hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ジオメトリー効果による異方的超伝導体の対称性および磁化機構の研究

強電子相関物質の一つであるSr_2RuO_4は,NMRのナイトシフト測定およびμSRから,その超伝導状態では時間反転対称性の破れた2成分の秩序変数が縮退したスピン三重項状態が実現していると考えられている.さらに,超伝導秩序変数の縮退のため,強磁性の磁区構造に似たドメイン構造を作る可能性が以前から示唆されていたが,近年Polar-Kerr効果の測定によって,大きさが50-100μm程度のドメイン構造を直接観測された.本研究ではSr_2RuO_4を報告されているドメインサイズよりも小さい数10μm程度のサイズに超音波破砕機および,集束イオンビームFIB(FIB)を用いて加工してSr_2RuO_4の多重連結リングを作製し,磁場中電気抵抗測定によるリトルパークス振動の観測行ない,超伝導ドメインが与える影響を調べることを第一の目的としている.本研究で使用したSr_2RuO_4単結晶試料(超伝導転移温度Tc=1.42K)はフローティングゾーン法によって作製し,試料の微細加工後はマイクロサンプリングプローブと呼ばれる非常に細いガラス棒でSi基板にのせ,Gaイオンビームを照射することでタングステンを層状に堆積させることができるデポジッションによって4端子電極を形成し,磁場中の電気抵抗測定を試みた.その結果,磁場を[001]方向に印加した場合,磁場によって電気抵抗が振動する現象は観測された.しかし,技術的な問題点もあり,この振動が本質的なものか,はっきりとした結論が得られていない.一方,リトルーパークス振動測定と並行して行った弱磁場領域(H//[001])の精密磁化測定から,以下のような結果を得た.すなわち,弱磁場領域では,ヒステリシスの大きさが磁場勾配に依存し,磁場勾配を大きくするにしたがって,ヒステリシスが小さくなる.この現象は,他の第II種超伝導体ではこれまで観測されていない現象であり,Sr_2RuO_4において初めて発見されたものである.我々は,超伝導秩序変数が2成分あることに起因している現象と考えている.強電子相関物質の一つであるSr_2RuO_4は,NMRのナイトシフト測定およびμSRから,その超伝導状態では時間反転対称性の破れた2成分の秩序変数が縮退したスピン三重項状態が実現していると考えられている.さらに,超伝導秩序変数の縮退のため,強磁性の磁区構造に似たドメイン構造を作る可能性が以前から示唆されていたが,近年Polar-Kerr効果の測定によって,大きさが50-100μm程度のドメイン構造を直接観測された.本研究ではSr_2RuO_4を報告されているドメインサイズよりも小さい数10μm程度のサイズに超音波破砕機および,集束イオンビームFIB(FIB)を用いて加工してSr_2RuO_4の多重連結リングを作製し,磁場中電気抵抗測定によるリトルパークス振動の観測行ない,超伝導ドメインが与える影響を調べることを第一の目的としている.本研究で使用したSr_2RuO_4単結晶試料(超伝導転移温度Tc=1.42K)はフローティングゾーン法によって作製し,試料の微細加工後はマイクロサンプリングプローブと呼ばれる非常に細いガラス棒でSi基板にのせ,Gaイオンビームを照射することでタングステンを層状に堆積させることができるデポジッションによって4端子電極を形成し,磁場中の電気抵抗測定を試みた.その結果,磁場を[001]方向に印加した場合,磁場によって電気抵抗が振動する現象は観測された.しかし,技術的な問題点もあり,この振動が本質的なものか,はっきりとした結論が得られていない.一方,リトルーパークス振動測定と並行して行った弱磁場領域(H//[001])の精密磁化測定から,以下のような結果を得た.すなわち,弱磁場領域では,ヒステリシスの大きさが磁場勾配に依存し,磁場勾配を大きくするにしたがって,ヒステリシスが小さくなる.この現象は,他の第II種超伝導体ではこれまで観測されていない現象であり,Sr_2RuO_4において初めて発見されたものである.我々は,超伝導秩序変数が2成分あることに起因している現象と考えている.強相関系における超伝導体はその多くで非s波の異方的な対形成が見られることから,精力的な研究がなされている.強電子相関物質の一つであるSr_2RuO_4は強い二次元性を持ち,そのフェルミ面の形状およびフェルミ液体的な性質はすでに詳細にわたって調べられている.また,NMRのナイトシフト測定およびμSRから,その超伝導状態では時間反転対称性の破れた2成分の秩序変数d(k)=d_0(sinak_x±isinak_y)zが縮退したスピン三重項状態が実現していることが確実視されている.さらに,超伝導秩序変数の縮退のため,強磁性の磁区構造に似たドメイン構造を作る可能性が以前から示唆されていたが,近年Polar-Kerr効果の測定によって,大きさが50-100μm程度のドメイン構造を直接観測した報告もある.

本研究ではSr_2RuO_4を報告されているドメインサイズよりも小さい数10μm程度のサイズに超音波破砕機および,集束イオンビームFIB(FIB)を用いて加工してSr_2RuO_4の多重連結リングを作製し,磁場中電気抵抗測定によるリトルパークス振動の観測を試みた.Sr_2RuO_4の超伝導特性である,時間反転対称性の破れや秩序変数の縮退がリトルパークス振動に与える影響を調べることが目的である.また,試料サイズが報告されているドメインのサイズより小さいため,シングルドメイン構造になる可能性があるので,磁場印加によって秩序変数偽(k_x±ik_y)z間の縮退を解くことにより,2ドメイン間のダイナミクスに関する情報が得られる可能性も考えている.本研究で使用したSr_2RuO_4単結晶試料(超伝導転移温度T_c=1.42K)はフローティングゾーン法によって作製した.試料の微細加工後はマイクロサンプリングプローブと呼ばれる非常に細いガラス棒でSi基板にのせ,Gaイオンビームを照射することでタングステンを層状に堆積させることができるデポジッションによって4端子電極を形成し,磁場中の電気抵抗測定を試みた.現段階では,超伝導転移の観測には成功したが,技術的な問題点もあり,2ドメイン構造に起因した現象の観測にはいたっていない.強電子相関物質の一つであるSr_2RuO_4は,NMRのナイトシフト測定およびμSRから,その超伝導状態では時間反転対称性の破れた2成分の秩序変数が縮退したスピン三重項状態が実現していると考えられている.さらに,超伝導秩序変数の縮退のため,強磁性の磁区構造に似たドメイン構造を作る可能性が以前から示唆されていたが,近年Polar-Kerr効果の測定によって,大きさが50-100μm程度のドメイン構造を直接観測されている.本研究ではSr_2RuO_4を報告されているドメインサイズよりも小さい数10μm程度のサイズに超音波破砕機および,集束イオンビームFIB(FIB)を用いて加工してSr_2RuO_4の多重連結リングを作製し,磁場中電気抵抗測定によるリトルパークス振動の観測行ない,超伝導ドメインが与える影響を調べることを目的としている.現段階では,超伝導転移の観測には成功し,磁場を[001]方向に印加した場合,磁場によって電気抵抗が振動する現象は観測されてはいるが,技術的な問題点もあり,この振動が本質的なものか,あるいは,超伝導ドメインの影響の有無については,はっきりとした結論が得られていない.本年度は,リトルーパークス振動測定と並行して弱磁場領域(H//[001])の精密磁化測定も行ない,以下のような結果を得た.すなわち,弱磁場領域では,ヒステリシスの大きさが磁揚勾配に依存し,磁場勾配を大きくするにしたがって,ヒステリシスが小さくなる.この現象は,他の第II種超伝導体ではこれまで観測されていない現象であり,Sr_2RuO_4において初めて発見されたものである.我々は,超伝導秩序変数が2成分あることに起因している現象と考えている.
暑熱ストレスを受けた鶏の脳内アミン動態の解析

