hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
青少年の生活習慣病予防医療を目的とした地域連携型研究・教育システムの構築

科研費補助金交付3年目は、長野県内3中学校の学校健診で生活習慣病の調査研究を継続し、以下の実績を得た。1.科学的エビデンスの構築:低出生体重(2500g未満)の生徒は、男子で血清尿酸値が、女子で血清中性脂肪、空腹時血糖値が有意に高値を示し、出生体重と生活習慣病との間に密接な関連性が認められた。また、生活習慣病の集積を予測する血液マーカーとして、従来報告した血清尿酸の他に、新たにHDLコレステロールの意義について報告した。以上の結果は、日本人一般中学生の生活習慣病予防の教育プログラムの開発に有用と考えられた。2.社会啓発活動:1)第3回市民公開講座開催(特別講演1:「松本市骨げんき教室における遠隔運動指導」、特別講演2:「食による生活習慣病の予防」、2)第6回学術講演会開催(特別講演1:「最近の子どもの運動と生活習慣病」、特別講演2:「長野県における遠隔医療の実施について」、3)第25回松本市健康フェスティバルで医療チームによる「家族で予防生活習慣病:ミニドックから健康相談まで」出展(親子の身体測定、血液検査、個別の結果説明、食事・生活指導)、4)中学校で「出前クリニック」(医療チームによる生徒の集団健康教育および保護者を交えた健康・食事・生活の個別指導)、出前授業(生活習慣改善、生活習慣病予防)実施、5)親子の食育講座開催(3回)、6)信州大学医学部附属病院に新たに設置された近未来医療推進センターで、夏休みおよび春休み期間中に、学校健診で生活習慣病関連項目に問題点を指摘された青少年とその家族を対象として、健康的な食生活・運動習慣の提案、推進に重点を置いた国内初の「生活習慣病予防外来」をオープンし、高い評価を得た。
小胞体－ゴルジ体間相互作用に着目したＥＲ　ｅｘｉｔ　ｓｉｔｅ形成機構の解明

MAG5は小胞体-ゴルジ体間のタンパク質輸送にかかわる因子として同定され,これまでに小胞体からゴルジ体への輸送小胞, COPII小胞の形成が起きる小胞体膜状のドメインERexitsitesに局在することを明らかにした.今年度はMAG5がERexitsitesにおいてCOPII小胞形成にどのような役割を果たしているのかについて焦点を当て,下記の詳細な解析を行った.COPII構成因子の膜への結合量について, COPII構成因子を発現する野生型植物体とmag5変異体植物体を材料に,分画遠心を用いて生化学的に解析を行った.その結果, MAG5はCOPII構成因子の膜への結合に関して蟹的に影響を与えないことが示唆された.続いて, COPII構成因子のER exit sitesにおける動態について調べるために, COPII構成因子を発現する野生型植物体とmag5変異体植物体を材料に, FRAP解析を行った.FRAP解析に関しては,ミシガン州立大学のFederica教授のグループとの共同研究により行った.その結果, MAG5の欠損により, COPII構成因子が膜から解離しやすくなっていることが明らかになった.以上の解析から, MAG5はERexitsitesにおいて, COPIIコートを安定化することにより適切なCOPII小胞形成を担っていることが示唆された.小胞体ーゴルジ体間のタンパク質輸送にかかわる新しい因子をさらに同定する目的で,正遺伝学的な解析を行った.小胞体一ゴルジ体間のタンパク質輸送に異常を示す変異体の種子細胞においては,種子貯蔵タンパク質は小胞体内の異常な構造体MAGボディに異常蓄積することが知られている.MAGボディ異常蓄積に着目した独自のスクリーニング系を用いて, 3系統の輸送変異体を単離することができた.(抄録なし)これまでに,MAG5は動物や酵母のSEC16のホモログであり,小胞体からゴルジ体へのタンパク質の輸送を担うこと,また,COPII小胞出芽部位であるER exit sites(ERES)に局在し,ERES形成に関わる可能性を示唆してきた.今年度は,MAG5の相互作用因子に関して下記の詳細な解析を行った.MAG5-GFPを構成的に発現する形質転換植物体を用いて,抗GFP抗体を使い共免疫沈降実験ののち質量分析によって解析した.その結果MAG5とSECI3が相互作用因子することを見出した.SECI3はCOPII小胞形成因子であり,SEC31と相互作用することが知られている.しかし,質量分析では,MAG5がSEC31と相互作用するという結果は得られなかったため,Y2Hを用いた解析を行った.その結果,MAG5とSEC31が相互作用することが確認できた.当初の実験計画では質量分析によってMAG5の相互作用因子を網羅的に解析し,未知のER exitsites(ERES)形成因子を同定する予定であったが,これまでに新規因子の同定には至っていない.mag5変異体は小胞体内に異常な構造体MAGボディを多数蓄積していた.このMAGボディを指標として変異体を単離することで,MAG5に関与する因子が得られると考えている.pro2S albumin::GFP-2S albuminをもつ植物体(homozygous line)を単離し,これを変異原処理した後に,M2種子を収穫した.現在,このMS種子プールから蛍光顕微鏡下でGFP蛍光を発する種子を取得するという1次スクリーニングを行っており,全体の約4分の1のスクリーニングを終えた.MAG5は小胞体-ゴルジ体間のタンパク質輸送にかかわる因子として同定され,これまでに小胞体からゴルジ体への輸送小胞, COPII小胞の形成が起きる小胞体膜状のドメインERexitsitesに局在することを明らかにした.今年度はMAG5がERexitsitesにおいてCOPII小胞形成にどのような役割を果たしているのかについて焦点を当て,下記の詳細な解析を行った.COPII構成因子の膜への結合量について, COPII構成因子を発現する野生型植物体とmag5変異体植物体を材料に,分画遠心を用いて生化学的に解析を行った.その結果, MAG5はCOPII構成因子の膜への結合に関して蟹的に影響を与えないことが示唆された.続いて, COPII構成因子のER exit sitesにおける動態について調べるために, COPII構成因子を発現する野生型植物体とmag5変異体植物体を材料に, FRAP解析を行った.FRAP解析に関しては,ミシガン州立大学のFederica教授のグループとの共同研究により行った.その結果, MAG5の欠損により, COPII構成因子が膜から解離しやすくなっていることが明らかになった.以上の解析から, MAG5はERexitsitesにおいて, COPIIコートを安定化することにより適切なCOPII小胞形成を担っていることが示唆された.小胞体ーゴルジ体間のタンパク質輸送にかかわる新しい因子をさらに同定する目的で,正遺伝学的な解析を行った.小胞体一ゴルジ体間のタンパク質輸送に異常を示す変異体の種子細胞においては,種子貯蔵タンパク質は小胞体内の異常な構造体MAGボディに異常蓄積することが知られている.MAGボディ異常蓄積に着目した独自のスクリーニング系を用いて, 3系統の輸送変異体を単離することができた.これまでにERexitsiteを形成する因子MAG5の解析を行い,現在その成果をまとめた論文の改訂を行っている.また,小胞体-ゴルジ体間の輸送異常を示す第二の因子MAG3の解析にも着手している.当該年度は,小胞体とゴルジ体の相互作用機構の解明に向けて,新たな変異体選抜方法を独自に考案し,1次スクリーニングではいくつかの変異体を得た.

