hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
肝化学発癌抵抗遺伝子座の二段階発癌過程での作用機序の研究

肝化学発癌剤に遺伝的に抵抗性DRHラットの抵抗性機構を明らかにすることが本研究の目的である。DRHと感受性F344ラットのF1に3'-Me-DABを投与し、8週後、肝部分切除をおこない、さらに20週間観察後、肝発癌、前癌病変ならびに癌組織の抵抗性座位のLOHを検索した。肝部分切除は前癌病変の検索と腫瘍促進の目的をかねておかなわれたものであるが、(1)肝部分切除をおこなったF1 ratsは行わなかったものに対し、有意に発癌率、癌発生数が高くF344ラットと同等であった。すなわち、DRHの半優性抵抗性はprogression段階での肝部分切除によりepigeneticに抑制されることが示された。(2)また発生した肝癌では抵抗性遺伝子座Drh1,Drh2についてLOHを検出しなかった。これらのことから、Drh1,Drh2はいわゆる癌抑制遺伝子として作用しているのではないことが示された。DRH系はDABのみならず、AAF等構造の異なる発癌剤に対しても抵抗性を示す。N-nitrosomethylbenzylamineは肝で活性化され食道癌をおこす発癌剤であるがDRHはこれにも抵抗性を示した。しかし4NQO経口投与による舌癌には全く抵抗性をみとめなかった。このことから、DRHの遺伝的抵抗性には肝における発癌剤活性化が深く関わっているものと考えられた。2つの抵抗性座位の個別の作用を明らかにするため両座位に対するcongenic ratを作成し現在戻し交配6代日である。完成すれば前癌病変、発癌についてそれぞれの関与を定量的に評価するIn vivo実験を実施する。
ヴォルフラム『パルチヴァール』研究―ｔｒｉｕｗｅ（誠）概念の分析を通じて―

誠実(triuwe)という概念を分析するにあたり、原典であるクレティアンの『ペルスヴァル』との比較をおこなった。『パルチヴァール』では200回を超えて多用されるtriuweという語だが、古フランス語で書かれた原典には対応する語がほとんど存在しないことが分かった。ただしこのような改変は『パルチヴァール』に特殊なのではなく、ヴォルフラムに先立ってクレティアンの作品をドイツ語に翻案したハルトマンのの作品にもすでに同様の傾向がみられる。「誠実(triuwe)」をはじめとする騎士の美徳に関する叙述が独自に付け加えられているのである。またそれらの箇所は、騎士の資質が問われ主人公が挫折し再出発するという、形式的にも内容的にも作品のかなめとなる場面に登場する。ドイツの詩人たちは原典を忠実に直訳したのではなく、筋や語り手の言葉に改変を加え、新たな騎士像や作品観を示そうとしたのだと推測される。比較を進めると、騎士として非難されるべき状態が原典では「恥」や「愚か」と評価されたのに対し、『パルチヴァール』では「誠実や名誉の欠如」と結び付けられている。そして問題はその個人にとどまらず、その者が所属する共同体や王の「不誠実」「不名誉」となる。共同体の「名誉」を取り戻すために戦うという騎士社会の基本的な行動原理がドイツ語版ではより分かりやすく図式化されている。他方でtriuweという語の使用範囲は幅広く、その内容に揺れがある点はさらなる考察を要する。多くの騎士のtriuweが客観的に評価可能な行動規範であるのに対し、パルチヴァールに要求されているtriuweには具体的な輪郭がなく、全人格的な生来の資質として捉えられている。以上の分析を研究史の中に位置づけるため、ドイツで研究文献を収集した。騎士の美徳という中世文学の基本的テーマに関する研究は、着眼点が時代とともに大きく推移していることが分かった。28年度が最終年度であるため、記入しない。『パルチヴァール』において、triuwe(誠)という語は他の叙事詩と比べて非常に多く登場し、プロローグでは作品の主題だとも述べられている。用例が多く意味も幅広いため、まず以下の4点で分類・整理した。1)誰のセリフか、あるいは語り手か、2)誰のどのような性質か、3)他の道徳概念との関係、4)前置詞や、動詞との結びつき。同様の分類をハルトマン・フォン・アウエの『エーレク』と『イーヴェイン』についてもおこなった。その結果、ハルトマンでは大部分が「宮廷の美徳としてのtriuwe」であるのに対して、『パルチヴァール』ではそれに加えて親族間のtriuweと、異邦人や醜い者のtriuweが描かれたことが、注目される。第二に、アーサー王騎士の代表とされているガーヴァーンと、騎士の戦いのために死んだパルチヴァールの父ガハムレトの冒険部分について、triuweと名誉の問題を分析した。原典の『ペルスヴァル』や素材と目されている作品と比較した結果、『パルチヴァール』では「騎士道」の全面的な肯定が問題視されている、と推論された。第三に、ガーヴァーンの魔法の城の冒険エピソードについて、名乗りの拒否というモチーフとtriuweの問題を考察すべく、筋の論理関係と個々の人物造形を原典と比較しながら研究を進めている。2015年7月にはボン大学のエルケ・ブリュッゲン教授に面会し、先行研究の扱い方や問題設定についてアドバイスをいただいた。また西洋中世学会、日本独文学会、国際アーサー王学会日本支部で研究報告し、さまざまな分野の研究者と意見交換をおこなった。語「triuwe」の用例を分類・整理したことにより、『パルチヴァール』における語の扱いの特徴がより鮮明になった。なお得られた結果についての考察はまだ途上にある。夏期にボン大学の研究者からアドバイスを受けた。また、ボン大学図書館とドイツ国立図書館で道徳概念や素材に関する先行研究を入手した。

多くの騎士のtriuweが客観的に評価可能な行動規範であるのに対し、パルチヴァールに要求されているtriuweには具体的な輪郭がなく、全人格的な生来の資質として捉えられている。以上の分析を研究史の中に位置づけるため、ドイツで研究文献を収集した。騎士の美徳という中世文学の基本的テーマに関する研究は、着眼点が時代とともに大きく推移していることが分かった。第一に、用例分類によって浮き彫りになった『パルチヴァール』の特徴である親族のtriuweと異邦人のtriuweを分析する。第二に、騎士の道徳概念に関する先行研究を参照する。これまでの『パルチヴァール』研究がどのような前提や視点から行われていたのかを知り、本研究の立ち位置を明確にしたい。第三に、原典の『ペルスヴァル』と比較し、「第二の主人公」ガーヴァーン像を分析する。原典の『ペルスヴァル』はガーヴァーンの冒険の途中で未完に終わっており、ヴォルフラムは独自の終結部を創作している。それにさいして新しく準備された人物や筋の論理関係、また反対に削除された要素について詳しく吟味する。28年度が最終年度であるため、記入しない。
ＨＩＶによるＴ細胞脂質ラフト機能停止の抗ミリストイル基ダイアボディによる機能回復

