hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
単細胞トランスクリプトームによる細胞階層性構造の解明

細胞集団の1細胞ずつの性格を明らかにし、真の細胞状態を把握することは生物学の研究にとって非常に重要である。本研究では微量/1細胞トランスクリプトーム解析法を開発し、がん細胞や免疫細胞の細胞集団の階層性を明らかにし、真の細胞状態を把握することで将来的に臨床研究に役立てることを目的とする。本研究では単一細胞遺伝子発現解析の発展系として数百以上の1細胞の遺伝子発現を同時に観察出来る革新的な技術(Nx1-seq)を開発した。この方法を用いて新たにがん細胞株、免疫細胞の1細胞遺伝子解析を行い有用性を確認した。本研究ではDNA/RNA hybrid oligo(dT)BeadsとDNA/RNA hybrid primerを用いた微量/1細胞トランスクリプトーム解析法の開発とそれを用いたがん幹細胞と免疫細胞の細胞集団の階層性を明らかにし、真の細胞状態を把握することで将来的に臨床研究に役立てることを目的とする。本年度は、方法の精度向上に取り組んだ。まず、DNA/RNA hybrid primerの配列と長さについて検討し、増幅率の増加、また、tubeのシリコンコーティング並びに液量を半分にすることでRNAの回収率の改善が見られた。次に大腸癌細胞株, HT29を対象にHoechst 33342dyeの取り込みにて、side population(SP)とmain population(MP)を分離後、単一細胞トランスクリプトーム解析を行った。16細胞ずつの解析でいくつかの遺伝子でSP特異的発現が観察された。その中で特にIL-8はSPでは16細胞中5細胞で発現が確認されたが、MP細胞では発現している細胞はなかった。さらにspherical colony formationと造腫瘍性を確認したSPとMPでバルク細胞(10,000細胞以上)でのこの遺伝子についての遺伝子発現解析をSAGE法とDNAアレイ法で行い比較したところ、単一細胞トランスクリプトームの結果と一致してSPで発現量が高かった。タンパク発現についても免疫染色で確認されたことから、がん幹細胞分画であるSPでIL-8が高発現していることが確認された。今後、さらに表面抗原についても解析する予定ある。本研究では微量/1細胞トランスクリプトーム解析法を開発すると共に、それを用いたがん幹細胞と免疫細胞の細胞集団の階層性を明らかにし、真の細胞状態を把握することで将来的に臨床研究に役立てることを目的とする。本年度は、昨年度に引き続き、DNA/RNA hybrid primerを用いた単一細胞トランスクリプトームの精度の向上に努めた。一方、単一細胞トランスクリプトーム法では1つ1つの細胞のコンストラクトを作製するものであるが、新たにバーコード化されたビーズに1細胞由来のmRNAを直径35マイクロメータのウェルで結合させ、1細胞を包括的に解析出来る革新的な技術を開発した。この方法により数千個から数万個の複数の単一細胞を解析することが出来る。また、この方法は前法よりも効果的にデータを得られることから、この方法を用いて新たに免疫細胞であるT細胞、がん細胞株の一部の1細胞遺伝子解析を行った。その結果、数百から数千の個々の1細胞の遺伝子発現情報が得られると共に、1細胞からの約1万個の遺伝子について解析できた。同一がん細胞株間の1細胞同士の相関は0.85以上で良好であった。この方法により得たデータを基にクラスタリング解析し、がん幹細胞と考えられる細胞から特異的/選択的に発現するマーカーを同定した。現在、細胞の性質を、データから得たマーカーを基にソーティングし、spherical colony formationで調べると共に、造腫瘍性をNOD/SCIDマウスへ移植して検証中である。得られた結果を基に細胞の階層性ならびに分化メカニズムを明らかにする。応用として癌免疫治療におけるモニタリングにおいて単細胞トランスクリプトームを行い細胞の変化と効果を検証する。1、2年度はDNA/RNA hybrid primerを用いた単一細胞トランスクリプトームの精度の向上に努めた。一方、単一細胞トランスクリプトーム法では1細胞ずつのコンストラクトを作製するものであるが、本研究において数百以上の1細胞の遺伝子発現を同時に観察出来る革新的な技術(Nx1-seq)を開発した。バーコード化されたオリゴdTビーズに1細胞由来のmRNAを容積20ピコリットルのウェル中で結合させる。また、この方法は前法よりも効果的にデータを得られることから、この方法を用いて新たにがん細胞株、末梢血単核球の1細胞遺伝子解析を行った。その結果、がん細胞株では数百から数千の個々の1細胞の遺伝子発現情報が得られると共に、1細胞からの約1万個種類の遺伝子について解析出来た。一方、末梢血単核球は単球、T細胞、B細胞、NK細胞にクラスタリングされこの方法により細胞の多様性が測定出来る事が明らかとなった。

さらにこの方法により得たがん細胞株のデータを基にクラスタリング解析し、がん幹細胞と考えられる細胞から特異的/選択的に発現するマーカーを同定した。今後、得られた結果を基に細胞の階層性ならびに分化メカニズムを明らかにする。応用として癌免疫治療におけるモニタリングにおいて単細胞トランスクリプトーム解析を行い細胞の変化と効果を検証する。細胞集団の1細胞ずつの性格を明らかにし、真の細胞状態を把握することは生物学の研究にとって非常に重要である。本研究では微量/1細胞トランスクリプトーム解析法を開発し、がん細胞や免疫細胞の細胞集団の階層性を明らかにし、真の細胞状態を把握することで将来的に臨床研究に役立てることを目的とする。本研究では単一細胞遺伝子発現解析の発展系として数百以上の1細胞の遺伝子発現を同時に観察出来る革新的な技術(Nx1-seq)を開発した。この方法を用いて新たにがん細胞株、免疫細胞の1細胞遺伝子解析を行い有用性を確認した。今回、新たにバーコード化されたビーズに1細胞由来のmRNAを直径35マイクロメータのウェル中で結合させ、1細胞を包括的に解析出来る革新的な技術を開発した。この方法により数千個から数万個の複数の単一細胞を解析することが出来ることから、細胞の解析が大変進んだ。27年度が最終年度であるため、記入しない。分子生物今後の研究では、新たにバーコード化されたビーズに1細胞由来のmRNAを結合させる技術を利用し、複数の単一細胞を解析する。前年度に引き続きがん幹細胞の単細胞トランスクリプトーム解析を行う。得られた結果を基にしてクラスタリング解析し、各細胞集団を同定するとともに遺伝子発現解析で得られた情報から特異的/選択的に発現するマーカーとして使用出来る表面抗原を選定する。もし、その分子の抗体が入手可能であれば、それを基に再び細胞株をソーティングする。入手出来なければペプチド合成をして抗体を作製する。ソーティングした細胞をspherical colony formationで調べると共に、がん幹細胞の造腫瘍性はNOD/SCIDマウスへ移植して検定する。がん幹細胞が特定出来ると予想される分子並びに抗体が見つかれば、それを用いてマウス移植実験にて抗体治療を行う。ここまで細胞株による検証と動物実験であるが、次に臨床サンプルで実験を行う。さらに、抗原刺激した免疫細胞が分化の過程でどのよう変化して行くか単細胞トランスクリプトーム解析を行いクラスタリング解析する。得られた結果を基に細胞の階層性ならびに分化メカニズムを明らかにする。応用として癌免疫治療におけるモニタリングにおいて単細胞トランスクリプトームを行い細胞の変化と効果を検証する。NA/RNA hybrid oligo(dT)BeadsとDNA/RNA hybrid primerを用いた微量/1細胞トランスクリプトーム解析法の開発については感度の改良が進んでいる。しかし、実験の再現性がまれに安定しないことがあり、機材、RNaseの混入等、試薬の管理による可能性が考えられた。
ビッグデータによる統計的機械学習を利用した南九州の漁業予測・赤潮予測モデルの開発

