hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ヒト脂肪由来幹細胞の細胞特性と潜在機能の解析

マウスを用いたVivoの脂肪虚血再還流障害モデルにおいても,障害後に脂肪組織の細胞外基質に貯蓄されていたbFGFが放出されるのにひきつづき,血管,脂肪組織のリモデリングとともに間質細胞からHGFが分泌されることが観察され,細胞の壊死,アポトーシスとともに,細胞増殖,とくにASCの細胞増殖が観察された。また,虚血再還流障害後の脂肪組織の線維化,瘢痕形成は,HGFの中和抗体により有意に促進され,さらにbFGF中和抗体,およびJNK阻害剤によっても有意に促進された。すなわち,ASCに分泌されたHGFにより線維化が阻害され,血管新生とともに脂肪再生にポジティブな作用をしていることが明らかとなった。本研究結果は目本再生医療学会,国際研究皮膚科学会で報告するとともに国際研究雑誌に投稿中であり,今後本研究結果に基づき,bFGFの徐放性ビーズを利用した線維化治療の前臨床研究を計画中である。対象とする疾患にはケロイド,肥厚性瘢痕,肝硬変などを想定している。本研究成果として、ASCのキャラクタリゼーションを行い、接着培養すると新鮮時には発現がなかったCD105(endoglin;間葉系幹細胞のマーカーの1つ)が発現すること、皮膚線維芽細胞をはじめ、骨髄由来間葉系幹細胞(BM-MSC)、臍帯由来幹細胞など間葉系の組織前駆細胞と形態的には類似しているが、機能、表面抗原発現における相違点を明らかにした。また、培養を続けると減少するCD34の発現を長期的に維持する培養法を開発した。さらに脂肪再生に関する研究を行い、ヒト吸引脂肪が幹細胞欠乏組織であることを明らかとし、幹細胞を補助的に用いる新しい脂肪移植法の概念を提唱した。免疫不全動物を用いて、ヒト脂肪組織および脂肪組織由来幹細胞を用いて脂肪再生への有効性を示した。また、GFPラットを用いて、幹細胞の追跡実験を行い、血管内皮細胞への分化を確認した。また、ヒト脂肪とヒト脂肪由来幹細胞の混合移植モデル(ヌードマウス)を用いて、やはり血管内皮細胞への分化を確認した。また、遠心処理により脂肪組織から水分が失われ、一部の脂肪細胞は破壊されるが幹細胞は生存することを明らかにし、また脂肪移植における遠心処理の最適化、脂肪組織および幹細胞の非凍結保存の最適化、長期凍結保存した脂肪由来幹細胞の機能解析結果を報告した。さらに、脂肪由来幹細胞にbFGFが作用するとHGFを強力にHGFを分泌することを明らかにし、この作用はJNKシグナルを介し、脂肪組織の虚血再還流傷害後の脂肪再生、血管新生において、脂肪幹細胞由来のHGFが線維化を抑制する働きがあることを明らかにした。また、血管新生、脂肪再生において脂肪幹細胞が主役的な役割を果たして増殖、遊走することを明らかにした。
疾患iPS細胞を活用した液性因子による運動ニューロン疾患の早期病態解明

球脊髄性筋萎縮症(SBMA)は、3050歳台の成人男性に発症する緩徐進行性の下位運動ニューロン変性疾患である。ポリグルタミン鎖の伸長した変異ARが、リガンドであるテストステロン依存的に凝集体を形成し、神経変性を誘導すると考えられてきた。一方で、変異AR凝集体によらない早期病態が示唆されており、またリュープロレリン(抗アンドロゲン療法)は発症早期の患者でのみ有効性が示されたことから、早期病態の解明と早期治療は必要不可欠である。本研究では、SBMA疾患iPS細胞による早期病態モデルを用いて同定した4つの分泌型神経ペプチドに着目し、SBMAの早期病態、神経・筋病態解明と新規治療標的の探索を行う。
EAPFS(拡張出現電位スペクトル微細構造)による表面構造解析法

本研究では、物質の表面構造解析を目的に多結晶Cr、蒸着Ti膜、アモルファスTiFe合金薄膜のそれぞれを試料としてEAPFS法の利用を試みた。1.多結晶Crについて:Cr-【L_1】以降のEAPFS信号に着目して、Cr-【L_1】を基準に解析処理を行なったところ、終状態の電子の角運動量l=0,1,2に対し、それぞれ2.53A,2.54A,2.54Aの結果が得られた。結晶学におけるバルクCrの最隣接原子間距離2.50Aとほゞ等しい結果となっている。2.蒸着Ti膜について:Ti-【L_1】以降の信号に着目して解析処理を行なったところ、l=0,1,2に対し、それぞれ2.93A,2.93A,2.58Aの結果が得られた。一方Ti-【L_3】以降では、l=0,1,2に対して、それぞれ3.29A,3.29A,2.97Aの結果が得られた。バルクTiの最隣接原子間距離が2.91Aであることを考えると、Ti-【L_1】励起ではl=0およびl=1への遷移が支配的であり、Ti-【L_3】励起ではl=2への遷移が支配的であると考えられる。3.アモルファスTiFe合金薄膜について:Ti-【L_1】以降の信号に着目して解析処理を行なったところ、l=0,1,2に対し、それぞれ2.58A,2.44A,2.31Aの結果が得られた。一方Ti-【L_3】以降では、l=0,1,2に対して、それぞれ2.87A,2.77A,2.57Aの結果が得られた。アモルファスTiFeの最隣接原子間距離のデータがないので、測定結果の値からは終状態における電子の角運動量の分配は決定できない。しかし同元素において励起準位が同じであれば、化学的環境に影響されず、終状態の角運動量の分配は等しくなると仮定するならば、アモルファスTiFe合金薄膜のTi-【L_1】励起ではl=0,1の値は2.58A,2.44A,Ti-【L_3】励起ではl=2の値は2.57Aが得られる。これら三つの値はほゞ等しくなることからアモルファスTiFeの最隣接原子間距離は2.5A程度と考えられる。感度や精度の向上についてまだまだ改善する必要があり、今後の検討課題である。
変異マウスを用いたリンパ管の発生、分化の解析

