hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ナノ周期構造体を用いた励起イオンビームの生成に関する基礎研究

本研究では加速器質量分析(AMS)における新しい同重体分離技術を提案する。具体的にはコヒーレント共鳴励起に基づく同重体分離であり、イオンが結晶チャネルを通過するときに大きな角度のイオン散乱を大幅に減少させる現象である「イオンチャネリング」に基づいている。本年度は,昨年度成果を得たイオンチャネリングを利用したディグレーダーを、AMS装置の小型化に向けて原理実証を行った。この原理実証ではイオンの大角散乱の抑制と、十分なディグレーダー機能によるベリリウムとその同重体であるホウ素の間のエネルギー差が得られることが確認された。今後実用試験として、耐久性や測定結果の安定性等にかかわる試験を行う予定である。これらの成果は、2018年秋季第79回応用物理学会学術講演会において招待講演で発表を行い、さらに論文投稿及び国内外において学会発表を行うことができた。平成30年度の研究活動の内、RCEを発生させるためのチャネリング技術の構築については当初計画よりも順調に進行しているが、RCEの発生については当初計画よりやや遅れている。平成30年度に予定していた研究計画に対してこれらの実施結果を踏まえて総合的に判断すると、おおむね順調に研究が進展していると考えられる。令和元年度もRCEによる励起イオンビームの生成を目指し静電偏向器中に配置したナノ・グレーティングに向かってイオンを入射する系を構築し、以下1から3に挙げる基礎実験を系統的に行うことで、RCEによる励起ビーム生成の道筋を明らかにする。1飛行高度に対するRCEの発生率の変化を明らかにする。2RCEの励起スペクトルを観測し、イオンのエネルギー広がりを把握する。3入射ビームの収束角に対するRCEの発生率の振る舞いを明らかにする。具体的にはコヒーレント共鳴励起(RCE)に基づく同重体分離であり,イオンが結晶チャネルを通過するときに大きな角度のイオン散乱を大幅に減少させる現象である「イオンチャネリング」に基づいている。本研究ではRCEに基づく同重体分離については結晶内での電離段階を利用した同重体分離を行っており,本年度はRCEによる励起イオンビームの生成を目指し予備実験としてイオンチャネリングのドーナツ効果における荷電分布について調べた。本成果は国内外において学会発表等行った。またRCEを基にした同重体分別法の開発過程において,イオンチャネリング自体も同重体分別に有用であることを着想した。本研究では,薄膜を結晶薄膜に置き換えイオンチャネリング状態を生成することで,両者のエネルギーの差を十分作ることのできる厚さ1 μm程度の比較的厚い膜でもビーム広がりが抑えられ分別能力が向上することを明らかにした。本研究を進めるにあたり,イオンチャネリングを利用したディグレーダーについても成果を上げることができ,論文投稿及び国内外において学会発表を行うことができた。RCEを起こさせるためのチャネリング技術の構築は、当初計画よりも順調に進行している。一方で、RCEの発生については、当初計画よりやや遅れている。以上より、おおむね順調に研究が進展していると言える。来年度以降も,RCEによる励起イオンビームの生成を目指し,静電偏向器中に配置したナノ・グレーティングに向かってイオンを入射する系を構築し,1飛行高度に対するRCEの発生率の変化を明らかにする,2RCEの励起スペクトルを観測し,イオンのエネルギー広がりを把握する,3入射ビームの収束角に対するRCEの発生率の振る舞いを明らかにすることを目指す。これらの三つの基礎実験を系統的に行うことで,RCEによる励起ビーム生成の道筋を明らかにする。

平成29年度において購入を予定していた実験に必要なケーブル類の納期が年度内に間に合わなかったことにより、購入を平成30年度に変更したため、ケーブル購入に係る経費が次年度使用額として生じることとなった。そのため平成29年度に購入を予定していたケーブル類の購入費用として平成30年度に使用予定である。平成30年度において新しい実験装置の設計に時間を取られ、平成30年度に計画していた物品購入を令和元年度に延期することにしたため次年度使用額が生じた。次年度使用額は令和元年度分経費と合わせて物品購入に係る費用や実験に係る費用等に使用する。
消化管癌のRNAにおけるN6-メチルアデノシン(m6A)による癌制御メカニズム

数種類の食道癌、胃癌、大腸癌細胞株を用いて、細胞培養後、RNAを抽出し、cDNAを作成してMETTL3のプライマーでqRT-PCRを行った。同様の解析を非癌細胞でも行い、消化管癌細胞株におけるMETTL3のmRNAの発現レベルを確認し、非癌細胞における発現レベルとの比較を行った。結果、細胞株においてややばらつきはあるものの、食道癌、及び大腸癌細胞株において、大部分が非癌細胞よりmRNAの発現レベルが高い傾向がみられた。また、上記の各種細胞株を用いてウェスタンブロッティングを行い、METTL3のタンパク質レベルについても解析した結果、一部の食道癌細胞株においてMETTL3が高発現していた。現在、METTL3、FTO、ALKBH5のsiRNAを準備中であり、食道癌、胃癌、大腸癌細胞株を用いたノックダウン実験の計画を立てている。また、METTL3、FTO、ALKBH5のノックダウン時の発現レベルの変化をみる代表的な癌遺伝子/癌抑制遺伝子/癌幹細胞マーカー遺伝子についても、標的となり得る候補遺伝子の検討を行っている。尚、人事異動により平成30年1月から研究施設を移ることとなり、異動先では同様の実験は行われておらず、すぐには実験を開始出来ない状況であった。新たな施設で実験を再開するにあたり、器具、試薬、機器などの環境を整えるため、必要物品を一から購入し、改めて実験が出来るよう調整を行っている所である。29年度が最終年度であるため、記入しない。
電子透かしのロバスト性強化に対する確率・統計的アプローチ

