hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
新しい多孔質金属錯体による高性能水素貯蔵材料の研究

水素エネルギー社会の構築には、高効率水素貯蔵技術の確立が必要不可欠である。これまで、水素吸蔵合金、ケミカルハイドライド等各種水素貯蔵材料が検討されてきたが、重量・体積当たりの水素密度が低いこと、リサイクル性、反応速度、分離・回収技術等様々な問題が存在し、これら諸問題の克服が期待されている。本研究では、細孔制御しやすく、水素等の小分子を吸蔵できる可能性が高い多孔質金属錯体高分子の持つ優れた性質に着目し、高性能可逆的水素貯蔵技術の確立を目的としている。有機リンカー4,4',4"-benzene-1,3,5-triyl-tribenzoic acid(H_3BTB)及び希土類金属硝酸塩を用いて、化学式Ln_3(BTB)_4(DMA)_3(H_2O)_9(Ln=Tb,Yb,Y,Er,Sm,Eu and Dy;DMA=N,N-dimethylamide)を有する一連の多孔質金属錯体高分子を構築した。これらの錯体は、パーマネント多孔性を示す。窒素吸着による表面積測定の結果、Tb-BTB化合物は77KにおいてI型吸着等温線を示し、Brunauer-Emmett-Teller(BET)表面積は732.25m^2/gである。本化合物の水素吸着量測定の結果、77K,1atmでは、180cm^3/g(1.58wt%)の水素吸着能を示す。これまで、水素吸蔵合金、ケミカルハイドライド等各種水素貯蔵材料が検討されてきたが、重量・体積当たりの水素密度が低いこと、リサイクル性、反応速度、分離・回収技術等様々な問題が存在し、これら諸問題を克服するブレークスルーが期待されている。銅、銀、亜鉛、コバルト、カドミウム、モリブデンなどの金属塩と配位子である1,3,5-tris(imidazol-1-ylmethyl)-2,4,6-trimethylbenzene,3,5-pyrazoledicarboxylic acid,3,4-dihydroxy-3-cyclobutene-1,2-dione,1,4-phenylenediacrylicacidなどを出発物として用いて、各種溶媒、反応温度・圧力条件下で、一連の新規金属錯体を合成した。単結晶X線構造解析を行い、結晶構造を明らかにした。結晶構造解析に加え、これらの錯体について各種分光法による解析を行い、熱安定性などについての評価を行った。ゲスト分子の脱離や、ガス吸着特性について検討を行った。DMF及びDEF溶媒中において、硝酸イットリウムとtrimethyl1,3,5-benzenetricarboxylateとの反応によって、多孔質金属錯体高分子Y2(BTC)2(DMF)(H2O)とY2(BTC)2(H2O)(BTC=1,3,5-benzenetricarboxylate)を合成した。TGA測定の結果、これらの化合物は熱的に高い安定性を示す。溶媒熱条件下で、硝酸マグネシウムと4,4'-oxybis(benzoic acid)(oba)との反応によって、多孔質金属錯体高分子[Mn5(μ3-O)2(oba)2(Hoba)2DMF(H2O)2]・(DMF)3(H2O)2を合成した。本化合物は4.5A×4.5Aの細孔を有することがわかった。硝酸亜鉛と4,4',4''-benzene-1,3,5-triyl-tribenzoic acid(H3BTB)との反応によって、ZnとH3BTBを有する新しい多孔質金属錯体高分子を合成した。本化合物はI型窒素吸着特性を示し、BET比表面積は783.19m2/g、細孔体積は179.94cm3 g-1(STP)である。これらの多孔質金属錯体高分子による水素吸着について検討を行った。

有機リンカー4,4',4"-benzene-1,3,5-triyl-tribenzoic acid(H_3BTB)及び希土類金属硝酸塩を用いて、化学式Ln_3(BTB)_4(DMA)_3(H_2O)_9(Ln=Tb,Yb,Y,Er,Sm,Eu and Dy;DMA=N,N-dimethylamide)を有する一連の多孔質金属錯体高分子を構築した。これらの錯体は、パーマネント多孔性を示す。窒素吸着による表面積測定の結果、Tb-BTB化合物は77KにおいてI型吸着等温線を示し、Brunauer-Emmett-Teller(BET)表面積は732.25m^2/gである。本化合物の水素吸着量測定の結果、77K,1atmでは、180cm^3/g(1.58wt%)の水素吸着能を示す。
タイト結合の機能細胞病理学-すきまの細胞生物学から治療への応用をめざして

タイト結合は、上皮および内皮細胞間をシールする細胞間接着装置で、物質の細胞間通過や細胞極性を制御している。そのため多くの疾患に関与している。本研究では、糖尿病網膜症における血液網膜関門のタイト結合機能変化、ビタミンDによるタイト結合調節、鼻粘膜におけるタイト結合、種々のサイトカインによるヒト鼻粘膜上皮や樹状細胞におけるタイト結合蛋白発現調節、サイトカインによる肝細胞のタイト結合蛋白発現調節を明らかにした。1.血管内皮バリアについて糖尿病網膜症は、糖尿病の重要な合併症の一つで放置すると失明に至る。糖尿病網膜症では、血液網膜関門の透過性亢進が初期から起こる。本研究では、血液網膜関門の透過性亢進がグリア細胞から分泌されるGDNFによって抑制されること、GDNFがRAR-alphaリガンドにより分泌が亢進することが明らかにした。このことは、糖尿病網膜症を早期に治療するあるいは進展を予防できること、網膜グリアが治療標的となりうることを示している。2.上皮細胞バリアについて(1)小腸粘膜上皮細胞におけるタイト結合を介したCa吸収機構Caは、約80%が小腸上皮細胞のパラセルラー経路を通過して吸収されるが、その分子機構については不明であった。我々は、ビタミンD受容体欠損マウスの小腸のタイト結合蛋白発現の解析と、ビタミンD依存性にCaを吸収することが明らかになっているCaco-2細胞を用いて、タイト結合蛋白claudin-2と-12が、Caのパラセルラー経路による吸収に重要な役割を演じていることを明らかにした。このことは、Ca吸収不良や骨粗しょう症の治療に貢献する可能性がある。(2)ヒト鼻粘膜上皮細胞におけるタイト結合の制御機構本研究では、まずhTERTを感染させることにより鼻粘膜上皮細胞を安定的に培養する技術を確立した。この細胞を用いて、タイト結合蛋白の発現、種々のサイトカインに対するタイト結合の反応や各種Toll-likeレセプター(TLR)のリガンドに対するタイト結合機能の変化を検討し、PKCによってタイト結合機能が亢進すること、TLR-2刺激でTSLPの発現が亢進することが明らかになった。またTSLPがアレルギー性鼻炎で発現が上昇していることを明らかにした。TSLPは樹状細胞の活性化に深く関与しており、これらの結果は、アレルギー性鼻炎の治療に応用できる可能性がある。本年度は、1.肝細胞におけるタイト結合蛋白claudin-2の役割、2.鼻粘膜におけるタイト結合について検討した。1.肝細胞の毛細胆管周囲にはclaudin-1,-2,-3の発現が認められている。Claudin-1,-3は肝小葉内全体に発現しており、claudin-2は中心静脈周囲に局在が認められる。WIF-B9肝細胞株に、フェノバルビタール処置を行うと、claudin-2とoccludinの発現増加を認めた。そこでclaudin-2の毛細胆管形成における役割を検討するため、siRNAによりclaudin-2をノックダウンしたところ、毛細胆管形成が抑制され、シグナル伝達分子LKB1、MAPK、Akt、p38MAPKのリン酸化の亢進が認められた。このことはclaudin-2が関与するシグナル伝達が細胞極性を調節していることを示唆している。2.サイトカインの鼻粘膜上皮細胞および樹状細胞のタイト結合蛋白への影響を検索した。特に樹状細胞の機能調節に関与するIL-7様サイトカインのThymicstromal lymphopoietin (TSLP)を中心に検討を行った。アレルギー性鼻炎の鼻粘膜では、正常鼻粘膜と比較して,TSLPの発現がmRNAおよび蛋白レベルで亢進していた。次に鼻粘膜上皮をTSLP高発現群と低発現群に分け、上皮内のLCA,CDllc陽性細胞数の計測を行った。TSLP高発現群では低発現群と比較して上皮内にLCAおよびCDllc陽性細胞が多数認められた。また培養鼻粘膜上皮細胞は、IL-1β/TNF-αおよびTLR2リガンドのP_3CSK_4処置により有意にTSLPの産生が誘導された。TSLP処理した培養鼻粘膜上皮細胞では、claudin-1,-4,-7,occludinの発現の増加、TERの増加、^<14>C-inulinの透過性の低下も認められた。さらにマウス樹状細胞株XS-52細胞に対してTSLPを処置したところ、claudin-7の発現が増加した。アレルギー性鼻炎患者の鼻粘膜上皮内において、CDllc陽性樹状細胸もclaudin-7を発現していることが免疫染色で確かめられた。本年度は、1.三細胞間タイト結合分子トリセルリンの発現調節と、2.ヒト正常膵管上皮細胞のタイト結合調節機構を中心に行った。1. 3種類の異なるタイプの上皮細胞(気道上皮細胞株、腸管細胞株、膵管上皮細胞株)を用いて、様々な細胞反応に共通にみられるストレス応答シグナルであるJNKの活性化に焦点を絞り、tricellulinの発現およびそのバリア機能調節機構を解析した。

