hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
新規エンドセリンBタイプレセプターアンタゴニストの合成及びその構造活性相関研究

本年度の研究の実施結果について以下に述べる.1.RES-701-1の化学合成に関しては,まずRing segmentとTail segmentの合成をそれぞれFmoc型固相法にて行った.続いて,両segmentの縮合を行い,最終脱保護後,HPLCにて精製し目的物を得た.しかし,予想された様にすでに他の研究者により報告されている結果と同様,得られた目的物はHPLC上での分析結果から天然品のRES-701-1とは異なる保持時間を示したため目的物ではないものと判断できた.2.次に,申請者は最小保護でRES-701-1前駆体を合成した後,分子内環化反応を行い,活性のある"投げ縄"構造をとるRES-701-1を得ようと試みた.この戦略に従って,直鎖のRES-701-1の前駆体を合成し,その後,効率よく分子内環化反応を行うことができたが,いずれのカップリング試薬の場合においても最終精製品はHPLC上,天然品のRES-701-1とは異なる保持時間を示すという結果に留まった.今回はET_Bレセプターに対しての選択性のなりペプチドしか得ることができなかったが,さらに環化する際の溶媒の選択,あるいは環化する部位の特定について検討を加えていけば,目的のRES-701-1を合成することが可能となるかも知れない.また,今回の研究では生物活性の検定についての考察あるいはRES-701-1の構造活性相関研究を行うまでには至らなかった."投げ縄"構造をとる特殊なペプチドであるRES-701-1を得るための予備試験的な研究を行うことはできたので,今後はさらにこの基礎データを基にしてET_Bレセプター選択的なペプチドの合成並びに構造活性相関について考察・検討していく予定である.本年度の研究の実施結果について以下に述べる.1.RES-701-1の化学合成に関しては,まずRing segmentとTail segmentの合成をそれぞれFmoc型固相法にて行った.続いて,両segmentの縮合を行い,最終脱保護後,HPLCにて精製し目的物を得た.しかし,予想された様にすでに他の研究者により報告されている結果と同様,得られた目的物はHPLC上での分析結果から天然品のRES-701-1とは異なる保持時間を示したため目的物ではないものと判断できた.2.次に,申請者は最小保護でRES-701-1前駆体を合成した後,分子内環化反応を行い,活性のある"投げ縄"構造をとるRES-701-1を得ようと試みた.この戦略に従って,直鎖のRES-701-1の前駆体を合成し,その後,効率よく分子内環化反応を行うことができたが,いずれのカップリング試薬の場合においても最終精製品はHPLC上,天然品のRES-701-1とは異なる保持時間を示すという結果に留まった.今回はET_Bレセプターに対しての選択性のなりペプチドしか得ることができなかったが,さらに環化する際の溶媒の選択,あるいは環化する部位の特定について検討を加えていけば,目的のRES-701-1を合成することが可能となるかも知れない.また,今回の研究では生物活性の検定についての考察あるいはRES-701-1の構造活性相関研究を行うまでには至らなかった."投げ縄"構造をとる特殊なペプチドであるRES-701-1を得るための予備試験的な研究を行うことはできたので,今後はさらにこの基礎データを基にしてET_Bレセプター選択的なペプチドの合成並びに構造活性相関について考察・検討していく予定である.
ゆっくり喋ると認識されやすい音声認識システムの開発

音声認識システムを使用時に誤認識が発生すると、人間であるユーザは訂正発話をゆっくりとした発話速度で行う傾向があるが、現在の音声認識システムはゆっくりした発話速度の音声の認識精度が悪いため悪循環となっている。本研究では、発話速度を自動推定し、その結果から最適な音声認識システムパラメータ(挿入ペナルティ、言語重み)を自動的に調整することでゆっくりした発話速度の音声の認識精度を大幅に改善した。本研究は「ゆっくり喋ることで認識精度が向上するような音声認識システム」を開発することを目的とする。通常、人間は速い音声よりもゆっくりした音声の方が認識しやすく、話し相手により明確に音声を伝えたい場合にはゆっくり喋る傾向がある。そのため、ゆっくりと発声することで認識精度が向上する音声認識システムは、人間にとって自然なユーザ・インタフェースであると言える。現在の音声認識システムで音響モデルとして広く使われているHMM(隠れマルコフモデル)は優れた音声認識フレームワークであるものの、HMMを用いた音響モデルではゆっくり発話することで認識精度が低下してしまうので、HMMを改良する必要がある。最初に、従来から行ってきた発話速度変動に対応した音響モデルに、発話速度が違うことによって音響的な特性が変わることを考慮した発音変動モデルを組み込むことを考えた。まず、発音変動が起きるコンテキスト情報を、長いセグメントを用いた統計量によって特徴パラメータに直接取り込むことを考えた。しかし、この方法はセグメントが長くなると次元圧縮の特性が悪くなり、特徴パラメータの次元数が多くなることでパラメータの推定精度の低下を招き、認識率の向上は得られなかった。次に、発話の転記テキストと実際の発話表記が異なる部分を場合分けしたモデルを作成し、これによって認識精度の向上を試みた。この方法と以前に開発した分析周期変更モデルとの併用により、わずかながら認識精度の向上を得た。しかし、この方法は発話速度が速い場合に対してより有効であるという結果となった。同時に、ゆっくり喋ることで上昇するような信頼度尺度の検討を行った。Studentのt分布の分布間距離をベースとして検討を行い、いくつかのアイデアは得たものの、明確な結論はまだ得られていない。この策定、実装が来年度以降の課題となる。本年度は、昨年度に引き続き、リスコアリング時に有効な、ゆっくり喋ることで上昇する信頼度尺度の検討を行った。当初想定していた分布間距離をベースとした尺度には有効性が見られなかったため、スペクトル変動度を尺度とする方法に切り替えて検討を行っている。同時に、音響モデルを高精度化する手法として、多次元ガウス分布の共分散行列パラメータについて検討を行った。具体的には、現在一般的に使われている対角または全要素ではなく、相関の大きい部分だけを用いる方法である。対角分布を用いる場合は混合数を上げることで擬似的に相関を扱うが、相関の大きい部分を直接的に扱うことで認識率は向上する。また、全要素に対してはパラメータ利用の効率性という点でアドバンテージがあり、学習データが少ない場合でも有効に働くと考えられる。結果として、今まで無視されていた静的パラメータ(MFCC)と動的パラメータ(ΔMFCC、ΔΔMFCC)の間の相関が大きいことが分かり、認識性能向上への手がかりが得られた。現在の音声認識システムにおいて、誤認識は避けられない課題である。誤認識が起きた場合、人間であるユーザは、人間との対話において誤認識が起きた場合と同様に、ゆっくり再発話することで認識してもらおうと試みるが、現在の音声認識システムは学習データの平均的な発話速度から外れた発話速度の音声に対しては認識率が低下してしまう特性があるため、さらに誤認識が起きる悪循環となってしまっている。この問題に対処するために、本研究ではゆっくりと発話された音声の認識率を改善することを目的とした。ゆっくりした発話で多く見られる誤りは単語挿入誤りであるため、認識システムの挿入誤りを制御するパラメータである"挿入ペナルティ"を発話速度に応じて自動的に調整する手法を提案した。発話速度の推定は、音節制約付き連続音素認識結果から母音部分のみを抽出し、母音の平均継続長から算出した。挿入ペナルティは、発話速度が分かっている開発データに対して様々な挿入ペナルティで認識実験を行い、最も認識率が良くなる条件から回帰分析により推定式を求め、これを利用した。また、音響モデル尤度と言語モデル尤度のレンジの違いを補正するパラメータである"言語重み"についても、同様に自動的に調整した。

