hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
原子間力顕微鏡リソグラフィー法によるグラフェンのバンドギャップ制御に関する研究

本研究では、AFMリソグラフィー法を利用してグラフェン中にバンドギャップを導入する技術の確立に取り組んだ。金属電極を有するグラフェン試料において、素子中央部を局所的に酸化することで、グラフェン/酸化グラフェン/グラフェン面内接合素子を作製した。電子輸送特性を評価したところ、非線形な電流-電圧曲線とともにVSD=3V程度の電流抑制領域が確認され、酸化グラフェンを精製することによるバンドギャップ形成に成功した。一方、後者については、グラフェンを局所的に絶縁化することで幅10nmの超微細グラフェン細線素子を作製した。作製した細線素子にはトランスポートギャップが形成され、ゲート電圧印加により電流のスイッチング動作が実現し、AFM陽極酸化法により超微細グラフェン細線素子の作成が可能であることを示した。本研究では、AFM陽極酸化法を利用して、グラフェン中にバンドギャップを導入する技術の確立に取り組んだ。その結果、(i)AFM陽極酸化法による酸化グラフェン生成、および(ii)グラフェン細線構造によるグラフェンのバンドギャップ制御に成功した。(i)シリコン基板上に形成されたグラフェンに、AFMカンチレバーを接触させ、カンチレバーに負の電圧を印加し、グラフェン表面に吸着している水分子が電界により電離させ、陽極酸化反応によりグラフェンを酸化した。カンチレバーを空間掃引することによりグラフェン/酸化グラフェン/グラフェン接合素子を作製した。素子の電子輸送特性を測定したところ、非線形な電流ー電圧曲線とともにΔVSD = 3 V程度の電流抑制領域を確認した。金属/半導体/金属接合が実現したことを意味する。さらに、カンチレバーへの印加電圧を変調したところ、電流抑制領域の幅が系統的に変化した。酸化度を変化させ、グラフェン/酸化グラフェン/グラフェン接合素子のトランスポートギャップを調整することに成功した。酸化グラフェンの酸化度がカンチレバー印加電圧とともに変化することは、ラマン分光・オージェ電子分光法によっても確認した。(ii)酸化グラフェンナノ構造により、グラフェンを局所的に絶縁化することで、幅10nm程度の超微細グラフェン細線素子を作製した。作製した細線素子には、トランスポートギャップが形成され、ゲート電圧を印加しない状態でコンダクタンスがゼロに抑制された。ゲート電圧を印加すると、電界効果によりコンダクタンスが増大し、スイッチング動作の実証に成功した。(i)AFM陽極酸化法による酸化グラフェンの生成シリコン基板上に形成されたグラフェンに、AFMカンチレバーを接触させ、カンチレバーに負の電圧を印加し、陽極酸化リソグラフィーを行った。カンチレバーへVtip=12 Vの電圧を印加すると、グラフェン表面に吸着している水分子が電界により電離し、陽極酸化反応によりグラフェンが酸化された。カンチレバーを空間掃引することにより任意の酸化グラフェンナノ構造を作製した。酸化グラフェンが形成された領域は、AFM摩擦像により画像化した。さらに、電気伝導測定用の金属電極を有するグラフェン素子中央部を、本手法を用いて局所的に酸化し、グラフェン/酸化グラフェン/グラフェン接合素子を作製しその電子輸送特性を測定したところ、非線形な電流ー電圧曲線とともにDVSD=3 V程度の電流抑制領域が確認され、金属/半導体/金属接合が実現していることを確認した。さらに、カンチレバーへの印加電圧を変化させたところ、電流抑制領域の幅がカンチレバーへの印加電圧とともに系統的に変化した。この結果は、カンチレバーへの印加電圧の変化によって、酸化領域の酸化度(酸素/炭素構成比)が変化し、酸化領域のバンドギャップが変化したためであると考えられる。標記の研究によって、酸化グラフェンの局所生成技術と酸化度のカンチレバー印加電圧による制御という当初の目的を達成することができた。本研究の目的である酸化グラフェンの局所生成によるグラフェンのバンドギャップ形成技術を、1年目に達成することができ、さらに本研究成果を論文発表することができた【S. Masubuchi et al., Nano Lett. (2011)】。これらの研究は、当初の目標では二年目に達成する予定であったものを、初年度に達成することができた物である。引き続き、酸化グラフェン生成と、グラフェン細線素子作製によるバンドギャップの形成法の確立に取り組む。特に、グラフェン細線素子作製法により注力し、室温おけるスイッチング動作素子の実現を目指す。研究成果発表のための旅費・AFMカンチレバーの購入費に利用する
人工心臓における機械弁でのキャビテーションの観察および定量化に関する研究

本研究では、拍動型人工心臓への二葉式機械弁の使用可能性を検討するため、一葉式機械弁と二葉式機械弁におけるキャビテーション発生の観点から比較を行った。一葉式機械弁には以前から使用してきたMedtronic Hall弁を、二葉式機械弁にはSorin Bicarbon弁を使用し、キャビテーション気泡の発生メカニズムを検討した。本研究室で開発された電気油圧式全人工心臓を模擬循環回路に接続して駆動し、心拍数60100bpm、心拍出量4.57.5L/minで灌流した。試験流体としては、血液と同様な粘度および飽和水蒸気圧を持つ50%のグリセリン水溶液を用いた(粘度3.4cP,飽和水蒸気圧-715mmHg)。左ポンプの流入側弁の運動が観察できるようにアクリル製のチャンバーを製作し、チャンバー上部に高速度カメラ(fx-6000,nac, Japan)を設置して、弁表面に生じるキャビテーション気泡を毎秒30,000フレームで記録した。閉鎖に伴う弁の軌跡はCCDレーザ変位センサ(LC-2450,Keyence, Japan)を用いて計測し、弁の閉鎖軌跡から閉鎖直前の速度を求めた。閉鎖直前0.3ms間の弁閉鎖速度は心拍数とともに増加しており、Sorin Bicarbon弁よりもMedtronic Hall弁の方が速くなっていた。キャビテーションの強さは弁の形状によって異なるが、いずれの弁においても心拍数の増加とともに観察時間は長くなり、閉鎖速度と同様にMedtronic Hall弁では長く、Sorin Bicarbon弁では短くなっていた。一葉式機械弁よりも二葉式機械弁の方が閉鎖速度は遅く、弁座の面積も小さいため、キャビテーション気泡の発生が少なかった。機械弁でのキャビテーション発生の観点からは人工心臓においては二葉式機械弁を使用したほうが溶血や弁表面壊食を防げると思われる。我々の研究室では拍動型の電気油圧型人工心臓や補助心臓を開発しており、弁としてはmonoleafletのMedtronic Hall弁を使用してきた。しかし、最近臨床ではbileaflet弁が主に使用されており、中心流や動力学の点においてmonoleaflet弁に関する優位性が明らかとされた。そこで、今回3種類のbileaflet弁について現在開発中の電気油圧型人工心臓システムへの応用の可能性についてキャビテーションの観点から検討した。直径21mmのSt.Jude弁、ATS弁とSorin Bicarbon弁を電気油圧型人工心臓に用いて僧帽弁の位置に装着し、心拍数60-100bpmで駆動した。CCDレーザ変位センサを用いて弁の閉鎖運動を検討し、圧力センサを用いて弁表面近傍での圧力低下計測し、高速度カメラにてキャビテーション気泡を撮影した。また、キャビテーション気泡の観察時間を機械弁でのキャビテーション定量化の指標として使用した。心拍数が増加するほど弁の閉鎖速度も増加していた。また、弁の閉鎖速度はATS弁で最も速く、Sorin Bicarbon弁で最も遅くなっていた。キャビテーション気泡はleaflet弁の閉鎖速度が最も速くなるleafletの円周で集中的に観察され、閉鎖速度が最も速いATS弁でキャビテーション気泡が多く観察された。弁の閉鎖速度が速いほどキャビテーション気泡の観察時間が長くなっており、これらには相関関係が存在していた。本研究では、キャビテーション気泡の崩壊までの時間と弁の閉鎖速度には相関関係があることから、キャビテーション気泡の観察時間で機械弁のキャビテーションの定量化の検討が可能であると考えられた。Bileaflet弁においてキャビテーション気泡の原因としてはmonoleaflet弁と同様にsqueeze flowが考えられ、閉鎖速度が遅いbileaflet弁は電気油圧型人工心臓にも使用可能であると考えられる。
集中治療患者の客観的呼吸困難感と長期予後との関連性に関する前向き観察研究

