子導入法として超音波導入法を検討した.ルシフェラーゼDNAをヒト大動脈平滑筋培養細胞に導入しルシフェラーゼ活性の程度を検討した.更にヒトHGFを導入し、発現したHGFの濃度をELISA法で検討した.この基礎実験より、超音波導入法の最適条件を得た.3)HGFプラスミドの導入in vivo:ラット膀胱に対する超音波遺伝子導入法を検討した.In vitroにより得られた結果を参考に、ラット膀胱に対してヒトHGF-DNAを導入した.一定の条件下で、良好な遺伝子導入効率が観察された.なお、一部の結果は、2002・2003年第33国際尿禁制学会にて発表した.
テクスチャリングによる高品位塗装技術の開発

下地塗装の塗装率について研究し、製品への高品質な塗装条件の決定を目標としている。平面とテクスチャリングされた基板表面に下地塗装であるプラサフ塗装を行い、塗装表面を画像処理することで塗装率を求めた。また、塗料の濡れ性を調べるシステムを開発し、濡れ性と基板表面の関係についても評価を行った。その結果、塗装条件、テクスチャリングの仕様、塗料の濡れ性によって塗装品質が変化することが示された。H24年度に行った4種類の塗装評価手(1クロスカット法(JIS H5600-5-6)による付着性評価、2マンドレル法(JIS K5600-5-1)による耐屈試験、3プルオフ法(JIS K5600-5-7 (ISO 4624))による付着性評価、4光沢度計による表面測定)により付着性及び表面光沢特性には基板と下地塗装(プラサフ処理)の関係が非常に重要であることがわかった。そこでH25年度は基板と下地塗装の関係を調査し、塗料のムラ評価をするための基礎データの採取を行った。行った実験とその結果を以下に示す。(1)基板上に塗布される塗料の観察と解析ソフトウェアの開発:基板上に塗布される塗料を動画によりその場観察し、画像を解析するソフトウェアを開発した。さまざまな塗布条件で実験を行い、塗料の塗装率を算出した。その結果、一般的に塗装は重ね塗りされるが、ほとんどの実験条件下では一回目の塗装により基板上を被覆することがわかった。二回目以降の塗装は、一回目に被覆できなかった微小領域への被覆と基板表面の凹凸を低減させる効果があると考えられる。(2)基板と塗料のぬれ性評価のためのソフトウェアの開発:塗装装置を用いた観察はマクロ的な塗料の状態を観察できるが、塗料一滴の挙動を観察することは難しい。そこで、ディスペンサーを用い塗料一滴の挙動(ぬれ性)の観察を行い、接触角などの形状パラメータを算出するソフトウェアの開発を行った。現状では静的に塗料を基板上に滴下した条件でソフトウェアの動作検証を行っている段階であるが、今後は動的に塗料を基板上に速さを持って衝突させた場合の条件下におけるぬれ性を調査する予定である。また、塗料の均一性(ムラ)を評価するための測定機を開発するため、測定機の設計を行い、現在、機構部品の組み立てと制御及びデータ取得プログラムを作成中である。H21H23年度に開発した塗装ロボットを用い、塗装特性と表面テクスチャとの関係を検証し、製品への高品位な塗装条件を検証するために、水性塗料による塗装実験を行った。塗装実験の評価手法としては、1クロスカット法(JIS H5600-5-6)による付着性評価、2マンドレル法(JIS K5600-5-1)による耐屈試験、3プルオフ法(JIS K5600-5-7 (ISO 4624))による付着性評価、4光沢度計による表面測定、の4種類の評価方法により塗装状態を評価した。その結果、以下の結果を得た。テクスチャ処理前の基板において、塗装速度、塗料噴射量、及び塗装回数による塗膜の表面機能すなわち表面粗さ、付着力及び光沢度を評価した。その結果、高品質な塗装を行うための条件は、塗装速度が100mm/s以上150mm/s以下、塗料噴射量が3.0g/min以上5.0g/min未満、クリヤー塗装回数が3回であった。テクスチャ処理の粗さ、方向及び塗装方向における塗膜の表面機能すなわち表面粗さ及び付着力を評価した。その結果、表面粗さにおいては、一方向のテクスチャ処理が二方向と比べて粗い表面となった。また、塗装方向による塗膜の表面粗さの相違は検出されなかった。付着性においては、基板の表面粗さが滑らかなほど塗装後の塗膜の付着力が高くなった、さらに、テクスチャに対して平行方向の塗装のほうが、直交方向の塗装と比べて付着力が高くなった。H24年度の研究実績は精密工学会春季大会で発表を行った。本年度はH25年度に行った(1)塗装率測定実験、及び、(2)濡れ性測定実験の精度を向上するため、実験装置の改良及び測定・評価プログラムの改良を行った.