Anisomycin処置においては、4時間でバリア機能の亢進とともに、tricellulinの発現増加がみられ、tricellulinの変化は、JNKおよびPKCのinhibitorで、バリア機能の亢進は、tricellulinのsiRNAの前処置により抑制された。上皮細胞の三細胞のタイト結合は、主にストレス応答シグナルであるJNKによって、tricellulin蛋白を介して制御されていることを示している。2.これまでに17症例の膵組織から培養系の確立に成功した。確立されたhTERT-PDE cellは無血清培地で増殖し、不死化はしておらず最大で4継代可能であった。免疫染色にて細胞質にCK7、CK19の明瞭な発現認め、CK-7、CK-19、CA-IIのmRNA発現を認めた。血清処置によりCL-4の細胞間境界への明瞭な局在を認めた。CL-4 mRNAはコントロールに比べ血清処置により107.1倍と著明に増加した。シグナル伝達経路同定のため種々の阻害剤を用いて検討した結果、pan PKC阻害剤が血清処置によるCL-4発現増加を部分的に抑制した。PKCシグナル伝達経路の重要性をさらに検討するため、PKC activatorであるTPAを処置したところ、CL-4は1nMから発現増加を認め、その発現増加はpan PKC阻害剤で完全に抑制された。
王溥『唐会要』復元のための基礎的研究

王溥『唐会要』を復元するための基礎的な作業として、当初から以下の3点を中心に研究を進める予定であった。(1)『唐会要』の通行本と諸抄本・四庫全書本との異同を全て明らかにする。(2)『唐会要』を引用する各種文献のうち、最も多く所引記事を持つ『玉海』と、それに次ぐ『事物紀原』について、これらのテキスト調査を行ったうえで、所引記事を整理して利用しやすいように一覧化する。(3)国内外の目録類に載せられた『唐会要』諸抄本の情報を収集し、抄本の伝存過程を追求し、現存する諸テキストの位置づけを明らかにするとともに、未知見のテキストの発掘に力を注ぐ。このうち、(3)については現存する諸テキストの伝存過程と位置づけがほぼ確定したので、「唐会要の流伝に関する一考察」(『東洋史研究』57巻1号、1998)と題して発表した。そこでは、南宋高宗期抄本が諸抄本のもとであることや宋刻本が節略本と推定されることなどが明らかにされている。(1)(2)は成果の公表までは至れなかったが、(1)のテキスト間の異同問題については、作業を終了したところから順次発表する予定である。(2)も『玉海』所引記事の一覧表の公表準備は終わり、来年度中には順次発表する予定で、『事物紀原』もカード化作業は終わり、一覧化に移っている。研究成果報告書には、(3)の成果の中間報告として、「『事物紀原』所引『唐会要』記事のカード化について」を掲載し、カード取りの方法論と全カード91枚を公表している。王溥『唐会要』は唐代史研究における最も基本的な史料の一つであるが、現存するテキストは成立当時の姿をそのまま伝えているわけではなく、伝世の過程で多くの脱誤と数巻の欠失を生じた。本研究は諸抄本の調査や他史料に引用された『唐会要』逸文の調査を通して、脱誤と欠失を可能な限り補い、本来の姿を復元することを目指すものである。今年度は、『唐会要』逸文が多く存在する『玉海』『事物紀原』『資治通鑑胡註』『資治通鑑紀事本末』『太平広記』『太平御覧』などを調査し、所引記事をカード化した。またカード化に当っては、現存する『唐会要』の諸テキストとの異同を調査し、その詳細をカードに付記した。この作業は『玉海』については既に完了しているが、その他についてはまだ7割程度しか完成していない。また『唐会要』のテキストクリティックのために、諸テキストを一覧にしたカードの作成作業は、予定よりやや作業が遅れており、まだ一部の巻をカード化し終えた段階である。これらの作業を行なう中で、この作業の成果として、『唐会要』の流伝過程が少しわかってきた。現在その成果は「『唐会要』の流伝に関する一考察」という題目で発表予定である。この論稿では、北宋代から『唐会要』には抄本と刻本の二系統のテキストがあったこと、抄本は明初まではほぼ完本で伝わったこと、伝わった抄本は南宋高宋期の抄本であること、通行本のもととなった殿版『唐会要』は、欠失と節略のある刻本(北宋期のものかどうかは不明)を底本に、四余録本と他史料を利用して校訂したため、抄本系とも大幅に異なる独特のテキストになってしまったこと、などを明らかにしている。王博『唐会要』は唐代史研究における最も基本的な史科の一つであるが、現存するテキストは成立当時の姿をそのまま伝えているわけではなく、伝世の過程で多くの誤脱と数巻の欠失を生じた。

