hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
色素材料の耐光性に関する基礎的・総合的研究

光退色制御における一重項酵素クエンチャーの寄与(北尾)、アントラキノン系・キサンテン系化合物の光反応(徳丸)についての知見を得た。2.色素光退色の物理有機化学的研究:半導体化したポリマー基質にペリレン系・キノン系顔料を分散した薄膜の光電変換(城田)、2ーヒドロキシアゾ色素の光酸化(正泉寺)機構を明らかにした。3.色素光退色の界面化学的研究:アニオン活性剤と油溶性染料(萩野)、高分子ラテックスと繊維(須沢)との相互作用を機構的に調べた。4.色素光退色における基質効果に関する研究:染色物の耐光性に及ぼす裏素材の影響(平嶋)、羊毛のクリスタルバイオレット染色物の耐光性に及ぼす細胞膜錯体の影響(古賀)についての知見を得た。5.色素光退色における固着・染着状態の効果に関する研究:酸性染料/BSA/セルロース系、非イオン染料/NSF/セルロース系の光退色(渋沢)、側鎖にパラローザニリンを持つ(L-グルタミン酸)膜の光刺激反応(滝沢)、反応性染料の絹への染着性と耐光性(安藤)、植物色素の金属錯体形成と耐光性(片山)について明らかにした。6.色素光退色における共存物質の効果に関する研究:ビニルスルホン系反応染料/セルロース系の異常退色(森田)、アゾ系含銅反応染料の光退色に及ぼす汗成分の影響(駒城)、天然色素の耐光性に及ぼす紫外線吸収剤タンニン酸の効果(木村)を検討した。7.表示材料色素・画像形成色素の光安定性に関する研究:アザマクロサイクル系化合物の金属錯体の光電特性を検討した(内田)。8.色彩の計測評価に関する研究:短時間の露光結果から長期露光後の色彩変動を推定する方法(寺主)、耐光性評価の際の標準的色濃度測定方法(村田)を提案した。
アジアの多様な水問題に対応可能な地域・流域規模の降水量変動の把握と予測

この研究ではRAMSとWRFの3つの非静力型の数値モデルを改良して、長期的な気候変化とそれに伴う水循環変動のシミュレーションを実施した。また地球温暖化のダウンスケールも実施し、将来の予測だけでなく、過去の気候変化の再現にも成功した。まず山岳地域の気候と水循環の再現では、上記の数値モデルの空間解像度を高めて、急峻な山岳を含む地域における降雪と積雪の再現し、流域単位の降水や融雪による河川流量の変化を再現することができた。積雲対流と地形や土地利用との関係については、我が国の冬に見られる、中国・モンゴルの地形性および土地利用による積雲、さらには大都市周辺の複雑な土地利用分布により引き起こされる積雲などを、極めて高解像度の数値モデルにより再現し、それらのメカニズムや地域の気候に及ぼす影響を調査した。また地域規模の気候および水循環については、チベット高原とその周辺、中国およびモンゴルにおいて、各地域の気候特性をもたらしているメカニズムを解明した。さらに疑似温暖化手法という新たなダウンスケールの手法を開発し、これらの地域の過去の気候変化の再現や地球温暖化にともなう将来気候の再現を実施した。疑似温暖化手法でGCMの持っているバイアスの影響を大幅に軽減するとともに、自然の年々変動による不確実性も軽減する長所がある。また温暖化にともなう気候の変化と;土地利用にともなう気候変化を比較しそれぞれの効果の大きさを評価した。GPS可降水量の解析では、我が国の高密度な観測網のデータを使って、水蒸気輸送と積雲生成の関係を明らかにするとともに、データ同化による降水の予報精度の向上も試みた。アジアの乾燥域と湿潤域の流域規模の降水分布をより正確に把握するため,雲解像の領域モデルの改良を実施した.まず,流域の上流部の降水は水資源の視点から見て特に重要であるものの,山岳が多いためモデルによる再現精度が低い.数値モデルにおける降水過程を見直して山岳周辺の水蒸気輸送と降水の精度向上を図った.また,山岳域の降水分布は山谷風などの気象の日変化の影響を強く受けるので,日変化の顕著なインドネシアの複数の島や山岳における降水の日変化の再現実験を実施し,日変化する降水システムの伝搬メカニズムを調査した.さらにモンゴル周辺・ベンガル湾周辺などアジア大陸全体やチベット高原による大規模な気候システムの影響を強く受けた降水システムのシミュレーションを実施し観測データによる検証を行った.昨年に引き続いて熱帯における降水の日変化と地形影響について,TRMMによる長期間の雨量観測データおよび数値モデルにより分析した.スマトラやボルネオ島での降水の日変化は海岸から100km程度の地域と内陸では大きく異なること,従来の積雲対流のパラメタリゼーションを仮定した静力学平衡モデルでは日変化の位相の再現が難しいこと,高解像度の非静力学平衡モデルによれば,沿岸の海上と陸上の両方の降水の変化が再現可能なことなどが明らかとなった.モンゴル高原において,衛星による雲画像と現地観測降水データを利用した,降水の日変化特性を調べた.この結果,モンゴルの降水は基本的には総観規模のトラフの影響下にある時に生じているがトラフの強引こよって降水に日変化が現れるときと,そうでないときがあることが明確になった.流域スケールの降水の地域分布は,日変化のある時とないときでは,我が国でみられるような顕著な違いは生じないことも明らかとなった.同様な研究をタイの降水についても実施した.またチベット高原の顕熱や積雲対流による加熱の影響がモンゴルやベンガル湾の降水に及ぼす影響についても,数値モデルにより調査した.雲解像領域気候モデルを用いて、冬季の日本における積雪量の再現を試みた。多雪年であった2005年と少雪年であった2006年の12月を選び、雨量・積雪深さなどをアメダスの観測データと比較した。この結果、雲解像領域気候モデルは、多雪年と少雪年の積雪分布の特徴を良く再現することを確認した。

ついで、大気大循環モデルMIROCによる2070年代の全球予測デーダを領域気候モデルに疑似気候変化差分の形で入力して、積雪の将来予測を実施した。この結果、標高1000m以下の地域を中心に積雪量は激減し、2070年代の多雪年には2000年代の少雪年と同レベルまで積雪量が減少することが示された。チベット高原南東部から華南にかけて配置されている気象観測用GPS受信機により得られた20地点前後の可降水量データを高解像度領域モデルに3次元データ同化手法により同化実験を実施した。その結果、降水予測に改善が見られたものの、その効果わわずかであった。データ同化前の入カデータの可降水量の精度が比較的良く、同化の効果が小さかったと思われる。中国の過去の降水データの分析によると、6月の揚子江の中下流域では、梅雨前線に沿って降水の増大が見られる。この長期的な降水の変動を領域気候モデル再現した。まず客観解析デーダのERA40を用いて、1960年代と1990年代の6月の降水量がよく再現されることを示した。ついで、客観解析データの気候差分だけを用いて、領域気候モデルによる疑似気候変化実験を実施した。疑似気候変化実験でも、1960年代と1990年代の降水量の変化が良く再現され、ここで提案した、領域規模の気候変動予測の新たな手法の有効性を検証することができた。
モジュライ空間と算術多様体の幾何の構築と展開

