hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
水田農業の持続性とレッドデータ生物の再生を両立するための野外基礎実験

初年度同様、現地に村人の協力で休耕田を有効活用したビオトープ水田を造成し、そこマメ科緑肥草生不耕起栽培による赤米・黒米数品種の低投入持続型栽培を試みた。タガメなどのレッドリストを含む多様な生物相のコロナイゼーションが確認でき、赤米1品種、紫黒米2品種が無農薬・無肥料栽培で収量性が良好であり、現地の耕作者からほど良い反応を受けた。本研究における以下の2項目について、洲鷹研究などを行い最終年度として農業ビオトープ理論として取りまとめを行った。1.レッドデータ個体群に関するフィールドワーク最終年度は、初年度から継統してきたタガメ個体群の動態について、兵庫県の高密度生息地において調査を行い、データの再現性の確認を行った。またゲンゴロウCybister属については、タガメ同様の標識再捕獲法を駆使した詳細な個体群の時空問的動態に関する解析を行った。これらの調査から、タガメとゲンゴロウでは、水田、ため池、水路などの利用形態が若干異なること。メインの繁殖地は両種とも水田であることが判明した。2.増殖要因解析実験附属農場では不耕起、緑肥マルチングによる低投入持続型栽培法、現地では水稲とクワイの混作実験を行い、そこでのレッドリスト種の増殖の可能性を検討した。その結果、低投入栽培法では多くの水生昆虫の定着、増殖が促進され、水稲の収量も十分得られた。また、現地における水稲とクワイの温混作実験では、両作物の混作が可能であり、クワイはタガメ、ゲンゴロウともに産卵に利用された。
デジタルPCRを用いた頭頸部がん血中循環腫瘍DNAの解析と新規バイオマーカー確立

本研究では、従来の方法と比べて非常に高感度かつ再現性高く遺伝子変異や増幅を検出することが可能なデジタルPCRを用いて血中循環腫瘍DNA(ctDNA)の解析を行い、頭頸部がんの新規バイオマーカー、特にこれまで実用化されていない「治療効果判定」および「再発予測」のバイオマーカー確立を目的としている。頭頸部がんの中でも腫瘍組織由来のDNA中にウイルス由来DNAが検出されることが明らかとなっているEBウイルス(EBV)関連上咽頭がんならびにヒトパピローマウイルス(HPV)関連中咽頭がんをまずは対象として症例の集積を進めており、平成30年度までにEBV関連上咽頭がん症例が4例、HPV関連中咽頭がん症例が25例が集積された。初回治療開始前の時点では、EBV関連上咽頭がんでは4例中3例(75%)において、HPV関連中咽頭がんでは25例中14例(56%)においてctDNAを検出可能であった。現在、治療開始前にctDNAを検出することができた17例について解析をすすめており、EBV関連上咽頭がんでは3例中2例(67%)で、HPV関連中咽頭がんでは14例中14例(100%)の症例において、初回治療終了時にctDNAが検出されなくなっており、病勢との関連があることが明らかになり、バイオマーカーとして有用であることが期待される結果となっている。過去の論文から、初回治療開始前のctDNA検出率が90%程度と予想していたが、実際には29例中17例と約60%程度にとどまったため、ctDNAが検出された症例数が想定よりも少なくなっている。血液採取から血漿抽出までの時間や保存状態の影響の可能性が高いと考えられ、血液保存体制の見直しが必要となり、EBV関連上咽頭がん、HPV関連中咽頭がん以外の症例の集積を開始できていない。EBV関連上咽頭がん、HPV関連中咽頭がんについて引き続き症例集積を進めていく。初回治療開始前にctDNAを検出することができた症例においていは、初回治療中のいくつかの時間点でのctDNAの量の推移を解析していく。また、初回治療終了後に再発を認めた症例でのctDNAの検出の有無についても解析を進めていく。ctDNAの検出率を高めるように血液血漿保存の条件検討を見直していく。具体的には、血液採取後にすみやかに血漿抽出を行うことができる体制の整備、ctDNAを分解しにくい採血管の採用を検討している。HBV関連上咽頭がんおよびHPV関連中咽頭がん以外の症例についての症例集積および解析が開始できていないため、本年度は執行額が少なくなった。次年度、これらの症例の集積、解析を開始することにより必要な物品等が増えること、血液血漿保存の体制の見直しが必要となっており採血管の導入などにも費用がかかることから、次年度これらに使用する。
肝臓星細胞によるビタミンA恒常性維持機構の解明

