hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
臓器の構築・維持を支えるシグナルファインチューニング

動物組織の構築や維持は、WntシグナルやShhシグナルなどの限られた種類のシグナル群によって制御される。しかしながら、わずかな数のシグナル群のON/OFFの制御のみで複雑な組織構築を支えられるとは考えにくい。これに加え、シグナル群の活動の局所的で厳密な微調整(シグナルファインチューニング)が必須であると考えられる。本研究ではまず、Wntシグナルのファインチューナー分子であるNLKについて解析を行い、NLKの機能破綻が悪性脳腫瘍を引き起こす分子基盤を解明した。また、大規模スクリーニングによりNLK特異的阻害剤を同定した。また、WntシグナルやShhシグナルの新たなファインチューナーを発見した。臓器の構築や維持は、WntシグナルやShhシグナル、Notchシグナルなどの細胞運命を制御するシグナル群によって制御される。非常に興味深いことに、臓器の構造や機能の複雑さに対して、臓器の構築・維持を支える細胞運命制御シグナルの種類はわずかである。しかしながら、わずかな数のシグナル群のON/OFFの制御のみで臓器の構築・維持を支えられるとは考えにくい。ON/OFF制御に加え、「シグナル群の活動の局所的で厳密な微調整(シグナルファインチューニング)」が臓器の構築・維持には必須であると考えられる。本研究では、タンパク質リン酸化酵素Nemo-like kinase(NLK)によるシグナルファインチューニングの分子基盤とその臓器構築・維持・破綻における機能を明らかにする。これにより、臓器の構築・維持を支える分子基盤の新たな一面を明らかにする。また、NLKの活性制御化合物も同定し、将来的な疾患治療・組織再生医療への貢献を目指す。本年度は、NLKの生体内における機能を詳細に解析するために、TALEN法を用いたNLKノックアウトゼブラフィッシュの作成と、GAL4-UASシステムおよび熱ショックにより時期組織と特異的にNLKを発現するゼブラフィッシュ系統の作成を行い、ほぼ完了した。また、哺乳動物細胞とゼブラフィッシュを用いたNLKの機能解析を行い、NLKが後脳においてShhシグナルを抑制して、後脳運動神経前駆細胞および小脳顆粒細胞前駆細胞の増殖を負に制御することを見いだした。また、NLK活性制御化合物を探索するための系をセットアップし、本スクリーニングを開始している。東京大学創薬オープンイノベーションセンターより15000種類程度の低分子化合の提供を受け、これらからNLK活性制御化合物の選別を行った。現在、一次スクリーニングがほぼ完了したところである。臓器の構築や維持は、Wntシグナルなどの細胞運命を制御するシグナル群によって制御される。本研究では、タンパク質リン酸化酵素NLKに特に注目してシグナルファインチューニングの分子基盤とその臓器構築・維持・破綻における機能を明らかにする。本年度は、昨年度より進めていた、NLKノックアウトゼブラフィッシュと、GAL4-UASシステム及び熱ショックにより時期組織特異的にNLKを発現するゼブラフィッシュの作成を完了し、それを用いてNLKの脳神経系及び消化器官における機能解析を進めた。NLKがShhシグナルの転写因子Gli1の保存されたセリン残基をリン酸化してShhシグナルを抑制し、神経前駆細胞の分化を導くことや、NLKが腸においてWntシグナルを正に制御して細胞増殖を正に制御することなどがわかってきており、現在これらについての論文を投稿準備中である。また、昨年度から行っているNLKの活性制御化合物の探索も行い、約16000化合物の中からin vitroにおいてNLKの活性を特異的に制御する化合物を発見した。加えて、NLKと、NLKをin vitroでリン酸化する分子であるHipk2の脊椎動物組織構築における関係を調べる過程で、Hipk2がNLKとは独立した経路でWntシグナルを制御することを見いだした(Cell Reports誌において発表)。本研究では、タンパク質リン酸化酵素NLKに特に注目してシグナルファインチューニングの分子基盤とその臓器構築・維持・破綻における機能を明らかにしようとしている。今年度は、ヒトの肝細胞がんや大腸がんの細胞株においてNLKをRNAiすると、細胞の生存活性が低下すること、即ちNLKがこれらのがん細胞の生存を正に制御することを突き止めた。また、昨年度までにin vitroscreeningで同定したNLK阻害剤が、ヒト細胞内においてもNLKの活性を抑制し、また、大腸がんや肝細胞がんの細胞株の生存活性を低下させることを発見した。さらに、ゼブラフィッシュを用いた解析により、Rasなどのがん遺伝子が関与する細胞間競合現象にNLKが関与することも発見した。

このように、NLKとがんの関わり、さらには、NLK阻害によるがん治療の可能性を示した。また、NLKによるシグナルファインチューニングを解析する過程で、ゼブラフィッシュ初期胚においてNFκBシグナルがNodalシグナルとユビキチンリガーゼPeli1によってファインチューニングされ、この制御が初期胚の背腹軸パターン形成に必須の働きを果たすことを見いだした(論文投稿中)。動物組織の構築や維持は、WntシグナルやShhシグナルなどの限られた種類のシグナル群によって制御される。しかしながら、わずかな数のシグナル群のON/OFFの制御のみで複雑な組織構築を支えられるとは考えにくい。これに加え、シグナル群の活動の局所的で厳密な微調整(シグナルファインチューニング)が必須であると考えられる。本研究ではまず、Wntシグナルのファインチューナー分子であるNLKについて解析を行い、NLKの機能破綻が悪性脳腫瘍を引き起こす分子基盤を解明した。また、大規模スクリーニングによりNLK特異的阻害剤を同定した。また、WntシグナルやShhシグナルの新たなファインチューナーを発見した。当初の予定通り、NLKの機能を改変した(あるいはNLKの機能を自在に改変できる)種々のゼブラフィッシュ系統の作成を完了することが出来た。さらに、これらを用いたNLKの機能解析も進め、神経系や腸におけるNLKの新たな機能が次々と明らかになりつつある。NLKの活性制御化合物の探索については、当初の期待以上にうまく行っており、in vitroにおいてNLKの活性を特異的に阻害する化合物と促進する化合物の双方が見つかってきている。また、NLKの活性制御機構を解析する過程で、タンパク質リン酸化酵素Hipk2を介した新たなWntシグナル制御機構を見いだした(Cell Reports誌において発表)。Hipk2をNLKの活性化因子として見なした当初の期待は外れたものの、Wntシグナル活性をファインチューニングする新たな機構を発見することができた。上記のことから、本研究はおおむね順調に進展していると考えている。27年度が最終年度であるため、記入しない。シグナル伝達新規に発見したNLKの機能について、当該分野の専門家と積極的に情報交換・共同研究を行い、研究のブラッシュアップを行いと共に、早期に論文発表できるよう全力を尽くして行く。また、発見したNLKの機能とがん・疾患の関係についても、専門家とのディスカッションを通じて詳細な解析を進めて行きたい。NLKの活性制御化合物については、ここまでで発見した化合物を起点に、「生体内でNLKの活性を制御でき、かつ毒性の少ない、疾患治療に寄与しうるような化合物」を作って行きたい。これにあたっても、有機合成や薬学の専門家との共同研究により、その研究を深化・加速して行きたい。
森林流域における積雪期の物質循環と微生物活動

