hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
節外性と節性濾胞性リンパ腫及びマルトリンパ腫間の網羅的分子病理学的な比較

節外性濾胞性リンパ腫、特に十二指腸症例を検索した。その結果、十二指腸濾胞性リンパ腫例は節性と同様免疫グロブリン遺伝子にon-going mutationは認められたが後者に比べて臨床病期の低くAIDの発現が明らかに低率であることを見出した。また、VHのusageではVH4VH5に偏在していいた。これにより、十二指腸濾胞性リンパ腫は節性と同様の分子発生機転を有しつつもMALTリンパ腫に近似した性格を有することを初めて発見した。診断ファイルに登録されている悪性リンパ腫症例約8000例中より節外性濾胞性リンパ腫、特に十二指腸症例を40例程度抽出し、臨床病理学的検討、通常のCD20,CD79aなどのB細胞マーカー、CD3,CD5などのT細胞マーカーに加えてCD10,MIB-1,bcl2蛋白を検索した。また、bc12遺伝子の再構成(t(14;18)(q21;q23))をPCR法によっても検討を行い、同時平行してクロナリティーの検索にはPCR法を用いた免疫グロブリン重鎖遺伝子の再構成を検索した。クロナリティーが認められたものではダイレクトシークエンス法でのVH遺伝子ファミリーを検索した。この結果、十二指腸濾胞性リンパ腫例は節性のそれと比較して臨床病期の低いこと、骨髄浸潤が低率であることを見出した。また、VHのusageではVH4に偏在していることがあり、これはMALTリンパ腫例に近いことが判明した。さらにt(14;18)では節性と比べてそん色ない転座で、あることがわかった。これにより、十二指腸濾胞性リンパ腫は濾胞性リンパ腫としての基本的免疫遺伝学的発生機転を有しつつもMALTリンパ腫に近似した性格を有することを見出し、学会、学術論文として発表した。マントル細胞リンパ腫については、多発性骨髄腫との関係で検索を開始している。このほかDNAマイクロアレイ(あるいはCGH法を選択することも含めて)では基本的条件設定を追究している。同時に節外性濾胞性リンパ腫、節性濾胞性リンパ腫について十分量を検索できる症例を収集することを進めている。このほかいくつかの悪性リンパ腫における臨床病理学的検討をし、文献報告した。引き続き十二指腸に主座をおく濾胞性リンパ腫について検討を行った。新たな成果として、新規症例ついて検討し、免疫グロブリン遺伝子再構成が見られた症例についてon-going mutationの有無について検索した。またVHファミリーのusageについても追加症例を加えて更に規模を拡大して検討した。その結果、on-going mutationは認められ、節性と同様の分化段階、胚中心細胞に近似した正確があることを確認した。このことから胚中心での細胞選択に重要な濾胞樹状細胞の分布を調べたところ、腫瘍性濾胞では周辺に濾胞樹状細胞が存在するが、全体としての分布はきわめて疎である予想外の結果となった。このような所見は粘膜関連リンパ組織リンパ腫でよくみる所見である。また、on-going mutationやclass switchに重要であるActivation-induced (cytidine)deaminase (AID)の発現を検討したところ、節性濾胞性リンパ腫と比べて明らかに低率な発現しかないことが判明した。このことは、十二指腸濾胞性リンパ腫が非常に特異な存在であることを示唆している。成果はUSCAPの公式雑誌であるModern Patholに投稿受理された。マントル細胞リンパ腫については、新規な知見は得られなかったがcyclin D1強発現で共有した異常を示す多発性骨髄腫でCD79aの発現との関係で興味ある知見があり今後検索予定である。DNAマイクロアレイについては、十分量を用いての検索ができず、他の検索手段を模索するとともに成人T細胞リンパ腫関係について検索しいくつかの知見を得て今後発展させる予定である。このほかいくつかの悪性リンパ腫における臨床病理学的検討をし文献報告した。
コケを用いた壁面軽量緑化パネルの開発

平成17年度は下記の2点についての検討を行った。第一は、コケ植物を用いた壁面用の軽量緑化システムを傾斜した折半屋根に施工した場合の各部温度及び気象条件について実測を行った。尚、比較のため緑化パネルを施工していない折半屋根(以下、緑化無し屋根)を並べて設置し、同じく各部温度の測定を行う。また、気象要素として、日射量、雨量、風速の測定を行っている。測定期間は2005年7月27日から9月30日で、データロガーの不調や台風による測定中断期間を除くと計34日間のデータを得た。また、このシステムは実測終了後も継続して屋外に設置し、コケの生育状況や美観についての確認を行っている。実測の結果、屋根裏面温度(実際の建物ならば、屋根の室内側表面温度に相当する)はコケパネルによる日射遮蔽効果により、日中は大きく低減する事が確認された。また、散水により含水率が高められたコケパネルの表面温度は日中も気温とほぼ同じ値を示すのに対し、コケに蓄えられた水分が蒸発した状態では日中には緑化無しの折半屋根と同程度の高い表面温度を示した。この事から、本測定対象のコケパネルにヒートアイランド現象緩和効果を期待するためには、散水により常に含水率を高く保つ必要があると言えよう。第二には、平成16,17年度の壁面緑化パネルの蒸発特性に関する実験及び実測結果に基づき、これまで筆者らが開発してきた多層都市キャノピーモデルAUSSSMに、壁面緑化の蒸発サブモデルの組み込みを行った。これにより、建物壁面を緑化した場合の気温低減効果が定量的に見積もり可能となった。筆者らは土壌を必要とせず仮根により多孔質体に定着する特性を持つコケ植物を用いた軽量な壁面緑化システムの試作を行った。緑化パネルは、コケを育成させる基盤材と基盤材下部を固定するプラスチック板で構成される。コケはギボウシゴケ科のスナゴケを用いており、コケの中でも特に乾燥に強く直射日光に耐性を持つ。これを蒔きゴケと呼ばれる手法で基盤材に育成定着させている。尚、コケを蒔く前にコケの根からよく土や砂を取り除き、短い仮根が基盤材に定着しやすくしている。コケを育成するための基盤材料としては、カーペット、稲藁、ココナツファイバーシート、感温性吸排水性樹脂、水槽濾過用スポンジ、水槽濾過用綿、不織布を取り上げた。7種類の基盤材料にコケを育成し長期間屋外に設置して、定着の様子を観察した。その結果、カーペット、ココナツファイバーシート、不織布の3種類は、コケの生育・定着が良好であり、基盤材として適していると判断された。作成した試験体の中でも比較的定着が良好であったココナツファイバーシートと不織布を基盤材としる試験体を屋外の鉛直壁面に固定して数ヶ月間自然環境に曝露し、コケの外観変化を観察した。その結果、ココナツファイバーシートを基盤材とする試験体は、定期的に散水を行った場合全面積の約50%のコケが剥離した。これは試験体作成時のコケの定着期間が不十分であった事が理由と考えられる。次に、試験体について蒸発特性(蒸発比-含水率の関係)、熱コンダクタンス-含水率の関係を実験により明らかにした。また、コケの湿潤状態と乾燥状態における日射反射率を測定し入射角依存性を考慮した直達日射反射率の推定式を提案した。第一に、昨年度に引き続きコケ緑化パネルの改良についての検討を行い、生育状況の調査を行った。具体的には、基盤材の異なる複数のパネルを長期屋外に設置し、色や生育状況についての観察を行った。また、コケを基盤材に固定する際の耐久性に問題があった事から、コケ種子をモルタルに混ぜ、スプレーガンで対象壁面に吹き付ける、いわゆる吹き付け工法による施工後のコケ補修の可能性について検討を行った。しかし、酸性のモルタルの影響によりコケが脱色する、という問題が生じたため、この施工方法については更に検討が必要と考えられる。第二に、2つの壁面緑化システム及び昨年度開発したコケによる軽量緑化パネルを対象として表面熱収支及び各部温度に関する観測を行った。測定項目は、気温、湿度、風速、壁面へ入射する日射量、長波長放射量、植物の葉表面温度、葉群層空気温度、土中温度などである。尚、吸湿性の無い材料で壁面緑化システムの表面形状を模擬したSAT計による対流熱伝達率の測定値から、熱収支成分で直接測定が困難な顕熱フラックスを推定し、熱収支残差から潜熱フラックスを同定している。また、緑化システムの縮小試験体を作成し、直接試験対の重量変化を測定する事によりバルクでの蒸発量を推定する方法により、別途測定精度の検定も行っている。観測から壁面緑化の熱特性に関して次の知見が得られた。1)入射角60度以下では日射反射率の入射角依存性は小さく、その平均値は0.1340.146となった。2)葉群層の熱コンダクタンスは概ね風速と正の相関が見られた。3)蒸発比は測定期間を通して0.10.2の範囲内で、季節変化、日変化は小さい。また、日射量と蒸発比の間に相関は見られない。以上の結果から、壁面緑化の熱収支を明らかにした。これにより、都市気候モデルに組み込むための壁面緑化モデルの基礎データが収集された。

