hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
持続性心房細動に対する新たな治療法の開発

本研究は、持続性心房細動において難治性の指標であり、局所アブレーションのターゲットである心房内異常電位(連続性分裂電位)に着目し、その成因・機序を明らかにし、持続性心房細動の治療成績の向上を目的として計画した。(1)初代心房筋培養細胞と線維芽細胞、あるいは心房筋細胞株HL-1細胞と線維芽細胞を平面電極上に混合培養した。高頻度ペーシングあるいはイソプロテレノール添加による電気生理学的特性を多電極アレイを用いて記録した。同様に、混合培養細胞に膜電位感受性蛍光色素を添加し、高速イメージングシステムで興奮伝播様式を可視的に解析した。高頻度ペーシング群あるいはイソプロテレノール添加群の混合培養細胞では活動電位持続時間の短縮が認められ、一部に連続性分裂電位様波形が認められた。同部位は細胞内カルシウム過負荷を示し、カルシウム調節関連分子の発現変化が認められた。HL-1細胞・線維芽細胞混合培養系を用いて、活動電位持続時間を指標に化合物のスクリーニングを行い、数種類の候補化合物を見出した。候補化合物の添加による細胞内カルシウム動態および遺伝子発現変化を現在評価中である。(2)野生型マウス・高脂肪食マウスに対し頸静脈的に多電極カテーテルを右心房に挿入し、電気生理検査および心房細動誘発を行った。高脂肪食マウスでは、通常食マウスと比較し、内臓脂肪・皮下脂肪の蓄積、アディポサイトカインの発現亢進が認められ、心房からの遅延後脱分極からの誘発活動の亢進が認められた。その結果、心房細動誘発率・持続性の亢進が認められた。培養細胞系の確立、電気生理学的特性の解析に予定より時間がかかり、その結果、化合物スクリーニングも少し遅れが生じたが、その後の培養系の解析およびマウスモデルの解析は順調に進んでいる。心筋細胞・線維芽細胞混合培養中の連続性分裂電位を認める部位から細胞を回収し、連続性分裂電位を生じさせる候補因子を同定する。化合物スクリーニングで異常電位を消失させうる化合物について、遺伝子・タンパク発現変化およびカルシウム動態を評価し、治療候補化合物の絞り込みを行うとともに、その作用機序を明らかにする。連続性分裂電位の抑制効果が確認された化合物について、心房細動モデルへ投与し、in vivoでの有効性を検証する。心房細動(発作性・持続性)に対する治療法として、肺静脈電気的隔離術をベースとしたカテーテルアブレーションは確立した治療法であるが、持続性心房細動における高い再発率が大きな問題として残っている。本研究は、持続性心房細動において難治性の指標であり、局所アブレーションのターゲットである心房内異常電位(連続性分裂電位)に着目し、これまでの持続性心房細動における電気生理学的・分子学的知見と実験系を基に、肺静脈ー左心房間異常電位あるいは左心房内異常電位を抑制する標的分子・薬剤を明らかにすること、およびドラッグ・デリバリー・システムによってピンポイントで薬剤を投与するシステムを構築することを目的とし、その結果、持続性心房細動に対し効率的で再発率の低い新たな治療法を開発することが目的である。初代心房筋培養細胞と線維芽細胞、あるいは心房筋細胞株HL-1細胞と線維芽細胞を平面電極上に混合培養し、高頻度ペーシングを行った。また多電極アレイを用いて活動電位持続時間、局所電位、興奮伝播様式を記録した。高頻度ペーシングを行った混合培養細胞では活動電位持続時間の短縮が認められ、一部に連続性分裂電位様波形が認められた。同部位は細胞内カルシウム過負荷を示し、Na+/Ca2+ exchanger (NCX) mRNAの発現増加が認められた。また、免疫染色では心筋細胞間にconnexin 40 (Cx40)の発現が認められたが、高頻度ペーシング群ではCx40の発現低下および発現の断裂様所見、および偏在化が認められた。数種類の薬剤でスクリーニングを行ったところ、短縮した活動電位持続時間の回復を示す薬剤が認められた。今年度は化合物ライブラリーのスクリーニングを行い、異常電位を生じさせる候補因子の同定および消失に有効な化合物の同定を進め、心房細動モデルに対する治療効果も検討する予定である。本研究の目的である肺静脈左心房間伝導抑制あるいは左心房内伝導抑制作用を有する化合物のスクリーニングを開始したところであるが、再現性の確立が難しく、また電気生理学的指標を十分に満たす化合物がヒットしていない。今年度これらの実験をさらに確立して遂行し、化合物の同定につなげたい。

候補化合物の添加による細胞内カルシウム動態および遺伝子発現変化を現在評価中である。(2)野生型マウス・高脂肪食マウスに対し頸静脈的に多電極カテーテルを右心房に挿入し、電気生理検査および心房細動誘発を行った。高脂肪食マウスでは、通常食マウスと比較し、内臓脂肪・皮下脂肪の蓄積、アディポサイトカインの発現亢進が認められ、心房からの遅延後脱分極からの誘発活動の亢進が認められた。その結果、心房細動誘発率・持続性の亢進が認められた。培養細胞系の確立、電気生理学的特性の解析に予定より時間がかかり、その結果、化合物スクリーニングも少し遅れが生じたが、その後の培養系の解析およびマウスモデルの解析は順調に進んでいる。研究代表者が主となり、大学院生・研究生等とともに下記の13の研究を進める。1.異常電位伝導抑制作用を呈する化合物のスクリーニング:電極記録システム、膜電位・カルシウム高速イメージングシステムを用いて、心房筋混合培養における電位の消失・細胞伝導性抑制を指標に化合物ライブラリー(抗不整脈薬、受容体拮抗薬、標的分子化合薬、免疫抑制薬など)、あるいは標的分子に対するアンチセンス核酸などのスクリーニングを行い、異常電位の消失・伝導ブロック作用を示す化合物をピックアップする。2.心房細動易誘発性マウスモデルに対する電位伝導抑制薬の効果:心房細動の誘発性・持続性を評価し、同時に心房細動中の心内電位を記録する。また全身麻酔下でテレメトリー心電計を植込み、自然発生性の心房細動を観察し、持続性を評価する。心房細動モデルマウスのランゲンドルフ潅流心あるいは心房組織切片を、培養細胞を用いた検討と同様、多点平面電極システム、高速イメージングを併用し、活動電位持続時間、局所電位、興奮伝播様式を記録し、心房内異常電位(連続性分裂電位)を同定する。