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大都市圏内での介護サービス専門職の地域差に関する研究：福岡市、飯塚市を比較して

本研究の目的は、福岡市と飯塚市を対象に、介護福祉士・介護支援専門員・看護師等の専門職比率に地域差があることとそれを生み出す要因を、両都市の施設管理者へのインタビューとそこで働く専門職へのアンケートを通して解明することである。平成30年度は都道府県別、福岡県市区町村別に介護サービス労働力不足の地域差と福岡市の施設で働く専門職の就業特性を捕捉するため、次の2点を中心に研究を行った。第1に、都道府県別に介護職員の離職率と特別養護老人ホーム(以下、特養)の介護職員に占める介護福祉士比率等を、既存データを用いて分析した。その結果、離職率の高い都道府県ほど介護福祉士比率は低く、介護福祉士比率の高い地域の多くは大都市圏からの地理的近接性に乏しい地方圏であることが判明した。これは、高卒進学者1,000人あたりの介護福祉士養成学校入学定員が地方圏ほど多く、卒業者の多くが学校立地都道府県出身者であり彼らの大半が出身都道府県内の特養に就職するためである。さらに、福岡県市区町村別に特養の介護福祉士比率を捉えると、福岡市を含む「福岡地域」では中央区、城南区を中心に地理的に離れるほど低く、飯塚市を含む「筑豊地域」では「福岡地域」と比べて全体的に低かった。第2に、福岡市特養管理者へのインタビューとそこで働く専門職へアンケートを行った。アンケート対象者の中心は専門職の中で人数が最も多い介護福祉士である。この結果、「既婚(子あり)」、「既婚(夫婦のみ)」で月給20万円以上の者の比率が高く、通勤時間15分以上の者の比率は「未婚(親と同居)」、「既婚(子あり)」で高い等、婚姻関係・居住形態等の個人属性により介護福祉士の就業特性は異なることが判明した。ただ、インタビューから、これらの就業特性は個人属性だけでなく事業所規模や経営方針、養成学校の立地特性等、複数の要素が関連して生じていることも明らかになった。本研究計画の中で最も重要な部分をなす事業所インタビューと介護福祉士へのアンケートに関して、当初予定していた福岡市を対象に実施できたから。また、研究期間1年目にこのテーマに関する論文を公表できているから。令和元年度は、飯塚市の特養管理者等へのインタビューとそこで働く介護福祉士へのアンケートを行う。その際、飯塚市内の特養だけでなく、必要に応じて行政や公共職業安定所等、飯塚市労働市場に詳しい組織・団体へのインタビューも実施する。これを踏まえて、福岡市と飯塚市で介護福祉士比率に地域差を生み出す要因を彼らの就業特性、事業所規模や経営方針、養成学校の立地特性等の複数の観点から考察し、学会発表を行い、論文を執筆する。当初、予定していたアンケート分析に使用するパソコン等の設備備品、および資料整理のための文具やプリンターインク等について、勤務先で貸与・設置されたもので対処することができたから。

ただ、今後は福岡市、飯塚市の両都市のアンケート結果を比較分析する上で、情報量が膨大になり容量の関係からデスクトップ型パソコンが必要になると考えられるため、必要に応じて令和元年度に購入する予定である。また、購入予定だった資料の一部がインターネットや大学図書館で入手・閲覧可能になったため、未使用額が生じた。この分に関しては、現在、福岡市調査の分析を行っている中で補充調査の必要性が高くなったため、その旅費に充当する。
ゲノムDNA化学修飾のニューロン発達における機能解明

哺乳類の脳の神経細胞(ニューロン)におけるDNAメチル化、及び、DNMT1の役割を解明することを目的とし、研究を行った。その結果、DNMT1が発達期において神経突起の伸長に関与すること明らかにした。また、ニューロン特異的なDNMT1の欠損が、マウスの不安様行動を誘発させることがわかった。これらの結果は、非分裂生のニューロンにおいてもDNMT1がその機能を発揮し、ニューロンの発達と活動を制御していることを示している。精神疾患発症やストレス応答脆弱性に、神経細胞(ニューロン)におけるゲノムDNAメチル化の関与が指摘され、さらにニューロンにおいて新たにヒドロキシメチル化というゲノム修飾が発見されるなど、脳・神経系におけるDNA化学修飾機構についての研究は、近年世界的に注目を集めている。そこで、本研究では、ニューロンの発達におけるDNA化学修飾の意義と、その酵素群の機能解析を行うことを目的とした。まず、ニューロン発達におけるDNA化学修飾酵素の役割を解析した。shRNAの発現によるDNAメチル化酵素Dnmt1のノックダウン(KD)、又は過剰発現を誘導し、ニューロンの形態的変化の有無を観察した。その結果、DNMTの発現変動により軸索伸長が変化することがわかった。また、メチル化活性を持たない変異型DNMT1を過剰発現させたニューロンにおいても、同様の軸索伸長の抑制効果が観られたことから、DNMT1はメチル化活性非依存的に、ニューロン軸索伸長を制御する機能を持つ可能性が示唆された。また、DNMT1欠損ニューロン由来の培養上清を用いた培養においては、野生型ニューロンの軸索伸長がより促進されたことから、DNMT1KDによる軸索伸長の促進は、培養液中に産生する細胞外因子によるものであることを示唆した。更なる実験の結果、DNMT1が、ニューロンの軸索伸長に関わるTrk受容体のTrkBとTrkCの活性化調節を介して軸索伸長を制御することを示唆している。次に、ニューロン特異的にDNMT1が欠損したCKOマウスを用いて行動解析を行い、精神疾患とDNMT1の発現との関連を調べた。その結果、その結果、オープンフィールド試験において、cKOマウスが不安様行動を示すことがわかった。そこで、本研究では、ニューロンの発達におけるDNA化学修飾の意義と、その酵素群の機能解析を行うことを目的とする。本年度はまず、ニューロン発達におけるDNA化学修飾酵素の役割を解析した。shRNAの発現によるDNAメチル化酵素Dnmt1のノックダウン(KD)を誘導し、ニューロンの形態的変化の有無を観察した。その結果、DNMT1KDニューロンでは、コントロールと比較すると、軸索がより伸長する傾向にあることがわかった。一方で、DNMT1の過剰発現したニューロンにおいては、軸索伸長が抑えられる傾向にあった。また、メチル化活性を持たない変異型DNMT1を過剰発現させたニューロンにおいても、同様の軸索伸長の抑制効果が観られた。これらにより、DNMT1はメチル化活性非依存的に、ニューロン軸索伸長を制御する機能を持つ可能性が示唆された。次に、DNMT1KDニューロンから培養上清を回収し、野生型ニューロンに添加する実験をおこなった。その結果、DNMT1欠損ニューロン由来の培養上清を用いた培養においては、軸索伸長がより促進されたことから、DNMT1KDによる軸索伸長の促進は、培養液中に産生する細胞外因子によるものであることを示唆した。また、ニューロンの軸索伸長に関わるTrk受容体のTrkBとTrkCの活性化がDNMT1KDニューロンにおいて観察された。これらの結果は、DNMT1がそれらの受容体の活性化調節を介して軸索伸長を制御することを示唆している。現在、DNMT1の標的領域等の同定と、相互作用因子の探索を行っている。上述したように、本年度は、DNAメチル化酵素の一つDNMT1がTrkレセプターの活性化を介してニューロンの軸索伸長を制御していることを突き止めた。このことは、DNA化学修飾酵素がニューロンの発達に寄与していることを示しており、本研究の目的の一つである、ニューロン発達におけるDNA化学修飾酵素の機能解析を明らかにする上で基盤となる成果である。また、発達中のニューロンのTrkレセプター活性化経路がDNMT1よって制御さているという結果は、次年度に予定されているDNA化学修飾酵素の標的領域決定や相互作用因子の探索を実行する上でも重要な成果である。従って、本研究課題は概ね順調に進展していると考えられる。今後も、当初の研究計画通り進める予定である。具体的には以下の通りである。1)DNMT

