hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
細胞を殺さずに細胞内分子を抜き取る

細胞内の特定分子を認識し,抽出可能とする前処理プロセス法の構築を目指した.その結果,脂質膜を抽出場とする簡便な抽出法,重合性脂質により作製されたリポソームによる,キラル認識能の創発に成功した.さらに,脂質膜場を電気泳動場とし,抽出した膜タンパク質の電気泳動分離を達成した.そして,細胞膜中の生体分子の高感度検出をin situで合成された銀ナノ粒子を活用した表面増強ラマン検出により達成した.以上のように,特定の分子認識ならびに抽出を可能とし,さらに分離・高感度検出を可能とするプロセスの構築に成功した.細胞内の特定分子を認識し,開閉自在なナノ空孔を自己組織的に細胞膜に構築することで“細胞を殺さずに細胞内の特定分子を任意の時間で抽出可能とする"前処理プロセス法の構築を目指す.これにより,単一細胞解析の前処理プロセスを簡便化するとともに,現状では実施不可能な同一細胞に対する継時的な細胞内発現分子解析を可能とする唯一の前処理プロセス法を確立する.この目標のもと、本年度は、抽出から分離分析のプロセス研究を重点的に実施した。そこで、細胞内発現分子の中の膜タンパク質に焦点をあてた。膜タンパク質はシグナル伝達、認識などの生命活動に関連した機能を果たしていることが知られているが、その分離分析は非常に困難であり、近年では、分離分析法の発展が乏しいために膜タンパク質の研究は停滞している。そこで、膜たんぱく質の抽出・分離分析を可能とする手法の確立を目指して研究を実施した。分離場としての多層脂質ナノ薄膜の構築法の開発、膜タンパク質の吸着抑制法の検討、多層脂質ナノ薄膜内での膜たんぱく質の拡散挙動の解明および脂質ナノ薄膜場が高度分離を可能とする特性の実証、多層脂質ナノ薄膜内での電気的輸送法の確立に成功した。そして、これらの知見を基に膜タンパク質の分離に成功した。脂質ナノ薄膜を分離場とする分離法は、脂質ナノ薄膜が創発する機能(サイズ効果、流動性、相転移など)を活用可能であり、従来にない新規かつ高度な分離が期待できる可能性を秘めている。そして、細胞を殺さずに細胞内分子を抽出・分離分析可能とするものである。当初計画していた内容に関する基礎的な検討を終え、査読ありの学術論文として成果をまとめ、採択されるに至っている。このため当初の計画以上に進展していると判断している。細胞内の特定分子を認識し,“細胞内の特定分子を任意の時間で抽出可能とする"前処理プロセス法の構築を目指す.これにより,単一細胞解析の前処理プロセスを簡便化するとともに,現状では実施不可能な同一細胞に対する継時的な細胞内発現分子解析を可能とする唯一の前処理プロセス法を確立する.本年度は,光学異性体の認識ならびに抽出(吸着)に関して研究を行った.光学異性体は物理的な特性は同じであるが,生体内での役割・効果は異なるため、光学異性体を認識し,抽出するプロセスの研究は細胞解析において重要である.このような研究背景のもと,細胞膜に類似の脂質ナノ薄膜によるアミノ酸などのキラル分離法の研究を実施した.ところで、細胞はラフトと呼ばれるナノドメインを形成し,このラフトは高度な認識場であると報告されている.そこで,この高度な光学異性体認識能を模倣するため、ナノドメインを形成するリポソームを作製し,光学認識能の評価を実施した.その結果,ナノドメインを形成する脂質ナノ薄膜では,ドメイン構成脂質の割合によりキラル認識能の創発が可能であり、またキラル認識能の制御が可能であった。また、キラル認識においてはドメイン境界界面ならびに秩序性の高いドメインが重要であることを見出した。これらの知見より、細胞は膜タンパク質・脂質分子集合体・ナノドメインのどれかもしくはこれらの協調によりキラル認識していると予測される。ところで、脂質ナノ薄膜は優れた機能を有しているが、その反面、脆弱であるという欠点を有している。そこで、重合性脂質に着目し、このリポソームの欠点を補完し、キラル認識能の創発・制御を容易に可能な手法の確立に成功した。さらに、吸着した成分を回収する技術として、脂質薄膜を固定化した浮上性粒子を作製し、脂質薄膜と相互作用する物質の簡便な抽出・回収法の確立を達成した。当初計画以上の成果を得ることが可能であった。特に、細胞膜のキラル認識能の解明につながる成果そして、応用を見据えたキラル分離法の確立に至ったのは計画以上である。その結果3報の国際英文紙に掲載が決まるとともに、解説文1報、依頼講演2件を行うにいたった。細胞内の特定分子を認識し,“細胞内の特定分子を任意の時間で抽出可能とする"前処理プロセス法の構築を目指す.これにより,単一細胞解析の前処理プロセスを簡便化するとともに,現状では実施不可能な同一細胞に対する継時的な細胞内発現分子解析を可能とする唯一の前処理プロセス法を確立する.本年度は,昨年度までに,吸着後,吸着体と目的物質を同時に回収する技術として,脂質薄膜を固定化した浮上性粒子を作製し,脂質薄膜と相互作用する物質の簡便な抽出・回収法の確立を達成している.また,疑似細胞膜を作製し,細胞内の光学異性体のキラル吸着を可能とする手法を確立してきた.今年度は,さらに上記の目的を達成するため,細胞内では酵素活性への関与など生体活動に必須の金属を選択的かつ高収率で回収可能な手法の検討を実施した.また,膜タンパク質や脂質クラスターの抽出時における蛍光標識・解析方法に関して併せて検討した.

