hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
睡眠時エネルギー代謝に影響を及ぼす生活習慣の時系列解析を用いた検討

睡眠時エネルギー代謝に影響を及ぼす生活習慣の一つとして、2種類の夕食(【高炭水化物食(HCD:PFC=10:10:80)】または【高脂肪食(HFD:PFC=10:78:12)】)を被験者に摂取させ、睡眠時代謝および睡眠深度に及ぼす影響を検討した。その結果、一晩の睡眠構造に試行間で差はなかったものの、HCDの深睡眠が第一周期で有意に減少した。夕食の栄養素組成が特に第一周期の睡眠構造に影響を及ぼす可能性が示唆された。食事誘発性熱産生(TEF)を運動後過剰酸素消費量の概念を組み込んだ算出方法を検討し従来の方法と比較検討した結果、簡易的にTEFの大きさを推定する方法として有効である可能性が示唆された。食事や睡眠,スポーツによる運動以外のエネルギー消費である非運動性エネルギー消費(nonexercise activity thermogenesis; NEAT)は,1日のエネルギー消費量の約1/3を占めると報告されており,このNEATを制限したときと通常の生活を送ったときの“血糖のゆらぎ"の違いについて,時系列の長期相関特性を特徴付けるDFAを用いて比較検討した.その結果, NEATを制限した場合では,一度血糖値が上昇(下降)すると長く続くという状態(糖尿病患者と同様の傾向)を示したことから,日常生活における微細な身体活動量が血糖調節機構に大きく影響を与える可能性が示唆された.数年前から共同研究として行ってきた遺伝子改変マウスのグルコースクランプ実験における同位体分析の結果,脂肪燃焼や血糖値低下を促すホルモンである「アディポネクチン」の受容体(アディポネクチン受容体;AdipoR)を活性化する分子量約430の低分子化合物を見出すことができ,新薬の開発に期待を持つことができる結果が得られた.朝食を欠食すると1日のエネルギー消費量や血糖値にどのような影響を及ぼすのかを検討した結果,エネルギー摂取量が等しい条件であれば1日のエネルギー消費量に差は認められなかったが,朝食を欠食することにより1日の平均血糖値が上昇するという結果が得られた.夕食に栄養素組成の極端に異なる2種類の食事(高炭水化物食(炭水化物80%)または高脂肪食(脂肪78%))を摂取することで,その後の睡眠中のエネルギー代謝および睡眠深度にどのような影響を及ぼすのか検討した結果,摂取したエネルギー量が同じであれば一晩を通したエネルギー消費量に差はなく,またエネルギーを作り出す基となった酸化基質にも差がなかったが,夕食の高炭水化物食が,睡眠時に利用される炭水化物量を増加させ,特に第一周期の深睡眠を減少させた.睡眠時エネルギー代謝に影響を及ぼす生活習慣の一つとして、2種類の夕食(【高炭水化物食(HCD:PFC=10:10:80)】または【高脂肪食(HFD:PFC=10:78:12)】)を被験者に摂取させ、睡眠時代謝および睡眠深度に及ぼす影響を検討した。以前から取り組んできた,時系列解析の一種であるdetrended fluctuation analysis法を用いて血糖変動を評価することにより,平均値や標準偏差といった基本的な統計量では分からなかった“血糖ゆらぎ"が,健常者でも日常生活の中で身体活動(non-exercise activity thermogenesis)を制限することにより,糖尿病患者に認められた現象と同様,負のフィードバック機構の減弱が認められるという結果が得られ,雑誌にアクセプトされたところである.また,加速度計を用いることで微細な身体活動を検出することが可能となり,間接熱量測定装置(ヒューマン・カロリメーター)と組み合わせることで食事誘発性熱産生(thermic effect of food)を推定できること,また一日の安静時代謝の変動も算出することが可能となったことから,それらのデータをまとめ投稿論文を作成中である.さらに睡眠時エネルギー代謝の詳細な解析を進めるにあたり,現在よりもさらに精度の高い分析器を用いることにより,睡眠測定に特化したヒューマン・カロリメーターが稼働し,脳波を測定するためのセットアップなどがようやく終わったところである.昨年度より行ってきた,メラトニン分泌に抑制効果のある短波長光(青色光)が睡眠に与える影響の実験結果は,現在投稿論文を作成中である.また,睡眠深度などを測定できる簡易型の脳波測定機器を用い,運動を実施するタイミングで睡眠や1日のエネルギー代謝,酸化基質に影響を与えるか否かを現在検討中である.さらに現在,睡眠に影響を与える運動について,フルマラソン前後での睡眠時間の変化を調べることを目的とし,フィールド調査を計画しているところである.研究課題の内容に関するダイレクトな論文は投稿できてはいないが,以前から取り組んできた研究課題についてアクセプトされ,また運動と睡眠に関するフィールド測定を含めさまざまな実験を進めているため,少しずつではあるが順調に進展していると考えられる.また,研究課題に取り組む上で欠かすことのできない食事や運動実施のタイミング,さらに食組成の違いなど,現在条件設定の詳細な検討を行っているところであり,次年度はさらに研究を発展させることができると予想される.日本国内の同じ間接熱量測定装置(ヒューマン・カロリメーター)および分析装置を用いている他施設の協力も得てデータ収集を行い,さらに海外の施設とも協力しながら,研究課題の内容について様々な角度から検討したいと考えている.

また,研究課題の内容に関して,実験室レベルでの測定だけでなくフィールド測定を行うことで,幅広い視点でエネルギー代謝と運動・食事のタイミングについて検討していきたいと考えている.睡眠測定に特化したヒューマン・カロリメーターのセットアップに予想以上に時間がかかり,当初予定していた被験者数をこなすことができなかったため,平成25年度へ繰越が生じた.次年度は,昨年度行う予定であった実験の被験者数を追加するとともに,睡眠およびエネルギー代謝,生体データ解析に関係する学会に参加し,情報収集や意見交換を行うとともに,現在行っている実験を滞りなく遂行できるよう,研究費を用いて実験を行っていきたいと考えている.
ロイコトリエン受容体CysLT2を標的としたがん免疫療法の確立

