hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
顔表情の表出テンポとリズムに基づく心理的内部状態の推定

ストレス検知モデルの結果,「不機嫌・怒り度」に高い傾向が認められる被験者は,不快ビデオ視聴時に「視線をそらす行動」が多く発生し,かつ脳が賦活し易い本研究は,情動変化による顔表情と生体検査や心理検査の関係性を解明し,顔表情の時系列変化から人間の心理的内部状態を推定する技術を確立することである.以下に各年度の実績概要を示す.平成2627年度は,被験者20名(男女各10名)に対して,平常状態,快・不快刺激を与えた状態の表情画像データセットを取得すると共に,唾液アミラーゼ試験によりビデオ視聴時における情動喚起要因の有効性を検証した.また,情動喚起ビデオによる快・不快刺激後の「喜び」表情の表出過程に着目し,顔部位が刻む表出リズムを相互情報量の観点から定量的に解析した.平成28年度は,ストレスチェックの測定内容(抑うつ・不安,不機嫌・怒り,無気力の3因子)の得点,隠れマルコフモデルの状態数を最適化して得られる表情の表出テンポと表情のリズムの尤度を基に,ベイジアンネットワークを用いて男性モデル,女性モデル,及び全体モデルの3種類のストレス検知モデルを構築した.また,プロトタイプシステムの試作を通してアルゴリズムの洗練化を実施した.平成29年度は,顔領域(顔全体,顔上部,顔下部)が刻むリズムの相互情報量から表情変化の「自然さ」と「不自然さ」を識別し,かつサッケードによる「注視回数」と「視線をそらす回数」を融合することにより,メンタルヘルスの可視化に向けた可能性を探った.快刺激に対する笑顔の表出形態からメンタルヘルスパターンを,視線の反応形態から注視反応パターンを抽出し,これら2種類の身体反応パターンの同期融合により心理反応メカニズムの定式化を試みた結果,心理的内部状態の推定技術に関して高精度化の見通しを得た.さらに,心理的内部状態推定技術の具体的な応用展開として,運転時における注意散漫状態の検出に適用した結果,運転スタイルや運転負担感受性の違いにより,ドライバ固有な状態推定モデルの構築が可能であることを明らかにした.日常的に抱えている心理的ストレスの蓄積程度と表情表出の因果関係をグラフィカルに表現したストレスモデルを開発し,ストレスの影響が現れ易い顔表情として「喜び」と「悲しみ」表情で,かつ表情の種別によって目元や口元など現れ易い部位が異なることを明らかにした.更に,快・不快刺激後の「喜び」表情の表出過程と顔部位の協調度合いに着目することで,「作り笑い」や「自然な笑い」を識別できると共に,顔表情は心の健康状態を現す窓として実用性が高いことを示した.無表情から表情表出を経て無表情に戻る区間を「表出テンポ」,その繰り返しを「表出リズム」と定義することの妥当性の検証が予定通り達成できた.具体的には,快ビデオ視聴後に喜び表情を表出する「一致表出」と不快ビデオ視聴後に喜び表情を表出する「不一致表出」に焦点を当て相互情報量の観点から検討した結果,より自然に近いと感じる笑顔とぎこちなさを感じる不自然な笑顔を識別できる可能性を確認した.平成28年度は,以下の課題について研究を実施する.・心理的ストレス検知モデルの構築と実装評価ストレスチェックの測定内容(抑うつ・不安,不機嫌・怒り,無気力の3因子)の得点,隠れマルコフモデルの状態数を最適化して得られる表情の表出テンポと表情のリズムの尤度を基に,ベイジアンネットワークを用いて心理的ストレス検知モデルを構築する.また,ストレス検知モデルの妥当性を評価するために,検知モデルのアルゴリズムを組み込んだプロトタイプシステムを開発し,アルゴリズムの洗練化を実施する.平成29年度は,以下の課題について追加実験を実施する.
光により制御された電子正孔多体系の物性と機能

本研究により、レーザー光によって制御された高密度電子正孔系における巨視的量子現象が以下の通り理論的に明らかにされた(1)光章動現象における量子多体効果位相緩和のと時間依存性を考慮に入れた一般化された半導体光ブロッホ方程式を導出し、それを数値的に解くことにより、量子多体効果が位相緩和に打ち勝って多体系に特有な光章動現象が生ずることを明らかにした。すなわち、クローン相互作用による多体効果を考慮しない場合には位相緩和現象によって吸収が単調に飽和する場合でも、電子正孔ペア凝縮状態による物質の自発的コヒーレンスにより振動的な光章動現象が生ずることが示された。(2)光双安定性と近接効果励起子は疑似ボ-ズ粒子であるためボ-ズ凝縮相を形成し超流動が起こると期待される。しかし高密度になるに従い励起子を構成している電子と正孔のフェルミオン性が表に出た電子正孔BCS相が実現される。我々は、これらのポ-ズ凝縮相とBCS相の間では1次の相転移が生ずることを既に明らかにしているが、弱く接合した二つの半導体のトンネル効果を解析することにより、その差異がトンネル現象の近接効果として観測できることを最近見いだした(3)量子揺らぎの効果上で述べたように、励起子系がヘリウム系と異なる着目すべき点は、励起光を制御することによりボ-ズ凝縮相から性質の異なるBCS相へ変化させ得ることである。それを理論的に扱うには、従来のBCS的な平均場理論では不十分で、揺らぎの効果を取り入れた解析が必要となる。そこで、超伝導における一般化された乱雑位相近似による理論を光と結合した電子正孔多体系に適用することにより、位相の揺らぎが関与した特徴的な集団励起モードの存在を見いだした。現在、それが光応答や輸送現象にどのように反映されるか解析中である。なお、本研究は多くのメモリーを消費する長時間の数式処理コンピュータプログラムの実行が不可欠で、本補助金により初めて可能になった。
有機-希土類複合系における単分子磁性の光制御を指向した研究

