hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
バイオ燃料用資源植物を活用した汚染土壌の有効利用と修復システムの構築

日本及び海外諸国では、土壌汚染が顕在化・深刻化しており、汚染土壌を有効利用しながら、効率的に修復する体系の確立は、緊急かつ重要な課題となっている。本研究では、バイオ燃料用の資源植物を活用し、汚染土壌の有効利用と効率的な浄化を両立させた、収益型の修復技術の確立を目的とし、研究を行った。主に以下の研究を行った。1)代表的工場敷地汚染土壌を収集し、その汚染の特徴を解明した。2)土壌修復に利用可能なバイオ燃料用資源植物を選択し、重金属に対する耐性及び蓄積能力を評価した。その結果、銅草とトウモロコシの重金属耐性が高かった。鶏眼草は重金属耐性が弱く、実用は困難であると判断された。3)資源植物による複合汚染土壌修復試験を実施し、植物の生育状況、浄化効果を評価した。その結果、微生物の接種により植物の生育量、土壌微生物量、ダイオキシン類の除去率及び重金属の蓄積量が増加した。4)バイオ燃料用資源植物(ひまわり、トウモロコシ)及び汚染土壌修復用植物(マリーゴールドと銅草)を用い、修復試験を行った。その結果、3種類の汚染土壌において、トウモロコシとひまわりの生育は優れていた。特に、トウモロコシの生育量は他の植物より高かった。また、修復能力を表す植物の地上部の重金属蓄積量について、トウモロコシと向日葵はCu、Zn、Pb、Cdの蓄積量が銅草に比べ数倍から十数倍高かった。トウモロコシとひまわりのCdとPbの蓄積量はマリーゴールドに比べ低かったが、CuとZnの蓄積量が高かった。従って、バイオ燃料用植物はファイトレメディエーション専用の植物と比べ、生育力が優れていると共に、重金属の蓄積性も劣っていないことが示された。収益性及び土壌資源保全の観点からも、専用の植物を用いた従来のファイトレメディエーション手法の代わりに、バイオ燃料用資源植物を利用することが可能であり、その利点が大きい。本研究では、バイオ燃料用の資源植物を活用し、汚染土壌の有効利用と効率的な浄化を両立させた、収益型の修復技術の確立を目的とし、有機汚染物質に高い分解能力を持つ白色腐朽菌(ヒラタケ)と組合せ、汚染の浄化効果と収益性を検討した。鉛及びダイオキシン類に汚染された土壌を埼玉県内の工場跡地で採取して使用した。夏季の資源植物ひまわりとトウモロコシをそれぞれ単独、または選択された白色腐朽菌と組合せ、汚染土壌を入れたポットで栽培し、植物生育量、収益性、ダイオキシン類、重金属に対する浄化効果を評価した。1)資源植物-ヒラタケ修復システムは工場敷地汚染土壌において植物生育、土壌微生物量および土壌の植物生産力を大幅に改善することができた。2)ひまわりとトウモロコシの重金属吸収量の順番はZn>Mn>Cu>Pb=Cr>Cd=Niであった。ひまわりのPb吸収量はトウモロコシより、2倍高かった。ヒラタケ接種により、ひまわりとトウモロコシの重金属の吸収量を増加させた。3)資源植物-ヒラタケ修復システムは、ダイオキシン類の修復効率も大きく促進することができ、複合汚染土壌の修復にも大きな促進効果があった。4)ヒラタケの接種により畑土壌と同様な植物生育量が産出された。収穫したバイオマスをバイオ燃料に利用する場合、畑土壌と同じように収益を得ることが可能と考えられる。
造血幹細胞ニッチを介した癌の骨転移成立機構の解明

骨への臓器特異的転移、および骨転移の成立・進展のメカニズム解明のために、本研究では骨転移における骨髄癌細胞ニッチの役割を明らかにすることを目的とし、「細胞接着分子を介した骨芽細胞と癌細胞の接着がニッチの形成に重要な役割を果たしている」との作業仮説を立てた。そのなかで、骨髄中の造血幹細胞ニッチの形成において、N-カドヘリンを介した骨芽細胞と造血幹細胞の接着が重要な役割を果たしていること、癌細胞のN-カドヘリンの発現が癌の悪性度と関連し、患者の予後と負の相関関係を示すことなどの報告から、特に細胞接着分子N-カドヘリンに注目し、研究を行った。昨年は、N-カドヘリンを過剰発現する癌細胞株、およびshRNAを用いたN-カドヘリンのノックダウン癌細胞株の樹立を行い、本年度は、これらの細胞を用い、in vivoの解析を行った。1.N-カドヘリン過剰発現株およびノックダウン株のin vivoでの増殖能N-カドヘリン過剰発現株およびノックダウン株の増殖能について、ヌードマウスへの移植により検討した結果、両者とも親株と比較して腫瘍増殖には差は認められなかった。2.N-カドヘリン過剰発現株およびノックダウン株の骨転移能の比較N-カドヘリン過剰発現株およびノックダウン株の骨転移能について、ヌードマウス左心室内移植モデルを用い検討した結果、こちらも両者とも親株と比較して腫瘍増殖には差は認められなかった。今回のin vivoの実験結果からはいずれも癌細胞におけるN-カドヘリン発現の差異の影響を認めることは出来なかった。しかし、発現の増強および減弱の程度が十分であったかなどについては検討の余地があり、今後、継続して検討を進めていく予定である。骨への臓器特異的転移、および骨転移の成立・進展のメカニズム解明のために、本研究では骨転移における骨髄癌細胞ニッチの役割を明らかにすることを目的とし、本年度は「細胞接着分子N-カドヘリンを介した骨芽細胞と癌細胞の接着がニッチの形成に重要な役割を果たしている」との作業仮説を立て、以下の検討を行った。1.N-カドヘリンを過剰発現する癌細胞株の樹立骨転移におけるN-カドヘリンの関与を明らかにするために、癌細胞にN-カドヘリン遺伝子をトランスフェクションし、N-カドヘリンを恒常的に発現する細胞株を樹立した。2.shRNAを用いたN-カドヘリンのノックダウン癌細胞株の樹立上記のgain of function実験に加え、loss of function実験を行うために、恒常的にN-カドヘリンを発現する癌細胞にN-カドヘリンshRNAを強制発現するコンストラクトを設計、導入し、N-カドヘリンのノックダウン細胞株を樹立した。3.N-カドヘリン過剰発現株およびノックダウン株の性状解析(1)細胞形態に対する作用:N-カドヘリンを過剰発現した細胞株では親株と比較して敷石状に形態変化を示したのに対し、N-カドヘリンをノックダウンした細胞株では逆の変化が認められた。(2)細胞増殖に対する作用:N-カドヘリン過剰発現株およびノックダウン株のいずれにおいても、親株と比較して細胞増殖に変化は認められなかった。4.骨組織におけるN-カドヘリンの局在骨組織におけるN-カドヘリンの局在を免疫組織化学的に検討した。その結果、骨芽細胞がN-カドヘリンを発現することが確認された。
肝臓線維化病態における、肝星細胞のＦｒｅｅ　ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ代謝機構の解明

