hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
遺伝子多型を手がかりとする瞬目発生の制御神経機構の解明

ヒトは眼球湿潤に必要な数の何倍も瞬きをしている。何のために頻回に瞬きをするのか、未だに大きな謎である。本研究は瞬きの頻度の大きな個人差に着目し、遺伝子多型を解析することで、その個人差を生み出す神経機構を明らかにし、さらに、自発性瞬目の機能的役割までも明らかにすることを目標として一連の研究を行った。その結果、ニコチン受容体に関連した遺伝子多型タイプにより瞬目率が異なること、大脳皮質の角回の灰白質の体積の量が瞬目率の個人差と正の相関があることを発見した。さらに、自律神経活動が瞬きに伴い大きく変化することを発見した。映像観察時の自発性瞬目の生起頻度の個人差が、ニコチン受容体α4β2の遺伝子多型のタイプにより異なることを発見した。この発見に基づき、ニコチンガム摂取により、瞬きの頻度に変化がでるかを調べたが、投与量が少なかったため、大きな影響は生じなかった。しかし、投与量を多くすると、副作用が大きくなるため、ヒトへの投与は困難であることが分かった。そこで、日常的に喫煙をしている人を対象に、喫煙前後での瞬目率の変化を調べた。その結果、一部の人では、喫煙後に瞬きが増加する傾向がみられた。しかし、個人差が大きく、統計的な有意差は認められなかった。さらに、瞬きの発生に関連する脳領域のセロトニン細胞の受容体がニコチン受容体であることに着目し、セロトニン投与により、瞬目率が変化するかを、動物を対象に研究を実施している。具体的には、セロトニンの再取り込み阻害薬を長期間服用することにより、セロトニン受容体の活動レベルを変化させ、同時に、安静時の瞬きをビデオ計測により長期間モニタリングを行い、両者の間に相関関係があるかを調べている。当初計画していたニコチン投与による瞬目率の変化の実験は終了し、さらに次のステップとして、ニコチン受容体が関係するセロトニン細胞に着目し、それと自発性瞬目との関係を明らかにする実験にすでに着手していることから、おおむね順調に進展している。本研究は瞬きの頻度の大きな個人差に着目し、その個人差を生み出す神経機構を明らかにすることで、自発性瞬目の機能的役割までも明らかにすることを目指している。そこで、本研究プロジェクトでは、ドーパミンやセロトニン、アセチルコリンなどの主要な神経伝達物質の遺伝子多型によって、映像を8分間自由に見ているときの自発的な瞬目率に違いがあるかを調べた。100名以上の健常な成人のデータを集めることで、従来考えられていたドーパミンではなく、ニコチン性アセチルコリン受容体をコードしている領域の遺伝子多型によって、自発性瞬目率に有意な違いがあることがわかった。ニコチン性アセチルコリン受容体は、黒質ドーパミン細胞の主要なプレシナプス受容体であるため、その受容体の活性化のしやすさが、瞬目率の大きな個人差を生み出している可能性が考えられる。そこで、このアセチルコリンを黒質ドーパミン細胞に放出している脳幹の脚橋被蓋核が自発的な瞬きに伴って活動を増加させているかをfMRIにより調べた。その結果、脳幹の一部で活動が増加している領域はみつかったが、脚橋被蓋核の活動変化を捉えることはできなかった。つぎに、瞬きの個人差と相関して脳の容積が変化している領域があるか、という全く別のアプローチから、瞬きの個人差を生み出す神経機構を明らかにすることにした。具体的には、54名の健常な成人の脳の構造画像をMRIを用いて撮像し、さらに、映像を見ているときの瞬きの頻度も計測した。その結果、右の角回が瞬きの頻度の高い人ほど、灰白質の量が大きいことを発見した。さらに、その領域のをTMSを用いて阻害したところ、瞬きの頻度が低下することを示した。以上の結果を論文にまとめて、国際英文誌にて発表した。瞬きの個人差と相関する脳の領域をMRIの構造画像に基づくVTM法により同定し、さらに、その領域をTMSを用いて活動阻害することで、瞬きの頻度が低下することを示した。瞬き発生との相関だけでなく因果関係まで示しすことで、瞬き発生の神経機序の解明に大きな貢献をすることができた。瞬きの頻度は、情動や覚醒でも大きく変化することから、自律神経系の活動が瞬きの発生パターンの個体差・個人内変動に大きな影響を与えているのではないかという着想を得るに至り、本年度は、瞬きに加えて、心拍・呼吸・汗腺などの生体情報を同時に計測することで、自律神経の活動が瞬きの前後でどう変化しているかを調べる研究を行った。まず最初に、25名の被験者を対象に、映像を自然な状態で見ている時の瞬きに応じて、瞬時心拍数がどのように変化するかを調べたところ、瞬き直後の数秒間の間、一時的に心拍数が有意に増加するという現象を発見した。

そこで、映像ではなく朗読音声を聞いている時や安静状態でも同様の現象を生じるかを調べたところ、やはり瞬き直後に心拍数の増加がみられたが、呼吸活動に変動は生じていなかった。さらに、暗闇の中で朗読を聴いてもらっても、同様の現象が生じることを確認した。つまり、瞬きに伴う視覚入力の変化がこのような現象を引きこしているわけではないのである。さらに、汗腺の活動も瞬き直後に上昇をしたことから、自律神経の中でも、副交感神経ではなく、交感神経の活動がこの心拍数上昇のトリガーとなていると推測される。今年度は上記の発見を英語論文にまとめて、国際誌に発表した( Nakano & kuriyama, International Journal of Psychophysiology 2017)。ヒトは眼球湿潤に必要な数の何倍も瞬きをしている。何のために頻回に瞬きをするのか、未だに大きな謎である。本研究は瞬きの頻度の大きな個人差に着目し、遺伝子多型を解析することで、その個人差を生み出す神経機構を明らかにし、さらに、自発性瞬目の機能的役割までも明らかにすることを目標として一連の研究を行った。その結果、ニコチン受容体に関連した遺伝子多型タイプにより瞬目率が異なること、大脳皮質の角回の灰白質の体積の量が瞬目率の個人差と正の相関があることを発見した。さらに、自律神経活動が瞬きに伴い大きく変化することを発見した。遺伝子多型の解析に加えて、遺伝子伝達物質の働きを変化させる薬物が自発性瞬目の頻度に及ぼす影響を調べることで、自発性瞬目の発生を制御している神経機構を多角的アプローチにより明らかにしていく計画である。瞬きの発生の個人差を生み出す脳の領域を同定できたので、今後は、その領域が脳梗塞などの病気などで障害を受けた人を対象に、瞬きの発生がどのような影響を受けているかを調べる。さらに、発達に伴い瞬きの頻度も大きく増加することから、当該脳領域の発達と瞬きの発生頻度の変化の関係を調べる。認知神経科学複数名の瞬目を同時に計測できるようにするために眼電アンプを5台購入する予定である。刺激提示ならびにデータ解析用のパソコンの購入を予定していたが、希望していたスペックに見合うものがすぐに納品できなかったため、今年度は既存のパソコンで対応した。さらに、既存のデータを使って新規のデータ解析をしたため、その分、実験協力者への謝金がかからず、人件費が当初の計画を下回った。すでに保有している生体用計測装置に追加という形で、複数同時計測が可能な眼電アンプを5台購入する計画である。画像処理のスペックが高いPCが発売されたので、それを今年度購入する。さらに、新奇なデータを集める実験を計画しており、実験協力謝金と装置の使用料で次年度中にすべての予算の使用が見込まれる。
多剤耐性緑膿菌に対する至適抗菌薬と投与経路の探索

