hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ヒト染色体逆位モデルマウスを用いたＥＶＩ１高発現による白血病幹細胞維持機構の解析

計画当初は3q21q26マウスが白血病を発症するか未定であり、造血幹細胞の解析を主に予定していたが、24年度の解析から3q21q26マウスが白血病を発症することがわかったため、白血病幹細胞の解析も含めて実施することにした。3q21q26マウスにおいて、3ヶ月令、6ヶ月令(白血病発症前)および白血病発症後の造血幹細胞および前駆細胞をフローサイトメトリーによって解析したところ、白血病発症前から、野生型マウスには存在しない表面マーカーの組み合わせをもつ造血前駆細胞様の細胞が蓄積していることがわかった。さらに、この細胞の性質をコロニーアッセイによって解析したところ、コロニー形成能が高いことがわかった。これらの結果から、EVI1遺伝子の高発現によって、白血病発症前から異常な細胞が蓄積し、これらの細胞がさらなる変異を得て白血病幹細胞になるのではないかと考えられた。24年度に3q21q26マウスのC57BL/6系統への純系化が完了したので、25年度にはこのマウスを用いて骨髄移植実験を行い、3q21q26マウスで蓄積している異常な細胞の性質を明らかにする。25年度では、3q21q26マウスの造血幹細胞および白血病幹細胞の性質解析を進めるとともに、24年度に純系化した3q21q26マウスを用いて骨髄移植実験を行う。白血病発症前および発症後の3q21q26マウスの骨髄から造血幹細胞、前駆細胞および3q21q26マウスに特異的に蓄積している細胞を分離し、それぞれを放射線照射マウスに移植することによって、幹細胞機能を解析する。また、それぞれの細胞において発現アレイ解析を行い、幹細胞としての性質を支えている転写因子EVI1の標的遺伝子を明らかにする。次年度使用額は、当初計画していた造血幹細胞、白血病幹細胞の解析の一部(コロニーアッセイ、細胞周期解析、アポトーシス解析)を次年度に延期することによって生じたものであり、延期した解析に必要な経費として平成25年度請求額と合わせて使用する予定である。25年度では、3q21q26マウスの移植実験を行う予定なので、マウスの購入費と飼育費として使用する。また、解析に用いるフローサイトメトリー、発現アレイの試薬の購入費、またこれらの解析に用いる機器の使用料として使用する。この研究成果を25年秋に行われる海外学会で報告するため、旅費として使用する。
未同定X線天体を用いた新しい中性子連星系の探査

ASTRO-H衛星での吸収線などの観測を実現するため、SXSの集光を担う望遠鏡の応答関数の作成を進めた。測定を完了し、現在は打ち上げに備えて、温度制御周りの仕上げに向け、準備を進めている。Chandra, Suzakuによる新しく発見したLMXBの観測提案を進め、Suzaku AO10では1天体採択されている。Chandraについては、審査中である。現在までに獲得した未同定天体の解析を進め、そのうち一天体の起源が銀河団であることがわかった。その件について査読論文として投稿している(審査中)。26年度が最終年度であるため、記入しない。銀河系バルジの48未同定天体の内、半分を目標に設定して、観測提案を予定していた。そのうち、平成25年度中に取得予定であったチャンドラ衛星の観測が衛星運用の都合で遅れ、平成26年度にずれ込んだ。実際の観測日時を以下にまとめる。これに伴い、資金の延長申請をした。26年度中に観測は行われ、遅延は発生したが研究を遂行できた。早速データ解析に着手し、並行して光赤外の対応天体を進めている。一方、すでに取得したデータを用いて論文を作成し、いままでに二本の査読論文が受理され、1本が投稿中である。ドラフト段階のものが3本ある。今年からは残りの24天体の観測提案を通すこと、いままで解析した天体の光赤外追観測を進めること、観測が済んだ24天体からNSのpopulationについてもまとめを開始している。また、観測と平行して、Astro-H衛星の観測準備を進めており、2台搭載される軟X線望遠鏡を完成させている。いままでの二年間で地上較正データの取得開始にこぎつけた。来年度も継続し、平成27年度の観測開始に備える。平成25年度中に取得予定であったチャンドラ衛星の観測が衛星運用の都合で一部のデータ取得が遅れたものの、観測が行われた。ASTRO-Hでの研究を発展させるため、望遠鏡部の性能評価を進めた。取得データの解析をすすめ、論文作成を進める。平成27年度に予定されているASTRO-Hの打ち上げに向けて、望遠鏡の応答関数の構築を進める。
霊長類オプシン遺伝子の機能解析による人類色覚の起源と進化の研究

新世界ザルであるコモンマーモセットとヨザルは従来の仮説と異なり複数の赤緑視物質遺伝子をもつことが前年度に示唆された。そこでこのことを検証するために各々のオス個体よりゲノムライブラリーを作成し赤緑視物質遺伝子の単離を試みた。そしてこれら2種において実際に複数の異なる赤緑視物質遺伝子の単離に成功した。コモンマーモセット赤緑視物質遺伝子にはp561、p556、p543の3表現型が知られているが、単離された遺伝子は塩基配列からp561とp543をコードしていることがわかった。コモンマーモセット計30個体に対するサザンハイブリダイゼーションからp556に特有のバンディングパターンを推定することを得たため、それを示す個体の網膜より赤緑視物質遺伝子cDNAを単離し、塩基配列からそれがp556であることを確認した。さらに視物質再構成実験によりこれらの遺伝子産物の吸光特性も予想される表現型と一致することを確認した。これらによりオスに2種類の表現型に対応する遺伝子を持つ個体がいることが明らかとなった。FISH(fluorescent in situ hybridization)分析の結果、コモンマーモセットにおいてもヨザルにおいても赤緑視物質遺伝子はX染色体長腕端に位置し、他の染色体上には存在しないことを明らかにした。しかしながらコモンマーモセットの家系を用いて三型の遺伝様式の解析を行った結果、オスにおける赤緑視物質遺伝子の複数性は二卵性双生児胚間の血液交換によるものであり、複数の遺伝子座位が存在するわけではないことが明らかになった。一方、ヨザルにおいては5種類の赤緑視物質遺伝子が単離されたが、それらのうち4遺伝子は終止コドンにより翻訳領域が中断されており、機能しているのは1種類のみと考えられた。これらの結果は従来の新世界霊長類色覚遺伝子に関するX染色体性1座位3対立遺伝子仮説にゲノム解析学的根拠を与えるものであった。新世界ザル12種及び原猿類4種の血液あるいは凍結組織片を京都大学霊長類研究所より入手し、DNAを抽出した。種の内訳は次の通りである。新世界ザル:ケナガクモザル(Ateles belzebuth)、チュウベイクモザル(Ateles geoffroy)、フサオマキザル(Cebus apella)、リスザル(Saimiri sciureus)、ヨザル(Aotus trivigatus)、ダスキーティティ(Callicebus moloch)、ワタボウシタマリン(Saguinus oedipus)、シロクチタマリン(Saguinus labiatus)、アカテタマリン(Saguinus midas)、セマダラタマリン(Saguinus fuscicollis)、コモンマーモセット(Callithrix jacchus)、クロミミマ-モセット(Callithrix penicillata)。原猿類:ワオキツネザル(Lemur catta)、エリマキキツネザル(Verecia variegatta)、オオギャラゴ(Galago crassicaudatus)、ショウギャラゴ(Galago senegalensis)。ヒトの赤視物質遺伝子とのサザンハイブリダイゼーションの結果フサオマキザル、ヨザル、コモンマーモセット、オオギャラゴそしてショウギャラゴは複数の赤視物質遺伝子座位をもつことを示唆した。これは従来の霊長類色覚の定説とは相容れない結果である。現在これらの種のゲノムライブラリーを作成中であり、より詳細な遺伝子の解析を展開する予定である。一方、非霊長類型高度色覚の代表としてのハトに関しては、全ての視物質遺伝子の塩基配列を決定した。
心臓形態発生におけるレチノイン酸転写制御因子に関する研究

