hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
憲法上の救済方法に関する体系的研究―違憲審査における法令の違憲性への司法的対応―

以上の研究成果は、博士論文として北海道大学法学研究科に提出し、その後公表する予定である。平成29年度は、アメリカ法における法令違憲判断の方法についての判例・学説を整理・検討し、わが国に参照した上で、法令違憲に際して司法の取りうる対応についての法準則を体系的に提示することを目指す。29年度が最終年度であるため、記入しない。
小児がん患児に対する院内感染予防のための排泄ケアの開発

血液腫瘍疾患で抗がん薬治療を受けた515歳の長期入院中のがん患児を対象に、糞便中の毒素検出、C. difficile分離培養、分離菌株における毒素産生パターンの同定、PCR ribotypingによる解析、付添いの状況や手指衛生等に関する調査をした。がん患児10名中8名からC. difficileが分離され、そのうち6名は、入院時にはC. difficileは分離されなかったが、入院経過中に培養陽性となった。8名中5名からtoxin A陽性toxinB陽性のC. difficileが分離され、そのうち2名はC. difficile関連下痢症/腸炎(C. difficile -associated diarrhea :CDAD)と診断された。8名から分離された9菌株においてPCR ribotypingによる解析を行った結果、2名から分離された2菌株は同一タイプであった。Clostridium difficileは,抗菌薬関連下痢症の主要な原因菌で,院内感染の原因菌としても重要である.がん患児は,抗がん剤治療のため長期入院を余儀なくされ,ほぼ全例で抗がん剤使用中に腹痛や下痢症等の症状が生じるが,細菌学的検査が行われていないことが多く,C. difficile感染症の実態は不明である.長期入院中がん患児におけるC. difficile感染予防のための簡単で効果的な排泄ケア方法の確立を最終目的として,C. difficileの消化管保有及び院内伝播の実態を調査した.対象は,血液腫瘍疾患で抗がん剤治療を受けた5歳15歳の患児.糞便中の毒素検出及びC. difficile分離培養を行い,分離菌株においては毒素産生パターンの同定,PCR ribotypingによる解析を行った.さらに付添いの状況や手指衛生等に関する調査をした.長期入院中の抗がん剤治療中のがん患児9名のうち,8名からC. difficileが分離された.そのうち,6名は,入院時にC. difficileは分離されなかったが,入院経過中に培養陽性となったことから,院内獲得の可能性が示唆された.8名中5名からtoxinA^+B^+のC. difficileが分離され,そのうち2名はC. difficile関連下痢症/腸炎(CDAD)と診断され,バンコマイシンによる内服治療が必要であった.このことから,小児がん患児においては,CDADは稀な感染症ではないことが明らかとなった.8名の患児から分離されたC. difficileの菌株でPCR ribotypingを行った.2名が同一のタイプであり,水平伝播の可能性が示唆されたが,その要因を明らかにできなかった.小児病棟では家族の付き添いが多く,がん患児の排泄ケアは患児自身や家族が全て行っており,看護師は行っていなかった.排泄ケア後の患児や家族が行う手指衛生は,数秒間の水洗か,ウェットティッシュで手指の清拭をするのみであったことから,患児や家族に対して,手袋の着脱を含めた手指衛生の指導を実施することが重要であると考えた.H19年度は、これまで実施してきた長期入院がん患児におけるClostridium difficile消化管保有と排泄ケアに関する調査結果をまとめ、学会発表および論文として投稿した(感染防止、2007。日本嫌気性菌感染症研究2007)。検討したがん患児10名中8名の糞便検体からC. difficileが分離され、そのうち6名は、入院時にはC. difficileは分離されなかったが、入院経過中に培養陽性となった。このことから、抗菌薬や抗腫瘍剤使用中の小児がん患児において非常に高い割合でC. difficileが消化管内で増殖していることがわかった。8名中5名からtoxin A陽性toxinB陽性のC. difficileが分離された。そのうち2名はC. difficile関連下痢症/腸炎(C. difficile associated diarrhea: CDAD)を発症し、バンコマイシンによる治療が必要であった。小児がん患児において、CDADは稀な感染症ではないことが明らかとなった。8名から分離された9菌株においてPCR ribotypingによる解析を行った結果、2名から分離された2菌株は同一タイプであったが、残りの6名から分離された7菌株はそれぞれ異なるPCR ribotypeを示し、水平伝播の可能性が示唆されたが、性別や年齢、院内教室の通学の有無において、この2児間に共通の要因は明らかにできなかった。

これまでの結果より、小児がん患児において非常に高い割合でC. difficileが消化管内で増殖していること、水平伝播の可能性が示唆されたことなどから、次年度は、効果的な接触感染予防法を明らかにすることを目的に、患児のベッド周囲及び排泄物の処理経路を明らかにし、その環境側面のC. difficile検出状況を明らかにしていく予定である。H20年度は、これまで実施してきた長期入院がん患児におけるClostridium difficile消化管保有と院内伝播に関する検討を論文として発表した(日本感染症学雑誌82(5)p419-4252008)。化学療法中のがん患児のC.difficle関連下痢症/腸炎の実態、および排泄ケアを行なう看護師や家族等の排泄ケア行動の実態を明らかにし、効果的な接触感染の方法を明らかにすることを目的に、長期入院がん患児におけるC.difficle消化管保有状況を継続的な調査・分析、患児の生活およびベッド周囲の状況、排泄物の処理経路等の確認を行なった。その結果、長期入院がん患児において非常に高い割合でC.difficleが消化管内で増殖していることや水平伝播の可能性が示唆された。さらに、小児の入院患児の場合、身の回りの世話を家族が行うことが非常に多い等、成人患者らとは異なる生活背景、入院状況であることが明らかとなった。よって、C.difficle感染症の予防方法を検討する上で、小児の成長発達段階や患児へのケアだけではなく、付き添いや面会の家族も含めて考慮した排泄ケアが重要であると示唆された。
超高圧高温実験に基づく"Missing xenon"問題の解明