心房細動モデルマウスに異常電位抑制薬・伝導抑制薬あるいは対照として溶媒のみを投与し、テレメトリー心電図で心房細動自然発生率・持続時間を測定する。多電極アレイシステム、高速イメージングにより心房内異常電位の消失を確認する。またカテーテルによる心房細動の誘発性・持続時間を測定し、薬効を評価するとともに、肝・腎など各臓器に対する安全性を生化学的・病理学的に評価する。3.心腔内ドラッグ・デリバリー・システム(DDS)の開発:異常電位抑制薬・伝導抑制薬あるいは対照をポリアミンゲルマトリックスに内包し、その表面をポリエチレングリコールで覆い、環境応答性ナノ粒子として封入する。このナノ粒子をバルーン表面にコーティングし、バルーン型DDSを作成する。心筋細胞・線維芽細胞混合培養中の連続性分裂電位を認める部位から細胞を回収し、連続性分裂電位を生じさせる候補因子を同定する。化合物スクリーニングで異常電位を消失させうる化合物について、遺伝子・タンパク発現変化およびカルシウム動態を評価し、治療候補化合物の絞り込みを行うとともに、その作用機序を明らかにする。連続性分裂電位の抑制効果が確認された化合物について、心房細動モデルへ投与し、in vivoでの有効性を検証する。予定していた一部の実験ができなかったため次年度使用額が生じた。2018年度に予定の実験を行う予定である。
自己免疫疾患末梢抗原に対する免疫寛容獲得機構の解明

本研究では、デスモグレイン3(Dsg3)に対するIgG自己抗体による尋常性天疱瘡をモデル疾患として、自己免疫発症機序の解明を目指した。Dsg3反応性T細胞には、自己抗体産生において病原性があるものとないものがあり、IL-4が病的抗体産生に重要であることが明らかにされた。また、ひとつのT細胞クローンが複数のB細胞に作用し、ポリクローナルな病的抗体を産生することが示された。病原性自己抗体による組織障害により、Dsg3反応性B細胞が除去される新しいB細胞末梢免疫寛容機序の存在が示唆された。本研究の目的は、臓器特異的自己免疫疾患の標的となる末梢自己抗原に対する免疫寛容獲得機構を解明し、より選択的な免疫抑制療法の基礎開発を目指すことである。平成17年度は、天疱瘡抗原Dsg3に反応するB細胞の抹消免疫寛容の解析として、Dsg3反応性B細胞トランスジェニックマウス(AK7-B-Tr)に、病原性を有するAK23 IgG mAbを投与し、抹消リンパ組織から自己反応性AK7 B細胞が消失する機序の解析を行った。自己反応性B細胞の除去には、CD4+T細胞が必須であり、しかも抗原特異性を有したCD4+T細胞の関与の可能性が示唆された。また、B細胞が消失する過程においてapoptosisが関与することも示された。以上のことから、病的活性を持つIgGの存在により生体に何らかの危険信号が発せられると、末梢に存在していた自己反応性B細胞に対し、抗原特異的にB細胞を除去するという新しい免疫寛容機構が存在することが示唆されている。さらに、CD4+CD25+FoxP3+T細胞などの調節性T細胞の関与を検討していく予定である。また、自己抗体産生に関与する自己反応性T細胞の解析として、Dsg3^<-/->マウスより複数のDsg3反応性T細胞クローン株を樹立した。全てはMHC class II拘束性の反応性を示したが、Vβchain usageとT細胞エピトープとの間の関連性は不明であった。またT細胞株は様々なサイトカイン発現パターンを示した。さらに、樹立された2株のT細胞クローンについてin vivoにおける病原性を確認した。すなわち、磁気ビーズで精製したB220+B細胞とともにRag2^<-/->マウスに移植すると、抗Dsg3 IgG抗体の産生が確認され、口腔粘膜のびらんなど天疱瘡表現型の出現が認められた。さらに、自己反応性T細胞であっても、病的抗体を誘導できるT細胞クローンとできないT細胞クローンの相違点を解析し、自己抗体産生におけるT細胞の役割をより詳細に解明する予定である。平成18年度は、天疱瘡モデルマウスにおけるT細胞の解析に大きく進展が見られた。昨年度とあわせて、Dsg3反応性T細胞を合計20株樹立し、Dsg3^<-/->B細胞とともにRag2^<-/->マウスへ移植し、抗Dsg3 IgG抗体産生、天疱瘡表現型の発現を解析することにより、そのin vivoにおける病原性を評価する系を確立した。Dsg3反応性T細胞の中に、病的抗体を誘導できるT細胞クローンとできないT細胞クローンが存在することを確認した。さらに、各T細胞株の特性(T細胞エピトープ、T細胞受容体遺伝子・発現サイトカイン・ホーミング能)を検討した結果、IL-4およびIL-10のみに病原性との関連性をみとめた(P=0.04)。さらに、sIL-4Ra、sIL-10Ra、sIFN-gR1を発現する組み換えアデノウイルスをRag2^<-/->マウスに投与後、Dsg3反応性T細胞株とDsg3^<-/->B細胞を移植すると、対照ウイルス投与群にくらべて、sIL-4Raを発現させたマウスでのみ抗体価の上昇や天疱瘡表現型の発現が抑制された。従って、天疱瘡モデルマウス病態においてIL-4が重要なことが示され、IL-4を標的とする治療法の可能性を示すことができた。さらに、昨年度の成果によりB細胞の抹消免疫寛容に関与することが示唆されたCD4^+CD25^+FoxP3^+調節性T細胞の解析を進めた。野生型CD4^+CD25^+T細胞は、Dsg3^<-/->T細胞およびDsg3^<-/->B細胞移植による抗Dsg3 IgG抗体産生、および天疱瘡表現型の発現を著明に抑制することを明らかにした。次年度において、Dsg3反応性T細胞トランスジェニックマウスの作成と、CD4^+CD25^+T細胞による抗体産生抑制機序の解析をさらに進める。

