hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
思春期における造形表現の質的変化をふまえた美術教育の方法論に関する実践的研究

具体的な留意点として、思春期の心理的特性を踏まえて導入や発想・構想段階の指導を行うことや、表現に当たっては描き方ではなく、ものの見方やとらえ方に留意すること、参考作品の鑑賞や完成作品の相互批評などの鑑賞機会を充実させることによって、表現活動と鑑賞活動とを有機的に関連づけ、活動全体を通じて造形表現に対する児童・生徒のメタ認知を促すようにすることである。実践の成果は、2日間にわたる全体研究会における報告と協議を通じて共有し合い、平成28年度に向けての課題を明らかにした。平成28年度(最終年度)の研究課題は、報告書の作成と研究成果の公開である。研究代表者は、思春期における造形表現の質的変化をふまえた美術教育の方法論に関するこれまでの研究成果を見直し、理論的な面からの整理を行った。またそれに併行して、研究協力者に対して2年間の教育現場での教育実践を中心に実践研究の成果に関する報告書の提出を依頼した。理論的な面から研究については、「(1)思春期の子どもの描画をめぐるこれまでの発達研究の成果と課題」「(2)表現の動因及び意図に基づく描画の発達過程の再検討」「(3)表現意図の形成に伴う困難としての思春期の危機」「(4)思春期の美術教育におけるリアリズムの問題」「(5)造形表現の過渡期としての思春期の美術教育のあり方」の観点から、思春期における造形表現の質的変化とそれをふまえた美術教育の方法論に関する研究の成果を取りまとめた。また、研究協力者による授業実践を通した実践的側面からの研究については、小学校高学年を対象とするもの1件、中学生を対象とするもの11件の計12件の成果報告が得られた。以上の研究によって明らかになった主な点は、「(1)思春期の子どもの造形表現に対する抵抗感やつまずきは、単に技術的な問題に起因するのではなく、言語の運用能力の発達に伴う造形表現(描画)に対する関心の低下と、それに付随する表現意図の形成の困難にあること」「(2)表現意図の形成とその具体化の方法とを子どもが一体的に考えられるような指導が必要であること」である。これらの基本的知見は、研究協力者による実践を通して「(3)思春期の子どもを対象とする美術教育においてどのような指導計画及び指導方法の改善が必要か」という視点から検証を行った。本研究課題における研究成果は、書籍『造形表現の過渡期としての思春期の美術教育』にまとめ、平成29年8月を目途に出版し公開する予定である。本研究は、課題研究23531217「思春期における造形表現の質的変化をふまえた美術教育の方法論に関する研究」の成果をふまえ、それを発展、深化させたものである。本研究では、思春期の子どもの造形的な心象表現(描画や彫刻)に見られる停滞の原因は、一般に信じられている批判的な意識の高まりによる自信喪失ではなく、言語の運用能力の発達に伴う造形的な心象表現に対する関心の低下とそれに付随する表現意図の形成の困難にあることを明らかにし、その改善方策を提示した。また、授業実践を通じて、指導計画及び指導方法に関する改善の視点から、思春期の子どもの造形表現の特質をふまえた美術教育の可能性と課題を明らかにした。研究一年目の目的の一つである「研究代表者と研究協力者の間で本研究の目的・内容及び方法等に関する共通理解の形成」については、概ね計画通りに進めることができた。
大学生版QOL指標の開発を踏まえた学修成果測定研究の新展開

研究初年度は、米国の大学生調査の13,155人分データを分析した。両親が大学「未」卒業者であり,当人が家族内で初めて大学に通う学生を「第一世代」とし,その対照群として,両親が大学のみを経験(未卒業を含む)している学生群,両親のうちどちらかが大学院も経験(未修了を含む)している世代を「大学院経験世代」として、分析した。研究2年目には、「大学生版QOL」の質問紙開発を行い、日本国内大学での予備調査を行い、項目分析を行った。過敏性腸症候群(IBS)や様々な心理尺度、経済格差を測る尺度を盛り込んだ学際的な質問紙を作成した。日本(東京、福岡2000人)と中国(北京1000人)で調査した。研究初年度にあたる本年は、来年度の大学生のQOL尺度作成の調査実施に向けて、論点整理と既存データの分析を行った。米国の大学生調査の13,155人分データを分析した。米国の大学生データには、親学歴や年収が項目として取られており、その観点から分析を行った。即ち、両親が大学「未」卒業者であり,当人が家族内で初めて大学に通う学生を「第一世代」とし,その対照群として,両親が大学のみを経験(未卒業を含む)している学生群(「大学のみ経験世代」),両親のうちどちらかが大学院も経験(未修了を含む)している世代を(「大学院経験世代」)として、分析した。これまで「第一世代論」はあったが、大学が大衆化した現在、「ポスト・第一世代論」として、両親学歴における大学院経験の効果を測定した。こうした効果が現れたことで、大学生のQOLにも両親学歴の効果が大きいと想定され、次年度の調査票作成に向けて大きく前進した。当初の予定になかった米国の大学生調査の13,155人分データが入手でき、その分析を行ったことで、大きな進捗を得た。その意味で、当初の計画以上に進展していると言える。「大学生版(QOL)」(Quality of College Student Life and Well-being)の質問紙開発を行い,日本国内大学での予備調査を行い,項目分析を行うなど、質問紙開発の手順を順次着実にこなした。医療分野におけるQOLに詳しい研究者を招き,その理論枠組みや複数ある包括的尺度のQOL指標の質問項目を具体的に検討したり,経済系の研究者を招き,経済学におけるwell-being研究の情報提供を頂いたりすることで,質問項目の原案をつくることを行った。その過程のなかで、過敏性腸症候群(IBS)や様々な心理尺度、経済格差を測る尺度を盛り込んだ学際的な質問紙を作成した。改訂嫌悪傾向・感受性尺度(DPSS-R)[嫌悪傾向(DP)8項目、嫌悪感受性(DS)8項目]、BIS/BAS尺度[罰の回避傾向(BIS) 7項目、報酬への接近傾向(BAS) 13項目、[駆動(D) 4項目、刺激探求(FS) 4項目、報酬反応性(RR) 5項目でも可]]、欧州社会調査の幸福度項目15項目、精神的幸福尺度(PWB) 8項目、権威主義的伝統主義的尺度10項目、健康関連QOL尺度(SFI-8) 8項目、Kasariの身体活動指標修正版5項目(失敗)、Q33-42:過敏性腸症候群診断基準(ROME-III) 10項目、過敏性腸症候群重症度指標(IBS-SI) 7項目、年収や金銭感覚、経済格差感覚を、教育学から、学歴や専攻状況などを盛り込んだ。実際に、日本(東京、福岡2000人)と中国(北京1000人)でインターネットによる調査を行った。「大学生版(QOL)」(Quality of College Student Lifeand Well-being)の質問紙開発を行い,日本国内大学での予備調査を行い,項目分析を行うなど、質問紙開発の手順を順次着実にこなすことを予定している。医療分野におけるQOLに詳しい研究者を招き,その理論枠組みや複数ある包括的尺度のQOL指標の質問項目を具体的に検討したり,経済系の研究者を招き,経済学におけるwell-being研究の情報提供を頂いたりすることで,質問項目の原案をつくることを行う.教育社会学分担者の予算に残額が生じたために、次年度使用額が生じた。分担者において、96円の繰越金と合わせて、次年度予算を執行する。金額も端数のため、主に、調査実施に際する文具等に利用する予定である。
テロメラーゼ活性を用いた根尖性歯周炎の病態解析