CysLT2はアラキドン酸から生合成される生理活性脂質であるロイコトリエンの受容体の1つである。気管支喘息モデルマウスの解析により樹状細胞が発現するCysLT2が免疫反応を抑制的に制御していることが報告されているが、NK細胞におけるCysLT2の生理機能は未だ明らかになっていない。申請者はCysLT2が造血細胞においてNK細胞に高い発現を示し、CysLT2欠損マウスを用いたmelanomaの細胞株であるB16F10細胞を使用した転移モデルマウスを解析した結果、CysLT2欠損により転移が抑制されることを明らかにした。本研究はCysLT2がNK細胞を介してがん免疫に関与しているかを明らかにし、NK細胞を用いたがん免疫療法の新たな知見を提供することを目的としている。前述のモデルマウスにおける転移はNK細胞に強く依存していることが報告されている。NK細胞を除去した転移モデルマウスを解析したところ、NK細胞の除去によってCysLT2マウスの表現型が抑制され、CysLT2欠損マウスの表現型がNK細胞のCysLT2に関与していることが示唆された。また、モデルマウスの肺におけるNK細胞を解析したところ、CysLT2の欠損によってNK細胞数やNK細胞の表面抗原は変動せず、細胞障害性顆粒の発現量が増加することが示唆された。これらの知見はCysLT2欠損によってNK細胞の機能が亢進することによりがん転移を抑制していることを示唆している。前述のモデルマウスにおける転移はNK細胞依存性であることが報告されている。CysLT2欠損マウスの表現型がNK細胞のCysLT2に関与しているかを明らかにするために、NK細胞を除去した転移モデルマウスを解析した。結果、NK細胞の除去によってCysLT2マウスの表現型が消失した。またモデルマウスの肺におけるNK細胞のFACS解析および細胞障害性顆粒であるパーフォリンおよびグランザイムの発現量の解析したところ、CysLT2の欠損によってNK細胞数やNK細胞の表面抗原は変動せず、細胞障害性顆粒の発現量が増加することが示唆された。これらの知見はCysLT2欠損によってNK細胞の機能が亢進することによりがん転移を抑制していることを強く示唆している。平成28年度に予定していた解析が順調に進行し、CysLT2がNK細胞の機能を抑制的に制御していることを明らかにしつつある。同年度に予定していたCysLT2のリガンドの発現量の測定はリガンドが脂質であることから測定が困難であり一部遅延しているが、平成29年度に予定していたin vitroにおけるNK細胞の培養系の条件検討を始めている。実験計画に沿ってマウスより分離したNK細胞の培養実験を行ったが、分離したNK細胞の純度が各実験によってばらつきがあり、培養中に細胞が死滅することがあったため、実験が予定より遅延している。また、本研究とは異なる着眼点でがん転移におけるターゲットとしている受容体の機能に関する報告があったため、新たな追加実験が必要になった。

気管支喘息モデルマウスの解析により樹状細胞が発現するCysLT2が免疫反応を抑制的に制御していることが報告されているが、NK細胞におけるCysLT2の生理機能は未だ明らかになっていない。申請者はCysLT2が造血細胞においてNK細胞に高い発現を示し、CysLT2欠損マウスを用いたmelanomaの細胞株であるB16F10細胞を使用した転移モデルマウスを解析した結果、CysLT2欠損により転移が抑制されることを明らかにした。本研究はCysLT2がNK細胞を介してがん免疫に関与しているかを明らかにし、NK細胞を用いたがん免疫療法の新たな知見を提供することを目的としている。前述のモデルマウスにおける転移はNK細胞に強く依存していることが報告されている。NK細胞を除去した転移モデルマウスを解析したところ、NK細胞の除去によってCysLT2マウスの表現型が抑制され、CysLT2欠損マウスの表現型がNK細胞のCysLT2に関与していることが示唆された。また、モデルマウスの肺におけるNK細胞を解析したところ、CysLT2の欠損によってNK細胞数やNK細胞の表面抗原は変動せず、細胞障害性顆粒の発現量が増加することが示唆された。これらの知見はCysLT2欠損によってNK細胞の機能が亢進することによりがん転移を抑制していることを示唆している。in vivo解析ではCysLT2アンタゴニストの投与によってモデルマウスにおける転移を抑制することができるかを解析する。in vitro解析ではNK細胞の刺激による細胞増殖能・細胞障害活性を解析する。また、NK細胞とtarget細胞の共培養による細胞障害性活性を解析する。現在、他研究室の識者にアドバイスを貰い、実験条件を再検討している。また、他の報告によって明らかになった分子の本研究への関与に関して検索を行っている。研究室の在庫の試薬によって研究費を節約することができ、適切なラボテクニシャンが見つからず、雇用が困難であったため。実験計画に沿ってマウスより分離したNK細胞の培養実験を行ったが、分離したNK細胞の純度が各実験によってばらつきがあり、培養中に細胞が死滅することがあったため、実験が予定より遅延し、本研究とは異なる着眼点でがん転移におけるターゲットとしている受容体の機能に関する報告があったため、新たな追加実験が必要になったため、次年度使用額が生じた。使用計画としては他の細胞分離試薬や培養試薬、抗体などの購入を主に考えている。平成29年度の使用額に合算して使用する。
高い伝導性を有する配位超分子の構築とその光機能制御

本研究においては主に、1)π受容性に富みかつ両末端に配位能を有する新規な配位子の設計・合成を行い、2)その配位子を用いて遷移金属イオンとの配位超分子を形成しその単結晶化および構造決定を行う事を目的として研究を推進してきた。その結果、以下のことを明らかにした。1.1,4-ナフトキノンジイミンを用いた銅及び銀錯体の合成と構造強いπ受容性を有するこの配位子を用いて銅(I)と錯形成を試みたところ錯形成が非常に速くすぐに黒色沈澱を生じた。この沈澱の電気伝導性はσ=10^<-2>Scm^<-1>であった。これは銅(I)が銅(II)に酸化され電荷移動を起こしているものと思われるが構造は明らかに出来なかった。一方、銀(I)イオンとの錯形成においては黄色結晶が得られその結晶構造解析の結果、銀2核に架橋した2量体構造であることがわかった。伝導性はなかった。2.2,3-ジシアノナフタレン(2,3-dcn)を用いた銀(I)錯体の構造この配位子と、種々の銅(I)及び銀(I)との錯体生成を試みたが、単結晶構造解析が可能な大きさの結晶が得られたのは、AgClO4の場合のみであった。得られた構造は2つの銀(I)に22つの2,3-dcnが架橋配位した2量体を形成しており、そのパッキングの仕方は結晶化に用いた溶媒により異なっていた。THFを用いた場合にはClO4イオンで架橋された2次元構造を形成していたのに対して、2-MethylTHFを用いた場合には各銀イオンにさらにもう一つの2,3-dcnが単座配位した2量体を形成していた。伝導性はなかった。
ケーラー多様体上のベクトル束の研究

