hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
300℃・10MGyの耐熱耐放射線性能を持つ電子・撮像デバイス用微小電子源の開発

高温・放射線環境に耐える絶縁膜の候補として、反応性スパッタによりSiN膜を、原子層堆積によりAl2O3膜を作製した。成膜には実際にフィールドエミッタアレイ(FEA)作製に使用する装置を用いた。絶縁耐圧を評価した結果、SiN膜は漏れ電流が多く、FEAの絶縁膜としては適さないことが明らかとなった。Al2O3膜はプラズマを援用しながら基板温度200°Cで作製したものが67 MV/cmの耐圧を示した。この値はSiO2膜と同程度である。また、緩衝フッ酸によるエッチング速度は100 nm/minとSiO2膜の約半分程度であり、従来の作製プロセスのままFEAが作製できることが明らかとなった。実際にSiO2膜とAl2O3膜を用いてFEAを作製し超高真空中で電子放出特性を評価した結果、100-tipのアレイから最大で100200μAの電子放出を確認した。また、FEAに対してγ線を照射し、電子放出特性や素子の各電極に流れる電流を測定した。非蒸発ゲッタポンプを搭載した真空容器を試作し、FEAが動作することのできる真空環境をγ線照射下で実現した。試験に用いたFEAは事前によくエージングし、できるだけ安定度を向上させた状態で使用した。1000-tipのアレイの特性は、研究代表者らが開発した評価方法である切片傾き解析を用いて解析した結果、表面状態の変化などは見られないことが明らかとなった。一方で、1-tipのFEAは、γ線照射下においてはステップ状の電流変動が多くみられる傾向があり、γ線照射によるエミッタ表面原子の移動を促進している可能性があることが明らかとなった。しかしながら、γ線照射による特性の劣化は特にみられず、10 MGyの寿命確保に対しても可能性があることを示すことができた。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。絶縁体薄膜の高温・放射線照射下における絶縁特性を評価するための各種絶縁膜の形成を行った。シリコン基板を熱酸化した二酸化シリコン膜、テトラエトキシシランを用いた化学気相成長法により作製した二酸化シリコン膜、反応性スパッタリングにより作製した窒化シリコン膜である。作製した絶縁膜のうち、特にテトラエトキシシランを用いて作製した二酸化シリコン膜について、高エネルギーのエックス線照射下における電圧電流特性の評価を行った。高エネルギーエックス線は、電子線加速器により加速した電子ビームをタングステン板に入射させることで行った。この場合のエックス線の線量率を正確に把握するためにアラニン線量計を用いて吸収線量の評価を行った。吸収線量率でおおよそ1.2 kGy/h程度までのエックス線照射では15分程度の照射の間、複数回の電流電圧特性を測定しても顕著な変化は見られなかった。測定した結果は、いくつかの電気伝導モデルを仮定したプロットを行って現在評価を行っているところである。他方、いくつかの電極に電位を与えない状態とすると、絶縁性が悪化することが見いだされた。電極の帯電などが原因と考えている。ガンマ線照射施設において真空下で電流電圧特性を測定することのできる可搬型の小型真空容器の設計と製作を行った。真空排気のあと封じきるだけでは圧力を保つことができないため、チタンサブリメーションポンプないしは非蒸発ゲッターポンプを取り付けることを想定した。装置を現在構成し、真空排気の試験中である。絶縁膜は3種類のものを準備することができた。実験の難しい高エネルギーエックス線照射下における絶縁膜の電流電圧特性の測定を繰り返し行い、放射線照射時にどのような状態になると絶縁膜に問題が生じるかの糸口をつかむことができた。ガンマ線照射に向けた小型真空容器についても予定通り設計と試作を行った。耐放射線・耐熱評価用の絶縁膜としてテトラエトキシシランを用いた化学気相成長法によりSiO2薄膜を、反応性スパッタ法によりSiN薄膜を形成した。これらの絶縁膜および熱酸化SiO2膜に60Co線源を用いて64 kGyのガンマ線照射を実施した。また、イオン加速器により1.6 MeV陽子線照射を行った。現在、薄膜の電流電圧特性の評価を進めている。また、バンデグラーフ型電子線加速に接続した真空装置内でX線照射装置内に電子源構造の酸化膜を設置し、X線照射下における絶縁特性の評価を行った。SiO2膜とSiN膜の2層構造を持つVolcano構造のエミッタ作製プロセスの検討をおこなった。SiO2膜250nmとSiN膜30nmとし、既に開発したエッチバック法によりSiO2のみの場合と比べてエミッタの開口形状が変化するかを調べた。その結果エッチバック法によりエミッタが開口でき、電子放出可能なデバイスが作製できることが確認できた。また、集束電極とゲート電極の間の絶縁層も2層構造としたダブルゲート型Volcano構造エミッタの作製方法も開発した。平成28年度に作製したガラス管式真空封止管の真空排気・維持特性を確認した。真空封止管の内部は10-7 Pa以下の圧力を実現することができ、封止後3か月経過後も10-6 Pa以下の圧力を維持していることを確認した。また、この真空容器に電子源を搭載し、単独で電子源を動作させることができることを確認するとともに、実際に60Coガンマ線照射装置においてガンマ線を照射しながら電子源を動作させることができることを確認した。

