hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
高齢者の地域居住を支える小規模多機能型居宅介護に勤務する介護福祉士の技術の明確化

しかし、年度内に予定していた介護福祉士へのフォーカスグループインタビューは、対象者らの協力を得て、計三回実施することができた。2019年度は、年度前半までに介護福祉士へのフォーカスグループインタビューの結果を質的に分析し、小規模多機能型居宅介護に勤める介護福祉士が地域居住の高齢者の生活をどのようにとらえているのか(生活の構成要素)を明らかにする。年度後半には、特別養護老人ホームでの調査から得られた「生活の構成要素」と合わせ、地域居住の高齢者の「生活の構成要素」を作成し、項目の妥当性を検討するため、全国の小規模多機能型居宅介護事業所を対象に質問紙調査を行う予定である。フォーカスグループインタビューの実施時期が、2019年2,3月であったことから、対象者への謝金の支払い、面接を録音した内容の文字起こしの依頼および代金の請求が4月以降となったためである。いずれも5月までに支払いを完了する予定である。2019年度は、小規模多機能型居宅介護事業所を対象に質問紙調査を予定しており、調査票や封筒の印刷、発送と返送の郵送費、回収できた調査票のデータ入力および分析のために、助成金を使用する計画である。
三次元的に空間に位置する視距離の異なる視対象の情報認識に関する研究

本研究の主題は,第一には視覚情報受容特性の観点から,今後期待される自動車用HUDの問題点を明らかにし,改善解や最適デザインのガイドラインを示すことである.第二には,三次元的に配置する遠近二種類の視対象の認識に与える(跳躍的)眼球運動の存在であると問題を単純化すれば,自動車用HUDと言う例題を通じて,(跳躍的)眼球運動と輻輳,情報の認識という3者の関連を,輻輳応答の継時的過程における視覚情報受容と処理プロセス(輻輳の加減速のケースでどう視覚情報は処理されているかなど)を明らかにすることである.研究の結果,以下の成果を得研究成果を,論文投稿13件(内投稿中1件を含む),口頭発表2件,その他の発表2件として発表した.(1)前景視対象に相当する遠方像(実像)とハーフミラによる表示像(虚像)視標とを、コンピュータにより運転条件を模擬して短時間呈示制御できる実験システムを構築した.(2)虚像と実像までの視距離の差、被験者の偏角移動量、各視標のパターン等を変化させ視標の誤知覚や認識正答率を実験評価した結果,誤知覚の発生メカニズムは輻嬢応答遅れに起因することが分かった.(3)同時に行った眼球運動計測の実験データから,表示像の俯角設定によって生じる眼球の共同運動応答と視距離差によって生じる輻鞍応答とに深い関連があり,共同運動が輻輳応答を加速促進効果があることが分かった.(4)現実の自動車では、HUDの微小俯角設定による意図的共同運動が、ドライバの誤認識低減に極めて効果的であることが分かった.(5)輻輳応答の遅れによる眼球運動がサッカード運動と連携していることにより,サッカード抑制が誤知覚を防ぐことに関連する視覚情報処理モデルを提案した.本研究の主題は,第一には視覚情報受容特性の観点から,今後期待される自動車用HUDの問題点を明らかにし,改善解や最適デザインのガイドラインを示すことである.第二には,三次元的に配置する遠近二種類の視対象の認識に与える(跳躍的)眼球運動の存在であると問題を単純化すれば,自動車用HUDと言う例題を通じて,(跳躍的)眼球運動と輻輳,情報の認識という3者の関連を,輻輳応答の継時的過程における視覚情報受容と処理プロセス(輻輳の加減速のケースでどう視覚情報は処理されているかなど)を明らかにすることである.研究の結果,以下の成果を得研究成果を,論文投稿13件(内投稿中1件を含む),口頭発表2件,その他の発表2件として発表した.(1)前景視対象に相当する遠方像(実像)とハーフミラによる表示像(虚像)視標とを、コンピュータにより運転条件を模擬して短時間呈示制御できる実験システムを構築した.(2)虚像と実像までの視距離の差、被験者の偏角移動量、各視標のパターン等を変化させ視標の誤知覚や認識正答率を実験評価した結果,誤知覚の発生メカニズムは輻嬢応答遅れに起因することが分かった.(3)同時に行った眼球運動計測の実験データから,表示像の俯角設定によって生じる眼球の共同運動応答と視距離差によって生じる輻鞍応答とに深い関連があり,共同運動が輻輳応答を加速促進効果があることが分かった.(4)現実の自動車では、HUDの微小俯角設定による意図的共同運動が、ドライバの誤認識低減に極めて効果的であることが分かった.(5)輻輳応答の遅れによる眼球運動がサッカード運動と連携していることにより,サッカード抑制が誤知覚を防ぐことに関連する視覚情報処理モデルを提案した.【本年度の主たる成果】1.再現性が困難な実車実験に代えて,ヘッドアップディスプレイ(HUD)評価を光学暗室内行う実験装置を組み上げた.コンピュータにより運転条件を模擬して,前景視対象に相当する遠方像(実像)とハーフミラにより呈示された表示像(虚像)とを,短時間呈示させた.本装置は表示像俯角や距離,輝度などを変化させることができる.2.実験装置を用いて,虚像と実像までの視距離差,被験者の俯角移動量,各視標のパターン等を変化させ評価した結果,誤認識の発生メカニズムは輻輳応答遅れに起因することが分かった.3.眼球運動計測の実験データとしては,俯角移動量によって生じる共同運動応答と視距離差によって生じる輻輳応答とに深い関連があることが分かった.4.現実の自動車では,HUDの微小俯角設定による意図的共同運動は,ドライバの誤認識低減に極めて効果的であることが分かった.5.以上の知見を中心に電子情報通信学会誌論文誌等に一部投稿した.【今後の予定】次年度以降は,これらの知見を基に,遠方像と表示像との三次元的な視標配置での経時的過程の視覚情報処理過程を実験的に調べる.具体的には,視線移動(跳躍的眼球運動)と輻輳応答,視標認識に焦点をあて,輻輳応答経時過程(トランジエントプロセス)での認識,視線移動量や速度と認識度合い,複数視標にいる逐次的情報受容過程,視覚情報の抑制の有無,サッケード抑制成分の有無と関連などを実験と計算機シミュレーションにより詰める.さらに,これらの実験結果に基づき視覚情報処理モデルと,輻輳や跳躍的眼球運動に関連した眼球運動制御モデルを構築する.【研究実績】(1)昨年度

