hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
知能化構造物の動的最適設計法に関する総合的研究

構造物の知能化とセンサ,アクチュエータの開発,有効利用の方法を探ることは深い関わりを持つ。この分野でも収穫があった。μ設計法やH∞制御,適応制御,スライディングモード制御などのロボット,磁気軸受け,振動制御などへの応用によって,構造設計に関する新しい方法論が示されたのも収穫であった。構造物に制御装置が一体化され目的に応じて動特性が自在に変更できると定義した,知能化構造物の動的最適設計法は次世代の重要な研究課題であるとの認識の元に,構造系と制御系の研究者が結集して3年間に渡る総合的研究を行い,最終年度に多くの研究成果を得た.その要点を纏めると,(1)動解析から構造最適化を図る方法が開発された.(2)構造系と制御系を結合するモデリング手法が開発された.(3)振動モード情報に基づく制御性を高めるセンサとアクチュエータの最適配置を得た.(4)不確かさを許容した構造物設計のためのロバスト制御理論が新しく展開された.(5)ニューラルネットワークを立体的に重ねた知的制御手法が開発された.(6)構造の簡単な単純適応制御手法が開発された.(7)構造系と制御系の統合最適設計法が開発された.(8)本研究の成果が機械構造物,建築構造物,土木構造物,車輌構造物,宇宙構造物,超高速回転磁気軸受,騒音制御など各分野で応用され,動的最適設計法の発展を見た.以上のように,本研究の目的はほぼ達成されたと考える.今後の課題は,ここで得た知見を大規模宇宙構造物や超々高層ビルなどに応用して,その成果を検証することである.
栄養代謝調節因子FACsの節足動物における網羅的解析

鱗翅目幼虫の唾液に含まれるFACsは植物の揮発成分放出を誘導するエリシターであり、この揮発成分が幼虫の天敵である寄生蜂を誘引することから、一連の反応は植物の関節防御応答と考えられる。研究代表者は、FACsが幼虫の窒素代謝の効率化に関わることを突き止め、鱗翅目幼虫以外にもFACs持つ昆虫を発見したことから、生合成酵素遺伝子を同定することを本研究の第一目標とした。また、FACsは幼虫体内で生理学的な機能を果たすと同時に、生物間相互作用のキー化合物として生態学的にも機能する。単純な低分子であるFACsがどのようにして生物間相互作用の重要な鍵となりえたのか、生態学的な背景を明らかにした。鱗翅目幼虫の中腸で生合成されるFACsは、幼虫の唾液を介して植物の傷口に付着すると、植物体全身でテルペン等の揮発成分の生合成・放出を誘導する。この揮発成分が幼虫の天敵である寄生蜂を誘引することから、FACsは間接防御応答の誘導エリシターであると考えられてきた。その一方で、幼虫体内ではFACsは窒素代謝の効率化に寄与している可能性が示唆されている。そこで、FACs縮合酵素を同定することを目的として、カイコ蛹での候補タンパク質の大量発現を行った。目的とする分子量のタンパク質が得られたことはSDS-PAGE及びウェスタンブロットで確認できたが、精製した酵素の失活が極めて早く、FACs生合成活性は確認されなかった。そこで、カイコでの有効性が実証されているゲノム編集技術TALENを用いて、目的タンパク質をコードする遺伝子のノックアウトを行った。候補タンパク質はアミノペプチダーゼNのファミリーに属する2種の酵素APN1とAPN4であり、両遺伝子は近傍に存在していたことから、それぞれのシングルノックアウト系統とダブルノックアウト系統、両遺伝子の切断部位間がごっそり欠落したLarge deletion系統の作出を試みた。それぞれ欠失数の異なる複数のミュータントの作出には成功したが、目的のアミノペプチダーゼのノックアウト個体が致死性を示したことから、ホモ系統の作出に予定より2世代多い6世代を要した。また、ホモ系統が病弱であったため、APN4は固定に失敗した。無事にホモ化に成功したAPN1ノックアウト系統の終齢幼虫において、現在、FACs生合成酵素の活性有無を調べている。鱗翅目幼虫の唾液に含まれるFACsは植物の揮発成分放出を誘導するエリシターであり、この揮発成分が幼虫の天敵である寄生蜂を誘引することから、一連の反応は植物の間接防御応答と考えられる。研究代表者は、FACsが幼虫の窒素代謝の効率化に関わることを突き止め、鱗翅目幼虫以外にもFACsを持つ昆虫を発見したことから、生合成酵素遺伝子を同定することを本研究の第一目標とした。カイコ幼虫を大量に用いて腸管細胞から目的の酵素を精製し、MS/MSのデータベースと照合したところ、aminopeptidase Nの一種と相同性が高いことが示唆された。カイコ蛹での大量発現を試みたが、FACs生合成活性は確認できなかった。そこで、ゲノム編集技術TALENを用いて、目的タンパク質をコードする遺伝子のホモ化したノックダウン系統を複数作出したが、いずれもFACs生合成酵素の活性失活は認められなかった。FACs生合成能が弱いカイコ幼虫を材料にしたことが主な敗因であると考え、現在はハスモンヨトウ幼虫で酵素遺伝子の同定を試みている。一方、FACsの起源について別の角度から研究を進めた結果、新しい知見がいくつか得られた。まず、FACsで誘導される植物のストレス応答遺伝子の多くが病害応答に関わる遺伝子と類似していることが明らかになってきた。昆虫が地上に出現した時点で、植物ー微生物間相互作用は既出であり、そこから派生する形でFACs応答性の間接防御メカニズムができたと考えられる。鱗翅目ではFACsの組成が種レベルで異なり、寄主植物との相互作用が影響してきたと考えられる。これに対し、コオロギは独自の生合成ルートを確立していたことから、昆虫の祖先種で分岐した後に、それぞれの昆虫において生理学的・生態学的戦略に基づいてFACsが取捨選択・改変されてきたことが示唆された。この研究により、農芸化学会の若手奨励賞を受賞した。目的酵素遺伝子のノックアウト・ホモ系統が致死性を示したのは予想外だった。このため、ホモ系統の作出に4ヶ月余計に要することとなった。化学生態学ホモ化に成功したAPN1ノックアウト系統でのFACs生合成活性の確認を行う。万一、APN1が候補遺伝子ではないことが明らかになった場合には、再度、候補遺伝子の絞込みを行う。

また、カイコを用いたTALENは確実である一方で、結果が出るまでに一年近くかかることから、ショウジョウバエを用いたCRISPR/Cas9技術の利用も考慮する。前述の理由により研究に遅れが生じたことに加え、TALENによるゲノム編集実験での試薬・酵素その他多くの支出を共同研究者に負担して頂いたため。前年度の成果を踏まえて、今年度はショウジョウバエでのゲノム編集など新しい研究に着手することを想定しており、当初の予算計画より支出が多くなる可能性がある。
両側体肢同時動作時に見られる機能低下現象に及ぼすトレーニング効果の生理学的機構