本研究は、地球の中心核に対応する130GPa以上の超高圧高温条件下で、キセノン(Xe)が鉄やケイ酸塩と化合物や固溶体を作るか否かを実験で明らかにし、その結果に基づいて、長年地球科学の分野で未解決の大きな問題として残されているいわゆる"Missing xenon"問題の解明に寄与しようとしたものである。レーザー加熱ダイヤモンドアンビル装置を用いた実験技術の改良により、低温下で試料室に鉄と液化したXeを封入し150GPaを越す圧力まで加圧した後、レーザーで照射して数千°Cまで加熱しながら、X線回折実験を行うことに成功した。その結果、このように核に対応する圧力温度条件下でもXeは鉄と全く反応せず、固溶体も作らないことが明らかになった。このことは今まで提唱されていた、大気中に欠損したXeはコア中に溶け込んでいる、という可能性を否定するものであり、Missing Xenon問題の解明には、別の可能性を考えねばならないことを示している。本研究は、地球のコアに対応する100万気圧を超す超高圧高温条件下で、金属化したキセノン(Xe)が鉄や珪酸塩と化合物や固溶体を作るか否かを実験によって明らかにし、それらの結果をもとに、長年地球科学の分野で未解決の大きな問題として残されている、いわゆる"Missing xenon"問題の解明に寄与することをめざしている。初年度は、物性研のわれわれのグループで長年開発を続けその利用技術も確立している、Xeガスの液化充填装置とマルチメガバール領域でのX線その場観察実験技術を組み合わせ、Xeと鉄の200GPa近い領域までの高温高圧実験を行った。物性研においてXeと試料をダイヤモンドアンビルに詰め、それをSPring-8のBL10-XUに持ち込んで、加圧と加熱を段階的に行いながらX線回折実験を繰り返した結果、実験された圧力温度領域内では新化合物は生成せず、観測された各相の体積から、固溶が起きている様子も無いことが明らかにされた。またこの結果は、この圧力温度領域で安定なFeと金属化したXeが共にhcp構造の金属になってはいるものの、その原子体積が大きく違うということで理解できることが明らかになった。今後はさらに温度領域の拡大に力を注ぎ、鉄が溶融した場合の反応についての実験的確証を得るよう努力することと、ニッケルは鉄よりXeと反応しやすいという理論的予測があることから、純鉄だけでなく、鉄-ニッケル合金との反応についても実験を行いたいと考えている。これらの結果を踏まえて、地球深部におけるXeの可能な存在形態に関して議論を行う。昨年度は、物性研のわれわれのグループで長年開発を続けその利用技術も確立しているXeガスの液化充填装置とマルチメガバール領域でのX線その場観察実験技術を組み合わせ、SPring-8においてXeと鉄の170GPaまでの高温高圧実験を行った。その結果実験された圧力温度領域内では新化合物は生成せず、固溶も起きていないことが明らかにされ、そこまでの段階の結果をすでに論文にまとめた。そこで今年度はさらに温度領域の拡大に力を注ぎ、鉄が溶融した場合の反応について実験することと、ニッケルは鉄よりXeと反応しやすいという理論的予測があることから、鉄-ニッケル合金との反応についても実験を行おうとしたが、準備したアンビルが加圧中に破壊したため、所期の条件下での実験を行うことはできなかった。また震災の影響で前期のPFマシンタイムが全てキャンセルされ、代わりの実験を遂行することもできなかった。そこでキセノンと鉄だけでなく、鉱物などより多様な物質との反応について研究対象を広げるべく準備と予備的な実験を進めている。これらの結果をふまえて、広い立場からMissing Xenon問題に関しての考察を進めている。本研究は、コアに対応する超高圧高温条件下で、キセノン(Xe)が鉄や珪酸塩と化合物や固溶体を作るか否かを実験によって明らかにし、それらの結果をもとに、長年地球科学の分野で未解決の大きな問題として残されている、いわゆる"Missing xenon"問題の解明に寄与することを目的とした。

研究開始当初からまずさまざまな技術開発を行い、それまで困難であったキセノンと鉄をダイヤモンドアンビル装置の試料室に封入し、超高圧まで加圧して実験を行う技術開発を行った。それを用いてFe-Xe系を150万気圧以上まで加圧してから3000Kを越す高温まで加熱し、SPring-8において高圧下のその場観察実験を行うことに成功した。その結果、このようなコアに対応する超高圧高温条件下でも鉄とキセノンは全く反応せず、新たな化合物も作らないことが、X線解析による格子常数の変化等から明らかにされた。この結果は大気中に欠損しているキセノンがコア中に含まれているのではないかという仮説を否定するものであり、Missing xenon問題の解明にはさらなる別の可能性の探究が必要なことが明らかにされた。この結果はアメリカ地球物理学連合で出しているGeophysical Research Letter誌に発表された。メガバール領域の実験では避けられないアンビルの破壊により、SPring-8の実験で当初予定した条件下での実験が行えなくなり、その後震災の影響でフォトンファクトリー(PF)が半年間停止したため、代わりのシンクロトロン放射光実験も行えなかった。24年度が最終年度であるため、記入しない。キセノン・鉄系のメガバール領域における基本的なふるまいに関しては、すでに初年度の実験で明らかにできたので、実験対象とする系を拡げ、鉱物なども含めより多様な物質とキセノンの反応関係を明らかにすることにより、Missing Xenon問題に関するより広い視野での考察を進める予定である。
オリゴマー形成によるGタンパク質共役受容体の機能調節機構

Gタンパク質共役受容体(GPCR)のオリゴマー形成は同じGPCRや類縁ファミリーGPCR間のみならず、構造的に異なるGPCR間でも生じて、受容体のリガンド結合、脱感作、細胞内移動、シグナル伝達などに様々な変化を与える。したがってオリゴマー形成はGPCRの多様性を促進する新しい機構であり、タンパク-タンパク相互作用が生理学的、薬理学的に重要な役割を果たす重要な例と考えられる。我々はすでに、神経伝達を抑制的に調節に関与するGPCR型プリン受容体において、A_1型アデノシン受容体とP2Y_1受容体間のヘテロダイマー形成とその生理的機能を明らかにしている。そこで、プリン受容体におけるヘテロダイマー形成の役割をさらに明らかにするために種々のプリン受容体サブタイプや他のファミリーのGPCRとの組み合わせで共発現実験をおこなったところ、A_1アデノシン受容体はA_1、P2Y_1、P2Y_2、D_1 dopamine、mGluR_1などとダイマーを形成、またA_<2A>アデノシン受容体もA_<2A>、P2Y_1、P2Y_2、P2Y_<12>、D_2 dopamine、mGluR_5などの各GPCRとダイマーを形成するという結果が得られ、プリン受容体のダイマーを形成する能力の高さが明らかになった。プリン受容体がGPCRの発現もしくは細胞膜へのトランスロケーションにおいてある種のシャペロンとして機能する可能性をも示唆している。別のGPCRファミリーに属するグルタミン酸受容体(mGluR1)のホモオリゴマー形成におけるリガンドの役割を、蛍光タンパクを結合させた受容体を用いたFRET実験で検討したところ、細胞内のダイマー形成ドメインの立体構造が細胞外ドメインへのリガンド結合刺激により調節されるということ、すなわち細胞内部の受容体ダイマー配置の変換が外部シグナルを仲介していたことを明らかにした。
食細胞の走化性運動におけるコフイリン・LIMキナーゼ系の役割

