hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
フォンタン型循環における肺血管のエンドセリン関連蛋白の分布とその動態

Fontan循環での肺血管局所におけるエンドセリンシステムの役割を明らかにするため、Fontan術後死亡例の肺組織を用いて、免疫組織学的解析と定量的リアルタイムPCR解析により、エンドセリンとその受容体の発現解析を行った。結果は、エンドセリン-1、エンドセリン受容体type A、type B全てが、Fontan後死亡例において正常対照に比して発現が亢進していた。受容体の発現亢進の報告は初めてのものである。【背景】近年、Fontan型手術は二心室修復の困難な様々な先天性心疾患に適用され、その治療成績は改善してきているが、Fontan手術未到達例や術後遠隔期の死亡例も少なからず存在する。予後不良症例ではFontan手術時の肺生検において、すでに末梢肺動脈壁の肥厚が存在するという報告もあり、Fontan candidateにおける肺血管の病理生物学的検討の意義が問われている。一方、肺血管収縮因子として重要なEndothelin-1(ET-1)の受容体拮抗薬が臨床応用されているが、Fontan循環においては血中ET-1濃度の解析の報告があるだけで、肺血管局所におけるET-1やET受容体Type A(ET-_AR)、Type B(ET-_BR)の発現について検討された報告は無い【目的】Fontan循環での肺血管局所におけるEndothelin systemの役割を明らかにするため、今回はFontan術後死亡例の肺の組織学的検討とその臨床背景を比較検討した。【対象と方法】1982年かも2000年までにFontan型手術を施行され、その後死亡した10例(F群)と、正常対照(心疾患以外の死亡例)4例(N群)について、剖検肺組織を用い、H-E染色および免疫組織染色を行い、その発現パターンを解析した。【結果】死亡時年齢はF群:13.0±6.1歳、N群:10.0±1.5歳であった。Fontan手術から死亡までの平均年数は4.9±3.9年で、術後の平均肺血管抵抗値は、3.0±0.7U・m2であった。肺動脈壁厚(% Wall Thickness)は、肺動脈径を100μm以上、50-100μm、50μm以下に分類すると、N群でそれぞれ、12.7±3.5、12.3±5.9、13.9±6.3であったのに対して、F群ではそれぞれ31.1±14.0、30.7±13.0、31.0±11.2と、どの径においても有意に肥厚していた。免疫組織染色では、肺血管内皮におけるET-1とET-_AR、血管平滑筋におけるET-_BRの発現もF群で有意に上昇していた。【考察】Fontan術後死亡例において、肺血管局所におけるEndothelin関連蛋白の発現は上昇しており、Fontan循環を破綻させる要因の一つである可能性がある。Fontan循環での肺血管局所におけるEndothelin systemの役割を明らかにするため、Fontan術後死亡例の肺の組織学的検討とその臨床背景の比較検討を行った。対象は1982年から2000年までにFontan型手術を施行され、その後死亡した10例(F群)と、正常に照(心疾患以外の死亡例)4例(N群)である。それらの剖検肺組織を用いて、EVG染色およびエンドセリン-1、エンドセリンレセプターA(ET-_AR)、B(ET-_BR)の免疫組織染色を行い、その発現パターンを解析した。また、リアルタイムPCR法を用いて、それらのmRNA発現の定量化を試みた。【結果】死亡時年齢はF群: 13.0±6.1歳、N群: 10.0±1.5歳であった。Fontan手術から死亡までの平均年数は4.9±3.9年で、術後の平均肺血管抵抗値は、3,0±0.7U・m2であった。肺動脈壁厚(% Wall Thickness)は、肺動脈径を500μm以上、100-500μm、50-100μmに分類すると、N群でそれぞれ、17.1±2.1、15.9±2.6、11.1±2.9であったのに対して、F群ではそれぞれ、20.8±2.7、25.2±4.0、26.7±3.9と、中小肺血管において有意に肥厚していた。免疫組織染色では、肺血管におけるET-1、ET-_AR、ET-_BRの発現は、どの径でもF群において有意に上昇していた。また、リアルタイムPCR法にても有意な発現の上昇が確認された。この事から、Fontan循環を破綻させる要因として、エンドセリンとそのレセプターの過剰発現が関与している可能性が示され、近年使用頻度が高まっているエンドセリンレセプター拮抗薬の治療有用性が示唆された。
最適パターン発見に基づく大規模半構造データからの知的情報獲得システムの開発

ネットワーク上に分散したウェブページやXML等の半構造データの急速な増大に対して,これらのコンテンツに直接アクセスするための効率良い手法の開発が緊急の課題となっている.本研究では,大規模半構造データからのデータマイニング(ウェブマイニング)に基づき,大量のデータ解析を対話的に支援する効率的なツールとして,従来の情報検索システムを超えた新しい情報アクセスシステムの開発を目指す.そのために,鍵となる技術として,最適パターン発見を木やグラフ構造に拡張して,半構造データに対する頑健かつ高速な最適化パターン発見アルゴリズムを開発する.さらに,ウェブマイニングを(a)有用な情報源の発見,および(b)特徴的なパターンの発見,(c)情報抽出の3つの過程からなると考え,これらを有機的に結合して,半構造データを対象とした知識獲得システムの効率良い実現方式を明らかにすることを目標とする,また,計算量理論と計算学習理論の最新の成果を援用して,計算量に徹底的に配慮した高速なアルゴリズムの開発を目指すことも特色である.平成13年度は,次の研究成果を得た.(a)「有用な情報源の発見」に関しては,部分系列パターンとエピソードパターンと呼ぶ組合せパターンに対する効率よい最適化マイニングアルゴリズムを開発し,これを文字列分類のための決定木学習アルゴリズムBONSAIに組み込んだ.(b)「特徴的なパターンの発見」に関しては,半構造データを最も基本的なラベル付き順序木(labeled ordered trees)のクラスとしてモデル化し,データ中の頻出共通部分構造に対する高速な発見アルゴリズムを開発した.木に関するパターン発見問題は,一般に高い計算量をもつことが多い.そこで,最右枝拡張法という効率よい発見手法を与え,これを複数の最適化手法と組み合わせて,半構造データに対する高速なマイニングアルゴリズムを与えた.(c)「情報抽出」に関しては,ウェブからの情報抽出問題を考察し,HTMLデータから木構造の情報を利用して必要な情報を効率よく切り出すTree-Wrapperアルゴリズムを開発した.ネットワーク上に分散したウェブページやXML等の半構造データの急速な増大に対して,これらのコンテンツに直接アクセスするための効率良い手法の開発が緊急の課題となっている.本研究では,大規模半構造データからのデータマイニング(ウェブマイニング)に基づき,大量のデータ解析を対話的に支援する効率的なツールとして,従来の情報検索システムを超えた新しい情報アクセスシステムの開発を目指す.そのために,鍵となる技術として,最適パターン発見を木やグラフ構造に拡張して,半構造データに対する頑健かつ高速な最適化パターン発見アルゴリズムを開発する.さらに,ウェブマイニングを(a)有用な情報源の発見,および(b)特徴的なパターンの発見,(c)情報抽出の3つの過程からなると考え,これらを有機的に結合して,半構造データを対象とした知識獲得システムの効率良い実現方式を明らかにすることを目標とする,また,計算量理論と計算学習理論の最新の成果を援用して,計算量に徹底的に配慮した高速なアルゴリズムの開発を目指すことも特色である.平成13年度は,次の研究成果を得た.(a)「有用な情報源の発見」に関しては,部分系列パターンとエピソードパターンと呼ぶ組合せパターンに対する効率よい最適化マイニングアルゴリズムを開発し,これを文字列分類のための決定木学習アルゴリズムBONSAIに組み込んだ.(b)「特徴的なパターンの発見」に関しては,半構造データを最も基本的なラベル付き順序木(labeled ordered trees)のクラスとしてモデル化し,データ中の頻出共通部分構造に対する高速な発見アルゴリズムを開発した.木に関するパターン発見問題は,一般に高い計算量をもつことが多い.そこで,最右枝拡張法という効率よい発見手法を与え,これを複数の最適化手法と組み合わせて,半構造データに対する高速なマイニングアルゴリズムを与えた.(c)「情報抽出」に関しては,ウェブからの情報抽出問題を考察し,HTMLデータから木構造の情報を利用して必要な情報を効率よく切り出すTree-Wrapperアルゴリズムを開発した.
末梢神経損傷後のニューロパチックペインとサイトカインネットワークの関連

