hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
周生期及び成長期におけるGABA抑制から探る脳の性差とホルモンの制御機構の解明

前年度はこの抑制機構の違いを明らかにするため、GABAA受容体サブユニットの発現解析をシナプス部、シナプス周囲とで比較したが顕著な違いがみられなかったため、条件を変えて再検討を行った。GABAA受容体サブユニットα1、α4、α5、β2/3、γ2、δ、の発現を解析したところ、PRIP1-KOマウスではシナプス直下の膜でα4サブユニットの発現減少がみられ、γ2サブユニットはシナプス直下の膜、シナプス周囲においてわずかな発現の減少がみられた。これは、これまでのパッチクランプ法による単一細胞レベルでのシナプス電流解析の結果において、zolpidem,ethanolによるトニック電流の減少と一致するものとなった。脳の性差を探るためGABAに焦点を当て、行動解析、シナプス解析、および関連タンパクの発現解析を行った。野生型の雌雄差行動解析では、新規環境下における活動量は雄雌とも時間経過とともに活動量は減少する傾向がみられたが、雄と比較してOVXマウスは活動量の減少が緩やかで、雄より行動量は高かった。PRIP-1 KOでは雌は野生型とKOで差はみられなかったが、雄はOVXマウスが雌に近く時間経過に伴う活動量低下が少なかった。GABAネットワークの違いを調べるため、扁桃体のGABAシナプス周囲の受容体サブユニット発現解析をシナプス部、周囲、前シナプス部に分けてウエスタンブロッティング法を行うことに成功した。1)マウス胎仔脳前頭前野へのGFP遺伝子子宮内電気穿孔法での導入。2)マウス胎仔脳へのGFP遺伝子導入により可視化した移動細胞の[Cl-]i、トニックカレント測定(胎生期、出生直後の性差):これまでに申請者らが確立した、大脳皮質錐体細胞でのGABA作動性トニックカレント研究の手法を生かし、まずマウスの子宮内胎仔脳室帯の神経前駆細胞に、電気穿孔法によりGFP遺伝子を繋いだプラスミドを導入し移動中の細胞に特異的にGFPを発現させ移動細胞を可視化する。数日後に仔ラットの脳スライス標本を作成して、移動中の前頭前野の皮質板細胞(GFP positive)を蛍光顕微鏡下で確認し[Cl-]iと細胞周囲のGABAによるトニックシグナルをグラミシジン穿孔パッチクランプ法で測定して移動状態と[Cl-]i、トニックシグナルとの相関を雌雄で比較し解析する。3)周生期、シナプス形成期脳の雌雄差解析1)2)はおおむね計画通り遂行した。3)に関してはシナプス形成期後の解析を先行して行っている。このほか、今後の解析に有用である細胞をシナプス部、シナプス周囲、細胞質に分画する手法を確立させた。27年度に引き続き成長期の行動解析の薬物による影響を引き続き行う。周生期に母子分離を行うと成長後のストレスが脳に影響することを雄マウスでは確認しているので、雌との差を解析する。神経生理学前年度に引き続き、周生期及び成長期マウス脳の雌雄差解析を行う。次年度は特に行動解析を中心に不安、抑うつの雌雄差解析およびそれに対する性ホルモンの関与を解析する予定である。課題は、周生期の性差の判別方法である。動物飼育購入及び飼育費用が予定額より少なかったため、残額が生じた。消耗品も残存しているものを優先して使用した。26年度は既存の機器を用いた電気穿孔法およびパッチクランプ法の実験を主に行ったため備品の購入はしなかった。また、消耗品も既存のものを優先して使用した。
脳内注意システム，動機付けシステムにおけるV4野の役割

サルを用いた単一神経細胞活動記録の研究により,視覚領野の神経細胞が,視覚的注意の状態に相関して活動を変化させることが多数報告されてきた.これらの研究では,活動を記録中の神経細胞の受容野に物理的に同一の視覚刺激を提示する一方で,動物が受容野内の刺激に注意を向けた条件と向けない条件で生じた細胞活動の差を,注意によるものと解釈してきた.しかしながら,これらの研究では注意を向けるべき刺激には常に報酬が連合されており,観察された細胞活動の差は,実は注意によるものではなく報酬期待を反映していた可能性がある.本研究では,視覚野の神経細胞活動を,注意と報酬(とりわけ動機付け)の両方を要因にして細胞活動が変動する統計モデルを用いて解析し,視覚野の神経細胞活動における報酬系の関与を検証することを目的としている.サルに注意研究で用いられてきた視覚探索課題を訓練し,課題遂行中に第四次視覚野(V4野)から単一神経細胞活動を記録する.報酬の量を試行ごとに変えることで,動物の報酬期待,とりわけ動機付けが異なる条件を導入する.もし,V4野の神経細胞活動が報酬系に関与していれば,報酬以外の実験条件が同一であっても,報酬量に依存して活動の変化が観察されるはずである.平成30年度は1頭目のサルを導入した.サルを用いた実験を行う際に必要となる獣医学的装備を整え,行動課題の訓練を行うためにサルの馴化を進めた.これと並行して実験装置の製作を行った.開始からちょうど1年目となるこの時期には,1頭目のサルの行動課題の訓練を完了し,神経細胞活動の記録実験に取り掛かる予定であった.しかしながら,行動課題の訓練はこれから行う状況であるため「やや遅れている」と評価した.遅れてしまった主要な理由は,実験スペースの確保に時間を要し,サルの導入が5ヶ月ほど遅くなってしまったことにある.平成31年度(令和元年度)は1頭目のサルに行動課題を訓練し,課題遂行中に神経細胞活動を記録する.並行して2頭目のサルを導入し行動課題を訓練し,完了次第,神経細胞活動の記録に進む方針である.サルを用いた単一神経細胞活動記録の研究により,視覚領野の神経細胞が,視覚的注意の状態に相関して活動を変化させることが多数報告されてきた.これらの研究では,活動を記録中の神経細胞の受容野に物理的に同一の視覚刺激を提示する一方で,動物が受容野内の刺激に注意を向けた条件と向けない条件で生じた細胞活動の差を,注意によるものと解釈してきた.しかしながら,これらの研究では注意を向けるべき刺激には常に報酬が連合されており,観察された細胞活動の差は,実は注意によるものではなく報酬期待を反映していた可能性がある.本研究では,視覚野の神経細胞活動を,注意と報酬(とりわけ動機付け)の両方を要因にして細胞活動が変動する統計モデルを用いて解析し,視覚野の神経細胞活動における報酬系の関与を検証することを目的としている.サルに注意研究で用いられてきた視覚探索課題を訓練し,課題遂行中に第四次視覚野(V4野)から単一神経細胞活動を記録する.報酬の量を試行ごとに変えることで,動物の報酬期待,とりわけ動機付けが異なる条件を導入する.もし,V4野の神経細胞活動が報酬系に関与していれば,報酬以外の実験条件が同一であっても,報酬量に依存して活動の変化が観察されるはずである.平成30年度は1頭目のサルを導入した.サルを用いた実験を行う際に必要となる獣医学的装備を整え,行動課題の訓練を行うためにサルの馴化を進めた.これと並行して実験装置の製作を行った.開始からちょうど1年目となるこの時期には,1頭目のサルの行動課題の訓練を完了し,神経細胞活動の記録実験に取り掛かる予定であった.しかしながら,行動課題の訓練はこれから行う状況であるため「やや遅れている」と評価した.遅れてしまった主要な理由は,実験スペースの確保に時間を要し,サルの導入が5ヶ月ほど遅くなってしまったことにある.平成31年度(令和元年度)は1頭目のサルに行動課題を訓練し,課題遂行中に神経細胞活動を記録する.並行して2頭目のサルを導入し行動課題を訓練し,完了次第,神経細胞活動の記録に進む方針である.当初の計画では平成30年度にサルに行動課題を訓練する予定であったため,必要な実験装置の費用を計上していた.これらの費用は平成31年度に使用する予定である.また,国内で開催される学会に参加するために計上していた旅費も来年度以降に使用する.
幕末・明治期における進取的音楽感性の形成に関する歴史的研究-長崎における洋楽・清楽・民謡の相互交流史の復元-

