hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
中心体.微小管による分裂面の決定機構

イトマキヒトデ卵母細胞では、減数分裂中に分裂装置を移動すると、動物極に限らずどこの表層でも極体ができることを減数分裂第一でも第二でも示した。つまり、分裂装置に対し、卵母細胞の表層は同じ反応をするのである。このことを利用して、分裂装置と表層の位置関係を変化させて、表層の反応を調べることにより分裂シグナルについて考察した。マイクロ操作法により、ガラス針を用いて分裂装置を動物極から離し、別の表層に近づけた後、ガラス針を抜いて分裂装置を放置した。その後、分裂装置は表層へ近づく場合と表層から離れる場合とがあった。分裂装置は表層の形態変化がある前後で観察できなくなった。この過程をビデオ装置により記録し、分裂装置の極のうち表層に近い方と表面との距離とし、観察できなくなる直前の距離を測定した。10μm以下の距離では、極体が形成されるか、表面が膨らんでから元に戻った。20μm以上では、すべて凹んだ。10-20μmでは、これら三種類の反応が混在した。極体形成時、表層ではアクチンが減って表面力が低下するので、分裂装置は10μm以下の距離では、表層のアクチンを減らして表面力を低下させることがわかった。逆に、20μm以上では、分裂装置は表層のアクチンを増やして収縮を起こさせて、表面をへこませていることが示された。このように、分裂装置は分裂シグナルを放出して、中心体から近いところにはアクチンを減らし、遠いところではアクチンを増やして収縮環を形成させるといった、2重のはたらきをしている。これは分裂シグナルが2種類あることを示すことを意味するのかもしれない。分裂中の細胞で分裂面がいつ、どこに決定されるかをいち早く判別するために、アクチンの分布を定量的に測定する方法を開発した。アクチンを蛍光標識ファロイジンで染色して蛍光顕微鏡で観察し、その像から表層のみをコンピュータで切りだし、その蛍光強度の分布を表層に沿って定量した。ウニ卵の分裂溝表層のアクチン量は極表層のそれより2-3倍大きく、また分裂溝への分布は一定の幅に限定されるのではなく、分裂溝が深くなるにしたがって広くなった。この分布について、通常の蛍光顕微鏡と共焦点蛍光顕微鏡との観察で一致することを確認した。また、イトマキヒトデ減数分裂における表層アクチンの分布についても予備的に測定した。分裂装置を観察するために、微小管は偏光顕微鏡で検知する方法を用いた。微小管毒を用いて、微小管の分布をかえて分裂装置の大きさと位置をかえる方法について、コルセミドを用いて条件を決定した。さらに、紫外線を照射して分裂溝を誘導する方法についても条件を決定した。これにより微小管の伸長が予想以上に激しく、分裂装置自身の位置をも変えてしまうことが判った。引き続いて以上の方法により、ウニ卵を用いて分裂シグナルを推定する実験を開始している。また、機械的に分裂装置を操作する方法について、イトマキヒトデの減数分裂の分裂装置を用いることを検討する実験を開始している。この系では、表層の反応から、表層に対して分裂溝を形成するに至るまでの様々な程度の分裂シグナルを与えることができると予想される。分裂中の細胞で分裂面がいつ、どこに決定されるかをいち早く判別するために、アクチン繊維の分布を定量的に測定する方法を開発した。卵母細胞をホルマリンで固定し、アクチン繊維を蛍光標識ファロイジンで染色して蛍光顕微鏡で観察し、コンピュータ画像処理で蛍光像から表層のみを切りだし、表層に沿った蛍光強度の分布を定量した。分裂装置の位置を観察するために、DAPIでDNAを染色して染色体を観察した。イトマキヒトデ減数分裂における表層アクチン繊維の分布は卵核胞崩壊後しばらくして動物極で大きかった。分裂前に植物極で増加した。極体のふくらみが現れる直前に動物極周辺で蛍光が強くなるが、動物極頂点でアクチン繊維が減少した。ふくらみが大きくなるにつれて、頂点のアクチン繊維はますます減少し、頂点周辺のアクチン繊維は増加して表層は収縮して、分裂溝になった。そして、分裂溝が極体をくびれきった。このことから、分裂シグナルは、中心体からの距離に対して表層アクチン繊維を増加させるだけでなく、2相性を示すことが明らかになった。また、極表層でアクチン繊維が減少することによって分裂装置の赤道が動物極周辺のアクチン繊維集積部まで移動してそこで分裂するという、極表層弛緩説を支持する結果となった。さらに、機械的に動物極を圧迫して減数分裂を阻害した卵母細胞のアクチン繊維の分布を観察すると、極体が形成されるときと同様に、動物極周辺に環状に集積したアクチン繊維の直径が時間とともに小さくなった。一方、卵表面の変形から、発生する張力が見積もられると考えられるので、極体形成中の張力の大きさを測定し、アクチン繊維の分布と比較検討する予定である。どこの表層でも分裂シグナルを調べることができるイトマキヒトデを用い、まず、分裂装置微小管が輸送する分裂シグナルによって、表層がどのように変化するかを調べた。極体形成中のイトマキヒトデ卵内の微小管構造を偏光顕微鏡で観察しながら、分裂装置を動物極表層からはがし、別の場所に垂直方向にして移動させた。分裂装置を表層に近づけると、極体ができるが、表層との距離を変えると表面が膨らむ、表面が凹むの2通りのことが観察された。

分裂装置はその軸に平行に移動させると、表面が膨らむだけで、極体の形成は起こらなかった。いっぽう、生きたままで細胞を観察することによって表層のアクチン量を推定し、分裂シグナルを調べるため、細胞形態からコンピュータ画像処理を行い表面の曲率を計算し、表面力を推定する方法を開発した。極体のふくらみが現れる直前に表面力が増し、動物極頂点で表面力が減少した。これはますます減少して、ほぼ一定となった。分裂溝になる膨らみの根本付近では、表面力が増大して、分裂溝が形成されるまで増大した。これを蛍光標識ファロイジンで染色して求めたアクチンの分布と比較したところ、極体形成中の表面力が大きい場所と時期にアクチンの量が大きくなっていて、細胞を固定して調べたアクチンの分布と表面力がほぼ合致していることが確かめられた。さらに、絶対値などについて、より詳しく検討中である。これらのことから、分裂シグナルは、中心体からの距離に対して表層アクチン繊維を増加させるだけでなく、2相性を示すことが確認できた。イトマキヒトデ卵母細胞では、減数分裂中に分裂装置を移動すると、動物極に限らずどこの表層でも極体ができることを減数分裂第一でも第二でも示した。つまり、分裂装置に対し、卵母細胞の表層は同じ反応をするのである。このことを利用して、分裂装置と表層の位置関係を変化させて、表層の反応を調べることにより分裂シグナルについて考察した。マイクロ操作法により、ガラス針を用いて分裂装置を動物極から離し、別の表層に近づけた後、ガラス針を抜いて分裂装置を放置した。その後、分裂装置は表層へ近づく場合と表層から離れる場合とがあった。分裂装置は表層の形態変化がある前後で観察できなくなった。この過程をビデオ装置により記録し、分裂装置の極のうち表層に近い方と表面との距離とし、観察できなくなる直前の距離を測定した。10μm以下の距離では、極体が形成されるか、表面が膨らんでから元に戻った。20μm以上では、すべて凹んだ。10-20μmでは、これら三種類の反応が混在した。極体形成時、表層ではアクチンが減って表面力が低下するので、分裂装置は10μm以下の距離では、表層のアクチンを減らして表面力を低下させることがわかった。逆に、20μm以上では、分裂装置は表層のアクチンを増やして収縮を起こさせて、表面をへこませていることが示された。このように、分裂装置は分裂シグナルを放出して、中心体から近いところにはアクチンを減らし、遠いところではアクチンを増やして収縮環を形成させるといった、2重のはたらきをしている。これは分裂シグナルが2種類あることを示すことを意味するのかもしれない。
マイクロサテライト領域に関わる国内主要造林樹種育種DNAマーカーの開発

