hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
黒色漆塗膜の変色メカニズムの解明と強化法確立のための基礎的調査研究

最終年度である本年度は、キセノンアーク灯によって試料を強制的に劣化させ、色彩変化、残存光沢率の変化、SEM観察、IRスペクトルによる比較、PY-GC/MSによる分析など多角的に現象を観察する作業を順次進めた。紫外線を照射した試料は昨年度までに作製した複層構造をした黒色塗膜の試料であり、半年以上暗所にて保管させ、十分に重合を進行させた状態で劣化試験をおこなった。さらに、先行研究ではほとんど議論されることのなかった表面粗さについて単層膜(4種類)および複層構造試料(7種類)の測定をおこない、各種のパラメーターを細かく紫外線照射時間ごと見ていくことで、作製手法の異なる黒色漆膜表面の差異を区別できる可能性を見出した。またこれまでの研究成果と実際の劣化状況を比べるため、京都、奈良、輪島、日光、沖縄、久米島での現地調査および聞き取り調査を行なった。一連の調査を通じて、手法ごとに検証した黒色塗膜の分析によって得られた研究成果は、黒色漆文化財の劣化現象を読み解くための一つの指標に成りうる可能性と、新たに修理していく際の手法を選択するための判断材料として意義があるとわかった。東日本大震災の影響で、2012年5月より開設する予定であった新本部の移設が半年遅れ、装置移設に伴って試料作製に使用する予定であった装置が半年使えなかった。漆試料は作製後少なくとも1カ月半以上放置してから紫外線照射試験を実施する点、時期をずらしながら紫外線照射試験を行う点から、試料片の一部の試験が終了していない状況であり、当初の交付申請書で計画していた分析の実施項目に若干の遅れが生じてしまった。24年度が最終年度であるため、記入しない。引き続き複層構造の塗膜の分析と、単層膜での揮発成分の測定など強制劣化試験後の分析項目を随時実施し、研究期間終了までに可能な限りのデータ収集につとめる。国内での修理技術に関する聞き取り調査を実施し、劣化塗膜の強化法に関する情報を整理する。
おっくうと感じている地域高齢者の閉じこもり予防支援策の開発に関する縦断的研究

本研究の最終目的は、介護保険未認定である75歳以上の住民を対象としたおっくうと感じている地域高齢者の閉じこもりに至る前の予防支援策を開発することである。本年度の目的は、1おっくうと感じている地域高齢者の外出についての思いを質的に明らかにする、2面接調査で得られた知見「1おっくうと感じる時、2外出についての思い」を含んだ質問紙を作成し、量的におっくうと感じている高齢者の外出についての実態を把握することであった。本年度の目的1については、以下の通りであった。対象者は、研究対象自治体・地域包括支援センター・老人クラブより紹介を受け、研究参加への同意が得られた一地方都市在住75歳以上の住民のうち介護保険認定を受けていないが、おっくうと感じている住民10名で、平均年齢82.8±4.4歳だった。おっくうと感じている地域高齢者の外出についての思いは、《楽しい》《体も心も気持ちがよい》等の外出を促す思い(9カテゴリ)、《大変である》《大儀である》等の外出を妨げる思い(12カテゴリ)が抽出された。おっくうと感じている地域高齢者は外出を妨げる思いを持つ一方で、外出を促す思いも持っていた。支援を行う際には、外出についての思いを把握した上で、外出を促す思いは支持し、外出を妨げる部分にはどのような背景があるのかを十分把握し、多様な側面から支援を行う必要があることが示唆された。本年度の目的2については、1の面接調査が延長したことで実施できていない。おっくうと感じている地域高齢者の閉じこもりに至る前の予防支援策の開発を目的として、平成29年度おっくうと感じている地域高齢者の外出についての思いについて面接調査を実施し、その結果を用いて平成30年度に介護保険未認定である75歳以上の住民への郵送調査を計画していた。平成29年度に研究対象者への面接調査を開始したが、面接調査目標対象者数の半分に満たなかった。そのため、平成30年度研究計画立案時に平成30年度も面接調査を実施する期間とした。結果、面接調査目標対象者数には至らなかったものの、平成2930年度の2年間で10名の面接を終了した。10名から語られた内容で飽和状態となったため、本研究データの分析を試みた。現在、分析を行った内容をもとに平成31年度以降の量的研究の質問項目の検討を行っているところである。研究当初には予期できなかった進捗状況であり、研究当初の計画とは1年度遅れている現状である。平成31年度の研究目的は、平成2930年度の質的研究結果を用いて、一地方都市在住の介護保険未認定である75歳以上の住民を対象に郵送調査を行い、おっくうと感じている高齢者の外出についての実態を明らかにする。令和2(2020)年度、研究を延長し、以下の研究を行う。平成31年度郵送調査回答者全員に平成31年度と同様の調査内容で郵送調査を実施し、おっくうと感じている高齢者の外出についての思いや外出頻度・種類別の社会活動状況の変化について明らかにする。また、郵送調査結果について分析し、おっくうと感じている高齢者の閉じこもりに至る前の予防支援策を開発する。本研究の最終目的は、介護保険未認定である75歳以上の住民を対象としたおっくうと感じている高齢者の閉じこもりに至る前の予防支援策を開発することである。平成29年度は、3ヵ年計画の初年度として、おっくうと感じている高齢者の外出についての思いを質的に明らかにすることを目的とした。調査対象は、一地方都市在住の75歳以上の住民のうち、以下の3点に該当する住民とした。1介護保険認定を受けていない。2全国的に使用されている基本チェックリストにて「うつ予防・支援」5項目のうち、「以前は楽にできていたことが今ではおっくうに感じられる」に該当する。3基本チェックリスト「うつ予防・支援」2項目以上に該当しない。調査方法は、一自治体の高齢者支援担当部署・地域包括支援センターに研究依頼を行い、対象者を選定した。そのうち、研究への協力意向をいただいた対象者へ訪問した。改めて研究者より本研究の目的や対象者・倫理的配慮事項について説明し、同意を得た上で、インタビュー調査を実施した。調査内容については、在宅高齢者を対象に質的研究を行った先行文献(古田ら,2008)を参考に1おっくうと感じる時2外出についての思い3対象者の属性(年齢・性別・家族構成等)で構成した。研究を実施するにあたり、申請者が所属する研究機関の倫理審査委員会の承認を得た(承認番号29-2-54)。現時点で8名の対象者より研究協力をいただき、インタビュー調査を実施した。8名の内訳は、男性1名・女性7名、年齢7588歳であった。インタビュー時間は平均1時間22分であった。現在、8名のデータ分析をしている最中である。対象者を紹介いただく地域包括支援センターの業務の多忙さ、本研究の対象者がおっくうと感じている高齢者としていることから、研究への協力に消極的な状況であり、目標としている対象人数20名まで達していない。

