hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
インプリント遺伝子のDNAメチル化模様を制御するDnmt3aの過渡的複合体

DNAのメチル化は、細胞の種類の決定、ゲノムインプリンティング、女性の持つX染色体のうち1つが不活性化される現象(X染色体不活性化)などに深く関わっている。がんなどの疾患においては、このDNAメチル化のパターンが異常になっている。故に、DNAのメチル化は、生物の体を正確に形づくるために必須の仕組みである。ゲノム全体の遺伝子のメチル化は、始原生殖細胞において、一度完全に脱メチル化された後、de novoのメチル化酵素(Dnmt3a)が行う。生化学的な実験で、細胞内において時間経過と共に変化するメチル化状態は定性的には観測されている。そこで、詳細なメチル化の順序や反応性を定量的に解析する必要がある。リアルタイムNMR法を応用して、複数分布するCpG配列にDnmt3aがメチル化を描き込む詳細な機構を明らかにすることを目的としている。反応したメチル基の検出方法を構築するために、反応性の高い大腸菌のメチル化酵素M.SssIを用いて実験を行った。このメチル化酵素もCpG配列のシトシンをメチル化する。DNAとメチル基供与体であるSAMとメチル化酵素M.SssIを混合してNMR試料管に入れ、37oCで13C-HSQCスペクトルの連続測定を行った。感度上昇のため、メチル基供与体のSAMは、転移されるメチル基を13C標識したSAMを用いること、メチル化シトシンのメチル基の領域だけを選択的に検出するパルスプログラムを用いるなどの工夫を行った。時間変化による各々のメチル化シトシンのシグナル強度の増加を取得でき、センス鎖とアンチセンス鎖のシトシンを区別することができた。その結果、センス鎖とアンチセンス鎖に存在するメチル化シトシンのシグナル強度変化が異なることから、センス鎖とアンチセンス鎖へのメチル化導入は同時ではないということが示唆された。29年度が最終年度であるため、記入しない。ゲノムインプリンティングは、由来した親の性別によって対立遺伝子のどちらが発現するかが決定される機構である。インプリント遺伝子発現の調節を行うのは、メチル化酵素(Dnmt3a)による精子あるいは卵子における異なったDNAのメチル化状態である。生化学的な実験から、インプリント遺伝子領域の時間経過と共に変化するメチル化状態は一度メチル化が入るとその位置から順番にメチル化されているような規則性がある。しかしながら、詳細なDnmt3aによるメチル化の順序や反応性は解析されていない。そこで、H19の転写開始点の上流2kbには、CpG配列に富む特徴的な繰り返し配列を含む30 bpのDNAに対するDnmt3aのメチル化反応を解析する。まずは、メチル化反応を追跡する手法を確立するために、Dnmt3aと同じCpG配列をメチル化する大腸菌のメチル化酵素M.SssIを用いて実験を行った。標的DNAをNMR試料管内に入れた後に、メチル基供与体のSAMとメチル化酵素を添加してメチル化反応を開始させ、シトシン5位に付加されるメチル基のNMRシグナルの増加をリアルタイムに追跡した。DNAや蛋白質に対して、SAMは過剰量必要であることが分かった。測定方法は、いつくかの測定法を検討した結果、NOESY法が最も適していた。標的配列CpGが両鎖に1つずつの場合は、両鎖のメチル化は、同程度の反応速度であった。一方、H19の配列を用いた場合は、複数あるシトシンのメチル化される反応速度は異なっていた。NMRで検出可能な酵素反応条件を検討するのに、少し時間がかかった。メチル基供与体SAMの濃度や反応に必要なBufferのシグナルによって感度が落ちるため、その検討などを行っていた。酵素活性を保持している蛋白質の調製の検討にも時間を要した。この機構は、個体発生、成長などの過程で必須な役割を果たす。インプリント遺伝子発現の調節を行うのは、精子あるいは卵子において形成されるDNAのメチル化状態である。生化学的な実験から、インプリント遺伝子領域の時間経過と共に変化するメチル化状態は観測されているが、詳細なDnmt3aによるメチル化の順序や反応性は解析されていない。また、Dnmt3aはヌクレオソームが存在すると酵素活性が増加することも報告されている。そこで、CpGに富む配列のDNAに対するDnmt3aのメチル化反応を解析する。まずは、NMRを用いたメチル化反応を追跡する手法を確立するために、Dnmt3aと同じCpG配列をメチル化する大腸菌のメチル化酵素M.SssIを用いて実験を行った。標的DNAをNMR試料管内に入れた後に、メチル基供与体のSAMとメチル化酵素Dnmt3aを添加してメチル化反応を開始させ、シトシン5位に付加されるメチル基のNMRシグナルの増加をNOESY測定を用いて追跡した。しかしながら、感度や分解能に問題があったため、供与されるメチル基を13C標識したSAMを使用することにした。13C-SAMを用いることにより、付加されたメチル基だけを追跡することができ、長鎖DNAでも検出可能であった。過剰量のSAMや反応に必要なBuffer由来の塩などで検出感度が低下するため、測定方法の検討も行った。13C-SAMの合成に時間がかかったことと、ヌクレオソームの調製に時間を要している。

DNAのメチル化は、細胞の種類の決定、ゲノムインプリンティング、女性の持つX染色体のうち1つが不活性化される現象(X染色体不活性化)などに深く関わっている。がんなどの疾患においては、このDNAメチル化のパターンが異常になっている。故に、DNAのメチル化は、生物の体を正確に形づくるために必須の仕組みである。ゲノム全体の遺伝子のメチル化は、始原生殖細胞において、一度完全に脱メチル化された後、de novoのメチル化酵素(Dnmt3a)が行う。生化学的な実験で、細胞内において時間経過と共に変化するメチル化状態は定性的には観測されている。そこで、詳細なメチル化の順序や反応性を定量的に解析する必要がある。リアルタイムNMR法を応用して、複数分布するCpG配列にDnmt3aがメチル化を描き込む詳細な機構を明らかにすることを目的としている。反応したメチル基の検出方法を構築するために、反応性の高い大腸菌のメチル化酵素M.SssIを用いて実験を行った。このメチル化酵素もCpG配列のシトシンをメチル化する。DNAとメチル基供与体であるSAMとメチル化酵素M.SssIを混合してNMR試料管に入れ、37oCで13C-HSQCスペクトルの連続測定を行った。感度上昇のため、メチル基供与体のSAMは、転移されるメチル基を13C標識したSAMを用いること、メチル化シトシンのメチル基の領域だけを選択的に検出するパルスプログラムを用いるなどの工夫を行った。時間変化による各々のメチル化シトシンのシグナル強度の増加を取得でき、センス鎖とアンチセンス鎖のシトシンを区別することができた。その結果、センス鎖とアンチセンス鎖に存在するメチル化シトシンのシグナル強度変化が異なることから、センス鎖とアンチセンス鎖へのメチル化導入は同時ではないということが示唆された。H19配列に対するDnmt3aのメチル化反応をリアルタイムNMR法で解析する。続いて、長鎖DNAでもメチル化反応を追跡可能であるかどうかを検討する。最終的にはヌクレオソーム上でのDnmt3aの作用機序を調べるため、601配列にH19配列をつなげた長鎖DNAを調製し、昨年度確立したリアルタイムNMR法でメチル化反応を解析する。15N,13C標識したDnmt3aの酵素活性ドメインを調製し、全残基の化学シフトを帰属する。そこに、CpGを含まないDNAを滴下していきNMRのシグナル変化を残基ごとに解析し、非特異的結合型構造の情報を取得する。同様に、CpG配列を1個含むDNA、複数含むDNAを用いて滴定実験を行い、異なるDNAを滴下した時のDnmt3aのシグナルの変化の違いを残基間で比較する。異なるDNAを用いることによって、非特異的結合型構造と特異的結合型構造の存在比を変化させ、両者の構造情報を分離する。この実験を、Dnmt3aの基質となるSAMを加えて行い、メチル化反応型の構造情報も得る。更には、これらDNA及びSAM存在下でのDnmt3aの緩和分散実験を行い、動的構造変化を解析する。リアルタイムNMR法によるDnmt3aのヌクレオソームを含むDNAへのメチル化反応解析を行う。207bpの601配列のヌクレオソームを調整し、リンカーに存在するCpG配列のメチル化反応を追跡する。
耐環境材料に生成する不働態皮膜の光照射による改質