リンパ管において血流が認められる突然変異マウスを発見、解析を始めたことを昨年報告した。このマウスにおける血流異常がどのような血管・リンパ管の形成異常に起因しているかを知るために、TRITC標識ゼラチンを成熟個体の腹部大動脈より投与し、TRITCで標識される脈管構造の共焦点レーザー顕微鏡による観察を行った(富山医科薬科大学大谷修教授との共同研究)。その結果、野生型マウスの小腸粘膜絨毛では毛細血管に蛍光シグナルが観察されるのに対して、ホモ型変異マウスのそれでは毛細血管に加え、中心リンパ管においても蛍光シグナルが観察された。従って、血管からリンパ管への血流の移行は、小腸粘膜絨毛における毛細血管から中心リンパ管への移行に端を発している可能性が高い。また、この変異マウスの原因遺伝子の解析のための交配実験を開始している。一方、リンパ管を容易に検出する実験系を確立するため、リンパ管内皮細胞特異的に標識遺伝子を発現する遺伝子導入マウス作成を行っている。既に特異的発現が報告されているLYVE-1、prox-1、VEGFR-3の遺伝子を利用した導入遺伝子の構築を進めた。マウスLYVE-1ゲノムDNAを利用した導入遺伝子の構築は、まずPCRを利用したin vitroミュータゲネシスにより、第1及び第2エクソンにそれぞれマルチクローニングサイトを導入すると同時に、本来のLYVE-1タンパク質の開始コドン以降に存在するATG配列に対して1塩基置換変異を導入した。翻訳制御配列の支配下で核移行シグナル付きβ-ガラクトシダーゼを発現するIRES-nls lacZ pAカセットを第2エクソンに導入したタイプを始めとする数種類の導入遺伝子を構築し、現在C57BL/6J受精卵への顕微注入による遺伝子導入マウスの作成を試みている。prox-1、VEGFR-3遺伝子を利用した導入遺伝子も構築中である。(1)2種類の近交系マウス(C57BL/6J,129/SvEv)間の交雑F1を起点とした兄妹交配によるマウス生産の過程で突然変異マウスを発見していたが、その変異系統の分離と維持に成功した。この変異系統では、ホモ型変異体で表現型の異常が容易に観察される。雌雄を問わず、哺乳期において乳糜腹水の貯留が認められる。また、慢性的な後肢の腫脹が認められる。加えて、正常個体では血液が流入することのない末梢組織のリンパ管において血流が認められ、特に小腸や腸間膜で顕著である。ただし、ホモ型変異体の雄は生殖不能、雌は生殖能力を有するが流産し、自らも死亡しやすいため、表現型異常の認められないヘテロ型変異体を後代検定によって同定することで、系統を維持している。(2)リンパ管内皮細胞特異的に発現していることが報告されているヒトlyve-1遺伝子のマウスホモログを、ESTクローンを元にクローニングした。マウスFosmidゲノムDNAを作成し、lyve-1遺伝子の独立したゲノムクローンを2種類(40,42kb)単離した。エクソン-イントロンの構造解析および制限酵素地図の作成を行ったところ、2クローンで重複のある領域、28kbについて欠失や再構成は認められなかった。この領域には、最初のエクソンの上流10kb、最後のエクソンの下流9kbが含まれていた。この領域を元に、lyve-1タンパク質の代わりにβ-ガラクトシダーゼを発現するトランスジェニックマウス、ノックインマウスの作成を進めている。

このマウスにおける血流異常がどのような血管・リンパ管の形成異常に起因しているかを知るために、TRITC標識ゼラチンを成熟個体の腹部大動脈より投与し、TRITCで標識される脈管構造の共焦点レーザー顕微鏡による観察を行った(富山医科薬科大学大谷修教授との共同研究)。その結果、野生型マウスの小腸粘膜絨毛では毛細血管に蛍光シグナルが観察されるのに対して、ホモ型変異マウスのそれでは毛細血管に加え、中心リンパ管においても蛍光シグナルが観察された。従って、血管からリンパ管への血流の移行は、小腸粘膜絨毛における毛細血管から中心リンパ管への移行に端を発している可能性が高い。また、この変異マウスの原因遺伝子の解析のための交配実験を開始している。一方、リンパ管を容易に検出する実験系を確立するため、リンパ管内皮細胞特異的に標識遺伝子を発現する遺伝子導入マウス作成を行っている。既に特異的発現が報告されているLYVE-1、prox-1、VEGFR-3の遺伝子を利用した導入遺伝子の構築を進めた。マウスLYVE-1ゲノムDNAを利用した導入遺伝子の構築は、まずPCRを利用したin vitroミュータゲネシスにより、第1及び第2エクソンにそれぞれマルチクローニングサイトを導入すると同時に、本来のLYVE-1タンパク質の開始コドン以降に存在するATG配列に対して1塩基置換変異を導入した。翻訳制御配列の支配下で核移行シグナル付きβ-ガラクトシダーゼを発現するIRES-nls lacZ pAカセットを第2エクソンに導入したタイプを始めとする数種類の導入遺伝子を構築し、現在C57BL/6J受精卵への顕微注入による遺伝子導入マウスの作成を試みている。prox-1、VEGFR-3遺伝子を利用した導入遺伝子も構築中である。
現代日本の都市的""性""様式に関する民族誌的研究―合法的性風俗世界の実証分析

本研究の目的は、性風俗世界(性風俗産業を中心に成る経済・文化・政治の複合的世界)の適法性をめぐる政治を明らかにしながら、日本の都市的生活様式の核である都市的"性"様式を解明することにある。平成22年度の成果は以下の通りである。第一は、「当事者」概念を使った本研究の方法論に関する検討である。本研究は民族誌的方法を用いた実証研究であり、実証性の確保には、調査研究方法、データの質・量、分析の妥当性などが鍵となる。研究の意義や意味を問う「当事者」議論の蓄積には、同時に実証性への問いが多く含まれる。現象学的な視点から「おんなのこ」(性労働者)と「私」(調査者)の関係を再考し、「当事者か否か」ではなく「(調査の場にいることを)許されるか否か」という点を重視して「当事者」概念を理解した本成果は、様々な実証研究に対する援用が可能である。第二は、本研究の軸となる性風俗世界と法の関係の検討である。詳細な分析の蓄積が薄かった「風営法」の条文を精査し、そのうえで、性風俗営業主体と性労働者が「適法性」を確保すべく行う諸実践を重点的に検討した。性労働者の視点を軸に、客や営業者とのつながりから性風俗世界を捕捉する本成果のアプローチは、(女性)性労働者と客・営業者を対立しあう存在として捉えることの多かった女性学や法学の成果に対して新たな視点をもたらす。第三は、「『おんなのこ』の民族誌」に向けた情報収集及び執筆活動である。東京都市部の性風俗店における参与観察調査の中で、性労働者と関係者を対象に、性労働に限られない様々な経験について情報を収集した。現在執筆中の本成果は、性風俗産業を経済・文化・政治の複合的世界として捉える本研究の根幹を成す。性の問題系から都市の人々の生を理解することは現代日本社会に生きる人々のありかたについて考えることに他ならず、都市研究を始め多くの研究分野に対する成果還元が可能である。本研究は、「合法性」を確保した性風俗世界の分析を通じて現代日本の都市的"性"様式のあり方を明らかにすることを目標にしている。これを達成するため、平成21年度は、性風俗世界に関与する人々(性労働者、客、男性従業者、オーナー、担当税理士、所轄警察署職員など)の視点から、性風俗世界の現実を明らかにする作業を重点的に行った。具体的には、定期的に(週2日のペース)実施した東京都市部の性風俗店における参与観察及び上記関係者への聞き取りである。その成果の一部は、論文(2本)や口頭発表等(4件)として平成21年度中に提出された。その中では、臨地調査から得た知見及びその分析結果を性労働に関する先行研究の流れに位置付けたうえで、性労働者が自らの実践や自己について抱く認識や、都市部に生きる女性たちの実態について、新たな側面から理解を行う可能性が実証的に提示された。また、平成21年度中には、「風俗営業等の規制及び業務の適正化等に関する法律(「風営法」)」の言説分析も併せて実施した。これは、今後も引き続き行われる性風俗世界の関係者による聞き取りの成果と併せて、検討の俎上に乗せられる。それにより、これまでは違法性や犯罪との関連から扱われることの多かった性風俗世界について、「合法性」という新しい角度から議論することが可能になる。更に、平成21年度には、本研究の柱である臨地調査の成果そのものに関する正当性をより強固にするため、臨地調査における倫理的問題の検討にも着手した。