染色体の末端部に存在するテロメア配列を伸張するテロメラーゼの活性は、癌細胞に限らず活性化リンパ球にも認められ、免疫応答との関与が推測されている。また、根尖性歯周炎にはリンパ球を中心とした細胞浸潤が存在し、病変成立に重要な役割を担っている。そこで本研究では根尖性歯周炎の病態解析を目的とし、歯周炎局所のテロメラーゼ活性の検索を行った。昨年度は難治性根尖性歯周炎の外科処置より根尖病巣を摘出し、全症例でテロメラーゼ活性を確認した。また、Ki6 7抗体による免疫染色により本酵素活性は病巣内に存在する一部の浸潤細胞と線維芽細胞によるものと考えられた。本年度はヒト末梢血のリンパ球よりテロメラーゼ活性の検出を試み、歯周炎局所のテロメラーゼ活性と比較、検討し以下の結果を得た。1.ヒト末梢血リンパ球は未刺激の状態ではテロメラーゼ活性はほとんど認められなかった。2.ヒト末梢血リンパ球に抗原レセプターのシグナル伝達分子であるCD3抗体で刺激すると、刺激後約48時間でテロメラーゼ活性が認められ、その後徐々に活性は低下していった。3.根尖性歯周炎のテロメラーゼ活性は全症例で認められたがリンパ球の活性化に伴うテロメラーゼ活性の70%から25%程度であった。以上のことから難治性根尖性歯周炎の病巣局所に存在するリンパ球や線維芽細胞は種々の程度でテロメラーゼ活性を獲得し免疫応答を成立させていることが示唆された。染色体の末端部に存在するテロメア配列を伸張するテロメラーゼの活性は、癌細胞に限らず活性化リンパ球にもその発現が認められ、免疫応答との関与が推測されている。そこで本研究では根尖性歯周炎の病態解析を目的とし、歯周炎局所のテロメラーゼ活性の検索、同時に病理ならびに免疫組織学的検索を計画した。今年度は難治性根尖性歯周炎と診断され、外科的処置の適応となった歯から根尖病巣を摘出し、病理組織学的診断ならびにKi67に対する抗体を使用した免疫染色を行った。また、組織抽出液を調整しテロメラーゼ活性の検出、定量も試み、以下の結果を得た。1.難治性根尖性歯周炎患者10名から摘出した根尖病巣はHE染色による病理組織学的診断の結果、全て歯根肉芽肺であった。2.上記の根尖病巣をKi67に対する抗体で免疫染色を行うと、病巣内に存在する一部の浸潤細胞と線維芽細胞が陽性反応を示した。3.テロメラーゼ活性検出のため、上記の根尖病巣より得られた抽出液を使用したTRAPassayでは、全ての症例が陽性であった。4.確認されたテロメラーゼ活性をPCR-ELISAで定量すると、症例により活性状態が異なっていた。来年度は以上の結果をふまえながら症例を重ね、ヒト末梢血リンパ球と比較しながら、歯周炎局所の本酵素の活性状態を把握し、病態をさらに解析する予定である。
愛着と後悔～機能・感情の多角的アプローチによる顧客ロイヤルティ構造の解明～

「品質を高める」「機能を増やす」ことは差別化の大きな要因となり,製品やブランドの競争優位性を高めるものと捉えられてきた.しかしながら,高性能化や多機能化をベースとした熾烈な企業間競争の結果,消費者のニーズと乖離した状態を生み出してしまっていることが危惧される.本研究では,ニーズマッチングを起点として,顧客満足度形成に対して,品質,性能といった物理的・機能的充足と愛着,後悔といった感情的充足の両側面からの従来の顧客ロイヤルティ構造の再構築を試みたものである.顧客満足度,ロイヤルティの獲得には感情的充足が不可欠であり,そのためにも消費者ニーズを的確に捉えることの重要性を示唆する結果が得られた.本研究は、従来の機能的充足指標をベースとした顧客満足度(CS)やロイヤルティに関する研究枠組を、顧客ニーズを起点として機能的充足のみならず感情的充足の両側面から見直し、拡充することで、ガラパゴス化、多機能性疲労、過剰品質、グローバル競争力の低下といった状況を打破するための知見・示唆を得ようとするものである。今年度は、研究の初年度にあたり、従来の機能的充足指標をベースとしたCS関連項目に対し、愛着や後悔といった視点からの感情的充足指標に関する測定項目を新たに加えた調査票の設計をおこなった。また、これらの充足を誘引する要因として、製品・サービスが消費者本来のニーズにマッチしているのか、またミスマッチといった乖離状態であるならば、それは不足しているのか、過剰に提供されているのか、といった観点からのニーズマッチングに関する測定項目などの測定項目を併せて追加することで調査票を作成し、3製品(携帯電話、パソコン、テレビ)、2種のサービス(美容院、アパレル)を対象に調査票による調査を行った。製品別、サービス別に加え、全体をプールしたデータにて仮説モデルにおける各項目をデータの信頼性をチェックしながら相互関連性をSEM(Structural Equation Modeling)を用いて検証をおこなった。その結果、ニーズミスマッチはCSを低下させる一方で、後悔を増大させ、総じてロイヤルティの低下に結び付くことが示された。また、単に高品質・高機能といった機能的充足を満たすだけではなく、いかに消費者のニーズを的確に捉え、それを最大限に満たすといったといった観点が愛着といった感情的充足には不可欠で、この感情的充足はCSと比べてもロイヤルティ向上に大きく寄与する。ものづくりの原点・基本姿勢に立ち返ることの重要性が改めて示唆される結果と考えられる。本研究は,従来の機能的充足指標をベースとした顧客満足度やロイヤルティに関する研究枠組みを,顧客ニーズを起点として機能的充足のみならず感情的充足の両側面から見直し,拡充することで,ガラバゴス化,多機能性疲労,過剰品質,グローバル競争力の低下といった現状を打破するための知見,示唆を得ようとするものである。今年度は研究の2年目に当たり,昨年度行ったアンケート調査によって得られた分析結果を検討し,仮説モデルの見直し,ブラッシュアップを行った。また,調査結果からは,製品やサービスそのものへの評価のみならず,それらを通じて得られる経験や価値が重要視されているといった知見を得ることができ,それらを踏まえて調査項目自体の大幅な追加を行った。携帯電話,パソコン,テレビといった製品に対し,新たに構築した調査業を用いたアンケート調査を実施し,仮説モデルの検証を行った。その結果,顧客満足度やロイヤルティに関しては機能的充足に対して感情的充足の影響が強いといった研究初年度に得られた知見に加え,製品を通じて得られる経験に基づく価値が与える影響を解明するなど,ものづくりのみならずコトづくりといった観点への指針を与える結果が得られたものと考えられる。研究2年目にあたる今年度は,機能的充足と感情的充足に焦点を当てて実施したアンケート調査項目に基づく分析結果を踏まえ,仮設モデルの見直し,検討を含め,調査項目を大幅に追加した上で再度国内にて新たなアンケート調査ならびに分析を行った。その関係で当初予定していた,海外を含めた調査範囲の拡充を次年度に繰り越すこととなったものの,研究の取りまとめに向けた基盤は十分に構築できたものと考える。本研究は、従来の機能的充足指標をベースとした顧客満足度やロイヤルティに関する研究のフレームワークを顧客ニーズを起点としたものに再構築することを企図したものである。機能的充足に加え、感情的充足といった観点から体系的に拡充することで、ガラパゴス化、多機能性疲労、過剰品質、グローバル競争力の低下といった指摘がなされる現状を打破し、競争力強化に向けた知見、示唆を得ようとするものである。今年度は当初の研究最終年度にあたり、これまでに行ったアンケート調査によって得られた分析結果の検討を行った。顧客満足度やロイヤルティの獲得に際し、製品品質や性能をはじめとする機能的充足に対し、愛着や後悔といった感情的充足の影響が強いといった研究初年度に得られた知見に加え、2年目には製品・サービスそのものへの評価に加え、それらを通じて得られる経験や新たな価値創出が重要視されているといった結果を得ることができた。これらの成果に加え、本年度はロイヤルティの一指標である口コミに着目したモデルを構築し、顧客自らが発する口コミがひいては他者からの口コミとなって自身が使用する製品・サービスへの評価に影響を与えるといった循環構造を持つことを定量的に示すことができた。これに伴い、より大局的な見地からアンケート調査項目や調査対象の拡充、仮説モデルのさらなるブラッシュアップを行い、調査期間の延長を申請するとともに、日本のものづくり、コトづくりに対する知見、示唆を与える研究の取りまとめに向けた基盤の構築を行った。これまでに得られたアンケート調査に基づく分析から、顧客満足度やロイヤルティの獲得には製品・サービスに対する機能的充足のみならず、感情的充足の影響が大きいことが示された。

