hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
小胞体膜タンパク質の増幅に伴う酵母小胞体膜合成制御機構の解明

小胞体は真核生物細胞における分泌,脂質合成などの研究では頻繁に対象とされ,その機能が詳細に調べられているが,その形態と増幅の機構は意外に知られていない。知申請者らは炭化水素鎖を酸化する酵母Candida maltosaの酵母小胞体膜酵素であるチトクロームP450Alk1をコードする遺伝子C-ALK1をSaccharomyces cerevisiaeで大量生産した場合に,あるいはまた,小胞体で蓄積する変異型分泌蛋白質大量に増幅生産した場合に,独特な形態をした小胞体膜の増幅があることを知り,そのような小胞体の形成の機構を解明すれば,上記のような理解を得られるのではないかという期待を持ち,研究を行ったものである。また、小胞体のような膜構造化の消長の研究には、膜脂質の代謝との関係を欠かすことができない。本研究は、そこで、酵母の膜脂質代謝に〓わる解析も行った。本研究の結果、目標とするところを全て明らかにすることができたわけではないが、いくつかの成果を得ることができた。1)膜脂質の合成という観点から、小胞体膜蛋白質の増幅による小胞体の増幅の過程で、必ずしも新規の膜リン脂質の合成が促進されているのではない。2)C-ALK1の増幅による小胞体の増幅に小胞体キナーゼIRE1が必要であるかないかは、酵母菌株の遺伝的背景による。3)小胞体に蓄積する変異型分泌蛋白質の分解は必ずしも全てがプロテアソームに依存しているわけではなく、他に分解系があると思われる。4)酵母に生育に必要な量のリン脂質を取り込ませ、その影響を調べる系を作製した。これによって脂質代謝に関する遺伝子変異株を単離し、脂質代謝に分子遺伝学的な解析を加えることができるようになった。本研究計画では、申請者らの有する酵母小胞体膜タンパク質チトクロームP450ALKの誘導発現系を利用し,この膜タンパク質の高生産に伴う酵母小胞体膜の増幅過程を生化学的に分析し,またその過程に関わる遺伝子及び遺伝子変異株を単離し,これらを分子遺伝学的・生化学的手法を用いて詳細に検討することにより,小胞体膜の増幅・形成のしくみの解明に至る新たな知見を得る。本年度に計画した実験のうち,(1)細胞全体のリン脂質合成を、[32P]正リン酸による均一標識により全体の組成の変化を検討し、パルス標識によって各リン脂質の合成速度を検討した。その結果,小胞体増幅条件下でリン酸標識の促進は見られず,かえって低下していることが観察された。長時間の標識では小胞体増幅条件の細胞で対照に比較して2倍に近い標識が見られた。この意外な結果はリン脂質の代謝回転の変化が重要であることを示唆する。本年度は以下のことを明らかにし、論文として公表した。(1)P450ALKを酵母Saccharomyces cerevisiaeで高生産する際に小胞体内腔蛋白質Kar2pとPdi1pの生産が増加していることを見いだした。これらの小胞体内腔シャペロン蛋白質は小胞体膜結合蛋白質キナーゼIre1pの関与するシグナル伝達系によって生産の増加が誘導される。そこでIRE1遺伝子を破壊したところ、上記シャペロン遺伝子の発現の上昇は観察されず、小胞体膜の増加も制限された。

この結果は小胞体の増幅にIre1pの役割が重要であることを示している。(2)細胞質に突き出た側活性領域に変異のあるP450ALKを同様に高発現させたところ、Ire1p欠損変異株でもKar2pの誘導生産が認められた。これは上記の結果と一見矛盾するが、KAR2遺伝子プロモーター領域にある熱ショック応答配列(HSE)によることが明らかになった。変異を有する膜蛋白質がなぜKar2pを誘導するのかわからないが、このP450ALKの高生産が野生型のものと異なり、karmellae状の膜構造を誘起することと関わっている可能性がある。本研究計画では、申請者らの有する酵母小胞体膜タンパク質チトクロームP450ALKの誘導発現系を利用し,この膜タンパク質の高生産に伴う酵母小胞体膜の増幅過程を生化学的に分析し,またその過程に関わる遺伝子及び遺伝子変異株を単離し,これらを分子遺伝学的・生化学的手法を用いて詳細に検討することにより,小胞体膜の増幅・形成のしくみの解明に至る新たな知見を得る。本年度は以下のことを明らかにし、一部は論文として公表した。P450ALKを酵母Saccharomyces cerevisiaeで高生産する際に小胞体内腔蛋白質Kar2pとPdilpの生産が増加していることを見いだした。さらにDifferential display法によつてKAR2の他にいくつかの遺伝子の転写が誘導されていることを見いだした。それらは、YLR194c、YNL208c、YER175c、YGR124w/ASN2、YFL106c/MDJ1、YGL121cであった。また、一方で転写が抑制されている遺伝子も見いだした。それらはYNL203c、YBR208c、DAL3であった。これらのうち、YLR194cとYNL208cを破壊しても生育に影響無くP450ALKの高生産にも何の影響もなかった。従ってこれらの比較的強く誘導される遺伝子の機能は不明である。今後これらの遺伝子の機能を解析することにより、P450ALK遺伝子の高発現によるER増幅の遺伝的制御が明らかになることが期待される。
アフリカの環境保全型農法における生物間相互作用の解明と害虫管理への活用