性の問題系から都市の人々の生を理解することは現代日本社会に生きる人々のありかたについて考えることに他ならず、都市研究を始め多くの研究分野に対する成果還元が可能である。
ロシアにおけるジェンダー研究-少子高齢化の視点から-

本研究では,ロシアのジェンダーの状況を明らかにするために,家事,育児,高齢者介護等のケア労働をめぐる社会関係と社会制度中心に,ジェンダーや家族の視点から分析した。特に育児と高齢者介護に焦点を当てて現地調査をペテルブルグ,ウラジオストック,エカテリンブルグ,カザンで実施した。その結果,ジェンダーという視点から女性が育児,家事,仕事,そして介護といった4つの労働のはざまでの葛藤する現状が明らかになった。本研究では,体制移行期を経て新段階にあるロシアのジェンダーの状況を明らかにする。具体的には,家事,育児,高齢者介護等のケア労働をめぐる社会関係と社会制度を日本と比較することによって,ジェンダーや家族の視点から分析する。特に,ケア労働の担い手,それをサポートする地域社会や地方行政,国家の家族・福祉政策について,また規範がジェンダーにどのような影響を与えているかについて検討する。より具体的には,(1)出産・育児支援システムを明らかにすること,(2)老人介護,高齢者就業,老齢年金の現状の把握,(3)(1)及び(2)とロシアの規範との相互関係を探る,(4)日本との比較によりロシアのジェンダー政策を中心とした社会政策を提言することを目指している。22年度は,ロシアペテルブルグにおいて老人介護施設の調査を実施した。ロシア正教関係の施設や老人ホームレスを収容している施設においても調査を行った。また,実際に老人介護を行っている女性へのインタビュー調査も多数実施した。それと同時に,本研究の協力者であるペテルプルグ大学教授であり,危機センター所長のザバディキナ氏からの助言を受け,ペテルブルグにおける少子高齢化の状況についての資料を収集し,分析を行った。23年度は,ロシアペテルブルグ、エカテリシブルグ、ウラジオストク、カザンにおいて幼稚園および老人介護施設の調査を実施した。ペテルブルグでは州にあるロシア正教関係の老人ホームと3か所の幼稚園、エカテリンブルグでは幼稚園、ウラジオストックでは老人ホーム、カザンでは老人ホームを調査した。カザンはイスラム教徒が多いためほかのロシアの都市と異なるのではないかと思っていたが、それほど大きな違いはなかった。しかしながら、人々の老人介護をめぐる意識は変化しているようである。本年度は基盤研究(C)「ロシアにおけるジェンダー研究ー少子高齢化の視点からー(平成22年度24年度)」が本年度で最終年度であったために、これまでの3年間の研究をまとめる作業および、研究発表を中心に研究活動を行った。秋までに研究成果をまとめ、研究代表者が、2012年11月7日にロシア科学アカデミー社会政治研究所主催の国際会議『ユーラシアにおける移民の橋』(於モスクワ科学アカデミー)において本研究成果の一部である「旧ソ連における移民のジェンダーへの影響」という題目で発表を行った。さらに、2012年12月1ー2日には、京都大学経済研究所において研究協力者のロシア科学アカデミー極東支部・歴史・考古学・民族学研究所上級研究員であるラーリナ・リーリヤ氏が、「極東における介護意識」、サンクトペテルブルグ大学心理学部准教授ナターリヤ・ホディリョーバ氏が「ペテルブルグにおける老人介護の実情」、龍谷大学非常勤講師スミルノワ・タチアナが「ソ連文学および新生ロシア文学に見る家族」、研究代表者の五十嵐が「ロシアにおけるジェンダー研究ー少子高齢化の視点からー」というテーマで成果発表を行い、討論者として、堀江典生氏(富山大学)、道上真侑氏(新潟大学)、大津定美氏(神戸大学名誉教授)、雲和広氏(一橋大学)、藤崎好子(高知大学)を招き、活発な議論を行った。これらの成果については、日本語、ロシア語、英語で著書の形で出版の準備を行っている。当初予定していた、ペテルブルグ、ウラジオストック、カザンでの聞き取り調査を終えることができた。また、エカテリンブルグは当初予定していなかったが、幼稚園での調査ができより多くの事例を集めることができた。24年度が最終年度であるため、記入しない。来年度は最終年度であり、これまでに調査したことにさらに、首都モスクワでの行政の聞き取りおよび高齢者介護に関する意識調査を行う予定にしている。
聖徳太子伝諸本の総合的研究

