hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
宿主からの防御・制裁への対抗に関連する根粒菌側因子が共生の進化に及ぼす効果

ミヤコグサ根粒菌の変異株として、ニトロゲナーゼ活性を持たないnifH欠失株、窒素固定能力が半減するnifA2欠失株、共生維持能力の低下したカタラーゼ遺伝子katE欠失株、根粒形成不能のnodA遺伝子の欠失株等のゲノムに異なる蛍光タンパク質遺伝子の導入を行った。各株の存在比率について、新規に導入する蛍光分光光度計を用いた定量条件の検討を進めた。また、別法として、上記変異株に定量PCRに適した特異プライマー配列を持つ人工DNA断片の設計を行った。実施中の以下の2項目は、予定より進行しているものと若干遅れているものがあるが、全体としてほぼ計画したレベルにあると判断している。1.宿主免疫・防御機構に対する根粒菌の対抗手段はどの様に進化しつつあるのかミヤコグサ根粒菌MAFF303099株のエフェクターMlr6361について、負の効果の原因となっているドメインを同定できた点は予定通りである。また、熱帯性ダイズ根粒菌の中には、他のダイズ根粒菌系統とは共生しないダイズ品種に有効な根粒を形成するために3型分泌系を用いる菌株が存在することを証明した点は予定以上の進行である。2.寄生的根粒菌系統に対する宿主からの制裁は存在して共進化における選択圧であるのか(共生能の劣った変異株への制裁の有無の検討)ミヤコグサ根粒菌について、共生能が様々に異なる変異株にそれぞれ別の蛍光タンパク質遺伝子を導入して、菌株の比を迅速定量可能とする系の構築を行っている。現状では、定量条件の検討段階にあり、やや進行が遅れている。なお、別法として定量PCRに適した特異プライマー配列を持つ人工DNA断片の設計は終了し、計画通りである。引き続き、以下の1)2)を進行させる。1)宿主免疫・防御機構に対する根粒菌の対抗手段はどの様に進化しつつあるのかミヤコグサ根粒菌の3型分泌系エフェクターに関し、共生に負に働くMlr6361の機能モチーフを同定するとともに新規エフェクターの探索を継続する。また、熱帯性ダイズ根粒菌の中には3型分泌系を用いて、通常のダイズ根粒菌とは共生不能なダイズ系統に有効な根粒を形成する菌株の存在することを確認したので、ミヤコグサとミヤコグサ根粒菌を用いて、当該3型分泌エフェクターを同定するためのプラットフォームを構築する。2)寄生的根粒菌系統に対する宿主からの制裁は存在して共進化における選択圧であるのか蛍光タンパク質等で標識した共生窒素固定能の異なるミヤコグサ菌株を宿主に同時感染させ、宿主側からの制裁の有無に関する解析を継続する。関連して、根粒・根面・根圏と非根圏からDNA抽出を行って菌株存在量を経時解析する実験条件を検討し、定量可能なミニ生態系モデルの構築を目指す。25年度が最終年度であるため、記入しない。
軟骨細胞に特異的に発現するコンカナバリンA受容体の構造と生理的機能の解析

軟骨細胞の分化成熟の制御機構において76KDaのConA結合蛋白が担う生理的機能を解明するために、本年度は特にこの蛋白のcDNAクローニングを行なって一次構造を決定することを主目的として行ない,以下の成果が上がった。1.内部アミノ酸配列の決定ウサギ肋軟骨から膜蛋白を調整し,WGカラム,ConAカラムで部分精製したサンプルをFPLCで精製した。一部をカルボキシメチル化後,トリプシン処理を行ないスマートシステムでペプチド断片を分離し,アミノ酸シーケンスを行なった。その結果,4種のフラグメントから内部シーケンスの情報がわかりメラノトランスフェリンとのホモロジーが高かった。2.抗体作製精製した残りの蛋白をマウスに免疫し抗体を作った。これは今後の実験に使用する予定である。3.cDNAクローニング内部アミノ酸配列の結果から4コのPrimerを作製しPCRで増幅した結果680bpのPCR産物が得られた。これをTAベクターに組み込みプローグとして使用し、ウサギ肋軟骨のcDNAライブラリーをスクリーニングして数回のクローンを得た。現在cDNAシーケンスを行なっているところである。4.ウエスタンブロッティングで臓器分布を調べた結果,P76は軟骨細胞に特異的に存在することを示した。5.軟骨細胞をP76抗体で染色し,共焦点レーザー顕微鏡で観察したところ,細胞膜に存在する蛋白であることが確認された。本年度の研究成果は日本生化学会(1994年9月於大阪)において発表し,現在論文投稿中である。
時間分解共鳴軟X線散乱によるフォノンとゆらぎのダイナミクスの研究

強相関電子系物質の電子構造の光誘起ダイナミクス研究を目的として、放射光X線を用いた時間分解型の共鳴軟X線散乱測定を行った。測定対象としてはBa3CuSb2O9やIr1-xPtxTe2等の2次元系のフラストレーション化合物及びBaFe2(S,Se)3等の揺らぎの大きな1次元系の超伝導体を計画し、特にダイナミクスに現れるフォノンと揺らぎに着目した研究を行った。光照射・光誘起相転移に伴う構造と電子状態変化のダイナミクスを観測した。100ピコ秒領域の広範な高速ダイナミクスの観測により、これらの物質の示すスピン液体状態や非従来型の超伝導などの量子現象と結合する集団的フォノンや軌道/磁性の秩序状態を時間軸で分離して観測した。Ba3CuSb2O9の研究においては、時間分解共鳴軟X線散乱測定により、この物質の示すスピン・軌道揺らぎと関連する「集団的フォノン」を、光照射に伴って発現する「コヒーレントフォノン」として直接的に可視化することに成功した。さらにX線吸収分光(XAS)により、六方晶のBa3CuSb2O9にはCu2+だけでなくCu3+サイトが混ざっていることが明らかとなった。酸化物におけるCu3+サイトは一般に負の電荷移動エネルギーを持つため、Ba3CuSb2O9は基底状態において酸素サイト側にホールが入った状態になっていることが示唆される。このことは酸素K端のXASや可視の光学スペクトルにpre-edge構造が観測されることともよく対応する。六方晶のBa3CuSb2O9においては、銅サイトと酸素サイトが強く混成した非常に奇妙な電子状態が実現しており、量子スピン軌道液体の発現と密接に関連していると想定される。また、超伝導体BaFe2(S,Se)3においては、超伝導と電荷・磁気・軌道の秩序と揺らぎの共存/競合関係をX線吸収分光および共鳴軟X線散乱によって分離観測した。時間分解共鳴軟X線散乱測定を行い、Ba3CuSb2O9が持つ集団的フォノンを、光照射に伴って発現するコヒーレントフォノンとして直接的に可視化することに成功した。フォノンの振動数は予想していた時間スケールとおおよそ合致する。また超伝導体BaFe2(S,Se)3においては、超伝導と電荷・磁気・軌道の秩序と揺らぎの共存/競合関係をX線吸収分光および共鳴軟X線散乱によって分離観測することに成功した。おおむね当初の想定通りの実験結果が得られ始めているため、計画としては順調であるが、詳細な温度変化などの測定には至っておらず、成果としてまとめていく為に、今後さらなる追加測定を計画する。放射光施設を利用した時間分解共鳴軟X散乱実験は、おおむね研究計画通りに行われ、想定する実験成果が得られ始めている。一方で研究代表者の本務先が移り、新たに大学の実験室内での可視領域の分光や電子線回折によるポンププローブ測定を行う体制が整った。今後、これらのフェムト秒領域の測定を時間分解共鳴軟X散乱実験に加えて相補的に行っていくことで、光誘起相転移ダイナミクスの研究を一層、推進させていく計画である。また、自由電子レーザー施設や海外の放射光のレーザーslicing設備も利用したフェムト秒領域の時間分解共鳴軟X線散乱も計画する。