独自に開発した抗ミリストイル基抗体を脂質ミセル存在下でミリストイル化されたHIV-Nefと混和すると、遠心してもHIV-Nefは脂質ミセルと共沈せず、この抗体がHIV-Nefと膜との相互作用を抑えることが分かった。次に、抗体ライブラリーを用いて、特異性が非常に高く、解離定数が10のマイナス9乗の抗HIV Nef抗体を開発した。この抗体に先の抗ミリストイル基抗体をつなげたダイアボディを作成した。これを用いて細胞膜を模した脂質ミセルとHIV-Nefとの相互作用の阻害実験を行った結果、プレリミナリーではあるが、HIV-Nefの膜への相互作用を抑えるという結果を得た。課題1ラフトの動的構成因子の同定(HIV-Nefが侵入するマイクロドメインの本来の動作の解析1)先に確立した手法により調製したJurkat細胞のラフトの構成タンパク質を網羅的に同定するための、ショットガンプロテオミクスの手法を確立した。本法によりラフトを構成する膜タンパク質の特性が分かった。2)Jurkat細胞を、マイトジェンとしてT細胞の活性化に用いられるphytohemagglutinin (PHA)、および、Proetein Kinase Cが関連する細胞内シグナル伝達系の下流を活性化し、T細胞に添加された場合はNF-kBパスウエイを活性化することが知られているPhorbol 12-myristate 13-acetate(PMA)で刺激した後、ラフトの構成因子を先に述べたショットガンプロテオミクスで同定した。これを未刺激の細胞の結果と比較することで、PHA/PMA刺激の前後で変化したラフト構成因子を特定した。課題2構成因子の1分子観察(HIV-Nefが侵入するマイクロドメインの本来の動作の解析機能を阻害しない部位を蛍光色素で標識したHIV-Nefを調製するために用いる部位特異的標識法でNefの合成量を確認したところ、充分量のサンプルが得られないことが分かった。そこで、Nef遺伝子のコドン使用頻度をサンプル調製系で用いる大腸菌のそれとあわせたところ、有意な合成量の増加を確認した。さらに、このようにした合成したリコンビナントNefをミリストイル化するための、in vitroミリストイル化の系を準備できた。課題1ラフトの動的構成因子の同定(HIV-Nefが侵入するマイクロドメインの本来の動作の解析1):先に確立した手法によりJurkat細胞のラフトを調製し、本研究室独自の二次元電気泳動法により解析を行った。その結果、顕微鏡観察では同じに見える細胞から調製したラフトのプロテオミクスデータ(二次元電気泳動画像)に違いが見出され、細胞の状態には通常の顕微鏡観察では分からない違いがあることが解った。そこで、細胞の培養方法を工夫することで、プロテオミクスのレベルでも同じ状態の細胞を調製する方法を構築した。課題2構成因子の1分子観察(HIV-Nefが侵入するマイクロドメインの本来の動作の解析2):機能を阻害しない部位を蛍光色素で標識したHIV-Nefを共同研究先から得て、これをリコンビナントNMT(ミリストイル化酵素)を用いて、in vitroでミリストイル化した。この蛍光標識HIV-Nefを、GFP融合型のラフトマーカー(LAT)を発現しているJurkat細胞に導入することで、HIV-Nefとラフトの共局在を観察した。他方、ミリストイル化されていないHIV-Nefもラフトへの局在が見られ、ミリストイル基依存的な移行以外のラフト局在メカニズムが存在する可能性が示唆された。課題3 HIV-Nefの機能を制御するダイアボディの開発:抗体ライブラリーを用いたHIV-Nefの標的化に使用する抗体の開発を行った。その結果、非常に結合力が強い抗体がひとつと、それよりは結合力が弱いと考えられる二つの抗体のクローニングに成功した。この抗体と、先にクローニングした抗ミリストイル基抗体をつなげたダイアボディを用いた、HIV-Nefの細胞内局在化の阻害による、AIDS発症の治療を試みる。他の対象では成功していた部位特異的標識が、HIV-Nefでは非常に難しいことが分かった。本研究では、共同研究により、無細胞タンパク質合成系を用いて充分量の部位特異的標識HIV-Nefを得ることが出来た。HIV-Nefの標的化に用いる抗体(抗HIV-Nef抗体)のクローニングに関しては、想定外の成功があり、当該抗体は、本研究以外にも非常に有用と考えられる。特異性が非常に高く(HeLa細胞の抽出物を用いた実験では非特異的な結合が全く見られなかった)、結合力の強い(KD10^-9)抗HIV Nef抗体の、抗体ライブラリーを用いたクローニングに成功した。この抗HIV Nef抗体は、当該研究開発でのエイズウイルス遺伝子産物の標的化に用いられる。他方、先にクローニングに成功していた抗ミリストイル基抗体とミリストイル化されたHIV-Nefと細胞膜を模した脂質ミセルを混和し、遠心操作を行うと、HIV-Nefは脂質ミセルとともに遠心管の底に沈むことはなく、液層に残存した。このことは、この抗体がHIV-Nefと膜との相互作用を抑えたことを示唆する。ミリストイル基によるミリストイル化タンパク質の膜へのつなぎとめの親和力はそれほど強く無い(KD=10-4:この弱い親和力がミリストイル基の生理機能には非常に重要なのである)ので、これを阻害するための抗ミリストイル基抗体の抗原(ミリストイル基)に対する

結合力は、KD=10-4より強ければ良く、通常の抗体の抗原に対する結合力ほどは強く無くて良い(強いと他のミリストイル化タンパク質に作用して副作用を生じる)。このとき、通常の動物免疫法では結合力が弱い抗体の取得が難しいが、申請者は抗体ライブラリーの技術を使って、すでに結合力の異なる複数の抗ミリストイル基抗体を取得済みである。本研究では、ミリストイル基に対する親和性がKD=10-6の抗体を使用することで、ミリストイル化タンパク質と膜との相互作用をブロックする。このコンセプトを証明するために、先の実験結果をふまえて、抗HIV Nef抗体に抗ミリストイル基抗体をつなげたダイアボディを作成した。これを用いて細胞膜を模した脂質ミセルとHIV-Nefとの相互作用の阻害実験を行った結果、プレリミナリーではあるが、HIV-Nefの膜への相互作用を抑えるという結果を得た。独自に開発した抗ミリストイル基抗体を脂質ミセル存在下でミリストイル化されたHIV-Nefと混和すると、遠心してもHIV-Nefは脂質ミセルと共沈せず、この抗体がHIV-Nefと膜との相互作用を抑えることが分かった。次に、抗体ライブラリーを用いて、特異性が非常に高く、解離定数が10のマイナス9乗の抗HIV Nef抗体を開発した。この抗体に先の抗ミリストイル基抗体をつなげたダイアボディを作成した。当初、プロテオミクスの手法として想定していた二次元電気泳動に加えて、よりラフト解析に適しているショットガンプロテオミクスの手法の開発に成功したことは、想定外の進歩である。他方、他のものでは成功していた部位特異的標識に、HIV Nefで問題(充分な収量を得られなかった)が生じたのは想定外であった。しかしながら、その問題も年度内に解決することが出来た。プロテオミクスに関しては、実験系の構築を終えた。本年度より、HIV-Nefの有無、また、細胞の状態に応じたラフト構成因子の変化を調べる。1分子観察に関しても、HIV-Nef、カルモジュリン、LAT(ラフトマーカー)相互の位置関係が、HIV-Nefの有無、また、細胞の状態に応じてどう変化するかを調べる。今回、標的化に用いる抗体の開発において、非常に高性能の抗HIV-Nef抗体のクローニングに成功したので、ダイアボディの作製を開始すると共に、その性能を評価系において調べる。分子生物学プロテオミクスに関しては、新たな手法をとりいれることにも成功し、想定以上に順調に進んでいるので、このまま、推進する。一分子解析に関しては、部位特異的標識分子の調製で想定外の問題が生じたが、その問題解決に概ね成功したので、当所の方針通りに進める。想定外の問題(部位特異的サンプルの調製に難航)が生じたことと、想定外の技術的な進歩があり一部解析方法に変更が生じたことで、当所の予定と差異が生じた。研究方針に変更は無いので、当該助成金は次年度以降の研究経費に組み込み、引き続き当該研究を継続する。
中国典籍日本古写本の研究

