hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
子宮体癌の筋層内浸潤におけるメタロプロティナーゼとその制御因子の役割

目的)子宮体癌の筋層内浸潤におけるメタロプロティナーゼ(とくにMMP-9)の役割とその制限因子とされるTGF-β_1との関連性を明らかにすることを目的とした。結論)子宮体癌の筋層内浸潤には、間質で産生されるTGF-β_1の増加に伴うMMP-9活性の亢進が関与するが、TGF-β_1の効果は、腫瘍細胞でのTGF-βreceptorの発現の程度により左右される可能性が高い。【目的】子宮体癌由来株のin vitro浸潤能とMMP-9の発現が相関することを平成8年度の研究実績として報告している.TGF-β_1は蛋白分解酵素の産生を抑制する因子の一つであり,MMP-9の発現を制御すると考えられる.本研究では,浸潤能の異なる子宮体癌由来株細胞のMMP-9活性および浸潤能に及ぼすTGF-β_1の効果を検討するとともに,子宮体癌症例についてMMP-9,TGF-β1の血中値,組織内発現を筋層浸潤度別に比較した.【方法】子宮体癌由来株(Ishikawa,KLE)および子宮体癌18例(Ib期群:8例,Ic期群:10例)の血清,血漿,癌組織のパラフィン包埋切片を材料とした.株細胞の浸潤能はMatrigel invasion chamberを用いて測定し,MMP-9活性はgelatin zymographyで検出した.MMP-9,TGF-β_1の血中値はEIA法で測定し,組織内発現はABC法で検出した.【成績】(1)株細胞のMMP-9活性と浸潤能は,ともにIshikawa株に比べKLE株で高かった.また,KLE株ではTGF-β_1の添加により濃度依存性にMMP-9活性と浸潤能の亢進が認められたが,Ishikawa株ではTGF-β_1を添加してもMMP-9活性,浸潤能とも変化がなかった.(2)血中MMP-9値,TGF-β_1値はIb期群に比べIc期群で有意の高値を示し,MMP-9値,TGF-β_1値の間には有意の正の相関性を認めた.(3)MMP-9は腫瘍細胞に,TGF-β_1は主として間質に局在し,両者の同時組織内発現の頻度はIb期群に比べ,Ic期群で有意に高かった.【結論】子宮体癌の筋層内浸潤には,間質で産生されるTGF-β_1の増加に伴うMMP-9活性の亢進が関与する.また,子宮体癌症例において,MMP-9とTGF-β_1の血中値は筋層浸潤度を推定する指標となりうる.目的)子宮体癌の筋層内浸潤におけるメタロプロティナーゼ(とくにMMP-9)の役割とその制限因子とされるTGF-β_1との関連性を明らかにすることを目的とした。
ケージド化合物励起用UV照射・調光装置の開発的研究

近年、UV光照射によって物質を活性化するケージド化合物が開発され、生理学的実験に用いられるようになってきた。ケージド化合物は、光によって瞬時に活性化することや分解過程が光強度に依存して変化することなど、物質の挙動を光という物理量によって自在に制御できる特性を持っており、定量的なシステムの解析に有利な可能性を持っている。しかし、従来は、主にある物質が、ある細胞において効果を持つかどうかを調べるような定性的な実験に使用されてきたのみである。これは、主にケージド化合物を制御することができるシステムが市販化されていないことによる。本研究では、単一細胞からの電気的記録を得るパッチクランプ法と組み合わせのできる、UV照射装置と調光システムを製作することを目的として進行した。パッチクランプ法で単一の神経細胞の活動を記録する際には、システムの振動を最小限に押さえる必要がある。ケージド化合物を励起するためのUV制御装置の振動などは記録を行う上で致命的とされる。そこで、UV光源とその制御部と記録を行う顕微鏡とはクオーツ製の光ファイバーで機械的に分離し、光ファイバーの出力を倒立型顕微鏡の落斜蛍光装置に接続した。光源には、100Wキセノンあるいは水銀ランプを用い、光のOn/Offをシャッターで制御した。UV光量は、ウエッジフィルターで調節し、2log unitの変化量を持たせている。これらのシステムは、すべてパッチクランプの実験を制御する自作プログラム(Pascal言語とアセンブリ言語のルーチン)との統合環境下にあり、パッチクランプ実験を行いながら、UVの光量、光刺激タイミングを自在にコントロールできる様になっており、実験の確実性、迅速性に優れるシステムが整った。このシステムを利用して嗅覚受容器細胞内、あるいは味覚受容器細胞内の生理活性物質(主にサイクリックヌクレオチド)の生体効果を確認した。生体から単離した嗅細胞のチャネル活動をパッチクランプ法を用いて記録して、記録の最中に細胞にケージド化合物を適用する励起用システムを開発した。嗅細胞における匂いの情報変換は、細胞内のcAMPに制御されることが知られており、細胞内cAMPをケージド化合物を用いて自由に制御出来れば、嗅覚情報変換のシステムを定量的に解析することが可能である。嗅細胞の大きさは約10ミクロンと小さく、長時間の記録を行うことは困難である上に、ケージド化合物を励起するためのUV制御装置の振動などは記録を行う上で致命的とされる。そこで、UV光源とその制御部を記録を行う顕微鏡とはクオ-ツ製の光ファイバーで機械的に離し、光ファイバーの出力を倒立型顕微鏡の落斜蛍光装置に接続した。UV光量は、ウエッジフィルターで調節し、21og unitの変化量を持たせている。このシステムを用いてUV光を照射した場合、500uMのケージドcAMPをロードした単離嗅細胞では、20msecの光パルスによって、匂い応答の飽和量の電流と同様の振幅を持つ電流応答を記録することが可能であった。これらのシステムは、すべてパッチクランプの実験を制御する自作プログラム(Pascal言語)との統合環境下にあり、パッチクランプ実験を行いながら、UVの光量、光刺激タイミングを自在にコントロールできる様になっており、実験の確実性、迅速性に優れるシステムが整いつつある。現在、嗅細胞のcAMP感受性を利用して、既知濃度のcAMP応答とケージド応答との比較を行い、ケージド化合物の活性と光強度との関係を調査中である。また、本研究では、最終的には脳内のニューロンにケージド化合物を適用することを目標とする。そこで網膜細胞をモデルとして実験を進めている。