また超伝導体BaFe2(S,Se)3においては、超伝導と電荷・磁気・軌道の秩序と揺らぎの共存/競合関係をX線吸収分光および共鳴軟X線散乱によって分離観測することに成功した。おおむね当初の想定通りの実験結果が得られ始めているため、計画としては順調であるが、詳細な温度変化などの測定には至っておらず、成果としてまとめていく為に、今後さらなる追加測定を計画する。放射光施設を利用した時間分解共鳴軟X散乱実験は、おおむね研究計画通りに行われ、想定する実験成果が得られ始めている。一方で研究代表者の本務先が移り、新たに大学の実験室内での可視領域の分光や電子線回折によるポンププローブ測定を行う体制が整った。今後、これらのフェムト秒領域の測定を時間分解共鳴軟X散乱実験に加えて相補的に行っていくことで、光誘起相転移ダイナミクスの研究を一層、推進させていく計画である。また、自由電子レーザー施設や海外の放射光のレーザーslicing設備も利用したフェムト秒領域の時間分解共鳴軟X線散乱も計画する。本年度は既存の装置・設備を流用することで測定が比較的順調に進み、新たに多くの物品を購入する必要性が乏しくなった。そのため次年度使用額が生じた。次年度は可視領域のポンププローブ分光や電子線回折測定を新たに計画し、当初からの予定でもあった精密測定用電子機器や光学部品を追加購入する。そちらの物品費に未使用額を充当する。測定手法を組み合わせた研究を遂行することにより相補的に研究を推進する。
EXAFS法によるプロトン導電体SrZr_<1-x>Yb_xO_3の局所歪みの解明

1.緒言ペロブスカイト型プロトン導電体はプロトン拡散性とプロトン溶解性によって特徴づけられている物質であり、この2つの特性はともに母体結晶とドーパントイオン間の局所的相互作用から発生している。もしくは、ドーパントイオンの局所性質が母体結晶の物性を大きく変化させたと言っても良い。イオン半径や価数の異なるドーパントイオンを母結晶中に取り込んだとき発生する局所歪みは、プロトン拡散過程を理解する上で重要であることはこれまで指摘されてきた。加えて、局所歪みを緩和させるためにプロトン欠陥や酸素空孔を生成するのであれば、プロトン溶解性と密接な関係があるとも考えられる。このことから、ドーパントイオン周りの局所構造からプロトン導電性を理解できる可能性がある。EXAFS法を用いてプロトン導電体SrZr_<1-x>Yb_xO_3のYb周りの動径構造関数を調べた。第一近接の酸素イオンの分布に強いサイドピークが現れていることから、2種類の距離を持つYb-Oイオン対が存在することがわかった。母結晶のZr周りの局所構造とラマン散乱の結果から、Ybが酸素八面体のオフセンター位置にシフトして分布していると結論づけた。3.誘電緩和(第27回固体イオニクス討論会で発表)ドープされたYbは、酸素八面体のオフセンターに位置することにより局所的な分極を生じさせる。これがプロトンと強く相互作用することによって、中性子準弾性散乱実験よって指摘されているプロトン拡散のTrapping Stateの要因になっていると考えられる。Ybイオンが作る局所的な歪み場とプロトンとの相互作用を詳細に調べるために、誘電緩和実験を行った。Ybを含まないSrZrO_3の場合では、緩和は見られなかったのに対し、Yb 2mol%以上では2つの緩和が観測された。不純物Ybの濃度依存性と、温度依存性から高周波側の緩和は、局在したプロトンの運動、低周波側の緩和はプロトンの集団運動によるものである可能性が高い。ペロブスカイト型酸化物プロトン導電体のプロトン導電性は、母体結晶と価数の異なるドーパントイオンによって生じた格子歪みと密接に関係する。EXAFS(Extended X-ray Absorption Fine Structure)法を用いてドーパントイオン周りの局所構造を調べ、ドーパントイオンがペロブスカイト構造をどのように歪ませているのかを明らかにすることが、本研究の目的である。高エネルギー加速器研究機構、物質構造科学研究所にてプロトン導電体SrZr_<1-x>Yb_xO_3(x=0.00,0.05,0.10)のEXAFS測定を行った。母体結晶中Zrイオンは酸素八面体中心の反転対称位置に配置され、ドーパントイオンYbはこのZrイオンと置換される。Zrイオン周りと、Ybイオン周りの局所構造を温度因子も含め詳細に調べた結果、Ybイオンは酸素八面体の中心からシフトした位置に配置されている可能性が高いことがわかった。これまで考えられていたYbイオンと酸素間の距離とは大きく異なり、約0.2Åの差を持つ短いボンドと長いボンドでYb-酸素は結合していることを明らかにした。このことは、Ybイオンを置換したことにより結晶内で双極子モーメントが発生していることが考えられる。結晶の誘電性とイオン導電性との関わりが大変興味深く、今後さらに、誘電率のYbイオン濃度依存性を調べ、プロトン導電性との接点を追求していく予定である。

