hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
未熟血管における高血圧性病変の発症とメカニズムの解明

低出生体重児では、成人期に入って高血圧などの心血管性疾患を合併することが報告されている。本研究では、胎児期の発育環境の悪化が胎児の健康状態に及ぼす影響を検討するため、ニワトリ胚を用いて、胎生後期にエピネフリンを継続投与した。エピネフリンを生理食塩水で溶解し、3種類の濃度(10^<-4>mol,10^<-5>mo1,10^<-6>mol)を作成し、艀卵11日から15日にかけて投与した。艀卵19日に解剖し、肺動脈病変を検討した。前年度までの成果で、投与したエピネフリンの濃度が高い群で、肺小動脈の中膜の肥厚が認められることが明らかとなった。これは肺高血圧症の組織分類であるHeath-Edwards分類のgrade IIに相当するものであった。本年度はそれに基づき以下の研究を進めた。血清中のエピネフリン濃度はエピネフリンの投与濃度に比例して、有意に上昇していた。また、心臓の右室/左室重量比も、エピネフリン濃度に比例して、増加していた。これらの結果から、胎生後期のエピネフリンの過剰が新生児の肺高血圧を引き起こす可能性が示唆された。免疫組織染色法を用いて、エピネフリンの過剰状態で発現されるメカニズムを検討した。ヒト肺高血圧で報告されている、BMPR-IIの発現欠失は負荷群、コントロール群いずれも認められず、BMP2,4,6の発現パターンも負荷群、コントロール群で差異を認めなかった。PECAMを用いて、肺動脈中膜の細胞増殖を検討した結果、エピネフリン投与群では、コントロール群に比べ、PECAMを発現した細胞数が有意に増加していた。このことより、肺小動脈中膜細胞はエピネフリン負荷により細胞増殖が亢進し、その結果、中膜肥厚をきたすが、BMPR-IIの経路は影響を受けていないと考えられた。低出生体重児が、成人期にはいって高血圧などの心血管性疾患を合併することが多く報告されていることより、胎児期の発育環境が児の健康状態に影響を及ぼす可能性が考えられる。カテコルアミンがその一要因かどうかをみるために、ニワトリ胚を用いて胎生後期にエピネフリンを継続負荷した。3種類の濃度(10^<-4>mol,10^<-5>mol,10^<-6>mol)のエピネフリンを生理食塩水に溶解し、孵卵1115日目に滴下連続投与した。コントロールとして生理食塩水のみを同様に滴下した。出生(孵卵20日)直前の孵卵19日目にニワトリ胎仔を採取し、体重測定後、各臓器の血管を組織学的に検討した。体重は高濃度群のものがコントロール群より低体重を示した。組織切片はヘマトキシリン/エオジン染色、マッソン染色(膠原線維を青色に染色)、ヴィクトリアブルー・ファンギソン染色(弾性繊維を青色、膠原線維を赤色に染色)を実施した。肺動脈中膜はエピネフリン濃度に従って肥厚しており、この所見はHeath-Edwards-Grading IIに匹敵する肺高血圧病変を示した。心臓では、右心室/左心室重量比がエピネフリン高濃度群で顕著な増加を認めた。他臓器の動脈中膜の厚さはコントロール群と比べたが差は見られなかった。これらの結果、胎生後期の高濃度エピネフリンが新生児高血圧を引き起こす可能性が示唆された。
歯科用合金の表面改質

高価に高カラット金合金に代るべき良質で安価な歯科材料を模索する段階で合金表面の改質技術に着目した。イオン注入法ならびにイオンプレ-ティング法による歯科用合金に対する表面改質の可能性を検討するための基礎的デ-タを収集する目的で本研究は実施された。審美性の観点から歯科用高カラット金合金を念頭におき,イオン注入法では純銅に金イオンを注入し、イオンプレ-ティング法では純銅ならびに低カラットの歯科用金銀パラジウム合金にTiNのコ-ティングを行なった。前者においては注入後、さらに表面層に耐食性に優れた規則構造を形成させる目的で真空中にて800°C×4hおよび24h焼純した試料についても検討した。改質表面の微細組織を走査型電子顕微鏡観察、イオン注入効果を光電子分光による深さ方向の元素分析、耐食性を動的アノ-ド分極実験相変化を電気抵抗測定ならびにX線回折実験により評価した。なお、金イオン注入は次の三条件で行なった。1×10^<17>個/cm^2(70KV)、5×10^<16>個/cm^2(30KV)、1×10^<16>個/cm^2(30KV)。得られた主な結果は以下の通りである。金イオン注入法に関しては、(1)金イオンの効果的な注入は低い出力の元で達成された。(2)耐食性の向上が認められた。(3)注入後の適当な熱処理により、Cu_3AuならびにCuAu_3規則相が形成され、さらなる改善が期待された。さらに、TiNイオンプレ-ティングに関しては、(1)金合金に似た黄金色をもった表面層が得られた。(2)耐食性の向上は大幅に改善された。(3)ち密で均質なコ-ティング層が得られ、付着性や機械的性質に優れていた。
Ｓｏｕｖｅｎｉｒに見る現代的消費の感性性

