hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
軟骨前駆細胞を用いた変形性関節症治療法の開発

CPCをOA発症と治療の新しいrole playerとすることで、分解・変性抑制薬を用いる消極的治療から修復・再生への積極的治療に転換できる可能性がある。また、細胞治療は注射などの保存的治療ができ、手術的治療を回避でき医療費・経済損失の低減にも寄与でき、本法は本法を開発する臨床的意義はきわめて大きいと考える。さらに有効性と安全性を検証していく予定である。日本白色家兎変形性膝関節症モデルを作製し、軟骨前駆細胞を関節内注射して関節症性変化の評価、組織学的評価を行った。免疫抑制を行うことなく関節腔内投与を行い経過観察しているが、投与後1ヵ月を経過しても明らかな有害事象はなかった。軟骨損傷に対するRECの関節腔内注射による治療は従来報告されている間葉系幹細胞よりも高い効果を示すと推察される。軟骨損傷に対する硝子軟骨による修復や、変形性関節症の進行予防、疼痛の軽減について検証する予定である。ウサギ関節軟骨を用いた培養細胞研究は進んであり、また、平成28年度予定のヒト軟骨細胞実験も行っている。ただし、陽性細胞の検出には時間が必要である。軟骨前駆細胞の検出の際の軟骨からの細胞単離のための酵素処理の手がかりを見つけ、その検出力を向上させることができた。更に単離方法の工夫を重ねて更なる検出力を向上させたい。ヒト関節軟骨からの軟骨前駆細胞の候補となる細胞をFACS解析を行って分離可能となったが細胞数はわずかであるため、有効な細胞数を得るための時間や培養液の工夫が必要であって、増殖後の表面マーカーの変化にも留意して研究を進めていく予定である。軟骨再生軟骨前駆細胞の検出には軟骨からの細胞単離の際に酵素処理に工夫が必要と考える。いくつかの酵素を試し、最も効果的な酵素で検出力を向上させたい。グリーンラットおよび半透膜を用いた研究は準備中であり、今年度は行わなかった。ヒト関節軟骨からの軟骨前駆細胞の候補となる細胞をFACS解析を行って分離可能となったが細胞数はわずかであるため、有効な細胞数を得るための時間や培養液の工夫が必要であり、その条件を設定するのに時間がかかったため。次年度早期にいくつかの酵素および抗体をまとめて購入するために残した。来年度は、28年度に予定している研究と共に上記実験を行う予定である。有効なCPC細胞数を得るための条件を設定し、兎を用いたvivoでのCPCの有効性を検証していく予定である。コラゲナーゼおよび抗体各種を購入予定である。
肥満関連炎症性疾患に関わるケモカインの日本型食品由来成分による制御

糖尿病などの肥満に伴う炎症性疾患の発症メカニズムの解明と日本型食品由来成分によるその制御を目的に、野菜を中心とした日本型食品中より機能性成分を探索した。その結果、カレーの香辛料であるフェヌグリーク中のジオスゲニン、トマトの果皮に含まれるナリンゲニンカルコン、松樹脂に含まれるデヒドロアビエチン酸が脂肪組織の炎症反応を抑制する活性を持つことをそのメカニズムとともに明らかにした。さらにナスからは脂肪酸関連の新規候補物質を見出した。肥満状態では、脂肪組織由来のMCP-1が脂肪細胞へのマクロファージの浸潤と活性化を誘導することで、アテローム性動脈硬化、インスリン抵抗性などの肥満に伴う炎症反応において重要な役割を果たしていることが示唆されている。そこで、肥満に伴う炎症性疾患の発症メカニズムの解明と日本型食品由来成分によるその制御を目的に、本年度はまず、炎症時の重要なメディエーターであるMCP-1と肥満との関連をMCP-1ノックアウトマウスを用いた動物実験および脂肪細胞とマクロファージを用いたin vitro実験において検討した。MCP-1ノックアウトマウスに高脂肪食を給与したところ、体重変化や脂肪組織重量、血糖値に有意な差は認められなかった。本研究申請後に発表された報告によると、MCP-1ノックアウトマウスの脂肪組織では、その重量に有意な差はないもののマクロファージの浸潤が低下することが示されている。従って、MCP-1は肥満に伴う脂肪組織の質的変化に関与することが考えられた。次に、肥大化脂肪細胞とマクロファージをin vitroにおいて共培養したところ、MCP-1の分泌は劇的に増加した。またここにさまざまな食品由来因子を添加したところ、柑橘類やトマトの果皮に多く含まれるナリンゲニン類や松樹脂に含まれるデヒドロアビエチン酸にMCP-1や炎症性サイトカインであるTNF-α、NOの分泌を低下させる効果があることが明らかとなった。さらに本年度はこのような炎症性サイトカインの発現を制御する日本型食品由来成分を高感度で探索するために、ヒトMCP-1とTNF-αの転写調節領域をヒト単球由来THP-1細胞に導入しステイブルセルラインを得ることで、in vitroスクリーニング系を構築した。また、系の有効性は、MCP-1やTNF-αの発現制御に関わるPPARγリガンドの添加によって確認した。そこで、肥満に伴う炎症性疾患の発症メカニズムの解明と日本型食品由来成分によるその制御を目的に、本年度は、日本型食品の中でも特に植物(野菜)に着目し、昨年度に構築した「炎症性サイトカイン(MCP-1およびTNF-α)の発現を制御する食品成分を高感度で探索するin vitroスクリーニング系」を用いて抗炎症作用を有する成分の単離を試みた。その結果、まず、カレーの香辛料として知られるマメ科の植物のフェヌグリーク(Trigonella foenumgraecum)中から、有効成分として、ステロイドサポニンであるジオスゲニンが見い出された。ジオスゲニンは脂肪細胞とマクロファージの相互作用による炎症反応に対しても実際に効果を発揮したため、さらにその抑制シグナルについて検討したところ、マクロファージにおけるNFκBおよびJNKシグナルを抑制することが判明した。また、ナス(Solanum melongena)をエタノールおよびヘキサンで抽出後、HPLCで分画したフラクション中にもこれらの炎症性サイトカインの発現を強く抑制するフラクションが見出された。そこで、このフラクションをさらにHPLCで分画し、LC-MSを用いて候補成分を検討したところ、脂肪酸関連の候補物質が見出された。現在NMRによる候補成分の同定を行っているが、脂肪酸はリガンド依存性の核内転写因子であるPPARγのリガンドとなることで抗炎症作用を発揮することが報告されているため、このナス中から見出された成分が肥満に伴う脂肪組織での慢性炎症反応に対しても有効性を発揮する可能性が高いことが考えられた。
楕円曲線論の位相幾何学への応用

