hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
タンパク質ノックダウン制御に基づく新規コンディショナルマウスの創製

1. YB1-DDモデルにおける脳内YB1の制御に関す検証脳内YB1の発現は生後3週令までしか見られないので、ヘテロYB1-DD仔マウスを用いて解析した。分娩1週間後、授乳中の母親(ヘテロマウス)にリガンドTrimethoprim(TMP)を10日間投与して、その後2週齢の仔マウスの脳内におけるYB1の変動を解析した。対照群に比較して、母親にTMPを投与した仔マウスの脳内YB1は有意な増加が認められた。また、同じく仔マウスの体内だけでYB1の発現がみられる骨格筋と心臓についても検討した。脳と同様に、母親にTMPを投与した仔マウスの骨格筋と心臓におけるYB1は有意な増加が見られた。これらの結果は、リガンドTMPは母乳を介して、仔マウスの血液脳関門を通過し、脳内YB1の制御が可能であることが示唆された。さらに、リガンド投与群の骨格筋と心臓におけるYB1の変動も見られたので、TMPが母乳を通して仔マウスの全身の標的タンパク質を制御できる可能性が示唆された。2.ホモYB1-DDマウスの胎生致死回避の検証従来YB1ノックアウトマウス(ホモ接合体)では重度な脳ヘルニアで胎生致死となることが知られている。上記の結果により、このモデルマウスではリガンドの投与による脳内YB1を制御できる可能性が示唆されたため、ヘテロ同士を交配して、ホモマウスの産出を試みた。交配時から親マウスにリガンドTMPを飲用水に溶かして投与した。TMP投与群では、ホモ仔マウスが産出され、YB1ノックアウトマウスで見られた脳ヘルニアなどの異常が観察されなかった。このモデルマウスでは、リガンドは胎盤を通過して胎仔に届け、ホモマウス胎生致死の回避と脳の発達異常が改善されたことが示唆された。しかし、ホモ仔マウスは生後1日目に死亡して、仔マウスの成長維持にはリガンドの投与方法と投与量を更なる検討する必要があると考えられた。[ターゲティングベクター作製]マウスレベルで、YB1の量を調整可能な仕組みとして、Destabilizing Domain (DD)配列を融合したターゲティングベクターを作成した。ターゲティングベクターは、YB1のN末端側にDDが融合するよう配列を付加する他、YB1の転写発現部位を解析する目的でCre-recombinaseが発現するように設計した。YB1のゲノム配列、DD・Cre・ネオマイシン耐性遺伝子の各種配列を、クローンの購入またはPCRによって入手し、ターゲティングベクターの作製を行った。ネオマイシン耐性遺伝子カセットには、後に除去できるよう、FLPe recombinase認識配列を付加した。同時に、相同組換え後の配列を有するコントロールベクターを作製し、それを鋳型として、相同組換え体ES細胞の選別に用いるPCR条件を決定した。マウスゲノムにおいてYB1遺伝子がシングルコピーであることは、既に確かめられた。[相同組換えES細胞の取得とキメラマウスの作製]C57BL/6由来のES細胞作製したターゲティングベクターを導入し、薬剤選別後、PCRにより相同組換えES細胞を選別・単離した。得られたクローンはサザンハイブリダイゼーションにより遺伝子型を確認し、マウス胚盤胞へ注入する。その後、仮親の子宮にて発生させキメラマウスを得た。[YB1-DDノックインマウスの系統確立]得られたキメラマウスを野生型C57BL/6マウスを交配させ、産仔を得た。目的の改変遺伝子を有する仔マウスを同定し、FLPerecombinase発現マウス(理研バイオリソースセンターより入手)と交配させ、ネオマイシン耐性遺伝子が除去されたマウスを得た。もう一度野生型との交配を行い、FLPe recombinase遺伝子を持たないYB1-DDノックインマウスヘテロ接合体を得、以後、繁殖・解析に用いる。ターゲティングベクターの作製、相同組換えES細胞の取得とキメラマウスの作製は予定通り進んでおり、YB1-DDノックインマウスの系統の確立まで終えた。以上より、総じて順調であると判断できる。[YB1発現部位の同定]免疫組織化学染色法を用いて、YB1-DDノックインマウス体内におけるYB1-DDの発現部位を同定できた。[YB1発現組織における機能解析]まず、wild typeマウスとYB1-DDヘテロマウスの体内各臓器におけるYB1タンパク質発現量の確認と比較を行った。YB1-DDヘテロマウスの体内代表の臓器におけるYB1の量は、wild typeマウスの約半分であることが確認できた。その後、リガンドTrimethoprim (TMP)の投与によるYB1-DDタンパク質に対しる体内制御は、代表的臓器について免疫組織化学染色法とウエスタンブロットによって解析した。結果として腎臓と脾臓では、TMP濃度依存的にYB1タンパク質の増加が見られたが、肝臓では顕著な変化が見られなかった。先行研究では、TMP投与後の体内組織の分布については、腎臓と脾臓では高濃度で、肝臓ではより低かったと報告した。本研究では、TMP投与後のYB1-DDヘテロマウス体内のYB1タンパク質変動の違いは組織内TMPの分布などに関与すると考える。これらの結果は、YB1-DDノックインマウスは機能していることが示唆された。まずYB1-DDヘテロマウスの体内YB1の発現が確認した。

その後、リガンドTMPの投与濃度依存的に、YB1-DDヘテロマウスの体内のYB1タンパク質の増加が見られ、このモデルマウスは機能していることが示唆された。以上より、概ね予定通り進んでおり、総じて順調であると判断できる。1. YB1-DDモデルにおける脳内YB1の制御に関す検証脳内YB1の発現は生後3週令までしか見られないので、ヘテロYB1-DD仔マウスを用いて解析した。分娩1週間後、授乳中の母親(ヘテロマウス)にリガンドTrimethoprim(TMP)を10日間投与して、その後2週齢の仔マウスの脳内におけるYB1の変動を解析した。対照群に比較して、母親にTMPを投与した仔マウスの脳内YB1は有意な増加が認められた。また、同じく仔マウスの体内だけでYB1の発現がみられる骨格筋と心臓についても検討した。脳と同様に、母親にTMPを投与した仔マウスの骨格筋と心臓におけるYB1は有意な増加が見られた。これらの結果は、リガンドTMPは母乳を介して、仔マウスの血液脳関門を通過し、脳内YB1の制御が可能であることが示唆された。さらに、リガンド投与群の骨格筋と心臓におけるYB1の変動も見られたので、TMPが母乳を通して仔マウスの全身の標的タンパク質を制御できる可能性が示唆された。2.ホモYB1-DDマウスの胎生致死回避の検証従来YB1ノックアウトマウス(ホモ接合体)では重度な脳ヘルニアで胎生致死となることが知られている。上記の結果により、このモデルマウスではリガンドの投与による脳内YB1を制御できる可能性が示唆されたため、ヘテロ同士を交配して、ホモマウスの産出を試みた。交配時から親マウスにリガンドTMPを飲用水に溶かして投与した。TMP投与群では、ホモ仔マウスが産出され、YB1ノックアウトマウスで見られた脳ヘルニアなどの異常が観察されなかった。このモデルマウスでは、リガンドは胎盤を通過して胎仔に届け、ホモマウス胎生致死の回避と脳の発達異常が改善されたことが示唆された。しかし、ホモ仔マウスは生後1日目に死亡して、仔マウスの成長維持にはリガンドの投与方法と投与量を更なる検討する必要があると考えられた。新規作製したYB1-DDノックインマウスを用いて、YB1-DDの発現部位を同定する。その後、リガンドTrimethoprim (TMP)の投与によるYB1-DDタンパク質存在量の変化の様式を解析する。YB1-DD発現量のTMP濃度依存性や、投与とタンパク質量変化のタイムラグ、代表的組織におけるTMPの感受性について、ウエスタンブロッティング及び免疫組織化学染色法によって確認することが予定している。具体的には、YB1-DDマウスを用いて、生後3週齢までの仔マウスに対して、TMP投与による脳内YB1の変動や、脳に及ぼす影響を検証し、この新しいコンディションナルマウスモデルにおける応用性を確認する。(上記URL:東京理科大学研究成果情報データベースRIDAI)・次年度使用額が生じた理由:H29年度消耗品のメーカーが変更して、より安価で購入したので、13,016円の残金が生じた。次年度の実験に使う予定である。
自然リンパ球に注目した脂肪組織恒常性維持機構の解明

