hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
過剰適応とストレス関連特性との関係性に関する行動科学的研究

本研究は,労働における過剰適応が,タイプA行動や防衛的悲観主義といったストレス関連特性とどのように関連しているのか,また対処行動の採用やストレス反応に与える影響について検討した。過剰適応は,ストレス関連特性との関連性は高いものの,対処行動やストレス反応に及ぼす影響はストレス関連特性の影響と比べて極めて低かった。このことから,労働における過剰適応はストレス反応を規定する要因として機能するのではなく,ストレスによってもたらされた状態だと考えられる。それゆえ過剰適応は,個人特性ではなく,ストレス反応の一つであるとみなすのが妥当である。過剰適応とは,社会・文化的環境に対する外的適応が過度に行われ,その結果として自己の内的安定性を維持する内的適応との不均衡が生じた状態を指す。社会や他者の要求や期待に応えるべく過剰に努力することから社会的に高く評価される。社会的には望ましい状況ではあるが,過剰な努力が過剰労働に結びつき,強いストレスを喚起することになるため,個人にとっては不適応となる。過剰適応については,これまで過剰適応の特徴の解明が検討の中心であり,ストレスに関連する個人特性との関係についての検討は不十分である。また,過剰適応の測定において社会的望ましさにより回答が歪む可能性がある。それを排除するために,投影法的手法を用いて過剰適応を測定する尺度の開発を行い,ストレスと関連する個人要因との関連を検討することを目的とする。平成28年度では,投影法的手法を用いた過剰適応尺度の開発及びストレス関連の個人特性と過剰適応との関連を検討することを目的とした。研究1として,投影法的手法を用いて過剰適応の程度を測定できる尺度(投影法的過剰適応尺度)の作成を行った。投影法的過剰適応尺度は,絵画を用いた場面想定法により反応を選択させるもので,10の対人関係トラブル場面に対して,怒り,許し・配慮,困惑・動揺,解決思考の4つの反応カテゴリーから本音としての反応と建て前としての反応を選択させるものである。従来から用いられている過剰適応傾向尺度との関連を検討した。研究2として,ストレスに関連する個人特性が過剰適応とどのような関連を示すのかを検討する。過剰適応は成人用過剰適応尺度を用いて測定し,個人特性としてタイプA行動傾向や防衛的悲観主義,自尊心,完全主義を測定し,抑うつやバーンアウトとの関連を検討する。平成28年度は,予定していた2つの研究のうち,研究1を終了し,研究2は調査の準備が完了したのみであり,最終的な調査の実施には至っていない。研究2については,調査実施に向けて使用する尺度の精査は行い,ネット調査の実施に向けて業者との打ち合わせに入っている。研究1では,過剰適応を投影法的観点から測定する尺度の開発を行った。過剰適応を起こしやすい人は他者からの評価を気にしやすく,社会的望ましさの影響を受けやすい。そのため,PFスタディに従い,対人関係トラブル場面の絵を提示し,そこでの対応を選択させる方法を採用した。回答には,その状況において,「相手に対してなんと言うか」(建前)と「心の中でどのようなことを思っているか」(本音)を尋ねた。対人関係トラブル場面は,同性の友人に対して物品や金銭の貸し借りや借りたものの破損といった10の状況を設定した。回答は,4つの反応カテゴリー(怒り,許し・配慮,困惑・動揺,解決思考)について2つの反応を準備し,合計8つの選択肢から本音と建前を別々に選択させた。また,対象によって過剰適応の程度が異なると考えられることから,相手との親密度の操作を行い,親友と挨拶をする程度の同級生の2条件を設定して,回答を求めた。分析対象は,社会的望ましさの高いもの(5点中4点以上)を除いた97名の大学生であった(男性59名,女性38名)。分析の結果,(1)本音で怒り反応が高く,親友に対しては抑制されていること,(2)許し・配慮は建前において認められやすく,本音においては親友に対して認められやすいこと,(3)解決思考は親友において認められやすく,友人において建前で認められやすいこと,(4)困惑・動揺は本音で認められやすいことがわかった。以上の結果から,本音と建前により反応に違いがあり,他者との関係性によっても異なることが明らかになった。(1)過剰適応とストレス関連特性が不適応に及ぼす影響の検討:過剰適応がバーンアウトや抑うつに及ぼす影響について,タイプA行動や防衛的悲観主義,完全主義といったストレス関連特性と比較した。過剰適応はストレス関連特性と関連し,0.1850.403の説明分散であることがわかった。ストレス反応への影響を検討するため,階層的重回帰分析を行ったところ,ストレス関連特性の説明分散は大きいものの,過剰適応の説明分散の増分は0.0040.023とかなり小さいことがわかった。(2)自己愛と完全主義が過剰適応と抑うつに及ぼす影響の検討:過敏型自己愛が過剰適応の評価懸念と正の関連を示し,自己志向的完全主義が過剰適応の評価懸念と強迫性格と正の関連を示し,抑うつに間接的に影響していた。他者志向的完全主義は抑うつへ直接正の関連を示す経路と評価懸念を介して間接的に影響する経路があることがわかった。また。過剰適応の抑うつへの影響の程度は自己愛や完全主義と比べて小さいことがわかった。(3)過剰適応が対処行動やストレス反応に及ぼす影響の検討:ストレス関連特性と過剰適応が対処行動の採用やストレス反応に及ぼす影響の程度を検討するために,階層的重回帰分析を行った。

対処行動に対しては,ストレス関連特性の影響の割合が大きく,過剰適応の影響の程度は小さいことがわかった。ストレス反応や仕事満足に対しては,ストレス関連特性と対処行動の説明分散が大きく,過剰適応の説明分散は有意ではなかった。このことから,過剰適応が対処方略選択やストレス反応に及ぼす影響力は小さいと言える。以上の結果から,複数の異なるストレス指標を用いても過剰適応の影響力は小さいことから,仕事ストレスにおいて,過剰適応はストレスを高める影響因(個人特性)ではなく,ストレスの結果生じた状態(反応)であると捉えることが妥当であると言える。本研究は,労働における過剰適応が,タイプA行動や防衛的悲観主義といったストレス関連特性とどのように関連しているのか,また対処行動の採用やストレス反応に与える影響について検討した。過剰適応は,ストレス関連特性との関連性は高いものの,対処行動やストレス反応に及ぼす影響はストレス関連特性の影響と比べて極めて低かった。このことから,労働における過剰適応はストレス反応を規定する要因として機能するのではなく,ストレスによってもたらされた状態だと考えられる。それゆえ過剰適応は,個人特性ではなく,ストレス反応の一つであるとみなすのが妥当である。平成29年度は,28年度に実施できなかった調査を実施する。現在質問項目の精査は終了し,調査会社との最終打ち合わせの段階となっていることから,すぐにでも実施できる状況で, 4月中には実施する。その後研究3と4を実施する予定である。研究3として,今回の調査で測定することのできなかった個人特性及び対処方略の採用についても検討する調査を実施する。具体的には,達成動機や承認獲得動機,失敗回避動機といった動機づけが過剰適応とどのような関係にあるのか,過剰適応者の採用しやすい対処方略や,過剰努力に対する自己正当化について検討する。研究2と同様,ウェブによる調査を予定している。研究4として,過剰適応者が実際に過度の努力をして高い生産性を示すのかを検討する。過剰適応は内的適応が阻害されストレス反応を示すとされているものの,自律神経系活動を指標としたストレス反応を測定した研究は少ない。そこで,他者から評価される課題状況を設定して,過剰適応と課題パフォーマンスとの関連,自律神経系活動への影響,およびそれらに関連する個人要因の解明に関する検討を行う。他者から評価される状況を設定し,困難性の高い精神作業(暗算課題等の認知課題)を実施する。また,過剰努力を喚起させやすいよう,他者からの承認欲求を高める操作を行う。測定指標として,主観的側面では主観的ストレス感,満足感,他者からの肯定的評価感を,行動的側面では課題パフォーマンスを,生理的側面では心拍数,血圧,抹消血流量,呼吸数を用いる。過剰適応とこれらのストレス反応との関係,動機づけの影響について検討する。臨床心理学平成28年度中に研究2として調査を実施する予定であったが,使用する尺度の選定及びネット調査を実施する会社の選定に時間がかかり,28年度中に実施することができなくなった。
新しいイノシトール1,4,5-三リン酸結合蛋白の機能と発癌抑制

