hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
計装化押込み試験とモデリングによるクリープ構成式の予測

高温で使用する構造材料についてはクリープの構成式(一般的には,クリープ速度,応力,温度,組織の関係式)を求めることが重要であるが,それにはある程度の試料サイズが必要となる.しかし,実機構造部材として使用中又は開発中の耐熱材料のように,微小なサンプルしか採取できず,引張クリープ試験ができないような場合には,計装化押込み試験を実施してクリープの構成式を得ることができれば有益である.本研究の目的は,一定圧力押込みクリープ試験の結果を用いて引張クリープ或いは単軸クリープの構成式が十分な精度で予測できることを示すことである.これを達成するために,押込みクリープの擬定常状態変形に関する構成式を導出し,Al-Mg固溶体合金をモデル材料とした計装化押込み試験とFE解析を実行して,次のような結果を得た.円錐形圧子による押込み圧力と押込みクリープ速度〓inが一定(p=ps,〓in=α)のとき,圧子直下の領域における相当応力〓と相当塑性歪み速度〓の等高線パターンは幾何学的な自己相似性を保ちながら拡がっていく.このとき擬定常状態変形が実現する.圧子の押込み速さを実質的に決定しているクリープ変形領域/をコントロールボリューム(CV)といい,応力指数がn=3.0の場合,この領域の大きさは〓〓α/180と見積もられる.この領域のクリープ挙動を代表する所をCV代表点といい,この点における代表相当応力は〓=p/3.であり,代表相当歪み速度は〓=α/3.6である.また,CV内の相当塑性歪みの平均値は約004である.Al-5_3mol%Mg固溶体合金やMg基二相合金の押込み試験結果について,この方法で整理したところ,引張クリープに関する構成式(クリープ定数を含む)を十分な精度で予測することができることが示された.高温で使用する構造材料についてはクリープの構成式(一般的には,クリープ速度,応力,温度,組織の関係式)を求めることが重要であるが,それにはある程度の試料サイズが必要となる.しかし,実機構造部材として使用中又は開発中の耐熱材料のように,微小なサンプルしか採取できず,引張クリープ試験ができないような場合には,計装化押込み試験を実施してクリープの構成式を得ることができれば有益である.本研究の目的は,一定圧力押込みクリープ試験の結果を用いて引張クリープ或いは単軸クリープの構成式が十分な精度で予測できることを示すことである.これを達成するために,押込みクリープの擬定常状態変形に関する構成式を導出し,Al-Mg固溶体合金をモデル材料とした計装化押込み試験とFE解析を実行して,次のような結果を得た.円錐形圧子による押込み圧力と押込みクリープ速度〓inが一定(p=ps,〓in=α)のとき,圧子直下の領域における相当応力〓と相当塑性歪み速度〓の等高線パターンは幾何学的な自己相似性を保ちながら拡がっていく.このとき擬定常状態変形が実現する.圧子の押込み速さを実質的に決定しているクリープ変形領域/をコントロールボリューム(CV)といい,応力指数がn=3.0の場合,この領域の大きさは〓〓α/180と見積もられる.この領域のクリープ挙動を代表する所をCV代表点といい,この点における代表相当応力は〓=p/3.であり,代表相当歪み速度は〓=α/3.6である.また,CV内の相当塑性歪みの平均値は約004である.Al-5_3mol%Mg固溶体合金やMg基二相合金の押込み試験結果について,この方法で整理したところ,引張クリープに関する構成式(クリープ定数を含む)を十分な精度で予測することができることが示された.本研究の目的は,計装化押込み試験法によって,米粒ほどの微小試片から引張クリープの構成式(クリープ速度,応力,温度,微視組織の関係)を予測できることを示すことである。これを実現するため,モデル材料としてAl-Mg固溶体合金(応力指数η〓3)を選び,押込みクリープ試験とその有限要素シミュレーションを実施した.主な結果を列記する.(1)円錐形圧子による押込み圧力pと押込みクリープ速度〓が一定なとき(ρ=ρs,〓=〓(s)〓α,α:荷重増分パラメーター),圧子直下の領域において,相当応力δと相当塑性歪み速度〓の等高線パターンは押込み深さに対応して幾何学的な自己相似性を保ちながら拡がっていく.このときδと〓の分布は押込みクリープ中に変化しないと見なせるため,擬定常状態変形が実現している.(2)押込み速度を実質的に支配する領域をコントロールボリューム(CV)と呼ぶことにする.その範囲は〓≧α/180で定義でき,αに比例することから,荷重速度に依存することが分かる.(3)CV内の変形挙動を代表する点のδと〓には,各々,δ=C_1ρs=ps/3,〓C_2〓in(s)=α/3.6という関係がある.ただし,C_2値は応力指数に依存する,(4)弾塑性FEシミュレーションから得られた圧子の押込み変位の時間変化:押込みクリープ曲線は,剛完全塑性体に関する理論から導かれた式でよく表すことができる.また,この曲線を理論式によって解析して得られた応力指数πは,有限要素に設定したη値と一致する.(5)Al-Mg固溶体合金に関する押込み

