hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
造血幹細胞移植・骨髄移植前処置における制吐療法の最適化に向けて

(目的)2009年よりアプレピタント(商品名:イメンドカプセルカプセル【○!R】)は本邦でも承認となった。また、従来の制吐剤と比較し半減期が長く、遅発性の悪心・嘔吐に対しても効果が期待できるパロノセトロン塩酸塩(商品名:アロキシ注【○!R】)が開発され2010に国内で認可された。造血幹細胞移植、骨髄移植では前処置として大量化学療法が用いられる。これにより生じる悪心・嘔吐の発現率は極めて高い。一方で、大量化学療法施行の際の制吐療法についてはデータが不足しており最適な治療が行われているとは言い難い。そこで本研究では大量化学療法時の悪心・嘔吐を抑えQOLを向上するための最適な制吐療法の組み合わせを見出すことを目的とし、大量化学療法時のアプレピタント、パロノセトロンの制吐効果への寄与を確認することとする。(方法)2012年4月1日から2013年7月20日までに自家末梢血幹細胞移植(AUTO-PBSCT)にて大量メルファラ療法を行った患者を対象としレトロスペクティブに調査を行った。主評価項目は全観察期間における嘔吐なしの患者の割合とした。副次的評価項目として化学療法投与中および投与後における嘔吐なしの患者割合、化学療法施行中および施行後におけるcomplete response(嘔吐なし、救済治療なし)の患者割合を評価した。救済治療は悪心があった場合の追加の薬剤投与と定義した。(成果)2012年4月1日から2013年7月20日までにAUTO-PBSCTにて大量メルファラン療法を施行した多発性骨髄腫またはPOEMS症候群、原発性アミロイドーシスの患者は14名であった。主評価項目、副次評価項目双方で全観察期間の嘔吐の割合に差は認めなかった。しかし、全評価項目においてイメンドカプセル使用群で効果的な傾向がみられ、差を認めなかった原因としてはサンプルサイズの小さが原因となることが予測され、更なる症例の追加が必要と考えられた。
敷設条件を考慮した液状化時におけるライフライン構造物の浮き上がり被害予測

地盤の液状化に伴なうマンホールの浮き上がりについて,その被害要因,メカニズムを明らかにし,被害予測と対策工法を検討するため,2003年十勝沖地震,2004年新潟県中越地震を中心に,マンホール浮き上がり被害の実態調査と地盤調査を実施してきた。その結果,埋設深度が同程度のマンホールの地震時の浮き上がり量は,周辺地盤でも一様に液状化が生じる砂地盤に埋設されたものより,軟弱地盤内に埋設されたマンホールや管路のほうが大きいことが明かになり,これまでの液状化被害予測等と大きく異なる結果となった。そうしたマンホールの敷設環境・敷設条件を,模型地盤内で再現し,同時加振による振動台実験結果の比較から,埋戻し土の液状化によるマンホールの浮き上がりは,(1)埋戻し土の液状化の発生そのものがトリガーとなり,マンホール側面の土粒子が底部に廻り込むことによって増大すること,(2)廻り込みは周辺地盤が粘性土のような完全な液状化に至らない軟弱地盤のほうが,埋戻し領域内で土粒子の廻り込みが大きくなり浮き上がり量も顕著に大きくなることを実験的に証明し,その浮き上がり量の上界値も得ることができた。一方,浮き上がり対策については,幾つかの方法が既に提案・実施されているが,費用対効果が悪く,敷設替えや改修が頻繁に行われる上・下水道などでは合理的な対策とは言えない。そうしたマンホールに対して本研究で明らかにした浮き上がりメカニズムをもとに,簡易な対策方法について検討し,効果が確認された。地震時の液状化によって,マンホールや埋設管といったライフライン構造物が甚大な被害を受けるていることに注目し,これまでの被害事例の検討と,浮上がり被害に着目した模型振動実験を中心に,初年度の研究を実施した。2003年十勝沖地震や2004年新潟県中越地震では,マンホールの浮上がり被害が多数見られた。一方で,広範囲な液状化が生じた1995年兵庫県南部地震では,顕著なマンホールの浮上がり被害は認められなかった。両者の違いは,周辺地盤の堆積環境にあると考え,十勝沖地震で被害が多かった北海道豊頃町,音別町,釧路市,新潟県中越地震で被害が集中した長岡市,小千谷市,見附市について,地盤調査を実施し,さらに,管路の敷設データ,被害資料の収集を行った。その中で,泥炭や腐植土といった軟弱地盤で掘削,敷設されたマンホールや管路に被害が集中していることが,統計的にも明らかとなった。そこで,泥炭地盤中に敷設したマンホールの模型地盤を作成し,振動台実験によって浮上がり被害の再現を試みた,砂質土地盤に敷設した模型での実験に比べ,明らかに小さな加速度レベルから浮上がりが生じ,その最終浮上がり量も約10倍程度異なることを明らかにした。この原因として考えられるのは,軟弱地盤の地震時応答と透水性,変形性にあると考え,地震応答解析によって軟弱地盤に敷設した管路の埋戻し土の方が液状化しやすいことを示した。また,振動台実験では,埋戻し土の液状化時ならびにマンホールの浮上がり時において,周辺地盤が砂質土であるほうが,結果的に変形追随性が高く,そのことがマンホールを拘束する結果となっていることを明らかにした。地盤の液状化に伴なうマンホールの浮き上がりについて,その被害要因,メカニズムと明らかにし,被害予測と対策工法を検討するため,2003年十勝沖地震,2004年新潟県中越地震を中心に,マンホール浮き上がり被害の実態調査と地盤調査を実施してきた。

そうしたマンホールの敷設環境・敷設条件を,模型地盤内で再現し,同時加振による振動台実験結果の比較から,埋戻し土の液状化によるマンホールの浮き上がりは,(1)埋戻し土の液状化の発生そのものがトリガーとなり,マンホール側面の土粒子が底部に廻り込むことによって増大すること,(2)廻り込みは周辺地盤が粘性土のような完全な液状化に至らない軟弱地盤のほうが,埋戻し領域内で土粒子の廻り込みが大きくなり浮き上がり量も顕著に大きくなることを実験的に証明し,その浮き上がり量の上界値も得ることができた。一方,浮き上がり対策については,幾つかの方法が既に提案・実施されているが,費用対効果が悪く,敷設替えや改修が頻繁に行われる上・下水道などでは合理的な対策とは言えない。そうしたマンホールに対して本研究で明らかにした浮き上がりメカニズムをもとに,簡易な対策方法について検討し,効果が確認された。
桜島火山における爆発地震の解析による爆発的噴火の力学過程の解明

