hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
高温登熟による胴割れ米発生に対する分子育種的解決策の開発

地球温暖化による夏季の異常高温が,胴割れ米を誘発し,コメの品質低下を引き起こしている.胴割れ米の発生低減にむけた対策の多くは,栽培方法や籾米の保存方法の見直しといった応急的な処置であり,より効果の高い根治的解決策が切望されている.これまでの研究から,申請者は胴割れ米の発生にオルガネラゲノムが関与し,オルガネラゲノムの置換によって胴割れ米の発生が抑制できることを明らかにした.これまでに,イネのオルガネラ(葉緑体,ミトコンドリア)をそれぞれ精製し,それらから抽出したオルガネラゲノムに対して次世代シーケンサーを用いて解析することで,従来よりも高精度にイネのオルガネラゲノムを解読することに成功した.また,1年間に6世代のイネ栽培を可能にしたバイオトロン栽培法を用いて作出した細胞質置換系統について,それらの遺伝子発現プロファイルを明らかにする目的で,細胞質置換系統の止め葉よりRNAを抽出し,マイクロアレイ解析を行い,オルガネラゲノム置換によって生じた遺伝子の発現変動を明らかにした.遺伝子発現に変動がみられた遺伝子群の中に光合成関連遺伝子が多く含まれていたため,細胞質置換系統の光合成能力を測定するとともに,葉緑体ゲノムにコードされている遺伝子の発現量に着目し,これらのプロセッシングに変化が生じていることを明らかにした.この結果は,シロイヌナズナにおける雑種強勢(ヘテローシス)に関する研究結果と酷似しており,核ゲノムとオルガネラゲノム間のクロストークに関する新たな知見として,非常に興味深い.地球温暖化による夏季の異常高温が,胴割れ米を誘発し,コメの品質低下を引き起こしている.胴割れ米の発生低減にむけた対策の多くは,栽培方法や籾米の保存方法の見直しといった応急的な処置であり,より効果の高い根治的解決策が切望されている.これまでの研究から,申請者は胴割れ米の発生にオルガネラゲノムが関与し,オルガネラゲノムの置換によって胴割れ米の発生が抑制できることを明らかにした(未発表).本年度は,イネのオルガネラゲノムの遺伝的多様性を明らかにする目的で,イネのオルガネラゲノムを次世代シークエンサーを用いて,解読を行った.最初にIlluminaのMiSeqを用いたゲノム解読を試みたが,これによって得られるショートリードデータだけではゲノム配列の解明が困難であったため,ロングリードデータが得る目的でPacBio R2によるゲノム解読を実施した.得られた大規模データを材料に,さまざまな解析ソフトを使用して,イネのオルガネラゲノムの高精度解読を目指している.本研究の更なる進展によって,オルガネラゲノムを対象とした育種の可能性も提示したい.研究室の異動があり,研究活動の円滑な実施が困難な時期もあったが,次世代シークエンサーデータの解析を進めることで,状況に応じた研究の進展が達成できた.今後は,さまざまな実験活動を順次再開していきたい.地球温暖化による夏季の異常高温が,胴割れ米を誘発し,コメの品質低下を引き起こしている.胴割れ米の発生低減にむけた対策の多くは,栽培方法や籾米の保存方法の見直しといった応急的な処置であり,より効果の高い根治的解決策が切望されている.これまでの研究から,申請者は胴割れ米の発生にオルガネラゲノムが関与し,オルガネラゲノムの置換によって胴割れ米の発生が抑制できることを明らかにした(未発表).これまでに,イネのオルガネラ(葉緑体,ミトコンドリア)をそれぞれ精製し,それらから抽出したオルガネラゲノムに対して次世代シーケンサーを用いて解析することで,従来よりも高精度にイネのオルガネラゲノムを解読することに成功した.また,1年間に6世代のイネ栽培を可能にしたバイオトロン栽培法を用いて作出した細胞質置換系統について,それらの遺伝子発現プロファイルを明らかにした.この実験では,細胞質置換系統の止葉よりRNAを抽出し,マイクロアレイ解析を行うことで,オルガネラゲノム置換によって生じた遺伝子の発現変動を明らかにした.今度は,発現が変動した遺伝子の機能に注目して,更なる研究を実施する予定である.研究室の異動があり,研究活動の円滑な実施が困難な時期があったが,次世代シーケンサー解析やマイクロアレイ解析などの実験を推進することで着実な成果を得られている.地球温暖化による夏季の異常高温が,胴割れ米を誘発し,コメの品質低下を引き起こしている.胴割れ米の発生低減にむけた対策の多くは,栽培方法や籾米の保存方法の見直しといった応急的な処置であり,より効果の高い根治的解決策が切望されている.これまでの研究から,申請者は胴割れ米の発生にオルガネラゲノムが関与し,オルガネラゲノムの置換によって胴割れ米の発生が抑制できることを明らかにした.これまでに,イネのオルガネラ(葉緑体,ミトコンドリア)をそれぞれ精製し,それらから抽出したオルガネラゲノムに対して次世代シーケンサーを用いて解析することで,従来よりも高精度にイネのオルガネラゲノムを解読することに成功した.また,1年間に6世代のイネ栽培を可能にしたバイオトロン栽培法を用いて作出した細胞質置換系統について,それらの遺伝子発現プロファイルを明らかにする目的で,細胞質置換系統の止め葉よりRNAを抽出し,マイクロアレイ解析を行い,オルガネラゲノム置換によって生じた遺伝子の発現変動を明らかにした.遺伝子発現に変動がみられた遺伝子群の中に光合成関連遺伝子が多く含まれていたため,細胞質置換系統の光合成能力を測定するとともに,葉緑体ゲノムにコードされている遺伝子の発現量に着目して,研究を進めている.