本研究では,誤検出確率を埋め込み係数に基づいて理論的に計算することが可能であり,さらにビットパターンを埋め込み可能な電子透かし法を開発した.ここでは,秘密鍵を使用して透かし信号を反復してコンテンツに埋め込み,誤検出確率を保証した上で検出する方法を提案した.実験では,透かしの有無を誤検出率に基づいて判定可能なだけなく,ビットパターンを復元できることを確認し,JPEG圧縮,縮小,切り取りなどの各種攻撃に対して耐性があることを示した.本研究では,透かしの検出時に,透かしが無いにもかかわらず「有り」と判断してしまう「陽誤検出の確率」(誤検出確率)を,埋め込み係数の分散を元に理論的に計算し,検出した透かし信号の誤検出率を保証する電子透かし法を開発した.ここでは,透かし信号を反復してコンテンツ(画像)に埋め込み,誤検出確率を保証した上で検出する新たな方法を提案した.さらに,同時にコンテンツの中にビットパターンデータを埋め込みことにより,透かしの有無を誤検出率に基づいて判定できるだけでなく,様々な付加情報を埋め込むことが可能な手法を開発した.実験では,いくつかの静止画像に対してJPEG圧縮・縮小・クロッピング等の攻撃に対して十分な耐性を有することを確認した.さらに,離散ウェーブレット変換された領域に対して,人間の視覚特性(HVS)を考慮した上で透かし信号を埋め込む手法を開発した.従来法として,検出時に透かし入り係数と透かし信号の相関を計算し,相関値の正負符号に基づいてビット判定を行う手法が提案されているが,本研究では,この手法を改良し,より多くの情報を埋め込めるように埋め込み・検出方法を再構築した.実験では,従来法と比べて2倍以上の情報を埋め込み可能となることを確認した.また,電子透かしの安全性を向上させるため,情報の埋め込み空間を秘密鍵によって生成し,埋め込み空間を攻撃者から見つけにくくする方法についても検討した.提案法では,攻撃者が秘密鍵を相関計算によって特性するのは極めて困難となり,安全性が大幅に向上している.一方で,従来と同じようにHVSに基づいて透かしの埋め込みが可能であり,さらに,JPEG圧縮・縮小・クロッピング等に対するロバスト性もほぼ同等である.すわなち,従来の電子透かしの性能や利便性を損なうことなく,安全性のみを強化することに成功した.本研究では,誤検出確率を埋め込み係数に基づいて理論的に計算することが可能であり,さらにビットパターンを埋め込み可能な電子透かし法を開発した.ここでは,秘密鍵を使用して透かし信号を反復してコンテンツに埋め込み,誤検出確率を保証した上で検出する方法を提案した.実験では,透かしの有無を誤検出率に基づいて判定可能なだけなく,ビットパターンを復元できることを確認し,JPEG圧縮,縮小,切り取りなどの各種攻撃に対して耐性があることを示した.電子透かしとは,音声・画像等のディジタルコンテンツの中に知覚できないような「透かし信号」を埋め込み,コンテンツに対して著作権・所有権や購入者に関する情報を付加するものである.電子透かしはコンテンツの圧縮・切り取りなどの加工,および第3者による透かし信号の意図的な削除などの「攻撃」に対して頑強さを持つこと(ロバスト性)が要求される.本研究課題では攻撃を受けて透かし信号がダメージを受けた場合でも,確率・統計的な手法を用いて高精度に透かしの検出が可能になるような新しい検出手法を開発し,確率・統計的アプローチによって電子透かしのロバスト性強化(検出性能向上)を目指す.これにより,ディジタルコンテンツ等,知的創作物の著作権保護技術の発展に貢献・寄与することを目的とする.今年度は,透かし信号を反復してコンテンツ(画像)に埋め込み,誤検出確率を保証した上で検出する新たな方法を提案した.さらに,有無を検出する信号と同時にコンテンツの中にビットパターンデータを埋め込み,検出では透かしの有無を誤検出率に基づいて判定し,さらにビットパターンを復元する手法を開発した.それにより,透かしの検出時に透かしの誤検出率を保証できるだけでなく,ビットパターンの埋め込み・検出も可能となった.実験では,JPEG圧縮・縮小・クロッピング等の攻撃に対して十分な耐性を有することを確認した.したがって,電子透かしを著作権保護に利用する上で,従来よりも信頼性や利便性が向上したと考えられる.本研究の特色の一つは,透かしの検出時に透かしが無いにもかかわらず,「有り」と判断してしまう「陽誤検出の確率」(誤検出確率)を,埋め込み係数の分散を元に理論的に計算し,検出した透かし信号の誤検出率を保証する点である.この目標を達成するために,今年度は,透かし信号を反復してコンテンツ(画像)に埋め込み,誤検出確率を保証した上で検出する新たな方法を提案した.さらに,同時にコンテンツの中にビットパターンデータを埋め込み,透かしの有無を誤検出率に基づいて判定し,さらにビットパターンを復元する手法を開発した.それにより,透かしの検出時に透かしの誤検出率を保証できるだけでなく,ビットパターンの埋め込み・検出も可能となった.実験では,いくつかの静止画像に対してJPEG圧縮・縮小・クロッピング等の攻撃に対して十分な耐性を有することを確認した.以上のことから,研究は概ね順調に進展していると考えている.離散ウェーブレット変換された領域に対して,人間の視覚特性を考慮した上で透かし信号を埋め込む手法を開発する予定である.検出時は透かし入り係数と透かし信号の相関を計算し,相関値の大きさに基づいてビット判定を行う手法が提案されているが,本研究では,この手法を改良し,より多くの情報を埋め込めるように埋め込み・検出方法を再構築する予定である.

さらに,電子透かしの安全性を向上させるためのいくつかの試みを実施する予定である.理論的考察,計算機実験に加え,得られたデータのとりまとめ,学会発表,論文作成を行う予定である.これらは,指導している大学院生達と連携して行う予定である.今年度は,研究成果の発表を行うことが主たる研究内容になると予想されるので,学会発表の旅費,学会の参加費,研究会資料・学術論文の別刷り購入費を主な使途として考えている.また,得られたデータをまとめ,論文を作成するためのパソコン(関連するソフトウェア含む)の購入を予定している.また,実際にデジタルカメラで撮影した自然画像に対する提案手法の有効性を検証するため,デジカメを購入する予定である.
遺伝的多様性と生物群集安定性との関係についての実験的・理論的研究

1.初年度に行った予備実験から、アズキゾウムシではなく、ヨツモンマメゾウムシを用いた方が、遺伝的多様性と群集安定性の議論がしやすいという知見が得られたため、世界各地からのヨツモンマメゾウムシについて、競争様式や産卵分布などの生態的形質に基づくクローニングを行った。2.遺伝的多様性ではなく、遺伝的には一様なのに、発生的多様性という被食者個体群を用いて1捕食者・被食者系がどのように安定化するかを、Individual-based modelによる理論的考察とともに、ヨツモンマメゾウムシと捕食寄生蜂Heterospilus prosopidisを用いた累代飼育系によって、実験的に検証した。3.遺伝的多様性によってもたらされる群集の安定性を、異形花柱性の進化という枠組の中で捉え、優性/劣性の遺伝様式と自花受粉のコストの関数との関係に基づいて、種内種分化に相当する機能的雄花1雌花の進化について議論した。4.行動多様性の群淘汰からの解釈や、遣伝的多様性が交渉ゲームにおいてもたらす影響などを、シミュレーションモデルを用いて考察した。5.ヨツモンマメゾウムシの1地域系統(個体群)に由来する複数系列を作成し、系列間での飼育条件の違いや人為選択の違いが、競争様式の進化にもたらす影響を実験的に解析した。6.ヨツモンマメゾウムシの1地域系統(個体群)内に見られる競争様式の多様性を説明する要因として、幼虫後期のマメ内での壁作り行動に注目して実験的解析を行った。7.寄主個体群内にみられる発育速度の多様性が、寄主-寄生蜂系の群集安定性に及ぼす影響について、個体べ一スモデルを作成し、理論的考察を行った。8.インゲンマメゾウムシの1齢幼虫におけるパイオニアとフォロワーの最適比率について、卵分布やマメ内での幼虫競争の強さを考慮した数理モデルを構築した。9.多様な発育段階にある寄主(マメゾウムシ幼虫)に対して、雌寄生蜂が卵の性を産み分ける機構として、マメ内での寄主の活性(採餌音)の変化に注目して、実験的解析を行った。1.本年度行った実験から、アズキゾウムシではなく、ヨツモンマメゾウムシを用いた方が、遺伝的多様性と群集安定性の議論がしやすいという知見が得られたため、世界各地で採集したヨツモンマメゾウムシについて、競争様式や産卵分布などの生態的形質に基づくクローニングを行った(日本生態学会2004にてポスター発表)。2.遺伝的多様性ではなく、遺伝的には一様なのに、発生的多様性という被食者個体群を用いて、捕食者-被食者系がどのように安定化するかを、Individual-based modelによる理論的考察とともに、ヨツモンマメゾウムシと捕食寄生蜂Heterospilus prosopidisを用いた累代飼育系によって、実験的に検証した(日本生態学会2005にポスター発表予定)。3.遺伝的多様性によってもたらされる群集の安定性を、異形花柱性の進化という枠組の中で捉え、優性/劣性の遺伝様式と自花受粉のコストの関数の関係に基づいて、種内種分化に相当する機能的雄花/雌花の進化について議論した(Sakai and Toquenaga2004)。1.ヨツモンマメゾウムシの1地域系統(個体群)に由来する複数系列を作成し、系列間での飼育条件の違いや人為選択の違いが、競争様式の進化にもたらす影響を実験的に解析した(Mano et al.投稿準備中)。

