hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
消費概念の拡張に伴う顧客の消費プロセスにおけるマーケティングの研究

次に、2新しいマーケティングと企業システムの提示についてであるが、まず、新しいマーケティングをそれが行われる時空間に注目し検討した。そして、その時空間で行われるマーケティングを価値共創マーケティングと呼び、それを可能にする企業システムを価値共創型企業システムとして概念化することにした。2.調査結果と結論1サービス業における文脈価値への影響において、諸要素の中核となるのがヒトであり、顧客との価値共創の為の相互作用的なコミュニケーションの態様が文脈価値の共創に大きな影響を与え、文脈のマネジメントが可能であることが明らかとなった。その結果、サービス業に限らず、諸要素を対象とした文脈マネジメントという新しい概念を引き出すことができた。また、サービス業においてもモノとの関わりはあることから、その効率的な調達において伝統的マーケティングとの接点が見出せたが、それは、すべての業種に共通しているといえる。そして、そのことは、2価値共創マーケティングと伝統的マーケティングは、モノ、サービシィーズを通じて連動しており、そのことを踏まえ、生活世界で顧客と価値共創し、さらに、市場においてモノへの共同選択・開発を可能にするという企業システム、すなわち、価値共創型企業システムの概念モデルを明らかにした。次年度(平成29年度)につても、当初の計画通り研究を進めていく。すなわち、製造業(B2B、B2C)、流通業へのインタビュー調査を実施し、その結果を分析する。とりわけ、初年度に示された「文脈マネジメント」、「顧客との共同関与」という視点に留意し、それらを研究成果に結びつけたいと考えている。最終年度(平成30年度)は、まず、サービス業に対して同様のインタビュー調査を実施する、そして、研究の総まとめとして、新しいマーケティング(購買後の消費プロセスに入り込み、顧客と価値共創するマーケティング)を浮き彫りにする。最終年度は、第一に、前年度と同様に「抽出された要素とマーケティングの関係」という視点から、サービス業を対象として調査研究を実施する。即ち、サービス業として、顧客との接点を活かしながらプロセスとしてのサービスをどのように提供しているかを調査する。第二に、新しいマーケティングと企業システムを提示する。具体的には、製造業、流通業(小売業)、サービス業に対する調査結果から、顧客の消費プロセスに入り込んだマーケティングの展開が消費概念を拡張することでどのように変わり、どのように新しい企業システムをもたらしたかを明らかにする。文献レビューに手間取り、アンケート調査実施期間に入り込んだため、許容範囲内ではあるは、当初よりやや小規模のアンケート調査を実施し、そのため予算の使用額が少なくなり、次年度使用となった。資料整理等のための人件費・謝金について、効率的な運営ができ、その分、結果として、経費節減となったため、次年度使用額が生じた。
歪みのある縮合多環芳香族炭化水素の合成と物性

ピレンやペンタセンを出発原料としてグリセリン縮合を行った。その結果、いずれもベンゼン環が5環から成る環式ケトンを得ることができた。特に、ペンタセンのグリセリン縮合ではベンゾアントロンの9,10-および4,5-位にベンゼン環が増環された9,10-ベンゾベンゾアントロン(以下、BBA)と4,5-BBAが合成された。これらはいずれも新しい環式ケトンであり、今後はこれらを出発原料にして、亜鉛末縮合およびアルカリ融解などを行い、新しい縮合多環芳香族炭化水素を合成する予定である。また、ペリナフテノンと種々の環式ケトンとの混合物を用いた縮合反応では新しい炭化水素の合成に成功した。得られた炭化水素については構造と物性の相関関係を明らかにするため、現在X線による構造解析に必要な単結晶を作成中である。一方、備品費で購入したパソコンを使って分子軌道法によるニトロ化反応の理論的考察を行った。より大きな縮合多環芳香族炭化水素の出発原料として環式ケトンのブロモ体を用いるが、目的物の単離精製が困難なため、通常はニトロ体を経由してブロモ体を得ている。そのため、ニトロ基の置換位置が非常に重要となる。ベンゾアントロン、ナフトアントロン、5,6-BBA、8,9-BBA、10,11-BBAをニトロ化したところ、基本骨格は同じであるにもかかわらず、置換位置は化合物によって様々であった。5,6-BBAを除く4つの化合物は最高被占分子軌道の電子密度が最も高い位置がニトロ化されることが明らかになった。5,6-BBAについては、活性化エネルギーを比較する反応速度論的な取り扱いで、ニトロ基の置換位置を説明することができた。
発生転換点におけるエピゲノム形成とヒト-マウス始原生殖細胞の比較エピゲノム解析

H27年度までに、着床前後のマウス胚体をエピブラスト、胚体外外胚葉、臓側内胚葉の組織に分け、それぞれの胚組織における遺伝子発現プロファイルを取得、解析し、着床前後で大規模な遺伝子発現の遷移が生じることを明らかにした。また、エピブラスト幹細胞(EpiSC細胞)は着床後のエピブラストのモデル細胞として有用であるが、Wnt阻害剤を用いることにより、従来の方法に比し樹立効率を飛躍的に向上させた画期的なEpiSC細胞樹立法の開発に成功した。この培養技術を応用し、naive型幹細胞であるES細胞からprimed型幹細胞であるEpiSC様細胞へと効率よく分化させる系を確立した。今後、このin vitroモデル系を用いて、着床前後に生じるエピゲノム変動の実態とその意義の解明を目指す。GS (Germline Stem)細胞は、試験管内で無限に増殖可能であり、精細管に移植することにより、精子を形成する能力を持つユニークな幹細胞である。このGS細胞の継代を続けると、しばしば造精能を喪失した株が出現するが、恐らくエピゲノム変化により精子形成能が低下したものと推察される。この造精能を欠損したGS細胞と正常GS細胞の発現プロファイル比較により、発現差のある約200の遺伝子を抽出し、その中から生殖細胞分化に重要と思われるエピゲノム制御因子を含む複数の遺伝子を見出した。今後は、これらの遺伝子機能の解析を通じて精子形成に必要な遺伝子、そのエピゲノム制御の解析を行っていく。27年度が最終年度であるため、記入しない。我々はこれまで、初期胚に存在する多能性細胞から、始原生殖細胞、配偶子へと至る一連の細胞系譜の発生過程において劇的に遺伝子発現・エピゲノムが変動する「変曲点」を同定するに至った。本研究では、これまで培った微量エピゲノム解析、エピゲノムイメージング技術等の新手法を駆使し、これらの変曲点における時空間的エピゲノムダイナミクスとその意義を追求することを目的とする。平成26年度は、1)特異的ゲノム配列のDNAメチル化を解析する新技術であるWhole-mount 3D MeFISH法の確立、2)哺乳類における代表的な大規模エピゲノム転換現象であるX染色体不活性化について、マウス着床前後胚における刷り込み型不活性化の消去とランダム型不活性化の確立時期の決定、3)着床前後のマウス胚を構成する各組織(内部細胞塊-胚体外胚葉、原始内胚葉-臓側内胚葉、栄養外胚葉-胚体外外胚葉)における網羅的遺伝子発現解析などの研究を実施した。1)については、基本技術は完成し(Shiura et al., 2014)、現在はより低コピー数のゲノム配列のメチル化を検出するための技術改良を進めている、2)については、受精後4.5日から5.0日の間で、刷り込み型不活性化が解除され、引き続き速やかにランダム型不活性化が開始することを初めて明らかにした。3)については、すべてのサンプルからRNA-Seqデータを取得済みであり、現在情報学的解析を行っている。また、ヒト型の多能性幹細胞であるEpiSC (Epiblast Stem Cell)の高効率樹立法を開発し、通常よりもより均質で未分化性の高い高品質EpiSC株を樹立することが可能となった。現在、同様の培養技術を用いて、ES細胞から、EpiSCを効率良く作製する分化誘導法の確立を行っている。研究は計画的に進展しており、計画の変更は必要ない。研究目的に挙げた3項目については、1)については報告済み(Shiura et al., PLOS One, 2014), 2)については、投稿中であり、3)については論文作成中である。当初の計画以上の成果として、多能性幹細胞には、未分化性の高いnaive型と、分化状態の進んだprimed型があるが、2014年度にprimed型多能性幹細胞であるEpiSC細胞の高効率樹立法を発表した(Sugimoto et al., Stem Cell Reports, 2015)。