金魚網膜から、視覚系の二次細胞である水平細胞を単離し、パッチクランプ法でグルタミン酸とGABAに対する細胞応答を得た。上述のケージド化合物制御システムを用いて、ケージドGluやケージドGABAの作用機構を調べる実験を進めている。生体から取り出した単一神経細胞(嗅感覚細胞)にパッチクランプ法を適用し、ケージドcAMPを導入し、細胞内cAMP放出に伴う膜電流を記録する系を確立することに成功した。ケージドcAMPの光分解過程を定量的に制御するために、ウェッジフィルタを利用してUV光源の光量を2logunitの範囲で約700ステップで変化させる装置を開発した。また、電気生理実験の制御とともに、これらすべての駆動系を単一コンピュータで制御するプログラムを作成し、この実験システムを利用して、嗅細胞における匂い順応のメカニズムを決定することに成功した。分子レベルでは、匂い情報が電気信号へ変換される過程は細胞内cAMPによって仲介され、cAMPは細胞膜の陽イオンチャネルを開くことによって細胞を電気的に興奮させる。嗅細胞は、応答中に細胞内カルシウムイオン濃度が増大すると、負のフィードバックによってチャネルが閉じ、嗅細胞は応答しなくなる。今回の、システムを用いることによりCaフィードバックが、一連の情報変換システムのどの部分に作用しているかを特定することができた。匂い物質に対する応答とケージドcAMPに対する応答は、同様の順応現象を示したので、CaのフィードバックサイトはcAMP合成酵素(アデニレートシクラーゼ)よりも下流部分に存在することが示され、また、cAMP分解酵素(PDE)の活性は順応状況でも影響を受けなかったので、細胞内CaがcAMP作動制チャネルに負に作用して、匂いに対する順応を制御していると結論した。単離神経細胞のチャネル活動をパッチクランプ法を用いて記録して、記録の最中に細胞にケージド化合物を適用する励起用システムを開発した。ケージド化合物を励起するためのUV制御装置の振動などは記録を行う上で致命的とされる。そこで、UV光源とその制御部を記録を行う顕微鏡とはクオ-ツ製の光ファイバーで機械的に分離し、光ファイバーの出力を倒立型顕微鏡の落斜蛍光装置に接続した。光源には、100Wキセノンあるいは水銀ランプを用い、光のOn/Offをシャッターで制御した。UV光量は、ウエッジフィルターで調節し、2log unitの変化量を持たせている。これらのシステムは、すべてパッチクランプの実験を制御する自作プログラム(Pascal言語とアセンブリ言語のルーチン)との統合環境下にあり、パッチクランプ実験を行いながら、UVの光量、光刺激タイミングを自在にコントロールできる様になっており、実験の確実性、迅速性に優れるシステムが整いつつある。また、現在、この試作機から得た教訓を生かし、2号機を作成している。このバ-ジョンでは、光ファイバーを介せず、平行光を投影して顕微鏡筐体に入力させる方式を用い、シャッターとウエッジフィルタを電気生理記録系から機械的に完全に単離している。
頭蓋冠縫合部早期癒合症発症に関与する細胞群の同定とその分化制御に関する研究

【目的】頭蓋顎顔面領域に形態異常を呈する先天性疾患には、矯正臨床と深く関わるものが多く、これまでに42疾患が歯科矯正治療に対する健康保険の適用となっている。中でも頭蓋冠縫合部早期癒合症は、胎生期に頭蓋冠縫合が癒合する先天性骨系統疾患であり、線維芽細胞増殖因子(FGF)/FGF受容体(FGFR)シグナル異常に起因するものが多く報告されている。アペール症候群(AS)は、頭蓋冠冠状縫合部の早期癒合と中顔面部の劣成長を伴う不正咬合、四肢の合指症を主徴とする疾患である。FGFR2におけるアミノ酸置換(S252WまたはP253R)が報告されており、FGF/FGFRシグナル異常に起因した機能獲得型変異が原因であるといわれているが、詳細な病態成立機序は不明である。当分野では可溶型FGFR2(sFGFR2)の骨芽細胞分化に対する抑制効果を報告してきた。本研究は、S252W変異を含むsFGFR2の精製タンパク質(sFGFR2Ap)が、頭蓋冠縫合部早期癒合症に及ぼす効果を検討することを目的とした。【試料および方法】COS-7細胞にsFGFR2Apを強制発現させ培養上清より精製を行った。担体として疎水化多糖ナノサイズゲル微粒子(ナノゲル)を用い、sFGFR2Apとの複合体を作製した。胎生15.5日齢ASモデルマウス(n=4)より頭蓋冠を摘出し、冠状縫合部の片側にはナノゲル(対照群)、反対側にはsFGFR2Ap-ナノゲル複合体(実験群)を適用し、4日間の組織培養後、HE染色法により縫合部の組織学的解析を行った。【結果および考察】冠状縫合部のHE染色組織像から、対照群では縫合部の癒合が観察され(n=4/4)、実験群では縫合部の開存が認められた(n=4/4)。【結論】精製sFGFR2Apの縫合部早期癒合に対する予防効果が示され、AS病態解明および新規治療法開発の一助となる可能性が示唆された。【目的】アペール症候群(AS)は、頭蓋冠冠状縫合部の早期癒合と中顔面部の劣成長に起因する不正咬合、四肢の合指症を主徴とする先天性骨系統疾患である。原因遺伝子として線維芽細胞増殖因子受容体(FGFR)2におけるアミノ酸置換(S252WまたはP253R)が知られているが、詳細な病態成立機序は不明である。本研究は、Apert型変異(S252W)sFGFR2タンパク質(sFGFR2Ap)を精製し、ASモデルマウス(ASマウス)の頭蓋冠縫合部早期癒合症発症に対する作用を検討することを目的とした。【試料および方法】COS-7細胞にsFGFR2S252W-FLAG発現ベクターを導入して得られた培養上清よりsFGFR2Apタンパク質の精製を行った。組織へのタンパク質輸送担体として、疎水化多糖のナノサイズゲル微粒子(ナノゲル)を用い、sFGFR2Apタンパク質との複合体を作製した。胎生15.5日齢ASマウス(n=4)より頭蓋冠を摘出し、冠状縫合の片側にはナノゲル単体を、反対側にはsFGFR2Ap-ナノゲル複合体を適用し、4日間の組織培養後、HE染色法により縫合部の組織学的解析を行った。【結果および考察】冠状縫合部のHE染色組織像から、ナノゲル単体作用側では縫合部の癒合が観察され(n=4/4)、sFGFR2Ap-ナノゲル複合体作用側では縫合部の開存が認められた(n=4/4)。【結論】精製sFGFR2Apタンパク質の縫合部早期癒合に対する予防効果が示され、AS病態解明および新規治療法開発の一助となる可能性が示唆された。胎生

