hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
共生社会の構築に資する持続可能性教育としての日本語教師養成プログラムの開発

本研究の目的は「持続可能性教育としての日本語教師養成プログラム」を作成することである。大学院志望者のための日本語教育学講座、大学学部生のリベラルアーツ科目、日本語教師の自主研修等のフィールドにおいて同プログラムをデザインしたのち実施し、プログラム中の対話の展開や終了後の受講生の認識を質的に分析することにより、内容やデザインの確定及びプログラムの意義を検討した。その結果、受講生は1事前課題、2議論、3ふり返りの3つのステップで学習を進展させつつ、グローバル化社会の在り様を自己を起点として学ぶことがわかった。本プログラムは、日本語教師養成のみならず、隣接分野での応用が可能であると考えられる。本年度は、昨年度に引き続き「持続可能性教育としての日本語教師養成プログラム」の提示を目的として研究を行った。本プログラム作成のために、以下の4つの小研究を並行して進めた。1日本語教師志望の留学生の調査、2既存の教師養成プログラムの再検討、3学部生対象の持続可能性言語教育プログラム開発、4現職日本語教師の自律的研修プログラム開発である。1は日本の大学院に留学し日本語教育学を専攻する大学院生のインタビューを質的に分析した。2では平成13年から24年までお茶の水女子大学大学院で実施された共生日本語教育実習の内容の縦断的な変化を質的に分析した。3は複数の研究協力者(お茶の水女子大学教授岡崎眸氏ほか)と共にお茶の水女子大学で学部生対象のリベラル・アーツの科目として90分授業15回分のカリキュラム開発を行い、授業を実施したのち、受講生の意識調査を行った。4では異なる職場に所属する日本語教師が集まり、人生上、職業上の課題を継続的に考える実践を継続的に行い、日本語教師が自律的に研修できるプログラムの内容開発を行った。1から4のうち、1と2は現状把握および既存のプログラムの検討である。日本語教師を目指す留学生の現況や、既存の教師養成プログラムにおける到達点および課題を批判的に検討することによって、3や4で新規のプログラムの開発を行う際の土台的知見とした。3と4ではプログラム・デザインの骨組みを作成した。1)事前課題、2)議論・対話、3)ふり返りの3つのステップが受講生の思考の進化を促す上で効果があった。また、議論のデザインには「対話的問題提起学習」、「ロール・レタリング」が有効であった。本年度の研究結果により、「持続可能性教育としての日本語教師養成プログラム」のデザインが形をなしてきた。本プログラムは日本語教師のみならず、隣接他領域のリーダー育成への援用も期待できる。【研究目的と課題】本年度は本科研の最終年度として「持続可能性教育としての日本語教師養成プログラム」(以下、プログラム)を完成させ、プログラムの批判的検討を行った。具体的には、1プログラム受講者はどのような問題意識を持っているか、2プログラム中の受講生の対話はどのように展開するか、の2点を研究課題とした。【研究方法】上記1は、日本の大学院に留学し、日本語教育学を専攻する大学院生5名に対するインタビューを、修正版グラウンデッド・セオリー・アプローチを用いて分析した。2はプログラムを実施した二つのフィールド(フィールドA:お茶の水女子大学2012年春学期リベラルアーツ科目・学部生23名、フィールドB:2011年に実施した日本語教師の自主研修・日本語教師3名)で、プログラム受講者のプログラム中の対話やふり返りを、言語生態学や成人学習論の観点から質的に分析した。【研究成果】分析の結果、1では、留学生たちが留学生活の中で母国の価値観と留学中に身につけた価値観が相反し、その葛藤の中に置かれやすいことが明らかになった。今後、留学生を対象としてプログラムを行う場合、受講生が抱える現在の状況に対する支援にとどまらず、将来展望を把握し、そのサポートを行う必要があることが示唆された。2のフィールドAでは、プログラム中に受講生と教師は互いに応答しながら自己と社会との繋がりを捉え返し、相互に支えながらグローバル社会に対する認識を深化していることが明らかになった。フィールドBでは、受講生同士の経験の語り合いは、単に個別の問題状況を掘り下げることに留まらず、転移による理論の更新が行われるに至ると、共通の状況の改善につながりうる全体に有益なものとしてフィードバックされることがわかった。本年度の成果をもって本研究は、数名でのグループから数十名のクラス授業への展開が可能なプログラムとしてデザインが確定できた。本研究の目的は「持続可能性教育としての日本語教師養成プログラム」を示し、プログラム参加者の学びを明らかにすることである。本年度はお茶の水女子大学において2011年4月から7月まで、日本語教育専攻の参加者15名による実践を行った。本実践の特色は、言語生態学を理論的背景とする「持続可能性教育としての日本語教育」の一形態として、グローバル化社会における日本語教師の役割や専門性を問い直すための教師養成プログラムを展開したことである。これは日本語教師養成において持続可能性教育をベースとした初めての試みである。

具体的には、経済連携協定や留学生30万人計画といった国家規模の施策が日本語教育に及ぼす影響を考える内容をシラバスに組み込んだ。教室活動は、1)事前課題として、あるテーマについて新聞記事などから調べ自分の考えを書く、2)事前課題に基づいたグループワークと全体共有、3)気づいたことや考えたことをふり返る、という3つのパートからなる。参加者の内省記録やグループワークの音声記録分析の結果、参加者は国の政策や世界規模の事象といった大きなテーマを、教育経験や生活経験などを参照して仲間と対話することによって、日本語教師という職に内包された社会的意義に開眼していったことがわかった。例として、ある参加者はこれまで留学を、極めて個人的なキャリアアップの一行動と捉えていたが、頭脳流出やグローバル経済下の競争激化という観点で仲間と議論したことにより、日本語教育が多言語人材への教育であること、世界規模の経済活動と関係が深いことが自覚されたというふり返りを得ていた。本研究では「持続可能背教育としての日本語教育」を教師教育で展開することによって、人間活動と教師活動の一体化が推進されることを明らかにし、「持続可能性教育としての日本語教師養成プログラム」の可能性を打ち出した。本研究では「持続可能性教育としての日本語教師養成プログラム」の“短期版"と“長期版"の開発を目的としていた。これまでの2年間にわたっては、主に“長期版"のプログラムの充実を図った。平成23年度、24年度と連続して、半期にわたるプログラムを試行した。2年目にあたる24年度は、前年度の実践を改良する形で行った。さらに、1年以上継続する、より長期的な実践についても、自律的プログラムとして継続的研修を実施中である。プログラム実施に当たり、研究上の必要性から、急きょ、現状把握および既存のプログラムの検討の研究計画を遂行した。これは、新規プログラムの開発にあたり、日本語教師志望の留学生の抱える問題及び、これまでの日本語教師養成プログラムが何を達成し、何を課題として残しているのかを把握する必要が出たためである。この2つの小研究については、データ収集及び分析を平成24年度にすべて終えている。その研究成果は、研究発表3件、査読付き論文3本(うち1本は審査中)の形に結実している。平成24年度には、プログラム策定の研究計画に即して、学部生対象、および現職日本語教師を対象に実践を行い、データを収集した。データの分析は順調に進展している。現在までに3件の研究発表を世に問うた形である。上述のことから総合的に見て、研究はおおむね順調に進展しているということができよう。当初の計画では、本年度は半期の実践を行うためのシラバスおよび教材案作成を行うことと、それに基づいて教室実践を行うことを予定していた。これらは予定通りに進行した。また、次年度の課題としていた、参加者に対するアンケート分析も行った点で、本年度の当初の計画案にあった課題はすべて終わらせることができた。
子宮頸部腺がんにおける組織型決定に関与する宿主側およびウイルス側因子の解析