応用物理学会、日本真空学会、およびこれらの学会が開催する研究会等に参加し、酸化膜形成に関連する情報収集および成果発表を行った。また、昨年度得られた結果についてドイツにて開催された国際真空ナノエレクトロニクス会議にて発表した。本研究の目標は、耐熱動作や耐放射線動作の可能な電子源を作製、評価し、300°C、10 MGyの耐熱・耐放射線性能を示すことにある。年度当初の計画として、1. 2層絶縁膜の形成、2.絶縁膜の絶縁特性の温度および放射線照射評価、3.耐高温・耐放射線絶縁膜を用いた微小電子源作製プロセスの検討、4.高温・放射線照射下における微小電子源の動作特性評価の準備、5.情報収集と成果発表を挙げていた。現時点でSiO2のほかSiNの成膜を行い、その2層構造を問題なく形成し、これらの絶縁層を含む電子源を試作することができた。また、X線照射下やガンマ線照射下における電子源の動作特性評価を行い、予備的な評価を実施することができている。成果は国内および国際会議等で発表した。これにより最終年度において、作製した電子源の耐熱性や耐放射線性能を調べる準備がほぼ整ったことから、進捗は順調と判断できる。高温・放射線環境に耐える絶縁膜の候補として、反応性スパッタによりSiN膜を、原子層堆積によりAl2O3膜を作製した。成膜には実際にフィールドエミッタアレイ(FEA)作製に使用する装置を用いた。絶縁耐圧を評価した結果、SiN膜は漏れ電流が多く、FEAの絶縁膜としては適さないことが明らかとなった。Al2O3膜はプラズマを援用しながら基板温度200°Cで作製したものが67 MV/cmの耐圧を示した。この値はSiO2膜と同程度である。また、緩衝フッ酸によるエッチング速度は100 nm/minとSiO2膜の約半分程度であり、従来の作製プロセスのままFEAが作製できることが明らかとなった。実際にSiO2膜とAl2O3膜を用いてFEAを作製し超高真空中で電子放出特性を評価した結果、100-tipのアレイから最大で100200μAの電子放出を確認した。また、FEAに対してγ線を照射し、電子放出特性や素子の各電極に流れる電流を測定した。非蒸発ゲッタポンプを搭載した真空容器を試作し、FEAが動作することのできる真空環境をγ線照射下で実現した。試験に用いたFEAは事前によくエージングし、できるだけ安定度を向上させた状態で使用した。1000-tipのアレイの特性は、研究代表者らが開発した評価方法である切片傾き解析を用いて解析した結果、表面状態の変化などは見られないことが明らかとなった。一方で、1-tipのFEAは、γ線照射下においてはステップ状の電流変動が多くみられる傾向があり、γ線照射によるエミッタ表面原子の移動を促進している可能性があることが明らかとなった。しかしながら、γ線照射による特性の劣化は特にみられず、10 MGyの寿命確保に対しても可能性があることを示すことができた。平成28年度の加速器を用いた実験で、絶縁膜の特性評価の方法をおおむね把握したので、今後はすでに作製した異なる種類の絶縁膜のエックス線・ガンマ線照射下における電流電圧特性を測定する。また、昇温下での測定を行い、電気伝導の機構について検討する。
神経突起の伸長・縮退過程における細胞骨格系ダイナミクスの解析

これまでの研究においては、プロテインホスファターゼ阻害剤であるカリキュリンA(CL-A)により神経突起が急激に縮退する現象を解析し、その縮退が微小管脱重合ではなくアクトミオシン活性化によるものであることを明らかにしてきた。偏光を用いることでアクチンフィラメントや微小管といった分子的配向性をもった細胞骨格を固定・染色することなくイメージングできるLC-PolScopeを用いた解析が本研究の大きな特色である。平成21年度の研究では、LC-PolScopeによるイメージングによって得られる分子配向性の情報を活用することに着手した。我々は、顕微鏡システムに技術的改良を加え、複屈折性の方向(slow axis)の情報を利用することで縮退過程における微小管の配向性を解析することに成功した。この結果、以前の論文で報告されていたようなCL-Aによる微小管の断片化とそれに伴う配向性の乱れは、縮退過程においてはまだ生じていないことが判明した。偏光を用いた分子配向性のイメージングは非常に例が少なく、光学的安定性が向上すれば神経突起の分岐形成などより生理的な解析対象への応用が考えられる。また、ミオシン軽鎖のリン酸化の関与をさらに調べるため、ミオシン軽鎖のリン酸化部位であるSer19とThr18をそれぞれAla残基に置換した変異体を作製した。このAA体ミオシン軽鎖を過剰発現させた神経細胞ではCL-Aによる神経突起の縮退がコントロールに比較して有意に阻害され、CL-Aが引き起こす急激な神経突起縮退におけるミオシン軽鎖のリン酸化の重要性が確認された。以上の実験成果は論文としてBiochemical and Biophysical Research Communications誌に掲載された。これまでの研究経過においては、プロテインボスファターゼ阻害剤であるカリキュリンA(CL-A)により神経突起が急激に縮退する現象を解析し、その縮退が微小管脱重合ではなくアクトミオシン活性化によるものであることを明らかにしてきた。偏光を用いることで分子的配向性をもった細胞骨格を固定・染色することなく検出できるLC-PolScopeを用いた解析が本研究の大きな特色である。平成20年度は以下のような進捗を得た。まず、高感度EMCCDを用いたEGFP-actinによる蛍光ライブイメージングを確立した。これにより神経突起縮退の主原因であるアクチン骨格を、退色や光毒性を極力抑えた状態で直接的に観察することが可能となった。この蛍光標識によるアクチン動態の解析は、偏光を用いた非侵襲的な観察法であるLC-PolScopeと相補的に細胞骨格の解析に寄与するものである。次に、ミトコンドリアの挙動を解析した。細胞内小器官の一つであるミトコンドリアの挙動を解析することで、アクチン細胞骨格の再編成により影響を受ける細胞内構造の様子がより鮮明に把握された。また、CL-Aによる神経突起の縮退が可逆的であることも明らかにした。さらに、各種阻害剤を用いた薬理実験によりPKCの関与を見出した。反発性ガイダンス因子による神経突起の縮退に関与がしばしば報告されるMLCKやRho kinaseとったキナーゼではなく、PKCがCL-Aによる神経突起縮退に関与していたという実験結果は意外性のあるものである。以上のような実験成果の一部は従来の研究成果と合わせてアメリカ細胞生物学会で発表された。また、その内容の論文化も進捗しており、数か月中にCell Motility and the Cytoskeleton誌に投稿予定である。
ＦＬＰによる水素分子活性化を利用した高性能不斉水素化触媒の開発