本研究は諸抄本の調査や他史料に引用された『唐会要』の逸文の調査を通して、脱誤と欠失を可能な限り補い、本来の姿を復元することを目指すものである。今年度は、調査によって明らかになってきた『唐会要』の流伝過程を、「『唐会要』の流伝に関する一考察」と題して公表した。そこで明らかにしたことは、以下のとおりである。1.『唐会要』は北宋期から少くとも2系統の異本が存在し、一つは抄本として伝えられていく完本、もう一つは1046年以前に蘇州で刊行された刻本である。北宋・南宋を通じて前者の方が後者より広く流布した。2.『唐会要』の抄本は、明初まではほぼ完本として存在したが、明代の間に大きく欠損した。その中で、南宋高宗期の抄本の系統を引くテキストが、卷710、卷49後半、卷92第2項卷94などを欠損してから、広く伝写され、多くの明抄正本・清初抄本の基になった。3.宋刻本のその後は不明確だが、これと殿版の底本と位置づけられている刻本が、もし同一だとすれば、この刻本は記事を抄録した節本で、南宋から明の間に大幅な欠損が生じ、清初には少なくとも卷710、卷94が欠失していた。4.殿版は欠損のある節本を底本と位置づけ、四庫本や他書で校訂・増補を行なったが、諸書所引の『唐会要』の記事を利用しなかったこと、2系統のテキストを混在させたことなどから、殿版は2系統のいずれとも異なるテキストになった。5.『玉海』所引の『唐会要』の記事は1060、『事物紀原』の所引の記事は92、『賢治通貨考異』所引の記事は20、『太平御覧』所引の記事は32、『太平広記』所引の記事は31、存在し、うち逸文の可能性があるものは、それぞれ119、5、5、2、2、である。王薄『唐会要』は唐代史研究における最も基本的な史料の一つであるが、現存するテキストは成立当時の姿をそのまま伝えているわけではなく、伝世の過程で多くの誤脱と数巻の欠失を生じた。本研究は諸抄本の調査や他史料に引用された『唐会要』逸文の調査を通して、誤脱と欠失を可能な限り補い、本来の姿を復元することを目指すものである。今年度は、3年間の研究の最後の年として、当初計画した三つの研究予定のうち、第3の伝存過程と現存テキストの位置づけは前年度までにその大半を明らかにし終えたので、第1の『唐会要』の通行本と諸抄本・四庫全書本との異同を全て明らかにすることと、第2の『玉海』『事物紀原』に引用された『唐会要』記事の一覧表を作成することを終了する予定だった。しかし両者ともあまりに大部なため、依然作業途中で、1年間では完成しきらなかった。それでも、第1のテキスト間の異同の問題については、終了した部分から順次発表する予定で、すでに研究成果の一部を「『唐会要』の靺鞨・渤海関係記事について」(仮題)という論文にまとめ、『朝鮮文化研究』第8号(2001年3月発行予定)に発表することが決まっている。第2の『玉海』所引の『唐会要』記事の一覧についても、来年度中には公表できる予定である。
長期環境作用を受ける無機複合材料の物質平衡と微細構造変性に関する統合解析法の開発

本年度得られた成果は以下に列挙される.1.前年度で得られた研究成果をさらに発展させ,任意の温度環境下における塩化物イオン平衡一般則の提案を行った.20°C室温下では,微細空隙水中に存在する自由塩化物と,細孔壁面に吸着あるいは化学的に取り込まれる固定塩化物の両者には線形関係が認められることが昨年度の研究成果より明らかになったが,ここではさらに温度範囲を40°C,60°Cと広げた際の平衡特性を実験により解明した.結果として,温度が上昇するにつれセメント硬化体の固定化能力は顕著に低下すること,また室温下において認められた自由-固定塩化物両者の線形関係が,高温環境下では崩れることが明らかになった.2.研究代表者が過去に提案している,炭酸作用下におけるpH予測手法の改良を行った.本手法は,物質移動・平衡・反応を含む複雑なプロセスであるため,従来の解析手法では秒単位の時間差分を必要とした.ここでは,日週程度の差分であっても十分な精度を有する非線形求解法の開発に成功した.数十年百年のオーダーが対象となるRC構造物の耐久性照査においては,本開発技術が重要な要素となる.新しいアルゴリズムにより,PCを用いた短時間での計算が可能になったため,ビジュアルインターフェースを有する寿命予測ソフトの開発も行った.3.空隙内のpH値と塩分平衡の相互依存性のモデル化を行った.二酸化炭素の作用により系内のアルカリ性が失われるにつれ,固定化塩分が解放されるとするモデルである.提案手法を用いることで,塩分と二酸化炭素が同時に作用することにより生じる複合劣化が解析可能であることを示した.4.温度が変化する条件下において,微細空隙中に蓄えられる水分平衡モデルの提案を行った.空隙をマイクロスケールの毛細管空隙,ナノスケールのゲル空隙,オングストロームの寸法を有する層間空隙に分類し,各々の温度敏感性を実験により抽出・モデル化したものである.本研究では,セメント系無機複合材料を主たる対象に取り上げ,環境作用を受けた材料品質の変性・劣化現象を予測する数値解析手法の開発を行うものである.初年度における研究成果は以下に列挙される.(1)セメント硬化体中に存在する塩化物イオンを,細孔溶液中に溶存イオンとして存在する自由塩化物,細孔壁面に吸着する吸着塩化物,及びセメント水和物と反応し化学的に結合される固相塩化物に分類し,細孔溶液搾出と滴定試験によって各々の定量関係を実験的に求めることに成功した.ここで,微細に粉砕した試料を種々の塩分濃度溶液に浸すことで,低濃度から飽和近傍を含むあらゆる濃度領域において,(自由塩化物)-(吸着+固相塩化物)間の平衡関係を見出すことに成功した.(2)一般に耐海水性を有することで知られる高炉スラグ微粉末混入系の塩分固定メカニズムを,項目(1)の分類に基づき解明した.高炉スラグ微粉末を混入することで,空隙壁面への吸着塩化物が増大すること,また化学的固定成分は比較的影響が小さいことを明らかにした.さらに,任意の水セメント比,及び高炉スラグ微粉末置換率に対する塩化物平衡モデルの提案を行った.(3)種々の配合条件を有するセメント硬化体の塩化物拡散性状を実験・解析両方の側面から検討を行い,外部からの塩分浸透を予測する数値解析技術の構築を行った.提案するモデルは,セメント硬化体空隙構造の幾何学的性質のみならず,項目(1)ならびに(2)で取り組んだ平衡状態(塩化物イオンの壁面への吸着状態)に依存するものである.来年度においては,他のイオン(カルシウム,硫酸,炭酸等)と塩分イオンを同時に取り扱う,複種イオン連成解析手法の確立を試みる.また,酸との反応プロセスに依存する系内のpHと塩化物イオンの平衡関係をモデル化することで,RC構造の複合劣化を追跡し得る評価手法の開発を行いたい.本年度得られた成果は以下に列挙される.1.前年度で得られた研究成果をさらに発展させ,任意の温度環境下における塩化物イオン平衡一般則の提案を行った.20°C室温下では,微細空隙水中に存在する自由塩化物と,細孔壁面に吸着あるいは化学的に取り込まれる固定塩化物の両者には線形関係が認められることが昨年度の研究成果より明らかになったが,ここではさらに温度範囲を40°C,60°Cと広げた際の平衡特性を実験により解明した.結果として,温度が上昇するにつれセメント硬化体の固定化能力は顕著に低下すること,また室温下において認められた自由-固定塩化物両者の線形関係が,高温環境下では崩れることが明らかになった.2.研究代表者が過去に提案している,炭酸作用下におけるpH予測手法の改良を行った.本手法は,物質移動・平衡・反応を含む複雑なプロセスであるため,従来の解析手法では秒単位の時間差分を必要とした.ここでは,日週程度の差分であっても十分な精度を有する非線形求解法の開発に成功した.数十年百年のオーダーが対象となるRC構造物の耐久性照査においては,本開発技術が重要な要素となる.新しいアルゴリズムにより,PCを用いた短時間での計算が可能になったため,ビジュアルインターフェースを有する寿命予測ソフトの開発も行った.3.空隙内のpH値と塩分平衡の相互依存性のモデル化を行った.二酸化炭素の作用により系内のアルカリ性が失われるにつれ,固定化塩分が解放されるとするモデルである.提案手法を用いることで,塩分と二酸化炭素が同時に作用することにより生じる複合劣化が解析可能であることを示した.