分子量130kDの新規のイノシトール1,4,5-三リン酸結合蛋白質(p130)は我々がIns(1,4,5)P_3アナログに対する先駆的かつ独創的な取り組みの中から見い出したものであるがヒト肺癌に多く見られる第2染色体長腕部欠損領域に本分子のヒト型ホモログをコードすると思われる遺伝子が存在する。したがって、がん抑制遺伝子産物である可能性を示唆する。p130の機能について特にがん抑制遺伝子産物である可能性について検討することが最終目標であるが、今年度は細胞内Ca^<2+>濃度変化に対する影響について検討した。p130を発現する細胞株(COS-1:p130)を作製した。発現したp130はプレックストリン相同領域(PHドメイン)を有するものの、細胞膜ではなく、細胞質内に局在していた。COS-1:p130をブラジキニンや上皮成長因子などで刺激すると対照細胞に比べて、細胞内Ca^<2+>上昇が抑制された。この効果はPHドメインを欠いたp130分子の発現細胞では認められなかった。したがって、p130はホスホリパーゼC(PLC)-Ins(1,4,5)P_3を介した細胞機能の内在性阻害分子として作用する可能性がある。どのサブタイプのPLCとおもに係わっているのかについて検索するため、in situハイブリダイゼーション法によってラット脳内のp130の分布を調べた。既報のPLC-βの分布と類似していた。
ナノCMOSを用いた無線通信用アナログ・デジタル混載LSI設計技術の研究

無線通信機で用いられる複素信号処理できるAD(Analog-to-Digital)変換回路の開発を行った.より低消費電力で高精度のAD変換が実現できる新たな回路構成手法を提案した.理論解析により提案手法の正当性を証明し,国際学会・学術論文誌の論文発表を行い,特許出願も行った.MATLABとSPICEによりシミュレーションで提案手法の有効性を確認し,検証のためにLSIチップの試作も行った.継続研究で研究成果を発展し,研究の完成度をあげたい.無線通信機で用いられる複素信号処理できるAD(Analog-to-Digital)変換回路の開発を行った.より低消費電力で高精度のAD変換が実現できる新たな回路構成手法を提案した.理論解析により提案手法の正当性を証明し,国際学会・学術論文誌の論文発表を行い,特許出願も行った.MATLABとSPICEによりシミュレーションで提案手法の有効性を確認し,検証のためにLSIチップの試作も行った.継続研究で研究成果を発展し,研究の完成度をあげたい.本研究では、通信用のアナログとデジタルが混載するシステムLSIの高性能化を実現するために、最先端のナノCMOSを用いた高精度、低消費電力のAD変換回路の実現を目指している。本年度では、研究計画に沿って、高精度・低消費電力の複素バンドパスΔΣAD変調器についで研究開発を行った。(1)複素AD変換画路のアーキテクチャの考案と選定を行い、システムの基本構成、通信のアプリケーションに適した信号処理手法、回路実現の可能性を考慮した結果、フィードフォワードΔΣAD型の変調器構成を採用した。この構成では、低電圧動作可能・広帯域信号処理が可能且つ回路の非理想特性の影響を軽減できるとの特徴があり、携帯通信機器が特有する低消費電力の要求にも達成する見込みがある。(2)複素AD変換回路アーキテクチャのブロック図レベルでの設計を行った。構成ブロックの検討に当たって、効率的に高精度のAD変換を実現できる複素のノイズ結合構成を新たに提案した。複素変調器の後段にエラー・フィードバック経路を追加し、二つ内部ADCの量子化ノイズを複素的に結合させ、再びADC回路の入力端へ注入することで、オペアンプ回路を追加せず、変調器の次数の増加を実現できたどこの提案構成とフィードフォワード構成の組み合わせでは、わずかな受動回路を追加するだけで複素ノイズ結合回路を構成でき、効率的に高次のノイズ・シェープ機能を実現し、低消費電力でより高精度のAD変換を実現できる。MATLABによるシミュレーションでは提案手法の有効性を確認した。提案した構成手法を国際学会MWSCASで発表を行った。(3)変調器内部の複素アナログ・フィルタおよび内部ADC/DACの構成手法の検討に着手し、提案したAD変換器構成の回路実現手法を検討した。本研究では、通信用のアナログとデジタルが混載するシステムLSIの高性能化を実現するために、最先端のナノCMOSを用いた高精度、低消費電力のAD変換回路の実現を目指している。本年度では、研究計画に沿って、高精度・低消費電力の複素バンドパスΔΣAD変調器について研究開発を行った。(1)複素AD変換回路のアーキテクチャの確認と検証を行った。特にLSIチップを実現する際に、必ず生じてしまう複素信号経路のミスマッチに注目し、その影響による性能劣化を軽減できる新しい回路構成を提案した。簡潔かつ低消費電力な回路で非理想特性の影響を軽減できるとの特徴がある。システム・レベルのシミュレーションで提案構成の有効性を確認した。国内・国外で特許出願を行い、国際学会MWSCASで研究成果の発表を行った。(2)提案した新しい回路構成手法の有効性をLSIチップで実証するために、LSIチップ試作に向けて調査と準備を行った。LSIチップで提案手法の実証可能性を最優先し、ファンダリの試作スケジュールと費用の面も含めて考慮した結果、TSMC社が提供する0.18umCMOSプロセスで試作を行うことに決定した。プロセス・パラメータの入手とLSI設計ツール整備を行った。(3)複素AD変換回路の要素クロック回路のLSIチップ試作を行った。具体的には、ΔΣADC回路で必要不可欠な構成ブロックである比較器回路、DAC回路、タイミング発生回路の回路構成を決定し、トランジスタ・レベルで各要素回路の詳細設計を行った。SPICEシミュレーションでその動作と性能確認を行った上、ハードウェアを実現するための回路レアイアウト設計も行った。各種の設計照合と詳細検証の上、ファンダリを通して実際のLSIチップ試作を行った。入手した試作LSIチップの実測・評価を行い、設計・試作した要素回路の機能と基本動作の確認ができた。また、いくつか改善できる項目も明確にでき、研究の完成度を上げるために、貴重な実測データが得られた。本年度は3年間の実施計画の最終年度であり、過去2年間の研究内容に基づき、研究計画に沿って、高精度・低消費電力の複素バンドパスΔΣAD変調器に関する研究を遂行しながら、研究成果のまとめも行った。(1)前年度試作したLSIチップに搭載した要素回路の測定・評価を行い、各要素回路の性能を明らかにした。測定結果に基づき、改善すべき項目を明確にし、一部修正回路の再設計を含め、ランジスタ・レベルで要素回路の詳細設計を行った。SPICEにシミュレーションで設計した回路の動作と性能確認を行った。要素回路の設計手法と実測結果を含んだ研究成果を学術雑誌に投稿し、掲載する事となった。(2)複素AD変換回路の全体回路の設計を行った。

