hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
日本語版マギル疼痛質問票による口腔顔面領域の病態診断法

対象疾患は歯髄炎と根尖性歯周炎群43例,抜歯後疼痛群15例,顎関節症群192例,炎症群59例,扁平苔癬群16例,神経痛群62例,義歯性疼痛群155例,悪性腫瘍群13例,非定型顔面痛群67例,さらに本質問票掲載表現がみられることから三叉神経麻痺群20例を追加した計642例である。疾患別疼痛表現選択数では,全体として非定型顔面痛群が最も多く,義歯性疼痛群が最も少なかった。表現グループを構成する各表現に与えられた強度得点による多重比較では,歯髄炎と歯周炎群および神経痛群の得点が高く,ついで非定型顔面痛群であり,他の疾患群の得点は低かった。疾患に特異的な表現を明らかにするため,それぞれの疾患の全患者のうちの20%以上に選択された表現をとりあげた.同時に各表現選択の有無を二値独立変数としてその疾患罹患の有無を従属変数としたロジスティック回帰分析を実施して各疾患毎に相対危険度が大きい表現用語を抽出した.その結果相対危険度が大きく,かつ20%以上の患者に選択された表現として,歯髄炎と歯周炎群では「うずくような」が,抜歯後疼痛群では「ジーンと感じる」が,炎症群では「うずくような」が,神経痛群では「ビーンと痛みが走る」「針で突くような」が悪性腫瘍群では「さわられるといたい」が,非定型顔面痛群では「ひどく不快な」が,三叉神経麻痺群では「しびれたような」「ぴりぴり」「ジーンと感じる」が特異表現として抽出された.しかし顎関節症群および扁平苔癬群,義歯性疼痛群では20%以上の患者に選択されると同時に相対危険度も大きい表現はみられなかった.口腔顔面領域の各種疼痛患者の痛みの多元的評価と、「表現用語の自由選択法」によって疾患別に特有の表現用語を選択し、疼痛病態と表現用語の関連性を明らかにすることで病態診断の一助とすることを目的に、本年度は、世界的に用いられている多元的疼痛質問票(McGill Pain Questionnaire)の日本語版(佐藤愛子ら訳:日本語板マギル疼痛質問票)を口腔顔面領域の各種疼痛疾患患者に応用し、共通プロトコールによるデータ集積と各疾患の多元的評価およびその統計分析を行う予定とした。現在、各支部への共通プロトコールの配布は終了しており、各支部データ集積が行われてきている。日本語板マギル疼痛質問票の基礎的検討では、本質問票は患者の性格には左右されないことが示唆された。疼痛患者の内容は顎関節症、三叉神経痛、義歯由来痛、非定型顔面痛、歯痛、癌性疼痛など多彩である。これまでのデータ分析結果で、三叉神経痛では日本語板マギル疼痛質問票にはない用語が多くの患者によって記載されていた。また顎関節症では女性の方が情動的表現を多く用いており、病悩期間の延長とともに情動的表現が増加していた。非定型顔面痛では選択用語数が増加していたなどの特徴がみられている。しかし、義歯由来痛では義歯をはずしていると無痛となり、また歯痛や炎症性疼痛では冷罨法など患者自身の工夫や努力で無痛化や強度の低下が生じることから、どの時点での評価とするかなど問題点もみられた。今回の予算執行が平成7年12月と遅く、このためセンターや支部での機器の設置が遅延したことから実際の可動は平成8年1月となってしまった。そのため研究期間が短くデータの集積が遅れている。平成8年度にもデータ集積を行いながら当初の研究目的を達成したいと考えている。疾患に特異的な表現を明らかにするため,それぞれの疾患の全患者のうちの20%以上に選択された表現をとりあげた.同時に各表現選択の有無を二値独立変数としてその疾患罹患の有無を従属変数としたロジスティック回帰分析を実施して各疾患毎に相対危険度が大きい表現用語を抽出した.その結果相対危険度が大きく,かつ20%以上の患者に選択された表現として,歯髄炎と歯周炎群では「うずくような」が,抜歯後疼痛群では「ジーンと感じる」が,炎症群では「うずくような」が,神経痛群では「ビーンと痛みが走る」「針で突くような」が悪性腫瘍群では「さわられるといたい」が,非定型顔面痛群では「ひどく不快な」が,三叉神経麻痺群では「しびれたような」「ぴりぴり」「ジーンと感じる」が特異表現として抽出された.しかし顎関節症群および扁平苔癬群,義歯性疼痛群では20%以上の患者に選択されると同時に相対危険度も大きい表現はみられなかった.
リーマン面上の有理型関数体及び正則関数環の研究

今回は非コンパクトなリーマン面上の極値関数であるAhlfors functionについての存在および一意性について研究をした。今までの研究により有限型のリーマン面上のAhlfors functionについていくつかの結果が得られてきたが、今回の研究では特に有限型でないリーマン面上のAhlfors functionにつての研究の成果を得た。具体的には有限型でないリーマン面上のAhlfors functionの一意性にかんする性質、具体的な特徴付け、さらに具体的なAhlfors functionの表現についてもいくつか結果が得られた。特にリーマン面上のAhlfors functionの一意性とそのリーマン面上の有界正則関数環によるresolutionで得られるリーマン面上のAhlfors functionとの間に大きな関係があることが分かった。次いでAhlfors functionが一意に存在するためのリーマン面に対する十分条件を得た。ある有限型でないリーマン面に収束するような有限型のリーマン面の増大列があったとき、各有限型のリーマン面上のAhlfors functionと増大列の極限となるリーマン面上のAhlfors functionついての関係式を得た。同様にリーマン面上の収束する点列の各点におけるAhlfors functionと収束した点におけるAhlfors functionについても関係式を得た。
脊髄阻血の量的判定に関する新しい試み

