hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ロボットスーツHALを用いた転倒予防トレーニングの開発と有効性に関する研究

本研究課題は中枢神経障害患者の転倒を予防することを目的に、サイボーグ型ロボットスーツHALを利用したリハビリテーションプログラムの開発に向け、歩行機能及びバランス機能障害を合併する中枢神経疾患患者を対象にHALリハビリテーションプログラム(HALプログラム)を実践した。HALプログラムは患者の筋力及び運動麻痺の程度、関節可動域範囲を考慮し、下肢随意運動を基にアシストトルクを設定する。立位が安定している者はトレッドミル上での歩行を、立位が不安定な患者の場合は免荷式歩行器を併用し、休息を入れながら30分間の歩行を実施した。本研究課題に亜急性期および慢性期の中枢神経疾患患者51名が参加した。HALプログラム実施後の立位バランス機能、歩行機能、下肢運動機能は実施前に比べ、有意な改善を示した。歩行の自立度は1段階以上の改善を認めた。また、亜急性期の患者は随意運動ができれば、HALプログラム後の歩行機能の自立度は改善する傾向にあった。慢性期の患者は立位のバランス機能が維持されていれば、HALプログラム後に歩行自立度に改善を示した。小型モーションセンサを用い、股関節、膝関節、足関節の運動学的分析を行ったところ、ロボットスーツからトルクを補助された股関節、膝関節だけでなく、ロボットからトルクの補助を受けない足関節の運動特徴も健常者に近づくことが分かった。また、継続的なHALプログラムの実施は歩行距離の延長と下肢筋力を向上させ、その背景には中心前回、中心後回の灰白質体積の増加が関係していることが分かった。拡散強調画像を利用した皮質脊髄路と皮質網様体脊髄路の解析では、HALプログラムの実施後にこれらの神経線維の改善を認めた。HALプログラムは亜急性期及び回復期だけでなく慢性期の中枢神経疾患患者の歩行自立度を改善させることができ、転倒を予防する上で有効なトレーニングになり得ると思われる。下肢運動機能障害を呈した者や高齢者の転倒は、重篤な生活障害を引き起こすだけでなく、転倒者は死亡することもあり、軽視できない問題である。移動支援ロボットであるロボットスーツHAL福祉用を用いた転倒防止のためのリハビリテーションプログラムの開発を目的に下肢運動機能障害を持つ患者を対象にロボットスーツHALによるトレーニングを実施した。18歳から86歳までの31名の患者(女性13名、男性18名)を対象にロボットスーツHAL福祉用を用いた転倒予防トレーニングを実施した。31名の対象者の疾患の内訳は、脳血管障害17名、脳腫瘍8名、頭部外傷3名、脊髄疾患3名であった。バランス機能検査をリハビリテーションプログラムの前後に実施した。プログラム後のバランス機能は概ね改善を示している。これらの研究成果は第50回日本作業療法学会にて報告予定である。現在リクルートできた症例数は31名で、当初の計画の6割をリクルートできている。ロボットスーツHALを用いたリハビリテーションプログラムの実施にあたって、重篤な有害事象も発生せず、安全に研究が遂行できている。中枢神経障害などにより下肢運動機能障害を呈した障がい者や下肢機能が衰えた高齢者の転倒は、重篤な生活障害を引き起こすだけでなく、転倒により死亡することもあり軽視できない問題である。本研究課題では、移動支援装置であるロボットスーツHAL福祉用を利用した転倒防止のためのリハビリテーションプログラムの開発を目的に下肢運動機能障害を持つ患者を対象にロボットスーツHALによるトレーニングを実践した。18歳から86歳までの下肢運動機能障害をもつ患者(45名、女性22名、男性23名)を対象にロボットスーツHAL福祉用を利用した転倒予防トレーニングを行なった。バランス機能はトレーニング実施後に有意に改善されることが示された。また、下肢機能障害に罹患してからの期間の長さによって、改善に影響する因子が異なることが分かった。平成28年度までにリクルートできた症例数は45名で、当初の計画の9割をリクルートできた。ロボットスーツHALを利用したリハビリテーションプログラムの実施にあたって、重篤な有害事象も発生せず、安全に研究が遂行できている。中枢神経障害患者の転倒予防を目的に、サイボーグ型ロボットロボットスーツHALを利用したリハビリテーションプログラムの開発に向け、歩行機能障害を呈する回復期及び慢性期の中枢神経障害患者を対象に、HALリハビリテーションプログラムを計画立案し、実施した。回復期および慢性期の患者51名がHALリハビリテーションプログラムに参加した。HALリハビリテーションプログラム実施前後の立位バランス機能、歩行機能、下肢運動機能を比較すると、HALリハビリテーションプログラムの実施後は、プログラムを実施する前に比べ、有意な改善を示した。特に歩行の自立度はHALリハビリテーションプログラムを実施する前に比べて、12段階の改善を認め、歩行時および立位時のバランス安定性の向上が背景にあると示唆された。また、回復期では下肢機能が良好な者ほど歩行の自立度は改善する傾向にあったが、慢性期患者の場合は立位のバランス機能が歩行自立度の改善と関連があることが分かった。歩行障害を引き起こす原因となった疾患の発症からの期間によって、歩行自立度の改善に関与する要因が異なることが分かり、それぞれの時期においてどの機能に重点を置き、トレーニングを実施すべきか、治療プログラムの立案に有用な情報が得られた。今回のHALリハビリテーションプログラムにおいて改善が芳しくなかった症例が数例観察された。回復期と慢性期に共通していた要因は、重度な高次脳機能障害を呈していることであった。また、回復期において重度の運動麻痺を呈している患者は歩行機能の改善が芳しくなかった。サイボーグ型ロボットロボット

