hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
インターネット利用病歴記録データベースを用いた放射線治療成績向上対策方法の確立

本研究は以下の内容を実現した。1)インターネット上のエージェント指向型オンライン放射線治療by病暦記録調査データベースを構築した。まず、日本放射線腫瘍学会(JASTRO)のデータベース委員会のもと運営されるROGAD(Radiation Oncology Greater Area Database)をインターネット上に移行させ、同じく日本全国の放射線治療施設を対象とした放射線治療病歴記録を行い、日本全国の放射線治療の実態を把握し、個々の症例の放射線治療計画の最適化、臨床的なQuality Assuranceへの貢献、放射線治療によるがん撲滅への貢献度調査、新技術、新施術の有効性評価を目的としたPCS(Pattern of Care Study)や、地域がん登録、院内がん登録、臓器別がん登録を統合するJNCDB(Japanese National Cancer Database)をも、インターネット上に移行する準備にとりかかった。これにより、日本の放射線治療のがん登録データベースにオンライン登録する基盤を整備した。また、そのデータベース・アプリケーションは、入力データの信頼性向上と、登録施設の入力負担を軽減し、情報公開の速度向上を図り、エージェント指向型を採用している。2)次に追跡調査精度を向上させるため、登録施設のHIS(Hospital Information System)、RIS(Radiology Information System)にアクセスし、通院情報、検査情報、診察情報、投薬情報から生存情報を抽出し、自動的に生存分析を行えるようにした。3)さらに、登録施設のデータベースと多施設型のデータベースの目的、データ項目、データコード、ストラクチャの差異を埋めるため、多施設型のデータベースを登録施設のプロトコルでカスタマイズでき、登録症例を登録施設のデータベースで登録しているかのように多施設型のデータベースに登録できるVPDB(Virtual Private Database)を開発した。4)また、個々の症例の治療計画立案時に、過去の予後情報、生存分析等から、その症例に最適な治療計画案を提示する、ラーニングシステムも開発した。インターネット上のデータベースを利用するため、最新の情報をリアルタイムで検索でき、最適な放射線治療計画案を提示できるようにした。5)さらにテキストデータだけでなく画像データを保存し、検索できるようにし、詳細な放射線治療の実態を把握できるようにもした。6)そして、集積された膨大な放射線治療症例登録と登録施設の構造調査から、現在の放射線治療の現場の問題点を解析し、現状でのガイドラインを作成した。以上により、インターネット利用病歴記録データベースを用いた放射線治療成績向上対策方法を確立した。プロジェクトは1.インターネッ卜上のエージェント指向型オンライン放射線治療病歴記録調査データベース構築2.放射線治療概要案提示する放射線治療Learning Toolの開発3.放射線治療Learning Systemの完成という3段階で実現される。初年度の本年は、第1段階であり、日本放射線腫瘍学会(JASTRO)データベース委員会の下、日本全国の放射線治療施設を対象とした放射線治療病歴記録調査を行い、個々の症例の放射線治療計画の最適化、物理・工学および臨床的なQality Assuranceへの貢献、放射線治療貢献度の把握、新技術・新施術法の有効性評価を目的としたインターネット放射線腫瘍学広域データベース(e-Radiation Oncology Greater Area Database:以下e-ROGAD)を構築し、運用した。入力データの信頼性向上と、登録施設の入力負担を軽減し、情報公開の促進を図るために、エージェント指向型のオンライン入力を実現し、施設既存のデータベースをプロトコルおよび構造変換してe-ROGADのリンクするためにパターン・マッチング手法によるコード対応表作成法も完成させた。

このリンク手法は施設の負担軽減、医療の進歩・細分化にともなう施設毎の視点の差異を統括する上では重要であった。また、インターネットを利用して、各施設固有のプロトコルに準拠した個別のウェブページを用意し、あたかも施設固有のデータベースに入力し、閲覧しているように見せ、ROGADに登録・保存できるバーチャル・プライベート・データベース・システムを開発した。これにより、各施設に対応し、精度・運用等の管理機能や情報循環・還元速度が向上したデータ収集環境が完成した。病歴記録データベースに集積された症例群の生存率解析し、その結果を放射線治療の成績向上に役立てるため、本年度は優秀な生存率を残すことが出来た治療群を抽出(特徴づけ)することを可能とした。連続的に値をとりうる放射治療照射線量の中から、他の集団とは異なる成績を残す集団毎の照射線量の閾値(境界値)を検定の有意差を用いて算出し、各症例の放射線治療における至適線量を統計的に求めた。従来、境界値を検出する場合、その値の前後の集団(つまり2群)で検定を行ない有意差を判断していた。しかし、この方法ではこの2群は純粋に治療成績が優秀な範囲とそうでない範囲であるわけがなく、優秀な範囲とそうでない範囲が連結されたのちにその他の範囲と比較されていることとなる。今回我々は予じめ複数の小さな範囲に分割しその範囲とその他の範囲との連結をくりかえし、その度毎に検定をくりかえすという手法を行なった。その結果、優秀な成績を残す至適線量を精度よく抽出することが可能となり、ラーニングシステムにおいて模範例として表示する治療法を、統計的に考案することが出来た。当然、本手法はコンピュータによって自動的解析されるため、インターネットを通じて検索を行ない、ラーニングシステムで模範例表示に至るまでに45秒しかかからない。(1)テキストベースの情報のみならず,治療内容の精度を検証するためには画像情報も必要である。CT画像,ポータル画像,治療計画画像などのDICOM画像,フィルムなどをデジタル・カメラで撮影し,JPG画像に圧縮し,データベース化を行なった。
骨の細胞活性をコントロールする合成細胞接着ペプチドのデザイン