胚発生の初期より全身に血液を送るポンプとして重要な役割を担う心臓は、形態形成の過程で多くの遺伝子がオン・オフすると考えられているが、未だにその全容は明かでない。私たちは動物実験でレチノイン酸がマウス胎仔心の流出路に異常を誘発し、流出路円錐隆起部を構成する間葉系細胞の増殖が抑制されることを確認してきた。ビタミンAシグナルは細胞内レチノイン酸結合蛋白、核内レチノイン酸受容体(RARとRXR)などによって標的遺伝子のレチノイン酸応答配列に結合しシグナルが伝達されているといわれている。そこで核内レチノイン酸受容体(RAR)に注目し、レチノイン酸による核内レチノイン酸受容体(RAR)発現制御を胎仔心(in vivo)を用いて検討した。正常胎仔心では核内レチノイン酸受容体(RAR)-β、-γは胎齢11日から15日に減少傾向が認められた。レチノイン酸を投与すると投与4時間後に大きなピークを示し、胎齢12または13日に小さなピークを示した。レチノイン酸投与後、胎齢12日に胎仔心を3つに分割し核内レチノイン酸受容体(RAR)発現を検討したところ、心流出路ではレチノイン酸処理により核内レチノイン酸受容体(RAR)-β発現の減少傾向が見られ、核内レチノイン酸受容体(RAR)-γでは増加傾向が認められた。第60回日本循環器学会(1996,大阪)発表、第32回日本小児循環器学会(1996,大阪)発表、Weinstein Cardiovascular meeting(1996,Philadelphia,USA)発表。第61回日本循環器学会(1997,東京)発表予定、第32回日本小児循環器学会(1997,京都)発表予定、第37回日本先天異常学会(1997,京都)シンポジウム発表予定。現在、上述した研究成果をDevelopmental Biologyに投稿準備中である。
炎症性微小環境で活性化されるNox複合体/ROSによる胃がん発生機序の解明

H.pyroli感染に起因する慢性炎症は胃がん発生の主な原因の一つである。本研究では、胃炎組織に浸潤してきた間質細胞から分泌されるTNF-αによってNox1複合体が活性化するメカニズムを明らかにし、これらが胃粘膜の過形成や化生の形成に関わる可能性を明らかにした。本研究で行った実験の結果は、胃炎組織で異常腺管が発生するメカニズムを解明する一端となる、新たな知見となった。またNox1複合体を阻害することによって、胃がん発生を予防する可能性について示すことが出来た。本研究は、炎症依存的ながん発生メカニズムを解明する一端として、Noxo1を含むNox1複合体によって産生されるROSが胃がん発生において果たす具体的な役割を明らかにすることを目的として行っている。具体的には、Noxo1遺伝子コンディショナル欠損マウスを作製し、胃がん発生モデルマウスであるGanマウスとの交配実験によって、Noxo1の遺伝学的機能の解明を目指すと同時に、胃がん細胞株を用いた、Noxo1ノックダウン実験及び強制発現実験を行うことによって、Noxo1の分子細胞学的な機能を明らかにすることを目的とする。2Noxo1遺伝子発現調節機構の解明:3種類の胃がん細胞株(SNU601、SNU719およびKATOIII)を用いて、培地へのTNF-α添加実験、Noxo1のプロモーターアッセイ、p65のノックダウン実験を行い、Noxo1がTNF-α依存的に活性化されたp65によって直接転写制御を受けることを明らかにした。また、Noxo1ノックダウン実験を行い、TNF-α刺激後のROS産生にNoxo1が必要であることを明らかにした。以上の結果から、TNF-αによるNoxo1を介したROS産生機構について、in vitroレベルでの制御機構を明らかにした。3Nox1複合体の阻害剤の経口投与によって、Ganマウスの腫瘍形成が抑制されることを明らかにした。この結果は炎症環境依存的な発がんにおけるNox1複合体のin vivoレベルでの重要性を示している。Noxo1コンディショナル欠損マウスの作製について、申請時にはNoxo1(flox/flox)マウスとRosa-CreERT2マウスとの交配実験を予定していたが、Noxo1(flox/flox)Rosa-CreERT2マウスの胃粘膜上皮組織において、Tmx投与後に目的のノックアウト効率が得られなかったため、Cln18-CreERT2マウスを新たに作製してNoxo1(flox/flox)マウスとの掛け合わせを進めている。また、胃がん細胞株を用いたin vitroでの実験は、ほぼ予定通り進行している。さらに、Nox1複合体に対する阻害剤の投与実験において、抗腫瘍効果が得られたことから、炎症環境依存的な発がんにおけるNox1複合体の重要性をin vivoレベルで示すことができた。本研究は、炎症依存的ながん発生メカニズムを解明する一端として、Noxo1を含むNox1複合体によって産生されるROSが胃がん発生において果たす具体的な役割を明らかにすることを目的として行った。H28年度は、以下に示すようにNoxo1遺伝子コンディショナル欠損マウスの作製を行い、Noxo1の遺伝学的機能の検証を行うとともに、胃がん発生モデルマウスや胃炎モデルマウスを用いてNox1複合体阻害剤の投与実験を行い、Nox1複合体のin vivoでの機能を明らかにした。2前年度、Nox複合体阻害剤の経口投与により、マウスの胃腫瘍形成が抑制されることを明らかにした。H28年度はこの阻害剤を、胃炎マウスモデル(C2mE)へ投与する実験を行い、胃炎組織における過形成や化生が抑制されることを明らかにした。また、本研究期間全体を通して胃がん細胞株を用いた実験を行い、TNF-αの下流でNox1複合体が活性化するメカニズムを明らかにした。胃炎組織に浸潤した炎症細胞から分泌されるTNF-αによってNox1複合体が活性化するメカニズムを明らかにし、これらが過形成や化生の形成に関わる可能性を明らかにした。以上の結果は、胃炎組織で異常腺管が発生するメカニズムを解明する端緒となる新知見となった。また、本研究成果によりNox1複合体を阻害することによって、胃がん発生を予防できる可能性を示すことが出来た。今年度は、Noxo1(flox/flox)Cln18-CreERT2 Ganマウスの作製を行い、マウス胃がん腫瘍組織の病理学的解析を行うことによって、胃がん発生におけるNoxo1の遺伝学的機能を明らかにする。また、これらGanマウスの腫瘍上皮細胞をオルガノイド培養し、形態の評価および分化・未分化マーカーでの染色を行うことによって、Noxo1の幹細胞性への寄与を評価する。

