hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
海底下の有機化合物バイオマーカーの炭素・水素同位体組成と生物活動

当初の予定通り、「海底下の大河」プロジェクトで実施された沖縄トラフの伊是名熱水域における研究航海(KT-10-23)に参加し、海底表層ピストンコア堆積物の脂質バイオマーカーの同位体組成研究を行った。試料は泥質堆積物で、表層から深度135cmまでの6つの深度について分析し、有機炭素量は最大1.9%まで含まれていた。炭化水素画分ではジノルポパンとジプロプテンなどの3つのC_<30>ホペンが多く検出されたのに対して、n-アルカンなどの飽和直鎖炭化水素は全く検出されなかった。また、これらホパノイドの炭素同位体比をガスクロマトグラフ燃焼同位体比質量分析計によって測定したところ、-49-45%。に分布し、主に化学合成バクテリア起源であることがわかった。さらに、脂肪酸画分ではC_<16>飽和脂肪酸やC_<32>ホパン酸が存在した。一方で、アルコール画分をヨウ化水素酸で分解したものについては、C_<40>イソプレノイド炭化水素などは検出されず、グリセロールジアルキルグリセロールテトラエーテル(GDGTs)やアーキオールなどのイソプレノイドエーテル脂質は存在せず、古細菌からの寄与はほとんどないことがわかった。これらの結果は伊是名熱水域の表層においては化学合成バクテリアが主に基礎生物活動を担っていることを示す。航海中に堆積物コアの間隙水で測定された硫酸塩やアンモニアの濃度が高かったことから、硫酸イオンやアンモニアイオンを使って代謝を行うバクテリア(アンモニア酸化細菌や硫酸還元菌)が重要な役割を果たしていると考えられる。「海底下の大河」プロジェクトで実施された沖縄トラフにおける2009年7月の鳩間海丘(NT09-11)および2009年10月の伊平屋北海丘(NT09-17)の研究航海で採集されたシンカイヒバリガイについて、脂質バイオマーカーの存在量とその炭素同位体比の分析を行った。試料を有機溶媒で超音波抽出後、アルカリケン化・シリカゲルカラムによって、炭化水素と脂肪酸画分に分画した。脂肪酸についてはメチルエステル化誘導体化を行った。得られた画分のそれぞれについて、ガスクロマトグラフ質量分析計にて化合物の同定を行い、ガスクロマトグラフ燃焼同位体比質量分析計にて炭素同位体比(δ^<13>C)を測定した。その結果、両方の試料からメタン酸化細菌由来と考えられるホパノイドであるジプロプテンが検出された。また、最も多く存在する脂肪酸はどちらの試料でもC_<16>の一不飽和脂肪酸であり、脂肪酸のδ^<13>Cは-51-44‰(鳴間海兵)と-56-47‰(伊平屋北海丘)であった。これらの値は過去に研究されたそれぞれの熱水噴出孔からのメタンの炭素同位体比(鳩間海丘:-48‰、伊平屋北海丘:-54‰)とほぼ一致した。両シンカイヒバリガイともにメタン酸化バクテリアを一次生産者として共生させ、メタンを炭素源としていることがわかった。残念ながら、試料量の関係からジプロプテンの同位体比を測定することができなかった。今後の課題として、脂質バイオマーカーの水素同位体比測定の他、堆積物やチムニー中に存在すると考えられるバクテリア・アーキアのバイオマーカーを検出することが挙げられる。それらの結果から海底下における微生物バイオマーカーの同位体的特徴を明らかにし、炭素源や水素源と微生物の代謝系を解明する。
無脊椎動物ミトコンドリアmRNAにおけるRNA編集の探索と5'末端領域の解析

尾索動物マボヤ(Halocynthia roretzi)ミトコンドリアDNAの解析の過程で、NADHデヒドロゲナーゼサブユニット4L(ND4L)遺伝子が、その下流のtRNA^<Cys>遺伝子と、同一転写方向で10塩基重なっていることが推測された。後生動物ミトコンドリアtRNAの遺伝子が下流遺伝子と同一転写方向で重なっている場合、そのtRNAがRNA編集の対象であることが知られている。遺伝子の重複の組み合わせはそれとは異なるが、このtRNA^<Cys>とND4LmRNAでもRNA編集がないかを検証した。tRNA^<Cys>と、その遺伝子の下流に配置しいかなる遺伝子とも重複していないtRNA^<Lys>遺伝子の産物であるtRNAとを、環状化して、そのcDNAを合成し、PCRで増幅後、クローニングし、その塩基配列の解析を行った。その結果、tRNA^<Cys>では5'-末端に4塩基の伸長が見られるた。また、ND4L mRNAの3'-末端領域は、oligo dTプライマーを用いてcDNAを合成し、そのプライマーとND4L mRNA特異的プライマーを用いたPCRによってcDNAを増幅し、クローニング後、塩基配列の解析を行った。ND4LmRNAでは塩基配列を解析したcDNAの大部分で、終止コドンが見られない、と言う結果が得られた。さらに、ND4L mRNAでは、遺伝子の塩基配列とは異なる塩基が一部見られるので、これがRNA編集に関係ないかどうかを検証中である。また、マボヤミトコンドリアの小サブユニットリポソームRNAの5'-末端及び、3'-末端のRNAレベルの配列を、cDNAの塩基配列を解析することによって明らかにすることを試みた。その結果、この小サブユニットリポソームRNAは、現在知られているものの中で最も短いものの一つであることが推定された。線形動物Ascaris suumミトコンドリア(mt)mRNAの解析を行った。A.suumのmtDNAにコードされているCytochrome oxidase subunit III (COIII)遺伝子はGUUコドンを開始コドンとして用いると考えられている。実際にこのGUUコドンが開始コドンとして用いられているのか、RNA編集の可能性がないのかを明らかにするため、A.suumの全RNAを用いて、5 ́-RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)を行い、COIII mRNAの5 ́-領域の解析を行った。解析した範囲では、A.suumミトコンドリアでは現在のところ、RNA編集の存在は確認されていない。この種については、5 ́-末端領域に限定せず、3 ́-末端領域についても、また、他のRNAについてもさらに解析を進める予定である。また、脊索動物(尾索動物)マボヤHalocynthia roretziミトコンドリア(mt)RNAの解析を行った。現在のところ、RNA編集の発見には至らないが、幾つか遺伝子配列の情報から予想していた位置とは大きく異なる位置でプロセシングされているRNA分子(mRNA及びtRNA)を見出したので、RNA編集との関連も考えながら解析を行っている。また、各種DNAデータベースより、無脊椎動物mtDNAの塩基配列データを入手し、それらについて、RNA編集の可能性について、さらに検討中である。
特別支援教育における作業療法ストラテジーの探索―School AMPS有用性

