hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
自死遺族が自死遺族支援グループに参加することによる効果

自死遺族のつどいに参加することによる効果を明らかにするために、自死遺族9名に半構造的インタビューを実施した。その結果、【自殺のことを安心して語ることができる】、【話を聞いてくれる人がいる】、【安心して感情表出ができる】、【気持ちの共有ができる】、【孤独感が軽減される】、【他者の体験を知ることができる】、【相談や頼ることができる】、【気持ちが少し楽になる】、【振り返りの場となり自身の変化を感じ取ることができる】、【亡くなった人を振り返る機会となる】、【外出するきっかけになり、気分転換になる】、【楽しみの一つになる】の12カテゴリーが抽出された。この結果を踏まえ、自死遺族支援を現在も実施している。本研究は自死遺族支援を実践しながら、自死遺族が自死遺族のつどいに参加することによる効果を検証し、自死遺族へのより効果的なケアを見出していくことを目的としている。平成26年度は研究者が上越地域において立ち上げた自死遺族のつどい「はじめの会」の活動を継続し、延べ39名の参加があった。9月には「自死遺族のつどいを運営するために必要な要素」というテーマで日本自殺予防学会にて学会発表し、【行政との連携】、【予算の確保】、【開催する場所の確保】、【継続的な広報活動】、【スタッフの確保】、【スタッフの育成】、【スタッフ間の信頼関係の維持】、【振り返りの実施】、【スタッフのモチベーションの維持】、【できる範囲での支援】、【研修会の開催】、【他機関とのネットワーク構築】、【アドバイザーの存在】、【運営するつどいの信頼性維持】、【安心して語ることのできる雰囲気づくり】、【参加者のニーズの存在】の16の要素が自死遺族のつどいを運営するために必要な要素であることを発表した。ここで抽出された結果を踏まえ平成26年度は、行政との連携に関して、市との連携を依頼し、公的機関の支援という安心感から運営するつどいの信頼性維持に繋がった。また開催する場所の確保や研修会の開催についても、市との連携により可能となった。自死遺族のつどいは現在も継続的に運営しており、評価修正を繰り返しながら現在に至っている。行政と連携後の自死遺族支援に関して、スタッフ間の議論で出されたつどいの効果や課題を本年の自殺予防学会で発表予定である。今後は自死遺族のつどいの参加者にインタビューを実施し、自死遺族のつどいに参加することによる効果を検証していく予定である。平成26年度はインタビューに向けての対象者の選定や対象者との関係性の構築も実施し、平成27年度のインタビュー実施を実現するための土台作りを行った。本研究は自死遺族支援を実践しながら、自死遺族が自死遺族のつどいに参加することによる効果を検証し、自死遺族が自死者の死を受け止め、気持ちの整理が出来るための効果的なケアを見出していくことを目的としている。平成27年度は研究者が上越地域において立ち上げた自死遺族のつどい「はじめの会」の運営や活動を継続し、平成27年度は述べ41名の参加があった。9月には日本自殺予防学会において「自死遺族のつどいはじめの会の活動実績と今後の課題」というテーマで学会発表し、つどいの効果として、場としての意味が大きい、安心して話すことができている、感情を出しやすい、自殺予防に繋がっている、継続的に参加することで変化が見られているがあげられ、市と連携することによっての効果としては、信頼性や安心感が増した、会場の確保がしやすくなった、スタッフ間での情報交換がしやすくなった、自死遺族がいた際の連携がしやすくなった、準備などの運営が楽になったがあげられた。今後の課題としては、運営を継続するためのスタッフの確保、スタッフの負担軽減、グループ分けの難しさ、初回参加につなげるまでの難しさ、参加しやすい日程の調整があげられた。インタビュー調査については、対象者の選定や協力に難航したが、対象者との関係性を築きながら現在のところ4件のインタビューが実施できている。平成28年度は引き続きインタビュー調査を実施し、自死遺族が自死遺族のつどいに参加することによる効果をまとめていく予定である。自死遺族のつどいの運営は計画通り順調に進んでおり、市役所や他の自死遺族のつどいなど他機関とのネットワークも構築しつつある。平成27年度の自死遺族のつどいはじめの会への参加者数は一定数あり継続的な参加も見られ、自死遺族のつどいを通して回復や変化が出てきている。これらは地域貢献という形でも認められている。自死遺族を対象としたインタビュー調査については、対象者の選定や協力を得ることの難しさがあるが、対象者との関係性を築きながら現在のところ4件のインタビューが実施できた。本研究は、自死遺族が自死遺族のつどいへの参加を通して、どのような効果があるのかを明らかとし、効果的な自死遺族のつどいの勧め方やケア内容を検討することを目的としている。調査方法として、自死遺族のつどいを運営し、参加者へのケアを実践しながら、同意を得た自死遺族に対しインタビューを行ない、自死遺族のつどいに参加することによる効果を検討している。平成28年度は研究者が運営する自死遺族のつどいに延べ41名の参加があった。本研究ではインタビュー対象者の選定や協力を得ることに難しさがあるが、インタビューは現在までに6件が終了した。現在までのまとめとして、自死遺族は同じ自死遺族の体験を強く求めていることが明らかとなった。

それは同じ体験をした者同士の気持ちの共有だけでなく、どのように苦しみを乗り越えて日常生活に復帰しているのかと言う回復や視点も含まれた。また話すことができない中で話せる安心感や、外に出ることができるきっかけ、一人ではないという孤独感の軽減、不安なときに頼れる安心感などの効果が見られた。一方で、参加者の中には年数が経過してから参加される方もおり、その場合は他者の経験を知りたいと言う目的ではなく、自身の振り返りや亡くなった方との思い出を振り返るといった目的もあり、自死遺族のつどいは亡くなった方の死を乗り越えて自身の成長を進めるといった効果も見られた。現在、新たにインタビュー協力者が見つかったため、期間を一年延長し、さらにデータ収集を重ね、自死遺族のつどいに参加することによる効果をまとめていく予定である。本研究は自死という性質上、対象者の選定に難しさがあるが、現在までに6件のインタビューが終了した。当初は3年の計画であったが、今回新たにインタビュー協力していただける対象者が見つかったため研究期間を一年延長し、インタビューを実施してデータを増やしていく予定である。自死遺族のつどいは引き続き運営を継続し、行政や他機関とのネットワークを活かしながら自死遺族のケアを実践し、自殺対策に貢献していく。本研究は、自死遺族が自死遺族のつどいへの参加を通して、どのような効果があるのかを明らかにすることを目的とし、自死遺族のつどいへの参加者にインタビューを実施した。昨年度までのインタビューデータに加えて、今年度もデータ収集を継続して分析を重ねた。自死遺族のつどいに参加することによる効果として、自死について語ることのできる安心感があげられた。身内の中でもあまり語ることができない中、自死遺族のつどいに参加することにより、これまで隠してきた自殺のことを安心して語ることができていた。これは一人ではないという孤独感の軽減、不安な時に頼ることのできる安心感にもつながっていた。また、自死遺族は同じ自死遺族の体験を強く求めており、自死後の日常生活に関わる様々な問題や他者との付き合い、そして自死した者との向き合い方など、他の自死遺族がどのように乗り越えているのかを知ることのできる場となっていた。さらに継続的に参加することによって、自身を振り返る機会となり、時間の経過による自身の変化を感じ取ることができていた。そこから新しい参加者へ自身の体験をアドバイスするなど、自死遺族としての成長や回復の促進といった効果も見られた。その他にも、今を生きる自分を見つめることができる、外に出るきっかけになる、亡くなった人を懐かしむことができるなどもあげられた。自死遺族のつどいは、自死遺族が苦しみを乗り越えて回復を早める効果があるが、一方で自死遺族のつどいとの相性もあると考えられた。現在、自死遺族のつどいは全国各地にできているが、つどいの運営主体や開催場所、参加人数など、雰囲気も含めて様々であり、自死遺族は自身が居心地の良い場所を見つけることが必要である。そのため他の自死遺族のつどいの情報提供をすることも必要であり、自死遺族のつどいのネットワークを作ることが今後の課題としてあげられた。自死遺族のつどいに参加することによる効果を明らかにするために、自死遺族9名に半構造的インタビューを実施した。
医療用ターゲティングマイクロバブルの力学的挙動の解明