本研究では、普偏楕円曲線の形式群の研究の基礎である亜群スキ-ムの理論とelliptic cohomologyのホップ・アルジェブロイド理論の整備・発展を行った。特に代数的位相幾何に代数幾何学の理論を導入するため代数的位相幾何での考える場である次数付代数のカテゴリ-で代数幾何の諸概念,例えばスキ-ム・その上の加群の層等を扱かえるように必要な定式化を行った。整数論における楕円曲線論,保型形式論との関係を明らかにするために,普偏楕円曲線のモデルの研究を行い、2次体上の小さいコンダクタ-をもつ楕円曲線の決定を行った。定義体の情報を得るために連分数を用い類の構造を調べた。ヴェイユ・谷山予想からみてモジュ-曲線のヤコビアンから楕円曲線は商として得られると思うので、モジュラ-曲線のC(J)上の定義式の決定を行った。派生的なものとしてある種の“embedding problem"の解を得た。保型形式の分野では、非アルキメデス局所体上の単純多元環の乗法群の“cuspidal unramified series"の指標公式を得た。これを基にヘッケ環,保型表現の形式群の研究を行った。局所対称空間のコホモロジ-群の研究では,次元公式について新しい結果を得た。常微分・方程式・特異積分の研究でも新しく得られた結果を保型関数論に応用する研究をした。将来の問題としては各分野で得た結果をふまえ,亜群スキ-ムのコホモロジ-理論つくり,この研究で得られたモデルで計算し,それを楕円曲線,保型形武,ヘッケ環の言葉で表し,球面ホモトピ-の週期族やMorara Kー理論を調べることを予定している。普遍楕円曲線の形成群を研究するための手段である亜群スキ-ムの基礎理論の整備を行い、その結果elliptic cohomologyから定義スキ-ムの表現するホップ・アルジェブロイドの決定を行った。亜群スキ-ムの理論に必要な次数付代数の理論をより深める研究を行った。普遍楕円曲線のモデルを得るため,至る所good neductionをもつ楕円曲線の研究を行い,ある仮定をみたす実2次体上でその様な楕円曲線の形が決定できた。保型形式の面では,非アルキメデス局所体上の単純代数の乗法群のcuspidal unramified seriesの指標公式が完全に決定できた。これは普遍楕円曲線に付隨する保型形式のヘッケ環の構造の研究に応用できる。今まで述べた結果は現在発表準備中である。リ-群のコホモロジ-と楕円的コホモロジ-の関連を調べるために必要となる局所対称空間のコホモロジ-群の次元について研究を行った。この次元はあるリ-群の既約ユニタリ-表現の重複度を使って表せる。この重複度が0でない表現の性質をWeil表現を用いた構成法で明らかにした。定義体として実2次体を考えるときには,単数や類の性質が必要となるが,従来知られていなかった性質がある数の連分数展開の比較で述べられることを示した。保型形式への応用につながる解析面での成果を以下述べる。ウルトラデイストリビュ-ションの超波面集合を定義し,その性質を調べることによって特性根の多重度が一定でない双曲型作用素の基本解の構造を明らかにした。又その作用素に関連した常微分方程式のスト-クス乗数を求めることにより基本解の超波面集合を決定した。特異積分の理論の級数の総和法への応用を与えた。亜群スキ-ムとホップ・アルジェブロイドの理論の整備を引き続き実施した。

特に楕円的コホモロジ-理論を普遍楕円曲線に付随した形成群のつくる亜群スキ-ムの表現論とみなすという立場より,亜群スキ-ムの表現論という新しい数学的対象の定式化を行った。代数幾何学理論の応用研究を進めた。この課程であらわれる代数的対象(例えば,環・加群)はすべて次数付きなので,次数付代数のカテゴリ-で,対象を取り扱う必要がある。このカテゴリ-内で代数幾何におけるのと同様に,スキ-ム・その上の加群の層の理論を構成するために,必要な概念の定式化を行った。普遍楕円曲線の新たなモデルの研究の過程で派生的なものとして,ある種の普遍代数方程式(ある重要なザロワ群をもつガロワ拡大の構成問題に関して)を与える保型関数体の定義式の決定を研究した。この関数体は楕円曲線の“moduli"とみなせるので、普遍楕円曲線の形式群と保型形式の形式群との関係を調べるのに役立つ。非アルキメデス局所体上の保型表現の研究は前年度で得られた単純代数の乗法群の不分岐カスピダル系列の指標公式についての結果の一般化とそれの形式群への応用について研究した。局所対称空間のコホモロジ-群・常微分方程式等の研究は、保型表現と楕円・保型関数論への応用を中心として行った。楕円曲線と結びついた保型形式やヘッケ作用素と亜群スキ-ムの関係を調べるために必要な準備研究を行った。さらに亜群スキ-ムのコホモロジ-を計算することにより球面のホモトピ-群の周期族との関係を調べることができると思うが,そのために必要な資料調査を行った。
オーストロネシア諸族における在来政体の比較研究―東南アジア島嶼部を中心に―

オーストロネシア諸族の在来政体の中心部に特徴的にみられる兄弟姉妹の関係について詳細な資料を収集することを目的に、杉島が2018年8月9月にインドネシア共和国東ヌサテンガラ州エンデ県で、また研究協力者の西島薫(現在京都大学学際融合教育研究推進センター特定助教)が2018年9月にインドネシア共和国西カリマンタン州クタパン県でフィールドワークを実施した。この調査から、域内バリエーションをふくめ、先行研究には書かれたことのない多くの新しい知見がえられた。この調査資料と既存の民族誌を関連づけて分析し、その成果を研究協力者の西島と共有するために、以下の日時場所で研究会を開催し、発表と議論をおこなった。[ ]内は主な発表者。12018年8月27日17:00-19:00/京都大学大学院アジア・アフリカ地域研究研究科/[西島]、22018年10月26日17:00-19:00/京都大学大学院アジア・アフリカ地域研究研究科[西島]、32018年11月16日17:00-19:00/放送大学京都学習センター[杉島]、42018年12月20日17:00-19:00/放送大学京都学習センター[西島]。2019年2月22日13:30-15:30、漢族の文化人類学的研究を専門とする、東洋大学アジア文化研究所研究員の植野弘子氏に同研究所で「漢族の歴代王朝における兄弟姉妹関係の役割」をめぐってインタビューをおこない、比較研究のための情報を提供いただいた。以上のような研究活動の成果を学術論文としてまとめつつある。当初の計画どおり、インドネシアでフィールドワークを実施し、学術的意義の大きい調査資料を収集できた。計画していたよりも回数は少なくなったが、研究協力者の西島薫と4回の研究会をおこない、情報共有と研究テーマに関する議論をおこなうことができた。2019年度もインドネシアで研究協力者の西島薫と連携してフィールドワークを実施する。2018年度にフィールドワークをおこなった地域では、効率よく調査資料を収集できることから、2019年度も同地域を中心に、やや調査地域を拡大してフィールドワークを実施する。また、研究協力者である西島薫との研究会は相互の知見を高め、モティベーションを維持するうえで有効なことが確かめられたので、2019年度においても継続して実施する。短時間で密度の高い情報が得られるので、オーストロネシア諸族と境界を接して居住する東アジア地域を長年にわたり研究してきた文化人類学者へのインタビューと議論を少なくとも1回はおこなう。
在外教育機関に学ぶ日本人高校生のキャリア意識-日本で育つ青少年との比較-