上記の通り,研究は順調に進められ、期待どおりの進展があったと考えられる.正遺伝学的解析に関して,proMAG5::MAG5-GFPをmag5変異体に導入した植物体を得,MAG5-GFPが機能的であることを確認した.しかし,proMAG5::MAG5-GFPをホモに持つ系統においても,蛍光強度が弱いため,MAG5-GFPの蛍光パターンを指標にスクリーニングを行うのは難しいと思われる.今後は生化学的な解析と,MAGボディを指標にしたスクリーニングに注力し,研究を行っていく.生化学的な解析に関しては,今後は,架橋剤を用いて相互作用を安定化させた後に,共免疫沈降実験を行うことを計画している.また,MAGボディを指標にしたスクリーニングに関しては,1次スクリーニングをさらに進めると同時に,選抜した種子を播種して,表現型の確認,2次スクリーニングと原因遺伝子の同定を順次行う予定である.さらに既知のMAGボディ蓄積変異体であるMAG3に関しては,細胞生物学的な解析や機能解析・変異体解析を進める.(抄録なし)
GPIアンカー型GFPトランスジェニックマウスによるGPIアンカー生合成系の解析

グリコシルフォスファチジルイノシトール(GPI)は、アルカリフォスファターゼやThy-1等を代表とするGPIアンカー型蛋白質を細胞膜上につなぎ止めるのに必須の糖脂質である。一方、いくつかのGPIアンカー型蛋白質は、細胞膜上にとどまるばかりでなく、細胞外に放出されることは知られているが、その遊離メカニズムや生理的意義はよくわかっていない。我々は、生体内におけるGPIの動態を解明するため、GPIアンカー型に改変した蛍光蛋白質EGFP(EGFP-GPI)をレポーターとして作成し、これを導入したトランスジェニックマウス家系を樹立した。このマウスでは、上皮系組織においてEGFP-GPIの頂端部局在化がみられ、また、膵臓・顎下腺・精嚢等の外分泌腺および精巣において、EGFP-GPIの体液中への遊離が認められた。そこで、本年度は、GPIアンカー型蛋白質遊離に関わる因子の同定を試み、以下の結果を得た。1)顎下腺組織より、抽出液を調整し、EGFP-GPI発現細胞からのEGFP-GPIの培養液中への遊離を指標に、GPIアンカー型蛋白質遊離因子の精製を、陰イオン交換、疎水性相互作用、ゲルろ過液体クロマトグラフィーにて行った。その結果、新規の腺性カリクレイン様蛋白が、同定された。しかしながら、この蛋白は、EGFP-GPIのみならず、膜貫通型EGFP(EGFP-TM)に対しても遊離活性を示す、また、GPIアンカー型蛋白の一種である胎盤型アルカリフォスファターゼ(PLAP)を遊離しないことから、真のGPIアンカー型蛋白質遊離因子としては、否定的であると考えられた。2)精巣組織より、抽出液を調整し、EGFP-GPIおよびPLAPのTritonX-100可溶相から水溶相への転換を指標にGPIアンカー型蛋白質遊離因子の精製を、陰イオン交換、ConAアフィニティー、ゲルろ過液体クロマトグラフィーにて行った。まだ、部分精製の段階であるが、いくつかの性質が判明した。(1)おそらく、膜結合型蛋白である。(2)Ca依存性の酵素活性がある。(3)塩基性蛋白である。(4)予想分子量が60-70kdである。(5)精子形成の開始とともに酵素活性が上昇する。(6)代謝産物が、PLC切断残基を認識する抗CRD(cross-reactive determinant)抗体に反応しない。(7)EGFP-TMに対しては、遊離活性を示さない。現在、この精巣におけるGPIアンカー型蛋白質遊離因子の精製をさらに進めている。グリコシルフォスファチジルイノシトール(GPI)-アンカーは、GPIアンカー型蛋白質を細胞膜上につなぎ止めるのに必須の糖脂質である。そのため、同アンカーの生合成不全は、多数のGPIアンカー型蛋白の細胞表面への発現を欠損させる。GPIアンカー生合成不全になるとヒトでは、発作性夜間血色素尿症(PNH)が発症し、マウスでは、胎生致死に至ることから、このシステムが、個体発生や生存のために必須な機能系であることがわかっている。本研究では、マウス生体内におけるGPIアンカー生合成系の動態を可視的にとらえるため、GPIアンカー型に改変したEGFP(EGFP-GPI)を作成し、これを導入したトランスジェニックマウス(Tgマウス)を解析することを目的としている。本年度は、以下のような結果を得た。2、Tgマウスの各組織におけるEGFP-GPIの発現量・発現パターンを、ウエスタンブロット法により解析した。その結果、上皮系組織においてEGFP-GPIの頂端部局在化がみられ、また、膵臓、顎下腺、精嚢等の外分泌線において、EGFP-GPIの分泌が認められた。3、分泌型EGFP-GPIを抽出しウエスタンブロット解析を行ったところ、顎下腺で分泌されているものは、膜アンカー型や他の分泌型に比べて有為にサイズが小さかった。この分子を蛍光活性を指標として単一精製し、N末端分析、質量分析およびメタボリックラベル解析を行ったところ、同分子はC末端側にGPIに一部であるエタノールアミンリン酸が結合したかたちで分泌されていると推定された。また、そのサイズから、GPIの糖鎖部分やイノシトールリン酸は存在せず、この分子で産生は従来のフォスフォリパーゼとは別種の活性によると考えられた。