骨の基質タンパク質の1つである骨シアロ・タンパク質(BSP)の、細胞接着促進効果について、モデルペプチドを用いて検討した。モデルペプチドとしては、BSPのアパタイト結合配列(E_7)と細胞接着配列(RGD)のみを含むペプチド(E_7PRGDT)を合成した。合成ハイドロキシアパタイト結晶を、BSP等のタンパク質または上記のモデルペプチドでコートして、それに骨芽細胞または破骨細胞を接着させた。骨芽細胞としては、MC3T3-E1細胞を用いた。破骨細胞としては、ラット骨髄細胞より活性型ビタミンDで分化させたものを用いた。BSPでコートしたハイドロキシアパタイト結晶には、いずれの細胞もよく接着した。この接着活性は過剰のRGDペプチドによって阻害された。これに対して、コートしない結晶またはアルブミンでコートした結晶に対しては、いずれの細胞の接着も見られなかった。BSPは細胞表面のインテグリンを介して、この細胞を接着させると考えられる。BSPモデルペプチドも、BSPと同様にこれらの細胞の結晶への接着を促進した。このペプチドはアパタイト結合配列と細胞接着配列しか含まないので、この接着活性のためにはこの両配列だけで十分であることがわかる。おそらくこのペプチドは、アパタイト結合配列部分で結晶に吸着し、RGD配列部分が環境に露出して、細胞のインテグリンと相互作用するのであろう。1.ミネラル結晶結合ペプチドの合成骨中に存在する、多くのハイドロキシアパタイト結晶結合タンパク質の共通配列として、ハイドロキシアパタイト結合性を持つアミノ酸配列を推定した。その結果、酸性アミノ酸の連続配列が、この配列に相当することが予想された。そこで、AspまたはGluの連続配列よりなるペプチドを化学的に合成して、そのハイドロキシアパタイトとの親和性について測定した。これらのペプチドはこの結晶に吸着して、その吸着性はこれらの酸性アミノ酸を他のアミノ酸に置き換えると減少した。また、これらのペプチドを任意のタンパク質に結合させると、そのタンパク質の結晶に対する親和性が上昇した。したがって、これらの連続配列がミネラル結晶結合部位を構成すると考えられる。2.ペプチドによる細胞接着実験Gluの連続配列と、既知の細胞接着配列であるArg-Gly-Aspをともに含むペプチドを合成した。このペプチドはアパタイト結晶に対して親和性を示した。このペプチドで合成ハイドロキシアパタイト結晶をコートして、それに対する骨芽細胞様細胞(MC3T3-E1)の接着について検討した。この細胞は未処理のアパタイト結晶には接着しなかった。これに対して、ペプチドでコートした結晶にはこの細胞はよく接着し、結晶表面で伸展した。この細胞接着促進効果は骨の細胞接着タンパク質に匹敵した。また、この効果は過剰のRGDSペプチドによって阻害された。したがって、今回合成したペプチドは、Gluの連続配列によってアパタイト結晶に吸着し、細胞接着配列を結晶表面に露出させ、そこにインテグリン・リセプターを介して細胞を接着させたと考えられる。骨の基質タンパク質の1つである骨シアロ・タンパク質(BSP)の、細胞接着促進効果について、本年度は破骨細胞を用いて検討した。BSPでコートしたハイドロキシアパタイト結晶には、破骨細胞がよく接着した。この接着活性は過剰のRGDペプチド、または抗BSP抗体によって阻害された。これに対して、コートしない結晶またはアルブミンでコートした結晶に対しては、破骨細胞の接着は見られなかった。BSPは破骨細胞表面のインテグリンを介して、この細胞を接着させると考えられる。前年度に合成したBSPモデルペプチド(E_7PRGDT)も、BSPと同様に破骨細胞の結晶への接着を促進した。このペプチドは、BSPのアパタイト結合配列(E_7)と細胞接着配列(RGD)しか含まないので、上記の接着活性にためにはこの2つの配列だけで十分であることがわかる。このペプチドによる接着も過剰のRGDペプチドによって阻害された。おそらくこのペプチドは、アパタイト結合配列部分で結晶に吸着し、RGD配列部分が環境に露出して、インテグリンと相互作用するのであろう。次にラット頭蓋骨の器官培養系にBSPモデルペプチドを添加して、その効果を組織学的に検討したが、骨芽細胞および破骨細胞数に関してコントロールとの間に差が見られなかった。
消化器癌(口腔癌)の放射線耐性関連遺伝子の解析と臨床応用

網羅的遺伝子発現解析プロファイリンを用いて、放射線耐性・感受性関連遺伝子を多数検索することにより、複雑な放射線耐性・感受性メカニズムを研究し、また、それらの遺伝子の中から放射線の耐性・感受性を判定するマーカーとなる遺伝子や、放射線感受性を増加させ、放射線増感効果が期待でき、実際の臨床に応用できる遺伝子を発見することを目的とした。放射線耐性関連候補遺伝子の中から、抗アポトーシス機能の報告があり、放射線感受性株に対する放射線耐性株の発現量に、有意な増加が見られたICAM2遺伝子の放射線耐性について、機能的解析を行なった。ICAM2siRNA処理をした放射線耐性株HSC2は細胞増殖が減少し、X線照射によるサバイバルカーブで、放射線感受性化が見られた。ICAM2発現ベクター処理をした、放射線感受性株HSC3は細胞増殖が増加し、X線照射によるサバイバルカーブで放射線耐性化が認められた。ICAM2siRNA処理をした放射線耐性株HSC2はAKT(Ser473部)のリン酸化が減少し、アポトーシス細胞の割合が増加した。今回の実験から、ICAM2発現は放射線耐性株で、PI3K/AKTの経路を通してアポトーシスを阻害することで、放射線耐性化に関与している可能性が示唆された。これ以外の遺伝子についても同様にsiRNAにより放射線感受性化が見られた候補遺伝子が判明した。さらにその候補遺伝子については阻害剤も存在し、阻害剤により、siRNAと同様に放射線感受性化が細胞株の実験で確認された。阻害剤を用いてマウスで実験を計画しており、マウス実験レベルで同様な放射線感受性化が確認されれば、臨床応用に役立てるものとなる実験であると考えている。
日本初期貨幣史の再構築