「聖徳太子伝」と総称される諸本群は、聖徳太子の伝記という基本的な枠組みこそ共通するものの、その記述方法や内容、あるいは分量等の様々な点において、各々が大きな違いを見せている。本研究では、「太子伝」は、およそ7系統に分類できるであろうとの見通しを得て、各系統から代表的な24本を選び、輪読・校勘作業を進めてきた。今回2ヶ年にわたる科学研究費の交付を受け、各系統で最善と判断され、校本の基礎となる9本の、現地調査と撮影とを行い、紙焼写真を作成した。他に12ヶ所の調査を行っている。この結果、当初の予定通り、ほぼ順調に系統分類の基礎となる精密な校本作成が進捗し、諸本の関係や文化史上の位置、また「太子伝」の製作や伝播に携わった人々等が明らかに成りつつある。こうした成果をふまえ、最終的には各系統別の諸本解題と校勘記とを付した。影印本「聖徳太子伝」の集成をめざしたい。「聖徳太子伝」は、従来から幾つかの本文が影印・翻字され、利用されてきてはいるものの、伝存数が厖大であり、各地に散在し、社寺等の非公開の機関に所蔵されるものが多く、書誌学的な解明が遅れており、十二分に活用されているとは言い難い。今回の計画に従って、太子伝関係資料が、網羅集成され、精密な解題とテクストクリティークを経た本文とが作成提供されたならば、歴史学・文学・宗教学のみならず、関連する各分野を裨益すること甚大であろう。これは書誌学・文献学を基盤とした、日本文化史研究の一つのテストケースとなるものと思われる。なお調査の過程で蒐集した資料は全て斯道文庫に保管し、所蔵者の許可を得られたものについては公開して、聖徳太子研究のセンター・フィルムライブラリーとして活用を計りたい。「聖徳太子伝」諸伝本は現在までの調査で、およそ7系統に分類できるという見通しを得ている。今年度はその各々の系統で最善と判断され、校本の基礎となる本の所蔵者10箇所に、閲覧・撮影の許可を乞い、宝物館改築中の醍醐寺を除いた、全ての所蔵者から本調査研究への御賛同を得ることができた。そこで以下に記す所に研究計画に従って研究担当者が出張し、精密な文献学的調査を実行し、内7所蔵者分の「太子伝」について、撮影或いはネガフィルムからの紙焼写真作製を行った。真名本系日光市輪王寺蔵本の紙焼写真作製仮名本系西尾市岩瀬文庫蔵本の撮影並びに紙焼写真作製・都内国立国会図書館蔵本の紙焼写真作製山田本系大津市叡山文庫蔵本の紙焼写真作製万徳寺本系伊勢市神宮文庫蔵本の撮影並びに紙焼写真作製拾遺集・宝物集系氷見市光久守蔵本の撮影並びに紙焼写真作製・都内内閣文庫蔵本の紙焼写真作製閲覧のみ瀬戸市万徳寺・天理市天理図書館・城端町善徳寺・井波町瑞泉寺等蔵本この結果、系統分類の基礎となる校本作成が進み、諸本の関係や文化史上の位置も、徐々にではあるが明らかになりつつある。こうした成果は別掲の牧野和夫論文等の形で公刊することができた。なお次年度は、今年度許可を受けながら撮影を行えなかった瀬戸市万徳寺・大阪市四天王寺、未だ閲覧できていない日光市輪王寺・高野町高野山を主に出張調査し、新たに法隆寺また醍醐寺とも交渉を行う予定である。

今年度はその各々の系統で最善と判断され、校本の基礎となる本の所蔵者の内、以下の3所蔵者の「太子伝」について、研究実施計画に従い担当者が出張し、精密な文献学的調査のうえ、撮影とネガフィルムからの紙焼写真作製とを行った。山田本系大阪市四天王寺蔵本万徳寺本系瀬戸市万徳寺蔵本新たに許可を得た奈良市東大寺蔵「正法輪蔵」存4巻そして、その後さらに諸本を索捜し、以下の12箇所の閲覧調査を実施した。日光市輪王寺・山東町柏原成菩提院・京都市大谷大学図書館・京都府綜合資料館・伊勢市神宮文庫・西尾市岩瀬文庫・天理市天理図書館・坂出市白峰神社・志度町多和文庫・琴平町金刀比羅宮図書館・大阪市大阪府立図書館・仙台市東北大学附属図書館この結果、宝物館改築中の為許可を得られなかった醍醐寺を除いて、所蔵者の賛意と協力とを頂き、当初の予定通りほぼ順調に系統分類の基礎となる校本作成が進捗している。諸本の関係や文化史上の位置も明らかになりつつあり、別掲の牧野和夫の著作等で報告することができた。こうした結果をふまえ、最終的には各系統別の解題と校勘記とを附した、影印本「聖徳太子伝」全4巻の集成をめざしたい。
細胞内品質管理ネットワークにおけるｍＲＮＡ―小胞体間での品質管理連携機構の解析

小胞体は真核生物における分泌系蛋白質の生合成の場であり、分子シャペロンを介したフォールディング状態の適格性を監査するシステムとして小胞体品質管理が存在する。小胞体品質管理機構は、構造異常蛋白質の発生及び蓄積に対しては、小胞体関連蛋白質分解(ERAD)や小胞体ストレス応答(UPR)、オートファジーを介した小胞体の大規模分解などの防御システムを用いることにより、小胞体機能の恒常性を維持し、異常蛋白質の蓄積に起因する小胞体ストレスから細胞を守っている。また、小胞体品質管理機構は、分泌系組織の発生過程や糖尿病・神経変性疾患等の発症機構における重要性が明らかにされており、その全容解明が期待されている。我々は最近の研究から、mRNA品質管理機構であるnonsense-mediated RNA decay (NMD)が小胞体品質管理において重要な役割を果たしていることを発見し、それぞれの品質管理機構を結ぶ相互制御機構について解析を進めている。昨年度においては、NMD制御因子群が恒常的に小胞体局在を示すことを明らかにし、特にSMG6遺伝子については小胞体ストレスによって発現量が上昇することを明らかにした。また、エキソリボヌクレアーゼ複合体DIS3およびEXOSC3についてはUPR経路の1つであるeIF2alphaリン酸化経路依存的に、小胞体ストレスにより発現誘導することを示した。以上の結果を踏まえ、NMDが小胞体品質管理において重要な働きをしていることを結論付け、本年度はその成果についての論文報告を行った。さらに線虫C.elegansを用いた遺伝学的解析からNMD不全による小胞体ストレス発生を緩和するサプレッサー遺伝子のスクリーニングを行い、小胞体機能に関与する遺伝子を含む7個の遺伝子を取得するに至った。今後はサプレッサー遺伝子とNMD及び小胞体品質管理機構との関連性を明らかにする。24年度が最終年度であるため、記入しない。小胞体品質管理機構は、構造異常蛋白質の発生及び蓄積に対しては、少胞体関連蛋白質分解(ERAD)や小胞体ストレス応答(UPR)、オートファジーを介した小胞体の大規模分解などの防御システムを用いることにより、小胞体機能の恒常性を維持し、異常蛋白質の蓄積に起因する小胞体ストレスから細胞を守っている。我々は最近の研究から、mRNA品質管理機構であるnonsense-mediated RNA decay(NMD)が小胞体品質管理において重要な役割を果たしていることを発見し、それぞれの品質管理機構を結ぶ相互制御機構について解析を進めている。本年度に行った研究よりSMG6およびUPF3Bについては一部が小胞体局在を示すことを明らかにした。また、NMD制御因子複合体の形成は小胞体ストレスの影響を受けない一方で、SMG6遺伝子の発現量が上昇することが見出した。さらに、一部のエキソリボヌクレアーゼ複合体の構成因子については、小胞体ストレス応答経路の一つである、eIF2alphaリン酸化経路への依存的に、発現が制御されていることが示した。以上の結果を踏まえ、NMDが小胞体品質管理において重要な働きをしていることを結論付けた。さらに線虫C.elegansを用いた遺伝学的解析からNMD不全誘発型小胞体ストレスに対する抑制変異株も取得及びサプレッサー遺伝子の同定を進めている。