単分子磁石とは一つの分子が磁石として振る舞う化合物であり,この20年間に分子磁性の分野では最も注目を集めている化合物群である.その合成に際し,大きな基底スピン多重度と容易軸型の磁気異方性の導入・制御が重要であるが,その実現のためには重希土類金属イオン,特にテルビウムやジスプロシウムの利用が有効である.2004年にTb-Cu二核錯体系として初めての単分子磁石が報告されて依頼,今日まで10例ほどの希土類系単分子磁石が報告されている.このような化合物群を対象とし,本課題研究では希土類金属イオンと周囲の金属イオンとの相互作用の解明,光による分子磁性の制御を目指した物質系の創成と、その詳細な物性・機能性の解明を目指し,研究を行った.光による分子磁性の制御を行うためには,希土類系の単分子磁石合成の設計指針の確立,つまり,確実に単分子磁石となりうる条件・ならない条件を明らかにする必要性がある.本研究では構造的にほとんど違いがないのにもかかわらず,単分子磁石として振る舞う錯体・振る舞わない錯体の1対について詳細な磁気挙動の測定を行い,このような違いが希土類金属イオン周りの配位構造の違いに起因する磁気異方性の違いに帰着できることを見出した.その結果,テルビウム(III)イオンは一般に容易軸型の磁気異方性を有すると考えられていたが,配位構造によっては困難軸型ともなりうること,また,容易軸型の異方性についても,結晶場構造の設計によりその特性を強化することが可能なことを見出した.以上の結果より,分子構造の設計に基づいて単分子磁石挙動を制御するための設計指針を示すことに成功した.単分子磁石とは一つの分子が磁石として振る舞う化合物であり,この20年間に分子磁性の分野では最も注目を集めている化合物群である.その合成に際し,大きな基底スピン多重度と容易軸型の磁気異方性の導入・制御が重要であるが,その実現のためには重希土類金属イオン,特にテルビウムやジスプロシウムの利用が有効である.2004年にTb-Cu二核錯体系として初めての単分子磁石が報告されて依頼,今日まで10例ほどの希土類系単分子磁石が報告されている.このような化合物群を対象とし,本課題研究では希土類金属イオンと周囲の金属イオンとの相互作用の解明,光による分子磁性の制御を目指した物質系の創成と、その詳細な物性・機能性の解明を目指し,研究を行った.光による分子磁性の制御を行うためには,希土類系の単分子磁石合成の設計指針の確立,つまり,確実に単分子磁石となりうる条件・ならない条件を明らかにする必要性がある.本研究では構造的にほとんど違いがないのにもかかわらず,単分子磁石として振る舞う錯体・振る舞わない錯体の1対について詳細な磁気挙動の測定を行い,このような違いが希土類金属イオン周りの配位構造の違いに起因する磁気異方性の違いに帰着できることを見出した.その結果,テルビウム(III)イオンは一般に容易軸型の磁気異方性を有すると考えられていたが,配位構造によっては困難軸型ともなりうること,また,容易軸型の異方性についても,結晶場構造の設計によりその特性を強化することが可能なことを見出した.以上の結果より,分子構造の設計に基づいて単分子磁石挙動を制御するための設計指針を示すことに成功した.
黄斑変性症発症機構におけるHtrA1の作用

我々を含め、多くの研究グループから日本人に多い滲出型黄斑変性症と強く関連することが報告されているHtrA1を高発現するトランスジェニックマウスの作製を試みた。その結果、9系統のトランスジェニックマウスが得られた。Real time-PCR法によるコピー数測定、ウェスタンブロッティングにより選別した3系統のトランスジェニックマウスについて眼底観察および、眼球の切片を作製しHE染色を行ったところ、眼底撮影によりドルーゼン様の沈着が観察され、HE染色による形態観察により網膜に変性部位が認められた。これらの研究成果から日本人に多い滲出型AMDと強く関連するHtrA1は、滲出型AMDの発症に関与していることが強く考えられ、HtrA1を高発現させたトランスジェニックマウスは滲出型AMDの発症機構の解明に有用なモデル動物として利用できることが示唆された。加齢黄班変性は米国では65歳以上で失明率が最も高い眼疾患であるが、日本でも急速な高齢化、生活の欧米化、診断装置の普及によって患者数は急増しており、その原因解明と予防・治療法の開発が急がれている。近年、加齢黄班変性の発症リスクを高める要因として、習慣要因として喫煙歴、遺伝的要因としてHtrAlのプロモーター領域の一塩基置換(SNP)が報告されている。本研究は、このリスク遺伝子HtrAlのトランスジェニックマウスを作製し、その眼底像、網膜形成の観察、HtrAlの基質となりうる因子の免疫組織染色および機能評価としてERGの測定をおこない、HtrAl過剰発現による網膜の変化を観察し、黄班変性症の発症機序におけるHtrAlの働きを解明することを目的としている。本年度は、まずマウス脳からTotalRNAを精製し、RT-PCT法によりマウスHtrAl遺伝子をクローニングした。さらにこの遺伝子にHAタグを有するベクタープラスミドにサブクローニングし、HtrAl遺伝子のC末にHAタグを付加した。このHA-HtrAl遺伝子を直鎖状にした後にマウス受精卵に注入にしトランスジェニックマウスの作成を試みた。その結果、9系統のHA-HtrAl遺伝子を持つトランスジェニックマウスを得ることが出来た。21年度は、これらのトランスジェニックマウスについて、眼底像、網膜形態の観察、HtrAlの基質となりうる因子の免疫組織染色および機能評価としてERGの測定をおこない、HtrAl過剰発現による網膜の変化を観察し、HtrAlの網膜における生理作用を解析する予定である。本研究により加齢黄班変性におけるHtrAlの作用を明らかにすると共に本トランスジェニックマウスが加齢黄斑変性モデル動物として利用されることが期待される。加齢黄斑変性は米国では65歳以上で失明率が最も高い眼疾患であるが、日本でも急速な高齢化、生活の欧米化、診断装置の普及によって患者数は急増しており、その原因解明と予防・治療法の開発が急がれている。近年、加齢黄斑変性の発症リスクを高める要因として、習慣要因として喫煙歴、遺伝的要因としてHtrA1のプロモーター領域の-塩基置換(SNP)が報告されている。本研究は、このリスク遺伝子HtrA1のトランスジェニックマウスを作成し、その眼底像、網膜形態の観察、HtrA1の基質となりうる因子の免疫組織染色および機能評価としてERGの測定をおこない、HtrA1過剰発現による網膜の変化を観察し、黄斑変性症の発症機序におけるHtrA1の働きを解明することを目的としている。本年度はまず、昨年度に作製したTgマウスの導入遺伝子のコピー数を測定および遺伝子発現をウェスタンブロッティングでおこない3系統のTgマウスを選別した。これらのTgマウスについて眼底観察および、眼球の切片を作製しHE染色を行ったところ、眼底撮影によりドルーゼン様の沈着が観察され、HE染色による形態観察により網膜に変性部位が認められた。
シグナル脂質代謝酵素DGKαの触媒機構及び分子内活性化制御機構の構造基盤の解明

脂質代謝酵素の一つであるDGKαは,"がん細胞を増殖させるが,逆にT細胞の活性を減弱する"という生理学的にユニークな働きをもつため,DGKαは,新規がん免疫創薬の標的として近年注目され,阻害剤のスクリーニングも進められてきた.しかし,細胞膜近傍の疎水的な環境で働くDGKの分子機構の詳細は,不明のままであり,合理的な阻害剤設計に必要なDGKの立体構造も未だ決定されていない.本研究では,DGKαの触媒機構,及び複数の制御ドメインによる分子内活性化制御機構を構造生物学・物理化学・生化学的手法により多角的かつ詳細に解析し,DGKαの構造基盤を明らかにする.脂質代謝酵素の一つであるDGKαは,"がん細胞を増殖させるが,逆にT細胞の活性を減弱する"という生理学的にユニークな働きをもつため,DGKαは,新規がん免疫創薬の標的として近年注目され,阻害剤のスクリーニングも進められてきた.しかし,細胞膜近傍の疎水的な環境で働くDGKの分子機構の詳細は,不明のままであり,合理的な阻害剤設計に必要なDGKの立体構造も未だ決定されていない.本研究では,DGKαの触媒機構,及び複数の制御ドメインによる分子内活性化制御機構を構造生物学・物理化学・生化学的手法により多角的かつ詳細に解析し,DGKαの構造基盤を明らかにする.
食物アレルギー免疫治療による心理的負担測定及びストレスと治療効果の関連