3カ年にわたる研究により、銅銭を基軸に据えた貨幣制度の導入が、中国式都城の建設と一体的に企画され、富本銭が発行された歴史的経緯が明らかになった。和同開珎の発行時には、銭貨の規格性を維持しつつ発行量の増大を図るために、鋳銭体制の整備と鋳銭技術の改良が図られていること、地金貨幣である無文銀銭を駆逐するために和同銀銭が発行されるなど、7世紀末から8世紀初頭にかけての貨幣関係記事が、名目貨幣である国内通貨の定着に向けた一連の貨幣政策として整合的に理解できるようになった。本研究は、富本銭と無文銀銭、和同開珎について、出土銭貨が内包する考古学的情報の分析を通して、わが国の貨幣制度の確立の過程を考究し、新たな視点から初期貨幣史の再構築を目的とするものである。3ヵ年計画の初年度にあたる平成20年度は、研究実施計画に沿って以下の研究を行った。1.初期貨幣(無文銀銭・富本銭・和同開珎)出土資料の整理・分析作業:20062008年に行った和同開珎全国出土集成データの分析をおこない、銭貨の出土が主に古代の官道周辺に集中する傾向を見出した。また注目される地域の出土事例を、研究協力者に研究集会で報告を依頼し、その性格について検討を加えた。2.和同開珎の型式分類とその年代的検討:2007年に行った銭貨鋳造実験で得られた鋳縮み率を基に、平城京出土銭范を再調査した結果、種銭の鋳造用鋳型である可能性が高まり、律令国家の銭貨生産体制の一班が明らかになった。さらに、古泉学による和同開珎の型式分類を整理し、出土銭貨研究への応用法を検討した。3.日・唐間の貨幣関係法制史料の収集と比較検討:唐中期の大銭に関する文献史料を収集し、大銭の形制を調査した結果、これまで性格の不明であった西大寺出上賈行銀銭が、唐の大銭を模倣した当五百銭の試鋳貨である可能性が浮上した。4.研究集会「出土貨幣研究の課題と展望」を開催し、弥生・古墳時代から平安時代の出土銭貨をめぐる論点を整理し、豊前と播磨の産銅と鋳銅遺跡に関する分析を行った。5.研究集会の記録集『和同開珎をめぐる諸問題(三)』を刊行するとともに、研究成果の一端を『出上銭貨日本の美術第512号』として公表した。本研究は、富本銭と無文銀銭、和同開珎の分析を通して、わが国の貨幣制度の確立過程を考究し、新たな視点から初期貨幣史の再構築を目的としたものである。3カ年計画の2年目に当たる平成21年度は、実施計画に沿って以下の研究を行った。1.経済史・法制史的分野の考察では、季禄の物品が具備する歴史的意味、位階による俸給差、調制にみる物品の価値などを整理し、奈良時代の物価と比較検討した。貨幣発行後も米、布帛などが基幹の物品貨幣として貨幣的価値を持ち続け、中世に至ることを確認した。また検討の過程で、雇役制、力役制度と銭貨の関係が新たな課題として浮上した。2.権衡制度と銭貨の重量に関しては、中国では開元通寳が重量単位になるほど、権衡制度と貨幣制度が密接に関係していたのに対して、わが国では富本銭の重量を同時代の開元通寳に合致させて発行したが、初期の古和同銭発行時に極端に重量化が進み、奈良時代の新和同になると軽量化が顕著に進行することを確認した。これは地金貨幣を駆逐するための銀銭対策の一環と見られ、銭貨が地金価値から離れて次第に名目貨幣化する傾向を把握することができた。3.研究集会「和同銀銭の鋳造技術をめぐる諸問題」を開催した。和同銀銭の私鋳銭を認定するための鋳縮み実験と、「珎」を「寳」の省画とする「和銅開寳」説の根拠となった銀の湯流れ具合を確認するために銀銭の鋳造実験を行い、実験結果について研究者間で議論を交わした。4.平成20年度に開催した研究集会『出土銭貨研究の課題と展望』の記録集を刊行した。本研究は、富本銭と無文銀銭、和同開珎の分析を通して、わが国の貨幣制度の成立過程を考究し、新たな視点から初期貨幣史の再構築を目的としたものである。平成22年度は実施計画に沿って以下の研究を行った。1.弥生・古墳時代の我が国出土中国銭貨の集成作業では、55遺跡から約250枚の出土例を収集した。

青銅器原料として我が国にもたらされた中国銭貨の一部が祭祀に使用された事例を確認でき、銭貨の祭祀的使用法の淵源を探ることができた。2.飛鳥池遺跡と藤原宮大極殿院出土富本銭の比較研究では、従来の七曜文の解釈に加えて、中央の太極から上下の両儀、両儀から四象が生じる両儀四象生成の文様であることを明らかにした。3.和同開珎の生産体制の復元研究では、銅銭の大量生産化を図るために中央で製作した種銭を各地の国衙工房に供給して生産した状況を推測できたが、和同銀銭の発行意図や銀銭の生産地の解明が今後の課題として残された。4.日本初期貨幣史の再構築に向けて研究史の整理を継続し、7世紀後半の銀・銅銭や和同開珎に関する通説の成立過程とその矛盾点を明らかにした。5.研究集会「古代長門の産銅と銭貨生産」を長登銅山文化交流館で開催し、長門鋳銭所跡の発掘調査成果、山城国府跡出土銅塊の科学分析に関する研究報告をめぐり研究者間で議論を交わした。6.平成21年度に開催した研究集会「和同銀銭の鋳造技術をめぐる諸問題」の研究報告書『古代銭貨の復元鋳造実験』(A4版120頁)を刊行した。
柳亭種彦の総合的な研究―種彦の吉原研究を中心に―

種彦の『好色本目録』『吉原書籍目録』の本文校訂を行うかたわら、『還魂紙料』を中心にそれらの書目の引用状況の検討を行なった。これらの作業を通じて、上方の文学作品が江戸の吉原を描く時の定型的表現の系譜について示唆を与える材料が見つかった。また従来知られていなかった『吉原一切鏡』についての知見を得ることができた。『鱸包丁青砥切味』の刊行と葛飾北斎らが関わる狂歌グループとの関係を明らかにした。種彦の合巻作品と大津絵の関係の検証をおこなった。『御誂染遠山鹿子』口絵からこの当時流行の「大津絵節」のテキストを復元することができた。I.種彦の年譜整備に関しては、以下の研究を行った。1富士講と種彦の関係に関心を払い、平成25年11月17日に開催された第18回国際浮世絵学会秋季大会(学習院大学)において「富士講と浮世絵」と題する発表を行った。内容は天保三年に刊行された種彦作『冨士裾うかれの蝶鵆』が富士講の修行者身禄の百回忌を当て込んだものであることを、葛飾北斎「冨嶽三十六景」、二代目歌川豊国「名勝八景」等の浮世絵出版の動向と関連付けながら実証したものである。2文政五年に刊行された「七変化女目鬘」の発見と研究をおこなった。この作品は従来書名すら知られていなかった新資料である。茶番等との関連で種彦の伝記研究の突破口ともなるもので、平成26年度中に発表予定である。II.吉原細見、および吉原関係資料の研究1吉原細見、吉原関係資料の収集に努めた。21により種彦の吉原研究を再確認する環境整備が進展した。本年は揚屋についての研究を行う予定である。江戸期の記録では知られていたが、存在が確認できなかった柳亭種彦作・歌川国貞画「七変化女目鬘」を発見し、『浮世絵芸術』168号に写真版で紹介し、翻刻を付し、解題を加えた。同作品は2014年10月から11月にかけて開催された太田記念美術館「歌川国貞展」に貸し出され、広く一般に知られることとなった。この作品により草双紙と浮世絵の密接な関係を説明することが可能となった。また板元の鶴屋金助と種彦の関係についても考察を加えることができた。また同作品は女性語の研究資料としても重要である。狂歌集を博捜することにより、柳亭種彦の新出の狂歌を見出すことができた。これにより種彦の年譜をさらに充実するとともに、文壇デビュー前の種彦を取り巻く狂歌壇の様相に新しい知見を加えることができた。『正本製』における板元の西村屋与八と作者の柳亭種彦の関係を考察することにより、『正本製』が西村屋の浮世絵販売のための重要なツールとなっていたことを発見した。これにより地本問屋が草双紙と浮世絵の二つのジャンルをどのように扱っていたか、また大衆小説、商業出版の最たるものである合巻が柳亭種彦の作品の中でも重要なジャンルである『還魂紙料』などの考証随筆の中に使用されている遊女評判記等の記述の抽出をおこなった。また吉原細見の現物、および写真の収集を行った。今年度は以下の7項目を中心に研究活動を行った。1.前年度に引き続き『富士裾うかれの蝶鵆』の研究を続け、富士講や手妻との関連についての研究を行った。2.同時代の他作者の合巻その他を調査することにより、板元との関係、歌舞伎との関係の研究を行った。西村屋与八から刊行された合巻の特殊性についての発見があった。3.『偐紫田舎源氏』の作品構造の研究を行った。また『御誂染遠山鹿子』についての研究を行った。4.柳亭種彦は甲州侍の出という意識が強かったため、その家系についての研究を中心に行った。種彦が当主であった高屋氏の家系は清和源氏満季流を称していたが、実質的には清和源氏義光流であることを明らかにした。その家系には武田氏滅亡後、多くの改変が行われていたことが判明した。また種彦の先祖が一時継承していた横手氏の本拠である北杜市白州町の実地踏査を行った。その結果、高屋氏の本貫は韮崎市の可能性が高まった。5.吉原細見を分析することにより、合巻に描かれた遊里と現実の遊里との乖離を研究した。6.『好色本目録』の研究を桃林堂蝶麿を中心に行った。7.種彦と浮世絵の研究を行った。これも西村屋与八・鶴屋喜右衛門との関係が深いことが判明した。絵入本ワークショップVIIIの実質的な責任者であったため、執筆活動が遅れた。ただデータや資料の蓄積は順調に進んだので、平成28年度に後れを取り戻せる見込みである。子どもを描いた浮世絵を破邪と予祝という視点から論じた。方法は疱瘡絵を分析して画題を確定し、それが子どもの浮世絵とどのような関係を持つか、この問題が種彦の交渉随筆とどのような関係を持つかを明らかにした。柳亭種彦の合巻処女作である『鱸包丁青砥切味』の刊行事情について、北斎及びその門人の蘭齋北嵩らを含む狂歌グループが板元西村屋

