hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
便中のαディフェンシン測定を用いた放射線性腸炎の定量評価と臨床応用

我々はPaneth細胞によって産生・放出されるα-defensinを便中から測定することにより放射線腸炎の評価が可能であるかを検討し、臨床上利用可能な放射線腸炎の客観的指標を見いだすため、本研究を行った。マウスにおける基礎実験では、α-defensinの放射線照射後における有意な減少を観察した。また、腸内細菌叢における検討では照射後3日目でα-defensinとFirmicutesの間に有意な負の相関が認められた。この結果から照射後のα-defensinによる低下が腸内細菌叢の変化に関与していることが示唆された。臨床では、臨床研究における症例集積が十分に進まず、臨床上の検討には至らなかった。我々は、放射線性腸炎を定量的に評価する方法としてαdefensinがその評価方法となる可能性について探るため本研究を行った。(1)マウスを用いた腹部照射モデルにおけるαdefensin量と病理組織像の検討;本学において付属動物実験施設の建て替えが丁度行われたことから、本年度前半は動物実験飼育場所の確保ができず、実質的に12月から作業を開始した。マウスへは本学RIセンターにおいて飼育し、その施設内にあるLinacを用いて照射を行った。使用したマウスは、特定の遺伝子による影響を除くため、ICRマウスオスを用いた。まず当初の予定より低い6Gyでの腹部照射を3匹に対して行ったが、6Gyでは明らかな腸炎の出現を認めず、一過性の体重減少は見られたが、αdefensinの照射群における変化は認められなかった。続いて、予定線量である8Gyで腹部照射を行った。8Gyでは照射群に一過性体重減少を認め、糞便量も一時的に減少が見られた。一部の照射個体においてαdefensinの低下と回復が認められたが、照射群と非照射群との有意な差は見られず、病理的な変化は認めなかった。合わせて採取した血中シトルリンにおいても、照射群と非照射群において有意な差は認められなかった。(2)臨床研究;本研究計画における臨床研究への前段階として、これまで当院にて行われた骨盤臓器への放射線治療における放射線線量とその腸炎の関連について検討を行った。本検討では30Gy以上での照射線量体積が臨床における腸炎の発生に関連していることが示唆され、この結果を第129回日本医学放射線学会北日本地方会で発表した。臨床研究として、前向きに検討を行うため婦人科腫瘍症例を対象に放射線治療単独治療群において血中シトルリンと糞便の回収を行うことを目的とした臨床研究計画書を作成した。本研究においてまず陽子線治療の腹部照射における有用性を明らかとするため、子宮頸癌の全骨盤照射におけるX線による強度変調放射線治療と陽子線治療の比較研究を北海道大学大学院の吉村高明先生とともに研究した。当初は強度変調放射線治療と比較し、陽子線治療において通常の陽子線治療計画では有為な差を認めなかったが、陽子線治療の治療計画の改善により小腸や骨髄への投与線量を低減できる可能性が示唆された。これらの結果については第107回日本医学物理学会学術大会ならびに第53回International meeting of the Particle Therapy Co-Operative Groupにおいて発表した。また、αディフェンシンが腸内の組織ダメージを反映するかどうかについての動物実験での研究については、8Gy以上の投与線量において照射後3日目の便中のαディフェンシンが低下していた。このころにおける体重減少も昨年度の研究で観察されていることから、αディフェンシンが放射性腸炎の出現を反映している可能性が高いが、実験におけるマウスの頭数が十分ではなく、次年度におけるさらなる追試が必要である。なお、血中シトルリンの照射後の変化ははっきりとは認められてはいない。臨床における応用については、現在臨床研究として研究代表者の所属する施設でIRBの承認を受け、現在も症例集積中であるが、症例が集まっておらず、実症例での解析はまだ行えていない。本年度は昨年度までに行ったマウスの腹部照射における腸炎前後でのα-defensinの変化を検討した。その結果、腹部へ8Gy照射を行った3日後で照射前よりも糞便中のα-defensin量の有意な減少を認めた。併せて測定していた血中のシトルリンには明らかな変化はなかった。病理組織像においても照射後3日と8日において陰窩における細胞の空胞化といった形態異常を認めることができた。また、腸内細菌叢についても検討を行ったところ、照射後3日目でα-defensinと腸内細菌叢の一種であるFirmicutesとの間に有意な負の相関が認められた。また、有意ではないものの、Bacteroidesの照射前後での減少傾向も認められた。この結果は、照射後のα-defensinの減少により腸内細菌叢の変化が生じている可能性を示唆するものである。これらの結果から、放射線腸炎の評価測定として、便中α-defensinの経時的測定が有用であることが示された。臨床上の応用を検討した研究として、骨盤内照射を行う症例の集積を行ったが、解析に必要な十分な症例数が集積できず、検討は行えなかった。陽子線治療の骨盤内照射における線量低減の可能性については、X線放射線治療の強度変調放射線治療と比較して骨髄の線量低減が可能となり、それにより血液毒性の低減が可能であることは示されたが、明らかな腸管線量の低減には至らなかった。

我々はPaneth細胞によって産生・放出されるα-defensinを便中から測定することにより放射線腸炎の評価が可能であるかを検討し、臨床上利用可能な放射線腸炎の客観的指標を見いだすため、本研究を行った。マウスにおける基礎実験では、α-defensinの放射線照射後における有意な減少を観察した。また、腸内細菌叢における検討では照射後3日目でα-defensinとFirmicutesの間に有意な負の相関が認められた。この結果から照射後のα-defensinによる低下が腸内細菌叢の変化に関与していることが示唆された。臨床では、臨床研究における症例集積が十分に進まず、臨床上の検討には至らなかった。昨年度において研究代表者の登録施設変更が生じたことにより、研究場所や施設の整備から行わなければならず、このため4月から10月にかけてマウス実験ならびに臨床研究登録申請手続きも中止となり、研究開始の遅延が生じた。10月からは共同研究者である中村先生の所属する研究施設でのマウスの実験が可能となり、また研究代表者の新たに所属する施設における臨床研究の申請も行うことができたが、そこから半年間での研究となったため十分な成果が得られていない。放射線腫瘍学動物実験における8Gy投与群のマウス頭数をさらに集積し、今年度にみられた照射後3日目のαディフェンシンの低下が放射性腸炎を反映しているかのさらなる検討を加える。また、今年度は十分に行えていない病理組織との対比についても継時的なマウス組織の採取を次年度においては実施し、αディフェンシンの低下と病理組織像との関連を明らかにしていく。また、腸内細菌叢の変化について解析を行っていく。臨床応用においては、臨床研究における症例集積を続け、実際の症例においての放射性腸炎と血液中のシトルリンやリゾチーム活性、食事との関連を検討し、人における放射性腸炎の細菌叢変化も検討していく。本学における動物実験の開始が予定より遅れ、このため動物実験の検討が不十分になっている。今回の研究で8Gyでははっきりした放射線性腸炎が観察されにくかったことも原因と考えられる。昨年度、今年度と予定していた腸内細菌叢の変化における研究が行えておらず、このため、2回分の腸内細菌叢の解析費用(100万円程度)が未使用のまま残っている。これらは次年度において行う予定である。また、実験において使用するマウスも予定数に達していない。これらの理由から次年度の繰り越しが発生している。今後さらにマウスを用いた動物実験を共同研究者である中村先生の協力のもとで継続し、腹部線量もさらに増加して、放射線性腸炎がはっきりと観察される線量におけるαdefensinの経時変化を検討する。また、臨床研究においても、代表者が異動となった先において改めて臨床研究計画書を提出し、症例の蓄積と試料の解析を行っていく。また、陽子線治療と通常の放射線治療における比較については、北海道大学病院分子追跡放射線医療寄附研究部門・技術補助員である吉村高明先生に研究協力者となっていただいており、吉村先生に通常の放射線治療と陽子線治療における線量分布における有意性について検討を進めていただき、照射線量の違いから陽子線治療の腹部照射における有用性について明らかにしていく予定である。次年度において、腸内細菌叢の解析を行う。また、マウス実験もさらに行う。
いじめの傍観行動と援助行動に関する研究