その手法として,金属受容体を結合させた疑似細胞膜を作製し,脂質分子あたりの金属イオンの吸着率ならびに金属イオンの吸着速度を解析した.その結果,吸着は数分以内で完了し,液液抽出系と比較して,高い金属イオンの吸着率ならびに選択性を得ることに成功した.これは疑似細胞膜の流動性・極性が関与し,金属受容体と金属イオンとの高効率な相互作用を可能としていることを明らかとした.さらに,細胞膜上の膜タンパク質や脂質クラスターの標識方法として,疎水化量子ドットを作製し,細胞膜内への選択的配向について検討した.その結果,膜の流動性や曲率の差異により疎水化量子ドットの存在位置を制御可能であること,つまり,選択的局在化に成功した.これより,細胞膜中の生体分子を選択的に量子ドットで標識することが期待できる.以上より,蛍光標識,抽出,回収法を達成したことから,当初の目的の実現が期待できる.細胞内の特定分子を認識し,抽出可能とする前処理プロセス法の構築を目指した.その結果,脂質膜を抽出場とする簡便な抽出法,重合性脂質により作製されたリポソームによる,キラル認識能の創発に成功した.さらに,脂質膜場を電気泳動場とし,抽出した膜タンパク質の電気泳動分離を達成した.そして,細胞膜中の生体分子の高感度検出をin situで合成された銀ナノ粒子を活用した表面増強ラマン検出により達成した.以上のように,特定の分子認識ならびに抽出を可能とし,さらに分離・高感度検出を可能とするプロセスの構築に成功した.今後は実施計画に基づき、研究を遂行するとともに、本研究を加速させ、当初計画にはなかった特許などの実用化を視野にいれた検討を実施する。抽出原理としては昨年度までに確立したために、さらに抽出性能の向上を検討する。また、現状では、細胞からの抽出を行っていないために、実際に細胞からの抽出を試みる。そして、得られた結果により、確立した抽出法の細胞への適用の可能性を評価するとともに、細胞へ適用した際の問題点を明確化する。そして、この問題点の解決を試み、当初の目的を達成する。分析化学
初期歌舞伎と沖縄の組踊 -大名屋敷における歌舞伎上演を回路として-

沖縄の組踊は、従来ヤマト(本土)の能楽の影響を受けて成立した芸能と考えられてきた。しかし初期歌舞伎研究者の立場から見ると、これは若衆歌舞伎・野郎歌舞伎時代の歌舞伎の影響を色濃く受けて成立しているように思われる。もしこの考えが正しいとすれば、組踊は初期の歌舞伎の生きた資料ということになり、また組踊から初期歌舞伎の要素を削除すると沖縄の芸能のオリジナルな姿が浮かんでくることになる。本研究は、こういった視点にたち、組踊と初期歌舞伎の関係を探ったものである。組踊は、玉城朝薫がヤマトの能楽を手本にして、享保三年(1718)に創始したものと言われている。若衆歌舞伎・野郎歌舞伎の時代を下限とする初期歌舞伎の時代は天和期(168183)までであり、享保三年(1718)に創始された芸能が、天和末年(1683)までの芸能の影響を受けることはあり得ないというのが従来の見解であった。本研究は、この時代的径庭を越えることに主眼がおかれている。既に研究代表者は「若衆歌舞伎・野郎歌舞伎と沖縄の組踊」(『歌舞伎研究と批評』20号、平成9年12月)において、組踊の成立時期に疑問を呈することと、玉城朝薫がヤマトで見た歌舞伎は芝居小屋で上演されたものではなく旧態を止めていた座敷芝居(大名屋敷に呼ばれて上演された歌舞伎)であることを指摘し、この時代的径庭を乗り越える試案を発表していた。本研究では、座敷芝居の実態解明に勤め、また組踊の各演目の実演を調査して、この考えを確定した。これらの成果は、平成12年2月に刊行した拙著『若衆歌舞伎・野郎歌舞伎の研究』(八木書店)所収の論文「若衆歌舞伎・野郎歌舞伎と沖縄の組踊」「座敷芝居の研究」にいったん発表した。また、本研究では、さらに詳細な検討を継続し、新しい資料を加えて私説を補完した。沖縄の組踊と初期歌舞伎の間に密接な関係があることを実証するのが、本研究の目的である。ここで「初期歌舞伎」というのは、寛文・延宝期(16611680)のいわゆる野郎歌舞伎の時代を中心に置いている。享保期(17161735)に玉城朝薫によって創始されたという組踊とは、半世紀近くの時間的径庭が存在している。この時間的径庭は、大名屋敷での歌舞伎上演という視点を中におくことによって解決していこうとしている。従って、本研究の資料としては、主として、沖縄県の諸機関に所蔵される『家譜』という近世の記録、大名家の歌舞伎上演をしばしば記録している弘前市立図書館に所蔵される『弘前藩庁日記』を用いる。また、現在上演されている組踊も、有益な資料を提供してくれるものと思われる。当該年度は『弘前藩庁日記』の宝永期(17041710)の「江戸日記」96冊の調査を行い、数件の歌舞伎・浄瑠璃関係記事を発見することができた。この時期から日記の記述量が増加しているため、次の正徳期の調査は次年度に繰り越さざるを得なかった。ただ、記述量が増加しているだけに、歌舞伎・浄瑠璃の上演記事も詳細で、荻野澤之丞という役者の引退時の動向など、組踊との直接的な関係は薄いが、若干の歌舞伎史上の新事実も発見することができた。また、沖縄県立芸術大学の楽劇科の実習として行われる組踊の舞台上演に立ち会い、演技・演出・衣裳・小道具の調査を実施した。

とくに、登場する大名の腰掛ける小道具は、初期歌舞伎の舞台に登場する事が絵画資料でわかっている「かづら桶」と共通することが知られ、注目されるものであった。1.2回にわたり弘前市立図書を訪館し『弘前藩庁日記』江戸日記享保期前半の調査を行った。ただし、当初予定していた享保前期(1716年1720年)130冊は、難読部分が多く、80冊の調査にとどまった。この80冊分については歌舞伎・浄瑠璃関係記事を抽出し、補助者(アルバイト)による下翻刻を終えた。2.3回にわたり沖縄県立芸術大学に出張し、組踊の実演に立ち会い衣装・道具類の調査を実施した。また、現地の写真家大城弘明氏と連絡をとり、組踊の舞台写真収蔵状況を調査した。3.上記の結果を統合して両者の関係を明らかにするため、以下の点について既発表の論文(『歌舞伎-研究と批評-』20号所収「若衆歌舞伎・野郎歌舞伎と沖縄の組踊」)に補筆を加え、論文集『若衆歌舞伎・野郎歌舞伎の研究』(平成12年3月、八木書店)に収録して刊行した。(1)古典文庫『未刊謡曲集』には「金玉羽衣」「初瀬物狂」を所収しており、組踊「銘苅子」女物狂」との影響関係を考えねばならないが、これは歌舞伎との関係より色濃いものとは考えられない。(2)『那覇市史』を調査することによって、宝永7年の玉城朝薫らの琉球使節が、江戸の薩摩屋敷で歌舞伎・浄瑠璃の観劇を行っていることが、明確になった。(3)姫路市立図書館蔵『重朗日記抜粋』を調査することによって、酒井雅楽頭が江戸屋敷に「琉球の楽人」呼んで芸能を演奏させていることが明らかになった。当該年度の研究実績は、以下に個条書きするが、その最大のものは、亨保期の弘前藩江戸屋敷に、辰松八郎兵衛が来演している記録の発見であった。辰松八郎兵衛は近松門左衛門の作品に出演する当期の代表的な人形遣いである。この辰松八郎兵衛は、従来劇場への出演のみが知られていた。今回発見した弘前藩江戸屋敷への来演の記録は、従来の辰松八郎兵衛像に大きな変更を迫るものとなるだろう。1.2回にわたり弘前市立図書館を訪館し『弘前藩庁日記』江戸日記享保中期の調査を行った。当該期より日記の分量が倍増することが判明し、当初予定していた112冊の調査は、その三分の一の40冊にとどまった。この40冊分については歌舞伎・浄瑠璃関係記事を抽出し、補助者(アルバイト)による下翻刻を終えた。2.沖縄県に出張しての組踊の大道具類の調査は、今年度は実施できなかったが江戸時代の資料(『琉球人行列記』)を購入し、文献調査を実施した。3.上記の1・2が当初計画を下まわったのは、他の機関に所蔵されている資料に本研究に関連するものがあることが判明し、その調査に時日を要したためである。調査した機関は、高知県立図書館・京都府立総合資料館・大阪府立中之島図書館・新潟県佐渡郡「鳥越文庫」などである。4.関連の研究発表として、平成12年5月20日「にわか懇話会」で「初代団十郎の俄」を口頭発表した。5.「江戸の演劇空間-もう一つの劇場-」という一般向けの文章を執筆し、『武蔵野美術』117号(平成12年8月1日)に掲載した。沖縄の組踊は、従来ヤマト(本土)の能楽の影響を受けて成立した芸能と考えられてきた。しかし初期歌舞伎研究者の立場から見ると、これは若衆歌舞伎・野郎歌舞伎時代の歌舞伎の影響を色濃く受けて成立しているように思われる。もしこの考えが正しいとすれば、組踊は初期の歌舞伎の生きた資料ということになり、また組踊から初期歌舞伎の要素を削除すると沖縄の芸能のオリジナルな姿が浮かんでくることになる。本研究はこういった視点にたち、組踊と初期歌舞伎の関係を探ったものである。
ラクトフェリシンの抗菌作用と抗炎症性作用