発話速度をコントロールして読み上げた新聞記事に対する認識実験の結果、普通話速(7モーラ/秒)、速い話速(10モーラ/秒)の音声の認識精度を維持したまま、遅い話速(4モーラ/秒)の単語正解精度を、45.6%から76.3%へと大きく改善することができた。また、音声認識精度を上げる手法として、共分散行列のパラメータの効果的な使用方法について検討し、静的特徴と動的特徴の相関を利用することで、効果的に共分散行列のパラメータを削減する方法を開発した。
文化財用"臭化メチル代替新規燻蒸剤"等が収蔵品DNAに及ぼす影響の科学的評価

文化財の虫やカビなどによる生物被害の防除は,温暖なわが国においては極めて重要なII問題である。しかし,オゾン層の保護のため,かねてより文化財燻蒸ガスとして広範に用いられてきた臭化メチルの使用が2004年末に全廃され,これに代わる方法の導入が現場から強く要請されている。しかし,燻蒸剤は殺虫・殺菌効力が高い一方で,文化財材質へも同時に化学的影響を及ぼすことも事実である。とくに,自然史系の博物館では,近年,DNA資源による系統解析がさかんになっているなか,頻繁に使用する燻蒸剤がDNAに悪影響を及ぼさないかという問題は切迫した課題であった。当該研究課題において,種々の殺虫燻蒸剤や薬剤を用いない殺虫法について一般的な処理条件でDNAへの影響を検討した。その結果、臭化メチル,ヨウ化メチル,酸化エチレン,酸化プロピレンなど殺菌効果を有する薬剤で燻蒸を行うと,資料に含まれるDNA分子の断片化の原因になり,その後のPCRによるDNAの増幅,DNA解析にも影響を及ぼす場合があることが明らかとなった。これに対して,異なる作用機作で働く殺虫燻蒸剤のフッ化スルフリルや,いわゆる薬剤を使用しない二酸化炭素処理,温度処理などの殺虫法では,DNAには明らかな影響はみられなかった。以上の結果については,原著論文や学会発表でその成果を発表した。また,DNAに影響を及ぼすことがわかった燻蒸剤などが,資料のタンパク質成分に及ぼす影響についてもあわせて予備的な調査を行った。その結果,一部の燻蒸剤が,標本資料のタンパク質に変性を促すなどの作用があることも明らかになった。タンパク質の種類によってはほとんど影響を受けないものもあり,タンパク質の構造とあわせて興味がもたれる。DNAへ顕著な影響があった燻蒸剤が必ずしもタンパク質に同様の影響を及ぼすわけではなく,またDNAへほとんど影響がなかったものが,逆にある種のタンパク質には大きく影響する場合もあった。この結果については,今後さらに検討を進め,DNAへの影響とあわせて考察していきたい。文化財の虫やカビなどによる生物被害の防除は,温暖なわが国においては極めて重要な問題である。しかし,オゾン層の保護のため,かねてより文化財燻蒸ガスとして広範に用いられてきた臭化メチルの全廃時期が2004年末に前倒しになることが決まり,これに変わる方法の導入が現場から強く要請されている。しかし,燻蒸剤は殺虫・殺菌効力が高い一方で,文化財材質へも同時に化学的影響を及ぼすことも事実であり,近年の文化財保存分野における大きな関心事になっている。とくに,自然史系の博物館では,近年,DNA資源による系統解析がさかんになっているなか,頻繁に使用する燻蒸剤がDNAに悪影響を及ぼさないものかどうか,という問題がきわめて切迫した関心事になっている。本年度は,今後,わが国で使用される可能性のある臭化メチルの代替燻蒸剤,ヨウ化メチル,酸化エチレン製剤,フッ化スルフリル,酸化プロピレン,および従来使用されてきた臭化メチル,および臭化メチル・酸化エチレン混合製剤,またこれと同時に,二酸化炭素処理,温度処理による殺虫法など,いわゆる薬剤を使用しない方法についても,自然史系の収蔵品のDNAへの影響を検討した。その結果,臭化メチル,ヨウ化メチル,酸化エチレン,酸化プロピレンなど殺菌効果を有する薬剤で燻蒸を行なうと,資料に含まれるDNA分子の断片化の原因になり,その後のPCRによるDNAの増幅,DNA解析にも,悪影響を及ぼすことが明らかとなった。これらは,いわゆるアルキル化剤というDNAやタンパク質に化学修飾を行なう一連の薬剤であり,発がん性を有するグループの薬剤である。