本研究では暑熱に対する鶏の反応性が飼育環境や加齢によって変動することを、種々の不快刺激下における脳内アミンおよびペプチドの動態を把握することにより解析することを目的とした。本年度においては、情動反応に関してアミンと密接な関係にある脳内β-エンドルフィン動態に及ぼす飼料摂取行動の影響を解析するために以下の実験を行った。【目的】大脳および間脳におけるオピオイドペプチドであるβ-エンドルフィン濃度に及ぼす給餌方法の違いがもたらす影響を検討した。【方法】実験には放卵状況が安定している白レグ系産卵鶏(200400日齢)32羽を供試した。光線管理は8時点灯の14L10Dとし、環境温度を20°C恒温とした。8時に飼料要求量を一括で給与した一括給餌区と、8時、11時30分、15時および18時30分に当分割給与した分割給餌区を設けた。慣熟飼育の後に9時、14時、20時および2時に供試鶏を断頭屠殺し、脳を摘出した。大脳と間脳部位のβ-エンドルフィン濃度を高速液体クロマトグラフィー電気化学検出器法で分析した。【結果】大脳のβ-エンドルフィン濃度に一括給餌区で光線明暗間の差は認められなかったが、β-エンドルフィン濃度は14時に最も低く、20時に最も高い値を示した。分割給餌区で、β-エンドルフィン濃度は14時に高い値を、20時に最も低い値を示した。間脳のβ-エンドルフィン濃度は、一括給餌区で明期に時間経過的に上昇し、20時に最高値に達し、暗期に明期の半分の水準まで低下した。以上の結果、飼料摂取のリズム性の差異は情動反応に影響し、この効果は脳内アミンを介するものと考えられた。本研究では暑熱に対する鶏の反応性が飼育環境や加齢によって変動することを種々の不快刺激下における脳内アミンの動態を解析することにより検証することを目的とする。本年度においては、脳内アミン動態に及ぼす屠殺方法、明暗環境、加齢および高温負荷の影響を解析するために以下の実験を行った。【目的】外部環境からの刺激に対する産卵鶏の反応を理解するために、大脳、間脳および脳下垂体のアミン濃度を種々の条件下で測定し、脳内神経系の動態を把握することの有効性を検討した。【方法】薬殺(断頭、ネンブタール薬殺)、明暗環境(7、15時)、日齢(200、370、600日齢)および環境温度(20、31°C10日間)の条件別に白レグ系産卵鶏を各区4羽供試した。光線管理は8時点灯の14L10Dとし、通常の環境温度は20°Cとした。部位別に採取した各脳組織のホモジナイズ上清のノルエピネフリン(NE)、エピネフリン(E)、ドーパミン(D)、セロトニン(5HT)およびアセチルコリン(ACh)濃度をHPLC-ECD法で分析した。【結果】薬殺時には大脳のNE、5HTおよびACh、脳下垂体のDおよびAChが断頭時より有意(p<0.05)に低かった。明暗環境による違いは認められなかった。370あるいは600日齢時には大脳のNE、5HTおよびACh、間脳のNEおよびD、脳下垂体のDおよびAChが200日齢時より有意(P<0.05)に高かった。環境温度による違いは認められなかった。以上の結果、脳内アミン濃度は外部環境からの刺激に対して大きく変動しないものと考えられたが、薬殺あるいは加齢により変化する可能性が示唆された。本研究では暑熱に対する鶏の反応性が飼育環境や加齢によって変動することを種々の不快刺激下における脳内アミンおよびペプチドの動態を解析することを目的とした。本年度においては、脳内ペプチド動態に及ぼす明暗環境および給餌の影響を解析するために以下の実験を行った。【目的】外部環境からの刺激に対する産卵鶏の反応を理解するために、大脳および間脳におけるペプチド濃度の日内リズムおよび給餌の影響を測定し、脳内神経系の動態を把握することの有効性を検討した。【方法】明暗環境(8、14、20および2時)および制限給餌の条件別に白レグ系産卵鶏を各区4羽供試した。光線管理は8時点灯の14L10Dとし、飼育環境温度を23°Cとした。部位別に採取した各脳組織のホモジナイズ上清のエンドルフィン(ED)、エンケファリンエピネフリン(EF)、ヒスタミンドーパミン(HS)、γ-ヒドロキシ酪酸(GABA)およびセロトニン(SE)濃度をHPLC-ECDおよびUV法で分析した。【結果】何れのペプチドとセロトニンに明瞭な日内リズムあるいは光線環境の影響が認められた。このような変化は大脳よりも間脳でより顕著であった。HSは飼料摂取行動と深い関係にあり、情動行動の発現に密接に関るものと考えられた。一方、昨年度の結果において観察されたストレス負荷時のセロトニン濃度は、脳内ペプチド動態とは関らないものと考えられた。

本年度においては、情動反応に関してアミンと密接な関係にある脳内β-エンドルフィン動態に及ぼす飼料摂取行動の影響を解析するために以下の実験を行った。【目的】大脳および間脳におけるオピオイドペプチドであるβ-エンドルフィン濃度に及ぼす給餌方法の違いがもたらす影響を検討した。【方法】実験には放卵状況が安定している白レグ系産卵鶏(200400日齢)32羽を供試した。光線管理は8時点灯の14L10Dとし、環境温度を20°C恒温とした。8時に飼料要求量を一括で給与した一括給餌区と、8時、11時30分、15時および18時30分に当分割給与した分割給餌区を設けた。慣熟飼育の後に9時、14時、20時および2時に供試鶏を断頭屠殺し、脳を摘出した。大脳と間脳部位のβ-エンドルフィン濃度を高速液体クロマトグラフィー電気化学検出器法で分析した。【結果】大脳のβ-エンドルフィン濃度に一括給餌区で光線明暗間の差は認められなかったが、β-エンドルフィン濃度は14時に最も低く、20時に最も高い値を示した。分割給餌区で、β-エンドルフィン濃度は14時に高い値を、20時に最も低い値を示した。間脳のβ-エンドルフィン濃度は、一括給餌区で明期に時間経過的に上昇し、20時に最高値に達し、暗期に明期の半分の水準まで低下した。以上の結果、飼料摂取のリズム性の差異は情動反応に影響し、この効果は脳内アミンを介するものと考えられた。
肺癌における直鎖状ユビキチン関連シグナルの機能解析と臨床応用