スーツHALを利用したリハビリテーションプログラムは回復期および慢性期中枢神経障害患者の歩行自立度を改善し、歩行や立位時の転倒を予防する上で有効なトレーニングプログラムの一つになり得ると思われた。平成28年度までに51例の患者に対し、HALリハビリテーションプログラムを実施し、目標としていた症例数を達成することができた。また、サイボーグ型ロボットHALによるリハビリテーションプログラムの実施によって有害事象は発生しなかった。治療プログラムの実践やデータ収集は、特に問題なく行えた。得られたデータの一部を解析し、HALリハビリテーションプログラムにおける歩行自立度の改善と改善に関連する因子に関する報告は、Neurologia medico-chirurgicaに投稿し、その論文が掲載された。しかしながら、運動機能、歩行機能などの身体機能データやMRIを用いた神経機能画像など、データの種別が多岐に渡り、解析に多くの時間を要している。これらのことが、研究計画の進捗をやや遅らせている要因であり、当初予定していた解析まで実施できていない。本研究課題は中枢神経障害患者の転倒を予防することを目的に、サイボーグ型ロボットスーツHALを利用したリハビリテーションプログラムの開発に向け、歩行機能及びバランス機能障害を合併する中枢神経疾患患者を対象にHALリハビリテーションプログラム(HALプログラム)を実践した。HALプログラムは患者の筋力及び運動麻痺の程度、関節可動域範囲を考慮し、下肢随意運動を基にアシストトルクを設定する。立位が安定している者はトレッドミル上での歩行を、立位が不安定な患者の場合は免荷式歩行器を併用し、休息を入れながら30分間の歩行を実施した。本研究課題に亜急性期および慢性期の中枢神経疾患患者51名が参加した。HALプログラム実施後の立位バランス機能、歩行機能、下肢運動機能は実施前に比べ、有意な改善を示した。歩行の自立度は1段階以上の改善を認めた。また、亜急性期の患者は随意運動ができれば、HALプログラム後の歩行機能の自立度は改善する傾向にあった。慢性期の患者は立位のバランス機能が維持されていれば、HALプログラム後に歩行自立度に改善を示した。小型モーションセンサを用い、股関節、膝関節、足関節の運動学的分析を行ったところ、ロボットスーツからトルクを補助された股関節、膝関節だけでなく、ロボットからトルクの補助を受けない足関節の運動特徴も健常者に近づくことが分かった。また、継続的なHALプログラムの実施は歩行距離の延長と下肢筋力を向上させ、その背景には中心前回、中心後回の灰白質体積の増加が関係していることが分かった。拡散強調画像を利用した皮質脊髄路と皮質網様体脊髄路の解析では、HALプログラムの実施後にこれらの神経線維の改善を認めた。HALプログラムは亜急性期及び回復期だけでなく慢性期の中枢神経疾患患者の歩行自立度を改善させることができ、転倒を予防する上で有効なトレーニングになり得ると思われる。
BCOR-ITD変異腫瘍モデルの作出と特性解析

BCOR遺伝子内の縦列重複変異(BCOR-ITD)は、研究代表者らが小児の腎腫瘍である腎明細胞肉腫から初めて発見した変異である。現在BCOR-ITD陽性腫瘍は、小児腎腫瘍のみならず、他の小児固形腫瘍や一部の成人腫瘍においても発見されつつある。BCOR-ITD変異陽性腫瘍は、他の遺伝子変異が非常に少ない特徴があり、BCOR-ITDが腫瘍形成におけるドライバー因子である可能性が高い。そこで、本研究では、変異モデルの作出・特性解析を試み、治療薬開発へと繋げることを目指す。平成30年度は、研究分担者と共にゲノム編集によるBcor-ITDマウスの作出を行った。ドナー配列は、ヒト腎明細胞肉腫で発見した配列と同様の重複パターンになるようにマウスのゲノム配列で作成した。BDF1マウスの受精卵の核に、マイクロインジェクションにより、gRNA, Cas9,ドナーベクターを注入し、モザイクマウスの作成を試みた。Bcor遺伝子は発生に重要な遺伝子であり、遺伝子の完全なノックアウトは胎生致死となることが知られているが、Bcor-ITD変異が発生にどのような影響をもたらすかは、まだ不明である。そのため、様々な条件でインジェクションを行い、Bcor-ITD変異を有するメスのモザイクマウスを得ることに成功した。メスのBcor-ITDモザイクマウスとC57BL/6マウスの交配により、F1マウスを得る事にも成功している。しかしながら、Bcor-ITDモザイクマウスとF1マウスは共に、妊娠率・出産率が低い傾向が認められ、現段階で繁殖・系統維持に困難をきたしている。予定していたゲノム編集によるBcor-ITD変異マウスの作出に成功した。しかし、繁殖に困難をきたしており、今後は細胞樹立を優先する。当初の予定通りに計画を推進するが、繁殖・系統維持が困難な状況にあるため、胎仔からの細胞株の樹立を優先する。可能であれば、受精卵からES細胞の樹立も試みる。作出したマウスの繁殖力が弱いため、飼育費が予定よりも少額であったため。また、人件費の支出がなかったため。次年度使用分については、ES細胞の樹立や特性解析のための試薬代として使用する。翌年度請求分は、当初の予定通りに使用する。
高融点金属Nbを利用した超耐熱合金の設計

Nbは融点が2470°Cと高く,密度は8.5g/cm^3と他の高融点金属(W:19.3g/cm^3,Re:21.0g/cm^3)に比べて相当小さいため,耐熱材料の高強度化にとって有望な合金元素である.NbをNiに固溶限以上添加するとDO_a型構造を有する金属間化合物相Ni_3Nb(δ相)が生成する.この化合物相は組成幅を持ち,融点(1673K)まで安定であるため高温構造材料としては有望な化合物であるが,結晶構造の対称性がよくない.本研究では,このδ相を利用して優れた耐熱合金を設計することを目的に,Ni-Nb-M(M:Fe,Co,Al,Ti,V)3元系の状態図を作成し,まず,δ相中への第3元素の固溶量及び第3元素の添加に伴う結晶構造の対称性の変化を明らかにしている.次に,γ-Ni母相中に析出するδ相の結晶学的方位関係,析出形態に及ぼす第3元素の効果を両相の格子ミスフィットの観点から明らかにし,これらの結果に基づいて,Ni_3Nb-δ相を利用した超合金の設計指針を示した.また,Ni-Nb-Al3元系において,これまで全く報告されていなかった新たな化合物相Ni_6NbAl-ηとその結晶構造(DO_<24>型構造)を明らかにし,この相はγ相及びδ相とともに3元共晶分解反応(L→γ+δ+η)を示すことを見い出した.3元共晶組成を持つ合金を作製して一方向凝固させた結果,これら3相は結晶成長方向に板状に配列することを見い出し,実用的な観点から,δ相の析出形態を制御した新しい高温材料の開発の可能性を示している.また,軽量耐熱材料として実用化が期待されているγ-TiAl基合金の相変態に及ぼすNbの効果についても調べている.すなわち,(1)α→α_2+γ,(2)α→β+γという2つの反応経路における高温α-Ti相の分解過程に及ぼすNbの影響を調べ,前者ではNbの添加がγ相の析出を遅滞させること,また,後者については共析型ではなくγ相の生成後β相が生成する2段階型で変態が生じることをTTT図を通して明らかにし,高温強度,高温加工性,靭性など目的に応じた組織制御を行なう合金設計の指針を示している.Nbは融点が2470°Cと高く,密度は8.5g/cm^3と他の高融点金属(W:19.3g/cm^3,Re:21.0g/cm^3)に比べて相当小さいため,耐熱材料の高強度化にとって有望な合金元素である.NbをNiに固溶限以上添加するとDO_a型構造を有する金属間化合物相Ni_3Nb(δ相)が生成する.この化合物相は組成幅を持ち,融点(1673K)まで安定であるため高温構造材料としては有望な化合物であるが,結晶構造の対称性がよくない.本研究では,このδ相を利用して優れた耐熱合金を設計することを目的に,Ni-Nb-M(M:Fe,Co,Al,Ti,V)3元系の状態図を作成し,まず,δ相中への第3元素の固溶量及び第3元素の添加に伴う結晶構造の対称性の変化を明らかにしている.次に,γ-Ni母相中に析出するδ相の結晶学的方位関係,析出形態に及ぼす第3元素の効果を両相の格子ミスフィットの観点から明らかにし,これらの結果に基づいて,Ni_3Nb-δ相を利用した超合金の設計指針を示した.また,Ni-Nb-Al3元系において,これまで全く報告されていなかった新たな化合物相Ni_6NbAl-ηとその結晶構造(DO_<24>型構造)を明らかにし,この相はγ相及びδ相とともに3元共晶分解反応(L→γ+δ+η)を示すことを見い出した.3元共晶組成を持つ合金を作製して一方向凝固させた結果,これら3相は結晶成長方向に板状に配列することを見い出し,実用的な観点から,δ相の析出形態を制御した新しい高温材料の開発の可能性を示している.また,軽量耐熱材料として実用化が期待されているγ-TiAl基合金の相変態に及ぼすNbの効果についても調べている.すなわち,(1)α→α_2+γ,(2)α→β+γという2つの反応経路における高温α-Ti相の分解過程に及ぼすNbの影響を調べ,前者ではNbの添加がγ相の析出を遅滞させること,また,後者については共析型ではなくγ相の生成後β相が生成する2段階型で変態が生じることをTTT図を通して明らかにし,高温強度,高温加工性,靭性など目的に応じた組織制御を行なう合金設計の指針を示している.Nbは融点が2470°Cと高く,密度は8.5g/cm^3と他の高融点金属(W:19.3g/cm^3,Re:21.0g/cm^3)に比べて相当小さいため,耐熱材料の高強度化にとって有望な合金元素である.NbをNiに固溶限以上添加するとD0a型構造を有する金属間化合物相Ni_3Nb(δ相)が生成する.この化合物相は組成幅を持ち、融点(1673K)まで安定であるため高温構造材料としては有望な化合物であるが、結晶構造の対称性がよくない.そこで本年度は、まず、Ni-Nb-M3元系の1473Kにおける状態図を作成して、δ相中への第3元素の固溶量を明らかにする.