第一は、コケ植物を用いた壁面用の軽量緑化システムを傾斜した折半屋根に施工した場合の各部温度及び気象条件について実測を行った。尚、比較のため緑化パネルを施工していない折半屋根(以下、緑化無し屋根)を並べて設置し、同じく各部温度の測定を行う。また、気象要素として、日射量、雨量、風速の測定を行っている。測定期間は2005年7月27日から9月30日で、データロガーの不調や台風による測定中断期間を除くと計34日間のデータを得た。また、このシステムは実測終了後も継続して屋外に設置し、コケの生育状況や美観についての確認を行っている。実測の結果、屋根裏面温度(実際の建物ならば、屋根の室内側表面温度に相当する)はコケパネルによる日射遮蔽効果により、日中は大きく低減する事が確認された。また、散水により含水率が高められたコケパネルの表面温度は日中も気温とほぼ同じ値を示すのに対し、コケに蓄えられた水分が蒸発した状態では日中には緑化無しの折半屋根と同程度の高い表面温度を示した。この事から、本測定対象のコケパネルにヒートアイランド現象緩和効果を期待するためには、散水により常に含水率を高く保つ必要があると言えよう。第二には、平成16,17年度の壁面緑化パネルの蒸発特性に関する実験及び実測結果に基づき、これまで筆者らが開発してきた多層都市キャノピーモデルAUSSSMに、壁面緑化の蒸発サブモデルの組み込みを行った。これにより、建物壁面を緑化した場合の気温低減効果が定量的に見積もり可能となった。
蛋白質のハイブリッド化による成長因子受容体を標的とする細胞増殖阻害分子の構築

カルボキシル基をエチレンジアミン(ED)でアミド化したウシのRNaseAはキャリアードメインなしでも,SV40で悪性化したSwissマウス3T3細胞株(3T3/SV40)に対して強い細胞毒性(GI_<50>=0.17μM)を示すことを昨年報告した。これはEDによるカルボキシル基の修飾でRNaseAがカチオン化され,アニオン性のガン細胞表面に効率よく濃縮されるために細胞に進入しやすくなること,及び導入したEDの立体障害で細胞内のRNaseインヒビターによる酵素活性の阻害を受けなくなることが原因と考えられた。この修飾では,RNase活性も大きく低下するため,今年度はEDによる修飾率を様々に変えたRNaseA誘導体を調製し,修飾率と細胞毒性及びRNase活性の関係を調べた。その結果,修飾率を上昇(カチオン性の増大)させるとRNase活性は単調に低下する(最大で0.2%まで低下)のに対し,細胞増殖阻害活性には最適の修飾率(最適のものはRNase活性が8.8%でGI_<50>が0.06μM)が存在することがわかった。さらに少ないカルボキシル基の修飾でRNase活性の低下を抑えつつかつ効率よく正電荷を導入することが可能かどうかを調べるために,種々の平均分子量を持つポリエチレンイミン1分子をカルボキシル基に導入したRNaseA誘導体を調製したところ,RNase活性は使用したポリエチレンイミンの平均分子量によらずほぼ一定(約25%)だが,細胞毒性は正電荷の増加(∝ポリエチレンイミンの平均分子量)とともに強まることが明らかになった(GI_<50>=3.30.33μM)。以上の結果より,RNase活性の低下を抑えつつ,大きな正電荷を導入したRNaseは,成長因子とハイブリッド化して成長因子受容体を標的とするガン細胞を標的とする細胞増殖阻害剤を構築するための毒素ドメインとしてきわめて有用であると結論した。
スポーツ哲学文献データベースの開発研究