平成1516(20032004)年度における研究で両名の挙げた成果は,以下の通りである。(1)江戸期から明治期にかけての長崎で伝承され,演奏に供されたことが確実な明清楽関係の工尺譜曲集を検討し,可能な限り五線譜化した。対象としたものは,江戸期では『花月琴譜』(1831年,大坂),『清楽曲譜』(1837年),『月琴曲譜』(1842年),『清風雅譜』(1859年江戸),『月琴詩譜』(1842年,江戸)であり,明治期のものは『西泰楽意』(1887年),『月琴・雑曲・清楽の栞』(1888年,東京),『月琴・俗曲今様手引草』(1889年,東京),『明笛・胡笛・月琴独習新書』(1910年,大阪)等である。着目したのは,工尺譜に対し朱書きで音長・休符などが示されているもの,または五線譜の影響によるものと思われる新種の記譜法によるものである。この結果有意義に五線譜化できた曲は江戸期20曲,明治期19曲であった。(3)明治期に入ってからよく利用されたことが看取できるのは,長原梅園編『月琴・俗曲今様手引草』であり,この中に採録されている西洋歌曲は,清楽的感性を深く身につけたはずの長原が,あらためて感動し普及を図ったものとして特筆に価する。その代表的なものは,「朝日のひかり」(「蛍の光」),「見わたせば」(「結んで開いて」)などであり,前者はスコットランド民謡,後者はルソーの作曲にかかるものである。また,長崎では工工四譜で書かれた沖縄歌曲も演奏されていた。これらの曲が積極的に受容された事実は,幕末・明治期において,民衆の間に進取的音楽感性が拡大・浸透したことを示す指標となると判断される。本年度の研究の中心は,長崎を中心に演奏された明清楽の曲調を復元することにある。今年度は,長崎県立長崎図書館郷土資料室および長崎市立博物館所蔵の明清楽譜を悉皆調査した。今年度の成果は,ほぼ次のようである。(1)明清楽の日本への導入は1660年代に始まるが,これらが流行歌となるのは文政年間(18181830)以後であり,清楽の代表的曲目「九連環」およびその替歌とされる「看々節」がそれを先導した。江戸時代の明清楽譜の出版は,この流行を期として開始され,『花月琴譜』(1831年,大坂),『清楽曲譜』(1837年),『月琴曲譜』(1842年),『清風雅譜』(1859年,江戸),『月琴詩譜』(1860年,江戸)などが出版された。これらをすべて撮影し,その異同を調査した。またこれらの楽譜に朱書きでリズムを示しているものがあり,それを手がかりに五線譜化を進めているが,これらのうち,音楽的に理解可能なのは約20曲である。なお,これらの清楽曲の多くは明治期の楽譜にも収録されているので,今後双方をくわしく比較して江戸時代の記譜法の理解を深め,納得のいく形で五線譜化を進めたいと考えている。

(2)明治期の清楽譜は上記の資料館所蔵のものだけでも20種類以上あり,それらをすべて写真撮影した。そのうち,『西泰楽意』(1887年),『月琴雑曲・清楽の栞』(1888年,東京),『月琴俗曲今様手引草』(1889年,東京)には,音長,リズム,小節などを示す記号の詳細な説明がなされており,これに従い約60曲の五線譜化を現在推進中である。(3)明治期に出版された清楽譜の中には,俗曲・唱歌・民謡など幕末から明治初期にかけての日本で伝承・流布されたものが約20曲見られ,かつ印刷楽譜の裏面に筆写されたものまであることを発見した。メロディーの復元中である。(4)上記の楽譜の中には,清楽曲・日本歌曲,文部省唱歌に採用された西洋曲などがあり,これらを受容した民衆の感性をさぐる手がかりとして有益と思われる。この点に留意しつつ,来年度に立ち入った分析を行いたい。本年度は,昨年度に引き続き,工尺譜として出版された歌曲集のうち,長崎で伝承され演奏されたことが確実な曲を五線譜化し,広く研究者が歴史資料として利用できるようにする作業を進めた。予定通り,歌曲集に採録された局の中から,演奏されたことを示す痕跡の明らかなもの100曲を五線譜化することができた。演奏されたことを示す痕跡とは,楽譜に朱筆で音長い・休止・装飾音などを示す記号が付されていることを指す。この成果は昨年度の成果と合わせ報告書にまとめた。この作業の結果,浮かび上がりつつある諸点を次に記したい。第一に,幕末に出版された明楽譜ならびに清楽譜の多くが長崎にもたらされ,愛奏されたことは,多くの記録に示されているが,いわゆる明清楽のうち実際に演奏されたことが確認できるのは,ごく少数の歌曲に限られていることが明らかになった。それらは「九連環」「茉莉花」などの短く親しみやすい歌曲,および器楽曲「中山流水」などで,戯曲的な「三国志」など長大な難曲は,演奏されないまま放置されたと判断される。第二に,明治14年(1881)年出版の文部省『小学唱歌集』所収の西洋歌曲が愛奏され,とくにのちに「蛍の光」として普及するスコットランド民謡など,軽快で明るい曲がよく演奏されたことが明らかになった。第三に,邦楽曲を愛奏する風潮は決して衰えず,恋を語る歌がよく演奏されたことが確認できる。とくに邦楽曲には八度(オクターブ)を越す九度または十度の跳躍が多用されたものが多く,この演奏を容易にするためには月琴などの楽器の助けが必要であったと思われ,そのことを示す記号も散見される。第四に,沖縄音楽,とくに楽天的な雰囲気を持つ曲が愛奏されたことが立証できる。これらを要するに,清国・西洋・日本本土・沖縄などの歌曲が同時に愛奏されることにより,進取的音楽感性が民衆の間に伝播・浸透したと判断されるのである。
顎顔面形態のパターン形成に関与する分子機構の解析