組み上げた評価装置を用いて,遠方の視標位置と,近方の視標位置を空間的に0度から10度まで変化させ輻輳応答の特性を計測評価した.(2)被験者は少数ではあるが,結果は,両視標の位置差が約2度以上になると,上下左右など方向によらず眼球の共同運動により輻輳応答が加速されることが分かった.(3)視距離の異なる視標情報のトラジエントな過程における認知特性を調べるために,遠方視標と近方視標の二つが同一の平面に表示される場合を設定し,表示像の切り替わり継時の表示情報の知覚特性を計測した.(4)実験では,両視標の総呈示時間を一定に保ちながら,一方の呈示時間を変化させ被験者の認知状況を報告させたが,一方の呈示時間が30msec程度になっても,被験者は両方の視標情報を正確に答えることができた.この結果から,視距離が異なる二つの情報の認知過程では,何らかの視覚情報抑制作用が働いていることが示唆された.(5)遠方視標と近方視標の表示視標の情報認知過程では,まず,共同運動で輻輳応答が加速され,共同運動によって生じるサッカード抑制により輻輳応答前後で受容される二種の情報の一方を抑制して二重知覚を低減・抑制するという視覚情報受容モデルが示唆される.(6)以上の知見をまとめて,現在論文投稿を準備している.【今後の予定】次年度は,最終年度として,全体のデータを補強すると共に,視覚情報受容モデルの記述,昨年度の結果も含め全研究を報告書としてまとめたい.本研究の主題は,第一には視覚情報受容特性の観点から,今後期待される自動車用HUDの問題点を明らかにし,改善解や最適デザインのガイドラインを示すことである.第二には,三次元的に配置する遠近二種類の視対象の認識に与える(跳躍的)眼球運動の存在であると問題を単純化すれば,自動車用HUDと言う例題を通じて,(跳躍的)眼球運動と輻輳,情報の認識という3者の関連を,輻輳応答の継時的過程における視覚情報受容と処理プロセス(輻輳の加減速のケースでどう視覚情報は処理されているかなど)を明らかにすることである.研究の結果,以下の成果を得た.研究成果を,論文投稿13件(内投稿中1件を含む),口頭発表2件,その他の発表2件として発表した.(1)前景視対象に相当する遠方像(実像)とハーフミラによる表示像(虚像)視標とを、コンピュータにより運転条件を模擬して短時間呈示制御できる実験システムを構築した.(2)虚像と実像までの視距離の差、被験者の偏角移動量、各視標のパターン等を変化させ視標の誤知覚や認識正答率を実験評価した結果,誤知覚の発生メカニズムは輻嬢応答遅れに起因することが分かった.(3)同時に行った眼球運動計測の実験データから,表示像の俯角設定によって生じる眼球の共同運動応答と視距離差によって生じる輻鞍応答とに深い関連があり,共同運動が輻輳応答を加速促進効果があることが分かった.(4)現実の自動車では、HUDの微小俯角設定による意図的共同運動が、ドライバの誤認識低減に極めて効果的であることが分かった.(5)輻輳応答の遅れによる眼球運動がサッカード運動と連携していることにより,サッカード抑制が誤知覚を防ぐことに関連する視覚情報処理モデルを提案した.
植物の主要なナトリウム吸収経路及びその分子実体の同定

植物の耐塩性向上のためには植物の持つナトリウム吸収経路を同定することが重要である。シロイヌナズナのカチオン-塩素共輸送体(AtCCC)変異株の塩ストレス下での表現型解析を行ったところ,AtCCCはナトリウムとともにカリウムの吸収に関わっていることが示唆された。また,AtCCC遺伝子の発現量は外部のカリウム栄養によって制御されていることから,AtCCCはカリウムの獲得に重要であることが示唆された。土壌に過剰量の塩分が蓄積されると塩害が発生する。多くの植物は塩害環境下ではその生産性を低下させるため、植物の耐塩性機構を理解し、耐塩性を向上させる試みは重要である。植物の耐塩性を向上させるためにはナトリウムの流入経路を同定し、その働きを抑制することが有効であると考えられる。本研究では、ナトリウムの取り込みを担う輸送体の候補としてカチオン輸送体CCCに着目して研究を行った。シロイヌナズナのAtCCC遺伝子についてはすでに塩ストレスによりその発現が抑制されることを明らかにしているが、イネのホモログOsCCC1遺伝子およびOsCCC2遺伝子についても塩ストレス処理による発現抑制が起こる事がわかった。しかしながらイネにおけるこれらの遺伝子発現の抑制程度については品種間差があり、今後、耐塩性との関連性を調査する必要があると考えられた。AtCCC遺伝子の組織レベルでの発現様式を調べるため、シロイヌナズナのAtCCC遺伝子のプロモーターGUS解析を行った。その結果、根の先端部位や維管束での強いGUS遺伝子の発現が確認された。酵母変異株を用いたAtCCCによるカチオン輸送能について調べたところ、興味深いことにAtCCCは特にカリウムを取り込むことが明らかとなった。この知見を元にAtCCCのT-DNA変異体の表現型を調べたところ、AtCCC変異体は高濃度のKClストレスに耐性を示すことが明らかとなった。以上のことからCCCはナトリウムのみならずカリウムの取り込みにも寄与していることが明らかとなり、CCCによる塩輸送機構は複雑なものであることが推察された。本研究課題の目的は,植物ではまだ解明されていない外環境から植物体へのナトリウムの流入機構を明らかにすることである。植物は塩害(塩ストレス)環境下ではその生産性を著しく低下させるため,農業生産上しばしば深刻な影響を引き起こす。よって植物の耐塩性を向上させる試みは重要であるものの,植物がナトリウムをどのようにして吸収するのかが長らく不明であった。本研究では,植物細胞が外部からのナトリウム吸収を担う輸送体の候補として,カチオン輸送体(CCC)に着目して研究を行っている。本年度の研究実績については以下の通りである。1.イネCCC遺伝子のクローニングについては,シロイヌナズナAtCCC遺伝子配列を元にイネにおけるホモログOsCCC1,OsCCC2のクローニングを行った。OsCCC1についてはほぼ全長配列のクローニングを行い,AtCCCとの高い相同性が保存されていることを確認した。OsCCC2については,サイズがOsCCC1の2/3程度と短く,さらなる解析を行っている。2.AtCCC,OsCCC1の発現解析については,環境ストレスに応答したこれらの遺伝子発現の変動をRT-PCRにより解析したところ,AtCCCとOsCCC1はともに高NaClストレス下で発現量が減少することが分かった。3.各種形質転換体の作出については,AtCCCプロモーターGUS解析のための形質転換体はいくつか系統を得ることができた。またAtCCC遺伝子の過剰発現株についても現在,形質転換体の作出を継続中である。次年度は引き続き,上記研究項目の継続も行う予定である。おおむね計画通りではあるが,形質転換体の作出等,実験材料の準備をさらに早めることで,その後の生理学的解析を詳細に行う予定である。特に大きな変更点等はなく,計画通りに研究を継続する予定である。研究費については発現解析等が順調に進行した分,幾分かの余剰が生じたが,来年度にさらなる詳細な生理学的解析を行う際の消耗品費として利用予定である。
シンクロトロンX線小角散乱法による結晶性ブロック共重合体の構造形成過程の研究