本年度の目的は、1おっくうと感じている地域高齢者の外出についての思いを質的に明らかにする、2面接調査で得られた知見「1おっくうと感じる時、2外出についての思い」を含んだ質問紙を作成し、量的におっくうと感じている高齢者の外出についての実態を把握することであった。本年度の目的1については、以下の通りであった。対象者は、研究対象自治体・地域包括支援センター・老人クラブより紹介を受け、研究参加への同意が得られた一地方都市在住75歳以上の住民のうち介護保険認定を受けていないが、おっくうと感じている住民10名で、平均年齢82.8±4.4歳だった。おっくうと感じている地域高齢者の外出についての思いは、《楽しい》《体も心も気持ちがよい》等の外出を促す思い(9カテゴリ)、《大変である》《大儀である》等の外出を妨げる思い(12カテゴリ)が抽出された。おっくうと感じている地域高齢者は外出を妨げる思いを持つ一方で、外出を促す思いも持っていた。支援を行う際には、外出についての思いを把握した上で、外出を促す思いは支持し、外出を妨げる部分にはどのような背景があるのかを十分把握し、多様な側面から支援を行う必要があることが示唆された。本年度の目的2については、1の面接調査が延長したことで実施できていない。おっくうと感じている地域高齢者の閉じこもりに至る前の予防支援策の開発を目的として、平成29年度おっくうと感じている地域高齢者の外出についての思いについて面接調査を実施し、その結果を用いて平成30年度に介護保険未認定である75歳以上の住民への郵送調査を計画していた。平成29年度に研究対象者への面接調査を開始したが、面接調査目標対象者数の半分に満たなかった。そのため、平成30年度研究計画立案時に平成30年度も面接調査を実施する期間とした。結果、面接調査目標対象者数には至らなかったものの、平成2930年度の2年間で10名の面接を終了した。10名から語られた内容で飽和状態となったため、本研究データの分析を試みた。現在、分析を行った内容をもとに平成31年度以降の量的研究の質問項目の検討を行っているところである。研究当初には予期できなかった進捗状況であり、研究当初の計画とは1年度遅れている現状である。目標の対象者数に近づくよう、対象者を紹介いただいている地域包括支援センターや対象自治体の高齢者支援担当部署に再度依頼を行い、本研究に該当する対象者を選定する。研究協力の意向がある対象者には、本研究の説明を行い、同意を得た上ですみやかにインタビュー調査を実施する。また、インタビュー調査終了後はデータ分析を行い、おっくうと感じている高齢者の外出についての思いを質的に明らかにする。その後、インタビュー調査で得られた知見「1おっくうと感じる時、2外出についての思い」を含んだ質問紙を作成し、平成30年度、量的におっくうと感じている高齢者の外出についての実態を把握していく予定である。平成31年度の研究目的は、平成2930年度の質的研究結果を用いて、一地方都市在住の介護保険未認定である75歳以上の住民を対象に郵送調査を行い、おっくうと感じている高齢者の外出についての実態を明らかにする。令和2(2020)年度、研究を延長し、以下の研究を行う。平成31年度郵送調査回答者全員に平成31年度と同様の調査内容で郵送調査を実施し、おっくうと感じている高齢者の外出についての思いや外出頻度・種類別の社会活動状況の変化について明らかにする。また、郵送調査結果について分析し、おっくうと感じている高齢者の閉じこもりに至る前の予防支援策を開発する。
癌微小環境におけるＲｈｏＡ関連蛋白質ＧＣＦ２の発現制御と転移浸潤メカニズムの解析

癌微小環境、特に上皮間葉移行(EMT)における細胞骨格調節因子GCF2/LRRFIP1の関与を明らかにするため研究を行った。膵癌細胞株でGCF2の発現を抑制することで、上皮系マーカーE-カドヘリンの発現が上昇、間葉系マーカーのビメンチンは発現が低下し、さらに機能的にも細胞の移動能・浸潤能が低下することが明らかとなった。そのメカニズムとして、GCF2はWnt signalにおけるβ-カテニンの核内移行を調節することでEMTを制御している可能性が示唆された。以上よりGCF2の発現を抑制することで癌細胞に上皮系の形質転換(Reversing EMT)を起こし、浸潤・転移を抑制する可能性が示唆された。GCF2/LRRFIP1(以下、GCF2)は、Actin関連タンパク質Flightless-1と相互作用を有するとされ、細胞骨格調節因子として報告されたタンパク質である。これまでの我々の研究により、GCF2の発現を抑制することでRhoAの活性化と細胞の移動能が抑制されることや、肝転移形成に関与することが明らかとなり、GCF2は癌細胞の浸潤・転移に重要な機能を有していることが明らかとなった。浸潤・転移の過程で、癌細胞では細胞骨格や細胞間接着に劇的な変化が生じるとされ、その現象は上皮間葉転換(EMT:epithelial-mesenchymal transition)として明らかにされつつある。GCF2は細胞の骨格調節、移動能に深く関与することから、EMTの過程においても機能を有することが示唆される。膵癌培養細胞株および切除組織標本において、GCF2とEMTマーカーの発現を検討し相関の有無を検討した。E-cadherinとGCF2の間には負の相関が認められた。さらに、SiRNAの手法でGCF2の発現を抑制した癌細胞株では、より強固な細胞間接着を獲得し、浸潤能の低下を認め、上皮系への形質変化を起こしていた。さらに、GCF2を発現抑制することでWnt canonical pathwayが抑制され、それによりβ-cateninの核内移行が阻害された。一方で、E-cadherinの細胞内ドメインでもあるβ-cateninの発現は上昇していた。以上より、GCF2はWnt canonical pathwayのmediatorであるDishevelledとの相互作用を通じて、EMTを制御している可能性が示唆された。なかでもGCF2の発現を抑制することは、癌細胞にReversing EMTを惹起し、浸潤の阻止という点で重要な意義を有していると考えられた。これまでの我々の研究によりGCF2は癌細胞の浸潤・転移に重要な機能を有していることが明らかになりつつある。本研究では、はじめに癌細胞の上皮間葉移行(EMT)におけるGCF2の関与について検討を行った。膵癌培養細胞株および膵癌切除組織標本において、GCF2とEMTマーカーの発現を検討したところ、E-cadherinとGCF2の間には負の相関が認められた。さらに、SiRNAによりGCF2の発現を抑制した癌細胞株では、E-cadherinの発現が上昇することで、強固な細胞間接着を獲得し、上皮系への形質変化を起こしていた。SnailなどのEMTを制御する転写因子は、GCF2の発現を抑制することでその発現が低下していたが、その機序としてWnt canonical pathwayの抑制によるβ-cateninの核内移行の阻害が考えられた。これらの成果は、英文誌にて発表した。(Douchi D, etal. Cancer Letters. 2015)さらに、膵癌細胞における抗がん剤、とくにGemcitabine感受性について検討を行った。GCF2の発現を抑制した癌細胞では、Gemcitabineの感受性が上昇することが示されたが、その機序としてJNK/c-Junの活性化が関与していることが示唆された。消化器外科学研究実績の概要にも記載したように、癌細胞の上皮間葉転換における関与、そのメカニズムについて詳細な検討をおこなうことができた。これは、本研究の重要な目的の一つであり、現在までの達成度としても順調に経過していると考えている。さらに、膵癌臨床検体を用いた免疫組織化学染色を行い、実際の癌組織の中で、とくに先進部において発現上昇を示唆する結果を得ることができた。