ビタミンAは視覚・生殖・胚発生・表皮機能維持など多くの生理機能に関与しヒトでは血中濃度が2μMに調節されている。ビタミンAを大量に貯蔵するヤツメウナギを用い細胞質レチノール結合タンパク質(CRBP)の解析を行い、ヤツメウナギCRBPがレチナールに結合しないことや小腸に強く発現していることなどを明らかにした。小腸におけるビタミンA吸収と肝臓におけるビタミンA貯蔵のバランスによって実現される血中ビタミンA恒常性維持機構は脊椎動物進化の早い時期から発達してきたことが示唆された。ウミヤツメのゲノム配列データベースをもとにカワヤツメ細胞質レチノール結合タンパク質(CRBP)のcDNAクローニングを行い、さまざまな脊椎動物のCRBP IおよびIIのアミノ酸配列と比較して系統樹を作成した。その結果CRBP IとCRBP IIはそれぞれ単系統群を形成し、カワヤツメCRBPは両単系統群の中間に位置することが明らかとなった。カワヤツメCRBPにHisタグを付加して大腸菌で大量発現し精製した。得られたタンパク質のレチノールおよびレチナールへの結合を調べたところ、カワヤツメCRBPはレチノールには強く結合するがレチナールにはほとんど結合しないことが明らかとなった。各種臓器におけるカワヤツメCRBP遺伝子の発現をノザンブロッティング法により解析したところ、全身、特に消化管で強い発現を示すことが明らかとなった。この発現パターンは全身、特に肝臓で強く発現している哺乳類CRBP Iの発現パターンとも、小腸特異的に発現している哺乳類CRBP IIの発現パターンとも異なり、両者の特徴を折衷したものであった。カワヤツメ成体は海でサケに取り付いてその血液を吸って生活している。血液中の主要なビタミンAはレチノールであるから、カワヤツメにとってのビタミンA源はレチニルエステルでもβカロテンでもなくレチノールである。カワヤツメが食餌から効率よくビタミンAを摂取するためにレチナールとの結合は必要なかったため進化の過程でレチナールとの結合性を失ったと考えられる。小腸におけるビタミンA吸収と肝臓におけるビタミンA貯蔵のバランスによって実現される血中ビタミンA恒常性維持機構は、脊椎動物進化の早い時期から発達してきたことが示唆された。四塩化炭素をラットに週2回8週間投与し、肝臓におけるTGFβ1, 2, 3 mRNAの発現量をリアルタイムPCRにより測定し、タンパク質の発現と局在を免疫組織化学により観察した。その結果、四塩化炭素投与によりTGFβ1, 3 mRNAの発現が誘導されることが明らかとなった。四塩化炭素投与前後でTGFβ2 mRNAの発現量に変化はなかった。四塩化炭素投与により、レチノールをエステル化する酵素であるレシチン:レチノールアシルトランスフェラーゼ(LRAT)mRNAや、レチノイン酸分解酵素であるCYP26A1 mRNAの発現も上昇することが明らかとなった。さらに、免疫組織化学によりTGFβ3タンパク質は肝臓実質細胞の細胞質に存在すると考えられた。これらの結果は、四塩化炭素投与により肝臓内でのレチノイドの動態が変動することと、TGFβ3による細胞外マトリックスの合成誘導が起こることを示唆している。実際レポーターアッセイによりTGFβ3遺伝子のイントロンにレチノイン酸応答領域があることを明らかにした。体内にビタミンAを大量に貯蔵していることが知られているヤツメウナギから、細胞内レチノール結合タンパク質(CRBP)のcDNAクローニングを行った。ヤツメウナギCRBPを大腸菌で大量発現・精製し、得られたタンパク質のレチノールおよびレチナールへの結合を調べたところ、ヤツメウナギCRBPはレチノールには強く結合するが、レチナールにはほとんど結合しないことが明らかとなった。本研究では、活性化星細胞で増強したレチノイドシグナルが、星細胞におけるビタミンA貯蔵を回復させるためのフィードバック調節機能を果たすのではないかと考え、その検証を行っているが、その過程で2報の原著論文を発表することができたため。今後も引き続き「活性化星細胞で増強するレチノイドシグナルはビタミンA貯蔵を回復するためのフィードバック制御機能を持つ」可能性を検証する。まずはじめに、レチノールをエステル化する酵素であるレシチン:レチノールアシルトランスフェラーゼ(LRAT)の酵素活性を、レチノール(ROL)を単独で基質にした場合と細胞内レチノール結合タンパク質(CRBP)と複合体を形成させて基質にした場合とで、どの程度変動するのかを生化学的に確認する。次に作業仮説において想定したフィードバックループの構成因子のいくつかに介入し、ループが破綻するかどうか確認する。具体的にはレチノイン酸受容体α(RARα)やCRBPのノックアウトマウスを用い、in vitroおよびin vivoで星細胞に活性化を誘導してレチノイドの量を定量し、野生型マウスの場合と比較する。ラット肝臓星細胞をパーコール密度勾配遠心法により調製して培養し、分子生物学的・生化学的解析に供するための消耗品費を計上した。さらに、学会発表のための国内旅費、英文論文投稿のための英文校閲費と投稿料を計上した。
蛋白質天然変性領域がもたらす相転移ダイナミクスの構造基盤解析

TIA1が顆粒状構造体や不溶性凝集体へと状態転移する条件を体系的に検証して、相図を作成する。得られた相図に基づいて、TIA1が構造転移する分子機序を考察する。(1)相図に基づくアプローチ」と(2)天然変性領域の動的構造のNMRによるアプローチのマクロ・ミクロ両視点の包括的解析から、TIA1の天然変性領域を介してストレス顆粒や不溶性凝集体へと構造転移する一連の重合反応の機序を明らかにする。
開リーマン面と凝等角写像の研究

開リーマン面上で生じる現象の解析が目標であった。・開リーマン面の研究としてDenjoy domainsは面積正の補集合を持つ平面領域に等角写像されないことを示し,その埋め込みの一意性に注意した。又,有現次元reduced Teichmuller spaceの1点であるリーマン面から埋め込み可能なリーマン面を表すreduced Teichmuller spaceの点がreal analytic submanifoldとなることを示し,埋め込み可能なリーマン面の弁別について考察した。リーマン面上で与えられたAhlfors-Rauchの変分公式を高次元に拡張した。・同相群の研究として,Mを連結非コンパクト2次元PL多様体,XをMのコンパクト部分多面体,Hx(M)をX上恒等的なMの同相写像全体に、広義一様収束の位相を入れた位相群として,Hx(M)のid_Mの連結成分Hx(M)_0のホモトピー型を決定した:(1)Hx(M)_0は次の場合を除いて可縮である:(2)上記の例外的な場合には、Hx(M)_0は円周のホモトピー型を持つ。この応用として,Hx(M)_0が可分Hilbert空間l_2にモデルを持つ無限次元位相多様体となることを示し,その位相型を決定した。・曲面の代数学的研究として,種数gのコンパクト向き付け可能曲面からn個の点をぬいた曲面の基本群をG(ただし、2-2g-n<0)とする。このとき、Gの任意の指数有限部分群Hに対し,Hに含まれるGの指数有限特性部分群Kで,G/Kの中心が自明となるものが存在することを比較的簡単に示している。・ウェーブレットの研究として,M進ウエーブレットのスケーリング関数のシンボルが満たす関数方程式の非負解について考察している。特に,この解が零点を持つ場合についてその位置と非負解の存在との関係を詳細に調べている。・マルコフ過程の研究として,一般の対称マルコフ過程の従属変換に対するディリクレ形式の公式を与え,それを用いてある種の特異な拡散過程の従属変換に対して,再帰性と到達可能性の判定法を与えた。本年度は,リーマン面の変動させたとき生じるAhlfors-Rauch Type Variational Formulasを高次元複素多様体に拡張することを試みている。擬等角写像の拡張の為ベルトラミテンサーを定義し,フォームのファミリーの正則性の概念を導入してVariational Formulasを得ている。ウェーブレットの研究として,直交M進ウェーブレットの微分可能性に関してHolder指数に対する評価式をフーリエ解析と正値作用素の理論を適用して得,更にこれを用いてHolder指数に対する精密な数値結果を得た。これは従来得られているSobolev空間の意味の滑らかさに関する結果からの帰結と比較してかなり鋭い評価を含むものである。マルコフ過程の研究として,マルコフ過程の収束族に対するDonsker-Varadhan型の大偏差原理をコンパクトな領域の外で消滅させた場合に確立し,その応用としてマルコフ過程の生成作用素の主固有値がそのマルコフ過程の確率法則に関して連続であることの証明を与えた。同相群の研究として,連結2次元多様体Mの同相群のid_Mの連結成分H_X(M)_0からコンパクト多面体XのMへの埋め込みの空間ε(X,M)への自然な制限写像が主バンドルになることを示し,応用として,ε(X,M)がl^2-多様体になることを示した。写像類群の研究として,境界付きの2つの曲面S_1,S_2の写像類群をはりあわせてコンパクトな曲面Sが得られるときの,S_1,S_2,Sの写像類群の「(重み)フィルターづけ」のcompatibilityを示した。シュレーディンガー作用素の研究としてvon Neumann-Wiener型のポテンシャルを持つシュレーディンガー作用素の正の固有値の非存在とポテンシャル係数との関連性および,一般固有関数の増大度について論じ,又,シュレーディンガー作用素の状態集積測度を適切な境界条件を持つ有界領域に制限された作用素の固有関数を用いる方法と全空間での作用素のスペクトル射影を用いる方法の2方法で定義し,この定義が一致する十分条件を与え,ディリクレとノイマンの境界条件でそれを検証した。