15.5日齢ASモデルマウス(n=4)より頭蓋冠を摘出し、冠状縫合部の片側にはナノゲル(対照群)、反対側にはsFGFR2Ap-ナノゲル複合体(実験群)を適用し、4日間の組織培養後、HE染色法により縫合部の組織学的解析を行った。【結果および考察】冠状縫合部のHE染色組織像から、対照群では縫合部の癒合が観察され(n=4/4)、実験群では縫合部の開存が認められた(n=4/4)。【結論】精製sFGFR2Apの縫合部早期癒合に対する予防効果が示され、AS病態解明および新規治療法開発の一助となる可能性が示唆された。本学歯学部顎顔面矯正学分野にて飼育中のApert症候群モデルマウス胎児(E15.5)あるいは同腹野生型マウス胎児(E15.5)から頭蓋冠を摘出し、in vitro器官培養系にて4日間培養し、パラフィン切片作成後、HE染色を行った。Apert症候群モデルマウス胎児由来頭蓋冠冠状縫合において早期癒合が発症していることを確認し、in vitroにおけるApert症候群の病態の再現を行うことに成功した。Apert症候群マウスの個体数確保に多数のブリーディング期間を要したため、現在達成度としてはやや遅れている。本学歯学部顎顔面矯正学分野にて飼育中のApertマウス胎児(E15.5)あるいは同腹野生型マウス胎児(E15.5)から頭蓋冠を摘出し、マイクロインジェクターおよび実体蛍光顕微鏡を用いて、冠状縫合部osteogenic front (Of)内、あるいは縫合部中央部未分化間葉系細胞に蛍光色素DiIをマイクロインジェクションし、4872時間組織培養を行う。培養終了後、凍結切片を作成し、蛍光顕微鏡にて標識細胞の局在を検索する。培養終了後、凍結切片を作成し、癒合した縫合部骨組織の観察を行い、病態成立に関わる細胞の位置的特徴付けを行う。又、骨芽細胞分化マーカー遺伝子(Bsp, Osteopontin, Osteocalcin, Msx2, Runx2, Twist1等)の発現をin situ hybrydization法にて検索し、標識細胞における骨芽細胞分化様相を検索する。また併せて培養液中にBrdUを添加することで、組織培養中における細胞増殖について免疫組織学的検討を加え、細胞死に関してはTUNEL染色にて検索する。さらには、Fgfシグナリングに関与する因子のリン酸化についての免疫組織学的解析を行う。試薬等消耗品に500,000円、成果発表の旅費に100,000円、成果発表の印刷代に100,000円の使用を計画している。
新しく確立した乳幼児急性脳症における中枢性ベンゾジアゼピン受容体の脳内分布

10例の乳幼児前頭葉急性脳症について、脳内ベンゾジアゼピン受容体の変化を明らかにするため、脳核医学検査として、99mTc ECD-SPECTおよび123I-iomazenil SPECTを経時的に施行した。また核医学画像で得られた検査結果を客観的に評価するため、eZIS法、3DSRT法、BEAT法などのコンピュータソフトウエアを用い画像解析を施行した。解析に際してはノーマルコントロールとなるデータベースがないため、小児期に発症するけいれん性疾患を対象としてデータを集積した。この研究の最大の課題はAIEFの最大の特徴である前頭葉領域の特異的な脳血流の低還流メカニズムの解明にある。我々はてんかんをはじめ様々な痙単性疾患におけるシナプス伝道レベルの障害に最も関与する抑制性シナプス伝達の主要な部分をになうGABA_A受容体と複合体を形成する中枢性ベンゾジアゼピン受容体に注目し、平成18年度中に、AIEFにおける中枢性ベンゾジアゼピン受容体の脳内分布の解析に必要な画像解析セットアップを完了した。具体的には、データ解析のため画像解析ソフトウェアであるeZIS法、3DSRT法、BEAT法の準備を整えた。中枢性ベンゾジアゼピン受容体に特異的に結合する^<123>I-iomazenil (IMZ)を用いたSPECT検査を院内核医学教室と協力し稼働とした。また比較画像対象として^<99m>Tc-ECD SPECTの定性撮影を稼働とした。乳幼児前頭葉急性脳症のみでは症例数が少ないと判断し、乳幼児期の痙単性疾患を比較対象とし核医学検査症例数を蓄積した。現在のところ症例数はIMZが約10件、ECDが約50件程度となった。次年度に向けてさらに症例数を蓄積していき、画像解析ソフトを応用して前頭葉領域のSPECT画像を解析していきたい。過去7年の期間、我々は乳幼児急性脳症について臨床的に研究し、乳幼児前頭葉急性脳症:Acute Infantile Encephalopathy Predominantly Affecting the Frontal lobes; AIEFの概念を乳幼児急性脳症の一型として確立した(Ann Neurol 2003;54 Suppl 7:127、脳と発達2003;35 Supp1:153、Pediatr Neurol 2006;36、Epirepsy Research 2006;70S)。AIEFは発症初期の症状は他の小児急性脳症に類似するが、生命予後が良く、亜急性期に前頭葉症状を呈し、同時期の脳血流検査で前頭葉領域を中心とした低還流を認める。近年その病態概念が国内でも定着し、臨床報告数が増加してきたが、そのメカニズムについては未解決の領域が多い。本研究の課題はAIEFの大きな特徴となる前頭葉領域の特異的な脳血流の低還流メカニズムの解明にある。我々はてんかんをはじめ様々な痙攣性疾患におけるシナプス伝達レベルの障害に最も関与する抑制性シナプス伝達の主要な部分をになうGABAA受容体と複合体を形成する中枢性ベンゾジアゼピン受容体に着目し、平成18年度中にAIEFにおける中枢性ベンゾジアゼピン受容体の脳内分布の解析に必要な画像解析セットアップを完了した。平成19年度には、画像解析ソフトとして、eZIS法、3DSRT法、BEAT法の臨床応用について症例研究を重ねた。脳血流評価である^<99m>Tc-ECDにこれらソフトを応用し、小児神経領域において臨床応用が十分可能であることを検証した。さらにベンゾジアゼピン受容体に特異的結合を示す^<125>I-iomazenil(IMZ)でも様々な疾患を比較対象としこれらソフトの解析を施行した。こられの結果につき平成19年3月に第6回脳SPECT解析講演会(大宮)で講演した。平成20年度には、様々な疾患群をコントロールデータベースとして、AIEFと比較検討解析を行いAIEFの前頭葉血流低下の解明とその病態の特徴を明らかにしたい。乳幼児期および小児期に発症する様々な痙攣性疾患における、抑制性シナプス伝達の主体であるGABA_A受容体と複合体を形成する中枢性ベンゾジアゼピン受容体の発現について、本受容体に特異的に結合を示す<125>^I-imomazenil(IMZ)について、核医学的に検討をした。今年度、我々が経験し本検査を施行した主な症例には、乳幼児前頭葉急性脳症、辺縁系脳炎、けいれん重責型急性脳症、複合型熱性けいれん、急性散在性脳脊髄炎、若年型脳梗塞、他、いくつかの疾患があった。各々の結果に対し、放射線画像解析ソフトである、eZIS、3-DSRT、BEAT法などを用いて検討をした。しかしながら、IMZのデータに関するノーマルコントロールのデータベースがなく、個々の疾患の特異性を示すことが困難であったため、ノーマルデータベースの作成に適切である症例をピックアップし、ノーマルコントロールの画像解析を施行した。