プロジェクト1日本語版客観的呼吸困難感評価スケールの作成:自分で症状を訴えられない患者様の息苦しさを医療者が観察して評価するためのツールを、日本でも使用できるようにし、集中治療室での呼吸困難感緩和の一歩とします。プロジェクト2集中治療室での日本語版客観的呼吸困難感評価スケール得点と、人工呼吸療法を必要とする患者様の、ICUでの死亡や在室日数・病院在院日数などの関係性を調査します。プロジェクト3集中治療室での客観的呼吸困難感評価得点と退院後6ヶ月の死亡率や、QOLおよび呼吸困難感との関係性を調査します。集中治療室での呼吸困難感が強いとスケールで示される人ほど予後が悪いのではないかと考えています。
Odd-skipped related 遺伝子の硬組織発生における機能解析

ターゲット遺伝子であるOsr1遺伝子およびそのプロモーター約2.9kbをPCRクローニングし、トランスジェニックマウス作出用ベクターに組み込んだ後にOsr1トランスジェニックマウスを作出した。作出したマウスを用いて新生仔マウス骨格標本および成体マウス骨格標本を作出し形態観測を行ったところトランスジェニックマウスは野生型と比較して体長および体重が有意に減少していた。また頭蓋骨前頭縫合および矢状縫合部において著明な縫合の閉鎖遅延を認めた。またトランスジェニックマウスでは同部におけるアルカリフォスファターゼの発現が減少しており骨芽細胞の分化の遅延が示唆された。さらに下顎切歯部においてエナメル質の形成不全が認められた。そこで、新生仔マウス頭蓋骨より骨芽細胞を分離し培養した後に骨芽細胞、軟骨芽細胞およびMsx遺伝子の発現を定量的RT-PCR法により解析したところ、トランスジェニックマウス由来骨芽細胞ではオステオカルシン、アルカリフォスファターゼ、アグリカンおよびMsx1, 2遺伝子の発現が有意に減少していた。加えてMTSを用いた増殖能試験をおこなったところトランスジェニックマウス由来骨芽細胞は増殖能が亢進していることが明らかとなった。以上の結果はOsr1遺伝子が頭蓋骨発生、特に骨芽細胞の分化過程において分化を抑制するとともに未分化な細胞の増殖能を亢進していることを示しておりOsr1遺伝子が頭蓋骨の発生過程において重要な役割を担っていることを示唆するものであると考えられる。
中性子回折用超高圧装置の開発と高圧下における水素結合系物質の挙動の解明

地球深部に遍在する水(水素)の存在状態を明らかにすることは、地球内部のダイナミクスや物質循環を理解する上で非常に重要である。本研究では水素を観察できる中性子線を用いることにより、地球深部に相当する高圧条件下において水や水素がどのような振る舞いをするのかを観察し、地球内部物質に対するこれらの影響を明らかにする手がかりを得ることを目的として、高温高圧中性子回折実験用に新たに開発したセルを導入し、研究を遂行した。最終年度(出産育児により一時中断後研究を再開した残り2ヶ月間)は、主に解析と今後に向けた追試実験を行った。水素の振る舞いを直接観察できる中性子回折の手法を用いて鉄ーシリケイトー水系の地球形成初期に集積した物質をモデル化した出発試料に対して高温高圧下その場観察を行い、高温高圧下で含水鉱物が脱水してできた水と固体の鉄とが反応して、鉄水素化物が生成する様子をリアルタイムでとらえることに成功した。これにより、鉄と鉄が水素化物となって有意に水を取り込むことが明らかになり、原始地球で始源物質が集積していく初期段階で、水素は鉄へと溶け込み始めていたことが示唆された。この研究結果は学術雑誌に論文として出版され、地球核に取り込まれた軽元素の問題に対して、これまで種々の実験が行われてきた純鉄とケイ酸塩の系だけではなく、水素化した鉄とケイ酸塩間での軽元素の分配を調べていくことの重要性を投げかけた。高圧下での中性子その場観察では、高温高圧が長時間安定に発生でき、かつ、大容量の試料でシグナル強度を稼げることが望ましい。そのためには、本研究で開発・導入した新型6-6セルに対して、高温高圧下での圧力抜け及びアンビルセルからの中性子の吸収を軽減などの課題を克服していく必要がある。今後の展望として、更なるセルの改良によりアセンブリの最適化を図っていくための基礎固めが本研究によってなされたと言える。28年度が最終年度であるため、記入しない。地球内部に遍在する水は、地球内部の諸現象(例えば、鉱物の構造相転移や化学反応)に影響を及ぼしうる。水や水素の存在状態を明らかにすることは、地球内部のダイナミクスや物質循環を理解する上で非常に重要である。本研究では、水素を観察できる中性子線を用いることにより、地球深部に相当する高圧条件下における水素の振舞いと、その地球内部物質に対する影響を探ることを目的として研究を行った。まず、含水鉱物のアナログ物質として知られる水酸化カルシウムCa(OD)_2について、大強度陽子加速器施設」-PARCのパルス中性子を利用した中性子実験を、高温高圧ビームラインPLANET (BLIl)にて行った。実験は、申請者自身が実験責任者として採択された実験課題に沿って行われた。申請者がこれまでに開発してきた高圧発生装置を持ち込み、この装置の有用性が示された。同時に、Ca(OD)_2の室温高圧相の回折パターンを測定することに初めて成功し、結晶構造と水素原子位置の詳細が明らかになった。また、別の実験から得られたCa(OD)_2の高温高圧相の結果も併せて、相関係と水素結合の変化について考察し、同等の構造をもつ水酸化物の高圧下での振る舞いに関して、体系的な理解につながる知見を得た。この成果報告としては、国内学会での発表に加えて、さらに学術雑誌に論文を投稿し、現在レビュー段階である。また2013年7月から、ドイツバイロイトにあるBayerisches Geoinstitut (BGI)に長期滞在中である。BGIにはJ-PARCにある大型6軸プレスと同じモデルの装置が備わっており、この装置の習得を兼ねた研究を行った。ここでは、結晶構造中に水素結合をもつ含水鉱物のlawsonite (CaAl_2Si_2O_7(OH)_2・H_2O)をターゲットとして、高温高圧下での変形実験を行った。回収試料の組織と結晶方位分布を調べた結果、勢断変形を受けた試料のみに特徴的な結晶方位選択配向と変形組織が観察され、lawsoniteが沈み込むスラブでの地震波速度異常を誘発する手がかりを得た。成果報告として、12月に米国で行われた国際学会で口頭発表を行った。本研究では、水素を観察できる中性子線を用いることにより、高温高圧条件下で起こる鉱物の構造相転移や化学反応などの諸現象における水や水素の振る舞いを観察し、地球内部物質に対するこれらの影響を明らかにすることを目的として、研究を遂行した。1、大型6軸プレスを用いた含水鉱物lawsoniteの変形挙動の観察2014年12月末まで、ドイツのバイロイト大学バイエルン地球科学研究所に長期で滞在し、大型6軸プレスを用いた高温高圧実験を行った。ここでは多様な分析装置を用いた回収試料の観察が可能であり、結晶構造中に多量の水を含む含水鉱物lawsonite(CaAl2Si2O7(OH)2・H2O)の高温高圧下での変形実験を行った。回収試料の微細構造を調べた結果、特定の温度と歪み条件下で剪断変形を受けた試料のみに特徴的な結晶方位選択配向と変形組織が観察された。また、透過型電子顕微鏡観察からも、調和的なすべり系を示す転位線が確認でき、lawsoniteが沈み込むスラブでの地震波速度異常を誘発するという仮説を支持する重要な手がかりを得た。