本研究では肺癌の新規治療標的として直鎖状ユビキチン(M1-Ub)とその合成酵素であるLUBACの可能性に注目した。初年度は肺癌患者データベース、及び肺癌細胞株ライブラリの双方から肺癌におけるLUBACの役割を解析した。その結果、LUBACが組織型としては肺腺癌の病態に関与する事が示唆された。さらに肺癌細胞株における解析からはLUBACが既知のNFκBシグナル経路に加え、他の重要なシグナル経路にも関与する事が示唆された。肺癌切除検体を対象とした解析ではリンパ腫発症に関わるLUBAC構成因子であるHOIPの遺伝子変異に類似した変異症例が2例同定された。次年度はより詳細に細胞株での解析と肺癌切除検体での解析を行った。肺腺癌細胞株を対象にLUBACの発現をするとEGF依存性の浸潤能・増殖能が低下し、その背景にはEGFRシグナルの下流にあるAKT/ERKが関与している。トランスクリプトーム解析からもLUBACの細胞増殖への関与が明らかとなった。肺腺癌切除検体187例でLUBACの免疫染色を施行した結果、I期の肺腺癌において、5年生存率はLUBAC構成因子陽性群で86.8%、陰性群で90.5%であり、陽性群でわずかに生存率の低下を認めたが、有意差は認めなかった(p=0.215)。また、LUBAC発現とEGFR遺伝子変異との関連は認めなかった(p=0.786)。さらに、LUBAC構成因子であるHOIPの遺伝子変異を有する症例に関してin vitroで解析行ったが、HOIP変異はNFκBの活性化やリンパ腫で報告されている様なLUBAC複合体形成への影響を認めなかった。以上から、細胞株を用いたin vitro解析からLUBACが肺腺癌においてEGFRシグナル経路や細胞増殖を制御する重要な因子である事が明らかとなった一方で、早期肺癌の切除症例における予後との有意な関連は認めなかった。本研究で我々は、「肺癌における直鎖状ユビキチン関連シグナルの機能解析と臨床応用」として、肺癌の新規治療標的として直鎖状ユビキチン(M1-Ub)とその合成酵素であるLUBACの可能性に注目した。研究計画の概略として、まず肺癌患者のデータベースと肺癌細胞株を対象にM1-Ub関連因子の網羅的スクリーニングを行い、LUBACとM1-Ubに関連の高い組織型や遺伝子変異の同定を目指す。さらに、スクリーニングで得られた知見を検証する為に、肺癌切除検体を対象に組織染色と遺伝子解析を行い、LUBAC発現と肺癌の臨床病理学的因子との関連を解析する。また、LUBACとM1-Ubの作用する機序を解明する為に、肺癌細胞株に対するLUBAC阻害剤の影響や、LUBACノックダウン/ノックアウトの影響を詳細に解析し、治療標的としての可能性を追求する。本年度の研究成果として、肺癌患者のデータベース解析からLUBAC発現が特定の組織型で有意な予後関連因子となることが明らかになった。また、肺癌細胞株のスクリーニングからは、LUBACが高発現する細胞株を同定し、既知のNFκB活性化に加えて複数の主要シグナル経路に影響する事を確認した。さらに、LUBACの選択的阻害剤は肺癌細胞株において増殖能/浸潤能を抑制し、細胞死を誘導する事を明らかにした。加えて、肺癌検体を対象に他疾患で報告されているLUBACの遺伝子多型を検索した結果、それと類似する遺伝子多型を2例の肺癌症例で同定した。今後、切除検体を対象にLUBAC発現を免疫染色で解析し、LUBAC発現と臨床病理学的因子との関連を検証する。また、肺癌細胞株を対象にLUBACをノックダウン/ノックアウトする影響や阻害剤の影響のより詳細な機能解析を進め、臨床応用への橋渡しを目指す。本年度の研究を通して、LUBACが高発現する組織型を同定し、予後関連因子であることが明らかとなった。肺癌細胞株では、LUBACが主要なシグナル経路に関与している事を同定した。さらにLUBACの選択的阻害剤は肺癌細胞株において増殖能・浸潤能の抑制し、細胞死を促進する事も確認した。また、報告されているLUBACの遺伝子多型と類似した変異を、2例の肺癌症例で同定した。以上から、平成30年度には、前年度の研究成果を元に、より詳細な研究進展が期待でき、全体を通して当初の研究計画に従って進行している為、「おおむね順調に進展している」と判断した。

トランスクリプトーム解析からもLUBACの細胞増殖への関与が明らかとなった。肺腺癌切除検体187例でLUBACの免疫染色を施行した結果、I期の肺腺癌において、5年生存率はLUBAC構成因子陽性群で86.8%、陰性群で90.5%であり、陽性群でわずかに生存率の低下を認めたが、有意差は認めなかった(p=0.215)。また、LUBAC発現とEGFR遺伝子変異との関連は認めなかった(p=0.786)。さらに、LUBAC構成因子であるHOIPの遺伝子変異を有する症例に関してin vitroで解析行ったが、HOIP変異はNFκBの活性化やリンパ腫で報告されている様なLUBAC複合体形成への影響を認めなかった。以上から、細胞株を用いたin vitro解析からLUBACが肺腺癌においてEGFRシグナル経路や細胞増殖を制御する重要な因子である事が明らかとなった一方で、早期肺癌の切除症例における予後との有意な関連は認めなかった。平成30年度には、平成29年度の研究成果を更に発展させ、次の解析を行う。I.肺癌切除検体を用いたM1-Ub関連因子の組織染色と遺伝子解析による検証:1平成29年度のスクリーニングから得られた知見を元に、肺癌切除標本を対象にLUBAC構成因子であるHOIP、HOIL-1L、SHARPINの発現を免疫組織染色で確認する。2肺癌切除検体におけるLUBAC発現と臨床病理学的因子との関連を解析する。特にdriver mutationなどの遺伝子変異や免疫チャックポイント分子との関連に着目する。II.肺癌細胞株におけるLUBAC阻害剤やノックダウン・ノックアウトによる影響の解析:1肺癌細胞株などを対象にCas9/CRISPR法によりHOIPノックアウト細胞を作製し、LUBACの生理機能や作用機序をより詳細に明らかにする。2LUBAC選択的阻害剤が特定の組織型やシグナル伝達経路に与える影響や、増殖能・浸潤能などの細胞機能に与える影響を検証し、治療標的としてM1-UbやLUBACの有用性を検証する。3Cisplatinなど抗がん剤や分子標的薬との併用効果も解析する。III.LUBACの遺伝子多型を有する肺癌の解析: 1LUBAC変異を有する肺癌切除検体を対象に各種免疫組織染色を行い、活性化しているシグナル経路を検証する。2変異体を作成し、in vitroでNFκBの活性化やLUBAC複合体形成への影響を検証する。当該助成金が生じた状況としては、肺癌切除検体を対象とした免疫組織染色を平成29年度に開始する予定であったが、平成30年度に繰り越しとなった為、次年度使用額が生じた。翌年度分として請求した助成金と合わせた使用計画に関しては、研究計画全体のスケジュールと内容が概ね順調に進展している為、予定通りの使用計画とした。
Bidens属植物中のマクロファージ分泌物調節成分の探索研究