本研究では認知の歪みの修正という観点からのいじめ防止対策について検討するため,一般的な反社会的行動に関する選択的道徳不活性化(SMD)といじめに関する選択的道徳不活性化(SMDB)に着目し、それらがいじめの傍観経験、制止経験、加害経験、被害経験とどのように関連するのかを明らかにすることを目的とした。調査は,公立定時制高校の14年生12クラス260名を対象とした。その結果、いじめの加害および傍観行動と被害経験には、一般的な反社会的行動に関する認知の歪みであるSMDといじめの認知の歪みであるSMDBが関連していることが示された。いじめは、その被害児童や被害生徒の学校適応に悪影響を与えるため、学校現場では適切な予防対策が求められている。近年、いじめのグループ・プロセスが注目されるようになり、いじめの被害者と加害者の周囲を取り巻く児童・生徒の存在が明らかになった。そこで、本研究では、直接的いじめと関係性いじめの傍観行動と援助行動に与える影響について集団要因と個人要因という観点から明らかにすることを目的としている。平成25年度は、26年度の調査研究実施に向けた基礎的研究を行った。具体的には、これまでの先行研究による知見をレビューし、質問紙調査に必要な尺度の収集および作成を行った。また、国内外の研究者とその尺度の妥当性についての検討を行い、研究の対象とする年齢を小学生および中学生から項目内容が理解可能な中学生および高校生に変更した。25年度末に調査対象校を確保したが、時間の確保が難しいため質問紙調査の実施は26年度に設定することにした。本研究では児童・生徒を取りまく学級環境の調整によるいじめ防止対策を教育現場に提案するため、集団要因としていじめに対する学級集団の規範的圧力を、個人要因としていじめに対する個人規範と反社会行動に関する認知の歪み、いじめに関する認知の歪みを取り上げ、それらがいじめの傍観行動と被害者への援助行動、加害行動、被害経験に与える影響について明らかにすることを目的とした。いじめは、直接的いじめと関係性いじめを研究の対象とした。高校生を対象に質問紙調査を行い、統計的分析を行った。分析の結果、反社会的行動に関する認知の歪みは責任転嫁、非難の帰属、道徳的正当化、非人間化、責任の拡散、結果の無視に分けられ、全てにおいていじめに関する認知の歪みと関連が認められた。いじめに関する認知の歪みといじめの役割については、いじめの傍観行動と中程度の正の相関があり、いじめを傍観した生徒ほどいじめに関する認知が歪んでいることが明らかになった。また、いじめに関する認知の歪みと加害行動、被害行動には低い正の相関が認められ、いじめの加害経験のある生徒およびいじめの被害経験のある生徒ほど、いじめに関する認知の歪みが認められた。いじめ被害者への援助行動といじめに関する認知の歪みとの間には関連が認められなかった。なお、これまでの研究で得られた知見を書籍にまとめた上、その要点については小学校、中学校、高等学校の教員を対象とした「いじめの防止に効果的な学級運営」についてのパンフレットを作成し、調査協力校および希望校に配布した。その結果,いじめの制止経験と生徒のSMD、SMDBは有意な関連が認められなかった。SMDと間接的いじめの加害経験と傍観経験については男子においては関連が認められず、女子では中程度の正の相関が認められた。SMDBは、男女共に低から中程度の正の相関が認められた。直接的・間接的いじめ被害経験とSMDとの関連は男子においては有意な関連が認められず、女子において低い正の相関が認められた。SMDBは男女共に低い正の相関が認められた。直接的いじめ加害行動は、SMDとSMDBにおいて男女共に低から中程度の正の相関が認められた。いじめの加害および傍観行動と被害経験には、一般的な反社会的行動に関する認知の歪みであるSMDといじめの認知の歪みであるSMDBが関連していることが示された。最も困難であった調査協力校を確保することができ、調査協力校との連携により、研究調査を実施することができた。調査時期が遅れたため、分析および成果発表に遅れが生じている。教育心理学調査で得られたデータをさらに詳細に分析し、分析内容や分析方法について学会で意見交換などを行うことでより適切な分析および考察を行う。また、本研究で得られた知見について学会等での発表を行う。当初計画していた計画のうち、上記したように前半の課題については当初の計画通りに進展したが、後半の課題である質問

紙調査については、いじめ事件の報道により、いじめへの社会的な関心が高まったことで学内的な実態調査が増加し、研究調査協力校の確保が一時的に困難な状況が発生した。そのため、質問紙調査の実施が当初の計画からやや遅れている状態である。したがって、全体としては「やや遅れている」と判断した。いじめが社会問題として注目されたことで、各学校が独自の調査を行ったことにより、研究調査をする余裕がなくなった。したがって、調査時期が大幅に遅れたことにより、データ入力等の人件費や学会での意見交換などで使う予定であった予算が使用できなかった。平成26年度は、25年度の研究計画で達成できなかった質問紙調査とそのデータの入力および分析を行う予定である。また、研究計画通りに本研究の結果とこれまでの研究による知見をまとめて学級環境の調整によるいじめ防止対策についての教員用パンフレットを作成する予定である。次年度は昨年度に入力が終わらなかったデータの入力作業(記述データの入力)を引き続き行い、さらに関連学会にてデータの分析、考察に関する意見交換を行う。いじめ事件の報道によっていじめへの社会的な注目が高まり、学内的な実態調査が増加したことで、研究調査協力校の確保が難しくなったため、前年度に質問紙調査を行うことができなかった。したがって、調査やデータ入力、分析に関する予算の執行ができなかった。25年度に実施する予定であった質問紙調査を26年度に行う。それに伴う質問紙用紙およびデータ入力、分析等で25年度未使用額を使用し、26年度分の研究費については教育現場用のパンフレットの作成など計画通りに執行する予定である。
時計遺伝子の発現異常が生活習慣病に及ぼす影響とその制御機構の解明

