hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
血液幹細胞cDNAライブラリーからの自己複製因子受容体のクローニング

われわれは、新規の増殖因子を探索する目的で血液幹細胞に発現される受容体型チロシンキナーゼの同定を行った。RT-PCR法により以下の受容体がクローニングされ、それぞれ解析を進めた。キナーゼドメインの自己リン酸化、および結合反応より、macrophage stimulating protein(MSP)が結合因子であることがあきらかになった。STKに対する抗体を作成して、FACS,免疫染色により検討したところ、腹腔マクロファージ、破骨細胞、赤血球細胞株に発現していることが明らかとなった。MSPのin vitroにおける幹細胞への作用は現在のところ、明かにできていない。2)TIE及びTEK:細胞外に免疫グロブリン、EGF,フィブロネクチン様構造をもつ受容体型チロシンキナーゼである。TIEに対するモノクローナル抗体を作成して、FACSによる検討をすると,TIEは、CD34陽性細胞(なかでも、CD38陰性の未分化幹細胞)、CD19,CD20陽性のB細胞に発現していることが明らかとなった。この結合因子は、幹細胞に作用すると考えられるが、まだ同定できていない。3)HTK:HTKは、Ephファミリーに属する。その多くは、神経細胞に陽性優勢に発現しているが、HTKは、例外的で、CD34陽性細胞に発現していることを明かにした。さらに、結合因子を、同定することができたが、生理活性に関しては、これから検討の予定である。我々は、骨髄から分離した血液幹細胞群の遺伝子発現をRT-PCR法により検索し、新たなレセプター型チロシンキナーゼ遺伝子である、TIE,TEK遺伝子をクローニングした。両者は、全体で、46%の相同性を示した。これらの遺伝子は、正常幹細胞、前駆細胞に強く発現されていることを確認した。これらの受容体に対する結合因子は、幹細胞の増殖にかかわるものと期待される。その後、血液幹細胞特異的と考えられたこれらの分子は、血管内皮細胞およびその前駆細胞にも発現されていることが明かとなった。したがって、幹細胞/ストロマ細胞の共通祖先細胞に、アプローチすることも可能になっている。一方、STK/RONは、MET,SEAに相同性が高く、血液細胞特異的に発現されていることが分かった。細胞外ドメインの短いほうの発現が主であり点が、他の受容体と異なる。また、STK分子C末端のペプチドに対するポリクローナル抗体を作成し、検討したところ、分子量約160KDのSTK蛋白が、血清添加により、リン酸化されるのが確認された。今後、この方法を用いて、各種細胞培養上清を検討し、結合因子の同定を試みたい。当初、自己複製因子受容体を、血液幹細胞cDNAライブラリーから、クローニングする予定であったが、標的をチロシンキナーゼ遺伝子に限ったため、幹細胞からのRT-PCR法によるクローニングと未分化細胞株cDNAライブラリーの利用で、上記のような成果を得た。しかしながら、今後、幹細胞の増殖分化を、より包括的に把握するためには、幹細胞cDNAライブラリーは、必須であり、PCR法によらない方法でその作製を試みる予定である。われわれは、幹細胞の自己複製因子を探索する目的で、血液幹細胞に発現される受容体型チロシンキナーゼの同定を行った。キナーゼドメインの自己リン酸化、および結合反応より、macrophage stimulating protein(MSP)が結合因子であることが明かになった。STKに対する抗体を作成して、FACS,免疫染色により検討したところ、腹腔マクロファージ、破骨細胞、赤血球系細胞株に発現していることが明かとなった。MSPのin vitroにおける幹細胞への作用は不明である。TIEに対するモノクローナル抗体を作成して、FACSによる検討をすると,TIEは、CD34陽性細胞(なかでも、CD38陰性の未分化幹細胞)、CD19,CD20陽性のB細胞に発現していることが明かとなった。

この結合因子は、幹細胞に作用すると考えられるが、まだ同定できていない。3)HTK:HTKは、Ephファミリーに属する。その多くは、神経細胞に優勢に発現しているが、HTKは、例外的で、CD34陽性細胞に発現していることを明かにした。さらに、結合因子を、同定することができたが、生理活性に関しては、現在検討中である。
海馬歯状回特異的遺伝子機能改変マウスを用いた脳高次機能の研究

海馬が記憶、学習に関与する重要な部位であると同時に、その傷害が統合失調症、鬱病病などの精神疾患とも関連することが報告されており、行動・機能変異をもたらす機構の解明が望まれている。NMDA受容体は、高いカルシウムイオン透過性と、細胞外のマグネシウムイオン濃度によるイオン透過性のブロックという特徴を持つイオンチャンネルとして知られ、この性質が、LTPの誘導を担うと考えられている。その機能の主軸をなすのがTransmembrane2(TM2)に存在するアスパラギン残基(N595 in NR2A)である。このアミノ酸に変異を導入するとマグネシウムブロックがかからなくなることが報告されている。そこで、ターゲット遺伝子としてNMDA受容体、MR2A遺伝子を用い、マグネシウムブロックを制御しているアスパラギン一個をグルタミンに変換し、特に、海馬歯状回のみでマグネシウムブロックが解除されるマウスを作成し、行動解析を行ったところ、活動量の亢進、プレパルスインヒビションの顕著な減弱、常同行動の増加等の表現型が認められた。これらの行動異常は、薬物投与で作成された精神疾患モデルマウスや統合失調症患者で観察される行動異常のパターンと類似しており、海馬歯状回が精神行動形成に重要な生理的役割を負っていることが示唆された。ついで、マウスに向精神薬として知られているハロペリドールを投与したところ、プレパルスインヒビションの減弱が改善した。また、MK801を投与すると顕著な活動量の亢進を示し興味深いことにドパミン量の亢進が観察され、これらの行動異常は、NMDA受容体のアンタゴニストによって引き起こされる統合失調症様の表現型とよく似ており、NMDA受容体NR2Aの部分的機能障害が海馬歯状回において限定的に引き起こされることが、このような統合失調症類似の表現型につながるということがわかった。このことは、海馬歯状回におけるNR2Aが精神行動構築の調節に重要な役割を果たしていることを示唆している。NMDA受容体は、学習、記憶、認知などを司る分子のひとつとして、重要な役割を負っていると同時に、それと関連して、統合失調症を含むいくつかの精神疾患や情緒の障害に関与していると考えられている。NMDA受容体は、高いカルシウムイオン透過性と、細胞外のマグネシウムイオン灘によるイオン透過性のブロックという特徴を持つイオンチャンネルとして知られ、この性質が、LTPの誘導を担うと考えられている。今回我々は、Cre-loxP recombinationsystemとスプライシングの制御システムを適用して、部位特異的に遺伝子変異を導入する新しい方法を開発し、上述のNR2AのN595の部位に一アミノ酸置換(N595Q)を導入し、それが海馬歯状回で特異的に発現するマウスを作成した。このミュータントマウスついて網羅的行動解析を行ったところ、活動量の亢進およびプレパルスインヒビションの顕著な減弱が観察された。これらの行動異常は、NMDDA受容体のアンタゴニストによって引き起こされる統合失調症様の表現型とよく似ており、NMDA受容体NR2Aの部分的機能障害が海馬歯状回で限定的に引き起こされることが、このような統合失調症類似の表現型につながるということがわかった。
事業体としての個人年金課税に関する研究

