hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
細胞外マトリックス改変および幹細胞分化誘導による硬変肝からの臓器再生

本研究は、肝硬変遺伝子治療研究の概念を発展させ、近年注目されている多能性幹細胞が、硬変肝からの臓器再生にどのように関わっているかを明らかにすることを目的とした。【方法】C57BL/6Jマウスに50%四塩化炭素(CCL_4)を2.0ml/kgで週1回,6週連続で経口投与し障害肝モデルを作成後、全身放射線照射900cGyを施行し,多能性幹細胞のソースとして同系のLacZ transgenic mouseの骨髄細胞を5×10^6個尾静脈より移植した。その後CCL_4投与は4週継続した。この系において、骨髄細胞移植後、週1回計4回にわたってヒト肝細胞増殖因子(HGF)の遺伝子導入を行い、硬変肝からの再生過程における骨髄由来幹細胞の関与を検討した。さらに、傷害肝臓へリクルートされる骨髄由来細胞の分画を検討する目的で、移植骨髄細胞におけるHGFレセプター;c-Metの発現を検討した。【結果】HGF遺伝子の導入後、肝組織中および血中においてヒトHGFタンパクの有意な発現を認め、CCL_4投与による硬変肝の有意な改善を認めた。硬変肝からの組織再構築過程において、LacZ標識細胞の肝組織内分布を検討すると、HGFの導入によりLacZ陽性細胞は著明に増加し、血管内皮細胞のマーカーとLacZの分布がほぼ一致し、その他わずかであるが、肝マクロファージのマーカーとLacZの分布に重なりを認めた。一方、肝星細胞、肝細胞およびoval cellにはLacZ陽性細胞を認めず、本モデルにおいては、骨髄由来細胞の血管内皮細胞・類洞内皮細胞への分化誘導が重要な働きを担っていることが推測された。一方、骨髄細胞にc-Metの発現を認め、HGFによる骨髄細胞の肝臓への誘導メカニズムが示唆された。【考察】骨髄由来細胞の肝細胞への誘導は認められなかったが、肝固有の組織幹細胞の分化誘導と骨髄由来細胞の血管内皮細胞の共同作業により、硬変肝からの臓器再生が効率的に行われることが推測された。本研究は、これまでの肝硬変遺伝子治療研究の概念を更に発展させ、近年注目されている多能性幹細胞が硬変肝からの臓器再生にどのように関わっているかを明らかにすることを目的としている。また、移植後もCCL4投与は4週継続した。この系において、骨髄細胞移植後、週1回計4回にわたってヒト肝細胞増殖因子(HGF)の遺伝子導入による肝硬変治療を行い、硬変肝からの再生過程における骨髄由来幹細胞の関与を検討した。対照群としてHGF遺伝子の代わりに生食を投与した群を作製した。【これまでの結果】HGF遺伝子の導入にはHVJリポゾーム法を用いたが、これまでどおり肝組織中および血中においてヒトHGFタンパクの有意な発現を認めた。また、HGF遺伝子導入後CCL_4投与による硬変肝の有意な改善を認めた。

この硬変肝からの組織再構築過程において、LacZ標識細胞の肝組織内分布を免疫組織学的検討にて行うと、血管内皮細胞のマーカーであるFactor VIIIとLacZの分布がほぼ一致し、その他わずかであるが、肝マクロファージ、Kupffer細胞のマーカーであるBM8とLacZの分布に重なりを認めた。一方、肝星細胞、肝細胞およびoval cellにはLacZ陽性細胞を認めず、本モデルにおいては、骨髄由来細胞の血管内皮細胞への分化誘導が重要な働きを担っていることが推測された。【考察】これまでの結果から、HGF遺伝子治療による硬変肝再構築過程に骨髄由来細胞の血管内皮細胞への分化が有意な役割を担っていることが判明し、現在骨髄由来細胞の分画の検討を進めている。本研究は、肝硬変遺伝子治療研究の概念を発展させ、近年注目されている多能性幹細胞が、硬変肝からの臓器再生にどのように関わっているかを明らかにすることを目的とした。【方法】C57BL/6Jマウスに50%四塩化炭素(CCL_4)を20ml/kgで週1回,6週連続で経口投与し障害肝モデルを作成後、全身放射線照射900cGyを施行し,多能性幹細胞のソースとして同系のLacZ transgenic mouseの骨髄細胞を5×10^6,個尾静脈より移植した。その後CCL_4投与は4週継続した。この系において、骨髄細胞移植後、週1回計4回にわたってヒト肝細胞増殖因子(HGF)の遺伝子導入を行い、硬変肝からの再生過程における骨髄由来幹細胞の関与を検討した。さらに、傷害肝臓ヘリクルートされる骨髄由来細胞の分画を検討する目的で、移植骨髄細胞におけるHGFレセプター;c-Metの発現を検討した。【結果】HGF遺伝子の導入後、肝組織中および血中においてヒトHGFタンパクの有意な発現を認め、CCL_4投与による硬変肝の有意な改善を認めた。硬変肝からの組織再構築過程において、LacZ標識細胞の肝組織内分布を検討すると、HGFの導入によりLacZ陽性細胞は著明に増加し、血管内皮細胞のマーカーとLacZの分布がほぼ一致し、その他わずかであるが、肝マクロファージのマーカーとLacZの分布に重なりを認めた。一方、肝星細胞、肝細胞およびovalcellにはLacZ陽性細胞を認めず、本モデルにおいては、骨髄由来細胞の血管内皮細胞・類洞内皮細胞への分化誘導が重要な働きを担っていることが推測された。一方、骨髄細胞にc-Metの発現を認め、HGFによる骨髄細胞の肝臓への誘導メカニズムが示唆された。【考察】骨髄由来細胞の肝細胞への誘導は認められなかったが、肝固有の組織幹細胞の分化誘導と骨髄由来細胞の血管内皮細胞の共同作業により、硬変肝からの臓器再生が効率的に行われることが推測された。
免疫ドミナンス制御機構の分子メカニズムと生物学的意義の解明

細菌やウイルスなどの微生物には多くのタンパク質が含まれ、各々のタンパク質についてT細胞が応答し得るエピトープが多数存在する。しかし実際には、それらの中で特定のエピトープに対してT細胞応答が優位に働くことが知られており、免疫偏向性と呼ばれる。実際にT細胞がどのエピトープを標的とするかという疑問は、獲得免疫システムにおいて最も原理的な命題の一つと言えるが、免疫偏向性がどのように決まっているかについては、多くの謎に包まれている。本研究課題では、抑制性免疫補助受容体の一つであるLAG-3に着目して免疫偏向性が生じるメカニズムおよび免疫偏向性の生物学的意義を明らかにする。
ヒト染色体21の構造と機能