2.ヨツモンマメゾウムシの1地域系統(個体群)内に見られる競争様式の多様性を説明する要因として、幼虫後期のマメ内での壁作り行動に注目して実験的解析を行った(Mano et al.投稿準備中)。3.寄主個体群内にみられる発育速度の多様性が、寄主-寄生蜂系の群集安定性に及ぼす影響について、個体ベースモデルを作成し、理論的考察を行った(Nakamichi et al. Journal of Animal Ecologyに投稿中)。4.インゲンマメゾウムシの1齢幼虫におけるパイオニアとフォロワーの最適比率について、卵分布やマメ内での幼虫競争の強さを考慮した数理モデルを構築した(Otsuka et al.投稿準備中,Ishida and Toquenaga投稿準備中)。5.多様な発育段階にある寄主(マメゾウムシ幼虫)に対して、雌寄生蜂が卵の性を産み分ける機構として、マメ内での寄主の活性(採餌音)の変化に注目して、実験的解析を行った(Nakamura and Toquenaga投稿準備中)。
齧歯類の道具使用学習を触発する好奇心の脳内機構

「好奇心」とは、新たな経験を求める行動傾向を表出するための内発的な動機付けの要素とされ、ヒトの創造性発現の重要な基盤になっていると考えられる。本研究は、熊手状の道具使用を習得する能力があることが予備実験により確認されている、齧歯類デグー(Degu; Octodon degu)を新モデル動物として用いて、高次認知機能研究の新たな座標軸たる「好奇心」という視点に切り込み、齧歯類ではこれまで類例の無い道具使用学習が、この動物に特徴的に発現する「好奇心」に由来するとの仮説に基づいて、道具使用を触発する脳内機構を神経科学的メカニズムの解明することを目的としてきた。昨年度は、齧歯類デグーが前肢による熊手状の道具使用を習得する能力のあることを確認し、新モデル動物として確立することやその訓練過程の軌跡の定量化に成功した。さらに、デグーが道具の機能を理解していることを示唆するデータと共にまとめた論文が、本年度PLoSONE誌に掲載されることになった。さらに、本年度はこのモデルを用いて道具使用行動習得に伴うニューロン新生の変化について組織学的に検討したところ、海馬歯状回の新生ニューロン数が道具使用訓練群で増加しているという結果が得られている。また、大脳皮質についても検討を行ったところ、他のげっ歯類ではほとんど見られない幼弱ニューロンの存在を大脳皮質前頭野で確認しており、その細胞とニューロン新生との関連性について詳細に検討を進めている。「好奇心」とは、新たな経験を求める行動傾向を表出するための、内発的な動機付けの要素とされる。しかし、好奇心を定義することは困難で、その神経科学的メカニズムについての研究はこれまで皆無であったと言って良い。齧歯類デグー(Degu ; Octodon degu)の手掌根部には手指と対向する親指状の突起があって、細草茎を把持するなどの高い手技巧緻性を発揮するので、道具の使用能力を有する可能性があると予想された。齧歯類ではこれまで類例の無い道具使用学習が、この動物に特徴的に発現する「好奇心」に由来するとの仮説に基づいて、道具使用を触発する脳内機構を検証することが本研究の最終的な目的である。そこでまず、齧歯類デグーが前肢による熊手状の道具使用を習得する能力のあることを確認し、好奇心のメカニズム探索の新モデル動物として確立することを試みた。熊手状の道具を使用して手の届かない遠方のエサを引き寄せて捕食するという訓練を、6匹のデグーを用いて約90日間行なったところ、訓練は装置馴致後、まずは熊手のすぐ手前に報酬(ヒマワリの種)を置き、手元に引き寄せるという訓練を行なった(Level1)。次に、熊手と報酬の距離を徐々に左右へ離していき(Level2)、最終段階では報酬を熊手の先端より外側に置く(Level3)というように訓練を行なった。その結果、Level2および3の条件でも全個体が熊手の操作で報酬を得ることが可能になり、その訓練課程の定量化により齧歯類の道具使用学習のモデル系の確立に成功した。さらに、デグーは色と大きさが異なる新規の熊手を用いても訓練時と同様に使用する事が可能であったことから、デグーが熊手を報酬獲得のための道具として機能的に認識しているのではないかと考えられ、齧歯類には希有な高次認知機能を習得することが確認できた。
自己調節ペプチドAmfSによる放線菌の形態分化と二次代謝の誘導制御