本年度に行った研究実績の概要を以下に箇条書する。(1)目的に合致した試料として、ε-カプロラクトン(結晶性)-ブタジエン(非晶性)2元ブロック共重合体(PCL-b-PB)を選定した。PCL組成が27vol%であり、全体の分子量が9,400から39,400までの5種類のPCL-b-PBを真空下アニオン重合法で合成し、それぞれの分子特性をGPC,H-NMR,VPO,DSCにより評価した。(2)結晶性ブロック鎖の融点以上の温度(65°C)でのPCL-b-PBの高次構造を、X線小角散乱(SAXS)法と透過型電子顕微鏡により調べた。その結果、低分子量のPCL-b-PBは65°Cで均一であるが、分子量が増加すると、ラメラ、および、シリンダー状のミクロ相分離構造をとることが分かった。このミクロ相分離構造のくり返し周期は、分子量の増加と共に増加する。(3)融点以下の種々の温度でPCLブロック鎖が結晶化した後の高次構造は、分子量にかかわらず、結晶性ラメラと無定形相とのくり返し構造(ラメラくり返し構造)となることが分かった。すなわち、融点以上で存在していたミクロ相分離構造は、ひき続く結晶化により完全に破壊する。ラメラくり返し構造の周期もまた分子量の増加と共に増加する。ラメラくり返し構造中の非晶性ブロック鎖のコンフォメーションについて考察した。(4)ミクロ相分離構造からの結晶化過程を、シンクロトロン放射を用いた時分割SAXS法により追跡した。定性的には、存在するミクロ相分離構造は結晶化の初期過程には影響を与えないが、後期過程には重大な影響を与えることが明らかとなった。現在、結晶化過程の定量的な解析を行っており、ミクロ相分離構造からの結晶化の特異性について検討中である。
アンチセンス・カルビンディンD28K遺伝子導入トランスジェニックマウスの研究

アンチセンス・カルビンディン(CB)遺伝子導入トランスジェニック(Tg)マウスの脳内におけるCBのmRNAおよび蛋白の発現は,前脳および中脳においてはノックアウト(homozygote)を示すこと,あるいは正常対照マウスの約50%の劇的な減少(heterozygote)を示すことをin situ hybridizationにより確認した。しかし,小脳(ブルキンエ細胞)ではTgマウスにおいても約10%の減少を示すのみであり,領域によって選択的な変化を示していた。若齢(3ヶ月齢)および老齢(24ケ月齢)の時点でもアルツハイマー型痴呆(ATD)に特徴的な神経病理所見である神経原線維変化や老人斑,顕著な神経細胞脱落などは認められなかった。さらに,他のカルシウム結合蛋白であるパルブアルブミン(PV)やカルレチニン(CR)の蛋白発現についてはかなり保たれ,加齢によってもあまり変化がなかったことより,CB発現の減少にともなってPVやCRが何らかの代償機構に関与している可能性もある。しかし,本Tgマウスは若齢の段階から海馬依存性の空間学習や空間作業記憶の障害や海馬CA1領域の長期増強の維持が障害されており,CBはCa^<2+>の緩衝作用のみならず,長期増強の維持にも重要な役割を担っていることが示唆された。本TgマウスはATDなども含めた認知機能障害を示すような変性疾患などの機序を解明するための有用なモデル動物になり得る。カルシウム結合蛋白の一種であるカルビンディンD_<28K>のアンチセンス遺伝子を導入したトランスジェニック(Tg)マウスを英国グループとの共同研究にて作成した。本Tgマウス系は、ゲノム当たり35-50コピーのアンチセンス・カルビンディンcDNAの導入が確認されている。平成8年度は、生後3ケ月齢の本Tgマウス(homozygote/heterozygote)脳におけるセンス・カルビンディンmRNAの発現についてin situ hybridization(ISH)法を用いて検討した。対照として統計学的に月齢・体重・性別を一致させたC57BL/6系正常マウス脳を用いて比較した。ISH法には、カルビンディンmRNAに相補的な合成オリゴヌクレオチド・アンチセンスプローブ(^<35>S標識)を用いた。フィルムオートラジオグラフィーによりセンス・カルビンディンmRNAの脳内での発現分布を調べ、同時にその発現量を定量化した。正常対照脳では、小脳プルキニエ細胞(脳内で最大の発現)、海馬、歯状回、大脳皮質、視床、被殻・尾状核などに特異的な強シグナルを認め、従来の同法による報告と一致した分布を示した。一方、Tgマウス脳においては、heterozygoteで前記正常脳でのシグナルに比べて全般的に約50%の有意な減少を、さらにhomozygoteで検出できないレベルにまで劇的なノックアウトを示した。ただし小脳は、heterozygote/homozygoteともに正常対照脳に比べて約10%の減少のみであった。アンチセンス・ストラテジーにより、本Tgマウス系は当該蛋白のセンスmRNAの脳内発現が少なくとも生後3カ月齢の時点では、小脳を除く部位において顕著に減少あるいはノックアウトされていることが確認された。現在、加齢に伴うmRNA発現の経時的変化を検討中で、次年度はさらに当該および関連蛋白の発現変化、神経病理学的変化の有無を確認する予定である。カルシウム結合蛋白であるカルビンディンD_<28K>(CB)のアンチセンス遺伝子を導入したトランスジェニック(Tg)マウスは、発生過程において致死的となることなく生育したが、特にhomozygoteではやや拙劣な運動を認めることがあった。昨年度(平成8年度)は、生後3か月齢の時点でのTgマウス脳におけるCB mRNA発現が小脳プルキンエ細胞の軽度減少を除いてノックアウトおよび顕著な減少を引き起こすことをin situ hybridization法により月齢・性別・体重を統計学的に一致させた正常対照野生型マウス脳と比較し報告した。

