hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
DNA増幅によるヒト・サイトメガロウイルス検出法の開発とその臨床応用

1.HCMV・AD169株のimmediate early(IE)領域にDNAで346bp、RNAで232bpの増幅断片を設定してprimerを作成した。PCRはSaikiらの方法に準じ、DNA Thermal Cyclerを用いて30サイクル増幅した。ウイルスmRNAの検出は、検体から抽出したRNAにreverse transcriptaseを作用させてcDNAを合成してPCRを行った。2.作成したプライマ-はHCMVのDNAを増幅したが他のヘルペス科ウイルスDNAやMRCー5細胞DNAを増幅せず、特異性が確かめられた。また、検出感度を検討した結果、10^<ー3>10^<ー4>pgのHCMV・DNAの検出が可能であった。3.HCMVをMRCー5細胞に感染させたあと経時的にmRNAの検出を試みたところ、感染後24、48、72時間では検出できたが、96時間以降は検出できなかった。4.前年度に報告したLAのプライマ-と今回作成したIEのプライマ-を併用することにより、DNAレベルでのHCMVの検出はより確実となった。また、in vitroの系でRTーPCRによりmRNAが検出し得たことから、今後臨床検体について潜伏感染時と再活性時のIEのmRNAの発現状態について検索することが可能になった。
MRSA DNAワクチンによる人工血管感染予防

MRSAに対するDNAワクチン合成と、MRSA重症感染症モデルと人工血管感染モデルの作成を行った。申請書に記載したDavid Mらの方法ではワクチン合成確立に至らず、Hu DLらの方法に変更したが、安定合成に至っていない。一方で細菌学的手技は上達し、MRSAの菌量を調整する手技は確立しており、MRSA縦隔炎モデルを完成させ、バイオフィルム形成人工血管(細菌含有層性)の作製中である。感染性人工血管移植モデルは、当科では確立しているので、速やかに作成する。DNAワクチンの安定供給を実現する必要がある。本研究は動物実験によって、人工血管感染の新しい予防法の開発を狙いとしている。具体的にはDNAワクチンの技術を血管外科領域に導入し、最も治療抵抗性であるMRSAを対象として、人工血管感染の予防法として確立することである。交付申請書に記載したとおり、22年度は(1)MRSAワクチンの合成方法の確立(2)MRSAワクチンの体内導入法の確立を目標としていた。(2)MRSAの体内導入法に関しては、交付申請書にはラットの腎臓の重症感染症モデルを用いると記載したが、文献検索の結果、MRSA縦隔炎モデルの方が研究内容に合致すると考え変更した。交付申請書に記載したとおり、22年度は(1)MRSAワクチンの合成方法の確立(2)MRSAワクチンの体内導入法の確立を目標とし、23年度は(3)MRSAワクチンを用いる人工血管感染の予防効果の評価(4)実施条件の最適化と感染予防のための新技術の開発、を目標としていた。(1)MRSAワクチンの合成に関しては、昨年度から引き続いて合成に力を入れているが、現在も難渋しておりHu DLらの方法(Infect Immun.2005:73:174-80)を用いているが、安定した合成に至っていない。(2)MRSAワクチンの体内導入法の確立に関しては、昨年度の報告書に記載した通り、MRSA縦隔炎モデルの方が研究内容に合致すると考え変更した。現在、ラットMRSA縦隔炎モデル(Journal of Chemotherapy. 2006 ; 18 : 268-77)が手技的に確立され、(1)のDNAワクチン合成が達成され次第導入を行う準備ができた。(3)MRSAワクチンを用いる人工血管感染の予防効果の評価としてバイオフィルム形成人工血管の作製中である。MRSAの菌液を1.0×10^8colony-formingunits(CFU)/mlに調整する手技は確立しているので、計画書通りバイオフィルム形成(細菌含有層性)人工血管を作製している。(4)実施条件の最適化と感染予防のための新技術の開発に関しては、感染性人工血管移植モデルに作成において当科の岩田・村瀬の協力を得て速やかに達成できる見込みである。DNAワクチンの安定供給を実現する必要があり、これを急いでいる。
多元情報を含有できる光学色素分子の創製と物質センシングへの方法論の展開

今後のオプトード開発においては光スペクトルから様々な多情報を得ることができる色素の設計が重要であると考えられるため、本研究では、新規センシング材料として、新しい設計概念を取り入れた多元情報色素(Multi-information dyes:MIDs)の合成と機能評価を行った。合成に先立って分子設計上考慮したポイントは以下の通りである。1)一分子中に共役系を介してプラスとマイナスの異符号の電荷を持たせることにより,様々な光スペクトル変化を誘起させる。2)色素分子の共役系に直接関与する位置に電子供与性及び吸引性の官能基を系統的に導入することにより,光スペクトル変化をコントロールする。3)センサーデバイスへの応用を容易にするために、ポリマーなどへの固定化に有効なサイトを持たせる。この様な分子設計に基づき、主としてメロシアニン系の12種類のMIDsを設計、合成した。そして、それらの色素と種々の物質との相互作用を調べることによって、色素の化学構造と吸収スペクトル情報の相関を求めた。この結果を基に、開発した色素を利用して様々なオプティカルケミカルセンシングの応用へと展開した。その結果、以下のような特性及びセンシング応用が可能であった。1)水分中のアルコールセンシングへの応用:MIDsを可塑化PVC膜(膜溶媒:NPOE)に包括させてアルコールセンシング膜を作製し、水溶液中のエタノール濃度の測定を可能とした。2)アニオンセンシングへの応用:プロトンとアニオンの協同抽出を利用したアニオン濃度測定を行った。可塑化PVC膜(膜溶媒:BEHS)にMIDsを包括させてアニオンセンシング膜を作製、水溶液中の過塩素酸イオン濃度の測定を可能とした。このように、MIDsは新規情報素子として様々な物質センシングに応用が可能である。三次元的スペクトル情報を含有できる光学色素分子として新しい概念を盛り込み、新規色素分子の構造の設計と合成を行った。分子設計上の概念は以下の通りである。1)一分子中に、共役系を通して複数異符号の電荷を持たせることにより、様々なスペクトル変化を誘起させる。2)色素分子の共役系に直接関与する電子供与性及び吸引性の官能基を系統的に導入することにより、スペクトル変化をコントロールする。3)使い易いセンサーデバイスへの応用を考慮し、ポリマーなどへの固定化に利用できるサイトをもたせる。ここでは共有結合による固定化サイトを考慮して、末端にオレフィン部位を持つベタイン型色素分子と、共に脂溶性側鎖を持つベタイン型色素分子を16種類合成し実験を行った。この色素を様々な溶媒系に溶解させて、分光光度計による吸光度測定を行った。又、この色素をクロロホルムに溶解させた溶媒抽出実験も行い、抽出後の油層の吸光度測定を同様な方法により行った。この色素は従来から用いられているpH指示薬と同様の、プロトン化による吸光度変化の他に、極性の変化(溶媒和)による最大吸収波長の変化も得ることができ、1つのスペクトルから多次元的な情報を得ることが可能である。色素分子に導入する官能基を変えることにより、これらのpH特性、ソルバトクロミック特性を変化させられることがわかり、電子吸引性や供与性基の導入によるpKaのコントロールも同時に可能であった。これらの色素のpH特性、ソルバトクロミック特性の検討から、このような色素分子によるpHセンシング、協同抽出によるイオンセンシング、ソルバトクロミック特性による有機溶媒中の水分測定、アルコール類の抽出による中性分子測定など、幅広いオプティカルセンシングへの応用の可能性があることがわかった。多元情報を含有できる色素分子としては、以下のコンセプトに基づいて設計し、光学的な物質センシングへの応用を検討している。(a)様々な吸収スペクトル変化を得るための色素骨格の選択。