2、高温高圧中性子回折実験に向けたセルの開発中性子その場観察では、高温高圧が長時間安定に発生でき、かつ、大容量の試料でシグナル強度を稼げることが望ましい。そこで、ブローアウトを防ぐために超硬アンビルの径を一回り大きくし、スチールのジャケットで周りをサポートしたアンビルセルを新たに導入した。さらに、セルのサイズや材質を変えながら圧力発生と加熱試験を繰り返し、最適なアセンブリの検討を行った。鉄-シリケイト-水の混合試料をサンプルとして実際にJ-PARCで中性子実験を行い、新型アンビルセルの性能が大幅に向上したことを確かめた。地球深部に遍在する水(水素)の存在状態を明らかにすることは、地球内部のダイナミクスや物質循環を理解する上で非常に重要である。本研究では、水素を観察できる中性子線を用いることにより、地球深部に相当する高圧条件下において水や水素がどのような振る舞いをするのかを観察し、地球内部物質に対するこれらの影響を明らかにする手がかりを得ることを目的として、研究を遂行した。1.高温高圧中性子回折実験に向けたセルの開発と応用中性子その場観察では、高温高圧が長時間安定に発生でき、大容量の試料でシグナル強度を稼げることが望ましい。これまでに本研究で開発した新型6-6セル(従来型よりも直径が一回り大きく、スチールのジャケットで周りをサポートした超硬アンビルを導入したもの)に対して、今年度は高温高圧下での圧力抜け、およびアンビルセルからの中性子の吸収を軽減させるという両課題を克服するべく、さらなるセルの改良を行いアセンブリの最適化を図った。2.放射光X線を用いた含水鉱物の高温高圧下での変形挙動その場観察2014年末まで滞在したドイツにて行った含水鉱物Lawsoniteの変形実験と回収試料の組織観察から、実験条件(温度や圧力,歪み,歪み速度,時間,粒径など)の違いによる影響を検証した結果として、特定の温度と歪み条件下で剪断変形を受けた試料のみに特徴的な結晶方位選択配向と変形組織が観察された。この結果を反映して今年度は、上記1の改良アンビルを用いて高温高圧下での変形実験の放射光X線その場観察を試みた。高温高圧下で試料を一定速度で変形させながら、新型セルのアンビルギャップのわずかな隙間からX線カメラの透過像と回折パターンの有為な変化をとらえることに成功した。これにより、改良セルの変形実験への応用が可能であることが確認できたと同時に、変形Lawsoniteの初のX線その場観察が実現された。今年度は前半にセルの改良および最適化を進め、後半にその実践・解析を行った。1.については鉄ーシリケイトー水系の混合粉末試料を用いた中性子実験を行う予定であったが、2015年秋に予定されていた大強度陽子加速器施設(J-PARC)でのビームタイムが、中性子源の故障により急遽変更・キャンセルとなり実施できなかった。しかし、オフラインや放射光X線を用いた実験結果を絡めて一貫したデータとフィードバックを得ることができた。これまで繰り返して行った実験の解析から、鉄が水素化物となって有意に水を取り込むことが明らかになり、この研究結果をまとめて、国際学術雑誌に論文として近々投稿する準備を進めている。2.についても現在データを解析中であり、試料の歪み量から変形メカニズムやレオロジーについての詳細を解明していく。
血管病変形成初期における内皮細胞プロテイナーゼ活性化型受容体の役割