その内容と結果を以下に示す。(1)塗装は、下地塗装、本塗装、クリア塗装の順に行われる。塗装において、下地塗装は本塗装の付着性や防腐性の向上などの重要な役割を担っている。すなわち、下地塗装は本塗装やクリア塗装に影響を及ぼす重要な工程である。そこで、本研究は下地塗装とテクスチャリングされた表面の塗装率を撮影画像から自動測定を行い、製品への高品質な塗装条件の決定を目的としている。昨年までの研究において測定プログラムを開発したが、その結果と人の視覚による評価では若干の差があった。そこで本年度はプログラムのアルゴリズムの改良と実験環境の整備,実験装置の改良を行い人の評価結果と自動測定による結果との差をなくした。

また,フラットな基板とテクスチャリングされた基板での塗装実験を行い、テクスチャリングによる塗装特性の影響も調査した。(2)濡れ性測定においては液体の接触角を自動算出するプログラムを開発した。昨年までにプログラムを開発し様々な条件下において接触角を自動算出した。その結果、液体の滴下条件、照明などの周囲の環境、基板表面の状態が接触角算出に影響を及ぼすことがわかった。そこで本年度は接触角算出に影響を及ぼす因子を固定化し、その条件下で接触角を正確に算出できるようにプログラムの改良を行った。その結果、より信頼のおける値を自動算出することができた。工学基板上に塗布される塗料のぬれ性(接触角)や塗装率などを算出するプログラムを開発したことにより、定量的に塗装状態を評価できるようになったが塗装条件が多岐に及ぶため理想的な塗装条件を見つけるためには実験条件を更に増やす必要がある。そのためH25年度では実施できなかった実験がある。H26年度は実験条件を増やし、最適な塗装条件の分類を行う予定である。また、本研究の目標の一つである塗料の均一性評価試験器の開発においては測定機の制御プログラムの開発を行っている。基板上の表面テクスチャと塗装特性の関係は前述の4種類の評価試験により関連付けられた。しかし、これらの結果は塗装が完了した表面に対しての結果であり、塗装工程間による塗装状態の変化など更に細かく塗装状態を調べることにより、最終的な塗装状態を高品位にすることができると考えられる。したがって、評価試験により一つの結果は得られたが、更に行う課題が出てきたという状況である。また、本研究の目標の一つである塗料の均一性評価試験器の開発においては測定機の設計が終わり組み立て中である。H25年度中には実験を行い、結果を得られる見通しである。流動性(濡れ性)試験についても現在実験を行い、その結果を解析するための解析プログラムを作成している段階であり、H25年度中に結果を出せる見通しである。塗料の均一性(ムラ)、流動性(濡れ性)を評価する。1塗料の均一性(ムラ)測定装置の開発:測定原理は、透明基板上に塗装された塗膜にレーザを照射し、透過した光量を測定することで塗料ムラを測定する。そして、塗膜界面の表面性状と塗装条件を考察することにより塗料が均一に塗布される最適条件を推測する。2流動性(濡れ性)解析システムの開発:開発したぬれ性評価プログラムによりぬれ性パラメータを求め、塗装結果と比較・検討を行い、基板上のテクスチャと関連した塗装の最適条件を調査する。2流動性(濡れ性)解析システムの開発:テクスチャ処理された表面の濡れ性をビデオカメラにより測定し、画像処理により濡れ性パラメータを求め、塗装結果と比較・検討を行う。H25年度は塗料の均一性を測定する装置の開発を終了し、実験を行う予定である。現在は装置の組み立てを行っており、装置を構成する配線や部品などを計上する。
高濃度二酸化炭素環境下におけるオゾンが水稲に及ぼす影響とその品種間差の要因解明

高濃度CO2環境下において、水稲の収量に対するO3影響が変化するか調べた。O3とCO2の暴露実験を実施するために、1年目に小型オープントップチャンバーにO3発生装置やCO2添加装置を導入した実験装置を作成した。23年目の2作期において、水稲4品種に対するO3とCO2の暴露実験を実施し、収量などに及ぼす影響を調べた。全品種とも高CO2(+140ppm)により収量が増加する傾向、O3の増加に伴う収量の有意な低下が認められた。高O2環境下におけるO3による収量低下程度は現状レベルのCO2でのO3影響とほぼ同様で、140ppmのCO2濃度上昇ではO3感受性は大きく変化しないのではないかと考えられた。