最終年度である平成18年度は、平成16-17年度に引き続き、同じ研究枠組みで継続調査を実施した。1.面接調査の実施海外研究協力者であるパリ国際学校(フランス)石村清則教諭らの協力により、現地にて下記調査を実施した。1)実施日時:平成18年6月(継続調査3年目の3年次:卒業時)2)実施対象校:パリ国際学校(フランス)、アムステルダム国際学校(オランダ)、デュッセルドルフ国際学校(ドイツ)3)対象者:インターナショナル・バカロレア(IB)ディプロマ・プログラム受講を希望する12年次生(パリ国際学校15名、デュッセルドルフ国際学校7名、アムステルダム国際学校3名、合計25名)4)面接調査内容:半構成的面接法、IBコースの印象、取得科目、大学進学希望先、将来の希望職種などキャリア意識、日本人意識、日本と現地の生活等について一人あたり1時間程度聴取*上記をテープ起こしし、分析資料を作成2.国際学校12年次生対象質問紙調査・IB取得科目、IBで身につく資質・技能、大学進学後のキャリア、日本人意識、日本社会についての意見などからなる質問紙を作成し、平成17年6月卒業の12年次生に各学校から配布してもらい回収*上記のデータ入力・整理3.面接調査・質問紙調査データ分析4.報告書作成・3年間にわたる調査結果に基づき、それぞれの知見を研究代表者・分担者、海外研究協力者全員で執筆し、報告書を作成した。同時に下記書籍として刊行した。(相良憲昭・岩崎久美子編著、石村清則・橋本八重子・吉田孝著『国際バカロレア-世界が認める卓越した教育プログラム-』明石書店2007年2月)最終年度である平成18年度は、平成16-17年度に引き続き、同じ研究枠組みで継続調査を実施した。(相良憲昭・岩崎久美子編著、石村清則・橋本八重子・吉田孝著『国際バカロレア-世界が認める卓越した教育プログラム-』明石書店2007年2月)1.インタビュー調査の実施海外研究協力者であるパリ国際学校(フランス)石村清則教諭らの協力により、現地にて下記調査を実施した。1)実施日時:平成16年9月2)実施対象校:パリ国際学校(フランス)、アムステルダム国際学校(オランダ)、デュッセルドルフ国際学校(ドイツ)3)対象者:インターナショナル・バカロレア(IB)ディプロマ・プログラム受講を希望する11年次生(パリ国際学校16名、デュッセルドルフ国際学校7名、アムステルダム国際学校4名、合計28名)4)インタビュー調査内容:半構成的面接法、IBコースの印象、取得科目、大学進学希望先、将来の希望職種などキャリア意識、日本人意識、日本と現地の生活等について一人あたり1時間程度聴取*上記をテープ起こしし、分析資料の作成2.国際学校12年次生対象質問紙調査・IB取得科目、IBで身につく資質・技能、大学進学後のキャリア、日本人意識、日本社会についての意見などからなる質問紙を作成し、平成16年6月卒業の12年次生に各学校から配布してもらい回収。*上記のデータ入力・整理3.卒業生(日本滞在者)調査上記3学校の教諭の推薦により、高校卒業後10年程度経過者6名(男子2名、女子4名)を対象に、在学生と類似のインタビュー調査(1.参照)と質問紙調査(2.参照)を実施。4.IBのプログラムについて、下記内容を執筆した。「心を育てる国際バカロレア・プログラム」pp.119-135(立田慶裕編『参加して学ぶボランティア』玉川大学出版部2004年9月)平成16年度に引き続き、同じ研究枠組みで継続して調査を実施した。1.インタビュー調査の実施海外研究協力者であるパリ国際学校(フランス)石村清則教諭らの協力により、現地にて下記調査を実施した。1)実施日時:平成17年9月2)実施対象校:パリ国際学校(フランス)、アムステルダム国際学校(オランダ)、デュッセルドルフ国際学校(ドイツ)3)対象者:インターナショナル・バカロレア(IB)ディプロマ・プログラム受講を希望する12年次生(パリ国際学校15名、デュッセルドルフ国際学校7名、アムステルダム国際学校3名、合計25名)*昨年度からの追跡調査であるが、パリ国際学校1名、アムステルダム国際学校1名、合計2名帰国

4)インタビュー調査内容:半構成的面接法、IBコースの印象、取得科目、大学進学希望先、将来の希望職種などキャリア意識、日本人意識、日本と現地の生活等について一人あたり1時間程度聴取*上記をテープ起こしし、分析資料の作成2.国際学校12年次生対象質問紙調査・IB取得科目、IBで身につく資質・技能、大学進学後のキャリア、日本人意識、日本社会についての意見などからなる質問紙を作成し、平成17年6月卒業の12年次生に各学校から配布してもらい回収*上記のデータ入力・整理3.卒業生(日本滞在者)調査上記3学校の教諭の推薦により、昨年の6名に続き、高校卒業後10年程度経過者2名(男子1名、女子1名)を対象に、在学生と類似のインタビュー調査(1.参照)と質問紙調査(2.参照)を追加実施4.国会会議録検索システムによる資料作成昭和20年8月15日平成17年12月16日間のすべての会議録で「バカロレア」で検索しヒットした50件のうちフランス国バカロレア17件を除き収録。国会でのインターナショナル・バカロレアの議論の推移を4つに分類し資料を作成した。最終年度である平成18年度は、平成16-17年度に引き続き、同じ研究枠組みで継続調査を実施した。1.面接調査の実施海外研究協力者であるパリ国際学校(フランス)石村清則教諭らの協力により、現地にて下記調査を実施した。1)実施日時:平成18年6月(継続調査3年目の3年次:卒業時)2)実施対象校:パリ国際学院(フランス)、アムステルダム国際学校(オランダ)、デュッセルドルフ国際学校(ドイツ)3)対象者:インターナショナル・バカロレア(IB)ディプロマ・プログラム受講を希望する12年次生(パリ国際学校15名、デュッセルドルフ国際学校7名、アムステルダム国際学校3名、合計25名)4)面接調査内容:半構成的面接法、IBコースの印象、取得科目、大学進学希望先、将来の希望職種などキャリア意識、日本人意識、日本と現地の生活等について一人あたり1時間程度聴取*上記をテープ起こしし、分析資料の作成2.国際学校12年次生対象質問紙調査・IB取得科目、IBで身につく資質・技能、大学進学後のキャリア、日本人意識、日本社会についての意見などからなる質問紙を作成し、平成17年6月卒業の12年次生に各学校から配布してもらい回収*上記のデータ入力・整理3.面接調査・質問紙調査データ分析4.報告書作成・3年間にわたる調査結果に基づき、それぞれの知見を研究代表者・分担者、海外研究協力者全員で執筆し、報告書を作成した。同時に下記書籍として刊行した。(相良憲昭・岩崎久美子編著、石村清則・橋本八重子・吉田参着『国際バカロレア-世界が認める卓越した教育プログラム-』明石書店2007年2月)
法務省旧本館(重文)の意匠ならびに構法に関する研究