スポーツの動作には、水泳の背泳のように四肢を左右交互に動かすものと、平泳ぎのように両側同時に動かすものがある。また、スポーツにおいては、すばやい筋力発揮を要求される場面が多く見られる。そこで、両側同時または一側単独のすばやい筋力発揮トレーニングを行なわせ、脳波と筋電図を用いてトレーニングによる変化のメカニズムを検討した。行なったトレーニングが両側性か一側性かによって反応動作時の筋力発揮レベルに違いが生じる可能性が示唆された。筋力発揮時にみられる両側性機能低下と反応時間に見られるそれとは異なるメカニズムによって制御されている可能性が示唆されているが、それぞれのメカニズムはこれまで個別に検討されてきており、同一の動作様式を用いて両者を調べた研究は見当たらない。そこで、同一動作を用いて筋力発揮時および反応時間課題遂行時の脳波を解析し、それぞれの両側性機能低下のメカニズムを比較検討し、「トレーニングによるbilateral deficitの特異的修飾」に大脳皮質レベルのメカニズムがどのように関与しているかを検討する。2008年度は、CNVを用いて、反応時間に見られる両側性機能低下のトレーニングによる変化のメカニズムを検討した。体育大学学生14名を両側トレーニング群6名、一側トレーニング群4名、対照群4名に分け、視覚刺激に対して、できるだけすばやく等尺性示指外転筋力を発揮する単純反応時間を、両側同時、一側左、一側右の3条件で計測した。反応課題遂行中の脳波と左右の手の第一背側骨間筋から筋電図を記録した。測定はトレーニング開始前、3週後、6週後に行った。トレーニングは、測定と同じ装置を用いて、単純反応時間課題を10回×2セット、週3日、3週間、両側トレーニング群は両手同時に、一側トレーニング群は片手ずつ行った。対照群はトレーニングを行わなかった。トレーニングによって、一側群では一側・両側条件に関わらず、全ての反応時間の項目に短縮方向への変化がみられ、CNVの振幅は一側C3以外が増加した。両側群では両側条件のEMG-RTが短縮方向に変化し、CNVの増加傾向がみられ、一側条件のMovement Timeの延長傾向がみられた。両側性反応動作特有のメカニズムや反応時間におけるトレーニング効果の特異性がある可能性が示唆され、本研究に用いた反応動作が筋力発揮を要する課題であったことから、大脳半球間抑制の脱抑制が起こったのではないかと推察した。2009年度も、2008年度に引き続き、CNVを用いて、反応時間に見られる両側性機能低下のトレーニングによる変化のメカニズムを検討した。両側トレーニング群、一側トレーニング群、対照群について、視覚刺激に対してできるだけすばやく等尺性示指外転筋力を発揮する単純反応時間を、両側同時、一側左、一側右の3条件で計測した。測定はトレーニング開始前、3週後に行った。トレーニングによって、一側群では全ての反応時間の項目に短縮方向への変化がみられ、CNVの振幅は一側C3以外が増加した。両側群では両側条件のEMG-RTが短縮、CNVの増加傾向がみられ、一側条件のMovement Timeの延長傾向がみられた。今後も、十分な被験者数に達するまで、測定を継続する予定である。今年度も引き続き、CNVを用いて、反応時間に見られる両側性機能低下のトレーニングによる変化のメカニズムを検討した。

両側トレーニング群、一側トレーニング群、対照群について、視覚刺激に対してできるだけすばやく等尺性示指外転筋力を発揮する単純反応時間を、両側同時、一側左、一側右の3条件で計測した。反応課題遂行中の脳波と左右の手の第一背側骨間筋から筋電図を記録した。測定はトレーニング開始前、3週後に行った。トレーニングは、測定と同じ装置を用いて、単純反応時間課題を10回×2セット、週3日、3週間、両側トレーニング群は両手同時に、一側トレーニング群は片手ずつ行った。対照群はトレーニングを行わなかった。トレーニングによるMotor Timeの変化と筋力の変化の間には両側・一側条件ともに相関が認められた。発揮筋力の大小でMotorunitの動員数や発火頻度が異なり、筋力の立ち上がりに影響し、Motor Timeを変化させたと推察した。側トレーニング群はトレーニング後に筋力が増加方向へ変化し、両側トレーニング群は減少方向への変化がみられた。このことから、反応時間におけるトレーニングが一側性か両側性かによって反応動作時の筋力発揮レベルの変化に違いが生じる可能性が示唆された。
ストローマ細胞に発現する造血関連遺伝子の同定と応用

近年造血幹細胞を含む成体幹細胞を再生医学に応用する研究が注目されているが、その臨床応用を視野に、in vitroにおけるその増幅および分化制御法の確立が重要な課題となっている。こうした目的において、成体幹細胞の生体内における制御機構、とりわけ幹細胞の存在する微小環境との相互作用について充分に理解する必要がある。私達は造血幹細胞の生存・増殖に骨髄内造血支持細胞であるストローマ細胞が必要である点に着目、造血支持活性を有するストローマ細胞株OP9細胞からシグナル配列単離法を用いて膜・分泌蛋白質をコードする遺伝子を単離し、その機能を解析した。昨年度までの本研究においてマイクロアレイ法、RT-PCR法、ノーザン解析法にて、ストローマ細胞の造血支持活性を増強すると報告されている増殖因子leukemia inhibitoryfactor(LIF)の刺激によるRNAレベルの発現量の変化および、組織発現部位の解析結果より未知遺伝子7個にしぼりその機能を解析した。Long-term cultureinitiatingcell assay(LTC-IC法)にて、そのうちの一つ、SST-4を高発現させたストローマ細胞の造血支持能が増加することがわかり、その機序につき検討した。SST-4はI型膜蛋白質で、脳と骨髄ストローマ細胞に限局した発現を示している。またSST-4はマトリックスメタロプロテネース(MMP)によって細胞外領域が切断されて細胞外に分泌されることがわかった。siRNAによりストローマ細胞のSST-4の発現を抑制すると、ストローマ細胞の造血支持能が有意に低下することが判明した。以上の結果より、SST-4は骨髄内ストローマ細胞に発現し、その造血支持能に関与していることがわかった。造血幹細胞は最も古くから解析されている成体組織特異的幹細胞であり、現在遺伝子治療、再生医療への応用を含め、改めてその重要性が着目されている。しかしその生体外長期培養及び分化誘導法などは臨床レベルでは実用化しておらず、その原因として造血幹細胞の造血微小環境における制御機構が詳細にわかっていないことがあげられる。私達は浩血幹細胞の生存・増殖・分化に骨髄内造血支持細胞(ストローマ細胞)が必要である点に着目、造血支持活性を有するマウス骨髄ストローマ細胞株OP9細胞からcDNAライブラリーを作製し、レトロウィルスベクター(pMX-SST)によるシグナル配列単離法を用いて膜・分泌蛋白質をコードする遺伝子を単離した。合計234クローンの遺伝子を同定し、構造的に全て膜・分泌蛋白質と考えられた。内訳は既知遺伝子181未知遺伝子42であり、既知遺伝子は増殖因子49受容体23接着因子71その他38であった。未知遺伝子については、42クローンの内、重複して単離されたクローンが3種類あり、これらを含め得られた部分配列より構造を予測、その部分アミノ酸配列より高次構造を予測した。また、得られた全クローンにてマイクロアレイを作製、マウス・ストローマ細胞の造血支持活性を増強すると報告されている増殖因子LIFの刺激によるRNAレベルの発現量の変化を検定しRT-PCR法、ノーザン解析法にて、確認した。その結果、未知遺伝子の内3クローン(SST-1,SST-2,SST-5)においてLIFによる発現の増強を認めた。これらの方法によって同定できた新規遺伝子の内、7クローンの全長cDNAを単離し、遺伝子産物の構造を予測、造血支持活性を検定している。
3次元MR画像による生体内軟部組織の挙動解析