特に低消費電力を実現するために、微細CMOSに適した低電源電圧、小さいバイアス電流条件での回路動作回路動作と性能確認を行い、すべての回路設計を完了した。(3)本研究で提案した回路構成手法の有効性を実証するために、LSIチップ試作の準備を行った。低消費電力かつ高速動作可能な微細CMOSで性能評価を行うため、TSMC社が提供する90mm CMOSプロセスで試作を行うことと決定した。全体回路のレアイアウト設計を行い、各回路構成素子及びチップ内配線の検証を行った。微細CMOSでLSIチップ試作を行うため、ファンダリの製造スケジュールの都合で、今年度中にチップの実測評価は出来なかったが、シミュレーション検証では、低消費電力で高いAD変換精度が得られることを確認できた。継続研究で実測評価を行う予定。(4)研究遂行の途中で大信号入力に適応できるΔΣADCの新しい構成手法を提案し、学会発表を行った。継続研究ではこの研究内容を発展していく予定。
エネルギー代謝系のがん細胞特異性を利用した抗がん剤のデザインとその応用

本研究では、抗がん開発のためのターゲットの探索研究に重点をおいた実験を展開し、以下に述べるような知見を得ることに成功した。1)正常な組織とがん細胞でのヘキソキナーゼアイソザイムの転写レベルの比較を行い、悪性度が高いがん細胞株AH130では、正常な組織にはほとんど発現していないII型と呼ばれるアイソザイムが多量に発現していることを見いだした。また、定量的解析の結果、がん細胞株AH130でのII型アイソザイムの転写レベルは、2.5fmol/mg of poly(A)+RNAと求まり、白色脂肪組織におけるII型アイソザイムの転写レベルの15倍にも至ることを明らかにした。2)4種の糖輸送担体のメッセージレベルについても、同様の手法で解析を行った。その結果、従来報告されていた通り、がん細胞では1型の糖輸送担体の転写レベルが顕著であり、そのレベルは、脳における同アイソフォームの転写レベルの62倍も高いものであった。これらの結果から、我々は、がん細胞では、1型の糖輸送担体とII型ヘキソキナーゼの転写レベルが顕著に亢進していることを結論することができた。3)そこで、がん細胞ではどのようにしてII型ヘキソキナーゼと1型糖輸送担体の転写レベルが亢進するようになるのか解析を行った。その結果、がん細胞では、細胞の増殖条件の変動に伴って、これらの転写レベルが著しく変動することが明らかにし、このような変動をもたらす主たる因子が血清に含まれる成分であることをつきとめることに成功した。これらの結果から、がん細胞では、その増殖条件の変動に伴って、特徴的な糖代謝経路が形成されること、ならびにその形成を支配している主たる要因が血清応答性因子であることを結論した。本研究では、我々が最近見いだした「エネルギー代謝系のがん細胞特異性」ということをターゲットとした抗がん剤の開発を目的として実験を行い、以下のような知見を得ることに成功した.1)がん細胞におけるII型ヘキソキナーゼの選択的転写阻害剤の開発に向けてがん細胞のエネルギー代謝を遮断する目的で、これに特異的かつ多量に発現したII型ヘキソキナーゼは絶好のターゲットであるので、その転写阻害剤の開発に取り組んだ.このための第一段階として、がん細胞におけるII型ヘキソキナーゼ遺伝子の転写調節因子の検索を行い、HIFと呼ばれる因子が有力な候補であることを見い出すことに成功した.2)II型ヘキソキナーゼの特異的阻害剤の開発に向けてがん細胞に多量に発現したII型ヘキソキナーゼの特異的阻害剤の開発には、まずその活性評価系の確立が必須である.そこで、大腸菌の発現系を用いて、II型ヘキソキナーゼを多量に発現させることを試み、その方法論の確立に成功した.3)ヘキソキナーゼのミトコンドリアへの結合の遮断剤の合成に向けてヘキソキナーゼはミトコンドリアに結合して、エネルギー獲得に寄与していることが明らかになったので、その遮断のためのペプチド合成ならびにアッセイ系の確立を行った.申請者らは,がん細胞に特徴的なエネルギー代謝系のキャラクタリゼーションと,これをターゲットにした抗がん剤の開発研究を行っている.これまでの研究で,がん細胞では多量に発現したII型へキソキナーゼが,ミトコンドリアに結合して,解糖活性の亢進に寄与していることをつきとめてきた.

