hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
成体脳のニューロン新生に関与するPax6の機能解析

脳を構成する細胞は大きく分けてニューロンとグリア細胞からなる。グリア細胞の中で最も多いとされるアストロサイトは、ニューロンの活動を能動的に制御していることが明らかになってきた。さらに、この数年の間に、アストロサイトは分子発現レベルにおいて神経幹細胞と共通の性質を持つことが明らかになってきた。すなわち、ある種のアストロサイトは実際に多能性のある神経幹細胞として振る舞い、ニューロンを生みだすことが生体内でも培養系でも報告されてきた。しかし、アストロサイトの発生機構に関する分子的知見はほとんどない。本研究では、アストロサイトの初代細胞培養法を用いて,ニューロン新生に関わる転写調節因子Pax6がアストロサイトの増殖・分化をも制御していることを明らかにした。本研究では、正常なマウス脳を用いて免疫染色を行い、アストロサイト前駆細胞およびアストロサイトがPax6を発現していることを明らかにした。アストロサイトにおけるPax6の機能を明らかにするために、胎齢18日の野生型およびPax6遺伝子の機能が失われたPax6変異マウスの大脳皮質を用い、アストロサイトの初代細胞培養を行った。その結果、Pax6の機能が失われたアストロサイトは野生型に比して細胞増殖が亢進し、未分化状態であることが明らかとなった。さらに、Pax6の機能が失われたアストロサイトは野生型に比べ高い移動能を示すことが明らかとなった。以上のことから、Pax6はアストロサイトの発生において、アストロサイト前駆細胞の増殖を抑制し、分化を亢進している可能性が示唆された。また、Pax6の機能が失われたアストロサイトの表現型はグリア細胞の腫瘍である神経膠腫に非常によく似ていることから、Pax6は神経膠腫の発生にも関与している可能性が示唆された。成体脳においてアストロサイトの詳細な観察を行った結果、大脳皮質および海馬に存在するアストロサイトのほぼすべては、Pax6陽性であることが明らかとなった。そこで、大脳皮質および海馬のアストロサイトにおけるPax6の機能解析を行った。大脳皮質および海馬に存在するアストロサイトのin vivoにおける形態を、野生型とPax6変異ヘテロ接合マウスとで比較した。方法としては、8週齢のマウスの切片で、抗GFAP抗体を用いて蛍光免疫組織染色を行い、共焦点レーザー顕微鏡により、アストロサイトの形態を観察した。その結果、野生型に比べ、Pax6変異ヘテロ接合マウスでは、アストロサイトの突起伸展や分枝が貧弱であることが明らかとなった。次にin vitroでアストロサイトの形態を観察するためにE18の野生型およびPax6変異ホモ接合マウスの大脳皮質を用いて、アストロサイトの初代培養を行った。その結果、無刺激の状態では、野生型とホモ接合マウス由来のアストロサイトは多角型を示し、形態的違いは認められなかった。次に、よりin vivoの状態を反映するために、初代培養アストロサイトに1.0mMのdbcAMPを添加し、多角細胞から星形細胞への形態変化を観察した。その結果、Pax6変異ホモ接合マウス由来のアストロサイトは、野生型に比べて形態変化が起こりにくいことが明らかとなった。以上の結果から、大脳皮質および海馬のアストロサイトにおいて、Pax6はその形態形成に関与していることが明らかとなった。中枢神経系において、アストロサイトは最も多く存在する細胞であるが、その発生、構造や機能の多くは明らかにされていない。成体脳においてアストロサイトの詳細な観察を行った結果、様々な領域に存在するアストロサイトのほぼすべては、Pax6陽性であることが明らかとなった。本研究では転写因子Pax6がアストロサイトの増殖や分化にどのように関わっているかについて、in vivoおよびin vitroの解析を行った。アストロサイトにおけるPax6の機能を明らかにするために、胎齢18日の野生型およびPax6変異ホモ接合マウスの大脳皮質を用いて、アストロサイトの初代培養を行った。その結果、ホモ接合マウス由来のアストロサイトは野生型に対し、細胞増殖が有意に増加していた。また、分化マーカーであるGFAPの発現が野生型由来のアストロサイトに比べ、ホモ接合マウス由来のアストロサイトにおいて減少していることが明らかとなった。これらin vitroの結果より、Pax6がグリア新生に関与していることが考えられたので、次にPax6がグリア新生を制御するのかをin vivoにおいて調べた。Pax6変異ホモ接合マウスは生後まもなく死亡してしまい、グリア新生が出生前後で起こる大脳皮質では解析が困難なため、大脳皮質よりも発生の早い脊髄において野生型およびPax6変異ホモ接合マウスのグリア新生を観察した。Pax6は脊髄においてもアストロサイトおよびアストロサイト前駆細胞に発現していた。アストロサイト前駆体の出現時期を前駆体のマーカーを用いて観察したが、グリア新生開始のタイミングに違いは認められなかった。興味深いことに、アストロサイト前駆細胞の増殖は胎齢16.5日で野生型に比べホモ接合マウスにおいて有意に増加していたが、胎齢14.5および18.5日では違いは認められなかった。さらにGFAPの発現量が胎齢16.5および18.5日のホモ接合マウスにおいて減少していた。これらの結果から、Pax6はアストロサイトの増殖および分化を制御していることが示唆された。

すなわち、ある種のアストロサイトは実際に多能性のある神経幹細胞として振る舞い、ニューロンを生みだすことが生体内でも培養系でも報告されてきた。しかし、アストロサイトの発生機構に関する分子的知見はほとんどない。本研究では、アストロサイトの初代細胞培養法を用いて,ニューロン新生に関わる転写調節因子Pax6がアストロサイトの増殖・分化をも制御していることを明らかにした。本研究では、正常なマウス脳を用いて免疫染色を行い、アストロサイト前駆細胞およびアストロサイトがPax6を発現していることを明らかにした。アストロサイトにおけるPax6の機能を明らかにするために、胎齢18日の野生型およびPax6遺伝子の機能が失われたPax6変異マウスの大脳皮質を用い、アストロサイトの初代細胞培養を行った。その結果、Pax6の機能が失われたアストロサイトは野生型に比して細胞増殖が亢進し、未分化状態であることが明らかとなった。さらに、Pax6の機能が失われたアストロサイトは野生型に比べ高い移動能を示すことが明らかとなった。以上のことから、Pax6はアストロサイトの発生において、アストロサイト前駆細胞の増殖を抑制し、分化を亢進している可能性が示唆された。また、Pax6の機能が失われたアストロサイトの表現型はグリア細胞の腫瘍である神経膠腫に非常によく似ていることから、Pax6は神経膠腫の発生にも関与している可能性が示唆された。
個体光合成系構築にかかわるシステミック・糖センサー・レドックス制御系の包括的解析