昨年までに、高脂肪食負荷を与えた際の体重増加に、小腸粘膜固有層由来の2型自然リンパ球(SI-ILC2)が関与し、SI-ILC2が腸間膜由来のILC2(WAT-ILC2)と異なる性質を持つことを明らかにしてきた。SI-ILC2とWAT-ILC2に機能的差異を検討するために、それぞれの細胞を用いてRNASeq解析を行い、肥満の誘導に関わる遺伝子の探索を行った。昨年はWAT-ILC2に比較してSI-ILC2において発現が10倍以上高かったIL-2の重要性を明らかにしたが、それ以外にも、リポタンパク質の分解酵素を抑制するAngptl4やタイトジャンクションを構成するTjp1などが候補に挙がったが、決定的な証拠を得ることはできていない。WAT-ILC2がなぜ肥満を誘導しないかという点に関して考察した。過去にWAT-ILC2が褐色脂肪細胞の誘導を介してむしろ肥満の抑制に関わるという報告があることから、WAT-ILC2の移植の際には肥満の誘導活性と抑制活性が拮抗している可能性が考えられた。そこでWAT-ILC2と脂肪細胞分化の関係を検討するためにトランスウエルを用いた培養系で前脂肪細胞から脂肪細胞への分化に与えるILC2の影響を詳細に解析したところ、活性化したILC2が脂肪細胞の分化を抑制することが明らかになった。興味深いことに抑制活性は脂肪細胞の分化の途中にILC2を共存させた場合のみ観察され、分化前や分化後に共存させても影響は見られなかった。一方、WAT-ILC2の培養上清も前脂肪細胞から脂肪細胞への分化を抑制し、コラーゲン発現を上昇させるなど繊維化を誘導することが明らかになった。これらの活性に関与する分子をRNASeq解析やプロテオミクス解析によって検討しているが同定には至っていない。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。高脂肪食負荷を与えた際、獲得免疫系のリンパ球を欠損するRag2-/-マウスは野生型マウスと同様に、顕著な体重増加と脂肪重量の増加を認めるが、全てのリンパ球を欠損するγc-/-Rag2-/-マウスでは体重増加も脂肪組織重量の増加も著しく抑制されていた。自然リンパ球の関与を疑い、NH細胞をγc-/-Rag2-/-マウスに移植した後に高脂肪食を負荷したところ、興味深いことに、小腸管粘膜固有層由来のNH細胞を移植した際には高脂肪食負荷による体重増加が回復したが、腸間膜由来のNH細胞を移植した際には回復しなかった。この結果は、腸管粘膜固有層由来のNH細胞が体重増加に貢献することを示唆する。このとき、小腸管粘膜固有層由来のNH細胞は小腸管粘膜固有層に移行したが、腸間膜には移行しなかった。一方、腸間膜由来のNH細胞は腸間膜と小腸管粘膜固有層の両方に移行した。従って、腸間膜由来のNH細胞が体重増加に影響を与えなかったのは、小腸管粘膜固有層へ移行できなかったことが理由ではない。これらの結果はまた、腸管粘膜固有層由来のNH細胞と腸間膜由来のNH細胞に機能的差異が存在することを示す。脂肪細胞分化におけるNH細胞の機能を解析するためにトランスウエルを用いた系で前脂肪細胞から脂肪細胞への分化に与えるNH細胞の影響を詳細に解析したところ、NH細胞が脂肪細胞の分化を抑制することが明らかになった。脂肪細胞の遺伝子発現を検討したところ、分化の初期に機能するC/EBP-βとC/EBP-δの発現は亢進していたが、成熟に関わるC/EBPαとPPARγの発現や成熟脂肪細胞で発現するアディポネクチンの発現が抑制されていた。一方、NH細胞由来の液性因子は脂肪細胞からのコラーゲンやエオタキシンの分泌を誘導した。これらの事実はNH細胞が脂肪組織のリモデリングや好酸球浸潤に機能することを示唆する。NH細胞にのみ発現する遺伝子を検索した結果、残念ながら、得られた候補遺伝子は神経系の一部に発現が見られるなど、真の意味でNH細胞特異的に発現する遺伝子は同定できなかった。そこで、血球系の細胞の中でNH細胞特異的に発現する複数の遺伝子に着目し、さらに定量PCR法によって特異性を確認し、2つの遺伝子(Inmt、Sparcl1)を同定した。これらの遺伝子を用いてCreやジフテリア毒素受容体遺伝子のノックインマウスの作成を行っている。Inmtに関してはCreのノックインマウスが生まれ、現在発現を解析中である。Sparcl1に関してはCreのノックインマウスが生まれたが、次世代が産まれていない。昨年までに、高脂肪食負荷を与えた際の体重増加に、小腸管粘膜固有層由来のNH細胞(2型自然リンパ球:SI-ILC2)が重要であり、腸間膜由来のILC2(WAT -ILC2)と異なる性質を持つことを明らかにしてきた。SI-ILC2とWAT-ILC2に機能的差異を検討するために、それぞれの細胞を用いてRNASeq解析を行った。WAT-ILC2に比較してSI-ILC2においてIL-2の発現が10倍以上高かった。IL-2Rβ-/-Rag-2-/-マウスに高脂肪食負荷を与えたところ、肥満に抵抗性である事が分かった。さらに、細胞内サイトカイン染色によってSI-ILC2や3型自然リンパ球(ILC3)がIL-2を分泌することも明らかになった。