筆者は、次の3つの目的をもって表記の研究課題に取り組んだ。(1)法務省旧本館に関する図面を分析して、エスキスから実施設計までの過程を明らかにする。(2)旧本館の耐震・防火構法をドイツの建築構法との比較によって位置付ける。(3)そして、旧本館の創建時の構法を明らかにする。:まず、図面の成立史については、現在、神戸芸術工科大学教授の坂本勝比古博士が保管されている旧本館に関する51点の図面を分析し、1887年から1892年に及ぶ図面(半分以上の図面に年月日はない)の年代を推定し、第1次案(西洋式)、第2次案(和洋折衷)、第3次案(再度西洋式)に分類することができた。次に、旧本館に現存する煉瓦ヴォ-ルト床は、当時のドイツではプロイセン型ヴォ-ルトと呼ばれた構法に類似するもので、各種あった防火床のなかでは最も単純なものが使用されたことを明らかにした。そして、旧本館の創建時の構法については、とくに3階床に関する建築仕様書を徹底的に解読して図解するとともに、解体調査で発見された3階の鉄筋コンクリート補強梁と煉瓦被覆梁は、濃尾地震(明治24年/1891)以後の緊急の地震対策から生まれたものであったことを明らかにした。以上の成果は、日本建築学会大会ならびに日本建築学会関東支部研究報告集で発表した。日本の近代建築技術である耐震ならびに防火構法は、明治20年代半ば以降に発達したとされる。法務省旧本館の構法の研究は、建築技術が近代的発展をまさに開始しようとした時期の構法を明らかにすることにほかならない。
webサービスにおけるマルチデータベース検索の研究

Webサービスの適用範囲を拡大するためには,異なったデータ形式の情報を横断的に検索し処理する機能が重要になる.本研究では,サイトの独立性が強く提供情報が必ずしも信頼できないWebサービス環境においてこのような検索機能を実現する方法を研究開発する.本研究の課題には,類似情報を異種のデータ形式で提供するサイトに対する問合せ方法,複数のサイトから部分的に提供された情報を全体的・統一的な情報に統合する方法,情報の品質を提供サイトや内容の整合性などから判別し質の良い情報を収集する方法,処理の効率化などがある.まずUDDIとWSDLを用いて各種のデータベースのスキーマ情報を統一的に扱うための方法を検討した.さらにマルチデータベース処理方式や情報品質判別方法などの検討を行い,プログラムを設計した.また,一部の機能についてプログラムの試作を行った.上記の検討を詳細化し,プログラムを試作し基本方式の実現可能性を検討した.XMLデータベースと関係データベースを対象とし,複数のWebサービスに対する検索・問合せ処理方法について部分的な試作を行いその動作を確認した.検索・問合せ結果のクライアントでの統合を行うためにXMLデータベースの検索結果と関係データベースの検索結果をXML形式で統合する方法の試作を行った.これらの検討によりWebサービスを利用してマルチデータベース検索を行うことによって,関係データベースとXMLデータベースを対象とした柔軟なシステムを構成することが可能であることを示した.XMLデータベースは半構造データやテキストを格納するのに適しているので,この方法をもとに各種のデータベースの情報統合を行うことができる.Webサービスの適用範囲を拡大するためには,異なったデータ形式の情報を横断的に検索し処理する機能が重要になる.本研究では,サイトの独立性が強く提供情報が必ずしも信頼できないWebサービス環境においてこのような検索機能を実現する方法を研究開発する.本研究の課題には,類似情報を異種のデータ形式で提供するサイトに対する問合せ方法,複数のサイトから部分的に提供された情報を全体的・統一的な情報に統合する方法,情報の品質を提供サイトや内容の整合性などから判別し質の良い情報を収集する方法,処理の効率化などがある.まずUDDIとWSDLを用いて各種のデータベースのスキーマ情報を統一的に扱うための方法を検討した.さらにマルチデータベース処理方式や情報品質判別方法などの検討を行い,プログラムを設計した.また,一部の機能についてプログラムの試作を行った.上記の検討を詳細化し,プログラムを試作し基本方式の実現可能性を検討した.XMLデータベースと関係データベースを対象とし,複数のWebサービスに対する検索・問合せ処理方法について部分的な試作を行いその動作を確認した.検索・問合せ結果のクライアントでの統合を行うためにXMLデータベースの検索結果と関係データベースの検索結果をXML形式で統合する方法の試作を行った.これらの検討によりWebサービスを利用してマルチデータベース検索を行うことによって,関係データベースとXMLデータベースを対象とした柔軟なシステムを構成することが可能であることを示した.XMLデータベースは半構造データやテキストを格納するのに適しているので,この方法をもとに各種のデータベースの情報統合を行うことができる.Webサービスの適用範囲を拡大するためには、異なったデータ形式の情報を横断的に検索し処理する機能が重要になる.本研究では、サイトの独立性が強く提供情報が必ずしも信頼できないWebサービス環境においてこのような検索機能を実現する方法を研究開発する.本研究の課題には、類似情報を異なったデータ形式で提供するサイトに対する問合せ方法、複数のサイトから部分的に提供された情報を全体的・統一的な情報に統合する方法、情報の品質を提供サイトや内容の整合性などから判別し質の良い情報を収集する方法、処理の効率化などがある.本年度はUDDIとWSDLを用いて各種のデータベースのスキーマ情報を統一的に扱うための方法を検討した.クライアントのアプリケーションのWebサービスインタフェース部分はWSDLを元にサービスごとに開発される.現在、Webサービスを実装する方法には、NET環境を用いるものとJava言語で実装する方法がある.このうち、NETは動作するプラットホームが限られているため、研究の基盤としてJava系技術を用いることとした.情報検索の対象としてはテキスト形式を基本とするものと関係データベースの2種類を検討した.テキスト形式の情報検索はサイト内での表現形式が何であっても、WebサービスではXML形式データへの問合せを処理可能とする.関係データベースの問合せは標準的なSQLで行うが、WebサービスではSQLとその解はXMLベースで送受される。両形式のデータの統合をクライアント側で行う方法を検討し、データ統合をXML形式で行う方法を提案した.Webサービスの適用範囲を拡大するためには,異なったデータ形式の情報を横断的に検索し処理する機能が重要になる.本研究では,サイトの独立性が強く提供情報が必ずしも信頼できないWebサービス環境においてこのような検索機能を実現する方法を研究開発する.本研究の課題には,類似情報を異なったデータ形式で提供するサイトに対する問合せ方法,複数のサイトから部分的に提供された情報を全体的・統一的な情報に統合する方法,情報の品質を提供サイトや内容の整合性などから判別し質の良い情報を収集する方法,処理の効率化などがある.昨年度はUDDIとWSDLを用いて各種のデータベースのスキーマ情報を統一的に扱うための方法を検討した.今年度は昨年度の結果を元にマルチベータベース処理方式の検討を行い,プログラムを設計した.また,一部の機能についてはプログラムの試作を行い,実現可能性を検討した.検討した事項は以下のとおりである.UDDIとWSDLの表現詳細化とその使用方法を検討し,UDDIで通常扱われない情報についてどのように扱うかについても検討した.

