hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
深部血管の非侵襲計測が可能な光音響法による血液酸素飽和度分布画像化システムの開発

動物実験においては,実験動物を人工呼吸管理下に置き,予め確保した採血ルートから採血を行い,血液ガス分析装置を用いて血液の酸素飽和度を観測し,対比データとした。非露出血管を対象に高精度化なデータを得るためには,光減衰のみでなく音響減衰への対策が必要と考えられる。ファントム及び露出血管を対象とした実験において,血液ガス分析と光音響法とで相関するデータが得られた。光音響画像化技術は,パルス光源と超音波エコー装置とを組み合わせた装置により,体内の血管などを高いコントラストで描出可能な技術である。本研究は,本技術を用いて,体内の血管内を流れる血液の酸素飽和度を採血することなく経時的に計測することを目的としている。高精度に血液酸素飽和度を観測するための光音響信号波形解析法を提案した。また,血液酸素飽和度分布画像化を可能とするための画像化装置を開発した。平成26年度は,本法による血液酸素飽和度計測精度を高めるための装置系の改良と,本法による計測精度を評価するための実験系の検討を行った。装置系を改良することにより感度面,精度面の両面において性能を改善しており,血液酸素飽和度分布画像を取得のためのイメージングシステムについても構築済みであるため,装置系の改良については順調に進展している。提案法による血液酸素飽和度計測精度を評価する実験系については,予備実験により実験上の課題とその対応について検討しており順調に進展している。医用工学平成26年度までに構築した装置系を用いて,光散乱媒体中に配置したファントムが発生する光音響信号を計測し,ファントムの光吸収特性を計測する実験を実施し,装置系の改良により精度がどの程度改善されたかを明らかにする。次に,動物実験或いはファントム実験により,本法を用いて計測した光吸収特性を基に血液酸素飽和度を計測し,血液ガス分析装置で計測した血液酸素飽和度と一致するかを検証する。最後に,血液酸素飽和度計測技術とイメージングシステムとを組み合わせることにより,血液酸素飽和度分布イメージングを実現する。平成25年度は,研究実績の概要欄に示す,13の項目を実施した。これらのうち,平成25年度に実施予定であった1及び2に関しては,超音波センサの改良の必要性が生じた2のファントム実験を除き完了しており,おおむね順調に進展している。また,平成26年度以降に実施予定であった動物実験に関しては,3に示す通り防衛医科大学校動物実験倫理委員会の承認を得たうえで予備実験を開始しており,当初の予定よりも進展している状況である。当初の計画において,動物実験用の消耗品を購入する予定であったが,既存の消耗品を使用することにより実験可能であったため,購入しなかった。アレイシステムの構築に向けて必要な電子機器を購入する予定であったが機材を慎重に選定しており未購入である。以上の理由により次年度使用額が生じた。平成25年度末に超音波センサの改良が終了したことから,改良済みの超音波センサを用いてファントム実験を実施する。平成25年度に先行して実施した予備実験における検討結果を基に,本法の検証のための動物実験モデルを確定した上で動物実験を実施し,動物を対象にした場合にも本法が有効であることを実証する。以上の検討と並行し,平成27年度に予定しているイメージング装置への適用に向けたハードウェアの構築を進める。
中国江南地方出土の古人骨に関する人類学的研究-渡来系弥生人の起源を巡って-

19992000年の2年間にわたり、北部九州の渡来系弥生人の源郷を明らかにする目的で、中国各地の新石器時代後半から漢代にかけての古人骨調査を実施した。1998年までの我々の調査によって、長江下流域の春秋戦国期漢代の人骨が形態、遺伝子ともに日本の北部九州弥生人に強く類似することが明らかになっているが、その正確な位置づけには、中国各地の古人骨との比較検討を経た上での考察が不可欠である。そのため、上海自然博物館、西安市文物局、及び吉林大学において収蔵人骨の調査を実施した。上海自然博物館には中国西端に位置する新彊ウイグル自治区出土の新石器時代人骨(哈蜜遺跡、B.P.3200)70体余りが収蔵されている。今回、外国隊としては初めて調査する機会を得たので分析した結果、哈蜜集団には著しく立体的な鼻骨形態など、通常の東アジア集団に見られない諸形質の混在が認められ、いわゆるシルクロード沿いの西域との人的交流が遅くともこの時期には始まっていたことが裏付けられた。また、そのシルクロードの東端に位置する西安市の戦国末前漢人骨は、哈蜜人骨とは明確に異なり、従来から華北を中心に分布する扁平・高顔傾向を主特徴とする人々との形態的類似性が明らかとなった。また吉林大学では、日本の弥生人との関係を探る上で重要と思われる中国北方、旧満州地域の青銅器時代漢代資料の調査・研究を実施した。いわゆる渡来系弥生人の原型とも言うべきこの華北古人類集団の形質や分布域が時代的、地理的にどのような変化を遂げたのか、その解明は今回の調査の主目標の一つである。これまで上記地域の古人骨資料が精査された事例はごく少なく、彼らの形質や地理的広がりの一端が今回の調査によって明らかになった点は今後の考察に非常に有益な知見となろう。また、この2年間を通じて南京市文物局、鄭州大学、吉林大学、及び西安市文物局の研究者計5名を招聘し、講義やシンポジウムを通じて中国、及び日本の古人骨資料に関する理解を深め、今後の共同研究計画についても協議した。先に科学研究費(国際学術:平成810年)によって中国江南地方で実施した調査結果を踏まえ、本年はその延長として、上海自然博物館、吉林大学考古学系、及びベトナム考古研究所に所蔵されている古人骨資料の調査を実施した。江南人骨については、先に報告したように、北部九州の渡来系弥生人に形態、遺伝子ともに非常に近い関係にあることがこれまでの調査で初めて明らかになっているが、単に似ていると言うだけでは、渡来系弥生人の起源問題にたいする明確な解答にはなりえない。そのためには、周辺地域や各時代の古人類集団とも比較研究を行い、広大な中国の古代住民のなかにおいて、彼ら江南古代人がどのように位置づけられるのか、彼らが果たして渡来系弥生人に最も近い集団といえるのかどうかを明らかにする必要がある。そこで、上海自然博物館においては、西方の新疆ウイグル自治区出土の新石器時代人骨(76体)を外国隊として初めて調査する機会を得た。また、北方の旧満州地域の新石器時代漢代資料(44体)を吉林大学において、さらに南方のベトナムで出土したドンソン文化期の資料(28体)をハノイの考古研究所と共同で調査した。

