hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
選択的注意と自発性瞬目に関する心理学的研究

目は心の窓といわれるように,目の動きから心理過程を推測しようとする試みは古くから行われてきており,人と人との対面場面でも目には注意がいく.本研究では,目の動きの中でも特にまばたき(瞬目)に注目し,選択的注意という心理過程を瞬目活動で説明するには,どのような手法で刺激を提示すればよいのかを明らかにし,選択的注意と瞬目がどのように関わっているのかを明らかにしようとするものである.本研究では,視覚及び聴覚モダリティに対する注意の方向や量をコントロールするための刺激提示方法を開発し,実験を行った.昨年までの研究によって,どのモダリティに向けるかによって瞬目発生のパターンは大きく異なり,瞬目発生が選択的注意の生理的指標として有効であることが示唆された.本年度は,顔への選択的注意を瞬目で調べるために実験を行った.その結果,二重モダリティ課題において,音刺激に注意を向けて計算を行っているとき,注意を向けていない画面によく知った顔写真が呈示されると瞬目発生が後々まで続くことが明らかになった.このことは,顔写真が呈示されるだけでは瞬目が1回発生するだけだが,よく知った顔写真の場合その顔を想起するため瞬目発生を引き起こすのであろうと考察された.このことから,顔写真に対する選択的注意の指標としても瞬目が利用可能であることが示唆された.来年度は顔写真記銘時および再認時の瞬目発生の様子を瞬目時間分布に表し,顔と文字では瞬目発生にどのような違いがあるのかを明らかにし,瞬目発生と選択的中との関係をさらに調べていく予定である.目は心の窓といわれるように,目の動きから心理過程を推測しようとする試みは古くから行われてきている.本研究では目の動きの中でも特にまばたき(瞬目)に注目した.瞬目は,心理過程と深く関わりながら生じ,瞬目発生の様子を瞬目時間分布に表すと,瞬目は情報処理の終了とともに発生し,その発生パターンは情報処理に伴う負荷と関係することが明らかにされている.このことから,瞬目の発生には注意が関係していると考えられる.ここでは特に選択的注意を取り上げる.選択的注意とは,外界からの刺激に対して,必要な刺激は処理を行い,不必要な処理は棄却する働きを行うものである.本研究では,選択的注意と瞬目がどのように関わっているのかを明らかにしようとした。そのために,視覚及び聴覚モダリティに対する注意の方向や量をコントロールするための刺激提示方法である二重モダリティ呈示法を開発した.二重モダリティ呈示法とは,視覚と聴覚の刺激を提示し,いずれかのモダリティに注意を向けさせるものである.視覚モダリティに注意を向けているときに,聴覚的に注意を引くような刺激を呈示する。また聴覚モダリティに注意を向けているときに,視覚的に注意を引くような刺激を呈示する.その際の瞬目発生パターンを調べた.本年度は,顔への選択的注意を瞬目で調べるために実験を行った.その結果,二重モダリティ課題において,聴覚モダリティに注意を向けているとき,画面によく知った顔写真が呈示されると,知らない顔写真に比べて瞬目発生が後々まで続くことが明らかになった.このことは,よく知った顔写真の場合,今の顔は見たことがあると,その顔を想起するため,瞬目発生を引き起こすのであろうと考察された.このことはり顔写真に対する選択的注意の指標としても瞬目が利用可能であり,カクテルパーティ状況や虚偽検出など様々な場面に瞬目活動が応用できることを示唆するものである.
哺乳類配偶子の雌雄差を規定する分子機構の解明

哺乳類配偶子の形成過程で確立される性特異的DNAメチル化パターンは、哺乳類の発生に必須であると共に、配偶子ゲノムの機能的性差を規定することが諸家の報告から明らかにされている。すなわち、性特異的DNAメチル化パターンは配偶子の性差を規定する主要素の一つであると考えられるが、性特異的パターン成立の分子機構(DNAメチル化によって配偶子の性差を規定する分子機構)は明らかになっていない。我々は、配偶子の性特異的DNAメチル化パターン確立に特異的に関与することが唯一知られている因子、DNAメチル化酵素関連因子Dnmt3Lに着目し、エピジェネティックな観点から、哺乳類配偶子雌雄差形成機構の解明を進めている。本研究助成の期間中に、Dnmt3Lタンパク質と相互作用する候補因子を二つ同定した。そのうち一つは、生殖腺で強く発現している事が判明した。この候補因子は、一部既知のタンパク質機能ドメインに類似の構造を持つが、明らかなファミリー遺伝子が見当たらず、機能未知であり、現在ターゲテイングによる機能解析を進めている。また、Dnmt3L遺伝子変異マウスから得られる異常胚(卵子で確立される特異的DNAメチル化を系統的に失っていると考えられる異常胚)からゲノムDNAを回収し、抗メチル化シトシン抗体で免疫沈降後、CpGプロモーターマイクロアレイを用いて沈降DNA量の網羅的定量を行い、ゲノムワイドなDNAメチル化異常領域の検索を行った。この手法により、新規の卵子特異的DNAメチル化候補領域が見出されてきており、現在これらの候補領域の詳細なDNAメチル化定量解析を行っている。近年の発生工学の進歩により,精子核に似たDNAメチル化パターンを有する卵子核を用いると,卵子二個から正常なマウス個体を発生させることが可能となった。この事実は,精子核と卵子核には機能的雌雄差が存在し,その雌雄差を定義する分子生物学的実体の一つは,精子と卵子それぞれに特異的なDNAメチル化パターンであることを示している。これまでに我々は,精子と卵子に特異的なDNAメチル化パターンが確立される分子機構の解析を行ってきたが,我々を含む諸家の報告は,さらなる未知因子の関与を示唆する。そこで,すでにこれらの過程に関与することが知られている因子Dnmt3Lを用い,その相互作用候補因子を同定し,その解析を行っている。現在までのところ,そのうち一つの候補因子は,生殖腺に限局して発現し,アミノ酸配列レベルで他の生物種にも保存されていることが判明した。現在この候補因子を培養細胞中で強制発現させ,その生理活性の有無を検討している。また,変異マウスの作製を試みているが,おそらく同候補因子周辺が反復配列に富んだ構造であることが技術的障壁となり,現在に至るまで変異ES細胞の樹立に成功していない。今後,更に他の配列領域を用い,ネガティブセレクションマーカーも組み込んだターゲティングベクターを構築し,候補因子遺伝子の変異モデル作製を目指す。
自給飼料確保と放棄水田保全のための浮稲飼料化技術の開発