本研究では、月別の気象データなどを長期間に渡り蓄積したビッグデータ、標本数よりも未知パラメーター数の方が多い高次元母数データなどに斬新な機械学習理論(深層学習を含む)や統計モデルを適用して、八代海および鹿児島湾における赤潮発生の有無、規模および発生時期の予測、鹿児島周辺海域におけるクロマグロ幼魚の来遊量予測およびシラスの漁獲量予測、鹿児島近海におけるキビナゴの資源解析などを行い、これらの課題に対する統計手法や数理モデルの開発および改良を目的とする。2018年度は、主に以下の3種類の研究を実施した。2016年までのキビナゴの日別漁獲量データおよび2017年度に作成したキビナゴの資源量指数(abundance index)を利用して、鹿児島近海におけるキビナゴの資源解析を非平衡プロダクションモデルを利用して行った。1999年から2018年までの20年間にわたっての3月の甑海峡の表面水温、第1四半期の卵稚仔調査の漁獲量、および3月のまき網による阿久根地域のシラス漁獲量に基づき、鹿児島県の西薩海域における春漁(4-6月)のシラス漁獲量予測を深層学習を使用して実施した。過去の八代海で赤潮が発生した年の発生日および終息日のデータ(鹿児島県水産技術開発センターが作成し、鹿児島県が公表している)に基づき、八代および水俣の気象データを利用して、Elastic Netと呼ばれるスパースモデリング手法や深層学習理論に基づき、八代海における夏季(7-9月)の赤潮発生時期(発生日および終息日)の予測を試みた。個別の研究課題の多くで深層学習手法を利用しており、k-fold cross-validationと呼ばれる実測データのランダム分割に基づいてモデルの性能評価を実施しているが、モデル作成に当たって検討する項目が多岐に渡り、深層学習に多大な計算時間を必要とする。そのため、当初想定したようなモデルのパフォーマンスが得られておらず、更なる検討および解析が必要である。なお、八代海における赤潮発生予測では、過去に出力変数として使用していた被害規模を表す指標が直近数年分入手出来ておらず、代替指標の探索にかなりの時間を要している。八代海および鹿児島湾における赤潮発生の有無・規模および発生時期(発生日と終息日を含む)の予測、鹿児島周辺海域におけるクロマグロ幼魚の来遊量予測およびシラスの漁獲量予測について、大別して以下の2種類の手法により、分析を進めていく予定である。1.深層学習に基づくデータ解析を実施するとともに、個々の説明要因がどのような影響を与えるかを調べる要因分析手法の開発および改良を試みる2.標本数よりも未知パラメーター数が多い場合の高次元母数推定に適用可能なElastic Netに代表されるスパースモデリング手法に基づき、予測および要因分析を実施する本研究では、短期スパンの気象データ等を長期間に渡り蓄積したビッグデータ、標本数よりもパラメータ数が多い高次元母数データなどに斬新な機械学習理論や統計モデル、データマイニング手法を利用して、八代海における赤潮発生の有無および規模の予測、鹿児島周辺海域におけるクロマグロ幼魚の来遊量予測、鹿児島近海におけるキビナゴの資源量予測を行い、これらの問題に関する統計手法や数理モデルの開発および改良を目的とする。2016年度は、主にスパースモデリングと呼ばれる、標本数よりも未知パラメータ数が多い場合にも適用可能な統計的機械学習手法を利用して、八代海におけるシャトネラ・アンティーカと呼ばれる赤潮の発生予測を行った。具体的には、Elastic Netと呼ばれる罰則付きの線形モデルを応用して2014年夏季(7-9月)、2015年夏季および2016年夏季の赤潮発生規模の予測を行ったところ、2014年および2015年はほぼ的中し、2016年も実際の被害を示す指標に近い予測値が得られた。要因分析の結果、梅雨入り日(5月1日を起点とする経過日数)や八代および水俣における春季の気温、両地点における風速や風向などの与える影響が大きいことが確認された。これらの結果の一部は平成29年度春季水産学会大会のミニシンポジウムで講演し、現在投稿準備中である。キビナゴの資源量予測モデル開発の第一歩として、鹿児島近海におけるキビナゴの漁法別の漁獲量・努力量データを利用してCPUEの解析を行い、得られた指数を利用してプロダクションモデルによりキビナゴ資源の絶対量推定を行ったところ、現状の資源量が7,700トン前後と推定された。MSY(最大持続生産量)の推定値は約3,000トンであり、近年の漁獲量は1,0002,000トン程度であることから、今後漁獲を増やしても資源への影響が少ないことが示唆された。気象データに基づく赤潮の発生予測において、実際にブリ養殖業への被害がみられた2016年度は、出力変数として過去に利用してきた被害の程度を示す指標が入手出来なかった。そのため、公表されている代替指標としてブリ養殖業への被害金額や赤潮発生から終息までの日数などを利用したが、モデル作成を最初から行う必要があり、多大な時間を費やすことになった。加えて、出力変数の形式ゆえに気象データに基づくオンライン学習モデルの実装を当面保留したため、当初の予定よりもやや遅れてしまい、水質測定データに基づく予測モデル作成を先延ばしにせざるを得なかった。