シロイヌナズナを用いて、成熟葉の光環境が発生途上の葉に及ぼす影響を調べた。若い葉の葉身の長軸/短軸比、解剖学的性質は自身の光環境とともに成熟葉の光環境に影響された。植物ホルモンのジベレリン(GA)とサイトカイニン(CK)が光環境やN条件に応じて植物体内の物質分配を調節するシグナルである可能性を検証した。材料としてイタドリを用い、強光・弱光、高N・低N条件下で栽培し、外生GA、CK、GA合成阻害剤を添加したときの形態的・生理的形質の変化を解析した、外生GA、CKによってL/Rは増加し、GA阻害剤によってL/Rが低下した。また、外生GAはLMAを低下させ、GA合成阻害剤はLMAを増加させた。陽葉陰葉分化に関与するシステミックな制御因子の探索に向けて、モデル植物シロイヌナズナを用いて解析を進めた。まず、シロイヌナズナを強光下(360μmol m^<-2>s^<-1>)または弱光下(60μmol m^<-2>s^<-1>)で水耕栽培し、陽葉と陰葉の形成を観察した。次に、成熟葉シグナルが発生初期の葉の陽葉陰葉分化を規定するというシロザの知見が、シロイヌナズナで再現されるか否かを調べるため、部分被陰処理を行って未熟葉の切片を観察した。シロイヌナズナのロゼット葉は、強光下で細長く、弱光下で平たくなった。強光下の葉と弱光下の葉とでは、葉身縦横比が強光下の葉で有意に大きくなり、葉重あたりの葉面積が弱光下の葉で有意に大きくなった。このことから、シロイヌナズナは、強光下で細長く厚い葉を形成し、弱光下で平たく薄い葉を形成することがわかった。葉の切片を観察したところ、シロイヌナズナの陽葉と陰葉とで明確な柵状組織の細胞層数の違いは認められず、代わりに陽葉の柵状組織細胞が陰葉のそれよりも細長くなっていたことから、シロイヌナズナ陽葉の厚みは、柵状組織細胞の伸長によるものと考えられた。部分被陰処理後の未熟葉切片では、成熟葉への光強度により厚みの違いがみられるものの、柵状組織細胞の伸長度合いに明確な違いはみられなかった。シロイヌナズナでは、葉に厚みをもたせる柵状組織細胞の伸長に、未熟葉自身の光環境も関与している可能性がある。一方、部分被陰処理後の未熟葉の縦横比は、未熟葉自身は弱光下にある場合でも、成熟葉が強光下にあれば縦横比が大きくなった。未熟葉が細長くなるか平たくなるかは、成熟葉の光環境によることがわかった。植物ホルモンのジベレリン(GA)とサイトカイニン(CK)が光環境やN条件に応じた物質分配を調節するシグナルである可能性を検証した。強光・弱光、高N・低N条件下で栽培したイタドリ(Polygonum cuspidatum)を用いて、(1)外生GA、CK、GA合成阻害剤を添加したときの形態的・生理的形質の変化の解析を行った。また、(2)光環境やN条件の変化や、葉と根のバランスの変化に応じた内生GA、CKレベルを定量した。実験(1)では、外生GA、CKによって葉/根比(L/R)が増加し、GA合成阻害剤によってL/Rが低下した。また、外生GAは葉面積あたりの重さ(LMA)を低下させ、GA合成阻害剤はLMAを増加させた。これらの形態的変化を通じてNareaや光合成能力、RGRが決定されていた。実験(2)からは、L/Rが高い個体ほど内生GA、CK濃度が高いことが分かった。また、高N条件下で生育させた個体を低N条件に変化させたとき、葉への物質分配は低下し、摘葉によって葉の量を減らしたときは葉への物質分配パターンは大きく増加した。このときの内生GA濃度は、葉への物質分配比と高い相関を示し、GAが環境条件の変化に対応して最終的に葉へのC分配のバランスをとるシグナルである可能性が示された。茎頂や個葉ごとのGA濃度を解析したところ、上位の葉ほどGA濃度が高く、そのような個体では茎頂のGA濃度も高かった。これらの結果は、上位の葉で合成されたGAが茎頂に輸送され、茎頂における新葉の成長が促進された可能性を示唆する。

これまでの研究から、植物個体レベルの葉/根比(L/R)、葉の厚さ(LMA)や葉面積あたりのN濃度(Narea)などの物質分配パターンは、光環境に応じた葉のN需要および土壌からのN供給に応じて、相対成長速度(RGR)を最大化させるように調節されていることが示唆された。また、数理モデルからは、環境変化や、葉や根の損傷に応じてL/Rを最適に調節するには、葉面積あたりのC同化速度とN吸収速度の比を認識し、新葉の成長速度を制御することで実現可能なことが示された。本年は材料としてイタドリを用いた。強・弱光、N貧・富栄養条件下で栽培し、(1) GA、CK、GA合成阻害剤を添加したときの形態的・生理的形質の変化の解析、(2)内生植物ホルモンの定量的解析(理研PSCと共同研究)を行った。実験(1)からは、GAやCKによってL/RやLMAが大きく変化し、これらの形態的変化を通じてNareaやRGRが決定されることが分かった。実験(2)の内生植物ホルモンの解析によって、光環境に関わらず葉面積あたりのGAと葉/根比が相関関係を持つことから、GAが個葉のサイズをローカルに制御し、システミックに葉の枚数を制御することで、最適なL/Rが実現されている可能性が示唆された。ハツカダイコンと葉ダイコンの接ぎ木を行い、胚軸の肥大の制御メカニズムへの、地上部/地下部のシステミックな情報伝達の関与を検討した。シロザを用いて行った実験を、モデル植物シロイヌナズナで再現できるかどうかを確認した。下位葉の効果はあるものの、シロザほど顕著な効果は得られなかった。25年度が最終年度であるため、記入しない。植物ホルモン関係の研究は大きく進展した。一方、糖シグナルに関する研究は、やや遅れている。担当している大学院生が修士に入学したてであったため、即戦力とはならなかったためである。年度後半にずいぶん力をつけて来たので、2013年度には十分な研究の進展が期待できる。分子遺伝学的解析が可能な点で、シロイヌナズナは有用であるが、成熟葉シグナルの解析に適しているとは言えない。材料として、ミヤコグサやシロザを用いる。また、部分環境制御システムを作成する。当初の予定通り、糖シグナル、レドックスシグナル、植物ホルモン、に注目した研究を3名の担当者で推進する。
中世イタリアにおける訴訟法と「公権力」