【1】実験的検討:雑種成犬24頭をペントバルビタール麻酔下に胸部大動脈と左内胸動脈の遮断により脊髄虚血とし,FPCを記録した。非脱分極性筋弛緩剤非使用群12頭と使用群12頭の2群に分け,更にそれぞれをFPC消失後20,30,40,50分間遮断を継続した後,遮断を解除した。FPCは弛緩剤使用時にも導出感度をあげることにより非使用時と同様に良好に導出でき,全例で動脈遮断後3分以内に消失した。後肢麻痺の出現頻度はFPC消失後20,30,40,50分間遮断継続でそれぞれ0/6,2/6,5/6,6/6であった。【2】臨床的検討:一時バイパスあるいは部分体外循環を用いた胸部および胸腹部大動脈瘤手術13例にFPCモニタリングを施行した。high dose fentanyl麻酔,vecueonium0.05mg/kg/hrを持続注入し,直接の筋電位であるM波の波高を筋弛緩剤使用前の1020%に維持して良好なFPCモニタリングが可能であった。脊髄虚血が発生するとFPCの出現頻度が減少し,続いてFPCが消失することが観察された。FPCが消失しなかった6例には対麻痺はなかった。FPCの消失は7例に認められたが,そのうち消失後1,2,13,19,29分後に血流を再開しえた5例には対麻痺は見られず、血流再開がFPC消失後23分となった1例に不全対麻痺,肋間動脈の切離後FPCが消失したまま経過した1例に完全対麻痺を経験した。完全対麻痺の1例を除く全例にFPCの再出現がみられた。【3】結論:FPCは足部から無侵襲的に得られる筋電位で,脊髄前角細胞の電気的興奮性を直接反映しており,非脱分極性筋弛緩剤使用時にも導出可能である。脊髄虚血ではFPCの出現頻度が減少し,続いてFPCが消失するが,FPC消失後20分以内に脊髄虚血を解除すれば対麻痺発生を防止できる。FPCモニタリング法は術中の脊髄虚血を早期に探知しうるので有力な脊髄虚血モニターとなりうる。1.イヌによる実験的検討(1)脊髄の虚血条件の強弱とFPCの態度,およびFPCと対麻痺発生との関係:1)実験結果:1左内胸動脈と左鎖骨下動脈遠位の胸部大動脈を遮断する脊髄虚血モデルでFPCは全例3分以内に消失した。2上記のモデルで動脈遮断継続時間と対麻痺発生の頻度を検討すると,FPC消失後20分遮断継続では対麻痺発生は見られなかったが,30分遮断では33%,40分遮断では83%,50分遮断では100%の対麻痺発生が見られた。3筋弛緩剤使用時にも非使用時と同様の結果がえられた。2)結論:胸部大動脈遮断時のFPCモニタリング法は,対麻痺を起こす脊髄虚血を,皮膚電極だけの無侵襲的方法で3分以内に知ることが可能であり,FPC消失後15分以内に脊髄虚血を解除すれば,対麻痺発生を防止しうることが示唆された。

(2)FPCとSEPの比較:ニュ-ロパック8を購入し,FPCとSEPの同時刺激,同時記録が可能になった。上記と同様の脊髄虚血モデルでFPCの波形変化はSEPより早期に出現し,より鋭敏な脊髄虚血モニタ-となりうることが示唆された。2.臨床的検討胸部および胸腹部大動脈瘤8例にFPCモニタリングを施行した。FPCの消失が4例に認められたが,そのうち,消失後2分および13分で血流を再開しえた2例には,対麻痺は見られず,血流再開がFPC消失後23分となった1例は痙性対麻痺(3カ月後歩行可能)に,また,大動脈遮断前に肋間動脈が切断され,その後FPCの出現を確認できなかった1例は弛緩性対麻痺となった。結論:FPCモニタリング法は何らかの補助手段を用いて大動脈遮断部末梢の血流を保てば,術中の鋭敏な脊髄虚血モニタ-として使用できる。1,イヌによる実験的研究(1)脊髄虚血発生後25分前後でFPCが消失する比較的弱い脊髄虚血条件では、対麻痺を起こさない脊髄虚血時間はFPC消失後2025分と、強い虚血条件より510分程度延長すると考えられる。(2)FPCと体性感覚誘発電位(SEP)を比較すると、強い脊髄虚血条件ではFPCはSEPより12分早く消失し、中等度の虚血条件ではFPCの消失はSEPのamplitudeの有意の低下より10分程度早くみられた。このことはFPCがSEPより鋭敏な脊髄虚血モニターとなりうることを示している。2.臨床的検討(1)一時バイパスあるいは部分体外循環(F-F bypass)を用いた胸部および胸腹部大動脈瘤手術13例にFPCモニタリングを施行した。大動脈遮断部の末梢血圧を6070umHg程度に維持し、vecuronium0.05mg/kg/hrで持続注入して直接の筋電位であるM波の波高を筋弛緩剤使用前の1020%に維持すれば、良好なFPCモニタリングが可能である。また、胸部持続硬膜外麻酔を併用いると、FPCモニタリングがより容易になる。(2)脊髄虚血が発生すると、最初にFPCの出現頻度が減少し続いてFPCの消失がみられる。FPCの消失は7例に認められたが、そのうち、消失後1,2,13,19,29分で血流を再開しえた5例には、対麻痺は見られず、血流再開が、FPC消失後23分となった1例に不全対麻痺、また、大動脈遮断前に肋間動脈が切離され、その後術中、術後を通じてFPCが消失したまま経過した1例に完全対麻痺を経験した。完全対麻痺の1例を除く全例にFPCの再出現がみれらた。(3)FPCモニタリング法はfalse negativeがなく、FPC消失後から血流再開まで20分間を安全域とすれば、false positiveも少ないので、極めてspecifityの高い対麻痺発生モニターと結論しうる。
肝細胞立体培養の蛍光顕微鏡観察を目的とした計算機ホログラムによる立体動画表示

従来から行っていた複数枚の投影画像からその物体の3次元的な空間周波数分布を求め,これからホログラムを計算する方法の研究を進めてきた.この手法によれば、従来情報の取得が煩雑であった3次元物体の空間情報の取得が効率的に行え、顕微鏡下の生体などの立体再生も可能である。本研究では,蛍光顕微鏡の射出瞳面に適当な開口をもうけ,これを移動させることで,実質的な投影方向を決定し,投影画像を取得することにし、この情報をもとに、3次元像の再構成を行うことを目的とする。この目的を達成するために、既設の干渉顕微鏡からの3次元位相分布の再構成を、先ず試み、再構成アルゴリズムの確認を行井、更には、立体像表示プログラムの作成と表示実験を行った。具体的には、(1)蛍光顕微鏡による画像取得装置の開発を行い、蛍光顕微鏡の射出瞳面に移動開口を置きこれを移動制御する装置の基本設計を実施。(2)微分干渉顕微鏡による、定量的な位相分布の3次元取得の実験。(3)複数枚の位相分布画像から、3次元的位相分布の再構成プログラムの開発。(4)複数枚の画像からその3次元フーリエスペクトルを求め,ホログラムを合成するアルゴリズムを開発し、立体像表示の実験を行った。(5)'ホログラムの最適再生像位置の推定法の研究と実証的評価実験。これらの、アルゴリズムの開発と平行して、立体像の効率的計算法の研究も進め、円筒面や球面上にホログラムを作製する手法の検討と評価法の開発も行った。また、極めて細い顕微鏡対物連巣(直径5mm)を対象物に刺して投影像を取得する方法の基礎的検討も開始した。これらの、アルゴリズムの開発と平行して、立体像の効率的計算法の研究も進め、円筒面や球面上にホログラムを作製する手法の検討と評価、立体像の再生に関係して、立体像が計算空間のどこに再生されるか(再生像のピント位置)を自動的に判定する手法の開発も行った。
神経情報伝達におけるカルシニュ-リンサブタイプの役割に関する研究