これまでに、酸性水溶液中でFe-Cr合金あるいはSUS304ステンレス鋼の不働態化中に紫外光を照射すると生成した不働態皮膜中のCr濃縮がさらに促進され、その結果、塩化物環境での耐孔食性が改善されることを明らかにしてきた。本研究では、塩化物イオンを含む中性水溶液中でSUS304鋼の不働態化中に紫外光を照射すると、同様にCrの濃縮が促進され、同時に孔食電位の上昇が認められた。このとき、光電気化学応答ならびに電気化学インピーダンス特性を測定したところ、不働態皮膜はn型半導体としての特性を示し、紫外光の照射によってドナー密度が増加することが分かった。一方、紫外光の照射による励起電子・ホール対の生成が直接の原因となるバンド構造の変化は殆ど認められなかった。上述の、紫外光照射によるドナー密度の増大は励起電子・ホール対の再結合にともなうエネルギー放出による欠陥の生成の結果生じたと考えられ、このことは皮膜内のイオン特に鉄イオンの外向拡散を容易にし、鉄イオンの優先溶解を促進することにより皮膜内クロムの濃縮が加速されたと考えられる。一方、純銅の湿潤環境での微量腐食に及ぼす紫外光照射の影響を検討した。紫外光照射がないとき、銅の酸化速度は温度、酸素分圧、湿度の増加とともに増大するが、紫外光照射により酸化速度は気相の酸素分圧に殆ど依存しなくなった。これは、銅表面に形成される吸着水膜中の酸化ポテンシャルが紫外光の照射により一定に制御されたと考えられる。金属材料の耐環境性は表面に生成する不働態皮膜と呼ばれる高々数nm程度の酸化物系超薄膜によってもたらされる。この皮膜は、半導体的性質を有するために様々な量子過程が可能であり、特に光照射はバンド間遷移を生じるためにその緩和過程が不働態皮膜の性質を改変する可能性がある。我々は、すでに酸性水溶液中にて生成するFe-Cr合金の不働態皮膜が紫外光照射によってCr濃度が促進され高い耐環境性を示すことを明らかにしている。本研究では、中性塩化物水溶液でのオーステナイトステンレス鋼の紫外光照射による改質をX線光電子分光ならびに電気化学インピーダンス法によって検討した。ステンレス鋼の中性塩化物水溶液環境では不働態皮膜生成開始後長時間にわたってCr濃度が進行するが、この間紫外光照射により不働態皮膜内Cr濃度は促進され、その結果塩化物水溶液内での孔食の発生は抑制された。このとき、不働態皮膜はn型半導体的性質を示すが、そのドナー密度は紫外光照射により増大した。さらに、インピーダンス測定中の紫外光照射により微分容量が減少することより、紫外光照射は不働態皮膜の溶液側空間電荷層の厚さを増大させその結果皮膜内バンド構造が変化することがわかった。光照射は励起電子・正孔対再結合におけるエネルギー放出、バンド勾配の変化によりFeイオンの外方拡散が加速され、その結果Cr濃縮が促進されたものと考えられる。

上述の、紫外光照射によるドナー密度の増大は励起電子・ホール対の再結合にともなうエネルギー放出による欠陥の生成の結果生じたと考えられ、このことは皮膜内のイオン特に鉄イオンの外向拡散を容易にし、鉄イオンの優先溶解を促進することにより皮膜内クロムの濃縮が加速されたと考えられる。一方、純銅の湿潤環境での微量腐食に及ぼす紫外光照射の影響を検討した。紫外光照射がないとき、銅の酸化速度は温度、酸素分圧、湿度の増加とともに増大するが、紫外光照射により酸化速度は気相の酸素分圧に殆ど依存しなくなった。これは、銅表面に形成される吸着水膜中の酸化ポテンシャルが紫外光の照射により一定に制御されたと考えられる。
新規:原子ビームによる表面科学および細胞生理化学への応用