本研究では,食物アレルギーの治療法として注目を集めている経口免疫療法が患児やその保護者に与える心理的負担感(不安感や精神的ストレスなど)を測定するための質問票を作成することと,慢性的なストレスが経口免疫療法の治療効果に影響するのかをアレルギーモデルマウスを用いて明らかにする。本研究は,満足度が高く・効果的な食物アレルギー治療法の確立の一助となることを目指す。
蛋白質の電子伝達複合体形成の阻害剤開発とプラスチド酸化還元反応の制御

光合成ではたらく電子キャリアー蛋白質であるフェレドキシン(Fd)は、電子授受の相手側酵素と特異的な蛋白質間相互作用ができる特性を備えている。この相互作用の主要なものは、蛋白質の塩基性アミノ酸と酸性アミノ酸の塩橋形成による静電的結合力であり、これらの側鎖荷電と同様なあるいは逆の荷電の三次元分布をもっポリペプチドはFdとFNRの蛋白質間相互作用力を弱め、分子間電子伝達反応を特異的に阻害することが期待される。本年度は、植物葉で機能する光合成型のFd:FNR複合体と根で機能する非光合成型のFd:FNR複合体の立体構造情報を基に、分子間相互領域を系統的に評価する研究を計画した。平成15年9月に別に申請していた学術創成研究費の採択が決定し、本研究は途上で廃止することとなったが、学術創成研究費との研究の継続性はあり、以下の知見を得た。1)Fd:NADP+還元酵素(FNR)との電子伝達反応において、電位が約200mVした変異体(葉型FdではS45G変異体及び根型FdではS46G変異体)はそれ自身は電子伝達不活性であり、葉型、根型の電子伝達複合体何れにおいても構造特異的な阻害分子として機能する。この阻害分子のX線結晶構造解析を行った。2)Fd:FNR複合体の立体構造をラン藻、高等植物の葉、根の3種について、分子進化の観点から考察し、それぞれの特異的分子認識にかかわるアミノ酸残基を明らかにし、それらが分子進化上高度に保存されていることを明らかにした。3)Fdの葉緑体内濃度は数十μMから100μMであり、この生理的な濃度下でのFdと酵素の蛋白質・蛋白質の相互作用や電子伝達反応を詳細に解析することが必要であり、FNRや亜硫酸還元酵素を対象に蛋白質工学的手法で明らかにした。この相互作用の主要なものは、蛋白質の塩基性アミノ酸と酸性アミノ酸の塩橋形成による静電的結合力であり、これらの側鎖荷電と同様なあるいは逆の荷電の三次元分布をもつペプチドや低分子化合物はFdとFNRの蛋白質間相互作用力を弱め、分子間電子伝達反応を特異的に阻害することが期待される。本年度は、複合体の立体構造情報を基に分子間相互領域と類似の構造を持つ一群のペプチド・蛋白質の阻害効果の評価を系統的に行い、以下の知見を得た。1)亜硫酸還元酵素やFd:NADP+還元酵素(FNR)との電子伝達反応において、電位が約200mVした変異体Fdはそれ自身は電子伝達不活性であるが、野生型Fdに対して競争阻害的に働き、そのKiは野生型FdのKmと同程度であことから、構造特異的な阻害分子として機能することが判明した。2)ポリリジン及びポリグルタミン酸を用いて、FdとFNRとの電子伝達反応の阻害を調べた結果、ポリリジンが強い阻害効果を持つことが判明した。3)重合度の異なるポリリジン(4mer、8mer、16mer、32mer)を化学合成し、上記の阻害効果を定量的に解析したところ、32merのものが数10μg/mlの濃度で50と阻害を示すことが判明した。一方、16merや8merはmgオーダーの濃度が必要であった。また、リジンとアラニンの32mer重合体(KA)_<16>では阻害能はリジン単独のものより低く、アミノ酸側鎖の陽電荷の分布の重要性が示唆された。今後、上記の実験結果情報に基づき、非解離性残基と解離性残基の組み合わせ配列を系統的に検討し、阻害に必要な構造要因を明らかにする。

3)Fdの葉緑体内濃度は数十μMから100μMであり、この生理的な濃度下でのFdと酵素の蛋白質・蛋白質の相互作用や電子伝達反応を詳細に解析することが必要であり、FNRや亜硫酸還元酵素を対象に蛋白質工学的手法で明らかにした。
大江健三郎の著作活動における日本思想史的意義－「戦後民主主義」論の観点から－

