hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
就活期から入社後に受けるネガティブフィードバックが職務態度や対人関係に与える効果

ただし、失敗から学ぶ動機づけが高い人においては、NFの頻度が満足度を低めるという否定的な効果は見られなかった。また、1度のNFが受け手に与える影響は、表現方法によって肯定的にも否定的にもなることが示された。なお、平成23年度(入社前)と今年度(入社後)の双方に回答した対象者の変化として、1能力の自己評価は低下すること、2職業価値観の中で、仕事の達成や職場の人間関係を重視する程度は低下し、プライベートを重視する程度が高まること、3上司からのフィードバックに対する期待頻度は下がることなどが分かった。◆実験結果:平成23年度の参加者のデータに、今年度補充した参加者を含めて分析を行った。就職の模擬面接として主体性と協調性について自己PRした参加者に対し、主体性についてNFを与え、その表現方法を1NFのみ、2PFを加える、3アドバイスを加えるの3パターンで操作した。その結果、参加者の面接後の感情状態やフィードバックおよび面接者に対する評価には、表現方法による違いは見られなかったが、3人の面接官による違いが示された。面接場面においては、表現方法よりも送り手の要因が重要であることが示唆された。研究計画で示した調査、および、インタビューは予定通り実施したが、実験の参加者数が計画より少なく、2012年度にデータを補充する必要があるため。24年度が最終年度であるため、記入しない。2012年度は全てのデータを取り終え、その分析に基づき各研究法で得られた知見を有機的に関連づけることを目標とする。関連付けを進めるために、本研究で扱った変数のみならず、その時代背景としての今日の社会情勢や大学生の価値観について、より広い視点で情報収集し、本研究の知見の解釈に役立てる。2011年度の実験の参加者数を補充する必要があり、研究計画を変更し、11月頃に参加者募集を行う。
電気化学活性プライマーを用いた新しい遺伝子定量法の開発

遺伝子の欠失や重複を正確かつ効率的に検出する手法の開発は,遺伝子診断や遺伝子治療の観点から重要である.しかし,これまでの手法は,厳密な定量性は与えていなかった.従って,保因者が女性で2本あるX染色体の片方に欠失が生じた場合(この場合は,見かけ上異常は現われず,その量的変化のみである)これまでの手法による診断は困難であった.ところで反応サイクルごとに遺伝子を倍増するポリメラーゼ連鎖反応(PCR)は遺伝子量とPCRサイクル数に定量性が期待される.しかし,これまでの研究からPCRサイクルの初期段階での定量化は高いがPCR反応サイクルを重ねれば定量性が悪くなることが明らかとなっている.これを克服するのは増幅サイクルの低い段階での検出である.しかし,PCRの特徴である高感度性は失われる.本研究者は,これまで電気化学活性基を有するオリゴヌクレオチドを合成し,これをDNAプローブとして高速液体クロマトグラフィー(HPLC)-電気化学検出器(ECD)を用いることにより高感度で迅速な遺伝子予定量法を開発した。この電気化学活性化オリゴヌクレオチドがPCRのプライマーとして利用できればこれまでの定量化PCRの問題点を抜本的に解決できるものと期待される.従って本研究では,電気化学活性化オリゴヌクレオチドをPCRプライマーとして用い,PCR-HPLC-ECDシステムによる遺伝子の迅速定量法を確立することを目的とした.当該年度において本定量法が実現可能であることを明らかにし、伴性劣性遺伝形式をとるDuchenne型筋ジストロフィー(DMZ)の保因者診断に応用した.これによって細胞一個からの遺伝子検出に成功した.これらの結果は,遺伝子診断に革命的な手法をもたらすものと期待している.遺伝子の欠失や重複を正確かつ効率的に検出する手法の開発は,遺伝子診断や遺伝子治療の観点から重要である.しかし,これまでの手法は,厳密な定量性は与えていなかった.従って,保因者が女性で2本あるX染色体の片方に欠失が生じた場合(この場合は,見かけ上異常は現われず,その量的変化のみである)これまでの手法による診断は困難であった.ところで反応サイクルごとに遺伝子を倍増するポリメラーゼ連鎖反応(PCR)は遺伝子量とPCRサイクル数に定量性が期待される.しかし,これまでの研究からPCRサイクルの初期段階での定量化は高いがPCR反応サイクルを重ねれば定量性が悪くなることが明らかとなっている.これを克服するのは増幅サイクルの低い段階での検出である.しかし,PCRの特徴である高感度性は失われる.本研究者は,これまで電気化学活性基を有するオリゴヌクレオチドを合成し,これをDNAプローブとして高速液体クロマトグラフィー(HPLC)-電気化学検出器(ECD)を用いることにより高感度で迅速な遺伝子予定量法を開発した。この電気化学活性化オリゴヌクレオチドがPCRのプライマーとして利用できればこれまでの定量化PCRの問題点を抜本的に解決できるものと期待される.従って本研究では,電気化学活性化オリゴヌクレオチドをPCRプライマーとして用い,PCR-HPLC-ECDシステムによる遺伝子の迅速定量法を確立することを目的とした.当該年度において本定量法が実現可能であることを明らかにし、伴性劣性遺伝形式をとるDuchenne型筋ジストロフィー(DMZ)の保因者診断に応用した.これによって細胞一個からの遺伝子検出に成功した.これらの結果は,遺伝子診断に革命的な手法をもたらすものと期待している.
腹腔鏡下手術支援ロボットによる触診システムの開発

本研究では、腹腔鏡下手術支援ロボットを用いて、がん細胞と正常な細胞を識別できる触診システムを開発する。はじめに、触覚が接触物体の硬さの識別に与える優位性、および術者に触覚フィードバックを行うのに適した部位について、実験により検証する。次に、手術器具を腹部に挿入するためのアクセスポートが手術器具に与える負荷を除去することにより、接触物体の硬さのみを術者に提示するシステムを構築する。さらに、術者に触覚および力覚をフィードバックする装置を構築し、硬さの異なる数種類の試料の識別実験を行い、開発した触診システムの有用性を定量的に評価する。
シナプス逆行性情報伝達の解明