この培養技術を使い、ES細胞から同調的にEpiSC様細胞へ転換させる実験系の構築もほぼ完了した。これにより、着床前後で起きるエピゲノム転換をin vitroで効率良く解析するモデル系が確立できると思われる。27年度が最終年度であるため、記入しない。MeFISH法については、さらに技術的改良を進めより低コピーのゲノム配列におけるDNAメチル化状態の検出を可能とすることを目指す。着床前後の各胚組織における遺伝子発現を網羅的に解析した報告はいまだ無いので、このデータをまとめることにより、哺乳類の着床という重要な生命現象に関する貴重な知見(エピゲノムおよびトランスクリプトーム)が得られることが期待される。X染色体不活性化ステータスの転換の時期が特定されたので、その前後における分子レベルの変動を、1細胞オミックス技術等を用いて詳細に解析し、不活性化に代表されるエピゲノム転換の分子的理解を目指す。加えて、ヒト始原生殖細胞に関する共同研究をオランダ・ライデン大学医学センターのS.Chuva de SauzaLopez博士と実施している。すでに、ゲノムDNAのサンプリングが進行中であり、2015年度中にヒト始原生殖細胞に関するエピゲノム解析を実施する予定である。
マウスコロナウイルスの神経毒性に関する分子生物学的研究

マウスコロナウイルスJHM株は,若令ラットに脳内接種すると,急性脳脊髄炎や亜急性の脱髄性脳脊髄炎を引き起こし,ウイルス性脱髄性疾患のモデルとして研究されている。我々は,ウイルスの神経毒性に関与する因子を明らかにし,神経毒性が発現されるメカニズムを解明する目的で実験を行なってきた。ウイルスの神経毒性には,ウイルス粒子表面のスパイク(S)蛋白の関与がいくつかの実験により示唆されている。我々は,ラットに対して神経毒性が極めて高いJHM変異株のS蛋白をその遺伝子の塩基配列を決定することにより推測し,既に報告のある神経毒性を示さないJHM株と比べ,141個のアミノ配挿入部位があることを明らかにした。さらに,この毒性の強いS蛋白を組換えワクシニアウイルスを用い,哺乳動物由来培養細胞で発現し,その蛋白性状について検討した。組換えウイルスにより発現したS蛋白は,分子量,抗原性,免疫原性の点でJHM変異株感染細胞で産生されるS蛋白(authentic S蛋白)と異なるところはなかった。またauthentic S蛋白と同様,細胞内で合成後S_1(96K)とS_2(86K)に解裂し,細胞融合を引き起こした。この細胞融合活性は,一般にウイルス病原性との関連が強く,今後細胞融合活性に関しその活性部位を明らかにする予定である。組換えワクシニアウイルスを用いて発現したS蛋白は,量的にはバキョロウイルスを用いた場合と比べ劣るものの,生物活性,抗原性などの点でauthentic S蛋白と高い類似性を示し,今後S蛋白の持つ多くの興味ある生物活性について解析されることが期待される。マウスコロナウイルスJHM株は,ラットに高い神経病原性を示し,急性脳脊髄炎や亜急性の脱髄性脳脊髄炎を引き起こし,ウイルス性脱髄疾患のモデルとして研究されている。我々はウイルスの病原性に関与する因子として,ウイルス粒子表面に存在するS蛋白に焦点をしぼり実験を行なってきた。既に我々の研究室では,ラットに対する神経病原性を異にするいくつかの変異株を分離し,比較することにより,S蛋白の大きいウイルス(Clー2)は,小さいウイルス(SPー4)と比べ,高い病原性を有することがわかっている。そこで神経病原性を分子レベルで解析する目的で,ラットに対し高い神経病原性を示すClー2株のS蛋白遺伝子のcDNAを作成し,その塩基配列を決定し,既に報告されている非病原性株のS蛋白遺伝子と比較した。Clー2S蛋白遺伝子は4128塩基からなるオ-プンリ-ディングフレイムを持ち,1376個のアミノ酸をコ-ドしていた。又推測されるアミノ酸配列から,N末端にシグナルペプチドを,C末端に膜貫通部位を持つ糖蛋白であることが明らかとなった。Clー2S蛋白を非病原株SPー4のS蛋白と比較すると,N末端から約1/3部位に141個のアミノ酸の挿入部位が認められた。即ち,非病原性SPー4株のS蛋白には,アミノ酸141個からなる欠損部位が存在することが明らかになった。以上の実験結果より141個のアミノ酸から成る領域が病原性に関与している可能性が示唆された。マウスコロナウイルスJHM株は、若令ラットに脳内接種すると、急性脳脊髄炎や亜急性の脱髄性脳脊髄炎を引き起こし,ウイルス性脱髄性疾患のモデルとして研究されている。我々は,ラットに対して神経毒性が極めて高いJHM変異株のS蛋白をその遺伝子の塩基配列を決定することにより推測し、既に報告のある神経毒性を示さないJHM株と比べ、141個のアミノ酸挿入部位があることを明らかにした。今回は,この毒性の強いS蛋白を組換えワクシニアウイルスを用い,哺乳動物由来培養細胞で発現し,その蛋白性状について検討した。