桜島火山で発生する爆発的噴火の力学過程をより詳細に明らかにするために、爆発地震の初動に続く振幅の大きな引き波(D相)に着目し解析を行った。D相は見かけ伝播速度、振動軌跡の卓越方向からP波と考えられるが、詳細に見てみると単純なP波とは考えにくい特徴が見られた。D相のパルス幅は震央距離が長くなるにつれ伸び、振動軌跡はパルスのピーク以降直線性が悪くなり楕円振動を示す。波形解析から、D相はP波で始まり、ピーク以降Rayleigh波が卓越してくることが明らかになった。波形の特徴から、D相を励起する震源は1つの円筒収縮力源ではなく、深さ2kmからそれよりも浅い部分へ順次伝播するのではないかと考え、鉛直方向に配置した10個の多点震源による観測波形の再現を試みた。その際、各点震源の震源メカニズムは円筒収縮を仮定し、各地震モーメントおよび発震時はグリッドサーチにより観測波形と理論波形の残差が最小になるように求めた。その結果、浅部における円筒収縮によりRayleigh波が励起され、観測されている現象を説明できた。地震モーメントは深部では大きく、浅部になるほど小さくなり、特に深さ1km以浅では、地震モーメントは急激に小さくなる結果が得られた。また,伝播速度については、深さ1kmまでは円筒収縮の伝播速度は2.0km/sであったが、それより浅部に移動すると速度は遅くなり深さ0.2kmでは1.5km/sとなった。桜島火山における爆発的噴火の発生の際には火口直下数100mの位置にガス溜りが形成されており、火道の上部ではマグマ中に気泡が形成されていると考えられる。今回得られた結果の浅部における地震モーメント、伝播速度の減少から、マグマ中の気泡の量は浅部ほど多くなっていることが考えられる。これまでの爆発地震の震源過程の研究では、D相は深さ2kmにおける1つの収縮力源によって再現されてきたが、これらの特徴はうまく説明できていなかった。D相は火道内のガスが上方へ抜け、圧力低下による火道収縮によって励起されると考えられる。波形の特徴を元に、D相を励起する震源は1つの収縮力源ではなく、深さ2kmからそれよりも浅い部分へ順次伝播するのではないかと考え、鉛直方向に配置した多点震源による観測波形の再現を試みた,その際、各点震源の震源メカニズムは円筒収縮を仮定し、各地震モーメントはグリッドサーチにより求められた。その結果、D相を励起する震源が浅部にも伝わるため観測されているRayleigh波がよく説明できた。また、地震モーメントは深部では大きく、浅部になるほど小さくなる結果が得られた。今後は各点震源の発震時間間隔をより詳細に調べ、火道内での物理過程、火口底での爆発的噴火の発生との関係を明らかにする。
積雪寒冷地における気候変動下の農地土壌物理環境予測：津軽地域のリンゴ園を対象に

気候変動に伴う冬季の気温上昇や降水パターンの変化は,積雪寒冷地においては根雪の期間や融雪の時期を変化させ,冬季春季の土壌水分・温度状態,土中の生化学反応や物質動態を変化させると考えられる.土壌水分や地温などの土中の環境は,作物生産や土壌微生物の働き,土中で生じる諸反応に影響を及ぼす.本研究では津軽地域のリンゴ園を対象に,将来予測されている気温や降水量の変化に基づいて数値計算(シミュレーション)を行い,「気候変動下において,積雪寒冷地では積雪や融雪の時期,量が変化することによって,農地土中の水分、温度状態や土中のCO2濃度分布がどのように変化し得るか」を検討する.気候変動に伴う冬季の気温上昇や降水パターンの変化は,積雪寒冷地においては根雪の期間や融雪の時期を変化させ,冬季春季の土壌水分・温度状態,土中の生化学反応や物質動態を変化させると考えられる.土壌水分や地温などの土中の環境は,作物生産や土壌微生物の働き,土中で生じる諸反応に影響を及ぼす.本研究では津軽地域のリンゴ園を対象に,将来予測されている気温や降水量の変化に基づいて数値計算(シミュレーション)を行い,「気候変動下において,積雪寒冷地では積雪や融雪の時期,量が変化することによって,農地土中の水分、温度状態や土中のCO2濃度分布がどのように変化し得るか」を検討する.
新規蛍光プローブの化学的ナビゲーションを応用した子宮頸癌円錐切除範囲の決定

本研究では子宮頸癌の前癌病変に特徴的な酵素活性を同定し、蛍光プローブ分子を用いて頸部前癌病変の可視化を実証し、将来の頸癌前癌病変の術中蛍光診断(化学的ナビゲーションシステム)の臨床応用を目指している。本研究においてCIN1からCIN3、微少浸潤扁平上皮癌においてGGTの染色強度が強い傾向を認めたが、現時点では有意差を認めなかった。これは、実験手技に起因する可能性を考えている。今回、GGTの特異的な発現亢進の可能性を明らかにできた。今後の蛍光プローベへの研究につなげたいと考えている。若年子宮頸癌は増加傾向にあり、前癌病変である異形成病変や上皮内癌患者数も増加している。前癌病変の段階で確実に診断しかつ根治切除するためには、低侵襲で正確に病変を検出する検査法が必要であるが、前癌病変を正確に可視化する検査ツールはいまだ開発されていない。近年、がん細胞に取り込まれると発色する蛍光プローブ分子が開発された。蛍光発色検出法が確立すれば、頸部摘出手術中に用いることで、リアルタイムに正確に病変範囲を確認でき、術中蛍光診断により遺残なく的確に切除範囲を決定できることが期待される。gamma- glutamyltransferase(以下GGT)はグルタチオンなどのγ-グルタミルペプチドを加水分解し、他のペプチドやアミノ酸にγ-グルタミル基を転移する酵素で、生体に広く分布する酵素であるが、がん細胞の細胞膜に過剰発現しており、肝臓癌や甲腺癌の発癌過程で、前癌細胞においてその酵素活性が亢進していることが報告されている。子宮頸癌では、患者血清中のGGT蛋白濃度が前癌病変と比較し浸潤癌では有意に高いことが報告されており、子宮頸癌においても発現または酵素活性が亢進している可能性がある。本年度は前癌病変や微小浸潤頸癌病変においてGGTが特異的に発現また活性亢進していることを臨床検体によって確認することを研究目標とした。免疫組織染色にて子宮頸癌にはGGTは発現が亢進している。しかし、前癌病変や微少浸潤頸癌病変での発現に現時点では有意差を認めなかった。これは免疫組織染色の抗原抗体反応に対する至適濃度・時間の再検討が必要であると考えている。今後、さらに症例数を増やし研究を進める予定である。免疫組織染色には至適な濃度・時間の設定が必須であるが、これまで子宮頸癌前癌病変の染色に対する報告がほとんどないためその設定に難渋した。本研究の目的は、子宮頸癌の前癌病変に特徴的な酵素活性を同定し、蛍光プローブ分子を用いて頸部前癌病変の可視化を実証し、将来の頸癌前癌病変の術中蛍光診断の臨床応用へつなげることである。