以上の結果から、in vivoにおいて確認されたフェノタイプに基づいて、胃がん細胞株を用いたNoxo1ノックダウン実験および強制発現実験を行い、Noxo1が関与する細胞生理学的機能を明らかにする。さらに、Noxo1ノックアウトマウスの腫瘍組織を用いて遺伝子発現解析を行い、これらの表現型に関与するシグナル経路を明らかにする。特に、間質細胞と腫瘍上皮細胞との相互作用による現象を解析するため、RAW264.7やTHP-1などのモノサイトと胃がん細胞との共培養実験を行う。腫瘍遺伝学
和漢兼作の作品集の構造に関する研究

今年度は『大江千里集』『法門百首』『和漢朗詠集』『千五百番歌合』における構造の問題を中心に研究を進め、論文一本を専門書に掲載し、学会発表を二件行い、その成果を発表した。『大江千里集』に関して、本年度の研究は擬定家本の本文を精査し、それと桂宮本との本文異同の性格を検討した。書写年代の早い擬定家本は必ずしも時代の下る桂宮本より優れる本文を持っていると言えない。従来の桂宮本を尊重する見解は、擬定家本が公開されている現在でも有力である。『法門百集』は『法華経』の経文を句題として詠まれた和歌を収める歌集である。その中に「盲亀浮木」という故事を踏まえる亀の歌が存在する。今年度の研究は和歌における亀の歌を精査し亀に関わる和歌における漢文学及び仏典の受容そしてそのような受容が和歌集の賀部に与えた影響について研究を行った。亀は和歌の研究ではほとんど研究対象として扱われたことのない歌語である。『法華経』の「盲亀浮木」という故事から出発し和歌における亀を検討することは今まで盛んに行われてきた歌語研究の補足となる。また、本研究は亀を詠む和歌における漢文学の受容を明らかにしただけではなく和歌における日本独自の変容をも論じた点に意義がある。『和漢朗詠集』に九月尽という部立が存在する。この部立に収められる漢詩句や和歌の主旨は惜秋である。九月尽は中国古典文学に存在しないジャンルであり、日本古典文学にオリジナルな特徴である。今年度の研究は九月尽部における和歌の構造に注目し、今まで指摘されていなかった九月尽部の惜秋歌における日本漢詩の影響及び惜秋詩における漢籍の惜春文学の受容について考察した。『千五百番歌合』に関して、それに見られる漢詩句形式による判詞を手がかりに歌語「ひぐらし」の詠まれ方が時代につれて変遷する中、詩語「寒蝉」との統一性をはかろうとする和漢兼作の歌人も存在したことを明らかにした。本年度は論文一本を専門書に掲載し、学会発表を二件行うなど、着実に研究を進め、かつその成果を発表した。『アジア遊学』掲載の論文では、「亀」という題材を取り上げ、漢故事や仏典由来の比喩を平安時代の和歌がどのように取り入れ、変容させたかを解明した。学会発表の一件目では、『千五百番歌合』に見られる漢詩句形式による判詞を手がかりに、歌語「ひぐらし」の詠まれ方が時代につれて変遷する中、詩語「寒蝉」との統一性をはかろうとする和漢兼作の歌人も存在したことを明らかにした。二件目では、惜秋という日本独自の詩歌の思想が、やはり漢文学の影響を受けながら表現を発達させてきたことを論じた。特に『和漢朗詠集』の九月尽部に収められた、やや特異な惜秋歌に、日本漢詩からの影響があることを論証できた。いずれの業績も、和漢比較文学の観点から価値を持ち、特に後二者に関しては、『千五百番歌合』判詞、『大江千里集』、『和漢朗詠集』といった、和漢の詩歌をともに並べる形式の作品に着目するという本研究のテーマの有効性を示すものだと考えられる。このように十分に研究の進展が見られ、本研究の完成に向けて順調に進んでいると評価できる。四月:前年度に既に学会発表を行った『千五百番歌合』における「ひぐらし」詠の構造に見られる漢文学の影響に関する研究成果を練り上げ、投稿論文にする作業を行う。五月:『大江千里集』・『和漢朗詠集』及び勅撰和歌集における六月末の「納涼歌」における漢文学の影響の有無および各作品の構造の関連性の有無を確認する作業を行う。六月:「納涼歌」の研究の成果を踏まえ、学会発表に向けて、原稿を作成し、学会発表の準備を行う。七月:前年度に行った『大江千里集』の部立に関する研究を再検討し、『大江千里集』の部立における漢文学の影響のみではなく、『大江千里集』が後世の作品集に与えている影響をも重視し、研究を進める。より合理性のある結論に導かせ、研究誌に投稿する準備を行う。八月:六月末の「納涼歌」の研究の学会発表を行い、質疑の時に得られた意見を踏まえ、研究の合理性を高め、学術誌に投稿する準備を行う。九月:『和漢兼作集』の構造を扱う準備として、先行研究を踏まえて、現存する二系統の本文の関係をより明白にする作業を行う。十月:『和漢兼作集』の部立及び部立内部の構造を分析し、これまでの作品集との類似性を探り、受容関係の有無を確認する作業を行う。十一月:『和漢兼作集』の構造に関する研究の成果を纏め、学会発表に向けて準備を行う。十二月:これまで行った『大江千里集』・『法門百首』・『和漢朗詠集』・『千五百番歌合』・『和漢兼作集』の構造に関する研究の結論を系統的に帰納し、博士論文の作成に向けて目録を作成する一月:博士論文の作成に向けて、各部分の内容が繋がるように書き直し、論文の言葉遣いを吟味し、推敲しながら、各研究の合理性を再考する。二月:博士論文の最終チェックを行う。

