hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
非結核性抗酸菌細胞壁糖ペプチド脂質に対する宿主応答の分子機序

抗酸菌-宿主関係において、抗酸菌細胞壁表層分子(特に、糖ペプチド脂質、糖脂質や蛋白質)は多機能分子であり、病原性に関与している。Mycobacterium avium complex(MAC)感染症は結核など抗酸菌感染症の約20%を占める。MAC特異的細胞壁表層糖ペプチド脂質(GPL)抗原を用いた迅速血清診断法の開発を試みた。GPLを用いたMAC感染症の血清診断法は感度および特異度ともに良好な成績(90%以上)を示し、かつ、血清抗GPL抗体価はMAC感染症の疾患活動性を反映した。従って、GPL抗原を用いた血清診断はMAC感染症の診断や疾患活動性の評価に有用であり、今後、臨床応用が期待される。抗酸菌DNA結合蛋白質1(MDP1)は菌体内や細胞壁に存在する抗酸菌特異的蛋白質である。MDP1の発現強度は対数増殖期<定常期=衰退期であった。機能的に細胞質MDP1はDNAと結合し、抗酸菌の増殖速度を遅延させ、休眠関連分子である。他方、抗酸菌表層MDP1は気道上皮細胞表面に存在するグリコサアミノグリカン(ヒアルロン酸など)に結合した。抗酸菌-気道上皮細胞の接着・侵入は抗MDP1抗体やグリコサアミノグリカンで阻害され、MDP1-グリコサアミノグリカン相互作用を介して、抗酸菌が宿主細胞に接着・侵入している。マウスを用いたin vivo感染実験結果から、抗MDP1抗体やグリコサアミノグリカンの結核菌感染前、或いは、感染後投与は生菌数を有意に減少させ、予防・治療の両者に有効な介入手段であった。MDP1-DNA複合体前投与は菌数を有意に減少させた。MDP1-DNA複合体の作用機序を解析したところ、1)抗MDP1抗体および2)interferon-g産生誘導が認められた。すなわち、MDP1を分子標的とした介入は新規治療・予防戦略として有望である。抗酸菌の特異的細胞壁表層糖ペプチド脂質や接着/侵入に関与する菌表層蛋白質の宿主に対する生物学的活性を免疫原性、炎症惹起や抗菌防御の視点から分子医学的に解析し、新規診断・治療候補として抗酸菌細胞壁糖脂質や蛋白質の可能性を探索した。Mycobacterium avium complex(MAC)特異的糖脂質蛋白質(GPLやその抗原決定基であるGPL核)を抗原とした血清診断はヒトMAC感染症に高い特異性(92.5%)や感度(95.1%)を示した。次に、抗菌化学療法反応群(治療による菌陰性化、14例)と抗菌化学療法非反応群(菌陽性持続、13例)の抗体価の推移を解析した。反応群では治療後に抗体価が有意に減少したが、非反応群では変動はなかった。また、非反応症例で肺葉切除患者(1例)の抗体価は切除後に減少した。すなわち、血清抗GPL核抗体価の測定はMAC感染症の診断のみならず、MAC感染症の疾患活動性を反映することが示唆された。現在、関西地区を中心として多施設-臨床試験が進行している。さらに、結核菌や弱毒ウシ型結核菌(BCG)などの抗酸菌から抗酸菌特異的DNA結合蛋白質(MDP1、分子量28kDa)を精製、遺伝子の塩基配列を決定、生物学的意義について解析した。MDP1の発現強度は指数増殖期く定常期=衰退期であった。

また、MDP1は抗酸菌の細胞質や表層に局在していた。機能的に細胞質MDP1は抗酸菌DNAと結合し、DNAやRNA合成、さらに、蛋白合成を阻害し、その結果、抗酸菌の分裂増殖速度を遅延させた。他方、抗酸菌表層MDP1は抗酸菌の気道上皮細胞への接着・侵入に関与し、抗酸菌特異的DNA結合蛋白質と宿主細胞表面に存在するグリコサアミノグリカン(GAG)に依存していた。予備的なin vivo感染実験結果は抗MDP1抗体やGAGの感染前や感染後投与でも有効、すなわち、予防・治療に有効な手段であった。抗酸菌細胞壁表層成分の宿主に対する生物学的活性を免疫原性(抗原決定基、液性および細胞性免疫)、炎症惹起や抗菌防御の視点から解析し、新規診断・治療候補として抗酸菌細胞壁糖脂質や蛋白質の可能性を探索した。Mycobacterium avium complex (MAC)特異的糖脂質蛋白質を抗原とした血清診断はヒトMAC感染症に高い特異性や感度を示した。現在、関西地区を中心として血清診断キット(試作)による多施設臨床試験が進行中である。結核菌や弱毒ウシ型結核菌(BCG)などから抗酸菌特異的DNA結合蛋白質(MDP1、分子量28kDa)を精製、遺伝子の塩基配列を決定、生物学的意義を解析した。抗酸菌表層MDP1は宿主細胞表面に存在するグリコサアミノグリカンに結合した。抗酸菌-宿主細胞の接着・侵入は抗MDP1抗体やグリコサアミノグリカン(特に、ヒアルロン酸)で阻害されたことから、MDP1-グリコサアミノグリカン相互作用を介して、結核菌が宿主細胞に接着・侵入している。マウスを用いたin vivo感染実験結果から、抗MDP1抗体やグリコサアミノグリカンの結核菌感染前、或いは、感染後投与は感染生菌数を有意に減少(約1-3/10)させ、予防・治療の両者に有効な介入手段であることが判明した。次に、MDP1を標的としたワクチン開発に着手した。MDP1単独やMDP1-DNA複合体でマウスを前免疫し、その後、結核菌を接種し、菌数や免疫学的指標からワクチン効果を評価した。MDP1-DNA複合体前投与により、菌数を有意に減少(約1/5)させた。なお、MDP1単独では菌数滅少効果を認めなかった。MDP1-DNA複合体の免疫学的作用機序を解析したところ、1)抗MDP1抗体および2)interferon-γ産生誘導が認められた。すなわち、MDP1を分子標的とした介入は新規治療・予防戦略として有望である。代表的な非結核性抗酸菌感染症であるMycobacterium avium complex(MAC)特異的糖脂質ペプチド核を抗原とした血清診断はヒトMAC感染症に高い特異性や感度(90%以上)を示した。血清診断キット(試作)による多施設臨床試験が進行中である。抗酸菌表層MDP1は抗酸菌細胞質内及び細胞壁に局在していた。細胞質内MDP1はDNA/RNAや蛋白質合成を抑制し、抗酸菌の遅発育性に関与していた。
水系スラリーを用いたクロスフローEPDによる環境低負荷型セラミックスコーティング

