hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
第6染色体短腕に存在する潰瘍性大腸炎感受性遺伝子の同定

最終的に得られたサンプルはApplied Biosystems社,ABI Prism 3100 Genetic Analyzerを用いて自動シークエンスを行っている.PCRよりシークエンスまでの行程は,全て96穴プレートを用いて行われ,簡便・高速・大量に処理することができるのが特徴である.'99年同胞罹患対を用いた疾患連鎖解析にて,潰瘍性大腸炎を含む炎症性腸疾患感受性遺伝子が染色体6番短腕に存在することが明らかとされた(Am J Hum Gene,1999).この染色体6番短腕(座位名: IBD3)の感受性領域は,約16Mbの広範なゲノム領域であり,直ぐに感受性遺伝子を同定できるほど狭い領域ではなっかった.そこで本申請者らはマイクロサテライトマーカーを(平均0.6Mb間隔)用いて連鎖不平衡マッピングを行い,さらにHLA, SNPをマーカーとして追加し,本疾患の感受性遺伝子座位を約0.3Mbまで絞り込むことに成功した.そこで、特定された0.3Mbのハプロタイプについて全シークエンス及び相関解析を行い,潰瘍性大腸炎の感受性遺伝子を同定することを目的とした.平成17年度は,HLA-DRBI*1502-MICA*009-HLA-B*52- C2-4-4・allele239のハプロタイプをホモ接合にもつ日本人潰瘍性大腸炎患者2名をPool DNAとしてsample No.1,さらに前記ハプロタイプを持たないHLA-B51-C2-4-4・allclc235をホモ接合にもつ健常対照者2名をPool DNAとしてsample No.2として,この2検体について全シークエンシングを行っていた.なお基準となるreference sequenceは, HLA-DR15-Cw7-B7-A3(Genome Research 2004)とした.このDNA sampleNo.1,2を用いて, HLA-B-C2-4-4領域約0.3MbをDyeTerminator法にてすべて直接シークエンスしている.HLA-B-C2-4-4領域約0.3Mbの配列を,約600bずつのフラグメント単位に分割し,MJ Research社DNA Engine PTC-2000を用いてPCRにて増幅している.PCRプライマーの設計には,独自開発のソフトウエアを使用した.得られたPCR産物は,Millipore Multiscreen-PCRキットを用いて精製されたのち,5`側および3'側の2方向よりシークエンスプライマーを設定し, ABI BigDye Terminatorを用いてサイクルシークエンス反応を行っている.その後, SIGMA Sephadex G50およびMillipore MultiScreen-HV, Clear platesを用いて再度精製している.最終的に得られたサンプルはApplied Biosystems社,ABI Prism 3100 Genetic Analyzerを用いて自動シークエンスを行っている.PCRよりシークエンスまでの行程は,全て96穴プレートを用いて行われ,簡便・高速・大量に処理することができるのが特徴である.平成18年度も上記作業を継続しておこなっている。99年同胞罹患対を用いた疾患連鎖解析にて,潰瘍性大腸炎を含む炎症性腸疾患感受性
高齢者の咬合接触状態と歯の動揺度に関する検討

高齢者の歯・顎・口腔は老化現象に伴っての歯の部分的な喪失、口腔管理の不十分さなどより、残存している歯の健康度に対して種々な障害となる事項がある。この残存している歯の障害となる事項のうち、歯の位置や上下顎の対咬状態などによる咬合接触の有無と個々の条件は残存歯の保全をはかる上に重要な因子と言うことが出来る。本研究は高齢者の残存歯の状態を咬合接触の有無より観察し、その保全に対する有効な指標を得ることを目的として行った。高齢者の咬合状態をアイヒナ-の分類によりA,B,C,の3群に区分し、各群における残存歯の咬合力、動揺度について検討した。被験者に最大咬合力と中等度の咬合力発揮時に、咬合圧力測定器(プレスケール)を用いて残存歯の咬合力分布状態を観察した。咬合支持の点より咬合接触面積・咬合力との関係をみると、対合接触が全くないC群は、支持域が部分的に失われているB群より接触面積・咬合力の平均値が減少する傾向を示した。また各群において同じ群の中でも被験者間に大きな差があるのは、その欠損様式が多様であるため、一定の傾向は認められなかった。またX線による高齢者の残存歯の骨吸収度は2039%で、残存歯の動揺度(ペリオテスト)よりみると上下顎残存歯間に咬合接触のある、いわゆる咬合支持の有無による動揺度を見ると、上顎では咬合支持があるものが、ないものより、動揺度は小さいことが示された。しかし、下顎の残存歯では、咬合接触の有無がとくに動揺度の大きさに差異がみられないことから、上下顎天然歯間部の咬合接触、咬合支持が、動揺度より見て残存歯の有効な保全につながることが示唆されると思われる。いずれにしても歯牙欠損によっては残存歯に負担がかかることは想定されることから、高齢者の咬合状態、歯の動揺度、および歯槽骨吸収度との関連性を幅広く診査し、これらのデータより高齢者の残存歯の状態を咬合型より検討し、残存歯の有効な保全に対応する必要性が示唆された。高齢者の咬合状態をアイヒナ-の分類によりA,B,Cの3群に区分し、各群における残存歯の咬合力、動揺度について検討した。まず、被験者の左右咬筋ついて筋電計(GCマッスルバランサー)を用いて筋電位を導出し、最大咬合力と50%咬合力時に咬合圧力測定器(プレスケール)を用いて残存歯の咬合力分布状態を観察した。咬合支持によるA,B,C群について咬合力との関係をみると、4カ所に咬合支持域のあるA群は、咬合支持域が減少するB,C,群より咬合力の平均値が低くなる傾向を示した。