近年、東アフリカを中心に環境保全型害虫管理技法として急速に普及しつつある「プッシュ・プル法」について、本手法における作物・害虫・天敵およびそのほかの圃場生物間における各種の相互作用を圃場試験によって解明するとともに、本手法のさらなる普及にむけて改良をこころみた。また、本法に対する農民の認識を調査することにより、本手法の普及要因を明らかにし、他地域や他作物への本手法適用の可能性について検討した。ケニア西部において、プッシュ・プル法をふくむ混作栽培の害虫抑制効果に、捕食性天敵がいかに関与しているのかを明らかにするため、操作実験によって圃場から天敵を除去し、混作区と単作区とのあいだで害虫と天敵の密度を比較した。その結果、トウモロコシの周囲にズイムシ類を誘引するギニアグラスを混作すると、捕食性天敵であるハサミムシ類およびクモ類の個体数が顕著に増加した。また、圃場より天敵を除去すると、ギニアグラス混作区のほうがトウモロコシ単作区よりもズイムシの個体数が増加した。これらのことから、ギニアグラスの混作はズイムシの捕食性天敵の保全に効果があり、これらの天敵の増加がズイムシの個体数を抑制していることが示された。住みかと餌を確保することを除去式操作実験によって明らかにした(小路)。このほか、ケニア西部のトウモロコシ圃場やプッシュ・プル法にける害虫誘引作物として、また牧草として重要なネピアグラスについて、害虫およびその天敵生物の探索を行なうとともに、近年多発が報告されているネピアグラス萎縮病の病原媒介昆虫の探索と同定を行なった(岡島・石川)。なお本研究では、アフリカの研究諸機関に所属する複数の研究者を研究協力者としており、国際学術交流でも一定の貢献を行なっている。その一環として、ケニアにある国際昆虫生理生態学センター(ICIPE)に所属する博士研究員であったC.A.O.Midegaを、2007年度の日本学術振興会外国人特別研究員として研究分担者の高須が受け入れることになった。また、研究代表者の足達をベナンに派遣し、本研究課題にかんする国際熱帯農業研究所(IITA)との共同研究を西アフリカにおいて次年度以降に実施することを、同研究所の上級研究員で本課題の研究協力者であるM.Tamoとのあいだで合意した。1)トウモロコシ畑の周縁植生がズイムシ類害虫とその捕食性天敵の個体群におよぼす影響前年度に引きつづき、ケニア西部において、操作実験によって周縁植生の異なるトウモロコシ圃場から天敵を除去し、害虫の密度を比較した。また、主要な捕食性天敵であるハサミムシ類の捕食能力について、室内実験を行により検証した。これらの実験の結果、ハサミムシ類をはじめとする捕食性天敵の存在によってズイムシ類の個体数は明らかに抑制されているものの、周縁植生がズイムシ類の個体数におよぼす特段の影響は認められなかった(研究分担者:小路、研究協力者:石原北斗)。2)ネピアグラス萎縮病の病原媒介昆虫の探索と同定トウモロコシ栽培で用いられる害虫誘引作物として、また家畜飼料として重要なネピアグラスにおいて、ケニア西部で近年多発が報告されているネピアグラス萎縮病の病原媒介昆虫の探索と同定を行なった。本年度に得られた媒介昆虫の候補となるサンプルから、未記載種1種をふくむウンカ下目7科17種が同定された。サンプルのなかではDelphacodes sp.およびTagosodes sp.が優占的であったが、このうちTagosodes sp.は同属にファイトプラズマ病を媒介する種が知られている(研究分担者:小路・岡島・石川、研究協力者:Z.R.Khan・H.M.Mohamed・藤沼聡)。3)農業・牧畜害虫の捕食寄生性天敵の生理・生態アフリカの農業および牧畜で重要な害虫をふくむ各種の昆虫について、それぞれの捕食寄生性天敵の生活史や繁殖生態にかんする研究を行なった(研究分担者:高須、研究協力者:C.A.O.Midega)。4)シンポジウムの開催本研究課題の研究協力者をふくむアフリカ人研究者2名を日本にまねき、日本応用動物昆虫学会大会の小集会として、「環境保全型害虫管理-日本とアフリカでのとりくみ」を表題にかかげたシンポジウムを開催した。1.混作がズイムシ類害虫とその天敵におよぼす影響ケニア西部において、トウモロコシ圃場における間作および周縁植生の害虫および天敵個体群におよぼす影響を圃場実験により調査した。また、主要な捕食性天敵であるハサミムシ類の捕食能力を室内実験により調査した。これらの実験の結果、間作および周縁植生やハサミムシ類が害虫管理上、ある程度の効果を発揮することが明らかになった(連携研究者:小路晋作、研究協力者:H.Mohamed)。2.ネピアグラス萎縮病の病原媒介昆虫の探索と同定トウモロコシ栽培で用いられる害虫誘引作物として、また家畜飼料として重要なネピアグラスにケニア西部で近年多発生が報告されているネピアグラス萎縮病の病原媒介昆虫の探索と同定を行なった。

その結果、ヨコバイ科のRecilia banda Kramerが媒介昆虫の候補種としてはじめて特定された(連携研究者:小路晋作・岡島秀治・石川忠、研究協力者:Z.R.Khan・C.A.O.Midega・藤沼聡)。3.ケニア西部におけるプッシュ・プル法の普及要因近年、環境保全型害虫管理手法としてケニア西部で急速に普及しているプッシュ・プル法について、その普及要因を明らかにした。農民はプッシュ・プル法の害虫抑制効果のみならず、プッシュ・プル法による土壌肥沃度の増進や牧草類の増収を重視していることがわかった(研究協力者:石原北斗)。4.国際研究者交流アフリカ地域の害虫や天敵をふくむ昆虫標本を数多く収蔵しているフランスおよびスウェーデンの博物館を訪問し、情報を収集した(連携研究者:石川忠)。また、南アフリカで開催された国際昆虫学会議に参加し、アフリカの作物害虫管理にかかわる数多くの研究者と情報交換を行なった(研究代表者:足達太郎、研究分担者:高須啓志、研究協力者:ZR.Khan・C.A.O.Midega)。
小児入院患者における薬剤関連エラーによる健康被害の疫学と費用分析研究