4.温度が変化する条件下において,微細空隙中に蓄えられる水分平衡モデルの提案を行った.空隙をマイクロスケールの毛細管空隙,ナノスケールのゲル空隙,オングストロームの寸法を有する層間空隙に分類し,各々の温度敏感性を実験により抽出・モデル化したものである.
プラズマ製錬における蒸気種同定と溶湯蒸機構に関する分光学的研究

金属製錬の分野において、熱プラズマは高付加クリ-ンエネルギ-として、さまざまな応用が考えられている。しかしながらこれまでの研究は、熱プラズマを単なる熱源とみなし、電離気体のもつ化学的作用やプラズマの物性値とその分布が与えるプラズマ特性などはあまり問題にされてこなかった。本研究ではこれらの因子が広い意味での製錬作用に与える影響を明らかにするために、基礎研究として、金属溶解時のプラズマの分光学的のキャラクタリゼ-ションを試みた。1.分解能0.16□の分光器、1024チャネルマルチ測光器、二重ピンホ-ル型位置決め装置を組み合わせた、分光測定システムを完成した。2.上記システムの採用により、プラズマ発光強度の投影面分布が短時間で計測でき、逆ア-ベル変換を施すことによりプラズマ半径方向の真の発光強度分布を精度よく求めることがはじめて可能となった。3.発光に関するボルツマンの法則、電離気体に関するサハの式などを適用して、FeおよびTi溶解時のArア-クプラズマの温度分布と溶湯蒸気密度の空間分布を決定した。その結果、以下のことが明かとなったa)プラズマ温度はプラズマ柱中心軸より離れるにしたがい低下し最高で6500K程度である。このとき、中心軸から数ミリ離れたところに温度変化の小さい層がある。b)溶湯ボタン表層部には金属蒸気が高い境界層が存在し、ボタン表層部の電荷担体は金属イオンである。このとき、密度の小さいTiの方が蒸気の分布範囲は広い。c)ArにH_2を添加するとプラズマ温度は低下するが、溶湯の蒸発量は増加する。溶湯の蒸発中心は陽極点から7mm程度離れて存在する。d)熱力学的計算から、溶湯の強制蒸発はとけ込みガスの再放出に伴って生ずる。研究計画初年度であり、実験装置とプログラムの製作および装置操作の習熟を主目的とした。すなわち、鉄を移行式直流アルゴンア-クプラズマ炉で溶解し、プラズマ温度や発生蒸気の分布を予備的に調査した。1.プラズマ各部から発する光を、2つのピンボ-ルをもった可動式のガイドを通して石英ファイバ-に導き、ツェルニ-タ-ナ-型分光器で測定する装置を製作した。スペクトルの測定には、マルチチャンネルデテクタ-を用い、分光器と連動して自動測定できるプログラムを開発した。また、スペクトル強度の見掛け測定値にバックグランド補正を行い、最も確からしい値を抽出することに成功した。2.アルゴンスペクトルの強度をボルツマンプロットしてプラズマ温度を求め、プラズマ内の空間分布を測定した。最高温度は約7000°Cで中心軸上から2mm、ボタン直上から5mm離れたところにある。これには鉄の蒸発が関係しているものと思われた。一方、鉄蒸気の温度は約5000Kでアルゴン温度より低い。アルゴンに水素を2%添加するとプラズマ温度は低下し、ことに周辺部の温度低下が著しい。3.ボタン直上の鉄の蒸気圧は、鉄の2200Kの平衡蒸気圧の2倍程度と大きく、何らかの強制蒸発機構が働いている。蒸気圧の最大値はボタン中心から約7mmはずれたところで観測され、この地点が鉄の蒸発中心であると考えられた。水素の添加により鉄の蒸発はより促進され、プラズマの緑端部がボタン表面から剥離し、そこに輝線が現れる。4.以上のことより、金属溶湯近傍では鉄の電子密度がより大きく、プラズマの電荷担体は主として鉄蒸気であると推測される。これは、プラズマ溶解の電力効率向上、プラズマの安定性に関して重要な意味を持っており、価値ある新発見であると考えられる。

研究計画第2年度においては、初年度に引き続き実験装置とコンピュ-タプログラムの習熟をはかり、精確な分光デ-タを計測するとともに、これに逆ア-ベル変換を適用して、プラズマ中発光強度の真値を求めた。さらに、これらの分光計測を移行式直流アルゴンア-クプラズマ炉に適用し、鉄およびチタン溶解時のプラズマ特性、とくに温度や発生蒸気の空間分布を測定し、その相違を比較検討した。1.前年度で報告した装置を用い、短時間内で分光デ-タの計測が可能となり精度良く逆ア-ベル変換を適用できた。これによりプラズマ各部の温度や金属蒸気密度の分布をもとめることが可能となった。2.ボルツマンプロットからもとめたプラズマのAr温度は、Fe溶解で6500K、Ti溶解で5500KTiが低い。温度はプラズマ中心軸上で最も高く、溶湯表面に近づくほど、中心から離れるほど低下する。また、Ar温度にくらべ金属蒸気の温度は5001000K低い。3.ArにH_2を2%添加するとプラズマは収縮して細くなり、Ar温度は低下する。このとき、周辺部の温度低下が著しい。4.溶湯から生じた金属蒸気はボタン表面を覆い金属蒸気プラズマを形成している。このとき、Arプラズマと金属プラズマはボタン近傍で電荷の交換を行い、その際輝線を生ずる。Feより軽いTiの蒸気はArプラズマ中に広く分布し、イオン化電圧が小さいことと相俟ってプラズマ周辺部でも発光する。5.金属蒸気の発生点は陽極点から離れたところにあり、そこを蒸気の吹き出し点としてプラズマ中に分散する。このとき、金属の蒸気圧は溶湯温度における平衡圧より高く、強制蒸発機構が働いている。なお、水素添加により蒸発が促進されることがTi溶解でも認められた。6.溶湯の強制蒸発はとけ込みガスの再放出に伴って生ずる。
顎関節滑膜細胞の破骨細胞誘導機構に着目した新たな変形性顎関節症治療戦略