癌細胞の浸潤メカニズムにGCF2の発現が強く関与することを示唆する知見であった。今後さらに、癌の臨床検体をもちいた詳細な検討を行うことを予定している。しかしながら、研究のもう一つの目標としていた、癌細胞と血管内皮細胞との相互作用におけるGCF2の機能の解析については、現在までのところ共培養システムの確立まで至っておらず、当初の計画どおりに進んでいない。Direct co-culture以外にdouble chamber plateをもちいたindirect co-culture法による検討も行ったが、癌細胞と血管内皮細胞との相互作用を検討するまでに至っていない。次年度以降に行うべき重要な課題と考えている。平成26年度以降は、平成25年度に得られた知見をもとに研究を継続していく。前述のように血管内皮細胞との相互作用とその機能解析に関しては、現在のところ、血管内皮細胞と癌細胞との共培養系の確立に至っていない。今後は、血管内皮細胞のCondition mediumを用いて、その液性因子のGCF2の発現に及ぼす影響を検討など、実験方法の修正が必要と考えている。また、現在GCF2の発現機構を解析するため、GCF2遺伝子のプロモーター領域を組み込んだレポーターベクターを設計、制作している。今後GCF2の転写調節機構の解析により、外基質など癌の微小環境下における転写調節機構をさらに詳細に行う。さらに、これまでの検討により、GCF2の発現が、癌細胞の上皮間葉移行に深く関与していることが示唆された。GCF2発現は、癌細胞にmesenchymalな形態変化をもたらすことが明らかとなった。最近海外の研究グループよりGCF2の発現が、抗癌剤の感受性に関与することを示唆することが報告された。抗癌剤等の薬剤の取り込み・排出に関与するトランスポーターの発現、局在にも影響していることが示唆されることから、今後GCF2の発現と、各種抗癌剤感受性についても検討を行う予定である。
新規卵巣癌動物モデルの確立と発癌メカニズムの解明

近年、卵巣漿液性腺がんの発生母地は卵管上皮細胞であるという新たな仮説が提唱されている状況のもと、卵管上皮細胞由来の卵巣がんを発症する動物モデルの確立は強く望まれている。本研究では、マウス卵管特異的糖タンパク質遺伝子(OGP)のプロモーター制御下でSV40ラージT抗原遺伝子を発現するトランスジェニック(OGPTag Tg)雌マウスを、卵管上皮細胞由来卵巣がんを発症する動物モデルを確立した。それを用いた発がん及び腹膜転移メカニズムの解明が期待できる。上皮性卵巣癌は早期から腹膜転移を起こして婦人科悪性腫瘍の中でも最も予後不良な癌腫であるが、その発症機序は依然として不明のままである。近年、卵巣漿液性腺癌の発生母地は卵管上皮であると指摘され、その発症メカニズムを解析できる動物モデルの確立は強く望まれている。我々はマウス卵管特異的糖タンパク質(oviduct-specific glycoprotein; OGP)遺伝子のプロモーター制御下でSV40ラージT抗原遺伝子を発現するトランスジェニックマウス(OGPTag Tg)を作製し、OGPTag Tg雌マウスが雌性生殖器で腫瘍を形成することを報告した。本研究では、OGPTag Tgマウスを卵管上皮由来卵巣癌を発症する動物モデルとして確立し、その発癌及び腹膜転移メカニズムの解明を目的とする。当該年度中にOGPTag Tgマウスにおける腫瘍の病理組織的な解析により、人高悪性度の漿液性卵巣腺癌と似た組織病態変化を確認した。4週齢で子宮の摘出手術により、卵巣癌の発症率を56%から100%まで上がった。さらに、OGPTag Tgマウスの卵管を摘出したら卵巣癌を発症しなったことから、OGPTag Tgマウスは、卵管上皮由来卵巣癌を発症する動物モデルとして確立できた。または、OGPTag Tgマウスの卵管、または卵巣腫瘍組織より上皮細胞を分離培養し、新規な細胞株を樹立した。これらの細胞は上皮由来性腫瘍マーカーCK8、または卵管特異的なタンパクOGPの発現は陽性であった。次年度からこれらの細胞の性質の解析を行うとともに、樹立された細胞株を用いた腹腔内移植による自然卵巣癌腹膜転移モデルの作製を試みる。上皮性卵巣がんは早期から腹膜転移を起こして婦人科悪性腫瘍の中でも最も予後不良な癌種であるが、その発症機序は依然として不明のままである。マウス卵管特異的糖タンパク質遺伝子(OGP)のプロモーター制御下でSV40ラージT抗原遺伝子を発現するトランスジェニック(OGPTag Tg)雌マウスが雌性生殖器で腫瘍を形成することが報告されている。本研究では、卵管上皮細胞由来卵巣がんを発症する動物モデルを確立し、それを用いた発がん及び腹膜転移メカニズムの解明を目的として行った。まず、OGPTag Tgマウスにおける腫瘍の病理組織的な解析を行った。OGPTagTgマウスは漿液性卵管上皮がんを発症し、その50%以上は上皮性卵巣がんの病理組織像を示した。また、卵巣の摘出あるいは移植、卵管の摘出などにより、OGPTag Tgマウスにおける卵巣がんの発生は卵管由来であることを明らかにした。以上のことからOGPTag Tgマウスは、卵管上皮由来卵巣がんを発症する動物モデルとして確立できた。さらに、新たに4匹のOGPTag Tgマウスの卵巣腫瘍組織より卵管上皮由来の卵巣がん細胞株を樹立した。昨年度に樹立した2つの細胞株を合わせて6種類の細胞株を同腹他個体マウスの腹腔内に移植し、腹膜転移モデルの作製を試みた。しかし樹立した細胞株は腹膜への着床が認められなかった。腹膜転移モデルの作製にあたり、樹立した細胞株へ新たな遺伝子導入を検討している。研究目的に沿って、平成27年度は計画通りOGPTag Tgマウスの卵巣腫瘍組織から新たな培養細胞株を樹立し、それによる自然卵巣がん腹膜転移モデルの作製を試みた。上皮性卵巣がんは早期から腹膜転移を起こして婦人科悪性腫瘍の中でも最も予後不良な主要であるが、その発症機序は依然として不明のままである。卵管上皮由来卵巣がんを発症するマウスモデルの確立に基づき、がん化初期過程の分子機構解明は本研究の目的である。今まで、卵管特異的な糖たんぱく質(Oviduct-specific glycoprotein:OGP)遺伝子プロモーター制御下でSV40ラージT抗原遺伝子を発現するトランスジェニック(mOGP-Tag)マウスの卵巣腫瘍発生母地は卵管細胞であることを卵管/卵巣移植、または病理学的な解析で確認した。病理組織学的に人高度悪性漿液性卵巣腺がんと類似していることから、卵巣漿液性腺がん発症動物モデルとして、その発症メカニズムの解析に利用可能である。がん化過程の分子機構を解明するため、発がんの各段階での特異的な分子を網羅して同定する必要がある。次年度から、発がんの初期、中期、また晩期の各段階での卵巣腫瘍組織により、遺伝子発現の変化(Microarray)、染色体コピー数変化(アレイCGH)を実施し、卵巣上皮細胞由来の卵巣がんにおける特異的分子を特定する。