本年度は、昨年度に引き続き精力的に医師レビューを行い、ほぼ全ての一次データについて医師レビューを終えることができた。一次データとは、十分に訓練した看護師レビューワーらによって、研究対象の全患者のカルテを経時的かつ網羅的に調査し収集されたデータであり、患者背景(潜在的リスクファクター)並びに薬剤に関連する詳細な情報、薬剤関連エラー、エラーによる健康被害の可能性が疑われる事象をすべて抽出したものである。一次データの収集方法と、本年度に実施した医師レビューのプロセスは、薬剤関連エラーを科学的、客観的に、かつ再現性高く同定するため、本研究の研究分担者でもある森本らによって確立された(Morimoto et al. Qual Saf Health Care, 2004)方法論に基づき実施した。この方法論に基づき、独立した医師3名で医師レビューを行い、全ての一次データについて薬剤関連エラーの発生及びエラーによる健康被害の発生といった主要イベントの評価と同定を行った。更にこの同定されたエラーや健康被害については、発生段階、原因、予防・緩和可能性、責任職種、責任薬剤、健康被害の重症度などの詳細な評価も行った。次年度はこの医師レビューの判定が一致していない症例や判定困難な症例について、上記3名の医師に加え、有害事象研究のエキスパートである医師1名を追加した計4名の医師によるレビューディスカッションにて全データのイベント評価と同定を行う。データ固定後は、データベースを構築し、薬剤関連エラー及びエラーによる薬剤性有害事象の詳細な分析と共に、それらの費用効果の検討も行う予定である。本研究は、有害事象研究の世界的標準の方法論で実施しており、得られる結果は国際的な比較が可能であり、汎用性もあるため、本邦の医療現場のみならず、医療システムや文化の異なる海外の医療現場にも貢献できると期待される。昨年度より、医師レビューに参加する医師を増員して対応を行なったため、本年度は医師レビューをほぼ終了することができ、おおむね、研究再開後の研究実施計画通りに研究が進展している。次年度も、研究再開後の研究実施計画に従い、研究を実施する。次年度は研究最終年度となるため、予定通りに研究を完遂できるよう、万全の体制を整え研究を進めていく。医療におけるエラーの発生とエラーによる健康被害は、医療安全上の喫緊の課題であるが、我が国の小児医療におけるエラーの現状は未だ明らかでない。又、エラーによって発生する費用が小児医療に及ぼす影響についても検討した報告はない。我々は、エラーの中でも頻度の高い薬剤関連エラーに着目し、我が国の小児入院患者におけるエラー及びエラーにより生じる健康被害の発生頻度とその詳細を、臨床疫学的手法を用いて明らかにすると共に、それらにより発生する費用が小児医療全体に及ぼす影響を分析し、我が国で今後のエラー対策に必要なエビデンスの構築を行うことを目的に、本研究を研究実施計画に基づき遂行した。初年度である平成27年度は、対象施設の対象病棟に設定期間中に入院した全ての入院患者を対象に収集した一次データについて、新たに独立した医師レビューを行った。一次データとは、薬剤関連エラーを科学的、客観的に、かつ再現性高く同定するために、研究分担者の森本らが確立した(Morimoto et al. Qual Saf Health Care, 2004)方法に基づき作成したトレーニングマニュアルを用いて、十分に訓練した看護師レビューワーによって、対象全患者のカルテを経時的かつ網羅的に調査収集されたデータである。研究代表者が薬剤性有害事象研究を行った際に収集したデータを元にしたデータであり、患者背景(潜在的リスクファクター)並びに薬剤に関連する詳細な情報、エラーや健康被害の可能性が疑われる事象をすべて抽出したものである。今年度は上記方法論の判定法に基づき、この一次データについて新たに医師レビューを行い、薬剤関連エラーの発生有無、エラーによる健康被害の評価を行い、イベント同定を進めた。同定されたエラーや健康被害については、更に発生段階、原因、予防緩和可能性、責任職種、責任薬剤、健康被害の重症度などの詳細の評価も行っている。研究計画通りに、一次データの医師レビューは進行しており、薬剤関連エラー発生の有無、並びにエラーによる健康被害の同定を行っている。育児休業取得の為、研究中断中である。本年度はすでに収集を終えた一次データについて、精力的な医師レビューを行った。一次データとは、十分に訓練した看護師レビューワーらによって、研究の対象全患者のカルテを、経時的かつ網羅的に調査し収集されたデータであり、患者背景(潜在的リスクファクター)、薬剤に関連する詳細な情報、薬剤関連エラー、並びにエラーによる健康被害の可能性が疑われる事象をすべて抽出したものである。この一次レビュー収集のためのトレーニングマニュアルと医師レビューのプロセスは、薬剤関連エラーを科学的、客観的、かつ再現性高く同定するために、本研究の研究分担者でもある森本らによって確立された(Morimoto et al. Qual Saf Health Care, 2004)方法に基づき実施している。そのため、得られる結果については国際的な比較も可能であり、本邦の医療現場のみならず、海外の医療現場にも貢献できると期待される。医師レビューのプロセスは、上記方法論の判定法に基づき、この一次データについて、薬剤関連エラーの発生、エラーによる健康被害の発生といった主要イベントの評価と同定を行い、これらの同定されたエラーや健康被害については、更に、発生段階、原因、予防緩和可能性、責任職種、責任薬剤、健康被害の重症度などの詳細な評価を、独立した複数の医師で行うものである。

すでに収集された一次データ量が膨大であり、相当な時間と労力を要するため、本年度は医師レビューの医師を1名増員し、計3名で医師レビューを進めているため、研究は計画通り順調に進行しており、次年度中には医師レビューを終了する見込みである。当初の予定より医師レビューに費やす労力と時間が増加する懸念が生じたため、医師レビューに参加する医師を増員して対応し、概ね研究再開後の研究実施計画通りに研究が進展している。本年度は、昨年度に引き続き精力的に医師レビューを行い、ほぼ全ての一次データについて医師レビューを終えることができた。一次データとは、十分に訓練した看護師レビューワーらによって、研究対象の全患者のカルテを経時的かつ網羅的に調査し収集されたデータであり、患者背景(潜在的リスクファクター)並びに薬剤に関連する詳細な情報、薬剤関連エラー、エラーによる健康被害の可能性が疑われる事象をすべて抽出したものである。一次データの収集方法と、本年度に実施した医師レビューのプロセスは、薬剤関連エラーを科学的、客観的に、かつ再現性高く同定するため、本研究の研究分担者でもある森本らによって確立された(Morimoto et al. Qual Saf Health Care, 2004)方法論に基づき実施した。この方法論に基づき、独立した医師3名で医師レビューを行い、全ての一次データについて薬剤関連エラーの発生及びエラーによる健康被害の発生といった主要イベントの評価と同定を行った。更にこの同定されたエラーや健康被害については、発生段階、原因、予防・緩和可能性、責任職種、責任薬剤、健康被害の重症度などの詳細な評価も行った。次年度はこの医師レビューの判定が一致していない症例や判定困難な症例について、上記3名の医師に加え、有害事象研究のエキスパートである医師1名を追加した計4名の医師によるレビューディスカッションにて全データのイベント評価と同定を行う。データ固定後は、データベースを構築し、薬剤関連エラー及びエラーによる薬剤性有害事象の詳細な分析と共に、それらの費用効果の検討も行う予定である。本研究は、有害事象研究の世界的標準の方法論で実施しており、得られる結果は国際的な比較が可能であり、汎用性もあるため、本邦の医療現場のみならず、医療システムや文化の異なる海外の医療現場にも貢献できると期待される。昨年度より、医師レビューに参加する医師を増員して対応を行なったため、本年度は医師レビューをほぼ終了することができ、おおむね、研究再開後の研究実施計画通りに研究が進展している。本研究では、すでに収集された一次データが膨大であり、医師レビューに相当な時間と労力を要しているため、次年度も引き続き医師レビューを進めていく。また、今後、医師レビューを進めていく中で、本研究に必要な情報が不足しているケースの発生も予測されるため、その場合は、各対象施設で追加の再調査を行う。追加の再調査が大規模に発生する場合には、再調査に必要なレビューワーを新たに雇用する。育児休業終了後は、速やかに研究を再開し、当初の研究計画に従い研究を進めていく。研究再開後の研究実施計画に従い、次年度以降も研究を実施する。
高度教職能力開発におけるナラティヴ・カンファレンス法の教育的意義に関する研究