これまでの結果から,光合成能力の向上が胴割れ米の発生抑制に寄与していることが推測されたが,どのように発生を抑制しているのかは依然として不明なため,さらなる研究を続けたい.研究は順調に進展し,データが蓄積されている.ただし,データ内には猛暑や冷夏などといった年度ごとの圃場における環境変動の影響が含まれており,圃場で栽培したイネサンプルを可能な限り長期間継続的に調査するため,次年度分サンプルの解析費用を繰り越し.より信頼性の高い研究結果に結びつけたいと考えている.地球温暖化による夏季の異常高温が,胴割れ米を誘発し,コメの品質低下を引き起こしている.胴割れ米の発生低減にむけた対策の多くは,栽培方法や籾米の保存方法の見直しといった応急的な処置であり,より効果の高い根治的解決策が切望されている.これまでの研究から,申請者は胴割れ米の発生にオルガネラゲノムが関与し,オルガネラゲノムの置換によって胴割れ米の発生が抑制できることを明らかにした.これまでに,イネのオルガネラ(葉緑体,ミトコンドリア)をそれぞれ精製し,それらから抽出したオルガネラゲノムに対して次世代シーケンサーを用いて解析することで,従来よりも高精度にイネのオルガネラゲノムを解読することに成功した.また,1年間に6世代のイネ栽培を可能にしたバイオトロン栽培法を用いて作出した細胞質置換系統について,それらの遺伝子発現プロファイルを明らかにする目的で,細胞質置換系統の止め葉よりRNAを抽出し,マイクロアレイ解析を行い,オルガネラゲノム置換によって生じた遺伝子の発現変動を明らかにした.遺伝子発現に変動がみられた遺伝子群の中に光合成関連遺伝子が多く含まれていたため,細胞質置換系統の光合成能力を測定するとともに,葉緑体ゲノムにコードされている遺伝子の発現量に着目し,これらのプロセッシングに変化が生じていることを明らかにした.この結果は,シロイヌナズナにおける雑種強勢(ヘテローシス)に関する研究結果と酷似しており,核ゲノムとオルガネラゲノム間のクロストークに関する新たな知見として,非常に興味深い.次世代シークエンサーデータの解析を完了させ,イネのオルガネラゲノムの構造を明らかにするとともに,その多様性に対する理解を深めたい.また,胴割れ米の発生機序に対して分子遺伝学的に迫りたい.次世代シーケンサーを用いたイネのオルガネラゲノムの解読と合わせて,ゲノム構造にも踏み込んで,論文発表を予定している.また,オルガネラゲノムを置換したことで遺伝子発現が変動することが明らかになり,これらの変動遺伝子の個々の役割(機能)に注目した研究を進めていく予定である.1年間に6世代のイネ栽培を可能にしたバイオトロン栽培法を用いて作出した細胞質置換系統について,遺伝子発現プロファイルを明らかにしたところ,光合成関連遺伝子の発現量に変動が認められ,細胞質置換系統の光合成能力にも違いが測定された.今後は,葉緑体ゲノムにコードされている遺伝子の発現量にも着目し,光合成能力を向上させている分子メカニズムの解明に取り組みたい.研究室の異動があり,研究活動を一時的に停止する必要があったため.研究室異動後の研究活動再開までの準備に時間がかかり,予定していた実験の一部を実施することができなかったため.研究は順調に進展し,データが蓄積されているものの,データ内には猛暑や冷夏などといった年度ごとの圃場における環境変動の影響が含まれており,圃場で栽培したイネサンプルを可能な限り長期間継続的に調査するため,次年度分サンプルの解析費用を繰り越し.より信頼性の高い研究結果に結びつけたいと考えている.予定していた研究内容を順次実施していきます.
「共生の倫理学」の基礎構築をめざした多文化性と多文化共生に関する現象学的研究

本研究は、共同体に関する人文社会学(歴史学、社会学、政治学等)の成果を検証することで、古来、人間が、原系列との同時的意識や、土地や共同体への没入の意識によって自己の存在を支えられてきたことを解明した。また、こうした解明の成果を、生の現象学や現象学的精神病理学の成果に接続させることで、諸個人の生の根底に、原系列としての〈生〉との結びつき、および、共同体や大地との結びつきがあることを哲学的に解明した。本年度の研究課題は「『生の現象学』における「文化」の一般的規定の明確化」であった。四年に亘る研究全体の基礎固めのために、本年度は、ミシェル・アンリの「生の現象学」の観点に立って「文化」を考察する際の基本的スタンスを明確化し、問題の焦点を浮かび上がらせることに努めた。研究成果としては、9月28日に開催された、日本ミシェル・アンリ哲学会主催の特別シンポジウム「ミシェル・アンリとフランス現象学」において、"La naissance de lacultured'apres laphenomenologie de lavie chez Henry"と題する提題を行い、また、11月4日には、ルーヴァン・カトリック大学(ベルギー)で開催されたJournees d'etude Fonds Michel Henry : Genese et structure de L'Essence de lamanifestationにおいて、同一タイトルで内容の一部を変更した発表を行った。ここでは、「文化」を、「意味」の現出ではなく、「価値」の現出として理解し、アンリの「生」概念が、この「価値の現出」の可能性として捉えられていることを確認した上で、自己受苦に基づく自己超過としての生がいかに文化を形成するか、また、生によって形成された文化の本質的特徴、文化に対立する「生の病」としての野蛮の由来、さらには、この野蛮からの救済としての文化の位置づけ等について検討した。また、後半は、常に社会制度や共同体のうちで現出するという文化の社会的側面を、アンリの「生の現象学」からいかに説明できるかについて考察した。この研究の成果は、2014年6月28-29日に北海道大学で開催予定の日本哲学会第73回大会にて「個体と文化ーアンリの生の現象学における制度化と共同体」というタイトルで発表予定である。平成26年度の研究課題は「主体的個体に定位した「文化の現象学」の構築」であった。文化という現象は、一般的に、個体を超えた次元で生成するものと理解されている。ある個体に特殊な文化など通常はありえず、文化とは共同体の文化であり、また、一つの伝統として社会の中で制度化されたものだとされる。そして、個体とは、しばしば、こうした共同体や制度のなかで形成された文化によって、一方的に規定されるものとして理解されるのである。だが、主体的個体に定位するミシェル・アンリの「生の現象学」のうちには、個体から出発して文化を説明しようとする意図を見出すことができる。平成26年度の前半は、とりわけ、ミシェル・アンリの著書『マルクス』の検討を通して、個体的生の現象学的考察から出発して、制度としての文化や共同体の文化をいかに説明できるかを考察した。その成果は、「個体と文化ーアンリの生の現象学における制度化と共同体」にまとめ、平成26年6月に日本哲学会第73回大会(北海道大学)において発表した。また、平成26年度の後半は、多文化主義形成の背景を解明するために、文化人類学、ナショナリズム論、国民国家論、社会心理学などのテキストを通して、文化、民族、国民、国家等がいかに理解されてきたかを検討した。今後も、この研究の方向性を継続する必要があるが、現在のところ、これらの学問分野の基本的理解が、文化、民族、国民などを構築主義的な観点から解明する点にあることが確認されつつある。また、構築主義的な観点に立った場合、従来主張されてきた多文化主義も、むしろ本質主義に基づくものと見なさざるをえないことも見えてきた。今後は、こうした方向の研究性を、ミシェル・アンリの生の現象学の研究と接続する可能性を探っていくことになる。平成27年度の研究課題は「文化形成と多文化性の現象学的考察」であった。こうした観点から、ここでは、もっぱら経済史、比較社会学、政治学、ナショナリズム論、国民国家論、社会心理学、文化人類学などの人文社会諸科学が、とりわけ「共同体の形成」というテーマについていかなる研究を展開してきたかを探究した。「共同体」がテーマの俎上に上がるのは、文化が共同体を離れてはありえないからであり、また、個体が文化を生きることが、個体の共同体との関わりと緊密に関係しているからである。研究は、主に、原始共同体から近代に至るまで、共同体がいかに形成され、また変遷してきたかを、歴史的、政治的、社会学的、人類学的、心理学的な観点から考察した。そこで明らかになったのは、原始以来、自然や共同体と密着して生きてきた個人が、近代へいたるプロセスのなかで、徐々に共同体から分離し、自立し、孤立化していく過程の詳細であり、また、そこで生じたと思われる経済学的、社会学的、心理学的な「生」の構造の変遷である。また、こうした共同体の変遷に引き続いて生じた、近代以降の国民国家形成やナショナリズム運動の政治的、社会学的、心理学的意味についても考察し、これら国民国家やナショナリズム運動が、「生」の起源としての共同性から分離された個人の生にいかに働き掛け、いかなる影響を与えたかを探究した。

