hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ニュートリノ精密測定にむけた原子核乾板開発

名古屋大学F研究室内で2010年より運用している原子核乳剤製造装置に比べ原子核乳剤の生産量を10倍規模にした原子核乳剤装置の建設が本計画の主目的である。月に2回のペースで富士フィルムOBの大関勝久、桑原謙一、両氏と主に名古屋大学F研の構成員とで原子核乳剤装置導入プロジェクトの会議での議論により推進している。大学当局の折衝を行い名古屋大学内での設置場所の選定を完了している。装置の各パーツの設計・発注を順次行っており、2019年度の装置の組み立・建屋(暗室)の建設・試運転に向けた作業が進んでいる。作業に合わせて担当者を決めそれぞれの作業を担当者を軸に推進しプロジェクト会議で状況・問題を全員が掌握しながら進めている。現在の分担担当は、乳剤製造装置のタンク・シリンダー等の各部品の発注先との設計打ち合わせ担当、装置配置設計担当、装置の運転シーケンス設計担当、純水担当、廃液担当である。製造装置の主要部である精密液送のシリンダーピストン(EPCJ)及び乳剤を仕込む各タンク(仕込み、水洗、熟成)の設計・発注はすでに完了している。また、実際に1回の仕込みにより約20kgの原子核乳剤の収量を見込んでいるが、その際に使う純水の量は1トン程度必要であり、純水及び廃液の制御も重要である。純水製造装置の選定はほぼできており2019年度早々に発注する予定である。廃液に関しては名古屋大学の廃棄物の管理係との打ち合わせを行ってきており、可能な限り廃棄物を減らし一般排水系統に流せるように工夫する。また実際の温度制御をシーケンスで行う試験もまもなく始める予定である。今年度末の現在、2019年夏からの組み立て試運転に向け、設置場所での実際の基礎部の工事、装置を設置する架台や装置の固定方法の検討・純水系統および廃液系統の配管等の細かな部材の選定を議論しているところである。原子核乳剤製造装置の名古屋大学内設置場所の選定が完了し、具体的な装置の設計がほぼ済み・2019年度より装置の組み立て試運転を行うべく部品の購入・搬入作業を行っていくところである。また純水系統・廃液系統の議論を行っており解決できる見込みがついている。実際の装置の運転シーケンスの設計も同時に進めているためパーツがそろってきた段階で運転シーケンスの試験もすぐにできるようにしている。純水系統・排水系統の配管までを含めた原子核乳剤製造装置全体の設置・配置の最終設計・組み立てを行う。まず主要部分の組み立て・配管ができた段階で乳剤の代わりに純水を流して液の流れの制御系シーケンスの組み立て・アルゴリズムの確認・ポリッシュを行う。乳剤系統、純水系統、廃液系統の制御を確認したのちに実際にゼラチン、原子核乳剤でのテストに進む。また、乳剤製造装置を設置後には部屋を暗室にする必要があるため天井、壁の設置をおこなう。実際に装置の制御が確認出来たら乳剤仕込み部から実際に乳剤製造の試験を行う。同時に原子核乳剤の材料を調液する調液センターの整備を行う。こちらは名古屋大学F研究室の既存の調液センターを整理・再設計することでの対応する。ただし、慎重な扱いが必要な硝酸銀の調合は装置のすぐ近くで行う設計で進める。実際に原子核乳剤の試験作成が始まったら乳剤中の硝酸銀の粒子径分布、PH、粘性の基礎的な特性測定、素粒子に対する感度等の検出器として要求される特性の測定の確認を行い生産体制の構築段階に移行する。

原子核乳剤製造装置の名古屋大学内設置場所の選定が完了し、具体的な装置の設計がほぼ済み・2019年度より装置の組み立て試運転を行うべく部品の購入・搬入作業を行っていくところである。また純水系統・廃液系統の議論を行っており解決できる見込みがついている。実際の装置の運転シーケンスの設計も同時に進めているためパーツがそろってきた段階で運転シーケンスの試験もすぐにできるようにしている。純水系統・排水系統の配管までを含めた原子核乳剤製造装置全体の設置・配置の最終設計・組み立てを行う。まず主要部分の組み立て・配管ができた段階で乳剤の代わりに純水を流して液の流れの制御系シーケンスの組み立て・アルゴリズムの確認・ポリッシュを行う。乳剤系統、純水系統、廃液系統の制御を確認したのちに実際にゼラチン、原子核乳剤でのテストに進む。また、乳剤製造装置を設置後には部屋を暗室にする必要があるため天井、壁の設置をおこなう。実際に装置の制御が確認出来たら乳剤仕込み部から実際に乳剤製造の試験を行う。同時に原子核乳剤の材料を調液する調液センターの整備を行う。こちらは名古屋大学F研究室の既存の調液センターを整理・再設計することでの対応する。ただし、慎重な扱いが必要な硝酸銀の調合は装置のすぐ近くで行う設計で進める。実際に原子核乳剤の試験作成が始まったら乳剤中の硝酸銀の粒子径分布、PH、粘性の基礎的な特性測定、素粒子に対する感度等の検出器として要求される特性の測定の確認を行い生産体制の構築段階に移行する。
植物由来新規ポリケタイド閉環酵素の探索と物質生産

