hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
医療用放射線トラック解析へ向けた生体内分子の電子衝突断面積の決定

放射線照射による生体細胞の損傷をミクロなエネルギー付与の観点から調べるには、電子の輸送過程を知ることが重要である。本研究では、生体構成分子の気相における電子衝突過程を電子スオーム実験によって調べる一方、細胞モデル中で電子線トラック解析を行った。電離係数や移動速度等のマクロパラメータをメタンやベンゼン等のガス中で実測し、分子構造を反映する特徴を見出した。また、電子線が起こす電離や励起の空間分布に関する知見を得た。本研究は、放射線照射による生体細胞の損傷をミクロなエネルギー付与の観点から調べることのできる電子線トラック解析に必要な生体構成分子の電子衝突断面積を、電子スオーム法によって決定するためのfeasibility studyを行うことを目的としている。電子スオーム法では、2重シャッター電極を用いた電子到着時間分布(ATS:Arrival-Time Spectra)法により、電離係数などのマクロパラメータ(スオームパラメータ)を実験的に測定する一方、この測定に対応した電子群のシミュレーション解析にてパラメータを算出し、両者の巨視的量の比較から微視的な電子衝突断面積の推定を行う。初年度として、新しい実験装置の構築と、電子衝突断面積が比較的よく知られているガス(生体組織等価ガス)の断面積データとパラメータ計算コードの整備に焦点が当てられた。本年度における実施内容を以下に列挙する。(1)新しい真空チャンバによるスオーム実験に備えたATS装置の構築を開始し、全系が完成しつつある。(2)既存の装置を用いて、メタンガスにおけるスオームパラメータを測定し、国内学会にて報告した。一方、メタン中でのパラメータ計算へ向けて、フーリエ変換型ボルツマン方程式による解析コードを現在も整備中である。(3)生体組織の中で最も重要な水(分子)に対し、水蒸気中でのスオーム実験と液相水での電子線トラック解析を行った成果が、それぞれ英文論文誌に掲載された。(4)モンテカルロ法を用いて計算する際のクラスタPCによる高速演算処理に関する国際学会発表が、論文誌に掲載された。本研究は、放射線照射による生体細胞の損傷をミクロなエネルギー付与の観点から調べることのできる電子線トラック解析に必要な生体構成分子の電子衝突断面積を、電子スオーム法によって決定するためのfeasibiHty studyを行うことを目的としている。電子スオーム法では、二重シャッタ電極を用いた電子到着時間分布(ATS : Arrival-Time Spectra)法を基本として、電離係数などのマクロパラメータ(スオームパラメータ)を実験的に測定する一方、この測定に対応した電子群のシミュレーション解析にてパラメータを算出する。また、生体物質中での電子線の飛跡解析を行ない、エネルギー付与過程を定量化する。今年度は、構築した実験系によって、スオームのタイムオブフライト(TOF)観測をこの分野で初めて実現した。また、水中電子線トラックシミュレーションによって、電離や励起事象が空間的に凝集して起こる現象を定量的に解析した。(1)新しい真空チャンバ内二重シャッタ電極の移動観測によって、メタンガス中にて電子スオーム重心の移動速度を実験的に決定し、フーリエ変換型ボルツマン方程式による解析結果と比較したところ、よい一致が確認された。この成果を、J. Appl. Phys.誌へ投稿して、現在minor revisionsに対する改訂の結果を待っている状態である。本研究は、放射線照射によって生体組織中に多数発生する電子線のトラック解析に必要な、生体構成分子の電子衝突過程を、電子スオーム解析によって明らかにすることを目的としている。生体物質中での電子線の飛跡解析に資する情報を得るため、今年度は、細胞を構成する基本分子に類似した分子として、ベンゼン(C_6H_6)やトルエン(C_6H_5CH_3)、エタノール(C_2H_5OH)を採り上げ、それらガス中のパラメータを求めた。これにより、環状構造を有するベンゼンが、DNAやRNAを構成する類似分子にかなり近い電子衝突特性を有することが示唆された。また、付加的に、生体適合材料の表面処理や半導体ドライエッチング用のガスとして広く用いられているCF_4(オゾン層破壊をもたらす特定フロンガス)の代替となりうるCF_3Iガス中での測定も行った。一方、電子線トラックのマクロな挙動に着目し,トラックが生体細胞中の核を通過する頻度から細胞死をもたらす確率を推定するモデルを立て、放射線量に対する細胞生存率曲線の公式を導いた。本年度における成果を以下に列挙する。(1)ベンゼン、トルエン、エタノール中で電離係数やドリフト速度を測定した結果、ベンゼンのような環状分子では、比較的低電界の条件にて電離係数が顕著に小さくなる特徴を示すことが明らかとなった。なお、昨年度測定したメタンについての成果は、J.Appl.Phys..誌で公開された。(2)CF_4の代替ガスとなりうる可能性を有したCF_3Iガスの特性を調べ、その成果がAppl.Phys.Lett.誌に掲載された。

(3)水中電子線トラック解析を、種々の初期電子エネルギーに対して行い、電離・励起が凝集して起こる過程をAI(aggregation index)という指標で評価すると共に、細胞核を通過するトラックによって細胞死に至る確率モデルを提唱し、国際会議にて報告した。
4年間に渡る本研究は大きく4フェーズから構成される:フェーズI[2019年度前半]:リダイレクション研究開発の状況調査フェーズII[2019年度後半2020年度]:(課題A)簡易裸眼立体視における両眼視差の相殺によるアナモルフォシスの先鋭化フェーズIII[2021年度2022年度前半]:(課題B)ヘッドマウントディスプレイ装着時のVR酔いの緩和フェーズIV[2022年度後半]立体視関連の他問題への展開可能性の模索と総括4年間に渡る本研究は大きく4フェーズから構成される:フェーズI[2019年度前半]:リダイレクション研究開発の状況調査フェーズII[2019年度後半2020年度]:(課題A)簡易裸眼立体視における両眼視差の相殺によるアナモルフォシスの先鋭化フェーズIII[2021年度2022年度前半]:(課題B)ヘッドマウントディスプレイ装着時のVR酔いの緩和フェーズIV[2022年度後半]立体視関連の他問題への展開可能性の模索と総括
アジア系アメリカ演劇におけるアメラジアン（混血）性の研究