・曲面の代数学的研究として,種数gのコンパクト向き付け可能曲面からn個の点をぬいた曲面の基本群をG(ただし、2-2g-n<0)とする。このとき、Gの任意の指数有限部分群Hに対し,Hに含まれるGの指数有限特性部分群Kで,G/Kの中心が自明となるものが存在することを比較的簡単に示している。・ウェーブレットの研究として,M進ウエーブレットのスケーリング関数のシンボルが満たす関数方程式の非負解について考察している。特に,この解が零点を持つ場合についてその位置と非負解の存在との関係を詳細に調べている。・マルコフ過程の研究として,一般の対称マルコフ過程の従属変換に対するディリクレ形式の公式を与え,それを用いてある種の特異な拡散過程の従属変換に対して,再帰性と到達可能性の判定法を与えた。本年度は,・開リーマン面の研究としてDenjoy domainsは面積正の補集合を持つ平面領域に等角写像されないことを示し,その埋め込みの一意性に注意した。・同相群の研究として,Mを連結非コンパクト2次元PL多様体,XをMのコンパクト部分多面体,Hx(M)をX上恒等的なMの同相写像全体に、広義一様収束の位相を入れた位相群として,Hx(M)のid_Mの連結成分Hx(M)_0のホモトピー型を決定した:(1)Hx(M)_0は次の場合を除いて可縮である:(2)上記の例外的な場合には、Hx(M)_0は円周のホモトピー型を持つ。この応用として,Hx(M)_0が可分Hilbert空間l_2にモデルを持つ無限次元位相多様体となることを示し,そめ位相型を決定した。・マルコフ過程の研究として,一般の対称マルコフ過程の従属変換に対するディリクレ形式の公式を与え,それを用いてある種の特異な拡散過程の従属変換に対して,'再帰性と到達可能性の判定法を与えた。
鉱物中の水素位置で読み解くマントルダイナミクス：鉱物物性の結晶化学的理解に向けて

本研究では、マントルダイナミクスの解明に向け、水に起因した物性変化を結晶化学原理により体系的に理解することを目的とし、高圧実験を主とした鉱物中の水素位置の決定および、今後の発展として、低温高圧その場IRへの装置の改良を試みた。常温における高圧その場IR実験の手法がおおむね確立したため、本年度は極低温下における無水鉱物中の水素のIR観察を試みた。一般に、物体の温度を極低温(10 K)まで下げIRスペクトルを測定することで、原子の熱振動が弱まり、ブロードなIRバンドは縮退し、シャープなバンドとなることが期待される。徳島大学野口直樹助教の協力の下、高圧実験により水を含ませたFoとEnの多結晶体を、8 Kという極低温下でIRスペクトルの測定を行った。本測定においては、残念ながら常温下のスペクトルと比べ大きな変化は見られなかった。しかしながら、近年Geiger and Rossman (2019)においてガーネットの80 KでのIRスペクトルの観察が報告されており、こちらでは常温下で1つのブロードなバンドだったものが、低温下では2つのシャープなバンドに分離していく様子が報告されている。鉱物によって変化が見られるものと見られないものがあるようであるが、シャープなバンドへと変化する鉱物に関しては今後水素位置決定の大きな助けとなることが期待される。そのため、現在開発途上ではあるものの、80 K程度の低温下での高圧その場IR測定を行うことを目的とし、岡山大学惑星物質研究所に設置された顕微真空IR装置の改良を行っている。低温の実現には、液体窒素を用いて熱伝導によりDACごと冷却することを想定している。しかしながら、熱伝導で冷却を実現するためには、10-4 Pa程度の真空度が必要で、現状の真空度では不十分であることが判明し、真空ポンプの取替えを含め、現在試行錯誤を加えている段階である。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。本研究では、マントルダイナミクスの解明に向け、水に起因した物性変化を結晶化学原理により体系的に理解することを目的とし、高圧実験を主とした鉱物中の水素位置の決定を目指している。上部マントルの主要構成鉱物であるカンラン石の水取り込まれ方に関する研究は数多く行われており、今までに実験的研究および理論的研究によって示唆された。しかし、カンラン石中の水素配置については未だ統一見解が得られていない。そこで、本年度、高圧下での鉱物中の水素位置に与える酸素雰囲気の効果を調べるために以下の研究を行った。様々な条件下(e.g.含水量、酸素雰囲気、圧力)で合成された含水試料のIR観測は、鉱物中の水素位置を推定するのに非常に有用である。本研究では特に酸素雰囲気に注目し、同水雰囲気下で酸素雰囲気を変えたときに、カンラン石中の含水量はどのように変化するかを明らかにした。結果、酸素雰囲気と含水量の関係には、大きな正の相関があることが分かった。Mo bufferとRe bufferでは含水量に10倍以上の開きがあった。Bai and Kohlstedt (1992)では300MPa以下の低圧で同様の実験を行っており、飽和含水量と酸素雰囲気の間には依存性は無く、飽和含水量は水雰囲気のみによって決まると報告している。しかしながら、本実験で明らかになったように、高圧下では、酸素雰囲気依存性が強く観測されたため、沈み込み帯といった深さ方向で大きく酸素雰囲気の変化していく領域では、同じ水雰囲気下でも酸素雰囲気の効果により含水量が大きく異なり、鉱物物性に大きな影響を与えることを示唆した。また、吸光度は軸方向で大きな差があり、a軸方向に平行に測定した方が、強い吸収が見られ、OH結合の伸縮振動は、b軸よりはa軸方向に沿った方向を向いていると考えられる。水素位置の特定には偏光光の利用が非常に有益であることを示した。地球の上部マントルは、主にカンラン石から構成されている。水(H+)がカンラン石の物理的性質にどのように影響するかを理解するために、オリビンの水素位置の知識は最も重要な情報の1つであり、水素位置を知ることは、鉱物物性の理解の本質であり、マントルレオロジーの解明に極めて重要である。そこで、本年度は、特に酸素雰囲気に注目し、同水雰囲気下で酸素雰囲気を変えたときに、カンラン石中の含水量はどのように変化するかを明らかにした。実験にはYale大学に設置されている川井型マルチアンビル高圧発生装置を用いた。圧力条件は3 GPa、温度条件は1200°Cである。水素について閉鎖系を達成するために、AuPdカプセルを使用した。また、酸素雰囲気を制御するため、Mo/Ni/Reカプセルを使用した。出発物質には、事前に結晶方位を測定し円柱上に切り出し、c面が表面に出るよう成型したSan Calros olivineの単結晶を使用した。回収試料はFT-IRでa軸・b軸それぞれに沿った方向で測定し、偏光した光を使用した。本研究より、高圧下では、酸素雰囲気依存性が強く観測されたため、沈み込み帯といった深さ方向で大きく酸素雰囲気の変化していく領域では、同じ水雰囲気下でも酸素雰囲気の効果により含水量が大きく異なり、鉱物物性に大きな影響を与えることを示唆した。

