hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
両大戦間期ロンドンにおけるレヴューを中心としたウエストエンド商業演劇に関する研究

イギリス、特にロンドンのウエストエンドにおける両大戦間期は、ミュージカルに先行する様々な音楽劇(オペレッタやミュージカル・コメディ、レヴューなど)が共存する時代であったが、本研究においては、この中でも特に、歌、踊り、寸劇からなるレヴューという表現形式をとりあげ、フランスやアメリカから移入されたレヴューがどのようにイギリス独自のものに発展していったかについて、特にチャールズ・コクランとノエル・カワードによるレヴューの上演資料を調査することにより明らかにした。イギリス、特にロンドンのウエストエンドにおける両大戦間期は、ミュージカルに先行する様々な音楽劇(オペレッタやミュージカル・コメディ、レヴューなど)が共存する時代であったが、本研究は、この中でも特に、歌、踊り、寸劇からなるレヴューという表現形式をとりあげ、そのレヴューのイギリス独自の発展過程を、当時の階級意識や劇場制度、異文化接触といった文化的社会的背景を視野に入れながら、明らかにしようとするものである。年目である今年度は、両大戦間期にレヴューがミュージックホールのような大衆演芸との差別化を経てウエストエンドの中産階級的な(ミドルブラウな)エンターテインメントへと変質する、その過程を研究の主な対象とした。具体的には、ロンドンのヴィクトリア&アルバート美術館分館、およびニュースペーパー・ライブラリーにおいて調査を行い、この時期に上演された代表的なレヴュー作品に関する新聞記事や広告、劇評など、初演当時の様子を伝える様々な資料を収集することにより実施した。その結果、1910年代後半においてはレヴューがヴァラエティのような大衆演芸とほとんど区別なく上演されていたのが、1920年代前半になると大衆演芸と明確に区別されるものとしてレヴューを語る例が散見するようになったこと等を確認した。この調査の具体的成果は、勤務先の紀要に「アンドレ・シャルロの『こちらロンドン!』-イギリス1920年代のレヴューに関する覚え書き」と題して掲載した。また、日本演劇学会の分科会である近現代演劇研究会10月例会では、本研究課題にも関連のあるウエストエンド劇場街の高級化という問題を一部とりあげて発表した。2年目にあたる今年度は、フランスやアメリカから移入されたレヴューが、1910年代から20年代にかけての時期に、いかにイギリス的な特徴を持つレヴューに変化していったかという点に焦点を当てながら研究を行った。まず、1年目の資料調査により明らかになった点を一部、「『寄席』のレヴューから『劇場』のレヴューへ」と題して文章にまとめた。これは、ミュージック・ホールと劇場の間に制度的な違いを設けるイギリスの伝統的な劇場法に目を向けることにより、この国に特有のレヴューの発展過程を説明したものである。イギリスに特有の発展過程とは、言い換えれば外来のレヴューのイギリス化ということになるが、本年度においては、具体的には、国際的に活躍していたプロデューサーのチャールズ・コクランが新進気鋭のイギリス人劇作家ノエル・カワードを台本作者として起用し、ロンドンで上演した『ダンスを続けて』(1925年)を中心に、上記のテーマの研究を行った。レヴューの場合、スクリプトとして活字になっているものがきわめて少ない上に、その関連資料も日本国内ではほとんど入手困難である。昨年度と同様、今年度もロンドン出張の機会を得て、複数の図書館を訪問し、上演台本、劇評、広告、舞台写真等、初演当時の様子を伝える種々の資料を収集した。この調査の具体的成果は、勤務先の紀要に「チャールズ・コクランの『ダンスを続けて』-イギリス1920年代のレヴューに関する覚え書き-」と題して掲載した。今年度も昨年度に引き続き、フランスやアメリカから移入されたレヴューが、1910年代から20年代にかけての時期に、いかにイギリス的な特徴を持つレヴューに変化していったかという点について研究を行った。今年度は特に、イギリスのレヴューの発展に大きく貢献したと言われるプロデューサーのチャールズ・B・コクランの仕事に的を絞り、ロンドンの大英図書館が所蔵する上演台本や、ヴィクトリア&アルバート・ミュージアムのコクラン・コレクション、そしてニュースペーパー・ライブラリー等で収集した劇評などを調査した。その結果、コクランがイギリス独自のレヴューを創造しようとして様々なスタイルの上演を試みていたことが具体的に判明した。例えば、Odds and Ends(1914年)という小劇場向けのレヴューの場合、バックステージものの体裁をとっており、フランスのレヴューをイギリスで上演することの困難さをメタ演劇的に表現していること、その一方で、フランスのレヴューを翻案したAs You Were(1918年)のように、レヴューと称しながらも現代のミュージカルに近い、一貫したストーリーを持つ統合型のレヴューになっているものもあったこと等がわかった。

また、コクランは古いタイプのミュージック・ホールであったロンドン・パヴィリオンを、より知的で洗練された観客向けの劇場に改築し、レヴューを何本か上演していたが、この劇場で上演していたのはレヴューの2つのタイプ、すなわち大劇場における華やかなレヴューと小劇場における風刺的なレヴューの2つのタイプの「折衷型」であったことなど、コクランの行った数々の革新的な試みを具体的に確認することができた。このロンドン・パヴィリオン劇場のレヴューについては、2011年12月18日に、日本英文学会関西支部大会で、「両大戦間期のウェストエンドにおけるイギリスのレヴューの成立」と題して発表した。
レーザーパルス温度ジャンプ法を用いた構造ダイナミクスの協同性に関する研究

まず、昨年度製作したヒ-ティングパルス発生装置の改善を行った。ヒ-ティングパルスの発生には現有のQ-スイッチNd:YAGレーザー(パルス幅10ナノ秒)を用い、この基本波(1064nm)を高圧(約20気圧)の水素ガスセルに入射し、水素分子の誘導ラマン散乱によって1.9ミクロン(1次のストークス光)のパルス光を得た。水は近赤外領域(2ミクロン)に強い吸収帯(20cm-1)を持つので、この付近の波長で水を振動励起すると、直接溶媒である水の温度を上げることができる。今回は約10%の発生効率でヒ-ティングパルスの発生に成功した。このようにエネルギーとしては本研究に必要なレベルは得られた。しかし、用いたNd:YAGレーザーのビームパターンが悪いため、発生したヒ-ティングパルスのビームパターンが非常に悪く問題となった。ビームパターンの良いNd/YAGレーザーが今後利用可能になるので、それを用いればこの問題は解決できると考えられる。試料の温度上昇を、ラマンスペクトルのストークス光とアンチストークス光の強度比から求めることを試みた。ストークス光とアンチストークス光の強度比は系のボルツマン分布によって決定されるので、なんら仮定をはさむことなく試料の温度を決定することができる。本研究では狭帯のカットフィルターを用いることにより、水溶液中の無機塩のストークス線とアンチストークス線を同時に測定した。現在のところヒ-ティングパルスのビームパターンが良くないために、プローブパルスとの空間的オーバーラップが良くない、また光子密度が高くなりセルにダメ-ジを与えてしまう、などの問題のために精度のよい測定ができていない。ただし温度上昇が起きていることは熱レンズ効果の存在によって確認できている。前記の問題を解決し次第、すぐに蛋白質の構造緩和の実験に取りかかる予定である。
理科の問題解決場面に特化した学習のユニバーサルデザイン方略の実証的研究