(1)キダチアロエ由来のIII型ポリケタイド合成酵素(PKS)であるオクタケタイド合成酵素(OKS)とアサ由来オリベトール酸閉環酵素(OAC)の共反応液に、ブチリルCoAとマロニルCoAを基質として作用させた場合の反応生成物について評価した。その結果、まず、OKSが1分子のブチリルCoAと7分子のマロニルCoAから新規パイロン誘導体を生産することが判明した。さらに、興味深いことに、OACがOKSの酵素反応液に共存すると、その新規化合物の生成量が約1.5倍増加することが確認された。このことから、OACは、プロピル基を有するポリケタイドCoAを基質として受け入れることが明らかとなった。これまでOACは、ペンチル基を有するポリケタイドCoA以外は基質として受け入れることができないと考えられていたが、本結果は、OACが他の長さのアシル基を有するポリケタイドCoAを基質として受け入れる可能性を示している。現在、他の長さのアシル基を有するポリケタイドCoAに対するOACの基質特異性について再評価を行っているところである。(2)昨年度に引き続き、OACのホモログ酵素と目される植物由来AtHS1及びPOP-3のポリケタイド閉環酵素としての機能について検討したが、いずれの基質を用いても、酵素反応生成物を確認することができなかった。現在、これについては、酵素反応条件の最適化を行っているところである。(3)領域横断型共同研究として、当該研究領域の研究者らが新たに見い出した酵素の結晶構造の取得と詳細な触媒機構の解明を試みた。その結果、アセチルCoAとマロニルCoAを基質としてオルセリン酸の生合成に関与すると想定されるエゾムラサキツツジ由来新規III型PKSのX線結晶構造の取得に成功し,その基質特異性や生産物特異性が,活性中心キャビティーの形状と大きさに極めて依存していることを明らかにした。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。アサ由来オリベトール酸閉環酵素(OAC)は、III型ポリケタイド合成酵素(PKS)が生産したポリケタイドCoAを基質する現状唯一の酵素である。OACが、様々なアシルーβーケタイドCoAを基質とすることができれば,新規化合物を生産できる可能性がある。本年度は、キダチアロエ由来のIII型ポリケタイド合成酵素(PKS)であるオクタケタイド合成酵素(OKS)がシンナモイルCoAや脂肪族CoAとマロニルCoAから生産するアシルーβーケタイドCoAを、OACが基質として受容し、新たな化合物を生産できるかを評価した。その結果、OKSがヘキサノイルCoAと6分子のマロニルCoAから生産した直鎖状ペンチルヘプターβーケタイドCoAをOACが基質とし,さらに,OKSとは異なる閉環反応をOACが触媒することによって生産されたと考察できる新規化合物5ーペンチルアロエソンを生産できることを明らかにした。アロエソンは、キダチアロエ等が生産する抗炎症成分であり、本新規化合物の抗炎症活性にも興味が持たれるところである。しかし、今回の解析では、OACはペンチル基よりも短いもしくは長いアシル基を有するポリケタイドCoAや芳香族を有するポリケタイドCoAを基質とすることは確認できなかった。現在、さらに詳細にOACの酵素反応生成物を検討しているところである。一方、今年度は、OACのホモログ酵素と目される植物由来AtHS1及びPOP-3のポリケタイド閉環酵素としての機能について検討した。その結果,トウゲシバ由来III型PKSであるHsPKS1が、シンナモイルCoAやジヒドロシンナモイルCoAとマロニルCoAから生産するアシルポリケタイドCoAを、OACが基質として未知化合物を生産する可能性が示された。現在、これらの未知化合物の構造決定を進めている。本年度は、OACを用いた新規化合物の創出と、AtHS1とPOP-3のポリケタイド閉環酵素としての機能について評価することを目標にしていた。AtHS1やPOP-3の反応生成物中に確認された未知化合物の化学構造の決定までには至っていないものの、OACが新規化合物5ーペンチルアロエソンを生産できることを明らかにしていることから、総合的に考えて、概ね計画通りに進展していると考えている。

現在、他の長さのアシル基を有するポリケタイドCoAに対するOACの基質特異性について再評価を行っているところである。(2)昨年度に引き続き、OACのホモログ酵素と目される植物由来AtHS1及びPOP-3のポリケタイド閉環酵素としての機能について検討したが、いずれの基質を用いても、酵素反応生成物を確認することができなかった。現在、これについては、酵素反応条件の最適化を行っているところである。(3)領域横断型共同研究として、当該研究領域の研究者らが新たに見い出した酵素の結晶構造の取得と詳細な触媒機構の解明を試みた。その結果、アセチルCoAとマロニルCoAを基質としてオルセリン酸の生合成に関与すると想定されるエゾムラサキツツジ由来新規III型PKSのX線結晶構造の取得に成功し,その基質特異性や生産物特異性が,活性中心キャビティーの形状と大きさに極めて依存していることを明らかにした。OACにペンチルヘプターβーケタイドCoA以外の基質を作用させた場合の酵素反応生成物について、さらに詳細に解析を行う。また、AtHS1やPOP-3の酵素反応条件の最適化を進め、それらの反応生成物中に見いだした未知化合物の化学構造を決定することを目指す。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。
乳児期ラットにおけるTGF-βの消化・吸収能への影響について

まず、EGF(Epidermal Growth Factor)によって腸管内の移動速度の遅延が観察された12日齢ラット(平均体重29.5g)を用いて、TGF-βによる胃内停滞時間や腸管内の移動速度への影響について、^<51>Cr-EDTAをマーカーに用いて観察した。TGF-β投与濃度1.0μg/rat、投与時間45分において、大変興味深いことに、雄ラットに対してはTGF-βは胃内停滞時間や腸管内の移動速度になんら影響を及ぼさなかったが、雌ラットに対しては、胃内に停滞した^<51>Cr-EDTA量は全体量の46.7±2.7%(平均±SE)と雄ラット、または対照群(BSA:Bovine Serum Albumin投与)の2倍量に達しており、有意に胃内停滞時間、また、腸管内の移動速度を遅くしていた。同様にIGF-I,IGF-II(Insurin-like Growth Fctor I,II)ならびにDes(1-3)IGF-Iついても実験を行ったが、有意な差は観察されなかった。これは、腸管におけるレセプターとの関連が推察される。これら細胞増殖因子の腸管における遺伝子発現や膜消化酵素への影響については、今後の課題である。
パンドデシネ文化の変容とその意義に関する研究

日本の「マンガ」はフランスで盛んに読まれているが、日本ではバンドデシネ(フランス語圏マンガ)は紹介が進んでいない。そこでBDの重要作品を選び出し、背景や影響関係を調査し、その意義と魅力を伝えることが本研究の目的となった。まず五月に来日したBDの巨匠メビウスが京都で行った講演を聴講し、「ユリイカメビウス特集号』(2009年7月)に論考「『インサイド・メビウス』は自伝なのか」、メビウスのインタビューとBD研究家ヌマ・サドゥールのエッセイの翻訳、「メビウス/ジャン・ジロー--主要作品解題」(原正人氏との共著)を寄稿した。六月には「大学でマンガ?!--研究発表とシンポジウム、第三部何を学び、何を見るか」と題されたマンガ学会主催によるマンガ学に関するシンポジウム(東京工芸大学)にコメンテーターとして参加し、首都大学東京で行った「バンドデシネ比較文化論」を題材にとり、日本における海外マンガの受容について発言した。同月には早稲田大学文学部主催によるシンポジウム「BDとは何か」において「文学/BD/美術」と題する発表を行い、文学的なBDやヴィジュアル・アート的なBDを紹介した。文学的BDとは実験的な文学作品を探究した「ウリポ」(潜在文学工房)の流れをくむウバポ(潜在マンガ工房)の活動にみられる、形式にこだわった図像遊戯的な作品である。ヴィジュアル・アート的なBDとは、フレモクと呼ばれる出版社が中心となって起こった従来のマンガの枠を越えた前衛的な作品を指している。このときの発表と討論をもとに推敲を施した論文「文学/BD/美術」を早稲田大学部フランス文学専修が発行する雑誌『Etudes francaises』第17号に発表した。
急性ストレス障害に対するIL-1受容体拮抗薬の治療応用への可能性に関する研究