本研究は樹状突起スパインの形態変化による機械的刺激が、シナプス後部から前部へと可塑性情報を伝達する可能性について検討した。まず、シナプス前部機能をFRET法により定量化する蛍光プローブを開発し評価を行った。このプローブ(iSLIM)によってシナプス前部機能の指標であるSNARE複合体形成を検出し、シナプス前部機能を評価できることを海馬培養スライス標本において我々は示した。次にsucrose高浸透圧刺激などの機械的刺激がプレシナプスに加わった際のシナプス前部機能の変化をこの機能プローブを用いて評価した。その結果、機械的刺激によりシナプス前部機能の変化が生じるという結果を得た。シナプス可塑性は、記憶・学習の神経基盤であり、特に、大脳錐体細胞のスパインシナプスでは樹状突起スパインの形態変化と連動していることが知られている。シナプス可塑性はシナプス後部(スパイン)機能のみが変化することでも成立するものの、シナプス前部(軸索ブトン)機能と後部の機能がどのように協調するかについては十分解明されていない。本研究課題では、スパインからシナプス前部への可塑性情報の伝達について解析する。本年度は、実験系の構築を主として実施した。まずシナプス前部機能を調べるため、カルシウム感受性色素タンパク質GCaMP6を発現する発現ベクターを作製した。シナプス前部からシナプス小胞が放出されたときに生じるスパイン内カルシウム濃度上昇をこのGCaMP6を用いて検出できることを確認した。また、GCaMP6を発現するAAVベクターも作製し、シナプス前部活動も可視化できるようになった。次にFRET (Forster resonance energy transfer) / FLIM (Fluorescence lifetime image microscopy)法を用いてプレシナプス機能を定量化するプローブの評価を行った。神経伝達物質放出確率上昇に関連するSNARE複合体形成を検出するプローブ(iSLIM)により、シナプス前部機能をシナプスを動作させることなしに可視化することが可能となった。iSLIMを用いることで、スパイン頭部体積とそのスパインに対応するシナプス前部機能が比例的な関係にあることが明らかとなった。これはスパインとシナプス前部が協調的に動作していることを示唆する。以上の結果を日本神経科学学会にて報告した。記憶・学習の基礎過程であるシナプス可塑性は、誘導から数時間程度の分子シグナル過程が特に明らかにされつつある。シナプス後部であるスパインは可塑性の誘導によって形態が変化するが、この形態変化による機械的な刺激そのものがシナプス後部から前部へと比較的早く可塑性の情報を伝達し、短時間に成立する記憶学習に貢献するという仮説を我々は考えている。海馬培養スライス標本においてシナプス前部機能を可視化してみると、シナプス前部のふくらみ(synaptic bouton)の一部分にSNARE複合体形成の高い場所が存在することがわかった。我々はこの場所はactive zone(シナプス間隙に面して神経伝達物質を放出する部分)を含む領域であると考え、このプローブよって2つの神経細胞がシナプス結合を形成していることを判定可能か否かを試みた。予備的な実験では、シナプス後部局在タンパク質PSD95と、シナプス前部機能プローブは、近接して局在する場合が観察された。このことから、このプローブはシナプス形成判定に有用であると考えている。光学顕微鏡によるシナプス形成の判定は、コネクトミクス(神経結合の網羅的解析)にも応用可能で、生体への適用も含めて今後も検討を継続する。1.実験系の確立:27年度も前年度に引き続き実験系の再現性・定量性の向上を試み、FRET /FLIMによるシナプス前部機能プローブ(iSLIM)に関して論文発表を行った。本プローブによりシナプス前部の光学顕微鏡による機能測定が可能となった。また、使用している顕微鏡は、青ー赤領域(460-630 nm)の蛍光を検出できたが、新たに赤外の蛍光を検出できるような光学系を追加した。これによって、プローブ由来の蛍光以外の光学的情報をより多く同時に取り込むことが可能となった。2.シナプス前部機能プローブ(iSLIM)の評価:今回掲載された論文において、我々は、SNARE複合体を形成する操作を行うとこのプローブの蛍光寿命が変化することを示し、培養海馬スライス標本錐体細胞における計測値から、静止状態におけるdockedシナプス小胞あたりのSNARE複合体の数を試算することにも成功した。また、このプローブはSNAREタンパク質のノックダウンをレスキューすることができたことから由来するSNAREタンパク質の機能をこのプローブが保持していることも確認した。このプローブにより、興奮性神経細胞のシナプス小胞とインシュリンを分泌するβ細胞の分泌様式の違いも明らかにできた。3.シナプス前部機能プローブを用いたシナプス結合の判定:今回開発したプローブを利用して多くの神経線維の重なりにおいてシナプス結合の有無を評価する試みを実施した。シナプス後部のみを標識するためにPSD95-mCherryタンパク質を樹状突起スパインに発現させ、SNARE複合体を検出するシナプス前部機能プローブをシナプス前部に発現させた。予備的な実験では、シナプス後部局在タンパク質PSD95と、シナプス前部機能プローブは、近接して存在する場合が観察された。このことから、このプローブはシナプス形成判定に有用と考えている。記憶・学習による神経回路の再編において、シナプスにおける伝達効率の変化(シナプス可塑性)が必須と考えられているが、興奮性シナプスの可塑性にはシナプス後部である樹状突起スパインの形態変化(あるいはスパイン新生)が伴うことが示されている。