また、吸光度は軸方向で大きな差があり、a軸方向強い吸収が見られ、OH結合の伸縮振動は、b軸よりはa軸方向を向いていると考えられる。今までに報告されているカンラン石中の水の多くの研究では、単結晶試料でも偏光光を用いずにIRスペクトルを測定しているものが多いが、水素位置の特定には偏光光の利用が非常に有益であることを示した。このことから、研究はおおむね順調に進展していると判断した。本研究では、マントルダイナミクスの解明に向け、水に起因した物性変化を結晶化学原理により体系的に理解することを目的とし、高圧実験を主とした鉱物中の水素位置の決定を目指している。そこで、本年度、高圧下で試料にかかる差応力を見積もるために、以下の研究を行った。・高圧実験回収試料の微細組織観察本研究課題では、水を含んだ無水鉱物のIRその場観察実験を行い、その手法の確立、およびIRスペクトルの圧力変化を観察した。実験より、Foのa軸に平行な偏光IRにおいて、4 GPa以上で3612 cm-1 (OHバンド)の高波数側への大きなシフトが観測された。一方、b軸に平行な偏光IRにおいては同波数のバンドは低波数側へシフトし、c軸に平行な偏光IRではほぼ変化しないという三者三様の挙動が観測された。しかし、本実験で高圧発生に用いたダイヤモンドアンビルセル(DAC)は、上下方向に一軸圧縮を加える機構であり、さらに圧媒体には赤外光に透明なKBrを用いているため、試料室内の静水圧性の悪さが実験結果に影響を与える可能性が指摘された。試料は既に回収済みであるため、直接試料に生じた差応力を測定することは不可能である。そこで、高圧実験回収後の試料に生じた差応力を見積もるため、愛媛大学GRCにおいてTEMによる微細組織の観察を行った。差応力は、試料の転位密度より求めることが出来るとされているためである。その結果、試料には極少量の転位が観察された。観察された転位量とこれまで報告されているカンラン石についての応力と転位量と比較することで、差応力は実験中に与えた最大圧力に比べ、十分に小さいことが明らかとなった。このことから、これまで私が行ったダイヤモンドアンビルセルを用いたFTIRスペクトルのバンドシフトは差応力の影響ではなく、圧力による効果によるものであると考えられる。上部マントル主要鉱物であるカンラン石に微量に含まれる水は、物性に大きな影響を与えることが知られているが、結晶中の水素の位置は物性を考える上で特に重要なテーマとなる。本研究課題では、カンラン石中の水素配置の解明に向け、高圧その場IR実験、電子状態計算を組み合わせて鉱物中の水素配置が物質科学的に与える影響を精密に理解することを目指して研究を進めている。本研究課題では、化学量論的には無水鉱物であるカンラン石中の少量しか存在しない水素の結合状態を高圧下でのその場IRスペクトル観察により世界で始めて成功し、FTIRスペクトルのバンドの波数の圧力依存性を明らかにしつつある。さらに、電子状態計算に基づき、実験結果を説明しうるカンラン石中のOHの位置の特定も行った。バンドシフトは差応力の影響を受ける可能性が指摘されていたが、TEMによる回収試料の転位観察の結果、差応力は実験中に与えた最大圧力に比べ、十分に小さいことも確認しており、現在論文を執筆中である。微小な水素の結合状態のシグナルを高圧下で捉えることは非常に難しく、この論文が公表されると、大きなインパクトを与えることが期待される。
EBウイルス転写調節因子Z蛋白に対する抗体価測定法の開発とその意義に関する研究

上咽頭癌(Nasopharyngeal carcinoma,NPC)とEpstein Barrvirus(EBV)の関連性は、患者血清中の抗EBV抗体価上昇や腫瘍組織内EBV核酸の証明などにより確立されている。特にウイルス複製サイクルに発現する早期抗原(early antigen、EA)や後期蛋白のEBV粒子抗原(viral capsid antigen,VCA)に対するIgA抗体は発症時にすでに上昇しており、疾患特異性も高いことから、病勢のマーカーとして用いられている。しかし腫瘍細胞ではウイルス複製サイクルはしばしば不完全に終わり、いわゆる流産感染となっている。このことを考えると、ウイルス複製サイクルにおいて早期抗原よりもさらに早く発現する前早期抗原(Immediate early antigen)である、Z蛋白やR蛋白に対する生体反応のほうがより早く病状を反映する可能性が考えられる。そこで今回、Z蛋白やR蛋白に対する血清抗体価を調べることにした。Z蛋白、R蛋白はそれぞれBZLF1,BRLF1遺伝子発現プラスミドを構築し、精製した。これらを抗原とし、担癌NPC患者、NPC緩解後患者の他、EBV関連疾患であるIM,ホジキン病患者や他の頭頚部癌腫瘍患者、および健常者血清との反応を、ウエスタンブロット法、ELISA法で検討した。その結果、担癌NPC患者では、全例抗Z蛋白、R蛋白抗体陽性であり、ELISA法での吸光度も他の群と比べ高値を示した。VCA-IgA抗体価と比較しても、抗Z蛋白、抗R蛋白抗体陽性はNPC特異性が高かった。以上よりNPC患者における抗Z蛋白、R蛋白抗体価測定は病勢の有用な指標となり得ると結論された。EBウイルス(EBV)は上咽頭癌(NPC),とりわけ未分化型NPC(undifferentiated-NPC:UNPC)に単クローン性に存在し、発癌に密接に関与したウイルスとされている。ところで、EBVは他のヘルペス群ウイルスと同様、生体内では潜伏感染の様式をとるが、再活性化によりウイルス粒子を産生する。このウイルス転写活性化に必要な蛋白はEBVのBZLF1遺伝子により発現されるZ蛋白である。そこで今回は、Z蛋白発現がもたらすNPC病態像への影響を考察することを目的として、抗Z蛋白抗体価の測定を計画した。第一ステップとして、遺伝子工学手法で純粋なZ蛋白を大量に人工的に合成することに成功した。すなわち、Z蛋白発現遺伝子すなわちBZLF1遺伝子をベクタープラスミド(p GENT2)に組み込み、大腸菌に取り込ませ、IUdRにてインダクションをかけて生成し、さらにその精製を行った。それは、約1Lの培養から細菌を回収し、氷中でsonicatorで破砕後、通常の手順で蛋白を分離抽出し、それをglutathion S-transferase(GST)カラムにて精製した。そこで第二段階として、現在これを抗原としたときの抗Z蛋白抗体測定に関する方法を確率するために、試験的にNPC患者血清中の抗体価を測定中である。実際的には1.ポリスチレン製96穴平底マイクロプレート(担体)を用いてZ蛋白(抗原)を固相化した。次いで2.精製したZ蛋白をメンブレンに吸着させ、streptoabithin HRP法にて抗Z蛋白抗体を発色させた。発色の数値化はイメージスキャナーにてパーソナルコンピューターに取り込みデジタル化を試みている。今後第三段階として、新しく開発したこの方法を用いて、NPC患者血清中の抗体価を広く測定し、その臨床的意義づけを血清疫学的に考察する予定である。Epstein-Barrウイルス(EBV)は、伝染性単核症(Infectious mononuceosis,IM)の病原体として知られる一方、上咽頭癌(NPC)との病因的関連が強く示唆されている。そして他のヘルペス群ウイルスと同様、生体内では潜伏感染の様式をとるが、種々の刺激で再活性化し、再び複製サイクルに入りウイルス粒子を産生する。このようなウイルス転写活性化に必要な蛋白はEBVのBZLF1遺伝子により発現されるZ蛋白である。一方NPC患者では血清学的にも抗EBV抗体価の上昇が報告されている。