一人の教師が,教育方法を工夫することで,より広い個人差に対応しようとする「学習のユニバーサルデザイン(Universal Design for Learning:以下UDL)」に注目が集まっている。本助成では,言語性ワーキングメモリ低位児に着目し,理科学習を中心とした問題過程における思考のつまずき等を考察した。第一に,言語性ワーキングメモリを測定しワーキングメモリ低位児を抽出した。第二に,ワーキングメモリ低位児の学習状況を観察した。第三に,ワーキングメモリ低位児の全国学力・学習状況調査(理科)の解答傾向を分析した。以上の研究から,ワーキングメモリ低位児のUDL方略を検討した。第一に文献調査おおび現地調査による先行実践および先行研究のレビューを行った。国内外における理科のUDLに関連する実践と研究成果のレビューした。主に,UDLの先進国である米国のCAST(Center for Applied Special Technology)を対象とし,文献調査と共に現地調査を行った。CASTは,米国のUDLを牽引する団体である。CASTの考えを反映した学校経営を行っている,コロンバス(インディアナ州)およびシカゴ(イリノイ州)の学校訪問を行った。第二に,授業観察や質問紙調査から,理科の問題解決場面におけるつまずき等から,児童の思考過程を明らかにし,個人差の観点から分析する予定である。その基礎調査として,ワーキングメモリの測定方法を検討し,実際に小中学生を対象に測定し,認知特性の把握した。また,理科におけるユニバーサルデザインの授業を試行し,その成果を分析した。授業デザインと共に,評価の方法に関する知見を得た。本研究では,特に,理科実験とその問題解決場面に焦点を当てた。本年度は,ワーキングメモリと理科授業の関係を検討した。第一に,集団式言語性ワーキングメモリテストを使い,小学生および中学生の集団のワーキングメモリの分布を調査した。第二に,ワーキングメモリ低位児を観察対象とし,理科実験を伴う問題解決場面のつまずきや成功の事例を検討した。第三に,全国学力調査の理科の正答率および誤答傾向とワーキングメモリの関係を分析した。その結果,理科実験および理科室での低位児の学習の困難性や理解の特徴が明らかになりつつある。本年度は,言語性ワーキングメモリに焦点を当てた。しかし,理科では視空間ワーキングメモリも大きく関係している。そこで,第四に視空間ワーキングメモリを集団で測定する方法を検討した。これらの成果は,複数の学会で発表した。基礎研究だけでなく,研究協力者と協議し授業デザインを検討し,実践することができた。本助成では,言語性ワーキングメモリ低位児に着目し,理科学習を中心とした問題過程における思考のつまずきや成功事例を考察した。測定には,樋口ら(2001)の開発した,「児童版集団式リーディングスパンテスト」を採用した。板書を写すことやスケッチに困難があることや映像資料による支援の可能性が明らかになった。複数条件を同時に比較検討することが困難であること,重さや粒子,方位などに強固な既有概念を持つこと,なじみの薄い器具の名称や類似する用語の区別が困難であること,メンタルローテーションが困難であることなどが示唆された。「UDLに関する調査」と「授業場面における思考過程調査」「認知特性の調査」等から,理科の問題解決場面におけるUDL方略のデザイン原則(案)を策定し,それをもとに授業デザインをすることを本年度の目標とした。「認知特性の調査」の手法を検討時期が遅かったことから,「授業場面における思考過程調査」は,一部の実施に留まっている。ただし,観察対象校は決定しているため,次年度はじめには実施する予定である。理科学習における言語性ワーキングメモリと視空間ワーキングメモリの関連を分析する。更に,これまでの基礎研究および試行授業を再分析し,理科学習のユニバーサルデザインのデザイン原則を検討する。それらの成果は,学会等で発表する。科学教育27年度は,「授業場面における思考過程調査」「認知特性の調査」を関連させた授業デザインを検討し,研究協力者の学級で実施する(デザイン実験(1))。ここでの授業観察および評価テストの分析結果から,デザイン原則(案)を導出する。次年度,本年度の成果をもとに教材を開発する。その費用が当初予算より増額する必要があるため。本年度予定した海外視察を次年度に実施するため。

複数の学校及び単元で授業実践を行う。そのための教材を購入する予定である。特に,ICTの活用を検討するために,タブレット等の購入が必要になる。旅費として利用予定である。
テトラヒメナのアルギニンキナーゼの構造,機能,及び進化に関する研究