これに際し、ノーマルコントロールの抽出がうまくいかず、熱性けいれん郡の症例をコントロールデータベースとして集めることに計画を変更したが、インフォームドコンセントをとれた症例数がたりず、結果を示すにいたらなかった。だが、本研究を通して、様々な疾患の脳血流検査をする機会を得、別頁に示した通り、多くの論文を生み出せたことは、本研究の臨床応用における可能性の有用性を示すに十分なものであり、今後とも、継続して本研究のデータベースを作成するべく、研究の継続を励行していきたい。
ショウジョウバエ成虫型時計細胞ネットワークの発生メカニズムと生物学的意義の解明

キイロショウジョウバエは、幼虫期の脳内に15個の時計細胞を持つのに対して、成虫羽化後には150個に増加する。しかし、どのようなメカニズムで時計神経が発生するのか、時計細胞ネットワークが変化する生物学的意義は解明されていない。本研究の目標は、概日時計の中枢を構成する細胞ネットワークが幼虫期から成虫期に至る発生過程、すなわち変態期においてどのように(=時計細胞の発生を制御する分子メカニズム)獲得されるのかを解明することを目的としている。本年度は前年度までに見つけた、時計神経の発生に関わる4遺伝子に関連する他因子、を詳しく解析した。昨年度までに見つけた4遺伝子から、insulin like signaling (IlS)が時計神経の発生に関係していると考え、IlS関連遺伝子をノックダウンしたところ、成虫の時計神経の発生異常が観察された。つまり、IlSが時計神経の発生に関与していることが分かった。また、昨年度から作成したトランスジェニック系統pdf遺伝子上流-GFP個体を使って各遺伝子のノックダウン系統を解析した。その結果、これまで確認されていた各ノックダウン系統における細胞数減少はなく、細胞の存在が確認された。しかし、時計の出力因子である神経ペプチドPDFの発現や時計タンパクCLKの発現が見られないことから、時計神経の時計機能そのものが消失していることが判明した。つまり、私たちが発見した4つの因子は時計神経における時計機能の獲得に必要なものであると示唆された。28年度が最終年度であるため、記入しない。ほとんどの動物は体内に概日時計を持っている。概日時計は脳内にある時計細胞という神経細胞のネットワークにより構成されている。時計細胞のネットワークは個体の成長とともに発達していく事が分かっている。例えばキイロショウジョウバエは、幼虫期の脳内に15個の時計細胞を持つのに対して、成虫羽化後には150個もの時計細胞を持つ。成虫期において新たに獲得される時計細胞は、成虫の概日時計システムに必須の機能を担う。これにより動物は時期特異的な活動リズムを示すと考えられる。しかし、どのようなメカニズムで時計細胞が発生するのか、時計細胞ネットワークが変化する生物学的意味は解明されていない。本研究の目標は、キイロショウジョウバエを研究材料として、概日時計の中枢を構成する細胞ネットワークが、幼虫期から成虫期に至る発生過程、すなわち変態期において、【1】いつどこで=発生過程における時間的・空間的な時計細胞誕生の系譜【2】どのように=時計細胞の発生を制御する分子メカニズム【3】なぜ=時計細胞ネットワークが幼虫型から成虫型へと変化する生物学的意味獲得されるのかを、分子生物学、遺伝学、行動学、そしてイメージングの技術を駆使して解明することを目的としている。平成26年度は(1)いつどこで(2)どのように、についての解析を重点的に行なった。1)いつどこで;変態期における時計細胞の増加とそれに伴うネットワークの構築機構の解明を目指し、様々なマーカー系統を活用して時間的・空間的な時計細胞誕生の系譜を解析した。その結果、ほとんどの時計細胞群が蛹化後48時間以内に揃う事、2)どのように;時計細胞発生に関わる遺伝子の探索を行なった。標的遺伝子として173遺伝子について検定を行った。検定の結果、活動リズム形成に重要な役割を担う時計細胞の発生に関わる遺伝子を4つ発見した。キイロショウジョウバエは、幼虫期の脳内に15個の時計神経を持つのに対して、成虫羽化後には150個に増加する。しかし、どのようなメカニズムで時計神経が発生するのか、時計神経ネットワークが変化する生物学的意味は解明されていない。本研究の目標は、概日時計の中枢を構成する細胞ネットワークが、幼虫期から成虫期に至る発生過程、すなわち変態期において、どのように(=時計細胞の発生を制御する分子メカニズム)獲得されるのかを解明することを目的としている。本年度は前年度に見つけた、活動リズム形成に重要な役割を担う時計神経の発生に関わる4遺伝子を詳しく解析した。2遺伝子のノックダウン個体は、リズム形成に重要である時計細胞群s-LNvの細胞数の減少、細胞サイズが小さくなるなどの発生異常が観察された。神経ペプチドPDFは、脳側方部に位置する時計細胞群s-LNvとl-LNvで発現する、最も重要な時計出力因子である。別の2遺伝子のノックダウンは、時計細胞群s-LNvにおいて、PDFの発現が見られなくなった。一方で、同じくPDFを発現する時計細胞群l-LNvでは正常にPDFは発現していた。これらの4遺伝子のRNAi系統で活動記録を解析した結果、活動リズムが消失していることが分かった。先の研究結果より、時計の出力因子である神経ペプチドPDFは、脳側方部に位置する時計細胞群s-LNvとl-LNvとでそれぞれ異なる発現制御を受けている可能性が示唆された。しかし、PDFの転写因子、エンハンサー領域等はほとんど分かっていない。そこでPDFエンハンサー領域特定を目的として、ショウジョウバエpdf遺伝子の上流解析を行った。その結果、s-LNvとl-LNvの両方の細胞群にGFPの発現が確認された。PDFが特異的な細胞に発現するためのエンハンサー領域の特定に前進した。私は本プロジェクトの達成のために3つのアプローチを設定した。すなわち、概日時計の中枢を構成する細胞ネットワークが、幼虫期から成虫期に至る発生過程において、【1】いつどこで=発生過程における時間的・空間的な時計細胞誕生の系譜【2】