本研究では、短期の気象データなどを長期間に渡り蓄積したビッグデータ、標本数よりも未知パラメータ数の方が多い高次元母数データなどに斬新な機械学習理論(ディープラーニングを含む)や統計モデルを利用して、八代海および鹿児島湾における赤潮発生の有無および規模の予測、鹿児島周辺海域におけるクロマグロ幼魚の来遊量予測、鹿児島近海におけるキビナゴの資源解析等を行い、これらの課題に対する統計手法や数理モデルの開発および改良を目的とする。2017年度は、主に以下の3種類の研究を実施した。経済的要因を取り入れた鹿児島近海におけるキビナゴの漁獲効率解析を行い、キビナゴの水揚単価(1kg当たりの水揚金額)が漁獲量変動に対して比較的頑健であること、漁法による水揚単価の違いがそれほど大きくないこと、統計解析の結果としてブランド魚として知られる甑島で漁獲されたキビナゴの水揚げ単価が他の地域の単価よりも低くなることが確認された。鹿児島周辺海域におけるクロマグロ幼魚の来遊量予測では、これまでに実施したTweedie回帰分析およびサポートベクター回帰に加えて、複数の中間層を持つ教師付きニューラルネットワークであるディープラーニング(深層学習)により予測を試みたが、現状では上記2つのモデルに比べて精度が劣るため、今後ニューラルネットワークの内部構造も含めたモデルの改良を行う予定である。八代海におけるシャトネラ・アンティーカによる赤潮の発生予測では、過去に出力変数として利用していた被害の規模を表す指標が今後利用出来ない可能性が高いため、養殖業の被害金額や赤潮発生から終息までの経過日数など、代替指標を利用した予測を実施した。鹿児島周辺海域におけるクロマグロ幼魚の来遊量予測では、一般に性能が良いと言われているディープラーニングの予測精度が、他の手法と比較すると、現状では高くなっていない。モデル構築に際して、本質的な分析の仮定やニューラルネットワークの設定などを逐次変更しているが、毎回の計算に多大な時間を要するため、難しさも感じている。八代海における赤潮の発生予測について、過去に出力変数として利用していた被害規模を示す指標が入手出来ておらず、公開データによる代替指標の探索を行っているが、現状では予測精度の高い指標が見つかっていない。本研究では、月別の気象データなどを長期間に渡り蓄積したビッグデータ、標本数よりも未知パラメーター数の方が多い高次元母数データなどに斬新な機械学習理論(深層学習を含む)や統計モデルを適用して、八代海および鹿児島湾における赤潮発生の有無、規模および発生時期の予測、鹿児島周辺海域におけるクロマグロ幼魚の来遊量予測およびシラスの漁獲量予測、鹿児島近海におけるキビナゴの資源解析などを行い、これらの課題に対する統計手法や数理モデルの開発および改良を目的とする。2018年度は、主に以下の3種類の研究を実施した。2016年までのキビナゴの日別漁獲量データおよび2017年度に作成したキビナゴの資源量指数(abundance index)を利用して、鹿児島近海におけるキビナゴの資源解析を非平衡プロダクションモデルを利用して行った。1999年から2018年までの20年間にわたっての3月の甑海峡の表面水温、第1四半期の卵稚仔調査の漁獲量、および3月のまき網による阿久根地域のシラス漁獲量に基づき、鹿児島県の西薩海域における春漁(4-6月)のシラス漁獲量予測を深層学習を使用して実施した。
Mibによるp120ctnのユビキチン化を介した細胞集団移動制御機構の解明

Mind bomb(Mib)はE3ユビキチンライゲースであり、標的タンパク質をユビキチン化することで、標的タンパク質の機能制御や安定性に関わっている。Mibは細胞間シグナルの一つであるNotchシグナルのリガンドをユビキチン化することでリガンドのエンドサイトーシスを制御し、Notchシグナルの正の制御因子として機能することが知られている。本研究課題で申請者はNotchシグナル制御とは独立にMibの細胞移動における機能を明らかにした。本研究課題ではCadherinの局在制御や細胞移動に関わるRac1の活性制御を行うp120catenin (p120ctn, Catenin delta1としても知られる)がMibの新規標的タンパク質であることを同定し、Mibが自身のユビキチンライゲース活性依存的にp120ctnの547番目のアミノ酸であるリジンをユビキチン化すること、ユビキチン化されたp120ctnはRac1を活性化する機能が低下することを明らかにした。さらにHeLa細胞やゼブラフィッシュの側線原基をモデルとしたライブイメージング解析により、Mibによるp120ctnのユビキチン化を介したRac1活性の制御が"persistent directional cell migration"と呼ばれる指向性のある細胞移動に重要であることを見出し、Mizoguchi et al.,Proc Natl Acad Sci U S A. 2017Oct 31;114(44):E9280-E9289にて報告した。本年度は細胞移動制御におけるMibのp120ctn以外の標的タンパク質の検討を行い、いくつか新規標的の候補が得られた。またp120ctnの機能制御に重要であると考えられているアセチル化に対してMib依存的なユビキチン化が影響を与えるかの解析も行った。E3ユビキチンライゲースであるMind bomb1(Mib1)はNotchシグナルの正の制御因子としてよく知られているが、申請者はMib1の新たな基質としてp120ctnを同定した。p120ctnは細胞移動に関わるRac1の活性化を促進することから、Mib1はp120ctnのユビキチン化を介して、細胞移動に関わるものと考えられる。これまでの解析からMib1はp120ctnのK547, K569, K574のいずれかまたは複数個所をユビキチン化しているものと推察された。そこで各々のリジンをアラニンに置換した変異型のp120ctnを作製し、ユビキチン化を検討したところ、K547がMib1によるユビキチン化部位であることが明らかとなった。またK547のユビキチン化依存的にp120ctnの機能が制御されていることも明らかとなった。次に側線原基の移動においてp120ctnの機能解析を行った。mib1変異体で側線原基の移動が観察されるが、この表現型がMib1によるp120ctnの機能抑制の損失に起因したp120ctnの機能亢進によるものであると考え、p120ctnの機能抑制実験を行った。その結果、モルフォリノアンチセンスオリゴを用いてp120ctnの発現を抑制すると、側線原基の移動が部分的に回復することが明らかとなった。このことからMib1によるp120ctnの機能制御がゼブラフィッシュの側線原基の移動制御に貢献していることが示された。以上の結果は現在論文投稿準備中である。また側線原基の移動を観察するにあたり作製したゼブラフィッシュトランスジェニックライン、Tg(UAS:Lideact-mCherry), Tg(UAS:Lifeact-EGFP), Tg(UAS:EB1-mCherry)は新規のトランスジェニックラインとしてgenesis 54(9) 483-489にて報告した。申請書に掲げた研究計画通りに研究が遂行できた。また研究成果の一部は論文発表を行った。以上のことから、おおむね順調に進展しているといえる。本研究課題ではMibの新規標的タンパク質としてp120catenin (p120ctn, Catenin delta1としても知られる)を同定した。p120ctnは細胞移動制御に関わるRac1の活性化やCadherinの局在制御に関わることが知られている。培養細胞を用いた生化学的な解析より、Mibはp120ctnと相互作用すること、Mibは自身のユビキチンライゲース活性依存的にp120ctnの547番目のアミノ酸であるリジンをユビキチン化すること、ユビキチン化されたp120ctnはRac1を活性化する機能が低下することを明らかにした。さらにHeLa細胞やゼブラフィッシュの側線原基をモデルとしたライブイメージング解析により、Mibによるp120ctnのユビキチン化を介したRac1活性の制御が"persistent directional cell migration"と呼ばれる指向性のある細胞移動に重要であることを見出した。