1)顎下腺組織より、抽出液を調整し、EGFP-GPI発現細胞からのEGFP-GPIの培養液中への遊離を指標に、GPIアンカー型蛋白質遊離因子の精製を、陰イオン交換、疎水性相互作用、ゲルろ過液体クロマトグラフィーにて行った。その結果、新規の腺性カリクレイン様蛋白が、同定された。しかしながら、この蛋白は、EGFP-GPIのみならず、膜貫通型EGFP(EGFP-TM)に対しても遊離活性を示す、また、GPIアンカー型蛋白の一種である胎盤型アルカリフォスファターゼ(PLAP)を遊離しないことから、真のGPIアンカー型蛋白質遊離因子としては、否定的であると考えられた。2)精巣組織より、抽出液を調整し、EGFP-GPIおよびPLAPのTritonX-100可溶相から水溶相への転換を指標にGPIアンカー型蛋白質遊離因子の精製を、陰イオン交換、ConAアフィニティー、ゲルろ過液体クロマトグラフィーにて行った。まだ、部分精製の段階であるが、いくつかの性質が判明した。(1)おそらく、膜結合型蛋白である。(2)Ca依存性の酵素活性がある。(3)塩基性蛋白である。(4)予想分子量が60-70kdである。(5)精子形成の開始とともに酵素活性が上昇する。(6)代謝産物が、PLC切断残基を認識する抗CRD(cross-reactive determinant)抗体に反応しない。(7)EGFP-TMに対しては、遊離活性を示さない。現在、この精巣におけるGPIアンカー型蛋白質遊離因子の精製をさらに進めている。
非対称戦争における戦争倫理の研究―戦争規則違反の構造的要因と「戦争のジレンマ」

本研究の目的は、今世紀の国際社会で比重を増しつつある非対称戦争に注目し、そこで生じている戦争規則(戦闘員保護(区別)原理)違反をめぐり、その構造的要因を「戦争のジレンマ」状況にあるものとして位置づけたうえで、非対称戦争において要請される戦争倫理を解明することである。最終年度の計画は、戦争規則違反のありうる免責理由の妥当性を検証しつつ、部分的遵守の事態を念頭に置いた戦争倫理を論証し、それを今世紀の非対称戦争に適用することであった。その研究成果は以下のとおりである。(1)松元雅和「弱者の最後の武器?ー非対称戦争における戦争倫理」グローバルジャスティス研究会(早稲田大学、2018年7月1日)では、非対称戦争において弱者が訴える交戦規則違反を道徳的に免罪しうる余地について検討し、非対称戦争の構造的側面を注視してもなお、必要性の観念から区別(非戦闘員保護)原理に根本的な変更を加える決定的な理由は見出せないとの結論を得た。(2)松元雅和「ロールズと倫理学方法論」『ロールズを読む』(ナカニシヤ出版、2018年)、27-49頁では、倫理学・政治哲学方法論としてロールズの反照的均衡を精査し、併せて狭い/広い均衡の概念的区別や科学方法論との異同を解明した。なお、研究期間全体を通じて実施した研究の最終成果は、「弱者の最後の武器?ー非対称戦争における戦争倫理」(仮題)として、2019年度中に国内学術雑誌より刊行予定である。本研究の目的は、今世紀の国際社会で比重を増しつつある非対称戦争に注目し、そこで生じている戦争規則違反をめぐり、その構造的要因を「戦争のジレンマ」状況にあるものとして位置づけたうえで、非対称戦争において要請される戦争倫理を解明することである。28年度は、本研究における予備的調査として、従来の国家間戦争と比較しながら、非対称戦争における戦争規則違反の実態を把握し、それが戦争目的と戦争手段の相反という構造的要因に由来することを解明した。具体的には、各種の国際機関・報道機関が報告する調査資料に基づき、非戦闘員保護(保護)原理の遵守/不遵守状況を確認し、とくに今世紀以降に生じている非対称戦争とその紛争被害を把握した。また、先行研究のレビューに基づき、非対称戦争における戦争規則違反の要因に関して、どこまで意識的/構造的に特定されているかを文献的に精査した。その成果の一端として、1)「テロと戦う論理と倫理」『論究ジュリスト』17号(2017年4月予定)では、テロリズムおよびテロとの戦いの特質とその是非に関して、権利論および功利主義の観点から倫理的に分析した。2)「カタストロフィとしての戦争ー正戦論における比例性原理の検討」『立命館言語文化研究』28巻1号(2016年9月)、151-169頁では、戦争の諸々の正当原因を、正当防衛と刑罰の観点から列挙・整理しつつ、マクロ比例性原理における戦争肯定と戦争否定の閾値を考察した。3)「平和主義の論理と倫理ーアポリア構造とその打開?」平和主義研究会(2017年3月11日)では、行為と事態、目的と手段、戦略と道徳の三つのジレンマ構造から平和主義の戦争倫理学的特質を解明した。本研究では、今世紀の非対称戦争において要請される戦争倫理の解明を段階的に実施する。28年度は、非対称戦争の構造的特殊性を「戦争のジレンマ」として特定する研究に従事した。その結果、第一に、テロとの戦いにおいて、権利論は自由の制限のような「次悪」を絶対的に許容しない点において、逆に功利主義は「次悪」の問題を過小に評価している点において、不十分であることを明らかにした。第二に、戦争の正否の判断にあたっては、正戦論や平和主義のいずれにおいても、帰結主義が必要不可欠であり、その具体的な輪郭を描くことが重要であることを明らかにした。第三に、目的と手段のジレンマ構造においては、正当原因や比例性のような正戦論的前提が平和主義へと論理的に接合する可能性を指摘した。これらの研究成果を通じて、非対称戦争においてなぜ戦争規則違反が生じるかを、戦争目的と戦争手段の相反という構造的要因に由来するものとして特定する本研究の当初課題を達成するとともに、次年度以降の課題達成に向けた有益な知見を得ることができた。29年度は、戦争規則違反のありうる免責理由の妥当性を検証しつつ、非対称戦争における戦争倫理を構築することに着手した。具体的には、「戦争のジレンマ」状況における戦争倫理の一例として、Walzerの議論を分析対象としながら、最高度緊急事態において非戦闘員保護(区別)原理の違反が免責される余地を検証した。その成果の一端として、1)"Ethics in Asymmetric Warfare: Why War Conventions Are Regularly Violated?" Athens Institute forEducation and Research, 15th Annual International Conference on Politics & International Studies (Titania Hotel, Greece), 12 Juneでは、非対称戦争において弱者が区別原理に違反することのありうる免罪理由とその是非を、必要性の観念に基づく「勝ち目への権利」論と「最高度緊急事態」論に照らして分析・評価した。

