hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
証券取引に関する犯罪の総合的研究

1昨年度に続き、証券の不公正取引の具体的論点に関する調査研究を行った。外国法制の研究を続行しつつ、とくにいわゆる“証券不祥事"の発生をも踏まえ、「インサイダ-取引の規制」「相場操縦の規制」「いわゆる損失補填の処罰」にとくに焦点をあてて研究を行った。2 (1)「インサイダ-取引の規制」に関しては、主観面での故意の立証の困難性、複雑な企業活動のうちで何を「重要事実」とみるかの判断の困難性(これには一連のインフォ-マルな決定過程の中でいかなる決定が「業務執行を決定する機関」による決定となるかについての基準を見出すことの困難性を含む)、情報の伝達過程など会社の内部事情を含めた事実の詳細を解明する必要性と困難性が問題の焦点であることが明らかとなった。(2)「相場操縦の規制」に関しては、とくにいわゆる「誘引目的」の立証が困難であるが、協同飼料事件東京高裁判決は第三者が誘い込まれることの可能性の認識の立証で足るとし、証券取引審議会不公正取引部会中間報告書もこの考え方に準拠するのが実際的であるとしている。しかし、そのような要件の緩和により適用は容易になるものの、適用範囲を不当に拡大するおそれが問題として残ることが明らかになった。(3)「損失補填の処罰」に関しては、1991年証券取引法改正により補填行為の処罰が行われることになったが、類似した贈収賄罪や商法上の利益供与罪との関連、異同を中心に検討を行い、具体的論点を明らかにし、それらについて考察を加えた。3以上により、証券の不公正取引をめぐる問題の核心に迫ることができたが、外国法制についてのより一層詳細な研究を踏まえてさらに検討を続け、具体的提言をとりまとめていくことにしたい。1(1)全体として、わが国における証券の不公正取引に関する実情の把握につとめ、焦点となる「インサイダ-取引の規制」「相場操縦の規制」「株式公開制度の改革」の諸問題について具体的論点を明確化する作業を行った。(2)本年度はとくにインサイダ-取引の規制について重点を置き、摘発第一号である「日新汽船事件」を素材として、法適用上・訴追上の問題点を具体的に明らかにした。また、相場操縦の処罰規定については、立証の因難さ、株取引の実情の複雑さに適用の因難さの原因があるが、目的要件に問題のあることを明らかにして、検討課題を明確化した。さらに、株式公開制度の改革に関連しては、改正証券取引法の「5%ル-ル」による株式大量保有に関する情報開示制度が始まったばかりであるので、それにより明らかとされつつある株式取引の実態の一端を把握してさらに問題点を明確化する作業を行っている。2 1の作業と並行して、外国における証券の不公正取引の規制について調査・検討を行った。その際には、研究分担者を二つのグル-プに分け、ドイツ、アメリカについてそれぞれグル-プ毎に検討を加え、その成果を相互に出し合って討議を行うという方法が採られた。これらの作業は、わが国における問題点の把握に関しても有益であった。3 1・2の作業により、論点によって進捗状況に差異は存するが、証券の不公正取引に関するいくつかの問題につき、その理論的問題点をかなり絞り込むことができたので、今後はさらに個別の論点について検討を深め、具体的な提言を行うべく考察を行うこととしたい。
窒素原子上での置換反応を利用するアミノ化合物の新しい合成法

オキシムsp^2窒素原子上での置換反応を利用し、種々の含窒素化合物合成法を見いだした。1-インダノンO-メチルスルホニルオキシムにSnCL_4、CF_3SO_3H存在下電子豊富な芳香族化合物を利用させると、オキシムsp^2窒素上への芳香族化合物の求核置換反応が進行し、対応するイミンが収率よく得られた。生成したイミンは加水分解によりアニリン誘導体に変換でき、これまで困難とされていた芳香族化合物の直接アミノ化を行うことができた。β位にマロン酸エステル部位を持つプロピルケトンO-メチルスルホニルオキシム誘導体に、DBUを作用させると、オキシムのsp^2窒素原子上で分子内置換反応が進行し、3,4-ジヒドロ-2H-ピロール誘導体が良好な収率で合成できた。脱離基を有するオキシムの窒素原子上で誘起金属化合物のカップリング反応による一級アミンの合成法を確立した。すなわち3,3',5,5'-テトラキス(トリフルオロメチル)ベンゾフェノンO-p-トルエンスルホニルオキシムとGrignard試薬との反応によりイミンが生成し、加水分解後、脂肪族および芳香族一級アミンが効率よく合成できる。m-ヒドロキシフェネチルケトンO-2,4-ジニトロフェニルオキシム誘導体にNaH、DDQを作用させることによりキノリンが、NaH、NaBH_4を作用させることにより、テトラヒドロキノリンがそれぞれ良好な収率で得られた。また本反応は一電子移動を含むアルキリデンアミニルラジカルを経由する反応であり、この一電子移動によるアミニルラジカル生成を利用することによって、3-ブテニルケトンO-2,4-ジニトロフェニルオキシム誘導体に、ラジカル捕捉剤存在下NaHと3,4-メチレンジオキシフェノールを作用させると、3,4-ジヒドロ-2H-ピロール誘導体を良好な収率で得ることができた。我々は、既にフェネチルケトンオキシム誘導体に過レニウム酸テトラブチルアンモニウムとプロトン酸を作用させることにより、フェニル基が窒素原子上で分子内/置換したキノリン誘導体が得られることを明かにしている。オキシムの窒素原子上への求核反応はあまり例がなく、本反応は含窒素化合物の有用な合成法となることが期待される。そこで本反応をより実用的な反応に発展させるべく研究を行った。その結果、m-ヒドロキシフェネチルケトンO-2,4-ジニトロフェニルオキシム誘導体に1,4-ジオキサン中水素化ナトリウムを作用させた後、2,3-ジクロロ-4,5-ジシアノ-p-ベンゾキノン(DDQ)で酸化すると、8-ヒドロキシキノリン誘導体が良好な収率で得られることを見いだした。なお、このとき他の位置異性体は全く生成しない。また、DDQにかわりシアノ水素化ホウ素ナトリウムを作用させるとテトラヒドロキノリンが得られる。さらに、脱離基を有するオキシムの窒素原子上に有機金属試薬が反応すれば、イミンが生成し、これを加水分解することによって第一級アミンが合成できると考えられる。様々なオキシムとアルキル金属試剤を用いて検討した結果,4,4'-ビス(トリフルオロメチル)ベンゾフェノンO-メチルスルホニルオキシムにHMPA-エーテル中、触媒量のCuCN・2LiClとアルキルGrignard試薬を作用させ、生じるイミンを酸加水分解することによって,対応する第一級アミンを好収率で得ることができた。1-インダノンΟ-メチルスルホニルオキシムにSnCl_4、CF_3SO_3H存在