ヒト染色体21の構造と機能をmRNA、コ-ドする蛋白質のレベルで研究している。mRNAのレベルはcDNAライブラリ-の作成を主な目標として現在ヒト染色体21のみをヒトの染色体として含むハムスタ-細胞およびマウスの細胞からcDNAライブラリ-を作成し、ヒトゲノムに特有の繰り返し配列を用いてスクリ-ニングを行い、数種のcDNAを単離した。これらをヒト染色体21上にマップした。これらの成果は文献4(Ebiharaら)にまとめられている。またヒト染色体21のゲノミックライブラリ-を作成し、そのなかからシングルコピ-DNAを選別し、各々のシングルコピ-DNAをヒト染色体21上にマップし、FAD(家族性アルツハイマ-病)領域にマップされる2種のDNAフラグメントを得た。これらのDNAフラグメントをプロ-ブとしてcDNAライブラリ-をスクリ-ニングすることによって得られるcDNAはFAD遺伝子の研究に不可欠である。これらの成果は文献6(Itoら)にまとめられている。ヒト染色体21からコ-ドされる蛋白質に対するモノクロナ-ル抗体を2種類、OK-2、YO-1を得た。前者は膜蛋白に対し、後者は細胞質、主に核蛋白に対するモノクロナ-ル抗体である。これらの抗体で脳の切片を染色することにより、脳内におけるこれらの遺伝子の発現を正常、ダウン症で比較した。いずれも特徴的にピラミダル神経細胞が染色されるが、ダウン症の脳の方が時間的に早く発現されることが判明した。ダウン症におけるprecocious agingを示すものとして興味深い結果である。これらの成果は文献1(Takashimaら)、文献2(Takashimaら)、文献3(Yaoら)、文献5(Obataら)にまとめられている。また小畑蘭子の博士論文、海老原充の修士論文、八尾良司の修士論文に詳細が記載されている。
レトロウイルス構造タンパク質の細胞膜輸送に関与する宿主因子の迅速同定法開発

HIV-1のGagが本来有するミリストイル化シグナルを数々の膜移行シグナルと置換した変異体を作成しその性質を解析した結果、(1)ミリストイル化非依存的にGagが重合する事、(2)ミリストイル化非依存的にGagが細胞膜に到達する事、(3)ミリストイル化非依存的にGagがVLPを産生する事、(4)ミリストイル化非依存的にVLP産生分子メカニズムは野生型同様にVpuおよびVps4感受性である事、(5)Gag間相互作用の強さとVLP産生能力には相関がない事などが明らかとなった。以上より、輸送経路をCD4等に置換する事によってGag細胞膜輸送および出芽を解析する事が可能であり、これをprobeとして簡便な機能的Gag相互作用因子の同定が可能である事が示された。Gagだけでなく、細胞の膜タンパク質と相互作用する諸因子の機能的なスクリーニング系の技術的開発基盤が達成されたと思われる。細胞遺伝子産物であるPLC delta 1 pleckstrinhomology domainとGagミリストイル化シグナルを置換したPH-Gagタンパク質は野生型と同等以上の効率でVLP産生するだけでなく、感染性を有するウイルスも産生する事ができた。これはウイルス複製サイクルがミリストイル基がなくても完全に機能することを示した世界で初の例である(論文投稿中)。機能および遺伝子量が類似するパルミトイル化はGagの細胞膜輸送効率が低いためVLP産生効率が著しく悪かった。ウイルス進化におけるミリストイル化シグナル選択の意義は、限られたゲノムに最小限の遺伝子量でGagによる効率的なウイルス産生を可能にするという事であると推測される。レトロウイルス学的に重要な学術的知見が置換型Gag変異体を利用して得られた意義は大きいと思われる。本研究の結果、HIV-1とMLVのGagが本来有するミリストイル化シグナルを細胞由来の膜タンパク質に置換した「膜タンパク質融合Gagタンパク質」は、膜タンパク質のtopologyを維持した状態で発現し、核周囲および細胞膜へ局在し、multimerizationし、出芽してVLPを産生することが判明した。これは「ミリストイル化はVLP産生に必須である」という通説が否定的であることを示唆する。Gagは、脂質ラフトから出芽すると考えられている。Gagはミリストイル化をうけて脂質ラフトへtargetingする。これは効率的なVLP産生に重要であると考えられている。膜タンパク質融合Gagタンパク質は形質膜上のマイクロドメイン局在を膜タンパク質に依存する。CD4は脂質ラフトに局在し、CXCR4は局在しない。HIV-1のGagを使ったCXCR4GagGFPとCD4GagGFPは共に出芽する。脂質ラフトに集積しないと考えられるCXCR4GagGFPの出芽効率がCD4GagGFPより高かった。つまり脂質ラフトへのtargetingはVLP産生に必須な要項ではないことが示唆された。以上より、Gag出芽は輸送経路に非依存的であることがはじめて示された。これらはミリストイル化を受けないGagの解析だけではわからなかった新知見であり、ウイルスの生活環を理解する上で非常に重要な発見である。本研究の結果はレトロウイルスの生活環や進化を理解するというウイルス学的見地において重要であるだけでなく、Gagや膜タンパク質と相互作用する諸因子の機能的なスクリーニング系の開発にも大きく資することが期待される。
悪魔像の文学的系譜――グノーシス主義との秘められた対決

