hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
情報プライバシーに配慮した情報共有範囲の設定システムに関する研究

本研究では、次の2つの研究と関連研究を行った。1)看護業務と患者のプライバシー保護の両立を目指す電子カルテ画面上の患者情報の表示方法および医療者間の情報共有の範囲、2)画面サンプルを用いて、患者の意向を考慮した設定システムの臨床現場での有用性を明らかにした。その他、職種および関係性の違いによるカルテ情報の共有範囲、入院患者の情報プライバシースコアと属性および主観的健康統制感(JHLC)との関連を明らかにした。個人情報保護法の施行後、医療機関の多くは患者情報の利活用に関する制約に対し様々な取り組みをしている一方で、患者の意向に配慮した電子カルテの見え方にまで十分に検討されてはいない現状がある。本研究は、患者自身が自分の個人情報を、どの医療者に、どこまで知っておいてもらいたいかをコントロールできるシステムの枠組みを構築することを目的としている。本年度は、看護師がケア実践していく中で、業務の支障にならない医療者間の情報共有の範囲および表示方法について明らかにすることを目的として調査を実施した。調査に先立ち、全国規模の学会に参加し、研究に資する情報収集、特に電子カルテシステムを開発している企業から患者情報の表示の仕方に関する情報提供を得た。それらの結果を基に紙面上の電子カルテの画面サンプルおよび無記名式質問紙を作成した。東海北陸地区にある515病院(ただし、電子カルテもしくはオーダーリングシステム導入済みが選択条件)に調査協力を依頼し、協力の得られた21病院の736名の看護師を調査対象とした。調査のすべては所属機関の生命倫理委員会の承認を得てから実施した。432名(回収率58.7%)の看護師から回答を得た。看護師の平均年齢36.3(SD9.9)歳、経験年数13.6(SD9.5)年、電子システムの利用月数32.9(SD23.9)か月であった。「患者の意向に沿って患者情報を非表示にするという考え」を受け入れ可能な者は約3割、賛成できる者は約4割であった。賛成できる者のうち、項目ごとの非表示方法を希望した者は約7割あり、私生活関連情報項目の非表示ならば受け入れ可能と回答した者は約半数であった。今後は調査結果の分析をさらに進め、その結果から模擬患者情報を設定した電子カルテの画面サンプルを作成し、医療者を対象に面接調査を行なう予定である。本研究は、患者自身が自分の個人情報を、どの医療者に、どこまで知っておいてもらいたいかをコントロールできる電子カルテ画面表示方法に関するシステムを構築することを目的としている。H21年度は、前年度の「患者情報の共有範囲の設定に関する調査」の結果をもとに、看護師が求める電子カルテ画面の患者情報表示項目と共有範囲、表示方法について明らかにするとともに、電子カルテの画面サンプル(パワーポイント版)を作成し、グループインタビュー調査を実施した。質問紙調査は422名の看護師から回答が得られ(回収率58.7%)、「患者の意向に沿って患者情報を非表示にする」という考えに39.0%が賛成し、実際の看護業務を考慮しても29.7%がこの考えを受け入れ可能なことがわかった。実施可能な非表示の方法とし、59.3%が項目単位、32.7%がカテゴリー単位を選択した。緊急時の表示方法は、53.3%が直ちに一括表示を、43.4%が項目ごとに表示できることを希望した。情報プライバシーの観点から、患者の意向に沿った電子カルテ画面の一部の項目の非表示にある程度の賛同が得られ、その実現に向けた検討の必要性が示唆された。電子カルテの画面サンプルは専門家の協力を得ながら、「患者情報プライバシー認識尺度(PIPS)」の簡易版「簡易プライバシーチェックリスト(CPC)」を反映させた情報選択画面および、非表示のイメージとし模擬患者情報にモザイクをかけた画面表示サンプルを作成し、東海北陸地区の電子カルテシステム導入済みの病院に勤務する看護師を対象に、この画面サンプルを実際に見てもらいながらグループインタビューを実施した。H22年度に実施する調査と併せて、今後結果の分析を進めて行く予定である。質問紙調査の結果は、国内学会での発表を行い、参加者の高い関心を得た。本研究は、患者自身が自分の個人情報を、どの医療者に、どこまで知っておいてもらいたいかをコントロールできる電子カルテ画面の表示方法に関する設定システムを構築することを目的としている。H22年度は、電子カルテの画面サンプル(PPT版)を使用し、前年度に調査協力の承諾を得ていた電子カルテシステム導入済みの病院に勤務する看護師と、新たに他職種(医師)を対象にグループインタビュー調査を実施した。他職種への調査にあたっては、専門家の協力を得て画面サンプルを一部修正した後に実施した。看護師対象の結果は、男性6名、女性43名、平均年齢39.4歳、電子カルテ平均使用年数は4.8年で所属病棟は様々であった。画面サンプルを実際に見て、患者の意向に沿って情報項目を一部非表示にする考えに賛成し、かつこのような設定が必要であると回答したのは全体の4割であった。

内容分析の結果から、情報プライバシーに配慮した電子カルテ表示の実用化に向けて、【情報コントロールの必要性】、【非表示方法による利益と不利益】、【患者情報の非表示と表示の手段】、【実用化に向けて検討すべき課題】の4つのカテゴリーが抽出された。医師対象の結果は、男性2名、女性3名、平均年齢40,8歳、電子カルテ平均使用年数は5,2年で所属診療科は様々であった。一部の項目にモザイクをかけて非表示にした部分の解除方法について、隠されている項目を一つずつクリックして表示する方法と、緊急時など医療上の判断でその情報が必要とされる場合に、特定のボタンへのクリックで全体を表示する方法の両方を希望し、特に緊急時は敏速に情報が表示できる仕組みを要望していた。今回の調査を通じて、自己情報コントロール権に配慮した設定システムの臨床現場での有用性を確認でき、緊急時やチーム医療における情報共有のあり方など、今後の課題を具体的に明らかにすることができたと考える。
仮想点字ブロック・仮想壁の感触再現と動的配置を用いた視覚障害者歩行支援