ターゲティングマイクロバブルの動力学的挙動の解明とその医療への応用を目的として,理論,数値解析および実験により,超音波照射下でのバブルの動力学的非線形挙動の解明を試み,さらにバブル群の動力学的挙動を実験的に調べた.その結果,非線形挙動や非球形振動への高分子膜の影響,分数調波共振への壁面の影響,壁との結合がバブルの振動に与える影響,壁面近傍のバブルの動力学的挙動とその周囲でのマイクロジェット発生現象,複数バブルの非線形相互作用による振動モードの局在化,バブル群の体積振動時の並進運動の特徴などを明らかにした.ターゲティングマイクロバブルの力学的挙動の解明とその医療への応用を目的として,高分子膜を有するマイクロバブルの非線形挙動について,理論,数値解析および実験による解明を進め,主に以下の研究成果を得た.(1)バブル径による表面張力の変化を分子動力学計算から算出することに成功し,その結果をマクロ的なバブル非線形振動計算に取り込むことにより,さらに圧縮型振動やサブハーモニック共振等の実験で報告された非線形挙動が現れることを確認できた.(2)表面モード励振や壁近傍での振動などでの非球形振動の解析を可能とする差分法的なC-CUP法および境界要素法による数値解析プログラムを開発し,球形振動時の圧縮型振動やサブハーモニック共振等の非線形挙動を計算できたほか,表面モード励振や壁近傍での振動における非球形振動の様子のシミュレーションにも成功した.(3)2個のバブルの非線形相互作用により,バブル間距離と超音波の振動数と振幅の条件によって,連成の振動モードの分岐が発生し,一方のバブルが大振幅で共振し,もう一方が小振幅で共振する,いわゆるモードの局在化が起こりうることを,非線形ノーマルモード法や多重尺度法という非線形解析手法を用いて理論的に明らかにし,さらに数値積分や境界要素法による数値解析によってもこれを計算することができた.(4)実験では,高速度カメラのデモ実験で,バブルの高周波振動の画像計測が可能であることを確認した.特に(1)(3)の成果については,(4)を発展させた実験計測による結果や,共同研究関係にあるオランダErasmus大学のNico de Jong教授の研究グループにより実験報告との比較をしながら,さらに詳細な検証を進めている.ターゲティングマイクロバブルの力学的挙動の解明とその医療への応用を目的として,初年度に続き,2年度目も,主に理論と数値解析によるバブルの非線形挙動の解明を進めて,以下の研究成果を得た.1.非球形振動(1)高分子膜の影響:軸対称気液二相流モデルに基づく数値流体力学シミュレーション(CIP法およびC-CUP法)により,高分子膜があるとバブルの非球形振動が起こりやすいことを確認した.(2)壁面近傍での挙動:同じ手法で壁面近傍バブルの挙動を解析し,マイクロジェットの発生の仕方,周囲の圧力や流れの急激な変化を明らかにした.(3)壁との結合の影響:境界要素法によるシミュレーションで形状変化を考慮できるように改良し,壁面付近での音響キャビテーションや壁面に付着したバブルの振動解析に成功した.後者では,壁との結合に起因したバブルの固有振動数の変化が再現された.2.分数調波共振への壁面と膜の影響:調和バランス法による非線形解析と数値計算を行って,壁からの反射波により分数調波が発生する超音波の周波数帯域と加振振幅の閾値が下がること,また膜の座屈による表面張力の急激な変化により加振振幅の閾値が下がることを明らかにした.3.複数バブルの相互作用(1)並進運動:超音波照射下で相互作用する2個のバブルの並進運動のパターンと,バブルの大きさ,バブル間距離,音圧,加振振動数などの条件との関係を数値計算および非線形解析により調べ,超音波と2個のバブルの振動の位相差によってパターンが決まることを明らかにした.(2)モードの局在化:初年度からの解析をさらに進展させ,非線形相互作用に起因する複数バブルの振動モードの分岐とそれに起因するモードの局在化をより詳細に予測し,数値シミュレーションによってその予測の妥当性を確認した.ターゲティングマイクロバブルの力学的挙動の解明とその医療への応用を目的として,初年度および2年度目に続き,最終の3年度目も,主に理論と数値解析によるバブルの動力学的非線形挙動の解明を進め,さらにバブル群の動力学的挙動について実験的な検討も行った.その研究成果の概要は以下の通りである.1.超音波照射下での壁面近傍のバブルの動力学的挙動の数値解析軸対称気液二相流モデルに基づく数値流体力学シミュレーション(CIP法およびC-CUP法)により,壁面近傍バブルの挙動を解析し,マイクロジェットの発生の仕方,周囲の圧力や流れの急激な変化をより詳細に調べた.特に,細胞壁を模擬したモデリングでの解数値析では,十分薄い膜壁の場合に,超音波照射下で偏平形に変形したバブルが膜を貫通する結果が得られた.2.超音波と干渉するバブル群の動力学的挙動に関する実験的検討バブル群の振動現象は気液界面の合体と分裂を伴う複雑な混相流であり,バブル群の体積振動における非線形局在化現象(複数のバブル間で生じうる振動エネルギーの局在化)はもとより,体積振動時の並進運動すらも十分に調べられてはいない.

