hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
がん疼痛治療における非ステロイド性消炎鎮痛薬の中止に関する検討

これまで、がん疼痛を持つオピオイド鎮痛薬とNSAIDsが併用投与されている患者においてNSAIDsの中止を日常臨床でどの程度実施しているかについては報告がなかった。本研究では、がん診療拠点病院の緩和ケアチームに勤務している専従医師に対して、がん疼痛に対してオピオイドと非ステロイド性消炎鎮痛薬(NSAIDs)が併用されている患者において、どの程度NSAIDsが中止されていることがあるのかについてインタビュー調査を行い、NSAIDsの中止基準について明らかにした。今年度中に、施設に質問紙を郵送する計画であったが、予備調査から作成する質問紙の作成が遅れたため。対象となる施設に対して、質問紙を郵送し、回収後に解析を予定している。緩和医療対象となる施設に対して、質問紙を郵送し、回収した後に解析を予定している。質問紙の郵送費、解析するための人件費、会議等の出席するための旅費が算定できなかっため。質問紙の郵送で生じる通信費が使用できておらず、次年度に繰り越すため。平成28年度に質問紙の郵送費、解析に伴う人件費、論文作成、論文投稿に費用を使用する予定である。質問紙の郵送、回収、解析に使用する予定である。
新生血管選択的な超音波造影ガス封入リポソームによる低侵襲性血管障害治療システム

本研究では,これまでに開発してきた超音波診断造影と薬物・遺伝子導入を可能とする超音波造影ガス封入リポソーム(バブルリポソーム)に,さらに新生血管に集積性の高い標的指向性ペプチドを付与した新規分子標的型バブルリポソームの作製に成功し,これを利用した超音波診断と治療的超音波を併用した遺伝子送達・導入法を確立した.さらに新規な超音波造影剤を利用した血管障害治療システムの構築を行うために遺伝子を搭載可能なカチオン性脂質を利用したバブルリポソームを作製し,虚血部位へのバブルの送達効果を超音波診断造影で確認した.実際に虚血性疾患モデルへの血管新生遺伝子(bFGF)の全身循環を介した超音波遺伝子導入を行うことで,血管新生因子の増加とそれに伴う血流回復を認めることを明らかとした.以上のことから本法が血管障害治療に有用な一手段となることを明らかとした.本研究では,これまでに開発してきた超音波診断造影と薬物・遺伝子導入を可能とする超音波造影ガス封入リポソーム(バブルリポソーム)に,さらに新生血管に集積性の高い標的指向性ペプチドを付与した新規分子標的型バブルリポソームの作製に成功し,これを利用した超音波診断と治療的超音波を併用した遺伝子送達・導入法を確立した.さらに新規な超音波造影剤を利用した血管障害治療システムの構築を行うために遺伝子を搭載可能なカチオン性脂質を利用したバブルリポソームを作製し,虚血部位へのバブルの送達効果を超音波診断造影で確認した.実際に虚血性疾患モデルへの血管新生遺伝子(bFGF)の全身循環を介した超音波遺伝子導入を行うことで,血管新生因子の増加とそれに伴う血流回復を認めることを明らかとした.以上のことから本法が血管障害治療に有用な一手段となることを明らかとした.本年度は,分子標的型の新規超音波造影剤としてのAG73修飾バブルリポソームを調製し,その機能評価をin vitro実験系にて行った.ラミニン由来細胞接着性ペプチドの中でも血管内皮細胞に選択性が高いとされているAG73(Cys-AG73)を用いて, PEG末端のMalemide基と, Cys残基のSH基の化学反応によってペプチド修飾リポソームを調製したところ,効率よくMaleimide基にペプチドを導入することに成功した。次に平均粒子径140-170 nmのAG73修飾リポソームに,超音波造影剤であるパーフルオロプロパンガスを封入することによりAG73修飾バブルリポソームを調製した。平均粒子径は、500800nm付近であった。調製したAG73修飾バブルリポソームの機能評価として,増殖性ヒトさい帯静脈内皮細胞(HUVEC細胞)との接着能,ならびに,その造影効果をin vitro系で明らかとした。さらに,血流中での血管内皮細胞への接着能を還流培養システムによる還流培養系を用いて評価を行い,AG73修飾バブルリポソームのin vivoを想定した血管病変部位への接着の可能性を示唆した。また, AG73修飾バブルリポソームと超音波併用による遺伝子導入効果を検討した。AG73修飾バブルリポソームを細胞へ接着させた状態で超音波照射することで,細胞膜上で効率よくキャビテーションが生じ,結果として遺伝子導入効果が増強することが示された。以上,AG73修飾バブルリポソームは増殖血管内皮細胞と安定に相互作用することから,新生血管の診断造影に有効な分子標的型の新規超音波造影剤として,さらには,血管病変の治療を目的とした遺伝子導入キャリアーとしての可能性が示された。本年度は,分子標的型の新規超音波造影剤としてのAG73修飾バブルリポソームの新生血管への標的指向性を評価するために,DiI蛍光色素で修飾したAG73修飾リポソームを作製し,Dorsal air sac法により,ICRマウス背部に人工的に新生血管を誘発した簡易モデルを作製し,AG73修飾リポソームを尾静脈投与し,新生血管への集積能について調べた.その結果,ペプチド未修飾リポソーム(PEG-リポソーム),コントロールペプチド修飾リポソーム(AG73T修飾リポソーム)においては,集積能は認められなかったのに対し,AG73修飾リポソームにおいて新生血管への顕著な集積が認められた.このことから,AG73修飾リポソームの新生血管への標的指向能が明らかとなった.次にDiI蛍光色素で修飾したAG73修飾リポソームに造影ガスを封入したAG73修飾バブルリポソームを調製し,DASモデルマウスに尾静脈投与したところ,背部皮下における集積が,蛍光顕微鏡で観察された.また,バブルリポソームとルシフェラーゼ発現プラスミド(pCMV-Luc)を尾静脈内投与した後に下肢部筋組織に対して,超音波照射(1MHz,2W/cm^2)したところ,超音波照射部位における遺伝子発現が観察された.以上のことから,AG73修飾バブルリポソームを利用することで血管新生関連遺伝子を下肢部筋組織へと送達する新生血管選択的な超音波造影ガス封入リポソームによる低侵襲性血管障害治療システムが確立できる可能性が示唆された.本年度は、分子標的型の新規超音波造影剤としてのAG73修飾バブルリポソーム(AG-BL)に遺伝子を搭載できるようにカチオニック脂質含有リポソーム(CtBL)の作製を試みた。さらにその遺伝子キャリアーとしての有用性をHUVEC、下肢虚血モデルマウスを用いて評価した。