本邦では、メタボリックシンドロームの患者数増加に伴い、非アルコール性脂肪肝炎の患者数が増大している。肝星細胞の遊離コレステロール蓄積は、TLR4シグナルの増大を介して、肝星細胞のTGFβに対する感受性を増大させるが、我々は細胞内コレステロール代謝関連遺伝子であるAcetyl-Coenzyme A acetyltransferase 1の欠損が、肝臓線維化病態を増悪させることを明らかにした。Acetyl-Coenzyme A acetyltransferase 1は非アルコール性脂肪肝炎を含む肝臓線維化治療の有望な治療標的となるであろう。食事由来のコレステロールが種々の肝臓病の進展に関与することは示唆されている。我々は、高コレステロール食が肝臓構成細胞の1つである肝星細胞にFree cholesterolを蓄積させ、TLR4シグナル増強を介してTGFβ依存的な肝臓線維化を増悪させることを明らかにした。そのため、高コレステロール血症を背景因子にもつ非アルコール性脂肪肝炎(NASH)を含む肝臓病の病態進展に、肝星細胞のFree cholesterol代謝は重要な役割を担っていると考えられる。そこで、平成25年度の研究は、Free cholesterol代謝関連遺伝子であるACAT1、LIPE、NCEPを肝星細胞特異的に遺伝子改変したマウスとヒト臨床検体を用いた検討を行った。ACAT1が欠損したマウスにおいて、四塩化炭素(CCl4)投与および胆管結紮(BDL)による肝臓線維化が増悪していることを確認した。ACAT1欠損マウスにおいて、血清および肝臓の総コレステロール量は変動していなかった。肝星細胞では、野生型に比べACAT1欠損型で総コレステロール量が高く、また、Free cholesterol量が高かったが、cholesterol ester量はほぼ同じであった。さらに解析を行ったところ、野生型に比べACAT1欠損型肝星細胞において、TLR4の蛋白質量およびTGFβ偽受容体であるBambiの発現量が低下しており、TGFβに対し易感受性を示していた。我々は、肝星細胞のFree cholesterol代謝関連遺伝子であるACAT1が肝臓線維化病態機序に関与することを報告した。これらの結果は、肝星細胞のコレステロール代謝が肝臓線維化に影響を及ぼすことを示した貴重な情報である。我々は既に、肝星細胞特異的にACAT1、LIPEおよびNCEH1を各々欠損させたマウスを作成した。これらのKOマウスで、1)メチオニン-コリン欠損食もしくはコレステロール過剰含有メチオニン-コリン欠損食の投与によるNASHモデル、2)高脂肪食もしくはコレステロール過剰含有高脂肪食の投与によるNASHモデル、3)通常食もしくは高コレステロール食の給餌後、CCl4投与もしくは胆管結紮施行した肝硬変モデルを作成した。現在、各群のマウスより肝臓及び血清を採取し、脂肪肝・肝障害・肝臓繊維化の差異を、組織学的・血清学的に評価検討中である。siRNAを封入したVitamin A結合リポソームVA-Lip-siRNAのin vivo投与により、肝星細胞特異的に標的遺伝子をノックダウンすることが可能である。そこで、上記1)3)のNASHおよび肝硬変モデルを野生型マウスで作成し、LIPE、NCEH1に対するVA-Lip-siRNAを投与した。また、肝臓より肝星細胞を分離し、遊離コレステロールの蓄積およびTGFβに対する応答性についても評価検討中である。これらの検討よりNASHを含む肝臓病の発症・進展において、肝星細胞のFree cholesterol代謝の果たす役割が明らかになり、新規診断法・治療法の開発につなげることが可能となる。本邦では、メタボリックシンドロームの患者数の急増に伴い、非アルコール性脂肪肝炎の患者数が増大している。これまでに、我々は、肝星細胞の遊離コレステロール蓄積はTLR4シグナルの増大を介して、肝星細胞のTGFβに対する感受性を増大させることを報告した。しかし、肝星細胞の遊離コレステロール代謝関連遺伝子が肝臓線維化病態に関与するのかは明らかになっていない。そこで、我々は遊離コレステロール代謝関連遺伝子であるACAT1、LIPE、NCEH1に着目し、これら遺伝子が肝星細胞特異的に欠損もしくは過剰発現したマウスを作製した。上記遺伝子改変マウスを用いて、肝臓線維化病態における肝星細胞の遊離コレステロール代謝の役割について解析を行った。肝星細胞のACAT1が欠損したマウスにおいて、四塩化炭素投与もしくは胆管結紮による肝臓線維化病態が野生型マウスに比べ悪化していることを明らかにした。ACAT1欠損マウスより肝星細胞を分離してin vitro解析を行ったところ、野生型肝星細胞に比べ、ACAT1欠損型肝星細胞で遊離コレステロール蓄積が増大しており、また、TLR4蛋白量も増加していた。さらに、野生型肝星細胞に比べ、ACAT1欠損型肝星細胞はTGFβに対し易感受性であった。