顎顔面は胎生期、神経堤から遊走して来た細胞が、頭部腹側でいくつかの顔面突起を形成し、それらが癒合・分化することで形成される。口唇を含む上顎は、神経堤細胞由来の顔面突起である上顎突起と内側鼻突起の癒合により形成が始まる。LOM homeobox遺伝子は、個体形成の設計図となる遺伝情報と考えられ、組織のパターン形成をつかさどることが示唆されている。われわれは、LIM homeobox遺伝子のうちL3/Lhx8が、chick embryoの上顎突起と下顎突起に特異的に発現することを示し、上皮由来因子がL3/Lhx8遺伝子発現を誘導していることを明らかにした。Chickは2次口蓋が癒合せず自然裂を発症するなど、哺乳類と相違点がある。そこでmouseとchickのL3/Lhx8遺伝子がcodeする蛋白配列について比較した。Chick L3/Lhx8EST cloneはmouseと90%以上のhomologyを示し、ほぼ共通であることを確認した。Chick embryoの上顎突起を摘出し、RT-PCRを入った結果、L3/Lhx8は上顎突起の形成が始まるstage19HHから増加し、上顎突起と内側鼻突起が癒合するstage27HHをピークに減少した。また上顎突起と内側鼻突起が癒合する前では(stage26)、上顎突起、内側鼻突起の癒合する双方の部位に、強い発現が認められた。また、stage18 chick embryoの上顎突起の上皮を除去すると、上口唇に裂を生じ、著名な上顎の劣成長が認められた。L/Lhx8の発現は、上皮直下の間葉細胞に見られることから、上皮-間葉系の相互作用により発現し、上唇の形成にL3/Lhx8が深く関与していることが明らかとなった。顎顔面は、複雑な構造から成り、その形成メカニズムは不明な点が多い。LIM homeobox遺伝子は、個体形成のボディープランとなる遺伝情報とされ、顎顔面の形成過程を司ると考えられる。これまでわれわれは、LIM homobox遺伝子のうちL3/Lhx8が、chick embryoの上顎突起と下顎突起に特異的に発現することを示し、上皮由来のFGF-8bあるいはTGF-β3がL3/Lhx8遺伝子発現を誘導していることを明らかにした。本年度は、chick L3/Lhx8遺伝子の解析をすすめ、顎顔面形成期における働きについて検討した。Chick embryoはmouseと異なり2次口蓋が癒合せず自然裂を発症する。Chick L3/Lhx8EST cloneはmouseと90%以上のhomologyを示し、ほぼ共通であることが明らかとなった。次に、上顎突起におけるL3/Lhx8遺伝子発現の定量解析を行った。Chick embryoの上顎突起を摘出し、RT-PCRを行った結果、L3/Lhx8は上顎突起の形成が始まるstage19 HHから増加し、上顎突起と内側鼻突起が癒合するstage27 HHをピークに減少した。以上のことから、L3/Lhx8遺伝子はchickとmouseと共通な構造であり、上顎突起が癒合し上顎が形成される時期に発現が強くなることが明らかとなった。口唇を含む上顎は、神経堤細胞由来の顔面突起である、上顎突起と内側鼻突起の癒合により形成が始まる。LIM homeobox遺伝子は、個体形成の設計図となる遺伝情報と考えられ、組織のパターン形成をつかさどることが示唆されている。われわれは、これらの形成メカニズムにLIM homeobox遺伝子が関与していることを報告した。

これまでの研究により、LIM homeobox遺伝子のうちL3/Lhx8は、顔面突起が癒合する時期に強く発現することが明らかとなっている。そこで、同時期のchick embryoから凍結薄切標本を作製し、L3/Lhx8をプローブとしてin situ hybridizationを行った。上顎突起と内側鼻突起が癒合する前stage 26では、上顎突起、内側鼻突起の癒合する双方の部位に、強い発現が認められた。Chick embryoを用いたRT-PCRでは、stage 27前後に発現量が増加していた。また、stage 18 chick embryoの上顎突起の上皮を除去すると、上口唇に裂を生じ、著明な上顎の劣成長が起こることも確認した。L3/Lhx8の発現は、上皮直下の問葉細胞に見られることから、上皮一間葉系の相互作用により発現し、上唇の形成に:L3/Lhx8が深く関与していることが明らかとなった。
cDNA発現クローニング法を用いたRasの制御因子の探索

