hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
典型元素の特性を活かした動く3次元π電子系の開発

ホウ素中心に従来のような嵩高い保護基や窒素原子などの導入を必要としない、安定な含ホウ素π共役平面という新たな骨格を有機合成により構築し、その物性を詳細に検討した。これまで、π電子系の周辺部にホウ素を導入した分子は数多く報告されているが、中央にホウ素を埋め込んだπ電子骨格は、誰もが憧れていた構造でありながら、その合成の困難さ故に報告はこれまで皆無であった。また一方で、物理化学的な手法によって得られる「ホウ素ドープグラフェン」は同様の含ホウ素π共役構造であり、魅力的な材料特性を示すものの、分子量も形状も揃っていないことから、科学的な電子状態の解明には至っていない。いわば本研究は、「ホウ素ドープグラフェン」をボトムアップ合成し、形状のそろった単一化合物として扱うことを可能にした最初の研究である。縮合多環式π電子系は、その構造の強固さから強い蛍光などの特異な光物性を示すだけでなく、平面性の高さに由来する密なパッキング構造から高い電荷移動度などの電子機能を発現することが期待される。特に、ヘテロ元素で修飾されたジフェニルアセチレンの二重環化反応を用いた様々な典型元素を含むラダー型分子の合成は盛んに行われている。今回、このような分子内環化反応を利用して、より二次元的に拡張されたπ共役分子を合成すべく、デヒドロベンゾ[12]アヌレン(DBA)に反応の足がかりとなる典型元素置換基をもたせることを考えた。DBAはエチニル-2-ヨードベンゼンの三量化による簡便な合成法が知られており、本研究では、この方法を用いてC_3対称に置換基修飾されたDBA誘導体の合成と、そこからの多重環化反応による新たな縮合多環式π電子系の開発についそ検討した。メチルチオ基をもつDBA誘導体を合成し、これに対して過剰量の三臭化ホウ素を作用させたところ、アセチレンへの求電子付加に伴い分子内三重環化反応が起こり、外周部にB-S配位結合を有する六環式のヘリセン型化合物が生成した。その構造はX線結晶構造解析により決定し、トリベンゾフルバレン骨格をもつことがわかった。この骨格は、DBAをリチウムで還元することによってもラジカル機構で形成されることが知られているが、今回得られたヘリセン型化合物ではメチルチオ基の立体障害により湾部位が歪んだπ曲面構造をとっていた。また、湾部位の歪み方向には結晶中で右巻きと左巻きがラセミで存在していた。ヘリセン型化合物は溶液で赤紫色を呈し、可視長波長領域にフルバレンの電子構造が寄与した特徴的な吸収帯をもつことがわかった。今後、さらなる分子修飾を行い、フルバレンの電子受容能を活かした機能性π電子系の開発に取り組む予定である。ホウ素を含むπ共役系は、強い電子受容性やルイス酸性などの電子的な特長をもつことから、有機発光材料、二光子吸収材料、電子輸送材料、化学センサーなどに応用されており、有機エレクトロニクスの分野で有望な化合物群である。ただし、水や酸素に不安定であるという欠点があり、この問題を克服すべく、2つの対策が講じられてきた。即ち、立体的に嵩高い置換基をホウ素周辺に導入することによる速度論的安定化と、ホウ素-炭素結合をホウ素-窒素結合などに置き換える熱力学的な安定化の手法である。しかしながら、前者では置換基の立体障害により固体中で分子間相互作用が妨げられ、高い電子移動度の実現が困難であった。また、後者では、ホウ素の空軌道が、窒素や酸素の孤立電子によって部分的に満たされてしまい、本来の含ホウ素π電子系の魅力的な物性が引き出せないというジレンマがあった。今回我々は、新しい安定な含ホウ素π電子系として、3配位ホウ素を縮合多環式π電子系の中央に閉じ込めた分子を開発することに成功した。従来にはなかった速度論的安定化の手法として、ホウ素周りのアリール基を全て縮環して平面構造に固定するという方法を見出した。実際にこの化合物は水や酸素、シリカゲルに対しても高い化学的安定性を示した。この含ホウ素π共役分子は、以前我々が報告したメチレン架橋トリフェニルボランと異なり、分子間の立体障害を生じない広いπ共役平面をもつことから、固体中で効果的なπスタッキングの形成が可能であり、今後高効率電子輸送材料としての応用が期待できる。

また、高い電子供与性をもつπ電子骨格と電子受容性をもつホウ素が軌道相互作用することで、HOMO-LUMOギャップが狭く、可視領域全体にわたる吸収と近赤外領域に至る蛍光特性を示した。さらに、平面固定化によるルイス酸性の低さを利用して、ルイス塩基存在下でのサーモクロミズムにも成功した。
プレセニリン機能障害によるシナプス制御機構の破綻

申請者らは「シナプスの解離」現象には、シナプスとシナプスを結合する接着分子の制御された切断が必須であるという作業仮説をたてた。今回の研究では、接着分子の切断の制御機構を解明にすることにより、シナプスのremodelingにつながる経路を明らかにする予定であり、この解離機構の解明により、シナプスの可塑性のメカニズムが一段と明らかになることが期待された。申請者らはこれまでの研究で、N-cadherinによるシナプス部の接着は、神経細胞の刺激に応じて2段階で切断を受けることを明らかにしてきた。申請者らは、上記の2つの切断部位を同定し、これらの切断を受けないような変異N-cadherin mutantを有するコンストラクトを作成した。昨年度の研究で、この変異N-cadherinをノックインしたノックインマウスの作成を開始し、今年度は主としてこのノックインマウスの作成に専念した。その結果、sheddingを受けない変異N-cadherinを有するノックインマウスのF1ヘテロの作成に成功している。これを元に、マウス脳の生化学的な研究、また、行動学的な研究、さらに、これらのマウスからの初代神経細胞をon chip上でネットワークを作るように配列して、電気生理学的な性質を調べるなどの方法での検討を考えている。これらの実験の結果、N-cadherinの切断が、シナプスの制御に生理的にどのように関わっているのかという結果が得られると期待される。これら一連の研究によりN-cadherinの切断不全が、どのように、生理的にシナプス機能に影響を及ぼすのか、またN-cadherinの切断を司る酵素の生理的な意義を検証できる可能性がある。アルツハイマー病ではシナプスの変性が初期から観察されるが、現在までにその原因は解明されていない。さらに、家族性アルツハイマー病の原因遺伝子であるプレセニリンPS1の機能障害がどのように、シナプス変性につながり、「記憶障害」を主徴とする神経症状が出現するのか、は依然として不明のままである。われわれは、平成18年度において細胞レベルの実験結果で、プレセニリン(PS1)の機能を制御する新たなメカニズムの一端を解明した。PS1はGSK3βというリン酸化酵素によりループ部分でリン酸化されることを見出し、このリン酸化の修飾を受けることで、PS1の局在が変化し、細胞膜から遊離して、その結果として、基質切断能というPS1の機能に変化が生じることがあきらかになった。この結果より、PS1の機能を修飾する要因を新たに同定することができた。これを踏まえて、PS1のリン酸化をmimicする変異PS1を発現するトランスジェニックマウスを作成した。現在、このマウスを解析中であり、すでに、いくつか影響を受けているシナプス蛋白を同定しつつある。今後は、これをヒトアルツハイマー病脳の組織にて検証する予定であるとともに、さらにマウスを用いてPS1の修飾による機能変化について検証を進めていく予定である。さらに、PS1の機能を変化させるGSK3βの発現レベルに影響を与えるような環境因子についても研究を進めて行く予定である。これは、今後孤発性のアルツハイマー病のシナプス変性の病態を考えていく上で極めて大きい意義があると考える。
「読経道」の研究-法華経読誦の芸道化に関する総合的研究-