本邦における子宮頸がんは、近年相対的に予後不良の腺がんが増加し約25%に達している。しかし、子宮頸部腺がんの発がん機構は未解明である。本研究は、正常ヒト子宮頸部上皮細胞に、ヒトパピローマウイルス(HPV)がん遺伝子E6/E7発現と、子宮頸部腺がんで頻度の高い宿主遺伝子変化を導入することにより、HPV腺がん発がんモデルの作製を目的とする。代表者らの樹立した正常子宮頸部由来上皮細胞株HCK1Tは、子宮頸がんの起源細胞であると近年報告されたSCJ細胞の形質を有する、世界的に珍しい細胞株である。HCK1T細胞を用い、同一起源細胞から扁平上皮および腺がんの発がんを誘導することにより、組織型決定に関与する(1)HPV側要因および(2)宿主側要因の特定を目指す。HPV腺がんの本態を解明することにより、早期診断法や治療法開発への発展が期待できる。子宮頸がんの大規模ゲノム解析研究から、腺がんではKRASの活性化型変異やSMAD4の欠損あるいは不活性化型変異の頻度が高いことが報告されている。研究代表者らは、HCK1T細胞に、扁平上皮がん腺がんの両者で高頻度に検出されるHPV16のE6/E7と、活性化型HRAS変異体HRAS(G12V)よびc-MYCの高発現を導入すると扁平上皮がんが誘導されることを以前報告した。そこで、ドキシサイクリン(DOX)依存的に、HPV16E6/E7および活性化型KRAS変異体KRAS(G12V)とc-MYC、または腺がんでより高頻度に検出されるHPV18のE6/E7およびKRAS(G12V)とc-MYCを発現するHCK1T細胞を作製した。さらに、これらの細胞のSMAD4のノックダウン細胞を作製し、単層培養における性質を比較検討した。結果、DOX依存的な細胞増殖やコロニー形成能の亢進が観察されたが、細胞特性の転換を示唆するマーカー発現等に目立った変化はみられなかった。SCJ細胞は、リザーブ細胞と呼ばれる細胞への分化を経て、扁平上皮細胞に分化することが報告されている。研究代表者らのこれまでの解析から、HCK1T細胞は、SCJ細胞のマーカーであるK17が発現しているものの、扁平上皮細胞のマーカーであるp63やK14も共発現しており、リザーブ細胞とSCJ細胞両者の特徴を有することが示唆された。p63は扁平上皮細胞の特性や幹細胞性を決定する重要な転写因子である。女性生殖器発生の過程においては、SMAD4はp63発現を誘導することにより、p63陰性のミューラー管から子宮頸部および膣の扁平上皮への分化を促進することが報告されている。研究代表者らのグループでは以前に、HCK1T細胞の増殖はp63発現に依存すること、しかしc-MYCを高発現させるとp63をノックダウンしてもHCK1T細胞は増殖できることを報告した。そこで、KRAS変異体およびc-MYCに発現に加え、SMAD4欠損がp63発現を低下させるかどうか検討したが、あまり変化はなかった。すなわち、腺がんの発生には、これら因子の発現や不活性化だけでなく他の因子が関与することが示唆された。一方で、SMAD4欠損によりp63発現が低下した細胞が出現しても、主に扁平上皮細胞の増殖を促進するために開発された現在の培養条件下では、それらp63発現の低下した細胞は増殖できず、結果としてp63発現が維持された細胞だけが増殖した可能性が考えられた。そこで、p63発現が低下した細胞の増殖をサポートする培養条件の検討を開始した。適切な培養条件の特定は、今後の研究計画に必須である。器官の発生・分化だけでなくがんの進行・維持には、上皮細胞に加え、線維芽細胞や免疫細胞などによってつくられる微小環境が大きく関与することが近年明らかになった。そこで、一年目に作製した、HPV16あるいはHPV18 E6/E7およびKRAS(G12V)およびc-MYC発現およびSMAD4ノックダウンの挿入有・なしHCK1T細胞の3D培養およびXenograftモデルを作製し、微小環境を少なくとも部分的に再現すれば、単層培養ではみられなかった組織型の転換が起こるかどうかを検討する。子宮頸部扁平上皮がんのマウスモデルでは、HPV16 E6/E7の発現に加え、エストロゲンが発がんに大きく関与することが報告されている。また乳がんなど女性特有の臓器由来のがんの発症には、エストロゲンが関与することがよく知られている。そこで、xenograft作成時に、マウスに徐放性エストロゲン剤を投与し、エストロゲンあるいはエストロゲンによる微小環境の変化等が、子宮頸がんの進行や組織型決定に関与するかどうかを検討する。SCJ細胞あるはリザーブ細胞から腺上皮細胞へ分化する機構は、全くの不明となっている。そこで、子宮頸部腺がんで際立って発現が高く、細胞特性の発現や維持に関与する可能性が高い転写因子の候補を抽出する。HPVE6/E7およびKRAS(G12V)等のがん遺伝子発現を導入したHCK1T細胞に、前述の転写因子を単独あるいは複数組み合わせて発現させ、細胞の形態や特性におよぼす影響を検討する。単層培養時、3D培養やxenograftを作製時における細胞形態・マーカー発現を検討し、腺がん発生に関与する転写因子や微小環境を解析する。