本研究では、肥満におけるDEC1 (Differentiated embryo-chondrocyte 1)の発現異常とFOXO1との物理的相互作用ならびにインスリンシグナル伝達経路との関与を解明し日内リズムへの影響について検討する。DEC1は、老化の中心的な役割を担っており、老化マーカーとしても広く知られている。そこで、肥満、生活習慣病、老化に関し、運動器症候群(ロコモティブシンドローム)に関与するシグナル伝達経路について、先に検討を行った。3ヶ月齢および加齢モデルの15ヶ月齢のSAMマウスを使用し、トータルRNAを大腿骨組織から分離した。それらの遺伝子発現およびmiRNA発現所見について、GeneSpringおよびIngenuity Pathways Analysisとの組み合わせにより、また、DNAマイクロアレイおよびmiRNAアレイを用いて解析を行った。遺伝子オントロジー(GO)分析にり、miRNAを標的とした遺伝子の極めて重要な転写関連プロセスと細胞内シグナル伝達を組み込んでいることを明らかにした。シグナル経路で、cAMP媒介シグナル、上皮接着結合シグナル、タイトジャンクションシグナル、ギャップジャンクションシグナル、カルシウムシグナル、およびサーチュインシグナルが骨老化に関与していることも明らかにした。RT-qPCRによりさらに解析したところ、加齢の制御転写因子が、miR-223-3p、miR-744-5p、miR-3103-5p、miR-4723-5pおよびmiR-6825-5pの制御に関与していることを示した。多数の組み合わせが識別されたmRNAとmiRNAの網羅的解析は、miRNAの異常発現は骨加齢において重要であることを示唆した。そして、その機能は関連シグナル上の特定遺伝子の転写を通して誘導されることが考えられた。今年度予定していた細胞におけるDEC1、FOXO1の発現リズムおよび関連する細胞内シグナル伝達経路について、進められていない。細胞の受給にあたり学内と提供先の諸手続きに不手際があり準備が滞ってしまった。細胞の入手が済んでおり、平成31年度は研究を進める準備が出来ている。マウス由来歯肉上皮細胞、マウス軟骨細胞、マウスiPs(肝臓細胞由来)をHighグルコース培地またはLowグルコース培地、口腔細菌であるP.gingivalis由来のLipopolysaccharide(LPS)刺激の3群で培養し、4時間ごと48時間までのDEC1、FOXO1の発現リズムをリアルタイムPCR法およびウェスタンブロッティング法を用いて確認する。さらに、細胞内シグナル伝達について、PI3K/Akt、Cox-2、NF- kβなどの炎症関連経路を解析、細胞上清中の炎症性サイトカインおよびケモカインをELISA法にて確認する。肥満モデルマウスとHigh-Fat Diet摂取におけるDEC1ノックアウトマウスの継時的なDEC1・FOXO1の発現の解析(in vivo):生後18ヵ月齢の肥満モデル( C57BL/6JHamSlc)マウスおよび12ヵ月齢のDEC1KOマウスを用いる。DEC1 KOマウスにはHigh-Fat Dietを6か月間自由摂取させる。6か月終了後、6時間おきにタイムコースでマウスの血液、歯肉上皮、大腿骨、肝臓、脾臓、歯槽骨を採取し、リアルタイムPCR法、ウェスタンブロッティング法によりDEC1、FOXO1の発現を解析する。Flow cytometry法による骨髄単核球細胞、脾臓よりT細胞を収集し、蛍光標識された抗CD45.1、CD45.2、B220、CD4、CD8、Gr-1、Mac-1およびTer119はFACS解析(BDBiosciences, San Jose, CA)にて評価する。ELISA法にて血液中のDEC1、FOXO1タンパク質量を解析する。大腿骨・歯槽骨についてマイクロCTによる骨形態計測と免疫染色による炎症状態の評価を行う。

細胞の入手が済んでおり、平成31年度は研究を進める準備が出来ている。マウス由来歯肉上皮細胞、マウス軟骨細胞、マウスiPs(肝臓細胞由来)をHighグルコース培地またはLowグルコース培地、口腔細菌であるP.gingivalis由来のLipopolysaccharide(LPS)刺激の3群で培養し、4時間ごと48時間までのDEC1、FOXO1の発現リズムをリアルタイムPCR法およびウェスタンブロッティング法を用いて確認する。さらに、細胞内シグナル伝達について、PI3K/Akt、Cox-2、NF- kβなどの炎症関連経路を解析、細胞上清中の炎症性サイトカインおよびケモカインをELISA法にて確認する。肥満モデルマウスとHigh-Fat Diet摂取におけるDEC1ノックアウトマウスの継時的なDEC1・FOXO1の発現の解析(in vivo):生後18ヵ月齢の肥満モデル( C57BL/6JHamSlc)マウスおよび12ヵ月齢のDEC1KOマウスを用いる。DEC1 KOマウスにはHigh-Fat Dietを6か月間自由摂取させる。6か月終了後、6時間おきにタイムコースでマウスの血液、歯肉上皮、大腿骨、肝臓、脾臓、歯槽骨を採取し、リアルタイムPCR法、ウェスタンブロッティング法によりDEC1、FOXO1の発現を解析する。Flow cytometry法による骨髄単核球細胞、脾臓よりT細胞を収集し、蛍光標識された抗CD45.1、CD45.2、B220、CD4、CD8、Gr-1、Mac-1およびTer119はFACS解析(BDBiosciences, San Jose, CA)にて評価する。ELISA法にて血液中のDEC1、FOXO1タンパク質量を解析する。大腿骨・歯槽骨についてマイクロCTによる骨形態計測と免疫染色による炎症状態の評価を行う。
植物病原細菌多剤排出ポンプの病原力としての役割