三月:和漢兼作の作品集に関する研究の研究報告を作成し、二年間の研究をより多くの方々に理解できるよう工夫し、出版できるよう作業を行う。今年度は『大江千里集』『法門百首』『和漢朗詠集』『千五百番歌合』における構造の問題を中心に研究を進め、論文一本を専門書に掲載し、学会発表を二件行い、その成果を発表した。『大江千里集』に関して、本年度の研究は擬定家本の本文を精査し、それと桂宮本との本文異同の性格を検討した。書写年代の早い擬定家本は必ずしも時代の下る桂宮本より優れる本文を持っていると言えない。従来の桂宮本を尊重する見解は、擬定家本が公開されている現在でも有力である。『法門百集』は『法華経』の経文を句題として詠まれた和歌を収める歌集である。その中に「盲亀浮木」という故事を踏まえる亀の歌が存在する。今年度の研究は和歌における亀の歌を精査し亀に関わる和歌における漢文学及び仏典の受容そしてそのような受容が和歌集の賀部に与えた影響について研究を行った。亀は和歌の研究ではほとんど研究対象として扱われたことのない歌語である。『法華経』の「盲亀浮木」という故事から出発し和歌における亀を検討することは今まで盛んに行われてきた歌語研究の補足となる。また、本研究は亀を詠む和歌における漢文学の受容を明らかにしただけではなく和歌における日本独自の変容をも論じた点に意義がある。『和漢朗詠集』に九月尽という部立が存在する。この部立に収められる漢詩句や和歌の主旨は惜秋である。九月尽は中国古典文学に存在しないジャンルであり、日本古典文学にオリジナルな特徴である。今年度の研究は九月尽部における和歌の構造に注目し、今まで指摘されていなかった九月尽部の惜秋歌における日本漢詩の影響及び惜秋詩における漢籍の惜春文学の受容について考察した。『千五百番歌合』に関して、それに見られる漢詩句形式による判詞を手がかりに歌語「ひぐらし」の詠まれ方が時代につれて変遷する中、詩語「寒蝉」との統一性をはかろうとする和漢兼作の歌人も存在したことを明らかにした。本年度は論文一本を専門書に掲載し、学会発表を二件行うなど、着実に研究を進め、かつその成果を発表した。『アジア遊学』掲載の論文では、「亀」という題材を取り上げ、漢故事や仏典由来の比喩を平安時代の和歌がどのように取り入れ、変容させたかを解明した。学会発表の一件目では、『千五百番歌合』に見られる漢詩句形式による判詞を手がかりに、歌語「ひぐらし」の詠まれ方が時代につれて変遷する中、詩語「寒蝉」との統一性をはかろうとする和漢兼作の歌人も存在したことを明らかにした。二件目では、惜秋という日本独自の詩歌の思想が、やはり漢文学の影響を受けながら表現を発達させてきたことを論じた。特に『和漢朗詠集』の九月尽部に収められた、やや特異な惜秋歌に、日本漢詩からの影響があることを論証できた。いずれの業績も、和漢比較文学の観点から価値を持ち、特に後二者に関しては、『千五百番歌合』判詞、『大江千里集』、『和漢朗詠集』といった、和漢の詩歌をともに並べる形式の作品に着目するという本研究のテーマの有効性を示すものだと考えられる。このように十分に研究の進展が見られ、本研究の完成に向けて順調に進んでいると評価できる。四月:前年度に既に学会発表を行った『千五百番歌合』における「ひぐらし」詠の構造に見られる漢文学の影響に関する研究成果を練り上げ、投稿論文にする作業を行う。五月:『大江千里集』・『和漢朗詠集』及び勅撰和歌集における六月末の「納涼歌」における漢文学の影響の有無および各作品の構造の関連性の有無を確認する作業を行う。六月:「納涼歌」の研究の成果を踏まえ、学会発表に向けて、原稿を作成し、学会発表の準備を行う。七月:前年度に行った『大江千里集』の部立に関する研究を再検討し、『大江千里集』の部立における漢文学の影響のみではなく、『大江千里集』が後世の作品集に与えている影響をも重視し、研究を進める。
傾斜農用地における熱および物質移動に関する調査研究

平成34年度の2ヶ年に亘り、傾斜畑に家畜ふん尿スラリーを散布した後、降雨や土壌表面からの土壌水分の蒸発に伴って、スラリー成分が溶出移動する。スラリー成分移動の原因は複雑であるが、とくに、カリウム、硝酸およびアンモニア態窒素、土中水の電気伝導度(E.C)の変化に注目し、土壌水分マトリックスポテンシャル変化との関わりを検討した。さらに、降雨に伴って、畑地から流出する流出水に流出率が、土壌の物理性(マトリックスポテンシャルや、飽和度)の変化によって、どのように変化するのか、刻々と変化する土壌水分の変化に対応させつつ検討した。また、土壌水分マトリックスポテンシャルと、傾斜畑における畑地温に関わりを検討した。(1).降雨と土壌水分マトリックスポテンシャル、土壌水分飽和度、畑面流出率の関わり:降雨に伴い、とくに時間当り雨量がおおよそ10mm以下で、降雨継続時間が数日にも及ぶ場合には、マトリックスポテンシャルや飽和度は、順次、傾斜畑の低位部から高位部に向って大きくなる。それに伴って、畑面流出率が増加し、試験中の流出は2050%であった。(2).スラリー成分中のカリウム、硝酸およびアンモニア態窒素濃度変化:いずれのイオンにおいても、降雨前に比べ後には、畑面流出水の有無にかかわらず、畑地表面では濃度減少の傾向を示した。その中でも、カリウムと硝酸イオン濃度の変化が顕著で、低位部および土壌下方への移動が多い。アンモニアイオンの濃度の低下や分布型の変化は、他のイオンに比較して少ないようであった。(3).畑面流出水中の各種イオン濃度:いずれのイオン濃度を見ても、散布した原液スラリ中成分の1%以下で、その値は小さかった。傾斜畑試験地(巾6.0m、畑面長71.5m、勾配7.2%)を造成した。試験地には、傾斜方向直線状に310m間隔で10地点に、テンシオメ-タと熱電対を設置した。テンシオメ-タは各測点10、20、30、40、65、100cm深に、また、熱電対は0、5、10、15、20、30、50cmに埋設した。降雨後の畑面からの流出水は、畑面最低位部に設置したパ-シャルフリュ-ムで測定した。糞尿スラリ濃度は、サンプリングした土壌のケン濁液上澄の電気伝導度LE.C)を測定して比較した。試験地内には、雨量計と蒸発計を設置した。畑面からの流出水は、パ-シャルフリュ-ム出口で採水した。テンシオメ-タの観測は降雨日には1日6回行った。地温は2時毎に記録させた。次に示すような調査試験を行った。(1)降雨中の畑地土壌のマトリックスポテンシャルを測定し、降雨に伴うマトリックスポテンシャルや土壌水分飽和度の変化と、畑面流出水の係わりを調べた。(2)降雨後の糞尿スラリの鉛直下方移動や畑面低位部方向への移動、そして、畑地外への流出を調査した。(3)降雨に伴う撒布糞尿スラリの希釈効果を調べた。(4)蒸発期間における土壌水分の変化と糞尿スラリ移動の係わりを調査した。(5)降雨に伴う畑地温の変化を調査した。平成3年度に引き続いて、平成4年度は、傾斜畑(面積403.6m^2、勾配7.7%、畑面長69.5m)において、家畜ふん尿スラリーを散布し、降雨や乾燥に基づく、畑地内での土中におけるスラリー成分(カリウム、硝酸、アンモニア、電気伝導度)の移動と分布を調査した。加えて、降雨によるスラリー成分の畑地外への流出移動や畑地温変動との関わりを調査した。

