hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
高精度立体視画像合成枝術を応用した仮想芸術作品創作支援システムの開発

しかしながら,3次元セル空間での微細な変形操作を行うためには,仮想粘土の構成要素であるセル数が膨大となり,実時間処理を行うことは困難である.本研究では,微細セルへの再帰分割,セルオートマトンの状態遷移規則の適用制限,セルサイズに応じた面の生成を行うことでこの問題を解決した.これにより,実際のろくろで陶芸作品を創作するのと同様に,ろくろによる回転体の成形,3次元での自由形状変形,微細モデリングによる表面彫刻が実時間で操作可能な仮想ろくろシステムを実現した.
顎顔面領域における炎症・発痛時の遺伝子発現動態の解析

1)炎症・発痛モデル動物(ニューロパチックペインモデル)の作成2)ニューロパチックペイン発症時の中枢での興奮性アミノ酸関与の解析脊髄後角・後索核での神経情報伝達に興奮性アミノ酸であるグルタミン酸がどのように関与しているか各種グルタミン酸受容体拮抗薬を用いて薬理学的、電気生理学的に検索した。またグルタミン酸受容体の遺伝子発現を形態学的に解析した。a)薬理学的検討b)電気生理学的検討c)形態学的検討モデル動物より新鮮凍結切片を作製し、RI標識したoligonucleotide probeにて組織上のグルタミン酸受容体の遺伝子発現(mRNA)を解析した。3)データ構築とまとめ上記のデータをまとめ論文作成、学会発表をおこなった。1)炎症・発痛モデル動物(ニューロパチックペインモデル)の作成2)ニューロパチックペイン発症時の中枢での興奮性アミノ酸の関与の検索痛覚・温度などの知覚情報が入力する脊髄後角や触覚や深部知覚(関節など)が入力する後索核での神経伝達物質アミノ酸、特に痛覚伝達に主要な役割を果たす興奮性アミノ酸のグルタミン酸の関与を各種グルタミン酸受容体拮抗薬を用いて薬理学的電気生理学的に検索した。a)薬理学的検討b)電気生理学的検討上記薬物による影響を細胞外単一神経活動より解析した。c)形態学的検討モデル動物より新鮮凍結切片を作成し、RI標識のoligonucleotide probeにて組織上でのグルタミン酸受容体の遺伝子発現(mRNA)を解析した。
包括的な生物学的指標を用いた発達障害児の病態解明・治療法に関する研究

注意欠陥多動性障害(ADHD)、高機能自閉症、アスペルガー障害(AS)等の、以前は軽度発達障害と理解されていた症候群は有病率も高く、高頻度に学習障害、不登校、摂食障害などの併存症、および精神上の問題もおこしやすく医学-教育-福祉上で重要である。しかしそれらの病因・病態は不明な点も多く、治療・早期介入に役立つ科学的な生物学的マーカーは極めて少ない。我々は、非侵襲的機能画像による3つ、アイマークレコーダー、近赤外線トポグラフィー(NIRS)、SPM-SPECTを用いた小児の脳機能計測、唾液を用いたコーチゾール、MHPG, IgA測定による評価法、発達障害における、SDQ(Strength and Difficulties Questionnaire)の信頼性、有用性の確立、発達障害児における睡眠指標の有用性を確立し、以下の多くの成果を報告した。NIRSでは併存症の無い若年性神経性食思不振症(AN)は、対照群と比べて、ボディーイメージ、高カロリーの食べ物などに脳血流の反応が全くなく、母親との愛着の写真にのみ過度な反応が見られた。またSPECTとMRIを重ねて統計解析するSPM法による解析では、ANでは両側頭頂葉と後部帯状回の脳血流低下が見られ、BMIの改善と比例して右視床、右頭頂葉、右小脳血流に正の相関があった。4歳から成人までの84人の正常で、年齢を6分割して課題注視時の総注視距離と反応探索スコアの基準値を確立した。アスペルガー症候群はコントロールと比べて、同じ部位の限られた部分を注視している事が判明した。唾液を用いたコーチゾールを用いた研究では, ANは早朝の覚醒反応(Awaking response)が見られず、コーチゾールが有意に高く、治療によって対照群と同じパターンに改善した。また、我々が日本の幼児-学童で基準値を作成したSDQはADHDとASの鑑別に有用であった。幼児期の睡眠指標では、睡眠日誌はアクチグラムと高い相関性が得られ有用である事が証明された。上記の研究は、全て英文で国際誌に採択された。現在、社会的に大きな問題になっている軽度発達障害の病因・病態は不明な点が多い。代表疾患である注意欠陥多動性障害(ADHD)、高機能自閉症、アスペルガー障害等は有病率も高く、医学-教育学上重要である。また軽度発達障害児は高頻度に学習障害、不登校、および摂食障害などの精神上の問題もおこしやすい。それらの病態把握のため、アイマークレコーダー(眼球探索追跡装置)を用いた学童の課題遂行時の情報処理等の解析をおこなった。まず小学生、中学生の健常児で、アイマークレコーダーを用いて17人の正常学童で、基準値を確立した。次に、アスペルガー障害児12名で課遂行時の視線総距離、停留点総数、平均停留等を測定し、若年発症の統合失調症12名と比較検討し興味ある結果が得られている。最終的にアスペルガー障害児を20名、統合失調症を20名、健常学童20人まで増やして解析し、国際誌に発表予定である。次に、軽度発達障害児のストレス反応を評価するため、唾液を用いてコーチゾールを測定する系をELISAキットを用いて確立した。コーチゾールの早朝覚醒反応、1日の分泌パターンを解析し、摂食障害の入院児19名で治療介入の前後で解析した。