テトラヒメナ(Tetrahymena pyriformis)に2種類のアルギニンキナーゼ(AK1, AK2)が発現していることを示すとともに,その酵素学的性質と細胞内での局在を明らかにした. AK1及びAK2の抗体を用いたウエスタンブロット法,また免疫蛍光抗体法により, AK1が繊毛内に局在していることを明確にした.局在を促進しているのは, AK1のN末端に結合する可能性が高いミリストイル基ではないかと考えられる.原生生物テトラヒメナ(Tetrahymena pyriformis)の繊毛運動の持続のためには,ATPの連続的な供給が必要であり,それはアルギニンキナーゼ(AK)を介した「アルギニンリン酸シャトル」機構によって維持されていると考えられている.1970年にWatts & Bannisterは,テトラヒメナ(Tetrahymena thermophila)に分子量の異なる二種類のAKが含まれることを示した.一方我々は,T.thermophilaのゲノムデータベースを徹底的にサーチし,ゲノム配列から二種類のAKアミノ酸配列(AK1,AK2)を抽出した.しかし,実際に両遺伝子がテトラヒメナの中で発現しているかどうかは,不明である.この研究では,T.piriformisを材料にして,原生生物由来のAK遺伝子(mRNA)の発現を初めて確認するとともに,そのcDNA及びゲノム構造を決定する.また,大腸菌でAK遺伝子を発現させてリコンビナント酵素を得る.更に,その酵素機能を詳細に測定し,他のAKとの比較から原生生物のAKの特性を明らかにする.また二種類のAKの細胞内局在を明らかにする.テトラヒメナ(Tetrahymena pyriformis)に2種類のアルギニンキナーゼ(AK1, AK2)が発現していることを示すとともに,その酵素学的性質と細胞内での局在を明らかにした. AK1及びAK2の抗体を用いたウエスタンブロット法,また免疫蛍光抗体法により, AK1が繊毛内に局在していることを明確にした.局在を促進しているのは, AK1のN末端に結合する可能性が高いミリストイル基ではないかと考えられる.原生生物テトラヒメナ(Tetrahymena pyriformis)の繊毛運動の持続のためには,ATPの連続的な供給が必要であり,それはアルギニンキナーゼ(AK)を介した「アルギニンリン酸シャトル」機構によって維持されていると考えられている.1970年にWatts & Bannisterは,テトラヒメナ(Tetrahymena thermophila)に分子量の異なる二種類のAKが含まれることを示した.また我々は,T. thermophilaのゲノムデータベースを徹底的にサーチし,ゲノム配列から二種類のAKアミノ酸配列(AK1,AK2)を抽出した.しかし,実際に両遺伝子がテトラヒメナの中で発現しているかどうかは,不明である.この研究では,T. piriformisを材料にして,原生生物由来のAK遺伝子(mRNA)の発現を初めて確認するとともに,そのcDNA及びゲノム構造を決定する.また,大腸菌でAK遺伝子を発現させてリコンビナント酵素を得る.更に,その酵素機能を詳細に測定し,他のAKとの比較から原生生物のAKの特性を明らかにする.また二種類のAKの局在を明らかにする.今年度は,T.pyriformisからmRNAを抽出し,コンセンサスプライマーを用いたPCR法により二種類のAK cDNAを増幅して,プラスミドヘクローニングした.原生生物の遺伝子では,Glnのコドンが,終止コドンで代用されているので,これを通常のものに変異させる必要がある.T. piyriformis AK1(40kDa酵素をコード)では,この変異を終え,Hisタグ(6xHis)を付加したリコンビナント酵素として発現させるために,pETベクターへの乗せ換えた。また,このリコンビナント酵素の酵素活性を予備的に測定した.一方,二種類のAK cDNA配列とゲノム配列を比較することでエキソン/イントロン配置を特定した.原生生物テトラヒメナ(Tetrahymena pyriformis)の繊毛運動の持続のためには,ATPの連続的な供給が必要であり,それはアルギニンキナーゼ(AK)を介した「アルギニンリン酸シャトル」機構によって維持されていると考えられている.我々は,テトラヒメナに分子量の異なる二種類のAK(40kDaのAKI及び遺伝子の重複と融合によって生じた2ドメイン型80kDaのAKII)が含まれることを示した.本年度は,AKIIのリコンビナント酵素の発現と二種類のAKの細胞内局在を明らかにすることを中心に研究を行なった.原生生物の遺伝子では,Glnのコドンが終止コドンで代用されているので,タンパク質発現のためにはこれを通常のものに変異させる必要がある.そのために先ず,2ドメイン型AKIIのGlnのコドン(ドメイン1に2カ所,ドメイン2に3カ所)を,通常のコドンに変異させた.また,Hisタグ(6xHis)を付加したリコンビナント酵素として発現させるために,pETベクターへの乗せ換えた.予備的な実験では,この2ドメイン型酵素は不溶性画分に回収され,可溶性酵素として得ることができなかった.ただし,ドメイン1側のみの部分は可溶化した.次に,AKI,及び可溶化したAKIIのドメイン1部分のリコンビナントタンパク質を用いて,これらを抗原としたマウス・ポリクローナル抗体を作製した。これらの抗体を用いてウエスタンブロッティングを行ったところ,テトラヒメナの細胞全体では,AKIIが強く検出され,AKIはほとんど検出されなかった.

一方,ジブカイン処理によって単離された繊毛では,AKIIは検出されず,AKIが強く検出された.即ち,AKIは繊毛に局在していることが明らかになった.原生生物テトラヒメナ(Tetrahymena pyriformis)の繊毛運動の持続のためには,ATPの連続的な供給が必要であり,それはアルギニンキナーゼ(AK)を介した「アルギニンリン酸シャトル」機構によって維持されていると考えられている.我々は,テトラヒメナに分子量の異なる二種類のAK(40kDaのAKI及び遺伝子の重複と融合によって生じた2ドメイン型80kDaのAKII)が含まれることを見い出した.本年度は,二種類のAKのC末にHisタグを付加しリコンビナント酵素を発現させ,両者の酵素活性を詳細に比較した(第81回日本動物学会にて発表).更に、2ドメイン型のAKIIはドメイン1と2に分離した酵素も作成して酵素活性を測定した.作成した4種類のリコンビナント酵素は,いずれも十分なAK活性を保持していた.ただし,AKIのリコンビナント酵素は構造的に不安定で,信頼性のある酵素パラメータを出すには時間を要した.AKIは,その抗体を用いたウエスタンブロッティングの結果から(昨年度の成果),繊毛に局在していることが明らかになっている.AKIのアミノ酸配列を詳細に検討した結果,N末のグリシンにミリストイル基が結合する可能性が強く示唆された.AKIは疎水的なミリストイル基を介して繊毛膜に結合し,構造的にも安定化している可能性がある.今後,AKIにおけるミリストイル基の存在の実証,ミリストイル化を触媒する酵素(N-ミリストイル・トランスフェラーゼ)のクローニング,及びミリストイル基の存在下,及び非存在下におけるAKI酵素機能の差異等を明らかにしていきたい原生生物テトラヒメナ(Tetrahymena pyriformis)の繊毛運動の持続のためには,ATPの連続的な供給が必要であり,それはアルギニンキナーゼ(AK)を介した「アルギニンリン酸シャトル」機構によって維持されていると考えられる.我々は,テトラヒメナに分子量の異なる二種類のAK(40kDaのAKI及び遺伝子の重複と融合によって生じた2ドメイン型80kDaのAKII)が含まれ,免疫抗体法に基づいて,AKlは繊毛に,AKllは細胞内全般に局在していることを見い出した.本年度は,先ず,2ドメイン型AKIIとAKIの酵素機能に違いを明確にした.AKI並びにAKII,そしてAKIIの2つのドメインを切り離した計4種類のリコンビナント酵素を作成し酵素活性を測定した。AKnの各ドメインは単独でも活性を示し,ドメイン間に相互作用があることも確認された.AKlとAKlIの触媒効率K_<cat>/K_d^<Arg>・K_m^<ATP>値を上ヒ較すると,AKIがAKIIよりも約1.5倍程度高いことから,AKIの方がより効率的な酵素であると考えられた.従って,両酵素は,局在する場所に応じたそれぞれの酵素機能を持つと言える.AKIのN末端配列にミリストイル化シグナルがあることに注目し,「AKIに存在する疎水的なミリストイル基がAKIの繊毛膜への局在を促進しているのではないか」という作業仮説を立てて,これを実証していくための基礎実験を行った.ミリストイル化が起こるためには,その反応を触媒する酵素ミリストイルトランスフェラーゼ(NMT)が必要である.
肝細胞癌における遺伝子発現プロファイリング解析とその診断・治療への応用