不純物Ybの濃度依存性と、温度依存性から高周波側の緩和は、局在したプロトンの運動、低周波側の緩和はプロトンの集団運動によるものである可能性が高い。
敗血症関連脳障害におけるシクロフィリンD/Surtuin3情報伝達系の連関解析

本研究では、従来の虚血性神経細胞死における脳内MPT(Mitochondrial Permeability Transition)の役割解析の成果を基盤として、敗血症関連脳障害の実態をMPT誘発ミトコンドリア機能不全の中心的役割を担うミトコンドリア・シクロフィリンD(Cyclophilin D:CypD)を介した細胞死・アポトーシス実行経路とミトコンドリアのエネルギー代謝やアポトーシス・酸化ストレス制御を担うSirtuin3(SIRT3)を機軸とした情報伝達系を介するミトコンドリア保護機構との連関解析に展開し、敗血症関連脳障害の機序解明を目指す。
第四紀後期の東アジアにおける哺乳類の大量絶滅-その要因にせまる

東アジアのうち,北海道を除く日本本土では後期更新世完新世に多くの種類の哺乳類が絶滅しているが,その絶滅期はMIS 3からMIS 2にかけてで,大型種だけでなく小型種も絶滅している.絶滅は短期間に急激に起こったのではなく,比較的長い期間に徐々に進行したようである.この地域ではずっと森林が維持され,環境変化が穏やかで,人類の影響もさほど強くなかったことが,そのようなパターンをもたらしたと考えられる.琉球列島では島ごとに絶滅のパターンが異なり,ここでは人類が絶滅に深くかかわっていると推定される.中国東北部では,ヨーロッパでのパターンに似た絶滅が起こったが,中国中・南部では絶滅はそれより限定されたものであったようである.台湾や韓国では,まだ研究が十分ではない.東アジアのうち,北海道を除く日本本土では後期更新世完新世に多くの種類の哺乳類が絶滅しているが,その絶滅期はMIS 3からMIS 2にかけてで,大型種だけでなく小型種も絶滅している.絶滅は短期間に急激に起こったのではなく,比較的長い期間に徐々に進行したようである.この地域ではずっと森林が維持され,環境変化が穏やかで,人類の影響もさほど強くなかったことが,そのようなパターンをもたらしたと考えられる.琉球列島では島ごとに絶滅のパターンが異なり,ここでは人類が絶滅に深くかかわっていると推定される.中国東北部では,ヨーロッパでのパターンに似た絶滅が起こったが,中国中・南部では絶滅はそれより限定されたものであったようである.台湾や韓国では,まだ研究が十分ではない.北は青森県から南は沖縄県におよぶ日本各地の第四紀の哺乳類化石(遺跡を含む)で、産出化石と化石産出層の調査・研究を行い、更新世から完新世にかけての動物相の変遷についてのデータを収集した。また、その時期の人類活動や古環境変化に関するデータの収集も行った。そのようなデータも含めて、日本列島の後期更新世と完新世の動物群についての総括論文が近日中に国際誌で出版されることになっている。また調査・研究を行った地域の中で、沖縄県宮古島では後期更新世から完新世にかけての詳しい動物相の変遷が明らかになり、その成果も近日中に国際誌で出版される予定である。このような研究により日本列島でのこの時期の哺乳類の絶滅の様相も従来より明らかになってきた。一方、中国では海外共同研究者の協力を得て、北京の研究機関ばかりでなく、遼寧省・吉林省・黒龍江省にも出向いて第四紀哺乳類化石と関連する資料を収集した。さらに台湾でも海外共同研究者の協力を得て、第四紀哺乳類化石とその産出層についての研究を開始し、次年度以降の本格調査に向けての準備体制を整えた。平成21年度に引き続き,北は青森県から南は沖縄県におよぶ日本各地の第四紀の哺乳類化石産地(遺跡を含む)で,産出化石と化石産出層の調査・研究を行い,更新世から完新世にかけての動物相の変遷についてのデータを収集した.特に沖縄県や鹿児島県では新産地の調査を重点的に行った.さらに,その時期の人類活動や古環境変化に関するデータの収集も行った.そのようなデータも含めて,日本列島の後期更新世の動物群についての総括論文や,沖縄県宮古島の後期更新世と完新世の動物群についての論文が近日中に国際誌で出版されることになっている.また,旧石器考古学の国内専門誌にも成果の一部を投稿し,これも近日中に出版される予定となっている.このような研究により日本列島でのこの時期の哺乳類の絶滅の様相も従来よりかなり明らかになってきた.一方,中国では海外共同研究者の協力を得て,北京の研究機関ばかりでなく,浙江省にも出向いて化石産地の現地調査を行い,第四紀哺乳類化石とそれに関連する資料を収集した.さらに台湾でも海外共同研究者の協力を得て,第四紀哺乳類化石の新産地の調査を精力的に行うとともに,沖縄県産の化石の比較研究を現地の研究機関で行った.これらのほか,平成22年度には韓国にも出向いて,旧石器考古学とそれに関連する分野の国際シンポジウムで研究発表を行うとともに,現地研究者の協力を得て朝鮮半島のデータの収集や化石標本の観察などを行った.平成22年度に引き続き,本年度も北は青森県から南は沖縄県におよぶ日本各地の第四紀哺乳類化石産地(遺跡を含む)で,産出化石と化石産出層の調査を行い,更新世から完新世にかけての動物相の変遷についてのデータを収集した.特に沖縄県では精力的に調査を行い,日本本土との比較をとおして,琉球列島の島々のような小さな島嶼での絶滅パターンの特徴を明らかにすべく,データの収集に努めた.これまでの研究成果の一部は,研究発表欄に記載したように,平成23年度に国際誌に2件の論文として公表したほか,旧石器考古学の国内専門誌にも1件の論文として公表している。また,研究成果の一部については,国内での学会や研究集会でも何度も発表を行った,特に沖縄県での研究成果は他分野の研究者の関心も高く,琉球列島に関する研究集会に招待を受けて研究発表を行った.海外での研究活動としては,海外共同研究者の協力を得て,中国の研究機関で標本調査や研究資料収集を行った,台湾でも海外共同研究者の協力のもと,現地での発掘調査と博物館などの研究機関での標本調査や研究資料収集を行った.台湾での研究成果は,台湾ではじめての洞窟での本格的な発掘調査で数多くの新知見が得られたことや,地理的に近い琉球列島の哺乳類化石研究に役立つデータが数多く得られたことなどであり,今後国際シンポジウムや国内の学会で成果の一部を発表する予定である.

