hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
マイクロRNAによる遺伝子発現ネットワークの制御を介したヒトの生体防御機構の解明

細菌やウイルスが感染すると、生体は免疫応答という生体防御機構を引き起こす。免疫応答には、自然免疫応答と獲得免疫応答があるが、自然免疫応答は免疫応答の初動で重要な役割を果たす即時対応型のシステムであり、サイトカインの誘導を伴う。哺乳類細胞にウイルスが感染すると、細胞外ではToll like receptors (TLRs)、細胞内ではRetinoic acid-inducible gene I (RIG-I) like receptors (RLRs)といったウイルスセンタータンパク質がウイルス特有の構成成分を認識し、I型インターフェロン(IFN)を誘導する。RLRsとしてRIG-I, Melanoma differentiation-associated protein 5 (MDA5), Laboratory of genetics and physiology2 (LGP2)が知られるが、RIG-IとMDA5はそれぞれ異なる特徴を持つウイルス性RNAを認識しIFNを誘導するのに対し、LGP2はこれまでその機能が明確ではなかった。我々はこれまでウイルスセンサーであるとされながらも機能が不明であったLGP2が、RNAサイレンシングの主要因子であるTRBPとの相互作用を介して、microRNA (miRNA)による遺伝子発現ネットワークを制御することを見出した。IFNにより発現量が増加したLGP2はTRBPとの相互作用を介して、TRBPが結合する特定のmiRNAの成熟化を抑制し、その標的遺伝子群を発現上昇させた。LGP2とTRBPの相互作用を介した特定のmiRNAとその遺伝子群の発現制御は、ウイルス感染細胞において生体防御機構として機能していると考えられる。昨年度は、細胞内ウイルスセンサータンパク質によるRNAサイレンシングの制御について、リコンビナントタンパク質やヒト培養細胞を用いた実験、さらに情報科学的な解析も行い、2報の原著論文を報告することが出来たため(Takahashi et al. 2018 Nucleic Acids Res. , Takahashi et al. 2018 Genes)。現在は、ウイルスセンサータンパク質によるRNAサイレンシングの制御が実際にウイルス感染細胞においてどのような生物学的意義をもつのかを解析している。2019年度に消耗品に使用する予定である。
摂食調節ネットワークの再構築と新規肥満制御因子の探索

1)肥満症と神経系の関連肥満発症への神経系の関与を、中脳切断ラットを用いて検討した。同ラットでは、末梢の満腹シグナルであるCCKやPYY、空腹シグナルであるグレリンの作用が完全にキャンセルされるだけでなく、摂食抑制に機能するレプチンの効果も有意に減衰していた。これらの結果から、神経系を介した中枢への情報入力がエネルギー恒常性の維持に重要な役割を果たしていることが示唆された。2)高脂肪食耐性ラットの解析高脂肪食ラットの約10%に普通食摂取群の平均体重を下回る高脂肪食耐性(DR)ラットが存在することを明らかにした。DRラットは、内臓脂肪の蓄積がきわめて少なく、脂肪合成系に関与する分子の遺伝子発現が低下している一方、脂肪酸β酸化に関わる分子の発現は増加傾向にあった。また、インスリン感受性がきわめてよいという特徴が認められた。これらの基礎データを基に、現在、DRラットの脂肪組織で特異的に変動する分子に着目し、in vitroおよびin vivoでの機能解析を進めている。1)摂食関連ホルモンの神経系を介する情報伝達機構脂肪細胞で産生され摂食抑制に機能するホルモン;レプチンの中枢への情報伝達における迷走神経および延髄-視床下部神経路の役割について神経遮断ラットを用いて検討した。グレリン、コレシストキニン、ペプチドYYなどの摂食関連ホルモンは、神経遮断により摂食亢進や抑制の作用が完全に消失するが、血行性経路が主要な伝達経路であるとされるレプチンについては、神経遮断ラットにおいても摂食抑制作用が認められた。しかし、神経遮断ラットにおけるレプチンの摂食抑制効果は、コントロールラットに比べ明らかに減衰しており、レプチン作用が完全に発揮されるためには神経系の正常な機能が重要な役割を果たしていることが示唆された。レプチン受容体は迷走神経求心細胞で産生されており、レプチン末梢投与により迷走神経求心線維の発火頻度は有意に増加した。これらの知見は、レプチン作用の少なくとも一部は迷走神経求心路を介して直接中枢へと伝達される可能性を示している。2)神経遮断のおよぼすエネルギー代謝調節機構への影響延髄-視床下部を切断した中脳切断ラットの術後1週目のエネルギー代謝パラメーターを解析した。体重増加量、摂餌量、酸素消費量、行動量、嗜好性、レプチンやインスリン濃度を測定したが、いずれもコントロールと有意な差を認めなかった。同ラットは術後1週以降は過食による著明な肥満を呈することが明らかとなり、現在その分子機構の詳細を検討中である。3)高脂肪食耐性ラットの解析高脂肪食摂取にもかかわらす内臓脂肪蓄積がきわめて少ない高脂肪食耐性ラットを作出し、エネルギー代謝調節機構の特徴や遺伝子発現の変動について検討を進めている。中脳切断ラットは、術後1週間目から過食による極度の肥満を呈することが明らかになった。同ラットでは、末梢の満腹シグナルであるCCKやPYYの作用が完全にキャンセルされるだけでなく、血行性に脳に到達し、エネルギー消費亢進に作用するレプチンの効果も有意に減衰していた。これらの結果から、中脳切断ラットでは、末梢からの情報伝達とその処理の異常により、エネルギー恒常性破綻を来たしている可能性が示唆された。脳内の摂食・エネルギー代謝関連物質の遺伝子発現には有意な変動は見られなかったが、褐色脂肪細胞でのUCP1発現が減少傾向にあり、エネルギー消費の低下が想定された。術後1週以降では、インスリン抵抗性やレプチン抵抗性も認められ、過食による肥満症の病態モデルと位置づけること可能である。2)高脂肪食耐性ラットの解析離乳直後のラットを1週間普通食で飼育し、普通食と高脂肪食の2群に分け、体重および摂餌量を連日測定した。高脂肪食給餌2-3週目から、高脂肪食ラットの約10%が普通食摂取群の平均体重を下回る高脂肪食耐性(DR)であることが判明した。DRラットは、肥満ラットに比べ内臓脂肪の蓄積がきわめて少なく、脂肪細胞のサイズも普通食ラットとほぼ同じであった。内臓脂肪の遺伝子解析では、脂肪合成系に関与する分子の発現が低下傾向にあり、脂肪酸β酸化に関わる分子の発現は増加傾向にあった。DRラットの末梢ホルモンの値には、有意な変化を示すものはなかったが、インスリン感受性がきわめてよいという特徴が認められた。

DRラットの脳内摂食関連物質の遺伝子発現には有意な変化を示すものはなかった。これらの結果を基に、現在、DRラットの脂肪組織で特異的に変動する分子に着目し、in vitroおよびin vivoでの機能解析を進めている。
非侵襲的脳機能イメージング法を用いた歯根膜感覚受容変化メカニズムの解明

