hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
fMRIを用いた口腔内ストレスによる脳賦活部位の同定

ストレス症状を有する人数は増加の一途をたどっているが、そのストレスの原因(ストレッサー)がロ腔由来であることも少なくない。ロ腔内ストレリサーとして、歯や歯肉め疼痛が主であるが、その他に咬合高径やコンタクトの不良、粘膜面の被覆や矯正治療までもがその要因として挙げられている。本研究では、これらロ腔内ストレッサーのうち咬合高径とコンタクトの不良に焦点を当て、これらのロ腔内ストレス下における脳賦活領域をfMRIの手法を用いて同定しロ腔内ストレスを客観的に解析・評価しようとするものである。fMRIでは、負荷(本研究では口腔内へのストレス)有りの状態と負荷無しの状態の2相を、30秒程度で10回20相程度行った。また、MRIの特性上、金属物の使用は避けたかった。そこで、上顎中切歯の歯面に遠隔操作で重さ負荷を秒単位でコントロールできる装置を作成した。研究組織のメンバーにおいて、上記のロ腔内ストレッサー付与装置を作動させながらfMRI撮像を行い、fMRIデータの解析とともに、装置を評価した。口腔内ストレッサー付与装置には、遠隔操作とこれを制御する高性能モータとワークステーションが必要であるため、設備備品費で購入した。口腔内ストレッサー付与装置以外の主要装置は、超高磁場型のMRスキャナおよびfMRIデータ解析装置であるが、これらは大阪大学および産業技術総合研究所に設置されているため自由にアクセス可能であった。fMRIの結果より、ロ腔内のストレスは、大脳の前頭前野に投射することが示唆された。ストレス症状を有する人数は増加の一途をたどっているが、そのストレスの原因(ストレッサー)が口腔由来であることも少なくない。口腔内ストレッサーとして、歯や歯肉の疼痛が主であるが、その他に咬合高径やコンタクトの不良、粘膜面の被覆や矯正治療までもがその要因として挙げられている。本研究では、これら口腔内ストレッサーのうち咬合高径とコンタクトの不良に焦点を当て、これらの口腔内ストレス下における脳賦活領域をfMRIの手法を用いて同定し口腔内ストレスを客観的に解析・評価しようとするものである。fMRIでは、負荷(本研究では口腔内へのストレス)有りの状態と負荷無しの状態の2相を、30秒程度で10回20相程度行うこととした。研究組織のメンバーにおいて、上記の口腔内ストレッサー付与装置を作動させながらfMRI撮像を行い、fMRIデータの解析とともに、装置を評価した。現時点では、口腔内ストレッサーによる刺激では、扁桃付近に賦活領域を認めているが、さらなる検討が必要と考えている。
甲状腺ホルモン受容体アイソフォームの機能解析

他研究機関より譲渡を受けた甲状腺ホルモンβ1受容体を発現するアデノウイルスを293細胞に感染させることにより大量調製し、これを神経細胞に感染させるための条件設定を行っている。細胞は当初はNeuro-2a細胞を予定していたが、維持の容易さとより複雑な分化能を有する点からまずPC12細胞を選択した。ルシフェラーゼを発現するアデノウイルスでの予備実験ではこれらの細胞にも高率にウイルス感染、遺伝子発現がおきることは既に確かめられている。また甲状腺ホルモン受容体の発現もホルモン結合アッセイによって確認されている。しかし細胞の分化というある程度長期間の感染継続と遺伝子発現を要する今回の研究では、感染ウイルス量の多寡により、細胞毒性が強力に出現してしまうために経時的な細胞の変化を追跡するのが難しかったり、あるいは逆に期待される変化がおきなかったりするなど理想的な実験条件の設定に予定以上の時間を要している。早急に条件設定を終了し、研究計画に記載したように、細胞分化の確認とそれに伴って発現する因子の同定を急ぎたい。甲状腺ホルモンα1受容体やα2バリアントを発現するアデノウイルスは現在作成中である。
生活習慣に影響する遺伝要因の解析とメンデルランダム化による生活習慣病コホート研究

本年度はゲノムワイド関連解析(GWAS)による生活習慣と関連する遺伝要因の検討、GWASにより見いだされたSNPと生活習慣との関連の再現性の検討、メンデルランダム化による生活習慣と病態との関連を検討し以下の知見を得た。1.日本多施設共同コーホート研究(J-MICC研究)参加者(3569歳の男女)のうち13,927名における検討にて、女性の脂質多量摂取との関連が示唆される遺伝子座が複数見出され(P < 1×10-5)、もっとも有意な関連を示したのはITPR遺伝子に関する遺伝子多型(rs10505999)であった。ただし別集団での再現性検討が必要である。2.昨年度までに見出されたコーヒー摂取量とHECTD4遺伝子の一塩基多型(SNP)rs2074356は、他の集団(J-MICC研究静岡地区・大幸研究の参加者9,392名)でもコーヒー摂取量との関連が再現された。3.同集団におけるメンデルランダム化解析にて、コーヒー摂取行動関連遺伝子多型と血清γ-GTPおよびASTとの間には、有意な負の関連が観察され(ともにP < 0.0001、アルコール摂取量等を調整)、コーヒー摂取量と血清γ-GTP・ASTとの関連を直接検討した場合と同様の結果であった。またJ-MICC研究参加者において、本研究で栄養素・食品群摂取量推定のために使用している食物摂取頻度調査票の再現性・妥当性を、秤量法食事記録調査を基準に検討し、同研究参加者においても一定の再現性、妥当性を有し、食物摂取頻度調査票を用いて食事摂取と遺伝要因との関連が検討可能であることを示した。これらの研究は今後、測定の誤りや交絡を生じやすい生活習慣の代理指標として、生活習慣と関連する遺伝的要因を用いる(メンテルランダム化)ことで、生活習慣が疾患リスクに及ぼす影響を再評価するための基礎となると考えられる。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。本年度はゲノムワイド関連分析(GWAS)により、生活習慣(喫煙、飲酒、食事、飲料摂取、運動、睡眠など)と関連する遺伝要因とくに一塩基多型(SNP)との関連の検討を開始した。そのためにまず、解析対象となる日本多施設共同コーホート研究(J-MICC研究)のデータより、生活習慣を表現型としたGWASに用いるデータセットの作成を試みた。GWAS用のタイピング(14,536名分)はすでに終了しており、本年度はタイピング用DNAチップにないSNPの推定(imputation)を実施した。一方、生活習慣データについてはJ-MICC研究のベースライン調査票データを用いたが、データセット作成の過程で、データにかなりの数の不備・矛盾が見いだされ、ベースライン調査を担当した調査機関への確認依頼、条件非該当者の除外、データクリーニングに相当の時間を要した。本年度末までに、GWAS用にDNA試料を提供した13調査地区のうち、1地区を除いてデータクリーニングが終了したが、生活習慣と関連する遺伝要因のGWAS本体を行うことができなかった。一方、GWAS解析で見出された生活習慣と遺伝要因との関連を検証するための試料として、冷凍保存されているバフィーコートから、DNAの抽出、整理を行った。解析用データセット作成の過程で、生活習慣データにかなりの数の不備・矛盾が見いだされ、データ確認、条件非該当者の除外、データクリーニングに相当の時間を要した。そのため、生活習慣と関連する遺伝要因のゲノムワイド関連分析本体を行うことができなかった。本年度は、生活習慣に影響する遺伝的要因の決定、生活習慣決定の生物学的メカニズム解明、また生活習慣が疾病リスクに及ぼす影響を検討する際に、生活習慣の代理指標となりうる遺伝子多型を探索するため、生活習慣と関連する遺伝子多型のゲノムワイド関連解析(GWAS)による検討を開始した。この検討では、遺伝情報の個人差と生活習慣の個人差との関係を、とくに仮説は設けず網羅的に検討する。生活習慣の代理指標となる遺伝子多型を見出すことができれば、生活習慣と疾病・病態との関係を検討する際に遺伝子多型を用いることにより、生活習慣自体を用いた場合に生じうる測定誤差、他の生活習慣などの影響(交絡)、因果の逆転といった問題点を解決できることが期待できる(メンデルランダム化解析)。検討対象の生活習慣としては、喫煙、飲酒、コーヒー飲用、緑茶飲用、運動、睡眠、自覚的ストレスおよびストレス対処行動、栄養素摂取、間食習慣などを設定した。分析対象者は日本多施設共同コーホート研究(J-MICC研究)の参加者のうち、GWAS用タイピングデータ(約60万種類の一塩基多型[SNP])が得られている約14,500名である。生活習慣に関する情報は調査票により収集されたものを用いた。あわせて生活習慣と関連する遺伝子多型との関係を検討するため、J-MICC研究の健診データの整備も行った。この結果、コーヒー飲用習慣と関連する新規SNPの候補が発見され、再現性の検討を進めている。しかしながら主要な研究分担者の休職により、検討を予定通りに終えることができなかった。主要な研究分担者の休職により、生活習慣と関連する遺伝子多型のゲノムワイド関連解析(GWAS)を終了することができなかったため。本年度は生活習慣と関連する遺伝要因をゲノムワイド関連解析(GWAS)により検討し、下記の知見を得た。