本研究の目的は、自己免疫疾患における世界基準となる独自の系を構築し、生理的条件下で、臓器特異的自己免疫性疾患の標的抗原に対する免疫寛容獲得機構を解明することである。平成19年度は、前年度までに樹立したDsg3反応性T細胞クローンからTCR(Dsg3TCR)のcDNAをクローニングし、その発現をTCR欠損T細胞ハイブリドーマへの遺伝子導入により確認した。続いてDsg3細胞外領域のオーバーラップペプチドを作成し、T細胞エピトープの同定に成功した。同じペプチドを認識する高親和性と低親和性と親和性の異なるTCRを同定した。さらに、各T細胞クローンによりin vivoにおいて誘導された抗Dsg3 IgGのエピトープをDsg1/3のドメインスワッピング分子を用いて解析し、T細胞エピトープと抗体エピトープの関係を解析した。ひとつのT細胞クローンがポリクローナルなDsg3特異的B細胞に対するヘルパー活性を有することを示した。これら解析されたTCRの中で3種のTCRを用いて、Dsg3TCRトランスジェニックマウスを作成中である。天庖瘡モデルマウスにおけるCD4^+CD25^+FoxP3^+制御性T細胞の解析をさらに進め、Tregの分化にも抗原特異性が関与し、特異的な抗原による負の選択の可能性を示唆する所見を得た。また、野生型皮膚をDsg3^<-/->マウスに移植した後に、Rag2^<-/->マウスに移植すると、抗体産生のみならず、表皮にCD4^+あるいはCD8^+T細胞が浸潤し、表皮細胞のapoptosisを誘導することが確認された。Dsg3というひとつの抗原を取り巻く様々なT細胞の機能を総合的に解析できる系を確立しつつある。デスモグレイン3(Dsg3)に対するlgG自己抗体により水疱、びらんが生じる尋常性天疱瘡をモデル疾患としている。平成20年度は、Dsg3に対する免疫寛容機構を包括的に解析するために、Dsg3反応性T細胞クローンの中で、同一のペプチド(Dsg3_<301-315>)を認識するが高親和性と低親和性を示すT細胞受容体(TCR)および他のペプチドを認識する3種のTCRを選出し、それぞれ3種のDsg3TCR-Tgマウスの作成をほぼ完了した。T細胞発生過程におけるTCR発現時期が生理的発現時期に近いTgマウスを選別するために、胸腺内でCD^-CD8^-(double negative)T細胞のなかで、CD44,CD25の発現パターンからDN4(double negative後期)においてTCRβの発現が細胞表面に認められるラインを選択した。Rag^2<-/->-Dsg3T-TCR-Tgマウスでは自己反応性T細胞が胸腺で負の選択を受けるが、Dsg3T-TCR-Tgマウスでは、胸腺での負の選択を逃れて末梢リンパ組織で認められ、かつDsg3ペプチドへの反応性を維持し、不活化されていなかいことを確認した。レトロウィルスベクターを用いて得られた自己反応性TCR群を種々のリンパ球サブセットに発現させることに成功し、Dsg3^<-/->マウスB細胞とともに移植することにより、疾患モデルの再構築を試みた。また、B6バックのDsg3^<-/->マウスにDsg3+皮膚(野生型皮膚)を移植後、そのレシピエントマウスのリンパ球をRag2^<-/->
顔表情認知に関与する２つの神経経路のダイナミクス特性の解明

これまでの研究では、脳内における顔認知システムとして、人物同定を処理する紡錘状回と、顔表情を処理する扁桃体の2つの経路の関与が示されてきた。しかし、近親者の顔認知でも同様な2つの経路で処理されているかは不明であった。そこで本研究では、機能的磁気共鳴画像法を用いて多ボクセルパターン解析により、近親者の顔認知時における紡錘状回と扁桃体の反応を計測・評価した。その結果、左側紡錘状回が近親者の人物同定と顔表情の認知の両方に関与していることを明らかにした。これらから、近親者では従来の顔認知モデルは当てはまらず、新たな近親者顔認知モデルを提言した。本研究の目的は、顔表情認知に関与する2つの経路(「すばやく粗い」神経経路と「遅くて緻密な」神経経路)の重み付けが、対象が母親か他者かによって変わりうるか、そのダイナミクス特性を明らかにすることである。顔表情認知には、「すばやく粗い」神経経路と「遅くて緻密な」神経経路の両方が関与していることが先行研究にて示されている。応募者はこれまでに顔表情認知の中で母親顔に注目して処理過程を検討し、1)自身の母親の笑顔を認知する際に「すばやく粗い」経路に関与する前頭前野が賦活すること、2)自身の母親の笑顔は対照の笑顔よりも「すばやく」認知できることを見出した。これらのことは、母親の笑顔認知の際には「すばやく粗い」経路に重きがおかれている可能性を示している。2つの経路に対する重み付けが母親顔とそれ以外で変わることが明らかになれば、顔表情認知においてこれらの経路を調整している神経機構の存在を提言できる。平成26年度については、各種帯域通過フィルタを適用した顔表情写真を用いた機能的MRI実験を行った。母親の笑顔・真顔・怒り顔写真と友人の笑顔・真顔・怒り顔写真に、6 cycle/imageのローパスフィルタを適用した。また、24 cycle/imageのハイパスフィルタを適用した。これらを見ているときの脳活動について、被験者17名を対象に測定した。一般線形モデルを用いた解析では、紡錘状回がハイパスフィルタ画像で活性化した。「遅くて緻密な」処理を紡錘状回が担っていることは先行研究に一致する。また、多ボクセルパターン解析を用いた結果、左側紡錘状回が、母親か友人か、笑顔かどうか、粗い画像かどうかの各モダリティの弁別を行っていることを明らかにした。顔表情認知には、「すばやく粗い」神経経路と「遅くて緻密な」神経経路の両方が関与しており、前者が視覚野から扁桃体へ至る経路、後者が視覚野から紡錘状回へ至る経路に相当すると考えられている。本研究では、被験者自身の母親顔(笑顔・真顔・怒り顔)写真および友人顔(笑顔・真顔・怒り顔)写真を見た際の脳活動について機能的MRIで撮像し、一次視覚野、扁桃体、紡錘状回を関心領域として多ボクセルパターン解析を行った。画像の見た目には依存しないことを示すために、それぞれの表情写真に3種類の空間フィルタを適応させた。その結果、左側紡錘状回が母親か友人かの弁別および表情の弁別をしており、これらは画像の見た目には依存しなかった。他の領域では有意な弁別正答率は得られなかった。これらの結果は、応募者の予想と異なり、左側紡錘状回が近親者における人物同定と表情認知の両方に関与していることを示唆している。機能的MRI実験を想定の被験者数にて行い、これらのデータについて多ボクセルパターン解析を行った。これらから得られた成果をまとめてOrganization for Human Brain Mapping学会および第18回日本ヒト脳機能マッピング学会にて報告した。これまでの代表的な顔認知モデルとしては、Bruce & Youngが行動実験によって示し、Haxbyらがそれらを発展させて脳内モデルとして発表したモデルがある。このモデルによれば、初期視覚野に入った顔の情報は、「相手が誰か」という情報と相手が「どんな表情か」という情報にわかれて、それぞれ紡錘状回と扁桃体で処理される。一方で、扁桃体は見知らぬ他者に対する警報システムも担っている。Haxbyらのモデルは見知らぬ他者の顔認知によるものであるが、近親者の場合、警報システムが不要である。このことは、近親者の顔認知では扁桃体の働きが比較的小さく、紡錘状回により依存したシステムが存在する可能性がある。