芸道としての法華経読誦、すなわち「読経道」がいかなる体系を持ち、どのように芸道化していったかを明らかにするために、今年度は、身延文庫(山梨県)・金沢文庫(神奈川県)などを中心に資料調査を重ね、4編の論文(および1編の小論文)の公表を行った。読経道資料の全体を俯瞰できるよう、各寺院・文庫への調査を通じて読経道資料を収集することは研究に欠かせない。今年度もこれまでと同様に、それらの調査の際に撮影した資料を整理し、解読を試みている。特に、身延文庫蔵『和語雑々抄』は、読経と和歌の学問を<声>という観点で繋ぐものとして注目される。今年度、本資料を閲覧できたことは大きな収穫であった。資料撮影や解読には、高性能のデジタルカメラやプリンターの力を存分に使うことができた。資料調査の成果はこれまでも公表してきたが、さらに充実して公にできるよう翻刻を進めるとともに、資料をめぐる文化的位置づけについて考究し、基礎作業を行った。また、読経道の全容を明らかにする作業の一階梯として、前年に刊行した『読経道の研究』の成果を発展させ、これがどのような体系を持った芸道であったのかの概観(いかに文化史的に魅力ある芸道であるか、という点をも含みつつ)と、音声に纏わる芸能としての特色を王権と性に関わらせて論じたものとを活字化した。3年間の研究は、著書『読経道の研究』の刊行を中核として、読経道の基礎的研究を推進したものである。さらに、本研究を宗教・文学・歴史・音楽の各側面において発展させる見通しも十分に立たせることができた。芸道としての法華経読誦、すなわち「読経道」がいかなる体系を持ち、どのように芸道化していったかを明らかにするために、今年度は、基礎資料の整備と法会の調査とを中心に据え、研究を進めた。読経道関連資料の収集と分析に関しては、金沢文庫・叡山文庫・真福寺・書写山円教寺・薬師寺など、諸寺諸文庫への聖教調査を行い、資料を撮影または複写し、翻刻した本文および書誌などのデータをパソコンに入力した。諸資料には個別に考察を加え、基礎的な作業を進めた。読経道周辺の資料と目される悉曇関係の聖教(主として真福寺蔵の聖教類)にも調査を加えた。また、後白河院の声明・読経を考察するために重要な三千院の御懺法講など、比叡山を中心に法会の調査を行った。さらに、読経道の系譜に見える人物達について日記記録類を中心に資料を集め、基礎資料の整備をはかった。特に、書写山周辺の人物(心空・鎮増など)について調査研究を行った。以上のような基礎的研究を推し進めるとともに、読経道そのものを俯瞰すべく、宗教と芸道とがこのなかでいかに結びついているのかを考究し、お茶の水女子大学人間文化研究科国際日本学シンポジウムにて発表、論文化した。また、これまでに明らかになった研究成果に関しては、一書に纏めるべく作業中である。芸道としての法華経読誦、すなわち「読経道」がいかなる体系を持ち、どのように芸道化していったかを明らかにするために、今年度は、読経道を専門に論じた著書の刊行と、3編の論文の公表を行った。『読経道の研究』(単著、風間書房刊)は、本研究の指標となるものである。本書は、論文編(<「読経道」考><書写山と読経道><能読の道命阿闍梨><明覚流の法華経読誦>の4部から構成される)と、資料編(三千院円融蔵『読経口伝明鏡集』、薬師寺蔵『法華声口伝』、但馬温泉寺蔵『法華経音曲』、法明院蔵『法華秘中略歎抄』の4本を収める)から成り、全体で読経道の実体解明を目指したものである。本書は、読経道の基礎的研究をなすもので、資料紹介とその分析により、読経道を巨視的微視的に論じ、見取り図を描いた。また、院政期の音声文化の転換点に関する論、読経道と諸分野(特に和歌)との交差についての論を公表した。さらに、法華経読誦に関する資料『法華読音』の紹介と解説を行った。『法華読音』は、天台教学との絡みで重要な書物であり、人的ネットワークを考える上で考究を重ねている。以上は、前年度から行っている資料調査の成果をも取り込み、継続的に進めている諸資料の読み解きを基とするものである。今年度提起した問題については、なお発展させるべく、資料調査および諸資料の位置づけ・解読を重ねているところである。

資料撮影や解読には、高性能のデジタルカメラやプリンターの力を存分に使うことができた。資料調査の成果はこれまでも公表してきたが、さらに充実して公にできるよう翻刻を進めるとともに、資料をめぐる文化的位置づけについて考究し、基礎作業を行った。また、読経道の全容を明らかにする作業の一階梯として、前年に刊行した『読経道の研究』の成果を発展させ、これがどのような体系を持った芸道であったのかの概観(いかに文化史的に魅力ある芸道であるか、という点をも含みつつ)と、音声に纏わる芸能としての特色を王権と性に関わらせて論じたものとを活字化した。3年間の研究は、著書『読経道の研究』の刊行を中核として、読経道の基礎的研究を推進したものである。さらに、本研究を宗教・文学・歴史・音楽の各側面において発展させる見通しも十分に立たせることができた。
ＮＩＰＳＮＡＰ１によるミトコンドリアの品質管理制御と疼痛慢性化との関連