本研究は自家開発のFuzzy推論による抽出法を用いた三次元再構成MR画像を用いて、前腕骨間膜および膝関節前および後十字靱帯、半月板などを例に、身体運動中の軟部組織挙動を明らかにするものである。助成期間内に正常ボランティアの前腕20肢、膝関節5肢の撮像を行い、三次元MR画像の再構成を行い、関節運動中の生体内軟部組織挙動の把握、位置情報による前腕回内外運動の三次元運動解析した。前腕骨間膜では回内外運動を中に著明な形状変化が生じること、膜内の形状変化が正常の回内外運同軸に一致した部分では少なく、回旋軸から離れた部分では大きいことが明らかになった。骨間膜の形状変化が生じる部分の膜の厚さが薄く、形状変化の少ない部分の膜の厚さが厚いことから、回旋軸周囲が前腕の支持性に大きく関与することがわかった。さらに薄い膜様部の形状変化が大きいことは回内外運動に合目的で、逆に膜様部の拘縮で回旋障害が生じることが示唆された。画像を用いた三次元運動解析から前腕骨間膜の形状変化の原因は橈尺骨間の距離変化と最大回内位での橈骨の挙側変位と尺側変位にあることが明らかになった。膝関節では三次元MR画像の合成に成功したが、画質は不良であった。この原因は使用したMR機種が膝関節運動の可能なopen型常伝導0.2T機種であったことが考えられた。矢状断像と冠状断像から半月板の膝関節屈曲時の後方移動と十字靱帯の緊張が示唆されたが、三次元MR画像ではあきらかな軟部組織挙動は判らなかった。本研究は関節運動への関与の大きい軟部組織の生体内での挙動を自家開発の3次元MRI(3D-MRI)で解明するものである。これまでの研究は主に屍体モデルか体表面の標点解析、X線、CT等を用いた骨の運動解析にとどまり、半月板や靭帯などの軟部組織の生体内での挙動を解明したものはない。本研究では特に下肢の膝関節半月板と前十字靭帯、後十字靭帯、上肢の前腕骨間膜と三角線維軟骨複合体の正常関節運動への関与を解明することを目的とする。本年度は健康成人ボランティアの上肢(手関節、前腕)のMRI撮影を最大回内位、回内45°位、中間位、回外45°位、最大回外位で行い、解析をした。撮像法はspin echo法T1およびT2強調像、gradient echo法T2_*強調像および脂肪抑制法T1強調像とし、撮像方向は横断像とした。1.5mm間隔での連続撮像を行い、撮像時間は各撮像法ともに約3分であった。得られたそれぞれの画像から自家開発のfuzzy推論による抽出法で骨および対象軟部組織(骨間膜および三角線維軟骨複合体)を抽出した。このfuzzy推論のよる抽出は解剖学的情報である形状、edgeの滑らかさ、連続性、と画像情報である輝度、面積を特定のfuzzy membership関数をかけ、重比例配分し、最も確からしい領域を決定するものである。これらのそれぞれの抽出像を重ね合わせ、表面renderingし、3次元再構成することで、3D-MRIを作成することができた。得られた3D-MRIの形状は実際の橈骨、尺骨、骨幹膜、三角線維軟骨複合体の形状とほぼ一致した。次年度は膝関節半月板と靭帯の抽出、三次元再構成を行う予定である。本研究は自家開発のFuzzy推論による描出法を用いた3次元再構成MRIを用いて、前腕骨間膜および膝関節前および後十字靭帯、半月板などを例に、身体運動中の軟部組織挙動を明らかにするものである。

本年度は健康ボランティア10名の回内外5肢位での前腕MRI横断像より、前腕骨間膜を抽出し、3次元再構成画像を作製した。各肢位の画像から骨間膜の回内外運動中の挙動が回内位の波状変形と最大回外位の最遠位部の背屈変形であることを明らかにし、そのtechnical note部をMagnetic Resonance Imaging誌に投稿、すでにacceptされ(1999年3月号に掲載予定)、また、解析結果をClinical Biomechanics誌に投稿中である。今年度申請の多数枚の画像を保存可能なZip drive deviceにより一度に多肢位の画像解析が可能になり、さらにビデオシステムにより動画での解析が可能になった。また、下肢のMRI横断像の連続撮像から前および後十字靭帯、半月板の描出、3次元再構成に成功した。現在、健康ボランティア10名の膝関節MRI画像を用いて、膝関節屈伸運動中のこれらの軟部組織挙動を検討中である。次年度は健康ボランティアを用いた正常時の軟部組織挙動に加え、ストレス負荷下での軟部組織挙動を半月板、前および後十字靭帯、前腕骨間膜に例をとって明らかにしていく予定である。また、抽出組織に手関節三角線維軟骨、膝内側および外側側副靭帯を加え、荷重関節である膝関節と非荷重関節である前腕および手関節の軟部組織挙動に関し、総合的な検討を加えていく。本研究は自家開発のFuzzy推論による描出法を用いた3次元再構成MRIを用いて、前腕骨間膜および膝関節前および後十字靱帯、半月板などを例に、身体運動中の軟部組織挙動を明らかにするものである。本年度は健康ボランティア5名の膝関節MRI横断、冠状断、矢状断像よリ、半月板、前および後十字靭帯、脛骨、大腿骨を抽出し、3次元再構成画像を作製した。MRI装置をopenに変更し、膝関節屈伸運動中の画像を撮影し、3次元再構成を行った。前十字靱帯の屈曲位での狭化と半月板の前側方移動、および圧縮変形を認めた。つまり、膝関節屈曲位は膝関節軟部組織に緊張性変化をきたすことが判明した。結果は本年度国際MR学会で発表予定である。また、上肢MRI横断像の連続撮像から前腕骨間膜を抽出、運動解析し、結果をHand Surgery誌に投稿、受理されている。今後は、抽出組織に手関節三角線維軟骨、膝内側および外側側副靱帯を加え、荷重関節である膝関節と非荷重関節である前腕および手関節の軟部組織挙動に関し、総合的な検討を加えていく。また、ストレス負荷時の軟部組織挙動についても検討する。
コンタクトレンズの装用はミリ波ばく露誘発眼障害を増悪させるか