当該研究課題に関する、新潟県・十日町、福島県・田島、日本アルプスにおける調査の結果明らかになったことの要点を以下にまとめる。新潟県・十上町における冬季降水中のNa^+濃度とMg^<2+>、Cl^-濃度それぞれの比は、海水中の濃度比と良く一致し、これらのイオンのほとんどが海塩を起源とするものであり、冬季降水中に含まれる化学物質の約7割が海塩を起源とするものである。冬型の気圧配置時の大陸からの寒気の吹き出しによる降水では、輪島での対流混合層が高く、十日町における降水中のNa^+濃度も高くなる。福島県・田島の林冠環境の異なる3地点(コナラ林、アカマツ林、林外)において、積雪中の化学物質濃度および生物量の変化を調べた。積雪中のPO^<3->_4濃度は、アカマツ林内とコナラ林内で林外よりも高いことから、積雪中のPO^<3->_4は有機物の二次生成物と考えられる。顕微鏡観察によると、林内の積雪中には細菌・カビ・藻類の存在が認められるが、積雪初期には低密度で、融雪最盛期に増加する。積雪中のクロロフィルaとフェオフィチンaの濃度は、アカマツ林内においてコナラ林、林外よりも高い。また、アカマツ林内およびコナラ林内のクロロフィルa濃度は、融雪最盛期に増加し、藻類が増加することを示している。福島県・田島の温暖積雪流域において、3水年にわたり渓流水質を継続的に調査した。降水量の極大は夏季に観測されるが、流出高は融雪期に最大となる。融雪時には、渓流水中のHCO^-_3濃度が減少し、Cl^-,NO^-_3、SO^<2->_4濃度は増加する。そのために、渓流水のpHが一時的に低下する。融雪期には比較的長い期間pH低下が持続する。夏季の渓流水中では、陰イオンでHCO^-_3が優先するが、融雪時には低下し、Cl^-+NO^-_3+SO^<2->_4の割合が多くなる。日本アルプスの蔵の助雪渓においても、融解期には雪渓表面に藻類やバクテリアが繁殖し、アルベドを低下させている。当該研究課題の対象が積雪期のため、初年度の現在は、集中的に観測および分析を行っている段階であり、本年度行った調査研究および今後の予定は次の通りである。◎田島流域(福島)流域から流去する物質を測定するために、流量計およびウォーターサンプラー等を設置し、積雪期前から観測を開始した。降水・積雪・融雪水・河川水を継続的に採取しており、逐次、化学分析および微生物分析を行う予定である。◎十日町市(新潟)昨冬季に採取した、降水・積雪・融雪水の化学分析を行い、現在解析中である。今冬季についても、降水・積雪・融雪水を採取継続中であり、逐次分析を行う予定である。◎母子里流域(北海道)夏季に、河川調査および融雪期の観測のための準備を行った。本流域の融雪最盛期は4月下旬のため、その時期に集中的な観測を行う予定である。

当該研究課題の2年目である本年度の進捗状況は、研究対象の3地域でそれぞれ次のようにまとめられる。◎会津田島(福島)昨年度から観測を継続し、研究成果の一部は、次頁のように学会誌に3編発表した。わが国の温暖積雪地の渓流水も融雪期にpHが低下し酸性化していることと、積雪中の窒素化合物が微生物活動によって消費されていることを明らかにした。今後も、降水・積雪・融雪水・河川水を継続的に採取し、逐次、化学分析および微生物分析を行う予定である。◎十日町市(新潟)これまで採取した、降水・積雪・融雪水の化学分析を行い、現在解析中である。今冬季についても、降水・積雪・融雪水を採取継続中であり、逐次、学会誌に成果を発表する予定である。◎母子里(北海道)これまでに採取した河川水および積雪試料の分析を行うとともに、逐次、学会誌に成果を発表する予定である。当該研究課題に関する、新潟県・十日町、福島県・田島、ネパール・ヒマラヤ、日本アルプスにおける調査の結果明らかになったことの要点を以下にまとめる。新潟県・十日町におけ冬季降水中のNa^+濃度とMg^<2+>、Cl^-濃度それぞれの比は、海水中の濃度比と良く一致し、これらのイオンのほとんどが海塩を起源とするものであり、冬季降水中に含まれる化学物質の約7割が海塩を起源とするものである。冬型の気圧配置時の大陸からの寒気の吹き出しによる降水では、輪島での対流混合層が高く、十日町における降水中のNa^+濃度も高くなる。福島県・田島の林冠環境の異なる3地点(コナラ林、アカマツ林、林外)において、積雪中の化学物質濃度および生物量の変化を調べた。積雪中のPO_4^<3->濃度は、アカマツ林内とコナラ林内で林外よりも高いことから、積雪中のPO_4^<3->は有機物の二次生成物と考えられる。顕微鏡観察によると、林内の積雪中には細菌・カビ・藻類の存在が認められるが、積雪初期には低密度で、融雪最盛期に増加する。積雪中のクロロフィルaとフェオフィチンaの濃度は、アカマツ林内においてコナラ林、林外よりも高い。また、アカマツ林内およびコナラ林内のクロロフィルa、融雪最盛期に増加し、藻類が増加することを示している。福島県・田島の温暖積雪流域において、3水年にわたり渓流水質を継続的に調査した。降水量の極大は夏季に観測されるが、流出高は融雪期に最大となる。融雪時には、渓流水中のHCO_3^-濃度が減少し、Cl^-、NO_3^-、SO_4^<2->濃度は増加する。そのために、渓流水のpHが一時的に低下する。融雪期には比較的長い期間pH低下が持続する。夏季の渓流水中では、陰イオンでHCO_3^-が優先するが、融雪時には低下し、Cl^-+NO_3^-+SO_4^<2->の割合が多くなる。ネパール・ヒマラヤの氷河の消耗域の氷上融水系には、ユスリカ類の水性昆虫とソコミジンコ類の甲殻類を確認した。これらの食物となっているのは、氷上で増殖している藻類やバクテリア類であることが考えられる。藻類やバクテリアの繁殖は、モンスーン期に盛んになり、氷河上を汚れ層が覆うような状況になる。この汚れ層は、氷河表面のアルベドを低下させ、ひいては氷河の融解を促進させる。日本アルプスの蔵の助雪渓においても、融解期には雪渓表面に藻類やバクテリアが繁殖し、アルベドを低下させている。
「ゲリラ豪雨」予報高精度化に向けた超高頻度・高解像度雷発光データ同化