これらの検討より、肝星細胞のACAT1が、肝星細胞内のコレステロール蓄積を介して肝臓線維化に関与することが明らかになった。また、大腸癌肝転移患者から肝切除に得られた正常肝組織より肝星細胞を分離・解析した結果、ヒト肝星細胞においてACAT1が主たる遊離コレステロール代謝関連遺伝子であった。これらの結果より、ACAT1は非アルコール性脂肪肝炎を含む肝臓線維化治療の有望な治療標的となることが示唆された。消化器内科、肝臓病学平成25年度は、Free cholesterol代謝関連遺伝子であるACAT1、LIPE、NCEPを肝星細胞特異的に遺伝子改変したマウスを用い、マウスNASHモデルおよび肝臓線維化モデルを作成した。肝臓線維化病態は、マッソントリクローム染色で評価した。肝細胞障害は、血清ALTで評価した。また、肝臓炎症病態は、炎症サイトカインのであるTNFαのmRNA発現量およびマクロファージのマーカーであるF4/80の免疫染色で評価した。マウスの血清および肝臓の総コレステロール量を測定した。さらに、マウス肝臓より肝星細胞を分離し、総コレステロール量およびFree cholesterol量を測定した。また、TLR4の蛋白質量およびTGFβ偽受容体であるBambiの発現量も確認した。よって、計画は概ね達成していると評価した。ヒト臨床検体については、DNAサンプルおよび血清よりデータの採取を行った。しかし、レーザーマイクロダイゼクションを用いて肝臓組織標本より肝星細胞の分離し、肝星細胞のFree cholesterol代謝関連遺伝子およびTGFβシグナル関連遺伝子の発現量解析については、現在、実施中により、未達成である。実験に使用予定であったマウス(肝星細胞特異的にACAT1、LIPE、NCEH1の各々が高発現するトランスジェニックマウスおよび肝星細胞特異的LIPE ; NCEH1二重欠損マウス)が微生物に感染したため、マウスをクリーンアップする必要が生じた。そのため、今年度に行うin vivo実験に遅れが生じている。今後は、マウスモデルで確認された現象が、ヒト肝星細胞においても確認できるのかを検証する。大腸癌転移肝癌転移患者の外科的切除肝臓の背景正常肝組織より初代肝星細胞を分離し、肝星細胞にFree cholesterolを蓄積させ、Free cholesterolとTGFβ感受性について、詳細な解析を行う。その、一方で、NASH、慢性肝炎、肝硬変患者の肝臓組織・血清・DNAサンプルを用いて、肝臓組織像、Free cholesterol代謝酵素SNP、血清コレステロール値との相関を明らかにする。Free cholesterol代謝酵素のSNPより、肝星細胞へFree cholesterolが蓄積しやすいと判定された患者は、肝臓線維化進展の危険度が高いものと考えられる。肝臓線維化
ナノサイズバブルリポソーム投与下超音波照射を用いた感染性心内膜炎の効果的治療法

感染性心内膜炎は心臓に疣腫を生じる全身性敗血症であるが、疣腫がバイオフィルムに覆われているため抗菌剤の浸透が十分に行われず難治性となる。バブル存在下に超音波を照射することによる組織内薬剤浸透効果の増強作用(ソノポレーション)が感染性心内膜炎の治療効果を上げる可能性について検討した。その結果、ナノサイズバブルリポソーム存在下の超音波照射によりラットに作成した疣腫内への薬物浸透効果が認められた。本年度は、(1)ナノサイズバブルリポソーム作成法の確立、(2)ナノサイズバブルに超音波照射を併用した際の組織(血栓)への影響、の検討を行った。ナノサイズバブルリポソーム作成にあたっては試行錯誤の末、混合するリポソーム量、パーフルオロプロパン量、超音波振盪器の条件と振盪時間を決定した。これにより比較的安定して自施設でナノサイズバブルリポソームを作成することができるようになった。ついで、作成したバブルリポソームが超音波照射下に生体組織に与える効果を検討する目的で、試験管内でイヌ静脈血(1mL)を用いて作成された赤色血栓に対するウロキナーゼの溶解効果がバブルリポソーム投与下超音波照射併用で増強されるかどうかを検討した。赤色血栓は、ウロキナーゼ単独(UK群)、超音波照射を併用したUK+US群、さらにバブルリポソームを併用したUK+US+BL群に分けた。超音浪はRICH-MAR社製Sonitron 2000(周波数:1MHz、強度:1.0W/cm^2、デューティー比:100%)を用いて2秒照射4秒停止のサイクルで照射を行い、溶解操作前後で血栓重量の変化をみた。その結果、溶解時間20分ではUK単独群と比較してUK+US群とUK+US+BL群で重量減少率は有意に高くなったが(UK vs.UK+US vs.UK+US+BL : 12.6±1.6 vs.23.4±5.2 vs.23.4±3.5%, p<0.05)、UK+US群とUK+US+BL群の間には差がなかった。以上より、血栓溶解効果は超音波照射併用により増強されるが、ナノサイズバブルリポソーム併用によるさらなる溶解増強効果は確認できなかった。昨年度はin vitroでの検討を行ったが、本年度は生体に対してナノサイズバブルリポソームを用いたsonoporationを検討した。【方法】腹部大動脈にカニュレーションした雄性SDラット10匹の両脚大腿四頭筋(n=20)を用いた。大腿四頭筋への局所的な分子導入を評価するために、蛍光色素FITC-デキストラン(0.18mg/g)をバブルリポソームまたは生理食塩水と混合し、腹部大動脈より0.3ml/minにて持続注入した。バブルリポソーム(0.01ml/g)注入群(B(+)US(-)群、n=5)、バブルリポソーム注入に超音波照射を併用した群(B(+)US(+)群、n=5)、および生理食塩水(0.01ml/g)注入群(B(-)US(-)群、n=5)、生理食塩水注入に超音波照射を併用した群(B(-)US(+)群、n=5)の4群に分類した。超音波照射には、東芝社製探触子(周波数2.2MHz)を用い、mechanical index 1.6、照射間隔20秒、照射回数10回/秒とした。プロトコール終了後、大腿四頭筋を摘出し凍結切片を作製した。蛍光顕微鏡を用いてFITC-デキストランの血管外漏出の有無を観察した。また、EHSA法にてFITC-デキストランの吸光度(波長45nm)をマイクロプレートリーダーで測定し、FITC-デキストランの濃度を求めた。【結果】蛍光顕微鏡観察により、B(+)US(+)群ではFITC-デキストランが筋細胞に滞留しているのが認められたが、他群では認められなかった。各検体においてELISA法より求めたFITC-デキストラン濃度は、有意差を得るには至らなかったものの、B(+)US(+)群で46.3±31.3μg/mlと他群に比べやや高値を示した(B(+)US(-)群:31.7±18.6μg/ml、B(-)US(+)群:35.7±11.2μg/ml、B(-)US(-)群;27.7±16.2μg/ml)。【考察・結語】超音波照射とバブルリポソームの併用効果による局所分子導入の可能性が示唆された。【背景】感染性心内膜炎(IE)の疣腫は血小板とフィブリンによって覆われているため抗菌薬を浸透させるのが困難で、難治性の一因となっている。微小気泡存在下で超音波を照射すると近傍組織の細胞膜に一時的な小孔が開く(ソノポレーション)。