当該研究課題に関連して主に次のような成果を得た.1.ある種の古典的非射影的代数多様体が,江口-Hanson計量から生ずるhyperkahler多様体の自然なコンパクト化としてとらえられること,および,その一般化として,ある種のhyperkahler多様体に対し四元数多様体としての自然な部分的コンパクト化の存在を示した.2.コンパクトかKahler多様体への被約代数群への作用に関し,(準)安定性の概念を導入し,これに対し幾何学的不変式論と同様,商空間の存在がKahler categoryで示せることを示した.また,(準)安定性を定義するデータが,適当な同変cohomology群を用いてparametrizeされることを見いだした.また,この定式化を用いて商空間のKahler錐の表示をあたえた.3.Jacobi予想と関連して,UFD上の導分δの性質と分類を,δ整因子の概念を導入し,δ整元のなす環を用いて調べた.4.放物的Higgs束のmoduli多様体の接空間を自然に表現する一次拡大加群を構成した.また二次拡大加群により非特異性の判定法をあたえた.5.A_∞型のDynkin図式に対応するコンパクトでない4m次元完備hyperkahler多様体を商構成法を用いて構成し,その性質を詳しく調べた.当該研究課題に関連して主に次のような成果を得た.1.ある種の古典的非射影的代数多様体が,江口-Hanson計量から生ずるhyperkahler多様体の自然なコンパクト化としてとらえられること,および,その一般化として,ある種のhyperkahler多様体に対し四元数多様体としての自然な部分的コンパクト化の存在を示した.2.コンパクトかKahler多様体への被約代数群への作用に関し,(準)安定性の概念を導入し,これに対し幾何学的不変式論と同様,商空間の存在がKahler categoryで示せることを示した.また,(準)安定性を定義するデータが,適当な同変cohomology群を用いてparametrizeされることを見いだした.また,この定式化を用いて商空間のKahler錐の表示をあたえた.3.Jacobi予想と関連して,UFD上の導分δの性質と分類を,δ整因子の概念を導入し,δ整元のなす環を用いて調べた.4.放物的Higgs束のmoduli多様体の接空間を自然に表現する一次拡大加群を構成した.また二次拡大加群により非特異性の判定法をあたえた.5.A_∞型のDynkin図式に対応するコンパクトでない4m次元完備hyperkahler多様体を商構成法を用いて構成し,その性質を詳しく調べた.
問題解決学習において獲得される基礎・基本的知識の可視的構造形態の究明

本研究は、問題解決学習の社会科授業において習得される「知識の構造」に着目し、その「知識の構造」の中において、いかなる知識が「基礎的・基本的な知識」としての位置を占めているのかを構造的・実証的に明らかにすることを目的としたものである。あるひとつの「知識」については、それが「基礎的・基本的な知識」であるか、それとも「応用的・発展的な知識」であるかといったような形で、絶対的な性格付けを行うことはできない。しかしながら、ひとつの「知識」というものは分離不能なパ-ツから構成されているものではなくて、それ自身の中に「階層構造」を有し、さらに別の知識と「相互関連」し合って成立しているものであるということができる。したがって、ひとつの「知識」はそれ自身の中に、より基礎的・基本的な要素を孕み、あるいは、他の知識の成立にとっての基礎的・基本的な要素となり、また、他の知識を前提にして成立しているということなどの点に鑑みれば、相対的な意味においては、「基礎的・基本的な知識」というものが措定されうると考えられる。本研究においては、いくつかの社会科授業を記録し、分析することによって、上述のような「基礎的・基本的な知識」のあり方を、子どもの発語(会話、作文等)から抽出される言語の構造として図式化することを試みた。本研究の成果を以て、ただちに普遍的な「基礎的・基本的な知識」の構造形態として、結論づけることはできないが、本研究で採用されているアプローチとその方向性を、今後の社会科授業研究においてさらに精緻に作り上げていくことによって、「知識の構造形態」を実証的に明らかにしていくことを今後の課題としている。
水稲における穂内穎果の成長斉一性検定法の確立および関連QTLの探索

出穂10日後の穂をヨードヨードカリ染色することにより、穎果の成長斉一性が評価できることがわかった。光環境および温度環境が穎果の成長斉一性に強く関与し、内生ABAが穎果の成長斉一性に関与することが示唆された。本研究の結果、穎果の成長斉一性および良登熟性に関与すると思われるいくつかの有望な系統を見出すことができ、穎果の成長斉一性と良登熟性および高温登熟性の関連を解析した。本研究はイネの穂内穎果の成長斉一性の評価法の確立、成長斉一性に関与するQTLの探索および成長斉一性と高温登熟性との関連を明らかにすることを目的とする。21年度は穂内穎果の成長斉一性評価法の確立および穎果の成長斉一性に対する高温の影響を明らかにすることを目的とした。穂内穎果の成長不斉一の一要因として開花後成長を開始しない発育停滞穎果の存在がある。グロースチャンバーで開花後のイネを栽培し、光条件および温度条件により成長停滞穎果を再現した。また数日おきに成長中の穎果の切除処理を行った。その結果、細胞分裂に関与するマーカー遺伝子の発現が成長停滞穎果では強く抑制されていたが、成長中の穎果の切除処理によりその発現が高まるとともに、それらの穎果は正常に登熟した。これらのことから成長停滞穎果は何らかの要因で成長が停滞しているが、登熟能を有していることがわかった。成長停滞穎果の内外穎を採取し、ヨード・ヨードカリ法による染色を行った結果、成長停滞穎果では染色されず、内外穎へのデンプンの蓄積が認められなかった。以上のことからヨード・ヨードカリ法により成長停滞穎果を識別することができることがわかり、穎果の成長斉一性の評価法として利用可能であることがわかった。この評価法を用いて22年度以降、穎果の成長斉一性に関与するQTLの探索を行う。ただし、この方法は受精障害等による不稔が生じない条件で有効である。穎果のデンプン蓄積期の成長斉一性は弱光条件で顕著に低下し、イネ体の糖レベルと密接に関わることが示唆された。またデンプン蓄積期の穎果の成長斉一性は、光条件に関わらず、高温により顕著に高まった。今後高温下で成長斉一性が高まるメカニズムおよび収量低下や品質低下との関係を明らかにする予定である。本研究はイネの穂内穎果の成長斉一性の評価法の確立、成長斉一性に関与する量的形質遺伝子座(QTL)の探索および成長斉一性と高温登熟性との関連を明らかにすることを目的とする。22年度は穎果の成長斉一性に関与するQTLの候補領域の推定および穎果の成長斉一性と収量や品質との間における関係の解明を目的として、コシヒカリ/Kasalathの染色体部分置換系統(CSSL)を実験材料とした実験を行った。これらの系統を水田で栽培し、穂揃い期に止葉切除処理を行った。各系統の止葉処理区および対象区の個体の穂を穂揃い5日および10日後に採取した。エタノール中に保存したサンプルを用いて、現在ヨード・ヨードカリ法による穎果の成長斉一性を調査中である。また成熟期に穂を採取し、収量および籾の登熟程度を調査した。籾の登熟程度として、全く子房の成長の認められない空籾、子房は成長を開始したがデンプン蓄積を開始していない発育停止籾およびデンプンを蓄積した籾に分類し、デンプン蓄積籾については比重1.13以上、1.061.13、1.001.06、1.00以下に分類し、各カテゴリーの籾数の割合を求めた。止葉切除処理により穂への炭水化物供給を制限することにより、各系統の登熟程度は低下したが、その低下のしかたは次の2つのタイプに分けることができた。空籾が増加するタイプと、空籾は増加しないが発育停止籾および比重1.06以下の充実不良籾の増加するタイプである。止葉切除による登熟歩合の低下が小さい系統には前者のタイプが多かった。今後穎果の成長斉一性を調査し、上記のデータとの関係、特に止葉切除による登熟歩合の低下と成長斉一性との関係について詳しく解析する予定である。本研究はイネの穂内穎果の成長斉一性の評価法の確立、成長斉一性に関与する量的遺伝子座(QTL)の探索および成長斉一性と高温登熟性との関連を明らかにすることを目的とした。