これらの結果はIL-2がILC2やILC3を維持することが肥満の誘導に機能することを示す。腸管組織における遺伝子発現も検討したところ、リポタンパク質の分解酵素を抑制するAngptl4の発現がSI-ILC2によって抑制されることが明らかになった。また、タイトジャンクションを構成するTjp1の発現もSI-ILC2によって抑制された。Tjp1の発現低下は腸内細菌由来のリポ多糖による炎症を誘導することが知られており、SI-ILC2はAngptl4やTjp1の発現を抑制することで肥満脳誘導に関与する可能性が示唆された。さらに、in vivoにおける前脂肪細胞の活性化や増殖を検討した。野生型マウスやRag2-/-マウスに高脂肪食負荷を与えると早期に前脂肪細胞の活性化と増殖が誘導されるが、全てのリンパ球を欠損するγc-/-Rag2-/-マウスにおいては前脂肪細胞の活性化や増殖が見られなかった。この事実もILC2が脂肪細胞の活性化や増殖を通じて肥満の誘導に機能するという我々の仮説を支持する。ILC2にのみ発現する遺伝子を検索した結果、残念ながら、得られた候補遺伝子は神経系の一部に発現が見られるなど、真の意味でILC2特異的に発現する遺伝子は同定できなかった。そこで、血球系の細胞の中でILC2特異的に発現する複数の遺伝子に着目し、さらに定量PCR法によって特異性を確認し、2つの遺伝子(Inmt、Sparcl1)を同定した。これらの遺伝子にCreとGFPを挿入したマウスをようやく作成することができたが、予想に反してこれらのマウスにおいてILC2でのGFPの発現は観察されず、c-Kitを発現する非血球系の細胞の一部においてGFPの発現が観察された。これは、我々がILC2に発現する遺伝子を検索するにあたり、c-Kitを用いて細胞を調整した際に混雑した非血球系の細胞由来の遺伝子を検出したためと考えられた。これらの経緯からこの方法によるILC2を特異的に欠損するマウスの作成は断念した。昨年までに、高脂肪食負荷を与えた際の体重増加に、小腸粘膜固有層由来の2型自然リンパ球(SI-ILC2)が関与し、SI-ILC2が腸間膜由来のILC2(WAT-ILC2)と異なる性質を持つことを明らかにしてきた。SI-ILC2とWAT-ILC2に機能的差異を検討するために、それぞれの細胞を用いてRNASeq解析を行い、肥満の誘導に関わる遺伝子の探索を行った。昨年はWAT-ILC2に比較してSI-ILC2において発現が10倍以上高かったIL-2の重要性を明らかにしたが、それ以外にも、リポタンパク質の分解酵素を抑制するAngptl4やタイトジャンクションを構成するTjp1などが候補に挙がったが、決定的な証拠を得ることはできていない。WAT-ILC2がなぜ肥満を誘導しないかという点に関して考察した。過去にWAT-ILC2が褐色脂肪細胞の誘導を介してむしろ肥満の抑制に関わるという報告があることから、WAT-ILC2の移植の際には肥満の誘導活性と抑制活性が拮抗している可能性が考えられた。そこでWAT-ILC2と脂肪細胞分化の関係を検討するためにトランスウエルを用いた培養系で前脂肪細胞から脂肪細胞への分化に与えるILC2の影響を詳細に解析したところ、活性化したILC2が脂肪細胞の分化を抑制することが明らかになった。
ウエルシュ菌α毒素とG蛋白質の関連性に対する生化学的手法と遺伝子操作による解析

ウエルシュ菌α毒素の作用機構について、細胞内情報伝達系との関連から検討した。α毒素の溶血活性の初期ステップは、本毒素の酵素活性によって、最初、赤血球膜のリン脂質が分解され、その刺激がGタンパク質を介して赤血球膜の内因性ホスフォリパーゼCを活性化、この結果、リン脂質代謝が亢進、この影響を受け、ホスフォリパーゼDも活性化され、一連の代謝系が亢進する過程と推察される。α毒素内のHis残基を部位特異変異法にて中性アミノ酸に置換し、その役割をα毒素の構造と機能の観点から検討した。α毒素は、強固に結合している2個の亜鉛と弱く結合をしている一個の二価金属イオン(亜鉛、Co^<2+>,Mn^<2+>など)を有する。強固に結合している2個の亜鉛の中の一番目の亜鉛は、11位のHis残基と結合し、N_+末端領域と共に毒素タンパク質の内部に埋め込まれた状態で存在し、毒素の構造維持に、さらに、二番目の亜鉛は、148位のHis残基と非常に強く結合し、リン酸エステルを切断する過程、すなわち、触媒部位において重要な働きをしている。次に、弱い結合で保持されている金属イオンは、68、126、そして、136位のHis残基でリガンドされており、この金属は、基質、すなわち、リン脂質との結合に重要な役割を演じている。ウエルシュ菌によるガス壊疽の起病因子として知られているalpha毒素は、溶血、致死、壊死作用、また、摘出腸管、血管収縮作用、さらに、酵素活性としてホスフォリパーゼC活性を示し、alpha毒素の作用の本体は、この酵素活性であると考えられてきた。平成5年度の研究において、alpha毒素の作用機構解明のアプローチに組織より取り扱いの容易なウサギ赤血球を用い、alpha毒素の溶血機構の研究を行い、この溶血は、本毒素のホスフォリパーゼC作用による膜の破壊ではなく、本毒素によって経時的に二相性で引き起こされる赤血球膜におけるホスファチジン酸合成と関連する機構によることを明らかにした。さらに、この合成は、alpha毒素による血球膜GTP-結合タンパク質の活性化を介する内因性ホスフォリパーゼCの亢進により、ホスファチジル4,5-二リン酸から生成したジアシルグリセロールがリン酸化されるホスファチジン酸合成経路、次に、この経路で生成したジアシルグリセロールによるプロテインキナーゼCの活性化を介するホスフォリパーゼCの不活化によって急激に抑制された後、ホスフォリパーゼDが活性化され、生成したホスファチジン酸の脱リン酸化によるジアシルグリセロールがリン酸化されるホスファチジン酸合成経路の2種類の代謝系に支配されていることを明らかにした。次に、alpha毒素によって活性化されるホスファチジン酸合成系を亢進する薬物、GTPgammaSは、毒素による溶血作用を亢進すること、さらに、その合成系を阻止する薬物、GDPbetaS、プロプラノロール(ホスファチジン酸ホスファターゼ阻害剤)は、その作用を阻止することから、alpha毒素の溶血作用発現には、このリン脂質代謝系の亢進が重要なステップであるという結論に達した。そこで、この研究によって、alpha毒素作用と密接に関連する赤血球の細胞情報伝達系を介するリン脂質代謝系が見いだされたと考える。α毒素内のHis残基を部位特異変異法に中性アミノ酸に置換し、その役割をα毒素の構造と機能の観点から検討した。α毒素は、強固に結合している2個の亜鉛と弱く結合している一個の二価金属イオン(亜鉛、Co^<2+>,Mn^<2+>など)を有する。