本研究の目的は、英語、ドイツ語、フランス語のスポーツ哲学文献に関する専門的文献データベース(スポーツ哲学文献データベース)を開発することである。このデータベースは、昭和62年に図書館情報大学システム開発センターの大型計算機上で稼働し、昭和63年にパーソナルコンピューター上で稼働する運びとなった。現在の収録文献数はおよそ1,900件。5つの大学でパーソナルコンピュータを介して利用されている。このデータベースの特色は、以下のとおりである。(1)キーワードの作成と評価が、ドキュメンタリストではなくスポーツ哲学を専攻する研究者によって行われることこのデータベースでは、研究者の個々の関心に基づいてキーワードが付与される。これにより、研究者の文献に対する考え方や評価、思想がキーワードに反映されることになる。複数の研究者がキーワードを付与することによって、キーワードの信頼性も高まる。(2)キーワードのポイントを利用した検索やキーワードの評価を行なうことができること(キーワードポイントシステム)にある。このデータベースでは、キーワードにポイントが付けられる。これを利用すれば、ポイント数の多いキーワードが付与された文献を検索したり、キーワードの評価を数量的に行なうことができ、データベースを研究資料として活用することができる。本開発研究の目的は英語,独語,仏語各圏のスポーツ哲学に関する文献データベースの作成にある。この分野に於ける専門的データベースは世界的に見ても例が無いが、さらに加えて本データベース開発研究の特色は、第一にキーワードの作成,評価を従来の様にドキュメンタリストがするのでなく、各該当文献の専攻分野に所属する複数のスポーツ哲学者(出来れば10名以上の)によって為そうとするところにある。第2には、専門的な分野のデータベース故に文献数が限られていることから、ほぼ30年間以上に渡ってデータを蓄積することができ、そのことによって更に各文献の検索回数,利用度等の統計的把握,best key wordsの選択,およびkey wordsの評価等が、経年変化に応じて自動的に行われることにある。このような目的を達成するために、本年度(3年計画の初年度)の課題として、1)データベースへの入力プログラムの開発,2)英語,独語,仏語各圏のスポーツ哲学関係文献の収集,整理,3)図書館情報大学汎用大型コンピュータHITACM-260Hへの書誌データの入力等が設定された。このうち1)の入力プログラムの開発は基本的に終了し、目下入力作業が行われている。しかし、検索システムとの絡みでなお若干の修正が必要である。2)に関しては全体で約3000件の文献情報を収集し、現在整理作業が進行中である。3)このうち英語圏857,独語圏524,仏語圏174,計1557件の書誌データが大型コンピューターに入力済みである。現在は、未入力文献の入力作業と1960年以前の文献及び1986年度の文献について収集と整理の作業が平行して行なわれている。本開発研究の目的は英語,ドイツ語,フランス語のスポーツ哲学文献に関する文献データベースを作成することである.その特色は, (1)キーワードの作成および評価が,ドキュメンタリストではなく,スポーツ哲学を専攻する研究者によって行なわれること,(2)文献の検索回数や利用度の統計的把握とベストキーワードの選択,キーワードの評価が経年変化に応じて自動的に行なわれること(キーワードポイントシステム)にある.本年度の研究成果ならびに今後の展望は以下の通りである.1)昭和62年度分の英語,ドイツ語,フランス語文献の収集と選択を終え,書誌事項を作成しコンピュータに入力した.2)これまで入力された文献の一部にキーワードが付与された.3)前年度からの課題であった入力システムの修正を終え,予備的な検索システムを開発した.4)日本体育・スポーツ哲学会第8回大会において研究発表を行ない,キーワードポイントシステムについて多数の賛同を得た.賛同者には協力者としてキーワードの付与を依頼した.今年度は協力者の約1割がキーワードを付与したにすぎない.協力者を量的に増加させることも含めて,目下解決策を検討中である.5)データベースをパーソナルコンピュータで稼働させる可能性について検討した.言語別にファイルを管理すれば可能であることが判ったので,パイロットデータベースを作成した.予め計画されていなかったことであるが,今後この方向での開発研究も同時に行なっていく予定である.本研究の目的は、英語、ドイツ語、フランス語のスポーツ哲学文献に関する専門的文献データベース(スポーツ哲学文献データベース)を開発することである。

このデータベースは、昭和62年に図書館情報大学システム開発センターの大型計算機上で稼働し、昭和63年にパーソナルコンピューター上で稼働する運びとなった。その特色は、(1)キーワードの作成と評価が、ドキュメンタリストではなくスポーツ哲学を専攻する研究者によって行なわれること、(2)キーワードのポイントを利用した検索やキーワードの評価を行なうことができること(キーワードポイントシステム)にある。本年度の研究成果は、以下のとおりである。1)昭和63年度分の英語、ドイツ語、フランス語文献の収集と選択を終え、書誌事項を作成しコンピュータに入力した。現在の収録文献数はおよそ1,900件である。2)これまで入力された文献の一部にキーワードが付与された。3)データベースをパーソナルコンピュータで稼働させることができた。5つの大学で利用されている。4)キーワードポイントシステムと、それを管理するシステムがパーソナルコンピュータ上で稼働した。5)日本体育・スポーツ哲学会会員から多くのキーワードがよせられている。キーワードポイントシステムが構想どおりの成果をだすのは、10年ないし20年先のことになると思われる。今後の成果が期待される。
コンボルーション法によって得られる高エネルギーX線吸収線量の計算精度を高める方法

トリプレット・エネルギー・エックス線(4、10,15MV)を発生するリニアック装置を用いて、以下の実験的・理論的研究を行った。1.透過X線強度データに基づいて、X線スペクトルを求める方法、並びにその計算ソフトを開発した。これにより、楔、補償ブイルターなどの設置による一次X線スペクトル変化及び被照射体内での一次X線スペクトル変化の評価を容易にし、精密な線量計算が可能となった。2.X線スペクトルに基づいて、水中での減弱係数を数式化し、零照射野TMR(組織最高線量比)を関数化した。この関数式に入る諸定数の一部は、一次線量及び散乱線量拡散分布関数を組み立てる際に利用された。3.水ファントム及び3層コルクファントム内でのTPR(組織ファントム線量比)を各種照射野に対して測定した。水ファントム及び3層コルクファントム内での線量OCR(軸外線量比)を各種照射野に対して測定した。これら二つの測定データは、コンボルーション法による線量計算に必要な基本関数(一次線量拡散分布関数,散乱線量拡散分布関数、電子汚染強度関数、コリメータOCR関数)の決定に利用した。4.主コリメータの遮蔽効果を表す「コリメータOCR」を導入した。他方,無限照射野を想定したX線強度分布を「線源OCR」の導入で試みた。有限な照射野における入射X線強度は、「線源OCR」と「コリメータOCR」の積でもって表すことを提案した。5.マルチリーフコリメータ(MLC),懊,遮蔽ブロック,カウチなどを被照射体の一部と見なして線量計算する方法を提案した。6.一次線量拡散分布関数式,散乱線量拡散分関数式が共に解析的に積分可能であることを利用し、3次元線量計算ソフトの高速化を試みた。本大学病院に設置されているトリプレット・エネルギー4MV、10MV及び15MVエックス線を発生するリニアック装置を用いて研究を行った。コンボルーション法による線量計算に必要な基本データは種々あるが、平成13年度では、X線スペクトルの取得に重点を置いた。X線は連続スペクトルであるので、人体、楔、補償フィルターなどを通過するとき、線質変化を起こす。このため、X線スペクトルの取得は非常に重要である。X線スペクトルの取得に関して、次の理論的並びに実験的研究を行った。1.媒体厚の関数として表した透過X線強度データに基づいて、X線スペクトルを求める計算ソフトを開発した。2.アクリル製ビルドアップキャップを被せた電離箱を用いて、各種媒体(アルミ、アクリル及び水等価物質)の厚さの関数として測定した透過X線強度データに基づいて、ライナックX線のスペクトルをビーム中心軸からの距離の関数で求めた。3.上記で得られたX線スペクトルを用いて、鉛の媒体を通過する際のX線強度を計し、これを実測と比較し、得られたX線スペクトル精度を確かめた。4.計算されたX線スペクトルに基づいて、水中での減弱係数をビーム中心軸からの距離及び深さの関数で数式化する(本年度中の課題)。5.ビーム中心軸からの距離の関数でもって、水中での零照射野TMR(組織最高線量比)を関数化する(本年度中の課題)。本大学病院に設置されているX線(4MV、10MV、15MV)