本研究の主たる目的は、アメリカにおける混血人種の研究史を踏まえた上で、20世紀および21世紀のアジア系アメリカ演劇およびアメリカ演劇史全般における「アメラジアン」(アジア人とアメリカ人の混血)の要素を考察し、アジア系、エスニックおよびマイノリティのアメリカ演劇の再定義を行うことである。2018年度は、主たる研究内容として、みずからを「アメラジアン」の劇作家と宣言するベリナ・ハス・ヒューストン(1957- )の戯曲研究を行った。主な研究実績としては、2018年度6月に日本演劇学会大会において、「ベリナ・ハス・ヒューストンの戯曲にみる多文化多人種の象徴としての「茶」の役割」という題目で研究発表を行い、ヒューストンのTea(1984)およびA Spot of Bother (2015)における多文化多人種の象徴としての茶の劇的要素について考察した。その議論において、A Spot of Botherは、混血人種と未婚の母への偏見を乗り越えて自立の道を切り開く母娘の連帯を描き、Teaは二重のマイノリティとして偏見に耐える戦争花嫁の苦悩と闘いを描く作品であることを分析したうえで、混血人種をポジティブに捉え、そのハイブリディティの可能性を開拓するヒューストンの両戯曲は、アジア系アメリカ演劇の流れを変える力を持っているという結論を導き出した。さらに、2018年度には、英米文化学会の分科会である「アジアパシフィックの劇場文化分科会」にメンバーとして加わり、アメリカ西海岸およびハワイの劇場文化についての研究を進めてきている。本分科会においては、2018年9月の英米文化学会大会において、1971年の設立以来、ハワイの「ローカル演劇」の上演を積極的に進めてきたKumu Kahua Theatreの歴史と意義、および本劇団から誕生したEdward Sakamotoの功績について発表を行った。研究計画書において主たる研究内容として掲げたベリナ・ハス・ヒューストンの戯曲研究については、2018年6月の研究発表において、ある一定の成果をまとめることができた。ヒューストンは、その代表作Teaにおいて、戦争花嫁たちの内的葛藤を象徴する劇的要素として日本茶を用いている。穏やかな癒しの時間を与える茶はしかし、提供までに時間と神経を使い、湯の温度や茶葉の量で微妙な味の違いを生み出すことから、戦争花嫁たちの人生における波風を内包し、「動揺を呼び起こす」要素と描写される。一方、A Spot of Botherにおいては、混血の主人公マナーリとインドからイギリスへ移住した母親の連帯を「紅茶」が象徴する。母親アーシャの経営する紅茶店は、マナーリがみずからの混血性を受け入れる舞台であり、母娘が「アジア系女性」としてイギリスで「生き残る」手段であり、彼女らの自立への道筋を示すものである。茶葉から一杯のミルクティーを、手間をかけて準備する過程は、ある国から別の国へと移住し、別の人種と結びつき、混血人種が生まれ育ってゆく過程と重なる。茶の味は見た目には明確ではないが、抽出時間やブレンドの比率で大きく変化するものであり、イギリスにおける紅茶の文化を見直すことは、多文化多人種の社会を再考することにもつながる。以上の点から、ヒューストンの戯曲における多文化多人種の象徴としての「茶」の劇的要素について考察を試みた。また、ヒューストンが提唱する「エスニック演劇」および演劇における実験性との関連から、2018年度は、ハワイにおけるローカル演劇についての研究を進めているところである。本年度は主に、ハワイのKumu Kahua Theatreから活躍を始め、ハワイローカル演劇の流れをアメリカ本土にまで広めた功績のあるエドワード・サカモトの戯曲を研究し、英米文化学会の分科会において2度研究発表を行った。今後の研究においては、引き続き、ベリナ・ハス・ヒューストンが描く「場所」と人種の問題を考察する予定である。ヒューストンは、アメリカへの移住前の日本人家族、アメリカに住む戦争花嫁、異人種夫婦の妻および混血女性をその戯曲の主人公として描いてきた。また、比較的最近の戯曲であるA Spot of Botherに描かれるように、彼女の戯曲においては、アメリカは、男性の逃亡と家族からの離脱という意味において断続性を表すことがある。以上のような観点から本研究では、ヒューストンが描くアメリカ、イギリス、日本という「場所」と人種性の関連を探ることとする。さらに、「場所」(ローカリティ)という観点から、ヒューストンの戯曲とハワイのローカル演劇の比較を行うことも計画している。本研究においてはさらに、ヒューストンと日本の関係についても調査を進める計画である。彼女の戯曲においては、たとえばTea, Kokoro (1994), Calling Aphrodite (2003), Calligraphy (2010)のように、日本を舞台にしたものや日本の伝統、慣習を題材にした作品が多くみられる。そのために、アジア系およびアメラジアンの劇作家の戯曲が多く上演されるニューヨークやアメリカ西海岸の劇場の調査、劇作家本人へのインタビューなどを行い、アメラジアンの劇作家の戯曲上演における問題点や今後の課題について調査を進める。さらに、両劇作家を日本へ招聘し、公開講演会、シンポジウムを行う計画をしている。応募者が事務局長を務めるアジア系アメリカ文学研究会を通じて、劇作家本人との招聘の方法は検討済みであり、企画に関わることができる学会員も多数在籍している。本研究の成果は、日本アメリカ演劇学会、日本演劇学会、アジア系アメリカ文学研究会などにおいて研究発表を行い、成果を論文にまとめて各学会誌に投稿する予定である。

2018年度は、主たる研究内容として、みずからを「アメラジアン」の劇作家と宣言するベリナ・ハス・ヒューストン(1957- )の戯曲研究を行った。主な研究実績としては、2018年度6月に日本演劇学会大会において、「ベリナ・ハス・ヒューストンの戯曲にみる多文化多人種の象徴としての「茶」の役割」という題目で研究発表を行い、ヒューストンのTea(1984)およびA Spot of Bother (2015)における多文化多人種の象徴としての茶の劇的要素について考察した。その議論において、A Spot of Botherは、混血人種と未婚の母への偏見を乗り越えて自立の道を切り開く母娘の連帯を描き、Teaは二重のマイノリティとして偏見に耐える戦争花嫁の苦悩と闘いを描く作品であることを分析したうえで、混血人種をポジティブに捉え、そのハイブリディティの可能性を開拓するヒューストンの両戯曲は、アジア系アメリカ演劇の流れを変える力を持っているという結論を導き出した。さらに、2018年度には、英米文化学会の分科会である「アジアパシフィックの劇場文化分科会」にメンバーとして加わり、アメリカ西海岸およびハワイの劇場文化についての研究を進めてきている。本分科会においては、2018年9月の英米文化学会大会において、1971年の設立以来、ハワイの「ローカル演劇」の上演を積極的に進めてきたKumu Kahua Theatreの歴史と意義、および本劇団から誕生したEdward Sakamotoの功績について発表を行った。研究計画書において主たる研究内容として掲げたベリナ・ハス・ヒューストンの戯曲研究については、2018年6月の研究発表において、ある一定の成果をまとめることができた。ヒューストンは、その代表作Teaにおいて、戦争花嫁たちの内的葛藤を象徴する劇的要素として日本茶を用いている。穏やかな癒しの時間を与える茶はしかし、提供までに時間と神経を使い、湯の温度や茶葉の量で微妙な味の違いを生み出すことから、戦争花嫁たちの人生における波風を内包し、「動揺を呼び起こす」要素と描写される。一方、A Spot of Botherにおいては、混血の主人公マナーリとインドからイギリスへ移住した母親の連帯を「紅茶」が象徴する。母親アーシャの経営する紅茶店は、マナーリがみずからの混血性を受け入れる舞台であり、母娘が「アジア系女性」としてイギリスで「生き残る」手段であり、彼女らの自立への道筋を示すものである。茶葉から一杯のミルクティーを、手間をかけて準備する過程は、ある国から別の国へと移住し、別の人種と結びつき、混血人種が生まれ育ってゆく過程と重なる。茶の味は見た目には明確ではないが、抽出時間やブレンドの比率で大きく変化するものであり、イギリスにおける紅茶の文化を見直すことは、多文化多人種の社会を再考することにもつながる。以上の点から、ヒューストンの戯曲における多文化多人種の象徴としての「茶」の劇的要素について考察を試みた。
動物行動研究における長期終日実験の研究意義に関する総合的検索