6つのグループにおけるモジュライ空間と算術多様体に関する幾何の構築と展開は世界的な業績を上げたと言える.例えば,分担者の望月拓郎は2014年のソウルにおける世界数学者会議において名誉ある全体会議の招待講演者に選ばれ,最近の成果の発表を行った.また,本研究費で進めたパリ・バルセロナ・京都を中心とする都市間国際シンポジウムは毎年順調に開催され,国際共同研究に繋がっている.例えば,研究代表者の森脇とグルノーブル大学フーリエ研究所のChen氏の共同研究の成果は本としてまとめられつつある.6つのグループにおけるモジュライ空間と算術多様体に関する幾何の構築と展開は世界的な業績を上げたと言える.例えば,分担者の望月拓郎は2014年のソウルにおける世界数学者会議において名誉ある全体会議の招待講演者に選ばれ,最近の成果の発表を行った.また,本研究費で進めたパリ・バルセロナ・京都を中心とする都市間国際シンポジウムは毎年順調に開催され,国際共同研究に繋がっている.例えば,研究代表者の森脇とグルノーブル大学フーリエ研究所のChen氏の共同研究の成果は本としてまとめられつつある.それぞれの研究群IVIの研究実績を要約する.I群:Enriques曲面のホモロジー的に鏡映な対合の研究の続きとして,ルート不変量にE7型格子をもつEnriques曲面の定義方程式を調べた.その結果、モジュラー不変量を用いて標準的楕円fibrationの定義方程式を書き下せることがわかった.II群:如何なる双有理変換を施しても,Zariski分解のできない算術的因子を発見した.また,Pseudo-effectiveな算術的R-因子に対して,それより,小さなR-主因子を見つける問題は,Dirichletの単数定理の拡張である.この問題を定式化し,基本予想の形にした.III群:量子アファイン展開環のテンソル積の構造について,代数的なアプローチと幾何学的なアプローチ両方を研究した.さらに,昨年度に引き続きクラスター代数と次数付き箙多様体の上の偏屈層の関係を,特異台の立場から研究した.IV群:複素単純リー環のSlodowy sliceが多くの場合,普遍ポアソン変形を与えることを証明した.さらに普遍ポアソン変形を与えないケースをすべて分類した.Darboux型の定理をC^*作用をもったシンプレクティック特異点に対して一般化した.V群:対称領域で助変数付けられた三次元Calabi-Yau多様体の解析的捩率がモジュライ空間上の保型形式のノルムで与えられる事を示した.Borcherds Φ-関数の代数的表示を得た.VI群:良い有理型平坦バンドルと,そのストークス構造に関する理論を整備した.「各点における形式的完備化が良いドリーニュ・マルグランジュ格子を持つ」,という仮定から大域的な良いドリーニュ・マルグランジュ格子の存在を導いた.1,ベクトル束のモジュライ空間の研究、2.アラケロフ幾何の研究、3.モジュライ空間と表現論の研究、4,導来圏と双有理幾何の研究、5.解析的ねじれの研究、6.モジュライ空間と複素幾何の研究の6つ研究領域の実績の概要を述べる。1.Enriques曲面にMathieu型のsemi-symplectic作用をもつ有限群を分類した。また,ルート不変量を用いて,自己同型群がalmost abelianなEnriques曲面を分類した。種数16のK3曲面のモジュライの単有理性の論文を公開した。2.算術的トーリック多様体における巨大な算術的因子がZariski分解をもっための必要十分条件を決定した.さらに,算術的トーリック多様体においてはDirichletの単数定理の類似が成り立つことを示した.これらは,Burgos Gil氏,Philippon氏,Sombra氏との共同研究である.また、算術曲面上での算術的因子に関する一般化されたHodgeの指数定理の等号条件は、その算術的因子がネフであるということを示した.その応用として,Zariski分解の数値的性質を証明することに成功した.3.手鋸箙多様体のホモロジー群にshifted Yangian代数の表現が構成される、というBravermanらの研究を用いて、shifted Yangian代数の既約表現の次元を、手鋸箙多様体のトーラス固定点の交叉ホモロジー群を用いて表す公式を証明した。さらに、そのトーラス固定点を、以前に研究していた次数付き簸多様体と同一視することによって、交叉ホモロジー群を計算し、Kazhdan-Lusztig多項式と結びつけた。4.Darbouxの定理は、シンプレクティック多様体上のシンプレクティック形式が局所的に一意的であること主張する。この主張をC^*-作用をもったシンプレクティック特異点に対して定式化し証明した。斉次多項式の完全交差であらわされるアファインシンプレクティック多様体は、複素半単純リー環のべき零軌道閉包であることを証明した。5.BorcherdsΦ関数の代数的表示を求め,その応用としてBorcherdsΦ関数に対するThomae型公式,Freitagテータ関数との関係,CM点における値の幾何学的解釈を得た.以上は,川口周(大阪大学),向井茂(京大数理研)との共同研究である.6.2次元トーラスTと2次元ユークリッド空間R^2の直積上のL^2-インスタントンの漸近挙動について研究した。