特にウイルス複製サイクルに発現する早期抗原(early antigen,EA)や後期蛋白のEBV粒子抗原(viral capsid antigen,VCA)に対するlgA抗体は発症時すでに上昇しており、疾患特異性も高いことから、病勢のマーカーとして用いられてきた。しかし、腫瘍細胞ではウイルス複製はしばしば不完全に終わり、いわゆる流産感染となっている。このことを考えると、ウイルス複製サイクルにおいて早期抗原よりのさらに早く発見する前早期抗原(Immediate early antigen)である。Z蛋白やR蛋白に対する生体反応のほうがより早く病状を反映する可能性が考えられる。そこで今回、Z蛋白やR蛋白に対する血清抗体価を調べることにした。Z蛋白、R蛋白はそれぞれBZLF1,BRLF1遺伝子発現プラスミドを構築し、精製した。これらを抗原とし、担癌NPC患者,NPC緩解後患者の他、EBV関連疾患であるIM,ホジキン病患者や他の頭頚部癌腫瘍患者、および健常者血清との反応を、ウエスタンブロット法、ELISA法で検討した。その結果。担癌NPC患者では、全例抗Z蛋白,R蛋白抗体陽性であり、ELISA法での吸光度も他の群と比べて高値を示した。VCA-lgA抗体価と比較しても、抗Z蛋白、抗R蛋白抗体陽性はNPC特異性が高かった。以上よりNPC患者における抗Z蛋白、R蛋白抗体価測定は病勢の有用な指標となりうると結論された。
分子不斉識別能を有する高分子LB膜の作成と機能化

生体膜の優れた高次機能である分子不斉識別能を有する高分子LB膜に付与することを目的として、軸不斉ビナフチルグループを導入した高分子LB膜の作成、その単分子膜、LB膜の性質について検討し、分子認識機能に基づく不斉識別応答や光学分割膜への応用をめざして、研究を行った。先ず、軸不斉ビナフチル基を有する高分子LB膜の作成に成功した。この単分子膜は約1.8nmと極めて薄く、固体基板上にLB膜として累積することもできた。機能としては、生体膜と類似機能の発現をめざし、分子認識機能について検討した。軸不斉ビナフチル基を有する高分子単分子膜を金属電極上に付着し、作用極として光学異性体分子に対する電位応答を観測し、その分子認識、不斉認識能について検討した。この単分子膜修飾電極を電気化学セルにセットし、電解質水溶液中に光学異性体分子としてフェニルエチルアミン(R,S-PEA)を添加したところ10^<-7>Mの希薄濃度のPEAに対して、電位応答を示し、電位はアノード側にシフトした。その電位応答は光学異性体により異なった。S-配置の軸不斉ビナフチル基はR-PEAに対してより大きな応答を示した。明らかに単分子膜中の軸不斉ビナフチル基が光学異性体を不斉識別していることを示している。LB単分子膜が1.8nmと超薄膜であることから高感度を生じ、ビナフチル基が単分子膜中で高度に配向していることが、選択性を増幅しているものと思われる。フェニルエチルアミン以外にもフェニルグリシノールに対しても不斉識別していることが観測され、しかもPEAに対してよりも識別はより大きな応答として現れた。軸不斉ビナフチル基の2位の置換基を水酸基からメトシキ基に変えたときは不斉識別応答は観測されなかった。不斉識別の分子機構についても議論することができた。LB膜において不斉識別応答を観測したのも、またその分子機構についても明らかにしたのはこれが世界で初めての例であり、注目された成果が得られた。生体膜の高次機能である分子不斉識別機能を有する分子組織体を構築する目的で、不斉源を有する高分子Langmuir-Blodgett(LB)膜に関する研究を行った。LB法は分子配向や分子配列が高度に規制された分子集合体を形成するので、生体膜類似の組織体の分子構築法として期待されている。近年、我々は長鎖アルキルアクリルアミド(AAm)系化合物がLB膜形成能に優れていることを見いだしている。本研究では不斉源として軸不斉ビナフチル基(BNap)を選び、このグループを有する重合性モノマーを合成し、AAmもモノマーと共重合することにより不斉サイトを有する高分子LB膜を作製し、不斉識別機能を有する超薄膜を得ることを目的とした。先ず、AAmと軸不斉ビナフチル基を有するモノマーとの共重合体の水面上に展開した単分子膜の性質について表面圧-面積曲線より詳細に検討した。この共重合体はAAmの側鎖アルキル鎖長が10,12,及び14の場合で、しかもBNapのモル分率が約0.2以下の場合に安定な凝縮単分子膜を形成し、固体基板に移し取ることができ、高分子LB膜を与えることが明らかになった。