(1)高密度オリゴアレイ(Tiling Array)を用いたChIP-chip法の確立ChIP-chip法とは、Chromatin Immunoprecipitaion(ChIP)によって得られたゲノムDNAを増幅し、ラベリングを行った後に、ゲノム配列がタイリングされたオリゴマイクロアレイにハイブリすることによって、転写因子結合領域等を網羅的に同定しようとする方法である。これまで、酵母を用いたChIP-chip法は既に確立されていたが、ヒトにおいてはゲノムがもつ高度な複雑性(リピート配列等)により、同じ手法では十分な結果が得られなかった。特に、ゲノムDNAの増幅においてリピート様配列の顕著な増幅が見られ、リニアリティーが失われてしまうことが大きな問題となっていた。そこで、IVT(in vitro transcription)を応用した増幅法を開発し、よりリニアリティーの高い増幅に成功した。これにより、ヒト癌細胞株を用いたChIP-chip法が確立された。上記chIP-chip法を用いて、ヒト染色体21・22番における癌抑制遺伝子p53の結合領域を同定した。結合領域は、遺伝子のコード領域にとどまらず、遺伝子間の領域にも数多く存在することが明らかとなった。これらの生理的機能については、現在解析中である。今年度は、肝細胞癌の臨床検体から抽出したRNAを材料に、Genechip解析を行った。その結果から、癌部で特異的に発現亢進している遺伝子を診断・治療に有用な遺伝子として選出し、その遺伝子がコードするたんぱく質を発現させて、そのたんぱく質に対する特異的抗体を作成中である。また、肝細胞癌において高頻度に変異が存在する癌抑制遺伝子p53に着目し、診断・治療の観点から、以下のような実験を進めている。(1)p53ファミリー遺伝子下流解析それぞれp53、p63、p73由来のTAドメイン・DBドメイン・OLドメインからなる複数のキメラ遺伝子をアデノ感染させたA549細胞株(肺ガン由来)mRNAのGenechip解析を行った。キメラ遺伝子をヌードマウス皮下に移植した癌組織に注射することで、p53そのものよりも大きな抗癌作用を持つものが存在することが明らかになった。このキメラ遺伝子を用いた癌遺伝子治療が期待される。また、治療に用いる上で、そのメカニズムについての理解は必須であり、発現誘導される下流遺伝子との関係について解析を進めている。(2)DNAダメージの大きさに対して、細胞がSurviveかCell deathかを決定するメカニズム癌抑制遺伝子p53は、細胞外部からの刺激に応答して、リン酸化を受け、細胞がアポトーシスに向かうためにはこのリン酸化が必須であることが知られている。しかし、一方でp53下流の活性化とリン酸化とは必ずしも相関しないことも知られており、どのようなメカニズムで細胞の運命を決定するのかは未だ明らかになっておらず、効率的な遺伝子治療を行ううえで、その理解は重要となる。そこで、p53リン酸化以外に、下流を決定するメカニズムが他にも存在するものと考え、その探索を進めるための予備実験を進めている。以上(1)高密度オリゴアレイ(Tiling Array)を用いたChIP-chip法の確立ChIP-chip法とは、Chromatin Immunoprecipitaion(ChIP)によって得られたゲノムDNAを増幅し、ラベリングを行った後に、ゲノム配列がタイリングされたオリゴマイクロアレイにハイブリすることによって、転写因子結合領域等を網羅的に同定しようとする方法である。
酸化物磁性人工格子の界面制御

酸化物人工格子膜作製として、金属ターゲットの交互反応性スパッタリング法を確立するため鉄ターゲットを用い、鉄薄膜の酸化過程の検討を行った。アルゴン及び酸素による反応性スパッタを行い、X線吸収微細構造(XAFS)測定のXANES領域により鉄酸化物薄膜の前駆体の構造を明らかにした。これにより、次のような結果を得た。酸素分圧4mTorrのときスピネルフェライトFe_3O_4およびγ-Fe_2O_3を主成分とし、10mTorrのときα-Fe_2O_3を主成分とするとする酸化膜が形成された。すなわち低酸素分圧下で4面体と8面体の酸素多面体が混在し、酸素分圧が大きくなると8面体が主となる酸化物が、比較的短距離な秩序を構成している状態であることが判明した。また、従来のバルクのFe_3O_4には見られない1桁大きな磁気抵抗効果(3%)を示し、抵抗率もバルクに比べ4桁も大きなすぐれた磁気抵抗効果材料であることをことを発見した。この膜の構造解析を透過電子顕微鏡により行いFe_3O_4の柱状構造が見られ粒界、粒間における空孔や空格子の存在が磁気抵抗効果に大きく寄与しているのではないかと予想した。一方、現実の酸化物多層膜として、光磁気記録用Bi置換ガ-ネット多層膜の設計・製膜を行った。各層間の格子定数差による応力による垂直磁気異方性を発現するガ-ネット多層膜を提案し、その組成と層構成を設計した。ある組成のBi置換ガ-ネット膜の製膜に、BiFe酸化物、希土類と鉄の酸化物、の2元ターゲットにより交互スパッタし、それぞれのスパッタ時間の調整により所望の組成の膜が得られる条件を、各ターゲットからのスパッタ率を求めることより実現した。各層間の格子定数差による応力を利用し、逆磁気歪み効果から垂直磁気異方性を大きくする膜の設計と多層膜の作製を試みた。この多層膜は熱処理により結晶化したが、層間の拡散が大きく格子定数の差が層間で作用しなかったため垂直磁化膜とはならなかった。今後更に層間の拡散を抑制する作製条件の探索が必要である。本年度は先ず3元のターゲットを持ちそれぞれ高速シャッタによって開閉することのできる反応性スパッタ装置およびその基板加熱装置を作製した。これを用いFe金属ターゲットを用い、アルゴン、酸素混合雰囲気中でのスパッタによりスピネルフェライトを作製することに成功しその時の最適雰囲気条件を求めた。これをさらに深く理解するために、その結晶化過程を求めることを最終目的とし結晶化前の前駆体について金属原子と酸素原子との配置をX線吸収微細構造解析(XAFS)により確定し、結晶化機構への寄与を解明する。XAFSでは金属原子と酸素原子との動径分布関数が求めるだけでなく、その配位数も求まりX線回折(XRD)による構造解析よりも前駆体の構造を分析するのに最適である。鉄酸化薄膜の前駆体についてXAFS分析の予備実験に成功し鉄のX線吸収端近傍の吸収スペクトルを得た。磁性ガーネットにおける磁気異方性の制御のため多層膜の層間の格子定数差から発生するひずみによる逆磁気ひずみを用いる。