下電子豊富な芳香族化合物を作用させると、オキシムsp^2窒素上への芳香族化合物の求核置換反応が進行し、対応するイミンが収率よく得られた。生成したイミンは加水分解によりアニリン誘動体に変換でき、これまで困難とされていた芳香族化合物の直接アミノ化を行うことができた。β位にマロン酸エステル部位を持つプロピルケトンΟ-メチルスルホニルオキシム誘導体に、DBUを作用させると、オキシムのsp^2窒素原子上で分子内求核置換反応が進行し、3,4-ジヒドロ-2H-ピロール誘導体が良好な収率で合成できた。脱離基を有するオキシムの窒素原子上で有機金属化合物のカップリング反応による一級アミンの合成法を確立した。すなわち3,3′,5,5′-テトラキス(トリフルオロメチル)ベンゾフェノンΟ-p-トルエンスルホニルオキシムとGrignard試薬との反応によりイミンが生成し、加水分解後、脂肪族および芳香族一級アミンが効率よく合成できる。m-ヒドロキシフェネチルケトンΟ-2,4-ジニトロフェニルオキシム誘導体にNaH、DDQを作用させることによりキノリンが、NaH、NaBH_4を作用させることにより、テトラヒドロキノリンがそれぞれ良好な収率で得られた。また本反応は一電子移動を含むアルキリデンアミニルラジカルを経由する反応であり、この一電子移動によるアミニルラジカル生成を利用することによって、3-ブテニルケトンΟ-2,4-ジニトロフェニルオキシム誘導体に、ラジカル補捉剤存在下NaHと3,4-メチレンジオキシフェノールを作用させると、3,4-ジヒドロ-2H-ピロール誘導体を良好な収率で得ることができた。
エンド型グリコシダーゼを用いたプロテオグリカン糖鎖の改変と機能変化

デコリンは、グリコサミノグリカン糖鎖を側鎖に一本持つ小型のプロテオグリカンである。しかし、成長軟骨由来のデコリンはコンドロイチン4-硫酸を持ち、関節軟骨や腱由来のデコリンはデルマタン硫酸を持つなど、臓器によりその側鎖の種類は異なっている。また、その生理作用としては、デコリンのコアタンパク質部分がI型、II型、およびVI型コラーゲンと結合し、コラーゲン繊維の形態形成、あるいは、TGF-Bの活性阻害などに関与していることが示唆されている。我々は、デコリンのGAG糖鎖の役割を解明することを目的に、その糖鎖部分の組み換え体の作製を試みた。デコリンは、ヒト黄色靱帯より、4Mグアニジン塩酸抽出後、超遠心、DEAE-Sephacel, Sepharose CL-4B, Octyl-Sepharose CL-4Bなどで単離した。グリコサミノグリカン糖鎖の組み換えは、エンド-β-N-アセチルヘキソサミニダーゼである精巣性ヒアルロニダーゼの糖転移活性を利用した。構造解析は、酵素消化、HPLC、MS分析などにより行った。ヒト黄色靱帯デコリンの糖鎖を分析した結果、イズロン酸(43%)とグルクロン酸(57%)から成るデルマタン硫酸であった。そこで、この糖鎖部分を精巣性ヒアルロニダーゼで加水分解し、結合領域(GlcA-Gal-Gal-Xyl)を含むオリゴ糖の付いたデコリンとした。次にこれを受容体とし、ヒアルロン酸、コンドロイチン、コンドロイチン4-硫酸、コンドロイチン6-硫酸を供与体として、精巣性ヒアルロニダーゼの糖転移反応を利用し、それぞれのグリコサミノグリカン糖鎖の転移を行った。その結果、いずれも転移され、ヒト黄色靱帯デコリンのデルマタン硫酸糖鎖をヒアルロン酸、コンドロイチン、コンドロイチン4-硫酸、コンドロイチン6-硫酸などに組み換えた人工デコリンファミリーを作製することに成功した。[目的]デコリンは、主としてデルマタン硫酸(DS)を側鎖に一本持つ小型のプロテオグリカンである。その生理作用としては、デコリンのコアタンパク質部分がI型、II型、及びVI型コラーゲンと結合し、コラーゲン線維の形態形成、あるいはTGF-βの活性阻害などに関与していることが示唆されている。そこで、デコリンのGAG糖鎖の役割を解明することを目的に、その糖鎖部分の組み換え体の作製を試みた。[方法][結果及び考察]糖鎖の転移を受ける受容体として、デコリン糖鎖の結合領域四糖(GlcA-Gal-Gal-Xyl)を有するオリゴ糖とした。これに、ヒアルロン酸(HA)、コンドロイチン(Ch)、コンドロイチン4-硫酸(Ch4-S)、コンドロイチン6-硫酸(Ch6-S)、脱硫酸化DS由来の二糖ユニットを、精巣性ヒアルロニダーゼの糖転移活性により転移させた。その結果、何れも転移され、特にHAとChは最大二十二糖の伸長が確認された。したがって、DSではなく、HA、あるいはCh等の糖鎖を有する人工デコリンの合成が可能となった。
孤発性タウオパチーに相関するタウ遺伝子多型の生化学的意義のゲノム編集を用いた解明