またB,C群では被験者間に大きな差があるのは、B,C群が多様であるため、現在データを収集中である。引き続き義歯装着前から術後まで経時的に残存歯の動揺度測定とレントゲン写真による歯槽骨吸収度と歯根膜腔の状態について観察し、高齢者の咬合状態、歯の動揺度、および歯槽骨吸収度との関連性を検討し、これらのデータより高齢者の残存歯の状態を咬合型より検討し、残存歯の有効な保全条件と対策について検討していきたい。高齢者の歯・顎・口腔は老化現象に伴っての歯の部分的な喪失、口腔管理の不十分さなどより、残存している歯の健康度に対して種々な障害となる事項がある。この残存している歯の障害となる事項のうち、歯の位置や上下顎の対咬状態などによる咬合接触の有無と個々の条件は残存歯の保全をはかる上に重要な因子と言うことができる。本研究は高齢者の残存歯の状態を咬合接触の有無より観察し、その保全に対する有効な指標を得ることを目的として行った。高齢者の咬合状態をアイヒナ-の分類によりA,B,Cの3群に区分し、各群における残存歯の咬合力、動揺度について検討した。被験者に最大咬合力と中等度の咬合力発揮時に、咬合圧力測定器(プレスケール)を用いて残存歯の咬合力分布状態を観察した。咬合支持の点より咬合接触面積・咬合力との関係をみると、対合接触が全くないC群は、支持域が部分的に失われているB群より接触面積・咬合力の平均値が減少する傾向を示した。また各群において同じ群の中でも被験者間に大きな差があるのは、その欠損様式が多様であるため、一定の傾向は認められなかった。またX線による高齢者の残存歯の骨吸収度は2039%で、残存歯の動揺度(ペリオテスト)よりみると上下顎残存歯間に咬合接触のある、いわゆる咬合支持の有無による動揺度を見ると、上顎では咬合支持があるものが、ないものより、動揺度は小さいことが示された。しかし、下顎の残存歯では、咬合接触の有無がとくに動揺度の大きさに差異がみられないことから、上下顎天然歯間部の咬合接触、咬合支持が、動揺度より見て残存歯の有効な保全につながることが示唆されると思われる。いずれにしても歯牙欠損によっては残存歯に負担がかかることは想定されることから、高齢者の咬合状態、歯の動揺度および歯槽骨吸収度との関連性を幅広く診査し、これらのデータより高齢者の残存歯の状態を咬合型より検討し、残存歯の有効な保全に対応する必要性が示唆された。
日本中世における地域経済圏の成立とその展開過程の研究

今回のテ-マ「日本中世における地域経済圏の成立とその展開過程の研究」の目的は、キ-ワ-ド「地域経済圏」の中世における成立から発展の諸相を追求・検討することにあった。この点の成果としては、福岡市での数度にわたる調査によって、筥崎八幡宮神社にかつて所蔵されていた油座関係文書の写しを確認できたことである。これにより著名な石清水八播宮神社の油座活動と同様に、筥崎八幡宮神社にも油座が存在し、その販売上の独占権を行使した実態や油座を統括した奥堂氏の存在などを明らかにできた。その結果、従来充分に解明されていなかった中世都市博多の流通活動の実態が、中世前期から追求できるようになった。この研究は、今後『筑前風土記稿』に採収されている中世関係文書の分析を行うことによってより充実できると考える。つぎに伊勢国桑名を起点とする伊勢湾沿岸の「地域経済圏」と太平洋沿岸地域との流通構造の実態、および桑名地域と近江国湖東地域との結びつきなど、中世都市桑名の経済活動を解明したことによって、地域と地域を結ぶ中世の流通活動の非常にダイナミックな実態を後付けることが可能となった。特に従来は桑名と近江国や美濃国など内陸部との流通活動は知られていたが、今回の研究では。東京大学史料編纂所架蔵写本「称明寺本書」や「角屋文書」「角屋由緒書」などの調査などを通じて、鎌倉期から伊勢湾沿岸地域と関東の太平洋岸地域との流通関係の存在が確認でき、さらに鎌倉期の北条氏支配下の流通の実態と戦国期の後北条氏支配下のそれとが比較できた点では、流通の時間的変質という大変意義のある検討ができたといえる。以上のように今回の研究では、瀬関内海地域の流通活動が北九州地域とつながり、さらに大陸にまで拡大している全国流通網が構成され、一方で畿内から関東へも展開するダイナミックな中世の経済活動を解明できた点で非常に成果があったと考えられる。
寄生蜂の学習行動と生物的防除への利用

チャノコカクモンハマキAdoxophyes honmai卵-幼虫寄生蜂、ハマキコウラコマユバチAscogasterreticulata(以下ハチ)は寄主を報酬とし植物成分を連合学習することで寄主探索を効率的に行っていると思われる。昨年度までの研究では、植物葉のエタノール抽出物を用い、9cmガラスシャーレ内での植物種間の識別能力について明らかにした。今回はこの結果を踏まえて、野外の網室(6m×4m×高さ2m)内でチャ、ヤマモモの鉢植えを用いて選択実験を行った。チャまたはヤマモモの葉で条件付けした雌ハチ30頭を両植物各6鉢配置した網室内に放飼したところ、放飼後10分以内には約半数のハチが条件付けされた方の植物上に移動した。この要因として視覚刺激、嗅覚刺激、接触化学刺激などが考えられる。このうち植物の嗅覚刺激に対する学習について嗅覚測定装置(4-arm olfactometers)により条件付けを行い、植物のにおいに対する連合学習について調べた結果、チャ葉抽出物で条件付けしたものはチャ葉のにおいを、ヤマモモ葉抽出物で条件付けしたものはヤマモモ葉のにおいに対して反応する傾向があり、においの学習が成立したと考えられる。以上の結果から、ハマキコウラコマユバチの野外での寄主探索には植物成分の学習が関与し、嗅覚が関わっていると考えられた。(1)寄生蜂ハマキコウラコマユバチの人工飼育人工飼育の方法はすでに確率されているが、現有の飼育設備ではスペースに乏しく十分な個体数を確保出来ない。そこで、新規に購入した恒温恒湿器でさらに拡大して人工飼育を行った。これにより、多くのサンプルにたいする学習効果のデータをとることが可能になった。短期雇用1名を随時雇用することで飼育の効率も上がった。(2)寄生蜂のハマキコウラコマユバチの合成品に対する学習効果ハマキコウラコマユバチの合成品に対する学習行動は今までの予備的な実験から確認されている。17年度は一般に植物の揮発性物質と言われている物質について学習行動の反応強度を調べた。チャの葉から揮発する成分として確認されている5種類の物質の生物検定を行うことで、好む(学習しやすい)物質:geraniol, linaloolと好まない(学習しにくい)物質:benzyl alcohol, (Z)-3-hexenol, methyl salicylateとに分類することができる。この結果に基づき、geraniol, linaloolの2成分の識別能力について調べた。一つの物質で条件付けすると2成分の選択実験においては、条件付けした成分の方を選択して長く反応した。この2成分を、geraniol : linalool=1:2と2:1に混合した場合にもこの2つのブレンドを識別した。このことから、単独成分のみならず、比率の異なる混合成分でも学習して識別可能であることがわかった。
等質開凸錐と等質ジーゲル領域の多角的研究