そこで本研究では、健常若年者17名に協力してもらい、近親者として自身の母親の笑顔・真顔・怒り顔を撮影した写真を用意し、これを見たときの脳活動を機能的磁気共鳴画像法により測定し、多ボクセルパターン分析(MVPA)を用いて脳活動を評価した。コントロールとして同性の友人の笑顔・真顔・怒り顔写真も提示した。MVPAの結果、左側紡錘状回において母親と友人の弁別におけるデコーディング正答率が有意に高かった。さらに同部位では、表情のデコーディング正答率も有意に高かった。右側紡錘状回、左右扁桃体、左右鳥距溝では有意なデコーディング正答率は得られなかった。以上のことから、近親者の顔認知では、「相手が誰か」という情報と「どんな表情か」という情報はともに左側紡錘状回で処理され、扁桃体の関与は小さいことが示唆された。これらから、Haxbyらの提唱したモデルとは異なる、近親者特異的な顔認知モデルを提唱した。これまでの研究では、脳内における顔認知システムとして、人物同定を処理する紡錘状回と、顔表情を処理する扁桃体の2つの経路の関与が示されてきた。しかし、近親者の顔認知でも同様な2つの経路で処理されているかは不明であった。そこで本研究では、機能的磁気共鳴画像法を用いて多ボクセルパターン解析により、近親者の顔認知時における紡錘状回と扁桃体の反応を計測・評価した。その結果、左側紡錘状回が近親者の人物同定と顔表情の認知の両方に関与していることを明らかにした。これらから、近親者では従来の顔認知モデルは当てはまらず、新たな近親者顔認知モデルを提言した。fMRI実験については、充分な被験者数を確保し、実施した。また、多ボクセルパターン解析を行った。今後さらに、searchlight解析や、行動データの解析などを行う必要がある。また、視線計測についても今後実施を検討したい。今後、論文にまとめて発表する。認知神経科学fMRIデータについては、行動データのまとめ、および脳活動についてsearchlight解析を試みる。さらに視線計測の実施を検討する。2014年7月9日、16日、30日の実験にてMRI機器トラブルにより撮像データを充分に得ることができず、当初計画に遅延が生じたため当初予定していた視線計測について遅れが生じているため論文の執筆と投稿・発表を行う。この際に不足データがあればMRI撮像を行う。視線計測についての機器補充および被験者謝金
マルチレベル・ガバナンス化するヨーロッパの民主的構造変化の研究

本研究は、2009年のリスボン条約の発効からユーロ危機に至るまで、マルチレベル・ガバナンス化するヨーロッパの民主的構造変化について検討してきた。EUの研究者や実務者へのアンケート調査、各国の個別研究を通じて、以下の結論を得た。1マルチレベル・ガバナンスや帰属の認識は、研究者と実務家の双方に幅広く浸透している。2.教育を除く、経済、財政、社会、環境、エネルギー、安全保障のいずれの政策も、EUレベルと加盟国レベルでその影響力を強め、サブ・ナショナル・レベルで低下した。3ユーロ危機をEU統合への契機とみるか、それを遅らせることで修復可能とみるかは、意見が半々に分かれた。本研究は、リスボン条約前後のEUにおいてマルチレベル・ガバナンス(MLG)化は強化されているか、それとも機能不全が表われているか。さらに、MLG化の下で各国・各地域の民主的構造はどのように変容しているか、を有識者などへのアンケート調査を通じて分析、検討するものである。初年度である当該年度は、ユーロ危機が長期化するなかで、まずは個々の各国研究、調査を進めることに主眼をおき、それを通じて適切なアンケート項目を検討した。2011年7月には、研究協力者であるディミトリ・ヴァンオーヴェルベケ(ベルギー・ルーヴェンカトリック大学)教授、他に9月にはグラント・ジョーダン(イギリス・アバディーン大学)教授、2012年3月には、フェルナンド・バイェスピン(スペイン・マドリード自治大学)教授を研究会に招き、ヨーロッパと地域対立により政治空白が続いていたベルギーの現状について講義いただきマルチレベル化する民主政治について議論すると同時に、今後の調査方法について検討会を開いた。アンケート項目については、上記検討会後、主に小川(代表者)、伊藤(南欧)、中田(フランス)、若松(イギリス)、松尾(ベルギー)が中心となって夏に現地調査を行った。その後、これらの意見を野田(ドイツ)、仙石(東欧)が推敲し、臼井、松尾、小川で取りまとめて、原案を作成した。本年度は特にユーロ危機が長期化し、予想を超えて研究対象であるヨーロッパ政治の動揺がみられた。そのため状況の見極めを慎重に検討し、議論することを余儀なくされた。よって、各種研究会を企画するとともに、ネットで情報を交換して各国とEUの政治変動の全体像について日々認識を更新した。こうしたヨーロッパの状況の調査、分析を生かして、代表者、分担者各人は本研究の成果を反映する新聞・総合雑誌への寄稿、インタビューも数多く行った。本研究では、MLG化の現状について、欧州の広い地域をカバーする専門家アンケートによって客観的に把握し、各国固有の問題に関する質的調査と総合することで、ヨーロッパ全体の民主的構造変化をとらえることを目的とする。本年度は、前年度に行ったMLGに関する専門家へのアンケートの結果についての議論と検討を行うことに加えて、EUにおける実務者に向けたアンケート調査を実施した。今回の調査は、「ヨーロッパ議会」、「地域評議会」、「経済社会評議会」を合わせて1500通のアンケートを送付した。その結果、MLGの存在は確かに認められるものの、2009以降においてはEUと加盟国政府の行動が相対的に比重を増しつつあり、かつ、加盟国間の格差は開きつつあることが伺えた。ヨーロッパ各地方についての研究としては、地方選挙における小政党の台頭が著しいイギリスの諸都市(ロンドン、シェフィールド、バーミンガム、ミドルズブラ)においては、特定の新興政党の台頭が一つのレベルから他レベルに波及していく過程を検証するための諸資料を収集し、その過程を政党の戦略、組織構造、選挙区基盤に照らし分析がなされた。