平成8年度には、イタリア、特にピ-サを中心とする北イタリアの教会裁判所と都市コム-ネの裁判所における訴訟制度の展開を、既存の研究文献及び教会関係の資料により跡づけ、両者が共に早くから明確に学識法的訴訟手続を導入しつつも、手続的細部の様々な点で相違を示すことを明らかにした。この準備作業を経て、平成9年度には、とくにシチリア王国の法典である1231年のLiber Augustalisの訴訟法規定の分析が進捗した。この分析の結果、裁判権の編成については、大幅にノルマン期の伝統に依拠していること、召喚については丁度Liber Augustalis発布の頃に集大成されはじめた学識法的訴訟法の基本原則を大枠で維持しながら、その範囲内で訴訟の能率化を図っていること、出頭の強制についても、普通法訴訟理論と比較すると高権的色彩は強まっているものの、法典発布以前の実務と比較するとむしろ被告に有利な規律がみられること、和解の可能性が普通法法源に比べて制限されていること、証拠法の面では、当時の教会法の訴訟法と比較して(理由づけなどにおいて特色はあるが)大きく異なる点はないこと、糾問手続を世俗の立法としてはいち早く導入するものの、当時の教皇庁が打ち出していた諸原則を大きく乗り越えて、被疑者の手続的権利の制限により犯罪者の刑事訴追を容易にするような傾向は必ずしも見られないことなど、多くの事実が明らかになった。今後、シチリア王国のiustitiariusの裁判所の訴訟実務の研究と共に、その人的構成についてプロソポグラーフィッシュな研究を行ない、Liber Augsutalisの訴訟法の現実的な機能について検討したい。今年度は、特にシチリア王国の法典である1231年のLiber Augstalisの訴訟法規定の分析が著しい進捗を見た。その全規定を正確に解釈すると共に、ローマ法源、教会法源、同時代の教会裁判所、世俗裁判所の実務との比較を行なった。訴訟法の規定は、Liber Augustalisの中でも大きな部分を占めるものであり、その分析は中世ヨーロッパを代表するこの法典の歴史的な性格規定のためには極めて重要である。この分析の結果、裁判権の編成については、大幅にノルマン期の伝統に依拠していること、召喚については丁度Liber Augustalis発布の頃に集大成されはじめた学識法的訴訟法の基本原則を大枠で維持しながら、その範囲内で訴訟の能率化を図っていること、出頭の強制についても、普通法訴訟理論と比較すると高権的色彩は強まっているものの、法典発布以前の実務と比較するとむしろ被告に有利な規律がみられること、和解の可能性が普通法法源に比べて制限されていること、証拠法の面では、当時の教会法の訴訟法と比較して(理由づけなどにおいて特色はあるが)大きく異なる点はないこと、糾問手続きを世俗の立法としてはいち早く導入するものの、当時の教皇庁が打ち出していた諸原則を大きく乗り越えて、被疑者の手続的権利の制限により犯罪者の刑事訴追を容易にするような傾向は必ずしも見られないことなど、多くの事実が明らかになった。そのほか、東京大学法学部所蔵のア-ドルフ・ヴァッハの文庫に収められている訴訟法関係の図書について調査し、そこにおける近世教会法訴訟法の理論と実務にかかる文献を検討した。本研究においては、ピ-サを中心として、13世紀の北イタリア諸都市のおける訴訟法のあり方を、既存の研究を中心として検討した後、特に1231年にシュヨウフェン朝のシチリア王国において発布された「シチリア王国勅法集成」の訴訟法の歴史的性格を、条文の網羅的にして詳細な分析と、同時代のイタリア及び教会の訴訟理論及び訴訟実務との比較によって明らかにすることに努めた。この分析の結果、裁判権の編成については、大幅にノルユン期の伝統に依拠していること。

しかし同時代の北イタリア都市国家の発展に対応して、訴訟の官僚制的な運営の傾向が強まっていること、召喚については、丁度「シチリア王国勅法集成」発布の頃に集大成されはじめた学識的訴訟法の基本原則を大枠で維持しながら、その範囲内で訴訟の能率化を図っていること、出頭の強制についても、普通法訴訟理論と比較すると高権的色彩は強まってはいるものの、法典発布以前の実務と比較すると、むしろ被告に有利な規律が見られること、和解の可能性が普通法源と比較して制限されていること、証拠法の面では、当時の教会法の訴訟法と比較して、(理由づけなどの点で特色はあるが)大きく異なる点はないこと、糾問手続きを世俗の立法としてはいちはやく導入するものの、当時の教皇庁が打ち出していた諸原則を大きく乗り越えて、被疑者の手続的権利の制限により、犯罪者の刑事訴追を容易にするような傾向は必ずしも見られないことなど、これまで必ずしも明瞭に認識されていなかった多くの事実が明らかになった。更にこれまで収集し得た裁判にかかわる証書の分析によっても、大略、法典の分析から得られた像が確認された。
耕地生態系における物質およびエネルギ-の動態と生産ポテンシャル

1988年と1989年の2カ年にわたり水田生態系,畑生態系および草地生態系について、物質およびエネルギ-の動態と生産ポテンシャルに関する解析実験を行い、次のような成果を得た.1、水田生態系....(1)水田における施肥窒素の作物生産に対する効果の発現機構と生産効率について、各種の施肥条件下で検討し、後期重点施肥と肥効期間の長い緩効性肥料の利用および根圏域の拡大が、生産効率と窒素の利用効率を高めることを明らかにした(2)水稲における吸収窒素の各分げつへの分配には、分げつの次位に基づく系譜的な一定の順位の存在を確認した.(3)生産ポテンシャルに及ぼす施肥窒素の影響について、作期と施肥法を変えて評価モデルを開発し、その適合性を検証した.(4)登熱各期に同化した^<13>Cの穂上の穎果への分配順位を明らかにした.(5)大型水田における微気象を調査し、生育反応との関連性を明らかにした.2.畑生態系....(1)畑作物生産における堆肥,茎葉残査等による土壌の有機物蓄積の動向について明らかにした.(2)トウモロコシ、コムギ、ジャガイモについて、施肥条件による窒素の動態と生産効率の差異を明らかにした.(3)ダイズについて硝酸イオンが多くなると、地上部の窒素同化量は増すが、根粒の窒素固定能は低下することを明らかにした.3.草地生態系....(1)アルファルファについて、刈取り前に追肥した窒素の一部は根に取り込まれ、刈取り後の再生に利用されることを明らかにした.(2)マメ科作物の根粒の表層部と維管束部におけるペクチン層とリグニン層の発達程度は、作物によって著しく異なることを明らかにした.1988年と1989年の2カ年にわたり水田生態系,畑生態系および草地生態系について、物質およびエネルギ-の動態と生産ポテンシャルに関する解析実験を行い、次のような成果を得た.1、水田生態系....(1)水田における施肥窒素の作物生産に対する効果の発現機構と生産効率について、各種の施肥条件下で検討し、後期重点施肥と肥効期間の長い緩効性肥料の利用および根圏域の拡大が、生産効率と窒素の利用効率を高めることを明らかにした(2)水稲における吸収窒素の各分げつへの分配には、分げつの次位に基づく系譜的な一定の順位の存在を確認した.(3)生産ポテンシャルに及ぼす施肥窒素の影響について、作期と施肥法を変えて評価モデルを開発し、その適合性を検証した.(4)登熱各期に同化した^<13>Cの穂上の穎果への分配順位を明らかにした.(5)大型水田における微気象を調査し、生育反応との関連性を明らかにした.2.畑生態系....(1)畑作物生産における堆肥,茎葉残査等による土壌の有機物蓄積の動向について明らかにした.(2)トウモロコシ、コムギ、ジャガイモについて、施肥条件による窒素の動態と生産効率の差異を明らかにした.(3)ダイズについて硝酸イオンが多くなると、地上部の窒素同化量は増すが、根粒の窒素固定能は低下することを明らかにした.3.草地生態系....(1)アルファルファについて、刈取り前に追肥した窒素の一部は根に取り込まれ、刈取り後の再生に利用されることを明らかにした.(2)マメ科作物の根粒の表層部と維管束部におけるペクチン層とリグニン層の発達程度は、作物によって著しく異なることを明らかにした.水田生態系・田畑生態系、畑生態系、草地生態系のそれぞれについて、物質およびエネルギーの動態を種々の生産レベルについて検討する第1年目として、次の成果をえた。1.水田生態系(1)移植直前の苗に同化、吸収された^<13>Cは、移植後に減少し、その程度は、水稲品種IR24および水原258では日本晴に比べて顕著であった。また下部の葉身、葉鞘の^<13>Cは上部の葉身、葉鞘へ速やかに再分配された。(2)気象および窒素の動態からみた水田の水稲生産ポテンシャルの評価モデルを開発するために、これを構築する幾つかのサブモデルに分けて検討した。第1に、水稲の生育期間を決定する発育のうち、穎花分化期から減数分裂期までの期間は窒素施肥の影響を受けやすいことが明らかになった。第2に、日射受光量から乾物への変換効率と葉身窒素濃度との関係は水稲では中程度であり、種間差があった。第3に、m^2当たり穎花生産に及ぼす影響に葉身窒素濃度と乾物の間に差異が認められた。(3)施肥窒素の効率は、出穂前にアンモニア態が、出穂後は硝酸態が優れていた。(4)水田微気象が水稲の窒素と炭素の代謝に及ぼす影響を検討するために、まず水田内における二、三の気象要素の水平分布を明らかにした。(5)新葉への吸収窒素の分配は、穂重型品種では穂数型品種に比べて多かった。2.畑生態系(1)飼料作物連作畑におけるエネルギー動態の解明実験において、トウモロコシ乾物生産量が堆肥施用によって顕著に増大する結果をえた。(2)基肥窒素施用効果にジャガイモとサツマイモの間には種間差があることを明らかにした。