その前癌病変に特徴的な酵素活性の候補のひとつとして、gamma- glutamyltransferase(以下GGT)を想定した。この酵素は生体に広く分布する酵素であるが、がん細胞の細胞膜に過剰発現しており、肝臓癌や甲腺癌の発癌過程で、前癌細胞においてその酵素活性が亢進していることが報告されている。子宮頸癌では、患者血清中のGGT蛋白濃度が前癌病変と比較し浸潤癌では有意に高いことが報告されており、子宮頸癌前癌病変においても活性が亢進していると考えられた。現在、免疫組織染色でGGTの活性を調べているが、免疫組織染色にて子宮頸癌にGGTは発現が亢進していた。しかし、前癌病変や微少浸潤頸癌病変での発現に現時点では有意差を認めなかった。これは実験手技に起因する可能性を考えている。免疫組織染色には至適な濃度・時間の設定が必須であるが、これまで子宮頸癌前癌病変の染色に対する報告がほとんどないためその設定に難渋している。今後、さらに症例数を増やし、特異的な発現亢進を明らかにして蛍光プローブへの研究につなげたいと考えている。婦人科腫瘍蛍光プローブを頸部上皮に局所投与を行い、酵素活性によりプローブを発色させ、蛍光内視鏡でリアルタイムでの可視化を実証するためには、子宮頸癌の前癌病変に特徴的な酵素活性を同定する必要がある。特徴的な酵素活性の候補のひとつとして、gamma- glutamyltransferase(以下GGT)を想定している。まず、免疫組織学的に子宮頸癌前癌病変におけるGGTの発現亢進を明らかにする必要がある。さらに症例を重ねてanti-GGT antibodyの至適濃度をまず設定する。3μg/mlより高く設定する必要があると考えている。その後、円錐切除直後の切除標本を使用し、蛍光ペプチターゼプローブの散布濃度・発色開始時間・蛍光持続時間のデータ収集を行う子宮頸癌組織、子宮頚部異形成組織に対するGTTの免疫染色を行っている。現在、至適な濃度や反応時間の設定を行っている。そのため次年度使用額が生じた免疫組織染色に対する条件設定が確立されれば、その後、さらに免疫蛍光プローブを使用して病変部位の同定が可能か検討する
口腔と胎盤マイクロバイオームによるジカ熱垂直感染機構の解明

ジカウイルスは,妊婦が感染すると高い頻度で胎児に小頭症をはじめとする重篤な神経障害を来す.我々は近年明らかにされた子宮内の常在菌叢と局所免疫,胎盤の上皮間葉移行に着目し,垂直感染機序の解明とその制御を目的とし、絨毛外栄養膜細胞のモデルとして、ヒトトロフォブラスト由来HTR-8/SVneo細胞を用い、子宮内に常在する可能性のある乳酸菌、上行性あるいは血行性に子宮内に到達する可能性のあるEshelichia coli, Staphylococcus aureus, Porphyromonas gingivalisの生菌あるいは培養上清を処理した。細胞のViabilityと可動性,マトリジェル浸潤を観察し、併せて風疹ウイルスとジカウイルスの複製に及ぼす影響を検討した。その結果、乳酸桿菌の中でもLactobacillus crispatusはHTR-8/SVneoの間質浸潤を強く促進したがLactobacillus acidophilisはHTR-8/SVneo細胞の浸潤に影響を与えなかった。マイクロアレイ解析とリアルタイムPCR解析により、その機序はMMP-1の発現亢進を介することが明らかになった。Eshelichia coli, Staphylococcus aureus,は強い細胞毒性を示す一方Porphyromonas gingivalis細胞毒性は弱いが、間質浸潤を強く抑制した。しかしながら、ウイルス複製についてはいずれの細菌も影響をおよぼさなかった。また、ウイローム解析では内因性レトロウイルスを含む複数のウイルス遺伝子発現を認めたが、現時点で垂直感染に関わる他のウイルスの特異的存在は認めなかった。これらのウイルス複製に影響する細胞内シグナル解析では、TLR3の発現上昇を認めたが、RIG-Iシステムは発現の変化を見なかった。病理標本では、合胞体細胞にウイルス抗原の染色性が見られたが、cytotrophoblastやinvasive trophoblastには見られなかった。子宮内細菌叢と絨毛細胞機能について、新たな知見を得たが、ウイルスの複製に及ぼす影響はまだ明らかになっていない。さらに、子宮内には妊娠の有無に関係なく、既知あるいは未知のウイルス遺伝子が認められるがこれが垂直感染にどのようにかかわるかは解析の必要がある。実際に垂直感染を来した症例は最近極めて稀であるが、現地の研究者と連携して検体を入手し、ウイルスのシークエンスを解析する必要がある。ジカウイルスの複数のウイルス株、あるいは変異を導入した株で検討する。付加する細菌の量を減らすあるいは培養上清の特定成分のみを使用する。南米に出かけて、実際に垂直感染を来した症例は最近極めて稀であるが、現地の研究者と連携して検体を入手し、ウイルスのシークエンスを解析する。培養系では、細菌の構成成分を分画してその句化を検討する。胎盤・羊膜由来幹細胞培養系を樹立し、分化誘導した幹細胞あるいはstemに近い性状を有する樹立絨毛細胞にウイルスを加えてウイルス抗原量を定量し、蛍光顕微鏡で複製動態を観察した。胎盤組織からDNAを抽出し,細菌特異的な16sRNA遺伝子をターゲットとしたPCR法並びに次世代シークエンサーにより細菌由来ゲノムを定量した.そして培養絨毛細胞に口腔細菌、膣常在菌である各種乳酸菌を添加し、絨毛細胞機能を解析した.その結果、胎盤には正常妊娠でも特異なマイクロバイオームが存在し、その構成菌の主体は、乳酸桿菌であり、一部乳酸球菌が存在することが判明した。乳酸桿菌は乳酸と過酸化水素により,乳酸球菌は産生するバクテリオシン、とくにNisinがグラム陽性菌のみならず、大腸菌や緑膿菌などのグラム陰性菌、嫌気性菌の発育を阻害することを明らかにした。この活性は他の抗菌薬や宿主由来の抗菌ペプチドとは交叉耐性が見られなかった。乳酸桿菌の中では、L.crispatusは膣上皮の創傷部に集まってその再生を促進したが、絨毛ではこのような活性は見られず、むしろ再生を阻害した。歯周病菌P.gingivalisは絨毛細胞の浸潤を強く抑制し、また初期胚の形成を阻害した。膣の再生では菌体産物によるTLR刺激が増殖を刺激したが、絨毛や羊膜ではTLR刺激によりウイルス感染に対する抵抗性が誘導され、これはtypeI interferonを介する可能性が示唆された。さらに、胎盤自体の産生するexosomeが母体面からautocrineに作用して絨毛へのウイルスの取り込みと接着を阻害することが判明した。本研究の遂行にあたり、胎盤、膣、消化管に存在する種々のバクテリアやウイルスを培養せずに定量する技術の開発が要求され、multiplex PCR,LAMP,RFLPによる解析技術を開発した。ジカ熱自体の胎盤感染系は確立できていないが、胎盤にマイクロバイオームが存在し、とくに乳酸菌が胎盤機能を調節していることが明らかになった。ジカ熱ウイルスは直接胎盤絨毛に感染する効率は非常に悪く、近年のデング熱に対する抗体保有者で、抗体依存性の感染増強が生じている可能性がある。また、我々が風疹で明らかにしたように、炎症性サイトカインやTLRリガンドの存在下でtrophoblastic columnがEMTを起こし、その間隙から直接胎児側のマクロファージや血管内皮細胞に侵入する可能歳が高い。一方、従来腟内の優位菌であっても子宮や胎盤には少ないと考えられてきた乳酸菌が少量ながら子宮内に存在することからその意義を検討した。乳酸菌の一部は腟上皮の再生を促進し、絨毛細胞の浸潤を促進することが明らかになったが、ウイルス抵抗性についても現在検討中である。

