hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
肝細胞増殖因子活性化酵素インヒビターの医薬への応用に向けての基礎的研究

肝細胞増殖因子(HGF)の過剰作用により腎障害が引き起されることが報告されており、HGFの過剰作用を抑制する治療薬の開発が期待されている。我々はHGF活性化酵素の活性を阻害する新しい蛋白性のプロテアーゼインヒビターを2種類(HAI-1およびHAI-2)見出している。本研究ではこれらインヒビターのHGFの過剰作用による疾病に対する治療薬としての可能性を探ることを目的として解析を行い、以下の結果を得た。1.HAI-1にはプロテアーゼインヒビターとしての活性に必要な領域としてKunitzドメインが2個存在する。そこでヒトHAI-1のそれぞれのKunitzドメインからなるHAI-1を作成し解析した。その結果、N末側のKunitzドメインがC末側のKunitzドメインよりはるかに高いHGF活性化酵素に対する阻害効果を示した。HAI-2にもKunitzドメインが2個存在する。マウスHAI-2のそれぞれのKunitzドメインについて同様に解析した結果、C末側のKunitzドメインがN末側のKunitzドメインより高い阻害効果を示した。今後はHAI-1とHAI-2のKunitzドメインのうち、どれが最も生体への応用に適しているかを解析する必要がある。2.HAIのKunitzドメインを生体に投与してHGFの活性化が抑えられるかを検討するためには、実験動物系の確立が必要である。そこでラットを用いてHGF活性化酵素を投与した場合にHGFの活性化が誘導されるかについて解析した。ラットに肝切除を行いHGFの合成が促進された時にHGF活性化酵素を投与したところ、HGFの活性化が誘導され、また肝再生が促進した。したがってこの系はHAIのKunitzドメインのインヒビター活性を検定するのに適した系であると考えられる。肝細胞増殖因子(HGF)の過剰作用により腎障害が引起されることが報告されている。したがってHGFの過剰作用を抑制する治療薬の開発が期待されている。我々はin vitroにおいてHGF活性化酵素の活性を阻害する新しい蛋白性のプロテアーゼインヒビターを2種類(HAI-1およびHAI-2)見出している。本研究は新しく見出されたインヒビターのHGFの過剰作用による疾病に対する治療薬としての可能性を探ることを目的としている。本年度は、HAI-1における活性領域の解析を行い、以下の結果を得た。そこでそれぞれのKunitzドメインからなるHAI-1を作成し解析した。その結果、N末側に存在するKunitzドメイン(Kunitz 1)が、C末側に存在するKunitzドメイン(Kunitz 2)よりはるかに高いHGF活性化酵素に対する阻害効果を示した。2.HAI-1にはKunitzドメイン以外にも長いN末側領域やKunitz 1とKunitz 2との間のLDLR-likeドメインなどが存在する。そこでこれらの領域のKunitz 1の活性に対する影響について、種々の欠損変異型HAI-1を作成して解析した。その結果、これらの領域はKunitz 1の活性には影響しなかった。これらの結果からKunitz 1ドメインのみで、HGF活性化酵素に対して高い阻害活性があることが明らかになった。したがってHAI-1の治療薬の可能性を探るためには、Kunitz 1ドメイン部分のみを取り出して検討すればよいことが明らかになった。

本研究はこれらインヒビターのHGFの過剰作用による疾病に対する治療薬としての可能性を探ることを目的としている。本年度はHAI-2による活性領域の解析および実験動物への応用系の確立を行い、以下の結果を得た。1.HAI-2にはHAI-1と同様にインヒビターとしての活性に必要な領域としてKunitzドメインが2個存在する。マウスHAI-2のそれぞれのKunitzドメインについてそのインヒビター活性について解析した。その結果、N末側のKunitzドメイン(Kunitz 1)とC末側のKunitzドメイン(Kunitz 2)は同程度の活性を示した。HAI-1ではKunitz 1にはるかに高いインヒビター活性があることから、今後はHAI-1とHAI-2のKunitzドメインのうち、どれが最も生体への応用に適しているかを解析する必要がある。2.HAIのKunitzドメインを生体に投与してHGFの活性化が抑えられるかを検討するためには、実験動物系の確立が必要である。そこでラットを用いてHGF活性化酵素を投与した場合にHGFの活性化が誘導されるかについて解析した。ラットに肝切除を行いHGFの合成が促進された時にHGF活性化酵素を投与したところ、HGFの活性化が誘導され、また肝再生が促進した。したがってこの系はHAIのKunitzドメインのインヒビター活性を検定するのに適した系であると考えられる。
日本の『詩経』図解における特色の形成に関する研究

