hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ゾウリムシとその核内共生細菌ホロスポラの世界分布図の作成

3.新種のホロスポラHolospora hiwatashiiを岩手県盛岡市で採集したP.bursariaの大核から発見した(論文投稿準備中)。4.Holospora obtusaを山口市で採集した。これまでにホロスポラが採集された場所の中で、山口市が世界最南端のホロスポラ採集地である。5.過去20年間に行われた、海外研究協力者のS.I.Fokin、H.-D.Gortz、藤島によるホロスポラ採集記録を収集し整理した。6.ホロスポラの感染によって宿主が各種ストレス耐性になることをを明らかにし、その分子機構を明らかにした(Hori and Fujishima, J.Euk.Microbiol.,50,293-298,2003;Nakamura et al.,投稿準備中)。原生動物繊毛虫類のゾウリムシ(Paramecium caudatum)には、Syngenと呼ばれる遺伝的に隔離されたグループが存在する。この研究では下記を明らかにすることを目標にする(1)P.caudatumを採集し、syngenの世界分布図を作成し、大陸の移動時期とsyngen進化が密接に関係しているかどうかを明らかにする。また、先祖型syngenのルーツを明らかにする。(2)Holosporaを持つP. caudatumを採取し、その宿主がどのsyngenに属するかを調べ、HolosporaがいつP. caudatumと共生関係を成立させたかを明らかにする。(3)Holosporaなしで生存できないほど関係が親密になったHolosporaとP.caudatumが出現しているはずという仮定のもとに、野外採集する。今年度に得られた成果を下に記した。(1)12月に、藤島と道羅は、オーストラリアのケアンズ近郊の熱帯雨林で、ゾウリムシの野外採集を行い、P caudatumを3クローンと、P. aureliaを13クローン得た。(2)藤島は、盛岡市で採取されたP. bursariaの大核に新種と思われるHolosporaを発見した。新種の可能性について継続して調べている。Paramecium caudatumには、分化の過渡的段階と考えることができるsyngenと呼ばれる遺伝的に隔離されたグループが存在する。syngenはかつて16種が発見されていたが、現在9種が保存されている。P.caudatumは海水では生存できずシストも形成しない。したがって、syngenの分布と進化は大陸の移動と密接な関係を持って行われてきたことが予測される。一方、P.caudatumには核内共生細菌Holospora属が4種類発見されている。筆者らは大核特異的Holospora obtusaを使って、この細菌の増殖は特定のsyngen特異的であることを発見した。これは、HolosporaとP.caudatumの共生の歴史とP.caudatumのsyngenの進化に関係があることを示唆している。本研究では、P.caudatumを採集し、syngenの世界分布図を作成し、大陸の移動時期とsyngen進化が密接に関係しているかどうかを明らかにする。Holosporaを持つP.caudatumを採取し、その宿主がどのsyngenに属するかを調べ、HolosporaがいつP.caudatumと共生関係を成立させたかを明らかにする。平成14年度は海外では、ニュージーランドで採取を行ったが、Paramecium属は採取できなかった。昨年、上海で採取したParameciumが新種と判明した。さらに、盛岡市で採集されたP.bursariaの大核に共生する新種のHolosporaを発見した。5.過去20年間に、海外研究協力者のS.I.Fokin、H.-D.Gortz、藤島によるホロスポラ採集記録を収集し整理した。6.ホロスポラの感染によって宿主が各種ストレス耐性になることをを明らかにし、その分子機構を明らかにした(Hori and Fujishima, J.Euk.Microbiol., 50,293-298,2003;Nakamura et al.,投稿準備中)。
ＴＳＡおよびＡｃーＳＤＫＰの眼科線維化疾患の治療効果の実験的検討

ヒストンデアセチラーゼ阻害剤(TSA)およびN-Acetyl-Aspartyl-Lysyl-Proline(Ac-SDKP)を用いて、眼科組織において線維化関連遺伝子の発現を抑制し、過剰な瘢痕化を抑制することが可能か否か、検討した。TSAを投与した角結膜瘢痕化モデルマウスでは、アルカリ外傷で誘導される過剰な瘢痕化が抑制された。Ac-SDKP投与群では、瘢痕化は抑制されなかった。ヒト結膜下線維芽細胞を用いた実験では、TSA添加で、TGFβ1,VEGF,コラーゲン発現を抑制し、リン酸化Smad2の核内移行を阻害した。TSAは眼科瘢痕化疾患の治療に使用できる可能性がある。角結膜瘢痕化モデル( 1N NaOH点眼でアルカリ外傷)を作成。具体的には、マウスに点眼麻酔を行い、1NのNaOHを3μl点眼する。眼表面には強い炎症が生じ、各種コラーゲンなどの線維性の細胞内マトリックス産生によって、角膜新生血管、角膜潰瘍、角膜混濁が生じる。経時的に眼球摘出し、下記1)3)を検討した。1)ヘマトキシリンーエオジン染色:コントロールとTSAおよびAc-SDKP投与群で、角結膜組織の浮腫および炎症細胞の浸潤を比較した。2)免疫組織的検討:誘導された角結膜瘢痕化および増殖硝子体網膜症の程度を比較検討した。筋線維芽細胞のマーカーであるアルファ平滑筋アクチン(α-SMA)やコラーゲン、マクロファージのマーカーのF4/80、線維芽細胞増殖に関与するConnective Tissue Growth Factor(CTGF)、単球の走化性因子で炎症組織への単球の組織浸潤の関与するMonocyte Chemoattaractant Protein-1(MCP-1)などの免疫染色を行った。TSAおよびAc-SDKPで細胞骨格形成に関与するα-SMAの発現や各種細胞外マトリックスの発現、マクロファージの活性などを確認し、瘢痕線維化、炎症に対する抑制効果の程度を比較検討した。エピジェネティクスの制御による眼創傷治癒過程の線維化および瘢痕抑制を研究の目的とする。眼科における線維化疾患にはStevens-Johnsons syndromeや春期カタル、術後瘢痕化、後発白内障、増殖硝子体網膜症等があり、各種細胞外マトリックスの沈着と過剰な組織収縮が関与し、遺伝子の発現異常が寄与すると考える。ヒストンデアセチラーゼ阻害剤(TSA)、およびN-Acetyl-Aspartyl-Lysyl-Proline(Ac-SDKP)を用いて、眼科組織において線維化関連遺伝子の発現を抑制し、過剰な瘢痕化を抑制することが可能か否か、検討する。平成25年度は結膜瘢痕化モデルマウスでの研究。経時的に眼球摘出し、下記1)3)を検討。1)ヘマトキシリンーエオジン染色:コントロールとTSAおよびAc-SDKP投与群で、組織の浮腫や炎症細胞の浸潤を比較。2)免疫組織的検討:誘導された角結膜瘢痕化の程度を比較検討する。筋線維芽細胞のマーカーであるアルファ平滑筋アクチンやコラーゲン、マクロファージのマーカーのF4/80、線維芽細胞増殖に関与するConnective Tissue Growth Factor、単球の走化性因子で炎症組織への単球の組織浸潤の関与するMonocyte Chemoattaractant Protein-1などの免疫染色を行い、TSAおよびAc-SDKPで細胞骨格形成に関与するα-SMAの発現や各種細胞外マトリックスの発現、マクロファージの活性などを確認し、瘢痕線維化、炎症に対する抑制効果の程度を比較検討。ヒト結膜下由来線維芽細胞や水晶体上皮細胞株α-TN4や網膜色素上皮細胞株ARPE-19を用いて、TSA、Ac-SDKPを添加し、以下を検討した。(1)TSAおよびAc-SDKP添加による各マトリックスの変化を観察した。コラーゲンやフィブロネクチン、connective tissuegrowthfactor(CTGF)などの免疫組織化学的検討を行った。TSA添加でコラーゲン、フィブロネクチン発現が抑制された。(2)細胞増殖能にTSAおよびAc-SDKPが関与するか否かを検討した。増殖能は抑制されなかった。(3) TSAおよびAc-SDKP添加24時間後、単層細胞シートに創を作製し、創の修復過程を観察した。TSA添加で遊走能は抑制された。(4)TSAおよびAc-SDKPを各濃度で添加して24時間後、培養液を採取し、コラーゲンやフィブロネクチンの発現に影響するか、検討した。TSA添加で抑制された。(5)real-

time reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR)によるmRNA発現の検討:各条件でのRNA濃度を測定し、TGFβやコラーゲンのmRNA発現をreal-time RT-PCRで検討した。TSA添加で抑制された。(6)TGFβ刺激による各タンパク変化や核内移行を検討した。TSAおよびAc-SDKP添加し、TGFβを添加後のPhospho-Smad2の発現を免疫組織化学、real time RT-PCR、およびウェスタンブロットを用いて検討した。TSA添加でphospho-Smad2の核内移行が抑制された。(7)血管内皮細胞:ヒト血管内皮細胞と線維芽細胞を共培養させ、TSAおよびAc-SDKP添加で、CD31陽性の血管内皮細胞の管腔形成に影響するか検討した。平成24年度におこなった角結膜瘢痕化モデルを再度検討した。角結膜瘢痕化モデルマウスで、経時的に眼球摘出し、ヘマトキシリンーエオジン染色、免疫組織的検討、m-RNA発現の検討をおこなった。TSAを投与したマウスでは、アルカリ外傷で誘導される過剰な瘢痕化が抑制され、各種RNA発現や免疫組織化学でも炎症性変化や瘢痕化が抑制されていた。Ac-SDKPでは、瘢痕化を抑制する効果は見られなかった。平成23年から26年までに得られたヒト結膜下線維芽細胞を用いたin vitroの実験、およびアルカリ外傷モデルマウスを用いたin vivoの実験の結果を基にして、眼科組織において、TSAを用いて線維化関連遺伝子の発現を抑制し、過剰な瘢痕化を抑制することが可能か否か、検討した。ヒト結膜下線維芽細胞において、TSAを添加することで、TGFβ1、VEGF、コラーゲン発現を抑制し、また、TGIFとSmad7の発現を促進し、リン酸化Smad2の核内移行を阻害した。アルカリ外傷モデルマウスでは、TSA投与で、過剰な瘢痕化が抑制され、各種RNA発現や免疫組織化学でも炎症性変化や瘢痕化が抑制されていた。TSAは眼科瘢痕化疾患の治療に使用できる可能性がある。眼科予定通りに検討できている。TSA、Ac-SDKPを用いて、平成25年度は結膜瘢痕化モデルマウスでの研究をおこなった。ヘマトキシリンーエオジン染色、免疫組織的検討、m-RNA発現の検討をおこなった。平成23年度は培養細胞レベルでの検討ができた。平成25年度は、結膜瘢痕化モデルでの実験を行う予定である。実際には、マウス結膜を全周切開する。切開された結膜は過剰な細胞外マトリックス沈着や組織収縮をおこす。経時的に眼球摘出し、下記1)3)を検討する。1)ヘマトキシリンーエオジン染色:コントロールとTSAおよびAc-SDKP投与群で、結膜組織の浮腫および炎症細胞の浸潤を比較する。2)免疫組織的検討:誘導された結膜瘢痕化の程度を比較検討する。
マクロファージ活性化因子とその制癌への応用に関する実験的研究

レクチンで活性化したヒト末梢血T細胞とT細胞由来急性白血病細胞との細胞融合によりヒトT細胞ハイブリドーマを樹立し、多数のハイブリドーマ培養上清中のマクロファージ活性化因子をマクロファージのグルコース消費能昂進、スーパーオキサイドアニオンの産生増強、ヒト単球および単球由来マクロファージの癌細胞障害活性の誘導、マウスマクロファージの癌細胞障害活性の誘導などを指標にして検索したところ、マクロファージの以上の多彩な機能に対応してマクロファージ活性化因子も複数の分子種から成ることが明らかとなった。またヒト単球の活性化にもプライミングシグナルとトリガリングングナルの2つの因子が必要で、2段階で進むが、ガンマインタフェロンはプライミングシグナルであつ、またガンマインタフェロンと異なるプライミングシグナルとしてのマクロファージ活性化因子、トリガリングシグナルとしてのマクロファージ活性化因子が存在することが明らかとなった。まだヒト単球、マウスマクロファージを活性化する因子のmRNAを抽出し、逆転写酵素によりcDNAを作製し、さらにDNAポリメラーゼIにより2重鎖cDNAを作り、大腸菌の形質転換を行ない、大量培養後Pst1でインサートを切り出し、発現ベクターに結なぎ再び大腸菌形質転換を行ない、グループ別け後プラスミッドを抽出しCos7細胞にトランスフェクションを行ない、マクロファージ活性化因子遺伝子のクローニングを行っている。さらにマクロファージ活性化因子の一種としてのガンマインタフェロンに対するモノクローナル抗体をつくり、これを用いてガンマインターフェロンの簡便な精製法を確立した。以上のマクロファージ活性化因子あるいはガンマインターフェロンをリポゾームに封入してin vivoに投与し、マクロファージを効果的に活性化し得ることを見出した。またムラミルジペプチド含有リポゾームとガンマインターフェロンの併用は有効であった。
小型MRIによるニホンナシ萎縮症の早期診断技術の確立

