hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
Ca Preconditioningによる心筋内Ca動態と虚血耐性の機序

冠灌流量を10%に減少させるlow-flow ischemiaを誘発し、同時にペーシングを加えた。左室圧・心電図をモニターした。2)細胞内Ca^<2+>動態([Ca^<2+>]I)の測定蛍光指示薬4μM fura-2を経冠動脈的に心筋に負荷し,340nm/380nmのUV励起光による500nmの蛍光強度比を光ファイバー照射測光ユニット(日本分光CAF110)を用いて測定。3)Ca preconditioningの作成高Ca溶液による(CPHC):灌流条件を通常のTyrode溶液から高Ca,Tyrode溶液(Ca^<2+>:3.5mM)に1分間変換し、再び通常の灌流液に戻した。低Na溶液による(CPLN):灌流液をTyrode溶液から、低Na,Tyrode溶液(Na^+:70mM,Tris:70mMに調整)に1分間変換した。低Na灌流によりreverse mode Na/Ca交換系が刺激され、Caの細胞内流入が起こる。4)実験プロトコール。4群に分けて検討。虚血10分、再灌流15分の対照群(n=6)に対して、CPHC群(n=6)、CPLN群(n=6)ともにCa preconditioningを2回施行後、虚血10分、再灌流15分施行。さらにIP群(n=6)としてIschemic preconditioningを2回施行後、虚血再灌流を行った。結果:CPHC群、CPLN群、IP群いずれもpreconditioningにより、一過性の細胞内Caの上昇がみられた。虚血10分及び再灌流1分の細胞内Caの上昇率は対照群の107.7±9.4%、57.1±13.7%に対して、IP群61.1±3.0%(p<0.01)、22.4±3.9%(p<0.05)に抑制された。CPLN群、CPHC群においても再灌流1分で21.5±10.1%(p<0.05)、23.8±7.4%(p<0.05)と抑制効果がみられた。いずれのpreconditioning群においても、再灌流後の不整脈発生頻度の減少と、rate-pressure productの回復傾向がみられた。結論:CPの保護効果として細胞内Ca過負荷の軽減が一部関与する。またIschcmic preconditioningの心筋保護効果発現のtriggerとして、一過性の細胞内Ca上昇が重要と思われた。
内因性オピオイド及び関連ペプチドの生理的・臨床的意義に関する研究

オピオイドペプチドは生体に広く分布するペプチドであるが,その意義については不明の点が多い.この研究ではまずヒト及び動物の脳やその他の組織での3種のオピオイドペプチド前駆体(POMC, proenkephilin A, proenkephalin B)のプロセシングを比較し,組織により同じ前駆体から異った最終産物を生ずること,従って異った作用に関与する可能性があることが示された.またproenkephalin Bの遺伝子構造からその存在が予測されたロイモルフィン(LM)が実在すること,このLMはカッパー受容体アゴニストで,強いモルヒネ様活性を有することを明らかにした.更にLMの脳室内投与はプロラクチン(PRL), GHの分泌を促進した.とくにPRL分泌作用は強力で,その作用の一部は下垂体への直接作用であることが示唆された.またオピオイドのGH分泌促進作用はGRFを介することも明らかにされた. LMの脳室内投与はアンジオテンシンーII(AII)により誘起されたバソプレッシン(AVP)放出を抑制した.この作用はナロキソンで阻害された.またナロキソン自身はAVP放出を軽度に促進することも見出され, LMが生理的AVP放出調節因子であることが示唆された.LMはまたラットにおいて顕著な血圧降下作用を示した.更にLMはまた飲水制限, AIIなどによる飲水を抑制した. LMの脳内分布と心房性ナトリウム利尿ペプチド(ANP)のそれに若干のオーバーラップがあることからANPの作用についても検討した.ANPもAIIや飲水制限によって誘起される飲水, AIIによる血圧上昇やAVP放出を抑制することが明らかになったが,両者の作用に相違点も認められた.以上の事実から脳内にはレニン・アンジオテンシン系とANP系があり,体液,血圧調節に拮抗的に働いていること, LMなどのオピオイドもこの系に関与していることが示唆された.オピオイドペプチドは生体に広く分布するペプチドであるが,その意義については不明の点が多い.この研究ではまずヒト及び動物の脳やその他の組織での3種のオピオイドペプチド前駆体(POMC, proenkephilin A, proenkephalin B)のプロセシングを比較し,組織により同じ前駆体から異った最終産物を生ずること,従って異った作用に関与する可能性があることが示された.またproenkephalin Bの遺伝子構造からその存在が予測されたロイモルフィン(LM)が実在すること,このLMはカッパー受容体アゴニストで,強いモルヒネ様活性を有することを明らかにした.更にLMの脳室内投与はプロラクチン(PRL), GHの分泌を促進した.とくにPRL分泌作用は強力で,その作用の一部は下垂体への直接作用であることが示唆された.またオピオイドのGH分泌促進作用はGRFを介することも明らかにされた. LMの脳室内投与はアンジオテンシンーII(AII)により誘起されたバソプレッシン(AVP)放出を抑制した.この作用はナロキソンで阻害された.またナロキソン自身はAVP放出を軽度に促進することも見出され, LMが生理的AVP放出調節因子であることが示唆された.LMはまたラットにおいて顕著な血圧降下作用を示した.更にLMはまた飲水制限, AIIなどによる飲水を抑制した. LMの脳内分布と心房性ナトリウム利尿ペプチド(ANP)のそれに若干のオーバーラップがあることからANPの作用についても検討した.ANPもAIIや飲水制限によって誘起される飲水, AIIによる血圧上昇やAVP放出を抑制することが明らかになったが,両者の作用に相違点も認められた.以上の事実から脳内にはレニン・アンジオテンシン系とANP系があり,体液,血圧調節に拮抗的に働いていること, LMなどのオピオイドもこの系に関与していることが示唆された.我々はオピオイドペプチドの前駆体構造から新しい内因性オピオイドペプチド、ロイモルフィン(LM)の存在を予測し、それが脳内に実在することを明らかにした。そこでLMの脳内分布を検討し、視床下部,辺縁系,大脳基底核などに多いこと、視床下部のLMは性週期とともに変動することを見出した。次にLMを始め、他のオピオイドペプチドのプロラクチン分泌への影響を観察し、LMに極めて強力なプロラクチン分泌作用があること、その作用の一部は下垂体への直接作用であることを明らかにした。またオピオイドペプチドのプロラクチン分泌促進作用の機序について、脳内アミンを減少させる薬剤を用いた検討を行うとともに、視床下部のin vitroでの潅流実験を行い、ドーパミンの分泌抑制が、プロラクチン分泌増加の一つの要因であることを明らかにした。またオピオイドペプチドは成長ホルモンの分泌を促進するが、その機序を明らかにするため、成長ホルモン放出促進因子(GRF)との関係を検討した。その結果オピオイドペプチドはGRFの放出を介して成長ホルモン分泌を促進することが、抗GRF抗体の投与などの実験で確認された。次にオピオイドペプチドは全てゴナドトロピン特にLHの分泌を抑制することを明らかにしているが、拘束ストレスによるLH分泌の抑制にオピオイドペプチドが関与するか否かを調べた。その結果関係は見られず、むしろセロトニン系の関与を示唆する成績を得た。次にオピオイドペプチド、とくにLMの飲水への影響について研究し、全ての要因による飲水を抑制すること、LMの作用が最も強いことを見出した。