タウの蓄積を認める疾患では,タウ遺伝子多型との相関が知られている.しかし,これらの多型の意義付けは解析が困難であった.CRISPR-Cas9法を応用したCORRECT法にてタウ疾患関連の遺伝子多型を導入し,タウ遺伝子の発現量,スプライシングへの影響を明らかとする.ゲノム編集導入率は標準的な方法で1%であった物を4.5%まで向上させた.しかし、効率は低く、遺伝子によって著しく異なる可能性があることを明らかとした.作成した細胞を用いてMAPTのスプライシング効率を検討したところ,4R/3Rtau比が増加している事を確認した.この細胞系は,薬剤のスクリーニングに応用可能である。ゲノムワイド相関解析にて多くのリスク一塩基多型(SNPs)が同定された.しかし,それらのSNPsの多くは,調節領域,非翻訳領域,イントロンに存在し,生化学的意義が不明である.タウの蓄積を認める進行性核上性麻痺(PSP),皮質基底核変性症(CBD)でも,タウ遺伝子多型との相関が知られている.しかし,これらの多型の生化学的な意義付けは,個体間の背景遺伝子、年齢,環境因子の影響があり解析が困難であった.近年開発されたCRISPR-Cas9法によるゲノム編集は,内在性の遺伝子の一塩基レベルでの編集を可能とした.本申請は,本技術にてタウ遺伝子関連のPSP/CBDリスクSNPsを変化させ,タウ遺伝子の発現量,スプライシングへの影響を明らかとする.これにより疾患関連SNPsの生化学的な意義を解明し,新規治療のターゲットを創出するゲノム編集にはCRISPR-Cas9法を用いる.本年度は、CRISPR / Cas9系を用いて効率的に変異を導入する方法として開発されたCORRECT法について検討した(Paquetら、Nature 2016)。MAPT遺伝子の選択的スプライシングを改変する点変異をCORRECTを用いてMAPT遺伝子に導入し、突然変異誘発事象を、対立遺伝子特異的TaqManプローブを有するddPCRシステムまたはHiDi DNAポリメラーゼを用いるPCRシステムを用いて評価した。その結果、我々はHiDi DNAポリメラーゼを用いてddPCRまたはPCRを用いてMAPTの遺伝子編集の効率を推定することを可能とした。ゲノム編集導入率は標準的な方法で1.0%であった物を4.5%まで向上させた。しかし、効率はAPPSweまたはPSEN1M146Vについての結果と比較して依然として低く、効率は遺伝子によって著しく異なる可能性があることを明らかとした。予定された実験について、概ね終了しているため、タウの蓄積を認める進行性核上性麻痺(PSP),皮質基底核変性症(CBD)でも,タウ遺伝子多型との相関が知られている.しかし,これらの多型の生化学的な意義付けは解析が困難であった.近年開発されたCRISPR-Cas9法によるゲノム編集は,内在性の遺伝子の一塩基レベルでの編集を可能とした.本申請は,本技術にてタウ遺伝子関連のPSP/CBDリスクSNPsを変化させ,タウ遺伝子の発現量,スプライシングへの影響を明らかとする.これにより疾患関連SNPsの生化学的な意義を解明し,新規治療のターゲットを創出するゲノム編集にはCRISPR-Cas9法を用いる.この目的で,CRISPR / Cas9系を用いて効率的に変異を導入する方法として開発されたCORRECT法について検討した(Paquetら、Nature 2016)。その結果、HiDi DNAポリメラーゼを用いてddPCRまたはPCRを用いてMAPTの遺伝子編集の効率を推定することを可能とした。しかし、効率は既報と比較して低く、効率は遺伝子によって著しく異なる可能性があることを明らかとした。作成した遺伝子変異を導入したHEK293Tを用いてMAPTのスプライシングを検討したところ,4Rtau/3Rtau比が増加している事を確認した.この結果から,本遺伝子変異が,異なる細胞系であっても,スプライシング効率を変化させることを明らかとした.この細胞系により,薬剤のスクリーニングが可能である.タウの蓄積を認める疾患では,タウ遺伝子多型との相関が知られている.しかし,これらの多型の意義付けは解析が困難であった.CRISPR-Cas9法を応用したCORRECT法にてタウ疾患関連の遺伝子多型を導入し,タウ遺伝子の発現量,スプライシングへの影響を明らかとする.ゲノム編集導入率は標準的な方法で1%であった物を4.5%まで向上させた.しかし、効率は低く、遺伝子によって著しく異なる可能性があることを明らかとした.作成した細胞を用いてMAPTのスプライシング効率を検討したところ,4R/3Rtau比が増加している事を確認した.この細胞系は,薬剤のスクリーニングに応用可能である。導入した細胞を単離し、そのスプライシング変化について明確とする。神経内科本年度は、研究室で保管してた試薬により、研究を遂行することが可能であったため。次年度において、遺伝子導入のための試薬購入、及びヌクレオチド作成、iPSの維持管理に使用する。
大洋島の植物集団における遺伝子多様度の維持機構と種分化初期過程の解明

外部からの遺伝的交流が制限されている大洋島の植物集団において、遺伝的多様性がどのように創出・維持されているのか,そして種分化がどのように進行するのかを明らかにするため、小笠原諸島のフヨウ属やシロテツ属などの植物群を対象として、現地調査、外部形態の解析、酵素多型分析に基づく集団の遺伝的構造の解析、葉緑体DNAの塩基配列データに基づく系統地理学的解析などを行った。その結果、フヨウ属の小笠原固有種モンテンボクにおいて、諸島内の地域集団間で葉緑体DNAの多型が数多く検出されたが,その分布は局所的であり、外部形態も集団間で大きな変異を示した。それに対して広域分布種のオオハマボウに関しては、小笠原諸島内で確認されたハプロタイプの多くが太平洋からインド洋にかけて広く分布することが明らかとなった.このことは、オオハマボウの種子は浮遊性をもつことで海流散布を行い、島嶼間で遺伝的交流が保たれていることを示唆する一方で、モンテンボクの種子は浮遊性を喪失し海流散布されないことが集団間の分化を促進する要因であると推測された。シロテツ属植物に関しては、大洋島の植物集団としては前例がないほどの著しい酵素多型が集団内で検出された。集団間の遺伝子流動の推定や繁殖システムの解明、祖先の多数回移入を検証するための遺伝子系図学的解析などを行った結果,同一分類群内の集団間の遺伝子流動は島間でも高く保たれ,外交配(雌雄異株)を行うことで集団内の遺伝的多様性が維持されていると推察された.また分類群間で開花期のずれや生育環境の棲み分けが見られ、このことが分類群間の遺伝子流動を制限し,種分化を促進している可能性も示唆された.しかし多数回移入を支持する結果はまだ得られていないため,遺伝的多様性の創出機構は現時点では未解決の問題として残された.小笠原諸島において分化したと考えられるシロテツ属(Boninia)とフヨウ属(Hibiscus)植物を対象として、大洋島における植物の種分化初期過程の解明のために下記の研究を行った。1現地調査:シロテツ属植物における交配実験の結果、近縁種間の強制的な交雑が可能であることがわかった。しかし現地調査において近縁種間の開花時期のずれが観察されたことから、遺伝的交流が制限されている可能性が示唆された。2形態観察:フヨウ属植物の葉形態の変異を定量化し、地域集団レベルで比較した結果、小笠原固有種のモンテンボクにおいて、父島と母島の集団間で顕著な差異が認められた。また、シロテツ属植物の形態解析の結果、新分類群(新種もしくは新変種)の存在が明らかとなった。3集団遺伝学的解析:シロテツ属集団における酵素多型分析(5酵素7遺伝子座)の結果、大洋島の植物集団として前例がないほどの高い遺伝子多様度が地域集団内に検出された。すべての遺伝子座において、対立遺伝子の多くが種間・地域集団間で広く検出されたことから、種分化の過程でボトルネックなどの遺伝子多様度を減少させるような作用が生じなかったと考えられる。同種内の局所個体群間の遺伝子交流は、島間よりも島内で高頻度に生じていることが明らかとなった。また、上記の新分類群と見なされた植物集団は、他の分類群とは遺伝的に分化していることが示唆された。4分子系統学的解析:フヨウ属の様々な地域集団において、葉緑体DNAの遺伝子間領域の塩基配列を決定・解析したところ、モンテンボクに極めて多くの遺伝的変異が存在し、父島・母島間で遺伝的に分化していることが明らかとなった。また分子系統学的解析の結果、小笠原諸島に分布する2種のフヨウ属植物は、それぞれ異なる祖先から分化してきた可能性が示唆された。集団間の遺伝子流動の推定や繁殖システムの解明、祖先の多数回移入を検証するための遺伝子系図学的解析などを行った結果,同一分類群内の集団間の遺伝子流動は島間でも高く保たれ,外交配(雌雄異株)を行うことで集団内の遺伝的多様性が維持されていると推察された.また分類群間で開花期のずれや生育環境の棲み分けが見られ、このことが分類群間の遺伝子流動を制限し,種分化を促進している可能性も示唆された.
外来移入種が国産アサリ生産に与える影響の検討