スラリー移動の原因として、畑地内の水移動が主なものである。従って、降雨に伴う畑面流出水や土壌水分マトリックスポテンシャルの変化に注目しつつ調査、検討を行った。その結果は、以下のように要約できる。(1).降雨に伴う畑地土壌水分マトリックスポテンシャルの変化は、降雨強度や降雨継続時間に関係するが、時間当り雨量が約10mm以上に達すると、ポテンシャルや土壌水分飽和度の増加が緩慢となった。畑面流出率は2050%の範囲であった。(2).降雨前・後の畑縦断面(測点No.110、深さ050cm)におけるカリウムイオンは、降雨後畑地全表面で濃度が低下した。とくに、土壌水分マトリックスポテンシャルが増加した部分の濃度低下が見られた。硝酸イオンはカリウムイオンとは異った変化を示した。アンモニアイオンは降雨AおよびBで、とくに大きな変化は認められなかった。(3).降雨に伴い、低位部側の土壌水分マトリックスポテンシャルが増加すると畑地温(030cm深)が低下し、高位部側で高い傾向を示した。(4).畑面流出水の中のスラリー成分は、いずれの降雨においても、散布したスラリー原液のほぼ1%以下と小さい値を示した。とくに、アンモニアの濃度が低い値を示した。
インスリン早期分泌障害は遺伝的に規定されているのか?

Clamp-OGL-CPR法は、膵・脳のグルコースセンサーを介さないインスリン反応性を評価するものであり、腸管から門脈領域での糖認識に基づく神経反応性を評価するもので、これまでの研究によりEIS障害が糖尿病の発症およびその増悪に関予している可能性が示唆されている。肥満者、耐糖尿障害者での検討は70例を超えたが、肥満もなく耐糖能障害もないと考えられる健常者での検討が25例に留まった。特に健常者を糖尿病素因の有無により2群に分け、75gOGTT時のinsulinogenic indexによるインスリン早期分泌能を評価した後にclamp-OGL-CPR法を実施し、その結果より1)EIS反応性とinsulinogenic indexの相関性および2)糖尿病素因とEIS異常との関連性を解析した。さらに、EIS障害に関連した遺伝子検索の目的で、当研究の被験者に前もって本研究の主旨を説明し、インフォームドコンセントを得た後に血液採取を行い、このサンプルをも用いて遺伝子の解析を開始した。特に、EIS障害(腸管、門脈領域のグルコースセンシングに関連した)グルコキナーゼ遺伝子多型(SNP)解析をおこなったが、これとの間には有意な関連性は見いだせなかった。また、インスリン早期分泌と関連する遺伝子の同定を試みるため、ラットでの発現ライブラリーを構築し、神経伝達シグナルの動きを指標とした発現クローニング法によりPGSを同定し、PGSの遺伝子異常を検索して2型糖尿病発症遺伝子の発見を試みたが、可能性としてグルコキナーゼ(GK)との関連性がある可能性が得られたが、現在も検討を続けている。門脈ブドウ糖センサー(portal glucosensor : PGS)が高血糖センサーとして機能し、これを介してインスリン早期分泌が惹起されることを明らかにする目的で、PGSを介するインスリン早期分泌を定量評価するためのhyperinsulinemic euglycemic clamp下で経口的ブドウ糖負荷し、その際のCペプチド反応性を評価する(clamp-OGL-CPR)での検討を早期糖尿病患者20名と肥満者20名(OGTTにてIGTかNGTの区別後)および健常者20名で実施した。耐糖能障害がある肥満IGT者ではPGS機能が障害されていたが、耐糖能異常のない単純肥満者では障害されていないことが再確認され、健常者をあわせこれら60名でのPGSに関連した遺伝子のSNPの検討を開始する準備にかかっている。この結果をアメリカ糖尿病学会で発表予定である。また動物実験系において門脈内ブドウ糖注入時のインスリン反応性を検討し、2型糖尿病も出るラットではこの反応性が欠如していることをみいだした。現在は、門脈を摘出しこのPGS機能に関連すると考えられる候補遺伝子の同定をすすめ、それに関連した免疫組織学的およべ電子顕微鏡を用いた検討を開始している。Mitiglinide(MT)は、nateglinide(NT)に比し立ち上がりが早く作用の持続がやや長いとされているが、厳密な比較検討は未だない。MTのインスリン分泌刺激動態をNT, glyclazide(GC)と比較検討した。門脈カテーテル挿入法および注入法を確立し、手術侵襲が完全に消失した後に非拘束下で実験を行った。SDラット、OLETFラットを用い薬剤投与60分後に経口ブドウ糖負荷し、インスリン分泌動態を観察した。薬剤負荷後60分間、糖負荷後120分間の門脈あるいは静脈血での血糖値、インスリン変化を比較した。また、門脈内に腸管吸収グルコースに見合うブドウ糖を持続投与して、MT, NT, GC投与した際の血糖値、インスリン濃度変化を比較した。これら実験により門脈血でのインスリン変化は静脈血より大で、微妙な濃度変化も比較可能であるとの結論を得た。2型糖尿病でPGS機能障害が存在するのか、この障害がインスリンの早期分泌障害と関連するかを検討した。