3.草地生態系(1)刈り取り前に葉面から吸収した窒素は、根に転流し、刈り取り後の再生に利用された。水田生態系、畑生態系、草地生態系における物質およびエネルギ-の動態の解明について第2年目の取り組みを行い、次の成果を得た。1.水田生態系......(1)水稲における吸収窒素の分配には、分げつの次位に基づく系譜的な一定の順位が存在することを確認した。(2)窒素の分配は、同一器官(葉身)においても、先端と基部、中肋の左右の部位によって異なることを明らかにした。(3)根圏域を拡大するにつれ、また、窒素の追肥時期が遅れるにつれ、窒素の穂への分配率が高まることを明らかにした。(4)肥効期間の長い緩効性肥料の効率的な利用と、分施による後期重点施肥は、登熟期の生長を助長して生産効率を高めることを明らかにした。(5)水稲の生産ポテンシャルに及ぼす施肥窒素の影響について評価モデルを開発し、その適合性を検証した。(6)大型水田における微気象を調査し、圃場の周辺近傍における葉温の変動傾向が著しく大きいことを確認した。2.畑生態系......(1)トウモロコシ-オオムギ連作稲の炭素収支、とくに土壌中の有機物の動態について検討した。(2)ダイズの開花と結実への土壌水分の影響を調査し、乾燥による阻害機構を明らかにした。(3)硝酸イオンはダイズの根粒着生を阻害し、窒素の固定能を低下させることを明らかにした。(4)コムギにおける窒素の追肥時期による窒素の動態と生産効率の差異を明らかにした。3.草地生態系......(1)アルファルファに対する窒素の葉面散布における窒素の分配動向を明らかにした。(2)マメ科作物の根粒表層部または維管束部におけるリグニン層またはペクチン層の発達は、作物の種類によって大きく異なったが、この差異と根粒からの窒素の放出との関連性についてはさらに検討の必要性を確認した。
HLAと連鎖した免疫抑制遺伝子とその発現の解析

HLAと連鎖した免疫抑制遺伝子(Is遺伝子)の発現とその医学生物学的意義を明らかにするために、Is遺伝子により支配される免疫低応答性の細胞レベル,分子レベル,および遺伝子レベルでの解析を進め、以下のような成果をおさめた。まず溶連菌細胞壁抗原(SCW),あるいは日本住血吸虫抗原(Sj)に対する免疫応答機構の細胞レベルでの解析を行なった。T4ヘルパーT細胞と抗原提示細胞の間の相互作用はHLA-DRにより遺伝的に拘束されているのに対し、T8サプレッサーT細胞による免疫抑制現象は、抗DQ単クローン抗体により阻止された。これにより、HLA-DR分子が免疫応答遺伝子の遺伝子産物として機能しているのに対し、HLA-DQ分子は免疫抑制に重要な分子であり、Is遺伝子の直接の遺伝子産物であることが示唆された。さらにSCWに対する低応答ハプロタイプであるDw2と,Sjに対する低応答ハプロタイプであるDw12のDQw1β鎖のアミノ酸配列の異同を検討し、【β_1】ドメインの高司変領域の違いにより、免疫抑制遺伝子の機能的相違がもたらされていることを示した。また、HLAと連鎖したスギ花粉抗原特異的Is遺伝子が抗原特異的サプレッサーT細胞を介して、IgE免疫低応答性を支配し、スギ花粉症に対する低抗性をもたらしていることを明らかにした。また、らい腫型らしい(LL)の感受性を支配する遺伝子がHLAと連鎖していることを示し、さらに、LL型らい患者より、らい菌抗原特異的サプレッサーT細胞の存在を証明した。LL型らい患者のらい菌抗原に対する非応答性がサプレッサーT細胞によりもたらされていることが示唆された。このように、ヒトにおける外来抗原に対する免疫応答の遺伝子支配が詳細に解明され、抗原特異的免疫調節機構におけるHLA-クラス【II】分子の役割りが明らかにされた。これらの研究成果は原因不明の難治性疾患の病因解明に資するものであり、さらに疾患の予防および治療への道を拓くものと期待される。
アジアにおける難治性寄生虫病(エキノコックス症等)に関する免疫診断、疫学研究