組換えウイルスにより発現したS蛋白は,分子量,抗原性,免疫原性の点でJHM変異株感染細胞で産生されるS蛋白(authentic S蛋白)と異なるところはなかった。またauthentic S蛋白と同様,細胞内で合成後S_1(96K)とS_2(86K)に解製し,細胞融合を引き起こした。この細胞合活性は,一般にウイルス病原性との関連が強く、今後細胞合活性に関しその活性部位を明らかにする予定である。組換えワクシニアウイルスを用いて発現したS蛋白は,量的にはバキョロウイルスを用いた場合と比べ劣るものの,生物活性,抗原性などの点でauthentic S蛋白と高い類似性を示し,今後S蛋白の持つ多くの興味ある生物活性について解析されることが期待される。
抗癌剤で誘導される遺伝子及びその転写制御を分子標的とした癌治療に向けた基礎研究

抗癌剤の中でもDNA障害を惹起するシスプラチンは、固形腫瘍の治療には必須の薬剤である。しかしシスプラチンとの接触がどの様に癌細胞の運命を制御する細胞内シグナルに変換されるのかは不明である。このシグナル伝達系の解明は、シスプラチンの分子薬理作用を知るだけでなく、効果増強法の考案や確かな分子標的治療を目指す遺伝子制御薬剤の開発においても重要な研究課題である。本研究では、転写制御を分子標的とする治療を考察する上でモデルとなる遺伝子群の解析を進め以下の点を明らかにした。1.シスプラチンで誘導される遺伝子群及び耐性細胞で高発現している遺伝子群の単離と同定を行った。誘導される遺伝子としてpH制御分子の一つであるV-ATPase(プロトンポンプ)、耐性細胞で高発現している遺伝子としてHMG1を同定した。プロモーター領域の単離はV-ATPaseのサブユニットC、DとF遺伝及びHMG1遺伝子について行い、塩基配列の決定を行った。(現在プロモーター活性の解析が進行中である。)2.トポIIα及びSTAT3遺伝子のプロモーターについてエピジェネティックな変化として、アセチル化やそれに起因するクロマチン構造の変化を見い出した。3.転写因子間の分子会合解析をシスプラチン障害で活性化されるp53を中心として行い、YB-1とp53の子会合とその意義について明らかにした。今後は新しい転写因子のクローン化を目指し薬剤感受性に直接関与する遺伝子を同定したい。また核内のDNA damage detectorとDNA damage sensorの核内分子会合マップを完成させたい。現在、p53ファミリーのp73にも着目してこれらの分子とHMG蛋白群の会合解析を始めている。
双曲型測度の極限的直積構造に関する研究

近年になってBarreira,Pesin,Schmelingらは,双曲型測度が「極限的直積構造」とばれる性質をもつことを発見しました.彼等はこの性質を用いてEckmann-Ruelle予想を解決しました.極限的直積構造は,位相的に定義された局所直積構造の測度論的な類似物になっています.しかし,局所直積構造ほどその研究は進められていません.本研究では,双曲型測度の極限的直積構造を用いたエルゴード理論的な研究を進めることを目的とします.本年度はHenon写像族を用いて特殊な双曲型測度の例を構成しました.ここで,Henon写像族とは1976年にHenonによって考案されたR^2上の写像で,次式で与えられます:f(x,y)=f_<a,b>(x,y)=(y+1-ax^2,bx).90年代の初頭にBenedicks-Carlesonは,(a,b)=(2,0)に近いLebesgue測度正の集合Eが存在し,(a,b)∈Eに対してf_<a,b>の臨界的集合と呼ばれるCantor集合Cと定数c>0とλ>1があって次を満たすことを示しました:x∈Cに対し接ベクトルv=(0,1)をとると,Collet-Eckmann条件|D_xf^n(v)|>cλ^nを満たす.この結果をもとにして,Benedicks-Youngは(a,b)∈Eに対してf_<a,b>がSRB測度をもつことを示しました.これらの結果に対して、私はいくらでも小さなLyapunov指数をもつSRB測度をもつようなHenonアトラクターの例を構成しました.正確にはEを上で述べたBenedicks-Carlesonのパラメター集合とし,E^*をEの密度点の全体とします.任意の(a,b)∈E^*のいくらでも近くに(c,b)∈(a,b)が存在して臨界点集合CのLyapunov指数の最小値が0であることを示しました.本研究で得られた例を基にして.双曲型測度がBernoulli性を持つための判定条件の研究、相関関数が多項式的な減衰をする(混合性の度合いが弱い)ストレンジアトラクターの構成ができると期待されます.近年になってBarreira, Pesin, Schmelingらは,双曲型測度が「極限的直積構造」とばれる性質をもつことを発見しました.彼等はこの性質を用いてEckmann-Ruelle予想を解決しました.極限的直積構造は,位相的に定義された局所直積構造の測度論的な類似物になっています.しかし,局所直積構造ほどその研究は進められていません.本研究では,双曲型測度の極限的直積構造を用いたエルゴード理論的な研究を進めることを目的とします.初年度の研究実績は次の通りです:本質的に双曲型測度μに引き寄せられる集合のハウスドルフ次元HD^s(μ)をHD^s(μ)=inf{HD(U W^s(x)):xεΛ,μ(Λ)=1}によって定義します.ここで,{W^s(x)}は安定多様体から構成される葉層構造,HD(A)は集合Aのハウスドルフ次元を表します.このときHD^s(μ)=Σδ_i+dim W^sを満たすことを示しました.ここで,δ_iは異なる正のLyapunov指数χ_iに対応する不安定多様体上の条件付測度のハウスドルフ次元を表します.この結果から,双曲型測度μがSRB測度になるための必要十分条件は,HD^s(μ)が多様体Mの次元と一致することであることが導かれます.ここでSRB測度とは高々可算個のエルゴード成分に分解され,各成分はBernoulli性をもつような測度であり,局所直積集合の性質の類似が成立つような理想的な測度です.この問題に関しては,北大の辻井氏と九大の平山氏の研究がありますが,我々の結果はアトラクターに吸引される領域をより精密に評価できることが特徴です.現在、上記の論文の投稿準備中です.証明は以下のようになされます:極限的直積構造を用いることによって十分小さな部分では局所直積構造に近い構造があることが保証されます.それらの各部分において安定多様体のホロノミー写像により,不安定方向の測度の次元が急激に変化しないことを示します.近年になってBarreira, Pesin, Schmelingらは,双曲型測度が「極限的直積構造」とばれる性質をもつことを発見しました.彼等はこの性質を用いてEckmann-Ruelle予想を解決しました.極限的直積構造は,位相的に定義された局所直積構造の測度論的な類似物になっています.しかし,局所直積構造ほどその研究は進められていません.本研究では,双曲型測度の極限的直積構造を用いたエルゴード理論的な研究を進めることを目的とします.本年度は昨年得られた次の結果に対し,別の方法による証明を与えました:本質的に双曲型測度μに引き寄せられる集合のハウスドルフ次元HD^s(μ)をHD^s(μ)=inf{HD(U W^s(x)):xεΛ,μ(Λ)=1}によって定義します.