このとき磁化、格子定数差の値を現実的な値に固定したとき、磁気異方性を最大にする組成を計算により求めた。これに基づいた膜を実際に作製するため、現在ターゲットの焼結条件と膜組成の関連を明確にする実験を行っている。スパッタ中のオゾン雰囲気の結晶への影響の研究については、現在オゾナイザーの接続を実施中であるが、オゾンの危険性に留意しながら進める必要がありもう少し時間が必要と考えられる。一方、還移金属の初期酸化過程を明らかにするため原子レベルにおけるモフォロジー、電子状態の把握のための走査型トンネル顕微鏡(STM)の準備を行っている。酸化物人工格子膜を作製法としての、複数金属ターゲットを用いた交互反応性スパッタリング法を確立する基礎として代表的な磁性金属である鉄ターゲットを用い、鉄薄膜の酸化過程の検討を行った。アルゴン及び酵素の混合雰囲気中の反応性スパッタを行い、X線吸収微細構造(XAFS)測定のXANES領域により鉄酸化物薄膜の前駆体の構造を明らかにした。このXANES測定により、通常のX線回折では観測されない次のような結果を得た。酸素分圧4mTorrのときスピネルフェライトFe_3O_4およびγ-Fe_2O_3を主成分とし、10mTorrのときα-Fe_2O_3を主成分とするとする酸化膜が形成された。すなわち低酸素分圧の下では4面体と8面体の酸素多面体が混在し、酸素分圧が大きくなると8面体が主となる酸化物が、比較的短距離な秩序を構成し長距離的秩序には欠けている状態であることが判明した。これらの膜の熱処理による、構造及び電気伝導度の変化を測定した。抵抗率の熱処理依存性から薄膜の構造変化を推定することが出来た。また、熱処理を行わない場合の酸化膜の抵抗率の絶対値が、バルクのFe_3O_4のそれに比べて4桁も大きく、空孔や空格子の存在が予想された。一方、現実の酸化物多層膜として、光磁気記録用Bi置換ガ-ネット多層膜の設計・製膜を行った。各層間の格子定数差による応力による垂直磁気異方性を発現するガ-ネット多層膜を提案し、その組成と層構成を設計した。ある組成のBi置換ガ-ネット膜の製膜に、BiFe酸化物、希土類と鉄の酸化物、の2元ターゲットにより交互スパッタし、それぞれのスパッタ時間の調整により所望の組成の膜が得られる条件を、各ターゲットからのスパッタ率を求めることにより実現した。各層間の格子定数差による応力を利用し、逆磁気歪み効果から垂直磁気異方性を大きくする膜の設計と多層膜の作製を試みた。この多層膜は熱処理により結晶化したが、層間の拡散が大きく格子定数の差が層間で作用しなかったため垂直磁化膜とはならなかった。今後更に層間の拡散を抑制する作製条件の探索が必要である。
化学分析に基づく飴出し法の最適化および伝統的な藍の再現

藍の歴史は古く、日本でも古典絵画に藍の顔料が使われていたことまでは機器分析などで明らかになっているが、その製造方法は不明な点が多い。本研究では、江戸時代の文献に概略のみ残されている古来の絵具製造法を再現し、発色の高い顔料化した藍を蘇らせることを目的とした。藍の飴出し抽出法とは、藍裂や藍糸から石灰と水飴を用い顔料化する方法であり、古くは葛飾北斎が記した『絵本彩色通』(1848年刊行)にその記述が認められる。種類の異なる蓼藍、琉球藍、インド藍の抽出試験を行い、結果試料を数種類の科学分析にかけることで、化学の側面から発色や物性、色数値の測定検証を行った。日本本島で行われる藍染はタデ藍の葉を発酵処理して「スクモ」をつくり、それを建てて染める一方で、インドや沖縄地方の熱帯、亜熱帯地域では、古くから沈殿藍、泥藍と呼ばれる手法で染められ、それぞれ色味に違いがある。しかし分析結果には植物や色味の違いは反映されず、常に一定の発色、色相、明度を示すことが分かった。また蛍光エックス線調査よりどの試料からもカルシウム(Ca)が検出されていることから、藍の顔料化に用いた石灰が含まれていることが明らかとなった。これは、藍顔料に夾雑物として石灰が残留しているのか、あるいはインディゴ色素が石灰に固着して顔料化しているのかは引き続き検証が必要である。飴出し法では石灰、水飴のどちらかが欠如してもこの変化は起こらず、藍の抽出も行えない。石灰を炭酸カルシウムに置き換えて実験を行ったところ、ほぼ抽出が行えなかったことから、抽出に用いる水を石灰の成分で強アルカリの状態にすることが重要だと考察された。配合を変えた試験でも結果に大きな違いは見られず、分量の調節では抽出された藍の精度を上げることは難しいが、どのような実験下でも安定して顔料化を行えることが実証された。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。本研究では伝統的な藍の顔料を抽出することを目的とする。地域ごとの藍の色味の検証も行う。化学染料でなく天然の藍染布から抽出する必要があるため、現地を訪れ収集することが求められる。◆国内における素材の収集(藍染布)藍染は日本、世界各地で行われているが地域により染め方も異なる。例を挙げると日本本島で行われる藍染はタデ藍の葉を発酵処理して「スクモ」をつくり、それを建てて染めるという方法が昔から行われてきた。一方でインドや、沖縄地方の熱帯、亜熱帯地域では、古くから沈殿藍、泥藍と呼ばれる手法で染められ、それぞれ色味に違いがある。29年度ではスクモで染められている島根の藍染め糸を収集し、また沖縄を訪れ伝統的な手法で藍染めを行う工房を視察すると同時に沈殿藍で染められた裂を入手した。◆沖縄県立芸術大学での学会発表また沖縄県立芸術大学で行われた琉球絵画の学会に出席し、琉球古典絵画の絵画技法と用いられた色材の見識を深めるとともに、琉球藍についての意見を交換する貴重な機会となった。◆藍の飴だし抽出試験様々な抽出試験を行うために、必要な道具や備品を購入し入手した藍染め糸・裂の抽出試験をそれぞれ行った。抽出時の石灰や水飴の配合は統一した。その後、和紙と絹に抽出した藍を塗布しサンプルを制作した。このときは膠をてん料として加えた。国内(島根・沖縄)の藍染め裂・糸の収集を行った。また現地の工房を視察し琉球藍について知見を広めるとともに沖縄県立芸術大学で行われた琉球絵画の学会に参加し、現地の研究員の方との意見交換をおこなった。収集した藍染め糸、裂の飴出し試験を行った。和紙と絹に抽出した藍を塗布しサンプルを制作した。