このことはMibがp120ctnのユビキチン化を介してRac1活性を適切なレベルに保っていることが細胞集団において個々の細胞が指向性を持った移動を行うために必要であることを示唆している。研究計画通りに研究が遂行でき、また研究成果を論文発表できたことからおおむね順調に進展しているといえる。Mind bomb(Mib)はE3ユビキチンライゲースであり、標的タンパク質をユビキチン化することで、標的タンパク質の機能制御や安定性に関わっている。Mibは細胞間シグナルの一つであるNotchシグナルのリガンドをユビキチン化することでリガンドのエンドサイトーシスを制御し、Notchシグナルの正の制御因子として機能することが知られている。本研究課題で申請者はNotchシグナル制御とは独立にMibの細胞移動における機能を明らかにした。本研究課題ではCadherinの局在制御や細胞移動に関わるRac1の活性制御を行うp120catenin (p120ctn, Catenin delta1としても知られる)がMibの新規標的タンパク質であることを同定し、Mibが自身のユビキチンライゲース活性依存的にp120ctnの547番目のアミノ酸であるリジンをユビキチン化すること、ユビキチン化されたp120ctnはRac1を活性化する機能が低下することを明らかにした。さらにHeLa細胞やゼブラフィッシュの側線原基をモデルとしたライブイメージング解析により、Mibによるp120ctnのユビキチン化を介したRac1活性の制御が"persistent directional cell migration"と呼ばれる指向性のある細胞移動に重要であることを見出し、Mizoguchi et al.,Proc Natl Acad Sci U S A. 2017Oct 31;114(44):E9280-E9289にて報告した。本年度は細胞移動制御におけるMibのp120ctn以外の標的タンパク質の検討を行い、いくつか新規標的の候補が得られた。またp120ctnの機能制御に重要であると考えられているアセチル化に対してMib依存的なユビキチン化が影響を与えるかの解析も行った。これまでの成果をまとめて論文を執筆中であるので、論文投稿を行う。また投稿時にレフリーより、指摘点があればそれに応じた追加実験を遂行する。本研究課題により、Mib-p120ctn-Rac1経路が細胞移動において重要な役割を果たしていることが明らかとなった。しかしながら、Mib機能阻害時における細胞移動の振る舞いは細胞種で異なることも新たに見いだされた。例えば本研究で用いたHeLa細胞とゼブラフィッシュ側線原基では双方細胞の移動方向の指向性は失われたが、Mib機能阻害時にHeLa細胞ではコントロールと比べ細胞移動速度が上昇し、逆にmib変異体の側線原基細胞の移動速度は野生型の側線原基細胞より移動速度が低下した。これは細胞接着の状態が異なるなど他の因子による影響であると考えられる。HeLa細胞ではMibのノックダウンでN-Cadherinの発現が低下することが報告されているが、mib変異体ではN-Cadherin, E-Cadherinの発現や局在に変化は見られなかった。p120ctnはCadherinの局在制御を行うことが知られている。このことから細胞種によってはMibによるp120ctnのユビキチン化はCadherinの局在制御にも関わる可能性が示唆される。
帝国公道会による地方公道会構想の実際

本研究で明らかにすることができたのは、下記のことがらである。帝国公道会の地方公道会構想は1910年代半ばに構想されたが、構想実現のための個々の府県への具体的働きかけはなされず、高知県に対しても同様であった。高知県への巡回講演が実現するのは1919年秋のことであり、大江卓の16年ぶりの帰県という形で地方公道会構想の実現の契機が生じたのである。また、高知県においては主だった被差別部落において部落改善が長年すすめられてきたが、取り組みの行詰まりのなか、部落改善に尽力した指導者の多くは県単位での部落改善の取り組みや部落差別撤廃に向けた社会への働きかけを県当局に期待していた。県当局も内務省主催の細民部落改善協議会を受け、県として各地域での部落改善の動向の把握と県の部落改善施策の方針の浸透を図ることが求められており、そのためには各地域の部落改善指導者を巻き込んだ組織の必要性を実感していたのである。このような、大江、部落改善指導者、県当局三者の思惑の一致により、1919年10月の高知県公道会の結成となったのであるが、県当局は県組織の構成について独自のプランを有していたわけではなかったため、帝国公道会の地方公道会構想どおりに高知県公道会が誕生するのである。しかし、ビジョンを有していなかった県当局としては、高知県公道会に独自の活動を期待する予算的裏づけを積極的におこなおうとすることはなく、1921年度からの主事一名の配置にしてもただ単に職員を配置したにとどまる。なお、高知県公道会が帝国公道会の支部として機能することはなく、友好的関係は保持し続けるも、活動そのものが帝国公道会の動向に左右されることはなかった。ただ、水平社との関係で言えば、基本的には帝国公道会同様、高知県公道会も幹部養成講習会を開催するなど、水平社への対抗的位置関係にあったことは間違いなかった。
ALMA望遠鏡を用いたデブリ円盤におけるガス探査

デブリ円盤は、太陽系以外の若い恒星周りで発見された、主に塵や岩石から構成される円盤で、数10-数100auの半径を持つリング状構造をしたものが多く見つかっており、リング構造や既に円盤内で形成された惑星の探査などの研究がなされてきた。しかし近年、デブリ円盤にはほとんどないと考えられてきた「ガス成分」が多くのデブリ円盤で発見され、その起源が注目されている。本研究では、デブリ円盤のガスの化学組成に着目し、その起源が、形成過程で残存されたものであるのか、あるいは塵からの2次的供給であるのかを探る。
NMR法による麻酔下および低酸素下における脳代謝、脳内生理活性物質の動態測定

