hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
自動圧迫装置により測定した定量化毛細血管再充満時間によるショックの予測

パルスオキシメータの原理を応用して爪床圧迫前後の近赤外光と赤色光の透過光変化から定量化した毛細血管再充満時間(Q-CRT)ならびに吸光度変化(ΔAb)と、血中乳酸値・敗血症との関連を検討した。救急外来内因性疾患例で、乳酸値≧2mmol/L群は<2mmol/L群に比して有意にΔAb値が低く、高乳酸血症予測の感度は64%、特異度は75%であった。敗血症予測におけるQ-CRTのカットオフ値は3.3秒、感度55%、特異度82%。予測精度はq-SOFAと同等で、SIRSよりも高い特異度を示した。ΔAbは高乳酸血症の診断に優れた指標であり、Q-CRTは敗血症予測の有用なパラメータであることが示された。1健常成人における自動指尖圧迫装置(APD )の至適圧迫圧の検討健常成人におけるAPDの至適圧迫圧を検討した。同一対象に対して複数回行って得られるQ-CRTの測定の幅が最も小さい圧迫圧を至適圧迫圧として検討を行った。設定圧(300、400、500mmHg)の間でQ-CRT、ΔAbの平均値に統計学的差をみとめず、また最大値と最小値の差の平均値は、Q-CRT、ΔAbともに400mmHgが最小であり、APDの圧迫の設定圧は400mmHgであると推定されたが、今後のさらなるデータ集積が必要である。2救急初療室におけるショックとの相関に係る検討重症救急症例の病院搬入時におけるQ-CRTと乳酸値の関係について検討した。対象は当院救命救急センターへ搬送された98例。試作したAPDをパルスオキシメータと接続し被検者の示指へ装着してQ-CRTを測定し、ショック指標(乳酸値、塩基欠乏、収縮期血圧、心拍数、呼吸数)との相関を検討した。また、Q-CRTが乳酸値または塩基欠乏の予測因子となるかを検討した。Q-CRTと各パラメータの相関の程度は、乳酸値(ρ=0.019、p=0.86)、塩基欠乏(ρ=0.11、p=0.31)、収縮期血圧(ρ=-0.028、p=0.80)、心拍数(ρ=0.094、p=0.39)、呼吸数(ρ=0.049、p=0.65)といずれも低かった。重回帰分析において乳酸値または塩基欠乏とQ-CRTとの間で有意な関連は認めなかった。今回、Q-CRTがショックと関連しなかった原因として軽症例が多く、対象症例の選択バイアスの可能性があること、救急初期診療中の患者であり体動を完全に除去できなかったこと、病態が変化している中での1回のみの測定であり、病態の本態を表していない可能性があることが考えられた。測定機器の機械的な調整作業に時間を要した点と、救急初療時の重症度が高い症例において診療を優先せざるを得なかった場合が散見され、症例数の蓄積が十分でなかった点が進捗の遅れの原因と考えている。至適圧迫圧を設定した自動指尖圧迫装置(APD)を用いて、初期・二次救急症例を対象に研究を実施した。【目的】指尖圧迫前後の吸光度変化(ΔAb)と静脈血乳酸値の関係について解析する。【方法】対象は、本学医学部附属病院救急部で血液検査を実施した139例の内因性疾患。研究デザインは前向き観察研究。測定項目は、年齢、性別、ICD10による疾患分類、来院時の以下の項目(体温、収縮期血圧、心拍数、呼吸数、SpO2、Hb、WBC、Alb、尿素窒素、Cr、CRP、Na、K、Cl、ΔAb)。静脈血乳酸値<2mmol/L群と≧2mmol/L群の2群間で測定項目を比較した。【結果】<2mmol/L群94例、≧2mmol/L群45例。単変量解析において≧2mmol/L群は<2mmol/L群に比較して、有意にΔAb値が低かった(p < 0.001)。多変量ロジスティック回帰分析において、ΔAbのオッズ比は0.16(95%CI:0.05 - 0.45, p = 0.001)であった。多変量解析の結果からΔAbは静脈血乳酸値の異常の有無を説明できる独立因子であることがわかり、カットオフ値は0.0342で、その際の静脈血乳酸値の異常を予測する感度は64%、特異度75%、尤度比2.42、ROC曲線によるAUC(95%信頼区間)は0.69 (0.60 - 0.76)であった。【考察】救急外来での簡便なショック予測に有用であり、比較的特異度が高いことから、高乳酸血症の診断に優れた指標であることが示された。集中治療室や手術室症例における同一症例への継時的計測データが得られていないので、今年度集積予定である。また、新たに作成予定の予測式の精度を他の症例にあてはめて昨年度内に実施できなかったためである。

【目的】パルスオキシメータの原理を応用して爪床圧迫前後の近赤外光と赤色光の透過光変化から定量化した毛細血管再充満時間(Q-CRT)ならびに吸光度変化(ΔAb)と、ショック、敗血症との関連について検討した。【ショック症例の動脈血乳酸値とQ-CRT】救命救急センターへ搬送された98例を対象に、Q-CRTとショック指標との相関を検討した。Q-CRTと各パラメータの相関の程度はいずれも低かった。体動を完全に除去できなかったこと、病態が変化している中での単回測定であることが結果に影響したと考えられた。【静脈血乳酸値とΔAb】初期・二次救急対応の救急部で血液検査を実施した139例の内因性疾患のうち、静脈血乳酸値<2mmol/L群94例と≧2mmol/L群45例を比較検討した。単変量解析で≧2mmol/L群は<2mmol/L群に比較して、有意にΔAb値が低かった(p < 0.001)。静脈血乳酸値の高値を予測するΔAbのカットオフ値は0.0342で、感度は64%、特異度75%。【Q-CRTと敗血症】救急外来症例で感染症かつSOFAスコア2点以上で定義した敗血症40例(敗血症群)と、感染症かつSOFAスコア2点未満の65例(非敗血症群)の2群間で、Q-CRTを比較し、敗血症の予測精度を従来の予測指標であるSIRS、q-SOFAと比較した。Q-CRTは、敗血症群が3.4秒、非敗血症群が1.8秒。敗血症の予測において、Q-CRTのカットオフ値は3.3秒、感度55%、特異度82%。Q-CRTは感度、特異度ともq-SOFAと同等であり、SIRSよりも高い特異度を示した。【まとめ】Q-CRTは救急外来において高乳酸血症の診断に優れた指標であり、またSIRSと比較して評価に要する時間が短く、q-SOFAよりも検者間での値のばらつきが少なく、敗血症の予測において有用なパラメータであることが示された。パルスオキシメータの原理を応用して爪床圧迫前後の近赤外光と赤色光の透過光変化から定量化した毛細血管再充満時間(Q-CRT)ならびに吸光度変化(ΔAb)と、血中乳酸値・敗血症との関連を検討した。救急外来内因性疾患例で、乳酸値≧2mmol/L群は<2mmol/L群に比して有意にΔAb値が低く、高乳酸血症予測の感度は64%、特異度は75%であった。敗血症予測におけるQ-CRTのカットオフ値は3.3秒、感度55%、特異度82%。予測精度はq-SOFAと同等で、SIRSよりも高い特異度を示した。ΔAbは高乳酸血症の診断に優れた指標であり、Q-CRTは敗血症予測の有用なパラメータであることが示された。今後は病態別に検討するとともに、Q-CRTならびに吸光度の差(ΔAb)を経時的に測定し、病態モニタリングの動的指標として研究を行う必要がある。また、より静的な状況でのモニタリング環境を求め、研究者施設の集中治療室と救急外来(ER)において調査を行っていく。次にこれらの結果に基づき、Q-CRTを用いて非ショック、軽症、中等症、重症といったショックの類型化と定義付けを行い、併せて乳酸値などの生化学的パラメーターの予測式を作成する。次に、異なる母集団に対して予測式の精度を検証する。さらに、作成した予測式や類型を異なる母集団に当てはめて、それらの精度を検討する予定である。今後は、今回得られたカットオフ値を基に、異なる救急外来の母集団に対して前向き症例集積研究を実施し、カットオフ値の精度を検証する。この際、年齢や病態、あるいは血液検査データなどによる補正を行い、最終的には定性的な予測ではなく、定量予測、すなわち乳酸値の予測式作成について検討する。また、病態別に同一症例において経時的な検討を加える予定である。
フィロウイルスの細胞侵入メカニズムと宿主域に関する研究