2015年度は、これまでに続き大江健三郎の文学についての研究を行なった。研究内容は主に二つに分けられる。第一に、大江健三郎の『沖縄ノート』についての研究が挙げられる。その成果は、論文「大江健三郎『沖縄ノート』における歴史意識の交差ー新川明の「沈黙」に吸引される言葉ー」として学会誌『日本近代文学』(2015/11)に発表した。この論文は、大江健三郎の『沖縄ノート』(1970)について、そこに語られる沖縄の詩人・新聞記者である新川明の思想との関わりから論じたものである。新川明は、いわゆる沖縄の「反復帰論」の代表的論客として語られることが多い。しかし『沖縄ノート』では、「反復帰論」の論者としてよりも、むしろそれ以前の著作である「新南島風土記」(196465)の書き手としてこそ、新川にスポットが当てられていた。大江は、新川が抱く、数百年単位での「南島」の人々の生きざまに向けられた歴史意識と、自らの歴史意識を交差させることで言葉を紡いでいったのである。この論文では、改めて「反復帰論」が議論される現在において、「新南島風土記」がいかに『沖縄ノート』において語られているかを探ることで、『沖縄ノート』と「反復帰論」との位置関係を明らかにすることを試みた。なお、この論文は、今後執筆予定の博士論文の一部となるものであり、その点で順調な研究の進展があったといえる。第二に、2016年6月に日本社会文学会で行なう予定の、口頭発表の準備に関わる研究が挙げられる。この発表は、大江健三郎の小説「飼育」について、執筆当時の1950年代後半の批評言説との関わりで論じようとするものであり、DC採用期間中の研究課題に沿う内容になっている。この研究についても、口頭発表を経て、投稿論文の形で公表することを目指している。27年度が最終年度であるため、記入しない。本年度は、大江健三郎の小説『セヴンティーン』及びその第二部『政治少年死す』を中心的な研究対象とした。2013年7月には日本文学協会の研究発表会において当該作品に関する口頭発表を行い、さらに、その発表をもとにした論文を作成し、同協会に投稿した。この研究における最大の成果は、当該小説が従来の研究において「モデル小説」として解釈されてきたことが、一種の神話であったことを、言語化して説明したことである。それは、単なる大江健三郎研究史に関わる成果としてあるわけではなく、「右翼テロ」という広く戦後日本史に関わる題材を扱っているという性質を小説が持っている点において、戦後文化史的、また戦後思想史的な問題にまで届く射程を持っていると考えている。具体的な考察の内容としては、1960年当時の大江健三郎にとって「民主主義」が決して単一の意味を持つものではなかったことを、文献を丹念にたどることで跡づけたことが挙げられる。そして、「戦後」を生きることと「右翼」的なものとのつながり、すなわち「戦後」において「天皇」が存在する社会に生きるということをどう捉えるのかという問題を考えるなかで、左右対立的な構図を踏み破る一瞬の跳躍=投企として、「右翼テロリスト」の「自殺」という結末を持つ小説が書かれたという結論を持った。以上の研究実績により、戦後日本の文化的状況に少なからぬ影響を与えてきた大江健三郎という作家を総体的に捉え、その思想史的意義を明らかにするという研究の目的については、一年目の課題として一定の成果が出せたと考えている。また、今年度において、「戦後文学史」や「思想史」に関わる大学院生による自主的な研究会に複数参加したことも、研究の進展に大きく寄与した。平成26年度の具体的な研究活動としては、7月に、所属する専攻の研究会で開催されたワークショップに参加し、口頭発表を行なった(言語態ワークショップ『〈戦後〉特集ー主体と責任ー』、2014年7月14日、東京大学・駒場)。また、それをもとに執筆した論文を2015年3月に発表した(「「戦争体験論」の意味ー『われらの時代』を「批判」するということー」、『言語態』2015年3月)。この論文では、1950年代後半の日本で、「戦争体験」を語ることがいかに重要な思想的課題としてあったかについて論じた。そのために、思想家の橋川文三が大江健三郎の小説『われらの時代』をいかに「批判」したかという問題を取り上げた。本論文は、橋川と大江の言説を比較することで、敗戦後の日本における思想状況の一端を明らかにすることを試みたものである。当時橋川は、「あの戦争」を現在にまで「継続」するものとして認識することの必要性を訴えており、その主張に基づいて『われらの時代』を批判していた。しかし本論文では、『われらの時代』を「批判」するということ自体を、橋川における「戦争体験論」を構築するための行為として捉え直した。さらに、平成25年度に学会誌に投稿していた論文の採用が決定し、当該雑誌の2014年9月号に掲載された(「大江健三郎の「自殺」する肉体ー「セヴンティーン」「政治少年死す」という投企ー」、『日本文学』2014年9月)。この論文では、大江健三郎の小説『セヴンティーン』について分析した。

小説発表と同時期の大江健三郎の言説、および同時代の社会状況との関連から、これまでも重要視されてきた『セヴンティーン』について再考を施した。1960年に発生した右翼テロリズムが、小説内容にどのように影響を与えているかについて分析したものである。2014年度は以上の計2本の論文を発表している。2015年度は、これまでに続き大江健三郎の文学についての研究を行なった。研究内容は主に二つに分けられる。第一に、大江健三郎の『沖縄ノート』についての研究が挙げられる。その成果は、論文「大江健三郎『沖縄ノート』における歴史意識の交差ー新川明の「沈黙」に吸引される言葉ー」として学会誌『日本近代文学』(2015/11)に発表した。この論文は、大江健三郎の『沖縄ノート』(1970)について、そこに語られる沖縄の詩人・新聞記者である新川明の思想との関わりから論じたものである。新川明は、いわゆる沖縄の「反復帰論」の代表的論客として語られることが多い。しかし『沖縄ノート』では、「反復帰論」の論者としてよりも、むしろそれ以前の著作である「新南島風土記」(196465)の書き手としてこそ、新川にスポットが当てられていた。大江は、新川が抱く、数百年単位での「南島」の人々の生きざまに向けられた歴史意識と、自らの歴史意識を交差させることで言葉を紡いでいったのである。この論文では、改めて「反復帰論」が議論される現在において、「新南島風土記」がいかに『沖縄ノート』において語られているかを探ることで、『沖縄ノート』と「反復帰論」との位置関係を明らかにすることを試みた。なお、この論文は、今後執筆予定の博士論文の一部となるものであり、その点で順調な研究の進展があったといえる。第二に、2016年6月に日本社会文学会で行なう予定の、口頭発表の準備に関わる研究が挙げられる。この発表は、大江健三郎の小説「飼育」について、執筆当時の1950年代後半の批評言説との関わりで論じようとするものであり、DC採用期間中の研究課題に沿う内容になっている。この研究についても、口頭発表を経て、投稿論文の形で公表することを目指している。研究計画に沿って複数の論文を執筆し、発表した。また、博士論文の執筆に向けた所属専攻内での第1次審査に合格した。それらの過程において、研究課題に対する理解度や今後の研究に対する目算は当初の計画以上に進展している。27年度が最終年度であるため、記入しない。研究課題に関わって組織・参加している研究会を今後も継続し、他の研究者との交流を深めながら視野を拡大し、研究をさらに推進する。また、平成26年度の研究成果によって、博士論文の執筆計画がより具体的なものになってきているので、博士論文としてまとめることを視野に入れながら、研究対象の選定をより具体的に絞っていき、論文の執筆を進める。研究計画に基づいた学会発表を口頭で行ない、さらにその発表をもとに作成した論文を同学会に投稿した。また、自主的な研究会を複数組織することにより、研究を推進するうえで他の研究者と多くの交流を持った。今年度に組織した研究会を今後も続けていき、研究を推進するうえでの視野の拡大を図る。それによって、研究対象である「大江健三郎」の外部に目を向けることの重要性をより鋭利に自覚し、通史的な大江健三郎研究というより、他の思想史的・文化史的事象との相互関連性に目を向けた研究を実現することを目指す。
複雑ネットワーク解析とシミュレーションによるサプライネットワークの頑健性の検証