本研究は麻酔、低酸素あるいは脳虚血が脳代謝、脳内生理活性物質の動態におよぼす影響を明らかにすることを目的としてin vivo NMRスペクトロスコピー(MRS)による検索を行った。NMR装置はJEOL JNM GX270 NMR spectrometerを用い、検出プローブには表面コイル型プローブを用いた。低酸素実験ではWistar系雄性ラットを用いて6%0_2(N_294%)での換気による低酸素負荷を、脳虚血実験では雄性砂ネズミを用いて総頸動脈両側結紮による脳虚血負荷を行い、脳の^<31>P、^<13>C、^1HNMRスペクトルの変化を観察した。低酸素負荷により^<31>Pスペクトルでは、creatine phosphate(Pcr)シグナル強度が約30%減少したが、ATPシグナルは変化せず、エネルギー代謝はかなり維持されると考えられた。^<13>Cスペクトルでは低酸素負荷により、β-glucose-C1シグナルの強度は維持されているのに対して、α-glucose-C1シグナルは大きく減少し、異性体による代謝の差異が示唆された。Lactate-C3シグナルは低酸素負荷により増大した。[1ー^<13>C]ーglucoseの代謝生成物であるglutamateのシグナルはC4位シグナル、ついでC2およびC3シグナルが出現した。また、^1Hシグナルでも低酸素負荷により、lactate-CH_3シグナルが増加した。脳虚血負荷により脳内Pcr、ATPシグナルの減少・消失と無機リン酸シグナルの増大が観察された。[1ー^<13>C]glucose投与後の虚血負荷により、glucose-C1シグナルの消失とlactate-C3シグナルの増加が認められた。[1ー^<13>C]glucoseに由来するglutamateのC2,C3およびC4シグナルは再開通後も出現せず、glutamate生成の抑制が示唆された。本年度はラットを用い、invivoでの脳内代謝関連物質の【^1H】および【^(13)C】-NMRスペクトロスコピーの基礎的検討、並びに生体での吸入麻酔薬の【^(19)F】-NMR測定に関する基礎条件を得るためのin vitro測定を中心に検討した。【^1H】-NMRはラットをペントバルビタール麻酔下に頭皮を直径1cmほど切除し、頭骨表面に検出コイルを密着して測定した。パルス系列1331とCPMG法を組み合せることにより、水や脂質の影響を低減して乳酸,N-アセチルアスパラテート等のシグナルを検出した。低酸素を負荷すると乳酸のシグナル強度が増加するが、現在、この変動について検索している。同様に処置したラットに【^(13)C】-グルコースを静注あるいは腹腔投与(いずれも250mg/kg)することにより、脳からの【^(13)C】-グルコースのシグナルを検出することに成功した。この測定には【^(13)C】-【^1H】専用の表面検出コイルを用い【^1H】デカップリングによる【^(13)C】シグナルの強度を高める工夫をしている。脳からの【^(13)C】-グルコースのシグナルは静注の場合、投与後2分間の測定ですでに検出され、30分後にはシグナルはほとんど消失した。腹腔投与の場合は投与後1020分程でシグナル強度が最大となり、60分後ではほぼ検出できなくなった。これら【^(13)C】-グルコースの動態を検索するとともに、【^(13)C】

-グルコース由来の代謝物質についても検出を試みている。一方、吸入麻酔薬であるイソフルレンの【^(19)F】-NMRは水中と炭化水素系溶媒中ではスペクトルの分裂様式が異なることを見出しており、麻酔薬の分布や脂質との相互作用の検索に応用できることが示唆される。以上、本年度は測定手法を中心に検討してきたが、麻酔や低酸素条件での上記検索を深めるとともに、生理活性物質等の微量成分検出についても検討する予定である。本年度は昨年度に引き続き[1ー^<13>C]glucoseを投与したラットおよび砂ネズミの脳^<13>CNMRスペクトルをin vivoで経時的に測定し,低酸素・脳虚血による解糖系の亢進,解糖系でのαーグルコピラノースの選択的な消費,再酸素化や血流再開による回復過程を直接グルコースの変動から観察した.さらに,投与した[1ー^<13>C]glucoseからのアミノ酸生成についてin vivoの検索を行った.(1)ラット(♂,約120g)に人工呼吸(30%O_2,0.5%ハロセン)を行い,大脳部分の頭蓋骨に検出コイルを密着させた.天然存在比での^<13>CNMR測定をを行った後,大腿静脈より[1ー^<13>C]glucose 500mg/kgを2回に分けて投与し,30%OD2D2吸入時,低酸素(6%O_2,ハロセンoff)負荷時および再酸素化時の^<13>CNMR測定を行った.93ppmと97ppmに観察されるαーformとβーformの[1ー^<13>C]glucoseのシグナルは,低酸素負荷時にはαーformがβーformに比較して大きく減少し,乳酸のシグナル(21ppm)が増加した. 30%O.ナ_<2.ニ>に戻すとαーformのシグナルは回復し,乳酸のシグナルは減少した.(2)ペントバルビタール麻酔にて砂ネズミに[1ー^<13>C]glucose 500mg/kgを静注,総頸動脈両側結紮による脳虚血を負荷し,脳の^<13>CNMRスペクトル変化を観察した.虚血負荷によりαーformのシグナルがβーformに先立って消失し,乳酸のシグナルが急速に増加した.再開後,[1ー^<13>C[glucoseシグナルが回復し,50分ほどで乳酸のシグナルが観察されなくなった.(3)ペントバルビタール麻酔にて砂ネズミに[1ー^<13>C]glucoseを持続静注し,[1ー^<13>C]glucose由来のグルタミン酸に帰属されるシグナルの経時変化を観察した.投与後,まずグルタミン酸の4位の炭素の^<13>Cシグナルが増大し,少し遅れて2位および3位の炭素の^<13>Cシグナルが増大することが見出れた.これはグルコースの代謝過程において^<13>標識位置が移動し,生成グルタミン酸においても標識位置が変化してゆくことを示している.
顎機能障害に対する手動型2自由度開閉口訓練装置の開発ならびに臨床適用に関する研究