本研究は、金属触媒を用いないメタルフリーで高エナンチオ選択的な不斉FLP触媒の開発を目的として研究を行っている。FLPは嵩高いルイス酸と嵩高いルイス塩基からなる"Frustrated Lewis Pair"(FLP)による水素分子開裂が基礎技術となっており、これまで90%eeを超える生成物を与える不斉FLP触媒は実現されていない。前年度から分子内にルイス酸とルイス塩基を有する新規FLP触媒の開発を検討してきた。しかしながら、イミンの不斉水素化反応において不斉はほとんど発現しなかった。この結果を計算化学により検証したところ、デザインした分子内FLPによる水素化反応において、ある程度嵩高い反応基質を用いると、協奏的水素化遷移状態を経る反応機構ではなく段階的反応機構で進行する事がわかり、そのままでは不斉を出す事が難しい事がわかった。そこで分子内FLPのデザイン変更が必要となったが、分子内FLPの合成は難易度が高く研究期間内に成果を得るため、分子間型FLPによる不斉水素化反応の開発に方針転換する事にした。そこで新規不斉ルイス酸の開発を検討し、ビナフチル骨格を有する新規不斉ホウ素ルイス酸の合成に成功した。これを用いてイミンの不斉水素化反応を行った所、80% ee程度の不斉収率を得る事に成功した。これは反応基質によっては従来触媒と同程度であるが、一部の反応基質においては従来触媒を大きく超える不斉収率であった。本研究において残念ながら目標値である90%eeには届かなかったが、従来触媒以上の成果を残す事ができ、今後の発展に大いに期待できる基礎的知見を得る事が出来たと言える。25年度が最終年度であるため、記入しない。1触媒設計のためのFLPによるイミンの水素化反応の理論的考察FLP触媒によるイミンの水素化反応は以下の機構で進行すると考えられている。まずFLPが水素開裂を行うと、ルイス塩基上にプロトン、ルイス酸上にヒドリドが結合する。このプロトンはイミンの窒素と水素結合することでイミンが活性化される。その後、ヒドリドがイミンの不飽和炭素を攻撃し、水素化反応が完了する。この機構を見ると、野依教授らにより開発されたホスフィン-ルテニウム-ジアミン触媒によるケトンの不斉水素化反応の反応機構に類似している。そこで、FLP分子内にルイス酸、ルイス塩基を配置し適切な不斉源を導入すれば、効率的不斉FLP触媒が開発できると考えた。研究代表者は分子設計の情報を得るためRepo, Riegerらにより報告されたFLPの水素化反応の遷移状態を計算した。モデル反応として、FLP-H+H- 2とメタンイミンの反応の遷移状態をB3LYP/6-G(d)レベルで求めた所、イミンへのプロトン移動とイミン炭素へのヒドリド攻撃は同時に起こっており、協奏的反応であることが示された。この遷移状態を見ると、FLP1の窒素周りに不斉源を導入すれば、イミンの不斉水素化が行えると考えられた。そこで反応点に近い所に不斉炭素を有しかつC2対称である光学活性2,5-二置換ピロリジンをFLP触媒に導入した新規分子を開発することにした。2新規不斉FLP触媒の合成検討2,5-ジメチルピロリジンを有する新規FLPを設計しその合成を試みた。現在までに中間化合物の合成には成功したが、この中間体へのB(C6F5)2基の導入までには至っていない。本年度中に最初のFLP触媒を完成させる予定であったが、未だ完成していない。不斉触媒反応はいくつもの触媒を作り反応を試す必要があるため、初年度とは言え、一つの触媒も完成できていない事は、遅れていると言わざるを得ない。

しかし、理論計算による反応機構解析は進んだため、"やや遅れている"の評価とした。この遅れの原因の一つはホウ素ユニットの含ルイス酸骨格への導入のしにくさが、予想を超えていたことにある。またもう一つ、研究代表者自身が研究期間中に所属大学を異動した事にも一因がある。異動後研究体制を整えるのにかなりの時間を要したが、ゼロから始めた本研究にとってこれは著しい時間的ロスとなった。次年度はこの遅れを挽回できるものと考えている。分子内にルイス酸とルイス塩基を導入したFLPは原理上、優れた不斉環境を与えると考えられるが、その合成には難があった。そこで本年度はキラルなホウ素化合物の開発に集中することで、高エナンチオ選択的なイミンの水素化反応触媒を開発する。また、イミンやエナミンの水素化反応の反応速度はFLPの構成要素、すなわちルイス酸とルイス塩基の相性に影響するものと考えられるので、それに関した基礎的な研究も行う予定である。25年度が最終年度であるため、記入しない。
ロバストモデルマッチングによる柔軟人工衛星の姿勢制御系設計

本研究の目的は,3軸人工衛星などの柔軟構造物の姿勢制御のために提案しているロバスト制御系設計法の効果を,実験により検討することにあった.次の項目1はこの目的に沿った研究の成果である.項目2は当初の計画にはなかったが,この設計法についての検討を行ない得られた成果である.項目3はまとめである.1.[実験装置の改善とモデル,制御系設計の検討]実験装置は片持の柔軟梁を回転するという単純な機構を持つ.これまではその回転変位のみが計測できたが,本年度は半導体位置検出素子を用い,梁に付した発光ダイオードの振れ角を計測する機能を付した.梁の振れ角の計測により,梁の粘性減衰と回転部の固体摩擦を同定することができた.これにより,より正確な制御系設計モデルが実現できた.このモデルに基づき検討を行なった結果,制御器が持つべき内部モデルが明らかになった.この知見をもとの制御系設計,実験を行なった.他のロバスト制御系設計法による実験結果と比較することによって,提案している手法の特徴,長所が明らかとなった.2.[制御系の安定性と設計法の拡張]提案している設計法の,理論的な安定性に関する検討をおこなった.その結果,制御器を正実にすることで,如何なる場合でも制御系が安定となることがわかった.しかし,このような制御器の実現は非常に難しく,実用的には有界性も考慮した設計が必要であるという結果を得た.また,この設計法には適用できる制御対象のクラスに制限があった.そこでこの制限を緩める設計法を新たに考案した.3.[今後の展開]梁の振れ角の計測ができるようになったが,この信号を実際の制御に利用するところまで至らなかった.そのため,項目1で行なった以外の制御系設計法の検討がなされていない.実験装置に残る問題点を解決して,今後つめていきたい.本研究の目的は,3軸人工衛星などの柔軟構造物の姿勢制御のために提案しているロバスト制御系設計法の効果を,実験により検討することにあった.次の項目1はこの目的に沿った研究の成果である.項目2は当初の計画にはなかったが,この設計法についての検討を行ない得られた成果である.項目3はまとめである.1.[実験装置の改善とモデル,制御系設計の検討]実験装置は片持の柔軟梁を回転するという単純な機構を持つ.これまではその回転変位のみが計測できたが,本年度は半導体位置検出素子を用い,梁に付した発光ダイオードの振れ角を計測する機能を付した.梁の振れ角の計測により,梁の粘性減衰と回転部の固体摩擦を同定することができた.これにより,より正確な制御系設計モデルが実現できた.このモデルに基づき検討を行なった結果,制御器が持つべき内部モデルが明らかになった.この知見をもとの制御系設計,実験を行なった.他のロバスト制御系設計法による実験結果と比較することによって,提案している手法の特徴,長所が明らかとなった.2.[制御系の安定性と設計法の拡張]提案している設計法の,理論的な安定性に関する検討をおこなった.その結果,制御器を正実にすることで,如何なる場合でも制御系が安定となることがわかった.しかし,このような制御器の実現は非常に難しく,実用的には有界性も考慮した設計が必要であるという結果を得た.また,この設計法には適用できる制御対象のクラスに制限があった.そこでこの制限を緩める設計法を新たに考案した.3.[今後の展開]梁の振れ角の計測ができるようになったが,この信号を実際の制御に利用するところまで至らなかった.そのため,項目1で行なった以外の制御系設計法の検討がなされていない.実験装置に残る問題点を解決して,今後つめていきたい.
メサンギウム細胞における一酸化窒素合成に対するアルギニン・バソプレシンの効果