自動車産業に着目し、自動車部品を製造するサプライヤ間やサプライヤと自動車製造会社間の部品供給・調達関係サプライネットワークについて、大規模な実データを収集し、構造解析をおこなった。本研究により、部品毎に特有の技術的特徴や市場の状況、企業間の資本関係などがネットワーク構造や時間変化に反映されている事が定量的に示された。また、ネットワークの構造とその頑健性との関係性、およびサプライヤ個々の生存戦略と全体の頑健性の関係性などについても有用な示唆を得た。サプライネットワークの時系列を捉えた定量研究は過去に殆ど例がなく、本研究の成果は今後の当該分野の発展に貢献するものである。本研究は、日本の基幹産業である自動車製造業におけるサプライネットワークを、自然災害や経済不況など様々なリスクに対してより頑健なものにするため、現実の複雑なネットワークの構造的変遷の解析やリスク検証を行うものである。本年度は、部品カテゴリを限定し、各部品のサプライネットワーク構造の経年変化を捉えるデータの収集および、その特徴解析を行った。数千にものぼる部品からカテゴリを絞ることで、個々の部品の特徴(技術の成熟度、価格、製造量など)やサプライヤの個別の事情が、如何に供給構造に影響しているかをより詳細に分析することが出来、今後より多くの部品について分析する優位性を確認する礎となった。分析では、生態学において、生態系の頑健性と、その系に属する種の生存性とのジレンマ的関係を定量化したネステッドネスという指標を導入した。これにより、全体としての市場全体の頑健性と、サプライヤ個々の生存戦略との関係性を議論することが出来た。分析結果から、市場が成熟するにつれ、市場全体が頑健性を増す方向に構造変化を遂げている様子が分かった。一方で、資本関係のある系列サプライヤに任せてしまう製造体制が出来ている部品では、市場の頑健性が理論的には低いにも関わらず、他社が参入できない均衡状態となっている様子も分かった。また、これらの市場にサプライヤが参入するには、どのような生存戦略を取るべきかについても、シミュレーションによって示唆を得た。これらの結果から、データ量を増やすことでより有意な示唆を齎し得ることが示され、次年度の研究の方向性が確たるものとなった。なお、本年度の研究成果は、データ追加をしつつ次年度中に発表する予定である。本研究は、自動車製造業に着目し、自動車部品製造サプライヤ間・サプライヤと自動車製造会社間の部品供給/調達関係(サプライネットワーク)の構造を解析し、その頑健性について検証するものである。前年度はエンジン部品に対象を絞り、その供給構造の経年変化を捉える実データを収集、解析した。これにより、部品毎の技術的特徴やサプライヤ個別の資本関係等の事情が、ネットワーク構造に反映されているという示唆を得た。これを踏まえ本年度は、様々なカテゴリに渡る部品200品目について、2000年代を通しての供給構造の経年変化を捉える実データの収集・それに基づくデータベース構築をおこなった。サプライネットワークの時系列変化を捉えた研究は過去に殆ど例がなく、本研究で構築したデータベースは今後の他の研究にも有用である。収集したデータの解析により、ネットワーク全体の頑健性と、サプライヤ個々の戦略との関連性、およびそれらと外部要因(技術変化、資本関係など)との関連性についても示唆を得る事が出来た。この結果をまとめた論文は、生産工学系で評価の高い論文誌に投稿し、既に採択が決定している。また、これを踏まえて、サプライヤや自動車製造会社の消失がどのような影響を及ぼすのかについて検証すべく、頑健性のシミュレーションもおこなった。シミュレーションの結果、サプライネットワークの構造は非常に非均質であり、特定の自動車製造会社に依存するサプライヤとそうでないもの等が見られた。特に、製造部品以上に地域のファクターが大きくネットワーク構成に影響しており、例えば中国系のサプライヤは密なクラスタを構成している事等が分かった。これらの知見は現在、更なる実験によって検証中であり、成果を纏めた論文は、今後海外の論文誌に投稿する予定である。研究の成果は十分に出ているため、研究自体は順調に進展していると言える。ただし、成果の内容が、より研究を進めることでより大きな成果となることを伺わせるものであるため、研究発表(学会発表や論文投稿)が後回しになり、計画より遅れている状況である。25年度が最終年度であるため、記入しない。本年度の成果から、全体としては正しい方向に研究を推進できていることが確認できたと考えている。今後は、さらなるデータの収集と分析を進める。また、当初の予定通り、次年度に予定しているシミュレーションなどにも着手する予定である。また、研究成果の説得性を増すために、データ収集と分析に注力したため、今年度の研究成果をまとめた報告がまだ出来ていない状況である。今後の成果と統合し、学会発表や学術論文投稿をおこなう予定である。
発育期腰椎終板障害の病態〜生体力学的・分子生物学的アプローチ〜

本研究は、1.分離症がすべり進展する時期を臨床面から検討し、その病態を生体力学的見地から解明した。2.発育期に分離症が生じた際の生体力学的変化を調査し、合併する椎体変形やすべり症発現につき考察する。3.分離症がすべりを生じる際に生じる局所変化を生物学的に調査するためにラットモデルを作製し、レントゲンおよび組織学的に評価した。結果、1.臨床面からは、骨年齢が最も脆弱である椎体の軟骨期に分離すべりが好発し、骨年齢の成熟に従い、すべる頻度が減少することが明らかとなった。また、骨年齢の違う新鮮仔牛脊椎を使った生体力学的解析より、骨年齢が若いほど小さい破損強度で成長軟骨板ですべりを呈した。以上より分離症は椎体の幼若期に、成長軟骨板の強度が脆弱であるため同部位ですべりに至ることが示された。2.新鮮仔牛屍体脊椎を用い、前方剪断負荷下における負荷変位動態を測定し、正常椎の負荷-変位曲線は2峰性で、分離椎のそれは1峰性であった。初期剛性、破損強度とも正常椎が高く、分離椎はすでに力学的異常を来していることが明らかとなった。また、臨床的には、レントゲン側面像における屈曲・伸展回転中心(IAR)を調査し、分離椎は明らかな不安定性を認めないものの、IARはすでに異常を示しており、すなわち、頭側に変位することが明らかとなり、分離症における生体力学的破綻が示された。3.4週齢と椎体の幼若な時期に椎弓切除を行い後方不安定化を計ると、発育期の分離すべり症にみられる椎体すべりと椎体楔状変形が再現され、有意義な発育期の分離すべり症の動物モデルとなることを明らかとした。また、その組織像より、椎体変形や椎体すべりに、成長軟骨板の障害が大きいことを示し、我々の提唱する、成長軟骨板でのすべり発生説が裏付けられた。本年度は、分離脊椎における生体力学的破綻について検討した。新鮮仔牛屍体脊椎を用いた実験では、前方剪断負荷下における負荷変位動態を測定した。各脊椎を脊椎可動区分(Functional Spinal Unit:FSU)に切離し、計10FSUを得た。5FSUにはpars defectsを作製しdefect(+)群とし、残る5FSUはpars defectsを作製しないdefect(-)群とした。これらFSUに前方剪断負荷を与え破損に至らせた。この際得られた負荷-変位曲線より、FSUの剛性(N/mm)、破損部位、破損の際の負荷量(N)および変位量(mm)を求めた。Defect(-)群における負荷-変位曲線は2峰性を示した。225.3±22.3(N/mm)の初期剛性を示し、3.5±0.5(mm)変位した後、964.0±87.1(N)で最初のピークを迎える。さらに、7.2±0.5(mm)変位した後、750.5±72.3(N)で次のピークを示した。Defect(+)群における負荷-変位曲線は1峰性であり、155.5±20.3(N/mm)の初期剛性を示した後、6.8±0.3(mm)変位し、734.1±65.3(N)で破損に至った。以上の様に、分離脊椎は負荷-変位曲線、破損強度および剛性においてすでに異常を来していることが明かとなった。また、臨床的には、レントゲン側面像における屈曲・伸展回転中心(IAR)を調査した。