本研究の主要テーマは1)血清学的に鑑別が困難とされてきているエキノコックス症(多包虫症単包虫症)ならびに嚢虫症それぞれについての鑑別血清診断法の確立、2)遺伝子診断法の開発、3)流行地での展開であった。研究は非常に順調に進展し、原著論文32編、口頭発表(国際会議、外国学会のみ、23題)、総説その他の出版物(9編)を発表することができた。1)血清診断法については、多包虫症、単包虫症、嚢虫症それぞれについて国際的に最も信頼性が高いと評価され始めている検査法を基本的に確立でき、それぞれ米国熱帯医学会誌に発表した。2)遺伝子診断法については岡本を中心としてミトコンドリアDNAの特定の酵素遺伝子解析に基づき、単包虫の株その他のテニア科条虫についての分子系統樹の解析に有用であることを報告した。その後、北海道で分離された多包虫の株を用い、ミトコンドリアDNAの全塩基配列の解読に成功し、現在では条虫、吸虫すべての遺伝子解析が基本的には可能になったと判断している。この研究成果は中尾を中心に進められたもの(論文作成中)である。3)エキノコックス症については中国、四川省と青海省にまたがるチベット高地の住民であるチベット民族を対象とするエキノコックス症疫学調査にEm18-immunoblot法による多包虫症と単包虫症との鑑別診断法が導入され、その他の血清診断法、画像診断法との比較解析から最も信頼性が高い方法であるという成績が得られている(論文準備中)。また、嚢虫症についての血清診断法をインドネシア(イリアン・ジャヤ)、パプア・ニューギニア、中国、南アフリカに展開し、それぞれの国々での深刻な流行の実態が判明し始めている。現在これらの国々以外の流行国からも共同研究の相談を受けている。これらの血清診断、遺伝子解析研究成果に基づき、来年度からの新規の国際学術(共同研究)で更なる展開が大いに期待できる。本年度の研究成果は以下の通りである。1.エキノコックス症に関する血清診断、遺伝子診断:(1)単包虫、多包虫それぞれの部分精製抗原を用い、両症の鑑別が可能な診断法を確立し、世界各地から送付された血清サンプルを用い、地球規模での考察を加えて、エキノコックス症国際会議の席で伊藤亮が報告した。(2)輸入症例である単包虫症について、血清、画像、遺伝子診断法を確立した。2.エキノコックス症に関する疫学研究:6月に、中国青海省、四川省にまたがるチベット高原におけるチベット民族の疫学調査を開始し、ポ-タブル超音波画像解析装置を用い、約5000人の住民調査から、何らかの肝臓病変を有し、エキノコックス症が疑診される人達、約300人をスクリーニングし中国人研究者を日本に招聘し、単包虫症、多包虫症の血清学的鑑別を試み、来年度の現地調査に役立つ貴重な成績を得た。3.有鉤嚢虫症に関する血清診断:(1)画期的な抗原精製に成功し、国際的に最も信頼される新しい血清診断法を確立し、(2)日韓寄生虫セミナーならびに(3)南アフリカで開催された国際嚢虫症会議において基調講演者として伊藤亮が発表した。(4)この診断法を用いて、インドネシア、イリアンジャヤ住民を対象とした疫学研究を開始し、地域住民の大多数が感染しているというショッキングな成績が得られた。4.有鉤嚢虫症に関する遺伝子診断:(1)イリアンジャヤにおける患者、患畜、中国、メキシコ、エクアドルにおける患畜から遺伝子診断に必要な有鉤嚢虫組織を採取している。

(2)遺伝子、抗原性の比較解析に必要なこれらの近縁種嚢虫を実験動物(複合免疫不全マウス)において世界で最初に作成することに成功した。5.来年度の疫学調査計画(中国、四川省、青海省地域におけるチベット民族の調査、新彊ウイグル自治区における少数民族調査)について、エキノコックス症国際会議の席で協議した。本研究の主要テーマは1)血清学的に鑑別が困難とされてきているエキノコックス症(多包虫症単包虫症)ならびに嚢虫症それぞれについての鑑別血清診断法の確立、2)遺伝子診断法の開発、3)流行地での展開であった。研究は非常に順調に進展し、原著論文32編、口頭発表(国際会議、外国傘会のみ、23題)、総説その他の出版物(9編)を発表することができた。1)血清診断法については、多包虫症、単包虫症、嚢虫症それぞれについて国際的に最も信頼性が高いと評価され始めている検査法を基本的に確立でき、それぞれ米国熱帯医学会誌に発表した。2)遺伝子診断法については岡本を中心としてミトコンドリアDNAの特定の酵素遺伝子解析に基づき、単包虫の株その他のテニア科条虫についての分子系統樹の解析に有用であることを報告した。その後、北海道で分離された多包虫の株を用い、ミトコンドリアDNAの全塩基配列の解読に成功し、現在では条虫、吸虫すべての遺伝子解析が基本的には可能になったと判断している。この研究成果は中尾を中心に進められたもの(論文作成中)である。3)エキノコックス症については中国、四川省と青海省にまたがるチベット高地の住民であるチベット民族を対象とするエキノコックス症疫学調査にEm18-immunoblot法による多包虫症と単包虫症との鑑別診断法が導入され、その他の血清診断法、画像診断法との比較解析から最も信頼性が高い方法であるという成績が得られている(論文準備中)。また、嚢虫症についての血清診断法をインドネシア(イリアン・ジャヤ)、パブア・ニューギニア、中国、南アフリカに展開し、それぞれの国々での深刻な流行の実態が判明し始めている。現在これらの国々以外の流行国からも共同研究の相談を受けている。これらの血清診断、遺伝子解析研究成果に基づき、来年度からの新規の国際学術(共同研究)で更なる展開が大いに期待できる。
体性感覚刺激の付与が脳と動機づけに与える影響：ERPとfMRIの融合研究

