hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
既存住宅活用型シェア居住における社会的意義と間取りの制約に関する研究

現代的な住宅の問題として、住まいを起点したコミュニティは、家族世帯がある一定の期間定住し形成されることを前提としており、非家族世帯の視点に欠けている。本研究では、日本における自主運営型のシェアハウスと、ドイツの多世代交流施設(MGH)を対象に、地域社会における新しい居住スタイルのあり方や空間の使われ方を探求することをも目的としている。その結果、自主運営型のシェアハウスでは、立地によって異なる役割を持つこと、職住や世代などの混在のきっかけを担っていること、MGHでは、プログラムやワンストップ機能を持つカフェを橋渡しとする動線計画により、自然な形での多世代交流場面創出が行われていることを示した。本研究の目的は、持ち家オーナーが住まいの一部をシェアする事例を対象とし、シェアをするに至った経緯、そこで築かれる人間関係のあり方、運営方法、生活の実態から、間取り面の安全性について考察を進めることにある。空き家活用としてのシェアハウスについては、既にシェアハウスの設計、運営を専門とする業者も多く存在し、一つの形態が出来上がっていると言える。現実問題、これから空き家になりうる潜在的空き家(オーナーが高齢化している、オーナーが時々使うが日常的には人が住まない)の数の問題、また第三者が介入しにくいという観点からも、これら潜在的空き家に着目する必要があると言える。そこで本論では、潜在的空き家の活用の可能性を探るため、初年度は、業者が介在するシェアハウスのうち、持ち家オーナーも一緒に住む事例、仏間を残したままシェアハウス化した事例について、仲介業者及び居住者にヒアリングを行った。また、世田谷区を中心にNPOが若者と高齢者をマッチングするオーナー宅活用型シェア居住=ホームシェア事例についても、新たに60代夫婦の離れを活用した事例と、60代単身女性がご自宅を活用した事例についてもヒアリングを行った。これらの事例は個別性が高く、一概に形を示すことは難しいが、長年住んできた愛着のある家と、ご自身と、若者のシェアメイトとの距離感をオーナー自身がどのような生活をしたいのかという観点から調整していることが一つの特徴と言える。仏間を残した事例では、親族が戻れる家を残したことでいつでも立ち寄れる場所ができたこと、一方入居者にとっては、ときどきやってくる親戚のような感覚を抱くという人間関係を築いている。一方、シェア居住のみではなく、短期間自宅を解放するAir BnBについては、webサイトから全体の間取りやオーナーの傾向をつかむべく情報収集中である。本年度は、住まいを中心とした異世代交流事例として、ドイツ連邦家庭・高齢者・女性・青少年省(Federal Ministry for Family Affairs, Senior Citizens, Women and Youth)による多世代ハウス(以後、MGH)の現地調査を行った。ドイツにおける多世代ハウスは、1住むための多世代ハウスと、2地域インフラとしての多世代ハウスに大別されるが、本研究では、後者の多世代ハウスを対象としている。空間的な特徴としては、既存の法人施設(幼稚園、高齢者施設、NPO等が運営する町のカフェなど)の一端にパブリック・リビング(開かれた集いの場)の設置が条件となっており、交流活動を行う場であるとともに、食卓を囲むことで交流を図るというコンセプトに基づき、カフェを提供している事例も見られた。行動観察調査は、数あるMGHのうち、ベルリン北部に位置するモアビット地区にあるMGH Sと、ザルツギッターという郊外にあるMGHを対象とした。行動観察調査は、開館時間である平日9時から18時に行い、利用者の行動をプロットした。調査日におけるMGH Sの来場者は、214名、平均滞在時間は、44分であったが、既存の母体施設利用者が施設利用時に立ち寄りやすいデザインや、パブリック・リビングルームの大らかな空間構成と、変化に富んだ家具配置、そして食事やカフェを提供するといった機能との相乗効果が、自然な形での多世代のコミュニケーションにつながっていると考えられる。また、日本におけるシェアハウスにおいても、規模別、また改修事例については元の建物種別ごとにその運営実態のインタビューを行った。また関東にある3シェアハウスにて、行動観察調査を行い、立地条件、居住層、シェアハウスの共有空間とアクセス空間とあり方によって、共有空間の使われ方に違いがあることを把握した。ドイツ連邦家庭・高齢者・女性・青少年省(Federal Ministry for Family Affairs, Senior Citizens, Women and Youth)による多世代ハウスについては、インターネットによる事前調査では、住居としての多世代ハウスを想定していたが、実際調査をしてみる、インフラとしての多世代ハウスであったなど当初予期していた事項との相違はあったが、課題想定をしていたより大きな枠組みで捉えることができたと思われる。本年度は、1)多世代の家プロジェクトの現地調査と、2)国内での居住者による自主運営(事業者が介在しない)のシェアハウスの運営実態・暮らし方調査を行なった。1).ドイツ連邦家庭・高齢者・女性・青少年省による家族支援のための環境整備と世代間関係の強化に焦点を充てた多世代ハウスプロジェクトについて、シュツットガルトとベルリンという都市部での利用実態に着目し、事業者へのインタビューと利用者の行動観察調査を行なった。本プロジェクトは、既存の福祉団体や保育園を運営する法人、NPOや市民ボランティア団体など既存の母体団体が、新たに世代の交流というコンセプトを取り入れ、従来の活動の幅を広げるかたちで展開される。バブリック・リビングルーム(開かれた集いの場)の設置が条件となっており、交流活動を行う場であるとともに、食卓を囲むことで交流を図るなど「施設びらき」を行う。行動観察調査より、施設が提供するプログラム(ヨガ教室、高齢者の体操教室、幼稚園の送り迎えなど)の前後に、パブリック・リビングの利用が増える。近隣の社会人がレストラン変わりにパブリック・リビングを訪れるなど、世代や職業に関わらず利用されている。