本邦における子宮頸がんは、近年相対的に予後不良の腺がんが増加し約25%に達している。しかし、子宮頸部腺がんの発がん機構は未解明である。本研究は、正常ヒト子宮頸部上皮細胞に、ヒトパピローマウイルス(HPV)がん遺伝子E6/E7発現と、子宮頸部腺がんで頻度の高い宿主遺伝子変化を導入することにより、HPV腺がん発がんモデルの作製を目的とする。代表者らの樹立した正常子宮頸部由来上皮細胞株HCK1Tは、子宮頸がんの起源細胞であると近年報告されたSCJ細胞の形質を有する、世界的に珍しい細胞株である。HCK1T細胞を用い、同一起源細胞から扁平上皮および腺がんの発がんを誘導することにより、組織型決定に関与する(1)HPV側要因および(2)宿主側要因の特定を目指す。HPV腺がんの本態を解明することにより、早期診断法や治療法開発への発展が期待できる。子宮頸がんの大規模ゲノム解析研究から、腺がんではKRASの活性化型変異やSMAD4の欠損あるいは不活性化型変異の頻度が高いことが報告されている。研究代表者らは、HCK1T細胞に、扁平上皮がん腺がんの両者で高頻度に検出されるHPV16のE6/E7と、活性化型HRAS変異体HRAS(G12V)よびc-MYCの高発現を導入すると扁平上皮がんが誘導されることを以前報告した。そこで、ドキシサイクリン(DOX)依存的に、HPV16E6/E7および活性化型KRAS変異体KRAS(G12V)とc-MYC、または腺がんでより高頻度に検出されるHPV18のE6/E7およびKRAS(G12V)とc-MYCを発現するHCK1T細胞を作製した。さらに、これらの細胞のSMAD4のノックダウン細胞を作製し、単層培養における性質を比較検討した。結果、DOX依存的な細胞増殖やコロニー形成能の亢進が観察されたが、細胞特性の転換を示唆するマーカー発現等に目立った変化はみられなかった。SCJ細胞は、リザーブ細胞と呼ばれる細胞への分化を経て、扁平上皮細胞に分化することが報告されている。研究代表者らのこれまでの解析から、HCK1T細胞は、SCJ細胞のマーカーであるK17が発現しているものの、扁平上皮細胞のマーカーであるp63やK14も共発現しており、リザーブ細胞とSCJ細胞両者の特徴を有することが示唆された。p63は扁平上皮細胞の特性や幹細胞性を決定する重要な転写因子である。女性生殖器発生の過程においては、SMAD4はp63発現を誘導することにより、p63陰性のミューラー管から子宮頸部および膣の扁平上皮への分化を促進することが報告されている。研究代表者らのグループでは以前に、HCK1T細胞の増殖はp63発現に依存すること、しかしc-MYCを高発現させるとp63をノックダウンしてもHCK1T細胞は増殖できることを報告した。そこで、KRAS変異体およびc-MYCに発現に加え、SMAD4欠損がp63発現を低下させるかどうか検討したが、あまり変化はなかった。すなわち、腺がんの発生には、これら因子の発現や不活性化だけでなく他の因子が関与することが示唆された。一方で、SMAD4欠損によりp63発現が低下した細胞が出現しても、主に扁平上皮細胞の増殖を促進するために開発された現在の培養条件下では、それらp63発現の低下した細胞は増殖できず、結果としてp63発現が維持された細胞だけが増殖した可能性が考えられた。そこで、p63発現が低下した細胞の増殖をサポートする培養条件の検討を開始した。適切な培養条件の特定は、今後の研究計画に必須である。
オオムギにおけるマイクロRNAを介した閉花性遺伝子の発現制御機構の解明

閉花性遺伝子を有した品種は開花時に感染する可能性がなく赤カビ病に強いことが知られており、閉花性遺伝子を活用した赤カビ病抵抗性品種の開発が期待される。オオムギ閉花性遺伝子cly1はmicroRNA(miR172)によって制御され、miR172結合部位内の塩基多型によりmRNAが切断を受けず、cly1遺伝子の転写レベルが著しく増加したことが形態変化の原因であることを明らかにしが、ヘテロ個体がなぜcly1は完全優性を示したのかまだ不明である。miRNAを介したta-siRNAの生成し、新たなsmall RNA分子を生成と自己制御しているという仮説が立てられた。HvAP2に新たな発現制御機構が存在していることを発見するため、オオムギ品種Morexのsmall-RNA cDNA libraryを解読し、約1億5千万リード(8チャンネル)を得られた。HvAP21の配列をBLASTし、アンチセンス配列と完全一致するものが5か所、計8リードがあり、これらの配列はHvAP2から生成したta-siRNAの候補とする。これらのsiRNAリードはすべてmiR172切断場所の5'上流に位置されているが、配置状態はフェイジングが確認できず、HvAP2から二次的なsiRNAが生成する仮説を直接に証明できなかった。オオムギコアコレクションの中から、閉花性劣性遺伝子(cly1.b)を持ちながら、鱗被の維管束は部分的に形成する品種(SV235)を発見した。SV235におけるHvAP2転写量抑制はプロモータのメチル化によるものと示唆した結果結果となった。具体的に、SV235が開花させる遺伝要因を調べるために、通常の閉花性品種KNG(cly1,b)や、SV223、SV230(cly1.c)と交配した。F_2植物の鱗被サイズを調査し、原因遺伝子座をマッピングした所、cly1と完全連鎖していることが確認できた。cly1の新たなアレルと推測された。通常、閉花性遺伝子cly1はmicroRNA(miR172)によって制御され、閉花品種閉のmiR172結合部位内の塩基多型によりmRNAが切断を受けず、cly1遺伝子の転写レベルが著しく増加したことが鱗被部の維管束が形成しない原因と考えられた。オオムギの閉花性は鱗被の発達不全、小型化によって生ずることがこれまでの研究であきらかになったが、鱗被の大きさに依存しない、あらたな閉花性機構を解明した。閉花性コムギの開発へ向けた研究を進める。オオムギ閉花性遺伝子Cly1はmicroRNA (miR172)によって制御され、miR172結合部位内の塩基多型によりmRNAが切断を受けず、Cly1遺伝子の転写レベルが著しく増加したことが形態変化の原因であることを明らかにしが、ヘテロ個体がなぜCly1は完全優勢を示したのかまた不明である。miRNAを介したta-siRNAの生成し、新たなsmall RNA分子を生成と自己制御しているのいう仮説が立てられた。Cry1に新たな発現制御機構が存在していることを発見するため、オオムギ品種Morexのsmall-RNA cDNA libraryを解読し、約1億5千万リード(8チャンネル)を得られた。HvAP2の配列をBLASTし、anti-sense配列と完全一致するものが5か所、計8リードあり、これらの配列はHvAP2から生成したta-siRNAの候補とする。これらのリードはすべてmiR172切断場所の5'上流に位置され(table 1)、現在転写産物の確認を行っている。オオムギ閉花性遺伝子Cly1はmicroRNA(miR172)によって制御され、miR172結合部位内の塩基多型によりmRNAが切断を受けず、Cly1遺伝子の転写レベルが著しく増加したことが形態変化の原因であることを明らかにしが、ヘテロ個体がなぜCly1は完全優勢を示したのかまた不明である。Cly1遺伝子の開薙アレルを形質転換可能な閉花品種Golden Promiseにアグロバクテリウム法によって導入する相補性形質転換体を作成した。コンストラクト作成日本でおこない、遺伝子導入は高度なオオムギ形質転換技術を有するドイツIPKと共同研究で行った。種子を輸入し、H24年度に国内で表現型を観察するオオムギコアコレクションの中から、閉花性劣性遺伝子(Cly1.b)を持ちながら、鱗被の維管束は部分的に形成する品種(SV235)を発見した。SV235ではCly1遺伝子の発現量が低下する事を明らかにした。この遺伝子の発現を調節する因子はCly1の近くにマップされる事が明らかになった。