動脈硬化初期病変形成の要因となる血管内皮細胞の透過性亢進におけるプロテイナーゼ活性化型受容体(PAR1)の役割を明らかにした。PAR1は、血液凝固因子トロンビンにより活性化され、(1)G蛋白質Gα13を介し、細胞外Ca2+非依存性、Rhoキナーゼ依存性のミオシン軽鎖ニリン酸化を引き起こす経路、(2)G蛋白質Gαqを介し、Ca2+依存性でミオシン軽鎖ニリン酸化を伴わない2つのシグナル伝達経路を介して内皮細胞の透過性を亢進させた。内皮細胞は、様々な血管障害因子により活性化を受け、動脈硬化の初期病変形成に重要な役割を果たす。その結果、血液凝固系の活性化、平滑筋細胞の増殖、血管透過性の亢進などが惹起され動脈硬化が進行する。本研究では、内皮細胞の活性化や透過性亢進におけるプロテイナーゼ活性化型受容体の役割を明らかにし、動脈硬化の初期病変形成における血液凝固系と内皮細胞機能との相互作用の役割を明らかにする。本年度は内皮バリアー機能に及ぼすトロンビンの作用について以下の研究成果をあげた。2.Phos-tag^<TM>電気泳動法を用い、内皮細胞をトロンビンで刺激するとミオシン軽鎖のニリン酸化体が一過性に増加し、一リン酸化体は有意な変化を示さないことを明らかにした。3.トロンビン受容体PAR1活性化ペプチドで刺激すると、トロンビンの場合と同様にミオシン軽鎖のニリン酸化が一過性に増加した。一方、PAR4活性化ペプチドではニリン酸化は認められなかった。4.トロンビンおよびPAR1活性化ペプチドでは一過性のCa^<2+>濃度上昇とアクチンストレスファイバーの形成が認められたが、PAR4活性化ペプチドではCa^<2+>濃度上昇とアクチンストレスファイバーの形成ともに認められなかった。以上の結果から、トロンビンはPAR1を介してミオシンのリン酸化とアクチンストレスファイバーの再構築を引き起こし、内皮細胞の透過性を亢進させることが明らかとなった。本年度は内皮細胞におけるトロンビンによるミオシン軽鎖のリン酸化の制御機構について以下の研究成果をあげた。1、トロンビンは2相性のミオシン軽鎖の一リン酸化と、一過性の二リン酸化を引き起こした。2、細胞外Ca^<2+>を除去すると、一リン酸化は抑制されたが、二リン酸化の程度および時間経過は影響を受けなかった。3、細胞内Ca^<2+>をキレートすると一リン酸化の初期相は影響を受けなかったが、トロンビン刺激前と刺激後20分以降の持続相は抑制された。トロンビン刺激前の二リン酸化は影響を受けなかったが、一過性の二リン酸化の一部が抑制された。4、Rhoキナーゼインヒビター(Y27632, H1152)は、一リン酸化の持続相を抑制したが、初期相には影響を与えなかった。二リン酸化は完全に抑制された。以上の結果から、内皮細胞においてトロンビンが引き起こすミオシン軽鎖の一リン酸化と二リン酸化は異なる制御を受けていることが明らかとなった。平成22年度は、電気抵抗を測定し、内皮細胞のバリア機能破綻に関わるミオシン軽鎖リン酸化の制御機構を明らかにする。内皮細胞は、血管内腔を一層に覆い血管透過性や血管緊張などを調節し、血管恒常性維持に重要な役割を果たす。一方、様々な血管障害因子により内皮細胞が障害され活性化を受けると、血液凝固系の活性化、血管透過性亢進(バリアー機能破綻)、平滑筋細胞の増殖などが惹起され、動脈硬化初期病変形成に重要な役割を果たす。本研究では、血液凝固系と血管壁との相互作用を仲介するプロテイナーゼ活性化型受容体という新しい視点から、凝固系と血管内皮細胞の相互作用の仕組みを分子レベルで明らかにし、動脈硬化病変形成の初期過程を理解し、新たな治療標的を確立することを目的とする。本年度は、新しく開発したPhos-tag SDS電気泳動法を用いてミオシン軽鎖リン酸化を、経内皮電気抵抗測定法を用いてバリアー機能を評価し、トロンビンによる血管透過性亢進に関わる分子やシグナル伝達経路について以下の研究成果をあげた。1.内皮細胞をトロンビン刺激すると、濃度依存性に細胞膜電気抵抗が低下し、透過性亢進が認められた。

2.透過性の亢進の一部は、Rhoキナーゼ、Ga12、Ga13、Gaqのインヒビターにより抑制された。3.トロンビンによるミオシン軽鎖の二リン酸化は、Rhoキナーゼインヒビターにより完全抑制されたがGaqのインヒビターでは抑制されなかった。4.トロンビンによるミオシン軽鎖の二リン酸化は、細胞外Ca^<2+>を除去しても抑制されなかった。5.トロンビンによるCa^<2+>濃度上昇は、Gaqのインヒビターにより抑制されたが、Rhoキナーゼインヒビターでは抑制されなかった。以上の結果から、内皮細胞においてトロンビンによる透過性亢進は、(1)細胞外Ca^<2+>非依存性でGa12、Ga13、Rhoキナーゼを介したミオシン軽鎖二リン酸化を伴う経路、(3)Gaqを介した細胞質Ca^<2+>濃度上昇を伴う経路の2つのシグナル伝達経路を介することを明らかにした。
海洋生物を素材としたPAF拮抗物質の探索

血小板活性化因子(Platelet activating factor;PAF)は、血小板凝集、好球中および単球活性化作用、血管透過性亢進、平滑筋収縮、血圧降下時の様々な作用を有し、喘息、腎炎等の各種病態のメディエーターとして知られる物質である。従って、このPAFの拮抗作用を示す化合物は、これらの病気の予防、治療薬として期待される。血小板活性因子(Platelet activating factor;PAF)は、血小板凝集、好中球および単球活性化作用、血管透過性亢進、平滑筋収縮、血圧降下等の様々な作用を有し、端息、胃炎等の各種病態のメディエーターとして知られる物質である。本年度の研究成果としては、PAFによる血小板凝集の阻害物質として海綿Theonella sp.よりマクロリド化合物であるBistheonellide Aと別のマクロリド化合物であるSwinholideAを、海綿Niphates sp.よりピリジンアルカロイドであるNiphatesine Aを、海綿Hyrtios sp.よりセスタテルペン化合物であるHeteroneminを、それぞれ単離し、それらの化学構造をNMR,MS等のスペクトルデータに基づいて同定した。また、好中球をA23187で刺激したときのPAF産生阻害物質として海綿Luffariella sp.よりセスターテルペン化合物であるLuffariolide Aおよび別のセスターテルペン化合物であるManoalideを単離し、上記と同様の方法に基づいて同定した。今後、これらの化合物について50%阻害濃度(IC_<50>,μg/mL)を測定する予定である。一方、未同定の海洋菌株の培養液の粗抽出物に、PAFによる血小板凝集の阻害作用が見い出されたので、現在、この活性を指標にしながら活性成分の分離、精製を検討中である。血小板活性化因子(Platelet activating factor; PAF)は、血小板凝集、好球中および単球活性化作用、血管透過性亢進、平滑筋収縮、血圧降下等の様々な作用を有し、喘息、賢炎等の各種病態のメディエーターとして知られる物質である。
有用物質生産の基礎となるアミノ酸排出機構に関する構造生物学的研究