(1)等質開凸錐の最小行列実現:任意の等質開凸錐を実正定値対称行列のなす凸錐をスライスする形で実現するものの内で,行列のサイズが最小となるものを,向き付けグラフを援用し,グラフ理論の用語により.その最小のサイズを明示的に記述した,この研究成果は,非専門家にも等質開凸錐へのアプローチを容易にするものである.学術論文として執筆中である.(2)等質開凸錐の基礎理論の整備:引き続き,この研究の完成を目指し,証明過程の細部の精査を行い,(1)の成果の論文に続き,論文を完成させる予定である.研究の概要としては,等質開凸錐の基礎理論におけるVinbergの論文(1963)にあった論証のギャップを,従前の幾何学的手法(Koszul)や解析的手法(Rossi-Vergne)とは異なり,Vinbergの論文の精神を引き継ぐ代数的な手法によって埋めるものである.この研究成果は,数学的な大道具を用いずに等質開凸錐の理論の基礎部分を補強するものである.(3)古典解析におけるホブソンの公式の証明の現代化:この公式は1894年にHobsonにより発表されたものであるが,その証明は技術的で大変わかりにくい.研究代表者の野村はLie代数的な手法を取り入れて簡明な証明を与えることに成功した.学術論文として,Kyushu Journal of Mathematics, 72 (2018), 423--427に掲載された.本研究はDunkl解析にも応用され,当初は予期していなかった方向へと発展している.(4)著書「球面調和函数と群の表現」を出版した.成果(3)も取り入れた内容になっている.(1)既約対称錐の特徴付け.この研究については,等質錐の中で既約対称錐を特徴付ける次の定理を,九州大学大学院数理学研究院博士研究員の山崎貴史との共同研究で証明し,学術論文として,Kyushu J. Math.に投稿し,受理された.得られた定理は,等質錐の基本相対不変式の次数についてのもので,階数rの等質錐Ωが既約対称錐になるための必要十分条件は,Ωおよびその双対錐Ω*に付随する基本相対不変式の次数が,順序を除いて,双方とも1,2,...,rとなることである.この証明に,研究代表者と山崎貴史がKyushu J. Math., 69 (2015), 11-48に出版した学術論文において開発した,向き付けグラフ(oriented graph)を援用する研究手法が用いられており,これまでの研究の発展としての重要な研究成果である.(2)等質錐の最適行列実現の研究.この研究も,(1)で引用した2015年出版の学術論文における研究成果の延長線上にあるもので,staplingの手続きで等質錐を実現するものを,そのstaplingを『引き剥がす』ことで,等質錐の行列実現の中で最小次元のものを与えるということを示すものである.この研究については,2016年2月に九州大学大学院数理学研究院で開催された国際ワークショップにおいて,研究過程の報告を行い,現在も詳細を詰めるべく,研究を継続中である.研究は順調に進展し,現在では計画以上の成果を得ていると自己評価している.2015年6月にルーマニアで開催された国際研究集会に本科学研究費から旅費を充当して参加し,旧知のIordanescu教授やNichita教授とも研究討議をおこなって,本研究課題の新たな研究方向への可能性も見出している.さらに,同年12月には,チュニジアにおいて,共同主催者として開催した第4回チュニジア・日本調和解析研究集会においても,本科学研究費から旅費を充当して参加し,チュニジア・スファックス大学のBaklouti教授をはじめ,フランスからの参加者・講演者であるFaraut教授,Duflo教授らとも研究討議を重ねることができ,本研究課題に関するあらたな知見も得られた.2016年2月の九大での国際ワークショップでも,フランスのGraczyk教授とも議論を重ね,現代統計学への等質錐への応用について幾多のヒントを得,私が推進してきたこれまでの研究の応用を見込んでいる.(1)等質錐の基礎理論の整備等質錐の基礎理論については,Vinbergによる1963年の論文で確立されてはいるのであるが,実はその論文において論証にギャップが認められる箇所がある.そのギャップを,Koszulは幾何学的な手法で,Rossi-Vergneは解析的な手法で埋めてきたのであるが,本研究では私自身の研究成果や研究協力者による研究成果を踏まえて,元々のVinbergの論文にあった精神に基づき,関係する非結合的代数の帰納構造とともに直接的な証明を与えることに成功した.この研究成果は,大道具を用いずに等質錐の理論の基礎部分を補強するものであり,等質錐の理論へのアプローチを非専門家に対して容易にするものとして,統計学等への等質錐の応用にも道を開くと期待される.(2)等質錐の最小行列実現の研究山崎貴史との共同研究で得られ,Kyushu J. Math., 69 (2015), 11--48として出版された研究成果を引き継ぐもので,その論文において構成された源凸錐をstaplingをしないで直和形式に並べ,基底の置換による行列成分の並び替えで等質錐を行列実現したものが,行列のサイズが最小のものであることを示した.

これは昨年度から継続する研究で,成果をまとめるにあたっては,証明やそこで用いられる概念の整理等,まだいくつかの部分において洗練化する余地があるので,その部分について平成29年度も引き続いて研究を行う.(3)「複素関数論講義」と題する図書を出版した.学部学生向きの教科書ではあるが,一部に本研究の過程で得た知見を盛り込んでいる.研究は順調に進展し,現在では計画以上の成果を得ていると自己評価できる.平成28年度の研究は修士課程の学生と共同で行い,大部分が2017年2月発表の修士論文にまとめられている.とくに,研究実績の概要の(1)で述べた等質錐の基礎理論の整備については,共著の学術論文として発表する予定である.(1)等質開凸錐の基礎理論の整備:前年度に引き続き,この研究の完成を目指し本研究課題の最終年度の平成30年度には学術雑誌に投稿できるように,証明課程の細部の精査を行い論文を執筆中である.研究の概要としては,等質開凸錐の基礎理論におけるVinbergの論文(1963)にあった論証のギャップを,従前の幾何学的手法(Koszul)や解析的手法(Rossi-Vergne)とは異なり,Vinbergの論文の精神を引き継ぐ代数的な手法によって埋めるものである.この研究成果は,数学的な大道具を用いずに等質開凸錐の理論の基礎部分を補強するものであり,非専門家にも等質開凸錐へのアプローチの道を容易にするものである.(2)等質開凸錐の最小行列実現:九州大学博士研究員の山崎貴史との共著論文(2015)における成果を踏まえた研究であり,平成30年2月の名古屋大学での研究発表の際に,論文執筆の前段階としてのいくつかの知見を得ることができた.(3)古典解析におけるHobsonの公式の証明の現代化:この公式は1894年にHobsonにより発表されたものであるが,その証明は技術的で大変わかりにくい.本年度の研究において,Lie代数的な手法を取り入れて簡明な証明を与えることに成功した.学術論文としてまとめて学術誌に投稿し,受理された.この成果を鳥取市で開かれたワークショップ(平成30年1月)で発表し,本証明がDunkl解析の場合にも応用できるとの参加者からの報告を得ている(平成30年3月).本研究のDunkl解析への応用という,当初は予期していなかった発展が期待できる.(4)「球面調和函数と群の表現」と題する本の原稿を書き終えた.平成30年夏に出版の見込みである.上記(3)の研究成果も取り入れている.研究は順調に進展し,現在では計画以上の成果を得ていると自己評価できる.平成29年度の研究はこれまでの研究成果をまとめるための研究発表の機会も得て,上記研究概要(1)で述べた論文執筆に向けての整理ができた.また上記研究概要(3)で述べたことは,(4)で述べた本の執筆中に得た成果であるが,証明法は甚だ簡明で,その証明の簡明さゆえに,予期していなかった方向への発展が見込める状況となった.(1)等質開凸錐の最小行列実現:任意の等質開凸錐を実正定値対称行列のなす凸錐をスライスする形で実現するものの内で,行列のサイズが最小となるものを,向き付けグラフを援用し,グラフ理論の用語により.その最小のサイズを明示的に記述した,この研究成果は,非専門家にも等質開凸錐へのアプローチを容易にするものである.学術論文として執筆中である.(2)等質開凸錐の基礎理論の整備:引き続き,この研究の完成を目指し,証明過程の細部の精査を行い,(1)の成果の論文に続き,論文を完成させる予定である.
ペプチドタグ間の化学反応に基づく相互作用検出を利用した薬剤結合蛋白質の網羅的探索