クリープ試験から得られたクリープの活性化エネルギーと応力指数は,従来の引張クリープ試験による結果とよく一致する.(6)押込みクリープ試験によるデータ(ps,〓in(s),T)から,δ=ρs/3と〓=α/3.6の関係を用いて変換することにより,引張クリープの構成式(δ,〓,T)を予測することができる.ここで予測された引張クリープの構成式は,これまでに引張クリープ試験から得られた式とほぼ一致する.本研究の目的は,押込みクリープ試験の結果から引張クリープの構成式(一般に,クリープ速度,応力,温度,組織の関係式)を予測できることを示すことである.この方法を確立することは,学術的な波及効果が期待できるだけでなく,例えば希土類を含む新材料の開発研究のように少量の試料しか入手できない場合に役立ち,実用的にも重要である.この目的を達成するために,押込みクリープの擬定常状態変形に関する構成式を導出し,一定圧力押込み試験と有限要素シミュレーションを実行した.押込み圧力ρと押込みクリープ速度αが一定となるとき,圧子直下の領域における相当塑性歪み速度と相当応力の等高線パターンは,押込み変位の増大と共に,幾何学的な自己相似性を保ちながら拡がっていくことが見出された.この事実は円錐形圧子の周囲で擬定常状態変形が生じることを意味する.圧子の押込み速さを実質的に決定しているコントロールボリューム(CV)内のクリープ挙動を代表する点をCV代表点とし,塑性力学的な見地から,この点を圧子下の領域でρ/3の相当応力(以後,代表応力という)が生じている場所に定義した.このCV代表点における相当塑性歪み速度(以後,代表歪み速度という)は,押込みにともなう表面変形が無視できるほど小さく,クリープの応力指数が3の場合,α/3.6ある.Al-Mg固溶体合金の押込みクリープ試験結果を用いて,クリープの応力指数と活性化エネルギーの値を求めると,それらは他の研究者によって報告されている引張クリープ試験の結果とほぼ一致する.また,上記で得た代表応力と代表歪み速度の値は,各々,引張クリープ試験の応力とクリープ速度の既報値に一致する.これらの結果は,押込みクリープ試験によれば,少量しか入手できない新材料のクリープ特性値を正しく抽出できるだけでなく,一軸クリープの構成式を十分な精度で予測可能なことを示している.高温で使用する構造材料についてはクリープの構成式(一般に,クリープ速度,応力,温度,組織の関係式)を求めることが重要であるが,それにはある程度の試料サイズが必要となる.しかし,実機構造部材として使用中又は開発中の耐熱材料などのように,微小なサンプルしか採取できず,引張クリープ試験ができないような場合には,計装化押込み試験を実施して引張クリープの構成式を得ることができれば大変有益である.本研究の目的は,一定圧力押込みクリープ試験の結果から引張クリープ或いは単軸クリープの構成式が十分な精度で予測できることを示すことである.これを達成するために,押込みクリープの擬定常状態変形に関する構成式を理論から導出し,Al-Mg固溶体合金をモデル材料とした計装化押込み試験とFE解析を実行して,次のような結果を得た.円錐形圧子による押込み圧力pと押込みクリープ速度αが一定のとき,圧子直下の領域における相当応力σと相当塑性歪み速度εの等高線パターンは幾何学的な自己相似性を保ちながら拡がっていく.このとき擬定常状態変形が実現する.圧子の押込み速さを実質的に決定しているクリープ変形領域をコントロールボリューム(CV)といい,応力指数が3.0の場合,その領域の大きさはε≧α/180と見積もられる.クリープ挙動を代表する所をCV代表点といい,この点における代表応力はp/3であり,代表歪み速度はα/3.6である.
河口・沿岸域におけるシルト性底質の凝集及び輸送過程に関する研究

1.本研究では,シルト性懸濁液の凝集と,凝集した沈降・堆積した底泥の波による浮遊とに関する二種類の実験を行なった.2.凝集実験では,現地の現象を模擬するため,懸濁粒子としては2種類の粘土鉱物(カオリン,ベントナイト)と現地感潮域4か所から採取した底泥を用い,懸濁水としては含有イオンを実海水と同じに調整した人工海水を用いた.得られた主要な結果は次の通りである.(1)全ての懸濁液で凝集がみられ,海水に凝集力があることが確認された.(2)粘土鉱物懸濁液では海水と混合後, 23時間で粒度分布が平衡に達した.この結果,現地で凝集反応が完了する時間的目安が得られた.(3)全ての懸濁液で人工海水濃度10%で既に凝集がみられ, 3050%以上では粒径はほぼ一定となった.現地では,感潮域の上流部分から凝集が生じると推定される. (4)粘土鉱物に比して現地底泥は極めて大きなフロックを形成することがわかった.これは現地底泥の含む有機物の作用と考えられたが,有機物を除去した現地底泥懸濁液では逆にフロックの大型化がみられる等,現地での凝集機構は単純な要因では説明できない.3.次に浮遊実験は,この目的で新たに製作したアクリル製の波動水槽を使い,現地海水と水道水のそれぞれを用いて行なった.底泥としてはベントナイトを水槽水と同じ水で練り混ぜて含水比を調整したものを用い,これを水槽中に長さ3mにわたり敷きつめ,水深は27cmと19cmで波を24時間経続して作用させた.得られた主要な結果は次の通りである.(1)海水による実験では,真水の場合のような底泥表面の破壊は起こらず,底泥は波作用後数分以内に波動を始める.これは海水の場合,真水の場合より底泥の流動性が大きくなるためと考えられる.(2)海水の場合,底泥の質量輸送がみられ,一方,底泥の含水比の経時変化はほとんど出ない.(3)まい上りは海水の場合の方がはるかに少ない.1.本研究では,シルト性懸濁液の凝集と,凝集した沈降・堆積した底泥の波による浮遊とに関する二種類の実験を行なった.2.凝集実験では,現地の現象を模擬するため,懸濁粒子としては2種類の粘土鉱物(カオリン,ベントナイト)と現地感潮域4か所から採取した底泥を用い,懸濁水としては含有イオンを実海水と同じに調整した人工海水を用いた.得られた主要な結果は次の通りである.(1)全ての懸濁液で凝集がみられ,海水に凝集力があることが確認された.(2)粘土鉱物懸濁液では海水と混合後, 23時間で粒度分布が平衡に達した.この結果,現地で凝集反応が完了する時間的目安が得られた.(3)全ての懸濁液で人工海水濃度10%で既に凝集がみられ, 3050%以上では粒径はほぼ一定となった.現地では,感潮域の上流部分から凝集が生じると推定される. (4)粘土鉱物に比して現地底泥は極めて大きなフロックを形成することがわかった.これは現地底泥の含む有機物の作用と考えられたが,有機物を除去した現地底泥懸濁液では逆にフロックの大型化がみられる等,現地での凝集機構は単純な要因では説明できない.3.次に浮遊実験は,この目的で新たに製作したアクリル製の波動水槽を使い,現地海水と水道水のそれぞれを用いて行なった.底泥としてはベントナイトを水槽水と同じ水で練り混ぜて含水比を調整したものを用い,これを水槽中に長さ3mにわたり敷きつめ,水深は27cmと19cmで波を24時間経続して作用させた.得られた主要な結果は次の通りである.(1)海水による実験では,真水の場合のような底泥表面の破壊は起こらず,底泥は波作用後数分以内に波動を始める.これは海水の場合,真水の場合より底泥の流動性が大きくなるためと考えられる.(2)海水の場合,底泥の質量輸送がみられ,一方,底泥の含水比の経時変化はほとんど出ない.(3)まい上りは海水の場合の方がはるかに少ない.
統合失調症の診断と適切な薬物治療への橋渡しとなるバイオマーカーに関する研究