感温液晶カプセル(熱により色調を変化させる微粒子)を眼内に注入することにより、眼内での熱輸送を可視化し、コンタクトレンズ(CL)装用の効果を検討した結果、若干の熱輸送抑制効果を見た。金属塗料を使用したカラーCLミリ波帯の吸収をTerahertz time-domain transmission spectrometerで電波の吸収特性を検討したが、カラーCLによる有意な電波吸収は認めなかった。家兎外眼部にフィットするチャンバーを作成し、電波曝露中の熱の外眼部への蒸散状態を可視化した結果、種々のCL(通常及び着色CL)の装用の有無による眼障害発生または眼障害を抑制する程の効果は認めなかった。1.正常有色家兎水晶体上皮細胞の分裂期細胞の出現状態ミリ波曝露による眼部障害は電波吸収による角膜の直接的な熱障害と角膜で吸収された熱が、房水を介して水晶体に輸送され、水晶体上皮細胞の障害を誘発することが考えられる。本研究は、細胞レベルの詳細な実験となるため、予備実験で正常家兎水晶体上皮細胞の分裂期細胞有無を観察したところ、瞳孔領周辺に多数の分裂期細胞を認めた。文献的には、水晶体周辺部には分裂期細胞は確認されるが、正常な水晶体では瞳孔領周辺には、分裂期細胞は出現しないことが通説である。この結果を実験動物納入会社を介して、ブリーダーに問い合わせたところ、有色家兎はクルーズドコロニーでの生産のため、遺伝性の障害が発生する可能性が報告された。その後、ブリーダーが持つすべての種用♂家兎の水晶体の正常性をブリーダーと金沢医大の共同研究で観察を行った。その結果、一部の種用♂家兎に異常所見を示す個体がおり、その異常家兎の除去を行うことにより、漸く、来年度より細胞レベルの研究を行う準備が整ったところである。2.家兎外眼部対流実験高周波のミリ波による眼部曝露では、電波は角膜の表面のみに吸収されるために眼内に輸送される熱の解析と共に、眼外部への熱の放散の状態を可視化し、定量することが望まれる。家兎眼部の形状を3Dスキャナーで記録、解析し、そのデータを基に3Dプリンターで家兎頭部のチャンバーを作成した。このチャンバーを家兎眼部に装着した状態で、76 GHzのミリ波(自動車衝突防止システムで採用され、日常生活での被曝が予測される)を曝露した際の眼外部の熱の対流の変化を532 nm緑色レーザーで、眼表面の断面を可視化し、電波曝露有無による眼外部での熱輸送の変化を捉えることができた。正常であるべき実験動物の水晶体上皮細胞に異常があることが判明した。有色家兎(ダッチ種)はクローズドコロニーでの生産のため、種♂家兎に異常があり、それが原因で遺伝性の初期白内障が生じていたと考えれる。当実験動物生産者は動物の出荷時には、外見的には正常性のチェックはなされているが、顕微鏡レベルでのチェックがなされていなかったのが原因である。動物供給会社を変えることも考慮したが、実験動物として供給されているダッチ種は何れの会社でもクローズドコロニーでの生産のため、同様の結果になることが容易に推察される。以上より、原因である異常種ウサギの排除が最も簡便で効果的であると判断し、異常実験動物の除去を行うスクリーニング実験を優先したため、本来予定していた実験の進捗状況に若干の遅れが生じている。1.正常有色家兎の水晶体上皮細胞の分裂期細胞の出現状態ミリ波曝露による眼障害は、角膜で吸収・発熱した熱が房水の対流により水晶体に輸送され、水晶体上皮細胞が熱障害を受ける。この細胞死をミリ波誘発による眼障害発生の指標にすることを本研究で計画した。一方で、実験に使用する有色家兎はクローズドコロニーで繁殖されており、種雄の異常により、先天白内障を誘発することを明らかにし、実験動物のブリーダーとの共同研究で異常雄家系の淘汰を行ってきた。昨年までの種雄家兎の異常のスクリーニング調査で白内障の既往がなかった雄家系の子孫に先天性白内障があることを、今年度に発見した。追跡検索の結果、雌の家系に以前に異常を認めた雄の先祖が関与していたことが判明した。以上により、瞳孔領における水晶体上皮細胞の分裂期細胞の存在の有無を、ミリ波曝露による微細な眼障害発生の指標とするには、実験開始前に家兎を生体下で水晶体上皮細胞の分裂期細胞の存在の有無を非侵襲的に検出する必要がある。しかし、現時点で水晶体細胞の状態を非侵襲的に観察する技術は世界的にも存在しない。従って、分裂期細胞の存在の有無を眼障害の微細な障害発生の指標とする研究案は断念せざるを得ないと結論した。2.コンタクトレンズ装用によるミリ波曝露眼熱障害軽減効果眼内での熱輸送を可視化する目的で感温液晶カプセル(温度変化で色調が変化する微粒子)を手術的に眼内(前房)に注入・浮遊させた状態で76 GHzミリ波(自動車衝突防止装置用に国際的に指定された周波数)を曝露した。コンタクトレンズ非装用では、曝露開始5秒で角膜直下の房水が38°C程度に加温され、曝露開始20秒で瞳孔領中央部が38ー39°C、前房上部では40ー42度°Cまで上昇することを認めた。

