hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
量子・情報物理・幾何の絡み合いの解明：量子古典対応の研究

スペクトル・情報エントロピーのスケーリング公式の解明という部分に関しては,順調に成果が蓄積されているといえる.当初計画になかったようなニューラルネットワークと特異値分解の関わりに関する成果も出ているので,他分野への波及効果も少しづつ出ているのではないかと思われる.また本研究課題に直結する専門書が発売され,それを用いた集中講義やセミナーの回数も順調に伸びているため,研究成果の発信や当該研究領域を盛り上げるという点でもよい波及効果が得られていると考えている.様々な専門性の方々と議論することによって新たな課題が浮き彫りになることも多く,それは最終年度に向けて研究課題を整理するうえで重要な指針の一つになっているとも言える.エンタングルメント・エントロピーをはじめとした量子情報のコンセプトに基づいて,理論物理における難問題にアプローチする動きが世界的に進行している.多方面の研究が展開されている中で,本課題推進者は,物性物理における量子多体問題から,重力やブラックホールの問題まで広い領域に渡って,それらにまつわる諸問題を系統的に取り扱う独自のアイデアと手法を発展させた.特に,特異値分解や情報幾何といったこれまでは情報分野で用いられてきた数理の背景に量子古典変換に関わる重要な構造が潜んでいることを解析的・数値的手法で明らかとし,それに基づいた理論を展開した.3年間の全体計画として,具体的には,(1)古典スピン系のスナップショット・エントロピーと量子系のエンタングルメントの等価性,(2)量子系のエンタングルメント・エントロピーから構成される情報幾何の構造,の大きな2テーマがあるが,最終年度である本年度では,特に後者に関する大きな成果を得た.テーマ(1)における特異値分解の機能と同様,情報幾何の計量テンソルにも自然な形で臨界系の複雑データをスケール分解して適切なメモリー空間にデータを格納する構造があり,それが量子古典変換やゲージ重力対応を自然に導くことを明らかにした.特に,BTZブラックホールと有限温度の量子臨界系との厳密な変換を与える現象論の構築に成功した.この成果は,本研究課題の今後の発展の観点からも重要であると期待される.加えて,これらの成果で得られたコンセプトを物性研究にも応用した.以上の結果は学術論文として公表し,国際会議・国内会議で招待講演等を行った.また前年度出版した専門書は初版第一刷を完売し,第二刷を発売した.これをもとに各所で集中講義を行い,分野発展の啓蒙という観点からも成果を残すことができた.一見異なる現象の背景に共通する普遍的な性質を明らかにすることは物理学の大きなテーマである.その中でも,d次元量子系を(d+1)次元古典系に変換するいわゆる量子古典変換は,様々な物理の分野に現れる重要概念である.近年,量子情報科学の概念を活用することで,この問題にアプローチすることが可能となってきており,多くの研究者の興味を引いている.本研究課題では,特異値分解や情報幾何学を用いて,量子古典変換の背景にある数理的構造を明らかとした.上記の数学は,複雑な量子系のデータをスケールの異なる情報に分解し,曲がった時空間に埋め込む方法であり,物理における情報的視点の重要性が明らかとなった.【現在までの進捗状況】の項目で述べたように,申請の平成27年度当初目的は達成されているが,それに加えて新たな課題も浮かび上がってきており,更に深い研究に意味があると考えられる.これについては現在シンガポールの共同研究者であるChing Hua Lee氏と研究遂行中である.また統計物理学のスピン模型だけでなくゲージ理論への応用も検討しており,その点からの研究の進展も望まれる.以上も同時に推進しながら,課題申請当初の平成28年度計画も遂行していく.
軽度失語症者と日本語学習者の構文能力の評価による言語処理メカニズムの解明

本研究では、失語症者と日本語学習者に対し言語聴覚学的および日本語教育学的評価を実施した。失語症者に実施した格助詞の穴埋め課題では、中心的意味用法は比較的確立した状況であることを明らかにした。また、問題集に基づいた課題では、日本語能力別の難易度の高低に関わらず誤りを認め、選択肢の意味的関連性の近さが影響している可能性が示唆された。日本語学習者に実施した異同弁別検査では、有声破裂音と無声破裂音の弁別の誤り等、復唱課題では、有声破裂音の無声化等が認められた。さらに、ポインティングスパンテストでは、母語に比べて日本語の把持力が低下する傾向を示す等、日本語学習者に対する言語聴覚学的評価の有効性を認めた。平成26年度は、失語症者や日本語学習者の格助詞「デ」「ニ」「ヲ」「ガ」の理解・表出の特徴に関する調査をもとに、今後、日本語学習者に対して実施する言語聴覚的評価の選定を実施した。失語症者の格助詞の理解・表出の誤り特徴に関しては、一部、論文として掲載された(保健科学研究誌第12号2015.3.31 p9199)。論文では、失語症者に助詞の穴埋め課題および文想起課題を実施した結果、失語症者の格助詞「ニ」の構造は、中心的用法は比較的確立された状態にあるものの、拡張した用法になるにつれて、意味カテゴリー構造が変化している、あるいは活性化しにくい状況であると分析し、失語症者の格助詞「ニ」の多義ネットワーク構造がどの段階で障害されているかについて明らかにした。また、日本語学習者の格助詞の理解・表出の誤り特徴に関しては、本年度、論文投稿予定である。本年度は、まず、失語症者に対して実施する予定の日本語教育学的評価の選定を行う。具体的には、初年度調査した失語症者の格助詞の理解・表出の特徴をふまえ、日本語能力試験などの既成のテストを調査し、聴覚的理解力、読解、会話、作文、文法、表記などの各分野から選定を行う。また、日本語学習者に対し言語聴覚的評価、失語症者に対し日本語教育学的評価を実施する。その後、双方の構文の誤りメカニズムに関する類似点や相違点を抽出し、言語処理メカニズムを明らかにしていく予定である。平成27年度は、昨年度明らかにした格助詞の誤りパターンを日本語学習者の分析にも用いられている認知言語学的視点から失語症者の新たな評価法および訓練法を提案し、一部、論文として掲載された(保健科学研究誌第13号2016.3.31p135-144)。論文では、まず、評価においては、中心的意味用法である構文を評価法の開始課題と位置づけ、その後、周辺的用法のどのレベルまで理解可能であるかを評価すること、また、訓練では、開始レベルをその評価結果に基づいたレベルから開始し、その後、周辺的課題に広げていく方法を提案した。また、中国語母語の日本学習者5名に対し、一般的に失語症者に用いられている標準失語症検査やSALA失語症検査、ポインティングスパンテスト(日本語版・中国語版)を実施した。分析の結果、一部の学習者については、日本語の音韻操作能力の低下によって、聴覚的理解力が低下している可能性が考えられた。しかしながら、被験者数が中国語母語話者中心で英語母語話者や韓国語母語話者が少ないため、今後、対象を増やし更なる検討が必要である。さらに、失語症者に対して実施する日本語教育学的評価を日本語能力試験問題集も元に作成した。本年度は、前述したように日本語学習者の被験者を更に増やし、言語聴覚的評価を実施、分析する。また、失語症者に対しても、日本語能力試験をベースに作成した日本語教育学的評価を実施、分析する。双方の結果を元に構文の誤りについて類似点や相違点をあげ、言語処理メカニズムについて明らかにしていく予定である。評価内容の検討および被験者の確保に時間を要したため、英語母語話者や韓国語母語話者の言語聴覚学的評価はほとんど実施できていない。今年度前半までには、さらに多くの被験者数を確保し、調査・分析を進めていく。平成28年度は、日本語教育学的評価を作成し、その評価を軽度失語症者に対し実施した。結果、N2レベルだけでなくN5レベルの課題にも誤りが多く認められた。その理由は、N5レベルの課題であっても、例えば、「はやく結婚( )たいですが・・・」の空欄に【し、して、する、した】の中から選択する課題というように意味的な関連性が近いものが選択肢に存在したことが成績低下に影響したのではないかと考えられた。他にも、N1N2レベルの日本語学習者(中国語母語話者・韓国語母語話者)に対し、失語症者の分析に使用されている言語情報処理モデルを用い、言語聴覚学的評価を実施した。結果、異同弁別検査では、有声破裂音と無声破裂音の弁別や無声破裂音の弁別の誤りが若干認められた。また、復唱課題では、異同弁別検査と比較して、誤りが多く認められた。誤りの特徴として、中国語母語話者は、はじき音の置換、有声破裂音の無声化、無声破裂音の有声化などが大きな割合を占めた。それに対し、韓国語母語話者では、無声破擦音の拗音化、有声破裂音の無声化、無声破裂音の置換などが認められた。