我が国の水稲の収量等に対して、光化学オキシダントの主成分であるオゾン(O3)による悪影響の発現が高濃度二酸化炭素(CO2)環境下で変化するか評価するとともに、O3とCO2の単独および複合影響の品種間差異が発現する要因を調べるために、当該年度では、すでに開発した小型オープントップチャンバーを改良しO3やCO2を添加する装置を作成し、それぞれの濃度制御等の評価を行い、O3とCO2添加実験手法を確立した。具体的には、開発した小型オープントップチャンバーに隣接して市販の物置を設置し、O3発生器、CO2ボンベ、CO2ガスの供給量を制御するための流量計等を配置し、小型OTCへガスを分配するように改良した。この改良した小型Oオープントップチャンバーのガスの制御精度の評価を行ったところ、O3除去効率は、O3除去区ではO3濃度が高い夏期においても野外のO3の約60%が除去されており、O3除去区の濃度は植物にほとんど悪影響を与えないレベルであった。また、小型オープントップチャンバー内にCO2を添加し、野外+100ppm、200ppm、400ppmになるように調整し、その精度を検証したところ、全ての濃度段階である程度精度良くCO2が制御されていた。O3添加についても同様に制御されており、O3とCO2添加が可能な仕様となった。当該年度において改良した小型オープントップチャンバーを用いて次年度以降の水稲に対するO3とCO2添加実験の実施が可能となった。本年度(2年目)は、水稲品種の収量等に対するO3とCO2の単独および複合影響について、前年度(1年目)に作成した小型オープントップチャンバーを用いた暴露実験によって調べ、O3の悪影響発現が高CO2環境下で変化するか評価した。水稲品種(コシヒカリ、彩のかがやき)を用いて、O3濃度3段階[O3除去区(CF)、野外O3濃度区(NF)、野外O3濃度+30ppb区(O3)]と、CO2濃度2段階[野外CO2濃度区、野外CO2濃度+150ppb区(CO2)]を設け、其々のガス処理条件を掛け合わせた6処理区(各3チャンバー反復)を設けた。5月下旬10月上旬まで育成し、収量を計測した。各処理条件で育成したコシヒカリと彩のかがやきの収量および収量構成要素について検討した。その結果、両品種ともCO2添加による有意な影響は認められなかった。コシヒカリにおいては、CO2添加によって子実の総数は増加したが不稔実数も増加し不稔実割合が増加したため増収は認められなかった。一方、オゾンにより収量が低下する傾向が認められた。オゾンによる収量低下の主な要因は、コシヒカリにおいては一穂当たりの稔実数の低下、彩のかがやきにおいては一穂当たりの稔実数の低下と個体あたりの穂数の低下であった。また、O3とCO2の複合影響は認められなかった。本年度(2年目)は、水稲品種の収量等に対するO3とCO2の単独および複合暴露実験を実施し、おおむね順調に進展していると思われる。3年目(最終年度)は、2年目と同様に、1年目に改良した小型オープントップチャンバーを用いて、水稲品種に対するオゾン(O3)と二酸化炭素(CO2)の単独および複合影響評価実験を実施した。水稲4品種(コシヒカリ、キヌヒカリ、彩のかがやき、彩のきずな)を用いて、O3濃度3段階[O3除去区、野外O3濃度区、野外O3濃度+30ppb区(高濃度O3区)]と、CO2濃度2段階[野外CO2区、野外CO2+150ppm区(高濃度CO2区)]を設け、其々のガス処理条件を掛け合わせた6処理区を設け、5月下旬10月上旬において育成し、収量などを計測した。その結果、各処理条件で育成した4品種のいずれにおいても、CO2添加による約1割程度の収量増加傾向が認められた。一方、O3による有意な収量低下もすべての品種で認められた。収量に対するCO2とO3の複合影響は認められず、両影響が相加的に影響していると考えられた。2年目と3年目の曝露実験結果を用いて、各年のO3除去区の収量を100%とした時の相対収量と育成期間中の昼間7時間40ppb以上の積算O3ドースであるAOT40との関係を各品種において検討した。その結果、すべての品種でO3により収量は低下し、現状レベルのO3で814%程度の低下、現状レベル+30ppbで1222%程度の低下が認められた。一方、150ppmのCO2濃度上昇によって収量は、8%15%程度増加していた。