従来動物や人間を被験体とした実験心理学的研究は、そおほとんどが1日のある時間帯だけ被験体を抱束することによって行なわれてきた。この方法にはいくつかの問題点があるという視点に立ち、本研究では1日24時間の連続実験の結果から従来の短期実験の結果を見直し、長期終日実験の意義を行動生態学的・行動経済学的アプローチ、時間生物学的アプローチ及び行動薬理学的アプローチから検討した。生体のさまざまな行動の発現は、その前後数日にわたる生体と環境とのかかわりによって大きく影響を受けることが行動経済学的、行動生態学的長期実験及び観察から指摘された。特に短期実験では摂食行動に関する重要な独立変数や従属変数を欠いていたために長期実験とは異なる結果がもたらされたことが示唆された。また、ストレス場面への個体の適応行動に関しては、両実験間で全く相反する事実が見出された。ストレス刺激の到来の予測が不可能な条件では短期実験の場合に嫌悪性が大きく、予測可能な条件では逆に長期実験の場合に嫌悪性とその残存効果が大きいという知見が得られ、両実験がもたらす生体の動機づけの違いが指摘された。時間生物学的観点からは、生体は概日リズムをもち、そのリズムは動物の行動活性に大きな影響をもつために時間帯によって行動の発現様態が異なり、従って一定時間帯による行動研究からでは包括的、普遍的行動理解につながらないことが指摘された。また、摂食可能時間や昼・夜の時間の長短が行動研究における重要な独立変数になることが実験的に示された。行動薬理学的アプローチでは、薬物の自己投与行動は24時間の長期観察によって始めて薬物の長期効果や依存性、精神毒性などの全体像がとらえられること、また、メチル水銀を用いた行動中毒学的動物実験からも終日実験特有の行動上の測度が得られた従来動物や人間を被験体とした実験心理学的研究は、そおほとんどが1日のある時間帯だけ被験体を抱束することによって行なわれてきた。行動薬理学的アプローチでは、薬物の自己投与行動は24時間の長期観察によって始めて薬物の長期効果や依存性、精神毒性などの全体像がとらえられること、また、メチル水銀を用いた行動中毒学的動物実験からも終日実験特有の行動上の測度が得られた本年度の研究実施計画通りに第1回の研究集会を62年11月に2日間広島において,第2回の研究集会を63年2月に3日間神戸において各研究分担者による研究計画や実施状況,それまでの研究成果等について情報交換及び討論を行なった.本研究の主目的は,從来の実験心理学における研究のほとんどが1日の特定の時間帶に被験対象を抱束して行なっていたことに対する見直しを迫る.つまり1日24時間連続実験によるデータと從来の短時間実験のデータとの比較やその意義を検討することである.そのために,行動の生態学的,時間生物学的,行動薬理学的アプローチを行なっている研究者8名が研究分担者となっている.第1回の研究集会では,各アプローチ領域における長期の実験環境の制御,研究手法,データの分析システム等を中心に情報交換を行ない,合担者相互に実り多い知見を得た.例えば,1台のマイコンで複数の実験を同時に走らせる自主開発プログラムの提示や,摂食行動をその持続時間によって食亊とみなすデータ処理によって行動分析に新たな視点をもたうしうる等,今後の研究推進に多くの利得をもたらした.第2回の研究集会では各アプローチ領域におけるそれまでの研究成果について発表と討論を行なった.焦点の1つはストレス場面における個体の環境適応に関するものであり,長期実験と短期実験との間に相反する亊実が見出された.つまりストレス刺激の到来予測が不可能な条件では短期実験の場合にその嫌悪性が大きく,予測可能な条件では長期実験の場合に嫌悪性と残存効果が大きいという知見が得られ,その意味について長期と短期実験がもたらす生体の動機づけの遠い等が活発に議論された.その他信サルの薬物摂取行動やラットのメチル水銀投与下での食物摂取行動の長期実験について発表と討論が行なわれた.

今後,これらの知見をもとに研究を推進し,63年秋に拡大研究会を実施することを計画した.昨年度の2回にわたる研究集会の討論にもとづいて、各研究分担者がそれぞれの主テーマについて実験的研究を行ない、最後に本研究のしめくくりとして昭和63年1月に公開研究発表会を名古屋地区において行なった。なお、この研究発表会には研究分担者以外の研究者にも発表を依頼し、本研究課題の総合的検討を行なった。本年度の研究の中心テーマは行動経済学的・生態学的観点から、又時間生物学的観点から、従来の短期行動研究を見直そうというものであり、前者では行動経済学が提唱する封鎖経済的及び開放経済的実験環境と行動新理学における短期実験及び長期実験との比較検討が行なわれた。この中で特に問題となったのは、従来の心理学における学習実験が絶食ー給食事態の実験パラダイムでなされてきたことにより、重要な独立変数や従属変数を見失なっていたことが指摘された。これらの変数は主に採餌行動に関するものであり、行動生態学で扱っている野外における採餌行動の理論化につながることが示唆された。時間生物学的観点からは、摂食可能時間や明、暗という一般活動性を制御する時間が行動研究のおける重要な独立変数となることが実験的に示され、そこから新たな従属変数である予期的摂食行動の重要性が指摘された。さらに、終日実験は被験体の体重統制を行なわないという利点があり、このことは、従来の短期実験が生体を飢餓や渇という一種のストレス下に置いたことによって終日実験とは異なる事実が見出されたことが強く示唆された。以上、動物の行動研究における短期実験の欠点とそこから展開される諸理論の問題点が、さまざまな観点から、又終日実験の研究結果から指摘され、これらの詳細な内容を昭和62年度の研究も含めて研究成果報告書にまとめた。
価値判断能力の育成を目指したエネルギー環境学習プログラムの開発

