hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
虚血性疾患治療に効果的な血管内皮前駆細胞の機能解析

生体内で機能的に働くアルデヒドデヒドロゲナーゼ活性の低い血管内皮前駆細胞(ALDH-Low EPC)は,低酸素応答性を有していることから,低酸素応答転写因子(HIF)の役割について解析を行った.HIF-2alphaがALDH-Low EPCの創傷治癒に作用していることが,有茎皮弁マウスモデルの解析で明となった。また,HIFの標的遺伝子であるVEGFおよびCXCR4が創傷治癒に重要な役割を果たしていることが証明された。【目的】本申請では,ヒト臍帯血由来痒EPCを単離し,増殖能の解析および細胞表面マーカー・遺伝子発現解析等を中心とした分化能の解析を通じて,EPCの性質を明らかにし,新たなEPCの単離同定とその生体内機能解析を行う.【研究計画および成果】ALDE-low EPCが,ALDE-high EPCと比較して,虚血部位における治癒効果が高いことから,両者間における低酸素応答性について解析を行った.先行研究により,ALDE-high EPCよりALDE-low EPCにおいて,低酸素に応答して標的遺伝子の転写活性化が促進していることが分かっている.2.siRNA導入後のEPCを用いた虚血部位における創傷治癒効果の解析それぞれのHIFに対するsiRNAによりHIF-1alphaあるいはHIF-2alphaの発現低下の見られたEPCを有茎皮弁移植モデルマウスに投与し解析を行った.HIF-1alphaの発現を低下させたEPCは,コントロール群と比較して,創傷治癒に対する有意な遅延は見られなかった.一方,HIF-2alphaの発現を低下させたEPC投与群において,創傷治癒効果が有意に遅延していることが明らかとなった.以上のことから,HIF-2alphaの標的遺伝子であるCXCR4のEPCにおける発現が,マウス有茎皮弁モデルにおける創傷治癒に対して重要な因子であることが明らかとなった.【目的】本申請では,ヒト臍帯血由来EPCを単離し,増殖能の解析および細胞表面マーカー・遺伝子発現解析等を中心とした分化能の解析を通じて,EPCの性質を明らかにし,新たなEPCの単離同定とその生体内機能解析を行う.【研究計画および成果】1.siRNA導入後のEPCを用いた虚血部位における創傷治癒効果の解析先行研究で,HIF-2alphaに対するsiRNAを導入したEPGを有茎皮弁移植モデルマウスに投与し解析を行ったところ,HIF-1alphaに対するsiRNAを導入したEPC投与群と比較して,創傷治癒効果が有意に遅延していることが明らかとなった.本研究では,HIF-2alphaの標的遺伝子であるCXCR4およびVEGFに対するsiRNAを導入したEPCを用いて,マウス有茎皮弁モデルにおける創傷治癒効果を指標に,どの因子が重要な役割をしているのか明らかにした.その結果,VEGF mRNAの発現を低下させたEPCを投与した群では,コントロール群と比較して20%程度の抑制効果が見られた.一方,CXCR4 mRNAの発現を低下させたEPCを投与した群では,コントロール群と比較して80%程度の抑制効果が見られた.以上のことから,HIF-2alphaの標的遺伝子であるCXCR4のEPCにおける発現が,マウス有茎皮弁モデルにおける創傷治癒に対して重要な因子であることが明らかとなった.2.マウス下肢虚血発症モデル(大腿動脈閉塞)の作成とEPCの機能解析大腿動脈を結紮し,マウス下肢虚血モデルを作成した.大腿動脈を結紮し,下肢かかと部位における血流を測定し,健常側の血流と比較した.手術後1日目より手術側の血流が大幅に低下し,3日目以降から徐々に増加を示し,14日目以降からは一定レベルに達することが分かった.今後,このモデルマウスを用いて,EPCのin vivo機能解析を行う.【目的】本申請では,ヒト臍帯血由来EPCを単離し,増殖能の解析および細胞表面マーカー・遺伝子発現解析等を中心とした分化能の解析を通じて,EPCの性質を明らかにし,新たなEPCの単離同定とその生体内機能解析を行う.【研究計画および成果】H21年度までに,siRNA導入後のEPCを用いた虚血部位における創傷治癒効果の解析により,以下のことが分かった.HIF-2alphaの発現を低下させたEPC投与群において,創傷治癒効果が有意に遅延していることが明らかとなった.加えて,HIF-2alphaの発現を低下させたEPCにおいて,HIF-2alphaの標的遺伝子であるCXCR4およびVEGFの発現が低下していることが分かった.H22年度は,CXCR4あるいはVEGFの発現を低下させたEPCを作製し,マウス有茎皮弁モデルにおける創傷治癒に対してどのような働きを有するのかについて詳細に解析を行った.vEGFsiRNAあるいはCXCR4 siRNAを導入した細胞群は,ともに創傷治癒が正常EPC投与群と比較して,有意に低下していることが分かった.

また,VEGF siRNAあるいはCXCR4 siRNAを導入した細胞群に対して,マウス有茎皮弁移植モデルにより,遊走能について解析を行った,CXCR4 siRNAEPCでは,VEGF siRNA EPCと比較して,創傷部位における細胞の出現数が大きく減少していることが明らかとなった.以上の結果より,創傷部位に働くEPCは,異なる2つの作用(VEGFとCXCR4が関係する)を介して,創傷治癒に作用していることが明らかとなった
焼酎産業における創エネルギー型ゼロ・エミッション

本研究の目的は凍結廃水処理と有機廃棄物の乳酸化を有機的に結合させることにより、焼酎産業のゼロエミッションを実現することである。すなわち、焼酎廃液の凍結廃水処理により清澄な処理水を得ると同時に焼酎生産プロセスに必要な冷熱をつくり出す(創エネルギー)。冷熱として用いられた融解水はプロセス水として利用する。さらに、蒸留粕と濃縮廃液から自然に存在する乳酸菌の作用により乳酸を生成させる。生成乳酸は分離後、水素細菌により生分解性プラスチックであるポリヒドロキシ酪酸(PHB)にされる。生分解性プラスチックは微生物により分解され、再び炭酸ガスと水になり、有機物となって焼酎生産に利用される。このように、本提案法では廃水処理と同時にプロセスに必要なエネルギーと水を得ることができ、しかも生分解性プラスチックをつくるための原料になる乳酸が生産でき、焼酎産業のゼロエミッションが達成される。実際に焼酎廃液を凍結処理したところ20000ppm以上あったCODが2回の凍結処理により200ppm以下まで清澄にすることができた。一方、濃縮された廃液と懸濁固形分に様々な糖を添加したところ、30g/l以上の濃度で乳酸が生成された。これらの乳酸は水素細菌によって量論とおりの収率で生分解性プラスチックであるポリヒドロキシアルカノエイト(PHA)にすることができた。これにより、提案法により、焼酎産業のゼロエミッションが可能であることが実験的には示された。
没我的視覚体験の為のデザインメソッドの研究