これに対して,異なる作用機作で働く殺虫燻蒸剤のフッ化スルフリルや,いわゆる薬剤を使用しない殺虫法では,明らかな影響はみられなかった。現在,湿度条件の違いなどによるDNAへの影響の大きさの差異についても,詳しく検討している。文化財の虫やカビなどによる生物被害の防除は,温暖なわが国においては極めて重要な問題である。しかし,オゾン層の保護のため,かねてより文化財燻蒸ガスとして広範に用いられてきた臭化メチルの全廃時期が2004年末に前倒しになることが決まり,これに変わる方法の導入が現場から強く要請されている。しかし,燻蒸剤は殺虫・殺菌効力が高い一方で,文化財材質へも同時に化学的影響を及ぼすことも事実であり,近年の文化財保存分野における大きな関心事になっている。とくに,自然史系の博物館では,近年,DNA資源による系統解析がさかんになっているなか,頻繁に使用する燻蒸剤がDNAに悪影響を及ぼさないものかどうか,という問題がきわめて切迫した関心事になっている。これまでに,種々の殺虫燻蒸剤や薬剤を用いない殺虫法について一般的な処理条件でDNAへの影響を検討してきたところ,臭化メチル,ヨウ化メチル,酸化エチレン,酸化プロピレンなど殺菌効果を有する薬剤で燻蒸を行うと,資料に含まれるDNA分子の断片化の原因になり,その後のPCRによるDNAの増幅,DNA解析にも影響を及ぼす場合があることが明らかとなった。これに対して,異なる作用機作で働く殺虫燻蒸剤のフッ化スルフリルや,いわゆる薬剤を使用しない二酸化炭素処理,温度処理などの殺虫法では,DNAには明らかな影響はみられなかった。そこで,さらに本年度は,各種殺虫処理を行なったとき,処理される資料の水分量の違いがどのようにDNAへ影響するかを調べた。その結果、高温処理については、乾燥した資料や通常の博物館環境で保管された条件の資料ではほとんどDNAへの影響はみられなかったが,湿った資料や,水浸資料ではDNAに若干影響を及ぼすことが明らかとなった。しかし,オゾン層の保護のため,かねてより文化財燻蒸ガスとして広範に用いられてきた臭化メチルの全廃時期が2004年末に前倒しになることが決まり,これに代わる方法の導入が現場から強く要請されている。とくに,自然史系の博物館では,近年,DNA資源による系統解析がさかんになっているなか,頻繁に使用する燻蒸剤がDNAに悪影響を及ぼさないかという問題は切迫した課題である。
保健所デイケアへ精神障害者を導入する際の導入方法とその意義に関する研究

本研究における調査対象は都内保健所(管轄人口16万人、保健婦数12名)における1年間の精神保健活動事例である。調査対象期間は平成7年10月1日から平成8年9月末日までの1年間とした。この期間内に保健所に把握された事例総数は478例であり、平均年齢46歳(SD=19.2)、男246名(51.5%)、女226名(47.3%)であった。診断分類中最も多かったのは精神分裂病であり44%を占めていた。このような事例中実際に保健所内のデイケアを利用した事例は50名であった。保健所の精神保健活動事例のほぼ10人に一人はデイケアを利用している実体が明らかとなった。またこれらのデイケア利用者に関して地区担当保健婦側に事前にデイケア利用に関する明確な意図があったか否か、及びその予定利用期間を調べたところ、デイケア利用者中半数に当たる23名に関しては保健婦があらかじめデイケアの利用意図をもっており、また、予定利用期間で最も多かったのは1年(34.5%)、2年(20.7%)、3年(10.3%)、2ヶ月(10.3%)となっていた。この内2ヶ月というのはデイケアへの体験的な参加を試みるためのものであった。次にあらかじめ保健婦側にデイケア利用に関する意図があるかないかに群分けし検討を行った結果、精神障害者の全体的機能評価及び精神障害者の社会的、職業的な機能評価の項目において有意に利用意図のある群が高かった。以上のような点を事例から検討した結果、保健婦側の利用意図の有無も重要であるが、それらの意図の方向性及び明確さ、そしてこれらの意図が精神障害者との間で充分に話された上で保健婦及び精神障害者の間で今後の方向性を共有できる場合が最も良いのではないかと考えられた。すなわち、デイケアへの導入時における導入方法として、精神障害者のニードを明確にした上でデイケア利用計画を保健婦、精神障害者ともに了承した上で導入する必要があると考えられた。また、このような方法は、保健所デイケアに限らず、保健所精神保健活動において様々な社会資源へと精神障害者を紹介する際にも採用されることが望ましいと考えられた。
祭りの音環境と民族美意識-特に兵庫県美方郡浜坂町久谷を例として-

本研究は「祭りの空気」とでもいうべき昂揚した気分を分析記述する方法としてサウンドスケープという概念を応用して、伝承民俗芸能の研究に新しい方法を開発しようとしたものである。集落全域にわたってかつ終日繰り広げられる祭礼の雰囲気は、視覚的にはある局面単位でしか感じる事ができないが、音景観の視点に立てば、祭りの雰囲気を時間経過の中でかつ総体的に把握する事ができる。久谷八幡の秋祭りを9時間に及んで1定点で通時録音を行った結果、時間持続において展開されるイヴェントにはそれを象徴する音響があり(ざんざか踊りの太鼓)、又祭りの雰囲気というものは、様々な音響による昂揚した気分的盛り上がりが単に一本調子に持続するのではなくて、時には静寂の時間をも内包する強弱のバランスDynamikに依って醸し出される事、かつ前述の象徴音響がこの持続に始まりと頂点と終止を感じさせる、即ち祭りの音環境には時間形式が成立していると言う事であった。しかしこのような祭りを維持する事はどの地域にでも可能なわけではない。久谷の場合、壮年層が少年たちに踊りを練習・伝承させることが十分機能し、そこで少年層が地域共同体に完全な意味で組み込まれる仕掛けになっている。音環境調査に現れた住民の祭りに関する音響への肯定的意識にも、踊りが住民を結束させる要因である事が窺える。比較のために兵庫県下の風流系太鼓踊り関係諸地域にアンケート及び実地調査を行ったが、民俗芸能が維持される理由には種々のケースがあるので、更に伝承の構造分析が今後の課題である。比較研究のために、久谷における日常時の定時定点録音以外にも多くの地域で録音録画実施した。又踊りのラバン採譜、歌の採譜を実施した他、歌詞も収集し、現在データベース作成のために入力中である。此れに依って比較検索作業が飛躍的に高レヴェルになるので、従来とは異なる次元での分布、系統論が展開出来る予定である。1.久谷の音環境の分析資料として録音・録画・聞き取り調査を行った(久谷の菖蒲網引、久谷八幡秋祭りとざんざか踊り)。更に風流系踊りと祭りとの関わりについての比較資料蒐集のため兵庫県(東条町秋津、吉川町湯谷、村岡町黒野・福岡、八鹿町青山・万万谷、但東町虫生・中藤、柏原町南多田・大新屋、波賀町安賀・有賀・上野、千種町鷹巣、温泉町、美方町、関宮町)、鳥取県(県立博物館・越路、佐治村余戸、国府町、岩美町、河原町、用瀬町、智頭町)、奈良県(十津川村武蔵、小原・西川)等の市町村で録音録画および聞き取り調査を実施した。2。ラバン記譜法によるざんざか踊りその他の採譜(64葉、24曲)と手やフリの比較分析。3。数年前からの採集されていた録音・録画も加えてAV資料の整理、分類、ダビング(研究分担者用)を行い、更にプレゼンテーション用としてコンピュータ処理に依る編集を行った(久谷八幡秋祭りの巡行状況、久谷網引きのサウンドスケープ、比較用資料として十津川大踊りの2分割映像画及び四天王寺聖霊会の進行状況のサウンドスケープと映像)。4。上記の資料による、祭りサウンドスケープと地域住民の祭礼に対する意識のアンケート調査結果の関係を現在分析中である。5。久谷のざんざか踊りを他の風流系踊りと比較し、その系譜・伝播・起源についての考察を始めている。比較分析に際しては、イヴェント複合(歌詞レパートリ・衣装・芸態・社寺祭礼との関係等)を対象としている。