飴出し法では石灰、水飴のどちらかが欠如してもこの変化は起こらず、藍の抽出も行えない。石灰を炭酸カルシウムに置き換えて実験を行ったところ、ほぼ抽出が行えなかったことから、抽出に用いる水を石灰の成分で強アルカリの状態にすることが重要だと考察された。配合を変えた試験でも結果に大きな違いは見られず、分量の調節では抽出された藍の精度を上げることは難しいが、どのような実験下でも安定して顔料化を行えることが実証された。◆飴出し法がどのような化学変化のなかで抽出されるのかを解明飴出し法では石灰、水飴のどちらかが欠如してもこの変化は起こらず、藍の抽出も行えない。この時に起こる化学変化を解明しデータとしてまとめる。◆石灰や水飴の他素材への置き換え実験化学変化の解析により導き出されたデータをもとに、組成が類似する他素材での置き換え実験を行う。より美しい藍の抽出可能な素材と配合を繰り返し選定し記録データを作成する。◆不安定な藍を効率よく抽出するための実験置き換え実験の中で最適だと導き出された材料を用い、配合や手順を変えより効率的な方法を検討する。◆海外を中心とした藍染め糸・裂の収集◆収集した藍染布と石灰、水飴による最適化実験とデータの編纂実験を重ねていく中で発色、透明度の最も高くなる工程、分量を導き出しデータとしてまとめる。◆研究報告書・サンプル作成および研究成果の公表と発表最終的には、研究報告書、色見本サンプルを作成し、研究協力者らの所属学会、美術館でのワークショップなどをはじめとする公開研究会にて発表を行う。また研究で得られた結果を共有し、役立てることを目標に、進行状況や技術工程を含めた研究成果を広く一般に公開するためにホームページやSNSを利用して公表していく。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。
家畜個体の肉質予測システム構築に向けた基盤研究

H29年度より解析を進めてきた骨格筋Pax7遺伝子の脂肪前駆細胞内における機能についてさらに解析を進め論文および学会にて発表を行った。本結果によりPax7が筋肉および脂肪細胞の分化転換能力を持つ可能性が明らかとなった。Pax7は骨格筋細胞内では転写を活性化させる転写因子として報告されているが、脂肪前駆細胞においては転写を抑制するリプレッサーとして機能してる。現在はクロマチン免疫沈降法を用いてPax7のターゲット遺伝子を同定するべく解析を進めている。Pax7単体もしくは核内に存在する他のタンパク質と複合体を形成しDNAに結合している転写因子であると仮定している。。脂肪分化抑制機構に加えて、脂肪細胞分化が阻害された場合、Pax7導入細胞が筋肉分化に誘導しているか否かを明らかにするために、培養条件やco-factorsの必要性も考慮に入れ、筋肉細胞誘導を試みた。H30年度における条件検討では筋管形成の確認までは至っていないが継続して解析を進めている。研究課題の大きな柱である、脂肪細胞分化の抑制機構については順調に進んでおり最終年度(H31年度)でターゲット遺伝子を同定すれば研究計画を達成できる。筋系細胞への分化誘導機構はPax7発現のみでは不十分であることが判明し、培養条件Pax7のco-factorsを同定することで解析を進めている。脂肪細胞分化の抑制機構はターゲット候補としている遺伝子群がPax7により直接転写抑制を受けているのかをPCR解析にて明らかにする。筋系細胞については候補としてクローニングし発現ベクターを作成したMyf5等をトランスフェクションで導入することで、分化能力に与える効果を筋管形成率や分化後期マーカーの発現活性化等の指標を用いて解析を行う方針である。本課題は細胞培養系を用いて、有用な家畜の創出のためのバイオマーカーの候補としてPaired Box 7 (Pax7)に着目して解析を行っている。これまでPax7は筋肉幹細胞に発現する遺伝子であり、筋肉細胞においては分化初期のマーカーとして広く知られている。このような早期マーカーのメカニズムを知ることで、筋肉ー脂肪組織がどのようにして形成されているのかを明らかにすることで、食肉の質向上を目指すことを上位目標としている。今年度の実績として、Pax7を脂肪前駆細胞に強制発現させた細胞株を樹立して解析を進めた結果、Pax7の発現株では脂肪滴の形成が阻害された。また脂肪分化マーカーの発現も抑制されていた。これらの結果から、Pax7は脂肪細胞の分化を抑制することを明らかとした。さらに、新たな肉質の指標となるマーカーを探索しており、ペルオキシソームに発現するNudix Hydrolase 7 (Nudt7)に着目しNudt7が筋肉細胞分化に与える影響についても検証を行っている。これまでに得られたPax7発現脂肪前駆細胞の分化抑制機構については結果をまとめ論文を投稿している。さらに、この細胞を筋肉細胞へ分化誘導できる培養条件の検討を行っている。さらにNudt7が筋管の筋線維タイプによる発現変動が認められるか実験を進めている。。現在も、筋肉細胞分化が可能な脂肪様細胞とはどのような特徴を持つものなのか、分子生物学的手法を用いて解析を進める。さらに、Pax7が脂肪細胞マーカーを抑制するメカニズムについてもプロモーターアッセイ等を用いて解析を行う予定である。平成29年度に計画していたRNA-seq解析をRT-qPCR解析法に変更した。RT-qPCR法で必要な試薬類はRNA-seq法に比較して安価であり、短時間で結果を得ることができた。平成30年度はこのRT-qPCR解析法で得られた結果を展開し、細胞培養やタンパク質解析をさらに進める予定である。以上の理由からH30年度使用額の執行には問題ないと考えている計画時には外部委託を行なって解析を進める予定であったが、学内の共同利用施設にある機器を用いて解析を行なった。今年度は必要となるタンパク質解析試薬が増やし
頭蓋咽頭腫における病理学的サブタイプと糖代謝に関する検討