末梢神経損傷後のマイクログリアはサイトカインを放出することで痛みを誘発すると考えられている。我々は特にTNF alphaに着目して検討を行った。その結果、末梢神経損傷後24時間をピークにマイクログリアに一過性に発現しており、受容体であるTNF R1が脊髄後角のastrocyteと一部のneuronに発現していることを明らかにした。末梢神経が損傷されると神経節あるいは脊髄でsatellite cellやマイクコグリアが活性化し、神経傷害性疼痛の発生に関与していることが近年明らかとなり、in vitroの実験系において活性化したマイクログリアから遊離されたサイトカインがneuronの過興奮性や神経因性疼痛の形成に重要な役割を果たしていることが示唆されている。平成21年度は神経因性疼痛モデルの一つであるSNIモデルを作成し、TNF alphaとその受容体であるTNFR1、TNFR2に着目して半定量的RT-PCR法とin situ hybridization(ISH)法にてmRNAの発現変化を調べた。その結果、脊髄ではTNF alphaはnaiveでは検出できず、SNIモデル作成12時間から増え始め、24時間をピークに、72時間後にはnaiveと同レベルまでmRNAの発現量が下がっていた。発現細胞を二重ISH-免疫染色法にて検討を行うと、マイクログリアで増加していることが分かった。この一過性の発現パターンに対して、TNFR1受容体はnaiveでは主にアストロサイトと脊髄後角のごく一部のneuronに発現が見られ、SNIモデル作成後はアストロサイトとマイクログリアでモデル作成後3日をピークに発現量が増加していた。また、TNFR2受容体はnaiveではマイクログリアに弱く発現していたが、モデル作成後3日をピークにマイクログリアで発現が増加していた。以上のことから、末梢神経損傷24時間後の脊髄後角ではTNF alphaがマイクログリアで増加することにより、アストロサイト・脊髄後角neuronでTNFR1により受容されることが神経因性疼痛形成の初期段階に関与していると考えられるため、この段階でTNF alphaの働きを抑えることで神経因性疼痛形成を抑制できる事が期待される。末梢神経が損傷されると神経節あるいは脊髄でsatellite cellやマイクログリアが活性化し、神経傷害性疼痛の発生に関与していることが近年明らかとなり、in vitroの実験系において活性化したマイクログリアから遊離されたサイトカインがneuronの過興奮性や神経因性疼痛の形成に重要な役割を果たしていることが示唆されている。平成21年度の結果から神経因性疼痛モデルの一つであるSNIモデルラットの脊髄において、TNF alphaはnaiveでは検出できず、SNIモデル作成12時間からマイクログリアで増え始め、24時間をピークに、72時間後にはnaiveと同レベルまでmRNAの発現量が下がっているという一過性の発現パターンに対して、TNFR1受容体、TNFR2受容体共にモデル作成後3日をピークに発現量が増加していた。このことから、TNF alphaのピークが24時間で48時間後には検出できなくなるにもかかわらず、受容体の発現ピークが3日後であるため、他のリガンドがTNF R1, R2受容体に作用しているのではないかと考え、リンホトキシンalphaとリンホトキシンbetaをRT-PCR法、in situ hybridization法を用いて検討した。その結果、DRG,脊髄においてリンホトキシンalpha, beta共に検出できず、SNIモデル作成114日において増加も見られなかった。そのため、脊髄後角においてTNF R1, R2は一過性に発現するTNF alphaが神経因性疼痛を引き起こす重要な因子であることが考えられる。これまでin situ hybridization法により神経因性疼痛モデルのひとつであるSNIモデルラットにおいてTNFalphaが脊髄後角マイクログリアで一過性に発現すること、その受容体であるTNFR1受容体は脊髄後角表層の一部のneuronとastrocyteに発現し、TNF R1、TNF R2受容体共にモデル作成後3日をピークにマイクログリアで発現量が増加することを明らかにした。TNF alphaのピークが24時間で48時間後には検出できなくなるにもかかわらず、受容体の発現ピークが3日後であるため、TNF alpha受容体タンパク質の発現動態がmRNAと異なっているのではないかと考え、数種類のTNF alpha抗体を購入し、Western blot法と免疫組織化学法を用いて信用できうる抗体を選別した。その結果、TNF alphaタンパク質発現もmRNA発現と同様の発現動態を示した為、TNF alphaは損傷後24時間ではastrocyteと表層の一部のneuronに作用し末梢神経損傷後の初期段階で神経障害性疼痛の形成に関与することが示唆される。
頭頸部扁平上皮癌における血管新生抑制因子を用いた腫瘍抑制効果に関する研究