1.日本多施設共同コーホート研究(J-MICC研究)参加者(3569歳の男女)のうち6,312名における検討にて、コーヒー摂取量との関連が示唆される2つの新規遺伝子座を見いだした(P < 1×10-6)。うち1遺伝子座内の一塩基多型(SNP)rs2074356は、同研究の他の参加者4,949名でもコーヒー摂取量との関連が再現され、2集団を合わせた分析ではゲノムワイド有意(メタ解析のP値2.2×10-16)であった。2.J-MICC研究の参加者14,088名(探索用6,403名、再現性検討用7,685名)において、ストレスコーピングと遺伝要因との関連を検討したところ、感情表出(「いやだと感じていること、思っていることを表情に出す」)および解放(「なりゆきにまかせる」)による対処の個人間変動のうち、それぞれ19.5%、6.6%を説明すると推測された。また遺伝子レベルの解析にて、シナプス成熟制御に関与する遺伝子であるFBXO45が感情表出に有意に関連していた。3.J-MICC研究参加者13,980名での検討にて、余暇の身体活動(4メッツ以上)と関連する新規のSNPが同定され(P = 2.5×10-8)、愛知県がんセンターの病院疫学研究参加者2,036名においても有意な関連が再現された(メタ解析のP値2.2×10-9、論文投稿中)。これらの結果は生活習慣に影響する遺伝的要因の決定、生活習慣決定の生物学的メカニズムの解明に有用なばかりでなく、測定の誤りや交絡を生じやすい生活習慣自体の代理指標として生活習慣と関連する遺伝的要因を用いる(メンデルランダム化)ことで、生活習慣が疾患リスクに及ぼす影響の評価にも役立つと考えられる。生活習慣と関連する遺伝子多型の検討はある程度、コーヒー飲用および余暇の運動については新規の関連遺伝子座も発見した。しかしメンデルランダム化による生活習慣と疾病リスク、病態との関連の検討は今後の課題に残されているため。本年度はゲノムワイド関連解析(GWAS)による生活習慣と関連する遺伝要因の検討、GWASにより見いだされたSNPと生活習慣との関連の再現性の検討、メンデルランダム化による生活習慣と病態との関連を検討し以下の知見を得た。1.日本多施設共同コーホート研究(J-MICC研究)参加者(3569歳の男女)のうち13,927名における検討にて、女性の脂質多量摂取との関連が示唆される遺伝子座が複数見出され(P < 1×10-5)、もっとも有意な関連を示したのはITPR遺伝子に関する遺伝子多型(rs10505999)であった。ただし別集団での再現性検討が必要である。2.昨年度までに見出されたコーヒー摂取量とHECTD4遺伝子の一塩基多型(SNP)rs2074356は、他の集団(J-MICC研究静岡地区・大幸研究の参加者9,392名)でもコーヒー摂取量との関連が再現された。3.同集団におけるメンデルランダム化解析にて、コーヒー摂取行動関連遺伝子多型と血清γ-GTPおよびASTとの間には、有意な負の関連が観察され(ともにP < 0.0001、アルコール摂取量等を調整)、コーヒー摂取量と血清γ-GTP・ASTとの関連を直接検討した場合と同様の結果であった。またJ-MICC研究参加者において、本研究で栄養素・食品群摂取量推定のために使用している食物摂取頻度調査票の再現性・妥当性を、秤量法食事記録調査を基準に検討し、同研究参加者においても一定の再現性、妥当性を有し、食物摂取頻度調査票を用いて食事摂取と遺伝要因との関連が検討可能であることを示した。
ヒトロ蓋扁桃胚中心の機能的形態に関する研究