XMLデータベースと関係データベースを対象とし,複数のWebサービスに対する検索・問合せ処理方法を検討した.検索・問合せ結果のクライアントでの統合を行うためにXMLデータベースの結果と関係データベースの結果をXML形式で統合する方法を検討した.情報品質判別方法のマルチデータベース処理への組み込み方法を検討し,レーティングの導入とその実装方法を検討した.Webサービスの適用範囲を拡大するためには,異なったデータ形式の情報を横断的に検索し処理する機能が重要になる.本研究では,サイトの独立性が強く提供情報が必ずしも信頼できないWebサービス環境においてこのような検索機能を実現する方法を研究開発する.本研究の課題には,類似情報を異種のデータ形式で提供するサイトに対する問合せ方法,複数のサイトから部分的に提供された情報を全体的・統一的な情報に統合する方法,情報の品質を提供サイトや内容の整合性などから判別し質の良い情報を収集する方法,処理の効率化などがある.平成15年度はUDDIとWSDLを用いて各種のデータベースのスキーマ情報を統一的に扱うための方法を検討した.平成16年度はマルチデータベース処理方式や情報品質判別方法などの検討を行い,プログラムを設計した.また,一部の機能についてプログラムの試作を行った.本年度は昨年度までの検討を詳細化し,プログラムを試作し基本方式の実現可能性を検討した.XMLデータベースと関係データベースを対象とし,複数のWebサービスに対する検索・問合せ処理方法について部分的な試作を行いその動作を確認した.検索・問合せ結果のクライアントでの統合を行うためにXMLデータベースの検索結果と関係データベースの検索結果をXML形式で統合する方法の試作を行った.これらの検討によりWebサービスを利用してマルチデータベース検索を行うことによって,関係データベースとXMLデータベースを対象とした柔軟なシステムを構成することが可能であることを示した.XMLデータベースは半構造データやテキストを格納するのに適しているので,この方法をもとに各種のデータベースの情報統合を行うことができる.
医療観光に関する医学および社会科学・地域研究の視点からの学際研究

医療観光の状況を送り出し国、受け入れ国に分けて調査をおこない、最新の知見を得た。これらの調査の結果。医療観光は医療システムが未成熟なアジア諸国にとっては大きなうねりであるが、単なる医療の問題にとどまらない大きな人の移動の文脈で考察することも必要であることが示唆された。今年度は一年目の成果を踏まえて、中国を中心に医療観光を起こしている国(患者が外部に出て行っている国)について調査した。また、インドで実際に携わる関係者に対するインタビュー、現場の視察を行った。また、マレーシアにおいて行われた医療観光の国際会議に出席して、マレーシアの医療観光を推進している政府組織であるMHTCやマレーシア民間病院協会幹部と議論を行った。国内では、2012年7月29日に、多摩大学目黒キャンパス601教室において、奥島美香(天理大学国際学部准教授),豊田三佳(立教大学観光学部准教授)氏から講演、また、2012年9月9日に多摩大学目黒キャンパス601教室において松尾瑞穂新潟国際情報大学講師、菊地靖早稲田大学名誉教授、国連大学客員教授の講演を拝聴した。講演順にインドネシアで、シンガポールでの医療観光の状況、インドでの受胎のためのツーリズムの状況、国際保健との関係、の知見を得た。その成果を加味して、最終的な研究成果の発表を公開形式のワークショップまたはシンポジウムを2月16日に早稲田大学において開催した。ここでは、アジアの経済成長と国際交流セミナーと題して、真野がアジアにおけるメディカルツーリズム、分担者の近藤がインドにおける経済成長戦略とメディカルツーリズム、協力者の川端、小野が東南アジアにおける経済成長戦略とメディカルツーリズムとロングステイの関連について報告し議論を行った。これらの調査の結果。研究会議を数回行い、医療観光の現状を明らかにした。なかでも、2011年10月2日14時ー18時に日本生産性本部では、科研研究者の小野真由美、真野俊樹、川端隆史、小野真由美、鳥居高に加えて、大泉啓一郎、日本総研上席主任研究員(タイ・マレーシア専門エコノミスト)を呼び、マクロな視点からも医療観光の背景を検討した。具体的には、「マレーシア:小規模国家が狙う新戦略」鳥居先生として、従来の比較優位の喪失と新規コアの確立の必要性から新しい成長の「核の育成」の指摘がありその中の一つとして医療観光があること。「中所得国のワナと中進国の課題」大泉先生として、中進国の社会保障制度、中進所得国の高齢化のインパクト、福祉国家VS国際競争力という視点で議論した。さらに、2012年12月6日9日には、マレーシア・クアラルンプールおよび近隣都市真野俊樹、川端隆史で行った。ここでは、パンタイ病院クアラルンプール、Prince Court Hospital、KPJ病院、Malaysia Health Travel Council、Sime Darby Medical Centerなどの調査を通して、医療観光の実態を明らかにした。2011年10月アジア政経学会などの学会発表の機会が思ったより早くおとづれた。発表内容は、真野が「メディカルツーリズム、あるいはヘルスツーリズムを奨励している新興国の側から見れば、産業政策の側面がある。それは、医療に対するサービス産業政策としての視点である。民主党による成長戦略の一つに加えられたように、日本でも数々の取り組みがみられる。本報告では、近年話題になり、批判もあったが新たな産業・ビジネスとして動き出しているメディカルツーリズムについて、今までの流れをまとめ、アジアでの状況、日本での動きを概観する」という発表を行い、それをうけ小野が「日本人の国際退職移住・ロングステイツーリズム:マレーシアの事例からみるケアを求めた国際移動への展開」、川端がマレーシアのニッチ戦略メディカル・ツーリズム振興策を事例にした考察として報告した。また、マレーシアでの調査研究の成果は、共済総合研究2012年3月号に発表した。一年目の成果を踏まえて、豪州、米国、英国およびドイツなど医療観光を起こしている国(患者が外部に出て行っている国)について、政府の公文書、医療機関や民間企業が発行する資料の収集・整理を行う。2012年5月26日にマレーシア学会で発表、また研究の総括的内容を共済総合研究に発表予定である。また、11月には、韓国の医療観光研究者と東京で情報交換を行う。さらに、共同研究者の近藤とともに真野がインドあるいは中国の調査を行う。そして、一年目の成果と総合して、ワークショップかシンポジウムを実施する。インド視察費用、その他海外視察費用、国内交通費、図書、通訳、研究協力者への謝金、専門的知識提供への謝金、会議費などに使用する予定である。
ヒートアイランド現象に対するポーラスアスファルト舗装の抑制効果