強固に結合している2個の亜鉛の中の一番目の亜鉛は、11位のHis残基と結合し、N-末端領域と共に毒素タンパク質の内部に埋め込まれた状態で存在し、毒素の構造維持に、さらに、二番目の亜鉛は、148位のHis残基と非常に強く結合し、リン酸エステルを切断する過程、すなわち、触媒部位において重要な動きをしている。次に、弱い結合で保持されている金属イオンは、68、126、そして、136位のHis残基でリガンドされており、この金属は、基質、すなわち、リン脂質との結合に重要な役割を演じている。
J. R. R. トールキンの中世英語英文学研究と「ファンタジー」創作を巡って

J.R.R.トールキンの研究者としての側面に焦点をあて、学術業績と創作(=いわゆる「ファンタジー」作品)との関連性を明らかにする。トールキンは中世英語英文学や北欧文学に関する研究を多く残している。本研究では同時代の学術的文脈を考慮しつつ、特にフィロロジスト(文献学者)としての成果とファンタジー創作の有機的な結びつき、そしてその文化的意義を考察する。「学問領域」と「大衆文化」を架橋したパイオニアとして、トールキンの学術的功績を捉え直すこととする。
音声明瞭度向上を目的とした補聴器におけるノイズフロア決定手法

ディジタル補聴器はフィルタを入力信号に施すことで雑音抑圧等が実現されるが,多くのアルゴリズムはフィルタにノイズフロアと呼ばれるフィルタゲイン最低値の設定が存在する。この値は音声明瞭度や雑音抑圧量,更には出力信号に発生するミュージカルノイズとも密接な関係があり極めて重要なパラメータであるが,その値は経験的に決定される。本課題では,観測信号のラウドネスを用い音声明瞭度の観点からこの値の最適値を周波数ごとに求める。これまでの基礎検討でラウドネスを用いたノイズフロア決定方法の有効性を確認してきた。本課題においては音声信号の動的な変動にあわせたラウドネスを用いることでさらなる音声明瞭度の改善を目指す。
基底一重項量子磁性体における圧力誘起秩序状態と相転移点近傍での臨界現象の研究

本研究の目的は、基底一重項磁性体における圧力誘起秩序相の秩序状態及び相転移点近傍での臨界現象を実験的に明らかにすることである。前年度までに行ったCsFeCl3の圧力下磁化・μSR・弾性中性子測定により、本物質では臨界圧力Pc=0.9 GPa以上の圧力領域で磁気秩序相が出現すること、及びその磁気構造が120°スピン構造であることが明らかになった。一方、常圧で磁気秩序を示す関連物質RbFeBr3の場合は、圧力印加により1.0 GPa以上の圧力領域で磁気秩序が消失することを明らかにした。これらの結果は、CsFeCl3と同様にRbFeBr3においても圧力印加が強磁性的な鎖内の交換相互作用を増強する役割を担うことを示している。最終年度である本年度は、CsFeCl3の圧力下非弾性中性子散乱測定により磁気励起の直接観測に成功した。臨界圧力Pc=0.9 GPa以下のスピンギャップ相では、圧力印加に伴い磁気励起のソフト化が観測された。これはギャップの大きさが圧力印加により抑制されていることの直接的な証拠であり、圧力下磁化測定の結果とも整合する。また、Pc以上の磁気秩序相においてはギャップを有する磁気励起とギャップレスな磁気励起の双方が観測された。この特異な磁気励起スペクトルの起源に関して、理論研究との比較議論を含めた内容を論文にまとめ学術雑誌への投稿を行った。加えて、基底一重項磁性体Ba2MSi2O6Cl2(M=Co,Cu)の中性子非弾性散乱測定の研究成果についても論文執筆・学術雑誌への投稿を行った。本研究の目的は、基底一重項磁性体における圧力誘起秩序相の秩序状態及び相転移点近傍における臨界現象を明らかにすることである。最低励起状態との間に有限の励起ギャップを有する基底一重項磁性体では、励起ギャップに相当する外場(磁場や圧力)を印加することで、非磁性基底状態から磁気秩序状態へと量子相転移を示すことが期待される。ここで、圧力誘起量子相転移を示す量子磁性体の報告は数少なく、スピンダイマー系物質(TlCuCl3及びKCuCl3等)にほぼ限られるのが現状である。本研究では、申請者が圧力誘起量子相転移を示すことを明らかにした擬スピン1の基底一重項磁性体CsFeCl3及びその関連物質を対象とし、低温磁化・電子スピン共鳴・中性子散乱等の高圧力下測定を行う。初年度である本年度は、これまでに得られたCsFeCl3の極低温及び高圧力下磁化測定の結果をまとめ、圧力誘起及び磁場誘起量子相転移に焦点をあてた論文の執筆・投稿を行った。Physical Review Bに掲載された本論文はEditors' Suggestionsに選定された。更に関連物質RbFeBr3の単結晶育成を行い、常圧及び圧力下での磁化測定を行った。RbFeBr3はCsFeCl3と同様にS=1基底一重項磁性体であるが、交換相互作用が大きいためゼロ磁場で磁気秩序を示す。まずは常圧において9 Tまでの磁化・比熱測定を行い、RbFeBr3の磁場ー温度相図を世界に先駆けて明らかにした。圧力を印加すると、磁気秩序転移に伴う磁化の異常が低温領域にシフトし、1.0 GPa以上で消失した。これはCsFeCl3の場合と同様に、圧力印加が強磁性的な鎖内の交換相互作用を増強する役割を担うことを示している。本研究成果の一部について国際会議で発表を行い、プロシーディングの執筆・投稿を行った。3He温度領域における圧力下磁化測定システムの立ち上げに関しては当初の計画より遅れているが、関連物質RbFeBr3の圧力下研究に進展が見られ、国際学会での発表及びプロシーディングスの執筆・投稿を行った。更にCsFeCl3の圧力下中性子散乱測定及びμSR測定に関して共同研究を通して進めている最中である。以上を総合的に判断し、「おおむね順調に進展している」とした。本研究の目的は基底一重項磁性体における圧力誘起秩序相の秩序状態及び相転移点近傍での臨界現象を実験的に明らかにすることである。本年度は擬スピン1を有する基底一重項磁性体CsFeCl3の圧力下中性子回折測定及び圧力下μSR測定を行い、臨界圧力Pc=0.9 GPa以上で基底状態が非磁性ギャップ相から磁気秩序相へと変化することを確認した。昨年度に報告を行なった高圧力下磁化測定の結果と良い一致を示しており、Pc以上での磁気的基底状態がミクロな視点からも証拠付けられたとことになる。特に圧力下中性回折測定の結果からは、その磁気構造が120°スピン構造であることが明らかになった。本研究成果についてPhysical Review BのRapid Communicationsでの掲載が決定した。圧力下μSR測定の結果については磁性体に関する国際会議ICM2018で発表予定である。更に、関連物質CsFeBr3における磁場誘起量子相転移の臨界特性に関する論文の執筆を行いPhysical Review Bに掲載された。本研究では希釈冷凍機温度(0.1 K)まで行った磁場中磁化・比熱測定の結果を元に磁場-温度相図を決定した。より低温領域まで相転移磁場の温度依存性を明らかにすることで、臨界指数1.50が得られた。この値は磁気励起子マグノンのBose-Einstein凝縮(BEC)で理論的に予想される臨界指数1.5と一致している。