コーヒータイムに時々訪れる職員や子供を介してのコミュニケーションが多く見られた。2).本年度は、立地によって異なるシェアハウスの役割を把握するため、地方都市や地方、郊外での調査を行った。調査より、被災地のシェアハウスでは移住者の窓口的役割、地方の商店街では新たな若者まちなか居住としての役割、地方都市では転勤による新規転入者の交流のきっかけとしての役割を果たしていることを把握した。また、郊外住宅地では、シェアハウスの一部を、店舗・アトリエ・事務所を併設した事例もあり、住むことに特化してきた住宅地の新たな可能性と言えるだろう。現代的な住宅の問題として、住まいを起点したコミュニティは、家族世帯がある一定の期間定住し形成されることを前提としており、非家族世帯の視点に欠けている。本研究では、日本における自主運営型のシェアハウスと、ドイツの多世代交流施設(MGH)を対象に、地域社会における新しい居住スタイルのあり方や空間の使われ方を探求することをも目的としている。その結果、自主運営型のシェアハウスでは、立地によって異なる役割を持つこと、職住や世代などの混在のきっかけを担っていること、MGHでは、プログラムやワンストップ機能を持つカフェを橋渡しとする動線計画により、自然な形での多世代交流場面創出が行われていることを示した。当初の予定通り、日本におけるホームシェア事例やオーナーも介在するシェアハウスの調査を行っている。また、Air BnBなどwebを中心とした情報収集を行い分析を進める。次年度以降の海外調査については、現地協力者から助言を仰ぎながら2015年度夏以降の本調査に向け、文献調査、情報収集を行っている。今年度は、ドイツ連邦家庭・高齢者・女性・青少年省(Federal Ministry for Family Affairs, Senior Citizens, Women and Youth)による多世代ハウスのうち子ども施設をベースにした多世代ハウスの調査が中心であったので、今後は、福祉施設をベースとした多世代ハウスにおいても、調査を進める。また、日本におけるシェアハウスについても、元建物種別のバリエーションを増やし、転用の可能性についても考察を進める予定である。建築計画次年度は、ドイツの多世代居住に関する調査を実施予定である。また、ドイツフライブルクなど大学町を中心としたホームシェアの取り組みについても、その募集方法、運営、管理等について調査を行う。引き続き、日本において、ホームシェアやAir BnBなど住まいの一部をシェアする形態についても実測、インタビュー調査を行う予定である。初年度の海外調査を予定していたが、今年度、次年度とずれ込んだため、次年度使用額が生じました。
『農夫ピアズ:Aテキスト』の全20写本転写テキストの電子化による頭韻研究

中世英文学頭韻詩『農夫ピアズ:Aテキスト』には20の写本が存在するが、従来Skeat校訂本の基本写本であるV写本(Bodleian Library,Oxibrd)とKane(1960)とSchmidt(1995)校訂本の基本写本であるT写本(Trinity College,Cambridge)が『農夫ピアズ』研究の中心となってきた。本研究ではAテキスト20写本の大半の所蔵館を訪れて写本調査を行った。さらに、写本資料の大半を高精度のカラー画像を入手してデジタル化した。この中で、K写本がBテキストとCテキストから多くの行が混入していることが明確になり、P写本は断片でありながら特異な表現を含んでいることが明らかになった.また、平成16年度以降、情報工学の「写本別転写テキスト書き分けプログラム」を応用して各写本の「電子化転写テキスト」を世界で初めて完成し、カラー画像と転写テキストを並置した.検索ソフトを活用すれば転写テキストの特定の写本資料から使用語彙を検索できる体制を築いた。電子化テキストをWEBアーカイブとして公開すれば世界中の研究者に『農夫ピアズ:Aテキスト』データベースの提供が可能になる.さらに、情報工学に基づく「文字認識」研究も1550年出版の『農夫ピアズ』の文字資料を研究を進めた.様々な問題が存在することが明らかになるとともに、「特殊撮影」と「顔料分析」などの研究を視野に入れて望ましい成果を挙げられる可能性がでてきた。また、平成16年度以降、情報工学の「写本別転写テキスト書き分けプログラム」を応用して各写本の「電子化転写テキスト」を世界で初めて完成し、カラー画像と転写テキストを並置した.検索ソフトを活用すれば転写テキストの特定の写本資料から使用語彙を検索できる体制を築いた。1.PPLA写本の基本写本であるCambridge, Trinity College R.3.14のカラー・フィルムを入手したことを始め、全20写本のカラー・フィルム、カラー・スライドなどを入手した。3.各写本の全ページを印刷して整理し、Kaneの校訂本と注釈を利用して各写本の転写テキストを作成する準備を行った。4.全20写本の画像データをコンピューターに入力し、デジタル画像データを完成した。このデータによって、PPLAのデジタル画像データが整い、転写テキストの作成に有効な研究環境を整理した。5.同時に、写本文字認識を処理する方法を委託業者とともに模索し、海外の研究者の動向を調べた。『農夫ピアズ』には、A, B, C, Zの4テキストが存在し、A, B, Cテキストにはそれぞれ20-30写本が存在するので、写本研究を進める意義が大きい。その中で、Aテキストの20写本を画像デジタルとしてデータベースを作成し、転写テキストを同時に作成すれば従来の校訂本作成だけでは得られない言語資料を体系的にデータべース化することが可能になる。平成17年度における研究実績の概要は次のようであった。4.初期印刷本の文字認識を昨年度に引き続き行い、1550年のRobert Crowley ed. Piers Plowman: The B-Textではある程度効果が得られることがわかった。また、写本の文字認識は平成17年度文部科学省のオープン・リサーチ・プロジェクトトに選定されて継続が可能になった。1全20写本の資料収集を終えて、デジタル画像とカラーファクシミリの作成を行った.これにより、パソコン上で画像に拡大機能を付けたPPLAのデータベースを完成し、従来よりも高品質の資料により精密な研究が可能になった。2「写本別書き分けプログラム」と「頭韻語コンコーダンス作成プログラム」の完成により、これまでに一定の研究が進んでいる、中世英文学の作品を組織的に研究することが可能になった.写本間の語彙的な相違も容易に把握できるようになり、頭韻などの文体的な相違も明瞭に示す可能性が出てきた.これらの効率的な作業は未開拓の研究分野に大きな役割を果たすことになる.3 PPLA写本を所蔵する、New York, Morgan LibraryとBritishLibraryを訪問し、写本と転写テキストを確認する作業を行った.中世英文学頭韻詩『農夫ピアズ:Aテキスト』には20の写本が存在するが、従来Skeat校訂本の基本写本であるV写本(Bodleian Library,Oxford)とKane(1960)とSchmidt(1995)校訂本の基本写本であるT写本(trinity College,Cambridge)を中心に研究を進め、本研究ではAテキスト20写本の大半の所蔵館を平成19年度までに訪れて写本調査を行った。この中で、K写本がBテキストとCテキストから多くの行が混入していることが明確になり、P写本は断片でありながら特異な表現を含んでいることが明らかになった.また、情報工学の「写本別転写テキスト書き分けプログラム」を応用して各写本の「電子化転写テキスト」を世界で初めて完成し、カラー画像と転写テキストを並置した.検索ソフトを利用して写本別の使用語彙や使用箇所を検索できる体制を確立した。電子化テキストWEBアーカイブを完成すれば世界中の研究者に『農夫ピアズ:Aテキスト』データベースの提供が可能になる.