ニホンナシで多発している萎縮症について、圃場レベルで移動可能な小型MRI装置による'幸水'症状発生樹の画像資料の入手とともに、生体情報としてSF-8サップフローメータで樹液流動及び水ポテンシャルの日変化をプレッシャーチャンバー法で計測した.その結果、MRIパラメータとして算出したT1・ADC・プロトン密度画像から、明らかに重度の萎縮症枝では、健全枝に劣る水分環境にあることが分かった.また、ADC値の変化は'幸水'枝内の水分生理が変化することとよく一致し、夜間は低位(2×10-5cm2/s)であるが、6:00以降上昇して12:00には5×10-5cm2/sとなった.ステージ別の樹液流についてみると枝葉の伸長時期には軽度の萎縮症発生枝と健全枝間に差異は認められないが、発芽期リン片脱落期展葉期には萎縮症枝で低位であり、水分通導機能の支障が示唆された.このような成果から、非破壊画像が入手できる小型モバイルMRIは、萎縮症発生の早期予測技術として有用できると思われる.ニホンナシで多発している萎縮症は、症状の早期発見と対策技術の確立が望まれている.そこで1)小型MRI装置で画像資料を入手した.その仕様は永久磁石、静磁場強度0.3T、ギャップ幅80mm、静磁場均一領域30mm、重量57kg.これをハンドリフトに搭載して、地上から160cm昇降可能とした.2)一方、生体情報としてSF-8サップフローメータ(Daletown社製)によって実際の樹液流動、さらに萎縮症発生枝・健全枝着生葉の水ポテンシャルの日変化をプレッシャーチャンバー法で計測した.その結果、MRIパラメータとして算出したT1・ADC・プロトン密度画像から、明らかに重度の萎縮症枝では、健全枝に劣る水分環境にあることが分かった.すなわち、T1緩和時間が600ms以上の動的水分プロトン分布が健全枝で認められ、高ADC値域も多く観察できた(図1).一方、枝内の樹液流は図2に示すような日変化を示した.ADC値の変化も`幸水'枝内の水分生理が変化することとよく一致し、夜間は低位(2×10-5cm2/s)であるが、6:00以降上昇して12:00には5×10-5cm2/sとなった.さらにステージ別の樹液流についてみると、枝葉の伸長時期には軽度の萎縮症発生枝と健全枝間に差異は認められなかったが、発芽期リン片脱落期展葉期には萎縮症枝で低位であり、水分通導機能に支障を生じていることが示唆された.このような成果から、高精度に検出できるステージの検討等が今後必要であるが、非破壊画像が入手できる小型モバイルMRIは、萎縮症発生の早期予測技術として有用できると思われる.ニホンナシで多発している萎縮症について、圃場レベルで移動可能な小型MRI装置による'幸水'症状発生樹の画像資料の入手とともに、生体情報としてSF-8サップフローメータで樹液流動及び水ポテンシャルの日変化をプレッシャーチャンバー法で計測した.その結果、MRIパラメータとして算出したT1・ADC・プロトン密度画像から、明らかに重度の萎縮症枝では、健全枝に劣る水分環境にあることが分かった.また、ADC値の変化は'幸水'枝内の水分生理が変化することとよく一致し、夜間は低位(2×10-5cm2/s)であるが、6:00以降上昇して12:00には5×10-5cm2/sとなった.ステージ別の樹液流についてみると枝葉の伸長時期には軽度の萎縮症発生枝と健全枝間に差異は認められないが、発芽期リン片脱落期展葉期には萎縮症枝で低位であり、水分通導機能の支障が示唆された.このような成果から、非破壊画像が入手できる小型モバイルMRIは、萎縮症発生の早期予測技術として有用できると思われる.今年度は、既に発生の確認できた萎縮症発生枝と健全枝の水分通導機能を比較した。すなわち、2011年7月下旬に筑波大学農林技術センター果樹園植栽の`幸水`樹を用いて、小型MRI装置出が画像資料を入手した。小型MRIの仕様は永久磁石は静磁場強度0.3T,ギャップ幅80mm、静磁場均一領域30mm,重量57kgであり、これをハンドリフトに搭載して、地上から160cm昇降可能とした。勾配磁場コイルは、平行四線型(Gx、Gy)とMaxwell pair型(Gz)とし、それぞれの勾配磁場効率は、22,8.0,7.3mT/m/Aであった。Gxは枝内の水の流れ(ADC:みかけの拡散係数apparent diffusion constant)を計測する際に必要な磁場勾配強度を補強するため30ターンとした。一方、生体情報については、SFー8サップフローメー(Daletown社製)によって実際の樹液流動を、さらにプレッシャーチャンバー法によって着生葉の水ポテンシャルを計測した。その結果、MRIパラメータとしてADCは`幸水'樹体内の水分生理が変化することとよく一致し、夜間は低位(2×10-5cm2/s)であるが、6:00以降上昇して12:00には5×10-5cm2/s以上を示し、その後低下した。ADCとT1パラメータは萎縮症発生枝で健全樹に比べ、低位であることが明らかとなった。一方、生体情報としての水ポテンシャルの日変化も発生枝着生葉で健全樹と比べ低位で推移することから、水分通導機能に支障を生じていることを明らかにした。

萎縮症発生の予測技術としては、現在、萌芽前の枝を供試して枝内のMRIを用いた水流動の計測の可能性の有無、さらにはサップフローメータを用いた萎縮症発生枝の検出を試みている。後者では水分流動に差異のあるものが検出されており、達観による萎縮症発生と一致するものと推定している。新規開発した小型MRI装置のフィールドでの利用ができることが判明し、その実用性が明らかとなった。ただし、今年度用いた枝は、既に発生した萎縮症枝であり、本来の目的である、予測技術開発には至っていない。一方、生体情報の入手は枝発育時とともに、現在萌芽前の枝を用い計測を行っているので、小型MRIで得られる画像解析により予測技術として利活用できる可能性は大きいと考えている。小型MRIによって入手できるパラメータとマッピング情報により、予測技術にまで発展できるよう、サップフロー・着生葉のクロロフィル蛍光値や水ポテンシャル等の生体情報との関連を明確にする予定である。今年度はMRIによる調査を中心に行ったため、当初予定していた生体情報の測定についてすべて網羅できなかった経緯があり、経費を次年度に持ち越し、以下の測定に資する経費として使用する計画としている。すなわち、萌芽前の枝内の水分流動がMRI計測によりできるかを見極めるため、種々のステージの枝を用いて、詳細に調査検討する。平行して萌芽前(展葉前)の枝を多数用い、計測値から達観による障害発生枝との関係を明確にする。さらに上記のように葉の展開後にも樹液流動、着生葉のクロロフィル蛍光値、水ポテンシャル、発生樹の根系の活性計測等を予定しており、これらの調査に該当する消耗品の購入に充てる予定である。
無形財情報の開示と金融機関の事業性評価融資の促進に関する研究