ヒトNPC1の多様性とフィロウイルスに対する感受性:ヒト由来Jurkat TおよびRamos B細胞はいずれもフィロウイルスに対して非感受性である事が知られている。面白いことに、Jurkat T細胞は、フィロウイルスの細胞吸着因子の一つであるC型レクチンを発現させることによって感受性を獲得したのに対して、Ramos B細胞は非感受性のままであった。そこで、Jurkat TおよびRamos B細胞のNPC1遺伝子をクローニングし、アミノ酸配列を比較したところ、2箇所(200番目と215番目)のアミノ酸が異なる事が分かった。これらのNPC1をクローニングし強制発現させた細胞を確立し、Vesicular Stomatitis Virus (VSV)のシュードタイプシステムを用いて、フィロウイルスに対する感受性の違いを解析したが、違いは認められなかった。コウモリ由来細胞のフィロウイルスに対する感受性を決定する因子の探索:既知のフィロウイルス全てについて、GPを持つシュードタイプウイルスの感染性を様々なコウモリ由来の培養細胞で比較した結果、エボラウイルスは感染するがマールブルグウイルスは感染しないコウモリ細胞(FBKT1)が存在する事が明らかとなり、レセプター(NPC1)の違いによるものと推定された。FBKT1にヒト由来のNPC1を導入するとマールブルグウイルスに対する感受性を獲得した。マールブルグウイルス感受性細胞とFBKT1の間で、NPC1のアミノ酸配列を比較した結果、GPとの結合に重要と考えられている領域のアミノ酸配列に違いが認められた。また、NPC1との結合に重要と考えられているGP上のアミノ酸配列にもエボラウイルスとマールブルグウイルスの間で違いが認められた。これらのアミノ酸を入れ替えると感染性が逆転した。以上より、GPとNPC1の結合がフィロウイルスの宿主域に関与している事が示唆された。28年度が最終年度であるため、記入しない。TIM-1およびNPC1の遺伝子多形による感受性の違い:ヒト由来Jurkat TおよびRamos B細胞はいずれもフィロウイルスに対して非感受性である事が知られているが、両者のNPC1には、数アミノ酸の違いがある。面白いことに、Jurkat T細胞はC型レクチンを発現させることによって感受性を獲得するのに対して、Ramos B細胞は非感受性のままである。Jurkat TおよびRamos B細胞のNPC1遺伝子をクローニングし、アミノ酸配列を比較したところ、2箇所(200番目と215番目)のアミノ酸が異なる事が分かった。今後、Jurkat TおよびRamos B細胞のNPC1を強制発現させた細胞を確立し、フィロウイルスに対する感受性の違いを解析する。コウモリ由来細胞のフィロウイルスに対する感受性を決定する因子の探索:フィロウイルスのGPを持つシュードタイプウイルスの感染性を様々な動物種由来の培養細胞で比較した結果、エボラウイルスは感染するがマールブルグウイルスは感染しないコウモリ細胞が存在する事が明らかとなり、レセプターの違いによるものと推定された。そこで、様々なコウモリ由来細胞のTIM-1およびNPC1遺伝子をデータベース検索し、幾つかの遺伝子をクローニングした。今後、これらを強制発現させた細胞を確立し、フィロウイルスに対する感受性の違いを解析する。当初の予定通り、ヒト由来Jurkat TおよびRamos B細胞のNPC1遺伝子をクローニングし、アミノ酸配列の比較から2箇所の違いを突き止めることが出来た事ならびにそれらを強制発現させるための爬虫類細胞(エボラウイルスが利用できるNPC1を持っていない細胞)の入手し次のステップへの準備が整った事。さらに、ゲノム配列が明らかになっていない様々なコウモリ由来細胞から、数種類のNPC1遺伝子をクローニングできた事。Jurkat TおよびRamos B細胞のNPC1をレトロウイルスベクターを用いて強制発現させた爬虫類細胞を確立し、フィロウイルスに対する感受性の違いを解析する。また、差が認められた場合、いずれのアミノ酸が重要かを明らかにする。さらに、コウモリ

由来細胞からTIM-1あるいはNPC1遺伝子のクローニングを継続し、クローニングされた遺伝子に関して、発現系を確立し、フィロウイルスに対する感受性の違いを解析する。28年度が最終年度であるため、記入しない。
動脈硬化進展における鉄の関与の解明