悪魔の表象を知らなければヨーロッパの真の顔を理解できない。ヨーロッパの「悪魔の肖像」を浮かび上がらせるべく、本研究の担当者3人(Dieter Trauden、久山雄甫、高橋義人)は定期的に会合を持ち、中世から18世紀にいたるテキスト(中世ドイツ語、ラテン語等)や研究文献を精読し、ドイツ語で議論を交わした。その結果「キリスト教とグノーシス」「堕天使ルチファー」「エヴァと原罪」「テオフィロスの芝居とマリア信仰」「魔女ー唯名論の問題提起」「トリスタン物語と12世紀ルネサンス」「エラスムス対ルター」「人間の根源悪ーヒューム、ルソーからカントへ」等の諸問題をかなりの程度明らかにすることができた。平成25年度は、西欧における悪魔像の誕生に焦点を当てた。実際に扱ったのは、1『聖書外典偽典』(バルトロメウス福音書、サロモンの遺言、エノク書等)で、2週間に一度、京都大学Trauden研究室で、研究分担者のTrauden氏、研究協力者の久山雄甫氏と3人で、ドイツ語訳の『聖書外典偽典』を読みながら、「天使とはいったい何か」「天使ルツィファーはどうして天から堕ちたか」などの問題を検討した。研究会は原則として隔週の月曜日か土曜日に行った。毎回2時間3時間である。続いて同じ研究会において、アウグスティヌス『神の国』第13章で扱われている神と天使と悪魔の関係、反グノーシス主義、オリゲネスの『諸原理について』における堕天使論、トマス・アクィナスの『神学大全』における神の認識の問題、トマス対グノーシス主義の問題を考察討議した。討議はすべてドイツ語で行った。現在では、それらの歴史的文献をもとにして誕生した中世ドイツの宗教劇(特に復活祭劇)を取り上げ、中世ドイツ語のテキストに即しながら、民衆はこれらの劇中で悪魔たちがイエスに打ち負かされる場面を見て笑うことによって悪魔に対する恐怖心を克服したことを考察している。西欧のキリスト教社会では神や悪魔と直接に対峙するところから独特な個人主義が誕生した。森鴎外はドイツに住みながら、そのような個人主義に対する違和感を拭うことができず、日本的な個人主義を模索した。それについてまとめたのが論文「無私の個人主義ー森鴎外とゲーテ」(岩波書店『文学』近刊)である。またルソーとゲーテは、アウグスティヌスの原罪説を真っ向から否定し、自然宗教の上に啓示宗教を位置づけたトマスとは違い、啓示宗教を否定し自然宗教にもとづく世界を構築しようとした。平成26年5月末にアイルランドで開かれる国際異文化交流独文学会(GiG)ではこの問題について発表することになっている。平成26年度は、前年度に引き続きDieter Trauden氏、久山雄甫氏と3人でのデモノロジー研究会を続けるとともに、科研の研究をもとにした『悪魔の神話学』と題する大部の著作をほぼ80%書き終えることができた。これは次の11章からなる。序文(西欧の影の精神史)、第1章(神の弟)、第2章(内在と超越)、第3章(堕天使という嘘)、第4章(原罪という嘘)、第5章(処女マリアという嘘)、第6章(魔女という嘘)、第7章(愛は悪魔よりも強し)、第8章自由意志論争、おわりに(カントの根本悪)、あとがき。第2章は、まだまったく手つかずである。(本書は岩波書店から刊行される予定)このうち平成26年度に書いたのは、第4章以下である(いまだ推敲中の章もいくつかあり)。原罪説を最初に唱えたのは、一般に信じられているようにアウグスティヌスだと仮定して第4章を書き進めていたが、デモノロジー研究会で初期教父に関する数多の文献を扱ううちに、アウグスティヌス以前にテルトゥリアヌスがすでに原罪説を唱えていたことが分かり、第4章は現在、改稿中である。第5章は、デモノロジー研究会で取り上げた『テオフィロスの芝居』の分析に当てられている。1926年に刊行されたK. Plenzat: Die Theophilusulegende(稀覯本)を入手でき、研究が捗った。他方、唯名論を扱った第6章は、その中核をなすオッカムの著作がきわめて難解で、この章をまとめるのに4か月を費やした。第8章を書くには、ルターとエラスムスの全集(ラテン語、ドイツ語、英訳)に当たる必要があり、平安女学院大学所蔵のものの他、京都大学や同志社大学に足しげく通った。「おわりに」はカントの「根本悪」説の批判に当てられているが、収集したカント研究書はいずれも「根本悪」説肯定の立場に立っており、カント批判を説得力あるものにするのにかなり苦労した。「悪魔像の文学的系譜」を古代・中世を中心に、Dieter Trauden氏(京都大学外国人教師)、久山雄甫氏(神戸大学文学部講師)とともに進めた。研究会は原則として隔週の月曜日に、京都大学のDieter Trauden氏の研究室で3人でドイツ語で行なった。3人の研究会で取り上げられたのは、次の3つのグループに分けられる。(1)デモノロジー(悪魔学)を導入し、広めた教父や聖人たち(テルトゥリアヌス、オリゲネス、アウグスティヌスらの教父、スコラ哲学(トマス・アクィナスら)など。(2)民衆のあいだにデモノロジーを広めるのに大いに貢献した復活祭を中心とする中世ドイツの宗教劇(『テェイフィルスの芝居』『ユッタの芝居』

『インスブルック復活祭劇』『レーデンティン復活祭劇』『ルツィファー』、『アンティクリスト』など)。(3)おそらくはデモノロジーに反対する立場から唯名論を唱えた人々(アベラール、オッカムら)。(4)悪魔の存在を信じる実在論者たちとそれを批判する唯名論者たちのあいだで交わされた普遍論争をテーマにしたU・エーコの小説『薔薇の名前』。この研究会を踏まえて代表者の高橋義人は、デモのロジー(悪魔学)を導入したことが、西欧精神史の最大の過ちだったという確信を深め、ヨーロッパ精神史に対する批判的見解を『悪魔の神話学』(全9章、400字原稿用紙で700枚ほど)として執筆した。これは2016年夏に岩波書店から出版される予定である。悪魔の表象を知らなければヨーロッパの真の顔を理解できない。ヨーロッパの「悪魔の肖像」を浮かび上がらせるべく、本研究の担当者3人(Dieter Trauden、久山雄甫、高橋義人)は定期的に会合を持ち、中世から18世紀にいたるテキスト(中世ドイツ語、ラテン語等)や研究文献を精読し、ドイツ語で議論を交わした。その結果「キリスト教とグノーシス」「堕天使ルチファー」「エヴァと原罪」「テオフィロスの芝居とマリア信仰」「魔女ー唯名論の問題提起」「トリスタン物語と12世紀ルネサンス」「エラスムス対ルター」「人間の根源悪ーヒューム、ルソーからカントへ」等の諸問題をかなりの程度明らかにすることができた。『悪魔の神話学』は、400字原稿用紙で600枚以上の大著になるので、完成にはもっと時間がかかると思っていたが、1章を1ヶ月でまとめるという課題を自らに課したため、予想以上に捗った。むろん大半の章は1ヶ月ではとうていまとめきれなかったし、まとめられた章も、その後のデモノロジー研究会で新しい文献に触れ、大幅に改稿しなければならなくなったこともあったが。ドイツ文学・思想私の個人研究(単著)である『悪魔の神話学』は、平成27年度9月には脱稿する予定である。またデモノロジー研究会の3人による共著で、ヨーロッパ中世のデモノロジーに関する共著を計画している。これは日本語で出版するつもりなので、研究分担者であるDieter Trauden氏の担当部分(ドイツ語)を誰かに邦訳してもらわなければならない。この共著の計画はまだまったく手つかずの状態にある。中世ドイツ演劇の専門家であるDr. DieterTrauden氏とともに研究会を開催したことによって、研究は当初予定していたよりもはるかに捗った。『聖書外典偽典』、アウグスティヌス、オリゲネス、トマス、中世ドイツ宗教劇に関する一次文献や二次文献は私もかなり知っているつもりだったが、氏は私よりもはるかにそれらに通暁しているからである。また文献のうちのかなりの部分はラテン語や中世ドイツ語で書かれているが、私や、ラテン語の得意な久山氏に分からない箇所も、氏は比較的簡単に解読してくれ、調査時間を大幅に短縮することができた。またTrauden氏は熱心なカトリック教徒で、アウグスティヌスの教えにかなり忠実であるが、私はアウグスティヌスの原罪説やトマス・アクィナスの啓示宗教にはきわめて批判的であるので、研究会の最中、ドイツ語での議論になることも時々あり、それによって銘々、自分の立場をより明確にすることができた。次年度は配分額が少ないため、意図的に残した。平成26年度4月からは中世ドイツの宗教劇の分析に進んだ。これから読むのは、『インスブルック復活祭劇』、『テオフィロスの物語』、『ユッタの物語』などである。
解糖系酵素の構造と機能