加えて、2)「規範研究における実証研究の役立て方ー反照的均衡を中心に」『政治思想研究』17号、98-123頁では、本研究課題である戦争倫理学も含む規範研究一般の方法論的特徴を、特に実証研究との接点に注目しつつ明らかにした。本研究では、今世紀の非対称戦争において要請される戦争倫理の解明を段階的に実施する。29年度は、28年度の課題である非対称戦争の構造的特殊性の解明に加え、「戦争のジレンマ」状況において要請される戦争倫理の構築に着手した。その結果、第一に、必要性の観念に基づく「勝ち目への権利」論と「最高度緊急事態」論よる免罪理由は、交戦規則違反を免罪する決定的な理由にはならないことが分かった。第二に、もし以上の結論が正しければ、非対称戦争における弱者は依然として、開戦法規上の正義と交戦法規上の正義が衝突する戦争のジレンマ状況に置かれ続けることになるとことも明らかにした。第三に、弱者が交戦規則違反に訴えるからといって、強者の交戦規則順守義務がなくなるわけではないことを指摘した。これらの研究成果を通じて、最終年度である30年度の課題達成に向けた有益な知見を得ることができた。本研究の目的は、今世紀の国際社会で比重を増しつつある非対称戦争に注目し、そこで生じている戦争規則(戦闘員保護(区別)原理)違反をめぐり、その構造的要因を「戦争のジレンマ」状況にあるものとして位置づけたうえで、非対称戦争において要請される戦争倫理を解明することである。最終年度の計画は、戦争規則違反のありうる免責理由の妥当性を検証しつつ、部分的遵守の事態を念頭に置いた戦争倫理を論証し、それを今世紀の非対称戦争に適用することであった。その研究成果は以下のとおりである。(1)松元雅和「弱者の最後の武器?ー非対称戦争における戦争倫理」グローバルジャスティス研究会(早稲田大学、2018年7月1日)では、非対称戦争において弱者が訴える交戦規則違反を道徳的に免罪しうる余地について検討し、非対称戦争の構造的側面を注視してもなお、必要性の観念から区別(非戦闘員保護)原理に根本的な変更を加える決定的な理由は見出せないとの結論を得た。(2)松元雅和「ロールズと倫理学方法論」『ロールズを読む』(ナカニシヤ出版、2018年)、27-49頁では、倫理学・政治哲学方法論としてロールズの反照的均衡を精査し、併せて狭い/広い均衡の概念的区別や科学方法論との異同を解明した。なお、研究期間全体を通じて実施した研究の最終成果は、「弱者の最後の武器?ー非対称戦争における戦争倫理」(仮題)として、2019年度中に国内学術雑誌より刊行予定である。29年度以降の課題は、戦争規則違反のありうる免責理由の妥当性を検証しつつ、非対称戦争における戦争倫理を構築することに着手することである。具体的には、第一に、「戦争のジレンマ」状況における戦争倫理の一例として、最高度緊急事態において非戦闘員保護(区別)原理の違反が免責される余地を検証する。第二に、戦争規則違反の免責理由として用いられる二重結果(double effect)説の妥当性を検証する。
腎性高血圧症における腎動脈収縮タンパク質と神経因子の昇圧作用

まず2腎性高血圧症に中枢性カテコラミンがいかに関与するかを検討した.2腎性高血圧動物に6-nydroxydopamine(6-OHDA)250ug/Kgをintraventrcular injectionしておくと(高血圧発症前),高血圧の発症が阻止された.視床下部のnorepineph-rine(NE)は高血圧動物では正常血圧動物より低レベルであったが,橋部のNE濃度は両群ともに同レベルであった.高血圧の慢性期には6-OHDを脳室内に投与しても高血圧は抑制されなかったし,シャム十6-OHDA群でも2K-1C十6-OHDA群でも中枢のNE濃度は不変であった.これらの成績より視床下部のNE代謝の低下が2腎性高血圧症の急性期の昇圧に重要が役割りを果していることが推測された.ついで中枢のカテコールアミン代謝がいかに昇圧に関与するのかを腎を中心として検索した.すでに前年度の検査で2腎性高血圧の高血圧維持に腸間膜動脈の血管収縮タンパク質と見做されているるnon-collagenous protein代謝の亢進が腎動脈にも見られるか否かが重要な所見であろう.腎動脈ではnon-collagenous protein,collagen代謝亢進が高血圧動物において見られた.あらかじめ6-OHDAを投与しておくと,高血圧の発症は急性期で抑制され,腎動脈のnon-collagenous protein代謝も抑制された.すなわけ2腎性高血圧症では,急性期には視床下部のNE含量が低下し,これか刺激となって腎動脈の収縮タンパク質代謝が亢進して腎動脈が収縮して血管抵抗を上昇させるため,高血圧となるというメカニズムが推測された.このような仮説は従来,報告されておらず,レニン・アンジオテンシン系の亢進のみでは説明つかなかった本症の病態に,新しい考え方を導入した実験と思われる.まず2腎性高血圧症に中枢性カテコラミンがいかに関与するかを検討した.2腎性高血圧動物に6-nydroxydopamine(6-OHDA)250ug/Kgをintraventrcular injectionしておくと(高血圧発症前),高血圧の発症が阻止された.視床下部のnorepineph-rine(NE)は高血圧動物では正常血圧動物より低レベルであったが,橋部のNE濃度は両群ともに同レベルであった.高血圧の慢性期には6-OHDを脳室内に投与しても高血圧は抑制されなかったし,シャム十6-OHDA群でも2K-1C十6-OHDA群でも中枢のNE濃度は不変であった.これらの成績より視床下部のNE代謝の低下が2腎性高血圧症の急性期の昇圧に重要が役割りを果していることが推測された.ついで中枢のカテコールアミン代謝がいかに昇圧に関与するのかを腎を中心として検索した.すでに前年度の検査で2腎性高血圧の高血圧維持に腸間膜動脈の血管収縮タンパク質と見做されているるnon-collagenous protein代謝の亢進が腎動脈にも見られるか否かが重要な所見であろう.腎動脈ではnon-collagenous protein,collagen代謝亢進が高血圧動物において見られた.あらかじめ6-OHDAを投与しておくと,高血圧の発症は急性期で抑制され,腎動脈のnon-collagenous protein代謝も抑制された.すなわけ2腎性高血圧症では,急性期には視床下部のNE含量が低下し,これか刺激となって腎動脈の収縮タンパク質代謝が亢進して腎動脈が収縮して血管抵抗を上昇させるため,高血圧となるというメカニズムが推測された.このような仮説は従来,報告されておらず,レニン・アンジオテンシン系の亢進のみでは説明つかなかった本症の病態に,新しい考え方を導入した実験と思われる.1)中枢性のカテコールアミンが2腎性高血圧症に関与するか、否かを検討した。2腎性高血圧ラット(2K-1C)の視床下部のノルエピネフリン(NE)含量は対照群のそれに比し50%低下した。6-OHDAの脳室内投与で急性期の2K-1Cラットの高血圧の発症は阻止されたが、慢性期ではそのようなことがなかった。橋部のNE含量に高血圧動物と正常血圧動物で同レベルであった。以上の所見より2K-1Cラットの急性期の高血圧上昇に、視床下部のNE代謝の低下が強く関与することが判明した(J.Urol.135:1066-1070)。
G→Cトランスバージョンを引き起こすグアニン酸化損傷の検出法の開発