また、ドイツにおいては、アンケート調査に協力してくれたドイツ人研究者2名(トレンハルト氏とフンガー氏)と直接面談し、ドイツ選挙とヨーロッパ政治の今後の展開に関する意見を聴取した。2014年3月6日には、ルーヴェン大学(ベルギー)にて研究代表者小川、分担者松尾、研究系協力者ディミトリ・ヴァンオーヴェルベケ同大教授によって、本研究課題の成果にもとづく研究会合を開催した。その他、イギリスのグラスゴウ大学のクリストファー・ベリー名誉教授や大分大学のスティーブン・デイ准教授を立教大学に招聘し、スコットランドや欧州議会についての検討を行った。本年度の研究実績として、前年度から行われているMLGに関するアンケート調査形式を確定し、10月より調査を実施した。その結果約60名の政治研究者にアンケートを依頼し、約48%の回答を得ることができた。本研究の研究代表者および各研究分担者は、海外出張を通じてアンケートの予備調査とともに、アンケート調査を補う現地聞き取り・資料調査、専門家との情報交換、ならびに一部成果発表を行った。研究代表者である小川はIPSA(世界政治学会)22回世界大会(スペイン・マドリード)において本研究の成果の一部として国際学会報告を行った。

松尾はヴァンオーベルべケ教授(ルーヴァン大学)からアンケート項目についてのアドヴァイスを受けたほか、欧州のEU研究者ネットワークであるTEPSA(ベルギー・ブリュッセル)を訪問し、研究員であるローラ教授からアンケート調査対象について助言を受けた。若松はイギリス(ロンドン・中部・南西部)を訪問し、ガバナンスと政治の多層化の地域間差異に関する資料を収集した(11月)。伊藤は2月中旬から下旬にかけて、イタリア(フィレンツェおよびローマ)において、マルチレベルな政党組織間関係と選挙運動との関連性についての実体調査を行った。また3月中旬にはシチーリア州にてカターニア大学関係者と面談し、ヨーロッパ、ナショナル、州レベルの政党政治・行政との関係についてヒアリングを行った。臼井はジェネーブ大学のバルジガー教授をリーダーとしドイツ・スウェーデン、韓国などから研究者が集う国際ワークショップ地域環境ガバナンス(地球総合研究所、RIHN主催、京都で開催))にファシリテーターとして参加し、マルチレベル化するヨーロッパの地域環境ガバナンスを主題に議論を交わし、最新の研究動向に関するヒアリングを実施した。一ノ瀬はアンケートの依頼対象者の絞り込みとアンケートの依頼を行った。代表者、各分担者はその研究分担にしたがって海外調査を含む作業を着実に進め、複数の実績を公表している。一方研究対象である欧州におけるユーロ危機の進行により、最新の状況の変化を政治、経済、行政、世論など多岐にわたり再調査する必要が生じたため、また、震災、計画停電などで各所属校の足並みが揃わず、研究のスタートが遅れたため、やや進捗を遅らせた部分がある。25年度が最終年度であるため、記入しない。本研究は、リスボン条約の合意後、未曽有の金融・財政危機に陥ったEUにおいて、マルチレベル・ガバナンス(MLG)化は強化されているか、それとも機能不全が表われているか、さらにMLG化とともに各国・各地域の民主主義の構造と正統性・実効性はどのように変容しているかを有識者(政治学の学術研究者)へのアンケート調査を通じて分析、検討するものである。24年度は、アンケート案を引き続き議論しながら、夏季に各担当者がそれぞれの担当地域にアンケートの依頼や状況調査のため現地調査を行ったうえで推敲し、10月に調査を実施することができた。実施に当たっては、改めて分担者と合わせて議論し、63名の有識者を対象に絞って依頼し、アンケートとWEBをリンクさせて回収を行った(約48%の回収率)。さらにこの回答にもとづいて25年2月に立教大学にて中間報告会を行った。その結果、EU加盟諸国の有識者の全般的傾向として、「EU諸国・地域間の経済的格差が拡大している」、それにもかかわらず「EUは進展(集権化)していく」と多くが認識しているという、きわめて興味深い知見を得ることができた。このことは、EUの民主的構造の変容について、有識者の中で決して単純ではない認知構造が生じていることをうかがわせるものといえる。ただし、実際に回答が得られた回答者の出身国・地域には偏りがみられるため、3月一杯までアンケート回収期間を延長して、より幅広い範囲の研究者から回答を得るよう努めた。この第一次アンケート結果についての分析と総括は、25年度2月の研究会議に続き、4月末に研究会議にて討議する。
ＥｎｄＭＴ制御機構の解明およびこれを基盤とした新規がん治療戦略の開発

がん細胞を取り巻く宿主間質細胞が腫瘍の進展を促進するキーファクターになることが知られている。本研究は、腫瘍内血管内皮細胞が間葉系細胞様の形質を獲得する(内皮間葉転換;EndMT)ことで腫瘍の進展を促進する可能性が報告されていることに基づき、1腫瘍内におけるEndMTの誘導メカニズムを解明すること、2EndMTががん病態に与える影響を解析すること、3腫瘍内EndMTの阻害を戦略とする新規がん治療を開発すること、の3点を大きな目的としている。前年度までに、血管内皮細胞に重要な転写因子ERGおよびFLI1の発現が腫瘍内では低下していることにより、EndMTが誘導されていることを見出していた。本年度は主に、ERG/FLI1の発現低下を介したEndMTが腫瘍の進展に与える影響を個体レベルで評価することを試みた。具体的には、血管内皮細胞特異的なErg/Fli1コンディショナルノックインマウス(Cdh5-CreERT2; Rosa26-Erg/Fli1)を作製し、腫瘍内の血管においてもErgおよびFli1の発現が維持される実験系を確立した。次に、本マウスにおいて、同腹コントロールマウス(Rosa26-Erg/Fli1)と比較して腫瘍の進展に違いが見られるかを評価した。その結果、原発腫瘍の増殖および薬剤抵抗性、がんの自発転移に有意な差異は認められなかった。この結果は、腫瘍内においてはERG/FLI1の発現低下によりEndMTが誘導されているが、しかし腫瘍内血管の異常な振る舞いを正常に戻すためにはERGとFLI1の発現を回復させるだけでは不十分であったことを示すと考える。本研究成果を取りまとめた論文を作成し、現在投稿作業を進めている。29年度が最終年度であるため、記入しない。