ナノサイズの超音波造影剤であるバブルリポソームは粒子径が小さいためソノポレーションにより低侵襲的かつ効率的に薬物デリバリーが可能であり、IEにおいても効率的治療が期待される。【目的】ラットにIEを発症させ、バブルリポソームを用いたソノポレーションの疣腫への効果を検討する。【方法】雄性SDラット(n=30)を用い、右総頸動脈より大動脈弁を経由し左心室内へポリエチレンカテーテルを留置し、大動脈弁逆流(AR)モデルを作製した。作製3日後に尾静脈より腸球菌を投与しIEを発症させた。菌注入2日後ラットを安楽死させ大動脈弁より疣腫を摘出した。得られた疣腫(n=8)を用いてコントロール群としてのB(-)US(-)群(n=1)、超音波照射単独のB(-)US(+)群(n=3)、バブルリポソームを注入し超音波照射をしたB(+)US(+)群(n=4)と3つの群で検討した。墨汁入り生理食塩水中に疣腫を固定し、RICH-MAR社製Sonitron2000(周波数1MHz、強度0.7W/cm^2、デューティー比100%)を用いて1秒照射後4秒停止で間歇照射を10分間行った。その後、疣腫の切片を作製し墨汁滴の深達度を4段階で評価した。【結果】AR発症率は67%でありIE発症率は全体の33%であった。得られた疣腫は平均径約2mmで染色深達度はB(-)US(-)群(0)、B(-)US(+)群(0.75±1.07)、B+US+群(1.97±0.93)であった。【結語】バブルリポソームを用いたソノポレーションは疣腫への効果的な薬物デリバリーの方法となり得ることが示唆された。
共助力向上をめざした地域防災コミュニティ構築のための社会実験に基づく実践研究

大地震に対する防災対策の効果を上げるには、自助だけでなく、地域住民の共助力の強化が欠かせない。特に首都直下地震の切迫性が指摘される中、この問題は助け合いの形が崩れている都市圏での喫緊の課題である。住民は東日本大震災を経験して自助・共助についての関心は高まったが、現在は首都圏の防災意識は低下している。特に共助の重要性を認識することが不足しており、訓練が充分なされておらず、地域コミュニティレベルでの復興力やマンションにおける共助体制は不十分である。そこで本研究は、共助力を高めた地域コミュニティを構築すべく共助の場として避難所と日常のコミュニティの交流をとらえ、住民の共助力を高めることを目的とする。大地震に対する防災対策の効果を上げるには、自助や公助だけでなく、地域住民の共助力の強化が欠かせない。特に首都直下地震の切迫性が指摘される中、この問題は助け合いの形が崩れている都市圏での喫緊の課題として追究が必要である。住民自身は東日本大震災の甚大な被害を目の当たりにして自助についての関心は高まったが、もはや2年を経過して首都圏の防災意識は少しずつ低下している。共助の重要性は注目されるようになってきたが、まだ訓練が充分なされておらず、地域コミュニティレベルでの復興力や特にマンションにおける共助体制は不十分である。共助体制は発災後の迅速な人命救助、復興の加速に寄与するなど重要な課題である。そこで本研究は、共助力を高めた地域コミュニティを構築すべく、既存の地域コミュニティにおける人的交流を活性化しながら、防災面での住民の共助力を高めることを目的とする。当該年度は2年目として、(1)地域住民の防災コミュニティへの参画意識、(2)女性が地域コミュニティ活性化を担えるか、(3)地域コミュニティの共助の代表例として避難所の運営をとりあげ、モデル地区である文京区内で実践と分析を実施した。一方町会活動が活発で避難所運営の実践的訓練を行っている横浜市内の避難所運営組織とも比較して、どのような部分が不足しているかを考察した。行った調査をまとめると次のようになる。○町会・行政ヒアリング○情報発信ツールの検討(ラジオや地域FMの活用、情報機器の活用等)○防災共助力に関する意識調査○地域コミュニティにおける実践活動(ワークショップ)の企画・実施○女性の力を活用する共助活動の考察大地震に対する防災対策の効果を上げるには、自助や公助だけでなく、地域住民の共助力の強化が欠かせない。住民自身は東日本大震災の甚大な被害を目の当たりにして自助についての関心は高まったが、3年を経過して首都圏の防災意識は少しずつ低下している。当該年度は3年目として、(1)地域コミュニティの防災力と共助体制の構築状況調査、(2)文京区内での共助体制の構築サポートと住民ワークショップによる啓発実践、(3)地域コミュニティの共助の代表例として避難所の運営をとりあげ、モデル地区である文京区内で実践と分析を実施した。調査結果より、住民の共助体制の構築については高齢者世代を中心とした中では少しずつ努力が始まっているが、より若い世代と交流するための仕掛けや女性を活用する仕組みが不足していることが分かった。さまざまな人的ネットワークの存在とその課題を調査から明らかにしてきたが、特に情報や交流を盛んにするための支援方法について考察した。住民自身は東日本大震災の甚大な被害を目の当たりにして自助についての関心は高まったが、もはや1年を経過して首都圏の防災意識は少しずつ低下している。

そこで本研究は、共助力を高めた地域コミュニティを構築すべく、既存の地域コミュニティにおける人的交流を活性化しながら、防災における共助力を高めることを目的とする。当該年度は研究初年度であるため、地域住民の抱える問題点の把握、防災やコミュニティに関する活動が活発な町会、不活発な町会の課題把握をモデル地区である文京区内で行う。一方町会活動が活発で避難所運営の実践的訓練を行っている横浜市内の避難所運営組織とも比較して、どのような部分が不足しているかを考察した。両町会へのヒアリング調査を通じて、実状をふまえ、どのような解決方法が可能なのかについて考察した。行った調査をまとめると次のようになる。○町会・行政ヒアリング○情報発信ツールの検討(ラジオや地域FMの活用、情報機器等)○防災共助力に関する状況調査○東日本大震災での共助・避難所運営に関するヒアリング○地域コミュニティにおける実践活動(ワークショップ)の企画・試行大地震に対する防災対策の効果を上げるには、自助や公助だけでなく、地域住民の共助力の強化が欠かせない。特に首都直下地震の切迫性が指摘される中、この問題は助け合いの形が崩れている都市圏での喫緊の課題として追究が必要である。住民自身は東日本大震災の甚大な被害を目の当たりにして自助についての関心は高まったが、現在、首都圏の防災意識は少しずつ低下している。共助の重要性は注目されるようになってきたが、まだ訓練が充分なされておらず、地域コミュニティレベルでの復興力や特にマンションにおける共助体制は不十分である。共助体制は発災後の迅速な人命救助、復興の加速に寄与するなど重要な課題である。そこで本研究は、共助力を高めた地域コミュニティを構築すべく、既存の地域コミュニティにおける人的交流を活性化しながら、防災面での住民の共助力を高めることを目的とする。当該年度は最終年度として、(1)地域コミュニティの防災力と共助体制の構築状況の調査、(2)防災に関する国際会議での研究成果発表、(3)文京区内での共助体制(避難所に着目)の構築サポートと住民ワークショップによる啓発実践を行い、モデル地区である文京区内で実践と分析を実施した。これまでの研究の集大成として、モデル地区における住民の意識調査を広範に行い、共助の構築に対する知見を得たほか、国際会議に発表し、アメリカなどの研究者と討論できたことで、地域コミュニティを核とした共助体制の構築に対する各国の考え方の相違点などが明らかになった。建築・住居の防災調査対象となる町会組織との良好な連携がとれており、当該年度に計画した研究調査のほとんどの調査を実施できた。実際に地域住民が参加してワークショップ調査を実施し、その意識を把握した。次年度も継続してこれを行う予定である。さらに住民の意識を把握し、それらに関する研究成果を学会に発表した。また次年度も発表予定である(発表確定)。研究対象者である地域コミュニティの防災活動まで実際に活性化されていることを町会長から口頭で評価された。こうした地域コミュニティの協力体制によって、研究成果も上がっている。調査対象となる町会組織との良好な連携がとれており、複数の調査を実施できた。さらに住民の意識を把握し、それらに関する研究成果を学会論文として発表した。
C3毒素発現マウスを用いた小脳における低分子量Gタンパク質Rhoの機能解析