どのように=時計細胞の発生を制御する分子メカニズム【3】なぜ=時計細胞ネットワークが幼虫型から成虫型へと変化する生物学的意味、である。平成27年度で【2】における解析を計画していた。その結果、【2】どのように=時計細胞の発生に関わる遺伝子の解析と、神経伝達物質のエンハンサー領域の解析を進行することができた。このような状況であるので本プロジェクトの達成度は順調に進んでいる、と判断している。キイロショウジョウバエは、幼虫期の脳内に15個の時計細胞を持つのに対して、成虫羽化後には150個に増加する。しかし、どのようなメカニズムで時計神経が発生するのか、時計細胞ネットワークが変化する生物学的意義は解明されていない。本研究の目標は、概日時計の中枢を構成する細胞ネットワークが幼虫期から成虫期に至る発生過程、すなわち変態期においてどのように(=時計細胞の発生を制御する分子メカニズム)獲得されるのかを解明することを目的としている。本年度は前年度までに見つけた、時計神経の発生に関わる4遺伝子に関連する他因子、を詳しく解析した。昨年度までに見つけた4遺伝子から、insulin like signaling (IlS)が時計神経の発生に関係していると考え、IlS関連遺伝子をノックダウンしたところ、成虫の時計神経の発生異常が観察された。つまり、IlSが時計神経の発生に関与していることが分かった。また、昨年度から作成したトランスジェニック系統pdf遺伝子上流-GFP個体を使って各遺伝子のノックダウン系統を解析した。その結果、これまで確認されていた各ノックダウン系統における細胞数減少はなく、細胞の存在が確認された。しかし、時計の出力因子である神経ペプチドPDFの発現や時計タンパクCLKの発現が見られないことから、時計神経の時計機能そのものが消失していることが判明した。つまり、私たちが発見した4つの因子は時計神経における時計機能の獲得に必要なものであると示唆された。私は本プロジェクトの達成のために3つのアプローチを設定した。すなわち、概日時計の中枢を構成する細胞ネットワークが、幼虫期から成虫期に至る発生過程において、【1】いつどこで=発生過程における時間的・空間的な時計細胞誕生の系譜【2】どのように=時計細胞の発生を制御する分子メカニズム【3】なぜ=時計細胞ネットワークが幼虫型から成虫型へと変化する生物学的意味である。採用初年度では(1)の完了と(2)におけるスクリーング解析を計画していた。その結果、(1)いつどこで=イメージングの技術による発生過程における時間的・空間的な時計細胞誕生の解析の完了、(2)どのように=時計細胞の発生に関わる遺伝子を発見した。今後の研究の推進方策としては、神経伝達物質PDFの発現制御を解析していく。具体的には、pdf遺伝子のエンハンサー領域の特定のため、さらに短く絞り込んだpdf遺伝子上流ゲノム領域をGFP遺伝子融合させたトランスジェニック系統の樹立を行っていく。
成人移行期の小児慢性疾患患者の心理社会適応を高める多職種協働患者中心型看護モデル

海外フィールド調査と文献検索、Web検索を行い、海外における移行期支援の現状に関する情報収集を行った。それをもとに、インタラクティブメディアの試作、全国の医療機関の看護師を対象とした国内調査を行った。日本の医療機関では小児慢性疾患患者は、成人になっても小児医療にとどまっていると回答した者が最も多く、移行準備支援も十分ではなく、また、小児慢性疾患患者の成人型医療への移行に関して施設内での基準や教育や連絡会なども殆ど無いことが明らかとなった。そこで、看護師対象の教育プログラム実施および看護ガイドラインの作成を行った。事例への看護実践を行い、評価・修正を行った。実践事例を加え第2版のガイドラインとしてまとめた。小児慢性疾患患者の生存率は上昇し続けている一方、成人を迎えた慢性疾患患者には多様な心理・社会的問題が報告されている。英米豪等諸外国では10代早期より成人医療への移行プログラムが重要視され、実施されている。そこで、これらのプログラムを参考に、日本の移行期の現状に関する調査を行い、成人移行を促進する看護職向け看護モデル(看護ガイドラインおよび教育プログラム)とともに、患者向け情報サイトやインタラクティブメディア・ツールの開発を目的とし、以下の内容について調査・検討を行っている。(1)北米及び欧州の思春期・青年期の小児慢性疾患患者への看護についてのフィールド調査・資料収集(1)成人医療への移行を促進する看護の実態(2)患者の利用する情報サイトや主体的な治療参加を意図したインタラクティブメディア・ツールの活用状況(2)国内調査(1)成人移行期(18-25歳)の小児慢性疾患患者の心理社会適応の実態とその関連要因(2)小児慢性疾患患者の成人移行期の問題への看護職の対応と、看護ー関連職種間の協働に関する実態(3)小児慢性疾患患者の成人移行期の心理社会適応に関して、他職種と協働を図った看護の実際とその有効性海外フィールド調査と文献検索、Web検索を行い、海外における移行期支援の現状に関する情報収集を行った。成人移行期の小児慢性疾患患者の心理社会適応を高める看護について、来年度の全国調査票の原案作成および看護実践に向けた準備を行った。(1)移行期ケアを中心とした海外フィールド調査では、ボローニャ大学医学部附属小児病院においてフィールド調査を行い、家族看護の実際、外来化学療法時の心理支援、思春期患者への心理療法やストレス軽減のための実践活動、心理的ダメージが大きい患者への精神療法についての情報・資料収集を行った。また、米国およびオーストラリアの小児病院のHP上に公開されている移行プログラムを収集し、分析を行い、インタラクティブメディアのヒントを得た。(2)国内調査準備および(3)事例への看護実践準備については、当大学医学部付属病院、国立成育医療センター、国立病院機構千葉東病院、あいち小児保健医療センター、北里大学病院の看護師らを研究協力者として会議を3回開催し、成人移行期にある患者への移行支援の実際について、各施設の研究協力者よりヒヤリング・アンケートを行い、それらを基に調査原案の作成した。さらに、来年度以降に展開する看護実践のあり方について議論を重ねた。国内においては、移行という言葉そのものの定義が施設や疾患によって様々であり、全国調査で移行支援の実態調査を正確に行うこと事態に困難があることが明らかになった。そのため、調査票の設計には、対象疾患者を社会生活可能な疾患・治療状況に限定し、また移行の現況については複数選択肢を設けた。来年度の全国調査計画書については、当大学医学部の倫理委員会に申請中である。事例への看護実践については、成人移行期の看護ガイドラインを策定し、さらにそのガイドラインを実践する専門的な技能を有した看護師を養成することが不可欠との結論に達した。国内外の資料・情報収集と分析を総括し、研究協力者会議でこのような看護師を養成するプログラムの内容を検討し、来年度に2日間ずつ2回にわたって実施予定である。本研究は成人移行期にある10代後半の小児慢性疾患患者について、看護職が他職種と協働しながら患者中心型の看護を実践するモデルを提案するものである。本年度の研究成果は以下のとおりである。1)成人移行事例と看護支援に関する全国調査:国公立基幹病院478施設の小児・小児科病棟看護師へ調査票を郵送し、100病棟より回答を得た(回収率20.9%)。総合病院が最も多く72施設であった。小児慢性疾患患者の成人医療への移行については、小児科医を中心とした連携医療体制が取られていることが明らかになった。従来の小児看護の中でも重視されてきたセルフケア支援は多くの施設が標準的に取り組んでいる状況であるものの、成人移行期に必要な健康教育や成人科を含む複数診療科との連携については、十分になされていないことが示唆された。2)成人移行期新に必要な患者方インタラクティブメディア・ツールの海外資料・文献の分析:移行準備プログラムの目的は、病識やセルフケア行動を適切に維持するだけでなく、必要な情報を自ら取捨選択し、意思決定を行うことを支援し、自立した成人患者となることを目指すものである。