Souvenirは,観光という感性的体験を感性的なままに保存する額縁の役割を果たす.一方souvenir購買を一つの消費行為と見るなら,それは感性のための消費である.この顕著な感性的消費行動の分析から,現代的消費における感性の役割について洞察を得るのが,本研究の目的であった.研究の結果明らかになったのは,1社交的・倫理的性格の強い日本のおみやげが飲食物を中心的内容とするのに対し,感性的消費の対象としてのsouvenirは置物類を代表とすること,2置物類の購買は欧米人に多く見られること,3日本人観光者も欧米では感性的な体験を求めることである.本研究の目的は,観光者によるsouvenir消費を対象として,美学と消費者行動研究の成果を踏まえながら,観光における消費の感性的性格を明らかにすることであり,最終的には現代における消費一般の感性的性格について見通しを得ることである.そのうち,本年度の研究は次の3つを課題とした.課題別,分担者別に実績を述べる.1.Souvenirと真正性(authenticity)についての文献調査(津上):authenticityの語源的・語誌的検討を進めた.すなわちこの語は「下手人」を意味するギリシャ語authentesに発しながら,15,16世紀に「親」を意味するラテン語auctor(またはaucthor)と混交を来たしたとされる.その結果として,現代の「正嫡」の意味を含んだ「真正性」概念が生じていると考えられる.16世紀のラテン語およびイタリア語文献調査の結果,ある程度この混交を確認することができた.2.消費に顕著な感性的質の発見(牧野):消費に顕著な感性的質として「ノスタルジックなもの」があると考えた.「個人的ノスタルジア」と「歴史的ノスタルジア」の概念を,喚起される感情の性質や,感性的質の観点から比較した.また「レトロ」を掲げる都内の商店街3箇所で聞き取り調査を行い,意図的な古めかしさと非意図的な古さの違いを検討した.このほか,souvenirにおける真正性とは何かを明らかにすることを目的とし,ハワイと京都のsouvenir店で聞き取り調査を行った.3.東日本大震災による観光者意識の変化に関する調査(津上):前年度に引き続き,被災地いわき市の調査を行なった.みやげ物屋兼海産物市場の「いわき・ら・ら・ミュウ」では,前年度3月に比べていくらか活気を呈していたが,取り扱う海産物は県外産ばかりで,原発事故が依然として大きな影を落としていることを確認した.本研究の目的は,観光者によるsouvenir消費を対象として,美学と消費者行動研究の成果を踏まえながら,観光における消費の感性的性格を明らかにすることであり,最終的には現代における消費一般の感性的性格について見通しを得ることである.そのうち,本年度の研究は次の3つを課題とした.課題別,分担者別に実績を述べる.2.ストックホルムなどヨーロッパ各地の観光施設におけるsouvenir販売状況の調査(津上):ストックホルム(スウェーデン),オスロ(ノルウェイ),ヘルシンキ(フィンランド),ロンドン,クラクフ(ポーランド)で調査を行なった.訪れたのはいずれも夏の観光シーズンであり,多くの観光者が屋外に出てどこも賑わっていたが,意外なことに日本では必ず見られる露店風のsouvenir販売施設が見当たらず,観光者の衝動的souvenir購買意欲に応える体制がないことがわかった.3.現代における消費一般の感性的性格についての見通し(牧野):消費者行動研究では,近年,商品購買後の「感性的経験」に注意が向けられている.Souvenirは,購買後の感性的経験が特に重要な意味を持つ商品であると考えられる.本研究では,昨年度までに京都とホノルルの土産物店で行った調査の結果を見直すと共に,感性の概念について学際的に検討した.また,絵画作品の分析を通してノスタルジアの問題について検討し,紀要論文にまとめた.Souvenirは,観光という感性的体験を感性的なままに保存する額縁の役割を果たす.一方souvenir購買を一つの消費行為と見るなら,それは感性のための消費である.この顕著な感性的消費行動の分析から,現代的消費における感性の役割について洞察を得るのが,本研究の目的であった.研究の結果明らかになったのは,1社交的・倫理的性格の強い日本のおみやげが飲食物を中心的内容とするのに対し,感性的消費の対象としてのsouvenirは置物類を代表とすること,2置物類の購買は欧米人に多く見られること,3日本人観光者も欧米では感性的な体験を求めることである.本年度の研究は次の3つを課題とした.課題別,分担者別に成果を述べる.1.感覚的快と感性的快との美学的区別:津上がカント『判断力批判』の当該箇所を再検討し,感性的快たる美が何故普遍妥当性を要求するかを確認した.2.Souvenirとおみやげの比較:津上が美学的・理論的考察を行ない,論文「Souvenir 観光体験の額縁」にまとめた.また牧野は,ハワイと京都で,観光客の選好に関する聞き取り調査を行った.そして,欧米人は日本人とは異なり,置物等の感性的なものを買う傾向があることを確認した.一方,観光地滞在中のオプショナル・ツアー選びにおいては,日本人も欧米人も,感性的な体験を求めていることが示唆された.両者の成果から,souvenirはおみやげと違い,感性的消費の対象であることが確認された.

3.東日本大震災による観光者意識の変化に関する調査:津上が2011年5月から7月までの3度の仙台周辺調査結果をもとに,同年10月東北大学での美学会全国大会たそがれフォーラムにおいて「Sensus communis再考:共感に立つ美学に向けて」と題する研究発表を行なった.その中で,東日本大震災を機に人類共同体が姿を現わしたこと,および共感に立つ感性判断が可能であると同時に危険であることを指摘した.この際,課題1.の成果が理論的前提となった.また2012年3月に福島県いわき市で調査を行ない,震災と観光者行動,とりわけおみやげ購買行動の変化に関する調査を行なった.牧野は,東京でも観光地が影響を受けていることに着目し,2011年5月に浅草の三社祭で観察と聞き取り調査を行った.感性的質の観点から結果を検討したところ,例年とは異なる感性的質が生じていることがわかった.上述の3つの課題のうち,1.については上述のとおり確認作業を続けたが,最終的結論を得るには,手書き文書を含めて,なお調査を継続しなければならない.2.の感性的質については,研究成果を次の論文および分担執筆の著作としてまとめたが,刊行が遅れている.またsouvenirにおける真正性に関しては,現在調査結果を検討している.今後成果をまとめ,発表したいと考えている.3.については,平成24年7月の時点では,被災地での観光者意識は平成23年度と大きな変化を呈していないことを確かめた.しかし,平成23年度に予定していたストックホルムでの調査(津上)は,本年度も延期し,平成25年度前半に集中的に行なうこととした.全体の達成度として「やや遅れている」を選択する所以である.上述の3つの課題のうち,1.については上述のとおり確認作業を終え,3.の理論的前提として役立てることができた.2.については,津上が美学の観点から理論的考察を行ない,牧野が消費者の選好に焦点を当てた現地調査を行なった.前者は論文として発表することができた.後者については,さらなる調査および理論的考察を加えてまとめる予定である.3.については,津上が東日本大震災と美学の関係について,実地調査を踏まえた理論的考察を行ない,口頭発表することができた.これは2012年5月中にウェブ公開される予定である.牧野は研究成果を論文にまとめ,2011年9月に『成城文藝』216号で発表した.これは既にウェブ公開されている.しかし当初予定していたストックホルムでの調査(津上)は,国内での調査と考察がより明確な姿をとるまで延期することとした.全体の達成度として「おおむね」を選択する所以である.当初,平成25年度の研究では,次の3つを課題とする計画であった.各項目について,これまでの実施状況を踏まえ,次のような具体的計画を提示する.1.消費概念の規定:これまでの理論的考察と実地調査から得られた知見をもとに,「消費」概念について,特に年度後半に集中的討論を行ない,共同研究の成果とする.2.研究成果の発表:津上はこれまでの研究の成果を,ポーランド,クラクフで平成25年7月に開催される国際美学会議で英語発表する他,『美学』などの雑誌に論文を投稿する計画である.牧野は,美学会,消費者行動研究学会等で,研究成果を発表する予定である.このほか,関連諸問題についても研究を深め,紀要等に論文を投稿する予定である.
肝細胞癌の発癌・進展における腫瘍血管構築の精密血流画像解析とその分子機構の解明