人々が集団的投資や事業を行う法的仕組みを事業体と呼ぶが、本研究は、生命保険や信託課税などを踏まえつつ、個人年金に対して事業体課税論を拡張し、その課税のあり方を導管性の概念を道具としつつ探究し、課税モデルを構築・提案しようというものである。個人年金の特長は、定期的・継続的な金銭的給付にあり、それにより受給者の生活が保障される点にあるし、このような生活保障の特質は、生命保険や各種の貯蓄、投資信託などにも見て取ることができる。本研究は、生活保障の観点から、年金や貯蓄、生命保険などを統合的な貯蓄勘定とみて、個人からの出資や分配、公的助成などの課税を統合的に把握すべきである、と結論づける。本研究は、個人年金に事業体課税論を拡張し、その課税のあり方を導管性の概念を道具としつつ探究し、課税モデルを構築・提案しようというものである。しかし、これまで申請者が蓄積してきた事業体課税論に関する研究では、導管性の高い組合課税についての理論的蓄積は十分にあると思われるが、法人課税がなされる受益者不在信託のような現在のところ非導管性の高い取り扱いが行われている事業体についての蓄積が十分になされているわけではない。そこで本年度では信託課税、なかんずくアメリカ連邦所得税におけるnon-grantor trustについて研究を行い、特にDistributable Net Income(DNI)概念を基軸とした信託段階での課税と受益者段階での課税、及びそこに至るまでの制度的変遷と各制度の欠陥、あるべき課税モデルの構築の検討を行った。我が国税制の理論的・実務的蓄積を踏まえると、我が国における信託に対する法人課税導入は、(別のアプローチはあるにせよ)-つの賢明な成果と評価できる。また上記研究遂行にあたり、導管性の高い事業体(外国パートナーシップ)に関して、国際課税及び地方税に関し、それぞれ国際課税の枠組みや地方税法の枠組みと整合性を欠く大きな税制上の欠陥を見いだした。それ自体理論的に研究するべき大きな問題ではあるが、同様の問題は導管性の低い事業体についても当てはまる可能性があり、その方向での検討がさらに必要であるとの知見を得た。上記研究成果について、速やかに学術雑誌について公表する予定である(すでに研究成果をまとめて投稿している段階のものあり)。本年は、生命保険課税にっき、特にDeath Benefitsと利子の切り分け及び前者の取り扱いを中心に研究を行った。生命保険が残された遺族等の生活の糧となっていることを踏まえると、最低生活費保障の観点がこれまでの研究では欠けており、それは給付時に生命保険金が非課税であることのみならず、稼得した所得から一種の貯蓄として生命保険料を支払った場合にはその部分を非課税にする(つまり控除を認める)ことが正当化されうる可能性がある。この点につき、従来の議論が生命保険料控除(個人年金部分含む)に対し概して批判的であったものとは違う枠組みを提示できるものと思われる。上記部分を含む最低生活費保障についての知見については、現在執筆中の論文にて速やかに公表する予定である。なお、導管性の高い事業体(外国パートナーシップ)に関して、国際課税及び地方税に関し、それぞれ国際課税の枠組みや地方税法の枠組みと整合性を欠く大きな税制上の欠陥を見いだした。それ自体理論的に研究するべき大きな問題ではあるが、同様の問題は導管性の低い事業体についても当てはまる可能性がある旨、昨年度の実績報告書において記しておいたが、この分の研究報告が公表されていることを申し添えたい。本年は事業体としてみた場合に個人年金課税をどのように構築するのか、立法論的検討を行うことを目的とする。私的であれ公的であれ、年金の特質とは、定期的に一定額の金銭給付が行われ、それにより受給者の生活が保障される(もちろん余裕があれば事業や投資の原資ともされうる)。したがって、(1)公的・私的問わず年金に対する課税はこのような生活保障の特質を織り込んだものであるべきであること(逆に生活保障を超えた部分については通常の所得課税の範疇で処理すればよく、特別の考慮は必要ない)、(2)年金以外に生活保障の特質を持つ金銭給付(給与所得が一番有名であろうが、勤労者以外の場合の投資所得や生命保険、相続すらも生活保障の性質を有する)をも含めて生活保障のあり方を考慮するべきである(そのための統一的な貯蓄勘定設定が考えられる)、(3)貯蓄の側面を持つ年金掛金(事業体への出資)は貯蓄として取り扱い、それ以外は所得税額計算上控除可能な現金支出(納税者間の移転)と扱う制度がモデルとして考えられる。

上記結論の基礎には、税(社会保険料含む)引後の手取額が一定額以上保障されているという意味での最低生活費保障の概念があり、本研究の最大の特質の一つである(例えば、この概念をカギとして給付付き税額控除の難点がみえる)。税法のみならず、社会保障法等周辺法領域においても有益な考え方と思われる(本年度研究成果の雑誌論文を参照されたい)。
フラクタルとその応用

この研究は、二項測度(binomial mesure)のパラメータによる高階の微分および差分方程式系に関する代表者関口健と塩田安信の共同研究を基に、フラクタル(特にマルチフラクタル)を数学的に厳密に調べ、さらに他分野へ応用を目指して開始された。各分担者はそれぞれの専門に関連する部分の研究をすすめ、代表者がそれを総括するとともに設備費で購入したコンピュータを用いてシミュレーション等もおこなうことで実行した。また、分担者以外の研究者特に塩田安信(秋田大学)岡田達也(福島県立医大)の協力があったことを付け加えておく。以下、標記の研究課題について、補助金を受けた期間中に得られた成果を報告する。1.マルチフラクタルスペクトラムが測度の特性量として意味があるかどうか、多項測度(multinomial measure)の場合に考察し、マルチフラクタルスペクトラムにより特徴づけられる多項測度のクラスを決定した。2.ディジタル和(digital sum)の巾乗和(power sum)の表現に高木関数等の至る所微分不可能な連続関数が現れる(Trollope,Choquet等の結果)のは、フラクタルの観点から非常に興味深いものである。我々はこの本質的な部分が二項測度とそのパラメータによる微分により得られる関数であることを発見した。3.二項測度とそのパラメータによる微分はディジタル和の指数和(exponential sum)を調べるとき、その役割は更に顕著になる。この手法で未解決であった指数和の誤差関数とその上限・下限を厳密に求めた。4.2.3.の結果は多項測度についてもパラレルに議論できると思われるが、これについては現在の作業中である。上記の1.3.4の結果については投稿の準備中であるが、2.の結果はJournal of Number Theoryに投稿した。
咬合感覚異常（症）に対する高次脳活動、自律神経活動、精神面からの病態解析