前年度に、Cre-loxP組換えを用いて小脳プルキンエ細胞特異的にC3毒素を発現するトランスジェニックマウスを複数系統作製したが、小脳懸濁液のウェスタンブロット解析では、C3毒素の発現を検出することができなかった。そこで本年度は、マウスへの薬剤(テトラサイクリンまたはドキシサイクリン)の投与によって遺伝子の発現をオン・オフすることができるTet-OFFシステムを利用したトランスジェニックマウスの作製を試みた。プルキンエ細胞特異的にトランス転写活性化因子tTAを発現するトランスジェニックマウスは、当研究室において既に作製済みであった。よって、tTAが結合するプロモータ配列(TRE)下に、C3遺伝子・IRES・EGFPをタンデムに繋いだトランスジーンを作製した。トランスジェニックマウスの作製に先立って、COS7培養細胞に作製したトランスジーンを導入し、C3およびEGFPの発現を評価した。COS7細胞の蛍光観察の結果、EGFPを発現している細胞は、細胞の形態が著しく変形し、死滅している細胞も多く観察された。これはC3毒素の発現によってRhoが不活性化され、細胞骨格系に異常を来たしたためであると考えられる。さらに、C3およびEGFPの発現は、培地へのテトラサイクリン投与によって消失した。よって、作製したトランスジーンは、C3およびEGFPを薬剤投与依存的に制御できることが確認できた。現在、このトランスジーンを用いて遺伝子改変マウスを作製している。小脳プルキンエ細胞における低分子量Gタンパク質Rhoの機能解析を行うため、Cre-loxPシステムによってプルキンエ細胞特異的にC3毒素の発現を誘導できるマウスの作製に着手した。C3毒素はボツリヌス菌由来の体外毒素で、Rhoのすべてのサブタイプ(RhoA, RhoB, RhoC)をADPリボシル化することによって不活性化する。まず、C3毒素をコードする遺伝子をCAGプロモーター下に繋ぎ、さらにloxP配列に挟まれたミニジーンをプロモーターとC3遺伝子の間に挿入することによって、Cre依存的にC3毒素を発現するようなトランスジーンを作製した。作製したトランスジーンをマウス前核期受精卵に微量注入し、偽妊娠マウス卵管に移植した。その結果、合計4系統のトランスジェニックマウスが得ることができた。それぞれのトランスジェニックマウス系統を、小脳プルキンエ細胞特異的にCreを発現するノックインマウスと交配し、プルキンエ細胞特異的にC3毒素の発現を誘導した。しかしながら、小脳懸濁液のウエスタンブロット解析の結果、C3毒素の発現は認められなかった。これは、トランスジーンが挿入されたゲノム領域の影響により、遺伝子発現が抑制されたことや、Cre-loxPシステムが適切に働かなかったことが原因として考えられる。そこで実験の方針を変更し、Tet-OFFシステムを用いて、テトラサイクリン依存的にC3毒素の発現を誘導できるトランスジェニックマウスの設計を行い、現在トランスジーンの作製を行った。
各種行為障害事例における病巣と障害像との関係に関する実階心理字的研究

さまざまな高次行為障害の臨床像を厳密な心理学的実験によって正確にとらえ、さらにMRIによる精密な病巣解析との関連から、以下のことが明らかにされた。1)後方連合野病変による行為障害後方連合野は、視覚、体性感覚、聴覚など、各種感覚が交流し、さらにそれらが統合されることによって複雑な機能を成立させる部位とされているが、これをさらに細分すると、1)上方後部連合野損傷では、純粋失書、運動覚性失読が生じ、ここには文字運動覚心像が存在する可能性が考えられる。2)下方後部連合野損傷では、観念運動性失行と観念性失行とが合併して起こることが多いが、それぞれが単独で生じることもある。3)内側部後方連合野では、両側楔全部の病変で体軸の感覚障害が、右側の楔前部から帯状回後部の病変では道順障害が起こる。前頭前野病変による行為障害前頭前野の損傷では、模倣行為、使用行為、道具の強迫的使用、他人の手徴候、書字過多、把握現象などが生じるが、これらはいずれも行為者の意志や意図の問題と関係している。前頭前野は大脳基底核や大脳辺緑系と線維結合をもつことから、損傷によって意志や意図の異常が生じることは十分考えられ、そうした面と行為障害の検討から、前頭前野を中心とした行為遂行のモデルが考案された(研究成果報告書参照)。今年度は、大脳病変による行為障害の中で、特にパントマイム失行、着衣失行、模倣行為の臨床病態について分析し、それらの機序を検討することから行為に関する脳内機構について考察した。なかでも物品の実際の使用や模倣行為が良好であるにもかかわらず自動詞的行為と物品使用行為のいずれにおいてもパントマイムの表出が悪いパントマイム失行は、これまでに記述されていない新しい失行症のタイプで、これが緩除進行性の変性疾患で明らかにされたことから、脳血管障害例でも詳細に検討すれば出現するかどうかが今後の課題とされた。また、物品の視覚提示によるパントマイム表出の検査で提示された物品に上肢が接近する接近現象と同時に模写課題において手本をなぞり描きしたり手本に接近して描くclosing-in現象とが緩除進行性変性疾患例で認められたが、これは正しい行為表出に必要な想起困難である場合の、代償的方略であると考えられた。3)内側部後方連合野損傷では、両側楔前部の病変で体軸の感覚障害が、右側の楔前部から帯状回後部の病変では道順障害が起こる。2)前頭前野病変による行為障害前頭前野の損傷では、模倣行為、使用行為、道具の強迫的使用、他人の手徴候、書字過多、把握現象などが生じるが、これらはいずれも行為者の意志や意図の問題と関係している。前頭前野は大脳基底核や大脳辺縁系と線維結合をもつことから、損傷によって意志や意図の異常が生じることは十分考えられ、そうした面と行為障害の検討から、前頭前野を中心とした行為遂行のモデルが考案された。(研究成果報告書参照)。
代数・位相・解析的K理論の研究