スペクトル曲線が無限遠まで自然に延長されること、トーラス方向の寄与が指数的に減少することなどを示すことで、トーラスT上のワイルド調和バンドルと直積上のL^2-インスタントンの間のNahm変換が得られた。さらに、常微分方程式の不確定特異点のストークス構造と類似の現象が、L^2-インスタントンの研究でも現れることを洞察しました。これは、ワイルド調和バンドルによるL^2-インスタントンの指数的な近似を得る上で重要なステップになるものと期待されます。今年度の研究実績を6つの研究群ごとに分けて説明する.第1群:Enriques曲面の自己同型群に関して大橋久範氏と共同で二つの成果を得た.一つは,Enriques曲面にsemi-symplecticに作用できる有限群の分類で,これまで課して来たMathieu型という条件を外して実行した.もう一つは,自己同型群の中に有限生成非可換自由群を指数有限の部分群としてもつEnriques曲面の発見である.後者についての共著論文(RIMS preprint 1715)は出版が決まっている.第2群:今年度は,ディリクレの単数定理の高次元算術多様体における類似について考察した.成り立つための十分条件は多く知られており,アラケロフ幾何の中心的テーマの一つである.今年度の研究で,グルノーブル大学のHuayi Chen氏との共同研究で,成り立つための必要条件を研究し,算術的力学系において,否定的な例があることを発見した.第3群:4次元ユークリッド空間上のインスタントンのモジュライ空間の交叉コホモロジー群の構造について研究し、W代数の表現の構造を持つことを示した.第4群:良いC*-作用を持つアファインシンプレクティック多様体Xに関してXの非特異部分の代数的基本群は有限であることを証明した.さらにXがクレパント特異点解消Yをもつとき,Yが森夢空間であることを,新たな視点から証明した.第5群:BorcherdsのΦ関数に対する代数的表示を得た.また,対合付きK3曲面の解析的捩率不変量を一つの例外を除き全て決定した.さらに,カラビ・ヤウ軌道体に対する不変量を解析的捩率を用いて定義し,Borcea-Voisin軌道体の場合に一つの例外を除きその不変量を決定した.第6群:周期性を持つモノポールのナーム変換に関するS. CherkisとA.Kapustinによる結果を精密化を試みた.昨年度と引き続き,六つの研究群(1,ベクトル束のモジュライ空間の研究,2.アラケロフ幾何の研究,3.モジュライ空間から定まる不変量の研究,4.導来圏と双有理幾何の研究,5.解析的捩率の研究,6.モジュライ空間と複素幾何の研究)はバランスよく,順調に研究が進んでいる.それぞれの群の研究成果は以下の通りである。1.有限Mathieu型作用の分類に関する研究には幾つかの極大群が現れる.これらの作用するEnriques曲面の定義式を具体的に書くことを試みた。2.算術的因子に対して得られている基本定理(算術的体積関数の連続性,算術的一般ホッジ指数定理,算術的藤田の近似定理,算術的ザリスキ分解等)をアデリック因子に拡張した。3.箙多様体の同変ホモロジー群上には、Yangianの表現の構造の余積の幾何学的な構成を与えたMaulik-Okounkovの結果を偏屈層の枠組みの中で定式化した。4.アファイン空間の中で斉次多項式の完全交差としてあらわされる特異アファインシンプレクティック多様体は、べき零多様体になることを証明した。
近傍銀河団の力学質量サーベイ

本研究の目的は、可視領域のマルチスリット方式による多天体分光器を製作し、近傍銀河団の銀河の視線速度を測り、それをもとに銀河団の力学質量を求めるというものであった。分光器の製作は平成9年度に終了し、昨年度と本年度に実験室レベルでの基本性能のチェックを行なった。また、解析ソフトの開発も行なった。当初の計画では今年度に本観測を行ない銀河団のデータを取得することになっていたが、我々が想定していた1mクラスの適切な望遠鏡の観測時間を得ることができず、データは取得できなかった。そこで、現在我々が所有している銀河(団)のデータを用いて、本研究の趣旨にのっとり、以下の研究を行なった。1.銀河の多数写った撮像データから銀河団の候補を自動的に見つけ出すソフトを開発し、それを実際の撮像データに適用し、予想通りの性能があることを確認した。このソフトは観測対象となる銀河団の選定に有用である。2.かみのけ座銀河団という巨大銀河団の矮小銀河の性質を調べた。その結果、かみのけ座銀河団の矮小銀河の測光的性質が、おとめ座銀河団(かみのけ座銀河団とは対照的な、不規則で貧弱な銀河団)の矮小銀河と同じであることがわかった。このことは、矮小銀河の性質が環境によらず普遍的であることを示唆する。3.約10個の近傍銀河団の撮像データを用いて、銀河団に属する銀河の光度関数を求めた。その結果、光度関数の形は銀河団間でばらつくものの、銀河団全体で平均を取ればフィールド銀河の光度関数と誤差の範囲で一致すること、銀河の形態別の光度関数は銀河団間で似通っていることがわかった。本研究の目的は、光学領域のマルチスリット方式による多天体分光器を製作して近傍の銀河団の銀河の視線速度を測り、銀河団の力学質量を見積もることである。本年度は、分光器の製作、試験観測、および解析ソフトウェアの開発を行なった。分光器は平成9年2月に完成した(当初の納入予定より遅れた理由については別紙を参照)。本分光器は仕様自体はオーソドックスなものであり、特に困難もなく作製できた。試験観測は平成9年3月に行なう予定である。これは、日本で銀河団を観測する最良の時期が春であることを考慮したものである(その他の時期は、天候が優れないか、あるいは、天の川に邪魔されることによって、銀河団の観測が困難になってしまう)。分光データの解析ソフトは、ひととおりの開発を終えた。今後は、試験観測で得られたデータを用いてプログラムの最終チェックと改良を行なう予定である。解析ソフトのうち、データの一次処理(あらゆる光学データに共通の、基本的データ処理)の部分は主として既存のソフトを組み込んだ。分光データの解析に特有な部分、すなわち、銀河のスペクトル線を同定する部分は、我々自身で製作した。当初の計画では今年度に本観測を行ない銀河団のデータを取得することになっていたが、我々が想定していた1mクラスの適切な望遠鏡の観測時間を得ることができず、データ取得はできなかった。

このソフトは観測対象となる銀河団の選定に有用である。2.かみのけ座銀河団という巨大銀河団の矮小銀河の性質を調べた。その結果、かみのけ座銀河団の矮小銀河の測光的性質が、おとめ座銀河団(かみのけ座銀河団とは対照的な、不規則で貧弱な銀河団)の矮小銀河と同じであることがわかった。このことは、矮小銀河の性質が環境によらず普遍的であることを示唆する。3.約10個の近傍銀河団の撮像データを用いて、銀河団に属する銀河の光度関数を求めた。その結果、光度関数の形は銀河団間でばらつくものの、銀河団全体で平均を取ればフィールド銀河の光度関数と誤差の範囲で一致すること、銀河の形態別の光度関数は銀河団間で似通っていることがわかった。
日本古典文学におけるモチーフインデックス化とその索引データベース化の研究