また、得られた結果を取りまとめ、論文の執筆・投稿、学会での成果の発表を行う予定である。研究責任者と分担者の異動のため、遺伝子的な解析が遅れた。上皮性卵巣がんは早期から腹膜転移を起こして婦人科悪性腫瘍の中でも最も予後不良な癌種であるが、その発症機序は依然として不明のままである。近年、卵巣漿液性腺がんの発生母地は卵管上皮細胞であるという新たな仮説が提唱されている状況のもと、卵管上皮細胞由来の卵巣がんを発症する動物モデルの確立は強く望まれている。マウス卵管特異的糖タンパク質遺伝子(OGP)のプロモーター制御下でSV40ラージT抗原遺伝子を発現するトランスジェニック(OGPTag Tg)雌マウスが雌性生殖器で腫瘍を形成することが報告されている。本研究では、卵管上皮細胞由来卵巣がんを発症する動物モデルを確立し、それを用いた発がん及び腹膜転移メカニズムの解明を目的として行った。まず、OGPTag Tgマウスにおける腫瘍の病理組織的な解析を行った。OGPTagTgマウスは漿液性卵管上皮がんを発症し、その50%以上は上皮性卵巣がんの病理組織像を示した。また、卵巣の摘出あるいは移植、卵管の摘出などにより、OGPTag Tgマウスにおける卵巣がんの発生は卵管由来であることを明らかにした。以上のことからOGPTag Tgマウスは、卵管上皮由来卵巣がんを発症する動物モデルとして確立できた。さらに、OGPTag Tgマウスの卵巣腫瘍組織より卵管上皮由来の卵巣がん細胞株を樹立した。樹立した細胞株の解析により、卵巣上皮細胞由来の卵巣がんにおける特異的な分子の特定を期待できる。本研究では、マウス卵管特異的糖タンパク質遺伝子(OGP)のプロモーター制御下でSV40ラージT抗原遺伝子を発現するトランスジェニック(OGPTag Tg)雌マウスを、卵管上皮細胞由来卵巣がんを発症する動物モデルを確立した。それを用いた発がん及び腹膜転移メカニズムの解明が期待できる。研究目的に沿って、平成26年度は計画通り、OGPTag Tgマウスにおける腫瘍の病理解析を確定したとともに、卵管の摘出等により、OGPTag Tgマウスで卵巣癌の発生母地の確認ができた。平成28年度は、OGPTag Tgマウスの腫瘍組織から樹立した培養細胞株に新たな遺伝子を導入し、転移能を持つ細胞株を作製するとともに、これらの細胞を用いた腹腔内移植による自然卵巣がん腹膜転移モデルの作製を試みる。または網羅的な遺伝子解析による卵管上皮細胞由来の卵巣がんにおける特異的分子を特定する。各発がん段階で、網羅的な遺伝子解析による特異的な分子を同定する。実験動物モデル平成27年度以後は、OGPTag Tgマウスの腫瘍組織から樹立された新たな培養細胞株を用いて、腹腔内移植による自然卵巣癌腹膜転移モデルの作製を試みる。または、発癌に関連する特異的な分子の特定によって、卵管上皮細胞からの発癌、及び腹膜転移メカニズムを解明する。樹立した細胞株を用いた腹膜転移モデルの作製が失敗したため、細胞の特性解析など費用の余りが生じた。遺伝子的な解析が遅れたから、そのための消耗品費の余りが生じた。OGPTag
モジュール型分子設計を駆使するπ電子系化合物の配列多様性とそのヘテロ接合体の創出

新しい有機電子材料開発を目指して、π共役系分子の配列およびその制御に関する知見を得た。オリゴチオフェンやペリレンなどのπ共役系小分子に分子認識部位を導入した化合物を開発し、ゲスト分子添加に集積・解離の制御に成功した。また、分子包摂能を持つらせん性多糖誘導体を用いて、共役系高分子の配列と構造制御に成功した。この多糖に、更に側鎖修飾を施すことで、刺激応答的分子包摂能の付与や、金属微粒子調製の触媒としての応用を達成した。今年度は、これまで極めて困難とされたπ電子系化合物の配列制御を実現することを目標として、[π電子系化合物]-[刺激応答部位]-[構造形成部位]の構成からなるモジュール方式を採用したオリゴチオフェン型の目的化合物の合成を行い、その自己組織化について検討を行った。あわせて、このオリゴチオフェン双頭型分子と組み合わせることで、自己組織化によるナノサイズのヘテロ接合の形成を目指して、アンモニウム骨格を両端に保つ一連の双頭型ペリレン分子を合成した。π電子系化合物としてオリゴチオフェンの両端に、構造形成部位となるアミド基を介して刺激応答部位であるクラウンエーテル骨格を導入した双頭型分子を合成し、それらの自己組織能を検討したところ、繊維状の一次元会合特性を示し、種々の有機溶媒をゲル化することが確認された。構造形成部位を取り除いた類縁体では、一次元会合特性は観察されなかったことから、この部位の有用性が確認された。また、クラウンエーテル部のゲストと成り得るキラルなアンモニウムカチオンをこの系に添加したところ、形成するゲルがCD活性になる事が明らかとなった。これは、この双頭型分子が一次元積層する際にクラウンエーテル部に与えられたキラル刺激に応答して、螺旋状に積層するためと結論付けた。興味深いことに、ゲスト不在下でのゲルは物理的振動による破壊に対して不可逆であり、ゲルを再形成することはないのに対して、ビスアンモニウム型のゲスト分子存在下では物理的破壊に対して可逆的にゲルが修復・再形成する「チキソトロピー」を獲得することが明らかとなった。我々のグループは、分子間相互作用を利用して、多種多様な分子配列様式を創出する豊富なノウ・ハウを蓄積して来た。これらの知識を活用すれば、多様なπ電子系化合物の配列および機能の制御が実現できると期待される。本研究の第一目的は、これまで極めて困難とされたπ電子系化合物の配列制御と、刺激応答による機能制御を確立することである。第二目的としては、創製されたπ電子集積体を共役系高分子等と複合化することにより、ヘテロ接合体を創出し、効率の良い有機ELや有機太陽電池の実現に供することである。共役系分子の集積化の刺激応答的制御に関する知見を得た。n型半導体特性を有するペリレンにグアニジウム基を修飾した分子は、各種リン酸アニオン誘導体との錯形成に伴って集積させることに成功した。ペリレン誘導体同士を架橋可能なオリゴリン酸誘導体が有効に機能することが明らかとなった。この発見は、ペリレンの集合形態やその解消などをリン酸誘導体の使い分けによって制御可能であり、リン酸誘導体をペリレンの光・電気化学特性から検出可能であることを示唆する。3重螺旋型の一次元ホストとして有用性を示してきたβ-1,3-グルカン類を用いて、共役系高分子の機能制御に成功した。pH応答ユニットを導入したカードランとカチオン性のポリチオフェンの複合体は、pHに依存してポリチオフェンの共役状態が異なる2種類の形態を形成できた。また、β-1,3-グルカン類がメタ連結型ポリフルオレンと錯形成しポリフルオレンの螺旋構造を固定化することを明らかにした。これらの成果はβ-1,3-グルカン類に導入した刺激応答ユニットにより様々な共役系高分子の電子状態を制御できること示している。さらに、カードランの側鎖に分子捕捉部位としてアミロースを導入した、樹状構造を持つ分岐多糖の開発し、幹部と枝部に異なる分子を配置した明確な構造を持つ複合材料の創製に成功した。我々のグループは“低分子有機ゲル"に関する研究を通して、糖、アミノ酸、尿素、核酸などの分子間相互作用を利用して、多種多様な分子配列様式を創出する豊富なノウ・ハウを蓄積して来た。これらの[構造形成部位]に関する知識を活用すれば[π電子系化合物]-[刺激応答部位]-[構造形成部位]の構成からなるモジュール方式を採用することにより、多様なπ電子系化合物の配列が実現できることに気付いた。[刺激応答部位]は配列完了後に、不要部位の切断除去や後重合による安定化に利用する機能性部位である。本研究の第一目的は、これまで極めて困難とされたπ電子系化合物の配列制御を実現することである。第二目的としては、創製されたπ電子集積体を共役系高分子等と複合化することにより、“ヘテロ接合体"を創出し、効率の良い有機ELや有機太陽電池の実現に供することである。