与八と交渉を行い、種彦を西村屋に誘ったことを日記の解析から明らかにした。さらに『鱸包丁青砥切味』に役者似顔絵が使用されていることを明らかにした。『古典文学の常識を疑う』(勉誠出版、2017)に「十九世紀江戸文学における作者と絵師・板元」として刊行予定である〈初校出)。『鱸包丁青砥切味』に大きな影響を与えた文化元年五月十六日の『絵本太閤記』の絶板、及び翌日の色摺絵本の禁令が合巻に与えた影響の研究を行い、この禁令を契機として合巻の絵本化という現象が起きたことを明らかにした。これについては国文学研究資料館第3回日本語の歴史的典籍国際研究集会で発表予定〈2017年7月29日)である。また他の作者への影響については絵入本学会の絵入本ワークショップX(2017年12月9日)で発表予定である。『還魂紙料』の「千年飴」に関し、種彦が使用した浮世草子の原本を特定し、種彦の交渉随筆のありかたについて明らかにした。これについては『実践国文学』92号(2017年10月刊)に発表予定である。大津絵の研究を行い、種彦の合巻『御誂染遠山鹿子』が大津絵節の影響の下に成立したこと、種彦の大津絵研究が同時代の大津絵研究とどのように関わっていたのかを明らかにした。種彦の『好色本目録』『吉原書籍目録』の本文校訂を行うかたわら、『還魂紙料』を中心にそれらの書目の引用状況の検討を行なった。これらの作業を通じて、上方の文学作品が江戸の吉原を描く時の定型的表現の系譜について示唆を与える材料が見つかった。また従来知られていなかった『吉原一切鏡』についての知見を得ることができた。『鱸包丁青砥切味』の刊行と葛飾北斎らが関わる狂歌グループとの関係を明らかにした。種彦の合巻作品と大津絵の関係の検証をおこなった。『御誂染遠山鹿子』口絵からこの当時流行の「大津絵節」のテキストを復元することができた。研究実績の概要でも記したように、種彦の伝記研究に関しては新資料の発見等により充実させることができている。また膨大な資料を収集整理している最中であるので、さらなる成果が期待できる。1についてはほぼ完了した。2・3・4・5・6・7については継続中である。2.については他作者の合巻の構造が種彦の亜流ともいうべきものであるので、山東京伝、曲亭馬琴、式亭三馬との比較研究が有効であると思われる。3の『御誂染遠山鹿子』については平成28年度の7月に開催が予定されているシンポジウムで発表予定である。4については徳川家康文書の研究、『寛永諸家系図伝』等の系譜類と紀州藩の研究が必要になる。6については蝶麿については完了したので、他の好色本作者との関係について検討を続けていく。日本近世文学柳亭種彦研究の基本は年譜であるので、年譜の充実を図る。柳亭種彦以外の合巻と種彦の合巻を比較することにより、画像のありかたについての研究を推進していく。天保改革の種彦に与えた評価を考察するためには種彦没後の弘化・嘉永期の出版統制のありかたを考察する必要があろう。もしかしたら天保改革における規制の大きさを『天保改革鬼譚』などのイメージから過剰に評価している可能性がある。それについての考察も必要になる。『正本製』における遊郭表現が文化文政期のものか、元禄以前のものかに関する研究を行う。そのためには揚屋図の研究が必要になろう。今年度は種彦と西村屋与八の関係についての論文を執筆する予定である。新資料の発見。富士山の世界文化遺産登録に伴う、富士講関係資料の出版等により、宗教学、美術史等、他領域の研究に対するアプローチが容易になった。研究実績の概要に記した成果を踏まえ、それを拡大していく。柳亭種彦の同時代の作者から、種彦へのアプローチを試みる。
筋萎縮性側索硬化症の病態生理に関する研究

ALSとその類縁疾患において、その病態の基礎となる中枢運動系の神経生理学的な研究を中心に行なった。ALSの類縁疾患であるMultifocal motorneuropathy(MMN)の患者血清で抗GMI抗体の高値(2400X)を示すものを用いて単一神経においてNaチャンネルブロックによる伝導ブロックを証明した。またALSのfasciculationが大脳磁気刺激により誘発されることをさらに症例を追加して検討した。ALSにおける脊髄運動ニューロンの発火確率を大脳磁気刺激後に調べたところ直接皮質脊髄路由来のprimary peakの著明な増高を認めるものがあり、同神経路の変成過程にglutamateなどによる興奮性神経細胞死が関与している可能性が示唆された。中枢運動系のメカニズムを探る目的でジストニアにおいてCNV(contingent negative variation)を調べた。また脊髄の運動メカニズムを調べる目的で同疾患においてTVR(tonic vibration reflex)を調べた。これらの成果は正常での中枢・脊髄運動系のメカニズムを明らかにすることによりALSの病態生理に寄与するものと考えられる。下濱らは家族性ALS例でのgenemutationについて新しい知見を得た。また高単位ビタミン12がDNAの転写の促進により神経の再生を促すことを見出し、この治療はALS患者へ応用できる可能性がある。本年度はALSとその類緑疾患において、その病態の基礎となる中枢運動系の神経生理学的な研究を中心に行なった。ALSの類緑疾患であるMultitocal motorneuropathy(MMN)の患者血清で抗GMI抗体の高値(24000×)を示すものを用いて単一神経においてNaチャンネルブロックによる伝導ブロックを証明した。ALSにおける脊髄運動ニューロンの発火確率を大脳磁気刺激後に調べたところ直接皮質脊髄路由来のprimary peakの著明な増高を認めるものがあり、同神経路の変性過程にglutamateなどによる興奮性神経細胞死が関与している可能性が示唆された。中枢運動系のメカニズムを探る目的でジストニアにおいてCNN(contingent negative variation)を調べた。また下濱らは家族性ALS例でのgene matationについて新しい知見を得た。
機能の創生を目指すヌクレオシドの化学合成