本研究では,1)がん細胞のエネルギー代謝系を構築しているマシナリーの同定と2)エネルギー代謝調節におけるポーリンの役割の解析を行い,それぞれをターゲットとした抗がん剤開発の可能性を検討した.1)の解析の結果,細胞のがん化のシグナルおよびその悪性化のシグナルに呼応して,II型へキソキナーゼと1型グルコース輸送担体の転写が協調的に亢進し,がん細胞に特徴的な糖代謝系を構築していることが明らかになった.従って,1型グルコース輸送担体とII型へキソキナーゼの協調的な転写亢進の分子機構が,抗がん剤開発の良好なターゲットになることを結論した.また2)の問題に関しては,がん細胞で多量に発現したII型へキソキナーゼのミトコンドリア膜上での結合部位がポーリンであることに注目してがん細胞に発現したポーリンの同定を進め,a)がん細胞では少なくとも2つのアイソフォーム,VDAC1およびVDAC2が発現していること,ならびにb)ミトコンドリア膜に局在しているのはこれらのうちVDAC2であることを見いだした.現在,VDAC2とII型へキソキナーゼの相互作用の様式に関する研究を進め,抗がん剤開発に際してのターゲットとしての可能性を検討中.がん細胞に選択的なエネルギー代謝を遮断する方法として、ヘキソキナーゼの転写抑制とミトコンドリアへの結合の阻害を挙げている。本研究では、ヘキソキナーゼのミトコンドリアへの結合阻害実験を行った。これまで、ヘキソキナーゼのミトコンドリアへの結合は、比較的調製が容易である脳のI型ヘキソキナーゼを用いた解析ばかりであり、II型ヘキソキナーゼのミトコンドリアへの結合に関する知見は全く得られていない。そこで、我々がすでに確立した大腸菌での発現系を用いて、インタクトなII型ヘキソキナーゼを発現させ、これをミトコンドリアへの結合実験に供することにした。なお、コントロールとして、Wilson教授の方法に従って、ラットの脳からI型ヘキソキナーゼを調製したものを用いた。まず、組み換えDNAにより、生体内で発現しているものと1アミノ酸も異ならないタンパク質を発現させる発現ベクターを構築し、大腸菌に発現させた。発現した100kDaのタンパク質をミトコンドリアに添加して結合実験を行ったところ、全く結合が観察されなかった。N末端アミノ酸配列を解析した結果、大腸菌に発現させた100kDaのII型ヘキソキナーゼは、そのN末端の10残基ほどを欠質していることが判明した。そこで、C末側半分のヘキソキナーゼに、第1エクソンに相当する21アミノ酸残基を添加した組み換え体を調製し、これを大腸菌に発現させ、結合の解析を行った。その結果、この組み換え体では、I型ヘキソキナーゼと同等の結合が観察された。これまで、II型ヘキソキナーゼのミトコンドリアへの結合を測定した例はなかったが、本研究によって、トランケイテッド型ではあるものの、II型ヘキソキナーゼのミトコンドリアへの結合を評価する系をはじめて樹立することができた。本研究では、抗がん開発のためのターゲットの探索研究に重点をおいた実験を展開してきた。これまでの研究で、1型の糖輸送担体とII型ヘキソキナーゼの発現が、細胞の増殖条件の変動に伴って、協調的かつ選択的に亢進することを明らかにすることができ、その制御因子として、血清が考えられることを明らかにしたので、今年度は、その機構の解明に焦点をあてた研究を行った。血清刺激は、もっぱら繊維芽細胞で検討されているため、3Y1細胞を用いた解析を行った。常法に従って、3Y1を低血清培地に順化させ、その後、培地を15%の血清を含むものに変え、1型の糖輸送担体とII型ヘキソキナーゼの転写レベルの経時的な変動を観察した。その結果、血清刺激開始24時間後に、1型の糖輸送担体とII型ヘキソキナーゼの転写レベルが、特異的かつ顕著に亢進することを見いだした。
マルチプレット・クラスタリング解析による地下き裂システムの透水性評価法の開発

マルチプレット・クラスタリング解析法を基礎にした地下き裂システムの透水性評価法を開発することを目的として,本年度は地下き裂システム透水性評価法の具体化を進めた.その成果の概要は以下の通りである.これまでの成果を踏まえて,実フィールドデータの解析を進めることにより,まず,マルチプレット震源に時空間分布により流体流動方向ならびに透水性き裂システム形成プロセスの推定が可能であることを示した.また,マルチプレット震源の高精度位置標定により抽出したき裂構造面走向傾斜と応力場より臨界間隙水圧を求め,これとマルチプレットの時空間分布を相互に解釈することにより,貯留層造成時の地下き裂臨界間隙水圧の分布ならびに圧力勾配の推定が可能であることをソルツフィールドのデータを用いて示した.圧力伝搬速度については,マルチプレットイベント数が少なく,震源分布が一様でない場合,推定が難しいことが分かった.マルチプレットのサイスミックモーメント解放量の増加量ならびに震源域面積の増加量により,貯留層内き裂構造の流体流動の度合いを推定することが可能であることを示した.地下き裂構造や動的挙動に関して,マルチプレット波形分類時のコヒーレンス周波数帯域との関係について検討した.以上のような解析結果をもとに,マルチプレット・クラスタリング解析法による震源標定を基礎とした貯留層内き裂群透水性評価手順を提案した.本解析法を,ソルツフィールドのデータに適用し,評価法の問題点や限界点を明らかにした.マルチプレット・クラスタリング解析法を基礎にした地下き裂システムの透水性評価法を開発することを目的として,本年度は地下き裂システム透水性評価法の具体化を進めた.その成果の概要は以下の通りである.これまでの成果を踏まえて,実フィールドデータの解析を進めることにより,まず,マルチプレット震源に時空間分布により流体流動方向ならびに透水性き裂システム形成プロセスの推定が可能であることを示した.また,マルチプレット震源の高精度位置標定により抽出したき裂構造面走向傾斜と応力場より臨界間隙水圧を求め,これとマルチプレットの時空間分布を相互に解釈することにより,貯留層造成時の地下き裂臨界間隙水圧の分布ならびに圧力勾配の推定が可能であることをソルツフィールドのデータを用いて示した.圧力伝搬速度については,マルチプレットイベント数が少なく,震源分布が一様でない場合,推定が難しいことが分かった.マルチプレットのサイスミックモーメント解放量の増加量ならびに震源域面積の増加量により,貯留層内き裂構造の流体流動の度合いを推定することが可能であることを示した.地下き裂構造や動的挙動に関して,マルチプレット波形分類時のコヒーレンス周波数帯域との関係について検討した.以上のような解析結果をもとに,マルチプレット・クラスタリング解析法による震源標定を基礎とした貯留層内き裂群透水性評価手順を提案した.本解析法を,ソルツフィールドのデータに適用し,評価法の問題点や限界点を明らかにした.マルチプレット・クラスタリング解析法を基礎にした地下き裂システムの透水性評価法を開発することを目的として,本年度は,AEマルチプレット・クラスタリング解析のソルツフィールド(フランス)データへの適用を行い,その結果を,検層データ等と比較検討を行った.本年度得られた成果を以下に記す.1.AEマルチプレットとき裂透水性を関係付ける物理量とパラメータの特定AEマルチプレットのメカニズム解析から推定できる震源面積の拡大量は,透水き裂ソーンの拡がりと関係があることがわかった.また,透水き裂形成速度とモーメントマグニチュード累積値との関係を明らかにし,マルチプレットに着目することにより,透水ソーン形成と透水性評価を行える可能性があることを示した.2.坑井内検層データの精査とモデル構築による貯留層内透水性き裂領域形成プロセスの検討AEマルチプレット・クラスタリング解析を基礎にして,貯留層内き裂の臨界間隙水圧とその分布,貯留層内圧力伝搬方向や伝搬速度,圧力勾配等の評価を行い,坑井内検層データと詳細に比較した.その結果,マルチプレット・クラスタリング解析による臨界間隙水圧推定法により,臨界間隙水圧分布を調べることにより,透水き裂ソーンの構造と形成速度だけでなく,貯留層内の間隙水圧上昇の様子とき裂内流体圧力の減衰の様子を推定できることがわかり,マルチプレット・クラスタリング解析をもとにした臨界間隙水圧推定法の有効性が示された.マルチプレット・クラスタリング解析法を基礎にした地下き裂システムの透水性評価法を開発することを目的として,本年度は地下き裂システム透水性評価法の具体化を進めた.その成果の概要は以下の通りである.昨年までの成果を踏まえて,実フィールドデータの解析を進めることにより,まず,マルチプレット震源に時空間分布により流体流動方向ならびに透水性き裂システム形成プロセスの推定が可能であることを示した.また,マルチプレット震源の高精度位置標定により抽出したき裂構造面走向傾斜と応力場より臨界間隙水圧を求め,これとマルチプレットの時空間分布を相互に解釈することにより,貯留層造成時の地下き裂臨界間隙水圧の分布ならびに圧力勾配の推定が可能であることをソルツフィールドのデータを用いて示した.圧力伝搬速度については,マルチプレットイベント数が少なく,震源分布が一様でない場合,推定が難しいことが分かった.