日本に伝存する古写本テキストは多くが隋唐期の写本に由来するものであり、かつ敦煌吐魯番写本がほとんど断簡であるのに比べ、しばしば完帙を伝えている点において大きな意義を有する。中国学の観点から、あたう限り中国古典籍の日本古写本を洗い出し、その所在、書写年代、伝承過程、形態、景印本の有無、先行研究などについて詳細な写本学的研究を行うとともに、本古写本に関する情報を統一的に整理し、中国典籍のテキスト研究に対して日本発信の権威ある目録を提示する。まず古写本の調査についていうと、2013年11月に愛知県豊田市郷土資料館において猿投神社所蔵漢籍(重要文化財指定)のうち『古文孝經』、『春秋經傳集解』、『論語集解』、『帝範』、『臣軌』、『史記』、『文選』の調査を、2014年1月に東京国立博物館において、その所蔵漢籍(国宝および重要文化財)のうちから『群書治要』卷22、卷31、『古文尚書』卷6、『王勃集』卷29、30、『劉子』殘卷、『帝範』上下、『蒙求』殘卷、『不空表制集』卷第1の調査を、研究代表者以下、分担者及び連携研究者、外国人研究協力者をふくむ全員で行ったほか、2013年及び2014年に代表者及び研究分担者が個別に台湾故宮博物院に赴き、同院所藏の楊守敬旧蔵写本の調査を行った。また研究成果の初歩的な公開及び研究課題にかかわる広報を目的として、東京国立博物館黒田記念館に場所を借り、ワークショップを開催した。およそ30名程度の出席者があり、活溌な質疑応答がなされた。このワークショップの発表内容は、「中國典籍日本古写本の研究」Newslatter No.1 (2014.7)として公刊した。研究代表者及び分担者はまた『敦煌寫本研究年報』第8號および、他の刊行物に研究成果を発表したほか、米国プリンストン大学、ロシア科学アカデミー東方写本研究所などの外国をふくむ学会において研究発表を行った。それぞれが收集した中国典籍日本古写本の書誌データは、将来データベースとして公開すべく、電子テキストとして蓄積されている。本年度の写本調査の主体は京都国立博物館の所蔵写本及び同館寄託の上野家所蔵写本であった。まず2014年12月19日に館蔵品である『世説新書』卷6残卷、『玉篇』卷9、『新撰類林抄』卷4、『大唐西域記』卷1、『南海寄帰内法伝』、『大慈恩寺三蔵法師傳』卷6、『続高僧伝』卷28(五月一日経)、『王勃集』卷28、『毛詩正義』秦風残卷、朱熹『論語集注』稿本、『玉篇』卷24断簡、手鑑「藻鹽草」、『広弘明集』卷13(中尊寺経)、『白氏文集』卷3、4を調査し、また2015年3月20日に上野家寄託品の吐魯番写本『三国志・呉志』残卷、『文選』卷1、『漢書・楊雄伝』、『不空表制集』、『白氏文集』卷4、『文選集注』卷48、『注千字文』、『文選』残卷、『文選・弁命論』、『古文孝経』残卷を上野家のご厚意により調査し得た。また同日、京都市所蔵の『毛詩・小雅』(実際には大雅)及び京博館蔵の守屋コレクション『内典隨函音疏』を同時に調査し得たことは幸いであった。2015年1月2930日に「敦煌學國際學術研討會・京都2015」を開催した。本科研費プロジェクトとしては、日本写本と敦煌写本との比較をテーマとすることで、共催のかたちででの参加であったが、国内外から50名に近い參加者(うち半数以上は中国をはじめとする外国学者)があり、日本古写本をふくむ古写本に関して活溌な議論が展開された。その成果は次年度に出版予定である。代表者の高田は湖北省博物館において楊守敬旧蔵写本の調査を行い、原本玉篇に関する重要な知見を得た。これについては再度確認調査を行った上で公表の予定である。古写本のデータは継続して蓄積されつつあり、2015年3月末の時点で880件の詳細な電子データが確保されている。本年度の写本調査の対象は主として宮内庁書陵部及び慶應義塾大学図書館の所蔵品であった。前者については、2015年11月18日、同30日、2016年1月12日に代表者及び分担者が三々五々同部を訪れて『史記范雎蔡澤列伝』、『陳書列伝』、『貞觀政要』、『古文孝経』、『苑詩類選』『李趙公集』などの中国典籍日本古写本の調査を行った。また2016年3月9日11日にかけて慶應義塾大学図書館および同大学付属研究所斯道文庫において同じく『遊仙窟』、『百二十詠詩注』、『駢驪句法』などの日本古写本を調査した。両者をあわせて約50点ほどの写本の調査を完了することができ、これらの調査結果をデータとして記録した。