また、それぞれの影響に品種間差が認められたため、収量構成要素について検討したが、応答が1年目と2年目で異なるなど明瞭な品種間差異の要因を突き止めることはできなかった。また、4品種とも高濃度CO2(+150ppm)環境下におけるO3による収量低下程度は現状レベルのCO2でのO3影響とほぼ同様で、150ppmのCO2濃度上昇かではO3感受性はあまり変化しないのではないかと考えられた。高濃度CO2環境下において、水稲の収量に対するO3影響が変化するか調べた。O3とCO2の暴露実験を実施するために、1年目に小型オープントップチャンバーにO3発生装置やCO2添加装置を導入した実験装置を作成した。23年目の2作期において、水稲4品種に対するO3とCO2の暴露実験を実施し、収量などに及ぼす影響を調べた。全品種とも高CO2(+140ppm)により収量が増加する傾向、O3の増加に伴う収量の有意な低下が認められた。高O2環境下におけるO3による収量低下程度は現状レベルのCO2でのO3影響とほぼ同様で、140ppmのCO2濃度上昇ではO3感受性は大きく変化しないのではないかと考えられた。当該年度において改良した小型オープントップチャンバーを用いて次年度以降の水稲に対するオゾンと二酸化炭素の添加実験の実施が可能となり、おおむね順調に進展している。次年度(3年目)は本年度(2年目)と同様に、水稲品種の収量等に対するO3とCO2の単独および複合暴露実験を実施し、総合考察を行っていく予定である。植物生理生態改良した小型オープントップチャンバーを用いて、水稲の収量に対するオゾンと二酸化炭素の添加実験を実施し、光化学オキシダントの主成分であるオゾンによる悪影響の発現が高濃度二酸化炭素環境下で変化するか評価する。当初予定していた海外発表を取りやめたことなどもあり旅費等の支出がすくなくなったため次年度使用額が生じた当初予定していた物品や旅費ならびに人件費の支出等が少なかったため、次年度使用額に変更が生じた。主に、実験実施の際の物品費とアルバイトの雇用など人件費に充当する予定としている。主に実験実施の際の経費に充当する予定。また、状況によってはアルバイトの雇用など人件費として使用予定。
植物細胞の微小管構築に関与する微小管結合タンパク質の生化学的解析

昨年度、MAP200がGDPによる微小管重合阻害効果を軽減することを明らかにした。今年度はMAP200がどのような機構で軽減するのかを調べた。MAP200の有無により各GDP濃度における微小管の動的不安定性の変化を調べた。MAP200は十分なGTPの存在下で伸長速度・カタストロフの頻度・レスキューの頻度の全てを増加させる。そのためMAP200は伸長速度やレスキューの頻度を増加させることで微小管重合量を維持すると思われた。しかし実際には重合速度の増加は僅かであり、レスキューの頻度は著しく減少した。一方、カタストロフの頻度が大幅に減少した。このことからMAP200の軽減効果は主にカタストロフを抑制することによると思われる。またMAP200がカタストロフを引き起こすためには十分なGTPの存在が必要であることが示唆された。MAP200-tubulin複合体どうしがGTPやtaxolの存在下で結合し、特にtaxolの存在下では微小管のプロトフィラメント状になることが確認された。このことより次の仮説を提案した。十分なGTPが存在する場合、微小管のプラス端でMAP200-tubulin複合体は長いプロトフィラメントを形成し、それがシート状構造を形成した場合には微小管の伸長を促進するが、負荷になる構造へ変化した場合にはカタストロフの促進を誘導する。この仮説に基づくとGDP依存的にプロトフィラメントは短くなり、負荷にならない。そのため、ある程度のGDPの存在下ではカタストロフは抑制される。一方、短いプロトフィラメントでも伸長は穏やかに促進される。これは上述の結果と一致する。この仮説はアミノ酸配列や生化学的性質が保存されている動物のMAP215 familyにおいても適用でき、動植物のMAP215 familyに共通した微小管制御機構だと思われる。植物細胞において微小管は微小管結合タンパク質により様々な構造物に構築され、多様多種な働きをしている。私はタバコ培養細胞BY-2から微小管及び微小管付随タンパク質群を精製し解析を行うことで、微小管構築機構の解明を試みている。今回、私は微小管タンパク質群に含まれる87kDaポリペプチドに注目し、その精製と解析を行った。87kDaポリペプチドはBY-2ミニプロトプラスト(脱液胞化プロトプラスト)粗抽出液から二回の微小管重合・脱重合サイクルにより濃縮され、陰イオン交換カラム及びゲル濾過カラムにより精製された。精製された87kDaポリペプチドをイオントラップ型タンデムマスにより解析したところ、シロイヌナズナのダイナミン様タンパク質AtDRP3(ADL2)のタバコホモログ(NtDRP3)であることが示唆された。AtDRP3(ADL2)は既にミトコンドリアとペルオキシソームの分裂に必須な遺伝子であることが報告されている。しかしながら現在までに植物細胞からダイナミンが精製された例はない。