これまでのところ、江南人骨に匹敵する類似度をもった集団は見つかっていない。今後、さらに各地の集団を調査し、中国及びその周辺における人骨形質、遺伝子の時代変化、移動経路を明らかにする中で、日本の渡来人問題の対する答えを探っていきたいと考えている。今年度も昨年に引き続き、北部九州の渡来系弥生人の源郷を明らかにする目的で、中国各地の新石器時代後半から漢代にかけての古人骨調査を実施した。これまでの我々の調査によって、長江下流域の春秋戦国期漢代の人骨が形態、遺伝子ともに日本の北部九州弥生人に強く類似することが明らかになっているが、その正確な位置づけには、中国各地の古人骨との比較検討を経た上での考察が不可欠である。今年度はまず、昨年と同様に上海自然博物館、及び吉林大学において収蔵人骨の調査を行い、併せて新たに西安市文物局との共同研究も開始した。上海自然博物館には中国西端に位置する新彊ウイグル自治区出土の新石器時代人骨(ハミ遺跡、B.P.3200)が収蔵されており、昨年度より外国隊としては初めて調査する許可を与えられたものであるが、今年度は昨年の調査で時間的に未調査で残されていた分、約30体についてのデータ採取を行い、同遺跡の人骨調査を終了した。併せて、中国側共同研究者と合同で同館において、同遺跡を中心に中国及び日本の古人骨に関するシンポジウムを開催した。吉林大学では、収蔵人骨の内、調査対象を日本の弥生人との関係を探る上で重要と思われる中国北方、旧満州地域の青銅器時代漢代資料(41体)に絞り、人類学的調査を実施した。また、中国の古都、西安市文物局では、近年の開発ラッシュによって出土した大量の古人骨が収蔵されており、今年度から新たに、その中の春秋戦国漢代の人骨資料(38体)について、共同研究を実施した。以上について研究成果をまとめるため、平成13年1月と2月に吉林大学、西安市文物局、鄭州大学の研究者(計3名)を招聘し、研究結果について検討を加えた後、調査報告書を作成した。
高エネルギ-密度リチウム二ツ電池用非晶質酸化物に関する研究

リチウム二次電池実用化の観点から正極活物質、電解液、負極活物質の3方面からの検討を行ってきた。具体的には(1)Cr_3O_8,V_2O_5をベ-スとした非晶質酸化物の種々の検討、(2)LiC10_4に代わる安全な電解質溶液の開発、(3)リチウム金属に代わる可逆性に優れたLi/カ-ボン複合電極の研究、というテ-マをそれぞれに与え、実験を行った。以下に研究期間中に得られた結果及び知見を列挙する。(1)結晶性Cr_3O_8より種々の形態の非晶質Cr_3O_8を作成したところ、高エネルギ-密度、高出力密度で、サイクル特性も極めて優れている事が分かった。この物質は非晶質であるが故に電極物応活性点が多く、優れた均一放電特性をもつうえ、サイトのエネルギ-の平均化が行われる事により滑らかな放電特性を有する。問題点として一次粒子を微細にするのが困難で高い電流密度で放電させることが難しい事が挙げられる。しかし本質的には高いリチウムイオン導電性を有しており、これはむしろ技術的な問題になると考えられる。CuV_<2ーx>Mo_xO_6(ブラネライト構造)は可逆性が良く、リチウムの出入りと共にCuの入出が同時に起こるというこれまでの活物質にない興味ある挙動を示した。この物質も優れた充放電特性を示したが、非晶質になるV側の方が良い特性を示したのは示唆的であった。(2)電解質に関しては、LiPF_4とPC及びDMEの1:1混合溶液が電流密度に関しても、充放電特性に関しても優れている事を見いだした。(3)Li/カ-ボン複合電極に関してはカ-ボンがリチウムの吸蔵放出を行い、リチウム上への直接析出を抑制する事が分かった。又この複合電極はカ-ボンの吸蔵放出量が大きく且つ可逆性のよい事が必要であるが、カ-ボンの種類によりこれらの特性は大きく変化した。本研究ではカ-ボンの構造と特性の関連性を吟味することにより、複合電極としての最適構造を提案することができた。非晶質Cr_3O_8は金属リチウムを陰極としたさいその開路電圧は3,8Vと高く電解質を分解する危険性があるので、Cr_3O_8にMnO_2、V_2O_5を添加して開路電圧の低下を試みたが、いずれも固溶体を形成しなく開路電圧の低下は認められなかった。V_2O_5はリチウム二次電池用陽極としての可能性が指適されているが、本研究では双ローラー法による超急冷およびゲル法より調製した非晶質V_2O_5について検討した。超急冷法はV_2O_5融液を3000回転分の双ローラーを通して作った。この非晶質V_2O_5は空気中の水分に敏感であった。放電特性は非晶質V_2O_5に特有な数段のプラトーがなくなり放電時間と共にゆるやかな曲線をえがいた。ゲル法による非晶質V_2O_5はNH_4VO_3水溶をイオン交換樹脂を通過させて得ることができる。えられた非晶質V_2O_5は150250°Cで乾燥させた。このV_2O_5は結晶性V_2O_5特有の段は残念ながらなくならなかったが、充放電のサイクルをくりかえす程安定しよい特性がえられた。

また新規なリチウム電池の陽極材としてスピネル型L_1CnVO_4に注目しその特性についても検討した。スピネル型L_1CnVO_4は結晶構造的にL_1が可逆的にインターカレートする可能性があり興味深い化合物である。L_1を陰極としたさい開路電圧は3.2Vで1mA/cm^2での放電のさいのエネルギー密度約300W^h/kgとかなり高い値を示しまた50サイクルの充放電によってもそのエネルギー密度は約1/2に低下したのみであった。またブランメラーライト型構造をとるCuV_2O_6のVをMoで置換したCuV_2ーxMoxO_6系についてXの値による結晶構造の変化および陽極材としての放電特性について検討した。この化合物高電流での放電が可能で0.8mA/cm^2の電流密度、3.5V【tautomer】2.0Vの電圧範囲で充放電した結果CuV_2O_6では30サイクルで0.15An/gの容量であったがCnV_<1.7>M_<003>V_6では0.20An/gとかなり良い充放電特性を示した。リチウム二次電池の向上のため、(1)陽極活物質として高原子価を含むCr_3O_8,V_2O_5をベ-スとした非晶質酸化物(比較のため結晶質の物質もあつかった)の種々の検討、(2)LiClO_4にかわる安全な電解質溶液の開発、(3)可逆性にすぐれたデンドライトの析出をふさぐためにLi/カ-ボン複合電極の研究、という3つのポイントについて本年度は研究を行った。(1)に関してまず述べると、非晶質Cr_3O_8は充放電特性に実にすぐれているが、一次粒子を微細にするのが困難で電流密度向上に問題がある。水との急速乾燥法やガラス材の添加を試みたが今までのところきわだった向上は見ていない。V_2O_5をベ-スとしたCuV_<2-x>MoxO_6(ブラネライト構造)はLiの可逆性がよくLiの出入とともにCuの入、出が同時におこる。V側では充放電過程で簡単に非晶質にない、Mo側では頑として結晶性を保ったままというおもしろい性質を示した。いずれもすぐれた充放電特性を示したが、非晶質になるV側の方がいい特性を示したのは示唆的であった。ただCuの析出が短絡という問題をひきおこすのが、難点であった。(2)に関しては、大容量にした際、爆発の危険性を100%は否定できないLiClO_4に変わる電解質がないかどうかを種々検討を行ったが、LiPF_4とPC及びDMEの1:1混合溶液がLi/a-Cr_3O_8電池では電流密度に関しても、充放電特性に関してもすぐれている事を見出した。(3)のリチウム極については、今まで色々な可逆性にすぐれたLi電極の検討を行ってきた。その結果、ある種のカ-ボンファイバ-(東レ、M46)が広い範囲でリチウムの層内への吸蔵、放出を行う事が明らかになった。このカ-ボンをリチウム金属とはりあわせた複合電極を作成し、LiC/a-Cr_3O_8の様な電池を作って充放電を繰り返すと、Li極では、充電でもどって来たLiがカ-ボンに吸収され、デンドライトの形成が見事におさえられた。充放電回数も大幅に増加した。リチウム二次電池実用化への最も大きな問題点はリチウム負極のサイクル特性だと言われている。本研究室ではこれまで特性劣化の原因と考えられるリチウムデントライトの析出を防ぐためにLi/カ-ボン複合電極の研究を行ってきた。その結果、確かにサイクル特性が改善されることが判明した。そこで本年度はさらに詳しい反応機構の解明を試みた。カ-ボンの放電反応即ちリチウムインタ-カレ-ション反応をX線回折測定を用いて解析すると興味ある結果が得られた。カ-ボンはリチウムと3段階で反応することが分かった。
パーキンソン病遺伝子群の作用機序とレヴィ小体形成とその伝播機構の解明