(1)電荷を持たない原子ビームをパルス化した低速原子散乱装置を開発した。空間分解能は0.1A以下である。入射プローブは電気的に中性であるので絶縁体表面原子構造の解析に活用でき原子像イメージを取ることができた。(2)細胞生理学への応用では2MeV-H^+ビームを真空外へ直接取り出し、溶液中においたべん毛をもつ生体細胞へ照射し運動能へ及ぼす効果を調べた。その結果、10^<11>atoms/cm^2の照射で細胞の働きに顕著な影響が出ていることがわかった。本研究を実施ている表面解析装置は、自作機である。長年かけて電子回路、計測用ソフトウエァー、試料用マニュピュレータを外部への依頼を行わずに全てを自作した。このため他にない独創性がある装置開発が進んでいると考える。H20年度は、計測用ハードウエァである電子回路の実装を再度見直した。飛行時間計測用計器の電子回路実装変更、複数のパルス信号が自由自在な時間タイミングで発生できるよう電子回路の変更、ステッピングモータ駆動用電源の変更などを実施した。その成果があり、飛行時間スペクトルは非常に優れたS/N比で取ることに成功した。かつデジタル・アナログ電子回路混在の計測用ハードウエァーがノイズの影響を受けなく安定して働くようになった。電子回路については実用新案を申請し権利化を図った。今後出願の変更も検討している(特46条の2)。早期権利化をはかったのは、自作電子回路をビジネスとして活用する旨の話があったからである。検出器周辺では電場の掛け方を変更し検出効率を100%とした。表面原子構造解析用として電源を購入した。次に生体細胞への照射のために10kVのイオン源を購入した。また検査用生物顕微鏡も購入した。大気中にて生体細胞ヘビーム照射を行うための装置の試作を始めた。本研究について2つに大別して記載する。一つは、絶縁体固体表面原子構造解析に関する研究である。現在においても表面科学分野において絶縁体表面原子構造を知ることは困難な課題である。理由は従来利用できていた電子線、イオンビームのプローブビームが利用できないからである。その理由は、固体表面に電荷が蓄積し、入射ビームがもつ電荷と反発するからである。そこで電気的に中性なビームを利用できるように工夫を行った。さらには100kHzのパルス化ビームとした。計測機器は自作を行い、これらを改良し電気的に安定して働くよう工夫を行った。実際には後方散乱された粒子の飛行時間を計測することで測定を行っている。計測機器の時間分解能は、10nsecで4ch同時測定できる機能を要している。本装置は、磁場中に設置した試料からの信号も計測できるようになっている。次に細胞生理学への応用について述べる。小型加速器で生成されたMeV領域のイオンビームを生体細胞へ照射する研究を行っている。例えば2MeV-H^+ビームを真空外へ直接取り出し、溶液中ないに存在させている生体細胞へ照射し、浸透への影響、DNAとの相互関係を調べている。10^11 atoms/cm^2の照射で細胞の働きに顕著な影響が出ていることがわかった。線エネルギー付与と細胞への照射効果の関連性について解析を行っている。この研究では、AFM装置を利用し細胞の形状観察も行っている。上記で述べた研究は、いずれも新しい分野の研究である。今後さらなる研究を進めていく。本研究は、表面科学と細胞生理学の2つに分けられる。最初に表面科学の研究についてのべる。現在まで、電荷を持たない原子ビームをパルス化した低速原子散乱装置を開発してきた。入射プローブは電気的に中性であるので固体表面での電荷蓄積を考慮することはなく絶縁体表面原子構造の解析に活用することを研究目的としている。平成22年度は3keV-^4He^0原子ビームを生成した。計測にあたり、前年度に特許出願を行った原子の飛行時間を測定するための計測計時装置を利用した。計測制御プログラムは、マッピングが取れるよう試料ホルダーに付随しているステッピングモータとの連動ができるようにした。研究を重ねた結果、絶縁体表面原子構造のマッピング図が取れる装置となった。2次元的には、XY方向であるが、深さ方向をZ軸とすると、表面第1原子層から第5、6層付近までの原子配列を反映したイメージ像が取れるようになった。恐らく世界的に見ても過去に類似した例はないのではないかと想像する。様々な試料を計測中であるが、得られるデータは新しい知見を含んでいると考える。2 MeV-H^+ビームを真空外へ直接取り出し、溶液中においたべん毛をもつ生体細胞へ照射しDNAとの相互関係を調べている。特に、線エネルギー付与と細胞への照射効果の関連性について解析を行っている。

この結果は、インドで開催された国際会議にて発表を行った。10^<11>atoms/cm^2の照射で細胞の働きに顕著な影響が出ていることがわかった。この研究では、AFM装置を利用し細胞の形状観察も行っている。上記で述べた研究は、従来にない新しい分野の研究である。今後さらなる研究の発展をさせていく尚、分担者のうち1名は、年度当初において本課題に取り組む予定であったが、業務が増加し実施することができなくなった。他の2名で研究を遂行し上記で述べた研究成果を挙げた。
はり構造の力学模型実験装置の試作研究

はりの力学現象を学生により深く理解・納得させるために、教室,実験室等やその他の場所で容易に実験できしかも学習効果を図るために筆者の提案による工業教育学習理論を導入した実験方法とその装置を案出しそれを製作した。以下、これらの実験を行った結果について報告することにする。1.実験に用いるはりの種類は、静定ばりと不静定ばり及び弾性支承ばりとに大別でき、これは移動支点,可動支点,固定支点を組み合せることで各種のはりの実験が可能であった。2.はりに載荷する荷重として、集中荷重,等分布荷重,三角形荷重,台形荷重等を単独にまたは複数個組み合せた実験を行った結果、各荷重ははりの変形に忠実に追従してくれることが分った。3.支点反力,たわみ,たわみ角などの測定データから静定ばりや不静定ばりの反力,たわみ,たわみ角の影響線を作成した結果と理論より得られる計算値と比較したところ良い精度で一致することができた。4.デジタル方式による静的ひずみ計測器を用いて、種々なる荷重に対するはりの断面が長方形でスパンが各変化する場合の静定ばり,不静定ばりのせん断力,曲げモーメントの値を測定し、得られた実験値と計算値との比較を行った結果、満足すべき測定精度を得ることができた。5.各装置は実験者の立場を踏えて、いろいろな工夫を施して設計,製作しているので、測定精度の高い実験ができる事が分った。今後の研究展開としては、橋梁に使用される外力荷重として間接荷重,移動荷重方式による静定ばりや不静定ばりについての力学現象を簡単に説明できるような実験装置を試作したいと考えている。また、静定ばり,不静定ばりの動的な性質についても今後さらに検討したいと考えている。はりの力学現象を学生により深く理解させるために(講義室や実験室等で容易に実験でき)学習効果を導入した実験装置を試作し、これらの実験を行った結果について以下報告する。1.実験に用いるはりの種類は、静定ばりと不静定ばり及び弾性支承ばりとに大別でき、移動支点、回転支点、固定支点を組み合せることにより種々なはりの実験を行うことができる。2.はりに載荷する荷重として、集中荷重、等分布荷重、三角形荷重、台形荷重、移動荷重、間接荷重などを単独にまたは複数個組み合わせた実験もできる。3.はりの寸法(スパン85cm,断面幅4.0cm,厚さtcm)及び材質は自由に選択でき、この他に変断面や箱型断面及び特殊な形状の断面の使用も可能である。4.支点反力、たわみ、たわみ角などの実験データから、静定ばりや不静定ばりの反力の影響線、たわみ及びたわみ角の影響線等を作成した結果と理論よりえられる計算値と比較したところ良い精度で一致することができた。5.本実験装置は実験する者の立場を十分に踏えて、色々と創意工夫した設計の元で試作した。したがって、特別な操作や実験技術を必要とせず、測定精度の高い実験ができた。次に、この実験装置を実践学習の場として実際の現場での授業へ利用し、また活用した結果、学生は目的意識と問題意識を自から持つようになり、また自から率先して学習し、そして解決していかなければいけないという意欲及び自発性が出てきたことである。
糞線虫感染排除後の肺に見られる高反応性ILC2に関する研究