第一に,臨床的な基礎研究として,生徒指導上及び学習指導上のケース・カンファレンスのデータが,エピソード記録として整理され,本研究の理論仮説が構築された.第二に,理論的な基礎研究として,ナラティヴ・カンファレンス法の理論的枠組みと方法論に関する仮説が構築された.第三に,これらの基礎研究に基づいて,ナラティヴ・カンファレンス法が高度専門職業人を養成するための教師教育カリキュラムの開発にとって持つ教育的意義が,臨床教育学の視点から明らかにされた.今年度は,高度教職能力開発に資するナラティヴ・カンファレンス“NCM"の実際を,教育現場における生徒指導上の実践事例(18件)や,学習指導上の実践事例(6件)への臨床的参画を通して蒐集した。また,この理論とその方法論的な枠組みを明らかにするために,内外における研究資料を蒐集し,その成果を国際学会等で発表した。具体的には,以下の研究活動を遂行した。1:現職教師教育カリキュラムの改善に関する内外の研究文献・資料の収集と整理を行なった。2:対人援助・発達援助活動においてナラティヴ・アプローチを応用した質的研究に関する内外の研究文献・資料の蒐集と整理を行った。1,2の成果は,日本教育学会の特別課題研究委員会(現職教師教育カリキュラムの教育学的検討)における報告書において「ナラティヴ・ベースの教師教育カリキュラム開発の試みー北海道教育大学大学院における臨床教育学履修体験の考察から」という論文として発表した。3:海外における研究資料収集として,モスクワ大学において「活動理論とナラティヴ・アプローチ」に関する研究文献・資料の蒐集と整理を行うことができた。4:理論的な枠組みを精査するために,ナラティヴ・ラーニングに関する文献を翻訳し,刊行の準備を進めることができた。5:臨床教育学のフィールドワークに基づくナラティヴ・カンファレンスに関する日本での取り組みを,2012年7月にモスクワ心理教育大学(MSUP)で開催された国際学会(ISCAR)の夏季セミナーにおいて発表し,研究交流を行うことができた。6:“NCM"をベースにした臨床参画によるフィールドワークを,檜山郡上ノ国町の小学校,北海道教育大学附属札幌小学校,北海道内公立小学校における授業研究で試行した。7:ナラティヴ・カンファレンス法の教育的意義を「当事者研究」として深めるための集団インタビュー調査を実施した。最終年度である今年度の研究活動は,以下の三つの機軸で遂行した.一つは,学校教育現場における参画研究の事例に関するデータ整理と臨床教育学的な分析である.今年度も,蒐集した生徒指導上の実践事例や学習指導上の実践事例を,子ども理解と発達援助のエピソード記録として整理した.今年度の記録と,そのカンファレンスに関するナラティヴなリフレクションの記録は,生徒指導に関するものが13事例,学習指導に関するものが6事例(広島県で3事例,北海道で3事例)であった.これらの事例は,本研究の理論仮説構築とその応用の基盤となる基礎データとなった.第二に,本研究の理論的な枠組みに関する国際的な視座からの考察である.今年度も,内外の研究調査を通して蒐集した理論的文献の整理を行い,ナラティヴ・カンファレンス法の背景となる理論的枠組みや方法論上の仮説を構築した.具体的には,クランディニン博士と研究協議を行い,ナラティヴ・インクワイアリーの思想と本研究の方法論との接点を探ることができた.また,ペンティ・ハッカライネン博士との研究交流をとおして,ヴィゴツキーの知的伝統とそこから発展した文化歴史的発動理論における本研究の位置づけを再検証することができた.第三に,これらの基礎的な研究活動(臨床参画研究と国際的理論研究)に基づいて,ナラティヴ・カンファレンス法(“NCM")の高度職能開発機能について臨床教育学的な視点から分析し,現職教師の高度な職能開発カリキュラムの創造に資する要因を抽出した.これらの研究成果は,2013年9月の日本臨床教育学会第3回年次大会の課題研究(招待講演)や,2013年11月の日本教育大学協会研究集会において発表した.また,今後は,内外の関連諸学会でも発表し,北海道教育大学大学院教育学研究科紀要『学校臨床心理学研究』等にも投稿する予定である.第一に,臨床的な基礎研究として,生徒指導上及び学習指導上のケース・カンファレンスのデータが,エピソード記録として整理され,本研究の理論仮説が構築された.第二に,理論的な基礎研究として,ナラティヴ・カンファレンス法の理論的枠組みと方法論に関する仮説が構築された.第三に,これらの基礎研究に基づいて,ナラティヴ・カンファレンス法が高度専門職業人を養成するための教師教育カリキュラムの開発にとって持つ教育的意義が,臨床教育学の視点から明らかにされた.今年度は,ナラティヴ・カンファレンス法(NCM)が現職教師の高度な職能開発に果たす意義と役割に関する理論仮説(生成的問い)を理論的に構築した。具体的には,内外における研究資料を収集し,基礎理論を構築するために,以下の計画を実行した。(1):現職教師教育カリキュラムに関する内外の研究文献・資料の収集と整理を行なった。特に,日本教育学会の特別課題研究委員会(現職教師教育カリキュラムの教育学的検討)での資料収集によって,本研究課題に関する内外の研究動向を包括的に把握することができた。(2):ナラティヴ・アプローチを応用した質的研究法に関する内外の研究文献・資料(とくに臨床教育学に関連するもの)の収集と整理を行った。その成果は,北海道教育大学大学院の研究紀要に投稿・掲載された。(3):海外における研究資料収集として,ナラティヴなアプローチを応用したカンファレンス型の学びに関する研究文献・資料の収集と整理を行うことができた。(4):フィンランドのナラティヴ・ラーニングに関する基本文献を翻訳し,その経過的な成果は,日本臨床教育学会の『臨床教育学研究』(創刊号)に投稿・掲載された。

(5):ナラティヴ・アプローチを活用した「高度職能開発支援」に関する基幹コンセプトと臨床教育学のフィールドワークに基づく具体的な取り組みを,イタリアのローマで9月6日に開催された国際学会(ISCAR:International Society for Cultural and Activity Research)で,"Narrative learning intervention in an inner-city public school"というテーマで発表し,研究交流をおこなった。(6):"NCM"フィールドワークを,檜山郡上ノ国町の小学校,北海道教育大学附属札幌小学校,札幌市内公立小学校で試行した。ナラティヴ・カンファレンス法(“NCM")が高度な教職能力開発においてどのような教育的意義を有するかという課題について,当初の計画以上に,理論的にも,実践的にも,深めることができている。一つには,教育現場におけるフィールドワークとして,このカンファレンス法を応用・検証する機会が当初計画していた水準を超え,生徒指導上の実践では18件,学習指導上の実践では6件,総計24件(当初の計画の1.5倍)のエピソード記録として蒐集することができている。具体的には,このカンファレンス法をベースにしたフィールドワークを,北海道檜山郡上ノ国町の小学校,北海道教育大学附属札幌小学校,北海道内公立小学校で試行し,北海道教育大学札幌校における生徒指導のカンファレンス(18事例)として試行し,その裏付けとなるべきナラティヴ・カンファレンス法の教育的意義を「当事者研究」として深めるための集団インタビュー調査を実施することができた。この展開も,当初計画以上の収穫である。二つには,このカンファレンス法の理論的基礎付けの作業が,フィンランド,カナダ,ロシアという複数の国々の拠点大学との研究交流を通して多角的に進めることができた。当初予定していた国際的交流の枠組み(フィンランド)を越えてその理論の検証作業が深化している。具体的には,モスクワにおいて,活動理論とナラティヴ・アプローチに関する研究文献・資料の蒐集を行い,ナラティヴ・カンファレンス法の理論と実際に関する日本での取り組みを発表することができ,フィンランドのオウル大学の研究者との共同作業として「ナラティヴ・ラーニング」に関する文献の翻訳が刊行予定となり,カナダのアルバータ大学で,臨床教育学とナラティヴ・アプローチに関する情報交流ができた。以上の観点から,当初の計画以上の達成状況にあると判断した。研究実績の概要で述べたとおり,平成23年度当初に計画していた研究活動(1)(6)は,ほぼ十全に遂行できた。とくにローマで開催された国際学会での発表には,国際学会誌から投稿を求める複数のオファーがあり,本研究の推進が国際的にも意義深いものであることが,いっそう明らかになった。
保健統計における系統的測定誤差の修正のための統計的手法の開発と応用