本研究では、主要な国内産造林樹種であるアカマツ、ヒノキ、スギの育種マイクロサテライト(SSR)、マーカーを多数開発すること、また一方で、労力と時間のかからないSSRマーカー作製法を新たに確立することを目指した。先ず第一に、従来の方法に代え、SSR含有断片の濃縮過程を加えた、PCR増幅のみの改良法を適用し、アカマツおよびヒノキのSSRマーカーを作製した。一方、それらの方法とは全く原理の異なる、より優れたSSRマーカー二段階作製法を考案した。この方法では、二段階からなり、一段目で、SSR片側のプライマーを決定し、二段目でもう一方のプライマーを決定する。アカマツ、ヒノキ、スギ、およびその他の様々な生物種で、この方法によりSSRマーカーを作製し、その汎用性、経済性等を検討した。その結果、本方法では、マーカー一つ当たりの作製に要する時間と労力が、従来の方法に比べて比較にならないほど少なくて済むこと、一段階目のサブクローニングによって、多数の異なるSSR含有断片が挿入されているコロニーが容易に得られるため、コロニーを拾えば拾っただけ多数のマーカーが作製できることが解った。一般に育種には多数のマーカーが必要となることから、育種SSRマーカーの作製には、この方法が特に威力を発揮するものと期待される。この二段階作製法は、植物だけでなく、菌類、昆虫、線虫に至るまで、様々な生物種に共通に適用可能であった。ゲノムにSSR領域が少ない生物種では、従来のコロニーハイブリダイゼーション法では効率が悪く、現実的にはマーカー作製が困難とされていたが、そのような生物種でも本法により、SSRマーカーが作製出来ると予想される。今後、この二段階作製法を利用して、スギ、ヒノキ、アカマツの育種SSRマーカーを増やして行きたい。本研究の目的は、主要な国内産造林樹種アカマツ、ヒノキ、スギの共優性マイクロサテライト多型マーカーの開発を目指し、マイクロサテライトマーカーの安価でしかも比較的労力と時間のかからない単離同定法を確立すること、その方法によりアカマツ、ヒノキ、スギのマイクロサテライトマーカーを多数作成すること、開発したマーカーの遺伝学的細胞学的特性を確定することである。また、病気抵抗性、高生長等の有用形質にリンクして遺伝するマーカーの特定も行う予定である。今年度は、これらのうち、アカマツとヒノキのマイクロサテライトマーカーの開発を行った。主な研究成果は以下のようであった。1.Edwardら(1996)のメンブランフィルターを用いマイクロサテライト同定法を改良し、マツ、ヒノキのマイクロサテライト領域を容易に多数分離同定できる方法を確立した。主な改良点は以下のようである。(1)使用する制限酵素を工夫し、(2)アダプターを工夫し、(3)洗浄パッファーを工夫した。2.確立した方法を用いて、アカマツ、ヒノキのマイクロサテライト領域をそれぞれ14個と15個分離同定した。3.決定したそれぞれの領域の塩基配列に基づいてマイクロサテライトの両端のプライマーを設計し、PCR増幅の可能なものを選抜した。アカマツに関しては、他のマツ科の12種についてもPCRを行い、マーカーの種特異性を調べた。この結果、多くのマーカーが、アカマツ以外の種でもPCR増幅することが解った。このことは、得られたマーカーが他のマツ科の種でも多型マーカーとして有効であることを示唆している。4.得られたアカマツマーカーを用いて東京大学田無試験地内の立木の多型解析を行い、多型性、ヘテロ接合率、共優性か優性か等、マーカーの特性を解析した。その結果、共優性と見られる多型マーカーを6個確定した。本研究の目的を十二分に達成するには、マイクロサテライトを短時間で多数開発する必要がある。昨年度は、アカマツとヒノキのマイクロサテライトマーカーの開発を、フィルターによるマイクロサテライト領域濃縮法を用いて行った。

今年度は、マイクロサテライトをさらに短時間でしかも多数開発するための方法開発に力を注いだ。その結果、濃縮法とは全く異なる原理に基づく方法を開発した。この方法で、現在試験的に様々な樹木種、菌類のマイクロサテライトを開発しているが、どの種でも、多数のマイクロサテライトマーカーを従来の方法に比ベ飛躍的に簡単にしかも短時間で開発することに成功している。この方法の概要は以下の通りである。(1)マイクロサテライトプライマーを用いてゲノムDNAを増幅し、ISSR断片を得る。(2)それをサブクローニングし、多数のISSR断片の塩基配列を決定する。(3)ISSR断片の配列からプライマーを設計する。(4)一方、ゲノムDNAを一つの制限酵素で切ったのち、制限断片に特殊なアダプターを付け、アダプター付き制限ライブラリーを作る。このようなアダプター付き制限ライブラリーを6種の制限酵素について作る。(5)ISSR配列から設計したプライマーとアダプター配列から設計したプライマーによるgene walking法によって、ISSR配列から設計したプライマー配列を含む断片のプライマーまでの塩基配列を決定する。この中には、マイクロサテライト配列が含まれていることになる。(6)決定した配列からマイクロサテライトの両側にプライマーを設定すれば、マイクロサテライトマーカーが完成する。この方法は、これまでに報告されている方法に比べて、極めて容易で時間がかからず、また、確実性が高い。今後あらゆる生物種で、汎用的な優れた方法として利用されるであろう。昨年度は、極めて簡便な、ISSR断片を出発点とするマイクロサテライト(SSR)作製方法を考案した。今年度は、昨年度確立した作製方法をさらに発展させ、抑制PCR用アダプターを付けた制限断片を出発とする、より汎用性の高い二段階法を確立した。方法の概要は以下のようである。(1)一段階目は、ゲノムDNAを一つの制限酵素で切ったのち、制限断片に抑制PCR用アダプターを付け、アダプター付き制限断片ライブラリーを作る。(2)SSR配列を持つプライマーとアダプター配列から設計したプライマーによるPCRによって、他種類の増幅断片を含むPCR産物を得る。(3)サブクローニングし、一端にSSR配列を持つ断片の塩基配列を必要なだけ決定する。(4)SSR隣接配列からプライマーを設計する。(5)二段階目は、設計したプライマーと抑制PCR用アダプタープライマーによって、アダプター付き制限ライブラリー6種をPCR増幅し、適当な大きさの一本のバンドのみを増幅するライブラリーを選び、PCR産物の配列を決定する。(6)配列からSSR両側の配列を決定する。(7)増幅を調べて、SSRマーカーを完成する。方法の汎用性をチェックするために、ニセアカシア、カンバ類の樹木、数種の外生菌根菌、マツノマダラカミキリ、マツノザイセンチュウを材料にして、SSRマーカーを作製した。
ヘリックスペプチド薄膜を用いた電子移動を制御できる新規分子デバイスの開発