課題1年目である今年度は、雷発光データ同化を行うために必要な観測演算子を構築することに主眼を置いて研究を行った。観測演算子とは、データ同化を行う際に、数値モデルの変数と観測データの関係性を記述する式である。ここでは、100万分の1秒のオーダーで観測される雷の発光位置と、数値気象モデルの物理量との関係を記述するべく、研究を推進した。観測演算子を構築するためには、まず高精細な数値モデルのデータが必須である。ただ、単に数値モデルで計算しただけでは、モデルの不確実性や現象のカオス性によって、観測との不整合が大きくなり、観測演算子の信頼性が大きく損なわれる。そのため、科研費申請書での計画通り、最新鋭の気象レーダーを30秒毎に数値モデルに同化し、高精細かつ高精度のモデルデータの作成を行った。30秒毎の高頻度データ同化そのものは本研究課題の最終目標ではないが、Miyoshi et al.(2016), Maejima et al. (2017)以来の数少ない研究成果として位置づけられ、本課題の中間成果として重要な意義を持つ。続いて、上記数値モデルデータと雷発光データの関係性を見つける研究を行った。で一般的に、強い上昇気流と多量の氷晶(あられ)の存在し、その氷晶同士が衝突する際に雷が発生する。そして詳細な雷発生の基準は、Takahashi(1978)の室内実験によって明らかにされている。代表者は、Takahashi(1978)での基準を踏まえつつ、数値モデルの同化サイクルと同じ30秒毎に、モデルの氷晶の質量と、雷の発光頻度を比較した。その結果、30秒間で20回以上の発光頻度を持つ場合において、発光頻度とモデルの氷晶の質量との相関係数が0.78という関係性を見つけた。この関係性は、観測演算子記述の上で大きな礎となり得る。以上の研究成果は、日本気象学会秋季大会にて口頭発表を行っている。申請段階における年次計画では、1年目の研究到達点として観測演算子の構築を挙げていた。そのための具体的なプロセスとして、(1)高精細・高精度な数値モデルデータセットの成、(2)雷の先行研究のレビュー、(3)雷発光データとモデルデータとの比較、の3つを提示していた。まず(1)に関しては、気象レーダーデータを同化した高解像度のシミュレーションを行って、30秒毎、100mメッシュの数値モデルデータセットが出来上がっており、計画を達成済みであると言える。(2)に関しては、Takahashi(1978)をはじめとした雷現象そのものの研究、さらにDickson et al.(2016)など、プリミティブではあるが雷データ同化に取り組んだ研究のレビューが行われ、本研究の持つべき方向性と意義をより強固なものにすることが出来た。(3)に関しても、観測演算子記述に向けた取り組みが一通り行われ、それらの成果は既に日本気象学会で報告済みである。ただし、観測演算子構築については、より精緻な記述に向けて改善の余地が指摘されている。観測演算子はデータ同化における要となる重要なポイントであり、シミュレーションの精度を左右するため、気象学会等で寄せられたコメントを十分に吟味して、改善を図る必要がある。全体を通して進捗を振り返ると、申請書での年次計画事項は全て遂行されており、順調な進捗が図られていると言える。しかし、指摘された課題点の解決は2年目も一部継続して行う必要がある。そのため1年目の研究計画の評価は、「概ね順調に進展している」とする。2年目の研究計画は、1年目に進めてきた観測演算子開発について一部継続するという点を除き、申請書の年次計画と大きな変更はない。本年度は最初に観測演算子について見直しを進める。そのための手法を以下に述べる。雷が発生してから電気的に中和するまでを1のシリーズとして、雷発光データを1つ1つのシリーズに分ける。この手法については、最近Yoshida et al.によって提唱されており、本研究で対象としている事例に適用することで、膨大な雷発光データから、大気中の氷晶が衝突して雷が発生する数マイクロ秒の期間を抽出することが出来る。これにより氷晶と雷発光の関連性を一段と浮き上がらせることが期待される。本研究課題で用いている雷発光データは世界的に見ても唯一無二のデータセットであり、観測演算子を構築しただけでも十分な科学的インパクトがある。そのため、観測演算子構築の段階で論文執筆に取り組む。続いて、構築した観測演算子を用いた雷データ同化実験に取り組む。まず少数の観測データを1回同化することによって、同化の前後で具体的にどのようなインパクトがあるか検証する。そして同化システムでおかしな挙動がないか、技術的側面についても十分な確認を行う。1回同化で妥当性が確認された段階で、本格的なデータ同化実験に移行する。雷発光データ同化が具体的にゲリラ豪雨の予測改善のどうつながるか、検証を行う。また、雷発光データ同化によって数値モデルで表現される大気がどのように変わったのか、物理的な解釈についても留意しながらデータ同化実験を進める。