今年度は有機半導体開発における重要課題であるπ電子系化合物の結晶化に関する新しい知見を得た。ポルフィリンのシクロデキストリン包摂錯体の単結晶の調整に成功し、その構造特性と光化学特性を評価した。この結晶中でポルフィリンはモノマー的に存在するものの、それぞれの分子間距離が近いため、効率的にエネルギー移動を起こす事が可能であった。興味深いことに、この単結晶の発光特性には角度依存性が観測された。また、ポルフィリン誘導体とビオロゲン誘導体をモノマーとしてクリック反応を油水界面で進行させたところ、そのモノマー形状が反映されままμmサイズまで成長した正方形あるいは長方形の高分子膜の形成が確認された。この膜の中ではポルフィリン・ビオロゲン間の電荷移動錯体の形成が示唆された。モノマーをビオロゲンから電荷移動錯体を形成しないビフェニル型へと変更したところ、数nm十数nm程度の膜厚を持ちながらcmスケールに至るほどの面積を持つ二次元高分子の創製に成功した。今年度想定していた目的化合物の合成、ライブラリ化に成功し,これらの自己組織能を評価することで、分子設計の合理性を証明できた。また、刺激をコントロールすることで、光学活性などの意図した機能を付与できることを証明しただけでなく、チキソトロピーなどの想定外の興味深い特性の発現に成功した。25年度が最終年度であるため、記入しない。有機半導体開発において重要課題である、π電子系化合物の結晶化に関して有益な知見を得た。特にπ電子系化合物のシクロデキストリン包摂錯体の単結晶の調製は難しいが、本研究によりその手法を確立することに成功した。以上の成果はπ電子系化合物が単分子状態で示す光化学・電気化学的特性を保持した結晶性材料の開発を実現するために極めて重要な発見である。また、本研究では得られた包摂錯体結晶が角度依存的な発光特性を示すことが明らかとなり、包摂錯体結晶が示す特徴を明らかにすることに成功している。また、油水界面でのHuisgen環化反応により得られた高分子二次元膜は、規則性構造を持つ特異な正方形あるいは長方形の高分子膜の形成を確認した。この高分子二次元膜は電子ドナーとアクセプターからなり、構造内部で効果的かつ多点的に電荷移動錯体を形成した高分子膜であることが確認された。以上は本研究の目的である効果的なヘテロ接合体の開発に重要な知見である。以上のように、平成24年度は超分子化学的戦略に基づくヘテロ接合体の開発に有益な、新しい知見を得ることができ、3年間の採択期間の初年度として十分な成果を得るに至った。今後は、多様な構造特性を持つπ電子系分子の名の構造体の創製を目指して、特に構造形成部位に様々な分子を採用した分子を合成し、その自己組織化特性を評価する。さらに、本研究の目標の一つであるナノサイズの有機ヘテロ接合を自己組織化により達成することを目指して、ドナー分子とアクセプター分子のそれぞれをライブラリ化する。ヘテロ接合の形成の為には、ドナー分子とアクセプター分子の自己組織化が協同的に進行することが必要となるので、分子設計と自己組織能の相関を詳細に検討して、高度な自己組織化を実現できる条件を見出す。
ヒト脳脊髄液プロテオームによる全身麻酔後認知機能障害に対する創薬標的の網羅的探索

術後認知機能障害(POCD)発症患者は、術後入院期間が長く、長期生存率も低いことが知られている。麻酔薬という比較的短時間の一見可逆的な脳への作用や手術侵襲が、どのようなメカニズムで長期にわたり障害を及ぼすのか不明である。この重要な未決の問いに対し、ヒト脳脊髄液(CSF)という貴重な臨床サンプルを使用し、POCDに関連するCSF内タンパク質総体の量的変動、構造変化を見出すことでPOCDの分子メカニズムに迫った。まず、血液と比してタンパク濃度が低いCSFにおいて、効率的にプロテオーム解析をする方法を模索した。iTRAQ(isobaric Tags for Relative and Absolute Quantitation;タンパク質発現相対定量解析)に供する前段階において、限外濾過およびabundant proteinsの吸着除去を行うことにより、CSFにおいても確実にiTRAQラベリングを実施する手法を見出し、髄液中タンパク90個あまりを同定することに成功した。また、タンデム質量分析法(MS/MS)以外に蛍光ディファレンスゲル二次元電気泳動(2D-DIGE)アプローチによるCSFプロテオミクス解析も実施した。そのどちらの手法においても十分なラベリング効率が得られ、定量性が検討できることがわかった。CSFのタンパク濃度が低いこと、および脳脊髄液ドレナージカテーテル刺入に伴う微小な血管損傷による血液混入の影響が除外できないことから、CSFのプロテオミクス解析手法の確立に難渋した。タンパク濃度が低いことに関しては、限外濾過およびabundant proteinsの吸着除去を行うことによりiTRAQAタグ付けと微量タンパクの効率的な検出が可能となった。血液混入については検体採取毎に個体差が大きく、解析対象となりうる検体は当初の計画よりも少数にとどまっている。臨床検体の収集については倫理委員会の管理の元、適正に行い、検体バンクは順調に構築されているが、目標症例数に達するにはまだ時間が必要である。引き続き貴重な臨床検体の収集に努め、iTRAQ技術を中心としたCSFペプチドライブラリーの構築を進める。文献的には髄液中のタンパクは1000種を超えるとされているものもあることから、サンプル処理、質量分析手法にさらなる検討を加え、その網羅性を向上させる必要があると考えている。作成したCSFプロテオームと血漿プロテオームを用い、Human Protein AtlasやCSF-PR 2.0などの既存のオープンソースのデータベースとソフトを利用し、血漿・脳・脊髄由来のタンパク質の選別を加速させる。また、網羅的プロテオーム解析に加え、特定のタンパク群を対象とした比較定量を行う半網羅的プロテオミクスも併施しPOCDの創薬標的を積極的に探索する。実験手技の確立に時間を要し、高価なiTRAQ試薬の使用量が当初予測より少なかった。次年度はすでに採取した臨床検体を含め積極的なプロテオーム解析を予定しており、実験試薬の購入に次年度繰越額を充当させる計画としている。
縦隔リンパ節好中球に着目した肺炎球菌肺炎における新しい免疫機構の解明