かつ抗LM血清の脳室内投与は飲水を促進する事実を見出し、LMの飲水抑制作用には生理的意義があるものと考えられた。またLMの脳室内投与は抗利尿ホルモン分泌を抑制する事実を観察した。我々の見出した新しいオピオイドペプチド,ロイモルフィンの脳内分布は既に明らかにしたが、その生理的変動を知るためラット性週期中の変化を則定した。その結果視床下部及び下垂体前葉のロイモルフィンは発情前期に最高値になる変動を示したが、下推体後葉,脳の他の部位のロイモルフィンは有意の変動を示さなかった。ロイモルフィンがメスラットの性行動を促進する事実と合わせて、ロイモルフィンの性機能調節における役割を示唆するものである。次にロイモルフィンの血圧,体液調節への影響をラットを用いて検討した。ロイモルフィンはアンジオテンシン【II】(A【II】)によって誘発される血圧上昇及び飲水を用量反応的に抑制した。この抑制はオピエート拮抗剤ナロキソンにより拮抗された。ロイモルフィンはまた飲水制限によって起こる飲水も抑制した。しかしナロキソン単独でも軽度の飲水の抑制が見られオピオイドの作用は複雑であることが明らかとなった。ロイモルフィンはまたA【II】や飲水制限によって起こるバソプレッシンの分泌を用量反応的に抑制し、この作用もナロキソンにより拮抗された。ナロキソン単独もバソプレッシン分泌を増加させたので内因性オピオイドペプチドはバソプレッシン分泌を抑制的に調節している可能性が大きい。興味あることは心房性ナトリウム利尿ペプチド(ANP)がロイモルフィンと同様にA【II】による昇圧反応,飲水,バソプレッシン分泌を抑制することである。ANPとロイモルフィンの間には一定の関係があるものと考えられるが、詳細は不明である。ロイモルフィンは下垂体プロラクチン分泌を用量反応的に促進した。この作用はラット下垂体灌流系においても証明されることから、従来FK33-824などのオピオイドにみられた視床下部ドーパミン機構を介する間接的なものと異なり、直接下垂体に対する作用と考えられた。ロイモルフィンの脳室内投与は無麻酔ラットの血糖,血中エビネフリンを増加させた。
菌増殖に関連する新たな因子を指標とした黄色ブドウ球菌感染症簡易診断法の開発

昨年度は試料中IsaA検出のための高感度な系(検出感度:1.5ng/ml)を確立した。本年度はこれを用いて、生体試料測定時に問題となる点についてさらに検討し、実際に血清中IsaAの検出を試みた。IsaAを指標として、黄色ブドウ球菌感染をいち早く確実に把握するためには、このタンパク質が、感染・増殖における早期段階から存在する必要がある。そこで、その産生プロフィールの詳細を調べた。その結果、培養上清中のIsaAは、増殖の開始直後から検出され始め、その量は菌増殖に伴って指数関数的に増加し、定常期の初めまで維持された。また、菌体表面上には対数増殖期を通して一定量のIsaAが常に存在していた。感染患者血清中には、黄色ブドウ球菌の抗原タンパク質に対して多量の抗体の産生されることが予想される。こうした抗体はIsaAの抗原部位をマスクするため、検出系の感度を大きく低下させる可能性がある。そこで、IsaA抗体の存在を骨髄炎患者血清と健康人について調べたところ、患者血清に高力価の抗体が確認された。一方、健康人ではその抗体価は全体的に低く、検出系のシグナル強度から両者を明確に区別することが可能であった。しかしながら、健康人由来であっても、一部の試料では患者のものと差のないシグナルを生じた。そこで、そうした血清中に存在する抗体の検出系に与える影響を調べるため、高力価抗体を有する健康人血清にヒスチジンタグ標識IsaAを添加しその検出を試みたところ、抗原タンパク質の存在を示す明確なシグナルは得られなかった。そこで、抗原抗体複合体を解離させるため、試料に熱処理を施したところIsaAの検出が可能となった。以上、本研究で確立した系を用い、感染に伴う黄色ブドウ球菌の増殖を極めて初期の段階で、IsaAを指標として捉えることが可能であった。今後、更なる感度の向上や常在する抗体のより有効な不活化方法等を検討し、また、検査に適する試料の選択や臨床経過と検査結果の相関等を明らかにして、実用化につなげて行きたい。この研究では黄色ブドウ球菌の菌体外タンパク質であるIsaAを指標として、同菌による感染症の簡易診断法の開発を目指す。このためには、菌増殖の初期段階において微量に存在するIsaAを確実に捉えることのできる高感度な検出系を確立する必要がある。今年度は、ELISA法とラテックス凝集法が、そうした検出系として利用可能かどうか検討した。まず、N末端部分にヒスチジンタグをもつIsaAの融合タンパク質(His-IsaA)を作製し、これを抗原として抗IsaAウサギIgGを得た。ELISA法については、抗原捕捉用として抗IsaA抗体、抗原検出用としてFITC標識した抗IsaA抗体とをそれぞれ用いたサンドウィッチ法を検討した。まず、標準試料としてHis-IsaAを用い、系の特異性および感度について調べた。その結果、試料中の濃度に依存してHis-IsaAは特異的に検出された。そして、その濃度が025ng/mlまでは、吸光度と抗原量との間に相関係数0.999以上で直線関係が成り立ち、その範囲内での抗原量の測定が可能であった。また、抗原濃度が0ng/mlの時の吸光度値から算出した`平均値+3標準偏差'はおよそ0.06で、この値に基づき系の検出限界を求めたところ、標準試料については1.5ng/mlであった。一方、ラテックス凝集法では、予め抗IsaA抗体でコートしたポリスチレンビーズをHis-IsaA溶液に加えてその凝集の有無を調べた。しかし、この場合、ELISA法に匹敵するほどの検出感度は得られなかった。以上の結果から、このELISA法が微量な抗原の検出に応用可能であることがわかった。さらに黄色ブドウ球菌の培養上清を用い、この検出系が菌増殖に伴って分泌されるIsaAをどの段階でとらえることができるかについて調べた。そうしたところ、培養開始時の菌濃度が4×10^5CFU/mlの場合、1時間培養液中に存在するIsaAの検出が可能であった。