本年度(平成9年度)は、第一にTgマウス脳内におけるこのCB mRNA発現の加齢による経時的な変化を調べた。生後12か月齢と20か月齢のTgマウス脳では、加齢にしたがって全般性にCB mRNA発現の軽度の減少を認め、野生型マウス脳における経時的な減少率よりやや強い傾向は示したものの統計学的な有意差には至らなかった。生後3か月齢のTgマウス脳のCB mRNA発現パターンは、これらの経時的観察でもほぼ保たれていた。第二に、生後3か月齢のTgマウス脳における抗CB抗体陽性細胞数の密度は、同月齢の野生型に比較して各部位ともmRNA発現パターンと一致した減少を示した。加齢による経時的変化も同様の結果であった。さらに他のカルシウム結合蛋白であるパルブアルブミン(PV)について抗PV抗体陽性細胞数の密度を調べたところ、各月齢においてもTgマウス脳でのPV発現は野生型と有意差はなく、減少および代償機構による増加などは認めなかった。第三に、各月齢における神経病理学的検索(Nissl染色・HE染色・渡銀染色・Holzer染色)を行なったが、神経細胞脱落、細胞構築の乱れ、グリアの増生などは認められなかった。アルツハイマー型痴呆脳に特徴的な神経病理所見の出現は現在までのところ得られていないが、来年度は本Tgマウス系の記憶・学習に関連した行動学、神経心理学、生理学的な検索を予定している。アンチセンス・カルビンディン(CB)遺伝子導入トランスジェニック(Tg)マウスの行動学的および電気生理学的な研究を英国グループと共同で行った。若齢(3ヶ月齢)および老齢(24ヶ月齢)のTgマウス(homozygote/heterozygote)と正常対照マウスについて海馬依存性に空間学習や空間作業記憶を反映するモーリス式水迷路テストおよび8方向放射状迷路テストを施行した。若齢Tgマウスにおいても,正常対照マウスに比べ,テストの最初と最終段階では有意な差はないが,テスト中間段階で機能獲得までの遅延が有意に認められ,認知機能障害を生じていた。老齢Tgマウスでは,最終段階に至ると徐々に正常対照マウスとの有意な差が大きくなり,障害が持続した。さらに,若齢(3ヶ月齢)のTgマウスの海馬CA1領域組織スライスを用いて,高頻度刺激後のfEPSPを測定した。Tgマウスのhomozygoteでは,短期増強のパターンとなり,長期増強の維持に障害が示唆された。本結果より,CBはprotein kinase Cやcalmodulin kinase IIのようなCa^<2+> activated kinasesなどとともに長期記憶の維持に重要な役割を担っていることが示唆された。本Tgマウスは,老化の機序やアルツハイマー型痴呆などにおける認知機能障害の機序を解明するうえで,有用な動物モデルになり得ると考えられた。
蛋白質の立体構造の詳細な検討から、多くの蛋白質は、モジュールと呼ばれる構造的にほぼ独立した部分の集合体であることが明らかになってきている。しかし、そのモジュール構造と蛋白質全体の構造と機能との相関についての実験的研究はほとんど報告されていない。本研究では金属蛋白質のうち、モジュール構造をとることが知られているミオロビン、ヘモグロビンなどのグロビン蛋白質に注目し、そのモジュール置換により、新規な構造や機能の分子設計、とくに多量形成能と酸素親和性の制御について検討をおこなった。天然のミオロビンやヘモグロビンの単離鎖(alpha,beta)は単独では安定な多量体構造をとれないのに対し、2種のヘモグロビンの単離鎖を混合することによりalpha2beta2型の安定な四量体構造が形成される。立体構造とアミノ酸配列からモジュールF4がサブユニット会合に関与していることが示唆されており、実際、我々の従来の研究から天然のbeta鎖のモジュールF4をalpha鎖のものに置換したChimera-betaalphaグロビンは、天然のbeta鎖と特異的に結合し、Chimera-betaalpha2beta2型四量体が生成することを見いだしてきた。今回、これらモジュール置換蛋白質の機能を詳細に検討することにより、Chimera-betaalpha2beta2型四量体が生成する際には、天然での四量体形成時(alpha2beta2)と同様に、酸素親和性が低下することが確認でき、このことはモジュールF4は単に蛋白質を会合させるだけでなく、会合体の機能をも制御することが明かとなった。さらに、単量体でしか存在しないミオグロビンを多量化するため、ヘモグロビンのモジュールF4を含むモジュール置換ミオグロビン2種(Chimera-Mbalpha,Chimera-Mbbeta)を設計し、単離、生成することに成功した。現在、その会合特性と機能変化を検討している。
異常発生するラン藻類制御のためのライフサイクルに関する研究

湖沼生態系におけるラン藻類の制御法の確立を最終目的に置き、その一環として湖沼生態系におけるラン藻類の生活環の解明を試みた。本研究では、これらの過程は何らかの有機化合物によって調節されると考察し、Microcystis自身が産生する2種の揮発性化合物、b-cyclocitralおよび関連化合物と低級アルコール類の生合成、産生挙動、分解(代謝)などの動態を検討し、実際の湖沼で生起する現象と比較・検討した。本年度の5つの実施計画のうち、1)野外における諸現象の観察は行われたが、未だその本質が把握できない状況が続いている。2)青色化現象の解明は、野外での観察および関連試料の分析の結果、実験室実験で得られている結果で説明が可能であることが判明し、現在2報の論文の投稿の準備をしている。3)揮発性化合物の動態調査では、目的揮発性化合物である、β-cyclocitralや1-butanol類はMicrocystis属のラン藻のみから検出され、今回用いた他の属のラン藻は産生していないことが示された。この結果はこれらの揮発性化合物がMicrocystis属のライフサイクルに関与している可能性を示唆している。なお、これらの結果は下記の論文に記載されている。さらに、本研究を実施中に新たに2-phenyletanolが多量に見出され、この化合物に関する研究も必要となった。4)本実験で検出された各化合物の機能に関する実験は、β-cyclocitralが溶藻および青色化に関与していることは明らかになっているが、その詳細は未だ未解明である。一方、1-butanol類の機能に関する研究は開始されていない。5)検出された各化合物の関連遺伝子やタンパク質に関する研究も進みつつある。β-Caroteneを切断してβ-cyclocitralを生成させる遺伝子(CCD)を取得したが、現在のところ物質レベルでの証明はできていない。一方、1-butanol類の生成に関与する脱炭酸遺伝子(KDC)をMicrocystis属から単離するとともにそのタンパク質も取得した。そして、物質レベルでの検討を行い、この遺伝子が確実に1-butanol類の生成に関与していることを確認した。なお、この結果は第45回水環境学会で発表した。次年度は1)、4)5)の実験とともにKDCに関する実験を重点的に行う予定である。本研究では、アオコを形成する代表的なラン藻であるMicroycstis属の制御法を確立することを最終目的にしている。具体的には、本属の生活環(ライフサイクル)が化学物質により調節されているとの仮説をたて、まず本属が放出する化学物質やそのオリジン(遺伝子、合成酵素)を見出す。また、これらの化学物質が実際の湖沼生態系での動態を調査する。これらの作業を通して、湖沼生態系において従来全く顧みられていなかった「ケミカルコミュニケーション」の実態を明らかにするとともにこれを利用する形で、Microycstis属の制御法を提案する。本年度の4つの実験計画のうち、1)では2010年に小規模な「青色化」現象が観察され、β-cyclocitralや3-methyl-1-butanolなどのアルコール類が検出されるとともにやはり青色化された領域ではラン藻類が消滅していた。また、季節により藻類の優先種が変化する現象にもこれらの揮発性化合物が関与していることも明らかになるとともに、いろいろな藻類のβ-cyclocitralに対する感受性が異なることも見出された。2)では、大いなる進展があった。Microcystis属の細胞が破壊されることにより放出されるβ-cyclocitralは極めて容易に酸化され、カルボン酸に変化し、青色化を生起する。この期間の研究で、この酸化の過程が以下のように明らかになった。すなわち、β-cyclocitralは水中の溶存酸素により過酸になり、これがBaeyer-Villiger型の酸化を行うことが判明した。この反応の結果、カルボン酸とともにエノールエステル体も副成分ちょしていることが確認された。さらに、このエノールエステル体は加水分解され、trimethylcyclohexaneを与えることも見出された。現在、これらの結果は投稿準備中である。3)では依然としてβ-caroteneからβ-cyclocitralへの過程の解明が明らかになっていない。4)アルコール類の生成に関する分子生物学的な研究はほぼ終了して、現在論文を投稿中である。しかし、これらのアルコール類に関する機能解明は未だ明らかになっていない。1)野外における諸現象の観察と収集した試料における種の同定と揮発性化合物の季節変動調査(研究協力者:有井鈴江(神奈川県企業庁谷ヶ原浄水場))過去7年間続けてきた種の同定と揮発性化合物の季節変動調査を実施した。その結果、β-cyclocitralの検出と藻類やラン藻類の季節変動には何らかの相関があることが確認され、第47回日本水環境学会で報告した。2)検出された各種揮発性化合物の生成機構および機能の解明(研究協力者:辻清美(神奈川県衛生研究所)3種のMicrocystis属