2017年度にまとめた英語論文を英文誌に投稿し、現在リバイスを進めている。2018年度前半は、学会、シンポジウムへの参加し、関連する研究を行っている研究者と打ち合わせを実施することで歯根膜刺激装置の形態改良を行い、犬歯並びに第一大臼歯の刺激を効率的に実施できるようになり、さらに刺激時のトリガーを効率的に検知できるようになった。2018年度後半は高齢者の歯根膜刺激時体性感覚誘発磁界の研究を遂行するため研究倫理申請を行い、東北大学大学院歯学研究科研究倫理審査員会の承認を得て、前年度から追加で若年者の歯根膜刺激時体性感覚誘発磁界の計測を17名分実施し、この若年者群の解析を行った。その結果上顎、下顎犬歯の一次体性感覚野における局在に関して三次元的な位置関係に有意差は認めらなかったが、潜時は下顎犬歯の方が有意に短くなっていた。これは、上下顎によらず同名歯の局在を同じにすることで、口腔内の複雑な運動をコントロールをしやすくしているが、開口反射等の生理反射は下顎の感覚が重要であることを示唆された。また高齢者のリクルートを開始し、2018年度前半に計測を開始できる目途がついた。さらに、2017年度に実施したインプラント埋入患者におけるインプラント刺激時体性感覚誘発磁界の解析を行い、天然歯との反応パターンの相違を確認した。これは以前から文献的に存在が示唆されていたオッセオパーセプションの可能性があり、さらに詳細に解析を行い学会発表、論文投稿に向けデータの整理を行っている。当初の目標である2年目までの高齢者の歯根膜刺激時体性感覚誘発磁界の計測の目途がたった。倫理申請に時間を要したため計測には至らなかったが、すでに高齢者のリクルートを進めており、2019年度に歯周炎患者を合わせてリクルートすることで、概ね目標を達成することができると判断したため。2019年度は歯周炎患者のリクルート並びに歯根膜刺激時体性感覚誘発磁界の計測を行う。平成29年度は、前年度から行っていた予備実験を発展させ、若年者の歯根膜刺激時SEFのデータ収集を行い、目標の15症例に達した。歯種別(下顎犬歯と下顎第一大臼歯)のSEFの潜時と大脳皮質一次体性感覚野における局在について解析を行い、第一大臼歯の方が犬歯よりも潜時は優位に短く、一次体性感覚野における局在は犬歯、第一大臼歯ともに正中神経と明らかに異なり、前下方に位置しており、他の口腔領域の近辺に位置していたが、犬歯と第一大臼歯で一次体性感覚野における局在に関して三次元的な位置関係に有意差は認めらなかった。よって歯は歯種によらず局在を同じにすることで、口腔内の複雑な運動をコントロールしやすくしており、潜時の違いにより歯種別の感覚を得ていることが示唆された。この結果を国際学会のBiomagnetic Sendai 2017で発表を行い、Young Investigator Awardを受賞した。また追加のデータを加えたものをまとめて、国際シンポジウムのThe 12th International Workshop on Biomaterials in Interface Scienceで成果の発表を実施した。さらに上下顎歯のSEFの潜時と大脳皮質一次体性感覚野における局在について解析を行い、上下顎で潜時に有意差はなく、三次元的な位置関係も有意差は認められなかった。最終的に25症例分のデータを取得し、同様に解析を実施し、英語論文としてまとめたため、平成30年度中に英文誌に投稿予定である。また、本研究の根本でもある歯根膜刺激時の感覚をより正確に解明するために、追加でインプラント埋入患者におけるインプラント刺激時SEFの計測を3名に対して実施し、現在、解析を進めている。現在、若年者の歯根膜刺激時SEFのデータの取得は終了し、さらに目標の症例数よりも多くの症例を集めることができたが、高齢者の歯根膜刺激時SEFのデータに関しては新たに倫理委員会の承認が必要になるため現在倫理申請の準備を進めており、平成30年度中に計測を開始する予定のため。

さらに、2017年度に実施したインプラント埋入患者におけるインプラント刺激時体性感覚誘発磁界の解析を行い、天然歯との反応パターンの相違を確認した。これは以前から文献的に存在が示唆されていたオッセオパーセプションの可能性があり、さらに詳細に解析を行い学会発表、論文投稿に向けデータの整理を行っている。当初の目標である2年目までの高齢者の歯根膜刺激時体性感覚誘発磁界の計測の目途がたった。倫理申請に時間を要したため計測には至らなかったが、すでに高齢者のリクルートを進めており、2019年度に歯周炎患者を合わせてリクルートすることで、概ね目標を達成することができると判断したため。平成30年度は高齢者の歯根膜刺激時SEFの刺激を開始するために東北大学歯学研究科研究倫理員会に倫理申請し、リクルートを仙台市シルバー人材センターに依頼することで、年度内に計測を実施する。さらに歯周炎患者における歯根膜刺激時SEFの計測を実施するためにこちらも合わせて倫理申請を行い、年度内に計測を開始することを目標に東北大学病院にて被験者のリクルートを行う。2019年度は歯周炎患者のリクルート並びに歯根膜刺激時体性感覚誘発磁界の計測を行う。昨年度は本格的な実験開始にあたり基礎データの収集を行っていたため人件費・謝金の使用が少なかったこと、物品も基礎データ収集のための最低限のものしか購入しなかったため次年度使用額が生じた。本年度は本格的な実験を開始するため、次年度使用額を被験者の謝金等の人件費並びに謝金に使用し、さらに被験者ひとりひとりで使用する機器を変えるため、物品費にも使用する予定である。倫理審査が遅れ、被験者の計測が一部実施できなかったため施設使用料、謝金で差額が生じた。次年度は施設使用料、謝金で使用し、さらに論文投稿料にも使用する。
希ガス同位体比、Ar-Ar年代測定に基づく地殻・マントルでの物質循環・進化の研究