PGS機能を評価する測定系、すなわちグルコースクランプ中にブドウ糖(0.2g/kg)を負荷し、その際のCPR反応性でPGS機能を評価する系を開発した。これにより糖尿病者での障害がどの時期より生のかを検討した。糖尿病者をBMIに基づき3群に分け(肥満、正常体重、やせ)、BMI>25.0の肥満者(IGT者と耐糖能障害のないNGT者)および健常者それぞれ10名を対照としてclamp-OGL-CPR法を実施した。血中CPRは、正常対照および肥満NGT者では有意に上昇したが、肥満IGT者と肥満糖尿病者ではごく軽度あるいは上昇が認められなかった。またこの間にGLP1は変化せず、CPR反応にインクレチンが関与していないことを明らかにした。この成績は、門脈ブドウ糖センサーを介するインスリン早期分泌は早期の肥満糖尿病患者や糖尿病発症以前の肥満IGT者でも障害されており、GS機能障害が糖尿病の発症およびその増悪に関与している可能性が示唆された。糖尿病素因とEIS障害との関連性を明らかにするために、肥満もなく耐糖能障害もないと考えられる健常者を対象として糖尿病素因の有無により2群に分け、75gOGTTとclamp-OGL-CPR法を実施し、その結果を基に糖尿病素因とEIS異常との関連性を解析した。さらにインスリン抵抗性とインスリン分泌異常を解析する目的で経腸栄養剤の耐糖能障害者での有用性をインスリン分泌動態を中心として解析し、インスリン早期分泌障害が糖尿病に如何に関与するかを検討した。早期2型糖尿病患者や肥満IGT者ではPGS機能が障害されているが、耐糖能異常のない単純肥満者では障害されていないことおよび糖尿病素因の有無とPGS機能間、およびPGS機能異常とSNPで評価した遺伝子の多型性とには関連性が明らかでないことも明らかにした。さらにhyperinsulinemic euglycemic clamp下で経口的ブドウ糖負荷でなくフルクトースを負荷した際に、健常者では8名中8名でCPR反応性があり、肥満NGT者では5名中5名で反応性があったが、肥満IGT者では8名中1名でのみ、2型糖尿病者では20名中1名のみでかすかな反応性を認めたのみであるという事実を見出し、今後このフルクトースセンシングとの関連性を検討していく予定である。さらに、EIS障害に関連すると考えられる(腸管、門脈領域のグルコースセンシングに関連した)グルコキナーゼ機能との関連性を検討している。
田んぼダムの経済評価に基づく戦略的整備計画手法の開発

田んぼダムの本格的な取組の普及に向けて,田んぼダムの経済価値の評価手法を確立し,地域治水計画上の位置づけおよび効果最大化のための戦略の構築した.経済価値の評価手法は,水田主体地域に特化した内水氾濫解析モデルによって得られた田んぼダムの浸水抑制量および抑制時間に基づき,経済評価モデルによって被害軽減額を計算するものである.さらに,多数の流域における経済価値を簡便に算出する方法として,上記の複数流域の被害軽減額を基礎データとした重回帰モデルを構築した,田んぼダムの普及には行政の主導が求められるが,こうした経済価値の評価田んぼダム導入予定地区の優先順位づけおよび重点的投資が重要であることを示した.田んぼダムの本格的な取組の普及に向けて,田んぼダムの経済価値の評価手法を確立し,地域治水計画上の位置づけおよび効果最大化のための戦略の構築した.経済価値の評価手法は,水田主体地域に特化した内水氾濫解析モデルによって得られた田んぼダムの浸水抑制量および抑制時間に基づき,経済評価モデルによって被害軽減額を計算するものである.さらに,多数の流域における経済価値を簡便に算出する方法として,上記の複数流域の被害軽減額を基礎データとした重回帰モデルを構築した,田んぼダムの普及には行政の主導が求められるが,こうした経済価値の評価田んぼダム導入予定地区の優先順位づけおよび重点的投資が重要であることを示した.平成23年度は,(1)水理実験による排水路からの横越流特性の把握,(2)地形適合セルの自動生成手法の開発,(3)内水氾濫による経済的損失に関する調査・資料整理,(4)田んぼダムの社会条件的課題の収集・整理の4項目を中心に研究・活動を行った.(1)水理実験による排水路からの横越流特性の把握新潟大学農学部の水理実験棟に設置した幅広実験水路にベニア板で作成した水田および排水路の模型を設置して,水路-水田間の越流現象を再現した.平成22年度に開発した内水氾濫解析モデルで再現した結果,横越流現象の特徴が明らかになった.(論文執筆中)(2)地形適合セルの自動生成手法の開発地形適合セルを半自動的に作成するためのGISを用いたアルゴリズムを構築した.GISの幾何処理機能を組み合わせて流域をモデル化することで,これまで要していた時間を約70%縮減することに成功した.本アルゴリズムの普及を見据え,現在マニュアルを執筆中.(論文投稿中)(3)内水氾濫による経済的損失に関する調査・資料整理過去11年間分の水害統計データ・延床面積データ等を入手し,内水氾濫による経済損失データの整理を行った.また,これまでに内水氾濫解析が完了している5流域の経済効果を算定した.(4)田んぼダムの社会条件的課題の収集・整理新潟県主催の「田んぼダムシンポジウム」のパネルディスカッションにおいて,田んぼダム実施流域の上流・下流の取組に対する意識等の意見交換を行い,社会条件的課題の収集および整理を行った.歴史的な上下流間の水争いの構造が引き継がれていおり,実質的な取組負担者である上流域の農家へのインセンティブ付与が取組普及には不可欠であることが明らかになった.最終年度である平成25年度は本研究の総まとめとして「田んぼダムの経済評価に基づく戦略的整備計画手法の開発」の課題目標を達成するため,以下の要素課題に取り組んだ.(1)田んぼダムの経済効果算定のための汎用モデルの構築平成23ー24年度の研究成果を踏まえて,まずは田んぼダムの内水氾濫抑制機能の数値解析手法(内水氾濫解析モデル)の一般ユーザー向けの汎用化を試みた.具体的には,モデルの入力データ準備を容易にするアルゴリズムの構築(吉川ら,2013)および内水氾濫解析モデルの結果から簡便に田んぼダムの経済効果を算定するための簡易評価手法(阿部ら,2012)の開発を行った.GUIユーザーインターフェースを備えるまでには至っていないが,以上の研究成果によって複雑な作業フローを大幅に簡便化することができた.実際に解析業務を担う民間業者からの依頼があり,本モデルの勉強会を開催したほか,他の業者への技術移転も現在進行中である.当初の目的である田んぼダムの取組普及に資する汎用モデルの開発は達成できたといえる.(2)流域を単位とした田んぼダムの戦略的な整備計画手法の確立上記モデルを利用した複数流域における解析の結果,田んぼダムの効果の出現が,流域スケールによって異なることが明らかとなった.このため,田んぼダムの戦略的な整備を計画する上では,流域全体を分割して考える必要があることが示された.小規模流域における効果(1次効果),中規模流域における効果(2次効果),流域全体の効果(3次効果)は,効果の規模,受益者の範囲が異なり,これらを考慮して計画を策定することが田んぼダムの普及および効果の最大化をもたらす.こうした田んぼダムの効果発現特性を踏まえた整備戦略を,計画学的観点から整理した.平成24年度は,1田んぼダムの経済効果算定のための簡易モデルの開発,2田んぼダムの治水計画所の位置づけと普及を支援する制度的な枠組みの提案を中心に研究活動を行った.これに加えて,3平成23年度に発生した新潟・福島豪雨災害における田んぼダムの効果実証作業を行った.1田んぼダムの経済効果算定のための簡易モデルの開発ー平成23年度に構築した田んぼダムの効果算定のための数値計算モデルと治水経済調査マニュアルに準じて算出した各田んぼダム実施流域における経済効果の計算結果を標本として,経済効果算定のための簡易統計モデルを開発した.これによって,簡便かつ効率的に流域における田んぼダムの効果が算定できるようになった.本成果によって,平成25年度農業農村工学会京都支部で「研究奨励賞」を受賞することが決定している.