本研究課題では、その形態変化による機械的刺激がシナプス後部から前部へと可塑性情報を伝達する可能性を検討した。まず、シナプス前部機能を定量化する蛍光プローブを開発し評価を行った。このプローブ(iSLIM)は神経伝達物質放出確率に関連するSNARE複合体形成を検出するために、それぞれ蛍光分子に融合されたsyntaxin分子とVAMP2分子で構成される。プローブの蛍光分子のFRET (Forster resonance energy transfer)を検出することによりシナプス前部機能を検討した。海馬培養スライス標本においてシナプス前部機能をこのプローブを用いて可視化してみると、シナプス前部のふくらみ(synaptic bouton)の一部分にSNARE複合体形成の高い箇所が存在することがわかった。また、スパイン頭部体積とそのスパインに対応するシナプス前部機能は比例的な関係を有していた。さらに、シナプス後部局在タンパク質PSD95と、シナプス前部機能は、近接して局在する場合が観察された。以上からこのプローブの値とシナプス前部機能との相関が示された。sucrose高浸透圧刺激によるプレシナプス細胞膜への機械的刺激によりシナプス前部機能の上昇が観察された。また、可塑性刺激によるスパイン体積増加などの機械的刺激によりシナプス前部機能の変化が生じるという予備的なデータを得ている。また、本年度、シナプス可塑性刺激による細胞骨格制御タンパク質cofilinのリン酸化と可塑性の広がりに関連について論文報告した。本研究は樹状突起スパインの形態変化による機械的刺激が、シナプス後部から前部へと可塑性情報を伝達する可能性について検討した。まず、シナプス前部機能をFRET法により定量化する蛍光プローブを開発し評価を行った。このプローブ(iSLIM)によってシナプス前部機能の指標であるSNARE複合体形成を検出し、シナプス前部機能を評価できることを海馬培養スライス標本において我々は示した。次にsucrose高浸透圧刺激などの機械的刺激がプレシナプスに加わった際のシナプス前部機能の変化をこの機能プローブを用いて評価した。その結果、機械的刺激によりシナプス前部機能の変化が生じるという結果を得た。1.実験系の確立:本年度は、スパイン内カルシウムイメージングによる、シナプス前部からの神経伝達物質放出を検出する実験系を立ち上げ、再現性・定量性の向上を目論見た。低入力レーザーパワーによって撮像回数を増加させることにより再現性・定量性が向上した。グルタミン酸イメージング(Marvin JS et al. (2013))によるシナプス前部活動の検出も成功したが、検出感度を考慮して現時点ではカルシウム感受性色素であるGCaMP6sを用いることとした。また、FRET /FLIMプローブ(iSLIM)の細胞内発現を確認し、プレシナプス機能とスパイン体積との間に比例的な関係があることを見出し、日本神経科学学会にて報告した。この項目については遅れは目立っていない。
DNAポリメラーゼ分子と異る校正に係わるヌクレアーゼの細胞内存在様式と加齢変化

遺伝情報が正確に伝達されることは、生物にとって最も重要な事の一つであり、DNA合成の校正はこれと深く係わっている。DNApolymerase alpha,beta,gammaは3′->5′exonuclease活性を分子内に持たないが、別の分子である3′->5′exonucleaseとともに校正しながらDNA合成を行う事を示唆してきた。本年度は、この校正に関与する3′->5′exonucleaseの細胞内存在様式、DNApolymerase alpha等との係わりを明らかにし、これらの点が加齢によって変化するか否かを検討することを目的とした。DNApolymerase alpha活性の高い術後48時間のrat再生肝を材料とし、核分画と細胞質分画をLieberman等の方法で分離した。さらに、この核分画を超音波破砕、遠心して核質分画を得た。核分画の庶糖密度勾配遠心法や核質分画及び細胞質分画のカラムクロマト法での解析により、核中に3′->5′exonuclease及びDNApolymerase alphaとも存在している事が明らかになった。低塩濃度での庶糖密度勾配遠心では、3′->5′exonuclease及びDNApolymerase alphaは同一画分に存在するので、両者は直接または別の蛋白等を介してゆるくassociateしていると考えられる。一方、これら3′->5′exonuclease及びDNApolymerase alpha,deltaともPhosphocelluloseカラムクロマト法で分離出来る。これは、3種の酵素共、異なる分子である事を示し、校正に係わる3′->5′exonucleaseはDNApolymerase deltaではないかという疑問を打ち消すものである。同様の結果が、生後24月齢rat再生肝でも見られた。このことは、DNApolymerase alphaと3′->5′exonucleaseの細胞内存在様式は加齢に伴う変異出現に関係なく、すでに報告したように、DNApolymeraseの忠実度の低下や、3′->5′exonuclease量の低下によるDNA合成での校正活性の低下が、加齢に伴う変異出現に関与すると考えられる。
腸管出血性大腸菌におけるプロファージ間相互作用と宿主菌進化へのインパクトの解明

申請者は、腸管出血性大腸菌(EHEC)のゲノム内において、ファージが別のプロファージゲノム内に溶原化していることを新たに見出した。本研究の目的は、新規の「ファージ内ファージ」に関して、ファージ共存パターンを解析し、新たなファージ間相互作用を明らかにするとともに、その形質変化への影響を解明することにある。本年度は、溶原化ファージの2つのパターンのうち、Stx2ファージが重複し、さらに片方のStx2ファージが別のプロファージゲノム(P0)内に組み込まれていたEHEC株を用いた解析を主に行った。本菌株に重複していたStx2ファージ、およびP0ファージを脱落させた株を作製した(それぞれDP1,DP2,DP0とする)。各株のStx2産生量を測定して野生型と比較すると、いずれの欠損株についても野生型の約半分のStx2産生量を示した。このことから、DP0がDP1やDP2と同程度のStx2産生量となることが明らかとなり、「ファージ内ファージ」がStx2産生量に何らかの影響を与えていることが示唆された。予想外の出来事として、本解析に使用していたStx2産生量の測定系(Sandwich ELISA)に関係する試薬が手に入らなくなったため、新たにStx2産生量の測定系を樹立した。新たな測定系により、より簡便なStx2産生量の測定が可能となった(詳細は後述の現在までの進捗状況の理由の項目を参照)。また、もうひとつの新規溶原化ファージパターンである、ラムダ型サテライト様ファージに関して、類似した溶原化パターンをこれまでに見出した系統とは異なる系統に属する大腸菌株のゲノムより見出した。このことは今後の実験に使用できる菌株が増えただけではなく、見出した現象の一般性を高めることができるという点で非常に重要であると考えられた。本解析において重要なStx2の産生性を評価する方法として、Sandwich ELISAによる測定系を利用していたが、抗体が固層化されたELISAプレートを入手することができなくなったため、新たにStx2の測定系を構築する必要に迫られた。このため、当初予定していた研究計画より少し遅れている。一方で、新たな系はHTRF (Homologous Time Resolved FRET)を測定原理とし、標識抗体とサンプルを混合するだけで、サンプル特異的なシグナルを得ることができる。これにより、簡便に数多くのサンプルを処理することができるようになり、今後より効率的にデータを取得することが可能になると考えられる。また、Stx2ファージが別のプロファージに溶原化していることで生じるStx2ファージの誘導効率に関して評価するためのファージ誘発条件を確定させ、さらに、「ファージ内ファージ」がStx2産生量に影響を与えていることが示唆されるデータも得られた。ラムダ型サテライト様ファージに関しても、これまでとは別の大腸菌系統に属する研究室保存株より新たに類似した溶原化パターンを見出した。以上のことから、研究計画自体は多少遅れているものの、ある程度順調に進展していると考えている。Stx2ファージの「ファージ内ファージ」に関して、ファージを誘発させる条件がある程度決まったため、次年度はより詳細にファージ誘導能を評価する。具体的には、Stx2ファージ誘発後のファージ誘導効率を、時間経過とともに増加するStx2産生量およびStx2ファージのコピー数を測定し、親株と各欠失株の間で比較する。また、本実験で使用した菌株のStx2ファージをK-12株(ファージ粒子非産生株)に溶原化させ、Stx2ファージ自身の誘導能を様々なタイプのStx2ファージと比較する。ラムダ型サテライトファージの「ファージ内ファージ」に関しては、当初の計画通り、サテライト様ファージの解析を行う。実際の評価項目は、上述のStx2ファージの誘導能に関する解析と類似していることから、同時進行が可能であると考えている。基本的な機能評価を行った後、サテライト様ファージが溶原化したK-12株の中から、サテライト様ファージが誘発される溶原株を検索・同定することを次年度の目標として行う。