グアニン酸化損傷の一つであるオキサゾロンはG→Cトランスバージョンを引き起こす。本研究では、この損傷に結合するアプタマーを見出すことを目的とした。固相に結合したOzに結合するものは得られたが、フリーのOzに強く結合する能力は持っていなかった。フリーのOzに結合するアプタマーを見出すための知見が得られた。DNA-RNAハイブリッドタイマー、dG-rUをDNA合成機上で合成した。その後、光反応と加水分解し、dZ-rUを生成させ、高速液体クロマトグラフィーでdZ-rUを精製した。単離したdZ-rUにNaIO_4処理を施し、アルデヒド基を生成させた。これにヒドラジン基を有する固相担体と反応させ、固相担体上にZ骨格を固定した。同時に、アプタマーを固相担体から剥離するためのdZの合成や、ネガティブコントロールのためのdGを固定した固相担体の合成を行った。(b)アプタマーの構築40塩基のランダム配列を含んだDNAライブラリー(約10^14種類)からSELEX法でアプタマーを選択した。具体的には、(i)DNAライブラリーから転写によりオリゴマープールを作製、(ii)(a)で作製した固相担体に結合させ、(iii)担体に結合したライブラリーを溶出、2本鎖DNAライブラリーに戻した。この(i)(iii)の操作を繰り返し、Zに結合するアプタマーを選択した。なお、非特異的な結合するものを選択ライブラリーから除外するため、天然ヌクレオシドを固定化した担体と混合し、液相を回収する操作も行った。こうして、Zに特異的に結合するいくつかのアプタマーを得た。DNAは化学物質であるために様々な物質・エネルギーと反応し、遺伝情報の変異を引き起こす。この変異が積み重なると最終的に癌や老化を引き起こす。空然変異の中でも最も単純な点突然変異は12通り存在し,そのうちグアニンからジトシンへの変異(G→Cトランスバージョン)のみが最近まで不明であった。我々は最近まで発生機構が不明であったG→Cトランスバージョンを優位に引き起こすDNA酸化損傷オキサゾロン(Oz)を見いだした。G→Cトランスバージョンはがん細胞におけるras遺伝子やp53遺伝子の点突然変異で見られる上、光増感反応やいくつかの酸化剤を用いた反応においても優位に起こる点突然変異である。G→CトランスバージョンをひきおこすOzが容易に検出できれば、細胞がガン発生のプレ状態にあるか否かを判別できる可能性がある。そこで我々はOzを固相担体に結合させ、40塩基のランダム配列を含んだDNAライブラリーからDNAおよびRNAアプタマーをSELEX法で選択した。しかしながら、選択されてきたDNAおよびRNAアプタマーはブリーのOzに全く結合しなかった。そこで本年度、フリーのOzに結合するアプタマーを得ることができるよう、Ozと固相担体の間のリシカーを工夫し、昨年度と同様にSELEX法でDNAおよびRNAアプタマーを選択した。その結果、得られたDNAおよびRNAアプタマーは、解離定数が0.3microM以上のものであった。本年度得られた知見をもとに今後、より綿密な分手設計をした上でOz結合固相担体を合成することで、Ozに対してより結合能の強いアプタマーを得たいと考えている。
ダイオキシン類の排泄促進に関わる遺伝子群の検索とその作用機構の解明

本研究では、発癌性や生殖毒性を有し、体内への蓄積性が非常に高い環境汚染物質であるダイオキシン類の排泄促進に関する検討を行った。既に我々は、ダイオキシン類の中でも最も毒性が強く難分解性の2,3,7,8-Tetrachlorodibenzo-p-dioxin(TCDD)を、マウスにおいて尿中へ積極的に排泄するcompound Aを見出している。そこで本研究では、まずcompound Aにより排泄されたダイオキシン類の分子の同定を行うために、得られた尿サンプルについてHPLCによる分析を行った。その結果、TCDDの代謝物と考えられるフラクションも得られたが、compound Aにより排泄が促進していたのは代謝を受けていないTCDDそのものである可能性が示唆された。そこで次に、TCDDのみを投与したマウスとTCDD+compound Aを投与したマウスの肝臓におけるmRNA発現パターンを、Affimetrix社のオリゴヌクレオチドアレイ(GeneChip Mouse Genome 430 2.0)を用いて解析を行った。各群3匹のマウスから得られた肝臓をプールし、そのRNAから得られたシグナル値をスキャッタープロットにより解析したところ、R^2=0.879となり遺伝子発現に変化がある可能性が示唆された。また45100個の搭載遺伝子のうち発現が2倍以上(log ratio≧1;p<0.05)のものが1173個、0.5倍以下(log ratio≦-1;p>0.95)のものが1504個確認された。
算数科における, 資質・能力の向上を目指した授業の創造

本研究は,理科教育で進めてきた,児童が自ら考え学ぶ“実験計画書"を活用した学び方を,理科教育だけでなく教科横断的に広げていくことを目的として行った。この“実験計画書"の考え方をもとに,具体的には第5学年の算数科「整数の性質」の単元で計画・実践・分析・検証することを試み,その有効性を確認することができた。そこでは,実験計画書を立てたように,単元の最終内容を示し児童自身に単元を逆向きに設計する授業を実践した。この実践を通して,算数科においても,児童自身で目的意識をもって授業を計画・実行し自ら課題を発見し解決していこうとする資質・能力を育成することが可能であると示すことができた。この実践については,「新しい算数研究8月号」2017年8月(東洋館出版社)に公開した。他単元の授業実践においても,常に児童が単元の終末を意識し,課題に対して課題意識をもって主体的・対話的に学習に取り組み,既習の学びを深い学びへと転換していった。同時に理科・算数科だけでなく他の教科でも児童にこのような学習態度が形成されつつあった。つまり,アクティブラーニングを通して今日求められる資質・能力の向上に向けた研究となった。さらに,この授業実践をもとに全職員にこの授業の取り組みを広げていくために,校内全体で継続的に資質能力の育成に向けた授業を展開していくのに必要な校内研修の進め方について研究者に示唆を仰ぎ,共同で「成功する校内研修の進め方」を出版し,この研究を広く広げることを試みた。
マルチエージェントモデルに基づく持続可能な言語サービス基盤のアジア展開