照射装置を用い、コンボルーション法による線量計算に必要な基本データ(一次線量拡散分布、散乱線量拡散分布、電子汚染強度)の取得のために、水等価ファントム、コルク不均質ファントムを用いて得られた線量データを解析することによって、コンボルーション法による線量計算に必要な基本データ(一次線量拡散分布、散乱線量拡散分布、電子汚染の線量拡散分布)の取得を行った。本年度はさらに、入射X線スペクトルの決定法に精力を傾けた。入射X線スペクトルをビーム中心軸軸からの距離の関数で表し、これに基づいて、以下の事項を遂行した。(1)水中での減弱係数をビーム中心軸からの距離及び深さの関数で数式化した。(2)ビーム中心軸からの距離の関数でもって、水中での零照射野TMR(組織最高線量比)を関数化した。(3)楔、補償フィルター設置による一次X線スペクトル変化の評価を可能にした。(4)被照射体内での一次X線スペクトル変化の評価を可能にした。コンボルーション法による線量計算の精度をさらに高めるために、以下の事項をも検討した。(1)コンボルーション法による線量計算に必要な基装置から出るX線強度分布を決めるために、「線源X線強度分布関数」及び「コリメータ効果関数」の導入(2)楔・補償フィルター、遮蔽ブロック、マルチリーフから出る散乱X線に起因する線量を考慮した基本計算ソフトを開発本年度の研究実績を箇条書きにして、以下に述べる。(1)本医学部付属病院に設置されているライナックX線(4MV、10MV、15MV)を用い、入射X線スペクトルの決定法を確立した。これによって、楔、補償フイルター設置による一次X線スペクトル変化及び被照射体内での一次X線スペクトル変化の評価を容易にし、精密な線量計算が可能となった。(2)同様に、水ファントム及び3層コルクファントム内でのTPR(組織・ファントム線量比)並びにOCR(軸外線量比)を測定した。これらの測定データは、コンボルーション法による線量計算に必要な基本データ(一次線量拡散分布関数、散乱線量拡散分布関数、電子汚染強度関数、コリメータOCRなど)の決定に用いた。(3)ライナックX線の入射強度分布を決めるために、「線源X線強度分布関数(線源OCR)」及び「コリメータ遮蔽効果関数(コリメータOCR)」の導入方法を確立した。(4)線量計算ソフトの開発に入った。本格的なソフトは、計算速度が非常に遅いので高速化の試みをした。(5)クラークソン法を積極的に取り入れて、さらなる高速化を目指す開発にも着手した。この計算原理は、岩崎の開発した一次線量拡散分布式及び散乱線量拡散分布式が解析的に積分可能であることを利用している。トリプレット・エネルギー・エックス線(4MV,10MV,15MV)を発生するリニアック装置を用いて,以下の実験的・理論的研究を行った.1.X線スペクトルに基づいて,水中での減弱係数をビーム中心軸からの距離及び深さの関数で数式化した.これを用いて,ビーム中心軸からの距離の関数でもって,水中での零照射野TMR(組織最高線量比)を関数化した.2.主コリメータの遮蔽効果を表す「コリメータOCR」の導入方法を確立した.これは,円形照射野の関数としたコリメータ散乱係数(S_c)にセクター法を適用して求める.他方,無限照射野を想定したX線強度分布の評価は,「線源OCR」の導入で行った.アクリル,アルミ,鉛ビルドアップキャップでの空中線量の測定値にX線スペクトルの軸外距離による相違を考慮すると,いずれのビルドアップキャップに対してもほぼ同じ線源OCR曲線が得られた.有限な照射野における任意点での入射X線強度は,軸外距離の関数である「線源OCR」と「コリメータOCR」の積でもって表す.3.マルチリーフコリメータ(MLC),楔,遮蔽ブロック,カウチなどを被照射体の一部と見なして線量計算する方法を開発した.
マウス初期胚発生におけるエピゲノム形成と細胞分化