平成3,4年度にわたる当総合研究により、解糖系酵素の構造解析、蛋白質の結晶化法、構造解析法について大幅な前進がみられた。解糖系酵素の構造解析については、キシラナーゼやセルラーゼの分子構造の決定(畑)、G4アミラーゼの結晶構造の同型置換法による決定(松浦)、バクテリア型リゾチームの構造決定(原田)に成功し、その基質結合様式の検討と機能の詳細な解明についての研究が進展中である。また小麦からのアミラーゼインヒビターの結晶化と重原子同型置換体の調整に成功した(福山)。今後このインヒビターの構造解析が成功すれば、アミラーゼの機能の理解の一層の発展が期待される。バクテリア型αアミラーゼの構造解析も、分子境界の検討まで進行した(山根)。マルトオリゴ糖(G5)生成酵素やセラチアプロテアーゼの結晶化や構造解析も進行している(浜田)。セラチアプロテアーゼは分子モデルが作成され、サーモリシンとの構造の類似性が明らかにされた。構造解析法についても、分子置換法の検討を進めた。差パターソン関数の分子置換法への適用(山根)、非対称単位中に6分子を含むDNA結合蛋白質HUの結晶構造の分子置換法による構造決定(田中)、リポアミドデヒドロゲナーゼの分子置換法による構造解析の再検討など、その有用性を明かにしノウハウを公開した。X線データの高速収集法やその迅速処理システムについても、ハード・ソフト両面で大きな前進があった(佐藤,田中,森本)。遺伝子工学面でも、微生物による再生可能資源エネルギー変換のためセロビオヒドロラーゼの微生物への組み込みによる発現の成功やガラクトシダーゼのクローン化が行われ、今後の構造解析への出発点となっている(飯島)。イソプロピルリンゴ酸デヒドロゲナーゼのキメラ化による熱安定性の解明と高機能酵素の分子設計も進んでいる(森山)。平成3年度は、主に解糖系酵素の結晶化・イメ-ジングプレ-トによる迅速デ-タ収集法およびデ-タ処理法、について研究を進めた。結晶化に成功した酵素の構造解析も進展し成果が得られている。1)山根は、αーアミラ-ゼのなかで末だ立体構造の決定されていないバクテリア産の耐熱性および非耐熱性αーアミラ-ゼの結晶化に成功し、非耐熱性αーアミラ-ゼの結晶構造解析を進めた。現在、電子密度図を計算し分子境界を検討している。耐熱性α-アミラ-ゼは、その活性状態に近いpH領域で再現性よく結晶化できる条件を見いだし、重原子同型置換体の探索を進めている。2)松浦は、βーアミラ-ゼの解析に引続き、G6アミラ-ゼの解析を進めている。以上末だ解明されてるとはいい難いアミラ-ゼの解媒作用の解明のために、不可欠な構造状報が蓄積されている。3)畑はキシラナ-ゼの活性部位の同定とリゾチ-ムと同様の触媒機構を明らかにした。4)原因はバクテリア産リゾチ-ムの構造を決定し、その分子設計への発展を進めている。5)浜田はG5アミラ-ゼの結晶化で成果を挙げている。6)松本はリポアミドデヒドロゲナ-ゼの結晶構造を分子置換法により決定した。7)福山はアミラ-ゼの触媒機能についての情報を得るために、小麦αーアミラ-ゼインヒビタ-の解析を進めている。現在結晶化に成功し、デ-タ収集中である。8)佐藤は、蛋白質構造解析のための良質な異常分散デ-タ収集用カメラと処理系を開発し、アミラ-ゼインヒビタ-の解析に適用している。田中、森本は収集したデ-タの処理法を開発した。

月原は構造解析のための分子置換法の新しい展開として位相の精密化を行い、良い結果を得た。9)飯島、森山はガラクトシダ-ゼなどの遺伝子工学的研究を進めている。以上の本年度の研究成果をまとめ、研究成果報告書を発行した。本年度も前年度に引続き、解糖系酵素の構造解析、蛋白質の結晶化法、構造解析法の検討を進めた。解糖系酵素の構造解析については、大巾な前進が見られた。畑はセルラーゼの分子構造を決定し、両解糖系酵素の立体構造の相同性を示した。松浦はG4アミラーゼの結晶構造を同型置換法により決定し、その基質結合様式から機能を検討した。福山はアミラーゼインヒビターの結晶化と重原子置換体の調整に成功し、分子境界を検討している。このインビターの構造決定により、アミラーゼの機能の一層の理解が期待される。山根は引続きαアミラーゼの構造解析を進め、分子境界の検討などの伸展がみられた。浜田はセラチオプロテアーゼを異常分散を利用して構造解析し、分子モデルの作成を行いサーモリシンとの構造の類似性を明らかにした。原田は新しいバクテリア型リゾチームの構造解析を進めている。構造解析法については、山根の差パターソン関数の分子置換法への適用、田中の非対称単位中に6分子を含むDNA結合蛋白質HU結晶の分子置換法による構造解析の成功、松本のリボアミドデヒドロケナーゼの分子置換法による構造解析結果の再検討など、今後の展開ば期待される結果が得られている。森本や佐藤は高速データ収集法やその迅速処理についての研究を発展させた。結晶化でも、原田は結晶化の成功する条件の特異性と蛋白質の結晶化のためのデータベース作成を検討した。樋口はヒドロゲナーゼの結晶化条件の再検討を行った。遺伝子工学面でも、飯島による再生可能資源エネルギー変換のためのゼロビオヒドロラーゼの微生物による発現の成功、森山のイソプロピルリンゴ酸デヒドロゲナーゼのキメラ化による熱安定性と立体構造の相関の解明が行われた。
コミュニカティブな初級ドイツ語授業に参加する大学生の「外国語学習観」に関する研究