従来、我々は肝細胞癌の発癌進展において動脈血統が上昇する前に門脈血流が低下することを証明してきた。当該研究期間においても門脈造影下CTおよび動脈造影下CT(CTA)を用いることにより肝発癌の進展に伴い動脈および門脈血流動態が変化することを証明してきた。特に最近の研究では酸化鉄造影剤を用いて網内系の取り込みを検討することによりKuppfer細胞の機能も血流動態と深く関与することも証明してきた。すなわち、前癌病変であるdysplastic noduleは肝細胞癌の前癌病変においてKuppfer細胞が保たれかつ、門脈血流も保たれること並びに動脈血流は低下していることをCTA、CTAP並びに造影ハーモニックイメージングを用いることにより証明した。又、早期肝癌においては動脈も門脈も低下した状態があること、又この時期を境にKuppfer細胞数も減少することをSPIO MRI及びCD68染色を用いてKuppfer細胞を免疫組織染色することにより証明した。通常型の肝細胞癌に進展すればSPIO MRIの取り込みはなくなり、従ってKuppfer細胞も減少すること及び免疫組織学的にCD68陽性細胞も減少することも示してきた。これらの解析においてCoded Harmonic ImagingのPost Vascular Phaseも極めて重要な働きをすることも示してきた。さらに、今年度はまったく新しい画像解析装置と新しい超音波造影剤(Definity, Sonozoid)を用いてビーグル犬の肝臓において微細血流をcoded phase inversionにて観察することに成功した。現在、肝腫瘍においてこれらの血管構築と肝血流動態との関連について検討中である。これらの成果の詳細は幾つかの英文論文並びにSpringer VerlagよりContrast harmonic imaging in the diagnosis and treatment of hepatocelullar carcinoma.に研究成果として発表した。I.肝細胞癌の発癌・進展に伴う腫瘍血管構築の変化の精密血流画像解析超音波造影剤レボビストによるハーモニックイメージングにより肝細胞癌の前癌病変である腺腫様過形成は早期動脈相において乏血性にそして後期動脈相において門脈血流由来と考えられる結節性濃染であることを明らかにした。また、古典的肝細胞癌においては腫瘍血管構築が動脈優位で門脈血流に欠くこともこの手法で明らかにすることが可能となった。その他の腫瘍性病変、特にFNHや血管腫の鑑別も造影ハーモニックイメージングにて明瞭に鑑別が可能であることを示した。II.肝細胞癌の血流と悪性度・血管新生因子肝細胞癌の悪性度評価において門脈造影下CT(CTAP)で血流を認める結節は動脈優位に転ずる率が極めて低く予後が良い腫瘍であることが明らかとなった。これらの腫瘍は組織学的には過形成結節性であり血管新生因子(VEGF)などは発現がみられていないことを明らかにした。肝細胞癌の発癌・進展においては、門脈血流の関与が極めて重要である。我々は、臨床材料を用いて肝細胞癌の初期病変ならびに前癌病変を門脈造影下CT(CTAP)と血管造影下CT(CTA)を用い、結節の血流動態を詳細に検討した。その結果、前癌病変である過形成結節は動脈血流は乏血性、門脈血流は保たれること、ならびに次のステップの段階では動脈血流も門脈血流も低下した状態に陥ること、さらにはその後、動脈血流が上昇し、多血性となり、通常型肝癌に進展することを本研究により証明した。また、一部の結節は乏血性の結節の中に動脈性血流の増加を認め、nodule in noduleの形をとって最終的に肝細胞癌へ進展することを証明した。

また、精密血流画像解析であるCoded Harmonic Angioを用いて検討した結果、このような門脈血流は超音波造影剤Levovistを静注して造影ハーモニック法を行うことにより、明瞭に観察することが可能なことも報告してきた。さらにLevovistは静注後5分後のphaseではKuppfer細胞に貪食、もしくは血管内皮細胞に沈着にするために前癌病変、初期病変では周囲肝と同程度の集積を示し、古典的肝細胞癌では周辺肝に比べて集積が低下することも証明してきた。これは従来より我々がアシアロ糖タンパクレセプターシンチグラフィにより証明したこと、あるいはCTAPで観察してきたこととよく一致する結果である。さらにこのような前癌病変・初期病変のKuppfer細胞をCD68染色で免疫組織染色した結果、前癌病変・初期病変にはCD68陽性細胞が多数存在し、早期肝癌、もしくは中分化型肝癌はCD34陽性の血管新生がおこり始めていることも組織染色により証明した。また、肝細胞癌の初期病変、境界病変が門脈血流と極めて相関し、門脈血流が流入する結節は予後が良いこと、あるいはdoubling timeが長いこと、大型の高分化型肝癌結節はフォローしていても臨床的経過観察をしていても多部位に動脈血流優位の癌が現れやすいことなどを報告した。
層状化合物のナノスペースを利用した複合的吸着選択性を有する新規多孔体の創製

1.層状水酸化物のソフト化学手法を用いた多孔質化層状水酸化物であるハイドロキシリン酸ジルコニウム([(NH_4)_2(H_3NC_2H_4NH_3)_2[Zr_3(OH)_6(PO_4)_4]]の層間をプロトン化したものは、一部分のアルキルモノアミンのみインターカレーションされ、エチルアミンで剥離することがわかった。インターカレーションさせた後、層間をシラン化させ、熱処理した結果、シラン分子は600-700°C程度で酸化してシリカに変化し、比表面積は300°Cで最大180m^2/g程度となり、かつミクロ細孔が最も発達した構造となった。2.層状遷移金属酸化物の再構築法による多孔質化KFe_<0.5>Nb_<1.5>O_5から得られるFe_<0.5>Nb_<1.5>O_5ナノシートと酸化鉄コロイドとの比を変えて混合し、ナノシートの再構築による多孔質化を試みた。その結果、変形したナノシートが積み重なってできる半径2nm程度の細孔とカードハウス型の半径48nm程度の細孔との二種類の細孔が存在し、前者はどの量比でも見られるが、後者はコロイドとナノシートの量比が0.2以下でのみ現れることがわかった。この系での最高の比表面積144m^2/gはコロイド/ナノシート=0.2において得られた。3.導電性高分子のナノシートとの複合による高分散多孔化α-リン酸ジルコニウム層間にアニリンをインターカレーションさせ酸性条件下で重合させること、およびアニリンあるいはピロールとα-リン酸ジルコニウム剥離溶液との混合溶液中で電気泳動-電解重合により導電性高分子の高分散化を図った。いずれの作製方法でも、導電性高分子重量当たりのキャパシタンスは導電性高分子単体よりもはるかに大きかった。また、酸化物ナノシートと導電性高分子の混合溶液より、ナノシートと高分子が積層した構造のものが得られた。本研究課題では、本年度は主として層状酸化物の剥離、および層状水酸化物のソフト化学特性についての検討を行った。以下にそれらについて説明する。1.層状遷移金属酸化物の剥離層状構造を示すKFe_<0.5>Nb_<1.5>O_5およびCs_<0.7>Ti_<1.825>O_4について、HClを用いてこれらをプロトン交換体、HFe_<0.5>Nb_<1.5>O_5およびH_<0.7>Ti_<1.825>O_4とした。両試料とも、粉末XRDパターンより、層間に存在するアルカリイオンがプロトンに交換されていることが確認された。次に、プロトン交換体について、テトラブチルアンモニウムハイドロキサイド(TBA)を用いて剥離を試みた。今回のプロトン中間体の場合、層間のプロトンがルイス酸点として働くことによるTBAとの相互作用により、層状構造が剥離することが期待される。TBA水溶液にプロトン交換体を添加し、48時間程度撹拌したところ、撹拌後の水溶液では、レーザー光によってチンダル現象が確認できた。この結果から、無機ナノシートがコロイド状態になっていると考え、剥離ができたと考えた。2.層状水酸化物のソフト