[乾物収量,可消化収量]浮稲の乾物収量は高い値を示し,特にFRC14は乾物で2,500g/m^2とトウモロコシの収量に匹敵する値を示した.子実を生産する稲の可消化乾物収量は子実収量がその大半を占めるのに対して,日本ではほとんど結実しない浮稲は,その収量の内訳は茎葉のOcc(細胞内容物)とOa(高消化性繊維)である.すなわち,イネのホールクロップサイレージは高いTDN含量を持つデンプン質飼料であるが,浮稲を原料とした飼料は,牧草に類似した,繊維質の飼料である.浮稲は,乾物収量,可消化乾物収量が高く,また,反芻家畜に必須の繊維質を含む飼料として有望である.[再生能力]1番草刈り取り後の再生した稲の草丈,乾物収量から明らかなように,子実生産の有無に関わらず,浮稲を含めて,稲の再生能力は高くないと思われる.特に浮稲では1回刈り区であるC区と各T1区,T2区,T3区のそれぞれの差が顕著であり,他の稲よりも1回刈りと2回刈りの差が顕著であった.[サイレージ特性]一般に,低水分サイレージであるイネサイレージは乳酸生成が抑えられ,pHが高いまま保存される.本試験においてもFRC12がpH4.3程度まで低下したが,他のサイレージはすべてpH4.5以上であった.子実を生産しなかった浮稲と子実を生産した日印交雑種のサイレージの間pHの差を示したが,両者の間に有意な差は認められなかった.また,サイレージ中の有機酸組成を双対尺度法を使って示した結果,日印交雑種のサイレージは酸の生成量が少なく,ほぼ原点近傍に表示された.すなわちサイレージ発酵があまり行われなかったため酸の生成量が少なかったか,もしくは生成された酸が発酵基質として消費されてしまったことを示す.浮稲はFRC12が1回刈り区および2回刈り区で乳酸生成量が多かったため,横軸の乳酸の近傍に表示された.このことはFRC12のpHが最も低かったことと符号する.またFRC5,FRC7は2回刈り区において乳酸生成量が多いことが認められた.その他の浮稲品種も日印交雑種より各種の酸の生成が多かったことが認められた.[乾物収量,可消化収量]浮稲の乾物収量は高い値を示し,特にFRC14は乾物で2,500g/m^2とトウモロコシの収量に匹敵する値を示した.子実を生産する稲の可消化乾物収量は子実収量がその大半を占めるのに対して,日本ではほとんど結実しない浮稲は,その収量の内訳は茎葉のOcc(細胞内容物)とOa(高消化性繊維)である.すなわち,イネのホールクロップサイレージは高いTDN含量を持つデンプン質飼料であるが,浮稲を原料とした飼料は,牧草に類似した,繊維質の飼料である.浮稲は,乾物収量,可消化乾物収量が高く,また,反芻家畜に必須の繊維質を含む飼料として有望である.[再生能力]1番草刈り取り後の再生した稲の草丈,乾物収量から明らかなように,子実生産の有無に関わらず,浮稲を含めて,稲の再生能力は高くないと思われる.特に浮稲では1回刈り区であるC区と各T1区,T2区,T3区のそれぞれの差が顕著であり,他の稲よりも1回刈りと2回刈りの差が顕著であった.[サイレージ特性]一般に,低水分サイレージであるイネサイレージは乳酸生成が抑えられ,pHが高いまま保存される.本試験においてもFRC12がpH4.3程度まで低下したが,他のサイレージはすべてpH4.5以上であった.子実を生産しなかった浮稲と子実を生産した日印交雑種のサイレージの間pHの差を示したが,両者の間に有意な差は認められなかった.また,サイレージ中の有機酸組成を双対尺度法を使って示した結果,日印交雑種のサイレージは酸の生成量が少なく,ほぼ原点近傍に表示された.すなわちサイレージ発酵があまり行われなかったため酸の生成量が少なかったか,もしくは生成された酸が発酵基質として消費されてしまったことを示す.浮稲はFRC12が1回刈り区および2回刈り区で乳酸生成量が多かったため,横軸の乳酸の近傍に表示された.このことはFRC12のpHが最も低かったことと符号する.またFRC5,FRC7は2回刈り区において乳酸生成量が多いことが認められた.その他の浮稲品種も日印交雑種より各種の酸の生成が多かったことが認められた.供試品種は西海203号,密陽30号,IR24号,レイホウ及びホシユタカを用い,1999年5月12日に播種,6月2日に移植した.栽植密度は30cm×15cmとした.施肥は化成肥料(N:P:K=16:16:16)を40kg/10a,追肥を7月24日に20kg/10a施した.移植後42日目(T3区),56日目(T2区),72日目(T1区)にそれぞれ刈取調査を行い,対照区として無刈取区を設定した.西海203号における生長解析

1.地上部の乾物重は全生育期間を通じてC区が量も大きかったが青刈り区では刈取時期が早いほど刈取後の乾物重が大きくなった.2.LAIにも同様の傾向が認められ,対照区は各処理区と比較してかなり高く推移したが,青刈り時期が早いほど刈取後のLAIの回復程度は大きく,登熟期間の後半には対照区とT3区はほぼ同じ値を示した.3.CGRはc区とT3区,T2区とT1区が似た傾向を示し,C区とT3区では登熟中期に著しく減少したが,T1区とT2区にはこのような傾向は認められなかった.NARについても同様にC区とT3区,T2区とT1区が類似した経過を示したが,刈取後のCGRの回復は青刈り時期が早いほど高いのに対し,NARは低かった.乾物収量と青刈り時期の関係1.いずれの品種においても,青刈り時期が遅くなる程青刈り収量は増加し,逆に再生稲収量は減少したが,総乾物収量はC区で最大となり,青刈り時期が遅いほど低下する傾向が認められた.2.最大乾物収量はホシユタカの対照(C)区で,他の青刈り区に対して明らかに差があったが,西海203号,レイホウおおびIR24号では,C区とT3区はほぼ同じであった.3.上記の結果から青刈り時期が遅い場合,刈取後の再生葉のNARは高まるが,出葉が停滞し,LAIの回復が著しく遅れることによりCGRが低下し,総乾物収量が低くなったものと推察される.実験1:飼料稲の多回刈り利用を目的として実験を行った.供試品種として西海203号,Tetep(倒伏したためデータなし),レイホウ,密陽30,IR24,ホシユタカおよび再生に優れると思われる浮稲品種群ライダ3品種を用いた.6月下旬に移植後,7月上旬(T1),7月下旬(T2),8月上旬(T3)に青刈りを行い,それぞれ青刈り収量および再生収量を測定した.その結果,青刈り時期が遅れるほど刈り取り後の回復が遅れ再生時の収量はT1>T2>T3となった.各品種の2回刈の合計収量は対照区の1回刈収量に及ばなかった.7月下旬から8月上旬が供試した稲の最高分げつ期であり,最高分げつ期後に青刈りを行った場合は急激に再生収量が低下することが示唆された.実験2:飼料稲では,一般的に高品質なサイレージを調製することが困難とされているが,日本ではほとんど結実しない浮稲は栄養生長期が長いため良質なサイレージ発酵特性が期待される.本実験ではHABIGANJ AMON2,HABIGANJ A8,T442-57,RD19,LAL DIGA,LALDIGHA,BARADIGHAおよび実験1のライダ3品種を用いてサイレージの調製を行った.同時に日印交雑種12品種を用いてサイレージを調製し比較した.8/1の青刈り時には浮稲のサイレージのpHは4.885.50,日印交雑種はpH4.965.55を示した.再生時は10/2刈り取りの日印交雑種でpH4.625.02,11/10刈り取りの浮稲でpH4.295.25の値を示した.pHが低く特に良好な発酵状態を示したBARADIGHAを始め,浮稲および日印交雑種の数品種がサイレージの原料として適当であることが示唆された.
低温適応酵素における低温適応機構の分子メカニズムの解明