さらに、情報工学に基づく「文字認識」研究も1550年出版の『農夫ピアズ』の文字資料を硬究を進めた.「特殊撮影」と「顔料分析」研究により成果を挙げられる可能性がでてきた。
電子ビーム励起高出力エキシマレーザによる大面積半導体薄膜のアニール

平成4年度から6年度の3年間の研究成果の概要を以下に示す。1.本研究の真空蒸着法により作製したα-Si:Hは、従来の低真空化学気相堆積法により作製した膜に比べ膜中の水素含有量が少なく(SIMS測定の結果)、またレーザーアニール時における水素の突沸による膜の損傷の少ない良質な膜であることが分った。2.試作した多面鏡反射板ホモジナイザーを用い、レーザ照射面内でのエネルギー均一化を計ることができ、均一な結晶化が行われることが明らかになった。3.アニールによるグレインサイズはas-grown Si薄膜の膜厚に依存し、Si薄膜が溶融深さよりも薄い場合には、結晶化速度が遅くなることが明らかになった(SEM観察の結果)。これは主に膜中でのエネルギー蓄積量が膜厚により変化するためであり、膜厚が薄い場合は熱エネルギーの蓄積により膜全体が溶解温度に達しやすくなり、結晶化速度が遅く、熱平衡が持続されやすい状態となるためであると説明される(シュミレーションの結果)。4.レーザーアニール時に基板加熱することで熱平衡状態の持続を促進し、グレインサイズを拡大化させることができ、アニールの均一性の向上が可能となった。5.レーザーパワーについては最適値があり、特に高い出力の場合はSi薄膜表面にヒルロックが発生しやすくなることが分った。以上本研究では主に真空蒸着法によるα-Si薄膜の作製、多面鏡ホモジナイザーによるアニールの均一化、アニール時の基板加熱効果について検討し、グレインサイズが大きく、かつ比較的大面積について均一性の高い良好なレーザーアニール技術を確立することができた。1,科研費により購入した超高真空油拡散ポンプが8月末に納入され,Eガン,基板加熱装置,シュラウドなどの組み込みを行い,高真空中でシリコンの分子線デポジションを行えるようにした。またガラス基板上への多結晶シリコン膜のデポジションを行い,成長速度,基板温度などをパラータとした成長実験を継続中である。2.ガラス基板上にプラズマCVDにより形成した厚さd=500A^^°およびd=1000A^^°のアモルファスシリコン膜にエキシマレーザ(KrF,248nm)を照射しアニール効果を検討した。d=500A^^°,d=1000A^^°の双方の試料ともエネルギー密度J=110mJ/cm^2付近から導電率が変化し始め,J=130mJ/cm^2付近で急激な導電率の変化を示した後飽和の傾向を示し,J=130mJ/cm^2付近で膜の融解が起こっていることが明らかになった。またJ=180mJ/cm^2を越えると膜が蒸発により局所的に消失してしまうため,d=5001000A^^°の膜のKrFエキシマレーザによるアニールにおけるエネルギー密度は100180mJ/cm^2の範囲に保つことが重要である。3.2で述べたエキシマレーザアニールを行う際に,赤外線加熱により基板を200°Cおよび300°Cに加熱しながらアニールし,基板加熱の効果を調べたところ,基板温度が高い程導電率が増加することが分った。d=500A^^°の試科を300°Cに加熱しながらアニールした試料ではホール効果測定の可能なものも得られ,J=150mJ/cm^2の照射で移動度が20cm^2/V・S,J=170mJで63cm^2/V・Sのものが得られた。基板加熱の効果はレーザ照射による触解・再結晶の過程で冷却速度が制御され,結晶粒の増大などを通してアニール効果を保進しているものと考えられる。

初年度の結果より分子線蒸着法によりガラス基板上に形成した多結晶シリコン膜のエキシマレーザ(KrF、波長248nm)における融解エネルギー密度のしきい値ならびに融解・再結晶化の有効性が明らかになったので、引き続き以下の研究を行った。1、レーザ照射による多結晶シリコン膜の融解においては面内のパワー密度の均一性が極めて重要で、エキシマレーザ固有の面内不均一性や干渉の効果はアニールの大きな障害となる。本研究では新しい試みとして個々に姿勢制御した9枚のアルミ蒸着反射鏡によりレーザビームを分割多重することによる均一化を行ったところ損失や干渉効果の少ない極めて良好なホモジェナイザーを実現することが出来、以下の実験は多面鏡ホモジェナイザーを用いて行ったものである。2、分子綿蒸着シリコン膜は水素化シリコン膜の場合のような水素の突沸が無いため融解のしきいエネルギー密度(110mJ/cm^2)の2倍程度までエネルギーを増加出来るが200mJ/cm^2を越えるとやはり膜の飛散が起こる。そこで180mJ/cm^2で多数回ショットを試みたところ次第に飽和の傾向は示すが、ショット回数とともに導電率が増加の傾向を示し、エネルギー密度の増加とともにレーザのショット回数、つまり融解再結晶の反復とともに結晶粒が増大していることが分かった。3、エキシマレーザーによる融解再結晶を行った後に熱処理を施すと更に導電率が増加し結晶性の改善が見られた。レーザアニールによる融解再結晶化の過程では再結晶速度が早いため欠陥の発生は防ぎ難いが熱処理により改善できる。4、ガラス基板のかわりに(100)Si基板に分子線蒸着した多結晶シリコン膜は基板界面に自然酸化膜が介在するためにas grownでは(111)に配向した多結晶となるが、これをエキシマレーザにより融解再結晶化すると(100)に配向したエピタキシャル層が得られることが分かった。この方法はシリコン基板上に多結晶とエピタキシャル成長層部分を選択的に形成する新しい方法として期待される。初年度(平成4年度)および次年度では、分子線蒸着法によりガラス基板上に成膜した非晶質シリコンをKrFエキシマレーザによりアニール処理を行い、溶融再結晶化による多結晶シリコン膜の作製について検討を行った。最終年度(平成6年度)では、さらに多結晶シリコン薄膜の良質化を進めるために以下の実験を行った。1.エキシマレーザビームの照射面内についてのエネルギー密度の不均一性を抑制し、より効果的なアニール処理を行うために、エネルギー損失が少なく、かつ安価に照射面内での均一化を行える多面鏡ホモジナイザーを試作した。その結果、アニール処理の面内均一化を計ることができた。2.同一エネルギー密度のレーザビームを使用した場合では、レーザ照射回数と共にグレインサイズおよびアニール深さは増加することが分ったが、レーザ照射回数の増加と共にその効果は飽和傾向を示した。レーザパワーを300mJ/cm^2程度と高くすることにより、一回のレーザ照射でも十分均一なアニールを行うことが確認され、レーザアニール処理の高効率化を実現できた。3.レーザ照射と同時に基板の加熱を行うことにより、ガラス基板への熱拡散が抑制され、シリコン薄膜全体を溶融させることが可能であることが分った。またレーザ照射時の基板加熱は、薄膜の冷却速度の遅延により凝固速度が低くなり、その結果グレインサイズの拡大化およびグレイン内部の結晶性向上に効果があることが分った。以上より、エネルギー密度300mJ/cm^2、基板加熱300°Cでレーザアニールを行った結果、膜厚100nmでは平均0.2μmのグレインサイズを有する多結晶シリコン膜を得ることができた。
卵巣原発の難治性明細胞腺癌治療おけるＨＢ－ＥＧＦの標的分子としての意義