また、製品・サービスそのものへの評価に加え、そこから得られる経験、価値が大きな影響を与えるといった結果が得られた。また、ロイヤルティについては、従来、自身の再購買に対する意向や他者への推奨度合いを示す口コミといった指標から測定されてきた。自身のロイヤルティの強さの度合いを示す他者への口コミであるが、他者から受ける口コミ自体が、自身の製品・サービスへの評価に影響を与えるといった循環構造を持つことを定量的に示すことができた。これに伴い、計画段階との比較においても、より大局的な見地からアンケート調査項目や調査対象の拡充、仮説モデルのさらなるブラッシュアップを行い、日本のものづくり、コトづくりに対する知見、示唆を与える研究として取りまとめるべく、調査期間の延長を申請することとなった。顧客満足度(CS;Customer Satisfaction)を高めることは、現在の企業経営において不可欠な要素となっている。その一方で、日本国内市場においては、製品・サービスの高性能化、多機能化競争の結果、ガラパゴス化とも揶揄されるような現象や、それら性能・機能を使いこなせないことによる消費者側の不満として多機能性疲労と呼ばれる現象を引き起こし、過剰品質といったことまでが言及されるなど、消費者のニーズと製品・サービスとの間にニーズのミスマッチを生じさせている。本研究では、製品・サービスと消費者のニーズとの間の「ニーズマッチング」を起点とし、機能的充足指標としての従来のCS研究の枠組みに、愛着や後悔といった感情的側面からの充足指標の概念を組み込むことで研究枠組みの拡張・再構築を企図したものである。機能的充足に加え、感情的充足といった観点から体系的にモデルを拡充することでガラパゴス化をはじめとする上記の諸課題やグローバル競争力の低下といった指摘がなされる現状を打破し、競争力強化に向けた知見、示唆を得ることを目的としたものである。アンケート調査に基づき、顧客満足度や再購買意図や口コミをはじめとする顧客ロイヤルティの獲得に際しては、製品品質や性能をはじめとする物理的・機能的充足に対し、愛着や後悔といった感情的充足の影響が強いこと、また製品・サービスそのものへの評価に加え、それらの利用を通じて得られる経験や新たな価値創造といった観点が重要であること、さらには顧客自らが発する口コミは、他者の製品・サービスへの評価に影響を与え、他者からの口コミにより自身の製品・サービスへの評価も影響を受けるといったある種の循環構造を持つことなどが定量的に示され、学会発表や論文発表に関する題材を整えることができた。今後はものづくりやコトづくりに有益な示唆となるよう本研究の成果を広く発信していきたい。
日本語教育における「ほめ」の使用実態と機能

教育場面においては教師と学習者の人間関係を構築することが重要である。そのような人間関係の構築・強化において,「ほめ」は重要な役割を果たす。本研究では,日本語の教育場面における「ほめ」について談話レベルで分析を行う。その際,「ほめる側」と「ほめられる側」の意識を考慮するとともに,他の種類の談話とも比較することで,その特徴を明らかにする。
天然タンパク質由来の機能をプログラムした人工タンパク質集合体の創成

化学者が「デザイナー」となって思いのままに、タンパク質の機能や構造をデザインしコントロールすることが可能となれば、「必要な時、必要な機能を自発的に発動するバイオナノロボット」が、医薬・バイオテクノロジー分野で活躍する時代もそう遠くないのかもしれない。本研究は、その足がかりとなる研究として「シンプルなデザインによる人工タンパク質集合体」に「天然タンパク質の潜在能力」を与えることで、機能性バイオマテリアルの作製を可能とする「タンパク質デザイン工学」を推進し、将来作製を目指す「バイオナノロボット」の実現に向けた挑戦的研究を行う。
北アメリカ大陸におけるアジア関連温帯要素植物群の個体群統計遺伝学的研究