神経幹細胞は自己再生増殖能と神経系多分化能を有した細胞である。中枢神経系内における神経幹細胞の生存維持に必要な機序については現在不明である。われわれは以前、抗うつ薬の投与が脳内のインターロイキン-1受容体アンタゴニスト(IL-1ra)の産生を促すことを発見した。ある種の炎症性サイトカインは神経幹細胞増殖阻害をすると考えられている。抗炎症性サイトカインの産生が神経幹細胞の増殖維持に必要かもしれない。この仮説の検証のため、培養神経幹細胞のIL-1ra産生能の有無について調べた。胎生12日ラット胎児から採取したneurosphereを100μlの培養液を加えた96穴マイクロプレートに移し、96時間後まで24時間ごとに20μlの培養液を経時的に採取した。採取した培養液はIL-1raの測定まで-80°Cで保存された。96時間後個々のneurosphereに存在する生細胞数をカウントした。培養液中のラットIL-1ra濃度は市販のELISA kitを用いて測定した。その結果、neurosphere104個のうち、96時間後までにその培養液中にIL-1raを検出できたものは7個であった。104個のneurosphereについて、産生量に関する標準階級化度数分布は危険率5%未満でpoisson分布に従った。また、各neurosphere内に存在していた細胞10^6個あたりのIL-1ra濃度については、標準階級化度数分布が危険率5%未満で正規性が無いとはいえないことがわかった(P値=0.2(上側確率))。以上の結果からneurosphere内に存在する細胞には、IL-1raを産生する能力があることがわかった。

中枢神経系内における神経幹細胞の生存維持に必要な機序については現在不明である。われわれは以前、抗うつ薬の投与が脳内のインターロイキン-1受容体アンタゴニスト(IL-1ra)の産生を促すことを発見した。ある種の炎症性サイトカインは神経幹細胞増殖阻害をすると考えられている。抗炎症性サイトカインの産生が神経幹細胞の増殖維持に必要かもしれない。この仮説の検証のため、培養神経幹細胞のIL-1ra産生能の有無について調べた。胎生12日ラット胎児から採取したneurosphereを100μlの培養液を加えた96穴マイクロプレートに移し、96時間後まで24時間ごとに20μlの培養液を経時的に採取した。採取した培養液はIL-1raの測定まで-80°Cで保存された。96時間後個々のneurosphereに存在する生細胞数をカウントした。培養液中のラットIL-1ra濃度は市販のELISA kitを用いて測定した。その結果、neurosphere 104個のうち、96時間後までにその培養液中にIL-1raを検出できたものは7個であった。104個のneurosphereについて、産生量に関する標準階級化度数分布は危険率5%未満でpoisson分布に従った。また、各neurosphere内に存在していた細胞10-6個あたりのIL-1ra濃度については、標準階級化度数分布が危険率5%未満で正規性が無いとはいえないことがわかった(P値=0.2(上側確率))。以上の結果からneurosphere内に存在する細胞には、IL-1raを産生する能力があることがわかった。
新規に発見したアンチセンスホモロジーボックスの分子論的意義の研究

ダブルストランドDNAのうち、ネガティブストランドDNAに相補的なRNAを想定し、それにより翻訳されると仮定したときのペプチドをアンチセンスペプチド(AS-P)を人工的に合成すると、元のペプチド(センスペプチド;S-P)と相互反応を起こすことが多い。このS-PとAS-Pの相互反応が蛋白質分子内でペプチド間相互反応を起こすことにより、分子の高次構造の形成や維持に得割を果たしていると考えた。S-PとAS-Pの関係を重複している部位をアンチセンスホモロジーボックス(AntisenseHomology Box:AHB)と命名し、AHB部位のペプチド(AHB-P)を作用させると分子の立体構造に変化を起こさせ、蛋白質分子の機能を阻害したり、あるいは増強したりする変化を及ぼすことができる。すでにエンドセリンレセプターやC5aレセプターの分子機能にAHB-Pが作用を及ぼすことを確認できた。そこで、活性の変化を定量的に測定することのできる補体系の蛋白質についてAHB-Pの作用について検討を行った。補体第3成分(C3)のAHBについて32種類のAHB-Pを合成して検討した結果、6種類のAHB-Pで抑制作用を認めることができた。C3にAHB-Pを作用させたあと、ゲル濾過でAHB-PをC3から分離してもC3の活性は抑制されたままであったので、AHB-Pの作用によりC3分子に不可逆的な構造変化をもたらしたと推察された。補体の膜攻撃Complex C5b6789を防ぐHRF20(CD59)のAHBについての解析も行った。それに基づいて合成したAHB-Pを作用させると膜障害の抑制を認めたが、コントロールペプチド等の実験がまだ十分ではないので、作用機序についての結論を得るには至っていない。
快適な歯科治療を目指して―自律神経解析からみた歯科治療が患者におよぼす影響―