そこでNtDRP3の生化学的性質について解析を行った。精製したNtDRP3を電子顕微鏡により観察した。GDP存在下ではNtDRP3は直径約10nmの粒状構造をとり、GTP存在下では幅が10nmの棒状構造をとることがわかった。これらの構造物は動物での知見から前者はNtDRP3の4量体であり、後者はNtDRP3の多量重合体であると考えられる。共沈実験と電子顕微鏡観察により、NtDRP3は微小管を束化することを明らかにした。また同様の方法により、NtDRP3がアクチン繊維も束化することを明らかにした。微小管束上には規則的なダイナミン様の構造物が観察されたが、アクチン繊維束上にはそのような構造物は観察されなかった。MAP200は真核生物全般に広く保存されているXMAP215/Dis1 familyに属しており、細胞内における微小管構造物の構築に必須な因子である事が知られている。XMAP215/Dis1familyに属するタンパク質は微小管の重合・脱重合(微小管の動的不安定性)を積極的に制御することによって、その機能を発揮していると考えられている。しかしながらその動的不安定性を制御する機構については詳しい解析はされていない。そこで私はXMAP215/Dis1 familyタンパク質の微小管動的不安定性制御機構を明らかにするために、タバコ培養細胞BY-2から精製したMAP200を用いて様々な解析を行った。まず、MAP200が微小管の動的不安定性に対してどのような影響を及ぼすかを調べた。その結果、MAP200は微小管のプラス端において動的不安定性の全てのパラメータ(重合速度・脱重合速度・カタストロフの頻度・レスキューの頻度)を増加させることを明らかにした。MAP200は複数のtubulin dimerと結合し、complexを形成する。またこのcomplexはGDP-tubulinでも形成されることを報告している。そこでMAP200の微小管動的不安定性制御機構を調べるために、様々なGDP濃度におけるtubulin溶液濁度測定実験を行った。微小管の重合はGDPの存在により阻害され、GDPの濃度依存的に微小管重合量が減少することが知られている。MAP200存在下ではこのGDP濃度依存的な微小管重合量の減少が軽減され、特にGDPの比率が25%以下の場合には微小管重合量の減少が起きないことを明らかした。今後、この現象を中心に詳細な解析を行い、MAP200の微小管動的不安定性制御機構を明らかにする予定である。

昨年度、MAP200がGDPによる微小管重合阻害効果を軽減することを明らかにした。今年度はMAP200がどのような機構で軽減するのかを調べた。MAP200の有無により各GDP濃度における微小管の動的不安定性の変化を調べた。MAP200は十分なGTPの存在下で伸長速度・カタストロフの頻度・レスキューの頻度の全てを増加させる。そのためMAP200は伸長速度やレスキューの頻度を増加させることで微小管重合量を維持すると思われた。しかし実際には重合速度の増加は僅かであり、レスキューの頻度は著しく減少した。一方、カタストロフの頻度が大幅に減少した。このことからMAP200の軽減効果は主にカタストロフを抑制することによると思われる。またMAP200がカタストロフを引き起こすためには十分なGTPの存在が必要であることが示唆された。MAP200-tubulin複合体どうしがGTPやtaxolの存在下で結合し、特にtaxolの存在下では微小管のプロトフィラメント状になることが確認された。このことより次の仮説を提案した。十分なGTPが存在する場合、微小管のプラス端でMAP200-tubulin複合体は長いプロトフィラメントを形成し、それがシート状構造を形成した場合には微小管の伸長を促進するが、負荷になる構造へ変化した場合にはカタストロフの促進を誘導する。この仮説に基づくとGDP依存的にプロトフィラメントは短くなり、負荷にならない。そのため、ある程度のGDPの存在下ではカタストロフは抑制される。一方、短いプロトフィラメントでも伸長は穏やかに促進される。これは上述の結果と一致する。この仮説はアミノ酸配列や生化学的性質が保存されている動物のMAP215 familyにおいても適用でき、動植物のMAP215 familyに共通した微小管制御機構だと思われる。
センサレス突極形ブラシレスDCモータの零速度制御法

