hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
複素芳香環間の電荷移動構造による高誘電率ポリマーの構築

主鎖に沿った電荷移動構造及び、ニトロ基やヒドロキシル基等の分極性置換基を有する芳香環系ポリマーを合成した。たとえばジニトロチオフェンやベンゾチアゾール,ピリダジンは電子受容性単位であるのに対して、ジアルコキシベンゼンは電子供与性単位である。そして、この電子受容性単位と電子供与性単位が交互に結合して生成するポリマーは電荷移動構造を持つ。そして、この電荷移動構造及びニトロ基等の分極作用により、同ポリマーには高誘導率が期待される。本年は、この様な分子構造を有する新規ポリマーを、パラジウム錯体を用いるC-Cカップリング重縮合により合成した。得られたポリマーは有機溶媒に可溶であり、キャスト法により良好なフィルムとすることができた。そして、このフィルムについて誘導率を測定したところ、2.5以上の高い比誘導率を示すポリマーがあることが分った。また、ポリマーの電荷移動構造を明らかにする目的で、低分子のモデル化合物を合成し、その単結晶構造をX線回折法により明らかにした。この低分子モデル化合物は長い領域において電荷移動構造を有すると考えられる固体構造を有し、またその固体構造に基づく2次非線形光学発光現象を示した。さらに、分子内電荷移動構造を有するパイ共役高分子で自己集積を行うものについて、大きなFaraday rotationを示すことを見出した。電荷移動構造及び、ニトロ基やカルボニル基等の分極性置換基を有する芳香環系ポリマーを合成した。たとえばジニトロチオフェンは電子受容性単位であるのに対して、チオフェン及びジアルコキシベンゼンは電子供与性単位である。そして、この電荷移動構造及びニトロ基の分極作用により、同ポリマーには高誘導率が期待される。本年は、この様な分子構造を有する新規ポリマーを、パラジウム錯体を用いるC-Cカップリング反応等により合成した。そして、このフィルムについてLCRメーターにより誘導率を測定したところ、2.5以上の高い比誘導率を示すポリマーがあることが分った。ピロールや1,3,5-トリアジン、チオフェン、チアゾール、ピリジン等の複素芳香環から成る新規ポリマーを合成した。また、高誘電率をめざして、ニトロ基やアルキニル基等の置換基を有する新規関連ポリマーを合成した。また、関連するオリゴマーを合成した。合成には、ニッケル錯体やパラジウム錯体を用いる有機金属重縮合法を主に用いた。また、3価鉄化合物を酸化剤とする酸化重合法によってもポリマーを合成した。得られた高分子は数千から1万以上の分子量を示した。そして、いくつかのポリマーについては、分光学的手法によりポリマー中に電荷移動構造が存在することを解析し、またその固体構造を粉末X線回折法等により明らかにした。関連するポリマーであるフェニレンにニトロ基の結合したポリマーでは、約3以上の高誘電率を示すポリマーがあることが分った。
蛍光タンパク質プローブを用いた尿酸輸送評価法の開発

腎臓に存在する尿酸トランスポーターは、血漿尿酸値を規定し、高尿酸血症の治療標的となる。本研究では、簡便な尿酸トランスポーター評価法開発を目的として、尿酸代謝酵素uricaseと、尿酸代謝の際の副産物である過酸化水素に応じて蛍光を変化させるHyPerとの融合タンパク質を開発した。腎由来細胞に尿酸トランスポーターおよび融合タンパク質を発現させ、尿酸を添加すると、添加量に応じて蛍光強度比が上昇した。さらに尿酸と共に尿酸トランスポーター阻害薬ベンズブロマロンを添加すると、蛍光強度比は有意に低下した。よって、本手法によって尿酸トランスポーターを介した尿酸輸送の蛍光検出が可能であることが示された。上記のB-1で活性を確認した融合タンパク質に尿酸を添加し、蛍光プレートリーダーによって蛍光値を定量することによって、尿酸量に応じた蛍光値の変化を示すかどうか検討した。反応条件はuricaseとHyPerを混合した測定系での先行研究によって決定したものを用いた。これまで設計した8種のバリアントの中から最も高活性を示した融合タンパク質を以下の実験に用いた。2.尿酸トランスポーター恒常発現細胞株の作製研究代表者は既にヒト胎児腎臓由来のHEK293細胞に尿酸トランスポーターhumanURAT1遺伝子を一過性発現し、その発現を抗URAT1抗体を用いた免疫染色により確認した。ここではさらに抗生物質G418による培養を行い、URAT1を恒常発現するHEK293細胞株を作製した。そして14C標識した尿酸の取り込み量を放射定量し、発現したURAT1が尿酸取り込み能を維持しているかどうか評価した。Aspergillusflavusを細胞バンクNBRCより譲渡を受け、培養を行った後にRNAを抽出し、RT-PCR法にて目的遺伝子uricaseを増幅した。得られた配列をpET発現ベクターにサブクローニングした。目的タンパク質を発現させた大腸菌破砕液(可溶画分)のUricaseの尿酸代謝能については、3,5-dichloro-2-hydroxybenzenesulfonic acid (DHBS)及び4-aminophenazoneを利用した発色アッセイ法により評価した(Clin. Chem., 26, 227, 1980)。結果、クローニングしたuricaseは可溶性画分に発現し、尿酸代謝能を持つことを確認した。また、蛍光タンパク質HyPerとuricaseの融合タンパク質を設計した。設計した融合タンパク質は大腸菌宿主において大量発現させ、uricase活性及び蛍光タンパク質HyPerの過酸化水素依存した蛍光活性を検討した。蛍光活性はタンパク質発現大腸菌懸濁液に過酸化水素を添加し、生じる蛍光を測定することにより行った。設計の際には、下の12を考慮したバリアントを作製した。1HyPerとuricaseを融合する位置2HyPerとuricase間のリンカー長柔軟性が高く、リンカー配列として汎用されているGGGS配列を採用し2,4,8,12回繰り返したものを検討した。結果、作製した融合タンパク質はいずれも尿酸代謝能及び過酸化水素依存的な蛍光活性を有していた。内、最も活性が高いものは、C末端にHyPerが配置され、リンカー配列が最長のGGGS12回繰り返しとなっている融合タンパク質であることを確認した。高尿酸血症の主な原因として腎臓の尿酸排泄低下が挙げられるが、腎臓における尿酸輸送の解明は進んでいない。放射性標識尿酸の取り込みを定量する現在の尿酸輸送評価法では、測定に多くの時間を要し、生細胞における尿酸輸送の経時的解析が不可能である。また複数の尿酸トランスポーターの相互連関を明らかにすることができない等の欠点が存在する。本研究では、組み換え蛍光タンパク質と尿酸代謝酵素uricaseの融合タンパク質を構築し、細胞内尿酸の蛍光検出法を開発することにより、1尿酸トランスポーター機能の簡便な定量評価、2細胞内尿酸分布の蛍光イメージングから、尿酸輸送機構の詳細を明らかとすることを目的とした。結果、設計した数種のバリアントから、尿酸代謝能および蛍光活性を保持した融合タンパク質を得た。活性を確認した融合タンパク質を発現した大腸菌に尿酸を添加し、蛍光プレートリーダーによって蛍光値を定量することによって、尿酸量に応じた蛍光値の変化を示すことを確認した。さらに、尿酸トランスポーターURAT1を腎由来培養細胞株に発現させる手法を確立した。発現の確認は抗URAT1抗体による免疫染色およびRT-PCRにより行った。そのURAT1発現細胞に構築した融合タンパク質をコードするベクターを遺伝子導入し、融合タンパク質を発現させた。融合タンパク質を発現するURAT1発現細胞に尿酸を添加した際の蛍光の経時的変化を蛍光プレートリーダーによりモニタリングした。蛍光の定量結果から、尿酸添加量に依存して融合タンパク質の蛍光変化が見られることを確認した。URAT