本研究は、研究遂行の途中で、当初の計画の不十分さに気づかされ、本来想定していなかった多様な人文社会科学の成果についての検討を余儀なくなれた。そのため、本年度の研究成果としては「個体と文化ーアンリの生の現象学の視点から」(『ミシェル・アンリ研究』第5号)にとどまった。しかし、上記の迂路は必要なものであり、この迂路を経て、再度、ミシェル・アンリの生の現象学に立ち戻ることで、当初の想定以上の研究成果に到達できるものと確信している。「研究実績の概要」にも記したように、本研究は、研究遂行の途中で、当初の計画の不十分さに気づかされ、本来想定していなかった多様な人文社会科学の成果についての検討を余儀なくなれた。そのため、研究遂行にはやや遅れが見られるが、しかし、この遅れ(迂路)は、研究を深めるためには必要な遅れ(迂路)であり、今後の研究にとっては、ここでの研究の成果がおおいに生きてくるものと思われる。平成28年度の研究課題は「『共生の倫理学』の基礎構築・研究の総括」であったが、本研究は、研究遂行中に、当初の計画の不十分さに気づかされ、当初想定していなかった多様な人文社会科学の成果について検討する必要性がでてきたため、今年度、「共生の倫理学」の基礎構築や研究の総括という課題にまで達することができなかったことは大変に残念であった。今年度、中心的に取り組んだのは、昨年度に引き続き、近代以降の国民国家形成やナショナリズム運動の政治的、社会学的な意味の考察と、ミシェル・アンリの生の現象学、および、木村敏の現象学的精神病理学における「共同性」、あるいは「集団主観性」に関する研究であった。「共同性」や「集団主観性」に関する哲学的・病理学的研究から解明されたことは、個人の自己が、その根底にあって、あらゆる個人に通底している〈生〉に由来し、その意味で、自己がその成立そのものからしてすでに、諸個人に通底する「共同性」や「集団性」を担っているということである。しかし、この「共同性」や「集団性」は、個人の自己に先立つものであるかぎり、決して、個人の集合として成立しているわけではない。その意味で、それは個人の根底にある〈原共同性〉と呼べる。そして、本研究がまさに問題にするのは、原始からの共同体の歴史や、近代における国民国家形成のプロセス、そして、世界大戦後のグローバリゼーションの波のなかで、個人の意識とこの〈原共同性〉との関係がいかに変遷し、今に至っているかということである。本研究は、途中からの研究の方向性の転換のため、上記のような問題に対して何らかの回答をあたえるまでには至らなかったが、このような形で課題を明確にできたことには大きな意義があったと考える。ここで明確化された研究課題は、本研究プロジェクトの終了後も、引き続き探究されることになる。本研究は、共同体に関する人文社会学(歴史学、社会学、政治学等)の成果を検証することで、古来、人間が、原系列との同時的意識や、土地や共同体への没入の意識によって自己の存在を支えられてきたことを解明した。また、こうした解明の成果を、生の現象学や現象学的精神病理学の成果に接続させることで、諸個人の生の根底に、原系列としての〈生〉との結びつき、および、共同体や大地との結びつきがあることを哲学的に解明した。本年度の研究は、当初の研究目的に沿って進められ、進捗状況も、若干の遅れはあるが、おおむね順調に進展していると言える。
ダイオキシン等人為起源有害ハロゲン物質の還元処理法

ダイオキシン類の分解無害化処理アルカリ金属ナフタレニドを用いた環元反応を、有機性塩素を無機性塩化物イオンに変換して脱離させる手法としてポリ塩化ジベンゾ-p-ジオキシン(PCDDs)ならびにポリ塩化ジベンゾフラン(PCDFs)のような微量でも高い毒性を有する物質の分解無害化処理に適用した。その結果本法は以下の要件を満たしている事が判った。1.希薄溶液の完全分解:PCDDsやPCDFs分子の塩素置換数の多少に拘らず、有機性塩素が完全に無機性塩化物イオンに変換されて脱離除去できる。2.迅速処理:室温において5分以内に分解反応は完了する。3.室温での処理:室温またはそれ以下の温度において発熱的に脱塩素反応が進行する。4.簡単な処理器具と容易な操作:処理に用いる反応容器は通常用いるガラス製フラスコで良い。また、分解処理は乾燥無酸素雰囲気下において行うのが原則であるが、分解される試料中に少量のプロトン性物質(水など)が含まれていても過剰量の還元剤を用いれば問題なく分解できる。5.経済性と安全性:還元剤は安価な化学原料であるナトリウム、ナフタレン、テトラヒドロフランから調製される。また還元剤の毒性は極めて低く、分解により生成するものは無害な塩化ナトリウムと有機性塩素を含まない有機残渣である。
高感度トロポニンＴは心房細動新規発症を予測するか？

心房細動(AF)発症の高危険症例に対する新規発症予防、早期発見が重要である。しかし、AF新規発症を予測するバイオマーカーは発見されていない。我々は高感度心筋トロポニンT(hsTnT)がAF発症のバイオマーカーになりうると考えた。HsTnTとAFとの因果関係を調べる。対象は当院人間ドック受診者のうち同意が得られたもの、および当科が行っている長崎県宇久町の健康診断受診者である。横断的研究では平成24年度にhsTnTがAFと独立して関連し、hsTnT値が高値であるほどAF有所見率が高いことを掴んでいる。縦断研究として平成25年度は予後を追跡した。AF新規発症を捉えhsTnTとの関連を検討する。わが国には100万人を超える心房細動(AF)患者がおり、そのQOL・生命予後は著しく損なわれている。AF発症の高リスク例を見いだし発症を積極的に予防すること、発症を早期発見し塞栓症予防に努めることが重要である。しかしながら、AFの新規発症を予測するバイオマーカーは発見されていない。我々は既に予備解析として横断的研究を行い、高感度心筋トロポニンT(hsTnT)がAFと独立して関連する因子であること、および、hsTnT値が高値であるほどAF有所見率が上昇することを掴んでいる。本研究では、縦断的研究を通してhsTnTとAFとの因果関係を調べ、hsTnTがAF新規発症を予測するバイオマーカーとなり得るか確認することを目的とする。対象は平成24年度に久留米大学病院で人間ドックを受ける約500名のうち同意が得られたもの、および当科が毎年ボランティアで行っている長崎県宇久町の健康診断受診者である。各評価項目およびhsTnT測定値のベースラインでのデータベース化を行った。平成25年度は、平成24年度に久留米大学病院人間ドックを受けた症例のうち、インフォームドコンセントを行い、同意を得られた被験者、および平成25年度の宇久町の健康診断受診者に対して予後追跡調査を行った。この予後調査において1年間の病歴聴取に加え、心電図検査を施行しAF新規発症を捉えた。今後、ベースラインでのhsTnTの値、あるいはベースラインからのhsTnTの増加がAF新規発症の独立した危険因子であるという仮説を検証する。各評価項目およびhsTnT測定値のベースラインでのデータベース化を行う。次の項目について評価・検討する。a.一般健常者におけるhsTnTの標準値およびAFの有病率を確認する。b.前述の予備解析と同様に、hsTnTとAFとの関連、独立した関連因子かを検討する。平成25年度は、平成24年度に久留米大学病院人間ドックを受けた症例のうち、インフォームドコンセントを行い、同意を得られた被験者、および平成25年度の宇久町の健康診断受診者である。予後追跡調査を行い、その結果を解析する。この予後調査において、1年間の病歴聴取に加え、心電図検査を施行し、AF新規発症を捉える。ベースラインでのhsTnTの値、あるいはベースラインからのhsTnTの増加がAF新規発症の独立した危険因子であるという仮説を検証する。さらに、hsTnT値と心不全・心事故・脳血管事故・血管事故などとの関連についても検討する。平成24年度の人間ドックおよび宇久町健診の検査項目のデータベース化が進行中である。(1)検査項目をデータベース化:一般検診(問診、身体測定、血圧測定)、一般採血検査(血算・血液生化学検査)、検尿(微量アルブミン尿、タンパク尿など)、栄養聞取り調査