最終年度は、所属機関で実験が可能な脳活動データの収集から開始し、被験者は大学生と大学院生に協力してもらい、30名程度の脳波データ測定を行った。その後、他大学の施設でのfMRI実験を行った。実験課題は、時間評価課題を用い、この課題に用いる刺激呈示の方法によって異なる条件を設定可能で、以下の5条件を設定した。1)左の手の甲(左手)、2)右の手の甲(右手)、3)左の足の甲(左足)、4)右の足の甲(右足)、5)コントロール。実験データの分析は、まず、脳波データとfMRIデータをそれぞれ個別に基礎分析を行ってから、fMRI実験の結果を元に脳波データを用いてのダイポール分析を行った。脳波実験の基礎分析の結果、手(左手・右手)条件では、呈示した反対側の電極位置(C1C3C2C4)の振幅が大きくなっていた。すなわち、対側支配性が出現していた。足(左足・右足)条件では、手(左手・右手)に呈示した場合と比べて、左右差(対側支配性)が小さかった。fMRI実験の基礎分析結果では、手(左手・右手)条件では、それぞれ対側の一次体性感覚野に活動があったが、足では、左足条件では、頭頂付近に賦活があったが、右足条件では活動を検出できなかった。ダイポール分析では、fMRI実験で得られた活動部位にダイポールを置き脳波データで検証し、刺激が出る前の2秒間の区間に活動が観察され時間的な変化を観察できた。体性感覚が与える顕著性ネットワークへの影響については、今後、さらにネットワーク解析や成分分析を行う。動機づけの程度による違いも行動データの分析をし、詳細に検討を進める予定である。今年度は、研究を開始するための、倫理申請と実験の準備(刺激と課題の作成)に時間を費やした。本研究の実験を行うための最初の手続きとして、所属先の倫理委員会に申請を行った。申請書の作成と修正に手間取ったが、倫理審査委員会から実験実施とその内容に承諾を得た。本研究の目的は、体性感覚刺激が動機づけに与える影響の検討である。体性感覚刺激を被験者にとって危険ではなく、倫理にも反しない形での呈示ということを考慮し、エアパフ(圧縮空気)を用いることにした。エアパフは、圧縮の空気のことで、皮膚に当たる速度の調節やチューブの径で皮膚に当たる面積を変えることができ、安全である。装置は、自作も可能であったが、どのくらい時間が掛かるかが読み切れないので、PCでコントロールできるようなエアパフ呈示装置を専門業者へ発注した。エアパフは複数の異なる形での呈示のために細かく指定や確認を行ったので、仕様書の作成に時間が掛かったが、年度内にエアパフ呈示装置の発注と納品が完了した。脳波とfMRIを用いた生理指標測定のための課題プログラムが必要であり、E-Prime(心理実験用刺激呈示ソフト)を用いて作成に取り組んだ。課題は、時間評価課題(あらかじめ指定した数秒程度の時間を頭の中で数えてもらい、その指定された時間が経過したと思ったらボタン押しを行い、数秒後に時間評価が合っていたか間違っていたかのフィードバック情報の提示)を用いる。この課題では、フィードバック情報(刺激)の操作(どのような刺激を呈示するか)により、異なる実験条件を作り出すことが可能である。本研究では、フィードバック刺激をエアパフ刺激として左手に吹き付ける形式で呈示し、正答不正答を表現させる。課題プログラムは作成したが、エアパフ呈示装置からのエアパフ刺激を組み込んでの課題プログラムの動作の確認までは進まなかった。エアパフ呈示装置からの異なる形式でエアパフを呈示するためのエアパフ吹出口やエアチューブの太さの検討や吹出口の可動性の向上のためのパーツの指定の検討に時間を要したため、エアパフ装置の発注と納品が遅れた。しかし、実験(生理/行動指標測定)遂行ための準備の最も難易度の高い部分の準備を終えられた。研究の進捗はやや遅れているので、速やかに実験実施を進めていきたい。昨年度は一年目ということで、本研究の脳活動実験を行うための倫理申請の手続きから申請と承認まで、課題プログラムの作成といった研究開始の基礎を整えることに想定以上に時間が取られた。今年度は、昨年度に作成した実験課題プログラムの最終確認から行った。課題は、E-Prime(心理実験用刺激呈示ソフト)を用いて、時間評価課題を作成した。フィードバック情報(刺激)の操作(どのような刺激を呈示するか)により、異なる実験条件を作り出すことができる。本研究では、フィードバック刺激を体性感覚(エアパフ)刺激として手足に吹き付ける形式で呈示し、正答不正答を表現する計画で、予備実験として被験者を募り、複数の形式でのエアパフ刺激の呈示を試した。どういう形でエアパフ刺激を呈示するのか決まらず、その理由として、繰り返してエアパフ刺激を呈示するため触覚の感度調整の難しさに直面した。エアパフ呈示機器から空気が出され皮膚に当たるその感覚が強過ぎても弱過ぎても、上手く感じ取ることができない。加えて、正答と不正答というエアパフ刺激を区別して感じ取ってもらう必要がありその設定に手間取ってしまった。

本研究の計画では、実験条件は5条件を設定するつもりではあったが、実験時には被験者毎にエアパフ呈示装置の配置等の移動、実験開始時に時間を要するため、これまでの実験と比較すると実験者の負担も増え、実験時間の延びは被験者の負担になることから、条件を減らすことを検討している。研究の倫理審査申請と承認、実験課題プログラムの作成、実験課題に用いる体性感覚(エアパフ)刺激の作成と設定に手間取っている。実験課題プログラムは、これまで用いていたものを修正し使用できる部分も多いため、そう時間は掛からなかった。体性感覚(エアパフ)刺激と課題を動かすパソコンとを繋ぎ、稼働させることに時間を要した。エアパフ刺激の呈示の形式を決定するため、複数の予備実験を行ってみたが、複数種類の体性感覚刺激の区別、感じ分けが難しさで予備実験が中断止してしまった。脳波計へのトリガー入力の確認まで進めることができなかった。実験遂行には機器設定も大事であるが、被験者への実験説明書、同意書、利き手テスト、謝金の支払いという部分の準備は整えることが出き、被験者希望者も事前募集も済ませることができた。本研究は予定より遅れているが、昨年度の計画の通り、エアパフ刺激の呈示の形式を決定し、刺激呈示と課題プログラム設定を完了させ、脳波計へのトリガー入力までの設定を終えることができた。予備実験も行ったが、年度末に差し掛かり、脳波測定の本実験を遂行するところまでは年度内には終わらなかった。実験課題が完成したので、fMRI実験のための予備実験も行なった。fMRI実験での実験で、手(左右の甲の指)と足(左右の甲と指)、4つの部分をそれぞれ別々に動かし、またその4部位に手動にてエアパフを吹きかけて、脳の体性感覚野の活動を確認した。手は対側の部位が活動し、足(特に足の甲から指先)は大脳縦列の内側にその領域があるため、脳波では同側の活動として測定される。fMRI実験(予備)の結果、想定された活動が観察された被験者とそうではない被験者に分かれたが、被験者数が少ないため、このfMRI測定による予備実験の結果を踏まえて、脳波本実験の設定(適性さ)が確認でき、またfMRI実験については脳波実験完了のあと再確認して行うこととした。実験課題で用いるエアパフ刺激の呈示の形式や実験器具の設定に手間取り、予備実験へ進むまで想定を超えた時間を要したが、fMRIでの予備実験も終え、脳波本実験を行い、必要な測定データを取るまでの準備が完了した。予備実験のデータ分析を行い、分析用のPCの準備、分析項目やその手順がスムーズに行えるように整えたので、この部分で少し遅れを取り戻し、計画の通りに研究を終える予定である。最終年度は、所属機関で実験が可能な脳活動データの収集から開始し、被験者は大学生と大学院生に協力してもらい、30名程度の脳波データ測定を行った。その後、他大学の施設でのfMRI実験を行った。実験課題は、時間評価課題を用い、この課題に用いる刺激呈示の方法によって異なる条件を設定可能で、以下の5条件を設定した。1)左の手の甲(左手)、2)右の手の甲(右手)、3)左の足の甲(左足)、4)右の足の甲(右足)、5)コントロール。実験データの分析は、まず、脳波データとfMRIデータをそれぞれ個別に基礎分析を行ってから、fMRI実験の結果を元に脳波データを用いてのダイポール分析を行った。脳波実験の基礎分析の結果、手(左手・右手)条件では、呈示した反対側の電極位置(C1C3C2C4)の振幅が大きくなっていた。すなわち、対側支配性が出現していた。足(左足・右足)条件では、手(左手・右手)に呈示した場合と比べて、左右差(対側支配性)が小さかった。
GnRHニューロンの脳内移動におけるセマフォリン3Aの役割