1阻害薬を添加した際にはそのような蛍光変化が見られないことから、URAT1による尿酸輸送を融合タンパク質により蛍光検出可能であることを示した。タンパク質工学平成24年度の研究が当初の計画以上に進展し、融合タンパク質の活性確認を順調に終了させることができていたため、本年度の計画においても、活性の高いタンパク質を用いて検討することができた。また、恒常発現株の作成においては、既に作製法が確立されていたため、こちらも順調に作製を終えることができた。大腸菌発現系におけるuricaseタンパク質の発現量が高く、活性のあるものを問題なく得ることができた。また、作製した融合タンパク質も全てが必要とする代謝活性・蛍光活性を有しており、問題なく研究を進行させることができたため。1.尿酸トランスポーター発現細胞へのUricase-HyPer融合タンパク質遺伝子導入融合タンパク質の遺伝子配列を哺乳類細胞発現用ベクターpcDNA3.1にサブクローニングし、尿酸トランスポーター発現細胞に遺伝子導入する。HyPerタンパク質の蛍光およびURAT1 mRNA発現量定量により、発現の確認を行う。融合タンパク質の発現が見られない場合の対応:1細胞種を他の腎由来培養細胞に変更する。2遺伝子導入条件を変更する(発現ベクターの種類または遺伝子導入法の変更。融合タンパク質を発現する尿酸トランスポーター発現細胞に尿酸を添加した際の蛍光の経時的変化を蛍光プレートリーダーによりモニタリングする。尿酸輸送能のないトランスポーター変異体を発現する細胞における融合タンパク質の蛍光変化を比較対象とする。尿酸の蛍光検出が得られない場合の対応:反応条件の再検討(溶液組成、温度、時間)を行う。これまで活性を確認した融合タンパク質に尿酸を添加し、蛍光プレートリーダーによって蛍光値を定量することによって、尿酸量に応じた蛍光値の変化を示すかどうか検討する。2.尿酸トランスポーター恒常発現細胞株の作製研究代表者は既にヒト胎児腎臓由来のHEK293細胞に尿酸トランスポーターhumanURAT1遺伝子を一過性発現し、その発現を抗URAT1抗体を用いた免疫染色により確認した。本申請課題ではさらに抗生物質G418による培養を行い、URAT1を恒常発現するHEK293細胞株を作製する。そして14C標識した尿酸の取り込み量を放射定量し、発現したURAT1が尿酸取り込み能を維持しているかどうか評価する。また、尿酸取り込み能を喪失するとの報告がある(J. Am. Soc. Nephrol., 15, 164, 2004)URAT1/G774A変異体の恒常発現株も同時に作製する。融合タンパク質の遺伝子配列を哺乳類細胞発現用ベクターpcDNA3.1にサブクローニングし、尿酸トランスポーター発現細胞に遺伝子導入する。
相間移動触媒法を用いた側鎖にビニルエーテル基を有するポリマーの合成と応用

本研究においては相間移動触媒法を用いたポリマー側鎖へのビニルエーテル基の導入と得られたポリマーの機能化・応用について研究を行なった。はじめにポリエピクロロヒドリン(PECH)とKOHやtーBuOKの反応によるビニルエーテル基の導入について詳細に検討を行なった。本反応により得られたポリマー(Pー1)は、はじめの予想に反して、ビニルエーテル基のカチオン重合による架橋反応ではなく、主鎖の切断が進行することが明らかとなった。このことから新しいポジ型レジスト材料への応用が期待される。したがって、Pー1のガラス転移温度(Tg)の上昇を目的として、ポリマー側鎖にビニルエーテル基の他に剛直でかさ高い置換基の導入について検討を行ない高いTgを有するポリマー(Pー3)を合成した。このポリマーは光カチオン重合開始触媒を用いると分解するばかりでなく、ビスアジド化合物やジチオール化合物との光反応では架橋反応が起ることから、架橋剤や触媒を選択することにより、ネガ・ポジ両方の機能を有するフォトレジストへの応用が期待される。さらに溶液中のPー1とチオール化合物の一種であるNーアセチルシスティーンとの光反応により側鎖に光学活性なアミノ酸残基を有するポリマーを合成することに成功し、光学活性化合物の分離膜等への応用が期待される。さらに相間移動触媒法のはじめての試みとして、高分子アニオン;ポリ(ビニルフェノール)と2-クロロエチルビニルエーテルとの置換反応によるポリマー側鎖へのビニルエーテル基の導入についても検討を行なった。反応率はビスアジド化合物との光反応によりネガ型のレジスト材料へ応用できることも判明した。
海岸急崖斜面の後退速度と崩壊周期の関係の解析