本研究班では、従来の医薬品開発を目標に直結したランダムスクリ-ニング的発想に基づく研究ではなく、核酸の構造や代謝の分子論的な解析を基に新しい機能性ヌクレオシドの創出を図ることを目的にしている。松田は、ヌクレオシドレベルでは化学的に安定であるがDNAに組み込まれると鎖切断などの反応性を示すヌクレオシドの設計を行っており、今年度は、2'ーdeoxycytidineの2'ーβ位にシアノ基、イリシアノ基、エチニル基を含む誘導体の合成を行った。この中で、シアノ基を含むCNDACは強い細胞毒性を示し、その5'ートリリン酸体は牛由来のDNAポリメラ-ゼαの強力な阻害剤となった。この時の阻害様式は、chainーterminator型であったが鎖切断の結果そうなったのかどうかについて更に検討を行っている。牧は、アデノシン誘導体が電子移動により酸化される新しい反応を見い出し、その反応を利用し、DNAやRNAの鎖切断へ応用しようと試みている。宮坂は、AIDSの原因ウイルスであるHIVーIを新しい様式で阻害するアシクロウリジン誘導体を合成した。その中でこれらの化合物は、従来のAZTやddIが感染細胞中の酵素によりトリリン酸体に変換されて、逆転写酵素を阻害するのとは異なり、リン酸化を受けずに阻害すること、また天然の基質であるTTPと非競合型の阻害を示すことから、逆転写酵素のTTP結合部位でアロステリックな阻害を示すことを明らかにした。綿矢は、ヌクレオシドやヌクレオチドの生物種間での差異を明らかにするために、寄生原虫をヒト由来細胞を用いて、糖部や塩基部が天然型とは異なる誘導体を用いて代謝系を調べた。リュ-シュマニアが特にプリン生合成がヒトとは異なることを利用して強い抗原虫作用を示すヌクレオシドを数種見い出した。
情動・ストレス反応におけるプロスタノイドの役割とその分子機構

プロスタノイドは、生体内において非常に多彩な作用を示すが、その作用は標的細胞表面にある特異受容体を介して発揮される。すなわちPGD, PGE, PGF, PGI, TXAに対してDP, EP, FP, IP, TPの各受容体であり、EPには4種類のサブタイプ(EP1-EP4)が存在する。我々は、これら8種類のプロスタノイド受容体cDNAをクローニングし、プロスタノイド受容体欠損マウスを作成した。中枢神経系におけるプロスタノイドの作用には、発熱や痛覚過敏の他、病的睡眠やACTHなどの神経内分泌の促進を引き起こすことが知られている。しかしながら、このようなプロスタノイドの神経病態作用の中で、その意義と詳細な分子メカニズムが理解されているものはほとんど皆無である。そこで、プロスタノイドによる病態生理的意義を解析するために、8種類のプロスタノイド受容体(DP, FP, IP, TP, EP1-4)欠損マウスを用いて解析を行った。その結果、(1)エンドトキシン(LPSなど)によるACTH分泌を測定し、EP1欠損マウスとEP3欠損マウスで分泌が有意に抑制されていることを見出した。さらにEP1欠損マウスでは、扁桃体中心部におけるストレス応答性c-fos発現細胞の減少、LPSによる行動抑制の障害を認めた。また、EP1欠損マウスで認められる表現型は、野生型マウスにEP1拮抗薬を投与することにより再現された。(2)EP1受容体欠損マウスの環境ストレスならびに社会的ストレスに対する行動解析の結果、EP1欠損マウスは、聴反射反応の亢進、自発跳躍の増加、断崖回避行動の障害、社交性の欠如ならびに攻撃性の亢進を認め、野生型で見られるストレス応答性が不安定になっていることを見出した。またEP1欠損マウスで認められるこのような表現型は、野生型マウスにEP1拮抗薬を投与することにより再現された。このことは、種々のストレス入力に対するいずれの応答においても、EP1シグナリングが関与することを示唆するものである。(3)EP2-EP4受容体欠損マウスにおいては、ストレスに対する著明な行動異常を認めなかった。(4)マウスのEP1、EP3受容体に対する特異的なポリクローナル抗体の作成に成功した。現在これらの抗体を用いて組織学的な解析を行っている。
2次元液体ヘリウム3単原子層薄膜の低温比熱と帯磁率

graphiteは原子レベルで平坦な表面を持ち、この上に物理吸着したヘリウム3(^3He)薄膜は2次元フェルミ粒子系として様々な2次元量子物性を示す。本研究ではこの系の比熱を0.0890.260Å^<-2>の広い吸着面密度にわたり、90μKから80mKで測定した。この測定は従来の測定を一桁以上低温側に拡張したものであり、これにより比熱の全貌が初めて明らかとなった。吸着第2層の固相では^3He原子間に数mK程度の交換相互作用が存在するが、これに比べ一桁以上低温まで相転移を示す比熱の異常は観測されず、この系の2次元性が非常に優れていることが実験事実として確認された。また、より低い面密度領域で実現される液相においては、約4mKに、フェルミ流体から期待される温度に比例する比熱の振る舞いからのズレとして異常が観測された。これについては既に、米国AT&T Bell研究所のGreywallとBuschは2mKから200mKの範囲で行った比熱測定において、約3mKにで比熱の折れ曲がりとして指摘していたが、彼らが使用していたCMN温度計がこの温度域で信頼性がなく、折れ曲がりの温度が面密度に依存しないこともあり、この異常の存在は疑問視されていた。本研究では0.1mK以下まで核帯磁率がCurie則に従う白金NMR温度計を用いて信頼性の高い測定を行い、この存在を確認したが、温度依存性は彼らの測定とは定性的に異なるものであった。この異常が液相のBCS転移に依るものであるのか、吸着基盤のheterogeneityに由来するものであるのかは依然不明であるが、今後、面密度依存性や吸着基盤にヘリウム4(^4He)をpre-coatした際の異常の有無を調べ、比熱異常の原因を究明する予定である。さらに、現在製作中の帯磁率測定装置も冷凍機に組み込み、帯磁率と比熱の同時測定により、この2次元フェルミ流体の性質を調べる予定である。
看護婦の夜勤、睡眠障害および医療事故の関連性についての疫学研究

