hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
レトロウイルスの病原性発現を規定する責任宿主因子の研究

フレンドウイルスのenvとFV-2(sf-Stk)が相互作用して細胞を癌化するための重要な活性化分子を明らかにした。癌化を指標にenvと相互作用するsf-Stkのアミノ酸領域を決定した。ウイルスの感染によりSf-StkがPI3キナーゼと結合することを証明し、その欠損マウスを用いて感染実験を行い、FV-2およびPI3キナーゼ依存性に脾腫発生が生じていることが判明した。またこの分子はストレス性赤血球造血に関与していることを明らかにした。HTLV-1の発現がIL-2除去によるストレスでp38を介して発現が調節されていることを明らかにした。FeLVによって引き起こされたMDSにおいてアポトーシス関連分子の上昇が検出された。以上よりレトロウイルス感染における宿主因子の様々な分子について同定し、その機能について研究成果を得た。(1)spleen focus-forming virus(SFFV)はsf-stkと複合体を形成し協調して細胞を癌化することを明らかにしてきた。本研究では、ウイルスが存在する場合、sf-stkはリン酸化され、細胞は足場非依存的に増殖をした。その細胞で、sf-stk分子をノックダウンすると、細胞は足場依存性の増殖へとなり、sf-stk分子の存在が細胞の癌化に関連していることを明らかにした。Sf-stk分子の下流で活性化している分子を検討したところ、MAPK、JNK、PI3Kの活性化が生じていることが明らかとなった。P38MAPKに関しては、トランスフォームした細胞では活性化しておらず、ストレスを与えることによっても、その細胞でP38MAPK活性を誘導することができなかった。P38MAPKの非活性化が細胞の癌化と関連することが示唆された。STATの活性化を調べたところ、STAT3の活性化が検出され、STAT1、3の活性化は見られなかった。シグナル伝達阻害剤を用いて、SFFVによる細胞の癌化について検討したところ、JNK、NEK、mTORおよびPI3Kの抑制は細胞の癌化を抑制した。これらの結果から、SFFV/stk複合体による下流分子の活性化を明らかにし、細胞の癌化に重要な分子について、明らかにした。(2)Human T-cell Leukemia Virus Type I(HTLV-1)の発現機構について、ストレスシグナルとの関連について検討したところ、IL-2の除去により、細胞へストレスを与えたところp38MAPKの活性化が認められ、それによってHTLV-1の発現が上昇した。P38MAPKを阻害したところ、ウイルス発現は低下したことから、少なくとも、p38MAPKを介するストレス経路によってたHTLV-1のウイルス発現が調節されていることを明らかにした。1. spleen focus-forming virus (SFFV)は感受性マウスに赤白血病を引き起こす。この発生メカニズムは、細胞内の様々なシグナル伝達分子を活性化することによると考えられる。本年度は、ウイルスによって活性化される分子のうち、PI3-キナーゼとウイルス性白血病発生についての役割を検討した。マウスはPI3-キナーゼのサブユニットp85αノックアウトマウスを用いて評価を行った。その結果(1)Sf-stk分子依存性に赤白血病を引き起こすウイルスでは、赤白血病発生は有意に減少した。(2)sf-stk分子非依存性に赤白血病を引き起こすウイルスでは、p85αの重要性については認められなかった。(3)p85α欠損胎児から線維芽細胞を作成し、SFFVを感染させたところ、細胞はトランスフォーメションを示した。しかし、細胞の増殖はコントロール細胞(+/+)と比較して明らかに緩やかであった。(4)p85α欠損マウスにおいては、成熟マウスにおける赤血球造血は正常であるが、ストレス性赤血球造血においては、明らかに造血反応がきわめて低下していた。以上の結果から、マウス生体における、PI3-キナーゼとウイルス発ガンおよびストレス性赤血球造血について新規な所見を得た。2.我々が単離したネコ白血病ウイルス(FeLV)分子クローン33を猫へ感染実験を行ったところ、22頭中9頭において骨髄異形成症候群(MDS)ならびに急性骨隨性白血病を引き起こすことが判明した。ウイルス感染猫はすべての猫において発症を示したわけではなく、発症に関しては遺伝的な背景が存在し、病原性発現を規定する宿主側の因子の存在が明らかになった。フレンドウイルス(Friend Spleen Focus-Forming Virus ; SFFV)は感受件マウスに赤白血病を引き起こす。その感受性を規定する主因子としてsf-Stkが知られている。Sf-Stk依存性に病気を引き起こすSFFV-P, SFFV-A

また、sf-Stk非依存性に病気を引き起こすSFFV-BB6株を用いて、PI3-kinaseの役割についてp85α欠損マウスを用いて検討1した。p85α欠損マウスでは、ウイルスによる赤白血病の発生はウイルス株に依存してその差が見られた。Sf-Stk依存性ウイルスではp85α欠損マウスでは赤自血病の発生は弱いことが明らかとなつた。一方sf-Stk非依存性ウイルス(SFFV-BB6)では、コントロールマウスと比較して赤白血病の発生にその差は見られなかった。sf-stkの346番目のチロシンがp85αと結合する部位として同定した。すなわち、sf-Stk依存性ウイルスはsf-StkおよびEpoRの両方からPI3-kinaseが活性しているものと結論され、sf-Stk非依存性ウイルスSFFV-BB6はEpoRを介して、PI3-kinaseを活性化しているものと結論された。これらの活性化メカニズムの違いが病原性発現の差として生じ、PI3-kinaseのウイルス発がんにおける役割および重要性を明らかにした。SFFVとsf-Stkが細胞内で共発現するとsf-Stkが活性化しNIH3T3細胞をトランスフォームすることを明らかにしてきた。Sf-Stkの様々な変異体を作成し、SFFVによる活性化メカニズムを検討したところ、sf-Stkの8番目および19番目のシステインがウイルスによる活性化に重要であることを同定した。おそらくこれらのシスティンを介してウイルスエンベロープとダイマーを形成しsf-Stkが活性化されることが予想された。
急性肺傷害に対するリン脂質投与の予防効果に関する研究:カルジオリピンを中心に