本研究課題に関する2年間の研究成果は以下の様なものである。1.1つの固定された写像に有限次元の骨格上でホモト-プとなる写像について調べ、その一般的性質を得た。2.Varadarajan集合の概念を一般化することに成功した。基本群の作用や局所化についても調べた。3.不定内積空間における作用素論に関する結果を得た。4.冨田ー竹崎の理論のある*ー代数への拡張について結果を得た。5.部分的に定義される積で閉じている族をpartial O^*ー代数とよび、その性質を調べた。非有界作用素の族を代数的に扱った。6.位数27の射影平面について調べた。大山丸方法によりある共線変換群を決定した。7.非ア-ベル群をもつ平面の例を構成し、またSherk平面の一般化について結果を得た。9.CCRー代数に例にとり、その性質を調べた。その解析をするための基本となる冨田理論がある表現において、成立することが分かった。10.旗多様体上の被拡領域において、実数値多重調和関数が正則関数の実部として表現されるための条件を決定した。11.実数値多重調和関数が正則関数の実部として表せるための条件をコホモロジ-群を用いて与えた。各研究分担者の専門を生かし、国内・国外の研究者との交流を深めることにより次の様な成果を得ることができた。1.ファントム写像の一般化として、1つの固定された写像に有限次元の骨格上でホモトープとなる写像について調べ、その一般的性質を得た。特に、極所化と完備化により特徴づけが行われることが判明した。2.物理学からの要請、特に素粒子論や相対論的量子力学に応えるための数学的分野の開拓の1つの方向に不定内積空間における作用素論の研究があるが、この分野における最近の研究成果の1つを得た。3.ヒルべルト空間上の非有界作用素族から成る部分*一代数について調べた。特に、富田一竹崎の理論のその代数への拡張について考え、いくつかの結果を得た。4.Sherkにより構成された位数27の射影平面について調べた。大山の方法によってSherk平面のspread setを書き、その共線変換群を決定した。また位数p^3(pは素数)のsemifield平面について調べた。5.作用素環における微分子の理論を含む、代数的な非可換微分幾何学を具体的な作用素環に適用することが目標であるが、その手始めとして1次元トーラス上のHomogeneous Banach algebraと呼ばれるものについてその局所環を調べた。この結果type-Cという性質をもつものについては、その構造がかなり明らかになった。6.旗多様体上の被拡領域において、次のことが解明された。(a)複素Lie群に値をもつ正則写像の解析接続に関する問題で、その正則包まで解析接続できることが判明した。(b)実数値多重調和関数が正則関数の実部として表現される(大域的に)ための条件が分った。解明が期得される多くの残された問題について次年度研究を行う。昭和64年度計画調書(継続)の研究計画・方法の欄で述べたような目標により研究を進めることにより、次の様に成果を得た。1.ペアリングのホモトピ-集合を考えることによりGottlieb集合やVaradarajan集合の概念を一般化することに成功した。ペアリングに双対な概念であるコペアリングについても調べた。さらにペアリングのホモトピ-集合に対する基本群の作用および局所化についても結果を得た。2.ヒルベルト空間上の非有界作用素の族を代数的に扱うことを考えた。部分的に定義される積で閉じている族をpartial O^・ーalgebraとよび、その性質を調べた。3.位数27の移行平面で無限直線上正則に作用するア-ベル共線変換群をもつ平面としてSherk平面を特徴付けた。上の条件で非ア-ベル群をもつ平面の例を構成し、また。Sherk平面の一般化についても結果を得た。4.多重調和関数の接続の問題について、次のことがいえた。

Dをn次元複素射影空間上のリ-マン領域の単調増加列の極限とし、D^^をDの正則包とするとき、D上の実数値多重調和関数がD上の正則関数の実部として表されるための条件はD^^の一次元コモホロジ-群が0となることである。5.Kー理論、非可換微分幾何の面から重要であると思われるCCRー代数を例にとり、その性質を調べた。その解析をするための基本となる冨田理論がある表現において成立することを見た。
酵母をモデルとした新規機能未知RNA分子群の組織的解析

我々は出芽酵母の転写単位の確定を目的に、ベクター・キャッピング法による完全長cDNA解析を行なった。その結果、世界最大の転写開始点(TSS)データを得るとともに、TSSやスプライシングの多様性などの新知見も得て、酵母ゲノムのアノテーションの向上に大きく貢献した(Miura et al. PNAS 2006)。この解析では3,303 ORF上流にTSSが同定されたのに対して、既知遺伝子間領域に由来する転写物、ORF内部にTSSを持つセンス鎖転写物、既知遺伝子に対するアンチセンス転写物が総計で1,865種も見出された。これらは、我々自身や他のグループによるタイリングアレイ実験でも確認された。これらの新規転写物の中から、機能性分子を見出すために、我々が別途作成した転写因子の恒常活性化株から得たタイリングアレイデータやChIP-Chipデータも統合して、転写因子に直接支配されている新規転写単位群を同定した。これらのうち、減数分裂への関与が示唆されたものにつき、遺伝子破壊の手法を用いて、個別に機能解析を進め、このアプローチの有効性を確認した。ベクターキャッピング法による酵母の全長cDNA解析の成果を取り纏めて、論文として発表すると同時に、UTゲノムブラウザ(http://yeast.utgenome.org/)を通してデータを公開した。我々はこの解析によって、3,5990RFを含む3,638既知遺伝子に関して11,575の転写開始点(TSS)を同定し、酵母では大半の遺伝子が複数のTSSを持つことを明らかにした。また45個の新規イントロンを見出し、4個の既知イントロンの位置を修正した。これらの中には酵母では例のないオルタナティブ・スプライシングや隣接遺伝子間でのスプライシングも含まれていた。更に、遺伝子間領域由来の新規転写単位、アンチセンス転写単位、ORF内TSSを持つ転写単位を、それぞれ少なくとも667、367、348個同定し、出芽酵母トランスクリプトームの予想外の複雑さを明らかにした。遺伝子間領域由来の新規転写単位については、その3'末端を決定して全構造を明らかにした。これらの結果は、5 'SAGEやタイリングアレイによる結果ともよい一致を示しており、高等生物で注目されてきたゲノム全般の転写や非コードRNAの解析において酵母がよいモデル系を提供できることが示唆された。こうしたトランスクリプトームの複雑性と転写単位確定における転写終結点把握の重要性に鑑みて、エマルジョンPCRとパイロシークエンスをベースとする454シークエンサーに合致したクローニング・フリーのペア・タグ・カウント法の開発に着手し、各段階の要素反応の最適化が進行中である。我々は出芽酵母の転写単位の確定を目的に,ベクター,キャッピング法による完全長cDNA解析を行なった。その結果,世界最大の転写開始点(TSS)データを得るとともに,TSSやスプライシングの多様性などの新知見も得て,酵母ゲノムのアノテーションの向上に大きく貢献した(Miura, et. al. PNAS 2006)。この解析では3,303 ORF上流にTSSが同定されたのに対して,既知遺伝子間領域に由来する転写物,ORF内部にTSSを持つセンス鎖転写物,既知遺伝子に対するアンチセンス転写物が総計で1,865種も見出された。これらは,我々自身や他のグループによるタイリングアレイ実験でも確認された。これらめ新規転写物の中から,機能性分子を見出すために,我々が別途作成した転写因子の恒常活性化株から得たタイリングアレイデータやChIP-Chipデータも統合して,転写因子に直接支配されている新規転写単位群を同定した。これらのうち,減数分裂への関与が示唆されたものにつき,遺伝子破壊の手法を用いて,個別に機能解析を進め,このアプローチの有効性を確認した。
日本滞在経験を持つ日系二世の「アメリカ従軍」の意味―ライフヒストリーを中心に