パーキンソン病(PD)の治療は、依然として対症治療のみであり、進行を遅くできるような疾患修飾療法の開発は遅れている。運動症状のみならず、認知症や自律神経症状などの非運動症状も日常生活を妨げる要素となっており、病変はドパミン神経のみならず多岐に渡ることは、明白であり、事実、レヴィ小体の主要構成蛋白であるα-synuclein (SNCA)は、機序は不明であるが、脳内を伝播すると報告されている。本課題では、PDの本質的病理マーカーであるレヴィ小体の形成メカニズムとその伝播機構を、2つのアプローチで明らかにする。1)遺伝性と孤発型PDには共通機序が存在することが予想されており、レヴィ小体が存在することが明らかな遺伝性PDの遺伝子産物の機能解明を行う。2) SNCA伝播システムを明らかにする。これらアプローチから孤発型PDにおけるレヴィ小体の形成メカニズムとその伝播機構の解明に迫ることを目的とした。2018年度は、1) PLA2G6(Park14)ショウジョウバエモデルを作製し、脂質組成の変化がレヴィ小体形成に重要であることを見出した。細胞死もレヴィ小体様の変化も脂質組成の変化で改善されることを明らかにした。このことはヒトPDにおいても脂質組成を変えるような食事療法をはじめとする非薬物療法の可能性を示すものである。また、Park22の原因遺伝子CHCHD2の変異型とSNCA過剰型を掛け合わせたショウジョウバエでは細胞死の増強効果が観察された。ミトコンドリアに一次的障害があるとレヴィ小体形成が促進されることが示された。2)伝播モデルに関しては、脳梁離断やボツリヌス神経毒で伝播が抑制されることを見出した。ボツリヌス神経毒で抑制されたことはtrans-synapticにSNCAが伝播することを示しており、現在数社で同時に進められている抗体療法の有効性の可能性を示唆するものである。既にSNCAの凝集メカニズムにミトコンドリア電子伝達系に関与する遺伝性PDの遺伝子産物であるCHCHD2の変異型が増強効果を示すことが明らかにされた。一剖検脳であるが、神経病理学的な検討で多くのレヴィ小体やSNCAニューライトを観察しており、SNCAの凝集にミトコンドリアが関与していることを見出しており、既に論文準備中であり、順調に計画が進んでいると考えている。また、PLA2G6の解析から脂質組成がレヴィ小体形成上重要であることを見出し、現在論文投稿準備中であり、順調に進んでいると言える。更にヒトPD患者での剖検脳における脂質解析も開始した。SNCAの伝播に関しては、ボツリヌスで一部養成されること、またヒトリコンビナントprefibril formの注入により12週するとヒトSNCAは凝集体から消えて、新たに内在性マウスSNCAに置き換わることを見出した。この現象はSNCAの伝播もまたプリオン蛋白同様αヘリックスからβシート構造へ変換されることを示すものである。マウスモデルでは伝播はプリオン様であると言える。抗体療法の有効性を考え、様々なエピトープに対する抗体を作製し、その伝播抑制効果の検討も開始しており、概ね計画は順調と言える。PLA2G6のショウジョウバエモデルを使い、シーズスクリーニングを行い、SNCA凝集抑制効果を示す治療開発を目指す。既にシーズスクリーニングを開始している。また他の遺伝性PDの原因遺伝子parkinやLRRK2でアストロサイトの機能不全が見出されているので、アストロサイトに注目してPLA2G6やCHCHD2のショウジョウバエモデルで解析を進める。また、レヴィ小体形成が予想される新規優性遺伝性PDの原因遺伝子Xを単離・同定できており、マウスモデルの作製と患者由来iPSを樹立してSNCAの凝集や細胞死メカニズムを明らかにする。伝播解析については、抗体療法が有効な手段であると考えられているが、治療効果を示すマーカーのスクリーニングを行う。ターゲットはSNCAであり、血液マーカーの同定を目指す。研究室には大学院性も3名、技術員3名おり、マンパワー的な問題はないと考えている。

また、Park22の原因遺伝子CHCHD2の変異型とSNCA過剰型を掛け合わせたショウジョウバエでは細胞死の増強効果が観察された。ミトコンドリアに一次的障害があるとレヴィ小体形成が促進されることが示された。2)伝播モデルに関しては、脳梁離断やボツリヌス神経毒で伝播が抑制されることを見出した。ボツリヌス神経毒で抑制されたことはtrans-synapticにSNCAが伝播することを示しており、現在数社で同時に進められている抗体療法の有効性の可能性を示唆するものである。既にSNCAの凝集メカニズムにミトコンドリア電子伝達系に関与する遺伝性PDの遺伝子産物であるCHCHD2の変異型が増強効果を示すことが明らかにされた。一剖検脳であるが、神経病理学的な検討で多くのレヴィ小体やSNCAニューライトを観察しており、SNCAの凝集にミトコンドリアが関与していることを見出しており、既に論文準備中であり、順調に計画が進んでいると考えている。また、PLA2G6の解析から脂質組成がレヴィ小体形成上重要であることを見出し、現在論文投稿準備中であり、順調に進んでいると言える。更にヒトPD患者での剖検脳における脂質解析も開始した。SNCAの伝播に関しては、ボツリヌスで一部養成されること、またヒトリコンビナントprefibril formの注入により12週するとヒトSNCAは凝集体から消えて、新たに内在性マウスSNCAに置き換わることを見出した。この現象はSNCAの伝播もまたプリオン蛋白同様αヘリックスからβシート構造へ変換されることを示すものである。マウスモデルでは伝播はプリオン様であると言える。抗体療法の有効性を考え、様々なエピトープに対する抗体を作製し、その伝播抑制効果の検討も開始しており、概ね計画は順調と言える。PLA2G6のショウジョウバエモデルを使い、シーズスクリーニングを行い、SNCA凝集抑制効果を示す治療開発を目指す。既にシーズスクリーニングを開始している。また他の遺伝性PDの原因遺伝子parkinやLRRK2でアストロサイトの機能不全が見出されているので、アストロサイトに注目してPLA2G6やCHCHD2のショウジョウバエモデルで解析を進める。また、レヴィ小体形成が予想される新規優性遺伝性PDの原因遺伝子Xを単離・同定できており、マウスモデルの作製と患者由来iPSを樹立してSNCAの凝集や細胞死メカニズムを明らかにする。伝播解析については、抗体療法が有効な手段であると考えられているが、治療効果を示すマーカーのスクリーニングを行う。ターゲットはSNCAであり、血液マーカーの同定を目指す。研究室には大学院性も3名、技術員3名おり、マンパワー的な問題はないと考えている。
ナノフィラーネットワーク形成プロセッシングによる機能性ポリマー材料の創出