本研究は地殻からマントル深部にわたる物質循環の様相を希ガス同位体比、Ar-Ar年代測定、その他の手法を用いて明らかにして、物質進化に関しての新しい知見を得ることを目的として行い、以下のような結果を得た。シベリア、シホテリアン地域からのマントル捕獲岩から、大気の値より低い3He/4He比を示すものが見いだされた。それらのカンラン石中などに流体包有物として存在するCO2に対するラマン分光測定結果から、流体がトラップされた圧力を推定する方法を開発し、それらは圧力として0.961.04Gpaで地下約30kmに相当する深さでトラップされたことを明らかにした。このことから、この地域の大陸下マントルでは、古い時代に沈み込んだ地殻物質の影響として低い3He/4He比を示し、微量元素などの存在度にも影響を与えていることが予想された。また幌満カンラン岩複合岩体中の金雲母に対して実施した40Ar-39Ar年代測定は約21Maの形成年代と過剰40Arの存在を示し、金雲母が形成された環境は地下深部で地下水などの影響を受け二次的に生成されたことを示唆した。一方、ハワイのロイヒ火山などの海底部から、深海潜行艇を用いて採取されたガラス試料に対して希ガス同位体測定を行ったが、斑晶のカンラン石中の包有物中でも、海洋地殻付近からの影響が示唆されるもののあることを示す結果を得た。さらにレユニオン島、モーリシャス島の火山岩試料の希ガス同位体比測定から、レユニオン島、1Maより古いモーリシャス島の火山岩は1214Raの3He/4He比を示すが、1Maより若いモーリシャス島の火山岩は8Raに近い3He/4He比を示した。この傾向は、海洋島の発達段階に対応すると考えられる。シベリア大陸東縁部では、10Ma-40Ma頃に噴出したアルカリ岩中にマントル物質としての超塩基性捕獲岩が見いだされ、それらには顕微鏡観察により流体包有物が含まれている。それらからカンラン石を分離し、破砕法により希ガスを抽出してその同位体比を測定した結果、その3He/4Heが大気の値よりが低いものが見いだされた。その存在には地域性がある。大陸下マントルを構成している物質中の包有物から抽出された希ガスで大気より低い3He/4He比を示したことはこれまでに報告例がなく、大陸縁辺部の特性である可能性がある。さらに段階加熱による脱ガスでは、カンラン石の溶融成分には中央海嶺玄武岩と同様の値を示す傾向があり、低い3He/4He比を示す成分はカンラン石中に見られる流体包有物に、マントル上部でとりこまれた可能性が大きい。また40Ar/36Ar比は1例を除いて1000以下であり、水などを通じての大気的成分の寄与を示唆する。ラマン分光分析を利用して推定した炭酸ガス包有物の圧力は、マントル最上部の値と調和的である。これらの結果から、シベリア大陸縁辺下のマントルでは、沈み込んだスラブに起因する循環物質が数億年オーダーの長期間、周囲のマントル物質と均質化しないままでいる可能性が示唆された。また東北日本や南北海道の第四紀火山の火山岩中の10Be/9Be比は、ハワイ・ロイヒ火山や第三紀火山の火山岩のものよりも高い値を示すことが明らかにされた。このことは、大気中でつくられた宇宙線照射生成核種としての10Be(半減期:150万年)は海洋堆積物中に濃集するが、スラブとともに沈み込んだ海洋堆積物が、島弧マグマ生成に関係していることを示す最も直接的な証拠となる。

今年度は、ハワイやレユニオンなどの海洋島に関する岩石試料についての希ガス同位体比測定などを行い、それぞれに特徴的な値およびそれらに関与している二次的な成分などの様相について新しい情報を得た。ハワイ島周辺の海底から潜水艇を用いて採取した試料に対しての希ガス同位体比の測定結果からは、深度5000m近くの海底から採取された急冷ガラスやカンラン石斑晶などでも、海水や地殻成分の影響が及んでいることが示唆された。このことは、特に高い3He/4He比を示しているロイヒ海山周辺でもその傾向が見られ、マグマが海洋底地殻などの影響を受けていることから、ほかの同位体比においてもある程度その影響が見られることを予測させている。一方、インド洋のホット・スポット火山であるレユニオン島においては、これまで報告されてきたのと同様に中央海嶺玄武岩の値よりやや高く、一様な3He/4He比を示すことが再確認された。しかしモーリシャス島では数百万年より古い玄武岩ではそれらの値がレユニオン島と同じような値であるのに対し、100万年より若い時期に噴出した玄武岩などの値は中央海嶺玄武岩の値に近づくことが示された。このことは、プルームが次第にリソスフェアなどの影響を受けた結果という推察される。またインド洋における希ガス同位体比がハワイ島などとはやや異なっていることは、その同位体比の分布がインド洋の各島においては類似した値を示すことから、下部マントルに起因する可能性のあることが示唆された。シベリアのシホテリアン地域からのマントル捕獲岩の示す3He/4He比中には、大気の値よりも低い値が見いだされた。それらの値が地殻からの影響であるか否かを判断するためには、その生成深度が分かればよい。これらのマントル捕獲岩中のカンラン石や輝石中には流体包有物が含まれているが、その中にはCO2によって満たされているものが存在する。それに対してラマン分光測定を適用することにより、それらの流体がトラップされた深さの圧力を準定することで試みた結果、0.96-1.04Gaの圧力が推定され、約30km程度の深さの上部マントルに相当することが明らかになった。このことは、低い3He/4He比をもたらした原因がマントル内に存在していることを示唆している。また中国東部地域におけるマントル捕獲岩中めカンラン石、輝石などを分離して希ガス同位体比測定を行った結果、南部、中部、北部などにおいてそれぞれ地域的に異なった値が得られ、古い大陸としての構造などとの関連をある程度まで反映している可能性が示された。一方、イオンマイクロプローブ(SHRIMP)によりわが国の第四紀の火成岩中のジルコンのU-Pb年代測定を試みた結果、1991年に噴出した雲仙岳の火砕岩中のジルコンに対しては90kaの年代値が得られた。この数値は、マグマ溜まりにおけるマグマの滞留期間が約9万年程度であった可能性を示唆している。
ケニアのＨＩＶ－１感染小児の病態進行に関与する宿主及びウイルス側因子の解明