咬合感覚異常(症)の患者の病態を明らかにするために、咬合違和感を惹起する咬合干渉を人工的に付与し、その時の状態を脳活動と自律神経活動を記録した。また心理テストを行い、精神面の評価も合わせて行った。方法は、歯科用フォイルを1枚ずつ重ね、グラインディングをタスクとした。“フォイル認知閾値"と“咬合違和感発生閾値"を記録し、その時の違和感を視覚的アナログ尺度(VAS値)で記録した。タスク施行時の自律神経活動と脳活動(fNIRS)の同時計測を行った。被験者は19名(男性11名、女性8名)とした。その結果、咬合違和感の発生には自律神経活動や高次脳機能活動は密接に関連があることが示唆された。平成25年度I.咬合違和感訴えて来院した患者を対象としたデータの収集:本研究遂行にあたり、当大学倫理委員会に申請し、承認後に下記の実験を行う。本研究の目的、意義、実験内容に同意が得られた咬合違和感を有する患者を対象に、心理テストおよび医療面接、そして自律神経活動を実施し、被験者を患者正常群(10名)、患者神経症圏群(10名)、患者うつ病圏群(10名)、患者自律神経反射不良群(10名)として以下の実験対象者とする。上記の患者被験者に対して、自律神経解析装置(クロスウェル生体情報モニター)と脳活動(光トポグラフィー、ETG-7100)の同時計測を下記の条件で実施する。1何も上下歯間に介在させない状態(すでに咬合違和感のある状態),2片側上下臼歯間に無味無臭の歯科用フォイル(1枚12μ)を1枚ずつ置いていき、タッピング、グラインディングのタスクを行い、その時の自律神経活動と脳活動の同時計測を行う。312μの歯科用フォイルを1枚ずつ重ねていき、被験者が歯科用フォイルを認知した枚数を『フォイル認知閾値』とし、その後は歯科用フォイルを5枚(60μ)ずつ増加していき、その都度計測を行う。計測のエンドポイントは200μを超えた時とする。II.咬合違和感訴えて来院した患者を対象とした臨床的データの取りまとめ:患者正常群、患者神経症圏群、患者うつ病圏群、患者自律神経反射不良群において、『フォイル認知閾値』とその時の自律神経活動と脳活動、『咬合違和感発症閾値後60μ毎』の自律神経活動と脳活動について解析し、正常群、神経症圏群、うつ病圏群、自律神経反射不良群における自律神経活動と脳活動の様相について解析する。連携研究者(小野弓絵)は、患者の光トポグラフィーの計測及びデータの解析、評価に携わり、研究代表者(玉置勝司)は、患者の自律神経活動計測および心理テスト実施を行う。I.被験者(当大学学生)を対象とした基礎的データの収集:(1)本研究遂行にあたり、同大学倫理委員会に申請し、承認後に下記の実験を行った。(2)本研究の目的、意義、実験内容に同意が得られた本学学生のボランティアを被験者として、心理テスト(GHQ:神経症圏スクリーニングテスト、POMS:うつ病圏スクリーニングテスト)、そして自律神経活動(起立試験)を実施し、正常群(男6名,女5名,計11名,平均年齢23歳)を実験対象とした。(3)自律神経活動と脳活動の計測および記録上記の被験者に対して、自律神経解析装置(クロスウェル生体情報モニター)と脳活動(光トポグラフィー、ETG-7100)の同時計測を下記の条件で実施する。1何も上下歯間に介在させない状態をベースラインとする。2片側上下臼歯間に無味無臭のメタルフォイル(1枚12μm)を1枚ずつ置いていき、タッピング、グラインディングのタスクを行い、自律神経活動(交感・副交感神経の安定性)と脳活動の同時計測を行った。312μmのメタルフォイルを1枚ずつ重ねていき、被験者がメタルフォイルを認知した枚数を『フォイル認知閾値』とし、その後咬合違和感として感じたメタルフォイル枚数を『咬合違和感発症閾値』とした。その後はメタルフォイルを5枚(60μm)ずつ増加していき、その都度計測を行う。計測のエンドポイントは200μmを超えた時とした。II.被験者(当大学学生ボランティア)を対象とした基礎的データの取りまとめ:正常群において、『認知閾値』とその時の自律神経活動と脳活動、『咬合違和感発症閾値』とその時の自律神経活動と脳活動、『咬合違和感発症閾値後60μm毎』の自律神経活動と脳活動について計測した。

咬合感覚異常(症)の患者の病態を明らかにするために、平成24,25,26年度までに同意が得られた被験者に咬合違和感を惹起する咬合干渉を人工的に付与し、その時の状態を脳活動と自律神経活動を記録した。同じ被験者に心理テスト(GHQ、POMS)を行いその時点の精神面の評価も合わせて行った。被験者数は19名(男性11名、女性8名、平均年齢22.6歳)であった。咬合違和感(咬合干渉)の付与は、これまでと同じで12μの歯科用フォイルを1枚ずつ重ねていき、被験者が歯科用フォイルを認知した枚数を『フォイル認知閾値』とし、その後は歯科用フォイルを増加していき、その都度計測を行った。計測のエンドポイントは咬合違和感を感じたフォイル厚を『咬合違和感閾値』とした。自律神経活動は自律神経解析装置と脳活動の同時計測と事前に起立負荷試験を実施し、被験者の自律神経活動から分類した。平成26年度(最終年)には咬合違和感訴えて来院した患者を対象としたデータの収集を試みたが、咬合違和感を訴える患者で計測の同意が得られ、実施することができたのは2名のみであった。患者を神経症圏群、うつ病圏群、自律神経反射不良群に分類することは今回は困難であった。最終年はこれまで記録した被験者19名と咬合違和感違和感患者2名に対して行った脳機能活動(光トポグラフィー),自律神経活動(起立負荷試験及び計測中の自律神経活動),心理テストのデータについて今回は取りまとめを行い,咬合感覚異常(症)の病態の解明の一助とした。また、日本補綴歯科学会の診療ガイドライン委員会でこの病態を『咬合違和感症候群( occlusal discomfortsyndrome)』として提案し、2013年5月の第122回日本補綴歯科学会(福岡)において、『咬合違和感症候群( occlusal discomfortsyndrome)』として報告した。歯科補綴学平成24年度では,計測に参加した学生ボランティアは11名のみであったが,平成25年度は8名追加されたが,現在19名(男10名,女9名)の被験者数でまだ不足している。これは,学生ボランティアの参加頻度が大幅に減少しているが,これは計測に要する時間が2時間を要し,学生の疲労感があることがその大きな原因と考えられる。最終年度も学生ボランティアの計測を引き続き行い,咬合違和感患者の計測も合わせて行うが,短時間での計測が行えるように配慮が必要である。『咬合感覚異常(症)』の病態を自律神経活動、脳活動、精神面から解明するために、3年間の研究期間を設定した。初年度:被験者の心理テスト、自律神経活動(起立試験)、人工的咬合違和感を設定し、タスク動作中の自律神経活動(交感神経と副交感神経の活動バランスの安定性)と脳活動(前頭前野に現れる脳血流量の変化)の計測を行い、正常群における自律神経活動と脳活動の特徴について解析することが、平成24年度の到達目標であった。しかしながら、計測に参加した学生ボランティアは11名のみで、当初予定していた正常群(10名)、神経症圏群(10名)、うつ病圏群(10名)、自律神経反射不良群(10名)からは大幅に下回ってしまった。この理由として,計測日が木曜日のみ、1名の被験者の計測であったこと、また学生ボランティアは歯学部の講義を終了したあとの17時以降であったことが考えられる。したがって,平成25年度は1日の計測人数を2名に増やし、被験者数の増加をまず行いたいと考えている。今年度(最終年度)は,不足している学生ボランティアによる被験者のデータを増加すること,そして臨床で咬合違和感を訴える患者のデータ計測を早期から収集を行う。さらに高次脳機能の光トポグラフィのデータの解析に関しては,連携研究者である小野弓絵(明治大学大学院・理工学研究科)の大学院生を作業従事者として雇用(時給制)し,データの処理を加速する予定である。
遺伝子アブレーションと分子介入による膵島傷害の抑制と再生の促進