第1年度(平成30年度)では、第1課題「無形財情報と事業性評価判断に関する理論的フレームワークの画定」に関して、事業性評価の意義とその背景を官公庁の報告書を参考に文献レビューすることによって、まず事業性評価の主たる課題が無形財としてのインタンジブルズないし非財務項目をいかに把握し、評価・測定するかにあることを浮き彫りにする。それを受けて、第2年度「金融機関の事業性評価融資に関する調査・分析」では、大阪商工信金等のヒアリング調査、及び過年度に行われた金融機関を対象としたアンケート調査結果を参考に、事業性評価に強く関連性を有すると考えられる非財務項目を抽出し、それを体系化しようとした。さらに、第3課題「事業性評価モデルの構築と金融機関の融資決定への適用可能性」を解明するために、事業性評価に関する関連研究として、ドイツの利益獲得能力指数及びわが国経産省のローカルベンチマークに関する文献研究を行い、その特徴と限界を明らかにするように努めた。その結果、ドイツモデルの短・中・長期の時間軸に即して企業の利益獲得能力を評価するための財務・非財務項目を統合化するアプローチはわが国での事業性評価モデルの設定にも有用であること、また、ローカルベンチマーク方式で用いられる経産省方式も対話ツールとして有用であることが確認されるが、日本の土壌に即した中堅・中小企業の事業性評価方式としては、限界を有することが指摘される。これらの研究成果を踏まえて、オペレーショナルな事業性評価方式を構築し、金融機関の融資決定に適用するのが、第2年度(平成31年度・令和元年)の課題である。本研究の成果を実効性あるものとするために、最終研究報告書を予定してまず本研究代表者による単独刊行を予定している。そのため、研究の進捗状況についても、厳格に自己評価・管理しつつ進めるようにしてきた。また、本研究分担者との研究会合を頻繁に行うことによって、研究の進捗度に留意して研究活動を行ってきた。以上、第1年度の研究成果を踏まえて、第2年度では、事業性評価の日本版方式を完成し、その有効性と信頼性について地銀・信金の融資担当者を対象として、それを実際に適用することによって実験研究を行う予定である。その結果を緻密に討議・分析して、日本版事業性評価モデルを完成させ、公表することにしたい。第1年度研究補助金の次年度使用が生じた主たる理由は、当初、予定していた地方銀行・信用金庫等に対して、融資判断における重要な非財務情報項目のアンケート調査を行う予定であった。しかし、最新の論文等においても平成20年10月に行ったアンケート調査結果とは大きな差異がみられないことから、第1年度での調査は行わなかった。その費用分が次年度先送りとなった。当該補助金については、第2年度においては、実験研究やヒアリング調査の強化を図りたい。
多因子疾患パーキンソン病遺伝子の解明とオーダーメイド医療をめざした至適薬剤の選択

パーキンソン病(PD)は多因子遺伝性疾患と考えられ、家族性PDではα-synucleinやparkin遺伝子が発見されたが、患者の大部分を占める孤発性PDでは疾患感受性遺伝子は証明されていない。本研究では、疾患感受性遺伝子を同定すると同時にSNPと各薬剤への反応性、副作用との関連を明らかにしオーダーメイド治療法を確立する、ことを目的とし今年度は以下の結果を得た。1)約27,000個のマイクロサテライト多型を基盤としたゲノムワイド関連解析を行っている。pooled DNA法によるゲノムワイドマイクロサテライト関連解析では平均100kb間隔に配置された約27,000マーカー全てに関して1次、2次、3次スクリーニングを行い、71個の候補マーカーを個別タイピング中であり、いよいよ全ゲノムから少数の領域に絞られてきた。これらと連鎖不平衡にある遺伝子が孤発性パーキンソン病の発症に関与している可能性がある。2)多くの候補遺伝子上のSNPマーカーを用いたケースコントロール関連解析では、1次スクリーニングとして、患者・対照各190人で122個の候補遺伝子上の267個のSNPsを解析した結果、16個の遺伝子上の計22個のSNPsが1次スクリーニングで残り、患者・対照それぞれ約900人で2次スクリーニング中である。3)これまでにDNAサンプルを約950収隻した。また高齢発症のため同胞発症例の収集が困難であるが、専門医にアンケートして約270家系が存在する回答が得られた。うち約60家系を採血した。パーキンソン病(PD)は多因子遺伝性疾患と考えられ、家族性PDでは_-synucleinやparkin遺伝子が発見されたが、患者の大部分を占める孤発性PDでは疾患感受性遺伝子は証明されていない。本研究では、候補遺伝子から未知のSNPを探索し、SNPをもとに患者群と正常群で階層化も考慮した関連解析を行い疾患感受性遺伝子を同定すると同時にSNPと各薬剤への反応性、副作用との関連を明らかにしオーダーメイド治療法を確立する、ことを目的とし今年度は以下の結果を得た。1)東海大学分子生命科学2との共同研究により、3万種のマイクロサテライトマーカーのバンクを用いてpooled DNA法による全ゲノムスキャンを開始し、現在までに約7800個のマーカーの解析を行った。まだ一次スクリーニングの段階だが、いくつかの領域で10の-6乗オーダーの有意差を得ている。2)これまでに臨床分類、臨床評価シート作成、UPDRSでのscore化、文書によるインフォームドコンセントのあるDNAサンプルを727収集した。また高齢発症のため同胞発症例の収集が困難であるが、オールジャパン体制で収集する。専門医にアンケートして約270家系が存在する回答が得られた。メンデル遺伝性と考えられパーキン遺伝子変異のないものは約40家系で、うち兄弟発症は10家系である。約27,000個全てのマイクロサテライト多型に関して1次スクリーニングが終了し、各染色体において5-12%のマイクロサテライト多型でp<0.05を認めた。他施設より連鎖領域として既報告である第1染色体上の領域に位置するマーカーは、p=3.9×10^<-6>であり、これらと連鎖不平衡にある遺伝子が孤発性パーキンソン病の発症に関与している可能性がある。2)数百個の候補遺伝子上SNP(一塩基多型)マーカーを用いた患者・対照関連解析を開始した。まず各群95人を対象とした一次スクリーニングを行った。

現在までに、家族性PD,ドーパミン、タンパク質分解などに関連する57個の候補遺伝子上の計115SNPsを解析終了した。その結果、アレル頻度カイ二乗検定でp<0.05のSNPは、UCH-L1、PRKCG、parkin、SYPH1、LMX1Bの5つの遺伝子上にみられた。これらは検体数を増やして二次スクリーニングを行うとともに、さらに多数の遺伝子・SNPを解析していく。3)これまでにDNAサンプルを約950収集した。また高齢発症のため同胞発症例の収集が困難であるが、専門医にアンケートして約270家系が存在する回答が得られた。うち約60家系を採血した。パーキンソン病(PD)は多因子遺伝性疾患と考えられ、家族性PDではα-synucleinやparkin遺伝子が発見されたが、患者の大部分を占める孤発性PDでは疾患感受性遺伝子は証明されていない。本研究では、疾患感受性遺伝子を同定すると同時にSNPと各薬剤への反応性、副作用との関連を明らかにしオーダーメイド治療法を確立する、ことを目的とし今年度は以下の結果を得た。1)約27,000個のマイクロサテライト多型を基盤としたゲノムワイド関連解析を行っている。pooled, DNA法によるゲノムワイドマイクロサテライト関連解析では平均100kb間隔に配置された約27,000マーカー全てに関して1次、2次、3次スクリーニングを行い、71個の候補マーカーを個別タイピング中であり、いよいよ全ゲノムから少数の領域に絞られてきた。これらと連鎖不平衡にある遺伝子が孤発性パーキンソン病の発症に関与している可能性がある。2)多くの候補遺伝子上のSNPマーカーを用いたケースコントロール関連解析では、1次スクリーニングとして、患者・対照各190人で122個の候補遺伝子上の267個のSNPsを解析した結果、16個の遺伝子上の計22個のSNPsが1次スクリーニングで残り、患者・対照それぞれ約900人で2次スクリーニング中である。
不均一分布結合を用いた光分配素子の設計法に関する研究