本研究は、提案する「ナノフィラーネットワーク形成プロセッシング」により、従来きわめて困難な30vol%以上の高濃度でフィラー分散し、フィラー界面間を部分的に100nm間隔以下の拘束領域にし、その界面領域の非平衡特性を顕在化させた機能性材料の創出を目指す研究である。具体的なプロセッシングは、1微細な多数の泡を使った温和なミキシング技術、2ポリマー発泡を利用したナノフィラー群の三次元界面領域を形成する、従来の視点とは異なる、ポリマー系ナノコンポジット開発方法である。本プロセッシングを実証し、高熱伝導性や高断熱性ポリマーを創出することを目標とする。
複数話者の音声コミュニケーションの意図・状況理解

人間と共生する機械を実現するためには、システムがユーザのモデルを知覚し、それに応じて適応的に行動することが重要であると考えられる。本研究では、音声対話によるインタフェースにおいて、協調的な応答を生成するためのユーザモデルについて検討を進めてきた。具体的には、システムに対する習熟度、タスクドメインに関する知識レベル、性急度の3つのユーザモデルを導入し、それに応じて対話制御を行う戦略を提案した。京都市バス運行情報案内システム(現在試験運用中:075-326-3116)において実装・評価を行った結果、各ユーザに適応した協調的応答が、習熟したユーザに対する対話時間を増加させることなく、初心者に対して適切なガイダンスとなることが示された。本研究で用いているユーザモデルの判別には、音声認識結果に含まれる意味情報以外に、発話間間隔やバージインの有無などの音声対話特有の特徴も用いている。特に、習熟度と性急度の学習・判別に用いる特徴はドメイン知識に依存していないため、これらのユーザモデルは他のドメインにも応用できる汎用的なものである。これらの研究成果に関しては、自然言語処理の分野で最も権域があるAssociation for Computational Linguistics (ACL)において発表論文として採択され、人工知能学会全国大会においても優秀賞を授与された。さらに、国内外の雑誌論文に掲載される予定である。また、新聞での報道もされた。
色素性乾皮症細胞におけるDNA修復に関与する欠損因子の精製とその機能の解析

色素性乾皮症(XP)には現在AIまでの9つの遺伝的相補性群が知られている。このうち臨床症状が最も重篤でしかも日本において発症頻度が最も高いA群XP細胞における欠損因子を部分精製し以下の知見を得た。精製の出発材料は主として攪拌培養して得られたHeLa細胞を使用した。これをホモジェナイズした後、高イオン強度下で核内タン白を溶出したものを粗細胞抽出液とした。A群欠損因子(A因子)の活性測定は細胞抽出液をA群XP細胞の細胞質に注射し、紫外線照射した後【^3H】-チミジンで2.5時間ラベルし、オートラジオグラフィーにより不定期DNA合成(UDS)の有無として調べた。活性は核内グレイン数により◆◆までの5段階に分けて定量化した。HeLa細胞抽出液を注入することにより、A群XP細胞のUDSは正常レベルまで回復し、また紫外線に対しても抵抗性を示すようになる。抵抗性を獲得するに要するA因子量は、正常レベルのUDSを示すに要する量の約4倍必要であった。A因子を注射して約2時間後にUDS量は最高値を示し、以後約14時間の半減期で活性は減少していった。A因子の自然状態での分子量は、ゲル濾過(G-200)での各分画のA活性測定の結果16万と9万であった。これら2つの活性分画を濃縮し、BからHまでの遺伝的相補性群に属するXP細胞に注射してUDS回復の有無により、それらの特異性を調べた所、A群にのみ有効であることが判明した。A因子は粗細胞抽出液の状態では極めて安定で4°C保存で少くとも4ヶ月は活性の損失がほとんどない。またA因子はタン白分解酵素により失活し、RNaseには抵抗性であることから恐らくタン白であると推定される。A因子はまた核細胞質にほぼ同一濃度で存在し、細胞当りの総量は紫外線に抵抗性を示すのに必要な量の少くとも10倍は存在していることも判明した。現在、高速液クロ等を使い、A因子の比活性を約200倍まで上昇させるまで部分精製することが可能となり、その活性を解析中である。
古代キリスト教思想の担い手としての知者の研究