薬剤が作用する本来の標的以外のオフターゲット分子を見つけ出すことは、副作用の理解のみならず、異なる作用機序を示す薬剤としての利用(ドラッグ・リポジショニング)も期待できる。申請者はこれまでに、化合物ータンパク質間相互作用を酵素活性を市場として読み出す方法(Interaction-Dependent Native Chemical Ligation and Enzyme Reconstitution; IDNCL-ER)を開発してきている。本研究では、このIDNCL-ER法や、タンパク質トランススプライシング(PTS)を利用した相互作用検出系を用いて、薬剤や薬剤候補化合物が相互作用するタンパク質を網羅的に探索する方法の開発を目的とした。平成30年度は主に、NanoLucルシフェラーゼを検出酵素としたIDNCL-ERを用いて、高脂血症治療薬であるアトルバスタチンと、これに結合するPDE6Dタンパク質を題材として検出系の開発に取り組んだ。アトルバスタチンは、本来の標的タンパク質であるヒドロキシメチルグルタリルCoA(HMG-CoA)還元酵素だけでなく、PDE6Dや、NQO2などとも相互作用することが知られている。そのため、これらのタンパク質との相互作用の検出を試みた。また、PTS法を利用して、βラクタマーゼ活性を指標として薬剤ータンパク質間相互作用を検出する系の開発にも取り組んだ。βラクタマーゼは、βラクタム系抗生物質を分解する酵素であり、これを検出酵素として用いることができれば、抗生物質耐性を指標としてオフターゲットタンパク質の探索ができるものと期待した。実際に、当研究室で開発した分割インテインDnaE変異体を用いて、ペプチドータンパク質間の相互作用に依存してβラクタマーゼ活性が生成する系の開発を試みた。昨年は予定通り、NanoLucレポーターを用いたIDNCL-ER法を利用して、高脂血症治療薬アトルバスタチンとタンパク質の相互作用検出系の構築ができ、βラクタマーゼ系の開発にも着手できた。以上から、研究はおおむね順調に進展しているといえる。本年度は、引き続き、NanoLucレポーターを用いた検出系を使って、実際にタンパク質ライブラリから薬剤と相互作用するものをルシフェラーゼ発光を利用して検出できるかについて検討する。ここでは、大腸菌を用いたペリプラズム発現系や、ファージを利用した方法、グラム陽性菌を利用した分泌発現系などを利用して、薬剤と発現タンパク質間の相互作用をin vivoで検出する系の開発を試みる。また、βラクタマーゼを検出酵素としたPTS系では、薬剤とタンパク質間の相互作用の有無により、活性型βラクタマーゼが生成するため、これを利用することで、βラクタム系抗生物質によるスクリーニングが可能となると期待される。そこで、実際に上記のタンパク質ライブラリ発現系を用いて、アンピシリン耐性を利用したオフターゲットタンパク質の探索に取り組む予定である。

当初の予定通り研究は順調であるが、課題の2, 3年目の金額が申請時より大きく減額されていたことや、今後消費税が10%にあがるため、2, 3年目の支出がその分増額することを考慮し、苦しい台所事情ながらも1年目の予算をやりくりをしたためである。
モモにおける休眠打破および生殖成長相移行メカニズムの解明

本研究ではモモ`矢口'の種子発芽,播種後1年未満の実生における,実生の生育と花芽分化時期について調査した。また,鉢栽培による1年生実生の開花に及ぼすABAおよびGA阻害剤(ウニコナゾール)処理の影響について検討した。1年生実生を低温処理し,播種した。実生を露地または温室内のポットに移植した。圃場の1年生実生の芽をFAA固定し,実体顕微鏡下で解剖した。鉢栽培および露地栽培した実生の開花状況,花芽着生節位,最高節位および樹高を調査した。モモ8年生実生では8月上旬から花芽分化が認められ,10月中旬には雌ずい形成期に達した。一方,1年生実生では,10月上旬にがく片形成期の花芽が認められた。10月中旬には花弁形成期のものが多く,11月上旬には雄ずいから雌ずい形成期の花芽が多く確認された。鉢栽培において,生育が順調な株においては,播種後400日で開花が認められた。ABA処理およびGA阻害剤処理は花芽形成を誘導しなかった。成長が旺盛な1年生実生においては,130以上の花芽が形成された。相転移における株の生育程度の影響について調べるために,1年生実生の開花株と未開花株で生育を比較したところ,株重,根重,茎の最大直径に有意差は認められなかった。種子発芽にエピジェネティクスの関与を明らかにするため,種子にDNAメチル化阻害剤処理を行ったが,低温不足による生育停滞を打ち消すなどの効果は認められなかった。1年生実生における花芽分化時期が確認できた。このことにより,花芽分化を誘導する遺伝子の発現時期を予測することができる。花芽分化における植物ホルモンの影響や花芽分化を誘導する遺伝子発現について調査する。種子発芽におけるDNAメチル化の関与については,処理時間を延ばすなどして,さらに検討する。試薬の使用量がやや少なかったため。
メタ認知を支える神経基盤と多重モデルの解明（国際共同研究強化）