ここでは,真空ポンプによって容器内の圧力を減じる工夫をすることに加え,スケールアップしたバブルでの計測を進め,微細化したバブル群の体積振動の観察実験を行い,従来の単一バブル(群ではなく単独のバブル)の理論との比較を行った.その撮影データの画像解析を行った結果より,体積振動時のバブル群の並進運動が単一バブルの理論の拡張によってほぼ説明できることを示唆した.ターゲティングマイクロバブルの動力学的挙動の解明とその医療への応用を目的として,理論,数値解析および実験により,超音波照射下でのバブルの動力学的非線形挙動の解明を試み,さらにバブル群の動力学的挙動を実験的に調べた.その結果,非線形挙動や非球形振動への高分子膜の影響,分数調波共振への壁面の影響,壁との結合がバブルの振動に与える影響,壁面近傍のバブルの動力学的挙動とその周囲でのマイクロジェット発生現象,複数バブルの非線形相互作用による振動モードの局在化,バブル群の体積振動時の並進運動の特徴などを明らかにした.実験に関しては,初年度より高速度カメラのデモ実験による検討を延長して先送りし理論検討と数値計算による現象解明を優先してきたが,2年度目も実験上必要な仕様に対して予算が見合わず,当初の実験計画内容の見直しを検討中である.実験延期の代わりに,壁近傍でのバブルの挙動や壁との結合による力学特性の変化等について数値解析による解明を前倒しして進めてはいるものの,実験延期のことを考慮して全体的には「やや遅れ」と評価した.機械力学実験面では,全体計画の見直しを図り,真空ポンプによって観察する容器内の圧力を減じる工夫をすることに加え,スケールアップしたバブルでの計測を進める.特に,超音波と干渉する気泡群の非線形局在化現象に関する実験的検討を目指す.一方,理論面では,壁近傍でのバブル変形時の流れや圧力の数値解析,壁との結合のモデリングと結合時の力学的特性の解析・数値解析を中心に,非線形挙動の把握を進める予定である.実験については高速度カメラのデモ実験による基礎検討の後,当該年度の当初の実験計画内容は次年度に先送りすることになったが,それに代わって,次年度の計画内容の理論検討の一部(表面モードの励振とモード局在化)と数値計算を先に当該年度で進めることができたため.実験計画遂行の遅れに伴い,当該年度に予定していた実験を次年度に回し,次年度予定していた理論検討および数値解析を当該年度に先に進めたため.次年度以降は,実験では,超音波探触子によるエコー計測および高速度カメラによる画像分析を行い,当該年度の予定でありながら先送りしたマイクロバブルの基本的な非線形共振特性を調べるほか,当初の予定通り,表面モード励振,モード局在化などについても調べていく.理論と数値計算では,表面モードの励振およびモード局在化の内容をより詳細に調べる.また,分子動力学計算では,リガンド分子の影響を調べる前にまず,膜分子の種類によるバブル振動特性への影響を調べることにする.その理由は,共同研究関係にあるオランダErasmus大学のNico de Jong教授の研究グループにより,その影響が実験で報告され始めているものの,そのメカニズムは不明のままであるため,分子動力学計算によりこの影響を解明できれば,バブルの最適設計に役立つと期待されるためである.そのうえで,リガンドを含めたモデリングを検討していく.これらの計算結果については,de Jong教授の研究グループの実験報告との比較検証をしながら,進めていく予定である.
転写因子IRF8の発現抑制を介したマラリアによる樹状細胞分化阻害メカニズムの解明

マラリアは寄生虫感染症の中で人類にとって最大脅威の疾患である。根絶が困難な原因の一つとして、マラリア原虫が宿主の免疫機能を抑制し、免疫から回避していることが考えられる。免疫応答を引き起こす上で、最も重要な免疫細胞のひとつに樹状細胞(DC)があるが、これまでに、マラリアのマウスモデル(赤内型マウスマラリア原虫(Plasmodium berghei ANKA)をC57BL/6マウスへ感染させる)を用いて、脾臓に存在するDCの割合が減少していることを見出してきている。本研究では、DCの割合減少がマラリアによる免疫抑制の根幹であると考え、そのメカニズムに関与する分子を明らかにすることを目的とした。マラリアのマウスモデルを詳細に解析し、感染マウスの脾臓では、DCサブセットの中でも抗マラリア免疫応答で大切な働きをしているcDC1の割合がとくに低下するとともに、cDC1の分化に必須の転写因子IRF8の発現が減少することを見出した。さらにcDC1に含まれるサブセットで、ケモカインレセプターXCR1を発現するDC(XCR1+ DC)がほぼ消失することを本研究で初めて明らかにした。XCR1+ DCは高いクロスプレゼンテーション能を有し、細胞傷害性T細胞(CTL)の誘導に優れた抗原提示細胞であることが知られている。しかし、原虫感染赤血球は通常CTLの攻撃対象とはならないので、CTL誘導以外の点でXCR1+ DCが抗マラリア免疫応答に寄与していることが示唆される。以上から、マラリア原虫が免疫回避するためにIRF8の発現を抑制してcDC1の分化を阻害するとともに、XCR1を免疫抑制の標的分子として、cDC1の中でもとくに抗マラリア免疫応答で重要な役割を果たすと考えられるXCR1+ DCを選択的に消失させている可能性を示した。寄生虫感染症のマラリアでは宿主のさまざまな免疫細胞の機能が抑制され、マラリア原虫が免疫系から回避していると考えられるが、その抑制メカニズムは十分に理解されていない。これまでに、マラリアのマウスモデルにおいて転写因子Interferon Regulatory Factor 8 (IRF8)の発現減少を伴う樹状細胞(DC)の分化阻害を見出してきたが、これはマラリアによる免疫抑制の根幹と考えている。本研究では、抑制メカニズムの解明に向け、マラリアによるIRF8の発現抑制とDCの分化阻害に関与する宿主タンパク質分子を明らかにすることを目的としている。既にマウス骨髄細胞からin vitroでDCを培養する系を確立しており、宿主タンパク質分子の探索に利用する準備を整えている。また、マラリア原虫Plasmodium. bergheiを用いて、in vitroにおけるDC分化に対する影響について解析を詳細に行い、DCの抗原提示能や遺伝子発現など、基礎的なデータを蓄積している。現在までに、IRF8の発現抑制を伴うDCの分化阻害に関与する宿主タンパク質分子の同定を目指し、IRF8-GFPトランスジェニックマウスの骨髄細胞からDCをin vitroで培養する系をこれまでに確立している。IRF8はDCの中のcDCサブセットの一つであるcDC1の分化や機能に重要な役割を果たしており、IRF8欠損マウスが好中球増多や脾腫を伴う慢性骨髄性白血病(CML)様の病態を呈することから、研究代表者はマラリアとCMLにおけるIRF8の発現動態の共通性に興味を抱いている。CMLの原因遺伝子BCR-ABLを骨髄細胞に導入して作製したマウスCMLモデルにおいて、BCR-ABL陽性細胞でcDCの分化不全の起こることがよく知られている。そこで、IRF8発現抑制の分子機構の共通性に着目しつつ、マウスマラリアモデルとマウスCMLモデルをよく対比し、in vitroのDC培養系を利用してIRF8発現抑制とDC分化阻害に関与する因子を明らかにするために研究を進めている。寄生虫感染症のマラリアでは樹状細胞(DC)をはじめとする宿主のさまざまな免疫細胞の機能が抑制され、マラリア原虫が免疫系から回避していると考えられている。しかし、その免疫抑制メカニズムは十分に理解されていない。本研究では転写因子Interferon Regulatory Factor 8 (IRF8)の発現抑制を伴うDCの分化阻害に関与する宿主タンパク質分子の同定を目指し、マウスの骨髄細胞からDCをFlt3L存在下にin vitroで培養する系をこれまでに確立してきた。IRF8はDCの中のcDCサブセットの一つであるcDC1の分化や機能にとくに重要な役割を果たしており、またミエロイド系前駆細胞の増殖や好中球の分化を抑制する転写因子でもある。Irf8欠損マウスでは好中球増多や脾腫を伴う慢性骨髄性白血病(CML)様の病態を呈することが知られており、さらに、CMLの原因遺伝子BCR-ABLを骨髄細胞に導入して作製したマウスCMLモデルにおいては、BCR-ABL陽性細胞でDCの分化不全が認められる。これまでに、BCR-ABL陰性細胞でもDCの分化不全の起こることを明らかにしつつあり、BCR-ABL陽性細胞の産生する液性因子がこの事象に関与することを示唆するデータを得ている。両疾患におけるIRF8発現抑制の分子機構の共通性に現在着目しており、IRF8発現抑制とDC分化阻害に関与する因子を明らかにするために、細胞表面分子ばかりでなく液性因子にも視野を広げ、マウスマラリアモデルとマウスCMLモデルをよく対比しながらDC培養系を利用して詳細な解析を進めている。本研究ではこれまでにマラリアのマウスモデルにおいてIRF8の発現減少を伴うDCの分化阻害を見出しており、これをマラリアによる免疫抑制の根幹をなすものと捉えている。