小胞体品質管理とRNA品質管理の相互制御機構の存在を、線虫C.elegansにおける遺伝学的解析に始まり、哺乳動物細胞における普遍性について明らかにし、論文発表を行うに至った点については、一定の評価ができる。今後はサプレッサー遺伝子の同定などのメカニズムの解明に向けた解析に、より一層の努力をする。24年度が最終年度であるため、記入しない。当初の計画通り、NMD制御因子群と小胞体品質管理因子との間の相互作用について、生化学的解析および遺伝学的解析を軸に解析を行い、その実態を明らかにして行きたい。
心筋Caチャンネルとα受容体の関与

モルモットの単一心室筋細胞のカルシウムチャンネルに対するブナゾシン(α_1遮断薬)の電気生理学的作用をパッチクランプ法を用いて検討した。1.-40mVの保持電位から10mV毎にさまざまな電位に膜を脱分極させて得られたカルシウム電流の電流一電圧曲線より、ブナゾシン(30,100μM)が膜電位依存性にカルシウムチャンネルを抑制することが明らかとなった。2.ブナゾシン(10-100μM)により濃度依存性にカルシウム電流値の減少を認めた。+10mVの膜電位で測定したカルシウム電流の50%抑制(IC_<50>)濃度は60μMであった。3.カルシウム電流の不活性化過程に関しては、本剤30μM及び70μMにより、定常状態不活性化曲線は過分極側にそれぞれ5mV及び9mV平行移動した。4.ブナゾシン(10μM)によるカルシウム電流抑制の程度は脱分極パルス頻度0.33Hz及び2Hzではそれぞれ50%及び87%であり、膜を頻回に反復して脱分極させるほど、カルシウムチャンネルが強く抑制されることが示唆された。以上より、α_1遮断薬であるブナゾシンが、膜電位、濃度及び頻度依存性に心筋カルシウムチャンネルを抑制することが明らかとなり、第4群の抗不整脈薬としての特質を有することが示唆された。
20世紀初頭米国のスクール・ソーシャルセンターにおける道徳教育としての市民性教育

第一に、デューイが構想したソーシャルセンターとしての学校の理論と実践を検討した。それは、大人を対象として、貧困や人種といった今ある社会問題を解決できる市民の育成と、子どもを対象として、その解決に将来的に貢献できる市民の育成を、同時に達成しようとする学校であったことを明らかにした。コミュニティに生きる子どもと大人が、学校を協働してつくり、利用することが社会変革の第一歩となり、民主的社会を担う市民育成の基礎となる。そのような学校は、「社会的セツルメント」と「萌芽的コミュニティ」に基づいている。第二に、バージニア州を取り上げ、社会的セツルメント型ソーシャルセンターとしての学校における道徳教育としての市民性教育の一端について考察した。公立学校をソーシャルセンターとすることを一つの目的とするバージニア州協同教育協会においては、コミュニティの産業や生活を司る各局と連携・協力しながら公立学校の普及や改善に努めるコミュニティ連盟という体制が整えられていた。そのような公立学校が「コミュニティ・センター」あるいは「ソーシャルセンター」と呼ばれ、学校に通う子どもと近隣住民がともに道徳を身につけ、構成員にふさわしい市民になれるようにした。第三に、ソーシャルセンター運動の歴史的評価をめざした。この運動に当初から深くかかわり、1920年代以後も指導的地位にあったクラレンス・A・ペリーに着目し、1920年代以後も継続している点と変質した点を探った。1920年代には、学校施設開放運動は、二つに分裂していた。一つはコミュニティ・センター運動であり、それは民間団体が主導するリクリエーション運動に吸収され、学校教育との連携を絶った。いま一つは、教育委員会の管理のもとで公立学校の校舎を地域住民に開放しようとする運動であり、リクリエーションが学校教育のなかに導入されていた。本研究に関連する文献を収集と分析を中心に研究を進めた。研究成果としては、第一に、スクール・ソーシャルセンターの理念の基盤となった、デューイのスクール・ソーシャルセンター論について、市民性概念に注目して分析した。デューイは、学校とコミュニティの関係を強化することにより、市民性教育を改善しようとした。他方、第一次世界大戦後には民主的な市民の育成を、大恐慌後には経済問題に関与できる市民の育成を説いた。社会状況や時代の要請に合わせて市民性概念を拡張し、それに即してスクール・コミュニティを再構築していることがことが明らかになった。第二に、デューイの主張を背景として、コロンビア大学ティーチャーズ・カレッジ附属学校ホーレスマン・スクールで行われた市民性教育について考察した。同校の市民性担当講師であったハッチ(Roy W. Hatch)に注目した。ハッチは、教科外活動や学校が位置する近隣の施設や自然環境を活用して、学校全体で人格を形成する方法を立案して、実際に指導したことを明らかにした。第三に、スクール・ソーシャルセンターの推進者であるペリー(Clarence A. Perry)や、パーキンス(Dwight H. Perkins)のスクール・ソーシャルセンターの理念や実際について検討した。研究代表者が10月から特別研究機関でアメリカに滞在した。そのため、資料の収集と分析については予定通り進めることができたが、研究分担者と十分に議論することが難しかった。また、アメリカ新教育運動やソーシャルセンター運動に関する史的研究や理論研究、本研究が対象とする1900年頃から1930年頃までのアメリカにおける道徳教育の分析も課題として残されている。研究代表者は、ニューヨーク市にあったコロンビア大学教員養成系大学院付属校ホーレスマン・スクールを対象として、市民性・道徳教育について考察した。とくに新教育の影響を受けて新設された、「ニューヨーク市学習」という単元に注目した。「ニューヨーク市学習」における、警察、消防署、市役所、電力会社、移民局、ミュージアムといった公的諸機関と連携した学習活動について精査し、同校で行われた市民性・道徳教育について実証的に解明した。また、スクール・ソーシャルセンターにおける道徳・市民性教育関連文献を収集して読解する作業を継続した。本研究に不可欠な文献はほぼ入手できた。デューイのソーシャル・センター論についても、道徳・市民性教育を中心として考察を開始した。“School as a social centre"(1902)を軸に、『学校と社会』、『明日の学校』、『デモクラシーと教育』などを分析して、ソーシャルセンターとしての学校に期待される役割や機能について考察した。研究協力者は、これまでの成果を、「社会センターとしての学校の機能転換ーペリーの校舎開放運動から近隣住区論へー」としてまとめ、主に一次集団による道徳教育について解明した。それを通して、スクール・ソーシャルセンターの概念の変容や類型についても論じた。一口にスクール・ソーシャルセンターといっても、ソーシャルセンターとスクールセンターの二つの意味があることが明らかになった。スクール・ソーシャルセンターの全体像や、道徳教育・市民性教育に果たした役割を理解する作業がまだ残っているため。