本研究は、平成26年度に、採択されたメタ認知の研究(科学研究費補助金・基盤研究B)を元に、国際共同研究を計画したものである。当課題は申請者自身が、マカクサルの実験系で見出したメタ認知の鍵となる「確信度」の知見を下敷きに、スタートしている。メタ認知は、内省による自己像の把握に関わり、従来、人文社会学や認知心理学の重要テーマとして、注目されてきたが、その神経基盤を探る実証研究は、近年、始まったばかりである。現在、世界のいくつかのラボで、ヒト・動物を対象に、その解明に取り組んでいるが、これらは、独立かつ散発的に行われているのが現状である。知る限り、メタ認知のモデル動物を確立して、神経科学的手法を適用できているラボは、極めて限られている。そのなかで、申請者は、マカクサルにおいて、自己の知覚判断に対する自信の程度(確信度)を報告させるメタ認知課題を確立し、神経生理学的手法・薬理学的手法を用いて、その神経基盤の一端を示した。この先行の利を生かしつつ、ヒトを用いて第一線の研究を行っているラボと国際共同研究を組むことで、各分野で閉じている知見を集約することを計画していた。しかし採択後に、ちょうど所属機関の異動があり、新しく赴任した先で、教育や研究の立ち上げに、注力する必要がでてきた。そのため、本グラントの主旨である、申請者自身が、まとまった期間、国外で研究する見込みが立たなくなったため、廃止申請した。内定年度:2015メタ認知は、内省による自己像の把握に関わり、従来、人文社会学や認知心理学の重要テーマとして、注目されてきたが、その神経基盤を探る実証研究は、近年、始まったばかりである。本研究では、ヒト・動物を対象にした実験のメリット・デメリットを、相互補完し、メタ認知の生物学的機構を、統合的に理解することをめざす。本研究は、平成29年の3月(平成28年度末)に申請しているので、事実上、平成29年度からのスタートとなる。それを実行するために、本年度は、国内外の研究者との連携計画を立てた。本研究を進めるために、具体的な連携計画をたてた。本研究は、平成29年3月に申請したため、事実上、プロジェクト1年目となった。国内外の研究者と、研究会において、メタ認知を支える神経基盤と多重モデルについて、有益な議論を行うことができた。例えば、初来日の海外の研究者を、学会に来てもらい、その後、意見交換を行うことができた。来年度以降、こちらから、海外に出向いて、研究を進める機会を増やす予定である。連携先の研究者が来日し、議論したことで、大きな研究の遅れはない。計画にそって、連携研究を実行する。こちらから、連携先に出向いて、研究を進める機会を増やす予定である。
内部特徴による時間データ類似検索方式の研究

本研究は,気象や医学等の分野で用いられる時系列データの分析の際に必要な類似検索を効率化する新たな方法の開発を目指す.これまでは時系列データにおける時刻ごとの値の差の大小により類似した時系列データを求める方法が代表的であった.しかし,時系列データが発生している対象物に内在する特徴の類似性考慮していないために,利用者から見れば得られた類似データが必ずしも類似しているとは言いがたい場合が存在していた.本研究では,対象物の内部的な特徴に着目する新たな方法を開発することで性能の向上および方法を支援する環境基盤を実現した.本研究は,気象や医学等の分野で用いられる時系列データの分析の際に必要な類似検索を効率化する新たな方法の開発を目指す.これまでは時系列データにおける時刻ごとの値の差の大小により類似した時系列データを求める方法が代表的であった.しかし,時系列データが発生している対象物に内在する特徴の類似性考慮していないために,利用者から見れば得られた類似データが必ずしも類似しているとは言いがたい場合が存在していた.本研究では,対象物の内部的な特徴に着目する新たな方法を開発することで性能の向上および方法を支援する環境基盤を実現した.本研究では、株価等の金融データ、シミュレーションによる科学技術データ、温度や気圧等の気象データなどの時間的に変化するデータである時間データの類似検索に関し、その適用能力の向上を目指す。すなわち、従来の類似性定義ではなく時間データが生成される内部構造表現に着目して記述した特徴の類似性を定義することで、特定の応用に依存せず広範囲の応用に適用可能なこれまでにない高い適用能力を持つ新たな類似検索手法の開発を目指す。本研究は次の研究項目を設定して研究を行う。1)内部特徴モデル表現の開発,2)内部特徴モデルを用いた類似検索方法の開発,3)本提案方法の特定応用分野への適用,の3項目である。平成20年度は、この3項目に関して次のような研究を行った。1)単純な内部特徴モデルを音楽分野に特化して検討を行い、従来の手法の体系化と同時に音楽分野での基本方式の構築を行った。その一部の成果を情報処理学会の全国大会で報告した。2)音楽分野での類似検索手法を事例として内部特徴モデルを用いた類似検索方法の導出を試みた。内部特徴としては、最もプリミティブな状態を持たない音素とし、この音素を介しての類似検索方法の実現と評価を行った。その成果の一部は、国際会議および論文誌論文として公開を行った。3)応用分野への適用に関しては、音楽だけでなく医療分野での技術ニーズについての調査を行うと同時に、完全非集中型DBでの実装を念頭に置き、この環境での内部特徴による類似検索処理の効率化のための基礎検討を実施した。その一部は研究会での発表を行った。本研究では、株価等の金融データ、シミュレーションによる科学技術データ、温度や気圧等の気象データなどの時間的に変化するデータである時間データの類似検索に関し、その適用能力の向上を目指す。平成20年度では、内部的特徴モデルの基本方法の確立を目指して研究を行った。その結果、既存類似検索手法の分類と体系化を実施すると同時に、基本方式を音楽を中心とする応用分野で実施した。平成21年度に関しては、平成20年度で実施した研究内容をより緻密にかつ広範に展開することを試みた。すなわち、平成20年度で基本方式の構築を行った内部特徴による類似検索の方式を構築するとと同時に各種応用情報への適用とモデル精緻化を行った。さらに、構築した内部特徴モデルの類似検索方法の第一段階の開発を行うと同時に精度の向上を目的としてモデルの精緻化をはかった。これについては、代表研究者が海外の研究者との研究交流を行うことで実現した。具体的には、平成21年度9月末より12月下旬までドイツのミュンヘン大学にて時系列データの類似検索と応用に関する研究グループを訪問し、技術の交流と議論によって、提案する方法の有効性を確認すると同時に方式の改善を実施した。また、本研究環境を推進するための基礎技術を固めるため、情報の信頼度や重要度の特徴定義および効率的な物理的インデックス構成法の研究を合わせて実施した。すなわち、従来の類似性定義ではなく時間データが生成される内部構造表現に着目して記述した特徴の類似性を定義することで、特定の応用に依存せず広範囲の応用に適用可能なこれまでにない高い適用能力を持つ新たな類似検索手法の開発を目指している。本研究では1)内部特徴モデル表現の開発2)内部特徴モデルを用いた類似検索方法の開発,3)本提案方法の特定応用分野への適用,の3項目での研究を行っている。

平成21年度に関しては、平成20年度で実施した研究内容をより緻密にかつ広範に展開することを試みた。最終年度の平成22年度では、これまでの研究状況および研究成果を踏まえて、類似検索方法の性質分析と他の応用分野への適用とモデル改良を行った。具体的には、構築した内部特徴モデルの適用可能性および精度の向上を目的としてモデルの改良をはかり内部特徴モデルとして確立を行った。さらに、内部特徴モデルを用いた類似検索方法の性質を調べた。この点に関しては平成22年度3月末より9月中旬までオーストラリアのクイーンズランド大学を訪問し海外研究者との研究交流によって性質の導出を行った。さらに、構築した内部特徴モデルを用いた新たな類似検索方法を他の応用分野での適用を図り、従来方法との優位性の評価を行い、提案方法の有効性を明らかにした。また、本研究環境推進のための基礎技術としての研究も合わせて実施した。
専用並列計算機による「場の物理」の研究