がん細胞を取り巻く宿主細胞ががん悪性化のキーファクターのひとつとなることが知られてきている。本研究では、腫瘍内血管内皮細胞が間葉系細胞に分化転換(内皮間葉転換;EndMT)することでがん悪性化を促進する可能性が報告されていることに基づき、EndMTの発生機序および腫瘍内EndMTのがん病態への寄与の解析、さらに発展的には腫瘍内EndMTの阻害を介した新規がん治療戦略の開発を行うことを目的とする。ヒト臍帯静脈内皮細胞(HUVEC)において血管内皮細胞を規定すると考えられる複数の転写因子のノックダウン解析を行った結果、ERGおよびFLI1のダブルノックダウンによりEndMT様の変化が誘導されることを見出した。このメカニズムを明らかにするため、ERG・FLI1の発現低下に伴う遺伝子発現プロファイルおよびヒストン修飾プロファイルの変化をそれぞれ遺伝子発現マイクロアレイとChIP-seqにより、ERGおよびFLI1のゲノム結合部位をChIP-seqにより解析した。この結果両転写因子が血管内皮関連遺伝子に対する転写活性化因子であることがゲノムワイドに示され、ERG・FLI1の発現低下を介したEndMTの発生機序の一端(内皮細胞の喪失)を説明できた。さらに、ERGおよびFLI1の発現低下がマウスB16F10メラノーマの腫瘍内血管内皮細胞においても見られることを組織免疫染色により確認しており、ERG・FLI1の発現低下を介したEndMTが実際に腫瘍内においても起きていることが示唆された。加えて、ERGおよびFLI1をダブルノックダウンしたHUVECが非常に強くB16F10細胞を誘引することを見出しており、EndMTを起こした血管内皮細胞が血管近傍にがん細胞を誘引することによってがん転移を促進する可能性を示すと考える。ERGおよびFLI1のダブルノックダウンによってEndMTが誘導できることを見出したことにより、第一の目的であるEndMT発生機序解明の大枠が達成された。加えて、さらに詳細な機序の解析に必要な全てのゲノムワイドデータの取得が完了していることから、EndMT発生機序解明に向けた作業が順調に進行していると考える。実際にEndMTという現象の一端である「内皮形質の喪失」を説明できるデータも得た。第二の目的である腫瘍内EndMTのがん病態への寄与の解析について、ERGおよびFLI1がin vivoの腫瘍微小環境において発現低下していることが明らかとなり、in vitroで解析しているものと同様のEndMTが腫瘍内で実際に起きている可能性を示すことができた。今後の個体レベルでの解析の基盤となる示唆的なデータを得ることにも成功しており、初年度として順調な滑り出しであると考える。がん細胞を取り巻く宿主間質細胞が腫瘍の進展を促進するキーファクターになることが知られてきている。本研究は、腫瘍内血管内皮細胞が間葉系細胞に分化転換(内皮間葉転換;EndMT)することで腫瘍の進展を促進する可能性が報告されていることに基づき、1EndMTのメカニズムを解明すること、2腫瘍内EndMTのがん病態への寄与の実際を解析すること、3腫瘍内EndMTの阻害を戦略とする新規がん治療を開発すること、の3点を大きな目的としている。以前より転写因子であるERGおよびFLI1の発現低下がEndMTを誘導することを見出していたが、さらにその下流機序として、両転写因子が転写を促進するマイクロRNA-126(miR-126)の発現低下がEndMTの誘導に重要であることを見出した。また、腫瘍内の血管内皮細胞においてERGおよびFLI1の発現が低下する原因として、腫瘍内にエンリッチされている液性因子があることを明らかにした。特にTNFα、IL-1β、IFN-γといった炎症性サイトカインの寄与が大きいものと考えている。

さらに、腫瘍内のEndMTが腫瘍の進展に与える影響を解析するため、血管内皮細胞特異的なERGおよびFLI1のノックインマウスの樹立を目指している。ES細胞からのキメラマウスの作製を経てERGあるいはFLI1それぞれのfloxマウスの作出に成功しており、現在は血管内皮細胞特異的にCreリコンビナーゼを発現するCdh5-Creマウスとの掛け合わせを順調に進めている。ERGおよびFLI1のダブルノックダウンによってEndMTが誘導されるメカニズムのさらに詳細な下流機序として、miR-126の関与を見出したことにより、第一の目的であるEndMT機序の解明が達成されつつある。第二の目的である腫瘍内EndMTの寄与の解析ついては、腫瘍内でEndMTが起きる(ERGおよびFLI1の発現が低下する)原因について見解を得ることができた。また、最も重要な解析である、マウス個体を用いたがん移植実験についても、必要なマウスモデルの樹立が順調に進行している。最終年度となる29年度中の論文投稿が現実的な視野に入っており、順調な進捗状況と考える。がん細胞を取り巻く宿主間質細胞が腫瘍の進展を促進するキーファクターになることが知られている。本研究は、腫瘍内血管内皮細胞が間葉系細胞様の形質を獲得する(内皮間葉転換;EndMT)ことで腫瘍の進展を促進する可能性が報告されていることに基づき、1腫瘍内におけるEndMTの誘導メカニズムを解明すること、2EndMTががん病態に与える影響を解析すること、3腫瘍内EndMTの阻害を戦略とする新規がん治療を開発すること、の3点を大きな目的としている。前年度までに、血管内皮細胞に重要な転写因子ERGおよびFLI1の発現が腫瘍内では低下していることにより、EndMTが誘導されていることを見出していた。本年度は主に、ERG/FLI1の発現低下を介したEndMTが腫瘍の進展に与える影響を個体レベルで評価することを試みた。具体的には、血管内皮細胞特異的なErg/Fli1コンディショナルノックインマウス(Cdh5-CreERT2; Rosa26-Erg/Fli1)を作製し、腫瘍内の血管においてもErgおよびFli1の発現が維持される実験系を確立した。次に、本マウスにおいて、同腹コントロールマウス(Rosa26-Erg/Fli1)と比較して腫瘍の進展に違いが見られるかを評価した。その結果、原発腫瘍の増殖および薬剤抵抗性、がんの自発転移に有意な差異は認められなかった。この結果は、腫瘍内においてはERG/FLI1の発現低下によりEndMTが誘導されているが、しかし腫瘍内血管の異常な振る舞いを正常に戻すためにはERGとFLI1の発現を回復させるだけでは不十分であったことを示すと考える。本研究成果を取りまとめた論文を作成し、現在投稿作業を進めている。ERGおよびFLI1のダブルノックダウンによりEndMTが発生する機序をさらに詳細に説明するため引き続き得られたゲノムワイドデータの統合的解析を行い、責任因子の絞り込みと分子細胞生物学的な証明を目指す。腫瘍内においてERGおよびFLI1が発現低下しているというエビデンスをさらに蓄積するとともに、腫瘍内でERGおよびFLI1の発現が低下する原因についても調査する。