変形性顎関節症(temporomandibular joint-osteoarthritis: TMJ-OA)は、慢性炎症を伴う軟骨の変性、骨の空洞化や顎関節の線維症などの様々な症状を引き起こすが、その発症機序については不明な点が多い。特にTMJ-OAの軟骨・骨変形症の発症機構については、現在まで不明である。そこで顎関節由来滑膜細胞fibroblast-like synoviocytes (FLSs)による破骨細胞誘導機構を解明することにより、軟骨・骨変形症の発症に必須なターゲット分子を同定し、顎関節における線維症阻害剤と軟骨・骨変形症阻害剤の併用によるTMJ-OAの根治療法の開発を目指す。
老化による血管内皮障害に関連する新規ユビキチン系分子の探索及び臨床応用への可能性

遺伝子機能スクリーニングを用いて血管内皮由来cDNAライブラリーより線維芽細胞にて酸化ストレスを増強させる液性因子であり、かつユビキチンの基質蛋白であるAnnexinA1(ANXA1)を見出した。ANXA1は抗炎症分子であると報告されているが、酸化ストレスにより細胞老化が誘導された環境においては切断を受け、C末端側の断片が炎症を惹起していると想定している。現在、このANXA1のC末端断片により酸化ストレスが惹起され、血管内皮の細胞老化を誘導し、細胞老化随伴分泌現象に関与する炎症性分子の分泌を増強することにより血管内皮障害を端緒とする各種加齢性疾患へ関与しているかについて検討中である。ユビキチンシステムに関連する分子機能の異常は酸化ストレスや小胞体ストレスによる細胞老化を促進し、様々な加齢性疾患への関与が想定される。本研究では、老化に伴う心血管疾患の進展において中心的な役割を担う血管内皮障害を鋭敏に反映するバイオマーカーやその病態に関連する創薬標的分子について血管内皮におけるユビキチン系関連分子に焦点を絞り探索、機能解析し、最終的には確かな情報を有する疫学研究を用いて臨床応用の可能性を検証することを目的とする。解析対象とするユビキチン関連分子の選定に際し、HVJ-Eベクターを用いた遺伝子機能スクリーニング法を用いた。先ず、老化に関連する遺伝子を得るためにHUVEC(ヒト臍帯静脈内皮細胞)の継代を繰り返し、senescenceを認めた段階でRNAを抽出した。そして、抽出したRNAをcDNA化し、発現ベクターに挿入されたcDNAライブラリーを作成した。実際の遺伝子機能スクリーニングでは、臨床サンプルを用いた将来的な臨床研究を念頭において、解析対象分子を液性因子またはその発現を調節する分子とするために共培養の系を用いることとした。具体的には24wellプレート4枚を用いて、作成したライブラリーをHVJ-Eベクターを用いて遺伝子導入したBHK-21細胞をupper chamberに、HUVECをlower chamberに共培養しH2O2で刺激し、24時間後にHUVECのβgal活性を測定した。その中で、最も高い活性を示したもの(細胞老化が促進)、最も低い活性を示したもの(細胞老化が抑制)に対応するwellのBHK-21細胞よりDNAを抽出し、大腸菌に形質転換することで、プラスミドを単離し、現在、挿入された遺伝子配列を解析中である。解析対象とする候補遺伝子は、ユビキチン系分子で液性因子であるものを選択する予定である。本研究では、加齢性疾患の予後を規定する血管内皮障害を鋭敏に反映するバイオマーカーや創薬標的分子を血管内皮におけるユビキチン系関連分子に焦点を絞り探索、機能解析し、更には確かな情報を有する疫学研究を用いて臨床応用の可能性を検証することを目的とする。前年度のスクリーニングで用いたHUVECのcDNAライブラリーは質が不良であったため、前述の目的に沿う候補遺伝子を得ることが出来ず、市販されているHUVECのcDNAライブラリーを用いて再度、遺伝子機能スクリーニングを行うこととした。同時に、前回のスクリーニングで用いた半定量的β-gal活性の測定キットは血管内皮細胞における過酸化水素による細胞老化(SIPS)に対する感度が低いため、より細胞老化またはそれに関連する現象をより鋭敏に繁栄する測定系を検討することとした。その結果、酸化ストレスマーカー8-Isoprostaneが感度良く過酸化水素による刺激に反応することを確認し、老化酸化ストレス説に基づきこの測定系により新規老化関連分子をスクリーニングすることとした。SIRT1活性の測定キットによる老化関連候補遺伝子のスクリーニングも検討したが、細胞溶解液を用いての簡便な測定は不可能であった。実際には、HUVECのcDNAライブラリーをHVJ-Eベクターを用いてBHK細胞に遺伝子導入し、そのconditioned mediumを過酸化水素で刺激したヒト線維芽細胞に添加し、8-isoprostaneを測定した。同時に遺伝子導入を行ったBHK細胞にも過酸化水素を添加し、8-isoprostaneを測定した。つまり、前者にて老化に関連する液性因子、後者で内在性因子を機能スクリーニングすることを考えた。現在、当初の目的に沿う液性因子を検索するために本実験により酸化ストレスを抑制したconditioned mediumを得たBHK細胞より遺伝子導入したプラスミドを回収し、挿入されている遺伝子のシークエンスを行い、2次スクリーニングを行う準備をしている。用いたcDNAライブラリーの質が不良であったため、候補遺伝子が得られなかったため。また、スクリーニングで用いる細胞老化に関連するより感度の良い測定系の再検討を行っていたため。本研究では老化に伴う心血管疾患の進展において中心的な役割を担う血管内皮障害を鋭敏に反映するバイオマーカーやその病態に関連する創薬標的分子について血管内皮から分泌されるユビキチン系液性因子に焦点を絞り探索、機能解析し、更には臨床検体も用いて臨床応用の可能性を検証することを目的とする。解析対象とする液性因子の探索に際してはHVJ-Eベクターを用いた遺伝子機能スクリーニング法を用いた。HUVECのcDNAライブラリーをHVJ-Eを用いてBHK細胞に遺伝子導入し、その培養上清をH2O2で刺激したヒト皮膚線維芽細胞(NHDF)に添加後、培養上清中の酸化ストレスマーカー(8-isoprostane濃度)を測定した。更に8-isoprostaneを指標とした酸化ストレスが最も促進されたwellから抽出したプラスミドを大腸菌に形質転換、増幅させることによりシングルクローン化した後、個々のプラスミドをCOS7に遺伝子導入し、その培養上清をH2O2で刺激したNHDFに添加し8-isoprostaneを測定した。