平成5年度の成果は、専用並列計算機開発・製作作業が中心である。ハードウェア面では、平成4年度に作成した基本設計を基に、専用並列計算機の詳細設計を行った。この作業の第一段階として、並列計算機を構成するノードプロセッサ・結合ネットワーク・システム制御・入出力制御の各部の論理設計を行った。各部の構成素子(演算素子、記憶素子等)の性能、構成方式等の技術的詳細の選択決定にあたっては、それらに基づく並列計算機が「場の物理」の研究に必要な計算性能を満たすかどうかを、シミュレータによる疑似実行を含む詳細な検討を行い、必要な場合は設計の変更を加えつつ最終案を作成した。第二段階として、これらの詳細設計の機能動作確認、特にノード間通信性能の確認用に、16台構成のプロトタイプの部分試作を行った。ソフトウェア面では、並列処理システム用システムプログラムの基本設計を開始した。特に、ノード間通信の速度は専用並列計算機全体の性能の鍵の一つであり、そのためのシステムプログラムについては、その詳細を略決定した。また、ノードプロセッサの機能強化に付随するプログラミングアルゴリズムの開発、それに対するコンパイラの基本設計を推進した。物理学研究者は、詳細設計の各段階において、設計された並列計算機の物理学の具体的問題に対する実効性能評価のために、種々の問題の仮想ベンチマークテストを行った。またその結果を基に、各々の問題に対して最適なアルゴリズムを検討した。以上の作業の成果として特記すべき点は以下のとおりである。1)汎用RISCチップのスライドウィンドウ方式による機能強化。大型科学計算に於ては、汎用RISCチップのキャッシュメモリが有効に機能せず、最高性能の1/10程度の能力しか発揮出来ない。これを解決するために、汎用RISCチップに擬似ベクトル機能をもたせるように機能強化することにし、その具体的方策として、平成4年度に考案したレジスタウィンドウ方式を一層発展させたスライドウィンドウ方式を具体化し、詳細な仕様を纏めるとともに具体的な論理設計の大部分を行った。2)機能強化RISCチップのコンパイラー開発の基本方針の決定。上記のような新方式の並列計算機向きの機能強化RISCチップを有効に利用するには、効率のよいプログラムのコンパイラー・アルゴリズムが必須である。これについても成案を得ることができ、さらにコンパイラーの雛形を得ることができた。3)3次元ハイパークロスバ-ネットワークの採用。性能、価格、実装面から、種々のデータ通信ネットワーク構成を比較検討することにより、3次元ハイパークロスバ-が最適との結論に達し、その詳細の仕様を纏め具体的な設計に着手した。4)物理学の応用例に対する実効速度の高速化。格子QCDのプログラムの中で一番重要な部分に対して、仮想ベンチマークを行ない、上記1)の機能強化が必要なことが明らかし、さらに、上記1)、2)、3)の詳細な検討の結果、並列計算機全体としての実効速度が最高速度の65%程度まで向上させることが可能となった。これは、並列処理システムとしては特記すべきことである。5)最高速度300GFLOPSの詳細設計進行中。上記の点を含め、デバッグ、メインテナンス、実装等諸々の点を詳細に考察し、最高速度300GFLOPSの性能の並列計算機の詳細な設計が進行中である。6)最高速度600GFLOPS及び1.2TFLOPSも技術的に可能。ノード・プロセッサ数を2倍、4倍に増加させることにより、最高速度600GFLOPSさらには1.2TFLOPSの並列計算機は現状の汎用大型機の上位機種と同程度の大きさ及び電力で技術的に製作可能であるとの結論に達し、その実現のために現状で可能な範囲での拡張性を用意している。

2)機能強化RISCチップのコンパイラー開発の基本方針の決定。上記のような新方式の並列計算機向きの機能強化RISCチップを有効に利用するには、効率のよいプログラムのコンパイラー・アルゴリズムが必須である。これについても成案を得ることができ、さらにコンパイラーの雛形を得ることができた。3)3次元ハイパークロスバ-ネットワークの採用。性能、価格、実装面から、種々のデータ通信ネットワーク構成を比較検討することにより、3次元ハイパークロスバ-が最適との結論に達し、その詳細の仕様を纏め具体的な設計に着手した。4)物理学の応用例に対する実効速度の高速化。格子QCDのプログラムの中で一番重要な部分に対して、仮想ベンチマークを行ない、上記1)の機能強化が必要なことが明らかし、さらに、上記1)、2)、3)の詳細な検討の結果、並列計算機全体としての実効速度が最高速度の65%程度まで向上させることが可能となった。これは、並列処理システムとしては特記すべきことである。5)最高速度300GFLOPSの詳細設計進行中。上記の点を含め、デバッグ、メインテナンス、実装等諸々の点を詳細に考察し、最高速度300GFLOPSの性能の並列計算機の詳細な設計が進行中である。6)最高速度600GFLOPS及び1.2TFLOPSも技術的に可能。ノード・プロセッサ数を2倍、4倍に増加させることにより、最高速度600GFLOPSさらには1.2TFLOPSの並列計算機は現状の汎用大型機の上位機種と同程度の大きさ及び電力で技術的に製作可能であるとの結論に達し、その実現のために現状で可能な範囲での拡張性を用意している。
イネの窒素転流におけるNADH依存性グルタミン酸合成酵素の役割

イネのシンク組織である穂を構成する窒素の半分以上は、老化している下位葉からの転流に由来する。この主な転流形態はグルタミンであり、シンク組織における窒素再利用の初期段階でグルタミン酸への変換が必須である。この変換をNADH依存性グルタミン酸合成酵素(NADH-GOGAT)が担うという作業仮説をたて、本年度はイネの穂の登熟過程に着目し、主に免疫学的手法を用いて研究を進め、以下の成果を得た。頴果におけるNADH-GOGAT蛋白質含量とその活性は、イネの貯蔵蛋白質が胚乳に蓄積を開始する開花後15日目まで急増し、以後徐々に消失した。開花後10日目の頴果をもみ殻と未熟玄米に分離後NADH-GOGAT蛋白質の組織分布を調べた結果、頴果全体の約84%のNADH-GOGATが未熟玄米に存在していることが判明した。また、予備的な結果ではあるが、パラフィン包埋後の頴果から横断切片を作成し、抗体染色を試みた結果、NADH-GOGAT抗原は師部柔細胞と伴細胞付近に局在している像が得られた。一方、もう一つのGOGAT分子種であるFd-GOGATは、葉緑体が比較的発達の認められるもみ殻に多く存在しており、NADH-GOGATとは全く異なる組織分布と挙動を示した。以上の結果は、シンク組織の師部周辺に局在しているNADH-GOGATが、老化組織から転流してきたグルタミンをアミノ酸代謝の中心であるグルタミン酸に変換している可能性を強く示唆する。これまで、役割が全く不明であったNADH-GOGATに関して、初めてその重要性を指摘した結果が得られ、その成果をまとめPlant Physiologyに掲載予定である。
スギ花粉抗原特異的免疫応答及び免疫抑制の分子機構の解析