本研究は、日本の説話を中心とする古典文学の内容をモチーフに分割し、索引化して、利用できるようにすることを目指したものである。研究室に保管されている既存の説話索引カードを利用し、これを修正・増補することを手段とした。しかしながら、底本の交換、内容の確認、書き換えは、当初の予想を大幅に超える時間と労力(入力の人件費)を必要としたため、全作品を対象にするには、充分ではなかった。そのため、これまで、詳しいデータのなかった。歌学書の中から鴨長明作「無名抄」を取上げ、その自立語索引を作製することに的を絞った。無名抄のテキストは、梅沢本が最古本であるが、従来、同系統の本文が知られておらず、孤立的な本文であった。調査の結果、阿波国文庫本が同系統本であることがわかった。そこで、この阿波国文庫本を底本として、自立語索引を作った。報告書の第一部は、本文編とし、阿波国文庫本の本文を正確に翻刻した。なお、底本の誤写または意味の通らない個所については、梅沢本と呉本とで対校した。第二部は、自立語索引編とし、人名とその他に分けて索引を作製した。梅沢本・呉本で校訂した部分は両方で引けるようにした。三年間の研究期間の第一年度として、本年度は主として.研究室に保管されている既存カードの点検修正とそのパソコンによるデータ入力を行うこととした。ついては、どのような方法でデータ化するかを検討したが、将来的に広く利用に供することを考え.既存の市販ソフトを利用するのが適当であるとの結論に達したので、範用性のすぐれた.MS-DOSのテキスト・ファイルとしてデータを蓄積することにした。作業はこれを市販の既存ソフトであるエクセルを用いて一覧表して作業を進めた。また、最適な底本を決定する手掛りとして、既存カードが利用した底本が何であるかを確認する作業が必要になり、これは専門知識を有する者が一点一点カードの内容と書籍の内容を対照検討することが欠かせないため.大学院生を大量に動員し、使用されている底本の確認を進めた。その上で、既存カードを遡及入力したが、本年度に入力できたものは、41作品、39,680件である。一件に複数の項目を含むものがあるため.項目数では4万項目を超えることとなった。次年度は本年度の結果をふまえて、底本の交換し、遡及入力を継続するが、必要度の高さと、三年目の完成の可能性を目途に、歌学大系を底本として、歌学書の項目入力を優先して行うこととした。本年度は前年度の結果をふまえて、次の作業手順を予定した。1パソコンを利用してモチーフインデックスをデータ化する方法を検討する。2作品毎に最適なテキストを勘案し、既存のカードの点検及び修正を行う。3新たな作品からのデータ収集を行い、既存のデータに付加する。4必要に応じて、テキスト所蔵者を訪れて、確認作業を行う。特に、2・3の作業を中心にするよう計画したが、データ量が、当初予想したよりも遥かに多量に上ることが明らかになってきたので、3年間の計画の中で一応利用可能な結果を出すために、扱う作品の範囲を限定することになった。そして従来、ほとんど利用可能なデータの提供が行われていない歌学書・歌論書の説話を優先することにした。まず、鴨長明の『無名抄』を最優先に取り上げることとし、データを取るための作品の底本の交換をすべく検討を行った。諸本の本文の比較検討を行った結果、いわゆる呉本の本文が最も信頼のおけるものであるという結論に達した。呉本は影印が刊行されているが、個人所有のものであり、使用に関わる権利関係の処理が煩雑になるため、これと同系統の本文を持ち、権利関係の処理が簡単な、東京大学図書館所蔵の阿波国文庫本を底本として使用することにした。これに基づいて、『無名抄』の索引データを採取・入力を行った。併せて、本文の翻刻を行った。

三年計画の第三年度であり、過去二年間の成果を踏まえて、本年度は以下のような作業を行った。1、既存カードの点検及び修正作業の継続。これについては、底本の検討が必要であり、現在の研究水準に合わせた底本の入れ替えを行いつつ、カード内容の確認・書き換え、入力を行った。2、新たな作品からのデータ収集を行い、既存データに付加する作業を継続。上記1とも関連して、本年度は最終年度に当たるため、利用可能な一定の成果を出すことを優先させることにしたので、利用価値が高く、従来提供されるデータがなかった歌学書・歌論書の中から鴨長明の「無名抄」を再優先に取上げることにし、結果的に、「無名抄」についてのみ自立語索引の形でデータを取り出すことができるようにした。「無名抄」のテキストは梅沢本が最古本であるが、従来は同系統の本文が知られておらず、孤立的な本文であったが、調査の結果阿波国文庫本が同系統本であることが判明したので、これを基準本文に採用した。3、以上の結果を踏まえ、研究成果報告書として、「無名抄」の自立語索引を作成した。報告書の内容は本文と自立語索引編の2部に分かれる。(1)本文編は、阿波国文庫本の本文を翻刻し、梅沢本と呉本とを対校本とした。(2)自立語索引編は、人名とそれ以外に分け、丁数と表・裏で引けるようにした。
慢性関節リウマチの病因に関与するT細胞の解析

【目的】慢性関節リウマチ(RA)の病因に関与する可能性のある自己抗原反応性T細胞をクローンレベルで検出し、それらのT細胞レセプター(TCR)遺伝子を解析する.【方法】RA患者末梢血よりT細胞を分離し、これをヒトII型コラーゲン(IIC)と試験管内にて共培養し、反応増殖するクローンを得た.これらのT細胞クローンよりRNAを抽出後、T細胞レセプター(TCR)遺伝子BV各ファミリーおよびBC領域に特異的なプライマーを用いてRT-PCR法を行い、TCRP鎖V-D-J領域遺伝子を増幅した.これらのDNAを熱変性させて1本鎖とし、SSCP法により展開することにより、塩基配列の違いに基づき、IICに反応して集積するT細胞クローンを直接検出した.さらに、これらのクローンと生体内(病変部)に集積しているクローンとを比較し、ジデオキシ法によりTCR遺伝子配列を解析した.【結果と考察】RA患者病変部にはT細胞がオリゴクローナルに集積しており、その一部は関節内成分の一つであるIICを認識して増殖していることが示された.さらに、IICに反応するクローンは、病変局所に集積しているT細胞クローンの一部と同一のTCR遺伝子塩基配列を有することが確認された.以上より、RA臥におけるT細胞のクローン増殖の一部は自己抗原であるIICの認識に由来することが明らかになった.さらに、このような細胞性の自己免疫反応と液性免疫(抗IIC抗体)陽性率および患者HLAとの関連を検討した結果、今回の検討では、SSCPで検出されうるクローンの頻度とこれらとは相関しなかった.このような方法により、RAの関節病変に集積するT細胞の抗原特異性を同定することは、RAの病因解明および特異的治療の開発につながるものと考えられる.【目的】慢性関節リウマチ(RA)の病因に関与する可能性のある自己抗原反応性T細胞をクローンレベルで検出し、それらのT細胞レセプター(TCR)遺伝子を解析する。【方法】RA患者末梢血よりT細胞を分離し、これをRAの仮想自己抗原であるヒトII型コラーゲン(IIC)と試験管内にて共培養し、反応増殖するクローンを得た。これらのT細胞クローンよりRNAを抽出後、T細胞レセプター(TCR)遺伝子BV各ファミリーおよびBC領域に特異的なプライマーを用いてRT-PCR法を行い、TCRβ鎖V-D-J領域遺伝子を増幅した。これらのDNAを熱変性させて1本鎖とし、SSCP法により展開した。以上により、塩基配列の違いに基づき、IICに反応して集積するT細胞クローンを検出した。さらに、これらのクローンと生体内(病変部)に集積しているクローンとを比較し、ジデオキシ法によりTCR遺伝子配列を解析した。【結果と考察】RA患者病変部にはT細胞がオリゴクローナルに集積しており、その少なくとも一部は、自己抗原であるIICを認識して増殖していることが示された。さらに、IICに反応するクローンは、病変局所に集積しているT細胞クローンの一部と同一のTCR遺伝子塩基配列を有することが確認された。このような解析により、RAの関節病変に関与するT細胞およびその抗原特異性を同定し、RAの病因解明および特異的治療の開発の可能性が開けるものと考えられた。【目的】慢性関節リウマチ(RA)の病因に関与する可能性のある自己抗原反応性T細胞をクローンレベルで検出し、それらのT細胞レセプター(TCR)遺伝子を解析する.【方法】RA患者末梢血よりT細胞を分離し、これをヒトII型コラーゲン(IIC)と試験管内にて共培養し、反応増殖するクローンを得た.これらのT細胞クローンよりRNAを抽出後、T細胞レセプター(TCR)遺伝子BV各ファミリーおよびBC領域に特異的なプライマーを用いてRT-PCR法を行い、TCRP鎖V-D-J領域遺伝子を増幅した.これらのDNAを熱変性させて1本鎖とし、SSCP法により展開することにより、塩基配列の違いに基づき、IICに反応して集積するT細胞クローンを直接検出した.さらに、これらのクローンと生体内(病変部)に集積しているクローンとを比較し、ジデオキシ法によりTCR遺伝子配列を解析した.【結果と考察】RA患者病変部にはT細胞がオリゴクローナルに集積しており、その一部は関節内成分の一つであるIICを認識して増殖していることが示された.さらに、IICに反応するクローンは、病変局所に集積しているT細胞クローンの一部と同一のTCR遺伝子塩基配列を有することが確認された.以上より、RA臥におけるT細胞のクローン増殖の一部は自己抗原であるIICの認識に由来することが明らかになった.さらに、このような細胞性の自己免疫反応と液性免疫(抗IIC抗体)陽性率および患者HLAとの関連を検討した結果、今回の検討では、SSCPで検出されうるクローンの頻度とこれらとは相関しなかった.このような方法により、RAの関節病変に集積するT細胞の抗原特異性を同定することは、RAの病因解明および特異的治療の開発につながるものと考えられる.
聴覚障害児の文章理解の方略に関する研究―黙読時の眼球運動の分析による検討―