ジカ熱の複数のウイルス株は現在収集中であり、母子感染を起こした株とそうでない株の差異を検討している。現時点では、絨毛細胞自体の感染抵抗性に関与する因子を同定するに至っていないのでこの解明が今後の課題である。ジカウイルスは,妊婦が感染すると高い頻度で胎児に小頭症をはじめとする重篤な神経障害を来す.我々は近年明らかにされた子宮内の常在菌叢と局所免疫,胎盤の上皮間葉移行に着目し,垂直感染機序の解明とその制御を目的とし、絨毛外栄養膜細胞のモデルとして、ヒトトロフォブラスト由来HTR-8/SVneo細胞を用い、子宮内に常在する可能性のある乳酸菌、上行性あるいは血行性に子宮内に到達する可能性のあるEshelichia coli, Staphylococcus aureus, Porphyromonas gingivalisの生菌あるいは培養上清を処理した。細胞のViabilityと可動性,マトリジェル浸潤を観察し、併せて風疹ウイルスとジカウイルスの複製に及ぼす影響を検討した。その結果、乳酸桿菌の中でもLactobacillus crispatusはHTR-8/SVneoの間質浸潤を強く促進したがLactobacillus acidophilisはHTR-8/SVneo細胞の浸潤に影響を与えなかった。マイクロアレイ解析とリアルタイムPCR解析により、その機序はMMP-1の発現亢進を介することが明らかになった。Eshelichia coli, Staphylococcus aureus,は強い細胞毒性を示す一方Porphyromonas gingivalis細胞毒性は弱いが、間質浸潤を強く抑制した。しかしながら、ウイルス複製についてはいずれの細菌も影響をおよぼさなかった。また、ウイローム解析では内因性レトロウイルスを含む複数のウイルス遺伝子発現を認めたが、現時点で垂直感染に関わる他のウイルスの特異的存在は認めなかった。これらのウイルス複製に影響する細胞内シグナル解析では、TLR3の発現上昇を認めたが、RIG-Iシステムは発現の変化を見なかった。病理標本では、合胞体細胞にウイルス抗原の染色性が見られたが、cytotrophoblastやinvasive trophoblastには見られなかった。子宮内細菌叢と絨毛細胞機能について、新たな知見を得たが、ウイルスの複製に及ぼす影響はまだ明らかになっていない。さらに、子宮内には妊娠の有無に関係なく、既知あるいは未知のウイルス遺伝子が認められるがこれが垂直感染にどのようにかかわるかは解析の必要がある。実際に垂直感染を来した症例は最近極めて稀であるが、現地の研究者と連携して検体を入手し、ウイルスのシークエンスを解析する必要がある。培養絨毛細胞に対するジカ熱感染系を確立する。すなわち、我が国(国立感染症研究所と長崎大学)からジカ熱ウイルス標準株を入手する。次に、サンパウロ州立大学から母子感染株を入手し、絨毛細胞に対する感受性を検討する。交差反応による感染増強作用が報告されているデング熱抗体(モノクローナル抗体あるいは患者血清)を入手し、これによるFCレセプター依存性の感染を検討する。さらに、口腔あるいは下部女性生殖器に存在する微生物あるいはその培養上清を添加して感染効率を検討する。
移植心での拒絶反応抑制遺伝子治療における遺伝子発現イメージング法の開発

遺伝子治療における導入遺伝子の発現を非侵襲的に評価する方法の開発を目的として、心臓移植をモデルとし、移植心に免疫抑制遺伝子を導入し、その免疫抑制遺伝子の発現レベルを非侵襲的にイメージングすることを計画した。本年度は、昨年度構築した治療遺伝子であるvirus interleukin-10 (vIL-10)とレポーター遺伝子である変異型dopamine D2 receptor (D2R)を同時に発現するベクターのin vivoでの評価を行った。まず、vlI-10が分泌性のタンパク質であるためにその発現場所を特定することが困難であることを考慮して、vlL-10の代わりにluciferaseを発現するベクターを構築した。マウスおよびラットの尾静脈よりベクターを投与し、生物発光イメージング装置を用いて、luciferaseの発現部位をイメージングし、ついでSPECT装置と放射性薬剤である[^<123>I]IBZMを用いて変異型D2Rの発現部位をイメージングした。その結果、luciferaseと変異型D2Rの発現が同じ部位でおこっていることを認めた。次に心臓にベクターを導入し、同様の方法によりluciferaseと変異型D2Rの発現部位をイメージングした。その結果、luciferaseと変異型D2Rの発現部位が同じ部位であることがイメージングできた。以上の検討により、構築した発現ベクターと放射性薬剤を用いることにより、核医学的手法により、導入遺伝子の発現をイメージングできることが示唆された。本年度は、治療遺伝子として免疫抑制サイトカインであるvirus interleukin-10 (vIL-10)とレポーター遺伝子としてdopamine D2 receptor (D2R)を同時に発現するベクターの構築および構築したベクターのインビトロ実験系での評価を行った。まず、vIL-10及びD2Rを同時に発現するベクターの構築は、vIL-10とP2Rの遺伝子の間にcap構造非依存的にタンパク翻訳出来るinternal ribosome entry site (IRES)の遺伝子配列を挿入しすることにより発現ベクターを構築した。さらに、臨床への応用を考え、D2Rのシグナル伝達がおこらないようした変異型D2Rを導入したベクターの構築も行った。構築してベクターをHEK293細胞に導入し、安定発現株を樹立し、インビトロ実験系における検討を行った。その結果、vIL-10が細胞培養液中に分泌されること、変異型D2Rが細胞膜に発現していることが確認できた。さらに、変異型D2Rではシグナル伝達が抑制されていること、D2Rの放射性リガンドに対して結合能を保持していることが確認できた。以上の検討により、構築した発現ベクターと放射性薬剤を用いることにより、核医学的手法により、導入遺伝子の発現をイメージングできる可能性が示された。
PLA・コラーゲン足場を用いたインプラント支持骨の開発