個別の結果から分析すると、母語話者によっては、音韻弁別課題では、良好な成績が認めたにもかかわらず、ある特定の日本語音韻に対する構音動作の習得ができていない、つまり、構音運動記憶の点での脆弱さがあるのではないかと考えられた。さらに、ポインティングスパンテストを実施した結果、中国語母語話者、韓国語母語話者の双方とも母語に比べて日本語の聴覚的把持力の低下が認められた。聴覚的把持力の低下は、失語症者の基本症状の一つといわれており、その能力は失語症者の聴覚的理解力に大きな影響を与えていると考えられている。日本語学習者も、日本語を学習半ばであるため、日本語の音韻が内的に再生しにくかったのではないかと考えた。本研究では、失語症者と日本語学習者に対し言語聴覚学的および日本語教育学的評価を実施した。失語症者に実施した格助詞の穴埋め課題では、中心的意味用法は比較的確立した状況であることを明らかにした。また、問題集に基づいた課題では、日本語能力別の難易度の高低に関わらず誤りを認め、選択肢の意味的関連性の近さが影響している可能性が示唆された。日本語学習者に実施した異同弁別検査では、有声破裂音と無声破裂音の弁別の誤り等、復唱課題では、有声破裂音の無声化等が認められた。さらに、ポインティングスパンテストでは、母語に比べて日本語の把持力が低下する傾向を示す等、日本語学習者に対する言語聴覚学的評価の有効性を認めた。平成26年度は、失語症者や日本語学習者の格助詞「デ」「ニ」「ヲ」「ガ」の理解・表出の特徴に関する調査をもとに、今後、日本語学習者に対して実施する言語聴覚的評価の選定を実施した。ただ、初年度は、日本語学習者に対し言語聴覚的評価を実施するところまでを実施する予定であったが、被験者の確保に時間を要したため、未実施の状況である。今年度は、失語症者の調査と平行して、日本語学習者の調査も実施していく予定である。日本語学習者については、県内の日本語教師数名に打診し、新たな被験者を紹介してもらう予定である。また、新たな失語症者の被験者についても県内施設の言語聴覚士に承諾をえており、5月中には評価実施予定である。失語症学、摂食嚥下障害学現在、県内の病院施設の複数の言語聴覚士の方に、担当の軽度失語症者へ日本語教育学的評価を実施することについて、また、県内の日本語教師の方に担当の日本語学習者へ言語聴覚的評価を実施することについて承諾を得た状況である。当初は、初年度に日本語学習者の言語聴覚的評価データを収集する予定であったが実施できなかったため、今年度は、失語症者の調査と平行して、日本語学習者の調査を実施し、研究を進めていく予定である。日本語学習者への言語聴覚療法を平成27年度に予定していたが、中国語母語話者を中心に実施したものの、英語母語話者や韓国語母語話者はほとんど実施できなかった。そのため、予算にあげていた協力者礼金が未使用残金として生じた。また、調査研究の成果を学会にて報告する予定であったが、日本語学習者の被験者がまだ少ない状況であったため、学会報告にはいたらなかった。以上のことから、調査研究途中報告旅費のみ使用残金が生じた。平成28年度は、英語母語話者、韓国語母語話者などの被験者を確保し、調査をすすめていく。そのため、今回の未使用残金はこの時点で協力者謝礼として使用予定である。また、研究成果を言語聴覚療法および日本語教育関連の学会などへ報告予定のため、調査研究報告旅費としての使用を予定している。
血小板由来細胞外小胞を用いた血管透過性亢進制御に対する新規治療アプローチ

集中治療を必要とする重症患者に生じる臓器障害の一因として、制御困難な血管透過性亢進があるが、これを制御しうる有効な手段は確立されていない。本病態の背景として、毛細血管内皮細胞の障害、特に隣接細胞間の接着装置の異常が知られており、この正の調整因子Angiopoietin-1やSphingosine-1-phosphateのキャリアーである血小板は、細胞間接着障害の修復因子として注目に値する。本研究では、血小板由来細胞外小胞(Plt-EVs)の血管透過性亢進病態への関与を検討し、Plt-EVsをmodulateすることが過大侵襲時の血管透過性亢進に対する新規治療アプローチとなりうるか検討する。
二酸化炭素を出発原料とする新規ケトンおよびα-ケト酸生成反応