N末端にアセチルチオフェニル基を有するロイシンとαアミノイソ酪酸との交互配列16量体ヘリックスペプチドと、同様にN末端にアセチルチオフェニル基を有し、C末端にフェロセン部位を有する16量体ヘリックスペプチド、あるいは両末端にフェロセン部位を有するヘリックスペプチド、それぞれを液相法により合成した。得られたペプチドを、金基板上に調製したドデカンチオールの自己組織化膜に挿入し、高真空下で、走査型トンネル顕微鏡観察(STM)および走査トンネル分光(STS)を行い、ヘリックスペプチドを介した電子移動反応を分子レベルで調べた。STMでは、ペプチド単分子、あるいは数分子からなるバンドルが、明るい点として観察された。この点においてSTSを行い、得られた電流電圧応答をSimmonsモデルを用いて解析した結果、フェロセン部位を持たないペプチドでは、0.75Å^<-1>という小さいトンネリングパラメーターが得られた。このことからヘリックスペプチド分子の電子伝達能はアルキル化合物(1.2Å^<-1>)に比べ優れていることがわかった。一方、C末端にフェロセン部位を有するペプチドの場合では、フェロセン部位を持たないペプチドの場合と比較して、STMチップに正のバイアス電圧をかけた場合のみトンネル電流値が増大するという整流性が観測された。それに対して、N末端にもC末端にもフェロセン部位を導入したペプチドの場合では、正負両方のバイアス電圧下で電流値は増大したが、整流性は観測されなかった。以上の結果から、フェロセン部位は電子ドナーとして機能するが電子アクセプターとしては機能しないので、C末端にフェロセン部位を有するヘリックスペプチドの場合、正のバイアス電圧下では、フェロセン部位からSTMチップへの電子移動が起こりトンネル電流の増大につながるが、負のバイアス電圧下ではSTMチップからフェロセン部位への電子移動が起こらないため電流値は変化せず、その結果整流性が観測されたと考えられる。
金属修復物の非破壊的同定法の開発に関する研究

本研究は、口腔内の金属修復物を撤去するなど破壊することなく、その修復物の構成成分を知り、アレルゲンとなる金属修復物を特定する臨床検査法を確立することであり、臨床の現場から強く要請されている。すでに本研究グループは、歯科用の金属材料を研磨する研磨用ポイントにかなりの金属が付着しており、この方式で非破壊的に金属試料を採取出来ること、およびこっれを用いて金属の構成成分を知ることができることを報告した。そこで本研究は、この新しい方法を用いて口腔内に装着されている金属修復物を非破壊的に同定するための簡便な臨床検査法を確立することを意図した。すなはち、この研磨用ポイントで非破壊的に採取した金属材料を、従来法のX線マイクロアナライザー法による分析を対照として、金属イオンの分析に簡便なイオン電極法および歯科用金属の電位走査法のうち、今年度は、野元の開発した歯科用金属の電位走査法に基づいて供試材料に歯科用銀合金、アマルガムを選び、合金を構成する金属成分について、それぞれ特有のピーク曲線を求めて検討した。その結果、以下の成績を得ている。1.歯科用銀合金に含有される錫、銅および銀は主として各々-0.5V、0.0Vおよび0.1V付近に酸化電流のピーク値を示し、3種の金属を分離同定できた。しかし、銅と銀についてはピーク値が近接しており重壘する場合があった。2.酸化ピーク電流の電気量から換算すると本分析は0.1ug程度の削磨試料で実施出来、分析時間は1試料につき3分以内で実施出来た。3.本法は非常に高感度であるため、削磨試料の調節、対数変換期の利用によって、実用化が図れる測定法になるものと考えられる。
ヨウ素を挿入したカーボンナノチューブのヨウ素129メスバウアー分光による研究

前年度に引き続き、ヨウ素を挿入した単層カーボンナノチューブを対象にヨウ素129メスバウアー分光を中心にした研究を行った。主な研究実績は以下のようなことがらである。1.高中濃度にヨウ素をドープしたカーボンナノチューブに関する研究高中濃度のドーピング領域ではヨウ素が15-,13-,12の状態で存在すること、また濃度が低くなると15-,12の割合が減少し、13-が増加することを明らかにした。また、I-の状態のヨウ素が存在し、濃度が低くなるとその割合が増加することを初めて確認した。さらに、合成方法の異なるカーボンナノチューブについて比較をおこない、チューブ径や不純物の割合が異なるにもかかわらずほぼ同様が得られることがわかった。これらの結果についてはHyperfine Interactionsにて公表される。2.希薄な濃度にヨウ素をドープしたカーボンナノチューブに関する研究希薄なドーピング領域ではヨウ素が純粋なI-の状態で存在することを初めて確認した。さらに加熱によりI3-からI-に分解する可能性を示唆するデータを得ることができた。3.ヨウ素がカーボンナノチューブに挿入される位置の検証カーボンナノチューブの先端を加熱処理することにより開くことができることを利用して、先端の開閉によりドープされたヨウ素の化学形態がどのように異なるかを検討するための準備を行った。ヨウ素がチューブの中外でどのような形態で挿入されるのかは今後の実験で明らかにしていく予定である。4.ヨウ素129のメスバウアースペクトルの第一原理計算による解析ヨウ素の電子状態についてDV-Xα法およびWIEN等の第一原理計算によりメスバウアーパラメータを求め、ヨウ素の電子状態の第一原理計算をもとにしたメスバウアーパラメータの解析結果と実験結果の比較検討を行う準備を行った。今後、その結果をもとにカーボンナノチューブとヨウ素との間の電荷移動に関与する電子状態についての解析を行う予定である。本研究では放射性同位元素である^<129>Iを用いる必要があるため、まず微量でしか扱えない^<129>Iを単層カーボンナノチューブ(SWNT)をマット化した試料に挿入する手順を確立した。また、^<129>Iのメスバウアー効果を測定するためのガンマ線源として用いるため、合成したMg_3^<128>TeO_6を京都大学原子炉で45週間の中性子照射を行い、^<129m>Te線源を作成した。そして^<129>Iを挿入した試料について、その濃度を変化させるごとにメスバウアー効果を測定し、ヨウ素の化学形態および電子状態について解析を行った。その結果、SWNT中でヨウ素は濃度が高い領域ではI_3^-、I_5^-およびI_2として存在していることが分かった。また濃度を薄くするにつれて、I_5^-およびI_2の割合が減少し、I_3^-の割合が増加するばかりでなく、新たにI^-の状態で存在するものも現れることが分かった。SWNT中で希薄なヨウ素がI^-の状態で存在することはこれまでには確認されておらず、本研究により初めて明らかになったことである。さらに、濃度を非常に希薄にするとヨウ素は純粋にI^-だけの状態になることも分かった。このことは、ポリアセチレンなどの導電性高分子に挿入されたヨウ素もI^-として一部存在するが、比較的希薄な領域でもI_3^-の状態が残ることと対照的である。SWNTと同様のグラファイトシートの骨格を持つC_<60>などのフラーレンでは、挿入されたヨウ素がI_3^-などの電子受容体としてだけでなくI^+といった電子供与体のヨウ素も含まれることが知られているが、SWNTでは電子供与体は存在していない。すなわち、SWNTへのヨウ素の挿入による電荷移動の形態は同様の骨格を持つフラーレンよりは、ポリマー状の導電性高分子と同様の形態を示すが、I^-の状態で比較的安定に存在するなどのこれまでにない特徴を持つということが明らかになった。