天然歯の咬合を支持しうる力学的特性を具備した開発済みである高強度の織物構造からなる生体吸収性足場のPLAと、「人工コラーゲン」を組み合わせて応用し,そこへ「移植細胞」から形成される再生骨により、早期にインプラントの咬合支持が可能となる足場を開発することを本研究における目的とした。まず、in Vitroにおいて織物構造PLAの足場としての骨再生を評価し、次に、実験動物において頭蓋骨骨欠損モデルにて足場の骨再生能を評価した。一方で、人工コラーゲンの足場としての骨再生能を評価した。さらに、大動物モデルを用いた骨欠損に対する再生能と歯周病の動物モデルにおいての歯周組織再生能の評価をおこなった。その結果、織物構造PLAは、in Vitroでの骨形成、動物モデルにおいても移植環境の変化で差があったものの足場としての骨再生能、そして歯周組織の再生能が確認できた。人工コラーゲンは、MSCにとっての足場としての機能だけではなく、骨補填剤としても評価可能であることがわかった。以上のことから、PLAと人工コラーゲンは各々が足場として有用であり、さらに機能を付与させることで細胞の足場としてだけではなく、それ自体が骨再生能を有するマテリアルに置き換わる可能性が明らかになった。足場に用いる生体吸収性の材料であるPLAを用いて織物構造についてその細胞接着能を検討し,細胞接着能をvitroで確認した。また,PCLコーティングによる複合化で材料強度の検討では,複合化により操作性の向上が認められた。これらのことからPLAを足場として用いた場合でもインプラント支持骨としての歯槽骨の再生能力が期待できることが明らかとなった.一方で足場としての機能よりも新規骨再生材料としてα-TCPを開発して骨再生が可能であるか検討した。気孔径を200-1000μmでの設計になるよう作製することが可能になった。そこで,これらの粒径を分類して200-500μと1000-1500μの2種類のα-TCPを製造分類できた。また人工コラーゲンの濃度は0.1,0.5,1.0,2.0%と比較検討したところ低濃度で細胞増殖に優れていることが明らかとなり,人工コラーゲンは濃度を決定させた。この材料を用いてのブタの頭蓋骨と顎骨に埋植し,材料吸収速度と骨再生を確認するために,CTを用いて骨増生過程を定量的に検索するシステムを確立してきた,具体的にはチタン製の1mm角柱クリップを成形して作成した顎骨および頭蓋骨の骨欠損部(φ6×2mm)に挿入することで,作成した骨欠損と自家骨との境界が明瞭になりより骨再生能のより定量的評価が可能になった。現在,μCTでの評価系を確立させるために,再生骨・母骨・チタンクリップのどれもが評価可能な画像を得られるように条件設定をおこなっている。一方,自己幹細胞を用いた細胞培養においては増殖・分化の後,ブタの自己血から調整したPRPを用いて手術時に再生材料と混和させるという培養系を確立することが可能になった。骨再生に用いる生体吸収性の材料を用いて、ブタの頭蓋骨と顎骨に埋植し足場吸収速度と骨再生を確認するために、組織学的検索も鏡面研磨とHE染色を併せておこなう。幹細胞の培養により分化誘導させた骨芽細胞をそれぞれの骨再生材料に播種して、培養系を確立させて、in vitroでの細胞増殖能試験をおこなって生体吸収性材料のもつ骨再生過程を明らかにする。一方,自己幹細胞を用いた細胞培養においては増殖・分化の後,ブタの自己血から調整したPRPを用いて手術時に再生材料と混和させるという培養系を確立することが可能になり、さらにブタ顎骨および頭蓋骨に作成した骨欠損と自家骨との境界が明瞭になりより骨再生能のより定量的評価が可能になった。そこで、培養過程における骨再生能を検討すするために、未分化間葉系幹細胞(MSC)の増殖能を評価する目的で予め培養工程にて増殖させた細胞を移植した場合の再生能と、生体内に直接移植してその再生能を比較した。その結果、予め培養して増殖させた細胞よりも生体内に直接移植した細胞のほうが骨再生能が大きいことがわかった。このことからコラーゲンのもつ特性を応用して細胞の有無に関わらず骨再生の可能性の探ることは大きな意義を持つものであることがわかった。

今後、コラーゲンでできた生体吸収性の材料を用いて、その弾性を利用した設計をすることにより、生体環境の活性度に応じた材料の構造を最適化することができ、また咬合支持においても十分な力学的強度を有する機能的な再生骨を支える材料の開発を目指すものである。力学的特性を具備した開発済みである高強度の織物構造からなる生体吸収性足場のPLAと人工コラーゲンを応用することにより、咬合支持が可能となるような力学的強度を有する足場を開発することを本研究における目的として、まず、in Vitroにおいて織物構造PLAの足場としての骨再生を評価し、次に実験動物において頭蓋骨骨欠損モデルにて足場の骨再生能を評価した。その結果、織物構造PLA足場は、動物モデルにおいても移植環境の変化で差があったものの間葉系幹細胞の足場としての骨再生能が確認できた。さらに、実験的歯周病モデルを用いての歯周組織の再生能においても歯根膜と歯槽骨の再生が確認できた。一方で、人工コラーゲンの間葉系幹細胞の足場としての骨再生能を評価した結果、人工コラーゲンの動物実験の結果は、間葉系幹細胞にとっての足場としての機能だけではなく、骨補填剤としても評価可能であることがわかった。この人工コラーゲンは血小板の凝集機能があることが確認されていることから成長因子による効果が考察されるところである。このことから、PLAと人工コラーゲンは各々が足場として有用であり、さらに機能を付与させることで細胞の足場としてだけではなく、それ自体が骨再生能を有するマテリアルに置き換わる可能性が示唆された。幹細胞の実用化においては、細胞に対する機能的なスキャホールドとしてのニーズはますます高まっている一方で、このような足場が骨補填剤としての機能性が発揮できれば歯科分野のみならず整形外科分野での骨再生治療においての人工骨およびスキャホールドとしての高いニーズがあり技術移転と新規材料開発の可能性は極めて高いと考えられる。
自己血採血後遅発性副作用のリスク解析と予防のための看護方法の開発