Corynebacterium glutamicumはグルタミン酸発酵菌として知られており、近年メカノセンシティブチャネルであるNCgl1221がグルタミン酸生産の誘導条件でグルタミン酸排出を担うトランスポーターであることが明らかとなってきた。その排出機構の詳細を明らかにするためNCgl1221のX線結晶構造解析を試みた。大腸菌におけるNCgl1221組換タンパク質の生産系および精製系を確立し、結晶化スクリーニングを行った。その結果、いくつかの条件でタンパク質結晶の生成が確認され、条件の最適化を行い、分解能は悪いながら反射の質の良い結晶化条件を見つけることができた。グルタミン酸発酵菌であるCorynebacterium glutamicumのグルタミン酸排出を担うとされるメカノセンシティブチャネルNCgl1221のグルタミン酸排出機構を構造生物学的に明らかにすることを目的として、NCgl1221の大腸菌での発現・精製条件の確立と精製タンパク質を用いた結晶化を行った。大腸菌で異種発現されたNCgl1221を精製度よく調整する方法を確立し、その後の結晶化スクリーニングにより、タンパク質結晶を得ることに成功している。しかしながら、良質なX線回折データを得るには至っていない。また、大腸菌だけでなくC. glutamicumを宿主とした発現系も構築し、発現を確認している。さらに、他のバクテリア由来のメカノセンシティブチャネルには存在しない、NCgl1221のC末のドメインが持つ役割に興味が持たれることから、C末ドメインのみの結晶化スクリーニングも行っている。また、グルタミン酸非生産条件においてもグルタミン酸を排出できることが知られている変異型のNCgl1221についても大腸菌での異種発現系を構築し、その結晶化スクリーニングも進めつつある。グルタミン酸発酵菌であるCorynebacterium glutamicumのグルタミン酸排出を担うとされるメカノセンシティブチャネルNCgl1221による、グルタミン酸排出機構を構造生物学的に明らかにすることを目的として、本年度も引き続きNCgl1221の結晶化を行った。前年度までに、NCgl1221の大腸菌での異種発現と精製法は確立しており、精製タンパク質を用いて結晶化スクリーニングを様々な界面活性剤を添加剤として用いて行った。微結晶が確認された条件について条件の最適化を一部行ったが、これまでに良質なX線回折データは得られていない。結晶化スクリーニングや結晶化条件の最適化には大量のタンパク質が必要となるため、ジャーファーメンターを利用した大量調製を目指した。発現株や培地などの条件を検討し、これまでよりも多くの組換タンパク質を安定に調整できる方法を確立しつつある。また、C. glutamicumにおける発現系も前年度までに構築を進めており、発現は確認できた。しかしながら、発現plasmidの保持が不安定であり、こちらの発現系を利用するには至っていない。これとは別に、グルタミン酸発酵時の代謝変化にアセチル化などの翻訳後修飾が関わっていることが示唆されていることから、排出を担うNCgl1221についても翻訳後修飾を受け、活性調節を受ける可能性を考えた。C. glutamicumから調製したNCgl1221を用いて、抗アセチルリジン・抗スクシニルリジン抗体を利用して、アシル化修飾を受けているかどうかを調べたが、NCgl1221はアシル化修飾を受けてはいなかった。NCgl1221は他のメカノセンシティブチャネルと異なりC末側に機能未知ドメインをもつため、アシル化修飾ではなく、このドメインが活性調節に関わる可能性を考え、トランケート体やC末ドメインのみの結晶化も進めている。NCgl1221は膜タンパク質であり、大腸菌を宿主とした異種発現や精製が困難であることが予想された。現在までに、NCgl1221の結晶化に用いることができるレベルでの精製法の確立に成功しており、結晶化スクリーニングにより、タンパク質結晶が得られている。しかしながら、得られている結晶の質は低いため、結晶構造の決定にはさらなる界面活性剤の検討や結晶化スクリーニング条件の検討など試行錯誤が必要だと考えている。また、野生型のNCgl1221と並行して変異多型のNCgl1221やCorynebacterium特有のドメインであるC末ドメインの結晶化も進めており、結晶構造の決定に至れば、NCgl1221のグルタミン酸排出機構の解明につながると考えられる。さらに、新たな発現系としてC. glutamicumにおける発現系も構築した。今後はこの発現系を用いたタンパク質精製はもちろん、in vivoでの機能解析にも用いることができると考えており、今後の本研究の発展に応用したい。25年度が最終年度であるため、記入しない。引き続き、メカのセンシティブチャネルであるNCgl1221の結晶構造解析を、野生型と変異型を並行して進めていく。

これまでに試したことのない界面活性剤や結晶化条件を検討していくことで、結晶構造の決定に至るようなより質の良い結晶を得ることを目指す。また、最近所属研究室において、C. glutamicumのグルタミン酸生産誘導条件における代謝フラックスの変化に代謝酵素のアセチル化やスクシニル化などの翻訳後修飾がかかわっていることが示唆されている。これまでにC. glutamicumにおいてNCgl1221がアセチル化などの翻訳後修飾を受けることは知られていないが、グルタミン酸生産の誘導条件下で構造変化を起こしてグルタミン酸を排出すると考えられているNCgl1221も、翻訳後修飾による調節をうけている可能性が考えられる。そこで、現在までに構築したNCgl1221のC. glutamicumでの発現系を用いて、NCgl1221がグルタミン酸生産誘導条件下、また非誘導条件下において翻訳後修飾を受けているかどうかを調べる予定である。結晶構造解析だけでなく、in vivo, in vitroでの実験を総合して、NCgl1221のグルタミン酸排出機構を明らかにしていきたいと考えている。25年度が最終年度であるため、記入しない。
量子凝縮系およびソフトマターにおける自己組織化現象に対する流れの影響の解明

スピン自由度を持つボース・アインシュタイン凝縮体(BEC)の強磁性相(強磁性BEC)では、強磁性体と同様に磁区パターンが観察される場合がある。本研究では、とくに面内磁気異方性のある場合(XY模型的な場合)のドメイン成長について研究を行ってきた。XY模型のようなベクトル模型でのドメイン成長は、渦の対消滅によって駆動される。XY模型では、逆符号の巻数を持つ渦同士で対消滅が起こる。しかしBECの場合にはスピン渦の巻数だけでなく超流動速度の循環も考慮しなければならない。循環も巻数も±1の渦は渦の周りにに質量流が流れており、渦芯では磁化が残っている。このような渦をMermin-Ho渦(MHV)と呼ぶ。本研究では、渦の種類がMHVのみの場合に限定してドメイン成長則を議論した。MHVには基本的な種類だけで4種類あるが、対消滅できるのは2組ずつである。互いに対消滅できないグループが混在することによって、XY模型での成長則とは少し異なる成長則が現れることを示し、これに補正を入れることでMHVの場合のドメイン成長則を導出した。また、数値計算によってその妥当性を検証した。強磁性BECでは、エネルギー散逸がなくてもドメイン形成が観察されるが、それに対応する古典系は相互作用しながら歳差運動しているだけのスピン系になる。その古典系の磁化ダイナミクスはLandau-Lifshitz-Gilbert(LLG)方程式で記述できる。平成27年度はLLG方程式を用いて一軸磁気異方性のある場合の研究も行い、エネルギー散逸がないのにドメイン成長が見られる理由を明らかにした。本研究ではまた、ソフトマターの系におけるパターン形成も研究してきた。高分子溶液である塗料を乾燥させた場合の乾燥パターンを、単純な数理模型を用いて、数値シミュレーションした。流れの効果によって不均一なパターンの出現が制御できることを示した。27年度が最終年度であるため、記入しない。スピン自由度を持つボース・アインシュタイン凝縮体(BEC)の強磁性相(強磁性BECと呼ぶ)では、強磁性体と同様に磁区パターンが観察される場合がある。そのドメインサイズ(磁区の特徴的な大きさ)の成長則は、磁気異方性がイジング模型的な場合は古典的な保存系での成長則と一致する。しかし、XY模型的な場合にはスピン渦の構造と超流動的な流れが密接に関係しているためドメイン成長は非常に複雑になる。本研究では擬2次元系の強磁性BECを扱い、XY模型的な場合のドメイン成長について研究を進めている。この系でのドメイン成長は渦の対消滅によって駆動される。渦を特徴づける量としては、スピン渦の巻数と超流動速度の循環を考慮する必要がある。この巻数と循環の組み合わせによって渦の構造が異なる。例えば、循環が0で巻数が±1の場合、渦芯で磁化が消える。このような渦をポーラーコア渦(PCV)とよぶ。循環も巻数も±1の場合は渦芯でも磁化が残る。平成26年度は、渦の種類がMHVのみの場合に限定してドメインサイズの成長則を導出し、数値計算によってその妥当性を検証した。パターン形成はソフトマターの系でも多く観察される。高分子溶液である塗料を乾燥させると、塗料および塗料を塗る基板の性質によっては、均質でない乾燥パターンが形成される場合がある。平成26年度は、なめらかな平板に塗料を塗る場合の理論模型を構築し、それを用いた数値シミュレーションを行った。表面張力や、基板からの溶媒の蒸発率が、均質でない乾燥パターンの形成に大きく影響しているとの知見を得た。