本研究は、読みの理解に何らかの困難が示される先天性重度聴覚障害児の文章読みの方略を明らかにするために、聴覚障害児の中でも、読書力の高い、先天性重度聴覚障害児を対象に、同年齢の健聴児との比較を通して、各種文章の黙読時の眼球運動を用いて、これらの聴覚障害児が用いる読みの方略を検討した。実験装置は、眼球運動測定装置(竹井機器S-0163)が使用され、黙読時における読みの時間、注視頻度、注視時間、回帰運動の時間、飛躍運動の距離(読みのスパン)、理解の程度が分析された。平成13年度には、主に物語文読み時の方略が分析され、学年による方略の違いとその発達傾向を明らかにした。読書力の高い聴覚障害児は、注視と回帰を多用し、短い読みのスパンを用いる方略を作用していた。平成14年度においては、説明文と詩文読み時の方略を検討した。聴覚障害児は、物語文と同様に、説明文や詩文においても、健聴児と異なる読みの方略を示し、注視回数と時間が大きい、回帰運動率が高い、読みのスパンが短いといった特徴が示された。このような傾向はすべての文章にみられる読書力の高い聴覚障害児の読みの方略であることが確認された。また、文章の違いによる方略の相違もみられ、難易度の増加にともない、注視時間の増加、回帰運動の減少増加し、読みのスパンの縮小といった方略を用いて、健聴児と同等の理解を行っていることが確かめられた。平成15年度においては、読書力上位群と下位群の比較と、聴力レベルの違いによる検討を行った。その結果、読書力下位群では、読書材に合わせた読みの方略の変換が難しく、学年の上昇にともなう発達傾向も示されなかった。また、読書力をマーチングした場合の平均聴力レベルによる違いを検討し、全体的傾向における大きな違いは確認できないものの、聴力レベルによる読みの方略が異なる可能性が示唆された。本研究は、一般に読みに困難を示す聴覚障害児の文章読みの方略を究明するために、読みのレベルの高い聴覚障害児の文章よみの方略を、黙読時の眼球運動の側面から検討し、明らかにすることを目的とするものである。平成13年度においては、主に、物語文読みの方略を、読書力の高いグループと読書力の低いグループを対象に、検討した。被験児は、先天性高度聴覚障害児(平均聴力レベル95120dB(HL))の小学部34年生18名と6年生12名、中学部23年生16名の計46名であった。実験材料は、小学部4年生用の物語文(約5分程度で読める分量)であり、実験装置は、眼球運動測定装置(竹井機器S-0163)が使われた。データの分析は、読みの時間・停留頻度・回帰運動の頻度・読みのスパン・理解度の側面から行われた。その結果、読書力の高い聴覚障害児は、読みの時間において、小学部児童と中学部生徒の間には差がある傾向が示された。停留・回帰運動の頻度においては、小学部児童に比べて中学部生徒は減少し、読みのスパンは拡大される傾向が示された。読みの理解においても、小学部児童に比べて中学部生徒の理解度が高く示された。一方、読書力の低い聴覚障害児においては、このような傾向が示されなかった。

また、読書力の高い聴覚障害児は、全体として、サッカード運動や逆行運動、停留、行変え時において、スムーズな眼球運動が示される一方、読書力の低い聴覚障害児においては、サッカード運動に常に小さな逆行運動あるいは微動が伴われること、また、停留においても時間的メリハリのない長時間の停留が認められるなど、いくつかの読みの過程において読書力の高い聴覚障害児とでは、質的な違いが示された。また、物語を読み進むにつれ、読書力の高い聴覚障害児においては、読みの時間や停留・逆行運動、読みのスパンにおける変化が示される一方、読書力の低い聴覚障害児においてはそのような傾向は示されなかった。来年度においては引き続き、説明文や詩などの文章ジャンル別検討を行う予定である。本研究は、読みの理解に何らかの困難が示されるとされる聴覚障害児の文章読みの方略を明らかにするために、黙読時の眼球運動を分析し、各種文章の読みにおける聴覚障害児が用いる読みの方略を検討するものである。平成13年度には、主に物語文読み時の方略が分析され、読書力や年齢による方略の違いとその発達傾向を明らかにした。平成14年度においては、説明文と詩文読み時の方略に焦点を当てた。被験児は、聾学校小学部35年生26名と中学部13年生30名(読書力によりそれぞれ2群分けを行った)、一般の学校の小学部35年生15名、中学部13年生20名であった。実験装置は、眼球運動測定装置(竹井機器S-0163)が使用され、黙読時における読みの時間、停留頻度、停留時間、回帰運動の時間、飛躍運動の距離(読みのスパン)、理解の程度が分析された。その結果、とくに読書力の高く、健聴児との理解の差は示されない聴覚障害児においては、全体的に健聴児と同様の傾向を示しているものの、読みの時間、停留時間、回帰運動の頻度、飛躍運動の距離といった側面で、読みの方略の違いが示された。また、文章間における眼球運動パターンの違いも示され、説明文においては、物語文より、より細かい内容の保持や把握が要求されることから、停留時間が長く、飛躍距離が短くなる傾向が示された。また、詩文においては、回帰運動の時間を増やし、飛躍運動の距離が短くして、理解を行っている傾向が示された。しかしながら、読書力の低い聴覚障害児においては、健聴児や読書力の高い聴覚障害児と異なり、読みの時間が長く、停留の頻度や数が多い、従って、飛躍距離が短い、回帰運動が少なく、時間的に短いといった特徴が見られた。また、このような傾向は、学年の進行に関係なく示されており、読書力の低い聴覚障害児においては、読みの方略の発達的傾向は示されなかった。また、説明文や詩文のような読書材の変化に対しても、読みの方略の変化がほとんど見られていない。このことから、聴覚障害児の読みの方略は、健聴児と異なり、個人差が大きく反映されていることが推察された。本研究は、読みの理解に何らかの困難が示されるとされる先天性重度聴覚障害児の文章読みの方略を明らかにするために、聴覚障害児の中でも、読書力の高い先天性重度聴覚障害児を対象に、同年齢の健聴児との比較を通して、各種文章の黙読時の眼球運動を分析し、これらの聴覚障害児が用いる読みの方略を検討するものである。平成14年度においては、説明文と詩文読み時の方略に焦点を当て、全体的に健聴児と同様の傾向を示しているものの、読みの時間、停留時間、回帰運動の頻度、飛躍運動の距離といった側面で、読みの方略の違いが示された。
サトイモ科植物及びアスパラガス属植物における性決定機構の解明