MRSAやVREなど抗生物質や消毒薬に対する耐性菌が出現し,また近年、カンジダの耐性菌も報告され,医科的に重篤な菌血症や播種性カンジダ症の増加が報告されている.このような各種薬剤に対する耐性菌の出現に伴い,従来の抗生剤あるいは抗真菌剤に代わる抗菌物質の必要性が,最近非常に高まっており,抗菌性だけでなく,これまでの抗真菌剤の大きな問題点であった副作用あるいは細胞毒性というものがなるべく小さい抗菌物質が望まれるようになっている.生物の外界の微生物に対する防御機構の一つに抗菌性ペプチドがあるが、これは生物が本来,自ら産生しているものであるため,生体に対しての副作用や為害作用は極めて小さく,抗生物質に代わり得るものとして大きな期待を集めている.本研究では抗菌性が広いと報告されているラクトフェリシンBの1731番目のアミノ酸配列とヒスタチンバリアント(Dhvar4)の配列に類似性を見つけ、3種のペプチドJH8194,JH8195,JH8944を合成し、その抗菌性をラクトフェリシンB、ラクトフェリシンH、ヒスタチンと比較検討し、さらに抗菌性とペプチドの物理化学的性質の関連性について検討を行った。その結果、抗菌性とヘリシティの間には関連性はなく、ペプチドのpI値と抗菌性の間に高い関連性が認められた。本研究では,抗菌性ペプチドの一つであるヒスタチン5のカンジダに対する抗菌性を検討し,カンジダ属6菌種33菌株に対するヒスタチン5の殺カンジダ作用は,C. tropicalis, C. albicans, C. guilliermondiiに対して非常に高い殺菌作用が認められた.また,C. para-psilosisやC. kruseiに対しては菌株による感受性の違いはみられるものの比較的高い効果が認められた.しかしC. albicansのうちHIV陽性患者の口腔内分離株に対しては,HIV陰性患者からの口腔分離株に比べて有意に低い感受性を示した.C. glabrataに対しては菌株による感受性の差が44.487.5%と大きいものの,基本的に低感受性であった.次に,抗菌ペプチドは,(1)水溶液中ではランダムコイルであり,疎水溶媒中でαヘリックスあるいはβシート構造をとる,(2)両親媒性,(3)塩基性という共通した性質を持っている.現在,アミノ酸の1次配列から高次構造を予測することは不可能であるとされており,既存のペプチドの構成アミノ酸の1数個を置換し,ペプチドの抗菌性の向上が計られている.我々は,αヘリックス構造をとるとされるヒスタチン5の誘導体であるDhvar41)と牛ラクトフェリシン(LFB)(17-30)に類似の配列パターンを入れ替えることで得た新規の合成ペプチドについてその構造および殺真菌作用について検討を行ったので報告する.今回作製した新規ペプチドは,蒸留水中ではランダムコイル状であったが,疎水溶媒中ではすべてαヘリックス構造を示した.各ペプチドの殺カンジダ作用はJH8194が最も高く,次いでLFB, LFB short, JH8195が高い殺カンジダ作用を示した.以下, LFH, JH8944, hsn-5と減弱し, Dhvar4が最も小さかった.以上より新規ペプチドおよびラクトフェリシンには非常に高い抗真菌性が期待できると考えられる.MRSAやVREなど抗生物質や消毒薬に対する耐性菌が出現し,また近年、カンジダの耐性菌も報告され,医科的に重篤な菌血症や播種性カンジダ症の増加が報告されている.このような各種薬剤に対する耐性菌の出現に伴い,従来の抗生剤あるいは抗真菌剤に代わる抗菌物質の必要性が,最近非常に高まっており,抗菌性だけでなく,これまでの抗真菌剤の大きな問題点であった副作用あるいは細胞毒性というものがなるべく小さい抗菌物質が望まれるようになっている.