本研究結果は、量子臨界現象の普遍性を実験的に検証することに成功したという意義を有する。本年度はCsFeCl3の圧力下中性子回折測定及び圧力下μSR測定の結果から、Pc以上で基底状態が磁気秩序状態となること及びその磁気構造が120°構造となることが明らかになった。圧力誘起磁気秩序状態がミクロな視点からも証拠付けられた点で大きな進展と言える。3He温度領域におけるCsFeCl3の圧力下磁化測定に関しては当初の計画より遅れている一方、関連物質CsFeBr3の量子臨界性に関する研究や新規基底一重項磁性体Ba2MSi2O6Cl2(M=Co,Cu,Ni)の磁気励起に関する研究に進展が見られた。以上を総合的に判断し、「おおむね順調に進展している」とした。本研究の目的は、基底一重項磁性体における圧力誘起秩序相の秩序状態及び相転移点近傍での臨界現象を実験的に明らかにすることである。前年度までに行ったCsFeCl3の圧力下磁化・μSR・弾性中性子測定により、本物質では臨界圧力Pc=0.9 GPa以上の圧力領域で磁気秩序相が出現すること、及びその磁気構造が120°スピン構造であることが明らかになった。一方、常圧で磁気秩序を示す関連物質RbFeBr3の場合は、圧力印加により1.0 GPa以上の圧力領域で磁気秩序が消失することを明らかにした。これらの結果は、CsFeCl3と同様にRbFeBr3においても圧力印加が強磁性的な鎖内の交換相互作用を増強する役割を担うことを示している。最終年度である本年度は、CsFeCl3の圧力下非弾性中性子散乱測定により磁気励起の直接観測に成功した。臨界圧力Pc=0.9 GPa以下のスピンギャップ相では、圧力印加に伴い磁気励起のソフト化が観測された。これはギャップの大きさが圧力印加により抑制されていることの直接的な証拠であり、圧力下磁化測定の結果とも整合する。また、Pc以上の磁気秩序相においてはギャップを有する磁気励起とギャップレスな磁気励起の双方が観測された。この特異な磁気励起スペクトルの起源に関して、理論研究との比較議論を含めた内容を論文にまとめ学術雑誌への投稿を行った。加えて、基底一重項磁性体Ba2MSi2O6Cl2(M=Co,Cu)の中性子非弾性散乱測定の研究成果についても論文執筆・学術雑誌への投稿を行った。本年度の未解決課題に取り組むと共に、3He温度領域における圧力下磁化測定システムの立ち上げを行う。始めにiHelium3(磁気特性測定装置MPMS専用の3He冷凍機)に搭載可能な圧力発生装置を作成し、圧力テスト及び温度テストを行う。本測定システムを用いてCsFeCl3の低温・圧力下磁化測定を行い、これまでに得られている1.8 Kよりも低温領域における圧力下磁気相図を完成させる。また、RbFeBr3の圧力下磁化測定については得られた結果の十分な解析及び議論を行い論文執筆を行う。未解決課題である3He温度領域におけるCsFeCl3の圧力下磁化測定を引き続き行う。得られた結果とこれまでに得られている1.8 K以上での磁化・中性子回折・μSR測定の結果と合わせ、総合的な解析・議論を行い論文執筆を行う。研究計画通りに進展しない場合に備え、Ba2MSi2O6Cl2(M=Co,Cu,Ni)の磁気励起に関する研究も平行して進める。磁気特性測定装置MPMS専用の3He冷凍機iHelium3を用いた圧力下磁化測定システムの立ち上げに関して遅れが生じたため。次年度使用額は引き続き圧力下磁化測定システムの立ち上げに充当する。
血管〓縮関与推定因子の複合刺激による相乗的血管収縮機能発現とその細胞内機序

脳動脈、冠動脈および抵抗血管は虚血性脳・心臓循環障害や高血圧症の発症部位であり、また、各種循環作用薬の臨床的標的部位でもある。血管〓縮関与推定因子は数多く知られるが、旧来の研究の多くは、新規内因活性物資が見つかるとその単独作用のみに目を奪われ、既知生理活性物質を旧弊のごとく捨て去り、木を見て森を見ずの感がある。著者は生体内での生理活性ペプチドの循環系における真の役割を探るべく、血管内皮由来ペプチドであるエンドセリン-1(ET-1)や交感神経由来のニューロペプチドY(NPY)などと血小板由来セロトニン(5-HT)との複合刺激によるによる脳・冠動脈の特異的収縮増強の細胞内機序について、プロテインキナーゼC(PKC)の関与の観点から研究した。先ず、血管収縮の3要素、すなわち、Ca^<2+>の細胞内流入、細胞内Ca^<2+>遊離、並びに収縮蛋白系のCa^<2+>感受性変動は決して独立した要因でないこと。脳・冠動脈ではCa^<2+>流入がCa^<2+>感受性を制御することを明確に示した。これは、血管拡張薬、たとえばCa^<2+>拮抗薬の血管部位作用特異性の機構の解明に利する発見である。また、PKC活性の細胞質から膜へのトランスロケーションと収縮機能が〓離すること。複合刺激による収縮増強にミオシン軽鎖リン酸化の有意な増加がもたらされることを見いだした。これらの結果は、複合刺激による収縮増強機構に、PKCを介する細胞内Ca^<2+>シグナリングの関与の重要性を強く示唆している。
Bowl型分子キャビティの構築とその高反応性化学種安定化への応用