ヨウ素がチューブの中外でどのような形態で挿入されるのかは今後の実験で明らかにしていく予定である。4.ヨウ素129のメスバウアースペクトルの第一原理計算による解析ヨウ素の電子状態についてDV-Xα法およびWIEN等の第一原理計算によりメスバウアーパラメータを求め、ヨウ素の電子状態の第一原理計算をもとにしたメスバウアーパラメータの解析結果と実験結果の比較検討を行う準備を行った。今後、その結果をもとにカーボンナノチューブとヨウ素との間の電荷移動に関与する電子状態についての解析を行う予定である。
花崗岩の風化生成物における鉱物学的研究

1.目的本研究は主として韓国の花崗岩を対象として次の目的をもっている。*花崗岩の風化現象が地域により異なっており、それがどのような原因でおこりるのか。*風化作用により生成した粘土鉱物は地域によりことなるのか。*我が国と同じようにいわゆるマサ化は認められるか。*我が国と同じように粘土細脈は認められるか。*花崗岩の変質に熱水作用は関与しているか。*粘土細脈中にはどのような粘土鉱物が生成しているか。*その粘土鉱物の鉱物学的特徴は。*その形成機構の解明*粘土細脈中の粘土鉱物の形成時代(K-Ar放射年代測定)。*総合的に我が国の花崗岩の風化変質機構と比較することにより、花崗岩の風化機構を解明する。2.韓国の調査地とその風化状態今回調査した地域は3ヶ所(釜山、慶州、ソウル)で、その内1ヶ所(慶州)は詳細な調査と試料採取を行った。釜山:釜山地域の基盤は主として白亜紀花崗岩(仏国寺花崗岩)で、釜山市周辺の山はこの花崗岩である。この花崗岩の風化状態は地表付近ではコアストーンが多く、表土もほとんど認められず非常に硬岩となっている。いわゆるマサ化した花崗岩はほとんど認められない。コアストーンも我が国の花崗岩中のものより2-3倍大きい傾向にある。山の斜面には我が国と比較して谷が少なく、全体にのっぺりした感じである。その浅い谷筋には崩壊して堆積しているコアストーン多くが認められる。それらの下の岩盤は非常に硬く割れ目が少なく、その間隔は非常に広い。慶州:今回主として調査した地域である。この地域には古第三紀火山岩中に数Kmの花崗岩の小岩体が点在しており、韓国側共同研究者である黄博士らによる研究で、39.7Ma-59。5Maの放射年代測定値が得られ、古第三紀の花崗岩であることが明らかになった。今回調査した岩体はその中で最も若い年代を示す岩体で、我が国の山陰地方に分布する山陰型の花崗岩に対比される。この岩体には岩体のほぼ真ん中を切るように道路が付けられており、連続した露頭観察が可能であった。それによると、火山岩との境界はいずれも広角度の断層により境されている。その断層には粘土鉱物が生成しており、一部には黄鉄鉱、方鉛鉱が脈状に形成され、境界部付近は著しい熱水変質作用を受けている。さらにこの岩体は部分的に著しい変質作用を受け、いわゆるマサ化している。このような場所には必ず粘土細脈が多く認められる。この様子は我が国の花崗岩のマサ化した地域には多く認められる粘土細脈の存在と非常に類似している。ソウル:ソウル地域はジュラ紀の花崗岩の分布する地域で、非常に新鮮な花崗岩が分布している。この地域もいわゆるマサ化した花崗岩はほとんど認められない。山岳部の斜面にはコアストーンが多く顔を出しており、全体としてはほとんど風化した花崗岩は認められない。しかし、谷ぞいに一部やや風化した花崗岩が認められるが、いわゆるマサ化まで風化は進んでいない。主とした調査はソウル大学の敷地内の工事現場の露頭で行った。その谷地形の露頭は新鮮な花崗岩が分布しているが、谷ぞいに断層が認められ、その断層と周辺に粘土細脈が多く認められた。その結果この谷ぞいの花崗岩はやや風化の進行が認められた。3.花崗岩の風化変質鉱物と粘土細脈中の粘土鉱物変質した花崗岩と粘土細脈を水簸し、粘土鉱物を集め、X線回折により粘土鉱物を鑑定した。釜山:花崗岩中に形成している粘土鉱物は主としてハロイサイトである。粘土細脈中の粘土鉱物はスメクタイト、カオリナイト、ハロイサイト、雲母粘土鉱物、雲母・スメクタイト混合層鉱物で、特にスメクタイト、雲母粘土鉱物、雲母・スメクタイト混合層鉱物である。慶州:花崗岩中に形成されている粘土鉱物は雲母粘土鉱物、スメクタイト、カオリナイト、ハロイサイト、緑泥石、雲母・スメクタイト混合層鉱物であった。そのうち特にスメクタイトが顕著に認められた。また、粘土細脈中の粘土鉱物も花崗岩と同じであるが、雲母粘土鉱物、スメクタイト、雲母・スメクタイト混合層鉱物が特に卓越している。ソウル:花崗岩に形成されている粘土鉱物は主としてハロイサイトである。一部スメクタイト、雲母粘土鉱物、雲母・スメクタイト混合層鉱物である。粘土細脈中の粘土鉱物は主として、スメクタイト、カオリナイトであった。4.粘土鉱物のK-Ar放射年代測定値ソウル調査地で花崗岩とそこに見られる粘土細脈中の粘土鉱物のK-Ar年代測定を実施した。測定試料は花崗岩1、粘土細脈3試料である。その結果花崗岩は143.7Ma、一方粘土細脈は104.3Ma、107.2Ma、73.2Maであった。この年代値からみると花崗岩はちょうど白亜紀とジュラ紀の境界付近で、粘土鉱物は後期白亜紀に相当している。