カルシニュ-リンは中枢神経系に豊富に存在するタンパク質脱燐酸化酵素で、その活性はカルシウム/カルモジュリンによって調節されている。カルシニュ-リンはNMDA受容体、電位依存性カルシウムチャネル等の様々な機能蛋白の脱燐酸化を介して神経情報化を介して神経情報伝達において重要な役割を果たしていると考えられているが、その詳細は不明である。研究代表者らは遺伝子クロ-ニングの手法により、カルシニュ-リンの全一次構造を明かにし、さらにカルシニュ-リンには少なくとも2種類の異なる遺伝子によってコ-ドされるサブタイプが存在することを明らかにしてきた。本年度は以下のような成果をあげることができた。1.合成オリゴヌクレオチドを用いたin situ hybridization法、及び大腸菌発現タンパク質を抗原として抗体を作製し、免疫組織化学的手法により、カルシニュ-リン各サブタイプのラット脳内における分布を調べ、カルシニュ-リンAα、Aβの2つのサブタイプが異なる分布を示すことを明らかにした。2.精巣特異的に発現するカルシニュ-リン類似蛋白質のcDNAクロ-ニングに成功した。この分子はおそらく、精子のカルシウム依存的な運動性に関係するものと思われる。3.ほ乳類でのカルシニュ-リンの機能を明らかにするためのモデル系として有用な酵母において、カルシニュ-リンBに相当する蛋白質のcDNAクロ-ニングに成功した。4.カルシニュ-リンの活性化機構について、カルモジュリンアンタゴニストを用いて解析した。現在は、各サブタイプの大量発現系を確立し、活性化機構をさらに明らかにすること及び、特異的阻害葉の開発を目的として研究を進めている。
ラットにおける摂食時,オキシトシン分泌の機序の解析

1.ラットの血漿オキシトシン(OXT)に対する摂食の影響:雄ラットに、採血用の心房内カニューレを留置し、14-16時間絶食させた後、固型飼料を10分間自由に摂取させ、その前後で採血を行った。採血は摂食開始前2分間隔で4回、摂食開始後は2分間隔で10回と摂食開始後30分に1回行い、RIAによりOXTのアッセイを行った。摂食前後における血漿OXTレベルはコントロール期間の平均値は35.9±1.6pg/ml、摂食開始後10分間の平均値38.3±1.6pg/ml摂食開始後1020分間の平均値41.3±1.4pg/ml、摂食開始30分の平均値45.1±2.7pg/mlで、摂食開始後の値はいずれもコントロール値に対し有意に(P<0.05)高かった。個々のラットについて摂食前後のOXT分泌パターンを見ると、摂食開始前の血漿OXTレベルは比較的安定していたが、摂食開始後は13例中11例のラットに1020pg/mlの範囲の動揺が認められた。このOXTレベルの動揺を授乳中ラットの血漿OXTレベルの変動と比較すると、射乳反射の際のように明瞭なパルス状とならず、また、摂食開始時間との関係も個体差が著しかった。なお、摂水時には血漿浸透圧が低下する前に血漿OXTの減少が認められた。2.OXT細胞の活動に体するブドウ糖の影響:ウレタン麻酔下の授乳期ラットよりOXT細胞の活動を同定記録し、その活動に対する1.5Mブドウ糖i.P.投与の影響を観察した。1.5Mブドウ糖投与でOXT細胞の活動は抑制された。一方、同じ浸透圧濃度の食塩水投与ではOXT細胞の活動は興奮を示した。以上の結果から、ラットでは、摂食時にはOXT分泌が促進されることが明らかとなった。OXTは血中ブドウ糖濃度を上昇させると報告されているが、このブドウ糖濃度上昇はOXT細胞の活動を抑制するところから摂食時にはOXT細胞-血中ブドウ糖の間にネガティブフィードバック調節機構が働くことが示唆された。
マルチモーダルな時間知覚メカニズムの研究

時間的な同期性は、異なる感覚モダリティに提示された情報を統合するための重要な手がかりである。今年度は、クロスモダリティの同期・非同期判断において、クロスモダリティで対応付ける特徴がボトムアップに決定できないときに、対応付ける特徴をトップダウンの注意によって選択できるかという問題について検討した。4種類の異なる色がランダムに交替する視覚刺激の中から一種類の色に注目して1種類の聴覚刺激との時間的な同期性を判断する場合と(実験1)、4種類の異なる音高がランダムに交替する聴覚刺激の中から一種類の音高に注目して1種類の視覚刺激との時間的な同期性を判断する場合(実験2)について実験を行った結果、時間領域の注意選択は空間領域の注意選択ほどには完壁ではなかったものの、トップダウンの注意によって対応付ける特徴を選択してクロスモダリティの同期・非同期判断を行うことができることが示された(Fujisaki & Nishida, 2008, Neuroscience Letters)。さらに今年度は、モダリティをまたがった時間情報処理について、モダリティの組み合わせに依存する部分と、モダリティの組み合わせによらない共通した部分とを切り分けるために、これまで行ってきた視聴覚間の時間知覚特性の研究に、触覚という第3のモダリティを加えて検討を開始した。聴触覚、視触覚、視聴覚の組み合わせについて、同一被験者を用いて、同期・非同期弁別課題を行って比較した結果、周期刺激の場合、視聴覚、視触覚の組み合わせにおいては同期・非同期弁別の時間周波数限界が約4Hzとなるのに対して、聴触覚の組み合わせでは約8Hz以上と特異的に高くなることが明らかになった。また周期刺激ではなく、単一パルスを用いた場合にも、聴触覚の組み合わせの時間応答が特異的に高くなることが明らかになった。これらの結果は、クロスモダリティの時間判断はモダリティの組み合わせによらずほぼ同程度になるという従来説の見直しを迫る発見である。異なる感覚モダリティ間の同期検出のメカニズムを探るため、今年度は、まず視聴覚同期検出の時間特性について検討した。具体的には、さまざまな時間周波数、さまざまな波形で輝度(視覚刺激)と振幅(聴覚刺激)を変調した刺激を用いて、視聴覚信号の同期・非同期弁別課題を行った。その結果、周期パルス列で変調した刺激の場合、変調周波数が約4Hzを超えると視聴覚の同期・非同期弁別がほぼ不可能になることが示された。また同じ変調波形を用いたモダリティ内での同期・非同期弁別実験の結果から、この時間周波数の限界が、視覚、聴覚、どちらか片方のモダリティの末梢の時間応答の制約によるものではなく、より高次のメカニズムの性質を反映したものであることが示唆された。さらに、変調波形に正弦波、およびハイパスフィルタをかけた単一パルスを用いた実験の結果から、このメカニズムの特性が、単純な線形ローパスフィルタモデルでは説明できないことが示された。これらの結果は視聴覚の同期が、各モダリティの信号から抽出された、時間的にまばらな、目立った特徴の対応付けによって検出されているという仮説を支持している。また、視聴覚の同期が、比較的低次の注意資源をあまり必要としないメカニズムによって並列的に検出されているのか、それとももっと高次の注意資源を要するメカニズムによって逐次的に検出されているのかを探るため、視覚探索のパラダイムを用いた視聴覚同期検出課題を行って検討した。結果は逐次探索を示唆するもので、この結果もまた、視聴覚の同期性検出がより高次の、時間的に目立った特徴の対応付けにもとづいて行われるという仮説を支持するものである。視聴覚の時間的な同期・非同期検出と視覚の運動検出は、計算論的に類似した問題を扱っている。それは両者が共に「対応問題」を解かなければならないということである。18年度は、視聴覚の同期・非同期検出が、視覚における低次の運動検出のようなメカニズムによって行われているのか、高次の特徴マッチングのような処理で行われているのか、それとも(視覚の運動知覚と同様に)複数のメカニズムが存在しているのかという問題について検討した。視覚研究で用いられるランダムドットパタンの時間領域のアナロジーとして、ランダムパルス列を刺激に用いた。実験の結果、刺激パルスの提示密度が高い場合に、視聴覚の同期・非同期弁別課題が不可能になってしまうということを発見した。この結果は、空間的に高密度のランダムドットが提示されても低次の運動検出器の働きによって運動が検出されるという(ランダムドットキネマトグラム)、視覚の運動知覚のメカニズムとは異なるものである。続いての実験では、視聴覚の時間的な対応付けの限界が刺激の時間周波数や刺激全体の物理的な提示密度によって決まるのではなく、時間的に目立った「特徴」の時間的な提示密度によって決定されることを明らかにした。これら一連の実験の結果は、視聴覚の同期性判断が、高次の視覚運動検出と同様に、時間的に顕著な特徴の対応付けを行うメカニズムに基づいて行われていることを示唆している。上記の研究以外に、今年度9月からは、視聴覚のスピーチ知覚メカニズムについての研究を、米国ワシントン大学のPatricia K.Kuhl教授との共同研究として立ち上げ、半年間シアトルに滞在して実験を行った。また、Kuhl教授の解説論文の翻訳を担当した。

