hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
インフォーマルな音楽学習のフォーマルな教育機関への導入に関する先進的事例の研究

両方の事例とも、伝統音楽が学校というフォーマルな場所においてどのように教えられているのかという点に注目して調査を行った。コタバルの中学校では、伝統的な影絵音楽や舞踏音楽が音楽の正規授業の中で行われており、すべての学年において段階的にこれらの音楽を学習していた。伝統音楽は、コタバルにおいても、地元のコミュニティの中で学習する機会は少なくなっており、音楽の授業で初めて伝統的な影絵音楽や舞踏音楽に接する生徒も多くみられた。しかし、授業実践では、教師によるさまざまな工夫がほどこされており、ほとんどの生徒が着実に技能を獲得していた。特に、音高やリズズを記憶していく方法において、担当教員独自の口承法(唱歌)が開発されており、この方法が複雑な伝統音楽の音型やリズムを素早く記憶することに効果的にはたらいていた。イラクの伝統音楽については、学習方法において、音楽院独自の学習メソードが開発されていることがわかった。イラクの音楽においては、さまざまなタクシーム(音階のようなもの)を基本として音楽を作っていくが、曲の途中でタクシームがさまざまに転調して用いられることが多く、絶対音高で音高を知覚していく必要性がある。こうしたことから、タクシーム音楽院のメソードでは、旋律の学習に関して、西洋の5線譜を基本とした記譜法が効果的にもちいられていた。イラクの音楽には、西洋の記譜法では表せない音程などが存在するが、西洋の記譜法をアレンジして、イラク音楽を5線譜によって学習する巧みな方法が開発されていた。初年度に行う海外での調査が1年遅れたため、データの分析と考察が遅れている。本年度までに行った観察データの分析はほぼ終了したが、研究成果を学会発表や論文等で発表するまでには至っていない。24年度が最終年度であるため、記入しない。現在まで海外の事例を2件調査したが、データ分析の結果、さらに異なる事例の調査が必要となってきた。最終年度は、海外での調査は行わない予定であったが、追加で調査に出向くことを計画している。
水晶振動子を用いた高分子薄膜の気体透過性および粘弾性評価装置の試作

本研究では高分子薄膜の気体収着・拡散等の挙動を水晶振動子を活用して評価すると同時に、気体が収着・拡散している状況下における粘弾性のその場観察を行うことで、従来あまり顧みられなかった高分子の分子運動の側面からの透過物性の理解を十分理解することを目的とする。まず耐圧容器の中に水晶振動子をセットでき、その共振周波数をリアルタイムで計測するシステムを試作し、各種高分子への気体収着測定の可能性及び精度を検討した。各種気体を導入した時の周波数変化から気体収着量を見積もると、精密電子天秤を使用して得られたデータと一致した。得られた気体収着等温曲線を解析することで、各種高分子の高次構造に関する知見を集積できた。また、ポリジメチルシロキサン(PDMS)膜を対象に、比較的高圧までCO_2の収着・透過実験を行った結果、臨界圧力を境にPDMS膜への溶解性や膜中におけるCO_2の存在状態に変化が生じた。一般に液体状態で存在していると考えられている膜中のCO_2は、臨界温度・圧力以上になると液体状態より粘性が小さい状態に変化し拡散性が増すと考えられた。更にこの方法は気体のみならず、各種溶媒蒸気の高分子への収着挙動をも検討できるものであった。次に高分子薄膜の粘弾性評価方法の確立を目指し、ネットワークアナライザによる水晶振動子の共振パラメータ(共振周波数並びに共振抵抗)の精密測定システムの構築と、得られるパラメータと粘弾性との相関について検討した。種々の高分子について共振パラメータの温度依存性を測定したところ、ガラス状態では共振抵抗、周波数ともに一定値を示すが、ガラス転移温度以上になると、共振抵抗は温度上昇とともに急激に増加した。共振周波数は一旦緩やかに増加しその後減少へと転じた。この結果より、高分子の粘弾性の温度変化と共振パラメータとの相関に関して理解を深められた。本研究では高分子薄膜の収着・拡散等の透過性能評価装置を水晶振動子を用いて製作し、CO_2の収着等温曲線・拡散係数・透過係数等の膜物性を明らかにし、膜評価を確立させると同時に同水晶振動子を活用し、CO_2が収着・拡散・透過している状況下における高分子薄膜の粘弾性のその場観察を行い、膜物性と粘弾性の同時測定により従来あまり顧みられなかった高分子の分子運動の側面からの膜物性の理解を得、膜性能を十分理解することを研究目的とする。更に、凝縮性流体CO_2の比容積(あるいは自由体積)を大幅に連続的に変化させることのできる超臨界流体を利用して、高分子膜中の超臨界流体の拡散及び溶解(相互作用)機構を体系的に解明しようとしている点は、本研究の特色である。高圧収着装置が概ね完成し、CO_2の超臨界状態のポリフェニレンオキサイド,ポリカーボネートの収着等温曲線が得られる状態である。今後得られた結果を用いて超臨界状態の収着機構を新たに検討すべきである。概略の超臨界CO_2の収着等温曲線が得られつつあるが、精確かつ再現性ある収着等温曲線を得る必要がある。初年度の研究計画はほぼ達成される予定である。ガラス状高分子膜への超臨界CO_2の収着等温曲線は全く新規なデーターであり、早く確立したデーターを発表できるように努めたい。現時点では特に問題はない状況である。本研究の結果として、CO_2-高分子系の分子運動の解明から、透過性のより正確な予測が期待され、更に高分子膜を用いた透過・分離性の機構解明及び応用への発展が十分期待される。