公立学校をソーシャルセンターとすることを一つの目的とするバージニア州協同教育協会においては、コミュニティの産業や生活を司る各局と連携・協力しながら公立学校の普及や改善に努めるコミュニティ連盟という体制が整えられていた。そのような公立学校が「コミュニティ・センター」あるいは「ソーシャルセンター」と呼ばれ、学校に通う子どもと近隣住民がともに道徳を身につけ、構成員にふさわしい市民になれるようにした。第三に、ソーシャルセンター運動の歴史的評価をめざした。この運動に当初から深くかかわり、1920年代以後も指導的地位にあったクラレンス・A・ペリーに着目し、1920年代以後も継続している点と変質した点を探った。1920年代には、学校施設開放運動は、二つに分裂していた。一つはコミュニティ・センター運動であり、それは民間団体が主導するリクリエーション運動に吸収され、学校教育との連携を絶った。いま一つは、教育委員会の管理のもとで公立学校の校舎を地域住民に開放しようとする運動であり、リクリエーションが学校教育のなかに導入されていた。ソーシャルセンターとしての学校や、そのような学校が存在した都市を取り上げて、道徳教育としての市民性教育のカリキュラムや方法、それを実現するための市の取り組みなどについてふみこんで研究を進める。スクール・ソーシャルセンターの事例としては、ニューヨーク市にあった私立の進歩主義学校エシカル・カルチャー・スクールや、コロンビア大学ティーチャーズ・カレッジの付属校ホーレスマン・スクールに注目する。とくに新教育の影響を受けて新設された「ニューヨーク市学習」における、警察、消防署、市役所、電力会社、移民局、ミュージアムといった公的諸機関と連携した学習活動について精査する。同校で行われた市民性・道徳教育について実証的に解明する。研究協力者は、スクール・ソーシャルセンターについて、引き続きペリーやパーキンスに注目して、社会教育、都市計画、学校建築といった観点から考察する。それにより、参加的市民性を育成する学校をつくるための社会的・制度的条件を解明する。上記の課題を早期に終了させ、当初の予定通り研究を進める。その成果は学会などで発表し、年度末には報告書を公刊する。研究代表者が特別研究期間を得て、アメリカに滞在していたために旅費が未使用となったため。2016年度後半にサバティカルでアメリカに滞在できたため、渡航費や滞在費を使う必要がなくなった。その分を2018年度のアメリカ出張費に回す。アメリカでの調査研究費として使用する予定。
T字一体型ナノプローブを用いたカーボンナノチューブの物性計測

本研究はT字-体型ナノプローブを用いた極微細線材の熱伝導率測定法をカーボンナノチューブ(CNT)に適用し、本測定法を完成の域にまで到達させることを目的とし、当初の研究計画に従って以下の研究を進めた。1)T字-体型ナノプローブを構成する加熱用ナノフィルムを改良、膜が均質で電気的特性が良好な加熱用ナノフィルムの製作手法を確立した。さらに、熱伝導率及び加熱用ナノフィルムとナノチューブ間の接触熱抵抗を同時に測定する方法を提案し、二段式ヒートシンク付きナノプローブを設計・製造することに成功した。2)CNTを独自に製作することを試みた。アモルファスカーボンの付着が少ない良質のCNTを製作し、その構造や寸法などの特性を試料ごとに個別に評価した。3)厚さが異なる種々のナノフィルムの電気抵抗、熱伝導率およびそれらの温度依存性について、低温(77K)から常温(300K)までの温度範囲で測定した。さらに、XRD及びTEMにより加熱用薄膜ナノフィルムの微細構造とその電気抵抗、温度特性及び熱伝導率との関係を明らかにした。4)CNTの熱伝導率の測定だけでなく、この測定法の精度に重要な影響を及ぼす、懸架白金ナノ薄膜の熱伝導率および電気伝導度と製造プロセスや組織構造との関係について、実験的・理論的な検討を行い、多くの新しい知見を得た。5)成膜速度や膜厚を変化させたナノフィルムの熱伝導率および電気伝導度の詳細な測定を行った。これらの特性は膜の厚さではなく、多結晶膜の結晶粒のサイズに依存していることを明らかにし、電気や熱のキャリアである電子の表面散乱や粒界での散乱を考慮した従来の理論と比較した。その結果、薄膜の物性がバルク材に比して大きく低下する原因は粒界での散乱にあることを確かめた。また、金属薄膜ではWiedemann-Frantz法則が成立しない理由についても明確な説明ができた。6)数種のカーボンナノチューブについて熱伝導率の測定を行い先に行った測定値と比較した。測定値に再現性があることが確認され、本測定法の実用性が確かめられた。本研究はT字一体型ナノプローブを用いた極微細線材の熱伝導率測定法をカーボンナノチューブに適用し、本測定法を完成の域にまで到達させることを目的とする。平成17年度は当初の研究計画に従って以下の研究を進めた。1)これまでの測定経験に基づき、T字一体型ナノプローブを構成する加熱用ナノフィルムを改良、設計・製造した。膜が均質で電気的特性が良好な加熱用ナノフィルムの製作手法を確立した。2)ナノチューブの熱伝導率及び加熱用ナノフィルムとナノチューブ間の接触熱抵抗を同時に測定できる方法を提案し、その方法を達成するための二段ヒートシンク式ナノプローブを設計・製造した。二段ヒートシンクは金を用いることで比較的容易に成膜できることがわかった。3)カーボンナノチューブと加熱用ナノフィルムとの接合方法を検討し、AFMのカンチレバの先端に直接成長させたカーボンナノチューブを、マニピュレータ付き電子顕微鏡下での操作により接合する手法を試みた。さらに、カーボンナノチューブと金ヒートシンクとの接合状況の良否についても確認した。4)カーボンナノチューブを独自に製作することを試みた。