マラリアによる免疫抑制に関与する宿主タンパク質分子を明らかにすることを目的として、マウス骨髄細胞からDCをin vitroで培養する系を確立しており、マラリア原虫Plasmodium. berghei感染赤血球の存在下/非存在下で、DCの抗原提示能や遺伝子発現など、DC分化に対する影響について解析を進めてきた。マウスCMLモデルでもIRF8の発現減少を伴うDCの分化阻害が見出されていることは、異なる疾患ではあるが、マラリアとCMLでDCの分化阻害に共通のメカニズムが存在する可能性を示唆するものである。近年、CMLの原因遺伝子であるBCR-ABL陽性細胞の産生する液性因子によりDCへの分化阻害が起こることが明らかにされつつあり、探索分子としてこれまでに着目してきた細胞表面分子ばかりでなく、液性因子による分化抑制まで視野を広げている。以上のように、研究計画に基づきながらも研究は広がりを見せており、現在はマラリアとCMLで見られるDC分化不全の共通性にとくに着目し、これをタンパク質分子の探索の手がかりとして順調に研究を展開している。マラリアは寄生虫感染症の中で人類にとって最大脅威の疾患である。根絶が困難な原因の一つとして、マラリア原虫が宿主の免疫機能を抑制し、免疫から回避していることが考えられる。免疫応答を引き起こす上で、最も重要な免疫細胞のひとつに樹状細胞(DC)があるが、これまでに、マラリアのマウスモデル(赤内型マウスマラリア原虫(Plasmodium berghei ANKA)をC57BL/6マウスへ感染させる)を用いて、脾臓に存在するDCの割合が減少していることを見出してきている。本研究では、DCの割合減少がマラリアによる免疫抑制の根幹であると考え、そのメカニズムに関与する分子を明らかにすることを目的とした。マラリアのマウスモデルを詳細に解析し、感染マウスの脾臓では、DCサブセットの中でも抗マラリア免疫応答で大切な働きをしているcDC1の割合がとくに低下するとともに、cDC1の分化に必須の転写因子IRF8の発現が減少することを見出した。さらにcDC1に含まれるサブセットで、ケモカインレセプターXCR1を発現するDC(XCR1+ DC)がほぼ消失することを本研究で初めて明らかにした。XCR1+ DCは高いクロスプレゼンテーション能を有し、細胞傷害性T細胞(CTL)の誘導に優れた抗原提示細胞であることが知られている。しかし、原虫感染赤血球は通常CTLの攻撃対象とはならないので、CTL誘導以外の点でXCR1+ DCが抗マラリア免疫応答に寄与していることが示唆される。以上から、マラリア原虫が免疫回避するためにIRF8の発現を抑制してcDC1の分化を阻害するとともに、XCR1を免疫抑制の標的分子として、cDC1の中でもとくに抗マラリア免疫応答で重要な役割を果たすと考えられるXCR1+ DCを選択的に消失させている可能性を示した。骨髄細胞からDCを培養する系を発展させ、IRF8の発現抑制を伴うDCの分化阻害に関与する宿主タンパク質分子の同定を目的としたスクリーニング系の確立を目指す。
鉛フリーはんだ実装における凝固欠陥の抑制技術開発