また、このLB膜のCDスペクトルは正の第一コットン効果、および負の第二コットン効果をもつ分裂型コットン効果を示し、出発原料であるビナフトールのS-Configurationを有する光学活性高分子LB膜が得られたことを示した。次いで、このLB膜の不斉識別について検討した。この単分子膜を一層だけ電極に付着し、作用電極としてフェニルエチルアミン(PEA)に対する不斉選択電位応答を調べたところ、PEAの鏡像体を強く不斉識別していることが明らかになった。LB膜として不斉識別応答を電位変化でモニターし、明らかにした最初の例であると思われる。今後(来年度に継続研究)は他の光学活性化合物に対する応答などやその識別機構について検討していく予定である。前年度の研究により、軸不斉ビナフチル基を有する高分子LB膜の作成に成功し、光学活性団を有する高分子超薄膜が作成できた。この単分子膜は約1.8nmと極めて薄く、固体基板上にLB膜として累積することもできた。本年度の研究ではこのLB膜の機能化について検討した。機能としては、生体膜と類似機能の発現をめざし、分子認識機能について検討した。軸不斉ビナフチル基を有する高分子単分子膜を金属電極上に付着し、作用極として光学異性体分子に対する電位応答を観測し、その分子認識、不斉認識能について検討した。この単分子膜修飾電極を電気化学セルにセットし、電解質水溶液中に光学異性体分子としてフェニルエチルアミン(R,S-PEA)を添加したところ10^<-7>Mの希薄濃度のPEAに対して、電位応答を示し、電位はアノード側にシフトした。その電位応答は光学異性体により異なった。S-配置の軸不斉ビナフチル基はR-PEAに対してより大きな応答を示した。明らかに単分子膜中の軸不斉ビナフチル基が光学異性体を不斉識別していることを示している。LB単分子膜が1.8nmと超薄膜であることから高感度を生じ、ビナフチル基が単分子膜中で高度に配向していることが、選択性を増幅しているものと思われる。フェニルエチルアミン以外にもフェニルグリシノールに対しても不斉識別していることが観測され、しかもPEAに対してよりも識別はより大きな応答として現れた。軸不斉ビナフチル基の2位の置換基を水酸基からメトシキ基に変えたときは不斉識別応答は観測されなかった。不斉識別の分子機構についても議論することができた。LB膜において不斉識別応答を観測したのも、またその分子機構についても明らかにしたのはこれが世界で初めての例であり、注目された成果が得られた。
多変数の特殊函数

本研究の目的は、「多変数特殊超幾何函数」の系統的探索を開始し、新しい特殊函数論の原型を構築することであった。これに対し、1.差分系の量子群対称性、2.合流型超幾何函数とHamilton系、3.配置空間の幾何学、4.表現論と積分変換-のそれぞれの観点から次のような成果を得た。1.野海は、可換なq差分作用素族と量子群対称性に関連して、量子対称空間とその上の球函数の理論を展開し、可換なq差分作用素系の量子群による実現を与えるとともに、その同時固有函数であるMacdonald多項式の表現論的実現を与えた。2.高野は、Grassmann多様体上の超幾何函数について、一般の確定型から合流型への退化の手続きに関する詳細な研究を行った。また、その非線形化にあたるPainleve型のHamilton系について、初期値空間の記述を行い、合流型への退化のメカニズムを解明した。3.佐々木は、射影空間内の1個の非退化2次超曲面とn個の超平面の配置空間を考察し、それに付随する超切換積分の満たす微分方程式の決定、対称性の記述を行った。特に射影平面内の配置の場合にべき級数解と独立なサイクルの構成を行い、AppellのF_2,F_4との関係、ある種のK_3族との関係を解明した。4.関口は、対称領域のPenrose変換の観点から、超幾何積分と超幾何微分方程式の高階化を考察し、ユニタリ表現の手法を用いて解空間の有限次元性を確立した。3.佐々木は、射影空間内の1個の非退化2次超曲面とn個の超平面の配置空間を考察し、それに付随する超幾何積分の満たす微分方程式の決定、対称性の記述を行った。
ニューロン・アストロサイト・ミクログリア・ネットワークの分子基盤の解明

細胞生物学的に研究が遅れているミクログリアの機能解明に焦点を当て、以下の項目について解析を行った。1)虚血後の記憶障害を改善する薬(PEPA:ピーパ)の作用機序についてPEPAはミクログリアのAMPA型グルタミン酸受容体反応を増強し、最終的にグルタミン酸によるTNF-a(腫瘍壊死因子)の放出を減少させることがわかった。TNF-aは高濃度では細胞毒性を有すると考えられているため、このような機序が記憶改善作用に寄与していることが示唆された。2)ミクログリアとアストロサイト・ニューロンとのネットワークについて炎症性メデイエーターであるブラジキニンの受容体がミクログリアに発現していることを証明した。末梢の組織で報告されているように、通常はB2受容体サブタイプが発現しているものの、ブラジキニン処置後24時間で、炎症時に発現してくると言われているB1受容体サブタイプが新たに発現してくることを定量的RT-PCRで示した。あるいはミクログリア・アストロサイトからブラジキニンによってどのような各種サイトカインが放出されるかを検討することによって、発痛物質ブラジキニンを介したグリア細胞とニューロン、さらには脳血管壁との関連が新たに解明され、脳傷害の新たな治療薬開発につながる可能性がある。当初、グリア・ニューロン連関の研究の一環として始めた以下の研究についても有意義な結果が得られた。3)神経疾患発症に関与する受容体の機能解明新規セロトニン受容体(5-HT5A受容体)はアストロサイトに主に発現し、その遺伝子多型と精神疾患(統合失調症)との関連が報告されたが、我々はまずグリア特有ではなく神経型受容体であることを発見した。またその機能解明のために正常型の5-HT5A受容体遺伝子ベクターを入手し、培養細胞に遺伝子導入して受容体・細胞内シグナル伝達系を解明した。その結果、すでに報告されている系(アデニル酸シクラーゼ系)のみならず、新たなシグナル伝達系として注目を浴びており、我々独自の方法で測定可能になったアデニル酸リボース系を抑制することが判明した。さらにクロスカップリングによってイノシトールリン酸系を亢進させることを解明した。このように一つの受容体が多様な細胞内シグナル伝達系にリンクしていること、カルシウム制御の上で相反するシグナル伝達系に同時にカップルしていることは、それだけセロトニンの作用が複雑であり、どの系が異常をきたすかによって精神疾患と結びつくのかという問題を解決する鍵となる。このようにセロトニンには多様なシグナリングが存在するということを世界で初めて報告した。本年度は、細胞生物学的に研究が遅れているミクロダリアの機能解明に焦点を当てた。脳虚血、脳傷害時における神経細胞障害にはミクロダリアの活性化とそれによるサイトカインの放出が重要な役割を果たしている。そこで、以下の項Hについて解析を行った。1)脳虚血後の記憶