マルチプレットのサイスミックモーメント解放量の増加量ならびに震源域面積の増加量により,貯留層内き裂構造の流体流動の度合いを推定することが可能であることを示した.地下き裂構造や動的挙動に関して,マルチプレット波形分類時のコヒーレンス周波数帯域との関係について検討した.以上のような解析結果をもとに,マルチプレット・クラスタリング解析法による震源標定を基礎とした貯留層内き裂群透水性評価手順を提案した.本解析法を,ソルツフィールドのデータに適用し,評価法の問題点や限界点を明らかにした.
S.mutansホスホトランスフェラーゼscrEII転写レベルの調節機溝の解析

S.mutansの蔗糖輸送系の一つであるホスホエノールピルビン酸依存ホスホトランフェラーゼ系(PTS)蔗糖エンザイムIIの遺伝子(scrA)発現調節機構解明のため、scrA遺伝子周辺に存在するであろうその調節遺伝子の検索を行なってきた。前年度までの研究で、これらの領域に三つの比較的小さな遺伝子の存在が明らかになっており、それら遺伝子の失活変異株の構築から、それらが調節遺伝子であるか否かを調べてきた。ところが、それらのうち、scrA遺伝子のすぐ下流の存在する遺伝子は、scrAの調節遺伝子ではなく、フルクトキナーゼをコードする構造遺伝子scrKであるらしいことが推定されるに至った。これにより、蔗糖がEmbden-Meyerhofの解糖系路へ至るまでの代謝系路の酵素の遺伝子がすべて同定されることになり、それらが蔗糖PTSレギュロンを構成しているものと考えられた。そこでscrAの発現調節はこのレギュロンを単位として考察する必要があり、その前にこのscrK遺伝子の性質を明らかにしておく必要があると考えられたので本年度はこれを行った。既にクローニングされているDNA断片は、このscrK遺伝子の3'末端を含んでいなかったので、染色体よりその3'領域を分離し、完全なscrK遺伝子を構築し、その塩基配列を決定し、更に過剰発現を試み、その性質を調べた。このscrK遺伝子は分子量約3万のタンパク質をコードしており、その上流にプロモーター様配列が認められることから、scrA遺伝子とは独立して制御されている可能性も示唆された。このフルクトキナーゼはマンノースもリン酸化し、マンノースはフルクトースのリン酸化を競合的に阻害した。またScrAや蔗糖6-リン酸水解酵素遺伝子ScrBのタンパク質では他菌種のものとかなり高い相同性が認められたけれども、それら菌種との間でのフルクトキナーゼにおける相同性は全く認めらず、前述の酵素基質特異性も異なり、同じ蔗糖PTSレギュロンを構成する遺伝子であるにもかかわらずその進化論的起源が異なるかもしれないと推定されたことは興味深い点であった。S.mutansのスクロ-ス輸送系の一つであるホスホエノ-ルピルビン酸依存ホスホトランスフェラ-ゼ系(PTS)スクロ-スエンザイムII(EII)の遺伝子(scrA)発現調節機構解明のため、私はscrA遺伝子と大腸菌由来のβーガラクトシダ-ゼ遺伝子(lacZ)との融合遺伝子を作製し、更にscrA遺伝子の転写活性が容易に検出できるようなS.mutansの変異株を作製して、スクロ-スをはじめ、種々の糖で培養後scrA発現を調ベた。これによればscrA発現は、明らかに転写、翻訳レベルでスクロ-スにより誘導されることを確認した。又scrA及び各々の下流に存在するdas,及びds1,ds2のいずれかがscrAの転写制御にかかわる調節遺伝子ではないかという推察からdsa,ds1,ds2のいずれかもしくは二者を失活させたscrA::lacZ二重変異株を作製し、それらの失活によるscrA::lacZ発現に与える影響から、いずれかscrAの調節遺伝子であるかを明らにしようと企画した。しかしdsa,ds1,ds2いずれの失活二重変異株においても、フルクト-ス、マルト-ス、ラクト-スとともに培養したときのscrA発現はスクロ-ス培養時のそれと比較すると著しく低く、いずれもscrAは依然としてrepressされていると考えられ、dsa、ds1、ds2いずれもscrAのリプレッサ-は考えにくい結果となった。一方scrA::lacZ変異株における誘導実験をより詳細に調べた結果、scrA発現はグルコ-ス、フルクト-ズ、マルト-ズが共存するとスクロ-スが存在するにも係わらずscrA発現は誘導されなかったが、ラクト-ス、ソルビト-ル共存下ではscrA発現は誘導された。しかも、極めて興味深い点は、スクロ-スで育った場合、上述の如くラクト-ス、スクロ-ス共存下でscrA発現が誘導されたが、クラト-スで育った場合、全く同じ条件下でscrA発現は誘導されなかった。即ち、scrAの発現は他の糖輸送と密接に関連して調節されていると推察され、特にラクト-ス輸送系の調節のメカニズムにはscrA発現のメカニズムを解く鍵があると思われるに至っている。そこで今後は、ラクト-ズEIIをクロ-ニグし、そのscrA発現に対する影響のメカニズムを明らかにしたい。S.mutansのスクロ-ス輸送系の一つであるホスホノ-ルビルビン酸依存ホスホトランスフェラ-ゼ系(PTS)スクロ-スエンザイムII(EII)の遺伝子(scrA)発現調節構機解明のため、scrA遺伝子と大腸菌由来のβーガラクトシダ-ゼ遺伝子(lacZ)との融合遺伝子を持つS.mutansの変異株を作製して、スクロ-スをはじめ、種々の糖で培養後scrA発現を調べた結果、scrA発現は、明らかに転写、翻訳レベルで調節されていることが確認された。しかも、scrA発現は他の糖輸送と密接に関連して調節されていると推察され、特にラクト-ス輸送系の調節のメカニズムにはscrA発現のメカニズムを解く鍵があると思われるに至った。そこで、そのscrA発現に対する影響にメカニズムを明らかにするため、ラクト-ス輸送系遺伝子をクロ-ニングを試みた。S.mutansはラクト-ス