【研究目的】多剤耐性緑膿菌に対する至適抗菌薬と投与経路における抗菌効果の関係について調査を行った。【研究方法】愛知医科大学病院にて臨床分離された多剤耐性緑膿菌株に対する各種抗菌薬の最少発育阻止濃度(MIC)はClinical and Laboratory Standards Institute (CLSI)のガイドラインを順守した液体培地希釈法を用いた。チェッカーボード法を用いて多剤耐性緑膿菌に対して有効な併用療法を選択した後、ヒトの血中薬物動態を模擬した抗菌薬の併用療法(注射)または、吸入投与の併用療法とマウス肺炎感染モデルを用いた薬力学試験を行った。サンプリングした組織は生食内へ入れた後、ホモジネーターを使用してすりつぶし、肺組織中の細菌濃度を確認した。【研究成果】チェッカーボード法の結果、当院で分離された多剤耐性緑膿菌に対して、コリスチン(CL)とアズトレオナム(AZT)の併用療法がin vitro試験で高い抗菌効果を示した。本研究に用いた多剤耐性緑膿菌のCLとAZTに対するMICは1、>256μg/mLであった。臨床の薬物動態試験でCL(5mg/kg/12h)とAZT (2g/8h)の血中濃度をシミュレートした薬剤投与(注射)をマウスに行い、その抗菌効果を確認したところ、併用療法ではCLとAZTの単剤療法よりも優位に菌量(log CFU_<24>)の低下を認めた(-3.36±0.0.86、-0.75±0.27、-0.06±0.35 ; p<0.01)。また、CLの吸入療法を用いて抗菌効果の変化を検討したが、CLとAZTとの併用療法の抗菌効果に大きな抗菌活性の改善は認められなかった。【意義・重要性】多剤耐性緑膿菌に対する抗菌薬の至適投与方法の探索は急務であり、本研究の結果は、高容量のCLとAZTの併用療法(注射)が多剤耐性緑膿菌に対して有効である可能性が示唆された。
ゼニゴケ葉緑体におけるトランススプリット遺伝子の情報発現メカニズムの解析

ゼニゴケ葉緑体ゲノムの全塩基配列より、特記すべきことはリボソームタンパク質遺伝子rps12が2本のDNA類に分断され存在して発見されたことである。すなわちリボソームタンパク質遺伝子rps12は3つのエキソンと2つのイントロンから構成され、エキソン1とそれにつづくイントロンの一部が60kbp離れて、反対のDNA鎖に見いだされた。これは生体内で初めて発見された新しい分割方式の遺伝子である。この新しい機構はトランス・スプライシングと呼ばれる。本研究は、ゼニゴケ葉緑体よりRNAを単離精製し、種々の合成デオキシヌクレオチドを用いたノーザンハイブリダイゼーション法、また、S1マッピング法により、トランススプライシングのプロセスを明らかにした。rps12エキソン1を含む転写物はその上流のアミノ酸203個からなるORF203から、下流に存在するリボソームタンパク質遺伝子rp20まで転写され、直ちに、ORF203とrps12エキソン1の間でプロセシングが起き、エキソン1を含む前駆体が、一つのトランススプライシングの基質になること、一方、rps12エキソン2およびエキソン3を含む転写物は上流は逆向き繰り返し配列から転写が始まり、下流にはリボソームタンパク質rps7およびNADH脱水素酵素のサブユニット遺伝子ndh2、ロイシン転移RNAまで続き、rps7とndh2の間でプロセシングが起き、rps12エキソン2およびエキソン3、rps7を含む前駆体が、もう一つの基質となることを明らかにした。スプライスされた成熟mRNAは、DNA塩基配列から予測される配列、すなわち、イントロンが削除された配列をもつ合成オリゴデオキシヌクレオチドを、プローブとして検出し、確かにトランスとシス・スプライシングは各々独立して起きていることを明らかにした。さらに、イントロンの2次構造モデルを組立て、ステム・ループIIIに切れ目が生じた通常のグループIIイントロンと同じ構造をとることを確認した。ゼニゴケ葉緑体ゲノムの全塩基配列より,特記すべきことはリボソームタンパク質遺伝子rps12が2本のDNA鎖に分断され存在して発見されたことである.すなわちリボソームタンパク質遺伝子rps12は3つのエキソンと2つのイントロンから構成され,エキソン1とそれにつづくイントロンの一部が60kbp離れて,反対のDNA鎖に見いだされた.これは生体内で初めて発見された新しい分割方式の遺伝子である.この新しい機構はトランス・スプライシングと呼ばれ,通常のシス・スプライシングと区別され,このような遺伝子発現方式が葉緑体に存在した生物学的意義は大変興味深い.本年度は,ゼニゴケ葉緑体よりRNAを単離精製し,種々の合成デオキシヌクレオチドを用いたノーザンハイブリダイゼーション法,また, S1マッピング法により,トランススプライシングのプロセスを明らかにした. rps12エキソン1を含む転写物はその上流のアミノ酸203個からなるORF203から,下流に存在する