1.地域の医療施設で自己血採血にたずさわる看護師の実態調査自己血採血後の遅発性副作用(DR)の看護方法を探索する基礎的知見として、岩手県内で自己血採血業務に携わる看護師の実態を無記名アンケートで調査した(回答15/19施設)。同採血に携わる看護師は67名で、7施設で専任者を定めていなかった。血管迷走神経反応(VVR)は6施設、DRは3施設で経験があった。看護業務は多岐にわたるが、DRの対応はなかった。研修機会は院内が1施設、院外が6施設だった。ほとんどの施設の看護師は静脈穿刺や採血副作用等に不安を感じていた。DRへの看護を推進するには、DRの認識を広め、業務の不安を減らす研修機会が必要であった。2.自己血採血後DRに関する前方視的疫学調査研究2.1.本調査参加施設の看護師を対象としたワークショップ:本調査の参加施設は前項調査を行った病院から公募した(岩手県内4病院)。参加施設の看護師を対象に、本研究を説明と「安全な自己血輸血」に関するワークショップを行った(計3回)。そこではマニュアル整備・確認、手技の統一、環境整備、採血副作用の対応等が課題とされ、クリニカルパスの活用、学習会の開催、採血手技や採血副作用のオリエンテーション等が提案された。2.2.自己血採血後DRに関する前方視的疫学調査研究:地域医療機関におけるDR発生率と危険因子を明らかにするために、前方視的疫学調査を前項4病院で開始した。調査対象は各施設で自己血採血され、本研究に参加同意が得られた患者とした。患者背景、初回採血時バイタルサイン、血算値、採血量と輸液量、VVR、採血後自覚症状と発生状況、患者満足度を調査した。採血直後の自覚症状はBlood donation reactions inventoryで、DRは前年度調査で報告された症状を6段階で調査した。本調査は平成30年11月から翌年12月末まで行う予定である。疫学調査を実施するにあたり、共同研究機関での倫理委員会への申請やワークショップを含む説明会の調整に時間を要したため、調査の開始が当該年度後半にずれ込んでしまい、予定登録患者数の達成度に遅れをみる状況である。同研究は共同研究機関で順調に進められてはいるが、共同研究機関との連携を強化し、今後も調査対象者の確保に努めていく。次年度も前方視的疫学調査研究を継続し、目標とする調査対象者の確保に努めていく。同調査の結果を集計・解析し、DRの予防と対処に関する看護方法の開発と検証につなげていく予定である。貯血式自己血輸血での自己血採血からしばらく経過した後に、頭痛・頭重感、ふらつき、倦怠感、眩暈などで発生する遅発性副作用の詳細は明らかになっておらず、その看護方法も確立していない。遅発性副作用の発生率と危険因子を明らかにするために、本年度は単施設における遅発性副作用の後ろ向きに疫学調査を行い、および地域の病院で自己血採血に携わる看護師の実態調査を開始した。1.自己血採血後の遅発性副作用に関する後ろ向き疫学調査研究自己血採血が行われた患者での遅発性副作用の発生頻度とその症状、および危険因子を後ろ向きに調査した。初回の自己血採血後1週間における遅発性副作用の発生頻度は33.7%で、採血当日に最も多くみられた。遅発性副作用を発生した患者の多くは、頭痛・頭重感、ふらつき、倦怠感、眩暈を訴えたが、ほとんどの症状は軽度で採血後4日目までに軽快した。遅発性副作用発生患者群と非発生患者群の患者背景や採血前バイタルサインなどをロジスティック回帰分析により解析したところ、その危険因子は、女性、低推定循環血液量、および採血前の軽度な頻拍であった。2.地域の医療施設で自己血採血にたずさわる看護師の実態調査本研究では地域の医療施設での自己血採血後遅発性副作用の前向きな調査を予定している。自己血採血には多くの医療機関で看護師が関わり、その中心的な役割を担っている。その調査を行うにあたり、岩手県内の医療施設で自己血採血にたずさわる看護師とその看護方法の実態に関するアンケート調査研究を計画した。アンケートでは、医療施設の基本的情報に加え、看護師業務(採血・観察・患者指導等)、研修制度、採血後副作用(迷走神経反応や遅発性副作用など)の経験、看護方法(看護手順、患者指導資料等の有無)、および看護上の不安等を調査する。地域の医療施設での自己血採血に関するアンケート調査と看護師を対象とした遅発性副作用に関するワークショップを当該年度内に予定していたが、研究協力機関と対象とする医療施設との調整に時間を要したため実施が次年度へずれ込んでしまった。次年度はじめにアンケート調査票を対象の医療施設(19病院)に発送した。

研修機会は院内が1施設、院外が6施設だった。ほとんどの施設の看護師は静脈穿刺や採血副作用等に不安を感じていた。DRへの看護を推進するには、DRの認識を広め、業務の不安を減らす研修機会が必要であった。2.自己血採血後DRに関する前方視的疫学調査研究2.1.本調査参加施設の看護師を対象としたワークショップ:本調査の参加施設は前項調査を行った病院から公募した(岩手県内4病院)。参加施設の看護師を対象に、本研究を説明と「安全な自己血輸血」に関するワークショップを行った(計3回)。そこではマニュアル整備・確認、手技の統一、環境整備、採血副作用の対応等が課題とされ、クリニカルパスの活用、学習会の開催、採血手技や採血副作用のオリエンテーション等が提案された。2.2.自己血採血後DRに関する前方視的疫学調査研究:地域医療機関におけるDR発生率と危険因子を明らかにするために、前方視的疫学調査を前項4病院で開始した。調査対象は各施設で自己血採血され、本研究に参加同意が得られた患者とした。患者背景、初回採血時バイタルサイン、血算値、採血量と輸液量、VVR、採血後自覚症状と発生状況、患者満足度を調査した。採血直後の自覚症状はBlood donation reactions inventoryで、DRは前年度調査で報告された症状を6段階で調査した。本調査は平成30年11月から翌年12月末まで行う予定である。疫学調査を実施するにあたり、共同研究機関での倫理委員会への申請やワークショップを含む説明会の調整に時間を要したため、調査の開始が当該年度後半にずれ込んでしまい、予定登録患者数の達成度に遅れをみる状況である。同研究は共同研究機関で順調に進められてはいるが、共同研究機関との連携を強化し、今後も調査対象者の確保に努めていく。アンケート調査の解析を行い、自己血採血にたずさわる看護師を対象とした遅発性副作用に関するワークショップを開催する。その後に地域の医療施設および対象者の同意に基づき前向き調査を行っていく。次年度も前方視的疫学調査研究を継続し、目標とする調査対象者の確保に努めていく。同調査の結果を集計・解析し、DRの予防と対処に関する看護方法の開発と検証につなげていく予定である。29年度に予定していたアンケート調査と看護師を対象としたワークショップの開催が次年度にずれ込んでしまったため。30年度にそれらを実施する。当該年度の経費を効率的に運用したこと、自己血採血に携わる看護師の実態調査および自己血採血後遅発性副作用の疫学調査研究の開始が遅れたこと、また予定登録患者数の達成がやや遅れていることに伴い発生した未使用額である。平成31年度請求額に併せ、平成30年度から継続しているDRの前方視的疫学調査研究と次年度に計画しているDRの予防と対処に関する看護方法の開発と検証に使用する予定である。
WNK4の下流シグナルの網羅的解析によるメタボリック症候群新規治療薬の開発