透析患者の腎性貧血の管理において鉄の投与は主要な治療法のひとつであるが、同時に酸化的ストレスを増強することなどから、動脈硬化を促進する可能性がある。我々は、鉄が血管内皮細胞の石灰化の因子となりうることを見出している。しかしながら、慢性腎不全における石灰化の主要な場は血管中膜細胞(メンケベルグ型動脈硬化)である。すでに予備的な解析で、鉄負荷が血管内皮細胞に石灰化を炎症ストレスと共に誘導し、マイクロアレイにて様々なサイトカイン等がこのプロセスに関わっていることを見出している。そこで、この鉄負荷が血管中膜細胞の石灰化に影響を与えるかどうか、またどのような機序で血管中膜細胞に石灰化を惹起させるかを明らかにし、新規の動脈硬化抑制の治療法を確立してくことを目的とする。論文として報告することができ、概ね順調ではあるが、大動脈中皮細胞で同じ挙動を示す細胞が使い切り、現在同じ挙動するものをスクリーニングしているため、少し次のステップが遅れている。培養血管中膜細胞における鉄負荷による石灰化促進を確認できる実験系の確立はすでに確立している。また、マイクロアレイを用いた鉄負荷による石灰化促進に関与する遺伝子の網羅的解明を終えている。マイクロアレイは鉄負荷・TGFβとそれぞれ単独・共刺激を行い、さらに刺激後day 1とday3を行うことで、現在IL24に着目して、検討を進めている。さらに、マイクロアレイで確認された細胞内シグナルの遺伝子レベルあるいはタンパクレベルでの確認。これにより鉄負荷による石灰化促進のメカニズムを明らかにしていく。また、鉄負荷で石灰化促進にかかわる細胞内シグナルをsi-RNAや抗体を用いてブロックすることで石灰化抑制が可能かどうかを検討していく。さらに酸化的ストレスの中和剤が薬剤として有効に働くかも検討予定である透析患者において腎性貧血の管理において鉄の投与は主要な治療法のひとつであるが、同時に酸化的ストレスを増強することなどから、動脈硬化を促進する可能性がある。我々のグループでは、既に培養大動脈血管中膜細胞(血管平滑筋細胞)の培養液中に鉄を添加刺激と炎症状態を惹起するようにTGFβ刺激を行って石灰化を惹起できるかどうかの予備実験を行っている。この予備実験で、低濃度の鉄刺激とTGFβ刺激の共刺激で石灰化は増強し、高濃度の鉄刺激では単独でも石灰化を惹起することを見出している。このことは、透析患者において鉄投与を安易に行うと石灰化を増強することを強く示唆している。この鉄による血管中膜細胞における石灰化促進に関して、既報が無いためにどの細胞内シグナルが寄与しているかを解明することは難しい。そのため、鉄刺激を行ったDay1と刺激を行っていないものとの比較をアジレント社のMicroarrayを用いて網羅的に検討を行った。Fold Change45倍以上でも、様々な遺伝子が動いていることが明らかになっている。これらを踏まえて、鉄負荷が血管中膜細胞の石灰化にどのような影響を与えるかを明らかにしていく。A.培養血管中膜細胞における鉄負荷による石灰化促進を確認できる実験系の確立B.マイクロアレイを用いた鉄負荷による石灰化促進に関与する遺伝子の網羅的解明。マイクロアレイは鉄負荷・TGFβとそれぞれ単独・共刺激を行い、さらに刺激後day 1とday3を行うことで、より確かなものを拾い出していく。C.マイクロアレイで確認された細胞内シグナルの遺伝子レベルあるいはタンパクレベルでの確認。D.鉄負荷で石灰化促進にかかわる細胞内シグナルをsi-RNAや抗体を用いてブロックすることで石灰化抑制が可能かどうかを検討していく。E.鉄負荷による石灰化促進にかかわるメカニズムを抑制することで動脈硬化、あるいは血管の石灰化を抑制する新規薬剤の開発が計画であるが、マイクロアレイでの遺伝子変化を再確認できており、またタンパクレベルでも検証でき、ほぼ予定通り進んでいる透析患者において腎性貧血の管理において鉄の投与は主要な治療法のひとつであるが、同時に酸化的ストレスを増強することなどから、動脈硬化を促進する可能性がある。具体的には、培養血管中膜細胞における鉄負荷による石灰化促進を確認できる実験系の確立をまず行う。次にマイクロアレイを用いた鉄負荷による石灰化促進に関与する遺伝子の網羅的解明を行った。

マイクロアレイは鉄負荷・TGFβとそれぞれ単独・共刺激を行い、さらに刺激後day 1とday3を行うことで、より確かなものを拾い出していった。さらに、マイクロアレイで確認された細胞内シグナルの遺伝子レベルあるいはタンパクレベルでの確認を行った。これにより鉄負荷による石灰化促進のメカニズムを明らかにしていった。また、鉄負荷で石灰化促進にかかわる細胞内シグナルを抗体を用いてブロックすることで石灰化抑制が可能かどうかの検討を行った。培養血管中膜細胞における鉄負荷による石灰化促進を確認できる実験系の確立はすでに確立している。また、マイクロアレイを用いた鉄負荷による石灰化促進に関与する遺伝子の網羅的解明を終えている。マイクロアレイは鉄負荷・TGFβとそれぞれ単独・共刺激を行い、さらに刺激後day 1とday3を行うことで、現在IL24に着目して、検討を進めている。さらに、マイクロアレイで確認された細胞内シグナルの遺伝子レベルあるいはタンパクレベルでの確認。これにより鉄負荷による石灰化促進のメカニズムを明らかにしていく透析患者の腎性貧血の管理において鉄の投与は主要な治療法のひとつであるが、同時に酸化的ストレスを増強することなどから、動脈硬化を促進する可能性がある。我々は、鉄が血管内皮細胞の石灰化の因子となりうることを見出している。しかしながら、慢性腎不全における石灰化の主要な場は血管中膜細胞(メンケベルグ型動脈硬化)である。すでに予備的な解析で、鉄負荷が血管内皮細胞に石灰化を炎症ストレスと共に誘導し、マイクロアレイにて様々なサイトカイン等がこのプロセスに関わっていることを見出している。そこで、この鉄負荷が血管中膜細胞の石灰化に影響を与えるかどうか、またどのような機序で血管中膜細胞に石灰化を惹起させるかを明らかにし、新規の動脈硬化抑制の治療法を確立してくことを目的とする。論文として報告することができ、概ね順調ではあるが、大動脈中皮細胞で同じ挙動を示す細胞が使い切り、現在同じ挙動するものをスクリーニングしているため、少し次のステップが遅れている。A.培養血管中膜細胞における鉄負荷による石灰化促進を確認できる実験系の確立B.マイクロアレイを用いた鉄負荷による石灰化促進に関与する遺伝子の網羅的解明。マイクロアレイは鉄負荷・TGFβとそれぞれ単独・共刺激を行い、さらに刺激後day 1とday3を行うことで、より確かなものを拾い出していく。C.マイクロアレイで確認された細胞内シグナルの遺伝子レベルあるいはタンパクレベルでの確認。これにより鉄負荷による石灰化促進のメカニズムを明らかにしていく。D.鉄負荷で石灰化促進にかかわる細胞内シグナルをsi-RNAや抗体を用いてブロックすることで石灰化抑制が可能かどうかを検討していく。E.鉄負荷による石灰化促進にかかわるメカニズムを抑制することで動脈硬化、あるいは血管の石灰化を抑制する新規薬剤の開発が計画であるが、さらにこの遺伝子産物を鉄の代わりに投与して動脈硬化が惹起出来るかどうかを確認する。
キノメチド構造が高度に導入されたチオフェン系レドックス分子の創製