4-Nitrophenylphosphatase domain and non-neuronal SNAP25-like protein homolog (NIPSNAP1)は、シナプス膜とミトコンドリアに存在している。シナプス膜のNIPSNAP1は、神経ペプチドのノシスタチンと結合し、触覚刺激が痛みとなるアロディニアの抑制に関与している。本研究では、後根神経節の神経細胞において、NIPSNAP1が活性酸素種の産生とミトコンドリアのオートファジー(マイトファジー)の制御に関与していることを明らかにした。申請者らは、疼痛制御ペプチド・ノシスタチンの結合分子として細胞膜に存在するNIPSNAP1を同定し、疼痛制御に関わることを明らかにした。他方、NIPSNAP1はミトコンドリアにも存在し、オートファジー関連分子との会合、NIPSNAP1高発現細胞でのミトコンドリア凝集、NIPSNAP1遺伝子欠損マウスでのノシスタチン非依存的な炎症性疼痛の慢性化が起こることを見いだした。本研究は、ミトコンドリアNIPSNAP1による(1)ミトコンドリアの動態制御、(2)ミトコンドリアのオートファジー(マイトファジー)制御、(3)疼痛慢性化との関連に焦点をあて、ミトコンドリアの品質管理に基づく疼痛慢性化の制御機構を解明する。本年度は、感覚神経の細胞体である後根神経節の培養細胞を用い、ミトコンドリアの機能不全によって誘導されるミトコンドリア動態とマイトファジーについて解析した。ミトコンドリア脱共役剤CCCPの24時間処理により、野生型マウスの細胞ではミトコンドリアとリソソームの共局在とオートファジーの主要なアダプター分子であるp62のドッド数が増加したことからマイトファジーの誘導が認められた。一方、NIPSNAP1遺伝子欠損マウスから調製した細胞では、CCCPによりミトコンドリアとリソソームの共局在は増加せず、p62のドッド数はCCCP処理の有無に関係なく増加していた。NIPSNAP1欠損ではp62は結合するもののミトコンドリアとリソソームとの融合が抑制されていることが示唆された。また、慢性疼痛として炎症性疼痛と糖尿病性神経因性疼痛モデルを作製し、NIPSNAP1やオートファジー関連分子の遺伝子発現やミトコンドリアの機能について解析した。炎症性疼痛ではNIPSANP1の発現が顕著に減少していること、糖尿病性神経因性疼痛モデルの脊髄後角では一酸化窒素の産生が上昇することを見いだした。疼痛制御ペプチド・ノシスタチンの結合分子として細胞膜とミトコンドリアに存在するNIPSNAP1を同定し、細胞膜NIPSNAP1とノシスタチンによる疼痛制御を明らかにした。他方、NIPSNAP1のオートファジー関連分子との会合、NIPSNAP1欠損マウスでのノシスタチン非依存的な炎症性疼痛の慢性化を見出している。本研究では、ミトコンドリアNIPSNAP1に着目し、ミトコンドリアのオートファジー(マイトファジー)の制御、疼痛慢性化との関連に焦点をあて、ミトコンドリアの品質管理に基づく疼痛慢性化の制御機構を解明する。本年度は、NIPSNAP1欠損マウスの後根神経節の初代培養細胞を用い、ミトコンドリア脱共役剤CCCPにより誘導されるマイトファジーについて解析した。野生型細胞でのミトコンドリアとリソソームの共局在数は、CCCP添加後6時間で7倍、24時間で2倍に増加した。その上昇はNIPSNAP1欠損により抑制された。オートファジー関連分子のp62とLC3のドッド数は、未処理のNIPSNAP1欠損細胞で2倍の上昇が見られた。NIPSNAP1欠損によりマイトファジーが抑制されることが明らかとなった。また、NIPSNAP1欠損マウスでは炎症性疼痛の増強が認められたが、末梢組織の浮腫、ケモカイン産生、マクロファージの浸潤には差がなく、脊髄後角のERKのリン酸化が上昇した。NIPSNAP1は炎症反応の亢進ではなく中枢性制御に関与することが示唆された。一方、オートファジーと糖尿病との関連が報告されていることから、糖尿病神経因性疼痛について解析したが、NIPSNAP1欠損マウスの疼痛は野生型と有意差はなかった。さらに、NIPSNAP1が神経因性疼痛で見られるアロディニアへの関与することから、脊髄後角におけるアロディニア発症機構としてJNKとMCP-1による経路を解明した。本研究の目的は、ミトコンドリアNIPSNAP1による(1)ミトコンドリアの動態、(2)ミトコンドリアのオートファジー(マイトファジー)制御、(3)疼痛慢性化との関連を明らかにすることである。(1)と(2)のNIPSNAP1によるミトコンドリアの動態とマイトファジーの制御に関しては、今年度は、NIPSNAP1欠損細胞を用い、CCCP処理の経時的な解析とオートファジーの選択的基質であるp62とその結合分子のLC3のドッド形成の解析を主に行った。その結果、NIPSNAP1欠損によりオートファジー不全を引き起こしていることが示唆され、NIPSNAP1がマイトファジーの制御分子であることが明らかになった。(3) NIPSNAP1による疼痛慢性化との関連に関しては、NIPSNAP1欠損マウスによる炎症性疼痛モデルと糖尿病モデルを作製し疼痛解析を行った。