リボソームタンパク質遺伝子rp120まで転写され,直ちに, ORF203とrps12エキソン1の間でプロセシングが起き,エキソン1を含む前駆体が,一つのトランススプライシングの基質になること,一方, rps12エキソン2およびエキソン3を含む転写物は上流は逆向き繰り返し配列から転写が始まり,下流にはリボソームタンパク質rps7およびNADH脱水素酵素のサブユニット遺伝子ndh2,ロイシン転移RNAまで続き, rps7とndh2の間でプロセシングが起き, rps12エキソン2およびエキソン3, rps7を含む前駆体が,もう一つの基質となることを明らかにした.さらに,スプライスされた成熟mRNAは, DNA塩基配列から予測される配列,すなわち,イントロンが削除された配列をもつ合成オリゴデオキシヌクレオチドを,プローブとして検出し,確かにトランスとシス・スプライシングは各々独立して起きていることを明らかにした.ゼニゴケ葉緑体ゲノムの全塩基配列より、特記すべきことはリボソームタンパク質遺伝子rps12が2本のDNA鎖に分断され存在して発見されたことである。すなわちリボソームタンパク質遺伝子rps12は3つのエキソンと2つのイントロンから構成され、エキソン1とそれにつづくイントロンの一部が60Kbp離れて、反対のDNA鎖に見いだされた。これは生体内で初めて発見された新しい分割方式の遺伝子である。この新しい機構はトランス・スプライシングと呼ばれ、通常のシス・スプライシングと区別され、このような遺伝子発現方式が葉緑体に存在した生物学的意義は大変興味深い。本年度は、ゼニゴケ葉緑体よりRNAを単離精製し、種々の合成デオキシヌクレオチドを用いたノーザンハイブリダイゼーション法、また、S1マッピング法により、トランススプライシングのプロセスを明らかにした。rps12エキソン1を含む転写物はその上流のアミノ酸203個からなるORF203から、下流に存在するリボソームタンパク質遺伝子rp120まで転写され、直ちに、ORF203と12エキソン1の間でプロセシングが起き、エキソン1を含む前駆体が、一つのトランススプライシングの基質になること、一方、rps12エキソン2およびエキソン3を含む転写物は上流は逆向き繰り返し配列から転写が始まり、下流にはリボソームタンパク質rps7およびNADH脱水素酵素のサブユニット遺伝子ndh2、ロイシン転移RNAまで続き、rds7とndh2の間でプロセシングが起き、rds12エキソン2およびエキソン3、rds7を含む前駆体が、もう一つの基質となることを明らかにした。さらに、スプライスされた成熟mRNAは、DNA塩基配列から予測される配列、すなわち、イントロンが削除された配列をもつ合成オリゴデオキシヌクレオチドを、プローブとして検出し、確かにトランスとシス・スプライシングは各々独々して起きていることを明らかにした。
III-V量子ドット/シリコンエバネッセントハイブリッドレーザの開発

半導体量子ドットを光源とする導波路エバネッセント結合型ハイブリッドシリコンレーザを実現した。本デバイスは、InAs半導体量子ドットを光ゲイン媒体とし、シリコン光導波路にレーザ光が直接的に入射されているものであり、ウェハ接合および薄膜転写技術により作製した。既存のハイブリッドシリコンレーザはいずれも量子井戸をゲイン媒体としており、今回高性能な量子ドットを採用することによって、世界最高温度動作を達成した。この成果は、特に高い温度特性が要求される高密度光集積回路の開発における重要な布石であり、次世代の高速・大容量・低消費電力演算・通信の実現に繋がるものである。化合物半導体量子ドットレーザのゲイン部とシリコン光導波路とを含むエバネッセントハイブリッドシリコンレーザ構造の設計を電磁場シミュレーションにより行い、適した各部分の寸法の選定を行った。周波数領域の有限要素法による電磁界解析の計算を行い、GaAsをベースとするIII-V化合物半導体のレーザ構造のメサの寸法、および、Si導波路の寸法に依存して、光閉じ込め係数がどのように変化するかを調べ、最終的に作製されるレーザ共振器におけるゲイン担当部分において基底光モードが主にInAs/GaAs量子ドットコア層部分にあり、それに対して、共振器両端のSi導波路結合部分においては主にSi部分にあるような構造の選定を進めた。その設計に基づき、化合物半導体とシリコンとのウェハ接合過程を含むレーザ構造の試作を進めた。具体的には、まずSOI基板上に電子線リソグラフィーと気相エッチングによりSi導波路の作り込まれたものの上に、半導体-半導体直接接合法によりInAs量子ドットレーザのウェハを貼り合わせた後、InAs量子ドットウェハからGaAs基板を選択的な液相エッチングにより除去を行った。そしてSi基板上に転写されたInAs/GaAs薄膜に、レーザ共振器構造となるメサの形成および電極構造の作り込みを行うことで、Si導波路上のInAs/GaAs量子ドットレーザデバイスを完成させた。このようにして作製した素子につき、エレクトロルミネッセンス測定を行い、シリコン光導波路には結合しない状態での化合物半導体内でのレーザ発振、また、自然放出光の光導波路への結合を観測した。本年度は、まず、昨年度に引き続き、III-V族化合物半導体/シリコンエバネッセントレーザの作製に取り組んだ。レーザ発振光がシリコン光導波路から観測されないことが問題点であったが、分析の結果、問題の起因となっている要素を抽出することができた。具体的には、GaAs/Si接合界面の機械的強度の向上や、III-V半導体薄膜内の共振器構造とシリコン光導波路の位置合わせ(アライメント)の精度の向上、また、レーザ共振器の光閉じ込め強度に関わるDBRミラーの設計およびシリコン基板のへき開の位置への考慮を含むシリコン導波路構造の改良等を課題として設定し、それぞれに取り組んだ。例えば、SOG(スピンオンガラス)を介した新規接合法の導入により、機械的強度の向上が確認された。また、レーザ構造作製プロセスフローの再設計を行った。シリコン光導波路構造の設計も完了した。派生的な研究テーマとして、光集積回路用途の半導体レーザである以上、その素子の変調動作は必須の課題となる。そこで、高速変調動作用に、新規にシリコン基板上InAs/GaAs量子ドットレーザの作製を行った。複数ラウンドに渡る測定、フィードバック、素子構造および作製工程の改善を重ねた結果、金属薄膜を介した接合法による素子と半導体同士の直接接合による素子の両方において、シリコン上量子ドットレーザとして世界最速となる6GHz変調動作に成功した。この成果は、量子ドットレーザを用いた高性能光集積回路の実現への重要な通過点の一つである。本研究課題の3ヵ年の中の2年目における進捗として、ほぼ予定通りの結果が得られていることに加え、高速変調動作という、当初予定していなかった派生的な成果を得ることができたため。本研究課題の当初の目的であった、世界初の半導体量子ドットを光源とする導波路エバネッセント結合型ハイブリッドシリコンレーザの実現に成功した。本デバイスは、InAs半導体量子ドットを光ゲイン媒体とし、シリコン光導波路にレーザ光が直接的に入射されているものである。InAs量子ドットを含むIII-V化合物半導体ダブルへテロ構造の成長されたウェハと、シリコン光導波路アレイを作り込んだsilicon-on-insulator(SOI)ウェハとをウェハ接合法により組み合わせることで作製した。既存のハイブリッドシリコンレーザはいずれも量子井戸をゲイン媒体としており、今回初めて高性能な量子ドットを採用することによって、世界最高温度動作を達成した。量子井戸と比較して低い体積ゲイン密度を補いつつ高い光結合効率を得るためのIII-V薄膜-シリコン導波路系の三次元的構造設計を行った。この成果は、特に高い温度特性が要求される高密度光集積回路の開発における重要な布石であると言える。また、並行してレーザ素子の高速変調にも取り組み、シリコンウェハに接合したInAs量子ドットレーザにおいて、シリコン上量子ドットレーザとして世界最速となる10GHz変調動作にも成功した。同時に、60°C条件下においても6GHzという高い変調速度を確認している。これら一連の成果は、光・電子融合集積回路における高性能な光源をもたらすものであり、次世代の高速・大容量・低消費電力演算・通信の実現に繋がるものである。