今日,鉛フリーはんだ実装において,凝固欠陥,粗大初晶化合物,界面欠陥など幾つかの深刻な課題が明らかになってきている.本研究は,鉛フリーはんだ付け現象における各種欠陥形成のメカニズムを解明し,高信頼性接続技術への学術基盤形成へ繋げることを目的として遂行した.まず,Sn-Ag-Cu系合金に着目し,冷却過程における金属間化合物の晶出形態の組織的評価を行い,更に素反応プロセスを熱力学シミュレーションにより検証した.その結果,Agが3.0wt%から3.9%の間でAg_3Sn初晶形成に変化が現れ,最適組成はAg量で約3.2wt%以下にあることを提案した.また,過冷却現象へ与える合金元素微量添加の効果を調べ,Feなどの非固溶型元素の効果が大きいことを明らかにした。ICリードのミクロ接続部分における凝固現象のその場観察を始めて実現し,同時に凝固シミュレーションにより凝固のプロセスを明らかにした.凝固最終部分の予測を可能にし,偏析や欠陥の生じる原因と場所の特定を始めて可能にした.鉛フリーはんだにおける凝固のその場観察とシミュレーションの有効性が証明され,詳細な諸パラメーターの凝固欠陥発生に対する影響を明らかに出来た.一方,鉛フリーはんだはんだ付けの界面ナノ構造をTEM観察により解明した.付加価値の高いNi-Pめっき/Sn合金界面における反応プロセスを解明した.この反応抑制には,はんだにCuを添加することで(Cu,Ni)_6Sn_5化合物が形成され,これによってNi拡散が抑制され,最終的に界面の信頼性向上が可能になることを示した.以上の成果は,はんだ接続の科学的基礎を築き,各種組織制御が可能になることを示したものとして,国際的に注目を集めている.平成15,16年の米国金属学会国際シンポジウムにおいて3件の招待講演を受け,更に国際会議招待講演2件の予定を持つ.また,国内では既に数十の招待講演を受けている.今日,鉛フリーはんだ実装において,凝固欠陥,粗大初晶化合物,界面欠陥など幾つかの深刻な課題が明らかになってきている.本研究は,鉛フリーはんだ付け現象における各種欠陥形成のメカニズムを解明し,高信頼性接続技術への学術基盤形成へ繋げることを目的として遂行した.まず,Sn-Ag-Cu系合金に着目し,冷却過程における金属間化合物の晶出形態の組織的評価を行い,更に素反応プロセスを熱力学シミュレーションにより検証した.その結果,Agが3.0wt%から3.9%の間でAg_3Sn初晶形成に変化が現れ,最適組成はAg量で約3.2wt%以下にあることを提案した.また,過冷却現象へ与える合金元素微量添加の効果を調べ,Feなどの非固溶型元素の効果が大きいことを明らかにした。ICリードのミクロ接続部分における凝固現象のその場観察を始めて実現し,同時に凝固シミュレーションにより凝固のプロセスを明らかにした.凝固最終部分の予測を可能にし,偏析や欠陥の生じる原因と場所の特定を始めて可能にした.鉛フリーはんだにおける凝固のその場観察とシミュレーションの有効性が証明され,詳細な諸パラメーターの凝固欠陥発生に対する影響を明らかに出来た.一方,鉛フリーはんだはんだ付けの界面ナノ構造をTEM観察により解明した.付加価値の高いNi-Pめっき/Sn合金界面における反応プロセスを解明した.この反応抑制には,はんだにCuを添加することで(Cu,Ni)_6Sn_5化合物が形成され,これによってNi拡散が抑制され,最終的に界面の信頼性向上が可能になることを示した.以上の成果は,はんだ接続の科学的基礎を築き,各種組織制御が可能になることを示したものとして,国際的に注目を集めている.平成15,16年の米国金属学会国際シンポジウムにおいて3件の招待講演を受け,更に国際会議招待講演2件の予定を持つ.また,国内では既に数十の招待講演を受けている.今年度は,Sn-Ag-Cu及びSn-Cu系合金に着目し,その組織制御の可能性を凝固現象から調査した.まず,これら合金の凝固から固相冷却過程における金属間化合物の晶出及び析出反応や形態の組織的評価を行い,更に素反応プロセスを熱力学シミュレーションにより検証した.その結果,Sn-Ag-Cu系では主にAgが3.0wt%から3.9%の間でAg_3Sn初晶形成に変化が生じることがわかり,冷却速度の影響を明らかにした.Cu量は0.50.9wt%の間では顕著な影響はない.Ag_3Sn初晶が粗大化した凝固組織が,引張特性の特に伸びへ悪影響することを明らかにした.これによって,この鉛フリーはんだを信頼性高く用いるための最適組成が,Ag量で約3.2wt%以下にあることを提案した.Sn-Cu合金に対しては,微量の添加元素や汚染元素の効果を凝固プロセスの検討で行い,組織制御としてAgやAuの微量添加が効果的であることを示した.前者は非固溶元素で後者は微量固溶元素となり,機械特性へ与える因子が異なる.一方,汚染元素としてのPbの混入は,低融点相の形成や合金粒界に偏析することで熱疲労特性を著しく劣化させることを明らかにした.この結果から,Sn-Cu系合金に対しては,現行部品めっきから生じるPb汚染に注意すべきことを指摘し,特にこの合金が用いられるスルーホール実装の形態では,基板の厚さ方向の大きな熱膨張が大きく影響し,設計上でこの値を小さくすべきことを提示した.この他の成果として,過冷却現象へ与える合金元素微量添加の効果を調べ,Feなどの非固溶型元素の効果が大きいことを明らかにした.

これによって,凝固プロセスの制御による組織微細化が可能になると期待され,次年度以降はその場観察と凝固シミュレーションを併せて,合金元素の及ぼす凝固過程への影響を明らかにする予定である.本研究では,これまで全く検討されていない鉛フリーはんだの凝固欠陥の形成過程や要因などをはんだ付け凝固のその場観察,シミュレーションおよび組織観察を通して明らかにし,欠陥生成の抑制へ結びつけることを目的とした.本年度は,モデルICのリード端子のSn-Ag-Cuはんだによるはんだ付け凝固その場観察に成功し,微小はんだ付け部での凝固の不均一性やリード材質がはんだ組織や凝固欠陥形成へ大きく影響することを明らかにした.この現象をさらに凝固シミュレーションを通して詳細なメカニズムまで解析し,凝固欠陥形成に与える諸パラメーターを明らかにした.その結果,特にリードの材質の熱伝導度の大小が大きく影響することが示唆され,はんだフィレットの冷却速度が遅い部分で欠陥形成が予測された.そこで,実際に銅とインバー合金(Fe-42Ni)を持いたICで微細組織の比較を行い,実際にデンドライト組織に大きな差が生じ,特に表面欠陥が粗大なデンドライトを形成するインバー合金で出やすいことを明らかにした.この一連の成果により,鉛フリーはんだにおける凝固のその場観察とシミュレーションの有効性が証明され,詳細な諸パラメーターの凝固欠陥発生に対する影響を明らかに出来た.一方,鉛フリーめっき処理表面の微細構造をTEM観察により明らかにし,更に鉛フリーはんだ/鉄系およびニッケル系合金のはんだ付けの短時間接合処理で形成する界面には,百nm程度のこれまでに報告されてなかった微細な界面層を形成することを明らかにした.なお,本研究成果は,論文投稿や米国TMS国際会議などの発表や招待講演として公表した.Sn-Ag-Cu鉛フリーはんだを用い,ICリードのミクロ接続部分における凝固現象のその場観察を始めて実現し,同時に凝固シミュレーションにより凝固のプロセスを明らかにした.形成されたはんだフィレットの組織観察から,凝固シミュレーションの正確さが検証された.ICリード材質がはんだの凝固速度へ与える影響を計算により明らかにし,さらにその場観察とはんだフィレット組織との対応を証明した.その結果は,はんだ組織の微細化には熱伝導に優れるCu配線がFe系の配線より有利であることを明らかにした.また,凝固最終部分の予測を可能にし,偏析や欠陥の生じる原因と場所の特定を始めて可能にした.一方,はんだ接続界面のTEMによるナノ構造観察と合金制御による最適化を行い,付加価値の高いNi-Pめっき/Sn合金界面における反応プロセスを解明した.これによって,信頼性の劣化につながる界面反応-Pリッチ層の形成のメカニズムを突き止め,Niがめっき中からはんだ液相へ著しく拡散するためNi不足の層が生じ,Ni_3Sn_4/Ni_3SnP化合物とPリッチ層が形成されることをTEM観察を中心に明らかにした.この反応抑制には,はんだにCuを添加することで界面反応にCuがNiより先に関与するため,(Cu,Ni)_6Sn_5化合物が形成され,これによってNi拡散が抑制され,最終的に界面の信頼性向上が可能になることを示した.これらの成果は,はんだ接続の科学的基礎を築き,ミクロ接続領域の高信頼性化のための各種組織制御が可能になることを示したものとして,国際的に注目を集めている.
転写因子を用いた人工誘導法によるスポロゾイト大量生産技術の開発