障害を改善する薬(PEPA:ピーパ)の作用機序についてPEPAはニューロンのAMPA型グルタミン酸受容体に作用し、その脱感作を抑制することによってAMPA型グルタミン酸受容体反応を著明に増大することが報告されている。ミクログリアには研究代表者がすでに発見したようにAMPA型グルタミン酸受容体が発現しているので(Noda et al.,2000)、ミクロダリアを介する記憶障害改善機構を検討した。その結果、PEPAはミクログリアのAMPA型グルタミン酸受容体反応を増強することによって、最終的にTNF-a(腫瘍壊死因子)の放出が減少することがわかった。TNF-aは高濃度では細胞毒性を有すると考えられているため、このような機序が記憶改善作用に寄与していることが示唆された。2)ミクログリアのブラジキニン受容体の発見炎症性メディエーターであるブラジキニンの受容体がミクログリアに発現していることを証明した。ニューロンで報告されているように、細胞内シグナリングの結果、Ca2^+依存性K+電流が観測された。さらにその結果、ミクログリアから一酸化窒素(NO)が放出されることが判明した。また、静止時のミクログリアにはB2受容体しか発現していないが、ブラジキニンによる活性化によってB1受容体を新たに発現することが判明した。これらのことより、末梢由来あるいは脳内で生成されたブラジキニンはミクログリアを活性化し、NOを放出することによって、ニューロン・アストロサイトのみならず、脳血管平滑筋にも作用する可能性が示唆された。1)ミクログリアとアストロサイト・ニューロンとのネットワークについてラット・ミクログリアを単離培養し、脳傷害、炎症時に関連して細胞外に増えると予想され、発痛物質である内因性生理活性ペプチド・ブラジキニンの受容体について検討した。脳内にブラジキニン受容体が発現することは示唆されていたが、ミクログリアにブラジキニン受容体が発現することをパッチクランプ法を用いて竜気生理学的に初めて示した。また、末梢の組織で報告されているように、通常はB2受容体サブタイプが発現しているものの、ブラジキニン処置後24時間で、炎症時に発現してくると言われているB1受容体サブタイプが新たに発現してくることを定量的RT-PCRで示した。細胞内でどのようなシグナル伝達系を介してどのような機能を発揮するのかは、これから生化学的に検討する予定である。ミクロダリアから、あるいはミクログリア・アストロサイトからブラジキニンによってどのような各種サイトカインが放出されるかを検討することによって、発痛物質ブラジキニンを介したグリア細胞とニューロン、さらには脳血管壁との関連が新たに解明され、脳傷害の新たな治療薬開発につながる可能性がある。2)神経疾患発症に関与する受容体の機能解明新規セロトニン受容体(5-HT5A受容体)はアストロサイトに主に発現し、その遺伝子多型と精神疾患(統合失調症)との関連が報告されているが、我々はまずグリア特有ではなく神経型受容体であることを発見した。またその機能解明のために正常型の5-HT5A受容体遺伝子ベクターを入手し、培養細胞に遺伝子導入して受容体・細胞内シグナル伝達系を解明した。
単クローン抗体を用いた牛毛ケラチン可溶化生成物の特性解析

牛毛ケラチン可溶化生成物を抗原として作製した単クローン抗体(MA617)の免疫化学的特性について詳細に検討を加えた。まず、本抗体の各種動物毛に対する反応性の差異を等電点電気泳動1SDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動とイムノブロットの組み合せにより解析した。その結果、本抗体の認識するトリコサイト由来サイトケラチンのサブユニットは、酸性/タイプIケラチンファミリーに属していたが、その認識サブユニットの種類、数において動物種による差異が認められた。特に、ラットについては酸性/タイプIケラチンファミリーHa1からHa4のうち、Ha1とHa4のみに特異的に反応し、Ha2とHa3には反応しなかった。このことから、本抗体の認識するエピトープは、mRNAのオルターネイティブ・スプライシングの結果、Ha1及びHa4サブユニット上に保存されたと理解された。次いで、各動物から採取した皮膚組織のメタカルン固定/パラフィン切片について、本抗体を用いた免疫組織化学的解析を行ったところ、生化学的検索結果と同様に動物種による差異が認められた。すなわち、本抗体の認識するエピトープの毛髄質、毛皮質、毛小皮、内根鞘及び外根鞘における分布に動物種差を認めた。さらに、ラット同胎齢の皮膚組織を用いて本抗体の認識するトリコサイト由来サイトケラチンの発現を解析したところ、背部皮膚では胎齢18日、ヒゲでは胎齢17日よりその発現が確認され、その発現は毛包の形成に同調して観察された。以上の結果より、本抗体の免疫化学的特性がより詳細に明らかになり、この結果をふまえて、今後、牛毛ケラチン可溶化生成物の免疫化学的解析を進め、その高度利用の道を探る予定である。
自己幹細胞及び組織工学による新規肺瘻治療法の開発

ラットを用いて、現在臨床で使用されているフィブリン糊及びPGAシートを用いた気胸ラットの肺を摘出し、病理学的検討を行った。また、実際にラットの皮膚より採取した繊維芽細胞を分離・培養し、細胞パッチの作成を行っている段階である。細胞パッチの作成方法について検討すると同時に、必要な繊維芽細胞の数及びその培養期間の検討を行ってきた。現在、実際に細胞パッチの作成にとりかかっている。ラットの皮膚より採取した繊維芽細胞の培養に難渋した。また、細胞パッチ形成を行うのに必要な細胞数の検討と、培養期間の検討に時間を要しており、細胞パッチの完成と移植までには到達できていない。より簡易で安定した細胞パッチ作成方法についてさらに検討が必要である。そのためには、パッチ形成に必要な繊維芽細胞数と培養期間をさらに検討する必要があり、実際に作成した細胞パッチについて、その強度を含めた安全性、移植方法、また移植後の長期効果について検討が必要である。ラットを用いた新規肺瘻デバイスの開発を目的としているため、初年度であるH29年度は1ラットの肺瘻モデルの作成、2現在、実臨床の場で頻用されている肺瘻閉鎖デバイスである、PGAシート及びフィブリン糊を使用して肺瘻コントロールを得た群の作成を主目的とした。1については、安定したラットの気管内挿管法及び麻酔法の検討、手術アプローチ法、統一した肺瘻作成法の検討を行った。経口気管内挿管は術中トラブルが多く、ラットの生存が難しかったことから気管切開法による気管挿管を採用した。また、手術はアプローチはやや右側臥位下に第4肋間もしくは第5肋間開胸とし、肺表面を18G針での統一した長さ、深さの肺損傷をおき、肺瘻モデルを作成した。2ラットの肺瘻モデルを作成後、PGAシートもしくはフィブリン糊で肺瘻閉鎖を行い、それぞれの群において、術後4週経過した群、術後8週経過した群、術後12週経過した群の患側肺の摘出を行った。また、コントロールとして正常肺も摘出し、正常肺群に加えて、PGAシート使用群、フィブリン糊使用群のそれぞれの摘出肺を病理学的に評価した。また、肺瘻閉鎖部に肉眼的に癒着が確認できた場合には、癒着部位の胸壁も合併切除を行うことで、癒着部分の病理学的評価を行えるようにした。肺瘻のデバイスを評価するためには、ラットの生存する肺瘻モデルを作成する必要があるが、ラットの人工肺瘻モデルの作成に難渋したため。細胞シートの作成(細胞組成やサイズなど)、ヌードラットへの移植とその評価(臨床経過、肉眼的評価、病理学的評価など)について検討し、他デバイスとの比較・検討を行う。肺瘻モデルの作成に難渋し進行に遅れが生じたため、引き続き動物実験を継続する必要があるため。実験の進行が予定よりも遅れてしまい、細胞パッチを実際に移植する動物実験まで達成することができなかった。そのため、予定よりも予算が余ってしまったが、テーマの変更はなく、現行の実験を継続する予定であり、細胞パッチ作成の費用及び動物実験費用として使用する。
日本の台湾統治政策と台湾総督府文書についての総括的研究