疼痛慢性化は、糖尿病性神経因性疼痛では見られず、炎症性疼痛に特異的であった。NIPSNAP1の疼痛制御選択性が認められたことより、NIPSNAP1がアロディニア制御にも関与していることから、アロディニア発症機構を明らかにした。また、炎症性疼痛の慢性化の制御ポイントは、末梢組織の炎症反応の亢進ではなく、脊髄後角の中枢性感作機構であることが明らかとなった。疼痛モデルにおけるオートファジーとの関連の発現変化については、免疫組織染色とReal-time PCRで解析を行っている。疼痛制御ペプチド・ノシスタチンの結合分子として同定したNIPSNAP1は、触覚刺激も痛みと感じるアロディニアの抑制に関与する。NIPSNAP1に関しては、細胞膜とミトコンドリアへの局在、オートファジー関連分子との会合、NIPSNAP1欠損マウスでのノシスタチン非依存的な炎症性疼痛の慢性化が見られる。本研究では、NIPSNAP1のミトコンドリアにおける役割に着目し、ミトコンドリアのオートファジー(マイトファジー)の制御と疼痛慢性化との関連について検討した。平成28年度は、NIPSNAP1発現HEK細胞を樹立し、ミトコンドリアの機能解析を行った。NIPSNAP1発現HEK細胞では、ATP産生やミトコンドリア脱共役剤CCCPにより誘導されるアポトーシスの活性化が抑制された。また、マイトファジー検出のため、ミトコンドリア局在化シグナルを付加したKeima-RedとParkinの発現プラスミド(pMitophagy Keima-Red mPark2)を細胞に導入した。Keima-Red蛍光タンパクは励起スペクトルがpHにより変化し、Parkinは損傷ミトコンドリアにユビキチンを付加することでマイトファジーが実行される。NIPSNAP1発現細胞では酸性下に局在するKeima-Redが上昇し、その上昇はCCCP処理細胞と同程度であった。一方、NIPSNAP1欠損マウスの後根神経節の初代培養細胞では、CCCPによるミトコンドリアとリソソームの共局在が抑制された。オートファゴソームの基質であるp62は、NIPSNAP1欠損細胞で凝集が見られた。さらに、NIPSNAP1欠損マウスの炎症性疼痛の増強は、脊髄後角のERKのリン酸化による中枢性制御が関与していたが、p62の上昇も見られた。これらの結果より、NIPSNAP1はミトコンドリアの品質管理を制御するマイトファジーに関与することが明らかとなった。4-Nitrophenylphosphatase domain and non-neuronal SNAP25-like protein homolog (NIPSNAP1)は、シナプス膜とミトコンドリアに存在している。シナプス膜のNIPSNAP1は、神経ペプチドのノシスタチンと結合し、触覚刺激が痛みとなるアロディニアの抑制に関与している。本研究では、後根神経節の神経細胞において、NIPSNAP1が活性酸素種の産生とミトコンドリアのオートファジー(マイトファジー)の制御に関与していることを明らかにした。本研究の目的は、ミトコンドリアNIPSNAP1による(1)ミトコンドリアの動態制御、(2)ミトコンドリアのオートファジー(マイトファジー)制御、(3)疼痛慢性化との関連を明らかにすることである。
ECRプラズマの一様性・制御における電磁波のモード変換・吸収の役割

電子サイクロトロン共鳴(ECR)プラズマは、低ガス圧力で高い電子密度を容易に得ることが出来る為、半導体加工のプラズマ源やビーム源として現在不可欠である。そのようなプラズマ源としてのプラズマには高密度、一様性、また大口径化が容易であることの3点が主に望まれる。ECRプラズマは電磁波動とプラズマの相互作用が明らかでない為に試行錯誤的に一様性を確保する必要があるが、これでは大口径化が困難である。こうしてECRプラズマにおける電磁波動の振る舞いを明らかにすることが切望されている。本研究では、プラズマ端でパワー吸収を行うことが出来る異常波(X波)とそのプラズマ周辺の真空境界での振る舞いについて着目し、これを利用しECRプラズマの制御性を高めることを目的としている。実験は磁気ミラー型プラズマ発生装置を用いて、電子サイクロトロン共鳴によりプラズマを生成した。マイクロ波の周波数は2.45GHz,最大出力5kWである。得られた主な成果は以下の通りである。(1)円筒導波管の基本モードであるTE_<11>のマイクロ波を用いて、直径200mmに亘って均一なECRプラズマ(均一性が±5%)の生成に成功した。(2)プラズマ中の電磁波測定を行った結果、(i)プラズマ密度が10^<11>cm^<-3>より低い時はR波とし波が共鳴領域まで伝播し、共鳴領域より下流ではL波のみが伝播していること、(ii)プラズマ密度が10^<11>cm^<-3>より高い時はR波のみが共鳴領域までに伝播し、共鳴領域より下流であh電磁波が存在していないことを明らかにした。(3)磁場に直角方向の電磁波測定を行い、得られた波形の分散関係から異常波(X波)が伝播していることを初めて見出した。(4)また、(i)共鳴領域より下流ではX波の波長が周辺部に行くに従って短くなること、(ii)電磁波の電場強度が周辺部で強いことから、一様分布の時に得られるイオン飽和電流の周辺部におけるピークはX波の高域混成波共鳴によるものであると結論される。(5)二次元モータ駆動装置を用いて、中心領域のみならず周辺領域においても詳細な電磁波測定を行った結果、中心領域でR波のみが伝播している条件下でも周辺領域で短波長のR波の他に長波長の電磁波が伝播していること、すなわちRCRプラズマ周辺領域でモード変換が起きていることがわかった。以上の結果は、半導体プロセス用大口径プラズマ源の開発に大きく貢献できるものと期待される。
乳幼児期の海馬神経回路形成機構の解明