分離椎のIARをみると、初期分離は対照群とほぼ同様な位置に存在するが、分離症の病期が進行期、終末期になると頭側に変位することが明かとなり、IARの観点からも、分離症における生体力学的破綻が証明された。本年度は、分離症がすべりを生じる際に生じる局所変化を生物学的に調査するためにラットモデルを作製し、レントゲンおよび組織学的に評価した。また、すべりや椎体変形が、椎間板由来ではなく、椎体骨および椎体成長軟骨板由来であることを証明することを目的に、選択的Cycloxigenase-2(COX-2)阻害剤(Etodolac)をモデルラットに投与し、その効果を検討した。結果、4週齢と椎体の幼若な時期に椎弓切除を行い後方不安定化を計ると、発育期の分離すべり症にみられる椎体すべりと椎体楔状変形が再現された。以上より、我々のモデルは有意義な発育期の分離すべり症の動物モデルとなることを明らかとした。またその組織像より、椎体変形や椎体すべりに、成長軟骨板の障害が大きいことを示し、我々の提唱する成長軟骨板でのすべり発生説が裏付けられた。さらに、Etodolac投与によりそのすべりは明らかに増加した。さらに、随伴椎体変形は制御された。以上のCOX-2阻害剤の効果より、発育期腰椎分離症のすべりメカニズムが椎間板変性を基盤とするのではなく成長軟骨板の障害が主に関与し、さらに椎体変形に破骨細胞が活性化された結果生じた変形であることが示された。
薬物の経鼻粘膜吸収剤形の開発研究

ペプチド薬物の経鼻吸収による適用法を開発する目的で剤形について検討をした。まずインタ-フェロンを種々の凍結破壊防止剤と吸収促進剤を用いて粉末剤形にして,生物学的利用能を比較した。グリココ-ル酸ナトリウムが最も高い吸収促進効果を示した。粉末剤形調整法として,混合法と凍結乾燥法を用いた。その結果,製剤調整のインタ-フェロンの力価は混合法の方が連結乾燥法より力価低下率が低く,凍結乾燥法の約3倍高かったが,生物学的利用能はどちらもほぼ同じ4.44.8%であった。これは混合法による調整は,インタ-フェロンの鼻粘膜上での失活が大きいと推察された。従ってペプチド薬物を粘膜上の蛋白分解酵素より保護し,鼻粘膜への透過率を高めるためにリポソ-ム化を試みた。実験方法としては,リポソ-ム化したインスリンを鼻粘膜とインキュベ-ションし,インスリンの力価を測定し,リポソ-ム化によるインスリンの活性低下を調べた。又,ウサギより摘出した鼻粘膜を用いて,インスリン内包リポソ-ムによるインスリンの膜透過を調べた。その結果,インスリンをリポソ-ム化しただけでは,膜透過を示さないが,吸収促進剤であるグリココ-ム酸ナトリウムで膜を前処理すると,膜透過性がフリ-のインスリンに比べ,著しく促進された。さらにインスリン内包リポソ-ムの膜透過機構を調べるために,鼻粘膜をリポソ-ムとして透過するのか,フリ-のインスリンとして透過するのかを,レシ-バ-側のリン脂質濃度を測定することによって検討した。その結果,レジ-バ-側にはリポソ-ムによるリン脂質は検出されず,リポソ-ムから放出されたフリ-のインスリンが膜透過していることがわかった。又,鼻粘膜中に残存するグリココ-ル酸ナトリウムの濃度と定量し,リポソ-ムが鼻粘膜の近傍で,グリココ-ル酸ナトリウムにより硬壊され,局所でインスリンが高濃度になるため,膜透過が促進されたと推察した。ペプチド薬物(インシュリンおよびインターフェロン)の経鼻吸収による適用法を開発する目的で剤形について検討した。既にインシュリンにおいてはウサギに粘膜付着性基剤を用いることによって、血中への吸収を高めることを報告した。インターフェロンにおいても、インシュリンと同様に、粘膜付着性賦形剤を用いて、ウサギにおける粉末剤形の鼻粘膜吸収実験を行った。その結果、まず粘膜付着性賦形剤だけでは血中にインターフェロンは検出されなかった。従って、種々の吸収促進剤として、胆汁酸塩およびカプリル酸ナトリウムを用いて検討した。その結果、グリココール酸ナトリウムが最も吸収促進効果が高かった。しかし、まだ生物学的利用能が低い(約3%)ので、吸収を高めるために、粘膜付着性賦形剤を試みた。カーボポールやヒドロキシプロピルセルロース等を用いたが、血中への吸収率を高めることはできなかった。これは、インターフェロン製剤の安定性のために添加されている人血清アルブミンとカーボポールが沈殿を生ずるため、インターフェロン自体が不安定になったためと考察した。又、インターフェロン粉末製剤の鼻粘膜上での安定性をin vitroで調べた結果、グリココール酸ナトリウムは鼻粘膜上での蛋白分解酵素阻害作用があることがわかった。しかし、in vivoの実験結果からは、鼻粘膜上でのインターフェロンが失活していると推察された。従ってペプチド薬物を粘膜上の蛋白分解酵素から保護するために、リポソーム化を試みた。

ここでは薬物としてインシュリンを用いた。まずリポソームはMLVとし、調整後のリポソームの特性を、粒子径、内包率および表面電位測定より調べた。その結果インシュリンは、負荷電のジセチルホスフェイトが存在するリポソーム中に、調整時の約10%を内包された。又、リポソームの表面電荷はインシュリンによって変化しないことがわかった。ペプチド薬物の経鼻吸収による適用法を開発する目的で剤形について検討した。まずインタ-フェロンを種々の凍結破壊防止剤と吸収促進剤を用いて粉末剤形にして、生物学的利用能を比較した。グリココ-ル酸ナトリウムが最も吸収促進効果が高かった。粉末剤形調製法として、混合法と凍結乾燥法を用いた。その結果、製剤調製後のインタ-フェロンの力価は混合法の方が凍結乾燥法より力価低下率が低く、凍結乾燥の約3倍高かったが、生物学的利用能はどちらもほぼ同じ4.44.8%であった。これは混合法による調製は、インタ-フェロンの鼻粘膜上での失活が大きいと推察された。従ってペプチド薬物を粘膜上の蛋白分解酵素より保護し、鼻粘膜への透過率を高めるためにリポソ-ム化を試みた。実験方法としては、リポソ-ム化したインスリンを鼻粘膜とインキュベ-ションし、インスリンの力価を測定し、リポソ-ム化によるインスリンの活性低下を調べた。次にウサギより摘出した鼻粘膜を用いて、インスリン内包リポソ-ムによるインスリンの膜透過実験を行なった。その結果、イスンリンをリポソ-ム化しただけでは、膜透過を示さないが、グリココ-ル酸ナトリウムで膜を前処理すると、膜透過がフリ-のインスリンに比べ、著しく促進された。さらにインスリン内包リポソ-ムの膜透過機構を調べるために、鼻粘膜をリポソ-ムとして透過するのか、フリ-のインスリンとして透過するのかを、レシ-バ-側のリン脂質濃度を測定することによって検討した。その結果、レシ-バ-側にはリポソ-ムによるリン脂質は検出されず、リポソ-ムから放出されたフリ-のインスリンが膜透過していることがわかった。ドナ-側のインスリン活性の経時変化より、リポソ-ム化はイスンリン活性保持には有効ではなく、吸収促進剤のグリココ-ル酸ナトリウムが有効であると推察された。まずインタ-フェロンを種々の凍結破壊防止剤と吸収促進剤を用いて粉末剤形にして,生物学的利用能を比較した。その結果,製剤調製後のインタ-フェロンの力価は混合法の方が凍結乾燥法より力価低下率が低く,凍結乾燥法の約3倍高かったが,生物学的利用能はどちらもほぼ同じ4.44.8%であった。従ってペプチド薬物を粘膜上の蛋白分解酵素より保護し,鼻粘膜への透過率を高めるためにリポソ-ム化を試みた。実験方法としては,リポソ-ム化したインスリンを鼻粘膜とインキュベ-ショし,インスリンの力価を測定し,リポソ-ム化によるインスリンの活性低下を調べた。次にウサギより摘出した鼻粘膜を用いて,インスリン内包リポソ-ムによるインスリンの膜透過実験を行なった。
児童の高齢者観に影響を及ぼす福祉教育プログラムの開発とその効果測定に関する研究