我々はこれまでにスギ花粉抗原に対する低応答性はヒト主要組織適合性抗原(HLA)に連鎖したIgEクラスの免疫抑制遺伝子によってスギ花粉抗原特異的サプレッサーT細胞を介して発現される常染色体性優性の遺伝形質であることを明らかにした。今回はスギ花粉抗原と特異的に反応する単クローン抗体CPA7及びCPA9を用いて抗体カラムを作製し、アフィニティークロマトグラフィーを行ってスギ花粉抗原の分子量41kDaと46kDaの2つの糖蛋白を大量に精製した。この精製スギ花粉抗原はほとんどのスギ花粉症患者血清において高いスギ花粉抗原特異的IgE抗体価を示し、スギ花粉の主アレルゲンであることが再認識された。つづいてゲルマクロマトグラフィーを行って分子量の差によって2つの糖蛋白を分離してそれぞれのスギ花粉症患者血清中の特異的IgE抗体価を測定したところ、有意な差は認められなかった。この結果分子量41kDaと46kDaの2つの糖蛋白はアレルゲン活性においてはほとんど差がないとかんがえられた。つづいて、スギ花粉症患者抹消血リンパ球と精製スギ花粉抗原を用いて数種類のT cell lineを樹立した。このT cell lineを使ってさらに分画精製したスギ花粉抗原に対するIgE抗体産生の反応系を確立した。
胎児心不全の出生前診断と治療に関する研究

定期検診時に異常を認めた胎児(胸水、腹水の貯留、浮腫など)に断層心エコー検査を施行し、上室性および心室性期外収縮などの胎児不整脈を診断し、治療してきた。断層心エコーでわからない電気的特性を明かにするために胎児心電図を制作中である。断層心エコー検査中、ファロー四徴症、左心低形成、エブスタイン氏症などの先天性心疾患を診断してきた。なかには胎児心不全の状態であり、母体への薬剤による治療および胎児の腹水,胸水を排出し、加療を試みた。胎児心不全の診断は心室容量、心筋壁運動、血行動態および心機能などで行うが、胎児についてはこれらの正常値もない。そこで、妊娠週数ごとの左室および右室の容積を正常胎児について測定し、正常値をだした。心不全時は心室の容積が増加するだけでなく、心房圧左、肺欝血などのために右室内圧の上昇、肺高血圧および三尖弁閉鎖不全が出現する。三尖弁閉鎖不全の持続時間および最大流速を正常胎児および病的胎児について定量化し、病的三尖弁閉鎖不全は持続時間が全収縮期の60%以上と長く、最大流速も0.6m/sec以上であると報告した(日児誌、未熟児新生児学誌)。胎児期の心房間交通は両心室のコンプライアンスの差、両心房の負荷状態などによって決り、左心室からの心拍出量に関与するので、非常に重要な意義を持つ。しかし、今だ心房間交通の人胎児の成績はない。我々は心房間血流のパターンおよび方向性が正常胎児と心房中隔欠損を持つ胎児では異なることを1992年の日本小児循環器学会で発表した。すなわち、正常胎児では二ないし三峰性の右左短絡であるが、病的になると多峰性であったり、左右短絡が出現してくることを明かにした。
人工透析患者向けプロバイオティックドリンクヨーグルトの創製

人工透析患者向けプロバイオティックドリンクヨーグルトの創製を目指し、2年間検討した結果、全乳をタンジェンシャルフロー方式で限外ろ過しカリウム等のミネラルを低減したものに、市販のDVIスターターとL.gasseriJCM1025を添加して37°Cで7時間培養することが最適であると確認された。培養後に4°Cの冷蔵室に保存し経時的にプロバイオティック効果が期待されるL.gasseri菌数を測定したところ、2週間後までは培養直後とほぼ同数の菌数を維持していることが確認された。100mlの牛乳には150mg前後のカリウムが存在しているため、一日当たりのカリウム摂取量を1,500mg以下にする必要がある人工透析患者は、乳・乳製品の摂取に注意しなければならない。近年、整腸作用など種々の生理効果が期待されるプロバイオティクスを含有したヨーグルトが市販されているが、人工透析患者はその恩恵を享受できない。多くの人工透析患者が投薬の副作用で便秘に苦しんでいる現状を改善することを目指し、カリウム含量を低減させた脱脂乳(以下、低カリ脱脂乳)を原料として、整腸作用が期待されるプロバイオティクスを含有し、しかも風味良好なヨーグルトを創製することを目的とした。平成28年度は脱脂乳を分画分子量10kDaの限外ろ過膜(UF膜)でカリウム含量の低減化を試み、処理後のカリウム含量を1/3以下に低減させるためにかかる費用ならびに所要時間を勘案し、低カリ脱脂乳の調製法を決定した。また、UF膜による処理で乳糖とカルシウム含量が減じたので、乳糖とカルシウムを処理前の含量まで添加した。プロバイオティクスとして添加する乳酸菌は、ヒト腸管由来のL. acidophilusグループ乳酸菌十数菌株から、胃酸耐性および胆汁酸耐性が強く下部消化管まで生菌として到達できるもの、ヨーグルト製造条件の温度ではほとんどプロテアーゼ活性を示さないもの、さらにヨーグルト製造過程でほとんど溶菌しないものとしてL.gasseri JCM1025株を選抜した。発酵スターターにはStreptococcus thermophilusとLactobacillus delbrueckiisubsp. bulgaricusを用い、選抜したL.gasseri JCM1025を発行後期に添加することで、発酵には影響を及ぼさないようにして、両者の共生関係を利用し最短8時間発酵での製品化を可能とした。平成28年度に設備備品として申請していたクロスフローリサーチIIiシステムの納期が手違いで著しく遅れたため、それを用いた低カリ脱脂乳の大量調製は年度末に数回施行したに過ぎず、このシステムを用いた低カリ脱脂乳調製の最適条件の確立は次年度にずれ込んでしまった。しかし、プロバイオティクスとして添加する乳酸菌は、胃酸耐性および胆汁酸耐性が強く下部消化管まで生菌として到達できるもの、ヨーグルト製造条件の温度ではほとんどプロテアーゼ活性を示さないもの、さらにヨーグルト製造過程でほとんど溶菌しないものという条件でL.acidophilusグループ乳酸菌12菌株からL.gasseri JCM1025株を選抜することができた。プロバイオティクスとして添加する乳酸菌のプロテアーゼにより製品ヨーグルトの風味が劣化することも懸念されたので、S.thermopphilusとL. bulgaricusを発酵スターターとして用い、両者の共生関係を利用し最短8時間発酵での製品化を目指し、プロバイオティック効果が期待されるL.gasseri JCM1025は別途培養した菌体を発酵過程の後期に添加し、発酵への直接的関与をできる限り避けるようにした。平成28年度に設備備品として申請していたクロスフローリサーチIIシステム(タンジェンシャルフローろ過方式)の納期が手違いで著しく遅れたため、平成28年度は既存の加圧式限外濾過システム(デッドエンドフローろ過方式)を用いて低カリ脱脂乳を作製し、それを用いてヨーグルトを試作したが、最終年度である本年度は、クロスフローリサーチIIシステムを用いることで、カリウムをデッドエンドフローろ過方式と同程度の水準まで除去するのに要する時間を1/19まで大幅に短縮可能であることが確認された。さらにこのシステムを用いることで、遊離のリンを10mg/ml程度低減することも可能であることが確認されたが、乳中のリンはカゼインに結合しているものが大部分なので、これ以上の低減は不可能と考えられた。プロバイオティックドリンクヨーグルトを作成するために添加するL.gasseri JCM1025の最適添加量をL.bulgaricus共存下でも選択的計数が可能であるマルトースMRS培地を用いて検討した。風味向上を目指し、遊離アミノ酸組成、遊離脂肪酸組成、さらにアセトアルデヒドをはじめとするカルボニル化合物組成を分析したが、市販のヨーグルトに比較して、アセトアルデヒド含量が低いことが確認されたため、市販のヨーグルトフレーバーを添加し風味向上を達成した。ドリンクタイプヨーグルトの場合でも、消費期限は2週間であるため、保存性を向上させる手立てとしてフローズンタイプのドリンクヨーグルトを試作した。その結果、約1ヶ月後でもL.gasseriJCM1025の生菌数が10.000,000cfu/ml以上を維持しており、その有用性が確認された。