マウス初期胚由来胚性幹細胞(ES細胞)および栄養膜幹細胞(TS細胞)と体細胞組織の比較により、それぞれの幹細胞に特徴的なDNAメチル化状態を示すゲノム領域を同定した。得られたDNAメチル化情報などに基づき、核移植クローン胚由来TS細胞は正常胚由来TS細胞と同等であることを示した。また、初期胚発生において、DNAメチル化プロフィールは形態的な細胞分化のあとで形成されることを明らかにした。ほ乳類ゲノムDNAには、細胞種によってメチル化状態の異なる領域(T-DMR)があり、そのメチル化/非メチル化の組合せが細胞種に固有のゲノムDNAメチル化プロフィールを形成する。DNAメチル化プロフィールは細胞種固有のトランスクリプトームを規定し、細胞分化の基盤になっている。マウス胚の細胞は、最初の細胞分化により内部細胞塊と栄養外胚葉とに分かれ、胚盤胞を形成する。DNAメチル化を含めたエピゲノム情報が割球運命の決定や維持の基盤になっていることがうかがわれる。マウス胚盤胞から得られる培養幹細胞の分化能の制御にも、ゲノムDNAメチル化プロフィールを含むエピジェネティック情報(エピゲノム情報)の関与が予測される。我々は、ES細胞やTS細胞を含む幹細胞のDNAメチル化解析を行ってきた。本研究計画では、これら幹細胞のゲノムDNAメチル化解析をさらに発展させることに加え、このような細胞系譜特異的なDNAメチル化プロフィールが、発生や細胞分化の過程でいつどのように形成されるのかを明らかにすることを目的とする。我々は、ES細胞とTS細胞でメチル化状態に顕著な差がある領域(T-DMR)をおよそ20カ所同定している。これらのDNAメチル化の違いが、それぞれの幹細胞が由来する内部細胞塊(ICM)と栄養外胚葉(TE)においても見られるのかどうかを検討することがひとつの目的である。トリプシン/パンクレアチン溶液を用いることで、胚盤胞の解離条件を設定することに成功し、ICMとTEを単離する手法を確立した。100-200個の細胞を用いたDNAメチル化解析法の検討が進行中である。また、ゲノムワイドなDNAメチル化解析のために、メチル化感受性制限酵素処理による切断断片のPCRによる増幅と、DNAタイリングアレイとを組み合わせた新たな手法(D-REAM法)も確立した。げっ歯類が持つプロラクチンファミリー遺伝子の多くは胎盤で発現し、妊娠の維持などに関わるが、D-REAM法により、その全ての遺伝子が胎盤で低メチル化となるT-DMRを有することが明らかになった。さらに、分化前後のTS細胞の比較では細胞周期のM期進行に関わる遺伝子に多くT-DMRが見つかり、これらの遺伝子のDNAメチル化による制御機構の存在が示唆された。以上に加え、ES/TS細胞でともに未分化時に強く発現するLin28に注目し、そのES細胞における機能解析を行った。マウスはLin28SAとLin28Bの配列のよく似た遺伝子を持つ。shRNAを用いたノックダウン解析により、予想外に、Lin28A発現レベルの低下がOct4発現の上昇を誘起することがわかった。-方、Lin28Bの発現低下はOct4発現の低下をおこし、これらの因子がOct4の発現に対し逆の作用を持つことが明らかとなった。ほ乳類胚の細胞は、胚盤胞形成に伴う最初の細胞分化により、栄養芽層(TE)と内部細胞塊(ICM)を構成する2つの細胞集団に分かれる。TEの細胞は将来主に胎盤を構築し、一方ICMの細胞は全ての体細胞と生殖細胞へと分化する。我々は、TEおよびICMからそれぞれ樹立されたTS細胞とES細胞でメチル化状態に顕著な差があるゲノム領域(TS-EST-DMR)をおよそ20ヵ所同定している。本研究は、これらのT-DMRのメチル化を指標に個体発生における最初の細胞分化とDNAメチル化プロフィール変化との関係を明らかにすることを1つの目的とする。本年度はまずいくつかのTS-EST-DMRについて、胎生6.5日胚のエピブラスト(ICM由来組織)と胚体外外胚葉(TE由来組織)におけるDNAメチル化状態をバイサルファイトシークエンス法で解析した。解析したいずれのT-DMRにおいても両組織間に差があり、in vivoにおいても両細胞系列のエピジェネティック・マーカーとして有効であることが示された。そこで、昨年度確立したTEとICMを分離する手法によりそれぞれを単離し、DNAメチル化状態を解析したところ、いずれのT-DMRもほぼメチル化されていない状態にあることが判明した。すなわちこの結果は、形態的なTE/ICMの分化が起こった後にそれぞれに固有のDNAメチル化プロフィールが確立されることを示唆する。本年度はまた、ゲノムワイドDNAメチル化解析法であるD-REAM法を用いた解析も用いることにより、クローンマウス胚由来TS細胞がコントロールTS細胞と同等の性質を有していることを示し報告した。さらに、体細胞にくらべES細胞で特異的に低メチル状態であるT-DMRが存在すること、それらのメチル化情報を指標にiPS細胞をES細胞と区別できること、iPS細胞のキメラ形成能を推測できること、などを新たに報告した。

ほ乳類胚の細胞は、胚盤胞形成に伴う最初の細胞分化により、栄養芽層(TE)と内部細胞塊(ICM)を構成する2つの細胞集団に分かれる。TEの細胞は将来主に胎盤を構築し、一方ICMの細胞は全ての体細胞と生殖細胞へと分化する。この分化運命の制限は、TEおよびICMからそれぞれ樹立されるTS細胞とES細胞でも良く保存されている。今年度も、我々が同定していたTS細胞とES細胞でDNAメチル化状態に顕著な差があるゲノム領域(TS-ES T-DMR)に焦点を絞り、発生過程におけるメチル化状態の変化を継続して解析した。その結果、解析することができたいずれのゲノム領域においても、着床前の胚盤胞(3.5日、および、4.5日胚)ではほぼメチル化されておらず、形態的なTE/ICMの分化が起こった後にそれぞれに固有のDNAメチル化プロフィールが確立されることがより明瞭に示された。また、これらのTS-ES T-DMRと相同なヒトゲノム領域のDNAメチル化状態をヒトES細胞-ヒト胎盤間で比較し、メチル化に差があることを発見した。すなわちこれらのゲノム領域のDNAメチル化制御は、種間を越えて保存されていることが考えられる。本年度はまた、体細胞と比較してES細胞で低メチル化であるT-DMR周辺の配列上の特徴を精査し、これらのT-DMRの周辺では反復配列のSINEが有意に豊富で、逆にLINEが少ないといった新たな特徴を見いだし報告した。こうした特徴を持つT-DMRはES細胞特異的転写産物(ECAT)の遺伝子座にも見られ、また、ゲノム全体における頻度よりもCpG配列が豊富であることもわかった。これらは、多能性幹細胞のエピゲノムを特徴付ける、新たな知見である。これまでの研究により、ヒトとマウスに共通して栄養膜細胞系列・胚体細胞系列間でDNAメチル化状態の異なるゲノム領域(T-E T-DMR)を同定し、これらが着床前のマウス胚盤胞(3.5日、および、4.5日胚)ではほぼメチル化されておらず、形態的なTE/ICMの分化が起こった後にそれぞれに固有のDNAメチル化プロフィールが確立されることを示してきた。今年度はさらに、着床遅延胚、接着培養胚盤胞、および、非接着培養胚盤胞についてDNAメチル化解析を行った。その結果、ほとんどメチル化されていない3.5日胚盤胞に対し、接着培養胚盤胞、非接着培養胚盤胞ではメチル化の上昇がみられ、T-ET-DMRにおける細胞系譜特異的なDNAメチル化は、体外培養胚盤胞では起こっていることが推測された。一方、着床遅延胚ではほとんどメチル化の上昇がみられなかった。着床遅延胚では形態的にも3.5日胚盤胞の状態がほぼ保たれているのに対し、培養胚盤胞では栄養膜細胞の分化が進行していると考えられることから、T-ET-DMRにおける栄養膜細胞系譜特異的なDNAメチル化は時間の経過に伴って自動的に生じるのではなく、栄養膜細胞の分化の進行に伴っているものと結論した。以上の成果をまとめ、国際誌に報告した。これに加え、マウスSry遺伝子上流領域の非CpG配列のメチル化が転写調節に関わること、および、マウスGsg2/Haspin遺伝子の発現がDNAメチル制御下にあることもそれぞれ報告した。
コーポレートガバナンスにおける株主代表訴訟と社外取締役の機能