水系スラリーを用いた電気泳動成形により金属表面にセラミックス微粒子をコーティングするプロセスを開発した。スラリーを循環させながら電気泳動を行うことで、粒子の分散状態を保持すること、及び密着性の弱い粒子をコーティング面から排除することを可能とし、これまでよりも密着性の強い、比較的均質なセラミックスコーティング膜を水系スラリーから作製することができた。シリカ粒子(平均粒子径20nm)を用いて,水系でスラリー調製を行い,ステンレス基板へのコーティングを行った.水中にシリカ粒子を種々の濃度で調製して,超音波ホモジナイザーで分散処理を行い,コーティング槽内に満たした後に,ステンレス基板を入れて固定し,直流電源につないだ.所定の電圧を印可してEPDを行い,得られたコーティング膜の重量を電子天秤で測定した.シリカ粒子は通常は水中で負に帯電するため,そのままでは陽極に析出することになり,電極となる金属が溶出してしまい(錆の発生),均質なコーティングは得られなかった.そこで,カチオン性界面活性剤であるポリエチレンイミンを分散剤として用いてスラリー調製することによって,シリカ粒子を陰極に析出させた.その結果電極反応によるコーティング膜上への錆の発生を抑制できた.しかしながら,乾燥後にはクラックが発生し,コーティング膜が剥離してしまった.そこで結合剤としてポリビニルアルコールを添加してスラリー調製を行い,コーティングした結果,クラックのない膜が得られた.現在のところ,粒子濃度が1vol%より低い条件で,ポリエチレンイミン,ポリビニルアルコールを添加し,さらに溶液のpHを中性付近にしたところで最もよいコーティングが得られることがわかった.特にスラリーを一定速度で循環させながらEPDを行った場合に、均質で割れや剥がれのない、比較的膜圧の薄いコーティングが得られた。今後は得られたコーティング膜を基板ごと熱処理し、膜の密着性の評価を行い、実際の使用に耐えられるような特性を発現できるように、コーティング条件を最適化していく予定である。近年めっきに用いられる重金属イオンの環境への悪影響という懸念から,金属めっきに代わる技術としてセラミックスコーティングが注目されてきた.その中でも電気泳動堆積法(Electrophoretic Deposition,以下EPDと略す)を用いてセラミックス微粒子を金属にコーティングする技術は,原理が単純で装置が比較的簡単な構造ですむことや,非常に複雑な形状の金属部品等にセラミックスをコーティングする場合でも,均一に電界をかけることができれば,電極の形状によらず一定厚みのコーティングを行うことができること,あるいは比較的コストがかからないプロセスであることなど多くの利点があり,実用化が期待されている技術である.現在EPDを用いたセラミックスコーティングに関する研究の大部分が,微粒子の分散の容易さ,あるいは乾燥速度の点から分散媒に有機溶媒を用いているが,これは環境負荷が大きいことや,作業環境の安全性の点から,最近では分散媒に水を用いたEPDについても研究報告が増加しつつある.しかしながら水系のEPDでは,粒子の分散状態を制御することや乾燥時のコーティング膜の剥がれを抑制することなど,解決しなければならない課題が多い.そこで本研究では,水系のEPDプロセスにおいて,乾燥時の膜の剥がれやクラック発生を抑制し,均一で緻密なコーティング膜を金属板上に作製することを目的として,スラリーの調製条件及びコーティング方法の工夫を検討した.スラリーを循環させながら電気泳動を行うことで、粒子の分散状態を保持すること、及び密着性の弱い粒子をコーティング面から排除することを可能とし、これまでよりも密着性の強い、比較的均質なセラミックスコーティング膜を水系スラリーから作製することができた。
慢性疾患児の生きる力を育む「自然体験」プログラムの開発に関する研究

慢性疾患をもつ子どもに、「自然体験」を活用して、生活の質を高め、「生きる力」をより強く育むことのできる「自然体験」プログラムを開発することを目的に研究を行っている。これまでの研究で、「自然体験」と気管支喘息をもつ子どもの「生活体験」や「疾患の自己管理」との関連、4歳児をもつ母親の「自己管理スキル」との関連などを明らかにした。平成17年度は、(1)京都府、奈良県、岡山県の大学生14回生232名を対象に、幼少時から青年期に至る過程での「自然体験」の頻度と内容、「自然体験」から得たものなどを調査した。分析は、学童期に慢性疾患を罹患した57名を対象とし、一部は健康な大学生と比較した。その結果、学童期に慢性疾患を罹患した大学生の「自然体験」の頻度は、全体的には健康な大学生と有意差はないが、日の出日の入りや星空を見る、キャンプするなどの体験については有意差があり、宿泊を伴う体験の少なさが考えられた。また、多くの学生が「自然体験」から得たものがあると感じており、病気の子どもが「自然体験」をすることの意味についても、ほぼ全員が「意味がある」と答えていた。自由記述の結果からは、「自然体験」は、生きていることの喜びを実感させ、闘病意欲を高め、生活や自分自身の幅に広がりをもたせ、豊かな人間性を養うなどの効果があることが示唆された。これらから、慢性疾患をもつ子どもに「自然体験」の機会を提供することは有益であると考えられた。なお、この調査結果は、第19回日本看護福祉学会、第53回日本小児保健学会で発表予定である。(2)「自然体験」が子どもと保護者に与える影響について検討するため、約2年にわたり「自然観察会」で慢性疾患をもつ子どもと保護者の参加観察を施行中であり、今後分析を行い、「自然体験」プログラムの開発を目指す予定である。
シロイヌナズナ転写制御因子ESR1の茎葉―根端軸形成における役割

β-グルクロニダーゼをリポーター遺伝子に用いて、ESR1及びESR2遺伝子のプロモータ活性を調べることにより、ESR1/ESR2の発現パターンを調べた。その結果、ESR1はglobular stageの初期から胚全体で発現しており、その発現は胚発生が進むとともに減少していく。walkihg sticks stageになると茎頂メリステム周辺で特異的に発現するが、その発現は発芽後、減少し、本葉が形成される時期にはほとんど見られなくなる。ESR2はglobular stage後期から胚発生過程を通して、子葉先端近くで発現していた。また、walking sticks stageから発芽後にかけて、ESR1と同様に、茎頂メリステム周辺で発現が検出された。発芽後は、茎頂メリステム周辺での発現は見られなくなるが、葉原基で発現が検出された。ESR1、ESR2遺伝子にT-DNA、あるいはトランスポゾンEn-1が挿入された破壊株をMax-Planck研究所から入手し、表現型を調べたところ、どちらの破壊株も見かけ上の異常が見られなかった。そこで、二重変異株の作製を行い、表現型の解析を行った。これらの多くは、子葉が形成されない,あるいは異常な子葉を持ち、その後の生育では、比較的正常な本葉を形成するが、複数の茎頂メリステム様構造を持ち、異常な葉序を示す。ESR2は胚発生の過程において子葉先端部で発現しており、ESR1、ESR2はともに、発芽前の茎頂メリステム周辺で発現していることを考え合わせると、ESR1/ESR2の機能は、子葉形成及び、茎頂メリステム形成と何らかの関係があると推定される。
繰り返し計算を必要としない平滑化パラメータ選択法の開発とその応用