コフィリンは普遍的なアクチン結合蛋白で、非リン酸化体のみがアクチンと結合して、繊維性アクチンの切断、脱重合を引き起こす活性をもつ。LIMキナーゼによってリン酸化されると、不活性体となりアクチンとは結合できなくなる。最近、我々は食細胞の活性酸素産生や貪食機能において、コフィリンが重要な制御機能をもつことを明らかにして報告してきた。本研究では、食細胞の走化性におけるコフィリンの役割を検討した。インターロイキン8(IL-8)は、食細胞に対する強力な生理的ケモカインだが、細胞内ではコフィリンの早い脱リン酸化反応と、それに続く再リン酸化反応を引き起こした。コフィリンのリン酸化領域のペプチドと膜透過性配列ペプチドを融合させた配列をもつペプチドS3-Rで細胞を前処理しておくと、コフィリンのリン酸化が阻害されるとともに、IL-8による走化性は亢進した。コフィリンのリン酸化領域についてC末側とN末側を逆向きにした配列のペプチドでは、コフィリンのリン酸化阻害も走化性亢進も起こらなかった。一方、PI3キナーゼの阻害剤であるワートマニンやLY294002で細胞を前処理しておくと、ケモタキシスもコフィリンのリン酸代謝回転も阻害された。さらに、コフィリンのsiRNAでコフィリンレベルを低下させると、走化性は抑制された。以上の結果より、食細胞の走化性には非リン酸化型の活性化コフィリンが不可欠の重要な役割を果たすこと、およびPI3キナーゼがコフィリンのリン酸化・脱リン酸化反応を上流で調節する機能を果たしていることが示唆された。【目的】コフィリンは、分子量19kDaのアクチン結合蛋白で、酵母や粘菌から哺乳度物細胞のあらゆる組織まで極めて普遍的に存在する。F-アクチンの切断・脱重合の活性をもつが、リン酸化されるとその活性はなくなる。最近、リン酸化を担う特異的酵素としてLIMキナーゼが、脱リン酸化を担う特異酵素としてSlingshotが同定された。我々は、刺激を受けた白血球においてコフィリンは、脱リン酸化、再リン酸化の制御を受け、活性酸素の産生や異物の貪食に深く関与することを明らかにしてきた。しかし、白血球の重要な機能の一つである走化性については、コフィリンがどのように関与するか不明である。そこで、本研究では白血球(好中球)の走化性運動におけるコフィリンの役割について検討した。【方法】ヒト培養未分化白血球HL-60細胞を、ジメチルスルホキシドおよび顆粒球コロニー刺激因子存在下に6日間培養して、好中球様に誘導し使用した。走化性因子としては、インターロイキン8(IL-8)使用し、走化性アッセイは96穴チャンバーで行った。IL-8受容体の発現はフローサイトメトリで、リン酸化コフィリンは特異抗体を使用したウェスタンブロッティングで解析した。コフィリンのリン酸化部位と細胞膜透過性配列を結合させたS3-Rペプチドを調製し、好中球様HL-60細胞を30分前処理して影響を検討した。細胞内におけるコフィリンおよびF-アクチンの分布は、特異抗体を使用した間接蛍光抗体法および蛍光標識ファロイジンで染色した細胞を、共焦点レーザー走査顕微鏡で観察した。【結果】IL-8の受容体は、未分化のHL-60細胞にはほとんど存在しないが、好中球様に分化させると顕著に発現し、0.11.0nMのIL-8により顕著な走化性を示した。好中球様HL-60細胞をInMのIL-8で刺激すると、コフィリンは30秒で一過性に脱リン酸化された後、再リン酸化された。S3-Rペプチドで処理した細胞はコフィリンの再リン酸化が阻害され、かつ走化性が抑制された。

また、IL-8刺激により細胞は変形し、コフィリンおよびF-actinはその変形した細胞膜直下に共局在するのが観察された。【結論】白血球がIL-8に対して走化性運動を起こす場合、コフィリンはリン酸化・脱リン酸化の制御を受け、細胞膜直下でF-アクチン形成を調節することにより、重要な役割を果たしていることが示唆された。【目的】コフィリンは、分子量19kDaのアクチン結合蛋白で、酵母や粘菌から哺乳度物細胞のあらゆる組織まで極めて普遍的に存在する。F-アクチンの切断・脱重合の活性をもつが、リン酸化されるとその活性はなくなる。最近、リン酸化を担う特異的酵素としてLIMキナーゼが、脱リン酸化を担う特異酵素としてSlingshotが同定された。我々は、刺激を受けた白血球においてコフィリンは、脱リン酸化、再リン酸化の制御を受け、活性酸素の産生や異物の貪食に深く関与することを明らかにしてきた。しかし、白血球の重要な機能の一つである走化性については、コフィリンがどのように関与するか不明である。そこで、本研究では白血球(好中球)の走化性運動におけるコフィリンの役割について検討した。【方法】コフィリンのsiRNAを、5種類デザインし(いずれも21mer)、細胞への導入にはトランスフェクション試薬TransIT-TKOを用いた。食細胞としては、ヒト培養未分化白血球HL-60細胞を、ジメチルスルホキシドおよび顆粒球コロニー刺激因子存在下に6日間培養して使用した。走化性因子としては、インターロイキン8(IL-8)使用し、走化性アッセイは96穴チャンバーで行った。【結果】分化誘導開始4日目の細胞にコフィリンsiRNAを導入し、6日目の細胞のコフィリンレベルをウェスタンブロッティングで調べた結果、約50%の低下が認められた。その細胞の走化性アッセイを行った結果、活性は低下していた。【結論】前年度報告した結果と総合して、食細胞がIL-8に対して走化性運動を起こす場合、コフィリンは一過性の早い脱リン酸化とそれに続く再リン酸化というリン酸の早い代謝回転制御を受けること、細胞膜直下でF-アクチン形成を調節することにより、走化性運動に不可欠な役割を果たしていることが示された。
大腸癌微小環境における細胞死機構の解明と治療開発

癌微小環境は、線維芽細胞、血管細胞、間質細胞などより構成され、癌細胞の増殖・進展に寄与する状況を生み出している。癌関連線維芽細胞は、癌細胞によって教育された線維芽細胞であり、癌細胞とのクロストークによりお互いが活性化されると考えられている。本課題では、線維芽細胞の視点から癌微小環境を検討し、癌関連線維芽細胞を標的とした癌進展抑制を目的とする新規治療法を探索する。特に、癌細胞-線維芽細胞間相互作用におけるエクソソームの役割とオートファジーの意義について明らかにする。
モーリシャスにおけるチャゴス難民の適応問題と国内外の援助活動の動向