本研究は、サトイモ科植物とアスパラガス属植物を材料として、性決定機構が異なる種間及び属間において雑種を作出し、その雑種の性表現を調査することで、両親に使用した2種間の性決定機構の差異について解明を試みている。また、植物における性表現の差異は、花の形態の差異として現れる。そこで、サトイモ科植物から花器官形成遺伝子群の単離を試み、サトイモ科植物の花器官の形態形成と性の分化について調査を行っている。1.アスパラガス属植物における種間雑種の作出...A. officinalisを中心として、数種のアスパラガス属植物との交配を行った。その結果、A. officinalisとA. chochinchinensisとの交配由来の種子が得られた。また、既に得られていたA. officinalisとA. schoberioidesとの種間雑種については、A. officinalisとの戻し交雑を行い、その後代を得ることに成功した。2.サトイモ科植物における花器官形成遺伝子群(MADS-box遺伝子)の単離...3'RACE法によりサトイモの花序のRNAからMADS-box遺伝子の単離をおこない、これまでに、4種類・9遺伝子の一部配列が得られている。これらの遺伝子について、5'RACE法により遺伝子の全長配列の決定を行った。また、各遺伝子に特異的なプローブを作成し、サザンハイブリダイゼーションを行った。その結果、ほとんどの遺伝子について、サトイモのゲノム中に1コピー存在することが確認できた。現在、サトイモの器官ごとにRNAを抽出し、ノーザンハイブリダイゼーションによる各遺伝子の発現解析を行っているところである。
ヒト移植肝のキメリズムの証明とキメラ細胞の抗老化作用の可能性

患者データベースの解析から、母親から胆道閉鎖症の女児、男児への移植は拒絶反応の低いことがわかった。また、レシピエント年齢が低いことが、免疫抑制剤からの離脱に有利であることが示唆された。年齢の高いドナーからの移植では、レシピエントの肝細胞のテロメアの短縮が高度であることがわった(Q-FISH法による測定)。移植片のテロメアは免疫学的によくコントロールされている症例では、延長する症例がみられた。母親からの男児への移植片中には多数のY染色体陽性細胞(主に血管内皮細胞)が観察された。しかし、ケラチン陽性細胞ではきわめて少数であった。平成23年度と同様に作業を行った。1.生検組織サンプルの収集を行い、臨床病理学的事項をデータベース化した。以上により症例、組織収集は終了した。移植時とりだされた胆道閉鎖症肝に関しては、Q-FISH法により肝細胞のみのテロメア長を測定を終わり論文として発刊し、テロメア測定の典型的手法であるサザンブロット法では肝細胞以外のDNAの混入により正確な測定ができないことを証明した(以上のデータはコントロールとなる)。肝移植後のグラフトの生検組織を得られ症例の性別の内訳は、母から女児(n=43),母から男児(n=33)、父から女児(n=18)、父から男児(n=20)であった。データベース化する過程で、臨床病理学的解析を行った。結果は性別のミスマッチは明らかに移植における拒絶反応が多い。父から女児への移植は急性細胞性拒絶の頻度の高いことを見出しドナーとレシピエントの性に関する英文論文を作成して投稿した。また、母から男児や女児では拒絶反応の頻度が比較的低いことから、男児および女児の妊娠に伴うキメラによる免疫応答に関する寛容が成立している可能性を考察した(投稿後査読中)。2.FISHならびに蛍光抗体法の実施。Y染色体プローブ(蛍光色素付加DNAプローブ)FISHを行い、さらに同一切片上でサイトケラチン蛍光抗体法を行い成功した。母から男児に移植の場合、グラフト組織の内皮細胞は、ほぼYプローブが陽性であった。内皮細胞は男児由来の細胞に置換されていることがわかった。サイトケラチン陽性細胞(肝細胞)内にY染色体プローブを見ることは非常にまれであった。1.114例の生体肝移植例(2001ー2012年)の臨床病理学的データを解析し原著論文が採択された。ドナーとレシピエントの性のミスマッチは移植における拒絶反応が多いことを証明した。母から女、男児への移植は拒絶反応の低いことから、妊娠によるキメラによる免疫応答に関する寛容が成立していることが示唆された。臨床上でドナーの性別を考慮すべきことを論文中で提案した。死体肝移植に関してもミスマッチに関する解析を行う次期の研究の動機となった(Transplantation Int, 2014)。2.レシピエントとドナーの両者から肝生検の得られている12例の肝細胞のテロメア長を比較解析した。なお、レシピエント肝はY染色体プローブ(蛍光色素付加DNAプローブ)によるDNA・FISH法により血管内皮細胞がレシピエント由来であることが実験で判明している。以上の解析から年齢の高いドナーからの移植では、レシピエントの肝細胞のテロメアの短縮が高度であることがわかった。移植片のテロメアは免疫学的によくコントロールされている症例では延長する症例がみられた(PloS One 2014)。3.レシピエントの免疫抑制剤内服86例と抑制剤離脱23例を比較解析した。ドナー年齢が低い症例で離脱例が多いことが判明した(投稿中)。4.生体肝移植において、母から男児への移植片の研究を行った。2001ー2010年までの35例を用いた。術後1-2カ月に拒絶反応ありは13例であった。22例は急性の拒絶反応はなかった。まず、Y染色体DNA・FISH、テロメア・セントロメアPNA・FISH、サイトケラチン免疫蛍光法による免疫蛍光法を実施した。類洞内の内皮細胞はY染色シグナルが陽性であった。現在、Y染色体陽性細胞の分布の時間的変化に関する論文を作成中である。小児生体肝移植では、移植後同時期に得られたドナー肝とレシピエント体内のグラフト肝のテロメア長は、例外的にグラフト肝が長いことがあった。レシピエント骨髄幹細胞由来の肝細胞の存在が示唆された。現在までの研究結果により、グラフト肝組織内のキメリズムを証明し、骨髄幹細胞由来の肝細胞とドナー由来の肝細胞のテロメア長を定量的FISH(Q-FISH)法により比較解析することを着想しました。