本研究の目的は,軽度発達障害児を対象に,学校版運動とプロセス技能評価(School AMPS)を用いた作業療法(以下OT)の成果を明らかにすることである。SchoolAMPSは教室における児童の課題遂行を観察評価し,運動とプロセス能力測定値を算出するものである。研究方法は,幼稚園等に通う児童9名(男性8名,女性1名,平均年齢5歳5ヶ月,軽度発達障害児6名,疑いのある児童3名)を介入群として,School AMPSの結果をもとにOTを実施し,約4か月後の再評価との差を比較した。また,幼稚園等に通う児童9名(男性6名,女性3名,平均年齢5歳2ヵ月,軽度発達障害児4名,疑いのある児童5名)を対象群とし,School AMPSのみを初回と約3か月後に実施し,その差を比較した。介入群,対象群それぞれの運動とプロセス能力測定値の初回と再評価の差をPahgedT検定を用いて分析した。その結果,介入群の運動能力測定値はp=0.033,プロセス能力測定値はp=0.020(p<0.05)となり,両者ともに有意差が認められた。その一方で,対象群の運動能力測定値はp=0.074,プロセス能力測定値はp=0.495(p>0.05)となり,両者ともに有意差が認められなかった。すなわち,School AMPSを用いてOTを実施した場合にのみ,児童の運動能力とプロセス能力に有意な改善がみられた。さらに,School AMPSを用いたOT介入を経験した11名の教員に対する調査では,全員が「School AMPSとOT介入が役に立った」,「作業療法士の関わりや提案が必要だ」と回答していた。以上の結果から,School AMPSを用いて児童の課題遂行を評価し,その結果をもとに教員と協働することで児童の課題遂行能力が改善し,教員がSchool AMPSを用いたOTの成果を実感していることが示唆された。本研究の目的は,わが国の養護学校,小学校・幼稚園におけるSchool AMPSを用いた作業療法介入の成果と学校現場における作業療法士の役割を明らかにすることである。作業療法独自の評価法の1つであるSchoolAMPSは、作業療法士が5日間の講習会に参加し、その後3カ月以内に米国AMPSプロジェクトに10名分の評価データを送り、評価者寛厳度の認定を受けて使用することができる。現在、わが国でSchool AMPSの認定評価者はわずか数名であり,わが国でのSchool AMPSの利用は始まったばかりである。そこで,今年度は,第42回日本作業学会でワークショップ「AMPSを使った作業療法の実際-学校版運動とプロセス技能評価School AMPS」を実施し,School AMPSについての見識を広めると共に,研究協力者を募った。その後,茨城県立医療大学においてSchoolAMPS講習会の開催を企画・実施し(2009/3/202009/3/25:5日間),養護学校及び小学校・幼稚園・保育所・児童デイケア等に非常勤又は常勤で務めているか、またはデータ収集期間(3ヵ月間)養護学校及び小学校・幼稚園に関わってくれる研究協力者7名に,SchoolAMPS講習会に参加してもらい,認定評価者の資格を取得してもらった。さらに, School AMPSに関する説明書とインフォームド・コンセント用紙を作成し,各協力者が勤務する或いは関わっている施設にデータ収集の協力を依頼した。現在,6施設より承諾を得ており,データ収集を開始している。
アリールホウ素置換基を有する遷移金属錯体を利用した新規人工光合成系の創製

27年度が最終年度であるため、記入しない。
免疫抑制剤による人為的な骨粗鬆症と骨移植に起因する骨吸収の分子遺伝学的制御

平成13年度はラットに免疫抑制剤FK506を連日28日筋肉注射(1mg/kg)し骨粗鬆症モデルラットを作製した。まずFK506投与骨粗鬆症モデルラットを組織学的に観察した。その結果組織学的にはFK506による実験群の骨吸収は、enchondral ossificationより下方でtrabecula boneの減少が認められ、またTRAP染色に陽性な破骨細胞はenchondral ossificationでコントロール群より明らかに数が増加していた。次に破骨細胞分化因子(ODF)と破骨細胞形成抑制因子(OCIF)遺伝子の発現を見るためRT-PCRのプライマーを設計しラットから脛骨を摘出しホモジナイズした後、抽出したmRNAをcDNAに転写しRT-PCRを行った。さらに雪印乳業から提供されたODF、OCIF遺伝子をクローニングし、ODFとOCIFのRNAプローブを作製し、In situ hyburidydation(ISH)で観察をした。OCIFはRT-PCR、ISHの両方ともにコントロール群と実験群ではほとんど差は認められなかった。しかし、ODFはRT-PCRでは明らかに実験群にてmRNAの発現が増加しており、また組織学的に破骨細胞の増加するenchondral ossificationから下方部に一致してISHでもODFの発現が実験群で強くなっていた。このことからFK506は骨芽細胞に作用して、ODFmRNAの発現を増加させ破骨細胞の分化・成熟を促し、増加が起こったことにより骨粗髪症が発症したことが今回の実験によって証明できた.平成l4年度は、免疫抑制剤FK506からODF、OCIFへのシグナル伝達機能を確認する目的で、上流の影響因子の検討を行った。まず最初に全身的な影響を見るために、コントロール群、実験群の血清を採取し破骨細胞の分化に影響を及ぼすサイトカインをELISA法にて検討した。その結果、IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-17を測定したがすべてのサイトカインにおいてコントロールと有意差は認めなかった。次に局所的な影響を観察するためにコントロール群、実験群の脛骨を摘出し、ホモジナイズした後タンパク質を抽出しWestern blot法を行った。検討したサイトカインは、破骨細胞の形成を促進するIL-1α,βやIL-6で、その結果は変化がなかった。以上のことから破骨細胞の分化に関与していると言われているサイトカインと免疫抑制剤による骨吸収とは関係ない可能性が出てきた。

次に破骨細胞分化因子(ODF)と破骨細胞形成抑制因子(OCIF)遺伝子の発現を見るためRT-PCRのプライマーを設計しラットから脛骨を摘出しホモジナイズした後、抽出したmRNAをcDNAに転写しRT-PCRを行った。さらに雪印乳業から提供されたODF、OCIF遺伝子をクローニングし、ODFとOCIFのRNAプローブを作製し、In situ hyburidydation(ISH)で観察をした。OCIFはRT-PCR、ISHの両方ともにコントロール群と実験群ではほとんど差は認められなかった。しかし、ODFはRT-PCRでは明らかに実験群にてmRNAの発現が増加しており、また組織学的に破骨細胞の増加するenchondral ossificationから下方部に一致してISHでもODFの発現が実験群で強くなっていた。このことからFK506は骨芽細胞に作用して、ODFmRNAの発現を増加させ破骨細胞の分化・成熟を促し、増加が起こったことにより骨粗鬆症が発症したことが今回の実験によって証明できた.以上の結果を現在論文にまとめ国際雑誌に投稿中である。今後の研究は平成14年度には、免疫抑制剤FK506からODF、OCIFへのシグナル伝達機能を確認する目的で、上流の影響タンパクのwestern blot法、免疫組織化学染色を行う予定である。平成13年度はラットに免疫抑制剤FK506を連日28日筋肉注射(1mg/kg)し骨粗鬆症モデルラットを作製した。まずFK506投与骨粗鬆症モデルラットを組織学的に観察した。その結果組織学的にはFK506による実験群の骨吸収は、enchondral ossificationより下方でtrabecula boneの減少が認められ、またTRAP染色に陽性な破骨細胞はenchondral ossificationでコントロール群より明らかに数が増加していた。さらに雪印乳業から提供されたODF、OCIF遺伝子をクローニングし、ODFとOCIFのRNAプローブを作製し、In situ hyburidydation (ISH)で観察をした。このことからFK506は骨芽細胞に作用して、ODFmRNAの発現を増加させ破骨細胞の分化・成熟を促し、増加が起こったことにより骨粗鬆症が発症したことが今回の実験によって証明できた.平成14年度は、免疫抑制剤FK506からODF、OCIFへのシグナル伝達機能を確認する目的で、上流の影響因子の検討を行った。まず最初に全身的な影響を見るために、コントロール群、実験群の血清を採取し破骨細胞の分化に影響を及ぼすサイトカインをELISA法にて検討した。
介護によって家族を看取ることによる生涯発達-「ケアすること」の両価的側面-