本研究では高分子薄膜の気体収着・拡散等の透過性能を水晶振動子を活用して評価すると同時に、気体が収着・拡散している状況下における粘弾性のその場観察を行うことで、従来あまり顧みられなかった高分子の分子運動の側面からの膜物性の理解を得、膜性能を十分理解することを研究目的とする。昨年までに、ゴム状高分子であるポリジメチルシロキサン(PDMS)膜を対象に、比較的高圧までCO_2の収着・透過実験を行い、超臨界流体(CO_2)-高分子系の相互作用の特徴を検討した。その結果、バルクのCO_2の状態が気体から超臨界状態へと変化するとPDMS膜への溶解性や膜中におけるCO_2の存在状態にも変化が生じることが示唆された。即ち、一般に液体状態で存在していると考えられている膜中のCO_2は、臨界温度・圧力以上になると液体状態より粘性が小さい状態に変化し拡散性が増すと考えられた。本年度は高分子薄膜の粘弾性評価方法の確立を目指し、ネットワークアナライザによる水晶振動子の共振パラメータ(共振周波数並びに共振抵抗)の精密測定システムの構築と、得られるパラメータと粘弾性との相関について検討を行った。種々の高分子について共振パラメータの温度依存性を測定したところ、以下のような結果が得られた。ガラス状態では共振抵抗、共振周波数ともに一定値を示すが、ガラス転移温度以上になると、共振抵抗は温度上昇とともに急激に増加した後減少へと転じた。共振周波数も同様に一旦緩やかに増加するが、共振抵抗の場合よりは低い温度で減少し始めた。これらの結果より、ポリマーの一般的な温度変化に対する共振パラメータの挙動がわかった。また、水晶振動子を用いることにより薄膜の粘弾性変化がガラス状態から流動領域まで広範囲にわたって測定可能であることがわかった。本研究では高分子薄膜の気体収着・拡散等の挙動を水晶振動子を活用して評価すると同時に、気体が収着・拡散している状況下における粘弾性のその場観察を行うことで、従来あまり顧みられなかった高分子の分子運動の側面からの透過物性の理解を十分理解することを目的とする。まず耐圧容器の中に水晶振動子をセットでき、その共振周波数をリアルタイムで計測するシステムを試作し、各種高分子への気体収着測定の可能性及び精度を検討した。各種気体を導入した時の周波数変化から気体収着量を見積もると、精密電子天秤を使用して得られたデータと一致した。得られた気体収着等温曲線を解析することで、各種高分子の高次構造に関する知見を集積できた。また、ポリジメチルシロキサン(PDMS)膜を対象に、比較的高圧までCO_2の収着・透過実験を行った結果、臨界圧力を境にPDMS膜への溶解性や膜中におけるCO_2の存在状態に変化が生じた。一般に液体状態で存在していると考えられている膜中のCO_2は、臨界温度・圧力以上になると液体状態より粘性が小さい状態に変化し拡散性が増すと考えられた。更にこの方法は気体のみならず、各種溶媒蒸気の高分子への収着挙動をも検討できるものであった。次に高分子薄膜の粘弾性評価方法の確立を目指し、ネットワークアナライザによる水晶振動子の共振パラメータ(共振周波数並びに共振抵抗)の精密測定システムの構築と、得られるパラメータと粘弾性との相関について検討した。種々の高分子について共振パラメータの温度依存性を測定したところ、ガラス状態では共振抵抗、周波数ともに一定値を示すが、ガラス転移温度以上になると、共振抵抗は温度上昇とともに急激に増加した。共振周波数は一旦緩やかに増加しその後減少へと転じた。
チベット－ヒマラヤ周辺山地におけるグローバル化時代の環境利用モデル再考

2012年度にインドのジャンムー・カシミール州ラダックにおいて実施したD村落に属する193世帯の農耕地に関する土地被覆調査,作付調査をArcGIS上でのデータ化をおこない,更にこれら現在の地籍図と,100年前のイギリス統治下で作成された地籍図との比較をおこなうために投影法を変化して1つのデータセットに統合した。こういった土地被覆の傾向に関して,地形との関連性を考察するためにステレオ合成ソフトSummit Evolutionを用い,2枚のGeoeye衛星画像(解像度50cm)を合成して高精度の三次元標高モデルを作成した。これら2つのデータに基づいて,道路の開通や家屋の立地という社会的な要素や農耕地の傾斜などや日当たりなどの地形に起因する要素が村落における土地被覆の変化にどのような影響を及ぼしているのかを考察した。D村落では,家屋から離れた農耕地や道路からのアクセスの難しい農耕地ほど放棄される傾向があり,農業の縮小が進んでいた。家屋に近い農耕地でも,傾斜などのために不利な条件にある土地では土地利用の変化がみられ,労働力を必要としない森林や果樹への転換がみられた。本年度は,インド北部ジャンムーカシミール(J&K)州ラダーク地域の村落(人口およそ1500人)を調査地として選定し,6月と9月,および3月に詳細な現地調査をおこなった。ラダーク地域の村落は,自給的な農業から市場経済に影響を受けた農業へと変化の途上にあるため,現在の農業経営を把握するために村落全体の200ha以上の全筆調査を実施し,各農耕地ごとの所有者や作付けを把握し,それをGIS上で統合・整理することによって村落全体の傾向を把握した。さらには,標高が異なるいくつかの家屋に自動温度計を設置し,村落環境の把握をおこなうとともに,自動カメラを設置して,人文景観の季節的な変化を記録する環境を整えた。この調査を通して,同じ村落に属する小河川の流域内であっても,その商品経済への適応過程は自然村ごとに異なっており,道路に近くて気象条件にも恵まれた下流部の自然村では果樹や野菜などを栽培し,それを市場や軍に販売することで上手く市場経済に適応していたが,一方で上流部の地域では,大量に外部地域から流入するコメやコムギによってオオムギの栽培が衰退する一方で,代替する作物や現金収入手段を模索するのが現状であった。こういった河谷部における生態環境とは異なる山地社会の事例として,同じくJ&K州に属するチャンタン地域を訪問し,上述のような広域的な生業調査を実施し,来年度以降に詳細な調査を実施する地域の選定作業もおこなった。中国国内のチベット地域における現地調査は制限されるため,本年度はCNKIデータベースを用いて食生活や農牧業に関する網羅的な文献調査をおこなった。その結果,外部地域からの安価な作物の流入や出稼ぎによる人口の流出といったインド山地社会と同様の変化を確認できた。山地社会におけるグローバリゼーションの影響は,地域が立脚してきた生態環境や地政学的な位置,交通インフラの整備状況に応じてその作用が異なっており,それによって地域の多様化を引き起こしていた。交通インフラに恵まれた地域では市場経済に適応した農業経営へと移行する一方で,交通インフラに乏しい地域では市場経済への対応が難しく,人びとの都市への移住を加速する傾向がみられた。そういう視点に立つと,グローバリゼーションは山地における地域の多様な変化を引き起こしており,隣接する村落でも全く異なる現状を生じさせていた。このように山地社会を人やモノの移動に基づく村落変化に関して,日本地理学会2012年秋季学術大会にて「山地社会における人文景観の変容インド北西部ラダックにおける村落の事例」という題目で報告するとともに,学術論文「ラダーク山地社会における農林牧複合の農業形態と土地利用の変容」としてまとめヒマラヤ学誌14号に報告した。また本年度は,現地調査で得られた知見とそこからの課題を調査地の人びとに問いかけ,今後の方向性を考えて行く足がかりとして2日間のワークショップを現地カウンターパートの協力によって開催した。そこではのべ100人以上の参加があり,十分な意見交換することができた。本研究は,山地社会における現象の解明のみに留まらず具体的な問題解決に資することを目的としているため,早い段階で地域の人びとにこちらの成果を報告する機会を得られたことは非常に意義があった。以上のように成果報告や現地調査を積み重ねており,計画以上に研究を実施できていると考えている。