1KDニューロンからRNAを回収し、マイクロアレイによって発現遺伝子を同定する。同時にDNAも回収し、MeDIP法を行い、発現が変化した遺伝子の転写調節領域のメチル化状態を調べる。さらに、DNMT1抗体を用いてクロマチン免疫沈降を行い、ハイスループットシークエンサーを使用しニューロンにおけるDNMT1標的領域の同定を行う。さらに、DNMT1の相互作用因子をタンパク質質量分析装置(LC-MS/MS)を用いて解析する。これらにより、ニューロン発達におけるDNMT1の機能を明らかにする。2)ニューロンにおいて特異的にDNMT1が欠損したSynapsinCre-Dnmt1floxマウスを用いて、恐怖条件付け試験により記憶能力の発達におけるDNMT1の役割を調べる。さらにオープンフィールド試験、明暗往来試験等を行うことで、情動行動に関わる脳領域の発達における役割も解析する。これらの実験によりマウスの行動に変化が見られた場合、海馬領域などを短期スライス培養し、電気生理学的手法により長期増強(LTP)や長期抑制(LTD)の変化を調べる。次年度も概ね研究費は、培養器具やプラスチック器具などの消耗品費、実験試薬やキット購入費、マウス購入費、遺伝子改変マウスの維持費として使用予定である。また、ハイスループットシークエンサー使用のための試薬費としても使用する。さらに、日本分子生物学会に参加するための交通費などの旅費として使用する予定である。
ナノポジショニングによるナノ・メガシステムの強度物性ゆらぎマップ測定システム

本研究は,ナノテクノロジーを基盤技術として開発するナノ・メガシステムを対象とし,これらの信頼性を支配するナノメートルオーダーの材料強度物性のゆらぎ分布を測定する技術を開発することを目的としている.独自に開発したナノ・メガシステムの強度物性ゆらぎマップ測定システムを活用し,次世代半導体用微細薄膜配線材料,高誘電率薄膜材料,次世代高温ガスタービン動翼材料等のナノスケール結晶構造,組織変化に基づく各種物性変動メカニズムの解明研究を推進した.その結果,薄膜配線材料においては,ナノスケールの柱状組織が形成されることで,機械特性(弾性率や破壊強度等)に強い三次元異方性が発現するとともに,ナノスケールで複雑な三次元分布が形成されることを実証した.また,高誘電率薄膜材料においては,原子レベルでの欠損に基づき、局所的な著しいバンドギャップ低減が発生し,絶縁特性の低下とともに,点欠陥の拡散に基づく大きな経時変化が生じることを解析的に明らかにした.これらの解析結果を,(財)高輝度光科学研究センター(SPring-8)内の光電子分光分析設備を活用して実証した.さらに,次世代高温ガスタービン向け耐熱合金において,高温高応力負荷環境でナノスケールの微細分散組織が構成原子の応力起因の異方的拡散挙動に起因して粗大化層状化し,急激に高温強度が劣化する現象の大気中可視化を実現し,その劣化損傷メカニズムを明らかにした.以上の研究から,本研究の当初目標であった,「ナノメートルオーダーの分解能(位置再現分解能:20nm)で測定対象領域を特定し,最小位置分解能100nm以下で材料表面の強度物性(弾性率,硬度,降伏応力,残留応力,界面接着強度等)のゆらぎ分布マップを,最小変位分解能0.2pm,荷重分解能1nN単位で測定する技術」を完成するとともに,その有用性を実証した.本研究は,ナノテクノロジーを基盤技術として開発するナノ・メガシステムを対象とし,これらの信頼性を支配するナノメートルオーダーの材料強度物性のゆらぎ分布を測定する技術を開発することを目的としている.独自に開発したナノ・メガシステムの強度物性ゆらぎマップ測定システムを活用し,次世代半導体用微細薄膜配線材料,高誘電率薄膜材料,次世代高温ガスタービン動翼材料等のナノスケール結晶構造,組織変化に基づく各種物性変動メカニズムの解明研究を推進した.その結果,薄膜配線材料においては,ナノスケールの柱状組織が形成されることで,機械特性(弾性率や破壊強度等)に強い三次元異方性が発現するとともに,ナノスケールで複雑な三次元分布が形成されることを実証した.また,高誘電率薄膜材料においては,原子レベルでの欠損に基づき、局所的な著しいバンドギャップ低減が発生し,絶縁特性の低下とともに,点欠陥の拡散に基づく大きな経時変化が生じることを解析的に明らかにした.これらの解析結果を,(財)高輝度光科学研究センター(SPring-8)内の光電子分光分析設備を活用して実証した.さらに,次世代高温ガスタービン向け耐熱合金において,高温高応力負荷環境でナノスケールの微細分散組織が構成原子の応力起因の異方的拡散挙動に起因して粗大化層状化し,急激に高温強度が劣化する現象の大気中可視化を実現し,その劣化損傷メカニズムを明らかにした.以上の研究から,本研究の当初目標であった,「ナノメートルオーダーの分解能(位置再現分解能:20nm)で測定対象領域を特定し,最小位置分解能100nm以下で材料表面の強度物性(弾性率,硬度,降伏応力,残留応力,界面接着強度等)のゆらぎ分布マップを,最小変位分解能0.2pm,荷重分解能1nN単位で測定する技術」を完成するとともに,その有用性を実証した.本研究は,ナノテクノロジーを基盤技術として開発するナノ・メガシステムを対象とし,これらの信頼性を支配するナノメートルオーダーの材料強度物性のゆらぎ分布を測定する技術を開発することを目的としている.数nmから数十cmの実構造物の表面において,ナノグリッドを用いたサーフェスエンコーダーシステムを応用してナノメートルオーダーの分解能で測定対象領域を特定し,特定した位置における材料表面の強度物性をナノインデンテーション技術を用いて測定する技術を開発する.初年度の主要研究実績は以下の通りである.1.ナノポジショニング技術による強度物性ゆらぎマップ測定技術の開発ナノ加工技術を活用し,石英基板上に正弦波を二次元に展開した形状を持つ二次元ナノグリッドとオートコリメーション法を原理とする角度センサの組み合わせにより,位置をサブ100nm以下の精度で検出できるナノポジショニング技術を開発し,空気ベアリングを応用した試料駆動ステージを試作した.また,ナノインデンテーション技術を導入し,サブ100nmの厚さを有する各種薄膜の強度物性評価を試み,薄膜の形成方法に依存して,厚さ方向に急峻な物性分布が形成されることを実証し,従来のバルク材料とは強度物性が著しく異なる場合があることを解明した.2.ナノ領域材料強度物性解析技術の開発原子結合状態に加え電子分布状態の解析も可能な量子分子動力学解析手法を応用し,半導体デバイスで使用されるナノメートルオーダー厚さの絶縁材料のバンドギャップ特性に及ぼす結晶ひずみや原子欠陥の影響を定量的に解明する解析技術を開発した.本解析技術に基づき,材料中に引張ひずみが作用することで最大30%程度バンドギャップが減少すること,原子欠陥(酸素空孔)の発生に伴い不安定分子の遊離が発生し,この遊離分子とマトリクス構造との干渉によりバンドギャップが著しく減少することなどを解明した.