また国外では台湾故宮博物院や大連図書館、さらに韓国の東国大学校などで日本古写本あるいは関連資料の調査収集にあたった。また日本古写本に関連する資料、とりわけ戦前期に公刊された覆製本などの收集につとめた。2015年1月29日30日に京都で開催された「敦煌學國際學術研討會・京都2015」の成果として、論文37篇を収録した論文集を『敦煌寫本研究年報』第10號(二分册)を公刊した。その電子版は近く以下のサイトで公開されることになっている。http://www.zinbun.kyoto-u.ac.jp/takata/chuseishahon.html過去一年間の研究成果は、学会において口頭発表するとともに、学術誌等に論文として掲載した。それらの一覧は別途掲出する。また研究成果を速報として広く一般に公開するために、ニューズレターの第二号を発行、配布した。古写本データは継続して蓄積されつつあり、2016年3月末時点で計928件の詳細(あるいは簡略)な電子データが確保されている。国内の写本調査はこれまでまず順調に進んでおり、データ化についても調査で実見したもの、二次資料からの転記によるよるものを含めて928件のデータを蓄積しており、将来のデータベース化の基礎が出来つつある。本年度の写本調査は、主として京都大学付属図書館所蔵の貴重書を対象として研究代表者及び分担者いより行われたが、また来年度の予備調査も兼ねて九州国立博物館でも調査を行った。前者については、2016年11月21日および2017年1月17日の両日、清家文庫の御注孝経(重文)、春秋左氏伝、尚書、大戴礼記、中庸、論語など、また新楽府、長恨歌伝、白氏長慶集など計21点の文献を実見し、写本学的調査を行うことができた。また九州国立博物館では、3月に晋書巻八十一の写本残巻及び唐詩残卷を調査し、前者については伝承に関する新たな知見を得た。また髙橋、道坂は台北の故宮博物館に赴いて楊守敬の観海堂旧蔵写本の調査を行い、玄は大連図書館、旅順博物館で古写本の調査を行った。図書館など所蔵機関の写本調査以外にも、古写本関連資料あるいは覆製本などの收集につとめた。研究成果の発信については、2016年9月に高田及び玄、永田がサンクトペテルブルクで開催されたロシア科学アカデミー東洋写本研究所主催のメンシコフ、チュグエフスキー記念「敦煌古写本」国際学術会議に出席し、論文の発表を行ったほか、学会発表あるいは学術誌等への寄稿のかたちで公開した。また研究成果の一般向け速報としてニューズレターの第三号を発行、配布した。その電子版は以下で見ることが出來る。http://www.zinbun.kyoto-u.ac.jp/takata/Kaken/NO3.pdf古写本のデータは継続して蓄積されつつあり、次年度にはそのデータベース化に取り組む計画である。国内の写本調査はまず順調に進んでおり、データ化についても調査で実見したものに加えて、二次資料からの転記を含め、千件近いデータの蓄積が見られ、データベース化の基礎が出来つつある。本年度の調査は、2018年1月30日に、研究分担者全員参加のかたちで東京国立博物館において国宝、重文の写本に対する熟覧調査を行い、中国から復旦大学歴史学系の余欣教授及び大学院学生2名もオブザーバー参加した。また分担者各人が個別に九州国立博物館(藤井)、秋田県中央図書館(玄)、愛知県一宮市木村家(高橋)、南京大学(道坂)、同志社大学(道坂)、石川武美記念図書館(道坂)などで写本調査を行った。研究成果の発信については、2017年12月3日に、高田をはじめ、研究分担者の永田、道坂、藤井、高橋、玄、田良島の全員が復旦大学(中国上海市)において日本所蔵古写本に関するワークショップを開催し、中国の研究者と意見交換を行った。當日の發表はすべて中国語で行われ、その題目は永田知之「京都的中國學家及其中國典籍日本古寫本研究」、道坂昭廣「王勃集佚文和王勃文學」、藤井律之「東京國立博物館藏淮南子兵略訓小考」、高橋智「關於南北朝期(14世紀)寫本《論語集解》」、玄幸子「關於市立米澤圖書館所藏《困學紀聞》20卷」、田良島哲「見於古筆手鑑的漢籍古寫本」、高田時雄「日本古代寫本是否存在過旋風裝?」であった。これら発表論文の日本語要旨はニューズ
子どもの被ばく線量を評価できる体液中RNAの探索と新規診断法の開発

平成30年度は前年度に引き続き、子ども期のマウスと大人期のマウスにおける被ばくによる生体影響と血清中で発現変化するmiRNAの解析を行った。大人期(8週齢)と子ども期(3週齢)のマウスC57BL/6NJcl雄にX線照射を行った。血算の結果、8週齢では1.0 Gy照射後6時間以降で、0.5 Gy照射12時間以降で白血球数の有意な減少が認められた。0.5Gy照射6時間以内では白血球数の有意な減少はなかった。また、白血球分画割合を調べたところ、リンパ球の著しい減少が確認された。一方、3週齢では8週齢と同様に1.0Gy照射後6時間以降で、白血球数の有意な減少が認められたが、0.5 Gy照射後24時間内では有意差はなかった。これらの結果は,0.5 Gy照射ではマウスの週齢によって白血球の放射線感受性が異なることを示唆している。そのほかの血算値については0.5Gy、1.0Gy照射後24時間以内で有意差はなかった。X線を0.5 Gyおよび1.0Gy照射したマウスから血清を採取し、miRNAマイクロアレイ解析を行ったところ、3週齢では非照射と照射後で2倍以上発現増加するmiRNAは272個存在した。8週齢では非照射と照射後で発現増加するmiRNAは8個存在した。これらのうちで8週齢と3週齢でともに発現増加するmiRNAは3個(mmu-miR-135a-1-3p、mmu-miR-1894-3p、mmu-miR-6969-5p)存在した。これらの3つのmiRNAは被ばく線量依存的に発現増加していた。一方、3週齢では被ばく線量依存性は確認できなかった。それゆえ、8週齢マウスの低線量被ばくマーカー候補となる可能性はあるが、本課題である子ども期に適した他のバイオマーカー候補の探索も引き続き行っていく。被ばくによって血中で発現変化するmiRNAバイオマーカー候補のスクリーニング(達成度100%)大人期と子ども期のともに発現変動するmiRNAは3個(mmu-miR-135a-1-3p、mmu-miR-1894-3p、mmu-miR-6969-5p)存在した。大人期のマウスにおいて被ばく線量依存性が確認されたが、子ども期では被ばく線量依存性が確認できなかった。今後は他の被ばくバイオマーカー候補の探索も引き続き行っていく。1被ばくによって血清中で発現変化したmiRNAのターゲットmRNA予測と関連パスウェイ解析2被ばくによって血清中で発現変化したmiRNAの由来臓器・細胞の特定を検討する。3miRNA以外の血清中non-coding RNAバイオマーカー候補の探索4既知バイオマーカーとの比較と診断能比較解析平成29年度は子ども期のマウスと大人期のマウスにおける被ばくによる生体影響と体液中で増加するRNAの探索を行った。本研究は弘前大学動物実験委員会の承認を得て行われた。得られた成果を以下に示す。13週齢(子ども期)と8週齢(大人期)のC57BL/6NJcl雄マウスX線照射(管電圧150 kVp、管電流20 mA、線量率1.0 Gy/min、遮蔽板:Al 0.5 mm + Cu 0.3 mm)を行った。X線0.5Gy、1.0Gy照射後の血球成分の被ばく影響を調べるため、赤血球数、ヘモグロビン濃度、ヘマトクリット値、MCV、MCH、MCHC、白血球数、血小板数を調べたところ、0.5Gy、1.0Gyともに8週齢では曝露3時間後以降で有意な白血球減少が認められたが、3週齢では有意差が認められなかった。ほかの血算値は被ばくによる変化はほとんどなかった。本解析により白血球の放射線感受性は3週齢より8週齢の方が高いことが明らかとなった。2X線0.5Gy、1.0Gy照射後の白血球分画の変化を調べるため、血液塗抹標本を作製しメイグリュンワルド・ギムザ染色を用いてそれぞれの白血球数の算定を行った。3週齢、8週齢ともに0.5Gy、1.0Gy照射後3時間の時点では白血分画に変化はみられなかった。8週齢では0.5Gy、1.0Gy照射後6時間でリンパ球分画の減少が認められたのに対し、3週齢では0.5Gy照射においてリンパ球分画の減少は認められなかった。本解析により大人期に比べて子ども期の0.5Gy照射6時間後における放射線への影響は乏しく、子どものリンパ球は大人に比べて放射線感受性が低いことを示唆している。3有意なリンパ球減少がみられないX線照射3時間後におけるその他の放射線被ばくバイオマーカー候補を調べるために、血清中miRNAの発現変動をマイクロアレイ解析によって行った。その結果、0.5Gyあるいは1.0Gy照射によって2倍以上血清中で発現上昇するmiRNAは8週齢では8個、3週齢では272個検出された。○子ども期のマウスにおける放射線被ばく影響評価(達成度100%)子ども期の被ばくによる生体影響を大人と比較して調べたところ、子どもの方が放射線被ばくへの感受性が低いことを示唆する結果を得た。このことはベルゴニー・トリボンドーの法則に合致しない重要な発券であった。