本研究課題では,ノンパラメトリック回帰に部分的一般化リッジ回帰を適用することにとり,Cp規準を最小にする平滑化パラメータが一意に求められるようにモデルを変換した.この結果を用い,繰り返し計算を必要としない平滑化パラメータの最適化法を提案し平滑化法の簡便化をはかり,簡便な平滑化法をさまざまな統計モデルに適応させた.本研究課題では,ノンパラメトリック回帰に部分的一般化リッジ回帰を適用することにとり,Cp規準を最小にする平滑化パラメータが一意に求められるようにモデルを変換した.この結果を用い,繰り返し計算を必要としない平滑化パラメータの最適化法を提案し平滑化法の簡便化をはかり,簡便な平滑化法をさまざまな統計モデルに適応させた.ノンパラメトリック回帰モデルにおいて,平滑化パラメータは推定曲線の局所変動の程度を制御する重要なパラメータである.パラメータの値が変われば推定曲線も大きく変化してしまうため,平滑化パラメータの最適化は重要問題であると言える.最適な平滑化パラメータは,(C_p,CV,GCV規準といった情報量規準の最小化により選択されるのが一般的である.しかし,情報量規準を最小にする解は陽な形で求めることができず,最適な平滑化パラメータを得るためには計算機による繰り返し計算が必要となる.本研究の目的は,平滑化パラメータを追加しC_p規準を最小にする解が一意に求められるようにすることで繰り返し計算を必要としない平滑化パラメータの最適化法を考え平滑化法の簡便化をはかり,簡便な平滑化法をさまざまな統計モデルに適応させることにある.Statistics and Computingに掲載が決まった論文では,基底関数と未知パラメータに線形変換を施すことにより,罰則付き平滑化における平滑化パラメータの選択問題が,部分的リッジ回帰におけるリッジパラメータ選択問題と同値であることを示し,線形変換後のモデルにおいて一般化リッジ回帰を適用することによりC_p規準を最小にする平滑化パラメータを陽な形で求めることができた.また,この新しい平滑化法では,従来の平滑化手法のように共通の情報量規準で平滑化パラメータと基底関数の個数を選択してもうまくいかない.そのため,基底関数の個数の最適化のための情報量規準も同時に提案した.さらに,研究発表,永井・柳原においては,新しい平滑化法をノンパラメトリック成長曲線モデルに,また,井上・柳原では,動経基底関数ネットワークに基づくノンパラメトリック回帰へ適用した結果を報告した.両結果とも従来の手法と同等のパフォーマンスを持ち,かつ計算時間を最高で1/5に短縮することができることがわかった.ノンパラメトリック回帰モデルにおいて,平滑化パラメータは推定曲線の局所変動の程度を制御する重要なパラメータである.パラメータの値が変われば推定曲線も大きく変化してしまうため,平滑化パラメータの最適化は重要問題であると言える.最適な平滑化パラメータは,C_p,CV,GCV規準といった情報量規準の最小化により選択されるのが一般的である.しかし,情報量規準を最小にする解は陽な形で求めることができず,最適な平滑化パラメータを得るためには計算機による繰り返し計算が必要となる.本研究の目的は,平滑化パラメータを追加しC_p規準を最小にする解が一意に求められるようにすることで繰り返し計算を必要としない平滑化パラメータの最適化法を考え平滑化法の簡便化をはかり,簡便な平滑化法をさまざまな統計モデルに適応させることにある.昨年の研究成果において,一般化リッジ回帰を適用することによりC_p規準を最小にする平滑化パラメータを陽な形で求めることができることをStatistics and Computingに発表した.ところが,一般化加法モデル(Generalized Additive Model:GAM)や動径基底関数ネットワークに基づくノンパラメトリック回帰モデル等の説明変数が複数あるモデルの場合,C_p規準を用いるために必要な誤差の分散の一致推定量の構成が難しくなる.そのため,分散の推定量を必要としない情報量規準を用いた方法が必要となる.研究発表,柳原において,そのような分散の推定量を必要としないGCV規準においても,GCV規準を最小にする平滑化パラメータを陽な形で求めることができることを報告した.この結果により,GAMや動径基底関数ネットワークに基づくノンパラメトリック回帰モデルに簡便な平滑化手法を適用できることになる.ノンパラメトリック回帰モデルでの平滑化パラメータは,推定曲線の局所変動の程度を制御する重要なパラメータである.値が変われば推定曲線も大きく変化してしまうため,平滑化パラメータの最適化は重要問題であると言える.最適な平滑化パラメータは, Cp, CV, GCV規準といった情報量規準の最小化により選択されるのが一般的である.しかし,情報量規準を最小にする解は陽な形で求めることができず,最適な平滑化パラメータを得るためには計算機による繰り返し計算が必要となる.本研究の目的は,平滑化パラメータを追加しCp規準を最小にする解が一意に求められるようにすることで繰り返し計算を必要としない平滑化パラメータの最適化法を考え平滑化法の簡便化をはかり,簡便な平滑化法をさまざまな統計モデルに適応させることにある.昨年の研究成果において,一般化リッジ回帰において,GCV規準を最小にするリッジパラメータが陽な形で求められることを統計関連学会連合大会において口頭発表を行った.その結果により,誤差分散の一致推定量を必要としない最適化法を提案することができた.しかしながら重要な問題として基底関数の個数の最適化が残っている.