Retinoids (ATRA, TAC-101)による抗血管新生阻害効果についてヒト臍帯静脈内皮細胞(HUVEC)を用いて検討した。以前に報告したようにRetinoidsはHUVECに対してVEGF存在下における増殖抑制効果と管腔形成阻害効果を認めた。続いて、HUVECの遊走能についてVEGF、bFGF存在下におけるRetinoidによる阻害効果を検討した。24穴のチャンバーの上層にHUVECを撤いてRetinoidとVEGF、bFGFの存在下に8μmのポアを通過するHUVECの数を測定した。刺激因子のみ存在する条件とRetinoidを添加した条件では、ポアを通過するHUVECの数はRetinoid存在下では抑制されていた。また、Flow cytometryにてHUVECの細胞周期のRetinoid投与による変化を測定した。Retinoid投与にて細胞周期はG1期に集中し細胞周期の停止が観察された。以上の結果より、Retinoidは各癌細胞に作用しVEGF、bFGFといった血管新生因子の産生を抑制すると共に、血管内皮細胞に作用しその細胞周期を停止させることにより増殖を抑制する。と同時に内皮細胞の遊走を抑制し、また血管内皮の管腔形成を阻害することで抗血管新生阻害効果を示すと考えられ、その機序が明らかになった。ヌードマウスを用いた実験では腫瘍内の血管数の減少が認められており、この結果を裏付けるものとなった。
抗体ー糖鎖高分子複合体の創製による細胞免疫操作法の確立

免疫細胞の膜タンパク質である、シグレックに強く結合する糖鎖高分子を開発した後に、この糖鎖高分子を用いて、免疫抑制効果の検討を行う。その後、現在の免疫抑制に用いられている、TNFα抗体に対する糖鎖高分子の修飾を行って、糖鎖高分子ー抗体複合体による効果的な免疫抑制効果の検討を行う。抗体は炎症箇所へのトラッキングを司り、狙った箇所にだけ、糖鎖高分子による免疫抑制が発現されることを目指す。
脂肪肝炎の新規治療法の開発-酪酸菌のプロバイオティクス効果の検討

高コレステロール食によって作成した脂肪肝炎モデルマウスに対して,酪酸菌製剤の投与した.投与後、4、8、16、および32週のいずれの時点においても肝臓では脂肪蓄積、炎症、および線維化のいずれもが抑制されていた。今回の研究において,酪酸がAMP activated protein kinase(AMPK)を活性化させること、および酪酸がヒストンのアセチル化を促進させることにより脂肪酸β酸化系遺伝子の発現を上昇させることを培養細胞を用いて新たに見出した。酪酸菌製剤は、高コレステロール食によって誘導される脂肪肝炎を改善する可能性がある。申請者が独自に開発した脂肪肝炎モデルマウスに酪酸菌製剤を投与し,開始後8週目,および16週目で肝臓を回収した.8週目においてすでに酪酸菌製剤は,肝臓への炎症細胞浸潤,および脂肪蓄積を抑制していた.16週目のサンプルは,現在検討を進めている.酪酸菌製剤の作用機序について, in vivo,およびin vitroでの検討を進めている.酪酸菌製剤が腸内で産生する短鎖脂肪酸である酪酸が調から吸収され,門脈を介して肝臓に到達し,脂質代謝改善作用,ならびに抗炎症作用を発揮しているのではないかと考え,門脈血中の短鎖脂肪酸の定量を試みている.培養肝細胞に酪酸をはじめとする各種短鎖脂肪酸を処置し,脂肪酸合成系,脂肪酸酸化系,およびコレステロール代謝系遺伝子のmRNA発現を検討した.短鎖脂肪酸の中でも酪酸は特にPPARalphaをはじめとする脂肪酸酸化系遺伝子群のmRNA発現を上昇させることを見出しており,酪酸菌製剤の作用の一端を説明し得ると考えている.今後は,酪酸の細胞内シグナル伝達経路の詳細を明らかにし, PPARalphaの発現調節メカニズムについても更なる検討を加える予定である.現在,臨床において整腸剤として用いられている酪酸菌製剤が脂肪肝炎に効果を示す可能性が明らかになったことから,治療へ応用が期待できると考えている.近年,過食や運動不足等の生活習慣を背景として,脂肪肝炎(Non-alcholic steatohepatitis, NASH)が年々増加しており,今後NASHからの肝硬変・肝がんの増加が懸念されるため,NASHの治療法開発は急務である.しかし,これまでに糖尿病治療薬,高脂血症治療薬などによる薬物療法が試みられたが,十分な有効性と安全性は得られておらず,治療法は未だに確立されていない.そこで,申請者は,C57BL/6Jマウスを高脂肪・高コレステロール食で飼育することにより独自に作出したNASHモデルマウスにおいて、酪酸菌製剤の効果を検討した。酪酸菌製剤の病原性腸内細菌を減少させる作用と肝臓おける酪酸の作用により,肝臓の炎症だけでなく,NASHの前段階である脂肪蓄積をも改善させる可能性があり,酪酸菌製剤の治療応用の可能性を検討する本研究の着想に至った.酪酸菌製剤の投与後、4、8、16、および32週のいずれの時点においても肝臓では脂肪蓄積、炎症、および線維化のいずれもが抑制されていた。今後、酪酸菌製剤の作用メカニズムを明らかにするために、DNAマイクロアレイを用いた包括的な発現遺伝子解析を行う予定である。また,培養細胞の実験においては,5種類(酢酸・プロピオン酸・酪酸・カプロン酸・吉草酸)の短鎖脂肪酸のうち、酪酸が最も強く脂肪酸β酸化系遺伝子群のmRNA発現を上昇させた。これには,酪酸がAMP activated protein kinaseを活性化させること、および酪酸がヒストンのアセチル化を促進させることが関与していることを見いだした.本研究は,酪酸が脂肪酸燃焼を促進させることを明らかにし,酪酸菌製剤が脂肪肝炎の治療に有用である可能性を示した.
動作への錯視の影響から検討する視覚情報認識－動作生成の過程