○血中で増加するmiRNAの網羅的スクリーニング(達成度100%)被ばく3時間後における子どもの血算解析ではほとんど有意差は認められなかったが、大人に比べて子どもの血清中miRNAの著しい変化が認められた。このことは子どもの被ばく影響評価に血清中miRNA解析が適している可能性を示唆するものである。本解析によって得られた成果は現在原著論文として報告する準備をしている。平成30年度は前年度に引き続き、子ども期のマウスと大人期のマウスにおける被ばくによる生体影響と血清中で発現変化するmiRNAの解析を行った。大人期(8週齢)と子ども期(3週齢)のマウスC57BL/6NJcl雄にX線照射を行った。血算の結果、8週齢では1.0 Gy照射後6時間以降で、0.5 Gy照射12時間以降で白血球数の有意な減少が認められた。0.5Gy照射6時間以内では白血球数の有意な減少はなかった。また、白血球分画割合を調べたところ、リンパ球の著しい減少が確認された。一方、3週齢では8週齢と同様に1.0Gy照射後6時間以降で、白血球数の有意な減少が認められたが、0.5 Gy照射後24時間内では有意差はなかった。これらの結果は,0.5 Gy照射ではマウスの週齢によって白血球の放射線感受性が異なることを示唆している。そのほかの血算値については0.5Gy、1.0Gy照射後24時間以内で有意差はなかった。X線を0.5 Gyおよび1.0Gy照射したマウスから血清を採取し、miRNAマイクロアレイ解析を行ったところ、3週齢では非照射と照射後で2倍以上発現増加するmiRNAは272個存在した。8週齢では非照射と照射後で発現増加するmiRNAは8個存在した。これらのうちで8週齢と3週齢でともに発現増加するmiRNAは3個(mmu-miR-135a-1-3p、mmu-miR-1894-3p、mmu-miR-6969-5p)存在した。これらの3つのmiRNAは被ばく線量依存的に発現増加していた。一方、3週齢では被ばく線量依存性は確認できなかった。それゆえ、8週齢マウスの低線量被ばくマーカー候補となる可能性はあるが、本課題である子ども期に適した他のバイオマーカー候補の探索も引き続き行っていく。被ばくによって血中で発現変化するmiRNAバイオマーカー候補のスクリーニング(達成度100%)大人期と子ども期のともに発現変動するmiRNAは3個(mmu-miR-135a-1-3p、mmu-miR-1894-3p、mmu-miR-6969-5p)存在した。大人期のマウスにおいて被ばく線量依存性が確認されたが、子ども期では被ばく線量依存性が確認できなかった。今後は他の被ばくバイオマーカー候補の探索も引き続き行っていく。平成30年度は平成29年度の課題を引き続き遂行するとともに、以下の課題を検討する。1網羅的スクリーニングによって得られた血清中miRNAの発現バリデーションを行う。2血清中miRNAが細胞外小胞内に存在するか明らかにする。また血清中において細胞外小胞の増加が認められるか調べる。3被ばくによって増加する血清中miRNAの由来臓器・細胞の特定を検討する。5侵襲性のない尿中miRNAバイオマーカーの探索を検討する。1被ばくによって血清中で発現変化したmiRNAのターゲットmRNA予測と関連パスウェイ解析2被ばくによって血清中で発現変化したmiRNAの由来臓器・細胞の特定を検討する。3miRNA以外の血清中non-coding RNAバイオマーカー候補の探索
サイトメガロウイルス胎内感染による脳形成障害の実験奇形学的研究

CMVの胎内感染によって生後になぜ障害が中枢神経系に限局して生ずるのか明らかでない。発育期の異なるマウスのMCMV感染に対する感受性を、尿中MCMVの放出を指標にした全身の感受性、および、ウイルス抗体を用いた免疫組織化学的方法による中枢神経系を含めた臓器別の感受性を解析した。1)発育期の異なるマウスへのMCMVの感染による尿中MCMVの放出MCMVは、1X103PFU/μ1のウイルス価で、各発育段階におけるマウス胚および生後のICRマウスへ以下のように感染を行った。a:胎令8.5日の羊膜腔内、b:胎令15.5日胚の腹腔内、c:生後2日目の腹腔内、d:生後11日目の腹腔内、e:生後30日目の腹腔内を注入した。尿中MCMVの検出はマウス胎児線維芽細胞(MEF)を用いたプラークアッセイ法で行った。胎令15.5日胚にMCMVを腹腔内に注入したマウスでは、生後10日目ころ尿中MCMVの放出が強く次第に減少して、生後23日まで認められた。生後2日目にMCMVを腹腔内投与したマウスでも同様の傾向を示した。一方生後30日目にMCMVを腹腔内投与したマウスでは尿中MCMVの放出は殆ど認めなかった。以上の結果は幼弱なマウスほどMCMVの尿中放出が強くこのウイルスに対する感受性が高いことを示している。2)発育期の異なるマウスへのMCMVの感染による脳および一般臓器の感受性の比較発育段階の異なるマウス胚および生後のマウスに上記のごとくMCMVを感染させ、脳および一般臓器(肺、肝臓、腎臓)におけるウイルス陽性細胞の分布を免疫組織化学的に調べた。生後あるいは感染後14日目では、E15.5およびPn2群のマウスのみ脳および肺、腎臓にウイルス抗原陽性細胞を認め、E8.5、Pn11およびPn30群のマウスでは認めなかった。ウイルス抗原は脳においては、大脳皮質および海馬の神経細胞とみなされる細胞に主として限局して認められた。生後あるいは感染後30日目では、E8.5群のマウスにおいて大脳皮質および海馬にウイルス抗原陽性細胞の小さなクラスターを散在性に認め、肺、肝および腎臓では検索した限りでは認めなかった。以上の結果は、発育期(胎生期および周産期)のマウスの大脳皮質および海馬の神経細胞はMCMVへの感受性が高く、生後比較的長時間残存する傾向を示すことが明かになった。発育期マウス脳の神経前駆細胞の大脳皮質への移動および定着に及ぼすマウスサイトメガロウイルス(MCMV)感染の影響を解析:

1)ICRマウスを交配させ、胎令14日目および胎令15日目に右側の子宮の胎仔脳室内にMCMV 2X10^3 PFUを、左側の子宮の胎仔脳室内にMEMを手術的に注入し、胎令15日目に5-bromo-2'-deoxyuridine(BrdU)25mg/Kg体重の割合に母親の腹腔内に投与し、胎令18日目に胎仔脳を固定し、大脳前額断で組織標本を作成した。MCMV投与胎仔脳はMEMを注入した対照群と比較して、側脳室の拡大、大脳皮質の菲薄化が認められ、BrdU標識細胞のcortical plate (CP)への移動が有意に抑制された。しかし、この時期においてウイルス抗原陽性細胞は側脳室内の脈絡叢内に目だち、脳室壁,internediate zone(IZ),CPには殆ど認めなかった。2)胎令14日目あるいは15日目に同様にウイルスおよびMEMを投与し、胎令15日目の母親の腹腔内にBrdUを投与して生後まで生育させた哺乳マウスの脳を同様に解析した。生後7-9日目において、ウイルス抗原が認められる大脳皮質の部分において,BrdU標識細胞の大脳皮質表層から深層へのup-side downの移動が抑制される傾向を示した。サイトメガロウイルス(CMV)の胎生期の感染によって小頭症などの脳形成障害あるいは機能的脳障害がが生ずることが知られている。私達はマウスを用いた動物実験モデルで、胎生期のCMVの感染によって如何に脳形成障害が生ずるか解析している。ICRマウスを交配し、膣栓の認められた日を0日とし、妊娠15.5日に右の子宮の胎仔脳室内にマウスCMV(MCMV)を1X10^3PFU注入し、左の子宮の胎仔脳室内にMEMを投与し、胎令18.5日および生後7日のマウス脳をBrdUおよびウイルス抗原陽性細胞の分布を解析した。生後においては、体重増加が少ないマウス脳においてのみウイルス抗原陽性細胞を認めた。生後7日目の新生マウスにおいては、ウイルス抗原陰性群(27匹)の体重5.17±0.67g、脳275±23.6mg、ウイルス抗原陽性群(15匹)の体重3.95±1.03g、脳重量249.5±37.0mgと有意の差が認められた。BrdU標識細胞を抗BrdU抗体で反応し、アルカリフォスファガ-ゼで青く発色、ウイルス抗原を抗ウイルス抗体と発色させ、カルバゾールで赤く発色する二重染色の解析を行った。その結果、1)胎令15.5日にMCMVを脳室内に注入し、3時間後に母親の腹腔内にBrdUを投与すると、BrdU標識細胞は常に先行して大脳皮質表層へ移動し、ウイルス抗原陽性細胞がその内側に認められた。しかし、BrdUとウイルス抗原の二重染色される細胞が5%ほど大脳表層に認められ、感染細胞がmigrationすることを直接示した。また、ウイルス感染脳においてBrdU標識細胞が有意に減少することを示した。ウイルス抗原と神経組織特異抗原であるneuronspecitic emolase(NSE)およびGFAPの二重染色で、ウイルス抗原陽性細胞は神経細胞であることを示した。
ロール・ツー・ロール印刷技術による大面積MEMSに関する研究

近年の情報技術の発展に伴って、柔軟で、かつ、持ち運びが可能な大面積画像ディスプレイの需要が高まっている。研究代表者らはこれまでに、プラスチック・フィルムをロール・ツー・ロール印刷技術を用いてMEMS加工することで、静電駆動型のファブリ・ペロ干渉計アレイを製作し、それをもちいて白色光源から赤、青、緑の3色の光を選択的に透過するカラーピクセル型の画像ディスプレイを開発してきた。この研究では、厚さ16μm程度のPENフィルム上に、グラビア印刷やフレキソ印刷を用いてマイクロパターンを形成し、それらのインクをモールド(鋳型)としたリフトオフ型の金属パターン形成を実施した。しかしながら、従来のこの方法ではパターンの変更の度に印刷用のロール原盤を加工し直す必要があり、多品種少量型のMEMSプロセスとの整合性が悪いことが課題であった。そこで本研究では新たに工業用のインクジェットプリンタを用いてCAD上で設計した任意のマイクロパターンをプラスチック・フィルム上に印刷で形成し、それによってスループットの高い印刷MEMSプロセスを実現した。また、プラスチック・フィルム表面におけるインクの濡れ性について調べ、テフロン系の膜を選択的に薄膜堆積することでフィルム表面の親水性/疎水性の別を制御して、パターン精度と分解能を改善することができた。さらに、圧電ポリマーであるPVDFフィルムの上に金属電極パターンを形成し、外部から印加した応力によって発電するパワーMEMS素子を学内他研究室との共同研究により開発した。本研究の最大の課題であった、インクジェット印刷によるマイクロパターンの精度、解像度に関して、対象となるプラスチック・フィルム表面の改質によって親水性と疎水性の制御が可能となり、従来の問題を克服した。この成果は、平成23年度中に学術論文として投稿し、すでに掲載されている。また、副産物的な研究成果として、応力から発電する圧電ポリマーを用いたパワーMEMSデバイスの試作に成功した。本件は国際会議発表論文としての採択が決まっている。本研究によって、MEMS構造の鋳型となるリフトオフ・パターンがインクジェット印刷によって可能であることが示された。今後は、リフトオフ・プロセスの対象となる材料の選択肢を増やすとともに、そのスループット(プロセスに要する時間)を改善する必要がある。本研究では、従来の半導体プロセスに依存したマイクロマシニング技術では対応できない大面積(幅数十cm)に渉るMEMS(Micro Electro Mechanical Systems)デバイスを製作するための技術として、インクジェット印刷プロセスによるマイクロ加工を検討した。研究代表者らは、平成21年度以前にはグラビア印刷やフレキソ印刷を用いたロール・ツー・ロール型の印刷技術によって大面積MEMSを加工する方法を開発した。しかしながら、この方法ではMEMS設計変更に応じて、その都度印刷原盤を変更する必要がある。そこで今回は新たに工業用インクジェット・プリンタを導入し、これを用いて半導体プロセス用のフォトレジストやその他の有機系材料を射出塗布することで、機械的に柔軟な薄いプラスチックフィルム材料の上に印刷解像度100μm程度の微細パターンを形成することに成功した。また、インクジェット印刷前のフィルム表面にC4F8系のテフロン材料をプラズマ堆積することで表面状態(疎水/親水)を調べ、系統的な印刷条件を確立した。また、この製造手法に基づいたフィルム型の静電アクチュエータ構造を設計し、より低い電圧で駆動するための設計手法とプロセス手法を見いだした。これらの成果に基づき、静電駆動ファブリ・ペロ干渉計型のカラーピクセルを製作し、大面積フレキシブルディスプレイへの応用を検討する実験を行った。
低温STMによる強相関物質の本質的不均一性および局在性に関する研究