培地上でXgalを水解して青いコロニ-を形成することが今回見いだされたので、まずS.mutansにおけるこの形質発現の機構を解析したところ、S.mutansにおいては、大腸菌におけるそれとは異なり、XgalはPTSによりリン酸化されるXgalーリン酸化されXgalーリン酸となったのちに水解されて青い色が生じることがわかった。そこでこの性質を利用して、S.mutansを宿主とした、マ-カ-レ-スキュ-プラスミッドの挿入によるランダミュ-タジェネシスを行い、青いコロニ-を形成せずラクト-スを利用できない変異株を数株得た。これらの株よりプラスミッド挿入部位に連続するDNA断片を含むプラスミッドとして大腸菌に回収した。これらのうち一つのクロ-ンは大腸菌では認められないホスホ-βーガラクダ-ゼ活性をもっており、分離されたプラスミッド上には約5KbのS.mutansの染色体DNA断片が含まれていた。今後は、この断片に含まれる乳糖輸送系遺伝子(群)の内どの遺伝子が発現したときに、scrA発現が抑制されるか等を前述のscrA発現検出異株等を用いて検討する。S.mutansの蔗糖輸送系の一つであるホスホエノールピルビン酸依存ホスホトランフェラーゼ系(PTS)蔗糖エンザイムIIの遺伝子(scrA)発現調節機構解明のため、scrA遺伝子周辺に存在するであろうその調節遺伝子の検索を行なってきた。前年度までの研究で、これらの領域に三つの比較的小さな遺伝子の存在が明らかになっており、それら遺伝子の失活変異株の構築から、それらが調節遺伝子であるか否かを調べてきた。ところが、それらのうち、scrA遺伝子のすぐ下流の存在する遺伝子は、scrAの調節遺伝子ではなく、フルクトキナーゼをコードする構造遺伝子scrKであるらしいことが推定されるに至った。これにより、蔗糖がEmbden-Meyerhofの解糖系路へ至るまでの代謝系路の酵素の遺伝子がすべて同定されることになり、それらが蔗糖PTSレギュロンを構成しているものと考えられた。そこでscrAの発現調節はこのレギュロンを単位として考察する必要があり、その前にこのscrK遺伝子の性質を明らかにしておく必要があると考えられたので本年度はこれを行った。既にクローニングされているDNA断片は、このscrK遺伝子の3'末端を含んでいなかったので、染色体よりその3'領域を分離し、完全なscrK遺伝子を構築し、その塩基配列を決定し、更に過剰発現を試み、その性質を調べた。このscrK遺伝子は分子量約3万のタンパク質をコードしており、その上流にプロモーター様配列が認められることから、scrA遺伝子とは独立して制御されている可能性も示唆された。このフルクトキナーゼはマンノースもリン酸化し、マンノースはフルクトースのリン酸化を競合的に阻害した。またScrAや蔗糖6-リン酸水解酵素遺伝子ScrBのタンパク質では他菌種のものとかなり高い相同性が認められたけれども、それら菌種との間でのフルクトキナーゼにおける相同性は全く認めらず、前述の酵素基質特異性も異なり、同じ蔗糖PTSレギュロンを構成する遺伝子であるにもかかわらずその進化論的起源が異なるかもしれないと推定されたことは興味深い点であった。
β-フェニルエチルアミンの分析と覚醒剤投与時の変化に関する研究

本研究では、まず、脳マイクロダイアリシス法による自由行動下におけるラット線条体細胞外液中のβ-フェニルエチルアミン(PEA)を高感度かつ再現性良く定量する方法を確立した。次に、PEAとその類似:化合物、例えば法中毒学において遭遇することの多い覚醒剤を同時投与し、PEAの濃度変化との間に何らかの関連性があるか否かについて検討し、さらに、これらの薬物投与後の脳神経細胞の形態学的変化についても可能な限り追求することを目的とした。1)PEA測定法のガスクロマトグラフィー/質量分析装置(GC/MSD)確立と基礎値の検索3-phenyl-propylamine(内部標準物質)およびpentafluorobenzaldehyde(誘導体化試薬)を用いることによってPEAを高感度分析することができた。本法によってラット線条体透析液中(細胞外液中)のPEA濃度を測定した結果、リンゲル液を潅流後90分までの各ラットの平均値は260.54pg/mlであった。大凡この値がラット線条体細胞外液中のPEAの基礎値と考えられた。ラット線条体透析液中のPEA濃度は20mg/kgのMAを投与直後から上昇し、投与から2時間後に一旦低下したが、再び上昇傾向を保持した。これは、MA投与によって増加した)amphetamine(AMPによるモノアミン代謝酵素B型の競合的阻害やPEAの再取り込み抑制が生じた可能性等が推測された。PEAの基礎値は線条体および視床下部がその他の部位と比較してやや高値を示した。また、20mg/kgのMA投与後のPEA濃度は、いずれの部位においても徐々に減少する傾向を示したが、線条体、海馬、視床下部、中脳および橋-延髄では24時間後に再度上昇した。この原因についての詳細は不明であるが、神経細胞自体の崩壊による可能性も否定できないものと推測される。10mg/kgのMA投与から6および12時間後では、各脳組織に特異的な組織学的変化は認められなかった。マイクロダイアレート中の微量PEAを高感度かつ特異的に検出するために、定量のための内部標準物質として3-phenyl-1-propylamine(PPA)を用いた。両物質を含む標準水溶液に1%pentafluorobenzaldehyde(PFBAL)トルエン溶液を加えて抽出的誘導体化条件を検討したところ、pH10、80°Cで30分間加熱の条件下で最適な抽出的誘導体化が可能であった。また、PEAおよびPPA誘導体の安定性については、試料を暗所で1日室温放置した場合、分解程度は15%以下であり、他の報告によるものと比較して良好であった。2.ラット線条体灌流液中のPEA濃度の定量ラットを定位脳固定装置に固定し、Konig-Klipperアトラスに基づいてラット線条体内に透析用プローブを挿入した。手術後は2日間放置後、リンゲル液を3μL/分で灌流し、透析液を30分間毎に90分間採取した。採取液中のPEA濃度をガスクロマトグラフィー/質量分析計を用いて定量した結果、90分までの平均値は260.54pg/mLとなり、各ラットにおいてほぼ一定した値が得られた。3. PEA投与後の脳神経細胞と組織細胞における免疫組織学的染色法の検討実験終了後の脳をホルマリン固定し、パラフィン包埋後、線条体部分を薄切した。