23年度は、コシヒカリ/Kasalathの染色体断片置換系統(CSSL)に対して、穎果のヨード・ヨードカリ法による成長斉一性の検定を行い、高密度籾割合、および高温登熟性との関連を調査した。また穎果の成長斉一性に関与する植物ホルモンの候補として挙げられるアブシジン酸を穎果各組織において定量するとともにABAの外部施用が子実成長に及ぼす影響を調査した。その結果、ヨード・ヨードカリ法による成長斉一性が大きい、すなわち穂内穎果の成長格差が小さいものほど高密度籾割合が大きい傾向が認められ、穎果の成長斉一性が低いことは効率的な登熟に有用な形質であることが示唆された。その一方で、高温登熟性に優れる系統で必ずしも穎果の成長斉一性は低くなく、両者の間には一定の関係は認められなかった。また、胚乳、胚および種皮のABA濃度は穎果の成長速度と高い相関関係が認められ、高温登熟環境ではこれらのABA濃度は著しく低下した。登熟初期の穎果へのABAの施用により、特に弱勢穎果の成長が促進され、穎果の成長斉一性へのABAの関与が示された。以上のように、穂内穎果の成長斉一性にABAが関与することが示唆され、また高温環境では胚乳におけるABA濃度が低下することから、登熟性と穂内穎果成長斉一性は何らかの関係が存在することが示唆された。本研究ではそのメカニズム解明には至らなかったが、穂内の穎果の成長斉一性の低いことが良登熟性に寄与することを明らかにし、また穎果の成長斉一性の低い系統を同定することができた。
術後下肢キネマティクスが再建前十字靱帯の機能に与える影響に関する運動解析学的研究

ACL再建術術後早期に歩行解析が可能なシステムの開発のため、装着型センサーによる評価システムを用いて反重力トレッドミル歩行時における下肢キネマティクスを評価した。その結果、免荷量の増加は遊脚期の股関節および膝関節の最大屈曲を有意に減少させることを明らかにした。次にACL再建術後症例に対しDrop vertical jumpにおける膝外反変化を検討し、患健側と性別に有意な交互作用を認め、女性症例では等速性膝伸展筋力の患健比と膝外反変化量との間には有意な相関関係を認めなかった。これは女性ACL再建術後症例のジャンプ着地における膝外反は大腿四頭筋筋力より姿勢制御機能に影響を受けることを示唆した。ACL再建術術後症例の歩行時の下肢三次元動作を臨床施設にて解析するため、装着型センサーによる三次元下肢キネマティクス評価システムの開発を行ってきた。その結果、角速度データを積分加算し下肢各セグメントの相対的角度を算出する本評価では角速度データの種々の誤差が時間経過とともに増大する「drift」を生じるという問題点が明らかとなった。以上の装着型センサーによる三次元下肢キネマティクス評価システムの「drift」を解決するため1)無限インパルス応答4次Butterworthフィルターによる角速度センサノイズの軽減、2)歩行時の角速度センサの信号から静止時の角速度センサのモード値のオフセット、3)double derivative and integration methodによる線形的driftの除去、4) 2つの姿勢での各加速度センサによる重力方向による各センサの初期相対角度設定の誤差軽減を行った。改良した本評価システムを用いて5例の健常者に対し、歩行時の下肢三次元動作を行った。その結果、股関節、膝関節、足関節の屈曲-伸展方向の「drift」は平均で2.1°, 33.3°, 15.6°減少した。以上より、改良した本評価システムを用いることにより、ACL損傷症例の歩行時における三次元下肢キネマティクスを医療機関診療レベルで評価が可能となった。術後早期のACL再建術術後症例に歩行時の下肢三次元動作を臨床施設にて解析するため、装着型センサーによる三次元下肢キネマティクス評価システムを用いて、反重力トレッドミル歩行時における三次元下肢キネマティクスを評価した。健常者15例に対し、反重力トレッドミル(Alter-G社、Fremont, California, USA)を使用し100%荷重、75%荷重、50%荷重の条件で歩行速度時速2.5kmにおける三次元下肢キネマティクスを計測し、反重力トレッドミルによる荷重の軽減が三次元下肢キネマティクスに与える効果を検討した。その結果、反重力トレッドミルによる荷重の軽減により、歩幅は有意に減少し、ケイデンス(歩行率)は有意に増加した。一方、股関節遊脚終期最大屈曲角度は100%荷重21.7±4.5°、75%荷重17.5±5.6°、50%荷重15.4±6.5°、膝関節遊脚期最大屈曲角度は100%荷重64.1±10.3°、75%荷重58.3±11.1°、50%荷重49.1±15.3°、足関節立脚終期最大背屈は100%荷重7.1±4.9°、75%荷重4.4±3.7°、50%荷重3.1±5.4°であり、これらパラメータは反重力トレッドミルによる荷重の軽減により有意に減少した。以上より、反重力トレッドミルによる荷重の軽減は、股関節、膝関節、足関節の歩行中の可動域変化を減少させ、その結果、歩幅を減少させることが明らかとなった。術後早期のACL再建術術後症例においては過大な膝関節の屈曲は移植腱の伸張や骨孔の拡大をもたらす可能性がある。したがって、装着型センサーによる三次元下肢キネマティクス評価システムと反重力トレッドミルを用いることにより、術後早期のACL再建術術後症例に歩行時の下肢三次元動作を安全に評価することが可能となった。本学大学病院での術前評価を受けるACL再建術症例が少なく、ACL損傷症例の歩行時における三次元下肢キネマティクス計測の施行ができなかった。術後早期のACL再建術術後症例に歩行時の下肢三次元動作を臨床施設にて解析するため、健常者対象25例に対し装着型センサーによる三次元下肢キネマティクス評価システムを用いて、反重力トレッドミル歩行時における三次元下肢キネマティクスを評価した。その結果、免荷量の増加に伴い,歩幅の減少と歩行率の増加とともに遊脚期における股関節屈曲,外転,膝関節屈曲は有意に減少させ,免荷量と歩行速度あるいは性別との間に有意の交互作用は認めなかった。したがって、装着型センサーによる三次元下肢キネマティクス評価システムと反重力トレッドミルを用いることにより、術後早期のACL再建術症例に歩行時の下肢三次元動作を安全に評価することが可能であることを明らかにできた。ACL再建術後症例17例に対しDrop vertical jump(DVJ)における前額面投影膝外反変化量の患健差および性差を検討した。その結果、再建側の膝外反変化量は女性10.5°,男性-3.4°,健側は女性4.3°,男性0.9°と患健側と性別の有意な交互作用を認めた。また、女性ACL再建術後症例に膝伸展筋力とDVJにおける膝関節運動の患健差の相関性を検討した結果、等速性膝伸展筋力の患健比(82±12%)とDVJにおける膝外反および屈曲変化量の患健差(外反-6.2±9.4°,屈曲7.9±6.0°)との間には有意な相関関係は認めなかった。