高効率電動機として突極形ブラシレスDCモータ(PM同期電動機)が普及してきている。ブラシレスDCモータの駆動には位置情報が必要不可欠であり,通常,エンコーダやレゾルバ等の位置検出器が用いられるが,位置検出器を取り除き,小形,軽量,低価格,高信頼性を実現する要求がある。この要求に対して,既に中高速度域における位置センサレス制御が開発されており,本研究では,零速度を含む低速度時の位置センサレス制御について,制御アルゴリズムの開発と実験的検証を行った。その具体的な内容を以下に示す。1.零速度を含む低速度駆動時の位置推定アルゴリズムとして,インダクタンスの位置依存性に基づいた推定法を開発した。この結果,6極,1.5kW,1500rpmの供試機を用いて,推定誤差2゚(電気角度)の位置推定精度が得られた。2.本推定法では,位置推定のためにパルス電圧を与え,電流を変化させるが,このとき電流変化に伴うトルクリプルを低減する電圧印加法を開発した。従来法では,定格トルクの12%のリプルが発生していたが,提案法により4%に低減できた。3.位置推定のために重畳するパルス電圧の大きさと位置推定誤差の関係を実験的に明らかにした。4.低速時のインダクタンスの位置依存性に基づいた位置推定法と中高速時の速度起電力に基づいた位置推定法のスムーズな切り替え法を開発した。この結果,零速度から定格速度,無負荷から定格負荷トルク範囲で安定な速度センサレス制御を実現した。高効率交流電動機として広く普及している突極形ブラシレスDCモータの回転子位置センサレス制御の零速度を含む低速度制御法について以下の点を明らかにした。1.低速度駆動時のセンサレス制御法のために巻線インダクタンスの位置依存性に基づいた位置推定アルゴリズム導出した。(1)二軸理論に従い,位置推定誤差が存在する場合の突極形ブラシレスDCモ一タの数式モデルを導出した。(2)瞬時的に大きな電圧ベクトルをモータに印加したときの電流応答と位置推定誤差の関係式を導出し,電流応答に基づいた回転子位置推定アルゴリズムを提案した。2.制御系設計のための印加電圧ベクトルと位置推定精度の関係を明らかにした。(1)大きな印加電圧により電流が変化するが,この電流変化によるトルクリプルを引き起こさないための印加電圧ベクトル方向を明らかにした。(2)位置推定精度は印加電圧ベクトルの大きさに反比例することを理論的に示した。さらに,電流の検出ノイズおよび電流推定精度の測定から,設計仕様として与えられる位置推定精度を満たす印加電圧ベクトルの大きさの設計式を導出した。3.1.5kW,1500rpmの供試電動機による低速度駆動の実験を行い,提案法の有効性を明らかにした。(1)±100%負荷トルクの範囲で零速度を含む低速度時の安定な駆動を実現した。(2)平均位置推定誤差2degの低速度駆動を実現し,0rpmから50rpmへのステップ速度指令に対しても安定な速度応答が得られた。今後は,実用化に向け,磁気飽和の位置推定精度への影響,モータの温度上昇特性を明らかにすると共に,モータ構造からみた提案方式の適用条件を明らかにする。
ナノチャネル電極構造による気液プラズマ3相の分離と高効率OHラジカル反応場の創成

本研究は水中に含まれるダイオキシン等の難分解物質の完全除去を実現するため,気体・液体・プラズマの3相からなる反応空間を形成し,効率良いOHラジカル生成と反応とを同時実現することを目的として進められた。これまでの研究例とは異なり,本研究では3相を分離制御しながらそれらの共存空間を形成することで,OHラジカルの高効率生成と反応場を実現した。反応場の構成としては,数mmの気液界面にマイクロプラズマを発生基点としたパルスプラズマチャネルを生成する方式と,気体と液体が混合状態で流動する気液二相流内の気液界面に沿ってパルス誘電体プラズマチャネルを発生する方式とを開発した。前者においては処理液導電率と供給ガスのプラズマ特性によって約150nsのプラズマ持続期間内にチャネル構造の大幅な変化とそれに伴うラジカル生成時刻が異なることを見出し,各相における反応過程の分離を行った。さらに,処理液の粘性に左右されず安定に複数のプラズマを同時に形成して,難分解物質として用いた酢酸を高速に完全分解できることを実証した。また後者においては,約100nsのプラズマ形成時間内に2相流の気泡内においてプラズマは主に気泡中心から発生し次第に気液界面に集中することを明らかにし,気液プラズマ界面へのプラズマ集中といった特異な反応場が形成されていることを確認した。さらにこの現象は液体の静電容量を含めた電気回路的考察でその挙動が説明可能であることを示し,ネオンガスを用いた場合は極めて高い分解効率が得られることを定量的に示した。一方で難分解物質分解の反応主体であるOHラジカルについては,レーザ誘起蛍光法による時間,空間分解計測により,ラジカル寿命やラジカル密度の評価を可能として,繰り返しパルスプラズマ生成条件と効率良いOHラジカル反応場の形成要因とを明らかにした。