北アメリカ大陸には日本を含む東アジアと近縁な高等植物群が数多く分布している。本研究は、東アジアー北米東部・西部型の典型的な地理的隔離分布を示す種群に生じた生態進化の実態を、個体群の時間的・空間的構造解析ならびに遺伝学的解析を含めた、個体群統計遺伝学的解析を通じて明らかにすることを目的として行った。2年間(平成1112年度)の研究期間では、北米西部と東部の両地域において、数多くのユリ科植物に関する野外生態調査ならびに実験試料の採集を行なった。まず、北米西部地域のロッキー山脈に生育するカタクリ属植物の1種(Erythronium grandiflorum)に関して、開花フェノロジー調査ならびにアイソザイム遺伝子を用いた集団の遺伝的解析を行った。その結果、異なる標高に広範囲にわたって生育するこの種では、標高の違いならびにそれによる雪解け時期の違いが毎年の開花フェノロジー変異、さらには集団間の遺伝子流動に大きく影響を与えていることが明らかになった。一方、東部地域ではエンレイソウ属植物3種を対象に、各種の繁殖特性および酵素多型を用いた個体群の遺伝的構造の解析を行った。その結果、これらの種は虫媒による種子繁殖ならびに地下茎による栄養繁殖を行うことが明らかになった。また、栄養繁殖が頻繁に観察された個体群では、同じ遺伝子型をもったクローン個体の集合が予想されたが、集団レベルでは非常に高い遺伝的多型が維持されていることが明らかになった。さらに、これらの野外個体群動態調査をもとに、植物個体群動態のシミュレーション・モデルの解析を行った。この他、ユリ属植物ならびにツバメオモト属植物に関しては、rbcL遺伝子ならびにmatK遺伝子の配列を決定し、これまでデータを蓄積してきている系統解析の補強を行った。本研究は、現在東アジアと北米大陸の両地域に適応放散し隔離分布を示す多くの近縁植物群に関しては、地域集団の時間的・空間的構造ならびに遺伝的構造を比較解析し、両地域で生活史を背景とした系統的制約(Phylogenetic constraint)と環境的制約(environmental constrait)の相互作用で生じた、多様な生態進化の実態を明らかにすることを目的としている。初年度にあたる平成11年度、大原ほか4名は8月に北米西部地域のカスケード山脈からロッキー山脈にかけての野外調査を行った。そして、カタクリを中心としたユリ科植物に関する実験試料の採集を行い、rbcL遺伝子ならびにmatk遺伝子の配列を決定し、これまでデータを蓄積してきている系統解析を補強することができた。また、アイソザイム遺伝子を用いた集団の遺伝的解析に関しても、新たな多型遺伝子座の特定を行った。さらに、ロッキー山脈地域においてはロッキー山脈生物学研究所所長のAllison氏とともに野外調査を行い、調査区の選定を行った。一方、高田は10月にウッズ・ホール海洋研究所を中心に北米東北部の林床植物の野外個体群動態調査を行ったほか、個体群の時・空間的構造ならびに遺伝的構造との関係を明らかにするための、推移確率行列を用いた植物個体群動態モデルの確立を行った。本年度はさらに3月に河野・林の2名が北米東南部におけるエンレイソウ属植物の野外個体群動態調査を行うほか、高田も再度渡米し、植物個体群動態モデルの解析を進める。来年度は、5月に北米東部地域、8月に北米西部地域におもむき、両地域に生育する多様な植物群の野外調査ならびに遺伝構造解析を行う予定である。本研究は、現在東アジアと北米大陸の両地域に適応放散し隔離分布を示す多くの近縁植物群に関して、地域集団の時間的・空間的構造ならびに遺伝的構造を比較解析し、両地域で生活史を背景とした系統的制約(phylogenetic constraint)と環境的制約(environmental constraint)の相互作用で生じた、多様な生態進化の実態を明らかにすることを目的としている。2年度(最終年度)にあたる平成12年度は、ロッキー山脈生物学研究所所長のAllison氏ならびにハント植物学研究所のUtech氏の協力のもと

野外生態調査を行った。まず、西部地域ではロッキー山脈に生育するカタクリ属植物の1種(Erythronium grandiflorum)を対象に、開花フェノロジーの調査を行った。その結果、異なる標高に広範囲にわたって生育するこの種では、標高の違いならびにそれによる雪解け時期の違いが毎年の開花フェノロジー変異、さらには集団間の遺伝子流動に大きく影響を与えていることが明らかになった。一方、東部地域ではエンレイソウ属植物3種を対象に、各種の繁殖特性および酵素多型を用いた個体群の遺伝的構造の解析を行った。その結果、これらの種は虫媒による種子繁殖ならびに地下茎による栄養繁殖を行うことが明らかになった。また、栄養繁殖が頻繁に観察された個体群では、同じ遺伝子型をもったクローン個体の集合が予想されたが、集団レベルでは非常に高い遺伝的多型が維持されていることが明らかになった。このほか、ユリ科ユリ属植物ならびにツバメオモト属植物数種に関する採集を行ない、これまでデータを蓄積してきている系統解析の補強として、rbcL遺伝子ならびにmatK遺伝子配列の決定を行った。
細菌由来の揮発性化合物を指標とする食品危害細菌検出法の開発

本研究は、細菌が産生する揮発性化合物(Microbial Volatile Compounds, MVCs)を、超高速GCを基盤とした電子嗅覚ノーズで測定し,細菌特異的MVCを指標とした細菌検出法として構築することを目的としている。本年度は、測定用培地および培養条件の検討を行い、次に細菌の属,菌種,菌株による違いの検討の行った.MVCs分析のための種々の増菌用液体培地を検討した結果、検出されたピークパターンが多彩であったTryptic soybroth (TSB)を測定用培地として決定した.次に、TSB培地での純粋培養系における細菌の属によるMVCsの違いを検討し、MVCsによる属の推定が可能かについて検討を行った。大腸菌群5属、18株のMVCsの主成分分析を行ったところ,Escherichia属とEnterobacter属とKlebsiella属-Serratia属-Citrobacter属の3つのグループに分けられた.よって,Escherichia属とEnterobacter属は属の判別が可能であったが,Klebsiella属,Serratia属,Citrobacter属の判別は難しかった.今後は主成分分析では判別できなかった属については詳しい分析を行う必要がある.最後に、菌株の違いによるMVCsについて検討を行った.非病原大腸菌3株,病原大腸菌1株のMVCsを測定した結果、非病原大腸菌の菌株間ではMVCは類似していたが,病原大腸菌と非病原大腸菌では異なっていた.詳細に解析した結果,非病原大腸菌に特異的なMVCsはなく,有意に強いMVCsも少なかったが,病原大腸菌では,特異的なMVCsと非病原大腸菌に比べて有意に高いMVCsが複数存在した.以上の結果、MVCsを分析することにより属の判別だけでなく病原性についても推定できる可能性が示された。当初に予期した以上に細菌間のMVCsが異なっていたため、順調にデータがでている。研究初年度であったが、学会発表も1件達成した(日本農芸化学会2019年度大会)今後は、MVCsのデータベース化も視野に入れ、純粋培養系における様々な菌株のMVCsデータを蓄積して行く予定である。また、2種以上の細菌の混合培養時にMVCsは、単独培養に比べてどのように変化するのか、また、食品試料を培養した時に常在細菌の影響がどのように受けるのか、などについても検討を行い。MVCsによる細菌検査の適応範囲や限界を決定する必要があると考える。MVCs測定にしようするSPMEファイバーの交換回数が予定よりも少なかったために当初予定よりも費用を抑えることができた。本年度未使用文について、次年度超高速GC解析ソフトウェアのライセンス数を増やす、あるいは解析ソフトウェアの更新に使用する予定である。
ICTを活用した天体観察法と太陽に関する教育用デジタルデータの開発と検証