内因性制御因子により抑制されない持続活性型CDK4の遺伝子(CDK4^<R24C>)を成体膵島へ導入することで膵島の増殖・再生を促進することを最終目的とする。CDK4^<R24C>遺伝子とFLAG標識配列を融合し組み換えアデノ随伴ウイルス(rAAV)を得た。これを飽和硫安により精製し、さらにIodioxanol密度勾配超遠心法にて濃縮精製を行った。Slot-blot hybridization法により定量したところ10^<11>-10^<12> viral genome/mlの高力価rAAVが得られていた。このrAAVによりex vivo, in vivoそれぞれの膵島細胞系で遺伝子導入能および発現性の検討を行った。培養細胞HepG2にコノウイルス液を作用させたところ、数十%の細胞でeGFPの発現が確認された。Ex vivoではBalb/cマウスより単離した膵島にdish内でrAAVを感染させ遺伝子を導入した。遺伝子発現の評価には約1週間の観察が必要であるが、培養環境下ではapoptosisを起こし観察不能であった。我々は遺伝子導入膵島を細胞外マトリックス(Matrigel)と混和し同系統マウスの皮下移植し、1週間後にFLAG配列あるいはGFPに対する抗体を用いて膵島単位での導入遺伝子の発現効率を評価するex vivo観察系の構築を新規に開発した。一方In vivo実験系としてはrAAVをBalb/cマウスの全身および膵局所投与を行った。全身投与は肝臓でのウイルス粒子の捕捉を回避すべく肝動脈、門脈を一時的にクランプした状態で尾静脈よりウイルスを注射する方法を完成させた。局所投与では実態顕微鏡下で膵臓に局所注入を行う方法を開発した。投与後は適時犠死のうえ膵臓を摘出標本化し、抗FLAG抗体で免疫組織化学染色を行い生体膵内における導入遺伝子の発現効率を評価するところである。AAVベクターに組み込んだCDK4のR24C変異体(CDK4_R24C)あるいはGFPのみ(Mock)を膵島で発現させ、膵島細胞再生につき観察した。治療実験には新生時期に75mg/kgの少量STZを投与したBalb/cマウス(nSTZ mice)を用い、STZ処理10週後に遺伝子導入処置を行った。この処置としては、AAVベクターにて発現させる遺伝子をCDK4_R24CとしてnSTZマウスの膵臓へ開腹直視下でウイルス液を注入した。遺伝子注入後は通常の食餌で飼育し治療後8週と12週にIPGTTを行うことでブドウ糖応答性インスリン分泌能(GSIS)を調べた。GFPの発現性で観察すると膵島への遺伝子導入率は約30%に達し、膵島への効率的な遺伝子導入法として膵への直接注入法の有効性が実証された。また病理標本を膵島面積で比較すると、Mockに比しCDK4_R24C群で有意にislet areaが大きかった。遺伝子導入後8週のブドウ糖負荷ではCDK4_R24C群で血糖曲線が低かったが、CDK4_R24C発現マウスの30分後血中インスリン値はCDK4_R24C群Mean±SDは801±203pg/ml、Mock450+134とp<0.05で有意にCDK4_R24C群が高かった。インスリン分泌亢進、血糖曲線の改善、ならびに膵島面積の増大は同時に認められ、膵島細胞増殖によるブドウ糖応答性インスリン分泌の改善が耐糖能障害の改善の原因であると考えられた。現在、遺伝子導入8週後、および12週後のマウスの膵臓の切片を作製し、増殖マーカーとしてBrdU染色性、CyclinD_CDK4 complexの活性を調べるため、Rb蛋白のリン酸化の度合いをリン酸化特異抗体を用いて調べている。これらによって膵島の増殖性の亢進をもたらす膵内分泌再生法の確立を目指しているところである。
サンスクリット美文学における文法性―インド中世多元的サンスクリット文化の解明―