1.肺炎マウスで縦隔リンパ節好中球の免疫における特異性を発見し、肺リンパ内皮細胞(LEC)の単離に成功し、肺LEC由来ケモカインによって縦隔リンパ節に好中球が集まる経路を証明した。1C57BL/6マウスに肺炎球菌血清型19Fを気管内投与し、15時間後にMLN・血液・気管支肺胞洗浄液をそれぞれ採取し、FACS法を用いて好中球(CD45+Ly6G-1A8+細胞)を単離した。2好中球は肺炎後に縦隔リンパ節に集まることを示した。3Lung digest法及びFACS法を用いて、肺内のLECの単離に成功した。4肺LEC細胞は好中球ケモカイン(CXCL1, CXCL5, G-CSF)を発現することを証明した。2.本研究に関連して、以下の論文を報告した。3.本研究に関連して、以下の発表を行なった。上述したように、肺炎マウスで縦隔リンパ節好中球の免疫における特異性及び肺リンパ内皮細胞がケモカインを産生する機能を発見し、研究を進めている。また、本研究に関連した学術論文をインパクトの高い一流国際誌に掲載した。さらに、国内の学術講演会でのシンポジウムでも発表を行った。研究成果は順調に得ているが、ボストン大学からRelAf/fマウスを譲受して行うLEC RelA欠失マウスの作成が、輸送の手続き等により遅れている。1.肺炎球菌肺炎マウスモデルの感染15時間後にMLN、脾臓を採取し(非感染コントロールマウスからも同様に採取)、組織固定後にB220抗体(B細胞)、CD3抗体(T細胞)、CD169抗体(マクロファージ)、MPO抗体(好中球)を蛍光染色し、電子顕微鏡を用いて好中球のリンパ組織内の局在場所について調べる。2.ノックアウトマウス作成の準備を行う。LEC由来のケモカインを特異的に欠失するマウスとしてLEC RelA欠失マウス(Prox1-Cre/Relaf/fマウス)を作成する。共同研究先であるボストン大学の所持するRela-floxedマウスを用いて、Prox1-Cre/Relaf/fマウスを作成する。1.肺炎マウスで縦隔リンパ節好中球の免疫における特異性を発見した。C57BL/6マウスに肺炎球菌血清型19Fを気管内投与し、15時間後にMLN・血液・気管支肺胞洗浄液をそれぞれ採取し、FACS法を用いて好中球(CD45+Ly6G-1A8+細胞)を単離した。ア)発現するサイトカイン(CXCL10・CCL19・CCL21)を測定し、さらに受容体(CXCR3・CCR7)を測定した。いずれもMLN好中球に特異的な発現はみられなかった。イ)MHC class IIの発現の有無についてフローサイトメトリーで解析したところ、血液・肺の好中球には発現は認めなかった(<1%)が、MLN好中球にMHCclass IIの強い発現(22%)を認めた。以上のことから、MLN好中球の特異性が明らかとなり、現在研究を進めている。3.本研究に関連して、以下の発表を行った。上述したように、肺炎マウスで縦隔リンパ節好中球の免疫における特異性を発見し、研究を進めている。しかし、前述の特異性の実験に予想を上回る時間を要したため、当初平成29年度に行う計画であった縦隔リンパ節における好中球の局在の同定についてはサンプルは採取出来ているものの、免疫染色ならびに電子顕微鏡観察が未だ施行できておらず、「やや遅れている」とした。本研究に関連した学術論文をインパクトの高い一流国際誌に掲載し、国内の学術講演会でのシンポジウムでも発表を行った。予定していたボストンでのミーティングについては、H30年3月にロサンゼルスで開催されたGordon Research Conference(学会発表に記載)で、ボストン大学のMizgerd教授とミーティング時間を取ることができたため、H29年度は計上しなかった。研究成果は順調に得ているが、ボストン大学からRelAf/f

マウスを譲受して行うLEC RelA欠失マウスの作成が、輸送の手続き等により遅れている。1.縦隔リンパ節(MLN)における好中球の局在を明らかにする。肺炎球菌肺炎マウスモデルの感染15時間後にMLN、脾臓を採取し(非感染コントロールマウスからも同様に採取)、組織固定後にB220抗体(B細胞)、CD3抗体(T細胞)、CD169抗体(マクロファージ)、MPO抗体(好中球)を蛍光染色し、電子顕微鏡を用いて好中球のリンパ組織内の局在場所について調べる。2.リンパ内皮細胞(LEC)に着目したMLN好中球の遊走メカニズムの解明3.さらに平成31年度実験を予定しているノックアウトマウス作成の準備を行う。2.でLECケモカインがMLN好中球の遊走に寄与すると証明できた場合、LEC由来のケモカインを特異的に欠失するマウスとしてLEC RelA欠失マウス(Prox1-Cre/Relaf/fマウス)を作成する。共同研究先であるボストン大学の所持するRela-floxedマウスを用いて、Prox1-Cre/Relaf/fマウスを作成する。1.肺炎球菌肺炎マウスモデルの感染15時間後にMLN、脾臓を採取し(非感染コントロールマウスからも同様に採取)、組織固定後にB220抗体(B細胞)、CD3抗体(T細胞)、CD169抗体(マクロファージ)、MPO抗体(好中球)を蛍光染色し、電子顕微鏡を用いて好中球のリンパ組織内の局在場所について調べる。2.ノックアウトマウス作成の準備を行う。LEC由来のケモカインを特異的に欠失するマウスとしてLEC RelA欠失マウス(Prox1-Cre/Relaf/fマウス)を作成する。研究遂行上、当初の研究計画調書・交付申請書に記載していた計画のうち、縦隔リンパ節好中球の特異性の実験に予想を上回る時間を要したため、縦隔リンパ節内の好中球の局在について免疫染色や電子顕微鏡を用いた実験を行えず、それらの研究費は次年度持ち越しとなる。また、平成30年度に予定しているマウス肺からのリンパ内皮細胞の分離およびノックアウトマウス作成に費用が嵩むことが研究開始後に判明したため、平成29年度に施行した縦隔リンパ節好中球の特異性を評価する実験についての費用は他の経費から捻出した。当初平成29年度に予定していた縦隔リンパ節内の好中球の局在について免疫染色や電子顕微鏡の評価、そして当初より見積もり金額の大きくなったマウス肺からのリンパ内皮細胞の単離に用いる酵素やフローサイトメトリー、およびノックマウス作成費用として平成30年度に研究費を使用する予定である。当初は平成30年度にノックアウトマウス作成を行う予定であったが、RelAf/fマウス輸送等の手続きが滞り、C57BL6マウスを用いた実験を主に行なったため、残額が生じた。次年度はノックアウトマウス作成及びフローサイトメトリー費用に予算を用いる予定である。
ファロ-四徴患児の自律神経活動に関する研究-無酸素発作をおこしやすい患児の特性について-