本研究では、モーショングラフィックス(動きを伴う、non-figurative, non-narrativeなグラフィック)による、没我的及び快適な視覚体験を構成する為のデザインメソッドの研究・構築を行う.モーショングラフィックス映像視聴の主観的感性評価についての心理モデルとして、感情価-覚醒度の二次元感性モデルに基盤理論を参照し、画像特徴量の解析を用いたモーショングラフィックス映像視聴における主観的覚醒度の評価手法の検討、および傾向についての知見を得る.本年度は、昨年度の研究状況を踏まえ、主に以下の3つを実施した.1)昨年度の研究成果である覚醒度評価手法の信頼性を検証する為に、映像刺と被験者を代えて追実験を行った.2)感情価(快不快)次元について、映像モチーフのまとまりや滑らかな起動の結果生じる、視点の定め易さや動きの追い易さが感情価と関係している傾向を見出し、映像の顕著点の推移情報(推移ベクトルの角速度)が有効な指標であることを明らかにした.3)研究で得られた知見を映像クリエイターが映像制作時に参照出来るよう、デザインガイドラインを作成した.(抄録なし)本研究は、没頭して長時間見続けてしまう様な体験を促すモーショングラフィックスの量的尺度を実験を通じて明らかにしつつ、これを効果的にデザインするためのデザインメソッドを構築することを研究目的としている.研究初年度である23年度は、視聴者の心理的負荷とモーショングラフィックス映像の画像特徴量との関係を調べる為の基礎実験を行った.23名の被験者に対して、モーショングラフィックス映像の「複雑さ」「激しさ」「飽きなさ」「心地よさ」についての印象評価実験を行い、その結果得られた印象得点と、フレーム間差分量の時系列的変動特性(スペクトル構成)との相関性の分析を行った.結果の考察から、特に「激しさ」の印象について、740ms-2000msの周期変動スペクトルと強い相関が有ることが示された.これは、Visual STM(視覚的短期記憶)の保持時間枠が600msであることから、その枠を越えた長さの周期を持つ動きのパターンを、まとまりとしてチャンキングすることが困難になり、認知負荷が高まることで主観的な印象に影響を与えているのではないか、と考えられる.この基礎実験により、モーショングラフィックスの快適情報量モデルを形成する上で、人間の視覚的なパターンチャンキング能力の特性を踏まえることの重要性が示された.従来、遊びや面白さの研究において、適度な認知負荷が面白さの要件であることが論じられて来たが、モーショングラフィックスについて、その認知負荷量を画像工学的な指標で具体的に計算出来る可能性を示した.本研究では、モーショングラフィックス(動きを伴う、non-figurative,non-narrativeなグラフィック)による、没我的及び快適な視覚体験を構成する為のデザインメソッドの研究・構築を行う.本年度は、これまで本研究の基盤理論として扱って来た最適覚醒理論から、覚醒度と快感情とは独立しているとするValence-Arousalの二次元感性モデルに基盤理論の変更を行った.そのうえで、画像特徴量の解析を用いたモーショングラフィックス映像視聴における主観的覚醒度の評価手法を再検討した.SD法による映像印象評価実験および確認的因子分析を行い、また、各映像刺激に対してフレーム間差分量の時系列分析、およびオプティカルフロー分析を行い、因子得点と画像特徴量を用いた分析指標との相関分析を行った.結果、以下のように、フレーム間差分量の時系列特性と、オプティカルフロー平均ベクトル長を用いた覚醒度評価の有効性が示された.1.フレーム間差分量の時系列特性の分析より、約200msec600msec程度の時間長の映像の変化(大量のオブジェクトの加速・減速、拡大一縮小・変形等)が頻繁に生じ、他の時間長の動きに対して支配的である場合に、覚醒度が上昇する可能性2.単位時間辺りの移動長がある閾値を越えると、急激に覚醒度が上昇する傾向がある可能性.即ち、遅過ぎると感じる領域、丁度良いと感じる領域、早過ぎると感じる領域の大きく3つの評価領域に別れるような、感覚の閾値が存在する可能性.本研究では、モーショングラフィックス(動きを伴う、non-figurative, non-narrativeなグラフィック)による、没我的及び快適な視覚体験を構成する為のデザインメソッドの研究・構築を行う.モーショングラフィックス映像視聴の主観的感性評価についての心理モデルとして、感情価-覚醒度の二次元感性モデルに基盤理論を参照し、画像特徴量の解析を用いたモーショングラフィックス映像視聴における主観的覚醒度の評価手法の検討、および傾向についての知見を得る.本年度は、昨年度の研究状況を踏まえ、主に以下の3つを実施した.1)昨年度の研究成果である覚醒度評価手法の信頼性を検証する為に、映像刺と被験者を代えて追実験を行った.2)感情価(快不快)次元について、映像モチーフのまとまりや滑らかな起動の結果生じる、視点の定め易さや動きの追い易さが感情価と関係している傾向を見出し、映像の顕著点の推移情報(推移ベクトルの角速度)が有効な指標であることを明らかにした.3)研究で得られた知見を映像クリエイターが映像制作時に参照出来るよう、デザインガイドラインを作成した.主観印象報告(感性指標)による認知モデルの基礎実験は一定の成果が得られ今後の研究推進の方向性を特定することができた.一方で、視線計測(生理指標)による認知負荷状態の評価モデルについては着手することができなかった.

リアルタイムで映像の負荷量を調整するインタラクティブシステムを構築する為に、視線計測による認知負荷状態の評価が有効であると考えられる.今後の研究で視線計測による認知負荷状態予測モデルを構築して行く.本年度当初、覚醒度によって快適さを評価する最適覚醒理論に基づき分析を行っていたが、相関性を見いだすことができなかった.そこで、基盤とする感性モデルを変更し、快感情価と覚醒度とを独立して扱うことにより、分析変数が整理された.それにより、まず覚醒度と映像の動きとの相関性が明らかになり、研究の次のステップとして、快感情価の因子について分析を進めることができる.感情価次元についても、これまでの考察から分析の大まかな方策がたてられている.本年度の研究成果により、動的な図像のパターンチャンキング行為が、モーショングラフィックスの認知負荷に強く関係しており、映像の印象に影響をあたえている可能性が示唆された.今後、動的な図像の条件(時空間的な規則性の程度)を変更し、チャンキングの難易度がどのように変化するのか、その際の主観的な印象にどのような影響を与えるか、調査・実験を通じて明らかにして行く.また、上述したように、視線計測による認知負荷状態予測モデルを構築する為に、同時に視線計測も行っていく.現時点で、感情価一覚醒度の二次元感性モデルのうち、映像の動きと覚醒度の関係について相関関係を明らかにすることができた.今後は、感情価についても同様に画像特徴量を用いた分析を行い、映像の動きの属性との相関関係を明らかにしていく.次に、分析により明らかになった知見を基にして、モーション生成を支援するアプリケーションを実装し、その有用性をユーザー実験を通じて確認する.(抄録なし)
多光子顕微鏡法による破骨細胞の膜ダイナミクスと骨破壊機能の分子基盤の解明