福井県越前海岸地域を例として,海岸急斜面地域の災害のメカニズムを明らかにした.越前海岸には急崖斜面が発達している.海岸線から沖には岩礁がいくつか残っている.岩礁は海岸から約200m沖まで存在する.最も遠くに位置する岩礁は500m沖である.岩礁の高さは海抜10m以下であり,全体的には,縄文海進時の波食棚あるいは海食台を形成していた.玉川地域では,数千年(57,000年)前の海水面は現在より約10m高いところに残っている.数千年前以降の海面低下により新期に波食棚が形成され始め,高さ10m分の旧段丘堆積物や岩盤を削りながら,陸側に向かって前進しつつある.その前進速度(海外線の後退速度)は約3cm/yである.海岸線の後退が自然災害の原因となっている.越前海岸の場合このような地質的環境を反映する自然災害としては下記のものが重要である.(1)海水面の低下によって,侵食基準面が下がり,そのため,河川の下刻が著しくなり,深い谷を作る.鉄砲水等の土石流が発生し易い.また,河川の下刻速度が斜面侵食速度より大きいため,河川の斜面では崩落や地滑りが発生し易い.(2)同様に,海岸斜面上に不安定にのっていた旧崩落性堆積物は斜面基部が洗い流されることによりゆっくりと下方移動を始めつつある.(3)現在の海岸線が数千年前の急崖に到達し始めたところでは,数千年間の風化により割れ目等が脆弱になっており,岩盤崩落を起こしている.(4)西落ちの断層が海岸に平行に通っているところでは,基部が細くなることにより,上盤側がゆっくりと海岸に向かって滑っている.こ研究については,平成6年度災害科学総合研究班中部地区シンポジュウムにて講演した.福井県越前海岸地域を例として,海岸急斜面地域の災害のメカニズムを明らかにした.越前海岸には急崖斜面が発達している.海岸線から沖には岩礁がいくつか残っている.岩礁は海岸から約200m沖まで存在する.最も遠くに位置する岩礁は500m沖である.岩礁の高さは海抜10m以下であり,全体的には,縄文海進時の波食棚あるいは海食台を形成していた.玉川地域では,数千年(57,000年)前の海水面は現在より約10m高いところに残っている.数千年前以降の海面低下により新期に波食棚が形成され始め,高さ10m分の旧段丘堆積物や岩盤を削りながら,陸側に向かって前進しつつある.その前進速度(海外線の後退速度)は約3cm/yである.海岸線の後退が自然災害の原因となっている.越前海岸の場合このような地質的環境を反映する自然災害としては下記のものが重要である.(1)海水面の低下によって,侵食基準面が下がり,そのため,河川の下刻が著しくなり,深い谷を作る.鉄砲水等の土石流が発生し易い.また,河川の下刻速度が斜面侵食速度より大きいため,河川の斜面では崩落や地滑りが発生し易い.(2)同様に,海岸斜面上に不安定にのっていた旧崩落性堆積物は斜面基部が洗い流されることによりゆっくりと下方移動を始めつつある.(3)現在の海岸線が数千年前の急崖に到達し始めたところでは,数千年間の風化により割れ目等が脆弱になっており,岩盤崩落を起こしている.(4)西落ちの断層が海岸に平行に通っているところでは,基部が細くなることにより,上盤側がゆっくりと海岸に向かって滑っている.こ研究については,平成6年度災害科学総合研究班中部地区シンポジュウムにて講演した.
半規管内リンパ液カルシウムとpHの制御(半規管内に結石は生じうるか?)

末梢性めまいとして頻度の高い良性発作性頭位めまい症は半規管内の浮遊物が原因であり浮遊物は内リンパ液よりも比重の高い炭酸カルシウムが主体と想定されている。半規管内リンパ液に炭酸カルシウムが析出し溶解しない状態はカルシウムイオン濃度、pH、炭酸ガス濃度と密接に結びついている。半規管内リンパのこれらの状態は電気生理学的手法では明らかにされていなかった。本研究ではこれらの条件を明らかにするための電気生理学的手技を検討した。半規管内で結石などの浮遊物が生じることにより典型的な良性発作性頭位性めまいが発症することが臨床的には明らかとなっている。しかし、半規管内に解剖学的には耳石を産生する細胞はなく、半規管内の病的浮遊物は耳石器からの耳石の迷入によるとされている。良性発作性頭位性めまいの自然治癒傾向を考えると耳石の迷入であれ、半規管内で浮遊物が析出するのであれ、結石の主体と考えられる炭酸カルシウムの半規管内での代謝を明らかにする必要がある。細胞外液であるにもかかわらず内リンパ液はK^+が高く、Na^+、Ca^<2+>が低い特殊な組成が維持されており、主な陰イオンとしてCl^-、HCO_<3^->が存在していることが明らかとなっている。内リンパには蛋白質、燐酸がほとんど含まれないことから、内リンパ液のpH安定化にはHCO_<3^->/CO_2系が緩衝系として働いているものと考えられる。一方、耳石の組成は炭酸カルシウムであることが知られ、その溶解度はpHと密接に結びついているものと考えられる。内リンパ内の炭酸カルシウムの析出、溶解の条件を検討するためpH、Ca^<2+>ならびにCO^2分圧を検討すべき対象と考えている。現在の実験対象はアプローチの容易な水平半規管であり、水平半規管に対して外側から骨迷路を削開し半規管内リンパヘ電極を刺入する方法を用いている。半規管の内リンパも蝸牛と同様に正の電位を持つことが知られておりこれを指標に内リンパ内腔に電極を刺入した。今回の検討においても水平半規管の膨大部に刺入した場合、数mVから10mV程度の正の電位を認めた。半規管別の違いなども検討すべき課題であり、今後は水平半規管以外の半規管の測定も検討したい。ヒトにおいて半規管内で結石などの浮遊物が生じることにより典型的な良性発作性頭位性めまいが発症することが臨床的には明らかとなっている。耳石の迷入であれ、半規管内で浮遊物が析出するのであれ、結石の主体と考えられる炭酸カルシウムの半規管内での代謝を明らかにする必要がある。炭酸カルシウムの溶解度はpHと密接に結びついている。一方、内リンパ液はたんぱく質が少ないため、主な緩衝系として炭酸ガス、重炭酸イオン系が働いている可能性が高い。そこで内リンパのカルシウムイオン濃度とpHの両者を検討することが必要と考えている。イオン電極法を用いた半規管内リンパのpHとCaの測定法の確立のため測定手技の改良を行い,in vivoでの安定した結果を得るための検討を続けた。前庭に対しては外側からアプローチのうえで骨迷路を削開し半規管内リンパへ電極を刺入する方法をとっている。半規管内リンパ腔は細いため、骨迷路の削開、電極の刺入角度により結果が一定とならない。現在はできるだけ膨大部に近い部位を開窓する方法を模索してきた。半規管内電位は当初では数mV程度であったが、検討を続けるうちに20mV程度を記録する場合も見られた。カルシウムイオンの濃度を半規管内電位による電気化学勾配に従うと考えるならば、数mVと20mVの場合では外液のカルシウム濃度から考えると1.0×10-3Mから3.0×10-3Mの濃度差が生じる。半規管での炭酸ガス分圧、pH、半規管内電位のそれぞれで変動が生じた場合、条件によっては炭酸カルシウムが析出する可能性は否定できない。今後も検討が必要である。
多値的採点モデルの母数を推定するパソコン用プログラムの開発