1.研究目的:本研究の目的はヒトロ蓋扁桃の胚中心の形態をコンピュ-タ-グラフィクスによる三次元画像解析法を用いて立体像化し、その三次元像より機能を知ろうとする胚中心の機能的形態学研究である。扁桃はリンパ様組織と云われるように主体は胚中心を有するリンパ組織であり、胚中心は明中心と暗殻より構成されている。これらの形態的特徴より胚中心の機能を知るのが本研究の目的である。2.研究材料と研究方法:手術時に摘出した口蓋扁桃を研究材料とした。ホルマリン固定、セロイジン包理、連続切片作製、HE染色を施行した。光顕像を拡大し、明中心、暗殻をデジタイザ-でトレ-スして、コンピュ-タ-に入力し、立体画像化して形態を観察した。3.観察結果:扁桃炎を反復する習慣性扁桃炎(A群)の扁桃と炎症の既往のない肥大軽度(B群)の扁桃の両者の胚中心を比較検討した。B群の胚中心は一般に小さく、暗殻も明中心の一部を被覆しているが、A群ではその形態は複雑なものが多い。明中心、暗殻の体積はB群はA群に比べて小さい値を示した。また扁桃が肥大するにつれて胚中心の大きさが大きくなる傾向を示した。炎症を反復する扁桃では明中心の体積が大きく、リンパ球の増殖の場として退行萎縮しないためと推定した。そこで家兎の扁桃でリンパ球の細胞分裂の動態を抗Brduモノクロ-ナル抗体法で細胞分裂を観察してコンピュ-タ-・グラフィクスで立体画像化し検討した。リンパ球の細胞分裂のない胚中心、また胚中心の一定の部位に分裂像がみられた。この所見は第92回日耳鼻総会、第2回国際扁桃シンポジウムで報告する予定である。
空間反転対称性のない強相関電子系超伝導に関する理論的研究

22年度は主に、強磁性超伝導体UCoGeとトポロジカル絶縁体の電子相関効果について研究を行った。まず、近年発見された強磁性重い電子系超伝導体UCoGeにおいては、特異な上部臨界磁場H_<c2>の振る舞いが観測されており、興味がもたれている。我々は、NMRの実験グループと共同研究を行うことにより、この物質の特徴的な強磁性磁気揺らぎを理論に取り込んで、H_<c2>の振る舞いを解析した。そこにおいて、H_<c2>の異方性はa軸とc軸で10倍以上ひらきがあり、その起源は磁場による量子臨界性のチューニングからくるpair weakeningにあることを示した。さらに、a軸からc軸へ磁場を傾けたときの磁場角度依存性は、異方的質量モデルでは説明できないほど急峻であり、磁気的量子臨界性が超伝導にとって重要であることが示された。このことは、UCoGeにおいて強磁性スピン揺らぎと超伝導とが直接的に結び付けられたことを意味しており、この超伝導がスピン揺らぎによって引き起こされていることの強い証拠を得たことになる。次に、トポロジカル絶縁体における電子相関効果についてである。トポロジカル絶縁体・超伝導体における相互作用の効果はまだあまり理解されておらず、理論的側面からも、またCePtBiなどの電子相関が効くトポロジカル絶縁体の候補物質の理解のためにも重要である。相互作用のないときのトポロジカル絶縁体の基本的な性質としてバルク・エッジ対応があげられるが、本研究ではとくに、そこにおける電子相関効果に着目した。エッジを持つような非一様な形状の系を考え、非一様系に対する動的平均場理論を適用し、サイト毎の局所状態密度を計算しエッジモードの性質を調べた。今後の課題として、バルク・エッジ対応が成り立たないような量子状態の実現可能性の解析などがあげられる。1、空間反転対称性のない重い電子系超伝導体CeRhSi3,CeIrSi3において実験で観測されている縦磁場Hc2の特異な振る舞いについて理論的解析を行った。この物質の超伝導は反強磁性の量子臨界点に非常に近いところで起こっているという実験的事実を理論に取り入れることによって、実験でみられるHc2の振る舞いは、空間反転対称性の欠如と強いスピン揺らぎの合わさった結果として出現することを指摘した。この結果は量子臨界点近傍のある種の超伝導体に対して一般的に成り立つと考えることができ、量子臨界点近傍の超伝導の理解を深めるものである。2、SrRu204の(001)界面の超伝導状態について理論的に研究を行った。界面においては空間反転対称比が欠如しており、そこにおける超伝導は、バルクの超伝導状態では破れていた時間反転対称性が回復した、ジンクレッド・トリップレッドの混合状態が安定化することを指摘した。また、空間反転対称性の破れの具合がそれほど大きくない場合には、この超伝導はトポロジカルに安定な状態であることを示した。この結果は、近年注目を集めているトポロジカル秩序の具体的な例を理論的に提示したものであり、トポロジカル超伝導の観測に向けた一助となることが期待される。平成21度は主に、擬2次元酸化物超伝導体Sr2RuO4の(001)界面における超伝導、空間反転対称性のない重い電子系超伝導体CeRhSi3,CeIrSi3の諸性質、さらに強磁性超伝導体UCoGeにおける上部臨界磁場に関して理論的研究を行った。まず、Sr2RuO4の(001)界面に関しては、界面近傍における空間反転対称性と超伝導対称性の関係を調べ、近年盛んに研究が行われているトポロジカル超伝導状態の実現可能性について議論した。次に、CeRhSi3,CeIrSi3に関して、常伝導状態での電気抵抗、スピン揺らぎの磁場依存性、超伝導対称性に対するスピン反転散乱の効果、縦・横両方向での上部臨界磁場Hc2などについて、ミクロスコピックな立場から理論的に解析した。実験で観測されているこれらの物質における諸物性が、空間反転対称性の欠如と量子臨界点近傍の反強磁性スピン揺らぎによって理解できることを示した。とくにHc2に関しては、新たに導出したHc2の一般的な計算式を用いて、これら二つの性質のinterplayが重要となることを指摘し、量子臨界点近傍の超伝導体のユニバーサルな性質の一側面を明らかにした。さらに、この結果を踏まえて、強磁性超伝導体UCoGeにおけるHc2の異常な振る舞いについて解析を行った。この物質におけるHc2の振る舞いを理解するためには、超伝導ギャップ関数の対称性だけでなく、強磁性スピン揺らぎの磁場依存性が重要であることを指摘した。また、そこにおける「帯磁率の非解析性」の効果についても解析を行った。現在、より現実の実験の状況に則した解析を進めている。

さらに、a軸からc軸へ磁場を傾けたときの磁場角度依存性は、異方的質量モデルでは説明できないほど急峻であり、磁気的量子臨界性が超伝導にとって重要であることが示された。このことは、UCoGeにおいて強磁性スピン揺らぎと超伝導とが直接的に結び付けられたことを意味しており、この超伝導がスピン揺らぎによって引き起こされていることの強い証拠を得たことになる。次に、トポロジカル絶縁体における電子相関効果についてである。トポロジカル絶縁体・超伝導体における相互作用の効果はまだあまり理解されておらず、理論的側面からも、またCePtBiなどの電子相関が効くトポロジカル絶縁体の候補物質の理解のためにも重要である。相互作用のないときのトポロジカル絶縁体の基本的な性質としてバルク・エッジ対応があげられるが、本研究ではとくに、そこにおける電子相関効果に着目した。エッジを持つような非一様な形状の系を考え、非一様系に対する動的平均場理論を適用し、サイト毎の局所状態密度を計算しエッジモードの性質を調べた。今後の課題として、バルク・エッジ対応が成り立たないような量子状態の実現可能性の解析などがあげられる。
生理活性物資に応答する電気化学センサーの開発