Pseudomonas syringae pv. tabaci (Pta) 6605の2つの主要な多剤排出ポンプMexAB-OprM, MexEF-OprNの病原力における役割を解析するため、mexB変異株とmexF変異株の病原力を精査した。今年は、mexB変異株、mexF変異株とそのダブル変異株を用いて植物由来抗菌性物質に対する感受性を生育阻止斑の形成試験で比較解析した。終夜培養した各菌株を軟寒天培地と混合プレーティングした後,各種化合物を浸み込ませたペーパーディスクを置床した。0.9 M t-桂皮酸,0.5 M p-クマル酸,1 Mアセトシリンゴン,1 Mスコポレチン,1 Mクロロゲン酸,0.3 Mフロレチン,1 Mナリンゲニン,200 mg/ml (+)-カテキンは顕著な生育阻止斑を形成しなかったが, 2 Mアセトバニロン,1 Mカテコールの場合阻止斑は,WTよりmexB変異株, mexF変異株で大きく,mexBmexF2重変異株ではそれと同等以上であった。1 Mクマリンの場合,mexB変異株の阻止斑はWTより若干大きく,mexBmexF2重変異株でより大きくなった。これらの結果は,MexAB-OprMとMexEF-OprNがアセトバニロン,カテコールを排出していること, MexAB-OprMはクマリンも排出していることを示唆している。一方,これら変異株の病原力については,Ishiga et al. (2017)の方法をタバコに応用したFlood Assayによって,再現性の高い実験結果を得ることができた。その結果,mexB変異株, mexF変異株は、接種後の病徴の進展,菌体増殖が野生株と比べ有意に低下することが確認された。以上の結果は,MexAB-OprMとMexEF-OprNはPta6605の病原力発現において重要な役割を担っていることを示している。本研究ではPseudomonas syringae pv. tabaci (Pta) 6605をモデル細菌として、2つの主要な多剤排出ポンプMexAB-OpeMとMexEF-OprNの病原力としての役割を解明しようとするものであり、そのためにまず、mexF欠損変異株とmexB欠損変異株を作出した。両変異株の遺伝子発現プロファイルを解析したところ、mexF欠損変異株ではmexAB-oprMの発現が増高した一方、タイプIII分泌システム(T3SS)関連遺伝子の発現が低下した。逆にmexB欠損変異株ではmexEF-oprN並びにABCトランスポーター等の遺伝子発現が増高し、psyIや菌体密度感知システムにより正に制御される遺伝子群の発現が低下した。これらのことからMexAB-OprMとMexEF-OprNは互いに補完的に機能することが推察された。mexF欠損変異株はswarming運動能が低下し、野生株に比べ宿主タバコに接種した際に病徴の進展、菌の増殖が低下したことより病原力に必要とされることが判明した。また、広宿主範囲プラスミドベクターであるpDSK519にmexTを組込み、Pta6605に導入したところ、構成的にmexT, mexEF-oprNの発現が増高し、AHLの生産がキャンセルされた。このことからもMexEF-OprNがAHL合成における負の制御因子として機能することが確認された。既にmexB, mexFの各欠損変異株を作出し、網羅的な遺伝子発現プロファイルを解析した。このうち、mexF欠損変異株については、mexAB-oprMの遺伝子発現が増高し、T3SS関連遺伝子の発現が低下することが判明した。また、swarming運動能が低下し、宿主タバコに対する病原力が低下したことより、MexEF-OprNが病原力にとって必要な因子であることが判明した。MexEF-OprNのAHL生産における役割を解析するため、mexEF-oprNの正の転写制御因子遺伝子であるmexTを高発現させたところ、AHL生産能が失われたことよりMexEF-OprNがAHL生産における負の制御因子であることが判明した。以上のことより、研究課題はおおむけ順調に進展していると判断した。本研究ではPseudomonas syringae pv. tabaci (Pta) 6605をモデル細菌として、2つの主要な多剤排出ポンプMexAB-OprM, MexEF-OprNの病原力における役割を解析するため、mexB変異株とmexF欠損変異株を作出し、それらの病原力を精査した。これまでmexF欠損変異株は、swarming運動能が低下し、野生株に比べ宿主タバコへの病原力は低下するとのデータが得られていたが、様々な接種法で検証した結果、野生株においてMexEF-OprNの病原力における必要性は低いと判断した。MexAB-OprMについては現在解析中である。広宿主範囲プラスミドベクターであるpDSK519にmexTを組込み、Pta6605に導入して、構成的にmexT, mexEF-oprNの発現を増高させた菌株では、AHLの生産がキャンセルされたことを前年度に明らかにしていたが、今年度はAHL合成酵素遺伝子であるpsyIの発現を解析した。mexT高発現株でのpsyIの発現は低いと考えていたが、予想に反して野生株やpDSK519だけを導入した菌株と同様レベルで発現していた。

このことからmexT高発現株でAHLが検出されないのは、AHLが合成されていなかったのではなく、合成されてもすぐに排出されたため蓄積しないためだと推察された。また、mexEプロモーターならびにmexAプロモーターのそれぞれにlacZYAを連結させたキメラ遺伝子を導入し、接種時にそれぞれのプロモーター活性をモニターしたところ、mexA::lacZYAを導入した場合、接種4日後にわずかなβガラクトシダーゼの活性があったが、mexE::lacZYAを導入した場合、βガラクトシダーゼの活性は見られなかった。感染時におけるmexAB-oprM, mexEF-oprNの発現についてはさらなる解析が必要である。fliC欠損変異株ばかりでなく、motABCD欠損変異株、aefR欠損変異株、gacA欠損変異株でAHLが蓄積されない原因がmexEF-oprNの高発現にあることを、数々のダブルミュータントを作出することにより明らかにした。さらにmexT高発現系の構築に成功し、mexTそしてmexEF-oprNを高発現させるとAHLが蓄積しなくなることを実証した。mexEF-oprNの発現、mexAB-oprMの発現をモニターできるレポーターキメラ遺伝子の作出は終えており、それらを導入した菌も作出済みである。以上のことより、研究課題はおおむけ順調に進展していると判断した。Pseudomonas syringae pv. tabaci (Pta) 6605の2つの主要な多剤排出ポンプMexAB-OprM, MexEF-OprNの病原力における役割を解析するため、mexB変異株とmexF変異株の病原力を精査した。今年は、mexB変異株、mexF変異株とそのダブル変異株を用いて植物由来抗菌性物質に対する感受性を生育阻止斑の形成試験で比較解析した。終夜培養した各菌株を軟寒天培地と混合プレーティングした後,各種化合物を浸み込ませたペーパーディスクを置床した。0.9 M t-桂皮酸,0.5 M p-クマル酸,1 Mアセトシリンゴン,1 Mスコポレチン,1 Mクロロゲン酸,0.3 Mフロレチン,1 Mナリンゲニン,200 mg/ml (+)-カテキンは顕著な生育阻止斑を形成しなかったが, 2 Mアセトバニロン,1 Mカテコールの場合阻止斑は,WTよりmexB変異株, mexF変異株で大きく,mexBmexF2重変異株ではそれと同等以上であった。1 Mクマリンの場合,mexB変異株の阻止斑はWTより若干大きく,mexBmexF2重変異株でより大きくなった。これらの結果は,MexAB-OprMとMexEF-OprNがアセトバニロン,カテコールを排出していること, MexAB-OprMはクマリンも排出していることを示唆している。一方,これら変異株の病原力については,Ishiga et al. (2017)の方法をタバコに応用したFlood Assayによって,再現性の高い実験結果を得ることができた。その結果,mexB変異株, mexF変異株は、接種後の病徴の進展,菌体増殖が野生株と比べ有意に低下することが確認された。以上の結果は,MexAB-OprMとMexEF-OprNはPta6605の病原力発現において重要な役割を担っていることを示している。mexEF-oprNの高発現によるAHL生産阻害の実証試験は終了したため、今後はmexB欠損変異株並びにmexF欠損変異株の多剤耐性能、病原力、遺伝子発現の解析を実施する。また、植物接種時におけるmexAB-oprM, mexEF-oprNの発現解析を引き続き行なう。
総合的数式処理システムの研究