既存のハイブリッドシリコンレーザはいずれも量子井戸をゲイン媒体としており、今回高性能な量子ドットを採用することによって、世界最高温度動作を達成した。この成果は、特に高い温度特性が要求される高密度光集積回路の開発における重要な布石であり、次世代の高速・大容量・低消費電力演算・通信の実現に繋がるものである。本課題の最終目標である「エバネッセントハイブリッドシリコンレーザ」の実現にまでは至っていないものの、レーザ構造の設計、試作、測定までを一通り行うことができ、かつ、シリコン光導波路には結合しない状態での化合物半導体内でのレーザ発振、また、自然放出光の光導波路への結合の観測に成功しており、上記最終目標の達成が有意に現実味を帯びて来ているため。本研究課題の目標であるエバネッセントハイブリッドレーザの実現に向け、問題点であるレーザ発振光がシリコン光導波路から観測されないことへの対応策(GaAs/Si接合界面の機械的強度の向上や、III-V半導体薄膜内の共振器構造とシリコン光導波路の位置合わせ(アライメント)の精度の向上、また、レーザ共振器の光閉じ込め強度に関わるDBRミラーの設計およびシリコン基板のへき開の位置への考慮を含むシリコン導波路構造の改良等)の施行を引き続き進め、目的の素子を実現する予定である。材料工学今後は、レーザ発振を達成し、かつ、シリコン光導波路への光結合を行うようなデバイスを実現するために、構造および作製法の改善を進める。研究計画書の提出時点では予定されていなかった研究代表者の所属の移動(東京大学から京都大学へ)が今年度に生じたことにより、当初予定していたものと比べ、研究活動に伴う支出が小さくなったため。在籍している研究室における既存の計算および実験の設備および材料を使用することができたため。当初の計画で本年度に行う予定であった物品等の購入を今年度に行う予定である。依然として、研究期間終了時点において研究は予定の通り遂行される予定である。新たな実験材料の調達に使用する予定である。
出芽酵母の複製開始複合体の構成因子の解析

1.研究目的:我々はマルチレプリコンを持つ真核生物の染色体複製のモデル系として出芽酵母第六染色体の複製開始点の解析を網羅的に行っている。これまでに、使用頻度や複製開始時期はそれぞれの複製開始領域で異なり、確実な染色体複製を行うために染色体レベルで何らかの制御を受けていることが明らかになってきた。本研究課題は第六染色体上の9つある複製開始領域の複製開始活性を決める因子を明らかにするために、in vivo UVフットプリント法によって複製開始複合体に関わる因子の同定と、各複製開始領域内の必須配列に形成される複製開始複合体と複製開始活性の相関について解析を行った。2.研究成果:UVフットプリント法により複製開始必須領域に結合するORC複合体をin vivoで解析することに成功した。この解析により、G1期に形成される複製前複合体(pre-RC)の形成に伴いORC複合体と必須配列の結合状態は弱くなること、この結合状態を維持するためにはCdc6およびMcm5の活性が必要であることを明らかにした(論文を投稿中)。また、pre-RCは複製開始と同時に崩壊すること、崩壊にはCdc7キナーゼの活性が必要であることが明らかとなった。このことからpre-RCの崩壊が複製開始の重要なステップであることが示唆された。さらに、pre-RCはS期初期に開始する領域ではG1期の直前にすばやく形成されるが、S期の終期に複製するものはS期の中頃までの長い時間をpre-RCの形成に要することが明らかとなった。複製開始の順序は、pre-RCが形成される時点ですでに決定されていることから、S/M期サイクリンのキナーゼ活性の変化によって直接制御されているのではなく、染色体の高次構造がpre-RC形成のための分子集合の速度あるいはpre-RCの崩壊のためのCdc7キナーゼのaccesibilityを規定する事によって決定されていることが示唆された(論文を投稿準備中)。
がんに対するヒト型モノクローナル抗体の開発と臨床応用

固形癌の間質内にBRMの1つであるOK-432(5KE)をfibrinogen(80mg)と混合して局所注入することによって,きわめて効率の良いリンパ球のin vivo activationが可能であり,ヒト・ヒトハイブリドーマの産生効率を高め得ることが分かった.大腸癌での検討では,局注例で得られたハイブリドーマの約30%が100ng/ml以上のヒト型イムノグロブリンを産生しており,そのうちで癌に特異性の高いイムノグロブリン産生が約20%に認められている.この手法で作成されたハイブリドーマの中から癌との反応性が高い1株(YJ-37,IgM)を選び,抗体の認識するepitopeの解析を行なったところ,そのepitopeは膜に存在するシアル酸を含む糖鎖であり,HPTLCおよびELISA法での検討からsialylatedlacto-seriesのIV^3NeuAcα-Lc^4およびIV^3NeuAcα-nLc^4であろうと考えられた.乳癌に対しても同様の局所注入をおこなって,乳癌組織との反応性を指標としてBMMK-33Gと呼ばれるハイブリドーマを得た.この抗体も乳癌細胞の膜と反応したが,正常乳腺のacinusおよびductとも弱く反応する性質があった.さらに,同様の局所免疫療法を甲状腺未分化癌患者に対して施行しハイブリドーマを作成したが,その中の1クローン(3C5)は,同一人の腫瘍細胞から樹立された細胞株(KOA-2)や甲状腺癌細胞(anaplastic & pappillary carcnoma)および乳癌細胞と反応するが,多くの正常組織とは無反応あるいは微弱な反応をしめすのみであることが分かった.これらのハイブリドーマは,最低6カ月以上にわたって高濃度のヒト型イムノグロブリンを産生しつづけることも証明された.以上の結果は,強力な局所免疫療法がリンパ球のin vivo activationにきわめて有効であり,癌に対するヒト型モノクローナル抗体の大量安定供給に道を開くものと考えられる。しかし,本研究期間内ではその臨床応用にまでは至っておらず,今後の研究課題として残されている.固形癌の間質内にBRMの1つであるOK-432(5KE)をfibrinogen(80mg)と混合して局所注入することによって,きわめて効率の良いリンパ球のin vivo activationが可能であり,ヒト・ヒトハイブリドーマの産生効率を高め得ることが分かった.大腸癌での検討では,局注例で得られたハイブリドーマの約30%が100ng/ml以上のヒト型イムノグロブリンを産生しており,そのうちで癌に特異性の高いイムノグロブリン産生が約20%に認められている.この手法で作成されたハイブリドーマの中から癌との反応性が高い1株(YJ-37,IgM)を選び,抗体の認識するepitopeの解析を行なったところ,そのepitopeは膜に存在するシアル酸を含む糖鎖であり,HPTLCおよびELISA法での検討からsialylatedlacto-seriesのIV^3NeuAcα-Lc^4およびIV^3NeuAcα-nLc^4であろうと考えられた.乳癌に対しても同様の局所注入をおこなって,乳癌組織との反応性を指標としてBMMK-33Gと呼ばれるハイブリドーマを得た.この抗体も乳癌細胞の膜と反応したが,正常乳腺のacinusおよびductとも弱く反応する性質があった.さらに,同様の局所免疫療法を甲状腺未分化癌患者に対して施行しハイブリドーマを作成したが,その中の1クローン(3C5)は,同一人の腫瘍細胞から樹立された細胞株(KOA-2)や甲状腺癌細胞(anaplastic & pappillary carcnoma)および乳癌細胞と反応するが,多くの正常組織とは無反応あるいは微弱な反応をしめすのみであることが分かった.これらのハイブリドーマは,最低6カ月以上にわたって高濃度のヒト型イムノグロブリンを産生しつづけることも証明された.以上の結果は,強力な局所免疫療法がリンパ球のin vivo activationにきわめて有効であり,癌に対するヒト型モノクローナル抗体の大量安定供給に道を開くものと考えられる。しかし,本研究期間内ではその臨床応用にまでは至っておらず,今後の研究課題として残されている.OK-432/fibrinogenの局注を施行した大腸がん患者4名について、切除材料の所属リンパ節からリンパ球を回収し、ヒトmyeloma細胞株HO-323と細胞融合を行なった。その結果、総計353個のハイブリドーマが得られたが、EIA法でヒト型イムノグロブリンを産生するクローンを選別したところ、うち116個が100ng/ml以上のヒト型IgM産生していることがわかった。ヒト型イムノグロブリン産生ハイブリドーマの得られる効率は、免疫療法非施行例を用いた場合に較べ明らかに高いことがわかった。マイクロウエーブ固定した大腸がん組織を用いて、免疫組織学的なスクリーニングを行なうと、これらのクローンのうち5つは正常大腸粘膜とはまったく反応せず、がんと特異性高く反応することがしめされた。さらに、そのうちでもっともがん反応性の高かった1クローン(YJ-37)を選び、その分泌上清を濃縮して抗体をビオチンで直接標識し、ヒト大腸がん細胞株LS-174Tを用いた膜蛍光抗体法を行ない、このヒト型抗体ががん細胞の膜に存在する抗原と反応することを確かめた。