我々が作成したWNK4ノックアウト(KO)マウスの解析では、脂肪細胞分化抑制、耐糖能の維持という表現系が観察された。WNK4を制御することが肥満や高血圧の治療につながっていくことが期待される。WNK4がどのように肥満と関連しているかを解明するため、WNK4ノックアウト細胞をCRISPR-Cas9を用いて作成した。GFP発現CRISPR-Cas9ベクターをそれぞれの細胞にトランスフェクションし、GFPを発現している細胞をFACSによりsingle cell sortingを行った。培養後、Western blottingにてWNK4の蛋白発現量を調べた。その結果、3T3-L1細胞で5クローン、mpkDCT細胞で6クローンの培養細胞ラインを得ることができた。得られたWNK4ノックアウト細胞の形質の評価を行う前に、single cell sortingによるartifact effectを確認した。mpkDCT細胞ではWNK4の発現量やその下流であるSPAKのリン酸化に影響は認められなかった。一方、3T3-L1は脂肪分化やPPARγの発現量にSingle化したクローン毎にばらつきが認められたため、WNK4 KOによる影響かどうかは複数のクローンを使用するなどして慎重に評価する必要があると考えられた。WNK4が活性化する低浸透圧刺激で下流のSPAKのリン酸化も増加する。WNK4 KOマウスではSPAKのリン酸化は著明に減少していた。mpkDCTでのWNK4 KO細胞では、下流のSPAKのリン酸化は低浸透圧刺激に反応してリン酸化の増加が認められた。培養細胞はマウスとは異なる形質を示していた。3T3に関してはPPARγおよびC/EBPαの発現がWNK4KOで減少していた。WNK4の脂肪分化への関与また、WNK4の下流シグナルはSPAK/OSR1以外にはほとんど知られていないことから、WNK4自体の機能も不明な点が多い。WNK4は腎遠位尿細管で塩分出納に関与するNa-Cl共輸送体(NCC)の主要な調節因子であり、腎と脂肪でのWNK4シグナルを同時に解析することは、肥満や高血圧といった治療法につながるものと思われる。脂肪分化能を有する3T3-L1細胞とマウス腎遠位尿細管細胞であるmpkDCT細胞を使用し、CRISPR-Cas9ゲノム編集法を利用しWNK4 KO細胞を複数クローン作製することに成功した。WNK4キナーゼの下流にSPAKがあることが知られており、WNK4が活性化する低浸透圧刺激で下流のSPAKのリン酸化も増加する。しかしmpkDCTでのWNK4 KO細胞では、下流のSPAKのリン酸化は低浸透圧刺激に反応してリン酸化の増加が認められた。マウスの結果からは変化していないことが期待されたが、培養細胞はマウスとは異なる形質を示していることが分かった。3T3に関しては脂肪分化のマスターレギュレーターであるPPARγおよびC/EBPαの発現がWNK4KOで減少していた。現在複数のラインを用いて脂肪分化率を検討している。またWNK4のインタラクトームの実験系も確立することができ、現在解析を進めている。またSILAC labelingの準備も現在進めており、Labelingが終了したらWNK4 KO細胞を利用しリン酸化プロテオミクスを行い、Wild typeとWNK4 KOのリン酸化の比較を網羅的に解析する予定である。WNK4の下流シグナルはSPAK/OSR1以外にはほとんど知られていないことから、WNK4自体の機能も不明な点が多い。クロスリンカーを用いてWNK4と関連する蛋白を解析するインタラクトームの実験系も確立することができ、現在解析を進めている。WNK4のkinase dependentなシグナル伝達系もWNK4の機能を知る上では非常に重要であると考えられる。WNK4 KO細胞とWild typeを使用しSILAClabelingの準備も現在進めており、Labelingが終了したらWNK4 KO細胞を利用しリン酸化プロテオミクスを行い、Wild typeとWNK4 KOのリン酸化の比較を網羅的に解析する予定である。解析によりWNK4と関連のあるリン酸化シグナルカスケードを同定することが可能となる。それぞれリン酸化シグナルカスケードは生理的な役割を持っていることが知られており、WNK4の細胞内での機能を明らかにすることが出来ると考える。同定した生理的役割からメタボリックシンドロームの治療対象となる可能性をもつシグナル伝達系を阻害し、その効果を検証する。

一方、3T3-L1は脂肪分化やPPARγの発現量にSingle化したクローン毎にばらつきが認められたため、WNK4 KOによる影響かどうかは複数のクローンを使用するなどして慎重に評価する必要があると考えられた。WNK4が活性化する低浸透圧刺激で下流のSPAKのリン酸化も増加する。WNK4 KOマウスではSPAKのリン酸化は著明に減少していた。mpkDCTでのWNK4 KO細胞では、下流のSPAKのリン酸化は低浸透圧刺激に反応してリン酸化の増加が認められた。培養細胞はマウスとは異なる形質を示していた。3T3に関してはPPARγおよびC/EBPαの発現がWNK4KOで減少していた。WNK4の脂肪分化への関与また、WNK4の下流シグナルはSPAK/OSR1以外にはほとんど知られていないことから、WNK4自体の機能も不明な点が多い。WNK4は腎遠位尿細管で塩分出納に関与するNa-Cl共輸送体(NCC)の主要な調節因子であり、腎と脂肪でのWNK4シグナルを同時に解析することは、肥満や高血圧といった治療法につながるものと思われる。脂肪分化能を有する3T3-L1細胞とマウス腎遠位尿細管細胞であるmpkDCT細胞を使用し、CRISPR-Cas9ゲノム編集法を利用しWNK4 KO細胞を複数クローン作製することに成功した。WNK4キナーゼの下流にSPAKがあることが知られており、WNK4が活性化する低浸透圧刺激で下流のSPAKのリン酸化も増加する。しかしmpkDCTでのWNK4 KO細胞では、下流のSPAKのリン酸化は低浸透圧刺激に反応してリン酸化の増加が認められた。マウスの結果からは変化していないことが期待されたが、培養細胞はマウスとは異なる形質を示していることが分かった。3T3に関しては脂肪分化のマスターレギュレーターであるPPARγおよびC/EBPαの発現がWNK4KOで減少していた。現在複数のラインを用いて脂肪分化率を検討している。またWNK4のインタラクトームの実験系も確立することができ、現在解析を進めている。またSILAC labelingの準備も現在進めており、Labelingが終了したらWNK4 KO細胞を利用しリン酸化プロテオミクスを行い、Wild typeとWNK4 KOのリン酸化の比較を網羅的に解析する予定である。WNK4の下流シグナルはSPAK/OSR1以外にはほとんど知られていないことから、WNK4自体の機能も不明な点が多い。クロスリンカーを用いてWNK4と関連する蛋白を解析するインタラクトームの実験系も確立することができ、現在解析を進めている。WNK4のkinase dependentなシグナル伝達系もWNK4の機能を知る上では非常に重要であると考えられる。WNK4 KO細胞とWild typeを使用しSILAC
知覚的マインドセットと文化的マインドセットの相似性・相補性に関する研究