金属錯体を触媒とする電気化学的二酸化炭素還元の分野では金属上でCO_2をCOに還元する報告例はおびただしい数に上るが、CO_2由来の金属-CO錯体(18電子)の金属-CO結合の還元的開裂が起こるために、CO_2はCOまでしか還元されない。本研究では通常の反応条件ではCO_2の活性化は還元的な条件に限られることから、CO_2と同条件下でのCOの活性化方法の開発を行い、CO_2とCOを同一の反応条件下で利用しうる方法論の開発を行った。ルテニウム金属錯体に配位した単座ナフチル配位子(C_8H_6N_2)のπ*軌道のエネルギーレベルが低く、容易に1あるいは2電子還元を受けてフリーの窒素の塩基性が極めて増大する。単座ナフチル配位子を有するRu錯体触媒によるCO_2の還元で中間体として生成するRu-CO錯体が還元されると、フリーのナフチル窒素がカルボニル炭素へ付加し、Ru-C-N-C-Nの5員環形成を形成する。そのため、Ru-CO結合にはナフチル基からN-C結合を通してカルボニル基に2電子供給が可能となった。その結果、従来化学的には不活性のため電解質として使用されていた4級アンモニュム塩がアルキル化剤となり、CO_2由来のRu-CO結合に求電子付加する新規ケトン合成反応系を見いだした。このように本研究の特色はCO_2とCOを同一の反応条件で活性化しうる方法論の開発であり、C1原料としてCO_2とCOの化学と直接結びつけるのみならず、金属-CO結合のカルボニル炭素の極性を逆転させる化学でもあり、新しい有機反応への発展が期待しうる。
光電子移動反応によるラジカル生成とその有機合成反応への展開

1.アリルシラン/アリルスズやアリルスズ/アリルスズなどのアリル14族複合金属試剤はベンジルやオルト-キノンなどの電子受容体分子との光電子移動反応において良好な電子供与体として働き,一電子酸化された複合試剤からスズカチオンが脱離することにより前者の複合試剤からはアリルシラン部位を有するアリルラジカルが発生し,後者からはアリルスズ部位を有するアリルラジカルが発生する。これらのラジカルと一電子還元されたセミジオンラジカルがカップリングすることにより,ルイス酸誘起反応では困難であったアリルシラン部位を有するα-ケトホモアリルアルコールやアリルスズ部位を有するα-ケトホモアリルアルコールが合成できることが明らかとなった。更にこのケトホモアリルアルコールを過塩素酸マグネシウムで処理するとシス-メチレンシクロペンタンジオールが得られ,フッ化テトラブチルアンモニウムで処理するとトランス-メチレンシクロペンタンジオールが得られるという立体選択的な5員環合成反応を見いだした。2.アリルキノンは自然界において様々な機能を持つ有用物質である。1,2-ナフトキノンの4位にアリル基を導入する際,アリル化剤としてアリルスズ類を用いるとアリル基側の位置選択性が熱反応と光反応では対称的であることを見いだし,熱反応ではα-選択的導入が,光反応ではγ-選択的導入を実現できた。即ち,光反応では電子移動反応によって生じたアリルラジカルが反応に関与することからこの対照的な位置選択性が発現することがわかった。3.また,従来アリル基を1,2-ナフトキノンの3位に導入することは困難とされてきたが,アリルシランとのラジカル反応を経由する光付加反応を利用すると直接導入が可能であることを明らかにした。二官能性アリル14族金属試剤である3-トリブチルスタニル-2-(トリメチシリルメチル)プロペン(アリルシラン/アリルスズ複合試剤)存在下でペンジルを光励起すると光電子移動反応がおこり、アリルシラン部位を持つメチルラジカルが発生した。このメチルラジカルはべンジルセミジオンラジカルとカップリングすることにより、アリルシラン部位を有するα-ケトホモアリルアルコールを高収率で与えた。また、3-トリフェニルスタニル-2-(トリフェニルスタニル)メチルプロペン(アリルスズ/アリルスズ複合試剤)を電子供与体とすると、アリルスズ部位を持つメチルラジカルが発生し、このラジカルがセミジオンラジカルとカップリングすることにより、アリルスズ部位を有するα-ケトホモアリルアルコールを高収率で与えた。これらのα-ケトホモアリルアルコーは同一分子内に求電子性のカルボニル基と求核性のアリルシランあるいはアリルスズ部位を同時に持つ分子であることから、従来法のルイス酸誘起反応では調製困難であり、またその分子構造から更なる変換可能な物質である。また、電子受容体として1,2-ナフトキノンを用い、電子供与体としてアリルスズ試剤を用いた反応では,アリルスズ試剤が光一電子酸化されて生じたアリルラジカルの位置選択的導入を可能にする手法の開発の糸口が見いだされた。即ち熱反応ではキノンカルボニルにアリル基のγ位で導入されるのに対し、電子移動により生じたアリルラジカルはキノンカルボニルにアリル基のα位で結合することが明らかとなった。このように、初年度の研究実績としてジケトンを電子受容体、アリルスズおよびその複合試剤を電子受容体とする光電子移動反応から生成するラジカル種を利用する特異な炭素-炭素結合反応が開発できた。

昨年度の成果に引き続き二官能性アリル14族金属試剤を電子供与体とし,種々のジケトンを電子受容体とする光電子移動反応から生成するラジカルの性質を活かしたカップリング反応により,アリルシラン部位を有するα-ケトホモアリルアルコールが高収率で得られ,この生成物を利用した立体選択的メチレンシクロペンタン誘導体の合成が達成できた。また,アリルキノンは電子伝達系あるいは補酵素QやビタミンK類などに重要な役割を担う化合物であるが,その合成法の中で最も効率的な方法としてキノン骨格へのアリル基の直接導入反応がある。本研究課題では1,2-ナフトキノンを基質として用い,γ-置換アリルスズ試剤をアリル化剤とした場合,熱反応ではキノンの4位にアリル基がそのα-位で導入されるのに対し,光反応ではキノンの4位にアリル基がそのγ-位で導入されることが明らかとなった。この結果は。1,2-ナフトキノンのキノンの4位に直接アリル基を導入できる反応である。一方,1,2-ナフトキノンの3位にアリル基を導入するのは非常に難しい課題の一つであり,これまでその方法はなかった。本研究では。1,2-ナフトキノンとアリルシランとの光反応で[3+2]環化付加体がビラジカル中間休を経由して高収率で得られ,その[3+2]環化付加体を三フッ化ホウ素,フッ化テトラブチルアンモニウム,あるいは硝酸セリウムアンモニウムを用いて開環酸化すると3-アリル-1,2-ナフトキノンが合成できることを見いだした。このように,昨年にひきつづいて光によるラジカルの生成を利用し,キノン骨格に直接アリル基が導入できる方法を開発することができた。更に,アルキル置換-1,2-ベンゾキノンのビラジカル性キノンメチド体の二量化についても新規な二量体の発見などの基礎的成果が得られた。
肺血管発生と肺高血圧症におけるTbx4の役割