ここで第3元素Mには、Niと同族元素であるFe、CoおよびNi_3M化合物を形成するAl、Ti、Vの5種類を選択した.その結果、δ単相領域はFe、Coの場合Nb等濃度方向に、一方、Al、Ti、Vの場合はNi等濃度方向へと拡張し、前者はNi_3MのNi副格子サイトに、後者はNb副格子サイトに置換型に固溶することを見い出した.また、それらの固溶量はAlの場合2at%と少ないのに対し、Fe、Co、Tiは10at%、Vは20at%であることを明らかにした.これらの結果に基づいて、第3元素の固溶に伴うδ相の格子定数変化を調べた結果、δ相の結晶構造の対称性はAlの固溶に伴って著しく劣化するが、他の元素が固溶すると向上し、特にCoの効果が大きいことが明らかとなった.Nbは融点が2470°Cと高く,密度は8.5g/cm^3と他の高融点金属(W:19.3g/cm^3,Re:21.0g/cm^3)に比べて相当小さいため,耐熱材料の高強度化にとって有望な合金元素である.NbをNiに固溶限以上添加するとD0a型構造を有する金属間化合物相Ni_3Nb(δ相)が生成する.この化合物相は組成幅を持ち、融点(1673K)まで安定であるため高温構造材料としては有望な化合物であるが、結晶構造の対称性がよくない.本研究ではこのδ相を利用して優れた耐熱合金の設計をすることを目的に、前年度は、Ni-Nb-M(M:Fe,Co,Al,Ti,V)3元系の1473Kにおける状態図を作成し、δ相中への第3元素の固溶量及び第3元素の添加に伴う結晶構造の対称性の変化を明らかにした.本年度はその結果に基づき、Ni-Nb-Al及びNi-Nb-Fe3元系合金を作製し、γ-Ni母相中に析出するδ相の析出形態について検討した結果、以下のことを見い出した:(1) δ相の析出形態はヴィドマンステッテン状となり、その結晶学的方位関係は{111}_γ//(010)_δ,<110>_γ//[100]_δとなる.(2) δ相の析出形態はFeの添加により微細化されるが、Alを添加してもほとんど変化しない.Feの添加によりδ相の析出形態の微細化は、δ/γ界面での格子ミスフィットの緩和により析出によって生じる弾性応力場が等方的になるためである.また、Ni-Nb-Al3元系において、これまで全く報告されていなかった新たな化合物相を発見し、この相がDO_<24>型構造Ni_6NbAl-η相であること、さらにこの相はγ相及びδ相とともに3元共晶分解反応(L→γ+δ+η)を示すことを見いし出した.3元共晶組成を持つ合金を作製して一方向凝固させた結果、これら3相は結晶成長方向に板状に配列することを見い出し、実用的な観点から、δ相の析出形態を制御した新しい高温材料の開発の可能性を示唆した.Nbは融点が2470°Cと高く,密度は8.5g/cm^3と他の高融点金属(W:19.3g/cm^3,Re:21.0g/cm^3)に比べて小さいため,耐熱材料の高強度化にとって有望な合金元素である.特に,Nbを過飽和に含むNi-Nb合金では金属間化合物相Ni_3Nb(δ相)が生成するが.この化合物相は対称性の悪いD0a型構造を有する.本研究ではこのδ相を利用して優れた耐熱合金の設計をすることを目的に、初年度は、Ni-Nb-M(M:Fe,Co,Al,Ti,V)3元系の状態図を作成し、また,次年度はその結果に基づいてγ-Ni相中に生成るδ相の形態について検討した.本年度は,δ相の構造を原子レベルで構造解析し,また,δ+γ2相合金用いて母相との格子ミスフィットを電子顕微鏡で調べ,以下のことを見出した:(1)化学量論組成のN_3Nb-δ相の構造ではNi原子が非対称に配列し,これは第2近接異種原子から強い相互作用を受けるためである.したがって,非対称性を緩和するためには,その相互作用を低減させるFe,Ni,Vなどの元素の固溶が有効であることを,実験及び計算結果から明らかにした.また,高温におけるδ相の構造をin-situで調べ,高温ほど非対称性は緩和される.(2)γ-Ni母相中に析出するβ相はFeの添加により著しく微細化される.
甲状腺癌特異抗原の検出システムの構築と機能解析