国民を代表する標本に対する健康調査から得られる保健統計に生じる系統的な測定誤差を修正するため、統計的手法の開発と応用を検討した。その結果、(1)国内の調査において国際的に標準的な標本抽出方法を導入する必要があること、(2)測定値を用いて自己申告バイアスを検出し修正が可能であること、ならびに(3)国内調査から得られた測定値に対して統計モデルを応用することにより国際水準の推計や国際比較分析への参加が可能であることが示された。本研究に適切な手法を開発するため、系統的な測定誤差の修正に関する最新の統計手法をレビューした。我が国における保健統計調査の個票データの目的外使用申請を行い(国民健康・栄養調査と国民生活基礎調査)、さらに他の国々における保健統計調査のうち公表されている個票データを取得した。これらのデータに統計的手法を応用し、以下の分析に着手した。1.国民生活基礎調査の標本抽出方法に関して、都道府県の人口の大きさに関わらず一定の抽出地区数を割り当てる現在の抽出方法が系統的測定誤差をもたらしている可能性を検討した。人口規模に比例した二段階無作為抽出法と比較するため、仮想的人口データを作成し、二乗平均平方根誤差を用いたシミュレーション分析を行い、後者に比較して推定誤差が大きくなることを示した。本分析結果は、我が国最大の健康調査のデータから得られる情報の精度の向上を促進し、国民の健康や保健医療制度に関する正しい理解を図るために重要であり、査読付学術雑誌へ投稿中である。2.健康調査で一般的に用いられている自己申告に基づく測定誤差を、客観的測定値を用いて調整するための二つの分析を開始した。まず一つ目は、米国における複数の健康調査の個票データから視力に関する自己申告値と客観的測定値を用いて、自己申告バイアスを検出し調整することにより、米国国民の視力の長期的推移を検討する分析である。二つ目は、我が国における身長と体重の自己申告値と客観的測定値を用いて、同様に自己申告バイアスを調整し、都道府県レベルの肥満度とその分布を推定することにより、自己申告値に基づく健康指標を用いた都道府県評価を行うための方法を検討する分析である。これらの分析は、費用面から健康調査で一般的に使い易い自己申告を活用し、長期系列や都道府県・市町村レベルでの国民の健康に関するより一層精度の高い情報を得るために重要である。前年度に引き続き国内外の研究者と意見交換をしながら分析手法の改善を行い、研究結果の一部を学術誌に掲載した。研究実績は以下の四点である。1.国民生活基礎調査の標本抽出方法に関する検討を行った。仮想的人口データを用いたシミュレーション分析を行い、国際的に標準的な抽出方法と比較することにより、現在の抽出方法の下では保健統計指標の推定誤差が増大する可能性を確認した。本結果は、人口レベルの健康調査の設計の改善を通じて精度を向上させ、国民の健康や保健医療制度に関する正しい理解を促すために重要である。2.米国における複数の健康調査から得られた視力に関する自己申告値と客観的測定値を用いて、自己申告バイアスの検出と視力障害の長期的推移を検討した。各質問調査から推定された視力障害の有病率には質問方法の違いによる顕著なばらつきが検出された。実測値を用いて自己申告バイアスを調整した後の推定値によると、有病率は1982年以降、概ね低下傾向にあるものの、1990年代後半以降は横ばい傾向にある可能性が示唆された。3.国民健康栄養調査から得られた身長体重、血圧、血糖値、コレステロ竪ルの実測値の集計値を用いて、国際比較分析を行った。日本では、国際的に見ても豊富なデータが揃っているが、採血前の空腹時間や血圧測定回数、服薬・既往データ収集の頻度といった測定方法の質において改善の余地が大きく、調査設計段階におけるより一層積極的な検討が急務であることが示唆された。4.身長体重に関する国民生活基礎調査の自己申告値と国民栄養調査の実測値を用いて、自己申告バイアスを調整して肥満度を推定し、自己申告値による地域レベルの健康評価を実施する可能性を検討した。国民生活基礎調査の大規模調査年においては両調査に共通のサンプルが小さいことから、欠損値補完等の処理を施したデータを用いる必要がある。
アポトーシス/CD300aを基軸とした全身性強皮症の病態解明と新規治療法開発