Amfクラスターは放線菌Streptomycesgriseusの形態分化誘導ペプチドAmfSとその排出系をコードしている。S1マッピングにより、amfTSBAオペロンの転写を司るプロモーター(PamfT)の転写開始点はamfT翻訳開始点の31bp上流にあること、その転写は野生株においては分化にリンクしておこり、amfR破壊株では全く起こらないことが判明した。PamfTの-35領域にはS.coelicolor A3(2)において多面的転写抑制因子として機能することが知られるBldDの結合コンセンサス配列が存在していた。S.griseusのbldD遺伝子はS.coelicolorのそれに高い相同性を示し、その転写はA-ファクターに非依存的であった。このことは、BldDはA-ファクターに非依存的に作用することが強く示唆された。ゲルシフトアッセイにより、BldDおよびAmfRのPamfTへの結合が確認された。BldDの過剰発現株ならびにamfT破壊株はともに分化が抑制されると同時に、PamfTの転写活性が顕著に抑制された。また、これらの株がAmfSの生産性を失っていたことから、amfTは活性型AmfSの生産に関与することが示唆された。以上の結果から、amfTSBAオペロンの転写は、AmfRとBldDがそれぞれ独立に直接作用することによって制御されており、それによってAmfSの発現と活性化が調節されていることが明らかになった。StreptomycesgriseusのamfS遺伝子破壊株は気中菌糸形成及び抗生物質生産能を欠損している。それは、amfSにコードされるペプチドがこの菌の分化と二次代謝の開始に必須の機能と役割を有しているからであると予想される。そこで、S.griseus野生株の培養上清からamfS遺伝子破壊株の分化を回復させる活性を有するペプチドを単離・精製した。精製は培養上清のエタノール沈殿画分から出発し、3段階の逆相クロマトグラフィーによって行った。得られたペプチドのN-末端配列は、エドマン分解によりT-G-X-Qであることが明らかになったが、5残基以降は何らかの修飾が原因で完全にブロックされていた。MASSスペクトルにより分子量は2,214Daと決定された。これらの結果とAmfSの一次配列を照合すると、精製されたペプチドはAmfSの22番目のThrの前で切断されたC末端側の領域がさらに何らかの修飾を受けて分子量が72Da減少した分子であることが強く示唆された。精製ペプチドのアミノ酸分析では、予想される配列のうちSer/4残基とCys/2残基が存在していないことが示された。従って、これらの残基において何らかの修飾が起こっているものと推定される。また、これらの残基はS.coelicolor A3(2)ならびにS.avermitilisのorthologにおいても保存されていた。以上の性状は、S.coelicolor A3(2)の気菌糸誘導ペプチドSapBのそれと酷似しており、AmfSとSapBが同一分子であることを強く示唆する結果となった。amf遺伝子クラスター(amfTSBAおよびamfRによるStreptomyces griseusの分化開始の分子制御メカニズムを解明する目的で、今回は特にamfTの発現と役割および活性型AmfSの構造に焦点を当てた研究を行った。amfTの前に位置し、amfTSBAを転写する主要プロモーターについて、S1マッピングによる転写解析とゲルシフトアッセイによる蛋白質の結合解析を行い、そこにAmfRが転写促進因子として結合すること、ならびにそれと独立して、Streptomycesの分化の開始に対する抑制型制御因子として知られるBldD蛋白が-35領域付近に結合し転写を抑制することをin vitroおよびin vivoの実験によって明らかにした。bldDについてはS.griseusの相同遺伝子をクローン化、塩基配列を決定し、周辺領域を含めS.coelicolor A3(2)のそれと高い相同性を示すことを明らかにした。

さらに、amfT破壊株を作成し、それが形態分化および二次代謝を欠損した形質を示すこと、ならびに活性型AmfSの生産性を失うことを明らかにし、AmfT蛋白が活性型AmfSの生産に必須であることを予想した。また、amfS破壊株に分化を回復させるペプチドをS.griseus野生株培養液の菌体外画分よりエタノール沈殿と逆相クロマトグラフィーによって単離精製し、それがAmfS推定配列のC-末端側22アミノ酸領域に由来することを明らかにした。
リコンビナントVII型コラーゲン大量暴露が皮膚細胞増殖および腫瘍形成に与える影響

生理的曝露量を大幅に超えたVII型コラーゲン大量曝露を行うため,大量にリコンビナントVII型コラーゲンを作成した。pDON-A1vectorにVII型コラーゲン遺伝子COL7A1cDNA全長を導入したコンストラクトを一般的に使用されるヒト有棘細胞由来のHaCaT細胞に導入すると,少量の系では,リコンビナントVII型コラーゲンが得られるが,徐々にVII型コラーゲン産生能が低下するため,大量の系には適さないことを新たに見いだした。この結果を受けて,同様のコンストラクトをヒト胎児腎臓由来293細胞に導入し,大量培養行った。その結果この系は,培養上清1リットルに付,10μgのリコンビナントVII型コラーゲンを得られることが判明した。得られたリコンビナントVII型コラーゲンを抗ヒトVII型コラーゲン抗体LH7.2を結合させたアフィニティークロマトグラフィーにて精製したところ,リコンビナントVII型コラーゲンを精製することが出来た。精製状況は,SDS-PAGEのCoomassie染色とウエスタンブロットで290kDに1本のバンドが得られることで確認した。この精製VII型コラーゲンを培養細胞に添加して,増殖状態を観察した。VII型コラーゲンを添加したHaCaT細胞,正常ヒト培養表皮角化細胞のいずれにおいても96穴プレートに10μlの添加では,差は見られなかった。100μlの添加でも無制限な細胞増殖がおこるわけではなく,むしろ僅かながらではあるが,細胞増殖の抑制を示唆した。この実験結果から,リコンビナントVII型コラーゲンの大量曝露が抑制のかからない自立性の細胞増殖や腫瘍形成と直接結びつく結果は得られなかった。この結果は,INTERNATIONALINVESTIGATIVE DERMATOLOGY 2003にて報告した。
銀河系中心天体 Sgr A*事象を使った教育活動とその評価