また年齢、性別をマッチした17名の健常児の測定結果と比較し検討した。摂食障害児は、コーチゾールの分泌パターンの異常が見られ、治療によって改善する事が明らかになった。注意欠陥多動性障害(ADHD)、高機能自閉症、アスペルガー障害等の、従来、軽度発達障害と理解されていた症候群は有病率も高く、しかも高頻度に学習障害、不登校、摂食障害などの併存症、および精神上の問題もおこしやすいので医学-教育-福祉上で重要である。しかし、その病因・病態は不明な点も多く、治療・早期介入に役立つ基礎的-臨床的研究は急務である。非侵襲的機能画像によるアイマークレコーダー、近赤外線トポグラフィー等を用いた、乳幼児・学童の課題遂行(Task時)の脳血流・代謝、情報処理等の解析をおこない、更に唾液を用いたコーチゾール、MHPG,IgA測定を施行しストレス、免疫、神経伝達物質の評価も進め多くの成果が得られた。まず小学生、中学生、思春期の健常児で、アイマークレコーダーを用いて17人の正常学童で基準値を確立し、高機能自閉症、アスペルガー障害児で課遂行時の視線総距離、停留点総数、平均停留等をアスペルガー障害児12名、若年発症の統合失調症12名で解析を終了し、興味あるデータが得られ投稿予定である。更に、アスペルガー障害児20名を、統合失調症20名、健常学童20人と比べて解析し、国際誌に発表準備中である。早期発症の神経性食思不振症(AN,平均年齢13.2歳)10人でSPMの手法を用いて、治療前後の脳血流、代謝の変化、治療前後のBMIの変化との相関を調べ、両側頭頂葉、後部帯状回、および右視床等が神経回路として重要である事を報告した。また、唾液を用いてストレス反応を評価するため、コーチゾールの分泌動態をELISAキットを用いて測定系を確立し、コーチゾールの早朝覚醒反応、1日の分泌パターンを解析し、摂食障害児20名で解析する予定である。軽度発達障害は有病率も高く,不登校、摂食障害等の精神上の問題もおこしやすく病因・病態も不明な点が多い。注意欠陥多動性障害(ADHD)、高機能自閉症、アスペルガー障害(AS)は、医学一教育-福祉を含む包括支援上大事である。非侵襲的機能画像によるアイマークレコーダー、近赤外線トポグラフィーを用いた脳血流・代謝、情報処理等の解析をおこなう。また唾液を用いたコーチゾール、MHPG,IgA測定をおこないストレス、免疫、神経伝達物質の評価も検討した。AS児29名、若年発症の統合失調症(JOS)24名を対照群と比較した。課遂行時の視線総距離(TESL)、停留点総数(RSS)、平均停留の解析を行いASでRSSが有意に少なく、JOSではTESL、RSSとも少なくASとは異なったパターンであり国際誌に投稿中である。次に、唾液を用いてストレス反応を評価するため、コーチゾールの分泌動態を行った。早朝覚醒反応、1日の分泌パターンを解析し、摂食障害児21名の治療前後で解析し、コントロール22名と比較検討した。摂食障害児では早朝覚醒反応が見られず、治療により症状の改善に伴い正常パターンに回復する事が判明し、治療効果の科学的な総合評価となりうる事を発見した(Int J Psychophysiol,2011)。
原発性胆汁性肝硬変の進展度診断に役立つ血清マーカー測定法の開発と応用

原発性胆汁性肝硬変(PBC)の診断は、肝組織所見と抗ミトコンドリア抗体(AMA)によって行われる。肝生検は全く安全な検査というわけではなく、また頻回に施行できるわけではないもし感度や疾患特異性が非常に高く、かつ測定が簡便迅速でより客観性のあるAMA測定法があれば、侵襲的な肝生検にとってかわる"gold standard"になりうるが、現在行われている種々の測定法にはそれぞれ利点と欠点があり感度や疾患特異性も多少異なっている。われわれはMESACUP-2テストミトコンドリアM2キットを用いたELISA法「抗ミトコンドリアM2抗体」と従来の測定法との比較を含めて、その特徴と臨床的意義について検討し、感度・特異度ともに従来の測定法に匹敵し、さらに、より細かい力価の変動が検討できるため、PBCの疾患活動性や治療のモニターにより適していると結論した。次に、我が国における一般人口でのAMA陽性率および、それより類推されるPBCの有病率について考察し、その結果、我が国には約33万人のAMA陽性者、約3-4万人のPBCが存在し、そのうち約2万人がPBCと診断されて現在医療機関に通院していると推測した。次に、AMA陰性のPBCの自然経過について検討し、PBCの診断にはWestern blot法によるAMAの判定が重要であると結論した。AMA陰性PBCといわゆる自己免疫性胆管炎との異同については、さらにselection biasを極力排除した検討が必要と考えられた。また、経済性・簡便性に優れたenzyme inhibition assay法によるAMAの測定は、特に発展途上国などでのスクリーニングに適していると考えられた。このように、各種測定法の特徴およびその有効な活用法が明らかになった。肝生検は全く安全な検査というわけではなく、また頻回に施行できるわけではない。もし感度や疾患特異性が非常に高く、かつ測定が簡便迅速でより客観性のあるAMA測定法があれば、侵襲的な肝生検にとってかわる"gold standard"になりうるが、現在行われている種々の測定法にはそれぞれ利点と欠点があり感度や疾患特異性も多少異なっている。われわれは最近開発されたMESA CUP-2テストミトコンドリアM2キットを用いたELISA法「抗ミトコンドリアM2抗体」と従来の測定法との比較を含めて、その特徴と臨床的意義について検討した。AMA関連抗体の対応抗原のうちPBCに特異的であるのはM2抗原であり、2-oxo-acid dehydrogenase complex (2OADC)という酵素群である。2-OADCはpyruvate dehydrogenase complex (PDC), 2-oxoglutarate dehydrogenase complex (OGDC),およびbranched chain oxo-acid dehydrogenase complex (BCOADC)からなり、それぞれE1,E2,E3のsubunitから構成されている。さらにPDC-E1とBCOADC-E1はE1αとE1β、またPDCにはE3 binding protein (E3 BP)が存在する。このうちPDC-E2が最も主要な対応抗原である。現在保険で認められている測定法は蛍光抗体間接法による「抗ミトコンドリア抗体」とELISA法による「抗ミトコンドリアM2抗体」である。蛍光抗体間接法は一度にすべての2-OADC酵素群に対する反応を検出するためPBCでは高頻度かつ高力価に検出されるstandardな検査法である。しかし、本邦における全国調査での陽性率は約85%であり白色人種と比べてやや低い傾向がある。

ELISA法は従来精製PDCを固相抗原としてPDCおよび交差反応性を有するE3 BPに対するIgGクラスの抗体のみを測定(MESA CUPミトコンドリアM2)していたためさらに感度が低い事が問題であった。平成14年4月より使用されるようになった新しいELISA法(MESA CUP-2テストミトコンドリアM2)では、リコンビナントのPDC-E2、BCOADC-E2、OGDC-E2を固相抗原として用い、さらに標識抗体として抗ヒトイムノグロブリン抗体を使用しIgGだけでなくIgM、IgAクラスの抗体も測定できるようになったため、感度が格段に上昇した。われわれの検討でも蛍光抗体間接法による「抗ミトコンドリア抗体」に匹敵する感度を示したが、なお82例中6例の結果が不一致であった。今後はこの新しい「抗ミトコンドリアM2抗体」が蛍光抗体間接法による「抗ミトコンドリア抗体」にとってかわる新しい"standard"になりうるのか、疾患特異性の検討も含めてさらなる評価が必要であり、その特異性も含めて検討をすすめている。抗ミトコンドリア抗体(AMA)の測定法には従来の蛍光抗体間接法(IF-AMA)の他に、ELISA法による「抗ミトコンドリアM2抗体」、Western blotting法(WB法)、enzyme inhibition assay(EIA法)があり、現在健康保険で認められているのはIF-AMAと『抗ミトコンドリアM2抗体」である.WB法はほぼ100%の感度があるが、手技が煩雑で定量性に乏しく研究室レベルで行われているのみである。EIA法はAMAがPDC活性を阻害することを利用した測定法でほほ100%の疾患特異性を有しているが、欧米に比べて抗PDC-E2抗体の出現頻度が低い本邦においては感度が問題となる.ELISA法による従来の「抗ミトコンドリアM2抗体」は精製PDCを抗原としてIgGクラスの抗体のみを検出するためEIA法と同様その感度が問題であったが、2002年4月から固相抗原にリコンビナントのPDC-E2,BCOADC-E2,OGDC-E2を用い、標識抗体に抗ヒトイムノグロブリン抗体を使用することにより、IgC, IgM, IgAクラスの抗体が検出可能となったELISA法測定キット「MESACUP-2テストミトコンドリアM2」(MBL社)(ここではNew-M2と略す)が使われるようになり、その感度がIF-AMAにほぼ匹敵するようになった.しかし、IF-AMAとNew-M2は保険点数が同じで同時算定はできないため、今後臨床の場で両者をどのように使い分けて行くかを検討する必要がある。そこでわれわれはPBCの診断および経過観察におけるNew-M2測定の臨床的意義をIF-AMAとの比較により検討した。当科にて経過観察されインフォームドコンセントを得たうえで血清を-80°Cで凍結保存されている原発性胆汁性肝硬変(PBC)47例、自己免疫性胆管炎8例、自己免疫性肝炎33例、B型慢性肝疾患(慢性肝炎4例、肝硬変6例)10例、C型慢性肝炎17例、脂肪肝8例、アルコール性肝硬変1例を対象に検討した結果、PBCに対する感度はNew-M2が93.6%とIF-AMAの89.4%を上回っていたが、特異度はNew-M2がAIHをはじめ他疾患で陽性となることがあるため90.9%とIF-AMAの98.7%より低く、したがって真度(正確度)はIF-AMAがやや優れていた。
プロポフォールによる静脈内鎮静法の研究-BISモニターと血中濃度を中心に-

