hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
肝イノシト-ルリン脂質代謝におけるジアシルグリセロ-ルリパ-ゼの役割

ラット肝の種々の細胞下画分にホスファチジン酸やホスファチジルコリンから生成してくるジアシルグリセロ-ル(DG)を速やかに水解するリパ-ゼ活性(DGリパ-ゼ活生)が存在することを見出し、このうち細胞質画分およびミクロソ-ム画分のDGリパ-ゼの性質について検討した。さらに、細胞質画分のDGリパ-ゼについてDEAEーセルロ-ス、ヘパリンセファロ-ス、ConAーセファロ-スの各カラムクロマトグラフィ-を順次行うことにより、高度に精製することに成功した。最終標品はSDSーPAGEで分子量約3万1千の位置に主要バンドを示し、純度は90%以上であると推定されたが、このほかにもきわめて薄い数本のバンドが認められた。また、部分精製標品の性質を検討したところ、次のような結果が得られた。(1)至適pHは約9.5(2)Zn^<2+>イオンにより強く阻害される(3)フッ化カリウムやセリンエステラ-ゼの阻害剤であるDIFやPMSFの添加で活性が著しい低下する(4)トリトンXー100、デオキシコ-ル酸ナトリウムなどのデイタ-ジェントおよび血清の添加で活性が促進される(5)最終標品の活性は非常に不安定であるが、ウシ血清アルブミンの添加で安定化する。一方、SDSーPAGEのゲルより電気泳動的に31Kバンド(DGリパ-ゼ)を溶出し、これを抗原としてウサギで抗DGリパ-ゼ抗体を調製した。現在、この抗体を用いて免疫学的手法によるDGリパ-ゼの性質、生体内分布、生理的役割等の検討を行っている。すでに、ホスファチジルコリン(PC)にホスホリパ-ゼCを作用させてジアシルグリセロ-ル(DG)を持続的に生成させる系(DG生成系)を利用し、生理的条件下で高活性を示すDGリバ-ゼがラット肝に存在することを見出している。本年度はDG生成系を用いた際のラット肝細胞質のDGリバ-ゼのキネティックス等を詳細に調べ以下の結果を得た。(1)DGリバ-ゼはDG生成系でPCから生じるDGを速やかに分解し、MGを生成させるが、MGはさらにMGリパ-ゼ活性によりグリセロ-ルに変換される。(2)PCに少量のDGを加えて調整したエマルジョンではDGリパ-ゼ活性はほとんど検出されない。(3)DG生成系ではDGリパ-ゼ活性はDGの濃度ではなく、DGの生成速度に依存する。(4)DGリパ-ゼ活性をDGの生成速度に対してプロットすると飽和曲線が得られ、二重逆数プロットは直線を示す。(5)DG生成系に対するDGリパ-ゼ活性は細胞質だけでなく、種々の膜画分にも広く分布している。これらの結果から、(1)DG生成系ではDGはPCリポソ-ムの脂質二重層の外層に生じる。(2)生成したDGその強い疏水性のため速やかに内層に移行し、DGリパ-ゼの作用を受けなくなる。すなわち、DCリパ-ゼは生成直後のDGにのみ作用し、活性はDGの生成速度に依存する。(3)PC-DGエマルジョンではDGの大部分が内層に存在し、基質として利用されない、と結論した。DG生成系はin vivo同様、脂質二重層中に低濃度のDGを持続的に生成させるものであり、DGリパ-ゼの本来の性質を調べる上で適切な基質供給系であると考えられる。今後、肝のDGリパ-ゼの酵素学的諸性質やMGリパ-ゼ活性との関連を調べるとともに、DGリパ-ゼの生成を試み、その生理的役割について考察を加える予定である。ラット肝の種々の細胞下画分にジアシルグリセロ-ル(DG)リパ-ゼの活性が存在することを見出し、すでにその性質一部を明らかにしている。

本年度は肝細胞質画分よりDGリパ-ゼの精製を試み、以下のとおりさらに詳細な検討を加えた。肝細胞質画分のDGリパ-ゼについてDEAEーセルロ-ス、ヘパリンセファロ-ス、ConAーセファロ-スの各カラムクロマトグラフィ-を順次行うことにより、高度に精製することに成功した。最終標品はSDSーPAGEで分子量約3万1千の位置に主要バンドを示し、純度は90%以上であると推定されたが、このほかにもきわめて薄い数本のバンドが認められた。また、部分精製標品の性質を検討したところ、次のような結果が得られた。(1)至適pHは約9.5(2)Zn^<2+>イオンにより強く阻害される(3)フッ化カリウムやセリンエステラ-ゼの阻害剤であるDIFPやPMSFの添加で活性が著しく低下する(4)トリトンXー100、デオキシコ-ル酸ナトリウムなどのディタ-ジェントおよび血清の添加で活性が促進される(5)最終標品の活性は非常に不安定であるが、ウシ血清アルブミンの添加で安定化する。一方、SDSーPAGEのゲルより電気泳動的に31kバンド(DGリパ-ゼ)を溶出し、これを抗原としてウサギで抗DGリパ-ゼ抗体を調製した。現在、この抗体を用いて免疫学的手法によるDGリパ-ゼの性質、生体内分布、生理的役割等の検討を行っている。
エリートスポーツ政策ネットワークの変容：オリンピックサイクルごとの比較から