本研究は難治性卵巣癌に対する新たな治療戦略として開発を進めている、HB-EGFを標的とした分子標的治療薬のより詳細な生物学的な意義を明らかにすることを目的としています。HB-EGFは直接癌の増殖を増強するだけではなく、血管新生や脂質代謝などに関わる遺伝子とお互いに調節し合うことで、増殖・浸潤能を強くすることがわかりました。この結果は、HB-EGFを標的とした新たな癌治療に対する感受性の診断薬を作成することに寄与します。本研究は、卵巣癌のなかでも難治性な明細胞腺癌の治療法の開発を目指して、卵巣癌の標的分子であるHB-EGFと明細胞腺癌の遺伝子背景との関連を明らかにし、標的分子としてのHB-EGFの意義を検証することを目的とした。HB-EGFは、三次元増殖に必須の分子であることを利用して、2次元培養条件下の細胞とマトリゲルを用いた3次元培養条件下の細胞、SCID MOUSE上で形成された腫瘍から抽出したRNAを比較して、3つのアレイシステム(発現アレイ、microRNAアレイ、CGHアレイ)を利用しHB-EGF発現に関わる遺伝子の探索を行った。発現アレイの結果により、HB-EGFの発現亢進とともに血管新生に関わる遺伝子群、脂質代謝に関わる遺伝子群の亢進を認めた。これらの遺伝子群の発現解析を行うと、HB-EGFの発現を抑制すると血管新生に関わる遺伝子群の発現も抑制され、このことよりHB-EGFは腫瘍の血管新生を調整していることが示された。また、HB-EGFはautocrine loopによりその発現が増強しているが、脂質代謝に関わる遺伝子群がHB-EGFのautocirne loopを亢進させており、HB-EGFの特異的抑制剤と脂質代謝の抑制剤の相乗的抗腫瘍効果を認めた。これらの遺伝子群の発現は卵巣明細胞癌の予後と関連し、HB-EGFの発現と相関していた。以上の成果より、HB-EGFの発現に関与する遺伝子分子が絞り込まれた。来年度はHB群、Non-HB群の代表的細胞株を用いて発現アレイ、microRNAアレイ、CGHアレイを用いて、発現調節に関わる遺伝子を探索し、HB-EGF抑制剤により有用な効果を示す遺伝子群の探索を行っていく。本研究は難治性卵巣癌に対する新規治療戦略として、HB-EGFを標的とした治療法の意義を明らかにすることで、その選択的阻害薬の開発に寄与するものである。前年度までになされてきた、DNAマイクロアレイを基にした遺伝子検索により、高HB-EGF環境での発現変動およびコピー数の変化のある遺伝子の候補を同定してきた。中でも血管新生に関わる遺伝子であるVEGFAやANGPTL4はHB-EGFにより発現が制御されており、増腫瘍能や浸潤能などの表現型を明らかにすることでこれらの分子が癌増殖に関わることを同定した。また、転写後調節に関わるexon junction complexの遺伝子やいくつかの代謝に関わる転写因子をHB-EGFを制御する因子として同定した。HB-EGF標的治療における血清中マイクロRNAのバイオマーカーとしての意義について検討を行った。in vivoモデルでの血清中マイクロRNAの網羅的検索では、高HB-EGF環境で発現が亢進するマイクロRNAをいくつか同定した。特にmiR-92とmiR-23aは癌において癌の浸潤に関わる分子であると報告されており、機能解析を進めて行く必要がある。また、HB-EGF選択的阻害薬であるCRM197を用いた臨床試験で、血清中HB-EGF濃度が低下した症例において、治療前後で変動した血清中マイクロRNAについて検討を行ったところ、miR-1281、miR-92a、miR-486-5pが挙げられた。これらに関しても機能解析や今後の臨床試験症例での解析を進める必要がある。これらの結果により得られた遺伝子群はHB-EGFの発現や癌の表現型に関わっており、これらを用いたCRM197感受性を予測する新たな診断方法の確立を目指す。本研究は、卵巣癌のなかでも難治性な明細胞腺癌の治療法の開発を目指して、明細胞腺癌の遺伝子背景とHB-EGFとの関連を明らかにし、HB-EGFの標的分子としての意義を検証することを目的とする。本年度は、まず、HB-EGFの標的分子としての意義を検証するために卵巣明細胞腺癌細胞株を用いてHB-EGFと他のEGFRリガンドの発現量をrealtime PCRとELISAにて測定した。その中で、HB-EGFのみが発現が亢進している細胞株とHB-EGFとともに他のEGFRリガンドも亢進している細胞株を同定した。その細胞株に、HB-EGFの中和抗体を使用すると細胞培養上清中のHB-EGFの発現が抑制され細胞増殖活性が抑制された。したがって、卵巣明細胞腺癌においてHB-EGFは標的分子となりうることが証明された。