本研究は電気化学センサーのなかでイオン電極に焦点をあて、その開発と応用を進めた。イオン電極の開発には新しい電極材料の開発が不可欠となるが、本研究ではリン酸エステル類が有機アンモニウムイオンのイオノフォアになることを初めて見いだした。周辺化合物の探索を含めた検討を今後の課題としている。一方、応用面としてはジソピラミド(抗不整脈薬)の血中濃度測定を代表例としてあげることができる。電極法の利点は、血清中に電極を浸すだけで遊離形の薬物濃度を定量できることである。一般に、薬物による治療効果は血液中で遊離形薬物濃度と強い相関性を示すと考えられているが、これまで開発されてきた方法では血液中のタンパクと結合した部分も含めた総薬物濃度で定量することが多い。遊離形薬物濃度だけを定量するためには、例えば、血清サンプルからタンパクに結合した部分を限外ロ過などにより分離する必要があり、測定に必要な血清量も多量になるうえ、分析に要する時間も必然的に長くなるという欠点があった。私たちは、ジソピラミドを含んだ血清中の遊離形薬物濃度を、(1)血清そのままで電極法を用いて定量する、(2)血清を限外ロ過し、遊離形のジソピラミド試料を調製後に、現在最もよく利用されている蛍光偏光免疫測定法により定量する。その結果、電極法と免疫測定法との相関関係(y=-0.123+0.991x、r=0.997)はよく、電極法が遊離形ジソピラミド濃度の新しい測定法になることがわかった。その他、尿中フェニルピルビン酸定量への電極法の応用、麻薬コカイン検出用の簡易型電極の開発、あるいは小児難治性てんかん薬として用いられている臭化物薬剤の血中濃度測定に臭素イオン電極とフローインジェクション分析とを組み合わせた自動分析装置開発に成功した。今年度は、イオン電極法の臨床化学分析への応用を積極的に進めた。まず第一に、小児難治性てんかん薬として用いられている臭化物薬剤の血中濃度測定に臭素イオン電極とフローインジェクション分析とを組み合わせた自動分析装置を完成させた。また、ジソピラミド(抗不整脈薬)の血中濃度定量へ電極法を適用することに成功した。一般に、薬物による治療効果は血液中の遊離形薬物濃度と強い相関性を示すと考えられているが、これまで開発されてきた方法では血液中のタンパクと結合した部分も含めた総薬物濃度で定量することが多い。私達は、ジソピラミドを含んだ血清中の遊離形薬物濃度を、(1)血清そのままで電極法を用いて定量する、(2)血清を限外ロ過し、遊離形のジソピラミド試料を調製後に、現在最も汎用されている蛍光偏光免疫測定法により定量する。その結果、電極法と免疫測定法との相関関係(Y=-0.123+0.991 X、R=0.997)はよく、電極法が遊離形ジソピラミド濃度の新しい測定法になることがわかった。その他、尿中フェニルピルビン酸の定量への電極法の応用、あるいは麻薬コカイン検出用の簡易型電極の開発に成功した。今年度は、イオン電極のイオノフォア開発を中心に研究を進めた。

特に、いくつかのリン酸エステルが有機アンモニウムイオンに対するイオノフォアになることを初めて見いだした。有機アンモニウム電極を作製するには、これまでアミンイオノフォアI(カリックス[6]アレーン誘導体)およびジベンゾ-18-クラウン-6が広く用いられてきた。これらのイオノフォアを用いた電極とリン酸エステル、例えば、リン酸トリス(2-エチルヘキシル)を用いた電極との間で選択性を比較すると、リン酸エステルの場合では特にK+およびNH_4+に対してよい選択性を与えた。有機アンモニウムイオンとリン酸エステルとの相互作用の直接的な証拠を得るために、ヘキシルアンモニウムとリン酸p-トリルを用いて^1H-NMR測定を試みた。ヘキシルアンモニウムの脂肪族プロトンシグナルは、リン酸p-トリル存在下では、NH_3+基に近いプロトンシグナルほど高磁場シフトを示した。これは、(1)ヘキシルアンモニウムのNH_3+基がリン酸p-トリルのP=O基の負電荷に分極した酸素原子と相互作用したために、ヘキシルアンモニウムの四級窒素から生じる強い誘起効果を減少させ、(2)その結果、窒素原子の近くにある脂肪族プロトンのシグナルがより強く高磁場シフトしたことを示した。その他の研究として、ESR法による「リポソーム膜の透過性マーカー」として使用されているスピンプローブ、テンポコリン、に応答する電極を開発し、免疫試薬の定量にイオン電極法がESR法よりも簡便性・経済性に優れていることを明らかにした。
「未来をつくる研究」としての外国人児童生徒教育研究‐台湾の「新南向政策」分析‐