また、OK-432/Fibrinogenの局注を施行した乳癌患者からも、同様手法でハイブリドーマを作成し、乳がん組織との反応性を指標としてBMMK-33Gと呼ばれるクローンを樹立した。このクローンもIgMを分泌し、がん細胞の膜に反応性を示したが、正常組織とも弱いながら反応性があり、乳腺のacinusおよびductを染めることが免疫組織学的に確かめられた。OK-432 5KE/fibrinogen80mgの混合液で局所免疫療法を施行した大腸癌患者の所属リンパ節を用いて,総計353個のハイブリドーマを作成し,その中から100ng/ml以上のヒト型イムノグロブリン(IgM)を産生する116個のハイブリドーマを選別した.さらに大腸癌細胞株LS174Tとの反応性が強い9つのクローンを選び,免疫組織学的に大腸癌と反応するが正常大腸粘膜とはほとんど反応をしめさない5つのクローンを選択した.その中で,がん組織と最も強く反応するヒト型イムノグロブリンを産生する1クローン(YJ-37)を詳細に検討した.YJ-37の認識する抗原の性状を知るため,免疫染色する組織切片の酵素処理による反応性の変化を調べたところ,trypsin消化の影響をうけず,sialidaseや過ヨウ素酸処理により著しい反応性低下をきたすことからそのepitopeはシアル酸を含む糖鎖であることが示唆された.さらに各種の抽出脂質および精製脂質との反応性をHPTLCおよびELISA法で検討したところ,その抗原はsialylatedlacto-seriesで,IV^3NeuAcα-Lc^4およびIV^3NeuAcα-nLc^4であろうと考えられた.また,同様の局所免疫療法を甲状腺未分化癌患者に対して施行し,同様の手法でハイブリドーマを作成したが,その中の1クローン(3C5)は,同一人の腫瘍細胞から樹立された細胞株(KOA-2)や甲状腺癌細胞(anaplastic & pappillary carcnoma)および乳癌細胞と反応するが,多くの正常組織とは無反応あるいは微弱な反応をしめすのみであることが分かった.
完全合成培地を用いたウシ初期胚の体外培養

これまでの研究(Takahashi & First;1992)を基に、タンパク質(BSA)ならびにグルコースを除去し、代わりにポリビニールアルコール(PVA)と20種類のアミノ酸(BME必須アミノ酸およびMEM非必須アミノ酸)を添加した化学組成の明らかな完全合成培地(修正合成卵管液;mSOF)を基礎培地として用い、ウシ初期胚(体外受精卵)の体外培養について検討した。その結果、以下のことが明らかになった。1)培養気相:培養気相中の酸素ガス濃度が胚の発育を左右する大きな要因であり、酸素ガスが胚の発育を左右する大きな要因であり、5%濃度が最適であること、高濃度の酸素は桑実胚までの発育のみならず、桑実胚胚盤胞の発育にも悪影響を及ぼすことが明らかになった。2)アミノ酸:基礎培地の20種のアミノ酸は、胚の発育を劇的に改善すること、また、タウリンを添加すると胚盤胞への発育率が高まり、グリシンを増量添加することにより、胚盤胞の品質もさらに改善(細胞数の増加)されることも判った。3)細胞増殖因子:インスリンはアミノ酸の共存する培地で胚の発育を促進し、その有効濃度は0.510μg/mlであること、またインスリン様細胞増殖因子(IGF-1、20ng/ml)も、インスリンと同様の胚発育促進効果のあることが判った。4)その他:培地を作成する水の量も胚の発育に影響を与え、イオン交換水や二次蒸留水よりもMilli-Q水が培地作成に適していることも判った。以上のように、5%酸素ガスの気相を採用し、良質の水を用いて、適当なアミノ酸ならびに細胞増殖因子を添加した完全合成培地を用いることになり、従来の共培養法に優る体外培養成果が得られることが明らかになり、ウシ初期胚の体外培養法の完成に一歩近付いた。これまでの研究(Takahashi&First,1992)をもとに、BSAならびにブドウ糖を除去し、代わりにポリビニルアルコール(PVA)を加えた合成卵管液(完全に組成の明らかな培地)を基礎培地として、ウシ初期胚の体外培養について以下の検討を加えた。ウシ初期胚は屠体卵巣から得られた未成熟卵子を体外成熟させ、体外授精により作成した。まず、必須および非必須アミノ酸(20種)と細胞成長因子のひとつであるインスリンの添加効果を検討した結果、アミノ酸の添加により胚の発育は改善されることが確認された。また、インスリン(5μg/ml)は、単独では胚の発育に影響を及ぼさないが、アミノ酸の添加された培地ではアミノ酸の胚発育促進効果を増強し、ウシ体外受精卵の桑実胚への発育率をさらに高めることが判った。また、110μg/mlのインスリンと1mMのブドウ糖の添加は、ウシ桑実胚の胚盤胞への発育を促進することも判明した。さらに、10μg/mlインスリンとアミノ酸を含む合成卵管液を基礎培地として使用し、培養気相、とくに酸素ガス濃度(2.520%)の影響を調ベた結果、5%酸素ガスの気相で最も高い発育率が得られ、それよりも低い濃度(2.5%)でも、高い濃度(1520%)でも胚の発育率は低下することが判った。また、5%酸素ガス濃度の気相でも通常の培地に添加されている5.56mMブドウ糖は、胚の発育を阻害することも確認された。これまでの研究を基に、タンパク質(アルブミン)ならびにグルコースを除去し、代わりにポリビニールアルコール(PVA)と20種類のアミノ酸(BME必須アミノ酸およびMEM非必須アミノ酸