外来移入種の巻貝サキグロタマツメタ(以下サキグロ)は貝食性で生きた貝類を捕食することから、水産重要貝類のアサリの生産や干潟域の貝類多様性に影響を与えることが懸念される。研究開始直前の2011年3月の東北地方太平洋沖地震の影響で、アサリもサキグロも個体数が大きく減少した。その後場所により回復過程は異なっており、地盤沈下の影響が大きかったところでは両者とも回復が遅れている。サキグロの原産地の中国ではサキグロも漁業資源として採捕・販売されており、アサリ資源への影響はほとんどないと考えられた。地震後アサリ採捕が行われていない福島県ではアサリもサキグロも増えており、サキグロ駆除を開始した。昨年度は東北太平洋沖地震により、調査を予定していた宮城県と福島県は大きな被害を受け、予定していた調査を行うことが困難になった。そこで調査の多くは次年度に行うこととしたが、調査地の宮城県2か所、福島県1か所の沿岸は地震前とは大きく環境が変化し、一部は立ち入り制限があった。調査対象種の外来生物およびアサリの生息状況も地震前とは大きく変化していることが予想されたため、当該年度は両者に対する地震・津波の影響の検討を行った。また、外来生物であるサキグロタマツメタの原産地における生息状況や水産重要種に対する被害などの現状を把握するため中国での調査を行った。1.地震後のアサリ養殖場の調査:地震・津波による地形変化、地盤沈下による干潮時の干潮域の変化等の一部を明らかにし、コドラート法によるアサリの生息状況を把握した。両県の当該年度のアサリ生産量は引き続きほぼゼロであり、生産再開の見通しは立っていない。サキグロタマツメタは成貝及び卵塊を発見し地震後も生息していることが明らかになった。また地盤沈下を起こしている場所での発見数が地震前より大幅に減少した。2.サキグロタマツメタの原産地のひとつである中国の青島周辺で調査を行った。サキグロタマツメタの生息を確認したが、大きな漁業被害は確認されず、また、サキグロタマツメタ自身が水産物として採捕・販売されており、しかもアサリよりも単価が高いことが明らかになった。また、調査地で採捕されたアサリの多くが日本に輸出されていることも明らかになった。3.東京湾でもサキグロタマツメタの地震・津波後の生息状況を確認した。東北太平洋沖地震により、研究対象としていたフィールドである宮城県と福島県は大きな被害を受け、フィールドそのものが大きく変化した。また、地震・津波の影響は軽微であったが、東京湾についても研究対象とするフィールドに地震前との違いが見られた。そのため、研究初年度である平成23年度は予定していたフィールド調査がほとんど行えず、また2年目の平成24年度は、調査対象種であるアサリと外来生物であるサキグロタマツメタの地震・津波後の生息状況をを把握するとともに、外来種の原産地である中国のフィールドでの調査を行った。これらをもとに、3年目にあたる平成25年度には宮城県2か所、福島県1か所をフィールドとして調査を行い下記の成果を得た。尚、地震・津波の影響で初年度予定していた調査がほとんどできなかったこと、本研究申請時の地震前とはフィールドの状況が大きく変化していることから、さらに1年間延長して研究を行うこととした。1.コドラート法により、アサリやサキグロタマツメタを含めた埋在性および表在性貝類の個体群動態を調査し、地震後の生息状状況を検討した。アサリは地震後も毎年発生し稚貝の加入がみられたが、夏以降の生き残りが悪く、資源は安定していないことが明らかになった。2.サキグロタマツメタは25年度も調査したすべての場所で発見されたが、明らかに再生産が認められた場所(卵塊と稚貝がみつかったところ)とそうでないところがあり、また何れの場所でも、採集された個体数は地震・津波前より少なかった。3.サキグロタマツメタの穿孔痕のある貝類の割合を求めたところ、生息している貝類の組成とは異なり、アサリへの穿孔割合が多いことが明らかになった。したがって、地震・津波後も、サキグロタマツメタはアサリの生産に影響を与え続けていることが明らかになった。2011年3月11日に発生した東北太平洋沖地震により、調査を予定していた宮城県と福島県は大きな被害を受け、現地に入り予定していた調査を行うことが困難になった。そこで、調査の多くは次年度に行うこととし、当該年度は予備的な調査と新たに加えた地震・津波の影響の検討を行った。