このような研究活動のほか,第四紀後期の哺乳類の絶滅現象について,一般の人々の理解を深め,研究成果をより多くの人々に普及するため,このような現象が古くから研究され,その成果が多くの本にまとめられている欧米で研究例を翻訳する試みも開始した.東アジアでの絶滅現象の解明にむけて,そのような先例を深く理解しておくことは重要と考えられるからである.次年度には1冊の翻訳を完成させて.その後に出版する予定である.平成23年度に引き続いて、本年度も北は青森県から南は沖縄県におよぶ日本各地の第四紀哺乳類化石産地や遺跡の現地調査と産出化石の系統分類学的研究を行うとともに、研究協力者の協力なども得て、化石骨を試料とした年代測定を実施し、多くの新しい年代値を得た。そのような研究活動で得たデータをもとに、後期更新世から完新世にかけての動物相の変化、特にその中で起った絶滅現象の実体を明らかにすべく、データをまとめている。平成23年度以降、特に精力的に調査を行っている琉球列島では、これまでに知られていなかった新しいデータが数多く得られ、それを日本本土のものと比較することによって、そこで起った絶滅現象が日本本土のものと時期的にも内容的にもかなり異なったもので、人類の活動の影響を強く受けている可能性が高いことが推定された。現在、そのような成果を論文化すべく準備を進めている。琉球列島と地理的に近い台湾での調査もこれまでに引き続いて実施し、これまで知られていなかった台湾での後期更新世から完新世にかけての動物相変化と絶滅現象の実態解明に向けて、おおよその見通しをつけることができた。中国での調査も平成23年度に引き続いて行ったが、本年度は現地調査を行わず、中国科学院古脊椎動物古人類研究所と動物研究所での標本調査と、本研究に関連するデータの収集、現地研究者との意見交換や情報交換などに研究活動をとどめた。平成23年度から第四紀の哺乳類の絶滅現象についての知識を一般に普及することと、本研究の成果と比較検討する目的で欧米の研究書の翻訳を行い、本年度末で1冊の翻訳をほぼ完成し、近日中に出版予定となっている。国内での現地調査や標本の調査,研究資料収集など,これまでの実績報告書に記載したようにほぼ計画どおりに進捗している,海外での現地調査や標本調査や研究資料収集なども,計画どおりに海外共同研究者の協力が得られ,順調に進んでいる。研究成果も,本研究開始後2年目からは学会や研究集会で積極的に公表するようにしているが,論文については投稿後,出版まで長い期間を要する場合があり,かならずしも成果が十分に公表できているわけではないので,その点については今後改善の方策を考えたい,一般市民向けの書籍や翻訳本の刊行については,ほぼ順調に準備が進んでいる.24年度が最終年度であるため、記入しない。国内・海外での現地調査や標本調査,研究資料収集などは,これまで順調に推移してきたので,これまでどおりに行っていく.そのような研究活動で集まったデータを本年度にはまとめて行きたい.海外での現地調査の中で,中国での調査では,従来の現地研究者による研究には化石産出層の層序や年代,化石の分類に問題点が多いことが明らかになってきたので,海外共同研究者の協力を得て問題点を整理し,それに対する対処法を検討し,今後の中国での研究の進展をはかる方策を検討していきたい.24年度が最終年度であるため、記入しない。
エクソソーム解析による尋常性白斑の発症メカニズム解明と新規治療への応用

(1)尋常性白斑病変部皮膚から単離してきたケラチノサイトの初代培養培地の解析:本研究に書面にて同意が得られた大阪大学市立大学付属病院と連携皮膚科クリニック皮膚科外来通院中の尋常性白斑患者(白斑病変部)および同年代健常人の皮膚を3mmパンチで皮膚組織を採取して、表皮ケラチノサイトを単離した。その後、無血清ケラチノサイト培地とCollagen-coated Dishにて37°Cインキュベーターで4日間培養後、培養上清を回収、Total Exosome Isolation Kit (Thermo Fisher社)によりエクソソームを濃縮、回収した。得られたエクソソームをエクソソームマーカー(CD63、Alix、Tsg101など)に対する抗体を用いてウェスタンブロッティグ、さらに、この画分を電子顕微鏡で観察し、直径30100nmの二重膜顆粒であることを確認できた。確認されたエクソソームについて、microRNAを抽出と精製を行った。(2)尋常性白斑患者病変部位から皮膚サクションブリスター液の解析:本研究に書面にて同意が得られた大阪大学市立大学付属病院と連携皮膚科クリニック皮膚科外来通院中の尋常性白斑患者(白斑病変部、健常部)および同年代健常人の皮膚を表皮水疱(サクションブリスター)を作成してもらった。注射針でサクションブリスター液だけを回収し、Total Exosome Isolation Kit (Thermo Fisher社)によりエクソソームを濃縮、回収できた。得られたエクソソームをエクソソームマーカー(CD63、Alix、Tsg101など)に対する抗体を用いて同様にウェスタンブロッティグ、この画分を電子顕微鏡で観察し、直径30100nmの二重膜顆粒であることを確認した。確認されたエクソソームについて、microRNAの抽出と精製を行った。臨床検体からの培養培地やサクションブリスター液を用いて、高精度のエクソソームを抽出と精製するため、いろんな回収方法を試して評価してみる必要がありまして、少し時間がかかりました。網羅的解析により候補遺伝子、タンパク質を同定し、in vitro機能解析上記網羅的microRNAとプロテオーム解析で遺伝子やタンパク質発現プロファイリングにより、申請者らがこれまで培ってきた解析技術を用いて、尋常性白斑表皮エクソソームに高発現/低発現するタンパク質を同定する。具体的には、サブトラクトされたタンパク質について、Gene Ontologyに基づく分類、およびIngenuity Pathways Analysis (IPA)ソフトウェアを用いたhypothetical network解析を行う。さらにターゲットとした疾患関連タンパク質を決定できれば、ヒト皮膚表皮正常メラノサイト(HEMn-MPs)を用いて、標的タンパク質の発現異常の色素細胞への傷害性(色素産生能の低下、色素細胞の死滅)をin vitroにて機能解析する。また、外用療法、紫外線治療などの標準的治療介入をされた患者皮膚組織よりも同様な方法でエクソソームを回収し、プロテオーム解析より同定した疾患関連タンパク質の発現を確認する。その後、得られた解析結果と症状改善度、活動性に有無などの臨床データを照合させることにより、疾患の発症機構そして治療効果に関わるエクソソーム内分子の同定に繋げたい。