生物の外界の微生物に対する防御機構の一つに抗菌性ペプチドがあるが、これは生物が本来、自ら産生しているものであるため、生体に対しての副作用や為害作用は極めて小さく、抗生物質に変わり得るものとして大きな期待を集めている.本研究では抗菌性が広いと報告されているラクトフェリシンBの1731番目のアミノ酸配列とヒスタチンバリアント(Dhvar4)の配列に類似性を見つけ、3種のペプチドJH8194,JH8195,JH8944を合成し、その抗菌性をラクトフェリシンB、ラクトフェリシンH、ヒスタチンと比較検討し、さらに抗菌性とペプチドの物理化学的性質の関連性について検討を行った。その結果、抗菌性とαヘリシティの間には関連性はなく、ペプチドのpI値と抗菌性の間に高い関連性が認められた。
社会開発の新たな枠組みの模索:社会福祉とソーシャルワーク実践の視点から

平成17年度から3年間にわたり実施されてきた本研究は、社会福祉及びソーシャルワーク実践と社会開発との関わりに焦点を当て、国内の地域福祉やソーシャルワークの新たな枠組み及び福祉専門職の社会開発への役割の解明を目的としている。平成19年6月12日から18日まで、中国北京の中国青年政治学院社会工作学院において日本のソーシャルワーク及び高齢介護に関する講演を行うと伴に、中国における今後のソーシャルワーク実践と社会開発との関わり方について教育者・実践者やアメリカからの福祉研究者も交えて開発とソーシャルワーク実践に関する協議を行った。平成20年1月には共同研究者でもある米国デンバー大学老年研究所長と米国NGOのソーシャルワーカーで現在グアテマラにおける農村貧困削減や女性の自立支援を行っている実践者へ本研究課題に関する聞き取り調査を行った。これまでの調査から、福祉援助技術の中でも特にコミュニティワークの重要性が明確になり、社会開発との共通点・相違点が明らかになってきた。エンパワーメント志向型のソーシャルワークは、先進国や開発途上国を問わず、地域における多様な問題を抱えるコミュニティを対象とした実践モデルとして大きな意義が確認された。また、コミュニティワークと高齢者介護・介護保険の課題について、11月に韓国ソウル市Sungkyunkwan Universityで口頭発表を行った。平成20年1月には福岡アジア都市研究所主催で「高齢者の住みやすい地域コミュニティを考える」セミナーにおいて、コミュニティワークの重要性及び地域での取り組みに関して検討した。研究成果として、前年度からの研究成果の一部を『世界の社会福祉年鑑2007』において、「アメリカのソーシャルワーク」及び「ICSDアジア太平洋支部会議」と題する論文にまとめた。更に、3月には「高齢者ケアを基盤としたコミュニティ形成:エンパワーメント・モデルとソーシャルワーク実践の課題」が『都市政策研究』に掲載された。1994年の国連社会開発サミット以降、発展途上国への経済成長中心の開発戦略の再検討がなされ、「人間を中心に置く」開発概念・手法である社会開発は、経済開発と並ぶ重要な開発課題であると認識されている。具体的には貧困対策、住民参加、女性支援、NGOとODAの連携などがあげられる。今後これらの分野において「住民参加」や「エンパワーメント」の諸概念に関する実践方法の分析・研究が急務とされている。近年では新たな開発パラダイムのもと援助戦略が次々に打ち出されており、その状況を踏まえて、社会開発と社会福祉・ソーシャルワークとの共有点を再検討し、フレームワークを構築する試みは社会開発の課題解決へ向けて貢献する点から大きな意義がある。本研究の目的は、1)社会開発と社会福祉の概念・理念の理論的発展、特徴及び相違点を明らかにする、2)社会福祉・ソーシャルワークが社会開発プログラム実践に果たす役割(理論及び援助技術方法)に関して考察する、3)社会開発分野への人材育成の課題を提示することである。2005年度(初年度)は、本研究領域に関する先行研究及び基礎研究文献(開発及び社会開発、開発分野における社会福祉・社会サービスの役割)の資料収集し、その検討・考察を行っている。2005年7月には、ブラジルで開催された国際社会開発コンソーシアム国際会議に参加し、日本における高齢者ケアの課題とエンパワーメント実践に関する発表及びセッションの座長を務めた。会議期間中に発表者・参加者と研究課題に関する意見交換も行った。また、2006年1月にバングラデシュのダッカ大学社会保障・社会福祉研究所所長の協力を得て、途上国におけるソーシャルワークの機能・役割について関連研究者及びBRAC(バングラデシュ農村向上委員会)実務者への聞き取り調査、及びフィールド調査を実施した。同年3月には、社会福祉分野のエンパワーメント理論・実践研究の第一人者であるDr.Enid O.Cox(デンバー大学社会福祉大学院教授・老年学研究所所長)を招へいする機会を得ることが出来たため、ソーシャルワーク(特にコミュニティワーク援助技術)の専門的知識・技術及びエンパワーメント実践と社会開発への役割などについて検討・協議を行った。2006年度(中間年)1月1日10日まで、バングラデシュ人民共和国に滞在し、現地ではダッカ大学社会福祉・研究所、開発NG0のBRAC及びGrameen Bankなどを訪問した。また、少額融資を実施しているNGOであるALWO(Natore、ダッカから約4時間)で聞き取り調査を行った。ダッカ大学では社会福祉・研究所の大学院生へ「日本における社会開発への取り組み」に関して講演を行うと同時に、バングラデシュにおけるソーシャルワークの役割、領域、現状と課題、開発との関連に関して関係者および学生と議論した。また、バングラデシュのヒ素問題に取り組んでいる、「アジアヒ素ネットワーク」のダッカ事務所にて、ジョソール県でのJICAとのプロジェクトに関して代表者から説明を受けた。今後、この問題に関する啓蒙活動、地域内の組織化、リーダーの養成、外部資源との連携など、コミュニティ・ソーシャルワークの援助技術の必要性も明らかになった。8月5日から15日まで、スリランカに滞在し現地での聞き取り調査及び視察を実施した。訪問先は、現地開発コンサルタント(ETA Lanka),現地NGO(サルポダヤ,南アジア女性のパートナーシップ,Women's Bank)、大学(コロンボ大学社会福祉学部・大学院)、政府機関(Ministry of Social Services and Social Walfare)、国連ハビタットなどであった。現地で「社会福祉サービス向上プログラム」の一環として障害者を対象とする「Community-Based Rehabilitation」の活動内容に関し、長年現地の福祉分野に関わっている青年海外協力隊シニア隊員から現状報告も受ける。