本研究の目的は,不均一分布結合を用いた光分配素子を低損失かつコンパクトに設計することにあった。この研究課題に対して,まず,軸ずれ構造を含む不均一分布結合系の特性を差分法を用いた数値計算で詳細に解析した。その結果,軸ずれ部の構造パラメータを適切に設計することで,放射損失を増大させることなく光分配器の素子長を大幅に短縮できることを明らかにした。また,本結合型分配器で分配された光波を任意間隔まで分離するには,曲がり導波路の接続が必要と考えられる。そこで,光波の蛇行抑制に基づく低損失多段折れ曲がり導波路の構成法を提案し,本構成法に基づいて設計した多段折れ曲がりを接続することで,曲がり部での放射損失を大幅に低減できることを明らかにした。更に,本多段折れ曲がりでは,分離間隔や分離長に依存せず,低損失性を維持できることも示した。これらの成果は,口頭発表を行うとともに,学会論文誌に投稿,掲載された。今後は,本分配器の諸特性を実験的に検証する必要があると考えられ,数値計算と平行してイオン交換法によるチャネル光導波路の試作実験も行っている。しかし,その特性測定にまでは未だ到っておらず,今後早急に実験的検証を行いたいと考えている。更に,不均一分布結合系の応用例として,Tapered Velocity Couplerを異方性結晶上に形成し,その電気光学効果を利用することで,広帯域な偏波分離器ならびに任意比光分配器を構成できることを数値シミュレーションにより明らかにした。これらの素子は,将来,その実用化が期待されるコヒーレント光通信の分野において,重要な役割を果たすものと考えれ,更なる性能向上が今後の課題として挙げられる。現段階までの研究成果は,口頭発表を行うとともに,学会論文誌に投稿,掲載されている。また,異方性結晶を用いたチャネル光導波路の試作実験も,実験環境が整い次第早急に行う予定である。
膜タンパク質を標的とした高親和性人工ペプチドリガンドスクリーニングシステムの開発

既存の医薬品の薬剤標的の50%程度を占めるGタンパク質共役受容体(GPCR)を代表とする膜タンパク質に関しては、活性の高い抗体そのものが作製できないことから抗体医薬ができないことが問題となっている。本研究は従来の抗体のように動物に免疫することなく、試験管内で抗体に代わる高親和性のペプチドアプタマーを取得することを目的とした。研究分担者の戸田らは前年度の研究で標的タンパク質である膜タンパク質を当初考えていたリポソームではなくナノディスクに埋め込むことにより、膜タンパク質を機能的に保持できることを実証した。また、ナノディスクに埋め込んだ膜タンパク質は機能解析が容易であることも判明した。そのため、今年度は研究代表者がこのナノディスクに埋め込まれた膜タンパク質に対して試験管内淘汰をcDNAディスプレイ法という進化工学的に手法により効率的に行うシステムの開発を行った。具体的には、β2アドレナリンレセプターというGPCRをナノディスクに小麦胚芽無細胞翻訳系を用いて組み込み、リガンドに対して結合することを確認した。これをHis-tagを用いて磁性体ビーズに固定化した。また、9残基から13残基のランダムな配列をもつ環状ペプチドをcDNAディスプレイライブラリとして作製した。すでに調整したβ2アドレナリンレセプターを埋め込んだナノディスクに対してcDNAディスプレイによる試験管内淘汰を行った結果、数10010 nM程度の解離定数をもつ環状ペプチドを複数取得することに成功した。cDNAディスプレイ法は現在注目されている低分子化抗体(ナノボディ)も取得できることから、この方法により動物免疫をせずにGPCRに対する低分子化抗体を効率よくスクリーニングすることも可能となる。本研究により抗体による疾病領域を従来の30から100種類以上に各段に拡げ、人々の健康に大きく貢献することが可能となる。1997年に世界に先駆けて進化工学的手法であるファージディスプレイの試験管内版“in vitro virus"法をライブラリーサイズを保ちつつ安定化し、様々な選択条件下でスクリーニングを可能にするcDNAディスプレイ法を開発した。さらに改良を加えてスクリーニング対象を従来不可能であった生細胞やRNAといった不安定な分子にまで拡張することが可能となった。また、このようなcDNAディスプレイ技術を応用しわれわれは従来では不可能と考えられた低分子化合物に結合するペプチドアプタマーの試験管内淘汰実験に成功した。このようにcDNAディスプレイ技術の完成度が高まり様々な機能ペプチドの取得が可能になってきている。一方、無細胞タンパク質合成は年々技術的改良が加えられ、近年では人工二重脂質膜(リポソーム)に膜タンパク質を発現する技術が開発されてきているさらに、これを利用した膜タンパク質の機能解析もできるようになってきている。本研究ではcDNAディスプレイ技術によるペプチドリガンドスクリーニング技術と標的となる無細胞タンパク質合成による膜タンパク質合成技術を融合させ、従来から主要な創薬標的にも関わらず抗体が作製しにくいGタンパク質共役受容体(GPCR)等の膜タンパク質に特異的に結合する人工ペプチドリガンドの創製を目指した。当初、膜タンパク質を通常のリポソームに組み込むことを考えていたが、リポソームの粒径を110μm以内に揃える技術がないため、二重脂質膜を膜骨格タンパク質(Membrane Scaffold Proteins:MSP)のベルトによって囲み、天然に近いリン脂質二重膜構造をとるナノ構造体を形成するナノディスクを利用することとした。ナノディスクの合成には成功したため、今後はこれを利用してスクリーニングを行う予定である。本研究では正しい構造を有する標的分子を提示すること、そして、アゴニストあるいはアンタゴニストとしてリガンド候補を探索するために適切な数量の母集団を準備すること、さらには有望なリガンド候補を取りこぼし無く同定することの3点に集約される。