転写因子発現コンストラクトを野生型原虫に導入し遺伝子組み換え原虫を作製した。つぎに本原虫を用いオオシストの培養を実施し、オオシスト形成に及ぼす転写因子誘導の効果を評価した。組み換え原虫オオシストの直径は野生型より増大したが核の分裂の進行は、野生型同様不十分なままであった。そこで実際この転写因子がオオシスト期にどのような遺伝子群を活性化しているかをChIP-seq法で解析した。その結果、標的遺伝子は数百個同定されたがゲノムDNAの複製やmitosisに関与する遺伝子を誘導している証拠は得られなかった。このことからスポロゾイトの形成には本転写因子に加え他の転写因子が必要である可能性が示唆された。オオシスト培養:前年度に作製したAP2-OC発現コンストラクトを血液ステージで野生型原虫に導入し、限界希釈法でクローン化し、遺伝子組み換え原虫を作製した。次にこの原虫からオオキネートステージを精製しオオシストの培養を実施し、オオシスト形成に及ぼす転写因子誘導の効果を評価した。対照としては野生型原虫を用いた。培養した組み換え原虫を顕微鏡下で観察したところ、組み換え原虫オオシストはその直径が野生型より大きくなっていた。しかしながら培養最初期における転写因子誘導の効果の重要な指標と考えていた核の分裂の進行は、野生型同様不十分なままであった。そこで実際AP2-OCがオオシスト期にどのような遺伝子群を活性化しているかを確認するためChIP-seq法で全標的遺伝子の同定を試みた。ChIP-seqはGFP融合AP2-OC発現原虫が感染した蚊中腸を用いて実施した。解析の結果、標的遺伝子は数百個同定されたがゲノムDNAの複製やmitosisに関与する遺伝子を誘導している証拠は得られなかった。このことからオオシストスポロゾイトの形成にはAP2-OCに加え別の転写因子が必要である可能性が示唆された。DNAの複製やmitosisは他のステージでもみられる。血液ステージでも同じ転写因子がDNAの複製やmitosisに関与している場合、遺伝子ノックアウト原虫は作製できない。したがってこれまでオオシストステージでの機能を見落としてきた可能性がある。今後GFP融合蛋白発現原虫を用いて他の転写因子のオオシストでの発現を確認する予定である。目的の転写因子の発現が確認できた場合、ChIP-seq等を実施した後、今回作製した組み換え原虫内で強制発現させることで本技術を完成に近づけたい。寄生虫学
真核生物の起源に関する分子進化学的研究-微胞子虫類の情報高分子の分析

本研究は、最も早く成立した真核生物の一つではないかと推測されているMicrosporidia属の原生動物N.bombycisとその近縁種を材料として、複数の情報高分子について分析し、Microsporidia属の系統進化学的位置付けを再検討し、さらに真核生物の起源に関し、分子系統学的な考察を加えようとするものである。Microsporidia試料としては、N.bombycis弱毒系、強毒系、Varimorpha sp.M12,Pleistophora sp.を選び、これらに関してrRNAおよび、分析の際に比較の対象となるデータが蓄積しつつあるelongation factor(EF)の遺伝子に関して、そのconsensussequenceに基づいて設計したprimerを用いてPCR法およびcloningにより配列を試み、これらの実験から選られた結果も含めて、データベースを援用して随時1次構造/高次構造の比較を複数の解析法を用いて行ない、真核生物の起源に関し検討を加えた。得られたsmall ribosomal subunit RNAの全塩基配列をもとに2次構造モデルを構築したところ、Microsporidiaのsmall ribosomal subunit RNAは一般の原核生物に比較して短く、またそれを反映して真核生物に共通して見られるいくつかのstemを欠失していることが明らかになった。一方、翻訳される遺伝子としてeleongation factorを選び、その配列を決定するべく各種のPCR primerの検討をおこなったが、現在までに報告されている各種生物のeleongation factorのアミノ酸配列に基づくprimerではdegeneracyが高く、目的のDNA断片を増幅することができなかった。本研究の対象とするNosema bombycisが属する微胞子虫類は真核生物の中では、最も祖先型であるとの推測がなされている。しかし、申請者等が決定した5SrRNAの2次構造モデルから得られる結論はN.bombycisが典型的な真核生物型であることを示しており、真核生物の起源を探るにはさらに多くの情報高分子に関する解析が必要である。本研究は、N.bombycisがその近縁種を材料として、複数の情報高分子について分析し、N.bombycisが属するMicrosporidia属の系統進化学的位置付けを再検討し、さらに真核生物の起源に関し、分子系統学的な考察を加えようとするものである。N.bombycis以外のMicrosporidiaとしてN.bombycis弱毒系、強毒系、Varimorpha sp.M12,Pleistophora sp.に関して、これらの16S-like RNA遺伝子の配列を決定し、分子系統樹を作成したところ、それは必ずしも従来の分類とは一致しなかった。また、rRNA以外の情報高分子として、elongation factor(EF)を選択し、そのconsensus sequenceに基づいて設計したprimerを用いて、PCR法およびcloningにより配列を決定することを試みた。得られた配列をアミノ酸に翻訳し、既知のEFのアミノ酸配列と比較したところ、微胞子虫Giardia lambriaのEFのアミノ酸配列と部分的に一致した。しかしこの一致の程度は低く、得られた配列が真にN.bombycisのEFもののであるか否かには未だ疑問の予知があるので、さらに検討中である。Microsporidia試料としては、N.bombycis弱毒系、強毒系Varimorpha sp.M12,Pleistophora sp.を選び、これらに関してrRNAおよび、分析の際に比較の対象となるデータが蓄積しつつあるelongation factor(EF)の遺伝子に関して、そのconsensus sequenceに基づいて設計したprimerを用いてPCR法およびcloningにより配列を試み、これらの実験から選られた結果も含めて、データベースを援用して随時1次構造/高次構造の比較を複数の解析法を用いて行ない、真核生物の起源に関し検討を加えた。

得られたsmall ribosomal subunit RNAの全塩基配列をもとに2次構造モデルを構築したところ、Microsporidiaのsmall ribosomal subunit RNAは一般の原核生物に比較して短く、またそれを反映して真核生物に共通して見られるいくつかのstemを欠失していることが明らかになった。一方、翻訳される遺伝子としてelongation factorを選び、その配列を決定するべく各種のPCR primerの検討をおこなったが、現在までに報告されている各種生物のeleongation factorのアミノ酸配列に基づくprimerではdegeneracyが高く、目的のDNA断片を増幅することができなかった。
民族の和解に関する宗教社会学的研究-近現代南アフリカ社会の事例分析