本研究は,仮想的に歩行誘導ブロックや通路壁があるように利用者に体感させるウェアラブル触覚VRシステムによる歩行誘導の実現を目的としている.研究開発項目は以下の3点である.1:歩行誘導ブロックや誘導路壁などの感触再現手法の探索,2:日常で必要となる歩行誘導・支援方法の探索,3:視覚障碍者と健常者間の人体感覚差異と,それを反映した適切な感触再現手法の探索歩行誘導ブロックや誘導路壁などの感触再現手法は,白杖にて,感触提示タイミングの操作による感触再現力の向上を図った.当初は,接触音提示などのマルチモーダル化を計画したが,聴覚リソースの利用が不適切との意見の基,感触提示タイミング制御による感触再現力の向上に注力し,振動激発点の直線性の向上等による総合的な感触再現力の向上を図った.足裏感触再現では,配列配置振動子によるファントムセンセーションは,靴底面を介した振動混和などから,感触再現に不適切な可能性が高まり,ピボット点と外縁点の順次振動による直線形状提示へ計画を変更した.それに共ない,まずは,当該手法と各人の感じ方の関係について,14名からデータを収集し,2018年度末段階で分析中である.日常で必要となる歩行誘導・支援方法の探索は,白杖にて,左右曲線路における歩行について,8名の被験者よりデータを収集し,逸脱や混乱などの発生原因を明らかにしつつ,それらの発生しない誘導路パターンについて追及した.視覚障碍者と健常者間の人体感覚差異とそれを反映した適切な感触再現手法の探索については,当初計画通り,デバイスの成熟を優先したため実施していない.現状では,デバイスの成熟度が,被験者実験を実施するには足りない物と判断した.本件は,デバイスの構造改善及び駆動システムの簡略化が進み,持ち込みによる実験が可能となった段階で追って判断する.本研究は,現在,やや実施が遅れている状況にある.当初計画では,2018年度において,デバイスの成熟化を実施し,視覚障碍者を対象とした簡易実験まで実施予定であった.しかしながら,概要にも示したとおり,成熟は進んでいるものの,実験が実施できる状況まで至っていない.これは,白杖先端刺激提示,足裏感触再現の両手法において,当初予定していた手法(音などによる刺激のマルチモーダル化,および,配列配置振動子とファントムセンセーションによる点や直線形状の提示)が,実利用者のアドバイスやその後の実験を通じて,目標のために不適切と判断され,手法を再構築していたためである.詳細は,概要と重複するため割愛する.また,研究分担者の米澤が産後休暇および育児休暇を取得し,年度初めから8月頭まで完全に研究業務を停止し,その後に緩やかに復帰したため,足裏感触再現デバイス関連の研究について,一部が2019年度に持ち越しとなっている.本件は,主要因では無いが,上記のデバイス成熟の遅れや,成熟後を予定していた視覚障碍者を対象とした簡易実験の遅れの一因とはなっている.上記事情により,研究期間の延長を含め,2019年度の初動状況を見極めつつ,十分な研究実施に向けた調整を進める.今後の研究は,まず,2018年度の研究により発生したデバイス成熟の方向性変更に伴うシステム実装の充実を図る.白杖,足裏感触再現,共に2018年度にて健常者からではあるが10名程度のデータを収集済みである.現在は,2018年度末時点では,それらについて分析を進めており,2019年度の前期にて,分析結果を反映したシステムを構築する.その後,二つのデバイスの簡易結合テストを実施し,年度後半より視覚障碍者を対象とした簡易実験を開始する予定である.人数としては各10名程度からを想定している.なお,「現在までの進捗状況」にも記載したとおりの理由により,本研究は,研究期間の延長を含め,2019年度の初動状況を見極めつつ,十分な研究実施に向けた調整を進める.本研究は,仮想的に歩行誘導ブロックや通路壁があるように利用者に体感させるウェアラブル触覚VRシステムによる歩行誘導の実現を目的としている.研究開発項目は以下の3点である.1:歩行誘導ブロックや誘導路壁などの感触再現手法の探索,2:日常で必要となる歩行誘導・支援方法の探索,3:視覚障碍者と健常者間の人体感覚差異と,それを反映した適切な感触再現手法の探索歩行誘導ブロックや誘導路壁などの感触再現手法は,白杖にて,感触提示タイミングの操作による感触再現力の向上を図った.当初は,接触音提示などのマルチモーダル化を計画したが,聴覚リソースの利用が不適切との意見の基,感触提示タイミング制御による感触再現力の向上に注力し,振動激発点の直線性の向上等による総合的な感触再現力の向上を図った.足裏感触再現では,配列配置振動子によるファントムセンセーションは,靴底面を介した振動混和などから,感触再現に不適切な可能性が高まり,ピボット点と外縁点の順次振動による直線形状提示へ計画を変更した.それに共ない,まずは,当該手法と各人の感じ方の関係について,14名からデータを収集し,2018年度末段階で分析中である.日常で必要となる歩行誘導・支援方法の探索は,白杖にて,左右曲線路における歩行について,8名の被験者よりデータを収集し,逸脱や混乱などの発生原因を明らかにしつつ,それらの発生しない誘導路パターンについて追及した.

視覚障碍者と健常者間の人体感覚差異とそれを反映した適切な感触再現手法の探索については,当初計画通り,デバイスの成熟を優先したため実施していない.現状では,デバイスの成熟度が,被験者実験を実施するには足りない物と判断した.本件は,デバイスの構造改善及び駆動システムの簡略化が進み,持ち込みによる実験が可能となった段階で追って判断する.本研究は,現在,やや実施が遅れている状況にある.当初計画では,2018年度において,デバイスの成熟化を実施し,視覚障碍者を対象とした簡易実験まで実施予定であった.しかしながら,概要にも示したとおり,成熟は進んでいるものの,実験が実施できる状況まで至っていない.これは,白杖先端刺激提示,足裏感触再現の両手法において,当初予定していた手法(音などによる刺激のマルチモーダル化,および,配列配置振動子とファントムセンセーションによる点や直線形状の提示)が,実利用者のアドバイスやその後の実験を通じて,目標のために不適切と判断され,手法を再構築していたためである.詳細は,概要と重複するため割愛する.また,研究分担者の米澤が産後休暇および育児休暇を取得し,年度初めから8月頭まで完全に研究業務を停止し,その後に緩やかに復帰したため,足裏感触再現デバイス関連の研究について,一部が2019年度に持ち越しとなっている.本件は,主要因では無いが,上記のデバイス成熟の遅れや,成熟後を予定していた視覚障碍者を対象とした簡易実験の遅れの一因とはなっている.上記事情により,研究期間の延長を含め,2019年度の初動状況を見極めつつ,十分な研究実施に向けた調整を進める.今後の研究は,まず,2018年度の研究により発生したデバイス成熟の方向性変更に伴うシステム実装の充実を図る.白杖,足裏感触再現,共に2018年度にて健常者からではあるが10名程度のデータを収集済みである.現在は,2018年度末時点では,それらについて分析を進めており,2019年度の前期にて,分析結果を反映したシステムを構築する.その後,二つのデバイスの簡易結合テストを実施し,年度後半より視覚障碍者を対象とした簡易実験を開始する予定である.人数としては各10名程度からを想定している.なお,「現在までの進捗状況」にも記載したとおりの理由により,本研究は,研究期間の延長を含め,2019年度の初動状況を見極めつつ,十分な研究実施に向けた調整を進める.2018年度の予算残について,研究分担者の米澤が産後休暇および育児休暇を取得し,年度初めから8月頭まで完全に研究業務を停止していた.緩やかに復帰したため,実質数か月間で1年分に予定したいくつかの研究内容は一部2019年度に持ち越しとなった.例として,アルバイト依頼予定作業,2018年度内に遂行できた実験結果を予備的なものとしたうえでの本実験実施部分のためのマシンや実装費用およびそれにかかわるアルバイトまたは業務委託作業,国際会議論文の準備および発表などがある.物品費用,人件費(謝金),発行代金,旅費等の執行を2019年に実施する研究項目に加えて行う予定である.
モーションキャプチャデータを用いた生体信号の実時間可視化