サルボダヤでは、創立者であるアリヤラトネ氏と紛争・平和センターに関わっているサルボダヤ担当者(Dr.Marasinghe)からも近年の活動について、さらにサルボダヤ敷地内における聴覚障害者のための学校(Sarvodaya Sawan Sahana Sewa)の校長先生からもサルボダヤの聾児童への教育、就学訓練などの取り組みについて聞き取り調査を行った。現在、スリランカにおいて、児童労働、非行、高齢者の介護、障害者福祉などの分野でソーシャルワーカーのニーズは非常に高く、貧困との問題と強く関連している。社会サービス・福祉省はコロンボ大学社会福祉大学院に博士課程の設置を予定している。貧困を取り巻く様々な社会問題に取り組んでいけるコミュニティソーシャルワークの必要性が指摘された。特に、津波後の地域社会の復興に欠かせない専門職だと言える。10月15日から23日まで、「第一回アジア太平洋支部国際社会開発コンソーシアム」の国際会議に国際組織委員・口頭発表・座長として参加した。アジア太平洋地域と地元タイからの約300名の出席した。この会議のメインテーマは「グローバリゼーション、人間の安全保障、開発」で、主にソーシャルワーク研究者・実務者が参加し、各国の現状や課題に関して議論、意見交換、ネットワーキングした。この会議中に高齢者福祉、児童福祉、障害者福祉、貧困、少数民族・マイノリティ、ジェンダー、人権、HIV/AIDS、環境と貧困、自然災害、人身売買、識字・教育などのサブテーマに関する情報収集した。特に地元タイ発表者の「一村一品運動(OTOP)」や「30バーツ医療政策」を通しての、貧困削減政策とその成果に関する分析、環境と貧困との課題についての発表は大変興味深かった。中間年度の本研究課題への取り組みは、(1)海外調査(バングラデシュ、スリランカ、タイ)及び国際会議参加を通して情報収集、専門家との意見交換・聞き取り調査を実施し、社会福祉と社会開発の概念の把握及び実践レベルでの課題について検討した。平成17年度から3年間にわたり実施されてきた本研究は、社会福祉及びソーシャルワーク実践と社会開発との関わりに焦点を当て、国内の地域福祉やソーシャルワークの新たな枠組み及び福祉専門職の社会開発への役割の解明を目的としている。平成19年6月12日から18日まで、中国北京の中国青年政治学院社会工作学院において日本のソーシャルワーク及び高齢介護に関する講演を行うと伴に、中国における今後のソーシャルワーク実践と社会開発との関わり方について教育者・実践者やアメリカからの福祉研究者も交えて開発とソーシャルワーク実践に関する協議を行った。平成20年1月には共同研究者でもある米国デンバー大学老年研究所長と米国NGOのソーシャルワーカーで現在グアテマラにおける農村貧困削減や女性の自立支援を行っている実践者へ本研究課題に関する聞き取り調査を行った。
エリウゲナの弁証法に関する哲学史的・体系的研究

本研究は、(A)哲学史的研究と(B)体系的研究の二面がある。(A)としては、プラトン、アリストテレス、プロティノス、プロクロス等のギリシャ哲学の影響は間接的ながらもその形跡は明確であること、及び偽ディオニシウスとマクシモスの影響は直接的でありかつ決定的であることが用語法や概念内容について確認された。但し、エリウゲナへのそれらの影響の経路の解明は今後の課題である。(B)としては、そのうちのエリウゲナの弁証法の形成発展についてはその初期から後期の『ペリピュセオン』までの調査はほぼ終えたが、それ以降の著作の調査は完了していない。またエリウゲナの弁証法と形而上学体系との関係については、「自然」(ピュシス、ナトゥ-ラ)という普遍概念の形成と意味を解明することによって明らかにすることが出来た。(1)研究資料の収集と整理。ほぼ満足できる結果を得た。(2)文献読解とデ-タベ-スの作成。上記(B)を参照。なお、エリウゲナの最晩年の著作『ヨハネ福音書序文説教』の読解の成果の一部は公刊された。パソコンによるデ-タベ-スの作成は文献読解より少し遅れて平行して進められた。ハイパ-カ-ドにギリシャ語、ラテン語、現代ヨ-ロッパ諸語、日本語を混在させて一つのファイルを作成するのに幾多の困難があり、時間もかかったが実現できた。(3)学術的意見の交換。国際エリウゲナ学会会員との交流により本研究は伸展を見ることが出来た。当学会への私の報告Recent Work on Eriugend in JapanはBulletinNo.15, p.47(1990年2月)として会員に配付された。パソコンによる国際交流はヨ-ロッパ諸国においてまだ機が熟していないため実現するに至らなかった。(4)研究発表。裏面参照。更に成果を発表する予定である。上記(B)を参照。(4)研究発表。裏面参照。
生細胞解析による転写制御におけるクロマチン修飾の意義の解明

細胞分化に伴うX染色体の不活性化時のクロマチン動態を明らかにするため、H29年度に引き続きX染色体可視化系の開発を進めた。CRISPR/dCas9-GFPによるゲノム可視化系を用いて、4箇所のX染色体領域の可視化に成功した。しかし、標的の繰返し配列が低コピーであるため生細胞観察のためにはゲノム領域の明るさが十分ではなかった。そこで、super-folder GFP(sfGFP)を3回タンデムに繋いだ3xsfGFPを用いることで、長時間のタイムラプス観察が可能な明るさを達成することができた。複数の領域を同時に可視化できる雌ES細胞を樹立し、H3K27me3-mintbody(mCherry)と同時に観察することで、核X染色体アリルの活性化状態を判別することが可能となった。特に、DXZ4領域とXist領域の2箇所を同時に可視化し、2点間距離を計測することで、染色体の凝縮度を評価することが可能となった。ES細胞の培地からLIFを除いて細胞分化を誘導すると、両方のX染色体アリル上にH3K27me3-mintbodyが一過的に濃縮し、また、未分化状態時に比べてDXZ4領域とXist領域の2点間の距離も短くなった。さらに分化が進むと、片方のアリルではH3K27me3-mintbodyの濃縮が見られなくなるとともにもう片方のアリルでの広がりが確認できた。このH3K27me3-mintbodyの挙動は、Xist RNAと同様であり、細胞分化の初期課程ではXist領域の近傍で一過性にヘテロクロマチンが形成されると考えられた。また、H3K27me3と同様に不活性X染色体に濃縮するH4K20me1を認識するmintbodyも同時に解析したところ、H3K27me3とH4K20me1はほぼ同時に蓄積することが示唆された。細胞分化に伴うX染色体不活性化の動態解析は順調に進行し、現在論文を執筆中である。X染色体に関する研究は、より高分解能での解析を進めるほか、再活性化の解析にも着手する。また、熱ショック応答に関する研究を進めていく。本研究では、転写活性化と不活性化におけるヒストン修飾の意義を理解するために、生細胞の翻訳後修飾可視化系にゲノム可視化系を組み合わせ、(1)熱ショックストレス誘導による転写活性化の際のクロマチン動態、(2)X染色体不活性化に伴うヒストン修飾動態、を明らかにすることを目的として行っている。(1)熱ショックストレスに応答した内在性転写単位の活性化メカニズムの解析:mCherryやHaloTagと融合した熱ショック転写因子(HSF1-mCherry, HSF1-Halo)を発現する細胞に、修飾特異的Fabを導入し、培養温度を43度にシフトした際のHSF1とヒストン修飾、RNAポリメラーゼII修飾の動態を観察した。また、HSF1が集積するサテライト領域(Sat3)に局在化するdCas9/CRISPRを構築し、さらに、その領域のヒストン修飾を変化させる系を構築した。ヒストンH3K9の脱メチル化酵素KDM4Dを融合させると、H3K9メチル化レベルが低下し、ヒストンアセチル化酵素であるp300のアセチル化酵素ドメインを融合させると37度においてもH3K27のアセチル化が上昇した。このアセチル化された状態では、37度でも転写が起こることが分かった。転写活性化(熱ショック)、転写抑制(X染色体不活性化)の両方とも、系の樹立に成功しており、研究は順調に進んでいる。