本研究では、天体望遠鏡を用いた子どもへの天体観察会に関しての効果的な観察法と、太陽に関する教育用デジタルデータの開発と検証を行った。観察法では、子どもには屈折望遠鏡を使用し、観察対象が分かりにくい子どもと治安などの不安を抱える保護者のために、携帯電話による撮影を可能とするエリア、観察のみのエリアに分けて行う方法を考案した。教育用デジタルデータは、注目ポイントをしぼった教育用データを作成し、1)イメージしやすい、2)理解しやすい、3)興味・関心を高める効果があることが分かった。児童・生徒の興味関心を高める太陽観測データの課題設定、提示法に関して、滋賀県内中学校での実践を通して調査を行った。実施した中学校の理科では、天文(太陽)の単元の直前に放射線に関する授業を行う。そのため、放射線に関する授業において、次回からの天文の単元への興味・関心づけを行うため、放射線を伴う太陽爆発現象(フレア)の動画活用、授業展開を検討し実施した(授業担当者は調査校中学校教員)。その結果、単元間のつながりがスムーズになるだけでなく、生徒から驚きの声が上がるほど太陽への興味が高まることが分かった。天体の単元に入る直前の授業において、太陽観測データの活用は初めての試みであったが、生徒の反応が大きく、活用する意義を見出した。また、国立天文台を訪問し、太陽観測データの中から子どもにとって興味・関心の高まる太陽現象の調査・整理を行った。天体観察・観望に関する情報収集および子どもに対する取り組み方を調べるため、公共天文台を訪問した。宮城県仙台市天文台では子どもへの見せ方や取り組み、岩手県きらら室根山天文台では読み聞かせを通しての子どもへの取り組みを視察した。12月には、子どもの反応を調査するため、滋賀県内小学校において児童と保護者向けの天体観察会を開催した。今年度は、観察会において対象天体を認識しにくい子どもにとっても分かりやすい観察の仕方を検討するため、公共天文台への視察と観察の仕方(撮影の仕方)の研究を行った。まず初めに、高崎市少年科学館での視察では、一般の方が観察する際に、望遠鏡の種類によって、夜空のどの星を見ているのかをイメージするしやすさが異なるという意見を得た。この意見は、これまでの研究代表者の観察会経験を通して感じていた点と同じである。理由として、屈折望遠鏡の場合は鏡筒が長いため、どの方向から光が来ているかイメージしやすい一方で、反射望遠鏡は鏡筒が短くイメージしにくいこと、また、小型望遠鏡の反射望遠鏡は鏡筒の横から覗くタイプのニュートン式が多く、光の方向がさらにイメージしにくくなることが考えられる。そのため、どの星を見ているか分かりやすくするには、子ども向け観察会では屈折望遠鏡が適していると考えられる。(ただし、反射望遠鏡には、屈折望遠鏡とは違うワクワク感や感動はある。)観察会中に光害をもたらす携帯電話を使用する保護者が多いため、携帯電話による写真撮影の時間、または、撮影用の望遠鏡を他とは少し離したところに設置することを計画した。これによって、光害の少ないエリア(望遠鏡)を確保できるという利点とともに、どの天体を観察しているのかをより把握しやすくなるという利点がある。一方で、携帯電話の光軸と望遠鏡の光軸を揃えることは難しく、撮影に時間がかかるため、人が並ぶ観察会では携帯電話による撮影を取り入れることは、不満感や困難さを新たに生じさせることになる。そこで、望遠鏡を用いた携帯電話による天体撮影法に関しての研究を行った。さらに、太陽観測データの調査では、小・中学校で扱うプロミネンス、フレアに関連するプロミネンス放出を伴うフレアのイベントを調査し、動画作成をした上で小・中学校で実際に使用し検証を行った。平成27年度には宇宙航空研究開発機構(JAXA)宇宙科学研究所に赴き、太陽観測衛星で観測された観測画像の中から教育に適した画像を選択し、黒点の消滅やプロミネンス放出を伴うフレア等に関する教育用デジタル動画を作成した。作成したデジタル動画の検証を小・中学校での講演や科学技術館での講演、また、将来教員を志望している埼玉大学教育学部生に向けた実践を通して行った。本研究期間内に公共天文台を訪問し、天体観察に関する情報収集および子どもに対する取り組み方を調べた。また、滋賀県内小学校において天体望遠鏡を用いた天体観察会を開催し、児童の興味・関心や観察面等における困難さ、および同伴している保護者側のニーズなどを調べた。それにより、天体観察では光害をもたらす携帯電話が、治安などの社会的な背景により天体観察中も手放しにくい事情が保護者側にあることが分かった。その結果、望遠鏡を通して見た天体像を携帯電話で手軽に撮影する方法を考案した。さらに、撮影会では子どもたちが観察天体を撮影できる望遠鏡のエリアと、少ない光害で観察できる望遠鏡のエリアに分けることで、興味関心を持てるようにした。また、このエリア分けにより、保護者のニーズにも応えられるようになった。太陽観測衛星の観測画像を用いて、黒点の形成・消滅、プロミネンス放出を伴うフレアなどの教育デジタルデータを作成した。また、作成したデジタルデータは、滋賀県内中学校6校、京都府内小学校1校・高校1校、島根県内小学校1校、公共科学館1、大学教育学部2校において検証を行い、児童、生徒の興味関心が高まることが分かった。2015年9月にノルウェーで行われたKIFEE国際フォーラムで本研究の成果発表を行い、ポスター賞を受賞した。