本研究では,モーションキャプチャシステムを使用して取得した動作データと生体信号(筋電図および心電図)を,3DCGアニメーションとして可視化する手法を開発した.開発した可視化システムは筋活動度と心拍数を,3DCGキャラクターを用いてリアルタイムで可視化するものである.可視化システムを用いることで,動作と生体状態の変化を同時に確認することができる為,生体状態の変化とその要因を直観的に理解することができる.開発システムを用いた剣道動作,介助動作の動作解析を行ない,システムの有用性の検証を行なった.平成24年度は,HMD(ヘッドマウントディスプレイ)を用いた可視化結果提示手法の開発,および可視化3DCGモデルの修正を行なった.また研究室学生によるHMD装着時および,HMDを装着しても可視化結果の見やすさの主観評価実験を行なった.従来の方法(プロジェクター投影や液晶ディスプレイ,タブレット端末)による可視化結果提示方法では,可視化結果を見る為に,被験者は頭の向きや体の向きを変える必要があり,実験動作を行ないながら可視化結果を見るという行為に無理があった.HMD上に可視化結果を提示することで被験者は自然な体の向き,動作で可視化結果を見ることができる.今回の開発ではHMDにEpsonのMOVERIOを用いた.このMOVERIOは透過型HMDの為,HMD上に映像を出力中でも周りの状態を把握できる.このHMDはAndoriodOSで動いている為,Wifiを使用し可視化結果計算PCで計算した可視化結果をHMDに映す手法を開発した.可視化結果がHMD上で正しく表示されているか確認しつつ,HMD上で表示する為の3DCGモデルの修正を行なった.具体的にはモデルの筋肉の視認性を挙げる為,大きさや色を変更した.モデルを修正する際には修正モデルを数種類用意し,それぞれの可視化結果の認識率や遅延などを主観評価による評価を行い,最も評価の高いものを使用することにした.HMDにおける映像の視認性の評価,および今回の可視化実験のような3DCGモデルの表示方法に関する研究は,GoogleGlassが登場し,今後加速していくであろうHMDの一般化に非常に重要であると考える.平成25年度は,生体信号可視化システムを使用し,透過型ヘッドマウントディスプレイ(HMD)上に可視化結果を提示した状態での動作実験,及び可視化システムの再開発を行なった.生体信号可視化システムを使用した予備実験において,HMDを装着した状態でのスポーツ動作の可視化提示手法に問題があることが分かった.原因は使用したHMD(EPSON:MOVERIO)の重量が重く激しい運動を行なうとHMDがずれてしまうことと,スポーツ動作中におけるHMD表示画面の認識率の低さである.またHMDで可視化結果を見ながらだと本来行なうべきスポーツ動作ができないといった被験者からの意見もあり,提示手法について見直す必要があることが分かった.スポーツ等の早い動きを伴う動作については可視化結果を実時間に提示するのではなく,動作終了後の任意のタイミングで確認できるように仕様を変更する必要があり,現在スポーツ動作を対象とした生体信号可視化システムの再開発中である.実時間可視化に関してはスポーツ動作ではなく,ゆっくりとした動きに適していると判断し,起立介助動作の実験を行なった.介助動作の介助を行なう側に可視化結果を提示し,起立介助動作の可視化実験を行なった結果,可視化結果を提示しない場合と,提示した場合に差異が生じることを確認した.今後は介助の専門家にヒアリング,および意見交換を行い,起立介助動作の動作改善や,介助未熟者への教示システムの開発へと研究を応用していく予定である.本研究により開発した生体信号の実時間可視化システムと介助起立動作を対象とした実験に関する論文を平成26年度中に情報処理学会に発表,投稿予定である.本研究では,モーションキャプチャシステムを使用して取得した動作データと生体信号(筋電図および心電図)を,3DCGアニメーションとして可視化する手法を開発した.開発した可視化システムは筋活動度と心拍数を,3DCGキャラクターを用いてリアルタイムで可視化するものである.可視化システムを用いることで,動作と生体状態の変化を同時に確認することができる為,生体状態の変化とその要因を直観的に理解することができる.開発システムを用いた剣道動作,介助動作の動作解析を行ない,システムの有用性の検証を行なった.平成23年度はモーションキャプチャシステムによって得られる人の動作情報と筋電図から得られる筋活動度といった生体情報を,3次元コンピュータグラフィックス(3DCG)によって作成した人体アバターアニメーションによって,測定と同時に実時間で統合可視化し,表示するシステムの設計を行った.また可視化システムの評価実験として起立介助動作,剣道経験者と未経験者の動作・生体負担計測を行った.実時間で可視化結果を提示することにより,介助者が非介助者の負担を軽減できること,非介助者も介助者の負担を知ることで,介助者の負担を減らすよう姿勢を変える等の動作を行なうことで,実際に介助者の負担が軽減することを確認した.しかしながら実時間可視化における信号処理方法,可視化方法には改善の余地がある為,今後改善を進める.また提示方法によっては,動作自体の妨げになる場合があった為,今後はプロジェクター,及び透過型ヘッドマウントディスプレイを主な提示機器として実験を進める.剣道の有段者,未熟者のデータ計測実験を行なった.