細胞分化に伴うX染色体不活性化の動態解析は順調に進行し、現在論文を執筆中である。生細胞解析、定量解析を進める。X染色体に関する研究は、より高分解能での解析を進めるほか、再活性化の解析にも着手する。また、熱ショック応答に関する研究を進めていく。
生体タグを用いた超個体群動態の把握による水系ネットワーク保全技術の展開

青森県岩木川水系を主な対象として,哺乳類であるカワネズミ,魚類,水生昆虫類を対象に移動分散率を解明するための手法として生体内元素分析を行った.炭素・窒素安定同位体に加えストロンチウム安定同位体,酸素安定同位体などの同位体比と20以上の微量元素濃度分析を行った.水系上流部のダム湖と中心とした水系ネットワークでは,魚類,カワネズミの支流間移動は認められず各個体群分断化の可能性が示唆された.水生昆虫では主にヒゲナガカワトビケラを対象とし検討したが,成虫の飛翔行動は上下流双方向で認められ,従来から論じられた上流方向へのベクトルの卓越は認められず,かつ大ダムが大きな障害となっていることが示された岩木川水系を主なフィールドとし、魚類、昆虫類の採集を行った。採捕した試料は、筋肉などの軟組織は乾燥試料として安定同位体分析、マイクロウエーブ酸分解試料として微量元素分析を行った。いずれの分析でも、地点特異的な数値が検出され、移動分散の指標となりうることが明らかとなった。また、時間的な情報が含まれる耳石など硬組織の分析に関しては、試行的に複数の種類で分析を行い、時系列的な変化を抽出することに成功した。しかしながら、サンプル処理量に関する限界があり、現在スピードアップに向けた分析の簡略化を試行中である。本研究では水系内に存在するダムの影響が大きいことが示唆される結果を得ており、この研究地点に加えてダムの影響が少ない場所でのサンプリングも並行して行う方向で検討を始めている。また次年度以降に向けて、ストロンチウム同位体などの新たな元素分析についても試行的な実験を行った。その結果、文献値よりも微量な試料量で検出が可能であることが示されたため、27年度以降本格的な分析を行うこととした。岩木川水系を主な対象地とし,そこに生息する魚類・水生昆虫類に加え食虫類などの生物とともに水や底質,POMなどを採集した。その後,炭素窒素同位体比や微量元素などの分析を行い,生息地の判別を行うとともに,移動個体の推定を行うための検討をした。また,魚類においては耳石の酸素同位体比をマイクロドリリングで個体発生的な時間軸でしながら分析し,水温履歴などについて検討を行った。同時に採捕されるカワネズミに関しても,個体群構造を把握すべく検討に加えた。水生昆虫では,幼虫成虫のストロンチウム同位体を計測し,水域別の値が認められるか検討を行った。現在のところ,ダム湖を中心とした流入河川間での魚類・カワネズミの移動は認められず,ダム湖対支川の関係性のみが抽出され,支川間の交流は極めて小さい可能性が見いだされた。水生昆虫では主にヒゲナガカワトビケラをターゲットとし,検討を行ったが,成虫期においても河川間の移動はほとんどないことが示唆される結果となった。本手法の有用性はこれらの結果より示すことができるものと評価した。手法開発から有用性評価が本研究の第一番目の目的であり,この点に関しては十分な成果を得ている。より複雑な超個体群構造を明らかにするためには更なるサンプルの分析が必要である。青森県岩木川水系を主な対象地として,哺乳類であるカワネズミ,魚類,水生昆虫類を対象に移動分散率を解明するための手法として生体内元素分析を行った.炭素・窒素安定同位体に加え,ストロンチウム安定同位体,酸素安定同位体などの同位体比と20以上の微量元素濃度を分析した.水系上流域のダム湖を中心とした水系では,魚類,カワネズミの支流間移動は認められず,各個体群の分断化の可能性が示唆された.一部の魚類ではダム湖-支流間の移動が認められたが,この減少はこのダム湖の水位操作との関係性を検討する必要があることが示唆された.制限水位管理方式である旧ダムから常時満水位管理となる再開発ダムへの変換によるダム湖完成後の検討課題となった.水生昆虫では主にヒゲナガカワトビケラを対象とし検討したが,成虫の飛翔行動は上下流双方向で認められ,従来から論じられていた上流へのベクトルの卓越は認められず,かつ大ダムが大きな障害となっていることが示された.支流間の移動は分析サンプルからは検出できず,より多数のサンプルを分析し検討する必要があるが,支流間移動がさほど頻出しないことが示唆された.この際,幼虫からさなぎを経て成虫への変態時に,継続してその特徴を持つ元素と特徴が消える元素が検出され,今後精査をすることにより使い分けが必要になることが明らかとなった.本手法が当該研究目的において有効であることが示され,より一般的な手法となるように分析技術を検討することにより,汎用性を高めることが今後の課題となった.青森県岩木川水系を主な対象として,哺乳類であるカワネズミ,魚類,水生昆虫類を対象に移動分散率を解明するための手法として生体内元素分析を行った.炭素・窒素安定同位体に加えストロンチウム安定同位体,酸素安定同位体などの同位体比と20以上の微量元素濃度分析を行った.水系上流部のダム湖と中心とした水系ネットワークでは,魚類,カワネズミの支流間移動は認められず各個体群分断化の可能性が示唆された.