観察法では、子どもには屈折望遠鏡を使用し、観察対象が分かりにくい子どもと治安などの不安を抱える保護者のために、携帯電話による撮影を可能とするエリア、観察のみのエリアに分けて行う方法を考案した。教育用デジタルデータは、注目ポイントをしぼった教育用データを作成し、1)イメージしやすい、2)理解しやすい、3)興味・関心を高める効果があることが分かった。望遠鏡を通して見た天体像を携帯電話で短時間で撮影する撮影法を考案した。この方法により、対象天体を認識しにくい子どもにとっても対象天体が分かりやすくなること、携帯電話による光害のエリアを減らせること、また、望遠鏡の光軸と揃えるのが困難で撮影に時間がかかる携帯電話を取り入れやすくしたことなどが利点としてあげられる。さらに、保護者のニーズにも応え、安心して観察会に参加してもらえる利点もあげられる。保護者のニーズに応えている理由として、小学校での観望会では必ず保護者が同伴する。観察会中の携帯電話の使用は控えていただくように依頼するが、実際には使用される方は多い。保護者側からすると帰りの連絡や他の理由によりやもえないこともあり、携帯電話を受け入れざるをえない状況がある。そのため、携帯電話による光害を伴っていたが、今回の研究で上記のように保護者のニーズに応え、光害の影響を減らすことができたる。太陽観測データをもとに作成した動画を小・中学校現場で検証したところ、好評で子どもの反応や興味・関心が高いことが分かった。天文学、太陽物理学公共天文台の視察を継続して行い、子どもにとっての分かりやすい観察の仕方を検討する。また、太陽観測データをもとに、学校現場で活用できる教育用データを作成し、学校現場で検証を行う。さらに、最終年度の今年度は、これまでの研究結果を学会、研究会において発表を行う。生徒の興味・関心を高める活用法の調査を、中学校教員の協力を得て中学校現場での実践を通して実施できたこと、また、その調査を通して天文の単元に入る直前の授業で、次単元である天文への興味づけとして太陽データを活用し子どもの反応が高かったことは評価に値する。公共天文台での読み聞かせや展示、観察法など様々な取り組みを視察・聞き取り調査、また、子どもの反応を調べるために小学校現場での天体観察会を実施した点で順調に進展している。2015年3月に北極海での日食観測を予定していたが、現地でのホテルを確保することができなかったため、2014年度は断念し、2015年度に残すこととした。夜の天体観察会や公共天文台での取り組みを通して、対象天体を認識しにくい子どもにとっても分かりやすい観察・観望の仕方を検討し、実際の観察会での実践を通して検証を行う。太陽観測データに関して教育用デジタルデータの作成を行う。また、小・中・高校の学校現場で作成したデジタルデータを使用し、検証を行う。3月に皆既日食を観察し、教育用デジタルデータに反映させる。2016年3月の日食観測のためのインドネシアへの渡航費または、9月にノルウェーで予定されている京都国際環境・エネルギーフォーラム(KIFEE)国際シンポジウムの教育セッションで研究成果の発表を行うための渡航費として計画している。
緑内障原因タンパク質の分子間相互作用の解析

正常眼圧緑内障の原因遺伝子として報告されたオプチニュリン(OPTN)について遺伝子変異が及ぼす蛋白機能、特に蛋白相互作用に関する検討を行った。これまでの遺伝子解析の結果からE50K変異によって重篤な正常眼圧緑内障が発症することから、この遺伝子変異の位置で相互作用が確認されているRab8蛋白との相互作用について検討を行った。相互作用を確認する方法として水晶発振子とGSTプルダウンアッセイ法を利用した。E50Kを含む、Science誌に報告された全ての遺伝子変異をそれぞれ導入し、大腸菌によって蛋白を発現させ、Hisタグとゲル濾過による精製を行った。同様な方法によってRab8も精製し、Rab8を水晶発振子に固定して、各種OPTNを個別に反応槽に加えて、Rab8-OPTNの結合力を測定した。その結果、E50K変異体蛋白はRab8と結合できないことが確認された。この結果はGSTプルダウンアッセイ法によっても確認された。Rab8は小胞体輸送を含む細胞内の蛋白輸送に関係していると考えられており、OPTNとの相互作用が遺伝子変異によって阻害されたことによって、細胞輸送系への影響が考えられる。現在我々はOPTNが発現する網膜神経節細胞株(RGC5)を使って変異体OPTN(E50K)を強制発現させ、オルガネラの変化を電子顕微鏡によって観察している。緑内障は日本において失明原因の第2位を占め、推定約200万人の患者が存在する。40歳以上の日本人では有病率は約5%で、開放隅角緑内障の90%が正常眼圧緑内障と報告されている。緑内障の原因遺伝子としてはすでにミオシリン、チトクロムP4501B1、オプチニュリン(OPTN)、WDR36の4遺伝子が発見されており、特にOPTNは初めての正常眼圧力緑内障の原因遺伝子として注目されている。これまでの解析によって日本人の緑内障患者に占めるOPTN遺伝子の変異が低いことが明らかになっているが、アミノ酸50の変異(E50K)など正常眼圧力緑内障との相関性が高い、我々はOPTN遺伝子変異が及ぼすタンパク質機能への影響を解析することにした。遺伝子変異がRAB8タンパク質との相互作用部位に近いことから、OPTNE50K変異体を大腸菌によって発現し、これをアフィニィティークロマトグラフィーによって精製し、Rab8との相互作用を測定し、正常体OPTNとの比較を行った。タンパク質-タンバク質の相互作用には検出感度の高い、水晶発振子を利用した。その結果、OPTNE50K変異体はRab8と相互作用できないことが明らかとなった。緑内障患者で報告されている他の遺伝子変異や遺伝子多型はRab8との相互作用に全く影響はなかった。これらの変異は正常者にも発見されており、緑内障との相関性が低いことが最近明らかになっており、それを裏付ける結果となっている。Rab8はアストログリア細胞内の小胞体輸送に関与していると考えられ、神経乳頭への直接的な影響が考えられるため、今後は細胞内でのOPTN-Rab8結合体の機能と緑内障との関係を調べる予定である。正常眼圧緑内障の原因遺伝子として報告されたオプチニュリン(OPTN)のクローニングを行い、緑内障患者で発見された遺伝子変異を導入して、結合タンパク質の一つであるRab8タンパク質との結合が阻害されるか水晶発振子を用いて検証を行った。その結果、E50Kの変異体OPTNはRab8との相互作用が全くないことが明らかとなった。さらに、異なる実験方法である、GSTプルダウン法を用いても類似する実験結果を得た。我々は変異体OPTNの発現は細胞オルガネラに何らかの変化をもたらすと考え、ラット網膜神経節細胞株(RGC5)に変異体OPTNを強制発現させ、オルガネラの変化を観察した。変異体OPTNの発現は細胞死を起こすことが明らかとなった。Rab8タンパク質は小胞体輸送に関与していると考えられ、現在輸送経路への影響を詳細に検討している。
マイクロ構造物と異方性材料のための,接合強度信頼性評価法の構築