甲状腺濾胞細胞を発生母地とする分化がんの簡便な診断法を開発するため、新たなモノクローナル抗体の作成とそれを用いた腫瘍マーカー測定法の構築を目差した。まず、甲状腺がん組織を抗原とするマウスモノクローナル抗体と甲状腺がん組織から精製したサイログロブリン(以下Tg)を抗原とする抗Tgモノクローナル抗体を作成した。得られた前者の抗体は良性腫瘍、濾胞がん、未分化がんおよび非甲状腺がん(肝がん、胃がん、大腸がん)組織中には存在せず、乳頭がん組織のみに存在する蛋白(RM40)と反応した。後者の抗体の一部にはTg糖鎖近傍のエピトープを認識するものがあった。血清中のこれらの蛋白を測定するために、得られた幾つかの抗体を組み合わせてマイクロプレート固相を使用した酵素免疫測定法(ELISA)を構築した。方法は直接血清中の目的抗原を測定する検査法と血清に適当な比率でレクチン(LCA, ConA)を添加して、Tg糖鎖の近傍エピトープを認識する標識モノクローナル抗体との結合阻害率を求めるTg糖鎖変異検出法を組み立て、両者を比較した。直接法に比べてTg糖鎖変異を検出する方法では、乳頭がん血清と良性腫瘍およびバセドウ病の血清で有意な差を認めた。この測定法を用いることで甲状腺分化がん、特に乳頭がんの腫瘍マーカー検査としての意義が認められた。また、モノクローナル抗体を用いて乳頭がん組織から特異蛋白RM40を精製し、この蛋白の解析中である。後者の抗体の部にはTg糖鎖近傍のエピトープを認識するものがあった。

方法は直接血清中の目的抗原を測定する検査法と血清に適当な比率でレクチン(LCA, ConA)を添加して、Tg糖鎖の近傍エピトープを認識する標識モノクローナル抗体との結合阻害率を求めるTg糖鎖変異検出法を組み立て、両者を比較した。直接法に比べてTg糖鎖変異を検出する方法では、乳頭がん血清と良性腫瘍およびバセドウ病の血清で有意な差を認めた。この測定法を用いることで甲状腺分化がん、特に乳頭がんの腫瘍マーカー検査としての意義が認められた。また、モノクローナル抗体を用いて乳頭がん組織から特異蛋白RM40を精製し、この蛋白の解析中である。
国際モデルとしての「日本型」人格形成教育の考察ー国際比較を通して

今日、世界的規模でのグローバル競争が意識される中、国際学力テストでの得点の高さや経済的発展を背景に、日本の教育も国際的に評価されてきた。しかし、その内容は多分に学力偏重であり、学力面と不可分に結びついた人格形成面への視点が欠けている。だが、実際は日本の教育は仕組みとして全人志向であり、世界的に全人的な人間育成や社会性関連での育成が重視される中、日本の教育モデルが国際的議論に組み込まれることが求められている。しかし、実際は、日本から教育発信は極めて少ない。以上の結果を踏まえ、本研究では、「日本型」全人的な人格形成教育を国際的議論の俎上にのせようとした。本研究は、当初の研究計画に記載されているように、国際比較の視点から、(1)「日本型」(東アジア型)モデル借用の国際的言説の考察と欧米的理解枠組みへの問題提起、(2)国際比較の視点から、「日本型」人格形成教育の特徴・課題の分析、(3)「日本型」全人的な人格形成教育モデルの再構築(課題の意識化、より民主化されたモデルの構築)とそれを国際的議論の俎上にのせること、を目的としている。これは、世界的規模でのグローバル競争が意識される中、国際学力テストで高得点をとる日本の学校教育の「学力」に関連した側面が国際的に注目される一方、学力面と不可分に結びついた人格形成面の仕組みは国際的にはほとんど認識されてこなかったとの理解に基づくものである。また、狭義の学力を越えた包括的な人間形成教育モデルの構築は、各国が21世紀の教育の方向性として模索しているものであり、本研究で扱っているテーマは国境を越える、今日的教育課題であるとの理解に基づいている。本年度は予定されていた海外研究者を含む本研究テーマの国際シンポジウムの開催、及び海外への国際発信や調査、昨年度立ち上げたHP (http://www.p.u-tokyo.ac.jp/tsunelab/tokkatsu/)の充実、及び、来年度予定している英文学術図書出版に向けた交渉を行なった。具体的には、日本型教育モデルの国際化に関わってきたアメリカの研究者、昨年度の海外発信用の教師用ガイドブックにも関わった教員の研究組織、日本の教育について学習プログラムで来日中のアメリカ・コロラド大学の教師団、本プロジェクトに関係している大学院生を含む日本側の発表を含む国際シンポジウムを開催した。また、マレーシアの教員養成研修において本テーマで研修を行い、韓国での状況調査を行なう等、国際比較視点からの日本型教育モデルの位置付けと発信をさらに推進させた。世界的規模でのグローバル競争が意識される中、国際学力テストにおいて、日本は高得点国として知られ、国際モデルとしても評価されてきた。だが、例えば、日本の学校教育の「学力」面が国際的に注目される一方、学力面と不可分に結びついた人間形成面の仕組みは国際的にはほとんど認識されてこなかった。今日、児童生徒の全人的な育成は、各国で21世紀の児童生徒の教育の重要な視点として推進されている。だが、多くの国で、こうした人間形成面での育成は、カリキュラムの中で体系的に位置付けられてこなかった。こうした中で、「日本型」は、狭義の「勉強」を越えた教育の仕組みを体系的にカリキュラムの中に位置付け、国際的にも参考となりうる特徴を持って展開されている。「日本型」人間形成教育の特徴や課題を国際的文脈で分析し、国際的に知られていない本分野での日本型モデルを海外に発信することによって、国境を越えた対話に貢献することが本研究の重要な目的の一つである。本年度は、研究実施計画に沿って、海外における日本型の人間形成教育の国際的な言説分析、国内調査、海外発信に向けた仕組み作りを行なった。上記、国際社会での言説を踏まえてJapanese Whole Child Education Homepage(http://www.p.u-tokyo.ac.jp/tsunelab/tokkatsu/)を立ちあげ、日本型の全人的な人間形成教育の「型」を海外に示した。その中では、「日本型」全人的な人間形成教育の軸となる特別活動の教師の研究会資料の英文版ガイドブック(The World of Tokkatsuとして再編、ダウンロード)、海外関連研究者との対話(追加中)等、今まで海外において知られてこなかった「日本型」全人的な人間育成教育の仕組みを示すような発信内容をターゲットした。また内外の教師が読む出版物で積極的に発信した。今日、国際学力調査の得点の高さや国際社会における経済的台頭等を背景に、日本をはじめとする東アジア諸国の学校教育は国際的にも学力面で注目されている。日本の授業研究、レッスン・スタディのモデルは、今日では国際的に広く参照されるようになっている。