本研究は「祭りの空気」とでもいうべき昴揚した気分を分析記述する方法としてサウンドスケープという概念を応用して、伝承民俗芸能の研究に新しい方法を開発しようとしたものである。集落全域にわたってかつ終日繰り広げられる祭礼の雰囲気は、視覚的にはある局面単位でしか感じる事ができないが、音景観の視点に立てば、祭りの雰囲気を時間経過の中でかつ総体的に把握する事ができる。久谷八幡の秋祭りを9時間に及んで1定点で通時録音を行った結果、時間持続において展開されるイヴェントにはそれを象徴する音響があり(ざんざか踊りの太鼓)、又祭りの雰囲気というものは、様々な音響による昴揚した気分的盛り上がりが単に一本調子に持続するのではなくて、時には静寂の時間をも内包する強弱のバランスDynamikに依って醸し出される事、かつ前述の象徴音響がこの持続に始まりと頂点と終止を感じさせる。即ち祭りの音環境には時間形式が成立していると言う事であった。しかしこのような祭りを維持する事はどの地域にでも可能なわけではない。久谷の場合、壮年層が少年たちに踊りを練習・伝承させることが十分機能し、そこで少年層が地域共同体に完全な意味で組み込まれる仕掛けになっている。音環境調査に現れた住民の祭りに関する音響への肯定的意識にも、踊りが住民を結束させる要因である事が窺える。比較のために兵庫県下の風流系太鼓踊り関係諸地域にアンケート及び実地調査を行ったが、民俗芸能が維持される理由には種々のケースがあるので、更に伝承の構造分析が今後の課題である。比較研究のために、久谷における日常時の定時定点録音以外にも多くの地域で録音録画実施した。又踊りのラバン採譜、歌の採譜を実施した他、歌詞も収集し、現在データベース作成のために入力中である。此れに依って比較検索作業が飛躍的に高レヴェルになるので、従来とは異なる次元での分布、系統論が展開出来る予定である。
赤痢菌感染による宿主マクロファージ細胞死誘導の分子機構

赤痢菌は宿主へ侵入した後、マクロファージに対してネクロシスに近い形態的特徴を呈する細胞死(pyroptosis)を誘導する。本細胞死誘導の分子機構は未だわかっていない部分が多い。本研究では、赤痢菌が分泌するType IIIエフェクターのうちの1つであるIpaH7.8がipaf inflammasomeを活性化させ、pyroptosisを誘導することを明らかにした。赤痢菌は宿主への侵入後、マクロファージに細胞死を誘導することによりその攻撃から逃れることができる。近年、この細胞死が既知のものとは異なる特徴を示す新しいタイプの細胞死であることが判明し、Pyroptosisと命名されている。赤痢菌の感染成立に影響する重要な要因であるにも関わらず、未だその分子機構は明らかになっていない。今回、当研究者は、赤痢菌タイプIIIエフェクターXが赤痢菌感染によるマクロファージ細胞死誘導に必須であることを見出した(投稿準備中)。マクロファージに赤痢菌野生株、エフェクターX欠損株及び過剰発現株を感染させ、LDHアッセイ及び顕微鏡観察を行ったところ、細胞死誘導がエフェクターX分泌依存的に認められた。LPS刺激により活性化したマクロファージに対しては、細胞死誘導がより促進された。また赤痢菌感染マクロファージにおいて、エフェクターXの分泌依存的にPyroptosisの典型的特徴として知られるcaspase-1活性化が認められ、更にcaspase-1 inhibitor処理によりエフェクターX依存的細胞死は阻害された。また、本細胞死はMG132処理により阻害されることより、エフェクターXの活性がユビキチン・プロテアソーム経路に依存するものであることが示唆された。エフェクターXに結合するマクロファージタンパク質の探索をPull down法を用いて行った結果、細胞死抑制因子の1つであるタンパク質Yが特定された。これより、エフェクターXがタンパク質Yをユビキチン化し排除することにより細胞死を誘導している可能性が推測された。現在、タンパク質Yに対するエフェクターXの活性を検証中である。赤痢菌が引き起こす下痢疾患により、発展途上国では乳幼児を中心に毎年多くの人命が失われている。一方、国内ではキノロン系耐性を含む薬剤耐性赤痢菌の出現により、抗生剤による治療が困難な場合が増加している。赤痢菌の臨床分離株はほとんどが多剤耐性菌であることから有効なワクチンが求められているが、赤痢菌は感染に伴い激しい炎症を誘導するために、現在において存在する弱毒化した生菌ワクチンではその安全性が保証されておらず、実用化は難しい。このような状況下において、ワクチン開発を含めた効果的予防法、治療法を確立するために、赤痢菌の感染機構を分子レベルで明らかにすることが急務とされている。病原細菌にとってマクロファージによる貪食殺菌からの回避は、感染成立を決定づける重要な要因であることから、本研究は赤痢菌感染に伴い引き起こされる宿主マクロファージ細胞死誘導の機構を解明することを目的とした。研究の結果、我々はマクロファージに細胞死を誘導する赤痢菌TypeIIIエフェクターを特定した。そして、本エフェクターがin vitroにおいてE3ユビキチンリガーゼ活性を示し、ipaf inflammasomeを活性化させCaspase-1依存的マクロファージ細胞死(pyroptosis)を誘導することを明らかにした(論文作製中)。更に、本エフェクターの有無が宿主の炎症応答に大きく影響することを見出した。本研究成果は、赤痢菌感染に対する宿主粘膜炎症応答の強さを決定する因子を特定したものであり、本研究により得られた知見は、炎症は最少化され、且つ、防御反応は最大限に誘導される理想のワクチン開発に貢献するものと期待される。
高安定性をもたらすダンパシールに関する実験的研究