水生昆虫では主にヒゲナガカワトビケラを対象とし検討したが,成虫の飛翔行動は上下流双方向で認められ,従来から論じられた上流方向へのベクトルの卓越は認められず,かつ大ダムが大きな障害となっていることが示された筋肉など軟組織分析は順調に行われているが、硬組織分析に関しては分析速度に改善すべき点が現れたため、この点を検討する必要がある。今後は,サンプルの分析に加え,これまで採捕できなかったが,より超個体群構造の鍵となる地点間の中間地点においてのサンプリングに集中することにより,局所個体群が隔離されているものであるのか,それとも交流可能なレベルにあるのかについての検討を行う。そのためには,ストロンチウム同位体比などの新たな手法を用いたサンプル分析を並行して行う。生態工学サンプル採集の戦略はおおむね順調であるため、新たに分析対象地域を増加させることにより、普遍的ない意味づけを行う。硬組織分析に関しては、分析の時間解像度の検討などにより簡略化を目指す。また新たな分析手法を取り入れ、その有効性を検討する。必要物品購入には残額が少額になり執行できなかったため,次年度に購入することで研究が速やかに進むことが予想された。分析機器の不具合により予定された分析の一部が行われなかった。そのため次年度にその分を持ち越すこととした。繰り越し分を含め必要物品等を速やかに購入,または調査開始し研究費を使用する。前年度に予定通り行われなかった分析について、年度の早い段階で分析をし、結果を得る予定である。
頭蓋・顎・顔面領域におけるヒト耳介軟骨前駆細胞を用いた軟骨再生法の開発

ヒト耳介軟骨膜から分離されたヒト軟骨前駆細胞は、軟骨細胞と比較して極めて高い増殖能と多分化能を有しているだけでなく、軟骨細胞と同様に軟骨基質産生能を有していることが明らかとなった。さらに、軟骨前駆細胞を重症免疫不全マウスに移植した結果、正常な耳介軟骨と同様に軟骨膜組織で覆われた軟骨が再構築された。コンドロイチン硫酸とハイドロキシアパタイト粒子を複合化した新規スキャフォールド(pCol-HAp/ChS)に播種した結果では、より大きい軟骨が再構築された。我々はヒト耳介より「ヒト弾性軟骨間葉系前駆細胞」である軟骨膜細胞を分離、培養することに成功している。本細胞を用いた軟骨再生医療のためには、この軟骨膜細胞の特性解析の推進および3次元形態を有する再生軟骨の再構築が必要である。本年度では、軟骨膜細胞の特性解析のために、(1)細胞増殖能、(2)多分化能、(3)自己再生能のうち(1),(2)について軟骨細胞と比較し分析した。(1)細胞増殖能:コロニーアッセイと長期細胞増殖能を比較検討した。コロニーアッセイでは、軟骨膜細胞は23.9±4.5個、軟骨細胞2.3±0.4個のコロニーを形成し、軟骨膜細胞は高いコロニー形成能を有していた。長期増殖能において軟骨膜細胞は、軟骨細胞に比べ約1000倍高い増殖能を維持し続けた。(2)多分化能:軟骨、脂肪、骨分化誘導を行った。まず、軟骨分化誘導培地にて培養すると、両者ともに組織学的にプロテオグリカン、II型コラーゲンに染色された。ELISAによるプロテオグリカン、エラスチン、コラーゲンの定量解析では、軟骨膜細胞は17.5±4.3、235.6±19.9、61.8±7.5μg/mlであり、軟骨細胞は19.0±1.3、234.0±16.3、55.8±4.9μg/mlであり同様であった。一方、脂肪分化では、軟骨膜細胞は脂肪滴を形成しOilred0にて染色されたが、軟骨細胞は脂肪滴を形成しなかった。同様に、骨分化では軟骨膜細胞は多数のCaの沈着を認めアリザリンレッドにて染色されたが、軟骨細胞は染色されなかった。これらのことより、軟骨膜細胞は「軟骨間葉系前駆細胞」であることが示唆され、今後の軟骨再生にとって重要な意義があると思われた。我々はヒト耳介より分離された"ヒト弾性軟骨間葉系前駆細胞"を用いて、特性解析の推進および3次元形態を有する軟骨の再構築を目的としている。本年度は(1)生体内における"ヒト耳介弾性軟骨問葉系前駆細胞"由来の再生軟骨の免疫不全マウスへの移植による再生軟骨の評価と(2)生体内における足場材料を用いた"ヒト耳介弾性軟骨間葉系前駆細胞"由来再生軟骨の作成および評価を行った。具体的には、(1)軟骨に分化誘導させた軟骨膜細胞由来および軟骨細胞由来の軟骨細胞を重症免疫不全(NOD/SCID)マウスの背部皮下に細胞を注入し移植を行った。移植3ヶ月後に形成された軟骨様組織を摘出し組織学的解析を行ったところ、軟骨膜細胞は軟骨細胞と同様にin vivoで成熟軟骨細胞へと分化し、その産生基質であるプロテオグリカンや弾性線維に富む弾性軟骨組織を再構築した。また、免疫組織化学染色からII型コラーゲン陽性弾性軟骨組織の周囲をI型コラーゲン陽性の膜様組織が被覆していることが確認された。移植後10ヶ月目に摘出した再構築組織でも同様な結果であった。一方、腫瘍形成、線維性組織形成、血管侵入や石灰化沈着は全く観察されなかった。これらの結果から、軟骨膜細胞はin vivoで生体組織と同様な組織構造を持つ弾性軟骨組織を長期的に再構築することが判明した。さらに、移植10ヶ月後の軟骨膜細胞由来軟骨および軟骨細胞由来軟骨細胞の乾燥重量を比較した結果、統計学的優位差をもって軟骨膜細胞由来軟骨の方が重いことが分かった。これらの結果から、軟骨膜細胞はin vivoで弾性軟骨組織を長期的に再構築することが判明した。(2)軟骨膜細胞を足場材料としてのコラーゲンスポンジに播種しNOD/SCIDマウスの背部皮下に移植した結果、1ヶ月後にプロテオグリカンや弾性線維に富む弾性軟骨組織を再構築した。我々はヒト耳介より分離された"ヒト弾性軟骨間葉系前駆細胞"の特性解析の推進および3次元形態を有する軟骨の再構築を目的としている。最終年度は、生体内における足場材料を用いた"ヒト耳介弾性軟骨間葉系前駆細胞"由来再生軟骨の作成および評価を行った。具体的には、分離し培養した軟骨膜細胞および軟骨細胞を生体外で培養し増殖させた後、足場材料のコラーゲンスポンジに播種し、NOD/SCIDマウスの背部皮下に移植を行った。

足場材料には、軟骨基質として知られるコンドロイチン硫酸と力学的強度を上げるためにハイドロキシアパタイト粒子を複合化した新規スキャフォールド(pCol-HAp/ChS)を用いた。電子顕微鏡観察では、その内腔は連通性に富んでおり、力学的特性では弾性軟骨と同様に高い圧縮弾性率を認めた。移植10ヶ月後に形成された軟骨様組織を摘出し組織学的解析を行った結果、Alcian Blue、弾性線維およびII型コラーゲンで染色され、軟骨周囲をI型コラーゲン陽性の膜様組織が被覆していることが確認された。一方、腫瘍形成、線維性組織形成、血管侵入や石灰化沈着は全く観察されなかった。より大型の弾性軟骨組織の再構築を目指し、直径15mm高さ5mmの円柱状pCol-HAp/ChSを用いて移植実験を行ったところ、1ヶ月後には12mmX12mmX5mmの弾力を有するヒト軟骨様組織が再構築された。組織学的解析により、スキャフォールド全域に成熟軟骨細胞が存在し、プロテオグリカン、弾性繊維の産生が認められたことから、軟骨膜細胞はpCol-HAp/ChSと共に移植することでヒト弾性軟骨組織を再構築することが判明した。これらの結果から、軟骨膜細胞は足場材料を用いることにより生体組織と同様な組織構造を持つ、より大型の弾性軟骨組織を長期的に再構築することが判明した。
イノシトール6リン酸がヒト好塩基球に及ぼす影響