○研究目的米国のエネルギー概念導入の方略をベースに,中学3年生を対象としたエネルギーの利用に価値観を育成する環境教育プログラムを開発,試行する。さらに,プレ・ポストテストを実施し,本プログラムの有効性を検証することを目的とする。○研究方法・米国及び諸外国のエネルギー概念導入の特質の分析を行い,これらを基礎とした学習プログラムを開発する。・試行授業を実施し,生徒の変容をアンケート調査等により評価し,授業の有効性を検証する。○研究成果米国及び英国の初等・中等教育段階の理科教科書の分析を行った。米国では、初等教育段階からエネルギー概念を導入し、その後スパイラルに知識を深めるという構造をとっていることが明らかになった。英国のナショナル・カリキュラムでは,エネルギーの移動という概念を中心に据えた学習について明記していることが明らかになった。また,エネルギーの利用に関する価値判断能力の育成という観点では,米国のNEEDプロジェクトによるトレードオフ教材が有効であると判断するに至った。・上記の教材に基いた2時間のエネルギー利用に関する学習プログラムを開発し,中学校理科の3年生の単元「科学技術と人間」終了後,試行授業を行った(対象生徒:2クラス61名)。1時間目には生徒各自でパソコンによる様々な発電所を設置した場合の発電量のシミュレーションを行い,2時間目には班毎さらに学級全体での発表を行い,話し合い活動を行った。アンケート調査によると,シミュレーションや話し合い活動を通して,エネルギー資源の問題を身近に感じ,互いの価値観を学び,持続可能な発展を目指す社会を作るために今後どのようにすべきかを具体的に考えることができたという肯定的な意見をもつことができたと回答した生徒が多かった。これらの点から,今回の学習プログラムは生徒のエネルギーに関する価値判断能力の育成に効果があったと言える。今後の課題として,生徒の話し合いをより良く行うために授業案を改善していきたい。
ビニルリン化合物を用いる新しい有機合成反応の開拓

本年度は、新規α-ホスホノビニルノナフラートの合成研究を行ない、またそれを用いた置換ビニルホスホナートの簡便合成について検討を行った。昨年度開発した、α-ホスホノビニルトリフラートの合成における問題点として、トリフルオロメタンスルホン酸無水物の求電子性が非常に高いことが挙げられる。そのため、用いる塩基や溶媒に制限が生じ、収率向上は困難であると考えた。そこでこの問題点を解決するため、より温和な反応剤であるパーフルオロブタンスルホニルフルオライド(Nf-F)を用いることを考えた。種々検討の結果、α-ケトホスホナートにDBUとNf-Fを作用させたところ、良好な収率でα-ホスホノビニルノナフラートを得ることに成功した。α-ホスホノビニルノナフラートは脱離能の高いNfO基を有していることから、α-ホスホノビニルカチオン等価体と考えられる。そこで、Pd存在下、アセチレンとのカップリング反応を試みた。その結果、いずれの場合も良好な収率で目的とするホスホノエンインの合成が行えることがわかった。また、ビニルスズとの反応も試みたところホスホノジエン化合物が得られた。また、α-ホスホノビニルノナフラートにスタンニル銅試薬を作用させ、リンのα位にSnを導入することを試みた。種々検討を行った結果、THF溶媒中0°Cで調整したスタンニル銅試薬をα-ホスホノビニルノナフラートに対して2当量反応をさせたところα-スタンニルビニルホスホナートが良好な収率で得られた。このようなα-スタンニルビニルホスホナートは新規化合物であるだけでなく新たな反応性が期待できる。そこでPd触媒存在下、α-スタンニルビニルホスホナートと酸クロライドを反応を試みたところ、良好な収率で、α-ケトビニルホスホナートが得られることを見いだした。ビニルトリフラートは、脱離能の高いトリフルオロメタンスルホニル基を有することから、ビニルカチオンやビニリデンカルベンの前駆体となることが知られており、遷移金属触媒を用いたクロスカップリング反応等においては、極めて有用な反応剤となっている。一方、ビニルホスホナ-トは、良好な親電子剤として活用されており複素環骨格合成における合成中間体として広く利用されている。この両者を組み合わせたα-ホスホノビニルトリフラートはトリフラートとホスホナ-トの両性質を有することから、新しい有機合成反応剤として活用が期待できる。まずはじめに、すでに知られているケトンからのビニルトリフラートの合成手法にならい、アシルホスホナ-トとTriflating agentとの反応によりα-ホスホノビニルトリフラートの合成を試みた。アシルホスホナ-トは、種々の酸クロリドと亜リン酸エステルとのArbuzov反応により容易に合成できる。条件検討の結果、塩基としてリチウムヘキサメチルジシラジドを、Triflating agentとしてTf_2Oを用いたときに最高33%の収率でα-ホスホノビニルトリフラートを合成することに成功した。しかしながら未だ満足のいく収率が得られていない。この原因として原料であるアシルホスホナ-トが不安定であることが考えられる。そこで、より安定で取扱の容易なホスホノエポキシドを原料に用いることを考えた。その検討に先立ち、ケトエポキシドとTrif1ating agentとの反応をモデルとして検討を行ったその結果、エーテル溶媒中、Tf_2Oを用い0°Cで反応を行ったところ、78%という良好な収率で、ビニルトリフラートの合成に成功した。現在同条件下、α-ケトビニルホスホナ-トを用いα-ホスホノビニルトリフラートの合成について検討を行っている。

そこでPd触媒存在下、α-スタンニルビニルホスホナートと酸クロライドを反応を試みたところ、良好な収率で、α-ケトビニルホスホナートが得られることを見いだした。
サル前頭前野における行動的意味の階層的情報処理の研究

複合視覚刺激を使ったgo/nogoタイプの選択的注意課題を遂行中のニホンザルの前頭前野から、単一ニューロンの活動を記録した。この課題では、複合視覚刺激の色に注目してgo/nogo反応を行う条件と、動きに注目する条件とからなる。昨年までの研究から、この課題遂行中のサルの前頭前野のニューロンには、特定の視覚次元に注目しているときにのみ、go刺激とnogo刺激に対して異なった応答を示すもの(色go/nogoニューロンと動きgo/nogoニューロン)と、注目する次元にかかわらず、go/nogo刺激にdifferntialな応答をするもの(色&動きgo/nogoニューロン)があることがわかっている。今年度は、前頭前野内の行動的意味の形成に関わるメカニズムについて調べるために、これら2つのタイプのgo/nogoニューロン(色go/nogoニューロンと色&動きgo/nogoニューロン)の前頭前野内での分布・ニューロン応答の性質を比較検討した。色go/nogoニューロンが集中的に記録されたのは、側頭連合野と密接な線維連絡を持つ主溝より下側の領域(46野の腹側部と12野)であり、色&動きgo/nogoニューロンが記録されたのは、主に、前頭前野からの出力領域と考えられている弓状溝領域と弓状溝周辺の運動前野からであった。刺激に対する応答の潜時は、有意に色go/nogoニューロン(109ms)の方が、色&動きgo/nogoニューロン(248ms)より短かった。一部のニューロンについては、刺激を記録半球と同側に呈示した場合と反対側に呈示した場合の応答の比較を行った。その結果、色go/nogoニューロンの約7割(特に反対側)が、一方の視野に呈示された刺激に対してのみdifferentialな応答を示したのに対し、色&動きgo/nogoニューロンの8割は、どちらの視野に呈示された刺激に対しても同様にdifferentialであった。以上の結果から、前頭前野における行動的意味の情報処理は、階層構造を持つことが示唆された。
大型宇宙構造物に対する分散制御理論