愛する人を喪う死別経験,身近な他者の介護をしながら老いを目の当たりにし看取るという経験は,やはり耐え難い経験である。その否定的な側面を十分に認め,それぞれの経験には多様性があること,そして一人の同じ人間であっても,時間や環境,当事者の心身の健康状態等によって,喪失経験後の受け止め方に変化が生じるということを理解しなければいけないことが示された。その上で,介護や死の看取りを経験することが,我々に生きるということを教えてくれると同時に,他者の危機を支えることで,自己の心にも成熟をもたらす可能性があり,ケアすることが意義あることであるという提案がなされた。現在、家族を介護している方と、以前介護を行って、既に看取った方を対象として、看取りを行う(行った)中で、ケアすることによる発達が、どのようなプロセスを経て認められるのかを明らかにすることを目的し、研究を遂行している。また身近な他者との死別と死別経験後のこころの発達の関連についても検討している。初年度の平成19年度は、以下の2つを中心に研究を行った。1.介護肯定感や負担感、ケアにおける性差の扱われ方等、ケアに関する国内外の研究動向を調査し、先行研究の成果とそれらの問題点を整理する理論的検討を行った。その結果、ケア研究の対象者の大部分は女性であり、男性がケアをすることの意味というものが検討されている論文は皆無に等しいということ、ケアを行う際の心理を検討する際に、肯定感のみの視点、反対に負担感のみの視点からの検討では不十分であり、多面的で両価的な側面を包含した視点からの検討が必要であることが明らかになった。2.上記1の結果をもとに「死別経験による人格的発達」に関する質問紙を作成し、調査を実施した。その結果、身近な他者との死別によって、死別経験後「自己感覚の拡大」「死に対する恐怖」「死への関心」の3側面の変化が認められた。また経験した死別に対して、ショックが大きかった場合に、またこれまでの人生の中で、もっともストレスフルな出来事であると認識していた場合に、死別経験による人格的発達得点が有意に高かった。この調査結果から、死別経験者自身にとって、死別が人生を揺るがすほどの出来事であり、深い落ち込み、哀しみを経験したと認知した場合に、死別経験後、人格的発達といえるポジティブな発達が認められることが示唆された。以上の結果を踏まえ、平成20年度は、介護者を対象にした面接調査を実施し、質的アプローチを行う予定である。平成20年度は、介護経験や死別経験が、生涯発達的にどのような意味をもつのかということに焦点化し、以下の3つを中心に研究を遂行した。1.死別や介護を中心に、喪失経験後のこころの発達に関して、国内外の論文を概観し、その中で喪失経験後のこころの発達がどのような文脈で研究され始め、現在どのように展開されているのかについて、研究動向を示しながら、今後の研究の方向性について考察を加えたレビュー論文を作成した。2.死別経験や介護経験は、成人期以降に遭遇するものではなく、年齢を問わず経験する可能性がある。しかしながら、死の外部化により、高齢者介護の現場や看取りの場面に遭遇することは少なくなっている。そのため、学校教育において、いのちの教育を行う必要性があると考えられるが、そのための予備的調査として、大学生を対象に、いのちの教育の経験の有無や必要性について等を調査した。その結果、大学生の多くがその必要性を認めていることが明らかとなった。3.死別経験や介護経験が死に対する態度にどのような影響を及ぼすのかに関して、青年期を対象に調査を実施した。その結果、介護経験においては、介護を間近で見ること、また介護に参加することによって、介護について考え、それが死についても考えることにつながり、死をむやみに恐れたり、軽視したりといったことが軽減され、死を他人事ではなく、自己の問題として捉えるようになることが示唆された。また死別経験においては、死別経験の有無ではなく、対象者にとって、その人との死別がどれほど重要なものであったのかといった死別の内容との関連が認められた。平成21年度は、生涯発達的視点から、介護や死別経験が個の発達にどのような影響をおよぼすのかについて、以下を中心に研究を遂行した。1.昨年度、アンケート調査を実施した、学校教育におけるいのちの教育の必要性に関する検討を論文として発表した。その際には、学校教育においていのちの教育を受けたかどうかと死に対する態度との関連、身近な他者との死別経験の有無と死に対する態度との関連を中心に分析をした。その結果、いのちの教育についても、死別経験についても、経験があるかないかということではなく、その内容、つまり経験の質と死に対する態度には関連があることが明らかになった。

2.身近な他者を介護する経験が、成人期以降の女性にどのような影響を及ぼすのかについて明らかにするために、現職の女性教員を対象にキャリア発達の視点からの検討を行った。その結果、結婚時や出産・育児期と比較して、介護をすることになった場合は離職を考える割合が多いことが明らかになった。また人生の節目に関しては、身近な他者との死別経験が多くあがっており、それにより、人格的に成長・発達したと感じるという記述が多く認められた。以上の一部と、これまでの3年間の成果を著書(分担執筆)としてまとめた。
商用周波数励磁下における電磁鋼板の鉄損の解析評価装置の試作