現在私は、熱性けいれんが海馬に与える影響を調べている。これは、熱性けいれんが歯状回の形成時期である乳幼児期に生じ、側頭葉てんかん患者の約60%が過去に熱性けいれんを経験しているためである。海馬歯状回を構成する顆粒細胞は、巨大な軸索終末(苔状線維巨大終末、以下LMTsと称する)を有し、シナプス後細胞を強く興奮させる能力を持つ。そのため、私は、熱性けいれんがLMTs形成に異常をきたし、海馬の興奮性上昇を介して将来のてんかん発症に寄与するという仮説を立てた。一部の神経細胞が可視化されるThy1-mGFPマウスにヘアドライヤーを用いて高熱を誘導(体温を40-42°Cに30分間維持)した。熱性けいれん群では、LMTsが本来の投射先である明瞭層ではなく、錐体細胞層内に観察された。LMTs密度は錐体細胞層内で上昇し、明瞭層では変化がなかった。ペントバルビタール処置により、熱性けいれんを抑制した際には錐体細胞層内のLMTs密度の増加が抑制されたことより、熱自体ではなく、けいれん発作によってLMTsの異所形成が生じたことが示唆された。これは短期的な変化ではなく、成体期においても生じていることを確認した。次に、異所形成が起こるメカニズムを調べるため、切片培養系を用いた。てんかん患者、あるいは、過剰興奮状態の誘導により、海馬内のcAMP量が増加することが報告されており、熱性けいれん後にもcAMPが上昇していることを免疫染色法により確認した。そのため、cAMPの阻害薬であるRp-cAMP、プロテインキナーゼA阻害薬RT5720の処置により、錐体細胞層内のLMTs密度の増加は抑制され、cAMP-PKA経路がLMTsの異所形成に関与することが示唆された。本研究は、側頭葉てんかんの発症メカニズムに迫れるだけではなく、そのメカニズムに基づいた新規治療法の開発につながると考えられる。海馬歯状回顆粒細胞は乳幼児期のラットにおいて、歯状回門内という領域で誕生し、顆粒細胞層まで移動する。移動過程を終えた新生顆粒細胞は適正な細胞配列、すなわち細胞層の形成を行った後、成熟過程に入るが、この過程には未だ不明な点が多い。本研究は乳幼児期における歯状回の神経回路形成機構を解明することを目的とし、特に顆粒細胞の成熟機構の解明に焦点をあてている。私は顆粒細胞の成熟に関与する因子としてGABAに着目した。これは歯状回門及び顆粒細胞層付近にGABAを放出する抑制性神経細胞の神経終末が多数存在するためであり、顆粒細胞層付近に到達し、GABAの入力を受けることが同細胞の成熟に必要であると考えた。私はまず、蛍光タンパク質であるGFPを発現したトランスジェニックラットから歯状回門領域を切り出し、野生型由来の海馬切片上に配置して培養し、幼若な顆粒細胞を可視化する手法を確立した。顆粒細胞を経時的に観察した結果、移動中に有するリーディングプロセスが主要な樹状突起に変化する様子が観察された。私はこのメカニズムに着目し、共培養切片をGABA_A受容体の阻害薬であるビククリン存在下で培養した結果、細胞体から突出する樹状突起数の増加が観察された。次にGABAが成熟に関与する機構を解明するため、KCC2(K^+/Cl^- cotranspoter)に着目した。これは、KCC2がGABA_A受容体の生理学的反応を興奮性から抑制性に変化させ、神経細胞の成熟に付随して発現するためである。KCC2の阻害薬であるフロセミド存在下で切片を培養した結果、主要樹状突起の維持にKCC2が必要であることが示唆された。本研究は歯状回を構成する顆粒細胞の樹状突起形成機構を解明することにより、海馬を発作焦点とする側頭葉てんかんの発症メカニズムに迫れるだけでなく、それに基づいた新規治療法の開発につながると考えられる。前年度に引き続き、乳幼児期の海馬歯状回神経回路の形成機構を解明するために、顆粒細胞の成熟機構に着目して研究を遂行した。難治性疾患である側頭葉てんかん患者では海馬が発作起始部となる可能性が示唆されているにも関わらず、その発達機構については未解明な部分が多い。私は、顆粒細胞が移動する際に有する先導突起が、その後の主要樹状突起に成熟することを発見した。そしてその過程には抑制性神経伝達物質であるGABA、そしてKCC2共輸送体が関与することをin vitro、in vivoにおいて明らかにした。現在は論文にまとめて投稿準備段階である。これは、熱性けいれんが歯状回の形成時期である乳幼児期に生じるためである。また、側頭葉てんかん患者の約60%が過去に熱性けいれんを経験していることも理由の一つである。私は、熱性けいれんが海馬歯状回の発達に障害をきたし、異常痕跡として将来にまで影響するという仮説を立てた。一部の神経細胞のみが可視化されるThy1-mGFPマウスにヘアドライヤーを用いて高熱を誘導した。具体的には体温を40-42°Cに30分間維持した。高熱誘導群において、全てのマウスでけいれん発作が確認された。熱性けいれんを誘導して1週間後に灌流固定し、共焦点顕微鏡により形態を観察した。

その結果、顆粒細胞の軸索終末が本来の投射領域とは異なる錐体細胞層内で観察された。現在はこのメカニズムを検証中である。本研究は、側頭葉てんかんの発症メカニズムに迫れるだけではなく、そのメカニズムに基づいた新規治療法の開発につながると考えられる。現在私は、熱性けいれんが海馬に与える影響を調べている。これは、熱性けいれんが歯状回の形成時期である乳幼児期に生じ、側頭葉てんかん患者の約60%が過去に熱性けいれんを経験しているためである。海馬歯状回を構成する顆粒細胞は、巨大な軸索終末(苔状線維巨大終末、以下LMTsと称する)を有し、シナプス後細胞を強く興奮させる能力を持つ。そのため、私は、熱性けいれんがLMTs形成に異常をきたし、海馬の興奮性上昇を介して将来のてんかん発症に寄与するという仮説を立てた。一部の神経細胞が可視化されるThy1-mGFPマウスにヘアドライヤーを用いて高熱を誘導(体温を40-42°Cに30分間維持)した。熱性けいれん群では、LMTsが本来の投射先である明瞭層ではなく、錐体細胞層内に観察された。LMTs密度は錐体細胞層内で上昇し、明瞭層では変化がなかった。ペントバルビタール処置により、熱性けいれんを抑制した際には錐体細胞層内のLMTs密度の増加が抑制されたことより、熱自体ではなく、けいれん発作によってLMTsの異所形成が生じたことが示唆された。これは短期的な変化ではなく、成体期においても生じていることを確認した。次に、異所形成が起こるメカニズムを調べるため、切片培養系を用いた。てんかん患者、あるいは、過剰興奮状態の誘導により、海馬内のcAMP量が増加することが報告されており、熱性けいれん後にもcAMPが上昇していることを免疫染色法により確認した。そのため、cAMPの阻害薬であるRp-cAMP、プロテインキナーゼA阻害薬RT5720の処置により、錐体細胞層内のLMTs密度の増加は抑制され、cAMP-PKA経路がLMTsの異所形成に関与することが示唆された。
レーザーアブレーション機構解明のためのナノ秒形態観察・分光システムと解析法の確立