骨は骨形成と骨破壊のバランスにより維持されている。生体内の骨破壊において主要な役割を果たしているのが破骨細胞である。本研究では、骨破壊機能の分子機構を明らかにするために、破骨細胞内の小胞の動きについて解析した。4次元イメージングを行なうことにより、生きた破骨細胞内の骨吸収に関係すると考えられる小胞の動きを、xy方向のみでなくz方向にも解析することが可能となった。本研究では、生体内の骨破壊機能が破骨細胞内から骨表面への小胞輸送によって規定されていることに着目し、この膜動態を蛍光蛋白質による多重標識と多光子顕微鏡法によって明らかにし、機能評価系を構築すると共に、これを利用して破骨細胞の骨破壊機能の分子基盤を解明することを目指す。平成21年度は、主に破骨細胞培養系の準備、実験材料の準備、ならびに遺伝子発現条件の検討を行なった。具体的には、以下のことを行なった。1.破骨細胞培養系の準備マウス由来マクロファージ系細胞RAW264.7を破骨細胞に誘導する条件について、誘導因子であるM-CSF及びRANKLのメーカーと濃度を検討した。2.遺伝子発現条件の検討各種遺伝子導入試薬を用い、導入効率が良く、分化誘導を阻害しない条件について検討を行なった。3.蛍光蛋白質との融合蛋白質を発現するプラスミドの準備マウス由来VAMP7をサブクローニングし、群青色蛍光蛋白質シリウスとの融合蛋白質を発現するプラスミドを構築した。また、細胞骨格系蛋白質と蛍光蛋白質との融合蛋白質についても発現プラスミドを準備し、これらプラスミドを複数遺伝子導入することによる多色蛍光の検出について、検討を行なった。上記の様に実験条件を十分に検討することにより、破骨細胞の機能評価が可能になったため、平成22年度には、実際に破骨細胞の骨破壊機能を評価し、骨破壊過程を制御している蛋白質を探索することを予定している。本研究課題は、生体内の骨代謝に重要な骨破壊機能が破骨細胞内から骨表面への小胞輸送によって規定されていることに着目した研究である。本研究では、破骨細胞内の膜動態を蛍光蛋白質を用いた多重標識と多光子顕微鏡の組み合わせにより、破骨細胞の新規機能評価系を構築すると共に、この評価系を活用することによって骨破壊機能の分子基盤の解明を目指した。平成22年は、前年度に確立した破骨細胞培養系と遺伝子発現系を組み合わせ、実際に細胞内小胞の4次元イメージングを試みた。その結果、破骨細胞内の酸性小胞の動きをxy方向のみでなくz方向にも追跡することが可能となり、骨破壊機能を小胞輸送という新たな観点から評価できるようになった。また実験を進める中で、リン酸カルシウム薄膜上での培養では、プラスチックディッシュ上での培養に比べ、破骨細胞の分化状態及び形態が異なり、細胞内小胞の位置や動態も異なっていることが示唆された。また、膜融合関連蛋白質の一つであるVAMP-7と群青色蛍光蛋白質シリウスとの融合蛋白質を発現するプラスミドを導入することで、VAMP-7過剰発現破骨細胞を誘導した。この細胞では膜動態が異常になっている可能性があり、現在更に詳細な解析を進めている。本研究においては、骨破壊機能の分子基盤を完全に解明するには至らなかったものの、新規の研究手法を開発・提示することに成功し、骨代謝に寄与する可能性のある分子の候補を見出した。本研究成果は、今後の骨代謝研究において、既存の方法とは全く異なるアプローチを可能にし、骨代謝分子基盤の全貌の解明や骨代謝不全に対する治療薬開発への大きな一歩となった。
中世・近世肖像画の調査・データベース化と歴史図像学的研究

本研究は,日本史の主要な画像史料の一つである肖像画に関する基礎的な調査と研究を行ってきた。その成果は、以下の通りである。第一点。東京大学史料編纂所は、明治時代以来、肖像画を模本の作成という手段によって蒐集してきた。現在までの蒐集点数は約900点に及んでおり,それらの紹介は急務であった。本研究では,全点を4×5判白黒フィルムで撮影し,四切りの大きさに引き伸したうえで、それらについての基礎的調査を行い、新たな目録を作成した。これによって,史料編纂所の所蔵する肖像画模本は多くの研究者の関心を集めよう。第二点。この引伸写真を光ファイリング・システムに取り込んで,簡単なデータベースとし,身分・職業・性別・老若・時代によって検索できるようにした。これによって,史料編纂所々蔵の肖像画模本から,日本の肖像画の特徴の幾つかを把握できるであろう。第三点。本研究では,各種の日本史叙述や自治体史叙述を悉皆的に点検し、肖像画情報に関する調査カードを合計約27000枚作成することができた。予算の制約によって、そのデータベース化までは実現できなかったが、このカードを検索することによって、日本史叙述における肖像画情報の全体を把握することができる。そして第四点。肖像画の個別研究によって、幾つかの新説を提出することができた。たとえば,文化庁保管の「守屋家本騎馬武者像」の像主名についてであり,高師直像とする通説に対し,新たに師直の子息師詮像であるとの新説を提出した。肖像画研究の方法論についても,幾つかのシンポジウムや研究会において発表し,今後の研究の発展のための基本的な論点を提出することができた。また,1996年3月には,史料編纂所主催で「肖像画と歴史学」と題するシンポジウムを開催し,当日は257名もの出席者と討論を行うことができた。第一点。第二点。第三点。そして第四点。1光ファイリングシステムの導入は1993年2月になったので、研究計画第二年度からその本格的な利用を行なうことになる。2史料編纂所に収集・蓄積されている800点以上に及ぶ肖像画模写本の調査については、約三分の一程度済ますことができた。また、その4×5フィルム(モノクロ)による写真撮影と焼き付け(四切引伸と密着写真)は完了した。次年度以降で台紙に四切引伸写真を貼って順次利用可能にしていく予定である。3日本全国の地方史誌類(県・市・町・村史など)に掲載・利用されている肖像画についての情報をカードに取って蓄積する作業は、全体のほぼ六割が終わった。次年度において完了する予定である。また、肖像画を掲載している美術書・図録類の収集も、十分ではないが、ある程度行なうことができた。次年度以降に、本格的に取組む予定である。4青森・岩手・宮城・新潟・静岡・滋賀・兵庫・山口・長崎・佐賀・熊本の各県、及び大阪・京都府などに出張し、肖像画についての情報入取に努めた。その結果改めて確認できたことは、(1)中世・近世肖像画の総数は恐らく数十万点に達するであろうこと、(2)市場に流れ出ることは少なく、しかるべき所に遺存していること、(3)したがって、何次にもわたる調査を継続していれば、その遺存状況の全体が把握できるようになるであろうこと、などである。5