)を添加した化学組成の明らかな完全合成培地(修正合成卵管液)を基礎培地としで用い、ウシ初期胚の体外培養について検討した。初期胚は、屠体卵巣由来の卵子を体外成熟させ、体外授精により作出し、試験に用いた。その結果、培養気相中の酸素ガス濃度が胚の発育を左右する大きな要因のひとつであり、その濃度は5%が最適であること、高濃度(20%)酸素は桑実胚までの発育のみならず、桑実胚胚盤胞の発育にも悪影響を及ぼすことが明らかになった。さらに、5%酸素ガスの気相を採用すれば、完全合成培地だけを用いた体外培養法でも、卵管上皮細胞との共培養法に優る培養成果が得られ、共培養の必要のないことも判った。培地組成、とくにアミノ酸については、タウリン(10mM)を加え、さらにグリシン10mMを増量添加することにより、体外受精卵の胚盤胞への発育率が高まり、胚盤胞の品質改善(細胞数の増加)されることも判った。さらに、細胞増殖因子であるインスリンは、アミノ酸との共存で胚の発育を促進し、その有効濃度は0.510μg/mlであること、またインスリン様細胞増殖因子(IGF-I、20ng/ml)もインスリンと同様に胚の発育促進効果のあることが判った。さらに、培地作成の基礎となる水質も胚の発育に影響を与え、イオン交換水や二次蒸留水よりもMilli-Q水の適していることが判った。
「日本の大学はなぜ変わらないのか」への学習組織論的アプローチ

2018年度は、主に文献研究と資料調査を通じて、我が国の大学改革の経緯と組織論をそれぞれレビューした。その成果は、「第3回教育改革の四半世紀と学生の変化」(ベネッセ教育総合研究所編『大学生の学習・生活実態調査報告書』7ー16頁、2018年)及び「日本の大学は、なぜ変わらないのか?変われないのか?ー4半世紀にわたる個人的経験を通してー」(佐藤郁哉編著『50年目の「大学解体」20年後の「大学再生」ー高等教育政策をめぐる知の貧困を越えてー』105ー157頁、京都大学学術出版会、2018年)にまとめた。その概要としては、日本の大学が戦後半世紀にわたり、さまざまな課題を抱えたまま、なかなか改善、改革ができない(と思われている)理由は、マクロ的には文部科学省の高等教育政策の成果が十分に検証がなされないまま、同じ課題がほぼ2年ごとに新たな答申や審議まとめなどで繰り返し指摘され、その都度新たな改善策が提起されていること。ミクロ的には、大学の組織構造やマネジメントが「サイロ構造」つまり学部・研究科縦割りであるため、課題の共有や改革のベクトルが相殺されてしまうことを明らかにした。ただし、大学が「サイロ構造」であることは、日本だけでなく欧米でも指摘されているところであり、なぜ我が国では、社会から「大学は変わらない」「大学改革が進んでいない」と指摘され続けているのかについては、例えば、学長のリーダーシップのあり方を含めて大学のガバナンスやマネジメントの実態をさらに探求する必要がある。本研究にかかる研究成果の一部を、2つの論文にまとめ、公表している。大学組織の特性を整理するだけでなく、1学長のリーダーシップなどのマネジメントやガバナンスの研究を一層推進する。2大学がサイロ構造であること、またその弊害については欧米でも同様に指摘されているところであり、大学改革の研究に国際比較の視点を取り入れ、日本の大学と大学改革の特性を明らかにする。これらの2点を中心にして研究を推進する。そのため、2019年度は文献研究に加えて海外調査も実施する予定2018年度は、主に文献研究と資料調査を通じて、我が国の大学改革の経緯と組織論をそれぞれレビューした。そのため、2019年度は文献研究に加えて海外調査も実施する予定予定していた外国出張が、訪問相手先との調整が不調に終わり実施できなかったこと。また、別財源で外国出張が可能であったため、使用予定額に残が出た。今年度は、できるだけ、計画的に出張や書籍購入を行う予定である。
大自由度系を含む力学系の大域的構造と分岐の研究