オリゴチオフェン類のすべてのCーH炭素に2,6-ジ-tert-ブチル-4-メチレンシクロヘキサ-2,5-ジエノン構造(キノメチド)を導入した,極めて非平面性の高い多段階酸化還元系分子の合成を目的とした研究を行い,テトラキノメチド体およびヘキサキノメチド体の合成を達成した。その構造はX線結晶構造解析から,中央5員環がねじれ舟形に折れ曲がることで立体反発を回避していることがわかった。酸化還元挙動においては,電子授受に応じて分子が大きくコンフォメーションを変化させることが明らかになると共に,その色調が大きく変化するエレクトロクロミズムを示すこともわかった。今年度は,昨年度より取り組んでいる高度キノメチド置換オリゴチオフェンの研究を引き続き行った。昨年度合成に成功したテトラキノチオフェン,ヘキサキノビチオフェンの次なるターゲットとして,ターチオフェンのすべてのCH部分にキノメチドが置換されたオクタキノターチオフェンを選んだ。この化合物はテトラキノチオフェン,ヘキサキノビチオフェンよりもさらに立体障害が増大しており,安定構造としてどのようなコンフォメーションをとるのか興味深い。合成法としてヘキサキノビチオフェンの合成に用いたフェノールが多数置換したチオフェン環の酸化的カップリングによって直接得る方法を検討したがうまくいかず,前駆体としてオクタフェノール置換ターチオフェンを合成し,それを酸化する方法を検討した。しかしながらさまざまな酸化剤,酸化条件を検討したが,現在のところ目的のオクタキノターチオフェンを得るには至っていない。前駆体のフェノール部位が酸化されることまでは確認できているが,やはり立体障害が大きいためか,閉殻構造であるキノン構造に落ち着くことができず,マルチラジカル種が生成したのち,分解が起こっているものと想像される。現在,キノメチドの数を減らしたターチオフェン誘導体の合成を行い,オクタキノターチオフェンを合成するための知見を得ることを検討している。昨年度よりターチオフェンのすべてのCH部分にキノメチドが置換されたオクタキノターチオフェンに取り組んでいたが,今年度は前駆体のポリフェノール体の酸化反応を系統的に調べることで,オクタキノ体の合成の困難さを明らかにすることができた。反応様式の異なる3種の酸化剤(DDQ,アルカリ性フェリシアン化カリウム,五塩化アンチモン)をテトラフェノール体,ヘキサフェノール体,オクタフェノール体にそれぞれ作用させて生成物を分析した。また五塩化アンチモンについては滴定実験を行い,反応をUVーVisスペクトルで追跡した。その結果,フェノール部位の数が増えるほど,反応中間体として重要な役割を果たすチエノキノイド構造がとり難くなることがわかった。オクタフェノール体においてはチエノキノイド構造を全く検出することができず,分子両末端のチオフェン環α位のフェノール部位と,残りの6つのβ位フェノール部位との反応性に差がないと言える。その一方で,五塩化アンチモンを酸化剤とした場合には,目的のポリキノ体は生成せず,テトラフェノール体,ヘキサフェノール体からはチエノキノイド構造が得られた。この原因は,五塩化アンチモンがルイス酸性を持つために,酸化によって生成したチエノキノイド体のカルボニル基に五塩化アンチモンが配位することでそれ以上の酸化が妨げられているためと考えられる。さらに,ポリアニオン種のサイクリックボルタモグラムを詳細に解析することで,オクタキノターチオフェンが合成できないのは,中間体であるキンクキノン型のチエノキノイド構造が本質的に不安定であるためと結論付けられた。不安定さの理由としては,過大な立体障害に加えて,多数の芳香環がキノイド構造をとることによる芳香族共鳴安定化の低下が挙げられる。今年度は高度キノメチド置換オリゴチオフェン類の合成に取り組み,チオフェンの4つの炭素全てにキノメチドが導入されたテトラキノチオフェン(1),ビチオフェンの6つの炭素全てにキノメチドが導入されたヘキサキノビチオフェン(2)の合成に成功した.化合物1はX線結晶構造解析により,そのチア[4]ラジアレン構造を明らかにした.また,2電子還元によりチエノキノイド構造を有するジアニオン種,4電子還元によりチオフェン構造をもつテトラアニオン種がそれぞれ安定に得られることを見出し,しかもそれらの電子スペクトルが大きく異なるという,いわゆるエレクトロクロミズムを示すことがわかった.さらに,硫黄原子の酸化により対応するS-オキシド,S,S-ジオキシド体を合成し,それらの電子スペクトルおよび酸化還元挙動が化合物1と大きく異なることを見出し,硫黄原子が化合物1の電子構造において重要な役割を果たしていることを明らかにした.化合物2は相当するヘキサフェノール体の酸化反応からは合成することができず,2,3,4-トリフェノール置換チオフェン誘導体の酸化的二量化反応により得ることができた.還元電位の測定から,化合物2はヘキサアニオンまでの生成が確認されたが,1電子目の還元においてその分子構造を大きく変化させることが明らかとなった.現在,さらにチオフェン環の数が増えたオクタキノターチオフェンの合成に取り組んでいる.

合成標的としては,かなりの困難が予想される化合物ではあったものの,今年度の目標としていたオクタキノターチオフェンの合成が達成できていないことを鑑みれば,研究の達成度はやや遅れていると言わざるを得ない。今年度は高度キノメチド置換オリゴチオフェン類において,オクタキノ体の合成までを目標とした.残念ながら目標を完全に達成することはできなかったが,ヘキサキノ体までの合成は成功し,しかもその合成法も従来の延長ではなく,新規な方法を見出すことができた.またオクタキノ体についても,前駆体までの合成に成功しており,来年度には達成できるものと考えている.またテトラキノ体についてはその構造,反応性,S-オキシド,S,S-ジオキシドへの変換など,その化学に関してほぼ明らかにすることができた.今年度が最終年度であることを考えれば,本研究課題の総括が行えるような研究の進め方をする必要がある。オクタキノターチオフェンの合成検討は引き続き行うものの,それにこだわらず,新たな分子設計に基づく非平面性キノメチド系化合物の合成を行い,これまでに得られた知見を総合して,高度キノメチド置換化合物の研究から導き出される新たな概念を提案できるようにしたい。研究計画で挙げた3つの柱のうち,1つがほぼ達成されつつあるので,残りの2つであるテトラキノチエノアセン類ならびにヘキサキノジチエノペンタレン類の合成に取り組む.今年度の研究で得た知見を活かしつつ,より簡便かつスマートな新規合成法の開発を目指す.標的分子が得られれば,その分子構造を明らかにするとともに,酸化還元挙動を中心とした物性面での新たな発見を探索する.今年度から研究機関が変更になったことに伴い,研究費は主として試薬品,ガラス器具などの消耗品に充てていく予定である。学会等の出張に関してはこれまでよりも困難になると予想されるが,可能な限り研究成果を発表できる機会を設けたい。次年度は特に高額の備品等を購入する計画はなく,主として試薬類などの消耗品に充てる予定である.ただ,学会等で成果の発表ならびに情報収集は重要であるので,そのための出張は適宜行う予定である.
癌の診断・治療法開発を目指した放出孔サイズ制御型の腫瘍低pH応答性ナノ粒子の開発