(1)委員会等設置会社の社内体制の強化のためには、社外取締役だけでは不十分であるので、アメリカ法が採用する「独立取締役」を検討し、日本にも独立取締役制度を導入すべきことを主張した。米国の独立取締役は、特別訴訟委員会に由来するが、デラウエア州会社法の判例を分析すると、サーベンス・オクスレー法以後その独立性は厳格になって来ている。また、経営監査の実効性を確保するには、独立取締役が経営者の影響から排除されることが必要であるので、米国ではどのような規制が採られ、いかなる提案がなされているかを検討した。例えば監査委員会には最低1名の会計専門家が含まれることが要求され、全米取締役協会は、独立した取締役候補者のデータベースを用意している。カリフォルニア州公務員退職基金は、「主任独立取締役」のガイドライン等を提唱している。(2)ドイツでは監査役会が取締役を任命するという2層制の制度を採用している。監査役会の半数は社外の者である。1994年以降ドイツ企業の国際競争力の強化を目的として頻繁な小改正が行われているが、重要な改正はコントラクト法によりなされた監査役会と決算監査人との連繋である。透明性開示法はこれを強化すると共に、上場会社に対しドイツ・コーポレート規準に応じているか否かを附属説明書で開示すべきものとしている。さらに貸借対照表改正法参事官草案、貸借対照表監督法参事官草案が公表されている。後者は米国のエンロン事件等のスキャンダルを契機としてドイツ会計監査機関等を新設しようとしている。(3)イタリアでは2003年1月17日の立法命令により、株式会社法が大改正された。会社の機関に関しては、従来の方式、2層制および単層制の選択主義を採用されている。2層制はドイツ方式を採用したものであり、単層制は、アメリカ方式を採用したものである。取締役会の3分の1が独立取締役とされ、代表訴訟も導入された。各国のコーポレート・ガバナンスは各国の事情に応じてそれぞれ異なっている。例えばフランスでは1995年のVienot委員会報告書(95年報告書・99年報告書)を経て2001年改正がなされているし、ドイツでは2002年にCromme委員会によりドイツ・コーポレート・ガバナンス・コーデックスが公表され、同年5月には透明性・開示法が可決され、上場会社の取締役会・監査役会は、勧告を考慮したかどうか毎年公表しなければならなくなった。後者コーデックスを解説する著書が最近何冊か公表されるに至っているので、本年度中に紹介したい。他方アメリカでは、取締役会の中に報酬委員会・指名委員会・監査委員会そして訴訟委員会が置かれ・訴訟委員会は全員が社外取締役から構成されている。訴訟委員会は訴訟内容を審査し、請求を免除すべきか、提訴が必要かを判断する。裁判所は、この判断を尊重し、訴訟委員会の独立性および誠実性のみを審査対象とする。1984年アロンソン事件では、裁判所の判断が必要となるのは「請求免除(demand excused)の判断のみで、請求が必要(demand required)の場合には経営判断の原則が適用されるとした。このような状況が続いた結果取締役会の社外取締役は75%と多数を占めるようになっている。これらの研究を深化させ、研究報告書にまとめるのが本年度の目標である。(1)米国では、株主代表訴訟に関連して、特別訴訟委員会が重要である。アメリカでは「会社が損害賠償を求める訴訟を起こすか否かは、他の経営問題と同様、取締役会にその決定権がある」という考えを採用している。

株主が取締役会に対し事前請求をせずに、代表訴訟を直接裁判所に起こした場合、取締役会は当該訴訟の却下を裁判所に申し立てすることができる。一方株主は、取締役会が訴訟に直接の利害関係を有し、いかなる提訴請求も自らの利益のために却下する危険性が高いことを立証すれば、取締役会への提訴請求は、免除される。その結果、株主はこの無益性を主張して直接裁判所に訴状を提出することも多い。裁判所は原告が提訴請求の無益性を立証できない場合には、会社側の訴え却下の申立を認める。裁判所が原告の主張する提訴請求の無益性を認めた場合、会社は取締役会が訴訟を提起するか、訴訟に利害関係のない取締役から構成される特別訴訟委員会を指名して、提訴の是非を判断させる。この際重要なのは、独立した弁護士の法的助言及び指導により特別訴訟委員会の調査がなされるているか否かである。模範事業会社法第7.44条(b)項2号は、特別訴訟委員会が2名以上の独立した取締役により構成されることを規定している。(2)ドイツでは監査役会が取締役を任命するという2層性の制度が採用されている。監査役会の半数は社外の者ある。1994年以降ドイツ企業の国際競争力の強化を目的として頻繁な小改正が行われているが、重要な改正はコントラック法によりなされた監査役会と決算監査人との連繋である。透明性開示法はこれを強化すると共に、上場会社に対しドイツ・コーポレート規準に応じているか否かを附属説明書で開示すべきものとしている。さらに貸借対照表法改正法参事官草案、貸借対照表監督法参事官草案が公表されている。後者は米国のエンロン事件等のスキャンダルを契機としてドイツ会計監査機関等を新設しようとしている。
生命のシステム的理解に向けたゲノム研究推進のための総合的基盤構築