ラン藻を用いて培養を行い、各種揮発性化合物生産挙動を詳細に調べた。その結果、生産量の差は認められたが、生産パターンは同様であった。また、β-cyclocitralの分解パターンはユニークであり、Baeyer-Villiger酸化が生起していることも確認された。3)β-Cyclocitral生成の関連遺伝子・タンパク質(carotenoid cleavage dioxygenase, CCD)の検討(研究協力者:Beata Bober,名城大学)3種のMicrocystis属からCCD遺伝子のクローニングおよびCCDの発現をおこなった。さらにこのCCDを用いてβ-caroteneおよび関連化合物を基質とする酸化開裂反応行い、生成物や基質特異性などの調査を行った。3種からそれぞれ2種のCCD遺伝子(CCD-1およびCCD-2)のクローニングに成功したが、これらをもとに作成したCCDによる酸化開裂反応は基質の水に対する溶解性が極めて悪く、成功には至っていない。これらの結果は日本薬学会第133年会で報告した。4)3-Methyl-1-butanolおよび関連化合物についてはその生物活性実験は行わず、2-ケト脱炭酸酵素(KDC)遺伝子のクローニングを実施、成功裏に目的を遂げている。Microcystis属に含まれる一次代謝産物としてβ-cyclocitralと6種のアルコール類を検出・同定した。また、これらの前駆体と考えられるβ-caroteneやアミノ酸からの生合成に関する遺伝子や関連酵素の確認もほぼ終了している。現在、これらの化合物の機能解明が行われており、β-cyclocitralは主に溶藻現象に関連し、また極めて迅速に酸化されることも明らかになっている。一方、6種のアルコール類の機能は現在までのところ明確にはなってはいないが、窒素栄養分の欠乏に関与しているデータが出つつある。24年度が最終年度であるため、記入しない。上述したように、当初の計画はほぼ順調に推移している。今後は実験室で行える2、3の補強実験を行うとともに野外での観察および従来取得していたデータを解析し、Microcystis属の「生活環」の解明にせまる予定である24年度が最終年度であるため、記入しない。
多様な個別言語の統語構造を決定する、人間固有の普遍的特性の解明

人間が生まれながらにして持つ言語獲得能力の性質を、あらゆる個別言語の構造を決定する原理と捉え、そのような普遍原理の体系、すなわち普遍文法を構築するのが、生成文法理論の目標である。本研究は、この生成文法理論の枠組みに基づくものである。普遍文法を構築するためには、ある個別言語の特性は他の個別言語の特性と比較され、提案された普遍原理が、多様性を含むものであるかどうか、多様性を含むものであるならば、その多様性が厳密に特徴づけられているかどうか、判断されなければならない。本研究では、英語、日本語の移動現象にみられる統語関係の普遍性と多様性の問題を考察した。具体的には、チョムスキーの『Minimalist Program』(MlT Press,1995)の枠組みでは捉えることのできない統語関係が、英語のWh移動現象および日本語のScrambling現象に存在していることを明かにし、「統語関係は意味のレベルで成立する」という生成文法理論が従来採択してきた仮説を破棄することを提案した。代案として、音・意味それぞれに関する解釈システムと統語システムの関係を派生的に捉えるモデルを提出し、問題となっている統語関係が説明できることを示した。本研究で厳密化された派生的統語モデルは、生成文法理論が一貫して維持してきた、統語関係および統語モデルに関する概念に変革を与えるものであり、統語理論研究に「解釈システムと統語システムの派生的関係」という新しい研究領域を開くものである。普遍文法を構築するために、ある個別言語の特性は他の個別言語の特性と比較され、提案された普遍原理が、多様性を含むものであるかどうか、多様性を含むものであるならば、その多様性が厳密に特徴づけられているかどうか、判断されなければならない。本研究では、主に英語、日本語のデータを分析し、句・節・文を作り出す語の結び付き方(以下、統語)の普遍性と多様性の問題を考察した。具体的には、チョムスキーの「Minimalist Program」(MIT Press,1995)に集約された枠組みでは捉えることのできない統語関係が、日本語のスクランブリング現象に存在していることを明かにし、「統語関係は意味のレベルで成立する」という生成文法理論が従来採択してきた仮説を破棄することを提案した。本研究で厳密化された派生的アプローチは、生成文法理論が一貫して維持してきた、統語関係および統語モデルに関する概念に変革を与えるものであり、このアプローチの採択は解釈システムと統語システムの派生的関係という新しい可能性を開くものである。
微生物毒素の細胞機能を解明する試薬として及び医薬としての応用への開発