今回はラット培養メサンギウム細胞(MC)において、アルギニン・バソプレシン(AVP)のサイトカイン誘導による一酸化窒素(nitric oxide : NO)産生への影響のみならず、サイトカイン誘導アポトーシスへの影響も検討した。MCを培養し、lipopolysaccharide(LPS)とinterleukin-1β(IL-1β)を培養液中に添加すると、inducible-NO synthase(i-NOS)誘導による24時間後のNO産生増加がグリース法等にて確認された。これに対し、AVPの同時添加は濃度依存性にNO産生を抑制した。また、LPSとIL-1βを培養液中に添加すると、非添加時に比べMCのアポトーシスも増加することがDNAラダー法にて確認された。これに対し、AVPまたはL-NMMAを同時添加すると、アポトーシスの増加は抑制された。サイトカイン誘導の代りに、NO供与剤であるsodium nitroprusside(SNP)を培養液中に添加しても、24時間後のNO産生は増加し、また、アポトーシスの増加も確認された。これに対し、AVPまたはL-NMMAを同時添加しても、NO産生およびアポトーシスの増加は抑制されなかった。これらの事から、MCにおいて、LPSとIL-1βの同時添加、または、NO供与剤であるSNPにより、NO産生の増加と同時にアポトーシス発現も増加し、NOのアポトーシスへの関与が示唆された。また、MCにおいてAVPは、IL-1βとLPSの刺激によるアポトーシス誘導を抑制するが、その機序としてはNO産生抑制を介している可能性が示唆された。ラット腎臓よりメサンギウム細胞を選択培養し、LPSとIL-1βを、培養液中に添加し、i-NOS誘導による24時間後のNO産生量を安定代謝産物であるnitrite産生量測定を行うグリース法を用いて測定した。LPSとIL-1βの単独添加によりNO産生量は無添加に比し有意に増加した。LPSとIL-1βを同時添加するとNO産生量は更に増加したが、これに対し、AVPは濃度依存性にNO産生を抑制した。LPSとIL-1β、AVPを同時に添加し、更に、AVPのV1レセプター阻害剤である、[1-(β-mercapto-β,β-cyclopentamethylene propionic acid),2-(O-Me)Tyr^2,Arg^8]vasopressinを添加するとAVPのNO産生抑制効果は解除された。これに対し、LPSとIL-1β、AVPに、オキシトシン・レセプター阻害剤の[d(CH_2)_5,Tyr(Me)^2,Om^8]vasotocinを同時添加するとAVPのNO産生抑制効果は解除されなかった。また、LPSとIL-1β、AVPを同時に添加し、更に、C-キナーゼ系阻害薬のcalphostin Cやstaurosprineを添加するとAVPのNO産生抑制効果は解除され、AVPのNO産生抑制に関する細胞内情報伝達系に関して、C-キナーゼ系の関与が示唆された。細胞増殖調節に関しては、メサンギウム細胞のアポトーシス発現を、DNAラダー法にて検討した。LPSとIL-1βの同時添加、または、NO供与剤であるsodium nitroprussideにより、メサンギウム細胞のアポトーシス発現は増加し、NOのアポトーシスへの関与が示唆された。
第二次世界大戦後の日本における科学研究活動と米国外交政策の関係についての歴史研究

本研究は,1950年代初頭から1960年代にかけて,米国政府が日本の学術的な科学研究に対して行っていた研究資金の支援の実態について,公開された米公文書史料を利用した実証的な歴史研究として明らかにすることを目的とする.冷戦期において,米国が科学研究を振興するために日本を含む主要国に対して研究資金の支援を行ってきたことがことが明らかになっているが,本研究は,米政府諸機関,特に国務省と軍関係諸機関等が,日本の科学研究に対して,どのような目的で,どのくらいの規模で研究資金の支援を行っていたのか,それに対して日本側がどのような対応をしていたのかについて,その実態を明らかにするものである.本研究は,1950年代初頭から1960年代にかけて,米国政府が日本の学術的な科学研究に対して行っていた研究資金の支援の実態について,公開された米公文書史料を利用した実証的な歴史研究として明らかにすることを目的とする.冷戦期において,米国が科学研究を振興するために日本を含む主要国に対して研究資金の支援を行ってきたことがことが明らかになっているが,本研究は,米政府諸機関,特に国務省と軍関係諸機関等が,日本の科学研究に対して,どのような目的で,どのくらいの規模で研究資金の支援を行っていたのか,それに対して日本側がどのような対応をしていたのかについて,その実態を明らかにするものである.
トロンボポエチン-トロンボポエチン受容体系の機能解析と臨床応用