これまでの調査では人びとの食事に関する調査を十分にはおこなえていないため,典型的な食事調査の手法である「24時間思い出し法」により広域的に人びと食事内容を把握するとともに,そのインフォーマントから数人を選び,食材の由来(購入したのか自家栽培かなど),購入した場合であればその場所,生産地,価格などを明らかにして,人びとの食生活に占める市場経済の影響を明らかにする。さらには過去の文献と比較することで,食生活の変化を時系列的に把握する。これまで詳細な調査を実施できていない中国国内のチベット地域における調査に着手できるような基盤を整え,調査を実施していく。具体的には,これまでの調査経験のある雲南省迪慶チベット族自治州と青海省玉樹チベット族自治州を想定している。山地社会の研究において,重要な比重を占めるようになっている地球温暖化に関して,継続的な観測を実施していくための基盤を整え,観測を開始する。すでに今年度においていくつかの場所では自動温度計などの設置を終えているが,さらにその数を増やして観測の精度を高める。これらの調査を実施することで,山地社会における人とモノの流れの変化をできるだけ詳細に把握して,現在の環境利用モデルを構築していく。次年度は,インド北部ラダーク地域にて2回の調査を実施する予定である。各調査では1月以上現地に滞在し,初回はインダス川沿岸の村落において昨年度からの継続調査をおこない,2回目の調査ではチャンタン地域のカルナク地区を主体として,家畜飼養に重点をおいて生活するチベット系住民の近年の生業や食生活などを具体的に明らかにする予定である。また,本年度は実施できなかった中国国内のチベット地域(雲南省および青海省)でも詳細な現地調査を実施し,近年の人やモノの移動に関する調査をおこなう。これらの調査に対する国外旅費・現地謝金として120万円を使用する予定である。村落における変化を広域的に把握する手段として本研究では衛星画像を用いているが,新たに調査をおこなうラダーク・チャンタン地域と中国国内のチベット地域の調査資料として,衛星画像(ERDAS-MAP)を購入予定である。その費用として20万円を使用する予定である。また,近年の山地社会に大きな影響を及ぼしている地球温暖化の影響を継続的に観測していくため,現地カウンターパートと協力してその態勢を整えるために,自動温度計・転倒升雨量計・降雪測定装置を購入する。同時に,チベット地域における農業の根幹にある灌漑農業に対する気候変動の影響を明らかにするために流量計を設置し,観測態勢を整える。これらの物品購入の費用として,30万円を使用する予定である。
トランスポゾン・タギングによる発芽関連遺伝子の探索と解析

発芽は栄養成長期の器官形成における重要なステップである。発芽時に、イネでは植物ホルモン・ジベレリン(GA)が重要な役割を担い、胚乳貯蔵物質の分解酵素の合成・分泌、芽・根の伸長および葉の展開を促進する。本研究では、トランスポゾン・タギングによりイネにおけるGA情報伝達系の調節因子を含む発芽関連遺伝子の変異体をスクリーニングした。(1)アラビドプシス等で知られるGA情報伝達系に関わる調節遺伝因子の既知配列に基づき、イネにおける相同配列またはイネの遺伝子配列をデータベースから得てプライマーを設計した。これらのプライマーを用いて、Acの高頻度転移系統から得た9594個体のプールDNAをテンプレートにPCRを行い、遺伝子の破壊株を探索したが、現在のところまだ見つかっていない。(2) Acが転移あるいは分離によって除かれてもGA応答性の変異を示す変異体を選抜した。これらの変異体ではRAmylA/GUS遺伝子の発現はほぼ正常であったが、胚乳の糖化が全く起こらないか、遅延していた。これらの変異体の胚から誘導したカルスを用いて、RAmylAがコードするaアミラーゼアイソフォームA+Bの翻訳、分泌制御に関わる生化学的な解析を行った。aアミラーゼはGAのシグナルにより細胞内に流入したCa^<2+>によって、翻訳・分泌レベルにおいて制御が行われる事が知られている。そこで、Ca^<2+>ポンプ、Ca^<2+>チャネル、PLC、ER-ATPase、CaM等の阻害剤を用いてaアミラーゼの翻訳、分泌量の増減を調べた。その結果、これらの変異体ではCa^<2+>ポンプ、PLC、ER-ATPaseは正常に働いているが、Ca^<2+>チャネルかまたはCaMについて、異常が起きている可能性が示唆された。
RNAおよびタンパク質生合成におけるプロセシング

RNAレベルでのプロセシングに関しては以下の研究が行われた。酵母mRNAキャップ合成酵素の大量精製法の確立、構成サブユニットの機能解明、同酵素の核局在性の解明、同酵素遺伝子の構造解析(上代)。新遺伝疾患グルタミルリボース-5-リン酸蓄積症がADP-リボシル蛋白質リアーゼの活性異常によって惹起されることの示唆(上田)。ヒトリボソームRNA遺伝子の転写終結部位の決定、前駆体RNAの3'未端の同定(村松)。マウスrRNAのプロセシング部位近傍に共通配列の存在確認、核小体U3RNAにこの共通配列と相補性があることの発見(緒方)。in vitroスプライシングの新しい系の確立とスプライシング因子の追跡(大島)。ピルビン酸キナーゼアイソザイムmRNA生成機構の解明(田中)。細胞mRNAを特定部位で切断しプライマーとして利用するインフルエンザウィルスRNAポリメラーゼの純化と機能解析(石浜)。センダイウィルスゲノムRNAに依存した無細胞転写系の確立、転写系へのチューブリンの関与(岩崎)。RNAプロセシングによる単位長ウィロイドになるのに必要なRNA配列の同定(飯)。タンパク質レベルでのプロセシングに関しては以下の研究が行われた。ヒトペプシノーゲンCのシグナルペプチドの解析(高橋)。大腸菌の細胞隔壁形成酵素であるペニシリン結合タンパク質3の細胞質膜通過にともなうプロセシングの機能の解析(広田)。大腸菌のリボソームタンパク質S5,S18,L12のN端アセチル化に関与する遺伝子と産物の解明(磯野)。2種のカルパスタチンの解析と、単位インヒビタードメインの同定(村地)。チモーゲンカルパインの細胞膜外部信号依存性の【Ca^(2+)】とリン脂質による活性化機構の解析(鈴木)。大腸菌ompF-ompCキメラ遺伝子を用いての分泌型タンパク質プロセシングの機構の解析(水野)。なお水島は研究事務、連絡、とりまとめに当った。
顔面部癌性および神経因性疼痛における脊髄路核知覚神経細胞の再生と機能再建