平成30年度は、これまで調査した『詩経』図譜の編纂・刊行背景を考察するとともに、この過程で改めて必要となった資料を調査・収集した。考察については、まず、これまで調査し得た15種の『詩経』図譜の編者と経歴、図譜の内容と特徴を整理し、「日本『詩経』図譜初探」にまとめた。そして、この成果をもとに、日本『詩経』図譜の特徴を考察する上で鍵となるであろう二つの現象、すなわち、1日本『詩経』図譜の考証方法の先鞭をつけたと考えられる稲生若水の物産学、2徐鼎『毛詩名物図説』翻刻の経緯と受容の分析を試みた。1について、稲生若水『詩経小識』に見える考証方法や京都大学や金沢市立図書館、杏雨書屋に所蔵の関連資料により、稲生若水は新井白石より依頼された『詩経』動植物考証に際して、まず明の馮復京『六家詩名物疏』を参照し、その上で、物産の大著『庶物類纂』編纂のために抜書していた本草書や医書、地方志の記載を参照したこと考えられた。このように稲生若水が物産学の観点から『詩経』動植物を考証したことは、その後の日本の『詩経』図譜や『詩経』名物考証書の方向性を決定づけたと推測される。2については、『毛詩名物図説』をめぐる春木煥光とその師である小野蘭山の問答の写本を解読・分析したところ、同書は当初小野蘭山の弟子が和名・訓点を施したが、後に北条蠖堂が買い取り改竄したこと、そして春木と小野の両者が客観的に『毛詩名物図説』の内容を検討していることが明らかとなった。以上二つの現象の考察はほぼ終えており、論文を作成中であったが、平成30年度中に完成させることができなかった。これまで調査し得た多くの資料の考察結果を含めて、この数年以内に論文化し公表したいと考えている。資料調査については、主に稲生若水と物産学の関係を記した資料と春木煥光の動植物考証に関する資料、そして新たに発見した『詩経』動植物の考証書を調査・収集した。平成27年度は、まず日本で編纂された『詩経』図解及び関連する資料の収集を行った。報告者は本科研費交付を受けるより前、既に十種程度の日本『詩経』図解を調査し撮影データを入手していたが、これに加えて、国会図書館、京都大学図書館、西尾市岩瀬文庫を中心に調査を行い、日本で早くに『詩経』図解を編纂した稲生若水、そして同様に『詩経』図解の編纂に関与し、あるいは影響を与えた松本愚山や江村如圭、松岡如庵、小野蘭山に関する資料のうち、『詩経』の解釈や名物考証に関わる資料を調査、収集した。また、皆川淇園と細井東陽の作成した『詩経』図解のデータを収集し、同時に、中国で編纂され日本で広く刊刻された徐鼎『毛詩名物図説』の稿本や、現存数が少なく中国では撮影が許可されなかった『六経全図』を日本で発見したため、これらについてデータを収集し、これまでの研究の不足を補った。次に、以前に収集した資料および本年度に調査、収集した資料をあわせて、日本における各『詩経』図解の編纂年代、編纂者の経歴と編纂意図、編纂者間の関係性の整理に着手した。以上に記した収集データ全般の分析、整理について、本年度は論文等を通じて外部公開をするまでには至らなかった。ただし、日本の『詩経』図解に関する事柄として、昨年度まで進めていた中国における『詩経』図解の分析のうち、清代における『詩経』図解の編纂と図解相互の関係性について論文「清代の『詩経』図解についてー前代の継承と改編ー」を発表した。このなかでは、清代後期に書肆が翻刻した日本の岡元鳳『毛詩品物図考』が広く普及し様々な『詩経』テキストに取り入れられるのと反比例して、中国で歴代翻刻と改編を繰り返しながら受け継がれてきた『詩経』図解が次第に失われていったことを指摘した。当初の計画では、本年度は日本で編纂された『詩経』図解の編纂者の経歴や編纂背景といったデータの概況を論文として発表する予定であった。しかし、昨年度までの研究課題であった中国清代における『詩経』図解の分析と整理について、新たな文献が入手でき、これが日本の『詩経』図解と関連性があったため清代『詩経』図解の再整理を優先したこと、また書籍の翻訳や校勘など、他の仕事に時間を要したことなどから、冒頭に記したデータの整理や論文執筆が本年度中に完成しなかった。昨年度は日本で編纂、刊行された『詩経』図解のついて、未見であった資料を広く調査、収集し、すでに調査し得た資料をあわせて時系列、およびその特徴によって整理した。この結果、日本の『詩経』図解は本草学者が中心となって編纂し、主に動植物を収録した図解本と、儒学者が中心となって編纂し、主に諸制度や礼に関わる事物を収録した図解本の二種類に分けられることを一層明確にした。このうち、後者は概ね明清時に編纂された中国の『詩経』挙業書の附録図解をそのまま収録している。これに対して、前者の動植物を収録する『詩経』図解は、中国では乾隆年間の徐鼎『毛詩名物図説』が最も早いものであり、日本における同種の図解は『毛詩名物図説』よりも早い時期から見られる。

つまり、動植物を収録する図解は日本において、独自に編纂されたものであったと言える。そこで、日本で動植物の図を収録する『詩経』図解がどのように編纂されたのか、その原因と編纂方法を明らかにするため、報告者は最早期に編纂された同種の図解の考察を試みた。これまでの調査の過程で明らかとなった最早期の図解は、新井白石が本草学者である稲生若水の力をかりて編纂した『詩経図』(宮内庁書陵部所蔵)である。同図は経筵のために編纂された画冊であり、広く普及したわけではなく、その後の『詩経』図解に大きな影響を与えたとは考えがたい。しかし、日本人がこれまで存在しなかった『詩経』図解をどのように編纂したか、その方法や工夫を知ることは、その後の『詩経』図解の編纂を明らかにする上で重要な手がかりだと考えられる。このため、現在は『詩経図』と『三才図会』や『本草綱目』など現存する『詩経』以外の図解本とを比較し、『詩経図』のより詳細な編纂過程の分析を進めている。当初の予定では、昨年度はそれまで調査、収集した日本の『詩経』図解を時系列で整理し、一旦その全容を整理した上で論文として公表すること、そしてこれを基礎として個別の『詩経』図解の編纂背景と特徴を分析することを予定していた。しかし、さらに調査をすすめたところ、日本における『詩経』図解の歴史を考える上で重要な図解のなかで未調査のものが幾つか存在したこと、そして本研究の前段階として行ってきた中国の『詩経』図解の成果を博士学位請求論文としてまとめていたことから、日本における『詩経』図解に関する論文を公表するまでには至らなかった。一方、『詩経』図解及びその周辺資料に関する調査は継続して行っており、特に図解本の編者が比較的著名な人物については、新たな発見が複数あった。なかでも、新井白石『詩経図』が日本において編纂された最早期の『詩経』図解であることを確信するに至ったこと、そして『詩経図』は中国の図解と異なり、伝統的に受け継がれてきた図譜を改編するのではなく、『三才図会』など、それまでの『詩経』図解編纂ではほとんど用いられてこなかった書物に依拠して編纂していることが明らかとなった。しかし、『三才図会』を出典とする図はほぼ器物に限られており、主に稲生若水が考証に携わったと考えられる動植物図については、図の類似性から『三才図会』や『本草綱目』の図、そして『六家詩名物疏』にような『詩経』の名物考証書に依拠したと推測されるが、まだ確証を得るにはいたっていない。以上のように、現在までの進捗状況は論文の公表という点では当初よりも遅れているが、資料調査などを通じてこれまでにはなかった発見などがあり、主に『詩経図』を主要な対象とする分析、そして日本の『詩経』図解全体の概観を整理、考察する内容の、二篇の論文を執筆して公表を準備している。平成29年度は前年に引き続き、日本において編纂された『詩経』図譜や『詩経』図譜の編纂者に関する資料、そして『詩経』名物の注釈や考証書を調査、蒐集した。調査範囲を注釈・考証書まで拡大したのは、諸々の『詩経』図譜に見える引用文献を検討したところ、江戸期の『詩経』図譜が本草学者や医師を中心に著された『詩経』動植物の注釈・考証書の成果を盛んに取り入れ、その内容を多様化させていったと推測されるからである。また、上述した調査の結果、日本でほぼ最初に編纂された『詩経』図譜は新井白石『詩経図』(宮内庁書陵部所蔵)であることが確認された。そこで、『詩経図』収録の図のほか、新井白石の日記や書簡、そして『詩経図』の動植物図の根拠となった稲生若水『詩経小識』といった関連資料を考察し、論文「新井白石の『詩経図』についてーその編纂経緯と名物考証」(早稲田大学中国古籍文化研究所編『中国古籍文化研究ー稲畑耕一郎教授退休記念論集』、2018年、東方書店)を公表した。
卵巣未熟奇形腫の分子遺伝学的解析