学校内外での教育支援や政策提言を行う民間非営利組織の重要性に着目し、精力的に移民支援活動を展開するジャーナリスト張正、廖雲章両氏に聞き取り調査を行った。台湾における両氏の活動については、研究協力者(翁麗芳)から詳細な情報を得た。また、関連する他の移民支援団体の活動の実地調査を行った。調査内容の検討により、張正、廖雲章両氏の活動には、移民の自己表出を重視する特徴を認めた。さらに、両氏には人権派の社会学者成露茜の影響が大きいと把握し、思想上の影響について考察した。この両氏の活動の特徴及び成露茜の人権思想の影響については、年度末の研究会(2019.2.15聖心女子大学台湾から研究協力者2名参加(翁麗芳、洪福財))において公表し、意見を交換した。成露茜に止まらず、父親で近代中国のジャーナリズム界に大きな足跡を残した成舎我を視野に入れるアイディアが示唆され、それに取り組むこととなった。同研究会においては、「十二年国民基本教育課程綱要総綱」に基づき2018年度から開始された新住民言語教育の実施状況と課題について、研究協力者から説明を受けた。教学体制や教材整備に課題はあるが、多元文化を追求する教育施策として、「新南向政策」に通じる民進党政権の価値観が反映しているとの見解に及んだ。このテーマについては、研究分担者(林初梅)が主に取り組んだ。経済関係強化だけではなく人権や多元文化による東南アジア諸国等との関係強化という観点から「新南向政策」を論じる意義を研究協力者と確認することができた。現地での聞き取り調査、研究協力者を招聘しての研究会の開催を予定どおり行った。前年度までに構築した研究協力者との協力関係をさらに強固にすることができた。新住民言語教育が開始されることから、それを一つの研究対象とすることを企図していたが、研究が進展し研究分担者(林初梅)の成果を生んだ。民間非営利組織の重要性を追求する今年度の目標に沿って、聞き取り調査等を進展させることができた。調査対象について中国・台湾のジャーナリズム史に関わる影響関係に新たに着目することとなったが、これは当初予期していなかったことで、資料の整理・分析が終わっていない。比較考察の対象となる日本での外国人児童生徒教育の歴史・現状把握については、研究組織各々が調査・分析を進めたが、全体としての共通認識には達していない。最終年度に入るので、成果の公表に努める。前半には、前年度末の研究会でテーマとなった、民間非営利組織の役割・意義について、報告書を作成する。内容は、張正、廖雲章両氏の活動と思想的背景が中心になるが、日本の外国人児童生徒教育における民間非営利組織の役割・意義・今後の展望についても考察する。そのための聞き取り調査、資料収集を行う。年度末には、「新南向政策」の人権・多元性の重視という特徴に光を当て、移民支援、言語教育、国際関係構築の実態と今後の展望をテーマとする公開研究会を開催する。そして、日本の状況への提言を行いたい。そのための聞き取り調査、資料収集を行うとともに、研究会開催等により、研究組織各員の知識共有、理解進展を図る。研究代表者および研究分担者は、それぞれ台湾において研究協力者から「新南向政策」の進展状況の説明を受けた。そして、初等教育から高等教育にわたる外国人児童生徒教育・国際教育の施策展開の現状を確認した。「新南向政策」は、東南アジアを主とする近隣諸国と、政治・経済・文化・教育など多方面において民主的な友好関係を確立しようとする台湾民進党政権の外交方針としてアピールされている。その展開を注視する意義を台湾の研究協力者とあらためて共有することができたことは、日台共同研究の重要性を確認するものとして意義があったと感じている。台湾の小学校では、「十二年国民基本教育課程綱要総綱」に基づき、2018年8月から新住民言語教育が実施される。「新南向政策」と関連が強いものと位置づけられ、本研究の重要な検討対象となることが確認できた。年度末には、台湾から研究協力者2名を招聘し、都内で公開研究会(「新南向政策とは何かー台湾の挑戦ー」発表者:翁麗芳(国立台北教育大学)「新南向政策とその学校教育におよぼした波紋」、洪福財(国立台北教育大学)「新住民語文課程列入国小必選修ー2019語文領域課綱的挑戦」会場:聖心女子大学4号館/聖心グローバルプラザ)を開催した。(2018年2月3日)台湾での聞き取り調査および台湾の研究協力者による現状報告を踏まえ、経済発展を支える移民政策、多元文化社会を支える人権政策、それらの政策の実効と継続を具体化する教育政策の関連を分析する中で、学校内外での教育支援や政策への提言を行う民間非営利組織が重要な役割を果たしていることが分かってきた。現地での聞き取り調査、研究協力者を招聘しての公開研究会の開催を予定どおり行った。研究協力者との研究協力体制をさらに確固にできた。新住民言語教育の開始という画期にあたり、それを一つの研究対象とすることで研究が進む見通しを得た。聞き取り調査などにより、民間非営利組織の重要性が分かってきた。今後の本研究の分析・考察の一つのポイントとすることができた。比較考察の対象となる日本での外国人児童生徒教育の歴史・現状の把握は進まなかった。

学校内外での教育支援や政策提言を行う民間非営利組織の重要性に着目し、精力的に移民支援活動を展開するジャーナリスト張正、廖雲章両氏に聞き取り調査を行った。台湾における両氏の活動については、研究協力者(翁麗芳)から詳細な情報を得た。また、関連する他の移民支援団体の活動の実地調査を行った。調査内容の検討により、張正、廖雲章両氏の活動には、移民の自己表出を重視する特徴を認めた。さらに、両氏には人権派の社会学者成露茜の影響が大きいと把握し、思想上の影響について考察した。この両氏の活動の特徴及び成露茜の人権思想の影響については、年度末の研究会(2019.2.15聖心女子大学台湾から研究協力者2名参加(翁麗芳、洪福財))において公表し、意見を交換した。成露茜に止まらず、父親で近代中国のジャーナリズム界に大きな足跡を残した成舎我を視野に入れるアイディアが示唆され、それに取り組むこととなった。同研究会においては、「十二年国民基本教育課程綱要総綱」に基づき2018年度から開始された新住民言語教育の実施状況と課題について、研究協力者から説明を受けた。教学体制や教材整備に課題はあるが、多元文化を追求する教育施策として、「新南向政策」に通じる民進党政権の価値観が反映しているとの見解に及んだ。このテーマについては、研究分担者(林初梅)が主に取り組んだ。経済関係強化だけではなく人権や多元文化による東南アジア諸国等との関係強化という観点から「新南向政策」を論じる意義を研究協力者と確認することができた。現地での聞き取り調査、研究協力者を招聘しての研究会の開催を予定どおり行った。前年度までに構築した研究協力者との協力関係をさらに強固にすることができた。新住民言語教育が開始されることから、それを一つの研究対象とすることを企図していたが、研究が進展し研究分担者(林初梅)の成果を生んだ。民間非営利組織の重要性を追求する今年度の目標に沿って、聞き取り調査等を進展させることができた。調査対象について中国・台湾のジャーナリズム史に関わる影響関係に新たに着目することとなったが、これは当初予期していなかったことで、資料の整理・分析が終わっていない。比較考察の対象となる日本での外国人児童生徒教育の歴史・現状把握については、研究組織各々が調査・分析を進めたが、全体としての共通認識には達していない。計画どおり、台湾において、「新南向政策」の下での外国人児童生徒教育および国際関係構築について調査を行う。その際、前年度に一つの検討事例とすることとした小学校での新住民言語教育、および前年度に重要な着目点と定めた民間非営利組織の活動について詳しく調査を行う。日本での外国人児童生徒教育の歴史・現状の把握を行い、外国人児童生徒教育に関わる政策提言性についての比較考察に備える。年度末に公開研究会を開催し、「新南向政策」の実施状況を報告するとともに、外国人児童生徒教育に関わる政策提言性について意見交換を行う。最終年度に入るので、成果の公表に努める。前半には、前年度末の研究会でテーマとなった、民間非営利組織の役割・意義について、報告書を作成する。内容は、張正、廖雲章両氏の活動と思想的背景が中心になるが、日本の外国人児童生徒教育における民間非営利組織の役割・意義・今後の展望についても考察する。そのための聞き取り調査、資料収集を行う。
抗NMDA受容体抗体がうつ病の予後経過に与える影響の検討