本研究は神経因性および癌性疼痛の病態発現機序について、神経細胞の傷害性をglutamate毒性とc-fosの局所的変化と神経可塑性の面から検討し、痛覚情報の三叉神経節および三叉神経脊髄路核尾側亜核への入力およびその制御様式について検討した。方法:癌性疼痛ラットは麻酔下に下顎骨膜下に癌細胞(Walker256B carcinocarcinoma)の注入を行い、神経因性疼痛ラットは、下歯槽管内にシリコンを注入し作成した。また、大槽よりクモ膜下腔に先端が三叉神経核レベルに位置するようループ型マイクロダイアリシスプローペを挿入した。1)行動変化:疼痛行動の観察はホットボックスによる低域値刺激に対する反応をclinchingの回数で評価した。2)癌性および神経因性疼痛後の脳脊髄液中glutamate濃度変化はダイアリシスプローベから人工脳脊髄液を潅流し、採取した透析液中のglutamate濃度をHPLC-ECD法で定量的に測定た。3)分子生物学的検討は癌性および神経因性疼痛モデル作成後に,三叉神経脊髄路核を摘出し、凍結切片を作成し、c-fos遺伝子発現をin situ hybridization法にて検討した。結果:癌性性疼痛および神経因性疼痛雄ラットのいずれも、注入後の疼痛潜時の有意な短縮を認めた。疼痛刺激時の三叉神経脊髄路核部の脳脊髄液中のglutamateの変化は癌性・神経因性疼痛雄ラットで有意な増加が認められた。病理学的検討では癌性および神経因性疼痛ラットのいずれも三叉神経脊髄路核の尾側亜核で初期からc-fos遺伝子発現が認められた。まとめ:疼痛によるprogrammed cell deathとそれに先行する遺伝子発現、および傷害部位のシナプス再生能の検討がある程度でき、臨床応用に向け問題点、や改善可能な点が明らかになり、さらにより可能性の高い治療法の確立へと展開できると確信する。1.癌性および神経因性疼痛のモデルの作成。:1)癌性疼痛のモデルの作成;凍結された癌細胞(Walker256Bcarcinocarcinoma)を溶解し、ヌードラットで生体培養、雄Sprauge-Dawleyラット背部で継代培養を行っている。その細胞を使用して癌性性疼痛ラットモデルを作成した。すなわち、雄Sprauge-Dawleyラットに、ハロタン(23%)/酸素麻酔下に下顎骨にドリルにて小孔を開け,癌細胞(Walker256Bcarcinocarcinoma)の注入を行う。骨膜,皮膚の縫合を行い、骨転移による疼痛モデルとしている。注入後、1、3、7、14、21、28日に疼痛行動を観察し、注入後の21日前後に疼痛行動が観察できた。2)神経因性疼痛では、ラットをハロタン(23%)/酸素をマスクで吸入させ、下歯槽管内にシリコンを注入し、三叉神経圧迫モデルを作成する。また、大槽よりクモ膜下腔にループ型マイクロダイアリシスプローベを挿入し、先端が三叉神経核レベルに位置するよう留置する。手術後1、3、7、14日までホットボックスによる低域値刺激に対する反応を観察した。2.癌性および神経因性疼痛後の脳脊髄液中glutamate濃度変化の検討:ハロタン(1%)/酸素吸入下でダイアリシスプローベから人工脳脊髄液を10μl/minで潅流し、各病日に採取する。ラットを任意に以下の群に分ける。薬物投与はモデル作成後より開始(浸透圧ポンプ)し、持続注入する。(1)偽手術

群:開創術のみ。(2)非治療群:生理食塩水を持続静注。透析液は分析まで-80°C下で保存し、透析液中のglutamate濃度はOPA誘導体化して、HPLC-ECD法で定量的に測定する。癌性性疼痛ラットおよび神経因性疼痛ラットにおける脳脊髄液中のglutamateは疼痛反応出現時に増加が観察された。1.癌性および神経因性疼痛後の脳脊髄液中glutamate濃度変化の検討:癌細胞(Walker256B carcinocarcinoma)を用いた癌性疼痛ラットにハロタン(1%)/酸素吸入下でダイアリシプローベから人工脳脊髄液を10μl/minで潅流し、手術後1、3、7日に脳脊髄液を採取した。透析液中のglutamate濃度をOPA誘導体化して、HPLC-ECD法で定量的に測定した。その結果、癌性疼痛は癌細胞注入後、3日目から発生し、経日的に増強した。脳脊髄液中のglutamate濃度は非治療群ラットにおいて3日目で5%、7日目で25%で増加した。この増加はTNF-α阻害薬の経静脈的投与によって抑制された。ラット癌性疹痛の病態について検討:分子生物学的(病理学的)、分子病理学的、遺伝子工学的検討の一部を行った。1.分子生物学的(病理学的)検討:癌性疼痛モデル作成後、1、3、7、日目に,三叉神経脊髄路核を摘出、凍結し、クライオスタットで厚さ10-40μmの凍結切片を作成した。これらの組織切片に対してprogrammed ce deathに関係するDM断片化に対するTUNEL染色とH-E染色を行った。次に、programed cell deathがラジカサイトカインとどのような相互関係を有するかを検討するために、TNF-α阻害薬を経静脈的に投与して遺伝子発と細胞死の観察を行った。その結果、術後3日目ではTUNEL染色の方がH-E染色より濃染していたが、術後7日ではTUNEL染色よりH-E染色の方が濃染していた。これらのことから術後3日目ではapoptosisが先行して起こが、術後7日目では細胞壌死が増加することが明らかとなった。2.分子病理学的検討:癌性疼痛モデルの三叉神経脊髄路核のグリア反応についてはGFAP、OX-42などのグリア関連蛋白を免疫染色し、時的に観察を行っているが、まだ一定の結果は得られていない。本研究は神経因性および癌性疼痛の病態発現機序について、神経細胞の傷害性をglutamate毒性とc-fosの局所的変化と神経可塑性の面から検討し、痛覚情報の三叉神経節および三叉神経脊髄路核尾側亜核への入力およびその制御様式について検討した。方法:癌性疼痛ラットは麻酔下に下顎骨膜下に癌細胞(Walker256B carcinocarcinoma)の注入を行い、神経因性疼痛ラットは、下歯槽管内にシリコンを注入し作成した。また、大槽よりクモ膜下腔に先端が三叉神経核レベルに位置するようループ型マイクロダイアリシスプローベを挿入した。1)行動変化:疼痛行動の観察はホットボックスによる低域値刺激に対する反応をclinchingの回数で評価した。2)癌性および神経因性疼痛後の脳脊髄液中glutamate濃度変化はダイアリシスプローベから人工脳脊髄液を潅流し、採取した透析液中のglutamate濃度をHPLC-ECD法で定量的に測定した。
二層カーボンナノチューブのボロンドーピング効果