前年度まで分析した南アフリカの事例について、より一般的な文脈から再検討するために、修復的司法のパラダイムを採用した。紛争後社会・移行期社会という社会類型を念頭において、具体的な当該ケースの社会的意義を再確認することがねらいであった。まず、社会変動期における法的規範の不安定性に着目し、法学研究者らの研究会にて南アフリカの事例に関する報告--「対話の逆説と和解の理解」--を行った(殺戮後の歴史和解プロセスの法理研究会、7月17日、於・慶応義塾大学)。次に、ここで得られた討論と示唆を踏まえて、紛争後社会という社会類型の特徴を整理し、より社会学的なパースペクティブからの報告--「紛争後社会の特質と課題--現代的な紛争収束をめぐって」--を行った(第77回日本社会学会、11月20日、於・熊本大学)。さらに、紛争収束と平和構築というテーマの関連に基づき、一連の分析について国際関係論の研究者らと検討する機会を得た(平和構築研究会報告「南アフリカ真実和解委員会の独自性と課題--他国における活動との比較から」2005年1月28日、於・名古屋大学)。前半期は、研究課題の理論的背景を整理し、その知見を近現代南アフリカ社会におけるキリスト教的理念と実践の変容に関して応用することに費やした。具体的には、宗教社会学説史の通覧および、そのなかで政治領域における宗教的要素の復活あるいは再適応とされる現象に対する分析に焦点をあてた。ここでは、従来の学説的傾向として、紛争・対立や先鋭的なナショナリズムに寄与する宗教的諸要素への着目は広範に共有されているものの、紛争後社会・多元社会という問題設定における宗教的機能は比較的看過されがちであるということが明らかになった。そこで、こうした理解をふまえて、エチオピア正教会をケーススタディとした宗教間対話論を構想、執筆した。近代南アフリカ社会における宗教的な政治改革運動の先鞭をつけたのが、1920年代以降急速に広まったエチオピア派独立教会であったことから、そのオリジナルであるエチオピア正教会の宗教実践とそこから引き出される形式的な含意を整理する必要があると考えたのである。後半期には、より現代の事例に視点をうつし、アパルトヘイト終焉前後のキリスト教系知識人と政治指導者の言説に注目した。南アフリカの政権移行をめぐっては、南アフリカ国内において人種政策(なかでも真実和解委員会)に関する積極的な論理的擁護を展開してきたのがキリスト教系知識人であったからである。そこで、1月から3月にかけてケープタウンとジョハネスバーグにおいてインタビューを重ねることで言説の検証を行った(主たる訪問先は正義和解研究所The Institute for Justice and Reconciliation)。この間の研究を通じて浮かび上がってきた現実が、その宗教的社会実践の軸として独自のシンクレティズムと世俗主義が機能しているというものである。この観点は現地滞在中に、'Christian Principles in a Social Transition'というテーマで論文にまとめ(African Study Monographs誌に投稿予定)、関連研究者の指導を受けた。1.アパルトヘイト期からポスト・アパルトヘイト期にいたる社会変動のさなかに、南アフリカのキリスト教関係者がどのような政治運動を展開したのかという点について、とりわけ、人種関係に対する立場の相違に焦点をあてて整理し、日本アフリカ学会にて口頭発表を行った(6月)。2.7月下旬から8月下旬にかけて南アフリカ共和国に滞在した。まずジョハネスバーグの南アフリカ放送局アーカイブで真実和解委員会公聴会の記録映像を閲覧し、つぎにケープタウンのアフリカ社会高等研究所で真実和解委員会後の政治的リアリティに関する指導を受けた。また、元委員会調査員とともに、犠牲者遺族に対する聞き取りを継続した。(この調査結果の一部は『アフリカレポート』掲載論文のなかで公表した)。3.9月上旬に、ニューヨークに拠点をおく政策立案シンクタンク・移行期正義国際研究所を訪問し、旧ユーゴスラビアにおける紛争処理プログラムに南アフリカで行われた事例を応用した際の、相違点と問題点を中心に、担当者へのインタビューを行った。4.上記2.と3.で得られた知見を、宗教社会学と法社会学の理論枠組みのなかで整理し、日本社会学会にて口頭発表を行った(10月)。5.以上の課題と調査に関する知見をまとめた総合的な論文を執筆し、提出した(12月)。6.上記5.の論文のなかから、歴史記述の問題に関わる分析について、関連する研究会にて報告した(国立民族学博物館共同研究、3月)。
大腸癌特異糖鎖構造の解析-その臨床応用をめざして-

ヒト大腸において、癌化による糖鎖構造の変化を検討するために、ヒト大腸癌組織および対照として同一症例の非癌部大腸粘膜組織から、直接糖脂質抗原を単離し、両者を比較検討した。そこで大腸における癌化による糖鎖抗原(糖脂質)の変動を明らかにし、遠位大腸癌組織において癌関連抗原を見いだした。今回検討した遠位大腸癌症例の全例において、非癌部正常大腸粘膜組織には殆ど現れず、癌組織にのみ顕著に発現の見られる糖脂質抗原が認められ、mass spectrometryをはじめとする生化学的分析法や、モノクローナル抗体を用いた免疫学的手法を用いて、その構造を分析し、Fuc-Gal-(Fuc)GlcNAc-Gal-Glc-CerであるLewis b血液型抗原であり、セラミド組成は、2-hydroxy C24の長鎖脂肪酸と、主要長鎖塩基としてC18のフィトスフィンゴシンであると同定した。この抗原は、遠位大腸癌に特徴的に発現する糖脂質抗原と考えられた。また、遠位大腸癌組織における中性糖脂質組成では、非癌部正常大腸粘膜組織と比較して、CDHの増加と、CMHの減少が認められ、癌組織において糖脂質糖鎖の合成不全が認められた。さらに、ヒト大腸癌細胞の生物学的性状を知るために、大腸癌患者の胸水より単層(OCUC-M)および浮遊性増殖(OCUC-F)を示す2クローンを樹立し、培養細胞の性状を比較検討した。培養上清中の糖鎖性腫瘍マーカーはいずれも高値を示し、さらにヌードマウスの皮下移植により形成した腫瘍から抽出した糖脂質において、両細胞の糖脂質抗原組成を比較検討した結果、シアル酸を有するガングリオシド組成に顕著な差異がみられた。単一癌組織より性質の異なる2種のクローンが得られ、本細胞株は、癌細胞の発育、増殖ならびに癌のheterogeneityの基礎的検討に役立つと考えられる。また、ヌードマウスの大腸へ移植することも可能で、大腸癌のin vivoモデルとしても有用と考えられる。ヒト大腸において癌化による糖鎖構造の変化を検討するために、ヒト大腸癌組織およびその同一症例の正常大腸粘膜組織から糖脂質を抽出し両者の糖脂質組成の変化を検討し、非癌部組織にはほとんどなく癌組織において顕著に発現のみられる糖脂質を見いだした。まず当科において手術により得られたヒト大腸癌組織とその同一症例の非癌部大腸粘膜組織を術後6時間以内に機械的に採取し、Folch法などにより粗糖脂質を抽出し、弱アルカリ処理、透折、凍結乾燥にて酸性糖脂質を、またアセチル化の後、フロリジルカラムに通して中性糖脂質を得た。これらの糖脂質をHPTLCプレ-トを用い、2次元薄層クロマトグラフィ-にて分離し、両者の糖脂質組成の差異を比較検討した。検討した遠位大腸癌症例全例において、正常大腸粘膜組織にはほとんどなく癌組織にのみ顕著に発現のみられる中性糖脂質を見いだした。現在、この中性糖脂質を精製し、一部はalditol acetateとしてGass Chromatography Mass Spectrometry(GC/MS)にて糖組成を分析し、intactな糖脂質はFast Atom Bomberdment Mass Spectrometry(FAB/MS)にて解析し、さらに各種モノクロ-ナル抗体(抗CA19ー9抗体、抗Sialyl Tn抗体、抗Le^a抗体、抗Le^b抗体、抗Le^x抗体、抗Le^y抗体)を用いたTLCーimmunostainingによる免疫学的検討を加えて、この糖脂質抗原の詳細な構造を分析中である。この糖脂質抗原は、遠位大腸癌関連糖鎖抗原として重要であると考えられる。