睡眠上の問題と業務上のミスやニアミスは関連がある可能性が指摘されている。看護婦の睡眠問題と医療上のミス等の実態を明らかにし、夜勤や交代勤務をする勤労者の健康保持や仕事上のミスの予防策を講じる上での方策を検討することはきわめて重要な問題と考えられる。本研究においては病院勤務看護婦を対象に調査を実施し、看護婦の夜間勤務ないし睡眠障害の実態について検討し夜間勤務と種々の医療事故との関連性について解析した。調査対象者は東京大都市、その他(埼玉県、三重県、福井県、青森県)に設置されている400床以上の総合病院8施設に勤務する看護婦で、調査期間は2003年9月の1か月間であった。調査対象病院は調査依頼をして了解を得られた病院で、東京大都市の大学附属病院4施設、その他の大学附属病院2施設、その他の公的病院各2施設であった。回答数は、4,407で、調査票の回収率については、94.0%であった。なお、これらのうち女性看護婦4,279名を解析の対象とした。ミスの有無と夜勤の有無について統計学的に有意な関係が認められた。睡眠時間の分布と医療ミスの有無の関連については、統計学的に有意な関係は認められなかった。入眠障害ないし日中の過剰な眠気とミスの有無との間には、統計学的に有意な関係が認められたが、睡眠の主観的評価、中途覚醒、早朝覚醒・再入眠障害とミスの有無との間には、統計学的に有意な関係は認められなかった。過去12ヶ月間の事故要因に関する多重logistic回帰分析結果過去12ヶ月間の事故要因として、調整後では配偶者なし、夜勤あり、年齢との間に有意な関連がみとめられた。14年度-睡眠障害と医療事故に関する調査項目の作成平成12年度厚生科学研究(日本看護協会・医療事故防止対策研究事業)において看護業務に関連する医療事故の実態調査を行っており、その調査結果に基づいて医療ミスに関する調査項目を作成し、作成し終えた睡眠調査項目と併せた新たな調査票を開発した。なお、睡眠項目については科学技術振興調整費「日常生活における快適な睡眠の確保に関する総合研究」の研究班がピッツバーグ大学の開発した調査票を日本語訳し、検討を重ねて作成したものから特に睡眠障害と関係のある14項目を採用して調査票を完成させた。東京都内の1箇所の大学病院において1病棟看護婦を対象にした調査票によるプレテストを実施し、その結果と病院が独自に実施した看護婦の医療ミスの調査結果を看護部長等との協力のもとで付き合せ、調査票の信頼性を検討した。また、各病院22名の看護婦から調査票について回答しにくい項目を指摘してもらい調査票の改善を行う。なお、調査対象看護婦が調査票に記入する時間は10分以内を目途にするもので、対象者が回答しやすい調査票にする。調査項目について、特に医療ミスに関する回答が対象者によって、そのとらえ方が違うため客観的に把握できるように検討し信頼性のある調査項目とした。なお、睡眠障害に関する項目はプレテストの結果から鑑みて極めて客観性のある項目になった。

調査対象病院は調査依頼をして了解を得られた病院で、東京大都市の大学附属病院4施設、その他の大学附属病院2施設、その他の公的病院各2施設であった。回答数は、4,407で、調査票の回収率については、94.0%であった。なお、これらのうち女性看護婦4,279名を解析の対象とした。ミスの有無と夜勤の有無について統計学的に有意な関係が認められた。睡眠時間の分布と医療ミスの有無の関連については、統計学的に有意な関係は認められなかった。入眠障害ないし日中の過剰な眠気とミスの有無との間には、統計学的に有意な関係が認められたが、睡眠の主観的評価、中途覚醒、早朝覚醒・再入眠障害とミスの有無との間には、統計学的に有意な関係は認められなかった。過去12ヶ月間の事故要因に関する多重logistic回帰分析結果過去12ヶ月間の事故要因として、調整後では配偶者なし、夜勤あり、年齢との間に有意な関連がみとめられた。
タイ国への区画整理技術移転に関する実証的研究

わが国が誇る都市開発手法である「土地区画整理」の技術がタイ国へ技術移転された過程を実証的に評価分析し、今後とも必要とされている他の国々に対する土地区画整理技術移転のあり方を理論的に考察した。また、タイ国への技術移転事例分析を通じて、今後より一層の普及を図るために「土地区画整理事業に関する技術の国際移転」に必要な技術開発の具体的課題を明らかにした。区画整理関連システムの比較研究を進めるために、タイ国における区画整理関連法規(タイ区画整理法、ランドサブディビジョン法、耕地整理法、土地法典およびタイ国政府作成の都市計画関連法規説明資料等)を収集し、その翻訳作業を進めた。また、比較対象とするわが国の土地区画整理事業については関連する資料の収集を進め、特に先買い・合併施行の活用について事例の分析を行った。なお、こうした作業を通じて、日タイ両国の法令の主要な部分の比較についてはおおむねその作業を終えることができた。また、技術移転のプロセスを正確に把握するために、JICAを中心として行われた各種支援活動の報告書を収集し、その内容の分析を行った。加えて、こうしたプロセスの評価を行うために、木下がタイ現地へ赴き、政府関係者(Department of Town and Country Planning, )、バンコク首都圏庁関係者(Bangkok Metropolitan Administration)、チュラロンコン大学関係者に対しヒアリングを行った。本研究は、わが国の土地区画整理技術がタイ国へ技術移転された過程を実証的に評価分析し、今後とも必要とされている他の国々に対する土地区画整理の技術移転のあり方を理論的に考察するとともに、より一層の普及を図るために土地区画整理技術の国際移転に必要な技術開発の具体的課題を明らかにすることを目的として行った。研究の到達点は以下の通りである。(1)タイ国LR法と日本の土地区画整理法の比較研究タイ国区画整理法の策定のべースになったのは日本の土地区画整理法であるが、このほかにタイ国耕地整理法、ランドサブディビジョン法、民商法、協同組合法などが参考にされたことが明らかとなった。また、結果として日本の制度との大きな違いは、組合を構成する組合員の条件、借地権者の取り扱い、仮換地制度の有無、保留地の位置づけなどであるにあることが判明した。(2)技術移転が成功した要因の分析これまでの経過をつぶさに検証した結果、今回の技術移転が成功した要因は、タイ国DTCPの強力なリーダーシップ、タイ国側の強い主体性、持続的な努力とともに日本政府の継続的な支援(技術協力、セミナーの開催、日本視察など)が大きな役割を果たしたと考えられる。(3)今後のLR技術移転で検討が必要な課題の抽出今後の技術移転では、協力を受ける側の主体性、長期にわたる努力、有能な専門家の派遣、一致協力して取り組む姿勢が非常に重要であると判断される。(4)LRを定着させる新たな技術開発支援の検討今後もアドヴァイザーを継続的に派遣して下支えするとともに、タイを中心とした新たな国際協力の道を志向して、より汎用性のある手法へと改善してゆくことが求められる。
ヘルペスウイルスプロテインキナーゼの性状解析