二層カーボンナノチューブにホウ素を添加することによってチューブ集合体としての導電率が向上することを見出した。これはホウ素添加とそれに続く熱処理によって二層チューブの結晶性向上と場合によっては融合が促進されたためであると考えられた。個別のチューブ束の場合にはチューブの結晶性,TEM内プローブとチューブの接触状態,そしてチューブと基板の接触状態の三つの要素によって導電性の値にばらつきが生じたものと考えられた。熱処理による結晶性の向上とチューブ/基板の接触状態は改善が可能であったが,プローブとチューブ束の接触状態は二層チューブの柔軟性により改善が困難であったため,データとしてはホウ素未添加の試料との有意な差が見出されていない。ホウ素と同様に重要な添加物であるフッ素を二層チューブに添加してEELS,Raman分光,フォトルミネッセンス,UV分光を行ったところ,フッ素化により二層チューブは外層のみが選択的にフッ素化されることを見出している。導電性の測定は今後の課題であるが,低下するものと見込んでいる。これらの結果より,二層チューブのドーピングがホウ素添加による外層同士の融合促進やフッ素添加による外層のフッ素化など,主に外層に対して影響を及ぼすことが明らかとなり,ラマン,フォトルミネッセンスにより内層が基本的に影響を受けていないことが分かった。このことから二層カーボンナノチューブは内層にナノチューブの本来の物性を期待し,外層を機能化したハイブリッド材料として利用することが可能であることを示した。この知見はナノチューブを利用した複合配線技術や,デバイス応用の際に交差するチューブ同士の影響や基板上に配置することによるチューブの物性変化を最小限にとどめることを可能にするという点で重要な結果である。初年度は現有のCVDチューブ生成装置を用いて二層カーボンナノチューブの生成を行い、得られたチューブの精製を既存の設備を用いて行って高純度の二層ナノチューブ試料を得る事を試みた。その結果、炭素源として用いる炭化水素ガス、コンディショニング触媒、そして触媒担持用酸化マグネシウム粉体の条件を厳密に制御する事で、精製工程に持って行きやすい状態の試料を得る事に成功した。これらの試料を硝酸処理、超音波分散、酸化の過程を繰り返す事で高純度の二層ナノチューブ試料を得る事に成功した。高純度化された二層チューブをTEM、SEM,ラマンを用いて分析した結果、構造の欠陥が少なく、良好なバンドル構造を有している事が明らかになった。この事から我々の利用した精製プロセスが二層ナノチューブの精製に有効である事が確認された。得られた高純度DWCNTへのボロンドーピングを試みた。燃焼管内でDWCNTとボロン含有試薬を加熱し、ドーピングを行った。この際に、DWCNTと試薬の混合比率を変化させ、DWCNTへのボロンドープ量の調整を試みた。得られたボロンドープサンプルに対して現有設備のSEM(JEOL JEM-6335FS)を用いてマクロな構造を観察し、現有設備のRaman分光分析装置(Kaiser HoloLab 5000 system)を用いて、二層チューブのG,Dピークから結晶性を判断し、Breathingモードからチューブの直径を求め、未ドープ試料からの各ピークの変化から、ドーピングの影響を探った。これによりグラファイトや多層ナノチューブの場合と同様にドープ量はせいぜい2%程度である事が分かった。これらに関してマクロな電気伝導特性を測定した。二年目は現有のCVDチューブ生成装置を用いて二層カーボンナノチューブの生成を継続し、前年度とは生成条件を変更して得られたチューブの精製を既存の設備を用いて行って高純度の二層ナノチューブ試料を得る事を試みた。その結果、炭素源として用いる炭化水素ガス、コンディショニング触媒、そして触媒担持用酸化マグネシウム粉体の条件を厳密に制御する事で、さらなる高純度、低汚染の試料を得る事に成功した。得られた高純度DWCNTへのホウ素ドーピングを試みた。得られたボロンドープサンプルに対して現有設備のフォトルミネッセンス測定装置を用いて特性の変化をとカイラリティの変化を探った。また、フッ素をドープしたDWCNTサンプルについても同様の計測を行った。その結果、フッ素ドーピングにより外層のシグナルが消失する事が明らかになった。ホウ素ドーピングによる影響はPL上に明確には出てこなかった。この事からチューブの半導体的性質にはホウ素が大きな影響を及ぼさない事が明らかになった。

熱処理による結晶性の向上とチューブ/基板の接触状態は改善が可能であったが,プローブとチューブ束の接触状態は二層チューブの柔軟性により改善が困難であったため,データとしてはホウ素未添加の試料との有意な差が見出されていない。ホウ素と同様に重要な添加物であるフッ素を二層チューブに添加してEELS,Raman分光,フォトルミネッセンス,UV分光を行ったところ,フッ素化により二層チューブは外層のみが選択的にフッ素化されることを見出している。導電性の測定は今後の課題であるが,低下するものと見込んでいる。これらの結果より,二層チューブのドーピングがホウ素添加による外層同士の融合促進やフッ素添加による外層のフッ素化など,主に外層に対して影響を及ぼすことが明らかとなり,ラマン,フォトルミネッセンスにより内層が基本的に影響を受けていないことが分かった。このことから二層カーボンナノチューブは内層にナノチューブの本来の物性を期待し,外層を機能化したハイブリッド材料として利用することが可能であることを示した。この知見はナノチューブを利用した複合配線技術や,デバイス応用の際に交差するチューブ同士の影響や基板上に配置することによるチューブの物性変化を最小限にとどめることを可能にするという点で重要な結果である。
シアノバクテリアの細胞間シグナル伝達の研究

単細胞シアノバクテリアSynechocystissp.PCC 6803の走光性運動の細胞間相互作用を顕微鏡観察で評価した。これによって、細胞は低濃度寒天プレート上では個別に運動し、集団を形成しないが、寒天濃度が高いプレートでは集団を形成し、その運動が同期する脈動様の運動を閉めIS田。さらにこの脈動が寒天表面の抵抗を越えたとき、集団全体として走光性運動を示した。また、さまざまな光受容体の変異体も同様の運動特性を示した。このような細胞運動の同期と抵抗の大きい高濃度寒天プレートでの運動能の促進は、線毛による細胞運動の促進とともに、細胞外の刺激が他の細胞の線毛運動の同期を引き起こしたことによると結論された。糸状性シアノバクテリアArthrospira platensisはらせん形糸状体の回転により運動を示す。この糸状体にサイクリックAMP(cAMP)を添加すると、細胞外多糖は糸状体の全面から分泌が促進され、糸状体の回転によって、後方の末端に蓄積した。この多糖の蓄積が糸状体の物体表面への付着や糸状体同士の付着・凝集を引き起こした。また、cAMPは糸状体の線毛運動によって駆動されると考えられる回転運動を促進した。cAMPは、A.platensisが細胞内で合成し、細胞外へ輸送することが知られていることを考慮すると、液性因子であるcAMPの分泌を介して、線毛運動と細胞外多糖蓄積を促進することで、糸状体凝集という細胞間相互作用を引き起こしていると結論された。細胞外からcAMPを添加すると、Synechocystisの細胞では約5分で、線毛運動に必要な遺伝子の発現が上昇した。このような遺伝子発現の制御と線毛運動による細胞間相互作用がシアノバクテリアの運動や細胞凝集などの複雑に制御していることが明らかになった。今後は、これらの経路における制御遺伝子の同定が必要と考えられる。シアノバクテリアの細胞間相互作用を、走光性の線毛運動によって評価した。当初の計画に従って、運動解析がしやすい好熱性シアノバクテリアThermosynechococcus vulcanusの運動性の評価を試みたが、顕微鏡観察ができる温度範囲では高温でみられる線毛運動を再現できなかった。そこで、常温性のSynechocystis sp.PCC 6803を用いて、運動解析を細胞レベルで行った。細胞運動の経時追跡により、近接した細胞が運動しやすいこと、運動した細胞は小集団を形成し、さらに運動性が促進された。また、運動性集団が非運動性細胞を取りこむことで、運動性を回復させた。これらは細胞表層の線毛による細胞間相互作用が細胞運動に必須であることを示している。なお、Synechocystisの細胞は小型球菌のため、個々の細胞の極性と光刺激による運動制御は成功しなかった。Synechocystisの細胞を寒天プレートに滴下直後は、個々の細胞は活発な運動を示したが、やがて数時間運動が低下し、その後再び回復した。どの場合も、個々の細胞はランダムな間欠運動を示したが、統計的には明らかな走光性を示した。上で述べたSynechocystisの細胞運動は寒天濃度に依存していた。つまり、低濃度寒天プレートでは、個々の細胞がランダムな間欠運動を示したが、高濃度寒天プレートでは個々の細胞運動は抑制され、細胞集団の運動が顕著であった。これは、個々の細胞の運動制御と細胞間シグナル伝達による運動制御の両方で調節されていることを示している。
豪雨時の山地河川における洪水の実態把握と予測精度向上