卵巣未熟奇形腫は若年者の卵巣に発生する胚細胞性腫瘍に属する悪性腫瘍である。奇形腫成分である胎芽期の神経外胚葉成分が悪性度を規定し、転移再発をきたす。しかし未熟奇形腫の腫瘍発生に関わる遺伝子異常は明らかになっていない。一方で、この胎芽期の神経外胚葉成分への分化を主体とする小児脳腫瘍である髄芽腫や多層性ロゼットを形成する胎芽性腫瘍は、形態的には未熟奇形腫の神経外胚葉成分と同一である。またこれらの小児脳腫瘍のもつ遺伝子異常は詳細な情報がすでに明らかにされ、最新のWHO分類にも反映されている。このような背景から、我々は胎芽期神経外胚葉成分に分化する小児脳腫瘍ですでに明らかとなった遺伝子異常が、未熟奇形腫の神経外胚葉成分に認められるかどうかを明らかにしたいと考えている。本研究課題について当施設における臨床研究倫理委員会申請書類を作成し承認を受けた。現在研究代表者の異動に伴う所属施設、研究責任者変更申請中である。研究に必要な試薬、消耗品を購入し、免疫染色、FISHの染色条件を検討中である。具体的には免疫染色抗体であるLIN28Aを購入し希釈倍率、賦活処理方法(バッファーをTRS、シトレートバッファーなどの種類をかえ、マイクロウェーブ処理時間を変更しながら調整する)、DAB反応時間を調整中である。Embryonal tumor with multilayeredrossettesは19q13.42に遺伝子座があるC19MCの増幅をみるためのFISHプローブも購入した。免疫染色、FISHの染色条件を決定後、対象症例に適応して実験を遂行予定である。
活性酸素及び活性酸素代謝機構の単離心筋細胞ミトコンドリア機能に与える影響

心筋細胞障害に関し、活性酸素が組織障害因子として重要な役割を果たしている事は、今日まで数多くの報告がなされている。平成4年度科学研究費によって、ラット単離心筋細胞に直接Oxydant(H_2,O_2,HOCl)を作用させ、in situでのミトコンドリア機能を検討した結果、ミトコンドリアのカルシウム代謝異常とATP産生障害を確認した。しかしながらミトコンドリア機能障害を生ずるには予測よりもはるかに高濃度のOxydantが必要であり、それは細胞内のRadical scavengersであるsuperoxide dismutase,catalase及びglutathioneperoxidase等が、障害部位にoxydantが到達する前に作用したためと考えられた。今回の研究ではあらかじめ細胞内のRadical scavengersを薬剤にて低下させた状態での単離心筋細胞にoxydantを作用させ、細胞内Defence mechanismとの関連をミトコンドリア機能について検討した。【結果】aminotriazolにて前処置をしたcatarase低下群の心筋単離細胞に低濃度のH_2O_2を作用させたところ、コントロール群に比し有意にミトコンドリア呼吸能、ミトコンドリア膜電位の低下を示した。その低下はH_2O_2の濃度依存性が見られ、高濃度になる程ミトコンドリア機能障害が強くみられる傾向を示した。しかしながらdiethilmalateにて前処置をしたglutathioneperoxidase低下群においては、低濃度H_2O_2を作用させてもコントロール群とほぼ同様に機能障害を生ずる迄にはいたらず、H_2O_2の濃度を上げても有意な差は見られなかった。以上の事はH_2O_2の単離心筋細胞ミトコンドリア機能に対する作用としては、細胞内cataraseがglutathioneperoxidaseに比し、重要な役割を担っているということが推測された。
マイクロストリップ線受動回路の合理的解析法・設計法に関する基礎研究

本研究に関しては、ほぼ予定通り進行したが、題目の通り基礎研究で終わった部分もある。具体的成果を列挙すると、1.題目のマイクロ波ストリップ線受動回路に関する基礎研究ということで、導波路に関しては、ストリップ線導波路,NRD導波路,グルーブ導波路およびマイクロストリップ線導波路に関するスラブモード展開に基づく合理的等価回路を導出し、これに基づいて導波路の特性(伝搬定数,電磁界分布)が計算できることを示し、研究発表を行った。マイクロストリップ線回路に関しては、発表する時間はなかったが、既に本研究室田部井康君の修士論文にその成果が記載されている。2.マイクロストリップ線不連続問題の3次元解析に関しては、当初の目的を果たすべく、ストリップ線導波路・方形導波管の各種2次元不連続問題の基本的な研究を継続して行うことができた。その成果は2次元不連続問題のみでなく、発展としての3次元問題に展開できる見通しを得た。これに関する具体的な成果は、(1)ストリップ線角正方形切断直角曲がりの最適カットの決定(2)ストリップ線角斜め切断直角曲がりの最適カットの決定(3)ストリップ線ステップ型不連続問題の等価回路の導出とその適用(4)方形導波管H面ステップ型不連続部の等価回路の導出とその適用および各種回路への展開3.フォスタ型等価回路に基づくフィルタ回路の合成に関しては、最終的な目的まで至らなかったが、着実にこの目的を果たすべく研究を行うことができた。例えば、(1)各種不連続問題でのフォスタ型等価回路に基づく解析の妥当性が検証されたこと(2)平行結合線路に関する固有モードを導出し、これに基づいてフォスタ型等価回路を導出し、さらにこの等価回路に基づいて入出力特性を計算し、この入出力特性の妥当性を確認したこと4.マイクロ波デジタル受動回路の合理的な解析に関しては、手をつけることができなかったが、各種等価回路を導出し、その妥当性を確認したので、今後の合理的な解析の基礎ができたと考えている。今年度当初は、マイクロストリップ線を中心に研究を進める予定であったが、研究を段階的に進めるのが合理的と考え、ストリップ線路を中心として研究を進めた。具体的な研究成果として、(1)ストリップ線側結合回路の固有モード解析によるフォスタ型等価回路の導出と具体的な適用による本手法の妥当性・有効性の確認(発表文献MW97-102,MW97-103)(2)ストリップ線ステップ型不連続問題の理想変圧器を介した等価回路を導出し、その妥当性を実際例を通して確認している。(C-2-63で発表予定,ミマツデータシステム「マイクロ波回路技術者及び研究者のためのCADプログラム」"1.2節線路の不連続"で出版予定。(3)(2)で述べたストリップ線不連続問題の適用例として、ストリップ線直角曲がりの角正方形切断および角斜め切断の固有モード展開に基づくフォスタ型等価回路を導出し、角正方形切断の場合にはその周波数特性を計算し、最適カットに関する見通しを得た。イ)角正方形切断の固有モード展開に基づくフォスタ型等価回路とその周波数特性の結果は、C-2-106,C-2-64で発表し、今後より詳細な結果を、マイクロ波研究会で発表する予定。ロ)角斜め切断の場合の固有値,固有モードをより精度良く解析する手法を確立し、既にSC-2-2で発表し、C-2-64で発表予定。