1.プロポフォールによる静脈内鎮静法の臨床効果を検討するため,研究内容に同意を得た健康成人ボランティア12名を対象として以下のような研究を行った。(1)プロポフォールを6mg/kg/hで5分間,3mg/kg/hで85分間持続投与を行い,投与終了60分間安静にしてその間各種検査を行った。(2)測定項目:鎮静度(BISモニター,鎮静スコア),平衡機能検査(定性,定量ともに開眼,閉眼で行った),血圧,脈拍数,呼吸数,動脈血酸素飽和度,プロポフォール血中濃度(3)結果:鎮静度はBIS値と鎮静スコアおおむね相関し,プロポフォール投与30-90分で鎮静程度は深くなった。平衡機能検査では,定性,定量ともに投与中止10分後に機能が障害され,中止30分後に回復していた。血中濃度は投与60分,90分後には各々1.0,1.3μg/ml(平均値)で鎮静に適正な濃度であった。(4)考察:BIS値が鎮静程度の評価に有効であった。またプロポフォール投与中止後,鎮静程度が回復しても平衡機能が回復しない時間があることが示された。2.プロポフォールによる静脈内鎮静法にて歯科治療を受けた知的障害者症例10例を対象にBIS値と歯科治療内容および覚醒時間との関係を検討した。(1)結果:歯科治療時間:38.5±12.0分、投与終了から覚醒まで:31.4±18.8分プロポフォール総投与量:243.8±86.3mg、プロポフォール投与速度:6.5±2.2mg/kg/hrであった。(2)BIS値:歯科治療中のBIS値の最頻値は35-55で、処置内容に関わらず同程度であった。歯科治療終了時および治療後のBIS値と覚醒時間に有意な相関関係が認められた。(3)考察:歯科治療時のBIS値を高く保つことにより覚醒を速くできるのではないかと考えられた。以上によりプロポフォールによる静脈内鎮静法にはBISモニターが有用であることが示唆された。研究内容に同意を得た健康成人ボランティア12名を対象とした。前日の十分な睡眠,実験当日朝より絶飲絶食を指示した。仰臥位にて左右前腕に静脈確保を行い,モニターを装着し20分間安静を保ち,プロポフォールを6mg/kg/hで5分間持続投与後,3mg/kg/hで85分間持続投与をした。投与終了後60分間安静にし,その間各種検査および採血を行った。(測定項目)鎮静度(BISモニター,鎮静スコア),平衡機能検査(定性,定量ともに閉眼および開眼で行った),血圧,脈拍数,呼吸数,動脈血酸素飽和度,プロポフォールの血中濃度。(結果)1.BIS:投与前に比べ3090分後に鎮静程度も深くなり,中止10分後に回復した。2.鎮静スコア:投与3090分後に有意に変化し,鎮静程度はおおむねBIS値と似た傾向を示した。3.平衡機能検査:定性,定量検査とも投与中止後10分後に機能が障害され,中止30分後には回復していた。定性による検査は閉眼が開眼に比べ難しく,評価が困難であった。

4.血中濃度:投与60分,90分後には各々1.0,1.3μg/ml(平均値)で鎮静に適正な濃度であった。5.その他:血圧,脈拍数,呼吸数とも臨床的に問題になる測定値はなかった。酸素飽和度は投与30,60分後に有意に低下した。(考察)1.BIS値と従来の鎮静スコアには相関があり,BIS値が鎮静程度の評価に有効であった。2.プロポフォールの投与中止後,BIS値及び鎮静程度が回復しても平衡機能が回復しない時間があることが示された。以上のことから,帰宅許可の判断には,回復過程における覚醒の程度,BIS値及び平衡機能等の総合的な評価が必要であることが示唆された。知的障害者歯科治療時の静脈内鎮静法におけるBISモニターの有用性を評価するために、BIS値と処置内容との関係、BIS値と覚醒時間との関係を検討した。(対象と方法)対象は静脈内鎮静法下に歯科治療を受けた知的障害者症例10例で、年齢27.2±8.9歳(1645歳)であった。静脈路を確保しBIS値の測定を開始した。歯科治療中プロポフォールを持続投与し鎮静程度を維持した。鎮静中は、血圧、脈拍数、経皮的動脈血酸素飽和度をモニターし、酸素を経鼻カニューレより2l/分で投与した。歯科治療の処置内容と処置中のBIS値の最頻値との関係を検討した。また、歯科治療終了時のBIS値、歯科治療中と歯科治療後のBIS値の最頻値、最高値、最低値と覚醒時間との関係を検討した。(結果)歯科治療時間:38.5±12.0分、投与終了から覚醒まで:31.4±18.8分、プロポフォール総投与量:243.8±86.3mg、プロポフォール投与速度:6.5±2.2mg/kg/hrであった。歯科治療中のBIS値の最頻値は35-55で、処置内容に関わらず同程度であった。BIS値と覚醒時間の関係は、歯科治療終了時および治療後のBIS値と覚醒時間に有意な相関関係が認められました。しかし、歯科治療中のBIS値と覚醒時間には有意な相関関係は認められませんでした。(考察)歯科治療の処置内容に関わらずBIS値は術中いずれの処置においても55以下であった。歯科治療終了時および治療後のBIS値と覚醒時間に有意な相関関係が認められたことから、歯科治療終了時のBIS値を高く保つことにより覚醒を速くできるのではないかと考えられた。以上によりBISモニターの有用性が示唆された。
超重核のα-γ核分光研究を目的とした新規Si-CdTe検出器の開発