家族性の統合失調症において、多くの糖代謝、脂質代謝酵素に異常が見つかっていることに注目し、統合失調症患者の血液を用いてバイオマーカーを探索した。28-29年度までの検討において、複数の患者赤血球中で、メチルグリオキサール(MGO)を前駆体として生成するアルグピリミジン(ARP)構造を有する糖化タンパク質の蓄積を見出したことから、MGOが糖化ストレスの原因物質である可能性が推定された。最終年度は、血液中診断マーカーとして、統合失調症患者血漿を試料としてMGOを測定すると共に、MGOの代謝に焦点を絞り、構築されたカルボニルストレス性統合失調症モデルマウス(食餌制限を受けたGLO1ノックアウト)を用いて予備検討を行った。その結果、特異的な低分子カルボニル化合物としてモデルマウス脳中においてMGOレベルの有意な上昇を見出した。それを前駆体とする糖化タンパク質が前頭前皮質、海馬、脳幹及び線条体で局所的に蓄積していることが判った。この結果から、今後、MGOにより糖化を受ける脳内のタンパク質を同定し、その影響を明らかにすることが、カルボニルストレス性統合失調症の発症機序解明の上で重要な位置を占めることが示唆された。3年に渡る研究から、1患者血漿中のカルボニル化タンパク質量が有意に高く、若年ほどその傾向が顕著であり、特にIgG軽鎖及びアルブミンのAGEs化が亢進していることを明らかにした。2原因物質の1つと考えられたMGOに対する高感度な定量法を開発した。3複数の患者赤血球中でARP化したタンパク質の蓄積を発見し、そのタンパク質を同定した。4カルボニルストレス性統合失調症モデルマウスを用いた予備検討において、特異的な低分子カルボニル化合物として、予想していた脳内MGOレベルの有意な上昇を見出した。以上の成果は、カルボニルストレス性統合失調症の診断、治療の橋渡しに繋がるものと考えられる。28年度の研究において、統合失調症患者血漿中のトータルカルボニルタンパク質量が、比較的若い患者において高い傾向にあることが明らかとなった。一方で、赤血球中のカルボニルタンパク質量には、統合失調症患者と健常人において、有意な差は見られなかった。しかし、各種のAGEs抗体を用いたウエスタンブロット法による検討の結果、赤血球中の58kDのタンパク質が、アルグピリミジン化しており、そのシグナルが、健常人に比べ明らかに強い統合失調症患者検体が見出された。神経細胞を用いた検討においては、メチルグリオキサールが誘導するカルボニルストレスに対し、ポリスルフィド(H2Sn)などの結合型イオウ種が、防御的に働くことが明らかとなった。更に、転写因子Nrf2の活性化剤であるカルノシン酸およびCDDO-Imを、ヒト由来神経細胞株SH-SY5Yに前処理するとき、メチルグリオキサール処理による細胞毒性が軽減されることを明確にした。また、Nrf2活性化効果を有する結合型イオウ種であるポリスルフィドを用いて同様の検討を行った。その結果、メチルグリオキサールが誘導する細胞毒性に対する結合型イオウの効果には、Nrf2系の活性化のみならず、直接的な消去作用が関与していることが示唆された。加えて、Nrf2活性化によるカルボニルストレスの軽減、抑制効果においては、グルタチオン合成の律速酵素であるGCLと、シスチンのトランスポーターであるxCTの発現増大による細胞内グルタチオン濃度の上昇が、最も重要な要因であることを初めて明らかにした。カルボニルストレス性統合失調症の、新規なバイオマーカーとして、統合失調症患者赤血球中に見出したアルグピリミジン化されたタンパク質の精製を試み、LC-MS/MSを用いた解析から、3種のタンパク質を同定することができた。アルグピリミジン化を受けているものが、その中のどのタンパク質であるのかについて、現在解析中である。また、メチルグリオキサールが誘導する、神経細胞に対するカルボニルストレスが、Nrf2活性化剤の前処理により軽減されることを、メチルグリオキサールの蓄積により生じるAGEsである、MGH1およびCEL化されたカルボニル化タンパク質の生成、蓄積量の比較から証明することに成功した。29年度の研究においては、カルボニルストレス性統合失調症の原因成分である可能性が推定されている、メチルグリオキサール(MG)の測定法を開発し、その実用化のための検討を行なった。MGはグルコースから解糖系あるいはメイラード反応の過程で、非酵素的に生じるα-ジカルボニル化合物である。本研究では、血中や脳内のMG濃度の変化及び蓄積について調べるため、簡便かつ高感度な蛍光ラベル化HPLC法を考案した。本法は、従来の方法に比べ簡便で、精度、再現性も良好であった。健常人血漿に本法を応用したところ、健常人におけるMG濃度は0.0240.258μM (mean ±SD = 0.098 ±0.066)の範囲で、これまで報告された値に近似するものであった。今後、本法を用いて、統合失調症患者血漿及びモデルマウス脳の各部位などにおける遊離MGの測定に用いていく予定である。一方、28年度の研究で、一部の難治性統合失調症患者の赤血球中において、抗アルグピリミジン(ARP)抗体で検出される56kDのタンパク質が見出された。アルグピリミジンはα-ジカルボニル化合物であるMGとタンパク質のアルギニン残基との反応で生成するAGEs構造の1つである。

そこで、29年度はその56kDのARP化タンパク質の精製、同定を試みた。患者血球より本タンパク質を精製し、詳細に解析した結果、LC-MS/MS法によりARP化タンパク質がselenium binding protein 1(SBP1)であることが解かった。統合失調症の患者においては、測定した22人中7人においてARP化SBP1の蓄積が認められたが、腎不全の患者赤血球においても有意なARP化SBP1の蓄積が見られたことから、赤血球中ARP化SBP1の蓄積は、統合失調症特異的ではないものの、新たなカルボニルストレス性疾患の指標となることが示された。カルボニルストレスマーカーとなる可能性のある、アルグピリミジン化タンパク質の同定に成功した。その蓄積は、統合失調症患者の約30%において観察された。また、カルボニルストレス性統合失調症の原因物質の1つであると予想される代謝物であるMGの分析法を確立したことにより、臨床検体の測定をはじめるに至った。家族性の統合失調症において、多くの糖代謝、脂質代謝酵素に異常が見つかっていることに注目し、統合失調症患者の血液を用いてバイオマーカーを探索した。28-29年度までの検討において、複数の患者赤血球中で、メチルグリオキサール(MGO)を前駆体として生成するアルグピリミジン(ARP)構造を有する糖化タンパク質の蓄積を見出したことから、MGOが糖化ストレスの原因物質である可能性が推定された。最終年度は、血液中診断マーカーとして、統合失調症患者血漿を試料としてMGOを測定すると共に、MGOの代謝に焦点を絞り、構築されたカルボニルストレス性統合失調症モデルマウス(食餌制限を受けたGLO1ノックアウト)を用いて予備検討を行った。その結果、特異的な低分子カルボニル化合物としてモデルマウス脳中においてMGOレベルの有意な上昇を見出した。それを前駆体とする糖化タンパク質が前頭前皮質、海馬、脳幹及び線条体で局所的に蓄積していることが判った。この結果から、今後、MGOにより糖化を受ける脳内のタンパク質を同定し、その影響を明らかにすることが、カルボニルストレス性統合失調症の発症機序解明の上で重要な位置を占めることが示唆された。3年に渡る研究から、1患者血漿中のカルボニル化タンパク質量が有意に高く、若年ほどその傾向が顕著であり、特にIgG軽鎖及びアルブミンのAGEs化が亢進していることを明らかにした。2原因物質の1つと考えられたMGOに対する高感度な定量法を開発した。3複数の患者赤血球中でARP化したタンパク質の蓄積を発見し、そのタンパク質を同定した。4カルボニルストレス性統合失調症モデルマウスを用いた予備検討において、特異的な低分子カルボニル化合物として、予想していた脳内MGOレベルの有意な上昇を見出した。以上の成果は、カルボニルストレス性統合失調症の診断、治療の橋渡しに繋がるものと考えられる。統合失調症患者より採取した赤血球中で、アルグピリミジン化を受けているタンパク質を同定するため、免疫沈降法などを用いて解析し、そのタンパク質を同定する。また、マウス脳内においてカルボニル化を受けやすいタンパク質を同定するため、メチルグリオキサールの投与を行いカルボニルタンパク質の精製、同定を試みる。カルボニル化され易い脳内タンパク質が特定された場合、そのタンパク質の機能を調べ、統合失調症との関わりについて考察し、検討を進める予定である。
生活習慣に関するライフスタイルと体組成および運動機能との関係