本研究は、台湾統治の基礎史料である台湾総督府文書を基に、台湾の統治構造と台湾総督府文書の構造を解明し、合わせて台湾総督府文書を近代史料学の立場から検討して近代行政文書学としての公文書学の構築を目指したものである。本研究の特徴は、従来の法制度史的な方法による政策史研究の限界を踏まえ、行政行為記録としての文書分析を通じて実際の政策決定過程を明らかにすることによって外地統治としての台湾統治構造を解明することにあることから、台湾総督府文書を詳細に分析していった。その結果、(1)台湾統治政策は強力な本国政府の指導下で遂行されていたこと、つまり台湾統治政策の決定は台北ではなく東京であったこと、(2)それは台湾総督への委任立法権の付与が実は政府への委任立法権の付与を意味していた、つまり六三法の条文解釈主義的な従来の定説は間違いで、三一法・法三号を含め台湾統治は違憲的制度であったこと、(3)台湾総督府文書は唯一残された中央政府の行政文書であることから未だ解明されていない近代行政文書学としての公文書学研究を構築するための最も重要な史料であること、(4)近代行政官僚にとっての公文書とは単なる行政行為記録でしかなくその限りにおいて保存管理されていたこと、(5)内規として定められていた文書保存規則は廃棄を前提とした文書保存主義によるものであったことが現代において公文書が継承されない原因を作っていること、(6)台湾総督府文書を事例にした公文書目録データベース化には、行政学・古文書学・歴史学の専門的知識とそれら専門家による共同作業が不可欠であることを明らかにすることができた。これらの成果は、今後の台湾統治史研究はもとより、台湾総督府文書の史料学的研究と近代行政文書学としての公文書学研究の発展に大きく寄与するものと思われる。「台湾総督府文書データベース」の作成本データベースは「台湾総督府文書目録データベース」及び「台湾総督府文書主要史料データベース」からなる。「台湾総督府文書目録データベース」は「基本データベース」と「人名データベース」から構成されている。「基本データベース」は『台湾総督府文書目録』に沿った内容で、本データベースの中心的なものである。また、「人名データベース」は『台湾総督府文書目録』に採集された人々の他、台湾総督府『職員録』からの人名が収録されており、植民地統治当時行政に関わった人々の動向を網羅的に検索することができる。「台湾総督府文書目録データベース」作成に関しては本年度は次の作業を行った。1.データベースの設計データベース作成にあたって基本的な構成およびその作業計画を決定した。2.データベース作成における諸問題の検討本データベースの作成時に特に問題になると思われるJIS第1・2水準漢字以外のいわゆる外字の処理方法および効率的な入力およびその補助のためのツール作成についての検討を行った。3.「基本データベース」作成のためのデータの入力及び試用「基本データベース」作成の第一段階として『台湾総督府文書目録』第1・2巻を入力し、データベースを作成した。また、共同研究者及び台湾史研究者に試用を依頼、その結果について検討を行った。4.「人名データベース」のデータ入力「人名データベース」作成第一段階として台湾総督府『職員録明治31年』を入力した。「台湾総督府文書目録データベース」は「台湾総督府文書」中の主要史料の原文を翻刻・収録し、検索できるようにするものである。本年度は試験的に一部の文書の翻刻化を行った。1.データベース化については、レコート一件分の表示が数画面にわたる現状から1件分の表示を1画面で見られるようにする。人名テーブルと官職テーブルを基本データベースとリンクし、データ表示をわかりやすくした。尚、現在の文書書誌情報webページの中に文書画像(カラー)を取り入れたサンプルを作成した。2.文書主要史料データベースについては、電子式複写及びマイクロフィルムや写真撮影により収集した。

(1)文書は解読して原型に合わせて文字入力する。(2)写真撮影により収集した史料のなかで重要なもの及び史料的に画像で入力する必要があるものについてはカラーによる画像入力も行った。(1)については、解読作業にかなりの時間がかかるが容量も比較的に少ないことから今後も現在の入力方法で進めていくこと、(2)については使用しているサーバーコンピュータの性能的問題があり、今後高性能なコンピュータに交換する。1.平成10年度に検討したデータベース化の問題点をふまえて、平成9年度入力した第1巻と第2巻に第3巻を加えて入力し、明治28年31年(3巻分)の台湾総督府文書目録をまとめたデータベースを作成した。これは、初年度作成したデータベースに検索項目を加え、一画面に7件分のデータを見られるように作成した。人名テーブルは明治28年29年分をデータベース化した。Web上でのデータベース公開に関してはデータの増大に伴いダウンロードに時間がかかりすぎる等の問題の為、今年度は実現を見合わせることにした。次年度、改善方法を検討する。2.文書主要史料データベースについては、昨年度に引き続き、次の方法で電子式複写及びマイクロフィルムや写真撮影により収集した。(2)写真撮影により収集した史料のなかで重要なもの及び史料的に画像で入力する必要があるものについてはカラーによる画像入力も行う。(1)については、いくつかの分野で入力作業を進めた。但し、入力済文書の蓄積はあるものの、コンピュータの性能の問題は依然として大きく、実用的レベルでの検索は次年度にその解説策を検討することにする。本研究において試行したのは、台湾統治政策を統治実態的に分析することにより、近代国家として成立していった大日本帝国という国家の構造を明らかにすることにあった。方法論的には、台湾総督府文書の文書学的分析を通して行政行為の構造解明を試みた。次いで、外地統治機関である台湾総督府の文書を行政行為の一つとして位置づけ、台湾総督府文書の文書論を解明した。さらに、本研究では台湾総督府文書目録のデータベースを作ることもあったことから、近代文書、とりわけ公文書の目録とは何であるのかに付いて、文書学的研究を行い目録学(近代公文書学としての)の完成を目指した。ここで求められたのが、統治構造論であり統治政策論であった。「台湾総督府文書データベース」の作成については、第1に基本データベースとして、「台湾総督府データベース」は、すでに刊行した「台湾総督府文書目録」に基づいて、明治28年度31年度の目録データ14345件をデータベース化した。目録事項は、門名、件名、年月日であり、件名についてはフリーキーワードで任意の事項について検索可能とした。第2に基本データベースを補完する「人名データベース」は、当該時期の文書に登場する14488名を入力した。なお日本人名・台湾人名では、JIS規格以外の漢字がかなり多く、基本データベースとリンクさせるには問題が残った。