近年、都心部の気温がその周辺部に比べて高温になる、いわゆるヒートアイランド現象が問題となっている。ヒートアイランド現象が夜間に多く報告されることや、都市の乾燥化の原因になっていることを考えると、地表面を覆っている舗装の影響は決して無視することのできない要因となっている。そうした中、従来の密粒度アスファルト舗装に代わる舗装としてポーラスアスファルト舗装が注目されている。この舗装体は、連続した空隙を持つ多孔質な構造であるため雨水を速やかに透水するという特徴を持ち、また従来の密粒度アスファルト舗装に比べて間隙率が大きいため熱容量が小さいという性質もある。そこで本研究では、ポーラスアスファルト舗装の熱的特性を調べた上で、舗装が大気を加熱する熱量を算出し、密粒度アスファルト舗装と比べてどの程度の熱的な違いが現れるかを調べた。まず、ポーラスアスファルト混合物、密粒度アスファルト混合物、コンクリートについて、表面の色を種々に変えて、表面温度と赤外放射量の関係および気温と大気放射量の関係を調べたところ、各物質の違い、色の違いについては、はっきりした違いは現れないことがわかった。すなわち、大気への影響を考えると舗装の違いによる影響といったものは少なく、舗装体の温度を低くすることが赤外放射量を少なくすることにつながるといえる。また、地上の舗装を用いた観測による大気からの赤外放射量、室内実験による舗装表面の熱伝達率を風速の関数として定量化した。以上のようにして実験と観測から求めた混合物の種々の熱特性を用いて、舗装体の表面温度からの赤外放射量、顕熱輸送量を算出し、大気に吸収される熱量を求めた。その結果、昼間はポーラスアスファルト舗装からより多くの顕熱輸送があること、各舗装体からの赤外放射量にはそれほど変わった変化は見られないこと、その結果総合的に、ポーラスアスファルト舗装からは夜間より少ない熱量が放出されていることがわかった。これより、ポーラスアスファルト舗装を採用した場合、夜間のヒートアイランド現象の抑制にはつながることが期待できるといえる。ただし、ポーラスアスファルト舗装が大気の温度上昇をどの程度抑えることができるか、またその温度差が上昇気流を抑えることができるかといったことについては、今後さらに細かいデータを収集し、気象学的な研究を進める必要がある。
ポリアセチレンの荷電ソリトンと金属転移

Peierls歪みを持つ一次元電子格子系が格子上に置かれた不純物に対して安定であるかどうかは実験的理論的に未知の問題である。ポリアセチレンは基底状態としてPeierls歪みを持つ一次元電子格子系ポリアセチレンの格子上不純物に対する格子の安定性の問題は大変興味深いが、この系で格子上不純物を化学的に安定に作る事は困難で未だに調べられていない。現在考えられる唯一の方法はμ^-を用いる事でμ^ーはポリアセチレン格子上のCμ^ーC複合核を形成しμ^ーの寿命の間は格子上不純物Bとして作用する。この不純物の効果はμ^-スピン共鳴(μ^-SR)を通して調べる事ができる。μ^-SRは高エネルギー物理学研究所内東京大学中間子科学研究センターに於いて行った。共鳴周波数は約500MHzで測定温度域は室温から窒素温度までである。室温に於いてシス型ではμ^-SRはほぼ自由な位置に観測されたが、トランス型では低磁場側へ約150ppmシフトしている事が明らかとなった。このシフトの差は大変大きく通常の化学シフトの差として説明する事は困難である。一つの可能性としてμ^-ーC格子上不純物によりトランス型に於いてはPeierls歪みが不安定となり金属転移が生じたと考えればこのシフトを半定量的に説明する事ができる。更にこの考えを確認するためトランス型で認められたシフトの温度依存性を測定した。シフトは200K近傍を境として消滅する傾向が認められた。この振舞いは高温域で不安定となったPeierls歪みが低温域で再び安定となったと考えれば定性的には理解できる。本実験で得られた結果は応用上も重要で従来の電荷移動によるドーピング以外の方法に於いても高分子、特にPeierls歪みを持つ高分子を金属化させる事ができる可能性のある事を示唆している。
副甲状腺ホルモン関連ペプチドの小胞体膜透過制御機構