予想外の出来事として、本解析に使用していたStx2産生量の測定系(Sandwich ELISA)に関係する試薬が手に入らなくなったため、新たにStx2産生量の測定系を樹立した。新たな測定系により、より簡便なStx2産生量の測定が可能となった(詳細は後述の現在までの進捗状況の理由の項目を参照)。また、もうひとつの新規溶原化ファージパターンである、ラムダ型サテライト様ファージに関して、類似した溶原化パターンをこれまでに見出した系統とは異なる系統に属する大腸菌株のゲノムより見出した。このことは今後の実験に使用できる菌株が増えただけではなく、見出した現象の一般性を高めることができるという点で非常に重要であると考えられた。本解析において重要なStx2の産生性を評価する方法として、Sandwich ELISAによる測定系を利用していたが、抗体が固層化されたELISAプレートを入手することができなくなったため、新たにStx2の測定系を構築する必要に迫られた。このため、当初予定していた研究計画より少し遅れている。一方で、新たな系はHTRF (Homologous Time Resolved FRET)を測定原理とし、標識抗体とサンプルを混合するだけで、サンプル特異的なシグナルを得ることができる。これにより、簡便に数多くのサンプルを処理することができるようになり、今後より効率的にデータを取得することが可能になると考えられる。また、Stx2ファージが別のプロファージに溶原化していることで生じるStx2ファージの誘導効率に関して評価するためのファージ誘発条件を確定させ、さらに、「ファージ内ファージ」がStx2産生量に影響を与えていることが示唆されるデータも得られた。ラムダ型サテライト様ファージに関しても、これまでとは別の大腸菌系統に属する研究室保存株より新たに類似した溶原化パターンを見出した。以上のことから、研究計画自体は多少遅れているものの、ある程度順調に進展していると考えている。Stx2ファージの「ファージ内ファージ」に関して、ファージを誘発させる条件がある程度決まったため、次年度はより詳細にファージ誘導能を評価する。具体的には、Stx2ファージ誘発後のファージ誘導効率を、時間経過とともに増加するStx2産生量およびStx2ファージのコピー数を測定し、親株と各欠失株の間で比較する。また、本実験で使用した菌株のStx2ファージをK-12株(ファージ粒子非産生株)に溶原化させ、Stx2ファージ自身の誘導能を様々なタイプのStx2ファージと比較する。ラムダ型サテライトファージの「ファージ内ファージ」に関しては、当初の計画通り、サテライト様ファージの解析を行う。実際の評価項目は、上述のStx2ファージの誘導能に関する解析と類似していることから、同時進行が可能であると考えている。基本的な機能評価を行った後、サテライト様ファージが溶原化したK-12株の中から、サテライト様ファージが誘発される溶原株を検索・同定することを次年度の目標として行う。
ビック・ピクチャデータ分析の方法論確立のためのシステム構築と基礎研究

平成30年度は、前年のテーマであった「ピクチャデータの基本的特性」について引き続いて研究を行った。特に、ピクチャをアップロードする行動や意識について焦点を当て、大規模なマーケティングリサーチを平成31年3月に実施した(スクリーニングサンプル数10,000人、本調査200人)。これらは、平成30年内における研究分析からの知見を十分に活かしたものであり、平成31年4月現在、継続的に研究・分析を行っている。基本的特性については、まだ十分な研究がこの分野で行われているとは言えず、さらなる研究が必要であると考えている。また、本年度のテーマであった「最適適用領域」については、グローバル領域において有効であることを研究した。日本商業学会第68回全国研究大会(平成30年5月、日大)で、研究協力者とともに、「グローバルリサーチ発展のためのピクチャマイニングの有効性と課題ーピクチャとテキストに対する体験効果と順序効果ー」の報告を行い、ピクチャマイニングの適用領域に関する議論を展開した。さらに次年度の準備として、AIやビッグピクチャ・データと連動した研究の方向性を探った。新たな研究協力者(流通科学大学綿貫准教授)と研究の方向性と方法論を考察するための意見交換を行うことができた。研究代表者が平成30年度から経営管理研究科ビジネス・リーダーシップ専攻の専攻長として任命され校務中心に動かねばならなかったこと、平成30年西日本豪雨という未曾有の災害があり、広島県内の各市町村から、防災・減災に関するリサーチの依頼が多くあった。さらにはこれからの防災・減災とマーケティングやマーケティングリサーチとのありかたについての議論や研究等が重なり、当初の予定よりもやや遅れている。引き続き重要課題であるピクチャのアップロード行動に関する研究分析を行い、学会報告や論文として発表するとともに、ビッグ・ピクチャデータの分析方法論についても研究をしていく。当初は「ビック・ピクチャデータ分析のためのシステム構築と実証研究(平成31年度)」を行い、SNSにアップロードされるオープンなビック・ピクチャデータを利用したビック・ピクチャデータ分析をすることが最終的目標であったが、AI研究との連携によって、より効果的なビッグ・ピクチャデータ研究ができると判断した。平成29年度はビック・ピクチャデータの課題として「データの基本的特性」について研究することを計画していた。この課題において、本年度の研究の焦点は、利用者の「ピクチャアップロード行動や意識」(行動意識調査)と「ピクチャデータに影響を与える社会的要因と文化的要因」(社会文化調査)の2つのテーマであった。1ピクチャアップロード行動や意識の研究「ピクチャアップロード行動や意識」はピクチャアップロードのための小規模モニターシステムを構築し活用する予定であったが、オペレーションが困難であること、費用対効果が得られない可能性が高いこと、さらには今までのピクチャマイニング分析手法が活用できないことから、現時点では見送ることにした。次年度以降への構築を目指していく予定である。本研究テーマに対しては、インスタグラムとツィッターに投稿されている写真とコメントについて定量的分析を行った。代表的なテーマパークのピクチャアップロード行動や意識を分析した結果、インスタグラムは過去・未来志向、ツィッターには現在志向の傾向があることがわかってきた。さらなる検証が必要であると考え、次年度以降も引き続き研究対象としていく。2ピクチャデータに影響を与える社会的要因と文化的要因ピクチャデータに影響を与える社会的要因や文化的要因については、主に定性調査による研究を予定していた。当初予定の3カ国でのインタビューを実施することはできなかったが、2018年3月にマレーシアで開催された国際学会において、ピクチャマイニングについて議論することができた。そこでは社会的要因や文化的要因をどのように考慮していくのかが検討された。平成26年度基盤C「マーケティングリサーチとしてのピクチャマイニングの確立とその適用領域の拡大」を諸事情により平成29年度に延長申請を行い研究していたこともあり、本研究の平成29年度研究計画の準備体制を整えるのがやや遅れてしまった。そのため、小規模モニターシステムを構築、運用することができなかったが、本研究はおおむね順調に進展している。