化学特性層状水酸化物であるハイドロキシリン酸ジルコニウム([ZrH-P]、(NH_4)_2(H_3NC_2H_4NH_3)_2[Zr_3(OH)_6(PO_4)_4])のソフト化学特性について検討した。[ZrH-P]はプロトン化処理を施すことで、層間に存在する大部分のNH_4^+およびH_3NC_2H_4NH_3^<2+>がプロトンと交換されることがわかった。プロトン化された[ZrH-P]について、アルキルモノアミンによるインターカレーション特性を調査したところ、試料の一部分のみインターカレーションされること、またエチルアミンが剥離剤として作用することがわかった。次年度より、これらの物質の多孔質化について検討をしていく予定である。本研究課題では、本年度は主として層状酸化物の剥離、および層状水酸化物のピラリングによる多孔質化の検討を行った。以下にそれらについて説明する。1.層状遷移金属酸化物の再構築法による多孔質化層状構造を示すKFe_<0.5>Nb_<1.5>O_5およびCs_<0.7>Ti_<1.825>O_4の塩酸処理により、プロトン交換体であるHFe_<0.5>Nb_<1.5>O_5およびH_<0.7>Ti_<1.825>O_4を作製した。これらの試料のテトラブチルアンモニウムハイドロキサイド(TBA)による剥離溶液と、遷移金属コロイドとを混合することにより、ナノシートの再構築による多孔質化を試みた。その結果、コロイドとナノシートとの相互作用によりカードハウス型構造を持つ多孔体が合成できた。また、比表面積は最大で200m^2/g程度であり、コロイドの添加量を変化させることで細孔径のコントロールが可能であった。2.層状水酸化物のソフト化学手法を用いた多孔質化層状水酸化物であるハイドロキシリン酸ジルコニウム([ZrH-P]、(NH_4)_2(H_3NC_2H_4NH_3)_2[Zr_3(OH)_6(PO_4)_4])のインターカレーション特性を利用してその層間空間を拡大し、その空間に種々のシラン分子を化学的に修飾することにより多孔質化を試みた。この試料を熱処理した結果、シラン分子は600-700°C程度で酸化してシリカに変化した。また、比表面積は300°Cで最大180m^2/g程度となり、かつミクロ細孔が最も発達した構造となっていた。本年度は、前年度に引き続きナノシートと鉄コロイドとの系での多孔体の合成およびナノシートと導電性高分子との複合化について検討した。層状遷移金属酸化物の再構築法による多孔質化Fe_<0.5>Nb_<1.5>O_5ナノシートと鉄コロイドとの混合比を変えて前年度と同様な方法で多孔体を合成し、多孔体特性の混合割合に対する依存性について検討した。その結果、半径2nm程度の細孔と半径48nm程度の細孔との二種類の細孔が存在し、前者はコロイドとナノシートの量比に依存せず常に見られるが、後者はコロイドとナノシートの量比が0.2以下でのみ現れることがわかった。小さな細孔はナノシートが変形して積み重なった結果生ずるナノシート間の細孔で、大きな細孔はカードハウス型の細孔であることがわかった。カードハウス型の細孔は、コロイドの量が増えると、形成されなくなった。この系での最高の比表面積はコロイド/ナノシート=0.2において得られ、144m^2/gであった。2.導電性高分子のナノシートとの複合による高分散多孔化導電性高分子と層状リン酸ジルコニウムの複合化により導電性高分子の高分散多孔化を二種類の方法で検討した。最初の方法は、α-リン酸ジルコニウムの層間でアニリンおよびピロール高分子を分散させる方法である。
「情報化」が経済に与える影響の実証分析

平成元年度行った「情報化」に関する理論的検討を踏まえて、平成2年度はモデルの構築と、それにもとづく実証分析を行った。具体的には「情報化」をマクロ経済学的に分析するために、情報財およびそれを生産する情報産業を定義し、その定義にもとづいて現在の産業連関表の産業を再分類し直した上で、情報産業、情報支援産業(コンピュ-タなどの情報機器を生産する産業)、非情報産業の規模を計測した。計測期間は、産業連関表のデ-タを基礎にしているため、1975年、80年、85年の3時点である。計測の結果から、次の諸点が明らかになった。(1)現在「情報化」と呼ばれているものの実態は、情報支援産業の急激な成長であって、ソフトウェア等に代表される情報財そのものを生産する産業は規模的にも、成長率の上でもそれほど大きくはない。(2)その最大の理由は、多くの情報活動は組織内で行われており、それらは市場では評価されないからである。このような結果およびそれに関する知見から、今後の研究の方向として、組織内の情報活動を何らかの形で評価できるような枠組みを考えるべきこと、そしてそのためには、常にマクロ分析だけでなくて、ある程度ミクロ、すなわち個々の産業ないしは企業にまで降りた分析を目指すべきことが明らかになった。今日、「情報化」という現象が経済全体の1つの大きな変動要因であることは否定できない。しかしこれまで経済学の分野では、このような現象は「情報の経済学」、「技術の経済学」という形でミクロ経済学の対象とされ、その理論的側面の解明が中心であって、マクロ経済学の視点にたつ実証分析はきわめて限られていた。このような状況は「情報化」の経済的、社会的重要性を考えると、きわめてアンバランスである。このような観点から、本年度は「情報化」が経済に与える影響を分析するための理論的枠組みの構築と実証分析のための手法の検討を行った。その具体的な内容は、以下のとおりである。(1)現在、様々な分野で議論されている「情報化」という現象のうち、主として経済に関する領域を整理した。(2)「情報化」の分析にとって重要な概念は、抽象的な情報ではなくて、具体的な情報財である。そのためミクロの「情報の経済学」で整理された経済財としての情報の概念を用いて、情報財の定義、情報財の経済財的性質、情報財と情報活動の関係についての基本的考え方を検討した。(3)情報財の需要、生産形態について考察した上、情報財の価格形成と価値とを分析する。そして情報財の市場についても考察した。(4)上の理論的考察をもとに、情報産業を具体的に定義し、「情報化」の実証分析の枠組みを提示するとともに、試算を行った。なお、今年度の研究成果の一部は廣松毅・大平号声著「情報経済のマクロ分析」として平成2年5月に刊行予定である。前年度行った「情報化」に関する理論的検討を踏まえて,本年度はモデルの構築とそれにもとづく実証分析を行った。具体的には「情報化」をマクロ経済的に分析するために、情報財およびそれを生産する情報産業を定義し、その定義にもとづいて現在の産業連関表の産業分類を再分類し直した上で,情報産業,情報支援産業(コンピュ-タなどの情報機器を生産する産業),非情報産業の規模を計測した。計測期間は,産業連関表のデ-タを基礎にしているため,1975年,80年,85年の3時点である。計測結果から,次の諸点が明らかになった。(1)現在「情報化」と呼ばれているものの実態は,情報支援産業の急激な成長であって、ソフトウェア等に代表される情報財そのものを生産する産業は規模的にも,成長率の上でもそれほど大きくはない。(2)その最大の理由は,多くの情報活動は組織内で行われており,それらは市場では評価されないからである。このような結果ないしは知見を踏まえて,今後の研究の方向として,組織内の情報活動を何らかの形で評価できるような枠組みを考えるべきこと,そしてそのためには,単にマクロ分析だけではなくて,ある程度ミクロ,すなわち個々の産業ないしは企業にまで降りた分折を目ざすべきであることが明らかになった。
免疫寛容におけるTGF-β産生T細胞の分化誘導メカニズムの解析