ここで,{W^s(x)}は安定多様体から構成される葉層構造,HD(A)は集合Aのハウスドルフ次元を表します.このときHD^s(μ)=Σδ_i+dim W^sを満たします.ここで,δ_iは異なる正のLyapunov指数χ_iに対応する不安定多様体上の条件付測度のハウスドルフ次元を表します.今回の証明はよりBarreira, Pesin, Schmelingの証明に沿った形で得られました.彼らの証明では測度を持つ集合を覆うチューブを,より細かな分割の和集合として構成します.我々の結果を得るためには,測度を持つ集合だけでなく,その安定集合に入る部分も覆うチューブを必要とします.その際,一つのチューブの中にどれくらいの分割が入るかを評価する必要がありますが,同様な評価が安定集合を覆うチューブに対しても成立することがわかりました.近年になってBarreira,Pesin,Schmelingらは,双曲型測度が「極限的直積構造」とばれる性質をもつことを発見しました.彼等はこの性質を用いてEckmann-Ruelle予想を解決しました.極限的直積構造は,位相的に定義された局所直積構造の測度論的な類似物になっています.しかし,局所直積構造ほどその研究は進められていません.本研究では,双曲型測度の極限的直積構造を用いたエルゴード理論的な研究を進めることを目的とします.本年度はHenon写像族を用いて特殊な双曲型測度の例を構成しました.ここで,Henon写像族とは1976年にHenonによって考案されたR^2上の写像で,次式で与えられます:f(x,y)=f_<a,b>(x,y)=(y+1-ax^2,bx).90年代の初頭にBenedicks-Carlesonは,(a,b)=(2,0)に近いLebesgue測度正の集合Eが存在し,(a,b)∈Eに対してf_<a,b>の臨界的集合と呼ばれるCantor集合Cと定数c>0とλ>1があって次を満たすことを示しました:x∈Cに対し接ベクトルv=(0,1)をとると,Collet-Eckmann条件|D_xf^n(v)|>cλ^nを満たす.この結果をもとにして,Benedicks-Youngは(a,b)∈Eに対してf_<a,b>がSRB測度をもつことを示しました.これらの結果に対して、私はいくらでも小さなLyapunov指数をもつSRB測度をもつようなHenonアトラクターの例を構成しました.正確にはEを上で述べたBenedicks-Carlesonのパラメター集合とし,E^*をEの密度点の全体とします.任意の(a,b)∈E^*のいくらでも近くに(c,b)∈(a,b)が存在して臨界点集合CのLyapunov指数の最小値が0であることを示しました.本研究で得られた例を基にして.双曲型測度がBernoulli性を持つための判定条件の研究、相関関数が多項式的な減衰をする(混合性の度合いが弱い)ストレンジアトラクターの構成ができると期待されます.
自己免疫性膵炎の発症病態や制御機構に関わるIL-35の働き

IgG4-related pancreatitis(AIP)の病態には,制御性T細胞(Treg)が関与すると報告されているが,その増減に関与するメディエーターや詳細な関係性は未だ不明な点が多い.そこでTregに関与し,抑制的な働きをすると考えられるIL-35を中心としたサイトカインとAIPの病態との関連に注目した.ヒト検体で末梢血中のTregを用いて,IL-35との関係性の解析を進め,AIP膵組織でもその発現について確認を行い,病勢のバイオマーカー及び今後の新たな治療法となるかを検討する.IgG4-related pancreatitis(AIP)の病態には,制御性T細胞(Treg)が関与すると報告されているが,その増減に関与するメディエーターや詳細な関係性は未だ不明な点が多い.そこでTregに関与し,抑制的な働きをすると考えられるIL-35を中心としたサイトカインとAIPの病態との関連に注目した.ヒト検体で末梢血中のTregを用いて,IL-35との関係性の解析を進め,AIP膵組織でもその発現について確認を行い,病勢のバイオマーカー及び今後の新たな治療法となるかを検討する.
網脈絡膜組織に対する網膜色素上皮由来胎盤成長因子の保護効果

本年度の研究により、ヒトRPE細胞株hTERT-RPE1においてPlGF発現を抑制すると血清除去によるアポトーシスが亢進し、このPlGF抑制RPE細胞にPlGFを外的に添加すると、濃度依存的にアポトーシスが抑制されることが示された。また、PlGF抑制RPE細胞においてはVEGF受容体(VEGFR)-2蛋白が減少しており、同細胞にPlGFを添加すると、VEGFR-2蛋白が回復した。VEGFR-2のmRNA発現は変化しなかった。これらのことから、PlGFにVEGFR-2蛋白を安定化する作用があることが示された。親株RPE細胞では、血清除去時にVEGFを添加すると濃度依存的にアポトーシスが抑制されたが、VEGFR-2をsiRNAで抑制するとVEGFによるアポトーシスからの保護効果は失われた。同様に、VEGFR-2発現が減少しているPlGF抑制RPE細胞においても、VEGF添加によるアポトーシスの抑制は失われていた。これらの結果により、PlGFがVEGFR-2蛋白を安定化することでVEGFによるRPE細胞保護効果を支える機序の存在が示唆された。さらに、RPE細胞特異的PlGF欠損マウスを作成し、ジェノタイピングにより遺伝子型を確認した。交付申請書に記載した平成30年度の研究実施計画のうち、「PlGF抑制RPE細胞を用いたin vitro実験によるアポトーシスの解析」および「RPE細胞特異的PlGF欠損マウスの作成」については終了し、検討により学術的意義のある結果を得ていることから、おおむね順調に研究は進展していると自己評価するものである。令和元年度は、PlGF抑制RPE細胞において、プロテアソーム阻害剤(MG132)、リソソーム阻害剤(バフィロマイシンA1)による分解系阻害がVEGFR-2発現に及ぼす影響の解析などをおこなう。またプロテアソームやリソソーム分解に関与する分子の発現や活性がPlGF抑制あるいは添加により変化するかをウエスタンブロッティングなどで解析し、PlGFによるVEGFR-2安定化の機序を検討する。さらに、RPE細胞特異的PlGF欠損マウスと同腹仔のPlGFヘテロおよびPlGF野生型コントロールマウスについて、網膜電図の測定および評価、光干渉断層計(OCT)による網膜および脈絡膜厚測定、HE染色による網脈絡膜組織の形態評価、網膜切片におけるTUNEL染色によるアポトーシス解析をおこない、比較検討することで網膜の形態学的および機能的評価をおこなう。理由:平成30年度の研究計画はPlGF抑制RPE細胞を用いたin vitro実験およびRPE細胞特異的PlGF欠損マウスの作成であったが、順調に研究が行われ、予定よりも低額の研究費で計画遂行が可能であったため。使用計画:令和元年度に計画している、PlGFによるVEGFR-2安定化の機序の検討、およびRPE細胞特異的PlGF欠損マウス網膜の形態学的および機能的評価に使用する予定である。
他動性の観点にもとづく韓日対照構文論研究