手術後の敗血症に起因する急性肺傷害をはじめとする臓器障害は、生命予後に大きな影響を及ぼすとされており、これらの予防は重要な課題とされている。本研究では、生体膜に存在するリン脂質のカルジオリピン(CL)を前投与することにより、リポポリサッカライドによりマウスに誘導される急性肺傷害が予防され、マウスの生存率が著明に改善することが明らかになった。この防御機序にはCLによる炎症メディエーター産生抑制が関与していることが示唆された。近年、カルジオリピン(CL)などのリン脂質がリポポリサッカライド(LPS)とLPS結合タンパク(LBP)の結合を抑制することが報告されている。しかしながら、実際に急性肺傷害の動物モデルで予防効果を検討した報告は見られない。そこで今回は、CLを含む各種リン脂質のうちどのリン脂質が、LPS-LBP結合およびマクロファージ活性化を最も効率的に抑制するかを検討し、将来的な臨床応用を念頭において、LPSによるマウス急性肺傷害モデルを作製した。無細胞系におけるLPS-LBP結合をELISA法で検出し、CL、ホスファチジルイノシトール(PI)、ホスファチジルコリン(PC)、ホスファチジルセリン(PS)、ホスファチジルエタノールアミン(PE)、スフィンゴミエリンによる結合阻害効果を判定した。RAW264マウスマクロファージ細胞をLPS処理し、活性化の指標として培地中の一酸化窒素(NO)を測定した。各種リン脂質を前処理し、活性化の指標に対する抑制効果を検討した。LPSを5週齢の雄性ddYマウスに腹腔内投与し、生存率、血中NO、腫瘍壊死因子(TNF)-αレベルおよび肺組織像を調べ、急性肺傷害を起こすLPS濃度を決定した。CLとPIはLPS-LBP結合をそれぞれ82%、34%抑制したが、その他のリン脂質は抑制しなかった。マクロファージ活性化に対するリン脂質(CL、PS、PC、PE)の効果を検討したところ、CLが最も強い抑制効果を発揮したが、その他のリン脂質には効果が見られなかった。マウスにLPS(10,20,40,60mg/kg)を腹腔内投与し、投与後の生存率、血中NO、TNF-α量の増加および肺組織傷害を調べた結果、40mg/kgのLPS投与量でマウス急性肺傷害が起こることが明らかになった。以上の結果に基づき、CLを中心にマウス急性肺傷害予防効果を検討する予定である。近年、無細胞系における実験で、カルジオリピン(CL)などのリン脂質がリポポリサッカライド(LPS)とLPS結合タンパク(LBP)の結合を抑制することが報告されており、前回までの無細胞系実験で、CLを含む各種リン脂質のうちCLが最も強くLPS-LBP結合を抑制することが明らかになった。そこで今回は、CL投与がLPSによるマウス急性肺傷害モデルを抑制するかどうかを検討した。LPSは10%ジメチルスルポキシド(DMSO)を含むphosphate-buffered salin e (PBS)に溶解し、40mg/kgの用量で投与液量6ml/kgをマウスに腹腔内投与した(n=9)。LPS投与24時間後の生存率は63%に低下していた。LPS投与24時間後の血中一酸化窒素(NO)、腫瘍壊死因子(TNF)-αレベルはLPS溶媒(10%DMSO+PBS)投与のコントロールに比べて著明に増加していた。LPS投与24時間後の肺組織には、肺胞の崩壊やうっ血が顕著に観察された。CLを大豆レシチンリポソームで乳化し、20mg/kgの用量で投与量4ml/kgをLPS投与直前にマウスに腹腔内投与し、24時間後の生存率に与える影響を検討した。その結果、CLを同時投与した場合、生存率は87%に改善した。現在、CLの血中NO,TNF-αレベルおよび肺組織像に及ぼす影響について検討中であり、今後はCL後投与による治療効果についても検討する予定である。前回までの実験で、カルジオリピン(CL)前投与がリポポリサッカライド(LPS)によるマウス急性肺傷害モデルを予防することが明らかになったので、その抑制機序を探るためにCLの血中一酸化窒素(NO)および腫瘍壊死因子(TNF)-αレベルに及ぼす影響について検討した。LPSは10%ジメチルスルポキシド(DMSO)を含むphosphate-buffered saline(PBS)に溶解し、40mg/kgの用量で投与液量6ml/kgをマウスに腹腔内投与した(n=10)。LPS投与84時間後の生存率は40%に低下していた。CLを10%DMSOを含むPBSに溶解し、100mg/kgの用量で投与量6ml/kgをLPS投与3時間前にマウスに腹腔内投与し、LPS投与84時間後の生存率に与える影響を検討した。その結果、CLを前投与した場合、生存率は90%に改善した。

LPS投与18時間後の血中NO濃度は, LPS単独投与では152.1±13.5μmol/lであったが、CL前投与はこのレベルを115.8±1.5μmol/lと有意に抑制した。また血中TNF-αレベルもCL前投与により、147.6±41.8pg/mlから55.1±10.5pg/mlへと抑制されていた。以上の結果より、CLはLPSによって誘導されるNOやTNF-αなどの炎症性メディエーター産生を抑制することにより、マウス急性肺傷害を防御することが示唆された。
聖教から見た鎌倉後期の公武権力と真言密教

本年度は、下記のテーマに即して研究を進めた。(1)【密教聖教の調査・研究】鎌倉後期の公武権力と真言密教の関係について、史料調査を行なった。とくに、高野山大学図書館に寄託された金剛三昧院所蔵の聖教には、鎌倉後期の真言僧に関わる史料があり、北条氏得宗や安達氏に関する内容も見える。重要なものから、順次翻刻に取り組んでいる。また、院政期の心覚が撰述した『別尊要記』第4帖の翻刻を公表し、同書が『雑筆要集』の原史料であった事実を指摘した。『別尊要記』を披見できるのは真言僧に限られることから、『雑筆要集』が寺院社会で成立した可能性は高いと考えられる。(2)【「吉田定房奏状」の研究】鎌倉後期の政治史研究の一環として、「吉田定房奏状」(『醍醐寺文書』所収)を再検討した。この「奏状」は、後醍醐天皇に対して、吉田定房が討幕計画を諫めた意見書として知られる。村井章介氏は、「奏状」の初稿が元応2年(1320)に上奏され、翌元亨元年(元応3年、1321、辛酉革命の年)にも改稿が上奏されたと論じる。そして、定房による諫言には、後醍醐の暴走を憂慮した後宇多院の意向があったとする。この村井説は通説的な位置を占めるが、その根拠となる「革命之今時」(「奏状」第8条)という表現は、書写者の誤読に起因するものであり、正しくは「革命之。今時」と区切るべきである(「革命」は、周の武王による放伐の故事)。さらに、吉田定房は、元応3年(元亨元年、1321)の改元定で辛酉革命説を否定しており、この点からも「革命」を辛酉とは解釈できない。現存の「奏状」を改稿と見做す点も含めて、村井説は成り立たず、その政治史理解にも再考が必要である。また、「奏状」を「定房の奏状に非ず」とする河内祥輔氏の説もあるが、これも「奏状」と関係史料の誤読を犯しているため、妥当性を欠く。以上の私見については、近々に論文として公表する予定である。研究遂行に必要な未刊の密教聖教について調査するとともに、重要史料の『別尊要記』第4帖を学界に紹介した。また、鎌倉後期の政治史研究についても検討を進めている。本年度に引き続き、高野山大学図書館に保管される密教聖教の調査を進めるほか、東京大学史料編纂所、神奈川県立金沢文庫などにも出張して、史料の発掘につとめる。
高感度ファブリ・ペロー干渉計用光学面の研究