本研究では,カリックス[6]アレーンおよびシクロファン骨格を用いてbowl型分子を設計・合成し,そのbowl内にいくつかの官能基を有する分子の反応性を検討した。まず,中央架橋部にオルシノールベンジルエーテルユニットを,側環部にジフェニルメタンユニット持つ新規な二環性シクロファンをいくつか合成した。その構造をNMRおよびX線結晶解析により検討し,それらが直径約14Åの底の浅いbowl型分子であることを明らかにした。bowl内にスルホキシド基をもつ分子の熱分解により安定な芳香族スルフェン酸を始めて合成・単離することに成功した。また,bowl内にリチウム体を発生させその反応により空孔内に官能基をもついくつかのbowl型分子を合成した。ついで,架橋カリックス[6]アレーン骨格をもつbowl型分子の合成を行い,その構造と反応性について研究した。フェノール骨格のパラ位に水素およびt-ブチル基を有するカリックス[6]アレーンを1位に臭素,アジド,t-ブチルチオなどの官能基をもつ2, 6-ビス(ブロモメチル)ベンゼン体で架橋すると収率よく対称型に反応したbowl型分子が高収率で得られた。このOH体およびそれをヨウ化メチルでメチル化したOMe体についてNMRによりその構造を詳細に検討した。また臭素化体についてはX線結晶解析により1, 2, 3-alternate配座であることが明らかとなった。t-ブチルチオ体からは酸化,熱分解を経て安定なスルフェン酸を得,その構造をX線結晶解析により決定し,臭素化体と同様1, 2, 3-alternate配座であることを示した。さらにアジド体については光反応を行い,中間に発生するナイトレンが通常の芳香族ナイトレンと異なり7員環に環拡大せず,周辺のカリックスアレーン骨格のベンゼン環へ付加反応し,特異な挙動を示した。反応場を適当に制御することにより、関与する反応種の構造・寿命などを自在に変化させたり、期待する反応のみを選択的に進行させたりすることは、有機化学の究極の目的の一つである。本研究では、Bowl(お椀)型の三次元的キャビティを持つ分子(これを本研究ではreaction bowlと呼ぶ)をシクロファンあるいはカリックスアレーン骨格に橋かけをして合成し、それを用いてこれまで合成が不可能であったいくつかの高反応性化学種(特に二量化、多量化が不安定性の要因であった化学種)を安定化・単離することを目的とした。まず、二環性シクロファン骨格系のBowl型分子の合成を行った。オルシノールを出発物質として橋かけ部分を合成し、脱保護後ジフェニルメタンユニットをつなげてBowl型分子を合成した。また、橋かけ部分のCH_2とOとを入れかえた分子も同様の方法で合成した。ジフェニルメタンユニットにメチル基を導入し、お椀の縁にメチル基を持つBowl型分子を合成した。次にカリックス[6]アレーンを出発物質とし、これに橋かけユニットを反応させ、ついでO-メチル化することにより不安定官能基の前駆体となる種々の官能基を持つBowl型分子を合成した。またこれらBowl型分子の構造をX線決勝解析、NMRスペクトルなどにより解析し、その構造的特徴を明らかにした。このようにして合成したBowl型分子を用い、対応するスルホキシドの熱分解により、硫黄の生体内酸化の重要な中間体でありながら、単離例のない芳香族スルフェン酸の合成・単離に成功した。

本研究では、Bowl(お椀)型の三次元的キャビティを持つ分子(これを本研究ではreaction bowlと呼ぶ)をシクロファンあるいはカリックスアレーン骨格に橋かけをして合成し、それを用いてこれまで合成が不可能であったいくつかの高反応性化学種(特に二量化、多重化が不安定性の要因であった化学種)を安定化・単離することを目的とした。昨年度二環性シクロファン骨格をもつBowl型分子の合成に成功したので、本年はその構造についてNMRにより詳細に検討し、カリックスアレーンBowl型分子では、その水酸基をアルキルオキシ基に変えることにより立体配座が大きく変わることが示された。特に、ベンジルオキシ基にした場合には、cone型と、1,2,3-alternate型をそれぞれ安定に単離できるという〔6〕カリックスアレーンでこれまで一度も観測されたことのない事実を見出した。分子力場計算の結果もこれらの重族事実を支持した。とらに、Bowlキャビティ内にアジト基をもつ化合物を合成し、その光反応を行ったところ、生成したニトレンが周辺のベンゼン骨格と反応してアセピンを生じ、さらにそれが環開裂を行うという興味深い異常反応を見出した。また、分子キャビティをもつ新規系分子としてランタン型分子およびm-テルフェニル型分子の合成にも成功した。
現代生命科学に基づく新たな生命基礎論構築の試み：創発の現代的解釈に向けて

生命が示す創発性をどのように理解すべきかという生命基礎論の重要課題に対して,文献データベースの情報に基づく客観的な現代生物学史の再構築を大きな柱として,創発概念の時代的変化を追跡するとともに,オルガネラの細胞内共生説や生物対流などいくつかの具体的な創発事象についての解析を行った。米国生物工学情報センターのPubMedに含まれる32の主要学術雑誌の1965年から2014年までのすべての論文のタイトルと要旨について,出現する語彙の統計解析を行い,この40年間が大きく3つの時期に分かれること,特に2000年以降のポストゲノム時代には,創発的概念が強調されるようになったことを明らかにした。生命科学はゲノム科学・ポストゲノム科学の時代を迎えて,知識の量が爆発的に増えただけではなく,その内容も,エピジェネティクスや非コードRNAなど,これまでの生命科学の知識にはほとんど含まれていなかったものが前面に出てきており,これらの理解が人間存在の特殊性(があるとすれば)やさらに広く生命が示す創発性の理解にも不可欠になってきた。こうした状況に基づいて,新たな生命の理解に向けた問題の整理と研究の方向性を探るため,本年度は以下の2つの研究を行った。2.生物学史上の主要な生命概念の検索:ジャン・ドゥーシュの遺伝学史,ミシェル・モランジュの生物学史という最新の文献をたどりながら,主要概念の変遷についてまとめた。さらに,パスツール研究所にあるジャック・モノーの未公開原稿を調査し,分子生物学黎明期における生命概念,特に偶然・必然概念,適応・進化の生化学的説明などを今日的見地から検討した。当初の予定において,本年度には,最新の生命関係文献のデータベースを構築することを計画していたが,これについては,ほぼ計画通りのものを実現することができた。最初の計画には含まれていなかったことだが,パスツール研究所でのノーベル賞50周年記念講演会への参加とアーカイブの調査が可能になったことから,分子生物学黎明期の生命概念の詳細な検討を加えた。一方,当初計画に含まれていた教科書の検索については,むしろ,生物学史的に重要な文献についての詳細な検討を行うことが有効であるとの判断から,上記の2つの文献を中心とした詳細な解析に置き換えた。このような経緯から,当初の計画を一部変更したものの,おおむね,計画通りに順調に研究が進展していると考えられる。生命が示す創発性をどのように理解すべきか,という生命基礎論の重要課題に対して,これまでにないアプローチで臨むことを本研究の主要テーマとしている。本年度は昨年度に引き続き,文献データベースの整理と分子生物学の発展における創発の扱い,さらに広く生物科学の歴史における創発的概念の扱われ方などを検討した。1.XMLを利用した生命科学文献データの整理とそこに現れた創発概念の検索:昨年度にはBaseXというソフトウェアを利用して,生命関連の主要雑誌の最近10年分の論文情報を整理したが,本年度は,さらにこのデータベースを拡充し,本格的に検索が可能なものにした。詳細はここでは省略する。2.分子生物学黎明期における創発の扱いについて,ジャック・モノーの研究史を例として,未公開文献を調査するということを,昨年度にも行ったが,本年度にもパリのパスツール研究所を訪ね,詳しい調査を行った。昨年訪ねた際には改修中であり,十分な調査ができなかったが,今年は立派な施設が完成し,多くの未公開資料を調査することができた。3.パリにある高等師範学校ENSのミシェル・モランジュ教授と二度にわたりディスカッションをし,教授の2016年の著作『生物科学の歴史』の翻訳を通じて,生命科学の歴史における機械論的概念と生気論的概念との相克の歴史を改めて浮き彫りにした。以上,本年度は,生命の創発的概念に関わる本研究の中核的な部分に関して,計算科学的な面と生物学史的な面の両面から,新たな知見を蓄積し,研究を推進することができた。上述のように,当初計画した研究を着実に実施している。本年度はこれまでの2年間の研究に引き続き,文献データベースの整理と分子生物学の発展における創発の扱い,さらに広く生物科学の歴史における創発的概念の扱われ方などを検討した。1.昨年度に開発したBaseXを用いた生命科学文献データベースを利用し,さらにRソフトを用いて統計解析を行った。1965年から2014年までの生命関連の主要雑誌32誌を対象として,そのタイトルと要旨について,各年次での出現頻度の高い100単語をすべて集め,重複を除き,タイトルで226語,要旨で213語を選んだ。これらの単語について,各年次における出現比率の推移についてクラスタリング解析を行った。その結果,出現頻度が著しく減少する第1グループ,ほぼ一定の第2グループ,著しく増加する第3グループのクラスタを同定した。また,タイトルと要旨での出現頻度は相関している場合が多かったが,必ずしも同じではなかった。この結果については,現在さらに精査中であるが,この結果に基づいて,現代生命科学が1990年付近で区分できることが推定された。2.第1グループには,具体的な生物名の他,クロマトグラフィーやゲル電気泳動など,当時最新の手法名が含まれる。第3グループには,パスウェイ,ネットワークなど制御に関わるもの,進化,結晶化など,新たなトピックに関連するものが含まれるが,機能,役割などの言葉も目立つ。