(b)色素の共役系に電子吸引性・供与性の官能基を導入して、色素特性の制御を行う。(c)センサーデバイスへの応用を考慮し、色素分子内に固定化サイトを導入する。本年度は、さらに高感度なセンシングへの応用を可能にするために、新しい光学情報色素の設計・合成を行った。この分子には色素骨格として顕著なソルバトクロミズムを示すことで知られる、Pyridinium N-phenoxidebetaine骨格を導入した。新規に合成した色素の基礎特性として、酸塩基特性とソルバトクロミック特性を調べた。その結果、この色素は顕著なソルバトクロミズムを示し、pH測定や有機溶媒中の水分測定など、種々のオプティカルセンシングへの応用の可能性があることが分かった。KD-M102と呼ぶ新規合成色素は、周囲の極性及びpHの変化に依存した構造変化からの吸光スペクトル変化を示す。この色素を様々な溶媒に溶解し(2x10-4M)、吸光スペクトル測定を行った。色素のpH特性は、メタノール:水=2:1(v/v)の組成で水のpHを変化させた場合の吸光度測定によって調べたところ、メタノール:水系におけるpKaは4.6であった。これは、色素中のBr基の効果によるもので色素は低いpKa値を示す。これまでの研究から、このような特性は中性pH域においてもソルバトクロミズムを示す電荷誘起型の分子型が保たれ、有機溶媒中の水分測定に有効である。この色素を用いて、THF中の水分組成を変化させたときの吸収スペクトルの変化を調べたところ、有機溶媒中の水分濃度を最大吸収波長によって測定することができることが分かった。また、極性変化に対する色素の感度が昨年度に報告したメロシアニン型の色素(KD-M5)より上昇し、以前より高感度なセンシングが可能となった。多元情報を含有できる色素分子として、以下のコンセプトに基づいて分子設計し、光学的な物質センシングへの応用を検討した。(a)様々な吸収スペクトル変化を得るための色素骨格を選択する。本年度は、高感度なセンシングへの応用を可能にするために、新しい光学情報色素の設計・合成(KD一M7)を行った。この場合、色素分子の骨格として大きなソルバトクロミズムを示すと考えられたメロシアニンを選んだ。実験には、新規に合成した色素のKD-M7と昨年までのKD-M5を使用した。1)溶媒特性による最大吸収波長の変化量が大きく、pKaの低いKD-M5を用いてアルコール濃度測定を行った結果、アルコール濃度変化に応じた最大吸収波長の変化が観察された。KD-M5を可塑化PVC膜に包括した膜センサーにおいてもアルコール濃度変化に応じた最大吸収波長の変化を示し、アルコール濃度測定が可能であった。また、濃度が一定であれば最大吸収波長の位置によって、アルコールの種類の判別も可能であった。
格子頂点作用素代数の部分代数の研究

格子頂点作用素代数の中で、互いに直交する共形元から生成されるヴィラソロ頂点作用素代数のテンソル積に同型な部分代数を考える。格子頂点作用素代数を、この部分代数の既約加群の直和に分解することにより、頂点作用素代数の構造に関する知見を得ることを目標に研究した。既約加群は、この部分代数の加群として最高ウエイトベクトルにより生成されるので、格子頂点作用素代数に含まれる最高ウエイトベクトルを決定することに、問題は帰着する。格子としては、A型、D型、およびE型のルート格子を√2倍したものを扱う。平成13年度に得られた研究成果は以下のとおりである。1.格子が√2A_1型の場合に、ウエイトが2以下の最高ウエイトベクトルをすべて決定した。2.格子が√2D_1型の場合、互いに直交する共形元の選び方は2通りある。このうちの一方については、最高ウエイトベクトルをすべて決定した。もう一方の選び方に対しては、ウエイトが2以下の最高ウエイト決定するにとどまっている。3.格子√2A_3型の場合、最高ウエイトベクトルはすでに決定されているが、それをもとに整数環の8を法とする剰余環上の符号に対応して新しいタイプの頂点作用素代数を構成した。4.格子が√2A_3型の場合の研究をもとにして、ムーンシャイン頂点作用素代数をある部分代数の既約加群の直和に分解することに成功した。平成14年度には、位数3の自己同型によるオービフォールドについても研究に着手し、次の成果が得られた。5.格子が√2A_2型の格子頂点作用素代数の位数3のオービフォルドの部分代数として、中心電荷が6/5のW_3代数を発見した。本研究は、格子頂点作用素代数を、その部分代数の既約加群の直和に分解することにより、頂点作用素代数の構造に関する知見を得ることを目的としている。また部分代数は、互いに直交する共形元から生成されるヴィラソロ頂点作用素代数のテンソル積を考える。この部分代数の既約加群は、最高ウエイトベクトルにより定まるので、格子頂点作用素代数に含まれる最高ウエイトベクトルを決定することに問題は帰着する。本年度に得られた研究成果は以下の通りである。1.格子が√2A_1型の場合に、最高ウエイトベクトルのうちウエイトが2以下のものをすべて決定した。格子頂点作用素代数は、ウエイトが2以下の最高ウエイトベクトルおよび共形元により生成されるので、頂点作用素代数の生成系が決定されたことになる。最高ウエイトベクトルをすべて決定することは、今後の課題である。このうち一方のものについては、最高ウエイトベクトルをすべて決定することができた。しかし、もう一方の選び方に対しては、ウエイトが2以下の最高ウエイトベクトルを決定するにとどまっている。3.格子が√2A_3型の場合、最高ウエイトベクトルはすでに決定されているが、その結果をもとにして、格子頂点作用素代数およびその加群の構造を調べることにより、整数環の8を法とする剰余環の元を成分とするある種の符号に対応して、新しいタイプの頂点作用素代数を構成した。4.格子が√2A_3型の場合の研究をもとにして、ムーンシャイン頂点作用素代数を、互いに直交する共形元から生成される部分代数の既約加群の直和に分解することに成功した。本研究の目的は、頂点作用素代数の重要な例である正定値偶格子から定義される格子頂点作用素代数の構造を、そのよい性質を持つ部分代数の加群として調べることである。出発点とする格子頂点作用素代数としては、A型あるいはD型ルート格子を√2倍した格子から定義されるものを考える。