本研究は、高感度ファブリ・ペロー干渉計に使用できる高精度、高透過率もしくは高反射率、高レーザ耐力、高信頼性を有する光学素子を提供し、同干渉計による重力波の検出を側面より支援することを目的とする。高出力レーザの現状での最大の問題点は、レーザ照射による光学素子の損傷である。レーザ損傷のしきい値が高くなければ、高出力レーザの開発が容易になると共に、装置全体を小型化し、高信頼化できる。このしきい値は材料、表面粗さ、表面層の状態に依存する。また、高反射率・低損失ミラーの製作においては、散乱の原因となる光学面の表面粗さ並びに加工変質層が極めて重要であることは論を持たない。本研究の研究実績および結果を要約すると以下のようである。1)小型空冷のアルゴンイオンレーザを設置することにより内部全反射顕微鏡システムを完成させ、その検出限界を検討した。検出感度は強い異方性を有し、レーザの光路と垂直方向の欠陥に対しては感度が高く、重力波検出のためのファブリ・ペロー干渉計のレーザ共振器に使われている超高精度光学部品の表面欠陥をも検出することができた。2)フロートポリシングにより合成石英を0.1nm rms以下の表面粗さに仕上げることができ、その面は内部全反射顕微鏡で観察しても研磨による欠陥が検出できないことが明らかとなった。3)各種加工を施した合成石英、ULTRA30並びにFK5の試料面にYAGレーザの3倍高調波である波長355nmのレーザを照射してレーザ耐力を測定した結果、材料としては表面のレーザ耐力は合成石英、ULTRA30、FK5の順に高く、FK5のフロートポリシング面のレーザ耐力は17.2J/cm^2であり、合成石英光学研磨面に比べ1.7倍レーザ耐力が高いことが明らかとなった。4)光学ガラスの超精密研削で研磨面よりも滑かな面を創成することができる。しかし材料の透過率は研磨面に比べ0.3%低下することを明らかにした。
イネの発生と形態を制御する遺伝子機能の解明

イネの発生を制御する遺伝学的メカニズムを理解するために,G1,SHL2,DL,EG1,およびFOS2遺伝子に着目して研究を行い,これらの遺伝子の機能を解明した.得られた結果は,イネにおける花や葉の発生,メリステムにおける細胞運命の制御の理解に貢献すると考えられる.イネの発生を制御する遺伝学的メカニズムを理解するために,G1,SHL2,DL,EG1,およびFOS2遺伝子に着目して研究を行い,これらの遺伝子の機能を解明した.得られた結果は,イネにおける花や葉の発生,メリステムにおける細胞運命の制御の理解に貢献すると考えられる.作物の形態は重要な農業形質と密接に関連している.たとえば,小穂は子実形成に直結し,葉の中肋の形成程度はイネの草型に影響する.本研究は,単子葉類のモデル植物であり主要な作物であるイネを研究材料とし,形態改変によるイネの品種改良を将来の大きな目標として,その基盤となるイネの発生・形態形成の遺伝的メカニズムを明らかにすることを目的として研究を行った.小穂器官が異常となる変異体に着目し,その原因遺伝子の単離と表現型の解析を行い,その遺伝子の機能の解明を進めた.護穎が外穎のように大きくなるlong sterile lemma(g1)変異体を解析した結果,この変異体では護穎が外穎へとホメオティックに転換していることを明らかにした.ポジショナルクローニング法により遺伝子単離を進めた結果,G1遺伝子候補を同定した.G1遺伝子を含むゲノムDNA断片をg1変異体に導入し,相補性検定を進めた.また,過剰な頴を生じるextra glumel(eg1)変異体についても解析を進めるとともに,その原因遺伝子を単離した.DL遺伝子の機能解明に関しては,マイクロアレイ解析によりDLの下流候補遺伝子について,その発現などの解析を行った.また,DLタンパク質の転写因子としての機能増強を通して,中肋形成および葉の直立性との関係を調べた.さらに,冗長的機能をもっている3つのYABBY遺伝子について,ノックアウト変異体において,他の遺伝子のRNAiによる発現抑制などをおこない,その機能の解明を試みた.作物の形態は,収量,栽培のしやすさ,単位面積あたりの栽培個体数など,農業的に重要な形質と密接に関連している.本研究は,モデル植物であり,かつモデル作物でもあるイネを研究材料とし,その形態や発生を制御する遺伝子の機能を明らかにすることによって,その成果を将来の形態改変に基づくイネの品種改良へと発展させることを目的としている.本年度は,小穂形態に異常を示す変異体として,long sterile lemma(g1)およびextra glume(eg1)変異体について,昨年度の成果を踏まえて,さらにその研究を発展させた.G1遺伝子に関しては,昨年度候補遺伝子として同定した遺伝子の相補性検定を行い,同定した遺伝子が確かにG1遺伝子であることを確認した.G1遺伝子は,機能未知のドメインと核局在シグナルをもつタンパク質をコードしていた.細胞内局在性をしらべた結果,G1タンパク質は核に局在すること,酵母のGAL4によるtransactivationによる解析の結果,G1タンパク質が転写活性能をもつことを明らかにした.さらに,イネの小穂の形態進化とも関連させて,G1遺伝子の研究成果を論文として発表した.EG1については,コードするタンパク質からジャスモン酸合成系に関わることが示唆されたため,eg1変異体にジャスモン酸を投与したところ,その変異が一部回復することが明らかとなった.以上の結果から,イネの小穂の発生・分化の時期に,ジャスモン酸類が重要な働きをしていることが示唆された.DL遺伝子に関しては,DLの発現量または機能の程度と,中肋の大きさとの間に強い関連があることが示され,これまでの仮説がさらに確証された.また,心皮形成において,DLの下流で発現制御されている遺伝子候補を見出した.作物の形態は重要な農業形質と密接に関連している.たとえば,小穂は子実形成に直結し,内外頴の大きさは種子の大きさに強く影響する.また,葉の中肋の形成はイネの草型に影響する.本研究は,形態改変によるイネの分子育種・品種改良を将来の目標として,イネの葉の中肋形成,花や花序(小穂・穂)の発生・分化の遺伝的分子機構を明らかにすることを目的としている.DL遺伝子は,葉において中肋の形成を支配する鍵遺伝子であり,花においては心皮(雌ずい)のアイデンティーの決定遺伝子でもある.これまで,DLが葉の中肋予定領域で発現するために必要な制御領域を同定してきた.その成果を活用して,葉の中肋構造の増強をはかり,葉の直立性を高めるための研究を行った.まず,DLが転写因子をコードしていることに着目し,強い転写活性能をもつVP16の転写活性化ドメイン領域とDLとの融合遺伝子を作製した(DL-VP16).次に,中肋予定領域で特異的に発現するための必要充分な因子をもつDG1配列を用いて,DL-VP16を発現させた.その結果,pDG1::DL-VP16形質転換体では,本来中肋が形成されない葉の先端まで中肋が形成されるようになり,中央部から基部の中肋も太くなることが示された.植物体全体を見ると,葉はより直立していた.次世代形質転換体を成育させその形質を調べた結果,pDG1::DL-VP16の次世代形質転換体は調べた独立の9系統すべてにおいて葉が直立していた.