(2)心血管系サロゲートマーカーをデータベース化:心電図(不整脈、心肥大、異常Q波、ST異常)、心エコー(左房・左室径、左室駆出率、左室心筋重量係数、拡張能)、頸部血管エコー(内膜中膜厚(IMT)、プラーク数、プラーク指数)、血圧脈波検査(ABI、PWV)(3) hsTnTをデータベース化:Roche社製hsTnT測定キットを用い測定。7月に平成25年度宇久町健診を通常通り予定している。平行して、平成24年度に久留米大学病院人間ドックを受けた症例のうち、インフォームドコンセントを行い、同意を得られた被験者に対して予後追跡調査を行う。この予後調査において、1年間の病歴聴取に加え、心電図検査を施行する。AF新規発症を捉える。これらの結果を解析し、ベースラインでのhsTnTの値、あるいはベースラインからのhsTnTの増加がAF新規発症の独立した危険因子であるという仮説を検証する。さらに、hsTnT値と心不全・心事故・脳血管事故・血管事故などとの関連についても検討する。hsTnT測定費用、宇久町健診旅費、解析ソフトウェア購入等に使用予定。
地球公共施設水準の地域間・地域内格差に関する数量的研究

1.地域医療施設や社会教育施設などの地域公共施設は,住民のニードを充足し,効率的かつ平等にサービスを提供することが要求されるが,実際には相当の地域間・地域内格差が存在している.一般に施設の利用効率を高めようとすれば,集中化により格差は拡大し,格差を縮小しようとすれば利用効率は低下する.そこで,本研究は利用者の施設利用行動にどのように反映しているのか施設水準の格差の実状を調査分析し,施設配置計画における平等性と効率性のトレードオフに関する計画指標を明らかにすることを目的としている.2.研究方法としてはまずモデルによる理論的解析を行い,事例として公共図書館と地域医療施設を選び,このモデルの妥当性を検討するという手法をとった.利用者の属性と施設水準の2つの要因が利用行動に与える影響をそれぞれ別個に計量する手法として,ランダム効用理論にもとずく多項ロジットモデルが有用であることが明らかになった.3.第一の事例としては千葉県柏市において地域図書館システムに関する住民の利用状況調査を実施し,施設水準の格差が施設選択行動にどのように影響しているかを多項ロジットモデルを用いて分析した.住民属性としては,自家用車の保有,自宅における蔵書数,勤務先などが有意であり,施設水準指標としては図書館の蔵書数,図書館までの距離が有意であるとの結果が得られた.4.第二の事例としては広島県の患者調査のデータを用い,主として地域間格差についての分析を行った.市町村間の年令構成による影響を排除した訂正患者率には施設水準の影響力はあまり明らかではない.これが新患発生率と平均入院期間とどのような関係にあるのかは,一日断面調査である患者調査からは明らかにはできなかった.医療保健・教育・福祉施設などの地域公共施設は、住民のニードを充足し、効率的かつ平等にサービスを提供することが要求されるが、実際には相当の地域間・地域内格差が存在している。一般に施設の効率性を規模の拡大によって高めようとすれば、地域的格差は拡大し、反対に平等性を高めようとすれば利用効率は低下するというトレードオフ関係がある。もうひとつの問題はサービス水準の評価指標のとり方である。孝え方を大別すれば、サービスの供給水準を用いる方法,サービスの需要水準を用いる方法,サービスの結果としての効果に着目する方法などがある。本研究は、実際の地域公共施設のあり方とそれに対応した住民の施設利用行動を実証的に調査分析することによって、施設計画に用いる適切なサービス水準指標を設定し、その地域間・地域内格差を計量し、それがどのような要因によって決定されているかを考究しようとするものである。具体的事例としては、施設利用の任意性,データの得やすさ,これまでの研究の実績などから、千葉県柏市の市立図書館利用調査によって地域内格差の実態を分析し、茨城県・広島県の患者調査データによって地域間格差の実態を分析する。分析の手法としては、施設利用を効用最大化を目的とする選択行動の結果として解釈し、多項ロジットモデルを用いる。昭和61年度においては、柏市における住民の図書館利用行動に二項ロジットモデルを適用して一定の成果を挙げることができた。この方法は、例えば新しい図書館の建設が住民の図書館選択にどう影響するかを、住民の社会経済特性と関係づけながら予測することが可能である。広島県の患者調査では、県道以上の道路ネットワークに最短路アルゴリズムを適用し市町村間の最短路マトリックスを算出、これを用いて市町村間の入院距離分布を求め、その格差を分析中である。1.地域医療施設や社会教育施設などの地域公共施設は,住民のニードを充足し,効率的かつ平等にサービスを提供することが要求されるが,実際には相当の地域間・地域内格差が存在している.一般に施設の利用効率を高めようとすれば,集中化により格差は拡大し,格差を縮小しようとすれば利用効率は低下する.そこで,本研究は利用者の施設利用行動にどのように反映しているのか施設水準の格差の実状を調査分析し,施設配置計画における平等性と効率性のトレードオフに関する計画指標を明らかにすることを目的としている.2.研究方法としてはまずモデルによる理論的解析を行い,事例として公共図書館と地域医療施設を選び,このモデルの妥当性を検討するという手法をとった.利用者の属性と施設水準の2つの要因が利用行動に与える影響をそれぞれ別個に計量する手法として,ランダム効用理論にもとずく多項ロジットモデルが有用であることが明らかになった.3.第一の事例としては千葉県柏市において地域図書館システムに関する住民の利用状況調査を実施し,施設水準の格差が施設選択行動にどのように影響しているかを多項ロジットモデルを用いて分析した.住民属性としては,自家用車の保有,自宅における蔵書数,勤務先などが有意であり,施設水準指標としては図書館の蔵書数,図書館までの距離が有意であるとの結果が得られた.4.第二の事例としては広島県の患者調査のデータを用い,主として地域間格差についての分析を行った.市町村間の年令構成による影響を排除した訂正患者率には施設水準の影響力はあまり明らかではない.これが新患発生率と平均入院期間とどのような関係にあるのかは,一日断面調査である患者調査からは明らかにはできなかった.
血管肥厚に対する白血球接着阻害療法の有効性に関する基礎的研究