糞線虫Strongyloidesvenezuelensis(Sv)感染マウスは、感染排除後も長期間に渡りグループ2自然リンパ球(ILC2s)が肺に残り、次の感染に備えていることを代表者は見出している。また昨年度の研究で、Sv感染経験マウスはパパインに対しても強く反応することを確認している。今年度はSv感染マウス肺のILC2sの性質について検討した。ILC2sがSv感染後何日目まで増殖するかを検討するため、Sv感染後経時的にEdUを投与し、フローサイトメトリーでEdUを取り込んだILC2数を調べた。その結果、EdU陽性のILC2sは感染8日目で最大となり、排虫完了後の22日目にはほぼ認められなくなった。このことから、Sv感染経験マウスの肺にいるILC2sは持続的に増殖しているのではない事がわかった。一度増えた細胞が肺の中にとどまってメモリー様の細胞として次の感染等に備えていると考えられる。次にSv感染マウスの肺のILC2sの性質がナイーヴマウスILC2sとどのように異なるかを調べるため、非感染マウスとSv感染1ヶ月後のマウスからILC2sを分取し、PMA/Ionomycinで刺激してサイトカイン産性能をフローサイトメトリーを用いた細胞内サイトカイン染色法で検討した。Sv感染経験マウスILC2sでは対象群と比較して強いIL-5/IL-13産性能が認められた。以上よりSv感染後の肺ではILC2sがメモリー様細胞として存続し、次の感染に対して高い反応を示して生体防御に働くことを明らかにした。寄生虫感染後の肺のILC2sが高反応性の細胞であることを証明できた。現在、種々のサイトカインの影響について検討している。また寄生虫感染マウスおよび非感染マウスのILC2sについて遺伝子発現解析を行っており、概ね順調に進展していると考えられる。種々のサイトカインおよびその受容体の欠損マウスや中和抗体を用いてILC2のメモリー様細胞への分化に対する影響を検討し、どの様な刺激でILC2sがメモリー用細胞に分化するかを明らかにする。またメモリー化に関与が期待される転写因子を見出しており、その欠損マウスを用いて当該転写因子のILC2sの機能における役割を証明する。さらに網羅的な遺伝子発現解析によりメモリー様ILC2sの特徴を明らかにし、有効な検出方法、誘導、あるいは抑制方法を開発し、感染症治療やアレルギー性疾患治療における新たな方策を提示する。糞線虫Strongyloidesvenezuelensis感染マウスは、感染排除後も長期間に渡りグループ2自然リンパ球(ILC2s)が肺に残り、次の感染に備えていることを研究代表者は見出している。この感染経験マウスのILC2sはナイーブマウスのILC2sよりも反応性が高いため感染以外の刺激にも強く反応するか検討した。(1)糞線虫感染マウスにプロテアーゼ活性を持つアレルゲンであるパパインを点鼻投与すると、パパイン単独投与群よりも強くILC2sと好酸球の肺への集積がみられた。この時、IL-33発現には差がないが、IL-5, IL-13といったTh2サイトカインが発現上昇していることから、ILC2sが強力に活性化してこれらのサイトカインを大量に産生し、好酸球を多く集積させたと考えられる。(2)パパインはプロテアーゼ活性によりIL-33を遊離させることが知られているため、同じようにプロテアーゼ活性を持つダニ抗原(HDM)を糞線虫感染経験マウスに点鼻投与したところ、パパインの場合と同様にILC2sの増加がみられたが、好酸球の増加は非常に弱く、代わりに強い好中球浸潤が認められた。(3)IL-33遊離を引き起こさないと考えられる卵白アルブミン(OVA)を水酸化アルミニウムをアジュバントに用いて免疫し、OVA点鼻投与で誘導される肺の炎症への糞線虫感染の影響を検討した。予想に反して、糞線虫感染はOVAによる炎症を増悪した。これはIL-33以外のTh2細胞由来の何らかの因子がILC2sを活性化したものと考えられる。以上の結果より、糞線虫感染後はアレルゲンによる肺の炎症が増悪することが明らかとなった。HDMやOVAを用いた実験結果は予想されたものではないが、線虫感染が肺の炎症反応を増悪するという当初の仮定には反しておらず、おおむね順調に進展している。

次にSv感染マウスの肺のILC2sの性質がナイーヴマウスILC2sとどのように異なるかを調べるため、非感染マウスとSv感染1ヶ月後のマウスからILC2sを分取し、PMA/Ionomycinで刺激してサイトカイン産性能をフローサイトメトリーを用いた細胞内サイトカイン染色法で検討した。Sv感染経験マウスILC2sでは対象群と比較して強いIL-5/IL-13産性能が認められた。以上よりSv感染後の肺ではILC2sがメモリー様細胞として存続し、次の感染に対して高い反応を示して生体防御に働くことを明らかにした。寄生虫感染後の肺のILC2sが高反応性の細胞であることを証明できた。現在、種々のサイトカインの影響について検討している。また寄生虫感染マウスおよび非感染マウスのILC2sについて遺伝子発現解析を行っており、概ね順調に進展していると考えられる。平成30年度はILC2sが維持されるメカニズムを明らかにする。ILC2sは感染排除後まで長期間観察されるが、このILC2は感染によって増加した細胞がそのまま残っているのか、細胞分裂、他組織からの流入などによって世代交代が起こっているのかを調べる。感染マウスよりILC2sを採取し、CFSEでラベルして感染マウスに移入する。経時的に肺ILC2sを採取し、CFSE陽性細胞の割合と、CFSEの希釈の程度をフローサイトメトリーで解析する。また、感染マウスより採取したILC2sを正常マウス肺に移入し、ILC2sが保有する内在性因子だけで維持できるのか、ILC2s以外の外来性因子が維持に関与するのかを調べる。ILC2sの誘導にはIL-33やIL-25が重要であることが知られている。これらのサイトカイン投与で誘導されるILC2sとSv感染によるILC2sの生存期間を比較し、IL-33やIL-25だけで長期生存可能なのか、その他の因子が必要なのかを調べる。ILC2sの機能はTSLPやIL-7, IL-9, IL-27, IL-1βによって増強、抑制、変化することが知られている。そこで、Sv感染後の肺でのこれらのmRNA発現を調べ、さらにILC2s維持における役割をリコンビナント蛋白や抗体、遺伝子組換えマウスを用いて解析する。これらの実験により、糞線虫感染後のILC2sの維持に必要なサイトカインが明らかになり、ILC2sの維持される機構が明らかになる。種々のサイトカインおよびその受容体の欠損マウスや中和抗体を用いてILC2のメモリー様細胞への分化に対する影響を検討し、どの様な刺激でILC2sがメモリー用細胞に分化するかを明らかにする。またメモリー化に関与が期待される転写因子を見出しており、その欠損マウスを用いて当該転写因子のILC2sの機能における役割を証明する。さらに網羅的な遺伝子発現解析によりメモリー様ILC2sの特徴を明らかにし、有効な検出方法、誘導、あるいは抑制方法を開発し、感染症治療やアレルギー性疾患治療における新たな方策を提示する。論文投稿関連費用として使用する予定であったが、諸事情により執筆、投稿が遅れたため。次年度初期に投稿予定である。平成30年度の助成金は当初の予定通りグループ2自然リンパ球の維持メカニズムの解析に用いる。当該助成金はILC2sの網羅的遺伝子発現解析を行うための資金として検討していたが、創薬等先端技術支援基盤プラットフォーム(BINDS)にて解析していただくことになったため未使用額が生じた。
腫瘍血管内皮の異常性獲得機構の解明 : がん細胞の分泌する小胞が腫瘍血管へ影響する