そして、10代より支援を開始するべきとされていたが、今回の分析によって、10から12歳といった早期から教育対象となっているのみならず、10代を3段階にわけ、段階的に進めている状況が明らかになった。また10代患者向けのウッブサイトは、患者の主体的な情報収集を支援すべきものであると思われた。3)成人移行期事例への実践展開:全国期間病院から募集した看護師30名に、全5回にわたって教育プログラムを試行した。さらにプログラム内で事例検討会を開催し、各施設で該当患者に対して行った移行期支援事例について検討を行った。実践事例の蓄積と、移行準備のガイドラインおよび患者が使用するための移行期手帳の必要性が示唆された。1)移行期ケアを中心とした海外フィールド調査と文献検索、Web検索海外における移行期支援の現状および移行支援プログラムの実際に関する情報収集を行った。2)全国の医療機関の小児慢性疾患患者のケアに携わる看護師を対象とした国内調査上記の資料を分析した結果を踏まえて全国調査を行った。調査の結果、日本の医療機関では小児慢性疾患患者は、成人になっても小児医療にとどまっているとの回答が最:も多く、移行準備支援も十分に行われておらず、また、移行に関する基準や教育や連絡会などもほとんど無いことが明らかとなった。3)成人移行期支援看護師の養成上記の結果をふまえ、看護師対象の教育プログラムが必要であるとの考えから、小児慢性疾患患者のケアに携わる看護師を対象として「成人移行期支援看護師養成講座」の実施および、プログラムで活用する「看護ガイドライン」の作成を行った。養成講座では看護師・医師・心理士など専門職による集中講義および、事例検討を含むグループワーク・患者当事者のシンポジウムを含むプログラムを実施し、2年間で合計60名の「成人移行支援看護師」を育成した。4)看護ガイドラインの作成、試用、評価および改定平成21年度に作成した看護ガイドライン(試案)の試運転を各施設において行い、平成22年度に修正・完成させ、看護ガイドライン(初版)を作成した。調査の結果、日本の医療機関では小児慢性疾患患者は、成人になっても小児医療にとどまっているとの回答が最も多く、移行準備支援も十分に行われておらず、また、移行に関する基準や教育や連絡会などもほとんど無いことが明らかとなった。
電気インピーダンス法による病的肝即ち、慢性肝炎肝硬変の虚血耐用能に関する研究

1.ラット正常肝の常温虚血再灌流実験を行ない、電気インピーダンスを測定した。その結果、抵抗率(ρ)は肝虚血後直ちに増加したが、虚血後40分で最高値を示した後、再灌流直前まで徐々に低下した。この最高値をρ_1、再灌流直前をρ_2とすると、ρ_2/ρ_1は再灌流後60分における胆汁流量の回復率と有意は正の相関を認めた。したがってρ_2/ρ_1は常温虚血障害肝のviabilityを予測する指標となることが示された。2.コリン欠乏食投与により作製したラット脂肪肝の常温虚血再灌流実験では、ρは正常肝と同様に虚血後増加したが、その変化は正常肝に比して緩徐であった。3.臨床における肝切除術時に電気インピーダンスを測定すると、正常肝ではラットにおける実験のごとく虚血後直ちに低下し、虚血後50分前後で最高値を示した後、徐々に低下した。脂肪肝、肝炎後硬変肝では虚血後の変化は正常肝に比して軽度であった。したがって、虚血後にρの変化が軽度なものは、病的肝のうち脂肪肝、肝炎後硬変肝であると診断し得る可能性が示唆された。4.ラット正常肝の冷虚血実験では、虚血開始時に対するlosstanσの比(%tanσ)は、4°C生理食塩水中では虚血後4時間まで、4°C UW液中では虚血後12時間まで急速に低下したが、虚血前値に対するATPの比(%ATP)との間には正の相関関係が認められた。したがってlosstanδは、生理食塩水中の冷虚血4時間まで、UW液中の冷虚血12時間までの肝組織中ATPの変化を捕えている可能性が示唆された。UW液中の冷虚血ではloss tanδは肝組織水分含有量の変化がみられないのにもかかわらず変化したことより、loss tanδは肝組織水分含有量には大きく影響を受けないことが示唆された。ラット正常肝の虚血再灌流実験を行ない、電気インピーダンスを測定した。その結果、抵抗率(ρ)は周波数によって異なるが、1kHzおよび10kHZにおいて以下のごとくの知見を得た。ρは肝虚血後直ちに増加したが、虚血後40分で最高値を示した後、再灌流直前まで徐々に低下した。この最高値をρ^1、再灌流直線をρ^2とすると、ρ^2/ρ^1は再灌流後60分における胆汁流量の回復率と有意は正の相関を認めた。以前の実験で胆汁流量の回復率は虚血障害肝のviabilityの適切な指標であるとの知見を得ており、ρ^2/ρ^1は虚血障害肝のviabilityを予測する指標となることが示された。コリン欠乏食投与により作製したラット脂肪肝の虚血再灌流実験では、ρは正常肝と同様に虚血後増加したが、正常肝に比して緩徐であった。臨床における肝切除術時に電気インピーダンスを測定すると、正常肝ではラットにおける実験のごとく虚血後直ちに低下し、虚血後50分前後で最高値を示した後、徐々に低下した。

ラット正常肝の冷虚血実験を行ない、電気インピーダンス、超微形態、肝組織中高エネルギー燐酸化合物、肝組織水分含有量の変化を測定した。肝を切除後直ちに4°C生理食塩水(生食群)、4°CUniversity of Wisconsin液(UW群)中に単純浸漬した。その結果、1.電気インピーダンス測定では、虚血開始時に対するlosstanδの比(%tanδ)は、生食群では虚血後4時間まで、UW群では虚血後12時間まで急速に低下しそれ以後は低下は緩徐となった。2.超微形態の変化では、Flamengのミトコンドリアスコアによりミトコンドリアの形態を評価した。虚血後両群ともにスコアは上昇しミトコンドリアの破壊が進行した。しかし、UW群は生食群と比較して破壊の進行が緩徐で、ミトコンドリアの形態がより保たれていた。3.肝組織中高エネルギー燐酸化合物では、虚血前値に対するATPの比(%ATP)は、生食群では虚血後4時間まで、UW群では虚血後12時間まで急速に低下したが、それ以後は低下は緩徐となった。4.肝組織水分含有量は虚血後、生食群では増加したが、UW群では増加がみられなかった。5.生食群では虚血4時間まで、UW群では虚血後12時間まで%ATPと%tanδの間には正の相関関係が認められた。したがって、電気インピーダンスの指標であるlosstanδは、生理食塩水中の冷虚血4時間まで、UW液中の冷虚血12時間までの肝組織中ATPの変化を捕えている可能性が示唆された。しかしloss tanδの変化が緩徐となってからはミトコンドリアスコアが示す組織学的変化を捕えることはできなかった。またUW液中の冷虚血ではloss tanδは肝組織水分含有量の変化がみられないのにもかかわらず変化したことにより、loss tanδは肝組織水分含有量には大きな影響を受けないことが示唆された。
X線結晶構造解析による膜を介した電子トランスポーター、DsbDの作動原理の解明