本研究は,ナノテクノロジーを基盤技術として開発するナノ・メガシステムを対象とし,これらの信頼性を支配するナノメートルオーダーの材料強度物性のゆらぎ分布を,実構造サイズレベルで測定する技術を開発することを目的としている.平成17年度は,ナノ・メガシステムの強度物性ゆらぎマップ測定システムの基本技術を完成させた.試験片のナノ領域(変位分解能:0.01nm)の強度物性を,隣接した多点間で連続して測定する計測システムを完成させた.ナノポジショニング技術を応用した試料移動ステージを使用し,さらに,ナノインデンテーション技術の高機能化を目的としてダイナミックコンタクトモジュール(荷重分解能:1nN)を導入した.この測定の空間分解能向上には,複数の角度センサを使用した高精度搬送システムを試作し,試料移動用ステージとして使用している.これにより,ナノスケールでの強度物性ゆらぎマップ測定を実現した.実際に半導体薄膜配線用銅めっき膜の強度物性が数100nm周期で数倍以上異なる分布を有し,バルク特性から大きく異なることを実証した.さらに,材料表面の微細組織変化を観察できるマルチチャンネル分光器(検出器)を導入し,高温ガスタービン用Ni基超合金のナノメートル分散組織がクリープ損傷の進行に伴い大きく変化することをIn-situ観察する技術も開発し,強度物性分布の変化も実証した.本測定システムにより,本研究の目標である数mmから数十cmの実構造物の表面において,ナノメートルオーダーの分解能(位置再現分解能:20nm)で測定対象領域を特定し,最小位置分解能100nm以下で材料表面の強度物性(弾性率,硬度,降伏応力,残留応力,界面接着強度等)のゆらぎ分布マップを,ナノインデンテーション技術を用いて最小変位分解能0.2pm,荷重分解能1nN単位で測定する技術を完成させた.本研究は,ナノテクノロジーを基盤技術として開発するナノ・メガシステムを対象とし,これらの信頼性を支配するナノメートルオーダーの材料強度物性のゆらぎ分布を測定する技術を開発することを目的としている.平成18年度は,17年度までに開発したナノ・メガシステムの強度物性ゆらぎマップ測定システムを活用し,次世代半導体用微細薄膜配線材料,高誘電率薄膜材料,次世代高温ガスタービン動翼材料等のナノスケール結晶構造,組織変化に基づく各種物性変動メカニズムの解明研究を推進した.その結果,薄膜配線材料においては,ナノスケールの柱状組織が形成されることで,機械特性(弾性率や破壊強度等)に強い三次元異方性が発現するとともに,ナノスケールで複雑な三次元分布が形成されることを実証した.また,高誘電率薄膜材料においては,原子レベルでの欠損に基づき,局所的な著しいバンドギャップ低減が発生し,絶縁特性の低下とともに,点欠陥の拡散に基づく大きな経時変化が生じることを解析的に明らかにした.これらの解析結果を,(財)高輝度光科学研究センター(SPring-8)内の光電子分光分析設備を活用して実証した.
造血幹細胞の分化様式の解析

造血幹細胞がどのようにして各細胞系譜へコミットするのか不明であった。造血幹細胞の運命の選択機序を解明するためにはクローナルな解析が欠かせない。申請者らはSingle-cell transplanation実験とPaired daughter cell実験(1個の造血幹細胞を培養し1回分裂させ2個の娘細胞を得た後、それぞれの娘細胞を別々のマウスに移植する実験)によってこの問題に挑戦した。従来、ドナーマーカーとしてLy5.1が用いられてきたが、Ly5.1は赤血球と血小板には発現しておらず、これらの細胞系譜の解析ができていなかった。そこで、蛍光色素のKusabira Orange (KuO)を発現したトランスジェニックマウスを作成し、このマウスから分離した造血幹細胞を移植実験に用いることにより、KuOをドナーマーカーとして顆粒球、単球、Bリンパ球、Tリンパ球系のみならず、赤血球、血小板系までも解析することができた。その結果、1個の造血幹細胞によって最初に再構築されるのは血小板であることが判明した。Single-cell cultureによって約10%の造血幹細胞集団が巨核球コロニーを形成し、Single-cell transplantationによって約10%の細胞が巨核球系再構築細胞(rMkP)として検出された。これらの結果は造血幹細胞とrMkPはごく近縁関係にあることを示唆した。そこで、Paired daughter cell実験を行ったところ、2個の娘細胞のうち一方が造血幹細胞で他方がrMkPや骨髄系共通前駆細胞として検出された。以上より、造血幹細胞が非対称性分裂を介して骨髄球系へ直接的に分化する経路(Myeloid bypass)が想定された。そして、造血幹細胞は分化過程において骨髄球系を優先して産生し、その後リンパ球系を産生するという新しい血球分化モデルを提唱した。24年度が最終年度であるため、記入しない。造血幹細胞はその自己複製能と多分化能によって造血システムを恒常的に維持している。しかし、造血幹細胞が自己複製するか否か、分化する場合にどの細胞系譜を選択するかという運命の選択がどのように制御されているかよくわかっていなかった。本研究では「造血幹細胞は非対称性分裂を介して一方の娘細胞が造血幹細胞を維持し、他方の娘細胞が骨髄球系前駆細胞へコミットする」という申請者らの独自の分化モデルを検証することを目的とした。造血幹細胞の運命の選択機序を解明するために、申請者らが開発したクローナルなアッセイ法を用いた。作成したKusabira Orangeトランスジェニック(KuO Tg)マウスを解析したところ、赤血球、血小板を含む、すべての血球系がKuOを発現していることが確認できた。そこで、KuO Tgマウスの骨髄よりフローサイトメトリーを用いてKuO陽性でCD34-c-Kit+Sca-1+lineage marker陰性(CD34-KSL)造血幹細胞を分離した。また、CD34-KSL細胞をさらにCD150とCD41の発現強度で分画し、CD150+CD41-CD34-KSL細胞、CD150+CD41+CD34-KSL細胞、CD150-CD34-KSL、細胞を分離した。次に、これらの細胞分画を用いてsingle-cell transplantationを行った。移植後、KuOをsingle-cell由来の細胞のマーカーとして用いて解析し、どの細胞分画に造血幹細胞が存在するかを判定した。これらのクローナルな解析から、興味深いことが明らかとなってきた。それは2種類の造血幹細胞が存在することである。移植後のキネティックスを比較すると一方は放物線型を示し、他方はS字型を示す。前者は移植早期から多分化能を示すのに対して、後者は移植後期に多分化能を示した。造血再構築レベルは前者より後者の方が有意に高く、また再構築期間も前者より後者の方が有意に長いことが明らとなった。そこで、申請者らは前者をLimited HSC(Hematopoietic stem cell swith limited self-renewal capacity)として後者のHSCと区別することにした。LlimitedHSCは上記3分画に存在するのに対して、HSCはCD150+CD41-分画にのみ存在することが分かった。