下顎運動障害症例に対しては、従来より開口訓練装置による開口訓練が行われている。いずれの各種開口訓練装置は、顎間距離、開口距離を拡大する単純な機構から構成されている。これに対し、今回は、手動型で2自由度を有する開口訓練装置を開発した。本装置は、上下ならびに前後方向の運動路を有する装置で、簡便かつ手動による開閉口訓練が可能である。対象症例は顎関節疾患(繊維性癒着症)による関節性あるいは、下顎骨骨髄炎、顎顔面外傷などの瘢痕性開口障害症例などであり、手動型2自由度開口訓練装置は、下顎運動障害症例のリハビリテーションとして有効であった。我々は、下顎運動障害症例に対する理学療法の必要性を重視している。生体の下顎運動を再現し、開閉口訓練の定量化を目的として、咀嚼ロボットを応用した開閉口訓練装置の開発を1995年より行っており、今回は以上の研究の一端としてこの装置とは機構を異にする手動型で2自由度を有する開口訓練装置を開発した。本装置は、下顎の回転ならびに滑走運動を誘導するために下顎の上下方向とともに前方方向の運動も行える2自由度を有する機構で、簡便かつ手動による開閉口訓練が可能である。基本構造は、開口作動部(作用点)、作動基部(支点)、手動部(力点)からなり、開口作動部は、症例に応じた上下歯列の床装置をネジで固定した。対側の手動部は、術者および患者自身の手で操作し能動受動的な開口訓練が可能であった。作動基部には、歯車があり、手動部からの力を伝達し下顎の上下的ならびに前方への運動を可能とした。対象は顎関節内障、下顎骨骨髄炎に後遺した瘢痕性開口障害、顎関節強直症などあり、手動型2自由度開口訓練装置により開口域の拡大がみられ、下顎運動障害症例のPhysical therapyに有効で、滑走運動の重要性が示唆された。下顎運動障害症例に対しては、従来より簡単な運動路1自由度、上下方向のみの下顎頭の回転運動を行なわせる開口訓練装置による開口訓練が行われており、いずれの各種開口訓練装置も、顎間距離、開口距離を拡大する単純な機構から構成されている。これに対し、本研究では、手動型で、かつ2自由度を有する開口訓練装置を開発し、実際の臨床例に適用しその成果を検討した。手動型2自由度開閉口訓練装置の開発本装置の機構は従来の上下方向のものに、歯車軌道を組込ませ、上下歯列への挿入先端の下方部分を前後に移動させるものである。本装置と上下顎歯列は即時重合レジンの歯型金属トレーによって連結される。本装置は重量700gと軽量で、取り扱いも簡便、携帯も自由で、操作費も安価である利点がある。臨床適用本装置は、従来の開口装置がもつ上下方向のほかに前後方向の運動路を有する装置で、簡便かつ手動による開閉口訓練が可能であった。本装置の臨床適応に、より確実に前後方向の下顎滑走運動を行なわせることにより、下顎頭を中心とした関節包、靭帯、開閉口筋に、より大きな運動域、距離を正常に準じて機能させることが可能となったことで、極めて有効な臨床効果が得られた。その結果、下顎頭、関節円板、その他の前述の周囲組織、関連器官に存在する非生理的な線維性の癒着、拘縮を剥離、伸展させ得たことが、好成績の理由であると考察される。
ハシリハリアリ属の種多様性と社会構造の進化

ハシリハリアリ属は世界の熱帯・亜熱帯域を中心に300種以上が知られるハリアリ亜科最大の分類群である。本属の顕著な生態的特徴として種間でコロニーサイズが大きく異なっていることが判明している。最小規模のコロニーは10個体程度だが、最大規模では5万個体を越える。このような種間に見られる著しいコロニーサイズの差は、種間の社会行動に大きな差をもたらし、行動の違いは形態的な差を創出すると考えられる。そこで、本属の生態と形態の相関した進化を調べることで、本属が亜科内で最も多様化した要因の一端を解明することを研究目的とした。本年度では、コロニーサイズの差をよく反映している生態として採餌行動に着目し、採餌の際に重要な役割を果たす大あご形態との関連を調べることとした。分子系統解析の結果、本属は大きく2系統(processionalis系統とdiminuta系統)に分かれ、各系統で対照的な採餌行動と大あご形態の相関した進化がおこっていることが判明した。processionalis系統は、大規模なコロニーを有する種を含む。この系統の種は大あごに明瞭な歯を複数保持しており、採餌の際に多数の働きアリが餌を細かく噛み砕いて各個体が運べるサイズにまで断片化する「餌解体」を行う。対して、diminuta系統は小中規模のコロニーを有する種を含む。こちらの系統の種は大あごに歯を持たず、採餌の際には餌解体を行わない。代わりに、餌を複数個体で協力して担ぎ上げ、もしくは引きずって運搬する行動を示す。以上のように、異なる系統間で異なる採餌戦略が進化し、それに伴って異なる大あご形態が進化してきたことが本属の高い種多様性をもたらした一因になっていると示唆された。これらの研究結果は学会大会にて発表した。28年度が最終年度であるため、記入しない。本年度、ハシリハリアリ属種のサンプル収集のため、野外調査を4か所で行った。1か所目、マレー半島では未入手のサンプルを得、さらに一部種の採餌行動を初めて詳細に観察できた。2か所目、台湾では初めての野外調査を行い、台湾に分布する本属全種のサンプルを採取した。同時に台湾農業試験場と台湾国立科学博物館で標本調査を行って、台湾から全くの未知であった1種を見出した。3か所目、沖縄本島でも初調査を行った。本島には台湾との共通種が分布し、地理的隔離された個体群として注視すべき重要な場所であった。4か所目、スマトラ島でも初調査を行い、本属種10種のサンプルを採取した。これまで調査を行った地域の種と合わせて、地史を色濃く反映した生物地理学的に重要なサンプルであった。研究室では、形態観察から種群の設立、各種の再検討を行った。結果、東洋区に分布する本属には13種群107種(うち51種が未記載)が含まれることが分かった。この種数は研究を始める前に知られていた種数(60種)を大幅に上回るものであり、東洋区において本属の種多様性が非常に高いことが明確になった。また、全世界の本属の種数が本研究により約350種となり、アリ科の中でも上位3番に入る程の種数を包含していることが判明した。また、ミトコンドリア遺伝子の塩基配列(1,461bp;COI, Cytb, 16SrDNA)を用いて、最尤法、ベイズ法による分子系統樹(67 OTU)を作成した。その結果、形態情報によった種群は概ね単系統群であることを確認した。同時に軍隊アリ化現象(数千数万個体の大集団で採餌を行う等の特殊な生態的特性)は分岐の深い単系統な3種群(processionalis種群、myops種群、currens種群)で生じており、この単系統群の共通祖先で1度のみ軍隊アリ化現象が生じたと推定された。上記研究結果の発表を、日本昆虫学会とアメリカ昆虫学会、日本生態学会で行った。ハシリハリアリ属の試料収集、生態観察のため沖縄本島で野外調査を行った。その試料とこれまで蓄積してきた試料を用いて、日本産(奄美大島、徳之島、沖縄本島)と台湾産の標本を比較した結果、日本産と台湾産のハシリハリアリは別種であることが判明した。また、ヨーロッパの7か国(ドイツ、オーストリア、イタリア、スイス、フランス、ベルギー、イギリス)・9か所の自然史博物館を訪れ、乾燥標本の調査を行い、一部を借用した。これにより、本属のほとんどの種のタイプ標本を見ることができた他、過去の分布記録の報告論文に使われた標本の多くを検することができた。実体顕微鏡を用いて収集した標本の外部形態を観察し、分類学的再検討を行ったところ、東洋区から100未記載種を含む173種を確認した。この種数は研究を実施する以前に知られていた種数の約3倍にあたり、東洋区は非常に種多様性の高い地域であることが明らかになった。また、これまでに取集した分子解析用試料を用いて、70サンプル分のミトコンドリア遺伝子と核遺伝子の4領域(COI, Cytb, 16SrDNA, wingless)を合わせた2,550bpの塩基配列を決定し、最尤法とベイズ法を用いて分子系統樹を作成した。両手法による系統関係は概ね一致し、大半の分岐において高い信頼度を持つ系統樹が作成された。系統解析の結果から、本属は2系統に大分されることが判明した。