研究代表者が平成30年度から経営管理研究科ビジネス・リーダーシップ専攻の専攻長として任命され校務中心に動かねばならなかったこと、平成30年西日本豪雨という未曾有の災害があり、広島県内の各市町村から、防災・減災に関するリサーチの依頼が多くあった。さらにはこれからの防災・減災とマーケティングやマーケティングリサーチとのありかたについての議論や研究等が重なり、当初の予定よりもやや遅れている。本年の研究により、ピクチャアップロード行動や意識は、本研究課題にとって最重要テーマであることがわかってきた。この課題に対して、十分な解明がなされないと、この先のビッグピクチャデータの分析への展開が困難であるため、研究計画の修正を行い、平成30年度はピクチャアップロード行動や意識について重点的に行うものとする。本年度の研究成果を学会報告や論文として公表できていないので、これらにも注力していく。平成30年度研究計画において、ピクチャリサーチの最適適用領域を行う予定であったが、これについては平成30年度後期に基本的研究を行い、本研究を推進していく。引き続き重要課題であるピクチャのアップロード行動に関する研究分析を行い、学会報告や論文として発表するとともに、ビッグ・ピクチャデータの分析方法論についても研究をしていく。当初は「ビック・ピクチャデータ分析のためのシステム構築と実証研究(平成31年度)」を行い、SNSにアップロードされるオープンなビック・ピクチャデータを利用したビック・ピクチャデータ分析をすることが最終的目標であったが、AI研究との連携によって、より効果的なビッグ・ピクチャデータ研究ができると判断した。当初、小規模モニターシステムを構築する予定であったが、オペレーションが困難であること、費用対効果が得られない可能性が高いこと、さらには今までのピクチャマイニング分析手法が活用できないことから、現時点では見送ることにしたため、「その他」の費用に差額が生じることとなった。また、グローバル領域での適用可能性について定性調査を行い、インタビューを実施する予定であったが、これを実施することができなかったことが「旅費」に差額を生じさせる原因となった。次年度以降にモニターシステム構築およびグローバル領域の研究を行う予定であり、そのための資金として翌年度分として活用していく。研究代表者が平成30年度から経営管理研究科ビジネス・リーダーシップ専攻の専攻長として任命されたこと、また平成30年西日本豪雨によるリサーチ依頼が多くあったことから、本年度予定していたピクチャマイニングの国際比較のための現地視察と実査を行うことができなかった。そのため、次年度使用額が生じた。本年度に国際比較研究ができるような実施する体制を作り、研究遂行に当たる予定である。
中性子反射法による人工格子の表面・界面の乱れに関する研究

中性子反射法を使った界面の乱れを定量的に評価する手法の確立を目指して、高エネルギー物理学研究所、ブ-スター利用施設に設置されている偏極冷中性子散乱装置、TOPと、日本原子力研究所、東海研究所に設置されている3軸型中性子散乱装置、TOPAN、という2台の分光器を使って、界面の乱れを制御した数種類の試料の偏極中性子反射率測定と、非光学散漫散乱の測定を行った。実験に用いた試料は、Fe/CrとCo/Cu金属人工格子で、これら物質は、巨大磁気抵抗効果を示す物質として知られており、この効果は界面の状態に密接な関係があると考えられている。Fe/Crでは、表面の粗さの異なる基盤上に成膜させることによって、Co/Cuでは、CoとCuの界面においてCoとCuの混合層を作ることによって、界面の状態を変化させた。これらの試料では、界面の違いによる、明瞭な磁気抵抗測定変化率の差が観測されることを確認したが、中性子反射率の測定においても反射率プロファイルに明瞭な違いが観測された。一方で、測定データから定量的な界面の乱れの情報を得るための解析プログラムの開発も行った。現在のところ界面の乱れが小さな試料に関しては、満足すべき結果が得られているが、界面の乱れが大きな試料に対しての計算は、実験を再現することができていない。これは、本来、原子配列の乱れを扱うモデルを、その乱れよって発生する磁気的な乱れを単純に当てはめることに限界があるためであると考えられるので、今後も引き続き、適切なモデルを構築していく必要がある。しかし、実験的には、この方法が、界面の磁気的な乱れを測定するのに、非常に有効であることを実証できたと考えている。巨大磁気抵抗効果で知られているFe/Cr人工格子を、異なる基盤上に成長させて、界面の乱れ具合の異なる2種類の試料を得た。これらの試料に対して、日本原子力研究所、東海研究所の改3号に設置されている3軸型分光器TOPANを使って、非光学条件での中性子反射を観測することによって、界面の乱れの度合いを評価した。界面の乱れは、光学条件での反射のまわりに散漫散乱として現れる。この散漫散乱の強度が大きいほど、界面の乱れは大きいと考えられる。この実験結果と、磁気抵抗変化の大きさを比較したところ、界面の乱れが大きいほど、磁気抵抗変化も大きいという結論が得られた。また、界面の乱れは、光学条件での反射スペクトルにも影響を与える。光学条件の反射スペクトルが、どのように界面の乱れによって影響を受けるかを調べるために、高エネルギー物理学研究所、ブ-スター利用施設に設置されている、TOP分光器を用いて、反射スペクトルの測定を行った。反射スペクトルには、各界面で反射した中性子の干渉効果により、フリンジが現れるが、界面の乱れが大きいと思われる試料では、乱れが小さい試料よりも、フリンジが不明瞭になるのが観測された。これらの実験データから、界面の乱れを定量的に評価するために、設備備品として購入した、ワークステーション上で、光学条件、非光学条件での反射スペクトルの計算プログラムを開発した。この計算では、界面や表面の乱れを、フラクタルとして記述することによって、定量的に扱う手法を採用した。現在、光学条件での反射スペクトルを任意の構造をもつ人工格子に対して計算できるところまで、完成しており、実験データとの比較を最小二乗法によって行えるように、プログラムの改良を加えているところである。今年度は、前年度に引き続き、Fe/Cr人工格子の反射率測定を行うとともに、新たに、豊田中央研究所よりCo/Cu人工格子の試料提供をうけ、巨大磁気抵抗効果と界面の乱れとの関連について調べた。新たに提供を受けたCo/Cuは、Fe/Crが基盤の違いにより界面の状態を変化させたものであるのに対し、試料作成時に界面においてCoとCuの混合層を作り、その厚さを変化させることによって、界面の乱れを制御したものである。