仏領から英領モーリシャスへの転換がモーリシャスを独立国家へと導いた。しかしこの独立の影にモーリシャス包括領土から切り離されインド洋イギリス領とされ、アメリカ軍基地として貸し出された島とその周辺諸島全てから強制移住させられた住民がいることを知らなければならない。Diego Garcia島を含むチャゴス諸島全体を悲劇的運命に導いたのは米本土からは遠いがあらゆる地域の中心、何処よりもアラブ諸国を望む絶好の地理的条件と自然の環礁が保護する港で、艦船も原子力潜水艦も停泊可能という基地として最大限に利用できる条件といえる。モーリシャスが英国より独立する際、条件としてインド洋英領とすることが提示された。チャゴス諸島はその後米国に貸与され、重要な軍事拠点として機密基地が建設された。そのため、チャゴスの住民は強制的にモーリシャスやセイシェルに移住させられた。今回の研究は主にモーリシャスに強制移住させられたチャゴス難民の現状とそれに関連した諸問題を取り上げることを主たる目的とする。平成21年度は、チャゴス難民のモーリシャスでの実態調査を行う上で、被験者の選定と依頼を行うための予備調査を行った。まずチャゴス難民グループのリーダーと実際に面談することができ、彼を含む難民たちの体験の概略を生の声で聞くことができ、更に、定期的に開かれるチャゴス難民の集いに参加し、彼らがいかにして独自の生活スタイル・文化を保持しようと努めているかを一見することができた。この予備調査で新たな視点として、第二世代以降のモーリシャス生まれのチャゴシアンのアイデンティティ問題が浮上したことから、サンプリングとして3名のモーリシャス生まれのチャゴシアンのインタヴューを依頼。彼らはモーリシャス人としての自覚があるが、第一世代の苦しみの歴史を決しておろそかにしているわけではない。第二世代以降の今後の問題を更に詳細に辿る必要性を感じた。21年度の調査の概要をまとめ"Transcultural Mappings"(シドニー大学主催)で発表、広く知られていないが国際的な問題を学識者に知ってもらい関心を持ってもらうという点では有意義であったと考える。フランス領モーリシャスからイギリス領モーリシャスへの歴史上重要な転換期がモーリシャスを独立国家へ導いたが、この転換ゆえにモーリシャスから切り離されイギリス支配下に置かれアメリカ軍基地となった島とそこから強制移住させられた住民がいることを忘れてはならない。Diego Garcia島とその周辺島民を悲劇的な運命に導いたのはその地理的位置と地質学的条件:自然の環礁が保護する港で、艦船も原子力潜水艦も停泊可能。現在その島には数十名のイギリス人以外は全てアメリカ軍関係者のみが滞在する。1991年湾岸戦争時、2001年の同時多発テロの後、アフガンへの攻撃もこの島からだった。インド洋上の唯一のアメリカ軍基地の役割は大きい。かつてはフランスとイギリスの争奪戦の渦中にあったこの島がイギリス領になったことで、「寄港地」からアメリカの中心的軍事基地へとその重要度を増すことになる。単なるアメリカ一国の帝国主義の犠牲ではなく、「脱中心化されたネットワーク状の支配装置」(アントニオ・ネグリ/マイケル・ハート『帝国-グローバル化国際秩序とマルテチュードの可能性』(2003))としての英米軍事網の犠牲となっているチャゴス難民の歴史を概観し、その戦いを共有することを目的とする。現存する帝国主義が「(至便の良い)遠隔地を利用する」ための理論と実践であるならば、それに戦いを挑む1万人にも満たないチャゴス難民はその抵抗文化の先駆者といえる。しかも無血独立だった。しかしこの独立の影にモーリシャス包括領土から切り離されインド洋イギリス領とされ、アメリカ軍基地として貸し出された島とその周辺諸島全てから強制移住させられた住民がいることをもっと知らなければならない。Diego Garcia島を含むチャゴス諸島全体を悲劇的な運命に導いたのは米本土からは遠いがあらゆる地域の中心、なによりもアラブ諸国を望む絶好の地理的条件と自然の環礁が保護する港で、艦船も原子力潜水艦も停泊可能という基地として最大限に利用できる条件といえる。イギリス政府は自然環境保護というもっともらしい条件で島民を寄せ付けない策略をめぐらせている。かつての「帝国」がその国力でチャゴス難民帰島の戦いを阻止しようとしている。そこで、日本の研究者として米軍基地をキーワードに沖縄との共同作業が何か出来るのではと考えた。すでにDialogue under Occupationという国際会議体がチャゴス難民リーダーを沖縄に招きシンポジウムを行なっていたが、継続的に対話を行うと共に有識者による意見交換を持つ機会を作る計画である。
組合せデザインの代数・幾何構造と最適組合せ符号への応用