そこで、そうした血清中に存在する抗体の検出系に与える影響を調べるため、高力価抗体を有する健康人血清にヒスチジンタグ標識IsaAを添加しその検出を試みたところ、抗原タンパク質の存在を示す明確なシグナルは得られなかった。そこで、抗原抗体複合体を解離させるため、試料に熱処理を施したところIsaAの検出が可能となった。以上、本研究で確立した系を用い、感染に伴う黄色ブドウ球菌の増殖を極めて初期の段階で、IsaAを指標として捉えることが可能であった。今後、更なる感度の向上や常在する抗体のより有効な不活化方法等を検討し、また、検査に適する試料の選択や臨床経過と検査結果の相関等を明らかにして、実用化につなげて行きたい。
心筋直接リプログラミングにおける、心筋梗塞病変への生体転化の基盤研究

本研究より、繊維芽細胞から心筋梗塞巣に効率的に遺伝子導入をする方法を、検索している。その中で、共同研究を行った心筋梗塞での治療として、細胞のゲノムを損傷することなく3つの心筋誘導遺伝子を導入して、梗塞巣の心臓線維芽細胞を効率よく短期間で、かつ直接的に心筋細胞へ転換して、心機能を改善することに成功していた。細胞移植を必要としない新しい心筋再生法として、心臓に存在する心筋以外の心臓線維芽細胞に心筋誘導遺伝子を導入して、心筋を直接作製する研究を行っている。その結果、マウス生体内の心臓線維芽細胞に3つの心筋誘導遺伝子のセンダイウイルスベクターを開発した。この心筋誘導センダイウイルスベクターを用いて、培養皿上で、効率よく短期間でマウスおよびヒト線維芽細胞から心筋細胞をゲノムの損傷なく、直接的に作製することに成功した。さらに心筋誘導センダイウイルスベクターをマウス心筋梗塞モデルの心臓に導入すると、1週間で心筋再生が始まり、1か月後には心機能が改善することを確認した。本研究では、心筋症にも注目しており拡張型心筋症などの、遺伝性心筋症にも注目をして、心筋直接誘導が改善できることを予定する。その結果により、細胞移植を必要としない新しい心筋再生方法を確立し、心筋梗塞や拡張型心筋症をはじめとするさまざまな心臓疾患に対する再生医療への応用が期待できるようになる。そのために、新たな遺伝子導入を検討する。今までの研究より、繊維芽細胞から心筋梗塞巣に効率的に遺伝子導入をする方法を、検索している。その結果、マウス生体内の心臓線維芽細胞に3つの心筋誘導遺伝子センダイウイルスベクターを開発した。その時に、センダイウイルスベクターの開発することに時間がかかってしまっていた。センダイウイルスは、有毒性が高くまた、センダイウイルスの生成に時間がかかってしまい、条件設定がかなりかかった。また、拡張型心筋症モデルマウスを作成するのが難しく、さらに、今後の遺伝子編集後の治療も考えており、適正な拡張型心筋症マウスを選定することが困難であった。現在も、その選定中であり、あと数ヶ月は時間がかかる可能性がある。また今後、細胞移植を必要としない新しい心筋再生方法を確立し、心筋梗塞や拡張型心筋症をはじめとするさまざまな心臓疾患に対する再生医療への応用が期待できるようになる。そのために、新たな遺伝子導入をするシステムを確立することを検討している。拡張型心筋症マウスを作成困難であり、また今後遺伝子編集後の治療も考えており、適正な拡張型心筋症マウスを選定することに時間がかかっている。現在も、その適正な選定中である。しかし、新たな遺伝子導入をするシステムを同時に開発中である。

現在も、その選定中であり、あと数ヶ月は時間がかかる可能性がある。また今後、細胞移植を必要としない新しい心筋再生方法を確立し、心筋梗塞や拡張型心筋症をはじめとするさまざまな心臓疾患に対する再生医療への応用が期待できるようになる。そのために、新たな遺伝子導入をするシステムを確立することを検討している。拡張型心筋症マウスを作成困難であり、また今後遺伝子編集後の治療も考えており、適正な拡張型心筋症マウスを選定することに時間がかかっている。現在も、その適正な選定中である。しかし、新たな遺伝子導入をするシステムを同時に開発中である。コラボレーションで、拡張型心筋症マウスを作成に時間がかかったため、実験に費やす金額が変わってしまった。そのために、残額が、955,153円となっている。その残額を使用し、遺伝子編集をするためのプラスミドを作成する予定である。それにより、拡張型心筋症マウスに、遺伝子編集を行う予定である。
十分に発達した乱流における時間的・空間的多重状態と記憶