1.このテーマに関する内外の従来の研究は、「知恵」の概念史を中心にしており、知恵の担い手である「知者」については、目ぼしい研究はほとんどない。これは研究史を顧みて明らかになった。2.古代における「知恵」とは、キケロの定義によれば、「神の事柄と人間の事柄とに関する知識」であり、従って「知者」とは、このような知識を探求する人である。この定義は、たとえばストア派の哲学者に妥当するのみならず、ユダヤおよびキリスト教の思想家にもほぼ当はまる。3.初期キリスト教のほとんどの思想家は、この意味での知者であった。ユスティヌス、アレクサンドリアのクレメンス、オリゲネス、ラクタンティウスなどが、知者であったことがそのテキストから判明する。4.かれらは、知者として知恵の伝統の中にあり、知者の系譜をなしている。5.かれらが知者であったことから生まれて来る思想的特質は、他の諸思想、とくにギリシア思想とユダヤ思想、さらにグノ-シス主義などと積極的に折衝しているところに認められる。つまり弁詳論的である。6.さらにそこから、単なる弁証でなく、他の思想のもっとも優れたところを自己の思想のうちに同化しようとする試みがなされる。「信仰」に加えて「知恵」あるいは「知識」をキリスト教信仰の必須の契機とする考え方がそれである。7.このような考え方は、東方のみならず西方においても、思想形成の有力な動機を提供したのであり、その最高の思想的表現は、アウグスティヌスに見られる。1.ラクタンティウスの『神の怒りについて』と『神の教え』における彼の知者理解を検討した。2.そこでは、知恵と知識との関係が重要であり、両者の関係は、ユダヤ・キリスト教の背景、ギリシヤ思想、とくにストア思想、ローマ帝国における政治的諸関係を反映する諸理念等の交錯によって複雑であることが認められる。3.ラクタンティウスは「キリスト教のキケロ」と称せられるように、ローマ的・ストア的知者に傾斜しており、ユダヤ的キリスト教的知者(とくにパウロ)のもの特質を十分継承していない。古代キリスト教思想の形成者及び担い手としては、クレメンス、また後のアウグスティヌスほどの知者としての力量を有していない。4.個人的知的能力による部分は別として、ほぼクレメンスに匹敵する思想史的状況における位置づけをもつにもかかわらず、ラクタンティウスがキリスト教的知者として中途半端にとどまった理由として、一つには彼の政治的態度が考えられてよい。5.また、ラクタンティウスの知的生成に、個人的な信仰的経験が乏しいことが注意される。7年度に引続きラクタンティウスの「知恵」及び「知者」の理解を検討した。かれは「キリスト教のキケロ」と称せられるように、とくにローマ的・ストア的知者の概念に強く影響されており、それがイエス・キリスト理解にも投影されている。そこからまた、かれが知恵と知者を論じる際に、自らをも知者の列に加えていることが明らかになる。かれによればイエス・キリストは天的な知恵をもたらした知者である。グノ-シス主義のように「グノ-シス」の啓示者ではないが、キリストは知恵の啓示者として知者なのである。ここで重要なことは、知恵を探求するがゆえに知者であるのでなく、知恵をもたらし、知恵をあたえるがゆえに知者と考えられていることである。この点でラクタンティウスは、ストア的人間主義的な知者論に完全に支配されているのではないことが明らかになる。そこには旧約の知恵文学の伝統における神のヒュポスタシスとしての知恵の観念が直接ではないとしても働いている。しかし知恵文学における知者の深刻な自己省察は、ラクタンティウスには稀薄であって、このためストア的知者論をキリスト教化することには成功していない。かれに依然としてラテン的教養人の域にとどまっているのである。

これは研究史を顧みて明らかになった。2.古代における「知恵」とは、キケロの定義によれば、「神の事柄と人間の事柄とに関する知識」であり、従って「知者」とは、このような知識を探求する人である。この定義は、たとえばストア派の哲学者に妥当するのみならず、ユダヤおよびキリスト教の思想家にもほぼ当はまる。3.初期キリスト教のほとんどの思想家は、この意味での知者であった。ユスティヌス、アレクサンドリアのクレメンス、オリゲネス、ラクタンティウスなどが、知者であったことがそのテキストから判明する。4.かれらは、知者として知恵の伝統の中にあり、知者の系譜をなしている。5.かれらが知者であったことから生まれて来る思想的特質は、他の諸思想、とくにギリシア思想とユダヤ思想、さらにグノ-シス主義などと積極的に折衝しているところに認められる。つまり弁証論的である。6.さらにそこから、単なる弁証でなく、他の思想のもっとも優れたところを自己の思想のうちに同化しようとする試みがなされる。「信仰」に加えて「知恵」あるいは「知識」をキリスト教信仰の必須の契機とする考え方がそれである。7.このような考え方は、東方のみならず西方においても、思想形成の有力な動機を提供したのであり、その最高の思想的表現は、アウグスティヌスに見られる。
感染免疫における腫瘍壊死因子α(TNFα)の機能解明:TNFα遺伝子欠損マウスを用いた感染病態発生機構の解明

コロナウイルスは、その株により消化器系・呼吸器系・肝臓・脳神経系など様々な組織に親和性を示すが、株間でのトロピズムや病原性の相違の原因となる機構は明らかではない。マウス肝炎ウイルス(MHV)は、その株によりマウスにおいて急性の激症肝炎・慢性肝炎・脳脊髄炎・脱髄などを発症し、ヒトのポリオを含めた脱髄性疾患のモデルとして研究されている。MHV感染による激症肝炎や脱髄・神経性疾患には宿主側の免疫系の影響、特にTNFαやIL-1βなどのサイトカインが関与していることが示唆されている。そこで、コロナウイルスに見られる株間での病原性の相違における分子生物学的基盤を明らかとするために、TGEV(ブタ伝染性胃腸炎ウイルス)強毒株およびワクチン株9株のS蛋白遺伝子およびORF3・3-1・4領域、ORF7領域のRT-PCR・RFLP解析を行ない、さらに同領域の塩基配列を決定し比較した。その結果、日本で1957年から現在まで流行したTGEVは大きく2つのグループに型別されることが明らかとなった。また、これまでの報告で病原性に関与していると考えられていたORF3・3-1・4領域の遺伝子欠損は病原性に直接関与しないこと示唆する結果が得られた。S蛋白遺伝子の病原性に関与していると思われる領域に欠損を持つTGEV株を新たに分離し、解析たところ本ウイルスは強毒株でありながら赤血球凝集能を欠くことが明らかとなった。一方、マウスに致死的な激症肝炎をおこすMHV-3株を用いて、TNFα遺伝子欠損マウスに対して感染実験を行ったところ、対照であるC57BL/6マウスと比較し、生存日数・生存率に明らかな差が認められた。肝臓でのウイルスの増殖には両系統間で有意差は認められず、ウイルスの増殖による直接的な肝細胞の破壊が劇症肝炎の病態形成に関わっていることは否定された。TNFα遺伝子欠損マウスでも感染後死亡するマウスが見られ、また詳細な病理学的検索の結果、両系統とも肝細胞のアポトーシスが同様に認められたことからTNFαは劇症肝炎の病態発生に重要な役割を果たしているもののTNFα以外の要因が存在することが示唆される結果となった。マウス肝炎ウイルス(MHV)は、その株によりマウスにおいて急性の激症肝炎・慢性肝炎・脳脊髄炎・脱随などを発症し、ヒトのポリオを含めた脱髄性疾患のモデルとして研究されている。現在、C57BL/6マウスのバックグラウンドのTNFα欠損マウスが作製されているが、MHVに特に感受性の強いBalb/c系のバックグラウンドを持つTNFα欠損マウスを作製するため、Balb/cマウスでバッククロス交配を行っており、現段階で6世代のバッククロスが終了している。12世紀までバッククロスを継続する予定である。一方、まず様々な症状を起こすMHV6株の分与を受けてウイルスストックを作製し、そのタイターを測定するとともに、それらのウイルス株感染細胞からtotal RNAを回収し、病原性に関与する遺伝的変異を解明する目的でORF3領域のcDNAをRT-PCRにより増幅した。