本研究は、我が国のエリートスポーツ政策を対象として、政策過程における諸アクター間のネットワークの構造や動態を政策ネットワークの視覚から分析し、その変容を明らかにすることを目的としている。本年度の研究では、シドニーオリンピックからリオデジャネイロオリンピックサイクル(1996年から2015年)までのエリートスポーツ政策におけるキー政策の政策過程の諸アクター間の相互作用を政策ネットワーク分析の視覚から明らかにすることを目的として研究を進めた。平成29年度の調査によって体系的に整理されたオリンピックサイクルごとのエリートスポーツ政策及び諸アクター(文部省・文部科学省・スポーツ庁、日本オリンピック委員会、中央競技団体、日本スポーツ振興センター、スポーツ議員連盟、地方自治体、都道府県体育協会等)に基づき、1キー政策の政策過程における諸アクター及び諸アクター間の関係に関する文献調査を行った。2キー政策の政策過程における諸アクター関係者に必要に応じて諸アクター間の関係に関するインタビュー調査を行った。31及び2の結果に基づき、Marsh and Rhodes(1992)が提唱しているメンバーシップ、統合、諸資源、パワーと言った4つの次元による分析枠組みを援用して、資源依存関係に基づく諸アクター間のパワー関係、政策ネットワークの構造や特質について分析を行った。以上により、研究対象とするオリンピックサイクルごとのエリートスポーツ政策における諸アクター間の相互作用を政策ネットワーク分析の視覚から明らかにした。平成29年度の調査によってエリートスポーツ政策の体系的な整理を行うことができたことから、平成30年度については、当初からの計画どおり文献調査及びインタビュー調査を行うことができた。このため、本年度の目的である諸アクター間の相互作用の分析についても計画どおり着手することができた。シドニーオリンピックからリオデジャネイロオリンピックサイクル(1996年から2015年)までを研究対象としたことで、ボリューム的には厳しい面もあるが、本研究の全体の予定からみると進捗はおおむね順調である。次年度は、シドニーオリンピックからリオデジャネイロオリンピックサイクル(1996年から2015年)までのエリートスポーツ政策におけるキー政策の政策ネットワークの変容を明らかにする。このため、1研究対象とするオリンピックサイクルごとの政策ネットワークの差異の分析を行う。2諸外国のエリートスポーツ政策に関する調査を行う。31及び2から総合的に政策ネットワークの変容を考察することを計画している。この中で、2諸外国のエリートスポーツ政策に関する調査については、当初は英国及び豪州を対象としていたが、その後の検討で我が国のエリートスポーツ政策及び政策ネットワークの考察のためには、デンマークのエリートスポーツ政策の調査が有効であることが判明した。このため、諸外国のエリートスポーツ政策に関する調査については、デンマークのエリートスポーツ政策の現地調査を行う予定である。本年度の研究では、まず、シドニーオリンピックからリオデジャネイロオリンピックサイクル(1996年から2015年)までの我が国のエリートスポーツ政策を特定するとともに、想定される諸アクターを明らかにすることを目的として調査を進めた。研究対象とする年代においては、エリートスポーツ政策・施策・事業を網羅的に示した資料は存在しないことから、1文部省・文部科学省・スポーツ庁の政策文書(保健体育審議会答申、スポーツ振興基本計画、スポーツ基本計画等)及び政府予算資料、JSC、JOCの関係資料、その他エリートスポーツ政策に関係する資料等を対象として調査を行い年度ごとに体系的に整理した。21の資料を基にして、これまで各年代でエリートスポーツ政策に関わっていた政府やスポーツ団体の関係者(退職者も含む)の探索をした。32で特定された政府やスポーツ団体の関係者(退職者も含む)に必要に応じてインタビュー調査を行い、各政策・施策・事業の内容や位置づけ等を明らかにし、オリンピックサイクルごとに整理した。43で特定されたオリンピックサイクルごとの政策に関係が想定される諸アクターについて検討した。以上により、研究対象とする年代における我が国のエリートスポーツ政策を体系的に整理し、これらの政策に関係が想定される諸アクターを明らかした。エリートスポーツ政策に関する資料収集に想定していた以上に時間を要したが、文部省・文部科学省・スポーツ庁を中心とするエリートスポーツ政策・施策・事業の体系的な整理を行うことができた。政策レベルのみならず、事業レベルの執行での主体者についても特定できたことで、関係する諸アクターの検討が可能となった。本研究の全体の予定からみると進捗はおおむね順調である。

以上により、研究対象とするオリンピックサイクルごとのエリートスポーツ政策における諸アクター間の相互作用を政策ネットワーク分析の視覚から明らかにした。平成29年度の調査によってエリートスポーツ政策の体系的な整理を行うことができたことから、平成30年度については、当初からの計画どおり文献調査及びインタビュー調査を行うことができた。このため、本年度の目的である諸アクター間の相互作用の分析についても計画どおり着手することができた。シドニーオリンピックからリオデジャネイロオリンピックサイクル(1996年から2015年)までを研究対象としたことで、ボリューム的には厳しい面もあるが、本研究の全体の予定からみると進捗はおおむね順調である。次年度は、シドニーオリンピックからリオデジャネイロオリンピックサイクル(1996年から2015年)までのエリートスポーツ政策におけるキー政策の諸アクター間の相互作用の分析を政策ネットワーク分析により行う。このため、1諸アクターに関する文献調査等により諸アクターの予備的情報の収集を行う。2諸アクター関係者へのインタビュー調査を必要に応じて行う。3諸アクター間の相互作用を政策ネットワーク分析により分析する予定である。次年度は、シドニーオリンピックからリオデジャネイロオリンピックサイクル(1996年から2015年)までのエリートスポーツ政策におけるキー政策の政策ネットワークの変容を明らかにする。このため、1研究対象とするオリンピックサイクルごとの政策ネットワークの差異の分析を行う。2諸外国のエリートスポーツ政策に関する調査を行う。31及び2から総合的に政策ネットワークの変容を考察することを計画している。この中で、2諸外国のエリートスポーツ政策に関する調査については、当初は英国及び豪州を対象としていたが、その後の検討で我が国のエリートスポーツ政策及び政策ネットワークの考察のためには、デンマークのエリートスポーツ政策の調査が有効であることが判明した。このため、諸外国のエリートスポーツ政策に関する調査については、デンマークのエリートスポーツ政策の現地調査を行う予定である。次年度以降に調査に要する経費がさらに必要になる可能性があるため。次年度において調査に要する経費がさらに必要になる可能性があるため。
新規 顎関節部治療材 ”ナタデココディスク” の開発