超重核のα-γ核分光研究にはα線検出のためのSi検出器とγ線検出のためのGe検出器を組み合わせたSi-Ge検出器アレイが用いられているが,本研究ではγ線検出器としてCdTe検出器を適用し,新規にSi-CdTe検出器アレイを製作した。CdTe検出器はGe検出器と比較してエネルギー分解能の面で多少劣るが,検出効率の高さと常温で使用できる利点がある。これにより,超重核のα-γ線連続測定が可能になった。超重核のa-Y核分光研究にはa線検出のためのSi検出器とY線検出のためのGe検出器を組み合わせたSi-Ge検出器アレイが用いられているが,本研究ではY線検出器としてCdTe検出器を適用し,新規にSi-CdTe検出器アレイを製作した。1×1cm^2(厚さ1mm)のCdTe検出器と2×2cm^2(厚さ0.3mm)のSiフォトダイオードを用いて検出器アレイを組んだ。CdTe検出器はGe検出器と比較してエネルギ一分解能の面で多少劣るが,検出効率の高さと常温で使用できる利点がある。また,Ge検出器と比べて検出器を構成するCdやTeの原子番号が大いために,高い検出効率が期待ざれる。α-γ線同時計測用に、Si検出器16chおよびCdTe検出器16ch分の同時計測が可能な信号処理回路システムを新規に構築した。この回路の構築によりエネルギー分光測定・壊変時間特性・検出器のヒットパターン等のデータ取得が可能になった。^<241>Am標準線源を用いて1.で製作したSi-CdTe検出器アレイの性能評価を行った。SiおよびCdTe検出器のエネルギー分解能・検出効率曲線・α-γ線放出間の時間測定を行った。CdTe検出器のエネルギー分解能は常温で59keVγ線に対して2.5keVであった。また、^<241>Amの5.48MeVα線と59keVのγ線の時間差67n秒も確認した。a-Y核分光研究において、ビーム照射時のバックグランド計数率の高さが重要となる。そこで、加速器運転時におけるバックグランド測定をおこなった。CdTe検出器の計数率は、0.3cpsとGe検出器の8000cpsと比較して非常に低い値を示す事を観測できた。超重核のα-γ核分光研究にはα0線検出のためのSi検出器とγ線検出のためのGe検出器を組み合わせたSi-Ge検出器アレイが用いられているが,本研究ではγ線検出器としてCdTe検出器を適用し,新規にSi-CdTe検出器アレイを製作した。また, Ge検出器と比べて検出器を構成するCdやTeの原子番号が大いために,高い検出効率が期待される。既存のα線連続測定装置(MANON)を改良し,このSi-CdTe検出器アレイを組み込んだ。α-γ線同時計測用に, Si検出器16chおよびCdTe検出器16ch分の同時計測が可能な信号処理回路システムを構築した。^<241>Am標準線源を用いて,製作したSi-CdTe検出器アレイの性能評価を行った。SiおよびCdTe検出器のエネルギ-分解能・検出効率曲線・α-γ線放出間の時間測定を行った。また^<241>Amの5.48MeVα線と59keVのγ線の時間差67n秒も確認した。
レトロウイルスゲノム二量体化及び組換えの分子機構と責任因子の探求

独自に構築したレトロウイルスゲノム二量体化測定系並びに組換え測定系を駆使して解析実験を行った。その結果、ゲノム二量体化が直接ゲノム組換えを規定するという合理的な機構の存在を示唆することが出来たが、これは古くから予想されていながらこれまで直接的な証拠は示されておらず、大きな意義を持つと考えられた。また粒子成熟とウイルスゲノム成熟の様々な相関を明らかにしたが、これらの知見は今まで遅れていたウイルス粒子成熟過程の理解に大きな進展をもたらすものと期待される。HIV-1を含むレトロウイルスのポジティブー本鎖RNAゲノムはウイルス粒子内で非共有的に結合して二量体を形成している。HIVゲノムニ量体化及びゲノム組換えの機序の解明は、遺伝的多様性を主要な生き残り戦略としているHIVの制圧の端緒となり、ワクチン開発を実施する科学的基盤を提供する。本研究では、粒子内HIV-1ゲノムニ量体化をパッケージングと独立した形でとらえて解析することのできる実験系およびHIVゲノム組換え効率を定量できる系を独自に構築した。これらを用いて様々なHIV-1サブタイプ間のヘテロゲノム二量体化および組換えウイルス生成機構の解析を行った。サブタイプの中で遺伝的多様性の大きいグループN・O・チンパンジー由来SIVcpzとグループMとのヘテロゲノム二量体化効率比較から、遺伝的近縁度と二量体化効率は必ずしも相関しないことが明らかとなった。グループM内で遺伝的距離がほぼ等しいサブタイプA・B・C間のヘテロゲノム二量体化の程度を比較したところ、A-C問の反応はホモニ量体化(A-A,B-B,C-C)と同等の効率を示したのに対し、A-B,B-C問のそれは明らかに低下しており、サブタイプの組合せによって二量体形成の効率に差があることが示唆された。変異導入実験の結果二量体化開始部位(DIS)が効率決定に重要な役割を果たしていることが明らかとなった。ゲノム二量体化効率と平行してヘテロゲノム間組換え効率を測定した結果、この二つの効率にほぼ完全な順相関が確認された。これはゲノム二量体化が直接ゲノム組換えを規定するという合理的な機購の存在を示唆している。このことは古くから予想されていながらこれまで直接的な証拠は示されておらず、今回の結果は大きな意義を持つと考えられる。HIV-1を含むレトロウイルスのポジティブ一本鎖RNAゲノムはウイルス粒子内で非共有的に結合して二量体を形成している。HIVゲノム二量体化及びゲノム組換えの機序の解明は、遺伝的多様性を主要な生き残り戦略としているHIVの制圧の端緒となり、ワクチン開発を実施する科学的基盤を提供する。本研究では、HIVゲノム二量体化とウイルス粒子産生時の粒子成熟との相関に関しての解析を試みた。その結果現在までに以下の成果を上げた。1.粒子成熟時に切断を受けるGag前駆体上の5箇所の切断サイトのうち、NCの前後のサイトがゲノム二量体化に重要であった。2.粒子の成熟ステップを模倣する一連の変異体を作成して観察した。その結果最初のステップ(p2-NC間切断)で急速にゲノム二量体化が進行した後、引き続く他サイトの切断によって徐々に均一な二量体として成熟していくことが明らかとなった。3.ウイルス粒子の形態的変化とゲノム二量体化の進行は完全には一致していなかった。4.粒子内RNAの被逆転写能力は粒子成熟の最初のステップによってほぼ十分に獲得されることが明らかとなった。本研究において研究代表者は、HIVの様々なサブタイプやその他のレトロウイルスにおけるゲノム二量体化とゲノム組換えについて包括的な解析を行うことで、これらの事象の機序あるいはこの二機能の相関の一般則を導き出し、それらを制御しているシス・トランス因子の検索を行うことを目的とした。当該年度においては、未だ不明な点が多く残されているHIV-1粒子成熟過程とウイルスゲノムの関係について解析を試みた。粒子成熟はHIV-1Gag内の5つの切断点がウイルスプロテアーゼによってプロセシングされることによって起こるが、成熟過程は斉一なものではなくいくつかの隣階が存在していると考えられる。我々は粒子成熟過程が中途段階で停止状態になる一連の変異体を作成し、これらの変異体を用いて、粒子成熟過程におけるゲノム二量体化、また粒子形態の変化についての観察を行った。粒子成熟過程においてはGagの最初の切断点であるp2-NCの切断によりゲノム二量体の安定化が一気に起きるがそれは十分ではなく、引き続いて起こる蛋白成熟によって多段階の中間体形成を経て均一で安定した二量体が完成することが示唆された。各変異体の粒子形状観察の結果、ゲノム二量体化にはウイルスコアの形成は必要なく、粒子成熟に伴う形態変化とゲノム二量体化の間に必ずしも明確な同期は見られなかった。ウイルス粒子内のゲノム逆転写能力はp2-NC切断により十分に獲得されたが、細胞への感染にはNCの完全な成熟が必要であった。