これにヘマトキシリン・エオジン染色、特殊染色としてLuxol-Fast Blue、Bodian染色および免疫組織化学的染色としてGlial fibrillary acid protein、B4isolectin染色を行った。その結果、いずれも有意な形態学的変化を認めなかった。脳マイクロダイアリシス法による自由行動下に覚醒剤methamphetamine(MA)を投与し、ラット線条体細胞外液中のβ-フェニルエチルアミン(PEA)との濃度変化との間に何らかの関連性があるか否かについて検討し、さらに、これらの薬物投与後の脳神経細胞の形態学的変化についても可能な限り追求することを目的とした。1)覚醒剤投与によるPEA濃度の変化(1)ラット線条体透析液中のPEA濃度は20mg/kgのMAを投与直後から上昇し、投与から2時間後に一旦低下したが、再び上昇傾向を保持した。10mg/kgのMA投与群では著名な変化は認められなかった。この理由としては、MA投与によって増加したAMPによるPEAやDAなどの脳内モノアミンの酸化的脱アミノ化に関わるモノアミン代謝酵素B型の競合的阻害やPEAの再取り込み抑制が生じた可能性等が推測された。(2)脳組織中のPEAの基礎値は線条体および視床下部がその他の部位と比較してやや高値を示した。また、20mg/kgのMA投与後のPEA濃度は、いずれの部位においても徐々に減少する傾向を示したが、線条体、海馬、視床下部、中脳および橋-延髄では24時間後に再度上昇した。この原因についての詳細は不明であるが、神経細胞自体の崩壊による可能性も否定できないものと推測された。(3)20mg/kgのMA投与後、各脳組織および血液中のAMP濃度は24時間後にいずれも痕跡程度に減少した。2)MA投与における脳神経細胞の組織学的変化10mg/kgのMAを腹腔内投与後、6および24時間後に脳神経細胞の組織学的変化を観察したが、特異的変化は認められなかった。
マルチアクセス環境におけるLMSを活用した豊かな学びに関する実証研究

急速な社会の情報化により様々な情報がネットワーク上に蓄積・整理され自由にアクセスし活用できるマルチアクセス環境が整いつつある。さらに,次期学習指導要領では,アクティブ・ラーニングがより一層重視され,「主体的な学び」,「対話的な学び」,「深い学び」の3つの学びの視点が重要となる。本研究は,この3つの学びの視点において,学びを増幅する道具としてICTを用いた学びを豊かな学びとし,LMSを活用した豊かな学びのモデルと授業デザインの開発を行い,学習者の学習者の行動変容や社会での貢献を評価する実証研究である。平成29年度の実践では、プログラミング教育においてLMSを中心とした包括的学修支援を重視するとともに学習状況の把握、個々の学習進捗状況に応じた指導展開を模索することを行った。また、自己調整学習を取り入れた学習デザインによる一定の持続的な学習やメタ認知、多様な動機づけにつながる結果となった。平成30年度では特に自ら学ぶ力を育てる方略としての自己調整学習を豊かな学びの環境に取り入れ、論理的思考力や問題解決能力などの獲得に繋がることを目的に学習モデルの修正と実践を行った。その結果、メタ認知や動機づけ、行動へと有意な成果が認められ自己調整能力の獲得につながった。現在までの4年間の実践から得られた成果をもとに豊かな学びの環境下においてプログラミング的思考の向上を目的に自己調整学習を取り入れた学習デザインを検討開発した。また、学習内容の対象をプログラミング教育にあて、ICTの活用と主体的・対話的で深い学び(=豊かな学び)を行うとともに、学習デザインに基づく教員の適切な介入・支援を行い、豊かな学びへとつながる有益な実証結果が得られた。以上のように、本研究の達成度としては概ね申請時の研究計画通りの進捗状況である。豊かな学びの環境下においてのプログラミング的思考向上を目的とした自己調整学習を確立するとともに現在までの実践の時系列データの分析を行い、自己調整能力の熟達化に迫る実証研究を行う。また、最終年度ということで研究成果を学会発表、学会誌等にて公表していく。平成29年度は、主として以下の事項を行った。1先行研究:先行研究の収集、学術交流、ICT活用先進校の視察を行う。2分析:平成28年度分の実践成果の分析。3追跡:平成28年度分の実践対象者の追跡調査。4開発:豊かな学びのモデルと授業デザインの開発。4シラバス作成:担当科目のシラバス作成。5学習指導案作成:実践校別の学習指導案と教材を作成。6LMS:実践校別に既存のLMSの調整・準備。7調整:実践校別担当者と指導方法の調整・打ち合わせ平成28年度の実践分析より、豊かな学びによる学習意欲の喚起や概念的理解の促進、包括的学修支援の重要性、基礎的・汎用的能力の向上についての成果が出ており、それらを基に授業デザインを検討した。現在までの3年間の実践から得られた成果をもとに自己調整学習を取り入れた学習デザインを検討し実施した。

現在までの4年間の実践から得られた成果をもとに豊かな学びの環境下においてプログラミング的思考の向上を目的に自己調整学習を取り入れた学習デザインを検討開発した。また、学習内容の対象をプログラミング教育にあて、ICTの活用と主体的・対話的で深い学び(=豊かな学び)を行うとともに、学習デザインに基づく教員の適切な介入・支援を行い、豊かな学びへとつながる有益な実証結果が得られた。以上のように、本研究の達成度としては概ね申請時の研究計画通りの進捗状況である。平成30年度は、開発した授業デザインをもとにさらに実践を重ねる。また、プログラミング教育をはじめとした情報教育において豊かな学びへとつながる実践を行うため、実践校・研究協力者などと実践内容・進捗状況について研究協議を重ね、具体的な学習内容とすることで授業デザインの効果を得やすくする。それにより、プログラミング的思考などの多様な能力にどのように影響を及ぼすかについても実証研究を行い、今後の研究に役立てる。豊かな学びの環境下においてのプログラミング的思考向上を目的とした自己調整学習を確立するとともに現在までの実践の時系列データの分析を行い、自己調整能力の熟達化に迫る実証研究を行う。また、最終年度ということで研究成果を学会発表、学会誌等にて公表していく。およそ10万円の繰越となった理由は当初謝金支払いによる研究補助をお願いする予定であったが、通常タスクの中で自身で行ったため想定より少ない謝金となった。次年度は、関東を中心とした遠方での学会発表が多く宿泊等旅費がかさむことが予想される。また、次年度の使用計画は、今年度購入した備品・消耗品等の維持・補填を中心とした利用が中心となり、概ね申請時の研究計画による使用を想定している。次年度は、時系列データ分析・多変量解析のための統計ソフトや機器、最終年度としての研究成果のまとめ、学会等報告のための出張等に費用ががかさむことが予想される。
悪性リンパ腫の組織発生、増殖および進展-Bリンパ球性を中心に-