腫瘍の血管は正常な血管と比較して構造的な異常がある。例えば、走行が乱雑で構造が未成熟であるため、栄養・酸素の供給が不十分となりやすいことが知られている。これらの異常性は腫瘍へ有利に働くと考えられている。そのため、腫瘍血管の異常性について理解することは、今後のがん治療において大きな意義があると考えられる。腫瘍の血管から単離した腫瘍血管内皮細胞は正常な血管と比べて、様々な形質異常を持つことを我々の研究グループでは報告してきた。例えば、腫瘍血管内皮細胞では正常血管内皮細胞と比較して、血管新生能が高い。こうした細胞レベルでの異常が腫瘍血管の異常性に関与することが予想されるが、腫瘍血管内皮細胞の異常がどのように引き起こされるか、という点については明らかとなっていない。本研究の目的は、これまで不明であった腫瘍血管内皮細胞の様々な異常性獲得に、がん細胞から分泌されたtumor-derived microvesicles (TMV)が影響するかどうかを調べることである。昨年度の研究において同定した高転移能がん細胞由来TMVに高発現するmiR-1246は、多種類のがん細胞由来TMVでも高発現することが今年度の研究において分かった。また、これらの結果がin vivoでも反映され得るかを検討するため、ヒト肺がん患者血漿から単離したTMV中のmiR-1246発現をqPCRで解析したところ、健常人における発現量よりも高いことが分かった。次に、昨年度までの研究において詳細ではなかったin vivoにおけるTMVの血管内皮細胞に対する取り込みを検討するため、Red Fluorescent Protein (RFP)発現メラノーマを用いて実験をおこなった。RFP発現メラノーマ由来TMVにRFP由来蛍光シグナルが検出されることを検討した後、RFP発現メラノーマ皮下移植腫瘍から腫瘍血管内皮細胞を単離した。フローサイトメトリーを用いてRFP由来の蛍光シグナルを解析すると、本来RFPが存在しないはずの腫瘍血管内皮細胞からRFPシグナルが観察された。これらの結果から、メラノーマ由来TMVが血管内皮細胞に対して、in vivoでも取り込まれ得ることが示唆された。miR-1246の機能・作用機序を解析するため、miR-1246 oligonucleotideをヒト正常血管内皮細胞へtransfectionしてマイクロアレイをおこなったところ、炎症関連遺伝子が活性化することが分かった。この結果から、miR-1246は炎症応答性(インターフェロン誘導性)miRNAである可能性が示唆された。また、miR-1246の標的遺伝子探索をおこなったところ、miR-1246の標的遺伝子となり得る配列を有するMALT1が腫瘍血管内皮細胞でも発現が低下していること分かった。(抄録なし)腫瘍の血管は正常な血管と比較して構造的な異常がある。本研究の目的は、これまで不明であった腫瘍血管内皮細胞の様々な異常性獲得に、がん細胞から分泌されたtumor-derived microvesicles(TMV)が影響するかどうかを調べることである。正常血管内皮細胞に対するヒトメラノーマ由来TMVの生理活性を検討したところ、PI3K/Aktのシグナル経路の活性化を介して運動能と管腔形成能を亢進させることが分かった。さらに、TMVが血管内皮細胞内へendocytosisされる(取り込まれる)ことが、血管新生能の亢進に必要であることが分かった。これらの結果から、腫瘍内に存在するTMVを取り込むことで腫瘍血管内皮細胞の血管新生能が亢進する可能性について示唆された。上述した研究内容については、日本癌学会・米国癌学会を始め6件の学会発表をおこない、査読付雑誌一報で報告をした。腫瘍の血管から単離した腫瘍血管内皮細胞は正常な血管と比べて、様々な形質異常を持つことを我々の研究グループでは報告しできた。

今年度の研究において、高転移性メラノーマ由来TMVでは低転移性メラノーマ由来TMVと比べてmiR-1246の含有量が増加していることを見出した。前年度までの結果において、TMVは血管内皮細胞に取り込まれたことから、miR-1246が血管内皮細胞へ取り込まれた際の影響に関して検討を進めた。miR-1246と同様の配列を持つoligonucleotide (mimic)をヒト正常血管内皮細胞へtransfectionしたところ、1低血清培養下において死細胞率が低下すること2接着能・運動能が増加すること3血管新生関連遺伝子として知られるIL-6, COX-2の発現が亢進することが分かった。また、TMVのin vivoにおける作用を検証するため、マウスを用いて体内動態を観察した。TMVを尾静注した際の血中半減期は約10時間前後であり、主に肝臓と脾臓へ集積することが分かった。上述した研究内容については、日本DDS学会・日本癌学会等、計3件の学会発表をおこなった。腫瘍の血管は正常な血管と比較して構造的な異常がある。例えば、走行が乱雑で構造が未成熟であるため、栄養・酸素の供給が不十分となりやすいことが知られている。これらの異常性は腫瘍へ有利に働くと考えられている。そのため、腫瘍血管の異常性について理解することは、今後のがん治療において大きな意義があると考えられる。腫瘍の血管から単離した腫瘍血管内皮細胞は正常な血管と比べて、様々な形質異常を持つことを我々の研究グループでは報告してきた。例えば、腫瘍血管内皮細胞では正常血管内皮細胞と比較して、血管新生能が高い。こうした細胞レベルでの異常が腫瘍血管の異常性に関与することが予想されるが、腫瘍血管内皮細胞の異常がどのように引き起こされるか、という点については明らかとなっていない。本研究の目的は、これまで不明であった腫瘍血管内皮細胞の様々な異常性獲得に、がん細胞から分泌されたtumor-derived microvesicles (TMV)が影響するかどうかを調べることである。昨年度の研究において同定した高転移能がん細胞由来TMVに高発現するmiR-1246は、多種類のがん細胞由来TMVでも高発現することが今年度の研究において分かった。また、これらの結果がin vivoでも反映され得るかを検討するため、ヒト肺がん患者血漿から単離したTMV中のmiR-1246発現をqPCRで解析したところ、健常人における発現量よりも高いことが分かった。次に、昨年度までの研究において詳細ではなかったin vivoにおけるTMVの血管内皮細胞に対する取り込みを検討するため、Red Fluorescent Protein (RFP)発現メラノーマを用いて実験をおこなった。RFP発現メラノーマ由来TMVにRFP由来蛍光シグナルが検出されることを検討した後、RFP発現メラノーマ皮下移植腫瘍から腫瘍血管内皮細胞を単離した。フローサイトメトリーを用いてRFP由来の蛍光シグナルを解析すると、本来RFPが存在しないはずの腫瘍血管内皮細胞からRFPシグナルが観察された。これらの結果から、メラノーマ由来TMVが血管内皮細胞に対して、in vivoでも取り込まれ得ることが示唆された。
データ同化に基づいた環境に配慮した農業施設の設計・施工・維持管理システムの構築