このデータを元に有段者と未熟者のデータを比較し,有段者の特徴,未熟者の特徴を分析,評価を行い,教示用のデータとして有段者データの可視化データを作成する.計測実験時の被験者から,剣道の打ち込み動作時に実時間可視化を行なっても,ほとんど可視化結果を意識することができないであろうとの意見を得た.その為,剣道などの速度を必要とするスポーツなどにおいては,動作後にすぐに可視化結果を確認できるようなシステムの必要性が生まれた.当初の目的であったiPadなどのタブレット端末や,HMD(MOVERIO)での可視化結果の提示手法の開発は順調であり,またその主観評価を行ないながらの開発によって,実時間で可視化結果を提示する場合はHMDを使用してのものが最も適しているとの結論を得ることが出来た.当初の目的であった,実時間可視化を行なう為のシステム開発,及び計測実験は予定通り進行することができた.計測実験から,次年度以降に実時間可視化における可視化手法の改善,提示方法の限定,スポーツ動作時の提示手法の検討が必要になったが,当初の研究計画で平成24年度に行なう提示手法の検討に関する研究の中で行なうことのできる範囲である.今後は当初の予定通り,スポーツ動作,介助動作,デザイン評価実験にHMDを用いた可視化手法提示を行い,その提示結果による動作の修正,改善(筋活動度や動作の変化)が行なわれているかを確認し,被験者の主観評価によって可視化提示手法の評価を行なう.今後は当初の予定通り,提示手法の検討を行ないつつ,システムの改善を平行して行なう.当初の予定では片眼式のヘッドマウントディスプレイを使用する予定であったが,昨年度新たにシースルー型のヘッドマウントディスプレイが発売された為,提示機器としてシースルー型を採用して実験を進める.平成24年度には現在行なっている剣道の打ち込み動作の可視化実験,未熟者への可視化結果提示による学習効果の評価実験を行なう.主にプロジェクターを使用した可視化結果の提示を行なう.また動作計測実験とは別にヘッドマウントディスプレイ,プロジェクター,タッチパネル型ディスプレイ,モバイル端末をそれぞれ使用した可視化結果提示実験を行い,可視化結果の理解度や操作性の評価実験を行なう.平成25年度には野球の投球動作や自動車のセンターパネル操作,介助動作の可視化実験を行う.それぞれの可視化実験により,スポーツ上達効果や,製品評価,リハビリテーション効果などへの可視化システムの有用性の評価を行なう.出張として,国内出張(研究打ち合わせ,学会参加,40,000円),情報収集の為の海外出張(ACM学会主催のSiggraph,300,000円)を行なう.謝金として実験被験者に謝金(1回1,000円x20回)を支払う.その他として研究成果を芸術工学会に投稿する(70,000円).設備備品としてタッチパネル型の液晶モニタを4台購入予定(単価70000円×4台)であったが,1台購入とし,代わりにシースルー型のヘッドマウントディスプレイ(単価80000円),および小型のプロジェクター(単価80000円)を購入し,ヘッドマウントディスプレイ使用時に使用する小型ノートPC(100000円を購入する).消耗品として計測実験の為に生体信号消耗品(80000円),動作計測消耗品(100000円)を購入する.出張として,国内出張(研究打ち合わせ,学会参加,150000円),情報収集の為の海外出張(ACM学会主催のSiggraph,300000円)を行なう.謝金として実験被験者に謝金(1回1000円x20回)を支払う.その他として研究成果を芸術工学会に投稿する(70000円).
遺伝性小脳虫部奇形ラットの病理学的研究:放射状グリア細胞の形態

遺伝性小脳虫部欠損ラット(HCVD)の病理発生を明らかにする目的で、胎生15日より生後30日までの小脳の形態学的観察を行った。HCVDの小脳は出生直後よりすでに小さく、生後各日齢の小脳正中矢状断切片では、小葉構築形成が著しく遅延した。生後5日齢頃より、HCVDにおいて異常細胞の血管周囲への集簇が観察された。14日齢前後では血管周囲細胞は著しく増数し、多くの有糸分裂像、活発なBromodeoxyuridine取込およびNerve growthfactor receptor陽性を示すことから、外顆粒細胞と理解された。その後、異常集簇した外顆粒細胞は徐々に減数し、その集簇部位は異形成小脳組織へと移行した。パラィフン切片および凍結切片を用いて、Bergmann gliaの形態を観察したところ、細胞配列異常の部位に一致して突起の波状配列・蛇行が観察された。これらの所見より、HCVDの異形成小脳組織形成の病理発生には、外顆粒細胞の血管周囲への集簇が関与すると考えられた。
経時データ解析の発展

自己回帰線形混合効果モデルは周辺モデルに変換した際、特徴的な分散共分散行列を示す。これを拡張して、新たな分散共分散行列を示し、学会発表を行った。自己回帰線形混合効果モデルが経済学など医学以外の他分野でどのように使用されているかの調査を行っている。英文書籍の出版や国際学会での発表を行い、おおむね順調に進展している。経時データ解析に関して国際学会で発表し、論文投稿を行う。これを拡張して、新たな分散共分散行列を示し、学会発表の予定である。ライフイベントのためやや遅れが生じた。次年度に英文書籍を完成させ、経時データ解析に関して国際学会で発表する。ライフイベントのため本年度の使用額が減り、次年度使用額が生じた。学会発表、英文校正に使用する。執筆を中心に行ったため、物品費や人件費の使用が当初計画よりも少なくなった。関連書籍購入のための物品費、成果発表のための旅費、論文原稿の英文校閲費などとして使用する。
T.reeseiにおけるL-ソルボースによるセラルーゼ誘導生成機構に関する研究