本研究の目的は、乱流の多重状態と記憶という現象に着目し、その発現機構を解明することで、特色として、壁との相互作用から生じる渦が重要な役割をする乱流(「壁有乱流」と略す)と、波が重要な役割をする乱流(「波有乱流」)とを対象とし、両乱流の相補的関係を利用して調べることにある。「壁有乱流」については、研究分担者の交替も有り昨年度から研究対象の流れを回転球殻内乱流に変更した。軸対称流れ及び3次元流れ用のプログラムを作成し先行研究との比較によるチェックも終わっている。この系は緯度による非一様性が有りチャネル乱流とは異なる空間的多重状態が期待されるが、幾何学的な変数に加えて回転の変数もあり探索域の選択が難しい。この流れの特性を掴むために先行研究に対応したパラメターでReynolds数を上げながら計算し、解が分岐を繰り返しながら複雑化し乱流へと遷移する様子を明らかにしつつある。「波有乱流」については、研究実施計画通り順調に進んでおり回転乱流と成層乱流の両方を比較をしながら調べている。これらの系では、低波数側に波動(それぞれ慣性波と内部重力波)が重要な役割をする弱乱流と、高波数側に渦が重要な役割をするKolmogorov乱流とが共存している。弱乱流領域を定量的に同定する指標となる量を提案し、波数空間において両乱流の領域の境界波数を見積もった。現在この結果を、国際学術誌に投稿中である。また、波数空間での非等方乱流のエネルギーの流れを考える際に問題となる「3波相互作用における不定性」を除去する方法として「Moore-Penrose逆行列の利用」や「渦無しフラックスベクトル」というアイデアを得た。これらの結果について国内学会4件、国際学会1件を発表した。更に、非等方乱流のReynolds数無限大での漸近的振る舞いを知るためにベータ平面乱流に拡張した2次元シェルモデルを提案し、国内学会で発表した。研究分担者の交替により「壁有乱流」の研究対象を変更したことや、所属機関の変更による研究環境の整備などに時間がかかったこと、加えて、当該年度の初夏に研究代表者の親族に不幸事が有り実家と頻繁に往復する必要が出て来たことや、12月1日より分担者が職位の関係で継続できなくなったこと等が進捗に遅れを生じた主な要因である。しかしながら、「波有乱流」については、発達乱流中にもヒステリシスが存在することを示すなど、研究分担者の努力により研究実施計画通りおおむね順調に進展している。「壁有乱流」については上記以外にも幾つか想定外のことが有り初期段階で少し時間がかかった。回転二重円筒内乱流では探索パラメター領域を絞り込むことや動径方向の計算点の分布やスキームの選択に時間がかかった。また、回転球殻内乱流では方位方向の非一様性のためか解像度依存性が大きく、必要な精度を保ちつつ高いReynolds数の計算をするためには当初の想定よりも大規模な計算が必要なことがわかった。加えて、この系には多数のパラメター(幾何学的なパラメータと外・内球殻の回転角速度)があり、探索範囲の絞り込みや流れのパラメター依存性を調べるには多くの計算を必要とする。しかしながら、研究分担者の努力により、延長した研究期間内に結果が得られる目処が立ってきた状況である。他方、研究実施計画にも記した物理を理解するためのモデルについても並行して着手している。十分に発達した非等方乱流のReynolds数無限大での漸近的振る舞いを知るためにシェルモデルを利用することとした。波動が重要な役割をする弱乱流と渦が重要な役割をするKolmogorov乱流とが共存するベータ平面乱流に、先行研究の2次元のシェルモデルを拡張した。数値シミュレーションにより幅広い冪乗則をもつ乱流の共存状態が得られ、そのエネルギーの波数空間での流れなどについて結果が出始めている。研究代表者の身内の不幸事や研究分担者の交替など想定外の事態が立て続けに起こり、進捗にやや遅れが出ており期間を1年間延長することとなったが、次年度を研究実施計画に書いた本研究課題のまとめの年とする。遅れを取り戻すため下記のことを並列して行い、研究成果の公表を急ぐこととする。次年度の前半は遅れの出ている「壁有乱流」の数値データの取得と解析を急ぎ、壁により生成された細かな渦の相互作用の結果として乱流中に現れる大規模構造と、そのロバスト性に起因する履歴効果について、不安定周期軌道の数値解の特性に焦点を当てて解析する。特に、回転球殻内乱流や回転二重円筒間乱流ではヒステリシスが実験的に報告されているので、対応した直接数値シミュレーションをして不安定周期軌道との関係などを調べる。後半は、「波有乱流」で得られたヒステリシスとの関係を調べ横断的に理解に務めまとめる。「波有乱流」である回転乱流や成層乱流では、引き続き波数空間でのエネルギー輸送を調べる。本研究課題の初年度及び2年目には、エネルギースペクトルが冪乗則を示すような発達乱流状態においてもヒステリシスを示すことを見出したが、この理解をエネルギーの流れのスウィッチングという側面から深める。これらの乱流に現れる大規模構造とエネルギー輸送、つまり実空間と波数空間でのダイナミックスを結びつけることにより、本補助事業の目的である時間的・空間的多重状態と記憶の関係を明らかにするのである。

他方、本年度の後半から始めた2次元シェルモデルによる解析を推し進め、直接数値シミュレーションでは到達不可能なReynolds数が無限大での漸近的な振る舞いを調べる。「壁有乱流」や「波有乱流」の直接数値シミュレーションの相補的結果と照らし合わせることで、延長した次の1年で研究実施計画に書いたように、十分に発達した乱流における時間的・空間的多重性と記憶についてまとめる。本研究では、壁との相互作用のある乱流(=「壁有乱流」と略す)と、波が重要な役割をする乱流(「波有乱流」)とを対象としている。前者では流れ(渦)の動力学が、後者では位相(波)の動力学が重要な役割をする。両乱流の相補的関係を利用しながら「乱流」と呼ばれるものの本質を探る。「壁有乱流」については、役割分担者の経験豊富な平行平板間乱流から始めることになっていたが、10月以降に研究分担者を続けることが出来なくなったため、あまり進展していない。代わって、矩形断面容器内の流れをシミュレーションし,バスタブ渦の発生および遷移過程がわかってきた。「波有乱流」については、研究実施計画どおり回転乱流から始めた。この系には慣性波が存在し、低波数側に非等方な波動乱流状態と高波数側に3次元等方性のKolmogorov乱流状態が共存することをシミュレーションにより確認した。また、この様な回転系ではTaylor-Proudmanの定理が知られているが、冪則を示すような十分に発達した乱流においてもRossby数が小さくなると回転軸に平行な大規模柱状渦が現れることを確認し、この柱状渦の出現が外力の振幅およびRossby数に対してヒステリシスを示すことを見出した。十分に発達した乱流においてヒステリシスを示す系として知られているのは、Taylor-Couette流のような閉じた系のみであったが、壁がない開いた系でもヒステリシスが起こりうることが分かった。他方、薄板の弾性波動乱流では、先行研究により低波数帯への外力の場合に強・弱乱流状態が共存することが分かっているが,高波数帯への外力の場合に2次元流体乱流のようにエネルギーが低波数側に流れ、凝縮のような様相を示すことも分かってきた。申請時点で2名いた研究分担者の内の1名が平成29年10月1日より転職したが、転職先では採用時に定められた本務と関係のある業務以外の兼任は認められず、本科学研究助成事業の研究分担者から削除する必要が生じた。そのため、その役割分担であった「壁有乱流」の数値計算およびデータ解析において進捗に若干遅れが生じてしまっている。しかしながら、当初予定していなかったバスタブ渦に関して、矩形容器内におけるその生成過程や遷移について調べが進んでおり、日本流体力学会などで発表している。また、二重円筒内のTaylor-Couette流や球殻内のCouette流をシミュレーションするための数値計算コードを開発し、乱流状態を調べるべくプログラムのチューニングとパラメターサーチを行っている段階である。他方、「波動乱流」の方は申請書の研究実施計画どおり順調に進展しており、回転乱流においては、冪則を示すような十分に発達した乱流においてもRossby数が小さくなると回転軸に平行な大規模柱状渦構造が現れることを確認し、この柱状渦構造の出現が外力の振幅およびRossby数に対してヒステリシスを示すことを見出した。これらの結果は、国際学会(24th ICTAMおよび69th APS/DFD)や日本物理学会などで発表した。それらをまとめて論文として国際学術誌に現在投稿中である。
Ｘ線結晶解析法及びＸ線溶液散乱法を用いた難分解性動物タンパク質分解機構の解明