Single-cell cultureによって約10%の造血幹細胞集団が巨核球コロニーを形成し、Single-cell transplantationによって約10%の細胞が巨核球系再構築細胞(rMkP)として検出された。これらの結果は造血幹細胞とrMkPはごく近縁関係にあることを示唆した。そこで、Paired daughter cell実験を行ったところ、2個の娘細胞のうち一方が造血幹細胞で他方がrMkPや骨髄系共通前駆細胞として検出された。以上より、造血幹細胞が非対称性分裂を介して骨髄球系へ直接的に分化する経路(Myeloid bypass)が想定された。そして、造血幹細胞は分化過程において骨髄球系を優先して産生し、その後リンパ球系を産生するという新しい血球分化モデルを提唱した。24年度が最終年度であるため、記入しない。Kusabira Orangeトランスジェニックマウスを用いたsingle-cell transplantationの実験系を確立することができた。これによって、次のスッテプであるpaireddaughter cells実験を進めることができるから。また、Limited HSCとHSCを区別することによって、両者の造血系再構築における役割分担を解析し、新しい知見が得れると期待されるから。これまでの報告は二つの細胞集団の上下関係を示唆するのみである。例えば、分化段階の上位にある造血幹細胞集団から下位にある造血前駆細胞集団への直接の分化経路を証明できていない。二つの細胞集団の関係を明らかにできる方法にPaireddaughter cellsアッセイがある。そこで、上位にある造血幹細胞が1回の分裂を介して下位にある前駆細胞を産生するかどうかを解析することによって、造血幹細胞の初期分化経路を明らかにする。また、同様な手法を用いて、HSCとlimited HSCの関係も明らかにしていきたい。
DNA脱メチル化を指標とした口腔がん新規エピゲノム治療法の開発

2011年に発表された全エキソーム解析から、口腔がんでは予想を超えたゲノム・エピゲノム異常の集積が明らかとなった。Ten-eleven translocation1(TET1)はDNAの脱メチル化を介してがん化に関与するエピゲノム関連遺伝子として近年注目されているが、口腔がんにおいては未だTET1の報告はなく、その機能は未知である。本研究では口腔がん細胞株および公共データベースを利用した詳細な遺伝子解析を行い、TET1が口腔がんにおいてoncogeneとしての機能を有することを見出した。今後本研究をさらに発展させることで、TET1が口腔がんの新規治療標的と成り得る可能性が期待できる。がんの発生にはゲノム異常に加えて、DNAメチル化、ヒストン修飾、ヌクレオソーム調整因子、非翻訳RNAのすべてのエピゲノム機構に制御異常があることが明らかとなった。とりわけ、DNAメチル化(5mC)はがん抑制遺伝子の発現を負に制御する修飾として、がん細胞の増殖や生存に寄与することが分かっている。これまでに口腔がんにおけるメチル化異常の研究は散見されるが、脱メチル化の観点からエピゲノム異常を検討した研究は皆無であり、その可能性は未知である。本研究は、口腔がんにおけるTET1の機能および臨床病期、予後との関連を解析するものであり、脱メチル化機構を標的とした新規エピゲノム治療法の開発を目的としている。平成28年度は主に細胞実験を中心に研究を進めた。まず正常ヒト初代培養細胞である口腔ケラチノサイト(HOK)細胞と口腔癌細胞株でTET1遺伝子の発現をmRNAレベル、蛋白レベルで解析したところ、口腔癌細胞株で有意にTET1の発現上昇を認めた。またsiRNAにてTET1をknock downしたところ、癌細胞において増殖能および遊走能の減少を認めた。次に公共データベースであるThe Cancer Genome Atlas(TCGA)にて口腔癌患者の正常組織と癌組織を比較したところ、細胞実験と同様、癌組織で有意にTET1の発現上昇を認めた。さらにTET1の高発現を認めた症例では、有意に原発腫瘍の広がりが大きかった。以上の結果より口腔癌においてTET1がoncogenicに機能している可能性が示唆された。予定された実験は概ね遂行することができたが、当初の仮説に反してTET1は口腔癌においてoncogenicに機能する可能性が示唆された。これは平成28年度の細胞実験および公共データーベースによる解析にて得られた結果である。この結果を支持するための追加の実験が必要となったため、当初の予定よりやや遅れた結果となった。その目的達成のために、細胞実験および臨床検体を用いた解析により、口腔がんにおけるTET1のDNA脱メチル化能を詳細に解析し、新たな治療標的となり得るかを検討するものである。平成29年度は平成28年度から継続している細胞実験およびTCGAデータベースによる臨床検体の解析を行った。TET1をsiRNAにてknock downした後の細胞内の5hmC量をドットブロット法にて測定したところ、5mC量の減少および5hmC量の増加を認めた。これによりがん細胞内で実際にTET1が機能していることを確認した。前年度までの細胞実験にて、TET1は一部の細胞株にてDNAのメチル化により発現が高度に抑制されていることを見出したが、TCGAデータベースにて298例の口腔がん患者のDNAメチル化頻度を解析したところ、DNAのメチル化を認めた患者はわずか5人(1.7%)であり、口腔がんではTET1のメチル化は低頻度であることが明らかとなった。さらにTCGAデータベースにて口腔がんを部位別に分け、TET1の発現と患者背景(年齢、性別、生活背景)や臨床病期との関係を詳細に解析したところ、有意差は認めなかったものの、舌がんにおいて原発の病変が大きい患者は、TET1の高発現を示す傾向を認めた。実臨床におけるTET1の意義を証明するためには、今後はさらに臨床検体の数を増やして解析を行う必要があると考える。平成29年度は臨床検体を用いた解析を計画しているが、平成28年度の細胞実験に引き続き、マイクロアレイを用いたTET1の標的遺伝子の同定も併せて行う予定である。siRNAにてTET1をknock downした際に発現の変動する遺伝子をマイクロアレイを用いて網羅的に解析し、共通に発現の低下した遺伝子を同定する。さらに細胞株を用いてReal Time-RT-PCRにて同定した遺伝子のvalidationを行う予定である。これらの結果を統合してTET1とその上流、下流のpathwayをターゲットとした新規治療標的の同定を目指す。口腔がん本年度は当初の仮説に反した結果が出たため予定していた実験を履行することが出来ず、使用予定であった試薬を購入することが出来なかった。
近世富山売薬を中心にした抜け荷取引とその運輸の研究