はじめにプラスミドDNAを搭載可能なバブルリポソームの作製を、カチオニック脂質DOTAPと中性脂質DPPCを用いて、リポソームを調製し、超音波造影ガス封入によるバブル化を行った。このバブルに蛍光修飾プラスミドDNAを添加したところ、バブル表面への結合がFACSより、確認できた。さらに、カチオニック脂質を含むAG-BLの調製が可能であること、FACS解析から、HUVECとの強い相互作用性も示された。そこでin vivoでの有用性を明らかにするために、AG-CtBLにルシフェラーゼ発現プラスミドを搭載し、下肢虚血モデルマウスに静脈内投与後、虚血部位への体外からの超音波照射を行ったが、有意な活性上昇は認められなかった。一方、ペプチド未修飾型のCtBLを用いた場合では、虚血部位において、顕著な遺伝子発現の上昇が認められ、in vivoイメージングシステムでも、虚血部位において、限局した発現が認められた。さらに、血管新生促進因子(bFGF)発現プラスミドをCtBLに搭載し、同様にモデルマウスに静脈内投与し、体外からの超音波照射をしたところ、qRT-PCR解析による血管新生関連因子の発現誘導とそれに伴う血流回復が認められ、本導入法の有用性が明らかとなった。以上より、全身投与を可能とするCtBLは、低侵襲的な血管新生遺伝子治療システムの開発において、有用な遺伝子キャリアーとなりうることが期待された。AG-CtBLを用いたin vivo遺伝子導入法に関しては、今後の更なる検討が必要と考えられた。
温度勾配チャンバを用いた高CO_2および高温によるイネ葉老化過程の遺伝子発現解析

本研究では、同一空間内で連続的な温度勾配を実現できる自然光型温室を用いて、僅かな気温のシフトおよび高CO_2濃度の組み合わせがイネの葉の老化に与える影響を解析した。実験は、CO_2濃度を外気と同じ(対照区)か外気+200ppm(高CO_2区)に設定した2棟のチャンバー内で、高温区(外気+2°C)、中温区(外気と同等)、低温区(外気-2°C)の処理を行った。品種はあきたこまちを用い、5月10日出芽、6月13日に6Lのポット当り2個体ずつ移植した。施肥窒素は、0.6gN/株とした。葉齢13葉および14葉頃に、12葉および13葉の光化学系IIのFv/Fm値およびSPADを、葉齢14葉頃に、13葉および14葉の光合成速度をLI6400(Licor社)により測定した。それぞれの試験区の主幹の出穂直後に生育調査およびSPADを測定した。イネの地上部乾物重は僅かに高CO_2区で対照区よりも高くなる傾向を示したが、個体当りの緑葉の葉面積はいずれの温度処理においても高CO_2区で小さくなった。第12葉のFv/Fm値は、13葉期には対照・高温区で高CO_2・高温区よりも高かったが、14葉期には共に低下した。第13葉では処理区による差はあまり見られなかった。SPADはいずれの葉齢でも高CO_2の影響は明らかではなかった。各個体における13葉と14葉の光合成速度を比較すると、14葉はCO_2区で対照区より高く、13葉ではあまり差がない結果となった。これらから、高CO_2濃度下の特に高温下では葉齢に伴い光合成速度が大きく低下することが確認された。また、初期のFv/Fmは高CO_2・高温区で対照・高温区よりも高かったものの、その後低下し対照区と差が無くなったことから、光化学系でも同様に光合成活性の低下が生じていることが観察された。
糖尿病におけるHDL代謝-HDL受容体SR-BI/CLA-1の役割と治療戦略-

糖尿病、特に高血糖では肝臓におけるHDL受容体SR-BI/CLA-1の発現を減少させる。高血糖はp38-MAPKを活性化し、核内のおけるSp-1を活性化する。Sp-1はHDL受容体SR-BI/CLA-1のプロモーター領域に結合し、遺伝子転写を抑制する。HDL受容体が減少することにより、HDL代謝が遅延し、糖尿病における動脈硬化を促進する。逆に糖尿病治療薬であるチアゾリジン誘導体は、肝臓におけるSR-BI/CLA-1の発現を誘導することで、HDL代謝を活性化している可能性が考えられた。糖尿病は、動脈硬化性疾患発症の最も重要な危険因子であるとされている。また糖尿病患者においてはHighdensity lipoprotein(HDL)コレステロールが低下し、HDL代謝異常が指摘されている。我々はヒト遺伝子CLA-1が、マウスSR-BIのホモログとしてヒトHDL受容体であることを同定してきた。現在までに我々はSR-BI/CLA-1の機能として、コレステロール逆転送系を介して動脈硬化に関与すること、アポトーシス細胞を認識し生体内防御に関与すること、細胞増殖、血管内皮細胞における血管弛緩因子(NO)の産生亢進を示し、SR-BI/CLA-1が様々な生命現象を仲介する多機能性受容体であることを提唱してきた。今年度の研究は、糖尿病(高血糖状態)が惹起するHDL代謝異常をHDL受容体SR-BI/CLA-1の観点から検証した。肝細胞におけるSR-BI/CLA-1の発現は、血糖値に応じて低下することが判明した。この高血糖による抑制はSR-BI/CLA-1の転写レベルで認められた。このメカニズムは、細胞内情報伝達系p38-MAPK pathwayおよび転写因子Sp1の活性化、Sp1によるSR-BI/CLA-1の転写抑制を介していた。さらには細胞からコレステロールをくみ出す分子ABCA1も同様の機序により抑制された。糖尿病モデル動物を使用した検討では、高血糖状態では肝臓におけるSR-BI/CLA-1が低下した。2,高血糖による血管内皮機能障害とSR-BI/CLA-1糖尿病による動脈硬化発症の一つの機序として、血管内皮細胞障害が提唱されている。糖尿病による高血糖、レニン-アンギオテンシン系の亢進は、血管弛緩因子である一酸化窒素(NO)の産生低下を惹起することが指摘されている。SR-BI/CLA-1は血管内皮細胞に発現しており、NO産生を促進する。我々は、HDLによるNO産生酵素(NOS)の活性化がSR-BI/CLA-1のC末端を介するPI3-K/Akt pathwayによることを報告した(Hypertension2007)。高血糖は、血管内皮細胞におけるSR-BI/CLA-1遺伝子発現を抑制した。高血糖によるSR-BI/CLA-1抑制は、転写レベルではFox0の不活性化(リン酸化)がSR-BI/CLA-1の転写調節に関与することが示唆された。現在までに我々はSR-BI/CLA-1の機能として、コレステロール逆転送系を介して動脈硬化に関与することなどSR-BI/CLA-1が様々な生命現象を仲介する多機能性受容体であることを提唱してきた。一方糖尿病は、動脈硬化性疾患発症の最も重要な危険因子であるとされている。また糖尿病患者においてはHigh density lipoprotein(HDL)コレステロールが低下し、HDL代謝異常が指摘されている。今年度の研究は、肝臓におけるSR-BI/CLA-1の遺伝子発現調節と糖尿病治療薬(チアゾリジン誘導体)関係について検討した。また膵臓局所におけるHDL代謝と脂肪毒性について検討をおこなった。糖尿病(高血糖状態)が惹起するHDL代謝異常をHDL受容体SR-BI/CLA-1の観点から検証した。1、肝臓におけるSR-BI/CLA-1発現変動とチアゾリジン誘導体について肝細胞におけるSR-BI/CLA-1の発現は、チアゾリジン誘導体(TZD)投与よって促進されることが判明した。このTDZによる促進はSR-BI/CLA-1の転写レベルで認められた。このメカニズムは、核内受容体PPAR-γとRXRの結合がヘテロダイマーを形成し、TZDが結合することにより促進活性化されることが判明した。TZDの投与はコレステロール逆転送系を活性化し、抗動脈硬化に作用することが考えられた。2、膵臓においてもHDL代謝が存在し、GLP-1 analog, exenatideは膵臓におけるABCA1発現を誘導し、HDLへのコレステロール汲みだしを促進し、膵β細胞機能を改善していることが判明した。DPPIV, GLP-1による糖尿病治療のメカニズムの一つとして、HDL代謝改善作用が考えられた。