そのため,基底関数をデータの位置で固定して規準量によりその個数をリッジパラメータにより減らす方法を考えた.そこで必要となるのは標本数が説明変数の個数よりも小さいときの一般化リッジ回帰である.本研究において,そのような場合でもGCVを最小にするリッジパラメータは陽な形でも求めることができることがわかった.また,主成分回帰に一般化リッジ回帰を適用し,その主成分の個数もGCV規準で選択すればさらに良い結果になることも分かった.部分的一般化リッジ回帰において,GGV規準を最小にするリッジパラメータを陽に求めることができることがわかった.その結果を利用することで,現在までに当初予定していた繰り返し計算を必要としない平滑化パラメータの最適化法をGAMへ適用することが可能であることがわかったから.24年度が最終年度であるため、記入しない。本研究課題の目的は,繰り返し計算を必要としない平滑化パラメータの最適化法を考え平滑化法の簡便化をはかり,簡便な平滑化法をさまざまな統計モデルに適応させることにある.繰り返し計算を必要としない平滑化法をGAMや動径基底関数ネットワークを用いたノンパラメトリック回帰モデルへ適用することが,部分的一般化リッジ回帰においてGCV規準を最小にするリッジパラメータが陽に求まることを用いることで可能であることがわかった.今後,実際に本研究課題で提案する手法をGAMなどに適用した場合の精度を数値的に調べる必要がある.また,GAMや動径基底関数ネットワークを用いたノンパラメトリック回帰モデル以外への適用も考える必要ある.24年度が最終年度であるため、記入しない。
看護婦支援のための器械出しロボットの開発

看護婦支援のための器械出しロボットを開発したので報告する。本ロボットは、手術器具を正確につかむための手術器具認識システムと手術作業者の差し出す手に器具を正確に供給する手術器具手渡しシステムにより構成される。(1)器械出し看護婦と手術作業者の作業分析;手術作業者の受取り方は、手のひらを上にして各指を自然に伸ばした状態で親指を手のひらの側面につける場合と手のひらを同様の状態で手のひらに対して親指を立てる場合に分類できた。前者の場合、看護婦は術者の人差し指第2関節付近から小指の第3関節を結ぶ直線上に器具の中心線を合わせて器具の重心が手のひら上に位置するように渡していた。後者の場合、親指と人差し指の間を通しながら手のひらに渡していた。(2)ロボットハンドの開発;生体の柔軟性を計測した結果、指先の弾性係数が152kpaであったので、ロボットハンドの爪先寸法を親指先の寸法(幅18mm、長さ20mm)にして、指先の弾性係数に近い172kpaのシリコンを用いて作成した。(3)手術器具認識システムの開発;手術器具の画像処理により、重心と輪郭線を抽出して重心から輪郭線までの距離(重心距離)を計測した。輪郭線長さと重心距離の関係により器具の形状を定量化し、データベースと比較して器具の種類を判定した。このシステムにより、多種多様な手術器具を自動的に判別して重心座標と先端座標から器具の把持点を決定し、(2)で開発したハンドで指定された器具を把持することができた。(4)手術器具手渡しシステムの開発;術者の差し出す手の画像処理により、手の形状、指先の座標、手のひらの回転角度を抽出して、(1)で明らかになった受取る際の手の形状による渡し方を選択し、ロボットの動作経路を決定した。
光合成酸素発生メカニズムの計測化学的解明

本研究は、光合成機能のうちでブラックボックスにとどまる水分解(酸素発生)の分子機構の解明を目的に、重要機能分子である一次電子受容体フェオフィチンaとプラストキノンQAの酸化還元電位を分光電気化学的精密計測により実測した。部分変異導入体および主要金属イオンを交換した光化学系II標品における結果を基に電位相関を解明することで、酸化力の源とされるP680の酸化還元電位を推定し、酸素発生速度との関連性を明らかにした。本研究では、光合成機能のうちでブラックボックスにとどまる水分解(酸素発生)の分子メカニズムにつき、重要機能分子である一次電子受容体フェオフィチン(Ph)とプラストキノンQAの酸化還元電位を分光電気化学的計測により実測し、電位相関を解明することで、酸化力の源とされるP680の酸化還元電位の実態に迫り、水分解系の物理化学的特性を明らかにすることを目的としている。本年度は、強光下で発現する特異的な光化学系II(PSII)をターゲットに研究を展開した。シアノバクテリアの一種T.elongatusのゲノムにはPSII反応中心タンパクD1(PsbA1)をコードする遺伝子が3つあり、これらの発現様式は培養条件によることが知られている。通常ではpsbA1が、強光下ではpsbA3が発現する。PsbA1もしくはPsbA3で構成されるPSIIの性質を調べると、PsbA3-PSIIの方が酸素発生活性が1.7倍ほど高く、また生育速度などが違うことが見出されている。これらの違いは、PsbAを構成する344アミノ酸残基のうちの21個の違いによるとされ、特に活性の差は、Phに近接する残基(D1-130)の違いがもたらすPhの電位差によることを既に申請者は電位計測から明らかにしている。すなわち、PsbA3-PSIIのPhの電位が17mVほど高く、P680の電位が不変ならば、電子供与体・受容体間の自由エネルギー変化がその分大きくなっているといえ、それが活性を高めている要因だとした。しかし、自由エネルギー差を熱発光分析により検討すると、単純にPhの電位変動だけでは説明できないことが分かった。そこでQAの電位計測を行うと想定とは異なり、30mVほどの差異があることを見出した。以上の結果から、Ph・QA間の電子伝達特性と酸素発生活性の相関およびP680の電位との関連性が明らかになった(論文取りまとめ中)。本研究では、光合成機能のうちでブラックボックスにとどまる水分解(酸素発生)の分子メカニズムにつき、重要機能分子である一次電子受容体フェオフィチン(Ph)とプラストキノンQAの酸化還元電位を実測し、電位相関を解明することで、酸化力の源とされるP680の酸化還元電位の実態に迫り、水分解系の物理化学的特性を明らかにすることを目的としている。本年度は、Thermosynechococcus elongatusのゲノムには系II反応中心タンパクPsbAをコードする遺伝子が3つあり、これらの発現様式は培養条件によることに着目し、研究を展開した。T.elongatusは通常ではpsbA1が、光ストレスを受けるとpsbA3が発現し、後者のほうが酸素発生活性が1.8倍ほど高いことが報告されている(杉浦ら、2010)。この活性の違いは、PsbAを構成する344アミノ酸残基のうちの21個の違いによるとされるが、それが各種機能分子にどのように影響するかは明らかにされていなかった。そこで、分光電気化学計測を一次電子受容体フェオフィチン(Ph)と二次電子受容体プラストキノンQAに適用したところ、それぞれ17mV、40mVほどPsbA3において高電位側にあることを見出し、Ph・QA間およびPh・P680間の自由エネルギー変化が大きくなっていることが明らかになり、P680の電位が変動していることが示唆される(論文投稿中)。さらに、熱発光分析により検討すると、QAから電子を受容する第二キノンQBの電位も異なり、酸素発生活性および電荷分離の量子収率に大きく影響していることが示された。現在解析を進め、論文の取りまとめを行っている。光化学系IIにおける水分解→酸素発生を担う酸素発生複合体は、4個のMnイオンと1個のCa2+からなるMnCaクラスターが触媒中心となり、表在性タンパク質やClーなどにより構成される。Ca2+あるいはClーを取り除くと酸素発生活性が失われるが、Ca2+の結合サイトにはSr2+が、Cl-結合サイトにはBrーがそれぞれ取りこまることが知られており、活性の度合いは低下するもののMnCaクラスターのS状態サイクルは機能する。イオン置換による酸素発生活性の低下は、熱発光など熱化学的な分析からS3状態の電子エネルギー準位の低下によるものと説明できるが(Ishidaら、2008)、さらにCa2+/Sr2+置換体では時間分解蛍光測定によりキノン間の電子移動(QA→QB)が遅くなっていること示唆されている(Kargulら、2007)。そこで、本年度では、好熱性シアノバクテリアThermosynechococcus