“視覚による認知ー動作生成"の過程への意識や注意といった認知的活動の関与について検討するために、本研究は、大きさ錯視(Ebbinghaus効果)を誘発する標的に対する反応動作を課題とする実験パラダイムを用いた実験に取り組む.動作課題として、大きさ錯視を誘発する標的に対して、1提示された標的(Ebbinghaus図形の真中の円)の大きさを見定めて、その大きさについて標的を掴む仕草により表す動作(Matching)と2Matching課題と同様の摘まみ動作により、標的に手を伸ばして摘まもうとする動作(Pantomimed Grasping)により、標的の大きさに対するその摘まみ動作の大きさの点から、錯視効果について検討する.本年度は、被験者の課題遂行において二重課題条件(Grasping/Matchingと同時に選択反応課題を遂行する)を課す知覚ー反応動作実験を実施した.それによって、“意識を他の課題遂行へ向けざるをえない状況"における、錯視効果の減少および課題動作への影響の観点から、“標的知覚ー動作生成"の情報処理過程への認知機能の関与について検討を試みた.いずれの動作課題に対しても錯視効果の度合は、二重課題条件によって減少することが確認された。この結果は、被験者の注意や意識が同時遂行された選択反応課題にも向けられたため、“標的の大きさ認識ー摘まみ動作形成"に対する意識的な処理過程が妨げられながらも、異なる標的の大きさに応じた摘まみ動作の大きさが形成されたことを示している。これは、意識を課題遂行にとって妨げとなる情報から逸らしながら課題を遂行させることができることの可能性を示すものと考えられる。この成果について運動制御研究に関する国際誌に投稿し、現在、査読者からのコメントに対して修正を加えている段階である。昨年度は当該研究期間の初年度にあたり、研究計画で予定している実験の遂行のための実験パラダイムとデータ獲得のためのシステム構築に時間を要した。現時点におけるシステムにより、計画している実験データ獲得・分析は遂行して論文投稿に至っているものの、研究計画の一部である課題動作中の脳波計測システムの導入に至らなかったため、それに関する実験については着手できていない部分において、当初よりも計画の進行がやや遅れていると認識している。上述の昨年度実施による実験結果において、MatchingおよびPantomimed grasping課題における二重課題条件による錯視効果の減少の度合いより、二重課題条件はMatching課題においてより効果的である傾向を示しながらも、統計的な有意差は検出されなかった。しかしながら、これら二つの課題の視覚情報処理ー課題動作遂行の過程への認知的活動の関与の仕方は課題の性質から異なることが考えられるので、この点についてPantomimed grasping(摘まみ動作を模倣する)ではなく、実際に標的を摘まむ動作によって検証することは、この実験パラダイムを用いた関連する研究領域にとって有益な知見をもたらすものといえる。この点については、当該研究期間における全体の研究計画の進捗に応じて取り組むことを検討したい。また、本研究計画の目的のひとつに掲げている「錯視を誘発する標的に対する課題遂行時の脳波を計測し、大脳皮質の活動パターンの点からの検討も試みる」という点に関しては、今年度前半にデータ計測システムを構築し予備実験に着手し、今年度中にデータを獲得できることを目指す。

しかしながら、これら二つの課題の視覚情報処理ー課題動作遂行の過程への認知的活動の関与の仕方は課題の性質から異なることが考えられるので、この点についてPantomimed grasping(摘まみ動作を模倣する)ではなく、実際に標的を摘まむ動作によって検証することは、この実験パラダイムを用いた関連する研究領域にとって有益な知見をもたらすものといえる。この点については、当該研究期間における全体の研究計画の進捗に応じて取り組むことを検討したい。また、本研究計画の目的のひとつに掲げている「錯視を誘発する標的に対する課題遂行時の脳波を計測し、大脳皮質の活動パターンの点からの検討も試みる」という点に関しては、今年度前半にデータ計測システムを構築し予備実験に着手し、今年度中にデータを獲得できることを目指す。研究計画に掲げている課題動作遂行中の脳波計測のためのシステム構築の進捗に応じて、それに要する機器備品の購入が次年度に持ち越されている。このシステムについて今年度中に構築するとともに、実験の実施に必要な消耗品費が必要となる。また、研究成果の国際誌への発表における論文校正にかかる費用を使用予定としている。
近代以降の翻訳語の流入が日本語に与えた影響について実証的研究

明治時代以降の翻訳語の流入によって、日本語表現にもたらされた変化の一つとして、"評価的文副詞"という形態の導入、ということを仮定したが、それを実証するために、まずは、いくつかの評価的文副詞を選び、国立国会図書館・大阪府立中之島図書館・大阪大学附属図書館所蔵の明治時代以降の英和辞書を調べて、日本語訳の変化等について調べ、文副詞という概念が導入され、それにふさわしい日本語訳の形態が固まってきた(「にもあるいは「ことに」という形)のが大正に入ってから(おそらく大正10年刊行の辞書が最初)だということがわかった。(明治時代の辞書では述語副詞「に」の形が用いられていた。)次に、それらの表現が翻訳文化流入以前にあったものかどうかを調べるために、江戸時代・明治時代・大正時代の資料(雑誌等)を集め、現在は、それらの資料における"評価的文副詞"の種類や頻度について比較調査中である。このような実証的研究の一方で、理論的な研究として、"評価的文副詞"についてのこれまでの英語学と日本語学での先行研究を追い、日本語には文副詞という形によらない"助動詞"の形(「てくれる」・「てしまう」・「やがる」の3つ)での評価的表現がある。ということを提案し、平成6年度春季国語学会や他の研究会等で発表した。「てくれる」に関しては論文の形でまとめ、現在は、全体的な枠組みについて論文を執筆中である。
北アフリカの砂漠爬虫類の分子系統学

アガマ科トゲオアガマ属の系統進化について、ミトコンドリアDNAの約1700塩基対を用いて分子系統学的な解析を行った。その結果、アフリカ大陸の種とアラビア半島の種が互いに単系統群を形成することが分かった。形態形質に基づく従来の仮説では、ソマリア半島に局所的に生息するマクファデニートゲオアガマは、紅海沿岸に生息するオセラータ・オルナータ種群と近縁関係にあるとみなされてきた。しかし分子解析の結果はこの仮説を支持せず、形態的類似性が収斂進化に依るものである可能性を示した。分子データから分岐年代を推定したところ、トゲオアガマ属は始新世にアジアでバタフライアガマ属から分岐し、その後西方へと分布域を広げたことが示唆された。アフリカ大陸への侵入は中新世以降であり、その適応放散はアフリカ大陸の乾燥化と密接な関係があると思われた。紅海を挟んで分布し、互いに姉妹群関係にあるオセラータトゲオアガマとオルナータトゲオアガマは、中期中新世以後の紅海の拡大によって分断的に種分化したことが示唆された。これらの発見は学術論文にまとめて投稿中である。また、日本進化学会の年会及びアラブ連合生物学者会議にて研究発表も行なった。その後、アガマ科の系統進化についてさらに詳細な知見を得るために、何種かのアガマ類についてミトコンドリアゲノム全塩基配列の決定を行なった。その結果、フトアゴヒゲトカゲを含むオーストラリアを原産とするアガマ類では、ミトコンドリアDNAの制御領域が2箇所に重複していることが判明した。アガマ類の系統的問題とからめて、この制御領域の重複のタイミングや分子機構について解析を進めている。北アフリカの砂漠爬虫類(本年度は特にアガマ科トゲオアガマ属)の系統進化について分子系統学的な解析を行った。平成14年10月には、研究分担者のアメルがスーダン及びエジプトにおいて爬虫類試料のフィ→ルド採集を行った。本属はサイテス2類に該当するので、サンプルの収集と持ち込みは特別な許可を得て行われた。その他個別の研究者やペットショップ等から入手したサンプルを併せ、トゲオアガマ属の主要な種(亜種)の試料を揃えることができた。これらの試料から全DNAを抽出し、ポリメラーゼ連鎖反応によるミトコンドリア遺伝子の増幅と塩基配列の決定を行りた。現時点で分析は完了していないが、予備的な解析により、1)形態による分類と整合してアフリカの種群とアジア・中東系の種群に分かれた、2)しかし形態の分類と整合しない系統関係も、後者の種群内において一部見られた、との結果が得られつつある。今後は、さらに詳細に系統関係と分岐年代の推定を行い、トゲオアガマ類の適応放散と地球環境の変遷(大陸移動、古気候変動、砂漠化など)との関係について仮説を提示したいと考えている。また我々は爬虫類の高次系統関係を明らかにする研究にも携わっており、本年度はイエメントゲオアガマからミトコンドリアDNAの全塩基配列決定を行った。アガマ類とカメレオン類が互いに系統的に近い関係にあり、両者ともにミトコンドリアDNAの分子進化速度が極めて高いという結果が得られつつある。
染色体転座形成のエピジェネティック機構の解明