本研究では、ライフスタイルに関連する事項として体組成、運動機能、食行動、健康関連QOL、運動に対する自信の程度および負担の程度、活動量をとりあげ、メタボリックシドロームに該当する者の特徴を多面的にとらえることを目的とした。その結果、運動に関す指導において、散歩などの活動量を上げるための運動指導だけでは、筋力が低下しているため下肢の関節に痛みが生じる可能性が示唆された。また、食事に関する指導でも、食事内容の指導のみならず、食行動(特に体質に関する知識と空腹満腹感覚のズレ)についての評価と指導が重要であることが示唆された。目的:本研究では,4060歳代の男女を対象として,メタボリックシンドローム(MS)の保健指導対象者に合致した者とそうでない者の「体組成」,「運動機能」の特徴を明らかにすることを目的とした。対象者:4062歳の男女92名(男性:51名,女性41名)とした。方法:A区職員の健康診断結(健診)果から腹位,BMI,血糖,中性脂肪,HDLコレステロール,血圧,喫煙歴を調査した。体組成計測では,体脂肪率,推定脂肪量,推定筋肉量,基礎代謝量を測定した。運動機能測定では片足立位保持時間,反復起立着座,Timed Up &Go(TUG),最大歩行速度,3分間歩行を測定した。また,「運動に対する自信の程度」と「運動に対する負担度」を調査した。分析方法:健診結果から保健指導の階層化分類((1)積極的支援:9名,(2)動機付け支援:12名,(3)情報提供:7名)と,非該当者について(4)規定値外2つ以上:22名,(5)規定値外1っ:12名,(6)問題なし:30名に分類し,体組成と運動機能について分散分析にて比較した。結果:体組成では,推定脂肪量・推定筋肉量・基礎代謝量で(1)(6)間に有意差が確認され,(1)積極的支援では脂肪量・筋肉量・基礎代謝量ともに(4)(5)に比して有意に高いことが示された(ρ<.05)。運動機能について,最大歩行速度では(1)積極的支援のほうが有意に速いことを示した(ρ<.05)。「運動に対する自信の程度」と「運動に対する負担度」に有意差はなかった。本研究の結果より,(1)積極的支援の特徴として,脂肪量も多いが筋肉量と基礎代謝量も多く,歩行速度が速いことが明らかとなった。また,運動に対する自信の程度と負担度には(1)(6)で相違が無いことが明らかとなった。したがって,(1)積極的支援に対するMS指導では,単なる運動指導ではなくライフスタイルに関する指導も重要であることが推測された。目的:本研究では、ライフスタイルに関連する事項として特に運動機能、食行動、健康関連QOLをとりあげ、メタボリックシンドロームに該当する者の特徴を多面的にとらえ、これらの側面における関連性を明らかにすることを目的とした。対象者:対象は公募にて協力の得られた97名(40歳代: 57名、50歳代: 29名、60歳代: 9名であった。方法:健康診断結果から腹位、BMI、血糖、中性脂肪、HDLコレステロール、血圧、喫煙歴を調査した。運動機能測定では握力、片足立位保持時間、反復起立着座、Timed Up & Go(TUG)、5m歩行時間、3分間歩行距離を測定した。健康関連QOLについての調査ではSF-36を使用した。分析方法:保健指導対象者に該当する群(以下保健指導対象者群)と該当しない群(以下非該当者群)に分類し、各測定項目における両群間の差を検定した。また、運動機能と食行動については両群における測定項目ごとの相関関係を分析した。成果:保健指導対象者の選定基準に該当した者は(保健指導対象者群)30名(男性25名、女性5名)であった。保健指導対象者に該当する女性が少なかったため、分析は男性のみで行った。握力体重比・CS-30・開眼片足立位保持時間・TUG・3分間歩行距離において保健指導対象者群と非該当者群間に有意差が認められた(p<0.05)。体質に関する知識、食動機、空腹・満腹感覚、総合計において保健指導対象者群と非該当者群間に有意差が認められた(p<0.05)。また、運動機能測定において、非該当者群ではCS-30(下肢筋力)と5m歩行時間・TUG・3分間歩行距離に有意な相関関係が認められた(p<0.05)が、保健指導対象者群ではこれらの間に有意な相関関係は認められなかった。食行動については、保健指導対象者群で食動機と他の項目すべてに有意な相関関係が認められた。

これらのことから、運動機能については、通常は筋力と歩行能力が相関関係にあるが、保健指導対象者群では相関関係がないため、運動に関して負担を強いていることが推測された。また、食行動の改善指導に関しては、食動機のズレを改善させることが、他の食行動の改善につながる可能性が示唆された。
全長デスモプラキンcDNAのクロ-ニングとその分子構造解析および遺伝子マッピング