力学系の大域的構造を位相幾何的方法と計算機援用解析を融合して解析するConley-Morseグラフの方法を改良し,隣接パラメータ領域に対するConley-Morseグラフ間の接続関係を求めるアルゴリズムの開発や,相空間の非一様グリッド分割で計算コストを軽減する手法を得た.Conley-Morseグラフの変化から力学系の構造の変化を捉える位相計算的分岐理論の観点から,crisis分岐などの新しい数学的定式化を得た.Conley-Morseグラフの方法を用いて結合写像格子や結合振動子系の大域的構造の解析を行い,不安定な不変トーラスなどの不変集合とそれらの間の結合関係が捉えられることを確認した.力学系の大域的構造を位相幾何的方法と計算機援用解析を融合して解析するConley-Morseグラフの方法を改良し,隣接パラメータ領域に対するConley-Morseグラフ間の接続関係を求めるアルゴリズムの開発や,相空間の非一様グリッド分割で計算コストを軽減する手法を得た.Conley-Morseグラフの変化から力学系の構造の変化を捉える位相計算的分岐理論の観点から,crisis分岐などの新しい数学的定式化を得た.Conley-Morseグラフの方法を用いて結合写像格子や結合振動子系の大域的構造の解析を行い,不安定な不変トーラスなどの不変集合とそれらの間の結合関係が捉えられることを確認した.力学系の様々な大域的構造に関して次のような成果が得られた.(1)位相計算的方法による力学系の大域的構造解析法の応用:前年度に開発した力学系の位相計算的大域構造解析の方法をいくつかの具体的な力学系に対して適用し,いくつかの改良の可能性を見出した.特にMorse分解の計算のためのadaptiveなグリッド分割の方法は,より大規模で高次元の力学系を解析するために有効であると考えられるまた.回帰的不変集合内の孤立不変部分集合を見出す計算アルゴリズムは,回帰的ダイナミクスのより詳しい情報を引き出すために不可欠である.これらについては,今後,実現に向けて更に検討を進める.(2)力学系の位相計算的分岐の研究:上述の位相計算的方法により力学系の大域的構造の変化を捉えるための数学的理論を構築する第一歩として,サドルノード分岐と呼ばれる最も単純な力学系の分岐を対象として解析を行った.より具体的には通常の分岐理論的観点からと位相計算的観点から分岐の情報の対応を明確にし,位相計算的解析を通常の分岐解析と関係づけることを試みている.数学的な結果はほぼ完成し,現在,具体的な例での計算機による検証を行っており,近く論文を完成する予定である.(3)3次元微分同相写像のヘテロクリニックサイクルの分岐:heterodimensional cycleと呼ばれるある種のヘテロクリニックサイクルは,3次元以上の微分同相写像のダイナミクスを知るために基本的な役割を果たす不変集合の1つであり,多くの研究者によって活発に研究されている.このheterodimensional cycleが構造安定なダイナミクスの典型的なモデルであるhorseshoeの内部の局所的分岐からある種の余次元2の特異性を経て発生することを示し,その変形の過程において発生するダイナミクスと分岐を調べた.平成22年度は,それまでの研究結果を踏まえて,新たな課題として,(A3)回帰的不変集合の構造の新しい解析法の開発,(B3)大域的分岐構造の検証法の整備,についての研究に重点をおいて研究を進めた.課題(A3)は(A2)回帰的不変集合の内部構造の解析,を発展させるもので,(A1)力学系のMorse分解を用いた位相計算的方法の整備,で開発した相空間の大域的構造の位相計算を回帰的不変集合の一部に対して適用することで,ある具体的な結合力学系の回帰的不変集合におけるヘテロクリニックサイクルの存在を得ることができた.この方法は今後更に検討して,より広い範囲の力学系に適用できる形に整備して行く予定である.課題(B3)では,多くの実例に対する大域的構造や分岐の位相計算を行うことで,様々な大域的分岐現象に対しての位相計算的な検証を試みるとともに,その検証の理論的な方法の整備を進める.特に,ここでは2パラメータ以上の高次元パラメータ空間にみられる余次元の高い分岐現象の位相計算的取り扱いに重点をおいて研究を進める.平成23年度はその前年度までの研究結果を踏まえて,新たな課題として,(A3)回帰的不変集合の構造の新しい解析法の開発,(B3)大域的分岐構造の検証法の整備,についての研究に重点をおいて研究を進めた.課題(A3)は(A2)回帰的不変集合の内部構造の解析,を発展させるもので, (A1)力学系のMorse分解を用いた位相計算的方法の整備,で開発した相空間の大域的構造の位相計算を回帰的不変集合の一部に対して適用することで,具体的な結合力学系であるロジスティック写像の大域結合系に適用して,その回帰的不変集合に含まれるヘテロクリニックサイクルの存在を示すことができた.この方法は今後更に検討して,より広い範囲の力学系に適用できる形に整備して行く予定である.課題(B3)では,様々な力学系の具体例に対する大域的構造や分岐をConley-Morseグラフを計算機援用で求める位相計算的解析を行うことで,局所的,ないし大域的分岐現象に対しての位相計算的な検証を試みるとともに,その検証の理論的な方法の整備を進めた.特に,最も単純な局所分岐であるサドルノード分岐について,位相計算的視点からの分岐の特徴付けが得られた.また,より大域的な分岐であるinterior crisisとboundarycrisisに注目し,interior crisisが見られる典型例である池田写像を位相計算的に解析して,これらの大域的分岐をConley-Morseグラフによって捉えるための数学的枠組みを整理した.

本研究計画の主な目的は,力学系の大域的ダイナミクスの理解に重要な力学系の大域的構造やその分岐についての知見を深めることと,それを応用して,具体的な非線型現象の数理モデルとして現れる力学系,特に大自由度力学系の振舞いに対するより良い理解を得ようとすることであった.平成24年度は,これまで取り組んできた各課題について,不十分な点を補いつつ,得られた成果の取りまとめを行った.特に重要な成果として,まず,ダイナミクスの大域的構造を位相幾何的方法と計算機援用解析を融合して調べるConley-Morseグラフの方法と呼ぶものについて新たな改良を行ったことが挙げられる.ここでは,隣接するパラメータ領域について得られたConley-Morseグラフの間の関係を示すclutching graphを計算機を用いて求めるアルゴリズムを開発したことと,相空間を非一様にグリッド分割することで計算コストを軽減する工夫が新し得られた.また,Conely-Morseグラフの変化を通してダイナミクスの構造の変化を捉える理論的枠組みとしての位相計算的分岐理論の研究を行い,局所的分岐であるsaddle-node分岐と,大域的分岐であるcrisis分岐について,それらを位相計算的視点から捉える新しい数学的定式化を得た.さらにConley-Morseグラフの方法の応用として,大自由度系の例として取りあげられる結合写像系CMLや結合振動子系に対する大域的ダイナミクスの解析を行い,Conley-Morseグラフの方法で不安定な不変トーラスなどの不変集合とそれらの間の結合関係が捉えられることを確認し,その有用性を検証した.前年度までの研究結果を踏まえて,平成23年度の新たな課題として,(A4)ヘテロクリニック・ネットワーク構造の解析と検証,および(B4)位相的分岐理論の基礎的研究の発展,についての研究にも着手し,順調に研究を進めた.24年度が最終年度であるため、記入しない。平成24年度は,最終年度として,これまで取り組んできた各課題の成果のとりまとめ,論文にまとめる作業に重点を置いて実施すると共に,その成果を発表して関連する研究者と研究打ち合わせを行う.24年度が最終年度であるため、記入しない。
筋細胞系譜の決定と分化の分子機構