この値は粘土細脈を形成した熱水作用が花崗岩を形成した後かなり長く活動していたことを示すものか、あるいはジュラ紀花崗岩の下に白亜紀花崗岩が存在するのか現時点では明確でない。結果の概要韓国はユーラシア大陸の一部であり、いわゆる大陸型の花崗岩地域である。しかし我が国はプレートの沈み込み帯に位置している。このことが両国の花崗岩の風化変質状態(割れ目が少ない粘土鉱物の違い)の違いを反映している可能性がある。1.目的本研究は主として韓国の花崗岩を対象として次の目的をもっている。*花崗岩の風化現象が地域により異なっており、それがどのような原因でおこりるのか。*風化作用により生成した粘土鉱物は地域によりことなるのか。*我が国と同じようにいわゆるマサ化は認められるか。*我が国と同じように粘土細脈は認められるか。*花崗岩の変質に熱水作用は関与しているか。*粘土細脈中にはどのような粘土鉱物が生成しているか。*その粘土鉱物の鉱物学的特徴は。*その形成機構の解明*粘土細脈中の粘土鉱物の形成時代(K-Ar放射年代測定)。*総合的に我が国の花崗岩の風化変質機構と比較することにより、花崗岩の風化機構を解明する。2.韓国の調査地とその風化状態今回調査した地域は3ヶ所(釜山、慶州、ソウル)で、その内1ヶ所(慶州)は詳細な調査と試料採取を行った。釜山:釜山地域の基盤は主として白亜紀花崗岩(仏国寺花崗岩)で、釜山市周辺の山はこの花崗岩である。この花崗岩の風化状態は地表付近ではコアストーンが多く、表土もほとんど認められず非常に硬岩となっている。いわゆるマサ化した花崗岩はほとんど認められない。コアストーンも我が国の花崗岩中のものより2-3倍大きい傾向にある。山の斜面には我が国と比較して谷が少なく、全体にのっぺりした感じである。その浅い谷筋には崩壊して堆積しているコアストーン多くが認められる。それらの下の岩盤は非常に硬く割れ目が少なく、その間隔は非常に広い。慶州:今回主として調査した地域である。この地域には古第三紀火山岩中に数Kmの花崗岩の小岩体が点在しており、韓国側共同研究者である黄博士らによる研究で、39.7Ma-59。5Maの放射年代測定値が得られ、古第三紀の花崗岩であることが明らかになった。今回調査した岩体はその中で最も若い年代を示す岩体で、我が国の山陰地方に分布する山陰型の花崗岩に対比される。この岩体には岩体のほぼ真ん中を切るように道路が付けられており、連続した露頭観察が可能であった。それによると、火山岩との境界はいずれも広角度の断層により境されている。その断層には粘土鉱物が生成しており、一部には黄鉄鉱、方鉛鉱が脈状に形成され、境界部付近は著しい熱水変質作用を受けている。さらにこの岩体は部分的に著しい変質作用を受け、いわゆるマサ化している。このような場所には必ず粘土細脈が多く認められる。この様子は我が国の花崗岩のマサ化した地域には多く認められる粘土細脈の存在と非常に類似している。ソウル:ソウル地域はジュラ紀の花崗岩の分布する地域で、非常に新鮮な花崗岩が分布している。この地域もいわゆるマサ化した花崗岩はほとんど認められない。山岳部の斜面にはコアストーンが多く顔を出しており、全体としてはほとんど風化した花崗岩は認められない。しかし、谷ぞいに一部やや風化した花崗岩が認められるが、いわゆるマサ化まで風化は進んでいない。主とした調査はソウル大学の敷地内の工事現場の露頭で行った。その谷地形の露頭は新鮮な花崗岩が分布しているが、谷ぞいに断層が認められ、その断層と周辺に粘土細脈が多く認められた。その結果この谷ぞいの花崗岩はやや風化の進行が認められた。3.花崗岩の風化変質鉱物と粘土細
木材乾燥中の4次元的な細胞形態変化の可視化による割れ発生メカニズムの解明

その場観察システム(環境制御室内に共焦点レーザー顕微鏡を設置した経時観察システム)の構築により,木材乾燥中に発生するマイクロクラックの一部始終を経時的にその場観察することに成功した。材の組織構造が異なる針葉樹スギ,広葉樹散孔材のアカシアハイブリッド,広葉樹環孔材のセンダンを対象に,詳細なマイクロクラックの発生挙動を含水率と関係づけて検討した結果,材の組織構造がマイクロクラックの形態変化に大きく関与することが明らかになった。日本では国産材の利用が進まず、利用されないことが森林の荒廃を招き、炭素固定能を低下させる傾向にある。国産材の需要低迷の一因として乾燥問題があり、木材を乾燥する際に生じる割れの発生挙動をアーティファクトの影響なく、細胞レベルで経時的に可視化する方法の開発は、今後ますます高品質な乾燥材が求められる中で極めて重要である。本研究では,試料の含水状態に左右されずに観察可能な共焦点レーザ顕微鏡の利点に着目し,木材ブロック試料を設置する雰囲気の環境制御法を確立することで,乾燥に伴う割れの発生挙動を3次元的な細胞レベルの変化に時間軸を加えて4次元的に可視化する方法の開発を目指す。木材を乾燥する際に生じる割れの発生挙動をアーティファクトの影響なく、細胞レベルで経時的に可視化する方法を開発するために、木材の含水率に左右されずに観察可能な共焦点レーザー顕微鏡(CLSM)の利点に着目し、木材ブロック試料を設置する雰囲気の環境制御法を確立することで、乾燥に伴う割れの発生挙動を3次元的な細胞レベルの変化に時間軸を加えて4次元的に可視化する方法を検討した。19年度の研究成果は以下の通りである。○自然乾燥に伴う割れ発生挙動の可視化広葉樹に比べて組織構造が単純な針葉樹(スギ)を対象に、CLSM下において割れを発生させるための環境制御法を検討し、割れの発生に成功した。これにより、アーティファクトの影響なく、割れ発生挙動を細胞レベルで、かつ経時的に可視化することが可能になった。この手法を使って得られた成果は次の通りである。まず、放射組織に沿って割れが進行する場合、割れは晩材部で発生することが明らかになった。次に、発生した割れは髄側、樹皮側の両方向へ進行するが、早材部で止まることを明らかにした。割れの進行とともに割れ幅は増大するが、乾燥終了前に減少し、発生した割れのうち、肉眼では観察できないレベルの割れが存在することが明らかになった。以上の割れ発生挙動については経時的な動画としてビジュアル化した。また、割れの深さ方向を解析したところ、晩材部で最も深く、年輪界を超える場合は急激に浅くなり、髄側への進行の場合は徐々に浅くなる傾向を明らかにした。本研究成果は投稿中である。20年度の研究成果は以下の通りである。○広葉樹材の乾燥に伴う割れ発生挙動の可視化広葉樹の環孔材センダンと散孔材アカシアハイブリッドを対象に,CLSM下で生材状態から表面と内部に水分傾斜を生じさせ,割れを発生させる環境制御法を確立し,乾燥初期に発生するマイクロクラックの経時的な挙動を可視化した。その結果,明瞭な成長輪界を有するセンダンでは,晩材部の放射組織および隣接部位で数カ所のマイクロクラックが発生し,随側・樹皮側へ,ともに放射組織に沿って進行した後,その幅が最大になって停止した。その後,緩やかに閉じ,乾燥末期にはその存在をCLSMでは観察できない傾向が認められた。一方,明瞭な成長輪界を有しないアカシアハイブリッドでは,無数のマイクロクラックが放射組織に隣接した部位で発生し,随側・樹皮側へ進行した後,その幅が最大になって停止した。その後緩やかに閉じるが,完全には閉じない傾向が明らかになった。以上のマイクロクラック発生挙動については経時的な動画としてビジュアル化した。21年度の研究成果は以下の通りである。○マイクロクラックの形態変化と抵抗率との関係