(1)地震後のアサリ養殖場の調査:船のほとんどが流されたことと地盤沈下、さらには放射能の影響が懸念されたことから、宮城県および福島県でのアサリ漁場調査はほとんど行うことができなかった。両県の当該年度のアサリ生産量はほぼゼロになり、まだ生産再開の見通しは立っていない。(2)原産地での調査も行うことができず次年度以降に行うこととした。(3)東京湾におけるホンビノスガイとアサリの分布調査、環境耐性実験:東京湾におけるアサリとホンビノスガイの分布等の研究情報の収集を行った。両者が共存する場所として調査を予定していたふなばし三番瀬海浜公園地先の浜は地震・津波の影響で閉園となり調査を行うことができなかった。(4)宮城県と福島県で陸からエントリーできる場所および東京湾で、外来生物サキグロタマツメタの地震・津波後の生息状況を確認した。東北でもサキグロタマツメタが生き残っていることを確認し、次年度以降に個体群動態や再生産などについて検討する。(5)本調査の内容には含まれていなかったが、地震・津波のストレスでアサリの貝殻に成長障害輪ができ、またその後成長した貝殻の模様が変化することを発見した。このことは新聞やテレビで繰り返し報道された。2011年3月に発生した東北地方太平洋沖地震により、研究対象としていた生物やその生息環境は大攪乱を受けた。また、東京湾についても、津波、液状化、地盤沈下等によりフィールドは地震前とは異なっていた。そのため研究初年度の平成23年度はフィールド調査がほとんど行えず、研究期間を1年延長した。また、本研究申請時と採択後では対象生物の棲息状況は大きく変わっていることが予想されたため、平成24年度には外来生物のサキグロタマツメタとアサリの地震・津波後の棲息状況の把握につとめ、その基礎データをもとにその後の研究を行った。本年度は引き続き、宮城県、福島県、東京湾を対象に調査を行い下記の成果を得た。1.両種の個体群動態を把握した。アサリ稚貝の生き残りは前年度よりよくなったが、新規加入は減少した。2.サキグロタマツメタの採集個体数は場所により大きく異なっていた。地震後アサリ漁を行っていない福島県相馬市の松川浦では、個体数が増加し、地震後はじめて一斉駆除が行われた。3.サキグロタマツメタの穿孔痕のあるアサリの割合は優占する貝類に比して高いわけではなくアサリの割合が高かった。このことから、外来生物のサキグロタマツメタは地震後、一時的に個体数は減少したが、その後は場所により個体群動態は異なっていることが明らかになった。また、アサリ資源への影響は地震後も続いていると考えられる。4.東京湾での調査の結果、サキグロタマツメタと外来種の二枚貝ホンビノスガイの分布域は2014年までは重なっていないことが明らかになり、両者は未だ捕食・被食関係にはなっていないと考えられた。しかし、飼育実験の結果、サキグロタマツメタはホンビノスガイを捕食することが複数示され、今後分布域が拡大した場合には外来種による外来種の捕食が現実化すると思われる。ホンビノスガイは漁業対象種となっており、今後も調査の継続が必要と考えられる。海洋生物学水産増殖学宮城県と福島県の海域は東北太平洋沖地震により環境が大きく変化したが、当該年度の調査で環境変化の状況やアサリ及び外来生物であるサキグロタマツメタの生息状況の一部がはじめて明らかになった。しかし、アサリ漁場そのものの整備が未だに行われておらず、漁場調査はほとんど行うことができなかった。一方、サキグロタマツメタの原産地での生息状況や水産被害の現状が明らかになった。
海岸クロマツ林における菌根菌の種多様性と塩化ナトリウム耐性

NaClがクロマツ-ショウロ菌根共生系に及ぼす影響を調べた.ショウロ14菌株は7段階のNaCl濃度に調整したMMN寒天培地上で25°C,暗条件下で培養した.40日後,培養した菌糸体の長径と短径を計測して菌糸伸長を算出した.各濃度5回繰り返した.この試験から選抜した1菌株を無菌的に試験管で育成したクロマツ実生苗に接種した.対照にはMMN寒天培地のみを接種した.90日後,蒸留水か25mM NaClを試験管に加えてからさらに90日間育成し,実生苗の地上部・地下部乾重,根端数,菌根形成率を求めた.各処理5本ずつ用いた.その結果,菌糸伸長はNaCl濃度の増加に伴い減少傾向を示した.ショウロの接種により実生苗の根端数は増加傾向を示し,NaCl添加により地下部重量は減少傾向を示した.以上より,ショウロのクロマツへの定着は,細根形成を促進させることで塩条件下におけるクロマツの生残に寄与しているものと考えられた.海岸クロマツ林における外生菌根菌の垂直分布を明らかにするため,異なる深さから採取された土壌中における外生菌根の形成状況とその分類特性を調べた.単木的に生育するクロマツ成木5本を選定し,各調査木の樹幹から160cm離れた海側の地点において土壌断面を作成し,105cmまでの4段階の土壌深から土壌ブロック(横×奥行き×深さ:10×10×15cm)を採取した.細根は外観から非菌根と菌根に大別し,後者は形態的,分子生物学的手法にもとづき,定着菌の推定を行った.採取された1388根端中,菌根は1351根端であった.現在,顕微鏡観察により菌根は7タイプに類別された.そのうちCenococcum geophilumと同定された菌根は細根自体が分布しなかった1サンプル以外の全てのサンプルで出現し,その菌根数は観察した菌根数の74.8%であった。以上から,海岸クロマツ林の表層土壌においてC.geophilumは優占する菌根菌である可能性が示唆された.海岸部で主要な塩であるNaClを構成するナトリウムイオン(Na^+)、塩化物イオン(Cl^-)が外生菌根菌のコツブタケに与える影響を調べた。海岸クロマツ林由来のコツブタケ2菌株Pt0、Pt3を用い、NaCl、Na_2SO_4、CaCl_2を添加した異なる5段階の濃度に調整したMMN液体培地上におけるコツブタケの菌体重量を調査した。その結果、培養終了時における塩添加区の菌叢面積は、塩の種類に関わらず0mMのものと比較して減少した。NaCl濃度で培養したPt0、Pt3の菌体重量は、50mM、200mMで最大となったが、200mMから500mMにかけては急激な減少がみられ、500mMの菌体重量は0mMのものより有意に減少した。Na_2SO_4添加区の菌体重量の変化は菌株間で同様の傾向を示した。100mMから250mM濃度間で有意な減少を示したが、250mM(500mM Na^+相当)における菌体重量は0mMのものと有意差はなかった。CaCl_2添加区では濃度間における有意な重量変化はなかった。以上から、Na^+は高濃度においてコツブタケに対してイオン毒性を有すると考えられた。Cl^-のイオン毒性は明らかにできなかったが、これは共存するCa^<2+>の影響と考えられた。クロマツ菌根の垂直分布を明らかにするための予備調査として、海岸クロマツの根系分布を調査した。土壌断面を作成し、10cm深ごとに土壌を190cm採取し、菌根数を計数した。その結果、最も多くの菌根が分布したのは、深さ10-20cmで全体の43%を占めた。また菌根は100-110cmの深さまで確認されたが、それ以深では認められなかった。以上より、菌根の垂直分布を明らかにするためには、100cm深までを対象に行うことが本調査地では適切であると判断された。現在、土壌深ごとに潜在する菌の把握を行うため、釣菌法による菌根形成実験を遂行中である。NaClがクロマツ-ショウロ菌根共生系に及ぼす影響を調べた.ショウロ14菌株は7段階のNaCl濃度に調整したMMN寒天培地上で25°C,暗条件下で培養した.40日後,培養した菌糸体の長径と短径を計測して菌糸伸長を算出した.各濃度5回繰り返した.この試験から選抜した1菌株を無菌的に試験管で育成したクロマツ実生苗に接種した.対照にはMMN寒天培地のみを接種した.90日後,蒸留水か25mM NaClを試験管に加えてからさらに90日間育成し,実生苗の地上部・地下部乾重,根端数,菌根形成率を求めた.各処理5本ずつ用いた.その結果,菌糸伸長はNaCl濃度の増加に伴い減少傾向を示した.ショウロの接種により実生苗の根端数は増加傾向を示し,NaCl添加により地下部重量は減少傾向を示した.以上より,ショウロのクロマツへの定着は,細根形成を促進させることで塩条件下におけるクロマツの生残に寄与しているものと考えられた.海岸クロ