次に、HB-EGFは、三次元増殖に必須の分子で、抗癌剤や標的治療薬の投与によりHB-EGFの発現を亢進させて薬剤への耐性示す。この特性を利用して、2次元培養条件下の細胞とマトリゲルを用いた3次元培養条件下の細胞、NOD/SCIDマウス上で形成された腫瘍から抽出したRNAを比較して、3つのアレイシステム(発現アレイ、microRNAアレイ、CGHアレイ)を利用しHB-EGF発現に関わる遺伝子の探索を行った。発現アレイの結果からHB-EGFの発現亢進とともに血管新生に関わる遺伝子群や転写因子のなかでも転写開始前複合体形成に関与する遺伝子群が亢進していることが示された。これらの遺伝子群の発現は卵巣明細胞癌の予後と関連し、HB-EGFの発現と相関していた。以上の成果より、HB-EGFの発現に関与する遺伝子分子が絞り込まれた。来年度以降は残り2つのアレイを用いてさらにHB-EGFの発現に関わる遺伝子の抽出を行い、最終的には抽出された遺伝子の標的分子としての可能性を検証していく。卵巣明細胞腺癌においてHB-EGFが標的分子となることが証明された。更に、発現アレイを用いてHB-EGFの発現調節に関わる遺伝子群や転写因子及びHB-EGFによって制御されている遺伝子群の同定までを現在遂行できている。卵巣明細胞腺癌においてHB-EGFが標的分子となりうることが証明された。更には発現アレイを用いたHB-EGF発現調節に関わる遺伝子群や転写因子の同定まで現在遂行できている。現在、アレイシステム(発現アレイ、microRNAアレイ、CGHアレイ)の中で、microRNAアレイとCGHアレイによる解析を行っている。来年度はその解析から同定された遺伝子群やmicroRNAをもとにHB群、Non-HB群の代表的細胞株を用いてHB-EGF抑制剤により有用な効果を示す遺伝子群の探索を行っていく。更には、卵巣癌組織を用いて、探索されたHB-EGFと関連のある遺伝子の発現の比較検討を行う。現在、アレイシステム(発現アレイ、microRNAアレイ、CGHアレイ)の中で、microRNAアレイとCGHアレイによる解析を行っており、その中で、HB-EGFの発現に関わる遺伝子背景及びHB-EGF発現亢進により増加する分子の探索を行う予定としている。アレイシステム(発現アレイ、microRNAアレイ、CGHアレイ)に必要なアレイの購入、アレイシステムによって同定された遺伝子群やmicroRNAの検討のための研究試料の購入及び卵巣組織を用いたHB-EGFと関連のある遺伝子群の発現の比較検討を行うための研究試料の購入に使用する予定である。アレイシステム(発現アレイ、microRNAアレイ、CGHアレイ)の解析を行っており、解析の結果、HB-EGFの発現に関わる遺伝子背景及びHB-EGFの発現更新により増加する分子の探索を行う。その結果、HB-EGFと関連のある遺伝子の発現の比較検討をrealtimePCR、ELISAやアレイシステムを用いて、発現の比較検討を行うために使用する予定である。
LDLによる動脈平滑筋細胞増殖における細胞内情報伝達系について

低比重リポ蛋白(LDL)による動脈中膜平滑筋(SMC)増殖とそれに関与すると考えられる細胞内情報伝達系について検討した。家族性高コレステロール血症由来(FH-)LDLは、正脂血由来(NL-)LDLに比較してSMC増殖を強く増進させた。その機序として第1に細胞へのCa^<2+>の取り込みの増加とCa^<2+>拮抗剤による抑制と細胞内Ca^<2+>の増加を認めた。第2に、LDL投与直後の細胞内Ca^<2+>の動きを同じくFura2による蛍光強度の変化により調べた。細胞内Ca^<2+>は、LDL投与後5秒より急激に上昇し約25-30秒後にinitial peakを形成した。その後plateauが5分以上継続した。initial peakは、ryanodine処理により消失し、Ca^<2+> freemediumによりplateauが消失することにより、前者は細胞内Ca^<2+> storeよりの、後者は細胞外液よりの流入であると推測された。第3に、細胞内Inositol trisphosphateの定量でもLDLは増加が認められた。第4に、FH-LDLとNL-LDLのSMC細胞膜へのfreecholesterol transferについて、検討した。FH-LDLは、その粒子内により多量のfreecholesterolを持ち、そのためfree cholesterol transferがconcentration gradientにより生じると考えられた。またsmall difraction analysisを用いた検討でもFH-LDLは細胞膜の構造上の変化をもたらすと考えられた。高コレステロール食により作成した家兎モデルにおける動脈硬化退縮に対するProbucolとDiltiazemの効果も合わせて検討した。高コレステロール負荷により完成した大動脈の硬化巣は、続く15週間の薬物投与によりより退縮が進んだ。これは主に大動脈中の脂質の減少によりもたらされており、細胞外マトリックス成分には変化がなかった。低比重リポ蛋白(LDL)による大動脈中膜平滑筋細胞(SMC)の増殖促進SMC細胞膜構造の変化、Fura-2を用いた細胞内Ca^<++>の変化について調べた。LDLは正脂血健康成人(NL^-)及び家族性高コレステロール血症(FH^-)より分離精製した。FH-LDLの成分の特徴は、そのfree cholesterol増加であり、このためと考えられるconcentration gradientによるLDL particleよりSMC細胞膜へのfree cholesterdの増加が生じていた。このfree chorestenolはx-ray解析により膜構造の変化をもたらしていた。増殖促進の定量は、^3H-Thymidineの取り込みにより評価し、FH-LDLはNL-LDLに比較して有意に増加が認められた。この増加はdihydropyridine系Ca^<++>拮抗剤により強く抑制された。Fura-2を用いたLDLによる細胞内Ca^<++>濃度の増加は、Receptor mediated fashionを示した。つまりinjectionは急速なCa^<++>の上昇(peak)を認め、次いでslowな丘状の増加(platean)を認めた。それぞれの上昇は、細胞内Ca^<++> store及び細胞外液のCa^<++>movementを薬物により抑制することで消失した。またreceptor antibodyにより抑制された。現在FH-LDLとNL-LDLの比較検討を行っている。SMC内情報伝達系については、イノシトールリン酸系へのLDLの影響を測定している。

IP_3の定量では、LDL20時間刺激後では、FH^-、NL^-両者に差は認められず、10分間刺激ではFH-LDLにおいて有意の上昇が認められた。前述した細胞内Ca^<++>の動きとIP系の動きについて現在LDLを用いて検討を進めている。高コレステロール食により作成した家兎モデルにおける動脈硬化退縮に対するProbucolとDiltiazemの効果も合わせて検討した。高コレステロール負荷により完成した大動脈の硬化巣は、続く15週間の薬物投与によりより退縮が進んだ。これは主に大動脈中に脂質の減少によりもたらされており、細胞外マトリックス成分には変化がなかった。
カルノシンによる哺乳類の恒常性維持の分子機構とカルノシン分解酵素CNDP2の解析