副甲状腺ホルモン関連ペプチド(PTHrP)は分泌経路によって輸送されるとともに、ある条件では核または核小体にも局在するというきわめて興味深い局在化の制御を受ける。本研究は、このタンパク質局在制御が分泌タンパク質の小胞体膜透過の過程で起こる可能性を証明し、その分子機構を解明する突破口とすることを目的として行った。この結果、以下の事を明らかにした。1.PTHrPのシグナル配列によるタンパク質の小胞体膜透過は通常の哺乳類分泌タンパク質のシグナル配列と同様にシグナル認識粒子に依存して小胞体膜に到達するものの、その後の膜透過機構は通常の翻訳に共役した機構ではなく、翻訳終了後に膜透過する。(投稿中)2.PTHrP前駆体の中間領域(35-87)とC-末端領域(107-141)の間に膜透過を制御する配列が存在する。これらの配列はタンパク質の小胞体膜透過を強く阻害すると同時に、翻訳に共役した膜透過に必須のリボソームと膜の間の結合を解離する。(投稿準備中)これらの知見はPTHrP前駆体が小胞体膜透過の過程で、細胞質に存在する核移行レセプター、リン酸化酵素あるいは細胞骨格の構成因子など、核へのタンパク質輸送にかかわる制御因子と相互作用して局在制御を受ける可能性を強く示唆している。PTHrPの局在や核および核小体での機能を制御する因子を検索する目的で、PTHrP前駆体を大腸菌に大量発現させ、非変性条件で精製する系を確立した。精製したタンパク質を用いて、サイトソル、小胞体膜および核の画分で相互作用する因子の検索を行った。この結果、いくつかの相互作用因子が発見された。現在、その同定と機能解析を行っている。これらの因子の一部はPTHrPの核移行レセプター結合部位が相互作用に必須であることから、両者の競合による輸送制御機構の存在が示唆される。副甲状腺ホルモン関連ペプチドの膜透過制御配列の同定無細胞タンパク合成系を用いた再構成実験、培養細胞発現系を用いた細胞分画実験および蛍光抗体法により、副甲状腺ホルモン関連ペプチド前駆体の中ほどとC-末端の2個所に膜透過制御配列が存在することを明らかにした。これらの膜透過制御配列は翻訳に共役した膜透過に必要な小胞体膜とリボソームの結合を解離させる機能をもつことを明らかにした。これらの配列はこれまでに膜透過制御があることが報告されているApoBタンパク質などの制御配列とはアミノ酸組成や一次構造上の共通点はなかった。また、核に輸送された副甲状腺関連ペプチドの融合タンパク質のうち、約半分はシグナルペプチドが切断されていた。この結果はこれまで考えられていなかった小胞体を経由した核へのタンパク質輸送経路が存在することを強く示唆する。これらの知見を投稿準備中である。副甲状腺ホルモン関連ペプチドのシグナルペプチドの機能解析無細胞タンパク合成系を用いた再構成実験により、副甲状腺ホルモン関連ペプチドのシグナルペプチドをもつ融合タンパク質は、シグナル認識粒子に依存して小胞体膜にターゲティングすること、翻訳に共役した膜透過に必須のプロテアーゼに耐性のリボソーム膜結合を形成しないこと、翻訳完了後に小胞体内腔への輸送が完了すること、融合するタンパク質を変えると膜透過の効率が変化することを明らかにした。これらの知見はシグナル認識粒子に依存したターゲティングと翻訳終了後の膜透過という新たな小胞体膜透過機構が存在することを示している。

本研究は、このタンパク質局在制御が分泌タンパク質の小胞体膜透過の過程で起こる可能性を証明し、その分子機構を解明する突破口とすることを目的として行った。この結果、以下の事を明らかにした。1.PTHrPのシグナル配列によるタンパク質の小胞体膜透過は通常の哺乳類分泌タンパク質のシグナル配列と同様にシグナル認識粒子に依存して小胞体膜に到達するものの、その後の膜透過機構は通常の翻訳に共役した機構ではなく、翻訳終了後に膜透過する。(投稿準備中)2.PTHrP前駆体の中間領域(35-87)、とC-末端領域(107-141)の間に膜透過を制御する配列が存在する。これらの配列はタンパク質の小胞体膜透過を強く阻害すると同時に、翻訳に共役した膜透過に必須のリボソームと膜の間の結合を解離する。(投稿準備中)これらの知見はPTHrP前駆体が小胞体膜透過の過程で、細胞質に存在する核移行レセプター、リン酸化酵素あるいは細胞骨格の構成因子など、核へのタンパク質輸送にかかわる制御因子と相互作用して局在制御を受ける可能性を強く示唆している。PTHrPの局在や核および核小体での機能を制御する因子を検索する目的で、PTHrP前駆体を大腸菌に大量発現させ、非変性条件で精製する系を確立した。精製したタンパク質を用いて、サイトソル、小胞体膜および核の画分で相互作用する因子の検索を行った。この結果、いくつかの相互作用因子が発見された。現在、その同定と機能解析を行っている。これらの因子の一部はPTHrPの核移行レセプター結合部位が相互作用に必須であることから、両者の競合による輸送制御機構の存在が示唆される。
自然言語処理システム,CORESによる文脈に適合した推論と予測の認知科学的検討

1.CORESの自然言語処理システムへの拡張(1)概念間の意味的関係を類似関係ノード,統語的関係を時間関係ノードとして表現し,関係自体にも属性や次に述べる活性度を持たせた.(2)人間に記憶容量があることを模してCORESの探索の範囲を限定するために,概念及び上記2種の関係ノードの活性度が,処理されるごとに,一定範囲内だけ,かつ,近傍ほど高くなるよう設定した.2.代名詞・省略語・予測処理の実現(1)代名詞曖昧代名詞を材料としたプライミング実験によって,代名詞の直後には語彙情報と近接性に基づいて一旦すべての候補が活性化され,文尾の動詞の後で正しい指示語だけが活性化されることが明らかとなった.そこでCORESに,まず語彙属性を結ぶ類似関係ノードと,時間的関係ノードの活性度によって,指示語の候補を上げ,動詞の後に動詞からの類似関係ノードをもとに候補を絞り込むという早期意味解析を行わせたところ,シミュレーションと実験結果はよく一致した.(2)省略語再認実験によって,まず統語的欠落によって省略部分が同定され,次にその部分に意味的に適切でかつ活性度の高い概念が補われることが明らかとなった.そこでCORESに,時間関係ノード,類似関係ノードと概念活性度を順次用いて概念を補完させたところ,実験結果を再現することができた.(3)予測プライミング実験によって助詞と先行概念の意味(文脈)が予測の促進要因となっていることが明らかとなった.そこで,助詞を介した時間関係ノードの活性度と類似関係ノードを伝播する概念活性度が総合的に最も高い概念をCORESに予測させた結果,実験結果を再現できた.以上,こうした認知科学的アプローチによって,これらの課題の人間の処理プロセスを明らかにできたと同時に,CORESを人間に極めて近い方法でこれらを解決することができる自然言語処理システムに発展させることができた.1.CORESの自然言語処理システムへの拡張(1)概念間の意味的関係を類似関係ノード,統語的関係を時間関係ノードとして表現し,関係自体にも属性や次に述べる活性度を持たせた.(2)人間に記憶容量があることを模してCORESの探索の範囲を限定するために,概念及び上記2種の関係ノードの活性度が,処理されるごとに,一定範囲内だけ,かつ,近傍ほど高くなるよう設定した.2.代名詞・省略語・予測処理の実現(1)代名詞曖昧代名詞を材料としたプライミング実験によって,代名詞の直後には語彙情報と近接性に基づいて一旦すべての候補が活性化され,文尾の動詞の後で正しい指示語だけが活性化されることが明らかとなった.そこでCORESに,まず語彙属性を結ぶ類似関係ノードと,時間的関係ノードの活性度によって,指示語の候補を上げ,動詞の後に動詞からの類似関係ノードをもとに候補を絞り込むという早期意味解析を行わせたところ,シミュレーションと実験結果はよく一致した.(2)省略語再認実験によって,まず統語的欠落によって省略部分が同定され,次にその部分に意味的に適切でかつ活性度の高い概念が補われることが明らかとなった.そこでCORESに,時間関係ノード,類似関係ノードと概念活性度を順次用いて概念を補完させたところ,実験結果を再現することができた.(3)予測プライミング実験によって助詞と先行概念の意味(文脈)が予測の促進要因となっていることが明らかとなった.そこで,助詞を介した時間関係ノードの活性度と類似関係ノードを伝播する概念活性度が総合的に最も高い概念をCORESに予測させた結果,実験結果を再現できた.以上,こうした認知科学的アプローチによって,これらの課題の人間の処理プロセスを明らかにできたと同時に,CORESを人間に極めて近い方法でこれらを解決することができる自然言語処理システムに発展させることができた.
吸血性節足動物の唾液腺に含まれる抗凝血因子の遺伝子工学的生産と抗血栓剤開発