高分子溶液である塗料を乾燥させた場合の乾燥パターンを、単純な数理模型を用いて、数値シミュレーションした。流れの効果によって不均一なパターンの出現が制御できることを示した。強磁性BECの磁区パターンの研究に関しては、状況を限定したうえでのドメイン成長則の導出に成功した。研究目的である普遍的なドメイン成長則の導出への第一歩となる成果であり、今後の研究の進展にもつながる。塗料の乾燥パターンの研究に関しては、塗料を塗る基板がなめらかな場合の理論模型の構築と数値シミュレーションを行い、基板に障害物がある場合など、より複雑な条件下での乾燥パターンの研究への基盤ができた。27年度が最終年度であるため、記入しない。強磁性BECの磁区パターンの研究に関しては、渦の種類をMHVのみの場合だけでなくPCVのみの場合や、それらを混ぜた場合のドメイン成長則について研究を進める。塗料の乾燥パターンの研究に関しては、塗料を塗る基板がなめらかな場合から、凸凹のある基板など、より複雑な条件を課した場合の研究へと発展させる。
科学の授業および科学啓蒙活動の効果の科学測定

子ども達の理科離れは危惧されて久しく、それに対する取り組みが行われ始めた。しかし、子ども達は本当に「理科好き」になっているのだろうか。その効果を客観的かつ科学的に測定することは難しい。東京農工大学守一雄教授が開発したFUMIEは、実験者が設定したターゲット語について、被験者の深層心理における好嫌を判定できる心理テストである。このテストで「科学」「理科」に対する好嫌の変化が測定可能かを調べるため、実験教室や特別授業などの「科学刺激」の前後でFUMIEとアンケートを行い、結果が連動するかどうかを調査解析した。短い時間の刺激による変化、また元々理科好きの子どもの変化が測定可能かという懸念があった。約一年間断続的に科学刺激を受けるグループ(長期)2集団、一日の科学刺激を受けるグループ(短期)4集団を調査対象とした。またそれぞれに、授業による強制参加のグループと、希望者が集まった希望参加のグループを選定した。FUMIE結果は以下の通り。長期希望(小学生16人,ターゲット:理科,有意差なし)、長期強制(高校生32人,ターゲット:科学,有意差なし)、短期強制A(小学生63人,ターゲット:理科,傾向差あり(負))、短期強制B(小中学生19人,ターゲット:理科,5%水準で有意差あり)、短期希望A(小学生31人,ターゲット:理科,有意差なし)、短期希望B(小中学生25人,ターゲット:理科,有意差なし)。長期・短期とも希望グループではアンケートの結果は良かったがFUMIEで有意差は出なかった。短期強制2グループのアンケートについて、集団Aの11%が刺激に対して全く面白くなかった・分らなかったと回答し、集団Bは全員が面白かった・よく分かったと回答した。ここでの調査では、理科好きだけでない集団においてFUMIEテストのみで効果測定ができる可能性しか示せなかった。さらに調査を進め、検討していく予定である。
近代日本の洋楽受容期における音楽鑑賞観の形成と位相

近代用語としての音楽鑑賞関連用語の意味の形成を探るために、近代辞典(35点)の掲載語を調査した。当時の書籍、雑誌、新聞から、音楽鑑賞関連の言説を収集した。近代日本の音楽鑑賞観の形成と変化は、次の3つの社会的文化的事象と緊密に関連していることが明らかになった。(1)演奏会の増加(2)蓄音機、ラジオの普及(3)学校での音楽鑑賞教育の展開近代用語としての音楽鑑賞関連用語の意味の形成を探るために、近代辞典(35点)の掲載語を調査した。(1)演奏会の増加(2)蓄音機、ラジオの普及(3)学校での音楽鑑賞教育の展開1.当該時代の関連用語の検討明治から昭和初期にかけての音楽鑑賞関連用語について、明治・大正期の各種辞典(事典)類を調査した。特に近代新語辞典を中心に、「アプリシエーション」「鑑賞」「賞翫」「翫味」「味到」「趣味」「感味」「感興」他の<音楽を聴くこと>に関連する用語の語義の違い、類似性などを検討した。その成果の一部は、日本音楽教育学会第40回大会において研究発表を行った(「近代新語辞典にみる音楽鑑賞関連用語-流行語としての<音楽を聴くこと>の輪郭-」)。2.音楽鑑賞に関わる言説の検索・収集明治中期から昭和初期に刊行された書籍、雑誌、新聞、その他に掲載された音楽関連記事・論説等から、音楽鑑賞に関わる言説を検索・収集した。書籍文献については、音楽、芸術、文学、社会、文化、娯楽の各分野の書誌類、データベース等を利用して探索した。雑誌文献については、各分野の関係雑誌の目次集成等を利用して探索した。新聞については、各紙の記事索引等を利用して探索した。1.音楽鑑賞に関わる言説の検索・収集21年度に引き続き、音楽、芸術、文学、社会、文化、娯楽などの各分野の、明治中期から昭和初期に刊行された書籍、雑誌、新聞他の音楽関連記事から、音楽鑑賞に関わる言説を検索・収集した。特に、音楽鑑賞教育史の先行研究で従来言及されていない分野の文献にまで調査範囲を拡大し、検索・収集した。2.検索・収集した音楽鑑賞に関わる言説の抽出と整理21年度に引き続き、収集した資料から音楽鑑賞に関わる記述箇所を抽出した。抽出した箇所は、次の5観点に基づいて整理した。(1)どのような用語で〈音楽を聴くこと〉を述べているか(2)記述内容は音楽鑑賞について何を主張しているか(3)記述内容と関連する思想的背景は何か(4)音楽鑑賞観の形成過程における3つの社会的文化的事象(市中での演奏機会の増加、蓄音機レコードやラジオの普及、学校における音楽教育の発展)の内、どの事象と関連するか(5)どのような人物が記述したか抽出した記述箇所は、音楽鑑賞観の詳細な分析に際しての利用しやすさを考え、PDFファイル化して整理した。3.音楽鑑賞観の抽出と思想的背景の考察整理した音楽鑑賞の言説資料から、更に音楽鑑賞観を分析し、明治中期から昭和初期における〈音楽を聴くこと〉への人々の意識の発生と変遷についての検討作業に着手した。今年度は特に、明治期に受容された西洋芸術思想や美学理論の影響関係、音楽学における形式主義の影響関係について考察した。1.音楽鑑賞観の抽出と思想的背景の考察明治中期から昭和初期刊行の出版物に掲載された音楽鑑賞関連の言説を収集・整理しつつ、音楽鑑賞観の形成過程における芸術思想や教育思想との影響関係を探究した。近代日本の音楽鑑賞観に包含されている諸概念の内、「趣味」「テーストtaste」の考察については、日本音楽教育学会第42回大会において研究発表を行った。また、『北海道教育大学紀要』において論文発表を行った(印刷中)。近代の「趣味」「テーストtaste」は、明治30年代以降の「趣味教育」の思想や明治40年代の「趣味」という語の社会的流行が契機となり広く普及した。音楽鑑賞観に包含される「趣味」には、次の4つの側面、(1)聴かれる対象としての音楽の性質(要素や様式的特徴)(2)聴き手の音楽を受容する能力(3)音楽を受容する能力が高まりある域に到達した状態(4)社会を向上させようとする指向性を見出した。上記(1)は、最も初期の側面であり、近代辞典類では「あじわい」「おもむき」「おおしろみ」という語義で定義されていた。音楽鑑賞の場合は、聴き取られるべき音楽の性質という意味である。(2)は、明治20年代から30年代にかけて英語のtaste概念が移入して形成されたと考えられる側面である。音楽鑑賞の場合、聴き手である主体の傾向や能力(聴取力や音楽理解力)を意味する。(3)は、到達した状態だけを重視しているのではなく、その状態に向かって音楽受容の能力を高めていくことが重視されていた。これは、教育における人格主義や修養主義の思想との関連が大きい。(4)は、社会全体が目指す音楽文化の方向として高級」文化の受容が主張された。これには、坪内逍遙らの趣味教育の啓蒙活動が深く関わっていた。