オオムギ閉花性遺伝子cly1はmicroRNA(miR172)によって制御され、miR172結合部位内の塩基多型によりmRNAが切断を受けず、cly1遺伝子の転写レベルが著しく増加したことが形態変化の原因であることを明らかにしが、ヘテロ個体がなぜcly1は完全優性を示したのかまだ不明である。miRNAを介したta-siRNAの生成し、新たなsmall RNA分子を生成と自己制御しているという仮説が立てられた。HvAP2に新たな発現制御機構が存在していることを発見するため、オオムギ品種Morexのsmall-RNA cDNA libraryを解読し、約1億5千万リード(8チャンネル)を得られた。HvAP21の配列をBLASTし、アンチセンス配列と完全一致するものが5か所、計8リードがあり、これらの配列はHvAP2から生成したta-siRNAの候補とする。これらのsiRNAリードはすべてmiR172切断場所の5'上流に位置されているが、配置状態はフェイジングが確認できず、HvAP2から二次的なsiRNAが生成する仮説を直接に証明できなかった。オオムギコアコレクションの中から、閉花性劣性遺伝子(cly1.b)を持ちながら、鱗被の維管束は部分的に形成する品種(SV235)を発見した。SV235におけるHvAP2転写量抑制はプロモータのメチル化によるものと示唆した結果結果となった。具体的に、SV235が開花させる遺伝要因を調べるために、通常の閉花性品種KNG(cly1,b)や、SV223、SV230(cly1.c)と交配した。F_2植物の鱗被サイズを調査し、原因遺伝子座をマッピングした所、cly1と完全連鎖していることが確認できた。cly1の新たなアレルと推測された。通常、閉花性遺伝子cly1はmicroRNA(miR172)によって制御され、閉花品種閉のmiR172結合部位内の塩基多型によりmRNAが切断を受けず、cly1遺伝子の転写レベルが著しく増加したことが鱗被部の維管束が形成しない原因と考えられた。多様なオオムギ遺伝資源のなかから開花性に関して新規な形質をしめす品種を発見し、その遺伝子発現と遺伝様式を明らかにした。Cly1相補検定のための形質転換実験も順調に進んでいる。オオムギの閉花性は鱗被の発達不全、小型化によって生ずることがこれまでの研究であきらかになったが、鱗被の大きさに依存しない、あらたな閉花性機構を解明した。オオムギの閉花性は小型の鱗被によって生ずることがこれまでの研究であきらかになったが、今後は鱗被の大きさに依存しないあらたな機構による閉花性に関する研究をおこなう。閉花性コムギの開発へ向けた研究を進める。
ヴェネツィア,『ドイツ人商館』(フォンダコ・デイ・テデスキ)の壁画復元の研究

1508年に竣工したヴェネツィアの「ドイツ人商館」(現中央郵便局)の外壁には、1507年から1510年までに制作されたと考えられるフレスコ画があったが、僅かな断片を除いて消滅してしまった。これを断片の様式や後世の模刻版画、そして文献史料等を加えて推測すると、概ね次のようになるだろう。大運河側壁面(西壁)=ジョルジョーネ制作:《裸婦立像》(ヴェネツィア、アカデミア美術館)、《翼をつけたプットー》(ソルトウッド城)、《裸婦立像》等のザネッティ版画、《天使にかしずく女性》(ヴァザーリ)、《戦利品》(リドルフィ)等々。メルチェリーア側(南壁)=ティツィアーノ制作:《ユディト》(ヴェネツィア、フランケッティ美術館)、《ギガンテス怪獣の闘い》等の断片(同)、《カルツァ・クラブ会員》等のザネット版画等々。しかし配置すべき壁面や壁面内の位置には不明な点が多い。今回の調査によって《ユディト》断片と南玄関壁をつぶさに観察し、両者の合成写真を作成することができたのは大きな収穫だった。そしてとの図像は《ユスティツィア》(正義)とする解釈の方がより適切であることも確認できた。またこの人物像は、ジョルジョーネの《裸婦立像》(西壁)がそうであるように、画家ティツィアーノの絵画様式を典型的に示している。同時にそれはティツィアーノ芸術その後の発展への出発点ともなるもので、この研究課題をさらにヴェネツィア絵画の発展史の研究へ向けさせることともなった。大火後の『ドイツ人商館』再建は1508年8月に竣工した。その外壁を飾ったフレスコ画は事実上消滅してしまい、1937年と1967年に壁面から剥離して、現在はヴェネツィアのアカデミア美術館とフランケッティ美術館他に損傷した僅かな断片が所蔵されるにすぎない。当初の状態を推測するには、まずこれらの現存断片の検証に加えて、史料図像と文献テキストとを渉猟しなくてはならない。現段階までの作業で明らかにできた画像類は1.現存断片ジョルジョーネ:《裸婦立像》、ティツィアーノ:《ユスティツィア》(《ユディト》)、《ギガンテスと怪物の闘い》、《トリトンとプットー》、《プットーと怪物の闘い》、《レヴァント人》、《オリエント人》、《紋章》、《カルツァ・クラブ会員》2.史料図像(現存断片作品以外の)ジョルジョーネ:《坐る若者》(Zanetti版画)、《坐る裸婦》(同)、ティツィアーノ:《カルツァ・クラブ会員》(Zanetti版画)、《女性胸像と頭-手のトルソ》(同)など3.文献テクスト《天使のかしずく女性》(Vasari)、《獅子の首をしたがえた男》(同)、《戦利品、青年、頭部、地球を測定している幾何学、円柱の間の騎乗人物、空想物》(以上ジョルジョーネ)、《裸足を見せる裸婦》、《帆のようなものをもつ若者》(以上ティツィアーノ)など(Ridolfi)、《アラベスク》、《イヴ》、小塔壁のふたつの《裸婦》など(Milesio)である。これらの画像がどの壁面にあったか、それらはなにを意味していたか、ジョルジョーネとテッィツィアーノの分担と制作時期、そして二人の作品の様式の違いはどこに認められるか等が今後の問題となる。ヴェネツィアの旧『ドイツ人商館』の大運河側の西壁面とメルチェリーア側の南壁面には、ジョルジョーネとティツィアーノとが描いたフレスコ画があった。文献史料で語られている描写物をも加えて、両壁面の当時の状態を推測すれば、概ね次のような制作分担と画面配置になるものと思われる。大運河側壁面ジョルジョーネ作:

《裸体立像》(ヴェネツィア、アカデミア美術館)、《裸婦立像》(ザネッティ版画)、《座る若者》(同)、《座る裸婦》(同)、《天使にかしずく女性》(ヴァザーリ)、《獅子の首をしたがえた男》(同)、《戦利品、青年、頭部、地球を測定している幾何学、円柱の間の騎乗人物、空想物》(リドルフィ)、《弓をもつキューピッド》(素描、ニューヨーク)、《有翼のプットー》(フレスコ断片)(ソルトウッド城)。メルチェリーア側壁面ティツィアーノ作:《ユディト》(ヴェネツィア、フランケッテイ美術館)、《ギガンテスと怪物の闘い》(同)、《トリトンとプットー》(同)、《プットーと怪物の闘い》(同)、《紋章》(同)、《レヴァント人》(修復中)、《オリエント人》(同)、《カルツァ・クラブ会員》(ヴェネツィア、パラッツォ・ドゥカーレ)、《カルツァ・クラブ会員》(ザネッティ版画)、《二人の裸婦》(同)、《裸足を見せる裸婦》、(リドルフィ)、《帆のようなものをもつ若者》(同)、他。1508年ないしは09年には完成したと考えられるこれらの壁画の統一的主題内容は不明である。しかし《ユディト》(《ユスティツィア》)のような中心画面には、当時ヴェネツィアが置かれていた時代状況にかかわる特定の意味が込められていたと解される。これは、絵画様式の問題とともにこれから究明すべき課題である。
ナノインプリント法による非線形高分子光導波路デバイスの簡便な作製法の提案

マルチメディアにおける情報伝送の大容量、高速化の流れの中で、宅内系へと通信の光化が進展している。光通信等において、光部品の集積化が可能な導波路型光回路が注目されている。中でも低価格、プラスチック光ファイバとの整合性等の観点から、高分子を用いた光回路が注目されている。特に、光機能性色素を含有する非線形高分子は、高非線形性、加工性に優れる等の利点を持つため、波長変換素子や光変調素子、機能性高分子光回路への応用が期待される。本研究では、機能性高分子光導波路作製に関して、金型を用いた新規作製法の提案と実証研究を行った。レーザ微細加工技術を用いて、ナノメートルオーダの解像度のマスターを作製し、高温下でマスターを非線形高分子に押し付けると同時に電界配向を行い、パターン形成と2次非線形性(1次電気光学特性)を発現した。実際に電気光学高分子薄膜にエンボス法で作製した0.67μm周期のχ^<(2)>を有する回折格子に、基本波を入射したところ、SHGの回折を観測した。また、回折格子のみならず、他の光導波路部品であるチャネル導波路やファイバガイド溝の形成について行った。電気光学高分子上に回折格子を有するチャネル型光導波路の簡便な作製法について検討し、回折格子はエンボス法により、導波路はフォトブリーチ法により作製を試みた。一括工程にて製作するため、新規複合マスク/マスターの作製を行なった。次にマスク/マスターとサンプル薄膜を固定して、ホットエンボス及びUVフォトブリーチを行った。結果、マスク幅の回折格子が導波路上に形成できていることを確認した。この作製法により、チャネル導波路上に特別なアライメントの必要なく回折格子を作製できることから、回折格子の他に、面外分岐ミラーやファイバーガイド用V溝等を組込んだ応用が期待される。中でも低価格、プラスチック光ファイバとの整合性等の観点から、高分子を用いた光導波路が注目されている。本研究では、機能性高分子光導波路作製に関する新たな作製法の提案と実証研究を行った。レーザ微細加工技術を用いて、ナノメートルオーダの解像度のマスターを作製し、高温下でマスターを非線形高分子に押し付けると同時に電界配向を行い、パターン形成と2次非線形性(1次電気光学特性)の発現を実現した。マスターは、ニッケル基板上のポリイミド薄膜にレリーフ回折格子を形成したものを用いた。高温下で各種非線形高分子薄膜にマスターを押しつけると同時にポーリングを行ったところ、サブミクロン周期のχ^<(2)>を有するレリーフ回折格子を作製することができ、その作製条件について検討した。また本方法は様々な非線形高分子薄膜に適用できることが明らかになった。マスターの耐久性を測定したところ、300°Cの高温下に200時間放置しても形状に変化はなく、高い熱安定性を示した。また、圧着ポーリングを数十回行っても、形状に変化はないことが分かった。この結果から、作製した複合材料構造マスターは、耐熱性と機械的強度に優れており、実用化に適している。

電気光学高分子薄膜に作製した0.67μm周期のχ^<(2)>を有する回折格子に、基本波を入射したところ、SHGの回折を観測した。また、他の光導波路部品であるチャネル導波路の形成についての提案も行った。マルチメディアにおける情報伝送の大容量、高速化の流れの中で、宅内系へと通信の光化が進展している。光通信等において、光部品の集積化が可能な導波路型光回路が注目されている。中でも低価格、プラスチック光ファイバとの整合性等の観点から、高分子を用いた光回路が注目されている。特に、光機能性色素を含有する非線形高分子は、高非線形性、加工性に優れる等の利点を持つため、波長変換素子や光変調素子、機能性高分子光回路への応用が期待される。本研究では、機能性高分子光導波路作製に関する新たな作製法の提案と実証研究を行った。レーザ微細加工技術を用いて、ナノメートルオーダの解像度のマスターを作製し、高温下でマスターを非線形高分子に押し付けると同時に電界配向を行い、パターン形成と2次非線形性(1次電気光学特性)を発現した。実際に電気光学高分子薄膜にエンボス法で作製した0.67μm周期のχ^<(2)>を有する回折格子に、基本波を入射したところ、SHGの回折を観測した。以上の結果を踏まえて、今年度は回折格子のみならず、他の光導波路部品であるチャネル導波路やファイバガイド溝の形成について行った。電気光学高分子上に回折格子を有するチャネル型光導波路の簡便な作製法について検討し、回折格子はエンボス法により、導波路はフォトブリーチ法により作製を試みた。一括工程にて製作するため、新規複合マスク/マスターの作製を行なった。次にマスク/マスターとサンプル薄膜を固定して、ホットエンボス及びUVフォトブリーチを行った。結果、マスク幅の回折格子が導波路上に形成できていることを確認した。この作製法により、チャネル導波路上に特別なアライメントの必要なく回折格子を作製できることから、回折格子の他に、面外分岐ミラーやファイバーガイド用V溝等を組込んだ応用が期待される。
清原宣賢遺文による日本漢字音の位相論的研究