Tbx4の肺間葉系特異的エンハンサーのコア領域(Tbx4-core lung mesenchymal enhancer, Tbx4-C-LME)の3'側にLacZ遺伝子をつなげた配列を4回タンデムに繋げたコンストラクトをインジェクションして得られたトランスジェニックマウスのF0解析を行った。可能性の一つであった気道平滑筋に特異的にLacZが発現するマウスも複数体認められたが、肺動脈にLacZが発現するマウスは得られなかった。そこで、肺動脈平滑筋マーカーとして、我々が独自に解析を進めていた2型イノシトール三リン酸受容体(IP3R2)の翻訳開始領域にLacZ遺伝子をノックインしたマウス(IP3R2-LacZマウス)を用いることとした。IP3R2-LacZマウスを胎生9日頃から成獣まで発生段階に合わせて観察すると、肺内では肺動脈に特異的にLacZが発現し、肺動脈の発生に伴って、胎生初期から主幹部から末梢に向かってLacZ陽性の肺動脈が伸長していく様が観察された。さらに切片で観察すると、肺動脈平滑筋に特異的に発現することが明らかになった。効率よく肺動脈平滑筋細胞を分取するために、IP3R-LacZ陽性細胞をLacZの蛍光基質であるSPiDER-βGalで染色し、FACSで分離することを試みた。現時点ではまだSPiDER-βGalの蛍光強度が高くなく条件検討が必要である。肺動脈性肺高血圧症(PAH)の患者ではいくつかTBX4の変異が報告されているが、その機能は未だ不明である。そこで転写因子TBX4の下流候補を過去の報告から選び出し、luciferase assayやChiP assayを実施した。Tbx4-C-LMEトランスジェニックマウスを用いたレポーターアッセイの結果、Tbx4-C-LMEのエンハンサー活性は肺動脈特異的ではなかった。そこで新たに、我々が独自に発見し注目してきた肺動脈平滑筋特異的分子マーカーである2型イノシトール三リン酸受容体(IP3R2)に着目し、IP3R2-LacZノックインマウスを用いて解析する方針とした。そのため当初の予定より研究は遅れている。しかしIP3R2-LacZノックインマウスは作製済みであり、以前の研究で胎生期における発現様式も一部解析を行っている。2)Tbx4の肺動脈平滑筋細胞における機能を解析するために、1)で分離した肺動脈平滑筋細胞を培養し、RNAiによってTbx4をノックダウンし、細胞増殖やアポトーシス活性を観察する。3)Tbx4の肺血管における役割を組織レベルで検討するために、胎生12日14日の肺の器官培養を行い、Anti-sense oligonucleotidesによるTbx4のノックダウンを試みる。IP3R2-LacZマウスの肺器官培養を行うことで、X-gal染色によって簡便に肺血管を可視化可能であり、発生過程の肺血管を詳細に観察する。4)Tbx4ノックアウトマウス(ヘテロ)を慢性低酸素刺激し、肺高血圧症の程度を観察する。Tbx4の肺間葉系特異的エンハンサー(Tbx4-lung mesenchymalenhancer, Tbx4-LME)のうち種間で保存性の高い150 bpの領域Tbx4-core lung mesenchymal enhancer, Tbx4-C-LMEを4回タンデムにつなげ、その3'側にhsp68 minimal promoterとLacZ遺伝子を連結させたコンストラクトを構築し、transgenic mouseの作製を試みた。このコンストラクトをインジェクションした受精卵を偽妊娠マウスに移植し、帝王切開で胎生14日に胎仔を取り出し固定、Whole-mount X-gal染色を実施した(F0解析)。2回のインジェクションにより、トータル46匹の胎仔を得、うち、PCRでLacZ遺伝子を確認できたのが7匹、うちX-gal染色陽性の胎仔は5匹であった。さらに、5匹中3匹は肺内にX-gal染色陽性領域が認められた。Tbx4-C-LMEは肺間葉系組織および、それに由来する細胞に広く発現すると予想していたが、予想に反して、複数個体の胎生14日胚において、特に気道に沿って気道平滑筋と思われる領域に限局してX-gal陽性領域が認められた。一方、肺動脈平滑筋領域には認められなかった。また、肺外にも骨格に比較的強い発現領域が認められ、肺特異性が保持されなかった。肺動脈性肺高血圧症の患者で認められたTBX4の変異を導入し、野生型または変異型TBX4を細胞株に強制発現させ、細胞内局在や転写活性がどのように変化するかを観察した。細胞染色を用いて細胞内局在を確認したところ、野生型では核に限局して発現していたが、一部の変異型TBX4では細胞全体に発現していており、核移行性が障害されている可能性が示唆された。Tbx4-C-LMEトランスジェニックマウスを用いたレポーターアッセイの結果、複数の胎仔で気道平滑筋領域での発現が認められ、肺血管における発現が認められなかったので、Tbx4-C-LME-Creの作製やTbx4-C-LME-GFPの作製ができなかったため。現在、他の肺動脈平滑筋特異的発現分子に着目してレポーターアッセイに着手している。