試料は、Si基盤の上に[Co(1.0-t_-mix)/CoCu(t_-mix)/Cu(2.2-t_-mix/CoCu(t_-mix)]を15回積層したもので、混合層の厚さ、t_-mix(nm)、は、0、0.10、0.15、0.25の4種類である。これらの試料の中性子反射率の測定を高エネ研のブ-スター利用施設に設置されている、偏極冷中性子散乱装置、TOPを用いて行った。年度の途中でビームが止まったこともあって、まだ、十分な測定が行われていないので、最終的な結論を出すにいたっていないが、反射率プロファイルが、混合層の厚さとともに変化することが確認された。ただし、Fe/Crの場合のような、反射率の大きな偏かは観測されなかった。現在、この中性子散乱実験に用いた試料の磁気抵抗測定の準備を進めているところである。反射率の計算プログラムは、フォートランでの開発は、ほぼ終了した。今のところ、分解能を取り入れた反射率の波長依存性を計算することができ、界面の乱れの少ないFe/Cr、Co/Cu、あるいは、標準物質であるNiミラー等の実験と、このプログラムを用いた計算の一致は、非常によい。ただし、混合層の厚さを、計算の際のパラメーターとして取り込んでも、上述の実験結果に見られるような変化を再現することができず、何らかの方法で、これらの影響を正しく計算に取り込む必要がある。現在、界面でのステップを考慮することで、界面の乱れを反射率に取り入れるプログラムを開発中である。
低投入条件におけるイネ品種の初期生長性に関する研究

本研究は,低投入条件における水稲の生産力ポテンシャルの向上を意図し,初期生長速度の遺伝的変異ならびにその要因を明らかにするとともに,その栽培上の意義についても検討したものである.国内およびアジア諸国の新旧品種と在来系統,直播適性の優れる品種,近年育成された多収性品種を収集した.120品種系統を増殖し,圃場観察の結果から63系統を供試品種として選定した.1.初期生長の解析個体当りの生長量を種子養分の利用に基づく従属栄養生長(DWh)と光合成に基づく独立栄養生長(Wa)の和とみなして解析を行った.Whの推移は主として最終Wh(DW_<h Max>)に左右される1次のロジスチック曲線で表され,DWaの増加速度は,相対成長率(RGR)を品種特性値とする指数関数モデルでよく表すことができた.2.初期生長の品種間変異イネ63品種・系統の発芽から分げつ発生時期までの生長を水耕条件下で比較したところ,個体当り生長量には190590mg,DW_<h Max>には922mg,RGRには8.611.4mgg^<-1>(°Cd^<-1>)の変異がみられた.上述のモデルを用いた感度解析の結果,初期生長が旺盛な品種の生長は,DW_<h Max>よりもRGRに起因する傾向が強いことがわかった.DWh Maxの品種間差異は,種子養分の利用率や利用養分に対する生長効率といった形質の影響は小さく,発芽時の種子重に直接左右された.RGRは,純同化率と正の相関を,地下部への乾物分配率と負の相関を示す傾向があった.4.圃場条件下での雑草との競争力における初期生長性の意義初期生長性が異なる4品種をタイヌビエとの混植および単植条件下で栽培した.雑草競合がイネの生長に及ぼす影響は生育初期からみられ,その程度は初期生長性の優れる品種で明らかに小さかった.そして,地下部遮断処理の有無を異にする混植処理区での結果から,生育初期における雑草競争力の差異には,とくに地下部要因が強く関与していた.イネ品種の初期生長性を評価する場合,このような地下部の生長に着目することの重要性が認識された.本研究は,低投入条件における水稲の生産力ポテンシャルの向上を意図し,初期生長速度の遺伝的変異ならびにその要因を明らかにするとともに,その栽培上の意義についても検討したものである.国内およびアジア諸国の新旧品種と在来系統,直播適性の優れる品種,近年育成された多収性品種を収集した.120品種系統を増殖し,圃場観察の結果から63系統を供試品種として選定した.1.初期生長の解析個体当りの生長量を種子養分の利用に基づく従属栄養生長(DWh)と光合成に基づく独立栄養生長(Wa)の和とみなして解析を行った.Whの推移は主として最終Wh(DW_<h Max>)に左右される1次のロジスチック曲線で表され,DWaの増加速度は,相対成長率(RGR)を品種特性値とする指数関数モデルでよく表すことができた.2.初期生長の品種間変異イネ63品種・系統の発芽から分げつ発生時期までの生長を水耕条件下で比較したところ,個体当り生長量には190590mg,DW_<h Max>には922mg,RGRには8.611.4mgg^<-1>(°Cd^<-1>)の変異がみられた.上述のモデルを用いた感度解析の結果,初期生長が旺盛な品種の生長は,DW_<h Max>よりもRGRに起因する傾向が強いことがわかった.DWh Maxの品種間差異は,種子養分の利用率や利用養分に対する生長効率といった形質の影響は小さく,発芽時の種子重に直接左右された.RGRは,純同化率と正の相関を,地下部への乾物分配率と負の相関を示す傾向があった.4.圃場条件下での雑草との競争力における初期生長性の意義初期生長性が異なる4品種をタイヌビエとの混植および単植条件下で栽培した.雑草競合がイネの生長に及ぼす影響は生育初期からみられ,その程度は初期生長性の優れる品種で明らかに小さかった.そして,地下部遮断処理の有無を異にする混植処理区での結果から,生育初期における雑草競争力の差異には,とくに地下部要因が強く関与していた.イネ品種の初期生長性を評価する場合,このような地下部の生長に着目することの重要性が認識された.低投入条件における水稲の生産力ポテンシャルの向上を意図し,初期生長速度の遺伝的変異ならびのその要因を明らかにしようとする研究の第1段階として,平成9年度は広範な遺伝子型の収集・増殖および実験1「多数品種の初期生長速度の測定」の一部を実施した.1,国内およびアジア諸国の新旧品種と在来系統,直播適性の優れる品種,近年育成された多収性品種を収集し,およそ120品種系統を滋賀県立大学研究水田において系統栽培した.初期生長の状況を圃場観察するとともにそれぞれの種子約200gを採種した.2,本補助金による購入備品であるインキュベータを使用して,低窒素濃度条件における養液栽培を現在実施中である。