ここでは、100万分の1秒のオーダーで観測される雷の発光位置と、数値気象モデルの物理量との関係を記述するべく、研究を推進した。観測演算子を構築するためには、まず高精細な数値モデルのデータが必須である。ただ、単に数値モデルで計算しただけでは、モデルの不確実性や現象のカオス性によって、観測との不整合が大きくなり、観測演算子の信頼性が大きく損なわれる。そのため、科研費申請書での計画通り、最新鋭の気象レーダーを30秒毎に数値モデルに同化し、高精細かつ高精度のモデルデータの作成を行った。30秒毎の高頻度データ同化そのものは本研究課題の最終目標ではないが、Miyoshi et al.(2016), Maejima et al. (2017)以来の数少ない研究成果として位置づけられ、本課題の中間成果として重要な意義を持つ。続いて、上記数値モデルデータと雷発光データの関係性を見つける研究を行った。で一般的に、強い上昇気流と多量の氷晶(あられ)の存在し、その氷晶同士が衝突する際に雷が発生する。そして詳細な雷発生の基準は、Takahashi(1978)の室内実験によって明らかにされている。代表者は、Takahashi(1978)での基準を踏まえつつ、数値モデルの同化サイクルと同じ30秒毎に、モデルの氷晶の質量と、雷の発光頻度を比較した。その結果、30秒間で20回以上の発光頻度を持つ場合において、発光頻度とモデルの氷晶の質量との相関係数が0.78という関係性を見つけた。この関係性は、観測演算子記述の上で大きな礎となり得る。以上の研究成果は、日本気象学会秋季大会にて口頭発表を行っている。申請段階における年次計画では、1年目の研究到達点として観測演算子の構築を挙げていた。そのための具体的なプロセスとして、(1)高精細・高精度な数値モデルデータセットの成、(2)雷の先行研究のレビュー、(3)雷発光データとモデルデータとの比較、の3つを提示していた。まず(1)に関しては、気象レーダーデータを同化した高解像度のシミュレーションを行って、30秒毎、100mメッシュの数値モデルデータセットが出来上がっており、計画を達成済みであると言える。(2)に関しては、Takahashi(1978)をはじめとした雷現象そのものの研究、さらにDickson et al.(2016)など、プリミティブではあるが雷データ同化に取り組んだ研究のレビューが行われ、本研究の持つべき方向性と意義をより強固なものにすることが出来た。(3)に関しても、観測演算子記述に向けた取り組みが一通り行われ、それらの成果は既に日本気象学会で報告済みである。ただし、観測演算子構築については、より精緻な記述に向けて改善の余地が指摘されている。観測演算子はデータ同化における要となる重要なポイントであり、シミュレーションの精度を左右するため、気象学会等で寄せられたコメントを十分に吟味して、改善を図る必要がある。全体を通して進捗を振り返ると、申請書での年次計画事項は全て遂行されており、順調な進捗が図られていると言える。しかし、指摘された課題点の解決は2年目も一部継続して行う必要がある。そのため1年目の研究計画の評価は、「概ね順調に進展している」とする。2年目の研究計画は、1年目に進めてきた観測演算子開発について一部継続するという点を除き、申請書の年次計画と大きな変更はない。
日本近世文学の文化基盤としての茶の湯文化に関する包括的研究

本研究は、従来、曖昧なままに検証されてきた文学作品と茶の湯の関係性について、江戸時代の作品を中心にして、よりその実態が明確になるように、文学作品と茶の湯の双方向から検証した。研究の成果としては、日本文学、とくに江戸時代の作品において緊密な関係があることを検証し証明した。具体的には井原西鶴の作品群やそれにつづく浮世草子、さらには江戸時代に大量に制作された随筆作品における茶の湯との関連性を精査したものである。平成25年度は前半期に元禄期以降に刊行された茶書の整理と精査を主としておこなった。茶書は主として藤村庸軒(1613ー1699)の茶話を娘婿の久須美疎安が記録した『茶話指月集』のように聞書系ものを中心とした。後半では茶の湯文化に関連する文学作品について検証した。俳諧・咄本についても検討して、昨年度におこなった随筆とあわせて収集し、個々の作品についてどのように茶の湯文化が浸透しているかを検討した。その過程で、西鶴の遺稿集のひとつであり、これまであまり高く評価されてこなかった元禄9年(1696)刊行の浮世草子『万の文反古』巻一の四「来る十九日の栄耀献立」の内容と遠藤元閑の茶懐石料理の解説書で同じく元禄9年(1696)に刊行された『茶湯献立指南』とを比較検討することで、この献立が従来の指摘のように視覚的に具体的な再現の可能な者ではなく、むしろ再現性が不可能な献立であった可能性を指摘し、そこにこそ文学的な価値があることを解明した。日本近世文学会『近世文藝』100号に投稿し受理され、掲載の予定となっている。また、前年度につづき俳茶会「夕顔の」歌仙についても、その連句と献立、および道具組の綿密な関係性についての検証も行ない、台湾の中國文化大学外國語文學院日本語文學系主催100學年國際學術研検會での国際シンポジウムで発表し、食文化をも取り込んだ「俳茶会」という日本文学のあり方について解説し、国際的にも広く日本文化。日本文学についての理解を得られたものと考える。平成24年度においては日本近世文学中期作品群見られる茶の湯関連記事の精査をおこなった。茶の湯文化はたんに表現だけではなく、そこには所作や器物が付随しており、現代のように映像文化が発達していなかった時代に、その実態がどのようであったかを解明するには、たんに文字言語による表現からの分析だけではなかなか難しい点がある。しかしながら、台子の点前などの伝書を少しずつ解明していくことで、その理解も進展する可能性を追究しようとしているのが本研究の特色であり、成果である。1浮世草子にみられる茶の湯文化関連記事の精査については永井堂亀友『風流茶人気質』(明和7/1770)や『當世宗匠気質』などの茶の湯の場面についてその実態とあわせて調査をした。この成果については、長谷川強ほか編『浮世草子事典』(2014年・新典社刊行予定)に項目執筆で発表される。2咄本にみられる茶の湯文化関連記事の精査については、『咄本大系』を悉皆調査して、茶の湯の場面のあるはなしを摘出した。3俳諧・川柳資料などの韻文についての精査は、矢野夏子「『俳諧茶の湯』の興行の実態ー『むかし合』所収『夕顔の』の巻を中心にー」(茶の湯文化学会『茶の湯文化学』4巻1997年pp.62-81)が紹介する「夕顔の」の巻について精査を行った。この成果は、講座日本茶の湯全史『茶と文学』(2013年・茶の湯文化学会編・思文閣出版刊行)において発表する。日本近世文学と日本を代表する伝統文化である茶の湯文化とが深い関係性を持つものであろうということは、およそ想定できることである。しかし、当時の茶の湯という文化が現在のように映像や画像資料で実見することができない以上、茶書といわれる作法書を通してその実態の把握に努める以外に方法はない。また、茶の湯文化特有の各流儀の存在により、横断的な茶書の把握が困難である学術環境を克服し、江戸時代の中後期の茶の湯文化の実態の解明をおこなうことは、日本近世文学の研究の進展に資するのみならず、茶の湯文化史の研究の促進にも大いに役立つと考え、今回の申請の研究を実施した。その結果として、茶の湯文化を照射することで、先行研究で見落とされてきた表現の解釈や作品の意味についてあらた知見を何点か提示できた。まずは、江戸時代の随筆のなかから「茶の湯」に関連する事項を抜き出してそれぞれに該当する部分についての検証をおこなった。