培養後に4°Cの冷蔵室に保存し経時的にプロバイオティック効果が期待されるL.gasseri菌数を測定したところ、2週間後までは培養直後とほぼ同数の菌数を維持していることが確認された。a)クロスフローリサーチIIiシステムによる低カリ脱脂乳の最適大量調製条件の確立本来ならば前年度に最適条件を確立することになっていたが、納期が遅れたためまだ検討が不十分であったので、今年度、精力的に検討し最適条件を確立する。b)プロバイオティック乳酸菌の最適添加量の決定プロバイオティック乳酸菌が持つ整腸作用等の生理効果が発揮されるためには、下部消化管まで少なくとも106cfu/mlの生菌が到達する必要があるといわれている。そこで、試作したプロバイオティックドリンクヨーグルト中のL.gasseriの生菌数を、L.bulgaricus共存下でも選択的計数が可能なマルトース-MRS培地用いて確認する。その結果を踏まえ,創製するプロバイオティックドリンクヨーグルトへの添加量を決定する。c)最適均質化圧力の決定透析膜を使って作製した脱塩脱脂乳から調製したヨーグルトはホエー分離が顕著で保形性も不十分であったこと、さらにヨーグルトの発酵には風味の点でL.gasseriは関与しない方が良いことより、一般的なスターター乳酸菌でタンク発酵させた後に冷却し、L.gasseri菌体を添加して十分撹拌した後に、均質化してドリンクタイプとすることを目指しており、均質化圧力とL.gasseriの生残性並びに舌触りを主な指標として検討し、最適均質化圧力を決定する。d)風味向上を目途とした香料の選定低カリ脱脂乳を原料としたプロバイオティックドリンクヨーグルトの風味について、遊離アミノ酸組成、遊離脂肪酸組成、さらにアセトアルデヒドをはじめとするカルボニル化合物組成を分析して風味を確認すると共に、官能評価を行い、おいしい医療用食品を目指し、最適な香料の種類とその添加量を決定する。酪農化学平成28年度に設備備品として申請していたクロスフローリサーチIIiシステムの納期が手違いで著しく遅れたため、それを用いた低カリ脱脂乳の大量調製は年度末に数回施行したに過ぎず、最適条件の確立は次年度にずれ込んでしまった。そのため、このシステム用に購入予定であった中空糸フィルターの購入を断念したため、次年度使用額が生じた。クロスフローリサーチIIiシステム用の中空糸フィルターを選定して購入し、低カリ脱脂乳を原料としたプロバイオティックヨーグルトの風味について、遊離アミノ酸組成、遊離脂肪酸組成、アセトアルデヒドをはじめとするカルボニル化合物組成を分析するためのHPLC及びGC用のカラムを購入する。また、結果を論文化し投稿する。
耐熱性リガーゼを用いたLCR法によるMN法並びにSs式血液型判定法の確立

1.MNSs型(5例)、MNs型(10例)、MSs型(3例)、Ms型(5例)、NSs型(2例)およびNs型(10例)の各血液型の血液から常法によりDNAを抽出した。2.M型とN型の抗原の相違部分、すなわちN末端から数えて1番目のアミノ酸の相違する塩基部分を3 ́末端にデザインした20bpのオリゴヌクレオチドと、それに隣り合った20bpのオリゴヌクレオチドおよび各オリゴヌクレオチドに相補的な2本のオリゴヌクレオチドを作製した。M型検出用、N型検出用の2種類、合計6本のオリゴヌクレオチドを作製した。また、S型とs型の検出においても、N末端から数えて29番目のアミノ酸の相違する塩基部分を検出するために、同様に6本のオリゴヌクレオチドを作製した。3.各オリゴヌクレオチドと鋳型DNAを用いてLCR反応を行った。LCR反応はLCR KIT(STRATAGENE)を用いて反応を行った。反応温度は、KITの添付マニュアルにある条件[92°C4分(1回)、60°C3分(1回)、92°C20秒、60°C20秒(25回)]の他、[92°C4分(1回)、60°C3分(1回)、92°C1分、60°C1分(20-40回)]、[94°C1分、65°C4分(20-30回)]、[95°C1分、55°C1分、65°C1分(20-40回)]等数種類の温度条件について検討を行った。また、Ligaseの濃度や鋳型DNAの量、用いるオリゴヌクレオチドの組合せ等についても検討を重ねた。結果M型、N型、S型およびs型のいずれの型においても、未だ期待された特異的増幅産物は得られていないが、今後更にオリゴヌクレオチドの長さや反応条件等の検討を続ける予定である。