ウシ鼻より精製したデスモソ-ムを免疫したマウスより作成した一種のモノクロ-ナル抗体によりマウスケラチノサイトcDNAライブラリ-をスクリ-ニングして9種類の陽性cDNAクロ-ンを得た。当初、これらのcDNAはデスモプラキンをコ-ドするものと考えられたが、その後の詳細な検討により、これらは最近発見された新しいデスモソ-ム接着板蛋白デスモヨ-キンをコ-ドすることが判明した。これは、これらのcDNAがデスモプラキンのものとは異なる巨大な約20kb mRNAとハイブリダイズすること、また、スクリ-ニングに用いた抗体の表皮抽出680kD蛋白およびcDNAより産生された融合蛋白との反応がデスモヨ-キン特異的モノクロ-ナル抗体と全く同一であることより確認された。これらのcDNAの一種DY6の全塩基配列を決定した。DY6は3693bpよりなり、デスモヨ-キンC末端球状部の一部を占める1231アミノ酸をコ-ドしていた。これらの配列は既知の配列と全く相同性を認めなかった。DY6は約10の特徴的な128残基繰り返し配列よりなり、これらの配列は、さらに4部位に分割され相互に高度の保存性を有していた。この128残基繰り返し配列の中には略7残基繰り返し構造があり、これはcoioledーcoil構造を形成する7残基配列とは全く異なるユニ-クなものであった。この略7残基構造からは、この部位が18のβ鎖とβタ-ンがantiparallelに繰り返し、中心部に非極性残基・表面に極性残基が見られる、非常にコンパクトな球状部位を形成すると予想された。さらに、その表面の規則的な酸性・塩基性残基の分布により他のデスモヨ-キンないしデスモソ-ム構成蛋白分子と電気的に結合し、デスモト-ム接着板形成に重要な役割を果たすと考えられた。現在、他のcDNAクロ-ンについても研究を進めているが、今後多数のクロ-ンの単離によりデスモヨ-キン全長cDNAを解析することはデスモソ-ムの構造・機能の解析に不可欠であると思われる。私共はウシ鼻表皮デスモソ-ムで免疫したマウスリンパ球を用いてモノクロナ-ル抗体を作成した。この抗体はデスモソ-ム接着板に反応することより抗デスモプラキン抗体と考えられたが、その後の詳細な分子量の測定の結果、最近確認された新しいデスモソ-ム構成蛋白デスモヨ-キンに反応することが判明した。この抗体による免疫スクリ-ニングにてマウス表皮細胞cDNAライブラリ-より9種の陽性クロ-ンを得た。これらのクロ-ンは約14kbのmRNAとハイブリダイズすることより、最近報告された8kbないし9kbのデスモプラキンと明らかに異なる。これらのクロ-ンのうち最大の3.2kbインサ-トを有するクロ-ン6をpBluescriptにサブクロ-ニングし、ExoIII/Mung bean nucleaseにより種々のデレ-ション変異株を作成後、dsDNAないしssDNAをSangerのジデオキシチェ-ンタ-ミネ-ション法により塩基配列を決定し、更に、アミノ酸配列を決定した。この結果、このクロ-ンは1060アミノ酸よりなるORFを有していた。

これらのDNAおよびアミノ酸配列はほかのデスモソ-ム蛋白を含む既報告とまったく相同性を認めず、33から66アミノ酸よりなる著明な相同性を有する6個の繰り返し配列を有していた。以上より、このクロ-ンはデスモヨ-キンをコ-ドし、この蛋白はデスモソ-ム形成上重要な全く新しい構造を有していることが示された。今後、ほかの8クロ-ンの解析を進めると共に、PCRないしプライマ-伸長法により5'及び3'にむけて伸長する。また、異なる抗体により他部位のクロ-ンを単離し、全長cDNAを明らかにし、この蛋白の遺伝子および分子構造を解析する。同時にセルソ-タ-によりソ-ティングしたヒト染色体を用いてヒト染色体へのマッピングをする予定である。昨年度、私共は抗デスモソ-ムモノクロ-ナル抗体を用いたマウスcDNAライブラリ-のスクリ-ニングにより9種のcDNAクロ-ンを得た。当初、これらのcDNAはデスモプランキンをコ-ドするものと考えたが、これらのcDNAより作成した融合蛋白がよく知られた抗デスモヨ-キンモノクロ-ナル抗体とも反応したことより、デスモヨ-キンcDNAであることが確認された。これらのcDNAの一つのDY6の全塩基配列を決定した。DY6は3693bpよりなり、これはデスモヨ-キンC末端球状部の一部を占める1231アミノ酸をコ-ドしていた。これらの配列は既知配列のデ-タベ-スの比較で類似の配列を全く認めなかった。DY6は約10の特徴的な128残基繰り返し配列よりなり、これらの配列は、さらに4部位に分けられ、それぞれの部位は相互に高度の保存性を有していた。この128残基繰り返し配列中には略7残基繰り返し構造があり、これはcoioledーcoil構造を形成する7残基配列とは全く異なるユニ-クなものであった。この部位の2次構造は18のantiparallel β構造により表面に極性残基、中心部に非極性残基が集合する非常にコンパクトな球状構造と予測された。さらに、その表面には繰り返し出現する酸性と塩基性残基の集合した部位により他のデスモソ-ム構成蛋白と電気的に結合すると考えられた。現在残りの9クロ-ンのうちDY6と異なる部位をコ-ドするDY8とDY15の塩基配列決定を進めている。また、別の抗デスモヨ-キンモノクロ-ナル抗体7Dー5Bにより得られた全く別の部位をコ-ドすると思われるcDNAも検討中である。さらに、これらのcDANをプロ-ブとして新しいクロ-ンを単離し、デスモヨ-キン全遺伝子を決定することは、この新しいデスモソ-ム接着板蛋白の全構造・機能を解析する上で重要なばかりでなく、表皮細胞接着の最も重要な装置であるデスモソ-ムの研究にも大きく貢献すると思われる。
神経変性過程における末梢性ベンゾジアゼピン受容体機能の解明