実験技術に中心をおいた初期の研究から,生物の創発的な特徴に注目した研究へと移り変わっていることがわかる。3.生命哲学・生命科学史に関連して,細胞内共生説の歴史や生命を宿した物質に関する考察を行い,これらに関する図書『創発の生命学』を刊行した。『細胞内共生説の謎』も近々刊行される。生命が示す創発性をどのように理解すべきかという生命基礎論の重要課題に対して,文献データベースの情報に基づく客観的な現代生物学史の再構築を大きな柱として,創発概念の時代的変化を追跡するとともに,オルガネラの細胞内共生説や生物対流などいくつかの具体的な創発事象についての解析を行った。米国生物工学情報センターのPubMedに含まれる32の主要学術雑誌の1965年から2014年までのすべての論文のタイトルと要旨について,出現する語彙の統計解析を行い,この40年間が大きく3つの時期に分かれること,特に2000年以降のポストゲノム時代には,創発的概念が強調されるようになったことを明らかにした。当初計画にはなかったことだが,パスツール研究所におけるアーカイブの調査を平成28年度にも行うことを計画している。それ以外は,当初計画に沿って,研究を進めていく予定である。最終年度では,これまでの研究をまとめるとともに,異なる2種類の生物の合体による進化として知られる細胞内共生説を題材として,生物学的新奇性の創発に関する考え方を整理したい。生命基礎論当初予定していたフランスでの資料調査が,パリでのテロ事件等の影響もあり,日程調整が遅くなり,滞在が短くなったことが一因である。ただし,かなり集中して作業したので,さしあたり必要な資料を調べることはできた。また,論文投稿がずれ込んで遅くなっているのももう一つの理由である。最終年度は,さまざまな論文を投稿する計画で,それに必要となる費用の支出が見込まれるので,大きな問題は生じないと考えている。
喉頭全摘出者が自助グループ参加によって得られる適応に及ぼす要因

喉頭摘出者の代用音声リハビリテーションを目的としたセルフヘルプ・グループ(SHG)会員710名を対象に、グループに参加することによるインテンシブとしてのセルフエフィカシーや、エンパワーメントする過程と影響要因を明らかにすることを目的とした。1.質問紙調査(平成13・14年度)261名(回収率36.7%)の有効回答を主成分、二元配置分散分析等により検討し、以下の結果を得た。(1)グループからは参加意欲や孤独感の解消などの【積極性の獲得】、代用音声獲得の【具体的能力獲得】、経験や感情をわかちあう【情緒的支援】を受けており、これらはエンパワーメントの要素であった。(2)上記の3因子は、食道発声獲得状況、ストレス対処パターン、日常生活負担感と関連が認められた。ストレス対処として【問題解決対処】【対人情緒的対処】が確認され、両者の傾向が強い程グループからの支援感は強かった。(3)原音発声を練習している初心クラスでは、ストレス対処の問題解決・対人情緒的対処ともに得点が低く、日常生活負担感が強い場合には、グループからの支援を感じる程度や参加率も低く、教室参加を中断しやすい結果が得られた。2.面接調査(平成14・15年度)質問紙調査による初心クラスは、広く提供される【情緒的支援】においても実感されていなかった。そこで面接調査により40名の初心クラス参加者の術前から退院後の生活体験を質的帰納的に分析し、238コードを抽出、55サブカテゴリー、20カテゴリーを形成した。すなわち初心者は失声という障害、社会的役割喪失の二重のパワーレス状態から、SHG参加により【失声の意味づけ】や【生活の折り合いのつけ方】などを周りのサポートによって確立し、次第に【食道発声獲得の必要性を自覚】し、【ライフスタイルの再編成を構築】しながら訓練継続に関する自己決定をしていることが判明した。研究計画書に沿い13年度は、喉頭全摘出者のセルフヘルプ・グループの銀鈴会において、自記式質問紙を用いた郵送調査を行った。1.調査対象:日本喉頭摘出者団体連合会加盟の発声教室会員710名のうち有効回答が得られた261名(回収率36.8%)。2.調査内容:関連研究とプレテストから、基本情報、5段階評定によるグループからの支援内容29項目を独自に作成した。3.分析方法:SPSSを使用、支援内容は因子分析を行い、訓練による発声クラス分けとの関連を分析した。有意差検定は分散分析を用いた。倫理的配慮は、主旨を説明し承諾書を得た。4.結果:平均年齢66.7歳。発声クラスは、初心14.2%、初級9.2%、中級8.4%、上級31%、電気喉頭使用13.8%、声優クラブ23.4%で構成されていた。支援内容は、積極性の獲得7項目、具体的能力獲得5項目、情緒的支援7項目の3因子(累積寄与率63%)が抽出された。発声クラスと支援内容は、支援内容3因子ごとに項目得点を合計し、発声クラスとの平均値と比較した。初心が、〔積極性〕16.6〔能力〕14.8.〔情緒的〕18.7と最も低かった。初級で〔積極性〕20.9〔能力〕19〔情緒的〕22.8で上昇幅も高かった。