本研究は総合的数式処理システムに関して、その構成と開発の基礎を実際のプログラミングで実証しつつ研究するものである。総合的数式処理の具体的描像としては、従来の数式処理を核に、(1)高等数学演算部、(2)数値計算・グラフィックスとの融合、(3)数学公式デ-タベ-スの装備とその自動運用、の三つの進んだ機能を追加したものを考えている。機能(1)は、従来の多項式や有理式などのデ-タ型に加えて、代数的数や代数関数、集合式や群など、多数のデ-タ型の組込を必要とする。これを下手に行うと、システムが複雑化してバグの原因となり、計算効率が下がる。本研究では、デ-タ型が全体として一般性と簡単さをもち、したがってデ-タ表現の枠組が複雑にならず、かつ計算効率が落ちないよう、数式の内部表現を何度も試行しながら決定した。また、内部表現に直結した核レベルのプログラムでバグを減らすよう、複雑ではあっても定形的な部分は「ひな型」プログラムに統合し、一部はプログラムを自動生成する機能を設けた。アルゴリズムのインプリメント用には、抽象的にデ-タ構造を操作できるよう、多数のデ-タ構造操作用コマンドを用意した。かくして、多種多様のデ-タ型をもち、内部表現にそれほど依存しないプログラミングが可能で、しかもREDUCEに比べて数倍の計算効率を持つ、総合的数式処理システムの核がほぼ実現できた。機能(2)に関しては、数値計算用のFORTRANプログラム、数式処理用のLispプログラム、などをオペレ-ティングシステムを介して結合する簡単な方式を考案し、インプリメントして実現容易性を示した。さらに、数値計算と数式計算の両方の計算法を融合化した算法をいくつか考案し、その有用性を示して、それらを「近似的代数算法」と名付けた。機能(3)に関しては、前回の研究で考案したインデックシング法の不備を発見し、改善したが、自動運用法の研究には時間が足りなかった。本年度は,総合的数式処理システムGALの開発・整備を続行するとともに,以下の4項目について具体的に研究を推進した.(1)数学公式データベースについて.前年度までに開発した方法は,三角関数などの数式書き換え型の公式にはうまく適用されるが,不定積分や級数などの演算型の公式にはうまく適用できなかった.そこで,公式を数式書き換え型と演算型の2種に分類し,公式のインデックシングをそれぞれに応じて若干修正した.また,プログラムを全面的に書き直し,見直しをした.(2)GCD算法の考案とベキ級数演算部の開発.多変数多項式のGCD(最大公約因子)の計算は数式処理における最重要演算の一つである.従来,多項式剰余列算法とモジュラ算法が知られていたが,多変数多項式の係数をべき級数として扱い,無用な高次項を捨てて計算する.非常に効率的な算法を考案した.これに伴ない,べき級数演算部をGALに組み込むとともに,算法をインプリメントして効率のよさを確かめた.(3)連立代数方程式のモジュラ・グレブナー基底解法の考案.連立代数方程式を数式処理で解く場合,計算途中で数係数が著しく増大して計算不能に陥ることが多々ある.これに対して,素数をモードとして計算し,あとで有理数係数の解を中国人剰余定理によって構成するモジュラ算法を考案した.この算法をGALにインプリメントしたところ.従来の方法では非常に長時間かかった問題が容易に解け,著しい有用性が判明した.

(4)数値数式の融合算法の有用性を示すために, 1変数代数方程式の重根と近接根の分離に対して数式処理の応用を試みた.浮動小数係数の多項式P(x)に対し, P(x)とdP(x)/dxの剰余列を計算し,結果の数係数が一定の微小量以以になったとき0にする,との簡単な算法で,重根と近接根が明解に分離できることをいくつかの例で示した.本年度は、総合的数式処理システムGALの開発・整備を続行するとともに、以下の3項目について具体的に研究を推進した。1.GALの型分けプログラムの自動生成。複数個のデータ型を扱う場合、各コマンドのトップレベル・プロシジャはほとんどが型分けプログラム(型によってサブプロシジャに分割すること)となる。数式処理システムでは多数の型が扱われるから、型分けが複雑になるが、これを自動化する機構を設けた。これは将来のデータ型の拡張への備えである。2.数学公式データベースについて。前年度までの公式インデックスシング法は、三角関数や特殊関数のように関数名が有力なキーワードとなる公式に対しては有用であるが、級数に対しては無力である。級数では被和関数が多項目あるいは有理式であることが大部分なので、級数のランニング・インデックスをキーワードとしたインデックス法を考案した。この方法をインプリメント・テストし、有用性を実証した。3.数値数式融合算法について。(1)近似的GCD算法を多変数多項式に拡張し、ある種の悪条件連立代数方程式の解法を与えた。その解法は、与方程式を良条件に変換するのみならず、元の方程式の近似根を根とする良条件連立方程式も構成する。この算法をインプリメントし、従来の数値算法と比較したところ、劇的な改善が見られた。(2)一変数多項式剰余列について、出発多項式が近接根をもつ場合に、余剰列の係数の精度低下と近接根の近接度との関係をほぼ明らかにした。(3)浮動少数係数のスツルム列について。近接根がある場合、あるいは主係数が異常に小さくなって主項が消された場合、消された主項を回復する逐次的算法を与えた。本年度の目標は、数式処理システムGALを整備し、マニュアルを印刷して各所に配布するとともに、数学公式デ-タベ-スの自動運用法の研究などを推進することであった。GALの整備については、前年度までに設計がほとんど固まり、また、型分けプログラムの自動生成法、内部表現に密接した面倒なプログラムの多くをひな型プロシジャに統合する方法がそれぞれ完成したので、従来、インプリメンティションをなおざりにしてきた部分を中心に全面的に書き直した。そして、なんとかマニュアルを印刷するまでにこぎつけた。しかし、GALの配布までにはあと数カ月の整備を必要とする。数値数式融合算法については、1変数多項式に対する近似的GCD算法と無平方分解算法を多変数多項式に拡張した。その応用として、ある種の悪条件連立代数方程式を良条件に変換し、精度よく解く方法を考察した。また、1変数多項式判余列の精度低下現象をほぼ解明した。上期二つの仕事に予想外に時間をとられ、数学公式デ-タベ-スの自動運用の研究はほとんど進展しなかった。
CD81を標的とした新規抗がん薬の開発