高抵抗率計を導入したその場観察システムを使って,スギの辺材を対象に,観察面における抵抗率の経時変化と関連づけたマイクロクラックの経時的な形態変化を可視化した。その結果,乾燥開始後,試料の平均含水率は急激に低下するが,試料表面の抵抗率は変化せず,その後ある時点で抵抗率が上昇し,マクロクラックが発生することが明らかになった。一方,心材では初期含水率,抽出成分がマイクロクラックの発生時期に大きく関与することが明らかになった。これら一連のマイクロクラック発生挙動について,経時的な動画としてビジュアル化することができた。木材を乾燥する際に生じる割れの発生挙動をアーティファクトの影響なく、細胞レベルで経時的に可視化する方法を開発するために、木材の含水率に左右されずに観察可能な共焦点レーザー顕微鏡(CLSM)の利点に着目し、木材ブロック試料を設置する雰囲気の環境制御法を確立することで、乾燥に伴う割れの発生挙動を細胞レベルでその場観察する方法を検討した。22年度の研究成果は以下の通りである。○スギにおける心材成分量および含水率とマイクロクラックの形態変化との関係生材含水率が低い赤心材と生材含水率が高い黒心材を比較すると、マイクロクラックの形態変化に大差はないが、初期含水率の違いによりマイクロクラック発生に要する時間が黒心材では長いことが明らかになった。黒心材の生材と温水抽出材を比較すると、心材成分の除去により乾燥が早くなることがわかった。赤心材を減圧注入して黒心材と同程度の含水率にしても、マイクロクラックの形態変化に大差がないことから、心材成分量の大小は関与しない可能性が示唆された。黒心材の心材成分を除去しても辺材生材のマイクロクラック発生挙動とは異なることがわかった。すなわち、辺材では不可視なマイクロクラックが存在するのに対して、黒心抽出材では顕微鏡下で残留するマイクロクラックがほとんどであった。○マイクロクラックと早材変形との関係その場観察システムを使って、早材仮道管の変形挙動の可視化に成功した。マイクロクラックは晩材部の放射組織で発生し、放射組織に沿って伸長・拡大して最大になったあと収縮し始めるが、そのとき早材仮道管が変形し始めることが明らかになった。
本質主義的信念が集団間葛藤に影響を与えるプロセスの解明

社会集団の多くは恣意的な分類であるにもかかわらず、人々は集団の間に遺伝子のような本質的違いが存在すると錯覚することがある。本研究では、こうした本質主義的信念が集団認知及び行動に与える影響を実験と調査によって検証した。内・外集団に本質的差異の存在が知覚されると、両集団に関する知識がなくとも、自分自身を含む内集団成員と外集団成員の間に、あたかも性質的な差異が存在するかのように知覚される「集団間差異の幻想」が生じることが明らかになった。本研究では、本質主義的信念と集団内及び集団間行動の直接的な関係は見いだされなかったが、集団間差異の幻想は、外集団への偏見、葛藤を生み出す十分な原因となると考えられる。社会集団の間に遺伝子のような本質的差異があると錯覚(本質主義的信念)することが、所属集団および他集団に関する認知に与える影響について実証的検討を行った。その結果、本質主義的信念を実験操作によって高めると、自己を手掛かりとした集団認知が促進され、1内集団に関しては自分と同じ特性を持った人が多いとの認識(False Consensus Effect: FCE)がなされる一方で、2外集団には、自分と異なる特性を持つ人が多いとの推測(False Uniqueness Effect: FUE)がなされるようになることが明らかになった。つまり、社会集団に対する本質主義的信念には、内集団の類似性を強調すると共に、自己及び内集団成員と外集団成員の差異の知覚を強調する効果があるといえる。本研究の結果は、本質主義的信念が、外集団成員との相互理解の主観的困難さを高めたり、偏見や差別を生じさせたりする要因となっている可能性があることを示している。ただし、集団成員の特性に関する推論と政治的意見に関する推論では、本質主義的信念の強さが与える影響に差異が認められた。これは、集団成員が持つ「特性」と「意見」では、遺伝子に類するような集団の「本質」によって規定される程度が異なると、人々が捉えていることの表れとも考えられる。このように本質主義的信念が集団認知に与える影響には、一定の複雑さが存在すると考えられる。以上の研究結果を受け、現在は、本質主義的信念と集団認知の関連の詳細を更に明確にするための追加実験を実施中である。平成27年度は、所属集団と他集団の間に遺伝子のような「本質的差異」が存在すると錯覚することが、集団成員の性質の知覚に与える影響を更に実証的に検討した。昨年度の研究では、内外集団を区別する本質が知覚される程度を操作し、その影響力を検証した。しかし、本質的差異の知覚を促した条件では、「本質」の分だけ、内集団成員と自己との類似性及び外集団と自己との差異に関する手がかりが認知的に多くなっていたことが考えられた。そこで、本年度は、内外集団という区分の背景に「本質」を知覚させる条件と「文化」を知覚させる条件を設け、集団内類似性と集団間差異に関する手がかりの量的差異を縮小した上で、本質知覚の効果を検討した。そして、1内外集団の間に本質的差異が知覚させると、自己及び内集団成員と外集団成員の特性次元の類似性知覚が低下すること、2内外集団の背景に文化的差異を知覚した場合や集団成員の持つ政治的意見について推論を求めた場合には、このような効果が生じないことを明らかにした。すなわち、本質主義的信念には、実在しない内外集団間の特性の違いをあたかもあるかのように錯覚させる効果があることが示唆された。さらに、上記の研究では、昨年度の研究成果と一貫して、人間の「特性」と「意見」では「本質」によって規定される程度に違いがあると人々が捉えていることが示された。そこで、平成27年度末に、人間の種々の性質と「本質」の関連性に関する認知を検証する社会調査を実施した。調査データは、平成28年度に分析を行い、その成果を学会等で報告する予定である。また、平成27年度は集団間葛藤に関する諸文献を更に渉猟し、これまで得られてきた知見の整理や本研究の仮説の洗練化も行った。その成果の一部は、大渕憲一(編)『紛争・正義・公正の心理学』(北大路書房)において「集団間葛藤の低減」と題した章としてまとめ、社会に広く公表した。前年度の研究から得られた知見を精査すると、新たな視点での実験と調査の追加実施が必要と考えられた。そこで、これらを当初計画していた研究の実施前に行うこととしたため、計画全体のスケジュールが予定よりも遅れた。また、平成27年度は身体的な事情で研究を順調に進めることができない期間が生じたことも一因と考えられる。ただし、前年度の成果に基づいて研究を進展させており、成果も積み重ねることができている。昨年度までの研究では、所属集団と他集団の間に遺伝子や神経生理学的な違いが存在するとの知覚が、両集団の構成員が異なる特性を持つとの推論を促すことを明らかにしてきた。ただし、こうした現象が生じるのは、内・外集団成員の特性に関する推論に限定されており、本質主義的信念がどのような次元(例.特性、意見)の集団認知により強い影響を与えるのかの解明が求められた。そこで本年度は第1の課題として、上記の問題について平成27年度末に実施した「人間の種々の特徴と(生物学的)本質の関連性認知」に関する調査データから検証を行った。その結果、遺伝子といった本質的要因は、価値観や信念といった観念的な性質よりも性格特性を規定する程度が強く、また身体的特徴や能力といった物理的な性質を規定する力はさらに強いと捉えられていることが明らかになった。