elongatusから、Ca2+/Sr2+あるいはClー/Brー置換された光化学系II標品を精製し、分光電気化学法によりQAの酸化還元電位を調べることにより、イオン置換が酸素発生活性および電子伝達特性に及ぼす影響を調べることとした。結果、Ca2+/Sr2+置換により+27 mVほどQAの酸化還元電位がシフトするのに対し、Clー/Brー置換ではほとんど変わらないことが分かった。本結果と既報の熱発光の結果から、S2/S3の電位変化は57 mV程度でしかないことが推察され、酸素発生活性は、Mnクラスターそのものの酸化還元電位ではなく、電子伝達に関与する機能分子の電位に大きく影響を受けることが分かった。実験自体は順調に進展してきたものの、一部の補完的データの取得を共同研究で行うことになり、取りまとめなどに時間を要することになり、論文投稿などが遅れているため24年度が最終年度であるため、記入しない。これまで申請者が開発してきた分光電気化学的手法により機能分子の酸化還元電位を実測し、研究を展開してきたが、電位の変動および自由エネルギー変化の解釈についてフランス・CNRS生物科学研究所およびパリ大学と連携して進めることにより、より詳細な解析を行い、酸素発生の源であるP680の電位推測をより確かなものにしていく。24年度が最終年度であるため、記入しない。
2系統の白内障を伴う小眼球症ラットにおける疾患原因遺伝子の染色体マッピング

白内障、小眼球症自然発症ラットであるSC系およびTEC系の疾患原因遺伝子を解明することを目的として、以下の解析を行った。まず、SC系およびTEC系の疾患原因遺伝子が同一遺伝子座に由来するか否かを検討するため、SC系とTEC系の間の交配実験を行った。その結果、SC系とTEC系の間のF_1にて小眼球症個体が出現し、小眼球症個体、白内障個体、正常個体の出現頻度が、ホモで小眼球症、ヘテロで白内障が出現すると仮定したときの理論値と有意に異ならないことから、SC系の原因遺伝子とTEC系の原因遺伝子は、同一遺伝子座の対立遺伝子であることが強く示唆された。次に、SC系およびTEC系の疾患原因遺伝子の染色体上の位置を明らかとするために、SC系とIS系およびTEC系とNIGIII系の交配により戻し交配個体を得、各個体の表現型を判別した上で、組織よりDNAを抽出した。連鎖解析のためのマーカー遺伝子として、単純反復配列よりなるマイクロサテライトマーカー遺伝子を用いた。これまでの研究により、これらのマイクロサテライトマーカー遺伝子よりなるラット染色体の連鎖地図がすでに作成されている。各戻し交配個体に由来するDNAについて、PCR法により各マイクロサテライトマーカー遺伝子のタイピングを行った。これまでのところ、ラットの第1および第3染色体上のいくつかのマーカー遺伝子についてタイピングを行ったが、いずれもSC系およびTEC系の疾患原因遺伝子との有為な連鎖は認められなかった。今後さらに多くのマイクロサテライトマーカー遺伝子についてタイピングを行い、疾患原因遺伝子の染色体上の位置を明らかにする予定である。
「協働型発達支援システム」に関する制度提案のための調査研究

1.研究目的本研究では障害児・者(疑いも含む)やその家族が乳幼児期から成人期までの一貫した支援を実現する「協働型発達支援システム」を確立するために、各自治体が持つ課題を整理し、社会資源や人的資源を有効に機能させるための政策的な提言を行うことを目的に、質問紙調査ならびにヒアリング調査を実施した。2.研究方法関西の194市町村の母子保健分野ならびに教育委員会を対象に質問紙調査を実施した。質問内容は、相談支援体制、連携協議会やサポートファイル、保護者支援等についての現状と課題、課題への対策についてであった。ヒアリング調査は発達支援で先進的な取り組みを行っている2市町村(仙台市・泉南市)を対象とした。3.調査結果調査票の回収率は母子保健分野34.5% (67/194)、教育委員会18.6% (36/194)であった。就学前から一貫した窓口を設置している市町村が16市町村(内滋賀県が9市町村)であった。連携協議会を設置している市町村は母子保健分野では88.0% (59/67)、教育委員会8.3% (3/36)であった。サポートファイルを運用している市町村は母子保健分野では61.2% (41/67)、教育委員会11.1% (4/36)であった。自由記述では、中学校卒業後に発達障害、不登校などの相談の受け皿が十分でないため、自立支援協議会の活用や相談対象年齢の引き上げなどを検討していた。この他、虐待や養育問題等の家族支援などが課題としてあげられた。4.研究成果中学校までの支援体制は一定整備されてきているが、中学校卒業後の支援体制を確立していくことが課題となっている。対策としては滋賀県を中心に進められている乳幼児期から成人期までを対象とした課の創設、現在ある相談支援の対象年齢の見直し、専門職の常勤化を進めることが必要である。また養育問題を抱える家庭へ対応するため、各機関の連携強化や保護者支援の拡充(レスパイトや子育て技術を学ぶ機会の提供等)を行うことが重要である。
タイト結合膜蛋白クローディンの組織多様性とZO-1との結合意義の解析