本研究は富山売薬商を中心にして、近世のしかも後期を中心にした抜け荷取引の実態を解明し、この抜け荷品および抜け荷関係の商品の輸送、運輸の実態を解明することを課題としたものである。抜け荷という事柄上、関係する史料はきわめて限られるために、富山売薬を中心としつつも、隣国の加賀や能登の海商などのこの抜け荷との関わりや、また昆布だけでなく密買い俵物輸送も調べた。また、地元富山の史料を調べるだけではなく、薩摩藩や長崎奉行所、松前藩・対馬藩、幕府関係の史料に加え、大坂・京都その他各地の関係史料をも追い求めて調べたが、この場合、漂流関係の史料にも着目して、関係史料の把握に努めた。以上の調査の成果をまず、史料の紹介と分析という形で結実させることをはかった。ただ、富山売薬商の直接関係する史料は都合により翻刻を断念したが、関係絵図についてはその分析を加えて雑誌へ投稿中である。このため現在までに発表した文書の紹介は、富山売薬商関係者以外の所蔵史料となったが、もちろんそれは富山売薬の抜け荷輸送に密接にかかわる昆布輸送のものである。研究論考としては、とりあえず抜け荷ではないが、薬種の越中小廻船による輸送、漂流について活字化した。また、口頭発表で薩摩藩主導による日本海地域への抜け荷輸送と富山売薬の昆布および抜け荷輸送も含めて、本研究の成果も取り入れて報告している。さらに、抜け荷の代表的海商である銭五など加賀海商についての報告も行っているが、もちろん能登の廻船による抜け荷輸送についての検討の成果とともに論考にまとめる予定である。本年度の研究は富山県・石川県の地元調査と両県外の他県調査に重点を置いて、関係史料の発掘に力を入れるとともに、収集した関係史料の解読作業と関係文献の再検討に務めた。この結果、本研究での一重点課題となっていた長崎口での富山売薬商による唐薬種入手の活動について、これまでまったく知られていなかった、その重要な背景となる富山藩の活動を確認できる史料を見いだすことができた。具体的には天保期に富山藩が長崎で売却される輸入品の売買に乗り出したことであり、またこの時に本藩もこれに関係していたことが史料からうかがえ、この時期の富山藩・加賀藩が藩財政打開に向けて必死の努力をしていたこと、しかもこのことが、富山売薬による薩摩藩での抜け荷入手にかかわる活動をもたらしたこと、また加賀藩の輪島での抜け荷取引黙認や、銭屋五兵衛の活動容認をもたらしたことがわかった。県外調査では、とりわけ対馬での宗家文書調査により、大きな成果があげられた。本研究の重要課題の一つに対馬からの薬種入手の問題があり、この点でも糸口となる関係史料を見いだすことができた。すなわち、これまで対馬の研究者にも富山売薬が対馬に入り込むことはなかったとされていたのが、今回の調査により一時的ではあるが、富山売薬商がこの対馬で売薬活動を行えたことを確認できた。これは大変に大きな成果といえる。富山売薬が対馬で一時的とはいえ活動したことは、彼らが朝鮮より対馬へ入る薬種の入手についてもそれなりの対応をみせていたことを確実に予測させるからである。なお、この他、薩摩口、大坂その他での薬種入手の富山売薬の活動と、入手薬種の運送についても資料収集とその検討を進めたことも付け加えたい。本年度の研究成果は、その中心となる昆布・抜け荷輸送の廻船では、まず長者丸関係史料について薩摩側の関係史料を東大史料編さん所所蔵の島津家文書および鹿児島大学付属図書館蔵玉里島津家文書の中から見いだすことができ、その史料的分析を進められたことがある。また.

越中船ではないが、加賀藩出身の船員も乗船して昆布を薩摩へ輸送中に漂流した宝力丸について、大坂への輸送とする史料もあるため関係史料を収集して検討し、薩摩への輸送で間違いないことを確認し.また問題となる大坂とした長崎奉行所・加賀藩の処理についても検討し、特に長崎奉行所の処置が当時の抜け荷盛行の背景をなす同奉行所の施策の一端を示すものであることを確認した。さらに、種子島関係文書から薩摩藩での富山売薬の動向と昆布,抜け荷売買に関わる史料確認に努め、加賀廻船が薩摩へ昆布輸送をしていた史料も見いだすことができた。なお、富山売薬薩摩組の者が作成した薩摩藩領図を見いだし、検討できたのも成果といえる。次に長崎での富山売薬の動向について、長崎県立図書館蔵文書で調べ、彼らがかかわった抜け荷取引を確認し、また加賀、能登関係者による抜け荷取引と輸送についても把握した。富山売薬などの抜け荷取引、輸送問題の前提となる富山藩・加賀藩関係の動向では富山県立図書館・金沢市立近世史料館の文書を検討したが、その背景理解のための史料確認は実施できた。このほか、文政・天保期に富山売薬が全国各地で抜け荷購入につとめたことを調べるために、酒田など奥羽地域の関係史料発掘に努め、また蝦夷地での富山売薬の活動に関する調査も実施した。本研究の成果をまとめるために、本年度に執筆に着手し、活字とした成果と、活字とするために執筆の準備を行ったその成果は次のような内容のものである。まず、抜け荷輸送とそれに伴う昆布や俵物輸送が、通常の海産物や一般物資の輸送と異なり、例えば通常利用しない東廻りの航路選択を行うなど危険を伴う航海により、漂流発生がみられることから、漂流した加越能廻船の全面的な検討を実施し、その航海のあり方と抜け荷にかかわる廻船の摘出に務め、天保以降の東廻りの利用について、越中の昆布船以外に加賀廻船のその航海に着目した。この点で、具体的に銭五廻船の「東洋漂流記」について検討し、同史料成立は明治に入るものの、銭五の廻船が昆布輸送を東廻りで行っていた可能性をみた。また、幕末に薬荷輸送中にロシアへ漂流した六渡寺の平寿丸の漂流も検討し、漂着先が沿海州であったことから、昆布を積むために蝦夷地へ向かった廻船は、時に沿海州への漂流の可能性があり、このため史料確認できる朝鮮・中国での漂着だけで、前記廻船の日本海での漂流の全体をつかむことにはならないことが明らかにできた。さらに、加賀と能登の廻船の抜け荷輸送についても検討を進め、前者の廻船の薩摩入津の確認と、見いだした大坂からの抜け荷輸送により摘発された能登と越中両国の廻船の事例から、その輸送の具体的あり方について、積問屋との関係も含めて明らかにした。なお、富山売薬薩摩組の中心商人が作成した「薩州国絵図」についても検討し、その作成背景と、彼らの薩摩藩とい地域の認識についても検討を及ぼした。
光不斉誘導反応の研究