本研究は気液プラズマ3相の分離制御を実現することで,マイクロメートル級の薄い気体層(以後気相膜と呼ぶ)内にプラズマを発生させ,効率よいOHラジカル生成と水中難分解物質の完全除去を実現する全く新しい反応場の創成を目的としている。気体流と液体流の相互作用を高速度ビデオカメラで詳細に観測し,微細気泡発生部と気泡形成部とを分離するリアクタ構造を考案した結果,プラズマ生成に適した気液二相流状態の生成に成功し,その生成条件の基礎を明らかにした。また気液二相流内の気相膜を誘電体バリア電極間に流入させることで,処理水と絶えず接触可能なプラズマ生成用気相膜として動作させた。誘電体バリア電極間の気相膜にナノ秒立ち上がりの高速パルス電圧を印加すると,膜内にパルスプラズマが形成でき,このプラズマは気相膜とともに移動することを見出した。さらに液体相と気相膜との界面においてプラズマ電流の集中がおこり,本研究が目的とする気液プラズマ3相界面での反応場が形成されていることを,高速度カメラによる観測から明らかにした。さらにプラズマへの投入電力の評価と難分解物質として使用した酢酸分解量とから処理効率を試算し,極めて効率良い分解が実現できる見通しを得た。一方で,物質分解に主要な役割を果たすと考えられるラジカル種の特定には至らなかった。気相膜は1mm以下で大きさは10mm以上であるが,その周囲は液体に囲まれている。こうした気相膜内における流体の挙動を明らかにするため,時間空間分解計測可能なレーザドップラー計測手法(LDV)を適用した。この結果,バリア放電の駆動周波数である数10kHzの交流電界下において,気体流の計測が可能な測定系を構築できた。本研究は水中難分解物質の完全除去を目的として,処理水中に気液プラズマ3相からなる新たな反応場を形成し,反応活性種の時空間分布計測,難分解物質としての酢酸分解を行った。

最終年度においては電極近傍の反応場をより拡張して,気液二相流の気液界面を反応場として選択し,流動するガス気泡内面に沿ってパルスプラズマを発生させた。同時に高繰り返し高速パルス駆動回路方式を確立することで,気泡時定数である10ms程度の時間内に気泡内面に沿った多数回の放電形成を実現した。これによって難分解物質分解に有効な,新たな高効率OHラジカル反応場を創成した。また,分光計測によって水中気泡内ラジカルの特定をすすめ,OHラジカルが主な活性種であることを明らかにすると共に,全有機炭素濃度計測によって,酢酸分解速度や分解効率を定量的に評価し従来のプラズマ処理方式を上回る分解速度と高い効率とが実現できることを示した。反応場としては,マイクロプラズマを発生基点として数mmの気泡内にパルスプラズマを生成する方式と,ガラスに挟まれた短ギャップ内に誘電体バリア放電を発生する方式とを開発し,前者においては酸素ガス供給時においても比較的低電圧で複数プラズマを同時生成でき,かつ分解速度が高いこと,後者においては高い分解効率が得られ,プラズマが気液界面に集中する特異な反応場を形成することを見出した。また,水上パルスプラズマをレーザ誘起蛍光法により観測することでOHラジカルの時空間寿命を定量化し,前記反応場おける高効率ラジカル利用にはプラズマの低電流駆動が有効であることを明らかにした。
関節リウマチの疾患感受性遺伝子の同定

独自に行った関節リウマチ罹患同胞対解析の結果をもとに、疾患感受性候補領域約25.3Mbを選定し、疾患感受性遺伝子を同定するためSNP(single nucleotide polymorphism)を用いた網羅的関連解析および連鎖不平衡解析を行った。候補領域内のNPをデータベースより抽出し日本人健常対照者46名のゲノムDNAを用いて頻度調査を行い、マイナーアレル頻度15%以上で、遺伝子領域を平均1020kb間隔でカバーするマーカーセットを作成した。TaqManアッセイを用いたタイピングをまずRA患者380名、健常対照者380名で行い、アレル頻度の差をx^2検定で解析した。728 SNP中P<0.05であった48 SNPを新たなRA患者380名、健常対照者380名でタイピングした。4 SNPが再現性を持って有意差を示し、これらのSNPはSEC8L1遺伝子のイントロン10に隣接して存在していた。これらのデータを統合したケース・コントロール760名ずつの解析ではSNP 441(rs2911495)でP=0.000059と強い有意差が検出された。SNP441周辺の連鎖不平衡解析を行うと、再現性を持って有意差を示したSNPはSEC8L1遺伝子内の約300kbのLD(linkage disequilibrium)ブロック内に存在していた。ブロック内に他の遺伝子は存在せずSEC8L1が疾患感受性遺伝子であることが予測された。ブロック内でのハプロタイプ解析では疾患感受性ハプロタイプ、疾患抵抗性ハプロタイプを同定した。培養滑膜線維芽細胞を含む人の組織を用いた発現解析ではSEC8L1がほぼユビキタスに発現していることが確認された。以上の結果よりSEC8L1を新規関節リウマチ疾患感受性遺伝子としてArthritis and Rheumatismに発表予定である。