宇宙構造物の振動抑制と姿勢制御を,制御対象のモデル誤差の存在のもとで,サブシステムごとの分散制御によって有効に行なう方法に関連して,以下の成果が得られた.1.センサーとアクチュエータが同位置・同方向に配置された宇宙構造物を対象としたロバスト安定化のためには対称なコントローラが優れていることを明らかにした.そして,ばねとダンパーで結合された大型宇宙構造物に対してサブシステムごとに対称なコントローラを分散適用することの有効性を示した.2.大規模システムのサブシステムごとの分散出力フィードバックによるH_∞制御法を提案した.そして,2次安定性の概念に基づくロバスト安定化法を開発した.3.構造物の設計にH_∞制御による外乱抑制を反映させる統合設計について,状態フィードバック制御による方法と出力フィードバック制御による方法を開発した.そして,設計目的によって,それらの性能が同一である場合と異なる場合があることを明らかにした.4.柔軟な太陽電池パドルをもつ人工衛星のモデリングと振動抑制制御法を提案し,モデルの不確かさや設計段階における低次元モデルの使用に対処する方法を開発した.5.宇宙構造の動作状態の変化に対応する安定化制御法として,複数の基準モデルに対する安定化制御器を補間することを提案し,その有効性と限界を明らかにした.6.非線形システムの平衡状態の変化まで考慮に入れたロバスト安定性であるパラメトリック安定性をル-リエ系と呼ばれる非線形フィードバックシステムについて考察し,解析法と安定条件を与えた.宇宙構造物の振動抑制と姿勢制御を,制御対象のモデル誤差の存在のもとで,サブシステムごとの分散制御によって有効に行なう方法に関連して,以下の成果が得られた.1.センサーとアクチュエータが同位置・同方向に配置された宇宙構造物を対象としたロバスト安定化のためには対称なコントローラが優れていることを明らかにした.そして,ばねとダンパーで結合された大型宇宙構造物に対してサブシステムごとに対称なコントローラを分散適用することの有効性を示した.2.大規模システムのサブシステムごとの分散出力フィードバックによるH_∞制御法を提案した.そして,2次安定性の概念に基づくロバスト安定化法を開発した.3.構造物の設計にH_∞制御による外乱抑制を反映させる統合設計について,状態フィードバック制御による方法と出力フィードバック制御による方法を開発した.そして,設計目的によって,それらの性能が同一である場合と異なる場合があることを明らかにした.4.柔軟な太陽電池パドルをもつ人工衛星のモデリングと振動抑制制御法を提案し,モデルの不確かさや設計段階における低次元モデルの使用に対処する方法を開発した.5.宇宙構造の動作状態の変化に対応する安定化制御法として,複数の基準モデルに対する安定化制御器を補間することを提案し,その有効性と限界を明らかにした.6.非線形システムの平衡状態の変化まで考慮に入れたロバスト安定性であるパラメトリック安定性をル-リエ系と呼ばれる非線形フィードバックシステムについて考察し,解析法と安定条件を与えた.理論面では,まず,センサーとアクチュエータのコロケーションによって保証される宇宙構造物の対称性に注目して,制御系のロバスト安定性のためには,対称でないコントローラより対称なコントローラが優れていることを示した.そして,単なる安定化以上の制御仕様を達成するLQ制御,H_2制御,H_∞制御などのコントローラとして,対称なものが得られるためには,仕様も対称であることが必要であることを示した.また,力学系としての構造物の設計に制御に要する費用の低減を反映させる統合設計の1つの方法を提案した.なお,この種の統合設計問題においては,通常,その最適化のための計算量が膨大であるが,本研究では,収束の速いアルゴリズムを作成した.応用面では,柔軟な腕を複数もつ宇宙ロボットのモデリングを行い,作業のための腕の動作がロボットの姿勢に与える影響を抑えた制御法を提案した.また,太陽電池パドルのモデリングと振動抑制のためのセンサー配置について知見を得た.以上の研究を通して,宇宙構造物のモデリングの手法として,偏微分方程式に基づく方法と有限要素法に基づく方法の適性を把握することができ,有益であった.まず,センサーとアクチュエータが同位置・同方向に配置された宇宙構造物の対称性に注目して昨年度に得た,制御系のロバスト安定性のためには対称なコントローラが優れているという結果を,本年度はばねとダンパーで結合された大型宇宙構造物に対して拡張した.この結果は,従来のDVDFB制御(Direct Velocity and Displacement Feedback)による効果を動的フィードバックの場合に拡張したものである.つぎに,力学系としての構造物の設計にH_∞制御による外乱制御を反映させる統合設計の方法を提案した.この統合設計問題については,昨年度,状態フィードバック制御による方法を与えたが,本年度は出力フィードバックによる方法を開発した.対処すべき初期外力がわかっている場合,状態フィードバックと同じ制御性能が得られることが明らかになった.また,初期外力がわかっていない場合については,状態フィードバックとは制御性能が異なることを示し,そのなかで性能のよいものを設計する指針を与えた.このほかに,柔軟な腕をもつ宇宙ロボットのモデリングと振動抑制制御法を提案した.また,宇宙構造物の動作状態の変化に対応するロバスト安定化法,大規模システムのサブシステムごとの分散出力フィードバックによるロバスト安定化法,非線形システムの平衡状態の変化まで考慮に入れたロバスト安定性の解析法,ディスクリプタ表現されたシステムの最適制御,モデル追従型の2自由度サーボ系の設計法などを開発した.以上の研究を通して,宇宙構造物の振動抑制と姿勢制御を,制御対象のモデル誤差の存在のもとで有効に行なう方法について有益な知見を得ることができた.
線虫生殖巣の形態形成を制御するフィビュリンー1のサプレッサー解析