本研究は、地球温暖化の主原因となっている二酸化炭素排出量の削減のために、現在は焼却処分されているコラーゲンなどの難分解性動物タンパク質を分解する特殊なタンパク質群の立体構造を、X線結晶構造解析法を用いて原子レベルで詳細に明らかにし、難分解性動物タンパク質の分解機構を解明するものであり、3種類のコラーゲンを分解するタンパク質の立体構造を高分解能で決定するとともに、SAXS解析から溶液中での挙動についても解明することができた。また、研究の過程で新たに1種類新規のコラーゲン分解酵素を発見した。京都府立大学のグループと共同で単離した、Geobacillus collagenovorans MO-1株から2種類(Pz-A、Pz-B)、Aneurinibacillus属細菌AM-1株から1種類(AM-1)の計3種類の、難分解性動物タンパク質分解酵素について、平成24年度までに結晶が得られ、それぞれ2Å付近の分解能のX線回折強度データが得られていたが、今回、宇宙航空研究開発機構(JAXA)と共同で、国際宇宙ステーション日本実験棟「きぼう」でのタンパク質結晶化実験を実施したところ、3種類すべてのタンパク質において非常に良質の結晶が得られた。これらをSPring-8 BL44XU大阪大学蛋白質研究所超分子構造解析ビームラインにおいて、X線回折データ測定を行ったところ、Pz-A及びPz-Bでは1.5Å、AM-1では1.3Åと従来に比較し、良質のデータが得られた。その構造解析を行った結果、従来温度因子が高く見えていなかったループの領域等についても詳細な立体構造データを取得することができ、基質認識機構について新たな知見が得られた。宇宙ステーションで結晶化実験を実施した3種類のタンパク質については、いずれも高品質な結晶が得られた。具体的には、国際宇宙ステーションでの微小重力下で結晶化実験を行うことにより、タンパク質Pz-B結晶について地上実験では、2.0Å分解能が最高分解能であり、阻害剤近辺が見えていなかったが、それらの残基の側鎖について、宇宙実験で得られたデータ(1.6Å)から、コンホメーションの確認ができた。また、酵素AM-1について阻害剤との複合体で、1.38Å分解能のデータセットを取得した。このことにより、阻害剤がAM-1を阻害する機構について原子レベルで明らかにすることができた。難分解性動物タンパク質およびその分解物は、細胞発生・接着・保護、ガン浸潤、β-アミロイド形成などに関わる生体機能分子として、生体内で重要な役割を果たしていることが明らかとなりつつある。このように、再生利用の価値が高いことが認知されているにもかかわらず、これまで分解が困難であり分解生成物の調製が難しいことなどの理由から難分解性動物タンパク質の再生利用につながる研究は行われてこなかった。今回、京都府立大学の研究グループとともに、コラーゲン等の難分解性動物タンパク質を分解する酵素をさきに単離したGeobacillus collagenovorans MO-1株から2種類、Aneurinibacillus属細菌AM-1株から1種類の計3種類発見し、これらをPzペプチダーゼA、B(PzA, PzB)、およびAM-1と命名した。平成24年度は、これら計3種類の、難分解性動物タンパク質分解酵素について、それぞれ結晶化を行いX線回折実験に供することのできる結晶を得ることができた。これらの結晶をSPring-8及びPFの放射光ビームラインでデータ測定することにより、Pz-B及びAM-1についてはセレノメチオニン化タンパク質結晶のSeのK吸収端を用いたMAD法により、それぞれ1.8Å、2.3Å分解能で結晶構造を決定することが出来た。また、Pz-Aに関しては、類似のタンパク質の立体構造が既に報告されているので、その構造を用いた分子置換法により、1.9Å分解能での結晶構造を決定することが出来た。PzA、PzB並びにAM-1の結晶は研究実績の概要に述べたように、得ることができた。ただし、これらの結晶が与える分解能は2Å前後であるため、アミノ酸変異の導入やリガンド・阻害剤との複合体形成によって分解能を向上させる工夫を講じているところである。ただし、結晶が既に得られている状況から鑑みて、早期に立体構造解析を完了できると考えられる。またJAXAが主宰する、「宇宙環境を利用した高品質タンパク質結晶生成と精密立体構造の解析」プロジェクトに応募した結果、これら3つのタンパク質は宇宙での高品質結晶化実験の候補タンパク質に既に採択され、第4回実験ではPzBの非常に良質なPzB結晶が複数生成した。SPring-8でX線回折実験を行ったところ予備的ではあるが1.5Å分解能を少し超える程度まで反射がみられ、その立体構造を精密化中である。

また、PzA、PzB並びにAM-1の3種類のタンパク質及び、その阻害剤との複合体の計6種類のタンパク質は、第5回実験及び第6回実験での重点課題タンパク質として選定され、第5回実験では、PzBを除く計4種類のサンプルについて結晶が得られ、回折実験は未実施であるが、高分解能の精密なデータを得ることが期待できる。また、ひきつづき地上での結晶化実験と並行して、宇宙環境を利用した結晶化実験も行う。以上の状況から鑑みて、一年目の最大の課題であった、3種類のタンパク質のX線結晶構造解析による立体構造解析については概ね目処がついている。(1)PzA、PzB並びにAM-1の高分解能X線結晶構造解析すでに、これら3つのタンパク質について結晶化は出来ている。そこで、解離定数がμM未満の各種基質アナログや阻害剤との複合体結晶を調製し分解能を向上させることを計画する。適切な結晶が得られたら、立体構造を決定する。基本的に構造解析(位相決定)は分子置換法を用いるので順調に進むものと期待される。(2)立体構造に基づいた基質認識部位の同定得られた高分解能のPzA、PzB並びにAM-1の立体構造を解析して、基質の輸送経路や基質認識に関わると予想される残基に部位特異的な変異を導入して、活性の変化を追究する(すでに並行して進行中であり、有望な変異体がいくつか見つかっている)。また、変異の導入と立体構造変化との関係を探るため、注目すべき変異型については、結晶解析を行ってアミノ酸置換が立体構造に及ぼす影響を明らかにする。(3)国際宇宙ステーションでの高品質な結晶の生成と、高分解能構造情報の取得これら3種類のタンパク質は宇宙航空研究開発機構が主宰する「きぼう」を用いた宇宙での無重力空間を利用した高品質タンパク質結晶化実験(第6回)の搭載候補タンパク質に選ばれている。宇宙で結晶が得られた場合には、より高分解能の回折データを収集することが期待できるので、それを基に原子レベルでの基質反応機構の構造生物学的基盤を明らかにする。(1)PzA、PzB並びにAM-1の高分解能X線結晶構造解析:昨年度に引き続き、高分解能のX線結晶構造解析を行う。そのために必要な、培養精製試薬、結晶化試薬、複合体を形成する化合物、等の消耗品の購入を主な用途とする。また、現在使用しているPCが経年劣化で現在販売されているものと比較すると計算速度が遅くなっていることが否めないので、新規にPCを購入することを検討している。(2)立体構造に基づいた基質認識部位の同定:立体構造が明らかになれば、基質認識部位周辺のアミノ酸残基の点変異体を作製し、それらの構造解析や、溶液散乱、CD、活性測定等のデータから基質認識部位の特定を行う。従って、変異体作製のための遺伝子操作キットや、活性測定に必要な試薬等の消耗品の購入を主な用途とする。(3)国際宇宙ステーションでの高品質な結晶の生成と、高分解能構造情報の取得:昨年度に引き続き、宇宙での結晶化を並行して行う。結晶が得られた場合には、SPring-8等の放射光施設でデータ測定を行うので、そのための結晶をハンドリングする治具等の消耗品等の購入を主とした用途とする。
バッチ-連続複合プロセス操業システムの開発