免疫寛容の機構の一つである能動的抑制に関与するTGF-β1を産生する調節性T(Tr)細胞が生体内のどの器官で、またどのようなメカニズムで誘導されるかについては未だ不明である。TGF-β1産生Tr細胞の免疫寛容への作用機序を明らかにするためには、まずT細胞からのTGF-β1の発現制御機構を詳細に理解する必要がある。これまでに、Beefl Isulinトランスジェニックマウスを用いた解析より、自己反応性TGF-β1産生細胞はアナジックな細胞であることを示してきた。また、経口免疫寛容で誘導されてくるTGF-β1産生細胞も、アナジー状態にあると言われている。さらに、TCR刺激によってカルシウム経路とPKC経路が活性化されて細胞内にシグナルが伝達され様々な応答が開始されるが、アナジー状態にあるT細胞においてはTCR刺激に対してカルシウム経路の活性化が低下していると言われている。以上のことより、カルシウム経路の活性化とTGF-β1の発現制御に注目した結果、カルシウム経路の活性化はTGF-β1のmRNA発現に対して抑制的に制御する作用し、またPKC経路の活性化によってmRNA発現は促進されることを明らかにした。現在、T細胞にアナジーを誘導し、アナジー状態にある細胞においてTCR刺激とTGF-β1 mRNAの発現制御の関係について検討中である。また、TGF-β1産生を促進させる作用をもつサイトカインであるIL-10に着目し、Tr細胞からのIL-10産生機構についても解析を行った。その結果、IL-10を高産生する自己抗原特異的Tr細胞の誘導には、生体内における自己抗原の発現量が関与し、さらにIL-10産生にはICOS分子が関係していることを明らかにした。本研究では、抹消での免疫寛容に重要な役割を担うTGF-β1産生能を有する調節性(Tr)細胞の分化誘導機構、及びT細胞からのTGF-β1産生機構についての解析目的としている。TGF-β1産生T細胞クローンの樹立や維持が困難であること、さらに現在の技術ではTGF-β1の検出感度が悪いなどの理由により、Tr細胞の分化制御機構やT細胞におけるTGF-β1遺伝子発現の分子機構の解明を難しくしている。TGF-β1プロモーターの制御化でgreen fluorescence protein (GFP)を発光するトランスジェニックマウス及びノックインマウスは、GFPの蛍光を追跡することによってin vivo及びin vitroでのTGF-β1産生T細胞の分化や誘導の様子を容易にモニターできるシステムとして有用である。我々がすでに成功したマウスゲノムライブラリーよりTGF-b1のプロモーター領域およびエクソン1を含む領域を用いてノックインマウスの作製に成功し現在はgermline transmissionを確認中である。また、T細胞からのTGF-β1産生において、TCRを介したシグナル伝達経路とその産生メカニズムの関係は詳細にはわかっていない。しかし、アナジー状態にあるT細胞がTGF-β1を産生することより、カルシウム経路とその発現制御に注目した結果、カルシウム経路の活性化はTGF-β1のmRNA発現に対して正と負、すなわち抑制的に制御する作用と発現を誘導する両方の作用があることをこれまでの研究で明らかにしている。
ナノ物質の未知構造解析手法の研究：二体分布関数を用いた解析アルゴリズムの構築

本研究では、構造未知のナノ物質に対して、その原子配置を解明するための二体分布関数の高度な解析アルゴリズムの確立を目的とする。本年度は放射光実験による標準データの収集や、二体分布関数を用いた未知構造解析について実空間法で取り組んだ結果をまとめた。年度の前半では、既存のX線回折法の未知構造解析について、直接法と実空間法を用いてシアノ錯体の構造解析を行い、論文にまとめた(CrystEngComm 2018, 20, 6713-6720)。さらにSPring-8の実験により、溶液中の酸化チタン原料や非晶質の二体分布関数の測定を行い、水溶液分散体の未知構造解析を行った(ACS Omega 2018, 3, 8874-8881)。複雑な系の二体分布関数の導出を行えるMaterialsPDFプログラムの開発が必須であり、論文の公開とともにプログラムの公開も行った。さらに天然鉱物のマガディアイト(層状シリケートの1種)は未知構造物質であり、回折法では解析困難であったため、二体分布関数とX線回折の両面から未知構造解析を行い、世界で初めて解析に成功した(Chem Sci 2018, 9, 8637-8643)。この物質は層状であり、層内の原子ペアは周期性は結晶性を示しているが、面間では乱れており、回折法のみではアプローチできない材料である。二体分布関数を用いた構造解析の良い例となった。既存の二体分布関数のプログラムには限界があったため、二体分布関数の高速シミュレーションのためのプログラムの開発を進め、標準試料についてシミュレーションを行えることを確認した。今後、数学的な処理により、効率的に未知構造解析にアプローチする手法の核になるプログラムにする予定である。このプログラムの開発とともに、実験データから原子ペアベクトルの導出プログラムの開発も進めているところである。二体分布関数のシミュレーションプログラムの開発にまで本年度で着手でき、標準試料の計算では既存のプログラムと同等の結果が得られている。拡張性や計算速度の面で多くのメリットがあり、今後の未知構造解析において多くの成果に繋がるものと確信できている。当初の予定通り、放射光施設において標準試料や解析試料のX線全散乱実験を行うことができ、二体分布関数の導出まで行った。さらに、二体分布関数を用いた未知構造解析について、典型的な例としてマガディアイトの構造解析に成功し、既に論文化まで達成したため大きな意義のある研究として注目されてきている。二体分布関数のシミュレーションについて、より柔軟な計算が行えるようにベクトル計算を局所構造や中距離などで分けて計算し、さらに構造の変換に関するベクトルも付与して計算できるようにすることで効率的な未知構造解析を可能になるはずである。この部分のアルゴリズムの確立とプログラム化が本研究の中心になることが分かってきたため、早急に進めたい。また、MaterialsPDFプログラムの開発により、複雑な系の二体分布関数の導出が行えるようなってきた。その中で、既存の二体分布関数の導出法・シミュレーション法の限界が見えてきた。具体的には孤立原子で求められた原子散乱因子が実材料に合わないという問題である。構造既知の物質であれば問題なく解釈できる部分として扱えるが、構造未知の場合、解釈が不可能である。また固体の本質を表す部分でもあるため、物性の理解には不可欠な点である。実材料の理解をX線散乱の観点から行うために避けて通れない問題であるため、この点に関しても今後、検討を進めていく。