もし、多量にレシピエント由来の肝細胞が見出され、テロメア長がドナー由来の肝細胞よりも長い場合には、キメリズムの誘発(骨髄幹細胞の肝細胞化)により、移植肝の小型化や肝の抗老化や慢性肝疾患の治療につながる。3年間にグラフト肝のY染色体の有無(肝細胞内にあることを証明する)による2群の細胞比と、細胞種類(XX染色体を有するドナー由来肝細胞とレシピエントのY染色体を有する肝細胞)別テロメア長の差異を明らかにし、英文論文として投稿し、採択をはかる。FISH法によりY染色体を有する細胞数を求め、小児患者(CBA患者)ではレシピエント由来の肝細胞が成人例よりも、はるかに多いと予想する。また、Q-FISH法を駆使して、ドナーとレシピエント由来の肝細胞のテロメア長を測定して、骨髄幹細胞由来の肝細胞のテロメアの長いことを知る。以上の結果により、グラフト肝のキメリズム(chimerism)の有無と実体を明らかにします。生検組織サンプルの収集を行い、臨床病理学的事項をデータベース化初期の段階はクリアできている。移植時とりだされた胆道閉鎖症肝に関しては、Q-FISH法により肝細胞のみのテロメア長を測定を終わり論文として発刊している。この中でテロメア測定の典型的手法であるサザンブロット法では肝細胞以外のDNAの混入により正確な測定ができないことを証明した。肝移植後のグラフトの生検組織を得られ症例の性別の内訳は、母から女児(n=43),母から男児(n=33)、父から女児(n=18)、父から男児(n=20)であった。データベース化する過程で、臨床病理学的解析を行った。結果は性別のミスマッチは明らかに移植における拒絶反応が多いことを証明した。父から女児への移植は急性細胞性拒絶の頻度の高いことを見出し英文論文を作成して投稿した。また、母から男児や女児では拒絶反応の頻度が比較的低いことから、男児および女児の妊娠に伴うキメラによる免疫応答に関する寛容が成立している可能性を考察し論文化し投稿中である。実際のテロメア長の測定は開始され、データの集積を待っている。全期間を通じての進捗状況としては概ね順調と考える。実験計画が倫理委員会を通過した。これまでに該当する症例の収集が進み、パラフィン包埋によりFISH用ブロックの作製を行い、組織Q-FISHによる予備実験とX、Y染色体特異プローブによる予備実験を行い良好な結果を得た。研究方法の確認(論文既報)、臨床病理学的データベースの完成は終了し(論文投稿中)実際のテロメア長の測定を強力に進める。母親からのグラフト肝中のY染色体陽性の肝細胞(ケラチンの免疫蛍光法を行う)を見出す。その細胞のテロメアセントロメア蛍光光度比を測定する。以上により、母親からの肝細胞と男児の幹細胞由来の肝細胞のテロメア朝を比較解析する。23年度に引き続きY染色体FISHを行い、組織FISHでは強テロメア光度の細胞を見いだし幹細胞の存在も含めて、X、Y染色体数の比率を求めキメリズムの存在を明らかにして行く。そのために具体的には下記の方法を実施する。1.生検組織の収集2.FISHならびに蛍光抗体法の実施Yプローブを用いたFISH、サイトケラチン蛍光抗体法3.Q-FISH法、4.蛍光写真撮影、5.Tissue Teloを用いたテロメア長解析研究費の使途としてはFISHの実験と、実験後の解析作業(蛍光写真撮影、オリジナルソフトウエアーTissue Teloによる解析)に人件費が必要になる。
吉蔵の法華経注釈書の定本作成に関する研究

中国隋代に三論教学を大成した嘉祥大師吉蔵(549-623)には、『法華玄論』『法華義疏』『法華統略』『法華遊意』『法華論疏』の5部の法華関係注釈書がある。これら法華関係注釈書の著述量は、彼の著作全体から見ても大きな割合いを占める。しかし、それらに対する文献学的研究は立ち遅れているのが現状であった。そこで吉蔵の法華経注釈書の定本作成を目的に研究申請した私どもは、今年度次のような研究を行なった。定本作成にあたり、私どもは時代の趨勢を鑑み、これまで活字化されていた吉蔵の法華経注釈書すべて(主として大正蔵経所収の文献)をOCRによってコンピュタ-入力することを企図した。その結果、学内の研究者や多数の大学院生の協力を得て、大部分その作業を終えることができた。これによって、「研究目的」に記した校訂本(定本)のCD-ROM化のための基盤は整えられたといえる。ただ、入力した原文に厳密な校訂を施した定本作成の作業までは終了するに至らなかった。東大寺図書館をはじめ各仏教系大学図書館より校訂に必要な写本や刊本はすでに入手してあるので、今後は精力的に校訂作業を継続する予定である。今年度のわれわれの研究により、博引旁証をもって知られる吉蔵の著作研究において、研究者はその引用経論の検索等に計り知れない便宜が与えられることは疑いなく、その点はあえてここで強調しておきたい。作成する定本は、活字化して公開するのが建前であるが、そのためにはさらに莫大な経費が必要であり、条件が整えば、国内外に向けてインターネット上でテキスト公開することも現在検討中である。
抗酸化剤によるヒトロ腔扁平上皮癌細胞死におけるHIF-1αの挙動