ファロ-四徴症(TOF)の約30%には、特徴的なチアノ-ゼ発作(無酸素発作)が3カ月ないし3歳で生じ、死亡原因で無酸素発作のしめる割合は大きい。無酸素発作の予防・治療として、現在までβ遮断剤が用いられ有効性が確認されているが、作用機序はいまだ十分に解明されていない。本研究では、TOF患児における自律神経活動を、Holter心電図記録における心拍変動を検討することから評価し、無酸素発作をおこしやすい患児の特性を検討して、無酸素発作の機序の解明とその予防・治療の妥当性を検討することを目的とした。まずTOF患児を年令別に1)6カ月未満、2)6カ月から1歳、3)1歳以上に分類し、さらに無酸素発作を認める群と無酸素発作を認めない群に分類した。正常対照群としては、年齢をマッチングさせた心臓に基礎疾患を認めない症例をあてた。但し、すべてβ遮断剤等は使用していない条件とした。Holter心電図の記録にはMarquette社製Holter記録計8500を使用し、RR間隔を同社製Holter解析器8000/Tにて1心拍毎に計測し、RR間隔解析プログラムにより周波数解析した。0.040.15Hzの低周波数成分(LF)、0.150.40Hzの高周波数(HF)、およびその比(L/H)について、24時間の平均値および1時間毎の日内変動を比較検討した。各年齢群ごとで、とくに深夜から早朝にかけての無酸素発作のおこりやすい時間帯を比較したが、TOF患児における自律神経活動に明らかな特徴は認めなかった。次に、TOF患児の無酸素発作を認める群と認めない群で同様に比較したが、無酸素発作と明らかな関係は認めなかった。とくに正常対照群の症例数が少なく、有意差検定の検討はできなかった。今後さらに症例数を増やし、自律神経活動が無酸素発作にどのように関与しているかの検討を続ける予定である。
微小変位低荷重マイクロ構造疲労試験機とそれを用いた強度評価法の開発

電子機器の小型化によりエレクトロニクス実装のはんだ接合部寸法のマイクロ化は進み、BGA・CSPはんだ接合部のように高さおよび直径は既に百数十ミクロンから数十ミクロンにまでなっている。これらのはんだ接合部の強度信頼性評価実験は今までのように標準試験片を用いて行うことが出来なくなり、実構造の強度評価試験を行わなければならない。本研究の目的は微小変位低荷重マイクロ構造疲労試験機の開発およびそれを用いたマイクロ構造の強度評価法の開発を目的とした。本研究で得られた成果を次のようにまとめることができる。(1)微小変位低荷重マイクロ構造疲労試験機の基本設計を行った。・本試験機の基本性能として設計した基本仕様の妥当性について検討を行い、次のような基本仕様を設定し基本設計を行った。・変位制御は基本的に試験片のチャック間の相対変位を直接に計測し、リニアアクチュエーター及び圧電素子アクチュエーターの制御にフィードバックし変位制御を行った。(2)微小変位低荷重マイクロ構造疲労試験機の設計および製作を行った。(3)強度評価試験の例としてエレクトロニクス実装のBGA・CSPはんだ接合部を用いて疲労強度評価を行った。・BGA・CSPはんだ接合部が受ける負荷はシリコンチップと基板の間に生じる線膨張ミスマッチによるせん断変形であるため、はんだ接合部のせん断疲労試験を行って、疲労寿命を調べられることを確認した。・はんだ材科は非常に顕著な力学的非線形性(弾塑性/クリープ)を有するため、実験条件に合わせて有限要素法解析による非線形応力ひずみ評価を行い、応力・ひずみに対する材料特性、形状などのばらつきの影響を明らかにした。・疲労実験と応力ひずみ評価解析の結果に基づいてはんだ接合部の疲労強度実験法および強度信頼性評価法を確立した。本研究の目的は微小変位低荷重マイクロ構造疲労試験機(最大変位ストローク:10mm、最高変位精度:0.1ミクロン、最大負荷:500N、繰返し周波数:1.0×10^<-4>20Hz)の開発およびそれを用いた強度評価法の開発を目的とする。上記研究目的を達成するために、平成9年度では所定の研究を行い、次のような成果が得られた。・本試験機の基本性能として設定した基本仕様の妥当性について検討を行い、次のような基本仕様を設定し、基本設計を行った。最大変位ストローク:10mm、最大変位精度:0.1ミクロン、最大負荷:1500Nとする、繰返し周波数:1.0×10^<-4>20Hz・変位制御は基本的に試験片のチャック間の相対変位を直接に計測し、リニアアクチュエーターおよび圧電素子アクチュエーターの制御にフィードバックし変位制御を行った。・荷重計測は無変形荷重計測機構を取り入れ、その制御機構を設計した。・(1)において確定した基本設計に基づいて試験機のフレーム、変位推進機構、試験片セッティング機構、試験片チャック、荷重計測機構の設計および製作を行った。(3)マイクロ構造の力学的特性の評価システムを構築した。(白鳥、于、小笠原)(購入するパソコンによって実行する)・マイクロ構造の顕微鏡写真のスキャンニング画像(2次元)から試験体の形状情報を取り出し、その情報を利用して有限要素法解析モデルを作成するシステムを完成した。・汎用有限要素法解析ソフトに確率有限要素法の手法を取り入れ、各種マイクロ構造の応力・ひずみ評価手法を確立した。

実装技術の小型化によりはんだ接合部寸法のマイクロ化は進み、フリップチップのはんだ接合部のように高さおよび直径は既に百数十ミクロンから数十ミクロンにまでなっている。この部材の微小化に伴い、結晶粒度、不純物介在物、マイクロボイド、表面ミクロクラック、酸化膜、加工変質層などの材料強度に及ぼす影響はバルク材料に比べ大きいので、バルク材料の強度=微細部材の強度とは必ずしもならない。そのため、これらのはんだ接合部の強度信頼性評価実験は今までのように標準試験片を用いて行うことが出来なくなり、実構造の強度評価試験を行わなければならない。マイクロマシンのようなマイクロ構造物の強度信頼性評価においても同じ問題がある。本研究の目的は微小変位低荷重マイクロ構造疲労試験機の開発およびそれを用いたマイクロ構造の強度評価法の開発を目的としている。平成10年度において得られた研究結果は次のようになる。(1)平成9年度に行った以下の研究項目を引き続き行った。・微小変位低荷重マイクロ構造疲労試験機の設計および制作を行った。・マイクロ構造の力学的特性の評価システムを構築した。(2)制作された試験機の基本テスト運行を行った。(3)マイクロ構造によく使われる微小引張試験片、薄板の曲げ試験片、異種材接合構造のせん断試験片を用いて各種試験を行い、試験片のチャッキング方法、マイクロ構造の基本試験法を確立した。(4)強度評価試験の例としてフリップチップはんだ接合部(高さ:80ミクロン、直径:150ミクロンの樽形)を用いて疲労強度評価を行った。・フリップチップはんだ接合部が受ける負荷はシリコンチップと基板の間に生じる線膨張ミスマッチによるせん断変形であるため、フリップチップはんだ接合部のせん断疲労試験を行って、疲労寿命を調べられることを確認した。・はんだ材料は非常に顕著な力学的非線形性(弾塑性/クリープ)を有するため、実験条件に合わせて有限要素法解析による非線形応力ひずみ評価を行い、応力・ひずみに対する材料特性、形状などのばらつきの影響を明らかにした。・疲労実験と応力ひずみ評価解析の結果に基づいてはんだ接合部の疲労強度実験法および強度信頼性評価法を確立した。
暴力と主体構築の研究-性的差異の行方