本年度は、大腸菌由来のDsbDと好熱菌由来のホモログであるCcdAについて、大腸菌の発現系を構築し、詳細な精製の検討を行った。膜タンパク質の精製に必要不可欠な界面活性剤の検討では、DsbD、CcdAともに、炭素鎖9個で構成されるNonyl-Glucoside以下の炭素数の界面活性剤では非常に不安定であることが明らかになった。また炭素鎖10個のDecyl-Maltosideを使うと、最も精製度が高く、結晶化に適していることが分かった。DsbDとDsbC複合体での結晶構造を明らかにするために、DsbCの大腸菌での発現系構築に着手し、10mg/L-cultureの高い発現量から、高い純度のDsbCを精製することができた。また、DsbDとDsbCの複合体を安定化するために、それぞれの活性中心のシステインを1つずつ欠損させ、電子を受け渡す反応中間体でジスルフィド結合を形成し、安定化する変異体を作製した。ジスルフィド結合を促進する酸化剤と反応時間を詳細に検討し、DsbD-DsbC複合体を安定にかつ、高純度で精製することができた。またDsbD、CcdAとチオレドキシンの複合体の構造解析を行うために大腸菌と好熱菌のチオレドキシンの大腸菌での発現系(20mg/L-culture)を構築した。どちらのチオレドキシンも高純度で精製することができ、DsbD・CcdAと電子の交換反応を行うことのできる機能的なチオレドキシンであることを確認した。DsbD単独、DsbD-Dsbc複合体の2つについて、低分解能(10Å以下)ながら結晶を得ることができた。
新規バイオポリマーを用いた急性膵炎の腸管環境制御

新規に開発されたバイオポリマーであるPolyhydroxybutyrate(PHB)の急性膵炎モデルにおける重症化防止メカニズムの有無を腸管内外環境の変化を中心に解析した.PHBは急性膵炎モデルにおけるバクテリアルトランスロケーションに対して防御的に作用した.PHBは糞便中有機酸組成に変動を与えることなく腸内細菌叢に影響を及ぼし,腸管内容物の滞留が減少し,腸管環境に影響することが示唆された.その仔細なメカニズムは更なる検討を要するが,急性膵炎の腸管侵襲に対してPHBの腸内発酵が新しい治療になりえることが示唆された.新規に開発されたバイオポリマーであるPolyhydroxybutyrate(PHB)の急性膵炎モデルにおける重症化防止メカニズムの有無を腸管内外環境の変化を中心に解析した.PHBは急性膵炎モデルにおけるバクテリアルトランスロケーションに対して防御的に作用した.PHBは糞便中有機酸組成に変動を与えることなく腸内細菌叢に影響を及ぼし,腸管内容物の滞留が減少し,腸管環境に影響することが示唆された.その仔細なメカニズムは更なる検討を要するが,急性膵炎の腸管侵襲に対してPHBの腸内発酵が新しい治療になりえることが示唆された.Polyhydroxybutyrate(PHB)は原核生物のエネルギーや炭素貯蔵物質であり,多くの好気/嫌気性微生物が酵素分解することが哺乳類消化酵素では分解されない.PHBの急性膵炎モデルにおける重症化防止メカニズムの有無を腸管内外環境の変化を中心に解析した.Wistar系雄性ラットに5%PHBを2週間自由摂取させて対照群と比較した(n=5).検討項目は,腹腔内臓器湿重量,糞便中のH_2O, NH_3,コハク酸,乳酸,ギ酸,酢酸,イソ酪酸,プロピオン酸,酪酸,吉草酸,イソ吉草酸,腸管内容物重量,盲腸内pHとした.5%PHB自由摂取下のWistar系雄性ラットに4.5g/kg体重の滅菌1-アルギニン-塩酸塩を腹腔内投与して急性膵炎を作成した.0, 0.25, 0.5, 1, 3日における解析を行った(各n=8).検討項目は,腹水量,腹水中/血中エンドトキシン,血中IL-1β, IL-6, TNFα,腹水/腸間膜リンパ節細菌培養とした.併せて,盲腸内容物の腸内フローラの遺伝子解析(T-RFLP法)を行った.糞便中H_2O, NH_3の減少,盲腸内pH上昇,胃滞留内容物の減少,臓器湿重量減少(小腸,腎臓)において有意差(p<0.05)がみられた.糞便中有機酸組成には変動は与えなかった.膵炎誘発6時間後の腹水量はPHB投与群で有意な低値をとった.また,血中エンドトキシンは12時間後までは有意差はないが,PHB投与群で1日目に有意な低値をとった.加えて腸間膜リンパ節の感染が有意に低率であった.T-RFLP法では,PHB投与により主にクロストリジウム属の減少がみられた.PHBは糞便中有機酸組成に変動を与えることなく腸内細菌叢に影響を及ぼし,腸管内容物の滞留が減少し,腸管環境に影響することが示唆された.その結果,急性膵炎モデルにおけるbacterial translocationに対しては防御的に作用した.Polyhydroxybutyrate(PHB)の急性膵炎モデルにおける重症化防止メカニズムの有無を腸管内外環境の変化を中心に解析した.Wistar系雄性ラットに5%PHBを2週間自由摂取させて対照群と比較した(n=5).検討項目は,腹腔内臓器湿重量,糞便中のH_2O,NH_3,コハク酸,乳酸,ギ酸,酢酸,イソ酪酸,プロピオン酸,酪酸,吉草酸,イソ吉草酸,腸管内容物重量,盲腸内pHとした.5%PHB自由摂取下のWistar系雄性ラットに4.5g/kg体重の滅菌1-アルギニン-塩酸塩を腹腔内投与して急性膵炎を作成した.0, 0.25, 0.5, 1, 3日における解析を行った(各n=8).検討項目は,腹水量,腹水中/血中エンドトキシン,血中IL-1β,IL-6,TNFα,腹水/腸間膜リンパ節細菌培養とした.併せて,盲腸内容物の腸内フローラの遺伝子解析(T-RFLP法)を行った.糞便中H_2O,NH_3の減少,盲腸内pH上昇,胃滞留内容物の減少,臓器湿重量減少(小腸,腎臓)において有意差(p<0.05)がみられた.糞便中有機酸組成には変動は与えなかった.膵炎誘発6時間後の腹水量はPHB投与群で有意な低値をとった.また,血中エンドトキシンは12時間後までは有意差はないが,PHB投与群で1日目に有意な低値をとった.加えて腸間膜リンパ節の感染が有意に低率であった.T-RFLP法では,PHB投与により主にクロストリジウム属の減少がみられた.PHBは糞便中有機酸組成に変動を与えることなく腸内細菌叢に影響を及ぼし,腸管内容物の滞留が減少し,腸管環境に影響することが示唆された.その結果,急性膵炎モデルにおけるbacterial translocationに対しては防御的に作用した.CVC挿入下の急性膵炎モデルにおける生存分析において,PHBの致命率低減効果が示された.