1.わが国では,未発達である児童の高齢者観を測定するスケールの開発を行った。Olejnic & LaRue(1981)の「高齢者観スケール」とSeefeltら(1977)のCATEスケールの中の「SD」を改良し、信頼性の高いスケールを作成した。前者は、老人や老いについての知識・認識を問う18項目の文章に2件法で答えるもの、後者は、老人のイメージを示す18形容語対(相反する形容詞)に5件法で答えるものである。これを用いた結果は、小学校低学年ほど肯定的な老人観・老人イメージを抱いていること、中学、高校に上がるほど肯定的でなくなること、とくに高齢者の身体的側面に対する否定的な見方が増えることなどである。さらに、要因分析の結果、小さい時の祖父母や高齢者とのよい交流経験が肯定的な高齢者観を形成する最も重要な要因であった。2.そこで、低学年のうちに、偏見の少ない高齢者観の形成を助長する福祉教育を行う必要性が認識された。そのために、福祉教育の現状を把握する調査を行った。東京都全域の幼稚園、小学校、中学校から3分の1を無作為抽出し、郵送調査を実施した(有効回収票数701)。高齢者との交流プログラムを実施している幼稚園は51.8%、福祉教育プログラムを実施している小学校は50.3%、中学校は50.3%であった。幼稚園では、敬老会や運動会等の行事に招待しての交流が43.6%で多く、小学校も行事への招待の方式が66.2%で多かった。中学校では、行事への招待(42.1%)よりも生徒会やクラブによる施設訪問等の課外活動の方が69.5%で多かった。半数が実施していたが、体系だった福祉教育とはなっておらず、授業等が過密で実施できない現場の悩みが多く表明された。3.福祉教育プログラムは、(1)副読本やビデオを使う、(2)高齢者等から体験や知識・技術を学ぶ、(3)一緒に活動して相互理解を図る、(4)高齢者や障害者を援助する体験学習などがある。5人の低学年児童に高齢者との2時間の昔の遊びと高齢者に関する3つのビデオをみるプログラムを実施して、効果をみた。我々の開発したスケールにより測定したかぎりでは、明白な効果が得られなかった。しかし、より受容的な態度が観察された。1,児童の高齢者観を測定するためのスケールの開発を行った。我々は、Olejnik & LaRue(1981)の「高齢者観スケール」およびSeefelt et al.(1977)のCATEスケールの中の「SD」などを参考にスケール開発に取り組んできたが、小学生、中学生、高校生を対象とした3回の調査で使用・改良を重ねてきた結果、ほぼ満足できる独自のスケールの開発に成功した。2,これまでの小学生、中学生を対象とした調査に加えて、今回、高校生(1,305名、東京・埼玉)を対象とした調査を行ったことにより、年齢(学年)による高齢者観の比較分析を行うことができた。

我が国の児童は、北米の仮説に反して、全体的にみれば、肯定的な高齢者観を抱いていること、しかし、年齢(学年)が上がるほど肯定の度合いが低くなること、また、因子分析の結果、高齢者の人格的側面については、小・中・高校生とも肯定的に評価したが、高齢者の身体的側面については、小学生以外は若干否定的に評価しており、我が国の児童も一部否定的な高齢者観を抱いていることなどが新たな知見として得られた。なお、高齢者観に影響を与える要因としては、「学年」と「高齢者との過去の交流経験」が重要であることが判明した。このことは、高齢者への偏見や虐待を防ぐための交流プログラムの導入は低学年児童ほど効果的であることを示唆している。3,そこで、小学生を対象とした交流プログラムの開発に向けて、文献収集を行ったほか、交流プログラムを実施している施設のヒヤリング調査を行った(江東園、金沢市第3善隣館など)。それらを踏まえて、現在、交流プログラムの原案を作成し、来年度の介入研究に向けて準備を進めている。1.わが国では、未発達である児童の高齢者観を測定するスケールの開発を行った。Olejnic&LaRue(1981)の「高齢者観スケール」とSeefeltら(1977)のCATEスケールの中の「SD」を改良し、信頼性の高いスケールを作成した。前者は、老人や老いについての知識・認識を問う18項目の文章に2件法で答えるもの、後者は、老人のイメージを示す18形容語対(相反する形容詞)に5件法で答えるものである。これを用いた結果は、小学校低学年ほど肯定的な老人観・老人イメージを抱いていること、中学校、高校に上がるほど肯定的でなくなること、とくに高齢者の身体的側面に対する否定的な見方が増えることなどである。さらに、要因分析の結果、小さい時の祖父母や高齢者とのよい交流経験が肯定的な高齢者観を形成する最も重要な要因であった。2.そこで、低学年のうちに、偏見の少ない高齢者観の形成を助長する福祉教育を行う必要性が認識された。そのために、福祉教育の現状を把握する調査を行った。東京都全域の幼稚園、小学校、中学校から3分の1を無作為抽出し、郵送調査を実施した(有効回収票数701)。高齢者との交流プログラムを実施している幼稚園は51.8%、福祉教育プログラムを実施している小学校は50.3%、中学校は50.3%であった。幼稚園では、敬老会や運動会等の行事に招待しての交流が43.6%で多く、小学校も行事への招待の方式が66.2%で多かった。中学校では、行事への招待(42.1%)よりも生徒会やクラブによる施設訪問等の課外活動の方は69.5%で多かった。半数が実施していたが、体系だった福祉教育とはなっておらず、授業等が過密で実施できない現場の悩みが多く表明された。3.福祉教育プログラムは、(1)副読本やビデオを使う、(2)高齢者等から体験や知識・技術を学ぶ、(3)一緒に活動して相互理解を図る、(4)高齢者や障害者を援助する体験学習などがある。5人の低学年児童に高齢者との2時間の昔の遊びと高齢者に関する3つのビデオをみるプログラムを実施して、効果をみた。我々の開発したスケールにより測定したかぎりでは、明白な効果が得られなかった。しかし、より受容的な態度が観察された。
歯周病関連細菌のリボソーム蛋白質の免疫学的研究