培養条件、乾燥条件などを変えてシートを作製し、生体材料として必要な条件として以下の4点に着目して評価し、これらについて優位なシートの作製・加工法を確立してきた。1)膨張して根管壁に密着する・・・吸水膨張性2)除去時に破断しない・・・引っぱり強度3)貼薬時の薬効が持続する・・・薬剤徐放性4)生体に対して有害性がない・・・生体安全性これをもとに、関節円板をモチーフとしたディスク状の“ナタデココディスク"を調整した。実際の臨床においては、顎関節強直症の外科的治療例の蓄積を行ってきた。中間挿入物に頬脂肪体を使用した症例を含む臨床例について、国際学会で発表を行った。国内外の学会に参加し、顎関節疾患、再建材料、その他治療法などについての情報収集を行った。ラット顎関節モデルとしての手術手技と、移植手法については試行した。実臨床では、顎関節強直症症例における中間挿入物として生体組織である&#38960;脂肪体を用いて良好な経過を得ることができた。退職、就職により、研究体制の再構築に時間を要した。顎関節強直症における中間挿入物として、実臨床で頬脂肪体を用いて良好な経過を得ている。同じ術野で小さな侵襲で適用でき、生体易害性のない自己組織である頬脂肪体で良好な成績を得たため、中間挿入物として合わせて評価していきたい。顎関節強直症自体は長期間を経て生じるものであり、遭遇頻度の小さい症例であるが、臨床症例の蓄積が重要であるので継続していく。培養条件、乾燥条件などを変えてシートを作製し、新規根管治療材に必要な条件として以下の4点に着目して評価し、これらについて優位なシートの作製・加工法を確立した。国内外の学会に参加し、再建材料、その他治療法についての情報収集を行った。また、実際の臨床においては、顎関節強直症の外科的治療例の蓄積を行った。実際の治療において、中間挿入物に頬脂肪体を使用した症例を含む臨床研究について、国際学会で発表を行った。予定通りナタデココディスクの開発を進めている。今後はラット顎関節モデルへの適用へと移行したい。実際の臨床においては、顎関節強直症の外科的治療例の蓄積を行っている。ラット顎関節骨折モデルへの適用を試行し、今後評価を行っていきたいと考えている。実臨床では、顎関節強直症の手術において自己組織である頬脂肪体を中間挿入物として適用し、良好な経過を得ている培養条件、乾燥条件などを変えてシートを作製し、生体材料として必要な条件として以下の4点に着目して評価し、これらについて優位なシートの作製・加工法を確立してきた。ラット顎関節骨折モデルを作成し、開発したナタデココディスクを中間挿入物としたモデルと、生育状況や病理組織学的評価検討を進めていきたい。またあわせて、現行臨床で適用している中間挿入物との比較検討にもつなげていきたい。顎関節強直症自体は長期間を経て生じるものであり、遭遇頻度の小さい症例であるが、臨床症例の蓄積が重要である。ラット顎関節骨折モデルへのナタデココディスク適用例に加え、有茎脂肪を挿入するモデル作成も検討したい。

顎関節強直症における中間挿入物として、実臨床で頬脂肪体を用いて良好な経過を得ている。同じ術野で小さな侵襲で適用でき、生体易害性のない自己組織である頬脂肪体で良好な成績を得たため、中間挿入物として合わせて評価していきたい。顎関節強直症自体は長期間を経て生じるものであり、遭遇頻度の小さい症例であるが、臨床症例の蓄積が重要であるので継続していく。2016年度は、情報収集と臨床例の報告を行った。他施設での開発、打ち合わせを計上していたが、メールなどでの打ち合わせを主として行ったため、予定額ほど要しなかった。ラット顎関節骨折モデルへの適用とともに、臨床例の蓄積と情報収集、報告を主として行った。頬脂肪体という自己組織の適用により良好な臨床経過が得られたことから、頬脂肪体を適用した臨床例の蓄積も並行して行っていく。退職、就職により研究体制の再構築に時間を要し、当該年度は活発な活動ができなかったため。今後、新しい評価などを行う場合には、他施設での実験が必要となる。また、臨床応用を見据えた臨床研究とあわせての評価も行っていきたい。積極的に情報収集をすすめ、成果発表につなげていきたい。
新規なナノ粒子分散Ni基アモルファス高速水素透過膜の創製とその透過機構の解明

前年度には、Ni-M-Zr(M=Ti, Zrなど)三元系アモルファス合金膜の作製と水素透過性の評価、およびNi-Nb-Zr合金膜のスパッタ製膜の予備的調査、アモルファス形成能の観点からの熱力学的考察を行った。平成17年度は前年度に引き続き、組織制御されたアモルファス水素透過膜の作製を試みた。作製手法としては単ロール液体急冷凝固法とともに、スパッタ法による水素透過膜の作製を試みた。本水素透過膜の作製に際しては、膜の両面に水素ガス分子の水素原子への解離を促進する目的でPd金属をスパッタ法を用いて被覆した後、水素透過性を調べた。その結果、スパッタ法を用いてもアモルファス膜を作製することが出来た。また、前年度の研究結果からNi,Nb, Zrの各元素のスパッタレートの違いを考慮し、本年度はほぼ期待通りの組成を有する製膜を行うことが出来た。使用した多孔質基材の調整を行い、セラミックス多孔質基材、金属焼結体多孔質基材を使用し、製膜を行った。スパッタ法による製膜の場合、薄膜では基材上の孔を完全に塞ぐ緻密薄膜の作製は困難であった。さらに耐水素脆性の向上のために組成の調整を行い、Ni-Nb-Zr合金にCoを添加したNi-Nb-Zr-Co合金で、比較的耐水素脆性の向上が見られた。この合金では、300°C程度の温度では数百時間にわたる長時間の透過試験を行っても、透過流量の低下・経時劣化はNi-Nb-Zr合金に比べて少ないことが分かった。平成16年度は、研究実施計画に従って、以下の三項目の研究を行った。(1)Ni-M-Zr(M=Ti, Hf)三元系急冷凝固アモルファス合金膜を作製した。TiおよびHfはZrと同族元素である。これらの急冷凝固薄帯を作製し、膜両面にPdを被覆した後、水素透過性を調べた。その結果、Ni-Ti-Zr合金では水素透過係数が10^<-8>[mol・m^<-1>・s^<-1>・Pa^<-1/2>]台の比較的高い値を示したが、Ni-Nb-Zr合金には若干及ばなかった。また、Ni-Hf-Zr合金に関しては、透過係数はNi-Nb-Zr合金よりもおよそ1桁低い結果であった。(2)実効流量を稼ぐため、アモルファス合金薄帯(約40μm)をより薄膜化するべく、スパッタ法による薄膜作製を試みた。その結果、約500°Cでの基板加熱でもアモルファス膜が得られた。支持基板にはガラス基板、アルミナ多孔質板、テフロン膜を使用した。しかしながら、約1μmの膜厚では支持基板上の孔を完全に被覆することが出来なかったので、約10μmの膜厚としてNi-Nb-Zrスパッタ膜を作製することが出来た。Ni,Nb,Zrの各元素によるスパッタレートの違いから、ターゲット組成の最適化・調整が必要であることが分かった。(3)アモルファス形成能の観点から、Ni-M-Zr(M=Nb,Ti,Hf,V,Ta,Y,Mo,Sc,La)の混合エンタルピーおよび原子寸法比の比較を行った。その結果、混合エンタルピーの比較から最もアモルファス形成能が高いのはHf次にTi,Scと思われるが、この考察結果は必ずしも水素透過測定結果と一致しなかった。すなわち、水素透過膜の合金設計と急冷凝固アモルファス薄帯作製の合金設計は必ずしも一致しないことが分かった。従って、水素透過性と急冷凝固アモルファス成形性のための合金設計を今後最適化する必要があることが分かった。
計算代数統計学の展開