アモルファスカーボンの付着が少ない良質のカーボンナノチューブを製作し、その構造や寸法などの特性を試料ごとに個別に評価した。5)厚さが異なる種々のナノフィルムの電気抵抗、熱伝導率およびそれらの温度依存性について、低温(77K)から常温(300K)までの温度範囲で測定した。さらに、XRD及びTEMにより加熱用薄膜ナノフィルムの微細構造とその電気抵抗、温度特性及び熱伝導率との関係を明らかにした。6)今年度は、サンプルとして十分な長さをもつカーボンナノチューブの製作が十分にできなかったためカーボンナノチューブ自体の熱伝導率の測定は次年度の課題として残された。今年度は、T字一体型ナノプローブの改良を行い、プローブ製作の歩留まり向上を目指すと同時に、測定精度の向上、手順の自動化など、測定システム全体の高精度化を目指して研究を進めた。カーボンナノチューブ(CNT)の熱伝導率の測定だけでなく、この測定法の精度に重要な影響を及ぼす、懸架白金ナノ薄膜の熱伝導率および電気伝導度と製造プロセスや組織構造との関係について、実験的・理論的な検討を行い、多くの新しい知見を得た。1.T字一体型ナノプローブの特性評価加熱用白金ナノフィルムの寸法にはナノフィルム自体や被測定試料の熱伝導率に依存した最適値がある。このため、白金ナノフィルムの熱的・電気的特性を詳細に測定し、線幅、厚さおよび長さとT字一体型ナノプローブの特性の関係、すなわち、CNTの熱伝導率測定に及ぼす影響を明らかにした。2.ナノフィルムの熱的・電気的特性成膜速度や膜厚を変化させたナノフィルムの熱伝導率および電気伝導度の詳細な測定を行った。これらの特性は膜の厚さではなく、多結晶膜の結晶粒のサイズによって大きく影響を受けることを明らかにするとともに、電気や熱のキャリアである電子の表面散乱や粒界出の散乱を考慮した従来の理論と比較した。その結果、薄膜の物性がバルク材に比して大きく低下する原因は主として粒界における散乱によることを確かめられた。また、金属薄膜ではWiedemann-Frantz法則が成立しない理由にっいても明確な説明ができた。3.接触熱抵抗の同時測定試料のCNTとナノフィルムの接合点における接触熱抵抗の値をCNTの熱伝導率と同時に測定する方法を確立した。ただし、2段式ヒートシンクのMEMSによる製作は困難を極め、実際の測定を遂行するには至らなかった。4.CNTの熱伝導率の測定と評価数種のカーボンナノチューブについて熱伝導率度の測定を行い、先に行った測定値と比較した。測定値に再現性があることが確認され、本手法の有効性が確かめられた。
フィンランドのナショナル・ロマンティシズムに基づく住宅地計画に関する歴史的研究

本研究は,ナショナル・ロマンティシズム期(18951915頃)のフィンランド建築に焦点を当てて,特にその後期の住宅地計画のあり方を研究したものである。実際には、収集した研究文献や資料に基づき、ヘルシンキのクロサーリ地区とムンキニエミ=ハーガ地区について詳細な分析を行った。クロサーリ地区は建築家L.ソンク(18701956)が1907年以降に取り組んだもので、小さな島に立地することで独立的な性格を維持し、その内部で自然と近く安定的で心地よい住環境を作り上げている.ただし、ヘルシンキ全体の発展との関係を断ち切る形で実現されたゆえに、地区の閉鎖性が大きな問題となってくる.一方のムンキニエミ=ハーガ地区は建築家E.サーリネン(18731956)が1915年に計画書を発表したもので、人口統計や交通網の構成などに基盤を置いた合理的な性格を持ち、フィンランドに初めて近代的な都市計画をもたらした内容と評価できる.しかし、全体として壮大な夢に近く、ほとんど実際に建築されることはなかった。この2つの住宅地計画の違いは、後期ナショナル・ロマンティシズムがもつ特徴をそのまま反映しており、さらにモダニズム以降のフィンランド建築の独自の発展を生む基盤を用意したものと考えられる。すなわち、近代建築の出発点として「都市」のみならず「原生林」も想定しようとする姿勢である。こうした点に、フィンランドのナショナル・ロマンティシズム建築の独自性を見出すことができ、特に住宅地計画は今後さらに分析対象として重視されるべきだと考えている。この研究の大きな目的は、北欧各国の文化一般および建築において、19世紀末から20世紀初頭に登場した「ナショナル・ロマンティシズム」と呼ばれる概念を取り上げ、その内容を分析して歴史的に定位させることにある。まず資料の収集に関しては、当初の研究実施計画どおり、本年度は国内に所蔵される資料を探索して、その利用の可能性を広げることに努めた。東京への資料収集旅行を1回行い、日本建築学会図書館(東京都港区)などに所蔵されている文献資料の内容把握をめざした。こうした基礎的な作業は来年度も継続してゆく予定である。1998年はフィンランドのモダニズム建築家アルヴァー・アールトの生誕100年にあたったため、世界各国において彼の作品に関する研究の大きな進展が見られた。そこで本研究でも、その内容を吸収し発展させることで、当初の実施計両で想定していた範囲を上まわるナショナル・ロマンティシズムからモダニズムへの建築の連続性に関する新たな知見が得られた。専門誌「建築文化」のアールト特集号に掲載された作品分析(2回)、およびセゾン美術館でのアールト展のカタログに寄せた論考に、その成果の一部を発表した。これらを通じて、ナショナル・ロマンティシズムの建築概念の中に含まれる自然環境に対する意識を正当に評価することが、フィンランド建築全体に対する本質的な理解に到達する必要条件であることが判明した。来年度の継続研究では、当初の予定どおりナショナル・ロマンティシズム期自体の住環境形成に焦点を当てて、可能であればヘルシンキその他フィンランド各地への調査・研究旅行も実施しつつ、成果をさらに論文としてまとめてゆく予定である。資料収集に関しては、当初の研究実施計画どおり、国内に所蔵される資料を探索して、その利用の可能性を広げる作業を継続した。東京への資料収集旅行を1回行い、再び日本建築学会図書館(東京都港区)などに所蔵されている文献資料の把握をめざした。こうした基礎資料のデータ化は、今後もできる限り続けてゆく予定でいる。1999年は2年継続の研究の最終年に当たったため、成果を研究としてまとめる作業にも重点を置いた。まず、本研究テーマを解明する前提として、北欧における伝統的民家のあり方と、19世紀以後の近代都市の形成史の2点を想定した。

前者については「ヨーロッパの家・第1巻」の掲載論文において、おもにノルウェーとスウェーデンの農家の全体配置、ログの建築構法、内部平面構成とインテリアなどの特質を論じた。後者は、「Excellent Finland」誌において都市ヘルシンキに焦点を当て、全体の形成過程から北欧的特質を抽出する試みを行なった。その上で、ナショナル・ロマンティシズムに基づく住宅地計画の具体例として、それぞれヘルシンキ郊外に計画・一部建設されたクロサーリ地区とムンキニエミ=ハーガ地区の2箇所を中心として、その他の例にも言及しつつ詳細に分析する作業を行ない、成果報告書にまとめた。その結果、ナショナル・ロマンティシズムがめざす近代化の方向性として、自国の伝統の再構成に固執する方法と、外国の新しい手法を積極的に導入する方法があり、それが住宅地計画の中にはっきりと反映していることが判明した。今後の課題として、これらの2つの方向性が次の北欧モダニズムの中に、いかなる形で引き継がれてゆくのかを解明することが必要となろう。
ANCA産生型腎疾患の発症調節物質に関する研究