言語サービス提供のインセンティブ設計において、インセンティブ維持メカニズムを考案するために、Mechanical Turk上で集合知翻訳の実験を行った。具体的には、クラウドソーシングを用いて日英翻訳タスクの翻訳作業と評価作業を設計し、クラウドによる作業データの収集を行った。データの整理と分析は引き続き基盤研究(S)の取組において行っている。また、Mechanical Turk上で集合知翻訳の実験と並行して、ある程度制御可能な環境においてもクラウドを用いた集合知翻訳の実験を行い、データの収集を行った。言語サービス基盤の連邦制運営のための制度設計において、運営組織ネットワークの自律的連携の実現をするために、言語サービス基盤のP2Pネットワーク構築の準備を行った。具体的には、現在運営中の言語サービス基盤「言語グリッド」のコアノードをサービスノードの数を拡張し、2種類の運営方針(運営組織と利用者、提供者の間に厳密に覚書を締結する運営タイプと、運営組織と利用者、提供者の間に覚書なしで柔軟に合意を取る運営タイプ)に基づいて相互接続を実現した。このように、一つ運営組織の配下で異なる運営方針に基づく複数の言語サービス基盤のコアノードを持つことが可能にする。引き続き基盤研究(S)の取組において、構築した運営組織のネットワークを用いて自律的連携の制度設計を行う予定である。また、連邦制運営のシミュレーションと評価をするために、言語サービス基盤において、言語サービスタイプの拡張と原子サービスの追加を行った。
婦人科癌に対する遺伝子治療の基礎的検討

1.ヘルペスウイルス(HSV)由来チミヂンキナーゼ陽性婦人科癌細胞株の樹立平成7年度に作成した子宮内膜癌培養細胞株2種ならびに絨毛癌培養細胞株2種のHSV由来チミヂンキナーゼ陽性細胞株は、その後の検討でいずれもガンシクロビル(CGV)に対する感受性に問題があることが判明したため、新たに子宮内膜癌培養細胞株HHUAと子宮頚部腺癌培養細胞株BU25に対して、HSV由来チミヂンキナーゼ遺伝子およびネオマイシン耐性遺伝子を組み込んだプラスミドをリポソーム法を用いて導入し、プラスミド遺伝子を安定的に発現しているクローンをネオマイシン誘導体G418を用いて選択した。得られたクローンのうち、GCV高感受性のクローンを選択した。以下の検討は、これらの新たに樹立したウイルス由来チミヂンキナーゼ陽性細胞株を用いて行なった。2.婦人科癌における殺傍細胞(バイスタンダー)効果の検討1.で樹立されたHSV由来チミヂンキナーゼ陽性婦人科癌細胞株2種を、由来した元の細胞株と種々の割合で混合培養し、これに対して種々の濃度のガンシクロビルを数日間作用させた後、生存細胞数を色素(トリパンブルー)排出法を用いて検討した。ウイルス由来遺伝子を導入されていない元の細胞株をHSV由来チミヂンキナーゼ陽性細胞と混合培養しGCVを作用させたところ、GCVの作用を受けないはずの元の細胞株もHSV由来チミヂンキナーゼ陽性細胞と共に死滅した。このことは、子宮内膜癌および子宮頚部腺癌においても殺傍細胞(バイスタンダー)効果が存在することを示しており、子宮由来腺癌に対するHSV由来チミヂンキナーゼ遺伝子を用いた遺伝子治療の可能性を示すものである。1.ウイルス由来チミヂンキナーゼ遺伝子陽性婦人科癌細胞株の樹立子宮内膜癌培養細胞株2種ならびに絨毛癌培養細胞株2種に対して,ヘルペスウイルス由来チミヂンキナーゼ遺伝子およびネオマイシン耐性遺伝子を組み込んだプラスミッドを,リポソーム法を用いて導入した。プラスミド遺伝子を安定的に導入された細胞はネオマイシン抵抗性となっているはずであるので,ネオマイシン誘導体のG418を用いて第1次の選択を行い,複数個のクローンを得た。次に,第2次選択として抗ウイルス薬のガンシクロビル感受性試験を行い,高感受性のクローンを選択し,ガンシクロビル高感受性ウイルス由来チミヂンキナーゼ陽性婦人科癌細胞株4種類を樹立することに成功した。2.婦人科癌における殺傍細胞(バイスタンダー)効果の検討(in vitro)1.で樹立されたウイルス由来チミヂンキナーゼ陽性婦人科癌細胞株4種を,由来した元の細胞株と種々の割合で混合培養し,これに対して種々の濃度のガンシクロビルを数日間作用させた後,生存細胞数を色素(トリパンブルー)排出法を用いて検討した。ウイルス由来遺伝子を導入されていない元の細胞株は,当然の事ながらガンシクロビルの作用は受けずに生存し,増殖した。一方,元の細胞株をウイルス由来チミヂンキナーゼ陽性細胞株と混合培養したガンシクロビルを作用させたところ,ガンシクロビルの作用を受けないはずの元の細胞株もチミヂンキナーゼ陽性細胞株と共に死滅した。このことは,子宮内膜癌および絨毛癌においても殺傍細胞(バイスタンダー)効果が存在することを示しており,婦人科癌に対するヘルペスウイルス由来チミヂンキナーゼ遺伝子を用いた遺伝子治療の可能性を示すものである。1.ヘルペスウイルス(HSV)由来チミヂンキナーゼ陽性婦人科癌細胞株の樹立平成7年度に作成した子宮内膜癌培養細胞株2種ならびに繊毛癌