L-ソルボースによるセルラーゼの誘導生成がどの様な機構によって起こるかを解明することを目的として,T.reeseiの親株(QM9414)および変異株(PC-3-7)の洗浄菌糸を用いてセルラーゼの誘導について検討した。1.L-ソルボースのセルラーゼ誘導生成の詳細な検討L-ソルボースは強力なインデューサーであるソホロースと同程度のセルラーゼを誘導するが,その必要濃度は高く誘導開始時期も遅かった。また,用いる菌糸の生育時期によりソホロースの誘導能はほとんど変らないのに対し,L-ソルボースでは対数増殖期に誘導能が大きく低下した。これは吸収されたL-ソルボースが代謝されるためと推察された。L-ソルボースとソホロースの同時添加効果が低濃度で認められるとともに,L-ソルボース単独では誘導能のない条件でソホロース添加による相乗効果も認められた。また,L-ソルボースのセルラーゼ誘導はグルコース抑制を受け,その感受性はソホロースの場合よりも高かった。2.誘導される酵素類の分析L-ソルボースはセルラーゼと同様キシラナーゼをも誘導し,その誘導能はキシラナーゼの特異的インデューサーであるキシロオリゴマーと同程度でありソホロースの約2倍であった。さらに,ソホロースではほとんど誘導できない特定のキシラナーゼ(19kDa)を誘導していた。3.L-ソルボースの代謝とセルラーゼ誘導能L-ソルボースの代謝経路にあると推定される物質はセルラーゼを誘導せず,グルコースを含めたこれら物質の低濃度での逐次添加においても誘導は起こらなかった。以上のことより,T.reeseiにおけるL-ソルボースによるセルラーゼの誘導はデリプレッションではないものの既知のインデューサーであるソホロースとは異なる機構によるものと推察された。
熱ショック蛋白Apg-2の肝脂肪化と肝発癌誘導機序の解析

蛋白質の恒常性維持を担う分子シャペロンの異常は、細胞の機能不全から、代謝異常、発癌、神経変性疾患の要因となる。我々は、ヒト肝がんで高発現しているHSP110ファミリーに属するApg-2に注目し、Apg-2-/-マウスが肝発癌や高脂肪食負荷による脂肪肝形成に抵抗性を示すことを見出した。Apg-2-/-マウス由来の肝癌をRNA sequenceで遺伝子発現解析したところ、細胞周期G2/Mに重要なCDK1/CyclinB1が低下しており、肝癌細胞株の検討でも同様であった。分子シャペロンが糖脂質代謝を介して、肝癌のアポトーシス抑制や細胞周期を制御することが判明し、癌治療の標的と成り得ると考えられた。Apg-2ノックアウトマウスを用いた脂肪肝炎モデル、肝発癌モデルおよび脂肪肝炎+肝発癌モデルに作成と解析脂肪肝炎モデル:高脂肪高コレステロール食を12週間、または、24週間投与することで作成した。肝細胞に発現するApg-2の重要性を評価するため、Apg-2ノックアウトマウスで肝細胞特異的にApg-2を発現させ、ノックアウトマウスの形質の可逆性を検証している。発癌モデル:生後2週間の雄性Apg-2-/-マウス(対照:雄性Apg-2+/+マウス)に25mg/kgのDenを腹腔内投与し、40週間後に肝発癌の状況を確認する。マウス脂肪肝炎+発癌モデルとしては、生後2週間の雄性Apg-2-/-マウス(対照:雄性Apg-2+/+マウス)に25mg/kgのDenを腹腔内投与する。Apg-2-/-マウスではWild typeマウスに比べて肝発癌が70%から34%に低下すること、および、高脂肪食(脂肪60%)12週では脂肪肝が著明に抑制されることから、生後2週間でDenを投与済みのApg-2-/-マウスが体重20g前後になった時点で高脂肪高コレステロール食(脂肪60%,コレステロール1.25%)を投与し、40週間後の時点で発癌に対する脂肪肝炎の影響を検討する予定とした。採取された肝組織からHE染色標本を作製し、血清からALT/AST、血糖、インスリン、脂質の値を測定、real-time PCRやWestern blottingでApg-2, ZO-1, SONAB, HSP70,脂質関連遺伝子、アポトーシス関連遺伝子、細胞周期関連遺伝子の発現を定量的に、免疫組織化学的でApg-2、ZO-1、SONABの肝細胞内での局在を検討している。また、AMPK、PPARa、PGC-1a、HSP70とのinteractionに注目して上記実験を行っている。Apg-2ノックアウトマウスを用いた、脂肪肝炎モデル、発癌モデル、マウス脂肪肝炎+発癌モデルは作済みで、現在得られたサンプルの解析を進めている。これらの検討で得られた結果からApg-2の最も関与するシグナル経路を同定し、ヒト肝癌細胞株やヒト肝癌の検体において同様の検討を行う予定であるが、ヒトサンプルの収集に少し手間取っている。ヒト肝癌細胞株の実験においてもreal-time PCRやWestern blottingでApg-2, ZO-1, SONAB, HSP70,脂質関連遺伝子、アポトーシス関連遺伝子、細胞周期関連遺伝子の発現を定量的に行う。また、AMPK、PPARa、PGC-1a、HSP70とのinteractionに注目して上記実験を進めて行く予定である。ヒト肝癌で高発現するApg-2の肝発癌における意義を解明するためApg-2ノックアウトマウスを作製した。このマウスではジエチルニトロサミン誘発性の肝発癌が抑制される。また肝癌細胞株でのApg-2の抑制がアポトーシスを誘導する。そこで、Apg-2による脂肪肝炎・肝硬変に由来する肝発癌の機序を検討すべくマウス脂肪肝炎モデルを作成したところ、本マウスでは脂肪肝炎が著明に抑制されていた。以上より、Apg-2は脂肪肝炎と肝癌発症に重要な役割を果たす可能性があり、Apg-2の脂肪肝炎・肝硬変の発症、さらに、それに由来する肝発癌における意義をヒト臨床検体やマウスモデルを用いて検討している。まず、ヒト肝癌細胞株を用いたApg-2の細胞増殖、抗アポトーシス、cancer EMTに関する検討を行った。ヒト肝癌細胞株の中で比較的分化度の高いHuh-7、PLC/PR5と分化度の低いHLE、肝芽腫由来でP53 Wild typeのHepG2細胞を用いて、Apg-2のサイレンシングをsiRNAを用いて行った。Apg-2のサイレンシングがin vitroで細胞数を減少させた結果よりApg-2が癌細胞の増殖に重要であると考え、Apg-2の抗アポトーシス作用、細胞増殖作用を検討する方法として、Brduの取り込みをELISA法で測定、アポトーシスをTUNEL染色で測定、Western blottingでPCNAやcyclin D1、caspase3、caspase9、BAX、Bcl-x、Bcl-2、Mcl-1、pRBを検討した。さらに低酸素負荷でApg-2の発現上昇を確認し、Apg-2をサイレンシングすることでHIFで誘導されるEMT関連遺伝子であるVEGF、snail、ZEB、twist、E-cadherin、vimentin、Zo-1、n-cadherinの発現動態に与える影響も検討している。