平成28年度は,本研究課題において前年度までに得られた結果に基づいて,DNA libraryscreening実験におけるgrid-blockデザインと呼ばれる組合せ構造に関する研究を行った.特に,grid-blockデザインの構成法とその漸近存在性について数論的立場から研究を行い,研究成果を国際誌に投稿した.本研究成果は,現在,査読中である.また,grid-blockデザインの概念をさらに発展し,grid-block被覆デザインという組合せ構造を考え,2 ×c grid-blockの数が最小となる最適かつ分解可能なgrid-block被覆デザインの組合せ論的特徴付けを行い,再帰的構成法を与え,分解可能な最適2 ×3 grid-block被覆デザインの存在性に関する必要十分条件を与えた.本研究成果は論文として国際誌Utilitas Mathematicaに採択された.そして,有限体上の乗法指標和に関するWeilの定理の帰結であるBuratti-Pasottiの定理を改良できて,その有限体上で構成するgrid-blockデザイン・差集合族などの組合せデザインの存在性限界の改良効果も示した.本研究成果は,国際誌Graph and Combinatoricsに公表された.28年度が最終年度であるため、記入しない。28年度が最終年度であるため、記入しない。今年度,私は以下の四点について研究を行なった:(i)アフィン不変なスタイナー4重系(SQS)の再帰的構成.私は昨年度までの研究において,位数が素数2倍のアフィン不変なスタイナー4重系(SQS)について,構成法を提案した.今年度は,さらに,位数が素数冪2倍のとき,円分剰余類の手法を用いると,SQSの具体的な構成法を与えた.(ii)アフィン不変な2QS(2-fold quadruple system)の構成.アフィン不変なデイザンを検討する中で, 2QSについては,SQSによく似た条件を満たすとき,類似の構成法が適用可能であるため,あるグラフの1因子の存在を仮定したもとでアフィン不変な2QSの直接構成法と再帰的構成法を与えた.(iii)巡回SQS・アフィン不変なSQSに関するグラフの1因子と数論との関係.アフィン不変なSQSや2QSの存在は,あるCGというグラフの1因子の存在性に依存することが明らかにされている.更に,CGグラフとKohler(1979)が定義したKGグラフとの関係を解明し,同型であることを示した.(iv)低衝突符号の概念の導入と最大衝突回数2の最適な低衝突符号の構成.情報通信における組合せ符号の一種の衝突回避符号を,より一般的に衝突数が少ない場合に拡張したいと考えている.また衝突を許さない場合には,送信できるユーザー数が少ないことが知られている.今年度の研究では,衝突回数が最大2回まで許される場合に,重み3と4の場合の構成法について検討した.その結果として,重み3の低衝突符号を衝突回避符号を用いて導くことができた.一方,重み4,符号長が素因子2と3しか持たない場合に,低衝突符号については,等差性に注目し,そこから得られるグラフ表現を用いて,最大符号語数の上限界値や符号語の選び方を得た.(i),本年度,以前の研究と密接に関係するシュタイナー四重系(SQS)という組合せ構造を中心し,一連の研究成果を論文にまとめて投稿され,国際誌『Designs, Codes and Cryptography』に受理された.また,デジタル情報通信の一つである光CDMAにおいて使えられる光直交符号と呼ばれる符号の構成問題も非常に密接な関係がある.このSQSの結果を使って,新たな光直交符号を得られた.さらに,アフィン不変という性質は統計的グループテスト,メッセージ認証符号,計算機のfiling schemeなどの様々な分野にも非常に有用であることが分かっている.(i)については,予想より多い結果が得れらた.アフィン不変なデザインの存在性と構成法の研究は,有限射影直線における特殊線形群という代数構造の性質を用いて,CGというグラフを定義し,このグラフの隣接関係に注目して,グラフの性質を部分的に明らかにした.このグラフは新たな代数的グラフであり,代数学(組合せ群論)と深い関連性があり,巡回的なSQSの存在性問題を完成に解決できるように,新しい道を指摘している.さらに,我々の研究に使われるCGグラフとデザイン理論の有名なKolherグラフは同型であることを示した.そして,アフィン不変なSQSの直接構成法を用いたCGグラフを解析整数論を利用して,1因子の漸近存在性問題を目指す,組合せ論的手法と数論の計算を組み合せて構成する手法を試みることが可能になった.(i)について,論文2本をまとめて投稿した.さらに,巡回的なGrid-blockdesignの直接構成法は難しいグラフのラベリング問題に応用できるアイデアを提供し,類似な問題にも活用可能な方法となっている.平成28年度は,本研究課題において前年度までに得られた結果に基づいて,DNA libraryscreening実験におけるgrid-blockデザインと呼ばれる組合せ構造に関する研究を行った.特に,grid-blockデザインの構成法とその漸近存在性について数論的立場から研究を行い,研究成果を国際誌に投稿した.本研究成果は,現在,査読中である.また,grid-blockデザインの概念をさらに発展し,grid-block被覆デザインという組合せ構造を考え,2 ×c grid-blockの数が最小となる最適かつ分解可能なgrid-block被覆デザインの組合せ論的特徴付けを行い,再帰的構成法を与え,分解可能な最適2 ×3 grid-block被覆デザインの存在性に関する必要十分条件を与えた.

本研究成果は論文として国際誌Utilitas Mathematicaに採択された.そして,有限体上の乗法指標和に関するWeilの定理の帰結であるBuratti-Pasottiの定理を改良できて,その有限体上で構成するgrid-blockデザイン・差集合族などの組合せデザインの存在性限界の改良効果も示した.本研究成果は,国際誌Graph and Combinatoricsに公表された.(i)(ii)については,当初の予想より多くの新しい結果が得られた.実際,これらの結果として,アフィン不変なデザインの無限系列ははじめです.その成果を2編の論文として投稿していた,その再帰的構成の手法を用いて,アフィン不変なSQSの存在性の必要条件も示した.(iii)については,アフィン不変なSQSの存在するため,あるCGグラフの1因子の存在に帰着できていた.そのCGグラフが特殊な頂点を除いて3正則グラフであることを明らかにして,さらに,グラフの位数が10万程度まで計算機で調べて1因子の存在を確認できた,また,そのCGグラグの1因子と数論との関連を指摘し,今後,巡回SQSの研究に対して,新たな成果が生まれたと思われる.(iv)については,組合せ符号の一種類として,衝突回避符号を一般化した低衝突符号の存在・構成問題についても結果を得て,現在論文としてまとめている.(i)については,我々の研究に使われるCGグラフとK&#246;hlerグラフとは同型であることを示した.その故に,KGグラフにおける「complete interval」という整数論の予想[3]は我々のCGグラフにも準用されることがわかる.実際に,KG(CG)グラフに1因子が存在するためは「3つの条件」が要求される,[3]では「2つの条件」しか使っていない.そこで本研究ではすべての「3つの条件」を考えて,さらに一般化されたKloosterman和などの解析整数論的な手法を用いて,CGグラフの1因子の漸近存在性における上下限界値の改良を図る.一方,CGグラフは有限体上の特殊線形群PSL(2,p)の生成集合から定義されている.これから,組合せ群論的立場からグラフに内在する性質を解明することも期待できる.我々はアフィン不変なSQSが存在するための必要条件を示した.しかしながら,構成できるSQSはアフィン群の作用による全ての固定部分群が自明である.固定部分群が自明でない場合は複雑な表示を持つことが多いため,その代数構造はわかっていない.この問題に対して,代数構造を解明し,それに再帰的な手法を加え,具体的構成法を研究する予定である.(ii)について,我々は巡回的Grid-blockデザインを着目し,代数的整数論を用いて,存在する十分条件を確かめ,構成法を提案した.しかしながら,Grid-blockのサイズが大きい場合は,数論的に「きれいな」条件を満たさないことが多い.そのため,組合せ論的手法と数論の計算を組み合せてより一般化された構成法を試みる.28年度が最終年度であるため、記入しない。
新しいビデオ嚥下造影解析システムの開発と応用