B.parvifloraエキスについて、マクロファージ(RAW264.7細胞)のNO産生能に対する抑制活性を指標として成分分離を行い、60種の化合物を単離し、同定及び構造決定した。5種の新規ポリアセチレン配糖体、2種の新規化合物を含む25種のフラボノイド、4種の新規ショ糖エステル、1種の新規カフェ酸ダイマー、2種の新規カフェ酸プレニルエステル、2種のカフェ酸誘導体、2種のケイヒ酸誘導体、2種の新規ネオリグナン、1種の炭素鎖10の新規シクロペンテノン配糖体、8種のキナ酸エステル、1種のベンジルアルコール配糖体、1種のナフトピロン配糖体、カロチノイド、ジテルペン、ステロイド及びmyo-inositolを同定及び構造決定した。これらの化合物のマクロファージのNO産性能におよぼす効果について、IFN-γとLPSで活性化した時の試験薬物の作用について検討した結果、4種のポリアセチレン配糖体に強い抑制が認められた。フラボノイドでは、3',4'-位に水酸基を持つフラボン、フラボノール及びオーロンにNO産性抑制活性が認められた。また、カフェ酸ダイマー、メチルキナ酸のカフェ酸エステルにNO産性抑制活性が認められた。次に、マクロファージのプロスタグランジンE2(PGE2)抑制効果について、LPSで活性化した時のショ糖エステル、カフェ酸誘導体に対する作用について検討した結果、数種の化合物にPGE2抑制活性が認められた。B.parvifloraエキスについて、ヘキサン、酢酸エチル及び1-ブタノールで順次抽出し、それらの画分について活性試験を行ったところ、マクロファージのNO産生能に対する抑制活性が共に1-ブタノール画分に比較的強い活性が認められた。そこで1-ブタノール画分についてバイオアッセイにより検討しながら各種クロマトグラフィを適用し、化合物1-5の5種の化合物を単離した。化合物1-5の構造はNMR、MSおよびMosher法の適用により、いずれも新規な炭素鎖10の直鎖状ポリアセチレンのグルコシドと構造決定し、2級水酸基の絶対配置を含めて絶対構造を決定した。ポリアセチレンの配糖体は天然からはBidens pilosaに続き2例目と考えられる。次にこれらの化合物のマクロファージのNO産性能におよぼす効果について、LPSのみ或いはIFN-γとLPSで活性化した時の試験薬物の作用について検討した結果、化合物2を除く1、3、4及び5ではLPSのみで0.116-0.225μM、IFN-γとLPSで0.077-0.116μMの活性が認められた。化合物1、3、4、5の抑制はLPSのみの刺激より、LPSとIFN-γの両者による刺激でより強い抑制が認められた。そしてこれらのポリアセチレン配糖体はマクロファージの活性化を抑制し、TNF-α等の炎症性サイトカイン類の遊離を抑制することも推察された。今後、他の活性成分の分離と構造決定を行うと共に、iNOS誘導に対する作用、TNF-α、IL-1、IL-6、IL-10、IL-12などサイトカイン分泌に対する作用について検討していく予定である。B.parvifloraエキスについて、ヘキサン、酢酸エチル及び1-ブタノールで順次抽出し、それらの画分について活性試験を行ったところ、マクロファージ(RAW264.7細胞)のNO産生能に対する抑制活性が共に1-ブタノール画分に比較的強い活性が認められた。また、ヘキサン及び酢酸エチル画分についても各種クロマトグラフィを適用し、本年度新たに55種の化合物を単離し、同定及び構造決定した。

2種の新規化合物を含む25種のフラボノイド、4種の新規ショ糖エステル、1種の新規カフェ酸ダイマー、2種の新規カフェ酸プレニルエステル、2種のカフェ酸誘導体、2種のケイヒ酸誘導体、2種の新規ネオリグナン、1種の炭素鎖10の新規シクロペンテノン配糖体、8種のキナ酸エステル、1種のベンジルアルコール配糖体、1種のナフトピロン配糖体、2種のカロチノイド、1種のジテルペン、4種のステロイド及びmyo-inositolを同定及び構造決定した。これらの化合物のマクロファージのNO産性能におよぼす効果について、IFN-γとLPSで活性化した時の試験薬物の作用について検討した結果、フラボノイドでは、3',4'-位に水酸基を持つフラボン、フラボノール及びオーロンにNO産性抑制活性が認められた。また、カフェ酸ダイマー、メチルキナ酸のカフェ酸エステルにNO産性抑制活性が認められた。次に、マクロファージのプロスタグランジンE_2(PGE_2)抑制効果について、LPSで活性化した時のショ糖エステル、カフェ酸誘導体に対する作用について検討した結果、数種の化合物にPGE_2抑制活性が認められた。
膜蛋白質の差異に基づく小胞膜系の機能的多様性の解析-シナプスと再生軸索成長円錐において-

1.シナプス小胞のエキソ・エンドサイトーシスサイクル調節機構に関与する、分子種および分子構築の定量的免疫電顕法を用いた機能局在の解析:この課題については、プレエンベデング1nm金粒子銀増感法を用いてRab3Aとラブフィリンの局在を明らかにした。すなわち前者が小胞膜に、後者が主に前シナプス膜に局在しており、生化学的な解析を裏づけるものであった。2.成長円錐というシナプス形成前の軸索先端における、シナプス小胞膜関連蛋白質の局在:この課題については、シナプトフィジン、シナプシンI、シナプトタグミンの局在を調べ、いずれも成長円錐に特に高濃度に存在し、小胞膜あるいは細胞質に局在していることを明らかにした。この事実は成長円錐においてすでに開口分泌様式の小胞の表面膜との融合が行われていることを示すものである。
免疫グロブリン性骨疾患の理解と制御