ヒストン脱メチル化酵素LSD1の白血病発症における役割について解析した。LSD1の最も短いアイソフォームを造血幹/前駆細胞に強発現するトランスジェニック・マウスを作製し、骨髄細胞を解析すると未分化造血幹細胞の増加が見られた。胸腺でTリンパ球の過形成が見られたが、白血病は発症しなかった。放射線照射を行うと、休止期造血幹細胞にLSD1を発現するラインで早期かつ高頻度にTリンパ芽球性リンパ腫/白血病を発症した。以上から、造血幹細胞におけるLSD1の強発現は、白血病発症の1次的異常であり、さらなる変異により白血病が発症すると考えられた。LSD1は、造血器腫瘍の進展阻止や治療の標的分子として期待される。LSD1はヒストン脱メチル化する酵素で、染色体構造をダイナミックに改変し、別々の染色体に位置するプロモーターを会合させ、転写を複合的に調節する。申請者らは、造血幹細胞において放射線等によってDNA二重鎖切断が惹起されると、切断部位からの転写を抑制するためにLSD1複合体がリクルートされるが、LSD1に量的・質的異常が存在すると染色体転座が誘導されるという仮説を立て研究を開始した。哺乳類のLSD1にはalternative splicingによりエクソン2と8に挿入が入ることで生じる4種のアイソフォームが存在することが報告されている。私たちはエクソン2の挿入(2a)の有無により生じる2つのアイソフォーム、2a-/8a- (-/-)と2a+/8a- (+/-)が存在していることを確認した。さらに、このもっとも短いアイソフォーム(-/-)はヒストン脱メチル化活性の本体であり、その発現は造血幹細胞において極めて低く、白血病細胞で強発現していることを確認した。私たちは造血幹・前駆細胞特異的にLSD1 (-/-)を強発現するトランスジェニック・マウスを作製した。これにより、LSD1 (-/-)を低レベルおよび高レベルに発現する2ラインを得た。LSD1 (-/-)の発現量依存的にLSK細胞の増加がみられ、さらにLSD1の低発現ラインの骨髄細胞は幹細胞性を示し、高発現のラインでは造血幹・前駆細胞の増加を確認した。これはヒト造血幹・前駆細胞におけるLSD1アイソフォームの発現パターンと一致していた。これらトランスジェニック・マウスは一見して正常ではあるが、造血幹細胞の自己複製能が亢進していることから、さらなる遺伝子異常を追加することで白血病の発症や染色体転座の頻度が増加するのではないかと考えた。実際、T細胞性リンパ芽球性リンパ腫・白血病をより早期かつ高頻度に発症した。LSD1はヒストンH3K4およびH3K9を脱メチル化する酵素で、標的遺伝子の発現をエピジェネティクに制御する。LSD1は様々ながんで強発現しているが、発がんの機序については不明の点が多い。今回、LSD1の白血病発症における役割について、トランスジェニック・マウスを作成して解析した。LSD1発現は正常ヒト造血幹/前駆細胞においては極めて低く、Tリンパ芽球性リンパ腫/白血病を含む白血病細胞で強発現していた。哺乳類のLSD1にはalternative splicingによってexon 2と8に挿入が入ることで生じる4種のisoformが存在するが、その最も短いisoformの発現は造血幹/前駆細胞において極めて低く、白血病細胞では強発現していた。このisoformを造血幹/前駆細胞に導入したところ、自己複製能の亢進が観察された。そこでこの最も短いisoformを造血幹/前駆細胞に強発現するトランスジェニック・マウスを作製し、骨髄細胞を解析するとLin-Sca-1+c-kit+未分化造血幹/前駆細胞の増加とHoxAファミリーの発現上昇が見られた。さらに骨髄Sca-1陽性細胞のアレイ解析を行うと、造血幹細胞の制御やT細胞系列への分化にかかわる遺伝子の発現が増加していた。これらのトランスジェニック・マウスは胸腺でTリンパ球のfocal hyperplasiaが見られたが、造血能は正常で白血病の発症も見られなかった。そこで放射線照射を行ったところ、休止期造血幹細胞にLSD1を発現するlineにおいて早期かつ高頻度にTリンパ芽球性リンパ腫/白血病の発症が観察された(Blood, 2015Apr 22, accepted)。以上から、造血幹細胞におけるLSD1の最も短いisoformの強発現は、白血病発症の1次的遺伝子異常であり、単独では白血化には至らないが、さらなる変異が加わることでfull-blownの白血病が発症すると考えられた。LSD1の最も短いisoformは、Tリンパ芽球性リンパ腫/白血病を始めとする造血器腫瘍の進展阻止や治療の標的分子として期待される。