昨年度の研究成果から、イノシトール6リン酸(IP6)はヒト好塩基球様KU812F細胞の脱顆粒を促し、さらに、ヒスタミン合成を担う酵素であるL-ヒスチジン脱炭酸酵素(HDC)の活性とそのmRNA発現量を増大させることが明らかとなった。KU812F細胞においてIP6によるHDC活性増大は転写レベルで誘導されており、ヒト末梢血から分離した好塩基球画分の細胞についても同様の結果が得られた。Fura 2-AMを用いたフローサイトメーター解析の結果、IP6によるHDC活性およびmRNA量増大は細胞内Caレベル上昇を伴うことが確認された。このHDC活性およびmRNA量増大は、Ca^<2+>/カルモデュリン依存性プロテインキナーゼII阻害剤であるKN-93により抑制されたことから、好塩基球のHDC発現にはCaシグナリングが重要であることが示された。また、IP6に応答して細胞内活性酸素種レベルの増大が認められ、ここで生成した活性酸素種は、生体防御や何らかの情報伝達に関わる役割を担っているのではないかと推察された。一方、KU812F細胞にはヒスタミンだけでなく、セロトニン、ドーパミンなどの生理活性物質が電気化学検出器を用いて検出された。しかし、10%ウシ胎児血清添加RPMI-1640培地中で1mMのIP6による7日間の培養処理では、これらの生理活性物質の細胞内蓄積量に顕著な変化を及ぼさなかった。本年度は、表面プラズモン共鳴現象を応用し、イノシトール6リン酸の受容体の単離、同定を試みた。金膜表面にカルボキシメチルデキストランをコートしたセンサチップを選択し、これにIP6を固定化した。このプレート上のIP6に結合するKU812F細胞の細胞膜タンパク質の単離を試みたが、現在のところ、特定のタンパク質の回収には至っていない。今後、実験条件を改良し、IP6結合タンパク質の同定を継続して進めていく。イノシトール6リン酸(IP6)は抗酸化作用や抗ガン作用が認められているが、免疫系に及ぼす影響について報告された例は少ない。IP6がヒト好塩基球様KU812F細胞に及ぼす影響を検討した結果、ヒスタミン放出(脱顆粒反応)の促進とヒスタミンの合成を担うヒスチジン脱炭酸酵素(HDC)の活性増大が認められた。Ca^<2+>を含まないタイロード緩衝液中でKU812F細胞を濃度1mMのIP6と37°Cで60分間インキュベートすると、約30%のヒスタミン放出が認められた。また、同じ条件に声いてHDC活性が約4倍に増大した。これらの細胞応答は、ホスホリパーゼC(PLC)阻害剤であるU73122、プロテインキナーゼC(PKC)阻害剤であるGF109203Xやchelerythrine、ホスファチジルイノシトール3キナーゼ(PI3K)阻害剤であるwortmanninにより抑制された。また、アクチノマイシンDおよびシクロヘキシミドを用いた検討の結果、IP6は、de novoのHDC遺伝子発現(mRNA転写)とタンパク質翻訳の双方を介してHDC活性増大を引き起こすことが示された。実際、IP6はKU812F細胞におけるHDCmRNA発現量を増大させた。これまでにホルボールミリステートアセテート(PMA)によるPKC活性化が好塩基球のHDC活性増大を促すことが報告されている。この場合、HDC遺伝子発現を伴わず、タンパク質翻訳レベルで調節されていることが示されている。そこで、IP6によるHDC遺伝子発現にはPI3K、PLCやCa^<2+>を介したシグナル伝達が重要であることが推察された。IP6は、経口摂取により様々な組織へ移行することが確認されている。血中へ移行したIP6は、好塩基球のヒスタミン産生と放出を介して何らかの生体調節機能を有する可能性がある。

金膜表面にカルボキシメチルデキストランをコートしたセンサチップを選択し、これにIP6を固定化した。このプレート上のIP6に結合するKU812F細胞の細胞膜タンパク質の単離を試みたが、現在のところ、特定のタンパク質の回収には至っていない。今後、実験条件を改良し、IP6結合タンパク質の同定を継続して進めていく。
回転水噴霧法による急冷凝固粉末の超薄切片法による電顕観察と物性

回転水噴霧法、金型鋳造など種々の冷却速度で凝固させたAlー50w/oCu合金を熱アルカリ溶液でAlを抽出し、ラネー合金触媒を作成した。従来の遅い冷却速度で得られた合金から作られたラネー触媒の触媒活性度に比較して、回転水噴霧法によって作られた急冷材からのラネー触媒は40%以上活性度が上がった。このような活性度の向上は金属の凝固時の冷却速度と明確な関係を示した。X線回折によるとアルカリ抽出されたラネー触媒はほぼCu単相の回折線を示したが、回折線は冷却速度が早いほどブロードであり、生成したCuの粒子が冷却速度が速いほど微細であると予想された。そこで、本研究ではラネー粉末をエボキシ樹脂に包埋しウルトラファインマイクロトームでダイアモンドナイフを使って約数nm程度の厚さの超薄切片を作成し、メッシュにホールドして直接電顕によって観察した。ラネー銅の場合にはダイアモンドナイフによって超薄切片を作成することは容易であり良好な試料が得られた。電顕観察によると急冷した場合にCuは数十ナノメータ程度の微細な構造をを示し、X線の結果と良い対応が得られた。このことから、触媒活性の向上は主として、Cu粒子の微細化による比表面積の増大によると考えるとうまく説明ができ、この結果は吸着法による比表面積測定とも対応した。急冷によるCuの微細化の理由としては1%添加したTiが急冷によりO相に固溶し、この固溶Tiがアルカリ抽出中に生じるCu原子の移動によるCu粒子の粗大化を抑制したものと推定している。今後はこのメカニズムをCu原子のまわりの結合状態をESCAなどで調べることにより、少しずつ明らかにし、より向性能なラネー銅の開発のための基礎資料としたい。