HIV-1感染児における病態進行に関連するウイルス並びに宿主因子を明らかにすることを目的とした。ケニアの早期発症児[5歳以下で抗レトロウイルス療法(ART)を開始した児29名]と遅発症児[10歳までARTを必要としなかった児32名]の間で、HIV-1 gagとnef遺伝子の多様性に有意差は認められなかった。遅発症児では早期発症児に比べ、病態遅延に関与するHLA型を持つ割合が高く、NefおよびGag蛋白質の両方でより多くのHLA-B関連エピトープを有していた。これらの結果から、HIV感染児では、宿主因子であるHLAがウイルス因子に比し、病態進行により重要な役割を果たしていることが示唆された。研究代表者のグループは、ケニアのニュンバニ孤児院でヒト免疫不全ウイルス1型(HIV-1)感染小児100余名の追跡調査を2000年から半年に1度行っている。(1)今年度、新たにプロジェクトを立ち上げるにあたり、現地を訪問し、HIV-1感染小児の追跡調査の目的と方法の説明・確認を行った。(2)2011年4月と10月に採取・凍結保存された検体(血漿と末梢血単核球)を金沢大学に移送し、血中ウイルス量(pVL)ならびにHIV-1薬剤耐性関連遺伝子変異の解析を行った。一次抗レトロウイルス療法(cART)開始後24ヶ月以内に75名中22名(29.3%)の児で治療が失敗(pVL>5,000コピー/ml)し、その内21名に薬剤耐性ウイルスが検出された。一次cART失敗例に対し、薬剤を変更したところ(二次cART)、二次cART開始後半年以内に85%の児で、18ヶ月以内に全例で、pVLが検出限界以下に減少した。末梢血CD4+T細胞はpVLに関わらず全ての児で増加した。適切なモニタリングによる治療薬の変更により、小児でもcARTによる十分な治療効果が期待される。(3)すべての児の末梢血単核球からゲノムDNAを抽出した。長期未発症者/遅発症者15名と早期発症者15名のゲノムDNAを対象に、ゲノムワイドヒトSNPアレイ(アフィメトリクス社)を使用し、それぞれ約250,000箇所の遺伝子多型解析を行った。現在、結果を解析中であるが、今までのところ各群に有意な遺伝子多型は見つかっていない。薬剤代謝に関連する遺伝子変異の解析、HLAタイプと病態進行に関しても現在、解析を進めている。(4)長期未発症者/遅発症者と早期発症者から分離されたウイルス遺伝子(nef,gag,eng)の解析を現在、順次行っている。研究代表者のグループは、東アフリカに位置するケニアのニュンバニ孤児院においてHIV-1母子感染小児を追跡調査している。本研究では、これらのHIV-1感染児の中の長期未発症群/遅発症群と早期発症群を対象に、(1)網羅的なゲノム多型解析により小児エイズ発症に関わる宿主因子を明らかにする、(2)既報の成人HIV-1感染者の病態進行に関与する宿主因子とHIV-1感染小児の病態進行との関連を解析し、小児エイズ発症に関わる宿主因子を明らかにする、(3) HIV-1感染小児の病態進行に関与するウイルス側因子を明らかにすることを目的としている。これまでの検討の概要は以下のようである。1.長期未発症者/遅発症者15名と早期発症者15名のゲノムDNAを対象に、ゲノムワイドヒトSNPアレイを使用し、それぞれ約250,000箇所の遺伝子多型解析を行ったが、各群に有意な遺伝子多型は見つかっていない。2. 114名中89名の児のHLA-A/Bのタイピングに成功した。早期発症群では長期未発症群/遅発症群に比べHLA B*0801、HLA B*4201、HLA B*4501が有意に高率にみられ(P<0.05)、これらのHLAタイプがエイズ病態進行に関与している可能性が示唆された。3.長期未発症者/遅発症者と早期発症者から分離されたウイルス遺伝子(gag, env)の比較解析の結果をまとめ、HIV-1感染小児の病態進行に関与するウイルス側因子について国際学術誌に投稿中である。4.二次抗レトロウイルス薬の効果に関するデータをまとめ、国際学術誌に投稿中である。本研究では、これらのHIV-1感染児の中の長期未発症群/遅発症群と早期発症群を対象に、(1)網羅的なゲノム多型解析により小児エイズ発症に関わる宿主因子を明らかにする、(2)既報の成人HIV-1感染者の病態進行に関与する宿主因子とHIV-

1感染小児の病態進行との関連を解析し、小児エイズ発症に関わる宿主因子を明らかにする、(3)HIV-1感染小児の病態進行に関与するウイルス側因子を明らかにする、ことを目的としている。これまでの検討で、(1)長期未発症者/遅発症者15名と早期発症者15名のゲノムDNAを対象に、ゲノムワイドヒトSNPアレイを使用し、それぞれ約250,000箇所の遺伝子多型解析を行ったが、各群に有意な遺伝子多型は見つかっていない。(2)114名中89名の児のHLA-A/Bのタイピングに成功した。早期発症群では長期未発症群/遅発症群に比べHLA B*0801、HLA B*4201、HLA B*4501が有意に高率にみられ(P<0.05)、これらのHLAタイプがエイズ病態進行に関与している可能性が示唆された。(3)長期未発症者/遅発症者と早期発症者から分離されたウイルス遺伝子(nef, gag)の解析を、順次行っている。(4)1次抗レトロウイルス療法(cART)開始後平均4.2年で、HIV-1感染児103名中43名(41.7%)が治療に失敗し(VL>5,000 copies/ml)、2次cARTに変更した。治療を失敗した43名全てで薬剤耐性ウイルスが検出された。これらの43名は平均3.7年間2次cARTを受けているが、1名(2.3%)のみが治療に失敗した。適切なモニタリングによる治療薬の変更により、小児でもcARTによる十分な治療効果が期待される。HIV-1感染者ではヒトにより病態進行が異なる。本研究では、HIV-1感染小児において病態進行に影響するウイルス並びに宿主因子を解明することを目的とした。研究代表者らは、2000年からHIV-1感染小児102名をケニアで追跡調査している。5歳以下で抗レトロウイルス療法(ART)を開始した児29名(早期発症者)と10歳までARTを必要としなかった児32名(遅発症者)を対象に、HIV-1 gagとnef遺伝子の多様性とMHC-I関連エピトープを二群間で比較した。検出されたHIV-1亜型はA1とDであり、亜型の分布に二群間で有意差は認められなかった。Nef機能性ドメイン10個の内PxxP3領域にのみ早期発症者でより多様性が認められた(33.3% vs. 7.7%, p=0.048)。Gagアミノ酸配列の多様性に二群間で有意差は認められなかった。病態進行遅延に関連しているHLA-A*7401とA*3201が遅発症者で(39.3% vs. 11.1%, p=0.049)、病態進行促進に関連しているHLA-B*4501は早期発症者で(33.3% vs. 7.4%, p=0.045)有意に高率に検出された。早期発症者に比べ、遅発症者ではNef蛋白質の推定HLA-B関連12-merエピトープ(3 vs. 2, p=0.037)、GagのHLA-B関連11-merエピトープ(4 vs. 1, p=0.051)とHLA-A関連9-merエピトープ(4 vs. 1, p=0.051)の中央値は高値であったが、NefのHLA-C関連エピトープ(4 vs. 5, p=0.046)とHLA-C関連11-merエピトープ(1 vs. 1.5, p=0.044)は低値であった。これらの結果から、宿主因子であるHLAがウイルス因子に比し、病態進行により重要な役割を果たしていることが示唆された。26年度が最終年度であるため、記入しない。
構造主義的観点からのアクセント変化と系統樹の再建

日本語アクセントが祖語に遡る音韻特徴であることの発見と、現在のさまざまな方言アクセントを生み出した音法則的なアクセント変化の解明をめざす研究は、100年を越える蓄積をもつが、いまだに全貌の解明には至っていない。本研究では、構造主義的な観点からこの問題を解決することをめざし、談話音声資料の収集と分析を行なう。
広義のライオトロピック液晶性に基づいた高分子イオニクスの開拓