遺伝子発現からみた果菜類の帯化の発現機構の解明

1.イチゴにおける奇形果の発生要因についてイチゴを用いて日長・温度を変えて栽培し品種ごとに奇形果の発生する環境条件を調査した.低温短日条件下で奇形果の認められる`Howardl7'`Robinson'などのHoward系品種と`福羽',`女峰'などの福羽系品種,1花梗に一つ着花する品種`Pajaro'を供試し,それぞれの品種を花芽分化期に日長処理ハウスに搬入し8,1012時間日長条件において奇形果の発生頻度について調査を行った.しかし,どの処理区・品質においても顕著な花梗の帯化は認められなかった.今後,帯化発現に条件を決定した後に帯化部と非帯化部の組織を比較し,帯化組織の特異的に発現するタンパク質,RNAの同定を試みる予定である.2.ダイズにおける帯化の発現要因について安定して茎に帯化の認められる品種`石化大豆'を用いた.1214時間日長で栽培した場合,`石化大豆'に帯化の発現が認められた.911時間日長で栽培した場合,帯化は認められなかった.本来ダイズの葉序は互生であるが,葉序に対生が認められたため,帯化の発現が完全に抑えられたのではないと考えられた.`石化大豆'においては短日条件下で帯化の発現が抑制されることが明らかとなった.また,頂芽を切除したときに伸長する側枝には帯化発現の抑制が認められた.`石化大豆'を用い,環境条件を変えることで帯化発現の調節が可能となり,同一植物体または同一品種の帯化組織と非帯化組織とを比較し,帯化発現に特異的なタンパク質,RNAの同定が可能になると考えられた.3.形質転換体の利用について矮化,節間伸長抑制および帯化などの形質を発現するrol遺伝子群を有するAgrobacterium rhizogenesをカンパニュラ,ブロワリア,ペチュニアに感染させ,Ri plasmidを導入し,得られた形質転換体をin vitroで育成中である.今後,形質転換体についてその生育特性を調査し,遺伝子の発現について調査する予定である.1.イチゴにおける奇形果の発生要因についてイチゴを用いて日長・温度を変えて栽培し品種ごとに奇形果の発生する環境条件を調査した.低温短日条件下で奇形果の認められる`Howardl7'`Robinson'などのHoward系品種と`福羽',`女峰'などの福羽系品種,1花梗に一つ着花する品種`Pajaro'を供試し,それぞれの品種を花芽分化期に日長処理ハウスに搬入し8,1012時間日長条件において奇形果の発生頻度について調査を行った.しかし,どの処理区・品質においても顕著な花梗の帯化は認められなかった.今後,帯化発現に条件を決定した後に帯化部と非帯化部の組織を比較し,帯化組織の特異的に発現するタンパク質,RNAの同定を試みる予定である.2.ダイズにおける帯化の発現要因について安定して茎に帯化の認められる品種`石化大豆'を用いた.1214時間日長で栽培した場合,`石化大豆'に帯化の発現が認められた.911時間日長で栽培した場合,帯化は認められなかった.本来ダイズの葉序は互生であるが,葉序に対生が認められたため,帯化の発現が完全に抑えられたのではないと考えられた.`石化大豆'においては短日条件下で帯化の発現が抑制されることが明らかとなった.また,頂芽を切除したときに伸長する側枝には帯化発現の抑制が認められた.`石化大豆'を用い,環境条件を変えることで帯化発現の調節が可能となり,同一植物体または同一品種の帯化組織と非帯化組織とを比較し,帯化発現に特異的なタンパク質,RNAの同定が可能になると考えられた.3.形質転換体の利用について矮化,節間伸長抑制および帯化などの形質を発現するrol遺伝子群を有するAgrobacterium rhizogenesをカンパニュラ,ブロワリア,ペチュニアに感染させ,Ri plasmidを導入し,得られた形質転換体をin vitroで育成中である.今後,形質転換体についてその生育特性を調査し,遺伝子の発現について調査する予定である.