培養細胞株2種のHSV由来チミヂンキナーゼ陽性細胞株は、その後の検討でいずれもガンシクロビル(CGV)に対する感受性に問題があることが判明したため、新たに子宮内膜癌培養細胞株HHUAと子宮頚部腺癌培養細胞株BU25に対して、HSV由来チミヂンキナーゼ遺伝子およびネオマイシン耐性遺伝子を組み込んだプラスミドをリポソーム法を用いて導入し、プラスミド遺伝子を安定的に発現しているクローンをネオマイシン誘導体G418を用いて選択した。得られたクローンのうち、GCV高感受性のクローンを選択した。以下の検討は、これらの新たに樹立したウイルス由来チミヂンキナーゼ陽性細胞株を用いて行なった。2.婦人科癌における殺傍細胞(バイスタンダー)効果の検討1.で樹立されたHSV由来チミヂンキナーゼ陽性婦人科癌細胞株2種を、由来した元の細胞株と種々の割合で混合培養し、これに対して種々の濃度のガンシクロビルを数日間作用させた後、生存細胞数を色素(トリパンブルー)排出法を用いて検討した。ウイルス由来遺伝子を導入されていない元の細胞株をHSV由来チミヂンキナーゼ陽性細胞と混合培養しGCVを作用させたところ、GCVの作用を受けないはずの元の細胞株もHSV由来チミヂンキナーゼ陽性細胞と共に死滅した。このことは、子宮内膜癌および子宮頚部腺癌においても殺傍細胞(バイスタンダー)効果が存在することを示しており、子宮由来腺癌に対するHSV由来チミヂンキナーゼ遺伝子を用いた遺伝子治療の可能性を示すものである。
交流アンペール式磁気浮上技術による管材・環材支持システムへの応用展開

アルミ管材用に特化した交流アンペール式磁気浮上装置を製作し,交流アンペール式の特長である浮上力増大効果,省電力効果,発熱低減効果について調査した。その結果,薄板と同様に,全ての項目で従来型である交流誘導式を上回る良好な特性が得られた。アルミ環材に対しては,アルミ環材に生じる誘導反発力とアルミ環材の自重分を上回る準定常な交流アンペール力による引上げが可能であることを試作機で実証した。このように,薄板用として提唱された交流アンペール式磁気浮上技術が,管材や環材に対してもその有効性を保持したまま適用可能であることが示された。非磁性金属薄板に対する浮上力発生方法として申請者らが提案してきた交流アンペール式磁気浮上技術を,これまでの円形薄板や方形薄板のみならず,管材(パイプ)・環材(リング)に適用することで新たな生産技術として応用展開することを目的としており,今年度はアルミ管材に対する浮上力生成状態について調査した。具体的には,アルミ管材用に特化した浮上力・アンペール力発生用固定子レールの設計と製作,有限要素法を用いた交流磁場解析による管内渦電流分布の可視化,交流誘導反発力および交流アンペール力の発生状態を確認し,交流アンペール力の重畳により誘導反発力のみの場合の約1.26倍の浮上力が得られた。また,継続実施してきた方形薄板に対する交流アンペール力重畳実験では,新規知見として,アンペール力発生用電磁石からの磁束位相を調整することにより,本方式や従来方式(交流誘導浮上)において不可避なジュール熱に伴う浮上高低下を抑制・調整できる可能性を見出した。本来,アンペール力発生用電磁石の励磁位相は,薄板内部の渦電流位相に同期するよう電源側で初期設定され,浮上力の重畳と浮上高の維持・位置決めには,励磁電流振幅が利用できると考えていた。しかしながら浮上高低下時には,アンペール力発生用電磁石の励磁電流の増加に伴う銅損増加が避けられない。新知見では,アンペール力発生用電磁石の励磁電流と磁束位相はある関係性を持って変化しており,励磁電流の減少に伴う磁束位相遅れの進展と,薄板内部渦電流との外積によるアンペール力(すなわち浮上高)の増加という連動性を確認した。この結果は,対象物が管材,環材のときにも有用であり,特に非磁性金属環材の懸垂浮上力制御に向けた重要な知見であるといえる。非磁性金属薄板に対する浮上力発生方法として申請者らが提案してきた交流アンペール式磁気浮上技術を,管材(パイプ)・環材(リング)に適用することで新たな生産技術として応用展開することを目的としている。H26年度はアルミ管材に対する浮上力生成状態についてFEM解析と実機による浮上試験により調査した。浮上力・アンペール力発生用固定子レールを計5本使用し,45度おきに放射状に磁極を配すことで,直径100 mm,肉厚2 mmのアルミ管材(長さ243 mm)をギャップ5 mm以上での浮上に成功した。FEM解析では,主として誘導反発力に寄与する下方3本の固定子レールと,主としてアンペール力に寄与する左右2本の固定子レールへの励磁電流振幅の割合を変化させ,ギャップ5 mmで自重と釣り合う浮上力が生成されるときのアルミ管材で生じるジュール損を計算した。薄板と管材での構造上の大きな違いは,左右2本の固定子レールからも誘導反発力が生じる点であり,これに伴う発熱の増大が懸念された。しかし解析結果からは,励磁電流振幅値の割合を調整すれば,発熱の原因となるジュール損が極小値を得,アンペール力を良好に追加できることが分かった。アルミ環材(リング材)に対する懸垂浮上の可能性調査として,DVDと同直径(120 mm)で厚さ2 mmのアルミ環材を固定子の下に配置した場合のFEM解析を行い,誘導反発力以上のアンペール力が浮上方向に発生することを確認した。また,実機として2種類の構造変化を許容した固定子およびコイル(平面コイルによる渦電流生成型,6極コイルによる渦電流生成型)を製作した。平面コイルによる渦電流生成を利用した装置に対しアンペール力の発生状態をテストしている段階である。アルミ管材(パイプ)に対する浮上力について詳細に調査した。100mm×243mm,肉厚2mmのパイプに対し,同一浮上高(5mm)でパイプ質量と同一の浮上力(4.04N)となる励磁電流値(交流誘導式と交流アンペール式で異なる)を設定し浮上力変化を測定した。交流浮上力は脈動を伴うが,交流アンペール式のほうが交流誘導式に比べ54%に軽減されることが明らかとなった。60秒後の浮上力低下度は,交流誘導式で約13%,交流アンペール式で約6%となり,交流アンペール式のほうがパイプでの渦電流損(発熱)が低下することが示された。アルミ環材(リング)に対する懸垂浮上力を実験的に調査した。DVDと同直径のアルミリング(断面:5mm□,質量23g)を浮上対象物とし,平面コイルを含む上方電磁石とリング周囲に配置された6極の側方電磁石で装置を構成した。上方電磁石と側方電磁石を別電源,別位相,同一周波数とすることで,下向きの交流反発力とリング自重を上回る上向きの交流アンペール力が準定常的に生成され,側方電磁石鉄心の高さ方向中央位置から平面コイル表面までの引き上げ動作が可能となった。アルミフレームに対する浮上力発生装置を製作した。