一方、ソフトコンタクトレンズを装用することにより、前述の温度上昇を若干遅延させる作用があることが明らかとなった。正常であるべき実験動物の瞳孔領の水晶体上皮細胞に異常を認める家兎の存在が明らかとなった。我が国で有色家兎を供給するブリーダーが2社あり、そのどちらにも共同研究に依頼を行ったが、1社のみの共同研究が許諾された。共同研究の許諾があった実験動物のブリーダーとの研究により、クローズドコロニーで飼育・繁殖される種雄家兎の水晶体を精査し、異常を持つ種雄家兎を淘汰することを続けてきた。昨年度の研究終了時点で、種雄に異常を認める個体は完全になくすことができたが、本年度に入って、新たな先天白内障家兎の存在が明らかとなった。その後の追跡調査により、先天白内障が見つかった雄家系には異常は認めなかったが、雌家系の先祖に以前に異常を認めたすでに淘汰した種雄の子孫であることが判明した。報告者は使用する実験動物はすべて、細隙灯顕微鏡で水晶体の異常の有無をチェック後に使用しているため、先生白内障の家兎が実験群に混じることは無い。しかし、生体家兎の水晶体細胞を非侵襲的に観察できる機器は存在せず、実験開始前に水晶体上皮細胞の正常性を確認する方法は現在ない。従って、瞳孔領内における水晶体上皮細胞の分裂期の細胞の有無を眼障害発生の微細な指標とするには、実験動物の正常性が大前提となる。本研究の進捗状況を鑑み、実験動物ブリーダーが保有するすべての種雌家兎の家系の正常性を網羅的に調査する時間的余裕はなく、本研究での「瞳孔領での分裂期の水晶体上皮細胞の存在」を微細な眼障害発生の指標とする実験は断念せざるを得ないと考える。ミリ波は日常生活で通信や自動車衝突防止用レーダーとして使用されている。高強度のミリ波被曝は、電波を角膜で吸収・発熱することにより眼障害を引き起こす。一方、1800万人とも言われるコンタクトレンズ(以下、CL)使用者のミリ波眼障害発生の有無は不明である。本研究は以下の3点を検討した。1)ハードCL、ソフトCL装用有無によるミリ波誘発眼障害の検討:ミリ波曝露による眼内での熱輸送(角膜から前房水を介して、眼球内部の水晶体への熱輸送)感温液晶カプセル(熱により色調を変化させる微粒子)を眼内に注入することにより、角膜から前房内への熱輸送を可視化した。CL装用の有無により、ミリ波の眼部曝露による眼内の温度上昇を比較検討した結果、CL装用により、眼内への熱輸送を若干抑制した。2)カラーCL(金属塗料を使用しているために、ミリ波吸収の可能性がある)装用によるミリ波誘発眼障害の検討:種々の色調のカラーCLをTerahertz time-domain transmission spectrometerでテラヘルツ帯を含むミリ波領域の電波の吸収特性を検討した結果、カラーCLの色調の有無で眼障害発生の有無に関与する程の差異は無かった。3)種々のCL装用有無による外眼部対流可視化実験:家兎外眼部周辺の3次元構造を3次元スキャナーでデータを取り込み、この眼外部形状データより、家兎眼にフィットする外眼部対流可視化用チャンバーを3次元プリンターで作成した。微細粒子の煙をトレーサーとして眼外部可視化チャンバー内にトレーサーを充填した後、緑色レーザーで可視化断面を作成した上で、ミリ波電波を曝露し、家兎角膜から眼外部に蒸散する熱の可視化を達成した。このモデルを使用し、種々のCL(通常及び着色CL)の装用の有無による外眼部での熱の動態を検討した結果、眼障害発生または眼障害を抑制する程の効果は認めなかった。感温液晶カプセル(熱により色調を変化させる微粒子)を眼内に注入することにより、眼内での熱輸送を可視化し、コンタクトレンズ(CL)装用の効果を検討した結果、若干の熱輸送抑制効果を見た。
尿中HGF測定による泌尿器系腫瘍の早期診断法の開発

本研究は、ヒトHGF ELISA系を尿中のHGFを測定出来るまでに高感度化し、泌尿器系腫瘍の早期発見、予後診断に応用することを目的として行ったものであり、以下の結果を得た。(1)組換え体ヒトHGFを抗原に用いてニワトリ及びウサギを免役し、それぞれ抗HGF卵黄抗体(IgY)及び抗HGF抗体(IgG)を調製した。(2)上記のIgy及びIgGをF(ab')_2化し、それぞれをHGFによるアフィニティーカラムで精製した後、さらにFab'化して、マレイミド基を導入したβーガラクトシダーゼと結合させたものを2次抗体とし、1次抗体にはマウス抗HGFモノクローナル抗体を用いてサンドイッチELISA系を調製した。(3)上記HGF ELISAの測定感度は、前者が20pg/ml、後者が2pg/mlであり、現在市販され臨床応用されているHGF ELISAの測定感度(0.2ng/ml)のそれぞれ10倍及び100倍であった。この測定感度は、これまでは濃縮しないと測定不能であった尿試料を、濃縮せずにHGFを直接測定することが可能な感度である。(4)健常者尿試料を用い、これら2種のELISAの回収試験、希釈試験、再現試験を行ったところ、いずれも満足すべき結果が得られた。(5)健常者尿試料(n=19)中のHGF濃度は、4.166.3pg/mlであったが、これをそれぞれのクレアチニン濃度で補正すると、19.3±7.1(SD)pg/mgクレアチニンであった。HGFは、ガラスやプラスティック表面、あるいは限外濾過膜に吸着し易く、濃縮操作を行うと測定結果に誤差を生ずる可能性が高い。上記の結果は、煩雑な濃縮操作を行うことなく、尿中HGF濃度の正確な測定が可能であることを示すものである。現在、種々の泌尿器系腫瘍及び炎症患者の尿試料を測定を試み、診断薬としての可能性を検討中である。
多剤輸送体が脂質輸送体から分岐した可能性の検証

ABCタンパク質はATP依存的な能動輸送体であり、脂質恒常性の維持や有害な脂溶性化合物からの生体の保護等重要な生理機能を果たす。ヒトでは48種類のABCタンパク質が確認されており、その多くが脂質の輸送体として機能すると考えられている。一方、脂質輸送体と極めて近いアミノ酸配列を有しながら、様々な構造の脂溶性化合物を輸送し多剤輸送体として機能するものが存在する。多剤輸送体は抗がん剤耐性のがん細胞で確認され、がんの化学療法の大きな障壁となっているほか、投与薬物の体内動態にも影響するため創薬に置いても重要である。これまで脂質輸送体と多剤輸送体の2種類の輸送体がどの様な機構で機能を分化させてきたは明らかになっておらず、機能分化機構を明らかにできればABCタンパク質の基質輸送機構の解明という学術上の大きな課題に有用な知見が得られることに加え、薬剤開発において有用な開発指針を提示できると考えられることから社会的貢献も大きい。本研究では人為的に多剤輸送体と脂質輸送体を改変し、それぞれの機能を交換することで、機能分化において重要な要素を抽出することを目的とした。研究初年度は基質取り込み経路に着目し、基質取り込みゲートを形成していると思われる膜貫通ヘリックスについて解析を行った。その結果、多剤輸送体には2箇所の基質取り込み経路が存在するのに対し、脂質輸送体では基質取り込み経路が一箇所しかないことが示唆された。また、脂質輸送体で基質取り込み経路として機能している領域は、多剤輸送体ではほとんど使われていないことが示唆され、基質取り込み経路が機能分化に重要である可能性が考えられた。先行研究において、多剤輸送体が2箇所の膜貫通ヘリックスの揺らぎ運動を利用して、基質取り込みゲートを形成すること、ゲートが基質の選別にも関与することからただ基質を通過させるゲートではなく、門番(ゲートキーパー)としても機能することを示唆する結果を得ている。そこで研究初年度は脂質輸送体の基質取り込み経路に着目し、解析を行った。その結果、多剤輸送体と脂質輸送体は基本的な基質取り込み機構を共有するが、その領域が異なることを示唆する結果を得た(2019年度、農芸化学会大会)。また、本研究で得られた結果をフィードバックし、高密度リポタンパク質形成に関与する脂質輸送型ABCタンパク質(ABCA1)のapoA-I結合部位を同定した。研究2年度目にはゲートを形成するアミノ酸の交換変異体など基質取り込み経路の交換によって機能転換が可能であるかを検証する予定である。また、ゲート以外に重要な領域が存在するかを検討するため、網羅的な交換変異対等の解析を予定している。また、ヒトのタンパク質と平行して大腸菌由来の脂質輸送体についても解析を行い、多剤輸送体への改変が可能であるかを検討する。研究初年度の手法改良によって解析に必要なタンパク質および精製に必要な界面活性剤を減少させることが可能となった。