2.音楽鑑賞観の形成と社会的文化的事象との関係性の検討音楽鑑賞観の形成には、聴取する対象として音楽を意識することが不可欠であり、近代日本の場合、音楽会の増加、蓄音器レコードやラジオの普及が音楽を意識化する契機となった。社会での音楽聴取機会の増加が、大正から昭和初期の学校における音楽教育への鑑賞の導入に繋がった。
高血圧原因遺伝子の決定と機能解明に関する研究

アンジオテンシノジェン遺伝子のコアプロモーター領域の変異(C-18アリル)が高血圧と関連することを報告した。本多型を有する日本人の頻度が極めて高いことから、日本人は本質的に食塩感受性の高血圧体質であることが示された。岩手県の大迫疫学研究における頭部MRI評価とRAS遺伝子多型の関連で、AT1/A1166C,AGT/M235T多型が無症候性脳梗塞のリスクとなることを示した。転写調節因子NFkBに対するおとり型核酸医薬(デコイ)の投与により心筋梗塞サイズの減少がもたらされるが、そのメカニズムとしてヒト内皮細胞におけるアポトーシス回避が重要であることを見出した。また、心筋梗塞や閉塞性動脈硬化症に対する血管新生療法として、ヒトHGF遺伝子導入が新生血管の形成と新生に必須な転写因子etsの活性増加をもたらすことを明らかにした。急性冠症候群の機序について、内膜内での収縮性平滑筋細胞の存在と同細胞でのAT1受容体発現を認め、内膜側での血管壁トーヌスの局所的な緊張亢進がプラーク破綻に関連する可能性を示した。また、プラーク内に存在するマクロファージを用いて、単球からの形質転換に伴うアンジオテンシン産生系の活性化を確認した。高血圧モデルラットの原因遺伝子のポジショナルクローニングを目的として、独自に20個のラット多型性遺伝子マーカーを検索した。この遺伝子マーカーに既知のマーカーを加え、高血圧遺伝子のポジショナルクローニングを行いつつあり、新たにラット第18染色体上のギャップジャンクション蛋白遺伝子座位近傍にラットの体重と連鎖する座位を発見した。このような遺伝子は、直接血圧値に影響しないが、間接的に高血圧に関与する遺伝子と考えられ、多因子疾患としての高血圧の遺伝子成因を解明して行く上で重要と考えられる。我々はヒト第19染色体上のインスリン受容体遺伝子座位が高血圧の成因のひとつとされるインスリン抵抗性に関与することも報告している。次いで高血圧候補遺伝子の機能を解明するため、遺伝子導入法を用いて特定遺伝子の機能喪失実験を行った。すなわち高血圧自然発症ラットの肝臓を標的臓器として、アンジオテンシノジェンに対するアンチセンス核酸やおとり型核酸(デコイ)の導入を行った。その結果、両核酸投与によるアンジオテンシノジェン遺伝子発現抑制で、高血圧の正常化が見られた。アンジオテンシノジェン遺伝子座位はヒト高血圧の有力な候補遺伝子であることは我々の研究を含め多くの報告により支持されているが、ラットの遺伝子解析からは否定的結果しか得られていない。今回の遺伝子導入法による研究からはラットにおいても本遺伝子機能が高血圧の維持に関与していることが明白となった。1.レニン・アンジオテンシン系遺伝子を始めとした各種循環作動因子遺伝子の多型を用いた関連研究を遂行した。その結果、アンジオテンシンII受容体AT1は、高血圧の重症化と、AT2は脂質代謝と関連することを認めた。また各種循環器病における最も強力な危険因子は加齢であることから、加齢関連遺伝子(Apolipoprotein E gene,Werner hericase gene)が無症候性心筋虚血や心筋梗塞の遺伝的危険因子になる事を明らかにした。さらに、大規模な遺伝疫学調査を行うための予備調査を完了した。2.ヒトアンジオテンシン変換酵素遺伝子をラット脳内に導入すると、2週間以上持続する高血圧をきたすことが分かり、また同様の現象はヒトキマ-ゼ遺伝子の脳内導入でも認められることが解った。また高血圧自然発症ラット(SHR)の脳に対するアンジオテンシノジェン転写調節因子のとおり型核酸(デコイ)導入で、持続的血圧低下が認められたことから、SHRの高血圧に、脳内レニン・アンジオテンシン系が関与していることが明らかになった。3.経時的病理組織学的検討により、ヒト冠動脈の動脈硬化やPTCA後の修復において、アンジオテンシンIIの存在が、血管内膜ではアンジオテンシン変換酵素の発現と一致し、もう一つのアンジオテンシンII産生酵素であるキマ-ゼは外膜に発現していることを認めた。またAT1,AT2受容体に対するペプチド抗体の作製に成功し、冠動脈でのプラーク破綻と内膜でのAT1の発現との関連を明らかにした。

本多型を有する日本人の頻度が極めて高いことから、日本人は本質的に食塩感受性の高血圧体質であることが示された。岩手県の大迫疫学研究における頭部MRI評価とRAS遺伝子多型の関連で、AT1/A1166C,AGT/M235T多型が無症候性脳梗塞のリスクとなることを示した。転写調節因子NFkBに対するおとり型核酸医薬(デコイ)の投与により心筋梗塞サイズの減少がもたらされるが、そのメカニズムとしてヒト内皮細胞におけるアポトーシス回避が重要であることを見出した。また、心筋梗塞や閉塞性動脈硬化症に対する血管新生療法として、ヒトHGF遺伝子導入が新生血管の形成と新生に必須な転写因子etsの活性増加をもたらすことを明らかにした。急性冠症候群の機序について、内膜内での収縮性平滑筋細胞の存在と同細胞でのAT1受容体発現を認め、内膜側での血管壁トーヌスの局所的な緊張亢進がプラーク破綻に関連する可能性を示した。また、プラーク内に存在するマクロファージを用いて、単球からの形質転換に伴うアンジオテンシン産生系の活性化を確認した。
戦国期西国における武家の家格上昇に関する構造的研究