1.閉ループスケジューリングシステム(昨年度までの研究で考案したもの)の電気炉-真空スラグクリーナー取鍋精錬炉-真空脱ガス装置-連鋳機/造塊装置プロセスへの適用:生産効率を最大にすることと、チャージ(バッチ)の流れを円滑にすることを調和させながら、電気炉におけるチャージの処理開始時刻、連鋳機におけるロットの処理開始時刻、台車の運用方法等を逐次オンラインで修正して行くことを試みた。昨年度までは、各チャージの連鋳機到着予想時刻のみをフィードバック量としていたが、本年度の研究では、システム全体の予想ガントチャート、各チャージの連鋳機前予測待ち時間をフィードバックすることとし、これらのパターンに基づいてスケジュールを修正するのが有効であることを確認した。2.知識ベースを用いた離散系システムシミュレータの試作:本研究の操業システムを種々のプラントに適用するためには、プラントの構成や運用方策の変更に柔軟に対応できるようなシミュレータの開発が重要である。そこで、プラントの構成と処理対象をフレームで、状態遷移則をプロダクションルールで表現し、前向き推論をもとにシミュレーションを実行するシミュレータを試作し、一つの製鋼プロセスに適用することによってその動作を確めた。3.直列形待ち行列の解析方法に関する-提案:バッチプロセスを含むプロセスの多くは直列形待ち行列としてモデル化され、そのスケジューリングには各段客数分布等が重要であるが、ポアソン到着、指数分布サービス時間の場合を除いては厳密な解析方法はまだ知られていない。そこで本研究では、拡散近似を用いた1つの近似解法を考え、それを致着時間、サービス時間ともにアーラン分布にしたがうプロセスに適用し、シミュレーションの結果と比較することによってその有効性を確認した。
現代の子ども達の生活リズムの乱れが心身の健康に及ぼす影響

1.小学生から大学生まで、学年段階が進むにつれて就寝時刻が遅くなり、それに伴って起床時刻も遅れがちになる。2.睡眠・覚醒リズムが著しく夜型に移行するのは、中学生の時期である。3.生活が夜型になると、睡眠評価も低下し、日常生活においても「だるさ」や「疲労感」を感じ、「イライラする」頻度も高くなる。4.生活リズムの乱れはつぎのような悪循環となりやすい。「夜更かし→自立起床ができない→朝食が食べられない→排便不規則→朝からでも疲れている→疲れたが口癖→学校であくび・居眠り→忘れ物→些細なことやわけもなくイライラ→昼間の活動量が低下→夜寝付きが悪い→夜更かし→」。この循環を断ち切るための生活の見直しが必要であると考えられる。5.これまでの研究の成果を踏まえて、つぎのような提案を行い、こども達の生活改善を促したい。提案1:成長期におけるこどもの心身の成長に睡眠は重要な役割を果たすことを、こども自身はもとより、親、教師も知ることが必要である。提案2:夜更かしは小学校高学年頃から徐々に始まり、中学生頃に顕著になっていく傾向とともに、情緒の安定性にも影響がみられるので、親や教師の生活指導にもこれらの観点が必要である。提案3:生活リズムの乱れを修正するために(1)少しずつでも就寝時刻を早める(2)休日でも起床時刻だけは大幅に変動させない(3)朝目覚めたらできるだけ自然の光を浴びる(4)毎日、少し汗ばみ体温が上昇するような運動をすること等が有効である。提案4:こどもの生活リズムを修正するためには、こどもの発達段階に合わせて、就寝時における親や家族の配慮と協力が必要である。現代の子ども達の生活は、おとなと同様に多様化、多忙化し、心身ともに疲労が蓄積しているのではないかと思われる様々な現象がみられる。そこで、現代の子ども達の生活にどのような問題点があるのか、生活リズムや心身の現状を把握し、健全な生活を維持していくための改善策を検討する目的で調査を実施した。平成10年度は中学生(有効票数425)と高校生(有効票数555)の生活実態調査を行った。結果はつぎのとおりである。中学生の生活実態:就寝時刻のピークは23:00-23:30(24%)で、23:30-0:30を合わせると約6割である。また0:30以降の生徒が21%である。睡眠時間は7時間が45%、6時間が23%で8割近くを占め、睡眠時間が「ちょうど良い」が40%であるが、「足りない」が57%で睡眠不足と感じている生徒が多い。起床時刻は64%が6:30-7:30の間で、「自然覚醒」が28%、「目覚まし時計」「家族に起こされる」が70%であり、寝起きが「すっきりしない」生徒が47%もいる。これらのことが影響して、学校では、「いつもだるい」が23%、「午前中がだるい」が16%、「午後がだるい」が36%である。イライラ感では「いつも」が12%、「たまに」が63%で、「疲れた」と「いつも言う」が37%、「時々言う」が55%である。高校生の生活実態:就寝時刻のピークは0:00-0:30(30%)で、0:00前が35%、0:30以降が36%である。睡眠時間は7時間が37%、6時間が34%で、睡眠時間が「ちょうど良い」が37%、「足りない」が58%である。起床時刻は61%が6:30-7:30の間で、「自然覚醒」が29%、「目覚まし時計」「家族に起こされる」が71%で、寝起きが「すっきりしない」