今年度は、当初の計画に従って着実に成果を挙げることができた。具体的な研究経過・研究成果は、次の通りである。(1)ストリップ線導波路のスラブモード展開法による横方向等価回路の導出およびこれに基づく解析平面回路理論に基づいて横方向等価回路を導出し、対応したソフトを作成し具体的な計算を行った。これまでの結果は電子情報通信学会で次の題目で発表した。今後、マイクロストリップ線導波路に取り組む予定である。田部井,平岡,許「有厚ストリップ線導波路の等価回路に基づく固有モード解析ー高さモード展開による平面回路方程式に基づいてー」1998電子情報通信学会ソサイエティ大会C-2-63,田部井,平岡,許「有厚ストリップ線導波路の高さモード振幅対モード次数特性ー考慮高さモード数によるー」1999電子情報通信学会総合大会C-2-73(2)ストリップ線導路不連続部の等価回路の導出2次元平面回路理論に基づいて、ストリップ線導波路を多線条伝送線路,不連続部を理想変圧器とした等価回路で表現されることを導出し、電子情報通信学会マイクロ波研究会で発表することができた。(MW98-82)(3)ストリップ線角正方形切断直角曲がりの広帯域周波数特性の計算ストリップ線角正方形切断直角曲がりをストリップ線導波路部と角正方形切断正方形平面回路部に分割し、前者より多線条伝送線路回路、後者に対しては(2)の結果を用いて各切断量に対して固有モードをka=20まで求め、対応したフォスタ型等価回路を導出した。フォスタ型等価回路と外部多線条伝送線路は理想変圧器で結合された等価回路が得られ、この等価回路に基づいて、ストリップ線角正方形切断直角曲がりの広帯域周波数特性が計算された。カット量0.55近辺でほぼ最適特性が得られるが、透過特性と帯域輻には競争関係があることを見いだした(つまり、0.55近辺でカット量を増やすと透過特性が改善されるが、帯域幅は狭くなる)。具体的な研究成果は、電子情報通信学会マイクロ波研究会(MW98-106,MW98-107)およびアジア太平洋マイクロ波会議(APMC'98WEIB-3)で発表した。(4)ストリップ線斜め切断直角曲がりの広帯域周波数特性の計算ストリップ線角斜め切断直角曲がりの広帯域周波数特性は計算中で、途中経過は既に電子情報通信学会で発表した。平岡,田部井,許「ストリップ線角斜め切断直角曲がりの周波数特性ーフォスタ型等価回路によるー」1998電子情報通信学会ソサイエティ大会C-2-62,平岡.手塚,許「角斜め切断正方形平面回路の固有モードの計算ー差分方程式化,階段状近似によるー」1999電子情報通信学会総合大会C-2-751.ストリップ線導波路の解析(1)ストリップ線導波路のスラブモード展開に基づく厳密な電磁界解析(前年度までに終了)に基づいて、汎用ソフトウエアを開発し、その動作を確認した。(2)考慮スラブモード数に対する電磁界分布・固有値の収束性を確認し、また、高次モードも含めたストリップ線伝送モードが計算できることを示した。(3)ストリップ線導波路の厚みを考慮した場合、および無厚の場合にも本ソフトが有効に動作することを確認した。
日本人小児におけるBMIによる肥満・やせのカットオフ値の確立

(1)6-18歳の「かくれ肥満」(BMI 95パーセンタイル未満、かつ腹囲95パーセンタイル以上)、および「かくれやせ」(BMI 5パーセンタイル以上、かつ腹囲5パーセンタイル未満)の頻度は、0.2%および2.8%(男性)、0.7%および3.4%(女性)であった。(2) BMIによる肥満・やせの「縦断的変化カットオフ値」を次のように設定した。ΔBMISDS:+0.65+0.95・-0.95-0.65(男性)、+0.63+0.92・-0.92-0.63(女性)、ΔBMIunit:+1+2・-2-1(6.5-10.5歳男女)、+2+3・-3-2(10.5-17.5歳男女)(1)6-18歳の「かくれ肥満」(BMI 95パーセンタイル未満、かつ腹囲95パーセンタイル以上)、および「かくれやせ」(BMI 5パーセンタイル以上、かつ腹囲5パーセンタイル未満)の頻度は、0.2%および2.8%(男性)、0.7%および3.4%(女性)であった。ΔBMISDS:+0.65+0.95・-0.95-0.65(男性)、+0.63+0.92・-0.92-0.63(女性)、ΔBMIunit:+1+2・-2-1(6.5-10.5歳男女)、+2+3・-3-2(10.5-17.5歳男女)(1)データ収集・整理現在までに、以下のデータを入手、整理した。(1)人間生活工学研究センター調査(1992-1994年度)による、0-20歳、身長、体重、腹囲(ウエスト囲・腸骨稜囲)の計測値(2)本研究に協力可能な小、中学校および慶應義塾大学病院小児科における小児の身長、体重、腹囲の計測値(一部縦断的データを含む)、および身体診察所見、血液検査データ(2)データ分析(1)-(1)のデータ(1992-1994年度)を用い、BMI(体重/身長^2)および腹囲の関係から、「かくれ肥満」(BMI95パーセンタイル値未満、かつ腹囲95パーセンタイル値以上)および「かくれやせ」(BMI5パーセンタイル値以上、かつ腹囲5パーセンタイル値未満)の性別年齢別頻度を算出した。BMI、腹囲のパーセンタイル基準値は、本研究者による既報データ(Ann Hum Biol 33 : 444-453, 2006, Eur J Pediatr 166 : 655-661, 2007)を用いた。その結果、「かくれ肥満」(6-18歳)の頻度は男性0.2%、女性0.7%、「かくれやせ」(6-18歳)の頻度は男性2.8%、女性3.4%であった。「かくれ肥満」・「かくれやせ」は女性においてより多い可能性が示されたが、その明らかな年齢別傾向は男女とも見いだせなかった。上記の「かくれ肥満」・「かくれやせ」の定義については、「かくれやせ」の方が「かくれ肥満」よりかなり多く見出されたことからも、各集団における健康障害の有無による再検討の必要性が示された。(1)データ収集・整理昨年度につづき本年度までに以下のデータを入手、整理した。(1)人間生活工学研究センター調査(1992-1994年度)による、0-20歳、身長、体重、腹囲(ウエスト囲・腸骨稜囲)の計測値(2)本研究に協力可能な小、中学校および慶應義塾大学病院小児科における小児の身長、体重、腹囲の計測値(一部縦断的データを含む)、および身体診察所見、血液検査データ(2)データ分析本年度は主に(1)-(2)のデータ、特に健常小児の6-18歳の連続した縦断的な身長、体重データを用い、BMIによる肥満・やせの「縦断的変化カットオフ値」を設定した。短期間の急激なBMI変化は脂肪量変化の反映と解釈できることから、健常小児におけるBMIのSDSの変化/年(△SDS)の正常範囲(土2SDの範囲)の上限値・下限値を、BMIによる肥満.やせの「縦断的変化カットオフ値」として設定した。BMIの△SDSは性別年齢別に既報の計算式(Arch Dis Child 76:47-49)に基づき算出した。△SDSの上・下限値はそれぞれ+0.65+0.95・-0.95-0.65(男児)、+0.63+0.92・-0.92-0.63(女児)で、それらに基づくBMI (unit)に換算した肥満・やせの「縦断的変化カットオフ値」はそれぞれ+1+2・-2-1(6-10歳)、+2+3・-3-2(10-17歳)であった。このことはBMI (unit)が1年間に年少児で12以上、年長児で23以上、上向き変化する場合に肥満、下向き変化する場合にやせと評価できることを示唆する。この「縦断変化カットオフ値」は成長学的見地から有用であり、今後「横断的カットオフ値」設定の重要な基盤となる。現在「横断的カットオフ値」設定に十分な数の血液検査データなどを解析中である。
自己加熱のない直流磁界型高精度ワイヤレス微小温度センサの開発