(目的)吸血性昆虫のオオサシガメRhodnius prolixusの唾液腺由来の血液凝固阻害因子を精製し、性状を調べると共に、cDNAクローニングを行って、バキュロウイルス発現系により大量に生産して、その活性を明らかにして、抗血栓剤の素材となる分子を開発することを目的とした。(方法)オオサシガメの唾液腺抽出液を作製し、血液凝固時間APTTおよびPTの延長を指標に血液凝固因子の阻害因子を精製した。分子の性状を明らかにし、凝固阻害活性の特性を調べ、抗体を作製した。唾液腺のcDNAライブラリーを作製し、抗体によりcDNAスクリーニングを行った。cDNAをバキュロウイルスベクターに組み込み昆虫細胞で発現させた。組み替え体の精製を行い、活性を調べた。(成果)オオサシガメ唾液腺には内因系凝固のXase(IX因子,VIII因子,PL,CaのComplex),および共通系凝固のlla(トロンビン)の阻害因子を含むことを明らかにした。Xase阻害因子をProlixin-Sと命名し、その性状解析をおこない、Prolixin-Sは分子量20kDaのヘム蛋白質であること、Prolixin-Sは一酸化窒素NOを結合し、動物の血管平滑筋を弛緩する活性を併せ持つことを明らかにした。Prolixin-S cDNAをクローニングし、その塩基配列を明らかにした。Prolixin-S cDNAをBaculovirus発現ベクターAcNPVに組み込み、昆虫細胞Tn5に感染させて発現した。細胞の培養液から組み替え体recombinant(r)Prolixin-Sを大量に精製することに成功した。rProlixin-SはXase阻害活性を示した。rProlixin-Sは、hemineを結合して、ヘム蛋白質とし、これににNOガスを吹き込むことにより、NOを結合したrProlixin-Sを調整することができた。このものはウサギの血管平滑筋に作用させて弛緩させる活性のあることを確認した。NOは唾液腺内の条件(室温pH6.0)では強くProlixin-Sに結合し、動物の血管内の条件(37C,pH7.4)では解離放出することを吸収スペクトルの変化を調べることにより明らかにした。(結論)Prolixin-Sは抗凝固活性と血管弛緩活性を持つ特異な分子であることが分かった。オオサシガメは唾液腺からProlixin-Sを分泌し、動物血管に注入して、血液凝固を抑え、血管を拡張して血液を集めて吸いやすくしていることがわかった。また、Prolixin-Sを遺伝子工学的に大量に発現させ、NOを結合し保存することが可能であること、動物体内ではNOを直ちに放出して血管を弛緩することなどから、この分子は医薬品開発の素材となる優れた特性を備えていることが判明した。

今年度はオオサシガメ(Rhodnius prolixus)を用いて唾液腺の構造や構成するタンパク質の分析を先ず行った。唾液腺は赤色で発育ステージに伴って大きくなる。吸血の前後では腺の収縮が認められた。切片にして見ると一層の細胞層からなる袋状の構造で内部に赤色の唾液が満たされていた。唾液腺抽出液を作製し電気泳動(SDS-PAGE)に依って構成するタンパク質について検索したところ,大部分のタンパク質バンドはいずれのステージでも観察されたが,我々がRpSG-Iと名付けたタンパク質バンドだけは,4令期と5令未吸血の時期には存在せず,5令幼虫が吸血して成虫分化を開始するのに対応して出現し,増加する。RpSG-Iは赤い色素を結合している。現在RpSG-Iの性状や活性について検討している。次に,唾液腺粗抽出液のもつ動物血液に対する凝固阻害活性について牛の血液を用いて調べた。サシガメの唾液腺一匹分の抽出液は約200ulの牛血液の凝固を完全に阻害することがわっかった。血液凝固阻害活性(clootting timeの延長)を指標にして,血液凝固阻害物質の精製を試みた。HPLCによりゲル濾過と陰イオン交換及び逆相クロマトグラフィーを行い,電気泳動的に一本のバンドになるまで精製することに成功した。このタンパク質バンドをRpSG-IIと命名した。現在,RpSG-IIの性状と血液凝固系のどの因子の阻害をするかについて検討している。また,今後の解析やスクリーニングに必要なpolyclonal及びmonoclonal抗体の作製をRpSG-I及びRpSG-IIの両者について行っている。また,これらのタンパク質のcDNAクローニングを行うため,唾液腺からのRNAの抽出及びcDNAライブラリーの作製を行っている。(目的)オオサシガメRhodniusprolixusの唾液腺から血液凝固阻害因子を精製し,そのcDNAクローニングを行い構造と活性特性を解析し,baculovirus系により発現する。(方法)オオサシガメ唾液腺の血液凝固阻害因子を,ガラス管内での血漿凝固時間の延長活性を指標にして,ゲル濾過およびイオン交換クロマトグラフィーにより,SDS-PAGEおよび逆相クロマトグラフィーで単一になるまで精製した。未吸血成虫の唾液腺から抽出したRNAを用いて調製したcDNAを発現ベクターgt11に組み込んでcDNAライブラリーを作製した。精製因子に対する抗体を作製し,cDNAライブラリーからこの因子のcDNAをクローニングし,その塩基配列を決定した。又cDNAをAcNPVに組み込んで昆虫細胞で発現させた。(成績)精製された本因子は赤色を呈し,400nmに特異的な吸収ピークを持つことから,ヘムタンパク質であることが判明した。精製された因子のAPTTおよびPTに及ぼす影響を検討した結果,APTTのみを特異的に延長したことから,この因子は内因系凝固阻害因子であることが明らかになった。更に活性について検討を行い,この因子が内因系lXa-Vllla-Ca-PL複合体によるX因子の活性化を阻害することを明らかにした。