微生物の産生する毒素は標的とする細胞局所や分子への傷害特異性が極めて高いため,この作用を利用して疾病細胞の選択致死や医学生物学研究への応用への開発を目的とした.ジフテリア毒素及びその標的分子であるペプチド伸長因子(EF2)の遺伝子に関する研究:ジフテリア毒素フラグメントAを包んだ裸のリポソームはエンベロプドウイルスの細胞への感染による巨細胞形成細胞を選択的に殺すことが一般化できる事が解った.フラグメントBの7ケ所の領域のペプチド(1827アミノ酸残基)を合成しその活性をみたところ, Pro-382Val-401のペプチドのみが毒素を細胞内へ送り込む活性をもっていた.これはフラグメントAを用いたイムノトキシンの選択毒性増強に応用できる.毒素耐性細胞よりクローニングされたADPリボシル化を受けないEF2のcDNAは医学細胞生物学研究への応用の可能性が示された.毒素原性大腸菌:この菌の腸管への定着は線毛が担う事が明らかにされ,この蛋白分子の定着活性を担うペプチドによって感染防御薬としての可能性が示された.志賀様毒素に特異的な10^5耐性細胞が分離され,これを用いて簡便な志賀様毒素検出法が開発された.ブドウ球菌ロイコシジン:この毒素は骨髄性白血病に対する感受性が正常白血球や骨髄幹細胞より高いことから,この投与は骨髄性白血病のマウスを4ケ月以上の延命効果を示し,骨髄性白血病患者の骨髄をロイコシジン処理して白血病細胞を殺した後に患者へ返す事の可能性も明らかになった.サフラマイシン:枚射菌の生産するサフラマイシンAは強い細胞傷害性を示す一方免疫機能を賦活させる.この誘導体を数多く合成することに成切した.これ等のうち,サフラマイシンYd-1塩酸塩はメラノーマの肺転移の阻害に, YBは経口投与でS-180固型癌に有効であった.一方このYBは免疫賦活作用も保持していた.以上述べた様に微生物の産生する高分子物質を用いて医療への応用の可能性を強く示した.微生物の産生する毒素は標的とする細胞局所や分子への傷害特異性が極めて高いため,この作用を利用して疾病細胞の選択致死や医学生物学研究への応用への開発を目的とした.ジフテリア毒素及びその標的分子であるペプチド伸長因子(EF2)の遺伝子に関する研究:ジフテリア毒素フラグメントAを包んだ裸のリポソームはエンベロプドウイルスの細胞への感染による巨細胞形成細胞を選択的に殺すことが一般化できる事が解った.フラグメントBの7ケ所の領域のペプチド(1827アミノ酸残基)を合成しその活性をみたところ, Pro-382Val-401のペプチドのみが毒素を細胞内へ送り込む活性をもっていた.これはフラグメントAを用いたイムノトキシンの選択毒性増強に応用できる.毒素耐性細胞よりクローニングされたADPリボシル化を受けないEF2のcDNAは医学細胞生物学研究への応用の可能性が示された.毒素原性大腸菌:この菌の腸管への定着は線毛が担う事が明らかにされ,この蛋白分子の定着活性を担うペプチドによって感染防御薬としての可能性が示された.志賀様毒素に特異的な10^5耐性細胞が分離され,これを用いて簡便な志賀様毒素検出法が開発された.ブドウ球菌ロイコシジン:この毒素は骨髄性白血病に対する感受性が正常白血球や骨髄幹細胞より高いことから,この投与は骨髄性白血病のマウスを4ケ月以上の延命効果を示し,骨髄性白血病患者の骨髄をロイコシジン処理して白血病細胞を殺した後に患者へ返す事の可能性も明らかになった.サフラマイシン:枚射菌の生産するサフラマイシンAは強い細胞傷害性を示す一方免疫機能を賦活させる.この誘導体を数多く合成することに成切した.これ等のうち,サフラマイシンYd-1塩酸塩はメラノーマの肺転移の阻害に, YBは経口投与でS-180固型癌に有効であった.一方このYBは免疫賦活作用も保持していた.以上述べた様に微生物の産生する高分子物質を用いて医療への応用の可能性を強く示した.微生物の産生する毒素は細胞表面やたんぱく分子への傷害の特異性が高いためこの作用を利用して医学生物学研究及び医療への応用は重要になりつつある。そこで細胞膜や蛋白及び核酸合成系に作用する代表的毒素であるロイコジシン,エンテロトキシン,ジフテリア毒素,サフラマイシンを取上げた。ジフテリア毒素はC末端側の分子量約20kに亘って種々な部位5ケ所について2025アミノ酸残基からなるペプチドを合成し毒素作用の阻害をみたところ、このうちの1つが作用を阻害した。現在これを抗原として家免で抗体を得つつある。エンテロトキシンに関しては、大腸菌から分泌される赤痢菌毒素と極めて類似の毒素が精製され性状が明らかになった。さらにこの毒素や赤痢菌毒素に、感受性細胞から毒素抵抗性変異細胞が分離された。この細胞の解析により毒素の作用機構もさらに明らかになるであろう。細胞表面へ作用するものとして病原性大腸菌の腸上皮細胞の刷子縁への定着活性がある。空腸上皮細胞から定着因子が分離された。この部位がさらに精製され、その構造が明らかになると感染機構のみならず感染防御への応用が期待される。ロイコジシンは白血球膜へ特異的に作用するが、各種白血球に対して感受性に差異がある事が解った。

特にヒト骨髄性白血病細胞には最も感受性が高く、それはリン脂質合成酵素メチルトランスフェラーゼとホスフォリパーゼA2の存在様式に依存しているためであった。この毒素によりこれら酵素の活性化により毒素の成分の1つがレシチンのβ位脂肪酸と容易に結合しNa-KAT Paseを活性化して白血球膜を崩壊する。サフラマイシンはその活性発現に関与すると考えられているαシアノアミン構造をもつ誘導体を合成して作用をみると、サフラマイシンと異なる作用様式で細胞障害作用がみられた。こうして新しく毒素分子の活性部位や作用機構が明らかになり、これらを基に医学研究や医療への応用が期待される。
がんに対するIFNを組み合わせた新しい抗体治療ストラテジーの開発