図像学関係の文献、とくに肖像画に関する研究を検討することによって、肖像画分析の方法論を考えた。とくに、日本における集団肖像画の成立・展開が重要な課題であることを確認できたのは大きな収穫であった。また、肖像画を大量観察することによって、多彩な歴史図像学的分析の可能性が見えてきた点も収穫であった。1光ファイリングシステムには、史料編纂所所蔵の肖像画模写本約九百数十点のうち、約四百点の入力を行うことができた。入力に思いの外時間がかかっているのは、第一に、本科研で購入できたシステムの能力の低さのためであり、次年度もその制約を受け続けることになる。第二に、その機器は何度かの故障が発生して、作業の中断を強いられたためである。2史料編纂所所蔵の肖像画模写本約九百数十点の調査については、約半数の調査を済ますことが出来た。それらの肖像画の原本の有無についての情報の整理は、一部について行い始めている。3日本全国の地方史誌類(県・市・町・村史など)に掲載・利用されている肖像画についての情報のカード取りは、全体の八割強にとどまった。この作業は次年度に完了したい。また、肖像画の掲載されている美術館や図録類については、作業を継続中である。4今年度は旅費が少なくなったので、京都を中心とした地域での調査に重点を置き、京都市立芸術大学や陽明文庫などにおいて、肖像画の調査・撮影を行った。また、長崎などにおいて肖像画調査を実施した。日本全国に存在する数十万点もの肖像画の情報把握には、今後何次にもわたる調査が計画されねばならないだろう。5肖像画の研究論文や歴史図像学に関する文献の収集は、本年度も続行した。日本の肖像画研究を推進するには、さらに東洋美術史における肖像画の位置づけに関心を深めなければなるまい。そうした作業を踏まえて、肖像画の歴史図像学的分析の方法を鍛えていくことになろう。(1)長年にわたって史料編纂所が模写してきた約九百点に及ぶ肖像画模本についての調査と調査カードの作成を、前年度に引き続いて行なった。(2)本年度には、画像ファイリングシステムへの上記の肖像画模本九百点の入力作業がようやく終了した。そこで、それらの肖像画をどのように検索しうるか、そしてそれらからどのような歴史情報を明らかにできるかを検討し、本システムを研究者が使えるように工夫していく作業を進めた。(3)県・市・町・村史、及び通史叙述などに使われている肖像画のカード作成は、前年度に引き続き行なっている。また、展覧会カタログや論文の収集なども進めた。(5)本年度から、個別の肖像画の研究にも着手し、伝足利尊氏像として有名で、最近では高師直像とされている守屋家本騎馬武者像(文化庁保管)について、それを高師直の子息師詮像であるとする新たな仮説を論文として提出した。また、大徳寺本と清浄光寺本の後醍醐天皇像についても、新たな仮説を発表することができた。なお、神護寺蔵の伝源頼朝像・伝平重盛像・伝藤原光能像についても、東京国立文化財研究所の米倉氏の新説に賛同し、重盛像を足利尊氏像、頼朝像を足利直義像、光能像を足利義詮像とする説に到達した。本研究の最終年度にあたるので、これまでに行ってきた調査・研究の総点検を第一の作業とした。その結果は以下の通りである。(1)これまで作成してきた都道府県史や市町村史の肖像画情報カードを都道府県別に整理・補充した。合計19700枚である。また、その他に図録類からのカード5500枚、辞典からのカード1500枚がある。
対馬における「国境」観の変遷と利用戦略に関する調査研究

2006年8月、10月、そして2007年3月の3回にわたり、対馬市にて現地調査および資料収集にあたった。8月の調査は「対馬アリラン祭」を中心に参与観察および関係者への聞き取り調査を行なった。この「対馬アリラン祭」は対馬における日韓交流行事の象徴的存在であるが、それだけに日韓関係の影響を受けやすい。この年は春先にかけて来島韓国人観光客の行動が全国ネットのTVニュースや新聞で取りあげられたこともあり、特に、これら全国規模で流通するマスメディア言説への反応に注目しつつ調査を行った。10月は「対馬アリラン祭」との関係を念頭に、厳原八幡宮例大祭の参与観察を行なった。この両者は同じ地区で開催されており、地区住民にとってはともに屋台や出し物が出る「ハレの日」であることには変わりない。しかし、前者が「日韓友好」のイベントであるのに対し、後者は神社の祭礼であり、その性格付けはかなり異なる。そこで、特に対韓感情および郷土意識に注目しつつ、調査を行った。2007年3月は、昭和20年代を中心に資料収集を行なったほか、当時の貿易に関わる様相について関係者にインタビューを行なった。このほか、昨年度に引き続き、対馬に関連する学術論文・調査報告書の調査収集を行なった。また各種基礎資料、特に交通手段・ルートの変遷に関する資料の調査収集に努めた。この過程で対馬における観光開発関連も収集を行った。これらの文献資料と聞き取りデータとを照合しつつ、地域の全体像を明らかにするための作業を進めた。なお、今年度までの成果の一部は論文として『国際交流センター報』に発表したほか、2本を投稿中である。まず、基礎資料として、対馬を主対象とする各種学術論文、学術調査報告書の閲覧及び収集を行なった。次に、交通路の変遷を中心に、合併前の旧町村史および広報誌、海運会社社史等の収集・閲覧を行なった。これらにより、海上交通路の変遷は大枠で明らかになったが、不明な部分も多く、継続して資料の収集及び調査を続ける予定である。また、『しま』(日本離島振興センター)等、離島振興法およびその展開に関する資料も収集を進めている。次に、昭和20年代30年代を中心に、日韓関係の変動に留意しつつ、対馬に関する新聞記事の閲覧を行ない、記事の内容、掲載頻度を調査した。これは全国紙、地方紙、および全国紙地方版の3つについて行なっており、現在も継続中である。以上の作業と平行し、2004年8月、11月、翌2005年3月の3回に渡り、対馬市にて聞き取り調査および参与観察調査を行なった。聞き取り調査は大きく2つの目的を持って行なった。ひとつは、交通/交流の変遷を軸に、戦後の対馬における生活の変遷を明らかにすることであり、現在は旧厳原町を中心に行なっている。ここで得られたデータは文献資料と照合しつつ、地域の全体像を明らかにする作業を進めている。もう一つは、毎年開催されている、通称「対馬アリラン祭」および関連行事に関する聞き取りであり、こちらは参与観察を交えながら、参加者へのインタビューおよび「朝鮮通信使行列振興会」責任者へのインタビュー等を行なった。なお、以上から得られた成果の一部は、韓国日本語文学会にて発表を行なった。2005年5月、8月、そして12月の3回にわたり、対馬市にて聞き取り及び参与観察調査を行なった。主要目的は2つある。1つ目は、交通/交流の変遷を軸に、戦後対馬における生活文化の変遷を明らかにすることである。このため、昭和40年代まで島内の各集落を結んでいた「渡海船」元乗組員や朝鮮半島からの引揚者などへの聞き取り調査を行なうとともに、関連資料の収集を行なった。2つ目の目的は例年8月に開催される「対馬アリラン祭」に代表される、国際交流を謳ったイベントを題材に、対馬における対外関係の変遷及び利用戦略を明らかにすることである。上記「アリラン祭」については参与観察及び関係者へのインタビューを行なったほか、2005年5月に行なわれた「日本海海戦100周年記念イベント」についても、平和的とは言いがたい素材を「国際親善イベント」に変換するための言説・装置に注目しつつ参与観察を行なった。さらに、昭和3040年代の新聞から、対馬に関連する内容の記事を、特に日韓関係との関連に着目しつつ調査・収集した。これらの文献資料と聞き取りデータとを照合しつつ、地域の全体像を明らかにするための作業を進めている。なお、今年度までの成果の一部は「韓国日本学連合会第3回国際学術大会」にて発表し、別の一部は論文として『人文学論叢』に発表した。