ヒト肝がん検体でのApg-2の発現解析がサンプル収集のため少し予定より遅れているが、マウス肝発癌モデル、肝癌細胞株での検討はおおむね順調に進行している。また、Apg-2ノックアウトマウスで得られたジエチルニトロサミン誘発性の肝癌において遺伝子発現解析を行っているが、野生型マウス由来の肝癌に比べてサイズが小さいため、解析に必要なサンプルの確保が困難であり、再度モデルを作成したために少し予定として遅れている。5月末にはモデルが完成するため、解析の再開が可能な状況である。ヒト肝がんで高発現するApg-2の肝発癌における役割を解明するためにApg-2ノックアウトマウスを作製し、ジメチルニトロサミンで誘発される肝発癌モデルで検討したところ、Apg-2ノックアウトマウスでは肝癌の個数、サイズの減少が確認された。また、肝癌細胞株でApg-2の抑制によりアポトーシスが誘導されることからApg-2の抗アポトーシス作用が示唆された。さらにApg-2はAMPKシグナルの抑制作用から脂肪肝形成を促進させることが判明しており、脂肪肝炎と肝癌発症におけるApg-2の役割について注目し、細胞増殖とアポトーシス、オートファジー、上皮間葉移行(EMT)におけるApg-2発現の意義を検討した。まずヒト肝癌細胞株の中から様々な分化度かつ野生または変異P53をもつ5つの細胞株HepG2, Hep3B, Huh-7, PLC/PR5, HLEを選択しApg-2のサイレンシングを行った。細胞増殖はCCK-8による細胞数同定、BrdU取り込み能をELISAにより測定、アポトーシスはTUNEL染色、Annexin-5, SubG1のFACSによる測定、P53のアセチル化の検出、オートファジーに関してはp62-NRF2, LC-3のimmnoblotによる検出、EMTは低酸素刺激によるHIF誘導を行い、snail,TGFbeta-1, twist, ZEB, VEGF, Zo-1, CDH1遺伝子の発現からbeta-cateninの核内移動について検討を行った。結果として、Apg-2は細胞周期のG2-M期を促進させることが判明し、CDK1/cyclinB1の活性化と分解に関わるkinase群に注目している。候補キナーゼを絞り込み、その分解過程におけるApg-2のE3であるStub1を介したユビキチン化促進機構について焦点を当てて研究している。蛋白質の恒常性維持を担う分子シャペロンの異常は、細胞の機能不全から、代謝異常、発癌、神経変性疾患の要因となる。我々は、ヒト肝がんで高発現しているHSP110ファミリーに属するApg-2に注目し、Apg-2-/-マウスが肝発癌や高脂肪食負荷による脂肪肝形成に抵抗性を示すことを見出した。Apg-2-/-マウス由来の肝癌をRNA sequenceで遺伝子発現解析したところ、細胞周期G2/Mに重要なCDK1/CyclinB1が低下しており、肝癌細胞株の検討でも同様であった。分子シャペロンが糖脂質代謝を介して、肝癌のアポトーシス抑制や細胞周期を制御することが判明し、癌治療の標的と成り得ると考えられた。ヒト肝癌細胞株の中で比較的分化度の高いHuh-7、PLC/PR5と分化度の低いHLE、肝芽腫由来でP53 Wild typeのHepG2細胞を用いてApg-2のがん遺伝子としての側面を検討する。
粒子識別検出器のための新しいLEDモニタリングシステムの開発研究

B中間子崩壊におけるCP保存則の破れを調べる実験に用いられるBELLE検出器の一つを構成する粒子識別のためのエアロジェル・チェレンコフ検出器(ACC)は、多数の光電子増倍管からなっているが、これらすべてのゲインを長期的に数%の精度で、モニタ出来るシステムを構築することは、非常に重要である。本研究では、このような性能を持つACCモニタリング・システムの開発を行い、以下のような成果を得た。1.さまざまな光源候補の中から、"NSPBシリーズ"のLEDが大光度、高速応答、短波長領域での発光スペクトルを持つためこれを選び、このLEDの発光強度の長期安定性及び温度依存性を独自の方法により測定した。その結果、いずれの点についても従来の他のどのLEDよりもはるかに優れていることがわかった。2.LED発光部の構造のために生じる発光強度角度分布の非一様性については、LED光の多重乱反射により、これをほぼ完全消滅させる方法を開発した。また、LEDの駆動電流の調整により、安定的にLED光の強度を必要な範囲内で任意に調整することが出来た。3.最小の光量損失率と最大の分岐均一性を持つ2段式光ファイバー分岐システム(19分岐×19分岐)を開発設計し、光量、一様性ともに求められる要求を満足することが確認できた。4.NSPB500SのLEDを用いたACCモニタリング・システムをACCに接続し、システムの光量絶対値、全チャネルにわたる光量の一様性を調べた。光量は、光電子数に換算すると約15から40、一様性は約95%であり、ACCのモニタリングに要求される条件をすべて満足するシステムが構築出来た。
物体を選択し、注意を向け、記憶することにおける前頭前野の役割

本研究では、前頭前野が実行機能に必要な、どのような情報を保持しているか調べるとともに、同部位の神経活動と行動との因果性を明らかにすることを試みた。まず、複数の動く物体のうち1つだけを内的に追跡する課題(内的追跡課題)遂行中の前頭前野における単一ニューロン活動を記録したところ、約7割のニューロンは標的刺激の位置によって活動を変化させ多野に対し、約2割のニューロンは妨害刺激の位置によって活動を変化させた.さらに興味深いことに,標的刺激と色の違う第二の妨害刺激を同時に提示したところ,いずれのタイプのニューロンもこれに応答しなかった.このことから,これらのニューロンのもつ信号は,外見では見分けられない物体を内的に区別するために有用であり,一見して異なる物体を区別することには有用ではないと考えられる.さらに、このようなニューロン活動が、物体選択に因果性を持つかを調べるため、内的追跡課題遂行中の前頭前野に電気刺激を行った.そうしたところ、視覚刺激の動き始めに電気刺激を与えた時にのみ、最終的に選択する視覚刺激の位置を変えることができた.これらの成果によって、前頭前野による空間的注意のトップダウン制御として、妨害刺激をモニターするための神経機構があることを世界で初めて見出すとともに、自由意思による視覚対象物の選択を微小電気刺激によって人為的に操作できることを示した。これらの知見は、前頭連合野の新たな機能を明らにし、現在の注意理論の一部に再考を迫るものである。前頭前野によって担われるトップダウン制御信号として、今までの先行研究では直接その存在が証明できなかったものを、明示的に証明できたこと。また、それらの成果を踏まえ、さらに発展させるために、次のプロジェクトにも着手できているため。順調に進行できているため、動物の健康等に配慮しつつ、着実に研究を進める。
交感神経活動と心筋応答からみた慢性心筋不全の進展予測と制御に関する臨床的研究