1)ビデオ嚥下造影解析システムの開発舌骨を運動指標とし,数値化,グラフ化するシステムの開発を試みた.デジタルビデオ画像をコンピュータに取り込み(30フレーム/秒),各フレーム毎に再生し,嚥下運動の代表的指標を同定した.フレーム左上を原点とする絶対座標点を表示,記録するソフトウエアを自作した.2)正常嚥下の解析咀嚼期(嚥下準備期)の舌骨運動は下顎運動と相関する傾向を示し,特にx軸の運動の相関が高かった(r=0.81).一方,Y軸の相関は低い傾向を示した(r=0.52).咽頭期では,舌骨の上前方移動が明らかになった.特にX軸方向の振幅が著しく大きくなった.咽頭期の開始時には下顎は上顎と接し,運動は停止した.咀嚼を有する嚥下の場合,約80%に咽頭期開始前に食塊が咽頭に進入する現象を認めた.液体と固形物の混合物を咀嚼嚥下した場合,約100%に咽頭期開始前に食塊が咽頭に進入する現象(咽頭進入)を認めた.3)脳卒中例嚥下の解析舌骨運動については解析中.誤嚥群において,液体と固形物の混合物を咀嚼嚥下した場合,全例に咽頭進入を認めた.非誤嚥下群において,液体と固形物の混合物を咀嚼嚥下した場合,咽頭進入を認める例は少なかった(約60%).考察異常嚥下の現象に咽頭期嚥下運動遅延がある.これは命令嚥下時の観察から食塊の位置と咽頭期嚥下運動の開始との時間差を考えものである.しかし咀嚼を有する嚥下の場合,正常でも咽頭進入は多く観察されこれを異常な現象と言う事はできない.新しい指標として,咀嚼停止から咽頭期嚥下運動の開始時の時間差を計測する方法が考えられ,現在評価中である.脳卒中例では液体と固形物の混合物をを咀嚼嚥下した場合,咽頭進入を認める例が正常群より少なかった.しかし,誤嚥を有する例では全例に咽頭進入を認めた.誤嚥のメカニズムとして,咽頭期嚥下運動遅延より,口腔機能と喉頭閉鎖機能の関連が重要である可能性が高い.1)ビデオ嚥下造影解析システムの開発舌骨を運動指標とし,数値化,グラフ化するシステムの開発を試みた.デジタルビデオ画像をコンピュータに取り込み(30フレーム/秒),各フレーム毎に再生し,嚥下運動の代表的指標を同定した.フレーム左上を原点とする絶対座標点を表示,記録するソフトウエアを自作した.2)正常嚥下の解析咀嚼期(嚥下準備期)の舌骨運動は下顎運動と相関する傾向を示し,特にx軸の運動の相関が高かった(r=0.81).一方,Y軸の相関は低い傾向を示した(r=0.52).咽頭期では,舌骨の上前方移動が明らかになった.特にX軸方向の振幅が著しく大きくなった.咽頭期の開始時には下顎は上顎と接し,運動は停止した.咀嚼を有する嚥下の場合,約80%に咽頭期開始前に食塊が咽頭に進入する現象を認めた.液体と固形物の混合物を咀嚼嚥下した場合,約100%に咽頭期開始前に食塊が咽頭に進入する現象(咽頭進入)を認めた.3)脳卒中例嚥下の解析舌骨運動については解析中.誤嚥群において,液体と固形物の混合物を咀嚼嚥下した場合,全例に咽頭進入を認めた.非誤嚥下群において,液体と固形物の混合物を咀嚼嚥下した場合,咽頭進入を認める例は少なかった(約60%).考察異常嚥下の現象に咽頭期嚥下運動遅延がある.これは命令嚥下時の観察から食塊の位置と咽頭期嚥下運動の開始との時間差を考えものである.しかし咀嚼を有する嚥下の場合,正常でも咽頭進入は多く観察されこれを異常な現象と言う事はできない.新しい指標として,咀嚼停止から咽頭期嚥下運動の開始時の時間差を計測する方法が考えられ,現在評価中である.脳卒中例では液体と固形物の混合物をを咀嚼嚥下した場合,咽頭進入を認める例が正常群より少なかった.しかし,誤嚥を有する例では全例に咽頭進入を認めた.誤嚥のメカニズムとして,咽頭期嚥下運動遅延より,口腔機能と喉頭閉鎖機能の関連が重要である可能性が高い.本年度の実績1)ビデオ嚥下造影解析システムの開発舌骨を運動指標とし,数値化,グラフ化するシステムの開発を試みた.デジタルビデオ画像をコンピュータヘ取り込み(30フレーム/秒),各フレーム毎に再生し,嚥下運動の代表的指標を同定した.フレーム左上を原点とする絶対座標点を表示,記録するソフトウエアを自作した.

さらに注目する舌骨前上縁の運動について検討した.原点を第4頸椎後下縁とし,第2頸椎椎体後下縁および第4頸椎後下縁を結んだ直線をY軸,それに直交する直線をX軸とした上で,絶対座標を相対座標に変換し,グラフ化するソフトウエア(既存の表計算ソフトウエアを応用)を作成した.以上により,嚥下時舌骨運動の2次元動作解析が可能となった.脳卒中嚥下障害例1例に試用し,嚥下訓練前・後の舌骨運動の変化について解析した.訓練前に観察できなかった嚥下時の舌骨運動が,訓練後には協調的な上前方移動を示した.前・後(各5回試行)の運動には統計的に有意差を認めた.この変化は画像の目視のみでは確認が困難であった.このシステムによりビデオ画像解析の目途が立ったが,手作業部分が多く,解析時間をに問題を残したため,今後検討を加える.2)脳卒中例の収集脳卒中嚥下障害例に,食物形態(水様造影剤,増粘剤入り造影剤,ペースト様造影剤,ゼリー様造影剤)と体位(60°座位,85°座位)を規格化したビデオ嚥下造影検査を施行し,53症例の画像情報を集積した.今後,臨床所見と各変数との関係について検討を行う.1)ビデオ嚥下造影解析システムの開発舌骨を運動指標とし,数値化,グラフ化するシステムの開発を試みた.デジタルビデオ画像をコンピュータに取り込み(30フレーム/秒),各フレーム毎に再生し,嚥下運動の代表的指標を同定した.フレーム左上を原点とする絶対座標点を表示,記録するソフトウエアを自作した.2)正常嚥下の解析咀嚼期(嚥下準備期)は下顎運動と相関する傾向を示し,特にx軸の運動の相関が高かかった(r=0.81).一方,Y軸の相関は低い傾向を示した(r=0.52).咽頭期では,舌骨の上前方移動が明らかになった.特にX軸方向の振幅が著しく大きくなった.咽頭期の開始時には下顎は上顎と接し,運動は停止した.咀嚼を有する嚥下の場合,約80%に咽頭期開始前に食塊が咽頭に進入する現象を認めた.液体と固形物の混合物をを咀嚼嚥下した場合,約100%に咽頭期開始前に食塊が咽頭に進入する現象(咽頭進入)を認めた.3)脳卒中例嚥下の解析舌骨運動については解析中.誤嚥群において,液体と固形物の混合物をを咽頭進入を認めた.非誤嚥下群において,液体と固形物の混合物をを咀嚼嚥下した場合,咽頭進入を認める例は少なかった(約60%).考察異常嚥下の現象に咽頭期嚥下運動遅延がある.これは命令嚥下時の観察から食塊の位置と咽頭期嚥下運動の開始との時間差を考えものである,しかし咀嚼を有する嚥下の場合,正常でも咽頭進入は多く観察されこれを異常な現象と言う事はできない.新しい指標として,咀嚼停止から咽頭期嚥下運動の開始時の時間差を計測する方法が考えられ,現在評価中である.脳卒中例では液体と固形物の混合物をを咀嚼嚥下した場合,咽頭進入を認める例が正常群より少なかった.しかし,誤嚥を有する例では全例に咽頭進入を認めた.誤嚥のメカニズムとして,咽頭期嚥下運動遅延より,口腔機能と喉頭閉鎖機能の関連が重要である可能性が高い.
サイトメガロウイルス感染に対する細胞応答のトランスクリプトーム解析に関する研究