ポンプの高効率化のために液膜シールに要求される性能は,漏れ量が少ないこと,さらに安定性の指標である.対角減衰係数および対角ばね係数が大きく,連成ばね係数の絶対値が小さいことである.そこで本研究では,シールしゅう動面にハニカム形状(六角形)の孔を有するダンパシールを用いてその静特性および動特性を実験的に解析した.孔の深さの異なる三種類のダンパシール[ダンパシールI(孔深さ:300μm),ダンパシールII(孔深さ:400μm),ダンパシールIII(孔深さ:500μm)]と,ダンパシールのランド部とほぼ同じすきま(178μm)を有する平行環状フラットシール(しゅう動面が滑らかなシール)を用いて実験を行った結果,以下の点が明らかになった.1.同じ条件のもとでは,ダンパシールの漏れ量は平行環状シールの約2/3に減少した.また,ダンパシールでは孔の深さが大きい程漏れ流量が減少した.2.ダンパシールIIの偏心方向流体力は負となりその大きさは平行環状シールと同程度になった.3.いずれのダンパシールも接線方向流体力の大きさが平行環状シールよりも大きく,ふれまわり運動を抑制する力が大きい.また,ロータのふれまわり方向と接線方向流体力の方向が一致するふれまわり速度比Ω/ω(Ω:ロータのふれまわり角速度,ω:ロータの自転速度)の範囲(不安定領域)は,いずれのダンパシールもωにはあまり依存しないが,平行環状シールはωとともに増加する傾向を示した.そしてωの大きいところでは不安定となるΩ/ωの範囲はダンパシールのほうが平行環状シールより狭くなった.4.主対角減衰係数はいずれのダンパシールも平行環状シールより大きくなった.5.主対角ばね係数はダンパシールIIが平行環状シールより大きくなった.また連成ばね係数の大きさはダンパシールII,IIIが平行環状シールよりも小さくなった.6.以上の結果より,漏れ特性に関してはすべてのダンパシールが,またロータの安定性に関しては特に孔深さ400μmのダンパシールIIがそれぞれ平行環状シールよりも優れた特性を示した.7.6の結果より,ダンパシールのしゅう動面に設ける孔の深さには最適な値が存在することが明らかになった.ポンプの高効率化のために液膜シールに要求される性能は,漏れ量が少ないこと,さらに安定性の指標である.対角減衰係数および対角ばね係数が大きく,連成ばね係数の絶対値が小さいことである.そこで本研究では,シールしゅう動面にハニカム形状(六角形)の孔を有するダンパシールを用いてその静特性および動特性を実験的に解析した.孔の深さの異なる三種類のダンパシール[ダンパシールI(孔深さ:300μm),ダンパシールII(孔深さ:400μm),ダンパシールIII(孔深さ:500μm)]と,ダンパシールのランド部とほぼ同じすきま(178μm)を有する平行環状フラットシール(しゅう動面が滑らかなシール)を用いて実験を行った結果,以下の点が明らかになった.1.同じ条件のもとでは,ダンパシールの漏れ量は平行環状シールの約2/3に減少した.また,ダンパシールでは孔の深さが大きい程漏れ流量が減少した.2.ダンパシールIIの偏心方向流体力は負となりその大きさは平行環状シールと同程度になった.3.いずれのダンパシールも接線方向流体力の大きさが平行環状シールよりも大きく,ふれまわり運動を抑制する力が大きい.また,ロータのふれまわり方向と接線方向流体力の方向が一致するふれまわり速度比Ω/ω(Ω:ロータのふれまわり角速度,ω:ロータの自転速度)の範囲(不安定領域)は,いずれのダンパシールもωにはあまり依存しないが,平行環状シールはωとともに増加する傾向を示した.そしてωの大きいところでは不安定となるΩ/ωの範囲はダンパシールのほうが平行環状シールより狭くなった.4.主対角減衰係数はいずれのダンパシールも平行環状シールより大きくなった.5.主対角ばね係数はダンパシールIIが平行環状シールより大きくなった.また連成ばね係数の大きさはダンパシールII,IIIが平行環状シールよりも小さくなった.6.以上の結果より,漏れ特性に関してはすべてのダンパシールが,またロータの安定性に関しては特に孔深さ400μmのダンパシールIIがそれぞれ平行環状シールよりも優れた特性を示した.7.6の結果より,ダンパシールのしゅう動面に設ける孔の深さには最適な値が存在することが明らかになった.本年度は,シールしゅう動面にハニカム形状(六角形)の孔を有するダンパシールを用いてその静特性および動特性を実験的に解析した.孔の深さの異なる三種類のダンパシール[ダンパシールI(孔深さ:300μm),ダンパシールII(孔深さ:400μm),ダンパシールIII(孔深さ:500μm)]と,ダンパシールのランド部とほぼ同じすきま(178μm)を有する平行環状フラットシールを用いて実験を行った結果,以下の点が明らかになった.1.同じ条件のもとでは,ダンパシールの漏れ量は平行環状シールの約2/3に減少した.また,ダンパシールでは孔の深さが大きい程漏れ流量が減少した.2.ダンパシールIIの偏心方向流体力は負となりその大きさは平行環状シールに比べて大きくなった.したがってダンパシールIIは平行環状シールに比べてロータのふれまわり振幅を小さくする力が大きい.3.いずれのダンパ