しかし、こうした「日本型」への注目は、日本型教育モデルの学力面に偏重し、モデルのもとでは学力面と不可分に結びついている人間形成的な側面に関しては、国際的な発信がなされてこなかったこともあり、ほぼ国際的には知られていない。それも、今日、世界的に、21世紀型の資質や能力に関連して、社会・感情面での育成、全人的な人間形成教育の必要性が唱えられる文脈においてのことである。本研究では、こうした状況の中で、「日本型」人間形成教育のモデルを、国際的な議論の俎上にあげ、世界的に関心の高まっている本テーマに関して、日本からの発信、双方的な情報交流がしうる土台作りに力を注いできた。最終年度においては、国際発信力の向上に焦点を当てた。一つには、東京大学教育学研究科附属の学校教育高度化センターの研究プロジェクトの一つとして展開し、国際発信すべき日本の特徴的な人間形成に関連した教育について募集し、ホームページからの国際発信を行なってきた。また、本テーマに関連した海外視察団を受入れ、海外での展開を後押しすると同時に、本研究代表者(本年度上記センターのセンター長)が海外において教師教育関連の組織において発信してきた。また、2015年度内に本研究の調査をもとにした章を含む著書をRoutledgeから出版する予定であり、既に出版契約も交わしている(恒吉編)。教育社会学上記のように、国際比較視点からの本テーマの分析を通して全人的な人間形成モデルを位置付ける作業、及び、国際シンポジウムや海外の教員とのモデルをめぐる意見交換を通しての特徴の分析、課題や可能性の検討、海外研究者・日本の関連教員・本分野の若手研究者のネットワークの形成、海外発信用のHPや英語による教師ガイドブックの作成、英語による図書出版等、当初の計画通りに進んでいる。狭義の学力にとどまらない、社会性や感情等の育成を同時に教育の目標としてターゲットする仕組み作りに対する海外における関心は高く、本研究における海外教員研修等においても、具体的な中身を更に発信してほしいという要請が極めて高い。本研究が「おおむね順調に進展している」と判断した理由は以下の通りである。それは、本研究における、「日本型」の人間形成教育を国際的な文脈において位置付けるという作業を踏まえ、それを国際的に発信してゆく作業が順調に進んでいること、そして、それに対して、内外の研究者、教育者、教育政策関係者からリアクションが増えつつあることによる。発信の種類は以下の三点をターゲットし、本年度の目標を達成している。1)海外の教員・教育政策関係者がすぐに参考にし、日本型の全人的人間形成教育の内容と仕組みがわかる英文ホームページを作成、そこから、英語での特別活動の教員ガイドブック等をすぐにダウンロードして参考にできるようにした。2)アメリカ・イギリスでの教員用の指導事典(Sage)で日本型の全人的人間形成教育について書いたり、教師用教育誌(『道徳と特別活動』『初等教育資料』)で本テーマについて執筆する等の実践者の問題関心を喚起すると同時に、アメリカの出版社から英文での本テーマの本を執筆することを交渉中である。3)来年度に向けた海外調査も順調に進みつつある。海外における日本型の包括的な人間形成モデル(カリキュラムに組み込まれた形での)への関心は海外に発信されてこなかったために知られてこなかったが、実際は、学問的のみならず、教育関係者・政策関係者においても非常にニーズが高いことが本研究の過程においても示されている。
和歌山平野における荘園遺跡の復元研究

1、荘園調査による荘園地図の作成宮井(用水)の水利・地名調査を実施して、和歌山平野の宮井灌漑地域全体の荘園遺跡地図(通称地名・遺跡と水利慣行の図面データ)を作成した。開発によって破壊の進行した岩橋荘故地・根来寺大門池についても、紀州惣国関連遺跡として同様の調査を行なった。2、古文書調査・翻刻作業と荘園地図国立国文学資料館史料館所蔵の「日前宮文書」「紀氏文書」、神奈川大学常民文化研究所・水産庁中央資料館所蔵の同筆者稿本、和歌山市立博物館所蔵の「林家文書」「岩橋文書」「太田文書」を調査・翻刻して、日前宮神領の分析をすすめた。特に永仁検注帳については翻刻を示して和歌山平野の中世景観を解明し、荘園地図上にデータを記入した。3、1・2の研究をもとにして、網野善彦説(平民・職人論)を再検討する考察をおこなった。1荘園調査宮井用水の水入れにあわせて、日前宮、岩橋荘故地(和歌山市高柳)、和田荘故地(和歌山市三田地区)の3箇所で水利調査を実施し、あわせて通称地名と、宮井全体の水利慣行についでも聞き取り調査した。さらに、水利組合文書および絵図をトレースして、明治地籍図類の所在を確認した。なお、当初予定に入っていなかった岩橋荘を加えた理由は、県道の敷設によって同荘の要地(政所比定地岩橋家や蓮如所縁の法照寺)が改変されたためである。県文化財センターによる同地の発掘調査(二〇〇三年二月)のデータも確保した。2古文書調査国立国文学資料館・史料館所蔵の「日前宮文書」「中橋家文書」、神奈川大学常民文化研究所所蔵の「日前宮文書(筆耕本・副本)」、水産庁資料館所蔵の「日前宮文書(筆耕本・正本)」(散逸)、和歌山市立博物館所蔵の「林家文書」「岩橋家文書」写真帳を調査・整理・閲覧して、日前宮領荘園・封郷についての解読を進めた。また、この問題についての第一人者である網野善彦教授に面談を求めて、懇切な御教示を得た(教授は二〇〇四年二月二十七日に病没し、我々が最後に接触した研究者と思われる)。3研究会の組織和歌山大学・大谷大学・帝塚山大学・天理大学・四日市大学など、近畿の惣国若手研究者(院生)を集めて、紀州惣国を対象とする共同研究を組織し、文書については相互に役割分担して解読・翻刻を組織的に進めた。その成果については、随時HP(http://www.geocities.co.jp/CollegeLife-Labo/9536/index.html)で公開して、全国から情報を集めた。1荘園調査による荘園地図の作成宮井用水の水入れにあわせて、日前宮宮郷流域の水利・地名調査を実施し、水利組合文書および絵図をトレースして、明治地籍図類の所在を確認した。昨年度の調査分(日前宮周辺、岩橋荘故地、和田荘故地)とあわせて、和歌山平野の宮井灌漑地域全体の荘園遺跡地図(通称地名・遺跡と水利慣行を記入した図面)を作成した。岩橋高柳遺跡および水軒堤防の発掘成果についても、和歌山県文化遺産課・同文化財センター・和歌山井堰研究会より調査資料の提供をうけて記入した。また惣国の比較研究として、根来寺門前大門池の水利調査を行なって都市空間の比較研究をした。2古文書翻刻作業と荘園地図東京大学史料編纂所所蔵の「紀伊国造家文書」、国文学資料館・史料館所蔵の「田所文書」、神奈川大学常民文化研究所および水産庁中央資料館所蔵の「日前宮文書(筆耕本・副本)」、和歌山市立博物館所蔵の「林家文書」「岩橋家文書」写真帳を調査・整理・閲覧して、日前宮領荘園・封郷についての解読を進めた。このうち主要な帳簿類についてはほぼすべてを翻刻して、データベース化した。1の荘園地図と照合し、和歌山平野の中世景観を解明した。3研究会の組織和歌山大学・大谷大学・帝塚山大学・四目市大学など、近畿の惣国若手研究者(院生)を集めて、紀州惣国を対象とする共同調査を組織し、文書については相互に役割分担して解読・翻刻を組織的に進めた。1荘園調査による荘園地図の作成