がん遺伝子Rasは、様々な腫瘍で活性化変異が見られ、Rasが関与するシグナルを抑制することは重要な課題である。本研究では、活性化Ras遺伝子でがん化した細胞株"DT"をモデル細胞に用い、その悪性化した性質を抑制する活性を持つ、すなわちRasの関与するシグナルを抑制する遺伝子を、同定することを試みた。一連の遺伝子スクリーニングの結果、約80個の候補遺伝子が同定された。1)cDNA発現クローニング法を用いてRasの制御因子を探索するため、Phagemid型のcDNA発現ベクベクターλHK2を開発した。このベクターには、cDNAを発現させるためのEF1αプロモーター、cDNAクローニング部位、培養細胞での選択マーカーであるblasticidin耐性遺伝子、大腸菌での選択マーカーであるampicillin耐性遺伝子、プラスミド部分を環状化するのに必要な2つのloxP部位を保持している。このベクターの開発によりより、以下のライブラリーの作製が可能となった。2)ラット脳cDNAライブラリーより、PI-SceIとI-CeuIにより、cDNAを切り出し、λHK2に挿入し、2つのcDNA発現ライブラリーを作製した。平均cDNAサイズはそれぞれ2.0、4.1kbであり、大部分がcDNAを含むことより、以下のトランスフェクション実験が可能となった。3)NIH3T3細胞由来でRasでトランスフォームした細胞株DTに、カルシウム-リン酸共沈法で、ライブラリーDNAをトランスフェクトした。Blasticidinを含む培地で細胞を選別後、コロニーの形態を顕微鏡で観察することにより、リバータントを同定し、コロニーを単離した。一連の実験により700個以上のリバータントを単離した。4)リバータントから、ゲノムDNAを抽出し、Creリコンビナーゼを働かせることにより、トランスフェクトしたcDNAを含むプラスミド部分を環状化し、大腸菌内に回収した。回収したプラスミドを再びDT細胞にトランスフェクトし、リバータント誘導活性があるかどうか検討した。現在、300個以上のリバータントから、約70個のリバータント誘導活性があると思われる遺伝子が同定され、これらの中にはこれまでRasとの関連が報告されていない遺伝子も含まれると考えられる。1)NIH3T3細胞由来で、がん遺伝子Rasによりトランスフォームした細胞株DTに、カルシウムーリン酸共沈法を用いて、本研究で作製されたphagemid型のcDNA発現ライブラリーをトランスフェクション後、接着性の強い細胞を選別し、その細胞のコロニーの形態を顕微鏡で観察することにより、形態が正常細胞に近くなった"リバータント"を同定・単離した。一連の実験により700個以上のリバータントを得、そのうちの約半数を用いてゲノムDNAよりトランスフェクトしたcDNAを含むプラスミド部分の回収を進めた後に、再びDT細胞にトランスフェクトすることにより、リバータント誘導活性を再現できるプラスミドを約80個回収した。2を)cDNA部分の5'側のDNA配列を決定した後に、ホモロジーサーチにより遺伝子名を知るとともに、完全長のcDNAでありそうかという情報を得た。これらの結果から得られた遺伝子はさまざまな機能に分類された。また、得られた遺伝子の中には、DNA配列は知られているものの文献上あまり解析されていない遺伝子も含まれていた。3)得られた遺伝子を過剰発現することにより、Rasのシグナル伝達経路上にあるMAPキナーゼやAktキナーゼのリン酸化にどのような影響を与えるか検討を進めた。また、得られた遺伝子の中から数個の遺伝子を選び、N末側あるいはC末側にMycタグを付け、細胞のどこに存在するか検討した。これらの中には構造や類似遺伝子の機能から予測される場所とは異なるものも含まれていた。得られた遺伝子の機能を知るために、イーストTwo-hybridスクリーニングを行い、結合タンパク質の候補の探索を進めた。がん遺伝子Rasは、様々な腫瘍で活性化変異が見られ、Rasのシグナルの制御は重要な課題である。本研究では、マウス線維芽細胞由来のNIH3T3細胞を活性化Ras遺伝子でがん化した細胞株"DT"を用いて、Rasによる悪性形質を抑制する活性を持つ、すなわちRasの介するシグナルを抑制する遺伝子を、cDNA発現ライブラリーからスクリーニングすることにより同定することを試みた。スクリーニングに先立ち、phagemid型のcDNA発現ベクターを開発し、これを用いて、完全長cDNAに富んだラット脳cDNA発現ライブラリーを作製し、今回の発現クローニング法に用いた。DT細胞にcDNA発現ライブラリーを導入後、悪性形質の抑制された接着性の強い細胞を選別し、最終的には顕微鏡観察により正常復帰株“リバータント"を単離した。一連の実験でリバータントが700個以上得られ、そのうちの約半分を用いて、リバータントの中からリバータントを誘導する活性を持つと思われる候補遺伝子cDNAを80個得た。Rasの下流のシグナルに関わるMAPキナーゼやAKTキナーゼのリン酸化について、これら候補遺伝子をトランスフェクションしたことによる影響を調べた後に、候補遺伝子の中から、あまり研究のされていないものに特に注目して研究を進めた。

例えば、リバータントHK2-2A4に含まれていた遺伝子は、データベースGeneCardの情報を見ると、核内に存在しクロマチンの形成の制御に関わっていると考えられていたが、実際に実験を進めると、タンパク質はほとんど細胞質に存在することが明らかとなった。また、結合タンパク質を調べるとMAPキナーゼ関連キナーゼなどが同定された。このように、候補遺伝子の中には、これまでRasの介するシグナルとの関係が知られていないものも含まれており、今後、創薬のためのヒントを提供すると考えられる。本研究の第1の目的であるphagemid型のcDNA発現ベクターの開発とcDNA発現ライブラリーの作製についてはすでに成功している。現在、それを用いて、Rasタンパク質の活性を制御する新たな遺伝子を同定する段階にあり、複数の候補遺伝子が得られている。24年度が最終年度であるため、記入しない。Rasの活性を制御する候補遺伝子の機能をより明らかにするために、過剰発現やノックダウンを適宜活用し、細胞の増殖や形態、シグナル伝達経路への影響、結合タンパク質の同定などをさらに進め、Rasに対する作用機序や機能を明らかにし、論文として発表できるように進めていく予定である。
スポーツ選手における筋硬度の低下と筋損傷、痛みの関連性の検討

1研究目的超音波診断装置の機能の一つであるエラストグラフィは,専用のカプラとアタッチメントを用い,組織の柔軟性を数値で表すことができる.この機能を用いて筋の柔軟性を定量化することで,筋肉の状態や外傷の評価,診断に使用できる可能性がある.エラストグラフィを用いて健常成人の肩関節深部筋の筋硬度を計測して,継時的変化を観察すること.2研究対象、方法対象は10代40代の健常成人男性65名(10代50名, 20代5名, 30代5名, 40代5名)とした.10代の対象者は球技(主に硬式野球)を日常的に行っている者とした.調査アンケート(身長,体重などの基本情報,スポーツ歴,痛みの有無等の聴取)を配布する.アンケートに漏れがないことを確認した上,身体機能計測(肩関節周囲の筋硬度測定,関節可動域測定,筋力測定等)を測定する.対象者の中から痛みがあった者、過去に筋損傷を生じた対象者を抽出し,筋硬度との関連を検討する.また対象者の筋硬度数値を年代別に比較検討する.3結果球技を行っている10代の対象においては、球技歴、練習時間に相関なく、年齢が上がるにつれて肩関節周囲筋の筋硬度は有意に上昇した.全対象を比較しても年齢が上がるにつれて筋硬度が上昇する傾向があった.また痛みがある選手は、痛みのない選手と比較し、僧帽筋上部/棘上筋の割合が有意に大きかった.上記の結果より、経験年数に関わらず、経年に伴いストレッチを継続して行う必要が示唆された.1研究目的超音波診断装置の機能の一つであるエラストグラフィは,専用のカプラとアタッチメントを用い,組織の柔軟性を数値で表すことができる.この機能を用いて筋の柔軟性を定量化することで,筋肉の状態や外傷の評価,診断に使用できる可能性がある.エラストグラフィを用いて健常成人の肩関節深部筋の筋硬度を計測して,継時的変化を観察すること.2研究対象、方法対象は10代40代の健常成人男性65名(10代50名, 20代5名, 30代5名, 40代5名)とした.10代の対象者は球技(主に硬式野球)を日常的に行っている者とした.調査アンケート(身長,体重などの基本情報,スポーツ歴,痛みの有無等の聴取)を配布する.アンケートに漏れがないことを確認した上,身体機能計測(肩関節周囲の筋硬度測定,関節可動域測定,筋力測定等)を測定する.対象者の中から痛みがあった者、過去に筋損傷を生じた対象者を抽出し,筋硬度との関連を検討する.また対象者の筋硬度数値を年代別に比較検討する.3結果球技を行っている10代の対象においては、球技歴、練習時間に相関なく、年齢が上がるにつれて肩関節周囲筋の筋硬度は有意に上昇した.全対象を比較しても年齢が上がるにつれて筋硬度が上昇する傾向があった.また痛みがある選手は、痛みのない選手と比較し、僧帽筋上部/棘上筋の割合が有意に大きかった.上記の結果より、経験年数に関わらず、経年に伴いストレッチを継続して行う必要が示唆された.
敗血症性ショックにおける血漿キニン系とalpha_2マクログロブリンの役割