4つの委員会及び拡大委員会を設置運営し、他3領域と連携した大規模支援の調整をおこなった。5年間の大規模ゲノム配列解析、トランスクリプトーム解析、ヒトゲノム多型解析、データベース構築・公開支援による成果の中には、例えばゲノム解析ではメダカ(Nature 2007)、ナメクジウオ(Nature 2008)、野生由来マウス、ギボシムシ、立襟べん毛虫、さらにはクマムシや多数の細菌種、さらにはヒト腸内細菌叢などのメタゲノム解析、疾患関連遺伝子では2型糖尿病(Nat. Genet. 2008)、ナルコレプシー(Nat. Genet. 2008)、脳動脈瘤(Nat Genet. 2008)など、わが国の特色を生かしたり、研究コミュニティの総力を結集したものも多数見られる。ゲノム科学にとって必須の活動であることを示すことができた。計画班、支援班担当の研究グループの研究レベルを高く維持すること、そして、他領域との連携でタイムリーな支援ができるように調整をおこなうため、2月の4領域合同班会議に合わせて領域の班会議をもち、研究内容の交流と共に支援活動の内容の情報交換をおこなった。そして、支援内容について審議するために総括班に次の4つの委員会をおき、2005年4月からの研究開始に備えた。1)DNAシーケンシングセンター委員会、2)トランスクリプトーム解析委員会、3)ヒト多型タイピングセンター委員会、4)情報解析・成果公開支援委員会これらの委員会では委員長のもと、関連する計画研究・支援班担当者、特定領域ゲノム4領域の関連する研究者及び評価委員などで組織し、4領域から支援要望を募り、緊急度、重要度などを審議して支援の順位などを決定することとした。機動的に進めるために、この決定をもって支援は進めるが、その内容は、速やかに本総括班メンバーに回報すると共に、4領域全体を統括する「生命システム情報」総括班に報告し今後の対応についての意見を求める。このようにして、機動的かつ妥当な支援事業となるように努めることを決定した。広報については、「生命システム情報」総括班と連携し、成果の公開・広報を開始した。(1)以下の4つの委員会を設置し、支援内容について審議を開始した。・DNAシーケンシングセンター委員会・トランスクリプトーム解析委員会・ヒト多型タイピングセンター委員会・情報解析・成果公開支援委員会(2)領域代表のもとに事務局をおき、連絡調整の体制を整えた。(3)合同班会議と同時に計画研究班会議(計画研究代表は全員総括班会議に参加)を開き、各班の具体的な目標、課題を確認した。また、ゲノム特定他3領域への支援・連携の技術的課題を検討した。(4)特定領域ゲノム4領域を統括する「生命システム情報」領域総括班会議に領域代表が参加し、領域全体の意見・希望・課題を聞き、本領域の方針を説明し、連携方策を検討・策定した。また、本領域が支援を中心とするものであってゲノム特定には必須なものではあるが、特定領域としては異質の設計であることから、本領域を適切に評価する方法について引き続き検討し、関係各方面に十分説明し働きかけることとした。(5)計画研究、支援班担当者は連携する他3領域の班会議に参加し、打ち合わせなどを進めた。1.以下の4つの委員会を設置し、支援内容について審議を進めた。(1)DNAシーケンシングセンター委員会(2)トランスクリプトーム解析委員会(3)ヒト多型タイピングセンター委員会(この拡大版として多型データ活用のための拡大委員会を置き、この下に作業部会として、データベース構築委員会、倫理問題検討委員会、データアクセス委員会を設置した)(4)情報解析・成果公開支援委員会2.領域代表のもとに事務局をおき、連絡調整の体制を進めた。(1)合同班会議と同時に計画研究班会議(計画研究代表は全員総括班会議に参加)を開き、各班の具体的な目標、課題を確認した。(2)特定領域ゲノム4領域を統括する「生命システム情報」領域総括班会議に領域代表が参加し、領域全体の意見・希望・課題を聞き、本領域の方針を説明し、連携方策を検討・策定した。また、本領域が支援を中心とするものであってゲノム特定には必須なものではあるが、特定領域としては異質の設計であることから、本領球を適切に評価する方法について引き続き検討し、関係各方面に十分説明し働きかけることとした。(3)計画研究、支援班担当者は連携する他3領域の班会議に参加し、打ち合わせなどを進めた。(1)4つの委員会(DNAシーケンシングセンター委員会、トランスクリプトーム解析委員会、ヒト

多型タイピングセンター委員会、情報解析・成果公開支援委員会)を設置し、支援内容について審議等を進めた。応用ゲノム疾患グループと基盤ゲノムタイピングセンターの協力によって産生される大量のGWASデータを活用するため及び応用ゲノム班員間で共有できるデータベースの構築のためにヒト多型タイピングセンター委員会の下に多型データ活用のための拡大委員会を置き、本年度末の追加配分によるGWAS解析の具体策を講じた。(2)領域代表のもとに事務局をおき、連絡調整の体制を整え、ゲノム特定全体の事務局と連携した。(3)計画研究班会議(計画研究代表は全員総括班会議に参加)を開き、各班の具体的な目標、課題を確認した。また、ゲノム特定他3領域への支援・連携の技術的課題を検討した。(4)特定領域ゲノム4領域を統括する「生命システム情報」領域総括班会議に領域代表が参加し、領域全体の意見・希望・課題を聞き、本領域の方針を説明し、連携方策を検討・策定した。(5)計画研究、支援班担当者は連携する他3領域の班会議に参加し、打ち合わせなどを進めた。(1) 4つの委員会(DNAシーケンシングセンター委員会、トランスクリプトーム解析委員会、ヒト多型タイピングセンター委員会、情報解析・成果公開支援委員会)を設置し、支援内容について審議等を進めた。昨年に引き続き、ヒト多型タイピングセンター委員会の下に多型データ活用のための拡大委員会を置き、GWAS解析の具体策を講じた。(3)特定領域ゲノム4領域を統括する「生命システム情報」領域総括班会議に領域代表が参加し、領域全体の意見・希望・課題を聞き、本領域の方針を説明し、連携方策を検討・策定した。また、本領域が支援を中心とするものであってゲノム特定には必須なものではあるが、特定領域としては異質の設計であることから、本領域を適切に評価する方法について引き続き検討し、関係各方面に十分説明し働きかけることとした。(4)計画研究、支援班担当者が連携する他3領域の班会議・個別会議等に参加し、打ち合わせを進めるようにした。(5)最終年度にあたり、成果報告書をとりまとめた。
英語教育を土台にした異文化トレーニング方法に関する実証的基礎研究

グローバル化が叫ばれている中、今後の英語教育において、異文化トレーニングを取り入れた授業はより重要視されてゆくと考えられるため、より実践的な方法であるカルチャー・アシミレーター法を取り入れた英語教育を実施する。同訓練法を取り入れた異文化コミュニケーション教育は主観的には有効であるとされているものの、現時点では客観的なデータが極めて少ない。このため、同訓練法を取り入れた異文化コミュニケーション教育の有効性に関する実証研究を行う。
代謝ストレス応答を介したアストロサイトの糖尿病性脳症に対する保護機構の解明