PTCA施行後の再狭窄は、初期反応として血管傷害部位への白血球や血小板の集積がみられることから、再狭窄は血管傷害に対する治癒過程の炎症性反応の結果と捉えることができる。これら炎症性細胞は、傷害により活性化された血管内膜に接着することにより活性化され、活性酸素、サイトカイン、細胞増殖因子等を産生・放出することから、血管平滑筋細胞の遊走・増殖などへの関与が指摘されている。一連の炎症性反応は、これら炎症性細胞の血管内膜への接着から開始される。そこで本研究では、各種血管傷害モデルを用いてこの細胞間接着阻害による血管肥厚抑制の可能性を検討した。血小板接着に関与するvon Willebrand因子阻害薬aurintricarboxylic acidはハムスター頚動脈カテーテル擦過モデルにおける血管肥厚を有意に抑制した。白血球接着の第一段階、rolling反応に関与するL-およびP-セレクチン阻害薬fucoidinの効果をVitaminE(VE)欠乏症のラット(バルーンカテーテル擦過法)およびマウス(結紮法)を用いて検討した結果、fucoidinはVE欠乏時の内膜肥厚を有意に抑制したが、対照正常動物では有意な影響はみられなかった。なお、ラット、マウスともにVE欠乏により傷害後の血管内膜肥厚が有意に増加していた。傷害部位での活性化白血球接着を生体位O^-_2依存性化学発光法にて検討した結果、VE欠乏時には白血球の接着が顕著に増加していた。なお、白血球細胞膜表面のL-セレクチン発現には両群で差はみられなかったことから、VE欠乏はrollin反応自体には影響せず、その後の接着、炎症関連物質の産生・放出等の反応を増強したものと思われる。以上の結果より、白血球の血管肥厚形成への関与は過酸化状態などにより異なることが示唆されたが、接着分子を標的とした炎症性細胞の接着阻害療法はPTCA後の再狭窄予防に有効である可能性が示唆された。白血球は障害発生後初期に障害部位に浸潤し活性酸素や各種サイトカイン等を産生・分泌することにより炎症反応の中心的役割を担っている。血管内膜肥厚形成も内膜障害に起因する反応であり、その初期過程において白血球の関与が推察される。そこで、一連の白血球が関与する反応の開始点である白血球の血管壁への粘着、すなわち白血球-血管壁間の細胞接着の阻害に基ずく血管肥厚抑制の可能性を検討した。実験動物には正常ラットと内因性抗atherogenic因子であるVitaminE(VE)欠乏ラットを用い、PIT法にて大腿動脈に血管内膜障害を作成した。白血球接着阻害薬には白血球粘着の第一段階であるrollingに関与する接着分子セレクチンの阻害作用を有するfucoidan、IP_6を用いた。VE欠乏群では障害作成3週間後にみられる新生内膜面積は対照正常群に比べ有意に増加していたが、fucoidan(10mg/kg/day)及びIP_6(30mg/kg/day)投与(障害作成後6日間)により内膜肥厚が有意に抑制された。一方、対照正常群では両薬物投与による血管肥厚への有意な影響はみられなかった。障害作成24時間後の障害部位での活性化白血球の集積をMCLA発光にて測定した結果、両群ともに発光量の増加が認められ、内膜障害後の初期に障害部位に白血球が集積していることが認められた。また、その発光量は対照正常群に比べVE欠乏群で著名に増加しており、両薬物投与によりその増加が抑制された。

なお、両薬物は本用量においてラット後肢足蹠カラゲニン浮腫モデルで同程度の有意な抑制作用を示した。以上、白血球粘着阻害によりVE欠乏時の血管肥厚増大が抑制されたことから、白血球の粘着およびそれに引き続く活性酸素やサイトカインの産生増加がVE欠乏時の血管肥厚増大に関与している可能性が示唆された。また、VE欠乏群で接着阻害薬の効果がより明らかにみられたことから、VE欠乏時に接着分子の発現が増大し、その結果肥厚形成が増大した可能性も示唆された。白血球は傷害発生後初期に傷害部位に浸潤し活性酸素や各種サイトカイン等を産生・分泌することにより炎症反応の中心的役割を担っている。血管内膜肥厚形成も内膜傷害に起因する反応であり、その初期過程において白血球の関与が推察される。そこで、一連の白血球が関与する反応の開始点となる白血球-血管内膜接着反応の第一段階、rolling反応の阻害による血管肥厚抑制の可能性を検討した。Vitamin E(VE)欠乏ラットおよびマウスを用い、それぞれバルーンカテーテル擦過法(ラット)、結紮法(マウス)による頚動脈血管肥厚へのL-及びP-セレクチン阻害薬fucoidinの影響を組織学的に検討した。ラット、マウスともにVE欠乏群では対照正常群に比べ傷害後の血管内膜肥厚が有意に増加していた。Fucoidin(10mg/kg/day)処置によりVE欠乏群では内膜肥厚が有意に抑制されたが、正常群では有意な影響はみられなかった。傷害部位での活性化白血球接着を生体位O_2^-依存性化学発光法にて検討した結果、VE欠乏群では白血球の接着が顕著に増加していた。なお、白血球細胞膜表面のL-セレクチン発現には両群で差はみられなかったことから、VE欠乏はrollin反応自体には影響せず、その後の接着、炎症メディエーター産生・放出等の反応を増強したものと思われる。以上の結果より、白血球の血管肥厚形成への関与は過酸化状態などモデル動物により異なることが示唆されたが、セレクチンを標的とした白血球接着阻害療法は血管肥厚予防に有効である可能性が示唆された。また、内因性VEの抗動脈硬化作用の一部は白血球依存経路の血管肥厚形成阻害によるものと考えられた。
脳機能計測によるバイオフィードバック学習成立の脳内過程に関する 研究