本研究では,まず,マイクロ構造物の接合強度評価パラメータを解析する数値解析手法の開発を行うことを目的とした.このために,前年度までに3次元異方性異種材界面き裂の応力拡大係数を解析する手法を開発していたが,これにグラフィック・ユーザー・インターフェースを整備して,一般ユーザーが'使用しやすいソフトウエアを完成させた.また,当該年度には,熱応力下の異方性異種材接合角部の応力拡大係数を解析する手法を完成させた.これにより,界面き裂のみでなく,さまざまな角度をもって接合した接合角部の特異性応力場の評価が可能となった.これまで,このような熱応力下の異方性異種材界面角部の応力拡大係数を解析する手法は無く,本手法はマイクロ構造物のみに限らず,あらゆる異種材接合角部の定量的な強度評価に道を開くものである.次の目的は,デジタル相関法を用いた々イクロ接合部のひずみ分布の直接測定手法の開発である.これについては,レーザー顕微鏡画像に対するレーザー走査時の位置ずれに起因する画像誤差を,異なる方向に走査した2枚の画像を使って補正する手法を開発し,デジタル画像相関法によるひずみ測定の精度を向上させた.さらにこの計測手法を用いて,部品内蔵基板中のひずみ分布を計測することにも成功した.以上の成果によって,マイクロ構造物中の破壊現象について,数値計算手法による解析結果を実測によって確認することが可能となったことから,強度評価の信頼性を高めることが期待できる.また,数値計算手法では解析が難しい,複雑な内部構造をもったマイクロ構造物内のひずみ分布や,構成部材の材料定数などを実測によって調べることが可能となった.本研究では,まず,マイクロ構造物の接合強度評価パラメータを解析する数値解析手法の開発を行うことを目的とした.このために,前年度までに3次元異方性異種材界面き裂の応力拡大係数を解析する手法を開発していたが,これにグラフィック・ユーザー・インターフェースを整備して,一般ユーザーが'使用しやすいソフトウエアを完成させた.また,当該年度には,熱応力下の異方性異種材接合角部の応力拡大係数を解析する手法を完成させた.これにより,界面き裂のみでなく,さまざまな角度をもって接合した接合角部の特異性応力場の評価が可能となった.これまで,このような熱応力下の異方性異種材界面角部の応力拡大係数を解析する手法は無く,本手法はマイクロ構造物のみに限らず,あらゆる異種材接合角部の定量的な強度評価に道を開くものである.次の目的は,デジタル相関法を用いた々イクロ接合部のひずみ分布の直接測定手法の開発である.これについては,レーザー顕微鏡画像に対するレーザー走査時の位置ずれに起因する画像誤差を,異なる方向に走査した2枚の画像を使って補正する手法を開発し,デジタル画像相関法によるひずみ測定の精度を向上させた.さらにこの計測手法を用いて,部品内蔵基板中のひずみ分布を計測することにも成功した.以上の成果によって,マイクロ構造物中の破壊現象について,数値計算手法による解析結果を実測によって確認することが可能となったことから,強度評価の信頼性を高めることが期待できる.また,数値計算手法では解析が難しい,複雑な内部構造をもったマイクロ構造物内のひずみ分布や,構成部材の材料定数などを実測によって調べることが可能となった.1.三次元異方性異種材界面き裂の応力拡大係数を解析する手法を開発した.本手法は,汎用有限要素法との親和性を考慮し,J積分法に重ね合わせの方法を導入したM積分法を用い,経路積分の際に必要となる諸量を有限要素法の離散点の情報から移動最小自乗法を用いることによって内挿し,自動的に取得するようにした.本手法によって得られた応力拡大係数は,同じ要素分割での有限要素法解析結果に変位外挿法などの他の手法を適用した場合に比べて,格段に高い精度が得られた.2.MEMSなどに良く用いられる,ガラスとシリコンの陽極接合について,その熱残留応力による破壊靱性値を測定した.この実験においては,通常シリコンと線膨張係数を合わせるために用いられるパイレックスガラスを用いずに,ナトリウムガラスを用いた.接合したナトリウムガラスとシリコンは,400°C付近で接合した後,降温する過程で破壊した.破壊温度から,1の三次元異方性異種材界面き裂の応力拡大係数解析手法を用いて,熱残留応力による破壊靱性値を測定した.その結果,シリコンに(111)面のものを用いた時の方が,(100)面のものを用いた時よりも破壊靱性値が高いことがわかった.(100)面ウエハを用いた時は,へき開面である(111)面に対するへき開応力が比較的高く,き裂は,シリコンの(111)面方向に進展するのに対して,(111)面ウエハの場合は,ガラスとシリコンの界面に沿ってせん断応力によってき裂が進展した.3.デジタル相関法を用いて,顕微鏡下の加熱冷却槽中で加熱した電子基板やシリコンチップを埋め込んだ積層基板中の熱ひずみを測定するシステムを構築した.このシステムでは,ピエゾステージを用いて,レンズの収差等によるデジタル相関法の誤差を修正する方法を開発し,精度の向上を実現した.この手法を用いて,微細構造物中に発生するひずみ分布を直接計測することが可能である.(数値解析手法の開発に関する研究成果)熱応力下の三次元異方性異種材界面き裂の応力拡大係数を解析する手法を完成させた.この手法は,通常の6面体要素の他に4面体要素に対しても有効に適応できることが判った.また,任意の二次元異方性異種材接合角部の応力特異指数と応力拡大係数をH-integralを用いて解析する手法を開発した.

この研究で,異方性異種材接合角部,異方性異種材界面き裂,均質体中のき裂を統一的に表すことのできる応力拡大係数の定義を提案した.(デジタル相関法による微細接合部のひずみ測定に関する研究成果)デジタル画像相関法をレーザー顕微鏡画像に適用することを試みた.その結果,レーザー顕微鏡画像には,走査型顕微鏡に特有な走査方向のランダムな画素ずれがあることが判明した.そこで,この画素ずれを画像処理によって取り除く方法を検討している.(電子実装部のはく離防止設計手法の開発に関する研究成果)2枚のシリコンチップを重ねて,基板状に樹脂封止したStacked BGA Packageについて,シリコンチップと基板の間のダイアタッチ剤によって吸湿リフロー耐久性が異なるという問題を,三次元異種材界面き裂の応力拡大係数を用いて評価した.その結果,吸湿リフロー耐久性が劣るダイアタッチ剤は,水分の溶解度係数が大きく,保管中に吸湿した水分がリフロー時により大きな圧力として作用し,シリコンチップと基板の間の初期欠陥を拡大させて破壊に至ることが予測された.本研究では,まず,マイクロ構造物の接合強度評価パラメータを解析する数値解析手法の開発を行うことを目的とした.このために,前年度までに3次元異方性異種材界面き裂の応力拡大係数を解析する手法を開発していたが,これにグラフィック・ユーザー・インターフェースを整備して,一般ユーザーが使用しやすいソフトウエアを完成させた.また,当該年度には,熱応力下の異方性異種材接合角部の応力拡大係数を解析する手法を完成させた.これにより,界面き裂のみでなく,さまざまな角度をもって接合した接合角部の特異性応力場の評価が可能となった.これまで,このような熱応力下の異方性異種材界面角部の応力拡大係数を解析する手法は無く,本手法はマイクロ構造物のみに限らず,あらゆる異種材接合角部の定量的な強度評価に道を開くものである.次の目的は,デジタル相関法を用いたマイクロ接合部のひずみ分布の直接測定手法の開発である.これについては,レーザー顕微鏡画像に対するレーザー走査時の位置ずれに起因する画像誤差を,異なる方向に走査した2枚の画像を使って補正する手法を開発し,デジタル画像相関法によるひずみ測定の精度を向上させることに成功した.さらにこの計測手法を用いて,部品内蔵基板中のひずみ分布を計測することにも成功した.以上の成果によって,マイクロ構造物中の破壊現象について,数値計算手法による解析結果を実測によって確認することが可能となったことから,強度評価の信頼性を高めることが期待できる.また,数値計算手法では解析が難しい,複雑な内部構造をもったマイクロ構造物内のひずみ分布や,構成部材の材料定数などを実測によって調べることが可能となった.
カイコ個体における相同組換え修復の研究・およびそれに関わる遺伝子群の機能解析