本研究は部分採点モデル(partial credit model)に着目して,以下の仕様に従うパソコン用プログラムを開発し,使用手引き書を印刷した.既存のプログラムとの比較検討を行い,(2)以下に本研究の特徴を持たせた.プログラムはNEC PC98シリーズパソコン及びDOS/Vパソコンで利用することができる.(1)項目母数と能力母数を最尤推定法に従って同時推定を行う.(2)ファイルへ保存された項目母数を用いて,カテゴリー特性関数,情報関数,相対効率をグラフィック画面へ表示する.(3)シミュレーションを行うための項目母数真値をファイルへ保存する.(4)シミュレーション実験用の人工データ(項目反応)を生成する.(5)項目母数を所与として能力値を推定するために必要なファイルを作成する.(6)項目母数を所与として能力値の最尤推定法及びEAP推定を行う.(7)共通項目法に基づいてステップ母数を等化する.(8)2組のステップ母数値の相関図を作成する.(9)シミュレーション実験で得られた能力推定値の推定精度を検討する.(10)異なる項目反応から推定された能力推定値を比較する.開発にBASIC言語を用いたため,現在流通しているパソコンの演算能力を十分に発揮できない問題点があり,演算速度の向上させるためには,別の言語を用いた開発が必要である.この点を今後の課題とする.本研究は部分採点モデル(partial credit model)に着目して,以下の仕様に従うパソコン用プログラムを開発し,使用手引き書を印刷した.既存のプログラムとの比較検討を行い,(2)以下に本研究の特徴を持たせた.プログラムはNEC PC98シリーズパソコン及びDOS/Vパソコンで利用することができる.(1)項目母数と能力母数を最尤推定法に従って同時推定を行う.(2)ファイルへ保存された項目母数を用いて,カテゴリー特性関数,情報関数,相対効率をグラフィック画面へ表示する.(3)シミュレーションを行うための項目母数真値をファイルへ保存する.(4)シミュレーション実験用の人工データ(項目反応)を生成する.(5)項目母数を所与として能力値を推定するために必要なファイルを作成する.(6)項目母数を所与として能力値の最尤推定法及びEAP推定を行う.(7)共通項目法に基づいてステップ母数を等化する.(8)2組のステップ母数値の相関図を作成する.(9)シミュレーション実験で得られた能力推定値の推定精度を検討する.(10)異なる項目反応から推定された能力推定値を比較する.開発にBASIC言語を用いたため,現在流通しているパソコンの演算能力を十分に発揮できない問題点があり,演算速度の向上させるためには,別の言語を用いた開発が必要である.この点を今後の課題とする.
人口希薄地域における生活・生業系文化遺産を対象とした観光マネジメントに関する研究

平成30年度は、地域の歴史文化等の魅力や特色を語るストーリーを文化庁が認定する「日本遺産」に着目し、ストーリーの傾向や認定動向を把握するとともに、特徴的な事例として、生活空間に根ざした防災遺産が認定された和歌山県広川町の事例を取り上げ、日本遺産認定に至る経緯や認定後の施策、観光客受け入れに対する課題や施策について、関係者へのヒアリングや関連資料等をもとに把握した。また前年度までの研究成果を踏まえ、近年の世界的な旅行者数の増加とともに国内外の著名な観光地において顕在化している、いわゆる「オーバーツーリズム」問題に対する視点も踏まえながら、人口希薄地域を取り巻く条件に応じた観光マネジメントの実践手法を整理した。研究期間全体を通じて、人口流出と高齢化の著しい地方の人口希薄地域に着目し、地域の生活・生業と密接に結びついた文化遺産の観光マネジメントのあり方を、主対象地を富山県南砺市五箇山地域に定めるとともに、国内他地域の事例調査も進めながら実例に基づき考究した。当初計画においては五箇山地域の関係者や地域組織との連携による社会実験を通じた観光マネジメントの検証も想定していたが、この点に関しては期間中に条件や体制を整えることができず実施できなかった。その代替的調査として、和歌山市雑賀崎地区において、漁村の生活文化を軸とした観光客受け入れの可能性を探るための実証実験を行うとともに、五箇山においては和紙産業を手がかりとした観光の現状と可能性、さらに日本遺産認定を受けた和歌山県広川町における施策の動向等を調査した。人口希薄地域においては、地域の生活や生業の持続・向上に資する観光客受け入れのあり方を初期段階から明確化・共有化するとともに、観光関連事業者と地域コミュニティの連携・協働と役割分担による受け入れ体制の構築が求められる。初年度は、第一に、文化遺産を対象とした観光マネジメントに関わる概念として「観光地経営」「観光まちづくり」「文化資源マネジメント」「観光活動設計」の4つを取り上げて、それらの共通点・相違点を整理しながら、本研究の主題である「生活・生業系文化遺産」のマネジメントに相応しい枠組みのあり方を検討した。第二に、本研究の主対象地である南砺市五箇山地域において、合掌造りを活用した観光振興が本格化する1950年代から世界遺産登録後の現在に至るまでの間に策定された観光関連計画を、「総合計画」「保全系計画」「観光系計画」の3種類に大別して計画資料を収集し、それらの内容の変遷について経年的な分析を試みた。その暫定結果については2015年度日本建築学会大会(オーガナイズドセッション)において報告を行っており、その確定版についても論文投稿に向けた準備を進めている。第三に、五箇山地域における現在の観光行動の実態を把握するため、2015年5月2・3日に相倉集落、同年8月8・9日に菅沼集落において、観光客へのアンケート調査と通行量調査を行った。合掌造り集落での滞在内容や、五箇山地域内外の観光地への立ち寄り、宿泊等の実態について把握し、その結果の一部については、2015年10月に行われた「白川郷・五箇山の合掌造り集落」世界遺産登録20周年記念パネル展と記念フォーラムにおいて報告を行った。今年度は研究遂行に際しての対象地の状況の見極め・条件整理を行いながら、主対象地域である南砺市五箇山地域における調査を中心に進めた。観光マネジメントに関する実証実験(社会実験)については、地域の条件が整わなかったため今年度の実施は見送ったが、観光客を対象としたアンケート調査等を実施することができ、一定の実態を把握することができた。比較対象地域の社会条件や関連施策の動向については、当該地域の妥当性も含めて精査の途上であるが、2016年度中に整理の目処がつくものと考える。平成28年度は、本研究の主対象地である南砺市五箇山地域を対象に、観光マネジメントにおいて近年重視される「滞在型観光」をいかに発展させるかという視点から、これまでの関連計画・施策において実現した事業等を整理し、歴史的視点から現在の施策状況を相対化するとともに、五箇山地域全体の観光資源を活用した滞在型観光のあり方や課題について検討した。五箇山においては、道路整備の進展により平野部とのアクセスが改善され始めた1970年代より、通過型観光から滞在型観光への転換を指向する施策が打ち出されてきたが、1990年代以降の世界遺産登録と高速道路整備により、入り込み客数が増加する一方で、その大半を合掌造り集落の見学を目的とした日帰り観光客が占める状況が続いており、世界遺産の緩衝地帯である五箇山地域(南砺市平・上平地域)全体での滞在型観光をいかに実現するかが大きな課題となっている。一方で、同年度に実施した五箇山地域の全集落を対象とした景観資源調査を通じて、世界遺産に登録された相倉・菅沼集落や、重要文化財等の合掌造り家屋以外にも、五箇山を特徴づける地形条件や集落形態、近代以降のダム開発がもたらした水辺景観などの特徴的な景観資源が把握された。これらの魅力ある風景への認識を促し、現地で体感してもらえるような環境整備や滞在型プログラムの必要性も浮かび上がった。これらの成果の一部については、2016年度建築学会大会(都市計画部門・研究懇談会資料)において報告を行うとともに、2017年度の建築学会大会においても口頭発表を行う予定である。昨年度に引き続き、主対象地域である南砺市五箇山地域において重点的に調査を行ったため、当初予定していた比較対象地域(白川郷、熊野、石見銀山)に関する調査が十分に行えていない。