昨年度の本課題研究で,スピロシクロプロパンフルオレン誘導体の光異性化反応(1__SYdblharw2__)においてアリール基がユーナフチル(1__fSYdblharw2__f), 9-フェナントリル(1__CSYdblharw2__C)のとき高い不斉誘導が起ることを見い出し,この原因が"ジアステレオ選択的分子内エネルギー移動"に帰せられることを明らかにした.引続きこの不斉誘導反応の機種に関連する諸問題を詳細に検討し,反応温度の低下につれて不斉誘導が高まること,さらに興味あることに濃度の増大によっても不斉誘導が向上することが明らかになり,これらは前述の機種で矛盾なく説明できることが分った.さらに, 1__SYdblharw2__の光異性化はアリール基が,第一3重項エネルギーの小さい, 9-アントリル基の場合(1__αSYdblharw2__α)でも起きることが見い出され,この場合も90%以上の不斉誘導が観測された.理由を追求した結果,寿命の短いアントリル基の第二励起三重項状態(T_2)からの分子内エネルギー移動が関与していることが明らかになった.アントリルのT_2からの分子内増感反応は他の系(例えば3__→4__)にも見られ,その一般性を示唆している.その他の光不斉誘導反応として, 5__→6__の光〔4+2〕付加反応を検討し, 5__Cにおいて-20°Cの反応で56%の不斉誘導が可能であることが明らかになった.昨年度の本課題研究で,スピロシクロプロパンフルオレン誘導体の光異性化反応(1__SYdblharw2__)においてアリール基がユーナフチル(1__fSYdblharw2__f), 9-フェナントリル(1__CSYdblharw2__C)のとき高い不斉誘導が起ることを見い出し,この原因が"ジアステレオ選択的分子内エネルギー移動"に帰せられることを明らかにした.引続きこの不斉誘導反応の機種に関連する諸問題を詳細に検討し,反応温度の低下につれて不斉誘導が高まること,さらに興味あることに濃度の増大によっても不斉誘導が向上することが明らかになり,これらは前述の機種で矛盾なく説明できることが分った.さらに, 1__SYdblharw2__の光異性化はアリール基が,第一3重項エネルギーの小さい, 9-アントリル基の場合(1__αSYdblharw2__α)でも起きることが見い出され,この場合も90%以上の不斉誘導が観測された.理由を追求した結果,寿命の短いアントリル基の第二励起三重項状態(T_2)からの分子内エネルギー移動が関与していることが明らかになった.アントリルのT_2からの分子内増感反応は他の系(例えば3__→4__)にも見られ,その一般性を示唆している.その他の光不斉誘導反応として, 5__→6__の光〔4+2〕付加反応を検討し, 5__Cにおいて-20°Cの反応で56%の不斉誘導が可能であることが明らかになった.
ボストン美術館所蔵浮世絵版画における歌川派役者絵の研究

世界最大規模を誇るボストン美術館浮世絵版画コレクションの中で、その大部分を占める歌川派役者絵のうち4850点を整理・考証・目録化した。さらに、コレクションのデータベースを構築し、当該館のHP上でのデータベース公開にデータを組み込む事によって世界的な浮世絵研究、歌舞伎研究の基礎を整え、今後の研究発展のための土台を築いた。2007年7月21日から9月20日まで科学研究補助金を用いて、アメリカ合衆国ボストンに滞在し、ボストン美術館所蔵浮世絵版画(特に初代歌川国貞作品を中心とする)の所蔵調査及び目録化を行った。また10月13日から12月20日までは、民間助成金(メトロポリタン東洋美術研究センター・東洋美術研究振興基金)を用いて、ボストン美術館所蔵浮世絵版画の所蔵調査及び目録化を継続して行った。その調査研究結果として、同館所蔵浮世作品のうち約2800枚を目録化し、同時に同館が管理する所蔵品データベースにその研究成果を反映させた。これと同時に初代歌川国貞落款一覧を作成するにあたっての基本的な枠組みを作成し、国貞落款一覧を作成する基礎を固めた。2007年6月20日から10月10日まで、立命館大学海外派遣研究員用特別研究費を用いてアメリカ合衆国ボストンに滞在し、ボストン美術館所蔵浮世絵版画(特に初代歌川国貞作品を中心とする)及び、同館所蔵歌舞伎番付の所蔵調査を行った。また2007年2月8日から3月17日まで科学研究補助金を用いて、ボストン美術館所蔵浮世絵版画の所蔵調査及び目録化を継続して行った。その調査研究結果として、これまで同館所蔵浮世作品のうち約3500枚を目録化し、同館が管理する所蔵品のデータベースにその研究成果を反映させた。この研究成果は、2007年ll月3日にアメリカ合衆国マディソンで行われた国際シンポジウムCompetition and Collaboration in Edo PrintsCulture: A NewPerspectiveにおいて、単独口頭発表「A List of Kunisada's Signatures: Its Usefulness and Problems」を行い、海外浮世絵研究者に向けて研究成果を発表した。同館所蔵の歌舞伎番付については、これまで未整理であったものを年代順・劇場ごとにファイリングし直し、立命館大学赤間亮教授と共にデジタル撮影を行い、今後行われるデータベース作成及び目録化のための基礎研究を行った。本研究はボストン美術館所蔵19世紀以降浮世絵版画のうち歌川派絵師による役者絵、とりわけ初代国貞作品を中心にその正確な目録化作業を行い、科学的な浮世絵研究を発展させるための研究基盤を築く事を目的とする。また、同時に本研究による成果をボストン美術館の収蔵システムに反映させ、浮世絵研究の基盤となる必須情報を公開し、国際的な研究環境を整備するという目的も兼ねたものである。今年度は、前年度から引き続き、ボストン美術館所蔵初代歌川国貞(後の三代目歌川豊国)浮世絵版画を中心とする歌川派浮世絵作品の目録化作業を行った。その結果、2009年3月時点で総計4850枚の目録化を行い、目録化を行った全ての作品についてデータベースを作成できた。今年度の初代国貞国貞浮世絵版画作品データベースについては、前年度と同様に立命館大学アート・リサーチセンターのサーバーへ随時メタ・データをアップし、申請者と同館研究員、及びボストン美術館学芸員のみがアクセス可能な制限付非公開のウェブサイトにおいて作品の閲覧と検索が可能となるようにしている。これとは別に、本研究で得た国貞浮世絵版画作品のメタ・データ(2008年度分は1350件)を昨年度より徐々に当該館独自で運用している収蔵品目録システムへ移行した。このことにより、当該館がウェブサイトで公開する所蔵品検索システムでの検索を可能として浮世絵研究の国際的な発展を促進させた。
新しいシナプス栄養因子プレセレブリンによるシグナル伝達経路の解明