我々はヒト遺伝子CLA-1が、マウスSR-BIのホモログとしてヒトHDL受容体であることを同定してきた。現在までに我々はSR-BI/CLA-1の機能として、コレステロール逆転送系を介して動脈硬化に関与することなどSR-BI/CLA-1が様々な生命現象を仲介する多機能性受容体であることを提唱してきた。一方糖尿病は、動脈硬化性疾患発症の最も重要な危険因子であるとされている。また糖尿病患者においてはHigh density lipoprotein(HDL)コレステロールが低下し、HDL代謝異常が指摘されている。昨年度の研究は、肝臓におけるSR-BI/CLA-1の遺伝子発現調節と糖尿病治療薬関係について検討した。今年度は、膵臓局所におけるHDL代謝と脂肪毒性について検討をおこなった。膵β細胞局所におけるHDL代謝は、脂肪毒性の観点から注目されており、細胞内コレステロール濃度上昇は、インスリン分泌不全をきたしている。細胞内コレステロール濃度の規定因子であるABCA1遺伝子について検討した。ABCAIはHDLにコレステロールを転送してコレステロール濃度を調整している。我々は、インクレチンであるGLP-1 analog,exenatideが膵臓におけるABCA1発現を誘導し、HDLへのコレステロール汲みだしを促進し、膵β細胞機能を改善していることを明らかにした。これらの作用機序は、カルシウム情報伝達系CaMKK/CaMKIV pathwayを介し、転写因子PREBをリクルートしていた。一方、高血糖は、p38-MAPKを介して、ABCA1の発現を低下させた。
知的障害を持つ人のアドボカシィに関する調査・研究

知的障害を持つ人たちのアドボカシィ運動の動向について,3点を中心に検討した.主な結果は次の通りである.(1)アドボカシィ運動の歴史と思想の整理:文献研究によって,アドボカシィ運動をノーマライゼーションの原理から必然的に導き出される思想的帰結として位置付けることができた.特に知的障害者のQOLの向上のため,アドボカシィ運動の発展が不可欠であることが指摘された.我が国においては,この面において欧米諸国と比較して相対的な立ち遅れが指摘されるが,その背景には我が国文化特有のパタ-ナリズムの影響が大きいと考えられた.福祉制度におけるパタ-ナリズムの影響については,今後,体系的に明らかにしていく必要があると思われる.(2)法的・制度的アドボカシィ:上記の日本型パタ-ナリズムのために,我が国の福祉制度にはこれまで法的問題として厳密に検討されることなくすんでいた.論議がないことは,あまり大きな問題がおこっていないことの表れと考えれば,それ自体きわめて幸運なことである.しかし,知的障害者の高齢化に伴い,今後は新たな問題が生じてくる可能性が指摘された.(3)セルフ・アドボカシィの可能性の検討:過去4年間,追跡してきた施設入所中高齢障害者を対象に面接調査を実施した.自己決定機会の拡大が自己決定能力の開発を促し,同時にセルフ・アドボカシィ意識の向上につながることが示唆された.知的障害を持つ人たちのアドボカシィ運動の動向について,3点を中心に検討した.主な結果は次の通りである.(1)アドボカシィ運動の歴史と思想の整理:文献研究によって,アドボカシィ運動をノーマライゼーションの原理から必然的に導き出される思想的帰結として位置付けることができた.特に知的障害者のQOLの向上のため,アドボカシィ運動の発展が不可欠であることが指摘された.我が国においては,この面において欧米諸国と比較して相対的な立ち遅れが指摘されるが,その背景には我が国文化特有のパタ-ナリズムの影響が大きいと考えられた.福祉制度におけるパタ-ナリズムの影響については,今後,体系的に明らかにしていく必要があると思われる.(2)法的・制度的アドボカシィ:上記の日本型パタ-ナリズムのために,我が国の福祉制度にはこれまで法的問題として厳密に検討されることなくすんでいた.論議がないことは,あまり大きな問題がおこっていないことの表れと考えれば,それ自体きわめて幸運なことである.しかし,知的障害者の高齢化に伴い,今後は新たな問題が生じてくる可能性が指摘された.(3)セルフ・アドボカシィの可能性の検討:過去4年間,追跡してきた施設入所中高齢障害者を対象に面接調査を実施した.自己決定機会の拡大が自己決定能力の開発を促し,同時にセルフ・アドボカシィ意識の向上につながることが示唆された.
低圧気体の安定性に関する気体論的研究