光と物質の相互作用に基づく多様な物理的・化学的現象の解明は、現在最も注目を浴びている分野である.我々はフィルム、微結晶、微粒子を含む各種有機固体の超高速分光、顕微分光、光反応、光マニピュレーションの研究を推し進めているが、パルスレーザー高強度を徐々に上げていくとその中で必ずパルスレーザーにより有機固体の形態変化が起こる.このダイナミクスは光物理・光化学現象として興味深いのみならず、構造・物性変化の動的側面を時間分解測定に基づいて考察することが出来る現象として貴重である.本研究ではナノ秒パルスレーザーとマイケルソン型干渉画像計測法を組み合わせ、10nsの時間分解能で20nmの表面変位を測定する新しい時間分解干渉画像計測法を開発した.これにより得られる微小形態変化ダイナミクスを、各種時間分解分光法のデータと組み合わせ考察することにより、アブレーションの基礎的研究として新しい地平線を切り拓くことが出来たと考えている.1)新しい方法論の開発2)“繰り返し多光子吸収"による光熱的レーザーアブレーション機構の確立3)光化学的レーザーアブレーション機構の確立4)高分子フィルムの膨張・収縮ダイナミクスの解明5)高分子固体の光分解反応とエッチングダイナミクスの解明1)蛍光スペクトル分布の異なるクマリンとロ-ダミンの溶液をレーザー励起して撮像光源とし、アブレーション時の飛散物質の画像測定に成功した。光源のスペクトル分布が異なると画像に違いが表れることを見出し、分光画像計測の有用性を示すことができた。さらに、フィルム表面から数ミリメートルの距離において吸収スペクトルの時間分解計測にも取り組み、飛散物質の分子集合状態に起因するスペクトル変化を捉えることに成功した。2)微小領域において10ナノ秒の時間分解能で形態、干渉画像、スペクトル測定の可能な光学系の設計に取り組み、システムの設計・製作を行った。これにより空間分解能10μmの領域の測定が可能になるものと期待される。現在、システムを立ち上げ、その基本的性能を調べている。3)現有する色素レーザーを用いて、アントラセン誘導体を含む高分子フィルムのアブレーション励起スペクトルの測定を行った。この結果、励起三重項状態の吸収ピーク付近の波長において、アブレーションにより生成するエッチング深さが最大となることが明らかとなった。この結果は、従来われわれの研究グループが指摘してきた、繰り返し多光子吸収機構の重要性を直接的に証明するものである。今後、導入されたOPOレーザーを用いてより広い領域の励起スペクトル測定に取り組む。4)アブレーション機構の解明のため、ガラス転移点の異なる種々の高分子フィルムを用いて干渉画像測定を行った。その結果、同一のレーザーエネルギーが吸収されているにも関わらず、ガラス転移点の低い高分子ほど過渡的膨張は大きく、またアブレーションのしきい値は高いことが明らかとなった。これは吸収されたエネルギーが機械的変形と温度上昇の二つに分配され、ガラス転移点の高い高分子では表面の熱融解・蒸発が起こるのに対し、ガラス転移点の低い高分子においては応力破壊が主となるためと考察した。光と物質の相互作用に基づく多様な物理的・化学的現象の解明は、現在最も注目を浴びている分野である.我々はフィルム、微結晶、微粒子を含む各種有機固体の超高速分光、顕微分光、光反応、光マニピュレーションの研究を推し進めているが、パルスレーザー高強度を徐々に上げていくとその中で必ずパルスレーザーにより有機固体の形態変化が起こる.このダイナミクスは光物理・光化学現象として興味深いのみならず、構造・物性変化の動的側面を時間分解測定に基づいて考察することが出来る現象として貴重である.本研究ではナノ秒パルスレーザーとマイケルソン型干渉画像計測法を組み合わせ、10nsの時間分解能で20nmの表面変位を測定する新しい時間分解干渉画像計測法を開発した.これにより得られる微小形態変化ダイナミクスを、各種時間分解分光法のデータと組み合わせ考察することにより、アブレーションの基礎的研究として新しい地平線を切り拓くことが出来たと考えている.1)新しい方法論の開発2)“繰り返し多光子吸収"による光熱的レーザーアブレーション機構の確立3)光化学的レーザーアブレーション機構の確立4)高分子フィルムの膨張・収縮ダイナミクスの解明5)高分子固体の光分解反応とエッチングダイナミクスの解明紫外レーザーパルスにより固体を高密度に励起すると、昇温、分解が集中的に起こり、結合が切れ、塊として、飛散する。これはレーザーアブレーションと呼ばれ、光と物質の相互作用に基づく高密度励起光化学過程として基礎的にも重要である。この固体の形態変化ダイナミクスを取り上げ研究した。本年度は高分子フィルムを取り上げ時間分解分光法による分子論的、動的な光反応としての測定解析と、時間分解写真、及び干渉画像計測による形態変化の観察を合わせて行うシステムと解析方式を開発した。同時に測定して得られたナノ秒時間分解能を持つ両データを検討してアブレーション機構の解明をはかり、実用への展開をはかり、以下の成果を得ている。(1)系の検討。光化学的にデータの揃った分子を取り上げ、高分子フィルムに添加し、それらの分子を励起してアブレーションを引き起こす。分光測定と形態変化の二次元イメージ像を同時測定し、これに基づき物性変化、励起状態、中間体毎の時間分解マッピングを得た。フィルムや化合物の種類、レーザー出力、励起波長との相関を調べ特徴を明らかにした。(2)レーザーアブレーション解析により新しい概念を得る。添加分子の発光、無輻射遷移の収量、寿命、光化学反応プロセスとの関係を調べ、又比熱、熱伝導率など物性値と比較検討し、両者を合わせて明らかになるアブレーションのミクロ過程のモデルを提出した。(3)ソフトの開発。

膨大なデータ量が必要であるイメージ像の解析に適したソフトプログラムを開発した。(4)実用的にも意味ある系に当てはめる。燃焼のモデルとなるニトロセルロース、飛散物による汚れが少なく微細加工に最適なトリアゼノポリマーのアブレーションダイナミクスを明らかにした。光と物質の相互作用に基づく多様な物理的・化学的現象の解明は、現在最も注目を浴びている分野である.我々はフィルム、微結晶、微粒子を含む各種有機固体の超高速分光、顕微分光、光反応、光マニピュレーションの研究を推し進めているが、パルスレーザー光強度を徐々に上げていくとその中で必ずパルスレーザーにより有機固体の形態変化が起こる.このダイナミクスは光物理・光化学現象として興味深いのみならず、構造・物性変化の動的側面を時間分解測定に基づいて考察することが出来る現象として貴重である.本研究ではナニ秒パルスレーザーとマイケルソン型干渉画像計測法を組み合わせ、10nsの時間分解能で20nmの表面変位を測定する新しい時間分解干渉画像計測法を開発した.これにより得られる微小形態変化ダイナミクスを、各種時間分解分光法のデータと組み合わせ考察することにより、アブレーションの基礎的研究として新しい地平線を切り拓くことが出来たと考えている.1)新しい方法論の開発2)“繰り返し多光子吸収"による光熱的レーザーアブレーション機構の確立3)光化学的レーザーアブレーション機構の確立4)高分子フィルムの膨張・収縮ダイナミクスの解明5)高分子固体の光分解反応とエッチングダイナミクスの解明
ニンジン培養細胞におけるオーキシンによる遺伝子発現を制御する転写調節因子の解明