単純ヘルペスウイルス1型(HSV-1)は少なくとも2つのウイルスプロテインキナーゼ、Us3とUL13をコードしている。本研究では、Us3の試験管内アッセイ系を利用し、Us3がウイルスタンパク質であるUL47Ser-77およびdUTPaseSer-187をリン酸化することを明らかとした。興味深いことに、UL47Ser-77のAlanine置換は、マウス角膜におけるウイルス増殖やHSV角膜炎の発症を減少させた。一方、vdUTPaseSer-187のAlanine置換は、マウスにおけるHSVの神経病原性を低下させた。本研究は申請者が世界に先駆けて確立した単純ヘルペスウイルスプロテインキナーゼ(PK)の試験管内アッセイ系を利用して、標的ウイルス基質および標的宿主細胞基質を網羅的に同定し、それらリン酸化の感染細胞およびマウス病態モデルにおける生物学的意義を解明する。これらの解析を通じて、ウイルスPKによる宿主細胞制御機構およびそれに基づくウイルス病態発現機構の全体像を明らかにすることを目的とした。本研究期間に我々は、試験管内アッセイ系を利用し、標的基質のスクリーニングを順次すすめた結果、新規標的ウイルス基質として、VP13/14を同定した。さらに解析を進め、VP13/14に関しては、リン酸化部位がSer-77であり、VP13/14の核局在の制御をウイルスPKが司ることが明らかとなった。また、本リン酸化現象が、単純ヘルペスウイルスの代表的疾患の一つであるヘルペス性角膜炎の効率的な発症に必要であることが、マウス病態モデルを用いた解析からも示唆された。また、当初の予定に加え、高感度質量分析系を用いた網羅的解析の結果、単純ヘルペスウイルス感染細胞における包括的なリン酸化状態を明らかにすることにも成功した。これらのリン酸化情報のデータベースは、単純ヘルペスウイルスの病態制御を理解する上で、今後重要な役割を果たすことが期待させる。事実、現在、本知見を基盤として、単純ヘルペスウイルスが脳炎を発症する際の病態制御機構の解析が後続研究として進行中である。以上の研究成果は、抗ウイルス戦略および単純ヘルペスウイルスワクチン開発への重要な基礎的な基礎的データと考えられる。本研究は、単純ヘルペスウイルスプロテインキナーゼ(PK)の試験管内アッセイ系を利用して、標的ウイルス基質および標的宿主細胞基質を網羅的に同定し、それらリン酸化の感染細胞およびマウス病態モデルにおける生物学的意義を解明すること、を目標とした。(i )昨年、報告した通り、本研究によりウイルスPKがウイルス因子の1つであるUL47のSer-77をリン酸化し、その核移行を制御すること、ヘルペス性角膜炎の効率的な発症を司ることが明らかとなった。(ii) (i)の解析の過程で、申請者らは高感度質量分析計を用いたリン酸化プロテーム解析系を導入し、HSV-1感染細胞におけるリン酸化状態を網羅的に解析し、データベースを構築した。その結果、HSV-1 UL50にコードされるvdUTPase Ser-187のリン酸化が、in vivoにおけるHSVの中枢神経系(central nervous system)の破壊能すなわち神経病原性(Neurovirulence)を促進することを見い出した。(ii)の知見は、第27回ヘルペスウイルス研究会、第37回国際ヘルペスウイルスワークショップ、第60回日本ウイルス学会学術集会において、その成果を発表済みであり、現在、論文作製中である。また、vdUTPase Ser-187研究における神経病原性の解析を共同研究に水平展開し、HSV-1 UL49にコードされるVP22が、強力な神経病原性因子であることも、国際学術誌であるJ. Virol. 86: 5264-5277.に報告した。24年度が最終年度であるため、記入しない。
臓器特異的自己抗原反応性T細胞による標的組織内三次リンパ組織形成機構

BALB/cマウス新生仔胸腺摘出により誘導される自己免疫性胃炎(AIG)モデルは、病態の進行と共に胃粘膜基部に特徴的なリンパ球集塊が多数認められる。これらの細胞集団は、T細胞とB細胞がはっきりと分離して存在していること、サイトカイン・ケモカインの発現パターン等の解析や組織切片の観察などから、異所性に形成された三次リンパ組織であることが明らかとなった。また、胃粘膜三次リンパ組織形成と血清中の自己抗体価との間には明らかな相関が認められ、病態の程度や自己抗体産生に局所リンパ組織が関与している可能性も示唆された。したがって、このAIGモデルは、健常状態ではリンパ組織が全く存在しない胃という臓器において慢性炎症に附随した三次リンパ組織が再現良く誘導されることから、その形成機構や臓器特異的な局所免疫反応を解析する上で極めて有用かつユニークな実験系である。一方、新生仔胸腺摘出よりも高率かつ簡便にAIGを誘導することと、その発症機構・三次リンパ組織形成機構をよりシンプルに理解しうるモデル系となることを期待して、胃壁細胞自己抗原H,K-ATPaseを認識する胃炎惹起性Th1クローンからT細胞受容体遺伝子を単離し、BALB/c背景のトランスジェニックマウス(T2-6AB)系統を樹立した。このT2-6ABマウスは早い時期から胃粘膜へのCD4+ T細胞浸潤が認められ、ほぼ100%の個体でAIG様の病態を示し、さらに、AIGモデルに比べ明らかに規模の大きな三次リンパ組織形成が認められた。加えて、胃粘膜にメモリー細胞ばかりでなく、ナイーブ細胞が多く浸潤していることや、三次リンパ組織内に高内皮静脈(HEV)が認められ、ケモカインCCL21の発現が誘導されていることも認められた。このように、このマウスの三次リンパ組織は、AIGモデルに比べて明らかに大規模で構造もより二次リンパ組織に近いことから、T2-6ABマウスは三次リンパ組織形成機構を理解する上で非常に有用なモデルであると考える。一方、三次リンパ組織が大規模で構造がしっかりしているにも関わらず、T2-6ABマウスは血清中の抗体価が非常に低く抑えられており、胃粘膜構造の破壊もさほど進んでいないなど、AIGモデルよりも病態が軽度であった。
アデノシン関連物質による臓器虚血再潅流障害の予防