本稿では、生成文法の枠組みの中で行われた70年代の使役の研究を見直して次のようなことを主張した。(A)使役の意味は従来いわれたような直接か間接かといった両極的なものでなく、直接性の側面にそって連続性を示すこと。そして、(B)使役形式がどのような状況と対応するかを見せる分布は、言語によって異なるので、語彙的使役=直接使役、生産的使役=間接使役という単純な等式は成り立たないこと、である。2.「意味を基盤とした韓日使役構文の分析-非規範的使役構文を手がかりとして-」本研究では、(1)韓日両言語における非規範的使役構文を統一的に説明できるものは何か、(2)使役の形態素の機能をどのように定義すれば、非規範的使役構文をも含めた使役構文全体を統一的に説明することが可能になるのか、という問題を解決することを目的とした。この問題は使役形式の機能を、行為が表に向かって展開するという意味的他動性の概念に基づいて定義することによって解決できることを提示し、両言語を統一的に説明するモデルとして「折り紙モデル」を提案した。3.「韓国語の自動詞とヴォイス-自発と受身の連続性-」韓国語には自動詞語幹に受身形が付加される場合があり、それは受身か自発かという問題について、ヴォイスの連続性の観点からその特徴について考えた。韓国語の事実からは、非対格の自動詞がさらなる自動化への派生を進めて、広い意味でのヴォイス現象に参与することがあることがわかる。他方、非人称受身や日本語の間接受身においても、非対格動詞が受身に関与することがある。この二つの現象を合わせて見ると、受身文の成立可否を根拠に提案された非対格仮説は再考の余地があるように思える。
メチルオキシド化合物分析用マイクロセンサーの開発およびその食品分析への応用

菌体から抽出、精製したDMSO還元酵素を用いてマイクロチップ型のバイオセンサーを作製した。本酵素は還元酵素であり、メディエーターにメチルビオロゲンを用いているため、-750mVvsAg/AgClという低い電位を印加しなければならない。流路の素材であるポリジメチルシロキサン(PDMS)は、重合反応により自由な形に造形しやすい反面、微量ではあるがガスを透過することから、測定溶液中の溶存酸素が測定値に影響する。通常のバッチ型センサーではアルゴンなどの不活性ガスをバブリングすることで脱酸素を行うが、細い流路内では気泡が付着して困難である。そこで、測定溶液中にグルコース(100mM-グルコースオキシダーゼ(8U/ml)-カタラーゼ(230U/m1)を添加することによって、極めて簡便に、かつ再現よく脱酸素が可能となった。バッチ型センサーの定量限界は200μM、RSD<3.6%で、測定値の再現性も十分であった。一方、シリンジポンプを用いて溶液を送液したところ、5μL/min以上では送液による電流値の乱れが観察され、安定したバックグランド電流値を得るには1μL/min程度の流速が望ましいことがわかった。また、送液により酵素の電極からの脱離によると思われる感度低下も観察された。一方、実サンプル測定では、ビール中のDMSO測定を試みたが、基質以外にバックグランド電流値を与え、今後の検討の課題である。本研究では、まずセンサーとして機能する薄膜電極を、ソフトリソグラフィー法を用いて作製した。作用極、対極はCr、Auを蒸着後、エッチング法で造形し、続いて擬似参照極をCr、Ag蒸着後、リフトオフ法で造形した。そこに、流路を作り込んだPDMSポリマーを接着し、電極が正常に機能するか確認した。その結果、メディエーターの還元電位(-750mV vs Ag/AgCl)では対極が剥離することが分かり、対極としてPt wireを流路に埋め込むことでこの問題を解決した。次に、既知のプロトコールに従ってR.sphaeroidesからDMSO還元酵素を精製し、BSA-グルタルアルデヒドでAu電極上に固定し、バッチ型のバイオセンサーを作製した。このセンサーは溶存酸素による還元電流の影響を受けるため、脱酸素が重要である。そこで、グルコースオキシダーゼ-カタラーゼ系を用いたところ、再現性よく溶液中の脱酸素を行うことができた。さらに、測定条件を最適化した結果、このセンサーは、検出限界200μMで、その検量線は1mMまで直線性を示した。各濃度におけるシグナルの相対標準偏差は3.6%以下で、感度は23.8mA/M・cm^2であった。また、この固定化法によるセンサーの耐久性については、6日以内では約半分の応答を維持していたが、8日後には応答が著しく低下した。DMSO還元酵素自体は15日後でも最初の80%の活性を維持することから、センサーの応答低下の主な原因は、薄膜電極表面からの酵素の脱離と考えられる。
損傷乗り越えＤＮＡ合成における細胞分化と紫外線線量率効果