1低温細菌Shewanella sp. AS-11由来の無機ピロフォスファターゼ(Sh-PPase)を大腸菌にて過剰発現し、精製を行った。Sh-PPaseは活性中心に2つのマンガンイオンを有するが、精製試料は金属結合体で無かったため、過剰量のMnイオンを含む緩衝液で活性化処理を行いEPR測定を行った。ところが、フリーのMnイオン由来のEPR信号に邪魔されて酵素由来の信号の解析が困難であった。そこで金属イオン活性化条件の再検討を行い、フリーのMnイオンを除去し、不純物のない活性型Sh-PPaseを精製することに成功した。この試料を用いて種々の条件でのEPR測定を行い、電子状態の解析を行った。解析結果より、2つのマンガンイオン間の距離が3.55Aであり、これまで明らかになっている2つのマンガンイオンを有する酵素と比較して非常に小さな磁気相互作用を持っていることを明らかにした。今後はこの活性化法を用いて、基質結合型での活性中心近傍の構造解析、さらに基質結合型、非結合型における活性中心の構造と酵素活性の温度依存性を明らかにしていく。2上記低温菌由来酵素との比較対象として、新たに中温菌由来無機ピロフォスファターゼの遺伝子を組み込んだプラスミドを作製した。またこれを用いて大腸菌での発現系の構築にも成功した。今後精製系をさらに精査し、低温菌由来酵素との比較実験を行う予定である。3Sh-PPaseの構造変化の温度依存性を直接観測するための変異体作製の設計を行った。今後数種類の変異体の発現・精製を行う予定である。4これまで開発してきた高速混合凍結装置について、さらに再現性良く試料の作製を行うため、ミキサー部の改良を行った。これを用いて現在試料のクエンチ時間の再構成実験を行っている。29年度が最終年度であるため、記入しない。
植物が独自に進化させたエンドサイトーシス制御機構の解明

シロイヌナズナには真核生物共通のRAB5であるARA7,RHA1と、植物特異的なARA6という、異なるRAB5メンバーが存在し、VPS9aはこれらのRAB5を共通に活性化する。VPS9aはRAB5の活性化に必要なVps9ドメイン以外には既知のドメイン構造を持たない。機能未知であるC末端側の領域がどのような機能を持つのかを調べるため、C末を削った変異体を作製して生化学的、遺伝学的に解析を行った。全長VPS9aと各種オルガネラマーカーとの2重染色を行ったところ、VPS9aの局在するエンドソームはTGNの近傍に局在した。また、ARA7,ARA6との3重染色を行っており、今後、ARA7,ARA6のどちらとよく局在するのか定量的に観察を行う予定である。また、Yeast Two Hybrid解析や共免疫沈降法を用いて、VPS9aがダイマーを形成することや、C末を削ったS304*変異体がARA6特異的に結合が減少することを明らかにした。このC末のみを精製してGEF活性の測定を行っても、活性への影響は観察されなかった。シロイヌナズナ植物個体で、S304*-GFPの局在を観察したところ、全長よりもサイトゾルへの拡散が減っている傾向がみられた。さらに、PI3K阻害剤であるウォルトマンニン処理を行うと全長に比べてリング状構造への局在の割合が増えていた。植物特異的なARA6は陸上植物に保存されており、その活性化因子であるRAB5 GEFについても解析を進めている。ヒメツリガネゴケVPS9(Pp VPS9)についてY2Hで相互作用を観察すると、不活性型のPp RAB5に結合がみられ、活性型のRAB5には結合はみられなかった。またPp ARA6へは活性型にも不活性型にも相互作用はみられなかった。植物のRAB5 GEF活性化機構は動物のものと大きく異なっており、これらの解析を進めることで、植物の分野のみならず、動物や酵母の研究分野においても大きなインパクトを与えると自負している。弱いアリルであるvps9a-2をEMS処理しエンハンサー、サプレッサーの探索を行う予定であったが、うまく行かずに停滞している。そのため、VPS9a-GFPを発現する植物を用いてIPをし、奈良先端大学植物ユニットの深尾助教にMS解析をお願いした。こちらも思うような結果は得られていないが、VPS9aのC末端側を欠損したVPS9aS304*-GFPを発現する植物も作製したので、こちらも同様の実験を行って相互作用因子を同定し、全長と比較して解析していく予定てなある。このVPS9aS304*-GFPの細胞内局在を観察すると、葉肉細胞に巨大なオルガネラのような構造物が観察された。現在オルガネラマーカーとかけあわせて解析している。また、この植物体ではエンドザイトーシスの遅延を示唆する結果も観察されている。D185A、Y225AのGFP融合タンパク質についても現在作製中である。培養細胞を用いたTransient Assayで、VPS9a-GFPはサイトゾルに拡散してしまう。しかし、C末端を欠いたS304*-GFPでは若干エンドソーム様のドットに局在しやすくなる様子が観察された。定量して確認していく予定である。また、近年動物のRab5 GFPが他のRabと相互作用するという報告がなされているため、VPS9aについてもいくつか他のRabとの相互作用についてyeast two hybridを用いて検証したが、現在のところ他のRabとの相互作用は観察されていない。

ヒメツリガネゴケVPS9(Pp VPS9)についてY2Hで相互作用を観察すると、不活性型のPp RAB5に結合がみられ、活性型のRAB5には結合はみられなかった。またPp ARA6へは活性型にも不活性型にも相互作用はみられなかった。植物のRAB5 GEF活性化機構は動物のものと大きく異なっており、これらの解析を進めることで、植物の分野のみならず、動物や酵母の研究分野においても大きなインパクトを与えると自負している。
日常の嚥下頻度を指標とした嚥下機能評価法の開発