線虫生殖巣のU字型の形態は、生殖巣原基の両端に1つずつ存在するリーダー細胞(DTC)がその移動をリードすることにより形成される。その過程において基底膜分子・フィビュリン-1は、生殖巣の伸長と生殖巣上皮の強度の維持に必須の役割を果たす。すでに我々は、フィビュリン-1依存的な細胞移動制御メカニズムの解明を目的とし、フィビュリン-1の機能欠損型変異体fbl-1(tk45)において引き起こされる、顕著なDTCの移動異常と不稔の表現型を抑圧できる5つの遺伝子(tk75-tk79)を分離した。そのうち2株の半優性変異(tk75およびtk76)は、野性型同様の形態を持ち捻性が強く回復した抑圧変異であり、今年度はそれらについて解析した。tk75変異体マップ領域内の予想遺伝子の塩基配列の解析の結果、基底膜の主要成分であるIV型コラーゲンのα1サブユニットEMB-9蛋白質のNC1ドメイン内にミスセンス変異を見つけた。変異が見つかったアミノ酸は、3量体NC1ドメイン同士が相互作用して6量体を作る際にインターフェースといて働く部位に相当した。変異型のemb-9(tk75)トランスジーンがfbl-1(tk45)変異体の表現型を抑圧できることを明らかとした。tk76変異はtk75変異と同一な変異であった。tk45変異体でEMB-9/IV型コラーゲンおよび基底膜蛋白質のナイドジェン-1蛋白質の局在が顕著に減少していることを明らかにした。一方、変異型のEMB-9(tk75)は、tk45の遺伝的背景でも顕著に局在がおこり、ナイドジェン-1蛋白質もほぼ正常に局在した。以上の結果から、IV型コラーゲンのNC1ドメインのインターフェース領域が基底膜の安定化および生殖巣の伸長を制御している可能性が明らかとなった。フィビュリン-1CはIV型コラーゲンのインターフェース領域の機能を調節している可能性が考えられた。本研究ではフィビュリン-1依存的な細胞移動制御メカニズムの解明を目的とし、フィビュリン-1の機能欠損型変異体fbl-1(tk45)において引き起こされる、顕著なDTCの移動異常と不稔の表現型を抑圧できる遺伝子の探索とその機能の解明を行なっている。EMS処理により、生殖巣の形態と不稔の表現型を抑圧できる変異体5株(fk75-tk79)を分離することができた。遺伝解析の結果から、そのうち2株は優性変異で3株は劣性変異であった。2株の優性変異(tk75およびtk76)は、野生型同様の形態を持ち捻性が強く回復した抑圧変異であることから、それらについてまず解析を行なった。(1)fbl-1(tk45)変異体のサプレッサー変異体のマッピング今までの解析から、tk75は3番染色体の中央付近のsma-2とunc-69の間のおよそ2.4マップユニットにマップした。SNPマッピングの結果、tk75は約200kbの比較的狭い領域にマップされた。tk76も同様の位置にマップできた。

(2)fbl-1(tk45)変異体のサプレッサー変異遺伝子tk75の同定の試みtk75変異体マップ領域内の予想遺伝子の塩基配列の解析の結果、ある基底膜タンパク質のN末端付近にミスセンス変異を見つけた。遺伝子をコードするゲノム断片をサブクローンした後、見つけた変異を導入した変異型の遺伝子のトランスジーンを作成し、変異型のトランスジーンがfbl-1(tk45)変異体の表現型を抑圧できるか検証しようとしている。線虫生殖巣のU字型の形態は、生殖巣原基の両端に1つずつ存在するリーダー細胞(DTC)がその移動をリードすることにより形成される。その過程において基底膜分子・フィビュリン-1は、生殖巣の伸長と生殖巣上皮の強度の維持に必須の役割を果たす。すでに我々は、フィビュリン-1依存的な細胞移動制御メカニズムの解明を目的とし、フィビュリン-1の機能欠損型変異体fbl-1(tk45)において引き起こされる、顕著なDTCの移動異常と不稔の表現型を抑圧できる5つの遺伝子(tk75-tk79)を分離した。そのうち2株の優性変異(tk75およびtk76)は、野生型同様の形態を持ち捻性が強く回復した抑圧変異であることから、今年度はそれらについて解析を行なった。(1)fbl-1(tk45)変異体のサプレッサー遺伝子tk76およびtk75のクローニング。tk76変異体マップ領域内の予想遺伝子の塩基配列の解析の結果、基底膜の主要成分であるIV型コラーゲンのα1サブユニットEMB-9蛋白質のNC1ドメイン内にミスセンス変異を見つけた。遺伝子をコードするゲノム断片をサブクローンした後、変異型のトランスジーンがfbl-1(tk45)変異体の表現型を抑圧できることを明らかとした。tk75変異はtk76変異と同一な変異であることが判った。(2)fbl-1(tk45)変異体のサプレッサー遺伝子の機能解析。tk45変異体の生殖巣基底膜でEMB-9/IV型コラーゲンおよび基底膜蛋白質のナイドジェンの局在が顕著に減少していることを明らかにした。一方、変異型のEMB-9(tk75)はtk45の遺伝的背景でも顕著に局在がおこり、ナイドジェン蛋白質もほぼ正常に局在した。以上の結果から、IV型コラーゲンのNC1ドメインがフィビュリン-1による基底膜の制御に関与する可能性が明らかとなった。
肺門部早期扁平上皮癌並びに異型扁平上皮化生の局在診断と遺伝子異常の解析