片方の系統は含まれる全ての種が東洋区に固有である。もう片方の系統は世界中に分布する系統であるが、その中から東洋区に固有の系統が生じていることがわかった。よって、本属内には東洋区に固有の系統が独立に2回生じているが判明した。また、東洋区固有の系統に含まれる種は、固有の形態的特徴と固有の生態的特徴を持つことも判明した。上記の成果に関して、2回の国内学会大会と2回の国際会議において発表を行った。東洋区に分布するハシリハリアリ属のほぼ全てのタイプ標本はヨーロッパに保管されているため、種を再検証する際の障壁になっていた。しかし、27年度にヨーロッパの主要な博物館をすべて回り、必要なタイプ標本のほとんどをみることができた。また、タイプ標本以外のコレクションも調査できたことにより、当初予想していた以上に多くの未記載種(100種)がいることが判明した。ヨーロッパに標本調査に訪れた際、現地のアリの研究者と交流を持つことができた。その研究者と親交を深めたことにより、入手が困難であったアフリカや南米の分子系統解析用試料を提供していただけることとなった。これにより、これまでは東洋区に限定した試料を用いて系統樹を作成していたが、全世界を見渡した系統樹の作成が可能となった。系統解析では、最尤法やベイズ法などの樹形探索法により、非常に信頼度の高い系統樹が作成できた。早期に信頼度の高い系統樹を作成できたことがたたき台となり、分岐年代の推定や祖先形質の復元など当初予定していなかった分野にまで調査範囲を拡大することができた。それらの成果は国内学会や国際会議で発表するに至った。さらに研究内容を発展させて、東洋区のハシリハリアリには他の地理区では見ることのできない固有の採餌行動と形態形質の相関した進化が見られることが判明した。その固有性を包含することにより東洋区の多様性は非常に高くなっていることが示唆された。この内容はポスター発表として第76回日本昆虫学会大会・第60回日本応用動物昆虫学会大会合同大会において公表し、ポスター賞をいただいた。以上のように、27年度は予期せぬ事態が多く生じたが、それらは研究をより良い方向に向かわせるものばかりであり、当初の計画を大きく上回って研究が進展たといえる。ハシリハリアリ属は世界の熱帯・亜熱帯域を中心に300種以上が知られるハリアリ亜科最大の分類群である。本属の顕著な生態的特徴として種間でコロニーサイズが大きく異なっていることが判明している。最小規模のコロニーは10個体程度だが、最大規模では5万個体を越える。このような種間に見られる著しいコロニーサイズの差は、種間の社会行動に大きな差をもたらし、行動の違いは形態的な差を創出すると考えられる。そこで、本属の生態と形態の相関した進化を調べることで、本属が亜科内で最も多様化した要因の一端を解明することを研究目的とした。本年度では、コロニーサイズの差をよく反映している生態として採餌行動に着目し、採餌の際に重要な役割を果たす大あご形態との関連を調べることとした。分子系統解析の結果、本属は大きく2系統(processionalis系統とdiminuta系統)に分かれ、各系統で対照的な採餌行動と大あご形態の相関した進化がおこっていることが判明した。processionalis系統は、大規模なコロニーを有する種を含む。この系統の種は大あごに明瞭な歯を複数保持しており、採餌の際に多数の働きアリが餌を細かく噛み砕いて各個体が運べるサイズにまで断片化する「餌解体」を行う。
胃癌根治手術合理化を目的とした新しいナビゲーションシステムの開発

概要:平成12-14年度にわたり申請者は、胃癌手術合理化を目的とした新しいナビゲーションシステムの開発に関する研究として、新しいモノクローナル抗体にPEGを結合させた放射標識抗体を作成しその基礎的検討を行なった。平成12年度の研究成果消化器癌に特異的に反応するモノクローナル抗体A7の胃癌特異性を向上させるために、A7を更にクローニングした結果,胃癌特異性は70%から90%に向上した。またクローニングしたA7をPEGに結合させることに成功した。平成13,14年度の研究成果この抗体をヒトに応用するにあたって、まず動物を用いてその特性を明らかにし、実際に臨床応用できるかどうかを検討した。全身麻酔下にウサギを開腹し、胃の粘膜下に放射抗体を投与し、各臓器、特に所属リンパ節への分布を計測した。PEG化抗体、元の抗体それぞれ5匹ずつ行った。双方ともリンパ節集積性は高く、リンパ節転移を検出するのに充分であった。現在本邦で行われている標準的胃癌手術は胃の広範な切除と盲目的リンパ節郭清であるが、これは一律な根治性が期待できる一方で機能障害を招き、根治性と機能性の追及という二律背反をわれわれに課している。この問題を解決するには、手術中に的確なリンパ節転移診断を可能とする手法により、過不足のない手術を実現することである。癌に特異的に反応する抗体を術前に投与し、これをガイドとしつつ、癌病巣のみを選択的に摘出する手術が完成すれば、不必要で過度の浸襲を避けることができる。1)申請者は胃癌に特異的に反応するモノクローナル抗体をlimiting dilution法でクローニングし、より選択性の高い抗体を作成した。2)新たに作成した抗体を精製し、抗体の異種性を軽減するために抗体にポリエチレングリコール(PEG)を結合させた。抗体/PEG比は1:2であった。3)抗体活性を計測した結果、PEG化抗体は元の抗体の結合活性の90%を保持していた。4)PEG化抗体に125-Iを標識し、これを担癌ヌードマウスに投与し、体外からの検出が可能かどうかとその精度を計測した結果、人に応用するのに十分であることが判明した。昨年度まで申請者は、胃癌手術合理化を目的とした新しいナビゲーションシステムの開発に関する研究として、新しいモノクローナル抗体にPEGを結合させた放射標識抗体を作成しその基礎的検討を行なってきた。平成13年度はこの抗体をヒトに応用するにあたって、動物を用いてその特性を明らかにし、直ちに臨床応用できるような素地を構築することを研究の目的とした。1)PEG化抗体に1 2 5-Iを標識し、これを担癌ヌードマウスに投与し、体外からの検出が可能かどうかとその精度を計測した。ガンマーカウンターにて経時的に各臓器の放射活性を計測すると、投与後24時間で腫瘍部への活性が最も高く、また他の正常臓器とのコントラストが最高になった。PEG抗体は元の抗体に比し高い腫瘍選択性を示した。また抗原活性は低かった。2)全身麻酔下にウサギを開腹し、胃の粘膜下に放射抗体を投与し、各臓器、特に所属リンパ節への分布を計測した。平成12、13年度にわたり申請者は胃癌手術合理化を目的とした新しいナビゲーションシステムの開発に関する研究として、新しいモノクローナル抗体にPEGを結合させた放射標識抗体を作成しその基礎的検討を行なった。その結果、消化器癌に特異的に反応するモノクローナル抗体A7の胃癌特異性は70%から90%に向上することが明らかになった。平成14年度の研究の概要動物実験1:平成14年度は、この抗体をヒトに応用するにあたって、まず動物を用いてその特性を明らかにし、実際に臨床応用できるかどうかを検討した。全身麻酔下にウサギを開腹し、胃の粘膜下に125-Iを放射標識した抗体を投与し、各臓器、特に所属リンパ節への分布を計測した。その結果、双方ともリンパ節集積性は高く、リンパ節転移を検出するのに充分であった。動物実験2:ビーグル犬を用いた。全身麻酔下に胃内視鏡を施行し、放射標識した抗体を経内視鏡的に胃粘膜に注入した。