この格子頂点作用素代数には、互いに直交する共形元が存在することが知られている。部分代数としては、これらの互いに直交する共形元から生成されるものを扱う。このような部分代数はヴィラソロ頂点作用素代数のテンソル積に同型になるが、ヴィラソロ頂点作用素代数の表現が詳しく研究されているため、その加群としてもとの格子頂点作用素代数を調べることができる。問題は、この部分代数に関する最高ウエイトベクトルを決定することに帰着する。本年度には次の成果が得られた。1.格子が√2D_1型の場合、共形元のある選び方に対してウエイトが2以下の最高ウエイトベクトルをすべて決定した。2.格子が√2A_3型の場合の研究をもとにして、ムーンシャイン頂点作用素代数をある部分代数の既約加群の直和に分解することに成功した。3.格子が√2A_2型の場合の研究をもとにして、ムーンシャイン頂点作用素代数の自己同型群であるモンスターの位数3の元を構成した。このほか、頂点作用素代数の自己同型による固定点全体、いわゆるオービフォールドに関係する研究として、4.格子頂点作用素代数の位数3の元による既約ツイスト加群を分類した。
脂肪酸合成鍵酵素におけるZnフィンガーモチーフの機能の解析

脂肪酸合成には主に二つの酵素が必要である。アセチルCoAからマロニルCoAを生成するアセチルCoAカルボキシラーゼ(ACCase)と脂肪酸合成酵素である。中でもACCaseは鍵酵素であり、脂肪酸合成の最初のステップを触媒し、油合成量を決めている。この酵素は二つの活性からなっている。ビオチンカルボキシラーゼとカルボキシルトランスフェラーゼ(CT)である。葉緑体や細菌のカルボキシルトランスフェラーゼのアミノ酸配列を調べると、Znフィンガーモチーフに似た配列が保存されている。これまで、このモチーフと酵素活性にどのような繋がりがあるのかは不明であった。Znフィンガーモチーフは、様々な重要な機能をしていることがよく知られているので、このモチーフと酵素活性の間に相関があると仮定し、それを証明する実験を行うことを当研究の目的とした。これまで、カルボキシルトランスフェラーゼ(CT)を精製するために酵素にヒスチジンタグをつけて実験を行っていた。しかし、ヒスチジンタグ自体も金属と強く相互作用してしまうので、Znフィンガーモチーフと酵素活性の相関はわからなかった。そこで、キチン結合ドメインを融合したCTを大腸菌で発現させて、精製し、モチーフと活性の相関を調べた。その結果、1)Znフィンガーモチーフを削除すると酵素活性がなくなること、2)キレート剤で配位している金属を除去すると酵素活性がなくなること、3)高周波プラズマ発光分光分析装置により配位している金属が亜鉛であること、がわかった。以上より、CTのZnフィンガーモチーフには亜鉛イオンが配位しており、この亜鉛イオンの結合が酵素活性に必須であることがわかった。植物の脂肪酸合成の鍵酵素であるアセチルCoAカルボキシラーゼは複合酵素でビオチンカルボキシラーゼとカルボキシトランスフェラーゼとからなる。カルボキシトランスフェラーゼは2つのサブユニット、アルファとベータからなる。このベータサブユニットに保存されたZnフィンガーモチーフがあり、その機能が不明である。われわれは活性のある組換え型酵素を大腸菌で発現することに成功しているので、さまざまなドメインを持った酵素を作成することができる。本研究ではZnモチーフをもつ領域を削除すると活性ある酵素が得られないので、このモチーフの役割を調べることを目的としている。このモチーフがFeまたはZnと結合するかを調べるため、モチーフの有無で組換え型酵素を作成し、配位している金属を高周波プラズマ発光分光分析装置で調べた。その結果Feは検出されずZnが検出された。これ以外にNiも検出された。本酵素は精製を容易にするため、His-tagを用い、Niカラムを使用するので、Niが溶出されたと推定される。結合したZnのモル比を算出するため、アミノ酸分析を併用し、分析したが、まだ再現性のある結果が得られていない。混入するNiが多すぎ、分析値が大きく変動するので、測定方法をさらに改良しなければならない。本モチーフは大腸菌型酵素にだけあり、動物型酵素にはないので、活性にどのような役割を果たすのか、今後検討すべき課題である。またモチーフを構成している近辺のアミノ酸配列を改変し、モチーフの活性に及ぼす影響などを今後調べる予定である。しかし、このモチーフと酵素活性にどのような繋がりがあるのかは不明であった。

昨年度は、カルボキシルトランスフェラーゼ(CT)を精製するために酵素にヒスチジンタグをつけて実験を行った。しかし、ヒスチジンタグ自体も金属と強く相互作用してしまうので、Znフィンガーモチーフと酵素活性の相関はわからなかった。今年度はキチン結合ドメインを融合したCTを大腸菌で発現させて、精製し、モチーフと活性の相関を調べた。その結果、1)Znフィンガーモチーフを削除すると酵素活性がなくなること、2)キレート剤で配位している金属を除去すると酵素活性がなくなること、および、3)高周波プラズマ発光分光分析装置により配位している金属が亜鉛であること、を明らかにした。以上より、CTのZnフィンガーモチーフには亜鉛イオンが配位しており、この亜鉛イオンの結合が酵素活性に必須であることを明らかにした。
異常出水にも生物生息空間の機能を保有する自己保存型水域環境の創出手法