1.エラスターゼ産生緑膿菌株と非産生株の何れか10^9個をフィブリン塊に包んでモルモット腹腔内に接種して急性腹膜炎を発生させたところ、何れの場合も菌接種2時間目頃より血中エンドトキシン濃度が上昇して敗血症に陥った。産生株の場合は、78時間目に死亡したが、主な剖検所見は諸臓器の微小循環系の拡張を中心とした循環障害であり、敗血症性ショック死が疑われた。一方、非産生株では、1012時間目に心嚢液貯留による心タンボナーゼで死亡した。2.頸動脈カテーテル法にて動脈圧を測定しながら、接種後4時間目に、抗モルモットalpha_2マクログロブリン(alpha_2M)ウサギIgGF(ab′)_2を静注してalpha_2Mを除去すると、産生株接種の場合のみ急激なショックを発症して死亡した。3.alpha_2Mを除去する直前に、緑膿菌エラスターゼの合成阻害剤もしくはヒトalpha_2Mを静注しておくと、このショックは阻止された。alpha_2Mを除去する直前に、抗モルモットハーゲマン因子ウサギIgGF(ab′)_2を静注して流血中のハーゲマン因子を除去しおいた場合にも、このショックは惹起されなかった。以上の結果は、【.encircled1.】少なくともこのモデルにおける敗血症性ショックが、緑膿菌が分泌するエラスターゼによるハーゲマン因子・カリクレイン・キニン系(血漿キニン系)の活性化によって生じること、及び、【.encircled2.】細菌性プロテアーゼに対する血漿インヒビターであるalpha_2Mが、敗血症性ショック阻止に不可欠な役割を果たしていることを示しており、本研究プロジェクトの目的は、ほぼ達成されたと考えられる。
ポリモーダル受容器の侵害刺激における分子薬理学的研究

蛋白質燐酸化酵素阻害剤であるW-77をアフィニティーカラムのリガンドとして用いて、我々はSDS-蛋白質電気泳動上、25kDaの蛋白質の発見に成功した。我々はこの蛋白質をニューロカルシンと命名した。ニューロカルシンはウシ大脳より精製された3EFハンド型のカルシウム結合蛋白質である。その特徴として1)主に中枢神経系に豊富に存在すること、2)少なくとも6つのアイソフォームが存在していること、3)W-77結合能におけるカルシウム感受性はカルモデュリンより高いこと、等が挙げられる。精製蛋白質によるポリクローナル抗体を作製し、組織分布を調べたところ、ニューロカルシンは特に脊髄神経節や前庭及び螺旋神経節の神経節細胞に強く発見されていた。途中の神経線維には抗体反応性は弱く、神経節細胞の神経終末に特に強く発現されていた。cDNAクローニングしたニューロカルシン遺伝子由来の発現蛋白質に対する抗体では神経節細胞の核が強く染まり、細胞質は染まらなかった。また、この発現蛋白質を固相化したアフィニティーカラムに数種類のウシ脳由来の蛋白質がカルシウム依存的に結合した。このことからニューロカルシンは知覚神経系に於て多機能な役割を果たしていることが示唆された。
高温断熱層の断熱性能におけるチャンネリング効果の研究

多孔質断熱層において,断熱剤と境界壁との間の熱膨張差にもとづく間隙の発生あるいは断熱剤の不均一充てん等に起因する内部対流のチャンネリングが,どの程度断熱性能の低下をもたらすかを,実験と解析の両面から検討した.最も基本的な断熱系として,側面から加熱され対向面を冷却された鉛直断熱層および下方から加熱された水平断熱層を対象とした.その実験的検討に際して,最高圧力8MPa,外径705mm,高さ800mmの圧力容器に耐圧冷却面を組み込み,ガラス粒子と窒素ガスからなる多孔質層を製作し,高温高圧断熱層を模擬した.実験結果によれば,間隙の大きさ,層内気体圧力により,対流発生の限界レイリ数が変化すること,間隙の発生は,条件によって,熱伝達を抑制する場合もあるし,促進することもあることを示している.すなわち,間隙部流動抵抗の減少が対流の発生を促進し,断熱性能を低下させる方向に働くと同時に,圧力が低く,レイリ数が低いとき,隙間空間の対流駆動力が弱く,間隙部流体の熱伝導率が小さいため,逆に断熱性能はむしろ増大させる方向に作用することがあり得ること,この両作用の相対的大きさによって断熱層熱伝達特性へのチャンネリングの効果が定まることを示している.この解析にあたっては, Brinkmanモデルに等価なBeaversJosephのスリップ条件を検討・考察し,この界面境界条件を用いるないしは狭い間隙内のHele-Shaw流れと多孔質内流れのアナロジを用い,また数値解析により層内対流発生の確認を行い,これにより層内対流発生の限界条件および断熱性能の,修正レイリ数および多孔質構造,間隙形状への依存性を明らかにし,それらの解析結果が鉛直および水平多孔質層に関する本実験結果ともかなりよく一致することを示した.なお,壁面近傍で多孔質を構成する固体の存在が制限され空隙率が局所的に増大する場合にも,等価間隙の概念を用い,同様のチャンネリング効果の説明を試みた.多孔質断熱層において,断熱剤と境界壁との間の熱膨張差にもとづく間隙の発生あるいは断熱剤の不均一充てん等に起因する内部対流のチャンネリングが,どの程度断熱性能の低下をもたらすかを,実験と解析の両面から検討した.最も基本的な断熱系として,側面から加熱され対向面を冷却された鉛直断熱層および下方から加熱された水平断熱層を対象とした.その実験的検討に際して,最高圧力8MPa,外径705mm,高さ800mmの圧力容器に耐圧冷却面を組み込み,ガラス粒子と窒素ガスからなる多孔質層を製作し,高温高圧断熱層を模擬した.実験結果によれば,間隙の大きさ,層内気体圧力により,対流発生の限界レイリ数が変化すること,間隙の発生は,条件によって,熱伝達を抑制する場合もあるし,促進することもあることを示している.すなわち,間隙部流動抵抗の減少が対流の発生を促進し,断熱性能を低下させる方向に働くと同時に,圧力が低く,レイリ数が低いとき,隙間空間の対流駆動力が弱く,間隙部流体の熱伝導率が小さいため,逆に断熱性能はむしろ増大させる方向に作用することがあり得ること,この両作用の相対的大きさによって断熱層熱伝達特性へのチャンネリングの効果が定まることを示している.この解析にあたっては, Brinkmanモデルに等価なBeaversJosephのスリップ条件を検討・考察し,この界面境界条件を用いるないしは狭い間隙内のHele-Shaw流れと多孔質内流れのアナロジを用い,また数値解析により層内対流発生の確認を行い,これにより層内対流発生の限界条件および断熱性能の,修正レイリ数および多孔質構造,間隙形状への依存性を明らかにし,それらの解析結果が鉛直および水平多孔質層に関する本実験結果ともかなりよく一致することを示した.なお,壁面近傍で多孔質を構成する固体の存在が制限され空隙率が局所的に増大する場合にも,等価間隙の概念を用い,同様のチャンネリング効果の説明を試みた.1.圧力容器(最高使用圧力8MPa,外径705mm,高さ800mm)に耐圧冷却面を組込み、ガラス粒子と窒素ガスからなる多孔質層を製作し、高温断熱層の模擬試験を行ない、チャンネリング効果により断熱性能の著しい低下の生じ得ることを実験的に確認した。2.鉛直多孔質層を対象とした温度分布の測定を行ない、これがチャンネル部対流と密接に関連すること、同対流が強くなれば温度変化が壁面近傍に集中し、極限としては多孔質層本体の熱抵抗の影響が小さくなること等が実験的に確められた。3.理論解析においては、間隙部対流と多孔質内対流の界面境界条件にBeavers-Josephの条件を用いて速度分布を決定し、従来の本研究者らの鉛直多孔質層内自然対流熱伝達の解析を、壁面チャンネリング効果を含むように拡張を行ない、局所チャンネリングの効果が断熱層全体の熱抵抗にどう関連するかを明らかにした。この解析結果は実験結果との比較に良い一致をみた。4.以上により、チャンネリングの存在が、一方で流動抵抗を減少させる効果(Darcy抵抗の減小による伝熱促進作用)をもち、他方で空隙の増加(固体熱伝導の減少)にともなう熱抵抗増加・伝熱抑制作用をもつこと、これらの総合効果としてチャンネリングのために熱伝達が促進されあるいは抑制されること、その折制-促進の条件は、修正レイリ数【Ra_s】k/sl(k:透過率,s:層厚さ,l:層