バイオフィードバックとは,自分では知覚できない身体状態をセンサによって検出し,その情報を利用して訓練を行い,やがてはそれを随意的に変化させられるようになる現象をいう。これを,脳内での意識上と意識下にわたる学習と考え,その過程をfMRI計測により明らかにする研究を行った。バイオフィードバックには多くの脳機能が同時に関係するため,いくつかの要素に分けて実験を行い,全体像と照合した。その結果,大脳前頭前野や眼窩前頭野の活動の重要性が示された。本年度は,主に実験系の構築とデータ処理手法の開発を行った。まず,皮膚温バイオフィードバックシステムを導入し,その使用法に慣熟するとともに,被験者に影響を及ぼす環境因子や心理的負荷状況を調べ,適切な実験条件を求めた。その結果,個人差を吸収できるようなベースラインの設定方法およびモチベーションを維持できるフィードバック方法がとくに重要であることが判明した。また,脳機能計測については,主にfMRIについて,さまざまな条件で被験者の反応を調べ,とくに心理的集中を確実にするための方策を探った。これは,fMRI測定とバイオフィードバック訓練が両立するためには,MRI装置の騒音等の環境下でも,バイオフィードバックに対して被験者が集中できるような条件が必須であるからである。その結果,皮膚温度をパターン化して視覚刺激として提示する方式が一つの有力な方法であることを見いだした。すなわち,単なる数値情報提示だけではなく,バイオフィードバック訓練中における自己の状況をより直感的に把握できるような表示が必要であることが示された。さらに,バイオフィードバックのモデルについてもその精緻化をはかり,従来困難であった「気づき」現象を組み込めるめどがついた段階である。一方,データから雑音成分を除去してS/N比をあげるための統計的な手法についても検討を行った。これは,データ処理過程において誤差を最小化する推定方法を求めることに帰着するが,一定の多変量空間において適用できる手法を開発しつつある。以上の準備と予備実験結果のもとに,次年度は本格的データ収集を行う予定である。昨年度の準備のもとに,本年度はバイオフィードバックに直接関係する2種類の実験を行った。ひとつは,バイオフィードバックの「気づき」に関連するもので,内的な未解決感が何らかのきっかけで一挙に解決する現象(いわゆる「閃き体験」)を扱った。視覚的に提示された2課題(アルファベット並べ替えによる単語形成,および複数熟語に共通する伏漢字の発見)を研究協力者に課し,課題遂行中の脳神経活動をfMRI装置により測定し,それと課題遂行成績との関連を調べる方法により,閃き現象に付随する脳活動部位を推定した。その結果,大脳視覚領野,手指関連運動野,前頭前野,前頭極,眼窩前頭野などに活動が検出されたが,前2者は課題遂行自体の行動に関係するものであり,後3者(いずれも前頭野)が心的操作に関連するものと判断された。とくに眼窩前頭野の活動は閃き体験の回数と相関が高く,一連の心的操作上で重要なはたらきをしていると推測された。一方,皮膚温バイオフィードバックを研究協力者に行わせた場合の,訓練中における脳神経活動を,やはりfMRIを用いて測定した。末梢皮膚温(具体的には左手示指末節)の時間経過を研究協力者前面のスクリーンに表示し,それを手がかりとして温度を上げる(あるいは下げる)努力を行うよう指示した。多くの場合,3回目程度で意識的温度制御に関する「気づき」感が得られる傾向にあった。バイオフィードバック訓練中の脳活動部位は個人により多様であり,必ずしも統一したパタンが得られなかった。これは個人ごとに学習方略が異なることに由来すると考えられる。そのため,データ解析は個人ごとに経時的に,内観報告を絡めた形で追跡する必要があるとともに,適性の問題から,研究協力者の数を増やす必要もある。翌年度は,このような問題点を勘案しつつ,実験例を増やす予定である。バイオフィードバック訓練における脳内過程を調べるために,皮膚温バイオフィードバックを対象として,訓練時の脳活動をfMRIにより計測するとともに,バイオフィードバック過程をいくつかの要素に分けて,それぞれに特徴的な脳活動をfMRI計測により捉え,全体像と組み合わせるという研究手法をとった。まず,その要素として,前年度は「気づき」を扱ったが,本年度は入力情報への関心の程度,すなわち「意識の振り向け」(attention)に関する神経過程を扱った。実験は聴覚に関してA,B二種類を行った。実験Aはある音楽メロディーに対する意識の違いを見るもので,無音状態,聞き流し状態,傾聴状態をそれぞれfMRIによって比較した。その結果,音楽受容そのものに関係する聴覚過程,メロディーに関係するイメージ生成過程,およびそれらに対する意識の振り向け過程が脳の各部位に同定され,意識に関わる活動は前頭前野の比較的下部に推定された。また,実験Bでは2種類のメロディーを混合して聞かせ,いずれか一方に意識を振り向けることを課題とした。被験者の行動はその同定数によって評価した。

その結果,大脳聴覚野,運動野,眼窩皮質,小脳等に活動が見られ,とくに眼窩皮質活動とパーフォーマンスの間に相関が見られた。以上より,音楽受容における意識の集中や弁別課題に対する神経活動は,大脳前頭前野下部において特徴的であることが示された。一方,皮膚温バイオフィードバック訓練中の脳機能計測は本年度も引き続いて行われ,訓練の成績との照合が行われた。このようなバイオフィードバック過程全体に関係する脳神経活動は,関連する変量が多岐にわたるため,実験後の内省報告(とくに用いたイメージ)を考慮するなど,慎重な解析が必要であった。その結果,訓練が進むとともに大脳辺縁系および視床下部の活動が見られる傾向にあった。現在,多変量解析等の手法により,さらに詳細な分析が進行中である。
戦後沖縄児童文化に南洋が与えた影響－儀間比呂志のライフサイクルと仕事を通して－