この両者は同じ地区で開催されており、地区住民にとってはともに屋台や出し物が出る「ハレの日」であることには変わりない。しかし、前者が「日韓友好」のイベントであるのに対し、後者は神社の祭礼であり、その性格付けはかなり異なる。そこで、特に対韓感情および郷土意識に注目しつつ、調査を行った。2007年3月は、昭和20年代を中心に資料収集を行なったほか、当時の貿易に関わる様相について関係者にインタビューを行なった。このほか、昨年度に引き続き、対馬に関連する学術論文・調査報告書の調査収集を行なった。また各種基礎資料、特に交通手段・ルートの変遷に関する資料の調査収集に努めた。この過程で対馬における観光開発関連も収集を行った。これらの文献資料と聞き取りデータとを照合しつつ、地域の全体像を明らかにするための作業を進めた。なお、今年度までの成果の一部は論文として『国際交流センター報』に発表したほか、2本を投稿中である。
原位置透水試験による環境地盤特性の定量的評価システムの開発

土壌汚染や地下水汚染に代表される地盤環境問題を定量的に評価するためには、汚染物質の移流拡散現象を的確に把握しなければならない。そのためには、これらの挙動を支配する地盤の浸透特性値の計測ならびに評価法は極めて重要である。本研究では、原位置透水試験や地下水計測データの新しい工学的な解析手法として、解析アルゴリズムに人工生命技術(Artificial Life Technology)を採用し、原位置透水試験データを現場にて迅速に解析し、従来、解析の困難であった複雑な帯水層条件下においても浸透特性を評価可能なシステムの開発を目的とした。当該研究期間の研究概要は以下のようである。(1)原位置透水試験として、揚水試験方法に着目し、漏水性被圧帯水層や透水異方性帯水層地盤などの複雑な地盤条件下で実施された揚水試験データについて、その計測データパターンと帯水層条件や水理境界条件の関係を分類整理し、ニューラルネットワークを用いて、それらの標準曲線形状を学習・認識させることにより、地盤の浸透特性値の評価システムを構築した。その際、システムの汎用性を高めるために、標準曲線形状のニューラルネットワークヘの学習方法を検討し、適切な学習データの選択方法について考察した。本方法の妥当性は被圧漏水性帯水層におけるサンプルデータおよび実際に実施された揚水試験データを用いて検討した。(2)構築されたニューラルネットワークを数値シミュレーションによって作成された複数の揚水試験データに適用し、本解析システムの有用性を検討した。特に、従来、解析技術者が個々の判断基準で行っていた揚水試験データのパターン分類と標準曲線の選択作業をニューラルネットワークによって合理的に行い、個人誤差の低減によって解析精度の向上が期待できることを確認した。(3)本研究で提案した解析作業をマイコンにて実行可能とし、揚水試験データを現場においてリアルタイム処理する迅速な地盤の浸透特性の算定システムを作成した。本研究では、原位置透水試験や地下水計測データの新しい工学的な解析手法として、解析アルゴリズムに人工生命技術(Artificial Life Technology)を採用し、原位置透水試験データを現場にて迅速に解析し、従来、解析の困難であった複雑な帯水層条件下においても浸透特性を評価可能なシステムの開発を目的する。また、複数の異なるインパクトを順次帯水層に与えて、その反応を現場にて総合的に処理する原位置透水試験システムを開発し、多層帯水層における環境地盤特性の工学的な評価指針の確立を試みる。平成10年度の研究概要は以下のようである。(1)原位置透水試験による非定常水位計測データのパターンと帯水層条件や水理境界条件の関係のデータを蓄積するために、長さ300cm、深さ100cmの軸対称扇形の大型土槽にまる帯水層地盤モデルを作成し、揚水および注水試験の室内模型実験を行った。その結果より帯水層地盤において地下水に与えたインパクトと各層で計測される水圧変動との関係を定性的に把握するとともに最適な計測点配置等、透水試験法についての検討を行った。同時に、原位置透水試験による水位計測データのパターンと帯水層条件や水理境界条件の感度解析を飽和不飽和浸透流解析を用いて行い、それらの標準曲線の作成を行った。(2) (1)で得られた原位置透水試験データの計測パターンを分類整理し、ニューラルネットワークを用いて、それらの標準曲線形状を学習・認識させることにより、浸透特性値の評価システムの開発を行った。

本方法の妥当性は被圧漏水性帯水層におけるサンプルデータおよび実際に実施された揚水試験データを用いて検討した。土壌汚染や地下水汚染に代表される地盤環境問題を定量的に評価するためには、汚染物質の移流拡散現象を的確に把握しなければならない。そのためには、これらの挙動を支配する地盤の浸透特性値の計測ならびに評価法は極めて重要である。本研究では、原位置透水試験や地下水計測データの新しい工学的な解析手法として、解析アルゴリズムに人工生命技術(Artificial Life Technology)を採用し、原位置透水試験データを現場にて迅速に解析し、従来、解析の困難であった複雑な帯水層条件下においても浸透特性を評価可能なシステムの開発を目的とした。平成11年度の研究概要は以下のようである。(1)原位置透水試験として、揚水試験方法に着目し、漏水性被圧帯水層や透水異方性帯水層地盤などの複雑な地盤条件下で実施された揚水試験データについて、そのパターンと帯水層条件や水理境界条件の関係を分類整理し、ニューラルネットワークを用いて、それらの標準曲線形状を学習・認識させることにより、地盤の浸透特性値の評価システムを構築した。その際、システムの汎用性を高めるために、標準曲線形状のニューラルネットワークヘの学習方法を検討し、適切な学習データの選択方法について考察した。(2)構築されたニューラルネットワークを数値シミュレーションによって作成された複数の揚水試験データに適用し、本解析システムの有用性を検討した。特に、従来、解析技術者が個々の判断基準で行っていた揚水試験データのパターン分類と標準曲線の選択作業をニューラルネットワークによって合理的に行い、個人誤差の低減によって解析精度の向上が期待できることを確認した。(3)本研究で提案した解析作業をマイコンにて実行可能とし、揚水試験データを現場においてリアルタイム処理する迅速な地盤の浸透特性の算定システムを作成した。
新規凍害防御剤による幹細胞の効率的凍結保存