Tbx4の肺間葉系特異的エンハンサーのコア領域(Tbx4-core lung mesenchymal enhancer, Tbx4-C-LME)の3'側にLacZ遺伝子をつなげた配列を4回タンデムに繋げたコンストラクトをインジェクションして得られたトランスジェニックマウスのF0解析を行った。可能性の一つであった気道平滑筋に特異的にLacZが発現するマウスも複数体認められたが、肺動脈にLacZが発現するマウスは得られなかった。そこで、肺動脈平滑筋マーカーとして、我々が独自に解析を進めていた2型イノシトール三リン酸受容体(IP3R2)の翻訳開始領域にLacZ遺伝子をノックインしたマウス(IP3R2-LacZマウス)を用いることとした。IP3R2-LacZマウスを胎生9日頃から成獣まで発生段階に合わせて観察すると、肺内では肺動脈に特異的にLacZが発現し、肺動脈の発生に伴って、胎生初期から主幹部から末梢に向かってLacZ陽性の肺動脈が伸長していく様が観察された。さらに切片で観察すると、肺動脈平滑筋に特異的に発現することが明らかになった。効率よく肺動脈平滑筋細胞を分取するために、IP3R-LacZ陽性細胞をLacZの蛍光基質であるSPiDER-βGalで染色し、FACSで分離することを試みた。現時点ではまだSPiDER-βGalの蛍光強度が高くなく条件検討が必要である。肺動脈性肺高血圧症(PAH)の患者ではいくつかTBX4の変異が報告されているが、その機能は未だ不明である。そこで転写因子TBX4の下流候補を過去の報告から選び出し、luciferase assayやChiP assayを実施した。Tbx4-C-LMEトランスジェニックマウスを用いたレポーターアッセイの結果、Tbx4-C-LMEのエンハンサー活性は肺動脈特異的ではなかった。そこで新たに、我々が独自に発見し注目してきた肺動脈平滑筋特異的分子マーカーである2型イノシトール三リン酸受容体(IP3R2)に着目し、IP3R2-LacZノックインマウスを用いて解析する方針とした。そのため当初の予定より研究は遅れている。しかしIP3R2-LacZノックインマウスは作製済みであり、以前の研究で胎生期における発現様式も一部解析を行っている。今後も継続してTbx4の肺における役割、特に肺血管発生と肺動脈性肺高血圧における役割を解明すべく研究を続けていくことには変わりないが、より肺動脈平滑筋に特異的な標的分子の発見を目指し、肺動脈平滑筋に特異的に発現する他の分子の探索とその分子のエンハンサー探索も行うこととした。一つの候補として、すでに体血管平滑筋や気道平滑筋に発現が低く、肺動脈平滑筋に発現が高い分子を特定しており、この分子のエンハンサー探索に着手している。また、Tbx4の肺血管発生や肺動脈性肺高血圧における役割を解明するために、当初はTbx4-C-LME特異的Tbx4欠損マウスの作製を予定していたが、Tbx4 flox/+マウス(L. A. Naiche, et al. Development 2007)の入手準備を始める予定である。2)Tbx4の肺動脈平滑筋細胞における機能を解析するために、1)で分離した肺動脈平滑筋細胞を培養し、RNAiによってTbx4をノックダウンし、細胞増殖やアポトーシス活性を観察する。3)Tbx4の肺血管における役割を組織レベルで検討するために、胎生12日14日の肺の器官培養を行い、Anti-sense oligonucleotidesによるTbx4のノックダウンを試みる。IP3R2-LacZマウスの肺器官培養を行うことで、X-gal染色によって簡便に肺血管を可視化可能であり、発生過程の肺血管を詳細に観察する。
がん化におけるプロテインキナーゼの機能

本研究では癌悪性化におけるAktの機能と関連して(1)Aktが細胞の前後極性の形成と維持に貢献することを見いだした。特にAktが細胞前方における方向性を持った微小管の安定化を誘導し持続的に極性を維持する事を明らかにした。また(2)Aktの活性制御機構について、PAKがAktとその活性化因子PDK1の両方に結合し、PDK1によるAktの活性化を促進する「スキャフォールド分子」として働く事を見いだした。さらにPAKはAktの基質選択性にも関わる事が示された。細胞の生死は細胞死シグナルと生存シグナルのバランスによって制御されると考えられるが、それらのシグナルがいかに統合され、生死の判断に結びつくのかは依然として謎である。広範なストレス刺激で活性化するJNKは、ミトコンドリア上流において細胞死制御に重要な役割を果たすことが示されてきたが、JNKが細胞死を誘導する機構はその大部分が未だ不明であった。一方でAktはさまざまな増殖因子や細胞接着の刺激によって活性化し、細胞の生存促進において中心的な役割を果たしている。Aktの基質としてはBad、FOXO、Nur77などが知られているが、これらの基質がリン酸化を受けると14-3-3タンパク質と結合し、アポトーシス誘導活性が抑制されるという共通のメカニズムが報告されている。われわれは14-3-3タンパク質がJNKによってリン酸化されることを見いだした。さらに14-3-3がリン酸化されると、BadやFOXOなどの14-3-3結合分子が解離することを明らかにした。したがってJNKが14-3-3をリン酸化することで多くのアポトーシス誘導分子が14-3-3から解離し、細胞死の誘導に貢献する可能性が示唆された。Aktによる14-3-3結合タンパク質のリン酸化とJNKによる14-3-3のリン酸化は、それぞれ生存シグナルと細胞死シグナルを担っており、両者の拮抗的なバランスの関係が生死の判断に寄与する可能性が示された。細胞周期のG1/S期制御に中心的な役割を果たす転写因子E2FファミリーのメンバーであるE2F1は、他のE2Fファミリーメンバーとは異なり、DNA損傷などの細胞障害に応答して分解が抑制され活性化し、アポトーシス誘導に働くことが知られている。E2F1遺伝子破壊によってがん化が促進することが示されているが、このとき、E2F1の持つアポトーシス誘導活性ががん抑制因子としての機能に重要であると考えられている。そこでE2F1の制御、特に分解制御メカニズムはがん抑制を理解する上で重要であると考えられるが、E2F1の生理的ユビキチンリガーゼについてはこれまで不明であった。当グループは、p53のユビキチンリガーゼとして良く知られている癌遺伝子産物Mdm2がE2F1のユビキチン化を直接触媒することをin vitro再構成系により示した(未発表)。また、このMdm2のE2F1ユビキチン化活性は癌遺伝子産物Aktによるリン酸化で著しく活性化した。本研究においてはさらに、E2F1上のMdm2によるユビキチン化部位を4つ同定した。重要な事に、これらのユビキチン化部位を変異したE2F1タンパク質が細胞内で安定化し、半減期が長くなる事があきらかになった。さらにMdm2-/-p53-/-繊維芽細胞においては、p53-/-繊維芽細胞よりもE2F1タンパク質の半減期が長くなり、Mdm2遺伝子産物がE2F1の生理的なユビキチンリガーゼであることが強く示唆された。従って、Mdm2とその活性化因子であるAkt(いずれも癌遺伝子)が癌抑制遺伝子p53に加えE2F1をも分解することにより癌化を誘導している可能性が示唆された。ごく最近、野生型およびユビキチン化部位変異体E2F1に結合する因子の候補を培養細胞抽出液からの免疫沈降により複数同定した。これらの中にはE2F1の転写活性を抑制する因子が含まれており、現在その抑制機構ならびに制御機構を検討中である。原癌遺伝子Aktは種々の癌で遺伝子増幅や活性化が認められており、また癌の悪性化との相関も高いことが知られている。本研究では、Aktによる細胞運動制御機構について検討した。我々は以前に増殖因子による繊維芽細胞の運動性上昇にAktが必須の役割を果たすことを報告した。Aktの活性型は移動中の細胞の前方(先導端)に局在する。本研究において、Aktとその活性化因子PDK1がPI3キナーゼからのシグナルのポジティブフィードバックに関与し、細胞の前方を規定することを示した。Aktシグナルを抑制すると極性が失われ、細胞の前方に特徴的なラフリング膜等の構造が阻害された。さらにAktは細胞の後方を規定するRhoと互いに抑制しあうことを示す結果を得た。AktがRhoを抑制する際の基質候補も得た。