宮崎県を流れる五ケ瀬川水系北川河口汽水域を対象に、自然界の変動を受ける空間にて生物を保全するための方法論を、甲殻類を対象として確立することを目的とした。具体的には、(1)環境省のデータ不足種であるカワスナガニの生活史を明らかにしえた。幼生期の挙動を明らかにするために、遺伝子による種の識別を可能にした。その結果、幼生は外洋に流れで得ることは少ないことを明らかにした。(2)対象生物の生活史における耐性や選好性を室内実験にて確認し、数理シミュレーションにより現地の生息状況との整合性を確認することができた。つまり、幼生は塩水懊の先端付近に集積することを示した。これは塩水の進入を利用して上流に上って来ていることを示しており、流動特性をうまく利用していることを明らかにした。(3)現地観測により生活史における移動特性、生息空間の選好性と幼生の着床特性を明らかにしえた。幼生期は比較的高い塩分を、成熟後は低い塩分を好むことを明らかにした。(4)対象生物の生息空間の条件を調査し競合種との生息可能域の重複を明らかにした。ハマガニなど環境をうまく利用しているものがほとんどであった。(5)異常出水に対応するための保護策としてワンドのような出水期に成体そのものが流されないような構造物を作っておくことで、中規模の出水による砂分の輸送が礫層にもぐり身を守っているカワスナガニにとっては最も影響が大きいので、砂分の堆積位置の調整が重要であることを明らかにした。本年度の研究成果は以下のとおりである。1)北川感潮域縦断方向の生息分布調査平成16年10月の台風23号による出水の後には8万個体と調査開始以来最も小さい値を示した.その後約1年間は低水準手推移している.平成18年度は個体数が多少回復したが,依然平成15年度と比べると依然低い水準にある.抱卵率は夏期に高く冬季に低くなり,水温の変動と平行して変動している.また,カワスナガニの生息にはD_<50>=1632mm程度で均等係数の大きい河床が適しているが,中央粒径のD_<50>=2mm以下となるような砂河床には生息は不向きであることを明らかにした.2)現地でのメガロパ幼生の回帰分布調査採取されたメガロパの数は平成18年9月には200個体以上のメガロパが見っかったが,11月にはその半分以下となりとなり,1月はほとんど見っからなかった.北川に生息するカニ類は夏季に抱卵するものが多く,艀化後数週間1ヶ月程度の浮遊養成期間を経て回帰してきたものと考えられる.9月の調査では,0kmと5.2kmでの結果に有意な差は見られなかったが,11月の調査では,ほとんどのメガロパが0kmで採取された.また,9月に採取されたメガロパは甲幅が,1mm程度のものが主であったが,11月に採取されたメガロパは2mm程度の甲幅であり季節によって回帰してくる種が季節によって異なっていると思われる。3)遺伝子レベルでのカニ類幼生の同定技術の確立今回作成したプライマー(Crab16sL1,Crab16sH1)は16s領域の種の特異性の表れる部分300bp程度を増幅する.平成18年9月に採取されたメガロパの塩基配列を確認したところ採取ポイントによる有意な差は見られなかった.同定が不可能である種が存在するので,今後DNAのリストを増やし,河川感潮域に生息する浮遊幼生期間の生活ステージを推測することを可能にしたい.宮崎県を流れる五ヶ瀬川水系北川河口汽水域を対象に、自然界の変動を受ける空間にて生物を保全するための方法論を、甲殻類を対象として確立することを目的とした。

具体的には、(1)環境省のデータ不足種であるカワスナガニの生活史を明らかにしえた。幼生期の挙動を明らかにするために、遺伝子による種の識別を可能にした。その結果、幼生は外洋に流れで得ることは少ないことを明らかにした。(2)対象生物の生活史における耐性や選好性を室内実験にて確認し、数理シミュレーションにより現地の生息状況との整合性を確認することができた。つまり、幼生は塩水楔の先端付近に集積することを示した。これは塩水の進入を利用して上流に上って来ていることを示しており、流動特性をうまく利用していることを明らかにした。(3)現地観測により生活史における移動特性、生息空間の選好性と幼生の着床特性を明らかにしえた。幼生期は比較的高い塩分を、成熟後は低い塩分を好むことを明らかにした。(4)対象生物の生息空間の条件を調査し競合種との生息可能域の重複を明らかにした。ハマガニなど環境をうまく利用しているものがほとんどであった。(5)異常出水に対応するための保護策としてワンドのような出水期に成体そのものが流されないような構造物を作っておくことで、中規模の出水による砂分の輸送が礫層にもぐり身を守っているカワスナガニにとっては最も影響が大きいので、砂分の堆積位置の調整が重要であることを明らかにした。
次世代オンサイト簡易遺伝子検査法「RCA-PAS法」の開発

本研究では遺伝子検査を臨床現場で使用するための簡易な遺伝子検査法の開発を目指して、RCA-PAS法を構築し、反応条件及び検出法について研究を行った。従来のRCA法では、環状化・等温増幅によるDNA合成の2段階の反応で行ってきたが、反応条件の最適化を行うことで同時に進行させることに成功した。更に、2種類の遺伝子配列に対してRCA法を行い、STH-PASを用いて多検体検出を試みた。その結果、STH-PAS上で各配列に特異的な検出に成功した。標的の配列と異なる組み合わせの場合にはシグナルは検出されず、本研究によって遺伝子の増幅・検出を容易にできるシステムの構築に成功した。等温増幅法を用いた簡易遺伝子検査法を実現するため、本研究のターゲット遺伝子として腸管出血性大腸菌のベロ毒素1遺伝子を選択し、遺伝子情報の収集を行った。収集した情報を基に保存性の高い領域をプローブ候補として選択し、等温増幅に用いるプローブを作製した。本検出法では、プローブの環状化、プローブを鋳型としたDNAの増幅、合成されたDNAの断片化の各工程に酵素を使用するが、環状化・増幅課程に適した酵素についていくつかの酵素を試験し、現段階では、環状化にはPreCR Repair Mix、増幅課程にはBstDNAポリメラーゼが適していることを明らかにした。断片化に用いる酵素は、DNA配列に依存するため、プローブの高次構造を解析した結果からEcoRIを候補として選択した。今後、マルチプレックスでDNA合成を行う際には、今年度選択した酵素を第一候補として使用し、反応条件の最適化を行う予定である。各工程の成否は、クロマトグラフの1つであるPASのシグナルの有無を主として用いている。環状化反応はターゲット遺伝子とプローブの両端にあるターゲット遺伝子の相補配列結合によってプローブ両端が近接することによって酵素が作用し、環状化を可能とするが、温度によって非特異的な結合が起こるため、温度の検証を行っている。その結果、16°Cで30分間反応を行った場合に最も非特異的な結合が抑えられることが示唆されている。増幅課程についても同様に温度の検証を行っており、最適温度は60-65°Cであることが示された。現在、反応時間は2時間であるが、時間を短縮しても同様に検出可能かを検証中である。断片化については、断片化処理によって、電気泳動ではシグナルが確認できるが、PAS上では、シグナルが減少することが明らかになり、現在は断片化を省略することも1つの候補として考えている。申請書で提案した時間軸にほぼ沿って実験を進めることができている。現状は、感度・反応時間にまだ課題が見られるものの、反応条件を整えることによって改善が可能であると考えている。昨年度は腸管出血性大腸菌由来の毒素遺伝子であるstx1の遺伝子配列から特定配列を抽出し、等温増幅反応を行い、検出することに成功している。本年度はstx1に加えてstx2遺伝子配列から保存性の高い領域をプローブ候補として選択し、等温増幅法によって遺伝子検出試験を行った。その結果、stx2を特異的に検出することに成功している。更にこの2種類の遺伝子配列について、1反応での同時に遺伝子検出するとともに反応時間の短時間化を目指して、環状化反応と増幅反応の同時進行を試みた。反応に必要となる酵素種の探索を行うとともに、最適な温度、塩濃度、時間などの反応条件を試験し、核酸クロマトグラフの一つであるSTH-PASを用いて検出を試みた。その結果、環状化酵素としてE.coli Ligaseを用いることで、通常14°Cで行うライゲーション反応より高温へシフトさせても非特異的な結合が起こりにくいことが示された。等温増幅酵素としてBst DNA合成酵素を用いることで、反応温度に幅を持たせた。結果として適正温度の範囲内である60°Cで増幅が確認され、更に環状化反応も特異的に起こることが示された。従来法では増幅産物を断片化してして検出していたが、断片化によってシグナルが減少するため省略することとした。環状化・増幅の同時進行に必要とする反応時間は1時間であり、従来の反応系(2時間)と比較して短時間で進めることができた。それぞれの遺伝子配列に対して相補的なプローブのみが環状化し、これを鋳型とした増幅反応が起こった結果、STH-PASにてそれぞれの遺伝子に特異的なシグナルが検出された。一方で、検出感度は100nMであり、更なる高感度化が期待される。これらの結果を基に現在論文を作成中である。今後はプローブ配列の最適化を進めることで更なる高感度化を進める予定である。当初の計画に従ってマルチプレックスでの検出に対応するべく、ベロ毒素2の遺伝子についても情報収集を行い、プローブの作成を進める。