IgGが破骨細胞の分化や機能を直接的に制御することを明らかにした。マウスには4種のIgGの受容体、FcgRI, FcgRIIB, FcgRIII, FcgRIVが存在し、このうち、FcgRIIBは他の3つの受容体に対して抑制的に働く。FcgRIIBの遺伝子欠損マウスは血漿中の免疫複合体が高値になり骨粗しょう症を呈すことから、免疫複合体は骨を減らすことを明らかにした。また、妊娠マウスに抗RANKL抗体を投与して、骨をはじめ全身への影響を検討し、胎児の骨組織が増加するだけでなく、胎児が死亡するという結果を得た。抗RANKL抗体は母マウスの乳腺の発達や育児本能に影響を与えることを明らかにした。IgG免疫グロブリンが骨吸収の原因細胞である破骨細胞の分化や機能を直接的に制御するということを分子レベルで明らかにすることに努めた。マウスには4種類のIgGの受容体、FcgRI、FcgRIIB、FcgRIII、FcgRIVが存在する。このうちFcgRIIBは他の3つの受容体が活性化型シグナルを伝達するのに対し、抑制性のシグナルを伝達する。FcgRIIB遺伝子を欠損するマウスでは自己免疫応答が亢進しており、加齢に伴って自己抗体産生が増加して自己免疫疾患を自然発症する。そこで過剰な自己免疫応答が骨量低下をもたらすか否かについて明らかにした結果、FcgRIIB欠損マウスは、加齢に伴うIgG産生の亢進し、同時に骨量減少を呈した。in vitroおよびin vivoの詳細な解析の結果、FcgRIIB欠損マウスの血清中のIgG免疫複合体が破骨細胞分化を促進させることが明らかになった。本研究は事前研究により成果に期待ができる研究を含んでおり、2年目に実施する高ガンマグロブリン血漿によって生じる骨量減少性疾患を治療するモデルマウスの作成に力点を置いている。そのため、平成27年度に予定していた分子メカニズムの解明は確実に年度内に終了させることを前提としており、計画はその通り順調に進んでいる。IgG免疫グロブリンが骨吸収の原因細胞である破骨細胞の分化や機能を直接的に制御するとことを分子レベルで明らかにした。マウスには、4種類のIgGの受容体、FcgRI, FcgRIIB, FcgRIII, FcgRIVが存在する。このうちFcgRI, FcgRIII, FcgRIVは活性化型シグナルを伝達するのに対し、FcgRIIBはこれらの活性化型受容体からのシグナルを抑制する。FcgRIIB遺伝子を欠損するマウスでは自己免疫応答が亢進し、加齢に伴って自己抗体産生が増加して自己免疫疾患を自然発症する。FcgRIIB欠損マウスはそのIgG産生量の増加と同時に骨量減少を呈した。In vitroおよびin vivoの詳細な解析の結果、FcgRIIB欠損マウスの血清中のIgG免疫複合体が破骨細胞分化を促進させることを明らかにした(Nat. Commun. 2015)。関節リウマチや自己免疫疾患を発症している際に血清中のIgG量が増加していることを鑑み、コラーゲン誘導性関節炎モデルマウスの血清交換術により、骨量の減少が抑制できるか否かを検討した。正常マウスの大量の血液から採取した血清プールをモデルマウスに経時的に投与して、IgG濃度を減少させることを検討した。現在までに、モデルマウスの血中IgG量を十分に下げる効果を得るまでには至っていないので、プロトコルを改定しつつ、再検討を行っている。また、破骨細胞分化因子RANKLに対する抗体治療が骨粗鬆症などの治療にすでに用いられているが、げっ歯類などの小動物を用いた臨床前動物実験のデータは少ない。特に、妊娠中の患者に対して抗RANKL抗体の使用は禁忌のため、妊婦および胎児に対する影響を解析した。RANKLは妊娠中の乳腺の発達に必要であるが、妊娠中の抗RANKL投与により乳腺発達が不十分になり仔は出生後に死亡する結果を得、現在論文投稿中である。骨粗しょう症モデルや自己免疫疾患モデルマウスだけでなく、高ガンマグロブリン血漿を呈するマウスを作製し、その骨組織を解析することで、IgG免疫複合体が骨量減少性疾患のバイオマーカーとなる可能性について検証する。骨免疫学本研究は事前研究により成果に期待ができる研究を含んでおり、27年度はin vitroの実験を迅速に進めることに留意し、昨年度の成果による学会発表にかかる旅費や人件費などにかかる支出はなかった。物品費についても、本年度のマウスを用いた実験の事前実験などにとどめることとしたため、予定額よりも少ない使用となった。本年度は、マウスを用いた実験などを多く予定し、それにかかる物品費やたんぱく質発現の網羅解析の委託費用などに使用する。また研究で得た成果を学会などで発表するための旅費を含む。
イヌとネコの急性期反応物質の体内動態と機能に関する基礎的および臨床的研究

研究課題ではイヌとネコの急性期反応物質について総合的に解析し、臨床応用していくことを目的としている。平成25年度は研究実施計画に記載したその他の細胞への血清アミロイドA (SAA)タンパクの影響について重点的に検討を行った。猫の乳腺腫瘍細胞株およびリンパ腫細胞株を培養し、そこに組み換え猫SAAタンパクを添加した。その結果、腫瘍細胞におけるタンパク分解酵素の一種であるMatrix Metalloproteinase-9 (MMP-9)の遺伝子発現およびタンパク産生が充進する様子が確認された。MMP-9は基底膜の主成分であるIV型コラーゲンを分解することから、腫瘍の浸潤や転移に強く関連することが示唆されている。さらに、SAAを添加した細胞は実際の細胞外マトリックスを破壌して浸潤する能力が亢進していることも示された。これらの反応は腫瘍ごと、あるいは細胞株ごとに多少感受性に差は見られたが、おおむね用量依存性であった。腫瘍に罹患した症例において血中SAA濃度はしばしば高値となるが、その結果として腫瘍のさらなる進行を引き起こしている可能性が示唆された。また、リンパ腫の症例における末梢血中MMP-9濃度の測定も行ったところ、症例によってばらつきはあるが、健常動物と比較して有意に血中MMP-9濃度が上昇していることが明らかとなった。血中MMP-9は厳密には急性期反応物質ではないが、有用な炎症マーカーおよび腫瘍マーカーになり得ると推測される。これも踏まえて、SAA濃度とMMP-9濃度の関連についてさらなる検討が必要と考えられる。(抄録なし)本研究はイヌおよびネコの急性期反応物質について複合的な解析を行い、疾患の重症度や病期の判定をより確実にすることを目的としている。本年度は特に猫の血清アミロイドAタンパク(SAA)の代謝機構に着目して研究を行った。SAAはヒトやネコにおける主要な急性期反応物質のひとつであり、炎症マーカーとして臨床応用されている。SAA濃度を適切に評価し、かつ制御するためにはSAAの代謝について知ることが必要である。ヒトにおいては過去の研究から単球あるいはマクロファージが重要な役割を果たしていることが明らかになっており、また代謝に影響を与えるいくつかの要因が指摘されているが、ネコにおいてはそういった情報が全く無い。したがって、ネコにおけるSAAの適切な評価のために、代謝機構を明らかにすることが必要と考えられた。具体的には、ネコの末梢血からマクロファージを分離し、組み替えネコSAA添加後の濃度変化をELISA法にて検出した。結果としては、添加されたSAAは経時的に減少していき、24時間でほぼ完全に消失した。SAAの局在を蛍光免疫染色にて検出したところ、添加後1時間以内にマクロファージ内に取り込まれていく様子が明らかとなった。24時間後にもマクロファージ内でSAAが検出されたが、その量は少なく明らかに蓄積している様子はなかった。以上よりネコのマクロファージにはSAAを取り込み、分解する能力があることが明らかとなった。マクロファージにLPSやデキサメタゾンによる事前刺激を加えた上で、SAAの取り込み能を検討したところ、デキサメタゾンによって取り込みは有意に抑制された。デキサメタゾンは臨床的にもしばしば用いられる薬剤であるが、今回の結果からデキサメタゾン投与時にはSAA濃度が偽陽性を示す可能性が示唆され、測定値の解釈に注意が必要であることがわかった。本研究はイヌとネコの急性期反応物質に関して総合的に解析することを目的としている。平成24年度は、研究実施計画の通り、培養細胞を用いた実験により、ネコの主要な急性期反応物質であり炎症マーカーとして用いられる血清アミロイドA(以下SAA)の生理的な機能を検証した。SAAは単球などの炎症細胞が産生するサイトカインの刺激により主に肝臓で産生されるが、その一方でSAAが単球を刺激し、サイトカイン産生を促進することが明らかとなった。これにより、炎症や組織障害によってSAAの血中濃度が上昇すると、それがさらなる炎症刺激となる悪循環に陥ることが明らかとなった。さらに、SAAが単球に作用する際は、細菌の外毒素・リポポリサッカライド(LPS)の受容体であるTLR4受容体を介して作用することも明らかとなった。炎症反応が細菌由来のものでなくても、TLR4受容体を抑制することで緩和的効果が得られる可能性が考えられる。ただし、予定していたグルココルチコイドの影響に関しては検討出来なかった。SAAの高値が生体にとって有害な悪循環をもたらすことが実験的に示されたこと、SAAが来院時点で高値であった症例は比較的早期に死亡していることに着目し、予後評価因子としてSAA測定の有用性に関して検討した。その結果、SAA濃度が高値であった症例の生存期間、特に短期的な数ヶ月から半年位の間の生存率は、SAAが正常範囲であった症例と比べて有意に低下していることが明らかとなった。これは実験計画にはなかったが、SAAのさらなる有用性を検討するという目的には沿っているものと考えられる。これらによってSAAの有害な作用が実験的に、また臨床的にも示されたこととなる。