今年度は、クロスモダリティの同期・非同期判断において、クロスモダリティで対応付ける特徴がボトムアップに決定できないときに、対応付ける特徴をトップダウンの注意によって選択できるかという問題について検討した。4種類の異なる色がランダムに交替する視覚刺激の中から一種類の色に注目して1種類の聴覚刺激との時間的な同期性を判断する場合と(実験1)、4種類の異なる音高がランダムに交替する聴覚刺激の中から一種類の音高に注目して1種類の視覚刺激との時間的な同期性を判断する場合(実験2)について実験を行った結果、時間領域の注意選択は空間領域の注意選択ほどには完壁ではなかったものの、トップダウンの注意によって対応付ける特徴を選択してクロスモダリティの同期・非同期判断を行うことができることが示された(Fujisaki & Nishida, 2008, Neuroscience Letters)。さらに今年度は、モダリティをまたがった時間情報処理について、モダリティの組み合わせに依存する部分と、モダリティの組み合わせによらない共通した部分とを切り分けるために、これまで行ってきた視聴覚間の時間知覚特性の研究に、触覚という第3のモダリティを加えて検討を開始した。聴触覚、視触覚、視聴覚の組み合わせについて、同一被験者を用いて、同期・非同期弁別課題を行って比較した結果、周期刺激の場合、視聴覚、視触覚の組み合わせにおいては同期・非同期弁別の時間周波数限界が約4Hzとなるのに対して、聴触覚の組み合わせでは約8Hz以上と特異的に高くなることが明らかになった。また周期刺激ではなく、単一パルスを用いた場合にも、聴触覚の組み合わせの時間応答が特異的に高くなることが明らかになった。これらの結果は、クロスモダリティの時間判断はモダリティの組み合わせによらずほぼ同程度になるという従来説の見直しを迫る発見である。
細胞内抗原高感度検出素子の創製

抗体は万能分子認識素子としてプロテオーム解析ツールとしても大きく期待される一方,生理的条件の細胞質は還元条件であるため,各ドメインのフォールディングに必須なSS結合が出来ず,従来抗体を生細胞細胞質で機能させることは困難と考えられてきた。そこで我々は分子内シャペロン活性のあるマルトース結合蛋白質(MBP)との融合発現により,還元的細胞質においてファージライブラリから選択した一本鎖抗体を機能的に発現させ,生細胞内で抗原を検出できないか試みた。本年度はモデル抗原として活性検出の容易な転写制御因子の一つDR1を用い,GST-DR1を大腸菌で発現してこれを用いたヒト型一本鎖抗体ファージライブラリのスクリーニングによりDRI特異的クローン3種を得た。そこでこれらをMBPおよびGFPとの融合タンパク質としてCOS-1細胞に発現させ蛍光顕微鏡で観察したところ,結合能の高いクローン2種を導入した細胞質で特徴的な輝点を観察した。そこでDR1を赤色蛍光タンパクmDsRed2と融合させ共発現させたところ,両者の共局在が認められた。またウェスタンブロットにより,MBP-scFv-GFP融合タンパク質は期待された分子量のものが発現していることが確認された。また,これらのベクターとともにTBPを介した転写活性のレポーターとしてSV40あるいはHSP70Aプロモーター下流にルシフェラーゼ遺伝子をもつプラスミドを共導入したところ,Dr1の活性であるTBP依存的転写活性化の抑制(シグナル減少)を,MBP-scFvが抑えていることを示唆する結果を得た。また別の実験で,抗フルオレセインscFvを大腸菌細胞質でMBP融合タンパクとして発現させた場合,細胞内にフルオレセインを導入すると非発現菌より有意に蛍光強度が強まるとの結果を得た。以上より,一般的なファージ抗体ライブラリから取得した一般的な抗体であっても,MBPと融合させることで生細胞内で機能的に発現可能なことが示されたと考えられる。
嗅皮質「勾い分子地図」の機能解析から情動の神経機構解明へ