これらの知見は、直感的に理解しやすいものではあるが、遺伝子などの生物学的要因、すなわち本質が人間の性質に与える影響についての人々の主観的「理解」についてほとんど体系的に検討されてこなかったことに鑑みると、本研究で種々の性質と本質の関連の認知を網羅的に検証されたことの学術的意義は大きいであろう。さらに本年度は、昨年度に着手した、本質主義的信念と内・外集団成員の性質推論の関連を検証する実験にも引き続き従事し、データの収集をさらに進めることができた。以上に加えて、平成28年度は北村英哉・内田由紀子(編)『社会心理学概論』(ナカニシヤ出版)の第3章「ステレオタイプ」を執筆する機会を得て、これまで行ってきた集団認知、特にステレオタイプや偏見に関わる諸文献の渉猟の成果を一般向けに公表することができた。さらに、執筆過程において、文献の精読、諸理論の整理が進んだことは、本研究の理論的発展にもつながった。平成28年度で研究を完了させる予定であったが、研究課題の一部を来年度に持ち越すこととした。これは育児等の理由で研究時間に制約が生じたためであるが、こうした事由に基づき研究期間の延長を申請したところ、これが認められた(詳細な延長理由は申請書にて報告済み)。本年度は、実施してきた実験の追加データの収集、社会調査データの分析、これまでの知見の整理と新たな理論的枠組みの構築を中心的課題に据え、取り組み、大きな成果には至らないまでも、そこに至るために必要な研究成果を積み上げることはできたと考えている。平成29年度には「社会集団に対する本質主義的信念によってより強く規定されている集団認知及び対人認知の次元の検証」を進める予定であるが、上述の本年度の準備を活かし、効率的な実施に努めたいと考えている。平成29年度は本質主義的信念が対人認知を超えて、集団内・集団間行動にも影響を与えうるかを実験によって検証した。まず、参加者を最小条件集団パラダイムによって無作為に2つのカテゴリーに分けた後で、架空のWEBニュース記事を提示してカテゴリー化の基盤に関する認識を操作した。具体的には、カテゴリーを「遺伝子等の生物学的要素」の違いを反映したものと認識させる条件、「社会・文化的要因」の違いを反映したものと認識させる条件、「基盤が無く、カテゴリーは非固定的なもの」と認識させる条件を設定した。その後、内集団成員あるいは外集団成員と1回限りの囚人のジレンマ・ゲームを行っているシナリオを提示し、相手への協力行動傾向及び相手の印象等を測定した。「社会・文化的要因」条件では、外集団成員には相対的に非協力行動及び行動規範の非共有の知覚がなされやすいことが示されたが、「生物学的要素」条件ではこうした効果は認められなかった。ただし、現実社会では、内・外集団の間に生物学的な違いのみが知覚されることは稀であり、社会・文化的な違いの知覚に加えて生物学的違いが意識されていることが多い。本質主義的な信念は、カテゴリーの間に社会・文化的な違いを知覚することの効果を強める調整要因としての役割を担っている可能性もある。また、「生物学的要素条件」では、他の条件よりも、相手への行動にばらつきがみられており、生物学的要素の共有・非共有の知覚が対人行動に与える程度には個人差があることが伺える。
魚類の多回産卵現象の成立・制御機構