前年度に完成したラインサンプリング・マルチフレーム・ストロボ観察システムを用いて実際に生産されている方向性電磁鋼板を商用周波数下で励磁して、磁壁の移動のストロボ観察を行った。この結果鉄損の大きい試料は、磁区が均一に分布せずかつその特効も円滑に行われていないことが上記観察より明らかとなり、本研究で開発した解析評価方式が実用非常に有用であることが確かめられた。特に励磁を上げて飽和領域に達するようになると磁区の生成消滅が生じてストロボ像特有の模様がみられることを新らたに見出した。又、方向性電磁鋼板のみならずアモルファス電磁薄板にも応用した結果、方向性電磁鋼板と同等の鮮明な磁区の観察が得られ、本方式がアモルファス試料にも有用であることが明らかとなった。得られた結果は次の通りである。(1) 5ミクロンのガラス被膜をもつ方向性珪素電磁鋼板(実用試料)について、鉄損の大きいものと小さいものとを選んでストロボ観察を行った結果、磁区の均一性、磁壁移動の円滑さが評価の有用な要因となることを実際に確かめることが出来た。(2)励磁電力を増加させ飽和領域に達するようになると磁区の生成消滅が生じてストロボ観察に特有の模様を示すことを見出し、この模様が試料の性質に密接な関係があることを見出した。(3)本方式をアモルファス電磁薄板に応用した結果、方向性電磁鋼板と同様、鮮明な磁区の観察が出来ることを確認し、本研究で開発した評価方法がアモルファス試料へも適用出来ることを確かめた。今後は、より広領域の走査像観察が出来るよう、装置本体(JEM-200B)の改造が必要と思われる。又、回路系の改良を行うことによって時間変化を詳細に追跡出来るようになるものと期待される。
中期ビザンツ帝国における婚姻と『抜粋集』の位置付け

本研究では12世紀の法学の復活以降、西欧において主要な法分野となったローマ法と教会法の関係を検討するため、西欧における法学の復活以前からローマ法と教会法を共に取り入れていた領域であるビザンツの法制史を検討する。検討に際しては、以降の法史料へ強い影響を与えたとされる8世紀の法整理『抜粋集』を基軸として、10世紀までに編纂された法典・教会法法源・法学者の著作を検討対象とする。以降のローマ法・教会法史料をテキスト・内容・用語法の点で『抜粋集』と比較することで、『抜粋集』の影響力の継続を検討する。さらに『抜粋集』の取り扱いの相違から、8世紀以降のビザンツにおけるローマ法・教会法の関係性を検討する。
魚種特有のイオン環境適応能と塩類細胞の機能の多様性

ウミメダカやティラピアなどの広塩性魚は、同一の個体が淡水、海水の双方に適応する能力を有している。またウグイはpH4以下の強酸性環境にも耐え得る。このように魚が多様なイオン環境に適応する上で、鰓の塩類細胞が重要な役割を担っている。1.ウミメダカ:成魚を海水および淡水に1か月間馴致した。鰓および鰓蓋膜の塩類細胞をFITCで標識したNa^+,K^+-ATPase抗体を用いて免疫染色し、レーザースキャン顕微鏡で観察した。その結果、鰓および鰓蓋膜の塩類細胞は海水群よりも淡水群で大きく発達していた。さらに、鰓の塩類細胞の微細構造を透過型電子顕微鏡および走査型電子顕微鏡で観察したところ、海水中では環境水に接する塩類細胞の頂端部が陥入しピットを形成していたのに対し、淡水中では頂端部がピットを形成せず、微絨毛が発達し表面積が著しく増大していた。また、微絨毛の周辺には数多くの小胞が観察された。これまで塩類細胞は、海水中で大きく発達し体内に過剰となる塩分を排出するという捉え方が一般的であったが、本研究の結果は塩類細胞の淡水中におけるイオンの取込みを示唆するものである。2.ウグイ:酸性環境に適応したウグイの鰓からNa^+/H^+ exchanger(NHE3)をクローニングした。このイオン輸送タンパクはH^+を排出すると同時にNa^+を取込むもので、酸性環境下で発現が高まっている。またNHE3は濾胞状に発達した塩類細胞の頂部側に局在することが、免疫組識化学により明らかとなった。塩類細胞に存在するNHE3は、ウグイばかりではなく魚類全般の酸性耐性メカニズムの本質を担う分子である可能性が高い。3.ティラピア:淡水飼育したティラピアをpH4.5の酸性環境で飼育したところ、環境水に接する頂端部が著しく拡張した塩類細胞が鰓で頻繁に観察された。このような形態を示す塩類細胞は中性の淡水で飼育した魚では認められず、ウグイの場合と同様に、酸性環境に適応する上で塩類細胞がH^+の排出とNa^+の取込みを行っているものと推察される。一般に、海水中では体内に過剰となる塩類を鰓の塩類細胞から排出し、淡水中で不足するNa、Cl、Caなどのイオンを塩類細胞から取込むことで、いずれの環境でも体内のイオン濃度を生理的範囲内に保っている。本年度は、魚類が様々なイオン環境に適応する際の生理学的機構を、ウミメダカを実験材料に用いて調べた。ウミメダカ成魚を海水および淡水に1か明間馴致した。鰓および鰓蓋膜の塩類細胞をFITCで標識したNa^+,K^+-ATPase抗体を用いて免疫染色し、レーザースキャン顕微鏡で巨視的観察を行った。

さらに、鰓の塩類細胞の微細構造を透過型電子顕微鏡および走査型電子顕微鏡で観察したところ、海水中では環境水に接する塩類細胞の頂端部が陥入しピットを形成していたのに対し、淡水中では頂端部がピットを形成せず、微絨毛が発達し表面積が著しく増大していた。また、微絨毛の周辺には数多くの小胞が観察された。一方、Na^+,K^+-ATPase活性および酸素消費量に淡水、海水両群間で差が認められず、淡水中でも海水中と同程度にエネルギーを消費して体液浸透圧が調節されていることが示唆された。これまで塩類細胞は、海水中で大きく発達し体内に過剰となる塩分を排出するという捉え方が一般的であったが、本研究の結果は塩類細胞の淡水中におけるイオンの取込みを示唆するものである。ウミメダカやティラピアなどの広塩性魚は、同一の個体が淡水、海水の双方に適応する能力を有している。またウグイはpH4以下の強酸性環境にも耐え得る。このように魚が多様なイオン環境に適応する上で、鰓の塩類細胞が重要な役割を担っている。1.ウミメダカ:成魚を海水および淡水に1か月間馴致した。鰓および鰓蓋膜の塩類細胞をFITCで標識したNa^+,K^+-ATPase抗体を用いて免疫染色し、レーザースキヤン顕微鏡で観察した。その結果、鰓および鰓蓋膜の塩類細胞は海水群よりも淡水群で大きく発達していた。2.ウグイ:酸性環境に適応したウグイの鰓からNa^+/H^+exchanger(NHE3)をクローニングした。このイオン輸送タンパクはH^+を排出すると同時にNa^+を取込むもので、酸性環境下で発現が高まっている。またNHE3は濾胞状に発達した塩類細胞の頂部側に局在することが、免疫組識化学により明らかとなった。塩類細胞に存在するNHE3は、ウグイばかりではなく魚類全般の酸性耐性メカニズムの本質を担う分子である可能性が高い。3.ティラピア:淡水飼育したティラピアをpH4.5の酸性環境で飼育したところ、環境水に接する頂端部が著しく拡張した塩類細胞が鰓で頻繁に観察された。このような形態を示す塩類細胞は中性の淡水で飼育した魚では認められず、ウグイの場合と同様に、酸性環境に適応する上で塩類細胞がH^+の排出とNa^+の取込みを行っているものと推察される。
トロンボモジュリン固定化法を用いた血液凝固抑制能を有する医用材料の開発