その結果、腫瘍細胞におけるタンパク分解酵素の一種であるMatrix Metalloproteinase-9 (MMP-9)の遺伝子発現およびタンパク産生が充進する様子が確認された。MMP-9は基底膜の主成分であるIV型コラーゲンを分解することから、腫瘍の浸潤や転移に強く関連することが示唆されている。さらに、SAAを添加した細胞は実際の細胞外マトリックスを破壌して浸潤する能力が亢進していることも示された。これらの反応は腫瘍ごと、あるいは細胞株ごとに多少感受性に差は見られたが、おおむね用量依存性であった。腫瘍に罹患した症例において血中SAA濃度はしばしば高値となるが、その結果として腫瘍のさらなる進行を引き起こしている可能性が示唆された。また、リンパ腫の症例における末梢血中MMP-9濃度の測定も行ったところ、症例によってばらつきはあるが、健常動物と比較して有意に血中MMP-9濃度が上昇していることが明らかとなった。血中MMP-9は厳密には急性期反応物質ではないが、有用な炎症マーカーおよび腫瘍マーカーになり得ると推測される。これも踏まえて、SAA濃度とMMP-9濃度の関連についてさらなる検討が必要と考えられる。ネコSAAの代謝機構に関する検討において、当初想定した以上の成果を得ることが出来た。この結果を国際学術誌にて発表するべく、現在論文作成中である。一方で予定していたSAAの機能や異所性の産生に関しては十分に検討を進めることが出来なかった。これらのことから、総合的にはおおむね順調であると判断した。一部薬剤の影響は検証出来なかったが、SAAの機能に関しては計画通りに進めることができた。また、当初の予定にはなかったものの、機能に関する知見や継続して測定している臨床例での測定データをもとに、臨床的な意義の大きい研究を追加で実施することができた。ただし、その分新たな炎症マーカーの開拓に関してはほとんど進めることができなかった。総合的には、おおむね順調であると考えられる。今後はSAAの産生機構やSAAの機能などに関する検討を進めていく予定である。いずれに関してもある程度の予備的検討は進んでいるため、材料が揃えば順調に進展するものと考えている。イヌにおけるC反応性タンパク質(CRP)に関しても同様の検討を行う予定ではあるが、組み替えタンパク質の作製などクリアすべき課題も多いことから、まずはネコのSAAに関する検討を優先的に行っていこうと考えている。予後因子としてのSAA濃度測定に関する新知見が得られたことで、SAAの機能に関して検討することの重要性がさらに高まった。今後はネコのSAAタンパクの機能に関してさらなる検討を加えていく予定である。一方で臨床の現場におけるネコのSAA測定の問題に関しては、症例の蓄積が進むにつれて問題点も少し変わりつつあるため、さらなる症例・測定データの蓄積を行っていく予定である。あわせて、新規炎症マーカーの開拓に関しては随時進めていく。(抄録なし)
土地所有の集団的規制に関する基礎論的研究

建築基準法上の私道は公的規制を強く受けている点で公道に近い性格を有するが,このことは沿道居住者に私法上の通行権が認められることを意味するものではなく,私道の通行は単に公的規制を受けたことの反射的利益にすぎない,と伝統的に考えられてきた。一方,規制違反の行為が生じた場合には,沿道居住者は特定行政庁を相手に是正措置命令や禁止・制限措置命令の発動を請求し得るが,こうした請求がなされたところで,特定行政庁は常にこれに応ずることが義務づけられるものではなく,この発動は特定行政庁の自由裁量行為であって,沿道居住者はかかる命令の発動を促すことができるにすぎない,とも一般に解釈されてきた。そこで,本研究は,まず第一に,沿道居住者による妨害排除請求の可否に関する,これまでの解釈状況および実務的取扱いについて具に分析する作業を行った。次に,(1)公的規制と私道所有権の関係,および,(2)公的規制と通行利用の関係について考察した。最後に,以上の考察を踏まえたうえで,私道所有者の通行妨害を相手に沿道居住者はいかなる場合に排除請求できるか,その法的根拠は何かについて試論を展開した。本研究は,結論として,安全および衛生という生活環境の保全という観点から,私道敷権利者の所有権は制限されることを積極的に容認すべく,沿道居住者には自衛手段として妨害排除請求権の行使が許されてよい旨の解釈を明らかにした。いわゆる建基法において道路として扱われる私道も,その維持・管理の権能はあくまで私道所有者に留保されているため,この所有者が,私道内に通行利用の妨げとなる工作物を設置するなどの行為に出ることが少なくなく,したがって私道所有権と私道の通行利用という通行利益との関係がしばしば裁判上で争われてきている。もっとも,同法44条違反の行為などに対しては,通行人は,特定行政庁を相手に,是正措置命令や禁止・制限措置命令の発動を求め得るのであるが,特定行政庁としては,かかる発動を求められたところで,常にこの求めに応ずることを義務づけられるものではなく,右の発動は特定行政庁の自由裁量の範囲内に属する行為であって,通行人としては単にこうした命令の発動を促すことができるにすぎない。だから,通行人としては,私道所有者を相手に,直截的に,その妨害の排除を求めて通行状態を確保しようとする行動に出ることは容易に予想されよう。こうした問題は,公法・私法の分類が妨げとなって生じていると考えられるため,その法的解釈は,単に妨害排除請求訴訟で示された解釈に着目しただけでは問題の本質を捉えたことにはならない。したがって,建基法上の規制が私道の所有権をどう制約づけることになるのか,ひいては上記の法的規制が通行人に対してどんな法的保護を与えることになろうか,という視点からの考察が当然に求められなければなるまい。こうした考察を踏まえたならば,現下の法秩序にあっては通行人に具体的な権利を認めることが困難であると思われ,だからこそ,例外的に通行人に妨害排除請求を認める必要性があるのではないか,と考えられるのである。次に,(1)公的規制と私道所有権の関係,および,