具体的には、サブトラクトされたタンパク質について、Gene Ontologyに基づく分類、およびIngenuity Pathways Analysis (IPA)ソフトウェアを用いたhypothetical network解析を行う。さらにターゲットとした疾患関連タンパク質を決定できれば、ヒト皮膚表皮正常メラノサイト(HEMn-MPs)を用いて、標的タンパク質の発現異常の色素細胞への傷害性(色素産生能の低下、色素細胞の死滅)をin vitroにて機能解析する。また、外用療法、紫外線治療などの標準的治療介入をされた患者皮膚組織よりも同様な方法でエクソソームを回収し、プロテオーム解析より同定した疾患関連タンパク質の発現を確認する。その後、得られた解析結果と症状改善度、活動性に有無などの臨床データを照合させることにより、疾患の発症機構そして治療効果に関わるエクソソーム内分子の同定に繋げたい。
学習者の個別学習データに基づく学習理解・進捗状況を指導者に可視化する手法の開発

ICTを活用した個に応じた学習活動において,個別学習支援システムに蓄積された学習履歴データを,専門的な知識や技術を要さずに,学校教員が学習者一人ひとりの学習特性を視覚的に把握できるシステムを開発した。教員養成学部生を対象に,学習履歴データから学習者の学習特性を分析する手法を検討したところ,学習者がどのようなトライ&エラーを繰り返してきたのかを可視化することで,教師は学習者の学習特性を把握できるようになるとわかった。また,単なる正誤の学習データのみではなく,テキストマイニング手法を用いた学習者の自由記述の評価やマルチメディアを活用した二次元的なデータ蓄積手法も有用であることを明らかにした。個別学習支援システムを用いて学習履歴データを蓄積するために必要な学校教室環境の課題について調査した。学校教員らへの聞き取りや物理的な調査の結果,学習情報端末の新規導入時には,無線LANモジュールの高性能化に伴い,既存無線LAN接続環境に不具合が生じ学習情報端末が接続できなくなる可能性を明らかにした。学習履歴の視覚化にあたってはICT活用環境整備は必須であり,ある程度の年数を経た学習環境下において新たな学習情報端末などを整備する際には,既存環境の見直しを行う必要がある。その際には,無線LAN規格の高度化やネットワーク帯域の見直し,無線LANアクセスポイントの設置場所の再考などがポイントとなることを明示することができた。続いて,学習履歴データから学習者の学習特性を表示するための,いわゆる学習分析の方法を検討するため,教員養成学部生を対象に,教育実習でのICT活用教育に関するアンケート調査を実施した。その結果,学校現場でICT活用するためには,ICT機器を積極的に活用している学校教諭らの指導を受けることや実習生自身の持つICT機器を用いて体験的に学習する活動が有用であったことが明らかになった。教育実習生らの学習成果は,単純な知識の詰込みではなく,いわゆるトライ&エラーによる体験的な学習活動に基づいていた。学習履歴を視覚化するにあたっては,学習者がどのようなトライ&エラーを繰り返してきたのかを教師が把握することが重要であり,その経緯を視覚化することで学習者の学習特性を学校教員が把握できるようになると考えられた。学習履歴データを収集するための学校教室環境の要件や学習者の学習特性を表示するための必要な要件を明らかにし,任意の学習者の学習履歴を教師画面上で視覚化する機能の設計を行う段階までは完了した。しかし,当初計画にあった既存の個別学習支援システムに実装しその機能を評価する段階は完了していないため,やや遅れていると判断した。試行の結果,学校教員は個々の学習者の学習過程を把握することができるようになったとともに,当該学習集団における正誤の割合や誤答傾向などを確認し,学習者の学習進度や理解状況に応じて適切に学習支援を行うことができるようになった。1学習履歴データの蓄積手法について,教育実習生のICT活用授業記録の蓄積をもとにその有用性を検討した。具体的には,教育実習生にICT活用授業時における困ったことやトラブルなどを設計したデータセットに基づいて記録・蓄積してもらい,教育実習生の学習状況の分析を試みた。データマイニングを通じて,教育実習時におけるICT活用の主なトラブルの要因を整理し,教育実習生が教育実習のなかで何を学んだのか,また今後の課題について明らかにすることができた。さらに,全天球ビデオカメラを用いた動画データの記録収集・蓄積を試み,テキストベースだけではなく,マルチメディアを活用した二次元的なデータ蓄積手法における有効性も明らかにすることができた。2学習者の学習特性分析について,教育実習生の教育実習前後におけるICT活用指導力の変化をもとに検討した。ICT活用指導力チェックリストに基づき記録・蓄積されたデータの分析から,教育実習の過程において,「教材研究や指導の準備・評価にICTを活用する能力」と「授業中にICTを活用して指導する能力」の2つの能力に飛躍的な向上があったことを明らかにした。教育実習でのICT活用必修化による学習効果を明らかにすることを通じて,データマイニング技術を利活用することによって学習成果を可視化し学習特性の解析に資することを示唆した。蓄積された学習履歴データから学習者の学習特性や任意の学習者の学習履歴を教師画面上で視覚化する機能を既存の個別学習支援システムに実装する。そして,実際の学校教育現場に導入し,試験運用と評価および機能改良を行う。教育工学
キメラマウスを用いた下垂体性小人症発症機構の解析

本研究では、下垂体性症人症マウスミュ-タントと正常マウスとのキメラマウスを作製し、キメラ下垂体のキメリズムの解析から下垂体前葉細胞の細胞系譜を解析し、これを基盤にし、成長ホルモン産生細胞分化に於ける微小環境を解析する事を目的としている。本年は、以下に述べるような実績を上げた。1)Snell下垂体性小人マウス(dw)、成長ホルモン単独欠損littleマウス(lit)及び先天性甲状腺機能低下症マウス(hyt)を米国ジャクソン研究所より導入し、繁殖を続け、各系統ともにキメラ作製用動物群をほぼ確立した。2)C3H【tautomer】BALB/cキメラを作製し、その下垂体前葉細胞の細胞系譜の解析に着手した。その為、先ず第一にマウス系統特異抗原に対する単抗体の作製を行ないC3H系統を特異的に認識する単抗体(この抗体はBALB/c,AKR,C57BLなどの近交系マウス細胞は認識しない)を産生するハイブリド-マ(17ー6,18ー15)の2細胞株を樹立し、次にそれを用いた免疫組織学的手法を確立した。その結果、キメラマウスを構成する多くの組織に於いてそのキメリズムを組織レベルで解析できた。他組織と同様に下垂体前葉、中葉、後葉でもまた、双方の系統の細胞が入り混ざっていた。現在、各前葉細胞の産生するホルモンに対する抗体を用いて細胞系譜を解析中である。3)現在進行中であるものとして、1)で確立したマウスを用いて、正常マウス間でキメラマウス作製を試みている。
テロメアとヘリケースの染色体維持における新規連係機構の解明