本研究の目的は、トロンボモジュリンの特性を活かし、これを材料表面に固定化した血液凝固阻止材料を開発することである。これまでに、遺伝子工学によって合成されたヒト由来のトロンボモジュリンをポリエチレン、セルロースフィルムなどの高分子材料に固定化し、その優れた抗血栓性について明らかにしてきた。今回は、トロンビンと相互作用する活性部位に相当するフラグメントのトロンボモジュリンを固定化し、機能発現について従来のトロンボモジュリンと比較をした。また、近年、表面プラズモン共鳴(SPR)を測定原理とするバイオセンサーが簡便に扱えるようになり、生体分子の相互作用の研究に用いられている。そこで、トロンボモジュリンとトロンビンの生体内における相互作用をより詳細に観察するためにSPRを測定原理とするBIA coreを用いて検討した。トロンボモジュリンは、アクリル酸をグラフト重合させたポリエチレンフィルムに水溶性カルボジイミドによって共有結合させることで固定化し抗血栓性の発現を評価した。BIA core測定は、リガンドとしてトロンビンを用い、アナライトとしてトロンボモジュリンを用いた。フラグメントのトロンボモジュリンの固定化が可能であり、従来のトロンボモジュリンとほぼ同じ抗血栓性を示した。BIA core測定では、トロンビンに対する解離定数がフラグメントおよび従来のトロンボモジュリンともにほぼ同等であったことから、トロンビンとの相互作用は同じであることがわかった。よって、活性部位に相当するフラグメントのトロンボモジュリンもまた抗血栓性材料として用いることができることが明らかになった。トロンボモジュリン(TM)は血管内皮細胞上に存在し血管の本質的な抗凝固活性の発現の中心物質であると考えられている。本研究の目的は遺伝子組み替え型トロンボモジュリンの特性を活かし、これを材料表面に固定化した血液凝固阻止材料を開発することである。本年度はTM固定化用基材として種々の医療用グレードの素材をフィルム状で使用した。官能基を有しない素材の表面を、コーティング法、放電処理法、グラフト重合法を用いて改質した。TMの固定化は放電処理表面を除いて再現性よく行えたが、最も効果的であったのはグラフト重合法によるアクリル酸グラフト表面であった。TMの固定化はカルボジイミド法(グラフト表面に対して)およびシアノゲンブロマイド法(セルロースに対して)を用いた。前者の方法で行った場合の方が固定化量が多かったが、それぞれの固定化トロンボモジュリンの機能測定を血液の凝固能、トロンビン結合能、プロテインC活性化能、血液細胞付着能を測定して検討した結果、いずれの場合も十分な抗血栓性を有していることが明らかになった。TMの固定化量に依存する機能であるトロンビン結合能はTM固定化量が多いほど高いことを考慮すると、固定化層の最外層にあるTMが抗血液凝固活性を発現するために、それぞれの材料において血液凝固活性に差が出なかったと考えられる。また臨床応用の場合を想定して、血液透析に用いられているセルロース中空糸内部にTMを固定化した。この中空糸を用いて、抗血液凝固活性の予備検討を行った。その結果、中空糸内部に固定化されたTMも比較的高い血液抗凝固活性を示すことが明らかになった。これらの成果から動物実験に使用するためのモジュール作成についての基礎的なデータが得られた。本研究の目的はトロンボモジュリンの特性を活かし、これを材料表面に固定化した血液凝固阻止材料を開発することである。具体的には、トロンボモジュリンを現在血液接触用材料として使用されている素材、例えば体外循環用脱血チューブの素材であるポリ塩化ビニルやポリウレタンおよびセルロース等に固定化し、血液凝固抑制能を測定してその有用性を確認する。本年度の成果は以下に示すとおりである。(1)トロンボモジュリンの新規固定化法の検討:複雑な形状の人工臓器表面に固定化するための新しい固定化法について検討した。

具体的には、トロンボモジュリンを有機溶媒可溶に改質し、材料表面へのコーティングを可能にした。反応時間を調整することにより、アルコールに可溶で界面活性剤による洗浄によっても脱離しにくい修飾トロンボモジュリンの合成に成功した。(2)チューブの作成:疎水化トロンボモジュリンを用いてシート状およびチューブ場に加工した素材への固定化を行った。これらは次項のex vivo実験に使用した。(3)従来の抗血栓性材料との比較:セグメント化ポリウレタンやヘパリンを固定化した抗血栓性材料との機能の比較を行った。トロンボモジュリン固定化材料はヘパリン固定化材料より優れた抗血栓性を示した。また、補体系を不活性化する効果も観察された。後者については確認中である。本研究の目的は、血管内皮細胞膜に存在し血管内の血液凝固を制御するタンパク質であるトロンボモジュリンの特性を活かし、これを材料表面に固定化した血液凝固阻止材料を開発することである。これまでに、遺伝子工学によって合成されたヒト由来のトロンボモジュリンをポリエチレン、セルロースフィルムなどの高分子材料に固定化し、その優れた抗血栓性について明らかにしてきた。最終年度の9年度は、トロンビンと相互作用する活性部位に相当するトロンボモジュリン-フラグメントを固定化し、機能発現について従来のトロンボモジュリンと比較した。また、近年、表面プラズモン共鳴(SPR)を測定原理とするバイオセンサーが簡便に扱えるようになり、生体分子の相互作用の研究に用いられている。そこで、トロンボモジュリンとトロンビンの生体内における相互作用をより詳細に観察するためにSPRを測定原理とするBIA coreを用いて検討した。トロンボモジュリンは、アクリル酸をグラフト重合させたポリエチレンフィルムに水溶性カルボジイミドによって共有結合させることで固定化し抗血栓性の発現を評価した。BIA core測定は、リガンドとしてトロンビンを用い、アナライトとトロンボモジュリンを用いた。本研究により、トロンボモジュリン-フラグメントの固定化が可能であり、従来のトロンボモジュリンとほぼ同じ抗血栓性を示すことがわかった。BIA core測定では、トロンビンに対する解離定数がフラグメントおよび従来のトロンボモジュリンともにほぼ同等であったことから、トロンビントトの相互作用は同じであることがわかった。よって、活性部位に相当するトロンボモジュリン-フラグメントもまた抗血栓性材料として用いることができることが明らかになった。
マルチオミクス解析による翻訳制御異常に着目したALS/FTDの病態解明

ヒトの筋委縮性側索硬化症/前頭側頭型認知症(ALS/FTD)の発症に深く関わるTDP-43の機能については不明な点が多い。本研究では、TDP-43のmRNA翻訳機能の制御不全が神経細胞の興奮性異常および病態の発現に深く関与するとの仮説に基づき、TDP-43による翻訳制御に関わるタンパク質とmRNAをターゲットとした新たなマルチオミクス技術を開発し、ALS/FTDの発症機序の解明を目指す。
溶血性レクチンの機能的発現と高機能化に関する研究