平成30年度は、平成29年度に実施した小規模のパイロット調査を経て、前期・後期の2回、質問紙調査を実施した。前期調査は英語学習経験とドイツ語学習に関する質問を主として平成30年5月6月に行い、14大学33名の教員の協力を得て、64クラス、合計1062名の学習者が質問紙調査に参加した。後期調査はドルニェイの「L2動機づけ自己システム」に関する質問項目を主として平成30年12月平成31年1月に行い、32名の教員の協力を得て、63クラス、合計986名の学習者が質問紙調査に参加した。また、1年間の「学習記録」には5大学39名の学習者が協力した。加えて、平成31年1月2月に実施した「聴き取り調査」には18名の学習者の協力を得た。前期質問紙調査の量的部分の分析結果については、研究代表者の所属機関の紀要に発表した。連携研究者も教師を対象とした研究を進め、5大学5名に「授業記録」(年間5回)を依頼し、授業参観(1回)・聴き取り調査(2回)を実施した。また、教師に関する研究は所属機関の紀要に論文として発表した。加えて、平成30年度はドイツから講師を招いて、コミュニカティブな授業運営に関するワークショップ及び講演会を2回実施した。1回目は元ベルリン州教育省ベルリン州立ヨーロッパ学校コーディネーターのW.Stotzka氏、ルードヴィッヒスブルク教育大学のProf. Dr. C.Roeder氏を迎えて7月に、2回目はドイツ外務省外郭団体のGoethe-Institut Osakaとの共催で、ドイツ語教材出版社Hueberの協力を得て10月に実施した。両企画は遠方からも参加者を集め、コミュニカティブな授業に関する理論及び実践の学習につながった。また、調査研究の進捗状況の共通理解と今後の研究計画の打ち合わせのために、連携研究者と複数回会議を行った。平成30年度は本調査の年であった。当初の計画に沿って、前期・後期において質問紙調査を実施した。前期調査には1062名の学習者、後期調査には986名の学習者が調査に協力した。加えて、1年間の「学習記録」に5大学39名の学習者が参加し、聴き取り調査にも18名の学生が協力した。前期調査の分析結果は所属機関の紀要に発表することができた。連携研究者も当初の計画に沿って、5大学5名の教師の授業参観及び聴き取り調査を実施することができた。また、教師に関する研究は、所属機関の紀要に発表することができた。加えて、ドイツから講師を迎えて、ワークショップ及び講演会を2回開催することができた。こうしたことにより、研究はおおむね順調に進展していると判断できる。次年度は、研究代表者が行っている学習者調査については、平成30年度に実施した質問紙調査、学習記録および聴き取り調査の分析を行い、8月に札幌で開催される国際学会で口頭発表し、その内容を論文として公表予定である。また、連携研究者の教師研究についても、聴き取りデータの文字起しと分析を行い、その結果を学会において口頭発表するとともに論文として公表予定である。また、新たに3名の教師に対して「授業記録」(年間5回)・授業参観(1回)・聴き取り調査(1回2回)を実施予定である。平成29年度は、平成26年度平成29年度の科研の課題である「ドイツ語学習の動機づけ」に関してこれまでに実施した質問紙調査と聴き取り調査を、本研究テーマである「外国語学習観」の視点から分析を行い、「ドイツ語学習の動機づけ」の分析結果とともに、日本独文学会研究叢書および所属大学・センターの紀要に論文として発表した。また、スイス・フライブルクで開催された、ドイツ語教師の国際学会「14.Internationale Tagung der Deutschlehrerinnen und Deutschlehrer」でも、この視点も含めて口頭発表した。連携研究者の教師研究に関しても「教師のビリーフ(信念)」について、上述の独文学会研究叢書に分析結果を公表した。聴き取り調査および質問紙における自由記述の分析を行う際のスキルの向上を目指して、英語教育・ドイツ語教育の教師を対象として、言語データの分析方法であるSCAT(Steps for Coding and Theorization)の専門家を招き、連携研究者と共にワークショップを開催した。講師の勤務先のある名古屋で実施したが、東京・大阪・神戸と遠方からも多くの参加者があった。今後の分析に役立つスキルの習得につながった。平成30年度に予定している学習者を対象とした質問紙及び聴き取り調査実施に向けて、勤務大学の倫理委員会に調査の許可を申請し、承認を得ることができた。加えて、連携研究者の教師調査実施のために、連携研究者の所属大学の倫理委員会に調査の実施許可を申請し、承認を得ることができた。平成30年度に実施予定である本調査に向けて、平成29年度は小規模なパイロット調査を実施し、先行研究およびパイロット調査の結果に基づき、質問紙の改善を実施した。また、今後の研究計画について、連携研究者と複数回会議を行った。平成29年度は、平成30年度の本調査のための準備の年と位置づけ、これまでの調査データを、本研究テーマの視点から分析し、国際学会で口頭発表するとともに論文として公表することができた。また、平成30年度の本調査に向けて質問紙の作成および必要な書類を作成し、所属大学の倫理委員会にそれらの書類を提出することで、質問紙調査実施の許可を得ることができた。

加えて、聴き取り調査や質問紙の自由記述の分析に際してのスキル向上をめざして、二日間にわたり、言語データの分析方法であるSCAT(Steps for Coding and Theorization)のワークショップを開催することができた。上記のように、平成29年度は、これまでの「ドイツ語学習の動機づけ研究」を踏まえて本研究テーマである「外国語学習観」の研究を進めることができたこと、平成30年度実施の本調査のための準備態勢を形成できたこと、加えて、連携研究者も「教師研究」のために調査対象者への打診など平成30年度の本調査の準備を進めている。こうしたことにより、研究はおおむね順調に進展していると判断できる。平成30年度は、平成29年度に実施した小規模のパイロット調査を経て、前期・後期の2回、質問紙調査を実施した。前期調査は英語学習経験とドイツ語学習に関する質問を主として平成30年5月6月に行い、14大学33名の教員の協力を得て、64クラス、合計1062名の学習者が質問紙調査に参加した。後期調査はドルニェイの「L2動機づけ自己システム」に関する質問項目を主として平成30年12月平成31年1月に行い、32名の教員の協力を得て、63クラス、合計986名の学習者が質問紙調査に参加した。また、1年間の「学習記録」には5大学39名の学習者が協力した。加えて、平成31年1月2月に実施した「聴き取り調査」には18名の学習者の協力を得た。前期質問紙調査の量的部分の分析結果については、研究代表者の所属機関の紀要に発表した。連携研究者も教師を対象とした研究を進め、5大学5名に「授業記録」(年間5回)を依頼し、授業参観(1回)・聴き取り調査(2回)を実施した。また、教師に関する研究は所属機関の紀要に論文として発表した。加えて、平成30年度はドイツから講師を招いて、コミュニカティブな授業運営に関するワークショップ及び講演会を2回実施した。1回目は元ベルリン州教育省ベルリン州立ヨーロッパ学校コーディネーターのW.Stotzka氏、ルードヴィッヒスブルク教育大学のProf. Dr. C.Roeder氏を迎えて7月に、2回目はドイツ外務省外郭団体のGoethe-Institut Osakaとの共催で、ドイツ語教材出版社Hueberの協力を得て10月に実施した。両企画は遠方からも参加者を集め、コミュニカティブな授業に関する理論及び実践の学習につながった。また、調査研究の進捗状況の共通理解と今後の研究計画の打ち合わせのために、連携研究者と複数回会議を行った。平成30年度は本調査の年であった。当初の計画に沿って、前期・後期において質問紙調査を実施した。前期調査には1062名の学習者、後期調査には986名の学習者が調査に協力した。加えて、1年間の「学習記録」に5大学39名の学習者が参加し、聴き取り調査にも18名の学生が協力した。前期調査の分析結果は所属機関の紀要に発表することができた。連携研究者も当初の計画に沿って、5大学5名の教師の授業参観及び聴き取り調査を実施することができた。また、教師に関する研究は、所属機関の紀要に発表することができた。加えて、ドイツから講師を迎えて、ワークショップ及び講演会を2回開催することができた。
分子振動の観点からみた分子性物質の光誘起ダイナミクス