リポソーム型ドラッグデリバリーシステム(DDS)用いて、効果的な癌治療を達成するためには、リポソームが腫瘍に送達された後に、リポソームから効率的に薬物が放出される必要がある。そこで、本研究では腫瘍低pHに応答して物性が変化するペプチドをリポソームに搭載することで、腫瘍特異的な薬物放出を可能とするDDSを開発した。すなわち、腫瘍内の微弱低pH環境応答性の膜不安定化ペプチドSAMPを設計し、リポソーム膜内にSAMPを組み込んだナノ粒子(SAMP-lipo)を構築した。SAMP-lipoは、腫瘍内の微弱低pH環境に応答して、低分子薬物を選択的に放出可能な薬物運搬ナノ粒子であることが示唆された。腫瘍内微弱低pHは腫瘍標的のための環境因子として着目されている。本研究では、この腫瘍低pHに応答して物性が変化する2種類のペプチドを各々リポソーム膜内・表面に搭載することで、体内動態および薬物放出に優れた新規薬物運搬ナノ粒子を開発することを目的した。平成25年度は、腫瘍内の微弱低pH環境下において、ナノ粒子からの薬物放出が促進されるナノ粒子を開発するために、微弱低pH応答性の膜不安定化ペプチドSAMPを設計するとともにリポソーム膜内にSAMPを組み込んだナノ粒子(SAMPリポソーム)を構築し、その機能性を評価した。SAMPリポソームにカルセイン(低分子化合物のモデル薬物)を封入した場合、pH 6.5において、約100%のカルセイン放出が認められた。またSAMPリポソームの脂質組成を検討した結果、負電荷脂質を含有する組成に比べて、正電荷脂質を含有する組成のリポソームの方が、微弱低pH下における薬物放出能が高いことが明らかとなった。さらに、SAMPリポソームから放出可能な薬物のサイズを検討した結果、モデル高分子薬物のデキストラン(3kD)は、SAMPリポソームから全く放出されなかった。また、カルセインとデキストランを共封入したSAMPリポソームでは、低分子のカルセインが選択的に放出され、デキストランの放出は認められなかった。以上の結果より、SAMPリポソームは腫瘍微弱低pHにおいて、低分子薬物を選択的に放出可能な薬物運搬ナノ粒子であると考えられる。平成26年度はSAPSリポソームに体内動態制御素子として低pH応答性脱離型PEGを搭載し、その機能性を評価する予定である。腫瘍微小環境の1つである微弱低pHが腫瘍標的化のための環境因子として着目されている。そこで、本研究では、腫瘍低pHに応答して物性が変化するペプチドをリポソームに搭載することで、腫瘍特異的薬物放出に優れた新規ドラッグデリバリーシステム(DDS)を開発することを目的とした。腫瘍内の微弱低pH環境下において、DDSからの薬物放出が促進されるナノ粒子を開発するために、微弱低pH応答性の膜不安定化ペプチドSlightly Acidic pH-responsivemembrane perturbablepeptide (SAMP)を設計するとともにリポソーム膜内にSAMPを組み込んだナノ粒子(SAMP-lipo)を構築し、その機能性を評価した。SAMP-lipoにカルセイン(低分子化合物)を封入した場合、pH 6.5における放出促進が認められた。さらに、SAMP-lipoにモデル高分子薬物のデキストランとカルセインを共封入した場合では、カルセインが選択的に放出されたことから、SAMP-lipoは低分子薬物のみを放出可能であることが示唆された。また構造活性相関を検討するために、長さ、物性の異なる5種のペプチドを設計・委託合成し、リポソームに搭載した場合の薬物放出能を比較した結果、オリジナルSAMPを搭載したリポソームが、微弱低pHにおける放出効率が高いことが明らかとなった。このSAMP-lipo表面をポリエチレングリコール(PEG)で修飾し、抗癌剤ドキソルビシンを内封したDDSの抗腫瘍効果を検討した結果、未処理群やドキソルビシン単独群に比べて、腫瘍成長の抑制が認められた。以上の結果より、本研究で開発したSAMPリポソームは、腫瘍内の微弱低pH環境に応答して、低分子薬物を選択的に放出可能な薬物運搬ナノ粒子であると考えられる。薬物送達学H25年度は、腫瘍低pHに応答して物性が変化する2種類のペプチドを各々リポソーム膜内・表面に搭載したナノ粒子の構築し、in vitroにおける機能性を評価することを目的とした。微弱低pHにおける薬物放出を促進するために、リポソーム膜内に搭載する微弱低pH応答性の膜不安定化ペプチドSAMPを設計し、それを搭載したリポソームの薬物放出促進を確認することができた。

また薬物放出能を指標として、リポソームの脂質組成の最適化を行い、正電荷脂質を含むリポソームが最も薬物放出能が高いことを明らかにするとともに、放出可能な薬物サイズも明らかにした。さらにSAMPの構造活性相関を検討し、低pH応答性の薬物放出に必要なぺプチド配列を同定するとともに、SAMPリポソームの薬物放出メカニズムに、低pH下におけるSAMP構造変化が関与していることを明らかにした。リポソーム膜内にSAMPを搭載したナノ粒子に関しては、計画通りに研究を進めることができたが、SAMPリポソームの機能性解析に集中して取り組んだため、低pH応答性の体内動態制御素子(低pH応答性の脱離型PEG)を修飾したナノ粒子の構築に関しては計画に比べて若干遅れているのが現状であり、平成26年度は効率的に研究を進める予定である。平成26年度は、はじめに低pH応答性の脱離型PEG(SAPS-PEG)修飾ナノ粒子の構築とその機能性を評価する。SAPS-PEGは既に設計済みであり、平成25年度に最適化したSAMPリポソームにSAPS-PEGを混合することによりナノ粒子の表面修飾を行う。構築したナノ粒子の体内動態を評価するために、Cd含有量子ドットを封入したナノ粒子を担癌マウスへ尾静脈投与し、IVISイメージングシステムを用いてナノ粒子の体内分布を継時的に観察するとともに、一定時間後の血液、腫瘍および主要組織内のCd量をICP-MSにより定量する。また蛍光イメージングによる低pH下の癌検出システムを開発するために、SAPS-PEGを修飾したSAMPリポソーム内にFRET複合体を封入したナノ粒子を担癌マウスへ投与し、IVISイメージング装置により、低pH下の腫瘍を検出可能かどうか評価する。さらに、SAPS-PEGを修飾したSAMPリポソーム内に抗腫瘍活性を有するTGF-β阻害剤およびanti-C7orf24 siRNAを共封入し、担癌マウスへ投与した際の抗癌効果を評価する。具体的には、TGF-βシグナル阻害による微小環境形成阻害は血管新生阻害を抗CD31抗体、マトリックス形成阻害を抗テネシン抗体を用いて免疫染色により評価する。また、in vivo RNAi効果は摘出腫瘍内のC7orf24 mRNA量をreal time PCRにより、細胞死をヘマトキシリン・エオシン染色およびTUNEL染色により評価する。
脳虚血モデルマウスにみられる摂食障害に対するn-3系脂肪酸の予防効果の評価