(2)公的規制と通行利用の関係について考察した。最後に,以上の考察を踏まえたうえで,私道所有者の通行妨害を相手に沿道居住者はいかなる場合に排除請求できるか,その法的根拠は何かについて試論を展開した。本研究は,結論として,安全および衛生という生活環境の保全という観点から,私道敷権利者の所有権は制限されることを積極的に容認すべく,沿道居住者には自衛手段として妨害排除請求権の行使が許されてよい旨の解釈を明らかにした。
TOF計測とDOI計測の両立が可能なPET用次世代検出器の開発

本研究では、PET(陽電子断層撮影法)装置の画質(解像度と感度)向上に向けて、ガンマ線飛行時間差(time-of-flight: TOF)計測技術と三次元放射線位置(depth-of-interaction : DOI)計測技術の両立が可能である実用的なPET検出器の開発を進めている。本年度は、前年度に簡易評価した検出器構造において、ブロック検出器開発のための実験・試作を行った。検出器構造は、実用上の観点から片端読み出し方式を採用した。前年度と同様、TOF用として優れた性能を有するLYSO及びLFSシンチレータを用いた。層ごとに反射材の挿入位置を変えることによってシンチレーション光を分配することにより、2 mm4 mm角の結晶で4層DOI結晶ブロックを複数作製した。受光素子としてはTOF性能に特化したSiPMである、コンパクトな浜松ホトニクス製MPPCアレイモジュールを用いた。まず、単一結晶及び1層の結晶アレイを用いて、各MPPCチャンネルのゲインやタイミング等の特性を調べる実験を行った。次に4層DOI結晶ブロックとMPPCアレイモジュールを光学結合することにより検出器プロトタイプを開発した。それらの間に挿入するライトガイドの厚みを変えた検討や、各MPPCの特性の補正法やデータ処理方式を変えた検討を行った。結果、ブロック検出器のプロトタイプにおいても、前年度に行った簡易実験と同様、各層5 mm厚の4層DOI結晶ブロックで500 ps前後のTOF分解能が得られた。しかし2 mm角3 mm角の結晶を使用した場合に結晶識別能の若干の低下が見られた。開発したブロック検出器のプロトタイプにおいても良好な性能が得られたため。結晶識別能の向上に向け、ソフト面・ハード面の双方で受光素子モジュールの改良を行う。また得られた検出器性能をベースに、PET装置性能を予測するモンテカルロシミュレーションを行う。本研究では、がん診断等に活躍するPET(陽電子断層撮影法)装置の画質(解像度と感度)改善に向けて、ガンマ線飛行時間差(time-of-flight: TOF)計測技術と三次元放射線位置(depth-of-interaction : DOI)計測技術の両立が可能である実用的なPET検出器の開発を進めている。初年度は、短冊状シンチレータの片端光読み出し方式および両端光読み出し方式に関して、製品として入手可能な受光素子モジュールを用いた原理実証実験を行った。シンチレータについては、TOF用として優れた性能を収めているLYSO・LFSシンチレータを用いた。それらの長さ(5 mm, 10 mm、15 mm、20 mm等)を変えた検討に加えて、表面研磨状態や結晶間材料(反射材の種類や挿入パターン)を変えた実験を行った。また受光素子については、TOF用受光素子として実績の多いSiPMとして、浜松ホトニクスMPPCモジュールを採用した。MPPCの有効受光面サイズ(3 x 3 mm2, 4 x 4 mm2, 6 x 6 mm2)やサブピクセルサイズ(25 μm, 50 μm, 75 μm)、及びそのモジュールのデータ処理方式などを変えた検討を行った。結果として、片端光読み出し方式に関しては、DOI分解能5 mm(4層DOI相当)程度で500 ps前後のTOF分解能が得られた。また両端光読み出し方式に関しては、同じくDOI分解能5 mm程度で200 ps台のTOF分解能が得られた。本研究で考案中の検出器構造に関して、初年度で予定していた実験が概ね完了したため。検出器構造の最適化を行う。特に結晶アレイの構造や、シンチレーション光を効率よく受光素子に導くライトガイド、MPPCをベースにしたコンパクトなモジュールの新規開発等について検討する。

また得られた検出器性能をベースに、PET装置性能を予測するモンテカルロシミュレーションを行う。購入を予定していた実験機器の一部において、所属ラボ所有のもので代用可能な見込みが立ったため。しかし提案する検出器構造に適した受光素子モジュールの開発に当初予想よりコストがかかることが判明したため、それにこの費用を充てることにした。提案する検出器構造において良好なDOI分解能とTOF分解能を達成することはできたが、結晶識別能向上に向けた受光素子モジュールの改良に時間を要することがわかったため。またその改良にかかるコストや時間を踏まえたうえで、実験で得られた検出器性能を基にPET装置の性能を予測するシミュレーションを行うかどうかも検討したい。
学習障害児への身体感覚及び体感を活用した外国語教育の教材作成とその実践

本研究の狙いは、(1)身体感覚及び体感を活用する体感型の新しい外国語学習に資する教科書及び教材等を作成する。そして、その教科書を用い新しい外国語学習法を学習障害児に実践することにより、学習障害児の外国語習得を支援すること。(2)本研究にて実践する体感型の外国語学習法を、特別支援学校での「外国語」の授業にて利活用し学習効果を実感することにより、新しい外国語学習法として普及させること。学習障害児にとっては、従来からある“紙(教科書)と鉛筆"を用いた暗記型の外国語学習法は困難である。学習障害児に適した外国語学習法として身体感覚及び体感を活用する体感型の外国語学習法が語学力を伸ばすことに貢献する。
細胞周期を調節する多機能タンパク質の遺伝学的研究