1末梢性ベンゾジアゼピン受容体(PBR)作動薬Ro5-4864の神経保護作用の確認カイニン酸神経損傷モデルおよび銅キレーターによる脱髄モデルを対象にPBRリガンドの防御作用の有無について確認をおこなった。Ro5-4864の投与頻度、投与期間の延長を試みたが、いずれの処置でも脳内の神経変性に対する防護作用は認められなかった。用量的に脳内のPBRに十分作用しており、またカイニン酸神経損傷モデルでは痙攣スコアを悪化させる傾向にあった。従って神経変性時に増加するPBRは神経変性とは独立して機能するか、もしくはPBRの活性化は症状を増悪させる可能性があると示唆された。2PBR欠損マウスの作成PBRの欠損は致死であるため、Cre-LoxPを用いたPBRのコンディショナル欠損マウスの作成をおこなった。ターゲティングベクターを作成し、5つの組み換えES細胞のクローンを作成した。このクローンをinjectionしたところ3匹のキメラマウスの作成に成功した。本キメラマウスに野生型マウスを掛け合わせたところ7匹のヘテロ欠損型マウスを得ることができた。現在これらのF1同士を交配しホモ欠損マウスの繁殖を試みている。1エタノール脳内局所注入モデルによる末梢性ベンゾジアゼピン受容体(PBR)のグリア細胞局在エタノールをラット線条体に局所注入することにより組織損傷を誘発し、損傷領域で過剰発現するPBRの細胞局在について、オートラジオグラフィー法および免疫組織化学染色により検証を行った。PBRリガンドDAA1106を用い受容体結合量を測定したところ損傷3日後から結合が増加しはじめ、7日後最大となり、結合の増加は3月後も確認された。またアストロサイトおよびミクログリアの細胞数をカウントしたところ、PBR結合はミクログリア細胞数と有意な相関が見られた。また、蛍光二重染色によりPBRと各グリア細胞と共染色したところ、ミクログリア内のPBRは3月後まで持続的に発現しているのに対し、アストロサイト内のPBRは5-7日に発現したのち、14日以降速やかに消失した。これらの結果からPBRはグリア細胞の増殖と深く関わっており、グリア細胞機能を探る上で重要なマーカーであることが明らかとなった。2 PBR作動薬Ro5-4864の神経保護作用の確認カイニン酸神経損傷モデルおよび銅キレーターによる脱髄モデルを対象にPBRリガンドの防御作用の有無について確認をおこなったものの、いずれのリガンドの処置によっても効果を確認することができなかった。現在用量について再検討をおこなっている。3 PBR欠損マウスの作成PBRの欠損は致死であるため、Cre-LoxPを用いたPBRのコンディショナル欠損マウスを作成している。このクローンを480個injectionしたところ8匹のキメラマウスの作成に成功した。しかしながらいずれのキメラマウスもgermlineにのってこなかったため、electoroporation段階からやり直しをおこなっている。
先端技術を用いた東アジアにおける農耕伝播と受容過程の学際的研究

この研究は圧痕法の実証的研究推進のための二つの主な目的をもつ。一つはモンゴル、ロシア、韓国と日本の初期農耕を圧痕法によって探ること、そしてもう一つは植物考古学研究における圧痕法の理論的・方法論的特質を確立することである。研究の結果、各地における初期農耕の導入時期とその特徴および今後の問題点を明らかにできた。さらには貯蔵食物害虫を初めとする家屋害虫の成立過程に関する証拠を得ることができた。また、圧痕法の特質を明らかにし、軟X線による調査を基軸にした圧痕の悉皆調査法を開発した。これらは今後の圧痕法による研究の推進の基礎となる。本年度の国内での調査は圧痕法の理論・方法論の確立のため昨年度から継続している宮崎市本野原遺跡の圧痕調査を実施し、現在も継続中である。本遺跡においては報告済みの資料と未報告の資料において、圧痕の出現率がどれほど異なるかを実証中である。同様に佐賀市東名遺跡では報告資料では検出できなかったコクゾウムシ属甲虫やダイズ属種子の圧痕を検出することができ、報告資料では圧痕組成の全体像を示さないことを立証した。また、三内丸山遺跡における未炭化種子・炭化種子との比較を行い、圧痕に人為的な利用植物(栽培植物も含む)や家屋害虫が入りやすい傾向があることを立証し、論文化した。これには三内丸山遺跡における圧痕調査が基礎となっており、これらの資料も公表した。また富山市小竹貝塚出土土器の圧痕調査の結果、混入種子の存在を明らかにし、今後の圧痕の調査法に関する方法の開発に結び付いた。国内ではこのほか縄文時代を中心とした20か所ほどの遺跡出土資料を調査し、在来植物の栽培化や大陸性穀物の流入時期に関する多くの情報を得ることができた。また、中国浙江省田螺山遺跡において土器圧痕調査を行い、良好なイネ圧痕資料を得ることができた。さらにはモンゴルヘンティ県の遺跡採集土器にキビ圧痕を検出し、これら地域においても栽培植物検出に圧痕法が有効な手法であることを実証できた。韓国における国際学会で圧痕法を基軸とした縄文農耕の問題についての発表を行い、アジア諸国への本研究の情報発信を行うとともに、国内の研究者や一般市民向けの研究発表や講演を行い、研究成果の公開を積極的に実施した。本年度は、青森県三内丸山遺跡、宮崎市本野原遺跡など縄文時代の遺跡における圧痕調査において、コクゾウムシ属甲虫を含む家屋害虫の圧痕を多数検出することができた点が大きな成果であった。これはこれまで生体化石としては検出しにくかった家屋害虫が土器圧痕として残りやすいことを証明したもので、土器製作の環境や土器づくりに対する先人の意識についての基礎的な資料を得ることができた。これらの成果を受けて、低湿地遺跡から出土する昆虫や種実の生体化石と台地上の遺構から出土する炭化種実、それらと土器圧痕として検出される昆虫や種実の性質の違いについての論考をまとめた。さらに土器づくりの環境の中でどのようにして圧痕が残るのかについても論考を発表した。沖縄での調査では弥生時代古墳時代相当期の野生雑草の種実を検出するにとどまったが、徳之島面縄貝塚において縄文時代後期相当期のコクゾウムシ属圧痕を検出することができた。コクゾウムシは五島列島の中島遺跡から縄文時代後期例を検出しており、九州北西部の島嶼地域にも存在することが明らかになった。さらに、韓国での圧痕調査によって、韓国最古および最古級のキビ・アワ資料を検出し、これまで考えられていた年代より1000年1500年古い時期に華北型の乾燥地農耕が朝鮮半島南部まで拡散していた事実を明らかにし、学会の注目を集めた。この成果は韓国における東三洞貝塚および飛鳳里遺跡の発掘調査報告書の中で公表された。これ以外に凡方貝塚においても新石器時代初期の雑穀資料を検出しており、今後、韓国農耕史の書き換えが必要と思われる。縄文時代晩期弥生時代早期の資料について福岡市・熊本市の複数遺跡において圧痕調査を行い、イネ以外にアワ・キビを検出している。また、これまで検出した圧痕およそ1300点を再度点検し、再同定を行った。この結果については、本年度報告書を作成予定である。本年度は、圧痕法の理論・方法論の確立のための取り組みとして、軟X線装置を導入して、悉皆調査を開始した。その検証事例として、富山市平岡遺跡において一部資料を軟X線により調査し、肉眼調査との圧痕検出率の差についての情報を得て、報告を行った。また、同様の目的で佐賀県嘉瀬川ダム関連遺跡出土資料を同手法によって継続調査中である。また、本調査法によって得られたデータをもとに、「圧痕の意図的混入」についての検証法について一定の見通しを得て、論文を投稿中である。もう一つの方法論確立のための試みである、報告済み資料と未報告資料の圧痕出現率の差の検証については、対象遺跡である宮崎市本野原遺跡において調査を完了した。今後論文作成の予定である。資料調査に関しては、国内においては縄文時代を中心とした10箇所ほどの遺跡において圧痕調査を実施し成果を得ている。また、国外では、モンゴル科学アカデミー考古学研究所所蔵の匈奴時代の土器の圧痕調査を実施し、6個の完形土器からキビ有ふ果圧痕を検出することができた。