非特異反応が起こるような場合には、プローブ内の共通配列についても最適化を進める。また、現在選択した酵素は、最適温度に幅があることが知られており、酵素を混合して環状化とDNA増幅を同時に進めることができるような条件を検討していく予定である。核酸科学概ね順調に進めているものの、予定した制限酵素の試験を省略したため、計画の修正を行った。予想に反してDNA合成に用途を変更したものの、使用しきることが困難であった。今年度の状況を踏まえ、マルチプレックスの試験を行うため、DNA解析のための装置を購入するとともに、プローブ候補を増やして試験を進める。更に、シングルの遺伝子検査について、論文の投稿を予定している。研究成果は、論文の他、学会発表を予定している。
産業廃棄物処理政策と集積に関する空間経済学分析

本年は研究機関最後の年であるため,研究の総括および研究成果の発表を中心に行った。まず,前年度同,産業汚染が地域集積にいかなる影響をあたえるのかについて分析を行うため。既存のモデルにこれらの要素を入したモデルを構築し,分析を行った。その上で環境政策が経済システムにいかなる影響を与えるかについて明らかにした。また,従来の核・周辺モデルは非線形の一般均衡体型で記述しされていたため,数値解析によるシミュレーションが主流であった。Ottaviano,Tabuchi,and Thisse(2002)は解析的に解ける核・周辺モデルの開発に成功し,筆者もこのモデルに環境を導入したモデルを構築し分析をおこない,環境を含まないOttaviano,Tabuchi,and Thisse(2002)とは異なる結果が生じることを示した.この研究成果はアメリカのSavannah(GA)で開催された国際地域学会の北米大会で報告された。本研究では,各経済主体による廃棄物発生のメカニズムの定式化を行い,それが各経済主体にいかなる影響をあたえのかについて環境経済学ならびに空間経済学の観点から理論的に明らかにすることを目的としている.主たる研究成果は以下の通りまとめられる.『`Industrial Garbage Tax and Environmental Policy Game under a Two-Region Model』では,財を生産する企業が何らかの廃棄物を生産工程において排出し,それをリサイクルもしくは委託処理し,委託された処理業者が不法投棄する可能性をモデル化した.分析の結果,1地域モデルにおいては,処理業者に補助金を与えることがモニタリングを強化する政策よりも望ましが,2地域モデルに拡張し,地域間で政策ゲームを行った場合,1地域では望ましかった補助金政策が必ずしも望ましくないことを示した.『Trans-boundary pollution transmission and regional agglomeration effects』では,新しい経済地理学の代表的モデルであるKrugman(1991)に工業部門が排出する汚染が農業財部門の生産性に影響を与えるようなモデルを構築し,越境汚染の程度が地域間の人口分布にどのような影響を与えるのか,さらには,環境政策としての課税が人口分布に与える影響についてもシミュレーションによる分析を行った.分析の結果,地域間で均等な人口分布となる均衡が安定から不安定に変わる臨界点に交通費と越境汚染の比率が影響することを示した.また,環境政策として外国の工業財に課税を行った場合,人口が減少することが分かった.本研究では環境政策が都市・農村間の人口移動にいかなる影響を与えるかについて研究を進めた.発展途上国において経済発展のためには多少の環境ダメージは不可避であるという主張のもとで,環境保全は軽視される傾向にあった.そこで本研究では汚染を排出するような工業財部門を想定して,その汚染が他部門に影響を与えるようないわゆるCopeland and Taylor型の定式化を発展途上国の失業問題を内生的に決定するHarris and Todaroモデルに導入してモデルの拡張を行った.このような分析の試みはDaito(2003)などのごく少数の研究でしか存在していない.しかしながら,Daito(2003)では工業財が排出した汚染が都市・農村に居住するいずれの家計にも等しくダメージを与えるという点では,地域という枠組みにおいてはそぐわない.そこでわれわれはこれに都市・農村間で汚染ダメージが異なるような非対称な汚染ダメージを想定し,モデルの構築を行い,分析した.このモデル分析によって得られた知見として,「工業財部門への環境政策は必ずしも都市の失業を悪化させない」というものである.したがって,多くの発展途上国においてなされてきた経済発展のためには環境汚染もやむを得ないという直感的な主張は必ずしも正しくないことを示した.このモデルは"Unemployment, Trans-boundary Pollution, and Environmental Policy in a Dualistic Economy"としてまとめられ,6月に福島大学で開催された日本経済学会およびカナダ・トロントで開催されたRegional Science Association Internationalの北米大会で報告がなされた.さらに環境ダメージを排出する企業に対する政府の関与の効果を分析するための分析も併せて行った.近年,産業組織論の分野で注目を集めているものに混合寡占市場の分析があげられる.これは,利潤最大化を目的とする私企業と社会厚生を最大にする公企業とが競争する市場を分析したものである.このフレームワークにおいて産業汚染を排出するような企業の行動が環境政策によってどのような影響を受けるのかについて分析を行った.分析の結果,企業の民営化が必ずしも環境のダメージの増大にはつながらないことを明示的に示した.この分析結果は,今後の政府の環境政策のあり方を再考する必要があることを示している.本年は研究機関最後の年であるため,研究の総括および研究成果の発表を中心に行った。
全身持久性運動時の高次精神機能への修飾-Single Trial Analysisによる解析-