ポリリジンを無水コハク酸と反応させることによりカルボキシル基を導入し、様々なカルボキシル基導入量のカルボキシル化ポリリジンを作成した。そのカルボキシル基導入量が65mol%程度の化合物に凍結保護作用があることが確認され、ラット、ヒトの間葉系幹細胞、ヒト脂肪由来幹細胞、マウスiPS細胞、ヒトiPS細胞の凍結保存において既存物質であるDMSOの代替物質として応用可能であることを示した。機序に関しても調べた結果、細胞膜の保護作用および凍結時の急激な浸透圧変化を抑制する作用が関係していることが示唆された。それぞれのカルボキシル化ポリリジンを培養液に0-20%に溶解し、ヒト骨髄由来間葉系幹細胞を懸濁して-80度のフリーザー中にて凍結した。このとき、ジメチルスルホキシド(DMSO)などの既存の凍害保護剤、血清タンパクなどは含まなかった。また10%DMSO溶液で凍結したものを比較対象とした。カルボキシル基導入率が65%程度で90%程度の最も高い生存率を示し、濃度は5%以上で良好な結果であった。最適化の結果、カルボキシル化65%(PLL(0.65))、濃度7.5%で最も良好なハンドリングとコントロール系よりも高い生存率、増殖率が得られた。また、解凍後の骨、軟骨、脂肪への分化能も維持されていた。ヒト脂肪由来幹細胞も同じようにPLL(0.65)7.5%-15%においてコントロールよりも高い生存率、増殖性、同等の分化能維持を確認した。PLL(0.65)は両幹細胞のどちらにおいてもDMSOよりも有意に低い毒性であることが示された。また、10種以上の樹立細胞株に関しても同様な凍結保護効果が見られ、汎用性も確認した。機序の解明に関しては、アミノ基を導入したポリカルボン酸にもある程度凍結保護効果が見られることから、両性高分子特有の性質であることが示唆された。また、FITC固定化PLL(0.65)によりこの高分子が凍結時に細胞膜を保護していることも確認した。これらの結果よりカルボキシル化ポリリジンは低い毒性と高い凍結保護能を持ち、分化への影響も低く、動物性タンパク質を用いることなく間葉系の幹細胞を凍結することが可能であり、安全性と効率性を兼ね備えた新規な凍害保護剤が開発されたと考える。引き続き、ヒトiPS細胞の凍結保存に取り組んでいるところである。このカルボキシル化ポリリジンを用いたマウスおよびヒトiPS細胞の凍結保存を行った。マウスiPS細胞は緩慢凍結方法において、カルボキシル化ポリリジンがジメチルスルホキシド(DMSO)の代替物質として機能することを確認した。つまり、血清、DMSOを全く含まず、カルボキシル化ポリリジンのみで凍結保存が可能であり、分化能や未分化性に影響を与えないことも確認した。また、エチレングリコールを添加することにより相乗効果が得られ、これまで以上に凍結保存効率を高めることが可能であった。次にヒトiPS細胞の凍結保存を行った。ヒトiPS細胞ではコロニーをばらしてシングルセル状態にするとアポトーシスを起こすことが知られているため、通常コロニーのまま凍結保存される。この場合、生存率はわずかに1%以下となることが知られているが、カルボキシル化ポリリジンを用いても改善は困難であった。また、シングルセルの状態でもROCK阻害剤を添加すると培養が可能なことを利用して、シングルセルで凍結し、解凍後にROCK阻害剤添加培養を行うことで30%前後の生存率が確保されることが報告されている。我々はDMSOの代わりにカルボキシル化ポリリジンを用いたが、単純にDMSOの代替物質としては機能せず、エチレングリコールやスクロースなどの添加物を種々工夫することでDMSOフリーのヒトiPS凍結保護液を開発した。このことから、細胞によって凍結に対する障害は異なること、また、カルボキシル化ポリリジンがDMSOとは異なる機序で細胞凍結保護を行っていること示唆された。温度を降下させながらのNMR測定により、カルボキシル化ポリリジンはDMSOやエチレングリコールなどの既存の凍害保護剤に比べて水の保持機能が弱い一方、凍結濃縮時の塩化物イオン、ナトリウムイオンをトラップし、浸透圧が急激に上昇することを防いでいるような知見が得られた。今後はこの知見をさらに詳細に解析し、機序の解明の研究を行いたいと考えている。
胎盤特異情報を付加させた再構築組織による母子境界領域の免疫応答の解析

糖尿病やアレルギー状態は子宮NK細胞の分化を遅らせ,そのアポトーシスを抑制し,胎盤特異因子である胎盤成長因子(PlGF)タンパクを減少させたが,代償的に成熟子宮NK細胞を有意に増加させ,妊娠維持に必要なPlGFタンパクを確保しているものと示唆された。一方,血管内皮成長因子には変化がなかったが,脱落膜形成を促進し,その結果,脱落膜由来のインシュリン様成長因子およびインターロイキン-15が子宮NK細胞の分化を誘導したものと示唆された。本研究の目的は、妊娠現象の全過程を通して母子境界領域での免疫応答と胎盤特異的情報との関連を総括的に把握することである。本年度は,胎盤特異情報の因子として,胎盤成長因子(Placental Growth Factor, PIGF)に注目し,流産モデルとしてインスリン依存型およびインスリン非依存型糖尿病マウスモデルを駆使して,その生殖能力を検討した。さらに母子境界領域における子宮NK細胞の分化と機能に関して検討した。両糖尿病マウスモデルの生殖能力は対照と比べて,子宮重量,胎子数,胎盤重量が有意に減少した。組織学的には胎盤迷路部が縮小し,基底脱落膜と間膜腺は肥大した。しかしながら,胎子への最も重要な血液供給であるラセン動脈には顕著な変化は認められなかった。P1GFmRNA発現は糖尿病モデルで有意に減少したが,そのタンパク質発現には有意な変化は認められなかった。P1GFタンパクを産生する栄養膜細胞層の縮小にもかかわらず,そのタンパク量が変化しなかったことは他の組織・細胞による代償性機能が働いたものと推察された。その候補として,子宮NK細胞を検討した結果,基底脱落膜および間膜腺におけるその細胞密度に変化はなかったが,基底脱落膜および間膜腺の肥大と考え合わせるとその細胞数は有意に増加していた。さらに,妊娠満期には消失する子宮NK細胞が依然として存在したことから,アポトーシスが抑制されていることが疑われた。すなわち,糖尿病状態(高血糖症)は栄養膜からのPlGFタンパクを減少させるが,代償的に子宮NK細胞を有意に増加させ,妊娠維持に必要なP1GFタンパクを確保しているものと示唆された。子宮NK細胞のアポトーシス抑制がFas発現抑制によるかどうかを現在検討中である。次年度は,胎盤形成の本質が血管新生にあることから,血管新生に関わる因子を検討する。本年度は,Th2サイトカイン優勢なアレルギーモデルマウスを用いて,生殖能力を検討した。特に,IgEと母子境界領域で出現するリンパ球との関連を明らかにすることを目的とした。さらに,胎盤特異情報の因子として,血管内皮成長因子(VEGF)と胎盤成長因子(PIGF)に注目した。アレルギーモデルマウスでは,対象群と比較して,血中IgE濃度は有意に高く(約100倍),胎盤の発達(重量)も悪かったが,胎子数と流産率に有意な差は見られなかった。逆に,間膜腺の発達は増加したが,そこで増殖する子宮NK細胞の動態に有意な変化は見られなかった。しかしながら,未熟な子宮NK細胞は有意に低く,アレルギー状態が子宮NK細胞の分化に強く影響していることが示唆された。IgEレセプターは変化しなかったが,高親和性のレセプターと低親和性のレセプターのバランスに変化が見られ,このアンバランスにより,子宮NK細胞の分化が彰響を受けたものと考えられた。VEGFは顕著な変化が見られなかったが,PIGFは低い傾向にあり,そのため胎盤の発達が低かったものと考えられた。今回は実験的に(強制的に)誘導させたアレルギーモデルであったので,今後の課題として,自然発症のアレルギーでの解析が必要であるが,高IgE血症が妊娠過程において,免疫担当細胞に影響を与えること,特にその分化過程に強く影響することが示唆された。本年度は,前年度からの検討事項であった自然発症アレルギーモデルマウスを用いて,生殖能力を検討した。対象群や前年度の実験発症群と比較して,血中IgE濃度は有意に高く(数百倍),胎盤の発達(重量)も悪かった。これは前年度の実験発症例と比較しても有意に異なる。統計的には胎子数と流産率に有意な差は見られなかったが,自然発症例ではそのバラツキが大きく,着床,妊娠状態の恒常性が失われているものと推察された。特に,着床間領域でポリープ状に子宮内膜が突出する箇所が認められ,さらに鬱血部位が存在し,血管透過性が増加していることが分かった。これらの病理的所見が妊娠維持の致命傷に必ずしもなっていないが,胎子の発育や胎盤形成に強く影響していることが示唆された。子宮NK細胞の分化もさらに遅れ,血管内皮成長因子(VEGF)と胎盤成長因子(PIGF)も有意に低かった。