次に個々のプラスミドに含まれるcDNAのシークエンスを行い、候補遺伝子をリスト化し、その中から酸化ストレスを増強させる液性因子であり、かつユビキチンの基質蛋白であるANXA1を見出た。ANXA1は抗炎症分子であると報告されているが、我々の検討では酸化ストレスにより細胞老化が誘導された環境においてはCalpain1の活性化よりANXA1がcleavageを受け、炎症作用を有するC末端側の断片が増加したためと想定している。今後、ANXA1のC末端断片が血管内皮の細胞老化を誘導し、細胞老化随伴分泌現象に関与する炎症性分子の分泌を増強することにより血管内皮障害を端緒とする加齢性の心血管疾患、代謝性疾患の病態への関与しているかについて基礎及び臨床的に検討していく予定である。遺伝子機能スクリーニングを用いて血管内皮由来cDNAライブラリーより線維芽細胞にて酸化ストレスを増強させる液性因子であり、かつユビキチンの基質蛋白であるAnnexinA1(ANXA1)を見出した。ANXA1は抗炎症分子であると報告されているが、酸化ストレスにより細胞老化が誘導された環境においては切断を受け、C末端側の断片が炎症を惹起していると想定している。現在、このANXA1のC末端断片により酸化ストレスが惹起され、血管内皮の細胞老化を誘導し、細胞老化随伴分泌現象に関与する炎症性分子の分泌を増強することにより血管内皮障害を端緒とする各種加齢性疾患へ関与しているかについて検討中である。本研究を担当している大学院生が基礎研究の初心者であったため、基本的な技術習得をするのに一定の時間を要したことと今回の遺伝子機能スクリーニングの予備実験、HUVECのcDNAライブラリーの作成に予想以上の時間を要したことが理由である。これまで用いていたcDNAライブラリーの質が不良であったため、cDNA全長が存在する発現ベクターを多く含む信頼性の高いcDNAライブラリーを用いることで確実になるべく多くの候補遺伝子を得るようにする。また、遺伝子機能スクリーニング後に解析対象とする遺伝子の幅を広げるために、前述の如く液性分子のみならず内在性分子についても2次スクリーニングに進めることが出来るように1次スクリーニングの方法を変更した。しかし、当初の予定通り、老化に関連するユビキチン系関連液性分子を優先的に解析対象とし、発現調節機構、機能解析、遺伝子改変マウスの作成、更には臨床サンプルを用いた老化関連疾患との関連の検討を進めていく予定である。老年医学前記、研究実績に記した老化促進または抑制機能をもつ可能性のある遺伝子について、個々にBHK-21細胞に遺伝子導入し、H2O2刺激下にHUVECと共培養することで2次スクリーニングを施行し、老化促進または老化抑制因子を選出する。解析候補遺伝子が多数ある場合には文献探索ソフトKeyMolnetを用いて血管でのユビキチンシステムを軸としたネットワーク解析を行い、本研究にて解析対象とするユビキチン系関連分子を機能性標的分子と推測される分泌蛋白を含む様に23個に絞り込み、決定する。
アジア諸国に対する日本の教育の影響に関する実証的比較研究-教育協力・援助の影響を中心として-

1.研究に関する打ち合わせ会1997年に8月28日と7月19日の2回打ち合わせ会を開き、研究の基本方針を検討した。同年8月24・25日にアンケート調査の検討会を持った。1998年6月20日に研究発表と海外レビューについて、1999年11月7日に研究成果のまとめ方を検討した。2.アンケート調査の実施、研究発表、レビュー調査1997年11月にアンケート用紙を作成し、12月から翌年2月までにアジア7ヶ国(韓国、中国、フィリピン、タイ、マレーシア、シンガポール、インドネシア)の帰国留生・研修生を対象に調査を実施した。回収した回答は約千通であった。1998年7月5日に日本比較教育学会第23回大会においてアンケート調査の結果を発表した。1998年の8月から12月にかけて韓国、中国、タイ、インドネシア、1999年8月にフィリピンのレビュー調査を行った。3.アンケート調査の主な結果日本における小集団活動、自主的学習、研究室制度、および集団活動に見られる朝礼、時間厳守などの評価が高かった。これらの特色は、「枠内小集団自主活動」と呼べよう。また、活字文化の基礎をなす読書・記録の習慣も評価されていた。その他、中央と地方の差がない施設設備、高い教員給与・社会的地位、地用分権制度、制服などの指摘も多かった。年功序列、男女差別には、韓国を除き批判が強く評価は低かった。4.研究成果報告書アンケート調査およびレビュー調査の結果は1998年度の中間報告書にまとめた。さらに以上の調査結果を踏まえて、日本の教育のアジア諸国に対する影響を総括し、日本教育は、今後、国際的にいかなる事柄を発信し、いかなる国際協力・援助活動をしていかなければならないのかについて検討し合い、その成果を最終報告書にまとめた。1.研究内容・方法に関する打ち合わせ会国立教育研究所にて第1回の会合を1997年6月28日(土)に、第2回の会合を7月19日(土)に開き、代表者・分担者あわせて、それぞれ9名、11名が参加した。その時に、研究の基本的な考え方、目標、範囲、方法、必要な設備、経費の使用方法などについて検討した。2.アンケート調査の検討会8月24日(日)・25日(月)の2日間にわたり、ホテル・サンレイク土浦(茨城県土浦市)で会合を持ち、アンケート調査の検討を行った。7ヶ国(韓国、中国、フィリピン、タイ、マレーシア、シンガポール、インドネシア)の帰国留学生および帰国研修生を対象にアンケート調査を行うこととし、その内容方法を検討した。参加者は、14名であった。アンケートの内容は、主に、日本で教育・研修を受けて帰国後、日本で学んだことの中で応用実践していること、または応用実践したいと考えていることを自由記述式で書いてもらうことにした。3.アンケート調査用紙の作成と発送アンケート用紙の原案(日本語版)は10月中旬までに作成した。それを11月中旬までに5言語(英語、韓国語、中国語、タイ語、インドネシア語)に翻訳し、11月下旬に印刷・作成した。その作業と同時に、10月-11月に各国の帰国留学生・帰国研修生名簿を収集し、また各国の返信用切手を購入した。帰国留学生名簿は、筑波大学、京都大学、広島大学、九州大学および慶応大学から収集した。帰国研修生名簿は、JICAの一般研修生と21世紀青年交流計画による招聘青年、およびAOTSの一般研修生を対象とした。収集した名簿に従い、12月中旬にそのアンケート用紙を7ヶ国に郵便で発送した。