分裂酵母テロメア結合蛋白質Pot1とヘリケースRqh1の二重変異株や、テロメラーゼTrt1とヘリケースRqh1の二重変異株が微小管阻害剤TBZに感受性になる機構の解明を試みた結果、pot1 rqh1二重変異株やtrt1rqh1二重変異株では、テロメアでの組換え中間体が蓄積したまま、染色体分配が進行することで、染色体分配が阻害されることがTBZ感受性の原因であることが示唆された。染色体末端テロメアの維持は、がん細胞の無限増殖に必須である。そこでテロメアをターゲットにした新しいがん治療法の確立を目指して、テロメアーゼ阻害剤の開発などが行われている。しかし、テロメラーゼ阻害剤は即効性がないことが問題である。テロメア維持阻害と別の薬剤の組み合わせによってテロメア維持機構を瞬時に阻害することができれば、テロメアをタッゲットにした即効性のある抗がん剤治療法の開発につながることが期待できる。我々は分裂酵母Pot1とRqh1二重変異が微小管重合阻害剤に高感受性になることを発見している。しかし別の研究室がらpotlrqh1二重破壊株が合成致死であるという論文が報告された。そこで本研究ではどのような時にpotlrqh1二重破壊株が合成致死になるのかを調べた。その結果、pot1完全欠損とrqh1完全欠損の二重変異株は合成致死であるが、pot1完全欠損とrqh1ヘリケース欠損変異株(以降rqh1-KA株)の二重変異株は生育可能であることを発見した。さらにpot1挿入破壊株とrqh1完全欠損株の二重変異株も生育可能可能であることを発した。このことからpot1挿入破壊株は何らかの断片が発現していることが示唆された。次にpot1と同様に破壊するとテロメアを急激に失うことが報告されているstn1とrqh1-KA株との二重変異株が作成可能であるのかを調べたところ、作成可であることがわかった。さらにこのstn1とrqh1-KAの二重変異株のテロメア構造はpotlrqh1二重変異株とは違うことがわかった。この違いをさらに解析することで、pot1とstn1のテロメアにおける機能の違いを解明でさる可能性が示唆された。テロメア維持阻害と別の薬剤の組み合わせによってテロメア維持機構を瞬時に阻害することができれば、テロメアをターゲットにした即効性のある抗がん剤治療法の開発につながることが期待できる。我々は、pot1 rqh1二重変異株が微小管阻害剤に感受性になることを発見している。テロメア間での相同組換え中間体が染色体分配時に存在することで姉妹染色分体がつながったまま染色体分配が進行することで、染色体分配を阻害することが微小管阻害剤感受性の原因となる可能性が考えられることが明らかとなり、学術雑誌に発表した。一方trt1 rqh1二重変異株も微小管阻害剤に感受性になることを発見しているがその原因はわかっていない。そこでpot1 rqh1二重変異株と同様にtrt1 rqh1二重変異株においても組換え中間体を持ったまま染色体分配がおこるかどうかをRPAフォーサイを追跡することで行った。その結果、pot1 rqh1二重変異株と同様にtrt1 rqh1二重変異株もRPAフォーサイを持ったまま染色体が分配されることがわかった。染色体末端には、テロメアと呼ばれる領域が存在する。テロメアはDNA繰り返し配列とそれに結合する蛋白質から構成されており、細胞の老化やがんと密接に関係している。我々は、分裂酵母テロメア結合因子pot1の破壊株とヘリケースRqh1の点変異株(rqh1-hd株)との二重変異株(pot1 rqh1-hd株)では、テロメアが組換えで維持されることや、微小管阻害剤感受性になることなどを報告している(Mol.Cell.Biol.2011)。本年度は、このpot rqh1-hd株のM期進行に異常があるのかどうかを調べた。そのために、微小管蛋白質に蛍光蛋白質を融合させて、微小管の伸長をライブ観察した。その結果、pot1 rqh1-hd株では、M期の進行がメタフェーズで停止する頻度が高いことがわかった。次に、M期で停止しているpot1 rqh1-hd株でスピンドルチェックポイントが活性化されているかどうかを調べた。方法は、スピンドルチェックポイントが活性化されたら分解が阻害されるセキュリン蛋白質に蛍光蛋白質を融合させた株を用いた。その結果、M期で停止しているpot1 rqh1-hd株では、セキュリンが分解されないままでいることを発見した。

また、pot1 rqh1-hd株のM期の進行がメタフエーズで停止する現象は、スピンドルチェックポイント因子であるMad2やBub1の破壊で抑圧された。これらのことから、pot1 rqh1-hd株は、スピンドルチェックポイントが活性化されることがわかった。
数理パズル「タングラム」の問題解決過程の解明と教育応用への領域横断的取り組み