一方、DVJと単純な着地動作時の膝膝外反変化量を比較検討したところ、膝外反変化はDVJの術側が7.3±7.8°,非術側が8.8±9.9°,両脚着地の術側が2.9±8.3°,非術側が-4.1±11.2°とDVJで高値を示した。したがって、これら知見は女性ACL再建術後症例のDVJにおける膝外反変化は大腿四頭筋筋力より姿勢制御機能に影響を受けることを示唆していた。ACL再建術術後早期に歩行解析が可能なシステムの開発のため、装着型センサーによる評価システムを用いて反重力トレッドミル歩行時における下肢キネマティクスを評価した。その結果、免荷量の増加は遊脚期の股関節および膝関節の最大屈曲を有意に減少させることを明らかにした。次にACL再建術後症例に対しDrop vertical jumpにおける膝外反変化を検討し、患健側と性別に有意な交互作用を認め、女性症例では等速性膝伸展筋力の患健比と膝外反変化量との間には有意な相関関係を認めなかった。これは女性ACL再建術後症例のジャンプ着地における膝外反は大腿四頭筋筋力より姿勢制御機能に影響を受けることを示唆した。ACL再建術術後症例の歩行時の下肢三次元動作を臨床施設にて解析するため、装着型センサーによる三次元下肢キネマティクス評価システムの測定精度解析を行った結果、角速度データを積分加算し下肢各セグメントの相対的角度を算出する本評価では角速度データの種々の誤差が時間経過とともに増大する「drift」を生じるという問題点が明らかとなった。このため、本「drift」の軽減に対する対策を行わなければならなくなったため。次年度はACL再建術予定症例の入院および手術日程を事前に入手し、ACL再建術予定症例の術前および術後の歩行時の三次元下肢キネマティクス計測を装着型センサーによる三次元下肢キネマティクス評価システムを用いて実施する予定である。スポーツ整形外科平成26年度において行われた装着型センサーによる三次元下肢キネマティクス評価システムの「drift」の軽減の改良により、ACL損傷症例の歩行時における三次元下肢キネマティクスを医療機関診療レベルで評価が可能となった。今後、ACL損傷症例の歩行時における三次元下肢キネマティクスの解析に直ちに着手する予定である。また、本下肢キネマティクス評価システムの「drift」の軽減のための手法は角速度センサを積分加算する他の測定系においても応用可能であり、高い学術性を有することより、本改善手法を国際的にも広く発信する予定である。術前評価を受ける前十字靱帯再建術症例が少なく、前十字靱帯損傷症例に対する歩行時における三次元下肢キネマティクス計測の施行をしなかったため。平成26年度は装着型センサーによる三次元下肢キネマティクス評価システムの改良を行ったため、ACL損傷症例の歩行時における三次元下肢キネマティクス計測を行わなかったため。ACL再建術予定症例の術前および術後の歩行時の三次元下肢キネマティクス計測を装着型センサーによる三次元下肢キネマティクス評価システムを用いて実施するため、消耗品(光学マーカー、タイツ、シューズなど)のため、物品費として130,978円の追加使用予定である。
支援の社会学-ハンセン病経験者の生と自律に関する総合的実証研究-

本研究では、ハンセン病経験者の生活の全体像を把握し、その生を多面的に支えるために、ハンセン病経験者や関連諸主体に対する聞き取り調査を実施した。それらのデータをもとに、今まで十分な考察の対象となってこなかった退所者の生を、彼らの実存的苦悩に照準して、家族・職場・地域など社会生活における主要な〈居場所〉の意味を考察した。また、ハンセン病療養所の臨床実践を事例に、従来の画一的な専門職批判を超えた実践倫理の重要性を考究した。ハンセン病経験者の生を多面的に支える上で、本年度は当事者や家族の生活の全体像を把握するため、ハンセン病療養所に関与する諸主体に対する聞き取り調査・参与観察を、数箇所のフィールド(療養所・SHG・支援組織等)において実施した。また、退所者・弁護士・専門医等から紹介を受けて面接の許諾を得た、関西・東海・東日本地方に居住する退所者・非入所者・家族に半構造化インタビューを実施し、今まで十分な考察の対象となってこなかった退所者の生を、彼らの実存的苦悩に照準して、家族・職場・地域など社会生活における主要な〈居場所〉の意味を考察する論文を執筆した。その結果、退所者の回復の営みを社会的に支えていくためには、病歴を開示できる「親密な他者」との対話を通じて、日常生活の固有の〈居場所〉を、ハンセン病の苦しみを分かちあうコミュニティに変えていくことの重要性が示された。本研究の知見は、ハンセン病問題に限らず、特に当事者だけでなく家族全体が異なった立場で「問題」の当事者と見なされるような、強固なスティグマを有する障害や病いに苦しむ人々を社会的にケアしていく上で、重要な示唆を持つと考えられた。本年度は、2カ年の研究課題の最終年度であり、ハンセン病経験者の生活の全体像を把握し、その生を多面的に支えるために、ハンセン病療養所入所者・退所者・非入所者・家族、療養所看護師・ソーシャルワーカー・義肢装具士などに対する聞き取り調査と、退所者の会(SHG)の参与観察を、数箇所のフィールド(療養所・SHG・支援組織等)において継続的に実施した。それらのデータをもとに、日本ハンセン病学会・日本社会学会等で、退所者や非入所者の生の経験に関する研究報告を行い、内在的検討を加えた。また、今まで十分な考察の対象となってこなかった退所者の生を、実存的位相に照準して、家族・職場・地域といった社会生活における主要な<居場所>の意味を解明する論文を社会学系査読誌に発表した。そして、国際看護師協会の研究雑誌日本語版に生活者のケアに関する総説を発表し、ハンセン病療養所の臨床実践を念頭に、従来の画一的な専門職批判を超えた実践倫理の重要性を主張した。従来のハンセン病問題に関するほとんどの経験的研究が、当事者へのヒアリングをもとに、その主観的な病いの意味を明らかにすることに目的を限定化していたのに対し、本研究は当事者のみならず、援助職や支援者など当事者と日常の相互作用を行う諸主体をも調査の対象とし、フィールドをより深くかつ包括的に捉えたものである。当事者の生をより豊かに支えていくことを目標に置いている点が他の研究とは大きく異なり、重要な臨床的意義を持つと考えられた。
重イオンビーム発生装置の高度化に関する研究