マツ林における外生菌根菌の垂直分布を明らかにするため,異なる深さから採取された土壌中における外生菌根の形成状況とその分類特性を調べた.単木的に生育するクロマツ成木5本を選定し,各調査木の樹幹から160cm離れた海側の地点において土壌断面を作成し,105cmまでの4段階の土壌深から土壌ブロック(横×奥行き×深さ:10×10×15cm)を採取した.細根は外観から非菌根と菌根に大別し,後者は形態的,分子生物学的手法にもとづき,定着菌の推定を行った.採取された1388根端中,菌根は1351根端であった.現在,顕微鏡観察により菌根は7タイプに類別された.そのうちCenococcum geophilumと同定された菌根は細根自体が分布しなかった1サンプル以外の全てのサンプルで出現し,その菌根数は観察した菌根数の74.8%であった。以上から,海岸クロマツ林の表層土壌においてC.geophilumは優占する菌根菌である可能性が示唆された.
ゲーム論的アプローチによる自律分散システムの構築

自律分散型のインターネットサービス基盤の構築を目指し,研究を遂行した.特に,高い可用性と運用コストの削減を目指し,ゲーム理論の成果を取り入れた分散アルゴリズムの設計を行った.その基本的なアイディアは,システムを構成する計算機を利己的に振る舞う主体と見なし,各計算機はシステムの運用の貢献度に応じて利得を得るというものである.本研究課題では,上記の考え方に基づいたゲーム論的なモデルを与え,さらにポテンシャルゲームや受動的複製手法のアイディアを基にアルゴリズムを考案した.さらに,様々な障害に対する耐性や消費電力の削減について,プロトタイプ実装による評価を行い,その有用性を示した.本研究は,インターネットサービスを提供する基盤システムを対象に,その耐障害性の向上と運用コストの削減(省電力化)を目標とするものである.特に,ゲーム理論の成果をもとに,各ノードを利己的に振る舞う自律的主体と見なすことにより,拡張性の高いシステムの構築を目指すものである.平成25年度の前半では,前年度に引き続き,故障ノードの代替のアルゴリズムと,システム全体の負荷に応じた稼動ノードの最適化のアルゴリズムを考案した.これらのアルゴリズムは,ポテンシャルゲームと呼ばれるゲームのクラスによるモデルを用いて,既存の受動的複製手法などを参考に構築されたものである.また,平成25年度の後半では,先に考案されたアルゴリズムを,シミュレーションとプロトタイプ実装によって評価した.耐障害性については,過半数のノードの故障やネットワーク分断などに耐性を有することが示され,また省電力化についても,ノード間での負荷に偏りが生じるような場合についても,自律的に負荷の集約が行われることが確認された.これらの成果は,2本の国際会議論文などによって発表された.本研究課題の遂行により,当初の目標であるゲーム理論による基盤システムの基本的なメカニズムの構築は,おおよそ達成されたと言える.一方,今後の研究の展開に向けた課題としては,耐障害性を向上と省電力化の二つのメカニズムを完全に統合したより実用的なシステムの構築が挙げられる.また,当初想定していた協力ゲームをもとにしたアルゴリズムの可能性について検討することも有意義であると考えられる.自律分散型のインターネットサービス基盤の構築を目指し,研究を遂行した.特に,高い可用性と運用コストの削減を目指し,ゲーム理論の成果を取り入れた分散アルゴリズムの設計を行った.その基本的なアイディアは,システムを構成する計算機を利己的に振る舞う主体と見なし,各計算機はシステムの運用の貢献度に応じて利得を得るというものである.本研究課題では,上記の考え方に基づいたゲーム論的なモデルを与え,さらにポテンシャルゲームや受動的複製手法のアイディアを基にアルゴリズムを考案した.さらに,様々な障害に対する耐性や消費電力の削減について,プロトタイプ実装による評価を行い,その有用性を示した.本研究は,広域分散システムにおける拡張性や耐障害性、さらには運用コストの削減を目指し、新たに経済学の一分野であるゲーム理論の成果を基にした自律分散システムの構築を目的とする。特に本研究では、経済活動における提携のモデルとして知られる協力ゲームの考え方を用いて、従来の合意アルゴリズムに代わる新しい動作原理によるシステムを考案することを目標としている。今年度は、目的とするシステムの動作原理を、分散アルゴリズムのモデルの上で確立することを目指して研究を遂行した。今年度に得られた主要な成果として、目的とするシステムの動作原理の根幹をなす計算機間のプロトコルを構築した。その概要は以下の通りである。まず、複数の物理マシンと、その上で稼働する仮想マシンによって構成される分散システムを想定し、サービスはこの仮想マシン層によって提供される。仮想マシンは全て同一のプログラムのインスタンスであり、どのサービス提供グループの構成要素にもなり得るものとする。さらにゲーム理論の基本概念である「利己的な」動作原理に基づき、各仮想マシンは自律的に自らの利得を最大化すべく、他の計算機と連携して一つのサービス提供グループの構成要素としての役割を担う。各グループでは、前述のように「連携したグループ内での機能維持への貢献度」に応じて、各仮想マシンに報酬が支払われる。すなわち、サービス要求に応えた分だけ、サーバの役割を担う仮想マシンの持つ「口座」に対価が振り込まれ、サーバは一定時間毎にその口座から報酬をグループ内で配分するというものである。また、当初の目的の一つであるシステムの省電力化のアルゴリズムについても研究を進め、その成果を国際会議にて発表した。目的とする分散システムの根幹をなす計算機間のプロトコルは、当初予定していた協力ゲームではなく、展開型のゲームとして表現することができた。また、本研究の目的の一つである省電力化のための方法についても、十分な考察を行うことができた。現時点では、耐障害性を実現する上での具体的な方法を確立するところまでは至っていないものの、今年度で得られた成果を基にして、最終的に目標としているシステム全体の動作原理を確立することが期待される。今年度は、「システム全体への貢献度に応じて各計算機に利得を配分する」という動作原理の確立が主要な課題であった。その実現方法として、本研究では展開型のゲームを基にしたものを構築したが、研究の実施を通じて、資源配分問題を解くためのアプローチとして知られているポテンシャルゲームや、当初の予定である協力型ゲームなど、他にも様々な手法を応用することが考えられる。現時点で完成するところまで至らなかった耐障害性を実現するための動作原理を考える上で、こうした他のアプローチを適用することも検討したい。また平成25年度は、本年度に得られた省電力化の手法を、耐障害性を実現するための動作原理に組み込むことについても着手する予定である。