CD300aはアポトーシス細胞上のホスファチジルセリンをリガンドとしアポトーシスの制御に関わる免疫応答分子である。本研究では、CD300a陽性CD8陽性T細胞の機能的特徴、全身性強皮症病態におけるアポトーシス/CD300a基軸の役割を明らかにすることを目的とした。今年度に実施した研究では下記の知見を得た。2.紫外線照射でホスファチジルセリンを発現させたアポトーシス細胞とCD8陽性T細胞の共培養を行い、アポトーシス細胞共培養下ではCD300a発現レベル、グランザイムB産生が低下することを確認した。ホスファチジルセリン阻害剤存在下では効果は抑制され、CD300aシグナルはCD8陽性T細胞において抑制的に作用することを見出した。本研究を通じてCD8陽性T細胞におけるCD300aシグナルの機能および発現制御機構を明らかにした。またびまん皮膚硬化型全身性強皮症患者ではCD8陽性T細胞上のCD300a発現レベルが亢進しスキンスコアと正の相関を示したことから病態への関与も想定された。本年度は健常者CD300a陽性CD8陽性T細胞の機能の解明を目的に研究を行い、下記の知見を得た。1.CD300aが高発現しているCD8陽性T細胞サブセットの同定:ナイーブ細胞でのCD300a発現は一部に留まるが、セントラルメモリー、エフェクターメモリー、エフェクター細胞と分化が進むにつれてCD300a発現レベルの亢進を認めた。またCD300aの発現レベルは高発現と中等度発現の二峰性を示し、CXCR3陽性Tc1サブセットはCD300a高発現細胞、CRTH2陽性Tc2サブセットはCD300a中等度発現細胞に大多数が含まれ、CD300a発現レベルとサイトカイン産生細胞との関連が示唆された。2.CD300a陽性細胞の機能的特徴の解析:CD8陽性T細胞をPMA+イオノマイシンで刺激しサイトカイン産生能および細胞傷害活性を評価した。その結果、CD300a陽性細胞においてサイトカイン(IFN-γ、IL-13)産生能、CD107a発現を指標とした細胞傷害活性能が高く、CD300a陽性細胞はエフェクター機能の高い細胞集団と考えられた。また少数例での検討ではあるが、CD8陽性細胞におけるCD300a発現レベルを全身性強皮症患者と健常者で比較したところ、全身性強皮症患者においてCD300a陽性率および発現レベルが亢進していた。臨床病型との関連では、びまん皮膚硬化型および間質性肺炎合併症例でCD300a発現レベルの亢進を認めた。本年度に行う予定であったCD300aの発現レベルを調整する因子を同定するための研究は十分に進められなかったが、全身性強皮症患者検体を用いた解析を前倒しで開始できたため、おおむね順調に進展していると考えられる。昨年度に引き続いてCD300a陽性CD8陽性T細胞の機能解析を行い、下記の知見を得た。2.抗CD300a刺激抗体を用いてCD8陽性T細胞におけるCD300aシグナルの意義を検討した。ヒト臍帯血静脈内皮細胞に対する細胞傷害アッセイに抗CD300a刺激抗体を加えると細胞傷害活性の低下が見られた。予備的検討では同抗体存在下でグランザイムB産生能に変化はなく、Fas/FasLを介した細胞傷害への影響が考えられた。また全身性強皮症患者と健常者の比較については検体数を増やして検討を行った。CD8陽性T細胞におけるCD300aの発現レベルは、びまん皮膚硬化型全身性強皮症で健常者と比較して有意に亢進していたが、限局皮膚硬化型全身性強皮症では健常者と同程度であった。重症度との関連では、CD300a陽性率はスキンスコアと正の相関を示した。健常者検体を用いたCD300a陽性CD8陽性T細胞の機能解析は進展しているが、強皮症患者検体を用いた機能解析は十分に進められなかった。また強皮症患者生検皮膚を用いた検討に取りかかれなかった。

次年度以降はCD300a陽性CD8陽性T細胞の機能的特徴をより詳細に解析すると共に、CD300a高発現細胞と中等度発現細胞についても特徴的な機能を有するか検討する。また本年度十分に進められなかったCD300aの発現レベルを調整する因子を同定する研究にも精力的に取り組む。さらに全身性強皮症患者での解析症例を増やし、病態形成における役割を明らかにすることを目標とする。CD300a刺激抗体を用いた系に加えて、アポトーシス細胞との共培養の系での機能解析を行う。強皮症患者検体を用いた機能解析や生検皮膚を用いた検討にも精力的に取り組む。本年度は予定していたサイトカイン刺激やT細胞サブセット極在条件下(Tc1:IL-12+抗IL-4中和抗体、Tc2:IL-4+抗IFN-γ中和抗体、Tc17:IL-6+IL-1β+IL-23+TGF-β+抗IFN-γ中和抗体+抗IL-4中和抗体)での機能解析を行わなかったため、必要な試薬は次年度に購入する予定である。本年度予定していた実験の一部が実施できなかったため次年度使用額が生じた。次年度に繰り越したT細胞サブセット極在条件下での機能解析に用いる中和抗体、生検皮膚の免疫染色に用いる抗体など実験試薬の購入に充てる予定である。細胞刺激に用いるサイトカインや中和抗体、フローサイトメトリー解析に用いる抗体など次年度に使用する実験試薬の購入に充てる予定である。
江蘇省東南部の伝統芸能と民間信仰をめぐる中国地域文化研究の試み

〔資料整理と分析〕本研究課題では、この3年間以上にわたり江蘇省南通地区の現地調査で収集した童子戯、通劇の文献資料や映像資料について、朱瑞平北京師範大学副教授らと共同で整理を進め、その中で特に宗教性の濃い「三界表」について、如皋以外の地域の「三界表」と比較し、如皋の地域特性の一斑を明らかにした。〔→謝金の使途〕また童子戯、通劇のみならず、江蘇省他地域や浙江省の演劇、伝統芸能の脚本についても独自に電子データ化し、N-gramなどの統計処理によって如皋童子戯の言語的特徴を浮き彫りにした。さらに、各作品の親疎関係をクラスタリングによる統計処理によって可視化し、伝統芸能分布地図の基礎データを整備した。〔→消耗品・謝金の使途〕〔成果の公表と報告書の作成〕成果報告書『江蘇省東南部の伝統芸能と民間信仰をめぐる中国地域文化研究の試み』(101頁)を2008年3月に刊行し、江蘇東南部における宗教芸能の地域的展開に関する論考「《三界表》解題」を発表したほか、校訂加注した「三界表」、「兄妹分裙」のテキスト及びその写真を公表した。このほか、香港浸會大學で2007年9月に開催された「中國戲劇與宗教學術研討會」にて、「地方戲的越界-江蘇如皋童子戲的三種表現形態-」と題する口頭発表を行い、如皋童子戯が見せる演劇、儀礼、芸能の三つのパフォーマンスから中国演劇史における童子戯の位置づけを明らかにし、ジャンルや地域を越えて自由に童子戯が移動、変化していくことから、行政区分に基づく現在の中国地方演劇や伝統芸能に対する認識の限界について問題提起を行った。なお、同学会に提出した論文を2007年12月に『金沢大学中国語学中国文学教室紀要』で公表した。〔→設備備品・印刷費の使途〕〔資料整理と分析〕本研究課題では、この3年間以上にわたり江蘇省南通地区の現地調査で収集した童子戯、通劇の文献資料や映像資料について、朱瑞平北京師範大学副教授らと共同で整理を進め、その中で特に宗教性の濃い「三界表」について、如皋以外の地域の「三界表」と比較し、如皋の地域特性の一斑を明らかにした。〔→設備備品・印刷費の使途〕〔調査と資料収集〕中国の共同研究者で如皋市東陳鎮出身の朱瑞平氏とともにこの3年間、南通、如皋両市を中心に童子戯の現地調査を行ってきたが、すでにかなりの映像、文献資料を蓄積できたので、今年度は長江を挟んで如皋、南通の対岸にある張家港市に調査地点を移し、2007年3月に現地調査を実施し、当地の演劇、祭祀儀礼に関する情報や映像資料を入手、購入した。また、関連する如皋、南通地域の地方志や、中国古典演劇の映像・音楽資料を日本で入手した。〔→海外旅費・国内旅費・設備備品の使途〕〔資料整理と分析〕映像記録については、現地で収集した童子戯の映像データをほぼ全てDVD化し、その中から一部を抜粋して音楽を採譜し、PCと電子キーボードを使って電子データ(MIDIファイル)化する作業を進めている。文献資料については、童子戯の中から、『珍珠塔』『楊家将』『陳世美』『羅通掃北』『兄弟分桾』などの作品について、現地で収集した唱本の写真資料から文字に起こし校訂したテキストを作成した。〔→設備備品・消耗品・謝金の使途〕また、これらの電子テキストを統計処理のプログラムなどを利用して解析を進め、文体の面から各作品間に見られるジャンルの差、地域差などを明らかにしつつある。〔成果の発表〕