また、井原西鶴『万の文反古』巻一の四「来る十九日の栄耀献立」などは、これまでは実在の献立を模しているものと考えられてきたが、同時代の茶書である遠藤元閑『当流茶湯献立指南』との比較検討を通して、その献立がいかに文学的なフィクションとして綿密に創作されたものであるかが明らかになった。さらに、松尾芭蕉の門人の俳諧師たちにも、少なからず茶の湯文化への造詣が見られることを、服部嵐雪『風俗文選』の俳文の精査をとおして解明した。日本文学俳茶会については台湾中國文化大学での国際集会で発表し、茶の湯文化の日本文学との密接な関係について国際的な理解を得られた。また、石塚修『西鶴の文芸と茶の湯』(思文閣出版2014)においてもその成果を十分に取り入れることができたと考える。江戸時代の随筆についても精査し、PDFファイルでのデータベース化をはかり、江戸文学研究と茶の湯文化研究において資するものがあったと言える。次年度は、最終年度としてこれまでの収集した文学の収集成果と、それをデータベース化したものをCDやwebで公開するなどして、他の文学研究に還元できるような研究成果として示したいと考えている。平成25年度は日本近世文学中期作品群に見られる茶の湯関連記事の整理をおこなう予定であり、1浮世草子における茶の湯関連記事のデータベース化を進めるとともに2咄本における茶の湯関連記事のデータベース化を進捗する。また1・2による成果が乏しい場合は俳諧・川柳資料などの韻文についても整理し、データベース化をはかりたい。研究成果公開のための郵送費の残金が発生したため次年度の研究成果公開費用に充当して使用する予定である。平成24年度内のデータ処理が一部終了しなかったため、集成した用例をデータベース化していく作業にあたるなかで、電子機器およびソフトウェア、ならびに研究支援者による入力の補助が必要となるので、当該の作業に充当する。さらに、研究成果の発表などのための旅費にも充てる。
繰返し弾塑性状態におけるひずみゲージの疲労限界適応範囲の指針および提案

既設鋼構造物を長期間に渡り安全に活用するためには,疲労破壊の原因となる疲労き裂の発生・成長挙動を定量的に把握する必要があり,広く認知されている簡便な評価手法として,ひずみゲージを用いた繰返しのひずみ範囲を計測する方法がある。しかし,ひずみゲージ自身も繰返し載荷の影響により特性が変化することが知られているにも関わらず,計測精度上問題ない範囲でこれを使用するための指針は確立されていないという問題が今なお残されている。この問題の解決に向けた基礎検討の一環として,研究申請時に立案した概要に沿って以下を実施した。1.繰返しひずみによるひずみゲージの状態を把握:繰返し弾性・塑性それぞれの状態におけるひずみゲージの抵抗変化と抵抗箔の状態変化の計測を実施した。2.ひずみゲージ使用に関する指針確立の検討:ひずみゲージに作用する繰返しひずみが弾性範囲の場合,ひずみゲージの適応範囲は高サイクル疲労領域でも精度上問題ないことを確認した。繰返し塑性状態における適応範囲については,作用する塑性ひずみの大きさに多大な影響を受けるため,ひずみ範囲を場合分けして検討を行う必要がある。今回は比較的低い塑性ひずみ状態について検討を行った結果,低サイクル疲労程度の使用範囲であれば特に問題がないことを確認した。
非対称チオエーテルのワンポット合成に向けた水中Ｃ－Ｓ結合生成タンデム触媒の創生

昨年度に引き続き、糖修飾N-ヘテロ環カルベンパラジウム錯体を用いて炭素ー硫黄カップリング反応について検討を行った。しかし、パラジウム錯体では、炭素ー硫黄カップリング反応が進行する条件を見つけ出すことができなかった。そこで、ニッケル錯体を利用することとし、これまでに合成したパラジウム錯体と同じく、Dーグルコピラノシル基をN-置換基としてもつN-ヘテロ環カルベン部位を2つとピリジン環1つからなる三座キレート型のピンサー配位子をもつニッケル錯体の合成を行った。まず、ピンサー配位子前駆体として、ピリジン環が末端部位となるC-C-N型と、両末端がN-ヘテロ環カルベンのC-N-C型を合成した。これらの配位子前駆体では、ピリジン環とN-ヘテロ環カルベン部位の連結にはメチレン基、C-C-N型の配位子の2つのN-ヘテロ環カルベン部位の連結にはエチレン基あるいはプロピレン基を用いた。これらの1種類のC-N-C型と2種類のC-C-N型配位子前駆体を用いて3種類のニッケル錯体を合成し、X線結晶構造解析により構造を明らかにした。また、これらの錯体の水中での安定性を調査し、C-C-N型錯体は、水中でも安定に存在しうるのに対し、C-N-C型錯体は水中で速やかに分解することがわかった。さらに、これらの錯体を触媒として用いた有機溶媒中あるいは水中での鈴木-宮浦クロスカップリング反応について調査を行い、C-N-C型錯体がこれまでに報告されているニッケル錯体と同等の触媒能を示すことを明らかにした。これらの結果は、今後の炭素-硫黄カップリング反応への拡張の足がかりとなるものである。本研究の企画段階で参考にした既報の論文に誤りがあり、この論文で用いていた基質では触媒が無くても炭素ー硫黄カップリング反応が進行するという事実が、本研究の初年度に明らかになった。このため、本研究では想定していなかった、パラジウム錯体を用いた触媒的炭素ー硫黄カップリング反応に適した基質の探索まで戻って検討を行う必要が生じた。さらに本研究で合成したパラジウム錯体を用いた反応では、炭素ー硫黄カップリング反応が進行する基質や条件を見つけ出すことができなかった。これは、パラジウムと硫黄の親和性が当初の想定よりも大きく、立体障害の大きい糖ユニットを配位子に導入することによる還元的脱離の促進が機能していないためであると考えた。そこで、本年度からパラジウムよりも置換活性で原子半径の小さいニッケルに研究対象を変更し、新たに本研究で用いる予定であったパラジウム錯体と同じ配位子をもつニッケル錯体を新たに合成する必要が生じた。また、これらのニッケル錯体が炭素-硫黄カップリング反応の触媒に適用できるかどうかを検討する前に、類似の触媒サイクルでより進行しやすい炭素-炭素カップリング反応での検討が必要になった。現在までに、合成した3種類のピンサーニッケル錯体のうち2つが有機溶媒中あるいは水中の両方での炭素-炭素カップリングを触媒するところまでは明らかにできた。今後、このニッケル錯体を触媒的炭素ー硫黄カップリング反応に適用する予定にしている。これまでに、パラジウムよりも原子半径が小さいため金属中心まわりの立体障害が大きくなり、さらにより置換活性であるため還元的脱離が進行しやすいと考えられるニッケルを用いた錯体に研究対象を移し、これらが有機溶媒中あるいは水中での炭素-炭素カップリング反応を触媒できることを確認できたため、まず、有機溶媒や水を溶媒としてこれらのニッケル錯体を用いた炭素-硫黄カップリング反応についての検討を行う。また、ニッケルやパラジウムといった10族元素の錯体だけではなく、他の族の元素の錯体を用いた検討も行う。具体的には、二座キレート型の糖修飾ビスNーヘテロ環カルベン配位子やピンサー配位子をもつロジウム錯体の合成を行い、その構造や反応性を明らかにするとともに、カップリング反応への適用の検討を行う。さらに、これまでに検討してきた単核錯体の系だけでなく、多核錯体の系に拡張し、カップリング反応への適用を検討する。架橋硫化物配位子をもつ多核錯体では、硫化物配位子は複数の金属イオンに強固に配位する。この硫化物配位子に炭素を求核付加させるとチオレート配位子となり、その配位力は硫化物配位子よりもかなり弱くなると考えられる。その結果、硫化物イオン存在下では、炭素-硫黄カップリングにより生成したチオレート配位子の置換反応が起こると期待される。以前に三重架橋硫化物配位子をもつ三核錯体の合成法を確立しているので、これらの錯体のカップリング反応の触媒への適応の検討を行うことを考えている。Nー置換基がアセチル保護したDーグルコピラノシル基で架橋部位がメチレンあるいはエチレンのビスNーヘテロ環カルベン配位子をもつパラジウム錯体を触媒として用いた炭素ー硫黄結合生成反応の検討を行った。最初に、これまでの報告例との比較のため、基質として4'ーブロモアセトフェノンとpートルエンチオールを用いた反応を有機溶媒中で行ったが、アセトニトリル中では、反応基質が触媒無しでも反応が進行することがわかった。さらに、4'ーブロモアセトフェノンのかわりに、より反応性の低い4'ークロロアセトフェノンを用いた場合でも無触媒で反応が進行することがわかった。ちなみに、これらの基質については、2017年に、可視光照射により無触媒で反応が進行することが報告された。無触媒反応では転化率がほぼ100%であるが、収率が70%程度であった。