計算代数統計、特にマルコフ基底や実験計画法に関して、多くの研究成果を得て、国際学術雑誌に刊行した.分担者の論文を含め本研究課題からの刊行論文は60編を超えており、非常に多くの研究成果が得られた.本研究の目的は近年急速に進展しつつある「計算代数統計学」(computational algebraic statistics)の研究を,我が国でも強力に推し進めることにある.計算代数統計学は,統計科学と代数学,さらには代数生物学とも密接な接点を持ち,これらの異分野間の交流の中で今後大きな学問的成果が期待される分野である.この分野は統計的モデリングを中心として,計算可換代数学とバイオインフォマティクスが結び付いており,これらの分野から若い研究者が参入している.我が国では,純粋数学者と数理統計研究者の間の住み分けが固定的となりがちであるが,本プロジェクト研究では,代数の専門家を含め,異なる分野の研究者が交流する形の学際的研究がおこなわれている.数理統計学においては,実験計画法における有限体の理論,統計的決定理論における変換群論とハール測度の応用,多変量分布論における連続群の表現論,離散データ解析における有限群の表現論,など伝統的にも様々な形で代数学が使われて来た.これらはそれぞれ一時代を画す研究成果をなしたが,最近の計算代数統計学の発展は,統計学と代数学の関係においてより大きなインパクトを持ち得るものである.それは代数学の研究者自身が計算代数統計を旗印にしていることにも見られる.計算代数統計学の分野でこのような学際的交流が進んでいるのは,最近になって代数学が「実際に計算できる分野」へ変貌をとげつつあるという背景がある.実際に計算できることから具体例への応用が進み,その中で新たな問題が意識されるという循環が生まれている.Sturmfelsの主張するように,多変数多項式を利用する分野にはすべて代数学が関わるとするならば,計算できる代数学の応用範囲は非常に広範であり,より大きな影響を与えると期待できる.計算代数統計、特にマルコフ基底や実験計画法に関して、多くの研究成果を得て、国際学術雑誌に刊行した.分担者の論文を含め本研究課題からの刊行論文は60編を超えており、非常に多くの研究成果が得られた.本研究では平成18年度に,研究代表者および分担者によってすでに多くの研究成果を得た.具体的な研究成果としては以下のものがあげられる.1)実験計画において観測値が離散値をとる場合のマルコフ連鎖法の研究実験計画法においては通常は観測値が連続量をとるものとし,その分布としては正規分布が仮定される.しかしながら,現実には観測値がカウントデータでり,非負整数しかとらない場合などがあり,そのような場合には正規分布での近似は不適切である.青木・竹村は,観測値が離散値をとるような実験計画の場面で,計算代数統計を用いて正確検定をおこなう手法を提案した.Segre-Veronese型配置の理論研究はこれまで大杉・日比らによっておこなわれて来たが,この理論は統計学におけるHardy-Weinbergモデルの検定の一般化と密接に関連していることがわかり,Segre-Veronese型配置の応用の一般論を展開した.3)分解可能モデルのマルコフ基底及び不変マルコフ基底の理論的性質の解明原・青木・竹村によって分解可能モデルのマルコフ基底及び不変マルコフ基底の理論的性質の解明がなされた.特にDobraの提案したマルコフ基底が極小マルコフ基底となるための必要十分条件が求められた.以上の研究成果は,それぞれtechnical reportの形で発表され,現在国際雑誌に投稿中である.本研究では平成19年度に,研究代表者および分担者によってすでに多くの研究成果を得た.具体的な研究成果としてけ以下のものがあげられる.1)実験計画において観測値が離散値をとる場合のマルコフ連鎖法の研究実験計画法においては涌常は観測値が連続量をとるものとし,その分布としては正規分布が仮定される.しかしながら,現実には観測値がカウントデータであり,非負整数しかとらない場合などがあり,そのような場合には正規分布での近似は不適切である.青木・竹村は,観測値が離散値をとるような実験計画の場面で,計算代数統計を用いて正確検定をおこなう手法を提案し,2水準系および3水準系の実験計画にともなうマルコフ基底の性質を求めた.Segre-Veronese型配置の理論研究はこれまで大杉・日比らによっておこなわれて来たが,この理論は統計学におけるHardy-Weinbergモデルの検定の一般化と密接に関連していることがわかり,Segre-Veronese型配置の応用の一般論を展開し,2本の論文にまとめた.3)分割表に関する部分和問題のマルコフ基底原・竹村・吉田によって,2元分割表でさらに適当な部分和を固定する場合のマルコフ基底が求められた.以上の研究成果は,それぞれtechnical reportの形で発表され,現在国際雑誌に投稿中である.本研究では平成20年度に,研究代表者および分担者によってすでに多くの研究成果を得た.具体的な研究成果としては以下のものがあげられる.1)トーリックイデアルは対称性の決定,統計学に現れるトーリックイデアルは対称性の高いイデアルが現れることが多いが,所与のトーリックイデアルに対して,その対称性を規定する群を決定することは難しいことが多い・清・青木・竹村は, Pertuibation methodとよばれる新たな方法を提案し,分割表解析に現れるトーリックイデアルの対称性を表す群を決定することに成功した.