培養液を入れた320×450×120mmバットに,播種穴に網を設置したスチロフォームを浮かべ,1穴5個体,1品種10穴に播種し,25/15°C(昼/夜温)の条件にて育成し,1週間間隔で,草丈および葉面積を調査している.この実験は,1回につき12品種として供試品種を変えて順次実施する.3,2の実験は平成10年度も実施し,その後,特徴的な品種系統を選定して,実験2「初期生長速度の差異をもたらす要因の解析」(平成11年度)に供する.低投入条件における水稲の生産力ポテンシャルの向上を意図し,初期生長速度の遺伝的変異ならびにその要因を明らかにしようとして,平成10年度は前年度から引き続き広範な遺伝子型の収集・増殖を行うとともに,生育特性が著しく異なる8品種・系統を供試して,初期の葉面積展開の差異が乾物生産に及ぼす影響について圃場実験を行った。1,国際イネ研究所から窒素利用効率が特徴的に異なる34系統,静岡大学農学部から熱帯アジアの在来イネである熱帯ジャポニカ・インディカ各9系統の割譲を受け,これにその他の数機関からの割譲種子を加えた計80系統を京都大学農学部研究水田において栽培した。初期生長の状況を圃場観察するとともにそれぞれの種子約200gを採種した。2,ごく長稈の中国江蘇省産在来イネ,国内産在来イネ,日本晴および多収系のタカナリを含む計8品種を,無窒素施肥条件で群落栽培し,それらの葉面積展開過程および乾物生産過程を比較した。中国産在来イネは他の供試品種に比べて初期の葉面積展開が速かったが葉身の窒素濃度が低く推移した。中国産在来イネは,受光日射の変換効率が他の品種よりも劣るものの生育初期の受光日射量がまさるために,生育前半の乾物生産は供試品種の中で最も優れており,生長における窒素利用効率が高いと評価された。このことから,窒素供給が制限される栽培条件においては,葉面積展開の旺盛な初期生長特性が,乾物生産において実質的な利点を有するものと考えられた。平成11年度は主に,前年までに収集・増殖したイネ64品種・系統を供試して,初期生長量と関連形質の変異を明らかにし,その品種間差異をもたらす要因について検討した.1.初期生長をよく表すパラメータを明らかにするために,日本晴,水原258号,Black Goraおよび中国在来品種の4品種を大粒区と小粒区に分けて水耕栽培し,従属栄養生長量(Wh)と独立栄養生長量(Wa)の推移を発芽後35日間追跡した.従属栄養期から移行期および独立栄養期への転換期は品種・粒大を問わず変わらなかった.Whの推移は各処理区の最終Wh(Whmax)を用いた1次のロジスチック曲線で表され,一方,Waの増加速度(有効積算温度ベース)は各時点のWh+Waと各処理区固有の相対成長率(RGR)の積でよく表すことができた.2.新旧の日本型,ジャワ型,インド型品種を含む計64品種の発芽後42日間の生長を水耕条件で調査した結果,個体当り生長量には190590mg,Whmaxには922mg,RGRには8.611.4mgg^<-1>(°Cd^<-1>)の変異がみられた.日本晴を基準品種として,そのWhmaxおよびRGRの一方を他の品種のパラメータと入れ替えながら,上記のロジスチック曲線と指数曲線とを用いて生長量を試算し基準品種の生長量と比較することにより,各品種の生長におけるWhmaxとRGRの相対貢献度を評価した.旺盛な初期生長は,全体に,WhmaxよりもRGRに起因する傾向の強いことがわかった.Whmaxの品種間差異は,種子養分の利用率や利用養分に対する生長効率といった形質の影響は小さく,発芽時の種子重にもっとも左右された.一方RGR,は葉身への乾物分配率と密接な正の相関を示す傾向があった.1.初期生長の品種間変異の解析個体当りの生長量を種子養分の利用に基づく従属栄養生長(Wh)と光合成に基づく独立栄養生長(Wa)の和とみなして解析を行った.Whの推移は主として最終Wh(Whmax)に左右される1次のロジスチック曲線で表され,Waの増加速度は,相対成長率(RGR)を品種特性値とする指数関数モデルでよく表すことができた.
液相析出法による希土類系物質のパノスコピック形態制御と材料機能の高度発現