本研究課題では、日本に滞在したのちにアメリカに帰国した「帰米」と呼ばれる日系アメリカ人二世に着目し、帰米のなかでも第二次世界大戦や戦後のアジア太平洋において日本語通訳・翻訳の任務でアメリカ軍に従軍した人々の経験を考察する。日本の帝国主義やアメリカの人種主義を経験した帰米の従軍を取り上げることで、これまで二世兵士のナショナル・アイデンティティや忠誠心が疑いのないものとして自明視されてきたことを問い直す。そのために、帰米のオーラル資料、手記、自伝を用いたライフヒストリー分析をおこない、帰米がアメリカ・日本への心理的距離感をいかに保ちながら自身の従軍経験を意味づけてきたのかを明らかにしていく。
「香港文学」の誕生と香港アイデンティティの成熟に関する研究

1949年の人民共和国建国以来、1988年の台湾全面自由化までの四〇年間、香港は台湾海峡を挟む中国・台湾の間にあって国家機構の過酷な統制を免れ得た「公共空間」であり、そこでは経済発展に伴い独自の文化が成熟した。80年代に至り中国返還が問題化するにともない、市民層は香港人アイデンテイテイの確立を強く求め、その際に大きな役割を演じたのが相互に密接な関係を有する文学と映画であった。本研究は香港アイデンテイテイの形成とこれに対して文学・映画が果たした作用を歴史的に解明し、「香港文学」という概念が登場してくる過程を明かにすることにある。主に1950年代以後の香港の文化および社会を対象として、以下の課題について調査・研究を行った。(1)香港文学の成熟と香港アイデンティティの形成:主要な三作家を取り上げ、也斯に関しては論文「香港詩人のFoodscapeというファンタジイ」、李碧華に関しては共著『文学香港与李碧華』等、施叔青に関しては拙訳『ヴィクトリア倶楽部』(国書刊行会)所収の「解説」で考察した。(2)香港映画の成熟と香港アイデンティティの形成:50年代の宝田明・尤敏コンビの『香港三部作』を中心とした日本映画界との影響関係を考察した成果は、宝田明(語り手)・藤井省三(聞き手)、「インタビュー宝田明、『香港三部作』を語る」また香港映画が香港および口頭発表「張愛玲上海文壇から香港映画界へ」で報告した。また中国の20世紀史を香港映画がいかに描いているかという問題は、拙著『中国映画百年を描く、百年を読む』(岩波書店)香港の章収録の7本論文で考察した。(3)(1)(2)に関する国際シンポジウム等の開催およびその他のシンポジウムへの参加:香港大学中文系開催シンポでは「東亜的村上春樹現象」(中国語)を、国際交流基金開催のシンポでは「香港映画の黄金時代I」の報告を行い、前者の内容は論文「村上春樹と東アジア」に記した。80年代に至り中国返還が問題化するにともない、市民層は香港人アイデンティティの確立を強く求め、その際に大きな役割を演じたのが相互に密接な関係を有する文学と映画であった。本研究は香港アイデンティティの形成とこれに対して文学・映画が果たした作用を歴史的に解明し、「香港文学」という概念が登場してくる過程を明かにすることにある。戦後香港における文学映画を対象として、以下の点について調査・研究を行った。(1)「南下文化人」文学の研究葉霊鳳、劉以鬯ら大陸からやってきたエミダラント文学者をめぐり、文化関係および社会史関係の資料収集を行い、これを調査する。(2)4月8日こ梁秉鈞・嶺南大学教授(詩人の也斯としても国際的に著名)、黄淑嫻博士(香港大学比較文学)、吉川雅之講師(東大)を東大文学部に招いて香港文化講演会を開催し、現代香港文学の歴史的展開を討議した。コメンテーターには野崎歓助教授(東大)、青木真紀子講師(一橋大学)に御願いした。(3)10月11月に二か月間台湾に出張し、中央研究院・国家電影資料館などにおいて戦後の香港文化界と台湾文化界との交流の状況を調査研究する。