本研究では,戦前に南洋群島での生活経験を持ち,南洋の文化を芸術表現の糧として取り込んで,戦後の絵本制作に引き継いでいった儀間比呂志(1923ー2017)に着目した。儀間の子どもの本の仕事を通して,南洋文化を背景とした戦後沖縄児童文学・文化の系譜について考察し、論文にまとめた。また赤松俊子(1912ー2000)や土方久功(1900ー1977)など,儀間と同様に南洋群島に向かったのちに子どもの本の仕事に取り組んでいった複数の芸術家にも言及し、儀間との比較研究を行うとともに,彼らの南洋群島での活動,戦中戦後に発表された子どもの本の仕事を調査し,その成果の一部を所属学会にて発表した。本研究では,戦前から戦中の南洋群島における日本人芸術家たちの芸術活動と,彼らが戦後に発表した芸術作品の表現に着目している。従来,教育や文化史研究において戦前の南洋との関係は南進論の文脈の中で語られることが多く,とりわけ戦中の南洋を題材にした教育内容や児童書などは負の遺産として否定的に論じられてきた。無論その研究成果は踏まえつつも,本研究では芸術家の南洋体験は必ずしも南進論の一翼としてひとくくりにできるものではなく,もっと多様で豊かな文化継承の水脈が見いだせるのではないかと考えている。そこで本研究では,戦前の南洋での文化体験を持つ沖縄出身の絵本作家・儀間比呂志(1923年生まれ)を取り上げ,1彼の芸術表現がいわゆる西洋的絵画や芸術のルーツとどのように違うのか,2戦前の南洋芸術の表現的特色はどういったものなのかを明らかにしたうえで,戦後の儀間比呂志絵本の展開について研究を進めた。現在,儀間比呂志絵本の作品的特徴や作品のテーマ,モチーフについては一通り研究成果をまとめつつある。昨年度は研究の準備段階と位置付けており,西洋的芸術,とりわけ絵画表現の変遷と特徴について学ぶとともに,南洋に渡った日本人画家たちの作品について文献調査を行った。聞き取り調査がやや遅れ気味であるが、文献の収集は順調に進んでおり,美術表現についての知識理解を深め,南洋美術の系譜について知見を深めることができた。その過程で,儀間比呂志に大きな影響を与えた土方久功、杉浦佐助といった芸術家たちの作品に、いわゆる西洋的芸術様式にはない土着の精神や思想を見出すことができた。おそらくこの系譜は赤松俊子や北川民次らにも連なっているものとの仮説を立てている。また儀間比呂志作品についても考察し、戦後沖縄児童文化史の中での位置づけについてまとめることができた。教育・文化史研究において、戦前の南洋と日本の関わりは南進論の文脈の中で語られることが多く、実際に南洋を舞台にした教材や当時の児童文学作品は批判的に論じられてきた。概ねその方向性には賛同する立場をとるが、その一方で筆者は戦前の南洋と日本の文化的関わりは南進論だけで一括りにできるものではなく、もっと多様で豊かな文化継承があったと考えている。とりわけ戦後文化の復興と発展に、外地からの引揚者の影響が強かった沖縄の事例を通してその仮説を検証したいと考えてきた。そこで本研究では、戦前南洋に生活の拠点を持ち、南洋の文化を芸術表現の糧として取り込んで戦後の児童文学創作に引き継いでいった「儀間比呂志の絵本の仕事」に着目した。本研究の目的は1儀間絵本の表現に現れた南洋文化の影響、郷土性と子どもへのまなざし、作品の主題や思想を明らかにすること、2儀間のライフサイクルと作品分析を統合し、戦前の南洋文化受容を背景とした戦後沖縄の児童文学の系譜、教育との関わりを明らかにすることを通して、戦前の南洋から継承してきた文化の再評価を行うことである。今年度は、南洋群島から沖縄へという視点を持っていた芸術家として儀間比呂志のほかに丸木俊に注目し、先行研究の検討を行ってきた。また、戦前南洋群島で創作活動を行っていた芸術家で、儀間比呂志にも影響を与えた土方久功や杉浦佐助らの仕事と生涯について文献調査を進めてきた。現在、儀間比呂志絵本の書誌作成と絵本作品の主題、思想分析についてはほぼ終了しつつある段階である。昨年度の研究準備期において収集した資料によって、西洋芸術、とりわけ絵画表現の特変遷と日本への受容過程については理解を深めることができた。また、南洋に渡った美術家たちの作品の特徴やライフサイクルについても調査を進めることができた。しかし、当初から予定していた儀間比呂志への聞き取り調査は、儀間の体調が思わしくないことから計画通りに進めることができなかった。本研究は,戦前から戦中に日本の委任統治領だった南洋群島において,美術家たちがどのような芸術活動を行い,またその芸術活動が戦後の作品にどういう意味を持ったのか等を明らかにすることを目的としている。従来の教育史・文化史研究において,戦前の南洋と日本との関わりは南進論の文脈で語られることが多く,とりわけ戦中に出版された南洋を舞台にした絵本の中には,戦意高揚の役割を果たしたとして否定的に評価される作品も少なくなかった。それは一面事実であるが,一方で南洋群島を生活の場とした美術家たちの体験の何が,戦後の作品に引き継がれたのかを明らかにすることも重要な課題ではないか。とりわけ戦後文化の復興過程において,外地からの引き揚げ者の影響が大きかった沖縄の事例を取り上げ検証していくことは,ユニークな研究課題であると考えた。

そこで本研究では具体的に,戦前の南洋群島で生活経験を持ち,南洋の文化を芸術表現の糧として取り込んで,戦後の絵本制作に引き継いでいった儀間比呂志(1923ー2017)の絵本の仕事に着目し,南洋文化の継承を背景とした戦後沖縄児童文学・文化の系譜,教育との関わりについて考察した。また研究を進めるうちに,儀間だけでなく赤松俊子(1912ー2000)や土方久功(1900ー1977)など,儀間と同様に南洋群島に向かったのちに子どもの本の仕事に取り組んでいった複数の芸術家の存在と儀間との関わり,比較研究にも関心が広がっていった。そのため,赤松や土方の南洋群島での活動,戦中戦後に発表された子どもの本の仕事についても調査し,その成果の一部を所属学会にて発表した。彼らの戦中の活動や作品評価に言及できたことが研究成果の一つとしてあげられる。本研究課題を踏まえ,彼らの作品に投影された南洋文化の影響,作品世界に通底する思想などをさらに追及していくことを今後の課題としたい。本研究では,戦前に南洋群島での生活経験を持ち,南洋の文化を芸術表現の糧として取り込んで,戦後の絵本制作に引き継いでいった儀間比呂志(1923ー2017)に着目した。儀間の子どもの本の仕事を通して,南洋文化を背景とした戦後沖縄児童文学・文化の系譜について考察し、論文にまとめた。また赤松俊子(1912ー2000)や土方久功(1900ー1977)など,儀間と同様に南洋群島に向かったのちに子どもの本の仕事に取り組んでいった複数の芸術家にも言及し、儀間との比較研究を行うとともに,彼らの南洋群島での活動,戦中戦後に発表された子どもの本の仕事を調査し,その成果の一部を所属学会にて発表した。今年度は,前年度に蓄積した資料の分析と研究の進化の段階と位置付けている。さらに儀間比呂志作品の考察を深めるとともに、戦前南洋に渡った芸術家たちの造形表現が、戦後日本の美術の中でどう評価されてきたか、またこれらの系譜が絵本表現としてどう展開されてきたのか、具体的に明らかにしていきたい。また儀間比呂志への聞き取り調査を行い、その思想的背景や表現の特徴について考察を深めていきたい。研究の最終年度である次年度は、これまでの成果に加えて「戦前の南洋社会と沖縄人」「南洋の芸術表現の特質」「南洋を経験した芸術家たちの表現」「儀間比呂志の南洋体験の意味と作品の主題・思想」という研究課題に焦点化して研究を進め、戦前の南洋文化の価値、継承の意味についてまとめていきたい。儀間比呂志本人への聞き取り調査は、ご逝去によりかなわなくなったため、取材メモや取材写真、所蔵書籍等の調査を検討したい。また、儀間が南洋で過ごした当時の南洋統治領の政策や沖縄人社会の実態についての調査を行うことで、聞き取り調査の代替とし、研究を深化させていきたい。立命館大学国際平和ミュージアム開館5周年記念、2017年度秋季特別展「儀間比呂志版画展ー沖縄への思いー」(2017年11月1日12月23日)の展示会図録,「儀間比呂志絵本作品書誌」作成へ助言・協力。教育学儀間比呂志への聞き取り調査と作品調査を数回に分けて行う予定であったが、儀間及びご家族の体調不良などにより実施がかなわなかった。また、関連して沖縄児童文化に関する調査を行う予定があったが、本務の都合により一部を実施できなかったため、繰越額が生じた。儀間比呂志への聞き取り調査と作品調査を行う予定であったが、昨年度に引き続き今年度もご本人の体調がすぐれなかたっために実施がかなわなかった。
新規生理活性ペプチドの発見と哺乳類への応用