【背景】肝の阻血再灌流障害の発生機序として、1980年代から活性酸素群が注目されている。これらの活性酸素群の生成に関してはいくっかの反応系が知られているが、阻血中のATPの分解によるHypoxanthineやXanthineの上昇とXanthine DehydrogenaseのOxidaseへのConversionを母地として発生する系が重要視されている。ATPの代謝産物であるアデノシンはアデノシン自体が持つ血管拡張作用の他に、High Energy Phosphatesのsubstrateとしての役割も有しており、これらの作用により近年、内因性アデノシンを増強させるnucleotide transport inhibitor等は臓器の阻血-再灌流障害の軽減に強力な作用を有することで注目されている。そこで、本研究はアデノシン関連物質を応用した安全な肝切除術の確立、肝移植におけるグラフト機能不全の改善、新しい臓器保存液の開発、あるいは多臓器不全の治療法の確立などを目的として行われた。【方法】ビーグル犬を使った2時間の完全肝虚血モデルを用いて、代表的な抗血小板薬であるジピリダモール(DYP)とアデノシンA_1リセプターのアンタゴニストであるKW3092[8-(noradamantan-3-yl)-1,3-dipropylxanthine]の効果を検討した。【結果】DYP投与群はnucleoside transport inhibitorの一つとして組織中のadenosine濃度を高める一方、phosphodiesterase inhibitorとしても虚血・再灌流障害を軽減し、動物生存日数の有意な延長を認めた。また、KW3092投与群は肝組織中のcAMPの上昇を認め、虚血・再灌流障害を軽減し、同様に動物生存日数の有意な延長を認めた。【まとめ】アデノシン関連物質は肝切除術、肝移植術、臓器保存における肝虚血-再灌流障害を軽減させ臨床における患者の安全性を高める効果を十分に期待できるものであると考えられた。また、これらの研究成果は2編の論文として報告された。本研究は動物実験にて肝臓での虚血-再灌流障害におけるアデノシン関連物質の生理学的機能を解明すると同時にアデノシン関連物質を用いた軽減策を確立し、その臨床応用を目指すことを最終目的としたものである。平成16年度は大動物を用いた肝温粗血モデル、肝切除モデル、肝移植モデルにて(1)nucleoside transportinhibitor (dipyridamole)、(2)adenosine A1 receptor antagonist (KW3902)、(3)phosphodiesterase inhibitor (dipyridamole、amrinone)、(4)adenylate cyclasestimulator (NKH477)を投与し、それらを通して、肝臓での虚血-再灌流障害におけるアデノシン関連物質の関与ならびにその機序の解明を行った。これらの薬剤は肝組織血流量を増大、肝酵素の逸脱を抑制し、肝組織内ATP量、adenosine量を増大、purine catabolites産生量を減少、cyclic AMP量の減少を抑制、さらには浸潤好中球数を減少させた。その結果、副作用が生じることなく2週間生存率を著明に改善した。これら薬剤の肝虚血再灌流障害に対する保護作用の機序は、虚血中にATP再合成の基質としてのadenosine濃度を上昇せしめ、その結果虚血中のエネルギー代謝を保持さらには、再灌流後のエネルギー代謝の回復を促進させたこと。虚血肝におけるpurine catabolitesの産生を抑制することによりxanthine oxidase系によるsuperoxide anionの産生を抑制し、oxidative stressを軽減させたこと。cyclic AMP濃度の減少を抑制することによりATP消費を抑制したこと。肝類洞の収縮を抑制し、さらに再灌流後の血小板凝集を抑制したことにより、肝組織血流を増加させ、微小循環障害を軽減したこと。肝への好中球浸潤を抑制し、elastase, protease等による細胞障害を軽減したこと、などによるものと思われた。来年度はこれらの研究結果を元に肝切除術、肝移植において臨床応用していく予定である。肝臓において、種々の原因による阻血状態ならびにその後の血流再開に伴って発生する一連の虚血-再灌流障害は、肝切除術の術中操作に伴う肝障害、肝移植におけるグラフト機能不全、多臓器不全に伴う肝機能障害等に深い影響を及ぼしており、時に患者を死に至らしめる。肝の阻血再灌流障害の発生機序として、1980年代から活性酸素群が注目されている。これらの活性酸素群の生成に関してはいくつかの反応系が知られているが、阻血中のATPの分解によるHypoxanthineやXanthineの上昇とXanthine DehydrogenaseのOxidaseへのConversionを母地として発生する系が重要視されている。ATPの代謝産物であるアデノシンはアデノシン自体が持つ血管拡張作用の他に、High Energy Phospbatesのsubstrateとしての役割も有しており、これらの作用により近年、内因性アデノシンを増強させるnucleotide transport inhibitor等は臓器の阻血-再灌流障害の軽減に強力な作用を有することで注目されている。本研究はこれらのことに着目しアデノシン関連物質を応用した安全な肝切除術の確立、肝移植におけるグラフト機能不全の改善、新しい臓器保存液の開発、あるいは多臓器不全の治療法の確立などを目的とした研究である。交付を受けた萌芽研究補助金による研究成果として、ビーグル犬を使った2時間の完全肝虚血モデルを用いにおいて、以下の知見を得た。代表的な抗血小板薬であるジピリダモール(DYP)はnucleoside transportinhibitorの一つとして組織中のadenosine濃度を高める一方、Phosphodiesterase inhibitorとしても虚血・再灌流障害を軽減し得た。

一方、アデノシンA_1リセプターはアデノシンの細胞保護作用を阻害することが知られており、アデノシンA_1リセプターのアンタゴニストであるKW3092[8-(noradamantan-3-yl)-1,3-dipropylxanthine]を用いた同様の実験においてEW3092投与群はcAMPの上昇を認め、虚血・再灌流障害を軽減し得た。以上の結果より、アデノシン関連物質は肝切除術、肝移植術、臓器保存における肝虚血-再灌流障害を軽減させ臨床における患者の安全性を高める効果を十分に期待できるものであると考えられた。【背景】肝の阻血再灌流障害の発生機序として、1980年代から活性酸素群が注目されている。これらの活性酸素群の生成に関してはいくっかの反応系が知られているが、阻血中のATPの分解によるHypoxanthineやXanthineの上昇とXanthine DehydrogenaseのOxidaseへのConversionを母地として発生する系が重要視されている。ATPの代謝産物であるアデノシンはアデノシン自体が持つ血管拡張作用の他に、High Energy Phosphatesのsubstrateとしての役割も有しており、これらの作用により近年、内因性アデノシンを増強させるnucleotide transport inhibitor等は臓器の阻血-再灌流障害の軽減に強力な作用を有することで注目されている。そこで、本研究はアデノシン関連物質を応用した安全な肝切除術の確立、肝移植におけるグラフト機能不全の改善、新しい臓器保存液の開発、あるいは多臓器不全の治療法の確立などを目的として行われた。【方法】ビーグル犬を使った2時間の完全肝虚血モデルを用いて、代表的な抗血小板薬であるジピリダモール(DYP)とアデノシンA_1リセプターのアンタゴニストであるKW3092[8-(noradamantan-3-yl)-1,3-dipropylxanthine]の効果を検討した。【結果】DYP投与群はnucleoside transport inhibitorの一つとして組織中のadenosine濃度を高める一方、phosphodiesterase inhibitorとしても虚血・再灌流障害を軽減し、動物生存日数の有意な延長を認めた。また、KW3092投与群は肝組織中のcAMPの上昇を認め、虚血・再灌流障害を軽減し、同様に動物生存日数の有意な延長を認めた。【まとめ】アデノシン関連物質は肝切除術、肝移植術、臓器保存における肝虚血-再灌流障害を軽減させ臨床における患者の安全性を高める効果を十分に期待できるものであると考えられた。また、これらの研究成果は2編の論文として報告された。