第一に、パズルゲーム・タングラムの洞察的問題解決に、主観的見通し評価と潜在的価値評価の多重システムの関与を示した。成果はThe 14th European Congress of Psychologyで報告した。第二にタングラムを協働で解決させ熟考を促すと、選択肢を厳選して熟議により解決率が上昇した。成果はThe 32nd Annual meeting of the BPS, Cognitive Psychology sectionで報告した。第三にタングラムを解くソフトウェア開発を目指し、パズルのピースを2個に限定した解決アルゴリズムを福島高等工業専門学校研究紀要第56巻に公開した。本研究は数理パズル「タングラム」の洞察的問題解決を実験心理学の立場から検討するとともに、計算理論的アプローチによる解決プログラムの開発と、高等数学の創造教育への応用を目指す、領域横断的取組である。26年8月に申請者、計算科学の大槻氏、数学教育の新井氏の三者で研究会を開催し、以下の点を確認した。1、タングラムにおける制約の検討では、過去の実験結果と記録画像を再分析する。2、眼球運動の測定が可能になったため、計画1にある熟達化の実験に、計画2の眼球運動の測定を前倒しで組み込む。3、創造教育への応用を目指す上で、協同学習をテーマに導入する。4、解決プログラムは、ピースの数を減らした条件から始める。1は、過去の未発表データに申請者がLinear mixed-effects modellingによる分析を実施中で、成果は27年7月の14th European Congress of Psychologyに発表予定である(登録済み)。2は、3種類のタングラム課題に同一の被験者が繰り返し取り組む実験を実施し、27年3月までに11名の参加者からデータを取得した。27年7月までにはさらに10名の実験を行う。3は、過去のデータと統合させる目的で26年8月に追加実験を行い、成果の一部は秋田大学教育文化学部教育実践研究紀要第37号に掲載された(平成27年3月発行)。さらに、本実験データの一部はThe British Psychological Society, 32nd Cognitive Psychology Section Annual Conferenceにおいて発表予定である(登録済み)。4は、大槻氏がタングラムのピースを23個に限定した場合でのプログラムを完成している。第一に「洞察的問題解決における潜在的評価と主観的評価」をテーマに解決への自信,作業の適切性評価,ピース操作の関係についてデータを再分析した。結果,これらは独立した処理系として問題解決に寄与することが明らかになった。成果は最終年度に14th European Congress of Psychology (2015年7月)で報告した。第二に協働学習のスキル育成や教授法の提案を目指し、「タングラムを活用した協働的問題解決」の実験を行った。ペアで作業する協働条件と単独で取り組む個人条件を設定し,また、熟考を求めた熟考群と,休憩を求めた統制群を設けた。結果,熟考を求めることで解決率が高まり,協働条件では解決時間が遅延した。成果は最終年度にBritish Psychological Society, 32nd Annual Cognitive Psychology Section Conference(2015年9月)で報告した。また「協働の形態が洞察的問題解決に及ぼす影響ー数理パズル"タングラム"を用いた検討」として秋田大学教育文化学部教育実践研究紀要第37巻(2015年3月)に掲載された。第三に「多様な制約の特定と眼球運動の解析」について取り組んだ。タングラムの多様な課題のうちライオン、矢印,アヒルの3課題で実験を行い,各制約の特定を目指した。作業者の眼球運動も測定し、課題解決中の視線移動を解析した。第四に、タングラム問題をソフトウェア上で解く基本アルゴリズムの設計を目指し、計算幾何学からのアプローチを試みた。第一歩として2個のピースに限定した組み合わせを解くアルゴリズムを開発した。成果は最終年度に「パズルゲーム"タングラム"解法の基本アルゴリズム」として福島工業高等専門学校研究紀要第56巻(2016年03月)に掲載された。眼球運動の測定は、実験環境の調整、解析プログラムの開発など技術的な課題がいくつか存在しており、27年度からの実施を計画していた。しかし、開発メーカーの協力でこうした問題が早期に解決し、26年度中に実験を軌道に乗せることができた。また、本助成を活用して実験者を雇用することで、27年度早々に第一段階の実験を終了する予定である。一方で、本計画で購入したソフトウェアを導入することで、過去に取得した実験データに対してより詳細なデータ抽出と分析を実施することができるようになった。この恩恵により、洞察過程を解明する鍵となる制約の変容について、新規に実験を行わなくとも過去の実験画像から新たに行動データを抽出し、より包括的な統計解析を実施、検討することができる。現在、分析は進行中で、27年中に国際学会での報告が可能である。これらの方法上の改善により、当初は計画にはなかったタングラムの協同学習へとテーマを拡張できた。

これはタングラムを使用した学習場面を想定した実験であり、27年度中に検討する予定だった高等数学における創造性教育へのタングラムの活用の基礎研究となっている。過去に行った実験を組み込むことで迅速に成果へとつなげることができた。この研究をもとに、26年度中に査読付き論文1編の掲載が決定し、27年度中の国際学会での発表を計画している。また、計算理論からのタングラムの解決プログラムも部分的に完成しており、27年度中の論文化を計画している。以上のように、本計画は実験の実施状況、テーマの広がり、成果の報告すべてにおいて当初の計画以上に進展している。実験心理学認知科学27年度の推進方策は以下の通りである。1、眼球運動を測定した実験データの解析とその成果報告。2、Linear mixed-effects modellingによるタングラムの解決過程の検討と、国際学会での報告。3、タングラムを使用した協同学習に関する研究の国際学会での報告。4、計算理論をもとに開発したタングラムの解決プログラムを発展させ、そのソフトウェアの解決過程とヒトが行う問題解決の特徴とを比較し、成果報告につなげる。14th European Congress of Psychologyへの発表登録と参加費の振り込みを26年度内に行い、その分を算入して予算を組んだが、学会自体は27年度の開催であるため、予算の使用は27年度になった。
嚥下リハビリテーションを目的とした喉頭運動の非接触型測定装置の開発