作家としては戦後香港・台湾で圧倒的な影響力を保ってきた張愛玲、台湾出身で70年代末に香港に渡って活躍する施叔青、香港作家でありながら台湾で多くの作品を出版している西西、董啓章らを対象とし、映画では侯孝賢らを対象とした。(4)以上の研究の成果を陳国球教授(香港科技大学)、梁秉鈞ら香港の研究者と協力して『文学香港与李碧華』という共著にまとめ、台北・麦田出版から刊行した。報告者は同書に論文4本(中国語、総計55頁)を寄稿した。本研究は3年間にわたり社会史的視点から香港の文学映画の成熟過程を明らかにするものであり、中間の年にあたる本年には、国際シンポジウムを開催して日本・香港・中国の研究者と共同討論の場を設けるいっぽう、7080年代の香港アイデンティティ形成を考察する論文を執筆した。(1)シンポジウム「香港アイデンティティの形成」の開催2001年5月18日東京千代田区日本教育会館にて東方学会が主催する「第46回国際東方学者会議」において本シンポジウムを主催し、東京大学人文社会系研究科外国人研究員の黄淑嫻博士と共に共同議長をつとめ、戦後香港文化史を検討した。発表者およびコメンテーターは以下の通りである。林少陽(東大大学院生)「劉以鬯『酒徒』中的両個空間ー香港与上海陳国球(香港科技大学教授)「収編与誤編ー中国文学史裏的香港文学」許子東(香港・嶺南大学助教授)「九〇年代香港小説与『香港意識』」梁秉鈞(嶺南大学教授)「都市文化与香港文学」(以上は北京語)黄淑嫺「権力と欲望の元でのアイデンティティ探求ー195060年代香港日本文化交流の研究」(日本語)コメンテーター吉川雅之(東大専任講師)、金文京(京大教授)、西野由希子(茨城大学助教授)、野崎歓(東大助教授、フランス文学専攻)、四方田犬彦(明治学院大学教授、映画学専攻)また論文「電影香港與李碧華」(中国語)香港を代表する作家の一人、李碧華の文学作品と香港における映画化との関係を通じて、香港アイデンティティ形成の80年代的特質を考察した。この論文は梁秉鈞編『香港文学與電影』(仮題・中国語)として2002年4月に香港・嶺南大学より刊行される予定である。9月には香港・広州に出張し、魯迅の現代香港に対する影響に関する調査を行った。本研究は3年間にわたり社会史的視点から香港の文学映画の成熟過程を明らかにするものであり、最後の年にあたる本年には、香港・東京における香港文化をめぐる国際シンポジウム開催に協力して、日本・香港・中国・欧米らの研究者と共同討論するいっぽう、戦後日港関係を俳優宝田明、作家村上春樹らを軸に考察する論文・エッセーを執筆した。また女性作家の施叔青(1945)が香港最高級の社交場であるチャイナ・クラブをモデルに描いた長篇小説『ヴィクトリア倶楽部』を翻訳出版し、これに11000字ほどの解説を付した。(1)国際シンポジウム「香港文化と香港映画」への参加2002年4月811日に香港嶺南大学と香港映画資料センター共催で行われたもので、当時東京大学文学部外国人研究員、現嶺南大学講師のMary Wong(黄淑嫺)博士の報告"Women who cross borders: MP & GI's modernity Program"に対し、藤井はMen who see women crossing bordersというコメントを行い、香港映画産業におけるモダニティと越境の問題を日港合作映画の視点から問題提起した。また会議全体の討議に参加した。
EZH1/2二重阻害による骨髄腫幹細胞を標的とした革新的治療法の開発

入手した8つのヒト骨髄腫細胞株においてEZH1/2二重阻害剤は著明な増殖抑制効果を示した。これらの細胞株におけるGI50は、EZH2特異的阻害剤であるGSK126と比較して20倍以上低値であった。この結果から、EZH2だけでなくEZH1も腫瘍の増殖に重要であることが示唆された。また、骨髄腫に対する第一選択薬であるプロテアソーム阻害剤耐性の細胞株KMS-11/BTZに対しても、EZH1/2二重阻害剤は著明に高い増殖抑制効果を示した。以上より多発性骨髄腫治療におけるキードラッグであるプロテアソーム阻害剤使用後の再発患者においてもEZH1/2二重阻害剤は有望な治療選択肢になり得る可能性が示唆された。また、ヒト骨髄腫細胞株(MM.1SおよびRPMI8226)を用いたRNAシークエンス解析を行い、WNT/β-cateninシグナルの遺伝子発現がEZH1/2二重阻害剤投与群において有意に亢進していることを突き止めた。さらに、クロマチン免疫沈降(ChIP)シークエンスを行った結果、WNT/β-cateninシグナルの多くの遺伝子がヒストンH3K27のトリメチル化を起こしており、阻害剤投与によりそれらが有意に脱メチル化される点は、2つの細胞株において共通のメカニズムであることが分かった。WNT/β-cateninシグナルが腫瘍増殖に与える影響を調べるために、脱リン酸化された活性型β-cateninを骨髄腫細胞株に過剰発現させたところ、活性型β-cateninの過剰発現により幹細胞活性の高いSide Population分画の腫瘍細胞数が有意に減少した。これらの結果から、WNT/β-cateninシグナルは骨髄腫細胞の幹細胞性維持に重要な因子の1つであり、シグナル上昇によって自己複製能が低下する結果、細胞増殖が抑制されることが示唆された。EZH1/2二重阻害剤は非常に高い増殖抑制効果を示しており、多発性骨髄腫に対する幹細胞を標的とした治療として良好な非臨床POCを取得できていると考えられるため。また、研究成果の一部を英文論文化し、発表することができた。EZH1/2二重阻害剤に対し抵抗性を示す細胞株があれば、RNAシークエンスによる網羅的解析を行い、原因遺伝子の探索を進める。また、幹細胞活性の高いSP分画をフローサイトメトリーで解析し、EZH1/2二重阻害剤によってin vitroだけでなく、in vivoの皮下腫瘍でもSP分画の細胞割合を解析し、EZH1/2二重阻害剤が幹細胞を標的とした治療として妥当であるか否かを検討する。EZH1/2のダイレクトターゲットであるWNT/β-cateninシグナルが、PDXモデルにおいても発現変化を起こすか否かを検討する。さらに、EZH1/2二重阻害によるWNT/β-cateninシグナルの上昇がSP分画特異的に起きている現象か否かについても検討する。現在、PDXモデルの樹立に成功したのは1例のみである。その理由としては、国立がん研究センター中央病院から得られる生検サンプル数が少ない点、移植生着に数ヶ月単位で時間がかかるため、非常に悪性度の高い腫瘍ではないと生着できない点が挙げられる。臨床科と協力してさらなる症例数の増加を目指す。

また、幹細胞活性の高いSP分画をフローサイトメトリーで解析し、EZH1/2二重阻害剤によってin vitroだけでなく、in vivoの皮下腫瘍でもSP分画の細胞割合を解析し、EZH1/2二重阻害剤が幹細胞を標的とした治療として妥当であるか否かを検討する。EZH1/2のダイレクトターゲットであるWNT/β-cateninシグナルが、PDXモデルにおいても発現変化を起こすか否かを検討する。さらに、EZH1/2二重阻害によるWNT/β-cateninシグナルの上昇がSP分画特異的に起きている現象か否かについても検討する。現在、PDXモデルの樹立に成功したのは1例のみである。その理由としては、国立がん研究センター中央病院から得られる生検サンプル数が少ない点、移植生着に数ヶ月単位で時間がかかるため、非常に悪性度の高い腫瘍ではないと生着できない点が挙げられる。臨床科と協力してさらなる症例数の増加を目指す。物品費の端数であり、次年度に実験用物品費として使用予定である。