α-リノレン酸給餌は、一過性脳虚血によって生じる摂食障害(摂食量と体重の減少)に対して軽減効果を発揮することが判明した。しかしながら、このときの脳内では肝臓など末梢組織で顕著にみられるエイコサノイド前駆体脂肪酸含量の変動がほとんどなく、脳内でエイコサノイドの産生が抑制されているとは考えにくいことがわかった。また、α-リノレン酸は、LPS投与後の視床下部で起こる炎症性サイトカイン産生応答を抑制することが判明した。これらのことから、一過性脳虚血によって生じる摂食障害に対するα-リノレン酸の軽減効果は、視床下部で起こる炎症性サイトカイン産生応答の抑制による可能性が示唆された。初年度は、マウス一過性脳虚血モデルにおける体重・摂食量の変化、海馬神経細胞死の発生、組織(肝臓、脳)中リン脂質脂肪酸組成に対するα-リノレン酸給餌の影響を評価した。1)体重・摂食量の変化:対照群において、一過性脳虚血1日後の摂食量および体重は、一過性脳虚血前に比べて有意に減少したのに対して、α-リノレン酸給餌群ではそれらの有意な減少は生じなかった。2)海馬神経細胞死の発生:両群の間で有意差なく、発生した。3)組織中リン脂質脂肪酸組成:α-リノレン酸給餌群では、対照群に比べてわずかではあるが脳リン脂質中のアラキドン酸含量の割合は有意に減少し、EPAが蓄積されていた。以上の結果から、α-リノレン酸給餌は、虚血性神経細胞死の発生には影響を及ぼさないが、一過性脳虚血によって生じる摂食量と体重の減少に対して軽減効果を発揮することが判明した。当初の計画通り、マウス一過性脳虚血モデルにおける摂食障害に対するα-リノレン酸給餌の影響を明らかにすることができたことから、本年度の研究は順調に達成されたと判断している。初年度は、α-リノレン酸(ALA)の給餌が、一過性脳虚血によって生じる摂食障害に対して、軽減効果を発揮することを明らかにすることができた。このとき全脳リン脂質中のアラキドン酸(AA)の割合が低下し、エイコサペンタエン酸(EPA)の割合が増加していたが、これらの変化の程度は、末梢組織(肝臓)におけるものに比べるとごくわずかであった。このことから、ALAの給餌は脳内のエイコサノイド産生の変動を大きく変化させているとは考えにくい。しかしながら、脳血管付近においては、ALAの給餌がこれらの脂肪酸の含量をより顕著に変化させていた可能性が考えられた。そこで本年度は、まずALAを4週間給餌したマウスの全脳から脳血管を濃縮した画分を調製し、そのリン脂質中の脂肪酸組成を調べた。脳血管濃縮画分中の総リン脂質中のAAの割合の低下とEPAの増加の程度は、全脳の総リン脂質中に見られたそれらとほとんど同じだった。この結果、ALAの給餌による脳内のエイコサノイド前駆体脂肪酸の含量変化は、脳血管周辺に局在して起こっているわけではないことが明らかになった。つまり、一過性脳虚血後の摂食障害に対するALAの軽減効果は単純な脳内のエイコサノイド産生抑制では説明できない可能性が高いと推測された。また、一過性脳虚血後の摂食障害に対するシクロオキシゲナーゼ(COX)阻害薬の経口投与の影響を検討したが、ALA給餌実験のような再現性のよい結果は得られず、上述の結果を裏付ける結果であった。一過性脳虚血では様々な炎症応答が複雑に働いており、今後、ALAの給餌が一過性脳虚血後の脳内の炎症応答に対する影響について検討する必要があると考えられる。脳の脂肪酸分析について、当初の計画よりも詳細に検討したため、予定していたEPA給餌の影響の検討を行っていない。ただし、本年度の結果から、EPA給餌でも、ALA給餌と同様に脳の脂肪酸組成はほとんど変化しないことが予想されるため、EPA給餌の実験は優先度が低いと考えている。我々は実験的脳虚血モデルマウスにおいて炎症反応が亢進し摂食障害が生じることを見出した。以前、n-3系脂肪酸を摂取したマウスは、LPS投与によって生じる摂食障害が生じにくいことを明らかにしていたため、脳虚血モデルマウスにみられる摂食障害に対してもn-3系脂肪酸は予防効果を発揮するのではないかと考え研究を行った。まずはじめに、n-3系脂肪酸のひとつであるα-リノレン酸の給餌がマウス一過性脳虚血によって生じる体重および摂食量の減少に対して軽減効果を発揮することを明らかにした。また、α-リノレン酸はマウス一過性脳虚血によって発症する脳浮腫は軽減したが、海馬神経細胞死の発生には影響を及ぼさなかった。n-3系脂肪酸の抗炎症効果は、組織リン脂質中のエイコサノイド前駆体脂肪酸であるアラキドン酸含量を低下させることで発揮される。また最近ではEPA由来の代謝物に抗炎症作用があることがわかっている。しかしながら、このときの脳および肝臓中リン脂質脂肪酸組成を解析したところ、肝臓ではアラキドン酸含量の低下およびEPA含量の増加が顕著であったが、脳においてはそれらの変動がほとんどなかった。このことから一過性脳虚血によって生じる摂食障害および脳浮腫に対するα-リノレン酸の軽減効果は、単純に脳内エイコサノイド産生抑制やEPA由来の代謝物による抗炎症作用では説明できないことが推測された。