目的:私たち歯科医師は治療中の患者が気分不快となることを経験する.歯科治療を受ける患者にとって処置に対する恐怖心や不安感,注射針刺入,疼痛などがストレッサーとなり,気分不快,循環変動を起こすと考えられる.そこで,歯科治療中の自律神経活動を解析し,治療が患者にどのような影響を与えているか検討することを目的とした.方法:口腔外科処置(下顎第三大臼歯の抜歯および外来小手術)が自律神経活動に与える影響を検討した.対象は研究に対して了承の得られた外来通院患者とした.モニター監視のみで行った対照群(C群)とミダゾラムによる静脈内鎮静法のもと行った群(S群)の二群に任意に分け研究を行い,観察項目は非観血的測定による収縮期血圧および拡張期血圧,心拍数,SpO2(BP-88,日本コーリン社製),心拍変動(Tarawa/Win, GMS社製)とした.観察時期は処置前安静時(pre),鎮静薬投与後(sed : S群のみ),局所麻酔開始時(la),局所麻酔5分後(post-la),抜歯時(ext),処置後安静時(post)とした.心拍変動は心拍ゆらぎリアルタイム解析システムで得られた低周波成分(LF)と高周波成分(HF)からそれぞれの比であるLF/HFを交感神経活動,HFを副交感神経活動として評価し,C群,S群を比較した.結果:循環変動について血圧はC群では各測定時期で変化がなかった.S群ではsedにおいて低下した.心拍数は両群においpost-laで上昇傾向を示した.自律神経活動はC群において各測定時期のLF/HF, HFに変化を認めなかった.S群ではsed以降の各測定時期でHFの低下傾向を認めた.考察:歯科治療のなかでも侵襲の大きいと考えられる下顎第三大臼歯抜歯が患者の自律神経活動に与える影響を検討された.循環変動について,両群にみとめられたpost-laでの心拍数上昇は処置時に使用した局所麻酔薬の影響と考えられた.また,S群におけるsed時の血圧低下はミダゾラム鎮静による循環抑制効果として,鎮静法が有用であったと考えられた.自律神経活動の評価は両群ともに一定の傾向は認められなかった.今回の方法では歯科治療中の自律神経活動を捉えることができなかったか,針刺入刺激や処置時疼痛により体動が起こり自律神経活動の記録に影響した可能性が考えられた.しかし,S群の歯科治療恐怖症患者で静脈確保時に気分不快と意識消失を起こした際,血圧低下,徐脈の循環抑制と白律神経活動としてわずかではあったがLF/HF低下とHF上昇がそれぞれ観察できたことから,ストレス緩和のための静脈内鎮静法には静脈確保が必要となるため,不快症状を起こさぬようさらに配慮が必要になると考えられた.目的:私たち歯科医師は治療中の患者が気分不快となることを経験する.歯科治療を受ける患者にとって処置に対する恐怖心や不安感,注射針刺入,疼痛などがストレッサーとなり,気分不快,循環変動を起こすと考えられる.そこで,歯科治療中の自律神経活動を解析し,治療が患者にどのような影響を与えているか検討することを目的とした.方法:口腔外科処置(下顎第三大臼歯の抜歯および外来小手術)が自律神経活動に与える影響を検討した.対象は研究に対して了承の得られた外来通院患者とした.モニター監視のみで行った対照群(C群)とミダゾラムによる静脈内鎮静法のもと行った群(S群)の二群に任意に分け研究を行い,観察項目は非観血的測定による収縮期血圧および拡張期血圧,心拍数,SpO2(BP-88,日本コーリン社製),心拍変動(Tarawa/Win, GMS社製)とした.観察時期は処置前安静時(pre),鎮静薬投与後(sed : S群のみ),局所麻酔開始時(la),局所麻酔5分後(post-la),抜歯時(ext),処置後安静時(post)とした.心拍変動は心拍ゆらぎリアルタイム解析システムで得られた低周波成分(LF)と高周波成分(HF)からそれぞれの比であるLF/HFを交感神経活動,HFを副交感神経活動として評価し,C群,S群を比較した.結果:循環変動について血圧はC群では各測定時期で変化がなかった.S群ではsedにおいて低下した.心拍数は両群においpost-laで上昇傾向を示した.自律神経活動はC群において各測定時期のLF/HF, HFに変化を認めなかった.S群ではsed以降の各測定時期でHFの低下傾向を認めた.考察:歯科治療のなかでも侵襲の大きいと考えられる下顎第三大臼歯抜歯が患者の自律神経活動に与える影響を検討された.循環変動について,両群にみとめられたpost-laでの心拍数上昇は処置時に使用した局所麻酔薬の影響と考えられた.また,S群におけるsed時の血圧低下はミダゾラム鎮静による循環抑制効果として,鎮静法が有用であったと考えられた.自律神経活動の評価は両群ともに一定の傾向は認められなかった.今回の方法では歯科治療中の自律神経活動を捉えることができなかったか,針刺入刺激や処置時疼痛により体動が起こり自律神経活動の記録に影響した可能性が考えられた.しかし,S群の歯科治療恐怖症患者で静脈確保時に気分不快と意識消失を起こした際,血圧低下,徐脈の循環抑制と白律神経活動としてわずかではあったがLF/HF低下とHF上昇がそれぞれ観察できたことから,ストレス緩和のための静脈内鎮静法には静脈確保が必要となるため,不快症状を起こさぬようさらに配慮が必要になると考えられた.

目的:歯科治療を受ける患者にとっては処置に対しての恐怖心や注射針の刺入,疼痛など種々な原因がストレッサーとなり,気分不快,循環変動などを起こす.そこで歯科治療が患者にどの様な影響を与えているかを治療中の自律神経解析を観察し検討した.方法:本年度は口腔外科処置が自律神経活動にどの様な影響を与えるかを検討するため,下顎第三大臼歯の抜歯を予定され,研究に対し了承を得られた外来通院患者を対象とした.モニター監視下で行った対照群(C群)とミダゾラムを用いた静脈内鎮静法下に行った群(S群)の二群に任意に分け研究を行った.観察項目は血圧,心拍数,Sp02(BP-88,日本コーリン社製),心拍ゆらぎリアルタイム解析システム(Tarawa/Win,GMS社製)を用いて,心拍変動の低周波成分(LF)と高周波成分(HF)およびその比(LF/HF)を求め,LF/HFから交感神経活動,HFから副交感神経活動を評価した.観察時期は処置前安静時(pre),鎮静薬投与後(sed:S群のみ),局所麻酔開始時(la),局所麻酔5分後(post-la),抜歯時(ext),術後安静時(post)とした.結果:血圧はC群では変化を認めなかった.S群ではsedにおいて低下した.心拍数は両群ともにpost-laに上昇傾向を示した.自律神経活動についてC群ではLF/HF,HFともに変化を認めず,S群ではsed以降HFの低下傾向が観察された.考察および展望:C群,S群ともにHF,LF/HFから評価した自律神経活動に著明な変化を認めなかったが,患者個々ではHF,LF/HFに大きな変化を示した症例もあり,個々の自律神経活動も併せて検討の必要性が示唆された.今後,さらに観察対象を広げ,今回の結果と併せて歯科治療が患者に与える影響を考察し,患者が歯科治療を快適に受けることのできる方法を検討してゆきたい.目的:私たち歯科医師は治療中の患者が気分不快となることを経験する.歯科治療を受ける患者にとって処置に対する恐怖心や不安感,注射針刺入,疼痛などがストレッサーとなり,気分不快,循環変動を起こすと考えられる.そこで,歯科治療中の自律神経活動を解析し,治療が患者にどのような影響を与えているか検討することを目的とした.方法:昨年度より継続した研究として,口腔外科処置(下顎第三大臼歯の抜歯および外来小手術)が自律神経活動に与える影響を検討した.対象は研究に対して了承の得られた外来通院患者とした.モニター監視のみで行った対照群(C群)とミダゾラムによる静脈内鎮静法のもと行った群(S群)の二群に任意に分け研究を行い,観察項目は非観血的測定による収縮期血圧および拡張期血圧,心拍数,SpO2(BP-88,日本コーリン社製),心拍変動(Tarawa/Win, GMS社製)とした.観察時期は処置前安静時(pre),鎮静薬投与後(sed:S群のみ),局所麻酔開始時(la),局所麻酔5分後(post-la),抜歯時(ext),処置後安静時(post)とした.心拍変動は心拍ゆらぎリアルタイム解析システムで得られた低周波成分(LF)と高周波成分(HF)からそれぞれの比であるLF/HFを交感神経活動,HFを副交感神経活動として評価し,C群,S群を比較した.結果:循環変動について血圧はC群では各測定時期で変化がなかった.S群ではsedにおいて低下した.心拍数は両群においてpost-laで上昇傾向を示した.自律神経活動はC群において各測定時期のLF/HF, HFに変化を認めなかった.S群ではsed以降の各測定時期でHFの低下傾向を認めた.
多発性硬化症患者に対する認知行動療法の導入およびアウトカム評価