したがって,世代を経ることによって,エピジェネティックな変異などにより,外来遺伝子の機能が損なわれていないことが確認された.DLの機能をさらに詳細に調べることを目的として,d1変異を昂進あるいは抑圧する変異体の探索を行った.ガンマ線照射によって変異を誘発したM2世代から,垂れ葉の表現型が昂進あるいは抑圧される変異体をスクリーニングしたが,1次候補は得られたものの,最終的に変異体を単離することはできなかった.さらに,効率の良い変異源処理として,受精卵へのMNU処理を行った.次年度以降,同様のスクリーニングを行い,さらにDLの機能を深く理解するための,遺伝的アプローチを進める予定である.
タイで発見された骨系統疾患の大家系に関する分子病態学的調査

タイ北部のチェンマイ大学の研究者によって発見された骨系統疾患のmesomelic dysplasiaの一大家系について責任遺伝子の同定と遺伝子変異について解析した。家系内の患者総数は15名で、これらの患者のうち9名と同一家系内の正常者13名の総計22名から血液を採取し、DNAを抽出した。染色体上の多マイクロサテライトをPCR増幅し、その型解析を実施した。このMesomelic dysplasiaの責任遺伝子座に関して連鎖解析を行ない、その遺伝子座を染色体の2q24-q32に決定することができた。そして、この領域にあるマップされている遺伝子の中からMesomelic dysplasiaの原因となる候補遺伝子を選択し、遺伝子の異常を解析している。現在、精力的にその異常の同定に従事しているところである。また、別の骨系統疾患の家系も発見され、同じ手法を用いることにより責任遺伝子の解明が可能で、この遺伝子の解析にも着手した。さらに、タイの南部のハジャイでも骨系統疾患の新しい家系を発見したので、この家系についても共同で遺伝子解析を進める予定である。タイ北部のチェンマイ地域で骨系統疾患の1種であるmesomelic dysplasiaを多発している一大家系が発見された。今回、この家系構成員を対象として、mesomelic dysplasiaの原因遺伝子の探索に関する共同研究を行った。現地において、この患者一大家系を構成員する患者のみならず正常者からも血液を採取した。採取した血液を日本に持ち帰り、EBヴィルスで株化するとともに、各々からDNAを抽出した。このDNAを材料として、染色体上にある100ヵ所以上のマーカーについて、その多型を各共同研究者が分担してPCR解析した。これには、蛍光ラベルしたプライマーを用いてマーカーDNAを増幅するとともに、増幅したDNAをDNAシークエンサーを用いて解析することにより、1塩基あるいは2塩基の差となるDNA多型を感度よく検出する方法を用いた。そして、得られたDNAの多型とmesomelic dysplasiaの表現型との連鎖をこの家系で解析を実施した。また、イタリアからのやや表現型を異にするmesomelic dysplasia例を参考とした。その結果、タイで発見されたmesome1ic dysplasiaの原因遺伝子の遺伝子座を2番染色体の2q24-2q32に決定することに成功した。現在、この遺伝子座領域にマップされている各種の遺伝子を候補にして、この家族患者で実際に異常のある遺伝子を検索している。今後、さらに詳細な家系解析を重ねることにより実際に異常のある遺伝子の候補がリストアップされる予定である。チェンマイ大学の研究者によって発見された骨系統疾患のMesomelic dysplasiaの一亜型の大家系を対象とする分子遺伝学的研究を本年度も実施した。この大家系の15人の患者の内9人からと、同一家系内の13人の正常者から血液を採取し、DNAを抽出した。染色体上のマイクロサテライトをPCR増幅し、その多系とこのMesomelic dysplasiaとについて連鎖解析を実施した。その結果、責任遺伝子の遺伝子座を染色体2q24-q32に特定することができた。現在、この染色体の領域に遺伝子座を有する遺伝子の中からMesomelic dysplasiaと関連する候補遺伝子を選び、その遺伝子での異常を解析しつつある。さらに、チェンマイ地域において他の型の骨系統疾患の例を発見したので、同様な手法を用いてその責任遺伝子の解明と遺伝子解析を実施するための準備を開始した。また、こうした研究の進展とともに他の研究者からの情報も入手できるようになり、タイ南部のハジャイ地域でも家族発生している骨系統疾患があることが判明したので、今後、この領域での研究を推進していく予定である。
抗チミン・ダイマー抗体によるDNA多型の検出

クローン化したDNAプローブを使ってDNAの制限酵素断片長多型(ミニサテライト多型)を検出するサザン法は,手間がかかるうえに,アリールの長さを正確に決めることができないため,だんだん使われなくなり,PCR法によって簡単に増幅でき,1塩基の違いを識別できるマイクロサテライト(STR)の型判定が法医学的DNA多型分析の主流になった.STRのアリールを正確に決めるには,PCR産物を変性ポリアクリルアミドゲル電気泳動した後,アリールの1本鎖を自動シ-クェンサーで分析するか,なんらかのマニュアル法で検出する.自動シ-クェンサーは高価で,簡単には購入はできない.そこで,経済的に,かつ簡易にバンドを検出するために,AAAG(すなわちCTTT)を反復単位とするSTR座であるACTBP2,AluVpA,FGA,D8S320,D11S488,D11S554を増幅し,変性ゲル電気泳動し,ナイロン膜にサザン・ブロットし,これを10分間紫外線照射することによってCTTT鎖をチミンダイマー(T-T)化した.このT-Tを,本研究で作製したモノクローナル抗体T-T(ペルオキシダーゼ標識)で首尾よく検出することができた.モノクローナル抗T-T抗体は,簡易な方法で作製した.細胞融合のパートナーであるマウス骨髄腫細胞P3U1の浮遊液の煮沸遠心上清を紫外線照射したもので同系マウスを免疫し,その膝窩リンパ節細胞とP3U1細胞を融合させて培養し,常法に従って抗T-T抗体産生ハイブリドーマをクローン化した.その後,抗体を含む腹水を得て,抗体をアフィニティ精製し,酵素標識して,STR分析に使用した.本法は,簡易な方法であり,法医学の実務への応用に適する.クローン化したDNAプローブを使ってDNAの制限酵素断片長多型(ミニサテライト多型)を検出するサザン法は,手間がかかるうえに,アリールの長さを正確に決めることができないため,だんだん使われなくなり,PCR法によって簡単に増幅でき,1塩基の違いを識別できるマイクロサテライト(STR)の型判定が法医学的DNA多型分析の主流になった.STRのアリールを正確に決めるには,PCR産物を変性ポリアクリルアミドゲル電気泳動した後,アリールの1本鎖を自動シ-クェンサーで分析するか,なんらかのマニュアル法で検出する.自動シ-クェンサーは高価で,簡単には購入はできない.そこで,経済的に,かつ簡易にバンドを検出するために,AAAG(すなわちCTTT)を反復単位とするSTR座であるACTBP2,AluVpA,FGA,D8S320,D11S488,D11S554を増幅し,変性ゲル電気泳動し,ナイロン膜にサザン・ブロットし,これを10分間紫外線照射することによってCTTT鎖をチミンダイマー(T-T)化した.このT-Tを,本研究で作製したモノクローナル抗体T-T(ペルオキシダーゼ標識)で首尾よく検出することができた.モノクローナル抗T-T抗体は,簡易な方法で作製した.細胞融合のパートナーであるマウス骨髄腫細胞P3U1の浮遊液の煮沸遠心上清を紫外線照射したもので同系マウスを免疫し,その膝窩リンパ節細胞とP3U1細胞を融合させて培養し,常法に従って抗T-T抗体産生ハイブリドーマをクローン化した.その後,抗体を含む腹水を得て,抗体をアフィニティ精製し,酵素標識して,STR分析に使用した.本法は,簡易な方法であり,法医学の実務への応用に適する.
β型チタン合金の破壊挙動におよぼす侵入型不純物元素の影響