高さ)、【b^3】/(ks)(b:間隙幅)、【hw^s】/λp(hw:Ofuchi-Kuniiによる壁面熱伝達率、λp:多孔質熱伝導率)、λg/λp(λg:流体熱伝導率)等の無次元数によって規定できることを明らかにした。なお間隙幅b=oの場合に対しても、壁面近傍で多孔質の存在が制限され空隙率が増大する場合、等価間隙幅の概念を用い同様の効果が示された。なお今後より詳細にわたる数値解析を予定している。
神経系におけるサイクリン依存性キナーゼの発現とその機能に関する研究

CDK5は成熟ニューロンで発現しているサイクリン依存性キナーゼの1つである。CDK5はin vitroの系において,ニューロフィラメントやタウ蛋白質などをリン酸化することが知られている。CDK5は免疫組織化学的にニューロンの軸索でのみ検出されたという報告がある。我々はCDK5に対する2種の抗体を用い免疫組織化学的研究を行った。その結果,今までの報告とは異なりCDK5に対する陽性反応は中枢神経系および抹消神経系のニューロンの軸索のみならず,核小体を除く核の部分にも検出された。ニューロンの核に存在するCDK5はニューロフィラメントあるいはタウ蛋白質キナーゼとは異なる生理的機能をもつのではないかと思われる。PCNAはDNAポリメラーゼのの活性化因子としての性質をもち,DNAの複製と修復に必須である。そのため,PCNAは増殖性細胞において多量に発現している。しかし,ノーザンブロットによると増殖性細胞の少ないマウス脳においてもPCNAKのmRNAは検出された。2種の抗PCNA抗体(PC10および19F4)をウェスタンブロットに用いて調べると,脳ではPC10でのみバンドが検出された。さらに免疫組織化学によって調べると,PC10陽性反応は広い範囲にわたってニューロンおよびグリアの核に認められた。細胞の増殖が起こっているsubventricular zone(SVZ)ではPC10および19F4の両者の反応が検出された。SVZ以外でのPC10陽性反応はPCNAに類似した蛋白質によると考えられるが,PCNAがリン酸化等の修飾を受けたものである可能性もある。サイクリン依存性キナーゼ(CDK)は一般的に細胞周期の調節に重要な役割をはたしているが,その中にはCDK5のように増殖能のないニューロンに高い発現を示すものもある。私は今まで主にCDK5についてマウス神経系におけるmRNAの発現(Ino et al.,Brain Res.,661,196-206,1994),蛋白質の局在(Ino and Chiba,Brain Res.,732,179-185,1996)等について明らかにしてきた。CDK5はp35と呼ばれる非サイクリン蛋白質によって活性化されることが報告されている。また,脳には抗サイクリンE抗体に反応性を示す蛋白質が存在することも報告されている。私は異なるエピトープを認識する2種類の抗サイクリンE抗体を用い,この蛋白質がサイクリンEそのものであること,ニューロンの核に局在することを見出した。前嗅核および梨状皮質に特に強い反応を認めたが,神経系全般に広く分布する。また,免疫沈降法によりサイクリンEがCDK5およびp35と結合する可能性のあることを見出した。CDK5はニューロンの核および細胞質の両者に局在を示し,p35は細胞質に高い局在を示した。生体内においてサイクリンEはCDK5と複合体が形成している可能性が高いが,p35と複合体をを形成しているかについては疑問の余地がある。サイクリンEとCDK5の神経系内における分布は必ずしも一致していないので,サイクリンEは他のCDKと,CDK5は他のサイクリンとも複合体を形成している可能性は高い。現在までのところCDK5がサイクリンEのみによって活性化されるか否かについては不明である。サイクリンEは細胞周期においてG1期からS期への移行に必要と一般に考えられているが,ニューロンに存在するサイクリンEは全く違った機能をもっていると考えられる。興味あることに,成熟動物の脳内で唯一細胞分裂が盛んに行われると思われているsubventricular zoneにはほとんどサイクリンEの局在は認められなかった。サイクリン依存症キナーゼ(CDK)は一般的に細胞周期の調節に重要な役割をはたしているが,なかにはCDK5のように増殖能のないニューロンに高い発現を示すものもある。

我々は今まで主にCDK5についてマウス神経系におけるmRNAの発現,蛋白質の局在等について明らかにしてきた。また,PCNAはDNAポリメラーゼの活性化因子としての性質をもち,一般に増殖性の細胞で発現が高いが,成熟脳でもある程度のmRNA発現があることを見出した。ある種のモノクローナル抗体を用いた免疫組織化学を行うと,ニューロンやグリアの核にその局在が観察された。ただし,これはPCNAそのものではなくPCNA類似蛋白質かPCNAが修飾されたものではないかと考えているが,詳細は不明である。また,脳には抗サイクリンE抗体に反応性を示す蛋白質が存在することも報告されている。我々は異なるエピトープを認識する2種類の抗サイクリンE抗体を用い,この蛋白質がサイクリンEそのものであること,ニューロンの核に局在することを見出した。前嗅核および梨状皮質に特に強い反応を認めたが,神経系全般に広く分布し,CDK5の分布とよく一致していた。さらに,in situハイブリダイゼーション法によってサイクリンEのmRNAが同様の分布を示すことを確認した。興味深いことに,成熟動物の脳内で唯一細胞分裂が盛んに行われると思われているsubventricular zoneではCDC2,CDK2,CDK4,PCNAの存在を見出したが,CDK5とサイクリンEは見られなかった。特にサイクリンEは細胞周期の調節に直接関与していると一般に考えられているので,この知見は極めて興味深い。現在,一部のCDKやサイクリンが神経細胞死に関与している可能性を示す知見が得られたので,今後はそちらの方向から研究を継続していく予定である。
観光圏におけるブランド構築に関する実証的研究