2)特定のファイバーを連結とするマルコフ基底の部分集合の研究,マルコフ基底はすべてのファイバーを同時に連結にするものであるが,特定のファイバーの連結性のためには,基底の部分集合で十分な場合がある. Hara-Takenura-Yoshidaは、2変数ロジスティック回帰モデルにおいてこのようなマルコフ基底の部分集合を求めている.3)実験計画法における非正則実験計画の新たなクラスの定義,伝統的な一部実施要因計画の理論においては,正則な実験計画が主に用いられ,その場合実験回数が完全実施要因計画の場合の1/2,1/4・などの形になり,実験回数を自由に定めることはできない・そこで実験回数が任意の場合には非正則な実験計画を用いる必要がある・青木・竹村はaffinelyfull-dimensional factorialdesignを定義し,いくつかの場合にそのクラスの中で最適な実験を求めている.本研究では平成21年度および平成22年度繰越期間に,研究代表者および連携研究者によって多くの研究成果を得た.具体的な研究成果としては以下のものがあげられる.1)分割表に対する階層モデルの部分モデルの提案多元の分割表のモデルとしては,階層モデルがもっとも基本的であるが,階層モデルはパラメータ数が多いために,高次の交互作用を何らかの形で特殊化してモデルの次元を減らすことが望ましい.その際に,階層モデルが持つ条件つき独立性の構造や尤度の局所化の性質を保持したままでモデリングすることが自然である.原・清・竹村は,この問題に対してhierarchical subspace modelという新たな統一的な枠組みを提案し,このモデルの数学的な性質を明らかにした.2)ランキングモデルへの超平面配置理論の応用紙屋・竹村・寺尾は,これまでランキングモデルへの超平面配置理論の応用の研究を進めてきた.すでに一次元のunfolding modelについては結果が得られていたが,新たに余次元が1という他の極端な場合について,ランキングのパターンの数を与えることに成功した.ランキングのパターンを数える問題は,一般的には曲面の配置の問題となり,数学的には非常に難しいが,余次元が1の場合は超平面配置の枠組みが適用できることがわかり,この場合について新たな結果を得た.3)マルコフ連鎖モデルのhomogeneity(斉時性)の正確検定のためのマルコフ基底の導出竹村・原は,マルコフ連鎖モデルからパスが複数観測される場合に,homogeneityすなわち推移確率が時刻によらないことの帰無仮説の正確検定のためのマルコフ基底を,状態数が少ない場合や期間が短い場合について求めた.一般の場合のマルコフ基底は今後の課題である.以上の研究成果は,それぞれtechnical reportの形で発表され,現在国際雑誌に投稿中である.
皮下脂肪由来再生細胞の血管再生治療臨床応用に向けた基本的情報の検討

皮下脂肪細胞はマウスモデルにおいて血管再生法の細胞として有効であることを証明した。また、老化、糖尿病の状態においては、血管再生能が低下する可能性が示唆されたが、高血圧においては明らかではなかった。今後のさらなる検討の重要な基礎的情報が得られた。動脈硬化症の末梢病変では、従来の治療法が奏功しない重症患者が下肢切断を余儀なくされている。下肢切断回避法として骨髄細胞を用いた血管再生療法が本邦で2000年より開始され、有効性・安全性が報告されているが、従来の骨髄細胞に比し、皮下脂肪細胞は容易に安全に採取でき、繰り返し採取可能なことから次世代の再生医療の有力な細胞供給源として期待される。しかし、その有効性・細胞の性質について詳細な検討はなされていない。本年度、我々はマウス下肢虚血モデルを作成し、ラットより得た皮下脂肪由来再生細胞(ADRC)の血管再生に必要な移植細胞数を検討した(0個、1×10^6個、3×10^6個)。レーザードップラー血流・毛細血管数(病理)による解析の結果、1×10^6個が最適であった。また、培養細胞と新鮮単離細胞を比較したところ、新鮮単離細胞のみで血管新生能を認めた。新鮮単離細胞は血管新生因子(VEGF,FGF-2,HGF)の発現が高い事も確認された。現在、再生医療を行うための細胞ソースはiPS細胞も含めて検討されているが、安全性の問題から極力、培養過程や細胞処理過程が単純であり、かつ治療目的に有効な細胞が求められている。本年度の我々の研究により、培養過程を経ず、繰り返し採取しうる皮下脂肪から分離したADRCが虚血組織の血流回復に寄与しうることが分かった。病理解析でも奇形腫や悪性腫瘍の発生は確認されず安全性も確認しえた。体性幹細胞の性質についての詳細な評価やメカニズムの解析は来年度以降の検討課題であるが、臨床応用に際し、重要な基礎的知見が得られたと考えられる。昨年度、我々は皮下脂肪由来再生細胞(ADRC)の血管再生の安全性・有効性をマウス下肢虚血モデルにおいて証明した。体性幹細胞の性質についての詳細な評価やメカニズムの解析が今年度の検討課題である。特に骨髄細胞ではリスクファクター存在下で血管新生の効果が減弱することが知られているが、臨床応用上重要な事項でありADRCにおいても検討した。ラットにおいて、高血圧・肥満・老化・糖尿病(耐糖能障害)モデルを作成し、それぞれADRCの回収数・性質・血管新生能を評価した。高血圧モデルはアンギオテンシンIIを浸透圧ミニポンプ(Alzet社)を用いて48週間持続投与することにより作成したが、2か月間の観察期間においては血圧の影響は皮下脂肪には生じていなかった。肥満モデルは高脂肪食負荷にて肥満を誘導した。このモデルにおいてはインスリン抵抗性を獲得しており、脂肪の炎症も認められ、フローサイトメーターにおいてCD68,45が増加し、CD34は低下していたが、血管新生能には影響がなかった。老化モデルは通常飼育にて、1218ヶ月齢まで加齢させたが、細胞の採取に調整が必要であり来年度以降の課題とした。糖尿病モデル:ストレプトゾトシン投与による糖尿病モデルを作成したが、体重や血糖値が安定せず皮下脂肪の採取が困難であり、来年度以降、モデルを考慮しつつ再検討することとした。動脈硬化症の末梢病変に対して、従来の治療法が奏功しない重症患者が下肢切断を余儀なくされている。下肢切断回避法として骨髄細胞を用いた血管再生療法が本邦で2000年より開始され、有効性・安全性が報告されているが、採取の際の侵襲や回数の限界、症例の限定など、多くの問題が残されている。従来の骨髄細胞に比し、皮下脂肪細胞は容易に安全に採取でき、繰り返し採取可能なことから次世代の再生医療の有力な細胞供給源として期待される。この3年間の期間において、我々は皮下脂肪由来再生細胞(ADRC)の血管再生の有効性をマウス下肢虚血モデルにおいて証明した。ラットにおいて、高血圧・肥満・老化・糖尿病(耐糖能障害)モデルを作成した。高血圧モデルラットでは、12週間の観察期間ではその影響はなかった。糖尿病モデル(ストレプトゾトシン投与ラット)では、ごく軽度のVEGFの発現に差があったが有意差は認めなかった。