シールも接線方向流体力の大きさが平行環状シールよりも大きく,ふれまわり運動を抑制する力が大きい.また,ロータのふれまわり方向と接線方向流体力の方向が一致するふれまわり速度比Ω/ω(Ω:ロータのふれまわり角速度,ω:ロータの自転速度)の範囲(不安定領域)は,ダンパシールII,IIIが平行環状シールよりも狭くなった.4.主対角減衰係数C_<xx>はいずれのダンパシールも平行環状シールより大きくなった.平行環状シールのC_<xx>に比べてダンパシールI,IIは約50%の増加,またダンパシールIIIは約30%増加した.5.主対角ばね係数K_<xx>はダンパシールIIが平行環状シールより大きくなった.また連成ばね係数K_<xy>の大きさはダンパシールII,IIIが平行環状シールよりも小さくなった.6.以上の結果より,漏れ特性に関してはすべてのダンパシールが,またロータの安定性に関しては特に孔深さ400μmのダンパーシールIIがそれぞれ平行環状シールよりも優れた特性を示した.7.6の結果より,ダンパシールのしゅう動面に設ける孔の深さには最適な値が存在することが明らかになった.最終年度にあたる本年度は,昨年度より実験精度を向上させるため,以下の点を改良した.(1)シールすきま内の液膜圧力分布ならびにロータ変位をデータをA/D変換する際のサンプリング周期を80musにして,従来の5倍の速さでデータを採取した.その結果,変動する圧力を詳細に精度良く測定することが可能になった(2)ロータの自転速度の範囲を広げ,最高速度を3000rpmまで上昇させた.したがって,自転速度がシールの特性に及ぼす影響がより明確になった.なお供試シールは昨年度と同じく,シールしゅう動面にハニカム形状(六角形)の孔を有するダンパシールを用いた.すなわち孔の深さの異なる三種類のダンパシール[ダンパシールI(孔深さ:300mum),ダンパシールII(孔深さ:400mum),ダンパシールIII(孔深さ:500mum)]と,ダンパシールのランド部とほぼ同じすきま(178mum)を有する平行環状フラットシールを用いた.実験結果より,以下の点が明らかになった.1.同じ条件のもとでは,ダンパシールの漏れ量は平行環状シールの約2/3に減少した.また,ダンパシールでは孔の深さが大きい程漏れ流量が減少した.2.ダンパシールIIの偏心方向流体力は負となりその大きさは平行環状シールと同程度になった.3.いずれのダンパシールも接線方向流体力の大きさが平行環状シールより大きく,ふれまわり運動を抑制する力が大きい.また,ロータのふれまわり方向と接線方向流体力の方向が一致するふれまわり速度比Ω/ω(Ω:ロータのふれまわり角速度,ω:ロータの自転速度)の範囲(不安定領域)は,いずれのダンパシールもωにはあまり依存しないが,平行環状シールはωとともに増加する傾向を示した.そしてωの大きいところでは不安定となるΩ/ωの範囲はダンパシールのほうが平行環状シールより狭くなった.4.主対角減衰係数はいずれのダンパシールも平行環状シールより大きくなった.また連成ばね係数の大きさはダンパシールII,IIIが平行
プロトテ力乳房炎の迅速診断の確立と防除法の検討

藻類のProtothecaiopfiiによる牛のプロトテカ乳房炎は牛乳の生産低下の原因となり、効果的な治療法がない。そこで効果的な治療法を調べるために抗真菌剤および消毒剤による抗藻活性を調べた。次に18SribosormalDNA領域のシークエンスによる臨床分離株の系統学的解析により、本邦の分離株がgenotype2標準株と同一のクラスター一を形成した。本邦におけるプロトテカ性乳房炎は各国と同様にP.zopfiigenotype2であることを示唆した。乳牛におけるプロトテカ乳房炎の集団発生は、酪農家へ甚大な損失となりすい。さらに乳製品の国内生産の向上のためにも早急の対策が必要である。しかしながら、本邦でプロトテカ乳房炎の疫学調査および防除対策は今まで十分に検討されていなかった。そこで今回、本研究を計画した。まず、PCR法によるプロトテカGenotype特異的検出法を確立し、それを用いて各県の農業共済および家畜保健所の獣医師の協力のもと、乳汁、バルク乳、牛舎環境から病原性Genotype株を検出する。さらに、乳房炎分離株に対して抗菌活性の強い抗菌剤・消毒剤を選択し、これらを発症農家で使用して防除効果の検討を行う。1.PCR法によるプロトテカ乳房炎の迅速診断法の確立多数の試料から迅速診断を行うために、試料から抽出したDNAからPCR法を用いて特異的にP.zopfiiの各Genotypeの検出法を確立する。これによって短時間で診断可能となる。2.プロトテカ乳房炎の分子疫学調査各地の農業共済および家畜保健所からの試料からPCR法でプロトテカの検出を行い、全国的に本疾患の原因菌が2型によるものかどうか確認し、さらに感染源の特定を行う。また各地から送られたた乳房炎の乳汁から菌を分離し、次年度の研究に使用する。3.プロトテカ乳房炎の防除法の検討プロトテカ症に対する治療用の各種抗菌剤と消毒剤の抗菌試験を行う。効果が認められた薬剤を用いてNOSAI愛知県で治療や搾乳機、乳房、乳房清拭用タオルに対する防除対策を実施する。乳牛におけるプロトテカ乳房炎の集団発生は、その防除法が確立されていないため、酪農家へ甚大な損失となる。本年度の研究同的として、愛知県、北海道、千葉県の農業共済および家畜保健所の協力の下でバルク乳、乳房炎乳汁、健康牛乳汁、搾乳機、牛舎環境の試料からプロトテカを分離し、我々が確立したPCR法でプロトテカの遺伝子タイピングを行い、全国的に本疾患の原因菌がGenotype2型によるものかどうか確認するとともに、感染源の特定を行った。その結果、愛知県、北海道、千葉県の乳房炎乳汁から分離したプロトテカは全てGenotype2型であった。一方、牛舎環境からは、Genotype 1型であった。このことから従来プロトテカ症は、環境からの感染とされていたが、牛の常在藻類による日和見感染症の可能性がたくなった。さらに、防除法を検討するために、液体培地微小希釈法による罹患牛および牛舎環境各分離株の各種消毒剤に対する感受性を調べ、野外分離株における遺伝子型と薬剤感受性との関連を検討した。その結果、プロトテカ性乳房炎罹患牛乳汁由来P.zopfii genotype2:10株および同罹患牛飼養牛舎内環境由来P.zopfii genotype1:10株の全てで、塩酸アルキルジアミノエチルグリシンおよびクロルヘキシジンは等しく次亜塩素酸、ポピドンヨードより強い感受性を示した。また、二酸化塩素には感受性を示さなかった。プロトテカ乳房炎の防除には、塩酸アルキルジアミノエチルグリシンおよびクロルヘキシジンが最も有用性があると思われた。牛舎環境周辺に腐生性に存在するPrototheca zopfiiは、牛乳房炎の原因藻類であり、乳量の減少、白色の凝固物を含んだ希薄な乳汁の分泌を引き起こす。本藻類は、生化学的あるいは血清学的に少なくとも2つの遺伝子型(P. zopfii genotype 1およびgenotype 2)に分類される。ドイツ、イタリア、日本、ポルトガルおよびポーランドにおいて、プロトテカ性乳房炎から分離された株のほとんどが、genotype 2と同定されることから、同遺伝子型が乳房炎の主要原因藻類であるとされている。しかしながら、本邦の他酪農地域における本疾患についての分子疫学的調査は行われていない。