以下、今年度に公表した研究成果のうち、今年度の研究実施計画に照らして特に重要と思われるものを述べる。・詩学者ヴァーマナが明言する「属格形は二者間の直接的関係だけでなく間接的関係も表す」という規定は、パタンジャリを頂点とするサンスクリット文法学の伝統からは認められないこと、ヴァーマナが実際の詩人達の実例を根拠に当該の規定の定式化に至っていることを明らかにした。このことは、サンスクリット詩人だけではなくサンスクリット詩学者もまた、文法規則の解釈に際して必ずしもパタンジャリの解釈に従うわけではないこと、それよりも詩作品における実例を重視する傾向があることを示す点で重要である。・作年度より開始したヴェーダ語と古典サンスクリット詩のつながりを見ようとする試みに関連して、古典期の美文学作品に頻出するx-bhuuta型の複合語(「x性を得ている、xになっている」)の源流をヴェーダ文献に探り、同複合語型の原形がヴェーダ語の特殊構文idam-bhuu「xを支配するに至る」に見られ得る可能性を指摘した。このことは、単語や表現の点だけでなく、統語論の点でもヴェーダ語からの影響、発展が古典サンスクリット詩には豊富に見られることを示唆する。・3年間の総括として行った「詩と文法」と題する口頭発表にて、1.サンスクリット文法学伝統の概観、2.サンスクリット詩学伝統が語る文法学の地位の概観、3.実作品に見る文法学と詩的技巧の関わりの検討、これら3点を通じて、古典サンスクリット文学における文法学の諸相を示した。伝統に沿う事柄を、新しく興味を引く仕方で歌い直すというのが印欧語族の詩人たちに観察される一般的特徴であるが、サンスクリット文学の世界においては、文法学は詩人たちに言葉の正しさを約束しただけでなく、彼らによる斬新奇抜な詩表現の創出にも一役買っていることを、意義深い点として指摘した。29年度が最終年度であるため、記入しない。本年度の研究課題は次の四点、1.文法学者パタンジャリ(紀元前2世紀)が『大注釈』中で掲ける文法学学習の主要な5目的を、ナーゲーシャ(17から18世紀)の注釈書『光照』を考慮して再検討すること、2.詩学者バーマハ(7世紀)の『美文の装飾』第六章(文法学の章)を読解し、文法学的観点から宮廷詩人達の言語運用の特質を分析すること、3.宮廷詩人バッティの表現に対して展開される文法家シャラナデーヴァ(12世紀)の諸議論の要点を整理すること、4.本研究に必要な美文学文献の電子テクスト化を完了させること、であった。以下にそれぞれの実施状況を述べる。1.主要な5目的だけでなく付随的な13目的も含め、文法学学習の18目的全ての再検討を終了した。その成果は、来年度発刊予定の単行本の序論の一部として公表される。2.『美文の装飾』第六章を構成する32の重要詩節の読解を終え翻訳を作成した。バーマハが文法学に深く関わるものとして言及する詩的技巧〈正しい語形成〉の概念と意義を解明した論考を雑誌論文として公表した。3.シャラナデーヴァの文法的議論の整理を完了し、そのいくつかを論究した。(1)バッティが文法規則例証の際に参照した今はなき文法学文献の存在を証明する論考を、第16回国際サンスクリット学会にて発表した。この成果は、近日出版される同学会文法学部門の論文集に収録される。(2)サンスクリット語の達人となるには多様なサンスクリット表現を学ぶべきとするバッティの態度が彼の規則例証の背後にあることを示す研究成果を印度学仏教学会第66回学術大会にて発表し、雑誌論文として公開した。4.当初の目標であった三つの美文学文献の電子テクスト化を完了した。文法学と美文学を軸に据えた上記成果は、サンスクリット文化や宮廷文化のみならず、広く学界のサンスクリット研究に貴重な資料を提供するものである。本研究が当初の予定以上に進展していると考える理由を、上記研究課題1-4に関連づけて以下に述べる。1について、次年度の計画であった、文法学学習の13目的の再検討を今年度に終わらせられた。付記すべきは、2016年2月から3月にかけてインドのプネーにて行われたサンスクリット文法学国際研究会に参加して、パーニニ文法学の核であるカーラカ理論に対する理解を格段に深めることができたと同時に、文法学の蘊奥を究めるGeorge Cardona名誉教授(ペンシルヴァニア大学)と、本研究に関わる諸問題について議論する機会を持つことができたことである。2について、広島大学で開催されたサンスクリット研究会(2015年12月)において、美文学の言語文化に関わるバーマハの議論の一部を参加者達と検討する機会を得られた。3について、シャラナデーヴァの議論の要点整理だけにとどまらず、来年度の課題であった個々の事例研究にも着手できた。4について、(1)研究二年目に予定していた、シャラナデーヴァの文法学文献『難解表現の説明』の電子テクスト化も本年度に完了でき、(2)手元になかった重要な諸美文作品の電子テクストをも日々の研究交流の中で入手できた。

本研究は、(1)サンスクリット文法学伝統における詩的表現の位置づけ、(2)詩学伝統における文法学の地位と文法性の位置づけ、(3)実際の美文作品に見る文法学の地位と文法性の位置づけという三視点から、サンスクリット文化における文法性と詩表現の相互関係を考察しようとするものである。以下、それぞれの視点に関わる研究実施状況を述べる。(1)文法家シャラナデーヴァは、古典期の詩人達によるヴェーダ語使用を正当化すべく「ヴェーダ語であってもある場合には非ヴェーダ語の領域で使用される」という原則を持ち出す。彼がこの原則を文法家パーニニの語法から導出する理論と背景を明らかにした。このような原則の定式化は、古風なヴェーダ語形が古典期の詩人達の語彙中に相当数入り込んでおり、彼らが規則に反してそれら特殊語形を多用していたことを示す。(2)-1詩的技巧と文法性の連関を論じる詩学者ダンディンの詩節を検討し、いくら詩的技巧をこらしても、文が文法性を欠いているならばそれら諸技巧は美的な味わいをもたらさないとする彼の考えを明らかにした。このことは、文法性を詩文の急所と見なす西北インドの詩学者たちの考えが、南インドで活躍したダンディンにも通底するものであることを示す。(2)-2詩論家バーマハが宣言する「詩人は『ヴェーダ語に準ずる』という原則に依拠してヴェーダ語を使用してならない」という言葉の意味とその思想的背景を闡明した。バーマハは大文法家パタンジャリの論説の流れに忠実に従い、美文作品の領域、すなわち非ヴェーダ語の領域でのヴェーダ語使用を固く禁じている。(3)バッティが文法学部門において規則例証のみに専心しているわけではなく、主に音の効果に関わる種々の文学技巧をしばしば規則例証表現の中に織り交ぜていることを明らかにした。彼のこのような詩的戦略はこれまで看過されてきたものである。昨年度と今年度、掲載許可が出ているものも合わせると、日本語論文6本、英語論文7本を研究成果として発信することができた。加えて、国際学会での英語による発表や国際研究会への参加を精力的に行い、世界水準の研究者との知的交流、情報交換を行った結果、本研究の精度は飛躍的に高まった。今年度より導入した新たな視点、すなわち「宮廷詩人のヴェーダ語使用」の考察も、本研究の深化につながった。この点に関し、美文学領域におけるヴェーダ語使用の問題を論じる、文法学者と詩学者の理論を扱う英語論文を2本書き上げたことを記しておく(うち1本は来年度に刊行予定)。さらには今年度、本研究が設定するすべての視点を包摂する研究書『バッティの美文詩研究ーサンスクリット宮廷文学とパーニニ文法学ー』(約30頁に及ぶ英文要旨を含む)を出版できたことは、本研究の極めて重要な研究成果として特記に値しよう。以上より、これまでのところ、申請書に記した計画に従って本研究は順調に進行していると判断できる。今後も学会発表、学術論文刊行、研究会参加、学際的交流を積極的に行い、本研究の更なる進展を目指したい。以下、今年度に公表した研究成果のうち、今年度の研究実施計画に照らして特に重要と思われるものを述べる。・詩学者ヴァーマナが明言する「属格形は二者間の直接的関係だけでなく間接的関係も表す」という規定は、パタンジャリを頂点とするサンスクリット文法学の伝統からは認められないこと、ヴァーマナが実際の詩人達の実例を根拠に当該の規定の定式化に至っていることを明らかにした。このことは、サンスクリット詩人だけではなくサンスクリット詩学者もまた、文法規則の解釈に際して必ずしもパタンジャリの解釈に従うわけではないこと、それよりも詩作品における実例を重視する傾向があることを示す点で重要である。
地球レベルの基礎生産を担う珪藻の「ウイルス感染死を介した」ブルーム維持戦略の解明