さらに、LPS投与後の脳内(視床下部)における炎症性サイトカイン類のmRNA発現量を定量したところ、α-リノレン酸の給餌によりTNF-α、IL-1βなどのmRNA発現量が減少していることを見出した。つまり、α-リノレン酸は、LPS投与によって視床下部で起こる炎症性サイトカイン産生応答を抑制することによって摂食障害を軽減している可能性が示唆された。これまでに、n-3系脂肪酸の脳内炎症反応に対する作用機序はあまりよくわかっておらず、本研究成果がその解明の糸口になると考えられる。α-リノレン酸給餌は、一過性脳虚血によって生じる摂食障害(摂食量と体重の減少)に対して軽減効果を発揮することが判明した。しかしながら、このときの脳内では肝臓など末梢組織で顕著にみられるエイコサノイド前駆体脂肪酸含量の変動がほとんどなく、脳内でエイコサノイドの産生が抑制されているとは考えにくいことがわかった。また、α-リノレン酸は、LPS投与後の視床下部で起こる炎症性サイトカイン産生応答を抑制することが判明した。これらのことから、一過性脳虚血によって生じる摂食障害に対するα-リノレン酸の軽減効果は、視床下部で起こる炎症性サイトカイン産生応答の抑制による可能性が示唆された。当初の計画どおり、平成28年度においては、EPA給餌の影響を初年度と同様に検討する。ただし、必要に応じて、シクロオキシゲナーゼ阻害剤投与による影響も新たに検討する予定である。また、脳リン脂質中の脂肪酸組成については脳組織を分画してより詳細に行う。最終年度は、ALAの給餌が一過性脳虚血後のマウス脳内の炎症応答に及ぼす影響について検討する予定である。具体的にはまず、視床下部における各種炎症性サイトカインなどの遺伝子発現をリアルタイムPCR法により解析する。また、EPAより、脳内に存在する割合も高く、給餌実験においてもその蓄積効果が高いとされるDHAの給餌実験を優先して検討する予定である。脂質生化学わずかに余剰金が生じたが、ほぼ予定通り使用した。わずかに余剰金が生じたが、ほぼ予定通り使用した。次年度の使用計画の範囲で消耗品の購入にあてる。最終年度の使用計画の範囲で消耗品等の購入にあてる。
II-VI及びV-VI族半導体マイクロクラスターの光励起効果

最近注目を注びでいるC_<60>の遠赤外スペクトル及びラマン散乱の温度依存性を詳細に調べた。又、それらの酸素の添加効果を調べたことろ、非常に大きな酸素添加効果がみられることがわかった。また、最近注目されているポーラスシリコンの発光現象の研究を行った。p-Si及びn-Siの両方で陽極化成法によりポーラスシリコンを製作し、そのルミネッセンスの強度の経時特性を調べたところ、非常に大きな光照射効果があることがわかった。また、ポーラスシリコンに超音波をかけると表面の粒子が分離してくる。これらの微粒子のポリマー中に埋め込んだ膜の光発光特性を調べた。真空中の場合と酸素のある場合とでホトルミネッセンスの発光スペクトルのシフトがみられ、酸化過程が大きな役割をしていることが示唆される。また、Si,Ge及びSrをスパッター法でSiO_2中に作ると発光特性を示す膜が得られる。これを測定し、ポーラスシリコン等の発光特性とくらべることを行った。ポーラスシリコンでは酸素の役割が大きいことがわかる。マイクロクリスタルCdSをGeO_2ガラス中に分散させた系で加圧しながらラマン散乱を測定し、相転移のサイズ効果をみることを行った。現在のところ、岩塩構造への相転移と共鳴効果のラマン散乱への寄与の分離を確立することが待たれる状態である。ゼオライト中に閉じ込めたSeのラマン散乱の温度依存性を測定すると、アモルファスSeともあきらかに異なったふるまいを示しており、閉じ込められたSeの状態の研究として興味がある。今後これらの研究を一層進める予定である。
発生工学プロテオミクスを用いたPKC-δシグナル伝達系の解明

蛋白質の生物学的機能をとらえる最も有効な手段として、発生工学的手法を用いて作製した遺伝子改変マウスの解析が挙げられる。本研究では、遺伝子改変によって生ずるマウス蛋白質の総体的な変化をプロテオミクス技術によって網羅的に検索するシステム「発生工学プロテオミクス」を構築し、それによって多くの酵素-基質関係を同定することによって種々のシグナル伝達系の総合的理解を目指した。プロテインキナーゼC(PKC)は細胞内シグナル経路の中心的な分子としてその重要性が指摘されてきた。近年PKCファミリーの1つであるPKCδがアポトーシスの際にICE様のプロテアーゼによって切断され、活性型に変換されることが報告された。われわれはPKCδの遺伝子を人工的に破壊したマウス(PKCδノックアウトマウス;以下PKCδ-/-マウス)を作成し、そのマウスにおける発生分化や組織機能における異常を検索することにより生体内でのPKCδの生理的役害を明らかにしてきた。しかしながらノックアウトマウスにおける異常のメカニズムについてはその詳細が不明であり、発生工学プロテオミクスを用いてさらなる解析が必要であった。発生工学プロテオミクスの前段階である定量的フォーカスド・プロテオミクスの技術について開発を行った。特に蛋白質の修飾で最も注目されているユビキチン化とリン酸化に対して、ユビキチン化プロテオーム及びリン酸化プロテオームの解析技術を確立した。さらに定量的プロテオミクス技術の確立を進めるために、培養細胞における安定同位体を用いた代謝ラベル法(SILAC)導入の検討を行った。さらに、これらの確立した技術を組み合わせて、翻訳後修飾関連プロテオームの定量解析技術を確立した。タンパク質の生物学的機能をとらえる最も有効な手段として、発生工学的手法を用いて作製した遺伝子改変マウスの解析が挙げられる。本研究では、遺伝子改変によって生ずるマウスタンパク質の総体的な変化をプロテオミクス技術によって網羅的に検索するシステム「発生工学プロテオミクス」を構築し、それによって多くの酵素-基質関係を同定することによって種々のシグナル伝達系の総合的理解を目指す。そのために、まずわれわれが作製したPKC-δノックアウトマウスを用いて、シグナル伝達分子のリン酸化レベルを網羅的に検討するシステムを構築した。リン酸化プロテオーム解析に関しては、リンパ球を刺激した状態と未刺激の状態のタンパク質を抽出し、抗リン酸基抗体を用いたアフィニティー精製によって基質分子を選択的に精製し、液体クロマトグラフィーとイオントラップ型質量分析計を組み合わせたLC-MS/MSを用いてショットガン解析することで、300種類以上のタンパク質の同定に成功している。さらに一部の基質分子に関してはリン酸化部位の同定が可能であった。さらに、安定同位体(^<13>C)を含むアミノ酸(ロイシン)を培地中に加えることによって、加えていない資料を対照として、その比較から二つの状態における同一タンパク質の比較定量が可能となる。この原理に基づき、刺激の有無によるリン酸化タンパク質の変化を網羅的に定量する方法を確立することを行った。その結果、シグナル伝達に関わる多くのリン酸化タンパク質が実際に抗原刺激等の有無でかなり変動することが確認された。蛋白質のリン酸化はチロシン、セリン、スレオニン残基へのリン酸基の付加反応であり、リン酸化はキナーゼ、脱リン酸化はフォスファターゼと呼ばれる酵素が関与している。キナーゼなどの基質の同定法として、ノックアウトマウスの解析にプロテオミクス的アプローチを組み合わせることが有効である。われわれは、鉄やガリウムなどの金属がリン酸と結合することを利用した金属固定化アフィニティークロマトグラフィー(IMAC : immobilized metal affinity chromatography)によるリン酸化蛋白質の濃縮法を用いて、様々な刺激を行った細胞の抽出液からリン酸化蛋白質の濃縮を行い、回収された蛋白質を質量分析計によってショットガン解析を行った。