うつ病の病態機序において、グルタミン酸受容体の1つであるN-methyl-D-aspartate受容体(NMDAR)の関与が指摘されるものの、うつ病患者における抗NMDAR抗体の保有率に関する研究は不足している。本研究では、うつ病を含む気分障害患者の血清・髄液中の抗NMDAR抗体保有率を調査し、また抗体価が精神症状と関連するかを検討した。岡山大学病院を受診し初期診断が気分障害であった患者のうち同意が得られた63名より、髄液または血清を採取し、cell based assay法を用いて抗NMDAR抗体(NR1A/NR2B IgG抗体)の有無を調べた。また陽性患者では簡易精神症状評価尺度(BPRS)を用いて治療前後の精神症状をスコア化し、抗体価との関連を単回帰分析にて解析した。63名中4名の髄液から抗NMDAR抗体を検出した。この4名は抗精神病薬・気分安定薬の治療に対して反応が乏しく、神経学的所見は臨床経過に沿って経時的に出現した。検査所見では、脳波異常が3名、頭部MRIの異常所見が1名、髄液中の細胞数増多が3名、オリゴクローナルバンド陽性が3名であり、1名が血中抗アクアポリン4抗体陽性であった。それぞれの患者に免疫療法や必要に応じた抗腫瘍療法が施行され、効果が見られた。BPRSは、測定不能であった1例を除き、3名で免疫療法後のスコアが減少しており、抗NMDAR抗体の抗体価とBPRSスコアに弱い関連が見られた。以上のことから、初期診断で気分障害と診断される患者の中に、抗NMDAR抗体脳炎患者が混在している可能性が明らかとなり、これは両疾患がグルタミン酸神経伝達の機能障害という共通の病態機序を持つためであることが示唆された。免疫療法により抗体価が減少しそれに伴い精神症状も改善したことから、初期診断が気分障害の患者においても、抗NMDAR抗体の有無を念頭に入れることが重要である。岡山大学病院を受診した精神疾患患者のうち、同意が得られた患者から血液または脳脊髄液を採取し抗NMDAR抗体を同定し、抗体の有無または抗体価を測定した。これまでに同意が得られた112名の精神疾患患者を対象に抗NMDAR抗体の有無を調査したところ、初診時診断が双極性障害13名中2名(15.4%)、統合失調症圏38名中1名(2.6%)の患者において、髄液検体で抗NMDAR抗体が陽性であった。そのうち2名は血清においても陽性を確認した。抗NMDAR抗体陽性患者は、向精神薬は無効であり免疫療法を受け、抗体の陰転化と精神症状の改善度には一致が見られた。また、うつ病患者31名やその他の精神疾患患者30名は髄液または血清で陰性であった。今後もサンプルを増やし知見を蓄積する予定である。また上記臨床研究的検討から得た知見にもとづき、基礎研究アプローチにより、免疫学的・炎症学的な観点で、抗NMDAR抗体の影響を、細胞、げっ歯類モデルを用いて、分子・細胞・回路・生理・行動レベルにおいて解析した。Wister妊娠ラットより胎児を抽出し大脳皮質初代培養細胞を作成し、Day In Vitro (D.I.V.)初日に抗NMDAR抗体(1陽性患者血清、2市販のウサギ抗NMDAR 1A抗体)を加え、D.I.V.3で神経突起伸長、神経遊走制御に重要である中心体の動態を検討したところ、1、2で処理した神経培養サンプルともに、神経突起の伸長抑制、中心体の機能障害がみられた。また抗体を除去したところ、2で処理した神経細胞においてのみレスキューされ、患者抗体では不可逆であった。当初予定した計画に沿って進展していると考える。

以上のことから、初期診断で気分障害と診断される患者の中に、抗NMDAR抗体脳炎患者が混在している可能性が明らかとなり、これは両疾患がグルタミン酸神経伝達の機能障害という共通の病態機序を持つためであることが示唆された。免疫療法により抗体価が減少しそれに伴い精神症状も改善したことから、初期診断が気分障害の患者においても、抗NMDAR抗体の有無を念頭に入れることが重要である。臨床研究的検討においては、今後もサンプルを増やし知見を蓄積する予定である。また、臨床評価のドメインとして、患者ごとに1症状の重症度、2認知機能、3社会性、4治療反応性をディメンジョナルに評価し、抗NMDAR抗体の有無・抗体価が関連するかを、背景要因・環境要因(精神疾患の家族歴、物質依存の有無、パーソナリティ傾向など)を加味して解析する予定である。基礎研究的検討においては、神経細胞をD.I.V.28まで培養し、樹状突起、シナプス、スパイン形成に対する、抗NMDAR抗体が与える影響について検討中である。また、子宮内胎生期マウス脳に抗NMDAR抗体を注入することで、in vivo脳発達における、抗NMDAR抗体の影響を検討する予定である。さらに、これらのマウスを用い、精神疾患関連行動学的各ディメンジョン(不安、抑うつ、情動、認知機能など)について解析し、また免疫療法、向精神薬投与の効果を検討する予定である。H29年度は、基礎研究において、細胞実験が主体であり動物実験には十分に着手できておらず、1,000,245円をH30年度に繰り越す形となった。H30年度には、cell based assay法を継続で行いつつ、細胞実験、遺伝子実験、動物実験などを計画しているため、次年度使用額を併せて計画的に使用していく予定である。
日本海型ブナ実生の生長における最適照度と葉緑素量の関係

1研究目的・意義群馬県沼田市の玉原高原では日本海型ブナ林が見られる。林床はチシマザサに覆われているブナの実生の生長には照度不足が予測されるが、実生の生育に高い照度が必要なく、逆に高い照度は阻害傾向もあることも分かった。そこで、ブナの実生にとって最適な照度であるかをそのときの葉緑素量(SPAD値)を調べることで判定する指標にすることが出来るかを葉緑素量と照度及び生長量との相関関係があるか調べた。2結果(1)光について森林内の照度は一定ではなく,場所,天候,時間によって変化する。そのため光はではなく、積算光量子量を測定した。光量子量は5月から6月は増加したが,葉が展開したため6月から7月,8月へ低下した。10月から11月は落葉のため増加した。(2)光量子と生長量について積算光量子と葉面積、葉数,樹高,幹の直径、年生長量(芽輪痕間の長さ)に相関がみられなかった。(3)光量子と葉緑素量について積算光量子と葉緑素量に相関はみられなかった。(4)葉緑素量と生長量について葉緑素量と生長量に相関はみられなかった。3考察生長は光合成量と呼吸量の差によって生み出されるものであるので,数枚の葉の光量子量を調べたのでは生長量との相関関係を導き出せないのではないかと思われる。葉も色々な方向を向いており,1枚1枚受け取る光量子の量は異なるので,その光量子のばらつきから生長量との関係を比較できないのだと思われる。積算光量子と葉緑素量に相関がみられない理由は不明である。積算光量子と葉緑素量に相関がないことから、葉緑素量と生長量にも相関がないと思われる。4結論森林内での測定の場合、葉緑素量を調べることで最適照度を判定する指標にすることはできない。
ドライビングシミュレータを用いた事故再現手法に関する研究