本研究は、注意や識別、判断といった認知過程に全身持久性運動がいかなる影響を与えるか検討することを目的とした。更に、競技スポーツ経験群と未経験群に対するその影響ほの比較を加え検討する。認知過程の生理的指標として事象関連電位300(以後P3)を用い、従来のP3加算平均法(Squiers1964)による測定と、加算しないP3の単一試行ごとの測定により解析した。その作業課題は、目標刺激(20%)と非標的刺激(80%)からなり、目標刺激に対しkey-press反応を行うもので、安静時と自転車運動時、回復期にわたり断続的に遂行された。被験者は健常な1820才の女性17名(競技スポーツ経験者5名、未経験者6名を含む)で、脳波は両耳朶連結を不関電極としてCzより導出した。データは磁気テープに記録され、解析はoff-lineで、目標刺激に対する反応時間(RT)、P3成分の潜時と振幅を測定した。その結果、RTは運動負荷と伴に増加し、回復期では運動負荷前の値に戻るのに対し、P3振幅および潜時は運動負荷の増加に伴い低下するが、回復期では運動負荷前の値にもどらなかった。これは、P3の変化が代謝性の影響を受けている可能性を示唆している。競技スポーツ未経験群が、運動時にRT遅延およびP3潜時増加を示すのに対し、経験群は、RT短縮およびP3潜時短縮傾向を示した。また、RTとP3振幅、RTとP3潜時の相関が運動群にはみられるが、未経験群にはみられない。更に経験群では運動時に相関係数および一次回帰直線の傾きがより増加し、S.D.はより小さくなった。このことは、反応行動と認知機能のtrainabilityを示唆すると考える。
イギリスにおけるテレビドラマと演劇の影響関係に関する研究

本研究は、イギリスのテレビ放送における事例からテレビドラマと演劇の影響関係について資料調査をもとに考察するものである。調査の成果から、リアルタイムでの放送が大半を占めていた1930年代1950年代中頃における初期のテレビドラマは、原作・脚本・演出・演技など多くの主要な要素を演劇に負っていることが明らかになった。録画・録音といった複製技術がテレビドラマ制作に取り入れられるに従って、テレビドラマの原初的な形態は失われていった。本研究の目的はイギリスのテレビ放送における事例からテレビドラマと演劇の影響関係を明らかにすることである。演劇との関わりから見た1930年から1980年代のテレビドラマの歴史を基礎的な資料調査とこれまでのテレビ研究の成果を参照することで通時的に記述する。これに加えてテレビと演劇双方で作品を残した劇作家、演出家を異なるメディア間の人材交流という観点から調査することで、これまでテレビドラマ研究、演劇研究の間で光が当たらなかった領域についての考察を行う。2014度は主に次の二つの事柄について調査を行った。一つ目はイギリスのテレビドラマ研究における先行研究の調査である。ジョン・コーギー(John Caughie)、ジェイソン・ジェイコブズ(Jason Jacobs)、ジョナサン・ビグネル(Jonathan Bignell)、レズ・クック(Lez Cooke)等による研究を参照しながら通時的なテレビドラマ史の理解に努めた。二つ目は、先行研究の調査によって得られた知見をもとに、具体的な作家、作品の分析を行うことである。1960年代後半から1980年代前半までサミュエル・ベケットが断続的に発表したテレビのための作品を取り上げて、作品内における顔の表象がテレビというメディアの初期的な形式への言及であることを明らかにした。その成果は、「トーキング・ヘッズの系譜学ーベケットのテレビ作品における顔」として学術誌に投稿し掲載された。本研究の目的は、イギリスにおけるテレビドラマと演劇の関係を調査し記述することである。そのために、本年度は二つの観点から調査を行った。一つ目はテレビドラマの歴史を放送技術の観点から考察することである。テレビカメラのサイズ、重量、使用可能な台数、記録媒体(フィルム、ビデオレコーダー)は撮影時に重要な問題であり、演出などの表現にも大きく関わってくる。また、テレビ受信機のサイズ、形状、画質なども同様に考慮すべき点である。二つ目はテレビドラマの制作者(ディレクター、脚本家、カメラマンなど)が技術的な問題をどのように捉えていたのかについて考察することである。テレビドラマは、舞台作品のスタジオでの再現から始まり、劇場からの舞台中継、フィルムなどの記録媒体を利用した放送、野外でのロケーションというように、技術的制約を乗り越えることで新たな表現を獲得してきた歴史がある。制作者による論考、証言を検証することで、放送技術の発展とテレビドラマの表現の間にある連続性を精査した。一つ目については、マーク・アルドリッジ『英国テレビの誕生』Mark Aldridge, The Birth of British Television: A History (Palgrave Macmillan, 2012)を手引きにして放送技術の発展について理解を深めた。初期のテレビについては、ラジオと同じ電波を利用しており、多くの人々がラジオ放送として聴取していたことなどから、他のメディアとの関わりも考察すべき点であることが明らかになった。二つ目については、BBCがテレビ放送の研究のために出版していた報告集B.B.C. Quarterlyを主な考察対象とした。初期BBCのテレビドラマのディレクターだったヴァル・ギールグッド(Val Gielgud)による報告など貴重な資料を収集し、順次分析を進めている。調査については当初の計画通りに進めているが、研究成果をアウトプット出来ていない。テレビドラマという放送劇のスタイルを考える上で、メディアの原初的な形態を創作に取り入れる脚本家としてサミュエル・ベケットの重要性を再確認した。ベケットは、創作するメディアを常に意識し、露骨なまでにメディアそれ自体を作中に登場させているからである。テレビ作品の場合は、テレビというメディアあるいはテレビドラマという形式が作中で言及されることになる。研究対象としたのは、『ねえジョー』(Eh Joe)、『ゴーストトリオ』(Ghost Trio)『・・・ただ、雲が・・・』(...but theclouds...)、『クワッド』(Quad)、『夜と夢』(Nacht und Traume)の五作品である。例えば、最初のテレビ作品『ねえジョー』は、ほとんどワンカットで撮影されており、リアルタイムで放送が行われていた初期のテレビドラマの形式を擬似的に用いており、そこにはないものをあたかも現前しているかのように見せるメディアとしてテレビ放送が言及されてる。また、初期のテレビ放送においては、ラジオ放送との関わりから「音声」と「口」の同期それ自体が視聴者にとって興味深い現象だったが、ベケットのテレビドラマにおいても、顔のクロースアップとリップシンクが作品の重要なシーンに置かれており、初期のテレビ放送への言及として考えられる。以上のような観点からベケットのテレビ作品を精読し、これまでの研究を踏まえた上で日本語への翻訳を行った。この成果は2017年中に出版される予定である。