高プロトン伝導性高分子の分野は、ミクロなナノ構造とマクロな物性であるプロトン伝導度の相関を直接議論できていない。この問題の起源は、高分子構造が長距離秩序を持たないために構造の議論が不十分であることが1つの要因である。研究代表者は、剛直な主鎖が排除体積効果で配向するライオトロピック液晶性に着眼し、アモルファスではなく組織構造(ラメラ構造)を有しかつ、10-1 S cm-1の高プロトン伝導性を示す高分子薄膜を世界で初めて発見している。この組織構造は水分子の含有で構造の規則性や周期性が向上する広義のライオトロピック液晶性を示すのが特徴である。現在の課題は、組織構造薄膜におけるプロトン伝導に強く寄与する構造的要因の洗い出しであり、広義のリオトロピック液晶性による組織構造化の起源の解明を目指すことである。本年度は主鎖骨格の1.剛直性・平面性の検討、2.脂環式骨格の検討、3.疎水基導入の検討、4.側鎖のアルキル鎖長の検討をそれぞれ行った。12種のスルホン化ポリイミドを合成しライオトロピック液晶性の起源を探索した。結果をまとめると、側鎖のスルホン酸基が予想以上に強いライオトロピック液晶性を示すことがわかり、含水時の組織構造化および高プロトン伝導性発現に寄与していることを突き止めた。結果の一部を示すと、スルホン酸基の50%を疎水基に置換してもなおライオトロピック液晶性がドライビングフォースとなり含水時に組織構造が得られることがわかった。この結果は研究開始当初は予想しておらず、想像以上に側鎖のスルホン酸基が自発的な組織構造化の過程を支配していることが明らかとなった。関連する論文発表は6件、学会発表は22件(うち招待・依頼講演は7件)実施した。研究は当初計画よりも早く進めることができており、研究目的であるライオトロピック液晶性の起源を化学的にほぼ解明することができた。また、予想以上の多くの知見が得られており、論文発表も滞りなく進んでいる。この結果を発表した後、国内外からの招待講演の依頼がさらに増えており、研究代表者オリジナルの独創的な研究を加速させることができていると考えられる。計画は当初の計画以上に進展しており、次年度の計画も予定通りの計画をもとに進める予定である。本研究の課題は、組織構造薄膜におけるプロトン伝導に強く寄与する構造的要因の洗い出しであったが、それがほぼ解明できたことから、これをもとに、アモルファス構造では従来議論できなかったプロトン伝導と構造的要因の体系的整理を目指すことで、新たな分子設計指針の導出と高分子イオニクスの知見を深めていく。
過疎農村の地域発展と少子化対策の日韓比較研究-外国人定住政策を中心に

国際結婚が日本と比較して20年遅れる韓国において、結婚移民者に対する社会的統合策に大きく転換した社会的背景と施策の有効性について、全羅北道鎮安郡・長水郡多文化家族支援センターの事例調査分析をとおして考察した。韓国文化への適応教育や韓国語学習など同化主義的性格が濃いものの、母国語の講師・通訳等の就労の場づくりや営農やコンピューター等の技能習得による就労自立支援、遠隔地に居住する者への訪問教育など結婚移民者のニーズにもとづく学習・指導援助が積極的に展開され、結婚移民者農山村への定住に寄与していることが明らかとなった。本研究は、日本と共通する問題を抱えている韓国農村との比較研究をとおして、少子高齢化をめぐる国家レベルの諸政策、地方行政機関、コミュニティの関係構造のあり方について、理論的・実証的に比較検討することを目的としている。本研究は3年計画で、研究は大きく二つの段階に分かれる。第一段階は、平成20年度および21年度、日韓にフィールドを設けて取り組む。第二段階は、第一段階の成果を踏まえながら、最終年度に理論的検討ならびに実践的検討を集中的に行う。第一段階初年度にあたる平成20年度は、日本国内の県および全国市町村の結婚支援策、外国人定住政策のデータ把握につとめるとともに、結婚移住者への支援、若者定住支援に積極的に取り組む福島県飯舘村の取り組み、及び宮崎県西米良村の取り組み状況を把握し、若者・女性の自由な活動・交流を支援するハード・ソフトの行政支援の重要性を把握した。海外調査は韓国政府の移住女性定住政策を把握するため女性家族部へのインタビュー調査を行うとともに、早くから移住女性の人権問題に取り組んできた韓国移住女性人権センターの訪問調査、水原市移住女性支援センター(教会)訪問調査をとおして、移住女性のおかれている現状やその支援活動の概観を把握した。加えて、次年度調査に向けた韓国農村部の情報収集につとめた。以上の平成20年度の調査研究を踏まえて、平成21年度は国内外の本格的調査研究を行い、農村地域社会発展と結びつく若者支援、外国人定住政策の方向について分析・検討する。第一段階は平成20年度および平成21年度、日韓にフィールドを設けて取り組む。第二段階は、第一段階の成果を踏まえながら、最終年度に理論的・実証的検討とその総括を集中的に行う。第一段階初年度は日本国内の県および全国市町村の結婚支援、外国人定住策のデータ収集に努めるとともに、若者・女性定住支援策に積極的に取り組む飯舘村及び西米良村の現地調査を実施した。海外調査は次年度予定の地域調査のための質料収集、地域調査の絞り込みのために、韓国政府機関や民間サイドで移住女性支援を早くから手掛けている韓国移住女性人権センター等の訪問調査を実施した。第一段階二年度は、初年度のデータ収集、韓国現地調査に向けた予備調査を踏まえて、韓国農村部のフィールドワークに重点をおき、全羅北道長水郡および鎮安郡の多文化家族支援センター、自治体、セマウル支部、小学校等の関連機関のインタビュー調査ならびに移住女性に対するインタビュー調査を実施し、韓国農村の国際結婚の現状、農村コミュニティの実態、移住女性の定住政策の効果等の把握に努めた。国内調査としては、県段階では「婚活」支援策で「成果」をあげている茨城県および飯舘村の取り組みについての訪問調査を実施した。とくに韓国調査をとおして、家・血縁をより重視する韓国農村社会の特性が国際結婚を急増させるとともに、それに対応した社会的統合策が意識的に取り組まれていることを確認できた。この点で日本も韓国から学ぶべき点が多いが、その一方で農村労働市場が狭隘で、ムラの共同的な紐帯が弱く、それに加えて日本以上の学歴偏重社会であることから、将来を見据えると危うさも見てとれた。最終年度は現段階の諸政策が少子高齢化を乗り越えるものとなりうるのか、現地調査の分析と補足調査を踏まえて理論的総括を行う予定である。平成22年度は本研究の最終年度にあたり、これまでの調査研究の成果を中間的なものではあるが、学会発表や研究論文としてとりまとめるとともに、平成21年度に行った韓国全羅北道長水郡および鎮安郡の補足調査を実施し、本研究全体の理論的・実証的な検討とその総括を集中的に行うことに努めた。韓国の補足調査では近年急増しているベトナムからの移住女性のインタビュー調査、移住女性への起業支援の実態調査、農村コミュニティと移住女性の関係、それらを支援する関連機関の役割を明らかにするため、多文化家族支援センター、地方新聞社、自治体の訪問調査を重点的に行った。韓国調査をとおして、農山村の過疎化の深刻化、未婚後継者の急増が日本以上のスピードで進んでいること、一方、それらの対応策が日本では自治体や民間に委ねられているが、韓国では政府あげて社会的統合策が進められていることを再確認した。