高齢者の嚥下機能と嚥下頻度の関連を検討するために、要介護高齢者33名を被験者として、経口摂取の有無で安静時1時間の嚥下回数を比較した。各群の嚥下頻度は、経口群:平均20.0±12.4回、経管群:8.1±6.9回となり、経管群では有意に嚥下頻度が少ないことが明らかとなった(p<0.01)。さらに経口群において、肺炎の既往の有無で嚥下頻度を比較したところ、肺炎なし群:平均24.2±12.1回、肺炎あり群:11.8±9.0回となり、肺炎あり群は有意に嚥下頻度が少ないことが明らかとなった(p<0.05)。この結果から、嚥下機能の低下した症例では嚥下頻度が低下している可能性があることが示された。高齢者の嚥下障害に関与するサルコペニアは、加齢だけでなく廃用により修飾される。嚥下機能の廃用は、嚥下関連器官を動かす頻度、つまり嚥下頻度の影響をうけると考えられる。我々は先行研究にて、要介護高齢者の嚥下頻度が健常成人と比べ減少していることを明らかにし、嚥下関連筋のサルコペニアが嚥下頻度の減少により生じる可能性を示した。しかしながら、高齢者の経管栄養症例や嚥下障害症例の日常の嚥下頻度、ならびに嚥下訓練の介入による嚥下頻度の変化は明らかではない。そこで本年度は、嚥下障害や経口摂取の有無などの条件での嚥下頻度を測定し、各症例における日常の嚥下頻度の指標を確立することを目的とした研究を行った。具体的に本年度に実施した研究は、療養型病院に入院中の高齢者のなかから、必要栄養量を全量経口にて摂取している者(経口摂取群:11名、平均年齢76±4.7歳)と全量経管栄養にて摂取している者(経管栄養群:11名、平均年齢74±10歳)を被験者として入院生活中の嚥下頻度を測定し、2群間で比較した。嚥下頻度の測定は1時間とし、測定中に経口摂取を禁止する以外は特に制限は設けなかった。測定の結果、各群の1時間あたりの嚥下頻度は、経口摂取群:平均27.5±14.0回、中央値22回、経管栄養群:平均10.8±8.8回、中央値9回となり、経管栄養群は経口摂取群と比較し有意に嚥下頻度が少ないことが明らかとなった(p<0.01)。この結果は、経口摂取の有無が日常の嚥下頻度に影響を与える可能性があることを示しており、「口から食事を摂る」という日常生活の中で定期的に嚥下運動を生じさせる行為が嚥下機能の維持に重要であることを示唆するものであると考えられた。経口摂取の有無など様々な条件を設定し、その条件の違いによる嚥下頻度の比較を行うためには、可能なかぎり測定条件(測定時間、周囲の環境など)が統一されている方が好ましいと考え、本年度は測定を1施設に限定して実施した。そのため、想定していた以上に被験者として該当する症例が少なく、被験者の選定に難渋した。なかでも、長期療養中の経管栄養症例は1施設内では人数が限られおり、目標とする症例数に到達することが困難であった。高齢者の嚥下障害に関わるサルコペニアは廃用により修飾されるため、嚥下関連器官を動かす頻度、つまり嚥下頻度は嚥下機能の廃用に影響すると考えられる。しかしながら、高齢者や嚥下障害症例の日常の嚥下頻度は明らかではない。そこで本年度も引き続き、嚥下障害や経口摂取の有無などの条件での嚥下頻度を測定し、各症例における日常の嚥下頻度の指標を確立することを目的とした研究を行った。療養病床に入院中の要介護高齢者を対象に、必要栄養量を全量経口にて摂取している者(経口群:20名、平均年齢76.1±7.8歳)と全量経管栄養にて摂取している者(経管群:15名、平均年齢77.2±6.9歳)を被験者として安静時1時間の嚥下回数を測定し、2群間で比較した。測定の結果、各群の1時間あたりの嚥下頻度は、経口群:平均20.0±12.4回、中央値17回、経管群:8.1±6.9回、中央値5回となり、経管群は経口群と比較し有意に嚥下頻度が少ないことが明らかとなった(p<0.01)。さらに経口群において、直近3ヵ月に肺炎の既往がない症例(肺炎なし群:12名)と既往がある症例(肺炎あり群:6名)とで1時間あたりに嚥下頻度を比較したところ、肺炎なし群:平均24.2±12.1回、中央値22回、肺炎あり群:11.8±9.0回、中央値9回となり、肺炎あり群は肺炎なし群と比較し有意に嚥下頻度が少ないことが明らかとなった(p<0.05)。

この結果は、経口摂取の有無が日常の嚥下頻度に影響を与えていること、嚥下機能の低下した症例では嚥下頻度が低下している可能性があることをそれぞれ示しており、定期的に嚥下運動を生じさせる行為、すなわち経口摂取や嚥下訓練が嚥下機能の維持に重要であることを示唆するものであると考えられた。今後は、引き続き経口摂取が嚥下頻度に与える影響を、禁食症例への嚥下訓練(直接訓練)での介入にて検討する予定にしている。高齢者の嚥下機能と嚥下頻度の関連を検討するために、要介護高齢者33名を被験者として、経口摂取の有無で安静時1時間の嚥下回数を比較した。各群の嚥下頻度は、経口群:平均20.0±12.4回、経管群:8.1±6.9回となり、経管群では有意に嚥下頻度が少ないことが明らかとなった(p<0.01)。さらに経口群において、肺炎の既往の有無で嚥下頻度を比較したところ、肺炎なし群:平均24.2±12.1回、肺炎あり群:11.8±9.0回となり、肺炎あり群は有意に嚥下頻度が少ないことが明らかとなった(p<0.05)。この結果から、嚥下機能の低下した症例では嚥下頻度が低下している可能性があることが示された。今後も当初計画した通り、1嚥下障害や経口摂取の有無などの条件での嚥下頻度を測定し、各症例における日常の嚥下頻度の指標を確立する、2嚥下訓練による介入前後での嚥下頻度の変化を調査し、その効果を検討する、以上の2点を目的として研究を推進していく予定である。1については、引き続き被験者を増やし測定を継続していく。また経管栄養症例だけでなく唾液分泌量や胃食道逆流のなどが嚥下頻度に及ぼす影響も検討する予定である。摂食嚥下障害当初購入を予定していた書籍が絶版となり、購入が不可能となったため。今後、研究を進めていく過程で必要となる資料や書籍などの購入を予定している。
過冷却液体中のイオン一分子反応におけるトンネル効果