2田んぼダムの治水計画所の位置づけと普及を支援する制度的な枠組みの提案ー田んぼダムの取組普及には取組農家へのインセンティブ付与のための公的支援が必要であると考えるが,支援策導入に向けた取組地区の優先順位付け手法の確立に取り組んだ.1で開発した簡易モデルを新潟県および富山県の全流域に適用して経済効果を算出し,優先的に取り組むべき流域を選定した.3新潟・福島豪雨災害における田んぼダムの効果実証ー平成23年度に発生した新潟・福島豪雨災害で降雨が集中した地域の田んぼダムの効果を検証した.該当地区は3地区あり,それぞれのモデルを作成し効果を定量化したところ,大きな物理的・経済的効果があったことが明らかになった.予定していた実験・調査は殆ど実施した.「(3)内水氾濫による経済的損失に関する調査・資料整理」はやや進捗が遅れている.これは,平成23年7月末に新潟県で発生した水害における田んぼダムの効果検証という当初予定していなかった作業に注力していたからである.25年度が最終年度であるため、記入しない。予定していた課題の検討は概ね完了した.「1田んぼダムの経済効果算定のための簡易モデルの開発」は統計的手法を用いたモデルであるが,標本である実証流域が15流域と少ないため,実証流域を増やし信頼性の高いモデルの構築を目指す予定である.この他,申請当初の予定にはなかったが,平成23年新潟・福島豪雨災害によって田んぼダムの役割と経済価値の実証ができたため,本豪雨災害を対象としてモデルの精度検証等を実施した.順調に進んでいるため,今後も交付申請書に示した計画に従って,研究を推進していく予定である.平成23年度に完了する予定であった「(3)内水氾濫による経済的損失に関する調査・資料整理」がやや遅れているため,本年度前半の完了を目指しデータの取得を急ぐ予定である.25年度が最終年度であるため、記入しない。平成25年度が本申請課題の最終年であるため,平成24年度までに共同研究者と検討・構築してきた「数値モデル」「経済効果算定のための簡易モデル」と「田んぼダムの治水計画上の位置づけと普及を支援する制度的な枠組みの提案」を融合させ,最終的な研究目的である効果的かつ効率的に田んぼダムの公益的機能を提供するための戦略的な取組配置技術を共同研究者全員で検討し,確立する.これには,行政機関の協力が欠かせないが,現在新潟県庁農地部には「田んぼダム勉強会」が設立されている.官学連携の体制をとりながら本研究目的を遂行したいと考えている.
疼痛・情動行動における脳脊髄FFAR1システムの重要性を検証する