本研究は、天文学の研究現場をリアルタイムに研究者・教育関係者・市民と共有することで、科学的な研究手法を市民に理解・普及させることを目的とした。このため市民や児童・生徒に科学の現場を体験・共有する仕組みを作ると同時に、研究者や教育関係者の協働・協創的による科学教育の現場を作る実験を行なった。この実践の対象は、当初はSgr A*事象、その後、系外惑星命名キャンペーン、天文学とアートの融合、最新天文学WS、重力波検出、「長野県は宇宙県」などの天文学イベントとした。これらを対象にした、研究者・教育関係者・市民のネットワークを作る過程で、共に科学的な考えたなどを共有してゆく、新しい科学教育を実践した。本研究は、当初、SgrA*事象(ガス雲G2が、銀河系中心巨大ブラックホール天体Sgr A*に接近した際に起きる現象)など天文学的な現象を使い、新学習指導要領で導入された「銀河」、及び、「銀河系」を教員や市民に広げるための研究者と教育者の混合組織を作り、新しいスタイルの科学リテラシー教育の手法を作ることにあった。しかし、事前の予想に反し、ガス雲G2がSgrA*に接近したにも関わらず、顕著な現象(SgrA*事象)が起きず、この現象を題材とした天文教育が出来ないという事態が生じた。一方で、同時期、国際天文学連合(IAU)初の天体命名キャンペーンがスタートした。これは、1995年度以降、約1800個の系外惑星(太陽以外の恒星の周りの惑星)が発見されており、このうち、20惑星系を市民からの募集で命名しようというものである。この状況で、本研究の重要なポイントである「研究者と教育者によるネットワーク、研究者と市民のネットワークによる科学教育」の実践として、ブラックホールと系外惑星をキーワードにした教育プログラムのための組織を作ることにした。系外惑星に関しては、系外惑星研究者を含めた「日本天文協議会IAU太陽系外惑星命名支援ワーキンググループ」を結成し、系外惑星に関する最新の天文学を広報普及に努めた。また、ブラックホールに関しては、研究者と教育者の連携を深めるための研究会(長野ブラックホール天文教育研究会)を11月に開催し、これを契機に、ブラックホールを使った天文教育教材開発をスタートさせた。現在、系外惑星命名キャンペーンで、一般市民の科学リテラシーの向上が期待している。また、ブラックホールを使った天文教育で、研究者と教育普及活動を行う人を連携させる枠組みが作られつつある。これらの活動をベースに、平成27年度からは、実際に教材開発などを進めていく予定である。本研究の目的は、1最新の天文学的の研究や観測状況をリアルタイムに市民に伝えることで、科学的な研究の現場を市民とリアルタイムに共有し、2科学的な研究手法の意味を市民に理解・普及することを目指すことである。このために、研究者と教育者の混合組織による研究と教育が同時進行する3研究者・教育者の協調によるスタイルの科学リテラシー教育の手法を作ることにある。当初、この目的として、銀河系中心の巨大ブラックホール(Sgr A*)にガス雲が落ちることで起きる諸現象(SgrA*事象)を対象とする予定であったが、平成26年度中に起きると期待されていたSgrA*事象は起きなかった。原因は、ガスと思われていたG2という天体が、周りに電離ガスを持つ星のためであろうと考えられている。このため、平成26年度の途中より、研究の対象をブラックホールに関係する諸現象(X線衛星Astro-H(愛称ひとみ)による観測広報などを含む)や系外惑星系など最新の天文学に関することに広げて、研究を再開した。ブラックホールに関しては、研究者と教育者の連携を深めるための第2回目の研究会(長野ブラックホール天文教育研究会)を5月に開催し、ブラックホールを使った天文教育教材を実際に開発している。これらは現状と成果を学会等で発表している。また、系外惑星系に関しては、国際天文学連合(IAU)初の天体命名キャンペーンを通じて、広報普及活動を展開した。現在、「研究者と教育者によるネットワーク、研究者と市民のネットワークによる科学教育」の実践として、ブラックホールと系外惑星をキーワードにした教育プログラムのための組織が2年目となり、実際にいくつかの教材案が提案されているが、実際の使用は平成28年度の予定である。これらの活動をベースに、平成28年度内に、教材開発や啓蒙活動を進めていく予定である。本研究の目的として、研究者・教育者の協調により、科学的な研究手法の意味を市民に理解・普及するための手法を作ることである。ここで、本研究での科学リテラシーの向上のための対象として、銀河系中心巨大ブラックホール天体Sgr A*を考えていたが、期待されているSgrA*事象が起きなかったため、Sgr A*事象を観測していたブラックホール研究者や理論の研究者、および、教育関係者(高校や大学の教員、および、プラネタリウムなどの社会教育関係者)など20人規模のブラックホール教育研究会を結成し、ブラックホールに関係するテーマの最新の研究を伝える教材開発を目指してきた。この中には、X線衛星AstroH(愛称、ひとみ)の観測対象としてのブラックホールなども検討されていたが、年度末の衛星破損事故のため、この方はストップしている。平成26年度後半より、系外惑星命名キャンペーンが行なわれて、系外惑星を対象にしたネットワークを構築しようとしたが、平成27年夏にキャンペーンが終わったことで、現状として研究者と教育者のうまい協調ネットワークの構築まで持ってゆくことが出来なかった。そのため、再度軌道修正をして、現在、ブラックホールをキーワードにした広報普及と教材の開発を行っている。このようないくつかの不測の事態により、当初より遅れた状況で進んでいる。

本研究の目的は、1最新の天文学的の研究や観測状況をリアルタイムに市民に伝えることで、科学的な研究の現場を市民とリアルタイムに共有し、2科学的な研究手法の意味を市民に理解・普及することを目指すことである。このために、研究者と教育者の混合組織による研究と教育が同時進行する3研究者・教育者の協調による新しい科学リテラシー教育の手法を実験することにある。当初の対象として、平成26年度に銀河系中心の巨大ブラックホール(Sgr A*)に落ちると期待されたガス雲G2で引き起こされる諸現象(SgrA*事象)を予定していた。しかし、期待されたSgrA*事象が起きなかった。このため、途中より、研究の対象を、ブラックホールに関係する諸現象や系外惑星系、大質量ブラックホール連星の合体衝突による重力波など「最新の天文学」に関することに広げることで、「ブラックホールを使った天文教育」の研究を再開した。これまで、研究者と教育者の連携を深めるための2度の研究会(長野ブラックホール天文教育研究会)を通じて、ブラックホールを使った天文教育教材を開発中である。一方、平成28年度は、具体的な研究テーマの絞込みが出来ずに、一時的な研究の停滞となった。その間に、系外惑星系に関しての広報普及活動を展開や、2016年2月発表の「大質量ブラックホール連星の合体衝突による重力波」初検出、および、ブラックホール・シャドーの観測を目指したVLBI電波観測計画など、申請時には無かったブラックホールに関する新しい研究テーマが進展した。現在、「研究者と教育者によるネットワーク、研究者と市民のネットワークによる科学教育」の実践として、ブラックホールを中心とした教育プログラムのための組織の3年目として、平成29年度内に、これまでのまとめの教材開発や啓蒙活動を進めていく予定である。本研究の目的として、研究者・教育者の協調により、科学的な研究手法の意味を市民に理解・普及するための手法を作ることである。ここで、本研究での科学リテラシーの向上のための対象として、銀河系中心巨大ブラックホール天体Sgr A*を考えていたが、期待されているSgrA*事象が起きなかったため、Sgr A*事象を観測していたブラックホール研究者や理論の研究者、および、教育関係者(高校や大学の教員、および、プラネタリウムなどの社会教育関係者)など20人規模のブラックホール教育研究会を結成し、ブラックホールに関係するテーマの最新の研究を伝える教材開発を目指してきた。現在、ブラックホールに関して(1)ブラックホール・シャドーのサブリミ波VLBIによる観測、(2)ブラックホール近傍の相対論的効果の直接的検証、(3)重力波によるブラックホールの検出などが大きなトピックスである。現在、(1)に付いてはサブリミ波VLBIによる観測が行なわれ、夏にはその成果が発表される予定である。(2)については、銀河系中心巨大ブラックホールSgrA
腫瘍局所における細胞間接着分子の発現における抗腫瘍効果の増強についての研究