血液学・分子生物学・薬学DNA二重鎖切断部位へのLSD1の局在について調べた。放射線照射後にLSD1がDNA二重鎖切断部位に局在することを共焦点顕微鏡を用いて確認した。正常細胞と転座を有する白血病細胞におけるLSD1の質的・量的異常について解析した。短いアイソフォーム(-/-)はヒストン脱メチル化活性の本体であり、その発現は造血幹細胞において極めて低く、白血病細胞で強発現していることを確認した。私たちはSca-1プロモーターを用いて造血幹・前駆細胞特異的にLSD1 (-/-)を強発現するトランスジェニック・マウスを作製した。これらトランスジェニック・マウスは造血幹細胞の自己複製能が亢進していることが分かった放射線照射を行うと、T細胞性リンパ芽球性リンパ腫・白血病をコントロール群に比べより早期かつ高頻度に発症することが分かった。上記実験を行い、In vivoとIn vitroの両方においてLSD1の質的・量的異常を確認でき、おおむね順調に進展していると考える。Sca-1プロモーターを用いて造血幹・前駆細胞特異的にLSD1 (-/-)を強発現するトランスジェニック・マウスに放射線照射を行い2次的損傷を加えると、T細胞性リンパ芽球性リンパ腫・白血病をコントロール群に比べより早期かつ高頻度に発症することを確認した。今後はこれらのマウスの腫瘍細胞を用いたFISHなどを行い染色体転座の発症の頻度を定量する。また、染色体転座が生じた場合、LSD1のDNA結合配列を解析し、転座の起こりやすい位置を解析する。一方、LSD1阻害剤の予防的投与で放射線照射により誘発したT細胞性リンパ芽球性リンパ腫・白血病を抑制できるか確認する。
機能的MRIを用いた脊髄損傷者の運動野に関する機能的研究

機能的MRI(fMRI)を用いて、脊髄損傷者群と健常対照者群の脳運動関連領域を比較した。脊損群では、足趾に運動指令を送る部分や足趾が動いていると理解する部分、一時的に記憶を維持する部分の活動が低下する傾向にあった。しかし、タイミング課題では、脊損群に積極的に運動遂行させる領域と足趾を屈曲するタイミング記憶する部分に活動増加が見られた。脊損群にとって、これらの運動を組み合わせ足趾の身体イメージと運動関連領野を温存することが必要である。脊髄損傷者を対象として測定を行うために、平成19年度は予備実験として健常者に対し身体イメージ及び運動イメージの生成と運動野の関係についてfMRIを撮影し検討を行った。対象は、16例(男性13例、女性3例)で平均年齢22歳であった。すべての症例は、右利きで右の手足を用いて測定を行った。測定方法は、スクリーン上に映し出された視覚刺激を用い、(1)3人称イメージによる手指及び足指を握る動き(一定、不定、及び自由の3種類)を模倣して、実際に動かすこととその動きをイメージすること、(2)1人称イメージによる系列動作(母指の次に残る4指を握る一定、不定、及び自由の3種類)を模倣する同様の測定、(3)飛んでくるボール(途中で消える)を受け取るタイミング課題を、手及び足で実際に受け取ることと受け取ることをイメージすること、(4)手足の向きを記憶し指示に従ってその方向を変える試行を、実際に動かすこととその動きをイメージすること、を行った。すべての測定は、fMRI撮影後、MATLAB上でspm2を用いて解析を行った。結果は、3人称イメージで一定の動きで足指を握る動きをイメージする時に、左のSMA及び44・45野(ミラーニューロン?)の活動性が上がった。1人称イメージで不定な足指の系列動作の動きを模倣してイメージする時に、左のSMAと46野(ワーキングメモリー?)の活動性が上がった。ボールを受け取るタイミング課題では、足指でボールを受け取ることをイメージする時に、SMAと44・45野の活動性が上がった。今回の予備実験では、足の動きをイメージすることにより、44・45野及び46野とSMAの活動性が上がることがわかった。身体イメージの生成には短期記憶が重要な役割を果たし、SMAと連携して運動野へ送り出される運動イメージを形作るという報告もある。今回の測定では、44・45・46野がSMAと関連付けられることが示唆された。次年度は、下肢機能を失って数年を経た脊髄損傷者に対し、検討を行いたい。目的は機能的磁気共鳴画像装置(fMRI)を用いて、背損者の脳運動関連領野について調査し、脊髄再生医療開始後のリハビリテーションの指針を得ることにある。まずデータ解析の参考とするため筋電義手装着者の脳活動についてfMRIで解析し、運動感覚野の機能的変化を明らかにした。次に以下の実験を行った。対象は健常者10名(健常群)と慢性期脊髄損傷完全対麻痺患者10名(脊損群)とし、スクリーン上の映像に従い課題を行い、fMRIで脳活動を測定した。課題1.手指、足趾の単純繰り返し運動における運動関連領野賦活の相違。手指運動時の脳活動は、両群とも手指に相当する運動野が著しく賦活した。しかし、足趾運動時は、健常群と比較し脊損群の足趾に相当する運動野は低下し補足運動野の活動が増加した。課題2.手指、足趾の一人称イメージを模倣した時の運動関連領野賦活の相違。足趾の運動を凝視した場合、健常群は下頭前回のミラーニューロンの活動が増加したが、脊損群は活動しなかった。手指運動をイメージした場合、健常群はワーキングメモリーの活動が増加したが、脊損群は活動しなかった。課題3.手指、足趾のタイミングを推論する運動での運動関連領野賦活の相違。足趾運動では、脊損群は帯状回運動野の活動が増加したが、健常群は少なかった。また、課題23で脊損者の足趾運動野の活動が低下していた。全課題を通し、脊損群の足趾運動野の活動低下を認めた。また、脊損者は足趾の認知に関し障害を持つ可能性があり、障害を持たないはずの手指の運動に関しても何らかの影響があることがわかった。一方、脊損群は課題1で補足運動野の活動が増加し、課題3で帯状回運動野が賦活した。したがって、脊損群にとってこれら運動を組み合わせ、足趾の身体イメージと運動関連領野を温存することが必要である。これは重要な知見であり、今後治療プログラムの作成の指針と成り得る。
振動および騒音測定による橋梁の損傷度判定に関する研究