さらにわれわれはIMACによるリン酸化ペプチドの精製と酵素的脱リン酸化を組み合わせることで効率よいリン酸化ペプチドの同定法を確立した。さらに定量的プロテオーム解析において非常に有効な手法である安定同位体標識法を用いて、Jurkat細胞(ヒトT細胞株)、Namalwa細胞(ヒトB細胞株)、HEK293T細胞(ヒト胎児腎細胞)のリン酸化関連プロテオームの変動解析を行い、一度の解析で130種類程度の蛋白質の同定・定量に成功している。これらの蛋白質の中で約90種類が刺激に応答して変動しており、多数の既知のシグナル伝達関連分子に加えて、これまでリン酸化の報告がない蛋白質も含まれており、新規リン酸化蛋白質のスクリーニング系としても有効であることが示された。現在、これらの方法をリバースジェネティクスへ適用を検討している。これらの解析から、複雑なシグナル伝達分子間の関係を全体像として捉えることが期待される。
完新世における砂州地形の発達過程と人間活動の変遷に関する研究

本研究の第一の目的は,完新世全体を通じての日本の砂州地形発達を明確にすることであった。そのために,異なった形態を示す7つの地域(駿河湾沿岸の浮き島ヶ原低地・清水低地・松崎低地・榛原低地,北海道常呂低地,相模川下流低地,浜名湖)を対象にして,砂州地形発達における共通性と地域性を考察した。その結果,日本において最高海面に達する約6000年前以前の海面上昇期に,砂州地形の形態の違いに関わらず,最も内陸側の砂州地形が形成され始めていたことが確認された。一方,地域差は,内湾の環境に砂州地形による閉塞の影響が現われ始める時期,および閉塞が完了する時期の違いとして現われることが明らかになった。さらに,最高海面に到達した後の砂州地形は,海側に向かって不連続的に発達していったが,その形成時期は5000ー4000年前と約2000年前の海面の停滞期ないしは低下期に一致しており,これも低地の形態の違いによらず共通に認められた。本研究の第二の目的は,縄文時代以降に人間活動の場となってきた海岸低地において,地形発達過程と人間活動変遷との関係を検討することであった。具体的には,駿河湾沿岸の浮島ヶ原低地,狩野川河口低地,および清水低地を対象地域として,自然地理学的な方法に基づいて推定された低地の地形発達過程と,考古学調査によって明らかにされた遺跡分布との間の関係を考察した。その結果,浮島ヶ原低地では砂州地形の海側への発達に対応するようにして人間活動の中心が移動した過程をよみとることができた。また,狩野川河口低地では旧砂州地形上が歴史時代の築城の中心になったことが確認された。一方,清水低地では,低地の発達と共に人間活動の範囲が拡大してゆく過程をとらえることができた。1.静清低地において、砂州地形を中心とした地形発達過程を考察するための地形・地質調査を行った。(1)静清低地の地形調査を行い,清水市押切で全長30mのオールコア・ボーリングを実施した。(2)オールコア試料の層相を詳細に観察した上で,有孔虫・貝・花粉・珪藻などの化石分析のための試料を採取した。さらに,2層準について年代測定を行った。(3)今回のボーリング調査によって,従来の研究では明確となっていなかった沖積層基底の基盤岩の存在を確認することができた。また,試料の詳細な観察によって,粘土層中に挟まれる砂の薄層が滞水層となって粘土中の水分を吸収し,粘土層のN値を高くしていることが明らかとなった。(4)静清低地において遺跡発掘調査に参加し,地形条件(砂州地形)と遺跡の分布域・時代との関係についての資料を追加することができた。2.房総半島南部の館山平野において,地形調査および有孔虫化石分析を行い,古環境変遷と砂州地形の発達過程を考察した。その結果,過去には報告例がなかった完新統中の有孔虫化石群集の特徴を明確にすることができた。さらに,すでに報告されている貝や造礁サンゴ化石との対比から,完新世における高温の沿岸水流入時期を復元することができた。名古屋港および佐渡ヶ島中平野において採取されたボーリング試料の有孔虫化石分析を行い,それぞれの地域における古環境変遷を予察的に考察した。4.北米東岸やオーストラリアのbarrier islandsに関する最新の研究成果を収集した。1.平成7年度に静清低地で採取したオールコア試料について,有孔虫・貝・花粉・珪藻化石分析および年代測定を行った結果,以下のようなことが明らかになった。

(1)内湾の形成はおよそ8000年前に始まり,5400年前頃までは沿岸水が流入し,外洋水の影響も及ぶ環境であった。(2)5400年前以降になると,砂州地形の形成によって背後の内湾は閉塞されて潟湖化した。さらに約4700年前には,砂州列がより海側に拡大したため,潟湖は湿地へと変化した。およそ2000年前になると,最も海側の砂州列が形成されるようになった。(3)砂州地形の離水は60005000年前の短期間に集中しているが,この時期は日本の海面変化における最高海面期後の海面停滞期ないし低下期に一致する。2.静清低地の地形発達過程と,時代ごとの遺跡の分布域との関係を検討した結果,両者の間には密接な関係があり,砂州列の発達に対応して人間活動の範囲が拡大していったことが明確になった。3.佐渡ヶ島国中平野において,有孔虫化石群集の解析結果に基づいて古環境変遷を考察した。4.日本および海外の砂州地形に関する従来の研究成果を整理した。1.平成7年度に静岡県清水低地で実施したオールコア・ボーリング試料中の有孔虫化石などの古生物学的解析結果および年代測定値に基づいて,低地における砂州の地形発達過程を検討した。さらに,低地に分布する遺跡の時代との対応から,低地の発達史と人間活動変遷との関係を考察した。これらのことより,次のような点が明確になった。(1)清水低地における砂州地形の形成は約6000年前以前から始まったが,内湾を本格的に閉塞するような砂州の発達は,およそ5000年前であった。この砂州は5000-4000年前には完成した。ほぼ同じ頃に,三保砂嘴も島状の地形から,有度丘陵側とつながる現在のような形態に形づくられた。(2)清水低地の中で人間が最初に進出した場所は,約6000年前以降に離水した最上位の完新世段丘の上であり,その時期は縄文時代後期頃(約3000年前)であった。その後,およそ2000年前以降になると,砂州や自然堤防上などに人間生活の場が拡大した。さらに4000年前頃に完成した砂州や三保砂嘴は,約1500年前以降の人間生活の拠点となった。2.駿河湾沿岸地域のほか,北海道常呂低地,相模川下流低地,浜名湖,九十九里平野,新潟平野などの砂州地形発達をまとめた結果,現在の低地の形態に関わらず,砂州地形の起源が完新世前半の海面上昇期までさかのぼることが明らかになった。3.日本における砂州地形の発達過程の特徴,および地形発達過程と人間活動変遷との間の関係を考察した結果をまとめて,報告書を作成した。