嗅皮質における匂い情報処理機構を解析する為に、感覚地図である「匂い分子地図」の構成原理を明らかにする事を目的に実験を進めた。内因性信号の光学測定法は比較的非侵襲性であり、感覚皮質の機能地図の解析に広く用いられている事から、本研究でもこの手法を用い解析を進めた。匂い分子単品、合成香料などを刺激として用い、それぞれの匂い刺激が嗅皮質上でどのように空間的に表現されているか解析を行った結果、それぞれの匂い刺激は嗅皮質の特定領域を活性化し、この空間パターンは異なった動物間でも保存されている事が明らかとなった。また、嗅皮質の機能解析を進める為には、嗅球「匂い分子地図」から更に情報処理の進んだ段階であると考えられる。従って、嗅皮質の機能解析を進めるためには、嗅球「匂い分子地図」の構成原理とその機能の理解が必須である。そこで、嗅球「匂い分子地図」の詳細な解析を行った。内因性信号の光学測定法と様々な匂い分子群を用い解析した結果、嗅球「匂い分子地図」上では、個々の糸球の活性化する匂い分子構造の特徴が、漸進的に体系的に表現されている事が明らかとなった。この成果は国際学会と論文で発表した。また、嗅球「匂い分子地図」の機能的意義を解析する為に、動物行動にとって重要な腐敗した食べ物から発せられる異臭の主な原因である、アミン類、脂肪酸類、アルデヒド類の匂いが、嗅球「匂い分子地図」上でどのように情報処理されているのか解析した。その結果、嗅球背側面の吻内側部に位置する糸球群が、これら匂い分子群の知覚に重要であり、また料理における香辛料を用いたこれら異臭のマスキングには、嗅球内局所神経回路での側方抑制が重要である事が明らかとなった。嗅皮質における匂い情報処理機構の解明を目指し、嗅皮質「匂い分子地図」に焦点をあて研究を行った。感覚皮質における機能地図の解析に広く用いられている内因性信号の光学測定法を用いることで、in vivoでの嗅皮質の光学測定を行った。嗅皮質は脳底部に位置する為にアプローチが困難であり、動物に対する侵襲性が高いために、安定した記録を行うことが困難であったが、手術法にさらなる改良を加えることで、より容易で動物に対する侵襲性が低い手術法の確立に成功し、嗅皮質から比較的安定した応答を得ることに成功している。匂い分子単品、合成香料や自然界の匂い等を刺激として用い、それぞれの匂い刺激が嗅皮質上でどのように空間的に表現されているのか解析を行った。その結果、特定の匂い刺激により、嗅皮質上の特定領域から応答が得られ、その空間的位置は異なった個体間でもほぼ保存されている可能性を示唆する結果を得ている。また、嗅皮質の機能地図は嗅球「匂い分子地図」から更に情報処理の進んだ段階であると考えられる。従って、嗅皮質の解析を進めていく上では、嗅球「匂い分子地図」のさらなる理解が必須であると考えられる。その為、嗅皮質の解析と平行し、嗅球「匂い分子地図」の詳細な機能解析も同時に行った。その結果、嗅球背側面、背外側面では個々の糸球を活性化する匂い分子構造の特徴が、「匂い分子地図」上で漸進的に体系的に表現されていることを見出した。この成果は国際学会で発表し、現在論文を投稿中である。また、アミンや脂肪酸に選択的に応答する糸球群について光学測定法と電気生理学的手法により解析を行った。その結果、これらの糸球群が、腐敗した食べ物から発せられる異臭の知覚に重要であり、また料理における香辛料を用いたこれら異臭のマスキングに嗅球内神経回路の側方抑制が重要であることを示唆する結果を得た。この成果は論文にまとめ現在投稿中である。
日本近代文学・思想史の実証的研究-大正教養主義における倉田百三を中核として-

平成9年度から11年度にかけて3年計画で行った本研究の研究成果は次のようである。すなわち、一、二年度に行った基礎資料の調査と収集をふまえて、三年度は更なる資料収集とその解読、整理を行い、それらのうえにたち、倉田百三及び大正教養主義の文学や思想の考察に入りその報告を段階的に行った。具体的には、以下の通りである。1、倉田百三文学観(庄原市)における調査当館所収の書簡、原稿、軸物類の整理とその報告。a,「倉田百三文学館所蔵<倉田百三関係資料>ー翻刻と紹介ー(一)(二)-」を『内海文化研究紀要』に掲載した。b,更に、その(一)(二)にあわせて、それらに収載できなかった資料類を加えて、『倉田百三文学館所蔵倉田百三の書と書簡<翻刻>』と題する報告書を作成した。2、倉田百三の文学や思想の整理。裏面に記したように、四つの関係論稿を作成し、公表した。3、綱島梁川記念室(岡山県上房郡有漢町)における調査。当室所収の関係書簡・文書類はきわめて難解であり、解読に思いの外時間がかかり、その報告は、今少し遅れる。しかし何らかの形で後日報告予定。以上が現段階での研究実績とその報告である。大正教養主義全体にかかわる総括はこれらの基本調査をふまえて、以降、継続して研究していきたい。本年度は、本格的な研究着手にいたる基礎的作業として、文献資料を購入し、大正教養主義における倉田百三と(見神の実験)で知られる網島梁川の思想的変遷を整理するとともに、倉田百三・網島梁川両思想家の資料発掘を行い、書誌学的整序をはかった。1.倉田百三文学館(庄原市)における調査倉田百三文学館が所蔵する書籍、雑誌および書簡等の調査とその整理を行った。書籍についてはすべて刊行年月日、発行所を調査記録し、雑誌『不二』および『生活者』については、全号調査の上、欠号を国立国会図書館、日本近代文学館等ですべて補い、基礎的調査を終了した。倉田百三文学館が常設展示している軸物、書簡、原稿類は写真撮影し、その翻刻の作業を継続しており、来年度中には終える予定である。また、文学館所蔵の書簡、原稿類(ともに未発表のものを含む)は、すべてコピーし、その翻刻の作業に着手している。2.網島梁川記念室(岡山県上房群有漢町)における調査網島梁川記念室所蔵の資料(書簡および原稿類)を写真撮影と複写を行い、その整理と翻刻に当たっている。これも、来年度中には作業終了の予定である。3.本年度購入した書籍および復刻雑誌は、『倉田百三選集』全13巻別巻1、復刻雑誌『生長する星の群』、宗教と文学関係書籍である。本研究第二年度にあたる本年度は、一年目の基礎資料収集を基底にして、更なる資料収集とその整理、そして、段階的にそれらの思想と文学の考察に入った。すなわち、下記の通りである。1.倉田百三文学館(庄原市)における調査当館所蔵の百三関係書籍、雑誌および書簡等の整理を行った。その内、書簡・軸物原稿類の翻刻については、大略完了、順次その報告を行うこととした。その第一部を「倉田百三文学館所蔵〈倉田百三関係資料〉-翻刻と紹介(一)-」として、発表予定。2.綱島梁川記念室(岡山県上房郡有漢町)における調査当記念室所蔵の資料(書簡および原稿類)の整理と翻刻を継続して行っている。3.「新しき村」福岡支部関係資料の発見と考察福岡支部旧会員真砂嘉十郎氏関係の「新しき村」および倉田百三関係の新資料の発見と紹介。4.百三の文学・思想の考察についてまずは、その初期の動向について考察。以上についての、段階的な成果と報告については、裏記の「研究発表」に記した。本年度は平成9年度から三年計画で始まった本研究の第三年目に当たり、全体のひとまずの総括

・整序を企図した。すなわち、一、二年度に行って来た基礎資料の収集をふまえて、更なる資料収集とその解読、その整理と報告を一つの課題とした。そして、それらのうえにたち、倉田百三及び大正教養主義の文学や思想の考察に入った。具体的には、以下の通りである。1、倉田百三文学観(庄原市)における調査当館所収の書簡、原稿、軸物類の整理とその報告。a,「倉田百三文学館所蔵〈倉田百三関係資料〉-翻刻と紹介(二)-」として昨昨年に続き『内海文化研究紀要』に掲載予定。b,更に、その(一)(二)にあわせて、それらに収載できなかった資料類を加えて、『倉田百三文学館所蔵〈倉田百三関係資料』と題する報告書を作成する。ほぼ、その策定を終え、近日中には刊行予定。2、倉田百三の文学や思想の整理。裏面に記したように、二つの関係論稿を作成、発表。3、網島梁川記念室(岡山県上房郡有漢町)における調査。当室所収の関係書簡・文書類はきわめて難解であり、解読に思いの外時間がかかり、その報告は、今少し遅れる。しかし、後日報告予定。以上が現段階での研究実績である。大正教養主義全体にかかわる総括はこれらの基本調査をふまえて、以降、継続して研究していきたい。
大規模疫学調査による欠損パターンの推移と口腔機能,QOL,全身状態との関連