1.喉頭運動検出器の設計と製作反射型フォトセンサは,近赤外光ダイオードとフォトダイオードとの対からなり,反射面で反射した光をフォトダイオードが検出する.その反射光の強度がセンサ/反射面間距離の2乗に反比例することを利用すれば,反射面までの距離を推定できる.このセンサを1次元配列し,反射面までの距離を同時測定すれば,面の1次形状が測定できる.はじめに,12個の反射型フォトセンサを縦に配列した検出部と,このセンシング部を前頭部に固定するアダプタを製作した.2.健常者の水嚥下時における喉頭運動の測定・運動パラメータの決定健常者に水10[ml]を一息でのんでもらい,そのときの喉頭運動を測定する.被験者は,実験の意図と手順を十分理解し,かつ実験に同意した5人とした.従来の研究結果を参考にして,新しい喉頭運動の分析パラメータを決定した.従来の分析方法は,喉頭の上下位置を8[mm]間隔で区切り,各区間の移動時間をパラメータとしていた.そこで,本研究でも便宜的に挙上運動を4相に区切り,時間パラメータとした.まず,嚥下開始時を顎二腹筋の筋活動開始時とし,t_0とした,この時刻t_0における位置から喉頭が5[mm]挙上した時点をt_1,同様に,t_0における位置から10mm,15mm,20mm挙上した時点をそれぞれ,t_2,t_3.t_4とした.これらの時刻{t_0,...,t_4}から,喉頭運動の時間パラメータ{t_<0,1>,t_<1,2>,t_<2,3>,t_<3,4>}を算出した.実験回数は5回とした.実験手順は以下の通り:1)被験者に水を口に含んでもらい,合図とともに一息で飲んでもらう.2)嚥下時の喉頭運動・顎二腹筋筋電図,嚥下音を同時測定する.3)測定データから分析パラメータを算出する.各被験者の5回の測定データから,分析パラメータ{t_<0,1>,t_<1,2>,t_<2,3>,t_<3,4>}の全被験者に関する平均値と標準偏差を算出した.それぞれ0.31±0.09[s],0.11+0.07[s],0.06±0.03[s],0.04士0.02[s]であった.この結果は喉頭運動の始め遅く,徐々に速くなる特徴と一致した.1.喉頭運動検出器の設計と製作反射型フォトセンサは,近赤外光ダイオードとフォトダイオードとの対からなり,反射面で反射した光をフォトダイオードが検出する.その反射光の強度がセンサ/反射面間距離の2乗に反比例することを利用すれば,反射面までの距離を推定できる.このセンサを1次元配列し,反射面までの距離を同時測定すれば,面の1次形状が測定できる.はじめに,12個の反射型フォトセンサを縦に配列した検出部と,このセンシング部を前頭部に固定するアダプタを製作した.2.健常者の水嚥下時における喉頭運動の測定・運動パラメータの決定健常者に水10[ml]を一息でのんでもらい,そのときの喉頭運動を測定する.被験者は,実験の意図と手順を十分理解し,かつ実験に同意した5人とした.従来の研究結果を参考にして,新しい喉頭運動の分析パラメータを決定した.従来の分析方法は,喉頭の上下位置を8[mm]間隔で区切り,各区間の移動時間をパラメータとしていた.そこで,本研究でも便宜的に挙上運動を4相に区切り,時間パラメータとした.まず,嚥下開始時を顎二腹筋の筋活動開始時とし,t_0とした,この時刻t_0における位置から喉頭が5[mm]挙上した時点をt_1,同様に,t_0における位置から10mm,15mm,20mm挙上した時点をそれぞれ,t_2,t_3.t_4とした.これらの時刻{t_0,...,t_4}から,喉頭運動の時間パラメータ{t_<0,1>,t_<1,2>,t_<2,3>,t_<3,4>}を算出した.実験回数は5回とした.実験手順は以下の通り:1)被験者に水を口に含んでもらい,合図とともに一息で飲んでもらう.2)嚥下時の喉頭運動・顎二腹筋筋電図,嚥下音を同時測定する.3)測定データから分析パラメータを算出する.各被験者の5回の測定データから,分析パラメータ{t_<0,1>,t_<1,2>,t_<2,3>,t_<3,4>}の全被験者に関する平均値と標準偏差を算出した.それぞれ0.31±0.09[s],0.11+0.07[s],0.06±0.03[s],0.04士0.02[s]であった.この結果は喉頭運動の始め遅く,徐々に速くなる特徴と一致した.

1.喉頭運動検出器の設計・製作反射型フォトセンサは,近赤外線発光ダイオードとフォトダイオードとの対からなり,反射面で反射した光をフォトダイオードが検出する.その反射光の強度がセンサ/反射面間距離の2乗に反比例することを利用すれば,反射面までの距離を推定できる.このセンサを1次元配列し,反射面までの距離を同時計測すれば,面の1次元形状が測定できる.はじめに,12個の反射型フォトセンサを縦に配列した検出部と,このセンシング部を前頸部に固定するアダプタを製作した.2.測定システムの構築センサの駆動・検出回路を自作し,A/Dコンバータを介してパソコンとオンラインで接続した,さらに,データの収集と表示のためのコンピュータ・プログラムを開発した.3.筋電図・嚥下音との同時測定システムの構築筋電計と嚥下音測定装置は従来のものを再利用した.両データともA/D変換器を介してパソコンに入力し,喉頭運動データと同時測定する.データ処理・分析を行う次の3つのプログラムを開発した:1)全データを表示するプログラム,2)喉頭運動検出器データ列を補間することにより喉頭位置を検出するプログラム;3)喉頭位置・筋電図,咬合音の同時測定データから運動パラメータを算出するプログラム.さらに,基礎実験として,1)センサのキャリブレーション,2)垂直移動距離の測定精度評価,3)水平移動距離の測定精度評価を行った.その結果,垂直移動距離の精度は,分解能0.16mm,絶対誤差0.12mm,水平移動距離の精度は,分解能0.55mm,絶対誤差0.43±0.34mmであった.これらの精度は,本装置の使用目的に対して必要かつ十分である.1.健常者の水嚥下時における喉頭運動の測定・運動パラメータの決定健常者に水10mlを一息でのんでもらい,そのときの喉頭運動を測定する.被験者は,実験の意図と手順を十分理解し,かつ実験に同意した5人とした.従来の研究結果を参考にして,新しい喉頭運動の分析パラメータを決定した.従来の分析方法は,喉頭の上下位置を8mm間隔で区切り,各区間の移動時間をパラメータとしていた.そこで,本研究でも便宜的に挙上運動を4相に区切り,時間パラメータとした.まず,嚥下開始時を顎二腹筋の筋活動開始時とし,t0とした.t0における位置から喉頭が5mm挙上した時点をt1,同様に,t0における位置から10mm,15mm,20mm挙上した時点をそれぞれ,t2,t3,t4とした.これらの時刻{t0,...,t4}から,喉頭運動の時間パラメータ{t0,1,t1,2,t2,3,t3,4}を算出した.実験回数は5回とした.実験手順は以下の通り:1)被験者に水を口に含んでもらい,合図とともに一息で飲んでもらう.2)嚥下時の喉頭運動・顎二腹筋筋電図,嚥下音を同時測定する.3)測定データから分析パラメータを算出する.各被験者の5回の測定データから,分析パラメータ{t0,1,t1,2,t2,3,t3,4}の全被験者に関する平均値と標準偏差を算出した.それぞれ0.31±0.09[s],0.11±0.07[s],0.06±0.03[s],0.04±0.02[s]であった.この結果は喉頭運動の始め遅く,徐々に速くなる特徴と一致した.2.健常者の粘性水嚥下時における喉頭運動の測定実験プロトコル作成嚥下障害者は一般的に嚥下を容易にするために飲料に粘性を付着させ食事をする.そこで,基礎データの測定として,健常者の粘性水嚥下時の喉頭運動を測定することにした.被験者は,実験の意図と手順を十分に理解し,かつ実験に同意した10人とし,実験回数は5回とする.実験手順は以下の通り:1)被験者に粘性水を口に含んでもらい,合図とともに一息で飲んでもらう.2)嚥下時の喉頭運動・顎二腹筋筋電図,嚥下音を同時測定する.3)測定データから分析パラメータを算出する.