液相反応においてミクロな初期過程を検討すると反応が分子配向の速度と競争的に起り、反応速度は時間に依存して変化する。同様な現象が低温トンネル反応においても見出されることが判明した。トンネル反応とは量子力学的トンネル効果により反応のエネルギー障壁を透過し、活性化エネルギーが零となり低温でも反応が起る。さらにこの反応には著しい同位体効果が現われる。分子配向の速度はアレニウス式に従って温度の低下と共に減少する。一方トンネル反応は速度は遅いが温度に依存しないため、低温ではトンネル反応と分子配向とが競争的になる。その結果、トンネル反応の速度定数は時間依存性を示す。1。低温エタノール中におけるベンゼンアニオンへのプロトン移行反応エタノール・ベンゼン混合物を77Kで放射線照射するとC_6H_6^-が生成する。このアニオンはエタノールと反応しC_6H_7になる。重水素化エタノールの場合は反応が遅くなり、大きな同位体効果がみられ、これはトンネル反応であろう。この場合、数μs以下で起る速い反応と100μs以上で起る遅い反応とから成り立っている。2。2,3-ジメチルブタンカチオンからのH_2脱離反応2,3-ジメチルブタン-SF_6を77Kでγ線照射するとジメチルブタンカチオンからH_2が脱離してテトラメチルエチレンカチオンが生成する。重水素化ジメチルブタンを用いると反応は著しく遅くなりトンネル効果が関与している可能性が高い。反応(2)は急速に反応する部分と、極めて遅く反応する部分から成り立っている。1。2。
日本中世における葬送墓制の総括的研究

中世の墳墓遺跡及び葬送墓制について3つのテーマを設定し、研究を進展させる形で進めた。以下、テーマ別に概要を記述する。【仏塔と墓の関係】福島県いわき市金光寺で確認した木製宝篋印塔の調査報告書を作成し、その内容について研究報告を行った。鎌倉時代後期において木製仏塔が墳墓の標識として屋外に造営されていた事実を遺物で証明するもので、今後の調査研究に木造仏塔の視点を加えるよう注意喚起を行った。【納骨信仰の研究】河内長野市金剛寺所蔵の木製小五輪塔の調査報告書を刊行し、あわせて研究発表を行った。小塔の内部に火葬骨片を納めたもので、元興寺の随時で多数の納骨とは異なり、おそらく同時で一人の方の遺骨の一部を粉砕して、一括して埋納したものであろう。高僧の遺骨信仰などに関係するものの可能性を考えた。また、高野山における納骨信仰のシンボル的な一石五輪塔のうち、形態が著しく退化した資料を明王院で確認し調査を進めていた。その報告書を刊行し、研究発表を行った。当該資料については年代の決め手を欠いているが、おそらく17世紀にかかるものとみられ、高野山の子院における納骨信仰について言及するに至った。【中世墓の破壊】研究開始期の成果から中世墓の終焉期を探るというテーマに読み替えて実施し、各地を巡回して研究会を開催した最後の地域として北陸(福井県小浜市)で研究会を開催した。また、第13回中世葬送墓制研究会と題して、これまでの研究会をまとめる形で総括研究会を奈良(元興寺文化財研究所)で実施した。それぞれの研究会資料集を冊子体で刊行した。いずれも600部程度印刷し各地の文化財関係機関およびこれまでの研究協力者に配布し、研究成果の周知化を図った。以上が全体の概要であるが、新発見資料も複数あり当初に予定した以上の成果をあげることができた。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。中世の墳墓および葬送墓制について、3つのテーマに絞って研究を進展させる形ですすめる。以下、テーマ別に成果の概要を記載する。【仏塔と墳墓の関係】テーマに関連する遺跡・遺物の基礎調査を実施した。その過程で鎌倉時代に属する木製宝篋印塔を新発見する好機に恵まれた。本年度は所蔵者と自治体への報告を行い、詳細調査は平成27年度に実施することで調整済。またこのテーマで、平成27年度に展覧会を開催するのでその準備を行った。さらに、仏塔と墓の関係を示す資料が既刊の報告書の中に発見したので、その検討を行い公表したほか、近世の大型石塔の検討も重要な課題と認識するので、九州の大名墓遺跡で報告の機会を得たため、成果の一部を盛り込んだ原稿を作成した。【納骨信仰の研究】高野山奥之院出土遺物を借用し、実測調査を行った。また、霊場関係の研究会に参加するなどして納骨霊場について検討を行った結果、意外にもその実態は知られていなかったため、先学のアドバイスを受けて、現状で一書を編み、広く周知を促すとともに、検討課題を抽出・整理する機会とした。刊行は平成27年度後期を予定(雄山閣『季刊考古学』135号)。【中世墓の破壊】中世の城や寺院の石垣へ転用された石塔の実態把握のため、研究会を実施した。そこでは城・寺院・都市の各遺跡から事例を抽出し、研究協力者に事例報告をお願いした。また現地見学会として、大和郡山市郡山城跡における石塔転用の実態を視察した。また、各地の中世後期における墓の有り方を探る方法として、16世紀頃を中心に出現する小石仏や一石五輪塔といった小石塔の実態を把握するため、各地で調査を実施した。中世の墳墓遺跡および葬送墓制について、3つのテーマを設定し研究を進展させる形で進めた。以下、テーマ別に成果の概要を記述する。【仏塔と墓の関係】福島県いわき市金光寺所蔵の木製宝篋印塔(文保二年/1318)を調査し、現存例のないきわめて貴重な資料であることを確認できた。またその資料を展覧会「小仏塔の世界」を開催して借用し、手元で詳細な調査を実施した。また、資料の状態調査から、地面に密着するものの屋内に安置するような環境に存在した可能性が考えられ、寺院の立地環境から横穴状遺構の中に安置される墓塔として建てられた可能性が高くなった。さらに、奈良文化財研究所の協力も得て、年輪年代測定を行うなど、計画以上の成果をあげることができた。次年度にはAMS法による測定を実施したのちに、これらの報告書を作成するとともに、成果を学術誌に投稿したいと考えている。【納骨信仰の研究】関係の研究会を実施して基礎的な作業を行う予定だったが、昨年度に頂戴したアドバイスどおりに一書を編むことができ、納骨霊場研究の現状を把握することができたことは大きな成果となった。また、次への課題も明確になった。【中世墓の破壊】平成26年度と27年度の二度にわたって関連の研究会を実施するとともに、関連遺跡の調査も実施した。研究会では多数の参加者を得たほか、詳細な資料集を編集することができ、一定の成果をあげることができた。