前年度にニンジン培養細胞におけるアントシアニン合成特異的subtracted cDNAライブラリーにより得た5種類のmyb相同遺伝子について,本年度において,まずその全塩基配列を決定した。その結果,5種類のうち,2つは98%の相同性があり,おそらく同一の遺伝子であることが考えられた。myb相同遺伝子において高い保存性が見られるDNA結合領域については,これら4種類のmyb相同遺伝子の塩基配列について80%以上の相同性が見られたが,その他の部分については,塩基配列上でそれぞれの間の相同性は55%以下であり,またアミノ酸配列でみても70%以下の相同性であった。そこで,これら4種類のmyb相同遺伝子における特異的な塩基配列領域を切り出して,これをプローブとして,分化状態でアントシアニン合成もしくは不定胚形成を行っている培養細胞,さらにオーキシン存在下で細胞分裂を繰り返しながらアントシアニン合成もしくは不定胚形成を行っているニンジン培養変異株からmRNAを抽出して,ノーザン解析を行った。その結果,4種類のうち1種類はアントシアニン合成を行っている正常細胞株および変異細胞株で発現しているのに対し,もう1種類はアントシアニン合成を行っている正常細胞株でのみで発現していた。さらに残りの2種類はアントシアニン合成細胞よりも,不定胚形成細胞において強い発現が見られ,しかもその発現の強さは分化過程の上で異なっていた。これらのことから,ここで得られた4種類のmyb相同遺伝子は,分化特異的に発現しており,それぞれは全く異なった分化状態で発現している,すなわち全く異なった分化にかかわる遺伝子の発現制御を行っていることが示唆された。アントシアニン合成の発現に関与しているmyb相同遺伝子のみを得るために,2,4-D存在下でアントシアニン合成を行っていない細胞から抽出したmRNAをテンプレートとしてOligo-dT30ラテックス上でcDNAを合成した。これに2,4-Dを含まない培地中でアントシアニン合成を行っている細胞から抽出したmRNAをハイブリダイズさせ,アントシアニン合成細胞および2,4-D存在下で脱分化状態にある細胞の両方で共通に発現しているmRNAを除去することにより,アントシアニン合成時に特異的に発現しているmRNAのみを集め,このmRNAからcDNAを合成し,λZAPIIベクターに導入し,subtracted cDNAライブラリーを作成した。これまでの研究からアラビドプシスのmyb相同遺伝子をプローブとしてニンジン核遺伝子ライブラリーから得た2種類のニンジンmyb相同遺伝子をもとに,すべてのmyb相同遺伝子において高い塩基配列の相同性を有するDNA結合領域を見い出して,この領域を切り出し,これをプローブとして,ここで作成したsubtracted cDNAライブラリーをスクリーニングし,アントシアニン合成時に特異的に発現しているmyb相同遺伝子をクローニングすることを行った。その結果12クローンが得られ,これらの制限酵素地図を作成して比較したところ,5種類のmyb相同遺伝子が得られたことがわかった。これまでトウモロコシにおいてはアントシアニン合成に関与するmyb相同遺伝子としてCおよびPlの2種類のみであると考えられていたが,ニンジンにおいてはアントシアニン合成時に発現してくるmyb相同遺伝子として少なくとも5種類あることになり,ニンジンにおけるmyb転写調節因子によるアントシアニン合成の制御機構は,これまでにトウモロコシで考えられていたものとは異なることがわかった。前年度にニンジン培養細胞におけるアントシアニン合成特異的subtracted cDNAライブラリーより得た5種類のmyb相同遺伝子について,本年度において,まずその全塩基配列を決定した。その結果,5種類のうち,2つは98%の相同性があり、おそらく同一の遺伝子であることが考えられた。そこで,これら4種類のmyb相同遺伝子における特異的な塩基

配列領域を切り出して,これをプローブとして,分化状態でアントシアニン合成もしくは不定胚形成を行っている培養細胞,さらにオーキシン存在下で細胞分裂を繰り返しながらアントシアニン合成もしくは不定胚形成を行っているニンジン培養変異株からmRNAを抽出して,ノーザン解析を行った.その結果,4種類のうち1種類はアントシアニン合成を行っている正常細胞株および変異細胞株で発現しているのに対し,もう1種類はアントシアニン合成を行っている正常細胞株でのみで発現していた。さらに残りの2種類はアントシアニン合成細胞よりも,不定胚形成細胞において強い発現が見られ,しかもその発現の強さは分化過程の上で異なっていた,これらのことから,ここで得られた4種類のmyb相同遺伝子は,分化特異的に発現しており,それぞれは全く異なった分化状態で発現している。すなわち全く異なった分化にかかわる遺伝子の発現制御を行っていることが示唆された。
癌の間質浸潤過程におけるコラーゲンレセプターによる負の制御機構の解明

2.K/D細胞において、細胞増殖の系にWTS assayを用いて再検討を行った。コラーゲンの非存在下、及び存在下のいずれの場合においても増殖活性は増強し、PI3K阻害剤によってその活性は抑制された。3.K/D細胞において、FAK、Cas1のリン酸化が促進し、互いに結合することが分かったが、市販されているFAKの特異的部位のphosphorylationを認識する抗体を用いて検証したが、明らかなリン酸化部位の同定にはまだ至ってない。PI3Kを介したシグナル伝達がK/D細胞においては重要であるが、PTENの発現量に影響はなかった。4.DDR1の下流に発現する遺伝子を検証するため、DDR1のknock downcell(K/D)を用いてコラーゲンの存在の有無、および接着後の経時的変化について検討するため。各種条件下における細胞培養でmRNAを精製し、cDNA arrayによる解析を行い、幾つかの遺伝子群について解析をしている。1.DDR1の癌細胞における機能解析ため、DDR1b Isoformの高発現細胞株(MCF7)を用いてレトロウイルスにより恒常的にshDDR1を発現させるstablecell lineを樹立した。Mock細胞と比較して、DDR1のknock downcell (KID)は、形態学的に細胞間接着が解離し偽足を伸長した。この変化はコラーゲン存在下では顕著であるが、コラーゲン非存在下でも確認された。また、Confocal microscopeを用いた解析により、KID細胞では上皮間でのE-cadherin発現が減少し、細胞内へ移動していた。2.K/D細胞の生物学的特徴を明らかにするため、細胞増殖・造腫瘍・運動・浸潤能について検討した。K/D細胞では、いずれの解析法においても有意な活性促進が観察され、特に運動能、浸潤能においては著明であった。また、これらの活性はIntegrin beta1中和抗体、PI3K阻害剤の存在下で有意に抑制された。4.DDR1のmajor isformのDDR1aとDDR1bの機能解析ため、DDR1aの発現がdominantである高転移細胞株(MDA-MB-231)を用いて、DDR1aとDDR1b各々のoverexpressionさせたstable cell lineを樹立した。2.K/D細胞において、細胞増殖の系にWTS assayを用いて一再検討を行った。
藍藻由来の新規メタロプロテアーゼ阻害物質の探索とその機能解析