Gagの切断によりゲノム二量体化が起こることは知られていたが、今回の解析によりこの二つの多段階のステップは同期しつつ進行するものの、各々の転換点は完全には一致していないという興味深い知見が得られた。また、感染能解析からは、ウイルスRNAの成熟が逆転写以外の感染過程にも重要な役割を担っている可能性が示唆された。今後変異体の感染能のさらなる解析などを通じてウイルス粒子成熟過程のより深い理解につなげていきたい。
災害により長期の避難生活を余儀なくされる看護支援モデルの構築

災害により長期の避難生活を余儀なくされている人々の中でも在宅療養者に焦点を当て、療養者と介護者のニーズに対応した看護支援モデルを構築することを目的とした。研究方法は面接調査後、内容分析を行った。研究対象者は療養者、介護者、訪問看護師とした。分析は災害の時期、状況・療養者の思いに対して訪問看護師の考え、現在における訪問看護師の行動について注目した。この研究結果から災害時の看護支援者モデルは訪問看護師自身と療養者(介護者含む)の双方のセルフケアを高めることが重要である。震災後の生活環境、介護力、経済面を踏まえ、療養者のニーズに応じた在宅介護の継続や看取りを考えることが必要であることが示唆された。本研究は平成2627年度の2年間計画で「災害により長期の避難生活を余儀なくされる看護支援モデルの構築」に取り組んでいる。目的は在宅サービスを受けている療養者と介護者、および彼らをケアする訪問看護師を対象とした調査により、以下の3点とした。1在宅療養を行いながら避難生活を送る療養者と介護者のニーズを明確にする。2訪問看護師による被災地内で通常のサービスを受けている療養者と、震災後住み慣れた自宅から避難された療養者への関わりの違いを明らかにする。31と2の結果より、災害時の在宅療養者に対する看護支援モデルを構築する。研究方法は、質的研究である。手順は、研究対象者へインタビュー調査を行い、データを収集する。分析は、インタビュー調査で得られたデータの帰納法的研究法、グランデッドセオリーを用いて行い、被災者のニーズに対応した災害時の看護支援モデルを検討する。また、研究協力者からスーパーバイズを得ながら災害時の看護支援モデルを構築する。最終的に、構築したモデルを研究対象者の訪問看護師にフィードバックし、現場に即した内容であるかの意見を頂き、モデルの臨床における実現可能性を検討すること研究の主旨としている。平成26年度は一年目として文献検討を行い、研究方法の検討を行った。また、当大学の倫理審査委員会の承認を受けた。同時に、被災地における復興の状況の視察を行い、研究対象者が存在するかどうか、また、研究協力の可能性についての相談を行うために被災地の訪問看護ステーション等に2回訪問した。この訪問により、本研究のインタビュー調査を実施するための情報収集となり、被災地の訪問看護ステーション等との関係性づくりに着手した。平成26年度より2年間で、「災害により長期の避難生活を余儀なくされる看護支援モデルの構築」を行う予定である。一年目にあたる平成26年度は、概ね予定通り進展している。その理由は、文献検討と研究方法の検討を行い、当大学の倫理審査委員会による承認を得ることができた。また、被災地を訪問し、復興の現状調査、情報収集、研究対象者の研究協力の可能性を検討した。そこで訪問した訪問看護ステーションの看護師からの情報によると本研究の対象者となる、震災による避難のためにADLが低下している被災地の療養者、その療養者を支援した看護師が存在していることが分かった。その対象者から研究協力の内諾を得ることができた。このことから本調査に入る前の研究対象者との関係性づくりに着手できたと考えている。2年間の研究の主幹となる平成27年度の半構成的面接による調査に向けて、方向性が示唆された。以上のことから、概ね十分な達成段階にあると考えられた。27年度が最終年度であるため、記入しない。災害看護在宅看護平成27年度は二年目として、一年目で訪問した震災による避難のためにADLが低下している被災地の療養者、その療養者を支援した看護師を対象者へパイロットスタディとしてインタビュー調査を2件実施する。(1件は、療養者1名・介護者1名・訪問看護師1名とする。)その結果からインタビューガイドの追加修正を行う。本調査として、研究対象者へのインタビュー調査8件を実施し、データ収集する。合計10件を予定している。インタビュー調査にあっては、研究協力者と二人で行う予定である。

インタビュー調査で得られたデータは、グランデッドセオリーを用いた分析を行い、被災者のニーズに対応した災害時の看護支援モデルを検討する。また、研究協力者からスーパーバイズを得ながら災害時の看護支援モデルを構築する。最終的には、構築したモデルを調査対象者の訪問看護師にフィードバックを行い、現場に即したものであるかの意見を頂き、モデルの臨床における実現可能性を検討する。平成28年度には、研究成果を学会発表、論文投稿することを計画している。これらのことから研究を推進していく予定である。27年度が最終年度であるため、記入しない。
遺伝子治療の基礎研究