その成果の一部は論文としてまとめ、現在投稿中である研究テーマ別に以下に整理する。【仏塔と墓の関係】予想外に、鎌倉時代後期の貴重な木製宝篋印塔を確認することができた。これまで未知の資料であるだけに発見できたことだけで、大きく課題は進展した。まず木製の塔が墓所と思われる場所に建てられていたこと、そうすると一定量の造塔を予想しておく必要があること、そのことは発掘調査で確認された石塔を保有しない遺跡でも、仏塔は建立されていた可能性を考える必要があること、などである。これは平安時代から造営されはじめる木製卒塔婆の流行とあわせて検討することで、古代から中世の墓所における仏塔を用いた供養祭祀の在り方を考えるうえで、きわめて重要な所見を得たことになる。【納骨信仰の研究】研究申請を行った段階から比べると予想以上に進展し、浸透したと考える。まず高野山奥之院の納骨器の新資料を実測調査したことや、納骨霊場遺跡を題材に一書(『季刊考古学』第134号)を編むことができ、研究の現状を世に問うことができたことである。大きな進展をみたと言える。【中世墓の破壊】予定どおり研究会を実施して、成果をあげることができた(第6回・第7回中世葬送墓制研究会)。また、平成26年度の第5回研究会と平成27年度の第7回研究会の成果をあわせて論文にまとめる機会を得て、平成28年度末に刊行された。さらに第7回研究会は山陰地域を題材にし検討を行った。墓の破壊という点では成果は小さいが中世墓の終焉の画期については、石塔を通じてかなり具体的に理解できるようになり、1617世紀の間にそれを求めることが可能であると認識できた。以上のように、当初計画どおりではないものも含まれるが、全体を通してみた場合には予想以上に大きな成果があったと言える。一部は新聞にも掲載されるなど研究の周知化という点でも少なからず進展をみたと言える。中世の墳墓遺跡および葬送墓制について、3つのテーマを設定し、研究を進展させる形で進めた。以下、テーマ別に成果の概要を記述する。【仏塔と墓の関係】福島県いわき市金光寺所蔵木製宝篋印塔の年輪年代測定とそれに伴うAMS法による年代測定を実施した。二つの自然科学分析の結果は、宝篋印塔に記載される銘文(文保二年/1318)に矛盾せず、且つ近い年代が得られた。自然科学分野間でのデータ比較だけでなく、資料自体に刻まれた銘文との比較研究が行われ、整合性が得られた成果は大きい。また、本年度中に中世武士の墓の成立に関わる資料として、埼玉県飯能市智観寺板碑と熊本県玉名市宇佐氏墓所五輪塔の調査を実施した。両者とも先代の遺骨を改葬し、墓所を整備したことが銘文から知られる貴重な事例である。【納骨信仰の研究】平成29年度に実施する高野山霊宝館での納骨信仰に関する展示事業に協力し、展示の事前準備として金銅製宝篋印塔(納骨容器として利用)の詳細調査を実施した。その成果の一部を展示に反映させ、さらに奥之院の納骨全般について、解説冊子やパネル原稿などを執筆した(展示は平成29年4月15日7月9日)。【中世墓の破壊】破壊された墓石や石塔の転用事例について行った2度の研究会(平成26・27年度)で、一定の研究の方向性が見えたので、その後は中世墓の終焉に関する研究へと発展させた。その目的を地域ごとに確認するため、4月に東京で関東地方を題材に、1月に滋賀県で近畿と東海地方を題材にして研究会を実施した。関東では板碑の終焉に視点を絞り、小型板碑の出現などについて地域制を明らかにした。
ミャンマーの地理的特性に着目したインフルエンザ監視:多剤耐性と新型重症化

ミャンマーで2010-2012年度にヤンゴン市とネピドー市でインフルエンザの流行調査を行い、インフルエンザ株の特徴と薬剤耐性の解析を行った。3年間に643株のインフルエンザウイルスを分離し、A/H1N1pdm09 257株、A/H3N2 182株、B 204株が検出された。流行時期は5-11月の雨期であった。A/H3N2とB型は日本の冬の流行に半年先駆けて新しい遺伝子型の株がミャンマーで先行して流行した。薬剤耐性に関してはA/H1N1pdm09にオセルタミビル耐性株の出現は無かった。B型は2株がザナミビル、オセルタミビル、ラニナミビルに耐性を示し、NA遺伝子248位に変異(I248G)が認められた。研究の目的:ミャンマー国におけるインフルエンザ疫学と分子疫学的な特徴および、薬剤耐性インフルエンザの出現について調査する。研究実施計画:ミャンマー国ヤンゴン市及びネピドー市の外来で急性呼吸器疾患を呈した患者をインフルエンザの迅速診断キットでスクリーニングを行い、新潟大学にてMDCK細胞を用いてウイルス分離培養を行った。さらに、リアルタイムPCRのサイクリングプローブ法を用いて、抗インフルエンザ剤のオセルタミビルに耐性となるNA遺伝子275位His→Tyrを新型インフルエンザ株でスクリーニングした。また、HA遺伝子シークエンスにより、新型インフルエンザの遺伝子グループを決定した。2010年5-9月までの4ヶ月間に582名をインフルエンザ迅速診断キットでスクリーニングし、咽頭ぬぐい液を採取した。新型インフルエンザは231件、A/H3N2は9件、B型は99件分離され、2010年には雨期に新型インフルエンザの流行があったことが判明した。ミャンマーで分離された新型インフルエンザは、NA遺伝子275位に変異はなくオセルタミビル耐性株はなかった。新型インフルエンザの樹形図解析からは全てClade 2のウイルスであり、日本で2009年に全国的に流行した新型インフルエンザと同じ群に属していた。同じ年にはミャンマーには新型インフルエンザの地域流行はなく、H3N2が流行したことが我々の調査で判明しており、ミャンマーは半鎖国状態のため新型インフルエンザの流行が1年遅れたと考えられる。インフルエンザのサンプリングは現在も続行中である。ミャンマーでは、これまでインフルエンザに関する情報はほとんどなく、ミャンマーのインフルエンザ流行状況を明らかにする。二つの都市(ヤンゴン市、ネピドー市)のサーベイランス拠点でインフルエンザ疑い患者からインフルエンザ迅速診断キットを使ってスクリーニングを行い、ウイルス検体を採取した。新潟大学でウイルス培養を行い、インフルエンザ流行疫学を明らかにした。ウイルスの遺伝子特徴を日本の流行株と比較し、さらにミャンマーの薬剤耐性インフルエンザの頻度を明らかにした。平成23年度は、6月から9月までにヤンゴン市で294件、ネピドー市から123件のインフルエンザ迅速診断キット陽性患者から咽頭ぬぐい液を採取した。新潟大学にてMDCK細胞を用いてウイルス分離培養を行ったところ、ヤンゴンの検体から46件(15.6%)、ネピドーの検体から119件(96.7%)のインフルエンザウイルスが分離された。ヤンゴンの分離株は、44件(95.7%)がインフルエンザA/H3N2,2件(4.3%)がインフルエンザB型で、ネピドーの検体は119件(100%)であり、すべてがインフルエンザA/H3N2であった。インフルエンザA/H1N1pdmは検出されなかった。2011年はミャンマーはA/H3N2が優勢であったことがわかった。流行時期はこれまでと同様にミャンマーの雨期であった。しかし、2011年は流行の規模が小さく、すぐに収束してしまった。A/H3N2のウイルスHA遺伝子、NA遺伝子解析を行ったところ、ミャンマーで2011年夏に採取された株は、2011-2012年の冬に日本で流行したインフルエンザ(A/Victoria/361/2011系)に類似した株であった。なお、A/Victoria/361/2011は2012-2013年のインフルエンザワクチン推奨株である。日本より半年早く新しい抗原性のA/H3N2が採取されたことになる。ノイラミニダーゼ阻害剤に対する薬剤耐性試験をA/H3N2の40株について行った。ペラミビル、オセルタミビル、ラニナミビル、ザナミビルに対して感受性であった。しかし、3株がオセルタミビルに対して軽度の外れ値を示したためNA遺伝子変異部位を現在精査中である。