1.低圧気体における二次元ベナ-ル問題を気体論を基に数値計算によって解析し,次のような結果を得た:(1)ベナ-ル対流(定常ロール解)が発生する条件(静止状態の安定条件)を明らかにした;(2)流れの場の形成に対する初期条件の影響を調べた;(3)単一では安定に存在するロールを並べたロール列挙を取り上げ,その安定条件と不安定解の新しいロール列への遷移の様子等が調べた.(1)においては,古典流体力学で知られている安定限界と別種の限界があることが示された.この限界が希薄化効果によるものか,古典流体力学の解析において余分に付加されている条件によるのかはさらに検討が必要である.2.低圧気体のテーラー・クェット流問題を気体論に基づき数値解析し,テーラー渦の発生する条件およびテーラー渦の構造を明らかにした.さらに2円筒間に温度差がある場合に研究を進めた.この結果,温度差は,ベナ-ル問題から類推される結果に相違し,流れを安定化する方向に働くことが示された.また直接シミュレーション法の安定性問題への適用の難しさを示す例も得られた.3.2の問題において,円筒が気体の凝縮相である場合(その表面で蒸発や凝縮が起る場合)に研究を進めた.この場合,軸対称かつ軸方向に一様な簡単な流れにおいて新しいタイプの分岐が存在することが示された.4.3の流れの連続体極限の解析的研究により,連続体極限で消滅するはずの希薄化効果がその極限まで及ぶこと(幽霊効果の存在)を示した.これは従来の流体力学の根幹を揺るがし,分子気体力学に新しい役割を与える重要な成果である.5.加熱された平板まわりの低圧気体を気体論に基づき数値解析し,希薄度を増すにつれ,自然対流から温度場によって誘起される流れの混在した場へと遷移していく様子を示した.6.高速希薄気流の安定性の研究に着手し,平板を過ぎる高速希薄気流の気体論に基づく数値解析を行った.1.低圧気体における二次元ベナ-ル問題を気体論を基に数値計算によって解析し,次のような結果を得た:(1)ベナ-ル対流(定常ロール解)が発生する条件(静止状態の安定条件)を明らかにした;(2)流れの場の形成に対する初期条件の影響を調べた;(3)単一では安定に存在するロールを並べたロール列挙を取り上げ,その安定条件と不安定解の新しいロール列への遷移の様子等が調べた.(1)においては,古典流体力学で知られている安定限界と別種の限界があることが示された.この限界が希薄化効果によるものか,古典流体力学の解析において余分に付加されている条件によるのかはさらに検討が必要である.2.低圧気体のテーラー・クェット流問題を気体論に基づき数値解析し,テーラー渦の発生する条件およびテーラー渦の構造を明らかにした.さらに2円筒間に温度差がある場合に研究を進めた.この結果,温度差は,ベナ-ル問題から類推される結果に相違し,流れを安定化する方向に働くことが示された.また直接シミュレーション法の安定性問題への適用の難しさを示す例も得られた.3.2の問題において,円筒が気体の凝縮相である場合(その表面で蒸発や凝縮が起る場合)に研究を進めた.この場合,軸対称かつ軸方向に一様な簡単な流れにおいて新しいタイプの分岐が存在することが示された.4.3の流れの連続体極限の解析的研究により,連続体極限で消滅するはずの希薄化効果がその極限まで及ぶこと(幽霊効果の存在)を示した.これは従来の流体力学の根幹を揺るがし,分子気体力学に新しい役割を与える重要な成果である.5.加熱された平板まわりの低圧気体を気体論に基づき数値解析し,希薄度を増すにつれ,自然対流から温度場によって誘起される流れの混在した場へと遷移していく様子を示した.6.高速希薄気流の安定性の研究に着手し,平板を過ぎる高速希薄気流の気体論に基づく数値解析を行った.1.低圧気体におけるベナ-ル問題およびテーラー・クェット問題を,気体論に基づき数値解析し,ベナ-ル流およびテイラー渦が発生する条件と共に,渦流の構造,解の分岐の様子等を明らかにした.2.上記テーラー・クェット問題において,円筒が気体と同じ物質の凝縮相である場合(その表面では一般に蒸発・凝縮が生じる)に進み,解析および数値解析の両面から研究を行った.ここでは1.の場合にくらべ,流れの場がさらに多様な振舞をすることが示され,流れの分岐の様子および個々の流れの振舞が明らかにされた.特に,次項3.で示すように,連続極限の気体の振舞を表すのに正しいとされてきた従来の流体力学が根本的欠陥を持つことを示す重要な結果が導かれている.3.2.の問題において,小さい希薄度に対してボルツマン方程式に基づき漸近解析を行い,連続体極限における解を求めた.問題に含まれるパラメータの広い範囲にわたって,蒸発・凝縮が生じない場合があることが明らかになっが,この場合流れは,古典流体力学のクェット流に一致するように一見思われるが,実はそうではなく,連続体極限で消滅する希薄化効果による流れの影響がその極限まで及ぶこと(いわば幽霊効果の存在)が示された.これは,従来の流体力学の根幹をゆるがし,分子気体力学に新しい役割を与える極めて重要な成果である.

4.温度場に起因する低圧気体特有の流れ(壁面温度の非一様性によって誘起される熱ほふく流等)は,3.で述べた幽霊効果が決定的影響を与えることが明らかになった.ここではその流れの一つとして,加熱平板まわりに誘起される低圧気流の気体論に基づく数値解析および実験を行い,希薄度を増すと自然対流から低圧気体特有の板の先端に誘起される流れの混在した場へ遷移していく様子を明らかにした.さらに,熱遷移流に関しては,機械部分のない真空ポンプへの応用等に関する実用的にも重要な研究成果が得られている.1.低圧気体における二次元ベナ-ル問題を気体論を基に数値計算によって解析し,次のような結果を得た:(1)ベナ-ル対流(定常ロール解)が発生する条件(静止状態の安定条件)を明らかにした;(2)流れの場の形成に対する初期条件の影響を調べた;(3)単一では安定に存在するロールを並べたロール列解を取り上げ,その安定条件と不安定解の新しいロール列への遷移の様子等を調べた.(1)においては,古典流体力学で知られている安定限界と別種の限界があることが示された.この限界が希薄化効果によるものか,古典流体力学の解析において余分に付加されている条件によるのかはさらに検討が必要である.2.低圧気体のテーラー・クェット流問題を気体論に基づき数値解析し,テーラー渦の発生する条件およびテーラー渦の構造を明らかにした.さらに2円筒間に温度差がある場合に研究を進めた.この結果,温度差は,ベナ-ル問題から類推される結果に相違し,流れを安定化する方向に働くことが示された.また直接シミュレーション法の安定性問題への適用の難しさを示す例も得られた.3.2の問題において,円筒が気体の凝縮相である場合(その表面で蒸発や凝縮が起る場合)に研究を進めた.この場合,軸対称かつ軸方向に一様な簡単な流れにおいて新しいタイプの分岐が存在することが示された.4.3の流れの連続体極限の解析的研究により,連続体極限で消滅するはずの希薄化効果がその極限まで及ぶこと(幽霊効果の存在)を示した.これは従来の流体力学の根幹を揺るがし,分子気体力学に新しい役割を与える重要な成果である.5.加熱された平板まわりの低圧気体を気体論に基づき数値解析し,希薄度を増すにつれ,自然対流から温度場によって誘起される流れの混在した場へと遷移していく様子を示した.6.高速希薄気流の安定性の研究に着手し,平板を過ぎる高速希薄気流の気体論に基づく数値解析を行った.
神経回路網形成や可塑的変化におけるMT-MMPの関与