分子性物質の光による物性制御を目指し、このような物質の光励起後のダイナミクスを様々な超高速分光法により明らかにする研究を行っている。従来は主として分子間電荷移動(CT)を励起し、その後新たに生じた電荷移動(CT)遷移や自由電子の応答を観測する研究が行われてきた。本研究では、新たにこれまで余り注目されていなかった自由度に着目した研究を行った。特に分子内振動は、固体の中では分子性物質に特徴的でしかも分子構造や分子の電荷等多くの自由度に敏感であることから、光誘起による物性変化のプローブとして有効であるのみならずその励起により物性を制御できる可能性がある。そこで、分子性物質における光誘起ダイナミクスを分子振動の観点から周波数領域及び時間領域の時間分解測定により明らかにすることを行った。そのためにまず前年度に開発した10フェムト秒分光装置の改良を行い分子内振動のコヒーレント振動の光誘起相転移における役割をより詳細に明らかにした。一方でピコ秒以降の遅い過程を探るための新たな時間分解赤外振動分光装置の開発も行った。これは以前の装置とは異なり広帯域の中赤外パルスと多チャンネル赤外検出器を用いて、振動スペクトル変化をより高い感度で測定するもである。これを用いて数百ピコ秒の比較的遅い時間でも非平衡な分子構造変化が継続していることを明らかにした。さらに各種超高速分光法を用い主に電子格子相互作用の強い擬1次元有機伝導体において、時系列でそのダイナミクスの詳細に明らかにすることに成功した。これらの結果から、このような系では光励起の後、単純な過程を経て熱平衡状態へ達するのではなく、途中にかなり複雑なエネルギー分配の過程が存在することが分かった。物質の性質を光を用いて制御することは、光の多様な性質を利用できるため様々な応用が期待出来る。これまで分子性結晶の光による物性制御の研究は主に分子間電荷移動(CT)を励起し、その後新たに生じたCT遷移や自由電子の応答を観測することにより行われてきた。本研究では新たにこれまで余り注目されていなかった分子振動という自由度に着目する。特に分子内振動は固体の中では分子性物質に特徴的でしかも分子構造や分子の電荷等多くの自由度に敏感であることから、光誘起による物性変化のプローブとして有効であるのみならずその励起により物性を制御できる可能性がある。そこで分子性物質における光誘起ダイナミクスを分子振動の観点から周波数領域及び時間領域の時間分解測定により明らかにすることを目的とした。本年度は特にπ電子系分子からなる分子性物質における分子振動を実時間で観測する装置として、高分解能ピコ秒時間分解振動分光装置、10フェムト秒電子状態分光装置の2種類を完成させた。それぞれより遅い時間における分子の電荷状態を分子振動波数のシフトより観測するもの及びより早く光励起直後に生成されるコヒーレントな分子振動の検出を行うものである。これらを用いて室温で擬1次元有機伝導体でありユニークな光誘起相転移を示すことが知られている(EDO-TTF)_2PF_6の光誘起直後に生成する20フェムト秒周期のコヒーレント振動や100フェムト秒後に光誘起特有の相が生成した後200ピコ秒掛かって生成する新たな相の存在を明らかにした。
環境要因の継世代的影響と遺伝リスク

今年度は我が班の最終年度になる。分担者のそれぞれが精通した実験系を駆使して、標準的作用原に関する作用量ー効果関係を検索し、各々の実験系の有効性と得られる結果の妥当性の確認を中心に研究を行った。1.ショウジョウバエ高感度検出系を検討し、検出系の細胞の種類と突然変異の型により検定結果が異なることを見いだし、リスク評価のうえで今後の問題点を指摘した。2.ENU低濃度暴露によるカイコの発生異常を調べ、当代幼虫における奇形(特に腹節の形成異常)および後代における各種突然変異も多数得られたことから、カイコ卵が環境汚染物質の毒性検定に有用であることをさらに確認した。3.環境要因が引き起こす継世代影響を、メダカを用いて検出する新しい実験系を開発した。ガンマー線とENUを代表的な作用源とし、優性致死、特定座位突然変異および奇形を指標とした本実験系の有効性と得られる結果の妥当性を約40万個の胚を使って検証した。得られた線量ー効果関係から、ガンマー線誘発総突然変異は、精子、精細胞の様な分裂終了細胞では、精原細胞に比べて約1020倍も感受性が高いことが明らかになった。4.環境要因による継世代的響として、化学物質とX線によるマウス奇形と発癌の作用量ー効果関係を調べた結果、奇形は明確な閾値と作用量、系統および作用時特異性を特微とすることを明らかにした。5.ヒトの正常肝臓及び肝癌組織についてO^6-AIG-アルキル転移酵素の測定したところ、同じ患者の正常組織は高い活性を示すが、腫瘍組織では活性がない場合2例存在した。6.ヒト細胞突然変異をAPRT欠損症の保因者由来リンパ芽球細胞を用いて調べ、DAP^rとTG^rは頻度だけでなく、遺伝子の構造変化の種類の上でも大きな相違のあることが示唆された。7.ヒトDNAの変異解析にはPCR増幅DNAを試料とするDNA:DNA2本鎖のDGGE法が最適てわかり、検出系の基盤で設定できた。
同期・非同期統合型マルチメディアグループウェアの研究および教育支援への適用

1.同期・非同期統合型マルチメディア会議システムASSISTの基盤構築これまで、同期・非同期統合型マルチメディア会議システムASSIST(AS-ynchronous and S-ynchronous I-ntegrated multimedia conferencing S-ystem for T-eams)の開発を進めてきたが、この基盤構築のために、アルタイム・非リアルタイムの会議を支援する多様なグループウェアを柔軟に構築することが可能な開発環境として、Web開発を容易にするためのコンポーネント群ADK(ASSIST Development Kit)をJava Beansを用いて開発した。これにより、ユーザは再利用件の高いWebアプリケーションの構築が可能になり、短期間で柔軟に同期・非同期グループウェアを構築することが大いに期待される。2.マルチメディア会議録の記録・検索・再生方式の検討会議内で発生するコンテンツの収集や編集、アップロード等についてできる限り労力をかけることなく会議の場にいなかった人にまで会議の一連の流れが容易に把握できるようなWebページを自動的に作成するシステムを構築し、議事のより詳細な把握を可能にした。さらに、ADKによって構築されたWebアプリケーションのアクセスログからインデックス化を行い、マルチメディア情報と関連付けさせる方法についても検討し、議事録として重要度に着目した検索方式についても検討した。3.Webベースビデオメーラーの開発プロトタイブの開発を行い、引用インターフェイスの検討と改良を重ねて、よりユーザ同士がコミュニケーションしやすいシステムを提案・開発し、利用評価を行った。受信者のビデオメールの再生場面は記録することによって、より魅力的なインタラクションを行うことが可能になった。4.教育支援システムへの応用ADKを用いて、学生による問題作成とグループ内の相互評価を可能とするオンラインテストを実装し、実際の授業で用いて、その実証評価を行った。これにより、効率的な問題作成ができた上、アンケートでは、教師および学生とのコミュニケーションが増加し、理解度も向上したという評価が得られた。また、Webベーススライド同期ツールを開発し、実際の授業で用い評価した。5.PDAや無線LANを用いたモバイルグループウェアへの展開スライドファイルから文字を抽出させ、それを独立して表示させる機能を実装することに上って、PDA上に表示されるスライドの見易さを改善した。また、インスタントメッセージングとグループプレゼンス情報の有効活用法の検討を行い、新しい提案をした。1.同期・非同期統合型マルチメディアグループウェアの基盤構成要素の開発・実装今年度は、基盤構築として、会議サーバ等で格納・利用するためのデータベース構造の設計と開発、およびWebベースシステムにおけるJavaBeansを用いた各種コンポネントの設計・開発を行った。データベース構造の定義は、同期・非同期統合型を意識したもので、ビデオの再利用性を高めるために、部分引用を可能にするための構造になっている。また、JavaBeansを用いた各種コンポーネントでは、Web開発を容易にするためのコンポーネント群を開発し、今後は、種々の機能群を提供する予定である。2.Webベースビデオメーラーの開発と同期・非同期統合型マルチメディアグループウェアへの適応化WebベースビデオメーラーVMailのプロトタイプの設計・開発を行った。プロトタイプとして、ビデオなどの部分引用インタフェースを検討し、ビデオのみを用いる場合と、テキストと組み合わせて用いる場合のためのユーザインタフェースの設計・実装を行った。3.多地点マルチメデイア会議議事録の記録・検索・再生方式の検討時間情報を埋め込むことができるテキスト議事録のプロトタイプを開発・実装した。