先ず、天然界に存在するポリフェノール類、抗酸化剤の中から腫瘍選択性のあるものを探索をすることから開始した。リグニンはアスコルビン酸やビタミンKのアポトーシス誘導活性を相乗的に促進した。大環状加水分解性タンニンやイソフラボンに腫瘍選択毒性が見られた。ステロイダルサポニンは、低濃度で酸化作用を介さず強い細胞障害活性を示した。各種植物抽出液は腫瘍選択性と、MDR克服活性を示した。CoCl_2の添加により、抗酸化剤のジオール部分が酸化を受け、アポトーシス誘導活性が抑制された。ヒトロ腔扁平上皮癌HSC_2細胞は、低酸素状態では、HIF-1αのHREへの結合が増加する。この時、抗酸化剤のNACや細胞内移行型のGSH ethylesterは、この反応を抑制するが、アスコルビン酸の抑制効果は、極僅かなものであった。一方、プロモーター領域にヒトVEGFのHREをtandemにrepeatしたlucifarase遺伝子を安定に発現する変異株を作成して、レポーターアッセイで、HIF-1の活性化を検討したが、通常酸素状態で高濃度のアスコルビン酸を添加6時間後で、全く誘導が認められなかった。これに対して、高濃度(5mM)アスコルビン酸添加によるHL-60細胞アポトーシス誘導時においては、HIF-1αmRNA発現の急激な増加と、MnSODmRNA発現低下が観察された。これは、アスコルビン酸による酸素消費の結果(MnSODも消費し尽くされ)、酸素供給に必要なタンパク質等を発現するように細胞側が応答したことを示している。これらのタンパク質の同定と、HIF-1αのmRNAの誘導にもかかわらず細胞死に至る機構の解明は、今後の研究テーマである。ECCGやイソフラボンは、マウスマクロファージRaw264.7細胞にもアポトーシスを誘導するが、baxの発現を2相性に変化させた(低濃度では低下、高濃度では増加)。抗酸化作用と酸化作用の切り替えの機構も今後の検討課題である。アスコルビン酸、没食子酸、エピガロカテキンガレート(EGCG)等の抗酸化剤は、ヒト口腔扁平上皮癌HSC-2や、唾液腺腫瘍細胞にDNA断片化(TUNEL法)やカスパーゼの活性化(M30モノクローナル抗体で検出)等のアポトーシスに特徴的な変化を誘導した。また、タンニンの中では、環状構造を持つ加水分解性タンニン、フラボノイド類の中では、イソプレニル化合物が最大活性を誘導した。ポリプレニルアルコールの中では、イソプレニル単位が4個のゲラニルゲラニオールが、また、ビタミンK_2誘導体の中では、イソプレニル単位が2個のMK-2が最大活性を示した。これらの物質は、ヒト歯肉線維芽細胞よりも、口腔癌細胞に対して障害的に作用した。この原因については、今後の解析が待たれる。EGCGを添加することにより、生存シグナル(bcl-2、akt)が減少し、カスパーゼ9及び3の活性化を介して、ヌクレオソーム単位のDNAの断片化が誘導された。アスコルビン酸の添加により、培養液中にラジカル、過酸化水素、メチオニンの酸化物が産生され酸化状態が生じたが、細胞内活性酸素(ROS)の産生は減少した。細胞内外の酸化還元状態の変化については、今後の検討課題である。

また、これら抗酸化剤の細胞障害活性は、低酸素誘導因子(HIF1α)を誘導されるとされる塩化コバルトで減弱したが、これは、塩化コバルトによる抗酸化剤の酸化による活性の低下なのか、それとも細胞内にHIF1αが誘導されたためなのかを検討中である。ヒト口腔扁平上皮癌HSC-2細胞は、低酸素状態においては、HIF-1αのHREへの結合が増加する。この時、抗酸化剤のNACや細胞内移行型のGSH ethylesterは、この反応を抑制するが、アスコルビン酸の抑制効果は、極僅かなものであった。一方、プロモーター領域にヒトVEGFの、HREをtandemにrepeatしたluciferase遺伝子を安定に発現する変異株を作成して、レポーターアツセイで、HIF-1の活性化を検討したが、通常酸素状態で高濃度のアスコルビン酸を添加6時間後で、全く誘導が認められなかった。これに対して、HL-60細胞においては、高濃度(5mM)アスコルビン酸によるアポトーシス誘導の過程では、濃度依存的にHIF-1αのmRNAの発現が、添加1時間以内に約2.5倍ほど増加することがRT-PCR解析で判明した。これは、アスコルビン酸添加により培養液中の酸素が消費して、hypoxiaが誘導されること、そして酸素供給に必要なタンパク質を発現するように細胞側が対応することを示している。これらのタンパク質を同定すること、また、HIF-1αのmRNAの誘導にもかかわらずHIF-1の活性化に至らずに細胞死に至る機構の解明は、今後の研究テーマである。緑茶主成分のEGCGや、イソフラボンは、リポ多糖によるマウスマクロファージRaw264.7細胞の活性化(NO、シトルリン、アスパラギン、TNF産生)を抑制するとともに、Raw264.7細胞にアポトーシス(TUNEL陽性細胞の出現、baxの発現促進、iNOS, SOD1の発現抑制)の誘導した。Baxの発現は、(抗酸化作用を示す)低濃度では低下するが、(酸化作用を示す)高濃度では増加し、2相性の調節機構が示唆された。高濃度の抗酸化剤は、HIF-1αとは対照的に、ミトコンドリアのMnSOD活性やMnSOD mRNAの発現を有意に低下させた。アポトーシスの進行過程で、細胞が低酸素・酸素ストレスに対処する機構として、HIF-1αやMnSODmRNAの発現調節を独立的に働かせている可能牲を示唆する。
内直筋と眼瞼内眥部、外直筋と眼瞼外眥部の関係の解明

(1)内直筋と眼瞼内眥部の関係上下眼瞼を瞼縁に平行に切り、眼瞼と内直筋の関係を調べた。上眼瞼は、瞼縁からそれぞれ1mm、5mm、下眼瞼は、瞼板が上眼瞼に比べて小さいので、瞼縁からそれぞれ1mm、3mmの部位を切った。上下眼瞼の1mmの部位の標本では、眼輪筋涙部が直接、瞼板に侵入していたため、内直筋から連続する線維組織(medial capsulopalpebral fascia : m-CPF)と眼瞼の直接的な交流はなかった。しかし、眼輪筋涙部の後面に密に付着している所見が得られたので、間接的には、影響を及ぼしていると考えられた。上眼瞼の5mmの部位の標本では、m-CPFが直接、瞼板内側へ侵入していた。従って、内直筋と眼瞼の直接的な関係が証明された。下眼瞼の3mmの部位の標本では、上眼瞼の5mmの部位と同様に、m-CPFが直接、瞼板の内側へ侵入していた。従って、下眼瞼でも内直筋と眼瞼の直接的な関係が証明された。(2)外直筋と眼瞼外眥部の関係上下眼瞼を瞼縁に平行に切り、眼瞼と外直筋の関係を調べた。上眼瞼は、瞼縁からそれぞれ1mm、5mm、下眼瞼は、瞼縁からそれぞれ1mm、3mmの部位を切った。上眼瞼のすべての1mmの部位での標本と、下眼瞼の1眼瞼を除く1mmの部位での標本では、外直筋から連続した線維組織(lateral capsulopalpebral fascia : l-CPF)は、瞼板外側と眼窩外壁を結ぶ外眥靭帯と合流して瞼板に侵入していた。一部の標本で眼輪筋成分を含んでいた。上眼瞼の5mmの部位の標本でも同様にl-CPFは、外眥靭帯と合流して瞼板に侵入していた。しかし、どの標本も眼輪筋成分は含んでいなかった。下眼瞼の3mmの部位の標本では、上眼瞼の5mmの部位と同様に、l-CPFは、外眥靭帯と合流して瞼板に侵入していた。しかし、一部の標本では、l-CPFは瞼板に達していなかった。内直筋と眼瞼内眥部、外直筋と眼瞼外眥部はともに直接の連絡線維を持ち相互に関連していた。