カルノシン(βアラニル-L-ヒスチジン)は哺乳類の筋肉や脳などに高濃度で存在するジペプチドで、抗酸化作用などがあるといわれているが、生理機能は不明の点が多い。また、生合成、分解に関る酵素類についても最近まで明らかではなかった。本研究では、カルノシンの機能の一端を明らかにする目的で、最近我々が見出したカルノシン分解酵素CNDP2の立体構造、生化学的性質、生体内分布の解析を行った。まず、X線解析などによりCNDP2の立体構造を決定し、その構造的特徴を明らかにした。さらに、視床下部のヒスタミンニューロンに高濃度で存在することを明らかにし、カルノシンのCNDP2による分解がヒスタミン合成の基質の供給に寄与している可能性を示した。本研究では、哺乳類の脳、筋肉に存在するジペプチドであるカルノシンと、それを分解する酵素CNDP2について解析し、それらの生理的機能と恒常性維持に果たす役割を明らかにすることを目的として、以下の実験を行った。1、CNDP2の発現とその調節我々はこれまでに、CNDP2が中枢ヒスタミンニューロンの存在する視床下部結節乳頭核(TMN)において強く発現することを見出し、カルノシンがヒスチジンの供給源としてはたらくのではないかと考えた。そこで、その分布についてさらに解析を行い、TMNにおいてCNDP2がヒスチジンを合成する酵素であるヒスチジン脱炭酸酵素と共存することを明らかにした。一方、概日リズムや絶食などによる変化は検出されず、ヒスタミンニューロンの関連性については更なる検討が必要と考えられた。2、CNDP2の立体構造解析とLidドメインの機能我々は、X線結晶構造解析により、CNDP2と阻害剤ベスタチンとの複合体の立体構造を決定した。その結果、サブユニット同士の相互作用が活性に必要であること、またそれがこの酵素の属するファミリーの金属ペプチダーゼに共通の特徴であること、そのほか、いろいろなユニークな特徴を持つことが明らかになった。現在さらに、阻害剤非存在下で結晶化条件のスクリーニングを行っている。3、カルノシン、CNDP2と酸化ストレスCNDP2の活性はCysをNEMなどで修飾すると失われることから、酸化ストレスやNOにより活性調節を受けることが考えられた。しかし、結晶解析の結果からは、Cysが活性中心にないことが明らかになり、NEM等の効果が活性中心に対する直接的な作用ではないことが判明した。そこで、その活性調節の分子機構を明らかにするため、Cysを修飾した後に質量分析等を用いて解析し、反応性の高いCys残基を特定した。<研究の目的>L-カルノシン(β-alanyl-L-histidine)は古くから知られたジペプチドで、脳や筋肉に比較的高濃度で存在し、効酸化作用や神経細胞の生存維持作用などがあるといわれているが、実際の生理機能は確立されていない。最近我々は、L-カルノシンが脳内ヒスタミン神経系に作用することなどを見出した。本研究では、カルノシンの生理機能の分子的作用基盤を明らかにする目的で、主としてカルノシン分解酵素CNDP2の構造と機能の解析を行う。<研究実績の概要>(1) CNDP2の立体構造解析とLidドメインの機能我々はすでに、CNDP2と基質アナログである阻害剤ベスタチンとの複合体の立体構造を決定したが、ベスタチンはクレフトの奥に存在しており、induced fitを予想させる。そこで、阻害剤非存在下での結晶化を試みているが、結晶化には至っていない。一方、最近同じファミリーに属するCNDP1の構造が阻害剤非存在下で解かれたが、これはopenな構造をしており、上記の予想を支持する。また、我々はすでに、LidドメインのHis228が活性に必須であることを見出しており、その解析をさらに進めるための複数のミュータントを作成した。現在、その性状を解析中である。(2)カルノシン、CNDP2と酸化ストレスCNDP2はSH試薬に感受性であることから、活性に関与するCysの同定を行っているが、複数個所のCysが関与する可能性があるため、複数個所のミュータントを作成し、その活性について検討している。(3) CNDP2と、もうひとつのカルノシン分解酵素CNDP1の比較解析我々は、主としてCNDP2を解析対象としてきたが、今回、同じファミリーに属するマウスとヒトのCNDP1を大腸菌で発現させるため種々のベクターにクローニングし、発現、精製のための条件を検討している。カルノシン(beta-alanyl-L-histidine)は哺乳類の脳や筋肉に高濃度で存在するジペプチドで、亜鉛をキレートする作用があることなどから生体内で抗酸化物質として働くことなどが予想されているが、真の生理機能は明確ではない。

われわれはこれまでに、カルノシンが脳内でヒスタミン神経系に作用することを見出し、体内環境の恒常性維持に関与することを明らかにした(Nagai et al. 2003など)。また、カルノシンを分解する酵素の一つ(CNDP2)をクローニングし(Otani etal. 2005)、その立体構造を明らかにし(Unno et al., 2008)、現在さらにその構造と機能の解析をすすめている。本年度においては、これまで我々が得たL-カルノシンとCNDP2に関する知見をふまえ、CNDP2の生理機能の分子的作用基盤を明らかにすることを目的として、以下のような実験結果を得た。これまでの解析から、CNDP2がメタロペプチダーゼM20ファミリーに属すること、水溶液中でダイマーを形成していること、ダイマーの相互作用領域にあるヒスチジン228が活性に必須であることなどが明らかになっている。本年度には、ダイマーであることが活性の発現に必須であること、また、ヒスチジン228はダイマー形成による活性の発現に必須であることを証明した。またこのヒスチジンは他の多くのM20ファミリーに保存されていることを見出し、このヒスチジンの関与するダイマー形成による加水分解反応の機構が、M20ファミリーの普遍的な反応機構であることを明らかにした。CNDP2については、さらに免疫組織化学によりマウスにおいて脳以外にもいくつかの臓器の特定の細胞に高い発現が認められ、CNDP2がいくつかの異なる生理的役割を持つことを明らかにした。今後その生理機能についてさらに検討をすすめる予定である。
ＭＲＩを用いた覚醒中枢領域における神経基盤の解明