cDNA display法および機能型膜タンパク質の完全インビトロ再構成系の二つの独自技術を融合し、従来の系を凌駕する効率的な膜タンパク質に対する作用ペプチド(アゴニストあるいはアンタゴニスト)の探索システムの基盤技術の構築を進め、代表的な膜受容体に特異的かつ高親和性の機能性ペプチドリガンド(ペプチドアプタマー)の取得をする。当初、膜タンパク質を通常のリポソームに組み込むことを考えていたが、1)組み込んだ膜タンパク質の機能アッセイが難しい2)膜タンパク質のリポソームの粒径を110μm以内に揃える技術がない(リポソーム粒径を一定に大きさに揃えることができないとセルソーターでの選択が不可能)ため、二重脂質膜を膜骨格タンパク質(Membrane Scaffold Proteins:MSP)のベルトによって囲み、天然に近いリン脂質二重膜構造をとるナノ構造体を形成するナノディスクを利用することとした。共同研究者の戸澤はすでにナノディスク技術を保有しており、複数の膜タンパク質のナノディスクへの埋め込みに成功している。今回、膜タンパク質としては活性評価が容易なロドプシンをモデル膜タンパク質とした。そして、MSPの大量合成とロドプシンのナノディスクへの組み込みを確認した。また、複数の膜タンパク質のナノディスクへの埋め込みを試している状況である。MSPにはHisタグが付いており、これによりNi-NTAビーズ表面に固定化する。当初の予定を変更してナノディスクを介してNi-NTAビーズ上に膜タンパク質を固定化する形となる。このため、膜タンパク質の膜外と膜内の両方のドメインに対してスクリーニングされることになる。このため、ナノディスクに対するスクリーニングの後で、酵母等で膜タンパク質を細胞上に発現し、これに対してスクリーニングをする予定である。現在、当初の予定通りMuscarinic acetylcholine receptor M2のベクターを合成し、これをナノディスクに埋め込む準備をしているところである。これが完成次第、セルソーターを用いたスクリーニングを行い、さらに次世代シーケンサーを用いて配列を解析、候補分子の絞り込みを行っていく。候補分子は無細胞翻訳系で合成し、分子間相互作用解析装置でその親和性を解析する。
スキルミオンダイナミクスの理論的研究

原子核物理学の分野で最初に提案されたスキルミオンと呼ばれるトポロジカルな場の配置は,今日,磁気スキルミオンとして磁性体中で実現することがわかっている.磁気スキルミオンは,カイラルな結晶構造を持つ磁性体や多層磁性体などの空間反転対称性が破れた系で広く観測されている.カイラルな結晶構造を持つ磁性体の3次元バルクでは,2次元のスキルミオンが外部磁場の方向へと積み重なったような構造ができており,それは糸のような形状をなすため,スキルミオンストリングと呼ばれる.我々は,スキルミオンストリングに局在し,ストリングの伸びる方向へと伝わるマグノンモードについて理論的に研究した.マグノンのスペクトラムは解析的に計算され,マグノンの連続スペクトラムの下に2つのモードがあることが判明した.それは,ブリージングモードと並進モードである.これらのモードは共に非相反性を示す.すなわち,マグノンの伝搬方向に依る非対称性が現れるのである.特に,ブリージングモードは分散関係にてkの1次の項を持ち,強い非相反性を示す.(一方,並進モードは南部・ゴールドストーンの定理によりkの1次の項を持つことは禁止されている.)これに伴い,ブリージングモードはk=0,すなわちストリングの方向に一様なブリージングでさえもエネルギーを1方向に運ぶことがわかった.我々は数値シミュレーションも同時に行い,以上の解析な結果が数値計算の結果と一致することを確かめた.以上の我々の結果はスキルミオンストリングという磁気テクスチャを用いた1方向熱チャネルの設計を可能にするものであり,応用上も興味深い.この結果は今後論文にまとめる予定である.28年度が最終年度であるため、記入しない。28年度が最終年度であるため、記入しない。空間反転対称性の破れた強磁性体中で観測されている磁気スキルミオンと呼ばれるトポロジカルなスピンテクスチャーは,次世代の高密度・省電力データデバイスの候補として注目を集めている.中でも,電流によって誘起されるスキルミオンの運動は,長年研究されてきた磁壁の運動とは全く異なっており,応用上有利な性質が多く報告されている.当該年度には,ナノワイヤに垂直に電流を流すことによって,ナノワイヤの方向にスキルミオンを動かすという新たな駆動方法を発見した.スキルミオンの運動は磁場中での電子の運動と類似しており,後者においてはエッジモードが重要な役割を果たしているが,この対比によりスキルミオン運動のエッジモードというアイデアを考えることにより本研究が生まれた.この新たな駆動方法の利点は大きく2つある.1つめは,磁壁の電流駆動や磁気スキルミオンの従来の方法による電流駆動と比較して100-1000倍もの大きな速度が得られることである.2つめは,不純物の存在下で現れる駆動のための閾値電流が,磁壁運動の閾値電流と比べて5-6桁程度も小さいことである(これは自由空間におけるスキルミオンの運動と同様である).以上の結果により,さらなる高密度・省電力データデバイス設計の指針が得られたといえる.さらに,今までに行った研究をもとにして実際にメモリーデバイスのプロトタイプを提案し,特許申請という形で発表している.これらの特許は,将来メモリー産業において我が国が世界をリードする際に重要特許となると信じている.まず,スキルミオンを情報ビットとして用いたデータデバイスを,微視的なシミュレーションを行うことにより理論的に作成した.ローカルな熱,磁場,電場,そして電流により,スキルミオンの生成・消滅がコントロールできる.これは情報の書き込み・消去に対応しているが,この書き込み・消去は,ナノ秒からピコ秒という超高速の動作が可能であることが判明した.また,昨年度の研究で明らかとなった「スキルミオンに働く巨大スピントランスファートルク」を応用して,スキルミオンによるレーストラックメモリーを設計した.以上の発見は,(i)超高密度,(ii)不揮発性,(iii)超低消費電力,という優れた特徴を持つスキルミオンデバイスの実現に向けた大きな前進といえる.そして,スキルミオンのダイナミクスだけではなく,磁壁のダイナミクスについても考察した.ここで考えたのは,磁壁の中の磁壁とも呼ばれるブロッホラインが密に多数入った磁壁であり),特に,電流で駆動した運動について,磁場駆動の運動と比較しながら調べた.この研究により,ブロッホラインの運動が,電流密度と速度の関係式を従来のものから大きく変えることが明らかとなった.具体的には,ピン止めが存在しない場合,従来の関係式では速度がGilbert緩和項の係数αと非断熱効果の係数βの比に比例していたのに対し,ブロッホラインの存在下では,αやβの値に依らないユニバーサルな関係式が得られることがわかった.これは,スキルミオンにおける関係式と同じ振る舞いである.さらに注目すべきは,ピン止めが存在する場合の駆動電流密度の閾値であり,閾値が小さいことで有名なスキルミオンの場合よりもさらにα倍小さいことが判明した.この研究は,長い歴史を持つ磁壁を用いたデバイス設計に対して全く新しい指針を与えるものであり,今後の実験研究を刺激する結果であると考えている.ブロッホラインの多数入った磁壁の電流駆動ダイナミクスでは,駆動電流密度閾値の小ささで知られる磁気スキルミオンと比べてもなお3桁程度小さい駆動電流密度閾値が実現するという,画期的な研究成果を挙げた.