特に脱落膜でのVEGFは前年度の実験発症群では変化が見られなかったが,有意に低下し,ラセン動脈の形成不全が認められ,局所での高血圧状態を誘起しているもの考えられ,これがひいては鬱血状態をさらに憎悪させたものと推察された。IgEレセプターは前年度の実験群と同様に変化しなかった。総じて,自然発症アレルギーの方が実験発症アレルギーより,免疫担当細胞の分化にもVEGFやPIGFの発現にも強い影響を与えることが分かった。
脳由来神経栄養因子による摂食脂肪蓄積制御機構の解明

Brain-Derived Neurotrophic Factor(BDNF)は、主に脳内で産生分泌される神経栄養因子であるが、脳内での産生が低下するとうつ病や神経性食思不振症の原因となることが示唆されている。摂食中枢においては、メラノコルチン受容体の下流シグナルとして、TrkB受容体に作用することによって、摂食をネガティブに制御し、末梢の異化反応を促進すると報告されている。しかしながら、BDNFが中枢や末梢組織においてどのような役割を果たしているかについては、まだまだ不明な点が多い。我々は最近、脂肪組織などの末梢組織においてBDNF/TrkBが発現しており、栄養状態によってその発現が変化すること、末梢組織特異的BDNF/TrkB欠失が摂食や脂肪蓄積に影響を与えることなどを観察している。以上より、中枢・末梢組織におけるBDNF/TrkB axisは、何らかの機序によって栄養状態を感知し、相互に作用することによって、摂食や代謝・脂肪蓄積制御に関与している可能性がある。本研究提案では、様々な遺伝子改変マウスを用いて、特に末梢のBDNF/TrkB axisが、どのように摂食や代謝・脂肪蓄積制御に関与しているかを明らかにし、今後の治療標的となりうるかについて検証することを目的とした。昨年度までの研究成果において、中枢性BDNF欠失マウスでは、過食・肥満・過活動の形質を認めた。aP2-Creを用いた脂肪特異的BDNF/TrkB欠失マウスも同様の形質を認め、その特異性に疑問が残った。そこで、Adipoq-Creを用いて再検証を行ったところ、脂肪細胞特異的BDNF/TrkB欠失マウスでは、摂食や脂肪蓄積には変化を認めなかった。以上より、正常食下における摂食・脂肪蓄積に対しては、脂肪細胞のBDNF/TrkBの役割は低いものと考えられた。26年度が最終年度であるため、記入しない。本研究提案では、様々な遺伝子改変マウスを用いて、特に末梢のBDNF/TrkB axisが、どのように摂食や代謝・脂肪蓄積制御に関与しているかを明らかにし、今後の治療標的となりうるかについて検証することを目的とする。まず、Synapsin-Creを用いた神経細胞特異的BDNF欠失マウス(SYN BDNF CKO)では既報と同様に過食・肥満・過活動を認めた。さらにaP2-Creを用いた脂肪特異的BDNF欠失マウス(aP2 BDNF CKO)、TrkB欠失マウス(aP2 TrkB CKO)も共に過食・肥満を認め、脂肪組織のBDNF・TrkBと中枢神経系との連関の存在が示唆された。しかしこれらのマウスでもSYN BDNF CKOと同様の行動異常を認めたため、aP2 TrkB CKOマウスの中枢神経組織でのTrkB発現を確認した。脳組織全体では発現変化は明らかではなかったが、視床下部のみで評価したところTrkBの発現が減少していることが明らかとなり、そのために過食・肥満形質を呈していると考えられた。

26年度が最終年度であるため、記入しない。いくつかの遺伝子改変マウスでの解析が終了している。脂肪におけるBDNF/TrkBの役割を検証するため、脂肪特異的遺伝子改変マウスも作製しており、おおむね順調に進展していると考えられる。新潟大学大学院医歯学研究院循環器内科
日本語習得過程における日本語処理の半球優位性並びにコントロール機能の変化