研究班の目的は、遺伝子治療に向けての基礎的研究で、以下に述べる2本の柱を立てて行われた。1.治療を目的とした遺伝子導入に関する研究この研究の目的は遺伝子を目的細胞(組織)に導入する場合のベクターの開発、トランスフェクションの手法の改善、発現率増強のための手法の開発、導入した遺伝子の安定性の確保、さらには遺伝子導入により引き起こされる癌化の防止策の検討など、遺伝子導入に際して考えられる様々な問題を検討した。遺伝子導入ベクターとして島田(隆)はHIVに着目した。これはレトロウイルスの一種でCD4陽性リンパ球に特異的に感染し、非分裂細胞の染色体に組み込まれる。このことから今後研究を重ねれば先天免疫不全、AIDS、癌の治療に利用できることを示唆した。斉藤はアデノウイルスベクターについて研究した。特にSRa、EF1a、CAG 3種のプロモーター活性につき検討しCAGがなかでも最も強力であることを見いだした(特許申請中)。島田(和)は遺伝子治療の理想的手法であるシーンターゲッテイングを用いた方法の開発を目指して、その効率を上げ、安定性を得る手法を検討した。そして、ヘルペスウイルスベクターの3′端を修飾することにより、細胞内でのベクターの安定性を得た。中西はセンダイウイルスがもつ膜融合性を利用し、リポゾームにこれを植え込んだ担体を開発した。また直接センダイウイルスをベクターに利用する手法も検討している。これは金田によっても追求されている。香川はミトコンドリア病の解明を精力的に行い、加えて、mtDNAパーテイクル銃を用いた、本症の遺伝子治療の基礎研究にも着手した。2.遺伝子発現機構の解明と疾患との対応に関する研究この研究の目的は遺伝子病(癌も含む)での遺伝子発現機構の異常を解明し、それが修復手法(治療)の対象になり得るか否かを検討するものである。なお、この研究にあたっては培養細胞や動物モデルでの検討が考えられる。遺伝子病の発症機構の解明がより詳細に究明されなければ、仮に遺伝子導入が成功しても、治療効果に結びつかない可能性もある。遺伝子発現機構(5′上流変異、胎児期突然変異、モザイクの解明、転写因子異常など)の解明はどの疾患に遺伝子治療の優先権を与えるかという問題にもつながる重要な研究である。導入した遺伝子が本来の調節を受けて発現する方法はいろいろあるが、今井はその1つとして酵母人工染色体(YAC)を用いて数百kbの遺伝子単位を細胞に導入し、発現パターンを研究する手法を開発した。森は肝型アルギナーゼをモデルとして、その上流を解析し、導入遺伝子の発現効果を上げる工夫をした。平井はアンチセンスオリゴヌクレオチド法を用いてヒト白血病の治療の可能性を追及し、期待できる成果をあげた。谷はヒトのピルビン酸キナーゼ欠損症の治療を目標とし、マウスの骨髄細胞にレトロウイルスベクターを用いてこの遺伝子導入の実験を始めた。多田、折居はそれぞれプロピオン酸血症、ペルオキシゾーム病をとりあげ、その遺伝子解析を進め、将来の遺伝子治療に備えるデーターを集積した。成澤、松田はフェニルケトン尿症、オルニチントランスカルバミラーゼ欠損症、モデル動物を用いて遺伝子治療の実験を開始した。

導入した遺伝子が本来の調節を受けて発現する方法はいろいろあるが、今井はその1つとして酵母人工染色体(YAC)を用いて数百kbの遺伝子単位を細胞に導入し、発現パターンを研究する手法を開発した。森は肝型アルギナーゼをモデルとして、その上流を解析し、導入遺伝子の発現効果を上げる工夫をした。平井はアンチセンスオリゴヌクレオチド法を用いてヒト白血病の治療の可能性を追及し、期待できる成果をあげた。谷はヒトのピルビン酸キナーゼ欠損症の治療を目標とし、マウスの骨髄細胞にレトロウイルスベクターを用いてこの遺伝子導入の実験を始めた。多田、折居はそれぞれプロピオン酸血症、ペルオキシゾーム病をとりあげ、その遺伝子解析を進め、将来の遺伝子治療に備えるデーターを集積した。成澤、松田はフェニルケトン尿症、オルニチントランスカルバミラーゼ欠損症、モデル動物を用いて遺伝子治療の実験を開始した。
スリランカの財政分権化と地方経済の強化

この三年間の研究に基づいて、我々はスリランカの自治体は透明性と機能の分掌化を欠いていると分析した。このことは地方の政治指導者や政府関係者の間に混乱、非効率さや紛争をもたらした。また、日本では1950年代から実施している地方交付税計画(LATP)を通じて、地方自治体への財政配分の分散化は自治代レベルでのガバナンスと発展に貢献していることが分かった。権限移譲による地方分権の有効性は現在、発展途上国の80%以上で実施されていることより実証されている。世界規模の事業再構築は国家内での辺境地域や開発途上地域のための地域開発戦略の更なる必要性を生み出しています。そのため、地域レベルで人々に力を与えることが重要です。日本の地方自治体は人を大切にし、地域開発のための戦略を開発するにあたって公共サービスを重視し追及しています。日本の地方自治体の自治は憲法で保障されています。地方自治体は、独自の収入源のため財政的安定性を持っています。中央政府に大きく頼ってはいません。他方、スリランカでは、地方行政や市民をエンパワーすることは非常に複雑であり、中央政府に権限を集中させることが重要視されている政治体制ではこうした動きには敏感であります。スリランカ憲法に修正第13条で示され、また、Lessons Learnt and Reconciliation Commission (LLRC)が推奨している、地方への権力の委譲の概念は、国の現在の政治指導者の包括的な理解を必要とします。しかしながら、2008年に終了したスリランカ内戦戦後において、市町村、地方公共団体、国レベルでの和解、平和構築そして開発のための政策を構築する強い必要性があることも現実です。こうした現状のもと、スリランカの現在の地方公共自治体は一貫性に欠けて、政治的に中央集権的されている非効率な行政システムといえます。我々は、本研究の一部として、スリランカにおける政府内資金配分の決定要因を特定することを試みた。財政分権化は、その枠組みにおいて、地方分権化をもたらし地方の活性化の要因となっている。それは、政府、民間セクター、市民社会を問わず、すべての社会関係者の役割と関係を伴う(UNDP 2005)。95%の民主主義国家が今や補助的国家政府を選出し、世界中のあらゆる国が大小・貧富に関わらず、政府の補助的国家層に政治的、財務的、行政的パワーを増加させている(World Bank 2000)。回収したデータを用いて、我々はSalgaoレポート(1989)に掲げられた7つの基準に、以下に示したとおりのウェイトを置きながら資金配分の決定的要因を探った。1.一人当たり国民所得(10%)、2.各地域の一人当たり国民所得と地域間の一人当たり国民所得額の最高値との差(10%)、3.貧困度(10%)、4.雇用状況(15%)、5.教育水準(15%)、6.健康と栄養状況(15%)、7.経済・社会インフラ(25%)。その結果、西部では、一人当たり国民所得、失業率、教育水準、健康と栄養状況については肯定的な関係が見られたが、貧困度については否定的であった。中央では結果は後退し、一人当たり国民所得、失業率、健康と栄養状況には肯定的な関係が見られたが、貧困度と健康と栄養状況については否定的であった。確立値を考慮に入れても、失業率と教育水準係数は非常に大きな要因であると考えられる。南部でも結果は後退した。失業率と健康と栄養状況には肯定的である一方、一人当たり国民所得、貧困度、教育水準については否定的な関係が見られた。実質的にデータを収集することができ、継続して収集が行っています。厳格な統計処理のためにいくつかのデータが必要で、また日本とスリランカの主題に関する政策レベルの専門家とのインタビューも行いました。国際大学での学生が、我々の研究プロジェクトのいくつかのコンポーネントに取り組んでいます。これは彼らの研究能力の向上に役立ち、さらには当研究にも有益な結果をもたらします。研究を行うのに必要なデータ収集は十分ある。だが、更なるデータ収集に取り組んでいる。特に正確な統計作業を行うのにデータが必要である。また、政府関係者や日本やスリランカに関する事項の専門家にインタビューを行った。国際大学での指導学生も本研究に携わっている。これにより研究の幅が広がり彼らの支援が非常に役に立っている。私の共同研究者、教授Sirimal Abeyratneは、2013年1月国際大学に来て、2014年1月まで滞在します。我々は今年、2冊の書籍を仕上げる相当量の作業を完了する予定しています。このプロジェクトの一環として、『スリランカ新興:日本のガバナンスと発達の経験を共有する』というテーマで、東京で2013年6月9日とコロンボで2013年8月中に国際会議を開催する予定でおります。我々の研究論文は、これらの2つの会議で発表されます。