当初の研究計画通りにイギリスにおけるテレビドラマについての先行研究の調査を行い、テレビドラマ史およびテレビドラマ研究の方法論について理解を深めている。また、投稿論文という形で研究成果をアウトプットすることができた。これまでの調査を続けながら、研究発表、論文投稿というかたちで成果を公開してゆきたい。演劇学これまでの調査を継続しながら、いままで研究対象とされてこなかった劇作家、脚本家、演出家などに調査対象を広げてゆきたい。2015年度はイギリスでの海外調査を行い、日本国内では手に入りにくい資料の収集を行う。そのための準備に取り組みたい。当初の計画では、初年度に研究図書の購入をまとめて行う予定であった。しかしながら、テレビドラマ研究、メディアと演劇についての研究は現在盛んに行われている研究テーマであり、毎年のように研究書が出版されている。研究期間中にこれらの図書を購入し続ける予算確保のために、当初の予定より洋書の購入を控えたので次年度使用額が生じた。研究テーマに関する研究書の購入に充てる。
神経細胞の生命情報の多様化を制御するRNA情報発現メカニズムと機能解明

中枢神経系において選択的スプライシングを制御するメカニズムに注目し、時空間的に選択的スプライシングを制御するRNA結合タンパク質SAM68とSAM-like molecule (SLM)のスプライシングプログラムの解明を行ってきた。網羅的解析によって、SAM68に特異的なスプライシング傾向として3'UTRを含んだexonが強く変動することがわかった。シナプス形成因子IL1RAcPは3'-endプロセシング異常により分泌型フォームとなってしまうことで、欠損マウス脳においてIL1RAcP依存的なシナプス集積能の低下やIL1シグナルに依存的な神経可塑性に異常をきたすことを明らかにした(投稿中)。成人脳では約1000億個にも及ぶ神経細胞が複雑かつ精密なネットワークをつくる。複雑な脳構造の構築と高次機能の発現には膨大な生命情報を必要とする。しかしながら、ヒトにおいても総数僅か2ー3万個程度の限られた遺伝子数に対して、どのように哺乳類の生命高次現象がプログラムされているのかは未だに大きな謎である。選択的スプライシングは単一の遺伝子から複数の遺伝子産物を生み出し生命情報を多様化させる重要な仕組みである。脳は選択的スプライシングの最も盛んな臓器であり、高等動物における複雑な組織構造と機能発現に強く寄与していることが予想される。採択者は、中枢神経系において選択的スプライシングを制御するメカニズムに注目し、これまでに興味深いファクターとして、RNA結合タンパク質SAM68/Sam-like molecule (SLM)を同定してきた。現在SAM68/SLMによる選択的スプライシングを中心とし、時空間的選択的スプライシングプログラムの制御機構と、それのコードする生命情報の多様性と神経系での機能的役割を理解することを目指している。昨年度は、当研究室でエキソンレベルでのマイクロアレイ解析によってSAM68/SLMの標的RNAの網羅的スクリーニングを行ったところ、エキソンレベルで有意な変動を示す遺伝子が300個以上同定され、その中からシナプス形成や特異的回路形成に重要とされる分子を抽出して解析を行った。RT-qPCRによりノックアウトマウスと野生型とのスプライシング比率を比較したところ、特に精神遅滞、自閉症、統合失調症、知的障害などの神経・精神疾患との関連性が示されている神経接着因子などで劇的なアイソフォーム変化が起きていることがわかった。今後は、これらの興味深いアイソフォーム変化に注目し神経系での生理的意義を解明することにより、生命情報の多様性の意義の一端を解き明かしていきたいと考える。今回の網羅的トランスクリプトーム解析によって、興味深い標的RNA分子が同定できたこと、またノックアウトマウスにおいて、これらの明確なスプライシング変化を検出でき、初期段階で予想以上に有益な情報を得ることができた。神経系での機能解析は現在すでに培養神経細胞を用いたin vitroレベルで始めているが、これに加え新たにin vivo(in utero)電気穿孔法など、in vivoレベルでのアッセイをセットアップ中であり、飛躍的な進展が期待される。昨年度は、当研究室でエキソンレベルでのマイクロアレイ解析によってSAM68/SLMの標的RNAの網羅的スクリーニングを行ったところ、エキソンレベルで有意な変動を示す遺伝子が300個以上同定され、その中からシナプス形成や特異的回路形成に重要とされる分子に注目して解析を行った。今後はこれらの興味深いアイソフォーム変化に注目し神経系での生理的意義を解明することにより、生命情報の多様性の意義の一端を解明することをめざす。2015年(採択年)より標的RNAの網羅的検索を目的としたexon microarrayと次世代シークエンス(NGS)のコンビネーション解析によって、興味深い標的RNA分子が同定でき、初期段階で予想以上に有益な情報を得ることができた。特に、ノックアウトマウスで神経・精神疾患との関連性が示唆されている分子群に劇的なアイソフォーム変化が起こっていることがわかり、このようなRNA基質としてIL1RAcP(精神遅滞), Ankyrin-G (自閉症、統合失調症、知的障害), Pcdh15(自閉症、統合失調症、Usher syndrome)などがあり、28年度はこれらに解析の的を絞り込み解析を進めてきた。