山地域に豪雨があると、これまでの流出モデルでは予測が難しい、鉄砲水や土石流と呼ばれる極端に大きな水位上昇やそれにともなう土砂流出が生じる(以降では「極端洪水」と呼ぶ)。この極端洪水は、観測が困難で実態把握や現象解明が進んでいない。そのため現状では、たとえ豪雨予測ができたとしても、いつどれほど河川の水位や流量が増加するのか予測できない状況がある。本研究では,申請者らが検討してきた新たな観測システムを用い、観測に基づいて豪雨時の山地河川での極端な洪水現象の実態を把握し、実態に基づいて豪雨時の水位や流量の予測精度向上をめざすことを目的としている。研究期間中に次の二つの課題に取り組む。1流域の湿潤度に依存する斜面の応答速度の実態解明と、2水位・流量と河道抵抗の関係の解明を行い、定式化し、予測モデルへの組み込み。1については、山地河川(東京大学樹芸研究所青野研究林)での1分間隔の水位観測から、斜面が十分に湿潤である場合、降雨ピークから流出ピークまでのピークの伝播速度は非常に速い場合があることを明らかにし(Asano and Uchida, 2018)、斜面と河道におけるピーク伝播速度を定量的に示した(Asano et al.,投稿中)。2については、独自の観測結果と文献調査から、山地河川の河道抵抗(水の流れやすさの指標)の増水にともなう変化を河床形態毎に整理した(浅野他2018)。河道抵抗は増水にともない急激に小さくなるが、多くの河川で水位が一定以上大きくなると抵抗の変化が小さくなること、また抵抗は小さくなるとはいえ、これまで基準としてきた値と比べると大きい場合が多く、山地河川では水深が上昇しやすくなる傾向を明らかにした。また、豪雨時の水位や流量変化についても定量的に把握するため、東京大学秩父演習林内の数十km2の流域で短い時間間隔での多地点での水位観測と、量水観測を行った。昨年度は洪水の実態把握中心に行った。観測は大雨による土砂流出で量水施設の一部が一時的に中断し、一部の水位計が埋没した以外は計画通りに進んでいる。流量観測の中断や水位計の埋没は想定内であるが、大雨時のデータ取得が目標なので残念である。得られた観測データの整理が昨年度中にはできなかったので、来年度に行うこととした。一方精力的に既存データ解析を進め、豪雨時の山地河川における極端洪水現象の実態について、以下の点が明らかになった。斜面の応答については、湿潤条件下では、斜面の応答速度が非常に早い場合があり(最大で数m/s)、豪雨時の斜面の応答には圧力伝播による水移動が卓越することを実際のデータから示すことができた。また、このような実測が行われた場所は他にないため、この結果が一般的であるのか調べるために、および応答速度の定量化を進めるために、水文観測態勢の整った荒川源流域(東京大学秩父演習林)での詳細な水位観測も開始できた。一方河道については、観測と文献調査から山地河道は凸凹が大きいため河道抵抗が大きく、豪雨時も水がそれほど早く流れないので水位が上昇しやすくなる傾向は山地河川に一般的な傾向であることを示せた。階段状河道の大規模出水のデータが限られているため、秩父演習林内の階段状河道に水位計などの機器を設置し継続して観測を行った。豪雨時のビデオ画像からの水位を読み取り、読み取り誤差の評価も行ってきたが、今年度はこれらのデータを用いて、流出解析等を開始した。また、国交省が収集している流量データのうち、山地河川での観測データについて整理し、大きな出水時の降雨ー流出応答を調べた。【さらなる実態把握】昨年度取得した秩父演習林における短い時間間隔での水位観測データ、流量観測データ等の整理を行う。雨量観測結果、レーダ雨量データの収集と整理を行う。湿潤条件下では斜面の水移動は圧力伝播が卓越するのか調べる。また3カ所ある流量観測結果を用いて、流量の空間分布の評価、洪水時の河道抵抗の分布、河道の洪水伝播速度などを評価する。豪雨時のビデオ画像から読み取った大規模出水時のデータを用いて流出解析を進める。大規模出水時の水位、流量変化と流域地形や河床形態や降雨条件との関係を分析する。様々な流域条件(地質、地形、土地利用)および降雨条件のデータを収集し、現象理解のための分析と、モデル検証に向けたデータ整備を行う。【定式化にむけて】今回新たに得られた結果やこれまでに得られてきた理解に基づいて、洪水時の山地河川の応答特性の定式化を行う。大規模出水時のデータを取得するのは非常に困難であったが、新しいデータや情報は得られつつある。まずは、実測データに基づき、河道の抵抗をモデル化する。また、斜面の圧力伝播による水移動のモデル化についても検討する。