珪藻は植物プランクトンの一種であり,その膨大な生産力は豊かな海洋生態系を支える原動力となっている。珪藻は,自身を殺すウイルスが存在しても長期の大増殖を維持することが可能である。その仕組みは未だ謎であるが,一つの仮説として珪藻はウイルス感染に抵抗する術を持ちつつも,分裂不調な細胞をウイルスで速やかに殺し,栄養塩として再利用する可能性が示唆されている。本課題では,海洋珪藻の全く新しい生態戦略「ウイルス感染死を介した珪藻のブルーム維持戦略」を提唱することを最終目的とする。植物プランクトンの1グループであり海洋の一次生産者として重要な珪藻は長期にわたって高密度のブルームを維持する。このブルームを維持できるメカニズムとして、ウイルスによる珪藻細胞の感染死が重要な役割を果たしている、という全く新しい独創的な仮説を立て、無菌連続培養系を構築することによってその検証を行う。珪藻ブルームの長期維持機構に関する研究代表者らの独創的な仮説を検証しようする研究であり、学術的意義は非常に大きい。新規性、独創性が極めて高い研究であると同時に、研究代表者らはこれまでに十分な準備を行っており、仮説が立証されて珪藻とウイルスの生態的な関係性に全く新たな概念が構築されることが期待できる。研究計画もよく練られている。
食道癌のがん幹細胞に着目した化学・放射線治療耐性の分子機序の解明と新規治療の開発

CD44v9はCD44のスプライシングバリアントの一つで、がん幹細胞のマーカーの一つと考えられている。様々な癌種においてEpithelial Mesenchymal Transition (EMT)と癌幹細胞の関連が報告されている。食道癌は他の消化管癌のなかでは選択可能な抗癌剤治療薬も少なく、依然として予後不良の難治性癌である。現在は手術療法に加え、化学療法・放射線療法を含めた集学的治療を行っているが、他消化管癌と比較し、十分な治療成績は得られておらず、治療成績の向上が望まれる。またCD44のバリアントアイソフォーム(CD44v)の発現は、遠隔転移と関連していることが報告されており、がん幹細胞のマーカーの一つと考えられている。食道扁平上皮癌におけるCD44v9発現は原発巣よりもリンパ節転移部で高発現していた。さらに臨床病理学的因子と比較検討したところ腫瘍先進部におけるCD44v9発現は、深達度が深くEMT症例が有意に多かった。また、CD44v9発現症例は有意に予後不良であった。以上から腫瘍先進部のCD44v9発現が、EMTおよび予後不良に関与することが示唆された。また、CD44v9発現と遊走能・浸潤能、増殖能、抗酸化能との関連を検討したところ、食道扁平上皮癌深部浸潤部のEMTに伴い発現が誘導され、腫瘍細胞の遊走能・浸潤能の亢進を引き起こすことが判明した。同時に、悪性度獲得に寄与すると考えられた。本研究において、CD44v9の発現は食道扁平上皮癌における予後不良因子のバイオマーカーとなり、治療標的因子となりえることが明らかとなった。本研究では、難治性消化管癌においてがん幹細胞の発現を確認し、化学療法・放射線療法にたいして耐性の要因となりえるがん幹細胞を探索し、治療耐性のメカニズムを明らかにする。そのうえで、薬剤耐性を制御するmicroRNAの働きの検討を行い、幹細胞治療を標的とした新しい分子標的治療の開発を目指す。切除された食道扁平上皮癌(ESCC)症例のパラフィン包埋切片を用いて抗ヒトCD44v9抗体を用いて免疫組織化学染色(IHC)を行った。染色条件の設定を行い、発現することを確認した。転移陽性であったリンパ節もIHCをおこない、腫瘍細胞中のCD44v9発現細胞の割合を以下のScoreを用いて評価した。ESCCの予後とCD44v9の発現に関連があったこと、またCD44v9が術前治療後の残存腫瘍に発現していたことから、幹細胞である可能性も示唆された。特に治療効果が高い症例に発現していることから治療効果予測にも十分使用可能と考えられた。食道癌切除症例においてCD44v9の免疫染色を行い、その発現を確認した。腫瘍の局在やその部位により発現の差があることが同定できたことから、がん幹細胞としての可能性が十分示唆された。CD44v9はCD44のスプライシングバリアントの一つで、シスチン輸送体を活性化し、細胞内シスチン濃度を上昇させ抗酸化作用を持つグルタチオン濃度を高めることで、各種抗癌治療、腫瘍の再発および転移に関与している。食道扁平上皮癌における腫瘍先進部でのCD44v9発現の臨床病理学的意義およびEMTとの関係を明らかにする。1腫瘍先進部における形態変化⇒100倍視野で5個以上のtumorbuddingを認めるもの2腫瘍先進部におけるE-cadherinの発現⇒腫瘍先進部において正常上皮よりE-cadherinの発現が低下しているものをEMT群とした。これまでの研究で明らかにしたCD44v9の発現と比較検討したところ、CD44v9はEMT群の腫瘍先進部で発現が高かった。さらに臨床病理学的因子と比較検討したところ腫瘍先進部におけるCD44v9発現は深達度が深く、EMT症例が有意に多かった。さらに、腫瘍先進部におけるCD44v9発現陽性群は有意に予後不良であった。食道扁平上皮癌における腫瘍先進部でのCD44v9発現の臨床病理学的意義およびEMTとの関係を明らかにした。

これまでの研究で明らかにしたCD44v9の発現と比較検討したところ、CD44v9はEMT群の腫瘍先進部で発現が高かった。さらに臨床病理学的因子と比較検討したところ腫瘍先進部におけるCD44v9発現は深達度が深く、EMT症例が有意に多かった。さらに、腫瘍先進部におけるCD44v9発現陽性群は有意に予後不良であった。以上から腫瘍先進部のCD44v9発現が、EMTおよび予後不良に関与することが示唆された。CD44v9はCD44のスプライシングバリアントの一つで、がん幹細胞のマーカーの一つと考えられている。様々な癌種においてEpithelial Mesenchymal Transition (EMT)と癌幹細胞の関連が報告されている。食道癌は他の消化管癌のなかでは選択可能な抗癌剤治療薬も少なく、依然として予後不良の難治性癌である。現在は手術療法に加え、化学療法・放射線療法を含めた集学的治療を行っているが、他消化管癌と比較し、十分な治療成績は得られておらず、治療成績の向上が望まれる。またCD44のバリアントアイソフォーム(CD44v)の発現は、遠隔転移と関連していることが報告されており、がん幹細胞のマーカーの一つと考えられている。食道扁平上皮癌におけるCD44v9発現は原発巣よりもリンパ節転移部で高発現していた。さらに臨床病理学的因子と比較検討したところ腫瘍先進部におけるCD44v9発現は、深達度が深くEMT症例が有意に多かった。また、CD44v9発現症例は有意に予後不良であった。また、CD44v9発現と遊走能・浸潤能、増殖能、抗酸化能との関連を検討したところ、食道扁平上皮癌深部浸潤部のEMTに伴い発現が誘導され、腫瘍細胞の遊走能・浸潤能の亢進を引き起こすことが判明した。同時に、悪性度獲得に寄与すると考えられた。本研究において、CD44v9の発現は食道扁平上皮癌における予後不良因子のバイオマーカーとなり、治療標的因子となりえることが明らかとなった。食道癌幹細胞マーカー陽性細胞の抽出を中心に行っていく。食道がん細胞株(TEシリーズ)を用いて、CD44v抗体による染色を行い、CD44vが発現している細胞をセルソーターを用いて検出分離する。がん幹細胞の特性である腫瘍形成能を利用し、がん幹細胞の高濃縮群の細胞を低吸着plateに播種・培養。スフィア形成を確認する。一方でタンパク電気泳動を2次元で行ない、CD44高発現、低発現で確認される新しいスポットをタンパク質量分析器で同定する。食道癌細胞株TE6を用いてCD44v9をノックダウンし、WesternBlot法にてCD44v9、E-cadherin、Vimentin発現を解析し、同時にTGF-βを用いてEMTを誘導し、WBにてCD44v9、E-cadherin、Vimentin発現を解析する。腫瘍浸潤におけるCD44v9がどのように関係しているかを明確にし、がん幹細胞としての役割を明らかにする。
アサギマダラにおける季節性ナビゲーションの神経行動学“生態学的アプローチ”