さらに平成25年度の後半では、それまでに確立したシステムの動作原理を、実際のシステム上でプロトタイプ実装し、動作確認や性能評価を行うことまでを実施することを目指したいと考えている。平成25年度は、引き続きシステムの動作原理に関する研究を遂行するための文献資料の購入を予定している。また、成果発表のための旅費や、プロトタイプ実装のための計算機利用料への研究費の充当を予定している。
生体中核酸系シグナル分子を標的とする水中での特異的捕捉反応プローブの開発

本研究では活性窒素種によって生成する8-nitro-cGMPや8-thio-cGMPなどの核酸系シグナル分子を共有結合捕捉する低分子化合物を開発し、検出プローブや創薬リードへ展開することを目指している。まず申請者らが開発したモデル分子nitroG-Graspと8-thioG-Graspの反応性を向上させるために、新規誘導体を合成した。新規nitroG-Graspは中性の水溶液中でも高い反応性を示した。また8-チオグアノシンの新しい反応性を見出せた。水中でのリン酸認識部位としてサイクレン-亜鉛錯体を選択して評価したところ、酸化損傷塩基8-oxo-dGTP検出分子として有用であることを見出した。申請者はジアザフェノキサジン環を基本骨格とした、8-ニトログアノシン(8-nitroG)を効率的に共有結合捕捉するモデル分子“nitroG-Grasp"を開発してきた。プロピルリンカーを有するnitroG-Graspは有機溶媒中では非常に効率的に8-nitroGを捕捉することに成功したが、水性溶液中のpH7条件下では反応性が非常に低いことが示された。そこで、反応性を向上させることを目的として、チオールまでのリンカー部分に官能基を導入することで固定化した誘導体を設計した。合成した新規nitroG-Grasp誘導体を用いて8-nitroGに対する反応性を調べたところ、pH 7の水性溶液中においても効率的に反応し、反応性を飛躍的に向上させることに成功した。これに並行し8-チオグアノシンサイクリックモノリン酸(8-thio-cGMP)を捕捉することを目的として、モデル分子“8-thioG-grasp"を設計・合成した。8-thioG-graspには脱離基を導入しており8-thioGからの求核置換によって結合形成させる設計とした。いくつかの炭素数の異なるリンカーの誘導体を検証した結果、脱離基までの炭素数が3、4の誘導体では8-thioGと効率的に反応することが示されたが、炭素数2の誘導体では分子内で環化することを見出した。また8-thioG-graspについても反応性を向上させるための設計として、リンカー部にアリルアルコールを導入した誘導体を合成した。新規8-thioG-graspを用いて捕捉反応を検討したところ、1価銅存在下の中性条件で捕捉反応が進行することを見出した。今後は詳細な反応機構を解明し、蛍光発光プローブの合成を目指す。本研究ではまず、「nitroG-Graspの反応性向上のための検討」と「8-thioG-graspの反応性向上のための検討」を中期目標としていたが、現段階で両方とも概ね達成していると考えられる。nitroG-Graspについては中性水溶液中での捕捉反応を達成することが出来た。また8-thioG-graspについても金属を介した中性条件での捕捉反応を達成している。本研究では生体中核酸系シグナル分子を標的とする水中での特異的捕捉反応プローブの開発を行った。まずシグナル分子として8-ニトログアノシン体と8-チオグアノシン体を標的とした捕捉モデル反応分子を検討した。これらグアノシン誘導体を認識する部位として1,3-ジアザフェノキサジン骨格を利用し、8-ニトログアノシンに対してはチオール基を、8-チオグアノシン体にはクロロアルキル基を導入した機能性分子を設計し、合成した。標的分子に対する捕捉反応を有機溶媒中で検討した結果、それぞれのグアノシン誘導体に対して、水素結合錯体形成を介した非常に効率的に共有結合捕捉できることが示された。8-ニトログアノシンに対する捕捉分子“nitroG-Grasp"については、速度論的解析も行っており、チオールまでのリンカー部の自由度とチオールpKaが反応性を決定していることが判明した。この結果を基にジオキサン環やベンジル基を導入した誘導体を新たに設計・合成した。これらについても8-nitorGに対して捕捉反応を調べた結果、pH7の緩衝液を混合した条件下でも効率的に反応することが示され、捕捉反応部位として有用であることが分かった。最終的にはリン酸認識部位も導入することで、シグナル分子である8-nitro-cGMPの共有結合捕捉分子へと展開する予定である。リン酸結合部位を検討する中で、1,3-ジアザフェノキサジン骨格にサイクレン-亜鉛錯体を導入した分子が、水中において8-オキグアノシントリリン酸(8-oxo-dGTP)に対して特異的に蛍光消光することを発見した。この性質を基に、有用な8-oxo-dGTP検出プローブ(8-oxoGTP Receptor)を開発することに成功した。以上のように本研究では、水中での特異的捕捉反応プローブの創製を目指す中で、新たな機能性分子への展開可能性を見出した。

「nitroG-Graspの反応性向上のための検討」と「8-thioG-graspの反応性向上のための検討」の中期目標を達成したため、今後は「リン酸認識部位の最適構造探索」と「捕捉反応部位とリン酸認識部位複合体の合成とin vitro反応検証」に着手する。リン酸認識部位については、サイクレン-亜鉛錯体が有用でないことをすでに検証済であるので、その他の静電相互作用を有する官能基導入を検討する。リン酸認識部位を導入した誘導体を用いて実際に水中での捕捉反応を評価し、反応性が示された場合はタンパク質を用いてin vitroでの捕捉反応についても検討する。核酸化学物品費の購入が予定金額よりも少なかったため、端数分程度の残額が生じたと考えられる。次年度は物品費(試薬・溶媒等)に使用する予定。
連歌史の研究