高グルコース環境は培養アストログリアにおいてminor pathwayの1つHBP亢進に伴ってERストレスを惹起し、Keap1/Nrf2システムを介して別のminor pathwayであるPPPの律速酵素glucose 6-phophate dehydrogenaseを誘導する。糖尿病における炎症の関与が知られているが、LSP刺激がMAPKを介してPPPを活性化することは、アストログリアのTLR4刺激を介した細胞障害に対する保護機構と考えられた。ケトン体産生はアストログリアにおいて高率で、神経細胞のTCAサイクルのエネルギー代謝を維持する可能性が示唆された。糖尿病における炎症反応の関与が注目されている。虚血性神経細胞障害において、内因性LPSリガンドが神経系細胞に発現するTLRsに作動し、種々のpro-inflammatory responseを惹起することが知られており、TLR4のノックアウトマウスでは梗塞巣が縮小することが報告されている。TLR4はニューロンのみならず、グリア系細胞にも発現が確認されており、特にmicrogliaにおいては、TLR4刺激がニューロンに傷害作用をもたらすことが知られている。しかし、同じグリア系細胞であるastrogliaにおけるTLR4の作用は十分に検討されていない。また糖尿病における臓器障害におけるTLR4の関与、特に脳における作用はほとんど検討されていない。今回、培養astrogliaにLPSを添加したところ、PPP活性化が生じることが明らかとなった。PPP活性制御にはphase 2 detoxifying/antioxidant enzymesのマスターレギュレーターであるKeap1/Nrf2システムが関与し、Nrf2が核移行することで酵素合成が誘導される。核移行促進因子の1つにNrf2リン酸化が想定され、Nrf2はMAPKのリン酸化基質であることが知られている。LSP刺激がMAPKを介してPPPを活性化することは、astrogliaのTLR4刺激を介した炎症性神経細胞障害に対する保護機構と考えられた。高血糖状態における酸化ストレスの増強に対して、脳の内因性保護機能をもたらすペントースリン酸経路(pentose-phosphate pathway, PPP)活性制御には2つの主要なメカニズムが作動することを示した。すなわち、急性のグルコース濃度変化に対するallosteric regulationと亜急性慢性のグルコース濃度変化に対するphase 2 detoxifying enzymesのマスターレギュレーターであるKeap1/Nrf2システムによる制御である。後者については、通常は細胞質内で速やかに分解される転写因子Nrf2とKeap1複合体が解離しNrf2が核移行することで酵素合成が誘導される。核移行促進因子の1つにNrf2リン酸化が想定され、Nrf2自身が小胞体(endoplasmic reticulum, ER)ストレス下のトランスデューサーであるリン酸化酵素PERKの基質であることが報告されている。高グルコース環境は培養アストログリアにおいて、解糖系のminor pathwayの1つヘキソサミン生合成経路(hexosamine biosynthesis pathway, HBP)亢進に伴ってERストレスを惹起し、さらにKeap1/Nrf2システムを介して別のminor pathwayであるPPPの律速酵素glucose 6-phophate dehydrogenaseを誘導する可能性がある。総じてアストログリアのグルコース代謝応答による神経保護作用が示された。脳はグルコースを唯一のエネルギー基質としてその酸化的代謝によってATPを産生し機能を維持する。骨格筋や心筋は脂肪酸が主なエネルギー基質であることと対照的である。しかし、脳にも脂肪酸の取り込みのためのトランスポーターが存在し、脳の脂肪酸代謝の役割が注目されている。今回、培養アストログリアとニューロンにおける脂肪酸の酸化的代謝を[1-14C]palimiticacidから産生される14CO2を用いて、また14Cでラベルされたacid-soluble fraction産生をケトン体として測定し、その代謝調節を検討した。また非アイソトープ法によりケトン体としてacetoacetate、β-hydroxybutyrateを個々に測定し、低酸素下におけるアストログリアにおけるケトン体産生の調節機序およびその利用の可能性を検討した。アストログリア、ニューロンともに脂肪酸のTCAサイクルにおける酸化的代謝はグルコース利用の1%程度であり、大部分はケトン体に変換された。ケトン体産生はアストログリアにおいて高率であり、これは低酸素下におけるAMPK活性化に依存した。低酸素後のニューロンは乳酸よりケトン体を高率に利用することで、再酸素化後のTCAサイクルのエネルギー代謝を維持する可能性が示唆された。脳卒中昨年度における計画通りに、TLRを介したastrogliaの脳保護機構を予測し、TLR4リガンドであるLPSに対する培養astrogliaの反応を、PPP活性化およびその制御機構としてのKeap1/Nrf2システムの活性化として具体的に示すことができた。、また両者をつなぐシグナル経路としてMAPKによるNrf2リン酸化を明らかにすることができた。高血糖環境におけるアストロサイトの反応について、仮説にしたがってペントースリン酸経路(PPP)の活性化が示され、その保護作用が確認された。

この基盤となる2つの制御メカニズムが明らかにされた。糖尿病に付随するインスリン抵抗性や、低血糖は脳に対する障害因子として作用するが、脳の有する内因性の保護物質としてケトン体(KB)の機能を検討する。肝臓で産生・供給される"外因性"KBは脳のエネルギー基質となることが古くから知られているが、今回は脳内で産生される"内因性"KBに注目し、特にastrogliaのKB産生制御メカニズムを明らかにし、astroglia由来の"内因性"KBがもたらすneuron保護作用を証明する。糖尿病における炎症の関与が注目されている。炎症性細胞障害において、内因性リガンドが神経系細胞に発現するtoll-like receptors(TLRs)に作動し、種々のpro-inflammatory responseを惹起することが知られており、TLR4のノックアウトマウスでは炎症性の中枢神経疾患の一つと考えられる虚血性神経障害において、梗塞巣が縮小することが報告されている。TLR4はニューロンのみならず、グリア系細胞にも発現が確認されており、特にmicrogliaにおいては、TLR4刺激がニューロンに傷害作用をもたらすことが知られている。しかし、同じグリア系細胞であるastrogliaにおけるTLR4の作用は十分に検討されていない。今後はアストロサイトと炎症反応という視点で糖尿病性神経障害を検討していく。培養アストログリアおよびニューロンにおける高グルコース環境とTLR4の関連を明らかにする。まず内因性TLR4リガンドであるlipopolysaccharide(LPS)が各々のPPP活性を変化させるか否かを検討する。次にLPSによるPPP活性化が、Keap1/Nrf2システムを介したものであるか否かをNrf2ノックアウトマウスから調整した培養細胞を用いて検討する。最後にTLR4への内因性リガンド刺激がNrf2のリン酸化を惹起するメカニズムを検討する。想定いているのはTLR4→MAPKのシグナル系であり、薬理学的に阻害薬を組み合わせて、WBによるNrf2のリン酸化を検討していく。