アルミフレームはB4サイズ(364mm×257mm,板厚3mm)で30mm幅の枠とし,交流アンペール力の効果を確認するために,長辺の一方に複数の貫通スリットを施し,面内渦電流を軽減する構造とした。固定子側は8個のトランスで構成し,フレーム自体に二次電流を流し,この二次電流に対する交流アンペール力用電磁石を6個配置した。本装置構成に対し,FEM解析を実施し交流アンペール力の有効性を確認している。以上より,非磁性金属薄板に対する浮上力発生方法として申請者らが提唱する交流アンペール式磁気浮上が,パイプ,リング,フレームの各形状に対しても適用可能であることを証明した。アルミ管材用に特化した交流アンペール式磁気浮上装置を製作し,交流アンペール式の特長である浮上力増大効果,省電力効果,発熱低減効果について調査した。その結果,薄板と同様に,全ての項目で従来型である交流誘導式を上回る良好な特性が得られた。アルミ環材に対しては,アルミ環材に生じる誘導反発力とアルミ環材の自重分を上回る準定常な交流アンペール力による引上げが可能であることを試作機で実証した。このように,薄板用として提唱された交流アンペール式磁気浮上技術が,管材や環材に対してもその有効性を保持したまま適用可能であることが示された。H26年度当初予定として,円筒アルミ管材に対する交流アンペール式磁気浮上では浮上力発生試験とともに浮上力低下の抑制(管材でのジュール熱抑制)があった。これに対し,固定子レールに印加する励磁電流の振幅値割合を調整することで,管材内のジュール損が極小となる条件があることを解析的に明らかにした。このことはアルミ管材の場合も薄板同様に交流アンペール力による磁気浮上方法が有効であることを示す重要な結果である。浮上実験も随時進行中であり解析結果同様の実験結果が徐々に得られている。さらに固定子磁極の極性を種々変更し,浮上に必要な注入電力の最適化を図る予定であり,今後も継続して管材用実験機による性能評価を行う。アルミ環材に対する交流アンペール式磁気浮上については,環材の懸垂浮上を念頭に置いたFEM解析や装置設計・実機製作を実施したものの,現状では所望の浮上力結果が得られていない。現状において平面コイルによる渦電流生成を利用した装置構成でアンペール力生成実験を重ねており,引き続きアルミ環材の自重を支持できるアンペール力の生成を目指す。また実機は6極コイルによる渦電流生成を利用した装置構成にも変更可能であることから,同様にアンペール力生成実験を行い前者の構成との比較評価を行う必要がある。当初予定では所望のアンペール力が得られ,懸垂浮上に向けたパラメータ導出等が予定されていた。非接触での懸垂浮上に必要となる周辺装置(センサや制御用DSP等)を準備したが,所望のアンペール力が得られておらず,製作した装置に対し解析,実験の両面から磁気回路や励磁方法等を工夫している段階である。なお,センサ,DSPは,現在は計測用および信号発生用として使用している。以上より,現在までの達成度はやや遅れていると判定した。27年度が最終年度であるため、記入しない。電気機器工学研究項目は大別して,1交流アンペール式浮上力発生方法を用いたパイプ状非磁性金属の磁気浮上技術の確立,2交流アンペール式の浮上力増補効果を最大限に利用したリング状非磁性金属の懸垂支持,3リング状非磁性金属の懸垂浮上と制御技術,4非磁性金属フレームに対する磁気力生成法の確立,の4つである。
制癌霊の高分子化と油性化による腫瘍親和性の増強に関する基礎的研究

高分子制癌剤が,より腫瘍選択にデリバーされる理由の一つは腫瘍組織における血管透過性の亢進である.この透過性が亢進している理由が,いかなる分子レベルの機構によっているかを前田らは検討し,それが,ブラジキニン産生系が活性化しているためであることを証明した.また,稲葉,平野班員はサイズの異なる腫瘍に対して, DIVEMAーアドリアマイシン結合型高分子制癌剤を用いて制癌実験を行い,腫瘍直径が数mm以上のものに対しては高分子化した方が,より有効であることを示し,前田らの提唱している固型腫瘍のEPR効果(Enhanced permeability and retention effect)によることを裏付けた.また,稲田は磁性化酵素がポリエチレングリコール結合酵素において可能であることを示し,将来磁石による固型腫瘍へのターゲティングが可能であることを示した.高橋班員はネオカルチノスタチン結合型結腸癌モノクローナル抗体(Aー7)によって動物モデルならびにヒト臨床においてものNCSよりはるかに有効であることを示した.今野および前田は,腸癌の肝転モデルに油剤化制癌剤SMANCS/Lipiodolを門脈より,手術時に投与することによって肝転移癌に対し左倒的に有効な予防法を開発した.桑野班員は薬剤耐性の克服にレチフールその他(ベンジルイソキノリン誘導体)ー等油剤が有用であることをin vitro系で示した.前田らは,スマンクスのもつBRM効果の解析した結果,スマンクスはマクロファージなどの活性化に加えて,ガンマインターフェロンをも誘導することをマウスの実験で見出した.つまり,高分子(ポリアニオン)結合によって制癌剤にもたらされる一つのメリットであることがわかった.高分子制癌剤が,より腫瘍選択にデリバーされる理由の一つは腫瘍組織における血管透過性の亢進である.この透過性が亢進している理由が,いかなる分子レベルの機構によっているかを前田らは検討し,それが,ブラジキニン産生系が活性化しているためであることを証明した.また,稲葉,平野班員はサイズの異なる腫瘍に対して, DIVEMAーアドリアマイシン結合型高分子制癌剤を用いて制癌実験を行い,腫瘍直径が数mm以上のものに対しては高分子化した方が,より有効であることを示し,前田らの提唱している固型腫瘍のEPR効果(Enhanced permeability and retention effect)によることを裏付けた.また,稲田は磁性化酵素がポリエチレングリコール結合酵素において可能であることを示し,将来磁石による固型腫瘍へのターゲティングが可能であることを示した.高橋班員はネオカルチノスタチン結合型結腸癌モノクローナル抗体(Aー7)によって動物モデルならびにヒト臨床においてものNCSよりはるかに有効であることを示した.今野および前田は,腸癌の肝転モデルに油剤化制癌剤SMANCS/Lipiodolを門脈より,手術時に投与することによって肝転移癌に対し左倒的に有効な予防法を開発した.桑野班員は薬剤耐性の克服にレチフールその他(ベンジルイソキノリン誘導体)ー等油剤が有用であることをin vitro系で示した.前田らは,スマンクスのもつBRM効果の解析した結果,スマンクスはマクロファージなどの活性化に加えて,ガンマインターフェロンをも誘導することをマウスの実験で見出した.つまり,高分子(ポリアニオン)結合によって制癌剤にもたらされる一つのメリットであることがわかった.