in vitroでは、骨肉腫細胞におけるCD81を抑制することで細胞増殖や細胞移動、浸潤を抑制することが可能であった。さらにそのメカニズムとしてErk,JNK,p38およびAktのタンパク質を評価すると,CD81を抑制した骨肉腫では明らかなErkとAktのリン酸化を抑制していた。また,細胞浸潤に関与するMMP2, MMP9,MT1-MMPの遺伝子発現を評価したところ、CD81を抑制した細胞ではそれらの発現が抑制していた。in vivoでは,ヌードマウスを用いて腫瘍形成モデルと転移モデルを作製した。CD81をknock outした群で腫瘍形成や転移は有意に少なかった。テトラスパニンの1つである,CD81はその他の癌腫で腫瘍増殖や転移に関与していると報告されているが,骨肉腫での役割は報告されていない。ヒト骨肉腫細胞株およびヒト骨芽細胞株にCD81の遺伝子発現およびタンパクの発現を確認した。また,siRNAで骨肉腫細胞株のCD81の遺伝子発現を抑制させると骨肉腫細胞株の増殖を抑制できた。CD81骨肉腫の増殖や転移にも関与していることが示唆された。骨肉腫は高悪性度骨腫瘍であり、小児や青年期に好発する。集学的治療法の発達に伴い,その予後は改善傾向であるが,肺転移がある症例では依然予後不良である。近年、がん治療で有効な分子標的薬が臨床応用されているが、骨肉腫に対する有効な分子標的薬は臨床応用されていない.一方,CD81はテトラスパニンファミリーの一つで多くのがん種において増殖および転移能に影響を与えると報告されている.CD81を抑制することで骨肉腫を制圧できれば、生命予後の改善が期待できる.われわれは,CD81を特異的に抑制することで多発性の滑膜増殖を抑制し,関節リウマチに対する治療効果を示してきた.この技術を応用することで,骨肉腫に対する抗腫瘍効果を検証し,CD81を標的とする新規治療薬を開発することが目的である.まず,骨肉腫細胞株および臨床献体から得た骨肉腫細胞を用いてCD81の発現を確認する.次に,CD81に対するsiRNAを作製し,siRNAによる遺伝子発現抑制効果と抑制条件下での遊走能・浸潤能への影響を評価する.増殖や遊走能において,変化を認めた際には,それらに関与するシグナル伝達経路(MAPKナーゼ経路など)の関与をwestern blotting法で評価する予定である.in vivoへの影響に関しては,CD81を長期的に抑制可能なshRNAもしくはCRISPER/Cas9システムによりCD81をノックアウトした骨肉腫細胞を用いて,腫瘍形成能や転移能(主に肺転移を評価する予定)の比較検討を行い、CD81の役割を明らかにしていく.CD81が骨肉腫細胞株に対する発現を評価し、siRNAで抑制可能であることを確認した。その抑制条件下で骨肉腫細胞の遊走、浸潤能が変化することを確認した。CD81の作用メカニズムに関してはwestern blotting法を用いて解析できている。in vitroでは、骨肉腫細胞におけるCD81の発現をsiRNAを用いて抑制することで細胞増殖や細胞移動、浸潤を抑制することが可能であった。さらにそのメカニズムとしてErk,JNK,p38およびAktのタンパク質をwestern blottingで評価すると,CD81を抑制した骨肉腫では明らかなErkとAktのリン酸化を抑制していた。また,細胞浸潤に関与するMMP2, MMP9,MT1-MMPの遺伝子発現をreal time RT-PCRで評価したところ、CD81を抑制した細胞ではそれらの発現が抑制していたことから、CD81はErkやAktのリン酸化経路を抑制することで細胞増殖を抑制し、さらにその下流にあるMMPの発現を抑制しすることで細胞移動能や浸潤能を抑制すると考えた。in vivoでは、CD81のknockout細胞をCRISPR/Cas9法を用いて作製した。その骨肉腫細胞の細胞増殖を確認するためにヌードマウスの皮下へ投与し、骨肉腫増殖モデルを作製した。20日経過したところでCD81をknockoutした群とコントロール群で明らかな増殖能に差を認めた。さらに尾静脈投与し、肺転移モデルを作製したところ、CD81をknockoutした群で有意に肺転移は少なかった。この事から、骨肉腫のCD81は細胞増殖や肺転移に関与しており,そのメカニズムはErk/MMPまたはAkt/MMPによるものであると考えた。骨肉腫モデルラットを作成し、in vivoで骨肉腫細胞株におけるCD81の役割を検討する。

現在、in vitroでの評価は順調に進展しているため、今後はヌードマウスを用いてin vivoでの効果を評価する予定である。CD81を抑制またはノックアウトした骨肉腫細胞株を作成し、マウスに移植することで腫瘍形成能や肺への転移能に影響を及ぼすかを検討する。骨・軟部腫瘍学今年度は正常組織および骨肉腫におけるCD81の検討を行った。CD81発現の検討には同様の試薬が使用できるため,次年度への繰り越しを行った。次年度は抗CD81に対するモノクローナル抗体を作成することに今年度の繰越金を使用する予定である。
マイクロCTを用いたクモヒトデ類骨格の比較形態：形質の進化的保存性の違いを探る