作成した各種の電子テキストデータをN-Gramによって解析し、童子戯を含む江蘇の諸演劇、芸能と浙江省の諸演劇、芸能について、主としてテキストの中で用いられている語彙の面から分析・比較し、これらの作品の隠れたテーマやモチーフにせまった論考「母たちの祈り-紹興「双状元宝巻」試論-」を発表した。〔資料整理と分析〕今年度は,この3年間に江蘇省南通地区の調査で収集した童子戯,通劇の文献資料や映像資料について,朱瑞平北京師範大学副教授らと共同で整理を進め,その中で特に宗教性の濃い「三界表」について,如皋以外の地域の「三界表」と比較し,如皋の地域特性の一斑を明らかにした。〔→謝金の使途〕また童子戯,通劇のみならず,江蘇省他地域や浙江省の演劇,伝統芸能の脚本についても独自に電子データ化し,N-gramなどの統計処理によって如皋童子戯の言語的特徴を浮き彫りにした。さらに,各作品の親疎関係をクラスタリングによる統計処理によって可視化し,伝統芸能分布地図の基礎データを整備した。〔→消耗品、謝金の使途〕〔成果の公表と報告書の作成〕成果報告書『江蘇省東南部の伝統芸能と民間信仰をめぐる中国地域文化研究の試み』(101頁)を2008年3月に刊行し,江蘇東南部における宗教芸能の地域的展開に関する論考「《三界表》解題」を発表したほか,校訂加注した「三界表」,「兄妹分裙」のテキスト及びその写真を公表した。また,香港浸會大學で2007年9月に開催された「中國戲劇與宗教學術研討會」にて,「地方戲的越界-江蘇如皋童子戲的三種表現形態-」と題する口頭発表を行い,如皋童子戯が見せる演劇,儀礼,芸能の三つのパフォーマンスから中国演劇史における童子戯の位置づけを明らかにし,ジャンルや地域を越えて自由に童子戯が移動,変化していくことから,行政区分に基づく現在の中国地方演劇や伝統芸能に対する認識の限界について問題提起を行った。なお,同学会に提出した論文を2007年12月に『金沢大学中国語学中国文学教室紀要』で公表した。〔→設備備品・印刷費の使途〕
不活性ハロアルカン類の精密分子変換

従来,ハロゲン化アリール・ハロゲン化アルケニルなどのsp2炭素-ハロゲンを有するハロゲン化物が精力的に研究されてきたのに対し,ハロゲン化アルキルなどのsp3炭素-ハロゲンを有するハロゲン化物を用いた反応は例が少ない.特に結合エネルギーの大きな炭素-塩素結合や炭素-フッ素結合の選択的活性化は困難である.本研究では鉄触媒に適切な配位子系を開発し,不活性な官能基炭素分子である塩化アルキル類を炭素資源として活用する精密合成手法の実現を目指し研究を行い以下に挙げる成果を得た.[1]鉄触媒によるハロゲン化アルキルとGrignard試薬のカップリング反応:一般にβ水素を有するハロゲン化アルキルを用いたクロスカップリング反応では,β水素脱離によるオレフィンの生成や,また金属ヒドリド種による還元体の生成が問題となり,望みの炭素一炭素結合生成反応が選択的に進行しない.そこで,ハロゲン化アルキルと芳香族Grignard試薬の鉄触媒クロスカップリング反応について,β水素脱離を制御する目的で種々の添加剤を検討した.結果,キレートジアミン化合物であるTMEDAを用いるとクロスカップリング反応が効率良く進行することがわかった.求電子剤としてヨウ化物・臭化物の他に通常困難とされる第二級塩化物を用いても反応は良好に進行し,クロスカップリング生成物が定量的に得られた.[2]鉄触媒によるハロゲン化アルキルと有機亜鉛試薬のカップリング反応:有機亜鉛試薬はその穏やかな反応性のため,官能基選択性や立体選択性の制御された高度分子変換を可能とする有機金属試薬として期待が持たれる.鉄触媒によるクロスカップリング反応のさらなる官能基共存性の向上を目指し,有機亜鉛試薬を用いた反応の開発を行い,ルイス酸性金属塩と鉄触媒の相乗効果により同クロスカップリング反応が速やかに進行することを見いだした.従来,ハロゲン化アリール・ハロゲン化アルケニルなどのsp2炭素-ハロゲンを有するハロゲン化物が精力的に研究されてきたのに対し,ハロゲン化アルキルなどのsp3炭素-ハロゲンを有するハロゲン化物を用いた反応は例が少ない.特に結合エネルギーの大きな炭素-塩素結合や炭素-フッ素結合の選択的活性化は困難である.本研究では鉄触媒に適切な配位子系を開発し,不活性な官能基炭素分子である塩化アルキル類を炭素資源として活用する精密合成手法の実現を目指し研究を行い以下に挙げる成果を得た.[1]鉄触媒によるハロゲン化アルキルとGrignard試薬のカップリング反応:一般にβ水素を有するハロゲン化アルキルを用いたクロスカップリング反応では,β水素脱離によるオレフィンの生成や,また金属ヒドリド種による還元体の生成が問題となり,望みの炭素一炭素結合生成反応が選択的に進行しない.そこで,ハロゲン化アルキルと芳香族Grignard試薬の鉄触媒クロスカップリング反応について,β水素脱離を制御する目的で種々の添加剤を検討した.結果,キレートジアミン化合物であるTMEDAを用いるとクロスカップリング反応が効率良く進行することがわかった.求電子剤としてヨウ化物・臭化物の他に通常困難とされる第二級塩化物を用いても反応は良好に進行し,クロスカップリング生成物が定量的に得られた.[2]鉄触媒によるハロゲン化アルキルと有機亜鉛試薬のカップリング反応:有機亜鉛試薬はその穏やかな反応性のため,官能基選択性や立体選択性の制御された高度分子変換を可能とする有機金属試薬として期待が持たれる.鉄触媒によるクロスカップリング反応のさらなる官能基共存性の向上を目指し,有機亜鉛試薬を用いた反応の開発を行い,ルイス酸性金属塩と鉄触媒の相乗効果により同クロスカップリング反応が速やかに進行することを見いだした.
熱帯泥炭地域の荒廃地修復にともなう炭素収支の変化