タイト結合(TJ)の膜蛋白であるclaudin (CL)は20種類以上から成るファミリーを形成している。各組織の上皮・内皮は、固有のTJの形態およびバリア機能を持っており、CLの発現パターンの解析はTJの多様性を説明するうえで重要である。脳血管内皮のバリア機能は胎生期には未熟であり、TJのstandを形成する膜内粒子はE面付着型である。しかし、成獣では膜内粒子はP面付着型となり同時にバリア機能も成熟する。そこで、成獣と胎仔の脳でのCLの発現パターンをRT-PCRで解析した。大動脈では、CL-1,5,10,12,15が発現しており、血管内皮細胞はこれらのCLを発現していると考えられる。しかし、成獣の脳では、CL-1,5,10,12は発現していたが、CL-15は発現していなかった。一方、胎生18日では、CL-10の発現が弱かった。これらの結果から、脳血管内皮は、CL-15が発現していないこととCL-10の発現が成長に伴って増加するという点で、他の血管内皮とは異なると推察される。また、CL-10および15にタグを付与してMDCK細胞にて発現すると、CL-10はE面付着型、CL-15はP面付着型のタイト結合を形成することがわかった。一般に、P面付着型のタイト結合のバリア機能は高く、逆にE面付着型のタイト結合のバリア機能は低いと言われている。今回のRT-PCRの結果は、血液脳関門と矛盾しているように思われる。しかし、タイト結合のバリア機能は、発現しているCLの組み合わせとそれらの比率によるとも言われており、今後はこの点についてさらに検討していきたい。また、CL-1のC末端はZO-1と結合し、さらに、ZO-1はアクチンフィラメントと結合している。ZO-1結合ドメインに変異を持つCL-1をMDCK細胞に導入すると、CL-1とZO-1の結合が阻害されて、細胞側面膜に異所性のタイト結合ストランドが形成された。このことから、CL-1とZO-1の結合は、タイト結合が本来の細胞膜頂端部に形成されるうえで重要であることが示唆された。タイト結合(TJ)の膜蛋白であるclaudin(CL)は現在までに少なくとも22種類から成るファミリーを形成している。各組織の上皮・内皮は,固有のTJの形態およびバリア機能を持っており,CLの発現パターンの解析はTJの多様性を説明するうえで重要である。脳血管内皮のバリア機能は胎生期には未熟であり,TJのstrandを形成する膜内粒子はE面付着型である。しかし成獣では膜内粒子はP面付着型となり同時にバリア機能も成熟する。そこで,胎仔と成獣の脳でのCLの発現パターンをRT-PCRで比較た。その結果、マウス成獣では、CL-1,2,3,4,5,6,8,9,10,11,12が発現し、CL-15,18,19は発現していなかった。また、大動脈では、CL-1,5,10,12,15が発現していた。

これらの結果から、血管内皮には、少なくともCL-1,5,10,12,15が発現しており、脳血管においては、CL-15が発現していないこととCL-10の発現が成長に伴って増加するということがわかった。また、CL-10,15にEGFPを付与してMDCK細胞にて発現すると、CL-10はE面付着型、CL-15はP面付着型のタイト結合を形成することがわかった。一般に、P面付着型のタイト結合のバリア機能は高く、逆にE面付着型のタイト結合のバリア機能は低いと言われている。今回のRT-PCRの結果は、これと矛盾している。しかし、タイト結合のバリア機能は、発現しているCLの組み合わせによるとも言われており、in situ hybridizationなどで脳血管内皮に発現しているCLを、今後、解析していく予定である。タイト結合(TJ)の膜蛋白であるclaudin(CL)は20種類以上から成るファミリーを形成している。各組織の上皮・内皮は、固有のTJの形態およびバリア機能を持っており、CLの発現パターンの解析はTJの多様性を説明するうえで重要である。脳血管内皮のバリア機能は胎生期には未熟であり、TJのstrandを形成する膜内粒子はE面付着型である。しかし、成獣では膜内粒子はP面付着型となり同時にバリア機能も成熟する。そこで、成獣と胎仔の脳でのCLの発現パターンをRT-PCRで解析した。大動脈では、CL-1,5,10,12,15が発現しており、血管内皮細胞はこれらのCLを発現していると考えられる。しかし、成獣の脳では、CL-1,5,10,12は発現していたが、CL-15は発現していなかった。一方、胎生18日では、CL-10の発現が弱かった。これらの結果から、脳血管内皮は、CL-15が発現していないこととCL-10の発現が成長に伴って増加するという点で、他の血管内皮とは異なると推察される。また、CL-10および15にタグを付与してMDCK細胞にて発現すると、CL-10はE面付着型、CL-15はP面付着型のタイト結合を形成することがわかった。今回のRT-PCRの結果は、血液脳関門と矛盾しているように思われる。しかし、タイト結合のバリア機能は、発現しているCLの組み合わせとそれらの比率によるとも言われており、今後はこの点についてさらに検討していきたい。また、CL-1のC末端はZO-1と結合し、さらに、ZO-1はアクチンフィラメントと結合している。ZO-1結合ドメインに変異を持つCL-1をMDCK細胞に導入すると、CL-1とZO-1の結合が阻害されて、細胞側面膜に異所性のタイト結合ストランドが形成された。このことから、CL-1とZO-1の結合は、タイト結合が本来の細胞膜頂端部に形成されるうえで重要であることが示唆された。
ゲノムスケール多数遺伝子配列データを用いた種の系統関係の推定