手術によって摘出されるヒト大腸癌組織と非癌部大腸粘膜組織から中性および酸性糖脂質を抽出し、2次元薄層クロマトグラフィーにて展開、分離し、両者の糖脂質組成の差異を比較検討した。遠位大腸癌において、非癌部大腸粘膜組織にはほとんど存在せず、癌組織にのみ顕著に発現のみられる中性糖脂質を見いだした。この糖脂質を分離、精製し、その糖鎖構造の分析のため、alditol acetate誘導体としてGas Chromatography分析を行い、またintactな糖脂質はFast Atom Bombardment Mass Spectrometry(FAB/MS)分析を行った。さらに各種のモノクローナル抗体を用いてTLC-immunostainingを行い、免疫学的検討を加えた。その結果、遠位大腸癌組織にのみ顕著に発現のみられるこの中性糖脂質の構造は、以下のごとく明らかになった。糖鎖組成はFucose、Galactose、Glucose、N-Acethylglucosamineの4糖からなり、モル比がそれぞれ2:2:1:1であった。negative ionmodeでのFAB/MS分析において、[N-H]^-イオンが、m/z1647,1663に検出され、次にFucoseの脱離によるフラグメントイオンが、m/z1501,1517に検出され、さらに順次糖が脱離したフラグメントイオンが、[CDH-H]^-(990,1006)、[CMH-H]^-(828,844)、[Cer-H]^-(666,682)であることから、糖鎖構造は、Fuc-Gal-FucGlcNAc-Gal-Glc-Cerであると示唆され、さらにTLC-immunostainingでは、抗Le^Y抗体と反応せず、抗Le^b抗体と反応したことから、遠位大腸癌組織にのみ顕著に発現のみられるこの中性糖脂質は、Lewis b血液型抗原またはその近似糖脂質であることが判明した。ヒト大腸において、癌化による糖鎖構造の変化を検討するために、ヒト大腸癌組織および対照として同一症例の非癌部大腸粘膜組織から、直接糖脂質抗原を単離し、両者を比較検討した。そこで大腸における癌化による糖鎖抗原(糖脂質)の変動を明らかにし、遠位大腸癌組織において癌関連抗原を見いだした。今回検討した遠位大腸癌症例の全例において、非癌部正常大腸粘膜組織には殆ど現れず、癌組織にのみ顕著に発現の見られる糖脂質抗原が認められ、mass spectrometryをはじめとする生化学的分析法や、モノクローナル抗体を用いた免疫学的手法を用いて、その構造を分析し、Fuc-Gal-(Fuc)GlcNAc-Gal-Gle-CerであるLewis b血液型抗原であり、セラミド組成は、2-hydroxy C24の長鎖脂肪酸と、主要長鎖塩基としてC18のフィトスフィンゴシンであると同定した。この抗原は、遠位大腸癌に特徴的に発現する糖脂質抗原と考えられた。また、遠位大腸癌組織における中性糖脂質組成では、非癌部正常大腸粘膜組織と比較して、CDHの増加と、CMHの減少が認められ、癌組織において糖脂質糖鎖の合成不全が認められた。さらに、ヒト大腸癌細胞の生物学的性状を知るために、大腸癌患者の胸水より単層(OCUC-M)および浮遊性増殖(OCUC-F)を示す2クローンを樹立し、培養細胞の性状を比較検討した。
運動ニューロンの変性機序に関する研究

今年度は運動ニューロン(MN)の特異性と、運動ニューロン疾患(MND)の特異性の検索の2つを主な目標とした。MNの特異性について出口はcholine acetyltransferase(CAT)単クローン抗体による免疫染色で、ラット脳神経核【III】,【IX】,【VI】と【V】,【VII】,【XII】の染色様式は違い、後者は脊髄MNに近似すると述べ、佐竹は脊髄神経節細胞のneurofilament(NF)蛋白質の高分子量成分に特異的な単クローン抗体でMNDの脊髄を染色すると、対照では染らないspheroidとMNが染ることを明らかにした。林はMNDの腰髄MNの乳酸脱水素酵素のヒストグラムは、高活性群が残存して低活性群が減少し、両者が同等に存する対照例とは異ることを明らかにし、加藤はMNDの腰髄MNのCAT活性を測定して、対照例よりも低い傾向を示すことを報告した。萬年はMNDでよく残存するOnuf核神経細胞を計測して、対照よりも面積が小さく、神経細胞内にhyaline inclusionを認めたと述べた。金光は鶏胚頸髄灰白質のシナプス形成の電顕的観察と、Golgi鍍銀法による軸索側枝の観察から、灰白質のシナプス形成は二次側枝に起ると考えた。長谷川は鶏刃脊髄の大型細胞はMNDの血清により、神経突起の伸展が抑制されると報告した。MNDの特異性について、中西はMNDのF波は対照例よりも有意に出現頻度が低く、F/M比が高く、持続時間が短く、位相数が少いと述べ、塚越は筋培養による、軽度中等度の筋変性を示すMNDの筋再生は良好で、対照例と筋変性がないか高度なMNDの筋再生は不良なことを示した。吉野は【N_2】Oにより、ラット中枢神経のcystathionint.の著増とtaurineの一過性増加を認め、MNDにおける葉酸サイクル異常を推察した。八瀬は低Ca,Mg,高Alの条件下でサルを飼育し、1年後脊髄MNの虎斑融解、axonal swelling、ライソゾーム増加、NFの走向異常を認めたが、骨格筋に著変はなかった。