本研究では、高温超伝導体に特徴的な異常が現れる強い不足ドープ状態の性質を低温STMを用いて調べることが主要な目標であった。はじめに、低温STMでバルクの性質を反映するデータを得るには、碧開性の優れたBi系の高温超伝導体を用いる必要があるが、この物質のキャリア制御は困難であった。本研究では、低酸素雰囲気下での熱処理と、SrサイトへのBiの置換を利用してTc20K程度のBi-2212試料の作成に成功した。低温STMでこの試料を含む広い範囲のキャリア濃度の状態密度分布・超伝導ギャップ分布を測定したところ、(1)状態密度上には、不足ドープ領域ではTcに比例するエネルギースケールが存在しないこと、(2)分解寸前まで過剰酸素を減少させた試料では、超伝導ギャップの不均一構造が消失する場合があること、を明らかにした。さらに、(1)ではTc=0の不足ドープ試料を含め、状態密度をギャップ値でスケールすると、広いキャリア濃度範囲でその形状が不変であることも示した。(2)の結論は、不均一構造が過剰酸素の存在によるものであるという仮説を支持する結果である。本研究では、さらに、不純物効果によりTcを減少させ、不足ドープ状態で起こる現象との差異を探る実験を行った。キャリア数を一定に保ちながら、Cuの一部をCoで置換して状態密度の変化を低温STMで測定した。その結果、不純物でTcを下げた場合でも、擬ギャップ状態が現れることを確認した。従って、擬ギャップの起源は、何らかのオーダーに伴う異常ではなく、電子系の局在化による可能性が高いことが示唆される。擬ギャップと局在の関係を調べるため、超伝導にならないが低温で電子局在を起こすBi系Co酸化物の低温STM測定を行った。この系では銅酸化物と類似の擬ギャップ構造が観測されること、また電荷秩序を思わせる特異な変調構造が観測されることが分かった。今年度は、1.(a)2台目の低温STM装置の立ち上げ、(b)電気抵抗などの超伝導特性測定装置の整備、といった実験設備の整備を重点的に進め、平行して、2.本計画の研究目標である金属-絶縁体転移と不均質状態の関連について研究を進めた。項目1の実験設備の整備に関しては、2台目の低温STM装置を稼動状態にすることには成功した。しかしながら、まだ定常的に液体He温度域で測定を行うには問題があり、今後順次問題を解決してゆく予定である。電気抵抗などの測定に関して、日常測定が可能になった。項目2に関しては、現在Bi系Co酸化物およびBi系高温超伝導体のBi-2223を中心にその低温STM測定や輸送測定を進めている。途中経過であるが、現状について簡単にまとめると次のようになる。Pbを添加しないBi系Co酸化物についてはSTM測定に成功し、Bi-O面と思われる格子像を得ている。低温下では、この格子像に十畳して、周期や方向の異なる3種類のストライプ状の凹凸構造が観測された。これらは、対称性からCo-O面の何らかの不均一、例えばストライプ状の電荷分布を見ているものと思われる。これは、低温STMによる初めての発見である。一方、電子状態密度はほとんど均一であり、高温超伝導体のような不規則な不均一状態は見られなかった。状態密度には、比較的強く温度依存する擬ギャップ状の構造が発見された。これは、電子系局在化の兆候と思われる。以上の点は、今後詳細な実験により確認する予定である。

Bi-2223については、超伝導ギャップの空間分布の測定を進め、Bi-2212に比べて不均一状態が弱い可能性が高いことがわかった。この点についても、両電子系を比較しながら詳細な研究を進める。今年度は、昨年度に引き続き(1)Bi系Co酸化物、(2)Bi系高温超伝導体の研究を行い、さらに(3)MgB2超伝導体の研究を開始した。(1)Bi系Co酸化物については、低温STM測定から、電荷ストライプに対応する不均一状態が存在する可能性を指摘した。今期の研究では、その存在を確認すべく、a.統計性を上げるため多くの試料での測定、b,不均一状態が電子起源か、Bi-O面変調構造の様な格子起源によるかを判断するためキャリア数(電子数)を減少させる試み、を行った。a.多くの試料による測定の結果、3種類の密度波のうち2つについては存在に確証が得られたが、1つは、まだ確認できていない。一方、b.キャリア数を減少させる試みは成功し、常温から絶縁体になる試料が作成できた。これにより不均一状態の変化が確認できたが、不均一が電子起源か、格子起源かに関しては確証を得るに至っていない。(2)高温超電導体に関しては、最適ドープBi-2223の不均一状態の観測に成功し、同じ最適ドープBi-2212に比べてはるかに不均一が小さいことが明らかになった。これは、伝導層の次元性の増加と矛盾せず、高温超伝導におけるgapの不均一は、超伝導転移温度を減少させる可能性が高いことがわかった。以上の成果は、2007年春の物理学会で発表した。また、Tcより高い温度で状態密度に観測される擬gapも不均一を示すことが知られている。Tcの低い強くunderdope試料の作成に成功し、Tcより十分高い温度で測定が可能になり、そこでは擬gapの不均一が見られないことがわかった。従って、擬gapの不均一は、超伝導gapの不均一の為に間接的に生じた現象である可能性が指摘される。Bi系Co酸化物のBi2Sr2Co20x(BC222)の電子状態の低温STMによる評価を行った。その結果、幾つかの重要な知見が得られた。BC222はBi-0面で劈開するが、劈開面には2種類の超構造を伴うBiの格子が観測された。それぞれの超構造は、TEM観測の結果と一致し、これにより実空間上の変調パターンが確認できた。それに加え、Co-0に由来すると思われるストライプ状の構造も観測され、同時に状態密度には強く温度依存する擬ギャップ構造が現れることが明らかになった。擬ギャップは、温度低下と共に急激に成長する。これらは、何らかの秩序状態の形成により引き起こされた変化と考えられる。電気抵抗の変化からも予測される、CDWやSDWの形成と矛盾しない。Bi系銅酸化物高温超伝導体のBi25r2CaCu208+xは、酸素量xを変化させることによりキャリア量を変化させることができるが、Tcの低いunderdopeの試料を作るのは困難であった。我々は、Bi/Sr比の制御や精密な酸素分圧制御を行い、dope量の非常に少ない試料の製作に成功した。低温STMにより試料の超伝導/擬gapを調べたところ、超伝導gap状の構造はほとんど消失していた。その結果、gapの空間分布における最小値がTcを決定するのではないことが判った。擬gap状態でも超伝導を担っていることは確実と見られる。また、Tcの2倍程度高い温度では、擬gapの不均一分布が非常に少なくなる傾向が見られた。
X^<(2)>周期構造を持つガラス導波路/ファイバの研究