ORF3領域は同じコロナウイルスに属するネコ伝染性腹膜炎ウイルスで弱毒株において遺伝子欠損が認められているが、RT-PCRの結果、MHVにおいても弱毒株であるS株のみで約300400bpの遺伝子の欠落が認められ、現在、その塩基配列の比較解析中である。また、マウス新生児脳からグリア系の細胞であるアストログリア細胞やTNFαなど炎症性サイトカインの主な産生細胞であるマクロファージ系細胞に属するミクログリア細胞の分離培養を行い、MHV感染時の変化について検討中である。コロナウイルスは、その株により消化器系・呼吸器系・肝臓・脳神経系など様々な組織に親和性を示すが、株間でのトロピズムや病原性の相違の原因となる機構は明らかではない。一方で、マウス肝炎ウイルス(MHV)は、その株によりマウスにおいて急性の激症肝炎・慢性肝炎・脳脊髄炎・脱随などを発症し、ヒトのポリオを含めた脱髄性疾患のモデルとして研究されている。MHV感染による激症肝炎や脱髄・神経性疾患には宿主側の免疫系の影響、特にTNFαやIL-1βなどのサイトカインが関与していることが示唆されている。そこで、コロナウイルスに見られる株間での病原性の相違における分子生物学的基盤を明らかとするために、TGEV(ブタ伝染性胃腸炎ウイルス)強毒株およびワクチン株9株のS蛋白遺伝子およびORF3・3-1・4領域、ORF7領域のRT-PCR・RFLP解析を行ない、さらに同領域の塩基配列を決定し比較した。その結果、日本で1957年から現在まで流行したTGEVは大きく2つのグループに型別可能であることが明らかとなった。また、これまでの報告で病原性に関与していると考えられていたORF3・3-1・4領域の遺伝子欠損は病原性に直接関与しないことが明らかとなった。S蛋白遺伝子の病原性や赤血球凝集能に関与していると思われる領域に欠損を持つTGEV株を新たに分離し、解析中である。一方、マウスに致死的な激症肝炎をおこすMHV-3株を用いて、TNFα遺伝子欠損マウスに対して感染実験を行ったところ、対照であるC57BL/6マウスと比較し、生存日数・生存率に明らかな差が認められた。現在、詳細な病理学的、免疫学的およびウイルス学的解析を進めている。また、MHV感染がマクロファージのサイトカイン産生など免疫機能に与える影響についてin vitroでの解折を行っている。コロナウイルスに見られる株間での病原性の相違における分子生物学的基盤を明らかとするために、TGEV(ブタ伝染性胃腸炎ウイルス)強毒株およびワクチン株9株のS蛋白遺伝子およびORF3・3-1・4領域、ORF7領域のRT-PCR・RFLP解析を行ない、さらに同領域の塩基配列を決定し比較した。その結果、日本で1957年から現在まで流行したTGEVは大きく2つのグループに型別されることが明らかとなった。また、これまでの報告で病原性に関与していると考えられていたORF3・3-1・4領域の遺伝子欠損は病原性に直接関与しないこと示唆する結果が得られた。マウス肝炎ウイルス(MHV)は、株により急性の激症肝炎・慢性肝炎・脳脊髄炎・脱髄など様々な病態を示し、これらの病態発生には宿主側の免疫系の影響、特にTNFαやIL-1βなどの炎症性サイトカインの関与が示唆されている。
高圧力プラズマにおける磁気流体不安定性安定化と3次元効果の研究

プラズマの高圧力化は核融合炉の実現において、これを最終的に阻害する磁気流体不安定性である抵抗性壁モード(Resistive wall mode(以下「RWM」という。))の安定化が不可欠である。RWMの安定化に用いる外部コイルによる3次元平衡への影響を調べた。外部コイルを用いたトカマクプラズマのRWM安定化実験の実験結果を3次元平衡コードで再構成しうることを示した。また、JT-60SAにおいて予定されている小面積のコイルを用いた場合では側帯派の影響が大きいことを示し、3次元平衡コードでプラズマに対する影響を調べうることを示した。トカマク装置の抵抗性壁モードのフィードバックコイルを用いた安定化において、プラズマ表面に対してコイルの面積は小さく、またコイル数も少数にとどまる。この場合に問題となる、MHD不安定性がモード構造を維持したまま成長及び減衰を行うという仮定(モードリジディティ)及び制御モードの側帯波のプラズウアに対する影響を定量的に評価を行うには、計測された磁場揺動からコイルによる磁場成分、周辺の構造物からの磁場成分を静磁場だけでなく、渦電流まで含めたダイナミクスを考慮して差し引き、プラズマの磁場成分のみを抽出する必要がある。そのために、以前RFXで行った抵抗性壁モード安定化実験の実験結果に対し、トロイダル効果も含めた、新たに全てのコイルと周辺構造物による磁場を3次元FEMで計算し、これらの効果を差し引くコードを用いてトカマク放電の17放電およびRFP放電の20放電の計算を行うことによって得られたデータを用いた解析の準備を開始した。また、磁場の3次元構造の計測に必須の複数軸計測の磁気センサーの開発を行い、試作品を製作し、R&Dを行った。磁気流体不安定性及び磁場構造に対する3次元効果に関するDIII-Dの実験に参加した。当研究課題の連携研究者の開発した3次元平行解析コード、HINT2コードを含む複数の平衡解析コードを用いた摂動磁場による磁気面への影響の解析に対するコードの妥当性の確認を目的とした。DIII-Dのプラズマに対して真空容器内に設置されたコイルにて摂動磁場を与えた場合、VMECコードに代表される、3次元MHD平衡解析コードと、Mars-F、IPECコード等の軸対象平衡解析コードに外部磁場の効果を線形的に取り入れたコードとを比較して、プラズマの3次元的な構造の変化がプラズマの低磁場側では比較的合っているのに対し、高磁場側では大きく相違があるため、新たに高磁場側に設置された3次元磁場計測用磁気センサーを用いてコードの計算結果との比較を行った。コードの妥当性の検証までには至らなかったが、上下非対称のプラズマを解くことができるコードと上下対称なプラズマのみ解くことができるコードがある中で、上下の対称性が高磁場側のプラズマの3次元的な変位に影響を与えうるとの新たな知見を得た。JT-60SAのRWM安定化コイルはモードの波長に対して非常に小さいため、その制御性についてRFXのトカマク放電を用いてJT-60SAのコイルを模擬して実験を行い、このような小さなコイルでもRWMが安定されることを確認したが、側帯波の影響によってプラズマの性能が低下し、大きな側帯派ではディスラプションにまで至ることが判明していた。JT-60SAのRWM制御時の側帯派の計算を行い、その影響が無視できないことを示した。さらにVMECにて計算を進め、このためにコイルが作る磁場のマッピングデータを作るコードを開発し、計算を行った。これらについて、JT-60SA用の3次元磁場計測用の磁気プローブの製作も含めてPlasma conference 2014にて発表を行った。RFXでの実験をH27年度に予定していたが、H27年10月にRFX装置改修が決定し、改修前までに予定の実験を実施できなかった。核融合炉の定常化及び高効率化には、磁気流体不安定性の一種である抵抗性壁モード(RWM)の安定化が必須であり、JT-60SAでは制御コイルを用いて安定化する予定である。しかしながら、コイルの面積は小さく、またコイル数も少数にとどまるため、これまでに、この問題に関連する実験をRFXのトカマク放電で行っている。この結果、制御コイル192個のうち6個のコイルまで減らしても制御対象のRWMを安定化出来ることを確認した。しかしながら、実効的なコイル面積が小さいことによる側帯波の励起によって、磁気面が3次元的な変形を受けてプラズマの性能が著しく低下し、プラズマ消滅に至ることがあることが明らかとなった。JT-60SAにおいても、高ベータ運転を行うためにはプラズマと壁の距離を小さくする必要があるため、3次元的な変形によりプラズマが壁に接触する恐れがある。一方、これまでヘリカル装置にのみ適用されていた3次元MHD平衡解析コードが整備され、トカマク配位に対して適用されつつある。本年度は、トカマクプラズマにおける外部磁場によって生じる3次元効果を、3次元MHD平衡解析コードを用いることによって解析可能であるところに着目し、RFX-modで様々な制御コイル配位で行ったトカマクプラズマに対して特に最外殻磁気面に注目して解析を行うこととした。観測されるMHD不安定性等から電流分布の予想を行い、これを用いて輸送解析コードにて放電開始から終了までのシミュレーションを行うことにより、電流分布と圧力分布を得た。これらとコイルの電流の情報、プラズマ中の単位電流あたりの磁場の分布を入れることにより、3次元MHD平衡解析コードVMECの計算を行った。