2012年の6月から9月にかけて、ヤンゴン市のサンピア病院と国立保健研究所と、ネピドー市の医学研究局で、インフルエンザ様症状を呈した患者の鼻咽頭ぬぐい液を採取し、その中からインフルエンザウイルス迅速診断キット陽性の検体を合計521件収集した。新潟大学大学院医歯学総合研究科で、ウイルス分離培養の結果、合計105件のウイルス株を分離した。その105件のウイルス株の内訳は、パンデミック09A型H1N1(以下、A(H1N1)pdm09)が25件、インフルエンザB型が80件であった。また、ミャンマーにおけるインフルエンザ流行のピークは8月であったヘマグルチニン(HA)及びノイラミニダーゼ(NA)遺伝子解析により、ミャンマーで得られたA(H1N1)pdm09は、HA遺伝子にD97N変異とS185T変異をもつことが特徴であるグループ6に属し、隣国であるバングラディシュで分離された株と類似していた。これらの遺伝子解析から、2009年に発生したA(H1N1)pdm09(グループ2)は、2010年にはグループ4に進化し、2012年にはグループ6に進化した。このことから、A(H1N1)pdm09は2009年から2012年まで継続して遺伝子進化を続けていることが明らかになった。サイクリングプローブPCRによる検査により、分離できたインフルエンザB型80件中10件がビクトリア系統、70株が山形系統に属していた。ミャンマーでは、2005年から2011年まではビクトリア系統が主に流行していたが、2012年からはもう一方の山形系統が主流になった。2012年にミャンマーで発生した山形系統のインフルエンザBはクレード2に属していた。2012年9月に研究代表者等がミャンマーに渡航し現地との調整を行い、2013年3月にはミャンマー人研究協力者を日本に招へいして今後の研究を討議した。ミャンマーはこの1年で急速に政治情勢が変わったにもかかわらず、ミャンマー国内の研究所や臨床医の協力体制は変わらず、インフルエンザ検体採取は順調に進んでいる。新潟大学におけるインフルエンザウイルスの分離培養や、その後のウイルス解析も順調に進んでいる。24年度が最終年度であるため、記入しない。平成24年度もミャンマーの二都市でインフルエンザ検体の採取を続ける。年に二回ミャンマーを訪問して進捗状況を確認する。新潟大学にてインフルエンザのウイルス分離培養と、ウイルス遺伝子解析、薬剤耐性について検査を行う。新たな試みとして、これまでにミャンマーで採取したノイラミニダーゼ阻害剤の薬剤耐性株を、遺伝子組み換え法のリバースジェネティクス法を使って再構築を行い、薬剤耐性であることを確認し、さらに出現のメカニズムについて解析を行うよう計画する。
東南アジア大陸部の上座部仏教僧伽における「民族宗派」の全体像把握に向けた研究

本研究は仏教と民族の関係について論じるものである。より具体的には、東南アジア大陸部で広く信仰されている上座部仏教(上座仏教、南伝仏教とも称す)の出家者について、少なくとも56の言語・文字を基礎とした「民族宗派」と呼びうる中間レベルの社会空間が広がっていることを指摘し、その根拠と全体像の解明を目的とする。
自己血管内皮細胞反応性ＮＫＴ細胞による中小型血管炎発症モデル

中小型血管炎を発症するモデルラットから単離したT細胞クローンVASC-1はラット培養血管内皮細胞(REC)と反応して活性化し、小型血管炎を誘導する。RECと反応することによるVASC-1の活性化は抗CD1d抗体により阻害されたので、VASC-1はNKT細胞であるといえる。VASC-1はtype I NKT細胞にinvariantなTCRを発現していないこと、ならびにtype I NKT細胞が結合するα-galactosylceramideに結合しないことから、type II NKT細胞と考えられた。小型血管炎の発症に自己血管内皮細胞反応性type II NKT細胞が関与していると考えられる。ANCA非依存性の中・小型血管炎を発症するenv-pXラット(ヒトT細胞白血病ウイルス1型のenv-pX遺伝子を導入したトランスジェニックラット)から、自己血管内皮細胞に反応するT細胞クローンVASC-1を樹立した。VASC-1はラット培養血管内皮細胞(REC)と反応して相互に活性化し、小型血管炎を誘導する。RECと反応することによるVASC-1の活性化は抗CD1d抗体により阻害されたことから、VASC-1はNKT細胞と考えられた。また、VASC-1はtype I NKT細胞にinvariantなTCRを発現していないこと、ならびにtype I NKT細胞が結合するα-galactosylceramideに結合しないことから、type II NKT細胞と考えられた。小型血管炎の発症に自己血管内皮細胞反応性type II NKT細胞が関与していると考えられた。ヒトT細胞白血病ウイルス1型(HTLV-I)のenv-pX遺伝子を導入したラット(env-pXラット)は免疫複合体や抗好中球細胞質抗体(ANCA)に非依存性の中小型血管炎を発症する。これまでの研究により、本ラットでは自己血管反応性T細胞による自己免疫性血管炎が発症すると考えられている。我々は、env-pXラットのリンパ節細胞を血管内皮細胞(EC)で繰り返し刺激することにより、EC依存的に増殖亢進を示すNKT細胞クローン1B8改めVASC-1を樹立した。VASC-1はECと反応することにより、細胞表面のCD62Lのsheddingを受ける。また、IL-2やIL-5などの炎症性サイトカインを産生する。一方、ECはVASC-1と反応し、eotaxinを産生する。VASC-1を野生型ラットに静注することにより、小型血管炎が誘導された。よって、VASC-1はECと相互に活性化し、血管炎を誘導すると考えられた。NKT細胞はCD1d分子に提示された糖脂質を認識するとされているが、自己ペプチドを認識するという報告もある。一方、CD1d分子は動物種間で構造が比較的良く保たれた分子である。そこで、サル由来のCOS7細胞にラットcDNAライブラリをトランスフェクションし、約100株のトランスフェクタントライブラリを作製、VASC-1と共培養し、VASC-1にIL-2やIL-5などの炎症性サイトカイン産生を誘導するトランスフェクタントクローン4D2を見出した。4D2に組み込まれたラット遺伝子が血管炎の標的となっている可能性がある。1)VASC-1がNKT細胞であることを確実にする。2) VASC-1が認識するEC抗原を同定する。3) VASC-1がECと反応した後、血管炎を誘導する機序を明らかにする。4)ヒト中小型血管炎におけるNKT細胞の関与を証明する。上記の研究目的のうち、1)と3)はほぼ達成された。2)も順調に進展している。よって、全体的におおむね順調に進展していると評価できる。1) 4D2に導入されたラット遺伝子を同定する。同分子がCD1dに提示され、T細胞受容体(TCR)を介してVASC-1に認識されることを明らかにする。2) 1)で同定する分子を認識するNKT細胞が、免疫複合体ならびにANCAに非依存的な中小型血管炎患者の末梢血に存在するか検討する。また、その機能について、他の血管炎の患者、他の自己免疫疾患患者、ならびに健常者の末梢血を対照として比較検討する。現有の物品を極力無駄を省いて有効活用したことにより、次年度使用額が発生しました。次年度に実施を計画している研究において、10万円程度のキットを数回使用する予定を含め、物品費(消耗品費)として約200万円、成果発表のための国内旅費として約10万円、論文掲載費として約10万円を使用する計画です。
昆虫社会性行動の獲得・発現・発達とその制御に関する化学生態学的研究