I.IFN-γ,TNF-αがマウス扁平上皮癌細胞であるNR-SI細胞の細胞接着間分子発現におよぼす影響、そして発現変化によってLAK細胞の接着および細胞傷害活性の変化がどのように影響を受けるか検討し、以下の結果を得た。3、IFN-γ,TNF-α併用処理で腫瘍細胞上のICAM-2分子の発現は増強したが、有意味差はみられなかった。以上より、LAK細胞の腫瘍細胞に対する接着性および細胞傷害活性は腫瘍細胞上の細胞間接着分子であるICAM-1分子の発現と関係があると考えられた。II、口腔癌に対するIL-2とIFN-β併用局所投与による局所的、全身的免疫反応の変化についての検討を行い、以下の結果を得た。1、癌局所へのIL-2とIFN-β併用投与により多数のリンパ球の浸潤が惹起された。また、この浸潤リンパ球の多くはCD3+,CD4+あるいはCD3+,CD8+であり、他にCD56+な細胞も見られた。2、末梢血リンパ球の細胞表面マーカーの検索から、CD3+,CD8+,CD56+細胞およびIL-2R陽性細胞の比率が投与前に比べ上昇していた。3、末梢血リンパ球のNK活性は投与前に比べ増強していた。in vitroにおける腫瘍細胞上のICAM-1分子の発現ならびにサイトカインによるICAM-1分子の発現の変化についてIFN-〓がin vitroにおいて腫瘍細胞上のICAM-1分子の発現増強に与える影響ついて検討を行った。実験に用いた腫瘍細胞はKB細胞(ヒト鼻咽腔癌)、SKO細胞(ヒト卵巣癌)である。IFN-〓の両細胞におよぼす直接的効果(細胞毒性)について検討したところ、IFN-〓の濃度が50U/ml,100U/mlでは細胞増殖率になんら影響を与えないが、500U/mlでは対照群(無添加)に比べ細胞増殖率の低下が認められた。次にIFN-〓が両細胞上のICAM-1分子発現におよぼす影響について検討を行った。両細胞は自然の状態で細胞表面にICAM-1分子を発現していることが確認された。IFN-〓の各種濃度および添加後の経時的な細胞表面のICAM-1分子の発現の変化を観察したところ、両細胞とも100U/ml添加24時間後には細胞表面のICAM-1分子の発現は増強していた。発現増強効果は72時間後も認められたが、増強率は24時間後が最大であり以降経時的に低下していた。またその発現増強効果はIFN-〓の濃度依存性が認められた。SKO細胞はKB細胞に比べ発現の程度は大きかった。口腔癌局所におけるICAM-1分子の発現について口腔癌組織のICAM-1分子の発現を手術時に切除した組織をABC法による免疫組織化学的染色により検討したところ、ICAM-1分子の発現は癌組織に比べ癌周囲ま間質にその発現が強く認められた。当初研究に用いる腫瘍細胞はK-562,Daudi細胞であったが、どちらもリンパ系腫瘍細胞であり申請者らが臨床で取り扱う腫瘍はほとんどが扁平上皮癌であるためKB細胞ならびにSKO細胞に変更し研究を行った。IFN-〓により腫瘍細胞上のICAM-1分子の発現増強が可能であることが確認でき、その発現増強はIFN-〓添加24時間で成され、その後発現率の低下はみられるが72時間後までは増強効果のあること、さらにその増強はIFN-〓濃度依存性であること、またその発現は腫瘍細胞の種類により異なることが確認された。ヒトの口腔癌組織におけるICAM-1分子の発現が癌組織に比べ癌周囲の間質に強く認められたことが何を意味するのかを検討していくことも本研究を臨床応用するためには重要と思われた。研究1 IFN-γがマウス扁平上皮癌NR-S1細胞上のICAM-1抗原の発現に及ぼす影響について。研究2エフェクター細胞のNR-S1に対する接着と反応時間について接着標的となるNR-S1は実験の72時間前に24穴プレートに3×10^4/wcllに調整し培養しておいた。

2)エフェクター細胞の調整新鮮脾細胞あるいはLAK細胞を1×10^7/mlに調整し、^<51>Crを100μl添加し2時間培養した。標識終了後のエフェクター細胞を4×10^5/mlに調整し、先に用意しておいたNR-S1に4×10^5/wcllずつ加えた。37°Cにて15,30,60,90,120,180,240,300,360,420分間培養した。各経過時間ごとに3wcllずつ3回洗浄し、非付着細胞を除去した後、1N Hclにて残存した付着エフェクター細胞を破壊し、溶液回収後ガンマーカウンターにて計測した。最大遊離はwellを洗浄せずに全細胞を破壊し、また最小遊離はエフェクター細胞を加えない培養液だけを回収して得た。結果研究1 IFN-γ100U/ml添加24時間後に発現量は約2.5倍に増強し、72時間後には約2倍と低下を示した。500U/ml,1000U/mlでは24時間後には100U/mlと同程度の増強であったが、48時間後には約3倍の増強であった。72時間後には発現量はやや低下した。研究2 NR-S1と新鮮脾細胞との接着は15分後にみられ(接着率3%)、その後接着率はやや低下するが7時間後までみられた。LAK細胞との接着は経時的に接着率の上昇が認められ、7時間後には約8%の接着率を示した。IFN-γ, TNF-αがマウス扁平上皮癌細胞であるNR-S1細胞の細胞接着間分子発現におよぼす影響、そして発現変化によってLAK細胞の接着および脂肪傷害活性の変化がどのように影響を受けるか検討し、以下の結果を得た。3、IFN-γ, TNF-α併用処理で腫瘍細胞上のICAM-2分子の発現は増強したが、有意差はみられなかった。以上より、LAK細胞の腫瘍細胞に対する接着性および細胞傷害活性は腫瘍細胞上の細胞間接着分子であるICAM-1分子の発現と関係があると考えられた。
加齢に伴う味細胞の応答性変化に関する光生理学的研究

高齢になると味覚感受性が低下することがヒトの官能検査および哺乳動物の味神経応答の記録から示されている。味神経応答の低下には味細胞における応答性変化と求心性シナプスにおける伝達効率低下などの要因が考えられる。そこで、味細胞の味覚応答性が加齢によって変化しているかどうかを明らかにするため、23ケ月の若齢マウスと14ケ月以上の高齢マウスとで味蕾細胞の味覚応答性と膜の性質を比較検討した。味覚応答は味蕾構造を保持した状態で非侵襲的に単一細胞の電気的変化を記録できる膜電位感受性蛍光色素を用いた光学測定により検討し、膜のイオンチャネルの解析にはwhole-cellパッチクランプ法を用いた。膜電位感受性蛍光色素としてRH795あるいはRH155を細胞膜に取り込ませ、それぞれ530nm、710nmの励起光を照射して膜の脱分極に伴う発光あるいは吸光の増大を二次元画像としてとらえ解析した。パッチクランプ記録により、高齢マウスの味細胞膜には若齢と同様に電位依存性のNa^+チャネルとK^+チャネルが存在しているが、Na^+電流の振幅は若齢に比較してかなり小さい傾向にあることがわかった。このことは、味刺激により発生した味細胞先端突起受容膜部の脱分極が基底側のシナプス部まで伝えられる際の効率が低下している可能性を示すと考えられる。また、若齢マウスの茸状乳頭味蕾を含む剥離上皮標本からの光学計測では、食塩、グルタミン酸ナトリウムやD-フェニルアラニンなどの味溶液を味孔部に限局して流出させると一部の味蕾細胞に緩徐な脱分極が発生することが観察された。高齢マウスでは、乳頭数は変化していないものの、脱分極応答を示す細胞数とその振幅が減少している傾向がみられた。以上の結果は、高齢マウス味蕾細胞に特徴的な多数の空胞あるいは老化物質リポフスチン顆粒の集積の観察とともに、味細胞膜に機能低下が生じている可能性を示唆し、高齢動物における味覚応答性変化は受容器の段階で生じていると推察された。
組織損傷修復時の生体初期反応-sheddingの分子機構―創傷治癒モデルでの解析―