溶血活性を有するレクチンCEL-IIIについて、バキュロウイルス-昆虫細胞発現系を利用して可溶性状態での機能的発現に成功した。次に、CEL-IIIの5つの糖結合部位のうち、それぞれ1つに変異を導入することによってその部位の糖結合能が消失した5種のCEL-III変異体を作製し、それらの溶血活性測定と糖結合における速度論的解析を行って、CEL-IIIの溶血活性発現に強く関与する領域を推定する事が出来た。本研究は、動物由来レクチンで唯一溶血活性を示すことが知られているCEL-III(Cucumaria echinata lectin-III)について、(1)バキュロウイルス-昆虫細胞による発現系を用いて溶血活性を保持した組換え型CEL-IIIタンパク質の機能的発現系を構築して、(2)溶血時の膜貫入・会合体形成ステップに直接関与するアミノ酸残基をCEL-IIIの変異体解析により同定して、CEL-IIIによる溶血メカニズムの全体像を明らかにするとともに、(3)マラリア伝播阻止を目指したトランスジェニック蚊の創製に有効な、特定の型の赤血球に対して強力な溶血活性を示す高機能CEL-III分子をファージディスプレイ法を利用して選抜し、作製することを目的にしている。本年度は(1)溶血性レクチンCEL-IIIの機能的発現系の構築について検討した。CEL-IIIタンパク質の機能的発現のためにバキュロウイルス-昆虫細胞による発現系を使用した。まず、CEL-III遺伝子をバキュロウイルストランスファーベクター(pBAC-gus系)にクローニングし、組換えトランスファープラスミドを構築した。その際に、培地中への分泌発現を試みるためにメリチンのシグナル配列をN末端に付加したもの、または付加していないものを作成した。また、C末端に精製を容易にするためにHis-Tagを付加したのもの、または付加していないものを作成した。構築したプラスミドとバキュロウイルスゲノムDNAをSpodoptera frugiperda(Sf)9細胞にコトランスフェクトし、相同組換えによって組換えウイルスを得、つづいてプラークアッセイを行って、組換えウイルスを純化した。このように作成したウイルス株を用いてCEL-IIIタンパク質の発現をウエスタン解析により検討したところ、メリチンのシグナル配列を付加したものについて、Sf9細胞内、および培地中へのCEL-IIIの発現が確認できた。発現最適時間は培養後約6日目であったので、大量培養を行なって、GalNAc-セルロファインカラムによるアフィニティークロマトグラフィーを行ない、組換え型CEL-III(rCEL-III)を精製した。rCEL-IIIはC末端にHis-Tagの有無にかかわらず、赤血球凝集活性を示したが、それは野生型CEL-IIIよりもやや活性が低いことも明らかになった。また、溶血活性も野生型CEL-IIIに比べると低いことが明らかになった。現在その諸性質について検討中である。本研究は、溶血活性を示すことが知られるCEL-III(Cucumaria echinata lectin-III)について、1)組換え型CEL-IIIタンパク質の機能的発現系を構築し、2)溶血時の膜貫入・会合体形成ステップに直接関与するアミノ酸残基をCEL-IIIの変異体解析により同定してその溶血メカニズムを明らかにするとともに3)マラリア伝播阻止を目指したトランスジェニック蚊の創製に有効な強力な溶血活性を示す高機能CEL-III分子を選抜し、作製することを目的にしている。本年度においては主に1)と3)について研究を行った。1)CEL-III機能的発現系構築:CEL-IIIのバキュロウイルス-昆虫細胞による発現系を用いて新たにN末端にHis-Tagを導入した分子の作製を試み、また精製法を改良した。溶媒条件を検討することによって培養液を直接アフィニティカラムに供与する方法を考案し、1段階で精製が可能になった。これまでに得られた組換え型CEL-IIIはauthentic CEL-IIIと比較して糖特異性は変化していなかったが、2%程度の溶血活性を保持するにとどまった。この溶血活性の低下は、赤血球上で検出されるCEL-IIIオリゴマーの量が極少量であることからオリゴマー形成能の低下によることが示唆された。現在、それらの糖結合能に関して速度論的解析を行っている。3)CEL-III高機能化:赤血球膜上糖鎖に対してより高い親和性(結合能)を持つCEL-III分子を作製するため、まずCEL-IIIの2つの糖結合ドメインのうちドメイン1の領域(CRD1)のみからなるタンパク質を作成した。ここではAsp23、His36、Asp43、Gln44が糖結合オウ活性に必須なアミノ酸残基であることが明らかになっているため、次にそれらのアミノ酸残基を含めた周辺の残基をランダムに変異するようにプライマーを設計し、PCRを行って、ランダム変異したCRD1遺伝子を作製した。これらをファージディスプレイ用プラスミドのpLUCKに導入し、CRD1変異体ライブラリーの作製を行なった。現在複数種の動物の赤血球に対して結合能を示すファージを選抜中である。

本研究は、溶血活性を示すことが知られるCEL-III(Cucumaria echinata lectin-III)について、1)溶血時の膜貫入・会合体形成ステップへ関与するアミノ酸残基をCEL-IIIの変異体解析により同定してその溶血メカニズムを明らかにするとともに、2)マラリア伝播阻止を目指したトランスジェニック蚊の創製に有効な強力な溶血活性を示す高機能CEL-III分子を選抜し、作製することを目的にしている。1)CEL-IIIの溶血活性に関与する領域の同定:前年度までに構築したCEL-IIIのバキュロウイルス-昆虫細胞による発現系を用いて、CEL-IIIの5箇所の糖結合部位の中で、Ca^<2+>配位に関与するアミノ酸残基(Asp43、Asp141、Asp188、Asp229、Asp276)をAlaに置換することによって、各糖結合部位の糖結合能を消失させた変異体(D43A、D141A、D188A、D229A、D276A)を作製し、その溶血活性を検討した。その結果各変異体はいずれも溶血活性が低下し、なかでもD43AとD229Aに関しては溶血活性が消失していた。さらに、各変異体の糖結合能をBIACOREを用いて解析したところ、糖タンパク質アシアロフェツインへの結合に関する解離定数はいずれも低下していたが、溶血活性が消失しているD43AとD229Aは他の変異体と同程度またはそれより強い糖結合能を有していたことから、糖結合の強さが溶血活性の低下・消失とは関連しないことが明らかになった。以上のことから、CEL-III中の5つの糖結合部位のうちAsp43とAsp229が位置する1α、2βサブドメインへの糖結合がCEL-IIIが溶血活性を発揮するための高次構造変化をおこすトリガーとなることが示唆された。2)CEL-III高機能化:前年度構築したCEL-IIIの糖結合ドメイン1の領域のみからなり、糖結合活性に必須なアミノ酸残基であるAsp23、His36、Asp43、Gln44を含めた周辺の残基をランダムに変異した遺伝子産物を提示するファージライブラリーを使って、ウサギ赤血球に対して結合するファージの選抜を行った。その結果、その配列が特定のアミノ酸残基に収束する傾向になることが明らかになり、強い糖結合活性を示す糖結合部位を構築するために必要なアミノ酸配列を推定できた。
液晶性物質を用いたウエットプロセスによる有機多結晶薄膜トランジスタの研究