今年度も清原宣賢の自筆本を調査した。また昨年度までの研究において、清原宣賢遺文に見られる漢字音を、同時代の漢字音および前時代の漢字音と対照させる必要性を感じた。そのため今年度は、南北朝時代から室町時代中期ごろまでの資料と、同時代の宣賢以外の人物が作成した資料をも範囲として、原本・複製の参照による調査を行った。また総括のため、漢字音の体系的記述と、位相論的記述を行った。体系的記述では、漢籍訓読資料と抄物の二種類の資料を選択し、漢字音の体系的記述を行った。資料として、漢籍訓読資料から1『春秋経伝集解』、2『毛詩鄭箋』、3『論語』、4『中庸章句』、5『孝経秘抄』訓点資料部分、6『胡曾詠史詩注』訓点資料部分を選択した。また抄物として、1『左伝聴塵』、2『孝経秘抄』抄物部分、3『胡曾詠史詩注』抄物部分、4『職原抄秘注』を選択した。本研究では、これらの資料の字音注を抜き出し、中国語中古音の体系と対照させるための表である「分紐分韻表」を作成した。分紐分韻表に基づき、声母(頭子音)、韻母(韻)、声調のそれぞれの項目について、中国語中古音の体系と対照させながら、記述を行った。位相論的研究では、一個人の漢籍訓読資料における字音点の多様性の記述、一個人の資料における各種字音系統の使用状況の記述、漢音形衰退に関する位相差の指摘、「数」という字の漢音形についての音形変化と位相差の指摘、一個人の-t入声の発音に関する位相差を指摘した。このように、位相論的研究は個別的な観点に基づいて、清原宣賢遺文における位相差を調査した点に特徴がある。位相論的研究においては対象資料として、体系的記述で扱った資料のみに留まらず、調査し得た清原宣賢遺文全体を資料として扱った。28年度が最終年度であるため、記入しない。本年度は、資料収集・資料整備、および本研究における基礎的論考を行った。資料収集では、清原宣賢遺文および関連文献を、原本やマイクロフィルム等の参照により収集した。資料整備では、分紐分韻表を作成した。分紐分韻表には中国語中古音の推定音価を載せた。また各資料の分紐分韻表の作成のみならず、複数資料を統合した分紐分韻表も作成している。音韻論的分析を行うための用例数を確保するため、文体ごとの表作成が望ましいと考えたためである。この他、複数の資料のデータ入力が完了している。本年度は2本の論文を発表した。坂水貴司「清原宣賢加点『春秋經傳集解』の反切注について」(『広島大学大学院教育学研究科紀要第二部(文化教育開発関連領域)』第63号2014年12月、広島大学大学院教育学研究科)は、清原宣賢が参照・引用した反切・同音字注に関する論考である。室町時代の学者である清原宣賢は『春秋經傳集解』加点の際、『附釋音春秋左伝註疏』所引の反切注を参照したことが知られた。このことは清原宣賢が加点する音注や加点資料の位置づけを知る上で重要だと考える。坂水貴司「清原宣賢加点漢籍訓読資料における字音点の多様性」(『訓点語と訓点資料』第134輯2015年3月、訓点語学会)では、清原宣賢加点の漢籍訓読資料における字音点に着目して、その多様性を述べたものである。種類・目的の異なる4資料を取り上げ、「各資料における音注加点傾向」「呉音を反映する字音点の加点」「反切・同音字注の仮名音注・声点への影響」「入声韻尾の促音表記」といった観点により異なりを観察した。その結果、経書では、他種の資料よりも規範的な漢音を使用していることが知られた。また、促音化した入声韻尾に関する表音的な音注加点をする資料や、初学者に修得困難な音注を加点しない資料があり、資料の目的によって字音点に異なりが生じることが分かった。1.清原宣賢加点本における位相差に関する研究発表京都大学文学部で開催された訓点語学会において、「室町時代の仮名点資料とヲコト点資料における漢字音の相違ー清原宣賢加点『標題徐状元補註蒙求』を資料としてー」と題した口頭発表を行った。これは、宣賢書写による『標題徐状元補註蒙求』二本を比較し、仮名点資料と比較してヲコト点資料の方が、1)同一部分で漢音形を選択する割合が高いこと、2)全濁上声の去声化を修正し、上声点を加点する割合が高いこと、3)軽音節非全濁上声字において去声化が見られないこと、4)「袍」字の声調において、韻書に依拠した平声点が差されていることを指摘した。その上で、識語より、講義に使用する資料にヲコト点資料が多いことを指摘し、講義の場を想定するか否かによって訓点が異なっており、字音点にも違いが生ずる、と結論づけた。2.宣賢加点本に基づく言語変化に関する論考

坂水貴司「清原宣賢と清原枝賢の字音点の相違についてー『論語』『中庸章句』を資料としてー」(『広島大学大学院教育学研究科紀要第二部(文化教育開発関連領域)』第64号2015年12月、広島大学大学院教育学研究科)では、清原宣賢加点本の字音点と、宣賢の孫である清原枝賢加点本の字音点とを比較して、訓点資料における変化について調査した。その結果、宣賢加点本と比較し、枝賢加点本では宣賢加点本よりも漢音形の衰退が著しいことや、いわゆる「四つ仮名」のうち、ジ・ヂが合流していること、「アウ」連母音が「ワウ」と変化していることなどを指摘した。3.資料収集・データ入力原本調査および原本複写、公刊された複製本やインターネット上に公開されている電子画像により、資料を収集した。多くの資料が字音資料として利用可能な状況にある。今年度は上述の資料の整備によって、訓点資料に加え、抄物および字書・辞書類の字音資料を大幅に拡大することができた。当初計画していた通り、同一人物加点の仮名点資料とヲコト点資料の比較をし、それに関する口頭発表を行うことができた。これは、同一文体内における比較で、ミクロな視点での比較であった。また、同一文体における、世代の違う一個人の加点本との比較をも行うことで、宣賢がどのような言語状況の中に生きていたのか、把握することができた。本研究においてはデータの量が極めて重要である。そのため、本年度は多くデータを収集することに務めた。本年度は、漢文訓読資料のみならず、抄物や字書、従来あまり活用されてこなかった神道資料などのデータも追加することができたので、次年度に向けての基盤ができたと考えている。以上の点で、本研究は予定通り進展したと考える。その一方、データの拡張に集中したために、多くの論考を行うことはできなかった。たとえば、データの不足に起因し、異なる文体間(たとえば、訓点資料と抄物など)での比較をなしえていない。データ不足はデータの追加によって改善されたと考えられるものの、今年度の段階では、当初の予定を超える進展は見ていない。以上より、本研究は予定通りの進展をしたものの、予定以上の進展をすることができなった。よって本研究はおおむね順調に進展している、と言えるであろう。今年度も清原宣賢の自筆本を調査した。また昨年度までの研究において、清原宣賢遺文に見られる漢字音を、同時代の漢字音および前時代の漢字音と対照させる必要性を感じた。そのため今年度は、南北朝時代から室町時代中期ごろまでの資料と、同時代の宣賢以外の人物が作成した資料をも範囲として、原本・複製の参照による調査を行った。また総括のため、漢字音の体系的記述と、位相論的記述を行った。体系的記述では、漢籍訓読資料と抄物の二種類の資料を選択し、漢字音の体系的記述を行った。資料として、漢籍訓読資料から1『春秋経伝集解』、2『毛詩鄭箋』、3『論語』、4『中庸章句』、5『孝経秘抄』訓点資料部分、6『胡曾詠史詩注』訓点資料部分を選択した。また抄物として、1『左伝聴塵』、2『孝経秘抄』抄物部分、3『胡曾詠史詩注』抄物部分、4『職原抄秘注』を選択した。本研究では、これらの資料の字音注を抜き出し、中国語中古音の体系と対照させるための表である「分紐分韻表」を作成した。分紐分韻表に基づき、声母(頭子音)、韻母(韻)、声調のそれぞれの項目について、中国語中古音の体系と対照させながら、記述を行った。位相論的研究では、一個人の漢籍訓読資料における字音点の多様性の記述、一個人の資料における各種字音系統の使用状況の記述、漢音形衰退に関する位相差の指摘、「数」という字の漢音形についての音形変化と位相差の指摘、一個人の-t入声の発音に関する位相差を指摘した。このように、位相論的研究は個別的な観点に基づいて、清原宣賢遺文における位相差を調査した点に特徴がある。位相論的研究においては対象資料として、体系的記述で扱った資料のみに留まらず、調査し得た清原宣賢遺文全体を資料として扱った。
複数の多層人工神経回路網を用いた群深層学習