生徒は54%である。学校では「いつもだるい」が42%、「午前中だるい」が19%、「午後だるい」が29%である。イライラ感は「いつも」が13%、「たまに」が67%で、「疲れた」と「いつも言う」が48%、「時々言う」が46%である。全体的には、中学生から高校生へと発達段階が上がるにつれて、生活が夜型に移行していく傾向が認められた。まず、平成10年度の中学生(425人)、高校生(555人)の生活調査の結果と平成8年度から10年度にかけて行った小学生(870人)、大学生(824人)の同様の調査結果を総合して、発達段階による子どもの睡眠・覚醒リズムと心身の状況や、家庭、学校生活との関連を分析した。その結果、小学生から大学生まで、学年段階が進むにつれて、就寝時刻が遅くなり、小学校低学年では、86.3%が22:00前に就寝するが、大学生では、69%が0:00以降である。それに伴って、起床時刻も学年とともに遅くなり、小学生では98%が7:30前に起床しているが、大学生では66.5%が7:30以降である。このように、睡眠が夜型に移行していく段階を検討したところ、中学生期における変化が最も著しく、0:00以降の就寝率が中一で17.7%、中二で36.3%、中三で54.7%となった。起床時刻の遅れともあわせて検討すると、中学二年生が睡眠・覚醒リズムの夜型化の境界であると考えられる。そこで、中学生に焦点を当てて分析すると、睡眠評価も低下し、日常生活においても、「だるさ」や「疲労」を感じ、「イライラする」頻度も高くなることがわかった。つぎに、調査結果をふまえ、実験観察記録に同意した小中学生を対象に睡眠・覚醒リズムと生活行動の関連を検討する実験を行った。7日間ActiTrack(連続行動測定器)を装着した中学生女子の結果を分析したところ、睡眠・覚醒リズムが乱れ、睡眠評価が低くなるに従って日中の活動量も低下することがわかり、睡眠の質と覚醒時の行動が連動することが示唆された。同様の実験観察を他の小中学生を対象に34日ずつ行ったが、共通に認められた傾向として、週末の睡眠・覚醒リズムの夜間へのずれ込みと、その後の睡眠評価の低下、および活動量の低下であり、現代の子ども達が休日に活発に活動していない姿が見えてきた。平成10年度、11年度に分析した、小学生から大学生までの生活実態調査の結果を踏まえて、睡眠・覚醒リズムと日常生活の関連について、実験観察記録を試みた。これまで、中学生女子を被験者に予備的に実験した結果では、睡眠・覚醒リズムが乱れて、睡眠評価が低くなるに従って、日中の活動量(ActiTrackによる連続行動測定結果)が低下する傾向が認められ、睡眠の質と、覚醒時の行動が連動する事が示唆された。そこで本年度はさらに睡眠評価(効果)と日中の活動量の関連を検討するために、児童(6歳女、11歳男、12歳男)3名、大学生6名(2022歳、男2名、女3名)を被験者に各被験者7日間連続生活記録観察をおこなった。児童の延べ生活記録日数は23日で、大学生は43日であった。その結果、次のような傾向が認められた。(1)日常生活における「遊び」行動については、児童の場合延べ日数のうち「遊び」行動があった日は100%でそのうち、6割が屋内での遊びであった。大学生は、延べ日数のうち、「遊び」行動があった日が55%で、そのうち37%が屋外、8%が屋内の遊びであった。しかし、児童の屋外遊びは散歩、プール、野球など活発な動きを伴うものであるのに対し、大学生の屋外遊びは、買い物、おしゃべり、ドライブといった、社交的、あるいは精神的なリフレッシュのための遊びで、活動性は児童のように高くないことが特徴である。
結晶の円二色性スペクトル

結晶の複屈折は旋光能よりも3桁も大きいために測定が難しく、今までほとんど測定されていなかった。このため数年前、結晶用精密旋光能測定装置HAUPを化学の分野で初めて導入した。次いで、結晶の円二色性スペクトルを測定するために、HAUPの進化型ともいうべき、異方性物質光学定数測定装置を設計、製作した。本装置の光源はキセノンランプを用いており、390?800nmの連続波長で測定できる。試料は水平にセットし、光は上から垂直に入射させる縦型である。試料の温度制御部はペルチェ素子を用いており、室温よりも10°C低い温度から最高100°Cまで変えることができる。円二色性スペクトルの測定では、二次元法により沢山のデータをとる必要があるため、測定ソフトもかなり充実したものを作製した。装置の性能をチェックするために、標準試料として石英を測定した結果、良好な結果が得られた。有機結晶については、現在、検討中である。有機結晶は柔らかいために、研摩が当初より問題になっていたが、柔らかい酸化鉄の研磨剤で最終仕上げをすることにより、測定誤差の小さい満足し得る結果が得られるようになった。その結果、トリプタミンと4-クロロ安息香酸のキラル複合結晶中に形成されたヘリックス構造により、大きな旋光能が誘導されることを明らかにした。本研究は、キラル有機結晶の光学活性の研究のランドマークとなった。また、イソプロピルベンゾフェノン誘導体をモデル化合物として絶対不斉合成の設計を検討していたが、この程、類似の化合物の結晶構造から情報を得ることにより、絶対不斉光環化反応に成功した。私は結晶の光学活性に興味を抱き、この数年問、今までほとんど測定されなかったキラル有機結晶の旋光能を、市販機第1号の結晶用光学活性測定装置HAUP(High Accuracy Universal Polarimeter)を用いて測定する研究を行ってきた。しかしながら、化学の分野では円二色性スペクトルが重要な位置を占めており、旋光能を明らかにするだけでは不十分である。そこで残る問題として、キラル結晶の円二色性スペクトルの測定を可能にするべく本研究を開始した。HAUPの特徴は、(1)厳密な原理式の導入、(2)偏光子、検光子による寄生楕円率を考慮したこと、(3)光学系を単純化し系統誤差を最小にとどめたことにあり、原理的に優れている。結晶の円二色性スペクトルの測定には、二次元測定法、多波長レーザーの導入など、現在のHAUPを若干改造することにより可能と考えられた。このため当初、現在のHAUPのを改造する方向で種々検討を重ねたが、その結果、改造よりも新たな次世代型HAUPを作る方が将来的に有利との結論に至った。新しい測定装置は連続波長を用いており、また、試料温度は0100°Cの範囲で制御できるなど、結晶の円二色性スペクトルの測定に必要不可欠な条件を満たしている。同時に旋光能の波長依存性である旋光分散も求めることができる。すなわち新HAUPによって、キラル結晶すべての光学活性特性(円二色性、旋光能、旋光分散)が測定できる。勿論、複屈折、直線二色性も求まるので、結晶のすべての光学特性の測定が可能となった。これは世界中で初めてのことでありその意義は大きい。この程、新装置が完成した。私は、今までほとんど測定されていなかった有機結晶の旋光能を、結晶用光学活性測定装置HAUP (High Accuracy Universal Polarimeter)を用いて測定を可能にする研究をここ数年間行い、分子配列と旋光能の関連性を初めて明らかにすることができた。このため次は、化学において重要な位置を占める円二色性スペクトルも結晶状態で測定できるようにしたいと思い、昨年度、次世代型HAUPを作製した。

本装置は光源としてキセノンランプを用いており、紫外から可視領域までの連続波長で測定可能である。本装置により、結晶の円二色性スペクトルばかりではなく、すべての光学活性特性(円二色性、旋光能、旋光分散)を測定できる。勿論、複屈折、直線二色性も求まるので、結晶のすべての光学特性の測定が可能である。本装置を用いて円二色性スペクトルを測定するには、従来の一次元法(簡便法)ではなく、二次元法により沢山のパラメーターをとってデータ処理する必要がある。このため本年度は、測定を自動化するためにソフトの開発を行った。この結果、オンラインでの連続自動測定が可能となり、大幅な省力化、高機能化を図ることができた。本装置により、まず標準試料の右水晶、左水晶の光学活性を一次元法および二次元法を用いて測定し、良好な結果を得た。以上、この5年間にわたって行った結晶の光学活性に関する本研究により、従来ほとんど測定されていなかった有機結晶の光学活性特性(円二色性、旋光能、旋光分散)をすべて測定できるようにした。本研究は高く評価されており、これからのキラル固体化学の構築、材料化学、生命化学への応用に向けて大きな一歩を踏み出すことができた。
障害児・者の生涯発達に関わる臨床心理学的援助システムとネットワークの開発