サ-モトロピック液晶性セルロ-ス誘導体の溶液学的研究

側鎖の炭素数がそれぞれ7及び10のセルロ-スアルキルエ-テルおよび炭素数が10のセルロ-スアルキルエステル誘導体を合成し、これらに分子量分別を施し、比較的分布の狭い(Mw/Mn=1.11.3)多数の分別区分を調製した。粘度法、光散乱法、超越心法などによる解析の結果、これら誘導体は全て、約9.0nmの持続長Pを有し、Pの温度係数(dlnP/dT)は、約5.0x10^<-3>K^<-1>であることが判明した。次に、これら誘導体の液晶ー等方相転移温度Tiを主鎖長の関数として決定し、理論的予測と比較した。この理論はセルロ-ス誘導体を円筒みみず鎖とみなし、その半剛直性と分子分子間排除体積を考慮して組み立てたものである。エ-テル誘導体のTiの分子量依存性は理論と良く一致し、従ってそのサ-モトロピック液晶(コレステリック液晶)は主として排除体積効果(エントロピ-効果)により安定化された中間相であると結論した。一方、エステル誘導体のTiは理論の予測に全く従わず、その液晶相の由来が異なることが示唆される。X線回折および赤外吸収によってエステル誘導体の液晶相を調べた結果、2量体や3量体などのオリゴマ-領域では、分子軸をカラム軸に垂直とするディスコティックカラムナ-相が、また重合度が約30以上のポリマ-領域では、分子軸をカラム軸に平行とするカラムナ-相が形成され、両相とも、側鎖のカルボニル基が液晶相の安定化に重要な役割をはたしていることが判明した。セルロ-ス誘導体のサ-モトロピック液晶性の起源を分子論的に明らかにする目的で、2種のアルキルエ-テル誘導体TriーOーheptyl Cellulose(THC)およびTriーOーdecyl Cellulose(TDC)を合成した。これらに溶液分別およびGPC分別を施し、分子量分布の狭い(Mw/Mn≦1.2)多くの区分を得た。特に、THC区分の数平均重合度DPnはオリゴマ-領域(DPn10)から高分子量領域(DPn2000)に及ぶ。これら分別区分を、光散乱法、超遠心平衡法、粘度法などの物理化学的測定に供し、持続長Pや分子径DならびにPの温度係数などの分子パラメ-タを正確に決定した。また、偏光顕微鏡観察とDSC測定に基づき、各誘導体のネマティック(コレステリック)ーイソトロピック相転移温度Tiを分子量の関数として決定した。一方、格子理論やOnsager型gasーofーrods理論をKhokhlovーSemenovのみみず鎖および自由連結鎖に拡張し、Ti点とセグメント数N=L/PならびにTi点と有効軸比P/Dの関係を理論的に調べた。Ti対NおよびTi対P/D関係に関する理論と実験の一致は良好であった。特に、Ti対Nに関し、実験はみみず鎖モデルに対する理論と極めて良い一致を示した。これらは、セルロ-スアルキルエ-テル誘導体のサ-モトロピック液晶性が分子鎖の半剛直性と屈曲度の温度依存性に由来することを示すとともに、従来より議論の多いセルロ-ス系分子鎖の統計的モデルとして、みみず鎖モデルが適当であることを示唆するものである(福田ら、高分子学会、京都、1991年5月、発表予定)。アルキルエステル誘導体に関する研究は、平成3年度に予定している。この系は新しいタイプの液晶、カラムナ-液晶を形成することが判明しており、エ-テル系との分子論的比較に興味が持たれる。平成2年度の研究で、セルロ-スのアルキルエ-テル誘導体が無容媒系で形成するコレステリック液晶が、主として、セルロ-ス

主鎖の半剛直性に基づくエントロピ-効果(排除体積効果)により安定化された中間相であることを分子論的に明らかにした。3年度の研究では、セルロ-スのアルキルエステル誘導体の液晶性を詳しく調べ、エ-テル及びエステル量誘導体のサ-モトロピック性の相違を比較検討した。数種の全置換セルロ-スデカノエ-ト(TDC)を合成し、分取用GPCを用いて比較的分子量分布の狭い(Mw/Mn=1.01.3)多くの区分を得た。これらエステル誘導体の融点Tmは重合度(DP)によらずほぼ一定の値(約65°C)を示した。一方、液晶一等方相転移温度Tiは重合度依存性を示し、オリゴマ-領域では、DPが2から増加するにつれTiは低下し、DP≧5で液晶性は消失した。X線回折によると、この領域の中間相はディスコティックカラムナ-相であることが判明した。DP≧20で再び中間相が現れ、この相は分子軸をカラム軸方向と平行するカラムナ-相であった。この相のTiはDPと共に上昇し、DP≧200でほぼ一定値(約100°C)を示した。この挙動は、定性的には、エ-テル誘導体のTi点の挙動と一致するものの、Tiが一定となるDPの値が全く異なり(エ-テル誘導体ではDP1000)、排除体積効果のみでは説明できない。因みに、溶液論的に決定した持続長Pの値は、両誘導とも約90Aであり、分子形態は、両者でほぼ等しい。赤外吸収スペクトルの温度依存性を調べた結果、カルボニル基の1750cm^<-1>付近の吸収がTi点で不連続な変化を示すことから、エステル誘導体の中間相が、分子鎖形異方性に加え、カルボニル基の関係する分子間相互作用により安定化された構造であると結論した。
自己組織化マップによる顎矯正手術計画の解析と計画支援システムの開発