本研究は,複数の学習器が相互作用を通じて未知データに対する振る舞いを補完する仕組みを構築し,必要とされる訓練データ数を抑えつつ精度の高い学習を目指すものである.本年度は前年度に引き続き,単一の学習器(ニューラルネットワーク)からドロップアウトを用いて複数のバリエーションを生み出す手法を,2群判別問題に対して適用する研究を進めた.また,対象問題を2群判別から3群以上の多群判別問題に拡大し,学習の変化を観測した.結果として,ドロップアウトを用いてバリエーションを生み出す方法では,特に学習の序盤において訓練データに基づく適切な出力を得ることが難しく,不適切な方向へ学習を進めてしまう要因となることが明らかとなった.こうした結果から,単一のニューラルネットワークからドロップアウトによりバリエーションを生み出し,それを学習に使用する方法は現実的ではないと結論づけ,本年度後半より完全に独立した複数の学習器を使用する方法へと舵を切った.また学習則自体の研究とは独立に,特に複数エージェントによる合意形成の方法について,一部のエージェントが合意形成を阻害する振る舞いを見せる状況において適切に合意形成がなされる条件を分析し,成果を国内会議において発表した.課題申請時には主に教師あり学習を対象としていたが,同様の考え方により相互作用に基づく強化学習手法についても考慮を始めた.その足がかりとなる研究について成果をまとめ,国内会議において発表を行った.本年度は前年度の研究を引き継ぎ,特に単一のニューラルネットワークからバリエーションのある複数のニューラルネットワークを生成し,自己学習に応用する方法について,その困難さを明らかにした.これは当初より想定されていたものであり,年度後半および次年度以降の研究へ繋がる結論を得るものであった.当初の計画にあった提案手法の時間的・計算資源的スケール性の解明には至らなかったものの,合意形成手法の安定性解析は開始することができた.本研究とは直接関わらないタスクが多く,やや時間的余裕がなかったようにも思えるが,計画では次年度以降を予定していた3群以上の多群判別問題に取りかかることができた点も考慮し,概ね計画通り進展していると判断する.当初の計画通り,独立した複数のニューラルネットワークを用意し,それらの合意形成で学習を進める方法について研究を進める.また,異なる構造を持ったニューラルネットワーク同士で学習を進める場合について実験的解析および考察を行う.また,合意形成を阻害するエージェントが存在する場合を考慮した合意形成問題そのものについてもより研究を進める予定である.本研究は,複数のモデルが合意形成などの相互作用を通じて未知データに対する振る舞いを補完することで,より少ない訓練データから精度の高い学習を行うことを目指すものである.今年度は当初の計画通り,基本理論の構築および実験環境の整備を行った.また,簡易的な実験を通して,提案方法の特性および課題について検討した.本年度は複数モデルの相互作用と学習機構について基礎的な性質を明らかにするため,複数のモデルを用いる方法として,大量の計算資源・計算時間を必要としない,1つのモデルから互いに差異を持つコピーを作り出す方法に着目した.このとき,コピーされた個々のモデルに差異を持たせる方策として,ニューラルネットワークの学習において過学習の抑制を目的として利用される手法であるドロップアウトを使用した.ドロップアウトにより生成されるモデルのバリエーションについて,ドロップアウト率との関係性も含め,現在も解析を進めている.生成された個々のモデルが未知データに対し出力する判別結果について全体で合意を形成し,妥当な出力を推定,学習へフィードバックするアルゴリズムを構築し,計算機上でシミュレートする環境を整えた.また,合意形成の方法が学習の進度に与える影響について簡易実験を通して検証を行った結果,各モデルの出力に対する確信度のような指標を導入し,これを合意形成に利用する必要性が示された.提案方法の基本的なコンセプトおよび方法論について実現可能性および課題と解決方針をまとめ,国内ワークショップ1件ならびに国際会議1件の発表を行った.また,簡易実験の結果と考察をまとめ,平成30年度開催の国内学会において発表を予定している.「おおむね順調に進展している」本年度は,課題開始年度として主に学習アルゴリズムおよび実験環境の構築を当初の計画としていた.研究実績の概要より,実験環境の構築ならびに学習アルゴリズムの構築ともに着手済みであり,また実験を通じたアルゴリズムの検証・解析にも着手している.以上より,本年度の評定として,計画通り進展していると判断した.本研究は,複数の学習器が相互作用を通じて未知データに対する振る舞いを補完する仕組みを構築し,必要とされる訓練データ数を抑えつつ精度の高い学習を目指すものである.本年度は前年度に引き続き,単一の学習器(ニューラルネットワーク)からドロップアウトを用いて複数のバリエーションを生み出す手法を,2群判別問題に対して適用する研究を進めた.また,対象問題を2群判別から3群以上の多群判別問題に拡大し,学習の変化を観測した.結果として,ドロップアウトを用いてバリエーションを生み出す方法では,特に学習の序盤において訓練データに基づく適切な出力を得ることが難しく,不適切な方向へ学習を進めてしまう要因となることが明らかとなった.こうした結果から,単一のニューラルネットワークからドロップアウトによりバリエーションを生み出し,それを学習に使用する方法は現実的ではないと結論づけ,本年度後半より完全に独立した複数の学習器を使用する方法へと舵を切った.また学習則自体の研究とは独立に,特に複数エージェントによる合意形成の方法について,一部のエージェントが合意形成を阻害する振る舞いを見せる状況において適切に合意形成がなされる条件を分析し,成果を国内会議において発表した.課題申請時には主に教師あり学習を対象としていたが,同様の考え方により相互作用に基づく強化学習手法についても考慮を始めた.その足がかりとなる研究について成果をまとめ,国内会議において発表を行った.本年度は前年度の研究を引き継ぎ,特に単一のニューラルネットワークからバリエーションのある複数のニューラルネットワークを生成し,自己学習に応用する方法について,その困難さを明らかにした.