本研究では大人数の地域在住高齢者を対象に、調査から得られた縦断的データを用いて欠損部位やパターンの変化について検討するとともに、欠損パターンと口腔機能、QOLや全身状態との変化や関連を検討することを目的としている。分析対象のデータには、SONIC研究ですでに調査を終了している対象者の70歳から90歳までの各年齢群のデータに加えて、新たな調査を実施し、無事にデータ収集を行うことができた。さらに、第127回日本補綴歯科学会学術大会にて、"咬合支持と隣接面接触情報をもとにした歯の欠損シミュレーション"というタイトルで、これまでに得られた2000名の高齢者の歯列データをデータ化し、隣接面の存在有無とその欠損パターンを分析することで、シミュレーションを開発しようとする取り組みについて発表を行った。さらに、平成30年度日本補綴歯科学会関西支部学術大会において、データサイエンスの歯科補綴学への応用に向けた取り組み、データ同化技術を用いた歯の喪失シミュレーションというタイトルで発表を行った。同発表の内容を以下に簡潔に示す。これまで収集した口腔検査データから、咬合支持の有無と隣接面接触の有無に関する情報を欠損パターンの遷移数理モデルとして離散モデル化し、咬合支持と隣接面の有無をセル・オートマトンで表し、咬合支持喪失を横断データから導き出した。歯の状態関数に対してパーセプトロンの重みを加えた尤度関数を確率的勾配降下法によって最小化することにより,残存歯数毎に各歯が失われる頻度を求めた.同シミュレーションの結果を,縦断データと比較した結果,統計的指標として,正確度0.93,精度0.95,再現率0.72,F値0.81という結果が得られた.咬合支持と隣接面有無の情報を用いることで,任意のヒトの歯の欠損パターンを推定可能であることが示唆された.初年度予定した新たなデータ収集は無事に全日程終了することが出来たため、順調であると言える。また、初年度から学会発表を行うことで、既存のデータを用いたシミュレーションの可能性について、またそれらについて我々が取り組んでいるということを、学内外を含めて周知できたことは非常に意義深いと考えている。今年度も新たな高齢者データの収集をSONIC研究に参画し、行っていく予定である。さらに、初年度に発表したシミュレーションにデータを加えつつ、新たな取り組みについても可能であれば学会発表等を行っていく予定である。当初予定していた物品が予定していた数より少量で済んだことや、予定していた額よりも若干安く購入できたことなどが挙げられる。ただしその額はさほど大きくないため、研究計画等にはほとんど影響せず今年度もほぼ予定通りの予算で実行可能だと考えている。
安定型狭心症における適切性使用基準（AUC）の医療経済効果

非侵襲的画像診断および侵襲的画像診断の適切性使用基準(AUC)の策定にあたって、3つの分野を設定した。1)各検査モダリティ(心電図、負荷シンチ、負荷エコー、負荷MRI、冠動脈カルシウムスコア:CCS、冠動脈CT:CCTA、冠動脈造影:CAG)を術前検査として用いる群のAUC、2)以前に検査を受けたことがあるかまたは既に冠動脈疾患と診断されている群に対するAUC、3)冠動脈疾患として検査を受けたことがない群におけるAUC、以上の3つである。これらの質問に対して78名の医師から回答を得た。その回答値を平均化することによって適切(A)、恐らく適切(M)、まれに適切(R)から構成されるJapan AUCを策定した。全82シナリオにモダリティ数を掛けた質問の合計は554であった。このうちの80シナリオにおける米国において策定されたUS AUCと日本人医師によるJapan AUCにおける完全一致率は39%であった。また各モダリティ別の一致率は心電図37%、負荷シンチ48%、負荷エコー50%、負荷MRI50%、CCS7%、CCTA18%、CAG60%という結果であった。1)群(術前検査群)においては7項目の質問に対して7つの検査モダリティのJapan AUCとUS AUCを比較したところ、49項目に対しての完全一致率は39%であった。2)群(冠動脈疾患群)においては50項目の質問に対して7つの検査モダリティのJapan AUCとUS AUCを比較したところ、337項目に対しての完全一致率は34%であった。3)群(冠動脈疾患非診断群)においては23項目の質問に対して7つの検査モダリティのJapan AUCとUS AUCを比較したところ、154項目に対しての完全一致率は49%であった。AUC策定アンケート調査の為のサイト構築と実際の回答を得るのに時間を要したが、当初予定していた回答数である80%程度の医師から回答を得たため、Japan AUCの策定に成功した。H31年度は学会・研究会における発表を通じてJapan AUCの修正を行い、更にアプリケーションソフトとして検索・引用出来るようにスマートフォン内への格納を目標とする。またJapan AUCの中で最も臨床上用いられる可能性の高い冠動脈疾患群と冠動脈疾患非診断群においてのフィードバックを行う予定である。具体的には個々の回答とJapan AUCの差が大きかった回答者に対して前述のスマートフォンアプリケーション使用によるフィードバックを通して診断モダリティ選択における動機づけの変更が可能であったかを検証する。またアプリケーションソフト使用による臨床上の満足度も併せて検討する予定である。安定型狭心症患者におけるクリニカルシナリオに対するアンケート調査によって本邦の非侵襲的画像診断検査または侵襲的血管造影検査の指導的医師達の意見を集約することをH29年度の目標とした。具体的にはカルシウムスコアリング、心臓MRI検査、心臓CT検査、心臓核医学検査、カテーテル検査、心臓エコー検査、心電図検査に係わるクリニカルシナリオを検討・作成した。検討した項目は、「狭心症状のある・なし」、「狭心症状のない不整脈診断に対して」、「失神症状の有無」、「前回検査が異常で引き続いて行う90日以内の検査」、「前回検査が不明確で行う90日以内の検査」、「前回検査から90日を超えて行われるフォローアップ検査」、「単純なフォローアップ検査」、「冠血行再建歴の有無と症状の有無」、「非心臓手術における術前検査」、「移植手術の前検査」、「運動処方のための検査」、「心臓リハビリテーション前評価」である。クリニカルシナリオ総数は82個とした。これらのクリニカルシナリオに基づいて、1. WEBサーバ環境構築、2.アンケート回答者のID / PASS発行、3.アンケート内容確定(前述のクリニカルシナリオを指す)、4.アンケートシステム制作完了、5.アンケートシステム動作検証・修正、5.アンケートシステム動作検証・修正の順番で作業を進めた。現在WEBアンケートシステムの動作検証中であるが間もなく7.アンケート回答者へURL・ID・PASSSの展開、8.アンケート回答結果CSVダウンロードの順番で作業を進める予定である。クリニカルシナリオの内容は複雑を極めている。具体的にクリニカルシナリオの大項目としては、「狭心症状のある・なし」、「狭心症状のない不整脈診断に対して」、「失神症状の有無」、「前回検査が異常で引き続いて行う90日以内の検査」、「前回検査が不明確で行う90日以内の検査」、「前回検査から90日を超えて行われるフォローアップ検査」、「単純なフォローアップ検査」、「冠血行再建歴の有無と症状の有無」、「非心臓手術における術前検査」、「移植手術の前検査」、「運動処方のための検査」、「心臓リハビリテーション前評価」である。またクリニカルクリニカルシナリオの中項目では「検査前確率による違い」、「前回検査からの経過時間<2年未満、2ー5年、5年以上」、「冠動脈カルシウムスコアが100以上、100ー400以内に収まっている」、「心不全の有無」などを勘案して総数は82個とした。これらのクリニカルシナリオに基づいて、1. WEBサーバ環境構築、2.アンケート回答者のID / PASS発行、3.アンケート内容確定(前述のクリニカルシナリオを指す)、4.アンケートシステム制作完了、5.アンケートシステム動作検証・修正、5.アンケートシステム動作検証・修正の順番で作業を進めたが全項目の確認と各種ブラウザーからの正常なアクセスが可能か、WEBページの展開が正常かどうか、入力データのダウンロードが正常に行われているかの検証に時間がかかった。