そこで研究2年度目には当該予算を用いて当初予定していなかった異なる多剤輸送体と脂質輸送体の比較研究、および大腸菌由来の脂質輸送体の機能改変に着手する。
強迫症の認知行動療法における遠隔スーパービジョンの有効性の検討

強迫症への有効性が実証されている心理療法として認知行動療法(Cognitive Behavioral Therapy; CBT)があるが、本邦では強迫症に対するCBTを実施できる治療者数が絶対的に不足している。本研究の目的は、強迫症状のために学校、職場、家庭での適応が困難になっている患者のために、有効なCBTを実施できる治療者を増やすことである。そのために、遠隔通信システムを利用した強迫症のCBTに対する専門家による治療指導(Supervision; SV)の効果を検証するとともに、それをもとに強迫症の治療マニュアルを作成することとする。
高血圧に伴う血管壁のリモデリング機構解明のための摘出血管の人工培養システム

【方法】昨年度開発した血管培養システムを用いて血管培養を試みた.無菌的に摘出した家兎頸動脈を灌流培養,無負荷培養,対照の3群に分けた.灌流培養群では試料を装置に取付けて内圧100mmHg,壁剪断応力約10dyne/cm^2の条件で3日間培養した.培養液にはDMEM+20%FCSを用いた.無負荷培養群では試料を培養槽内に静置した.両群とも培養終了時に内圧負荷試験を行い内圧-外径関係を求めた.次に10^5Mのノルアドレナリンで平滑筋を収縮させた時の内圧-外径関係を求めた.平滑筋収縮前後の同一内圧における外径を比較して,内圧-外径収縮量関係を求め,平滑筋活性の指標とした.実験終了後,血管を輪切りにして実体顕微鏡下で無負荷時の内外径,全壁厚,中膜壁厚を求めた.対照群では摘出後6時間以内に同様の実験を行った.【結果】内圧-外径曲線には灌流培養群-対照群間では有意差がなかったが,無負荷培養群では100mmHg以上の外径が対照群に比べ有意に小さく,曲線の傾きが急峻になる内圧も有意に低下していた.内圧-収縮量曲線に関しては収縮の最大値には3群間で有意差がなかったが,生理的内圧(100mmHg)での収縮量は対照群に比べ両培養群で有意に低下していた.また無負荷時の内外径・全壁厚は3群で有意差がなかったが,中膜壁厚は無負荷培養群で対照群に比べて有意に薄かった.【考察】家兎頸動脈は壁厚が100μm程度と薄いため,壁内外からの拡散栄養で活性を維持できるのではないかと予想した.ところが生理的な力学条件下で血管を培養しても,血管の収縮特性には変化が現れた.一方,無負荷状態で培養すると,収縮特性だけでなく内圧-外径関係や中膜壁厚にも変化が現れた.このことは,血管の形態や機能を維持するためには何らかの力学的負荷が必要なことを意味すると考えられる.【方法】昨年度開発した血管培養システムを用いて血管培養を試みた.無菌的に摘出した家兎頸動脈を灌流培養,無負荷培養,対照の3群に分けた.灌流培養群では試料を装置に取付けて内圧100mmHg,壁剪断応力約10dyne/cm^2の条件で3日間培養した.培養液にはDMEM+20%FCSを用いた.無負荷培養群では試料を培養槽内に静置した.両群とも培養終了時に内圧負荷試験を行い内圧-外径関係を求めた.次に10^5Mのノルアドレナリンで平滑筋を収縮させた時の内圧-外径関係を求めた.平滑筋収縮前後の同一内圧における外径を比較して,内圧-外径収縮量関係を求め,平滑筋活性の指標とした.実験終了後,血管を輪切りにして実体顕微鏡下で無負荷時の内外径,全壁厚,中膜壁厚を求めた.対照群では摘出後6時間以内に同様の実験を行った.【結果】内圧-外径曲線には灌流培養群-対照群間では有意差がなかったが,無負荷培養群では100mmHg以上の外径が対照群に比べ有意に小さく,曲線の傾きが急峻になる内圧も有意に低下していた.内圧-収縮量曲線に関しては収縮の最大値には3群間で有意差がなかったが,生理的内圧(100mmHg)での収縮量は対照群に比べ両培養群で有意に低下していた.また無負荷時の内外径・全壁厚は3群で有意差がなかったが,中膜壁厚は無負荷培養群で対照群に比べて有意に薄かった.【考察】家兎頸動脈は壁厚が100μm程度と薄いため,壁内外からの拡散栄養で活性を維持できるのではないかと予想した.ところが生理的な力学条件下で血管を培養しても,血管の収縮特性には変化が現れた.一方,無負荷状態で培養すると,収縮特性だけでなく内圧-外径関係や中膜壁厚にも変化が現れた.このことは,血管の形態や機能を維持するためには何らかの力学的負荷が必要なことを意味すると考えられる.
体のサイズとエネルギー代謝をコントロールする神経系のホメオスタシス制御の機構