本研究は、β型チタン合金に関して侵入型不純物元素酸素、窒素、水素、炭素の溶解・加工工程における挙動、時効、機械的性質に及ぼす影響、破壊機構に果たす役割の解明からなっている。平成5年度における本研究の結果、侵入型不純物元素の内酸素、窒素、炭素に関しては、バルクの含有量は溶解原料および溶解時の雰囲気制御により決定され、内部への拡散は少ない。しかしこれら元素の内水素は、他の元素とは異なった挙動をすることが明らかとなった。すなわち、生産工程中酸洗のみならず冷間加工においてもバルク内に取り込まれバルク内濃度が上昇する。これはβ相に対する水素の溶解度が大きいことが要因と考えられ、β型チタン合金に特有の性質である。水素はβ相安定化元素でありβ型チタン合金のβ相からα相への相分解を著しく遅らせることが明らかとなった。代表的実用β型チタン合金Ti-15V-3Cr-3Sn-3Alの母相であるβ相は、常温においても水素の固溶度が大きく、通常使用される材料中には数10100ppm程度の水素が含まれている。また、、本合金では、合金中の水素量が1001000ppmの間では、水素脆化は認められなかった。破断時に放出される水素ガスの量が他の金属材料より多いことが確かめられた。これは、β相が高い水素の固溶限を持つためである。超高真空中加熱による脱水素処理を行った試料の力学的特性値から通常本材料に含まれる水素量でも変形破壊時に延性を低下させている。しかし、その機構に関しては明確にすることはできなかった。今後、変形・破壊に及ぼす水素の役割および時効組織に及ぼす影響をさらに詳細に明らかにすることによりβ型チタン合金の組織制御法の確立およびその結果として力学的特性を改善することが可能と考えられる。本研究は、beta型チタン合金に関して侵入型不純物元素酸素、窒素、水素、炭素の溶解・加工工程における挙動、時効、機械的性質に及ぼす影響、破壊機構に果たす役割の解明からなっている。平成5年度における本研究の結果以下のことが明きらかとなった。これら侵入型不純物元素の内酸素,窒素,炭素に関しては、バルクの含有量は溶解原料および溶解時の雰囲気制御により決定される。これは酸素,窒素,炭素は、チタンと強い結合力を有し安定な化合物を形成するためであり、加工工程中の雰囲気によっては表面にこれら化合物膜を生成する。しかし、このため内部への拡散は少ない。従って、溶解など溶解過程を含む工程での内部への直接の侵入以外の場合は、適切な雰囲気制御をすることによりこれら元素のバルク内濃度上昇を阻止することは困難ではない。これはbeta相に対する水素の溶解度が大きいことが要因と考えられ、beta型チタン合金に特有の性質である。また、水素はbeta相安定化元素でありbeta型チタン合金のbeta相からalpha相への相分解を著しく遅らせることが明らかとなった。一例を挙げると、水素量100ppmの通常の試料は、溶体化状態において硬度240HVを示し510°C・24時間の時効によって硬度360HVまで増加硬化が飽和する。一方水素量800ppmの試料では、24時間の時効によって30HVの硬度増加しかみられない。代表的構造用チタン合金Ti-6Al-4Vに関しては、これら侵入型不純物元素の研究が行なわれており、水素化物の生成、壁開割れの発生などが明らかにされている。

平成5年度に得られた結果と考え併せ特に水素に注目して研究を行なう。本研究は、β型チタン合金に関して侵入型不純物元素酸素、窒素、水素、炭素の溶解・加工工程における挙動、時効、機械的性質に及ぼす影響、破壊機構に果たす役割の解明からなっている。平成5年度における本研究の結果、侵入型不純物元素の内酸素,窒素,炭素に関しては、バルクの含有量は溶解原料および溶解時の雰囲気制御により決定され、内部への拡散は少ない。しかしこれら元素の内水素は、他の元素とは異なった挙動をすることが明らかとなった。すなわち、生産工程中酸洗のみならず冷間加工においてもバルク内に取り込まれバルク内濃度が上昇する。これはβ相に対する水素の溶解度が大きいことが要因と考えられ、β型チタン合金に特有の性質である。水素はβ相安定化元素でありβ型チタン合金のβ相からα相への相分解を著しく遅らせることが明らかとなった。代表的実用β型チタン合金Ti-15V-3Cr-3Sn-3Alの母相であるβ相は、常温においても水素の固溶度が大きく、通常使用される材料中には数10100ppm程度の水素が含まれている。また、本合金では、合金中の水素量が1001000ppmの間では、水素脆化は認められなかった。破断時に放出される水素ガスの量が他の金属材料より多いことが確かめられた。これは、β相が高い水素の固溶限を持つためである。超高真空中加熱による脱水素処理を行った試料の力学的特性値から通常本材料に含まれる水素量でも変形破壊時に延性を低下させている。しかし、その機構に関しては明確にすることはできなかった。今後、変形・破壊に及ぼす水素の役割および時効組織に及ぼす影響をさらに詳細に明らかにすることによりβ型チタン合金の組織制御法の確立およびその結果として力学的特性を改善することが可能と考えられる。
力感覚呈示型インターフェイスを用いた仮想空間作業システムの研究