紫外光ポーリング(紫外光照射+高電場印加)によりガラス材料に誘起される2次光非線形性に関して、材料科学に基づく微視的な観点に立脚した基礎からのアプローチを研究の基本方針とし、構造または物性変化を決定する因子、光非線形性を決定する因子などについて、それらの機構解明を行った結果、多くの重要な新しい知見を得た。以下に主な研究成果を示す。◎ゲルマニウム添加シリカ・ガラス材料の紫外光ポーリングによって、波長変換のために求められる光非線形性が、LiNbO_3結晶でのd_<22>係数を越える大きさまで誘起されることを初めて見い出した。◎紫外光ポーリング電場の増大による光非線形性の増大と、ポーリングの際に生じる吸収スペクトル変化の間に強い相関が認められることを初めて見い出した。光非線形性の発現に、欠陥が大きな寄与を及ぼすことを示しており、さらに、主要な欠陥を示唆する極めて重要な最初の実験例である。◎紫外光ポーリングにより誘起される光非線形性と光吸収の両者の緩和過程を調べ、次に示す重要な結果を得た。1)紫外光ポーリングにより誘起される光非線形性の緩和過程が単一指数関数型に良く合致しており、非線形性の起源が単一の起因によることを明確に示している。2)緩和過程の温度依存性について測定を行い、光非線形性の活性化エネルギーが、光吸収から求められるGeE'と呼ばれている欠陥の活性化エネルギーと極めてよく一致することを見い出した。これは、ガラスに誘起される2次光非線形性の発現に主要な寄与を及ぼす欠陥構造がGeE'であることを明確に示唆している。◎非線形性の周期構造形成のために用いる光学干渉系を設計・構築し基本測定を行った。発現する光非線形性により干渉縞のシフトが観測され動作電圧の定量的評価が可能となった。
1か月児を育てている母親の子育て到達度を測定する尺度の開発

本研究の目的は、およそ産褥1か月の時点での母親の子育ての到達状況を明らかにする尺度を開発することである。平成15年度:30名の産後1か月の母親のインタビューから、産後1か月の子育ての到達状況として《育児の実践》《子どもとの捉え方》《子どもの泣きへの対処》《支援者の存在》《現在の気持ち》の5つカテゴリーが導き出された。この5つのカテゴリーをもとに、25項目からなる「子育ての到達状況を測定する質問紙」を作成した。平成16年度:271名の質問紙調査の結果から以下のことが明らかとなった。構成概念妥当性の検証のため、主因子法、プロマックス回転による因子分析を行った。その結果、第1因子「育児への自信」、第2因子「体調不良」、第3因子「支援者の存在」、第4因子「育児の実践」が抽出された。さらに25項目中、因子負荷量が低い7項目を除外した18項目を用いて併存妥当性、信頼性係数を求めた。質問紙の併存妥当性を検討するために、「子ども総研式育児支援質問紙」の得点と本質問紙18項目の合計得点との相関係数を求めたところr=-0.68(P=0.001)であった。今後の課題は、再度質問項目の見直しを行い、尺度の信頼性、妥当性を高めることである。産後1か月の母親の育児技術の習得状況を明らかにするために、産褥1か月健診を受診する30名の母親に30分程の半構成的な面接を行った。分析は、母親たちの語った内容を逐語録化し読み込み、母親の育児にまつわる状態を帰納的に抽出した。移行期である1か月の間におむつ交換、着替えは9割、ほ乳瓶の扱いは全員の母親ができ、おむつ交換は6割の母親が入院中にマスターしていた。沐浴を実施する母親の7割は、できていると回答していた。これらの技術習得は、母親が育児を実施することで、子どもの扱いに怖さが無くなり、子育てに手慣れた感覚を持ち、できるという感覚を持てるようになっていた。子どもの栄養では、母乳栄養は7割の母親ができていると回答し、抱く、吸わせる、なだめて飲ませる感覚がつかめてきたらできるようになっていた。混合栄養の場合、母乳量不足の判断、人工乳を補う量、搾乳について判断しかねていたが、入院中から混合栄養だった母親は、入院中からできていたと回答していた。子どもの栄養は、乳汁分泌の状況、吸わせやすい乳首か否かによって左右されていた。子どもが泣く原因は、7割の母親が大体予想が付く状態になっていた。子どもの泣きに対して家族のアドバイスを受け、予想を立て、子どもをよく見、泣き方の違いに気づき、対処できるようになっていた。子どもの健康状態について9割近くの母親は、皮膚の状態、くしゃみ、飲みの様子、体温測定など視覚的情報から判断していた。9割の母親が子育てや自分のことを相談できる対象を持っており、特に実母に対しては、自分を育ててくれたことを認め、子育ての先輩として尊敬するようになっていた。7割の母親は家族に家事を頼み、休養を確保していた。休養より上の子への対応や家事を優先させている1割の母親は休養が困難であった。休養が取れている母親は、健康状態を良好ととらえ、これらの母親は気持ちの休まりやゆとりを持てていた。目的:産後1か月の母親の子育てに関する状態を明らかとする質問紙を開発すること。方法:平成15年度の結果から、5カテゴリー、25項目の「産後1か月の母親の子育て到達度質問紙(案)」を作成した。5月に産褥1か月健診を受診した母親5名にプレテストを実施した結果、本質問紙の回答に対して、質問項目のわからなさ、回答のしにくさは認められなかった。回答に要する時間は、23分であった。本調査:質問紙配布期間:7月9日12月28日。配布対象:研究協力の得られた5施設の産後1か月健診を受診する母親500名。

配布手順:研究協力依頼を研究者、もしくは外来の看護職、あるいは受付担当者が口頭と書面で行い、承諾の得られた母親に手渡した。回答は、診察の待ち時間、診察後に行うように依頼した。分析方法:構成概念妥当性のため主因子法、プロマックス回転を用いた因子分析を行った。併存妥当性の検証には、育児困難感を測定する尺度である「子ども総研式育児支援質問紙」を用い相関係数を求めた。信頼性の検証にはCronbach α係数を算出した。結果:質問紙配布総数500部、回収部数479部(回収率95.8%)。作成した質問紙すべてに回答し、1か月健診の時期が、産後28日から35目までの271部(有効回答率56.6%)を有効回答とした。因子分析の結果、4因子が抽出され、因子名とCronbach α係数は以下の通りである。第1因子「子育てへの自信」(.799)第2因子「体調不良」(.630)第3因子「支援者の存在」(.567)第4因子「育児の実践」(.705)。因子負荷量が低い7項目を除外した18項目のCronbach α係数は.676であった。基準関連妥当性のため、育児の困難感を測定する「子ども総研式育児支援質問紙」との相関係数を求めた結果、Pearsonの相関係数は、-0.68(P=0.001)であった。考察:今回作成した質間紙は、項目数が少なく、産後の母親への負担は少ない。第1因子「子育てへの自信」については、内的一貫性が支持された。結論:質問紙としては、さらなる洗練が必要である。