昨年度に引き続き,コイ科の多回産卵魚であるタイリクバラタナゴの雌を個体識別し,水槽内で雄および産卵床となる二枚貝とともに飼育し,産卵管の伸長を指標として産卵(排卵)周期を調べた.産卵周期後期および産卵周期中期の個体を集め卵巣を摘出し,卵黄球蓄積をほぼ完了した大型の卵母細胞(次に排卵される卵群)と,卵黄球を含むそれ以外の小型の卵母細胞とに分け,生殖腺刺激ホルモン(GTH)とともに22°Cで1824時間培養し,培養液中のエストラジオール17β(E_2)と17,20β-dihydroxy-4-pregnen-3-one(17,20β-P)を時間分解蛍光免疫測定法で測定した.その結果,産卵周期中期の個体では,卵黄蓄積を完了した大型卵母細胞も,それ以外の小型の卵母細胞も,ともにサケ下垂体抽出物の添加により,単位乾燥重量あたりほぼ同量のE_2および17,20β-Pを産生することが明らかとなった.これに対し,産卵周期後期の個体では,卵黄蓄積を完了した大型卵母細胞はE_2産生能が低下し,逆に17,20β-P産生能が著しく上昇していたが,小型の卵母細胞における17,20β-P産生能には大きな変化は見られなかった.したがって本種のような多回産卵魚では,1回産卵型のサケ科魚のように,排卵期に卵母細胞がE_2産生型から17,20β-P産生型へ急激に変化することはなく,両方のステロイドを産生できる移行期を経て,徐々に17,20β-P産生型に変化することが示唆された.また,LH型のGTHであるHCGは本種においてはいずれのステロイド産生についてもほとんど効果がなく,FSH型のGTHとされるPMSG(妊馬血清ゴナドトロピン)が,両ステロイド産生に高い効果を示した.また,海産の多回産卵魚であるベラ科のササノハベラについて,その産卵周期と脳内ステロイドとの関係を免疫組織化学的に調べ,若干の知見を得た.昨年度に引き続き,コイ科の多回産卵魚であるタイリクバラタナゴの雌を個体識別し,水槽内で雄および産卵床となる二枚貝とともに飼育し,産卵管の伸長を指標として産卵(排卵)周期を調べた.産卵周期後期および産卵周期中期の個体を集め卵巣を摘出し,卵黄球蓄積をほぼ完了した大型の卵母細胞(次に排卵される卵群)と,卵黄球を含むそれ以外の小型の卵母細胞とに分け,生殖腺刺激ホルモン(GTH)とともに22°Cで1824時間培養し,培養液中のエストラジオール17β(E_2)と17,20β-dihydroxy-4-pregnen-3-one(17,20β-P)を時間分解蛍光免疫測定法で測定した.その結果,産卵周期中期の個体では,卵黄蓄積を完了した大型卵母細胞も,それ以外の小型の卵母細胞も,ともにサケ下垂体抽出物の添加により,単位乾燥重量あたりほぼ同量のE_2および17,20β-Pを産生することが明らかとなった.これに対し,産卵周期後期の個体では,卵黄蓄積を完了した大型卵母細胞はE_2産生能が低下し,逆に17,20β-P産生能が著しく上昇していたが,小型の卵母細胞における17,20β-P産生能には大きな変化は見られなかった.したがって本種のような多回産卵魚では,1回産卵型のサケ科魚のように,排卵期に卵母細胞がE_2産生型から17,20β-P産生型へ急激に変化することはなく,両方のステロイドを産生できる移行期を経て,徐々に17,20β-P産生型に変化することが示唆された.また,LH型のGTHであるHCGは本種においてはいずれのステロイド産生についてもほとんど効果がなく,FSH型のGTHとされるPMSG(妊馬血清ゴナドトロピン)が,両ステロイド産生に高い効果を示した.また,海産の多回産卵魚であるベラ科のササノハベラについて,その産卵周期と脳内ステロイドとの関係を免疫組織化学的に調べ,若干の知見を得た.魚類の多回産卵現象の成立・制御機構解明の一環として,血中あるいは培養液中のステロイドホルモン測定系を,固相化第二抗体を用いた競合法による時間分解蛍光イムノアッセイにより組み立てた.その結果,1.5192pg/wellの範囲で良好な標準曲線を得ることができ,魚類の血中あるいは培養液中の各種ステロイドホルモンの測定に充分使用可能であることがわかった.コイ科の多回産卵魚であるタイリクバラタナゴの雌を個体識別し,水槽内で雄および産卵床となる二枚貝とともに飼育し,産卵管の伸長を指標として産卵(排卵)周期を調べた.水温25°Cではほぼ3日周期で規則正しい産卵が起こった.産卵管伸長開始期にあたる排卵直前の個体の卵巣中にはA(卵径0.60-0.85mm),B(卵径0.85-1.10mm),C(卵径1.30-1.80mm)の3群の卵黄球を含む卵母細胞が存在し,卵成熟および排卵の過程でC群の卵径(長径)は2.60-3.00mmまで急速に増大した.この間,B群の卵径は0.90-1.20mmまで徐々に増大したが,A群はほとんど変化しなかった.卵の産出の前後からA群とB群は急速に成長し,それぞれB群とC群に置き替り,新たなA群が加入した.

この間の下垂体生殖腺刺激ホルモン分泌細胞(GTH細胞)を電子顕微鏡で観察したところ,GTH細胞には大小2種類の分泌顆粒が存在し,この内,小顆粒は排卵周期内で大きな変化を示さなかったが,大顆粒はB群がC群に移行する時期(卵黄蓄積期)に大型化し,C群の卵黄蓄積終了時には逆に小型化していた.したがって,GTH細胞の大顆粒は卵黄蓄積に深く関与することが示唆されたが,今後この点をさらに明らかにしたい.また,来年度はこれら卵群ごとのステロイド産生能を,時間分解蛍光イムノアッセイを用いてin vitroで調べる予定である.同様に,他の多回産卵魚についても検討する.昨年度に引き続き,コイ科の多回産卵魚であるタイリクバラタナゴの雌を個体識別し,水槽内で雄および産卵床となる二枚貝とともに飼育し,産卵管の伸長を指標として産卵(排卵)周期を調べた.産卵周期後期および産卵周期中期の個体を集め卵巣を摘出し,卵黄球蓄積をほぼ完了した大型の卵母細胞(次に排卵される卵群)と,卵黄球を含むそれ以外の小型の卵母細胞とに分け,生殖腺刺激ホルモン(GTH)とともに22°Cで1824時間培養し,培養液中のエストラジオール17β(E_2)と17,20β-dihydroxy-4-pregnen-3-one(17,20β-P)を時間分解蛍光免疫測定法で測定した.その結果,産卵周期中期の個体では,卵黄蓄積を完了した大型卵母細胞も,それ以外の小型の卵母細胞も,ともにサケ下垂体抽出物の添加により,単位乾燥重量あたりほぼ同量のE_2および17,20β-Pを産生することが明らかとなった.これに対し,産卵周期後期の個体では,卵黄蓄積を完了した大型卵母細胞はE_2産生能が低下し,逆に17,20β-P産生能が著しく上昇していたが,小型の卵母細胞における17,20β-P産生能には大きな変化は見られなかった.したがって本種のような多回産卵魚では,1回産卵型のサケ科魚のように,排卵期に卵母細胞がE_2産生型から17,20β-P産生型へ急激に変化することはなく,両方のステロイドを産生できる移行期を経て,徐々に17,20β-P産生型に変化することが示唆された.また,LH型のGTHであるHCGは本種においてはいずれのステロイド産生についてもほとんど効果がなく,FSH型のGTHとされるPMSG(妊馬血清ゴナドトロピン)が,両ステロイド産生に高い効果を示した.また,海産の多回産卵魚であるベラ科のササノハベラについて,その産卵周期と脳内ステロイドとの関係を免疫組織化学的に調べ,若干の知見を得た.