これまでのI型インターフェロン(IFN)シグナルの研究をがん治療の領域において発展させた形で,がんの抗体治療の新しいストラテジーを提案し,臨床応用へ向けた分子基盤を見出すことを目的として研究を推進した.まず細胞表面のタンパク質をビオチン化させる方法を用いて,IFN-βに応答してがん細胞に比較的選択的にその発現レベルが顕著に増強する分子群を同定し,その結果,5つのターゲット分子に着目した.今年度,まず,これら5つの候補分子の細胞外領域に対するモノクローナル抗体の作製を行った.スクリーニングの結果,今年度内に抗体を用いた解析が可能となった2つのターゲットSCI101とSCI102について検討を進めた.皮下に担がんさせたマウスの系において,これらの抗体を用いて,IFN投与後の腫瘍内組織のターゲット分子のタンパク質発現レベルを経時的に検討したところ,昨年度検討した担がんSCIDマウスを用いた系での実験結果とconsistentな結果が得られた.SCI101の方がIFN刺激後16時間目をピークに24時間目にはその二分の一以下にタンパク質の発現レベルが低下するのに対し,SCI102はもう少し早い発現経過を示し,6時間目がピークで,24時間目にはほとんど発現レベルは無刺激のレベルに近くなる結果となった.次に,発現プロファイルを元に,IFN-β投与群と非投与群で治療抗体の抗腫瘍効果を検討した.発現ピークの1時間前に尾静脈より抗体投与を5日間行なった結果,IFN-β投与のみでも非投与群と比べ,腫瘍径の減少がみとめられたが,抗体投与を併用した群の方が,IFN-β投与のみよりもより,腫瘍が縮小する傾向がみとめられた.現在,数を増やして再現性を検討している.また蛍光物質をラベルした治療抗体を用いて,IFN投与による治療抗体の腫瘍局所への集積の検討を行っており,できるだけ早急に論文にまとめることを予定している.我々がこれまでに行ってきたIFN研究に基づき,それを発展させた形で, IFNシグナルとがんの抗体治療と組み合わせることで従来の抗体治療にはない,新たな治療コンセプトを確立し,その臨床応用へ向けた分子基盤を見出すことを目的として研究を進めた.まず,がん細胞と正常細胞とのI型IFNに対する反応性の違いをDNA chipを用いてその誘導遺伝子群を比較検討し,その中で細胞表面に発現する分子に着目して,がん細胞表面に顕著に発現増強される分子を同定することが当初の予定であったが,実際に細胞膜上でタンパク質レベルである程度の発現がみられるものに着目し直接的にスクリーニングするため, I型IFN刺激後に細胞表面にのみビオチン化処理を行うという方法を用いた.その後,細胞膜分画を分離し, SDS-PAGEを行った後質量分析による解析でタンパク質を同定した.20以上のバンドを検索した結果,最終的に5つにターゲットを絞った.その後,実際に細胞染色によって発現を確認した.さらに担がんSCIDマウスを用いたin vivoの系においてもがん組織において発現が増強されることを確認した.一方,現在,これらの候補分子の機能についてとくにがん細胞の増殖における関与という局面から最終的な検討を行っている状況であり,この結果を考慮した上で,ターゲット分子を最終決定したいと考えている.さらに,次年度からは,ターゲットに対する抗体を作製して, IFN併用による抗体の抗腫瘍効果について検討を進めていく予定である.これまでのI型インターフェロン(IFN)シグナルの研究をがん治療の領域において発展させた形で,がんの抗体治療の新しいストラテジーを提案し,臨床応用へ向けた分子基盤を見出すことを目的として研究を推進した.まず細胞表面のタンパク質をビオチン化させる方法を用いて,IFN-βに応答してがん細胞に比較的選択的にその発現レベルが顕著に増強する分子群を同定し,その結果,5つのターゲット分子に着目した.今年度,まず,これら5つの候補分子の細胞外領域に対するモノクローナル抗体の作製を行った.スクリーニングの結果,今年度内に抗体を用いた解析が可能となった2つのターゲットSCI101とSCI102について検討を進めた.皮下に担がんさせたマウスの系において,これらの抗体を用いて,IFN投与後の腫瘍内組織のターゲット分子のタンパク質発現レベルを経時的に検討したところ,昨年度検討した担がんSCIDマウスを用いた系での実験結果とconsistentな結果が得られた.SCI101の方がIFN刺激後16時間目をピークに24時間目にはその二分の一以下にタンパク質の発現レベルが低下するのに対し,SCI102はもう少し早い発現経過を示し,6時間目がピークで,24時間目にはほとんど発現レベルは無刺激のレベルに近くなる結果となった.次に,発現プロファイルを元に,IFN-β投与群と非投与群で治療抗体の抗腫瘍効果を検討した.発現ピークの1時間前に尾静脈より抗体投与を5日間行なった結果,IFN-β投与のみでも非投与群と比べ,腫瘍径の減少がみとめられたが,抗体投与を併用した群の方が,IFN-β投与のみよりもより,腫瘍が縮小する傾向がみとめられた.現在,数を増やして再現性を検討している.また蛍光物質をラベルした治療抗体を用いて,IFN投与による治療抗体の腫瘍局所への集積の検討を行っており,できるだけ早急に論文にまとめることを予定している.
微生物によるブラシノライド様物質の生産

1.イネラミナジョイントテストを用いて、糸状菌1098株の菌体メタノール抽出液中のブラシノライド様活性物質の存在を検討し、ブラシノライド換算10ng/g wet cellという高いオーダーの活性を示す菌32株を得た。生産菌は菌学的に見て著しい偏りがあり、接合菌Cunninghamella,不完全菌Penicillium,Trichoderma,Aspergillas,Cladosporiumなどに多かった。一方、属内の生産性は、調べたかぎりで普遍的であった。2.菌体当りの活性は、培地を変えてもほぼ一定しており、種々のステロイド化合物を加えても増えることはなかった。3.菌体メタノール抽出液中の活性は、シリカゲルクロマトでブラシノライドより疎水的な画分と、メタノールではじめて溶出されるきわめて親水的な画分の2つに大きく分かれた。量的には、前者がほぼ全活性画分の60%を占めていた。4.Cunninghamella blakesleeanaの菌体メタノール抽出液を濃縮後,中性酢酸エチル抽出,アルミナカラムクロマト,アセトン抽出,シリカゲルカラムクロマト,調製用HPLCなどによって処理し、4.5g/7kg wet cellのブラシノライドより疎水的な活性物質を得た。これは原液の示す活性の85%である。この物質はTLC,GC/MSによってモノオレインと同定された。市販の植物由来モノオレインにもブラシノライド様活性のあることが、確認された。モノオレインのブラシノライドに対する比活性は約2万分の1、10μg/mlのオーダーで検出される。5.ジオレインはモノオレインより活性が弱く、トリオレインは不活性である。一方、遊離のオレイン酸はモノオレインより10倍強い活性を示した。ステアリン酸,パルミチン酸とそのグリセリンエステルは、オレイン酸の場合より弱い活性を示し、グリセリンは不活性であった。6.オレイン酸とその誘導体による、植物調節について考察した。
脳内デリバリーを促進する細胞膜融合性ナノ集合体を用いたタンパク質点鼻型製剤の開発

本課題では,膜親和性集合体を内封したSolid-in-Oil-in-Water (S/O/W)エマルションに物理的(粒子径,形状,堅さ),化学的(細胞認識リガンド,粘膜付着性)修飾を行い機能化することで,タンパク質の嗅上皮粘膜からの脳内移行性を向上させる。本年度はまず,タンパク質の鼻腔ー脳デリバリーに使用するS/O/Wエマルション製剤の調製を行った。膜乳化技術により,微細エマルションの調製が可能となった。また,エマルション安定性向上のために固体脂を用いた固体エマルションの調製も行った。このエマルションのキャリアとしての脳移行機能をマウスを用いてin vivoイメージングシステムで評価する予定であったが,機器の不具合が生じ,次年度での評価へ延長することとした。その代わりの方法として,マウスへ鼻腔投与後に脳を摘出しタンパク質を定量することで脳移行性を評価した。タンパク質の脳移行性はキャリアを微細化することで促進されることが確認されたが,コントロールとして用いたタンパク質水溶液に対しての大きな優位性は確認されなかった。タンパク質の体内動態を評価する分析装置に不具合があったため。エマルション製剤の表面修飾を行い,ターゲティング性を有するタンパク質キャリアを開発する。また,in vivoイメージングシステムを用いて,鼻腔投与後のタンパク質の脳内移行性を追跡する。この結果を,製剤設計に反映させる。
キシラン分解細菌の基質分解システムにおける菌体表層キシラナーゼの機能解明