本研究は,測温素子と温度情報読み出し回路を空間的に分離できる接触型温度センサとして直流磁界型高精度ワイヤレス微小温度センサの開発に関するものである.以下に本研究で得られた知見を示す.・直流磁界型高精度ワイヤレス微小温度センサの主要要素である,感温フェライト膜,磁気読み出し装置,磁気バイアス印加装置,ヨーク等の最適な形状および配置を申請設備備品であるガウスメータや小型環境試験器,磁界解析ソフトウェアを用いて,種々検討したところ,最適解ではないがおよその傾向をつかむことができた.また,信号処理部分にマイコンを用い外部磁界によるノイズの除去をリアルタイムに行える装置を試作した.・測温素子である感温フェライト膜と磁気読みだし装置との非接触達成距離に関しては目標値である5mm近傍(S/N比を考慮すると現状は4mm程度)が達成できた.ただし,現時点ではまだ最適値の同定には至っていないため,引き続き実機でのデータ収集と理論解析が必要である.・本センサによる計測温度分解能は約0。02°C程度であり,目標の0.001°Cには至ることができなかった.ただし,上記の性能は,現在の赤外線センサの分解能と同等程度であり,今後,感温フェライト膜の温度依存性の向上と信号処理装置の性能向上により,目標分解能が達成できるよう引き続き装置の改良を行う予定である.・感温フェライト膜の温度依存性の向上には,磁気バイアスによる制御も考えられるため,シミュレータを用いて調査した結果,ある程度は制御できるが,広範囲には利用できないことを確認した.そこで,感温フェライト膜の温度特性を物理的に制御する事の検討を開始した.現在は,応力を印加した場合の感温フェライト膜の磁気の温度特性への影響,ならびに理論解析を進めている.・得られた研究成果は,随時国内外の学会をはじめ,取材や研究会を通じて発表を行った.本研究は,測温素子と温度情報読み出し回路を空間的に分離できる接触型温度センサとして直流磁界型高精度ワイヤレス微小温度センサの開発に関するものである.以下に本研究で得られた知見を示す.・直流磁界型高精度ワイヤレス微小温度センサの主要要素である,感温フェライト膜,磁気読み出し装置,磁気バイアス印加装置,ヨーク等の最適な形状および配置を申請設備備品であるガウスメータや小型環境試験器,磁界解析ソフトウェアを用いて,種々検討したところ,最適解ではないがおよその傾向をつかむことができた.また,信号処理部分にマイコンを用い外部磁界によるノイズの除去をリアルタイムに行える装置を試作した.・測温素子である感温フェライト膜と磁気読みだし装置との非接触達成距離に関しては目標値である5mm近傍(S/N比を考慮すると現状は4mm程度)が達成できた.ただし,現時点ではまだ最適値の同定には至っていないため,引き続き実機でのデータ収集と理論解析が必要である.・本センサによる計測温度分解能は約0。02°C程度であり,目標の0.001°Cには至ることができなかった.ただし,上記の性能は,現在の赤外線センサの分解能と同等程度であり,今後,感温フェライト膜の温度依存性の向上と信号処理装置の性能向上により,目標分解能が達成できるよう引き続き装置の改良を行う予定である.・感温フェライト膜の温度依存性の向上には,磁気バイアスによる制御も考えられるため,シミュレータを用いて調査した結果,ある程度は制御できるが,広範囲には利用できないことを確認した.そこで,感温フェライト膜の温度特性を物理的に制御する事の検討を開始した.現在は,応力を印加した場合の感温フェライト膜の磁気の温度特性への影響,ならびに理論解析を進めている.・得られた研究成果は,随時国内外の学会をはじめ,取材や研究会を通じて発表を行った.直流磁界型高精度ワイヤレス微小温度センサは,感温フェライト膜を測温素子とすることにより,測定対象の温度変化を磁気特性の変化として,原理的に非接触で読み出すことが可能なセンサであり,事実上自己加熱が無視できるという優れた特徴を有する.以下に,本年度の研究状況を研究実施計画に基づいて報告する.■測温素子の温度特性の制御測温素子である感温フェライト膜の温度特性を制御するために,感温膜の磁気特性の温度依存性を様々な条件下(磁気バイアスやストレス印加等)で測定する装置を試作した.現在磁気シールド部分等の調整作業中であるが,本装置により感温膜に対する様々な条件設定が温度特性を計測しながら行えるようになるため,任意の特性に制御する技術の開発がスムーズになることが期待できる.■センサ構造の検討直流磁界型高精度ワイヤレス微小温度センサの主要要素である,感温フェライト膜,磁気読み出し装置,磁気バイアス印加装置,ヨーク等の最適な形状および配置を申請設備備品であるガウスメータや小型環境試験器等を用いて検討した.ただし,現時点ではまだ最適値の同定には至っていないため,引き続き実機でのデータ収集と理論解析が必要である.■調査および研究成果の発表直流磁界型高精度ワイヤレス微小温度センサは,感温フェライト膜を測温素子とすることにより,測定対象の温度変化を磁気特性の変化として,原理的に非接触で読み出すことが可能なセンサであり,事実上自己加熱が無視できるという優れた特徴を有する.以下に,本年度の研究状況を研究実施計画に基づいて報告する.■センサの最適化外部磁界の影響を受けにくいセンサ構造をシミュレーションおよび信号処理技術により検討した.