その理由として、五箇山の合掌造り集落のように特定のエリアのみに観光客が集中する状況を改善することは、人口希薄地域における観光マネジメントの主要課題の一つであり、そのためにも周辺エリア(五箇山においては世界遺産緩衝地帯でもある平・上平地域)における受け入れの可能性を、過去の施策や潜在する資源の把握を基礎として検討する必要があると判断したことによる。調査内容・手法を一部変更したことで上記の遅れが生じているが、研究の視点や内容そのものも、今年度の調査を通じて深めることができたと考える。今年度は、合掌造り集落を主体とする世界遺産の緩衝地帯として位置づけられている南砺市五箇山地域の地域資源の現状、及びそれらの観光活用(観光資源化)の実態や潜在力を把握するための調査を行った。前年度に実施した五箇山地域の全集落を対象とした景観資源調査の結果については、「眺望景観」の観点から類型化を行い、それらの観光活用の可能性についても検討を行った。また、かつて合掌造り集落の冬の副業として営まれ、現在も生産が受け継がれている五箇山和紙について、製紙に加えて紙漉き体験等の観光客受け入れも行っている2事業者を対象に、和紙生産の現状や観光客受け入れの現状に関するヒアリングを行うとともに、観光客へのアンケート調査を通じて生業の体験や五箇山観光に関する認識やニーズ等の把握を行った。また、当初計画では予定していなかった対象地域として、漁業集落として独自の歴史的環境と生活文化が受け継がれ、2017年に日本遺産にも認定された和歌山市雑賀崎地域において、地域組織や民間事業者との協働により、地域資源の把握とそれらの知見に基づく観光モニターツアーの実施を行い、その効果と課題を検討した。これらの成果のうち、五箇山地域の眺望景観の分析に関しては、2017年度の日本建築学会大会の学術講演会で発表を行った。また五箇山地域の和紙生産と和歌山市雑賀崎地域における取り組みについては、2018年度の日本建築学会大会の学術講演会において発表を行う予定である。進捗が遅れている理由として、第一に、研究代表者が2017年度から担当することになった和歌山大学COC+プログラム(わかやま未来学副専攻)に関する業務が多忙となったため、本研究の現地調査や資料収集等に費やす時間が削減された。第二に、本研究の主要な対象地域である南砺市五箇山地域において、研究の一環として実施予定であった、地域の関連主体との連携による社会実験等の実践型調査を行うための社会的条件(地域の関係者とのスケジュールや体制等の調整など)が十分に整わなかったため、当初予定した期間内に実施することができなかった。平成30年度は、地域の歴史文化等の魅力や特色を語るストーリーを文化庁が認定する「日本遺産」に着目し、ストーリーの傾向や認定動向を把握するとともに、特徴的な事例として、生活空間に根ざした防災遺産が認定された和歌山県広川町の事例を取り上げ、日本遺産認定に至る経緯や認定後の施策、観光客受け入れに対する課題や施策について、関係者へのヒアリングや関連資料等をもとに把握した。また前年度までの研究成果を踏まえ、近年の世界的な旅行者数の増加とともに国内外の著名な観光地において顕在化している、いわゆる「オーバーツーリズム」問題に対する視点も踏まえながら、人口希薄地域を取り巻く条件に応じた観光マネジメントの実践手法を整理した。
神経変性疾患の晩発生発症を規定する因子の遺伝的同定とその解析