本研究では、ドライビングシミュレータを用いた事故解析手法を開発することを目的として、ドライバビリティ評価の基礎実験、典型的な事故状況を想定した回避実験を行った。基礎実験としてはドライビングシミュレータの時間遅れに対するドライバビリティの評価を行い、車線追従成績(パフォーマンス)が一見落ちないように見える状況でも生理的指標から見ると心拍変動解析(ストレス)が大きく、ドライバリティ総合的に低下する場があることが確認された。また回避実験では、回避内容の分析結果を実車でのデータと比較して、シミュレータにおいても同様の回避操作を行っていることを確認するとともに、将来的なITSを見据えた操舵支援装置を提案し、同様の回避実験により大幅な回避性能の向上を確認した。また、アイマークレコーダを用いた自動運転から手動運転への切り替え方法の評価と、身体障害者用車両を想定したジョイスティック車の操作性向上のための研究を行った。ジョイスティック車については具体的にはジョイスティックの反力の利用、ジョイスティックの操作量と実舵角の関係を速度依存にしたり、非線形の関係にしてシミュレータで実験を行った。その結果、操作性の向上に関して一定の成果をあげる事ができた。また人の四肢末端には、各方向に対しての剛性の分布を表したスティフネス楕円が存在し、ジョイスティックの位置や反力分布が操作性に影響してくることを実験にて明らかにした。ドライビングシミュレータを用いた事故解析手法を開発することを目的として、本年度はその準備段階としてドライビングシミュレータの改良とドライバビリティ評価の基礎実験、および典型的な事故状況を想定した回避実験を行った。まずドライビングシミュレータの改良に関しては、新たにモーション装置を持つ可動式のドライビングシミュレータを製作した。モーション装置の制御により加速度の模擬方法を検討し、ドライバを乗せた評価実験により傾斜を用いた加速度感覚発生方法を採用した。これにより従来の固定式シミュレータ比べ臨場感が向上し、危険回避などの実験における実車感覚の再現性が向上した。次にドライビングシミュレータを用いた基礎実験としてドライバビングシミュレータの時間遅れに対するドライバビリティの評価を行った。評価はドライバの車線追従成績(パフォーマンス)と心拍変動解析(ストレス)の2つの観点から行った。両者の結果には開きがあり、パフォーマンスが一見落ちないように見える状況でも、生理的指標から見るとストレスが大きくドライバビリティの総合的に低下する場合があることがわかった。今後本手法を応用することで事故解析においてもパフォーマンスとストレスの両面からの事故要因の分析が可能になると思われる。さらに、ある地域での交通事故状況のデータを元に、良くあるパターンの事故をシミュレータ上に再現し、回避操作の解析によってドライバ特性を見る基礎実験を行った。回避操作内容の分析結果を実車でのデータと比較して、シミュレータにおいても同様の回避操作を行っていることを確認した。また危険な状況でドライバが回避できる余裕時間や、操舵可能な最大角速度などについても数名の被験者から基礎データを収集した。さらにこれらのデータを元に得られた傾向から将来的なITSを見据えた操舵支援装置を提案し、同様の回避実験により大幅な回避性能の向上を確認した。平成11年度は、前年度に引き続きドライビングシミュレータを用いた事故解析手法を目的とし、ドライビングシミュレータの更なる改良と様々な状況での車両挙動及びドライバビリティの解析を行った。シミュレータの再現性をより高くする為にモーション制御のアルゴリズムに並進動作を加えることを試みた。まだアルゴリズムとして不十分な点も見受けられるが、車両の始動、停止時の再現性はこれにより高まると思われる。また、被験者車両による単独走行から他の車両が存在するより複雑な交通環境を構築した。これにより実験環境が現実の道路交通の環境に近くなり、実験データの信頼性が向上すると考えられる。今回はドライバビリティ指標の一つとしてアイマークレコーダを用い、運転中のドライバの注視位置を得られより幅広い解析を可能にした。身体障害者用車両を想定した研究は、下肢が不自由な障害者を想定した車両としてジョイスティック車、および両手のみで運転できる特殊装置を取り付けた車両(以降手動運転補助装置付車両と呼ぶ)に関して研究を行った。ジョイスティック車、手動運転補助装置付車両についてドライビングシミュレータを用いて操縦性を調べた。また、ジョイスティック車については運転操作が非常に困難であるため、操作性を向上させるために研究を行った。具体的には、ジョイスティックの反力の利用、ジョイスティックの操作量と実舵角の関係を速度依存にしたり、非線形の関係にしてシミュレータで実験を行った。

その結果、操作性の向上に関して一定の成果をあげる事ができた。また人の四肢末端には、各方向に対しての剛性の分布を表したスティフネス楕円が存在し、ジョイスティックの位置や反力分布が操作性に影響してくることを実験にて明らかにした。また、同時に実車にて手動運転補助装置を取り付け実験を行っている。
細胞複製制御におけるCa^<2+>の役割の分子生物学的研究

本研究の目的は細胞複製過程におけるCa^<2+>を中心としたシグナル伝達の分子機構を明らかにすることである.具体的には,酵母の性フェロモンによって誘導されるCa^<2+>の流入,または流入したCa^<2+>の受容または伝達に欠損をもつと考えられる突然変異株群(mid1mid5)を解析することにより,Ca^<2+>シグナルの発生から受容・伝達に至るまでの遺伝子ネットワークを明らかにすることであった.本年度は特にCa^<2+>の流入に欠損をもつmid1株と,流入したCa^<2+>を受容または伝達できないmid2株をそれぞれ相補する遺伝子(MID1とMID2)を単離し,構造解析と両遺伝子の破壊株の細胞周期に関する解析を行った.その結果,MID1遺伝子は548アミノ酸残基から成り,疎水性領域を4ヶ所もつタンパク質をコードしていることを明らかにした.その領域の1つのアミノ酸配列は動物細胞の種々のイオンチャネルの膜貫通領域のアミノ酸配列と相同性があった.MID1遺伝子破壊株の解析から,MID1遺伝子は生育に必須の遺伝子であり細胞周期のG_1期における出芽とM期における核分裂に必要であることが分った.一方,MID2遺伝子産物は376アミノ酸残基から成り,膜移行のためのシグナル配列,動物細胞のイオンチャネルと相同な膜貫通領域を1つおよびCa^<2+>結合領域と考えられる領域を1つもっていることを明らかにした.MID2遺伝子破壊株は正常に増殖できた.両遺伝子間の相互作用を調べた結果,MID2遺伝子はmid1変異を抑圧できるが,MID1遺伝子はmid2を抑圧できなかった.このことは,一連のCa^<2+>シグナルのカスケードのなかで,MID2遺伝子産物はMID1遺伝子産物の下流で働くことを示している.この遺伝学的結論は,mid1変異株はCa^<2+>流入に欠損をもち,MID2遺伝子産物はCa^<2+>結合領域をもつという上述の知見をうまく説明できる.本研究の目的は細胞複製過程におけるCa^<2+>を中心としたシグナル伝達の分子機構を明らかにすることである.具体的には,酵母の性フェロモンによって誘導されるCa^<2+>の流入,または流入したCa^<2+>の受容または伝達に欠損をもつと考えられる突然変異株群(mid1mid5)を解析することにより,Ca^<2+>シグナルの発生から受容・伝達に至るまでの遺伝子ネットワークを明らかにすることであった.本年度は特にCa^<2+>の流入に欠損をもつmid1株と,流入したCa^<2+>を受容または伝達できないmid2株をそれぞれ相補する遺伝子(MID1とMID2)を単離し,構造解析と両遺伝子の破壊株の細胞周期に関する解析を行った.その結果,MID1遺伝子は548アミノ酸残基から成り,疎水性領域を4ヶ所もつタンパク質をコードしていることを明らかにした.その領域の1つのアミノ酸配列は動物細胞の種々のイオンチャネルの膜貫通領域のアミノ酸配列と相同性があった.MID1遺伝子破壊株の解析から,MID1遺伝子は生育に必須の遺伝子であり細胞周期のG_1期における出芽とM期における核分裂に必要であることが分った.一方,MID2遺伝子産物は376アミノ酸残基から成り,膜移行のためのシグナル配列,動物細胞のイオンチャネルと相同な膜貫通領域を1つおよびCa^<2+>結合領域と考えられる領域を1つもっていることを明らかにした.MID2遺伝子破壊株は正常に増殖できた.両遺伝子間の相互作用を調べた結果,MID2遺伝子はmid1変異を抑圧できるが,MID1遺伝子はmid2を抑圧できなかった.このことは,一連のCa^<2+>シグナルのカスケードのなかで,MID2遺伝子産物はMID1遺伝子産物の下流で働くことを示している.この遺伝学的結論は,mid1変異株はCa^<2+>流入に欠損をもち,MID2遺伝子産物はCa^<2+>結合領域をもつという上述の知見をうまく説明できる.
網膜光障害の発生機構とその防衛法の検討