本研究では,申請者らが検討してきた新たな観測システムを用い、観測に基づいて豪雨時の山地河川での極端な洪水現象の実態を把握し、実態に基づいて豪雨時の水位や流量の予測精度向上をめざすことを目的としている。研究期間中に次の二つの課題に取り組む。1流域の湿潤度に依存する斜面の応答速度の実態解明と、2水位・流量と河道抵抗の関係の解明を行い、定式化し、予測モデルへの組み込み。1については、山地河川(東京大学樹芸研究所青野研究林)での1分間隔の水位観測から、斜面が十分に湿潤である場合、降雨ピークから流出ピークまでのピークの伝播速度は非常に速い場合があることを明らかにし(Asano and Uchida, 2018)、斜面と河道におけるピーク伝播速度を定量的に示した(Asano et al.,投稿中)。2については、独自の観測結果と文献調査から、山地河川の河道抵抗(水の流れやすさの指標)の増水にともなう変化を河床形態毎に整理した(浅野他2018)。河道抵抗は増水にともない急激に小さくなるが、多くの河川で水位が一定以上大きくなると抵抗の変化が小さくなること、また抵抗は小さくなるとはいえ、これまで基準としてきた値と比べると大きい場合が多く、山地河川では水深が上昇しやすくなる傾向を明らかにした。また、豪雨時の水位や流量変化についても定量的に把握するため、東京大学秩父演習林内の数十km2の流域で短い時間間隔での多地点での水位観測と、量水観測を行った。昨年度は洪水の実態把握中心に行った。観測は大雨による土砂流出で量水施設の一部が一時的に中断し、一部の水位計が埋没した以外は計画通りに進んでいる。流量観測の中断や水位計の埋没は想定内であるが、大雨時のデータ取得が目標なので残念である。得られた観測データの整理が昨年度中にはできなかったので、来年度に行うこととした。一方精力的に既存データ解析を進め、豪雨時の山地河川における極端洪水現象の実態について、以下の点が明らかになった。斜面の応答については、湿潤条件下では、斜面の応答速度が非常に早い場合があり(最大で数m/s)、豪雨時の斜面の応答には圧力伝播による水移動が卓越することを実際のデータから示すことができた。また、このような実測が行われた場所は他にないため、この結果が一般的であるのか調べるために、および応答速度の定量化を進めるために、水文観測態勢の整った荒川源流域(東京大学秩父演習林)での詳細な水位観測も開始できた。一方河道については、観測と文献調査から山地河道は凸凹が大きいため河道抵抗が大きく、豪雨時も水がそれほど早く流れないので水位が上昇しやすくなる傾向は山地河川に一般的な傾向であることを示せた。階段状河道の大規模出水のデータが限られているため、秩父演習林内の階段状河道に水位計などの機器を設置し継続して観測を行った。豪雨時のビデオ画像からの水位を読み取り、読み取り誤差の評価も行ってきたが、今年度はこれらのデータを用いて、流出解析等を開始した。また、国交省が収集している流量データのうち、山地河川での観測データについて整理し、大きな出水時の降雨ー流出応答を調べた。【さらなる実態把握】昨年度取得した秩父演習林における短い時間間隔での水位観測データ、流量観測データ等の整理を行う。雨量観測結果、レーダ雨量データの収集と整理を行う。湿潤条件下では斜面の水移動は圧力伝播が卓越するのか調べる。また3カ所ある流量観測結果を用いて、流量の空間分布の評価、洪水時の河道抵抗の分布、河道の洪水伝播速度などを評価する。
子どものヘルスプロモーション促進への基礎教育における外来看護実習と外来看護の構築

本研究は、子どもが自分の身体や健康に関心をもつことができるように、「診察」「吸入」「点滴注射」「血液/採血」「予防接種」について、その理由と実際のやり方などを、実物・モデル教材を用いて外来看護師と看護学生が協働して実施し評価したものである。子どもたち(5歳前後)は緊張しながらも積極的に取り組み、一緒に参加した保護者は子どもに説明することの大切さなどに気付いていた。また、看護学生は補助的に関わりながらも、子どもの様子や健康教育の意味について理解を深めることが出来ていた。これらの結果などをもとに、外来看護師が行う子どもたち向けの健康教育プログラムの具体的提案や、看護学生の外来実習の方法について検討した。本研究は、看護学基礎教育を行なっている大学と小児外来をもつ臨床現場が協同・連携して子どものヘルスプロモーションの促進に向けた看護プログラムを実践し、基礎教育における外来看護実習の位置づけの明確化と、子どものヘルスプロモーションに向けた外来看護のモデル構築を目指すことを目的としている。具体的には、(1)国内外の子どものヘルスプロモーションや外来看護に関する資料・情報収集の実施(2)外来看護実習の受け入れ状況、実習実施状況について医療機関、教育機関の調査の実施(3)子どものヘルスプロモーションに向けた看護プログラムの開発と実践評価(4)子どものヘルスプロモーションを支えるための外来看護の検討と提言(5)看護基礎教育における外来看護実習カリキュラム案の提案本研究は、子どもが自分の身体や健康に関心をもつことができるように、「診察」「吸入」「点滴注射」「血液/採血」「予防接種」について、その理由と実際のやり方などを、実物・モデル教材を用いて外来看護師と看護学生が協働して実施し評価したものである。本研究は、看護学基礎教育を行なっている大学と小児外来をもつ臨床現場が協同・連携して子どものヘルスプロモーションの促進に向けた看護プログラムを実践し、基礎教育における外来看護実習の位置づけの明確化と、子どものヘルスプロモーションに向けた外来看護のモデル構築を目指すことを目的に4年計画で行なう研究である。初年度の今年度は、外来におけるヘルスプロモーション促進のためのプログラム作成のために基礎データを収集した。(1)文献検討:子どものヘルスプロモーションについてはその定義が明瞭でないが、健康増進のための関わり、慢性疾患児への教育的支援などが発表されている。子どものヘルスプロモーションに外来看護としてどのように関わっているかの文献は少なかった。(2)看護基礎教育機関への調査:看護大学82校中50校は何らかの形で外来実習を行なっていた。実習目標はほぼ達成しているとしているが、2日以内の実習のため学習内容は知識理解に留まっており、具体的な援助過程には至っていない。実習内容を深めるための指導体制や時間、場の課題があげられており、小児看護学の中での外来看護の教授・実習内容をカリキュラムにどう位置づけていくか要検討である。(3)医療機関への調査:医療機関へは小児科標榜診療所、一般総合病院小児科外来、小児専門病院に調査依頼を行い返送のあった310データにっいて分析した。外来では積極的にさまざまな教材を取り入れて看護に活かす努力が見られているが、現場の厳しさについても意見が多くあげられていた。また実習を受け入れている病院においては、学生の準備状態、指導体制についての課題が教育機関同様にあげられており、教育・臨床現場双方から課題解決策を検討していくことが示唆された。今後さらなる意見の吸いあげを行なうためにフォーカスグループインタビューを予定している。(4)海外視察について:イギリスの大学2箇所および子ども病院等4箇所の見学・意見交換を通して、子どものヘルスプロモーション支援のための基礎教育と実践との連携にっいて検討中である。2年目の今年度は、以下3点について実施した。(1)フォーカスグループインタビューの実施:昨年度の調査結果より、外来実習についての具体的現状の確認とカリキュラム素案の検討のため、医療機関に勤務する看護師15名、教育機関の小児看護学教員13名にグループインタビューを実施し、小児看護学における外来看護実習カリキュラム作りに着手し始めた。(2)看護プログラムの作成:子どものヘルスプロモーションに向けた看護プログラム4種類について作成・検討を行った。外来診察パッケージはシナリオが完成。処置パッケージと検査パッケージについては内容を検討し、コンピューターグラフィックスおよび絵本の作成段階にある。外来探検パッケージについては内容検討中である。どのプログラムも看護師と実習生との協働で行われるため、その方法の検討、および評価指標について検討し、次年度は順次実施評価する予定である。(3)日本外来小児科学会のワークショップの企画・運営:診療所や外来における小児看護学実習について、50名の参加者とともに意見交換を行い、外来看護実習内容について検討した。次年度も継続的に実施のため学会にエントリーし、診療所における外来看護実習カリキュラムを提示し討議する予定である。今年度より看護プログラムの作成と実施に向け、特に医療機関の研究協力を募り、外来での実施に向け準備を整えている。