ミツバチ類の社会性行動を司る化学コミュニケーションと社会性行動解発因子ヒトなど動物に認められる社会性行動や個体間コミュニケーションの発現・獲得・発達過程を知ることは重要である.集団における社会性行動の成り立ちを解明する目的で,日本の固有種ニホンミツバチApis cerana japonica Rad.(Acj)と,モデル生物のセイヨウミツバチApismellifera L.(Am)を用いた.実験は,様々な社会性行動を解発する情報化学物質と,寄生ダニ戦略(異個体間衛生グルーミング行動)および,寄生ガ対策(異物認識-排除行動)について行った.結果:Acj群の巣門付近では,働き蜂による異個体間グルーミング行動が頻繁に観察された.室内生物試験において,Acj働き蜂が衛生グルーミング行動を引き起こすダニ由来の情報化学物質を機器分析したところ,ダニの抽出物からはC14,16,18などの脂肪酸類とそのエステル類・炭化水素類が検出された.そこで,野外の自然群を用い,自然状態により近い環境で,ダニ由来の化合物に対する巣門付近の働き蜂の応答を調べた.巣門前の野外生物試験で,Acj働き蜂はダニ由来の物質に対して,対照区より多くの個体が反応した.試料に対して,集まる・触角で触る・繰り返し戻ってくるなど,試料をチェックする行動は,対照区と比べて有意に多く認められた.ミツバチ類の社会性行動解発因子を同定した.ミツバチ類の社会性行動を司る化学コミュニケーションと社会性行動解発因子ヒトなど動物に認められる社会性行動や個体間コミュニケーションの発現・獲得・発達過程を知ることは重要である.集団における社会性行動の成り立ちを解明する目的で,日本の固有種ニホンミツバチApis cerana japonica Rad.(Acj)と,モデル生物のセイヨウミツバチApismellifera L.(Am)を用いた.実験は,様々な社会性行動を解発する情報化学物質と,寄生ダニ戦略(異個体間衛生グルーミング行動)および,寄生ガ対策(異物認識-排除行動)について行った.結果:Acj群の巣門付近では,働き蜂による異個体間グルーミング行動が頻繁に観察された.室内生物試験において,Acj働き蜂が衛生グルーミング行動を引き起こすダニ由来の情報化学物質を機器分析したところ,ダニの抽出物からはC14,16,18などの脂肪酸類とそのエステル類・炭化水素類が検出された.そこで,野外の自然群を用い,自然状態により近い環境で,ダニ由来の化合物に対する巣門付近の働き蜂の応答を調べた.巣門前の野外生物試験で,Acj働き蜂はダニ由来の物質に対して,対照区より多くの個体が反応した.試料に対して,集まる・触角で触る・繰り返し戻ってくるなど,試料をチェックする行動は,対照区と比べて有意に多く認められた.ミツバチ類の社会性行動解発因子を同定した.社会性行動(衛生グルーミング行動)を解発する情報化学物質(グルーミング行動解発因子)の同定:ニホンミツバチ働き蜂は,寄生ダニ(Varroa destructor)に対して,ダニの寄生に気づき,他個体に付着したダニを咬みとって殺す異個体間衛生グルーミング行動を行う.一方,セイヨウミツバチはダニに対するグルーミング行動を行わない.ニホンミツバチは暗い巣の中でダニの存在を探知し,ダニ由来の情報化学物質を手がかりにしてグルーミング行動を行っていると推定された.そこで(1)暗い巣内のミツバチの社会性行動の観察・記録の可能性を探る目的で,小型暗視行動観察記録装置を用い,ニホン・セイヨウの両ミツバチの巣内に設置し,ミツバチ働き蜂の平常時の行動および,衛生グルーミング行動を記録解析すること試みた.その結果,暗く狭い巣内でのミツバチの行動観察は難しく,巣内への設置方法や装置の形状など,改良を施す必要性のあることが明らかになった.(2)寄生ダニに焦点をあて,ニホンミツバチ働き蜂のグルーミング行動を解発する因子について検討した.あらかじめ10匹-の働き蜂を入れたシャーレを用意した.そこへ寄生ダニ側を背部に固定あるいは,寄生ダニの抽出物を背部に塗布した働き蜂をシャーレ内へ導入し,実験的に異個体間グルーミング行動が解発されるかどうかの生物試験を行った.寄生ダニや寄生ダニの溶媒による抽出物は,衛生グルーミング行動を再現した.(3)ダニ抽出物を各種クロマトグラフィーで分画し,各画分を生物試験して活性を確認すると同時に,機器分析を行って候補化合物を検索した.その結果,ダニ由来の抽出物には炭化水素類・脂肪酸類・エステル類などの化合物が複数含まれていることが明らかになった.(4)これらの研究成果について,日本昆虫学会,日本応用動物昆虫学会,国際化学生態学会,国際昆虫学会において発表を行った.本研究で得られた結果のまとめは,学会誌への投稿を予定している.「昆虫の社会性行動はどのような原因で起こり,コミュニケーションはどのように獲得するのか?」社会性行動を解発する刺激や要因を解明すると共に,社会性行動の発達過程を司る分子基盤を明らかにしたい.これらを明らかにするため,社会性昆虫のミツバチをモデル生物として用い,昆虫の社会性行動の獲得・発現・発達とその制御に関する分子基盤を知る目的で,ここでは,嗅覚・視覚情報に焦点を当て,下記に示す3項目(a, b, c)について基礎的研究を行った.(a)社会性行動(衛生グルーミング行動)を解発する情報化学物質(グルーミング行動解発因子)の同定,(b)社会性行動(個体間コミュニケーション)を解発する情報化学物質の同定:個体間コミュニケーションに関与する化学的因子の同定,(c)加齢・老化に伴う社会性行動(グルーミング行動・個体間コミュニケーション)の発現・発達過程の解析.