発生過程において嗅覚器原基から移動した生殖線刺激ホルモン放出ホルモン(GnRH)産生ニューロンは脳内に進入後、中隔背側部で腹側方向へ進路を変更する。ニワトリ胚では嗅球と中隔背側部に反発性軸索ガイダンス分子セマフォリン3A(Sema3A)の局所的発現があり、進路変更におけるSema3Aの関与が推察された。ニワトリ胚前脳にエレクトロポレーション法でSema3A遺伝子を異所性導入すると、GnRHニューロンは異所性Sema3A発現領域近傍で分散し、後方への移動が障害された。生体内でSema3AはGnRHニューロンに対し反発性に作用することが判明した。生殖腺刺激ホルモン放出ホルモン(GnRH)産生ニューロンは脳外から脳内へ移動し視床下部に定着する。本研究は、脳内におけるGnRHニューロンの進路変更が反発性軸索ガイダンス分子セマフォリン3A(Sema3A)により制御されている可能性について、ニワトリ胚を用いて実験的に検証することを目指している。組織培養によるニューロン移動アッセイでは、GnRHニューロンの移動能はSema3Aによって抑制され、受容体ニューロピリン1(NP1)抗体投与により抑制が解除されている。生体内でもSema3AがGnRHニューロンに対して同様の反発活性を示すかどうかを知るために、リコンビナントヒトSema3A浸漬デキストランビーズの前脳内側部への移植を試みた。孵卵3.5日胚(E3.5)を用いた脳室内へのビーズ移植は比較的容易であったが、脳実質内への移植はむずかしく、移植方法を検討している段階である。移動中のGnRHニューロンはSema3A受容体であるニューロピリン1(NP1)mRNAを一時的に発現する。移動過程においてGnRHニューロン上のNP1発現パターンに違いがある可能性を考え、脳内移動が盛んなE6-7にてNP1抗体とGnRH抗体との蛍光二重染色を行った。進路変更前では嗅神経内側枝に沿って移動中の多くのGnRHニューロンはNP1を共発現していたが、移動経路途上あるいは進路変更地点では、嗅神経内側枝から離れたGnRHニューロンはNP1を発現していなかった。この結果は、GnRHニューロンの進路変更にNP1が関与する可能性を強く示唆する。NP1 siRNAを用いてGnRHニューロン上のNP1発現抑制を行うための条件設定を検討している。(1)生殖腺刺激ホルモン放出ホルモン(GnRH)産生ニューロンは脳外から脳内へ移動し視床下部に定着する。ニワトリ胚における組織学的観察から、GnRHニューロンの脳内進入と進路変更に反発性軸索ガイダンス分子セマフォリン3A(Sema3A)が関与している可能性を想定した。本研究では生体におけるSema3AのGnRHニューロンに対する反発活性を検証するために、脳内の移動経路上にSema3A遺伝子を異所性導入し、GnRHニューロンの反応性を調べた。GnRHニューロンの脳内進入が始まる前の孵卵3.5日の前脳内側部にエレクトロポレーション法によりニワトリSema3A遺伝子(Watanabe et al., 2014)を導入し、3日後にGnRHニューロンの動態を調べた。前脳内側部へのSema3A遺伝子導入個体では、脳内に進入したGnRHニューロンは異所性Sema3A発現領域近傍で塊状となり、中隔背側部への移動が阻害された。また、正常発生ではGnRHニューロンは前脳内側部表層に沿って中隔背側部へ移動後、腹側方向へ分散するが、一部のGnRHニューロンはSema3A発現領域近傍で脳実質内に分散する傾向を示した。これらの結果は、脳内に発現するSema3AはGnRHニューロンの移動に対し反発性に作用することで、GnRHニューロンの脳内移動に重要な役割を果たしていることを示す。(2)GnRHニューロン移動におけるSema3Aの作用に加えて、嗅覚系に発現しているソマトスタチン(SS)のGnRHニューロン移動に対する役割を知るために、孵卵3.5日嗅板組織のコラーゲンゲル三次元培養にて調べた。SS(1nM)あるいはSSアナログのオクトレオチド(100nM)の投与により組織片から培地へ移動するGnRHニューロン数は有意に増加した。SSはGnRHニューロンの嗅神経に沿った移動を調節している可能性がある。嗅覚器原基を発生起源とする生殖線刺激ホルモン放出ホルモン(GnRH)産生ニューロンの脳内移動における反発性軸索ガイダンス分子セマフォリン3A(Sema3A)の役割について調べた。ニワトリ胚では、GnRHニューロンの脳内移動様式は神経線維依存性から非依存性へと変化し、かつ腹側方向へ進路の変更が生じる。移動中のGnRHニューロンを含むニワトリ胚脳組織とSema3A分泌細胞塊との共培養実験では、GnRHニューロンの移動能はSema3A存在下で著しく低下し、ニューロピリン1抗体投与により回復する。Sema3AのGnRHニューロンに対する反発活性を生体で検証するために、昨年度に続いてエレクトロポレーション法によるSema3A遺伝子のニワトリ胚前脳内への異所性導入を行った。脳内に進入したGnRHニューロンは移動経路途上の異所性Sema3A発現領域近傍で分散し、より後方への移動が障害された。