本研究では,「データ同化に基づいた設計・施工・維持管理システム」を新たに構築することを目的とし,3年間研究を実施した。得られた主要な成果は以下の通りである。1)地盤工学的問題に特化したデータ同化手法(アルゴリズム)の提案とその精度検証,2)建設工事にかかる費用だけでなく,環境負荷も考慮した新しい意思決定基準,Life Cycle and Environmental Costを新たに提案し,数値実験によってその有用性を示した。,3)模型実験により構造物の施工過程を再現できる可能性を示した。構造物の建設工事を行う際は,計画・設計段階で複数の案が出され,その中から安全性と経済性を満足しうる計画・設計が最適案として選定される。その選定の際に用いられる意思決定基準はライフサイクルコストと呼ばれ,建設実務で一般的に用いられている。しかしながらこの基準は,設計案の経済性にのみ着目しており,建設工事が環境に及ぼす影響については考慮されない。そのため,最も経済性に優れているが,周辺環境への影響が最も大きな設計案が選定される可能性がある。環境は一度破壊されると修復することが難しく,また修復に多くの費用が必要となる場合が多い。このことは,最も経済的な設計を採用したにも関わらず,環境コストを考えると最も非経済的な設計案を選定してしまう可能性があることを意味している。そこで平成25年度は,経済性と安全性のみならず構造物の建設が周辺環境に及ぼす影響も考慮しうる意思決定基準,ライフサイクル・環境コストを提案を目的とした。はじめに,環境の貨幣価値を推定する方法として仮想評価法に着目し,仮想評価法に基づいたアンケートを作成した。作成したアンケートを岡山県在住の一般市民に配布し,300の有効回答を得た。得られたデータを統計解析し,環境の価値を貨幣価値として表わす一つの方法を示した。さらに,環境価値の推定結果に基づき,新しい意思決定基準,ライフサイクル・環境コストを提案した。その後,提案した意思決定基準の有効性について検証するため,河川改修工事を対象とした数値実験を実施した。複数の仮想の河川改修案を考え,その中で最も河川生態系への影響が小さい改修案を選定しうるかを検討した。その結果,提案した位置決定基準により,最も環境に調和的な設計案を選定できることを示した。当該年度は,「データ同化手法の高度化:地盤工学的問題に特化した粒子フィルタアルゴリズムの開発」を目的とした.粒子フィルタの逐次重点サンプリングアルゴリズムは,応力履歴が重要となる弾塑性問題にも適用可能であるが,計算の進行に伴って重みが特定の粒子に集中する「退化」と呼ばれる現象が生じる.この退化を防ぐためのアルゴリズムとして,融合粒子フィルタが提案されているが,計算途中で粒子をサンプリングするため,このアルゴリズムを弾塑性問題に適用することはできない.そこで,融合粒子フィルタにおいてリサンプリングした後,再び初期の計算に戻る再帰的アルゴリズムを新たに提案した.このアルゴリズムは融合粒子フィルタと逐次重点サンプリングアルゴリズムを組み合わせたアルゴリズムととらえることができる.提案したアルゴリズムを数値実験に適用し,その有効性について検証した.その結果,提案アルゴリズムは,応力履歴に依存する弾塑性問題においても精度よく機能し,さらにこれまで問題となっていた退化現象を回避できることが明らかとなった.平成26年度は,「データ同化に基づいた設計・施工・維持管理システムの構築と模型実験による有効性検証」に取り組んだ。前年度までに得られた知見に基づき,農業施設(土構造物)の設計・施工・維持管理までのライフサイクルを統合して支援できるシステムを構築した。具体的には,数値シミュレーションモデルとして,土/水連成弾塑性有限要素解析を用い,データ同化手法として,平成24年度に提案したアルゴリズムを用いた。ライフサイクルコストの計算に際しては,平成25年度に提案した環境影響も考慮したLCC,Life Cycle and Environmental Cost(LCEC)を用いて,経済性だけでなく,環境負荷も考慮しうる方法を提案した。提案システムの有効性を検証するため,まず,土構造物の設計施工維持管理過程の模型実験での再現を試みた。具体的には,小型の遠心模型実験を用いて,模型容器内で盛土の施工過程やセメント混合処理土やサンドドレーンなどの対策工の適用を再現した。実験中の計測はデジタルビデオカメラを用い,基礎地盤の鉛直・側方変位を計測した。再現実験の結果,盛土建設や地盤改良など,個々の問題だけを取り扱った実験であれば,意図した実験が行えるものの,設計・施工・維持管理過程までを含めた実験の実施は煩雑であり,また,実験容器が小さく,複雑な細工はできなかったため,模型実験による構造物の設計・施工・維持管理プロセスの精緻な再現は課題となった。そこで,検証用実験として,軟弱地盤上への盛土建設という単純な問題をとりあげることとした。提案手法を再現実験に適用し,提案手法により,精度よく地盤の挙動が予測できることを示した。また数値実験においては最適な設計案だけでなく最適な対策案も決定できることを確認し,提案手法の有効性について実証することができた。

地盤工学当初計画していた研究,新しい意思決定基準の提案は実施することができ,目標を達成できたと考える。しかしながら,提案基準の実際問題への適用については取り組んでおらず,今後のさらなる適用例の積み上げが必要である。以上のことから,「おおむね順調に進展している」と評価する。当該年度に計画していたアルゴリズムの開発が予定より早く完了したため,予算の前倒し請求を行い,26年度に実施予定の模型実験の予備実験を行った.この予備実験により,26年度に実施予定の実験もスムーズに進むことが予想され,当初の計画以上に進展していると判断できる.平成25年度はおおむね目標を達成することができたが,提案した方法について数値実験上でその有効性を実証したにすぎない。今後,提案手法が実務に適用可能な方法まで進展するためには,さらなる適用例の積み上げが必要である。よって今後は,数値実験のみならず,実際の問題にも適用していく必要がある。これまで計画通りに研究が進行しているため,当初の予定通り,25年度には「ICTを導入した情報化施工技術・維持管理技術の事例収集とそのデータベース化および環境負荷・環境リスクを考慮した新しい意思決定基準の提案」に取り組み,26年度には「3)データ同化に基づいた設計・施工・維持管理システムの構築と模型実験による有効性検証」に取り組む予定である.24年度のように,当初計画よりも進展がみられる場合,26年度実施の実験の予備実験を実施する予定である.次年度使用額が生じたが,その金額は1,166円であり,ほぼ計画通りに予算を使用できたと考える。次年度使用額は1,166円と少なく,当初の計画通り使用する。該当なし
水辺植物群集の維持と再生に及ぼす外来水生植物の影響とその非線形性を探る