このプロトタイプの実装により、それまで多くの時間を要していたビデオの場面探索が、テキストの議事録を取るだけで瞬時に行えるようになった。また、複数のユーザが同時にテキスト情報を入力するための分散協調テキスト議事録の設計も行った。今後、開発・実装を行う予定である。4.同期・非同期統合型マルチメディアグループウェアの教育支援への適応化Webを用いたスケジューリング可能な講義録自動作成システムのプロトタイプを構築した。これは、Webページ上で講義のビデオを記録する端末および、その講義の日時を指定するだけで、自動的にWebサーバからビデオを記録する端末へその情報が伝達され、指定日時になると自動的に記録を開始・終了を行い、さらに、記録した結果をWebサーバに返却し、自動的にWebページ上に公開するというものである。1.同期・非同期統合型マルチメディア会議システムASSISTの基盤構築リアルタイム・非リアルタイムの会議を支援する多様なグループウェアを柔軟に構築することが可能な開発環境のプラットフォームの実現としてADK(ASSIST Development Kit)を構築した。これにより、ユーザは、Webページを入れ子的にテンプレート単位で設計することができ、再利用性の高いWebアプリケーションの構築が可能になる。また、ほとんどの操作がWebブラウザのみでできるので、短期で柔軟に同期・非同期グループウェアを構築することが期待される。2.Webベースビデオメーラーの開発と評価Webベースビデオメーラーの開発とそのユーザインタフェースの改善と利用評価を行った。本年度は、受信者のビデオメールの再生場面を記録することによって、より魅力的なインタラクションを行うことが可能になった。3.教育支援システムへの応用ADKを用いて、学生による問題作成とグループ内の相互評価を可能とするオンラインテストを実装し、実際の授業で用い、その評価を行った。これにより、効率的な問題作成ができた上、アンケートでは、9割以上の学生から少なくとも他の授業でも用いたいという結果が得られた。また、Webベーススライド同期ツール開発し、実際の授業で用い、評価した。その結果、理解度の向上が把握された。4.マルチメディア会議録の記録・検索・再生方式の検討
植物カルモジュリン様タンパク質によるウイルス毒性因子の認識制御機構

植物に対して微生物は共生してともに利益を得る関係から病原体として敵対する関係まで多様であり、植物は接触したり侵入してくる微生物の中から病原体を見分け防御機構を働かせることは身を守るために大切である。病原ウイルスは、その毒性に関わる因子として、RNAサイレンシング抑制タンパク質を持つ。我々は最近、植物はカルモジュリン様タンパク質を介してこのRNAサイレンシング抑制タンパク質を感知することで病原ウイルスの侵入を認識し、分解に導くことで防御する仕組みを見出した。本研究で、このカルモジュリン様タンパク質によるウイルス毒性因子の認識・分解機構の詳細を解明する。
NPO諸組織を連携する知識型情報システムの構築とナレッジマネジメントに関する研究

本研究はNPOの組織運営にナレッジマネジメントを導入し、組織連携を図る方法を研究することを目的とする。NPOの最大の資源は人とその知であるという認識から、NPO間で情報や経験的知識を共有するための情報システムを構築し、これを活用して個々のNPOが活動し、組織間連携により活動が活性化する組織運営を検討した。1.NPO情報ネットワークシステムの構築・運用・改善(1)中核となる情報システムとしてインターネットを用いるWebサーバーを構築し、Webページを通して情報共有を行うシステムを試作して、実用に供しながら情報提供機能の充実、ユーザインタフェースの改善を行った。(2)NPO間のコミュニケーションやコラボレーションを支援するためにグループウェアを導入し、組織間連携の中核システムとして機能しうるように活用方法を検討した。(3)インターネット活用の安全性確保のため、情報セキュリティ問題について検討した。2.NPO間連携のための組織経営手法の研究(1)NPOと企業組織を比較し、組織デザインとしてNPOセンター版ハイパーテキスト型組織、知識中心型のNPO組織運営、NPOナレッジコミュニティについて研究した。(2)NPO間で交換・共有する情報(フロー情報、ストック情報)を組織学習で活用し、NPOのナレッジサイクルを作り出すための組織マネジメントについて研究した。(3)仮想空間と実空間のコラボレーションを整合させ、人的組織とITベースシステムの協調・協同について考察した。3.事例として石巻地方広域圏の特定非営利活動法人「いしのまきNPOセンター」を取り上げた。本情報システムの存在はNPO間の連携意識を高めることに役立っている。本研究はNPOの組織運営にナレッジマネジメントを導入するための方法を研究することを目的としている。本年度は、NPOの諸組織間で情報や経験的知識の共有をはかるための中核システムを立ち上げ、これを活用してNPOメンバーが活動し、新たな知識を発見し、組織の発展に活かすマネジメント手法について研究した。1.NPOの組織マネジメントについての研究(1)研究対象の地方広域型NPOとして、石巻地方広域圏におけるNPO支援センターである特定非営利活動法人「いしのまきNPOセンター」(以下、NPOセンター)の協力を得ることにした。(2)NPOセンターにおける組織機能や情報要求を調査し、これまで経営組織論研究の対象であった企業組織との比較研究を行った。この結果、新しいタイプの企業組織とNPOの間にマネジメント上の共通点を見出すことができた。2.NPOサーバーシステムの構築およぴ運用(1)NPO諸組織を連携するネットワークとしてインターネットを用い、NPOセンターを核とするサーバーを立ち上げた。この上で、Webページを通して情報共有を行うシステムを試作し、試用に供しながら情報提供機能の充実、ユーザインタフェースの改良に取り組んでいる。(2)コミュニケーション・コラボレーション支援のためにグループウェアを導入し、活用方法を研究している。3.NPOの人材育成をはかるために、組織マネジメント、ITの利用に関する講演や相談等を行った。地方社会におけるIT活用にあたっては、都市圏ではみられない問題点も明らかになった。本研究はNPOの組織運営にナレッジマネジメントを導入する方法を研究することを目的としている。本年度は、前年度に立ち上げた情報システム(インターネットサーバー)の充実をはかり、これを活用して個々のNPOが活動を展開するとともに、NPO間の連携によって活動の活性化および発展を促す組織経営の方法について研究した。1.NPO情報システムの充実および運用(1)前年度に立ち上げたNPOサーバーシステム上で、Webページやグループウェアを用いるコミュニケーション、情報共有を行うシステムを稼働し、実用システムとして機能しうるように改善した。(2)石巻地方広域圏の特定非営利活動法人「いしのまきNPOセンター」の協力を得て、NPO情報の収集・蓄積・更新を行い、NPO活動、NPO間のコラボレーションに役立つシステムを運用している。2.NPO間連携のための組織経営手法の研究(1)NPO間で交換・共有するフロー情報とストック情報は、ナレッジコミュニティの形成に不可欠であるとの知見から、その組織デザインとしてNPOセンター版ハイパーテキスト型組織について研究した。(2)ナレッジコミュニティにおける組織学習は、暗黙知の連鎖を作り、ITベースの形式知へと連結して、NPO活動に資するナレッジサイクルを作り出す。そこで、NPOセンターの組織マネジメントの方法について研究した。