このモデルにおいてはインスリン抵抗性を獲得しており、脂肪の炎症も認められ、フローサイトメーターにおいてCD68,45が増加し、CD34は低下していたが、血管新生能には影響がなかった。老化モデルは通常飼育にて、1218ヶ月齢まで加齢させたが、老化個体からのADRCの採取率が極めて悪く今後の研究の課題とした。今後のADRCの血管再生治療応用に関しては、新鮮単離ADRCと培養ADRCと比較したが、新鮮単離ADRCのほうが有用であることが示され、CPCなどを必要としないシステムのほうが有用であるため、臨床応用に近いデータを得られた。ADRCによる血管再生療法の研究は採取方法をはじめ、既報の論文が少ないが、その基礎的な技術開発から着手し、細胞の機能評価を終了できた。本年はその細胞の保存・機能維持に関する重要な情報にまで研究を広げることができ、おおむね順調に進展していると考えている。また当初は、ヒトADRCによる細胞機能評価を予定していたが、当該研究機関における"ヒト幹細胞を用いる臨床試験に関する指針"への申請に時間を要し、来年度に向けて施行予定である。24年度が最終年度であるため、記入しない。本研究は、臨床応用(鳥取大学医学部付属病院)に向けた基礎的な情報の確立が重要である。平成23年度中に"ヒト幹細胞を用いる臨床試験に関する指針"への申請が受理され、本年度(平成24年度)中に、その臨床応用が開始予定である。この被験者からの細胞などを保存し、解析することから、基礎的な検討と実際の臨床でのデータの整合性を確認することができる。これらのデータは、他大学においても試行中・検討中のヒトADRCによる再生治療に重要な情報となるため、様々な検体(ADRC)を評価することが可能な組織・ネットワークづくりも課題である。
糖尿病療養指導士と患者会の協働によるセルフケアpower upプログラムの有効性

【目的・方法の達成状況】『糖尿病・予備軍のある人とCDEとの協働によるセルフケアpower upプログラムの企画』にあたり、糖尿病・予備軍のある人と地域における地域糖尿病療養指導士(CDEL)との相互作用の場であるセルフヘルプグループ活動について、CDEL150名に対して研修会を開催した。「魅力的な友の会にするために」をテーマに、1グループ56人の25グループで検討した。検討内容を記録に残し、その内容からコードを作成し、カテゴリー化した。【結果】友の会発展の課題については、302コード、17カテゴリーが抽出された。その内容は、患者会員の減少や高齢化、医師やCDELのマンパワー不足・業務外での負担、仕事等で若い人の参加減少、経済的負担と制約、アピール不足、ニーズにあっていない、患者・CDEL・友の会・施設間の横のつながり不足、継続できにくいシステム不備、会員の特典がない、冊子の活用状況、糖尿病への偏見などがあった。魅力的な活動については、482コード、20カテゴリーが抽出された。その内容は、アプリやWeb活用、興味を引く楽しい活動、糖尿病に限らない健康教室、個別性・地域特性・社会の動向に対応した活動の対象・内容・方法、さかえの改革と患者会費の検討、糖尿病を気負わずに支え合いリラックスできる企画、県や市や大学や福祉と協働、糖尿病包括連携、登録制や診療報酬加算など病院診療や制度システムの中に組み込むなどがあった。【協働プログラム企画の方向性】友の会はメンバー共生で仲間とともに生きていくセルフヘルプグループである。糖尿病とうまく付き合うためには一人ではなく家族や医療者や友人などと交流の幅を拡げ話し合うことが大切である。そのためにはメンバーの主体性・対等性・ニーズに合った方法・組織化しすぎずに同じ志を持った仲間が気軽に集まれることが重要なカギとなることが示唆された。2018年度の調査の意義は今後の協働プログラム企画にあたり、意義が大きいものであったが、労務状況や体調管理との調整がつかず、予定していた研修会の一つしか達成できず、行政などとの会議の開催や協働プログラム企画に至らず、2019年度のプログラム実施が延長しそうである。1.行政などとの会議の開催2.「患者力を高めよう!セルフケア自己評価支援」CDEL研修会の開催し、同時にCDEL療養支援実践能力の調査3.協働プログラムの企画(協働プログラムの実施の中で調査の統制群などの調査ができるように企画する。)4.協働プログラムの企画が重要なため、実施を半年から1年遅らせる。【当該助成金が生じた状況】研修会の実施や調査が一部終了できていないこと、プログラム企画の進捗の遅延【使用計画】前年度に使用予定のタブレット設備費、企画会議交通費を2019年度に合わせて使用する。
ママコナ属における花筒長の多様化と送粉者を介した生態的種分化過程の解明

ポリネーターシフトは顕花植物の生態的種分化にとって重要と考えられているが、どのような環境下でどのように進行するのかは不明確である。本研究で用いたママコナ属は長舌ハナバチ類が主要なポリネーターだが、紀伊半島南部に分布するオオママコナは、顕著に長い花筒を持ち、昼行性スズメガがポリネーターとなることが明らかになった。また、花筒が短いヤクシマママコナは屋久島高地に分布が限られ、主にハナアブ類による訪花が確認された。両分類群ともシコクママコナに近縁だが、生育地では開花期に長舌のハナバチ類がほとんど確認されず、適した訪花者が少ない環境下で、本来は盗蜜・盗粉者だった昆虫に適応進化したものと考えられる。平成25年度には1)ママコナ属の花形態の計測及び分布状況の確認、2)ママコナ属の自生地におけるポリネーター調査、3)DNA解析、4)オオママコナ及びヤクシマママコナ自生地での淘汰圧測定、5)調査結果の公表を行う予定であった。1)については、平成24年度に調査出来なかったホソバママコナ、ヤクシマママコナ、ママコナに関して調査を進めることができた。2)の送粉昆虫調査については、主にオオママコナ、ヤクシマママコナの局地的に分布する1種、1変種で進めることができ、特に花形態が特殊化しているオオママコナでは主な送粉昆虫がホウジャク類(スズメガ科)であることを明らかにした。ヤクシマについては天候の影響もあり調査が不十分で、平成26年度に引き続き調査を行う予定である。このほか、ホソバママコナ、ママコナについてはいずれも長舌を持つハナバチ類が主な送粉昆虫であると予測された。3)のDNA解析については、日本産の全種・変種についてDNAサンプルがそろった状況になり、葉緑体のtrnL-F領域について解析を行い、大まかな系統的関係について明らかにした。短い領域しかまだ読めておらず、さらに解析を進める必要がある。これらの結果については、平成26年3月の日本生態学会において公表済みである。このほか、平成25年度には韓国で新たに記載されたM. koreanumについて調査を行うことができ、こちらもホウジャクが送粉に関わっていることが示唆された。平成24年度には標本によるママコナ属の分布調査、ママコナ属予備調査及びポリネーター調査、予備調査結果の公表の3点について調査・研究を進める予定であった。標本によるママコナ属の分布調査については、大阪市立自然史博物館の標本をはじめ、国立科学博物館、広島大学、九州大学の標本を閲覧することができ、ママコナ属の全種について全国的な分布の状況を把握することができた。特に本研究で生態的な解明を進めるオオママコナについては、紀伊半島南端部に分布が限られ、他地域からは全く確認できないことが明らかになった。また、送粉昆虫調査については、主にオオママコナ、エゾママコナ、タカネママコナの局地的に分布する3種で進めることができ、特に花形態が特殊化しているオオママコナでは主な送粉昆虫がホウジャク類(スズメガ科)であることを明らかにした。エゾママコナ、タカネママコナ、シコクママコナについてはいずれも長舌を持つハナバチ類が主な送粉昆虫であると予測された。ママコナ属では一般にマルハナバチなどの長い口吻を持つハナバチにより花粉の送粉がされ、花形態もそれにマッチしたものとなっている。これに対して、今回確認されたオオママコナのように、蛾が主な送粉昆虫となる種はママコナ属では、初めての確認となると考えられる。オオママコナの調査結果については、平成25年3月の日本生態学会で公表した。また、今年度調査では、平成25年度以降に実施予定のDNA解析に向けて、各地でサンプリングを実施し、オオママコナ、シコクママコナ、エゾママコナ、タカネママコナについてサンプルが集まった。残りのママコナ、ツシマママコナ、ヤクシマママコナ、ホソバママコナについては、平成25年度にサンプリングを行う予定である。平成26年度はオオママコナ及びヤクシマママコナのポリネーター補足調査、オオママコナ及び近縁種のシコクママコナ生育地において訪花昆虫相の調査を実施した。また、平成27年3月に開催された日本生態学会において調査結果を公表した。本研究では特徴的な花筒を持つオオママコナ(長花筒)、ヤクシマママコナ(短花筒)の送粉生態や花形態の変異等の基礎的情報の調査を行い、DNA解析によってこれら局地的分布種の分化過程を明らかにすることを目的とした。