それに対しパラジウム錯体存在下での反応では、基質の転化率が無触媒反応の場合よりも低く、6090%となるが、収率は6080%であり、転化率に対しての収率が向上することがわかった。これは、基質の分解反応か副生成物の生成反応がおさえられているものと考えられ、反応性生物の収率向上につながるものである。また、可視光照射により無触媒で反応が進行しない基質を用い、合成したパラジウム錯体を触媒としたCーS結合生成反応についても検討したが、今回合成した錯体では、反応は進行しなかった。そこで、糖修飾三座配位子を用いたパラジウム錯体や、糖修飾Nーヘテロ環カルベン配位子をもつロジウムあるいはイリジウム錯体の合成を試みている。これまでに、錯体に水溶性を持たせるために糖部位を導入したビスNーヘテロ環カルベン配位子前駆体を合成し、そのパラジウム錯体を得ている。これらのビスNーヘテロ環カルベン配位子は、二つのNーヘテロ環カルベン配位子部位をメチレン鎖で架橋した構造を持ち、メチレン鎖の長さにより、金属錯体を形成した際に立体的に嵩高い糖置換基の位置が調整できる。これまでに、エチレン鎖で架橋したビスNーヘテロ環カルベン配位子をもつパラジウム錯体の合成法は確立されていたが、炭素数が一つ短いメチレン鎖で架橋されたビスNーヘテロ環カルベン配位子をもつパラジウム錯体は同様の合成法では合成できていなかった。今回、合成法を改良することによってそのパラジウム錯体を得ることができた。得られたパラジウム錯体の炭素ー硫黄結合生成反応に対する触媒活性を評価するため、Chin. J. Chem.で報告されていた基質4'ーブロモアセトフェノンとpートルエンチオールを用いて反応を行った。しかし、これらの基質は触媒がなくても反応が進行することがわかり、さらに反応性の低い4'ークロロアセトフェノンを用いても進行することがわかった。現在、触媒的炭素ー硫黄結合生成反応に適した、より反応性の低い基質の探索を行っている。また、金属錯体存在下での反応では、副生成物の生成あるいは原料基質の分解が抑制される結果が得られている。並行して、パラジウム以外の金属を用いて触媒となり得る錯の体合成を試みた。金属ソースとしてロジウム、イリジウム、白金を用いてビスNーヘテロ環カルベン配位子前駆体と反応を行い、錯形成を確認した。今後、これらの錯体の単離、構造解析、触媒活性の評価を行っていく。昨年度に引き続き、糖修飾N-ヘテロ環カルベンパラジウム錯体を用いて炭素ー硫黄カップリング反応について検討を行った。しかし、パラジウム錯体では、炭素ー硫黄カップリング反応が進行する条件を見つけ出すことができなかった。そこで、ニッケル錯体を利用することとし、これまでに合成したパラジウム錯体と同じく、Dーグルコピラノシル基をN-置換基としてもつN-ヘテロ環カルベン部位を2つとピリジン環1つからなる三座キレート型のピンサー配位子をもつニッケル錯体の合成を行った。まず、ピンサー配位子前駆体として、ピリジン環が末端部位となるC-C-N型と、両末端がN-ヘテロ環カルベンのC-N-C型を合成した。これらの配位子前駆体では、ピリジン環とN-ヘテロ環カルベン部位の連結にはメチレン基、C-C-N型の配位子の2つのN-ヘテロ環カルベン部位の連結にはエチレン基あるいはプロピレン基を用いた。
樹状突起スパインの刈り込みにおけるオートファジーの役割の解析