本研究は、看護学基礎教育を行なっている大学と小児外来をもつ臨床現場が協同・連携して子どものヘルスプロモーションの促進に向けた看護プログラムを実践し、基礎教育における外来看護実習の位置づけの明確化と、子どものヘルスプロモーションに向けた外来看護のモデル構築を目指すことを目的に4年計画で行なう研究である。3年目の今年度は、以下の2点を中心に実施した。(1)看護プログラムの実践・評価:プログラムの実施にあたり、アウトカムモデルを使用して評価方法を検討した。そして今年度は3つのプログラムを実践・評価している。「診察」は4医療機関・17名の参加、「吸入」は3医療機関・13名の参加、「点滴」は2医療機関・7名の参加がそれぞれあった。プログラムに対する評価は、子どもの参加観察、同席保護者へのグループインタビューなどを通して行ったが、どのプログラムに対しても子どもたち(3歳6歳)の反応はよく、保護者からの意見も肯定的であった。3プログラムについては次年度も引き続き実施すること、また新たに「予防接種」「血液検査」を加えて実施・評価を検討している。また、次年度はこれらのプログラムを公開し、より多くの看護師が外来で実施できるように啓発していくことと、実施前後の子どもの反応についても質問紙調査を実施しているため、その評価も含めたヘルスプロモーションの外来看護実践を検討する。(2)小児看護学における外来看護実習カリキュラムの検討:昨年度に引き続き、外来ワークショップに参加した外来看護師・看護教員の17名で外来実習内容について検討した。提案した実習内容は、19項目92内容である。現場に即し、かつ今日の外来看護の重要性を学生が学ぶことができるように、具体的な学生への関わり方についても検討し精選している。次年度はこれらの内容を看護教育者等から意見を伺いカリキュラム内容として提示していくとともに、上記プログラムへの学生参加による評価を行い、外来での学生実習の学びの環境を提案していく予定である。本研究は、看護学基礎教育を行なっている大学と小児外来をもっ臨床現場が協同・連携して子どものヘルスプロモーションの促進に向けた看護プログラムを実践し、基礎教育における外来看護実習の位置づけの明確化と、子どものヘルスプロモーションに向けた外来看護のモデル構築を目指すことを目的に4年計画で行なう研究である。4年目の最終年度は、以下の3点を中心に実施した。(1)看護プログラムの実践・評価:昨年度作成した評価方法を基に、今年度は2つのプログラムを中心に実践・評価した。「血液検査」は3医療機関・4名の参加、「予防接種」は3幼稚園・29名の参加があった。プログラムに対する評価は、子ども(5歳前後)の参加観察、同席保護者(幼稚園では幼稚園教諭)へのインタビューなどを通して行った。
網膜ニュ-ロンの軸索輸送障害時における細胞内物質の動態に関する研究

網膜細胞による情報伝達には網膜ニュ-ロンに発想する神経伝達物質が深く関わる。この伝達物質は細胞内カルシウムイオン[Ca^<2+>]i上昇をシグなるとしてシナプスにおいて放出、作用、再利用される.伝達物質の前駆物質やペプチドは細胞体から神経末端へと軸索輸送されている.この輸送能が傷害されると正常な神経機構が作働しなくなる。輸送能は低酸素、虚血、代謝異常などで傷害されるが、興奮性アミノ酸による神経刺激、神経傷害もその1つのモデルである。一方ミュ-ラ細胞も神経情報伝達に大事な役割をもつことが明らかとなってきた。こうしな状況下我々は培養ミュ-ラ細胞、網膜ニュ-ロンを用いて、これらの細胞に刺激、毒性を示す物質の影響を細胞レベルで解明する目的で研究を行った。まず、培養網膜ニュ-ロンに、ドパミン,GABA,アセチルコリン、サブスタンスPが発現していることを間接蛍光法により同定した。[Ca^<2+>]iの濃度上昇は指示薬(furaー2AM)蛍光濃度をfluorospectrometryにて測定された。アミノアジピン酸では、ミュ-ラ細胞にはLー体が最も強く作用し、ニュ-ロンにはDー体が強い作用を有することを明らかにした。アミノアジピン酸を培養系に投与し長期観察した実験では、ミュ-ラ細胞のDNA量は抑制されなかった。またGFAPを増強(発現増加)させることも明らかとなりミュ-ラ細胞のアジアピン酸に対する抵抗性が示された。この実験ではニュ-ロンはむしろ脆弱であることがわかった。4アミノピリジンを用いた同様の実験からは、培養網膜ニュ-ロンの多くがLー型のカルシウムチャンネルを有し、一部はTー型の可能性があることを薬理学的に推定しえた。網膜ニュ-ロンとミュ-ラ細胞が共存した場合とミュ-ラ細胞単独の場合の細胞応答の差もこうした実験を通して明らかとなった。このほか熱ショック作用、basic FGFの局在、神経原性腫瘍についても研究した。網膜ニュ-ロンの培養系において、まず購入した倒立型微分干渉装置付き双眼顕微鏡による観察が行われた。培養ニュ-ロンはネットワ-クを形成し、かつグロ-スコ-ンも存在した。ニュ-ロンやミュ-ラ-細胞と基質への関り方は検討中であるが、ニュ-ロンとミュ-ラ-と細胞との関り方をみるには解像力が十分とはいえなかった。そこでミュ-ラ-細胞と混合培養しない、新生児ラット網膜をラミニン塗布を施した培養系で、NCAMの発現の有無を確かめた。NCAMは培養1日目で一部のニュ-ロンで発現したが、3日以降には殆ど消失した。また予めNCAM抗体を加えて培養すると、ニュ-ロン同志はばらばらになる傾向を顕著に示した。すなわち、網膜細胞を培養系に移すと胎生期に発現することが知られているNCAMが発現し、再構築がはじまると考えられる。さてこうして出来た培養ニュ-ロンがどれだけニュ-ロンとして性質を有しているかを調べる為に神経伝達物質が発現しているか否か、関節蛍光法を用いて検討した。その結果ド-パミン、サブスタンスP、γアミノブチル酸(GABA、アセチルコリンを発現しているものが多数認められ、既に検討済みのニュ-ロフィラメントペプタイドの発現と共に、培養ニュ-ロンが確かにニュ-ロンとしての性質を維持していることが確認された。しかし形態との対応は明らかでなかった。