多機能タンパク質である酵母カルモデュリン遺伝子に系統的に変異を導入し、温度感受性変異株を多数作製した。カルモデュリンの標的蛋白質との結合に関わっている8つのフェニルアラニン残基に注目して実験を行った。得られた14個のカルモデュリンの温度感受性変異株で特筆すべきことは、非制限温度下で4つの異なる表現型を示したことであった。すなわち、1)スピンドル・ポール・ボディの複製、2)出芽、3)アクチンネットワークの制御、4)カルモデュリン自体の芽の部分への局在化、という4つの独立の過程の特異的欠損を持っていた。さらに異なる表現型を持つ変異の間に、遺伝子内相補という現象が見られたことから、カルモデュリンの多重機能性が遺伝学的に立証された。さらに10種類の変異カルモデュリンを大腸菌内で発現させ、各々の蛋白質をSDS-PAGEで判断して単一バンドになるまで精製した。精製した蛋白質を用い、ゲルオーバーレイ実験を行なって、カルモデュリン結合蛋白質のひとつであるカルシニューリンの触媒サブユニットとの結合を調べたところ、F12A,F16A,F19A変異を持つ変異カルモデュリンは、カルシニューリンとの結合活性を失っていた。カルシニューリンの変異株は、高Na+感受性、性フェロモン存在下の致死性等の性質を示すが、カルモジュリンのF12A,F16A,F19A変異も同様の表現型を示した。以上の結果から、カルモデュリンの標的蛋白質との結合に関するモデルを考察した。
訪問看護における家族介護者への医療安全に関する教育プログラムの開発

本研究の目的は、訪問看護における医療事故とリスクマネジメントの実態と医療安全に関する教育ニーズを把握し、訪問看護における家族介護者への医療安全に関する教育プログラムの開発を行い、そのプログラムの有効性も検証することである。今年度は、日本国内の訪問看護における医療事故とリスクマネジメントの現状と医療安全に関する教育ニーズを明らかにすることを目的とした。全国9735箇所で無作為抽出した訪問看護ステーション管理者4000名を対象としたWebでの無記名式質問紙調査法である。Webアクセス用のURL等を含む調査依頼文書を送付し、協力を依頼した。Webによる回答・送信をもって同意を得たものとした。調査内容は、(1)2017年度と2018年度(2018年11月30日現在)に発生したインシデント(以下、Iとする)とアクシデント(以下、Aとする)件数、(2)最多数で最大の影響レベルのIとA、(3)家族介護上のIとAの件数と種類、(4)管理者から見た家族が安全を守る試み・安全を守る上での困難、(5)訪問看護師が指導している安全確保の内容と家族への教育内容、(6)病院看護師及び他機関・多職種との連携において発生したIとA、(7)医療安全に関する教育ニーズ等である。結果、分析対象112件のI件数は1148件、A件数は229件であった。家族介護上のIとAは、訪問看護師と同様な発生傾向で、転倒転落や服薬等に伴い発生しており、家族介護者が安全を確保する上での心理的な負担感があることが確認できた。また、病院看護師及び他機関・多職種との連携においてもIとAがあった。最新の医療安全に関する研修や家族介護者への医療安全に関する教育等のニーズがあることが確認できた。訪問看護師による家族指導は実施されているが、今後さらに、家族介護者への安全確保のための知識やスキルを高める教育的支援を行う必要性が示唆された。概ね研究計画に沿った進捗である。WEB調査による回収率の少なさから、調査期間及び対象数を増やすなど改善を行ったため、当初予定していた研究期間が若干延長したものの、第5回日本医療安全学会学術総会において、「在宅療養生活における医療安全の現状と課題ー日本国内の訪問看護における医療事故とリスクマネジメントの現状と医療安全に関する教育ニーズ経過報告ー」というテーマで、座長・パネリストとして今年度の調査研究の経過報告を発表することができた。12018年度の研究成果については、看護科学学会に発表する予定である。2訪問看護における家族介護者への医療安全に関する教育プログラムの開発を行うため、熟練訪問看護師へのフォーカスグループインタビューによる訪問看護における家族介護者への医療安全に関する実践内容を質的に分析する(2019年7月から9月)。3熟練訪問看護師の実践内容から、到達目標・内容・方法を検討し、訪問看護における家族介護者への医療安全に関する教育プログラムを開発する(2019年10月から2020年2月)。4教育プログラムの妥当性の確認のため、訪問看護師にフォーカスグループインタビューを行う(2020年4月から9月)。5プログラムの実施と有効性を検証する(2020年10月2021年1月)。

WEB調査による回収率の少なさから、調査期間及び対象数を増やすなど改善を行ったため、当初予定していた研究期間が若干延長したものの、第5回日本医療安全学会学術総会において、「在宅療養生活における医療安全の現状と課題ー日本国内の訪問看護における医療事故とリスクマネジメントの現状と医療安全に関する教育ニーズ経過報告ー」というテーマで、座長・パネリストとして今年度の調査研究の経過報告を発表することができた。12018年度の研究成果については、看護科学学会に発表する予定である。2訪問看護における家族介護者への医療安全に関する教育プログラムの開発を行うため、熟練訪問看護師へのフォーカスグループインタビューによる訪問看護における家族介護者への医療安全に関する実践内容を質的に分析する(2019年7月から9月)。3熟練訪問看護師の実践内容から、到達目標・内容・方法を検討し、訪問看護における家族介護者への医療安全に関する教育プログラムを開発する(2019年10月から2020年2月)。4教育プログラムの妥当性の確認のため、訪問看護師にフォーカスグループインタビューを行う(2020年4月から9月)。5プログラムの実施と有効性を検証する(2020年10月2021年1月)。主な理由として、以下の点が挙げられる。1)回収率が少なかったので、対象者数を増やし、調査期間を延長した。そのための調査費の支払い手続きが遅れ、2019年度の支払いとなった。2)関連学会への参加を予定していたが、業務の調整がつかず、取りやめたため、旅費が抑えられた。
高効率遺伝子導入法を用いた血管内皮E-セレクチンを介する細胞内情報伝達の解明。

E-セレクチンは血管内皮細胞に発現する接着因子で急性および慢性炎症において重要な働きをしていることが近年明らかになってきた。我々はすでに白血球がE-セレクチンを介して血管内皮細胞に接着する際に、細胞表面のE-セレクチンが細胞骨格と結合することを示し、E-セレクチンのシグナル伝達への関与の可能性を世界に先駆けて報告した。今回、アデノウイルスベクターシステムを利用してE-セレクチンの過剰発現系を構築し、培養内皮細胞での発現を確認し、ラット大動脈への遺伝子導入に成功した。ラット大動脈に導入されたE-セレクチンは流速存在下で白血球の接着を誘導することが解明された。モデルによってが可能となった。今後は、この新しいモデルを使って血管レベルでのE-セレクチンの機能の詳細にあきらかにしていく。今回、アデノウイルスベクターシステムを利用してE-セレクチンの過剰発現系を構築し、シグナル伝達機構の詳細を解明した。正常型、細胞内ドメイン欠損型のE-セレクチンを過剰発現させた血管内皮細胞をアイソトープでラベルし、そのリン酸化レベルを調べ、E-セレクチンの細胞内ドメインがリン酸化を受けていることを明らかにした。また、このリン酸化は白血球の血管内皮細胞への接着に伴い脱リン酸化を受けることもわかった。今後はこの脱リン酸化機構をさらに詳細にあきらかにしていく。