宮井用水の水入れにあわせて、日前宮周辺、岩橋荘故地、和田荘故地(以上第一年目)、日前宮宮郷流域(2004年)の水利・地名調査を実施し、水利組合文書および絵図をトレースして、明治地籍図類の所在を確認した。両年調査分より、和歌山平野の宮井灌漑地域全体の荘園遺跡地図(通称地名・遺跡と水利慣行を記入した図面)を作成した。なお、当初予定に入っていなかった岩橋荘を加えた理由は、県道の敷設によって同荘の要地(政所比定地岩橋家や蓮如所縁の法照寺)が改変されたためである。岩橋高柳遺跡および水軒堤防の発掘成果についても、和歌山県文化遺産課・同文化財センター・和歌山井堰研究会より調査資料の提供をうけて記入した。また惣国の比較研究として、根来寺門前大門池の水利調査を行なって都市空間の比較研究をした。2古文書調査・翻刻作業と荘園地図国立国文学資料館・史料館所蔵の「日前宮文書」「中橋家文書」、神奈川大学常民文化研究所所蔵の「日前宮文書(筆耕本・副本)」、水産庁資料館所蔵の「日前宮文書(筆耕本・正本)」(散逸)、和歌山市立博物館所蔵の「林家文書」「岩橋家文書」写真帳を調査・整理・閲覧して、日前宮領荘園・封郷についての解読を進めた。また、この問題についての第一人者である網野善彦教授に面談を求めて、懇切な御教示を得た(教授は二〇〇四年二月二十七日に病没し、我々が最後に接触した研究者と思われる)。それをもとに、東京大学史料編纂所所蔵の「紀伊国造家文書」、国文学資料館・史料館所蔵の「田所文書」、前出の日前宮文書(筆耕本・副本)」、「林家文書」「岩橋家文書」写真帳を調査・整理・閲覧して、日前宮領荘園・封郷についての解読を進めた。このうち主要な帳簿類についてはほぼすべてを翻刻して、データベース化した。1の荘園地図と照合し、和歌山平野の中世景観を解明した。また第3年次の最終段階において、研究協力者の野田阿紀子氏より、日前・国懸神宮の調査成果を提供いただいた。3成果報告書の刊行研究データをすべて提示する成果報告書を刊行した。上記1は第一章、2は第三章にすべて包括し、第二章考察編に検討成果論文を掲載した。
アルコール依存症者の飲酒欲求につながる感情体験の分析

アルコールの過剰摂取は、アルコール依存症はもとよりアルコール性肝硬変をはじめ様々な生活習慣病の引き金にもなるうえ、酒気帯び運転などの社会的問題にもつながるが、決定的な打開策に乏しく、古くて新しい問題である。アルコール依存症者の回復の基本は想像以上の困難を伴う断酒である。一般にアルコール依存症者は、自らが依存症であることを認めにくい上、たとえ周囲のサポートによって医療の場に現れても、気分の落ち込み、焦燥感、ストレスによって関与する人々に攻撃的態度を示しやすく、看護職は当事者に対して陰性感情をもちやすく看護介入しづらい。そこで本研究においては、アルコール依存症者が示す感情に焦点をあて、アルコール依存症者の飲酒欲求につながる感情体験を明らかにし、分析を行うことによってアルコール依存症者への新たな看護介入への示唆を得ることを目的とした。研究参加者は、アルコール依存症者のための自助組織に通いながら断酒を継続し、本研究の参加基準を満たし、研究参加に同意した36名の男性である。参加者に半構造化面接を行い逐語禄を作成し、累積KJ法によりデータを段階的に質的に分析した。その結果、アルコール依存症者は自分だけの主観的世界にこだわり、否定と肯定、反発と受容、甘えと行動が反転しながら循環し、葛藤し続けていた。何等かの個別の目標をたてて自分だけの主観的世界から飛び出し、客観的視点を得ながら体験を重ねる必要性が示唆された。飲酒を「やめたい」、「やめられない」といった自我意識を払拭できるほどの動機づけを得られるような環境を整えることが示唆された。アルコールの過剰摂取はアルコール依存症をはじめ、多くの人々の心身の健康や社会生活を損なう重要な要因である。これまでのアルコール依存症についての研究結果にはばらつきがみられ有力な打開策に乏しいのが実情である。アルコール依存症への医療的支援では自助組織と連携をとりつつ当事者自身が飲酒欲求につながる自己のありようについて深く省みるための支援が重要である。しかし、看護職や関与する周囲の人々はアルコール依存症者への感情的なわだかまりや、対応への困難感があり、適切な支援を提供しにくい現状にある。そこで本研究においては、アルコール依存症者自身の感情面に焦点を当て、アルコール依存症者の飲酒にまつわる感情体験やその意味、周囲との関係についての明確化を試みた。今年度実施した内容は以下のとおりである。(1)問題提起(平成21年4月6月)問題意識を深めつつ文献検討を行いインタビューガイドを作成した。(2)状況把握(平成21年7月8月)アルコール依存症者の自助組織に関与する男性で、DSM-IV、KASTによりアルコール依存症と認めら本研究への参加の同意を得られる研究参加者を募り、3名の研究参加者に半構造化面接を実施し、インタビューガイドの妥当性や面接の方向性を確認した。研究参加者には感情を表現しにくい場面もみられたため、「感情のリスト」を作成し、適宜提示して参加者の発言を促進するように工夫した。(3)本質追求(平成21年9月平成22年3月)20名の研究参加者に協力が得られ、半構造化面接を行った。飲酒欲求につながる感情体験には個別性があるものの、何らかの類型化の可能性も推測された。現段階では累積KJ法により段階的に緻密に分析を行っており、ほぼ研究計画書のタイムスケジュールどおりに行えている。また、情報収集と分析の全過程においては研究の妥当性を確保するために金沢大学大学院などで継続的に意見交換を行っている。アルコール依存症に関する研究は国内外である程度行われているものの、その有力な打開策に乏しい。そこでアルコール依存症者が飲酒に至ったきっかけから依存の形成、回復過程に至る実態を感情の側面から把握し、アルコール依存症者の飲酒につながる感情体験の分析を行うことによってアルコール依存症者の体験の意味や本質の明確化を試みた。

研究参加者は、現在アルコール依存症者のための自助組織に通い断酒を継続し、本研究の参加基準を満たし同意の得られた36名である。研究参加者に行った半構造化面接の録音から逐語録をおこし、累積KJ法による段階的なデータの分析を行うとともに、KJ法本部川喜田研究所や他研究者とのワークショップ、大学院ゼミ等における意見交換やスーパービジョンを受け、研究結果の妥当性の確保に努めた。累積KJ法は一般的に問題提起、状況把握、本質追究、構想計画、具体策、手順化の6ラウンドに分けられ、問題提起ラウンドにおいては、アルコール依存症者は窮地に陥り医療の場に登場しても断酒継続しか回復の方法がないことや、看護職から関与困難とみなされ支援の機会を逸しがちであることがわかった。そもそもアルコール依存症者についての統計的数値はまちまちであり、実態の把握自体が困難であり、慎重な対象理解が求められていることが示唆された。状況把握および本質追求ラウンドにおいては、研究参加者は飲んでも飲まなくても孤独で絶望しがちな気質への対処法としてアルコールを摂取しているうちに依存症になっていたが、依存症であることを認めたくない気持ちや、酒だけを救いとする信念があるため、受け入れがたい現実と自らの思いとの間で葛藤しながら自らと類似した体験をもつ人々との支えあいのなかで時間をかけて状況改善の方向に視点が変化していくことがわかった。今後本質追及をさらに深めたうえで、構想を練り具体策の手順化を行い、アルコール依存症への具体的な看護介入を検討する。
サルコペニアの疾患概念確立のためのバイオマーカーに関する研究