リガンドが不明なオーファン受容体に対する新規生理活性ペプチドを発見することは、新たな生理機能の解明や創薬の観点から非常に重要である。しかし、近年その発見は減少している。私は対象をモデル生物に変え、その情報を元にホ乳類での発見につなげようと考えた。その結果、ショウジョウバエにおいて新規生理活性ペプチドを発見し、解析した。本研究では、対象をホ乳類からショウジョウバエに変え研究を行うことにより、その情報を元にホ乳類での発見へとつなげていく。申請書提出時に発見していた、ショウジョウバエ新規生理活性ペプチド、idalin-1, idalin-2(仮称)について、生化学、生理的研究を行った。idalin-1. idalin-2ともにS-S結合のリング構造があり、C末端がアミド化されている。活性にはS-S結合は必須であるが、C末端アミド化は必須ではないことがわかった。また、idalin-1に関してはN末端が2個、15個長いフォームも発見した。idalin-1は脳、腸、脂肪、眼に強く発現しており、idalin-2は脳神経系やthoracicoabdominal ganglionなどの神経節に発現していた。idalin-1の過剰発現ショウジョウバエを作製した。野生型ショウジョウバエの幼虫は壁を上り高い位置でさなぎを形成し羽化するが、idalin-1過剰発現ハエは壁に登らず、餌のある底の部分に留まったままで死亡する率が高かった。この原因は現在解析中であるが、idalin-1は絶食によって発現量が低下することから摂食抑制作用を有すると推測されるので、摂食行動に関連した異常なのか、或いは眼に発現していることから視覚系の異常なのか、害虫駆除剤への応用なども含め、大変興味深い。その他、ショウジョウバエ新規生理活性ペプチドを新たに2つ発見した。本研究では、対象をホ乳類からショウジョウバエに変え研究を行うことにより、その情報を元にホ乳類での発見、解析へと、また昆虫での機能解析を行うことにより病態モデル生物の作成を目的とし研究を行った。先に発見していたショウジョウバエ新規生理活性ペプチド、idalin-1,idalin-2について昨年度の生化学的解析に加え、今年度は作成した特異抗体を用い、免疫染色を行い、発現分布を解析した。その結果、中枢系、腸管に加え、脂肪にも強く分布していることがわかった。またクロキンバエにおける投与実験より、idalin-1は摂食行動を強力に誘発することを見いだした。この効果はクロキンバエにおいて摂食が抑制される、柑橘系の臭いをかがせても持続することより、idalin-1が中枢性に摂食行動を制御している可能性が示唆された。昆虫では脂肪から分泌される液性因子によって中枢のインシュリン様ペプチドの動態が制御され、摂食や成長が調節されていることが最近わかってきた。今後この液性因子がidalinである可能性を追求していき、ホ乳類の摂食調節モデルとして活用できないか検討していきたい。またidalinとは別のショウジョウバエ新規生理活性ペプチド、dRYamide-1, dRYamide-2を発見した。このペプチドの構造、作用する受容体の解析から、dRYamideは昆虫におけるニューロペプチドYに相当する可能性が考えられた。今後、さらなる解析によりdRYamideの機能、ホ乳類への展開を検討していきたい。
高次クロマチン構造形成に関与するRNA分子発現機構の解析

分裂酵母では、RNAiに関与する因子が高次クロマチン構造の形成に関与することが明らかにされており、Ago1はその中心的な役割を果たす因子である。本年度は、まずヘテロクロマチン形成におけるAgo1の詳細な機能を探るため、Ago1と相互作用する因子の生化学的な単離を試みた。エピトープタグを融合させたAgo1をアフイニティー精製し、結合する因子を質量分析計を用いて解析した結果、Ago1と相互作用する因子として新規にArb2(Argonaute binding2)を同定することに成功した。Arb2をコードするarb2^+遺伝子を欠損させた破壊株では、他のRNAi因子の欠損株と同様にヘテロクロマチン構造に由来するサイレンシングの解除が起こり、また、ヘテロクロマチンに由来する短いsiRNAの産生が見られなくなることから、Arb2が分裂酵母のRNA機構に関わる新規の因子であることが明らかになつた。Ago1は、以前の解析からChp1,Tas3という二種類のタンパク質と共にRITSと呼ばれる三者複合体を形成し、この複合体がsiRNAを取り込むことで、ヘテロクロマチン領域へターゲッティングすることが明らかにされている。興味深いことに、今回我々が同定したArb2は、このRITS複合体を形成するAgo1とは、異なる分画のAgo1と相互作用しており、またクロマチン免疫沈降法により、クロマチン領域へは直接結合していない事が明らかとなつた。以上の結果から、今回新規に単離されたArb2は、二本鎖RNAを取り込んだAgo1が、RITS複合体を形成する途中の段階を制御する、これまでに報告のない新しい制御因子であることが示唆された。1.ヘテロクロマチンに局在するRNA代謝関連因子の解析本年度は、まず細胞内局在を解析する網羅的なスクリーニングで、ヘテロクロマチン様の局在を示す機能未知の因子TB04につい解析を行い、以下の点を明らかにした。1)TB04はヘテロクロマチンタンパク質Swi6と共局在する、2)TB04の局在はSwi6,Clr4に依存しない、3)TB04と相互作用する因子としてCrb3,Las1,Rix1を同定した、4)温度感受性変異株を解析したところ、TB04の変異体はpre-rRNAのプロセッシングが異常となり、tRNAの異常な蓄積も確認された。以上の結果は、TB04がrRNAのプロセッシングに関わることを示唆するが、ヘテロクロマチン局在との関連を直接示すものではない。現在tRNAやsnoRNAの発現調節を介してrRNAのプロセッシングに関わると言うモデルについて検証を進めている。2.ヘテロクロマチンに由来するRNA発現・調節機構の解析分裂酵母では、RNAiに関与する因子が高次クロマチン構造の形成に関与するが、詳細な制御機構については不明な点が数多く残されている。本年度の研究では、二本差RNA特異的な分解酵素Eri-1に着目して解析を行い、以下の点を明らかにした。1)分裂酵母のEri-1が実際に二本差のRNAを特異的に分解する活性を持つ、2)eri1+の遺伝子破壊によってサイレンシングが増強される、3)Eri1の機能が他のRNAi因子に依存し、RNAi経路を介して作用している、4)eri1+の変異で核内のヘテロクロマチン構造の変化が起きている、5)eri1の欠損株では短いsiRNAの異常な蓄積が見られる、6)Eri1もsiRNAも細胞質に局在する。以上の結果は、核内の高次クロマチン構造形成が、siRNAの存在量によって制御される機構を示唆する結果と考えられる。