非侵襲的画像診断および侵襲的画像診断の適切性使用基準(AUC)の策定にあたって、3つの分野を設定した。1)各検査モダリティ(心電図、負荷シンチ、負荷エコー、負荷MRI、冠動脈カルシウムスコア:CCS、冠動脈CT:CCTA、冠動脈造影:CAG)を術前検査として用いる群のAUC、2)以前に検査を受けたことがあるかまたは既に冠動脈疾患と診断されている群に対するAUC、3)冠動脈疾患として検査を受けたことがない群におけるAUC、以上の3つである。これらの質問に対して78名の医師から回答を得た。その回答値を平均化することによって適切(A)、恐らく適切(M)、まれに適切(R)から構成されるJapan AUCを策定した。全82シナリオにモダリティ数を掛けた質問の合計は554であった。このうちの80シナリオにおける米国において策定されたUS AUCと日本人医師によるJapan AUCにおける完全一致率は39%であった。また各モダリティ別の一致率は心電図37%、負荷シンチ48%、負荷エコー50%、負荷MRI50%、CCS7%、CCTA18%、CAG60%という結果であった。1)群(術前検査群)においては7項目の質問に対して7つの検査モダリティのJapan AUCとUS AUCを比較したところ、49項目に対しての完全一致率は39%であった。2)群(冠動脈疾患群)においては50項目の質問に対して7つの検査モダリティのJapan AUCとUS AUCを比較したところ、337項目に対しての完全一致率は34%であった。3)群(冠動脈疾患非診断群)においては23項目の質問に対して7つの検査モダリティのJapan AUCとUS AUCを比較したところ、154項目に対しての完全一致率は49%であった。AUC策定アンケート調査の為のサイト構築と実際の回答を得るのに時間を要したが、当初予定していた回答数である80%程度の医師から回答を得たため、Japan AUCの策定に成功した。H31年度は学会・研究会における発表を通じてJapan AUCの修正を行い、更にアプリケーションソフトとして検索・引用出来るようにスマートフォン内への格納を目標とする。各検査モダリティのエキスパート医師に選定に時間を要している。WEBアンケートの結果はCSVダウンロードによって1ー10の数値によって表される。1ー3はまれにに適切、4ー6はおそらく適切、7ー9は適切、0は無回答である。各質問項目における数値のへ金を求め、本邦における82個のクリニカルシナリオに対する意識調査結果とする予定である。また当院または当院の関連医療施設にて循環器内科修練を受け居ている医師からのWEBアンケートシステム回答も集積することを予定している。検討する差異は、1,日本国内におけるエキスパートと修練医との意識の違い、2,複数の米国学会間でコンセンサスの得られているクリニカルシナリオに対する本邦回答医師との差異である。これらの結果の差異を論文化し査読者と学会のコンセンサスを受けた上でその内容をスマートホンアプリとして構築予定である。構築されたアプリを使用することによって、本邦循環器内科修練医の対しては、本邦エキスパート医師の回答をフィードバックすることが可能となる。
絶対ガロア群とトポロジー