多発性硬化症(MS)患者への非薬物介入として認知行動療法(CBT)を導入し、患者の抑うつ状態およびQOLの変化を評価した。神経内科受療中のMS患者10名に対して、CBTを全8回実施し、導入前、中間、終了時にQOL評価尺度のFAMS、および抑うつ評価尺度のCES-D(を実施した。参加者10名中2名に抑うつが認められず、1名が途中辞退したため、7名分のデータを取得した。結果、FAMSの合計点が終了時に改善し、抑うつの程度は中間時点で改善が見られた。FAMSの下位尺度「精神的状態」、「思考と疲労」で改善が見られた。今回CBTの有用性が示唆されたが、さらにデータを蓄積する必要がある。本研究の目的は、多発性硬化症(Multiple Sclerosis:MS)患者に対する非薬物介入として認知行動療法(Cognitive Behavior Therapy:CBT)プログラムを作成・実施し、患者の生活の質(Quality of life:QOL)に対するCBTのアウトカムを評価することである。諸外国ではすでにMS患者に対してCBTが導入されているが、本邦ではうつ病や気分障害等の精神科領域において適応されているものの、MS患者に対するCBT導入の報告はない。そこで、平成26年度は、以下の2点を実施し、成果を得た。1.MS患者のCBTに関する文献を網羅的に収集し、海外での導入状況および実施方法、効果について把握した。MEDLINE、CINAHL、PsycINFOの2000年から2014年を対象年限とし、'Multiple Sclerosis'`Cognitive Behavioral Therapy'をKey wordsをとして検索した35編の英文論文のSystematicReviewを行った。MS患者に対するCBTは、カナダ、アメリカ、イギリス等において行われており、個別療法のみならず集団療法、電話使用、インターネット使用、コンピュータプログラムなどの実践例が報告されていた。研究デザインはMS患者数例を対象にした小規模介入研究から100名を超えるランダム化比較試験まで様々であった。効果検証は半構造化インタビューによる質的評価、うつ評価スケール、QOL評価スケールなどにより行われ、複数の論文で効果が検証されていた。2.精神科領域で行われているCBT研修会に参加し、プログラム作成および実践に必要な情報を収集すると共に、スーパーバイズを受ける準備を行った。以上より、MS患者へのCBT実施のプロトコル案を作成した。多発性硬化症(MS)患者の抑うつや疲労感等に対する非薬物介入として、認知行動療法(CBT)の効果が諸外国で報告されている。本邦においてはMS患者に対するCBTの報告はない。CBT前後のMS患者の心理的適応状態およびQOLを評価することによりMS患者のQOLに対するCBTのアウトカムを評価することが本研究の目的である。平成27年度は、上記調査の準備期間としての位置づけである。パイロットスタディーを計画し、先行論文のレビューからCBT実施のプロトコルを作成した。MS患者のうち、抑うつ、不安感、疲労感といったCBTが適応となる条件を先行研究より抽出し、MS患者に対するCBTの適応基準を明確化した。また、CBTのアウトカムを評価するためのQOL評価尺度を選定した。次いで、CBTの実施経験がある臨床心理心理士を本研究の実施者としてリクルートした。協力病院に通院中の患者を研究参加者に推薦することについて協力病院より了解を得た。本研究は介入研究のため、現在、研究者の所属機関および協力病院の倫理審査委員会に申請準備中である。倫理審査委員会の承認を得たのち、パイロットスタディーと本調査に取り掛かる予定である。CBTを実施する臨床心理士のリクルートに時間を要したことと、倫理申請準備に時間を要していることが主な理由である。多発性硬化症(Multiple Sclerosis:MS)は、中枢神経系に脱髄性病変を生じ、時間的・空間的多発を特徴とする進行性疾患であるが、多くの症例で抑うつ、不安感、疲労感を呈し、患者の生活の質(Quality of life; QOL)を低下させる要因の一つとなっている。MS患者の抑うつや不安感、疲労感に対して、海外ではすでに認知行動療法(Cognitive Behavior Therapy:CBT)が導入され、効果が報告されている。CBTは、対象者の認知面に働きかけることによりセルフコントロールを高め、そのことにより問題解決を助けるものである。本邦では、精神科領域で臨床看護も含めて広く導入されているが、MS療養者に対しては薬物療法が中心で、CBTの報告例はない。MS患者に対するCBTの効果が確認されれば、非薬物療法としてのCBTの可能性が高まり、入院患者に対する看護ケアの一つとして導入することも可能となる。以上より、申請者らは、現在MS患者に対してCBTのパイロットスタディとして実施中である。中間評価で6名中4名の患者にCED-D上改善がみられ、3名にFAMSの改善が見られた。今後さらにデータ収集を継続する。CBTを実施する臨床心理士のリクルートに時間を要したことが主な理由である。研究者が研修を受けた厚生労働省マニュアルによるCBTのスキルを有し、かつ雇用条件に見合う臨床心理士のリクルートに6か月を要した。外来患者は外来日に合わせて月1回のペースでCBTを実施するため、一人当たりのCBTの期間が延長している。研究の進捗状況から研究期間を1年間延長し、平成29年度から最終年度の平成30年度にかけて10名のMS患者を対象にCBTのパイロットスタディを実施した。

患者の通院予定に合せて月1回のペースで計8回のCBTを実施し、導入前、中間時、終了時にMS患者のQOL評価尺度であるFAMS(Functional Assessment of Multiple Sclerosis)日本語版、および抑うつ状態評価尺度のCES-Dスケール(The Center for Epidemiologic Studies Depression Scale)を実施した。研究参加に同意した患者10名のうち、2名は導入前のCES-Dの結果で抑うつ傾向が認められず対象から除外した、残る8名のうち、1名は3回目終了時点で辞退したため、7名の結果を分析対象とした。結果、CES-Dの下位尺度項目で改善が見られ、FAMSの合計得点でQOLの改善が示された。対象者からの主観的な評価として、CBTが対象者にとって心理的に効果を実感する旨の質的データが得られた。CBTは構造化された心理的介入として臨床看護において実施可能性が示されている。今回は統計的有意を確認するには至らなかったが、今後は事例数を蓄積してMS患者に対する心理的ケアの一環として有効性を確認する予定である。多発性硬化症(MS)患者への非薬物介入として認知行動療法(CBT)を導入し、患者の抑うつ状態およびQOLの変化を評価した。神経内科受療中のMS患者10名に対して、CBTを全8回実施し、導入前、中間、終了時にQOL評価尺度のFAMS、および抑うつ評価尺度のCES-D(を実施した。参加者10名中2名に抑うつが認められず、1名が途中辞退したため、7名分のデータを取得した。結果、FAMSの合計点が終了時に改善し、抑うつの程度は中間時点で改善が見られた。FAMSの下位尺度「精神的状態」、「思考と疲労」で改善が見られた。今回CBTの有用性が示唆されたが、さらにデータを蓄積する必要がある。研究計画に記載した当該年度の到達目標については概ね達成している。若干の遅れとしては、以下が挙げられる。1.当該年度に作成したCBT導入プロトコルについて、神経内科専門医および臨床心理専門家のスーパーバイズを受けて精錬させる必要がある。2.平成27年度に実施予定のパイロットスタディの実施に向けた医療機関との調整等が必要である。現在準備中の介入研究の倫理申請を完了させ、承認を得る。CBT実施者との調整が済み次第パイロットスタディーと本調査に取り掛かる予定である。現在6名の研究参加者にCBTを継続実施中である。今後さらに研究参加者を増やし、10名まで実施する予定である。CBT実施前、中間、終了時のCES-DおよびFAMSの結果を分析し、CBTの効果とQOLに対するアウトカムを評価する。また、CBTを実施する際の課題等について、臨床心理士、研究参加者からヒヤリングを行い、プロトコルの修正を図る。神経難病看護今後は神経内科専門医および臨床心理専門家のスーパーバイズを受けて精錬させたCBT導入プロトコルを用いてパイロットスタディを実施する予定である。
ヒト血漿血小板活性化因子アセチルヒドロラーゼ活性欠損例への赤血球同族酵素の関与