本研究は重イオンビームの大強度化を目的とし、特に炭素ビームについて研究してきた。本年度は昨年度までの研究成果をもとに、大強度炭素イオンビーム加速を目指し、レーザーイオン源、ソレノイド磁石、RFQ線形加速器を利用した加速実験を行った。昨年度までの研究では、ソレノイド磁場をイオン源のプラズマ輸送部に印加すると加速ビーム電流が増大することを実証した。しかし、ソレノイド中を通過するレーザー生成プラズマの振る舞いを計測することができなかった。そこで、ソレノイド磁石内部に挿入可能でビーム軸垂直方向のイオン分布が測定可能な電流プローブを製作し、レーザー生成プラズマの振る舞いを磁場0350ガウスの条件で測定した。その結果、磁場印加時にプラズマはビーム軸垂直方向に閉じ込められるが、ビーム軸方向には膨張を続けることが明らかになった。この結果はレーザーイオン源の特徴である高ピーク電流を保ちながらビームの長パルス化が可能であることを意味する。また、ソレノイド磁石下流ではイオンは電子の動きに追随し、ビーム軸垂直方向に発散する傾向にあることが判明した。次に、RFQ線形加速器とイオン源を炭素4価イオン用の条件に合わせて炭素ビーム加速実験を行った。その結果、ソレノイド磁場を900ガウスに設定した状態で、ピーク電流35.8mA、パルス幅2.1μs、粒子数1.2×10^11個の炭素4価イオンビーム加速に成功した。同様に、炭素6価イオン用条件でも加速実験を行った結果、ピーク電流32.8mA、パルス幅1.6μs、粒子数5.2×10^<10>個の炭素6価イオンビーム加速に成功した。これらの加速ビームは、従来の最大ピーク電流であり、ビームパルス幅は4倍程度増加している。以上のように、本研究によりレーザーイオン源で高ピーク電流を保ちながら長パルス化を行う方法を実証し、数十mA以上の重イオンビームが唯一加速可能なレーザーイオン源の高度化が達成された。本年度は研究を遂行するために必要な高周波四重極型線形加速器(RFQ線形加速器)及び加速器用高周波電源の調整と、イオン源部分の改良を行った。同時にイオン源テストベンチを用いて、レーザー照射によるプラズマ発生機構の理解を目指し低価数イオン発生時のレーザーパワー密度と発生するプラズマの関係を実験により明らかにした。高周波電源について、加速ビームの安定化のため高周波電源-加速器共振器間にサーキュレーターを設置した。イオン源を接続せずに加速空洞のみの状態で共振器のコンディショニングを行い、150kW以上の共振器への投入電力を達成した。イオン源部分の改良については、イオン源へのレーザー入射方法をイオン源後方からの入射からイオン源側面からの入射に変更した。これまではレーザー光路の存在でターゲットの可動範囲が限定されていたが、この改良によりターゲット可動範囲が従来の3倍程度に広がり、長時間運転が可能となった。その後イオン源をRFQ線形加速器に接続し、イオン源高圧部への電圧印加試験を行った。それにより既定の60kVが印加されることを確認した。炭素ターゲットを用いて加速試験を行い、イオン源、加速共振器、分析系が正常に動作することを確認した。以上の加速実験用装置の改良と同時にイオン源テストベンチを用いて発生価数と密接に関係するレーザーパワー密度を変化させながら炭素、アルミニウム、ケイ素、鉄、タンタルと金のプラズマを分析し、レーザーパワー密度と発生粒子数、価数の関係を明らかにした。次にレーザー照射条件を金の1価イオンに最適化した状態でペッパーポットエミッタンス測定器を用いてエミッタンスを測定し、0.0025pi mm mradの規格化RMSエミッタンスを得た。レーザーイオン源は1回のレーザー照射で1つのイオンビームを取り出すことができるパルス重イオン源である。本研究ではレーザーイオン源で発生したプラズマを直接RFQ線形加速器に入射させる直接プラズマ入射法を用いて重イオンビームを加速している。加速に成功しているパルス幅は1マイクロ秒程度であるが、シンクロトロン等への応用を考えるとより長いパルス幅のイオンビームを供給できることが必要である。そこで本年度は加速ビームの長パルス化、及びRFQへの効率的な入射条件を求めることを目指し研究を行った。レーザー生成プラズマはターゲットの垂直方向にドリフトしつつ断熱膨張する。パルス幅はドリフト距離に比例して増加し、ドリフト距離の3乗に反比例して電流量が低下する。そのためドリフト距離を制御することでRFQへの入射電流量とパルス幅を制御することができる。30cm,62.5cm,91cmの3通りのドリフト距離を用いて炭素6価イオンビーム加速実験を行い、入射電流量と入射効率についての関係を探った。その結果、入射電流量を制御することでRFQへの入射効率を大幅に改善できることを実験的に示した。加速ビームの長パルス化を行うにはドリフト距離を長くする必要であるが、レーザー生成プラズマとドリフト距離には前述した関係があるため、ドリフトさせると引き出せるイオン粒子数が低下してしまう。そのためパルス幅には限界がある。そこでレーザー生成プラズマをソレノイド磁場で閉じ込めることで粒子数を損なうことなく長パルス化を行うことを目指した。ソレノイド磁石を製作してイオン源テストベンチに挿入し、ソレノイド磁石によりプラズマが閉じ込め得ることを実験的に示した。その後、炭素6価イオン加速実験によりソレノイド磁石を使うことでパルス幅を損なうことなく電流量が増加することを示した。