神経系の可塑的変化というと、LTPやLTDといったシナプスにおける伝達効率の変化のみが注目されているが、同時にシナプスが再構築され、形態的な変化が生じることも明らかになりつつある。その変化には早いダイナミックな反応による細胞外マトリックスの分解が必須であり、プロテアーゼの関与が考えられる。細胞外マトリックスの分解に関わる膜型マトリックスメタロプロテアーゼ(MT-MMP)のうち、MT4-、MT5-MMPが神経系に発現していることが知られている。そこで最初に、MT4-、MT5-MMPの詳細な発現部位を、遺伝子欠損マウスを用いて解析した。定量的RT-PCRおよびLacZ染色、免疫染色によりMT4-MMPおよびMT5-MMPの生理的な発現部位を同定した。神経系の形態変化が観察される例として、神経因性疼痛の発症の際に観察される、脊髄後角における軸策の伸長が知られている。そこで、MT5-MMP遺伝子欠損マウスを用いて神経因性疼痛モデルを作成し、疼痛に対する反応を検討したところ、遺伝子欠損マウスで疼痛に対する閾値の低下が観察された。また、その際、遺伝子欠損マウスで軸索の伸長が認められなかった。このことから、疼痛に対する閾値の低下はMT5-MMPの欠損によると考えられ、また、その原因として、遺伝子欠損マウスで軸索の伸長が起こらなかったことによると考えられた。1.現在、神経系の可塑的変化というと、LTPやLTDといったシナプスにおける伝達効率の変化のみが注目されているが、同時にシナプスが再構築され、形態的な変化が生じることも明らかになりつつある。その変化には早いダイナミックな反応による細胞外基質の分解が必須であり、プロテアーゼの関与が考えられる。細胞外基質の分解に関わる膜型マトリックスメタロプロテアーゼ(MT-MMP)の中で、MT4-MMPおよびMT5-MMPが神経系に発現していることが知られている。そこで最初にMT4-MMPおよびMT5-MMPの詳細な発現部位を、遺伝子欠損マウスを用いて解析した。定量的RT-PCRおよびLacZ染色、免疫組織染色によりMT4-MMPおよびMT5-MMPの生理的な発現部位を同定した。2.神経系の形態変化が観察される例として、神経因性疼痛の発症に伴い、触刺激を伝え神経後角深層(第IIIIV層)に終末するAβ線維が、痛覚を伝えるC線維の終末部(第II層)へ軸策伸長を起こすことが知られている。そこで、MT5-MMP遺伝子欠損マウスを用いて神経因性疼痛モデルを作製したところ、遺伝子欠損マウスで疼痛に対する閾値の低下が観察された。
有機電解合成におけるメディエーター反応機構の解明

I金属イオンメディエータによるアルキルベンゼンの酸化によるアルデヒド生成硫酸中でCe(IV)メディエータ(Ce(IV)/H_2SO_4)を用いると,p-メチルアニソールの酸化によりp-アニスアルデヒドが高収率で得られた。また、Ce(IV)/H_2SO_4よりも酸性水溶液中でのカソードピーク電位(Ered)が高いCe(IV)/HClO_4は、アセトニトリル溶液中での見かけの酸化電位(Es,ox)がより高いp-キシレンからp-トルアルデヒドの生成に対して高い効率を示した。その他のメディエータと基質についても検討した結果、芳香族アルデヒド生成における収率と反応選択性はEs,oxとEredの電位的な相互関係によってほぼ決定づけられることがわかった。II有機溶媒中におけるフラビン類縁体のメディエータへの適用有機溶媒に可溶なフラビン類縁体であるリボフラビンテトラアセテート(Fl)のジヒドロ還元体(FlH_2)は、アセトニトリル中において様々な基質を還元できることがわかった。即ち、キノン類、脂肪族アルデヒドあるいは芳香族アルデヒド類を還元して対応するアルコールを与えることを見いだした。またアセトニトリル中FlまたはFlH_2をメディエータとし、過塩素酸存在下基質の電気化学的還元反応を検討した。試験極にはおもに金電極を用いた。メディエータとしてFlを用いた場合、生成したアルコールは使用したメディエータとほぼ等量であった。ここで、メディエータをFlからFlH_2にかえると生成量は飛躍的に増大し、アセトアルデヒドの場合、ほぼ100%の収率でアルコールが得られた。
酸化窒素による鳥類膵分泌調節

1.酵素細胞化学的手法により、ニワトリ膵臓内におけるNADPH-diaphoraseの局在を検索した。同酵素は、膵臓内の神経要素(神経節細胞、神経線維)に同定された。NADPH-diaphorase陽性反応産物は、電子顕微鏡下において電子密度の高いdepositとして容易に観察された。陽性神経節は、小葉間結合組織内に多く見出された。神経節細胞内において反応産物は、核膜及びゴルジ装置に主に観察された。これらの陽性細胞に終末している神経線維は同酵素に陰性であったことから、膵臓内に分布する酸化窒素放出神経は副交感神経節後線維であると思われる。NADPH-diaphorase陽性神経線維は、膵臓内の細動脈周囲に密な神経叢を形成していた。また主膵管の上皮下及び筋層にも比較的密に分布していた。電顕下ではこれらの線維は、細動脈及び膵管の筋原線維に終末していた。腺房間及びB島周囲にはまばらに陽性線維が認められたが、A島には認められなかった。これらの結果よりニワトリ膵臓において酸化窒素は主に血流調節を介して膵分泌調節に与るものと思われる。2.酸化窒素放出神経のマーカー酵素であるNADPH-diaphoraseと酸化窒素合成酵素(NOS)の分布比較を、酵素組織化学と免疫組織化学の二重染色により行った。両酵素の分布は、多くの神経節細胞において一致したが、NOS陰性のNADPH-diaphorase陽性神経節細胞も存在した。神経線維においてはNOSの染色性が著しく悪く比較検討するには到らなかった。NOS免疫反応は、膵島細胞の内のインスリン産生細胞に認められたが、これについてはさらに詳細な検討が必要であると思われる。これらの結果よりNADPH-diaphoraseは、ニワトリ膵臓においても酸化窒素放出神経のマーカー酵素として有効であると思われる。
圧力を変数とした2成分ポリマーブレンドの動的不均一性に関する誘電的研究