私どもはこれまでに、組織の再生・修復で重要な役割を担うと考えられる細胞膜アンカー型細胞増殖因子としてEGFファミリーのメンバーであるHB-EGFを新規に同定し、皮膚の創傷治癒時にsheddingが亢進していることを報告してきた。本研究ではHB-EGF shedding酵素の同定と活性発現制御機構の解明を中心課題として行い、以下の結果を得た。従来報告されている膜結合型メタロプロテアーゼADAM9によるHB-EGFプロセシングをADAM9ノックアウトマウス由来線維芽細胞を用いて検証した結果、ADAM9+/+線維芽細胞およびADAM9-/-線維芽細胞ともに、HB-EGFプロセシングはTPA刺激により一過性に誘導され、両者に有意な差は認められなかった。そこで新たなHB-EGF shedding酵素の同定を試み,ADAM12がHB-EGFのプロセシング酵素であることを示した。さらにHB-EGFプロセシングはADAM12ノックアウトマウス由来線維芽細胞では全く認められず、ADAM12がHB-EGFのプロセシング酵素の一つであると結論付けた。ADAM12の細胞内ドメインに結合する蛋白を酵母two-hybridでスクリーニングし、その結果2つのSH3蛋白質PACSIN3と新規蛋白質Eve-1を同定した。PACSIN3は416アミノ酸からなりC-末端側に3つのSH3ドイメインを持つ。また、Eve-1は767アミノ酸からなりC-末端側に4つのSH3ドイメインを持つEve-1aと23アミノ酸の挿入配列を持ちその結果C-末端側に5つのSH3ドイメインを持つEve-1bの2つのアイソフォームを同定した。PACSIN3とEve-1のoverexpressionによりangiotensin II依存性HB-EGF sheddingがそれぞれ部分的にかつ、共発現により相加的に抑制された。以上の結果から、HB-EGFプロセシングにはADAM12が関与しており、酵素の活性化制御には複数のSH3蛋白質が関与している可能性が示唆された。さらに、私どもが新たに開発したEGFファアミリーのshedding酵素阻害剤を用いて、皮膚創傷治癒時での表皮角化細胞からのEGFファPミリーのsheddingとそれによって引き起こされる表皮角化細胞の遊走が創傷治癒には必須である事を明らかにしてきた。これらの研究成果に基づき、本年度はHB-EGF shedding酵素の同定を中心課題として行い、以下の結果を得た。従来報告されている膜結合型メタロプロテアーゼADAM9によるHB-EGFプロセシングをADAM9ノックアウトマウス由来線維芽細胞を用いて検証した。その結果、ADAM9+/+線維芽細胞およびADAM9-/-線維芽細胞ともに、HB-EGFプロセシングはTPA刺激により一過性に誘導され、両者に有意な差は認められなかった。

そこで新たなHB-EGF shedding酵素を同定するために,HB-EGF sheddingの制御因子であるPKCδに結合する膜型メタロプロテアーゼを酵母two-hybrid法でスクリーニングし、得られた膜型メタロプロテアーゼの野生型及びドミナントネガテイブ型によりTPAによって誘導されるHB-EGF sheddingが各々増幅および抑制するかどうかを検討した。その結果、ADAM12二がHB-EGFのプロセシング酵素であることを明らかにした。EGFファミリーshedding酵素の同定EGFファミリーの中のHB-EGFを代表としてshedding誘導剤の違いによって活性化される酵素に違いがあるかどうかを検討した。TPAとangiotensin II依存性HB-EGF sheddingはドミナントネガテイブADAM12およびADAM12RNAiにより効果的に阻害された。一方、IL-8依存性HB-EGF sheddingはこれらによっては全く影響を受けなかった。そこで他のADAMファミリーメンバーのRNAiを用いて検討した結果ADAM12ではなくADAM10が関与していることが強く示唆された。shedding酵素活性化機構の析EGFファミリーshedding酵素の代表例としてADAM12に着目し、その活性化機構の解析を行い以下の結果を得た。ADAM12の細胞内ドメインに結合する蛋白を酵母two-hybridでスクリーニングし、その結果2つのSH3蛋白質PACSIN3と新規蛋白質Eve-1を同定した。PACSIN3は416アミノ酸からなりC-末端側に3つのSH3ドイメインを持つ。また、Eve-1は767アミノ酸からなりC-末端側に4つのSH3ドイメインを持つEve-1aと23アミノ酸の挿入配列を持ちその結果C-末端側に5つのSH3ドイメインを持つEve-1bの2つのアイソフォームを同定した。PACSIN3とEve-1のoverexpressionによりangiotensin II依存性HB-EGF sheddingがそれぞれ部分的にかつ、共発現により相加的に抑制された。以上の結果から、TPA、angiotensin IIとIL-8依存性のHB-EGFプロセシングは異なる酵素によって制御されていることが示唆された。また、酵素の活性化制御には複数のSH3蛋白質が関与している可能性が示唆された。
１６～１７世紀の日本海地域における情報と大名