採集標本に基づく記載分類学的成果として,沖縄県の海底洞窟から得られた新種,また海底洞窟に産するクモヒトデ類の種のリストについて論文として発表した.熊野灘のクモヒトデ類相については,他の底生動物とともに論文としてとりまとめた(木村ほか,2018).クモヒトデ類の中でも変わった形態をもつOphiambix属に新種を見いだし,同属の他種と骨格構造を比較し記載論文としてまとめる準備作業を行った.タイから得られたクモヒトデ類については種のリストを作成し,少なくとも1種の未記載種と1種のタイ新記録種を認めている.広域に分布する種の中には,隠蔽種の存在が示唆されてきていたため,正しく種を認識するために,問題となっているいくつかの分類群について,COI,16Sの配列に基づき分子系統地理学的な解析を実施した.ニシキクモヒトデについては,東南アジアから高知までの個体と,和歌山や相模湾からの個体との間で系統的な差が検出された.キヌガサモヅルについては,これまでに解析されていなかった北海道南東部より得られた個体を解析し,東北沖に分布する個体と同種であることが確認された.クラゲに共生しているクラゲノリクモヒトデについては,日本と東南アジアの個体間で遺伝的に交流があり,同一種であることが確かめられた.X線マイクロCTによる観察については,これまでに東京大学総合研究博物館と共同で観察を進め,解析に必要となる14科84種の観察を実施した.その結果,従来は解剖でしか観察ができなかった内部の骨,特に口を形成する囲口板の数や歯板・口板の盤内部における形態を全てにおいて観察できた.系統との関係において形態を比較することにより,様々な骨片の形質の進化的な保存性について分析を行うための基盤を築くことができた.標本の収集については,様々なプロジェクト研究によって,新たに,紀伊半島周辺,沖縄周辺海域,相模湾から伊豆諸島,タイ,マレーシアよりクモヒトデ類標本を採集した.標本の分析もほぼ予定通り進められている.本研究の要であるマイクロCTによる形態観察については,東京大学総合研究博物館の協力を得ることができ,データ収集を行っているところである.国立科学博物館筑波研究地区への新たなX線マイクロCTの導入を進めることもできた.研究過程で得られた結果について,今年度も学会発表は順調にこなしており,一部の成果は研究論文として公表することができた.分子系統解析については,特に,問題がありそうな分類群において,今年度も配列データの取得を継続する.データの分析を随時行うことにより,途中結果をみながら分子系統解析を進めていく.マイクロX線CTによる骨格の形態観察については,昨年度に引き続き東京大学総合研究博物館の協力を得て進めるとともに,国立科学博物館でも観察を実施できる可能性が高い.これまでに集めてきたでデータを系統データと比較することにより,様々な形質の進化的保存性についての議論を深める.本年度は,第10回ヨーロッパ棘皮動物学会議,他において,これまでに得られている一部の成果を発表する.日本国内の各地(茨城県沖,沖ノ鳥島沖,沖縄県周辺,宮城県大槌沖,神奈川県相模湾)ならびに,海外(タイおよびマレーシア)における野外調査によって,材料とするクモヒトデの追加サンプルを収集した.沖縄県の海底洞窟からは未記載種を認め論文として発表した(Okanishi & Y. Fujita, 2018).また,既存の標本からも,日本の太平洋側に分布するツルボソテヅルモヅルの一種が新種であることを認め,発表した(Okanishi & T. Fujita, 2018).平成30年度に予定していた米国スミソニアン博物館におけるタイプ標本観察については,今年度に一部実施することができた.マイクロCTによる観察は,東京大学総合研究博物館の協力を得て観察を進めており,これまで14科58種の観察を終えている.データの分析を進めており,現在までに,これらの種において,従来は解剖でしか観察ができなかった盤や腕の内部の骨片の形態を観察することに成功している.体の各部の骨片の形態について,盤の中の骨格を中心に解析を進め,比較を行いつつある.種レベルで系統分類に疑問がある分類群にターゲットを絞り分子系統分析を行いつつある.キヌガサモヅルに関しては,隠蔽種の識別に成功した(Okanishi et al., 2018).これまでに,ニシキクモヒトデ,ツノモヅル,シゲトウモヅル,について沖縄から相模湾までのサンプルについて,16SとCOI配列を明らかにした結果,これらの種については,日本の中ではほとんど遺伝的な差が無いことが分かった.また,ニシキクモヒトデについては,マレーシア,タイのサンプルを加えて解析を行ったところ,16S配列では,ほとんど遺伝的な差が見られなかった.標本の収集と分析については予定通り進められている,本研究の要であるマイクロCTによる形態観察については,東京大学総合研究博物館の協力を得ることができ,データ収集を行っているところである.これらの過程で得られたデータより学会発表ならびに研究論文の執筆も進めている.採集標本に基づく記載分類学的成果として,沖縄県の海底洞窟から得られた新種,また海底洞窟に産するクモヒトデ類の種のリストについて論文として発表した.熊野灘のクモヒトデ類相については,他の底生動物とともに論文としてとりまとめた(木村ほか,2018).クモヒトデ類の中でも変わった形態をもつOphiambix属に新種を見いだし,同属の他種と骨格構造を比較し記載論文としてまとめる準備作業を行った.タイから得られたクモヒトデ類については種のリストを作成し,少なくとも1種の未記載種と1種のタイ新記録種を認めている.

広域に分布する種の中には,隠蔽種の存在が示唆されてきていたため,正しく種を認識するために,問題となっているいくつかの分類群について,COI,16Sの配列に基づき分子系統地理学的な解析を実施した.ニシキクモヒトデについては,東南アジアから高知までの個体と,和歌山や相模湾からの個体との間で系統的な差が検出された.キヌガサモヅルについては,これまでに解析されていなかった北海道南東部より得られた個体を解析し,東北沖に分布する個体と同種であることが確認された.クラゲに共生しているクラゲノリクモヒトデについては,日本と東南アジアの個体間で遺伝的に交流があり,同一種であることが確かめられた.X線マイクロCTによる観察については,これまでに東京大学総合研究博物館と共同で観察を進め,解析に必要となる14科84種の観察を実施した.その結果,従来は解剖でしか観察ができなかった内部の骨,特に口を形成する囲口板の数や歯板・口板の盤内部における形態を全てにおいて観察できた.系統との関係において形態を比較することにより,様々な骨片の形質の進化的な保存性について分析を行うための基盤を築くことができた.標本の収集については,様々なプロジェクト研究によって,新たに,紀伊半島周辺,沖縄周辺海域,相模湾から伊豆諸島,タイ,マレーシアよりクモヒトデ類標本を採集した.標本の分析もほぼ予定通り進められている.本研究の要であるマイクロCTによる形態観察については,東京大学総合研究博物館の協力を得ることができ,データ収集を行っているところである.国立科学博物館筑波研究地区への新たなX線マイクロCTの導入を進めることもできた.研究過程で得られた結果について,今年度も学会発表は順調にこなしており,一部の成果は研究論文として公表することができた.分子系統解析については,初年度に引き続き,平成30・31年度も配列データの取得を継続する.データの分析を随時行うことにより,途中結果をみながら分子系統解析を進めていく.マイクロX線CTによる骨格の形態観察についても,初年度と同様の内容の観察作業を継続する.必要に応じて走査型電子顕微鏡や樹脂包埋等の他の方法でも形態観察を行う.本年度は,第16回国際棘皮動物学会議他において,これまでに得られている一部の成果を発表する.分子系統解析については,特に,問題がありそうな分類群において,今年度も配列データの取得を継続する.データの分析を随時行うことにより,途中結果をみながら分子系統解析を進めていく.マイクロX線CTによる骨格の形態観察については,昨年度に引き続き東京大学総合研究博物館の協力を得て進めるとともに,国立科学博物館でも観察を実施できる可能性が高い.これまでに集めてきたでデータを系統データと比較することにより,様々な形質の進化的保存性についての議論を深める.本年度は,第10回ヨーロッパ棘皮動物学会議,他において,これまでに得られている一部の成果を発表する.(理由)予想外の天候の不順により予定していた標本採集調査の一部が実施できなかった.それにより入手する予定であった標本の分析ができなかったため,次年度に行うこととした.そのための消耗品を次年度に購入することとした.(使用計画)
有限型超越整函数の力学系