発送数は、韓国900通、中国750通、フィリピン900通、タイ800通、マレーシア900通、シンガポール500通、インドネシア700通の計5,450通であった。発送・回収方法にあたっては、こちらから直接発送・回収した(4,200通)ほか、JICA、AOTSの各国支部の協力を得て、配布・回収を行った。4.アンケート用紙の回収アンケート用紙の回答は1月下旬から届き始め、2月末現在で941通を回収した。国別では、韓国102、中国157、フィリピン189、タイ190、マレーシア126、シンガポール55、インドネシア122であった。これらの回答を急ぎ分析し、1998年7月に行われる日本比較教育学会第34回大会において、その結果を発表する予定である。1.研究内容・方法に関する打ち合わせ会国立教育研究所第1会議室にて、1998年度第1回目の会合を、1998年6月20日(土)に行った。この会合においては、(1)日本比較教育学会第34回大会における課題研究発表の分担内容について、(2)今年度の海外でのレビュー調査の計画について、それぞれ検討を行った。2.日本比較教育学会第34回大会での発表1998年7月4(土)・5(日)に、広池学園・麗澤大学(千葉県柏市)にて開催された日本比較教育学会第34回大会において、課題研究I「アジア諸国に対する日本の教育の影響」と題する共同発表を行った。この発表では、昨年度に実施したアンケート調査の結果を基に、その成果を整理して報告した。司会を村田翼夫・西野節男が務め、「アンケート調査の概要」(池田充裕)、「帰国留学生からみた東南アジア諸国への影響」(渋谷英章)、「帰国留学生からみた東アジア諸国への影響」(稲葉継雄)「帰国研修生からみた影響」(山田達雄)という分担で発表を行った。3.海外でのレビュー調査昨年度のアンケート調査の結果を踏まえて、今年度は海外でのレビューを実施した。調査者は、稲葉継雄(韓国担当)、大塚豊(中国担当)、平田利文(タイ担当)、西野節男(インドネシア担当)の4名であった。当初予定されていた渋谷英章(フィリピン担当)、山田達雄(マレーシア担当)は今年度の渡航はかなわなかった。4.中間報告書の執筆・作成昨年度のアンケート調査の結果、また、今年度の海外レビュー調査の内容を中心に、中間報告書の作成を進めている。報告書は1998年3月中に刊行する予定である。1.研究に関する打ち合わせ会:1999年11月7日(日)に、東京学芸大学人文研究棟本館4階教育学演習室において研究打ち合わせ会を行った。この会合では、(1)国別研究成果の報告、(2)今後の作業内容と分担(アンケート調査結果の分析および訪問調査結果のまとめ等)、(3)研究のまとめ方(地域別・国別、教育協力・援助との関係)、(4)最終報告書の作成について検討を行った。参加者は9名であった。2.海外にてのレビュー調査:今年度、昨年度に引き続き2名が海外でのレビューを実施した。渋谷英章氏は、1999年8月26日-9月5日間フィリピン、村田翼夫氏は、1999年11月23日-12月5日間タイで調査を行った。3.資料整理:アンケート調査の結果内容を集計・整理して、Microsoft Accessにて編集・加工の作業を行った。
隙間水が関与した摩擦現象と隙間水の流体現象の研究

自然界の現象の理解や人工的なナノ機械の構築において、構成する物質間の摩擦現象の解明は重要な研究テーマの一つであると考えられる。この摩擦現象は、物質間の隙間に水などの液体が存在することによって顕著に影響を受けると推測される。特に隙間の大きさがナノメートルスケールになると、バルクとは異なる新規摩擦現象の発現が期待できる。本研究では、2次元空間および1次元空間に液体がある場合の摩擦現象、および隙間の液体について摩擦が関与した流体現象を研究する。
超音波を利用した非侵襲的な脳内への薬物デリバリー技術の構築

近年、アルツハイマー病をはじめとする脳で機能を発揮する薬物・遺伝子治療が開発されつつある。しかし、血液-脳関門の存在により脳内への薬物や遺伝子のデリバリーは、厳密に制限されており、脳で機能を発揮する薬物や遺伝子の脳内への低侵襲的な導入方法の開発が望まれている。本研究では、微小気泡と超音波の併用による脳にダメージのない遺伝子導入法を開発した。今後、本技術が脳への薬物・遺伝子導入に関する突破口になるものと期待される。本研究の目的は、バブルリポソームと超音波照射の併用による脳内への薬物・遺伝子デリバリー法を確立することである。そのなかで、昨年度までに、バブルリポソームと超音波照射の併用での脳組織に対する傷害性評価と傷害性の低い超音波照射条件の最適化を行った。その検討において、超音波照射強度1.2 W/cm2、超音波照射時間1分が脳傷害を誘導しない上限の超音波照射条件であることが明らかとなった。そこで、本年度はこの超音波照射条件での脳内への遺伝子デリバリーおよび脳内での遺伝子発現部位についてβ-ガラクトシダーゼ発現プラスミドDNAを用い検討した。その結果、脳全体で発現が確認できた。特に海馬や視床において強い発現が認められた。このバブルリポソームの製剤化を考えた場合、長期保存に耐えうる製剤化が必要となる。一般にマイクロバブルは凍結乾燥製剤となっているため、バブルリポソームに関しても凍結乾燥製剤として保存安定性を確保することが可能になると思われる。そこで本年度は、バブルリポソームの凍結乾燥製剤化の可能性について検討した。リポソームの凍結乾燥に利用されているショ糖溶液にバブルリポソームを懸濁して凍結乾燥したところ、きれいな凍結乾燥ケーキが作成できた。また、これを復水したところ凍結乾燥前とほぼ同等の粒子径およびガス保持量のバブルリポソームになることが明らかとなった。このことから、バブルリポソームの凍結乾燥製剤化が可能であることが示唆された。本研究の目的は、ナノバブル(バブルリポソーム)と超音波を併用した脳内への低侵襲的かつ脳特異的な遺伝子・薬物デリバリー法を開発することである。平成23年度には、バブルリポソームとプラスミドDNAを全身投与後に脳に対して経頭蓋的に超音波照射することで、脳選択的な導入遺伝子の発現が認められることを見出した。平成24年度には、本遺伝子導入法の脳組織傷害性や遺伝子発現部位について評価した。この検討において、超音波照射強度が1.2 W/cm2、超音波照射時間1分以内であれば、脳に対して傷害がないことを明らかとした。さらに、脳への遺伝子導入に対して最適化された超音波照射条件を用い、脳内の遺伝子導入部位についてβガラクトシダーゼ発現プラスミドDNAを用いて評価した。その結果、脳全体での発現が確認できた。特に海馬や視床において高い発現が認められた。そこで、平成25年度の検討において、バブルリポソームと超音波照射に併用による脳への遺伝子導入において、どのような細胞種に遺伝子が導入されているのかを検討した。蛍光たん白質であるビーナスを発現するプラスミドDNAをバブルリポソームと超音波照射の併用により脳内に遺伝子導入し、その後脳を回収し、海馬や視床でのビーナスの発現部位を各種細胞に対するマーカーを用い免疫染色法により評価した。その結果、ニューロン、アストロサイト、オリゴデンドロサイト、血管内皮細胞でビーナスの発現が認められた。このように血管内皮細胞の外側にある脳実質細胞に対しても遺伝子導入が可能であった。このことから、バブルリポソームと超音波照射の併用は、血液ー脳関門を一時的に開放できることが示された。このことから、本方法は血液ー脳関門透過性を一時的に向上させうる新たな脳内への遺伝子・薬物導入ツールとして適用可能になるものと期待される。本研究では、そのコンセプト証明をすることができたと考えている。そのなかで、本年度はバブルリポソームと超音波照射の併用での脳組織に対する傷害性評価と傷害性の低い超音波照射条件の検討を行った。まずはじめに、脳組織への傷害性を評価するため、マウス尾静脈よりバブルリポソームを投与し、その後経頭蓋的に超音波を脳に向けて照射した。超音波による組織傷害性は超音波照射強度および時間に依存することが知られているため、それらのパラメーターをふって検討を行った。その結果、超音波照射強度1.2W/cm2、超音波照射時間1分が脳傷害を誘導しない上限の超音波照射条件であることが明らかとなった。そこで、この超音波照射条件での脳内への遺伝子デリバリーについて検討した。マウス尾静脈からルシフェラーゼ発現プラスミドDNAとバブルリポソームを全身投与し、その後脳に向けて経頭蓋的に超音波照射した。