今年度は、前々年度および前年度の報告書に記載した方針に従い、樹状突起スパインに存在する巨大タンパク質複合体であるシナプス後肥厚(PSD)のプロテオーム解析を推進した。◆発達段階におけるPSDタンパク質のリモデリング:マウスの生後の発達段階において、樹状突起スパインの数や単位時間あたりの形成数・剪定数は大きく変化する。この過程にPSDタンパク質のリモデリングが関与している可能性を考え、異なる発達段階のマウスの脳からPSDを精製し、プロテオーム解析を行った。前年度のデータはばらつきが大きい、血液のタンパク質が混入しているなどの問題があったため、PSDの精製手順、および解析する質量分析装置・ソフトウェアを変更し、再解析を行った。その結果、上記の問題が改善された精度の高いデータを得ることに成功した。さらにk平均法による変動パターンのクラスタリング、統計学的解析による有意な変化の検出、およびバイオインフォマティクス解析により、生後発達段階のマウスの脳において、シナプスの成熟を説明しうるPSDのリモデリングが生じていることを明らかにした。また、既存のオミックスデータとの相関を調べることで、このPSDリモデリングが主に転写レベルで制御されていること、げっ歯類・霊長類間で進化的に保存されていることを見出した。これらの成果は国内外の学会で発表を行っている。◆既存PSDプロテオームデータの分析:前年度の研究をさらに拡張し、過去に出版されている25報の論文に含まれる計43セットのPSDプロテオームデータを統合し、解析した。まずクラスタリング等により、相互のデータの関連性を示した。また「複数のプロテオーム解析で検出されているが、機能が全く調べられていない因子」をさらに解析したところ、PSDの液-液相分離に関与している可能性が示唆された。今後はこれら未知のPSDタンパクの機能解析を進めていきたいと考えている。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。■幹細胞の神経細胞への分化樹状突起スパインの形成および刈り込みの過程をin vitroで評価する実験系を構築するため、分化により樹状突起スパインを形成することが報告されていたヒト神経前駆細胞株を入手し、分化実験を試みた。しかしながら、結果として論文で示されていた樹状突起スパイン形成の再現はできなかった。培養期間や細胞の密度、培養皿のコーティングなど、様々な条件を検討したが、後シナプスマーカーであるPSD-95の発現は観察されなかった。また、細胞の生存率や分化パターン(ニューロン様、グリア様細胞への分化割合等)も不安定であり、いずれの点からも樹状突起スパインの形成および刈り込みの過程を評価する実験系には適さないと判断した。■シナプス後肥厚局在タンパク質の探索受入研究者とのディスカッションの上、基本的な研究方針として、樹状突起スパインの制御因子をオートファジーに限らずより包括的な観点から探索することとした。樹状突起スパイン制御因子の候補として、樹状突起スパインに存在する巨大タンパク質複合体であるシナプス後肥厚に含まれるタンパク質群に着目した。これらの中から重要な因子の候補を絞り込むため、過去に報告されていたシナプス後肥厚のプロテオミクスのデータに含まれる4000以上のタンパク質を情報生物学的に分析している。またこれとは別に、異なる生理的条件下におけるシナプス後肥厚を精製し、プロテオーム解析を行うことで特定の条件下で増加または減少するタンパク質を探索している。今後は上記の解析で洗い出した因子群の樹状突起スパインへの関与を初代培養神経細胞及び動物の脳を用いて探っていく予定である。培養神経細胞を用いて樹状突起スパイン制御因子をスクリーニングする実験系の構築はうまくいかなかった。そのため「研究実績の概要」の項に記した通り、基本的な研究方針として、樹状突起スパインの制御因子をオートファジーに限らずより包括的な観点から探索することとした。樹状突起スパイン制御因子の候補として、まず樹状突起スパインに存在する巨大タンパク質複合体であるシナプス後肥厚に着目し、この構造体に含まれるタンパク質を解析することとした。シナプス後肥厚の情報生物学的、および生化学的解析の実験基盤はすでに構築できたため、次年度では進展が見込めると考えている。今年度は(前年度の報告書に記載した方針に従って)樹状突起スパインの制御因子をオートファジーに限らず、より包括的な観点から探索している。具体的には、樹状突起スパインに存在する巨大タンパク質複合体であるシナプス後肥厚(PSD)に着目し、ここに樹状突起スパインの重要な制御因子が含まれていないか調べることとした。◆生後発達段階におけるPSDタンパク質のリモデリング生後の発達段階において、樹状突起スパインの数や単位時間あたりの形成数・剪定数は大きく変化する。この過程にPSDタンパク質のリモデリングが関与している可能性を考え、異なる発達段階のマウス脳からPSDを精製し、プロテオーム解析を行った。その結果、主要なPSDタンパク質はいずれの脳サンプルにも含まれていたが、高い再現性で特定の時期の脳でのみ検出されるPSDタンパク質が計数十個あることが明らかとなった。現在はこれらの因子の樹状突起スパインのダイナミクスへの影響を評価するため、培養神経細胞で機能的二次スクリーニングを行っている。◆既存PSDプロテオームデータの分析PSDタンパク質の中には、これまでに「検出されてはいるがその機能が全く調べられていない」因子が残っており、これらが樹状突起スパインの動態等に関与している可能性があると考えた。

このような未解析のPSDタンパク質を洗い出すため、過去に出版されている14報の論文に含まれる、計16セットのPSDプロテオームデータを解析し、統合した。この中には複数のプロテオーム解析で検出されているが、全く調べられていない因子が数十個含まれていた。初代培養の神経細胞を用いて、これらのうち高ヒット数のタンパク質の局在を調べたところ、確かにPSDに局在していることがわかった。よって、このデータ分析はPSDタンパク質を洗い出す有効な手法であることが示唆された。今後はこれらの因子の機能解析を進める予定である。生後発達段階におけるPSDタンパク質のリモデリングについては、プロテオーム解析の結果、各週齢のサンプルにおいて、それぞれ数千個のタンパク質の検出および定量に成功した。また、これらのデータの全体的な傾向も一通り分析した。ここまででも一定の価値のある知見ではあると考えられる。今後はこの研究をさらに発展されるため、重要と考えられた分子群について、培養神経細胞およびマウス個体を用いた機能解析を進めていく予定である。また既存PSDプロテオームデータの分析については、培養神経細胞を用いた実験から、この手法が新規PSDタンパク質の同定に有用であることが確認できた。全体として、研究はおおむね順調に進展していると考えている。今年度は、前々年度および前年度の報告書に記載した方針に従い、樹状突起スパインに存在する巨大タンパク質複合体であるシナプス後肥厚(PSD)のプロテオーム解析を推進した。◆発達段階におけるPSDタンパク質のリモデリング:マウスの生後の発達段階において、樹状突起スパインの数や単位時間あたりの形成数・剪定数は大きく変化する。この過程にPSDタンパク質のリモデリングが関与している可能性を考え、異なる発達段階のマウスの脳からPSDを精製し、プロテオーム解析を行った。前年度のデータはばらつきが大きい、血液のタンパク質が混入しているなどの問題があったため、PSDの精製手順、および解析する質量分析装置・ソフトウェアを変更し、再解析を行った。その結果、上記の問題が改善された精度の高いデータを得ることに成功した。さらにk平均法による変動パターンのクラスタリング、統計学的解析による有意な変化の検出、およびバイオインフォマティクス解析により、生後発達段階のマウスの脳において、シナプスの成熟を説明しうるPSDのリモデリングが生じていることを明らかにした。また、既存のオミックスデータとの相関を調べることで、このPSDリモデリングが主に転写レベルで制御されていること、げっ歯類・霊長類間で進化的に保存されていることを見出した。これらの成果は国内外の学会で発表を行っている。◆既存PSDプロテオームデータの分析:前年度の研究をさらに拡張し、過去に出版されている25報の論文に含まれる計43セットのPSDプロテオームデータを統合し、解析した。まずクラスタリング等により、相互のデータの関連性を示した。また「複数のプロテオーム解析で検出されているが、機能が全く調べられていない因子」をさらに解析したところ、PSDの液-液相分離に関与している可能性が示唆された。
生物学的根拠に基づく白質可塑性画像マーカーの開発