平成19年度は(1)加熱スピンコートによる多結晶薄膜作製の詳細な検討(2)平成18年度に検討した棒状液晶系(チオフェン系)、円盤状液晶(フタロシアニン系)の多結晶薄膜を用いた有機トランジスタの作製および評価(3)新規な液晶材料(チオフェン、ペリレン系)の多結晶薄膜の電荷輸送評価および有機トランジスタの作製および評価を行った。(1)液晶相を示す温度における加熱スピンコートを行った際のみ、均一な薄膜作製が可能であった。従って、液晶相においてスピンコートをすることが均一な薄膜作製には重要であることが示唆された。(2)棒状液晶においては良好なトランジスタ特性を示し、移動度(>10^<-2>cm^2/Vs)が過渡光電流測定法で求まる移動度(粒界の影響を受けていない移動度)と一致したのに対し、円盤状液晶においては良好なトランジスタ特性は示さなかった(移動度<10^<-5>cm^2/Vs)。これは配向制御が容易な棒状液晶においては粒界方向を制御でき粒界の影響を受けない電荷輸送特性になったのに対し、円盤状液晶は分子配向制御ができず、粒界の影響を強く受けたためと示唆された。(3)過渡光電流測定法により高移動度(>0.1cm^2/Vs)を示すターチオフェン液晶、およびペリレン液晶を上記と同様な方法でトランジスタを作製したところ、それぞれ、pチャネル、nチャネルで動作し、移動度が0.1cm^2/Vsを超えることを見出した。このように液晶性物質の多結晶薄膜は、(1)液晶相を用いることで通常では困難なウエットプロセスによる均一な多結晶薄膜の作製が可能、(2)液晶相を経由することで分子配向制御させた多結晶薄膜作製が可能、(3)粒界方向を制御でき電荷輸送方向には粒界の影響が少ない、といった特徴を有することが明らかになった。その結果、通常の多結晶材料の真空蒸着法で示されるような高移動度(>0.1cm^2/Vs)を示すpチャネル、nチャネルのトランジスタをウエットプロセスで実現させることに成功した。今年度は(1)電極からの電荷注入が容易な液晶材料の開発、(2)スピンコート法による多結晶薄膜作製法の開発、に着手した。(1)液晶材料開発は円盤状、棒状液晶それぞれ検討した。円盤状液晶においてはフタロシアニン液晶(8H_2Pc)に注目し、ウエットプロセスによる精製である再結晶法を用いサンプルを精製し、液晶相で正孔・電子がそれぞれ0.2、0.3cm^2/Vsの移動度、多結晶状態においては0.05-0.2cm^2/Vsの正孔移動度を持つことを過渡光電流測定法により明らかにした。この液晶材料は100°C以下で液晶相を示し、電界強度5x10^4V/cmの低電界から金電極から正孔の注入が容易に起きることより、このフタロシアニン液晶(8H_2Pc)はデバイス用材料の有力な候補になると考えられる。棒状液晶においてはオリゴチオフェン(α-4T)液晶(6-QTP-6)に注目した。オリゴチオフェン液晶においても再結晶法により精製したサンプルにおいて、液晶相において正孔移動度が0.05-0.08cm^2/Vsであることが過渡光電流測定法よりわかった。(2)多結晶薄膜作製法の開発においては、スピンコート法による均一な結晶薄膜の作製を試みた。フタロシアニン液晶においては一般的な有機溶媒でスピンコートを行ったところ、表面粗さ(RMS値)が5nm程度の均一な薄膜が容易に得られた。この特徴は他の円盤状液晶でも同様でありアルキル鎖を多数持つことで均一になったものと考えられる。棒状液晶も同様にスピンコートを行ったが、膜とはならず微結晶の凝集体(いわゆる粉状態)になった。そこで、オーブン内にてスピンコートを行い液晶相温度で製膜を行った結果、均一な薄膜が作製できた。今後、新規購入したスピンコートを赤外線加熱で完全に温度制御を行いながらスピンコートを行うことで均一な結晶薄膜作製を試みる。

(3)過渡光電流測定法により高移動度(>0.1cm^2/Vs)を示すターチオフェン液晶、およびペリレン液晶を上記と同様な方法でトランジスタを作製したところ、それぞれ、pチャネル、nチャネルで動作し、移動度が0.1cm^2/Vsを超えることを見出した。このように液晶性物質の多結晶薄膜は、(1)液晶相を用いることで通常では困難なウエットプロセスによる均一な多結晶薄膜の作製が可能、(2)液晶相を経由することで分子配向制御させた多結晶薄膜作製が可能、(3)粒界方向を制御でき電荷輸送方向には粒界の影響が少ない、といった特徴を有することが明らかになった。その結果、通常の多結晶材料の真空蒸着法で示されるような高移動度(>0.1cm^2/Vs)を示すpチャネル、nチャネルのトランジスタをウエットプロセスで実現させることに成功した。
神経細胞の新しい分化マーカーとしての糖脂質の同定

神経細胞における糖脂質の特異的発現を検索するために、ラット小脳(生下時)由来の初代培養細胞を我々が開発した一連の抗糖脂質特異モノクローナル抗体を用いて解析した。ニューロンでは顆粒細胞が抗GD1b抗体と強く、抗GD3抗体と弱く反応したが、その他の抗体とはまったく反応しなかった。この抗GD1b抗体の反応性はシアリダーゼ処理により消失した。しかし、シアリダーゼ処理細胞は、抗GM1抗体と強く反応した。顆粒細胞はコレラ毒素(GM1結合蛋白質)やテタヌス毒素(GT1b結合蛋白質)とも強く反応した。上記結果は顆粒細胞に発現される主要なガングリオシドはGD1bであることを示唆した。従来、ニューロン特異ガングリオシドとしてコレラ毒素やポリクローナル抗体を用いた研究によりGM1が報告されてきたが、我々の結果はまったく異なる。ある種の小型神経細胞は抗GD2抗体と強く反応したが、コレラ毒素やテタヌス毒素とも強く反応した。この神経細胞は未同定であり今後の検討を要する。プルキンエ細胞は抗O-Ac-ジシアロガングリオシド抗体と強く反応したが、その他の抗体とはまったく反応しなかった。この細胞をアンモニア蒸気で処理すると反応性が消失すること、およびシアリダーゼ消化後の糖鎖の骨格がnLc4Cerであること等より、このガングリオシドはO-Ac-DL1と結論された。グリアではアストロサイトにGM4,GD3,Gb4Cer,Gb5Cerが、オリゴデンドロサイトにGalCer,SM4sが特異的に発現されていることが判明した。さらに、これら細胞は、各々、抗GFAP抗体と抗MBP抗体と特異的に反応することを免疫二重染色法にて確認した。GalCerはオリゴデンドロサイトのマーカーとして広く利用されているので、上記結果は、各糖脂質は神経細胞の有用な分化マーカーになる可能性を示す。
全相平話二種データベースの構築