本研究では、顎変形症患者の外科的矯正治療における顎矯正手術計画を支援する人工知能システムを開発した。平成13年度は、頭部X線規格写真(以下セファロ)分析(軟組織側貌分析)に基づいた症型分類を目的に、自己組織化マップと遺伝的アルゴリズムを融合した分類手法を考案し、バイオメディカル・ファジィ・システム学会第14回年次大会で発表した。さらに、重み付きユークリッド距離に基づく自己組織化マップを多段配置した分類方法を考案した。これにより臨床医の症型診断と90%以上一致することがわかった。平成14年度は、セファロ分析(軟組織側貌分析)データをもとに類似症例を自動検索する画像データベースの構築を目的に、顎変形症患者の側貌写真および側方セファロ写真を収集し、パソコンに取り込み、パソコン上で硬・軟組織側貌分析を行うプログラムを作成した。また、手術による軟組織側貌計測点の移動量を予測するため、術前の硬・軟組織側貌と顎骨の移動位置から術後側貌を予測する方法を、ネオファジィニューロンおよび分類手法(前年度開発)を組み合わせた手法で提案した。以上の成果を基に、平成15年度は、(1)類似症例を自動検索する画像データベース(プロトタイプ)を作成した。また、(2)術前の側貌形態(硬・軟組織側貌)および顎骨の移動位置から術後側貌を予測するシステムを搭載し、顎矯正手術計画支援システムをパソコン上に構築した。さらに、新規症例に応用して臨床応用の可能性を探ることを目的に、ソフトウェアの開発と改良を行った。本研究では、外科的矯正治療における手術計画を支援するための人工知能システムの開発を目的としている。本年度は、患者のセファロ画像から特徴量を抽出し、それに基づいた症型分類を自己組織化マップと遺伝的アルゴリズムを融合した手法で実現した。自己組織化マップは、入力されるデータ集合をそれらの類似度に応じて2次元のマップ上に写像するニューラルネットワークである。この特徴を利用して自己組織化マップをパターン分類へ応用した研究が数多く報告されている。しかしながら、自己組織化マップで考慮される類似度は主にユークリッド距離測度に基づいているので、抽出した特徴量に不必要なものが含まれている場合、適当な分類が実現されないという問題点がある。これに対し、エキスパートは、入力データに含まれる各要素に対して重み付けを行い、適当な分類を実現していると考えられる。本研究では、重み付きユークリッド距離測度に基づく自己組織化マップを提案した。各要素に対する適当な重み付け係数を決定するために、最適化問題への応用が注目されている遺伝的アルゴリズムを採用した。自己組織化マップの重み付け係数と分類結果を、それぞれ遺伝的アルゴリズムの個体と適応度に対応させることで、エキスパートと同様の分類を行うことが可能である。この手法を第14回バイオメディカル・ファジィ・システム学会年次大会において発表した。また、エキスパートは多くのクラスの分類を行う際、始めはおおまかに、徐々に細かく分類を行っていると考えられる。エキスパートの分類過程をより忠実に実現するために、重み付きユークリッド距離に基づく自己組織化マップを多段に配置する構成も提案した。提案した分類手法を、顎変形症患者の分類に適用したところ、90%以上の正解率を得ることができた。この結果を第3回自己組織化マップ研究会で発表予定である。本年度は、顎変形症患者の症型分類アルゴリズムの構築と、術後の側貌予測アルゴリズムの開発を行い、これらソフトウェアのパッケージングに関して研究を行った。具体的には、自己組織化マップと遺伝的アルゴリズムを融合した手法を用いて、顎変形症患者の症型分類を行うアルゴリズムを開発した。自己組織化マップは分類問題に多く用いられているが、パラメータの決定に問題がある。一方、遺伝的アルゴリズムは最適化問題に非常に有効な手法である。提案手法は遺伝的アルゴリズムを用いて自己組織化マップのパラメータを決定するものである。従来の線形分類法や非線形分類法などでは顎変形症患者の症型分類は困難であったが、本手法により高い精度で分類が可能であることを確認した。

この結果をInternational Conference on Soft Computing and Intelligent Systems (2002年10月21-25日につくば市で開催)において報告した。また、ネオファジィニューロンと呼ばれるニューロンモデルを用いて、術前の硬組織計測点と軟組織計測点の座標および術後の硬組織計測点の座標に基づいて、術後の軟組織計測点の座標を高い精度で予測する手法を開発した。さらに、術前の患者を上述のシステムで症型分類し、各症型に用意した予測システムを用いることで、より高い予測精度が実現できたことを確認した。この結果を第15回バイオメディカル・ファジィ・システム学会年次大会(2002年10月19-20日に下関市で開催)において発表した。以上の2つのアルゴリズムを、ユーザーインターフェイスの優れたソフトウェアで実装するために、株式会社キューブスにパッケージングを依頼した。現在、ソフトウェア上で分類・予測が可能な状態である。本研究では、顎変形症患者の外科的矯正治療における顎矯正手術計画を支援する人工知能システムを開発した。平成13年度は、頭部X線規格写真(以下セファロ)分析(軟組織側貌分析)に基づいた症型分類を目的に、自己組織化マップと遺伝的アルゴリズムを融合した分類手法を考案し、バイオメディカル・ファジィ・システム学会第14回年次大会で発表した。さらに、重み付きユークリッド距離に基づく自己組織化マップを多段配置した分類方法を考案した。これにより臨床医の症型診断と90%以上一致することがわかった。以上の成果は1st.Int.Conf.on Soft Computing and Intelligent Systems、バイオメディカル・ファジィ・システム学会九州山口支部会、第3回自己組織化マップ研究会およびバイオメディカル・ファジィ・システム学会第15回年次大会にて発表した。平成14年度は、セファロ分析(軟組織側貌分析)データをもとに類似症例を自動検索する画像データベースの構築を目的に、顎変形症患者の側貌写真および側方セファロ写裏を収集し、パソコンに取り込み、パソコン上で硬・軟組織側貌分析を行うプログラムを作成した。また、手術による軟組織側貌計測点の移動量を予測するため、術前の硬・軟組織側貌と顎骨の移動位置から術後側貌を予測する方法を、ネオファジィニューロンおよび分類手法(前年度開発)を組み合わせた手法で提案した。以上の成果を基に、平成15年度は、(1)類似症例を自動検索する画像データベース(プロトタイプ)を作成した。また、(2)術前の側貌形態(硬・軟組織側貌)および顎骨の移動位置から術後側貌を予測するシステムを搭載し、顎矯正手術計画支援システムをパソコン上に構築した。さらに、新規症例に応用して臨床応用の可能性を探ることを目的に、ソフトウェアの開発と改良を行った。これらの成果を、第16回国際口腔顎顔面外科学会および第16回バイオメディカル・ファジイ・システム学会年次大会において発表した。