1)長花筒を持つ、オオママコナが分布する紀伊半島南部周辺におけるママコナ属の分布状況については、国内の主要なハーバリウムにおいて標本調査を行い、オオママコナの分布が紀伊半島南部に限られること、近接してシコクママコナが分布していることを明らかにした。2)ママコナ属の花形態計測は、ママコナ属全種において実施し、オオママコナが他種より顕著に長い花筒を有していることを明らかにした。また、タカネママコナのいくつかの集団、ヤクシマママコナに関しては、他分類群よりも花筒が顕著に短くなる。3)長花筒、短花筒のママコナに関わるポリネーターを3年にわたり調査した。結果として、オオママコナの主要な訪花者がホシホウジャクであり、口吻長、花筒長の関係よりポリネーターとして機能していることが明らかとなった。ヤクシマについては観察時間が十分ではないが、ハナアブ類がポリネーターとして機能している可能性がある。系統解析や各集団での花筒長にかかる淘汰圧の測定は十分に実施できていないが、長花筒のオオママコナはシコクママコナから派生したと考えられる結果が得られている。これらの調査結果より、有効なポリネーターの少ない紀伊半島南端部において、盗蜜者であったホウジャク類に適応することでオオママコナがシコクママコナより分化したものと考えられる。送粉生態学特に本年度調査を進める予定であった、「課題2:ママコナ属の花形態の変異を明らかにする」、「課題3:長花筒または短花筒の分類群の受粉にはどのようなポリネーターが関わっているか明らかにする」の2点については概ね当初の計画通りに進行した。もう1点の「課題4.オオママコナ、ヤクシマママコナを含むママコナ属はどのように進化したか?」については、まだ解析が不十分ながら、日本産ママコナ属の大まかな系統関係については明らかになった。課題2については長筒花をもつオオママコナについて、同属の他種やオオママコナの分布域の周辺の近縁種(シコクママコナ)とも比較することができ、他種に比べ2倍以上長い花筒を持つことを示すことができた。これとは逆に短花筒を持つヤクシマママコナについては、シコクママコナの半分程度の長さの花筒しかなく、顕著に短いことが明らかになった。課題3については、長筒花のオオママコナについて同属の他種と異なり、蛾類(ホウジャク類)が主な送粉昆虫であることを明らかにした。花筒が短いヤクシマママコナについてはまだ調査が不十分であるが、ハナアブ類が送粉に関わっている可能性も考えられえる。課題5の淘汰圧の生育地での測定については、自家受粉率が高く、結果率に個体間で大きな差が見られないため、実施が困難となった。平成26年には、自殖の程度を袋掛け実験などを通して明らかにしたい。以上より、平成25年度に実施予定であった計画はほぼ予定通りに進行した。課題5の生育地における淘汰圧の測定については、困難なことが明らかになったが、そのほかの課題については概ね当初計画の予定の通りに進行している。特に本年度調査を進める予定であった、「課題1:標本調査によりママコナ属の分布状況を明らかにする」、「課題2:ママコナ属の花形態の変異を明らかにする」、「課題3:長花筒または短花筒の分類群の受粉にはどのようなポリネーターが関わっているか明らかにする」の3点については概ね当初の計画通りに進行した。課題1については本年度でほぼ調査が終了し、今後、データ整理・取りまとめを行う。これとは逆に短花筒を持つヤクシマママコナについては、平成25年度に調査予定である。
新型エンテロトキシン・病原因子を保有する黄色ブドウ球菌・MRSAの分子疫学