ヒトサイトメガロウィルス(HCMV)感染にともなう宿主側の細胞応答を網羅的に解析し、ウイルス感染に対するトランスクリプトーム解析の先駆的モデルを提出することを目標として、平成13年度は以下のことを行った。平成13年7月までにhumanRefSeq9,600遺伝子、平成14年1月までにhuman RefSeq12,000遺伝子からなる合成DNAマイクロアレイの作製を完了した。合成DNAマイクロアレイに特化したハイブリダイゼーションにおいてシグナル・ノイズ比を極大化する装置を開発し、特許出願した(特願2001-323412;スライドガラスハイブリダイゼイションチャンバ)。HCMVおよびUV不活化HCMV感染後4、8、24、48、72時間のヒト正常線維芽細胞からmRNAを抽出し、作製した合成DNAマイクロアレイとハイブリダイズさせ、遺伝子発現プロファイルを取得した。さらに、HCMVおよびUV不活化HCMV感染後24時間の培養上清からウイルス粒子を除いたものを培地として24時間培養した正常線維芽細胞から同様にして遺伝子発現プロファイルを得た。これらのプロファイルを集積してクラスタ解析を行い、HCMV粒子の細胞への結合・侵入が急速な宿主細胞応答をひき起こし、細胞外に放出される種々の宿主因子の遺伝子発現が上昇すること、さらにそれらの宿主反応はウイルス遺伝子の発現に従属して低下することを明らかにした。すなわち、これらの結果は、HCMV遺伝子の発現によりそれに先立っておきる宿主側の応答が抑制されることを示している。HCMV粒子の許容細胞表面への結合あるいは細胞内への侵入を契機として主として炎症に関与する多くの宿主遺伝子が発現され、ウイルス遺伝子の発現および複製サイクルの始動がない場合はそれらの高発現レベルが維持されることから、これらの宿主反応を抑制できるどうかがHCMVの許容性決定のひとつの指標となるのではないかと考える。
視床における報酬予測機能の神経回路網による数理モデル化

視床では,デルタ振動,ガンマ振動,紡錘振動などの振動現象が観測されており,これらの振動現象は脳機能の発現に深く関与していると考えられている.したがって,視床における神経情報処理を解明するためには,視床で観測されるこれらの振動現象が視床のニューロンに対してどのような影響を与えているのかを明らかにする必要があると考えられる.本研究課題の初年度にあたる本年度は,単一ニューロンへの細胞外電場による摂動に対して得られる膜応答に注目し,細胞外電場が単一ニューロンに対して与える効果をマルチコンパートメントモデルに導入した数理モデルを用いて数値実験を行った.生理実験の結果によって示唆されている受動的膜特性の不均一性を考慮した場合,細胞外電場を摂動入力として与えることによって,樹状突起遠位部において二相性の応答が得られることが示された.一方,樹状突起近位部では一相性の応答が得られた.これらの結果は,細胞外電場に対する膜応答が樹状突起における位置によって異なることを示唆するものであり,単一ニューロンによる情報処理様式の理解を深める重要な結果である.この成果は,日本物理学会,日本神経回路学会,電子情報通信学会ニューロコンピューティング研究会などの国内学会で発表するとともに,北米神経回路学会,計算論システム神経科学会議ならびに日独計算論的神経科学シンポジウムにおいて発表を行った.また,得られた成果を学術雑誌と技術研究報告において公表した.視床では,デルタ振動,ガンマ振動,紡錘振動などの振動現象が観測されており,これらの振動現象は脳機能の発現に深く関与していると考えられている.したがって,視床における神経情報処理を解明するためには,視床で観測されるこれらの振動現象が視床のニューロンに対してどのような影響を与えているのかを明らかにする必要があると考えられる.本研究課題の初年度にあたる本年度は,単一ニューロンへの細胞外電場による摂動に対して得られる膜応答に注目し,細胞外電場が単一ニューロンに対して与える効果をマルチコンパートメントモデルに導入した数理モデルを用いて数値実験を行った.生理実験の結果によって示唆されている受動的膜特性の不均一性を考慮した場合,細胞外電場を摂動入力として与えることによって,樹状突起遠位部において二相性の応答が得られることが示された.一方,樹状突起近位部では一相性の応答が得られた.これらの結果は,細胞外電場に対する膜応答が樹状突起における位置によって異なることを示唆するものであり,単一ニューロンによる情報処理様式の理解を深める重要な結果である.この成果は,日本物理学会,日本神経回路学会,電子情報通信学会ニューロコンピューティング研究会などの国内学会で発表するとともに,北米神経回路学会,計算論システム神経科学会議ならびに日独計算論的神経科学シンポジウムにおいて発表を行った.また,得られた成果を学術雑誌と技術研究報告において公表した.
ウイルス複製に重要なHBVεとHCV3'Xの類似構造に結合する細胞蛋白の検索

B型肝炎ウイルス(HBV)とC型肝炎ウイルス(HCV)は、ゲノム構造や複製様式が異なっているにもかかわらず、生物学的共通点を持っている。(たとえば、両者とも増殖中間体はRNAであり、肝細胞で増殖し、細胞障害性はないものの宿主免疫反応を介して持続性炎症を惹起し、肝細胞癌の発生にも関与すること、等である。)HBV RNAのε構造とHCV RNAの3'X構造は、両ウイルスの複製・パッケージングに重要である。我々は、両構造に同一の7塩基配列を含む類似2次構造があることを報告した(Proc Japan Acad 78: 12-14,2002)。そして、この類似構造が両ウイルスの生物学的共通性に関与しているという仮説を立てた。その検証のため、肝細胞抽出物中に両構造と結合する蛋白があるかどうかを調べた。両構造をとり得るようなDNAオリゴマー(但し、チミンをデオキシウリジンで置換)およびRNAオリゴマーをプローブとして、SDS-PAGE-サウスウェスタン法(HepG2細胞抽出蛋白)を行った。HBV εおよびHCV3' Xに対応するオリゴマーに共通して結合する110kDa、35kDa、15kDaの蛋白を認めたが、そのうち特に35kDaの蛋白が強いシグナルを示した。それらの蛋白を同定するために、λgt11を用いてHepG2cDNA発現ライブラリーを作製し、サウスウェスタン法にて上述のオリゴマーと結合する蛋白の単離を試みた。結合の条件を変えながら約60万クローンをスクーニングした結果、4つの独立したクローンが単離された。そのうちの一つはリボゾーム結合蛋白L5であり、アミノ酸配列から推定される分子量は約34kDaで、目的とする蛋白の予想サイズと一致した。その他の3クローンも含めて、現在、全長の単離を試みている。これらの蛋白がHBV・HCV両ウイルス増殖に与える影響を調べることが今後の課題である。我々の研究目標は、B型肝炎ウイルス(HBV)RNAのεとC型肝炎ウイルス(HCV)IRNAの3'Xの類似構造に結合する蛋白を単離・同定すること、さらにそれらが、両ウイルスの生物学的共通性に関係があるかどうかを調べることである。HBVRNAのε構造と、HCVRNAの3'X構造は、両ウイルスの複製・パッケージングに重要な働きをする。我々は、両者には、同一の7塩基配列を含む類似の2次構造があることを報告した(Proc Japan Acad 78:12-14,2002)。それらの2次構造をとり得るようなDNAオリゴマー(但し、チミンをデオキシウリジンで置換)およびRNAオリゴマーをプローブとして、SDS-PAGE-サウスウェスタン法(HepG2細胞抽出蛋白)を行い、HBVεに対応するオリゴマーと結合する110kDa、35kDa,15kDaの蛋白、およびHCV3'Xに対応するオリゴマーと結合する110kDa、55kDa、35kDa,15kDaの蛋白の存在を確認した。これらのうち110kDa、35kDa,15kDaのものは両者に共通するものであった。(HCV3'Xオリゴマーと結合する55kDa蛋白は、既にHCV3'Xとの結合が報告されているPolypyrimidine tract binding protein (PTB)と大きさが一致する。)現在、HepG2cDNA発現ライブラリーを用いて、上述のオリゴマーと結合する蛋白のスクリーニングを進行中である。現時点において、複数の結合クローンを得ているが、いずれも結合の特異性が低く、目的であるところの、特異的な結合蛋白の単離にまでは至っていない。