損傷乗り越えDNA合成(以下TLS)は、ヌクレオチド除去修復とともに、紫外線損傷の重要な修復機構である。しかし、これら二種類の修復機構のヒト細胞の分化発生ならびに太陽紫外線程度の緩照射での役割は不明であった。本研究では、紫外線の緩照射装置の開発とTLS欠損細胞株の樹立を行った。実験結果は太陽紫外線程度の緩照射ではTLSが主要な役割を果たしていることを示した。また、Nbs1欠損マウスES細胞と同マウス繊維芽細胞を用いて紫外線感受性を検討した結果、TLSの機能が成体と胚で異なることを示唆した。損傷乗り越えDNA合成(以下TLS)は、ヌクレオチド除去修復とともに、紫外線感受性の重要因子である。従来のTLS生物実験では皮膚線維芽細胞のような分化細胞を用い、また太陽紫外線の数百倍の線量率で照射されるなど実体が環境中とかけ離れた条件下で研究されてきた。本研究では、TLSを開始させる蛋白NBS1を欠損したモデルマウスのES細胞と成体マウス線維芽細胞、およびそれぞれの野生型細胞を、太陽紫外線レベルの低線量率で照射して、環境中におけるTLSの防御的役割とその分子機構を明らかにする事を目的とする。始めに、紫外線線源と石英製の培養皿の距離とneutral density filterを用いて太陽紫外線と同程度の0.1J/m2/分の紫外線線量率の照射装置を作製した。この装置を用いて、NBS1欠損細胞とXPC欠損細胞に各線量のUVを照射してコロニー法による線量-生存率曲線を求めた。その結果、野性型の細胞では紫外線急照射に比較して緩照射(0.1J/m2/分)では生存率大きく回復したが、NBS1欠損細胞では、緩照射による回復は部分的であった。一方、XPC欠損細胞では、野性型細胞と同程度の回復が緩照射により得られた。紫外線照射により誘発されるDNA損傷をElisa法を用いて定量した結果、シクロブタン型チミン二量体は緩照射でも細胞内に残存していた。このことから、シクロブタン型チミン二量体を除去する能力が欠失したNBS1欠損細胞が緩照射でも高感受性であると思われる。続いて、Nbs1欠損マウスES細胞と同マウス繊維芽細胞を用いて紫外線感受性を検討した結果、Nbs1欠損マウスES細胞の紫外線感受性はわずかであるが、Nbs1欠損マウス成体繊維芽細胞は顕著な紫外線高感受性を示した。ヌクレオチド除去修復では胚発生ではゲノム全体で働く経路、そして成体では転写に共役した経路が使われることが知られているので、我々の結果はTLSの機能が成体と胚で異なることを示唆している。
特殊なホロノミー群をもつ多様体およびその部分多様体の研究

1.associative部分多様体の2次変形の研究G2構造を持つ7次元多様体の重要な部分多様体のクラスにassociative部分多様体がある。特にG2構造がnearly parallel G2構造のとき、その錘はSpin(7)多様体になりassociative部分多様体はCayley錘部分多様体になる。これは特異点の研究に重要である。nearly parallel G2構造を持つものの代表例は7次元球面である。その等質associative部分多様体はJ.Lotay氏により分類されている。以前の研究で、A3と呼ばれるもの以外の無限小変形は非障害的であることを示した。A3は他の幾何からは現れないnearly parallel G2幾何特有の対象ゆえ、その変形を捉えるのは難しい。本年度は、その研究を更に発展させることができた。まず、一般の状況でassociative部分多様体の無限小変形が、2次まで非障害的になるための具体的な必要十分条件を導いた。そしてその応用として、表現論を用いてA3の無限小変形は2次まで非障害的であることを示した。Frolicher-Nijenhuis bracketの導入には、Nijenhuis-Lie微分を用いる。幾何構造が可積分なとき、この2乗は0となりコホモロジーが定義できる。複素多様体の場合には、それはdc作用素に一致しそのコホモロジーはde Rhamコホモロジーに同型である。H.V.Le氏、L.Schwachhofer氏との議論により、G2, Spin(7)多様体の場合にこのコホモロジーを研究し、その構造を決定した。いくつかの場合は通常のコホモロジーに一致し、またあるときは無限次元になることを示した。28年度が最終年度であるため、記入しない。R8の原点を通る4次元平面との交叉で得られるassociative部分多様体の分類を行った。squashed S7の自己同型群による作用を除いて、2種類に限られることを示した。通常のS7の場合はただ1つに限ることが知られており、それとは対照的な結果を得た。また以前行った等質なassociative部分多様体の分類に基づき、表現論を用いて無限小変形の空間の次元を計算した。更にすべての場合に、無限小変形は可積分であり、実際の変形を自己同型群、およびnearly Kähler CP3内の概正則曲線を用いて具体的に記述することができた。通常のS7の場合には、可積分かどうか判定できないものがあったが、squashed S7の場合にはすべて可積分性が示せた。2. S4の反自己双対束のcoassociative部分多様体の具体的構成コンパクトLie群の分類をもとに、S4の反自己双対束内で3次元、および4次元の軌道をもつものを分類した。それにより、等質coassociative部分多様体は、自己同型群の作用を除いて零切断のみに限ることを示した。更に上記分類に従って、余等質性1のcoassociative部分多様体を記述する常微分方程式を導出した。多くの場合、解を具体的に求めることができ、coassociative部分多様体の族を構成できた。加えて、それらの位相を決定した。1.アフィンルジャンドル部分多様体の導入ラグランジュ部分多様体の一般化として、アフィンラグランジュ(totally real)部分多様体がある。アフィンラグランジュ部分多様体にはJ-volumeという自然な汎関数が存在する。ラグランジュ部分多様体に対しては、これは通常の体積汎関数に等しい。J-volumeを極小にするような部分多様体の存在問題は、定スカラー曲率ケーラー(cscK)計量の存在問題等と同様の枠組で理解されることが知られている。更にある条件下では、特殊ラグランジュ部分多様体の研究にも重要であると考えられている。アフィンラグランジュ部分多様体の奇数次元の類似として、佐々木多様体内にアフィンルジャンドル部分多様体の概念を導入した。これはルジャンドル部分多様体の一般化にもなっている。まず、アフィンルジャンドル部分多様体のφ-volumeという自然な汎関数を定義した。これはJ-volumeの奇数次元の類似である。この第二変分公式を計算し、ambient spaceがあるη-Einstein佐々木多様体の場合には、安定性が導かれることを示した。また同じ仮定のもと、φ-volume汎関数はアフィンルジャンドル部分多様体全体の成す空間の中で凸であることがわかった。既存の漸近的に錐なcoassociative部分多様体等の変形については理解を深めたが、それを他の部分多様体に対して応用するには至らなかった。一方、新たな部分多様体の概念を導入し、既存の結果を一般化することができた。H.V.Le氏、L.Schwachhofer氏との議論により、G2, Spin(7)構造に対しても、新しい視点で研究が行うことができた。