当初の予定通り、放射光施設において標準試料や解析試料のX線全散乱実験を行うことができ、二体分布関数の導出まで行った。さらに、二体分布関数を用いた未知構造解析について、典型的な例としてマガディアイトの構造解析に成功し、既に論文化まで達成したため大きな意義のある研究として注目されてきている。二体分布関数のシミュレーションについて、より柔軟な計算が行えるようにベクトル計算を局所構造や中距離などで分けて計算し、さらに構造の変換に関するベクトルも付与して計算できるようにすることで効率的な未知構造解析を可能になるはずである。この部分のアルゴリズムの確立とプログラム化が本研究の中心になることが分かってきたため、早急に進めたい。また、MaterialsPDFプログラムの開発により、複雑な系の二体分布関数の導出が行えるようなってきた。その中で、既存の二体分布関数の導出法・シミュレーション法の限界が見えてきた。具体的には孤立原子で求められた原子散乱因子が実材料に合わないという問題である。構造既知の物質であれば問題なく解釈できる部分として扱えるが、構造未知の場合、解釈が不可能である。また固体の本質を表す部分でもあるため、物性の理解には不可欠な点である。実材料の理解をX線散乱の観点から行うために避けて通れない問題であるため、この点に関しても今後、検討を進めていく。
リン酸塩ガラスの超プロトン導電性発現に関する研究

本研究は高プロトン伝導を示すリン酸塩ガラスの合成条件とガラス中のプロトン伝導機構を明らかにした。低温溶融あるいは加湿雰囲気中ガラス転移温度以下での熱処理により高プロトン伝導が実現されることを見いだしたが、これはガラス中に導入される水分子を介したホッピングによりプロトン移動度が増加するためであると結論づけられた。さらに、高プロトン伝導と化学的耐久性を両立するための条件を明らかにし、環境負荷の低い新たなプロトン伝導性ガラスを開発するための指針を得た。リン酸塩ガラスにおけるプロトン導電性の発現を明らかにするために、種々の擬2元系リン酸塩ガラスについて合成条件ならびにアニールによる伝導度変化を測定し、以下の結果を得た。1)ガラス試料をより低温、より短時間溶融し、これを急冷した試料ほどプロトン伝導度が増加し、リン酸鉛系ガラスにおいても阿部らによって提案されている式σ=A_o[H+]^2に従うことが示された。2)このガラス試料を空気中において適温でアニールするとプロトン伝導度は大幅に向上した。熱分析、赤外吸収スペクトルならびに中性子回折から、ガラスへの水の吸収に伴うプロトン伝導性の増大であることが示された。3)プロトン伝導度の温度依存性に対する考察から、ガラスへの水の吸収による伝導度増加はプロトン濃度の増加ではなく、ガラス構造中の水分子を介したプロトン移動度の増大によるものであることが示唆された。4)リン酸塩ガラスのプロトン伝導性は測定を行ったすべての系で同様に振る舞うことが示されたが、特にリン酸鉛系ガラスへの水の吸収ならびにプロトン伝導度の増大が顕著であることが明らかとなった。これはPb-Oの結合エネルギーがガラス形成酸化物群と修飾酸化物群の中間に位置することによるガラス構造の特異性に由来すると考えられる。また、伝導度とともにガラスのFSDPに反映される中距離秩序形成が顕著になることが示された。以上の結果から、ガラス中の水はH_2O分子、H^+(-OH基)というプロトン伝導度に対する効果が異なる2種類の形態で存在する。特に環境負荷の高いPbに変わる中間酸化物(例えばZn)により構造を制御して、化学的安定性を損なうことなく多量のH_2O分子をガラス中に導入することにより高いプロトン導電性ガラスが実現できることを明らかにした。リン酸塩ガラスにおけるプロトン導電性の発現を明らかにするために、擬2元系よりも耐久性を向上させたリン酸塩ガラス12BaO-12Sr-12PbO-64P205を中心として合成条件による赤外吸収特性、比熱ならびに伝導特性の変化を測定し、以下の結果を得た。1) 900°C以上で溶融したガラスについては、すでに提案されているプロトン伝導度がプロトン濃度の2乗に比例するという関係に従うが、それ以下の温度で溶融したガラスではプロトン濃度から期待されるプロトン伝導度より大幅に増加する。2)プロトン伝導度ならびに比熱はガラス転移温度に比例する。このことはガラス中に含まれる全水分量がガラス転移温度とプロトン伝導度を支配していることを示唆している。ガラス中の水にはリン酸鎖中でOH基として存在するものと水分子の状態で存在するものがある。赤外吸収スペクトルの測定から低温で溶融したガラスではOH濃度に上限があると考えられることから、これに代わって水分子が増加すると考えられる。3)交流インピーダンス測定から、プロトンホッピングの活性化エネルギーは高温で溶融したガラスではほぼ一定、低温で溶融したガラスではイオン伝導の活性化エネルギーにほぼ等しい。このことから、プロトン生成のエネルギーはガラスの溶融温度低下とともに減少し、低温溶融ガラスではゼロになると考えられる。以上の結果から、リン酸塩ガラスでは溶融温度によって以下のような伝導機構の変化が生じていると考えられる。高温溶融ガラスでは熱的に生成されたプロトンが直接非架橋酸素をホッピング伝導するのに対して、低温溶融ガラスは遊離したプロトンがすでに存在し、これがガラス中に分散する水分子を媒介としながらホッピング伝導をする。このため、低温溶融ガラスでは高プロトン伝導性が実現しているものと考えられる。Iリン酸塩ガラスのプロトン伝導機構についてプロトン伝導ガラスの伝導機構を明らかにするために、12BaO・12Sr・12PbO・64P_2O_5ガラスの交流インピーダンス測定を行った。900°C以上で溶融したガラスでは溶融温度の低下とともにキャリア濃度が増加するのに反して、多量の水分子を含む低温溶融ガラスでは溶融温度に依らずほぼ同一のキャリア濃度を示し、赤外吸収測定から推定したプロトン濃度と同様の結果が得られた。TIC測定から得られた移動度はキャリア濃度やイオン伝導度の値と半定量的な一致を示し、低温溶融ガラスの高いプロトン伝導性は移動度の増加に起因していることが示された。これらの結果から、低温溶融によりリン酸塩ガラス中に含まれる水分子に起因する移動度増加がプロトン伝導性の発現には重要である。