トロンボポエチンの細胞内情報伝達に関与する細胞内分子の報告に関してはこれまで幾つかあったものの、それらは全て既知の分子でありトロンボポエチンに特有な分子は未だ同定されていない。トロンボポエチン受容体をコードする遺伝子はmplとして既にクローニングされているがその機能に関してはいまだ不明な点が多い。我々はこれまでに、トロンボポエチンの標的細胞における作用発現の機構を解析するため、ヒト巨核球系細胞株であるMo7e細胞を用い細胞内の機能性分子に関して主にリン酸化について調べた。解析の結果、Mo7e細胞においてはトロンボポエチン刺激によりDNA合成が誘導されることが明らかとなった。さらに解析を進めたところ、DNA合成が誘導される状況においてJAK-2,Shc,Sos,Vav,c-Cblがリン酸化を受けることも明らかとなった。以上の結果よりこれらの細胞内分子がトロンボポエチンの細胞内情報伝達に関与している可能性が示唆されている。JAK-2はJAK/STAT pathwayに属する細胞内情報伝達分子であることが知られており、また、Shc及びSosはRas pathwayに属する細胞内情報伝達分子であることが知られている。一方、Vav及びc-Cblについては現在のところ前述の二つの細胞内情報伝達経路には属さないことは知られているものの、細胞内における機能については不明の点が多い。以上よりトロンボポエチンが標的細胞においてその機能を発揮するためにはJAK/STAT pathway、Ras pathwayに加えてVav及びc-Cblの属する未知の細胞内情報伝達機構が必要であることが示唆されていた。また、我々はRas pathway構成分子の一つであるGrb-2に会合するリン酸化分子の純化及びクローニングに成功した。現在この分子のトロンボポエチンの細胞内情報伝達機構における機能を解析中である。生体内に存在する造血器官は、数多くの造血因子が複雑なネットワークを形成して維持されている。その中で、巨核球-血小板系の分化、増殖を誘導する因子としてトロンボポエチンが同定され遺伝子クローニングされた。トロンボポエチンが標的細胞上に存在する特異的受容体と結合し、トロンボポエチンの持つ情報が受容体を介して細胞内に伝達されその作用が発現される。トロンボポエチンの細胞内情報伝達に関与する細胞内分子の構造に関してはこれまで幾つかあったものの、それらは全て既知の分子でありトロンボポエチンに特有な分子は未だ同定されていない。トロンボポエチン受容体をコードする遺伝子はmplとしてすでにクローニングされている。現在のところmpl遺伝子はその細胞内領域の違いによってP TypeとK Typeの2種類が存在することが知られている。しかし、P TypeとK Type両者ともその遺伝子産物は受容体としての機能を有しているものの、それらの機能的差異に関しては現時点において証明されていない。以上のように、トロンボポエチンおよびその受容体の機能に関してはいまだ不明な点が多い。以上よりトロンボポエチンが標的細胞においてその機能を発揮するためにはJSK/SAT pathway、Ras pathwayに加えてVav及びc-Cblの属する未知の細胞内情報伝達機構が必要であることが示唆されていた。

以上よりトロンボポエチンが標的細胞においてその機能を発揮するためにはJAK/STAT pathway、Ras pathwayに加えてVav及びc-Cblの属する未知の細胞内情報伝達機構が必要であることが示唆されていた。また、我々はRas pathway構成分子の一つであるGrb-2に会合するリン酸化分子の純化及びクローニングに成功した。現在この分子のトロンボポエチンの細胞内情報伝達機構における機能を解析中である。
がん微小環境に着目した新たな腫瘍血管新生阻害療法の開発

腫瘍血管内皮細胞に特異的に発現しているマーカーをシグナル伝達経路,新規性などの観点からピックアップした.siRNAによるマーカーのノックダウンを行い,マーカーの発現抑制が及ぼす細胞への増殖・遊走能への影響を解析した.その後蛍光免疫2重染色によりおこない,ヒト腫瘍血管における発現を確認した.ヒトにも発現が認められたマーカーの阻害剤を用いたところ,in vivo血管新生の抑制を伴う抗腫瘍効果をみとめた.腫瘍血管内皮特異マーカーを標的とする治療の実現が可能であることが示唆された.腫瘍血管内皮細胞に特異的に発現しているマーカーをシグナル伝達経路,新規性などの観点からピックアップした.siRNAによるマーカーのノックダウンを行い,マーカーの発現抑制が及ぼす細胞への増殖・遊走能への影響を解析した.その後蛍光免疫2重染色によりおこない,ヒト腫瘍血管における発現を確認した.ヒトにも発現が認められたマーカーの阻害剤を用いたところ,in vivo血管新生の抑制を伴う抗腫瘍効果をみとめた.腫瘍血管内皮特異マーカーを標的とする治療の実現が可能であることが示唆された.腫瘍の血管は腫瘍の進展と転移に大きな役割を果たしていることから血管新生阻害療法にはがんの治療法として重要なものであることが認知され始めている。ところが従来の血管新生阻害剤は正常血管内皮細胞を用いて研究開発されたものがほとんどである。申請者らは腫瘍血管内皮の分離と培養に世界に先駆けて成功した後に、それらが正常血管内皮とは様々な点で異なることを報告してきた(Hida K., et.al. Cancer Re 2004)。理想的な血管新生阻害剤を開発するためには、腫瘍血管内皮の生物学的な特異性を把握することが重要である。そのことを目的として申請者は4つの異なる腫瘍(口腔扁平上皮癌を含む)から純度の高い腫瘍血管内皮細胞を分離することができ、これらが増殖能や遊走能などが高いことなどがわかった。さらに遺伝子の発現パターンをDNA microarrayにて正常血管内皮と比較検討することまで研究を進めることができた。DNA microarray解析により4つの腫瘍血管内皮細胞に共通して発現亢進している遺伝子を汎腫瘍血管内皮マーカー(さらには汎腫瘍マーカー)として重要なものとしてピックアップすることに成功している(マーカーに関して特許出願にむけて準備中)。それらのうち4個の遺伝子は実際のヒトの腫瘍血管にも発現がタンパクレベルで確認でき、23個の遺伝子に関してはSYBRを用いたreal-time PCRによってその発現亢進が確認された。平成20年度はさらに、これらのマーカーのうち標的可能なものを絞り込み、siRNAならびに既存のinhibitorなど使用可能なものを腫瘍血管内皮細胞特異的に標的化する目的でin vivoで用い、その抗腫瘍効果を確認した。さらに他の遺伝子に関してもノックダウン実験などを行いその阻害の機序についての解析を行っている。4種類のTumor ECならびにNormal ECのmRNA発現のAgilentDNA microarray chipを用いたマイクロアレイによる比較により,これらTumor ECに特異性のあるものをピックアップした.シグナル伝達経路ごとのグループ分け,さらには新規性など,さらには未知の遺伝子に関してはgene cardsなどのデータベースを用いて,塩基配列から細胞表面タンパクか分泌タンパクかなどの予測を行い,Tumor ECマーカーとしての有用性の観点から,さらに追跡するべきものを約40遺伝子にまで絞り込んだ.これらのうち創薬のターゲットとなるマーカーの絞り込みをさらに行うためにsiRNAによるマーカーのノックダウンを行った.初代培養の血管内皮にまずはsiRNAを効率よく導入できる条件(トランスフェクション試薬や条件)を検討し,マーカーの発現抑制が及ぼす細胞への影響を解析した.そのうち先ずsiRNAによりノックダウンが可能であった遺伝子について先に生物学的な影響を見ることとした.細胞の増殖に対する影響をEGM-2存在下で検索し,さらに細胞遊走能に対する影響をboyden chmberを用いたmigration assayにより解析した.増殖に影響のあったもの10遺伝子,遊走に影響のあったもの13遺伝子をその後ヒト腫瘍切片における発現解析を行うこととして,現在蛍光免疫2重染色の条件検討をおこなっている.平成22年度はそれまでに明らかになったTumor EC特異マーカーのうち,それらの中和抗体,またはシグナル伝達をブロックするkinase inhibitorなどすでに薬剤として使用可能なものからマウス腫瘍モデルを用いて,腫瘍血管新生阻害効果を解析する.実際には腫瘍血管内皮で発現が元進しているLOXの阻害剤などを用いて血管新生とともに腫瘍の増殖が抑制されることを見出した.また,血液中の循環Tumor ECにおいて発現しているマーカーを検出する系を立ち上げた.また,腫瘍血管内皮細胞特異マーカーのうち,分泌蛋白は血清の腫瘍マーカーとして有用と考えられることから一部のマーカー,biglycanについてwestern blottingによって血中における検出もこころみた.現在がんの悪性度との関連について検討をおこなった.さらにTumor ECにおいて特異的遺伝子発現が亢進する遺伝子を発現するメカニズムの1つとして,腫瘍細胞と内皮細胞との相互作用による可能性を考え,その機序にを明らかにするための研究も行った.具体的にはがん細胞の培養上清による処理,またはがん細胞との共培養によって,Normal ECにTumor EC特異マーカーの発現亢進がおきるのかをreal time PCRで検討した.その結果がんの培養上清によって正常血管内皮細胞のgrowthfactorの受容体の発現やVEGF,SDF1などのサイトカインの発現レベルが上昇すること,さらに正常血管内皮細胞の生存能の元進も見出した.腫瘍血管内皮細胞の特異マーカー発現のメカニズムにがん細胞からの因子によるのではないかということが示唆された.
ハイブリッド型コラーゲンによる培養細胞の確立及び脳内出血モデルに対する脳内移植