1日後、脳を回収しルシフェラーゼ活性の測定を行った。その結果、脳において高いルシフェラーゼ発現が観察された。なお、このとき超音波照射していない他の組織のルシフェラーゼ活性も測定したが、肝臓、腎臓、心臓、脾臓、肺などの超音波照射していない組織のルシフェラーゼ活性は低レベルであった。このことから、本方法が脳傷害を誘導せずに低侵襲的に脳内に遺伝子を導入可能な非常にユニークな方法であることが示された。本年度の計画は、昨年度設定された超音波照射条件での脳内への遺伝子導入における遺伝子導入部位の特定およびバブルリポソームの安定保存を可能とする製剤の開発であった。今回の検討で、脳内の遺伝子導入部位の特定および凍結乾燥製剤化が可能となったため、当初の目標をほぼ達成できたものと考えている。本年度の計画では、脳傷害性が低く遺伝子導入可能な超音波照射条件の検討であり、目的をほぼ達成できたものと考えている。本年度の検討では、βガラクトシダーゼ発現プラスミドDNAを利用して脳内に超音波を用いて遺伝子導入を行った。この時、脳全体での発現が認められ、特に海馬や視床での発現が高かった。今回の遺伝子導入では、一般的に考えると脳の血管内皮細胞に主に遺伝子が導入されると考えられる。そこで、今後は海馬や視床のどの細胞に遺伝子が導入されているのかを免疫染色などを併用して遺伝子発現細胞の同定を行う。また、バブルリポソームの凍結乾燥製剤化が可能となったので、実際に保存安定性などの評価を行う。これらのデータを集積し、最終的に脳内への超音波デリバリーに最適なバブルリポソーム製剤に仕上げていく。これまでに得られた超音波照射条件などの結果を基にして、バブルリポソームと超音波照射の併用による脳内への遺伝子導入特性や血液ー脳関門の透過性亢進の可能性などを評価する。特に遺伝子導入特性では、どのような細胞種に細胞が導入されているのかを検討する。また、透過性亢進に関する研究では、分子量依存性などの評価を通じて薬物の脳内デリバリーへの応用の可能性を模索する。さらに、利用しているバブルリポソームの安定性評価や製剤化に向けた検討を行っていく次年度は細胞内への遺伝子導入効率を評価するためにサーマルサイクラーを購入し、遺伝子導入量の定量を行う。このサーマルサイクラーを購入するため、本年度の研究費を一部繰り越した。さらに、次年度は脳内の細胞を免疫染色し細胞の特定をおこなうため、実験動物の購入や免疫染色用の抗体を購入する予定である。凍結乾燥製剤に関する検討では、凍結乾燥に必要なバイアルなどの消耗品を購入する。また、当該研究分野の最新情報の収集および意見交換のため、関連学会で研究成果を公表するために旅費を計上する。本年度、バブルリポソームの凍結乾燥製剤化のための基礎検討を行うため、バイアル凍結乾燥機を購入する予定であった。しかし、大学移転のために実験を一時的に止めざるを得なくなった。また、移転前に本機を導入しても移転費用化必要となってしまうため、次年度に購入することとし、その残金を次年度に繰り越すこととした。次年度はバイアル凍結乾燥機を購入し、バブルリポソームの凍結乾燥化に関する研究を進める。また、そのための試薬など消耗品を購入する。また、当該研究分野の最新情報の収集および意見交換のため、関連学会で研究成果を公表する予定である。
〈大乗涅槃経〉系三昧経典の研究-方等泥〓経を中心として-

如来蔵・仏性思想を説き、大乗仏教思想形成の大きな核ともなった<大乗涅槃経>(以下涅槃経とも)は、すくなくとも十種類の経典の影響下に編纂されている。そうした経典のなかでこれまでほとんど研究がなされてこなかったものに「三昧」という主題と関係する経典群がある。本研究ではそれらの経典のうち涅槃経と経典の主題とプロットの展開がかなりの程度かさなる『方等泥〓経』(二巻、西晋・竺法護訳)、その異訳である『四童子三昧経』(三巻、隋・闍那堀多訳)、および対応する西蔵訳(^*Aryacaturdarakasamadhisutra)を考察対象としてとりあげ、<大乗涅槃経>との比較研究のための基礎作業を行った。この二年にわたる研究期間において果たした作業の主要な成果は、(1)上述三者をもちいた批判校訂テクスト作成、および(2)経典形成過程の概観である。このうち(1)校訂テクストはチベット訳北京版No,804,Du 152a7-192a3(デルゲ版No.136,Na 144b2-179a4)トクパレス版、ナルタン版をもちいて行ったので、東西両系統のカンジュールを網羅したほぼ完全なものとなり、研究成果として公開した。漢訳については大正新脩大蔵経を用いて、脚注に異読を注記するかたちをとった。蔵漢の比較テクストは、分量が膨大であることもあり、漢訳との比較対照テクストは冒頭から三分の一程度の完成をした。今後も作業を継続する。(2)についてはその成果を「聖なる書物のかなたへ」(『言語と身体--聖なるものの場と媒体--』(岩波講座・宗教五巻)として公表した。それによって個人的な体験が公共化されて口頭伝承体制が整い、やがて書写の出現によって仏教の聖典形成がおおきく変容される過程を、涅槃経の形成過程を基本にすえてあかすことができた。今年度の成果は、本研究テーマを従来の仏教研究史上に正確に位置づけるために行われたマクロな視野からの考察と・本テーマを遂行するための個別研究に分けられる。後者はさらに、基礎資料作成、ならびに三昧と仏教、如来蔵思想と仏塔信仰の解明の三点となる。前者から述べる。本研究は中期大乗経典の代表である涅槃経の解明を進めるために、深い関連が指摘されながらもまったく解明の進まなかった方等泥?経を文献学的に解きあかすことを目的としているが、本研究代表者は、そもそも大乗仏教の研究成果の正確な位置づけ作業について、現在までに学界で作りあげられてきた仏教史の理解がさまざまな面で妨げとなることを強く感じてきた。現在のこの状況にあっては、個別文献の解明は、仏教研究方法史の解明と同時に進めていかなけばならない。今年度は、大乗仏教在家仏塔起源説が日本の研究者をめぐる社会的風土のなかで作られていったかを中心に分析し、成果をUCLA(USA), American Academy of Religion大会のそれぞれで公表した。(発表題目Liberating OurselvesfromModernity : Some Reflection on Buddhist Studies in Japan)