これはドリフト距離を長くしても電流量が低下せず1パルス中の粒子数が低下しないことと同値である。本研究は重イオンビームの大強度化を目的とし、特に炭素ビームについて研究してきた。本年度は昨年度までの研究成果をもとに、大強度炭素イオンビーム加速を目指し、レーザーイオン源、ソレノイド磁石、RFQ線形加速器を利用した加速実験を行った。昨年度までの研究では、ソレノイド磁場をイオン源のプラズマ輸送部に印加すると加速ビーム電流が増大することを実証した。しかし、ソレノイド中を通過するレーザー生成プラズマの振る舞いを計測することができなかった。そこで、ソレノイド磁石内部に挿入可能でビーム軸垂直方向のイオン分布が測定可能な電流プローブを製作し、レーザー生成プラズマの振る舞いを磁場0350ガウスの条件で測定した。その結果、磁場印加時にプラズマはビーム軸垂直方向に閉じ込められるが、ビーム軸方向には膨張を続けることが明らかになった。この結果はレーザーイオン源の特徴である高ピーク電流を保ちながらビームの長パルス化が可能であることを意味する。また、ソレノイド磁石下流ではイオンは電子の動きに追随し、ビーム軸垂直方向に発散する傾向にあることが判明した。次に、RFQ線形加速器とイオン源を炭素4価イオン用の条件に合わせて炭素ビーム加速実験を行った。その結果、ソレノイド磁場を900ガウスに設定した状態で、ピーク電流35.8mA、パルス幅2.1μs、粒子数1.2×10^11個の炭素4価イオンビーム加速に成功した。同様に、炭素6価イオン用条件でも加速実験を行った結果、ピーク電流32.8mA、パルス幅1.6μs、粒子数5.2×10^<10>個の炭素6価イオンビーム加速に成功した。これらの加速ビームは、従来の最大ピーク電流であり、ビームパルス幅は4倍程度増加している。以上のように、本研究によりレーザーイオン源で高ピーク電流を保ちながら長パルス化を行う方法を実証し、数十mA以上の重イオンビームが唯一加速可能なレーザーイオン源の高度化が達成された。
培養細胞シートを用いた中耳粘膜再生の試み-移植用シートの開発とその臨床応用-

中耳真珠腫や癒着性中耳炎などの中耳疾患において術後の再発や鼓膜の再癒着の予防を目的として、温度応答性培養皿を用いて粘膜上皮培養細胞シートを作製し、シート移植による中耳粘膜の再生を試みた。動物実験では良好な結果が得られ、中耳粘膜の再生を促す移植材料として粘膜上皮細胞シートは有用であると考えられ、今後の新たな中耳手術の治療法として期待できた。中耳真珠腫や癒着性中耳炎などの中耳疾患においては、術後に中耳腔及び乳突腔の正常粘膜を保存することが困難な症例も多く、良好なガス換気が失われ、術後鼓膜の再癒着や中耳真珠腫の再発が起こりやすい。このような症例に対して術後の露出した骨面上に早期に粘膜を再生させることが癒着や再発の予防になると考えられる。これまで中耳手術においては、粘膜の再生を期待して鼻粘膜、頬粘膜移植やシリコン膜、ゼルフォームなどが使用されてきたが充分な結果は得られていない。ヒトにおける培養細胞シートの開発及びシート移植が可能となれば中耳粘膜の再生が促進され、これまでコントロールすることが困難であった肉芽増生や骨増生が抑制されることが期待できる。倫理委員会の承認及び本人の同意を得たうえでヒト中耳粘膜を術中に採取し、explant culture法にてI型コラーゲンをコーティングした培養皿に初代培養を行い、中耳粘膜上皮細胞を分離した。分離した細胞を温度応答性培養皿上で約2週間培養し細胞シートを作製した。作製した人工中耳粘膜をH-E染色にて形態観察を行ったところ、ほぼ単層の上皮様構造が認められた。将来的に中耳粘膜からの粘膜採取が困難な場合や採取できる粘膜が中耳の場合は微量である点などを考え、同時に鼻粘膜細胞シートの応用も検討した。倫理委員会の承認及び本人の同意を得たうえでヒト下甲介粘膜を術中に採取し、同様に細胞シートの作製を行い、H-E染色にて形態観察を行った。人工中耳粘膜と同様にほぼ単層の上皮様構造が認められた。また、走査型電子顕微鏡(SEM)では微揉毛はほとんど観察できなかったが、多角型の細胞配列を認め、透過型電子顕微鏡(TEM)ではtight junction、desmosomeなどが認められ、細胞間接着の存在を確認した。今までに我々は倫理委員会の承認及び本人の同意を得たうえで、ヒト下甲介粘膜を術中に採取し、温度応答性培養皿を用いた細胞シートを作製に成功している。この鼻粘膜細胞シートの将来的な中耳腔や乳突腔への移植に向けて、家兎を用いた動物での移植実験で検討を行った。動物実験委員会の承認のもと家兎の鼻粘膜細胞シートを同様に作製し、同一家兎の中耳骨胞へ移植を行った。対象を粘膜除去のみ行い細胞シートの移植を行わない粘膜単独除去群とする。約8週間後に機能的検討として中耳腔全圧最大値を測定し、さらにCTでの骨増生の評価と粘膜再生に関して組織学的検討を加えた。粘膜除去群に比しシート移植群においてはCTおよび組織学上、骨増生が抑えられ、また中耳腔全圧最大値も高値であり、ガス換気能も良好と考えられた。このような症例に対して術後の露出した骨面上に早期に粘膜を再生させることが癒着や再発の予防になると考えられ、培養細胞シートの開発及びシート移植が可能となれば中耳粘膜の再生が促進され、これまでコントロールすることが困難であった肉芽増生や骨増生が抑制されることが期待できる。家兎を用いた動物実験では、動物実験委員会の承認のもと温度応答性培養皿を用いて家兎の鼻粘膜上皮細胞シートを作製し、同一家兎の中耳骨胞へ移植を行った。対象を粘膜除去のみ行い、細胞シートの移植を行わない粘膜単独除去群とし、約8週間後に機能的検討として中耳腔全圧最大値を測定し、さらにCTでの骨増生の評価と粘膜再生に関して組織学的検討を加えた。

粘膜除去群に比しシート移植群においてはCTおよび組織学上、骨増生が抑えられ、また中耳腔全圧最大値も高値であり、ガス換気能も良好と考えられた。動物実験では良好な結果が得られ、今後の臨床応用に向け我々は倫理委員会の承認及び本人の同意を得たうえで、ヒト下甲介粘膜を術中に採取し、温度応答性培養皿を用いた鼻粘膜上皮細胞シートを作製した。ヒト下甲介粘膜を術中に採取し、同様に細胞シートの作製を行った。H-E染色ではほぼ単層の上皮様構造が認められ、走査型電子顕微鏡(SEM)では微揉毛はほとんど観察できなかったが、多角型の細胞配列を認め、透過型電子顕微鏡(TEM)ではtight junction、desmosomeなどが認められ、細胞間接着の存在を確認した。
眼疾患モデルとしての変異マウス・アラキドン酸と血小板活性化因子の阻害