また、もう一つの目的である、同定マニュアルの作成に関しては、道免き谷津遺跡と雷下遺跡の文時代弥生時代の植物遺体の調査をもとに、写真撮影を行い,同定マニュアルに使用する写真のストックを充実させた。これらの研究成果については、著作物による公開のほか、各種学会や研究会、一般市民向けの講演会などで積極的に情報発信を行った。本科研による研究課題は以下の2つであった。1.圧痕法による調査をモンゴル・韓国・中国・ロシア、国内では琉球列島へ拡大する。2.圧痕検出法と圧痕調査法の方法・理論を構築する。課題1に関する成果:大陸側の資料としては、直接・間接的に調査を行い、中国浙江省田螺山遺跡資料、遼寧省上馬石遺跡資料、モンゴル科学アカデミー歴史・考古学研究所所蔵の匈奴墓出土土器これまでの主たる手法である土壌洗浄法(フローテーション法)を補完し、さらには新たな歴史パラダイムの転換につながる方法であることが証明できた。また、国内では沖縄のグスク時代資料や貝塚後期資料、徳之島・奄美の縄文遺跡面縄貝塚、嘉徳貝塚などで良好な資料を得、南西諸島における穀物資料の出現期、家屋害虫コクゾウムシの存在などを明らかにできた。課題2に関する成果:圧痕で出てくるタネやムシの特性について、他の植物考古学的方法による資料に比べて、「栽培植物」や「家屋害虫」が高率で出現することを証明した。これは土器が食料の保存や加工を行った家屋内で製作されたことも意味する。また、圧痕は他の手法による資料とは異なり、後代の腐食や混入がなく、土器製作時に粘土に入った(入れられた)タネやムシがそのままの形(数量)で残されている。よって、初心者と熟練者の枠を越えて、だれもが遺漏なくすべての圧痕を検出する方法が必要である。その手法として、軟X線で圧痕を検出し、従来のレプリカ法に加え、X線CTによる3D像復元の手法を開発した(「熊大方式」と命名)。この手法により、肉眼観察による圧痕検出数に比べ8倍もの高率で圧痕が含まれることが明らかになり、土器作りに際して縄文人たちが栽培植物種実を意図的に土器粘土中に混入したことを立証した。この研究は圧痕法の実証的研究推進のための二つの主な目的をもつ。一つはモンゴル、ロシア、韓国と日本の初期農耕を圧痕法によって探ること、そしてもう一つは植物考古学研究における圧痕法の理論的・方法論的特質を確立することである。研究の結果、各地における初期農耕の導入時期とその特徴および今後の問題点を明らかにできた。さらには貯蔵食物害虫を初めとする家屋害虫の成立過程に関する証拠を得ることができた。また、圧痕法の特質を明らかにし、軟X線による調査を基軸にした圧痕の悉皆調査法を開発した。これらは今後の圧痕法による研究の推進の基礎となる。本研究の目的は、1.圧痕法による栽培植物や家屋害虫の検出を国内外の地域に拡大すること、2.圧痕法の理論と方法を整備する、という2点にある。1に関しては、中国上馬石遺跡の報告の刊行、モンゴル国内の匈奴遺跡出土土器の圧痕調査、国内では中部・関東・北陸・九州の縄文時代遺跡の圧痕調査などを実施し、一部については報告を行うなど、着実な成果を得ることができた。2に関しては、1軟X線を用いた潜在圧痕の検出手法の開発、2軟X線・X線CTを用いた検出圧痕に基づく種実の意図的混入の実証研究を行い、圧痕法に係る方法論や理論はほぼ確立できた。これら成果については、研究論文や調査報告において果たしている他、一般向けの冊子や展示図録などにおいて、一般市民への研究成果の公開も行っている。これは前年度の課題を一歩改善したものと評価している。
高分解能のX線回折を示すチトクロム酸化酵素とチトクロムbc_1複合体の結晶の作成

ウシ心筋チトクロム酸化酵素の結晶化条件に及ぼす界面活性剤の効果を詳細に検討し、デシルマルトシドで安定化した標品から酸化型で1.9Å分解能程度の反射を示す結晶が再現性は不十分であるが得られた。しかしながらこの界面活性剤のアルキル側鎖の炭素数が9でも10でも結晶成長は大きく異なり、X線回折能のはるかに低い結晶しか得られなかった。一方、糖部分の構造も結晶化条件に大きく影響し、マルトースからサッカロースに置換しただけで、微結晶さえ得られなくなった。つぎに、このデシルマルトシドで安定化した標品の結晶の種々の誘導体を作成した。アジ化物結合型とシアン化物結合型は完全酸化型酵素結晶をそれぞれの配位子を含む溶液に浸漬することによって調整した。一方、還元型と還元型-CO結合型は自動酸化性が極めて強いため、窒素気流中でも結晶をそれぞれの型に安定に保つことは不可能であった。しかしながら、母液中では結晶を完全に固定することは不可能であるので、還元剤を含む溶液と平衡化したSephadexゲルによってX線回折用のキャピラリー単結晶を固定した。さらに、嫌気性を完全にするため、単結晶の両側に微結晶の層を置いた。単結晶の酸化状態および配位子結合状態は還元剤のみをキャピラリーに満たしたときの単結晶の吸収スペクトルによって確認した。これら全ての誘導体の、2.8Å分解能以上のX線回折を確認した。一方、ドデシルシュウクロースによって安定化されたウシ心筋チトクロムbc_1複合体の、4°Cで2.8Å分解能のX線回析能を示す結晶が得られた。しかし、ウシ心筋チトクロム酸化酵素と異なり、界面活性剤の構造は結晶化条件にあまり大きな影響を与えなかった。さらに、再現性が不十分であるため、精製条件について詳細に検討している。チトクロム酸化酵素結晶化に及ぼす界面活性剤の構造の効果を組織的に検討した。アルキルポリオキシエチレン型界面活性剤のオキシエチレン鎖長は結晶化条件に大きく影響し、長さによって六方両錘状、四角板状、四角柱状の三つの型の結晶が得られた。しかし、飽和炭化水素鎖長は臨界ミセル濃度に大きく影響するが結晶化条件には全く影響がなく、同じ結晶がほとんど同一の条件で得られた。一方、糖アルキル型界面活性剤を用いたときは結晶化条件に及ぼす界面活性剤の構造の影響はずっと大きく、デシルマルトシドで得られた結晶がドデシルマルトシドを用いると結晶の完全性が著しく低下したし、デシルシュークローズでは結晶さえ得られなかった。ただ、デシルマルトシドで安定化した標品の結晶の完全性はアルキルポリオキシエチレンのそれよりはるかに高く、一部の回折点は2.8Å分解能でさえ認められた。このような結晶化条件に対する高い構造要求性は界面活性剤の親水性部分の構造のかたさによるものと考えられる。したがって、界面活性剤は結晶の安定化に寄与する相互作用に直接関与していないとこれまで考えられてきたが、これらの結果は、結合した界面活性剤間にも特異的な接触があり、それが結晶の完全性を高める要因となっていることを示唆している。チトクロムbc_1複合体結晶化条件に及ぼす界面活性剤の構造の効果を検討し、デシルシュークロースにより、四角両錘型の新しい結晶を得た。この結晶化は結晶の可溶化の際のタンパク質濃度に敏感で20mg/mlで可溶化すれば析出するが、25mg/mlでは析出しなかった。