我々の研究グループはこれまでに、線虫C.エレガンスの体の大きさが感覚情報とその下流で働くcGMP依存性タンパク質キナーゼEGL-4によって制御されていることを報告している。昨年度(17年度)は新たに単離した変異体の解析からグアニル酸シクラーゼGCY-12がEGL-4の活性を制御している可能性を示唆する結果を得た。gcy-12変異体では、egl-4同様に感覚情報に依存した体のサイズの減少が起きない。また、gcy-12遺伝子の過剰発現によって、egl-4変異体とは逆の表現型である、体のサイズ減少、産卵の活性化が起こる。さらに、二重変異体の解析からも、この二つの遺伝子が同じ経路で働いていることが示唆された。本年度(18年度)はgcy-12遺伝子の性質について、詳しい解析を行った。(1)グアニル酸シクラーゼGCY-12は、リガンド結合領域と考えられる比較的大きな細胞外領域と膜貫通領域、細胞内の酵素活性領域からなる。GCY-12の活性がその細胞外領域を介して何らかの外部からのシグナルによって制御を受けているのかを調べるため、細胞外領域をコードする配列を欠失したgcy-12遺伝子を作製した。その結果、このような欠損型gcy-12遺伝子でもgcy-12変異体に導入すれば、正常な体のサイズ制御を回復させることが分かった。(2)正常な体のサイズ制御に必要なgcy-12遺伝子の発現場所を調べたところ、egl-4同様に複数の感覚神経での発現が重要であることが明らかになった。(3)線虫にはgcy-12以外にも、感覚神経で働く複数のグアニル酸シクラーゼ、例えばdaf-11やodr-1、の存在が知られている。これらの遺伝子とgcy-12遺伝子の使い分けについて調べるために、二重変異体を作製して解析を行った。その結果、daf-11には全く体のサイズ制御に異常がないことが分かった。一方、odr-1とgcy-12との二重変異体は、gcy-12変異体と較べて体のサイズ制御の異常の度合いが大きくなることから、odr-1遺伝子も体のサイズ制御において、少なくとも部分的な役割を担っていることが示唆された。我々の研究グループはこれまでに、線虫C.elegansの体の大きさが感覚情報とその下流で働くcGMP依存性タンパク質キナーゼEGL-4によって制御されていることを報告している。昨年度は新たに単離した変異体の解析からグアニル酸シクラーゼGCY-12がEGL-4の活性を制御している可能性を示唆する結果を得た。今年度は、引き続いて以下の2点において研究成果を得た。1.グアニル酸シクラーゼgcy-12遺伝子の変異体は、感覚受容変異体の体の小ささを回復させる抑圧変異体として単離された。今回、我々はグアニル酸シクラーゼgcy-12遺伝子の過剰発現を試みたところ、野生型において体のサイズの減少が引き起こされることを見いだした。また、egl-4変異体においてはgcy-12の過剰発現の効果が見られないことから、EGL-4 cGMP依存性タンパク質キナーゼに依存して体のサイズの減少が起きていることが示された。この過剰発現実験の結果は、感覚情報がGCY-12を介してEGL-4の活性を制御することで体のサイズの調節に関わっているという我々のモデルを裏付ける。また興味深いことに、gcy-12の過剰発現は産卵異常や餌の上での個体の動きについてもegl-4変異体と逆の表現型を示すことも分かった。2.我々は、感覚受容変異体の体の小ささを回復させる別の抑圧変異体chb-3の原因遺伝子が、GCY-12の感覚繊毛への局在に働いている新規タンパク質をコードしていることを明らかにしている。しかし、我々の抑圧変異体スクリーニングで単離されたアリルchb-3(eg52)は、変異部位の解析から完全な機能喪失型ではないことが予想されていた。今回chb-3遺伝子のコード領域を半分近く欠失した新規アリルchb-3(qj2)を作製して、表現型を解析した。この新規アリルqj2においても、eg52と同程度のGCY-12の感覚繊毛への局在異常が見られた。このことは、eg52がnullに近い機能喪失型であることとともに、CHB-3タンパク質がGCY-12の感覚繊毛への正常な局在に必要であることを改めて示した我々の研究グループはこれまでに、線虫C.エレガンスの体の大きさが感覚情報とその下流で働くcGMP依存性タンパク質キナーゼEGL-4によって制御されていることを報告している。(1)グアニル酸シクラーゼGCY

-12は、リガンド結合領域と考えられる比較的大きな細胞外領域と膜貫通領域、細胞内の酵素活性領域からなる。GCY-12の活性がその細胞外領域を介して何らかの外部からのシグナルによって制御を受けているのかを調べるため、細胞外領域をコードする配列を欠失したgcy-12遺伝子を作製した。その結果、このような欠損型gcy-12遺伝子でもgcy-12変異体に導入すれば、正常な体のサイズ制御を回復させることが分かった。(2)正常な体のサイズ制御に必要なgcy-12遺伝子の発現場所を調べたところ、egl-4同様に複数の感覚神経での発現が重要であることが明らかになった。(3)線虫にはgcy-12以外にも、感覚神経で働く複数のグアニル酸シクラーゼ、例えばdaf-11やodr-1、の存在が知られている。これらの遺伝子とgcy-12遺伝子の使い分けについて調べるために、二重変異体を作製して解析を行った。その結果、daf-11には全く体のサイズ制御に異常がないことが分かった。一方、odr-1とgcy-12との二重変異体は、gcy-12変異体と較べて体のサイズ制御の異常の度合いが大きくなることから、odr-1遺伝子も体のサイズ制御において、少なくとも部分的な役割を担っていることが示唆された。
緊張性と防衛性に配慮した心理劇技法と評価方法の開発