1.角膜・網膜血管新生:血小板活性化因子(PAF)受容体ノックアウトマウスおよび過剰発現マウスにアルカリ障害およびアルカリより弱い上皮障害モデルによって角膜血管新生を誘導する実験を行った。様々な条件で比較したが、野生型とノックアウト、過剰発現マウスの間に血管新生の有意な差を認めなかった。2.実験的ぶどう膜炎:PAF受容体ノックアウトマウスのミクログリアを用いて、PAFに対する反応を検討した。ミクログリアはPAFに対してMAPKの活性化を伴う走化性を示した。またPAFによりサイトカイン、神経栄養因子の誘導がみられたが、その反応はむしろ神経保護的に働くことが示唆された。PAF受容体ノックアウトマウス、細胞質型フォスフォリパーゼA2(cPLA2)のノックアウトマウスでブドウ膜炎モデルに適すバックグラウンド(BALB/c)に戻し交配を行う計画であったが終了しなかった。一方このマウスを用いてPAF受容体とぶどう膜炎の発症の関係を探るモデルとして、LPSを用いた実験的ぶどう膜炎を発症させたが、血小板活性化因子(PAF)受容体ノックアウトマウスおよび過剰発現マウスで差が見られなかった。3.網膜光障害:PAF受容体ノックアウトマウスおよび細胞質型フォスフォリパーゼA2(cPLA2)のノックアウトマウスに様々な条件で光照射をおこなった。光照射後によって野生型、PAF受容体およびcPLA2ノックアウトマウスの双方に視細胞のアポトーシスが誘導された。光照射後の後極部網膜外顆粒層のTUNEL陽性細胞の数を計測したところ、経時変化としては統計学的な有意差を認めなかった。光照射後4日以降、視細胞層はPAF受容体ノックアウトマウスで野生型に比べて有意に温存されていた。このことより、PAF受容体は傷害された視細胞の貧食処理に関与すると考えられた。一方cPLA2ノックアウトマウスに関しては野生型と視細胞の障害は差がなかった。4.網膜変性症:遺伝的網膜変性モデルマウスであるC3H(rd)とcPLA2あるいはPAF受容体のノックアウトマウスを掛け合わせる戻し交配を引き続き行う予定であったが、種々の事情により中止している。研究実績の概要1.角膜・網膜血管新生:血小板活性化因子(PAF)受容体ノックアウトマウスにアルカリ熱傷によって角膜血管新生を誘導する実験を行ったが、野生型とノックアウトマウスの間に有意な差を認めなかった。現在、別の条件で血管新生実験を行っている。2.実験的ぶどう膜炎:PAF受容体ノックアウトマウス、細胞質型フォスフォリパーゼA2,(cPLA2)のノックアウトマウスでブドウ膜炎モデルに適す遺伝的バックグラウンド(BALB/c)に戻し交配を行っている。交配が完了したマウスを月いてヘルペスウイルスを抗原としたブドウ膜炎モデルを作る予定である。3.網膜光障害(1) PAF受容体ノックアウトマウスを用いて網膜光障害モデルを作成した。(2)方法:PAF受容体ノックアウトマウスに5000ルックス3時間の光照射をおこなった。アポトーシスは形態学的変化の解析、TUNEL法、DNA ladder法によって検出した。同時にアポトーシス関連の遺伝子発現について、in situ hybridization(ISH)法によって解析した。(3)結果:光照射後によって野生型、ノックアウトマウスの双方に視細胞のアポトーシスが誘導された。

光照射後24時間後の後極部網膜外顆粒層のTUNEL陽性細胞の数を計測したところ、統計学的に有意な差は認められなかった。ISH法により遺伝子型に関わらず視細胞にc-fosの高発現が認められた。次に光照射96時間後の網膜外顆粒層の厚さを計測したところ、野生型がノックアウトマウスと比べて有意に薄くなっていた。このことより、PAF受容体は視細胞の光誘導性アポトーシスそのものに関与しないが、アポトーシス細胞の貪食処理に関与する可能性が示唆された。4.網膜変性症:遣伝的網膜変性モデルマウスであるC3H(rd)とCPLA2あるいはPAF受容体のノックアウトマウスを掛け合わせる戻し交配を行っている。今後、戻し交配が完了したマウスを用いて網膜の変性状態の詳細な検討そ予定している。1,角膜・網膜血管新生:血小板活性因子(PAF)受容体ノックアウトマウスにアルカリ障害によって角膜血管新生を誘導する実験を行った。様々な条件で比較したが,野生型とノックアウトマウスの間に有意な差を認めなかった。現在,さらに弱い上皮障害モデルで検討している。2,実験的ぶどう膜炎:PAF受容体ノックアウトマウス,細胞質型フォスフォリパーゼA2 (cPLA2)のノックアウトマウスでブドウ膜炎モデルに適すバックグランド(BALB/c)に戻し交配を行っている。このマウスを用いてヘルペスウイルスを抗原としたブドウ膜炎モデルを作成し,検討をすすめている。3,網膜光障害(1) PAF受容体ノックアウトマウスを用いて網膜光障害モデルを作成した。(2)方法: PAF受容体ノックアウトマウスに様々な条件で光照射をおこなった。アポトーシスは形態学的変化の解析,TUNEL法,DNAラダー法によって検出した。同時にアポトーシス関連の遺伝子発現について,in situ hybridization (ISH)法によって解析した。(3)結果:光照射後によって野生型,ノックアウトマウスの双方に視細胞のアポトーシスが誘導された。光照射後の後極部網膜外顆粒層のTUNEL陽性細胞の数を計測をしたところ,経時変化としては統計学的な有意差を認めなかった。光照射後4日以降,視細胞層はノックアウトマウスで野生型に比べて有意に温存されていた。このことより,PAF受容体は傷害された視細胞の貪食処理に関与すると考えられた。ミクログリアはPAF受容体を高発現し,かつ貪食能を有するので,ミクログリアの分布パターンと活性に関して比較検討している。4,網膜変性症:遺伝的網膜変性モデルマウスであるC3H(rd)とcPLA2あるいはPAF受容体のノックアウトマウスを掛け合わせる戻し交配を引き続き行っている。戻し交配が完了したマウスを用いて網膜の変性状態の検討を進めている。1.角膜・網膜血管新生:血小板活性化因子(PAF)受容体ノックアウトマウスおよび過剰発現マウスにアルカリ障害およびアルカリより弱い上皮障害モデルによって角膜血管新生を誘導する実験を行った。様々な条件で比較したが、野生型とノックアウト、過剰発現マウスの間に血管新生の有意な差を認めなかった。