慢性心不全患者のquality of lifeおよび生命予後を改善するためには、心不全の進行を予測し、早期に抑制することが重要であるが、その予測指標は未だ明らかにされていない。申請者らは従来の研究で、慢性心不全患者においては運動中の拡張期特性が悪化し、この悪化はβ遮断薬により抑制されることを明らかにし、労作時の過剰な交感神経刺激が不全心筋の代謝に悪影響を及ぼす可能性を示した。したがって、労作に対する不全心筋の代謝応答あるいは脆弱性を、臨床的かつ非観血的に評価できれば、心筋不全の進行を予測する上で有力な指標になり得ると考えられる。本研究では、慢性心不全患者において労作による左室拡張機能障害が遷延するか否かを明らかにし、心筋不全の進行を予測する臨床的指標を見いだすことを目的とした。拡張型心筋患者12例と正常対照群8名を対象に、症候限界ランプ自転車負荷試験を行い、負荷前および負荷後1時間、3時間、5時間、1日、3日、7日の7時点で、心拍数および収縮期血圧を測定した。同時に心エコー・ドプラー検査を施行し、収縮期機能の指標として左室内径短縮率を、拡張期機能の指標として左室流入血流速パターンから心房収縮期と急速流入期の最大血流速の比(A/E)および拡張早期波減速時間(DT)を求めた。その結果、拡張型心筋症群では、心拍数、収縮期血圧および左室内径短縮率は運動前後で変化を認めなかったが、A/EおよびDTは負荷後1時間から有意な上昇を認め、前値に復したのは3日後であった。正常対象群では、すべての指標に有意な変化を認めなかった。以上より、慢性心不全患者においては単回労作による左室拡張機能障害は少なくとも運動後24時間以上にわたり遷延することが明らかになった。さらに、運動後のA/EおよびDTを評価することにより、運動に対する不全心筋の脆弱性を非侵襲的に評価できる可能性を示し、運動後のA/EおよびDTが心筋不全進行の予測指標になり得ることを示唆する。慢性心不全患者のquality of lifeおよび生命予後を改善するためには、心不全の進行を予測し、早期に抑制することが重要であるが、その予測指標は未だ明かにされていない。申請者らは従来の研究で、慢性心不全患者においては、運動中の拡張期左室圧-容積曲線が上方へシフトし、このシフトがβ遮断薬の前処置により抑制されることを明らかにし、労作時の過剰な交感神経刺激が不全心筋の代謝に悪影響を及ぼす可能性を示した。平成4年度では、慢性心不全患者において単回労作が遷延性の左室拡張機能障害をもたらすか否かを検討した。冠動脈に有意狭窄のない拡張型心筋症患者10例と正常対照群5名を対象に、症候限界ランプ自転車負荷試験を行ない、負荷前および負荷後1時間、3時間、5時間、1日、3日、7日の7時点で、心拍数および収縮期血圧を測定した。同時に心エコー・ドプラー検査を施行し、駆出機能の指標として左室内径短縮率を、拡張期機能の指標として左室流入血流速パターンから心房収縮期と急速流入期の最大血流速の比(A/E)を求めた。その結果、拡張型心筋症群では、心拍数、収縮期血圧および左室内径短縮率は運動前後で変化を認めなかったが、A/Eは負荷後1時間から有意な上昇を認め、前値に復したのは3日後であった。以上より、単回の運動は、ほぼ3日間にわたって拡張型心筋症の左室拡張機能を低下させることが示された。すなわち、不全心に対する運動の悪影響は遷延し、その蓄積が心不全を悪化させる可能性が示された。今後は、この遷延性左室拡張機能障害におよぼす交感神経系の関与を解明し、その障害の程度が心筋不全進行の予測指標となるか否かについて検討する予定である。

その結果、拡張型心筋症群では、心拍数、収縮期血圧および左室内径短縮率は運動前後で変化を認めなかったが、A/EおよびDTは負荷後1時間から有意な上昇を認め、前値に復したのは3日後であった。正常対象群では、すべての指標に有意な変化を認めなかった。以上より、慢性心不全患者においては単回労作による左室拡張機能障害は少なくとも運動後24時間以上にわたり遷延することが明らかになった。さらに、運動後のA/EおよびDTを評価することにより、運動に対する不全心筋の脆弱性を非侵襲的に評価できる可能性を示し、運動後のA/EおよびDTが心筋不全進行の予測指標になり得ることを示唆する。慢性心不全患者のquality of lifeおよび生命予後を改善するためには、心不全の進行を予測し、早期に抑制することが重要であるが、その予測指標は未だ明かにされていない。申請者らは従来の研究で、慢性心不全患者においては、労作により拡張期左室圧-容積曲線が上方へシフトし、このシフトはβ遮断薬により抑制されることを明らかにした。この結果は、労作時の過剰な交感神経刺激が不全心筋の代謝に悪影響を及ぼすことを示唆する。したがって、労作に対する不全心筋の代謝応答あるいは脆弱性を、臨床的かつ非侵襲的に評価できれば、心筋不全の進行を予測する上で有力な指標になり得ると考えられる。平成4年度の研究において、拡張型心筋症(DCM)患者では単回労作により左室拡張機能の指標である心房収縮期と急速流入期の最大血流速の比(A/E)が増加し、この増加は24時間持続することを示した。しかし、A/Eは重症心不全では偽正常化することが知られており、重症例ではA/Eの増加が拡張機能の悪化を反映しない可能性がある。そこで平成5年度は、労作による左室拡張機能障害が遷延することを明らかにするため、DCM患者12例(DCM群)および健常人8名(対照群)を対象として、A/Eに加えて重症例でも拡張機能が評価できる指標として拡張早期波減速時間(DT)を用いて検討した。その結果、DTはA/Eと同様の挙動を示し、DCM群では運動により延長し、この延長は運動後24時間以上持続すること、一方、対照群では運動による変化を認めないことが示された。以上より、単回労作による左室拡張機能障害は少なくとも運動後24時間以上にわたり遷延することが明らかになった。この成績は、運動後のA/EおよびDTを評価することにより慢性心不全患者における運動後の遷延性左室拡張機能障害すなわち運動に対する不全心筋の脆弱性を非侵襲的に評価できる可能性を示し、運動後のA/EおよびDTが心筋不全進行の予測指標になり得ることを示唆する。
食品機能性成分による消化管免疫制御細胞の機能成熱