25種の硬骨脊椎動物の625遺伝子のデータセットを用いて、異なる時期のアミノ酸置換速度を推定した。calibration pointとして、(1)ray-finned fishとlobe-finned fishの分岐(420.7 - 444.9 Ma), (2) mammalとsauropsidの分岐( 318 - 332.9 Ma), (3) teleost fishとholosteanの分岐(250 - 331 Ma)を用いた。最尤法で推定した枝長の平均値をこれらのcalibration point間の時間で割ることによって推定した置換速度は、(1)と(2)の分岐間の置換速度が、(2)の分岐以降の置換速度の2-3倍高く、(3)の分岐以降の置換速度よりも高い傾向を示した。(1)-(2)間の高い置換速度を用いると、シーラカンスと肺魚の分岐はそれぞれ408-427 Maと399-414 Maとなり、化石データと非常によく一致する。また、(2)の分岐をcalibration pointとしたとき、有袋類と真獣類の置換速度の違いを考慮すると、有袋類と真獣類の分岐前は真獣類の置換速度に近いと考えるのが化石データと矛盾がなく、真獣類の属間の分岐は90 Maよりも最近であることが示唆された。また、sauroposidでは鳥類の分岐以前の置換速度はトカゲの置換速度と同じくらい高く、鳥類では置換速度の低下が起こっと考えるのが化石データと矛盾がなく、GalloanseraeとNeoavesの分岐は110 Maと従来の推定値よりも大きいものとなった。また、(3)の分岐以前のray-finned fishでも置換速度はteleost fishよりもむしろ高かった可能性があり、holosteanだけでなくteleost fishでも置換速度の低下が起こった可能性が示唆された。解析により、全てのデータセットにおいて、外群としてcartilaginous fishを用いると肺魚が四足動物に近縁である系統樹が支持され、ray-finned fishを用いるとシーラカンスが四足動物に近縁である系統樹が支持された。系統分類では、ray-finned fishがcartilaginous fishよりも四足動物、シーラカンス、肺魚に近縁であることが確立されているが、近年の研究では肺魚が四足動物に近いとする説が有力である。四足動物、シーラカンス、肺魚の系統関係を知るために、なぜ外群によって異なる系統関係が支持されるのかを調べた。最も大きく影響しているのは、ray-finned fishの配列データの分化の程度がcartilaginous fishよりも高いことであることがわかった。この結論を得るために系統関係推定法や数学的モデルを考慮したり、データから推定されたbranch lengthを用いたcomputer simulationを行ったり、様々な試みをしなければならなかったので、当初の計画よりも時間がかかった。これまでに3つの多数遺伝子データセットを用いてシーラカンス、肺魚、四足動物の系統関係の推定を行った。その際、ray-finned fishはcartilaginousfishよりもこれらの3つのグループにより近縁であり、outgroupとして用いるのにより適当であると一見思われた。cartilaginous fish及びray-finned fish, cartilaginous fishのみをoutgroupとして用いるとシーラカンスよりも肺魚が四足動物に近縁であることが強く支持されたが、ray-finned fishのみをoutgroupとして用いると、3つのグループの系統関係は曖昧になり、シーラカンスが四足動物により近縁であることが強く支持される場合も用いたデータセットや系統樹作成方法によってはあった。これはray-finned fishはcartilaginousfishよりも進化速度が速いため、rayfinned fishをoutgroupとして用いる事により、3つのグループの系統関係の推定に誤った結果がcartilaginous fishを用いるよりも出やすいことが考えられ、このことはcomputer simulationによっても支持された。今年度は進化速度の遅いrayfinned fishであるgar, bowfinをデータに加える事により、gar, bowfinをoutgroupとして用いると、cartilaginous fishをoutgroupとして用いた時と同じように肺魚と四足動物が姉妹関係にあることが強く支持されることを示した。軟骨魚類と硬骨魚であるray-finned fishをアウトグループとして用いたシーラカンス、肺魚、四足動物の系統関係の推定で、アウトグループが影響することが、これまでの研究でわかった。系統的には硬骨魚であるray-finned fishの方が軟骨魚類よりもシーラカンス、肺魚、四足動物(lobe-finned vertebrate)に近いが、進化速度が速いために、正しい系統関係の推定には適していないというものである。それを実際のデータで検証するために、進化速度が遅いray-finned fishであるgarやbowfinをアウトグループとして用いて、肺魚がシーラカンスよりも四足動物に近縁であることが高い統計的支持を得ることを確かめた。この結果を論文としてまとめ雑誌Genome Biology and Evolutionに発表した。この系統解析に用いたアミノ酸データを用いて、1lobe-finned vertebrateとのray-finned fishの分岐、2哺乳類とsaroupsid(鳥やトカゲ)との分岐、3garとbowfinとteleost fishの分岐の化石年代から長期的アミノ酸の進化速度の計算を行った。1と2の分岐間の進化速度が2以降の進化速度の約3倍くらい高いという結果になった。

1の分岐の化石年代の不確かさを考慮しても1と2の分岐間の進化速度が2以降よりも高いという結論には影響しないと思われる。また、3の分岐以降garやbowfinの進化速度はteleost fishよりもずっと遅くなっているが、1と3の間では3以降のteleost fishと同じかそれよりも高い進化速度であった可能性を示唆する結果を得た。これらの結果を論文にまとめ、投稿し、現在revise中である。分岐年代推定の論文にまとめるのに、論文とするための詰めに思ったよりも時間がかかっている。25種の硬骨脊椎動物の625遺伝子のデータセットを用いて、異なる時期のアミノ酸置換速度を推定した。calibration pointとして、(1)ray-finned fishとlobe-finned fishの分岐(420.7 - 444.9 Ma), (2) mammalとsauropsidの分岐( 318 - 332.9 Ma), (3) teleost fishとholosteanの分岐(250 - 331 Ma)を用いた。最尤法で推定した枝長の平均値をこれらのcalibration point間の時間で割ることによって推定した置換速度は、(1)と(2)の分岐間の置換速度が、(2)の分岐以降の置換速度の2-3倍高く、(3)の分岐以降の置換速度よりも高い傾向を示した。(1)-(2)間の高い置換速度を用いると、シーラカンスと肺魚の分岐はそれぞれ408-427 Maと399-414 Maとなり、化石データと非常によく一致する。また、(2)の分岐をcalibration pointとしたとき、有袋類と真獣類の置換速度の違いを考慮すると、有袋類と真獣類の分岐前は真獣類の置換速度に近いと考えるのが化石データと矛盾がなく、真獣類の属間の分岐は90 Maよりも最近であることが示唆された。また、sauroposidでは鳥類の分岐以前の置換速度はトカゲの置換速度と同じくらい高く、鳥類では置換速度の低下が起こっと考えるのが化石データと矛盾がなく、GalloanseraeとNeoavesの分岐は110 Maと従来の推定値よりも大きいものとなった。また、(3)の分岐以前のray-finned fishでも置換速度はteleost fishよりもむしろ高かった可能性があり、holosteanだけでなくteleost fishでも置換速度の低下が起こった可能性が示唆された。これまでの解析で用いたデータセット中のray-finned fishは全てteleostというグループに属している。teleostの共通の祖先ではwhole genome duplicationが起こった可能性が高く、このことによりteleostの進化速度が速くなっていると言われている。Ray-finned fishでもteleostではないgarなどのデータが最近発表されており、試行的研究において、これらgarなどのデータの進化速度はteleostよりも遅いことがわかっている。
幕藩領主の思想史的研究-近世前期を中心として-