本研究では騒音および振動測定により橋梁の損傷程度を推定する方法について検討した。特に、実橋における測定を行い、路面状況、伸縮装置付近の損傷と発生振動・騒音との関係を検討した。実測を行った橋梁は橋長1040m、幅員10.5mのPCコンクリート連結橋と鋼3径間連続斜張橋からなる橋梁である。この橋梁には9つの伸縮装置があり、このうち7つはゴム製伸縮装置、2つが鋼製伸縮装置である。本研究で得られた知見を以下に列挙する。1.橋面上の一般部および橋梁外の接近道路での測定結果を比較すると、橋梁の中心に近い測点の方が、橋梁全体から発生する低周波音の影響が大きい。スペクトル解析より橋面で測定した低周波音には24Hzの周波数成分が多く含まれる。2.路面の損傷状況を発生騒音から推定することは困難であった。これは通過車両から発生する騒音による影響が大きいためである。また、車両通過時に発生する騒音は車両速度および車両重量にほぼ比例して大きくなる傾向にあることが明らかとなった。3.橋梁伸縮装置部から発生する騒音は伸縮装置の材質、形状により異なる周波数特性を持つことが明らかとなった。ゴム製伸縮装置では伸縮装置幅175mmで68Hz、305mmで14Hz付近、315mmで1012Hzでそれぞれ卓越する周波数成分を持つ。したがって、これらの卓越周波数が変動することで伸縮装置の変状を推定することができるものと考える。ただし、橋面上での測定ではこの特性を見いだすことは困難であり、伸縮装置下面での測定が必要である本年度は、橋梁から放射される騒音の内、特に伸縮継ぎ手部から放射される騒音に着目し、実橋梁において騒音測定および測定結果の解析をおこなった。測定対象とした橋梁にはゴム製伸縮装置と鋼製伸縮装置があり、また、ゴム製伸縮装置は全幅が異なるものが計7個用いられている。これらの伸縮装置部分を車両が通過する際の騒音を測定した。これらの伸縮装置について3通りの測定方法を用いて、普通騒音と低周波音を測定する。得られたデータより音圧レベルおよび周波数特性について検討した。以下に本年度の研究で得られた知見を列挙する。(1)騒音測定を橋上伸縮継ぎ手付近(測定1)、伸縮継ぎ手設置橋脚基部(測定2)および伸縮装置設置橋脚から橋軸直角方向に20m離れた地点(測定3)で実施した。その結果、測定1と測定3では通過車両の影響が大きく、伸縮装置からの騒音特性を把握することは困難であることが明らかとなった。(2)測定13で得られる音圧レベルには明瞭な差異は認められないものの、車重が大きいほど音圧レベルは大きくなる。(3)各測定での騒音の周波数特性を解析した。その結果、測定1と測定3では低周波音において24Hzの卓越周波数があるものの、全測点について共通の周波数であり通過車両から発せられる騒音と考えられる。(4)測点2では各伸縮装置ごとに明瞭な卓越周波数の違いが低周波音について認められた。ゴム製の伸縮装置では、伸縮装置の幅と卓越周波数の間に関係があると推定される。ただし、橋面上での測定ではこの特性を見いだすことは困難であり、伸縮装置下面での測定が必要である
光合成特性評価における簡便な手法の検討と対応する光環境の予測

ブナ樹冠を対象に光環境と光合成特性を測定し、同時に葉の形態特性とポリフェノール量を測定した。最大光合成速度は、比葉面積およびポリフェノール量との関係で整理された。光合成能力を評価する指標として比葉面積を用い、落葉での比葉面積の分布から、光合成能力別の葉量を求めた。これらの結果を利用して晴れた日のブナ樹冠における光合成を推定し、その80%は全葉面積の36%でまかなわれていると試算された。光は植物の成長に不可欠な光合成の駆動力であるが、その多くは光合成に利用されない光であり、またこうした過剰な光は光合成を低下させる要因となり得る。そこで、ブナ樹冠内の異なる光環境を対象に光環境と光合成特性の測定から、樹冠内における過剰光について整理した。光飽和点は410730μmolm^<-2>s^<-1>であり、最大光合成速度と正の相関がみられた。期間中最も日積算光量子束密度が高いを対象とし、光飽和点を超える光を各測定個所における過剰光とすると、日中の過剰光の最大頻度は60%となった。このときの過剰光を含む光量子束密度の積算値は37molm^<-2>day^<-1>であり、日積算光量子束密度に対する割合は93%であった。また、日積算光量子束密度が5molm^<-2>day^<-1>より低い6か所では光飽和点を超える光量子束密度は観測されず、他の2か所でも過剰光の日中頻度は4%以下であった。期間中最も日積算光量子束密度が低い日を対象とした場合、日積算光量子束密度が9molm^<-2>day^<-1>より低い13か所ではいずれも光飽和点を超える光量子束密度は観測されなかった。過剰光が観測された5か所のうち日中の過剰光の最大頻度は21%であり、日積算光量子束密度に対する割合は46%であった。そこで、ブナ樹冠内の異なる光環境を対象に光環境と光合成特性の測定から、樹冠内での光環境・過剰光に対する生理特性の応答ついて整理した。樹冠内の光環境は、最下層において相対光量子束密度1.65±0.2%まで低下する。最大光合成速度は2.311.4μmolm^<-2>s^<-1>の範囲にあり、相対光量子束密度50%以上では最大光合成速度の増加はほとんど見られない。携帯型光学ポリフェノール測定器を用いて測定されたポリフェノール量は0.020.15μmolm^<-2>の範囲にあり、相対光量子束密度との関係において最大光合成速度よりも高い正の相関関係を示した。また、比葉面積(SLA)は、約100440cm^2g^<-1>の値を示し、SLAと最大光合成速度、ポリフェノール量は負の関係を示した。SLAが葉の生理特性を表す指標となり得ることから、リタートラップを用いて回収された落葉のSLA分布を求めた結果、130cm^2g^<-1>付近にピークを持ち90500cm^2g^<-1>の範囲に分布した。SLAの分布から光合成能力(生理特性)別の葉量が推定された。ブナ樹冠内では空間的に光環境が大きく異なり、相対照度で2100%とその変化は大きい。また、光環境によって葉の生理生態的特性が変化することはよく知られており、明るい光環境にある陽葉は、高い光合成能力と、形態的には厚い特徴を持つ。一方、より暗い環境にある陰葉では、逆に形態的に薄く低い光合成能力となる。こうした、光環境勾配に対する葉の生理生態的特性の反応についての研究は多く行われているものの、生理生態的な特徴で区分しだ樹冠内での葉量の分布に関する報告ば少ない。樹冠部における光合成を求める際には、葉の光合成能力とその光環境の他、これに対応した葉量評価が重要になる。そこで、光合成能力を評価する指標として比葉面積(SLA)を用いる。落葉のSLA分布から、光合成能力別の葉量を求あ、この結果を利用してブナ樹冠における光合成推定を試みる。これにより、樹冠光合成の推定における光合成能力別葉量の重要性についての評価を行う。単位葉面積あたりの日積算光合成量はSLAが増加するにつれて低下し、SLAが300cm^2g^<-1>より高い葉では負の値を示した。また、落葉のSLAは76594cm^2g^<-1>の範囲にあり、120130cm^2g^<-1>にピークを持つ分布を示した。これらから、単位林分面積あたりの樹冠光合成を求めると488.4mmol m
肺MAC症の治療効果を予測するバイオマーカーの探究