牛政治の先鋭化したかたちと思われる現在のグローバル・レベルの監視社会のなかで、主体化/隷属化の図式が、他者殺傷を介しての自己殺傷となって現れ、殺傷を軸に、新たな(非)自己形成の物語が浮上しつつある,この新しい(非)自己の有り様から出現してくる、従来とは異なった暴力の布置は旧来のジェンダー体制を利用しつつ、ジェンター体制を崩して、別の差別化へと変容させていく。その戦略の巧妙な操作について批判的視点を保持するには、ジェンダー研究の視点と、暴力に開する理論的アプローチの両方から、文化表象を分析する必要があり、それを試みていった。フーコー/アガンベンの主体理論の検証を「死の政治学」という軸で再検討する作業をおこない、近年の暴力への理論化を探求した。その成果は編著書『欲望・暴力のレジーム』、論文"Human/Unhuman"で、また日本アメリカ文学会中部支部特別講演のバートルビー論、東北大学国際会議のリスポンス「市民・欲望・暴力」、A・ネグリ初来日記念シンポジウム「マルチチュード/暴力/ジェンダー」で公表。さらに戦争言説との関係における政治的・個人的な「friendship(友愛)」の分析を(不)可能な証言の見地から、映像分析した(日韓シンポ「スクリーンからの手紙はどこに届くのか」)。暴力の変遷と性的差異の再理論化については、日本学術会議の『性差とは何か』や『環』掲載の「デリダの贈与」で、また生命と社会の再生産言説については、日本英文学会全国大会シンポジウム「産んで/産まないで〈魔女〉になる女と単性生殖」で発表。文化表象では、アメリカニズムに見られる知性・反知性の対立構造の展開を「ジェンダー・レトリックと反知性主義」で、音楽のジェンダー解析については日本音楽学会全国大会シンポジウム「オペラとジェンダー」のリスポンス等、多方面で公開・発表した。本年度は映像表象に現れる暴力・欲望・政治について分析し、国内外の国際会議(第10回国際女性映画祭シンポジウムの招聴発表(in Seoul)、梨花女子大学アジア女性センター春期レクチャーの招聘講演(in Seoul)、NASSSの招聘リスポンス(名古屋))等で発表した。とくに焦点を当てたのは、バイオポリティクス(生政治)の今日的意味であり、人口に膾炙する映画表象に如実に、また巧妙に書き込まれている暴力の汎日常的様相を分析した。ミシェル・フーコーからジョルジュ・アガンベンおよびフロイトの精神分析の再解釈を試みた。それに連なるものとして、『現代思想』アントニオ・ネグリ特集に収録した「マルチチュード/暴力/ジェンダー」がある。また現在の世界を切り取る視角として「戦争の世紀」におけるフェミニズムの変容と役割を分析した。またNASSSでは、戦後の日米関係をデリダの「友愛」の概念から再解釈し、黒澤明の映画分析に繋げた。岩波書店から出版された『壊れゆく世界と時代の課題』の第4章「言語と法、人間の領域--正義はどこにあるのか」では、現在のわたしの関心事を表明する機会を与えられ、正義の再定義にからめて人間概念の変容を語り、さらに今後の研究へと繋げた。
各種発癌プロモーターによる胞状奇胎由來培養細胞の発癌過程における分子生物学的分析

われわれは、絨毛性疾患の発癌に関する研究において絨毛癌の潜在的癌細胞と考えられている全胞状奇胎の作製を試みてきた。現在まで、76回の胞状奇胎組織の培養を施行し、7回の長期継代に成功した。しかし、これの培養細胞は増殖が緩慢で34年のlife spanをもち、最終的にはその増殖を停止してしまった。今回、無月経9週の全胞状奇胎組織から得られた培養細胞(BM-72)は以前の培養細胞とは、その形態、増殖能に差があり、SCIDマウスへの移植による腫瘍形成能も観察された。しかも、発癌プロモーター(TPA)、2週間処理細胞でのSCIDマウスへの移植ではプロモーターの濃度依存性に腫瘍増殖能に差が認められた。そこで、発癌プロモーター処理のどの時点で、どんな遺伝子の変化が起きるのであろうかをRNA arbitrary primed PCR(RAP-PCR)differential display法を使用して差異があればその異常部分のゲノムの検出、単離、同定をすることを目的とした。最近、新しく2種類の胞状奇胎培養細胞(BM-75,BM-76)を得て,SCIDマウスへの移植を試みるに、形態、増殖能はBM-72細胞に似ているが腫瘍形成能は認められなかった。培養細胞(BM-72,BM-75)に発癌プロモーター(TPA)を0.1,1.0,10,100pg/ml2週間添加処理したときに発現が誘導されると思われるcDNAをアガロース上に展開させて、TPA濃度間のバンドに差を認めるかをみると、ある3種の合成ヌクレオチドランダムプライマーの組み合わせの結果からBM-72細胞においては、2個のcDNA断片がTPA100pg/mlにおいて他のTPA濃度のバンドと異なり発現が抑制されているのが見られた。BM-75細胞についての発癌プロモーター処理後のRAP-PCRdifferentialdisplayの検索の結果でも、TPA1.0,10pg/mlにおいてcNDAの高発現並びに抑制がみられた。従来の培養細胞より増殖の良好な新しく樹立された胞状奇胎由来培養細胞(BM-72)の各種発癌プロモーターによる悪性転換(癌化)を二重軟寒天中でのコロニー形成能、スキットマウス系での腫瘍形成能を指標にして調べ、さらに、発癌プロモーター処置のどの時点で、どんな遺伝子の変化が起きるのであろうかをRT-PCR-differential display法を使用して腫瘍形成能を生じたプロモーター処理細胞と無処理の差異から異常部分のゲノムの検出、単離、同定をする。今年度の研究実績はBM-72細胞のSCIDマウスへの移植では無処理の細胞でも充実性の腫瘤を形成した。初代は、いずれも、約4ヶ月目に1.5x1.0x0.7cmの大きさの腫瘤を形成し、肺転移も認めた。2-3代目までは4週以内に同大の腫瘤を形成し代が進むにつれてプロモーター処理群の方が未処理群より腫瘤形成速度が早かった。最近では、サイトカインの一種であるTNF-αが自然界に存在する発癌プロモーターとして脚光を浴びているので、我々もTNF-αで細胞を処理し、実験を施行している。(二重軟寒天コロニー形成能、SCIDマウスへの移植、遺伝子分析など)