IIリン酸塩ガラスの耐久性向上に関してリン酸塩ガラスにおける高プロトン伝導性と耐久性の両立を目指し、重元素を含む多元系ではなく、擬2元系ZnO-P_2O_5ガラスをベースとして、これにAl_2O_3、NH_4OHの添加効果について検討を行った。リン酸塩ガラスへのAl_2O_3添加が化学的耐久性向上をもたらすことはよく知られているが、NH_4OHも同様に高い化学的耐久性向上をもたらすことを見いだした。さらにNH_4OH添加ガラスでは、アニールによっても無添加ガラスと同様にプロトン伝導の向上が見られることを示した。また、加水分解によるリン酸塩ガラスの結晶化にはガラスの表面状態、とくに表面の微細な凹凸の存在が核生成の原因であり、滑らかな表面を作成することで結晶化が抑制されることを明らかにした。
神経芽腫細胞株(SK-N-SH)における癌幹細胞同定への試み

神経芽腫は胎生期の神経堤細胞neural crest cellを由来とする小児の固形悪性腫痛である。悪性度の高い神経芽腫において癌幹細胞の存在が提唱されているが同定には至っていない。また、神経芽腫ではその形質によりS、I、Nと3つのタイプに分類され、特にIタイプにおいて癌幹細胞との関係を示唆する報告がなされている。我々は不均一な細胞群からなるSK-N-SH細胞を用い、癌幹細胞の同定と分離を目的に研究を行った。貝体的には、3タイプそれぞれに相当するクローンを作成し、特にこれまでの実験において幹細胞性を示すことを確認しているIタイプのクローンについて、他2つのクローンとの差異を調べることで、癌幹細胞同定を試みた。これまでの研究で, CD44、CD133が神経芽腫の癌幹細胞マーカー候補としてあげられたが、これらだけでは、癌幹細胞群を特異的に分離することができなかったため、さらに癌幹細胞群を特定するためのマーカーを探すべく、S, I, Nタイプの表面マーカー発現様式を網羅的に探索したところ、Iタイプ特果的な発現を確認し、多くのマーカー候補を得た。さらに、得られた表面マーカー発現解析の結果をこれまでに行ったSK-N-SH細胞のクローン間での遺伝子発現解析(Iタイプ特異的な遺伝子発現の解析)および実際の臨床症例での遺伝子発現解析(予後不良群に特異的な遺伝子発現の解析)の結果と重ね合わせて解析することで、癌幹細胞同定のための表面マーカー候補の絞り込みを行うことができた。また、遺伝子発現解析の結果、悪性度の高い神経芽腫とWnt/β-catenin、PDGF, CD38系, IL-6, STAT, TGF-βシグナル系との関連が示され、癌幹細胞同定のための分子マーカー候補が得られた。今後は得られたマーカー候補の有用性を確かめるべく、SK-N-SH以外の神経芽腫細胞株も用いて更なる検討を行い、癌幹細胞同定を目指す予定である。
複雑な自然変動環境下での気温応答性を制御する遺伝子の同定

北海道のイネ品種が、光周性を失っているのに、本州での栽培と北海道での栽培で、開花時期が大きく変化する現象から、北海道の品種が、光周性を失うことで、気温応答性を亢進しているとの仮定で、北海道品種「ゆめぴりか」にEMS処理により、突然変異を導入し、開花が遅れる個体を西東京市の圃場で選抜した。その結果、約30系統の新規の開花期遅延突然変異体を得た。その中で、表現型が顕著である変異体を野生型品種と交配し、F2集団を現在、温室で展開することで、この変異体の原因遺伝子の同定をMutMap法で進めようと栽培実験を行っている。また、得られた変異体の気温応答性を確認するために、幼苗を行った気温条件で栽培し、その後のイネの葉の遺伝子発現を、開花期関連遺伝子に関して確認する実験系の開発を行っている。これまでに、ゆめぴりかに加え、コシヒカリや日本晴の開花期遺伝子の気温応答性を確認することで、北海道の品種では、2030°Cの間で、高温になるにつれ、開花期促進遺伝子であるEhd1の発現が向上するのに対し、コシヒカリや日本晴では、違う気温応答を示す予備的な結果が得られており、その追試に加え、手元の各種関連変異体を使った気温応答性を調査中である。また、この科研費の予算で、約1平米強の栽培スペースを持つ人工気象室を4基設置し、現在、最終試験運転中である。今後、長日・短日x高温区・低温区の4栽培条件での開花期を各種系統・変異体で栽培する計画を立てている。メーカーの設計の不備で、人工気象室の気温制御にトラブルがあり、少し調整に時間がかかっているが、おおむね、計画通りに研究が進捗しており、変更の予定はない。MutMap法による、新規変異体からの遺伝子単離と、新しい人工気象室での栽培実験、さらに、気温応答性を迅速に評価する実験系の確立を同時進行で進めていく。上記、新規変異体は、フロリゲンのmRNAの量が高いにもかかわらず、開花が非常に遅い、これまでにない表現型を示す変異体であり、その原因遺伝子の同定は基礎研究上の大きな発見につながる可能性があるので、優先して進めていく予定である。
In vivo における接着界面の劣化機構の解明に関する研究

生体内での接着の劣化を検討するために、サルの生活歯に象牙質に達する平坦面を形成し、その平坦面に接着性レジンを充填した。試験期間としては1日、180日、360日とし、サルの屠殺後にMicro-tensile bond testを用いてレジンの象牙質への接着性の経時的変化を調べた。あわせて破断面のSEM観察を行うことにより接着界面の経時的な変化を観察し接着の劣化機構を検討した。その結果、実験期間中では接着強さの変化は無かったが、FE-SEMを用いた観察によると接着界面の劣化は含浸層を介して起こることが明らかとなった。含浸層内では、先ずコラーゲン線維間に存在するレジンが徐々に抽出され最終的には一部のコラーゲン線維が露出するようになった。試験期間内において、接着強さに変化がなかったことから象牙質のコラーゲン線維は一部でいわれているように朽ち果てていかないことが判明した。接着の長期安定性を図るためには含浸層内で経時的にレジンが抽出されないことが重要であり、充分なレジンの浸透と重合性の向上が望まれる。さらに、今回採用した試験法は接着の長期耐久性を検討する上で極めて有効であることが判明した。中林によって提唱された樹脂含浸層の概念は広く知られており、接着剤の浸透性がこの含浸層の形成に強く関与していることが世界でも常識となった。ところが、含浸層の存在によって短期的な接着性が向上することは明かではあるが、含浸層が接着の長期耐久性にどのような影響をもたらすかは現在のところ明らかではない。また、修復物辺縁に漏洩が起こった場合、接着界面、特に含浸層への水分の透過によって、接着剤層の劣化が引き起こされ、長期的には接着の破壊が起こることが想像される。しかしながら、生体内における接着界面の劣化に関する検討を行った報告は未だに見られないのが現状である。本研究の目的は、ボンディングシステムを用いて生活歯に窩洞形成後充填しその接着界面に存在する漏洩の経路の変化を経時的に観察すると共にMicro tensile bond testを用いて窩底部の接着性の経時的な変化を咬合力や口腔内環境の影響を加味して検討することにある。平成7年度は、in vitroの観察・試験を中心に検討を行った。先ず、抜去歯を用いて辺縁漏洩の経路を検討した結果、含浸層内には明らかに漏洩の経路となる欠陥が見出された。このような欠陥が長期的にどのような経緯を示すかについては現在生活歯に接着操作を行い平成9年度に検討する予定である。次ぎに、窩洞内面における接着についてMicro tensile bond testを行って検討したところ、特に窩底部象牙質に対する接着性はレジンの重合収縮・象牙質の深さの影響を受け引っ張り接着強さは極めて低いものであることが判明した。そのため、生体内で窩洞形成を行い窩底部象牙質に対する接着性を検討することは困難であることが懸念されたため、生体内では比較的平坦な面を用いて検討することにした。この結果についても平成9年度に検討する予定である。本研究の目的は、ボンディングシステムを用いて生活歯に充填しその接着界面に存在する漏洩の経路の変化を経時的に観察すると共にMicro tensilebond testを用いて接着性の経時的な変化を咬合力を口腔内環境の影響を加味して検討することにある。