RWM補正コイルの電流を変えることによって、トカマクプラズマの3次元的な平衡が得られ、最外殻磁気面の形状が有為に変化することを確認した。プラズマの高圧力化は核融合炉の実現において、これを最終的に阻害する磁気流体不安定性である抵抗性壁モード(Resistive wall mode(以下「RWM」という。))の安定化が不可欠である。RWMの安定化に用いる外部コイルによる3次元平衡への影響を調べた。外部コイルを用いたトカマクプラズマのRWM安定化実験の実験結果を3次元平衡コードで再構成しうることを示した。また、JT-60SAにおいて予定されている小面積のコイルを用いた場合では側帯派の影響が大きいことを示し、3次元平衡コードでプラズマに対する影響を調べうることを示した。実験を行う外国の実験装置とのスケジュール調整により実験が遅れたため。RFXにおいて行われた192個の抵抗性壁モード制御コイルのうち、様々な個数、位相の組み合わせで行った実験に対して、3次元解析コードVMECを用いて、3次元磁場のプラズマに対する影響を調べる。RFXでは既にVMECを導入済みであり、先方の研究者と協力して研究を進める。JT-60SAにおいて、抵抗性壁モード制御中のプラズマ平衡をVMECを用いて調べる。JT-60SAへのVMECの導入は連携研究者と共同ですでに行われている。工学本年度DIII-Dで行った実験結果に対して、上下非対称なプラズマを解析可能なHINT2においても該当放電の解析を行い、それぞれの位置の3次元磁場計測用磁気センサーで観測されると予想される磁場の計算を行い、実験結果と比較する。また、JT-60SAでのRWM制御時の側帯派の影響を調べるためVMECでのJT-60SAプラズマの計算を進める。実験装置のスケジュールとの調整のため実験開始が26年度にずれ込んだため。平成27年度に予定していたRFXコンソーシアム(伊)での実験が、RFX装置の改修により一部未実施となったため、実験に係る費用(旅費、物品費等)が次年度使用額として生じることとなった。25年度、26年度に予定していた実験参加がそれぞれ1年ずつ後ろ倒しになったため。RFXコンソーシアム(伊)での、実験と実験結果の計算に係る打合せ、及び計算遂行のための旅費、物品として使用する。平成26年5月にDIII-Dで行われる予定の磁気流体不安定性及び磁場構造に対する3次元効果に関する実験に参加する。具体的には、連携研究者の開発した3次元解析コード(HINT)やVMECを用いた摂動磁場による磁気面及び磁気流体不安定性の安定性への影響の解析についてDIII-Dの外部磁場発生コイルを用いて検証を行う。また、RFXで得られたデータについて、これらの3次元解析コードを用いた解析を行う。26年度予定していたRFXへの実験参加を27年度に行う。実験装置のスケジュールとの調整のため実験参加開始が26年度にずれ込んだため。平成25年度に予定していたRFXおよびDIII-Dでの実験参加を26年度に行う。また、計算機の購入を行う。
ナノカーボンテンプレートによる低次元・高品質結晶成長技術構築と光素子応用

本研究では、ナノカーボン材料をテンプレートとした新しい微細加工技術・結晶成長技術を新たに提案し、材料系を問わず、10nm級の一次元構造を実現する新しい手法を構築した。窒化ニオブによる超伝導ナノワイヤーの作製した結果、量子位相スリップ、熱位相スリップの観測やそのメカニズムを明らかにした。また、カーボンナノチューブへのアルミナの成長も行い、アルミナ成長による発光特性制御に成功した。本研究では、ナノカーボン材料を用い、その低次元構造をテンプレートとした新規微細加工技術を提案し、現在のリソグラフィー・エッチング技術では実現できない数nmオーダーの微細加工を実現する。加えて、ナノカーボン材料のフレキシビリティー・化学的安定性・低表面エネルギーといったナノカーボン独自の性質に着目して、ナノカーボンを基板とした独自の結晶成長を提案し、従来の固体基板では実現できない基板での薄膜およびドット形成を実演する。最終的には、本手法による微細加工・結晶成長技術を光物性制御や光デバイス開発に広く適用可能であることを示すことを目的とする。今年度は、カーボンナノチューブをテンプレートとして、一次元ナノワイヤー作製方法の構築とそれによる低次元量子物性の発現に関する研究を進めた。超伝導体である窒化ニオブをカーボンナノチューブ上に形成し、シリコンチップ上に超伝導ナノワイヤーを作製するとともに、その電気伝導測定が可能なデバイスを作製した。その結果、低次元超伝導体に発現するとされる超伝導ー絶縁体転移を観測することに成功した。また、低次元超伝導体に特有の磁束のトンネルに相当する位相スリップを観測したが、電極材料の超伝導転移に誘起された位相スリップの変化を観測することに新たに成功した。また、カーボンナノチューブ上に、原子層堆積装置によるAl2O3成長を試みた。その結果、成長条件に応じて、ドット状からワイヤー状の成長制御が可能なことを明らかにした。研究計画では、カーボンナノチューブをテンプレートとして、金属材料である窒化ニオブを用いたナノメートルオーダーのナノワイヤー成長に成功するとともに、そのナノワイヤーにおいて、超伝導ー絶縁体転移などの新たな量子輸送現象の観測に成功した。これは、従来の微細加工では実現が難しい新たな微細加工法と物性制御法を示したものである。また、原子層堆積装置を用いてカーボンなオンチューブ上に誘電体であるAl2O3を成長することで、当初の目的である量子ドットの形成や1次元ナノワイヤーの形成といった成長制御法も示した。さらに、当初の予定を超えて、カーボンナノチューブの励起子発光制御に関する成果も得た。今年度研究を進めた1次元微細加工技術や量子ドット・薄膜成長技術に関する研究を引き続き進展させるとともに、それによる光物性制御に関する研究を進める。また、これによる単一光子生成や光デバイス応用に関する研究も着手して、本研究で提案する低次元構造作製法が、新たな光デバイス実現に有効であることを示す。半導体工学、ナノサイエンス、ナノカーボン材料、デバイス開発
ロバート・ボイルの科学思想の起源・背景と研究スタイル