中級、上級では、さらに得点が高く、声優クラブでは、〔積極性〕27.6〔能力〕23.3〔情緒的〕27.1と最も高くなった。また、3因子ともクラス間で有意差が認められた(<0.01)。5.考察:初心クラスでは発声が出来ないため、具体的能力の獲得が低いのは当然と考えるが、情緒的支援もほとんど実感されていなかった。クラスが上がる毎に全体的に得点は上昇しており、会話の上達が支援内容の受け止め方を左右する要因といえる。声優クラブでは、積極性の獲得が他の2因子よりも得点が高く、クラスへの参加頻度も高いことから、食道発声を教えるという援助者の役割獲得がその要因のひとつに挙げられる。平成14年度は以下のテーマで二つの学会に成果発表を行った。1.看護研究学会発表;「喉頭摘出者の日常生活負担感とセルフヘルプ・グループから得ている支援」2.看護科学学会発表;「喉頭摘出者のストレス対処とセルフヘルプ・グループから得ている支援」<成果内容>1.対象の概要;241名の対象者(男性90.4%)、平均年齢は66.7歳2.ストレス対処;因子分析により「情緒的対処」「問題解決対処」の2因子(寄与率44.5%)を抽出した。3.支援内容;「積極性の獲得」「情緒的支援」各7項目、「具体的能力獲得」6項目の3因子(寄与率63%)を抽出した。一元配置分散分析により対処パターンとの関連を見た。<結論>1.喉頭摘出者のストレス対処として「対人問題対処」「問題解決対処」が確認された。2.セルフヘルプ・グループからは「積極性の獲得」「具体的能力獲得」「情緒的支援」を受けていることが確認され、これらは相互に関連があった。3.食道発声が上達するにつれて、支援3因子の得点も上昇していた。喉頭摘出者のグループ参加目的は、食道発声の獲得にあるので、目的の到達状況に影響を受けていた。4.ストレス対処として「対人情緒的対処」や「問題解決対処」の傾向が強い喉頭摘出者は、グループから支援を受けていると感じる程度も強かった。5.「具体的能力の獲得」は上級クラスにおいて、「情緒的支援」は中級以上で、対処パターン間での有意差が認められた。参加当初の目的でもある食道発声の上達が満たされると、喉頭摘出者が持つ対処方法の差により、セルフヘルプ・グループからの支援の受け止め方も異なることを確認した。以上の横断的研究結果を踏まえ、最も支援を必要としている初心者クラスに焦点を当て、つぎのような目的に沿って縦断的研究を開始している。目的:「初心者クラスの中で初回参加者の生活体験を聞くことにより、中途脱落の理由を明らかにする」喉頭摘出者の代用音声リハビリテーションを目的としたセルフヘルプ・グループ(SHG)会員710名を対象に、グループに参加することによるインテンシブとしてのセルフエフィカシーや、エンパワーメントする過程と影響要因を明らかにすることを目的とした。1.質問紙調査(平成13・14年度)261名(回収率36.7%)の有効回答を主成分、二元配置分散分析等により検討し、以下の結果を得た。(1)グループからは参加意欲や孤独感の解消などの【積極性の獲得】、代用音声獲得の【具体的能力獲得】、経験や感情をわかちあう【情緒的支援】を受けており、これらはエンパワーメントの要素であった。(2)上記の3因子は、食道発声獲得状況、ストレス対処パターン、日常生活負担感と関連が認められた。ストレス対処として【問題解決対処】【対人情緒的対処】が確認され、両者の傾向が強い程グループからの支援感は強かった。
天皇制の法史学的考察-古代と近代-

主として、次の3つの柱に即して研究した。(1)王権の理論的研究、(2)古代天皇制研究、(3)西欧近代市民社会の法的側面の研究。(1)はマルクス『資本論』商品編における商品の呪術的性格と王のカリスマ的性格の比較的言及を掘り下げたもの、(2)は出雲論、(3)はsocietecivileを規律するlois civilesの本源的形態の研究である。そして、本応募研究に先行する私自身の近代天皇制研究と上記(3)とを総合して、日欧比較近代国制・法制論に関する論文も執筆した。21年度当初に提出した「研究実施計画」において、研究課題の第1にあげた「出雲関連の論文の執筆」は、「古代天皇制における出雲関連諸儀式と出雲神話」論文としてまとめられた。この論文は、『続日本紀』の記事などに散見される、出雲国造が天皇に対して賀詞などを奉上する儀式の意義について考察したものである。この儀式に関する諸研究は、二つの問題軸に即して、分岐が認められる。すなわち、Aこの儀式の挙行時点に関して、(1)この儀式が、出雲国造新任に際しての儀式であるのか、それとも、(2)天皇即位に際しての儀式であるのかという問題軸と、Bこの儀式の意義について、(1)天皇に対する国造の服属儀礼か、(2)天皇即位を出雲国造が寿ぐ儀礼か、(3)出雲国造祖神による諸神平定のことの天神に対する神話上の報告儀礼の現実における再現儀礼か、(4)天皇に対して出雲国造が行うタマフリ儀礼か、という問題軸である。通説は圧倒的に(1)(1)説であるが、大浦元彦氏は(2)(2)説、関和彦・森田喜久男両氏は(1)(3)説、菊地照夫氏は(1)(4)説を唱えられた。本稿は、以上のいずれにも批判的であり、独自の説を主張する。すなわち、(a)この儀礼の初見である716年や、これに次ぐ724年の儀式すなわち出雲関連諸儀式の原型(律令天皇制成立期における出雲関連儀式)においては、天皇即位儀礼の一環としての、大国主神の高天原=天皇王権への国譲り儀礼であったが、(b)8世紀中葉以降に変質が始まり、『延喜式』(10世紀初頭)には、(1)(3)の儀式として調え直された、とする見解である。以上のうち、(a)については、儀式の祭儀神話としての『古事記』神話論の観点から、(b)については、『延喜式』収載の「出雲国造神賀詞」の分析を通じて、論証した。全く新しい出雲神話・出雲関連儀式論を構築し、このことを通じて、古代国制史全体に関する通念の根本的見直しのための問題提起が出来たと考える。私は、2010年度の「研究実施計画」として、次のように記した。「今年度は、上記(2)の研究に力を注ぐ。具体的には、(1)「日本近代法の特質-<臣民=私民の法>または<不全の市民法>-」(仮題)論文の執筆に取り組むとともに、(2)日仏近代の全法体系(公法=天皇制・君主制のみならず、民法をも含む全法体系)の比較研究に着手する」。(1)について。同名の論文を執筆した(ただし、出版社の編集の遅れにより、まだ刊行されていない)。論文の目次は次の通りである。「1.課題設定、2.フランス近代法-<市民法>、3.日本近代法-<臣民=私民の法>または<不全の市民法>、4現代日本法-不全の市民法の持続、5.<近代主義>の継承の課題」。目次から推測されるように、この論文は、フランス近代法(市民の法)との対比において、近代天皇制下の日本近代法は、市民の法が不全であったことを、民法典起草者の穂積陳重と、憲法学者の穂積八束の法思想を中心に、解明したものである。以上のうち、天皇制的法体系の対極にあるものとして理解されるフランス近代法の原初の姿を、次に述べる研究において、遂行した。(2)について。「近代民法の原初的構想-1791年フランス憲法律に見えるCode de lois civilesについて-」(『民法研究』第7号、信山社)を発表した。目次は次の通り。「1.1791年民法典構想の復元、2.全社会関係を規律する根本法-1791年民法典構想の特質(I)-、3.人権の法と秩序の法droit priveとdroit public-1791年民法典構想の特質(II)-、4.人格の法と財産の法:近代インスティトゥティオネスの原型-1791年民法典構想の特質(III)-、5.フランス近代法史における1791年民法典構想の位置、結び-広中俊雄氏の民法体系論に寄せて-」。