近年では食品成分や腸内細菌が生体にとっての環境因子として数量的にも質的にも主たる存在であることが認識され、消化管免疫の状態がアレルギーや糖尿病など全身性の免疫病にも影響するのではないかと推測されるようになった。本研究の対象となる免疫制御性細胞は、過剰な炎症性免疫応答や抗体応答を制御することにより、生体にとって有害な炎症(疾病)を回避する働きを持つ。CD4陽性T細胞がTh1、Th2、誘導型制御性T細胞(induced regulatory T cells : iTreg)などの効果細胞として消化管で分化し十分機能するためには消化管微小環境におけるサイトカインが重要である。自然免疫シグナルを受けた際、これらサイトカインは樹状細胞、マクロファージ、腸上皮細胞などの抗原提示細胞から産生される。とりわけIL-10はiTregの機能発現に重要な働きを有するため、我々は、マウス骨髄由来樹状細胞からIL-10の産生を誘導する乳酸菌を同定した。その一株であるLactococcus Lactis cremoris C60について、死菌体の熱水抽出画分(C60Ex)にIL-10産生誘導機能が存在すること、その機能発現経路は、TLRシグナル伝達機構下流のアダプター分子であるMyD88に完全依存性であること、とりわけTLR2およびTLR9がIL-10産生においても主要な菌体成分認識経路であることを示した。また、in vivoにおけるC60Exの効果を検証するため、BALB/cマウスにC60Exを経口投与した後、脾臓、腸間膜リンパ節、バイエル板を抗CD3抗体存在下で培養した結果、樹状細胞から産生されたIL-10によりIL-10産生性T細胞(Tr1様制御性T細胞)あるいはIL-10+IFN-γ産生性制御性T細胞がin vivoで誘導されると考えられた。IL-10はその遺伝子欠損マウスで腸炎の自然発症がみられるなど、消化管免疫制御性細胞の機能成熟における調節因子として実際に重要な働きをすることが知られており、本研究の成果から、食品成分が消化管免疫恒常性の安定化に寄与することが示唆された。免疫細胞に自然免疫シグナルを与え、かつ制御性細胞の機能成熟に効果を有する食品機能成分を選定することを目的とした。マウス骨髄細胞をGM-CSF存在下で培養して樹状細胞を誘導し、各種乳酸菌死菌体と共培養した後抑制性サイトカイン(IL-10)の産生を測定した。脾臓培養細胞についても同様の評価試験を行ったところ、乳酸球菌(ラクトコッカスラクティス)はマウス脾臓細胞および骨髄由来樹状細胞から効率よくIL-10産生を誘導し、共培養中に免疫制御性細胞を誘導した。また、乳酸球菌の中でもとりわけIL-10産生誘導効率の高い菌株としてDRC-1およびC60(ラクトコッカスラクティスラクティス)を同定した。成分同定を試みたところ、これら2株のin vitroにおける効果は、熱水抽出画分に含まれることが示唆された。C60株を用いてin vivoにおける効果の検証を行った。BALB/cマウスにタンパク質抗原を経口投与し、経口免疫寛容を誘導する。C60の死菌体を同時に経口投与した群では、経口免疫寛容が対照群に比べて更に効率よく誘導されるとともに、パイエル板制御性細胞の機能(in vitro細胞増殖抑制、in vitro抗体産生抑制)が増強されていた。

C60はin vivoにおいても免疫制御性細胞を誘導することが示された。C60のようなプロバイオティクスの消化管免疫機能への効果を分子レベルで解明するための基盤とするため、BALB/cマウスパイエル板細胞の表面抗原解析を行った。これまでにパイエル板にはCD11c^<lo>B220^<hi>のプラズマサイトイド型樹状細胞が多く存在し、経口免疫寛容誘導に関与することを示唆する結果を得ている。今回これら樹状細胞群にCD19も共発現することを見出した。また、T細胞群の特徴としては、CD103を強発現するパイエル板特異的細胞群を観察した。近年では食品成分や腸内細菌が生体にとっての環境因子として数量的にも質的にも主たる存在であることが認識され、消化管免疫の状態がアレルギーや糖尿病など全身性の免疫病にも影響するのではないかと推測されるようになった。本研究の対象となる免疫制御性細胞は、過剰な炎症性免疫応答や抗体応答を制御することにより、生体にとって有害な炎症(疾病)を回避するとともに、無駄な免疫細胞の活動を平常時は抑えることにより、いざ病原体等の危険と対峙する際には免疫応答の立ち上がりを効率よくするという手綱のような働きをしている。本年度、マウス骨髄由来樹状細胞からインターロイキン10(IL-10)の産生を誘導する乳酸菌を複数同定した。とりわけLactococcus Lactis cremoris C60については、死菌体の熱水抽出画分にIL-10産生誘導機能が存在することを解明した。プロテアーゼを作用させてもIL-10産生誘導機能は残るのに対し、酸分解により機能を失うことから、機能性物質は糖成分であることが示唆された。広い分子量範囲で同等の機能を示すことから、有効成分は一定の機能性糖鎖が繰り返す構造を有すると考えられた。現在構造解析を進めている。また、その機能発現経路はMyD88依存性であることをMyD88遺伝子欠損マウス由来樹状細胞を用いることにより明らかにした。さらに最近ではLactococcus Lactis cremoris C60は、成熟樹状細胞からのIL-10産生を誘導するのみならず、IL-10産生能の高い制御性樹状細胞の分化にも関与するとの知見を得ている。また本年度は、皮膚炎モデルマウスを用いて制御性細胞の効果を検証する実験系を構築した。本研究の対象となる免疫制御性細胞は、過剰な炎症性免疫応答や抗体応答を制御することにより、生体にとって有害な炎症(疾病)を回避する働きを持つ。われわれは昨年度までにLactococcus Lactis cremoris C60について、死菌体の熱水抽出画分(C60Ex)が樹状細胞からのインターロイキン-10(IL-10)高産生を誘導することを示し、その受容体としてトル様レセプター2および9が重要であることを示した。In vivoにおけるC60Exの効果を検証するため、7週齢のBALB/cマウスにC60Exを5日間投与した後、脾臓、腸間膜リンパ節、パイエル板を酵素消化し、抗CD3抗体を添加して48時間培養した。