本研究の目的は覚醒の中枢領域を決定し、その神経基盤を解明する事である。その為に覚醒時における脳機能と脳構造の変化をMRIにより全脳探索的に解析する。候補領域として推測している領域は線条体である。薬物によって覚醒状態が高まっている時では、線条体神経細胞は継続的な興奮状態にある事が予想される。そこで本年度は、線条体神経細胞が継続的な活動を示した際、脳構造や脳機能にどのような影響を与えるのかを明らかにする為、脳機能や脳構造変化を可視化する新たなMRI技術の開発を試みた。線条体神経細胞の活動をoptogeneticsにより特異的に活動させた際の脳構造変化を可視化する技術(Opto-DTI)を開発した。この技術を用いる事で、線条体神経細胞を長期的に活動した際に、線条体を貫通する皮質神経の軸索におけるミエリンが薄くなっている事を発見した。また線条体神経細胞自身の繊維が細くなっている事が分かった。線条体の活動が脳全体に及ぼす影響を脳構造の観点から解析する事ができた。MRIで発見した構造変化は、超解像顕微鏡観察を利用した組織学解析によりミクロに確認した。また、脳機能解析においても新たなfMRI技術を取り入れ、応用した。血流を介して神経活動を描出していた従来のfMRI技術では適切な線条体活動を描出する事が出来なかった。そこで、血流を介さずに神経活動やネットワークを描出できる技術を取り入れ、応用した。これにより線条体回路を適切に描出出来るようになった。長期的に線条体が活動した際の脳機能変化や脳構造変化を捉える新たなMRI技術の開発とその応用を行い、線条体回路における構造変化を明らかにすることができた。線条体神経細胞の活動をoptogeneticsにより特異的に操作し、その時の脳構造変化をdiffusiontensor imaging (DTI)により解析するOpto-DTIという技術を考案し、実証した。さらにDTIによるマクロな解析だけではなく、超解像顕微鏡観察を取り入れ、組織学的手法によりミクロ情報まで明らかにし、MRIデータの信頼性を高めた。これらの技術によって、線条体神経細胞を長期的に活動した際には、線条体を貫通する皮質神経の軸索におけるミエリンが薄くなっている事を発見した。次に脳機能変化を可視化する新たなfMRI技術を開発と応用を行った。通常、fMRI技術はneurovascular couplingの原理に基いており、fMRI信号変化には血流動態が大きく影響する。特に線条体では神経活動とfMRI信号が一致しないという事例が多々あり、通常のfMRI技術では適切な神経活動を描出できない。そこで血流動態に依存しない新たなfMRI技術であるdiffusion functional MRI (DfMRI)の開発と応用を行ってきた(Abe et al., Plos Biol, 2017)。本年度はこのDfMRI技術を応用し、線条体回路の血流非依存的なネットワーク解析を目指した。従来のfMRI解析で行っているfunctional connectivity(FC)解析をDfMRIで応用する事で、血流非依存的な回路解析を確立させた。この回路解析技術を用いて、線条体の既存ネットワークを抽出する事が出来た。覚醒剤を長期的に投与し、覚醒状態を高めたマウスにおいて、線条体回路における脳構造や脳機能がどのように変化しているのかを、開発した技術(Opto-DTIやDfMRI)を用いて明らかにする。さらに、線条体神経細胞はドパミン受容体1型または2型のどちらかを持つ神経細胞が存在するため、この2種類の神経細胞をoptogeneticsによって切り分け、各細胞が線条体回路に及ぼす脳機能変化と脳構造変化を明らかにしていく。

長期的に線条体が活動した際の脳機能変化や脳構造変化を捉える新たなMRI技術の開発とその応用を行い、線条体回路における構造変化を明らかにすることができた。線条体神経細胞の活動をoptogeneticsにより特異的に操作し、その時の脳構造変化をdiffusiontensor imaging (DTI)により解析するOpto-DTIという技術を考案し、実証した。さらにDTIによるマクロな解析だけではなく、超解像顕微鏡観察を取り入れ、組織学的手法によりミクロ情報まで明らかにし、MRIデータの信頼性を高めた。これらの技術によって、線条体神経細胞を長期的に活動した際には、線条体を貫通する皮質神経の軸索におけるミエリンが薄くなっている事を発見した。また線条体神経細胞自身の繊維が細くなっている事が分かった。次に脳機能変化を可視化する新たなfMRI技術を開発と応用を行った。通常、fMRI技術はneurovascular couplingの原理に基いており、fMRI信号変化には血流動態が大きく影響する。特に線条体では神経活動とfMRI信号が一致しないという事例が多々あり、通常のfMRI技術では適切な神経活動を描出できない。そこで血流動態に依存しない新たなfMRI技術であるdiffusion functional MRI (DfMRI)の開発と応用を行ってきた(Abe et al., Plos Biol, 2017)。本年度はこのDfMRI技術を応用し、線条体回路の血流非依存的なネットワーク解析を目指した。従来のfMRI解析で行っているfunctional connectivity(FC)解析をDfMRIで応用する事で、血流非依存的な回路解析を確立させた。この回路解析技術を用いて、線条体の既存ネットワークを抽出する事が出来た。覚醒剤を長期的に投与し、覚醒状態を高めたマウスにおいて、線条体回路における脳構造や脳機能がどのように変化しているのかを、開発した技術(Opto-DTIやDfMRI)を用いて明らかにする。さらに、線条体神経細胞はドパミン受容体1型または2型のどちらかを持つ神経細胞が存在するため、この2種類の神経細胞をoptogeneticsによって切り分け、各細胞が線条体回路に及ぼす脳機能変化と脳構造変化を明らかにしていく。
気管支喘息の分子病態学 : β2-アドレナリン受容体遺伝子変異と喘息病態に関する研究