相溶性高分子ブレンドの分子運動における不均一性を支配する因子として、分子間距離が重要であるとの認識から、その距離を変化できる外部パラメータである圧力を利用することが本研究の目的である。平成1617年度の2年間で、圧力印加が可能な誘電緩和測定システムの構築を行い、その性能評価のために単純な一成分アモルファス高分子について、高圧下での誘電測定を行った。圧力媒体としてシリコンオイルとケロシンの2種類について調べた。シリコンオイルは粘性(100センチストークス)が高いため、印加できる圧力としては200MPaが上限となった。一方ケロシンでは、400MPaまで容易に圧力を上げることが可能であった。測定試料として、主鎖に平行な双極子(A型双極子)成分を持つ屈曲性高分子であるポリオキシブチレンを選んだ。この高分子はA型双極子を持つことから、末端間ベクトルのゆらぎを誘電緩和(ノーマルモード緩和)として観察できる。実験の結果、ノーマルモードの緩和時間τ_nの対数は、圧力Pにほぼ比例することがわかった。(この様な緩和時間の圧力依存性は過去の研究で明らかにされている。)また、セグメント運動の緩和時間に関しても、同様の関係が成立し、直線の傾きもほぼ同じであった。これらのことから、加えた圧力が試料に伝わっていること、および、圧力印加下でも正常に誘電緩和測定ができることがわかった。常圧下でのポリマーブレンドのダイナミックスに関する研究は、種々の系について調べたが、その圧力依存性に関しては、まだ系統的な実験データが得られていない。ようやく、測定ができる段階に達したところである。今後、高圧誘電緩和測定を行い、動的不均一性と印加圧力との関係について詳しい研究を進め明らかにしていく予定である。2成分相溶性高分子ブレンドにおける異種セグメント間の協同運動性を支配するパラメータとして分子間距離が重要である。そして、分子間距離を変化させ得るパラメータとして圧力がある。本研究は、圧力印加が可能な誘電緩和測定システムの開発と、様々な相溶性高分子ブレンドの高圧下でのセグメント運動特性の評価を目的としている。今年度は、750MPaまで静水圧が印加可能で、塩度を-30°Cがら200°Cの範囲で変化できる誘電緩和測定セルの設計と製作を行った。圧力媒体(シリコンオイルや軽油)と高分子試料を完全に隔離するためにテフロンの膜を用いたが、その膜によるシールが容易になるよう独自の電極形状とした。具体的には、円柱を半分に割った"かまぼこ"型の平行平板電極で、そのまわりを熱収縮テフロンチューブで覆う形とした。また、当研究室で所有する低周波誘電緩和測定装置(FFTアナライザーと電流アンプを組み合わせたもの;周波数範囲2.5mHz-1kHz)のパーソナルコンピューターによる完全自動化および測定精度を上げる工夫を凝らし、損失係数tanδ=0.001まで精度良く測定ができるようになった。これらの装置と、既存のLCRメーターを用い、測定周波数範囲が2.5mHz-2MHzと9桁におよぶ高圧誘電緩和測定システムを完成させた。現在は、ポリ酢酸ビニルやポリエーテルなどの単成分高分子系について測定を進めている。今後は、2成分ブレンドの測定を行い、2種類のセグメント運動がどのように圧力に依存するかを誘電緩和法により調べることで、異種セグメント間の協同運動性と動的不均一性の相関を解明していく予定である。今年度は、昨年度に構築した、圧力印加が可能な誘電緩和測定システムの改良および性能評価を中心に行った。

圧力媒体としてシリコンオイルとケロシンの2種類について調べた。シリコンオイルは粘性(100センチストークス)が高いため、印加できる圧力としては200MPaが上限となった。一方ケロシンでは、400MPaまで容易に圧力を上げることが可能であった。実際に圧力が試料にかかっているかを確かめる意味もあり、単純な1成分高分子系の測定から行った。試料として、主鎖に平行な双極子(A型双極子)成分を持った屈曲性高分子であるポリブチレンオキシドを選んだ。この高分子はA型双極子を持つために末端間ベクトルのゆらぎを誘電緩和(ノーマルモード緩和)として観察できる。実験の結果、ノーマルモードの緩和時間τ_nの圧力P依存性は、A,B,P_0を定数として持つlogτ_n=A+B/(P_0-P)の関数形に従うことがわかった。(この様な緩和時間の圧力依存性は既に良く知られている。)また、セグメント運動の緩和時間に関しても同様の関係が成立した。これらのことから、加えた圧力が試料に伝わっていること、および、圧力印加下でも正常に誘電緩和測定ができることがわかった。ただし、問題点として、高分子試料と圧力媒体の隔離が不完全であると、特にケロシンの場合に試料中に容易にケロシンが溶け込んでしまうことが判明した。その改善のため、これまで、テフロンの熱収縮チューブとテフロンテープにより電極中に試料を隔離して封じ込めていた部分を、厚み1mmのテフロン容器で完全に覆い、その中に試料と電極をセットするようにし、テフロン容器ごと圧縮する形とした。その結果、より良いデータが得られることがわかった。
双方向インターネット通信を利用した遠隔外科教育カリキュラム構築