今後、結合の条件・プロープの長さ等を変えて、サウスウェスタンスクリーニングを継続してが、UV-crosslinking法等の別の方法についても試行する予定である。B型肝炎ウイルス(HBV)とC型肝炎ウイルス(HCV)は、ゲノム構造や複製様式が異なっているにもかかわらず、生物学的共通点を持っている。(たとえば、両者とも増殖中間体はRNAであり、肝細胞で日殖し、細胞障害性はないものの宿主免疫反応を介して持続性炎症を惹起し、肝細胞癌の発生にも関すること、等である。)HBV RNAのε構造とHCV RNAの3'X構造は、両ウイルスの複製・パッケージングに重要である。我々は、両構造に同一の7塩基配列を含む類似2次構造があることを報告した(Proc Japan Acad 78:12-14,2002)。そして、この類似構造が両ウイルスの生物学的共通性に関与しているという仮説を立てた。その検証のため、肝細胞抽出物中に両構造と結合する蛋白があるかどうかを調べた。両構造をとり得るようなDNAオリゴマー(但し、チミンをデオキシウリジンで置換)およびRNAオリゴマーをプローブとして、SDS-PAGE-サウスウェスタン法(HepG2細胞抽出蛋白)を行った。HBVεおよびHCV3'Xに対応するオリゴマーに共通して結合する110kDa、35kDa、15kDaの蛋白を認めたが、そのうち特に35kDaの蛋白が強いシグナルを示した。それらの蛋白を同定するために、λgt11を用いてHepG2cDNA発現ライブラリーを作製し、サウスウェスタン法にて上述のオリゴマーと結合する蛋白の単離を試みた。結合の条件を変えながら約60万クローンをスクリーニングした結果、4つの独立したクローンが単離された。そのうちの一つはリボゾーム結合蛋白L5であり、アミノ酸配列から推定される分子量は約34kDaで、目的とする蛋白の予想サイズと一致した。その他の3クローンも含めて、現在、全長の単離を試みている。これらの蛋白がHBV・HCV両ウイルス増殖に与える影響を調べることが今後の課題である。
伝統構法木造建築物の石場建て柱脚の滑り挙動における床束の突き上げ効果に関する研究

柱脚を基礎に緊結しない石場建て構法による伝統構法木造建築物の地震応答性状において、特に既往研究により示唆された、足固め下に設置される床束の突き上げ挙動に関する研究を行った。床束が、見かけの摩擦係数に及ぼす影響を実験的・理論的に解明し、柱脚の滑りに関する合理的な耐震設計法の構築に資することを目的とした。平成26年度において、柱脚部のみからなる石場建て木造軸組の振動台実験を実施した。既往の実験結果を「床束無し」の状態と考え比較対象として、柱脚と床束底面の鉛直荷重の変動、床束の回転角と試験体全体の水平変位の関係、滑りの発生タイミングと滑り量等を明らかにするとともに損傷性状を把握した。実験結果から得られた結論の概要は以下のとおりである。(1)床束が足固めを突き上げることによって柱軸力を低減させるため、摩擦力は小さくなり柱脚の滑りが発生しやすくなる。(2)一方、低減した柱軸力は床束に作用し、傾斜復元力が相応に大きくなるため、床束の幅程度までの滑り量であれば、滑ったとしても原点(変位ゼロ)への復元性が非常に高い。(3)床束の幅を超える大きな滑り(水平変位)が生じると上記の床束の効果は失われ、床束無しの状態と同様の性状を示す。柱脚の滑り挙動は不確定性が大きく、耐震設計において定量的な評価が難しい現状にある。本研究で得られた成果は、柱脚の滑り挙動のメカニズムの一端を明らかにしたものであり、今後、合理的な耐震設計法の構築に資するものである。
腎障害進行におけるRBファミリーp130の機能解明と新規E3リガーゼの同定

我々は細胞周期関連ユビキチンリガーゼの生体機能および疾患、との関連に注目し、特に炎症、細胞死および細胞増殖、線維化が連続して起こる腎障害モデルに着目し解析するために、片側尿管閉塞性マウスモデルを経時的に1、3、5、7、14日で作製した。また、コントロール腎として、Sham operationしたマウスの腎臓を7日目で取り出した。これらのUUO腎を用いてウエスタンブロット法にてタンパク量を調べてみると、UUO3日目からp130/RB2タンパク量が増加し、Sham ope腎と比較すると7日目でp130/RB2タンパク質が最も顕著に蓄積することを見出した。一方、mRNAの発現量をQRT-PCR法で調べた結果、UUO1日目、3日目でp130/RB2mRNAレベルは減少傾向を示したが5日目からはSham ope腎レベルまで回復した。また、本研究ではp130の腎障害における機能を明らかにするため、p130ノックアウト(KO)マウスを用いて3、7、14日のUUOを作製した。野生型マウスUUO腎とp130KOマウスUUO腎を用いて、細胞増殖マーカーであるKi67抗体により免疫染色し比較検討した結果UUO3日目で尿細管上皮細胞の細胞増殖が野生型UUO腎よりp130KOマウスUUO腎で増加していることが確認された。細胞増殖に増加に伴い、野生型マウスUUO腎よりp130KOマウスUUO腎で尿細管の拡張が多く見られた。また、階も同様にp130KOマウスUUO腎で増加していることがわかったこれらの結果から、p130は腎障害初期にて細胞増殖を停止させる方向に働くために、尿細管上皮細胞および間質細胞にて鋤日していることが示唆された。