3日後、犬に再び全身麻酔を施し、開腹下に胃の所属リンパ節への抗体の集積性を計測したところ、注入近傍のリンパ節への放射活性が高く、本抗体は大型動物においてもリンパ節集積性が高いことが明らかになった。
効果的なe-Learningコース開発支援の在り方とシステム化に関する研究

本研究の成果をまとめると以下のようになる。(1)インストラクショナル・デザインによるe-Learningコース開発についてe-Learningコース開発が進んでいる米国等におけるインストラクショナル・デザイナーが果たす役割とノウハウを調査し、それらの分類整理を行なった。また、インストラクショナル・デザインに関して解説しているWebサイトを調査して、そのデータベースを作成しインストラクショナル・デザインについての学習を支援するシステムのプロトタイプを開発した。e-Learning教材は、画像・動画・音声・文章など色々な形態の素材を含むため、e-Learning教材を開発するにあたって、様々な著作権処理をしなければならないという課題がある。そこで、本研究では、大学などの高等教育機関が、e-Learning教材などを開発する場合に必要な著作権処理を支援するシステム開発を検討し、大学などの高等教育機関がe-Learning教材などを開発する場合の支援システムとして、e-Learning教材などに関する質問に回答していき、それらの回答から必要な著作権契約を提示するシステムのプロトタイプを作成した。e-Learningコースを開発する際に特に配慮する必要がある著作権に関する多岐にわたる視点と項目を整理した。また、e-Learningコース開発に関する著作権について、著作物の利用目的、利用形態、利用対象者など種々の条件の組み合わせに対応したデータベースを開発した。e-Learningのコース開発等をする場合、著作物の2次利用を自由にすると、知らない間に他人のものになってしまうことを心配する人もいる。そこで本研究では、「教育用電子的著作権再利用改変合意」の基本的な概念を確立した。
項目反応理論にもとづく妥当でない回答の検出指標が臨床群を識別できるか

項目反応理論のperson-fitを利用することで, MMPIの尺度8において統合失調症群を健常群と区別できたが,尺度2でうつ病群の区別はできなかった。このことは,統合失調症群は健常群と不連続であるが,うつ病群は連続性のあることが示唆された。また,社会的望ましさはテスト得点に加算的に影響するのではなく,社会的望ましさに敏感な個人とそうでない個人とではその影響が異なるという交互作用があることが明らかになった。今年度は,社会的望ましさがテスト得点にどのように影響するのかについて主に検討した。その結果,社会的望ましさがどの個人のテスト得点にも同じように加算的に反映されることはなく,社会的望ましさに敏感な個人はその影響がより大きく,敏感でない個人は社会的望ましさの影響は少ないことが明らかになった。ただし,この交互作用はBigFiveのN尺度とA尺度には見られたが他の尺度には見られなかった。このような結果を項目反応理論のどのようなパラメタに反映されるのかを検討するために,多値の項目反応モデルを適用した。解析にはMULTILOGとPARSCALEを利用したが,一部パラメタの推定が安定しない場合があるので,データを追加中である。臨床群のMMPIデータは50名弱を収集することができた。来年度も引き続き収集する予定である。今年度は,項目反応理論のperson-fitによる臨床群と健常群との弁別の可能性を探るために,臨床データ198名(男98,女100)のうち,統合失調症(46名)とうつ病(18名)をとりあげ,それぞれに関連の強いMMPIの尺度(統合失調症では尺度8,抑うつでは尺度2)について特性値の推定とperson-fitとの関連を検討した。統合失調症群では,健常群とは異なり,両変数の間に正の傾きを持つ回帰式が得られたが,抑うつ群では,健常者と同様に負の傾きの回帰式が得られた。つまり,健常群から推定した尺度8のパラメータは,統合失調症群に対しては適用可能でなく,尺度2では抑うつ群に適用可能であるといえる。さらに言えば,統合失調群と健常群の間には連続性がないが,抑うつ群と健常群の間には連続性がある可能性を示唆しているといえる。うつ病群の標本数が数が少ないのでさらに追加する必要がある。また,DIFによる臨床群と健常群の弁別の可能性も検討したが,臨床群の数が少ないこともあり,あまり明確な結果は得られなかった。さらに,臨床群のperson-fitは,faking-badな態度による健常者(60名)のperson-fitと正直な態度(377名)のperson-fitとの中間の値を取ることが分かったが,この理由が不明であるのでさらに検討する。社会的望ましさの影響の影響については,系列範疇法に該当する項目反応理論のSamejima modelに基づくパラメタ推定を720名のデータに関して行ったが,まだ,一部パラメタの推定が安定しない場合があるので,データを追加する予定である。今年度は,項目反応理論のperson-fitによる臨床群と健常群との弁別の可能性を探るためにMMPIに関して実施した昨年度分析を,臨床データ(特に抑うつ群)を増やして再度実施した。その結果,昨年度と同様に,統合失調症群では,健常群とは異なり,特性値の推定とperson-fitの間に正の傾きを持つ回帰式が得られたが,抑うつ群では,健常者と同様に負の傾きの回帰式が得られた。つまり,統合失調群と健常群の間には連続性がなく,抑うつ群と健常群の間には連続性がある可能性が昨年と同様に示された。社会的望ましさの影響の影響については,項目反応理論のMuraki(1992)のGeneral Partial Credit Model(GPCM)による,各項目の位置のパラメタの推定を753名のデータに関して行った。さらに,Thurstonの系列範疇法によるに各項目の位置を推定し,両者の関係を検討した結果,よく似た結果ではあったがGPCMのよる推定値の方が,頻度の少ないなどの理由でカテゴリーをまとめることの影響が少ないものであった。今年度は,MMPIの短縮版を作成するための基礎的な検討を行った。短縮版の作成は,項目反応理論によるパラメタを参照して,識別力の高い項目を上位からいくつか使うという方法をとった。また,短縮版が完全版との等価性を検討する方法として,完全版を実施した群を,対応をとった2群に分けて,その両群の間の相関をとる方法を考案し,その方法の有効性をシミュレーションによって検討した。シミュレーションデータは項目反応理論に基づいて発生させた。その結果この方法はかなり有効であることが確認された。