人間の遠隔操作で動く作業ロボットの高度化や知能化が進むにつれて,スレープ側のロボットの把握動作などの仕事に応じて,操作側の人間の手に何らかの方法でロボットの作業感覚をフィードバックできる装置の必要性が指摘されている。本研究では,流体(空気)の圧力を用いた臨場感のある操作支援を実現する力感覚呈示装置「流体グローブ」を装着した操作者が,スレーブ側の遠隔操作用作業ロボットの代わりに計算機内に構築された仮想ロボットにより仮想作業を行い,作業の結果としての反力が力感覚の形で操作者にフィードバックされ,違和感の無い仮想作業が体感できる双方向の仮想空間作業システムの開発を行った。本年度はまず,研究代表者が提案・試作した,力感覚呈示型インターフェイス(流体グローブ)を仮想空間作業システムに応用するための改良を行い,計測制御システムと作業空間からの情報に応じて装着者への力感覚と接触感覚の呈示を容易にするシステムを構築した。次に,スレープ側の作業ロボットに相当する部分を計算機上のモデルによる仮想的な空間内に実現するのに先立ち,この仮想空間作業システムの構築の際に問題となる実際の作業空間と力感覚呈示型インターフェイスとの相互の関係の問題点を把握するため,実際の作業用マニピュレータを試作し,力感覚呈示型インターフェイスを用いた把握実験を等して力感覚の呈示試験を行い,力感覚の呈示がスレープ側の作業に有効性であることを確認した。今後は,ロボットの動作や作業感のモデルにより高速に処理されモニタ上に表示された作業画面を使った仮想的な作業を行う仮想空間作業システムを計算機上に構築し,力感覚呈示型インターフェイスとこの仮想空間作業システムを結合し,仮想空間に対する違和感の無い作業が実現できる統合システムを完成させ,その操作性能,制御性能,体感性能などを実験的に検討する必要がある。
生後発達期における小脳顆粒細胞の電気的性質変化が神経回路形成に果たす役割

神経回路が機能性を獲得するには、発達過程、特に生後直後の神経細胞の活性調節が必須である。近年の分子生物学を駆使した脳研究により、神経回路形成期の遺伝子発現パターンが明らかになりつつある。一方で、電気生理学的に、発達過程において神経細胞の電気的性質が大きく変化することがさまざまな神経細胞を対象とした研究で報告されている。しかしながら、これらの電気的性質の変化が、神経回路形成にどのように関与しているか、不明な点が多い。本研究の目的は、神経細胞の電気的性質の変化が、神経発達、神経回路形成にどのように関与しているかを明らかにすることである。平成19年度は小脳スライス器官培養系を用いて、小脳顆粒細胞の発達における電気的性質変化の役割を検討した。まず、リポフェクションにより、GFP発現ベクターを導入し、小脳顆粒細胞を可視化し、正常な発達をするかどうか検討した。その結果、小脳穎粒細胞は、in vivoでの報告と同様に形態が変化したことから、正常な発達をすることが確認できた。次に、GFPで同定したそれぞれのステージの小脳穎粒細胞に対して、パッチクランプ法を用いて電気的性質を解析し、電気的性質の発達に伴う変化を明らかにした。そこで、電気的性質の変化のひとつ、静止膜電位の移行の役割を検討するため、静止膜電位の移行を阻害する条件下、小脳スライスを器官培養した。その結果、小脳顆粒細胞の発達が阻害されることが明らかになり、静止膜電位の移行が小脳穎粒細胞の発達・回路形成に必須であることがわかった。一方で、電気生理学的に、発達過程において神経細胞の静止膜電位など電気的性質が大きく変化することがさまざまな神経細胞を対象とした研究で報告されている。本研究の目的は、神経細胞の電気的性質の変化が、神経回路形成にどのように関与しているかを分子レベルで明らかにすることである。平成18年度は初代培養を用いたin vitroの分化系において、膜電位の変化のメカニズムを薬理学的に検討した。さまざまな阻害剤を培養液に添加し、分化マーカー遺伝子の発現を定量的CR法を用いて検討した。その結果、leakのカリウムチャネルの阻害剤、bupivacaineが、多くの分化マーカー遺伝子の発現を抑制した。一方、電位依存性カリウムチャネルの阻害剤、TEAなどは一部の分化マーカー遺伝子の発現のみ抑制した。これらの結果から、leakのカリウムチャネルの活性が小脳顆粒細胞の分化に寄与していることが示唆された。また、小脳顆粒細胞の分化に関わる遺伝子の発現を抑制する効果的な方法を検討した。プラスミドDNAを用いたshRNAによるRNAi法および、アデノウイルスを用いたRNAi法、siRNAを用いたRNAi法を検討した。その結果、siRNAをエレクトロポーレーションにより導入する方法が、最も効率的に遺伝子発現を抑制できることがわかった。
鏡面反射特性を有する自由曲面の非接触3次元形状計測法の開発

カメラと光源を用いた能動的画像計測法により鏡面形状の計測を行うために、3軸直交直動テーブルとパン/ティルト回転テーブルから構成された5自由度カメラシステムを試作し、同システムを用いて鏡面の形状計測実験を行った。本システムは、カメラ光軸上に点光源を有し、面の法線方向から照射した光を同一方向で受光するという方法をとることで、面法線の直接的計測を行うことが特徴であり、これにより大型形状に対応でき、かつ裏面反射に影響されない計測が可能となる。初年度において、プロトタイプのシステムを構築し、形状計測実験を行った。その結果に基づき、次年度では以下の改良を施した。ハード面では、第1に、直動テーブルの組み合わせ部分の装置構成精度を高めるために、再度システムを組み直した。第2に、対象鏡面上の1点の位置情報を取得するための対象物体の固定面を、アクリル製の基準面から機械加工により精度を出した鋼鉄製の基準面に変更した。ソフト面では、第1に、計測開始時点のシステム初期化方式を確立した。第2に、基準面と対象鏡面との接触点位置およびその点における面法線方向を求める方式を考案した。第3に、双3次の面形状関数を仮定した局所的な面形状の補正計算アルゴリズムを開発した。実験は、計測誤差を評価できるようにガラス製の平面鏡と半径75mmの鋼球を用いて行った。平面鏡については、得られた再構成面の仮想平面からの最大ずれ量は12mmで、良好な結果を得た。鋼球の半径については、真値75mmに対して73.7mmから75.1mmの範囲で結果がばらついたが、各計測における再構成点と平均球面との平均ずれ量は49mm、標準偏差は14mmであり、球としての形状は正確に再構成された。誤差要因は多岐にわたると考えられるが、これらを個々に改良した上で、自由曲面の形状計測を行い、精度を評価することが今後の課題である。今年度は、鏡面の非接触形状計測法を開発する第一段階として、鏡面全体にわたって面の法線方向を測定できるように、空間の任意な位置で任意な姿勢を取り得る5自由度装置を試作した。この装置は、3台の互いに直交する直動テーブルと2台の回転テーブルから構成されており、回転テーブルにCCDカメラを取付けて能動的な光学測定を行えるようにしたものである。計測システムのハードウエアとしては、この5自由度測定装置を試作したほか、装置を支持する台を設計・製作し、また装置とコントローラ等を結ぶ信号線が装置の動きを束縛しないような工夫を施した。本計測システムは、5自由度測定装置のほかに画像処理装置およびこれらを制御するパーソナルコンピュータにより全体が構成されているが、システムのソフトウエアとしては、これら装置の制御プログラム、画像から必要な情報を抽出するための処理プログラム、そして、得られた法線情報を基にして3次元形状を再構成するための図形処理プログラムの開発を行った。また、形状評価や計算結果を表示するためのグラフィック処理等の周辺プログラムを作成した。システム完成後、形状計測実験を行った。実験には、計測誤差を評価できるようにガラス製の平面鏡と半径75mmの鋼球を用い、以下の結果を得た。平面鏡については、得られた再構成面の仮想平面からの最大ずれ量は0.012mmであった。鋼球については、真値75mmの半径に対して平均半径が74.41mmであった。再構成面に対して3次関数による平滑化処理を施した後の平均半径位置と各表面点との最大ずれ量は0.049mmであった。