本研究の目的は、河川水辺植物群集の存続可能性と再生可能性に対する外来水生植物の非線形な影響とその機構を解明し、水辺植物群集の適切な保全および復元対策に必要な情報を提示することである。外来水生植物であるチクゴスズメノヒエを研究対象種とした。調査地は、外来水生植物の侵入が著しい多摩川中流域の流水辺とした(東京都府中市、国立市、日野市)。また、東京農工大学府中キャンパス栄町圃場内に設置した簡易ビニールハウスおよび東京学芸大学内の温室において実験を遂行した。本年度は、実施計画に基づき以下の調査・実験を行った。1、水辺植物の種数や量に対するチクゴスズメノヒエの影響を推定するため、東京都日野市の多摩川河川敷内のチクゴスズメノヒエが優占する区画から在来種が優占する区画にかけて0.5 m x 0.5 m方形枠を30枠設置し、植生調査および地表面の光環境調査を実施した。2、チクゴスズメノヒエの侵入とその量の増加が、水辺の一年草の更新に影響を及ぼすのかを実験的に検証するため、東京農工大学栄町圃場において、競争実験を行った。また、水辺植物に対するチクゴスズメノヒエの影響の程度が水位によって異なるかどうかを検証するため、本実験では水位の操作も行った。3、水辺植物群集の再生可能性に対するチクゴスズメノヒエの影響を検討するため、東京学芸大学温室において、実生発生法による埋土種子集団調査を実施した。これらの調査・実験は全て平成27年度中に完了した。1、と2、の結果より、チクゴスズメノヒエは河川の流水辺に生育するヤナギタデのような一年草の量、成長および種子生産に負の影響を及ぼすことがわかった。成果の一部は第63回日本生態学会大会で発表した。今後、得られたデータのさらなる解析を進め、学術雑誌への投稿準備を進める。特に、チクゴスズメノヒエの量と水辺の一年草の量・茎長との関係の非線形性を解析する予定である。翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。外来水生植物であるチクゴスズメノヒエ(イネ科)を研究対象種とした。1.水辺植物群集の存続に及ぼすチクゴスズメノヒエの影響を明らかにするため、多摩川中流域流水辺のチクゴスズメノヒエが優占する区画から在来種が優占する区画において植生調査を行った。2.チクゴスズメノヒエの量の増加が水辺植物群集の更新に影響を及ぼすかどうかを実験的に検証するため、チクゴスズメノヒエの移植密度を操作した競争実験を開始した。3.水辺植物群集の再生可能性に対するチクゴスズメノヒエの影響を検討するため、多摩川中流域流水辺のチクゴスズメノヒエが優占する区画から在来種が優占する区画の埋土種子集団を調査した。1と3の結果より、調査地である多摩川中流域の流水辺は外来植物に著しく優占される一方で、絶滅危惧種であるカワヂシャを含む在来植物種のハビタットでもあることが確認された。以上の調査・実験は、2か年に渡ってモニタリングを行う必要があり、成果は来年度に取りまとめる。特に、チクゴスズメノヒエの量と地上部植物群集および埋土種子集団との間の非線形関係を抽出するための統計解析を試みる予定である。本年度行うことができなかった外来水生植物の除去実験と在来植物種の被陰試験は、来年度実施する予定である。

3、水辺植物群集の再生可能性に対するチクゴスズメノヒエの影響を検討するため、東京学芸大学温室において、実生発生法による埋土種子集団調査を実施した。これらの調査・実験は全て平成27年度中に完了した。1、と2、の結果より、チクゴスズメノヒエは河川の流水辺に生育するヤナギタデのような一年草の量、成長および種子生産に負の影響を及ぼすことがわかった。成果の一部は第63回日本生態学会大会で発表した。今後、得られたデータのさらなる解析を進め、学術雑誌への投稿準備を進める。特に、チクゴスズメノヒエの量と水辺の一年草の量・茎長との関係の非線形性を解析する予定である。室内実験を行う予定であった東京農工大学府中キャンパス内の大型ビニールハウスが2014年2月の大雪により壊れたため、室内実験の開始が遅れた。現在は、東京農工大学府中キャンパス栄町圃場に新たに設置した簡易ビニールハウスおよび東京学芸大学内の温室にて実験を遂行している。また、実施計画では対象種であったオランダガラシの多くの個体が2014年6月の出水により消失したため、野外調査の開始が遅れた。オランダガラシの消失のため、本年度では、調査対象種を外来水生植物であるチクゴスズメノヒエとした。チクゴスズメノヒエは国内外の水辺植物群集に影響を及ぼすことが懸念されている。加えて、実験を行い易いサイズであり(植物高50cm前後)、強健で栽培もしやすい。そのため、チクゴスズメノヒエは本研究計画目的の達成に適切な種と判断された。調査および屋内実験については、現在順調に進行している。野外調査および屋内実験の遂行がやや遅れたため、当初予定していた国内学会での発表を行うことができなかった。翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。本年度は、まず昨年度に開始した野外調査および室内実験のモニタリングを秋期まで継続し、その結果を1本の論文としてとりまとめ、冬期をめどに投稿する予定である。同様の内容を基に、昨年度実施する予定であった日本生態学会での研究発表を実施する。また、野外におけるチクゴスズメノヒエの除去実験、チクゴスズメノヒエ優占区画内への在来種種子の播種実験、在来植物種実生の耐陰性試験を本年度秋期から開始する予定である。
十九世紀フランス言論界に於ける政治・文学の相関とその史的展開に関する綜合的研究