アサギマダラ複眼の視細胞構成を明らかにする研究を、生理光学・組織学・電気生理学・分子生物学の異なる手法を駆使して行った。その結果、複眼3領域の同定とその特徴の解明が予想以上に進んだ。生理光学で同定した複眼腹側には光受容部位の周りに赤い色素をもつ個眼と持たない個眼があった。一方、複眼背側の個眼はいずれも同様の色素を持たない。また、準超薄切片を観察したところ、複眼背側は光受容部位が大きく発達した背側辺縁領域とそれ以外の背側領域に分かれていた。視細胞には、分光感度の違いから紫外・青・緑受容型の3種類があり、緑受容細胞には複数のサブタイプがあることがわかってきた。さらにトランスクリプトーム解析により、アサギマダラは紫外・青・長波長受容の3タイプの視物質を持つことも確認できた。生態学的研究を進めるために必須なフライトシュミレーターの構築は、ドイツのグループとの共同研究によって進めてきた。現在は、テストタイプものが出来上がっており、チョウの発生シーズンを待っている状態である。アサギマダラの飛行奇跡を野外で追跡するシステムの新規開発についても議論し模索を重ねてきたが、技術的な難しさから実際の共同研究には至っていない。領域会議での議論中に思いついた、アサギマダラの飛行とその定位に関わる複眼領域を同定する室内行動実験系を新たにデザインした。チョウが中で飛んでいる小さなかご周辺の光強度や色勾配を変えて、チョウの飛行の変化を観察した。その結果、アサギマダラは短波長の光に対して強い光走性を示すことを発見した。さらに、複眼の異なる領域を覆った個体の飛行を観察したところ、背側領域は飛行のモチベーションコントロールに必須で、特に照明光の色勾配の受容に重要であることが新たにわかってきた。以上の成果は、平成30年度に国際学会にて発表する。非常に異なる実験手法を複数用いる研究計画を立てていたが、実験を平行して進めてそれぞれの部分で予定通りの成果を生むことができた。特に一人で全ての実験的研究を進めていることを考えると、これまでほとんど明らかになっていなかったアサギマダラの複眼構成・機能・飛行との関係について非常に多くのことが明らかになったと考えている。さらに予定になかった複眼領域と飛行の関係を調べる行動実験を実際に立ち上げ、重要な結果を得られたことは特筆に値し、当初の計画以上の発展をしたと考えている。平成29年度に大きく進んだ、「複眼の組織・生理学的特徴」と新たにデザインした行動実験による成果「走光性における複眼領域の役割」については、順次で論文としてまとめ年度中の発表を予定している。平成30年度は、フライトシュミレーターを使ったアサギマダラの定位方向の観察により注力する予定である。すでにテストタイプもできているため、綿密に計画した野外及び室内実験から多くの新しい知見が出てくると期待している。得られた結果は、複眼や走光性の知見と合わせて、渡りにおける定位行動の仕組みの総合的な理解に繋げたい。新たに行動の背景にある高次中枢の仕組みを明らかにする実験的研究の方向性も探り、神経科学の班との共同研究を模索したいと考えている。渡りには、天空の光情報ほか温度や地磁気も関わるとされている。そこで、アサギマダラの脳を対象にトランスクリプトーム解析を進め、アサギマダラの渡りに関わる感覚系の遺伝子群の同定などにもチャンレンジする。

特に一人で全ての実験的研究を進めていることを考えると、これまでほとんど明らかになっていなかったアサギマダラの複眼構成・機能・飛行との関係について非常に多くのことが明らかになったと考えている。さらに予定になかった複眼領域と飛行の関係を調べる行動実験を実際に立ち上げ、重要な結果を得られたことは特筆に値し、当初の計画以上の発展をしたと考えている。平成29年度に大きく進んだ、「複眼の組織・生理学的特徴」と新たにデザインした行動実験による成果「走光性における複眼領域の役割」については、順次で論文としてまとめ年度中の発表を予定している。平成30年度は、フライトシュミレーターを使ったアサギマダラの定位方向の観察により注力する予定である。すでにテストタイプもできているため、綿密に計画した野外及び室内実験から多くの新しい知見が出てくると期待している。得られた結果は、複眼や走光性の知見と合わせて、渡りにおける定位行動の仕組みの総合的な理解に繋げたい。新たに行動の背景にある高次中枢の仕組みを明らかにする実験的研究の方向性も探り、神経科学の班との共同研究を模索したいと考えている。渡りには、天空の光情報ほか温度や地磁気も関わるとされている。そこで、アサギマダラの脳を対象にトランスクリプトーム解析を進め、アサギマダラの渡りに関わる感覚系の遺伝子群の同定などにもチャンレンジする。
重合反応制御のためのマルチメタリック分子触媒の設計

我々は、金属ポルフィリン錯体とかさ高いルイス酸からなるマルチメタリックシステムが高度に制御された高速な高分子合成に有効であることを見いだしている。本研究では、より一般的な系への展開をはかるため、マルチメタリック系を実現するための候補となる嵩高いチタン錯体を用い、ヘテロ開環重合の制御を試み、以下の成果を得た。1)アルコキシチタン錯体が、7員環の環状エステルであるε-カプロラクトンをアニオン重合させ、分子量分布の狭いポリエステルを与えることを見いだした。しかも重合はリビング的に進行することが分かった。また、ジクロロチタン錯体が、7員環の環状カーボナートを重合させ、両末端に水酸基を持つ分子量分布の狭いポリカーボナートを与えることを見いだした。2)カチオン性チタン錯体がオキセタンのカチオン重合を引き起こし、分子量分布の狭いポリエーテルを与えることを見いだした。その際、生長末端の片末端はトリフラート(求電子種)であり、もう片末端はチタンアルコキシド(求核種)になっていることが分かった。このカチオン重合の途中で、ある種のオニウム塩を加えてオキセタンの重合を停止し、もう片末端のチタンアルコキシドからラクトンを重合させることにより、相当するブロック共重合体を分子量分布の狭い形で合成することにはじめて成功した。これは、ワンポットでカチオン重合とアニオン重合が連続的に進行したはじめての例である。3)アルコキシチタン錯体が、オキセタンと環状酸無水物の共重合を引き起こすことを見いだした。得られたポリマーはオキセタンユニットとポリエステルユニットを共に有していたが、トリスアミド配位子を有するチタン錯体を用いると、ほぼポリエステルユニットのみからなる交互性の高い共重合体が得られた。
有機分子の保持・放出制御のためのゲート付き分子カプセルの開発