本研究は、加齢に伴う骨格筋量・筋力減少(サルコペニア)の危険性の調査およびスクリーニングとしての最適なバイオマーカーの確立を目的とした。1,サルコペニアの代謝性疾患に対する危険性に関する研究骨格筋は糖を貯蔵する働きがあることから,高齢者におけるメタボリックシンドローム(MS)では,サルコペニアが内臓脂肪とは独立して影響を及ぼしていることが推測された。そこで,2005年-2006年に関連施設において、腹部CTによる内臓脂肪計測および全身DXAによる四肢骨格筋量(SMI)計測を受けていた高齢女性90例を対象とし,保存血清を用いて追加検査を行い,ウエスト周囲径を除いたMSのリスク数に関する検討を行った。結果は,高齢女性におけるサルコペニアが,内臓脂肪とリスク数との関連をさらに増強させること,さらに内臓脂肪とは独立してリスク数と関連することが明らかとなった。2,サルコペニアのバイオマーカーに関する研究当院および関連施設の外来患者および入院患者に問診,身体計測(筋力測定含む),高齢者総合機能評価,血液尿検査,全身DXAを行い,検討を行った。四肢骨格筋量指標と下腿周囲径、ならびに握力の間に、有意な正の相関が認められた。四肢骨格筋量指標とBMIの間には有意な相関は認められなかった。血清レプチン濃度と体幹脂肪量指標との間に、有意な正の相関が認められた。血清レプチン濃度と四肢骨格筋量指標の間に、有意な負の相関が認められた。血清レプチン濃度に対する重回帰分析によれば、体幹脂肪量指標が独立した正の、四肢骨格筋量指標が独立した負の説明変数であった。高齢女性において、レプチンはsarcopenic obesityのバイオマーカーとなる可能性が示唆された。
「クレオール」のフランス文学

「移住者の子孫として植民地にルーツをもつフランス人作家」としてカミュ、デュラス、ル・クレジオを取り上げ、文学テクストの精緻な読解というミクロなアプローチと、そのテクストを歴史的、社会的、思想的文脈に位置づけるマクロなアプローチを有機的に関連させながら、植民地の表象を重層的に分析した。これらの作業を通じて、植民地帝国主義の膨張から脱植民地化にいたる18世紀から現代までのフランス文学の流れを新たな展望のもとに捉え直すことが可能になった。本研究では、これまで共通の枠組みのなかで問題にされることの少なかった、語本来の意味での「クレオール」(=植民地生まれの白人)の作家に焦点を合わせる。具体的には、フランス系アルジェリア人の子として生まれたカミュ、植民地に派遣されたフランス人教師を両親として仏領インドシナに生まれたデュラス、そして18世紀末にモーリシャス島へ移住し20世紀初頭までそこに根を下ろしていた家族に生まれたル・クレジオである。これらの作家は、いずれも自らの生まれ育った土地においては余所者の白人でしかなく、かといってフランス本国に帰属意識を持つこともできず、二重の外在性のなかに生きることを余儀なくされ、「支配者」とも「被支配者」とも異なる視点から植民地を見ているだろう。彼らの文学における植民地の表象が、エグゾティスム文学に見られる「支配する側によって外側から描かれた植民地」や、フランス語圏文学に見られる「支配される側によって内側から描かれた植民地」とどのように異なり、どのように重なるのかを考察することによって、植民地帝国主義の膨張から脱植民地化にいたる18世紀から現代までのフランス文学に新たな視座を引き入れることが本研究の目的である。初年度においては、本研究の対象である「移住者の子孫として植民地にルーツをもつフランス人作家による文学」を明確化したうえで、カミュ、デュラス、ル・クレジオの作品の分析を通して、まずは彼らにおいて植民地がどのような位置を占めているのかを明らかにすることを試みた。その作業と並行して、それぞれの作家のテクストが歴史的文脈のなかで持つ意味を検討するための準備として、アルジェリア、ヴェトナム、モーリシャスにおける植民の歴史や入植者の状況に関する資料の調査・収集を行った。2015年12月にパリの国立図書館や移民歴史館などで資料の調査・収集を行う予定でいたが、11月の同時多発テロの影響で渡仏を取りやめることとなったため、当初の研究計画の一部を遂行することができなかった。二年目の研究においては、初年度に引きつづきカミュ、デュラス、ル・クレジオの作品分析を行いつつ、「支配者」とも「被支配者」とも異なるまなざしを体現した「移住者の子孫として植民地にルーツをもつフランス人作家による文学」の特徴を、「旅行者として植民地を訪れたフランス人作家による文学」と「植民地の表象」という観点から比較することで浮き彫りにすることを試みた。2016年7月および12月にフランス国立図書館や移民歴史館にて植民の歴史や入植者の状況に関する資料の調査・収集を行った。旅行者として植民地を訪れたフランス人作家がどのように植民地を表象しているかについて、中継基地の飛行場長としてサハラ砂漠のキャップ・ジュビーに赴いたサン=テグジュペリの作品を分析した。また、ル・クレジオに関して、フランス語フランス文学会関東支部大会のシンポジウムで「ル・クレジオと夢」という題で発表を行った。この発表については今秋発行の『関東支部論集』に掲載される予定である。