この結晶は格子定数もこれまでに得られているものよりずっと小さく、実験室の回折装置でも測定可能出あるため、重原子誘導体調製のスクリーニングにも便利である。しかし、X線回折の分解能はまだ6Å程度でありさらに結晶化条件の最適化が必要である。ウシ心筋チトクロム酸化酸素の結晶化条件に及ぼす界面活性剤の効果を詳細に検討し、デシルマルトシドで安定化した標品から酸化型で2.2Å分解能以上の反射を示す結晶が再現性は不十分であるが得られた。しかしながらこの界面活性剤のアルキル側鎖の炭素数が9でも10でも結晶成長は大きく異なり、X線回折能のはるかに低い結晶しか得られなかった。一方、糖部分の構造も結晶化条件に大きく影響しマルトースからサッカロースに置換しただけで、微結晶さえ得られなくなった。つぎに、このデシルマルトシドで安定化した標品の結晶の種々の誘導体を作成しあ。アジ化物結合型とシアン化物結合型は完全酸化型酵素結晶をそれぞれの配位子を含む溶液に浸漬することによって調製した。一方、還元型と還元型-CO結合型は自動酸化性を極めて強いため、窒素気流中でも結晶をそれぞれの型に安定に保つことは不可能であった。しかしながら、還元剤を含む溶媒中では結晶を完全に固定することは不可能であるので、還元剤を含む溶液と平衡化したSephadexゲルによってX線回折用のキャピラリー単結晶を固定した。さらに、嫌気性を完全にするため、単結晶の両側に微結晶の層を置いた。単結晶の酸化状態は還元剤のみをキャピラリーに満たしたときの単結晶の吸収スペクトルによって確認した。これら全ての誘導体の、2.8Å分解能のX線回折を確認した。一方、ドデシルシュウクロースによって安定化されたウシ心筋チトクロムbc_1複合体の、4°Cで2.8Å分解能のX線回折能を示す結晶が得られた。しかし、ウシ心筋チトクロム酸化酵素と異なり、界面活性剤の構造は結晶化条件にあまり大きな影響を与えなかった。さらに、再現性が不十分であるため、精製条件について詳細に検討している。
IP_3受容体の構造・機能相関とCa^<2+>統御分子との機能的協関

1.タイプ1とタイプ3IP_3受容体のIP_3結合のCa^<2+>依存性は正反対で、Ca^<2+>濃度の上昇とともに、タイプ1は高親和性から低親和性に(EC_<50>が100nMCa^<2+>)、タイプ3は低親和性から高親和性に(EC_<50>が872nMCa^<2+>)、変換した。IP_3誘導性Ca^<2+>放出(IICR)チャネル活性では、タイプ3はタイプ1よりもIP_3感受性が低かった(EC_<50>=358nMvs226nM)。従って、Ca^<2+>とIP_3の両方の細胞内濃度変化がタイプ特異的なIICRを制御すると示唆される。マウス肝臓のIP_3受容体はほとんどがタイプ1とタイプ2で、タイプ1ノックアウトマウスではタイプ2がほとんどであった。タイプ2は高親和性のIP_3受容体と予想されていたが、このノックアウトマウス肝臓のIICRのIP_3感受性はタイプ1と同じくらいの値であった(EC_<50>=260nM)。2.IICRとCa^<2+>ストア容量依存的Ca^<2+>流入(SOC)との機能協関を明らかにするため、IP_3受容体とSOC特性を示すTrpチャネルをSf9細胞に共発現させることに成功した。現在、IP_3受容体とTrpとの相互作用について解析中である。また、IP_3受容体が強発現したストアではCa^<2+>ポンプ活性が上昇することから、放出チャネルと取り込みポンプとの協関が示唆された。3.タイプ1遺伝子promoterの-398-295小脳特異的な正の制御領域を見つけ、-334-318に核蛋白が結合するE-boxに類似したbox-Iを同定した。また、タイプ2遺伝子promoterの一次構造を決定し、転写開始点が翻訳開始ATGの334269bp上流に複数存在することも明らかにした。4.ラット腎臓において、タイプ1は血管平滑筋細胞とメザンギウム細胞に、タイプ2は皮質から内髄質の集合管間在細胞に、タイプ3は血管平滑筋細胞・メザンギウム細胞・皮質集合管主細胞に特異的に発現分布していた。細胞内分布では、タイプ1とタイプ2が細胞質全体に存在するに対して、タイプ3は基底膜側の細胞質に局在することから、極性のあるCa^<2+>シグナル伝達が示唆される。
ドイツ占領下フランス南部における定期刊行物と検閲制度についてのアーカイブ研究

2015年末のフランスにおける大統領令によってヴィシー政権やドイツ占領時代の行政文書の閲覧が一般に公開されたことを背景に、本研究計画は当時のフランス南部において発行されていた定期刊行物に掲載されている文学・演劇・映画といった異なるジャンルに関するテクストを研究対象として取り上げ、それらのテクストが検閲制度などの社会的制約を生成、流通、受容のそれぞれの段階でどのように受けていたかを、公立・私立を問わずフランス各地にあるアーカイブで収集する資料との比較作業を通じて明らかにすることを目指すものである。