これは当初より想定されていたものであり,年度後半および次年度以降の研究へ繋がる結論を得るものであった.当初の計画にあった提案手法の時間的・計算資源的スケール性の解明には至らなかったものの,合意形成手法の安定性解析は開始することができた.本研究とは直接関わらないタスクが多く,やや時間的余裕がなかったようにも思えるが,計画では次年度以降を予定していた3群以上の多群判別問題に取りかかることができた点も考慮し,概ね計画通り進展していると判断する.本年度扱ったモデルのコピーを生成する方法は,複数モデルの独立した更新を行う必要がなく計算時間を削減できる点で効率的な研究の進展に寄与している.一方で,ドロップアウトによりモデルのバリエーションを確保する点は提案方法において非常に重要な要素であるため,本年度に引き続き検証・解析を進めていく.また,アルゴリズム構築における簡易実験において必要性が示されたモデルの出力の確信度にあたる指標を早期に定義し,これを合意形成に利用する方法および妥当な指標が満たすべき要件について検証を進める.当初の計画通り,独立した複数のニューラルネットワークを用意し,それらの合意形成で学習を進める方法について研究を進める.また,異なる構造を持ったニューラルネットワーク同士で学習を進める場合について実験的解析および考察を行う.また,合意形成を阻害するエージェントが存在する場合を考慮した合意形成問題そのものについてもより研究を進める予定である.実験用機材(物品費)の購入費を当初予定額より抑えることができたため生じた未使用額.研究をより活発に進めることを目的とし,積極的に成果発表および資料収集,外部の専門家との打ち合わせを行うための旅費として使用する.前年度繰り越し額の余剰分.次年度の旅費の一部として使用予定.
中南米に分布するタイレリア原虫の分子系統進化

タイレリア原虫は全世界に分布している。日本のタイレリア原虫(Theileria sergenti)と類似の原虫は環太平洋,アジア,ヨーロッパに分布しているが、これらの原虫種の分類学的関連は不明である。本原虫は宿主体内で巧みに免疫を回避することや、感染がダニを介することなどによりいまだ制圧されていない。わが国においても本原虫による小型ピロプラズマ感染症は経済的被害が大きく本病の防除が強く望まれている。タイレリア属に分類される原虫は10種類以上知られているがT.parvaやT.annulataならびに日本を始め東に分布するT.sergentiはモノクローナル抗体を用いた抗原性状や原虫遺伝子の解析が進んでいる。しかし南アジア、豪州、ヨーロッパに分布するT.buffeliやT.orientalisの解析は遅れている。加えて北米、中南米に分布するタイレリア原虫(Theileria sp.)についてはほとんど解析されていない。本研究は中南米の国々でタイレリア原虫ならびに媒介ダニを採集し、日本の原虫、媒介ダニと比較することにある。昨年度ブラジルから得た200検体あまりのウシの血液を解析したが全くタイレリア原虫は得られなかったことより、南米ではほとんどタイレリア原虫(とくに病原性タイレリア原虫)が分布していないものと考えられる。そこで今年度はダニに注目して解析した。それは世界に分布するタイレリア原虫の媒介ダニの唾液成分の遺伝子を比較することにより共進化していきたタイレリア原虫の相違を知ることができるのではないかと考えられるからである。そこでまず、ブラジルのBoophilus microplusやAmblyoma americanumでとられている唾液腺由来のカルレチクリンに注目した。カルレチクリンはカルシウム結合蛋白で、ダニの吸血の際宿主の補体活性化や血液凝固を阻害し吸血持続していると考えられている。そこでカルレチクリン遺伝子をアフリカのダニ、Rhipicehalus appeendiculatusのダニ唾液腺cDNAライブラリーよりRACE法で得た。その結果、この遺伝子は1224塩基で408個のアミノ酸をコードしていた。他のダニ(Boophilus, Amblyoma)の遺伝子と比較したところ、アミノ酸配列で87%94%の相同性を示した。次に血液凝固阻害に重要な役割をもつダニ唾液腺由来のセルピン(セリンプロテアーゼインヒビター)に注目し、アフリカのダニ、R.appendiculatusとHaemphisalis longicornisより同じくRACE法により遺伝子を得た。R.appendiculatusから4つ、H.longicornisから3つの遺伝子を得た。これらは大腸菌で発現させ、生物活性を調べている。

本原虫は宿主体内で巧みに免疫を回避することや、感染がダニを介することなどによりいまだ制圧されていない。わが国においても本原虫による小型ピロプラズマ感染症は経済的被害が大きく本病の防除が強く望まれている。タイレリア属に分類される原虫は10種類以上知られているがT.parvaやT.annulataならびに日本を始め東アジアに分布するT.sergentiはモノクローナル抗体を用いた抗原性状や原虫遺伝子の解析が進んでいる。しかし南アジア、豪州、ヨーロッパに分布するT.buffeliやT.orientalisの解析は遅れている。加えて北米、中南米に分布するタイレリア原虫(Theileria sp.)についてはほとんど解析されていない。本研究の目的は中南米の国々でタイレリア原虫を採集し、日本の原虫との比較を通して分類学的位置付けを明らかにすることにある。今年度はブラジルを訪問し、200検体あまりの牛の血液を得た。この赤血球材料からDNA抽出キットを用いてDNAを抽出し日本に持ち帰った。これらDNAは日本のタイレリア原虫を増幅させるプライマーを用いたPCR法では増幅してこなかった。そこでタイレリア原虫以外の赤血球寄生原虫を検出するために、現在18SリボゾームRNA遺伝子のV4領域を増幅させる方法で原虫株の検出を行っている。同時にブラジルのリオグランテ大学のDr.Masudaと共同でブラジルに分布しているオウシマダニ(牛の原虫を媒介)のダニ由来成分の性状解析を行い、日本のタイレリア原虫を媒介するフタトゲチマダニのものと比較した。現在、ダニ唾液腺由来のcDNAライブラリーをつくり遺伝子解析を行っている。タイレリア原虫は全世界に分布している。日本のタイレリア原虫(Theileria sergenti)と類似の原虫は環太平洋,アジア,ヨーロッパに分布しているが、これらの原虫種の分類学的関連は不明である。昨年度ブラジルから得た200検体あまりのウシの血液を解析したが全くタイレリア原虫は得られなかったことより、今年度はダニに注目して解析した。それは世界に分布するタイレリア原虫の媒介ダニの唾液成分の遺伝子を比較することにより共進化していきたタイレリア原虫の相違を知ることができるのではないかと考えられるからである。