細菌に含まれる様々な構成物の中で免疫活性を有するものはいくつか知られている。その中にリボソーム画分がある。リボソーム画分はこれまでに抗酸菌において細胞性免疫を惹起するという報告があり、ワクチンとしての利用、すなわちリボソームワクチンの可能性が示された。よって歯周病原因菌ととらえられているPorphyromonas gingivalis(以下Pg)のリボソームタンパク質について検討を進めた。まず既知のリボソームタンパク質の一つであるMycobacterium bovis BCGのL7/L12の塩基配列を元にサザン法にてクローニングを試みたが、PgのL7/L12を含む遺伝子断片を得ることができなかった。次に大腸菌のL7/L12を元にしてサザン法を行ったところ制限酵素BamH1で消化した5.5kbpの断片を得ることができた。抗酸菌はGCリッチであるためうまくハイブリしなかったためと思われる。次にBamH1断片をさらに様々な制限酵素で消化し、それぞれの塩基配列を決定したところ、大腸菌のL7/L12と類似したN末端の塩基配列を見いだすことはできたが、完全なPgのL7/L12の塩基配列を決定することはできなかった。L7/L12にはいくつかの機能ドメインがある。N末端は2両体形成に関与し、C末端はGTPase活性に関与している。抗酸菌のL7/L12の場合、免疫活性部位はC末端よりに存在しており、その部分は他の細菌のL7/L12とはアミノ酸配列の相同性が低い部分である。今回決定できたPgのL7/L12の配列はN末端側であり、大腸菌とは高い相同性を示す部分であった。よってこの部分には免疫反応を惹起する部位は含まれていないと思われる。歯周疾患は口腔内の細菌による感染症と考えられる。これまで、感染症の原因菌についてその病原因子、免疫活性物質が何であるかについて様々な研究がなされてきた。菌体成分の中で免疫系を活性化するものはいろいろあるがその中でいくつかの細菌においてリボソーム画分についての報告がある。口腔内細菌においては、リボソーム画分をワクチンとして利用する研究も行われている(S.mutans等)。リボソーム蛋白質は大腸菌では52種存在している。その中で免疫系を活性化する蛋白質はいくつかあるが、今回歯周病原因菌であるPorphyromonas gingivalis(以下Pg)のリボソ-ム蛋白質L7/L12について研究を進めた。L7/L12についてはいくつかの菌において高い免疫活性可能があることが報告されている。歯周病原因菌であるPgのリボソーム蛋白質については現在ほとんど研究が成されておらず、まずは遺伝子のクローニングを行うことから始めた。通法に従い、Pgを培養し、染色体DNAを精製した。これをいくつかの制限酵素で消化し、すでに報告されているMycobacterium bovisのL7/L12遺伝子断片をプローブとしてサザンハイブリダイゼーションを行ってPgのL7/L12を含む遺伝子断片を回収した。さらにMycobacterium bovisのL7/L12遺伝子配列を元にプローブを作成し、先に得られた遺伝子断片を鋳型としてPCR法を行ってPgのL7/L12の遺伝子の増幅を試みた。現在そのPCR法の条件を設定している段階である。また、同時に成人性歯周炎患者に実験の趣旨と方法を説明し、同意を得られた患者から血清を採取している。
哺乳類進化におけるPEG10の挿入時期とインプリンティング領域の解析

マウス6番染色体近位部には、レトロトランスポソン由来のインプリント遺伝子であるPEG10を含むインプリント遺伝子クラスターが存在する。マウスにおいて胎盤形成に必須であるPEG10の哺乳類ゲノムへの挿入時期やインプリントとの関連性を調べるため、有袋類のワラビー、単孔類のカモノハシの相同ゲノム領域を解析した。PEG10は、ワラビーには真獣類と高い相同性を示す形で存在するが、カモノハシには存在しないことがわかった。さらに、マウスPeg10周辺に存在する複数のインプリント遺伝子について、ワラビーのオルソログを解析した結果、ワラビーでインプリントを受けるのはPEG10のみであり、真獣類のように広いインプリント領域を構成していないことが明らかになった。それはDMR(differentially methylated region;親由来によりDNAメチル化状態が異なるゲノム領域でインプリント遺伝子の片親性発現に重要)の違いに由来し、真獣類では隣接する遺伝子のプロモーターまで広がっているのに対し、ワラビーでは厳密にPEG10の5'領域に限られていることを明らかにした。これらの結果は、外来配列やレトロトランスポゾンの挿入がインプリンティング領域の起源となりえること、すなわちこの領域のDMRによるインプリント制御機構は、PEG10レトロトランスポゾンの挿入に対するDNAメチル化による不活性化機構を起源としている可能性を提示している。本研究は有袋類における初めてのDMRの発見を報告したものであり、DNAメチル化によるインプリント制御機構が真獣類と有袋類の共通の起源をもつことを明らかにした。また、レトロトランスポゾンの挿入が新しいインプリント領域を形成することを明らかにし、インプリント領域の起源に重要な新知見を与えたものである。単孔類と有袋類におけるPEG10の有無を調べるため、PEG10の両隣の遺伝子であるSGCEとPPPIR94の間のゲノム配列を決定した。その結果、有袋類であるタマーワラビーのゲノム中にはPEG10が存在したが、単孔類であるカモノハシのゲノム中には存在しないことが明らかになった。このデータは、マウスにおいて胎盤形成に必須であるPEG10遺伝子は、卵生哺乳類である単孔類が胎生哺乳類の共通祖先から分岐した後にレトロトランスポゾンとしてゲノムに挿入し現在の機能を獲得したことを示唆しており、レトロトランスポゾンの挿入が哺乳類の胎生進化における非常に重要な因子の一つであったことが考えられる。有袋類におけるPEG10の遺伝子構造は、遺伝子内部とタマーワラビー胎仔cDNAの5'または3'末端に付加したアダプター配列との間でRT-PCRを行う5'RACEおよび3'RACE実験により決めた。その結果、有袋類PEG10のエクソンイントロン構造や予想されるアミノ酸配列は、真獣類であるマウスやヒトのPEG10と非常に高度な保存性を示すことがわかった。従って、真獣類と異なったタイプの胎盤をもつ有袋類においても、PEG10が何らかの役割を果たしており、哺乳類の胎生進化の比較的初期の段階に貢献した可能性が高いことが考えられる。また、有袋類におけるPEG10周辺遺伝子(SGCE, PPPIR9A, ASB4)を、同じ有袋類であるオポッサムを含む多種間で保存された配列にプライマーを設計しPCRで増幅した。その後、今後の実験に必要である多型頻度が比較的高いと考えられるUTR配列を含む領域をRACE実験により決定した。