守護家を中核とする秩序が容易に否定されず家格秩序の根強い存続が認められる諸氏と比較・検討しながら、守護代家であった尼子氏が守護職を獲得するに至る事情を分析した結果、守護京極氏の家督後継者が断絶する中で、京極氏から尼子氏への国成敗権の継承がなされ、幕府もこれを保証・認定するというプロセスを経て、尼子氏の家格上昇が実現したことが明らかになった。尼子氏の覇権は室町幕府ー守護体制に対する反逆・独立の中から生まれたものではなく、家格上昇に関する社会的合意を勝ちとる上で、守護家の家督・守護権の継承、幕府によるその認定という手続きを踏むことが大きな意味をもっていたと結論づけられる。前年度に引き続いて既刊史料集からの史料検索・抽出作業を進め、室町・戦国期守護権力の研究に必要なデータを集積した。活字史料の検索・抽出と併行して、原史料・未活字史料を閲覧するために、東京大学史料編纂所・国会図書館・京都府立総合資料館などに史料調査に出向いた。東京大学史料編纂所では「佐々木文書」、国会図書館では「古簡雑纂」、京都府立総合資料館では「東寺百合文書」などの史料を閲覧し、必要史料については写真版からコピーを入手した。以上の調査・研究をふまえて、「日本中世の権力秩序と情報伝達」(松原弘宣・水本邦彦編『日本史における情報伝達』創風社出版、2012年7月、p95-122)、「戦国期尼子氏の守護職獲得と室町幕府」(企画展『戦国大名尼子氏の興亡』図録、2012年10月、p62・63)、『山城国一揆と戦国社会』(吉川弘文館、2012年12月、p1-222)、『山口県史通史編中世』(山口県、2013年1月、p375-434)などの著書・論文を発表した。また、「山名宗全とその時代」(2012.8.4、鳥取県鳥取市)、「室町時代の京極氏と出雲支配」(2012.8.11、島根県松江市)、「京極氏による出雲支配の諸段階」(2012.8.12、島根県松江市)、「山城国一揆の歴史的意義について」(2012.9.15、大阪府豊中市)、「尼子氏の勢力拡大と中央政界」(2012.10.27、島根県出雲市)、「室町・戦国期守護の権力構造と発給文書」(2013.2.16兵庫県西宮市)の口頭報告を行った。戦国期は流動性の高い社会であり、室町幕府ー守護体制が形骸化し、中央から各地域の権力状況を秩序づける機能が弱体化していく中で、地域権力のあり方は多様な展開をたどる。本研究では、戦国期の武家の家格上昇の事例として、出雲尼子氏を中心的に取り上げて考察を進め、守護代家であった尼子氏が守護職を獲得するに至る事情を詳細に跡付けることができた。一方、守護家を中核とする秩序が容易に否定されなかった能登畠山氏・伊予河野氏・周防大内氏・但馬山名氏や、守護が追われて国人一揆が国成敗権を掌握した南山城の事例などを分析して、尼子氏の事例との比較・検討を行った。作業の結果、守護代が実権を掌握しながらも守護家を推戴しつづけた諸大名の場合には家格秩序の根強い存続が認められるのに対し、尼子氏の場合には、守護京極氏の家督後継者が断絶する中で、京極氏から尼子氏への国成敗権の継承がなされ、幕府もこれを保証・認定するというプロセスを経て、尼子氏の家格上昇が実現したことが明らかになった。尼子氏の覇権は室町幕府ー守護体制に対する反逆・独立の中から生まれたものではなく、むしろ守護代家が自らの家格上昇に関する社会的合意を勝ちとる上で、守護家の家督・守護権の継承、幕府によるその認定という手続きを踏むことが大きな意味をもっていた事実が浮かび上がる。地域権力秩序のあり方は、各地域それぞれの事情をふまえて考察を深めていくべき課題であり、一律に論じることはできないが、家格上昇の論理や手続きを考察する上で、戦乱の推移や軍事的要素にとどまらず、社会的合意をどのように取り付けていくかが鍵を握っており、中央政界や近隣地域の政治状況を十分に踏まえて読み解いていくのが重要であると認識できた。尼子氏と並んで顕著な家格上昇を実現した毛利氏については今回は取り上げることができなかったが、引き続き研究を進めていきたいと考えている。『萩藩閥閲録』『出雲尼子史料集』『山口県史』『加能史料』など、既刊の史料集から、戦国期権力の秩序と家格上昇に関連する文書・記録類を検索・抽出して必要な史料を集積した。

活字史料の検索・抽出と併行して、原史料・未活字史料を閲覧するために、東京大学史料編纂所・京都府立総合資料館・山口県文書館などに史料調査に出向いた。東京大学史料編纂所では「毛利氏三代実録」、京都府立総合資料館では「東寺百合文書」、山口県文書館では「永田秘録」などの史料を閲覧し、必要史料については写真版からコピーを入手した。以上の調査・研究をふまえて、2011.10「戦国期の地域社会論と権力移行論ー池享氏の二冊の論文集を読んでー」(『織豊期研究』13号、p3141、2011年10月)、「能登畠山家と室町幕府ー守護体制」(『石川の歴史遺産セミナー講演録能登第12回14回』石川県立歴史博物館、p5670、2012年3月)、「大山祇神社文書の整理と伝来」(『地域創成研究年報』7号、p1-17、2012年3月)の論説を発表した。既刊の史料集から、戦国期権力の秩序と家格上昇に関連する文書・記録類を検索・抽出する作業は順調に進展し、必要な史料をかなり集積することができた。4月から9月まで、所属先のサバティカル制度を利用して東京大学史料編纂所の国内研究員に就任したことによって、原史料・未活字史料の史料調査についてもかなり成果を挙げることができた。以上のようにして集めた史料を整理・分析する中で考察を深め、その一部を4編の著書・論文と6件の口頭報告において公表した。集めた史料のデータベース化は今後の課題である。原史料・未活字史料を閲覧するための史料調査にもある程度取り組んだが、校務の都合により調査に出向く機会をあまりとることができなかった。そのため、予定していたよりも旅費を使うことが少なく、次年度に繰り越し金が生じることになった。前年度までに集めきれなかった史料について、継続して調査・収集に取り組むとともに、これまで集積したデータを整理・分析して、史料から導き出せる論点の整理を行い、研究の集約に努めていきたい。前年度に検索・抽出しきれなかった史料について、既刊の史料集からの検索・抽出に継続して取り組む。また、4月から半年間、東京大学史料編纂所の国内研究員に任用されたので、これを利用して編纂所が集積してきた史料の閲覧・収集に重点的に取り組む。以上をふまえて、これまで調査・集積してきたデータを整理・分析して、史料から導き出せる論点の整理を行う。そして、中間報告を兼ねて、尼子氏・大内氏に関する論説の公表と、出雲京極氏についても口頭発表を行う予定である。追加調査のための旅費と関連図書の購入費に充てるほか、研究成果を総括する印刷物の刊行をめざしたいと考えている。