本研究では,fとしては有限型超越整函数と呼ばれる,特異値の集合が有限集合になるような超越整函数について,そのジュリア集合上の力学系的性質を考察した.具体的には,相空間上の適当な分割を定義することによって,各点に対して無限個のシンボルからなるitineraryを定義し,(1)どのようなitineraryが実際に実現されるか?(2)同じitineraryを共有する点全体の集合がどのようなものになるか?を考察した(ただし,このitineraryは相空間上のすべての点に対して定義されるものではない.軌道がある特定の漸近値に対する漸近路の逆像上に来るような初期点以外に対して定義される).本年度は特に構造有限超越整函数と呼ばれる,有限型超越整函数全体の集合の部分集合に属する超越整函数について次のような結果を得た.まず(1)については,itineraryをs__-=(s_0,s_1,...)としたとき|s_n|がある増大条件を満たすとすると,実際にs__-をitineraryとして持つような点が存在する.更に(2)については、s__-に対する同じ条件下でh_<s__->(t)(t>^∃t_*)という曲線が存在して,h_<s__->(t)上の任意の点は同じitinerarys__-を共有し,かつ,h_<s__->(t)上の任意の点はfの反復によって∞に行く.更に,itinerarys__-が周期的であって,fの特異値がある条件を満たすときは,曲線h_<s__->(t)をfの逆函数の分枝を用いて可能な限り引き戻すことによって,これが1点に収束し,その点はfの周期点になる.また,この周期点は反発的周期点または放物的周期点である.本研究は「有限型超越整函数」と呼ばれる、特異値の集合が有限集合になるような函数について,そのジュリア集合上の力学系的性質を考察するものである.具体的にはまず第1に,fの反復によって∞に行くような軌道の集合がどのような構造を持っているかを明らかにすることを目標にし,更に具体的には,指数函数族λe^zの場合に既に知られている結果を参考にしながら,相空間上の適当な分割を定義し,それによってitineraryを定義することを試みた.その後,「どのようなitineraryが実際に実現されるか?」という問題を考察した.結果的にはまず,有限型超越整函数のサブクラスである構造有限超越整函数に対して,s___=(s_0,s_1,...)が実現されるitineraryであるとすると「h_<s___>(t)(t>^∃t_*)という曲線が存在して,h_<s___>(t)上の任意の点は同じitinerary s___を共有し,かつ,h_<s___>(t)上の任意の点はfの反復によって∞に行く」という結果のある不完全な部分を埋め,結果を多少改善することができた.また一般の有限型超越整函数fに対しては,fがasymptotic valueをもち,更にそのasymptotic pathのfによる可算無限個の逆像が同様のasymptoticをもつ,という仮定の下ではitineraryが定義できることが示せたが,意味のあるitineraryを無条件に定義することは残念ながらできなかった.これは「有限型である」というだけですでに相当広いクラスであり,これらを無条件に同一に扱うことが難しいことを示しているように思われる.一方でサブクラスである構造有限超越整函数は谷口の表現定理により,積分を使った具体的表現が可能であるので統一的に扱うことが可能である.来年度は当初の計画ではh_<s___>(t)が定義されたとして,次に「この曲線をfの逆函数の分枝を用いて可能な限り引き戻したときに、それが1点に収束するかどうか?」という問題についての研究を行なう予定であったが,すでに構造有限超越整函数のクラスについてはfの特異値の挙動に関してある条件を設定すると,この場合には1点に収束するということがほぼ示せている(詳細を詰める作業が若干残っている).これらの成果は2002年8月に北京で開催された国際数学者会議(ICM2002)をはじめ,いくつかの研究集会で報告を行った.論文での発表は成果がまとまってからにしたいので,今年度は見送った.本研究では,fとしては有限型超越整函数と呼ばれる,特異値の集合が有限集合になるような超越整函数について,そのジュリア集合上の力学系的性質を考察した.具体的には,相空間上の適当な分割を定義することによって,各点に対して無限個のシンボルからなるitineraryを定義し,(1)どのようなitineraryが実際に実現されるか?(2)同じitineraryを共有する点全体の集合がどのようなものになるか?を考察した(ただし,このitineraryは相空間上のすべての点に対して定義されるものではない.軌道がある特定の漸近値に対する漸近路の逆像上に来るような初期点以外に対して定義される).本年度は特に構造有限超越整函数と呼ばれる,有限型超越整函数全体の集合の部分集合に属する超越整函数について次のような結果を得た.まず(1)については,itineraryをs__-=(s_0,s_1,...)としたとき|s_n|がある増大条件を満たすとすると,実際にs__-をitineraryとして持つような点が存在する.

更に(2)については、s__-に対する同じ条件下でh_<s__->(t)(t>^∃t_*)という曲線が存在して,h_<s__->(t)上の任意の点は同じitinerarys__-を共有し,かつ,h_<s__->(t)上の任意の点はfの反復によって∞に行く.更に,itinerarys__-が周期的であって,fの特異値がある条件を満たすときは,曲線h_<s__->(t)をfの逆函数の分枝を用いて可能な限り引き戻すことによって,これが1点に収束し,その点はfの周期点になる.また,この周期点は反発的周期点または放物的周期点である.