以前の研究で、A3と呼ばれるもの以外の無限小変形は非障害的であることを示した。A3は他の幾何からは現れないnearly parallel G2幾何特有の対象ゆえ、その変形を捉えるのは難しい。本年度は、その研究を更に発展させることができた。まず、一般の状況でassociative部分多様体の無限小変形が、2次まで非障害的になるための具体的な必要十分条件を導いた。そしてその応用として、表現論を用いてA3の無限小変形は2次まで非障害的であることを示した。Frolicher-Nijenhuis bracketの導入には、Nijenhuis-Lie微分を用いる。幾何構造が可積分なとき、この2乗は0となりコホモロジーが定義できる。複素多様体の場合には、それはdc作用素に一致しそのコホモロジーはde Rhamコホモロジーに同型である。H.V.Le氏、L.Schwachhofer氏との議論により、G2, Spin(7)多様体の場合にこのコホモロジーを研究し、その構造を決定した。いくつかの場合は通常のコホモロジーに一致し、またあるときは無限次元になることを示した。基本的な解析的手法を会得したが、それを研究に実際に応用するまでには至らなかった。一方で、Lie群の理論を用いて、具体的な部分多様体を多く構成することができた。加えて、局所的な変形空間の次元も計算し、それらが可積分であることが示せた。これまでは、部分多様体は境界がないものを扱ってきたが、境界つきの場合も考える。そして境界つき部分多様体の変形空間、およびambient spaceの構造を摂動したときの変形空間の様子をみる。また、非コンパクトな漸近的に錐な部分多様体についても、同様のことを調べる。更に、昨年度に引き続きG2, Spin(7)構造自身、その幾何構造の変形等について研究を深める。28年度が最終年度であるため、記入しない。今後は、解析的な側面に注力して研究を行う。漸近的に錐な場合など、非コンパクトな場合の先行研究もよく理解する。そしてG2構造を摂動させたときの、漸近的に錐なassociative部分多様体のモジュライ空間の性質を調べる。更にその後、associative、ケーリー部分多様体の類似性から、コンパクト、および漸近的に錐なケーリー部分多様体に対しても同様のことを考える。
金属ポルフィリン環状ホストを用いた高次フラーレンの分子認識と構造変換

フラーレン類にはC60よりもサイズの大きな、高次フラーレンが存在する。さらにその中にはC76、C78やC84などの不斉な炭素骨格を有するものが存在し、光学材料や医薬品としての応用の面で注目されている。キラルな高次フラーレンは官能基や特定の不斉中心を持たない、分子不斉を有する炭素クラスターである。これらの構造的特徴は、キラルな高次フラーレンが、他の分子と相互作用するための足場に極めて乏しい分子であることを意味する。そのため、それらのキラリティを認識することは本質的に困難である。そこで、不斉な湾曲を有するポルフィリン部位を導入した新規キラルホストを設計、合成し、C76との複合化を試みた。実際に、ホストのエナンチオマーとラセミ体のC76からなる複合体の水素核核磁気共鳴(1HNMR:1H Nuclear Magnetic Resonance)スペクトルを測定した所、20°Cにおいてホストに由来する1HNMRシグナルにジアステレオマー複合体に由来する分裂が観測され、さらにジアステレオ複合体の積分比から、このキラルホストがC76に対してKlarge/Ksmall=1.2程度のエナンチオ選択性を有していることを明らかにした。さらにホストの光学異性体を用いて、実際にラセミ体のC76からエナンチオ選択的抽出を行えることも確認した。このホストは、キラルフラーレンを不斉認識可能な、初めてのホスト分子である。研究者は現在、不斉な炭素骨格を有する炭素クラスターのキラリティセンシングを目標として研究を行っている。三次元的な球状構造に由来するキラリティをセンシングするために、相互作用部位として、不斉に歪んだπ共役面を有するキラルな新規ポルフィリン環状ホストを設計、合成した。新規キラルホストと、不斉炭素クラスターの一つである高次フラーレンC_<76>との複合化を行ったところ、^1H NMR上で、ホストに由来する^1H NMRシグナルがジアステレオマー複合体間で非等価になることを見出し、C_<76>のキラリティを^1H NMR上でセンシングすることに成功した。プロトタイプのホストでは、キラリティセンシングの際に測定温度を低温にする必要があったが、分子デザインの検討により、センシングに有効な構造要素の抽出を行い、ホスト構造のチューニングを行った。その結果、測定温度を下げずに、室温でもC_<76>のキラリティセンシングが可能なホストの合成を達成した。さらに、このホストをC_<76>の光学純度決定に利用し、既存の報告よりも正確なC_<76>のΔεの算出に成功した。すなわち、本キラルホストの、不斉炭素クラスターに対するキラルシフト試薬としての有用性を示した。本キラルホストを利用した光学純度決定法は、他の不斉炭素クラスターの物性値算出にも大きな威力を発揮すると期待される。また、キラルホストを用いて、C_<76>との複合体の形で再沈殿を行うことにより、析出した複合体中でC_<76>の一方のエナンチオマーが濃縮されることを見出した。この知見を発展させることにより、新しい、簡便で効率的な不斉炭素クラスターの光学分割法が開発できると期待される。研究者は現在、不斉な炭素骨格を有するキラルフラーレンの不斉認識を課題として研究を行っている。三次元的な球状・楕円状構造に由来するキラリティをセンシングするために、相互作用部位として、不斉に歪んだπ共役面を有するキラルな新規ポルフィリン環状ホストをすでに設計、合成し、C_<76>のキラリティを^1H NMR上でセンシングすることに成功している。このことを利用し、既存の報告よりも正確なC_<76>のΔεの算出に成功した(JACS.2006.10690-10691.)。また、キラルホストの分子デザインを再検討し、ポルフィリンβ位にアルキル基を導入した置換タイプのポルフィリンを基本骨格とした新規キラルを設計、合成したところ、このホストが1.0:1.2程度の選択性でC_<76>の一方のエナンチオマーを選択的に取り込むことを^1H NMR上で確認した。このホストは、キラルフラーレンに対してエナンチオ選択性を有する初めてのホスト分子である。また本キラルホストのエナンチオマーを用いて、過剰量のラセミ体C_<76>から、わずかであるが一方のエナンチオマーを選択的に抽出できることも見出している。この時、エンリッチされるC_<76>のエナチオマーは^1H NMRで確認されたホストのエナンチオ選択性と一致することも確認した。このような選択性は、ポルフィリンβ位が無置換のタイプのキラルホストでは全く見られない。β位へのアルキル基の置換によるポルフィリン環の歪みの増大や、電子ドナー性の増大によって、C_<76>と不斉ポルフィリンがより強く相互作用することが、ホストのエナンチオ選択性の要因だと考えられる。

そのため、それらのキラリティを認識することは本質的に困難である。そこで、不斉な湾曲を有するポルフィリン部位を導入した新規キラルホストを設計、合成し、C76との複合化を試みた。実際に、ホストのエナンチオマーとラセミ体のC76からなる複合体の水素核核磁気共鳴(1HNMR:1H Nuclear Magnetic Resonance)スペクトルを測定した所、20°Cにおいてホストに由来する1HNMRシグナルにジアステレオマー複合体に由来する分裂が観測され、さらにジアステレオ複合体の積分比から、このキラルホストがC76に対してKlarge/Ksmall=1.2程度のエナンチオ選択性を有していることを明らかにした。さらにホストの光学異性体を用いて、実際にラセミ体のC76からエナンチオ選択的抽出を行えることも確認した。このホストは、キラルフラーレンを不斉認識可能な、初めてのホスト分子である。
光応答性界面活性剤を用いたエマルションの解乳化挙動