磁界解析ソフトウェアを用いて,測温素子である感温フェライト膜と磁気読み出し素子(MI素子)および磁路となるヨークの構造に関して配置と形状を種々検討したところ,最適解ではないがおよその傾向をつかむことができた.また,信号処理部分にマイコンを用い外部磁界によるノイズの除去をリアルタイムに行える装置を試作した.また,測温素子である感温フェライト膜と磁気読みだし装置との非接触達成距離に関しては目標値である5mm近傍(S/N比を考慮すると現状は4mm程度)が達成できた.■測温素子の温度特性の制御磁気バイアスによる感温フェライト膜の磁気の温度特性の制御法をシミュレーションにより検討した.シミュレーションによりある程度は制御できるが,広範囲には利用できないことを確認した.応力を印加した場合の感温フェライト膜の磁気の温度特性への影響を計測する装置を試作した.現在,試作装置にて印加応力と磁気特性の関係を測定ならびに理論解析を進めている.■調査および研究成果の発表応用物理学会等の講演会,および研究代表者が幹事を務める電気学会調査専門委員会等で磁性体を利用したセンサや微小温度計測技術に関して調査および発表を行った.また,研究成果の一部をJournal of Magnetism and Magnetic Materials(オランダ,Elsevier Science社刊行,磁気と磁性材料に関する学術論文誌)に発表した.
準結晶の高圧下のX線解析

準結晶の安定性に関し弾性的性質と高圧下の相転移について調べた。1.安定相準結晶であるTC型I相のAl-Li-Cu系と準安定相準結晶のMI型I相のAl-Fe系について高圧下の相転移を調べた。Al-Fe系は等方的に圧縮され、相転移は見られなかった。Al-Li-Cu系では圧力の増加と共に、準結晶相→アモルファス相→長距離秩序相(高圧相)へと転移する圧力誘起構造変態を見い出した。この一連の相変態は準結晶でははじめて見い出されたものである。この準結晶相からアモルファス相への転移はSiO_2やSnI_4などを見い出されている結晶相の圧力誘起アモルファス化との類推から、基本となるクラスタ-構造を保持しながら準結晶相特有の長距離秩序が失われてアモルファス化するものと理解される。また、この相転移に伴い電気抵抗も著しく変化し、準結晶相の大きな比抵抗をもつ負の温度係数からアモルファス相の小さな比抵抗をもつ正の温度係数へと電気的性質の変化が見られた。今後、高圧相の構造決定及び相変態の詳細を明らかにし、準結晶の構造安定性など物性の理解を深めることをめざす。2.上記二つの系の準結晶相はいずれも高圧下で等方的に圧縮された。体積弾性率(B_0)は、Al-Fe系ではB_0190GPa、Al-Li-Cu系ではB_070GPaと大きな差違が見い出された。いずれの系もAlを主成分とするため、構成原子のみからではこの差違は説明できず、クラスタ-の内部構造の違いが反映しているものと考えられ、準結晶の内部構造による系統的なデ-タ集積が必要である。
一般化された岩澤理論について

今年度は,受け入れ研究者落合理の以前の発表論文(1) Colemanfamily上の稠密な点においてその点上にあるモジュラー形式に付随したp進ガロア表現はDeligne-志村によって構成されている.このfamilyの上にガロア表現が伸びることを示す一般論であるpseudo-representationの理論は,今の状況ではordinaryのときの岩澤代数のような局所環上の状況ほど単純には機能しない.Coleman familyが定義されるaffinoid algebra上でのpseudo-representationを解析して論文内にまとめた.(2) Perrin-Riouの仕事などでも若干あいまいに扱われていたDistribution algebraのintegralstructuremの構成の詳細を丁寧に調べ記述し論文内にまとめた.(抄録なし)本年度の本研究費による研究のメーンテーマは,局所ガロア表現に対するexponential mapをガロア表現の変形空間で補間することである.このような補間を構成することは様々なp進L函数の構成や多変数の岩澤主予想を得るための非常に大事なステップである.ある固定されたガロア表現の円分変形の場合には,ColemanやPerrin-Riouの研究によってこのような問題が解決されていた.研究代表者は,2003年に出版した論文において,代数群GL(2)に対するnearly ordinaryな肥田変形においてこの問題を解決した.これは円分変形以外の場合としては初めてのものである.引き続いて2011年に完成したFrancesco Lemma氏と共著のプレプリントにおいてよりランクの高い代数群GSp(4)のnearly ordinaryな肥田変形に対しても(適当な条件の下で)この問題を解決した.かくして,nearly ordinaryの条件の下では大きな進歩が得られている.一方で,GL(2)の場合に置いてもColemanによる変形族のようなnearly ordinaryでないが興味深い変形がありこれらの変形においてもexponential mapの補間の問題を考えることは有益である.本年度は,こういったnearly ordinaryでない一般化を目指して(1)古典的なPerrin-Riouの結果の(一般的な変形の拡張を目指した)証明の再分析を行った.およそ先に進むに必要になると思われる性質の大半を確立することが出来た.今年度は,ガロア変形に対するColemn-PerrinRiou写像と呼ばれる写像を構成するための研究を行った.受け入れ研究者落合理の以前の発表論文"A generalization of the Coleman map forHida deformation"(American Jour. of Math., 2003)でordinaryかつ階数2という仮定の下で,ガロア表現のBloch一加藤の指数写像を補間する結果が得られていた.その論文以後数年の間にp進ホッジ理論の研究者たちにより様々な技術革新が得られており,そういった新しい道具立てを用いてnon-ordinaryの場合や階数が2の場合の同じ問題を考えることは非常に重要であると思われる.特に,今回は共同研究としてordinaryからnon-ordinaryへと一般化することに重点をおいて,上述の受け入れ研究者による2003年の結果を階数は2でnon-ordinaryなColeman familyへと一般化することを目指した.一年の間に様々な細かい技術的な障害に遭遇してその都度ひとつひとつ地道にクリアしてきた.以前ののPerrin-Riouの仕事等でも若干あいまいに済まされていたDistribution algebraのintegralstructureやColeman familyの精密な記述などに気をつけながらdual exponential mapを補間するほぼ欲しい結果を得つつある.現在,それらをまとめて論文に仕上げる最終段階である.今年度は,受け入れ研究者落合理の以前の発表論文(1) Colemanfamily上の稠密な点においてその点上にあるモジュラー形式に付随したp進ガロア表現はDeligne-志村によって構成されている.このfamilyの上にガロア表現が伸びることを示す一般論であるpseudo-representationの理論は,今の状況ではordinaryのときの岩澤代数のような局所環上の状況ほど単純には機能しない.Coleman familyが定義されるaffinoid algebra上でのpseudo-representationを解析して論文内にまとめた.(2) Perrin-Riouの仕事などでも若干あいまいに扱われていたDistribution algebraのintegralstructuremの構成の詳細を丁寧に調べ記述し論文内にまとめた.外国人研究員の来日は11月のはじめであり,今年度の研究開始期間は短かったが既にPerrin-Riouの仕事の拡張の方向性に関していくつかのアイデアを得ることが出来た点で順調な進展を遂げたと言える.当初意図した最終目標のdual exponential mapを補間には既にかなり近づきつつある.それにとどまらず,この結果がColemafamilyに対するPerrinRiou式の岩澤主予想の定式化につながることに気づいた.かくして意図しなかった応用が射程に入ってきた意味で当初の計画以上に進展していると判断される.本年度得られた結果をもとに引き続き目的とするColeman mapの証明の核心に迫って行きたい.まずは詰めてきた細部の議論を論文として形にすることに尽くしていきたい.その上で上述の岩澤主予想の定式化に関する次の仕事へと進んで行きたい.(抄録なし)
ＴＭＥＭ１６Ｅ遺伝子欠損マウスをホストとした特異的モノクローナル抗体の開発