分泌性タンパク質プレセレベリンは、腫瘍壊死因子(TNFα)やアディポネクチンと同じC1qファミリーに属する新しいタイプの神経栄養因子である。小脳穎粒細胞において産出、分泌され、ターゲットであるプルキンエ細胞に作用し、穎粒細胞軸索(平行線維)-プルキンエ細胞におけるシナプスの形成・維持とともに、成熟シナプスにおいて機能的可塑性を制御する分子であることが分かってきた。プレセレベリンのプルキンエ細胞における受容システムを解明し、そのシグナル伝達経路を解明することが本研究の目的である。我々は培養細胞を用いた発現系から調整、粗精製したプレセレベリンが、培養プルキンエ細胞や短期培養小脳スライス標本において、プルキンエ細胞樹状突起上に存在する神経棘に選択的に結合することを明らかにした。この実験事実はプレセレベリンそのものがリガンドであること、プレセレベリン受容体がプルキンエ細胞神経棘上に特異的に局在することをはっきり示している。また、成熟小脳から調製したシナプトソーム分画、およびPSD分画にプレセレベリン分子と強い結合を示す、受容体タンパク質の存在を示唆する結果も得ることができた。またプレセレベリンは6量体を形成していること、この6量体構造はアミノ末端側に存在する2つのシステイン残基に依存しており、このシステイン残基変異体は3量体であって6量体を形成せず、プルキンエ細胞への結合能、及びシナプトソーム分画への結合能を欠如することを見出した。これらの知見を2006年度日本神経科学会にて発表した。一方、プレセレベリン欠損マウスから調整した培養プルキンエ細胞では、in vivoでの結果と同様に平行線維シナプスの低形成が異常所見として観察され、プレセレベリン投与後約24時間でシナプス低形成が回復することを発見した。すなわちプレセレベリンがシナプス形成を外的に制御できる新しい分子であることを示唆できた。腫瘍壊死因子(TNFα)に類似性を持つプレセレブリン(Cbln1)は成熟小脳においてシナプス前部(顆粒細胞)から放出され、顆粒細胞-プルキンエ細胞のシナプス形態と機能(LTD誘導)を制御する、全く新しいタイプのシナプス栄養因子である。本研究は2年間の研究期間の間に1)活性型・不活性型Cbln1分子の精製、2)受容体分子の同定、3)Cbln1のLTD誘導活性の解明の個別目標を達成し、Cbln1機能の分子機構を解明、成熟脳における神経栄養因子群の理解を飛躍的に深めることを目的としている。本年度の研究成果1)2)TNFαは、3量体を形成し、3量体構造を認識する受容体に結合することから、同じファミリーに属するCbln1分子も3量体形成が受容体結合、活性化に必須であると予想されていた。さらに、Cbln1N末端側のシステイン残基の存在はSS結合による更なる多量体化の可能性を示唆していた。実際、培養細胞に発現させたCbln1タンパク質は6量体を形成していることを明らかにした。この野生型Cbln1分子を哺乳類細胞系にて生成し、培養プルキンエ細胞、短期培養小脳スライス漂品に添加したところ、プルキンエ細胞樹状突起上の神経棘に特異的な結合が観察された。さらに3量体形成予想部位の変異Cbln1は細胞外に分泌されないこと。SS結合部位の変異Cbln1は、分泌はされるが、プルキンエ細胞への結合能を失うことを明らかにした。これらの結果は、シナプス前部である顆粒細胞から分泌された6量体Cbln1分子がシナプス栄養因子の実体であり、その受容体はシナプス後部であるプルキンエ細胞の神経棘に存在していることを示している。3)Cbln1欠損マウスを用いてLTD誘導過程のどのステップに異常があるか検討した。プロテインキナーゼC活性化によるGluR2のリン酸化は正常、GluR2分子のエンドサイトーシス経路も正常であった。

一方、プレセレベリン欠損マウスから調整した培養プルキンエ細胞では、in vivoでの結果と同様に平行線維シナプスの低形成が異常所見として観察され、プレセレベリン投与後約24時間でシナプス低形成が回復することを発見した。すなわちプレセレベリンがシナプス形成を外的に制御できる新しい分子であることを示唆できた。
モータ駆動式プッシャープレート型人工心臓システムの開発と評価