これまでの検討結果から、FFAR1は脳内モノアミン遊離を調節することで、情動行動に関与することが示唆された。本年度は、1依存性薬物コカインによる移所運動活性亢進効果や、2遷延する疼痛に伴ううつ様行動におけるFFAR1の機能的関与に関してさらなる検討を加えた。1コカイン誘発移所運動活性亢進効果におけるFFAR1の機能的役割コカインを野生型マウス(雄性C57BL/6J)に単回投与(20 mg/kg、i.p.)すると、移所運動活性を急速に亢進させるが、FFAR1遺伝子欠損マウスにおいては、この効果は有意に減弱していた。同様の結果がFFAR1拮抗薬GW1100を用いて再現可能か否かを検討したところ、GW1100(10 mg/kg)の腹腔内前投与(30分前)により、同様な抑制効果が観察された。また、野生型および欠損マウス線条体領域における各種モノアミントランスポーター、ドーパミンD1およびD2受容体発現レベルを定量的PCR法で比較したが、いずれの分子に関しても有意な変化は認められなかった。現在、各種抗体を入手し、タンパク質レベルで比較検討している。2FFAR1は慢性疼痛に伴ううつ病に関与するか?疼痛に伴ううつ様行動に対する三環系抗うつ薬アミトリプチリン(10 mg/kg, i.p.)の効果をより詳細に検討すると、炎症性疼痛に伴ううつ様行動は野生型およびFFAR1欠損マウス共に抑制傾向であったが、末梢神経障害性疼痛に伴ううつ様行動には無効であった。しかし別種の三環系抗うつ薬イミプラミン(60 mg/kg, i.p.)は末梢神経障害性疼痛に伴ううつ様行動には依然無効であったが、炎症性疼痛に伴ううつ様行動は野生型、欠損マウス共に有意に抑制した。また本年は、痛みに伴う不安様行動を検出するため、オープンフィールド試験および高架式十字迷路試験を用いた検討を重ねている。本年度は、FFAR1拮抗薬(GW1100)およびFFAR1遺伝子欠損マウスを用い、各種疼痛モデル(カラゲニン投与急性炎症性疼痛モデル;完全アジュバント投与遷延性炎症性疼痛モデル;末梢神経障害性疼痛モデル: L4/5 spinal nerve ligation;術後疼痛モデル)におけるFFAR1の機能的重要性を検討した。特に術後疼痛モデルにおいては、疼痛行動学上、患側後肢の機械的疼痛が完全寛解している術後10日目にGW1100を単回脳室内投与すると、投与後30分から患側の機械的痛覚過敏が再発するとともに、脊髄後角においては患側触刺激に伴いリン酸化ERKの発現が認められた。すなわち、上位脳FFAR1の活性化は遷延する疼痛状態時における内因性疼痛抑制に寄与すること、そのメカニズムの1つとして、下行性疼痛抑制系賦活に関与することが示唆された。さらに我々は、上記モデルマウスを用い、FFAR1は疼痛に伴ううつ様行動に関与するか否かを検討したところ、遷延性炎症および末梢神経障害モデルのFFAR1欠損マウスでは、尾懸垂試験における不動時間の延長を早期に引き起こし、かつ不動時間延長の程度も大きかった。そこで脳内モノアミン遊離におけるFFAR1の機能的関与を検討するため、線条体においてin vivoマイクロダイアリシスを行った。FFAR1欠損マウスにおける正常時モノアミン遊離量は、野生型マウスと比べ、ノルアドレナリンとセロトニンは減少傾向を示し、ドーパミンは有意に増加していた。さらに野生型マウスにFFAR1作動薬を局所投与すると、セロトニン遊離は増加するが、ドーパミン遊離は減少した。一方、GW1100の局所投与は、セロトニン遊離を減少させ、ドーパミン遊離は増加させた。以上の結果から、FFAR1は脳内モノアミン遊離を調節することで、うつなどの情動行動に関与することも示唆された。「研究実績の概要」に述べたように、疼痛などのストレス刺激に伴う情動行動に、上位脳におけるFFAR1の機能的重要性が明らかになりつつあり、特に脳内モノアミン系の調節に関与するという興味深い可能性が示唆された。上位中枢におけるFFAR1の機能に関しては不明な点が多い中、本研究結果は、FFAR1作動薬の新規の抗うつ薬としての可能性を示している点で非常に重要であると考えている。昨年度の検討結果から、FFAR1は脳内モノアミン遊離を調節することで、うつなどの情動行動に関与することが示唆された。そこで本年度は、1依存性薬物コカインによる移所運動活性亢進効果や2遷延する疼痛に伴ううつ様行動に、FFAR1は機能的に関与しうるか否かを検討した。1コカイン誘発移所運動活性亢進効果におけるFFAR1の機能的役割コカインを野生型マウス(雄性C57BL/6J)に単回急性投与(20 mg/kg、i.p.)すると、移所運動活性を急速に亢進させるが、FFAR1遺伝子欠損マウスにおいては、この効果は有意に減弱していた。また、in vivoマイクロダイアリシス法を用い、マウス線条体部位におけるモノアミン遊離に対する検討結果から、FFAR1はセロトニン遊離を促進させることで、コカイン誘発移所活性亢進効果に関与することが示唆された。2FFAR1は慢性疼痛に伴ううつ病に関与するか?

疼痛モデルとして遷延性炎症性疼痛モデル(Freundの完全アジュバント投与モデル:CFAモデル)と末梢神経障害性疼痛モデル(L4/5 spinal neve ligationモデル: SNLモデル)を使用し、これらの疼痛モデルをFFAR1遺伝子欠損マウスに適応して機械的疼痛様行動やうつ様行動(尾懸垂試験)を検討するした。その結果、両疼痛モデルにおける疼痛様行動をFFAR1欠損マウスの方が強く呈し、また尾懸垂試験における不動時間延長の程度も大きかった。さらに、三環系抗うつ薬アミトリプチリン(10 mg/kg, i.p.)は、CFAモデルには有効であったが、SNLモデルには無効であった。上記in vivoマイクロダイアリシス法を用いた実験結果から、FFAR1は脳内セロトニン遊離を調節することで、疼痛閾値や気分などの情動行動制御に関与する可能性が示唆された。上位中枢におけるFFAR1の機能に関しては未だ不明な点が多い中、疼痛などのストレス刺激に伴う情動行動変化に、脳内セロトニン・ドパミン遊離調節を行うFFAR1の機能的重要性が明らかになりつつある。本研究結果は、FFAR1が新規抗うつ薬開発の良い標的となる可能性を示している。また、FFAR1欠損マウスにおいては、コカイン投与による移所運動活性応答が有意に減弱していたことから、依存性薬物による行動変化にもFFAR1は関与している可能性が示唆された(本検討に関しては、本年度末に論文投稿を行った)。これまでの検討結果から、FFAR1は脳内モノアミン遊離を調節することで、情動行動に関与することが示唆された。本年度は、1依存性薬物コカインによる移所運動活性亢進効果や、2遷延する疼痛に伴ううつ様行動におけるFFAR1の機能的関与に関してさらなる検討を加えた。1コカイン誘発移所運動活性亢進効果におけるFFAR1の機能的役割コカインを野生型マウス(雄性C57BL/6J)に単回投与(20 mg/kg、i.p.)すると、移所運動活性を急速に亢進させるが、FFAR1遺伝子欠損マウスにおいては、この効果は有意に減弱していた。同様の結果がFFAR1拮抗薬GW1100を用いて再現可能か否かを検討したところ、GW1100(10 mg/kg)の腹腔内前投与(30分前)により、同様な抑制効果が観察された。また、野生型および欠損マウス線条体領域における各種モノアミントランスポーター、ドーパミンD1およびD2受容体発現レベルを定量的PCR法で比較したが、いずれの分子に関しても有意な変化は認められなかった。現在、各種抗体を入手し、タンパク質レベルで比較検討している。2FFAR1は慢性疼痛に伴ううつ病に関与するか?疼痛に伴ううつ様行動に対する三環系抗うつ薬アミトリプチリン(10 mg/kg, i.p.)の効果をより詳細に検討すると、炎症性疼痛に伴ううつ様行動は野生型およびFFAR1欠損マウス共に抑制傾向であったが、末梢神経障害性疼痛に伴ううつ様行動には無効であった。しかし別種の三環系抗うつ薬イミプラミン(60 mg/kg, i.p.)は末梢神経障害性疼痛に伴ううつ様行動には依然無効であったが、炎症性疼痛に伴ううつ様行動は野生型、欠損マウス共に有意に抑制した。また本年は、痛みに伴う不安様行動を検出するため、オープンフィールド試験および高架式十字迷路試験を用いた検討を重ねている。線条体FFAR1シグナル系は、ドーパミン神経伝達を調節することも明らかとなってきた。予備的検討段階ではあるが、FFAR1欠損マウスはコカイン投与による移所運動活性応答が有意に減弱していた。