本研究は、3つのキシラナーゼ遺伝子を持つキシラン分解細菌Paenibacillus sp. W-61のキシラン分解・資化機構におけるキシラナーゼ(Xyn5)の役割を解明することを目的とした。本年度は菌体表層に結合しているXyn5が、xyn5自身および他のキシラナーゼ遺伝子の発現誘導物質となるキシロオリゴ糖の供給に重要な役割を果たしていることを明らかにし、Journal of Bacteriologyに発表した。これまで菌体表層に結合したキシラナーゼは、基質を菌体表層付近で効率よく分解するための装置であることが示唆されていた。本研究により、菌体表層キシラナーゼは本菌の産生する他のキシラナーゼ遺伝子の誘導物質を生産するという新たな役割が明らかになった。本菌と同じく細胞表層に結合したキシラナーゼを持ち、諸性質が異なる複数のキシラナーゼを産生する細菌は7種報告されており、これらの細菌も本菌と同様の遺伝子発現制御機構を持つことが予想された。さらに3つのキシラナーゼ遺伝子のキシロオリゴ糖による発現調節機構を明らかにするために、キシラナーゼ遺伝子群の発現を制御する新規転写因子を探索した。その結果、Xyn3の発現を正に制御するAxyRを発見し、AxyRがxyn3のプロモーター領域に結合するためには補因子として重合度2-4のキシロオリゴ糖が必須であることを発見した。これまでに糖が転写因子の補因子として機能する事例は報告されていたが、本研究により糖の重合度によって転写因子とDNAの親和性が変化することが初めて示唆された。
訪問看護師と周囲のチームワークが訪問看護ステーションの効率性に与える影響の評価

STの訪問看護師と周囲とのチームワークの実態を評価し、チームワークの良さがSTの効率性につながることを確認することを目的に研究を行った。STのチームワークを測定する指標としてRelational coordination尺度を用いたところ、チームワークの良好なSTでは、利用者の在宅見取りが起こりやすく、また安全文化が醸成されていることが明らかになった。一方、STの経営に直結しうる生産物である訪問件数については、職員条件等を調整した上でも、チームワークの良好さとの関連を認めなかった。<概要>文献レビューとヒアリングを行い、STの効率性測定の前提条件として、ST利用者の訪問看護の必要度を判定する簡便な指標が必要であることを特定したため、海外の既存尺度(CHIRS)の日本語版作成を行った。<1:文献レビューとヒアリング>国内外の医療・介護サービス提供機関の効率性測定、およびパフォーマンス評価に関する文献をレビューし、効率性測定方法を体系的に整理した。さらに、東京都内の2STの経営者・管理者へのヒアリングを行った。これにより、STの効率性測定の前提条件として、利用者の訪問看護重症度を調整する必要があることがあることを特定した。<2:ST利用者の訪問看護の必要度を判定する指標の開発>訪問看護利用者の身体的重症度等から、その必要性の高さを判定する指標が必要であると判断したため、まずはアメリカとトルコですでに活用されている訪問看護必要性判定指標(CHIRS)の翻訳を行った。原作者に許可を取り、日本語版の尺度項目に修正してみた。これは、訪問看護師が、利用者の心身の状況を定期的に評価するための項目群で、原版は24領域、約600個の項目からなる。この中から、訪問看護経験のある研究者、およびSTに勤務する看護師4名との討議の結果、1日本の制度の中で提供している訪問看護にそぐわない尺度、2日本の訪問看護では入手不可能な評価項目を除外した10領域の68項目を選定した。訪問看護ステーション(ST)利用者の訪問看護師にかかる手間量を判定する指標(試行版)を作成し、その分布と妥当性を確認するために、STを対象に利用者調査を実施した。また、経営指標とあわせて、利用者指標を定期的に観測するためのデータ管理webシステムを開発した。その他、文献レビューとヒアリングの結果から、STの立地条件として周囲の高齢者人口・競合STの密度を考慮する必要性が示された。<1:ST利用者の訪問看護師にかかる手間量を判定する指標の作成>地方都市1市にある全30か所のSTの管理者を対象に、自記式質問紙調査を行った。うち20か所から利用者899名に関する情報を得た。訪問看護の手間量に応じて利用者を分類すると、STによって利用者分布が大きく偏っていることが明らかとなった。STの効率性を評価する際、本指標を用いてSTの利用者像を考慮した評価方法を用いる必要があることが確認された。そこで、経営指標に加えて、利用者像を定期的に報告しうることを目的として、ST管理者をユーザーと想定し、webを用いた簡便な報告システムを開発した。<2:STの立地条件を表す指標の作成>他方、文献レビューとヒアリングの結果から、STの立地条件として周囲の高齢者人口・競合STの密度を考慮する必要性が示された。1県の全ST57か所を対象に、各STの立地場所について、近隣人口密度・近隣ST競合可能性の指標化を試みた。GISを用いて、公開人口・施設住所データを基に指標(試行版)を作成し、対象県のST管理者・専門家5名にヒアリングを行い、指標の問題点を特定した。STの経営効率を評価する際に、考慮すべき立地条件を示す指標を作成することが必要であることが明らかとなった。訪問看護の効率性測定に重要な変数が特定でき、さらにその評価指標を作成する具体的な手順(指標案の作成)まで進んでいる。また、最も困難が予想された、訪問看護ステーションの経営指標を定期的に測定するためのシステムの開発がほぼ完了している。一方、3年目の大規模調査を進めるためには、各種指標測定手順の確定、および調査施設・フィールド交渉をしておく必要があるが、現段階では未対応である点に少し懸念がある。全体を俯瞰するに、当初の計画通りに概ね順調に進んでいると判断できる。<1:訪問看護師と周囲のチームワークが影響するST利用者の訪問看護成果指標の探索>訪問看護の成果指標を定義するため、国内外の訪問ケアサービス・看護サービスの成果指標を測定した文献を体系的にレビューした。抽出した成果指標案の中から、ケア提供者のチームワークによって改善が見込まれると想定される成果指標を抽出するため、都内の訪問看護師4名を対象にヒアリング調査、また国内の看護学会に参加し情収集を行った。ケア提供者のチームワークの概念として、Relational coordination(関係性の調査:日本語版の測定尺度は研究代表者らのグループが先の研究で開発済)を第一に設定した。本概念が成果指標につながる基礎理論(Relational coordination theory, Gittel et al, 2003)に照らし合わせ、STのチームワークがその成果指標に結びつくまでのメカニズムについて仮説をたてた。<2:訪問看護師と周囲のチームワークとST利用者の見取り場所の関連の探索>平成27年度に実施した訪問看護ステーション(ST)利用者カルテ調査データを分析した。17箇所のSTから、各事業所・看護師の情報、及び83名の死亡終了者(死亡を理由に訪問看護利用を終了した者)の情報を収集した。