予定通りに研究を開始した。研究室にて糖代謝に関わると考えられるGLUT-1とHexokinase-2の抗体を用いた病理学的染色を、当院の頭蓋咽頭腫症例に対して開始している。病理学的検討のための器具、特に薄切器については現有していたが、オーバーホールを行った。さらに、一般的染色から、免疫組織学的検討まで、現有の機器で検討を行うための不足の機器や薬品類も整備した。さらに、病理切片を画像データとして取り出すための顕微鏡など、必要物品を一通り整備した。まず、全体ではないが、一部症例について、Glut-1、Hexokinase-2を用いた免疫組織学的染色を開始した。現状では、仮説通りの染色結果が得られている。免疫組織学的検討を繰り返し、確実と思われれば、遡って多くの症例でこれを行う予定である。検討の途中で、より病理学的な検討も必要になってきており、病理学分野の研究者とも共同で検討を行っている。もし、症例全体を使った検討で、明らかな差がみられるようであれば、VE-1抗体を用いた染色、あるいはBRAF V600Eに関する直接のシーケンスを予定している。検討の過程で、トルコ鞍部腫瘍が海綿静脈洞に進展する場合、動眼神経三角を介した特殊な頭蓋内進展形式をとることを見出した。この様な進展形式をとるトルコ鞍部腫瘍は、動眼神経麻痺を生じる為、注意が必要で、治療方法についても議論が必要である。これについては、すでに論文として報告した。初年度として予定通り、免疫組織学的検討のフローが整備され、免疫染色に関する実験を行っている。実験の最も重要な仮説に関する一部を用いたパイロット実験で、すでに概ね仮説に合致した結果が得られている。これに関する追加の確認実験を現在行っており、これが成功すれば、全体の症例を用いた本試に入ることができる。順調に進行しているが、論文の出版まで含めると、もう少しペースを上げることが望ましい。さらに実験をすすめる。実験の経過中に気づかれたトルコ鞍部病変の海綿静脈洞から、動眼神経三角への進展に関する検討についてすでに論文発表を行った。現状では、すでに得られた一部症例の結果について、確実であるかどうかを確認中である。病理学の専門家にも協力を仰ぎ、検討中である。これが確認されれば、すぐに全症例の検討を行う。クリアーな結果が得られるようであれば、VE-1による染色、あるいは、BRAF V600Eに関するシーケンスを行い、病理学的亜型を確定させる実験を追加する。さらにFDG-PETを現在まで行った症例について検討しする予定である。次年度はいよいよ本格的な染色に移る。交体に関する費用が最も問題になる。現在購入予定の抗体は非常に高価なもの(VEー1抗体)も含む。また、シーケンスについても機器は当該施設の共用機器を用いることが可能であるが、ランニングコストは高価である。
放牧家畜の食草行動,反すう行動の長期間解析システムの開発とフィールド試験

1分間当りの顎運動回数と顎運動休止回数(顎運動が3秒以上休止する回数)を同時記録することにより、食草行動と反すう行動が区別できる。今回、この顎運動回数と顎運動休止回数が一台の装置で同時記録できる家畜携帯用の小型電子記録装置(Jaw Recorderと名付ける)を開発し、またその装置を用いて放牧地の牛の放牧行動行動を長期間にわたり観察した。顎運動記録トランスジューサーとして、胸囲形呼吸ピックアップを下顎部に装着し、顎運動にともなう電気信号(抵抗変化)の変化を装置に入力し、1分間当りの顎運動回数と顎運動休止回数を計測した。この装置はデータの記録容量(32768データ)が大きく、一度に最大22日間分の顎運動回数と顎運動休止回数の1分値を連続して同時記録できた。ホルスタイン育成牛にこの装置を携帯させ、イタリアンライグラス草地に13日間放牧し、放牧行動を調査した。1分毎に記録した顎運動回数と顎運動休止回数を用いて、13日間の食草行動、反すう行動を正確に記録できた。食草時間と反すう時間は放牧開始後6日間は増加し、その後は増加しなかった。また食草時の顎運動回数は放牧前半で、日増しに増加した。その後はあまり変化しなかった。これらの変化は可食草量の減少と草高の抵下に深く関係していると思われた。今回開発した装置は、牛以外にも馬、緬羊、山羊、シカ等の放牧動物の食草行動、反すう行動を長期間自動記録する装置として十分利用できるものと思われた。
標的指向性・光感受性リポソームの薬物動態解析

ベルテポルフィンを光感受性物質とした標的指向性・光感受性リポソームの作成を行った。532nm、698nmのレーザー照射で破壊され,さらに抗癌剤であるシスプラチン(CDDP)を内包したリポソームはレーザー照射によりCDDPを放出することを明らかにした。正常マウスでの急性毒性試験では、血球系および肝酵素の異常を認めなかった。Colon26細胞を用いたin vitroの系及び、担癌マウスモデルにおける検証で光照射群で強い癌細胞増殖抑制効果を得た。標的指向性・光感受性リポソームは、細胞毒性を起こすことなく安全性を高めた効率の良優れたドラッグデリバリーシステムを持つ薬物に成りうる可能性が考えられた。光感受性リポソームの光照射による破壊実験: H24年度までに、ベルテポルフィンを光感受性物質とした光感受性リポソームの作成に成功し、物性レベルにおいてレーザー光照射により内包薬物が放出される研究成果を得た。本年度は、in vitroでその効果を確かめた。シスプラチン内包光感受性リポソームと大腸癌の培養細胞株であるColon26細胞を用いて、光照射により放出されたシスプラチンの癌細胞増殖抑制効果を調べた。その結果、光照射なしでは、シスプラチンが放出されず増殖抑制効果がなかったが、光照射群では強い細胞抑制効果が得られた。光照射によるリポソームの破壊に関して特許申請準備中である。リポソームの薬理効果の解析:リポソーム内包薬物を変えて薬理効果を調べ、様々な薬物がその薬効を発揮できるか調べた。薬物の候補として、ステロイドだけでなくぶどう膜炎に発症に重要な役割を果たすマクロファージをピンポイントに標的とするクロドロン酸を内包したリポソームを作成し、その薬物動態を解析した。腹腔内投与と静脈投与による検討では、静脈投与の抑制効果が高かった。実験的自己免疫性ぶどう膜炎(EAU)を作成し、クロドロン酸内包リポソームを静脈内投与するとマクロファージが抑制され消炎すると予想されたが、予想に反して炎症は増悪した。血球分画を調べると好中球が明らかに上昇していた。脾臓の有意な委縮を認めた。EAUマウスは、ヒトぶどう膜炎のモデル動物であり、脈絡膜を主体としたぶどう膜炎を起こすが、このモデルでは網膜浅層が障害された。腸管、特に回腸・盲腸に炎症がみられ眼所見と合わせベーチェット病のマウスモデルになる可能性が示唆された。クロドロン酸内包リポソームのEAUマウスのmiRNAに及ぼす影響の解析:クロドロン酸内包リポソームをEAUマウスに静脈内投与しmiRNAとその標的mRNAの発現解析を行っている。シスプラチン内包光感受性リポソームに関して、シスプラチン単独投与では、細胞毒性を発揮する濃度でもリポソームに内包すれば高濃度の薬物内包量でも細胞毒性を示さないことが明らかとなった。その結果、光照射なしでは、シスプラチンが放出されずColon26細胞の増殖抑制効果がなかったが、光照射群では強い細胞抑制効果が得られた。さらに、in vivoにおける癌細胞抑制効果の解析を引きつづいて行った。Balb/c Slc-nu/nuの6週齢雌マウスにColon26細胞を移植し担癌マウスモデルを作成した。0日目(colon26細胞移植後7日目)と7日目にCDDP内包リポソームを尾静脈投与した。レーザー照射はリポソーム投与6時間後、3、4、5、6、7、10、11日後に1分間照射した。腫瘍体積を測定して内包薬物による抑制効果を解析した結果、リポソーム非投与群およびレーザー非照射群では腫瘍体積の減少がみられなかったのに対して、リポソーム投与群では経時的に腫瘍増殖抑制効果が認められ、さらにレーザー照射で抑制効果の増強が認められた。同時に、投与マウスの体重を解析したが、優位な体重減少は認められなかった。一連の解析により、シスプラチン内包ベルテポルフィンリポソームは、光照射に応じて内容薬物を放出し、効率よく癌細胞の増殖抑制効果を発揮し、副作用を軽減したドラッグデリバリーシステムとしての担体となりうる可能性が示唆された。ベルテポルフィン内包リポソームの作成の条件検討を行った。ベルテポルフィンの溶解性に関して、凍結乾燥法による内包の程度を3種類(10, 5, 1 mg/ml)の濃度で検討した。その結果、限外濾過後の平均粒子径が200nmの均一な分布を示す5mg/mlの濃度を至適濃度と決定した。