神経変性疾患は晩発性に発症するが、なぜ神経変性疾患が晩発性に発症し、進行するのか、その理由は明らかではない。これまでに、ショウジョウバエを用いた遺伝学的スクリーニングによって、神経変性を抑制する因子を網羅的に探索する過程で、Rpn11というプロテアソーム構成因子の過剰発現が神経変性の加齢に伴う進行を抑制することを見出してきた。Rpn11が19S複合体の蓋部構成因子であり、その過剰発現が神経変性の進行を抑制したことから、加齢に伴うプロテアソームの活性変化に注目した。生化学的手法を用いて26Sプロテアソームの量及び活性が加齢に伴い低下することを明らかにしていたことから、Rpn11過剰発現系統の生体内におけるプロテアソームの生化学的解析を行ったところ、老齢個体においても生体内の26Sプロテアソームの量及び活性が比較的維持されることが明らかとなった。一方で、遺伝学的にRpn11の発現を低下させると生体内の26Sプロテアソームの量及び活性が低下するとともに、加齢に伴って神経変性が観察された。さらに、Rpn11過剰発現系統では野生型と比較して寿命の延長が見られたことから、プロテアソーム活性の維持が通常の老化プロセスにも影響を及ぼす可能性が示唆された。本研究において、ショウジョウバエを用いた遺伝学的スクリーニングによって得られた神経変性の進行を抑制する因子Rpn11の同定により、老齢個体における生体内の26Sプロテアソーム活性の低下を遺伝学的操作で向上させることによって神経変性の進行を抑制できる可能性を示した。これは加齢に伴う生体内の26Sプロテアソーム活性の低下が、神経変性疾患の晩発性発症や加齢に伴う進行の原因、つまり危険因子の一つであることを強く示唆するものである。本研究の成果はMol Cell Biol.29(4)に掲載された。多くの神経変性疾患において、神経細胞における異常タンパク質の凝集・蓄積とそれに伴う神経細胞死が共通する病態として知られており、これら異常タンパク質の主要な分解経路としてユビキチンプロテアソームシステム(UPS)がある。さらに、神経変性疾患の大きな特徴の一つとして加齢に伴って発症リスクが上昇することが挙げられるが、神経変性疾患が晩発性に発症する理由は未だ明らかではない。我々は、寿命が約60日と短く遺伝学的な研究に適したショウジョウバエを用いて、生体内でのプロテアソーム活性と神経変性の発症との関与に着目した。ショウジョウバエ頭部におけるプロテアソーム活性を測定したところ、加齢に伴うプロテアソーム活性の減少と、ユビキチン化タンパク質の蓄積が観察されたことから、加齢によるプロテアソーム活性の低下が神経変性疾患の晩発性発症における危険因子の一つであると考えた。そこで、加齢に伴うプロテアソーム活性の変化を制御する因子を明らかにするために、ショウジョウバエを用いた機能欠失型の遺伝学的スクリーニングを行った。現在までに数系統のプロテアソーム活性化系統を得ており、このうち2系統がポリグルタミンによる進行性の神経変性様表現型を抑制した。これは、加齢に伴う生体内のプロテアソーム活性の低下が遺伝子レベルで制御されていること、また老化に伴うプロテアソーム活性の変化が神経変性疾患の発症を制御する可能性を示唆するものである。今後、これらの系統に関して原因遺伝子を同定し、加齢に伴うプロテアソーム活性の変化がどのように制御されているのか、さらには晩発性発症との関与について明らかにしていきたい。多くの神経変性疾患において、神経細胞における異常タンパク質の凝集・蓄積とそれに伴う神経細胞死が共通する病態として知られており、これら異常タンパク質の主要な分解経路としてユビキチンプロテアソームシステムがある。我々はショウジョウバエにおいて、加齢に伴うプロテアソーム活性の減少と、ユビキチン化タンパク質の蓄積を観察したことから、加齢によるプロテアソーム活性の低下が神経変性疾患の晩発性発症における危険因子の一つである可能性を考えた。神経細胞死に関わる遺伝子の機能獲得型スクリーニングを行って得られた系統の一つでは、原因遺伝子の過剰発現によって、26Sプロテアソームの減少を伴うプロテアソーム活性の加齢による低下の抑制が認められ、伸長ポリグルタミン発現による複眼の変性の進行を抑制した。とのように、神経変性とプロテアソーム活性の変動とは密接な関係があることが示唆された。そこで、加齢に伴うプロテアソーム活性の変化を制御する因子を明らかにするために、ショウジョウバエを用いた機能欠失型の遺伝学的スクリーニングを大規模に行った。このスクリーニングによって得られた変異系統のいくつかは加齢に伴うプロテアソーム活性の低下が抑制され、さらに伸長ポリグルタミン発現による複眼変性を抑制した。

Rpn11が19S複合体の蓋部構成因子であり、その過剰発現が神経変性の進行を抑制したことから、加齢に伴うプロテアソームの活性変化に注目した。生化学的手法を用いて26Sプロテアソームの量及び活性が加齢に伴い低下することを明らかにしていたことから、Rpn11過剰発現系統の生体内におけるプロテアソームの生化学的解析を行ったところ、老齢個体においても生体内の26Sプロテアソームの量及び活性が比較的維持されることが明らかとなった。一方で、遺伝学的にRpn11の発現を低下させると生体内の26Sプロテアソームの量及び活性が低下するとともに、加齢に伴って神経変性が観察された。さらに、Rpn11過剰発現系統では野生型と比較して寿命の延長が見られたことから、プロテアソーム活性の維持が通常の老化プロセスにも影響を及ぼす可能性が示唆された。本研究において、ショウジョウバエを用いた遺伝学的スクリーニングによって得られた神経変性の進行を抑制する因子Rpn11の同定により、老齢個体における生体内の26Sプロテアソーム活性の低下を遺伝学的操作で向上させることによって神経変性の進行を抑制できる可能性を示した。これは加齢に伴う生体内の26Sプロテアソーム活性の低下が、神経変性疾患の晩発性発症や加齢に伴う進行の原因、つまり危険因子の一つであることを強く示唆するものである。本研究の成果はMol Cell Biol.29(4)に掲載された。
ローカルとグローバルの対立と超克－東南アジア舞台芸術における身体技法の伝承と創造