メタロプロテアーゼの代表的酵素であるカルボキシペプチダーゼA(CPA)に対する強力な阻害活性をしめした淡水産藍藻Oscillatoria agardhii由来の環状ペプチドanabaenopeptin Gについて、CPAによる基質認識部位がウレイド結合の先にあるアミノ酸残基であり、また類縁体の合成から環構造が開いた直鎖型anabaenopeptinは不活性であることを確認している。そこで環構造のどの部位が活性発現に必要かを評価するために、まず全てのanabaenopeptinに必ず含まれている_L-homotyrosine残基とN-Meアミノ酸および_D-Lys残基の活性発現への寄与を検討した。これら目標のアミノ酸残基を他の残基に置換した類縁体を合成し活性の評価を行った結果、興味深いことに、_L-homotyrosine残基を_L-Alaに変換したものでも活性は同程度に維持された。またN-Me-_L-Alaを_L-Ala残基に、さらに_D-Lysを_L-Lysに改変した類縁体においても活性は維持された。このことよりanabaenopeptin Gの阻害機構は、環状構造部の残基は直接的には活性発現には関与していないことが判明し、環構造全体のコンフォメーションが阻害に寄与しているのでないかと考えられた。現在、環構造を構成するアミノ酸数を増減させた類縁体を作成中であり、どの程度の環の大きさで阻害活性が維持されるかを検討中である。また新規メタロプロテアーゼ阻害物質の探索のひとつとして、各種らん藻の培養上清中の金属キレート活性をCAS法による鉄キレート活性によって評価したところ、らん藻Anabaena variabilis NIES-23株の培養濾液に強力な鉄キレート活性を認めた為、活性本体としてschizokinenを逆相クロマトグラフィーを用いて単離・精製し、NMRおよびMSを用いて構造決定を行った。本物質は鉄欠乏培地で培養すると大量に培地中に確認されることから、微生物が鉄欠乏下で鉄獲得の為に生合成するシデロフォアの一つであると考えられる。昨年単離したA. cylindrica NIES-19由来のanachelinsは残念ながらCPAには活性を示さなかった。現在schizokinenがCPAおよび他の金属プロテアーゼに対して阻害活性をもつか調査中である。
健診要医療判定・医療未受診者の特性：健診・レセプト突合による疫学研究と質的研究

本研究は健康保険組合のレセプトと健診データの匿名化突合により、高血糖と高血圧に関する要医療判定者を追跡し、6か月以内の受診は糖尿病で3割強、高血圧で3割以下であること、未受診の予測因子は、若年、検査値が受診勧奨の基準を越えるが比較的低い値であることを示した(Tsujimura, Diabetes Res Clin Pract [in press])。京都府A市に移住した東日本大震災被災者11人に面接を行い、住民票の移動の有無で健診受診機会が変わることが示された(投稿中).現在の特定健診・特定保健指導は、生活習慣病予備軍としてのメタボリック症候群対策に主眼が置かれる一方、検診結果で「医療機関受診が望ましい(要医療)」と判定された糖尿病・高血圧・脂質異常者への対応は実施主体によって大きく異なり、有効な対策の樹立、効果の検証が遅れている。本研究は(1)保険者の有する健診・レセプト(診療報酬明細書)の突合データセットを開発し、コホート研究により生活習慣病の「要医療判定」者の頻度とその後の受診状況、その予測因子を解明する。(2)「健診要医療判定」かつ医療機関未受診者を対象に面接調査(個別・集団)を実施し、その心理的・行動的プロセスを解明する。複数の健康保険組合由来のレセプトと健診データの匿名化突合により、統合的なデータセットを構築して要医療判定者(糖尿病[空腹時血糖126mg/dl又はHbA1c6.5%以上かつ非服薬者]・高血圧[収縮期血圧140mmHgかつ/または拡張期血圧90mmHgかつ非服薬者]の頻度、その後の医療機関受診状況の記述的な解析を進めた。その結果、糖尿病の可能性のある健診受診者のうち、6か月以内に医療機関を受診したのは3割強、同様に高血圧に関しては3割以下であった。医療機関未受診の予測因子は、年齢が若いこと、血圧値・HbA1c値が受診勧奨の基準値を越えるが比較的低い値であることが得られた。健診受診者の特性を考慮した受診勧奨システム、健診後の受療行動も考慮した健診の評価・研究が望まれる(論文投稿・査読後修正中)。面接調査に関しては京都府A市の成人を対象に、検診受診とその後の医療機関受診について予備面接を行った。特に東日本大震災による東北地方からの避難者の方々(11人に面接調査を実施)は、住民票の移動の有無で健診受診機会が変わることが示され、予防含む保健医療の継続性の課題が指摘された(論文投稿準備中)。京都府A市に移住した東日本大震災被災者11人に面接を行い、住民票の移動の有無で健診受診機会が変わることが示された(投稿中).現在の特定健診・特定保健指導は、生活習慣病予備軍としてのメタボリック症候群対策に主眼が置かれる一方、検診結果で「医療機関受診が望ましい(要医療)」と判定された糖尿病・高血圧・脂質異常者への対応は、実態把握から介入法まで実施主体によって大きく異なり、有効な対策の樹立、効果の検証が遅れている。平成25年度は複数の健康保険組合由来のレセプトと健診データの匿名化突合により、統合的なデータセットを構築して糖尿病・高血圧の要医療判定者の頻度、その後の医療機関受診状況の記述的な解析を進めた。その結果、糖尿病の可能性のある健診受診者のうち、6か月以内に医療機関を受診したのは3割余り、同様に高血圧に関しては3割以下であることが明らかとなった。医療機関未受診の予測因子としては、年齢が若いこと、血圧値・HbA1c値が受診勧奨の基準値を越えるが比較的低い値であることが得られた。現在、これらの成果は論文投稿中である。特に東日本大震災による東北地方からの避難者の方々は、住民票の移動の有無で健診受診機会が変わることが示され、予防含む保健医療の継続性の課題が指摘された。平成25年度は継続的比較分析を進め、成果の発表につなげたい。投稿中の2論文では、健保組合被保険者を対象として、健診で糖尿病・高血圧について要医療の判定を受けた者の頻度、その後の医療機関受診状況、予測因子に関するコホート研究の論文の受理・発表を目指す。また健診未受診に関する面接調査・継続比較分析を継続して、論文化を勧める。H24年度は突合データベースの解析を優先し、健診関係の面接者数が予定よりもやや少なかった。そのための予定謝金が残ったので、今年度は当初予定の達成に向けて面接調査を進める。