1.集団健診受診者の中から無作為に選んだ34歳から91歳までの1030人(平均63±8(SD)歳,女性781人,男性249人)について、血漿中の血小板活性化因子(PAF)アセチルヒドロラーゼ活性のスクリーニングを行った。そのうち48人(4.7%,女性39人,男性9人)に、本酵素活性の欠損が認められた。2.血漿酵素活性非欠損群(982人,63±8歳)、欠損群(48人,65±8歳)両群間に、年齢や喫煙者の割合、body massindex、血圧、尿検査成績、血球数、血液生化学検査値の有意差はなかった。また、疾病罹患率も、非欠損群が44%、欠損群が54%と、両群間に有意差がなく、いずれの血漿酵素欠損者にもPAFの生理作用と直接結びつくような重篤なアレルギーやショック症状の既往を認めなかった。3.血漿酵素欠損者に赤血球PAFアセチルヒドロラーゼ活性の欠損はなく、その赤血球中の同族酵素活性の平均値は0.71±0.28(SD)μkat/g proteinであり、非欠損者の平均値0.51±0.15μkat/g proteinを上まわった。4.血漿酵素欠損者の自家血漿による50%赤血球浮遊液は、全血と同様に、生理的な濃度(10nmol/l)となるように加えられたPAFの一部を除去した。しかし、欠損者の多血小板血漿(血小板数26万/μl)においては、乏血小板血漿と同様に、同濃度のPAFの減少はみられなかった。また、欠損者の単球/マクロファージの培養上清のPAFアセチルヒドロラーゼ活性は、培養1週間後においてもきわめて低値のままであった。5.以上の結果は、血漿酵素欠損者においては、赤血球が、PAFの介在する病態を緩和する機構の一部に関与している可能性のあることを示唆している。しかしながら、欠損者において生理的濃度のPAFが、非欠損者に比べて長時間、血中に残存しうることが明らかになったことから、血漿PAFアセチルヒドロラーゼ欠損と、病態又はその形成過程との関連の詳細については、さらに検討が必要であると考えられる。
両側同時経頭蓋イメージングを用いた新たな聴覚野機能の解明

両耳聴では一側聴と違い、音源の空間的な位置把握、騒音下での聴取能向上などの効果が得られる。これまで動物を使った大脳聴覚野の研究は、技術的な困難さから、両耳別々に音提示、左右別の大脳聴覚野を研究することは難しかった。われわれはこれまで用いてきた落射型蛍光顕微鏡を改良し、斜め上方から投射することで両側大脳聴覚野の反応を全く同時に記録し、またコンデンサースピーカーと導音管を用いることで両耳別刺激が可能な装置を開発した。それにより、従来刺激側と反対側の大脳聴覚野で処理されていると考えられていた反応が、同側でも多くの処理がされていること、両耳刺激では片側刺激と違う反応が得られることが判明した。左右の耳からの情報は聴覚伝導路で統合、処理される。言語の処理における左半球優位性のように、大脳聴覚野では左右の機能分担が存在することがわかっている。このような、聴覚野における機能分化は、聴覚という感覚系の進化において、有利で効率のよいシステムとして成立したものであると思われ、その解明はよりよい補聴理論の開発など臨床上も有用であると予想される。そこでわれわれは、両耳同時に刺激ができ、かつ両側同時に大脳聴覚野の測定ができる装置を構築することとした。大脳聴覚野は側頭部に位置するため、これまでわれわれが行ってきたフラビン蛋白蛍光測定装置のように顕微鏡が垂直にある装置で聴覚野の反応を測定する場合、マウスを側臥位に近い体位で固定する必要があった。側臥位の場合、同時に両耳を刺激することは不可能であった。そこで本年度はマウスを自然に近い腹臥位で固定し、水平方向から測定するシステム、両耳別に刺激を与えることができるシステムを構築した。本実験システムでは、マウスの固定具、スピーカーの調整、顕微鏡、イメージング解析装置の配置などを、最適な状態に築き上げるため、一からデザインし直したため、多くの時間を費やした。現在、いままで使用していた音(純音、AM音、FM音)を両耳別々に提示し、その反応を両側聴覚野から同時に測定、過去のデータと検証している。左右の耳から入力される別々、あるいは同じ音入力は、それぞれ別の伝音系、蝸牛、蝸牛神経核での分析、処理を経て、聴覚伝導路で統合、処理される。言語の処理における左半球優位性のような大脳聴覚野での左右別の機能分担は、なぜ存在するのか。聴覚野におけるこのうような機能分化は、聴覚という感覚系の進化において、有利で効率のよいシステムとして成立したものであると考えている。大脳という上位中枢で、このような機能分化が、どのように構築されているのか、その機能を解明することは、よりよい補聴理論など、臨床上も有益な情報となると考えている。そこで、われわれは今まで行ってきたフラビン蛋白蛍光イメージングを発展させ、両側同時に機能解析ができる新しい実験システムを構築し、左右別刺激、別記録ができるようにし、さらなる脳機能分化の詳細について解析することを考えた。これまでフラビン蛋白イメージング法を用いてマウス聴覚野の研究を行う場合、これまではマウスを生理的ではない体位である側臥位にして測定しなくてはならず、呼吸状態の不安定さ、両耳同時に刺激、両側同時に記録といったことができなかった。そこで、左右別の記録ができるような装置を一からデザイン、構築した。さらに、左右耳別に違った音を発することができるように、小動物用コンデンサスピーカーを導入した。現在、片耳ずつ音刺激をした場合、同側大脳聴覚野の反応、反対側大脳聴覚野の反応の違い、加えて両耳同時に刺激した場合の反応を比較することで、両耳聴における大脳聴覚野の機能を解析している。