本研究は、実験的リハビリテーションとして運動学習訓練や非侵襲脳刺激を実施し、誘導される脳の可塑的変化を測定するMR画像マーカーを開発することであった。拡散テンソルイメージング解析やvoxel-based morphometryなどの先端的なMRI解析は、脳機能障害患者の病態や回復過程を評価する方法として期待されている。一方、人の脳構造や脳機能には個人差があり、リハビリテーションを施行しても十分な効果が得られないケースが存在する。この問題の解決には、リハビリテーションの効果に影響する脳構造や脳機能の個人差を正確に評価し、患者ひとりひとりに合わせたオーダーメイド・リハビリテーション法を開発する必要があると考えた。そこで本研究では、脳可塑性のMR画像マーカーとして先端的な神経イメージング法であるdiffusionspectrum imagingを臨床用に開発した。この手法は、従来の拡散MRIと異なり、その計測に強い拡散傾斜磁場(high b-value)を適用することで細胞内の情報を抽出する試みである。特に白質神経において、神経軸索径や髄鞘密度の解析に有用と考えられている。開発した本手法は、運動学習訓練などの学習の前後に適用することで、神経回路の可塑性を細胞レベル(軸索径、髄鞘密度、神経線維の方向)で評価できると考えられる。また非侵襲脳刺激の個人差を同定するために、脳機能と非侵襲脳刺激による行動の変化の相関関係を評価した。その結果、暗算課題において、脳機能の半球間優位性が高いほど、非侵襲脳刺激の効果が高いことが示唆された。将来的には、本研究で開発したdiffusion spectrum imagingを用いて脳可塑的変化の個人差を計測し、さらに個々の脳の状態に合わせた非侵襲脳刺激を与えることで、患者ひとりひとりの状態に即したオーダーメイド・リハビリテーションが可能になると考えられる。翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。
Seed and Soil理論に着目した尿路上皮癌所属リンパ節の新規病理診断

研究1 :尿路上皮癌微小リンパ節転移の頻度をサイトケラチン免疫染色法で、後ろ向きに評価した。結果、pN0とされた腎盂尿管癌7/51例(14%)に微小リンパ節転移を認めた。研究2 :膀胱全摘症例と腎尿管全摘症例で微小リンパ節転移の頻度を前向きに評価した。膀胱全摘症例の9%(2/22例)で微小リンパ節転移を認めた。研究3 : VEGFC mRNA, VEGFD mRNA, VEGF3R mRNAの尿路上皮癌原発巣での発現量と病理学的因子との関連、及び所属リンパ節リンパ管密度と病理学的因子との関連を評価した。T2以上の浸潤癌の原発巣においてVEGF C mRNAの高発現を認めた。またリンパ節転移陽性症例でリンパ節辺縁洞のリンパ管密度が有意に高いこと、リンパ節転移陰性症例においても半数でリンパ節辺縁洞でのリンパ管密度の上昇を認めることを確認した。本研究の目的は、手術で得られた所属リンパ節検体に関して、免疫組織学的手法を中心に用いて、詳細に観察することで、通常のHE染色のみでは評価困難な原発巣(seed)の転移樹立能を、その土壌(soil)側から評価した新しい病理診断法を樹立することである。まず、尿路上皮癌における微小リンパ節転移の頻度について、サイトケラチン染色を用いてリンパ節転移の有無を再評価する研究を行った。腎孟尿管癌に関しては通常のHE染色でリンパ節転移なしと診断された症例の約一割で微小リンパ節転移を認めることを明らかにし、論文を発表した(Abe et al.EJSO 2010)。また現在、腎孟尿管癌に対し積極的に行われる腹腔鏡下腎尿管全摘除術においても、開腹手術と同等のクオリティでリンパ節廓清が安全に施行できることを明らかにし、論文発表した(Abe et al.Journal of Endourology 2011)。その他、尿路上皮癌におけるリンパ管新生関連因子の発現量、所属リンパ節におけるリンパ管新生に関して解析中である。リンパ管新生関連因子の発現量に関しては、リアルタイムPCR法を用いて、リンパ管新生促進因子として知られるVEGFC,DのRNA発現量に関して、尿路上皮癌においては、リンパ節転移の頻度が低いとされる腎細胞癌にくらべて亢進している知見を得ている(未発表データ)。またリンパ管新生の程度に関しては、D2-40抗体を用いた免疫染色法でリンパ管密度と臨床病理学的特徴との関連を評価中である。腎孟尿管癌に関しては通常のHE染色でリンパ節転移なしと診断された症例の約一割で微小リンパ節転移を認めることを明らかにし、論文を発表した(Abe et al. European Journal of Surgical 0ncology 2010)。また現在、腎孟尿管癌に対し積極的に行われる腹腔鏡下腎尿管全摘除術においても、開腹手術と同等のクオリティでリンパ節廓清が安全に施行できることを明らかにし、論文発表した(Abe et al. Journal o fEndourology 2011)。微小リンパ節転移に関しては、さらに北海道大学病院泌尿器科、北海道がんセンター泌尿器科、市立札幌病院泌尿器科での多施設共同前向き研究として、膀胱癌及び腎孟尿管癌に関して、あらかじめ定義したリンパ節廓清範囲を前向きに施行している。現在、膀胱癌26例、腎孟尿管癌35例の登録があり、膀胱癌に関して4/26例でリンパ節転移を認め、さらにpNOと判断された22例中、サイトケラチン染色で2例(約9%)の微小リンパ節転移を認めており、現在症例を蓄積中である。(膀胱癌、腎孟尿管癌における至適郭清範囲に関する前向き観察研究,UMIN試験ID:UMIN000003279)その他、尿路上皮癌におけるリンパ管新生関連因子の発現量、所属リンパ節におけるリンパ管新生に関して解析中である。

リンパ管新生関連因子の発現量に関しては、リアルタイムPCR法を用いて、VEGFC,DのRNA発現量は尿路上皮癌45例(膀胱癌20例、腎孟尿管癌25例)においてC,DともにpT2以上の症例で、pT1以下の症例に比較して有意に発現が高いことを確認した(未発表データ)。またリンパ管新生の程度に関しては、D2-40抗体を用いた免疫染色法でリンパ管密度と臨床病理学的特徴との関連を評価中である。