1.脳内出血モデルについては、片側線条体collagenase注入によるラットモデルを作成し、再現性が高く、出血後の回転運動を評価することによりin vivoでの治療効果判定が可能なモデルであること、また出血後長期に放置されると組織学的に大脳基底核に二次的な退行変性をきたすことなどを発表した。2.上記モデルに対しての通常のラット胎児神経細胞移植をパイロットスタディとして行ったが、血腫腔中という厳しい環境下では、移植された細胞は生着しなかった。3.コラーゲンミクロスフェアを用いて、回転培養下でヒト血管内皮細胞をスフェアに付着させ、これを脳内出血モデルラットに移植した。血腫腔中心部では壊死損傷が強く、生着は認められなかったが、辺縁部において、宿主脳内へ遊走をする移植細胞を認めた。4.凍結した神経幹細胞は虚血損傷が加わった脳組織中でも生着しうることを細胞保存液をもちいた実験で組織学的に示した。5.別の脳損傷モデルとして、幼若脳の低酸素・脳虚血モデルを用い、虚血耐性能の獲得にはプレコンディショニングとして熱負荷、虚血負荷が有効であることを示し、さらにこの機序にはこれまで言われてきたような熱ショックプロテインが関与しないことを示した。6.ヒト臍帯静脈血管内皮細胞は異所性にヌードマウスの脳内に移植された時に、脳本来の血管内皮でないにも関わらず、血液脳関門を形成することを組織学的に示した。1.脳内出血モデル作成これまで、片側線条体co11agenase注入によるラットモデルを作成し、再現性が高く、出血後の回転運動を評価することによりin vivoでの治療効果判定が可能なモデルであること、また出血後長期に放置されると組織学的に大脳基底核に二次的な退行変性をきたすことなどを発表した。2.牛アテロコラーゲン(typel)のみの脳内移植牛アテロコラーゲン(コラーゲン分子を形成するらせん部の両末端に存在するテロペプタイドをペプシン処理することにより失活させたもの)から作成したゲルブロックを正常ラットおよびヌードラットの線条体へ移植した。1、2、4週後のホスト脳の免疫拒否反応のは組織学的に認められなかった。3.コラーゲン内三次元培養(液状コラーゲン内に細胞を包埋しゲル化した後に培養する)マーカー遺伝子GFPを導入したヒトアストロサイト、ヒト血管内皮細胞をコラーゲン(typel)1%含有培地にて培養し、その立体構造および生存を確認した。コラーゲンミクロスフェア上培養およびコラーゲンハニカム内培養については検討中である。4.神経幹細胞長期培養ラット神経幹細胞を2か月にわたり長期培養しその超微細構造の変化などについて検討し、学会・論文発表を行った。遺伝子導入については、その効率が未だ低すぎて有効な導入効果を認めていない。1.脳内出血後の退行変性これまで、片側線条体collagenase注入によるラットモデルを作成し、再現性が高く、出血後の回転運動を評価することによりin vivoでの治療効果判定が可能なモデルであること、また出血後長期に放置されると組識学的に大脳基底核に二次的な退行変性をきたすことなどを発表した。2.牛アテロコラーゲンのみの脳内移植後の組識学的変化牛アテロコラーゲン(コラーゲン分子を形成するらせん部の両末端に存在するテロペプタイドをペプシン処理することにより失活させたもの)から作成したゲルブロックを正常ラットおよびヌードラットの線条体へ移植した。1、2、4週後ホスト脳の免疫拒否反応のは組識学的に認められなかった。3.コラーゲンスフェアによる長期培養マーカー遺伝子GFPを導入したヒトアストロサイト、ヒト血管内皮細胞をコラーゲン(type I)1%含有培地にて培養し、その立体構造および生存を確認した。コラーゲンミクロスフェア上培養が可能であることが判明した。脳内出血後のラット脳では、反応性のミクログリアの出現を中脳黒質に認めた。

同時にドーパミン産生神経細胞の数の減少も認められ、順行性・逆行性の遅発性の神経変性が起きていることが組織学的に示された。これらの変化は、脳内出血の大きさに比例する傾向にあった。コラーゲンミクロスフェアを用いて、回転培養下でヒト血管内皮細胞をスフェアに付着させ、これを脳内出血モデルラットに移植した。ミクロスフェアと細胞との最適比及び培養条件を決定した。血腫腔中心部では壊死損傷が強く、生着は認められなかったが、辺縁部において、宿主脳内へ遊走をする移植細胞を認めた。従って、脳内出血による脳損傷後にex vivo遺伝子導入が可能であると共に、血管新生を介して宿主内の血行再建にもプラスに働くと、期待される結果が示された。コラーゲンミクロスフェアのみの脳内移植した実験では、免疫抑制を加えても、経時的にミクロスフェアは吸収される傾向にあり、また免疫抑制剤なしの環境では免疫拒否反応は僅かであった。コラーゲンミクロスフェアを用いて、繊維芽細胞・肝細胞等を一度に大量に培養可能なことが実験的に報告されているが、血管内皮細胞の培養の報告はこれまでにない。今回の研究で、細胞数の効果的な増殖のみならず、移植に際しての基質としても有用であることが示された。
複合系の分子機能