アゾベンゼン基を有する光応答性界面活性剤を用いて調製したエマルションの光誘導解乳化に成功した。アゾベンゼン基を有する界面活性剤のトランス体からシス体への光異性化反応によってエマルションは解乳化した。界面活性剤の界面物性変化が光誘導解乳化を引き起こすことを明らかにした。種々の油で光誘導解乳化を試みたところ、解乳化には油の種類に汎用性があることが分かった。光誘導解乳化が分離抽出技術の新たな方法として期待する。本研究は、能動的にマテリアルの性質をコントロールできる刺激応答性マテリアルの新たな利用法としてエマルションの解乳化に着目し、新たな刺激応答性マテリアルの作製およびその現象の発現機構の解明を行い、工業的な応用を目指している。刺激応答として光を用いた光誘導解乳化は、従来の解乳化に考えられる欠点を補えるものと期待される。本年度は、これまでに達成している光応答性のアゾベンゼン基を有するGemini(双子)型界面活性剤を用いた光誘導解乳化の発現機構を界面化学および有機合成化学的な側面から明らかにすることを目的としている。界面化学的手法は、油/水界面に吸着している界面活性剤が紫外光照射によって収縮することが分かった。これは、光照射によるアゾベンゼン基の構造変化に伴い、油/水界面全体に配向している界面活性剤が一時的な油/水界面の直接的な接触を導くことを示唆している。有機合成化学的手法では、アゾベンゼン基を有するGemini型界面活性剤の類縁体を合成し、その一部において光誘導解乳化が確認されたことから、Gemini型界面活性剤中のスペーサー部位にアゾベンゼン基を有することが重要であることを明らかにしている。これらの結果より、紫外光照射による解乳化機構は以下のように考える。界面活性剤中のアゾベンゼン基が光照射による異性化に伴う分子の伸縮によって、一時的な油/水界面の直接的な露出が起こるため、エマルション中の油/水界面にも一時的な露出が油滴間の合一を促進させ、最終的にエマルションの相分離、すなわち解乳化を導くと考えられる。本年度は、光誘導解乳化を工業的に応用するために、安価でかつ容易に高収率で合成可能な光応答性界面活性剤を用いた系での光誘導解乳化について検討した。昨年度に達成した光誘導解乳化に用いた界面活性剤は、安価な試薬のみで合成されたが、総収率が約10%であった。そこで、本年度は安価な試薬のみで合成可能かつ総収率が約60%で合成できた光応答性界面活性剤でエマルションを調製した。このエマルションに紫外光を照射したところ、油と水が完全に相分離、解乳化することを見出した。また、紫外光照射によって油/水の界面張力が上昇することが分かった。界面張力の上昇は、エマルションの界面自由エネルギーの上昇を意味し、油/水の界面積を減少させる、すなわちエマルションが不安定化することを示す。そのため、この光誘導解乳化が紫外線照射による界面張力の増加に伴い、エマルション中の油滴が合一したことに起因することを明らかにしている。従来の光誘導解乳化では、完全な油と水の相分離に6時間に光照射が必要であった。この時間は実用的なものではなかった。本年度に達成した光誘導解乳化は同スケールにおいて90分間で完全に油と水が相分離した。さらに、マイクロリアクターを用いることで3.5分での光誘導解乳化に成功している。本研究では、光応答性界面活性剤を用いることでエマルションの解乳化を光のみで達成し、その工業的な応用を目指している。初年度には当研究室で発見した光誘導解乳化の発現機構を明らかにし、2年目である本年度は、明らかにした光誘導解乳化を実用的なものに近づけるために検討してきた。その結果は、光誘導解乳化の実用化に向けた際の欠点を補うものであり、当初の実験計画に対しておおむね順調に進展していると評価できる。刺激応答として光を用いた光誘導解乳化は、従来の解乳化に考えられる欠点を補えるものと期待できる。本年度は、光誘導解乳化の汎用性を検討するため、昨年度までに見出した光誘導解乳化を用いた有機反応について検討した。光応答性界面活性剤を含む水溶液と油相にn-オクタンを用いたエマルションの光誘導解乳化を昨年度まで検討してきた。この現象の汎用性を広げるため、油相の種類を変更した。油相の種類には、ハンセン溶解度パラメータから種々のものを用いた。その結果、溶解度パラメータの分散値に関わらず、極性値および水素結合値の小さな油相を用いた場合には安定なエマルションが得られ、光誘導解乳化が観察された。

とくに、炭化水素系の油では顕著なエマルションの不安定化が確認された。水や油の混合しない二成分の液体の界面積は乳化を行うことで増大し、解乳化することで減少する。最終的に、水相と油相は完全に分離する。このことから有機合成分野で用いられる相間移動触媒を用いた有機反応に着目した。この反応は、有機溶媒に可溶な有機化合物を水に可溶な無機物と反応させる不均一な系(エマルション)で行われる。その際に反応化合物の単離に光誘導解乳化が有効であると考えた。そこで、シアン化ナトリウムを用いたシアノ化反応に光誘導解乳化を用いたところ、従来の単離方法に比べ容易に反応化合物の単離に成功した。アゾベンゼン基を有する光応答性界面活性剤を用いて調製したエマルションの光誘導解乳化に成功した。アゾベンゼン基を有する界面活性剤のトランス体からシス体への光異性化反応によってエマルションは解乳化した。界面活性剤の界面物性変化が光誘導解乳化を引き起こすことを明らかにした。種々の油で光誘導解乳化を試みたところ、解乳化には油の種類に汎用性があることが分かった。光誘導解乳化が分離抽出技術の新たな方法として期待する。光誘導解乳化の発現機構を解明し、解乳化に及ぼす重要な因子の解明に成功している。しかしながら、現在の光誘導解乳化には界面活性剤の合成収率が低い、解乳化を達成するための光照射時間が長いといった欠点を有している。一方で、高収率で合成可能なアゾベンゼン基を有する界面活性剤はすでに得られている。今後は、明らかにした発現機構に基づき、高収率で得られる界面活性剤を用いて先述した欠点を改善する系での光誘導解乳化を探索していく。これまでに光誘導解乳化の発現機構を明らかにし、その結果に基づき実用化に向けた問題点について改善してきた。さらに実用化のために、解乳化のスケールアップおよびエマルションで用いる油のバリエーションについて検討するとともに、光誘導解乳化による簡便な分離・抽出方法を検討する予定である。界面化学学会発表での費用である旅費を支出する予定であったが、学内予算から支出したために差額が生じた。当初、学会発表での費用である旅費および論文の別刷り費用を支出する予定であったが、大学内予算から支出したためである。当該年度において、実験に必要な物品を購入することで支出する予定である。