中でも移住女性家族への経済的支援やハングル教育を、金銭的援助を伴う事業による、女性達自身の経済的自立に向けた支援をとおして行っていることが明らかとなった。しかも、多文化家族支援センターや民間企業が交流の場所を提供し、コミュニテイビジネスを起こすための支援へと新たな段階を迎えていることも注目された。しかし、同時に、こうした支援策がなされる背景に、農山村住民の貧困化があることも見逃してはならない。都市住民と農村住民の階層間格差は深刻で、社会的統合策を進めざるを得ない政府の危機感がみてとれた。日本の農山村の外国人移住女性家族の階層問題についての新たな検討課題も見えてきた。なお、日韓の地域づくりにも詳しいグジャイン氏(韓国鎮安郡政職員)を招聘し、本研究の成果をめぐって総括的な意見交換の場を計画していたが、東日本大震災のため中止せざるをえず、とくに今後の課題を確認する総括的な検討は年度をまたいで行ったことを付記しておきたい。
オーダーN法第一原理計算による水溶液中DNAの構造安定性に対する研究

我々が開発してきたオーダーN法第一原理計算手法を水溶液中のDNAの複雑系に適用する事に成功した。複雑な系においても、セルフコンシステントな電荷分布を安定に得ること、ある程度精度の高い基底関数を用いた計算が可能となったことから、系の全エネルギー、原子に働く力を信頼性の高い第一原理計算で計算することができた。この計算結果から、この系における古典力場の精度と問題点を明らかにし、古典力場の改善の可能性を示した。本研究では、我々が開発して来たオーダーN法第一原理計算手法を、水溶液中のDNA(数千から数万原子)の系に適用し、この系における水和構造、構造安定性などを明らかにすることを目標とする。研究の過程で、生体系に対する第一原理計算にもとづいた研究を行うために必要な理論手法を明らかにし、その手法開発も行う本年度は、X線結晶解析の実験結果によって得られたDNAに水分子を加えた構造に対して、セルフコンシステントな一電子密度、密度行列、全エネルギー、そして原子に働く力を求めた。計算の際には、擬原子軌道による基底関数としては十分な精度を持つDZP基底によって局所軌道を表し、その係数を部分系に対して最適化を行うことによって効率的な計算を実現している。この手法によって水溶液中のDNA分子約3400原子の系に対して、セルフコンシステント計算が安定に行える事が分かった。また、上記の方法によって計算される力の精度は十分であることを確認し、古典力場による結果と比較を行った。その結果、第一原理計算の計算値と古典力場の計算値がほとんど同じ部位と系統的に異なる部位があることが分かった。一方、今回の方法では全エネルギーの計算値に対しては数値誤差が大きい可能性があることも分かり、次年度に改善する必要があることが分かった。プログラム開発としては、DNAの構造安定性の議論のためには、局所軌道の重なりから生じる誤差を補正するプログラムを作成し、テスト計算を行った。また、密度行列最適化において計算をより安定に行う為の変更を行った。研究の過程で、生体系に対する第一原理計算にもとづいた研究を行うために必要な理論手法を明らかにし、その手法開発も行う平成21年度は昨年度に引き続き、古典分子動力学プログラムAMBERの分子動力学の軌跡から何点かのスナップショットの構造に対してオーダーN法第一原理計算を実現し、AMBERによる古典力場の結果と第一原理計算の結果の比較を行った。計算された力に対しては、古典力場と第一原理計算の違いが場所や環境によってどのように変化するのかを詳細に調べ、カウンターイオンとの位置関係による影響などを明らかにした。本研究から原子に働く力の計算がかなり精度良く行えることは示されたが、その一方で全エネルギーの計算は多原子系の計算を行っている事から生じる誤差が無視できないことが分かった。この問題を解決するために、密度行列を表す局在基底の最適化方法を改善するための手法開発を行った。さらに、従来の第一原理計算で問題となるファンデルワールス相互作用の効果を調べる研究を開始した。プログラム、手法開発に関しては、物質・材料研究機構の大型計算機が平成21年度に更新されたので、プログラムの高速化を行い、並列化効率の調査を行った。その結果、1000を越える並列度でも並列化効率が高いことが分かり、シリコン系に対して大規模計算が可能であることを示した。本研究では、我々が開発して来たオーダーN法第一原理計算手法を、水溶液中のDNA(数千から数万原子)の系に適用する。研究の過程で、生体系に対する第一原理計算にもとづいた研究を行うために必要な理論手法を明らかにし、その手法開発も行う。昨年度の研究で、複数のスナップショット構造間のエネルギー差に対して計算精度を得ることが困難であることが分かったため、平成22年度は局在軌道を設定する方法の変更を行った。同時に、局在軌道の最適化に対する効率的な手法開発も試みた。全エネルギーに関しては、部分系において最適化局在軌道を求めて、それを用いるという方法で誤差の相殺が期待できることが分かった。この手法の範囲内において、オーダーN法第一原理計算によりDNA系に対する全エネルギー、原子に働く力を十分な精度で計算することが可能になった。本研究での大規模第一原理計算によって得られた結果を古典力場の計算と比較することにより、水溶液中のDNA系に対する古典力場の精度と問題点を明らかにすることができた。一方、生体系に対する第一原理計算ではファンデルワールス相互作用(vdW相互作用)が問題となることが指摘されているが、vdW相互作用を取り入れた交換相関エネルギーの汎関数が最近提案されている。この新しい交換相関エネルギーによるエネルギー補正を計算するプログラムが大阪大学のグループによって作成されている。このプログラムを我々のオーダーN法第一原理計算プログラムと一緒に用いる事によって、スナップショット間のエネルギー差が通常のGGAの計算に比べてどのように変化するかを明らかにした。
日本語の複文・重文の表現パターン記述方式とその計算機用意味辞書の構成法に関する研究