幼児期・学齢期の障害児・軽度発達障害児の発達援助技法の検討と担任保育士・教員への支援を「コンサルテーション」の視点から専門機関と保育園・学校等々の連携の体制を作るとともに、それらの子どもの対人関係スキルの向上の援助方法を提案できた。学齢後の肢体不自由障害者への動作及び心理的援助システムの試みを行い、地域での援助システムのモデルを提示した。また、発達障害者をもつ大学生への支援の問題点と方法を明らかにした。1.幼児期・学齢期の障害児・軽度発達障害児の発達援助技法の検討と担任保育士・教員への支援のあり方を「コンサルテーション」の視点から明らかにするため、(1)発達援助技法の検討のため本学「総合臨床心理センター(センター)」に来談する障害幼児・障害児童生徒に対する援助を障害の種類、発達特徴などの基づく分類を行い、援助形態(集団<心理劇>・個別)毎の援助活動を実施した。(2)さらに、援助技法(遊技療法と動作法)による発達変容の過程を分析するため実践活動を実施した。2.担任保育士・教員への支援のあり方を「コンサルテーション」の視点から明らかにするため、(1)保育及び教育的支援のための親への意識調査を行った。(2)保育園・学校における障害児への対応に関する調査票及び幼児・児童生徒の保護者に対して子ども発達状況認識と保育園・学校等への要望等に関わる調査票を作成した。(3)通常学級に通う発達障害児の保護者及び担任に対して、それぞれの立場からの実態やそれぞれの問題点を明らかにするための面接調査を行った。その結果、担任との相互理解が必ずしも出来ていないこと、学級内の他児童と保護者に理解してもらうことの困難性が明らかになった。3.在宅障害者の心理的適応状況の実態調査を障害者用と家族用の質問票を作成し、質問票調査を行った。また、今後の心理的援助に向けての問題点を明らかにするために、就労及び不就労の身体障害者に対して心理的適応状態と問題点についての面接調査を行った。その結果、動作不自由と心理的な問題があることが分かった。4.障害児者への心理的援助(心理的リハビリテイション)について南アジア(インド・イラン)での実践活動の共同調査を行った。1.軽度発達障害児の自己への疑問を生じる時期と内容を検討し、その疑問と告知の時期と内容の実態について検討した。その結果,自己への疑問の有無.方向性に関しては,注意欠陥/多動性障害児.高機能広汎性発達障害児の両群の間に有意差はなかった。ただし,疑問の方向性に関しては,両群共に,小学校低学年では特別な支援環境への疑問が多く,高学年になると自分の特性への疑問が加わる傾向にあった。障害の告知に関しては,注意欠陥/多動性障害児の方が障害の告知を受けている人数が多い傾向がみられた。また,内容に関しては,本人の特性を伝えること・肯定的な評価を行いながら伝えていることが示された。2.離島における障害児・者への生涯発達援助のシステムつくりのため沖縄県宮古島市における心理リハビリテイションによる援助法を導入し、2回の訓練キャンプ(平成18年11月1617日、12月25日28日)を実施し、その結果の調査を行った。その結果、養護学校小中高の児童生徒は学校での自立活動など発達援助教育があるが、学校とは異なる地域での援助システムも必要があり、特に学齢期を越えた青年期障害者は在宅が多く、地域での心理リハビリテイション活動などの援助システムが不可欠であることが、本人及び保護者からニーズが大きいことも分かった。今後は、このシステムを継続するための支援ネットワークの構築が課題となる。3.過疎地区の在宅高齢者及び障害高齢者への援助システムとネットワークを検討すべく、熊本県八代市大川地区において水俣市との連携によって地域在宅高齢者の心身の活性化に向けた動作法と回想法による援助活動と調査を実施した。その結果、高齢者の活性化が促進され、参加高齢者からの評価も高く、継続のニーズも多く有効性が認められた。継続の体制作りが課題となった。4.研究成果の一部をアテネでの国際応用心理学会において発表した。5.インド及び韓国において、障害児・者への発達援助の体制について調査し、資料の収集を行った。1.普通小中学校に通う発達障害をもつ小中学生に対して対人関係スキルの向上を計っての小グループアプローチを行った。グループアプローチは、参加メンバーの特徴に従い、(1)集団プレイセラーピーを中心とするグループ、(2)心理劇的な場面構造でのロールプレイを行うグループによるセラーピーを実践した。これにより、それぞれのグループ、メンバー相互の関係の深まりと相互理解が向上した。2.地域で生活する脳性マヒ者(19歳42歳)の動作の改善と心身の弛緩体験による生活の質の向上を計るための動作法の地域援助プログラムを作成し、2泊3日での実践を行った。その結果、動作改善のみならず参加者の相互交流が一層活性化された。

3.障害児教育担当の教諭へのコンサルテーション活動を中心にして、学校と家庭との効果的な連携のあり方について検討した。対象児は、多動で発達障害が疑われる小学生、ADHD傾向のある特別支援学校中学部生徒、特別支援学校高等部生徒で攻撃的行動を示す生徒などである。また、効果的な学校、家庭、地域資源(特別支援相談員)の協働的アプローチについても言及するために、特別支援相談員へのコンサルテーション過程について分析、検討した。4.広汎性発達障害児のエコラリア機能の発達過程を明らかにすることを目的とした。対象は16名の広汎性発達障害児の保護者であった。その結果、自己刺激的な機能が最も早く生起して、常同的な質問が最も遅く生起するという過程が見出された。また、発達に伴って、消失する傾向を示す機能は知的機能との関連が示唆された。5.青年期の発達障害、特に学生相談においてアスペルガー症候群の大学生に対する修学支援を継続して行った。彼らの問題は、対人関係の構築の難しさ、その他に生活や時間等の自己管理の難しさがある事が分かり、周辺の関係者、たとえば家族、教員、相談員が随時連携をとり、本人の注意を喚起することが不可欠であることをあきらかにした1.普通小中学校に通う発達障害をもつ小中学生に対して対人関係スキルの向上を計っての小グループアプローチを行った。グループアプローチは、参加メンバーの特徴に従い、(1)集団プレイセラーピーを中心とするグループ、(2)心理劇的な場面構造でのロールプレイを行うグループによるセラーピーを実践した。これにより、それぞれのグループ・メンバー相互の関係の深まりと相互理解ぶ向上した。2.地域で生活する脳性マヒ者(19歳42歳)の動作の改善と心身の弛緩体験による生活の質の向上を計るための動作法の地域援助プログラムを作成し、2泊3日での実践を行った。その結果、動作改善のみならず参加者の相互交流が一層活性化された。その結果,自己刺激的な機能が最も早く生起して,常同的な質問が最も遅く生起するという過程が見出された。また,発達に伴って,消失する傾向を示す機能は知的機能との関連が示唆された。彼らの問題は、対人関係の構築の難しさ、その他に生活や時間等の自己管理の難しさがある事が分かり、周辺の関係者、たとえば家族、教員、相談員が随時連携をとり、本人の注意を喚起することが不可欠であることをあきらかにした