彼らの文学における植民地の表象が、エグゾティスム文学に見られる「支配する側によって外側から描かれた植民地」や、フランス語圏文学に見られる「支配される側によって内側から描かれた植民地」とどのように異なり、どのように重なるのかを考察することによって、植民地帝国主義の膨張から脱植民地化にいたる18世紀から現代までのフランス文学に新たな視座を引き入れることが本研究の目的である。最終年度の研究においては、前年度に引きつづき対象とする作家の作品分析を行うのと並行して、デュラスが少女時代を過ごしたヴェトナムや、ル・クレジオの生まれ育ったニースを訪れて資料の調査・収集を行うとともに、マルセイユの地中海文明博物館、ナントの歴史博物館、パリの移民歴史博物館などにおいてフランスの植民地貿易や移民の歴史について知見を広げることによって、「移住者の子孫として植民地にルーツをもつフランス人作家による文学」の特徴を総合的に捉えることを試みた。「移住者の子孫として植民地にルーツをもつフランス人作家」としてカミュ、デュラス、ル・クレジオを取り上げ、文学テクストの精緻な読解というミクロなアプローチと、そのテクストを歴史的、社会的、思想的文脈に位置づけるマクロなアプローチを有機的に関連させながら、植民地の表象を重層的に分析した。これらの作業を通じて、植民地帝国主義の膨張から脱植民地化にいたる18世紀から現代までのフランス文学の流れを新たな展望のもとに捉え直すことが可能になった。まずは昨年度実施できなかったパリでの資料調査を遂行するとともに、引きつづきカミュ、デュラス、ル・クレジオの作品分析を行う。そのうえで、支配者」とも「被支配者」とも異なるまなざしを体現した「移住者の子孫として植民地にルーツをもつフランス人作家による文学」の特徴を、「旅行者として植民地を訪れたフランス人作家による文学」(=エグゾティスム文学)や「旧植民地におけるかつての被支配民族出身の作家が宗主国の言語で自らの世界を表現する文学」(=フランス語圏文学)との比較を通して浮き彫りにすることを試みる。引きつづきカミュ、デュラス、ル・クレジオの作品分析を行うとともに、それらの作家のルーツであるアルジェリア、ベトナム、モーリシャス島を訪れ、資料調査を行う。そのうえで、「支配者」とも「被支配者」とも異なるまなざしを体現した「移住者の子孫として植民地にルーツをもつフランス人作家による文学」の特徴を、「旅行者として植民地を訪れたフランス人作家による文学」(=エグゾティスム文学)や「旧植民地におけるかつての被支配民族出身の作家が宗主国の言語で自らの世界を表現する文学」(=フランス語圏文学)との比較を通して浮き彫りにしながら、三年間の研究の成果をまとめる。近現代フランス文学2015年12月にパリの国立図書館や移民歴史館などで資料の調査・収集を行う予定でいたが、11月の同時多発テロの影響で渡仏を取りやめることとなったことにともない、旅費として想定していた助成金を使用しなかったため。当初はアルバイトを使って資料の整理などを行うことを考えていたが、自分自身で行ったため人件費として想定していた額が未使用となった。当初2年目には海外での資料調査収集を1回予定していたが、初年度に行うことができなかった分をあわせて2回行うこととしたい。研究に必要な資料を追加して購入するための費用にあてるつもりである。
発生異常の分子機構のジーントラッピング法による解析

ジーントラップ用ベクターを作製した。これは、レポーター遺伝子としてプロモーターをもたないLacZ遺伝子、選択マーカーとしてAc-neo遺伝子、染色体から再回収するためのマーカーとしてアンピシリン耐性遺伝子とSupF遺伝子を含む。ES-MSI細胞を用いた予備実験では、600個のG418耐性クローン中、80個がX-gal染色陽性であった。さらにこのうち6クローンから、5'側隣接領域の回収を試みたところ、ベクターが複数挿入していた1例を除き容易に回収できた。またこのプラスミドをF9細胞に導入すると、4例でレポーター遺伝子が発現した。すなわち、レポーターの発現したトラップベクターは高率にプロモーターの直下に挿入してした。これらの中からES細胞の分化に伴い速やかにレポーターの発現が消失するクローンについて回収した領域を解析し、分化誘導に反応する最小領域を決定して塩基配列を調べたところ、典型的なオクタマー結合配列が2つ認められた。さらにゲルシフトほうによる解析の結果から、このプロモーターはOct-3の標的遺伝子の1つであると考えている。また、クローンからはキルラマウスができなかったので、回収したプラスミドを用いてトランスジェニックマウスを作製して、レポーターの発現パターンの解析を行った。このマウスの成体組織で、後頭葉の大脳皮質の限定された神経細胞と十二指腸の神経節細胞においてレポーターの発現を検出した。ES-D3細胞に用いて同様の実験を行った。ES細胞でレポーターの発現をみた14クローンのうち、12クローンからキメラマウスが得られ、このうち9クローンのキメラマウスからは、ES細胞由来のトラップベクターをヘテロにもつ個体が得られた。現在、胎生期におけるレポーターの発現パターンとホモ個体における表現型の解析を進めている。
酸化ストレスと小胞体-オルガネラ維持の分子機構

本研究では植物の酸化ストレス応答機構として、小胞体タンパク質BI-1によるオルガネラの維持機構を明らかにすることを目的として研究をおこなった。植物は種々の環境ストレスに適応して生育しており、そのために細胞の生死を柔軟に制御する機構を有している。BI-1は酸化ストレス誘導性細胞死の抑制因子として単離された小胞体タンパク質である。本研究では、小胞体のストレス耐性因子BI-1の細胞死抑制機構をその相互作用因子を単離、解析することにより解明することを目指した。これまでにBI-1に相互作用する因子としてはカルモジュリンとチトクロムb5が単離されている。このうち、本年度はチトクロムb5とBI-1の相互作用について詳細な解析を行った。すなわち、本因子は酵母を用いたtwo-hybrid法により単離された因子であるが、これらの相互作用が実際に植物細胞内で起きているかを、BiFC法やFRETの手法を用いることにより証明した。BI-1タンパク質は膜局在性であるために可溶化が難しく、これまで抗体の作成や、タグを用いたタンパク質検出法による相互作用解析が困難であった。そこで、蛍光タンパク質を用いたバイオイメージング法による相互作用解析の手法を取り入れたものである。BiFC法により、全長のBI-1と小胞体局在性のチトクロムb5の可溶性領域が植物細胞(タバコ)でも相互作用することを明らかにした。また、さらにFRET法を用いることにより、全長のBI-1と全長のチトクロムb5が相互作用できることを明らかにした。植物は種々の環境ストレスに適応して生育している。本研究では植物の酸化ストレス耐性機構として小胞体タンパク質によるオルガネラの維持機構を明らかにすることを目的として研究をおこなう。本年度は以下の成果を得た。小胞体のストレス耐性因子BI-1は、そのC末端領域にcoiled-coil領域を有しており、この部分を削った変異タンパク質はストレス耐性能を消失することが明らかとなっている。そこで本因子と結合する因子を様々な手法を用いて単離することを試みた。その結果、カルモジュリンがC末端領域に結合することが明らかとなった。また、酵母を用いたTwo Hybridスクリーニングからは、チトクロムb5が単離された。BI-1との結合領域を調べた結果、チトクロムb5はBI-1のC末端領域以外の場所に結合していることが明らかとなった。チトクロムb5はシロイヌナズナゲノム中に6種類存在し、ミトコンドリアおよび小胞体膜上に局在化する分子種が知られている。BI-1が小胞体膜タンパク質であることから、小胞体局在型のチトクロムb5が植物細胞内でBI-1との相互作用因子である可能性が考えられる。実際に、酵母を用いたスクリーニングにより単離された分子種も小胞体局在型のチトクロムb5であった。チトクロムb5は脂肪酸合成系の酵素群に電子を供給する役割を担っている。BI-1はチトクロムb5との結合を介して、酸化ストレスによりダメージを受けた膜成分の修復や、脂質シグナルの調節機構に関与しているのかもしれない。これらの仮説に基づいて、さらに詳細な解析を行っていく予定である。