平成26年度は、外科修練医を対象とした双方向インターネット通信による複数同時受講型の講義システムおよび内視鏡外科基本手技の遠隔教育システムを構築した。平成27年度から28年度においては、内視鏡外科基本手技遠隔トレーニングプログラムの教育効果を検証するための無作為比較試験を行った。体内縫合結紮手技を細分化して指導する群と、毎回手技全体を教える群に分けて、その教育効果を比較検討した。検討結果は体内縫合結紮手技を細分化して指導する群の方が各回の指導時間が短くなり、より効率的な指導を行える可能性が示唆された。また両群とも、最終的には設定した時間内に体内縫合結紮手技を行えるようになり目標は達成された。研究計画では、平成26年度に内視鏡外科トレーニングを行う準備となる研修評価システム構築、評価を含めたデータを管理するデータベースの作成、トレーニングプログラムの構築、インターネットを用いた遠隔トレーニングシステムの確立を目標として掲げた。以下その進展、実績について概略をまとめる。1.外科研修医の内視鏡外科手技達成目標の設定と評価スコア、データベースの構築当施設関連病院の外科研修医の研修目標、実績、評価を記録する個人別データベースを構築した。このデータベースは幾つかの関連病院の協力によりすでに運用が開始している。今後このシステムの教育的効果について調査予定である。2.内視鏡外科トレーニングプログラムの構築初期研修医向けの内視鏡外科基本知識・手技研修プログラムおよび、後期研修医向けのより高度なプログラムを構築することを目標に掲げた。ドライボックスにおける基本手技トレーニングプログラムとウェブレクチャーによる基本知識講義のプログラムはすでに実施を開始している。また後期研修医に行う、ブタアニマルラボでのより高度なトレーニングは平成26年度に北海道大学内にて2回開催済みである。3.双方向インターネット通信を用いた内視鏡外科遠隔トレーニングシステムの確立すでに内視鏡外科遠隔トレーニングのシステム開発は終了した。この内容については、2014年10月2日盛岡で開催された第27回日本内視鏡外科学会総会で、タイトル「遠隔トレーニングを可能にするスマートフォン向け内視鏡外科手術トレーナー(Tr-BOX)の開発」として発表済みである。(演者:溝田知子,渡邊祐介,倉島庸その他)以下本研究の4つの目的のうち2項目に対しての実績を記載する。残りの2項目については今後の研究の推進方策で述べる。・各研修医の技能向上を記録・追跡するためのデータベース構築:北海道大学地域関連病院のうち試験的に選んだ5施設の協力を得て、研修医の手術経験および達成度に関するデータベースを構築し既に試験運営を実行している。実際には若手外科医が経験すべき代表的な手術術式を選択し、それらの術式の経験症例数およびその達成度に対する自己評価、指導医評価、また必要であれば具体的な指導医からのコメントをデータベースへ継続的に記入し、4ヶ月毎に研究者らがその教育効果をデータ解析により行っている。・双方向インターネット通信を利用した内視鏡外科遠隔トレーニングシステムの構築:北海道大学病院と地域関連病院間で双方向インターネット通信による複数同時受講型の講義(初期研修医)、内視鏡外科基本手技(初期研修医)、手術ビデオ評価・フィードバック(後期研修医)、アニマルラボ(後期研修医)を中心とした遠隔外科教育システムを構築した。具体的には以下の通りである。1).講義:インターネット会議システムを用いて、文献検索、統計、症例報告手法など、毎回決められた内容に対して、通年で4回双方向性の講義を行った。2).手術ビデオ評価・フィードバック:腹腔鏡下鼠径ヘルニア修復術について修練医が執刀した手術ビデオを評価し修正点をフィードバックするシステムを構築し、この教育システムは現在も継続されている。3).アニマルラボ:北海道大学動物実験施設においてブタを使用したサージカルトレーニングシステムを構築した。現在では年に4回程度、腹腔鏡下消化器・消化管手術の手術手技トレーニングを行っている。上記のごとく、内視鏡外科基本トレーニングプログラムおよび高度な内視鏡外科トレーニングプログラム構築のための環境設定は順調に終了している。今後それらの教育効果を検討することで、本研究の目的が達成可能となることから、現在まで本研究はおおむね順調に進展していると判断された。北海道大学病院と地域関連病院間の連携調査にて、本研究初年度にあたる平成26年度は、外科修練医を対象とした双方向インターネット通信による複数同時受講型の講義システム、および内視鏡外科基本手技の遠隔教育システムを構築した。内視鏡外科基本手技の遠隔教育システムは研究計画通り、当科にて開発した携帯式ドライボックスシミュレーターおよびスマートフォンを利用した画期的な教育システムとして、平成26年10月に盛岡で開催された日本内視鏡外科学会で発表した。平成27年度から28年度においては、この携帯式ドライボックスシミュレーターを用いた内視鏡外科基本手技遠隔トレーニングプログラムの教育効果を科学的に検証するための無作為比較試験を行った。この研究では内視鏡外科の基本手技で必須とされる体内縫合結紮をトレーニングテーマとした。より効率的な遠隔トレーニングの指導方法を検討するため、体内縫合結紮手技を細分化して指導する群と、毎回手技全体を教える群に分けて、その教育効果を比較検討した。

この研究結果は平成28年3月に米国ヒューストンで開催された米国消化器内視鏡外科学会(Society of American Gastrointestinal and Endoscopic Surgeons: SAGES)で口演発表された。また同時に同学会の機関誌であるSurgical Endoscopyへ投稿され、現在審査中である。今後は本研究で構築された遠隔教育システムをより高度な手術手技の教育へも応用させ、汎用性のある教育システムとして発展させる計画である。平成26年度は、外科修練医を対象とした双方向インターネット通信による複数同時受講型の講義システムおよび内視鏡外科基本手技の遠隔教育システムを構築した。平成27年度から28年度においては、内視鏡外科基本手技遠隔トレーニングプログラムの教育効果を検証するための無作為比較試験を行った。体内縫合結紮手技を細分化して指導する群と、毎回手技全体を教える群に分けて、その教育効果を比較検討した。検討結果は体内縫合結紮手技を細分化して指導する群の方が各回の指導時間が短くなり、より効率的な指導を行える可能性が示唆された。また両群とも、最終的には設定した時間内に体内縫合結紮手技を行えるようになり目標は達成された。研究計画において、研究初年度は教育システム構築を目標に掲げていた。予定通り、研究初年度において遠隔トレーニングの土台となる、当施設関連病院の外科研修医の研修状況と成果を啓示的に記録するデータベース開発が終了し、実際に試験活用を始めている。また内視鏡外科基本手技を、双方向インターネット通信を利用して指導するプログラムおよびシステム構築が完了した。この2点が初年度の具体的な目標であったため、研究は順調に進んでいるといえる。現在進行中である以下の2つの研究目的に対しての方策を記す。・初期研修医を対象とした内視鏡外科基本トレーニングプログラムの構築と検証:当科にて開発した携帯式ドライボックスシミュレーターを用いた遠隔トレーニングプログラムは既に開発され、その利便性を確認した。その後、実際に内視鏡外科基本手技に対する遠隔トレーニングを行い、異なる2つの教え方、すなわち1)一度に一つの手技全体を指導していく方法、2)一つの手技を各ステップに細分化しステップごとに指導する方法、の教育効果を証明すべく無作為比較試験を実施している。この2種類の指導方法による遠隔トレーニング自体は既に終了し、現在詳細なデータを分析・検討中である。本年度はこれらのデータ解析をもとに、この遠隔トレーニングの有用性に関する結論を導き、国内外の学会および論文にてその結果を公表予定である。・後期研修医を対象としたより高度な内視鏡外科トレーニングプログラムの構築と検証:後期研修医執刀の内視鏡外科手術ビデオを材料として、北海道大学関連病院からあつめた手術ビデオを対象として、より高度な内視鏡外科手術技能の評価とフィードバックを継続的に行っている。現在その教育的フィードバックの教育効果を検証中であり、計画中の8割の検証が終了したところである。
平面四角形型錯体の反応モデルとしての5配位錯体