ブレオマイシンをはじめとするDNA切断分子につき、本研究班独自の方法論に立脚し研究を行なった。複雑なブレオマイシンの分子を合成するために開拓した合成法を用い、各種のモデル化合物を合成した。特にピリジン核にジメチルアミノ基を導入するという分子設計により、天然のブレオマイシンを越える酸素活性化を達成した。さらに金属結合部位のモデルにディスタマイシンを連結した新しい人工ブレオマイシンを合成し、天然のブレオマイシンとは異なるアデニン、チミンに特異的なDNA切断を実現することができた。人工ブレオマイシンがDNAの狭い溝に結合し活性酸素がデオキシリボース部位の近くにくることがコンピューターを用いた計算により示された。またエンージイン構造を持つ抗生物質エスペラミシンの研究を行ない、エスペラミシンはDNAの狭し溝に結合し、塩基配列特異的にDNAを切断することを示した。免疫の低分子有機化学に関する研究も独自の方法論に立脚している。すなわちサプレッサーT細胞、ヘルパーT細胞、キラーT細胞などの細胞表面複合糖質の特徴を調べ、これらT細胞サブセットのレクチンを用いた濃縮法を確立した。また生体内で癌細胞に強い細胞障害性を発揮するキラー細胞の分離濃縮法を確立した。さらにT細胞活性化機構、特に細胞膜ホスホリパーゼ類の役割の詳細を明らかにし、シアロシルグリセロリピド誘導体が阻害剤として有望であることを明らかにした。有機リン酸基含有ペプチドの研究は、ジメチルホスフィニル化されたヒドロキシアミノ酸を含む短鎖ペプチドはきわめて高い親水性を持つという独自の知見に基づくものである。この疎水性ー親水性変換法を用いコレシストキニンの活性発現に必須な硫酸エステルをジメチルホスフィニル基で置き換えることにより、末梢投与で中枢に作用することのできる薬物の開発への道を開いた。
銅タンパク質の電子メディエーター機能に関する研究

本研究では、銅イオンを活性中心に有するオキシダーゼであり、アミノ酸残基が直接電子授受を行う重要なサイトとして考えられているガラクトースオキシダーゼ(GAO)を用いて、その酸化還元反応を電気化学的に制御すると共に、電子伝達機能の解析を行うことを検討した。まず、GAOと電子授受を行うメディエーターを選択するために、1-Methoxy PMS,Meldolas'Blue,p-Bezoquinone,Ferrocenylmethyl-trimethylammonium bromide,Ferrocene monocarboxylic aciなどを検討した。その結果、Ferrocene monocarboxylic acidをpH9の緩衝液中で用いた場合、良好なメディエーターとして機能することが明らかとなった。Ferrocenylmethyl trimethylammonium bromideも電流の増加を示したが酸素の酸化電流の影響を受けやすい電位であるため明確なメディエーター機能を認めることはできなかった。なお、その他のメディエーターとGAOとの電子授受は観測されなかった。次に、Ferrocene monocarboxylic acidを用いてk_f/a vs. 1/sプロットによりk_f(pseudo-first-order rate constant)及びk_s(=k_f/[z])(homogeneous second-order rate constant)を算出したところ、k_f=65.2s^<-1>,k_s=13.0x10^5l mol^<-1> s^<-1>の値が得られた。なおGAOはpH=6付近に酵素活性の最大が認められるが、Ferrocene monocarboxylic acidを用いた場合にはpHが6及び7の時には、メディエーター機能を示さなかった。このことは、Ferrocene monocarboxylic acidとGAOとの相互作用のpH依存性を反映している。Ferrocene monocarboxylic acidがメディエーター機能を示したpH=9の状態は本来の酵素の最適条件とは異なり若干変性した状態とも考えられる。そこで積極的に変性剤を用いてGAOに構造変化を与え、メディエーターとの電子授受への影響について調べた。そこで変性剤として塩酸グアニジンを用い、変性剤の濃度を変化させることによりGAOの構造変化にともなう、I_k(kinetically-controlled current)/I_d(diffusion-controlled current)の変化を測定した。その結果、1Mの塩酸グアニジンを共存させたところ、10%以下にI_k/I_d値が減少した。そこで次にGAOの反応基質としてガラクトースの代わりに3-Methoxybenzyl alcoholを用いて同様の実験を行ったところ、1Mの塩酸グアニジンを共存下でも未変性時の約30%のI_k/I_d値を保持した。このことは基質に対する酵素の反応特異性が変性過程で異なることを示すと考えられた。
急性疾患において医療行為のレベルを決定する初期検査としての血清中チトクロームC値

チトクロームCの測定を診断に応用する件は、これまで文献上の報告もなく、診断試薬としても知られておらず、これらの点を調査検討した上で国内外に特許を申請している。すなわち、この病態診断の考え方と方法は我が国で開発された独自のものである。本研究ではインフォームドコンセントを取得した上で様々な疾患の患者とくに臓器障害を有する患者の血清・髄液・尿などを収集し、チトクロームCおよび細胞障害との関連の深いサイトカインの測定を行った。またその結果を患者の予後と比較検討した。なお現時点で用いている方法ではチトクロームCは正常人では血清中では検出されない。その結果、以下の疾患すなわち、新生児脳虚血性疾患、インフルエンザ脳症・脳炎、血球貧食症候群、膵炎および肝炎、脳虚血性疾患、肝臓・腎臓の臓器移植後、多臓器不全で血漿チトクロームの上昇が確認された。インフルエンザ感染症においては脳症および他臓器不全を発症する患者においては早期から血清中チトクロームCが上昇した。また多臓器不全患者においては血清中チトクロームCの測定が予後の判定に有用であった。これらの中で特にインフルエンザ脳症はわが国での頻度も高く、予後は不良の場合も多い。重症のインフルエンザ脳症患者における予後判定因子としての血清中チトクロームC値を検討することにより、医療行為のレベルの妥当性の検討を加えることで今後インフルエンザ脳症の治療に大きくこうけんするものと考えられる。
アメリカ植民地時代における宗教と創作の関係についての研究