日本海地域とこれに関係の深い諸大名を対象に、藩と藩、藩と幕府との間にみられた情報収集・交換の実際と意義について究明した。具体的には、奥羽大名の関ケ原合戦前後の情報獲得、加賀藩家臣団形成過程における情報ネットワーク、萩藩の幕府との交渉における人脈の在り方等が解明された。また、松平忠直事件という政治的重大事件をめぐり、福井藩・津山藩・秋田藩・幕府の動向が、一次史料を用いた事実究明と、家譜・系譜類にみる言説の変遷という両側面から解明され、事件の過程における情報獲得・交換の在り方が明らかになった。これらの研究成果については、科研費研究成果報告書『近世初期の大名と情報』として刊行した。1617世紀の日本海地域に所在した大名家の情報収集・管理の在り方を解明し、当該期の日本海地域の政治的特質に迫るという研究目的のもと、本年度は次の史料調査を実施した。(1)福井県立図書館寄託松平文庫・福井県立文書館収蔵複製本、(2)津山郷土博物館所蔵愛山文庫、(3)和歌山県立文書館「紀州家中系譜並に親類書書上げ」、(4)山口県立文書館毛利家文庫、(5)金沢市立玉川図書館近世史料館加越能文庫「先祖由緒井一類附帳」、(6)北海道釧路市の柿崎氏所蔵史料これらの調査のうち(1)・(2)・(3)は、元和9年に不行跡により隠居させられた越前北荘城主松平忠直関係史料の調査を主目的としたものであり、同事件に対する諸大名の情報収集の在り方を解明する一環として実施した。(4)は、萩藩における近世初期藩政史料を調査し、同藩主毛利家における情報収集・管理の解明を目的としたものである。(5)は、系図・家譜史料の研究資源化と人物情報データベース作成の基礎資料とすうための調査として、加賀藩前田家の家臣団帳簿である「先祖由緒井一類附帳」を調査したものである。(6)は、調査対象である米沢藩上杉氏の家臣柿崎氏に関する史料の調査であり、明治になり子孫が北海道に移住したため現住地に赴いて調査したものである。忠直事件の関係史料については、別の科研費(基盤研究(B)「近世前期西南諸藩史料の統合的研究」研究代表者小宮木代良、20092012年度)による西南諸藩における同事件への対応の解明と合わせて、同事件に対する諸大名の情報収集と管理、相互の情報交換の動向がかなり明らかとなった。一方、(4)・(5)については、膨大な史料が調査の対象であり、成果を得るまでには、今後さらに調査を積み重ねる必要がある。また、学術支援職員を雇用し、収集史料の整理を行うとともに、史料編纂所書庫に収蔵されている日本海地域の自治体史等から関係史料の抽出作業を行った。1617世紀の日本海地域に所在した大名家の情報収集の在り方を解明し、当該期の日本海地域の政治的特質に迫るという研究目的のもと、本年度は次の史料調査を実施した。1石川県調査:金沢市立玉川図書館近世史料館所蔵「加越能文庫」のうち加賀藩前田家家中の系譜「先祖由緒并一類附帳」、2秋田県調査:秋田県公文書館所蔵の秋田藩主佐竹家家中の系譜「元禄家伝文書」、3岡山県調査:岡山大学附属図書館所蔵の岡山藩主池田家家中「先祖書上」1の調査は昨年度からの継続であり、1万点以上存する「先祖由緒并一類附帳」のうち約半数の撮影を終えた。2・3は今年度着手し、2では「元禄家伝文書」450点余を撮影した。3は鳥取藩主から岡山藩主に転じた池田家家中の「先祖書上」の調査であり、必要な部分を複写して入手した。その他、1では近世史料館所蔵の加賀藩士「津田家文書」や白山市・羽咋市所在史料を、3では岡山市・備前市所在史料の調査を、併せて実施した。以上収集した史料のうち、1の「先祖由緒并一類附帳」については、データベース化のための学術支援職員による入力作業を継続している。また、今年度は研究成果報告書として、秋田県公文書館および史料編纂所に所蔵されている初代秋田藩主佐竹義宣から家老梅津憲忠に宛てた書状を集成した『佐竹義宣書状集ー梅津憲忠宛』(東京大学史料編纂所研究成果報告2013ー3)を刊行した。同書は、本科研の研究分担者金子拓・及川亘の両名が編集に加わっている。さらに、今年度は、近世初期の秋田藩家老梅津政景の日記について、秋田藩のみならず日本海地域の大名の交流や情報交換の動向をみる上に重要な史料であることから、利用の便宜を図ることを目的にフルテキストデータベース化のための入力作業に着手した。1金沢市立玉川図書館近世史料館所蔵「加越能文庫」のうち加賀藩主前田家家中の系譜「先祖由緒并一類附帳」の調査・撮影、2秋田県公文書館所蔵の秋田藩主佐竹家家中の系譜「元禄家伝文書」の調査・撮影。12ともに前年度からの継続で、1では1万冊以上存する「先祖由緒并一類附帳」のうち、本年度は2,616冊を調査し、適宜必要な撮影を行った。

これまでの分も合わせ9,963冊の調査を終了した。2では「元禄家伝文書」のうち452点を撮影した。その他、福井市・鳥取市などで補足調査を実施した。1で撮影した「先祖由緒并一類附帳」」については、学術支援職員によるデータベース化のための入力作業を継続している。また、昨年度に引き続き、近世初期の秋田藩の家老梅津政景の日記『梅津政景日記』のフルテキストデータベース化のための入力作業を継続し、約70%の入力を終えた。さらに、今年度は研究発表会を開き、1佐藤孝之「加賀藩家臣団の形成過程ー「先祖由緒并一類附帳」を素材としてー」、2金子拓「松平忠直の隠居と秋田藩」の2報告を行った。1は、「先祖由緒并一類附帳」調査の成果として、同史料を利用して加賀藩前田家の家臣団形成過程検討したもので、中間報告ではあるが、前田家が大大名に成長する過程で様々な出自の者が家臣となっており、そこに情報ネットワークの存在を想定した。2は秋田藩の「元禄家伝文書」調査の成果であり、元和9年の松平忠直の隠居事件をめぐる佐竹氏の動向を、情報収集の面に着目して検討したものである。本年度は1金沢市立玉川図書館近世史料館、2秋田県公文書館、3米沢市上杉博物館・同市立米沢図書館、4福井県立図書館、5津山郷土博物館、6和歌山県立文書館、7山口県文書館などに赴き、1では加越能文庫「先祖由緒并一類附帳」、2では「元禄家伝文書」、3では米沢藩主上杉氏関係文書および同家臣千坂家文書等、4・5・6では越前北荘城主松平忠直事件関係史料、7では毛利家文庫「継立原書」などを調査した。なお、「先祖由緒并一類附帳」は13,000点余のすべてについて調査し、必要部分の撮影を終了した。「元禄家伝文書」についても約500点のすべてを撮影した。また、フルテキストデータベース化のための『梅津政景日記』の入力作業も終了した。さらに、成果の公表の一環として公開研究会「近世初期の大名と情報」を開催し、研究分担者による5本の研究報告を行った。そして、この5本の報告をベースに、別途に2本を加えた研究成果報告書『近世初期の大名と情報』を刊行し、1黒嶋敏「関ケ原合戦前後の奥羽大名と情報」、2佐藤孝之「加賀藩家臣団の形成過程と家臣の由緒」、3小宮木代良「松平忠直隠居前後の越前支配について」、4同「松平忠直事件にかかわる言説の変遷」、5金子拓「松平忠直の隠居と秋田藩」、6同「秋田藩家老木場宣忠関係文書について」、7及川亘「将軍上洛供奉における萩・毛利藩の宿所について」を収録した。これらの研究によって、日本海地域やこれに関係の深い諸大名を対象に、奥羽大名の関ケ原合戦後の情報獲得、加賀藩家臣団形成過程における情報ネットワーク、萩藩の幕府との交渉における人脈の在り方等が解明され、また松平忠直事件という政治的重大事件をめぐり、福井藩・津山藩・秋田藩・幕府の動向が、一次史料を用いた事実究明と、家譜・系譜類にみる言説の変遷という両側面から解明され、幕府と藩、藩と藩の間の情報収集・交換の在り方等が明らかになった。日本海地域とこれに関係の深い諸大名を対象に、藩と藩、藩と幕府との間にみられた情報収集・交換の実際と意義について究明した。具体的には、奥羽大名の関ケ原合戦前後の情報獲得、加賀藩家臣団形成過程における情報ネットワーク、萩藩の幕府との交渉における人脈の在り方等が解明された。また、松平忠直事件という政治的重大事件をめぐり、福井藩・津山藩・秋田藩・幕府の動向が、一次史料を用いた事実究明と、家譜・系譜類にみる言説の変遷という両側面から解明され、事件の過程における情報獲得・交換の在り方が明らかになった。