(1)句解の分岐点連歌の付合は、前句と付句との関係を言外に補って解釈するため、様々な解釈が可能となり、作者の作意とは別の解釈を行う自由さえ保証されていた。事実、『聖廟法楽千句』の古注の第一種注と第二種注は、内容の上で対照的で、前者は、前句を言葉に表現された通りに素直に受け取り、平明な叙景句として解釈する傾向があり、後者は、取りなしや主体の転換といった、前句の内容が付句によって大きく変わるような読み方を好み、前句の言葉の細かなところまで、付句の読みに反映させようとする。この相違は、『竹林抄』古注に見られる、宗祇と兼載の解釈の方法の違いに対応している。第二種注の理詰めに陥りがちな解は、『竹林抄』によく見られるもので、兼載もそれを発展的に受け継いでいる。一方宗祇は、旧来の地下連歌の機知的な趣向の作意を退け、努めて平明な叙景叙情で解釈しようとする新しい読みを打ち出していた。『聖廟法楽千句』『竹林抄』の古注には、そのような対立の構図が反映されているのである。(2)京都女子大学図書館所蔵連歌関係資料翻刻と解題I京都女子大学に蔵される『連歌教訓歌』『連歌百韻巻物素眼法師書』について翻刻と解説を行った。前者は、古典文庫『宗長作品集連歌学書編』に収録される「長歌・俳譜」の一本であり、後者は、二条良基と救済が出座する連歌百韻である。(3)京都大学蔵実隆自筆和漢聯句訳注解説「和漢聯句略史」と、三条西実隆と公条父子による、永正七年の両吟和漢聯句百韻のうち、第1句から第20句までの和句の注釈を執筆した。京都大学に蔵される、連歌研究上重要な資料である『伊勢千句注』と『園塵』の二点に関する研究を行った。『伊勢千句』(大永二年、宗長・宗碩両吟)の古注釈については、先行研究において精注群が七種類に分類されているが、京都大学蔵の国文A本と国文B本は、そのどれにもあてはまらない注である。既存の注と比較すると、国文A本は第一種注に近く、国文B本は上巻のみの伝本であるが、下巻のみの第五種注(清家本)と共通点が認められることがわかった。一方、京都大学蔵の谷村本は、第七種注の中でも異文の多い注であるが、この谷村本を含めた第七種注と第六種注は、核となる部分を共有しながら少しずつ異なる注となっている。両注には、千句の座に臨んで直接見聞したかのような描写が見られ、同じ講釈を聞書した者の手で複数の異本が編まれたものと考えた。兼載の句集『園塵』については、『園塵』第一、第二の諸本の成立過程について考察した。まず『園塵』第一のIII類本は、I類本の句を削除して詞書や配列を整えたものと考えられる。III類本は京大本奥書の明応三年九月までには成立している。『園塵』第二は、明応三年末から翌年初にかけての時期に『軽塵』の一部を削除し、新作を加えて成立した。『園塵』第二の編集は『園塵』第一の改編に次いで着手されたものと思われ、ともに『新撰菟玖波集』編纂に向けての準備の一環であったと見ることができる。連歌の付句は、前句によく付くと同時に、打越から離れる、すなわち「三句め離るる」ように付けることが望まれる。「三句め」の語は、連歌用語として様々な場面で用いられるが、特に「打越に繋がる前句の意味を、付句で別の方向に転換させているとき」に用いられた場合、打越からどのように転じているのかを、その都度検証しなければならない。例えば、「何事か人の詞にもれぬらん/あひもあはずも名は立にけり」の句に対する「何事をも人はひはんする物なればなり。三句めの句也」(『竹聞』)の指摘は、疑問の意であった前句を、付句で反語に近い意味に転じたことを指して言ったものと考えられる。兼載独吟『聖廟法楽千句』の古注の「三句め」の指摘を検討してゆくと、兼載は「て留」の前後の句で「三句め」の工夫を行っていることが知られる。「て留」の句は、その句を挟んで打越と前句が、ともに「した後、する」という付け方になりやすく、輪廻しやすいためである。例えば「里の砧にやどやからまし/はださむく山風送り日は暮て/君こずは又いかにあられむ」の三句は、打越も付句も日が暮れた後の行為になってしまわないよう、付句では「日は暮て君こずは」、「日が暮れてあなたが来なければ」と続けて読み、日が暮れたという前句を、まだ日は暮れていないことにすり替えてしまう。この技法は、兼載著『連歌延徳抄』にも「治定」を「あらまし」に転じる付様として説明されている。

兼載の著書や聞書、その作品の古注には、同時代の宗祇のものと比べて、明らかに「三句め」の指摘が多く、注目すべきものである(以上は、「兼載「三句め」の技法」の論文にまとめる)。「『聖廟法楽千句』試注」は、『聖廟法楽千句』の初折表八句について、兼載自筆奥書を持つ尊経閣文庫本の本文と四種類の古注を翻刻し、注釈を試みたものである。(1)句解の分岐点連歌の付合は、前句と付句との関係を言外に補って解釈するため、様々な解釈が可能となり、作者の作意とは別の解釈を行う自由さえ保証されていた。事実、『聖廟法楽千句』の古注の第一種注と第二種注は、内容の上で対照的で、前者は、前句を言葉に表現された通りに素直に受け取り、平明な叙景句として解釈する傾向があり、後者は、取りなしや主体の転換といった、前句の内容が付句によって大きく変わるような読み方を好み、前句の言葉の細かなところまで、付句の読みに反映させようとする。この相違は、『竹林抄』古注に見られる、宗祇と兼載の解釈の方法の違いに対応している。第二種注の理詰めに陥りがちな解は、『竹林抄』によく見られるもので、兼載もそれを発展的に受け継いでいる。一方宗祇は、旧来の地下連歌の機知的な趣向の作意を退け、努めて平明な叙景叙情で解釈しようとする新しい読みを打ち出していた。『聖廟法楽千句』『竹林抄』の古注には、そのような対立の構図が反映されているのである。(2)京都女子大学図書館所蔵連歌関係資料翻刻と解題I京都女子大学に蔵される『連歌教訓歌』『連歌百韻巻物素眼法師書』について翻刻と解説を行った。前者は、古典文庫『宗長作品集連歌学書編』に収録される「長歌・俳譜」の一本であり、後者は、二条良基と救済が出座する連歌百韻である。(3)京都大学蔵実隆自筆和漢聯句訳注解説「和漢聯句略史」と、三条西実隆と公条父子による、永正七年の両吟和漢聯句百韻のうち、第1句から第20句までの和句の注釈を執筆した。