申請時点で保有した市販品を含むTMEM16E抗体は,絶対的な陰性対照のTMEM16Eノックアウトマウスでも非特異反応が強く、各種アプリケーションにおけるTMEM16Eの特異的検出を断定することが困難であった。本研究ではTMEM16Eを高い信頼度で検出できる抗体の開発を目指し、リンパ節近傍にTMEM16E発現ベクターを導入して抗原を発現させてラットを免疫する方法を実施した。その結果、抗原免疫動物リンパ節より採取したリンパ球をラット骨髄腫由来細胞と融合した抗原反応抗体産生ハイブリドーマを多数ストックし、各種抗体アプリケーションにおいて高感度検出能力を示すモノクローナル抗体産生クローンが得られた。本研究グループはTMEM16E遺伝子の異なった変異が、家族性遺伝疾患の原因遺伝子となることを報告してきた。すなわち、1)形質獲得変異の優勢遺伝形質は骨系統組織、特に上下顎に遅発性の硬化性病変を伴う顎骨骨幹異形成症を起こし、2)機能喪失変異の劣性遺伝形質は上下肢帯部の骨格筋組織に特徴的な恒常性筋組織修復機構の不全が原因となる遅発性の筋ジストロフィーを起こす。本研究ではTMEM16Eを高い信頼度で生検レベルで検出できるモノクローナル抗体を作製する独自の方法を用い、臨床診断ツールとしても汎用性の高い特異抗体を開発することを目指している。本年度は293細胞およびCHO細胞を標的として、抗原の細胞表面発現をTMEM16E発現ベクター導入により全長および部分長で検証した。検証は非固定ベクター導入細胞に対するFCM、ELISAによるネイティブ抗原の検出を本研究グループが開発したラビット由来抗TMEM16E特異血清および既存市販抗体にて検討した。さらに、抗原免疫法およ免疫動物をTMEM16E KOマウスとするか野生型ラットとするかを慎重に検討した。その結果野生型ラットを免疫動物とした際のDNA免疫法は、非常に高感度で日固定標的に対するFCM、ELISAに使用できる血清抗体価を与えたため、野生型ラットを免疫動物としてDNA免疫法を用い動物を免疫したのち、所属リンパ節細胞からのハイブリドーマ作製を実施した。細胞表面に特異抗原を発現させ動物を免疫できた。ネイティブな表面抗原を細胞の固定を経ずFCMとELISAでスクリーニングできた。ハイブリドーマ樹立後の陽性クローンスクリーニングは非常に良好であった。現在陽性クローンをKO動物を対照に抗原特異性を確証する態勢で進展は順調である。TMEM16E遺伝子の異なった変異は、家族性遺伝疾患の原因遺伝子となる。本年度は野生型ラットを免疫動物としてDNA免疫法を実施し、所属リンパ節細胞からのハイブリドーマを作製した。ハイブリドーマはクローン化の前にプールとした。陽性プールを同定するために抗原を表面発現した293細胞を播種したプレートに対して非固定ELISAを実施して40プールを同定できた。この40プールそれぞれから限界希釈法でハイブリドーマクローンを選択し、培養上清を抗原を表面発現した293細胞を標的としたFCMで評価した。この結果陽性ハイブリドーマクローンを23株樹立できた。特異抗体産生陽性クローンをKO動物サンプル由来を対照に抗原特異性を確証する。IHCの条件を確立する。口腔外科学
逆"浮き草"構造をもつ高分子有機薄膜の構造と光スイッチング

(1)逆"浮き草"構造をもつ高分子有機薄膜の構造と光スイッチング"逆浮き草"構造をもつ高分子材料(epichlorohydrin-ethlene-diamineに約18本のoctadecyl基がついたもの、ES3)のラングミュアーブロジェット(LB)膜を作成し、赤外スペクトルを測定した。赤外スペクトルの測定結果からアルキル鎖がトランス-ジグザグ構造をとっていること膜面に対してほぼ垂直に立っていることなどが明らかになった。さらにアミド基が水素結合の鎖を形成していることがわかった。次にこのLB膜の温度変化の赤外スペクトル測定を行った。その結果、60と110°C付近に相移転点があることがわかった。またその温度は1層膜と多層膜で変化することも明らかとなった。さらにoctadecyl基の数の異なる3種類(ES1、ES2、ES3と呼ぶ)を用意した。ES3と異なり、ES1、ES2ではoctadecyl基の数が少なくなるにつれ、アルキル基にゴーシュ構造をとりやすくなった。ES3のキャスト膜とLB膜が入れ子構造を取っているのに対し、ES1,ES2のLB膜ではそうなっていないことがわかった。(2)逆"浮き草"構造をもつ高分子薄膜と類似構造をもつラングミュアーブロジェット膜の構造逆"浮き草"構造をもつ高分子有機薄膜と類似構造をもつラングミュアーブロジェット(LB)膜の構造の研究としてアルキルテトラキノジメタン(Cn-TCNQ)のLB膜の研究を行った。とくにLB膜の秩序-無秩序転移の研究、LB膜作製後の配向変化などに重点をおき研究を行った。この研究では紫外可視分光法、赤外分光法、原子間力顕微鏡法をあわせ用いた。赤外分光法は分子構造に関する知見を、原子間力顕微鏡法は膜の形態に関する知見を、紫外可視分光法は発色団の会合状態と膜の状態に関する知見を与える。これらの方法をあわせ用いることによりユニークな知見をうることができた。(3)有機薄膜の微小領域における構造とダイナミクス,および構造変化有機薄膜の微小領域における構造とダイナミクス,および構造変化をAFMや時間分解の手法を取り入れた近接場光学顕微鏡(SNOM)などを用いて解析した。また,有機薄膜薄膜作製の溶媒や湿度条件と膜構造の相関についても考察した。"逆浮き草"構造をもつ高分子材料(epichlorohydrin-ethylene-diamineに約18本のoctadecyl基がついたもの)の合成を行なった。ついでそれらのラングミュアーブロジェット(LB)膜を作製し、赤外スペクトルを測定した。赤外スペクトルの測定結果からアルキル鎖がトランス-ジグザグ構造をとっていること腹面に対してほぼ垂直に立っていることなどが明らかになった。その結果、60と110°C付近に相転移点があることがわかった。