このPI3K-Akt経路のポジティブフィードバックとRhoとの相互抑制は、細胞の前後極性の確立メカニズムを説明しうると考えている。長い距離を移動する繊維芽細胞等の細胞においては、前後極性の維持に微小管が関与することが知られている。しかし、細胞外のシグナルに応答していかなるメカニズムで微小管が配向するのかについては不明であった。本研究において、細胞の前後極性の確立に関わるAktが、その後の微小管の安定化に重要な役割を果たす事を明らかにした。Akt活性を抑制すると配向を持った微小管の重合が阻害され、また活性型Aktを発現するだけで安定な微小管の量が上昇した。さらにこの際のAktの基質について検討中である。Aktは、細胞の増殖・生存・運動・グルコース代謝など、様々な過程において必須の役割を果たすキナーゼであるが、それぞれのコンテクストにおいてAktがどのようにして様々な機能を使い分けているのかは不明であった。最近我々は、PAKというキナーゼがAktおよびその活性化因子PDK1と同時に結合し、Aktの活性化を促進するスキャフォールド分子であることを見出した。興味深いことに、優性抑制型Aktを発現すると、細胞の生存、タンパク質翻訳、運動性は全て抑制されるのに対し、優性抑制型PAKの発現によりPAK依存的経路を阻害した場合には、細胞運動性が選択的に抑制されることが明らかとなった。このことは、PAKがAktの一部の機能を選択的に制御していることを示唆している。PAKがAktの機能を選択的に制御するメカニズムとして我々は、PAKがAktのアイソフォーム特異的にスキャフォールド分子として機能する可能性に注目した。AktにはAkt1、Akt2、Akt3という3つのアイソフォームが存在し、ノックアウトマウスを用いたin vivoの解析などから、それぞれ特異的な機能を持つことが示されつつある。まず、我々の用いている繊維芽細胞の系において、Akt1およびAkt2の細胞運動性への関与について検討したところ、Akt1が細胞運動性の促進に関与し、Akt2の関与は少ない事が示された。さらに、PAKがAkt2に比べてAkt1とより強く結合し、Akt1をより強く活性化することも明らかとなった。
心血管病変形成におけるコリン作動性抗炎症経路の役割の解明と治療への応用

アセチルコリンエステラーゼ阻害薬によるコリン作動性抗炎症経路の活性化は、アポリポ蛋白E欠損マウスにおける動脈硬化性病変の形成や、下肢虚血モデルマウスの血流回復を抑制した。これらの効果にはサイトカイン産生の抑制が重要な役割を果たす事が示唆された。アセチルコリンエステラーゼ阻害薬が心血管病治療の新たな戦略となり得る可能性が示唆された。【背景と目的】迷走神経刺激により、慢性心不全ラットの長期生存率が改善し、リポポリサッカライド投与による敗血症モデルでの炎症反応が減弱すると報告されている。この経路はコリン作動性抗炎症経路として知られている。可逆的コリンエステラーゼ阻害薬であるドネペジルはアルツハイマー病患者の認知機能を改善するが、心血管病の形成へどのような影響を与えるかについては明らかにされていない。本研究では、ドネペジルによる薬理学的な迷走神経刺激がアポリポ蛋白(Apo)E欠損マウスの動脈硬化に与える影響について検証した。【結果】10週齢のオスのApoE欠損マウスに高脂肪食およびアンジオテンシンII(490ng/kg/day)を投与し、動脈硬化モデルを作製した。ドネペジルおよびフィゾスチグミン(同じくコリンエステラーゼ阻害薬)を4週間投与した。ドネペジルの経口投与(5mg/kg/day)およびフィゾスチグミン投与(2mg/kg/day)によりマウス大動脈におけるOil red O陽性の動脈硬化病変は有意に抑制された。心拍数、血圧、コレステロール値に有意な変化は認めなかった。大動脈弁輪部へ浸潤するマクロファージも有意に抑制された。ドネペジル投与により大動脈におけるMonocyte chemoattractant protein-1とTumor Necrosis Factor-αの発現、NADPHoxidaseの活性および活性酸素の産生が有意に抑制された。【結論と意義】本研究により、ドネペジルによる薬理学的な迷走神経刺激には顕著な抗酸化、抗動脈硬化作用のあることが明らかとなった。フィゾスチグミンでもほぼ同様の結果が得られたので、この作用はアセチルコリンの分解抑制に基づくと考えられる。この結果を他の動物モデルやヒトの動脈硬化にあてはめるには注意が必要であるが、コリンエステラーゼ阻害薬は動脈硬化性心血管病変の新たな治療法として有用である可能性が示された。インスリン抵抗性の形成など様々な慢性疾患において慢性炎症の関与が示唆されている。コリンエステラーゼ阻害薬のもつ抗炎症・抗酸化作用が他の慢性疾患の治療へも応用できる可能性が示唆される。可逆的コリンエステラーゼ阻害薬であるドネペジルはアルツハイマー病患者の認知機能を改善するが、心血管病の形成に対してどのような影響を与えるかについては明らかにされていない。本研究では、ドネペジルによる薬理学的な迷走神経刺激が血管新生に与える影響を検討した。【結果】8週令のC57BL/6マウスの一側の大腿動脈を結紮し、急性虚血から徐々に血流が回復するモデルを作成した。ドネペジルおよびフィゾスチグミン(同じくコリンエステラーゼ阻害薬)の投与はレーザードップラー法により評価した虚血下肢の血流回復を抑制した。内皮細胞の免疫染色により検討した2週間後の虚血下肢の筋肉内毛細血管密度も低下していた。ドネペジルを投与されたマウスの虚血下肢ではvascular endothehal growthfactor(VEGF)とinterleukin(IL)-1ssの発現が低下していた。下肢虚血モデルにドネペジルを投与すると同時にIL-1ssを筋肉内注射すると,ドネペジルによる血流の低下、虚血下肢の筋肉内毛細血管密度の低下、VEGFの発現低下が改善した。【結論と意義】本研究により、ドネペジルによる薬理学的な迷走神経刺激はIL-1ssの発現抑制により血管新生を抑制することが明らかとなった。フィゾスチグミンでも同様の結果が得られたので、この作用はアセチルコリンの分解抑制に基づくものと考えられる。血管新生は心血管病の進展において二面的な影響がある。動脈効果により閉塞あるいは狭窄した血管の末梢への血流を維持するために側副血行路の形成は重要である。一方で、粥状動脈硬化病変における血管新生はプラークの不安定化に寄与すると考えられている。ドネペジルの血管新生抑制効果が動脈硬化症を有する患者のイベントにどのような影響を与えるかについては臨床的な研究が必要であるが、抗炎症作用などを考えると有用である可能性が示唆される。