リーマン面のモジュライ空間の算術的な基本群,それは写像類群を副有限完備化したものによる有理数体の絶対ガロア群のある拡大となる.一方,写像類群を近似するある次数付きLie代数から,曲面の基本群のMalcev完備化の微分で,シンプレクティック元を消すようなもの全体のつくる次数付きLie代数(以後h(g)と書く)への,Johnson準同型と呼ばれる自然な射がある.上記算術的な基本群の幾何的な部分と数論的な部分は,それぞれ(位相的な)Johnson準同型の像と余核に現われることがわかっている.本研究はこれら両者の関係をトポロジーの立場から解明することを目指している.本年に実行した研究を具体的に記すと,つぎのようになる.1.Lie代数h(g)のコホモロジー群の元を大量に定義し,これらとh(g)のSp-不変な部分加群,およびKontsevichのある定理を経由して,自由群の外部自己同型群のホモロジー群の元との関連の本格的な研究に着手した.これらは,Galois元の平方根となることが予想されるものである.2.トレリ群の構造と絶対ガロア群の外表現との関連について,整数論および位相幾何学の双方の立場からの研究をさらに積み重ねた.本研究は極めて深く大きな課題であるため,全容の解明にはなお多くの年月を要すると思われるが,今後も着実な成果をあげていきたい.リーマン面のモジュライ空間の算術的な基本群,それはモジュライ空間のorbifoldとしての幾何学的基本群,すなわち写像類群を副有限完備化したものによる有理数体の絶対ガロア群のある拡大となる.一方,写像類群を近似するある次数付きLie代数から,曲面の基本群のMalcev完備化の微分で,シンプレクティック元を消すようなもの全体のつくる次数付きLie代数への,Johnson準同型と呼ばれる自然な射がある.上記算術的な基本群の幾何的な部分と数論的な部分は,それぞれ(位相的な)Johnson準同型の像と余核に現われることがわかっている.本研究はこれら両者の関係をトポロジーの立場から解明することを目指している.本年に実行した研究を具体的に記すと,つぎのようになる.1.次数6の場合にGalois元をコード図によって具体的に記述した.また種数2,1の場合の退化の様子も完全に決定した.2.コンピューターによる実験的計算の範囲を広め,次数10の場合の様相に関するデータを集め出した.3.一般の次数4k+2の場合のトポロジー,数論双方の立場からの理論的考察を進めた.リーマン面のモジュライ空間の算術的な基本群,それはモジュライ空間のorbifoldとしての幾何学的基本群,すなわち写像類群を副有限完備化したものによる有理数体の絶対ガロア群のある拡大となる.一方,写像類群を近似するある次数付きLie代数から,曲面の基本群のMalcev完備化の微分で,シンプレクティック元を消すようなもの全体のつくる次数付きLie代数(以後h(g)と書く)への,Johnson準同型と呼ばれる自然な射がある.上記算術的な基本群の幾何的な部分と数論的な部分は,それぞれ(位相的な)Johnson準同型の像と余核に現われることがわかっている.本研究はこれら両者の関係をトポロジーの立場から解明することを目指している.本年に実行した研究を具体的に記すと,つぎのようになる.1.コンピューターによる実験的計算の範囲を広め,次数10,14の場合に関する情報を集め始めた.2.表現論の方法を使うことにより,次数付きLie代数h(g)のSp-不変な部分加群のヤング図形による完全な記述を得た(一般の次数について,Galois元はこの部分加群に入ることが分かっている).リーマン面のモジュライ空間の算術的な基本群,それは写像類群を副有限完備化したものによる有理数体の絶対ガロア群のある拡大となる.一方,写像類群を近似するある次数付きLie代数から,曲面の基本群のMalcev完備化の微分で,シンプレクティック元を消すようなもの全体のつくる次数付きLie代数(以後h(g)と書く)への,Johnson準同型と呼ばれる自然な射がある.上記算術的な基本群の幾何的な部分と数論的な部分は,それぞれ(位相的な)Johnson準同型の像と余核に現われることがわかっている.本研究はこれら両者の関係をトポロジーの立場から解明することを目指している.本年に実行した研究を具体的に記すと,つぎのようになる.1.Lie代数h(g)のコホモロジー群の元を大量に定義し,これらとh(g)のSp-不変な部分加群,およびKontsevichのある定理を経由して,自由群の外部自己同型群のホモロジー群の元との関連の本格的な研究に着手した.これらは,Galois元の平方根となることが予想されるものである.2.トレリ群の構造と絶対ガロア群の外表現との関連について,整数論および位相幾何学の双方の立場からの研究をさらに積み重ねた.本研究は極めて深く大きな課題であるため,全容の解明にはなお多くの年月を要すると思われるが,今後も着実な成果をあげていきたい.
転写因子ＫＬＦ６による肥満と２型糖尿病の発症機序の解明

肥満と2型糖尿病は心血管疾患のリスク因子であり、発症機序の解明が急務である。転写因子KLF6は脂肪細胞分化を促進し、また高脂肪食を投与したKLF6ノックアウトマウスは体重増加や脂肪肝の形成が抑制されたため、肥満や2型糖尿病の病態形成におけるKLF6の関与が示唆された。高脂肪食を投与した肝細胞、脂肪細胞、マクロファージそれぞれにおける特異的KLF6ノックアウトマウスの検討から、肝細胞と脂肪細胞におけるKLF6の関与が示唆された。特に肝細胞においてKLF6がPPARalphaの発現を間接的に促進する、という作用機序が示された。肥満と2型糖尿病の治療開発にもつながる興味深い知見であると考えられる。(i)肝臓特異的KLF6ノックアウトマウスの解析:肝臓特異的KLF6ノックアウトマウスは高脂肪食負荷条件下では、体重増加が対照群と比較して有意に低減され、インスリン抵抗性を呈しにくく、耐糖能はより保持される、という表現型を呈した。KLF6が肝細胞においてmiRNA 10bの発現抑制を介してPPARaの発現を間接的に促進する、という作用機序が確認された。(ii)脂肪組織選択的KLF6ノックアウトマウスの解析:脂肪組織特異的KLF6ノックアウトマウスに高脂肪食負荷を行った。予備検討の段階であるが、下記結果が得られた。脂肪組織特異的KLF6ノックアウトマウスは対照群と比較して、体重増加が有意に低減され、肝重量が軽い一方、白色、褐色脂肪組織いずれも組織重量に有意な差は認められなかった。組織所見については脂肪組織特異的KLF6ノックアウトマウスで肝臓の脂肪変性が有意に抑制されており、また白色脂肪組織では小型脂肪細胞の数やその周囲の細胞成分が数多く認められた。これらは全身KLF6ヘテロノックアウトマウスに高脂肪食を負荷した際に認められた表現型と酷似しており、脂肪細胞においてKLF6が肥満や糖尿病形成において直接的に関与することを示唆している。(iii)マクロファージ選択的KLF6ノックアウトマウスの解析:高脂肪食負荷下でマクロファージにおけるKLF6の働きが肥満や糖尿病の病態形成に関与するかを検討するために、マクロファージ選択的KLF6ノックアウトマウスを作成し、高脂肪食を負荷した。マクロファージ選択的KLF6ノックアウトマウスにおける体重増加、肝臓や脂肪組織の組織重量と組織所見は対照群と比較して有意な差異を認めず、本疾患モデルにおいてKLF6がマクロファージにおいて果たす役割は大きくないものと考えられた。肝臓と脂肪組織それぞれにおける臓器特異的KLF6ノックアウトマウスを用いた検討を行っている。(i)肝臓特異的KLF6ノックアウトマウスの解析肝臓特異的KLF6ノックアウトマウスは既に作成済みで、予備検討および増殖段階に入っていたため、スムーズに実験を進めることが可能であった。予備的検討ではKLF6がPPARaの発現を制御することが示唆されていたが、さらに解析を進めたところ以下のような事実が明らかとなった。肝臓特異的KLF6ノックアウトマウスは高脂肪食負荷条件下では全身のKLF6ノックアウトマウスと同様に、体重増加が対照群と比較して有意に低減されており、インスリン抵抗性を呈しにくく、耐糖能はより保持されていた。KLF6をノックアウトした肝細胞を用いた培養細胞実験ではKLF6ノックアウトによりPPARaの下流因子であるTrb3やPEPCKのmRNAの発現が低減していた。PPARaの発現に関してはmRNAレベルでは影響を受けない一方で、タンパクレベルでは有意に低減されていた。KLF6のPPARaに対する作用は転写後調節であることが想定された。miRNAの発現をチェックしたところ、KLF6はmiRNA 10bの発現抑制を介して、PPARaの発現に間接的に関与していることが分かった。(ii)脂肪組織選択的KLF6ノックアウトマウスの解析下記のように脂肪組織特異的KLF6ノックアウトマウスを作成した。計画通りKLF6 floxマウスと脂肪組織特異的にCre recombinaseを発現するaP2-Creマウスを繁殖させ、それらを交配させることにより、脂肪組織特異的KLF6ノックアウトマウスのラインを獲得した。現在繁殖体制に入るとともに、少数例による予備的検討として高脂肪食負荷下において特に脂肪組織に着目した表現型の検討を行っている。KLF6が肝細胞においてmiRNA 10bの発現抑制を介してPPARalphaの発現を間接的に促進する、という作用機序が確認された。