"逆浮き草"構造をもつ高分子材料(epichlorohydrin-ethylene-diamineにoctadecyl基がついたもの)のラングミュアーブロジェット(LB)膜を作製した。昨年は一種類であったが,本年度はoctadecyl基の数の異なる3種類(SE1,SE2,SE3と呼ぶ)を用意した.SE3(octadecyl基が18本)はLB膜を作りやすく,またアルキル基がトランス-ジグザグ構造をとり,膜面に対してほぼ垂直となっていた。一方octadecyl基の数が少なくなるにつれ,アルキル基にゴーシュ構造をとりやすくなった。SE3のキャスト膜とLB膜を比較したところ,両者に違いが見られた。キャスト膜ではアルキル鎖が入れ子構造を取っているのに対し,LB膜ではそうはなっていないことがわかった。SE3にアゾ基の入った高分子材料を合成した。逆"浮き草"構造を持つ高分子有機簿膜ES-1の分子配向構造を赤外分光法を用いて調べた。その結果次のようなことが明らかになった。1)ES-1のラングミュアーブロドジェット(LB)膜ではアルキル鎖が基板に対してほぼ垂直になっており,しかもトランスジグザク構造をとる。2)1層目は上の層とは異なった分子配向をとる。3)金基板場のLB膜は60°C秩序-無秩序転移を起こす。pretransitionの構造変化がある。4)金基板場のキャスト膜ではアルキル鎖が傾いた配向をとる。5)キャスト膜ではLB膜と異なり75°Cで秩序-無秩序転移を起こす。ES-1とは異なる高分子有機簿膜ES-3についてはすでに報告したが、今年度は両者のLB膜,キャスト膜の配向構造の違いについても研究した。
エンハンセオソーム転写因子複合体の形成による植物細胞死の誘導の分子機構

植物の細胞死誘導機構の解明のために、シロイヌナズナの細胞死制御因子LSD1、及びLSD1と相互作用するAtbZIP10の機能解析を行ってきた。本研究では、細胞死誘導に関わるAtbZIP10がAtbZIP53、ABI3と共に強い転写活性化能をもつ転写因子複合体エンハンセオソームを形成するという知見を基に、AtbZIP10を含むエンハンセオソーム転写因子複合体による細胞死誘導における転写活性化メカニズムを解明することを目的とした。その結果、AtbZIP10は他の転写因子とエンハンセオソーム転写因子複合体を形成することで、細胞死誘導に直接関与する遺伝子群の転写活性化を行っていることが明らかになった。プログラム細胞死は、壊死とは異なり生物に利益をもたらす遺伝的に制御された積極的な細胞レベルでの死である。植物において、細胞死が病害抵抗性を始めとする防御応答や器官形成等の高次機能の制御に幅広く関与することが明らかになってきているが、細胞死の誘導に直接関わる転写制御メカニズムについてはほとんど明らかになっていない。これまでの研究から、細胞死の制御に関わることを明らかにしているAtbZIP10は、AtbZIP53、ABI3と共に「エンハンセオソーム」という転写活性化能が非常に強い転写因子複合体を形成することで、貯蔵タンパク質の蓄積や浸透圧調節などに関わる遺伝子群の転写制御を行っていることが報告されている。細胞死誘導の転写制御においてもAtbZIP10等から構成されるエンハンセオソームが機能していると示唆されることから、本研究ではAtbZIP10を含むエンハンセオソームに注目し、モデル植物シロイヌナズナにおいてエンハンセオソームによる細胞死誘導遺伝子の転写制御に関する実験を行うことで、植物細胞死の誘導の転写制御の分子機構の全体像を明らかにすることを目的とした。共発現解析などによりAtbZIP10の直接の標的遺伝子の候補として同定した細胞死誘導に関わるγVPEとLSD1は、AtbZIP10、AtbZIP53、ABI3の3つの転写因子の存在下でのみ強く転写活性化されることを既に明らかにした。またクロマチン免疫沈降(Ch-IP)法を用いた実験から、AtbZIP10がγVPEとLSD1のプロモーター領域上へ結合することも明らかにした。過去の知見を総合すると、細胞死誘導に関わるγVPEとLSD1がAtbZIP10の直接の標的遺伝子であり、AtbZIP10がトリガーとして機能することでエンハンセオソームによりこれら遺伝子の転写が強く活性化されると示唆された。プログラム細胞死は植物において、細胞死が病害抵抗性を始めとする防御応答や器官形成等の高次機能の制御に幅広く関与することが明らかになってきているが、細胞死の誘導に直接関わる転写制御メカニズムについてはほとんど明らかになっていない。これまでの研究から、細胞死の制御に関わることを明らかにしているAtbZIP10は、AtbZIP53、ABI3と共に「エンハンセオソーム」という転写活性化能が非常に強い転写因子複合体を形成することで、細胞死誘導の転写制御を行っていると考えられる。本研究ではAtbZIP10を含むエンハンセオソームに注目し、モデル植物シロイヌナズナにおいてエンハンセオソームによる細胞死誘導遺伝子の転写制御に関する実験を行うことで、植物細胞死の誘導の転写制御の分子機構の全体像を明らかにすることを目的とした。細胞死誘導に関わるγVPEとLSD1は、AtbZIP10、AtbZIP53、ABI3の3つの転写因子の存在下でのみ強く転写活性化され、またAtbZIP10がγVPEとLSD1のプロモーター領域上へ結合することを既に明らかにしている。今年度はエンハンセオソームのトリガーとなると考えられるAtbZIP10の核移行には、γVPEの上流で機能するMAPキナーゼカスケードは関与していないことを明らかにした。また、AtbZIP10はγVPEとLSD1のプロモーター領域上に直接結合しているわけではなく、ProDHの場合と同様にエンハンセオソームを構成するAtbZIP53、もしくはABI3を介して結合しているという新しい知見も得られた。これまでの知見を総合すると、細胞死誘導に関わるγVPEとLSD1がAtbZIP10の直接の標的遺伝子であり、AtbZIP10がトリガーとして機能することでエンハンセオソームによりこれら遺伝子の転写が強く活性化されると示唆された。