1)モデル動物の検討本来血中には検出されないMPO活性、MPO-ANCAが、抗GBM腎炎ラットおよびアジュバント関節炎ラットの血漿中で高値を示した。MPO活性、MPO-ANCA価のいずれも高値を示した抗GBM腎炎ラットでは、尿中たんぱく量が有意に高く、また、アジュバント関節炎を発症しているラットの関節の浮腫率は無処置群に比較して有意に高かった。2)アセアノスタチン(i-14:0)経口、腹腔投与に対する評価アジュバント関節炎ラットに対して、アセアノスタチンを経口(20mg/kg)あるいは腹腔投与(30mg/kg)、血清中のMPO-ANCAへの影響について検討したところ、アセアノスタチン投与群で明らかな減少を認め正常レベルまで回復した。また、関節の腫脹の程度、牌臓・胸腺重量の変化、血清の生化学的変化等を指標としてその臨床効果について評価したところ、腹腔内投与によって、体重増加の抑制の改善、白血球増加の抑制、足浮腫の抑制、骨破壊の抑制が認められたが、溶媒投与群(コントロール群)でも同様の薬理作用がみられた。腹腔内投与という処置自体により、腹腔で炎症がおこり、その影響で見かけ上の抗炎症作用が出た可能性が考えられる。従って、アジュバント関節炎に対する経口、腹腔両投与法では、アセアノスタチンによる治療効果は弱いものと判断された。血中のアセアノスタチン濃度が十分上昇していない可能性もあるが、現在その定量法については確立していないため検討する必要がある。さらに、抗GBM腎炎発症モデルラットについてもアセアノスタチンの効果の評価をする予定である。以上のことから、1)アジュバント関節炎モデルマウスでは、MPO-ANCAが上昇した。2)アセアノスタチンの経口および腹腔投与により、MPO-ANCAが正常レベルまで減少した。3)血管炎、腎炎でMPO-ANCAはリスク因子になっており、アセアノスタチン投与でMPO-ANCAが減少したことは、病態改善にまで至らなかったものの、病態のリスクを軽減したことであり、アセアノスタチンの臨床応用に一歩前進したことを意味している。また、臨床でのMPO-ANCA値だけでは病態の重症度の指標にはならず、エピトープ解析が必要であると思われる。今後は、MPO-ANCAが高値を示したモデル動物のMPO-ANCAのエピトープ解析によるアセアノスタチンの評価をする必要があり、血管炎患者の治療法の検討との関係を明らかにするためにも重要であると思われる。MPO放出阻害物質アセアノスタチンの効果をin vivoで評価するためのモデル動物系を決めるために、以下に示す6種類の系について検討した。a)カラゲニン誘発胸膜炎(ラット)b)カラゲニン誘発足浮腫(ラット)c)アジュバント関節炎(ラット)d)LPS誘発急性肺障害(マウス)e)抗GBM腎炎(ラット)f)卵白アルブミン感作肺障害(ラット)それぞれの血漿中のMPO活性はH_2O_2を基質としたperoxidase活性測定により測定した。またMPO量、抗MPO量をELISA法により測定した。c)のアジュバント関節炎ラットモデルでは、アジュバント接種後、1、2、3週後に採取した血漿をサンプルとした。e)の抗GBM腎炎ラットモデルでは、抗ラット糸球体基底膜血清量を2 dose(0.2ml、0.3ml)用いた。ELISA法による血漿中のMPO量の測定では、各モデル動物とも差を認めなかった。MPO活性は抗GBM腎炎ラットで顕著に高値を示したが、その程度は、接種した抗血清量に依存していなかった。また、アジュバント接種から2週目の関節炎ラットで高値を示した。一方、ELISA法で測定した抗MPO抗体量は、アジュバント関節炎ラットモデルで、接種後2週目をピークとして顕著に高値を示し、また抗GBM腎炎ラットでも、接種した抗血清量に依存して高値であった。MPOの自己免疫疾患への関わりが指摘されていることから、興味深い結果と考えられる。c)、e)のモデル動物系を用いて、アセアノスタチンのin vivoにおける結果について検討する予定である。

従って、アジュバント関節炎に対する経口、腹腔両投与法では、アセアノスタチンによる治療効果は弱いものと判断された。血中のアセアノスタチン濃度が十分上昇していない可能性もあるが、現在その定量法については確立していないため検討する必要がある。さらに、抗GBM腎炎発症モデルラットについてもアセアノスタチンの効果の評価をする予定である。以上のことから、1)アジュバント関節炎モデルマウスでは、MPO-ANCAが上昇した。2)アセアノスタチンの経口および腹腔投与により、MPO-ANCAが正常レベルまで減少した。3)血管炎、腎炎でMPO-ANCAはリスク因子になっており、アセアノスタチン投与でMPO-ANCAが減少したことは、病態改善にまで至らなかったものの、病態のリスクを軽減したことであり、アセアノスタチンの臨床応用に一歩前進したことを意味している。また、臨床でのMPO-ANCA値だけでは病態の重症度の指標にはならず、エピトープ解析が必要であると思われる。今後は、MPO-ANCAが高値を示したモデル動物のMPO-ANCAのエピトープ解析によるアセアノスタチンの評価をする必要があり、血管炎患者の治療法の検討との関係を明らかにするためにも重要であると思われる。1.研究目的人の自己免疫疾患、炎症における好中球の過剰反応を抑制する物質をin vitroの系で検討し、併せてその作用機序を明らかにする。また、自己免疫疾患・炎症のモデル動物の系を確立し、病態とミエロパーオキシデ-ス(MPO:好中球ライソゾーム酵素)および抗MPO抗体との相関性を示したモデル系を選び、好中球の過剰反応を抑制する物質の効果を検討し、in vitroの系における効果との外挿をする。2.研究方法Lewis系ラット(6 W、♂、一群6匹)の一側の足にアジュバントを投与し、MPO放出阻害物質(アセアノスタチン)をアジュバント投与から18日後まで、経口投与(20mg/kg)した。ポジティブコントロールとして、cyclosporin A(10mg/kg)を同様に連日経口投与した。アジュバントのみを一側の足に投与した群をコントロール群、アジュバント非投与群をノーマル群とした。次の10項目について、アセアノスタチンの効果を評価した。Aアジュバント投与足の容積の経時変化Bアジュバント非投与足の容積の経時変化C体重の変化D末消血中の白血球数の変化E脾臓重量F胸腺重量G血清中の還元型SH量I血清中のムコたんぱく量3.研究成果昨年度、6種類の炎症動物モデルを作成し、それらの血漿中あるいは気管支洗浄液上清中のMPOおよび抗MPO抗体を測定したところ、抗GBM腎炎ラットおよびアジュバント関節炎ラット(特に投与2週間後)の血漿中で、MPO活性が高値を示した。ELISAで検出した抗MPO抗体については、抗GBM腎炎ラットおよびアジュバント関節炎ラット(特に投与2週間後)の血漿中で高値を示した。これらの結果に基づき、まず、アジュバント関節炎ラットに対して、アセアノスタチンを経口投与し、その効果を評価した。アジュバント投与・非投与足の容積の経時変化では、わづかにアセアノスタチンの効果が認められた。体重変化では、アセアノスタチン投与群で体重の減少が認められ、毒性が示唆された。