プッシャープレート型血液ポンプと組み合わせるために試作した埋め込み型補助心臓用アクチュエータのDCブラシレストルクモータを制御するために、固定デューティ比、可変電圧型パルス幅変調方式を考案した。従来の固定電圧、可変デューティ比型の制御法に比べて、モータの出力にかかわらずトルク変化がなめらかで、モータ巻線での温度上昇を低く抑えられるため、埋め込み型システムの制御に有効であると考えられる。試作したアクチュエータをこの方法で駆動するために、ポンプ動作制御部とモータ速度制御部にそれぞれ16ビットおよび8ビットマイクロプロセサを使用した駆動制御装置を試作した。モータ速度をオープンループで制御するソフトウェアを開発するために、試作したトルク試験機を用いて、アクチュエータのトルク特性を調べた結果、試作したポンプは所用の性能を発揮するものとわかった。そこでこの結果に基づいてソフトウェアを開発した。ポンプ動作制御部には動作モードの管理と、モータ制御情報のモータ速度制御部への通信を行なわせた。収縮期にはポンプストロークを監視して、その変化に応じてモータを制御し、拡張期には一定時間で末期位置までプッシャープレート駆動用のロッドを戻す方式とした。プログラムはC言語とアセンブリ言語を用いた。モータ速度制御部には、ポンプ制御部からのモータ制御情報に応じてタイマと電圧源を制御させ、タイマからの割り込みによってモータの位相を制御させた。プログラムはアセンブリ言語を用いた。模擬循環回路を用いてポンプの性能試験を行ない、後負荷100mmHg、拍動数約100bpmのときほぼ設計通り6l/minの流量が得られた。ポンプ効率は約6%、アクチュエータ外表面の温度上昇は18°Cであった。将来、さらに効率を上げ温度上昇を抑制するための新しい駆動制御方式の検討を開始し、動物実験を行なって高信頼性を有するシステムに発展させていく予定である。前年度に試作したトルクテスタを用いて試作アクチュエータのトルク特性を詳細に調べた。モータへの入力電圧と回転数をパラメータとして、入力電流、発生トルク、上昇温度等を測定した。この結果、試作したアクチュエータは所用の性能を発揮しうるものと確認された。新しく考案した電圧可変型パルス幅変調方式(前年度研究実績報告書参照)でモータを駆動するため、上記トルクテストの結果をもとにモータの入力電圧を制御するための8ビットプログラマブル電源を試作した。この電源は±14V、7Aまでの電圧、電流を供給できる。この回路を制御するためのソフトウェアを新たに開発し、既に試作済みのモータ回転数制御用ソフトウェアと組み合わせて、モータ制御用サブプロセサシステムのプロトタイプソフトウェアとした。既に開発中の最大ストローク15mmで1回拍出量60mlの得られるプッシャープレート型ポンプを試作したアクチュエータに取りつけ、補助心臓システムとして動作させるための16ビットメインプロセサシステム用ソフトウェアをC言語とアセンブリ言語で作成した。駆動モードは1)定ストローク、2)定拍動数、3)心電図同期および4)手動の4種とした。外部設定は、モードの他にポンプストローク、拍動数、収縮期対拍動周期比(%シストール)および心電図R波からの遅延時間とした。モータ制御用のフィードバック信号にはプッシャープレートの位置を用いることとし、ホール素子で測定した。これらの信号は、8個のアナログポートおよび4ビットディジタルポートから入力される。ハードウェア、ソフトウェアともプロトタイプがほぼ完成したので、模擬循環回路を用いた評価実験で改良を行ない、動物実験による評価に進む予定である。
『琉球国由来記』『琉球国旧記』を中心とする琉球王府編纂事業の基礎的研究

18世紀の前半期に集中して行われた琉球王府の編纂事業の特徴がよく表れているのは、和漢混淆体の地誌である『琉球国由来記』(1713年)の編纂から漢文体の地誌『琉球国旧記』(1731年)の編纂である。それは、単に文体の変化を意味しただけではなく、17世紀から本格的に導入された風水の枠組みによる琉球国の地理の再編成であり、家譜等が成立することにより祭祀の場が「歴史」の舞台として叙述されることでもあった。本研究は、両書の間で編纂されたと考えられる新たな資料『古事集』を分析することにより、それを明らかにした。本年度は、「『宮古島旧記』(雍正五年本)に記されたアヤグー「地方旧記」の歌謡世界ー」(島村幸一編著書『琉球交叉する歴史と文化』勉誠出版、2014年1月刊、pp96ー118)と「『佐銘川大主由来記』論ー第一尚氏を始祖に戴く氏の物語ー」(『南島文化』第36号、沖縄国際大学南島文化研究所紀要、2014年3月刊、pp1ー18)を発表した。「『宮古島旧記』(雍正五年本)に記されたアヤグー「地方旧記」の歌謡世界ー」は『琉球国旧記』(1731年)の資料のひとつとなった「地方旧記」であるが、この書における歌謡世界を探ることによって見えてくる宮古島地域の歌(アヤグ)によって伝えられる「歴史伝承」を考察した。宮古島地域はアヤグによって地域の歴史を伝える伝統があったが、これが漢文で記される『琉球国旧記』には反映されることがなかったことも考察した。「『佐銘川大主由来記』論ー第一尚氏を始祖に戴く氏の物語ー」は昨年度から手掛けていた、第一尚氏を始祖に戴く一族の始祖伝承を記した資料『佐銘川大主由来記』を解読した論である。第一尚氏の本家筋は、「地方」にあって士族になることはなかったが、その一族が第二尚氏の時代になってどのように自らの一族の物語を作り、記したかを考察した。この論は、家譜を持つ士族とともに、家譜を持たなかった一族がどのように自らの一族の物語を描くのかを知る上で、大いに参考になると思われる。この外、本年度は宮古島に赴き宮古島市立総合博物館に所蔵されている仲宗根家本『御嶽由来記』『宮古島旧記』(雍正五年本)』『宮古島記事』『宮古島記事仕次』等を写真撮影により収集した。本年度は、「琉球の「歴史」記述ー夏氏(内嶺家)・毛氏(豊見城家)の家譜記事と正史記述を中心にー」(『立正大学大学院文学研究科紀要』第29号、平成25年3月刊、pp.47-77)を発表し、第二尚氏王統の有力士族の家譜記事が二番目の正史蔡鐸本『中山世譜』、三番目の正史蔡温本『中山世譜』、四番目の正史『球陽』にどのように記述されていくかを考察した。夏氏の始祖は、琉球史上有名な阿摩和利(アマワリ)の乱にかかわって「逆臣阿摩和利」を「討伐」した氏、毛氏の始祖は、阿摩和利に滅ぼされた「忠臣護佐丸」である。その二氏の家譜記述が正史にどのように具体的に入っていったか追いながら、琉球王府の正史記述形成の一端を考察した。17世紀後半以降次第に形成されると考えられる家譜記述は、その始祖達の働きが王に対していかに忠実であったかを記述することが重要なことであった。正史は資料に乏しい前代の氏族伝承的な記述を、一定の基準に従って受け入れていったと推定される。その転換点が蔡温本の『中山世譜』であり、氏族の伝承的記述をさらに大きく受け入れて記述したのが『球陽』であったと考えられる。『球陽』は外巻として漢文説話集『遺老説伝』を持つが、蔡温本に「歴史」と「遺老伝」との区別を分けて登場した氏族伝承を、大きく正史の叙述に組み入れて記した。本年度は外に、第一尚氏の末裔達の氏族伝承ともいえる『佐銘川大主由来記』の解読にも手を付けた。これは有力氏族とは、異なる家譜記事がどのようなものであるかをみるためで、家譜資料を多角的に分析する視点を確保するためである。また、沖縄県石垣市及び竹富町を訪れ、『琉球国由来記』『琉球国旧記』に記される遺跡、御嶽の調査をし、合わせて石垣市図書館、竹富町史編集室を訪れ資料の収集をはかった。本年度は、1「『琉球神道記』にかかわる「琉球言説」」(『立教大学日本学研究所年報』第12号、立教大学日本学研究所、2014年7月)、2「琉球から見た『椿説弓張月』」(『沖縄文化研究』法政大学沖縄文化研究所、第42号、2015年3月)、3「『琉球国旧記』の編纂ー『琉球国由来記』から『琉球国旧記』へー」(『立正大学大学院紀要』第31号、立正大学大学院文学研究科、2015年3月)を発表した。1は、『琉球神道記』の琉球への影響も見ながら、特に近世日本の国学者等に与えた影響を探った論である。