また、脳内進入部位に多量の異所性Sema3Aが発現した場合、GnRHニューロンの多くは脳内に進入できず、進入した少数のGnRHニューロンは近傍に分散し、背側方向へは移動しなかった。これらの結果は、Sema3AはGnRHニューロンに対し、反発性に作用することを示している。正常発生では嗅球と中隔背側部の進路変更地点近傍にSema3Aは限局して発現し、移動中のGnRHニューロンの多くは受容体ニューロピリン1mRNAを発現している。生体と培養系においてSema3AのGnRHニューロン移動に対する反発活性が検証されたことから、ニワトリ嗅球原基と前脳内側部に発現しているSema3AはGnRHニューロンの脳内進入部位を限定し、中隔背側部での進路変更に関与する可能性が強く示唆された。発生過程において嗅覚器原基から移動した生殖線刺激ホルモン放出ホルモン(GnRH)産生ニューロンは脳内に進入後、中隔背側部で腹側方向へ進路を変更する。ニワトリ胚では嗅球と中隔背側部に反発性軸索ガイダンス分子セマフォリン3A(Sema3A)の局所的発現があり、進路変更におけるSema3Aの関与が推察された。ニワトリ胚前脳にエレクトロポレーション法でSema3A遺伝子を異所性導入すると、GnRHニューロンは異所性Sema3A発現領域近傍で分散し、後方への移動が障害された。生体内でSema3AはGnRHニューロンに対し反発性に作用することが判明した。(1)ニワトリ胚前脳へのSema3A遺伝子の異所性導入実験により、生体内でSema3AがGnRHニューロンの脳内移動に対し反発性に作用することが証明された。これらの結果は、嗅球に発現する内在性Sema3AはGnRHニューロンの嗅球への進入を抑制することで、背尾側方向への移動を促進している可能性を強く示唆する。(2)中隔背側部におけるGnRHニューロンの進路変更にSema3Aが関与する可能性については検証できなかった。進路変更地点である中隔背側部に至るGnRHニューロンの移動経路は前脳内側の狭い領域であることから、エレクトロポレーションによる遺伝子導入の成功率は低い。そのため、腹側方向への移動と視床下部定着が明確となる時期での解析が進まなかった。今後の課題である。(3)嗅板組織のコラーゲンゲル三次元培養系において、GnRHニューロン移動に対するソマトスタチンの促進作用が判明した。発達中の嗅覚-前脳系に一時的に発現するソマトスタチンはGnRHニューロンの嗅神経に沿った移動を調節している可能性が示された。神経発生(1)中隔背側部におけるGnRHニューロンの進路変更にSema3Aが関与する可能性を検証するために、Sema3A遺伝子の異所性発現実験を継続する。進路変更には軸索伸長の方向や細胞体の向きの変化、あるいはガイド構造となる神経線維束の形態変化などが伴うと考えられる。Sema3A遺伝子導入個体におけるGnRHニューロンの移動動態について、GnRHニューロン分布、GnRHニューロンの軸索伸長の方向、GnRHニューロンのガイド構造と考えられる嗅神経内側枝の走行との関係などに変化があるかどうか、形態的特徴を詳細に調べる。(2)脳内において、GnRHニューロンはSema3Aに対し反発性に反応することが明らかとなったことから、中隔背側部におけるGnRHニューロンの進路変更にSema3Aが関与する可能性は高い。これを実証するために、GnRHニューロン上に発現するSema3A受容体に対する遺伝子機能抑制実験が必要である。進路変更の時期
スポーツによる腋窩神経障害の発生状況調査と予防のためのコーチング

本研究は2013年度に引き続き腋窩神経障害の発症傾向とその頻度を明らかにしようとするものである。腋窩神経障害は、最近クローズアップされているスポーツ障害であり、「投げる」、腕を使って「打つ」、道具を使って「打つ」など、肩を使ってスポーツを実施する種目において多発すると考えられる。本年度は発症頻度、発症傾向に関するフィールド調査のさらなる推進と、昨年度に実現できなかった動作分析システムに関わる機材の調整、および動作分析実現の可能性について検討する一年となった。発症の頻度・傾向については、大学生運動部を対象に昨年度に調査をしたバレーボール、硬式野球、ハンドボール、陸上競技に加え、ソフトボール、バスケットボールを調査・測定をした。また昨年度に調査した種目についてもさらに追加調査を実施した。その結果、2014年度については以下のことが分かった。1発症率については男女差は認められなかった。2肩関節使用頻度の高い種目に発症率が高い傾向にあった。すなわち肩関節使用頻度が高いスポーツ種目では30.1%(バレー、ハンド、ソフト、野球)、肩関節使用頻度の低いスポーツ種目では20.6%(陸上、バスケットボール)であった(しかし有意な差は認められなかった。p=0.133)。なお種目別でみると、バレーボールやハンドボールに多かった。今後は肩関節使用頻度を練習時も含め、細かく数値化し比較する必要があると考えられる。障害を起こしやすいと考えられる動作の特徴に関する動作分析については、モーションキャプチャシステムの準備を整え、予備実験を実施した。しかし動作を検討するだけの十分な測定結果は得られなかった。原因として第一に測定精度の問題、第二に腋窩神経障害を発症している被験者の発症前データの欠落があげられる。今後は腋窩神経障害を発症する頻度の高いスポーツ種目について、縦断的測定データ取得が必要であろう。本研究はスポーツ傷害の中で最近クローズアップされて肩関節障害でもある「腋窩神経障害」について、その発生状況を分析し、障害を持つ者に対してのその緩和方法とその予防のためのコーチング方法についての知見を得ようとするものである。平成25年度は、腋窩神経障害に関する予備調査と動作分析に使用する機材の調整の一年となった。予備調査は、複数の方の使用頻度が高い運動部(バレーボール部、野球部、ハンドボール部、陸上競技部の投てき部門のそれぞれ一部の選手群)について、我々の考えている障害鑑別方法の妥当性と、実際の腋窩神経障害の発生状況を調査した。予備調査の結果、我々の実施する障害鑑別方法によって、腋窩神経障害がある程度判別できることが確認できた。また腋窩神経障害は運動種目によってばらつきがあることも確認された。これらをもとに、平成26年度はスポーツ種目別の発症頻度の違い、発生状況についての本調査の実施に入る。モーションキャプチャー用の撮影装置を平成25年度に購入予定であったが、これらのソフト及びカメラが別に準備できることになり、代わりにフォースプレートを購入した。これらを使用し、腋窩神経障害に関連する動作について、平成25年度は総合的に分析できる環境を整えるべく努力した。今のところモーションキャプチャに関してはソフトの準備と撮影環境の整備が十分とは言えず、平成26年度中の予備動作実験実施のための準備をしている状況である。p=0.133)。フィールドワークとしての腋窩神経障害の発生状況調査は順調であり、26年度の早い時期に中京大学体育学研究科倫理委員会の承認を受けて本調査に入る予定である。一方動作分析については、機材調達に時間がかかり、さらに購入品目を変更したことにより納期が遅くなった。平成25年度中にモーションキャプチャーの動作確認が終了予定であったが、現在データ取得方法と、実験環境(体育館内の環境)の整理をしている。平成26年度の上半期には、データの取り込みの確認ができると考えられる。

平成26年度上半期の間に倫理委員会の審査を受け、腋窩神経障害の発生状況に関する本調査に入る。本年度は昨年度に実施した部活動の被験者数を増やすこと、および新たにいくつかの部活動のについて腋窩神経障害の調査を実施する。また、動作分析については、平成26年度の上半期の間にモーションキャプチャの動作確認とパイロットスタディを実施する。さらに、我々の考えているストレッチング方法によって、腋窩神経障害を有する選手の障害緩和が実現するかどうかの調査の実施を開始する。フィールドワーク時に被験者に支払う「被験者謝金」が必要なくなり、さらに出張等の「旅費」は、別に支払いが可能になったために残額が生じた。次年度に「被験者謝金」が必要になった場合に、この残額を充てる。しかし、今年度と同様に「被験者謝金」が不必要になった場合には、研究成果公表のためのホームページ作成のためパソコン購入および作成ソフトの購入、または学会旅費等に使用する予定である。