そこで本研究では、genotype 1、2およびP. blaschkeaeの標準株および愛知県の分離株21株、さらに北海道臨床分離株3株、千葉県臨床分離株8株に対して、18S ribosormal DNA領域の遺伝子解析を行い、系統学的解析から、採材地域における分子疫学的調査を行った。18S ribosormalDNA領域のシークエンスによる臨床分離株の系統学的解析により、本邦の全ての臨床分離株がP. zopfii SAG2021T(genotype 2標準株)と同一のクラスターを形成し、genotype1分離株のクラスターから独立することが明らかとなった。また全ての環境由来株(糞便、牛舎環境内汚水、水など)がP. zopfii SAG2063T(genotype 1標準株)と同一のクラスターを形成した。この結果から、本邦におけるプロトテカ性乳房炎は、各国と同様にP. zopfii genotype 2であることを示唆した。また、地域および採材場所による系統学的な変異は認めなかった。プロトテカ性乳房炎の感染経路、感染源の解明には、本藻類のさらなる分子疫学的調査が必要である。本年度の目標である感染源の特定は、日和見感染の可能性がはっきりしてきたので、おおむね順調に進展していると考えている。また、乳牛に使用可能な感受性のある消毒剤が選別できたので、本研究目的の防除法の確立に向かって進展していると評価している。24年度が最終年度であるため、記入しない。乳牛のどの部位にプロトテカが常在しているのか、乳牛の皮膚、粘膜、ルーメン、糞便からのサンプリング調査を行う。これは、今までの農済および家畜保健所との協力研究下で十分推進可能であると考えている。これによって、研究目標である感染源の確定が判明する。
北海道における魚つき林をテーマとする環境教育の実践に関する民俗学的基礎研究

平成19年度は、利尻町、利尻富士町、奥尻町において北海道漁業協同組合連合会女性部による「お魚殖やす植樹運動」の実践に関する調査を実施した。また、奥尻町では合わせて「北の魚つきの森」認定事業の実践に関する調査も行った。運動開始から現在に至るまでの活動状況、植樹後の苗木の生育状態と苗木の具体的な管理問題、各地域の沿岸環境・水産資源・人間活動の結び付きに関する基礎的情報を記録した。両運動は「魚つき林の育成と保全」を通じて地元の森林や沿岸・河川環境の回復を主たる目的とした運動である。生産・生活の場としての海を理解すること、植樹の実践と沿岸環境・資源の回復を結びつけて理解することを狙いとして植樹を実施している。魚つき林育成が資産形成を目的とするものではなく、かつ結果がすぐに目に見える形で現れるものではないだけに、海と森林との結び付きに関して、特に漁業関係者が蓄積・伝承してきた経験知や伝承を現在に伝える具体的な環境教育の実践が必要である。平成17年度は北海道立文書館、北海道大学附属図書館、信漁連・漁連図書資料室において資料調査を実施し、北海道内における魚つき林制度の概略を再整理するとともに、北海道内における以下の植樹運動について調査を行った。(1)えりも岬国有林緑化事業(えりも町)。(2)北海道漁業協同組合連合会女性部による「お魚殖やす植樹運動」(乙部町、江差町、せたな町大成区、利尻町、利尻富士町)。(3)「北の魚つきの森」認定事業(乙部町、石狩市浜益区、蘭越町)。(4)「松前・離島小島を愛する会」の活動(松前町)。主として道内の日本海沿岸地域の植樹運動の実践事例を調査し、運動開始の背景や現在の活動状況、沿岸環境・水産資源・人間活動の結び付きに関する基礎的情報を記録した。森林法により指定された「魚つき保安林」の復元を目指した植樹運動(えりも町)も含め、森と海とのつながりや環境・生態系をキーワードとした「魚つき林」育成を目指す植樹運動が展開されていることを確認した。上記の植樹運動開始の背景を以下のようにまとめることができる。(1)過去において、森林伐採という人為的理由により地元の海や沿岸域の環境が変化し、その変化が人びとの日常生活に少なからぬ影響を及ぼしてきたという事実を受けて、地元住民が植樹運動を開始(えりも岬、松前町小島)。(2)生産・生活の場としての海を理解すること、植樹の実践と沿岸環境・資源の回復を結びつけて理解することを狙いとして植樹を開始(漁協女性部の運動)。(3)行政機関主導で地元住民を取り込んで運動を開始(「北の魚つきの森認定事業」)。平成18年度は北海道内における以下の植樹運動について調査を行った。(1)えりも岬の緑を守る会(えりも岬国有林緑化事業(えりも町))。(2)北海道漁業協同組合連合会女性部による「お魚殖やす植樹運動」(江差町、松前町、厚岸町、北見市常呂町、佐呂間町、湧別町、利尻町、利尻富士町)。(3)「北の魚つきの森」認定事業(むかわ町、新冠町)。主として北海道内のオホーツク海・日本海沿岸地域の植樹運動の実践事例を調査し、運動開始の背景や現在の活動状況、沿岸環境・水産資源・人間活動の結び付きに関する基礎的情報を記録した。上記3つの植樹運動は、最終的な目的は異なるものの、「魚つき林の育成と保全」を通じて地元の森林や沿岸・河川環境の回復を主たる目的とした運動である。運動内容を大きくまとめると以下のようになる。(1)えりも町の運動は、えりも岬国有林の緑化事業の進展にともない組織されたものである。植樹祭への参加の他、育樹(枝落し)活動、中高一貫環境教育の実践を目的とする地元中学校・高校と連携・協力を図っている。(2)道漁連女性部の運動は、生産・生活の場としての海を理解すること、植樹の実践と沿岸環境・資源の回復を結びつけて理解することを狙いとして植樹を実施している。(3)「北の魚つきの森」認定事業は、地元行政機関の主導の下に推進協議会を組織して運動を展開している。地元漁協やボランティアなどの地元住民を取り込み、認定地区内における植樹・森林整備、河川環境の保全を進めている。
マルチホップ無線網における伝送速度及び通信距離の変動に対応可能な負荷分散方式