観光地の振興のためには、認知、動機付け、訪問へと結びつける地域のブランド構築を図っていく必要があるが、様々な主体が協力し合う広域観光エリアにおいて統一的なブランドを構築することは喫緊の課題である。本研究では2008年から国によって認定されてきた観光圏を対象としてブランド構築のための体制や取り組み、ならびに各観光圏に対するユーザーの認識を明らかにするとともに、海外事例について現地調査を行い、広域的な観光地におけるブランド構築に向けた戦略について考察した。その結果、ブランド構築に向けて3段階で戦略を検討することや、広域エリア全体のマーケティングを適切に行う組織と仕組みの必要性などが示された。本研究で対象とする「観光圏」は初年度から5年間が経過し、観光庁によって制度の抜本的な見直しと基本方針の改正が行われた。平成25年度からは新たな方針に基づく「新観光圏」の認定が進められている状況である。こうした状況を受け、平成24年度は海外事例調査を中心に行った。夏季に湖水地方を中心とする北イングランドにおける観光地の情報提供状況と広域としてのブランドづくりについて、資料収集ならびに現地調査、ヒアリング等を実施した。湖水地方は英国最大の国立公園であるとともに、全体がカンブリア・カウンティに含まれている。当地のブランド構築については、国立公園管理局、イングリッシュヘリテージといった公的機関およびナショナル・トラストといった国家レベルの諸団体が資源の保護ならびに適性利用についての管理を行っており、当地の強力なイメージ付けにつながる風景や文化資源等の維持管理が徹底されていることが明らかになった。加えて各ディストリクトや民間事業者が緩やかに連携しながら、マーケット別に多様な魅力の提供を行っており、当地のブランドづくりに結びついていることが明らかになった。この他、岩手県・宮城県の広域観光圏について、特に被災後の状況について現地調査ならびにヒアリングを行っている(旅費等は別予算による)。震災後の観光の復興状況については、被災状況よりも震災前の観光体制の熟度が大きく影響しており地域差が生じてきている。また、広域連携については特に県の役割が大きくなっており、今後の広域的なブランドがどのように再構築されていくかについて、引き続き調査を実施する必要があると考えられる。一方、本年度中に行う予定であった観光圏の認知・イメージに関する全国調査について、調査項目等の検討を進めたが、年度内に実施には至っていない。平成25年度早々に実施の予定である。「観光圏整備」事業は開始から5カ年が経過し、初年度の16地域の認定から、最大49の地域を認定するに至った。この間、特に補助事業については当初の「観光圏整備実施計画に基づき実施する事業」から「観光地域づくりプラットフォームの形成の促進」、さらには「ブランド確立に向けた戦略的な取組」へと目的を変えてきており、また、その対象も6地域に絞られた。短期間の間に制度が大きく変更されていることから、「ブランドの確立」の成否ならびにそれに寄与した取り組みを判定することが困難な状況であった。そうした中、平成25年度は引き続き各地域の動きについて情報収集を行うととともに、海外事例調査を実施した。8月にはドイツ・シュバルツバルト(黒い森)地域における広域連携の体制ならびにブランドづくりの取り組みについて現地調査を行った。また、3月にはフランス・プロヴァンスならびに周辺地域の現地調査を行っている。前者については、関係者へのヒアリングを実施し、官民の様々な組織が広域の観光振興に取り組んでいること、また、ブランドづくりにあたり、大小様々な組織がそれぞれでマーケティングを実施しながら集客のための戦略を明確に設定していること等が把握できた。また、南仏の調査では各ツーリスト・インフォメーションなどを訪問し、それぞれの機能や情報提供について調査を行い、広域的に認知されているイメージの強化に加え、マーケットに合わせて細かくメニューづくりを各組織とも実施していることなどが明らかとなった。総じて、わが国と比較すると観光プログラムづくりがどの組織のレベルにおいても戦略性を持って行われており、マーケティングを商品づくりに活かしていくスキルの高さが伺えるものであった。なお、本年度が最終年度であったが、上述の理由により年度内に国内事例の評価を実施することは時期的に困難と考え、1年間の期間延長を申請することとした。本研究は、観光庁が平成20年度から認定する全国の「観光圏」を対象に、広域連携や関係者相互の連携によるブランド形成をモデル的に明らかにし手法の体系化を行うとともに、課題や解決方策を提言していくことを目的としている。平成23年度には各観光圏の整備計画の概要把握、情報発信ツールの収集を行うと共に、タイプの異なる2ヶ所の観光圏について現地調査ならびに関係者ヒアリングを行った。計画書の分析からは、いずれの観光圏でも「ブランド構築」が目標として掲げられているものの、構築されるブランドの具体性や情報戦略が乏しいということが指摘できる。観光圏そのもののタイプとしては、観光地としての成熟段階にあり、マーケットにイメージが広く認知されていると考えられる地域と、今後、新たなイメージづくりに取り組む発展段階の地域とが想定され、それぞれから当該年度の現地調査の対象地を選定した。

ヒアリング調査により、いずれの地域でもブランド形成に向けた強力なイメージ形成のための事業の実施があまり見られず、また既存の観光地単位の枠組みを越える取り組みが積極的に行われているとは言いにくい状況であると言える。その中で比較的まとまった取り組みについては、地域づくりに熱心に取り組む組織・個人が核となり、広域的な体制づくりを進めている段階であることなどが明かとなった。なお、23年度には観光圏の認知・イメージに関する全国調査のプレ調査を実施する予定であったが、費用面や結果の有効性等からプレ調査及び本調査を一連のものとして24年度以降に実施することとし、23年度には調査項目の設計を行った。「観光圏整備事業」は平成24年に方針の大きな見直しが図られ、現在では「ブランド確立に向けた戦略的な取組」を目的として大きく掲げている。平成27年度には上記の視点より、旧方針の下で国の認定を受けた49の観光圏を対象に、各観光圏の整備計画の内容を分析することで、各観光圏がブランドづくりに向けた取り組みや、そのために活かすべき特徴、資源をどのようにとらえているかを再整理した。またその結果に基づき全国webアンケート調査を実施し、各観光圏が構築を目指すブランドイメージや、そのために活用しようとする特徴、資源に対する評価を行った。また、国内事例調査、海外事例調査の成果と合わせて研究全体のとりまとめを行い、さらに成果の一部を第29回日本観光研究学会全国大会論文発表会にて発表を行った。本研究の成果は、主に以下の2点である。1.観光地のブランド構築に向けて、1他とは差別化が可能な優位性を有する魅力は何か、2その優位性をコンセプトとして明確に示しているか、3マーケットにそのコンセプトが正しく伝わっているか、の3段階に分けて戦略を検討していく必要がある。観光圏では、広域の観光地同士の連携が図られているが、優位となる魅力の明確化、ならびにマーケットへのアピールが効果的に行えていない状況であることが指摘できる。2.またわが国では観光地における地域づくりと誘客のためのプロモーションとが同じ文脈の中で企画・実地されることが多く、特に後者については観光客により有効な情報発信が行えていないことが指摘できる。海外事例調査からは、広域的に行われているプロモーションにおいて各地域の特徴・個性が必ずしも網羅的に取り入れられてはいないことが明らかとなり、戦略性の高さが伺えた。今後、わが国でも「複数の組織がいかに役割分担を行っていくか」を戦略として定め、効果的な連携を取っていくことが必要と考えられる。観光計画・地域計画研究代表者が平成24年度から勤務先を移動したことにより、本年度の調査に速やかに着手できなかったことが、研究の遅れにつながった最大の原因である。また、研究分担者もそれぞれ新規の課題に着手する中で、議論がなかなか進められなかった状況でもあった。
近代初期英国バンケット・トレンチャーのアーカイブ化とその文化的背景の総合的研究