肺Mycobacterium avium complex(MAC)症患者の気管支肺胞洗浄(BAL)中のヒト抗菌ペプチドcathelicidin/LL-37がMAC症治療の治療効果を予測するバイオマーカーとなることを明らかにするために、これまでに8例にBALを行っていたが、平成29年度に新たに肺MAC症疑い例15例に同意を得てBALを施行した。7例にM. aviumを検出し、6例に治療を開始している。これまでに合計14例が解析可能な症例としてエントリーされた。平成30年度に新たに11例に同意を得てBALを施行した。5例にM. aviumを検出し、3例に治療を開始した。また、M. intracellulareを検出した1例、M. abscessus+M. intracellulareを検出した1例も治療開始した。合計19例が解析可能な症例としてエントリーされている。平成29-30年度に26例の患者に気管支肺胞洗浄を行ったが、MAC菌が培養されなかった症例が多かったため目標症例数に達しなかった。LL-37の抗菌活性の検討については、現在論文作成中である。気管支肺胞洗浄を行う患者のエントリーを継続しつつ、京都医療センターと共同研究を行い症例集積、検体収集していく。平成29年度に15例の患者に気管支肺胞洗浄を行ったが、MAC菌が培養されなかった症例が多かったため目標症例数に達しなかった。症例集積が少なかったため、LL-37の測定を行わなかった。症例が集まり次第、ELISAキットを購入し、LL-37の測定を行う。
火山性微動の起源：流れ誘起振動の新仮説

火山性微動が、地下の流路をマグマが流れるときに発生する「流れ誘起振動」に起因する、という仮説を多角的に検証する試みをおこなった。水槽にゲル媒質を充填し、鉛直方向に板状の流路をつくって粘性流体を流す実験をおこなったが、期待される振動は発生しなかった。断面が楕円形の流路について、流れ誘起振動の線形安定解析をおこなった。その結果、ダイクのような有限幅の板状の流路の場合、板の横幅と同程度の波長のレイリー波がもっとも不安定化することが示唆された。これを実際のマグマの流れにあてはめると、ダイクなどの流路の幅に上限があることと、発生する火山性微動の周期に上限があることとが関係している可能性が示唆された。弾性媒質中に埋め込まれたシート状の流路を粘性流体が流れるときに発生する振動を計測するための予備実験をおこなった。アクリル水槽にジェランガムの溶液を流し込み、水平方向に45 cm四方、深さ20 cmのゲルの層を作成した。この中央部に、厚さ4 mmで幅100 mmの板状の流路を鉛直に作り、下から上へプルラン溶液(粘度170 mPa s)を流した。不安定を起こすのに必要と見積もった数cm/s程度の流れをつくり、ゲル媒質の光弾性を利用して流路の変形のようすを水槽の横から光学的に観察しようとしたが、期待される振動は見出されなかった。このような予備実験を3回おこなった。不安定を起こすのに必要な流速は、無限に広がる板状の流路に対する線形理論に基づいたものであったが、有限の大きさの流路に対して正確な値を与えるかどうかはわからなかった。そこで、断面が有限で、流れ方向には無限に長い流路に対して同様の線形計算をおこなった。流体運動に対してはストークス近似(低レイノルズ数で慣性項が無視できるという近似)を適用し、境界要素法をもちいて離散方程式を得た。計算コードを作成し、過去の類似研究(たとえば無限に長い流体楕円柱に沿って伝わる表面波の分散関係)を再現することを確認した。いくつかのパラメータに対する計算の結果、たとえば断面が楕円の場合、波長が楕円長径にくらべて小さければ、以前の線形理論が適用できて、臨界流速が波長に反比例するが、波長が長くなって楕円長径に近くなると、不安定が生じなくなることがわかった。したがって、波長(流れ方向の流路の長さ)を長くとればいくらでも低い流速で不安定が起こる、という単純な考えが成り立たないことがわかった。前年度に引き続き、弾性体中の狭い流路を粘性流体が流れるときに生ずると予想される固有振動を計測するための室内実験をおこなった。定常な流れを維持するためのポンプを導入した。理論計算から予想される臨界速度に達するように、流れを速くすることは可能であったが、流路を取り囲む弾性体(ゲランガムのゲル)が水槽内を滑って移動する、流路自体が変形するなどの支障があり、本年度も振動を再現することはできなかった。実験系と比較するために、無限に伸びる流路の流れ誘起振動に関する境界要素法をもちいた線形解析も、前年度に引き続きおこなった。振動の物理過程をより詳細にあきらかにするため、流路に沿って伝わる表面波の分散関係も数値的に計算した。楕円形と仮定した流路断面の扁平率を系統的に変えて、考えられる対称性をすべて考慮して計算した結果、流路の屈曲変形に対応する反対称モードと、流路幅の膨張・収縮に対応する対称モードとが、扁平率の変化に対して異なるふるまいをすることがあきらかになった。またこれまでの研究では、流路を満たす媒質の粘性率はゼロと仮定していたが、本研究では粘性率を有限とし、この粘性率の違いに対する分散関係のふるまいも調べた。長波長の対称モードにおける波の遮断(カットオフ)が再現された。境界要素法の計算プログラムについては、これまでかなり計算時間がかかっていたところ、複素ベッセル関数の計算方法を修正した結果、固有値計算の際に必要となる行列の作成時間が減ずることになり、性能を大幅に改善することに成功した。室内実験については、流路を支える周囲の弾性体として選定したゲランガムゲルを効果的に固定するための方策がなかなか得られず、現在のところ滞ったままである。そのため本来は本年度で研究に区切りをつける予定であったが、一年間研究期間を延長することにした。境界要素法の数値計算については、これまで計算時間がかなりかかっていたため、系統的に計算結果を出すことが難しく、とりまとめに時間を要した。数値計算の結果のみ成果発表する予定であったが、公表する形にできなかった点で、研究は遅れていると言わざるをえない。無限弾性体中の流路を粘性流体が流れるときに起こる自励振動の線形安定解析の結果を総括し、現象の物理メカニズムを考察した。平板流路モデルについては、もっとも不安定化しやすい反対称モードの解析解を長波長領域で導いた。流路内の流体の速度分布が放物線型に一致すると不安定が阻害されることの理由も、その解析解をもちいて説明した。いっぽう対称変形モードの場合、流路に沿って伝搬するクラック波はあるカットオフ波長以上で減衰解になるが、対称モードの流れ誘起振動は、この減衰解が不安定化したものであることがわかった。さらに最終年度は、流路に接する有限の厚さの層の弾性波速度が、その外側よりも遅い場合の解析もおこなった。