日本語の意味解析に必要な3種類の意味辞書のうち、第2の「複文・複文表現意味辞書」の開発を目指す研究である。本年度は,日本語の複文・重文の意味的構造を英語の表現構造に対応させ、その抽象化と計算機処理可能な表現の方法を明らかにするため,日本語と英語の比較表現を採り上げ,その構造上の意味を英語表現と対応させて定義するとともに、第1の辞書開発で得られた日本語単語の単語意味属性体系を使用して、機械処理に適用できるような意味的制約条件が記述できるかどうかを検討した。その結果によれば,日英機械翻訳の場合,日本語表現に対応する英語表現は比較的決定しやすいのに対して,英日翻訳での日本語表現の決定はより困難が予想される。しかし,平均的に見ればいずれの場合もパターンの平均多義は,3程度であるから,これを意味類型によるパターン選択の曖昧性と考えると,翻訳パターンを決定するには,数件のキーワードなど,意味的識別を可能とする指標を導入すれば良さそうである。ここで,意味的に類型化されたパターングループの中から,最適な翻訳パターンを選択するためのパラメータとして何を導入すればよいかが問題となるが,まず,考えられるのは,意味の強さのパラメータである。これらの検討結果を「日本語意味類型に着目した日英意味辞書の研究企画」としてまとめ,2年前に私的な研究会として発足させた「辞書プロジェクト委員会」(15名)に提案し,次年度以降の共同研究の方法について議論をした。今年度は、まず、重文・複文の構成要素となるキー表現を調べるため、外国人用の日本語教科書から、約500種類の連語表現を収集し、その意味的用法を分類すると共に、表現の意味的類型化をする際のキーワードとなる意味記述用語を抽出した。また、N-gram統計プログラムを応用し、大規模な日本語コーパスから、重文・複文の文型パターンを効率よく収集するための方法として、目標毎に、縮退させる単語の種類を適切に選択する方法を考えた。しかし、縮対させすぎると文構造そのものが見えなくなってしまうおそれがある。そこで、重文・複文の文型の抽出に適した要素置き換え方法を探るため、連鎖型共起表現抽出の場合、離散共起表現抽出の場合それぞれについて、4種類、2種類の要素置き換え方法を考え、毎日新聞95年度の第1面の1万文をを対象に、抽出実験を行った。その結果、ごみの抽出を抑制する観点と重文・複文の文型を判断する観点から見ると、連鎖型共起表現抽出法では、動詞、助動詞、接続助詞、形式名詞、副詞、句読点など以外を記号に置き換える方法、離散型共起表現抽出法でも、ほぼ同種の置き換えが、適切だと判断された。そこで、同新聞の1年分160万文を対象に、上記2種類の方法を適用し、文型抽出を行った。これにより、多くの文型表現が抽出できる見込みとなったが、その後の人手による文型選択を効率化するには、今一歩、工夫が必要と見られる。今後は、実際に重文複文の文型を収集しながら、より細かな、置き換え制御法を検討していくことが期待される。
たこつぼ心筋障害の成因と病態に関する実験モデル動物を用いた包括的検討

たこつぼ心筋障害のメカニズムと病態を、ストレス負荷誘発モデル動物を用いて検討した。遺伝子群を網羅的に解析し、血管ではα刺激、心臓ではβ刺激による遺伝子レベルでの適応を明らかにした。扁桃体中心核と外側核は他の亜核や下位の視床や脳幹の脚傍核からの入力が集まること、内側核は視床下部の各亜核へ遠心性の出力を行っていることを明らかにした。ストレス→辺縁系→扁桃体→特に内側核→視床下部→自律神経系→心血管系→遺伝子応答という流れを示した。ストレス→中枢神経→交感神経系の過剰興奮により、たこつぼ心筋障害を起こすメカニズムと病態を明らかにするため、中枢神経系および心臓の両面から、ストレス負荷誘発モデル動物を用いて、本年度は以下の項目を検討した。ストレス負荷後のラットの心臓および大動脈のサンプルで、Microarray法で発現が変化する遺伝子群を網羅的に解析し、擬陽性を除くためRT-PCR法で選別し、さらにα受容体遮断薬あるいはβ受容体遮断薬前投与のサンプルでも解析した。心臓では主にβ刺激により37種類の遺伝子が、血管では主にα刺激により48種類の遺伝子発現が変化することが判明した。これらは転写因子、シグナル伝達関連因子、代謝、血管新生、ストレス応答に関するものであり、これらのほとんどはストレスに対してその影響を減ずるように作用していることが報告されており、これらの遺伝子応答はストレスに対する適応応答と考えられる(投稿中)。しかし、個々の因子に関する具体的な役割は必ずしも明らかではなく、機能解析を始めている。また扁桃体や視床下部を中心としたストレス応答の神経回路の検討を続けていて、扁桃体の亜核の相互連絡や求心路に関して、追加の実験を行っており、早急に投稿する予定である。またストレス負荷後の血液サンプルを用いて、酸化的ストレスの指標である4-hydroxynonenal(HNE)の測定中である。これらは転写因子、シグナル伝達関連因子、代謝、血管新生、ストレス応答に関するものであり、これらのほとんどはストレスに対してその影響を減ずるように作用していることが報告されており、これらの遺伝子応答はストレスに対する適応応答と考えられる(Heart and Vesselsに掲載)。また扁桃体や視床下部を中心としたストレス応答の神経回路の検討を続けていて、扁桃体の亜核の相互連絡や求心路、扁桃体から視床下部の諸核への投射を検討した。扁桃体の各亜核には、より上位の辺縁系、および視床、視床下部、脳幹からの入力があるが、亜核間で相違があること、扁桃体内での相互連絡にも特徴があることを明らかにした。特に中心核は、他の亜核や下位の視床や脳幹の脚傍核からの入力が集まること、一方、内側核は、視床下部の各亜核へ遠心性の出力を行っていることを明らかにした(投稿準備中)。すなわち、ストレス→辺縁系→扁桃体→特に内側核→視床下部→自律神経系、神経内分泌系→心血管系という流れを示すことができた。ストレス→中枢神経→交感神経系の過剰興奮により、たこつぼ心筋障害を起こすメカニズムと病態を明らかにするため、中枢神経系および心臓の両面から、ストレス負荷誘発モデル動物を用いて、以下の項目を検討した。これらは転写因子、シグナル伝達関連因子、代謝、血管新生、ストレス応答に関するものであり、これらのほとんどはストレスに対してその影響を減ずるように作用していることが報告されており、これらの遺伝子応答はストレスに対する適応応答と考えられる(Heart and Vessels)。扁桃体の各亜核には、より上位の辺縁系、および視床、視床下部、脳幹からの入力があるが、亜核間で相違があること、扁桃体内での相互連絡にも特徴があることを明らかにした(分子精神医学)。

特に中心核と外側核は、他の亜核や下位の視床や脳幹の脚傍核からの入力が集まること、一方、内側核は、視床下部の各亜核へ遠心性の出力を行っていることを明らかにした(分子精神医学)。すなわち、ストレス→辺縁系→扁桃体→特に内側核→視床下部→自律神経系、神経内分泌系→心血管系という流れを示すことができた。
高度好塩菌リボソ-ム蛋白質の構造と進化に関する研究