昼光色螢光燈による光照射(1.2x10^4mW/m^2)で無麻酔・無拘束のWistar系ラットを一定時間光照射し、網膜光化学障害の閾値と光照射後の暗所での回復(dark recovery)の検討で、12時間以上の光照射、14日間のdark recoveryで有意に低いERG a-波及びb-波振幅が得られ、光顕的に上方網膜の外顆粒層の強い減少が見られた。blue lightによる網膜光化学障害の検討では、4.0x10^4mW/m^<22>の照射光強度では30分以上の光照射でERG a-波、b-波及び律動様小波はラットでは有意に低下した。dark recovery14日までは振幅の増大が見られた。7000luxの照明下に7日間おいた家兎EOGの明順応後の振幅は22%の減弱を示した。ラットでは、光障害後の杆体の細胞死のピークは2-3日であったが錯体では2-3週あたりであった。光障害の早期に内層にapoptosisが多く見られ、内顆粒層と神経節細胞の細胞死はnecrosisの形態を示した。網膜光化学障害に対しラットでは、0.5mg/体重(g)以上のアスコルビン酸全身投与、ヘパリン結合性細胞成長因子であるMidkine1μg/μl、bFGF 1μg/μl硝子体内注入で有意な防衛作用を示した。α-トコフェロールは欠乏餌と補填餌飼育ラットでは網膜内含有量に80倍の違いがあったが、光照射後両群のERG及び光顕的に外顆粒層に差は認めなかった。電顕では短時間光照射で視細胞外節の乱れが欠乏餌群で著明であったが、12時間以上の光照射ではその差は見られなかった。しかし視細胞核のpyknosisが24時間光照射後補填群では60%であるのに欠乏餌群では90%であり、この細胞核の濃縮はapoptosisによるものと考えた。ラット・家兎を用いて、可視光線での網膜光障害を検討した。光照射装置:ラットの実験では光照射光源には、蛍光燈を使用したX線写真読影用シャウカステンを用いた。前面のプラスチック板面の輝度は2000cd/m^2であった。家兎の実験では、同様に蛍光燈を使用した証明装置を試作した。家兎眼前で4000luxであった。動物は無麻酔・無拘束状態で一定時間光照射した。照射中の温度は室温とし、温度上昇を防ぐために換気は充分行った。連続光照射後に暗所飼育(dard recovery)を2週間行い、ERG記録を行った。ERG記録は、500W Xenon光源からの刺激光を中性フィルターを使用し1.0log単位で調整し順次強い刺激として記録した。刺激時間は5msec。家兎での結果:試作した光源では、24時間、48時間の連続光照射ではERG、EOGには変化は見られなかった。ラットでERG変化の閾値設定:2、4、6、8、10、12、24、48、72時間の連続照射を行った。10時間以内の連続照射では、2週間後のERGは無照射群(対照群)との間にERGa-波振幅、b-波振幅・頂点潜時には差を認めなかった。

しかし12時間以上の連続照射では、両群の間に有意の差を認め、照射群では極度の低振幅であった。その後の実験では全て12時間照射、2週間のdark recovery後のERG記録で検討した。薬物による防御効果の検討:(1)Vitamin C:光照射24時間前と直前に投与すると、0.5mg/体重gr以上では有意な防御作用が認められた。(2)Midkine:1μg/μl溶液の硝子体内投与で、有意の防御効果が認められた(本実験のみ150foot candle1週間連続照射)。(3)Vitamin E:Vitamin E欠乏餌飼育と補填群で検討した。両群間の網膜内Vitamin E含有量に有意の差を認めたが、正常対照群の間に照射後のERGに差を認めなかった。青色フイルター(HOYA B-390)と熱吸収フイルター(HOYA HR-30)を通過したXenonランプからの光でラットを照射した。照射光のエネルギーは4.0×10^4mW/m^2であった。5、15、30分、1、2、3時間の照射後14日間のdark recoveryの後ERGを記録した。30分以上の光照射でERGa-波、b-波及び律動様小波は有意に低下した。dark recoveryの長さに関する検討で、14日までは振幅の増大が見られたが、それ以上の日数をおいても振幅の増大は見られなかった。2.白色光(螢光燈)網膜障害の電顕的検索杆体に比べ錐体の方が光障害に対して強く、杆体の細胞死のピークは23日であったが錐体のそれは23週あたりであった。光障害の早期に内層にapoptosisが多く見られた。内顆粒層と神経節細胞の細胞死はnecrosisの形態を示した。この所見はBuechi & Szczesny(1996)の報告とは異なるが、彼らはrose bengal静注後に光照射している点が、今回の結果と異なる理由と考え、現在特殊染色によりなお検討中である。3.白色家兎での光障害の眼電図(EOG)による検討白色家兎を照度約7000luxの螢光燈光照射ケージ内で7日間飼育後にEOG検査を施行した。暗順応終了時の振幅を100として、暗順応及び明順応下の光照射群と非照射群とを比較した。明順応開始30分の時点では無光照射群の振幅は166±38%であったが、光照射群では129±17%と低値を示した。