筋細胞系譜の決定と分化に関する研究を総合的に行い、以下の結果をえた。1.筋細胞系譜の決定を制御しているマイヨプラスミンの分子的実態を明らかにするためにサブトラクション法による、マイヨプラスミンで特異的に発現する遺伝子を分離した。ツメガエルの胞胚のアニマルキャップにアクチビンを作用させることにより筋肉が分化するシステムを用いて筋細胞誘導にともなって発現する遺伝子カスケードを解析し、さらにmyf-5の発現を制御する因子の解析を行った。4.Myogeninが1次筋管細胞の形成のみならず、2次筋管細胞の形成も制御していることを明らかにした。Myogenin-/-の筋芽細胞を樹立した。bFGF, LPAなど異なる性質をもつ増殖因子が異なる性質をもつ筋芽細胞をもたらすこと、その作用点はMyoDの発現抑制、MyoDの機能抑制、Myogeninの発現誘導プロセスの3点であること、LPA、血清からの増殖シグナルは細胞密度の上昇、すなわち、接触阻害による分化誘導シグナルを打ち消すことが出来ないことが明らかになった。5.筋収縮構造形成に重要なアクチンの重合を制御する因子、コフィリン、プロフィリン、ADPの発生における発現と細胞分裂時の分裂溝にコフィリンが濃縮すること、コフィリンのリン酸化が機能に重要えあることを明らかにした。また、骨格筋特異的なC蛋白を同定した。6.筋管細胞で発現する低分子量G蛋白質を同定した。筋細胞の最終分化過程では一部の細胞がアポトーシスで死滅すること、この過程にフォスフォリパーゼCgが関与することを示した。筋細胞系譜の決定と分化の分子機構の解析を目標として研究を行い、次に列挙する研究成果が得られた。なお、本実験はホヤ胚、アフリカツメガエル胚、ニワトリ胚、マウス、培養筋芽細胞など、それぞれの研究テーマに最もふさわしい実験系を利用して行われたが、共通に機能する遺伝子が多く、全体を通して一つのコンセプトを提出する方向で研究が展開された。1)アクチビン、フォリスタチンの卵における存在部位、結合蛋白を決定した。アクチビンとレチノイン酸により腎管が誘導されることを見い出し、神経誘導時に発現する遺伝子を分離した。2)ホヤのMyoDホモログを分離し、機能を解析した。また、アクチン遺伝子ファミリーを分離し、その発現制御領域を決定した。3)LTPが筋芽細胞の増殖させ、MyoDによるmyogeninの発現誘導を抑制することにより分化を抑制することを発見した。4)Sonic hedgehogの発現部位を解析した。また、BMP受容体cDNAを2種分離した。FGFをニワトリ胚の側板に作用させると新しい肢ができることを発見した。5)アクチン集合蛋白質ADF,コフィリン、プロフィリンの発生過程における発現を解析した。コフィリンを過剰に発現させるとアクチン繊維系に重大な影響があらわれること、イノシトールリン脂質がコフィリンの機能制御に関与していることが示唆された。6)マウス筋芽細胞C2C12の分化過程でc-Junが関与してアポトーシスがおこることを見い出した。筋肉で発現する低分子量GTP結合蛋白、細胞融合に関与するドメインをもつ蛋白をコードする遺伝子群を分離した。筋細胞系譜の決定と分化に関する研究を行い、次の結果を得た。1.ツメガエルの胞胚のアニマルキャップにアクチビンを作用させることにより筋肉が分化するシステムを用いて筋細胞誘導にともなって発現する遺伝子カスケードを解析し、さらにmyf-5の発現を制御する因子の解析を行った。3.Myogeninが1次筋管細胞の形成のみならず、2次筋管細胞の形成も制御していることを明らかにした。

bFGF,LPAなど異なる性質をもつ増殖因子が異なる性質をもつ筋芽細胞をもたらすこと、その作用点はMyoDの発現抑制、MyoDの機能抑制、Myogeninの発現誘導プロセスの3点であること、LPA、血清からの増殖シグナルは細胞密度の上昇、すなわち、接触阻害による分化誘導シグナルを打ち消すことが出来ないことが明らかになった。4.筋収縮構造形成に重要なアクチンの重合を制御する因子、コフィリン、プロフィリン、ADPの発生における発現と細胞分裂時の分裂溝にコフィリンが濃縮すること、コフィリンのリン酸化が機能に重要えあることを明らかにした。また、骨格筋特異的なC蛋白を同定した。5.筋管細胞で発現する低分子量G蛋白質を同定した。筋細胞の最終分化過程では一部の細胞がアポトーシスで死滅すること、この過程にフォスフォリパーゼCgが関与することを示した。6.筋細胞系譜の決定を制御しているマイヨプラスミンの分子的実態を明らかにするためにサブトランクション法により、マイヨプラスミンで特異的に発現する遺伝子を分離した。
南アジアを中心とする女神崇拝の社会人類学的研究

1.女性学の発展とともに社会における女性の地位や父権的な社会構造の解明は進展したが、経済、政治の領域に比べると、宗教の領域、とくに非西欧社会の宗教とそこに現れる女性の表象や女神がいかに現実社会の女性観、女性の地位と結びついているのかという論議は始まったばかりである。本研究は、以上の問題意識のもとで、(1)スリランカとインドでの調査資料をもとにヒンドゥー社会の女神崇拝を分析すると同時に、(2)関連文献を吟味して南アジアの女神信仰について理解を深め、(3)より一般的な視点から宗教とジェンダーやセクシュアリティの関係を分析することの三つを目的とした。当初の目的が十分に達成されたのは(1)である。2.(2)については、調査地の女神崇拝をいくつか比較した。さの際、女神が自立しているのか男神に依存しているのかという、自立の度合いを示す軸を縦軸にとり、儀礼において日常の社会規範に対するような反構造的性格の強さを横軸にとった。そして、さまざまな女神崇拝を位置づけることで、それらと信者集団の性格との関連を論じた。3.(2)については、文献資料を収集し、文献目録を作ると同時に、(1)での分析の適用を一部の女神崇拝に試みた。また現代欧米の女神崇拝運動について分析をした。3.(3)については、アルチュセールのイデオロギー論に依拠しつつ女神崇拝のメカニズムを抽出するように試みた。4.今後は、(2)の文献資料をさらに幅広く収集し、より厳密な分析を行うと同時に、ヒンドゥー教だけでなく、仏教やインドのキリスト教における女神崇拝についても考察を深めたい。また(3)についても異なる観点からの理論化を探りたい。初年度の研究計画では、1.申請者がすでに収集したスリランカと南インド社会における女神崇拝の一次資料の整理、分析、2.文献報告を吟味して南アジアにおける女神崇拝の性格および構造を抽出、3.文献目録の作成、4.女神崇拝の通文化的な比較を可能とするデータベースの作成、の4つが主要な実施項目であった。1と2について。スリランカとインドの女神崇拝を儀礼に限って比較する場合、いかなる視点が有効かを考察し、口頭で発表した。次年度には論文としてまとめる。まず、儀礼において女神と男神との関係がいかなるものか(前者が後者に依存しているか、自立しているのか)、つぎに儀礼の中に日常生活を律する秩序に対立するような要素を認めることが可能か、そうした要素の占める割合はどの程度のものか、それとも秩序を強化するような局面が強調されているのか、といった観点から、自立・依存の軸と反秩序・秩序の軸を設定して資料の分析を試みた。反秩序的な要素が高く、女神の自立性が強い場合が、従来報告されている民衆ヒンドゥー世界の女神祭祀と言える。これにたいし男神への依存性が強調され、反秩序的な要素が認められないものに伝統社会のエリートたるバラモン世界の家庭祭祀をあげることができる。女神の性格が崇拝者の社会的な地位や女性の地位と密接に関係しているということがここから推測できる。3と4については継続中である。また女神研究の意味を明示し、通文化的な視点を確立するために、現代北米社会における女神崇拝とその思想的な背景について小論を発表した。さらに、女神崇拝を南アジア社会に特徴的な母子関係との関係で説明しようとする心理学・精神分析学的な立場についても批判的な考察を準備中である。1.女性学の発展とともに社会における女性の地位や父権的な社会構造の解明は進展したが、経済、政治の領域に比べると、宗教の領域、とくに非西欧社会の宗教とそこに現れる女性の表象や女神がいかに現実社会の女性観、女性の地位と結びついているのかという議論は始まったばかりである。