□H30年度はこれまで考案を重ねてきた舞台創造研究における演出方法論の実践研究を行い、その結果を2018年10月、神奈川県、長野県それぞれでの劇場にて2回に分けて発表し、専門家、一般鑑賞者の方々から多くのフィードバックを得ることができた(北村、兼古、楜沢)。2018年6月インドネシア、バリ島、ギャニャール県テガラランの調査村を訪れ、宗教儀礼の調査を行った。12月にバリ島の調査村を再訪し、宗教儀礼の調査を行った。また、村人を招いて製作中の映像作品の上映会を行った(村尾)。また、H29年度にカンボジアにて実践発表をした劇場演出方法論を改めて精査し、その発展的研究発表として、北米各都市(Japan Society NY、John F. Kennedy Centerワシントン、Stephens Hall Theatreタウソン)にて発表し、カンボジアと日本の国際共同制作舞台創造についての課題や舞踊作品の演出論について多くのフィードバックと高い評価を得た(北村、兼古)。□12月9日に研究分担者らの主催で報告研究会を実施し、世田谷パブリックシアターの会議室にてそれぞれの研究成果報告を発表を行った(荒谷)。□視聴覚資料アーカイブについては、ダンスステージの記録以上の可能性を考察し、映像の可能性をライブステージの制約範囲内で、できる限りの撮影手法と高ビットレートによる記録をリファレンスとした低ビットレートの記録との整合性の実験、低照度でのライティングによるノイズの弊害をできるだけ緩和させるためのカット毎にマニュアルでノイズ除去を行った。定点での撮影を一歩進め、中央定点のマスターショットの他にステージ脇左右に定点カメラ、客席後方左右にスライダーを利用したリグを組み、自由度の高いアングルを産み出す工夫を行い、別途、ステディカムを使用した映像を本番前に撮影した。国内外共に、劇場や舞台芸術領域のオーガナイザー、公的機関との提携を強く組むことができたため、予想以上の規模における研究成果発表が可能となった。国内では2県、2つの劇場からの提携協力があり、舞台創造におけるフィールドリサーチ研究と実践創作の相互作用、創発効果に大いに興味を持っていただけた点が大きく、リハーサル・実践場所提供やネットワークの広がりなど、様々な助言・協力を得ることができた。また、北米各都市での発表は、Japan Soiety NYの助力により、複数地域にて成果を発表することができ、アジア発信の国際共同製作舞台芸術研究の成果を、国際レベルにて確かめる重要な発展となった。そして、各研究分担者のそれぞれの研究内容と舞台芸術実践研究との繋がりと広がりの多様さが成果として出はじめていることが、本研究の計画以上の進展につながった。H30年度の実績成果を踏まえ、H31年度は新たな研究リサーチ対象として、中央アジアへのフィールドリサーチを予定している。東南南中央アジアにおける儀礼、音楽、舞踊や武術における身体技法や、その土地の現代に脈々と生きるシャーマニズムの現状について、共同体社会、芸術表現などの視点からリサーチを進める。また国内では、去年度の成果のさらなる発展として、舞台創造実践研究を進め、劇場にてその成果を発表し、アーカイブ作成とともに、研究成果を広く流布させるように努める。現代における東南アジアの地域伝統文化の実践・継承と、その基盤となる地域社会の役割を、グローバル、ローカル、ナショナルの各次元において、多様さと矛盾を明らかにしながら検証し、現代舞台芸術の創作方法論を見いだすことを目的とする研究課題。このような課題のもと、H29年度は以下のような研究活動を進めた。1)カンボジア、インドネシアをはじめとする東南アジアの伝統芸術における身体技法とその共同体、社会背景、芸術領域背景のリサーチ・分析を実施した。(北村)2)国内では佐渡、国外では南アジアへと研究対象を広げ、伝統芸能、および現代の芸術表現についての現地調査を行ない、東南アジアとそれらとの比較研究を行った。(北村)3)現代舞台芸術と伝統芸術の思想、技法のつながりと対話がどのように可能かを、舞台芸術作品のコンセプトレベルで検証し、試験的に実践研究発表を佐渡、及びカンボジアプノンペンにて実施した。(北村・兼古)4)H29年12月、国内外の文献・視聴覚資料によるリサーチや、各地域における国立民族博物館、芸術大学との提携研究を進め、フィールド・リサーチを通して伝統舞踊・武術・音楽などのバックグラウンドを持つ現代の研究者らとの研究報告会を世田谷パブリックシアターの提携にて実施。(荒谷、村尾、北村)5)メディア論研究も舞台上演や現地フィールドワークの記録撮影についての課題を明確化し、翌年度に備え試験的な撮影を行なった。(楜沢)6)インドネシア(ジャカルタ・バリ島)にて学術調査。ジャカルタでは、昨年インドネシアで初めて設立された現代美術館MACAN、新国立図書館、バリ島では、バリ国立博物館を訪れて調査と資料収集を行った。また、バリ島では、ギャニャール県の調査地を再訪し、バリ島人の身体文化と芸術に関するフィールドワークと民族誌映像の撮影を行った。(村尾)各研究者のこれまでのリサーチ実績と構築してきたネットワークが急速により広範囲で繋がったことや、国際交流基金アジアセンターでのリサーチプロジェクト情報により、研究計画は発展的な広がりを得た。カンボジア、プノンペン市にあるAmrita Performing Artsとの提携が強固となったため、現地でのフィールドワークと舞台実践研究発表を非常に良い環境にて実施することができた。またフィールドワークでは、ジョグジャカルタのプンチャック・シラットの団体Tantungan Projectとの人脈が繋がったことで、インドネシア、および、他地域のフィールドリサーチをスムーズに実施することができた。

インドネシアではジョグジャカルタ、西スマトラのパダンパンジャンにて、武術プンチャック・シラットの各伝統流派のセッションプログラムからの個人的な招聘を受けたことにより、貴重な現地実践参加が可能となった。また、研究分担者、連携研究者らの自らの研究者・実践家ネットワークの広がりにより、バリにおける儀礼、ボルネオにおける精霊音楽についてのフィールドリサーチも実施することができ、東南アジア各地域のリサーチが急速に広げることができた。数年先に予定していたタイのリサーチについては、チェンマイでの舞踊家の紹介にて武術実践者とのネットワークが繋がったことで、ラーンナ古武術技法や舞踊・音楽についてのリサーチを行うことができた。□H30年度はこれまで考案を重ねてきた舞台創造研究における演出方法論の実践研究を行い、その結果を2018年10月、神奈川県、長野県それぞれでの劇場にて2回に分けて発表し、専門家、一般鑑賞者の方々から多くのフィードバックを得ることができた(北村、兼古、楜沢)。2018年6月インドネシア、バリ島、ギャニャール県テガラランの調査村を訪れ、宗教儀礼の調査を行った。12月にバリ島の調査村を再訪し、宗教儀礼の調査を行った。また、村人を招いて製作中の映像作品の上映会を行った(村尾)。また、H29年度にカンボジアにて実践発表をした劇場演出方法論を改めて精査し、その発展的研究発表として、北米各都市(Japan Society NY、John F. Kennedy Centerワシントン、Stephens Hall Theatreタウソン)にて発表し、カンボジアと日本の国際共同制作舞台創造についての課題や舞踊作品の演出論について多くのフィードバックと高い評価を得た(北村、兼古)。□12月9日に研究分担者らの主催で報告研究会を実施し、世田谷パブリックシアターの会議室にてそれぞれの研究成果報告を発表を行った(荒谷)。□視聴覚資料アーカイブについては、ダンスステージの記録以上の可能性を考察し、映像の可能性をライブステージの制約範囲内で、できる限りの撮影手法と高ビットレートによる記録をリファレンスとした低ビットレートの記録との整合性の実験、低照度でのライティングによるノイズの弊害をできるだけ緩和させるためのカット毎にマニュアルでノイズ除去を行った。定点での撮影を一歩進め、中央定点のマスターショットの他にステージ脇左右に定点カメラ、客席後方左右にスライダーを利用したリグを組み、自由度の高いアングルを産み出す工夫を行い、別途、ステディカムを使用した映像を本番前に撮影した。国内外共に、劇場や舞台芸術領域のオーガナイザー、公的機関との提携を強く組むことができたため、予想以上の規模における研究成果発表が可能となった。国内では2県、2つの劇場からの提携協力があり、舞台創造におけるフィールドリサーチ研究と実践創作の相互作用、創発効果に大いに興味を持っていただけた点が大きく、リハーサル・実践場所提供やネットワークの広がりなど、様々な助言・協力を得ることができた。
躁うつ病の連鎖領域におけるTRPC7についての位置的候補遺伝子アプローチ研究