本研究は、アメリカ植民地時代における宗教、とりわけ、ピューリタニズムを視野に納めながら、ピューリタン詩人における宗教観と創作との関係について考察・研究することを目的とした。総括的に言えば、3年間にわたる研究は、(1)アメリカ植民地時代においてピューリタニズムが文学に対して果たした意味と役割に関する文学史的、精神史的な考察、(2)個別の詩人、特に、アン・ブラッドストリートとエドワード・テイラーが、ピューリタニズムを彼女らのそれぞれの人生と創作においていかに位置づけているかに関する伝記的、文体論的研究、(3)(1)及び(2)の過程で収集される文献の整理、という3段階に区分された。本研究は、伝統的な文学分折方法に則って、ピューリタニズムを歴史的・政治的・宗教的に視野に入れながら、アメリカの詩人の発祥を探り、また、ピューリタニズムが支え刺激した結果として生まれた詩作品を読解していった。ピューリタニズムが創作を抑圧したというこれまでの通説の一般的な正しさを認めながらも、アン・ブラッドストリートに関しては、宗教が生活に根ざすなかで、いかに創作を支えたのかを解明した。エドワード・テイラーに関しては、生活が宗教そのものであるなかで、いかに想像力が既成概念から逸脱してゆくのかを解明した。そして、これらの解明を通して、ピューリタニズムが、むしろ、個別の作者への作用に差はあるものの、結局のところ創作を刺激していった点で、積極的に再評価されるべきことを明らかにした。本研究によって、アメリカ植民地時代の精神構造が理解され易くなるだけでなく、アメリカ文学の創作者たち全般に共通するような想像力の秘密が明らかにされたと確信している。平成7年度は、主として、アメリカ植民地時代におけるピューリタニズムの役割を、精神史的、文学史的に研究した。この際に、コットン・マザ-の著作を筆頭に、可能な限りの資料・図書にあたったが、とりわけ、ジョン、ウィンスロープの『日記』がアン・ブラッドストリートとの関連で、サミュエル・スィーウォールの『日記』や『手紙』がエドワード・テイラーとの関連で精査した。また、近年、ピューリタニズム関連の文献、特に信仰告白をめぐる資料の読み直しが盛んであるので、これらの文献も可能な限り入手し、その調査・分析を行った。7月から、パソコンを利用して、資料・図書に関するデータの入力に着手した。夏期休暇中には、ある機関の招きでアメリカに短期滞在する機会を得たので、宗教関係の蔵書では定評のあるミネソタ州セント・ポールのベセル大学でピューリタン関係の資料に当たった。11月には、神戸女学院大学や同志社大学で資料を収集した。同時に、本申請者は、日本の他の教育機関に所属する研究者との研究会や読書会に積極的に参加している。平成7年度末までの中間報告として、アメリカン・ピューリタニズムのなかのエドワード・テイラーの位置に関する研究をとりまとめ、「アメリカの暗い情熱--エドワード・テイラー再読」と題する論文で、渡辺利雄編『読み直すアメリカ文学』(研究社、1996年)に納めた。また、日本の現代詩が英米詩から学ぶものは何かという視点から、「寂しい海に囲まれて--現代日本詩への希求」という題で論文をまとめ、『幻実の詩学』(ふみくら書房、近刊)に発表する予定である。平成8年度は、前年度に引き続いて、アメリカ植民地時代に関するさまざまな情報やピューリタニズムについての文献、および、アン・ブラッドストリートやエドワード・テイラーに関する批評や解説類を資料として入手して、重要だと判断するものから、順に、データ・ベース化を進めた。同時に、コンピュータに入力する作業を続行中である詩作品のクロス・レファランス等を活用しながら、主として、アン・ブラッドストリートに関して、考察した。

まず、彼女の家族関係としては、なぜ、彼女たちが一家としてイギリスからアメリカへ移住してきたのか、マサチューセッツ湾植民地の総督を務めた父へ、彼女は、どういう思いを抱いていたのか、また、植民地の要職を務め、イギリスに交渉にまで行った夫サイモンとは、どのような生活をしていたのか、彼との愛情生活はいかなるものであったのか、さらには、彼女が自分の子どもへ、どのような愛情を持っていたのかを分析した。そして、そうした家族関係が、正統派ピューリタニズムのなかで、どう位置づけられ、どの辺りで、正統派からはみ出しそうになるのかを考察した。この際に、人称代名詞の使用方法などを手がかりにしながら、彼女の信仰における神の位置と意味を解明しようとした。アメリカ文学会や英文学会を中心として、日本の他の教育機関に所属する研究者との交流を積極的に行った。平成8年度末には、アン・ブラッドストリートに関して、「ピューリタニズムにおける性と回心」というタイトルの論文を、後藤昭次編『アメリカ文学のポリティクス』(大阪教育図書)に収めた。本研究は、アメリカ植民地時代における宗教、とりわけ、ピューリタニズムを視野に納めながら、ピューリタン詩人における宗教観と創作との関係について考察・研究することを目的とした。総括的に言えば、3年間にわたる研究は、(1)アメリカ植民地時代においてピューリタニズムが文学に対して果たした意味と役割に関する文学史的、精神史的な考察、(2)個別の詩人、特に、アン・ブラッドストリートとエドワード・テイラーが、ピューリタニズムを彼女らのそれぞれの人生と創作においていかに位置づけているかに関する伝記的、文体論的研究、(3)(1)及び(2)の過程で収集される文献の整理、という3段階に区分された。本研究は、伝統的な文学分析方法に則って、ピューリタニズムを歴史的・政治的・宗教的に視野に入れながら、アメリカの詩人の発祥を探り、また、ピューリタニズムが支え刺激した結果として生まれた詩作品を読解していった。ピューリタニズムが創作を抑圧したというこれまでの通説の一般的な正しさを認めながらも、アン・ブラッドストリートに関しては、宗教が生活に根ざすなかで、いかに創作を支えたのかを解明した。エドワード・テイラーに関しては、生活が宗教そのものであるなかで、いかに想像力が既成概念から逸脱してゆくのかを解明した。そして、これらの解明を通して、ピューリタニズムが、むしろ、個別の作者への作用に差はあるものの、結局のところ創作を刺激していった点で、積極的に再評価されるべきことを明らかにした。本研究によって、アメリカ植民地時代の精神構造が理解され易くなるだけでなく、アメリカ文学の創作者たち全般に共通するような想像力の秘密が明らかにされている。