3.地方社会においてITは未だ常時利用できる環境には至っておらず、NPOメンバーの日常ツールとはなっていないが、紙ベースの情報交換を補完しながら、ITベースの情報システムを用いるNPO間の連携意識は少しずつ高まっていることを確認した。本研究はNPOの組織運営にナレッジマネジメントを導入する方法を研究することを目的としており、実践事例として石巻地方広域圏の特定非営利活動法人「いしのまきNPOセンター」の協力を得た。本年度は、昨年度までに構築し実用化したNPO情報システムを改善し、NPOナレッジコミュニティのIT基盤として機能しうるようにすると共に、この中でNPO活動が活性化し発展するための組織経営について研究した。1.NPO情報システム(インターネットWebサーバー)の運用・改善(1)NPO情報システムを実用に供しながら、Webページの充実、グループウェアによるコミュニケーションにより、NPO間連携の中核システムとして機能しうるように改善した。また、インターネット活用の安全性確保のため、情報セキュリティ問題について検討した。(2)次期システムに向けて、携帯電話を末端情報ツールとして導入する方法について検討した。2.NPO間連携のための組織経営手法の研究(1)NPOナレッジコミュニティを形成するために、NPOの活動知識を用いるNPO間連携を実現する組織マネジメントについて検討した。(2)情報通信ネットワークを用いるバーチャルなコラボレーションと人間の実交流によるリアルなコラボレーションを整合させ、NPO間で交換・共有される情報(フロー情報、ストック情報)について検討し、人的組織とITベースシステムの協調・協同のあり方を考察した。(3)企業等における経営管理/経営戦略を、NPOの活動管理/活動戦略に適用するための検討を行い、ナレッジマネジメントによる知識中心型のNPOの組織運営について研究した。3.地方の情報通信環境はまだ不十分で、オンライン/オフラインの併用であるが、このような中核システムの存在はNPO間の連携意識を強めることに役立つことを確認した。
乾癬の遺伝要因とその制御分子探索

乾癬の病因解析を進める目的で、乾癬患者集団を用いて、SNP解析を軸として乾癬疾患感受性遺伝子群の解析を推進することにより、この3年間に以下の点を明らかにすることができた。1)ヒト主要組織適合抗原のひとつであるHLA-Cw6のレセプターになっているKIR (Killer cell immunoglobulin-like receptor)分子の多型性を支配するKIR遺伝子の多型解析から、単一なKIR遺伝子から成る患者群(タイプI)と複数のKIR遺伝子群から成る患者群(タイプII)の2つに大別されることを明らかにした。(J.Invest.Dermatol.,122:1133-1136,2004)2)乾癬と相関を示すHLA-Cw6の遺伝学的メカニズムを説明する根拠として、HLAクラスI遺伝子を通して疾患感受性を支配するKIR遺伝子の多型性をみていたことが示唆される。3)乾癬治療薬のひとつであるシクロスポリンに対する治療応答性の面から解析すると、タイプI(活性化KIRとして2DS4のみを有する)の方が、タイプII(活性化KIRを複数個有した群)の乾癬患者群よりPASIスコア減少率でみたとき、治療応答性が良好であることを明らかにした。(皮膚の科学,3(5):518-522,2004)4)ケラチノサイトの分化・増殖に関与すると推測されているHLA領域内のHCR(α-helix coiled-coil-rod homolog)遺伝子のSNP解析結果から、白人乾癬患者集団で認められる箇所と同一部位での有意(P<0.05)なSNP多型を観察したが、HLA-Cw6との連鎖不平衡に由来するものか、あるいは一義的相関であるのかの結論は得ることができなかった。(日皮会誌,115(13),1955-1957,2005)その後の研究から、HCR遺伝子は、ある重要な機能を有する受容体遺伝子であることが判明したので、現在、解析を進めているところである。(1)ゲノム解析乾癬初期病変形成に重要であり、かつNKT細胞の機能を反映するkiller cell immunoglobulin-like receptor(KIR)遺伝子について、日本人の尋常性乾癬患者、関節症性乾癬患者を対象にPCR法を用いて遺伝子多型解析を行った。尋常性乾癬患者96例、健常者50例を用いたKIRフェノタイプの発現の解析により、特定のKIRフェノタイプと尋常性乾癬との間に有意な相関を新たに見出すことに成功した。その結果は論文発表を行った(J.Invest.Dermatol.、印刷中)。また、乾癬感受性遺伝子のひとつであるHCRに着目し、そのアミノ酸翻訳領域を主に日本人の尋常性乾癬患者約20例のSNPs解析を行った。まだ症例数は少ないものの、すでに尋常性乾癬と高い相関の見られる変異を認めている。しかもその結果は、すでに欧米人を対象に行った実験結果と合致するものもあれば、日本人に特有と考えられる変異もあり、今後のさらなる解析の必要性を支持するものであった。ハイリスクハプロタイプの同定に向け、現在も症例数を増やし検討を進めているところである。さらに、上記日本人乾癬患者においてHLA領域の遺伝子多型の解析を行い、乾癬感受性遺伝子間の相互関係を明らかにする試みに取り組むとともに、韓国人の尋常性乾癬患者においても同様な多型解析を始めている。これに関してはまだ予備実験段階であり、今後症例数を増やす予定である。(2)プロテオーム解析乾癬患者