コリンエステラーゼ阻害薬であるドネペジルはアルツハイマー病患者の認知機能を改善するが、心血管病の形成に対する作用についての検討はない。本研究では、ドネペジルが血管新生に与える影響を検討した。【結果】8週令のC57BL/6マウスの一側の大腿動脈を結紮し、急性虚血から徐々に血流が回復するモデルを作成した。ドネペジルの投与はレーザードップラー法により評価した虚血下肢の血流回復を抑制した。同時にIL-1βを筋肉内注射すると,ドネペジルによる血流の低下が改善した。筋芽細胞を用いた検討では、低酸素によりIL-1βの発現が誘導され、アセチルコリンで誘導が抑制された。低酸素はAktを活性化し、やはりアセチルコリンで抑制された。マウスの虚血肢ではAktが活性化されていたが、ドネペジルの投与により活性化が抑制された。【結論と意義】本研究により、ドネペジルによる薬理学的な迷走神経刺激はIL-1βの発現抑制により血管新生を抑制することが明らかとなった。動物実験および培養細胞を用いた検討から、ドネペジルによりアセチルコリンが増加し、アセチルコリンがAktのリン酸化を抑制するために血管新生が抑制される事が示唆された。粥状動脈硬化病変における血管新生はプラークの不安定化に寄与すると考えられている。ドネペジルの血管新生抑制効果が動脈硬化症を有する患者のイベントにどのような影響を与えるかについては臨床的な研究が必要であるが、コリンエステラーゼ阻害薬が新たな動脈硬化治療薬となる可能性が示唆された。コリンエステラーゼ阻害薬が動脈効果へ及ぼす影響についての研究を平成22年度に報告した。そして血管新生に及ぼす影響についての研究を平成23年度にまとめる事ができたため,研究は概ね順調に進展していると考えている。血管新生に及ぼす影響に関しての論文は現在in pressである。24年度が最終年度であるため、記入しない。薬理学的な迷走神経がどのような機序によって抗動脈硬化、抗血管新生効果を引き起こすかの分子機序に迫る研究を行う必要がある。アセチルコリン受容体の選択的な刺激薬や拮抗薬などを用いることによってどの受容体が関与するかを解析する。また、アセチルコリンがinterleukin-1βの発現を抑制する機序について,受容体の関与や細胞内シグナル伝達などに関して培養細胞を用いて研究を行う。
脊椎動物の肺の獲得プロセスに関する進化発生学的研究

ゼブラフィッシュのTbx4、Nkx2.1、Fgf10が浮力を調節する鰾の組織芽に発現していることを明らかにした。Fgf10のアンチセンスモルフォリーノ単独もしくはTbx4とTbx5のアンチセンスモルフォリーノを同時に胚へ顕微注入したところ、鰾芽におけるNkx2.1の発現が消失し、鰾が低形成もしくは欠失することを明らかにした。ポリプテルスのTbx4とNkx2.1遺伝子のcis制御領域の解析のためにBACクローンを得て、Nkx2.1 BACクローンのショットガンライブラリーを作成した。マウスとゼブラフィッシュのゲノム情報を用いてNkx2.1とTbx4のcis制御領域(non-coding region)の比較を行った。Tbx4遺伝子はマウス-ゼブラフィッシュ間で極めて類似しており、高度に保存されている領域が多数見つかった。これに対し、Nkx2.1遺伝子近傍のnon-codingregionには高度に保存された配列が5箇所存在した。これらの保存された配列をレポーター遺伝子と組み合わせ、遺伝子組換えゼブラフィッシュを作成してエンハンサー活性を検討したところ、各配列単独では肺芽/鰾芽領域にレポーターレポーター遺伝子は発現しなかった。また前述の高度に保存されている5箇所の配列を結合させた人工エンハンサーを作成したがこれも鰾芽には発現しなかった。ナメクジウオのTbx2/3とTbx4/5をクローニングし、その発現パターンをWISHによって明らかに、両遺伝子が咽頭(鰓嚢)に発現していることを確かめた。1.ニシツメガエル胚において、Tbx4、Tbx5、Nkx2.1、Fgf10が肺芽に発現していることが明らかとなり、これら遺伝子調節ネットワークが四足動物において普遍的に肺の形成に関わっていることが示唆された。2.ハナカケトラザメのTbx4、Nkx2.1遺伝子の発現パターンの解析を行った。軟骨魚類において肺は存在しないが、発生中の肺芽相当領域にも明確な発現は観察されなかった。3.肺を持たないゼブラフィッシュ胚で、Tbx4、Nkx2.1、Fgf10が浮力を調節する鰾(ウキブクロ)の組織芽に発現していることを明らかにした。4.肺と鰾がその形成に同じTbx-Fgf10-Nkx2.1遺伝子調節ネットワークを用いていることが示唆されたため、肺を持つマウスと鰾を持つゼブラフィッシュのこの遺伝子調節ネットワークが同じ起源のものであるかを確かめるために各遺伝子の発現制御領域の比較解析を行った。これらの保存された配列をレポーター遺伝子と組み合わせ、遺伝子組換えゼブラフィッシュを作成してエンハンサー活性を明らかにすることを試みた。現在のところ各配列単独では肺芽/鰾芽領域にレポーター遺伝子は発現していない。5.ポリプテルスのTbx4とNkx2.1遺伝子のcis制御領域の解析のためにBACクローンをスクリーニングし、それぞれのクローンを得た。Nkx2.1のBACクローンのショットガンライブラリーを作成し、支援班にショットガンシークエンスを依頼した。
霊長類の四足歩行メカニズム:不連続な模擬的樹上環境による実験的アプローチ

霊長類は比較的大型の動物であるにもかかわらず、樹上を俊敏に移動できる種が多くいる点において、稀な哺乳類集団である。霊長類の四足歩行には、手足による把持運動、体重の後方移動、そしてダイアゴナル・シーケンス歩容といった他の哺乳類には見られない特徴が報告されており、こうした特徴のすべてについて霊長類の樹上生態との関連が指摘されている。本研究では、ニホンザルの四足歩行について実験室環境における運動学的分析を中心に遂行した。目的は運動学的データからニホンザルの四足歩行における前肢および後肢の運動制御機構を推測し、先行研究の知見のあるヒトやネコの位置的行動における体肢の制御機構と比較することであった。前肢と後肢の各々を3つのセグメントに分割し、セグメント間の協調関係を主成分分析によって捉えた。ニホンザルの四足歩行において、後肢は体肢の向きと体肢の長さという2つのモジュールによって制御された。このモジュール戦略は体肢の運動制御を単純化する機構として、ヒトの二足歩行における後肢の制御やネコの四足姿勢における四肢の制御に採用されていることが知られている。これに対して、ニホンザルの四足歩行における前肢の制御は従来提示されてきた機構とは異なるものであった。結果からは次に示す2種類の前肢の制御機構が可能性として推測された。1)モジュール戦略が採用されていない。2)モジュール戦略はある(その中の一つは体肢の向きである)が、単純化には貢献しない。いずれの機構がニホンザルの前肢の制御に採用されているにしても、本研究の結果からは、霊長類の四足歩行が体肢の運動制御の点においても特異的であることが示唆される。今後は、この結論を基に新たな仮説を設定し、ニホンザル以外の霊長類種や比較対象として霊長類以外の動物について運動学的分析をおこない、仮説の検証を重ねていく必要がある。
鎌倉時代書跡の様式展開による基礎的研究