誤差の主要な原因としては、測定装置の校正精度および計測対象物体を固定する際の測定装置との相対位置精度に問題があると考えており、これらの改良が今後の課題である。平成6年度に行った平面および球面に関する形状計測結果を基に、誤差の評価と計測精度の向上について検討を行ったところ、誤差の要因として、装置の校正精度、形状再構成のための拘束点位置計測精度および再構成計算方法に問題があると考えられた。第1の点については、直動テーブルの組み合わせ部分に改良を施し、再度システムを組み直した。第2の点については、対象鏡面上の1点の位置情報を得るのに、計測システムとは独立した基準面が必要となるが、これを簡易的なアクリル製の基準面から、定盤上に固定した鋼鉄製の基準面に変更した。さらに、基準面の位置情報を得るために、基準面上に格子状に配置した9点のマ-カ位置を三角測量の原理で計測し、基準面と対象鏡面との接触点位置およびその点における面法線方向を求める方式を考案した。第3の点については、双3次の面形状関数を仮定して、局所的に面形状の再構成計算を進めるアルゴリズムを開発した。本計測システムを用いて対象鏡面を計測するには、毎回カメラ光軸位置の初期化を行う必要があり、従来はその処理を半自動的に行ってきたが、それを全自動化するためのプログラムを作成した。また、基準面位置計測を新たに行うこととしたため、同カメラシステムを用いた画像計測プログラムの開発を行った。以上のハード、ソフト両面の改良を行い、前年度に引き続いて球面の計測実験を行ったところ、計測精度は前年度より僅かに改善されたものの、ほぼ同等の結果となり、目標の誤差±100μmを達成できていない。この原因として、ひとつには機械加工精度に依る装置校正の限界が考えられるので、今後は当社予定していたソフト処理による装置校正方法について引き続き検討する。
貧酸素水塊への酸素供給は化学合成独立栄養細菌による有機化合物合成を促進するか？

「悪天候時の強風等を原因とした水塊攪拌による一時的な酸素供給」や「貧酸素水塊の解消を目的とした大規模なエアレーション実験」は,貧酸素水塊の規模縮小に貢献するが,根本的な貧酸素水塊の解消や沿岸域の富栄養化の改善には貢献しない。その理由は,(仮説)貧酸素海域への酸素供給によって,海底堆積物表層で活発化した化学合成独立栄養細菌が,好気呼吸によって水塊の再貧酸素化を促し,炭酸固定による有機化合物合成を行って,海域の有機物量の減少を妨げるためである。本研究では,貧酸素海域への酸素供給がもたらす,有機化合物合成速度,細菌群集の数,種類,呼吸代謝等の変化を解明し,上記の仮説を解明する。
不安定構造物の動的挙動に関する基礎的研究

不安定構造物とは、構造を形成する部材に対し、歪を生じない様な変位が主体的な構造物である。不安定構造物を構造力学の立場から理論的に扱う場合、釣合形状に到るまでに大変位を生じ、また、内力が仕事を行わないため、一般的に行われている静的な釣合状態を基準とした手法では困難な場合が多い。我々は、既にこの様な構造物に外力が作用した場合に生じる大変位移行過程を準静的に扱う理論及び解析手法を提案してきた。この理論では、特別な困難を伴わずに不安定構造物の大変位移行過程を把握することができる。しかし、実現象において生じる移行過程は、動的なものであり上述の手法の準静的な取扱いでは不充分なことも多い。本研究では、既に開発した準静的な解析手法に対し質量や慣性力の影響を考慮した動的な理論を開発するための基礎的な研究を行うことにある。本年度は、基礎理論の構築、2次元不安定トラス構造モデルの実験と解析を行った。実験:実験は、鋼製のリンクバーによる2次元モデルを平面内に吊るし、重力下で落下させることにより行った。節点にはテフロン樹脂を挿入し摩擦の影響を極力抑え、簡易なバランスアームを作成し、重力下でも加速度が小さくなるように外力を調整した。測定写真内にストップウォッチを写し込み時刻を記録した。結果の例を左図に示す。解析:解析は、目下開発中の理論に基づき行った。大変位過程の微少時間に射影行列と一般逆行列の理論を応用することにより、数値積分を行わない解析手法となっている。通常の手法に比較し、各増分ステップにおいて必要とされる計算自由度数が軽減され、また、収束計算を必要としないため、数値計算上のメリットが大きい。レイノルズ数を基準として上述の実験と相似になるように各パラメータを設定した数値解析を実行した。結果を左図に示す。解析結果と実験結果は、詳細においては違いが認められるものの全体的な傾向は一致している。時間的なオーダーもほぼ一致しており、本年度の目標である解析手法の開発と実験データの収録は達成された。結果を左図に示す。
生活モデル理論に基づく高次脳機能障者の生活支援プログラム評価に関する研究