金属フッ化物錯体を前駆体とするソフト溶液プロセスである液相析出法による薄膜作製に対しては表面層の物性を活かした高機能発現に必要な薄膜形成反応プロセスにおける反応溶液組成・反応条件の最適化を試みた。特に、・材料のマクロ的複合化技術、特に傾斜組成を有する薄膜設計の確立・希土類含有物質の機能発現を目的とした組成の最適化・金属ナノ粒子共存固定化による発光性希土類錯体の増強による機能化の3点について検討を行ったところ、ナノコンポジットとしての複合系薄膜の機能を高次構造の構築によるパノスコピック材料としての薄膜高次構造化を行うことが可能となり、ナノコンポジットとしての複合系薄膜の機能を高次構造の構築において、より光学的物性制御に必要な空間的規則性を向上させるとともに、パノスコピック材料としての薄膜高次構造化手法を確立した。本研究では、金属コロイド自身のプラズモン共鳴吸収時のエネルギー移動の阻害による消光と金属表面での被覆率の最適化によるエネルギー移動における増強の2つの現象のバランスについて検討した。銀コロイドを分散させたEu(III)錯体からの発光増強について、大きな配位高分子を形成しない低濃度領域のEu(III)ジピコリン酸(dipic)錯体の銀微粒子共存系における発光挙動を対象とし、溶液中での構造体形成とEu錯体の発光特性の相関について検討した。Eu(NO_3)_3・5H_2OのDMF溶液に所定量のdipicを加えた錯体溶液を作成し、dipic錯体溶液の蛍光スペクトル及び蛍光寿命を測定した。また、DMF中で保護剤をPoly(vinylpirrolidone)としてAgNO_3を還元し調製した銀コロイドを錯体溶液に所定量添加し、TEM観察, UV-visスペクトル測定によりサンプル内の銀微粒子について、また発光スペクトル測定、蛍光寿命測定により希土類錯体についての知見を得た。Eu^<3+>イオンに対する錯体の配位は[Eu(dipic)_3]^<3+>で示される事が知られているが、発光スペクトルにおいて単一の蛍光バンドが見られる為には4-5倍のdipicが必要であることが明らかとなった。そこで、銀コロイド添加後のEu(dipic)_5^<3+>によるプラズモンの吸収の変化を測定したところ、添加後数日間を経て、銀コロイドの凝集を示すプラズモンが見られた。この試料について蛍光スペクトルを測定したところ、銀コロイド濃度が100pM程度までは蛍光が増強し、その後緩やかに減衰する結果が得られた。このことから、金属コロイド近傍における蛍光増強現象においては非常に増強の程度は限定されているが、その機構として、金属粒子の近接場において存在するEu錯体との相互作用が要因の一つとして挙げられることが明らかとなった。化学
長距離輸送される活性型サイトカイニンに特異的な生理機能の解析

サイトカイニンは器官間を長距離輸送されて作用することにより、器官間の情報伝達分子として機能する植物ホルモンである。先行研究では、リボシド型サイトカイニン前駆体のみが長距離輸送され、作用器官において活性化されると考えられていた。しかし、申請者のこれまでの研究は、活性型サイトカイニンも根から地上部へ長距離輸送されて作用することを示唆していた。本研究は、遺伝学を駆使した接木技術を用い、長距離輸送される活性型サイトカイニンの機能を解析することを目的として行った。まず、地上部でサイトカイニン前駆体を生合成することができない接木植物および地上部でサイトカイニンを活性化できない接木植物を用意した。これらの接木植物の表現型観察、サイトカイニン内生量の測定により、長距離輸送された活性型サイトカイニンとサイトカイニン前駆体は地上部における機能が異なることが示唆された。また、異なる栄養条件下において地上部に対するサイトカイニン輸送量を解析することにより、活性型サイトカイニンとサイトカイニン前駆体の長距離輸送は異なる制御を受けることが示唆された。本研究を通じ、植物は二種類のサイトカイニンを輸送することにより、根と地上部の綿密なコミュニケーションを行っていることが示唆された。
PACAP受容体のバソプレシン分泌・合成制御機構

新規神経ペプチドPACAPの含有ニューロン終末は視床下部の視索上核や室傍核に密に分布し、その神経終末が神経内分泌細胞にシナプスを形成しているのを我々は免疫電顕的に観察・報告している。免疫組織化学法とin situハイブリダイゼーション法の組合せ法を用いて視索上核をしらべたところ、バソプレシンニューロンが特異的にこのレセプターを発現しているのが明らかになった。バソプレシンニューロンはノルアドレナリン性ニューロンの神経支配を受けており、ノルアドレナリンおよびPACAPはcAMP-プロテインキナーゼA系を介して細胞内のカルシウム濃度を上昇させる事が単離神経分布細胞を用いた実験で明らかになった(Shioda et al., 1998, 1999)。特異的なカルシウムチャンネル阻害剤を用いて上記と同様の実験を行った結果、PACAP/ノルアドレナリンは共調して細胞膜のT-,L-型のカルシウムチャンネルをリン酸化し、細胞内に大量のカルシウムを流入させ、最終的に分泌顆粒の放出が起きることが明らかになった(Shioda et al., 1999)。PACAP(Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide)は種々の細胞内のcAMP産生を強力に亢進させることが知られている。視床下部の神経内分泌細胞に発現しているPACAP受容体がPACAPに応答してどのようなシグナル伝達を介してバソプレシンの分泌・合成を調節しているのか、さらには循環調節機構におけるPACAPの役割を機能形態学的に明らかにする目的で実験を行った。即ち、ラット視床下部バソプレシンニューロンにおけるPACAPレセプターサブタイプの遺伝子発現をしらべ、バソプレシンニューロンのシグナル伝達をしらべた。1) In situハイブリダイゼーション法を用いてラット脳内のPACAPレセプター(PAC1-Rs)の遺伝子発現をしらべたところ、視索上核のバソプレシンニューロンに強い遺伝子発現がみとめられた。さらにIn situ RT-PCR法を用いて同領域を検索し、このレセプターのサブタイプ発現を検索したところ、PAC1-R,PAC1-R-hopの2タイプの遺伝子発現がみられた。レセプター抗体を用いた免疫組織化学的観察でも同部位にタンパク発現を認めた。2)視床下部神経分泌細胞を単離し、fura2をloadingした後PACAPを投与して細胞内のカルシウム濃度を測定した結果、PACAPによる細胞内シグナル伝達はcAMP-protein kinase A(PKA)を介するものであることが種々の酵素阻害剤を用いることにより明らかになった。またこのPKAはN-,L-型のカルシウムチャンネルを活性化し、細胞内のカルシウム流入が促進されて分泌果粒の放出につながることが明らかになった。以上、当初の目的は達成したが、今後さらに種々のイオンチャンネルブロッカー等を用いて生理実験を行い、どのようなセカンドメッセンジャー系がPACAP受容体のシグナル伝達に関与するのかを検索する予定である。免疫組織化学法とIn situハイブリダイゼーション法の組み合わせ法を用いて視索上核をしらべたところ、バソプレシンニューロンが特異的にこのレセプターを発現しているのが明らかになった。バソプレシンニューロンはノルアドレナリン性ニューロンの神経支配も受けており、ノルアドレナリンおよびPACAPはcAMP-プロテインキナーゼA系を介して細胞内のカルシウム濃度を上昇させることが単離神経分泌細胞を用いた実験で明らかになった(Shioda et al.,1998,1999)。特異的なカルシウムチャンネル阻害剤を用いて上記と同様の実験を行った結果、PACAP/ノルアドレナリンは共調して細胞膜のT-,L-型のカルシウムチャネルをリン酸化し、細胞内に大量のカルシウムを流入させ、最終的に分泌果粒の放出が起きることが明らかになった(Shioda et al.,1999)。