本研究は、日本の内閣文庫(国立公文書館)に所蔵され、孤本である『全相平話』の二種の電子テキスト化を試みたものである。この電子テキスト構築においては、現在一般的であるデータ構築とは異なった試みを行っている。一つは、文字コードの問題である。この「全相平話二種データ」は、Unicode (ISO-10646-1・UCS-2)を使用することによって、はたしてUnicodeが古典データ構築の用途に向いているかどうかの問題を検証してみた。またこれは同時に、現在提供されているOSやソフトウェアなどのツールが、どこまでUnicodeに対応しているかを確認することともなった。もう一つは、データの公開の問題である。「全相平話二種データ」は、構築作業と同時にインターネット上におけるデータ公開を行っているが、これについても、受け手のコンピュータ環境を意識した上で、ある程度の制約を受けざるを得なかった面がある。そして、おそらく世界でもまだ数少ないUTF-8ベースの公開を行った。さらに、文字コード問題とも密接な関係を持つが、画像データと電子テキストの問題も重要である。画像データと電子テキストの組み合わせ、という面ではまだ不十分なところがあるが、本報告書に付すCD-ROM中において、画像データと電子テキストを合わせて収録する試みを行った。内閣文庫所蔵の『全相平話』のうち二種(『三国志平話』『武王代約平話』)のマイクロフィルムを入手。校正を加え、テキストデータベースを作成した。また、内閣文庫よりテキストデータのインターネットの公開の許可を取得。『三国志平話』上巻については、Linuxサーバ(http://nika01.hum.ibaraki.ac.jp/nikaido/)においてS-Jisベース・Big5ベース・UTF-8ベースによる公開を開始した。この途中に発生した問題について、『人文学と情報処理』第24号に、「『三国志平話』データベースについて」を発表した。
巨大基数公理及び連続体仮説との関連でみたP_κλ上のイデアル論

2.Reflection proncipleを用いて,Ρ_κλ上のクラブフィルターは,自然なstationoary setに制限すると,弱い意味で前飽和的であることを示した.3.Ρ_κ(2^λ^<<κ>)が弱い分割の性質をもつならば,mildlyλineffableであることを示した.4.λのcofinalityがκ以上で,κより大きくλ以下である基数がすべてII^2_1-describableならば,Ρ_κλ上のnonineffableイデアルは分割の性質をもたない集合のイデアルと一致する.5.その他:研究課題の項目としてはあげなかったが,関連する事項についても進展があった.(1)Huge基数を含むモデルから出発して,ω_1上にω_2飽和な可算加法的イデアルが存在するモデルを構成する強制法で,従来より簡単なものを発見した.(ii)超コンパクト基数の存在を仮定して,2^ω<2^κだがκ<λならば,◇_<Ρ,λ>が成り立つ強制モデルを構成した.(3)イデアルI_fのcofinality,additivity number,covering number等に関する独立性証明を行った.2.Reflection proncipleを用いて,Ρ_κλ上のクラブフィルターは,自然なstationoary setに制限すると,弱い意味で前飽和的であることを示した.3.Ρ_κ(2^λ^<<κ>)が弱い分割の性質をもつならば,mildlyλineffableであることを示した.4.λのcofinalityがκ以上で,κより大きくλ以下である基数がすべてII^2_1-describableならば,Ρ_κλ上のnonineffableイデアルは分割の性質をもたない集合のイデアルと一致する.5.その他:研究課題の項目としてはあげなかったが,関連する事項についても進展があった.(1)Huge基数を含むモデルから出発して,ω_1上にω_2飽和な可算加法的イデアルが存在するモデルを構成する強制法で,従来より簡単なものを発見した.(i)2^ω=2^κでκ<λならば,◇_<κ,λ>が成り立つ.(ii)超コンパクト基数の存在を仮定して,2^ω<2^κだがκ<λならば,◇_<Ρ,λ>が成り立つ強制モデルを構成した.(3)イデアルI_fのcofinality,additivity number,covering number等に関する独立性証明を行った.1.λが正則で,κがmildly λineffableならば,Ρ_κλの濃度はλに等しいことが分かった.2.Reflection proncipleを用いて,Ρ_κλ上のdiamondprincipleを証明した.3.ineffabilityと分割の性質について:(1)Ρ_κλが分割の性質をもつならば,弱い分割の性質をもたないΡ_κλの部分集合のなすイデアルは2^λ飽和ではないことを示した.(2)連続体仮説のもとでは,cofinalityがκ未満であるλについては,Ρ_κλ上のnoninef£aUleイデアルは分割の性質をもたない集合のイデアルに真に含まれることが分かった.4.その他:今年度の研究課題の項目としてはあげなかったが,関連する事項についても進展があった.(1)Huge基数を含むモデルから出発して,ω_1上にω_2飽和な可算加法的イデアルが存在するモデルを構成する強制法で,従来より簡単なものを発見した.(3)Laver強制法ではdual splittingできないrealは付加されないことを証明した.(4)強制法の性質Eと,それに対応する無限ゲームGP(V)に対して以下のことを示した:(i)PがEを満たせば,プレーヤーIIはGP(V)で必勝法をもつ.(ii)IIがGP(V)で必勝法をもつならば,countable support iterationによる強制拡大においても,IIはGP(V)で必勝法をもつ.(iii)GP(ω)でプレーヤーIが必勝法をもたないことと,Pで付加されるrealはグランドモデルの擬スラロームで捕まえられることとは同値である.1.Reflection proncipleを用いて,Ρ_κλ上のクラブフィルターは,自然なstationoary setに制限すると,弱い意味で前飽和的であることを示した.これは,Foreman-Magidor-Shelahの有名な結果の拡張になっている.2.ineffabilityと分割の性質についてKunenの極大フィルターに関する定理に匹敵する結果を得た:(1)λのcofinalityがκ以上で,κより大きくλ以下である基数がすべてII^2_1-describableならば,Ρ_κλ上のnonineffableイデアルは分割の性質をもたない集合のイデアルと一致する.(2)上記と同じ仮定のもとでは,Ρ_κλ上の正規(λ,2)-distributiveイデアルは分割の性質をもつ.3.その他:今年度の研究課題の項目としてはあげなかったが,関連する事項についても進展があった.(ii)超コンパクト基数の存在を仮定して,2^ω<2^κだがκ<λならば,◇_κ,λが成り立つ強制モデルを構成した.(2)イデアルI_fのcofinality, additivity number, covering number等に関する独立性証明を行った.