平成元年度から三年度にかけてわれわれがおこなった研究の成果は、以下の四点にまとめることができる。1.まず、十九世紀フランスの定期刊行物を収集しえたこと。『ル・フィガロ』『ル・フィガロ・シュプレマン・リッテレ-ル』『ラ・クロッシュ』『ラ・ルヴュ・ファンテジスト』『ル・メッサ-ジュ・ド・ラサンブレ』『ロ-ロ-ル』『ラ・コ-ティディエンヌ』『ル・ゴ-ロワ』といった刊行物をマイクロ・フィルムの形で購入したことは、東京大学本郷キャンパスの新聞研究所の基礎的資料収集を補完するものであり、一次資料をもとにした研究を今後継続してゆくための基盤となる。2.ロマン主義の時代の小説とジャ-ナリズムの関係。これについては冨永がスタクダ-ルの場合をとりあげ、当時の日刊新聞『ラ・コ-ティディエンヌ』との関連から、小説『アンリ・ブリュラ-ルの生涯』(1835ー36年)を精密に分析し、社会と作家との相互作用をあとづける論文をフランス語で発表した。3.第二帝政期の文学とジャ-ナリズムの関係。これについては、松村がボ-ドレ-ルの詩をとりあげ、それが『家庭評論』という定期刊行物に発表されたにはいかなる意図にもとづいているのか、また、詩人が下敷にしている中世神学者の伝説的挿話が言及された『両世界評論』誌の論考およびその源泉の調査がいかに詩の理解に寄与するかを示す、綿密な論考を提出した。4.第三共和制下の文学・芸術と社会の相関。これについては、湯浅と中地がそれぞれランボ-の作品をとりあげて詩人と社会の関係を精密に研究したほか、竹内はマラルメの難解な作品とジャ-ナリズムの関係を追跡し、椎名は音楽の分野における社会との相関についての論究を発表した。平成元年度の研究業績は、大別して以下の3領域に分けられる。1.ロマン主義時代の小説とジャ-ナリズムとの関係。2.第二帝制期の文学・芸術とジャ-ナリズムとの関係。3.第三共和制下の文学・音楽創作とジャ-ナリズムとの関係。1については冨永がスタンダ-ルの場合を取り上げ、当時の日刊新聞「ラ・コ-ティディエンヌ」との関連を研究し、「スタンダ-ルクラブ」に仏文の論文を発表の予定である。この日刊新聞については、当初の予算より研究助成交付金額が少なかったため、資料収集に欠落を生じているが、第二年度に補完する予定である。2については、稲賀が画家ギュスタ-ヴ・ク-ルベの場合について、第二帝制下の生存中から死後20世紀初頭にいたる評価の変遷をジャ-ナリズムの反応と相即的にとらえた論文を東京大学教養学部外国語科研究紀要に発表の予定であるほか、ブリジストン美術館における、日本でははじめてのク-ルベの組織的な展覧会のカタログ執筆に参加して、その研究成果の一端を公表した。3については、竹内が詩人マラルメの「イジチュ-ル」研究を同上の紀要に発表予定のほか、マラルメとジャ-ナリズムとの関係に関する、まとまった研究を準備中である。また中地は詩人ランボ-について、その創作を社会的状況のなかに位置付けなおし、あらたな読解の試みを日本語、フランス語双方で発表予定である。最後に椎名は音楽学に関する国家博士論文を準備中であるが、フランス第三共和制以降における、音楽創作とその批判的、理論的受容の側面に関する考察を、仏文にて同上の紀要に掲載する予定である。平成2年度の研究業績は、大別して以下の三領域に分けられる。1。ロマン主義時代の文学と社会。2。

第二帝政期の文学とジャ-ナリズムとの関係。3。第三共和制下の文学・芸術と社会の相関。1については、フランス語で発表した雑誌論文において、冨永がスタンダ-ルの作品『アンリ・ブリュラ-ルの生涯』(1835ー36年)を取り上げ、そこに現れた、当時の社会と作家との様々な相互作用を細かく跡付ける試みを提出した。2については、松村がボ-ドレ-ルの詩を取り上げ、それが『家庭雑誌』なる定期刊行物に発表された意図、詩人がインスピレ-ションを得た中世神学者の挿話の発表された『両世界評論』誌の論考を手掛かりに社会主義が成す背景について、その研究成果を発表した。3については、湯浅と中地がそれぞれランボ-について当時の社会情勢、思想状況を視野に含めた画期的な論考をフランス語、日本語で発表したほか、二人の共同作業によるバタイユの重要文献の読解を公刊した。他方、竹内はマラルメ読解の作業を続けつつ、コンピュ-タ-を駆使したマラルメの詩作品のデ-タベ-スを発表した。最後に椎名は、近代・現代音楽についてその思索を深め、科学研究費で購入した『レペルトワ-ル・アンテルナシォナル・ド・ラ・プレス・ミュジカル』を素材にした研究を準備している。平成三年度の研究業績は、大別して以下の3領域に分けられる。1。象徴主義の時代における文学と思想の関係。2。第三共和制下の文学・芸術と社会の関係。3。文献学の問題点。1については竹内がマラルメの場合を取り上げ、詩人・批評家マラルメが当時の社会的状況の中でいかなる形式を選択し、その根底に流れる思想を裏付けるためにいかにデ-タ・ベ-スが有効な手段となりうるか、また、同時代のジャ-ナリズムの実証的な調査がいかに不可欠な方法であるかを示した。2については湯浅が詩人ランボ-の作品の詳細な読解を試み、そこに現代思想の問題点との関連を指摘し、また詩人の軌跡についても年代的に追跡する研究をおこなった。また中地はランボ-の日本における受容をフランスで発表し、日本人としての比較文学的な貢献と言えよう。椎名は音楽学の観点から芸術と社会の相関を考察した研究を続けている。3については、従来受動的にしか享受されてこなかった文献学の成果を、その時代におきなおしてその思想的、社会的意味をまで視野におさめた研究を松村がおこなった。
切削加工におけるびびり振動の常識を覆す切削工具の逃げ面テクスチャ設計

切削加工におけるプロセスダンピング現象のシミュレーション技術を応用して,プロセスダンピングを効果的に発現する切削工具の逃げ面テクスチャの設計技術を開発し,従来の常識を覆す究極のびびり振動抑制技術の確立に挑戦する.提案手法では,切削加工中の振動によって生じる,工具の逃げ面接触力を推定する新しい解析モデルを開発する.これを活用し,効果的にプロセスダンピングのみを発現し,びびり周波数に対してロバストに振動減衰効果をもたらす手法を開発する.加工実験を通じて提案手法の検証を行い,びびり振動に対して万能な革新的振動抑制技術の確立を目指す.切削加工におけるプロセスダンピング現象のシミュレーション技術を応用して,プロセスダンピングを効果的に発現する切削工具の逃げ面テクスチャの設計技術を開発し,従来の常識を覆す究極のびびり振動抑制技術の確立に挑戦する.提案手法では,切削加工中の振動によって生じる,工具の逃げ面接触力を推定する新しい解析モデルを開発する.これを活用し,効果的にプロセスダンピングのみを発現し,びびり周波数に対してロバストに振動減衰効果をもたらす手法を開発する.加工実験を通じて提案手法の検証を行い,びびり振動に対して万能な革新的振動抑制技術の確立を目指す.
交換力顕微鏡における最適なプローブの開発

昨年度までのプローブの試作およびその評価をうけ、リード電極部の材料の改善・4端子化、作製プロセスの最適化を実現することで、SMRM用プローブであるMR素子を搭載したカンチレバーを歩留まり良く作製することを可能にした。また、MRセンサのアスペクト比を変えることによるMR特性の違いについても検討した。さらに作製したプローブを市販のプローブ顕微鏡ユニットに搭載し、磁性ガーネット表面からの漏えい磁場のマッピングを行った。取得した像からプローブの空間分解能と磁場感度を見積もると、5μm×1μmというMR素子サイズのプローブを用いた場合、空間分解能は約1μm、磁場感度は数Oe程度であることがわかった。プローブの空間分解能を改善するにはMRセンサの微細化が必要であり、現行の作製プロセスを用いても微細化(100nm)は容易に達成できる。現在採用している異方性磁気抵抗素子(Anisotropic Magnetoresistive sensor : AMR sensor)を用いた場合、素子を微細化することで100nm程度の空間分解能が達成できると考えられる。さらに高感度なスピンバルブ素子を磁気センサとして搭載すれば、さらなる高分解能化が実現できる。数10nm程度の分解能が達成されれば、磁気抵抗素子を搭載したカンチレバーが交換力顕微鏡用の有力なプローブになると考えられる。