従来までの研究で,比較的短期間の学習経験によって視覚情報処理のラテラリティが変化することが明らかとなっている(Endo et al.,1982:吉崎,1988:Yoshizaki,1990).本年度の研究では,このようなラテラリティの学習による変化が実際の学習場面で生じることを確認する.また同時に,昨年度までの科研費研究で検討されてきた半球のメタコントロールをとらえるパラダイムを用いて,学習過程でのメタコントロールを担う半球の変化についても検討を加える.実際の習得状況として,留学生が日本語を習得していく過程が取り上げられた.実験1では,まず日本人大学生17名(右利き)を対象に平仮名1文字対のマッチング課題のラテラリティ並びに,メタコントロールについて検討した.まず,両視野提示条件を除き,ラテラリティの観点から分析を加えた.正答に要した反応時間を3要因分散分析(提示時間(20ms vs 120ms),反応のタイプ(same/different),提示視野(左視野/右視野)にかけたところ,2次の交互作用が見られた.この交互作用は,提示時間が短い条件(20ms)では,反応タイプと提示視野の単純交互作用が見られるのに対して,提示時間が長い条件(120ms)ではそのような単純交互作用が見られないことの反映だと推察された.つまり、20ms提示条件時には,same反応で左視野優位性,different反応で右視野優位性を示したのが,120ms提示条件時ではsame,different反応とも弱い右視野優位性を示したのであった.両視野提示条件の成績から,半球のメタコントロールについて検討した結果,20ms提示条件時において右半球がメタコントロールを担当していることが推察された.実験2では,来日して1年以内で日本語を学習している留学生を対象に,実験1と同じ課題が実施された.対象者は6名であった.実験1と同様の分析を行ったところ,2次の交互作用は見られず,実験1の結果とは大きく異なるものであった.実験2は,またpilot studyの段階ではあるが,日本語学習初期の仮名文字認知のラテラリティやタメコントロールは,母国語として処理する日本人のそれとは異なることが予想された.従来までの研究で,比較的短期間の学習経験によって視覚情報処理のラテラリティが変化することが明らかとなっている(Endo et al.,1982:吉崎,1988:Yoshizaki,1990).本年度の研究では,このようなラテラリティの学習による変化が実際の学習場面で生じることを確認する.また同時に,昨年度までの科研費研究で検討されてきた半球のメタコントロールをとらえるパラダイムを用いて,学習過程でのメタコントロールを担う半球の変化についても検討を加える.実際の習得状況として,留学生が日本語を習得していく過程が取り上げられた.実験1では,まず日本人大学生17名(右利き)を対象に平仮名1文字対のマッチング課題のラテラリティ並びに,メタコントロールについて検討した.まず,両視野提示条件を除き,ラテラリティの観点から分析を加えた.正答に要した反応時間を3要因分散分析(提示時間(20ms vs 120ms),反応のタイプ(same/different),提示視野(左視野/右視野)にかけたところ,2次の交互作用が見られた.この交互作用は,提示時間が短い条件(20ms)では,反応タイプと提示視野の単純交互作用が見られるのに対して,提示時間が長い条件(120ms)ではそのような単純交互作用が見られないことの反映だと推察された.つまり、20ms提示条件時には,same反応で左視野優位性,different反応で右視野優位性を示したのが,120ms提示条件時ではsame,different反応とも弱い右視野優位性を示したのであった.両視野提示条件の成績から,半球のメタコントロールについて検討した結果,20ms提示条件時において右半球がメタコントロールを担当していることが推察された.実験2では,来日して1年以内で日本語を学習している留学生を対象に,実験1と同じ課題が実施された.対象者は6名であった.実験1と同様の分析を行ったところ,2次の交互作用は見られず,実験1の結果とは大きく異なるものであった.実験2は,またpilot studyの段階ではあるが,日本語学習初期の仮名文字認知のラテラリティやタメコントロールは,母国語として処理する日本人のそれとは異なることが予想された.
歯胚由来幹細胞を応用した歯周組織再生マテリアルの開発

本研究ではティッシュエンジニアリング技法でのさらなる細胞の供給源として、ヒト智歯歯胚からの組織間葉系幹細胞の分離、培養を試みさらにはその特性についての検討を行なった。結果、歯根膜組織を再構築することを目的としティッシュエンジニアリングに用いる自己由来細胞のソースとしてヒト智歯由来の間葉系幹細胞が有用であることが示唆され、今後、スキャフォルドとの親和性等さらに検討を行うことが必要と考えられた。近年、様々な生体材料に自己細胞および増殖・分化因子を組み合わせたティッシュエンジニアリングが開発され発展しつつある。なかでも、人工多能性幹細胞(iPS細胞)を代表とする胚性幹細胞(ES細胞)にかわる多分化能を有する細胞の開発、研究が行われている。本年はティッシュエンジニアリング材料に組み合わせるため、自己由来の細胞として大きな可能性を有すると考えるヒト智歯歯胚由来間葉系幹細胞についての検討を行った。智歯歯胚は8歳から12歳までの矯正学的理由により抜去された埋伏智歯を使用し、患者には実験に供することの同意を得ている。抜去したヒト智歯歯胚を酵素下にて細胞単位まで分離回収し培養を行った。幹細胞マーカーとされるSTRO-1陽性細胞に対し、磁石抗体を応用したDvnabeads^[○!R]を用い、分離回収をおこなった。全細胞にしめる間葉系幹細胞の割合は6%であった。また、それら磁石抗体を再分離し、さらに培養を継続、細胞の増殖を確認している。さらに、抜去天然歯由来の歯根膜細胞からSTRO-1陽性細胞を分離し同様の実験を行った。その結果、回収率は2.2%と智歯歯胚に比べ有意に低かった。さらには歯胚由来の細胞は培養経過においてALP活性及びタンパク量測定で歯根膜由来細胞に比べ高い値を示すことを確認した。以上より、歯根膜組織を再構築することを目的としティッシュエンジニアリングに用いる自己由来細胞のソースとしてヒト智歯由来の間葉系幹細胞が有用であることが示唆され、今後、スキャフォルドとの親和性等さらに検討を行うことが必要と考えられた。本年はティッシュエンジニアリング材料に組み合わせるため、自己由来の細胞として大きな可能性を有すると考えるヒト智粛粛胚由来間葉系幹細胞についてのさらなる検討を行った。幹細胞マーカーとされるSTRO-1陽性細胞に対し、磁石抗体を応用したDynabeads[○!R]を用い、分離回収した。抜去したヒト智歯歯胚は酵素下で細胞単位まで分離し幹細胞の回収を行った。その中に占める間葉系幹細胞の割合は6%であったことは以前に報告しているが、さらに培養を継続培養し、タンパク量の変化とALP活性の推移について観察を行った。その結果歯胚由来の細胞は培養経過においてALP活性及びタンパク量測定で高い値を示すことを確認した。本年は引き続き、ヒト智歯歯胚由来間葉系幹細胞についてのさらなる検討を行った。幹細胞マーカーとされるSTRO-1陽性細胞に対し、磁石抗体を応用したDynabeads^<[○!R]>を用い、分離回収した。今回は培養環境としてDMEMに代えて間葉系幹細胞培地(MSCGM)を使用し分離培養を行っている。MSGCMにて細胞を培養したところDMEMに比べて細胞の増殖分化速度が増加することが碓認された。また、細胞を軟骨誘導環境にて培養を継続したところAlcian blueに染色されるマトリックスを形成し、また骨誘導環境にて培養を継続したところAlizarin redに染色されるノジュールを発現した。以上より、歯根膜組織を再構築することを目的としティッシュエンジニアリングに用いる自己由来細胞のソースとしてヒト智歯由来の間葉系幹細胞が有用であることが示唆された。