本研究では以下の2つの成果を得た.片方向リンクを含むマルチホップ無線網におけるパケットルーチング方式各リンク毎に通信距離が異なる状況ではルーチングにおける片方向リンクの扱いが重要である.既存の代表的なルーチング方式の多くは双方向リンクのみを利用した経路構築を行うが,緊急時に利用される一時的なマルチホップ無線網では片方向リンクの存在割合が事前に予測できない場合も多いと考えられ,片方向リンクの割合が多い場合には既存手法では接続性が極端に低下することが問題であった.一方,片方向リンクの多い環境で高い接続性を確保できる手法として双方向フラッディング方式が知られているが,生成される制御パケット量が膨大であるため実用に向かない.本研究では,双方向フラッディングをベースとして,フラッディングの範囲を適切に制御することで,接続性を維持しつつ制御パケット量を大きく低減する,FOCUS方式と呼ぶルーチング方式を提案した.Random waypoint modelを用いたシミュレーションにより,FOCUSは,双方向フラッディング方式と比較し制御トラフィック量を約50%低減する一方,経路確立成功確率の劣化は最大2%程度で抑えられ,有効性が確認された.リンクのスループットを指標とするマルチキャストルーチング方式リンクごとに伝送速度が異なるマルチホップ無線網では,リンクのメトリックを伝送速度の逆数で定義してルーチングを行うことにより単なる最短ホップルーチングよりも高いスループットを得られるが,従来はこのアプローチがユニキャストルーチングに対してしか検討されていなかった.本研究では,新たにマルチキャストルーチングにこのアプローチを適用する手法を提案した.提案手法により,複数の宛先にユニキャストで送信する従来手法と比較し,遅延時間を同等に維持しつつ,制御トラフィック量を最大で1/4程度に低減できることをシミュレーションにより確認した2005年度は,2006年度に向けた基礎検討として、通信距離がノード毎に異なるが各々の通信距離は時間的に変動しないという条件のマルチホップ無線網で,最短経路ルーティングプロトコルの検討を行った。一般のマルチホップ無線網では,通信距離が全ノードで同一という条件を設定するが,通信距離がノード毎に異なる場合には,網には片方向リンクが多く発生するため,従来と異なる原理のルーティングプロトコルが必要である.従来提案されている代表的なルーティングプロトコルの手法は主に2種類ある。第一は送信元ノードから宛先ノードに向かって経路探索パケットをフラッディングして経路(往路)を構築した後、復路を同じリンクを用いて設定する手法である.片方向リンクを含む網では接続性が大幅に劣化する.第二は,第一の手法と同じ原理で往路を構築した後,宛先ノードから送信元ノードに向かって別の経路探索パケットをフラッディングすることにより復路を構築するものである.第二の手法は第一の手法と比較し,接続性を大幅に高められるが,経路構築で発生する制御パケット量が第一の手法の約2倍となり,ノードの密度の高い網では膨大な量の制御パケットが発生することが問題になる。これらの問題を克服するため,本研究では,第二の手法をベースとして,往路・復路の経路構築の際のフラッディングの実行範囲を限定することで,経路構築性能を維持しながら制御パケット量を大幅に低減する手法を新たに提案した.シミュレーションの結果,提案手法は、第一の手法と比較して経路構築の成功確率を最大約4倍とし,第二の手法と比べ発生する制御パケット量を約50%削減することを明らかにした。2006年度は2005年度の提案手法に基づいて,各ノードの無線リンクの伝送速度と通信距離が時間的に変動する条件を設定し,この条件で動作する新たな負荷分散ルーティングプロトコルを考案・評価する予定である.本研究では以下の2つの成果を得た.片方向リンクを含むマルチホップ無線網におけるパケットルーチング方式各リンク毎に通信距離が異なる状況ではルーチングにおける片方向リンクの扱いが重要である.既存の代表的なルーチング方式の多くは双方向リンクのみを利用した経路構築を行うが,緊急時に利用される一時的なマルチホップ無線網では片方向リンクの存在割合が事前に予測できない場合も多いと考えられ,片方向リンクの割合が多い場合には既存手法では接続性が極端に低下することが問題であった.一方,片方向リンクの多い環境で高い接続性を確保できる手法として双方向フラッディング方式が知られているが,生成される制御パケット量が膨大であるため実用に向かない.本研究では,双方向フラッディングをベースとして,フラッディングの範囲を適切に制御することで,接続性を維持しつつ制御パケット量を大きく低減する,FOCUS方式と呼ぶルーチング方式を提案した.Random waypoint modelを用いたシミュレーションにより,FOCUSは,双方向フラッディング方式と比較し制御トラフィック量を約50%低減する一方,経路確立成功確率の劣化は最大2%程度で抑えられ,有効性が確認された.リンクのスループットを指標とするマルチキャストルーチング方式リンクごとに伝送速度が異なるマルチホップ無線網では,リンクのメトリックを伝送速度の逆数で定義してルーチングを行うことにより単なる最短ホップルーチングよりも高いスループットを得られるが,従来はこのアプローチがユニキャストルーチングに対してしか検討されていなかった.本研究では,新たにマルチキャストルーチングにこのアプローチを適用する手法を提案した.提案手法により,複数の宛先にユニキャストで送信する従来手法と比較し,遅延時間を同等に維持しつつ,制御トラフィック量を最大で1/4程度に低減できることをシミュレーションにより確認した
肝癌の起源と癌幹細胞の制御機構及び新規治療法の解明

原発性肝癌の一つであるFibrolamellar Hepatocellular Carcinoma (FLC)は若年者に多く、根治的治療は外科的切除のみで化学療法や放射線療法は奏功せず、予後不良な疾患である。病因は不明であり、病態解明や治療につながる研究が困難である大きな要因として、現在までに細胞株や動物モデルが存在しないことが挙げられる。我々はFL-HCC患者腹水由来細胞をKubota's Mediumで培養後に免疫不全マウスの皮下に移植し,世界に先駆けてマウス体内で継代可能なFL-HCC patient-derived xenograft (PDX) tumor modelの確立に成功した。近年,ヒト正常肝組織において肝細胞と胆管の2方向性分化能を持つ細胞である肝幹細胞のさらに前駆細胞で,肝外胆管組織に存在し,肝細胞や胆管のみならず膵内分泌細胞の3方向性分化能を持つ細胞として胆管系幹細胞が同定されたが, FL-HCC PDX model由来細胞はDNAJB1-PRKACAおよび癌幹細胞様の特性を持ち合わせており,ヒト正常肝幹細胞から成熟肝細胞の各分化段階細胞を用いたRNA-sequence解析から,その遺伝子発現パターンが正常胆管系幹細胞に類似していることが明らかとなった。これらの結果と癌幹細胞と正常幹細胞が類似した特性を持ち自己複製能制御機構の破綻が癌化につながる可能性が示唆されていることから, FL-HCCの起源は胆管系幹細胞が悪性形質転換した細胞である可能性が考えられた。我々の確立したFL-HCC PDX tumor modelは研究ツールとして従来困難であった癌幹細胞の自己複製・増殖・分化制御メカニズムを直接FL-HCC由来細胞およびマウス個体レベルでの解析を可能とし,FL-HCCの病態解明のみならず将来的な新規治療法の開発への応用を含めたFL-HCC研究のさらなる発展へ大きな寄与が期待される。27年度が最終年度であるため、記入しない。