このうち、シナプス形成因子として知られるIL1RAcPでは、SAM68が膜型/分泌型のアイソフォーム選択を支配しており、SAM68ノックアウトマウスでIL1rapの3'UTRエキソン選択が大きく変わる。これにより、本来膜型しかない脳内で分泌フォームが異常に増えてしまい、さらにこの分泌フォームがIL1RAcPとその受容体PTPdeltaの相互作用をアンタゴナイズすることで、シナプス形成能が阻害されることを明らかにした。なお、このIL1RAcPに関しては解析がほぼ終了し、すでに現在投稿段階にはいっている。成人脳では約1000億個にも及ぶ神経細胞が複雑かつ精密なネットワークをつくる。しかしながら、ヒトにおいても総数僅か2ー3万個程度の限られた遺伝子数に対して、どのように哺乳類の生命高次現象がプログラムされているのかは未だに大きな謎である。選択的スプライシングは単一の遺伝子から複数の遺伝子産物を生み出し生命情報を多様化させる重要な仕組みである。中枢神経系において選択的スプライシングを制御するメカニズムに注目し、時空間的に選択的スプライシングを制御するRNA結合タンパク質SAM68とSAM-like molecule (SLM)を同定してきた。SAM68/SLMの支配する時空間的スプライシングプログラムの全容解明のため、一昨年度にexon arrayをベースにRNA-seqを組み合わせたトランスクリプトーム解析によって、これらRNA結合タンパク質の標的RNAの網羅的検索を行った。その結果、SAM68に特異的なスプライシング傾向として3'UTRを含んだexonが強く変動することがわかった。シナプス形成因子IL1RAcPは3'-endプロセシング異常により分泌型フォームとなってしまうことで、欠損マウス脳においてIL1RAcP依存的なシナプス集積能の低下やIL1シグナルに依存的な神経可塑性に異常をきたすことを明らかにした(投稿中)。上記に加え、小脳において神経活動依存的にスプライシングが制御される分子についても検索したところ、Neurofascinという接着因子の選択的スプライシングが神経活動によって制御されることを発見し、この制御因子としてRNA結合タンパク質Rbfox1を同定した。Rbfox1はカルシウム流入によって核内に強く集積することでNfasc186の生成が亢進されることがわかった(Suzuki et al., 2017)中枢神経系において選択的スプライシングを制御するメカニズムに注目し、時空間的に選択的スプライシングを制御するRNA結合タンパク質SAM68とSAM-like molecule (SLM)のスプライシングプログラムの解明を行ってきた。網羅的解析によって、SAM68に特異的なスプライシング傾向として3'UTRを含んだexonが強く変動することがわかった。
国家統治拡大と跨境少数民族の生活経験の変化－タイと中国のラフ族の比較研究

本研究は、東南アジア大陸部北部から中国西南地方の山地帯に居住する少数民族ラフ族のキリスト教徒および伝統派集団を対象として、国境を跨いで暮らしている跨境民族の生活と生活経験とが、タイと中国の中央政府による辺境への統治拡大という状況の中で、いかに変化してきたかを、フィールドワークと民族語による聞き取りから明らかにした。同じ名前の民族であっても、その生活変化と生活経験とは、国家(タイ・中国)および宗教(世界宗教・伝統宗教)という関数の違いによって、異なった結果が見られることが明らかになった。東南アジア大陸部北部から中国西南地方にかけて居住・移動してきた少数民族は、当該地域の変容と諸国家による近代国家建設と辺境地域への支配拡大の中で、その生活は大きく影響を受け、変わってきた。その結果、現在では、国家状況の違いによって、同じ民族であっても、驚くほど異なった状況と生活経験が見られる。本研究は、国境を跨いで居住する少数民族を対象としたフィールドワークを実施し、地域の再編成と近代国家建設の中で、跨境民族がいかなる生活変化を経験し、社会変化をどう受容し、また対応してきたかを、タイおよび中国の国家コンテクストの中で比較検討する。タイ語や漢語などの優勢言語でなく、民族語による丁寧な聞き取りを通して、住民の視点にできるだけ近づいた形で、跨境周辺民族の生活経験の理解を試みる。本研究は、「跨境民族の生活経験の変化」というテーマについて、(1)対象地域の社会空間の変化およびタイと中国の統治拡大の過程の検討、(2)タイおよび中国における各時代の少数民族住民の生活変化の経験についての比較研究、(3)少数民族住民による自らの過去についての語りに反映される周辺民族の社会的経験の検討の3課題を軸に進められるものである。平成25年度においては、フィールドワークの面では、タイ国に渡航し、タイの伝統派およびキリスト教徒ラフ族の宗教と宗教経験に関するデータを収集した。具体的には、伝統派ラフ族村落の祭祀空間についてさらなるデータを加えるとともに、キリスト教徒ラフ族の日曜礼拝と教会落成式を取材した。いずれも、仏教国タイで非仏教徒として暮らす集団の生活経験に関わるデータである。成果公表の面では中国のラフ族を対象にして、かつて国家権力に対抗するほど大きな力を持っていたラフ族の仏教中心地について現状を報告し、宗教的節制について考察する英語発表を国際学会で行った。東南アジア大陸部北部から中国西南地方にかけて居住・移動してきた少数民族は、当該地域の変容と諸国家による近代国家建設と周辺地域への支配拡大のなかで、その生活は大きく影響を受け、変わってきた。本研究は、国境を跨いで居住する少数民族を対象としたフィールドワークを実施し、地域の再編成と近代国家建設のなかで、跨境民族がいかなる生活変化を経験し、社会変化をどう受容し、また対応してきたかを、タイおよび中国の国歌コンテクストのなかで比較検討する。本研究は、「跨境民族の生活経験の変化」というテーマについて、(1)対象地域の社会空間の変化およびタイと中国の統治拡大の過程の検討、(2)タイおよび中国における各時代の少数民族住民の生活経験の変化についての比較研究、(3)少数民族住民による自らの過去についての語りに反映される周辺民族の社会的経験の検討の3課題を軸に進められるものである。平成26年度においては、フィールドワークの面では、タイ国に渡航し、タイの伝統派ラフ族集団とキリスト教徒ラフ族集団について、主に生活用品の使用状況の変化とその背景について聞き取り及びデータ収集をおこなった。成果公表の面では、(1)中国のかつてのラフ族の仏教中心地および仏教カリスマ、(2)近代化とタイのラフ族における音楽状況の変化について、合わせて4度の英語発表を国際学会などでおこなった。そのうち一度は、国際学会での招待講演である。東南アジア大陸部北部から中国西南地方にかけて居住・移動してきた少数民族は、当該地域の変容と諸国家による近代国家建設および周辺地域への支配拡大のなかで、その生活は大きな影響を受け、変わってきた。その結果現在では、帰属する国家の状況のちがいによって、同じ民族であっても、驚くほど異なった状況と生活経験が見られる。本研究は、国境を跨いで居住する少数民族を対象としたフィールドワークを実施し、地域の再編成と近代国家建設のなかで、跨境民族がいかなる生活変化を経験し、社会変化をどう受容し、また対応してきたかを、タイおよび中国の国家コンテクストのなかで比較検討する。本研究は、「跨境民族の生活経験の変化」というテーマについて、(1)対象地域の社会空間の変化およびタイと中国の統治拡大の過程の検討、(2)タイおよび中国における各時代の少数民族住民の生活経験の変化についての比較研究、(3)少数民族住民による自らの過去についての語りに反映される周辺民族の社会的経験の検討の3課題を軸に進められる。平成27年度においては、フィールドワークの面では、タイ国に渡航し、タイのキリスト教徒集団について、儀礼様式の変化とその原因について聞き取りを行ない、変化の背後にある国家による民族/宗教政策について検討した。