末梢リンパ組織(リンパ節、消化管など)に発生する悪性リンパ腫の多くはB細胞性であり、Bリンパ腫の組織発生について多角的に検討した。とくに濾胞中心細胞由来のものと、濾胞のマントル層リンパ球由来のリンパ腫の特性を検討した結果から、後者の独立性を明らかにしえた。1.発生学的にリンパ節の一次濾胞は胎齢16週に、被膜下に小結節として出現する。構成細胞の約30%はCD5(Leu-1)陽性のBリンパ球であることが特徴的である。このリンパ球は同時にIgD陽性で、ごく一部のものはAL-P陽性を呈する。2.生後、反応濾胞となって胚中心が出現すると、上記の一次濾胞細胞はマントル層リンパ球となる。マントル層リンパ球は内層と外層に分けられ、内層はCD5^+IgD^+リンパ球から成り、外層はAL-P陽性と少数のCD5陽性によって特徴づけられる。3.びまん性中細胞型リンパ腫は濾胞性中細胞型リンパ腫のびまん性化とみなされてきたが、腫瘍細胞の形質に差があり、マントル層リンパ球由来とみなされ、CD5、IgD、AL-Pなどが陽性を呈する。一方、濾胞性リンパ腫はCD10陽性を示す。4.濾胞樹状細胞(FDC)は濾胞性中細胞型リンパ腫では密に出現してくる。これに対し、マントル層リンパ腫では全体に亘って不規則に出現し、腫瘍細胞がFDCの増生に関連している可能性が示唆された。5.遺伝子の面から、マントル層リンパ腫ではbcl-1の再構成を認め、濾胞性リンパ腫では高頻度にbcl-2の再構成を認めた。今後、マントル層リンパ球の役割と機能をBリンパ球の分化・成熟及び再循環の面から、明らかにする必要を痛感した。Bリンパ腫の発生様式、腫瘍細胞の増殖および進展を明らかにするため、ヒト胎児リンパ節、Bリンパ腫の新鮮摘出材料およびBリンパ腫樹立細胞株を対象として免疫組織化学的および分子生物学的に検討した。その結果、1.ヒト胎児リンパ節の検討から、胎生期におけるBリンパ球の出現は胎令10週以降に始まり、一次濾胞は胎令16週に形成され、被膜近くの辺縁洞に接し小結節状をなしてくる。一次濾胞の細胞構成としてCD5陽性Bリンパ球が重要で、胎令25週のリンパ節では一次濾胞の約35%を占めている。2.対象とした低悪性度Bリンパ腫のうち、びまん性リンパ腫である小細胞型と中細胞型が一次濾胞ないしマントル層リンパ球から発生することを明らかにし、胚中心細胞由来の濾胞性リンパ腫とは組織発生上明瞭に区別される。その鑑別として細胞の形態学的特徴のみならず、免疫組織化学的にはCD5、Leuー8、IgDおよびアルカリフォスタ-ゼ染色の結果を組み合わせることによってマントル層由来と決定しうる。次に、胚中心由来の濾胞性リンパ腫は、CD10陽性と、bc1ー2遺伝子の再構成によって特徴づけられる。また、Bリンパ球のアルカリフォスファタ-ゼは、Bリンパ球がマントル層から胚中心に移っていくための活性化に必要なことがわかった。3.悪性リンパ腫細胞の増殖能は、患者の治療および予後に深く関係する。種々の検討を行なった結果、Bリンパ腫にとってはKiー67が有用で、びまん性大細胞型で最も陽性率が高かった。Kiー67の陽性率は患者の予後ともよく相関するが、病期や治療薬剤との関連は今後に残されている。

4.腫瘍の進展に伴う腫瘍血管はある型のTリンパ腫で特徴的であるが、Bリンパ腫においても毛細血管の増生が顕著である。腫瘍の進展における内皮細胞や腫瘍細胞と接着分子との関連としてICAMー1の陰性例に骨髄浸潤を多くみとめたが、これも今後の重要な課題である。Bリンパ腫の組織発生と腫瘍細胞の生物学的性状を明らかにする目的で、前年度の研究の発展を試みた。すなわち、Bリンパ腫の新鮮材料については、1)低悪性度リンパ腫の組織発生を明らかにするため、免疫組織化学的検討および遺伝子学的検索を行なった。対象とした低悪性度リンパ腫はびまん性小細胞型、びまん性中細胞型、濾胞性中細胞型と濾胞性混合型である。この中で特に中細胞型に焦点を絞って免疫組織化学的検討と遺伝子学的検討との対比を行なった。その結果、びまん性中細胞型は前年と同様、CD5、alーpおよびIgD陽性などによって特徴づけられ、更に遺伝子学的にはbclー1遺伝子の再構成を27例中6例に、またCD5陽性10例中6例に認めた。しかし、CD5とbclー1遺伝子再構成との間には在意の相関を認めなかったが、濾胞性リンパ腫にはbclー1の再構成はみられなかった。これに対し、濾胞性中細胞型はCD10とbclー2遺伝子の再構成によって特徴づけられ、両者間に有意の相関を認めえた。これらの特徴から、びまん性中細胞型と濾胞性小細胞型とは生物学的にも異なり、組織発生上も異なることが示唆され、前者のびまん性中細胞型はマントル層リンパ球に由来するものとみなされた。前年度に比較し、bclー1遺伝子の再構成を検索出来た点はひとつの進歩といえる。2)接着分子と腫瘍の進展に関してはLFAー1およびICAMー1との関連を検討した。その結果LFAー1とリンパ腫の進展との関連は明らかでないものの、ICAMー1陰性例に腫瘍細胞が血中に出現したり、あるいは骨髄を侵襲する例が多い。ICAMー1陽性例は腫瘍細胞が遊離性となる傾向の少ないことによると思われるが、今後の研究課題と考える。Bリンパ腫の組織発生、腫瘍細胞の増殖能および進展機序を明らかにするため、ヒト胎児リンパ節、ヒト扁桃および悪性リンパ腫の新鮮摘出材料と樹立細胞株を対象として免疫組織学的および分子生物学的に検討した。その結果、1)Bリンパ球はヒト胎児リンパ節では胎令10週に出現し、リンパ節の末梢部にみられる。胎令16週になると皮質の辺縁洞に接して一次濾胞が形成され、その構成細胞の約30%がCD5陽性のBリンパ球であり、本細胞が一次濾胞構成細胞として重要である。2)ヒト扁桃のリンパ濾胞は胚中心とマントル層から成り、CD5陽性Bリンパ球はマントル層内にのみ見出され、胚中心内にはみとめられない。胚中心細胞はCD10陽性を呈する。さらに、マントル層は内層と外層とに分けられ、内層リンパ球はIgD陽性でCD5も陽性を呈する細胞が多く、外層リンパ球はアルカリ-P陽性でCD5陽性細胞は少ない。アルカリ-Pはリンパ球の芽球化に重要な役割を果たすことと、PKC-IIの活性化に関連することが示唆された。3)低悪性度Bリンパ腫の発生部位として、マントル層リンパ球と胚中心細胞とがあげられる。マントル層由来のBリンパ腫は、びまん性リンパ腫の小細胞型と中細胞型を示し、この大部分の症例がマントル層リンパ球の性状を有している。遺伝子的にはbc1-1の再構成を示す例をみるが、CD5発現との間に有意な相関を見出しえない。一方、濾胞性リンパ腫は胚中心リンパ球の性状を示し、腫瘍細胞はマントル層由来のものに比較し、核のくびれ程度が高度である。遺伝子的にはbc1-2再構成を呈するものが多く、CD10発現との間に有意の相関を示す。