【対象と方法】蛍光気管支内視鏡検査を施行した喀痰細胞診要精査および肺癌患者46症例よりの生検材料74病巣(正常気管支および気管支炎N=22,扁平上皮化生N=15,異型扁平上皮化生N=23,扁平上皮癌N=14)を対象とした.従来の白色光気管支鏡検査の後蛍光気管支内視鏡施行,生検を施行し病理組織学的に検討した.この際同一部位の生検を2度行い,液体窒素にて凍結に-80°Cにて保存,組織学的診断の後テロメラーゼ活性をTRAP法にて測定した.【結果】正常気管支および気管支炎,扁平上皮化生,異型扁平上皮化生,扁平上皮癌におけるテロメラーゼ活性値(平均値±SD)は,6.2±7.5,13.9±14.8,18.5±20.8,54.5±22.3unitsであった。正常気管支および気管支炎の平均値+2SD=21をCut off値と設定すると,扁平上皮化生は15例中5例33%が,異型扁平上皮化生は23例中8例35%が,扁平上皮癌は14症例全例がCut off値以上の高値を呈した.【結論】テロメラーゼ活性は,気管支扁平上皮癌の多段階発癌過程における組織学的変化に比例して増加する可能性が示唆された.【対象と方法】蛍光気管支内視鏡検査を施行した喀痰細胞診要精査および肺癌患者46症例よりの生検材料74病巣(正常気管支および気管支炎N=22,扁平上皮化生N=15,異型扁平上皮化生N=23,扁平上皮癌N=14)を対象とした.従来の白色光気管支鏡検査の後蛍光気管支内視鏡施行,生検を施行し病理組織学的に検討した.この際同一部位の生検を2度行い,液体窒素にて凍結に-80°Cにて保存,組織学的診断の後テロメラーゼ活性をTRAP法にて測定した.【結果】正常気管支および気管支炎,扁平上皮化生,異型扁平上皮化生,扁平上皮癌におけるテロメラーゼ活性値(平均値±SD)は,6.2±7.5,13.9±14.8,18.5±20.8,54.5±22.3unitsであった。正常気管支および気管支炎の平均値+2SD=21をCut off値と設定すると,扁平上皮化生は15例中5例33%が,異型扁平上皮化生は23例中8例35%が,扁平上皮癌は14症例全例がCut off値以上の高値を呈した.【結論】テロメラーゼ活性は,気管支扁平上皮癌の多段階発癌過程における組織学的変化に比例して増加する可能性が示唆された.前癌病変と考えられる気管支扁平上皮化生のテロメラーゼ活性およびテロメラーゼ活性を制御しているHTERTmRNAの発現を検討した.【対象と方法】LlFEによる蛍光内視鏡検査を施行した喀痰細胞診要精査,肺癌30症例よりの生検材料56病巣を用いた.同一部位を2度生検し一方は病理組織学的に検討,他方は採取後凍結保存した.テロメラーゼ活性は凍結標本より蛋白質を抽出TRAP法で定量値を求めた.hTERT mRNAの発現はReal-time PCR法によって測定した.【結果】正常気管支,気管支炎(N=22),扁平上皮化生(N=9),異型偏平上皮化生(N=17),扁平上皮癌(N=8)におけるテロメラーゼ活性は,6.2±7.5units,19.5±13.4,16.5±22.6,49.5±18.0であった.正常気管支,気管支炎のMean+2SD=21をCut off値としそれ以上を陽性とすると,陽性率(%)はそれぞれ0%,44.4%,29.4%,100%であった.前癌病変と考えられている扁平上皮化生の約35%にテロメラーゼ活性の上昇が認められた.hTERT mRNAの発現はテロメラーゼ活性高値の例に認められている.【対象と方法】蛍光気管支内視鏡検査を施行した喀痰細胞診要精査および肺癌患者46症例よりの生検材料74病巣(正常気管支および気管支炎N=22,扁平上皮化生N=15,異型扁平上皮化生N=23,扁平上皮癌N=14)を対象とした.従来の白色光気管支鏡検査の後蛍光気管支内視鏡施行,生検を施行し病理組織学的に検討した.この際同一部位の生検を2度行い,液体窒素にて凍結し-80°Cにて保存,組織学的診断の後テロメラーゼ活性をTRAP法にて測定した.【結果】正常気管支および気管支炎,扁平上皮化生,異型扁平上皮化生,扁平上皮癌におけるテロメラーゼ活性値(平均値±SD)は,6.2±7.5,13.9±14.8,18.5±20.8,54.5±22.3 unitsであった.正常気管支および気管支炎の平均値+2SD=21をCut off値と設定すると,扁平上皮化生は15例中5例33%が,異型扁平上皮化生は23例中8例35%が,扁平上皮癌は14症例全例がCut off値以上の高値を呈した.【結論】テロメラーゼ活性は,気管支扁平上皮癌の多段階発癌過程における組織学的変化に比例して増加する可能性が示唆された.
遺伝的汚染をまねくモザイク魚介類の出現機構と育種形質への影響の解明

1.サクラマス受精卵の卵割阻止処理に由来する胚において、分裂の遅滞、割球サイズの不均一、染色体の断片化、多極分裂等の細胞学的異常を観察し、これらが致死的なモザイク胚の出現原因と推定した。2.第一卵割阻止処理由来のアマゴについて、生殖腺を含む様々器官・組織におけるモザイク性を検討し、他の器官に四倍性細胞が含まれない場合でも、生殖腺に四倍体由来の二倍性生殖細胞が含まれる場合があることを示すとともに、このような四倍体由来の二倍性配偶子(卵、精子)を用いて実際に三倍体を作出し、モザイクの利用による倍数体育種の可能性を示した。3.サケマス類の野生集団および人為雌性発生集団について、半数体-二倍体モザイク個体の生存性を示し、さらに、致死的な半数体個体であっても二倍体細胞とモザイク化することにより生存性回復が可能なことを、半数体と二倍体間の胚盤移植操作による半数体-二倍体キメラキンギョの作出により実験的に確認した。4.北海道内の野生フナ集団とドジョウ集団について、異なる倍数体細胞からなるモザイク個体の出現を認め、これらのモザイクにおける特殊な生殖様式(クローン卵あるいは精子の産生)の解明を行うとともに、カットスロートトラウト、ヒメマス養殖種苗に半数体-二倍体、二倍体-四倍体モザイクが出現することを見出し、卵質とモザイク出現の関係を考察した。5.第二極体放出により誘起したエゾアワビ三倍体集団についてモザイクを見出し、飼育実験により追跡した。その結果、触手のモザイク性は飼育期間中変化するが、触手以外の器官ではモザイク性は見られず、当初懸念した三倍体がモザイク状態を通じて、生殖腺を含む器官において二倍体化する現象は認められなかった。1.染色体操作、特に第一卵割阻止処理とモザイク出現の関係を、サクラマスにおける発生胚のDNA量フローサイトメトリー(FCM)と細胞・組織学的観察により解析したところ、発生速度変異、三極分裂、四極分裂、無核細胞化、小型細胞化等の現象と倍数体・異数体モザイクの発生ならびに生残率低下との密接な関係が示唆された。2.ヒメマス、カットスロートトラウト等の養殖種苗集団において、FCMによるモザイクの検索を行ったところ、2n/4n、1n/2n等のモザイクが、場合によっては顕著な頻度(42%)で出現する事が判明し、通常の受精・育成によってもモザイクが生じることが示され、今後、卵質ならびに受精環境との関連の解明が必要と考えられた。3.アマゴでは第一卵割阻止由来の2n/4nモザイクは大型の2n卵を産み、正常2nとの交配により、高頻度で3nが生じることが判明した。従って、モザイクは倍数体育種推進の良好な素材となることを実証できた。4.サイトカラシン処理による極体放出阻止により作出したエゾアワビでは、2n、3nに混じって、35%の率で2n/3nモザイクが出現した。またモザイクでは、同一個体の上足触手の一本毎に倍数性が異なることが判明した。さらに生後15月齢まで、殻長、体重を追跡調査した限りでは、モザイクに形態異常、成長傷害は見られなかった。5.胚操作によるキメラ作出技術により倍数体モザイクと同質の状態を胚に作り出し、その特性を見たところ、n/2nキメラが生存可能であったことから、一部のn/2nモザイクの生存に同様の機構が働くことが示唆された。1.アマゴ卵の卵割阻止処理(650Kg/cm^2,6分間)において、四倍体は受精4-6時間後処理の異常胚に、二倍体-四倍体モザイクは受精5.5-7.25時間後処理の正常胚に高い率で見られた。7ヶ月令