本研究の目的は、黄色ブドウ球菌の新型エンテロトキシン様毒素(SElW, SElX, SElY)、新規病原因子、新規変異型付着因子の、臨床分離株および健康人定着株における疫学的分布状況と病態・疾患との関連を明らかにすることである。新型エンテロトキシン様毒素について、北海道の市中感染型MRSA624株について解析した結果、selxは86.2%、selyは35.6%、selwは93.4%の菌株に検出された。ミャンマーでの健康成人由来144株でも、selx, sely, selwは各々94%、20%、98%に検出され、同様の分布状況を示した。これら新型エンテロトキシン様毒素の遺伝子学的解析のため、異なるコアグラーゼ遺伝子型の株から対象を選び、22株のselw、69株のselx、46株のsely遺伝子の配列を決定した。以上のほか、新規ブドウ球菌種S. argenteus 9株についても調べたところ、selyが7株に検出、selx、selwは異なる1株づつのみに検出された。新規病原因子フォンビルブランド因子結合蛋白遺伝子(vWbp)は健康成人由来株で81.3%に検出された。新規変異型付着因子(エラスチン結合蛋白、ebpS-v)は、バングラデシュでの病院分離株430株中4株(ST121)に、また北海道における健康な小児の口腔由来株においても143株中、2株(ST45、ST120)に検出された。北海道の2つの遺伝子型株のebpS-vは、ST121のそれと同じ系統に属することが系統解析で判明した。新型エンテロトキシン様毒素遺伝子(selw, selx, sely)の検出と遺伝子配列の決定が終了したため。また新規病原因子フォンビルブランド因子結合蛋白遺伝子(vWbp)の検出の一部、新規変異型付着因子・エラスチン結合蛋白遺伝子(ebpS-v)の検出と解析が終了したため。すでに遺伝子配列を決定した新型エンテロトキシン様毒素遺伝子(selw, selx, sely)の系統遺伝学的解析を行ない、早期に論文化する。フォンビルブランド因子結合蛋白遺伝子(vWbp)の分布状況を他の菌株群を対象に調査し、その遺伝子配列の多様性を解析する。ebpS-vについてはミャンマーの病院分離株を対象に検出・解析を行なう。
ニューロメジンSの新しい生体調節機構の解明

ニューロメジンS(NMS)は、ペプチドレベルでの脳内分布が不明である。そこで、ラット脳の各領域における組織含有量をラジオイムノアッセイで測定した結果、遺伝子発現量の高い視床下部に匹敵した高濃度のNMSが、低発現部位である中脳、橋・延髄でも検出された。これにより、主に視床下部に存在するNMS産生神経細胞から脳幹への神経線維投射が推測され、脳幹に作用することによるNMSの未知の機能の存在が示唆された。ニューロメジンS(NMS)は、申請者の所属する研究室で発見された生理活性ペプチドであり、これまでの研究にて概日時計の調節、摂食抑制、尿量減少、乳汁分泌促進といった、視床下部の神経核ネットワークを介する興味深い機能が明らかにされている。しかしながら、NMS産生ニューロンが構成する脳内神経ネットワークが不明なため、NMSの生理的役割は未だ完全には確立されていない。そこで本研究では、ラット脳におけるNMSの分布をペプチドレベルで解析した。ラット脳の各領域におけるペプチド含有量を新たに開発したラジオイムノアッセイにて測定したところ、遺伝子発現量の多い視床下部だけでなく、発現量の少ない中脳、橋・延髄でも豊富にNMSが存在し、視床下部のNMS産生ニューロンから脳幹への神経線維投射が示唆された。また、免疫組織化学染色による解析では、脳幹網様体での免疫陽性反応が観察された。一方、脳幹での受容体の発現をリアルタイムPCRにて検討したところ、2型受容体の発現が確認されたが、その強度は視床下部のそれにはおよばなかった。これらの結果は、下位脳幹に作用することによるNMSの未知の機能の存在を強く示唆している。本年度は、各種生理的条件におけるラット脳でのNMSの含有量を測定した。NMSは非常に強力な摂食抑制およびエネルギー代謝亢進活性を有するが、絶食状態にしても脳各部位におけるペプチド含有量に変化は観察されなかった。一方、視床下部視交叉上核ではNMS遺伝子の発現量は、明期に高く暗期に低下する。しかしながら、脳幹部だけでなく視交叉上核を含む視床下部でも明暗期でペプチド含有量に差が観察されなかった。今後、NMSの有する機能とペプチドの量的変化を詳細に検討する必要がある。また、本研究にて示唆された脳幹でのNMSの未知機能については、ノックアウトマウスを用いた解析を継続している。生理活性ペプチドは、組織間あるいは細胞間の主要な情報伝達分子の1つであり、ホルモンとしての内分泌的調節に加え、神経ペプチドとして摂食、飲水、性行動及び睡眠覚醒などの本能行動や、生体の恒常性を維持するための自律機能を調節する。このように、生理活性ペプチドは、生体機能の調節において広範かつ重要な役割を果たしているため、新たな生体調節機構の解明を目的として、その機能解析研究が盛んに試みられている。ニューロメジンS(NMS)は、ニューロメジンU受容体の新たな内因性リガンドとして同定された神経ペプチドである。その遺伝子発現は、中枢神経系、脾臓及び精巣で認められ、視床下部での発現量が最も高い。また、幾つかの視床下部神経核にてNMS mRNAの発現が観察されているが、なかでも視交叉上核での発現が突出している。現在では、脳室内投与実験にて、概日時計の位相変位、摂食抑制、尿量減少、乳汁分泌増加が観察されるなど、NMSは脳内で興味深い機能を発揮することが示された。しかしながら、脳内でのペプチドの分布、すなわち、NMS産生ニューロンが構成する脳内神経ネットワークが不明なため、NMSの生理的役割は未だ完全には確立できていない。そこで、本年度はラット脳におけるNMSの分布をペプチドレベルで解析した。これまで、視床下部におけるNMSの興味深い機能が示されていたが、本年度の研究にてNMSの脳内分布を明らかにした結果、これまで考えられていなかった、視床下部のNMS産生ニューロンから脳幹への神経線維投射が示唆された。一方、脳幹ではNMSの2型受容体の遺伝子発現が認められた。本年度までのこれらの成果により、脳幹でのNMSの生理的役割が示唆することができたため、本研究計画はおおむね順調に進展していると評価できる。今後も引き続き、免疫組織化学染色によるNMSの脳内分布の解析を推進する。

また、脳内でのNMS産生ニューロンによって構成される神経ネットワークをより明確に示すため、NMS遺伝子プロモーターの制御により蛍光タンパク質を過剰発現するトランスジェニックマウスを作出し、神経ネットワークの解明を試みる。これらに加え、これまでの研究では脳幹でのNMSの機能は明らかになっていないため、脳室内投与や脳幹への直接投与によって、脳幹におけるNMSの機能解析を試みる。また、既に作製済みであるNMSノックアウトマウスを用いて、生理的なNMSの役割を明らかにする。次年度に使用する予定の研究費は、主に旅費及び謝金として計画していたが使用しなかったものであり、これを翌年度は物品費として使用する予定である。本研究計画は、国立循環器病研究センターの保有する共同研究機器ならびに、国立循環器病研究センター研究所生化学部の機器を中心に使用するため、研究を遂行するための物品費(消耗品)を中心として研究費の使用を計画している。また、最新の知識・情報を収集するための調査・研究旅費、ならびに成果発表に関する必要経費の使用も計画している。