平成23年度はPolyhydroxybutyrate(PHB)の急性膵炎モデルにおけるBacterial translocation抑制の有無を,さらに実際の病態に近い中心静脈栄養(CVC)下の状況で確認することを目的とした.7週齢のSPF-Wistar系雄性ラットに空腸痩を作成し,さらに右頚部からCVC;時間当たりブドウ糖0.16g,塩化ナトリウム2.65mg,酢酸カリウム1.96mg,燐酸二水素カリウム1mg,硫酸マグネシウム0.67mg,グルコン酸カリウム1.62mg,硫酸亜鉛5.23mg,囓歯類必須アミノ酸含有とした.PHB群はCVC1日後からホモゲンにて分散・安定化させたPHB1.25g含有粉末懸濁液を1日2回経空腸投与した.コントロール群はホモゲン分散液のみ投与した.4.5g/kg体重の滅菌1-アルギニン-塩酸塩を単回腹腔内投与して急性膵炎を作成した.8日目に屠殺し,回腸・盲腸・直腸・盲腸内容物を採取し,糞便中のH_2O,NH_3,コハク酸,乳酸,ギ酸,酢酸,イソ酪酸,プロピオン酸,酪酸,吉草酸,イソ吉草酸,腸管内容物重量,盲腸内pHを測定した.屠殺1時間前にBrdU 20mg/kg体重を静注した.CVC挿入下に急性膵炎モデルにおける生存分析において,PHBの致命率低減効果が示された.小腸・大腸の増殖/アポトーシスの変動の検討では,PHB投与群で小腸増殖帯におけるBrdU LIの増加と大腸TUNEL陽性細胞の低下が示された.血清MIF濃度は全経過で有意な変動はみられなかったが,PHB投与群で腸間膜リンパ節の大腸菌感染が有意に低率であった.CVC下でPHBは糞便中有機酸組成に変動を与えなかったが,T-RFLP法でClostridium sp.の占拠割合の減少が認められた.
無歯顎既製トレーの新規開発設計に関する研究

I.目的上下顎無歯顎顎堤を三次元的に計測することを目的とし,三次元レーザスキャナとパーソナルコンピュータを用いた形態計測および顎堤分析を行った.II.方法当教室で保存している上下顎無歯顎研究模型の中から,上下顎それぞれ140個(男性60個,女性80個)を抽出した.抽出した研究模型を三次元レーザスキャナ(LPX-250,ローランドDG)を用い,スキャンピッチ0.2mmの平面スキャンを行った.スキャンされた模型は画面上で三次元的に自由に動かすことができ,あらゆる方向から観察が可能である.また分析ソフトを用いることにより,二点間距離は数値で表される.顎堤計測の基準点は後方基準点を上顎は左右ハミュラーノッチ,下顎は左右レトロモラーパッド1/2に設定し,左右後方基準点間距離をそれぞれ顎堤幅径とした.また左右後方基準点の中点から前方に垂線を引き正中顎堤頂との接点を前方基準点とし,この垂線をそれぞれ顎堤長径とした.III.結果と考察三次元レーザスキャナによる研究模型のスキャンは,模型設置からデータ保存までおよそ7分であった.顎堤幅径,長径など二点間距離の測定もノギスによる実測や座標計算せずに,実測値が数値で表される.したがって本方法を用いることにより接触型プローブを用いた方法に比べ,大幅に労力と時間を短縮することができた.得られたデータから上下顎の顎堤を分析したところ長径,幅径はそれぞれ,47.1,47.2,30.9,56.3mmであった.幅径と長径について男女別でt検定を行ったところ,上顎の幅径と長径,下顎の幅径で有意差が認められた(p<0.05).また,顎堤幅径と長径(幅径/長径)の比率を求めたところ,上顎では1.00,下顎では1.49の分布を示した,しかし幅径と長径の相関係数は,上顎r=0.116,下顎r=0.239と相関が認められず,長径と幅径の関係から顎堤を分類することは困難であると思われた.I.目的上下顎無歯顎顎堤を三次元的に計測することを目的とし,三次元レーザスキャナとパーソナルコンピュータを用いた形態計測および顎堤分析を行った.II.方法当教室で保存している上下顎無歯顎研究模型の中から,上下顎それぞれ140個(男性60個,女性80個)を抽出した.抽出した研究模型を三次元レーザスキャナ(LPX-250,ローランドDG)を用い,スキャンピッチ0.2mmの平面スキャンを行った.スキャンされた模型は画面上で三次元的に自由に動かすことができ,あらゆる方向から観察が可能である.また分析ソフトを用いることにより,二点間距離は数値で表される.顎堤計測の基準点は後方基準点を上顎は左右ハミュラーノッチ,下顎は左右レトロモラーパッド1/2に設定し,左右後方基準点間距離をそれぞれ顎堤幅径とした.また左右後方基準点の中点から前方に垂線を引き正中顎堤頂との接点を前方基準点とし,この垂線をそれぞれ顎堤長径とした.III.結果と考察三次元レーザスキャナによる研究模型のスキャンは,模型設置からデータ保存までおよそ7分であった.顎堤幅径,長径など二点間距離の測定もノギスによる実測や座標計算せずに,実測値が数値で表される.したがって本方法を用いることにより接触型プローブを用いた方法に比べ,大幅に労力と時間を短縮することができた.得られたデータから上下顎の顎堤を分析したところ長径,幅径はそれぞれ,47.1,47.2,30.9,56.3mmであった.幅径と長径について男女別でt検定を行ったところ,上顎の幅径と長径,下顎の幅径で有意差が認められた(p<0.05).また,顎堤幅径と長径(幅径/長径)の比率を求めたところ,上顎では1.00,下顎では1.49の分布を示した,しかし幅径と長径の相関係数は,上顎r=0.116,下顎r=0.239と相関が認められず,長径と幅径の関係から顎堤を分類することは困難であると思われた.無歯顎補綴の臨床において,患者来院時にまず行う処置として概形印象採得がある.この概形印象から製作された研究模型は,診査,診断,義歯床下に含まれる口腔粘膜部と周囲粘膜との形態的関係,個人トレーの製作など多くの情報が含まれている.通常,概形印象を採得する場合,モデリングコンパウンドを用いる方法が通法とされている.しかし,モデリングコンパウンドは準備の煩雑さや操作に熟練の必要性などの欠点である.多忙な日常臨床においては,歯科材料の向上に伴い,無歯顎においても操作性,価格性によりアルジネート印象材を使用することが大半であろう.無歯顎の概形印象をアルジネート印象材で採得する際,その既製トレーの適合性が非常に重要になる.現在,市販されているアルジネート用無歯顎既製トレーは外国製であったり,その設計された時代が古かったりして,現在の日本人の無歯顎顎堤に適合するトレーは見あたらない.そこで本研究は,新たに無歯顎既製トレーを設計,製作することを目的とした.トレーの新規設計,製作に先立ち,まず無歯顎顎堤を詳細に計測することにした.研究模型を三次元スキャナにより測定し,データベースに蓄積する.さらに分析されたデータから,上下顎の無歯顎