実際に作成したリポソームにレーザーを照射し破壊実験を行った。ベルテポルフィンは、いくつかの吸収波長をもち、532nm(緑)、561nm(黄)、659nm(赤)とヒトの加齢黄斑変性に対する光線力学療法で使用される698nm(赤外)の4種類で行った。その結果、吸収の強い532nmと698nmで崩壊を認めた。実際に確かめたのは粒子径の分布であり、レーザー光により破壊されたと予想される残骸が凝集した結果、Z-averageが増加することをみただけである可能性が考えられた。この可能性を否定するために、シスプラチン(CDDP)を同時に内包させて破壊実験を行った。532nmと698nmの波長でレーザー照射を行い、破壊され粒子径が凝集により増加することを確認したうえで、限外濾過を行い濾液中にCDDPが放出されていることを確認した。実際のベルテポルフィン内包リポソームを正常マウスに投与し急性毒性試験を行い薬物投与が生体に及ぼす影響に関して解析した。リポソームの投与量は100, 200, 400 mg/Kgの3条件で行った。その結果、赤血球・白血球数に異常を認めず、AST, ALT, ALP, BUNなどの酵素に異常を認めなかった。これらのリポソームは最終的には細網内皮系で捕捉され分解されると考えられるが、投与1カ月後の臓器重量を、心臓・肺・肝臓・腎臓・脾臓で調べたところ、200 mg/Kgと400 mg/Kgの投与群において脾臓において臓器の増加が認められた。。光感受性リポソームに関して、物性解析で、光照射により内包薬物が破壊され放出されることを確認し、in vitroで内包薬物が薬理効果を発揮することを明らかにできた。光照射により自由に思いのままにリポソームを破壊する概念はなく、既存のリポソームに比較して新捗性があり特許申請に向けて準備中である。クロドロン酸内包リポソームをEAUマウスに投与する実験では、当初の予想に反して炎症が増悪する結果が得られた。理由の解析の中で、感染がない状態で好中球が上昇する病態と、眼の網膜浅層における炎症、回盲部の炎症細胞浸潤を偶然にも発見し、ベーチェット病のモデルマウスを作成できる可能性のあるデータが得られている。EAUマウスは、確かにヒトぶどう膜炎のマウスモデルであり、眼に炎症は起こるが腸管には炎症は起こらず、さらにこの炎症モデルのeffector細胞はT細胞であり厳密な意味でのベーチェット病のモデル動物ではない。今回、明らかになった事実を、さらに解析することにより、難病にも指定されている疾患のモデル動物を作成し、疾患の病態解析や薬物の開発につながる大きな成果をもたらす可能性がある。リポソームの作成に関して、企業と共同で光感受性リポソームを作成し、その物性を解析し予想通りの物性が得られていることが明らかにできた点と、特許出願に向けての準備ができている点で、おおむね順調の進展していると考えている。大腸癌の細胞株でのシスプラチン内包リポソームの細胞抑制効果が得られたので、H25年度は担癌マウスモデル(ヌードマウスに皮膚癌の癌細胞を移植したもの)を用いて、光照射を行い抗癌作用が発揮されるかin vivoで検証する。クロドロン酸内包リポソームの実験では、全身臓器の病理を詳細に解析することと、眼局所に好中球の浸潤がみられるか解析する。血球成分を解析し、厳密にeffector細胞の同定を行う。
質量分析イメージングおよびＰＥＴ低酸素トレーサーによる治療抵抗性肺癌の代謝解明

平成24年度は臨床研究のみを施行した。慶應義塾大学病院呼吸器外科の肺癌術前症例22人(男/女17/5)に対して国立がん研究センターで施行されたATSM-PETを解析した。を投与し術式、病理所見、最終病期を調べた。術式に関してはP肺摘除術1例、肺葉切除11例、区域切除3例、部分切除2例、生検のみが5例であった。また腫瘍の組織型に関しては腺癌8例、扁平上皮癌6例、大細胞神経内分泌癌1例、大細胞癌1例、小細胞癌1例、非小細胞癌が3例であった。病理病期はIAが2例、IBが4例、IIAが3例、IIBが2例、IIIAが5例、IIIBが1例であった。ATSMは低酸素状態を比較的明瞭に反映するため腫瘍の低酸素領域に集積することが予想された。画像のSUV値など具体的な集計は行っていないものの扁平上皮癌では比較的腫瘍の中心に集積を認めこれは病理組織学的にも腫瘍の中心ではおそらく低酸素によるものと思われる壊死を認めていた部位と一致している。腺癌においては比較的高分化である、肺胞上皮置換性に増殖するGGN病変では集積がほとんど見られないものの低分化な腺癌においては集積が認められる傾向にあった。しかし比較的低分化な扁平上皮癌でも集積が非常に低いものもありこれらをどう理解するかは今後の検討課題である。なお当院で2012年3月に発覚した医療倫理違反に関し、本研究はすべての倫理審査を経ており違反事案とは無関係であることは宣言できるが、臨床試験を含めた当科主導の研究は一度すべて中止することとなり、本研究も2年での研究環椎が不可能と判断し中止とする。