魚には完全な四倍体は見られず、いずれかの器官において四倍体細胞を含む、器官別の二倍体-四倍体モザイクであった。従って、血液、鰭等の倍数性判定のみでは、二倍性の配偶子を産生しうる四倍体生殖細胞系列をもつ個体を見逃す可能性が示された。2.アマゴにおける二倍体-四倍体モザイクは成熟可能であり、産出された大型の卵は二倍性の卵核をもつことが明らかになった。また、四倍体雄の産する精子は頭部が大きかった。従って、配偶子のサイズを指標として、四倍体生殖細胞系列をもつモザイク親魚を選抜し、次世代において三倍体、四倍体を染色体操作なしに交配のみで作出することが可能になった。3.エゾアワビにおいては、三倍体作出を目的としたカフェイン処理による極体放出阻止群において、昨年度のサイトカラシンB処理群と同様に、三倍体、二倍体にまじって、二倍体-三倍体モザイクが認められた。倍数性の相違は、同一個体の異なる触手間でも認められ、器官によりモザイク性が異なることが示された。昨年度にひきつづき、モザイクの殻長、体重の追跡を行ったが、目下(25ヶ月令)のところ形態異常、成長障害は見られない。4.野生集団のギンブナおよびドジョウについて、自然発生モザイクの存否を明らかにするため、倍数性判定を行ったところ、前者では三倍体-四倍体の、後者では二倍体-三倍体のモザイクがごく低頻度で出現した。これらは、各々雌性発生三倍体ギンブナおよびクローン二倍体ドジョウを起源とし、精子の偶発的遅延受精により生じた可能性が示唆された。1.サクラマス受精卵の卵割阻止処理(700Kg/cm^2,7分間,受精後5-7時間)に由来する胚の細胞学的観察から分裂の遅滞、割球サイズの不均一、染色体の断片化、多極分裂等の細胞分裂異常が認められ、これらが有核細胞と無核細胞からなるモザイク胚、大型核を持つ細胞と小型核をもつ細胞からなるモザイク胚、また、有核、無核、大型核、小型核の細胞からなるモザイク胚の出現原因と考えられた。2.排卵後の放置時間とモザイク出現の関係は明らかにできなかった。3.第一卵割阻止に由来する二倍体-四倍体モザイクアマゴの産む二倍体卵を用いて三倍体作出が可能であり、モザイクを用いた新たな倍数体育種技術が開発できた。4.エゾアワビにおいてカフェインあるいはサイトカラシンB処理による第二極体放出阻止法で三倍体処理群を作成したところ、目的とする三倍体に混じり、ごく少数の二倍体-三倍体モザイクを見出した。これらの初期稚貝期における殻長は正常二倍体および三倍体と差はなかった。上足触手において検出した二倍体-三倍体モザイクを2年間追跡した結果、触手以外の組織(外套膜、鰓、肝臓など)ではモザイク性は認められなかった。触手のモザイク性は個体の形態、成長度に影響しなかった。4.胚操作により作出した半数体-二倍体キメラは同じ構成のモザイクと同様の生存性を示すことが判明し、人為キメラによりモザイクの特性を再現しうることが示唆された。5.一部野生集団の二倍体(2n)-三倍体(3n)モザイクドジョウ雄では、精子のDNA量が通常精子の二倍であったこと、この精子と通常卵の受精から三倍体が生じたこと、およびUV照射卵との受精による人為雄性発生から二倍体が生じたことから、これらの作る精子は二倍性(2n)であること、さらに、これら子孫のマイクロサテライト等のDNAマーカー分析から、精子は遺伝的に同一のクローンであることが判明した。
アレルギー性炎症の慢性化及び再燃にかかわる血管透過性亢進因子の解析に関する研究

慢性関節リウマチなどの慢性炎症性疾患を解析するために開発された炎症モデルであるラットの再燃型アレルギー性空気嚢型炎症モデルでは、アレルギー機序に基づく炎症反応を再燃させると、急性のアレルギー反応で認められるアナフィラキシ-性の血管透過性亢進反応は認められないが、炎症局所での血管透過性は徐々に亢進する。そこで、本モデルの炎症再惹起後の血管透過性亢進を誘発する因子の解析を試みた。その結果、アレルギー機序に基づく炎症反応を再惹起した後経時的に採取し炎症滲出液中には、血管透過性を亢進させる因子(血管透過性亢進因子)が新たに産生されていることがラット皮内反応により確認された。炎症滲出液をイオン交換クロマトグラフィーにより分画すると、血管透過性亢進因子は異なった2つの塩濃度で溶出され、炎症滲出液中には少なくとも2種類の血管透過性亢進因子が存在していることが示唆された。そのうち1つの分子量は約35kDaであった。ラット皮内反応において、本因子の活性は抗ヒスタミン・抗セロトニン薬を同時に投与することにより抑制されたことから、本因子はヒスタミン(あるいはセロトニン)を介してその作用を発現していることが示唆された。また、ステロイド性抗炎症薬(プレドニゾロン)を前投与した後に炎症反応を再惹起すると、炎症滲出液中の血管透過性亢進活性は低下したが、非ステロイド性抗炎症薬(インドメタシン)を前投与した場合は変化は認められなかった。従って、ステロイド性抗炎症薬は、これらの因子の産生を抑制し、あるいは活性を阻害することにより抗炎症効果を示していることが示唆された。
NK・LAK細胞標的認識レセプター様分子ファミリーのリガンド分子の同定

本研究はNKレクチン様分子の抗原認識、シグナル伝達機構の解析によりNK・LAK細胞の標的認識、細胞障害機構の解明をめざすものである。本年度は以下の研究を実施した。1.NKG2,CD69,NKR-P1,Ly-49各分子のトランスフェクタントを作成した。2.NKG2,CD69,NKR-P1,Ly-49各分子とヒト抗体Fc領域を融合したキメラ分子(レクチンIg)を遺伝子工学的手法を用いて作成した。3.2で得られたレクチンIgを用いてNK・LAK標的細胞を含む種々の培養細胞パネルとの反応性をFACSにて解析した。NKG2IgはHL60、V937と反応しこれらの細胞表面上にリガンド分子が存在することが示唆された。これより、NKG2-リガンド分子がLAK細胞障害機構にかかわる可能性が考えられる。一方CD69IgはWEHZ231,A202J,BAL17などのマウスB細胞株と反応した。4.各レクチンIgと糖・糖脂質パネルとの反応性をELISA法で解析したところNKG2Igと糖脂質スルファチドが結合することが明らかとなった。