これまでフラビン蛋白イメージング法を用いてマウス聴覚野の研究を行う場合、これまではマウスを生理的ではない体位である側臥位にして測定しなくてはならず、呼吸状態の不安定さ、両耳同時に刺激、両側同時に記録といったことができなかった。そこで、平成23年度、24年度にかけて、左右別の記録ができるような装置を一からデザイン、構築した。平成24年度当初は、これまでわれわれが行ってきたマウスの前方に置かれたスピーカーから発した音に対する反応を左右聴覚野別に記録、その違いを解析することを考えていたが、左右耳別に違った音を発することができるように、小動物用コンデンサスピーカーを導入することができたため、左右別々あるいは同時の刺激音を提示、さまざまに組み合わせ反応を測定を開始している。これまで垂直方向から測定していた実績を踏まえ、垂直方向から測定できる装置を開発するできることは容易に予想されたため、それに合わせた細かい装置の調整を行うことができた。25年度が最終年度であるため、記入しない。これまで垂直方向から測定していた実績を踏まえ、水平方向から両側同時に測定できるようにする装置の構築自体は容易であった。しかし、両側同時に記録するための位置調整、角度調整などに使用する器具などの作成にある程度の時間を要した。現在、記録を安定してとることができるように実験を重ねている段階である。これまで行ってきた音刺激法ではマウス前方のスピーカーからの刺激であったため、両耳にどのくらい負荷がかかった結果の反応であったのか不明であった。そこで、今回構築したフラビン蛋白蛍光イメージング装置を用いて、マウス用の小さなコンデンサスピーカーから、片耳ごと別々に音刺激を行うことができるようになった。まずは過去に用いてきた刺激音を左右耳別に提示することで、左右の聴覚野別の反応の違いを確認する。その後、雑音負荷などを行った上での片耳聴、両耳聴の効果について探る。今回構築したフラビン蛋白蛍光イメージング装置、マウス用の小さなコンデンサスピーカーを用いることで、安定して左右別々の耳刺激、左右別々の大脳聴覚野からの測定ができることがわかり、基礎データを収集中である。現在、過去に用いてきた刺激音を片耳ずつ提示することで、刺激側と同側、反対側の聴覚野がどのように反応が得られるかを調べている。その後、片耳で見た刺激と同じ刺激を両耳で行った場合の左右別の反応の差を見ることで、片耳聴、両耳聴の違いを探る。また両耳の刺激を周波数を区切って変化させてリ、時間を変えて提示することで、よりシャープで強い反応が得られるかを探っていき、よりよい補聴理論へつながればと考えている。
授業研究の「グローバル化」と「ローカル化」に関する実証的研究

「授業研究」が国際的な研究の焦点となって約10年が経過し、この間、国際授業研究学会の設立、国際学術大会の開催、専門学会誌の発行がなされるようになった。各国単位でも米国、英国、インドネシアのように組織化が進行している。本研究から、ローカル化を進めている主体は、WALSに代表されるグローバルな研究資源からの知見と人的ネットワークを自国内に取り込み、また、グローバルなネットワークは、各地区で研究・研修を担っている組織や個人を取り込みながら、ローカルな知見と人的資源を活用していることが明らかになった。このことは、授業研究のグローバル化とローカル化が、相互依存・相互影響の関係にあることを示している。Arani, Shibata, Lee, Kuno, Matoba, Fong & Yeo(2014)において、シンガポールのローカルレベルの授業スクリプトを文化的授業分析の方法によって抽出する研究をまとめた。Kuno & Ikura (2014)においては、日本のローカルな授業研究文化の一つである授業記録に基づく授業研究の特色を生かして、一つの単元を通して「抽出児」における学習過程の分析を行うことで、日本的授業研究の一側面を描出した。アラニ(2014)においては、授業研究のローカル化とグローバル化を命題にして、その関係モデル的を仮説的に提起した。そこでは、グローバル化、ローカル化という事象は、グローバルな課題をローカルな視点と処方箋で改善しようとし、またローカルな問題をグローバルに進展する解決方法で改善しようとする営みであるというクロス課題解決モデルで示された。同モデルは、本研究実施上の基本的なフレームワークとして今後の理論形成の土台となるものである。今年度の研究成果としては、国際学術ジャーナルに2本の論文、国内の学会誌に2本の論文が掲載された。国際ジャーナルに掲載された論文は、イランにおける授業研究の発生・展開過程を負うことで、ローカルな文脈における初期段階の開発過程を明らかにしたもの(Moghadam, Arani, Kuno)と日本の任用前教師が授業研究によりどのように意識の変化を得たのかを明らかにしたもの(Chichibu)である。また、国内学会誌掲載の2本は、シンガポールの教員に対する質問紙調査を行いその分析を行ったもの(千々布・久野)と、PISA調査をめぐる課題を論じるとともに授業観の転換に授業研究が果たす役割について述べたものである(久野)また、国際学会の一般発表としては、(3)改善の科学として授業研究の新しい見方を示したもの(EARLI: Cyprus)、(4)授業研究のカリキュラム適用性について(WALS:Thailand)、(5)若手教師における授業研究による実践力量の形成について論じたもの(EAIS:Japan)、(6)指導主事によるラーニングコミュニティを通した授業改善について論じたもの(WALS:Thailand)の4本がある。研究分担者の千々布による図書出版物は、福井県という日本の授業研究のローカル性を読み解く研究であるが、千々布・久野論文で執筆したシンガポール質問紙調査と重ね合わせることで、福井県とシンガポールの両面地域におけるグローバル性とローカル性の交差点が浮かび上がることになる。本研究は、アジアとヨーロッパの2カ所で、質問紙調査と現状観察に基づくデータ収集(実態把握)を行うことを中核的方法としている。第2年次には、アジアにおける先進的な授業研究実施国であるシンガポールを対象にした調査を行い、その成果を学会発表を行うとともに研究論文にまとめ公表した(査読付き全国学会誌)。第2年次である今年度には、授業研究のローカル性とグローバル性の交差点に当たる研究課題として、研究業績に示した次のような主題が浮き彫りになってきた。すなわち「イランにおける授業研究」「initial teacher educationにおける授業研究」「カリキュラム適用性を高める授業研究」である。これらの研究課題の中に、本研究主題の授業研究のグローバルな文脈とローカルな文脈における課題と解決方法の交互作用を解き明かす鍵があるものと思われる。これらの課題が次第に明らかになったことが、おおむね順調に推移している都判断する根拠である。今年度の研究成果としては、久野による国際学会への招待講演が2本、久野、千々布、アラニの国内学会での研究成果公開が4本などとなっている。国際的に出版された編著もアラニの1本が挙げられる。アラニの国際出版は、一人の日本人教師の職業人としての授業改善の営みを世界的視野から取り上げたものである。国内の研究発表は、主に日本における授業研究のローカル化とグローバル化が融合しつつある福井県の事例に関する千々布の研究成果である。福井県においては、Professional learning communityとしての教員間の協力体制が教員文化として根付き安定しているが、その背景には、校長の調整的リーダーシップが欠かせない。福井の事例については、昨年の研究成果に示したように国際的な評価も受け始めており、グローバル化とローカル化の接点として有効な事例となっている。これまでの3年間の研究成果と国際ネットワークを生かして、2017年11月には世界授業研究学会(WALS)を名古屋大学にて開催することとなった。WALSは、世界各地の研究者、実践者、教育行政担当者、教員研修講師などが授業研究に関わるローカルな研究課題を持ち寄り、グローバルな規模で課題の解決の取り組みを協議する本研究に関わる中核的な学会である。本研究を通して、このようなグローバルネットワークに中心的に参画し、名古屋大学が世界ネットワークの核の一つとして位置づけられることになったことは大きな成果である。今後は、WALSという授業研究の世界的ネットワークを生かし、大学の組織的な改革とも連動させながら、本領域の世界的学術拠点としての役割を一層高められるよう、さらに研究を積み重ねる。