本年度は、第3年目の最終年にあたり、一応これまでの研交成果をふまえながらまとめる方向で進めた。昭和63年度および平成元年度の過去2年間の調査研究のデ-タをもとに、さらに本年度に実施した調査研究のデ-タを加えて勘案すると、鎌倉時代に書かれた書跡のこの時代狂特の様式がうかがえる。たとえば、別途作成した「研究成果報告書」にも示したように、この時代には、とくに、高僧遺墨いわゆる墨跡が注目され、しかも、その筆者は文化史・宗教史上にも著名な人々で、それぞれ個性味豊かで質的にも高い書風が展開されている。しかし、主流を成す書風は、平安末期の藤原忠通を祖とする法性寺流、これを受けた後京極流、および平安の藤原行成を祖とする世尊寺流と考えられる。ついで本研究において、遺品整理を進めるにあたり、仮りに(1)写経・(2)典籍・(3)詩歌・(4)墨跡・(5)文書に区分してデ-タを収録した。それらは実地調査のほか、近年の展覧会に出品されたものでカタログに所収されたものも含まれている。それによると、(1)(5)の各内容よって、少しずつ書体の趣が異なるようであり、また、筆者によってもかなり個人差が見える。のみならず制作年代が、平安に近いものと、ずっと下った鎌倉末期さらに南北朝時代のものとは、書風はもとより料紙装飾たとえば金銀切箔砂子などの装飾法にも違いが明らかであり、また金銀泥下絵についても同様に判せられる。なお、上記の(1)(5)の遺品は国文学・歴史その他人文科学の重要資料となりうるもので、今後、現存遺品の資料収集と合わせ、文献資料を援用しながら、鎌倉書跡研究の解明を果たしたいと考える。現時点において研究発表の詳細は未定ながら、後日、単行本または論文によって成果を示すつもりである。本研究を総合的に解明するためには、まず鎌倉時代書跡の現存遺品を中心とする資料収集が必要とされる。そのため、本年は文献資料およびその関連図書を可能な範囲で備え、書跡遺品の現存状況を確認するとともに、それにもとずき資料収集を着手した。調査等の時間的制約もあり、当初掲げた対象とすべき書跡遺品は意外に数が多く、それらの全般にわたることは困難なため、従来手がけた研究に直結する詩歌や文書などから順に調査研究を進めている。着手して改めてわかったことは、現存遺跡の国文学・歴史等の本文的価値はもとより、何よりも、筆者・制作年代等の判明する点で、今後の研究を進展する上での大きな手がかりが、漸次把握されつつあることである。それらにもとずき、最終的に現存遺品資料に文献資料を合わせて検討の結果、鎌倉時代の各筆者別の書風の特徴を知るとともに、共通的な書風から把えた時代性といったものを引き出す可能性が得られたことは、収穫であった。今後の方針としては、現存遺品の調査研究をさらに協力に推進することが必要とされるため、次年度においてはとくにその点に留意して研究に臨むこととしたい。なお、当研究の成果については、次年度以後に逐次、論文等で発表の予定である。本年度は、鎌倉時代書跡のうち、筆者または制作年代の明らかなもので、未調査分の調査研究を進展させるよう心がけた。とくに、京都・西本願寺所蔵の後鳥羽天皇ほか筆の「熊野懐紙」や、宮内庁所蔵の「後鳥羽天皇宸翰消息」などを中心に、調査研究ならびに写真撮影を果たし、今後の研究基礎資料として確保した。これらの資料を通覧すると、鎌倉時代の宮廷書道の実態がよく把握できるようである。

たとえば、同時代の懐紙や消息などの書式あるいは書風に共通性が認められ、さらに、文書のもつ史料性、本文に見る国文学的価値も見逃がしがたい資料も見出される。これらは、他の文献資料による裏付けによって、さらに重要性が増すであろう。とりわけ、書跡の様式展開を見ると、その時代に核となる人物に焦点を当て(たとえば、後鳥羽天皇など)、その書写様式や書風などを、周辺に置かれる人物の作例と比較対照し、両者の相関性を見ることも重要な意義をもつと思われる。これによって、一つの時代様式を把握する手がかりが得られ、また一つの流派(書流)の発生および展開を見ることが可能である。今後は、いくつかの主要な人物、あるいは代表的作品に限定して、研究を進展させる予定である。本年度は,第3年目の最終年にあたり、一応これまでの研究成果をふまえながらまとめる方向で進めた。昭和63年度および平成元年度の過去2年間の調査研究のデ-タをもとに,さらに本年度に実施した調査研究のデ-タを加えて勘案すると,鎌倉時代に書かれた書跡のこの時代独特の様式がうかがえる。たとえば,別途作成した「研究成果報告書」にも示したように、この時代には,とくに、高僧遺墨いわゆる墨跡が注目され、しかも,その筆者は文化史・宗教史上にも著名な人々で,それぞれ個性味豊かで質的にも高い書風が展開されている。しかし,主流を成す書風は,平安末期の藤原忠通を祖とする法性寺流,これを受けた後京極流,および平安の藤原行成を祖とする世尊寺流と考えられる。ついで本研究において,遺品整理を進めるにあたり,仮りに(1)写経・(2)典籍・(3)詩歌・(4)墨跡・(5)文書に区分してデ-タを収録した。それらは実地調査のほか,近年の展覧会に出品されたものでカタログに所収されたものも含まれている。それによると,(1)(5)の各内容によって,少しずつ書体の趣が異なるようであり、また,筆者によってもかなり個人差が見える。のみならず制作年代が,平安に近いものと,ずっと下った鎌倉末期さらに南北朝時代のものとは,書風はもとより料紙装飾たとえば金銀切箔砂子などの装飾法にも違いが明らかであり,また金銀泥下絵についても同様に判ぜられる。なお,上記の(1)(5)の遺品は国文学・歴史その他人文科学の重要資料となりうるもので,今後,現存遺品の資料収集と合わせ,文献資料を援用しながら,鎌倉書跡研究の解明を果たしたいと考える。現時点において研究発表の詳細は未定ながら,後日,単行本または論文によって成果を示すつもりである。