1.PCRを用いたARMS法とdi-deoxi法を用いたdirect sequenceにより、β2-アドレナリン受容体遺伝子nucleotide 46,79,523を検出するARMS法を確立した.2.確立されたARMS法を用い、健常者150名、気管支喘息患者178名の遺伝子型を検討した.喘息との関連では、各遺伝子型は喘息発作とは直接関連していなかったが、Gly16/Gly16型は喘息の重症度と関連するとともに、キサンチン製剤の使用頻度と関連していた.また、遺伝子型には明確な人種差が認められ、特にGln27/Glu27型は本邦では約1%にしか認められなかった.1.PCRを用いたARMS法とdi-deoxi法を用いたdirect sequenceにより、β2-アドレナリン受容体遺伝子nucleotide 46,79,523を検出するARMS法を確立した.2.確立されたARMS法を用い、健常者150名、気管支喘息患者178名の遺伝子型を検討した.喘息との関連では、各遺伝子型は喘息発作とは直接関連していなかったが、Gly16/Gly16型は喘息の重症度と関連するとともに、キサンチン製剤の使用頻度と関連していた.また、遺伝子型には明確な人種差が認められ、特にGln27/Glu27型は本邦では約1%にしか認められなかった.1.遺伝子変異検出法の確立2.健常者と気管支喘息患者における各遺伝子変異の頻度の検討当科外来通院中の気管支喘息患者178名、検診受診者および正常ボランティア150名の末梢血白血球からDNAを抽出し、ARMS法を用いて、3ケ所の変異(nucleotide46.,79,及び523)の遺伝子型を決定した.現在、気管支喘息患者と健常者での遺伝子型の差、気管支喘息の病態と遺伝子型の関連性などに関する検討を行っている.1.昨年度行った健常者(150名)と喘息患者(178名)についての遺伝子型(Arg16→Gly,Glu27→Gln)の結果を用い、本年度はその生理学的・臨床的意義の解析を行った.まず、Glu27→Gln変異についてはGln27ホモの頻度が日本人では100人に1人と極端に少なく、遺伝子頻度で0.09であり欧米人と著明な差を認めた.いずれの変異も健常者と喘息患者間に有意な差を認めず、喘息発症遺伝子とは考え難かった.病態との関連性では、Arg16→Gly変異は喘息重症度やキサンチン製剤の使用頻度と有意な関連性を認め、この変異が喘息病態を規定していることが明かとなった.2.健常者末梢血リンパ球c-AMP反応と遺伝子型の関連性の検討を行った.Arg16→Gly変異に伴い、梢血リンパ球のβ2-刺激薬に対する感受性は変化していなかったが、c-AMPの最大反応はGly16変異を持つ者で低下の傾向を認めた.現在、経口β2-刺激薬服用前後での同様の検討を喘息患者を対象に検討中である.3.喘息患者における遺伝子多型とβ2刺激薬regular useの効果に関する検討を開始し、現在、目標の約2/3の患者での臨床試験を終了した.1.健常人における末梢血単核球c-AMP反応とβ2-アドレナリン受容体遺伝子型:EC50では各遺伝子型ごとに差は認められなかったが、最大反応ではGly16を有する遺伝子型(Gly16/Arg16およびGly16/Gly16)がArg16/Arg16型に比し低値の傾向を認めた(P<0.1).2.β_2-アドレナリン受容体遺伝子型のβ_2-刺激薬(サルブタモール)定期吸入療法(RegularUse)に対する効果への影響:β_2-アドレナリン受容体遺伝子型が判明している気管支喘息患者19名(Arg16/Arg16: 6名、Arg16/Gly16: 7名、Gly16/Gly16: 6名)に2週間のβ_2-刺激薬(サルブタモール)定期吸入療法(Regular Use)を行い、この前後で一秒量(FEV1)、メサコリン気道過敏性(PC_<20>)、吸入β_2-刺激薬による末梢血c-AMPの変動、などを測定し、遺伝子型による差異を検討した.2週間の定期吸入療法前後で、Arg16/Arg16型では、FEV1,PC_<20>,c-AMP反応とも有意な変化は認めなかった.Gly16/Gly16型では、FEV1の有意な低下、PC_<20>の有意な減少、c-AMP反応の有意な低下が認められた.この結果は、Gly16/Gly16型ではβ_2-刺激薬(サンブタモール)定期吸入療法により、臨床的にも受容体down-regulationが生じ、喘息コントロールの悪化が生じると考えられた.
外傷による生体反応に対する遺伝子分析に基づく個別化対策に関する研究

近年,同程度の侵襲に対しても過剰な炎症反応を引き起こす症例において,個々の遺伝的な要因の関与が指摘されている.そして救急集中治療医学領域では各種サイトカインや目然免疫にかかわるtoll-like receptor、やCD14などの各種遺伝子多型が侵襲に対する生体反応の程度金の関与が示唆されている.われわれは外傷(熱傷等も含む)患者を含む集中治療室入室患者に侵襲に対する生体反応にかかわる分子の遺伝子多型解析を行い.IL-6血中濃度をはじめとする各種臨床検査データ,臨床経過,転帰などど遺伝子多型を比較検討する本研究を行い以下の点を明らかにした.2.血中IL-6濃度異常高値とTNF,IL-1ra遺伝子多型に関連を認めた.3.これらの結果よりhigh-riskの遺伝子多型を有するIL-6血中濃度異常高値症例は制御困難なサイトカイン動態を呈し,予後不良であった.3.また敗血症患者を対象に重症度,予後とこれらの遺伝子多型の関連につき検討した結果,TNF,IL-10遺伝子多型と敗血症患者の予後との関連を認めた.4.本研究で検討した多くの遺伝子多型頻度は日本人以外の人種で報告されている頻度と異なった.近年,同程度の侵襲に対しても過剰な炎症反応を引き起こす症例において,個々の遺伝的な要因の関与が指摘されはじめている.そして救急集中治療医学領域ではTNF, IL-1β,IL-10などの各種サイトカインや自然免疫にかかわるtoll-like receptor、やCD14などの各種遺伝子多型が侵襲に対する生体反応の程度への関与が示唆されつつある.われわれは外傷(熱傷等も含む)患者を含む集中治療室入室患者にその侵襲に対する生体反応にかかわる分子の遺伝子多型解析を行い.そして迅速測定システムなどを用いたIL-6血中濃度をはじめとする各種臨床検査データ,臨床経過,転帰などと遺伝子多型解析結果を比較検討する本研究を行い以下の点を明らかにした.2.血中IL-6濃度異常高値とTNF, IL-1ra遺伝子多型に関連を認めた.3.さらにこれらの結果よりhigh-riskの遺伝子多型を有するIL-6血中濃度異常高値症例は制御困難なサイトカイン動態を呈し,予後不良であった.4.また敗血症患者を対象に重症度,予後とこれらの遺伝子多型の関連につき検討した結果,TNF, IL-10遺伝子多型と敗血症患者の予後との関連を認めた.5.本研究にて検討した多くの遺伝子多型頻度は日本人以外の人種で報告されている頻度と異なった.近年,同程度の侵襲に対しても過剰な炎症反応を引き起こす症例において,個々の遺伝的な要因の関与が指摘されている.そして救急集中治療医学領域では各種サイトカインや目然免疫にかかわるtoll-like receptor、やCD14などの各種遺伝子多型が侵襲に対する生体反応の程度金の関与が示唆されている.われわれは外傷(熱傷等も含む)患者を含む集中治療室入室患者に侵襲に対する生体反応にかかわる分子の遺伝子多型解析を行い.IL-6血中濃度をはじめとする各種臨床検査データ,臨床経過,転帰などど遺伝子多型を比較検討する本研究を行い以下の点を明らかにした.2.血中IL-6濃度異常高値とTNF,IL-1ra遺伝子多型に関連を認めた.3.これらの結果よりhigh-riskの遺伝子多型を有するIL-6血中濃度異常高値症例は制御困難なサイトカイン動態を呈し,予後不良であった.3.また敗血症患者を対象に重症度,予後とこれらの遺伝子多型の関連につき検討した結果,TNF,IL-10遺伝子多型と敗血症患者の予後との関連を認めた.4.本研究で検討した多くの遺伝子多型頻度は日本人以外の人種で報告されている頻度と異なった.