歪んだ四角錐型構造をもつ5配位錯体、[PtX(hfac)_2]^-(X ; Cl^-,Br^-,I^-,hfac;ヘキサフルオロアセチルアセトネート)は溶液中で速い配位サイト交換運動を行なう。温度NMRから、アピカル位のO-ドナーがXに対してシス位のO-ドナーを置換する運動と、トランス位のO-ドナーを置換する運動が独立して起こっていることがわかった。ハロゲン化物イオンごとに速度比較すると、シス効果とトランス効果の序列がわかる。Gaussian 98を用いてB3LYP/3-21レベルのab intio MO計算を行なった。得られた各運動の活性化自由エネルギーより、シス効果の序列、Cl>Br>Iと、トランス効果の序列、I>Br>Clが確認され、実験結果との一致をみた。シス効果については今回初めて詳しく研究されたものである。N-、C-およびO-ドナーを持つ類似の5配位錯体の合成には失敗したが、hfacのカルボニル炭素にこれらが付加した珍しい構造の錯体が得られた。N-ドナーが付加した錯体は、カルボニル化合物と一級アミンからイミンができる反応の四面体型中間体の初めてのモデルであり、シッフ塩基錯体に変化する。また、条件によっては、一旦解離して金属を襲い、置換反応を起こす。また、有機溶媒のC-HやO-Hを活性化して、これらの共役塩基が付加した錯体を与える。C-ドナーの付加によってできるC-C結合は不安定で、容易に開裂したり、他の塩基と置換したりする。このように、弱いC-C結合は大変珍しく、今後どのように応用するかを考えていきたい。ハライドイオンを含む5配位錯体,〔Pt(hfac-O,O')_2X〕^-(hfac=ヘキサフルオロアセチルアセトネート)の溶液中のダイナミクスを温度変化NMRで調べると、二種類の分子内運動をしていることがわかった。その速度からBr^-とI^-配位子はトランス効果が大きいのに対し、Cl^-配位子はシス効果が大きいことが予測され,現在MO計算による裏付けを計画している。一方、メチルアミンは〔Pt(hfac)_2〕中の金属ではなく、1つのhfacの1つのカルボニル炭素を攻撃し、そこに-NHMe基が付加した錯アニオンをつくることがわかった。この中間体は溶液中でシッフ塩基錯体に変化した。この事実はケトンと一級アミンの反応によるイミン合成の中間体として考えられているsp^3-中間体が、白金(II)により安定されたことを意味しており、大変興味深い。この中間体はニトロメタンやアセトンのC-H結合を活性化して-CH_2NO_2や-CH_2COCH_3付加体を与えた。同様の反応を〔Pt(hfac)_2〕とメチルアミンで行うと、今度は無機イオンのときと同様にアミンは金属を攻撃してhfacを置換した。パラジウムではハライド錯体と同様の5配位錯体を経て反応が進行するのだろう。他方、三級アミンや2_-アミノピリジン類は溶媒中の不純物の水を活性化して、1つのhfacの1つのカルボニル炭素にOH基が付加したPt(II)錯アニオンを作った。このようにN-2塩基の〔M(hfac)_2〕に対する反応性は多様にあるので、今後は金属、N-塩基の種類などを系統的に変えて反応を試みる予定である。平面四角形型d^5遷移金属錯体の置換反応や幾何異性化反応は会合型機構で進むことが多く、その中間体の5配位錯体も多く単離、研究されている。

我々は[Pt(hfac)_2](hfac=ヘキサフルオロアセチルアセトネート)と無機陰イオンとの反応で、すでに四角錐型5配位錯体、[PtX(hfac-O,O')(hfac-O)]^-の塩を単離し、その溶液中のダイナミクスを報告した。今年度はこの系のab initio計算を行い、実験結果との良い一致を見い出した。一方、[Pt(hfac)_2]とメチルアミンとの反応では、5配位錯体ではなく、アミノ基が一つのhfacカルボニル炭素に付加した珍しい中間体錯体、(MeNH3)^+[Pt(hfac)(hfac/NHMe)]^-1が単離された。この錯体をCH_2Cl_2溶液中低温で放置するとシッフ塩基錯体、[Pt(CF_3COCHCN(Me)CF_3)_2]が生成するので、ケトンやアルデヒドと一級アミンとの反応でイミンができる反応の四面体型中間体をはじめて安定に取り出したものと評価される。また1の溶液を室温で放置すると[Pt(hfac)(MeNH_2)_2]^+(hfac)^-に変化した。このことからPt(hfac)_2と求核試剤との反応は、求核試剤がP-塩基、S-塩基およびハライドイオンのようにソフトで金属との親和性が高い場合は5配位中間体を通るのに対し、ハードなN-塩基の場合はカルボニル炭素をまず求核攻撃して準安定な付加体をつくるが、温度上昇とともに離脱して金属を攻撃して置換を起こすことがわかった。また中間錯体1はH_2O、MeOH、ニトロメタンおよびアセトンと反応し、容易に-OH、-OMe、-CH_2NO_2,および-CH_2COCH_3基がカルボニル炭素に付加した錯体を与えた。こうして新たに生成したC-N、C-OおよびC-C結合は、X-線構造解析によれば結合距離はそれほど長くないにもかかわらず、容易に切断される性質を持っていることが明らかとなった。このように容易なC-N、C-OおよびC-C結合の生成と切断は大変珍しい。ハライドイオンを含む5配位錯体,[PtX(hfac-O,O')_2]^-(hfac=ヘキサフルオロアセチルアセトネート)の溶液中のダイナミクスを温度変化NMRで調べた結果得られたトランス効果の順、I>Br>Clとシス効果の順、Cl>Br>Iをab initio MO計算で確かめた。計算では、5配位構造の最適化と、考えられる分子内サイト交換運動の各経路についての遷移状態の構造およびエネルギーを求めた。その結果、5配位構造の計算結果は実測のX線構造によく一致した。また、遷移状態のエネルギーから2つの経路が働いている可能性が認められ、それぞれから実験で得られたトランスおよびシス効果の序列と一致することがわかった。シス効果の順が決定されたのはこれが初めてである。[Pt(hfac)_2]と一級アミンであるMeNH_2との反応では5配位錯体はできず、アミンがhfacのカルボニル炭素に付加した珍しい錯体,(MeNH_3)^+[Pt(hfac)(hfac-NHMe)]^-ができた。今年度はさらに、エチレンジアミン類が-NH_2部分で付加したzwitter ion型錯体,[Pt(hfac)(hfac-NH(CH_2)_2NHR_2)]を合成し、そのX線解析に成功した。転移したアミノプロトンはカルボニル酸素と水素結合して構造安定化に寄与していることがわかった。温度変化NMRの測定により、エチレンジアミン部分は容易に解離し、[Pt(hfac)_2]の4つのカルボニル炭素の間を飛び回る運動をしていることがわかった。