さらに,今まで行っていた磁気スキルミオンの研究で得られた知見をもとにデータデバイスの理論設計を行い,磁気スキルミオンの分野が応用に近づいた.以上のように,当初の計画以上に進展していると考える.原子核物理学の分野で最初に提案されたスキルミオンと呼ばれるトポロジカルな場の配置は,今日,磁気スキルミオンとして磁性体中で実現することがわかっている.磁気スキルミオンは,カイラルな結晶構造を持つ磁性体や多層磁性体などの空間反転対称性が破れた系で広く観測されている.カイラルな結晶構造を持つ磁性体の3次元バルクでは,2次元のスキルミオンが外部磁場の方向へと積み重なったような構造ができており,それは糸のような形状をなすため,スキルミオンストリングと呼ばれる.我々は,スキルミオンストリングに局在し,ストリングの伸びる方向へと伝わるマグノンモードについて理論的に研究した.マグノンのスペクトラムは解析的に計算され,マグノンの連続スペクトラムの下に2つのモードがあることが判明した.それは,ブリージングモードと並進モードである.これらのモードは共に非相反性を示す.すなわち,マグノンの伝搬方向に依る非対称性が現れるのである.特に,ブリージングモードは分散関係にてkの1次の項を持ち,強い非相反性を示す.(一方,並進モードは南部・ゴールドストーンの定理によりkの1次の項を持つことは禁止されている.)これに伴い,ブリージングモードはk=0,すなわちストリングの方向に一様なブリージングでさえもエネルギーを1方向に運ぶことがわかった.我々は数値シミュレーションも同時に行い,以上の解析な結果が数値計算の結果と一致することを確かめた.以上の我々の結果はスキルミオンストリングという磁気テクスチャを用いた1方向熱チャネルの設計を可能にするものであり,応用上も興味深い.この結果は今後論文にまとめる予定である.ナノワイヤに垂直に電流を流すことによるスキルミオン運動の駆動方法により,通常の電流駆動に比べて100-1000倍もの速度を実現できるという大変インパクトの大きい理論を提案した.さらに,この研究は当該年度の早い段階において高い完成度を実現することができた.そのために,多くの国際会議において本研究成果を発表し,周知させることができた.その他にも特許申請を行うなど,重要特許を他国に取られないよう尽力している.以上のように,当初の計画以上に進展していると考える.スキルミオン結晶を電流で駆動した際に,ブラッグスポットが非自明な変化をすることがシミュレーションで見られている.これを解析的な計算で導出し,さらに実験家と協力して観測する.28年度が最終年度であるため、記入しない。まず,実際にメモリーとして働く構造の提案をさらに進め,それに伴う特許を着実に押さえる.また,今までは2次元におけるスキルミオンのダイナミクスを重点的に取り扱ってきたが,次元をさらに上げて3次元におけるスキルミオンのダイナミクスをも考えるつもりである.28年度が最終年度であるため、記入しない。
ヨーロッパ・地中海世界における異宗教・異宗派間の相剋と融和をめぐる比較史研究

当初の研究計画に即して、国際ワークショップと国際シンポジウムを3年連続で組織し、第一線で活躍する合計14名の研究者を世界各国から結集して、キリスト教諸宗派、イスラーム、ユダヤ教などを対象に、広域的な視野のもとで異宗教・異宗派間の関係を比較史的に研究した。これにより得られた共通認識をふまえて、研究者間の濃密な国際交流ネットワークを構築し、研究代表者を編集責任者として、全員の協力による共著出版の準備を進めることができた。共同研究の初年度にあたる平成21年度は、まず6月7日に東京大学文学部で第1回研究会を開催し、研究代表者による研究計画の経緯・趣旨・実施方針の提示とともに、参加者が各自の研究構想を発表し、討論がなされた。その結果、参加者全員による問題意識の共有と相互理解が深められた。また当初の計画にしたがい、日本語と英語による本科研ウェブサイトを開設し、研究目的、計画、メンバー構成、および研究会・講演会・ワークショップ企画に関する情報を広く内外に発信する拠点とした。さらに12月28-29日には、三重県伊勢市の神宮会館で第2回研究会を開催し、参加者全員が当該年度における研究の取り組みや海外調査の結果を相互に報告するとともに、平成22年度以降のワークショップ・国際シンポジウムの準備を進めるために、海外からの招聘候補者の紹介・検討が行われた。この研究会には第1回研究会に参加できなかったメンバーも参加し、合宿形式の濃密な討論を通じてメンバー間の相互理解は一層深まり、比較研究の共通の論理的枠組みを構築する作業が進められた。最後にヨーロッパ歴史学界との交流を図る最初の企画として、3月4-14日にダブリン大学トリニティ・カレッジ上級講師のグレイム・マードック氏を東京大学に招聘し、近世ハンガリー・トランシルヴァニアにおける宗教改革・宗派問題にかかわる3回の連続講演会を組織した。講演会には科研メンバー以外にも多くの参加者が出席し、講演内容・討論ともに有益であった。マードック氏との交流を実現したことにより、最終年度の国際シンポジウム企画に向け一歩前進したと考えている。第2年目の平成22年度は、まず7月に東京大学で第3回研究会を開催し、11月の国際ワークショップの開催計画を話し合うとともに、各メンバーが研究の進捗状況を報告、それぞれについて質疑応答を交わし、問題意識の共有と相互理解を深めた。11月に「ヨーロッパ・地中海世界における諸宗教の相剋と融和」第1回国際ワークショップを開催し、アメリカ、イスラエル、フランスから4名の研究者が参加した。オスマン期エジプトのコプト、ヴェネツィア海外領土のギリシア正教徒、スペインのモリスコ、フランス海軍のプロラスタント、アイルランドのカトリック信徒を対象とする研究報告に基づき、異宗教・異宗派間の関係、とくに宗教と政治権力との関わりについて議論を深めた。12月には兵庫県神戸市で第4回研究会を開催、研究体制と将来計画について検討した。さらに19世紀末20世紀初頭の独仏対立を背景とするユダヤ教徒コミュニティー内部の対立関係をめぐって、研究協力者による報告がなされ、シオニスト運動から神戸在留ユダヤ人家系まで、幅広い討論が行われた。研究会に続いて神戸市内の複数の宗教施設(モスク、カトリック中央教会、シナゴーグ、ハリストス正教会、バプテスト教会)を訪問し、各施設で聖職者・信徒による講義を受け、宗教の日常的営為および神戸の都市空間における諸宗教の共存について認識を深めた。最後に、3月に東京大学で本科研主催の「『ユーラシア諸宗教の関係史論』合評討論会-信仰における他者性をめぐって-」と題する公開シンポジウムを実施し、日本から西ヨーロッパに至るユーラシア各地の諸宗教間の相剋と融和、受容と排除のメカニズムを比較史的に論じ、一国史の枠組みを超えて共通の論理に基づく歴史解釈を探究した。第3年目の平成23年度は、まず7月に東京大学で第5回研究会を開催し、10月の国際ワークショップの開催計画・準備状況を話し合うとともに、各メンバーが研究の進捗状況を報告し、それぞれについて質疑応答を交わすことで問題意識の共有と相互理解を深めた。10月には「ヨーロッパ・地中海世界における諸宗教の相剋と融和」第2回国際ワークショップを公開形式で開催し、メンバー以外では海外からの招聘報告者としてフランスから3名の研究者とコメンテータとして日本の研究者も参加した。そこでは、中世南フランスの異端、近世イタリアの異端審問、近世フランスの宗教書出版活動、近世低地地方の秘密結社、オスマン帝国内のギリシア・カトリックを対象とする研究報告が行われ、活発な討論を経たうえで、異宗教・異宗派間の関係、とくに宗教的アイデンティティや宗教と政治権力との関わり、宗教と社会との関わりについて、さらなる研究推進のための示唆を得ることができた。12月には和歌山県高野山で第6回研究会を開催し、研究体制と研究計画について検討した。さらに明治・大正期の仏基同一起源説、高野山と真言密教の関係史、仏教における「他者性」の問題について、歴史学や仏教学を専門とするメンバーおよび招聘研究者による報告がなされ、比較宗教史などの観点から幅広い討論がなされた。研究会に続いて金剛峯寺を初めとする宗教施設を訪れ、諸宗教の共存と融和や、その可能性を探求した人間の知的営為について認識を深めた。