本研究は、近代初期英国文化とバンケット・トレンチャーの社会的実践との関係を明らかにし、英米におけるデジタルアーカイブ構築の基盤を作った。また17世紀の豊かな食文化と文化的伝統を対象に、キリスト教的起源の聖的図像、警句と植物学や土着の習俗起源の世俗的な図像、モットー、警句の絶妙な絡み合いから文化の豊かな表現が生まれた過程を明らかにした。一方で地理的にも視点をひろげ、イタリア、オランダなどを中心とする当時の文化的先進国のエンブレムが英国のエンブレムに与えた影響も考察し、またエンブレム的図像と警句の関係はアメリカにおける文化的影響関係にも転じていることから、エンブレムの地政学的変異も研究した。近代初期英国においてバンケット・トレンチャー(デザート用装飾木皿)が持つ社会的文化的意味や役割を包括的に調査・研究し、英国ルネサンスの宴会様式への理解を更に深めるため、資料のデジタルアーカイブを構築する準備を行った。初年度の主な作業としては、まず、バンケット・トレンチャーに関する所蔵調査や関連する基礎文献の収集、リサーチを行い、英国における近代初期のバンケット・トレンチャーの図像資料や関連一次資料のデータ収集を実施した。当時の英国における図版印刷文化に多大な影響を与えたオランダの印刷文化を調査するために、アムステルダムやアントワープ、そしてライデンの博物館などで研究資料調査を行った。英国ではマイケル・バース等の当該分野の専門家達と連絡を取って打ち合わせをし、バンケット・トレンチャー図像アーカイブの構築・分類を行うための助言を得、大英図書館やグラスゴー大図書館などを拠点にして関連の図像資料等のコーパスを構築するための準備を進めた。また、バンケット・トレンチャーと同じ文化的基層を共有するエンブレム的伝統がシェイクスピアのような一般的な演劇においてどのように発現しているかを検証するため、『ヴェニスの商人』における“fortune"と“lottery"という言葉の劇的効果をめぐり、エンブレム文学の伝統だけでなく、イタリア商人の代表的運命観やギャンブル観など当時の社会的背景を視野に入れながら、これらの概念がどのようにヴェニスという法の支配に基づく共和制国家を舞台とする芝居の複層的意味形成に貢献しているかを考察した。本研究の二年目に当たり研究調査や発表を通じて国内外の研究者と連携し、当初の目的である近代初期英国において流行したバンケット・トレンチャーの資料収集を実施し、資料のアーカイブ構築とそのデジタル化を行った。デジタル・アーカイブの整理・分析のために、収集した資料のカテゴリー別分類とそれぞれの文化的背景・意味の分析を行い、バンケット・トレンチャーが近代初期の英米において、どのように使用され、流通していたか、またそれらが欧州大陸文化からどのような影響を受けていたかについての考察を深めた。今年度は、東京の図書館で研究調査を実施すると同時に、海外では特に、ドイツ、イングランド、及びイタリアの美術館および博物館で広く現地調査を実施し、バンケット・トレンチャーの図像に関する大陸文化からの影響関係を、エンブレムやイソップ物語、植物誌などの印刷文化におけるビジュアル・カテゴリーを中心に考察し、デジタルデータの収集・整理を精力的に行った。8月にはドイツで開催された国際エンブレム学会に参加し、バンケット・トレンチャーの意匠の権威であるマイケル・バース氏やピーター・デイリー氏と情報交換した。またイングランドではバース氏の紹介で同じく大衆パンフレットの図像学の専門家であるマルコム・ジョーンズと情報交換しバンケット・トレンチャーに関する有益な情報を得ることができた。イタリアでは伊藤博明氏の案内によりバンケット・トレンチャーの意匠の元となった数々の図像を調査することができた。研究成果の一部は、天理大学おやさと研究所第271回研究報告会で発表し、「“Your fortune stood upon the casket there" (3.2.201):『ヴェニスの商人』における「三つの小箱選び」の文化的背景とエンブレム解釈の新たな可能性」の論文として『エンブレムの諸相』にて発表した。本研究の最終年度に当たり、当初の目的である近代初期英国においてバンケット・トレンチャー(デザート用装飾木皿)が持つ社会的文化的意味や役割を包括的に調査・研究し、英国ルネサンスの宴会様式への理解を更に深めた。まず、4月に東京で開催されたエンブレム研究会例会に出席し、バンケット・トレンチャーにおけるエンブレム的要素について研究協力者と専門的意見交換を行った。7月には、天理大学公開講座「地域研究への招待」において、「越境する芸術/食文化:英国ルネサンスのデザート用木皿にみる移入・伝播の過程」と題して、これまでの研究成果を一般聴衆に公開した。9月には、主にロンドンのヴィクトリア・アルバート美術館、大英博物館においてバンケット・トレンチャーを実際に調査し、デジタル記録を収集した。1月には、今回の研究成果の一部を含めた、シェイクスピアと宴会研究を総括する書籍『《シェイクスピア》と近代日本の図像文化学:エンブレム、ジェンダー、帝国』を金星堂より出版し、広く成果を公開した。3月には、延期になっていたNY出張を実施し、主にメトロポリタン美術館において収蔵されているバンケット・トレンチャーを実際に調査し、デジタル記録を収集した。発表や調査を通じて国内外の研究者と連携し、また英国や日本の図書館で資料調査を行うことにより、資料のデジタルアーカイブ構築のための研究資料を英米両国において収集し、その表面に描かれた図絵とテキストの分類、分析を行い、その使用目的と方法、そして意味を明らかにし、平成2123年度の基盤研究(C)をさらに広範に展開することができた。