平成8年度の研究によって生体内で窩洞形成を行い窩底部象牙質に対する接着性を検討することは困難であることが懸念されたため、生体内では比較的平坦な面を用いて検討することにした。サルの生活歯に象牙質に達する平坦面を形成し、その平坦面に接着性レジンを充填した。試験期間としては1日、180日、360日とし、サルの屠殺後にMicro tensilebond testを用いてレジンの象牙質への接着性の経時的変化を調べた。その結果、接着強さはこの期間を通じて30MPaを維持していたが、接着界面の劣化は経時的に認められた。接着性修復を成功させるためには接着の長期耐久性が極めて重要である。今回のin vivoにおける研究の目的は生体内での接着の劣化を検討することであった。試験期間としては1日、180日、360日とし、サルの屠殺後にMicro-tensile bond testを用いてレジンの象牙質への接着性の経時的変化を調べ、あわせて破断面のSEM観察を行うことにより接着界面の経時的な変化を観察し接着の劣化機構を検討した。その結果、実験期間中では接着強さの変化は無かったが、FE-SEMを用いた観察によると接着界面の劣化は含浸層を介して起こることが明らかとなった。含浸層内では、先ずコラーゲン線維間に存在するレジンが徐々に抽出され最終的には一部のコラーゲン線維が露出するようになった。試験期間内において、接着強さに変化がなかったことから象牙質のコラーゲン線維は一部でいわれているように朽ち果てていかないことが判明した。接着の長期安定性を図るためには含浸層内で経時的にレジンが抽出されないことが重要であり、充分なレジンの浸透とその重合性の向上が望まれる。さらに、今回採用した試験法は接着の長期耐久性を検討する上で極めて有効であることが判明した。
肝癌幹細胞におけるエピジェネティックな制御機構の解明と新規治療法の確立

ポリコーム群(PcG)タンパクEZH2は、肝癌幹細胞の自己複製能維持に必須であり、sh-RNAや低分子化合物3-deazaneplanocin A (DZNep)を用いてEZH2のヒストンH3K27メチル化酵素活性を阻害することで、肝癌幹細胞が分化傾向を示し、造腫瘍活性が低下することを確認した。また、マウス胎児肝臓由来の正常肝幹細胞における全ゲノムクロマチン免疫沈降シーケンス(ChIP-Seq)により562個のbivalent geneを同定した。次に、肝幹細胞の分化誘導時のマイクロアレイデータを比較・検討し、bivalent geneの中でより密接に分化制御に関与するものを抽出し得た。申請者らは、レンチウイルスベクターや低分子化合物3-deazaneplanocin A(DZNep)によるEZH2の機能阻害を行うことで、肝癌幹細胞が分化傾向を示し、造腫瘍活性が低下することを確認した。培養系および免疫不全マウスの異種移植の系にて、DZNepと同様に5-FUも肝癌細胞の増殖抑制を示したものの、フローサイトメトリーの解析では、5-FU投与マウスの腫瘍では癌幹細胞分画がenrichされるのに対して、DZNepでは同分画の確実な減少を確認した。以上より、DZNepの癌幹細胞特異的治療薬としての可能性を見出した(Chiba et al, Int J Cancer, 130;2557-67, 2012)。また、多くの固形癌において幹細胞マーカーとして機能する1型アルデヒド脱水素酵素(ALDH1)に着目し、肝癌細胞における機能解析を行った。ALDH1のノックダウンによる癌幹細胞分画の増減はなく、また癌幹細胞の増殖活性および造腫瘍活性の変化もみとめられなかった。病理学的検討では、ALDH1を高発現する肝癌では低発現の肝癌に比べて、AFP値が低く(P<0.01)、組織学的に高分化型肝癌を多くみとめ(P=0.03)、術後再発率が低い傾向がみとめられた(P=0.08)(Chiba et al, Hepatol Res, in press)。よって、肝癌において、ALDH1は幹細胞マーカーではなくむしろ分化マーカーとして機能し、良好な予後を示すバイオマーカーとなる可能性が示唆された。また、正常な肝幹細胞において、chromatin immunoprecipitation-sequencing (ChIP-seq)法によるヒストン修飾(転写活性化に働くトリメチル化ヒストンH3K4(H3K4me3)と転写抑制に働くトリメチル化ヒストンH3K27(H3K27me3))の網羅的解析を行い、肝幹細胞の分化制御機構を検討した。ChIP-seqの結果、H3K4me3とH3K27me3が共存するbivalent geneが562個抽出され、その一部で、ES細胞や造血幹細胞において報告されているものとの重複がみとめられた。GO解析では、増殖抑制、細胞分化に関与する遺伝子群がenrichされていた。またマイクロアレイ解析との照合の結果、これらのbivalent geneのうち、肝細胞分化、胆管細胞分化、肝細胞/胆管細胞双方の分化の際に、それぞれ128、115、72個の遺伝子の脱抑制がみとめられた。これらの遺伝子の中には、肝癌においても重要な役割を果たすことが報告されているものが含まれており、今後その機能解析を進める予定である。ヒストンメチル化酵素阻害剤(DZNep)が肝癌幹細胞に対して抗腫瘍効果を示すことを明らかにした。また、正常肝幹細胞を用いたChlP-seq解析を行い、H3K:27me3修飾を受ける遺伝子座、Ezh2の標的遺伝子座を特定しえた。25年度が最終年度であるため、記入しない。ポリコーム遺伝子Ezh2がピストン修飾を介して直接的に制御する標的分子を多数同定したが、その中から注目に値する分子を複数リストアップし、正常肝幹細胞と肝癌幹細胞における機能解析を既に開始している。