私はまた、約2週間のインタビューを実施し、研究を行うために、カナダとヨーロッパの国へのスタディツアーを実施する予定です。2012年夏に米国に行き、ハーバード大学及びイエール大学の研究者とミーティング、インタビュー等を行う。また7月か8月にスリランカでプロジェクトミーティングを行い、そこで現在執筆を予定しているスリランカの財政分権化についての書籍に協力してくれる人を最終決定する。日本からの12つ程のケーススタディーも含める予定である。中央政権から地方分権への日本の資金配分についての権威である日本人教授に協力してもらうことが既に決定している。12月に共同研究者であるSirimal Abeyrathne教授が来日し、1年間滞在する予定である。この間に書籍の執筆を行う。Sirimal Abeyratne教授と私は、2013年6月09日東京工業大学で開催される『スリランカ新興:日本のガバナンスと発達の経験を共有する』と題する会議でこれまでの研究結果を発表する予定です。Sirimal Abeyratne教授の交通費及び滞在費を必要とします。夏の米国、スリランカの出張旅費と研究協力者の謝金が大半をしめることになるが、米国でのミーティング、インタビューは、この研究に大きな成果を期待できる。
南スラヴの口承文芸と現代文学の連関に関する研究─イヴォ・アンドリッチを中心として

本研究の目的は、口承文芸から記述文学への移行という普遍的問題を考察するための手がかりとして、旧ユーゴスラヴィア唯一のノーベル賞作家アンドリッチの作品と、その背景にある南スラヴ口承文芸との連関を考察すること、また、そうした口承文学が、アンドリッチ作品を経由して、現代文化にどのように表出しているかを探ることにある。アンドリッチの文学世界はボスニアと深く結びついており、アンドリッチが取り入れた口承文学は主としてボスニアのものである。そこで、二年目にあたる2018年度は、ボスニアにおけるアンドリッチ研究の流れを追った。現在、アンドリッチはボスニア文学史において注記が必要な作家として扱われているが、それがどのような意味を持つのかを六十年代の移民雑誌に遡って検証し、九十年代、そして二一世紀にどのような問題を投げかけているかを検討した。アンドリッチの文学世界の基盤について検証し、成果を出すことができたため。口承文学と現代文化という二つの側面からの研究を続け、その接合点としてのアンドリッチの意義についての考察を深める。初年度にあたる本年は、まず、口承文学をめぐる背景についての資料を集めるとともに、アンドリッチと現代文化とのかかわりを論じた。具体的には、ユーゴスラヴィアを代表する映画監督エミール・クストゥリツァにおけるアンドリッチの意義を論じた。(奥彩子「ボスニアの奇想ークストゥリツァによるアンドリッチの翻案」小川公代、村田真一、吉村和明編『文学とアダプテーション』春風社、2017、pp.315-339)この論文では、クストゥリツァがアンドリッチを自身にとってもっとも重要な作家とみなし、映像作家としてのキャリアの初期にアンドリッチの短編「ビフェ・タイタニック」を映像化していたこと、その一方で、世界的な成功をおさめたのち、アンドリッチの代表作『ドリーナの橋』の映画化を構想しながらも、現時点ではそれに成功していないこと、その意味について論じた。口承文学に関する基本文献を集めることができ、現代文化とのかかわりから成果を出すことができたため。育児休業期間があったため、海外出張ができなかった。次年度に海外出張をする予定である。平成30年度は国外調査の日数を短期間しか確保できず、旅費の支出が当初計画より少なくなった。平成31年度も国外調査に長く出ることは難しそうだが、研究活動を円滑にすすめるためにインターネットを利用して書籍を購入する等の工夫をする予定である。
記憶の心理物理学に及ぼす手がかりの生態学的妥当性の影響

本研究の目的は、人物の身長評価を行い,身長評価のために有効な手がかりを探索することにあった。手がかりは知覚像と記憶像において,類似した構造を持つのか,さらには異なった構造を持つのかを実験的に検討した.身長という大きさ評価を行うにあたって,本研究においては,人物のさまざまな身体部位間の比を,構造化された手がかりを考とた.身体部位間の比は,人物の体の形ととらえることが可能である.形変数が,知覚された大きさと,記憶された大きさ評価値に,どのような影響を及ぼしているのか.また形変数は,知覚像と記憶像ではどのような構造化が行われているかを調べた。まず男女13名づつを,黒い均等な背景条件のものと,正面,側面,背面から撮影した.それぞれの人物の身体部位21箇所を,マルチン法に準拠して計測した.この計測値から,身体各部位の比を求め形変数とした.知覚条件では,人物の画像を観察しながら,記憶条件においては,一度記憶した人物の顔だけを観察しながら,それぞれ人物の身長を評価した。形変数の解析を行う前に,人物の客観的身長と,評価された身長の関係について分析した.評価された身長が客観的な身長に完全に対応するならば,勾配は1になるはずである.知覚条件の身長評価の結果で,勾配がもっとも1に近かったのは,体の向きが側面の場合であった(勾配0.62,決定係数0.72).正面,背面の順で勾配が緩やかになった.この結果は記憶条件でも同様であった.人物の身長を客観的な評価できる体の向きは,顔がすべて見える正面ではなく,側面であった.身長評価に有効な形変数として,知覚,記憶ともに共通したのは「顔の大きさと背丈の比」変数であった.知覚像と記憶像では,手がかりの構造化が異なることが示唆された.本研究の目的は、人物の身長評価を行い,身長評価のために有効な手がかりを探索することにあった。形変数の解析を行う前に,人物の客観的身長と,評価された身長の関係について分析した.評価された身長が客観的な身長に完全に対応するならば,勾配は1になるはずである.知覚条件の身長評価の結果で,勾配がもっとも1に近かったのは,体の向きが側面の場合であった(勾配0.62,決定係数0.72).正面,背面の順で勾配が緩やかになった.この結果は記憶条件でも同様であった.人物の身長を客観的な評価できる体の向きは,顔がすべて見える正面ではなく,側面であった.身長評価に有効な形変数として,知覚,記憶ともに共通したのは「顔の大きさと背丈の比」変数であった.知覚像と記憶像では,手がかりの構造化が異なることが示唆された.
メタコリンまたは迷走神経刺激による気道抵抗の増加に対する硬膜外麻酔の影響