遺伝子構造解析技術の進歩により,蛋白質の一次構造の決定において蛋白質化学的手法,及び遺伝子の塩基配列決定法を,同時に用いることが,最も迅速に多数の蛋白質の一次構造を決定することが可能になっている。従って,計画書に記したように,高度好塩菌リボゾ-ム蛋白質の一次構造解析にこの手法を用いた。即ち,蛋白質L23のアミノ酸配列に基ずいて26残基からなるオリゴヌクレオチドを合成し,好塩菌ゲノムライブラリ-のスクリ-ニングを試みた結果,大腸菌リボゾ-ム蛋白質S10オペロンに相当する8個の好塩菌蛋白質(L3,L6,L23,L2,S3S19,L22,L29)の遺伝子群をクロ-ニングすることができ,それらの塩基配列からアミノ酸配列を推定することができた。このようにして得られた一次構造を,既知の大腸菌及び真核生物のリボゾ-ム蛋白質と比較した結果,4個の蛋白質(S3,S19,L22,L29)は,大腸菌だけに類似し,3個の蛋白質(L3,L2,L23)は,大腸菌と真核生物の両方の蛋白質に類似し,1個の蛋白質(L6)は,真核生物の蛋白質にのみ類似していることが明らかになった。また,これらの好塩菌蛋白質の遺伝子編成を,大腸菌S10オペロンのそれと比較した結果,大腸菌蛋白質L16に相当する好塩菌蛋白質が存在しないこと以外は,それらの配列は高く保存されていることが明かとなった。さらに,5'及び3'末端領域の塩基配列の解析より,3個のリボゾ-ム蛋白質以外の蛋白質遺伝子が存在することも明らかとなった。
有限要素解析及び拍動循環試験に基づく二尖弁形成術の医工学的評価法確立に関する研究

本研究では,現在明らかになっていない二尖弁疾患における交連調整角度を明らかにするために,二尖弁形成術式評価法構築及び,二尖弁形成術の術式最適化に取り組む挑戦的研究である.交連調整角度が術後大動脈弁性能に及ぼす影響を明らかにするため,任意の交連角度を有する二尖弁疾患モデルを作製し,有限要素解析を用いた弁尖に生じる応力分布の算出と,拍動循環シミュレータを用いた弁拍動性能の計測を行うことにより,二尖形成術評価法の構築と二尖弁形成術式の最適化に取り組む.本研究では,現在明らかになっていない二尖弁疾患における交連調整角度を明らかにするために,二尖弁形成術式評価法構築及び,二尖弁形成術の術式最適化に取り組む挑戦的研究である.交連調整角度が術後大動脈弁性能に及ぼす影響を明らかにするため,任意の交連角度を有する二尖弁疾患モデルを作製し,有限要素解析を用いた弁尖に生じる応力分布の算出と,拍動循環シミュレータを用いた弁拍動性能の計測を行うことにより,二尖形成術評価法の構築と二尖弁形成術式の最適化に取り組む.
北朝隋唐碑における鐫刻実態に関する基礎的研究

本研究は、墓誌(墓中に置く石刻)の刻法研究で長く培った方法を碑に代表される地上の石刻に応用し、碑の鐫刻も墓誌同然に復数の刻者が分担して行っていたことを実証することにより、碑における刻工間の関係、筆写法と鐫刻法の関係、刻派の形成、碑の鐫刻の実態解明に資することを目的とする。2018年度は、淑徳大学書学文化センター及び大東文化大学書道研究所の所蔵拓本の調査、拓本の入手、影印本の入手を通じて、研究に値する碑版の抽出を行い、その字跡の第一次整理を学生を雇用して行った。次いでその中から本研究の目的に照らしてより意義深いと考えた碑版数種についてその刻法の分析考察を進めた。その数種中、前年度に研究成果を公刊した柳公権「廻元観鐘楼銘」の刻者「邵建和」が、刻工「強演」とともに刻者として名を連ねる「金剛般若羅蜜経」(824)が、刻法を分析する上で最も条件が整っているうえ本研究の目的にもっとも適うと判断し、その研究を進めて論文を公刊した。「金剛般若羅蜜経」は柳公権47歳の揮毫に係る石刻で、明初にすでにその半ばを欠き、その後原石は亡逸し、現在は孤本の唐拓が伝わるだけである。唐拓本によれば、12個の横石全468行5106字からなり、末尾に刻者を「強演・邵建和刻」と明記する。しかし、当該石刻の字跡を分析した結果、相容れない7種(あるいはそれ以上)の刻法が混在することが明らかになった。このことは強・邵2名だけが当該石刻の刻者であったわけではなく、7名あるいはそれ以上の刻者が鐫刻を分担していたことを明示し、強・邵2名は当該石刻の鐫刻に関わった刻者たちを代表する立場にあると考えるのが自然である。鐫刻におけるこの実態は、前年度の研究成果と同様に、石刻中に明記する刻者及び刻者数が当該石刻の実際の刻者及び刻者数と一致する保証がない実態を伝えており、石刻における鐫刻実態を解明する重要な事例の一つとみなしうる。拓本所蔵機関における調査撮影については、淑徳大学書学文化センター及び大東文化大学書道研究所の両機関で実施した。前者機関の所蔵拓本は整本(全搨本。石刻全体の姿が見られる状態の拓本)が多くを占めるため、計画のとおり広角ズームレンズを購入し撮影に活用した。計画に入れていた大阪市立美術館所蔵拓の調査は、研究の主対象とした唐代碑版が大東文化大学書道研究所・淑徳大学書学文化センター・成田山書道美術館所蔵品と全て重複することが判明しため、実施しなかった。研究成果の公刊も計画とおりで、唐の名工「邵建和」が関わった「金剛般若波羅蜜経」(824)の鐫刻の実態について論文を公刊し、当該石刻の鐫刻についてこれまでまったく知られていなかった知見を提示した。そのほか、「邵建和」やその弟「邵建初」の所刻を中心に、字跡の初期整理を終えて、各鐫刻実態について研究を行っている。また、調査対象碑版を効率的に検出するために整理している「北朝隋唐碑拓本所在目録稿」については、対象範囲を「碑」に限定せず、墓誌・造像記・その他を含む内容に拡大することにした一方、主たる研究対象を隋唐としたことから、「北朝」を省いて「隋唐」に絞って行っており、計画とおり次年度に公刊する準備を進めている。大東文化大学書道研究所、淑徳大学書学文化センターにおける拓本調査と撮影による資料収集を継続して行う。また成田山書道美術館については、今年度は整本を中心に調査を実施する計画である。なお、これら機関未所蔵の石刻については必要に応じて東洋文庫所蔵拓本について閲覧をしたうえで、撮影と紙焼きを依頼することも考えている。また影印本、拓本についても常時点検し、予算の範囲で補足的に購入し研究に供する。現時点で分析対象の候補としている石刻に8種あり、うち「邵建和」の所刻2種、その弟「邵建初」の所刻1種については、優先的に分析を進めている。今年度の調査結果や購入した影印本・拓本により、研究意義が高い対象も加わるものと思われ、それらの内から、本研究の目的に照らしてより意義深い石刻について、研究を進めて論文を公刊する。本研究は、墓誌(墓中に置く石刻)の刻法の研究で長く培った方法を碑(に代表される地上の石刻)に応用し、碑の鐫刻も墓誌同然に複数の刻者が分担して行っていたことを実証することで、碑における刻工間の関係、筆法と鐫法の関係、刻派の形成等、碑の鐫刻の実態解明に資することを目的とする。初年度は、成田山書道美術館、大東文化大学書道研究所の所蔵拓本の調査と、拓本の入手、また各種影印本の入手を通じて、研究に値する拓本の抽出を行い、その字跡の整理を学生を雇用して行った。