カゴ型構造の分子は、外部から隔離された内部空間での機能や、内部空間への物質の取り込みの観点から、近年注目が集まっている。しかしながら、これまでに報告されているカゴ型分子の多くは、物質の取り込みや放出の速度がカゴ型骨格自体にもともと備わっている隙間の大きさによって決まっており、ゲストの出入りを任意のタイミングでコントロールする機構は未開拓であった。そこで本研究では、配位結合によってカゴ型骨格の開口部の「窓」部分に開閉機構を導入し、有機物を中心としたゲストの出入りのコントロールを目指すこととした。これまでの検討により、クリプタンド型コバルト(III)三核錯体の開口部をジアミンの配位により効果的に閉じることができることを明らかにしているので、本年度は、一旦閉じた開口部を開くことができるかどうかについて検討を行った。開く機構として、ジスルフィドの交換反応に着目した。ジスルフィドはチオラートなどの求核剤存在下で結合が動的になること、すなわちS-S結合が可逆的に開裂・再結合を起こすことが知られている。カゴ型配位子にコバルトとシスタミンH2N(CH2)2SS(CH2)2NH2を導入することによって、開口部が閉じたカゴ型錯体を合成した。この錯体のセシウムイオン取り込みの速度について調べたところ、以前報告したヘキサンジアミンで開口部を閉じたカゴ型錯体と同様の取り込み抑制効果が見られた。このとき、50%の取り込みまでに要する時間は14hであったが、チオラートアニオンを共存させると取り込みが加速された。取り込み速度は14倍もの加速効果を示した。すなわち、チオラートを共存させてジスルフィド結合を動的にすることで、「開いた」カゴ型分子として振舞うホストに変換できたことが確かめられた。カゴ型分子の開閉機構の研究の一環としてジスルフィドの動的特性を用いた機構を開発し、実際にゲスト取り込み速度の制御に適用することができたため。研究初年度はコバルト三核メタロホストにジスルフィドを導入することで開閉機構を実現できた。本年度は、有機分子を包接できるサイズの新規なカゴ型分子として、各種クリプタンド型のホストを新たに設計・合成し、その開閉機構の創出について検討を行う。可逆な開閉機構については、配位結合によりフタ部位を開口部に連結する手法を用い、効果的なゲスト取り込み速度の制御を目指す。また、これと並行して、カリックスアレーンやシクロトリベラトリレンなどのお椀型の有機骨格を複数組み合わせた新規なカゴ型配位子を設計・合成する。得られた配位子を各種遷移金属イオンと錯形成させてカゴ型錯体に変換するとともに、各種ゲストの取り込み能や閉じ込め効果について評価する。
就学前障害児支援における連携強化に向けた情報交換システムモデルの開発

本研究課題の目的達成に向け、今年度は以下の2点を遂行した。1点目は、情報交換及びICT活用に関する全国調査である。この取り組みに関して今年度は、就学前障害児の保護者と支援スタッフを対象に、郵送法による質問紙調査を実施した。調査の実施は、全国の福祉型児童発達支援センター(旧・知的障害児通園施設)と特別支援学校幼稚部の全てに依頼し、113か所(全体の26.7%)から承諾が得られた。質問紙は、保護者1050名と支援スタッフ673・名から回収した。回答を分析した結果、昨年度に得られた仮説は、支持できることが確認された。また、保護者と支援スタッフは、89.3%がインターネットを利用しており、25.9%がSocial Networking Service(SNS)を利用していることも明らかとなった。2点目は、就学前障害児支援向け情報交換システムモデルの開発と検証である。この取り組みに関して今年度は、昨年度に開発したシステムモデルを用いて実施した、実践検討の結果を詳細に分析した。その結果、システムモデルは、保護者が支援スタッフと連携して支援を実施する際の情報交換に対する満足度を向上させるために、有効なものであることが確認された。また、今年度はフィージビリティの更なる向上を目指し、保護者と支援スタッフとの情報交換を補完する手段にSNSを位置付けた実践を行った。その際SNSには、臨床現場の担当者への聞き取り調査を踏まえ、登録したユーザー全員が自動的にネットワークを結ぶ改修を施した。その結果、SNSへの登録ユーザーが増え、昨年度よりも情報交換に活用される機会が増加した。以上から、本研究が考案したモデルは、就学前障害児への支援において実用可能であり、保護者が支援スタッフと連携して支援を実施する際の情報交換に対する満足度を向上させるために有効であることが確認された。本研究課題の目的達成に向け、現在は以下の2点を遂行している。この取り組みに関して本年度は、調査項目を精査するために、2010年に実施した質問紙調査のデータに詳細な分析を加えた。その過程で、保護者の情報交換に対する満足度は、連絡ノートが持つ「子どもの日常的な様子や変化が交換されやすい」という優れた特性によって向上している可能性がある、との重要な仮説を得た。そのため現在は、この仮説検証を目的の中心に置いた質問紙調査の準備を進めている。この取り組みに関して今年度は、上記1点目の成果と先行研究を踏まえ、保護者の情報交換に対する満足度の向上を重視したモデルを設計・開発した。このモデルには、連絡ノートよりもICTを活用した情報交換のほうが「子どもの日常的な様子や変化が交換されやすい」という要素を充実させる、という仮説を含んでいる。このモデルをもとに、フィージビリティも考慮し、Social Networking Service (SNS)を利用したプロトタイプシステムを実装した。また、当該システムが即座に臨床現場で適用可能となったことから、研究実施計画を繰り上げて、連絡ノートとの比較を通したユーザビリティテストと実践検討を実施した。その結果、保護者・支援スタッフの両者を対象とした検討から、a)連絡ノートと同程度のユーザビリティが確保されていること、b)「子どもの日常的な様子や変化」はSNSのほうがより充実して交換できること、が確認され、臨床上の意義が得られた。今後は、ユーザビリティとフィージビリティの更なる向上を目指したモデルの設計・開発を継続し、実践を通した検証を重ねる予定である。なお今年度は、所属研究室等の関連プロジェクトにも参加し、臨床現場の実践者と積極的な議論を交わしながら本研究を遂行してきた。