リドカインによる胸部硬膜外麻酔がメタコリンによる気道の収縮に対して影響しないことを報告した。リドカインの血中濃度の影響および気道過敏性との関係を調べるため実験を継続した。方法:ウサギを用い,ぺントバルビタール麻酔下に気管切開し人工呼吸器で換気した。胸部で硬膜外腔にカテーテルを挿入し,1%リドカイン0.5mLまたは同量の生食を投与した。持続静脈内投与は,リドカインを3mg/kg引き続き200μg/kg/minまたは同量の生食を投与した。気道抵抗,血圧,動脈血酸素分圧,血中リドカイン濃度を測定した。気道の過敏性は,アルブミンにPAF(血小板活性化因子)とカプサイシンを用いて作成し,より人の喘息に類似させた標本を用いた。メタコリンの濃度を0.02,0.2,2%と増加させ,気道内に吸入し,気道収縮の濃度による変化を求めた。結果:リドカインによる硬膜外麻酔は,生食を硬膜外腔に投与した群と比較し,メタコリンによる気道収縮に差を示さなかった。気道過敏性のないウサギにリドカインを持続静脈内投与すると,生食を投与した群と比較し,2%メタコリンによる気道収縮を抑制した(73±15(cmH20・1^<-1>・sec^<-1>±SD)から50±9(p<0.05))。気道過敏性のウサギに対しても,リドカイン静脈内投与は,生食を投与した群と比較し,2%メタコリンによる気道収縮を抑制した(95±10から71±9(p<0.05))。リドカインの血中濃度は,硬膜外麻酔では1μg/ml以下で,静脈内投与では約5μg/mlであった。結論:以上のことから,硬膜外麻酔で作用がはっきりしなかったのは,リドカインの血中濃度による全身作用の違いが考えられた。また,気道収縮の抑制作用は,イリタント受容体の関与を含めた過敏性のあるなしにかかわらず作用するが,その程度には限界があることがわかった。研究目的1:メタコリンまたは迷走神経刺激による気道の収縮に対して胸部硬膜外麻酔が気道抵抗を増加または減少させるのか調べる。実際に迷走神経を刺激し、また迷走神経活動と心臓交感神経発射活動を記録し調べることで自律神経の関与を明らかにできる。研究目的1-1:メタコリンで誘発した気管支収縮に対し、硬膜外麻酔は増悪させるのかどうか調べる。研究によって得られた知見:(1)0.2%メタコリンを気管内に噴霧した結果、気道内圧は25%増加し、コンプライアンスは26%低下した。これらは,硬膜外麻酔による交感神経ブロックで変化せず、硬膜外麻酔はメタコリンによる気管支収縮に影響を及ぼさなかった。(2)このときの血中リドカイン濃度は1μg以下であった。気管支収縮に対するリドカインは全身性に作用しの血中濃度が関係するとの報告もあり、リドカインを静脈内持続投与し、3-5μg程度の血中濃度のときのメタコリンに対する反応性を研究中である。研究目的1-2:メタコリンで誘発した気管支収縮に対し、迷走神経刺激は気道抵抗を増加させるのかどうか調べる。研究によって得られた知見:

(1)コントロールにおいて、迷走神経刺激で、気道内圧の増加およびコンプライアンスの低下を示すが、連続刺激中の最初の10-15秒で刺激効果が減弱しコントロールの状態にもどった。(2)0.2%メタコリンを気管内に噴霧して生じた、気道内圧増加、コンプライアンスの低下は、迷走神経刺激で変化は認められなかった。メタコリンで誘発した直接的な気管支収縮に対し、自律神経の関与は弱いことが考えられた。実験計画書に従い、さらにイリタント受容体への関与について研究を続けたい。実際に交感神経と迷走神経活動を記録しながら,メタコリンまたはカプサイシンで引き起こした気道収縮に対する硬膜外麻酔の影響を調べた。実験にはネコを用いた。ペントバルビタールの腹腔内投与で気管切開を行った。パンクロニウムで不動化し,人工呼吸器を用いて換気した。心臓交感神経,迷走神経活動を導出記録した。気道収縮の評価は,最大気道内圧(cmH20)とコンプライアンス(ml・cmH20^<-1>)を用いた。気管支平滑筋を収縮させるため,生理食塩水で溶解した0.2%メタコリンまたはカプサイシンを,気管内に噴霧した。噴霧から15分間,気道内圧の増加とコンプライアンスの低下を確認し,変動しないことを観察して,硬膜外腔へ20%リドカイン1.0mlを注入した。リドカイン注入前と注入15分後を比較した。メタコリン投与で,最大気道内圧は10.6±1.1から13.4±1.1cmH20へ25%上昇した。コンプライアンスは,3.3±0.3から2.5±0.2ml・cmH20^<-1>へ26%低下した。交感神経活動は56%増加し,迷走神経活動は変化しなかった。硬膜外麻酔で,最大気道内圧,コンプライアンスとも変化しなかった。血圧は85±10.0mmHgへ低下し,交感神経活動はベースラインから60%減少した。迷走神経活動はほとんど変化がなかった。カプサイシン投与で気道内圧は10.4±0.5から12.4±0.58cmH20へ20%上昇した。コンプライアンスは,4.1±0.5から3.2±0.4ml・cmH20^<-1>へ22%低下した。交感神経活動は48%増加し,迷走神経活動はわずかに減少しただけであった。硬膜外麻酔で,最大気道内圧とコンプライアンスは変化しなかった。交感神経活動はベースラインから56%減少した。迷走神経活動は39%減少した。硬膜外麻酔は,メタコリンおよびカプサイシンによって引き起こされた気道収縮に影響を及ぼさなかった。
インターロイキン12の産生及び活性調節による免疫制御

IL-12はin vivoで例えば腫瘍の拒絶を惹起しうる如く、T細胞機能を著名に亢進して全身性または組織局所的炎症を惹起させる。このことは逆に移植片拒絶反応、自己免疫等炎症疾患の成立及びその慢性化にこのサイトカインが深くかかわっていることを示唆し、IL-12の作用を制御することが各種病態の改善に連がることが考えられる。そこで本年度の研究はIL-12の生体内での産生制御機構を解析することを目的とした。次の成果が得られた。T-APC相互作用においては、T細胞上のCD40LによりAPC上のCD40が刺激される結果、APCからIL-12が産生されることがわかっている。このCD40LによるIL-12の産生はB細胞の存在によって著明に抑制された。即ち、B細胞はCD40を発現しており、APCのCD40と拮抗し、活性化T細胞上のCD40LがAPCのCD40とinteractすることを阻害することがわかった。又、IL-12産生は、三つの主要なTh2サイトカイン(IL-10,IL-6,IL-4)により複雑に制御されることが明かとなった。IL-10はCD40L刺激によるIL-12産生を著明に抑制した。IL-6はCD40L刺激による産生に影響を与えなかった。又IL-4はCD40L刺激のIL-12産生を亢進した。以上、IL-12産生はB細胞及びTh2サイトカインにより複雑な制御を受けることが明らかになった。次の成果が得られた。