これまで近世史研究において、幕藩領主の意識・思想を真正面から取り上げ、その歴史的特質や地域・時期による変質等々を明らかにするような研究は行われなかった。そこで本研究では、幕藩制支配の確立期である近世前期にしぼって、この時期の幕藩領主の意識・思想を歴史的に位置づけようとした。1.各地に史料調査に出かけたりして、幕藩領主の意識・思想を読みとり得る史料として、(1)幕藩領主自身の編著作類、(2)幕藩領主が遺したという由緒をもつ大名家訓類、(3)幕藩領主の言動を側近・近習らが書き記した言行録、(4)幕藩領主を後世「明君」として美化しその言動を書き記す明君言行録、を調査・収集してきた。また幕藩領主層のブレーンの著作類がある場合には、それも撮影してきた。2.幕藩領主の旧蔵書の調査、及び蔵書目録の調査も精力的に行ってきた。収書傾向を見ると、個々の幕藩領主の蔵書には一定の個性が認められるが、軍書(軍学書・軍記物)や政道書等の書物は、すべての幕藩領主が共通して持っており、注目される。3.多くの藩で『理尽鈔』あるいはその関連書を所蔵していることがわかった。現存しなくても、蔵書目録を見るとかつては所蔵しているケースも数多くあった。4.13の作業を通じて、個々の幕藩領主の政治意識、政治と「太平記読み」との関わりについて考察した。また上記の史料調査を通して、(1)特定の藩主を神格化しているところ、(2)特定の藩主を「明君」化しているところ、(3)藩主の神格化も明君化も行っていないところ、があることがわかった。藩の政治・体制(藩世界)の形成において藩主の神格化や明君化がどのような意味を持っているのか、についても検討した。1、幕藩領主の意識・思想の歴史的特質を明らかにするためには、幕藩領主の意識・思想を読み取ることができる史料を掘り起こすことから始めなければならない。その史料として、(1)幕藩領主自身の編著作類、(2)幕藩領主が遺したという由緒をもつ大名家訓類、(3)幕藩領主の言動を側近・近習らが書き記した言行録、(4)幕藩領主を後世「明君」として美化しその言動を書き記す明君言行録等を挙げることができる。また、幕藩領主の思想史的研究には、個々の幕藩領主がどのような書物を読んだのか、どのような蔵書を形成したのか調査する必要がある。そこで今年度は、岡山藩主池田家、津山藩主松平家、上田藩主松平家、盛岡藩主南部家、高知藩主山内家、宇和島藩主伊達家、松江藩主松平家、仙台藩主伊達家、熊本藩主細川家、鳥取藩主池田家等の旧蔵史料の閲覧を開始し、幕藩領主関連の書物や蔵書目録等の重要史料を撮影・入手することができた。2、本研究は、「太平記読み」を軸とした政治思想史の当否をも問うものでもあることから、「太平記読み」関連史料がそれぞれの藩に残っているかどうかの調査も行った。多くの藩で『理尽鈔』あるいはその関連書を所蔵していることがわかった。3、大名家の調査を通して、(1)特定の藩主を神格化しているところ、(2)特定の藩主を「明君」化しているところ、(3)藩主の神格化も明君化も行っていないところ、があることがわかった。藩の政治・体制(藩世界)の形成において藩主の神格化や明君化がどのような意味を持っているのか、検討する必要を痛感したので、次年度以降の課題としたい。

4、本研究の重要性について、これまでの成果を踏まえて、全国学会で報告した(「政治常識の形成と「太平記読み」」)。本研究の2年目にあたる本年は、まず、1,前年度に引き続き、幕藩領主の意識・思想の歴史的特質を明らかにするために、幕藩領主の意識・思想を読み取ることができる史料を掘り起こす作業を行った。(1)幕藩領主自身の編著作類、(2)幕藩領主が遺したという由緒をもつ大名家訓類、(3)幕藩領主の言動を側近・近習らが書き記した言行録、(4)幕藩領主を後世「明君」として美化しその言動を書き記す明君言行録等、(5)幕藩領主周辺の蔵書・蔵書目録等を収集した。あわせて旧大名家等に残される「太平記読み」関連史料の掘り起こし作業も積極的に行った。2,収集した史料の内、特に重要なものを、パソコンに入力しデータ化する作業を開始した。今年度入力したのは、『遺教録』、『柴田朝意遺書』『柴田朝意訓戒書』、『陽広公偉訓』、『東照宮御遺訓』『東照宮御遺訓附録』、『明君家訓』、『恩地左近太郎聞書』等である。3.「明君創造」論・「仁政イデオロギー」論・「民間社会」論等を打ち出したことで著名な深谷克己氏の仕事を検討し、「つながりあう歴史学-思想史研究から深谷克己を読む-」という研究報告を行うとともに、同名の論文を執筆した。4.「民衆思想と改革政治」と題する研究会(百名程度の参加者、第54回民衆思想研究会)を企画し、18世紀中後期の藩政改革を取り上げ、民衆思想との絡みで領主層の意識・思想から実際の政治施策までをも検討する機会を得た。5,国際シンポジウム:日韓歴史共同研究会(韓国のソウル大学校にて開催)で、「日本近世における儒教の位置-近世前期を中心にして-」という発表を行い、朝鮮の政治思想と比較しつつ日本の幕藩領主の政治思想の特質を指摘した。(1)各地に史料調査に出かけ、幕藩領主の意識・思想を読みとり得る史料として、幕藩領主自身の編著作類、幕藩領主が遺したという由緒をもつ大名家訓類、幕藩領主の言動を側近・近習らが書き記した言行録、幕藩領主を後世「明君」として美化しその言動を書き記す明君言行録、を調査・収集してきた。また幕藩領主層のブレーンの著作類がある場合には、それも撮影してきた。(2)幕藩領主の旧蔵書の調査、及び蔵書目録の調査も精力的に行ってきた。収書傾向を見ると、個々の蔵書には一定の個性が認められるが、軍書や政道書等の書物は共通して所蔵されており、注目される。史料調査を通じて、現在興味を持っている大名家を挙げれば、松浦、島津、鍋島、松平(島原)細川、稲葉、黒田、毛利、浅野、池田、木下、池田(岡山)、池田(鳥取)、松平(松江)、松平(津山)、伊達(宇和島)、山内、蜂須賀、松平(高松)、松平(松山)、京極(丸亀)、岡部、徳川(和歌山>、松平(福井)、前田(大聖寺)、前田(金沢)、前田(富山)、松平(上田)、真田、牧野(長岡)、上杉、伊達(仙台)、松平(会津)、南部(盛岡)、南部(八戸)、佐竹、津軽であり、それぞれで関連史料を収集してきている。(3)多くの藩で『理尽紗』あるいはその関連書を所蔵していることがわかった。現存しなくても、蔵書目録を見るとかつては所蔵しているケースも数多くあった。(4)上記の(1)(3)のデータをコンピュータに入力した。また収集した史料の内、特に重要なものを、パソコンに入力しデータ化する作業を開始した。(5)個々の幕藩領主の政治意識、政治と「太平記読み」との関わりについても分析するとともに、藩の政治・体制(藩世界)の形成において藩主の神格化や明君化がどのような意味を持っているのか、についても検討しつつある。(6)本研究の成果をも踏まえて、2002(平成14)年の歴史学研究会大会日本近世史部会で、「近世の政治常識と主体形成」という報告をした。