タイ国南部熱帯泥炭湿地を主な対象に、以下のことを明らかにした。(1)地温の日変化もたらす泥炭分解は6%程度大きいだけであり、推定が容易な日平均地温を使って炭素放出を推定することができる。(2)泥炭分解は、地下水位が5cm以下になると急速に進むが、地下水位40cm程度以下では45tC/ha/yrのほぼ一定になり、泥炭層の厚さには依存しない。(3)東南アジア各地の泥炭のポテンシャル分解速度は、同様の温度依存性を持ち、値の相違は最大で40%程度にとどまった。(1)ナコンシタマラート県の排水されている泥炭湿地荒廃地(クアンクレン地区)に設定された2ブロックの試験圃場(1ブロックは周囲に土手を築き、湛水状態で水管理を行う湛水区、他の1ブロックは通常の畑条件の対照区)において、水管理の相違による泥炭分解量を測定し、土壌水分あるいは地下水位と分解量の関係を明らかにした。(2)ナコンシタマラート県チャウアート地区において、これまでの研究過程で調査を継続してきたメラレウカ・カユプテ植林地でのバイオマス成長量と倒木を見積もるための毎木調査、リタートラップによる落枝落葉等を継続させた。(3)同地区において、メラレウカ・カユプテの葉、樹皮、根の各部位位からの呼吸量と器官温度との関係、さらにメラレウカ・カユプテ林における各部位の面積を測定し、単位地表面積当たりの呼吸量を推定した。(4)ナラチワ県ピクントン王立研究所内の試験林において、オイルパームの葉、樹皮、根の各部位からの呼吸量と器官温度との関係、さらにオイルパーム林における各部位の面積を測定し、単位地表面積当たりの呼吸量を推定した。(5)同所内の試験林において、熱帯泥炭湿地の原生林における優先樹種4種の樹皮呼吸とと器官温度との関係を精密に測定し、研究代表者らが過去に測定した値が過小に測定されている可能性を見出した。(6)室内実験で泥炭の基礎物性値測定を測定し、その値をベースにシミュレーションを行ったところ、土壌表面温度と土壌呼吸に大きな位相のズレが生じることを明らかにした。タイ国南部の泥炭湿地地域において、開発が放置された荒廃二次林および生態系修復が行われつつある二次林という二っの生態系を対象に、以下のことを行った[現地計測・調査よる炭素収支各要素の決定]以下の現地観測を行った。呼吸・分解と流出によるフロー樹木各器官の呼吸量、泥炭の分解量の測定を行った。成長によるストックと落枝落葉等のフローこれまでの研究過程で調査を継続してきた荒廃地や植林地でのバイオマス成長量と倒木を見積もるための毎木調査、リタートラップによる落枝落葉等を継続した。泥炭湿地林での地上部バイオマス分布調査結果を解析し論文として公刊した。〔泥炭分解モデルのための基礎物性値と環境要因の影響把握〕現地で採取し輸入した泥炭試料を用いて国内で以下の実験を実施した。泥炭層での分解過程測定成功した現地の地温・水分環境を再現させる泥炭分解シミュレータを開発し、地温の鉛直分布と日周期変化の影響を明らかにした。タイ国南部の泥炭湿地地域を中心に、東南アジア泥炭地域における開発に伴う土壌呼吸による炭素放出量の推定を目的とし以下のことを行った。〔広域での泥炭分解推定のための基礎物性値の把握〕タイ国南部Narathiwatに加え,東南アジアにおける代表的な泥炭地であるインドネシアRiau,マレーシアSarawakの泥炭土壌を用い,ポテンシャル分解速度と地温との関係を室内実験によって計測した。その結果,何れも温度と共に上昇し,3540°C付近でほぼ同等の最大値を取った後に減少するという同様の変化傾向を示した。値については,3地点でほぼ同程度という興味深い結果が得られたが,他の1地点の結果が30°C付近で,他の約2倍程度の値を取っており,有機物含有量やpHなどでは相違を説明できなかった。こうしたことから,広域推定を行うには,微生物相の違いも含め,更に多点での計測が必要と判断された。〔地下水位と泥炭層厚が泥炭分解に及ぼす影響の把握〕昨年度に開発に成功した現地の地温・水分環境を再現させる泥炭分解シミュレータを使い,タイ国南部NarathiwatとNakhon Si Thammaratで採取し輸入した泥炭試料で室内実験を実施した。その結果,どちらの泥炭でもほぼ同じ値を取り,その変化は地下水位-5cm程度までは一定値,地下水位-5-40cm程度まで増加,その後,地下水位-40-60cm程度において一定値になるという新たな興味深い知見が得られた。また,これらの結果は現地調査の値ともほぼ一致していた。

こうした結果から,泥炭層は40cm以上厚かったとしても,表面からのCO2放出量には影響を与えないという極めて興味深い新たな知見が示された。こうした知見は雑誌論文として投稿準備中である。
生体内で発生する活性酸素の無侵襲検出法の開発

1.生体内で発生する活性酸素の無侵襲検出法の検討活性酸素種とスピン標識化合物(スピンプローブ)との反応性を検討するため、O_2によるスピンプローブのESRシグナルの減衰を調べたところ、6員環スピンラベルのシグナルはグルタチオン存在下で比較的速く消失した。一方、6員環スピンラベルは、O_2存在ルミノール発光を5員環スピンラベルに比較して強く抑制した。活性酸素の局所検出部位として肺を選び、マウスに経気道投与したスピンラベルのL-バンドESRシグナルの減衰を無侵襲測定したところ、電荷を持つスピンラベルが肺内で非常にゆっくり消失した。以上の結果より、肺を測定対象部位とした場合、電荷を持つ6員環スピンラベルが活性酸素検出プローブとして適すると考えられ、4級アンモニウムの6員環スピンラベル,CAT-1を用いて2の実験を行った。なお、リポソーム崩壊を用いる方法については、肺内で長時間封入マーカーを保持するリポソームを見つけることができたものの、活性酸素によるリポソーム崩壊の感受性を上げるまでには至らなかった。2.疾患動物における活性酸素検出ディーゼル排気粒子(DEP)を経気道投与したマウスあるいはパラコート投与マウスについて肺に投与したCAT-1のシグナル消失をL-バンドESRにより測定したところ、これらの処理によりシグナルの消失速度が有意に速くなった。このうちDEPについては、OHラジカル消去剤の投与によりシグナル消失速度が未処理の場合と同程度まで遅くなり、活性酸素を無侵襲検出している可能性が示唆された。今後は、このシグナル消失速度の変化と活性酸素生成との関連について、種々の活性酸素消去剤や活性酸素発生系を使用して明らかにしていく必要がある。