現在までの連鎖研究により双極性障害において複数のグループから一致した報告のある染色体領域は21番の長腕22.3にあるマーカーPFKLからD21S171である。我々はこのPFKL近傍にあるカルシウムチャネルタンパク遺伝子TRPC7(LTRPC2,TRPM2)が双極性障害の感受性遺伝子である可能性について検討した。TRPC7遺伝子は90kbにわたり32のエキソンがあり、1503アミノ酸残基により構成される。相同性検索からtransient receptor potential蛋白(trp)ファミリーに属すると考えられる。TRPC7には7回の膜貫通領域が存在することから、trpとしてCa2+チャネルを形成していると考えられる。ごく最近になってTRPC7がADP-riboseやH_2O_2などの酸化ストレスで開く全く新しいカチオンチャネルであることが解明された。このことは虚血などでの神経細胞死をもたらし、神経系の可塑性にも関与していると考えられ、きわめて本質的な機能を有する新たなカルシウムチャネルと思われる。気分障害患者にカルシウム動員の異常が認められ、その治療薬がカルシウム動員に調整的に働くことは明らかにされている。このTRPC7について、双極性障害患者40名においてSSCP法による変異スクリーニングを行なった。その結果、複数の1塩基多型を同定した。1つは翻訳領域の多型(Exon 11)はアスパラギン酸からグルタミン酸にアミノ酸の変化を伴うミスセンス変異であった。確認された多型については、双極性患者群(DSM-IV診断による)92名(男性43名、女性49名、平均年齢:45.8±12.4)と年齢と性を一致させた健康成人での頻度を比較した。本研究の結果からは我々が見いだした多型については双極性障害との関連は認められなかった。TRPC7遺伝子は90kbにわたり32のエキソンがあり、1503アミノ酸残基により構成されていた。相同性検索からtransient receptor potential蛋白(trp)ファミリーに属するとみなされる。さらに、TRPC7には7回の膜貫通領域が存在することから、trpとしてCa2+チャンネル蛋白として機能していると推定された。ノーザンブロット法にてTRPC7遺伝子のmRNAは6.5kbのバンドとして脳にほぼ局在して発現していた。以上のことからTRPC7は躁うつ病の候補遺伝子であることが強く示唆された。本年度は、TRPC7遺伝子の32エキソンすべてについて増幅領域が400bp程度になるようにプライマーを設計し、PCR産物をSSCP(single strand conformation polymorphism analysis)にて変異スクリーニングを行った。現在のところdirect PCR sequencingにより確認しえた翻訳領域のSNPs(single nucleotide polymorphism)は5個所あり、そのうちの3多型はアミノ酸置換を伴うミスセンスであった。また、エキソンに隣接する介在領域においてもSNPsを15個所、3塩基欠失を1部位で認めた。翻訳領域に存在する多型については双極性障害患者100名、健康成人100名アミノ酸における頻度を求め関連解析を行ったが、稀な頻度の多型が多いためか、明らかな有意差は認められなかった。さらに今後はサンプル数を増やすとともに、介在領域や5'-あるいは3'-非翻訳領域の多型についても疾患との関連を調べ、感受性遺伝子である可能性についての検討をすすめていきたい。TRPC7

遺伝子は90kbにわたり32のエキソンがあり、1503アミノ酸残基により構成される。相同性検索からtransient receptor potential蛋白(trp)ファミリーに属すると考えられる。TRPC7には7回の膜貫通領域が存在することから、trpとしてCa2+チャネルを形成していると考えられる。ごく最近になってTRPC7AがADP-riboseやH_2O_2などの酸化ストレスで開く全く新しいカチオンチャネルであることが解明された。このことは虚血などでの神経細胞死をもたらし、神経系の可塑性にも関与していると考えられ、きわめて本質的な機能を有する新たなカルシウムチャネルと思われる。気分障害患者にカルシウム動員の異常が認められ、その治療薬がカルシウム動員に調整的に働くことは明らかにされている。このTRPC7について、双極性障害患者40名においてSSCP法による変異スクリーニングを行なった。その結果、複数の1塩基多型を同定した。1つは翻訳領域の多型(Exon 11)はアスパラギン酸からグルタミン酸にアミノ酸の変化を伴うミスセンス変異であった。確認された多型については、双極性患者群(DSM-IV診断による)92名(男性43名、女性49名、平均年齢:45.8±12.4)と年齢と性を一致させた健康成人での頻度を比較した。本研究の結果からは我々が見いだした多型については双極性障害との関連は認められなかった。
グリア細胞による睡眠覚醒制御機構の解析

睡眠は進化的に保存された行動にも関わらず、その機能やメカニズムは完全には明らかになっていない。近年、睡眠覚醒に関わる神経ネットワークの同定が光遺伝学などの技術によりなされているが、これら神経回路による睡眠覚醒の制御機構は不明である。一方、グリア細胞の活性によっても睡眠覚醒や体内時計が制御されていることが指摘されている。研究代表者はこれまで、ショウジョウバエを用いた睡眠研究を行うことで、睡眠制御に関わる遺伝子や神経回路を同定してきた。さらに、グリア細胞のサブクラスターを時期特異的に活性化させることにより、睡眠時間の増加・減少が見られることや、加齢性の睡眠障害に関わるグリア関連の遺伝子を同定している。本研究課題では、グリア細胞による睡眠覚醒ならびに体内時計の制御メカニズムを明らかにすることを目的とする。本研究課題の遂行により、グリア細胞による制御メカニズムが明らかになることで、睡眠の機能やメカニズムに迫ることを目指した。当該年度は、時期特異的活性化により睡眠時間の変化が見られるグリア細胞のサブクラスターにおいて、抑制の効果ならびに時計遺伝子の影響を検討した。その結果、特定のグリア細胞サブクラスターを刺激/抑制した際の睡眠量の変化において、時期依存性が認められた。そのため、時計遺伝子変異体のバックグラウンドにおいて、上記グリア細胞の活性化/抑制を行い、これらグリア細胞の睡眠制御における体内時計の影響を検討した。グリア細胞の抑制による睡眠への影響を検討した。時計遺伝子の影響については、変異体における想定外の表現型が見られたため、使用する系統等の方針変更が必要となった。使用する時計遺伝子の変異体についての検討を進める。消耗品の購入費が想定より少なかったため。