本年度は,実証的根拠を欠いた信念が受容される過程について,二重過程理論にいう直観-分析(内省)的な認知スタイルと,文化心理学のいう包括-分析的認知スタイルの相互作用について,取得済みのデータを用いた再検討をするとともに,非実証的信念と同様の認知過程が関与していると考えられている「それらしく見える戯言(pseudo-profound bullshit, Pennycook et al., 2015)」の受容についても,2つの認知スタイルとの関連を検討した。それらしく見える戯言とは,文法構造や個々の語の意味については問題はないが,全体を通すと意味が通じなくなる一方で,一部の人が,そこに何らかの深遠な意味を見いだしうる文言(例隠された意図は並ぶ物のない抽象美を変貌させる)を指し,超常信奉や陰謀論などの非実証的信念と同様に,内省的思考との間で負の関連が見られることが明らかにとなっている。加えて,ランダムなパターンの中に,意味のあるオブジェクトを見いだすパターン錯覚とも関連することが示されている。本研究では,非実証的信念および戯言の受容について,内省的思考の効果と,それが文化的認知スタイルによって調整されるかどうかの検討を行った。その結果,超常信奉,疑似科学信奉,および戯言に対する受容の判断は,全体としては内省的思考傾向とは負の相関を示すものの,内省的思考の効果は文化によって異なり,特に西洋圏の参加者においてその傾向が強いという結果が共通して見られた。本研究の成果の一部は国際学会等で発表された。さらに,全体の成果をまとめた論文の執筆を行った。現在は投稿のための最終準備中となっている。平成27年度においては,認知スタイル測定指標の整備と,大域・局所処理の誘導が包括的・分析的処理の実行に影響を与えるかどうかについての予備的検討を行った。前者の認知スタイル測定指標については,Analysis-Holism Scaleの日本語版を作成し,尺度構造について確認した。また,今後調査の項目として用いるに当たって,なるべく小数の項目数で測定するためにオリジナルの24項目から12項目を選んだ短縮版の項目選定を行った。大域・局所処理スタイルの測定指標の整備は28年度に行うこととした。また,28年度以降に行うオンライン実験のための環境整備にかかる予備的検討を行った。後者の大域・局所処理誘導が,包括的・分析的処理の選択に影響するかどうかについては,事前にNavon図形を用いて処理方向を誘導した後で,文化心理学の領域で用いられている包括・分析的処理の測定課題を行ったが,知覚的マインドセットの誘導によって文化的思考のパフォーマンスに変化は見られなかった。この原因については,28年度において継続して考察を行う。知覚的スタイルの誘導が包括的・分析的処理を測定する課題のパフォーマンスに変化を与えなかったという予備的実験で得られた結果が,実験手続き上の問題であるのか,知覚的マインドセットと文化的マインドセットの関係性が想定していたのとは異なるものであることによるのかについて,まだ明確な仮説を立てるに至っていない。また,この理由を検討するための,当初予定していなかった実験または調査の必要性が生じている。平成28年度では,オンライン実験のための環境整備について,27年度に行った成果をとりまとめた。その結果,オンライン調査・実験ともに,オフライン・サンプルと同程度以上の信頼性を持つこと,オフライン研究に比べて研究の計画・実施・分析にかかるサイクルが極めて短く済むことが明らかになった。本研究の成果は,2本の学術論文として刊行された。大域・局所処理と包括・分析処理の認知スタイル間の関係については,大域および局所処理誘導が文化によって異なる包括・分析処理に与える影響を検討する実験を,前年度に引き続いて行った(実験は現在も継続中であり,終了次第分析を行う)。これに加えて,文化に根ざした認知スタイルが,現実場面での信念や信念に基づいた判断に与える影響についての検討を行った。その結果,より一般的な二重過程思考に加えて,文化的背景を持つ認知スタイルも信念の強度の説明変数として有効であることが示された。特に,因果関係に対する理解や,矛盾する命題の処理の仕方が信念の強度に影響することが示された。知覚的スタイルの誘導が文化的マインドセットを測定する課題のパフォーマンスに影響を与えていないことについて,一部の手続きを修正した実験を行っているが,必要なサンプルの収集がまだ完了していない(2017年4月末までには収集予定)。また,文化的マインドセットが他の処理過程に影響を与えることについて,単純な知覚的処理への影響は限定的であり,むしろより高次の推論・判断過程に対する影響を検討した方が良いのでは,という意見があったため,追加の検討を計画中である。文化に根ざした包括ー分析的認知スタイルが,現実場面での信念や信念に基づいた判断,特に二重過程理論が想定する直観的ー省察的認知システムに与える影響についての検討を行った。具体的には超常現象および疑似科学への信奉の程度が,認知能力,人格特性,および認知スタイルにどの程度媒介されているかの検討を質問紙調査により行った。その結果,直観的な個人はそれらの信奉を強く持ち,省察的認知の働きが強い個人ほど信奉の程度も低いという先行研究と同様の傾向が見られたことに加え,認知の文化差,特に因果関係の理解の仕方の差が最も強い説明力を有していることが明らかになった。さらに,直観ー省察的認知システムの働きについて,より実験的なパラダイムで検討することの必要性が考えられたため,本年度は予備的な研究に着手した。

具体的には,論理的推論の結論が,直観的には正しく感じられるものの論理的には妥当ではないなど,直観的帰結と論理的妥当性が相容れない三段論法における真偽判断に影響する要因を検討する実験を質問紙型,および判断に要する反応時間を測定する認知心理学実験の2つの手法を用いて検討した。その結果,信奉者は推論を誤りやすく,省察的認知の傾向が強い個人は正解率が高い傾向にあることが示された。また,より時間をかけて推論するほど正解率が高いことも示された。これらの成果の一部は国際学会等で発表された。ただし,実験的手法を用いた研究は,本年度は予備的な検討にとどまり,文化比較を行っていないので,今後は,この成果を元にした文化比較実験を実施する予定である。文化差研究について一部研究計画の見直しが必要になるなど想定外の事情により当初の予想よりは遅れている。しかしながら,研究計画の見直し自体はすでに終了しており,具体的な調査項目の選定も概ね完了している。また,それに伴い,昨年度に実施した予備的調査の結果を踏まえた論文執筆も一部停止していたが,年度内には草稿を書き上げることができる見込みである。本年度は,実証的根拠を欠いた信念が受容される過程について,二重過程理論にいう直観-分析(内省)的な認知スタイルと,文化心理学のいう包括-分析的認知スタイルの相互作用について,取得済みのデータを用いた再検討をするとともに,非実証的信念と同様の認知過程が関与していると考えられている「それらしく見える戯言(pseudo-profound bullshit, Pennycook et al., 2015)」の受容についても,2つの認知スタイルとの関連を検討した。それらしく見える戯言とは,文法構造や個々の語の意味については問題はないが,全体を通すと意味が通じなくなる一方で,一部の人が,そこに何らかの深遠な意味を見いだしうる文言(例隠された意図は並ぶ物のない抽象美を変貌させる)を指し,超常信奉や陰謀論などの非実証的信念と同様に,内省的思考との間で負の関連が見られることが明らかにとなっている。加えて,ランダムなパターンの中に,意味のあるオブジェクトを見いだすパターン錯覚とも関連することが示されている。本研究では,非実証的信念および戯言の受容について,内省的思考の効果と,それが文化的認知スタイルによって調整されるかどうかの検討を行った。その結果,超常信奉,疑似科学信奉,および戯言に対する受容の判断は,全体としては内省的思考傾向とは負の相関を示すものの,内省的思考の効果は文化によって異なり,特に西洋圏の参加者においてその傾向が強いという結果が共通して見られた。本研究の成果の一部は国際学会等で発表された。さらに,全体の成果をまとめた論文の執筆を行った。現在は投稿のための最終準備中となっている。知覚的スタイルの誘導が包括的・分析的処理を測定する課題のパフォーマンスに変化を与えなかったという予備実験の結果について,その理由を探るための追加の調査または実験を行う。