「授業研究」が国際的な研究の焦点となって約10年が経過し、この間、国際授業研究学会の設立、国際学術大会の開催、専門学会誌の発行がなされるようになった。各国単位でも米国、英国、インドネシアのように組織化が進行している。本研究から、ローカル化を進めている主体は、WALSに代表されるグローバルな研究資源からの知見と人的ネットワークを自国内に取り込み、また、グローバルなネットワークは、各地区で研究・研修を担っている組織や個人を取り込みながら、ローカルな知見と人的資源を活用していることが明らかになった。このことは、授業研究のグローバル化とローカル化が、相互依存・相互影響の関係にあることを示している。本研究は、1授業研究のグローバル化とローカル化の原理的解明、2授業研究展開国であるインドネシアにおけるローカル化・グローバル化の調査、3授業研究中核国であるシンガポールにおけるローカル化・グローバル化の調査、4授業研究新帰国である英国におけるローカル化・グローバル化の調査によって進めるよう構造化されている。1については、アラニ(2014)ならびに、現在執筆中の久野の論文により所定の整理をつけることができる状態にある。2については、本研究の協力機関であるインドネシア教育大学よりバンドン市内のGagas-Ceria Innovative Kindergarten & Schoolに協力と関係を結ぶことができ、質問紙調査と面接調査の基盤を作ることができた。3については、Lee氏ならびにLim氏へのヒヤリングにより、授業研究を通して得られる緊密な教員間の協力関係に着目し、それをより強化する目的の取り組みとしてProfessional Learning Community形成の傾向が強まっていることを把握することができた。4については、ロンドン市カムデン区をベースに英国での授業研究の開発に取り組むダドレー氏のインタビューを行い、英国におけるローカルな文脈に関するのデータを得ることができた。一例を挙げれば、授業研究を実施してる学校を結び知見を交流させる学校間ネットワークの構築が特色として示された。現在、得られたデータを元に、次年度に向けて比較調査が可能な共通質問紙ならびに独自性を明らかにするための個別質問紙の開発を行っているところである。第2年次に実施したシンガポールを対象にした質問紙調査と同様に、第3年次においては、英国における質問紙調査を実施することを主な研究課題とする。合わせて、最終年次として、1これまでの研究によって得られたデータを総括すること、2得られたデータを総合的に分析・考察することにより、3研究課題に対して一定の解を導き出していくことをめざしている。授業研究のグローバルな展開については、本研究分野の中核的学会であるWorld Association of Lesson Studies(WALS)が設立後、10年を経た今日、一定の成果と課題が現れ、新しい局面に来つつある。
白血病に対する薬剤耐性機構の解明と新たな分子標的治療戦略の構築

BCR/ABLキナーゼ阻害薬imatinibは慢性骨髄性白血病に対する有用な分子標的薬であるが、同剤の耐性機序の解明と有効な克服法の開発は重要な課題である。1.DNAマイクロアレイ法による、BCR/ABL陽性白血病細胞株KCL22とimatinib耐性株KCL22/SRとの遺伝子発現プロフィールの比較から、情報伝達系関連分子RhoAの耐性株における高発現が明らかとなった。新たなimatinib耐性株K562/SRとKU812/SRにおけるRhoAの発現をWesternblot法を解析し、特にKU812/SRで発現がきわめて増強していることを見いだした。2.新規Chk1阻害薬UCN-01をimatinibに併用することによりimatinibの耐性克服が可能であるか検討した。imatinib耐性BCR/ABL陽性細胞株は両剤の併用によってもアポトーシスの誘導がみられず、一方でG_0G_1期にある細胞比率の増加を認めた。さらにisobologramで細胞増殖に対する効果を検討した結果、何れの耐性細胞株でも相乗的増殖抑制効果は認められず、一部の細胞株ではむしろ拮抗的に作用した。従って、細胞周期に抑制的に作用する分子標的薬はimatinibの作用を阻害する可能性がある。3.様々な細胞内因子の機能調節に関与しているヘムのimatnib感受性への影響について検討した。hemin存在下で、KCL22細胞に対するimatinibのIC_<50>値は3.17倍に増加し、アポトーシスが誘導され、アポトーシス関連分子の増加が抑制された。heminはimatinibによるリン酸化BCR/ABL量の低下を阻害しなかったことから、BCR/ABLキナーゼ活性非依存的に作用しているものと推察された。更に、KCL22細胞にheminを添加することでYGCS遺伝子プロモーター活性の上昇および細胞内グルタチオン(GSH)濃度の増加を認めた。以上からヘムはimatinib感受性の調節に重要であり、その機序の一端はGSH合成系を介しているものと推察された。Imatinibは慢性骨髄性白血病に対する有用な分子標的薬であるが、耐性の出現が臨床的に問題となる。従って、耐性機序の解明と有効な克服法の開発が重要な課題である。本研究では、新たなimatinib耐性株K562/SRとKU812/SRにおけるRhoAの発現をWestern blot法を解析し、特にKU812/SRで発現がきわめて増強していることを見いだした。さらに、RhoAのimatinib感受性における役割を明確にするため、siRNAによるRhoA発現抑制の影響について検討している。そのため、KU812/SRに対するsiRNAの導入条件の決定を行なった。次に、imatinib耐性株と親株におけるRac1,Cdc42等の低分子量G蛋白質(G protein)群とその下流にある分子群の発現について、Western blot法により比較検討した。その結果、明らかに発現量に差のある分子は見いだし得なかった。2.Imatinib感受性および耐性BCR/ABL陽性細胞株を用いて、imatinibと新規Chk1阻害薬UCN-01との併用効果について検討した。