心理劇は即興劇を用いる集団心理療法のひとつである。心理劇はすべての参加者の自発性と創造性によって成り立っているのである。つまり、治療として用いるにしても、教育として用いるにしても、心理劇の適用における重要な側面は集団の凝集性と受容性である。本研究の目的は参加者が緊張感や抵抗感を抱かずに心理劇に参加することを可能にする効果的な技法の開発である。様々な検討の結果、参加者の心理的状態を配慮した心理劇の適用が重要であることが示された。特に、心理劇の経験があまりない参加者に対しては参加者が場面を想像しやすい言語・非言語刺激を用いるソシオドラマ(社会劇)の技法が有効であることが示唆された。本研究の目的は対象者の緊張性や防衛性に配慮した心理劇(サイコドラマ・ソシオドラマ)の新たな技法の開発であり、平成26年度は以下の研究を行った。(1)親子関係をテーマとするソシオドラマの展開についての研究:親との新たな関係を再構築していく青年期において、ソシオドラマを用いた親に対する認識の変化を促すことを目的としたソシオドラマを実施し、親子関係認知に関する尺度を用いて、その効果について検討を行った。結果、役割交換法を用いたソシオドラマの有効性が示唆された。この研究成果は学術雑誌に掲載された【ソシオドラマにおける役割交換法が大学生の親子関係認知に与える影響、心理劇研究、第38巻、15-27、共著者:岩男尚美】。(2)サイコドラマの技法であるマジックショップを用いて、対象者の緊張性や防衛性を緩和し自発的な自己表現を促すための工夫について大学生を対象とした心理劇セッションを通じて検討を行った。その結果、補助自我と呼ばれる主役を支援する機能を工夫することが参加者の自己理解に影響を及ぼすことが示唆された。この研究成果は、日本心理臨床学会第33回秋季大会で報告された【マジックショップにおける展開が心理劇の参加体験に及ぼす影響、ポスター発表、平成26年8月26】)。(3)精神科病院における心理劇を用いた臨床実践のあり方について、これまでの臨床事例を題材としてメタ分析を行った。対象はアルコール使用障害者、統合失調症者、認知症者を対象とする心理劇実践事例である。それぞれの対象が抱える認知的、感情的特性を配慮した心理劇の導入と展開が治療効果を高まることが示唆された。この研究の成果は、第40回西日本心理劇学会・第20回日本心理劇学会合同大会(福岡)のシンポジウムで発表された【シンポジウム:ライフサイクルに寄りそう心理劇「成人期:停滞からの脱却をめざす心理劇」平成27年2月22日】当該年度は「研究の目的」「研究実施計画」に基づき以下の3つの研究を遂行し学会にてその研究成果を発表した。(1)参加者の防衛的態度を緩和するような心理劇の技法を開発し、インタビューや尺度を用いてその効果を測定した。大学生を対象とした心理劇グループを構成し、サイコドラマ的アプローチとソシオドラマ的アプローチを実施しその体験の違いを分析した。大学生を対象として安全に心理劇を実施する方法論について発表した。【研究発表1】岩男尚美・下池洸史朗・古賀聡、集団療法における社会的役割関係への焦点化と個人特性への焦点化:大学授業における心理劇実践のあり方の検討、日本心理臨床学会第34回秋季大会、2015年9月18日、神戸国際会議場、【研究発表2】岩男尚美・古賀聡、ソシオドラマを通して青年はどのような親心に気づくのか、西日本心理劇学会第41回大分大会、平成28年2月14日、ホルトホール大分(2)心理臨床実践において対象者の特性に応じた心理劇技法を開発するために発達障害者を対象とした臨床実践研究を実施し、その成果を学会で発表した。【研究発表1】五位塚和也・古賀聡、自閉症スペクトラム障碍児の心的過程への気づきに関する一考察、日本心理臨床学会第34回秋季大会、2015年9月20日、神戸国際会議場(3)心理劇実践者が心理劇を行う際の意図や工夫、困難感について、実践者を対象にインタビューを実施し分析した。その結果を、学会で発表した。【研究発表1】江頭愛・重橋のぞみ・古賀聡、統合失調症者の心理劇に参加した看護師の患者理解の変容、2015年日本リハビリテイション心理学会学術大会、2015年11月13日、大分オアシスタワーホテル、【研究発表2】塚本駿・下池洸史朗・古賀聡、自閉スペクトラム症児・者を対象とする心理劇実践者の意図と工夫、西日本心理劇学会第41回大分大会、平成28年2月14日、ホルトホール大分これまでの心理劇研究の成果(発表済みの論文等)が評価され、心理劇の研究会講師や講義など心理劇を実践する機会に恵まれた。その結果、これまでの研究において開発された心理劇技法の効果を検証する機会、さらにあらたな心理劇技法を試みる機会に恵まれたことが順調な研究進展に寄与したと考えられる。平成28年度は対象者の緊張性や防衛性に配慮した心理劇の方法論について検討を行った。個人の経験や表象世界を劇として表現化するサイコドラマと個人には焦点化せずに社会的役割関係や社会的課題をテーマとして提示するソシオドラマの技法の開発を行った。

大学生を対象とした心理劇演習、対人援助職を対象とした心理劇研修会、中高年と高齢者を対象とした生涯学習場面で心理劇を実施し、比較的心理劇体験が少ない対象者に対して、安全かつ効果的に心理劇する方法について検討した。心理劇セッションにおける観察記録、セッション後の心理劇尺度とアンケートを用いて、その効果について検討した。具体的には以下の心理劇技法を開発した。1回想内容を写真イメージとして外在化したのちに劇化を行うサイコドラマ技法の開発、2日常生活で抱えている葛藤や問題からの心理劇導入を行わず、理想的なできごとや例外的にうまくいったことに題材を求め心理劇のなかで現実的な検討を行っていく解決志向アプローチを取り入れたサイコドラマ技法の開発、3写真や絵画、玩具などの非言語的刺激を題材にグループメンバー間で共有できる季節の行事や懐かしさを伴う過去の生活体験を振り返るようなソシオドラマ技法の開発、4俳句などの言語的刺激を題材にグループメンバー間で共有できる季節の行事や懐かしさを伴う過去の生活体験を振り返るようなソシオドラマ技法の開発いずれの技法においても上記の尺度やアンケートからも、心理劇経験が少ない対象者にとっても必要以上の不安や戸惑いを感じずに、自己理解が進むことが示された。心理劇は即興劇を用いる集団心理療法のひとつである。心理劇はすべての参加者の自発性と創造性によって成り立っているのである。つまり、治療として用いるにしても、教育として用いるにしても、心理劇の適用における重要な側面は集団の凝集性と受容性である。本研究の目的は参加者が緊張感や抵抗感を抱かずに心理劇に参加することを可能にする効果的な技法の開発である。様々な検討の結果、参加者の心理的状態を配慮した心理劇の適用が重要であることが示された。特に、心理劇の経験があまりない参加者に対しては参加者が場面を想像しやすい言語・非言語刺激を用いるソシオドラマ(社会劇)の技法が有効であることが示唆された。これまで実践報告が多かった心理劇の効果について、ソシオドラマとサイコドラマともに尺度を用いた実証的研究を行った点である。さらに、臨床実践における心理劇適用においては、対象者の緊張性や防衛性に配慮した導入は不可欠であるが、これまでの臨床事例に対するメタ的分析を行い、臨床実践上の配慮のポイントを明確にしたことも、この領域の発展に大きく寄与したと考えられる。また、これらの研究成果は、すべて学術論文、学会発表として公開した点も、本研究が順調に進展していることを示すと考えられる。平成26年度における主だった研究成果の公開を以下に示す。1ソシオドラマにおける役割交換法が大学生の親子関係認知に与える影響、心理劇研究、第38巻、15-27、共著者:岩男尚美2マジックショップにおける展開が心理劇の参加体験に及ぼす影響、ポスター発表、平成26年8月263第40回西日本心理劇学会・第20回日本心理劇学会合同大会(福岡)シンポジウム:ライフサイクルに寄りそう心理劇「成人期:停滞からの脱却をめざす心理劇」平成27年2月22日次年度は、最終年度でもあり心理劇におけるサイコドラマ的アプローチとソシオドラマ的アプローチを比較しながら総合的に心理劇の方法論について検証していく。さらに、大学生を対象とした実証的研究の成果を発達障害児者や認知症高齢者を対象とした心理劇の臨床実践に応用できるかを検証する。さらに、これまで学会で発表してきた多数の成果を今年度は学術誌に投稿し心理劇の臨床的な意義やそのための配慮や工夫について公表する予定である。臨床心理学今後は大学生などの青年期以外の年代に対する心理劇の検証を行う予定である。