本研究は、生活モデル理論に基づくプログラムを実施している高次脳機能障害者の小規模作業所での実践を評価することで、生活モデル理論によるプログラムの有効性を実証し、高次脳機能障害者にとってより効果的な生活支援プログラムを開発することが目的である。昨年度末から今年度は、これまでの生活モデル理論に基づく高次脳機能障害者の生活支援プログラム評価に関する研究の成果を踏まえ、プログラムを途中で放棄(作業所を長期間休むなど)した利用者への支援と、就労支援のプログラムの評価を試みた。リハビリテーションプログラムを放棄する者は(1)通所開始間もない頃に「自分は(健常者であるので)他の障害者と一緒にされたくない」と、障害が認知できないことから早期にプログラムから離脱するケースと、(2)長期間リハビリテーションに参加し回復もみられるが、他の障害者が一般就労したといった情報や、家族等から回復を急がされる(「ずいぶんよくなってきたから、そろそろ就職できるんじゃないの」といった)言葉により、簡単に自分にとって必要なプログラムを見失うことが見受けられた。(1)の場合は、無理に通所開始を促すのではなく、自分なりに就労や復学をした結果やはりうまくいかないことを理解するまで待っしかない。しかし、(2)のケースでは、ある程度様々な状況や自分自身の障害も受け入れ理解することができるようになるため、今どのようなことで混乱し、何があるから慌てているのか、自分にとって何が必要なのか、今まで成功したことと失敗したことはどんな違いがあるかについて、繰り返し面接を行うことで、落ち着きを取り戻しプログラムに参加できるようになる。ただし、この面接を通じた支援が途切れてしまうとかなり長期間プログラムから離脱し、結果として混乱した状況も長期化する。電話などでも支援を行うが、直接面接し支援を行うケースよりもプログラムへの復帰率は低い。今後も引き続き、プログラムを長期離脱した利用者への支援のあり方を検討する必要がある。就労支援については、事例が1例みられたが、開始直後であるため評価には至っていない。しかし、復職に向けジョブコーチが復職先の上司と打ち合わせを繰り返し、試験的に受け入れてもらうなど進展は見られる。継続して就労支援プログラムについても研究する必要がある。平成16年度は、3ヶ所の作業所に新規登録した高次脳機能障害者の実態把握を中心に調査を実施した。3ヶ所の小規模作業所では回復段階を3段階に分け、障害の程度に応じたプログラムを提供していた。第1段階では、退院後まもなく通所を開始するケースが最も多い。退院直後は、高次脳機能障害を呈する状態が顕著に現れることが多く、また家族も突然高次脳機能障害を抱えた息子等に対して、「どう対応していいのかわからない」「なぜあのような行動をするのか理解できない」など戸惑いを感じていることが多いことが明らかとなった。従来の医学モデルを中心にしたリハビリテーションプログラムでは、身体的な回復に焦点が当てられることから、家族や本人のメンタルケアは置き去りにされてきたことが家族の話しなどからうかがえた。今後は退院直後から通所を開始した者と退院後かなり時間が経過者との比較を行っていく予定である。生活モデルによる高次脳機能障害者への生活支援は、高次脳機能障害者のできる部分(健康な部分)に焦点をあてかかわるため、「暴れる」「暴言を吐く」「キレル」といった行為の減少が見られていることがわかった。本人が記載している記録物からの変化では、特に最終段階の小規模作業所に通所する者では、自分自身の障害に対する理解が深まっているような言動の記載回数が増えたり、相手に感謝したり思いやる言動がすべての通所者が記載するといった変化が確認された。来年度は、更に実態把握に努め、生活モデル理論に基づく高次脳機能障害者の生活支援プログラムの有効性を明らかにしていきたい。今年度は、第1段階の作業所に通所する重度高次脳機能障害者の認知リハビリテーションの効果の検証を中心に研究を進めた。高次脳機能障害者は退院直後、特に記憶障害が重度であることが多い。記憶障害は生活の中で混乱を引き起こし、家族の介護負担を実感させる。第1段階の作業所では、自分の行動を思い出す手がかりとして写真を撮っていた。「さっき〇〇やってたよね」といった言葉では、記憶を引き出すことは極めて困難である。写真は何度見ても場面が変わることがないので、本人も勘違いではなく、自分が覚えていないことを直視させられ、自身の障害に対する認知が深まると解釈できる。第1段階では、写真には必ず本人が活動している場面が収められており、それをみて「ふりかえり」を作成する。自分が写っているにもかかわらず、思い出せない場合には、匂いや感触など感覚的な情報や快の感情(本人が楽しそうに笑っていた場面など)の情報を中心に補足し思い出せるよう支援を行う。第1段階がクリアすると、次の段階では本人が後姿で活動を行っている場面など、最初よりも思い出す手がかりが少ない写真を撮って、「ふりかえり」を書かせる。これでも思い出せない場合には、補足情報を提示する。

第3段階では、自分が写真を撮って(本人は写っていない)、それを見ながら「ふりかえり」を作成できるようする。言葉だけで何度も情報を提供するよりも、視覚的情報が繰り返し確認でき、かつ感覚的な補足提供することで、記憶を思い出す手がかりになることが分かった。また、回復の早い人では2ヶ月程度で自分の写っていない写真をみながら「ふりかえり」を補足情報なしに記録できるようになり、詳細な観察による記録が可能になることが明らかとなった(誤字などはまだ見られる)。生活の中で、本人が好きなものや印象的な場面は、誰でも記憶を想起するための手がかりになる。高次脳機能障害者自身の生活を活用することで、効果的な認知リハビリテーションになっていると考えられる。来年度も継続し効果評価を実施したい。本研究は、生活モデル理論に基づくプログラムを実施している高次脳機能障害者の小規模作業所での実践を評価することで、生活モデル理論によるプログラムの有効性を実証し、高次脳機能障害者にとってより効果的な生活支援プログラムを開発することが目的である。昨年度末から今年度は、これまでの生活モデル理論に基づく高次脳機能障害者の生活支援プログラム評価に関する研究の成果を踏まえ、プログラムを途中で放棄(作業所を長期間休むなど)した利用者への支援と、就労支援のプログラムの評価を試みた。リハビリテーションプログラムを放棄する者は(1)通所開始間もない頃に「自分は(健常者であるので)他の障害者と一緒にされたくない」と、障害が認知できないことから早期にプログラムから離脱するケースと、(2)長期間リハビリテーションに参加し回復もみられるが、他の障害者が一般就労したといった情報や、家族等から回復を急がされる(「ずいぶんよくなってきたから、そろそろ就職できるんじゃないの」といった)言葉により、簡単に自分にとって必要なプログラムを見失うことが見受けられた。(1)の場合は、無理に通所開始を促すのではなく、自分なりに就労や復学をした結果やはりうまくいかないことを理解するまで待っしかない。しかし、(2)のケースでは、ある程度様々な状況や自分自身の障害も受け入れ理解することができるようになるため、今どのようなことで混乱し、何があるから慌てているのか、自分にとって何が必要なのか、今まで成功したことと失敗したことはどんな違いがあるかについて、繰り返し面接を行うことで、落ち着きを取り戻しプログラムに参加できるようになる。ただし、この面接を通じた支援が途切れてしまうとかなり長期間プログラムから離脱し、結果として混乱した状況も長期化する。電話などでも支援を行うが、直接面接し支援を行うケースよりもプログラムへの復帰率は低い。今後も引き続き、プログラムを長期離脱した利用者への支援のあり方を検討する必要がある。就労支援については、事例が1例みられたが、開始直後であるため評価には至っていない。しかし、復職に向けジョブコーチが復職先の上司と打ち合わせを繰り返し、試験的に受け入れてもらうなど進展は見られる。継続して就労支援プログラムについても研究する必要がある。