「ロバート・ボイルの科学思想の起源・背景と研究スタイル」を明らかにするために、ボイルが実際に手元におき、執筆に利用した書籍を解明することに、今回の研究の焦点をあわせた。その書籍の解明の手法としては、ボイルがページ数を明示して引用する箇所をボイル著作集、ボイル所管集、ボイル草稿の全体にわたってリストアップし、ボイルが利用することが可能であった(つまりボイルの執筆以前に出版された)版と具体的に照合する作業を行った。ボイルは当時としてもきわめて珍しい書物を利用していることがしばしばあり、同定することができなかったものも28点残ったが、58点までは同定することができた。そのなかには、これまでのボイルの研究史においてまったく視野に入っていなかったものも含まれる。ここでは一般的傾向だけを列挙しておこう。1)ボイルは中世の著作をほとんど利用していない。ここでスコラ哲学に関しても、17世紀に出版された数冊の概説書に依拠している。2)ルネサンスの著作に関してもボイルは、アグリコラやゲスネル等ごく少数の例外を除き、利用していない。3)ボイルは直近に出版された集成本(コンペンディウム、コモンプレイス・ブック、詞華集等)をよく利用している。4)ボイルは同一の著作の異なる版を利用することが少なくなかった。5)ページ数をはじめ、引用においてはボイルは正確な引用を行っていることが少なくなかった。ロバート・ボイルの研究スタイルの特徴についてそのもっとも基礎的な要因を明らかにした。ひとつは、ボイルが貴族であって、十分な資産を活用できたことである。もうひとつは、ボイルが弱視であって、著作家とのしてキャリアの出発時から、写字生を利用していた点である。ボイルは、写字生を使って著作にほとんどすべてを口述筆記したのみならず、実験日誌を記す際にも、読書ノートを取る際にも写字生を使った。また実験の遂行に当たっては、有用なロバート・フックやドニ・パパン等、当時として第1級の科学者・実験家を実験助手として雇い、実験をさせ、実験ノートを付けさせている。従ってボイルの著作のいくつかは、今の基準で言えばフックやパパンとの共同研究であって、ボイル一人の業績と見ることはできない。また身近にサミュエル・ハートリッブやヘンリー・オルデンバーグ等、海外との情報交換の有能な窓口をもち、当時にあっても相当に珍しいキミアのドイツ語の書籍を入手し、翻訳してもらったり、内容を教えてもらったりしている。そうした書物をボイルは、ボイルの著作としてもっとも有名な『懐疑的化学者』(1661)で秘密のソースとして利用している。そして、ボイルは一般的に中世やルネサンスの原典に直接あたることなく、当時数多く出版された百科事典的書物、コモンプレイス書、詞華集、ドクソグラフィカルな書物を利用することが多かったことを明らかにした。
遺伝子改変動物を用いたグレリンによる摂食調節ニューロンネットワークの形態解析

グレリンは成長ホルモンの分泌促進作用のみならず、摂食促進やエネルギー代謝調節に関わっている。中枢におけるグレリンネットワークを神経解剖学的に解明することは複雑な摂食調節機構を解明する上で重要である。本研究ではCre-loxPシステムによってグレリン発現細胞特異的に緑色蛍光タンパク質を高発現する遺伝子改変動物の作製を目的とした。緑色蛍光タンパク質を検出することで、グレリン産生細胞の分布局在を同定した。グレリンは中枢における摂食調節ペプチドとして重要であることから、脳内のニューロンネットワークを解明する必要性が極めて高い。そこでグレリンニューロン特異的に緑色蛍光タンパク質(GFP)を過剰発現する、または逆行性に軸索輸送が可能な緑色蛍光タンパク質を過剰発現するCre-loxPシステムをもつトランスジェニックマウスを開発し、グレリン産生ニューロンの脳内分布・局在およびグレリンニューロンに対する求心路を緑色蛍光をトレースすることで神経解剖学的に解析することを目的とした。グレリン遺伝子転写調節領域8.6kbの下流に組換え酵素Cre一変異型エストロジェン受容体(ER)融合体cDNAおよびヒト成長ホルモンpolyAシグナル部位をもつDNAをこの順番で結合させ、グレリン遺伝子プロモーター-CreER-poly(A)のDNAコンストラクトを構築した。一方、すでに構築したシグナルペプチド-eGFP一破傷風毒素C末断片-IRES-核移行型LacZの順番で結合しているDNAコンストラクトを強力なプロモーター活性を持つCAGプロモーター-10xP-neo-loxPの下流に挿入し、DNAコンストラクトを構築した。各々のDNAコンストラクトを制限酵素処理し、精製後、注入用のDNAとし、C57BL系マウスの受精卵に注入した。グレリンは成長ホルモンの分泌促進作用のみならず、摂食促進や脂肪蓄積といったエネルギー代謝調節に関わっている。本研究ではCre-loxPシステムによってグレリン発現細胞特異的に蛍光タンパク質を発現する遺伝子改変動物を作製することを目的とした。前年度から引き続き、グレリン遺伝子プロモーターでCreと変異エストロゲン受容体の融合タンパク質を発現するトランスジーンを受精卵に注入し、1系統の遺伝子改変マウスが完成した。現在は繁殖およびloxPを導入したマウスとの交配を行っている。前年度、CreのDNA組換え部位であるloxPを導入した蛍光タンパク質または軸索を逆行性輸送する蛍光タンパク質を過剰発現するトランスジェニックマウスを作出に成功した。本年度は前年度に完成した2系統の緑色蛍光タンパク質発現マウスおよび1系統の軸索を逆行性輸送する蛍光タンパク質発現マウスを実験に供することができる数まで繁殖させた。そして、それぞれのマウスを全身性に組換え酵素Creを発現している遺伝子改変マウスと交配させ、生まれてきたダブルトランスジェニックマウスにおいて緑色蛍光タンパク質が全身性に発現していることを確認した。すなわち緑色蛍光タンパク質発現マウスによってその蛍光タンパク質を指標に局在・分布の解析および軸索を逆行性輸送する蛍光タンパク質発現マウスによって緑色蛍光タンパク質を辿ることで、特定ニューロンを支配するニューロンを同定することが可能となった。今後、これらの遺伝子改変マウスを用いることで、Creを発現する遺伝子改変動物を種々作出し、交配するだけで、迅速にニューロンネットワークの解析ができる強力なツールになる。