第4年目で最終年度にあたる平成24年度は、まず7月に第7回研究会を開催し、10月の国際シンポジウムの開催計画・準備状況を話し合った。また各メンバーが研究の進捗状況を報告し、それぞれについて質疑応答を交わすことで、問題意識の共有と相互理解を深めた。10月には、東京大学駒場キャンパスにおいて、国際シンポジウム「ヨーロッパ・地中海世界における諸宗教の相剋と融和」を2日間にわたり公開形式で開催した。この研究会議では、科研メンバー16名に加え、本研究に関連するテーマに取り組む7名の研究者を海外(フランス、イギリス、アイルランド、イスラエル、レバノン、ロシア)から招聘した。1日目は「近世ヨーロッパにおけるカトリックとプロテスタント」、2日目は「地中海世界と西アジアにおける宗教的多元性」というテーマのもと、諸宗教・諸宗派が交錯するヨーロッパ・地中海世界において、宗教的「他者」がどのように受容され、あるいは排除されたのかという歴史的現実を明確にし、また比較するための個別報告の場を設けた。そこでは、各発表者と参加者の研究と関心にもとづく活発な議論が展開された。12月には、長崎市で第8回研究会を開催し、研究実施状況を点検するとともに、本科研の総括のありかたについて議論した。また、メンバー1名による近世ヨーロッパにおける草の根の寛容思想についての報告、さらにキリシタン研究を専門とする2名の招聘研究者による、キリスト教と仏教や日本の信仰習俗との類似性の指摘やキリシタンの葬制とキリシタン伏碑登場の背景の解説がなされた。研究会に続いては、唐寺やキリシタン関連の施設・墓地などを巡り、またカクレキリシタン爺役の方から話をうかがう機会を得、異宗教・異宗派間の融和の試みと実践について認識を深めた。当初立てた研究計画に沿って、研究に参画する各研究者は個別の専門的研究を遂行し、それらの成果は雑誌論文や図書、学会発表などによって着実に積み重ねられている。また、国際ワークショップを成功させ、本研究の課題について知見を深めることができた。次年度の国際シンポジウムの準備も着実に進んでいる。以上により、最終年度に本研究の総括を用意できる段階に至った。24年度が最終年度であるため、記入しない。最終年度にあたる平成24年度は、国際シンポジウムを成功に導くことを最大の目的とする。この国際シンポジウムには、日本史や東洋史の研究者にも参加を要請し、学会組織との連携も視野に入れつつ、日本で開催するに相応しい視野の広がりを実現するよう準備を進める。さらに、この国際シンポジウム報告集を、適切な形で出版する計画も同時並行的に進め、4年間の研究成果を学界に定着させための検討を進める。年度末には最後の研究会を開催して、国際シンポジウムおよび4年間の研究活動の成果について総括し、反省点を整理したうえで、将来の新しい研究計画について討論する。
心筋炎心筋症における免疫学的研究-単クローン性抗体による免疫組織化学及び免疫治療

【I】.ヒト心筋症心筋炎の研究:11例の拡張型心筋症患者の生検心筋insituではLeu【1^+】のT細胞の浸潤を認める。T細胞サブセットの中、Leu【2a^+】のCytotoxic/suppressonT細胞(Tc/s)は8.7±3.5%,Leu【3^+】のHelper/inducer T細胞(Th/i)は5.5±3.6%であり、T4/T8比は0.7±0.6であった。またT4/T8比は11例中9例で1以下を示した。一方、4例の特発性心筋炎ではLeu【2a^+】,Leu【3^+】のリンパ球浸潤の程度は様々であり、T4/T8比は0.12.5と一定の傾向を示さなかった。症例中にはLeu7のNK細胞の浸潤の多いものもみられた。心筋生検組織像とリンパ球浸潤の程度との対比:拡張型心筋症患者の生検心筋光顕像を筋原線維の疎少化,心筋細胞の錯綜配列核の変化,線維化について04+のスコアで半定量化して、各症例のリンパ球浸潤の程度との相関を求めたが、有意な結果は得られなかった。NYHAの心機能分類と単核細胞浸潤の程度を対比するとNYHAの【III】【IV】群は【I】【II】群に比して単核細胞浸潤が多い傾向を示した(P<0.1)。【II】.マウスの実験的CoxsackieB3 visus性心筋炎:ウイルス接種第5日より細胞浸潤が出現し、第9日で最も広範囲であった。T細胞は第9日,14日,3カ月,12カ月では各々90±29,113±22,16±3,6±1/0.2【mm^2】,Lyt【1^+】のTh/iは79±23,101±19,14±4,6±2,Lyt【2^+】のTc/sは15±3,12±4,4±1,2±1であった。Lyt1/Lyt2(T4/T8比と相同)は第14日で最も高く、9.1±3.6を示し、概して高値であった。ウイルス性心筋炎ではリンパ球数の上からはTh/i細胞が優位であった。免疫電顕ではLyt【2^+】のリンパ球が心筋細胞の筋鞘に付着し、心筋細胞をin vivoで傷害していると考えられる像が観察された。また、Lyt【1^+】のリンパ球がマクロファージと接合する所見もみられ、helper T細胞の活性化に関係する像と考えられた。以上のごとく、心筋症心筋炎の心筋in situではリンパ球による細胞性免疫機構が極めて重要な役割をはたしていることが明らかとなった。

また、Lyt【1^+】のリンパ球がマクロファージと接合する所見もみられ、helper T細胞の活性化に関係する像と考えられた。以上のごとく、心筋症心筋炎の心筋in situではリンパ球による細胞性免疫機構が極めて重要な役割をはたしていることが明らかとなった。