前年度の結果より、Brca2の一部であるBRC repeatsとC末端領域(SX fragment)がRad51と強い結合がみられた。Brca2は、非常に大きなタンパク質であり、BRC repeatsは単量体Rad51と、C末端領域は多量体を形成したRad51と相互作用していることから、Brca2がRad51の機能制御を行なう上で、この2つのドメイン解析は非常に重要である。そこで、本年度はSXのミュータントを作製しRad51との相互作用を詳細に調べた。その結果、SXフラグメントの17アミノ酸残基が非常に重要であることが分かった。さらに、SXはDNA結合活性を有しており、Rad51結合ドメインと隣接していることが分かった。昆虫においても、Brca2がRad51の機能制御を行なっていると考えられる。さらに、昆虫において相同組換え遺伝子の網羅的な相互作用をしらべるために、Insect two-hybrid systemを構築した。その結果、他生物で報告されていなかった相互作用をいくつか検出できた。特に、機能があまり分かっていないRad52がRPAやファンコニ貧血症原因遺伝子の一つであるFacnJと相互作用していることが明らかとなり、今後その機能解析を行なう予定である。Insect two-hybridsystemは、機能未知なタンパク質の機能推定に有用なツールになりうると考えられる。昆虫においても、相同組換え修復の基本となるメカニズムは高度に保存されていることが明らかとなったが、それらを制御する部分では酵母・ヒトなどとは異なっており本研究を引き続き行なうことで、相同組換え修復における有用な情報が得られると期待される。本年度は、申請者が以前より既に単離していたBrca2について詳細に解析を行なった。ヒトにおいては、Brca2は乳ガン原因遺伝子の一つであり、相同組換えに関与すると考えられている。まず、yeast two-hybrid systemを用いてカイコにおける相同組換え関連遺伝子の相互作用解析を行った結果、Brca2の一部であるBRC repeatsとC末端領域がRad51と強い結合がみられた。ヒトでは、Brca2のC末端領域がRad51と相互作用することが知られているが、カイコBrca2のC末端領城は他生物との相同性はほとんど見られなかった。さらに、このC末端領域を生化学的に解析した。この領域はRad51の多量体形成を阻害しなかったが、2本鎖DNAと強く結合することが明らかとなった。また、Brca2のC末端領域はRad51とdsDNAの結合の安定化を促進する働きをもっていることが示唆された。さらに、我々はRad52と非常に相同性の高い遺伝子を単離した。Rad52は酵母においては相同組換えに一番重要な遺伝子である。この遺伝子はゲノムプロジェクトが終了している他の昆虫には存在していなかった。カイコ培養細胞において、Brca2及びRad52をRNAiによりノックダウンし、これらが組換えに関与しているかを調べたところ、Brca2が相同組換えに働いていることが明らかとなった。Rad52も生化学的に解析したところ、dsDNA・ssDNA結合、ライゲーションの促進、一本鎖DNAのアニーリング活性においてはヒトRad52と同様の活性を保持していたが、細胞内で実際にどのような働きを行なっているかは現時点で明らかではない。
象牙質への機能性モノマ-の接着機構解明に関する研究

歯質,特にコラ-ゲンへの機能性モノマ-の接着機構を調べるために,NMR法を用いて,機能性モノマ-とコラ-ゲンとの相互作用について検討した.コラ-ゲンモデルとして(Pro^1ーPro^2ーGly^3)_<10>を用い,コラ-ゲン100mgを1mlのD_2O中に懸濁し,これにメタクリル酸,HEMAを所定量添加して^<13>C NMRスペクトルを測定した.機能性モノマ-とコラ-ゲンとの相互作用の様子を詳細に検討するために,基準ピ-ク(HMDS)に対する主鎖中のt.h.ならびにr.c.に帰属されるGlyのC=Oピ-クの相対面積強度を求めた.メタクリル酸を添加した場合,その濃度が0.70mmol以上の濃度で,水溶液中からコラ-ゲンが析出するために,C=Oのピ-ク強度は急激に低下し,メタクリル酸はコラ-ゲンと強い相互作用を示すことがわかった.これは恐らく,末端NH基のNがプロトン化され,その部位にCOO^-が対イオンとして固定されたためと考えられ,この対イオン効果によりコラ-ゲンの性質が変わるために,コラ-ゲンが析出したものと考えられる.これに対し,HEMAの場合は,添加濃度が0.70mmolの時にコラ-ゲンがD_2O中に溶解するために,t.h.のピ-ク強度が急激に増加した.その後,添加量の増加に伴い,t.h.の強度が低下し,その代わりにr.c.のピ-ク強度の増加が認められる.このことよりHEMAはコラ-ゲンを膨潤・溶解することがわかる.また,HEMAの水酸基とPro^2のC=Oとの水素結合形成に伴う,高磁場側へのシフトが観測された.以上の結果より,カルボキシル基を有するメタクリル酸とHEMAの接着機構は異なることがわかった.歯質,特にコラ-ゲンへの機能性モノマ-の接着機構を調べるために,NMR法を用いて,機能性モノマ-とコラ-ゲンとの相互作用について検討した.コラ-ゲンモデルとして(Pro^1ーPro^2ーGly^3)_<10>を用い,コラ-ゲン100mgを1mlのD_2O中に懸濁し,これにメタクリル酸,HEMAを所定量添加して^<13>C NMRスペクトルを測定した.機能性モノマ-とコラ-ゲンとの相互作用の様子を詳細に検討するために,基準ピ-ク(HMDS)に対する主鎖中のt.h.ならびにr.c.に帰属されるGlyのC=Oピ-クの相対面積強度を求めた.メタクリル酸を添加した場合,その濃度が0.70mmol以上の濃度で,水溶液中からコラ-ゲンが析出するために,C=Oのピ-ク強度は急激に低下し,メタクリル酸はコラ-ゲンと強い相互作用を示すことがわかった.これは恐らく,末端NH基のNがプロトン化され,その部位にCOO^-が対イオンとして固定されたためと考えられ,この対イオン効果によりコラ-ゲンの性質が変わるために,コラ-ゲンが析出したものと考えられる.これに対し,HEMAの場合は,添加濃度が0.70mmolの時にコラ-ゲンがD_2O中に溶解するために,t.h.のピ-ク強度が急激に増加した.その後,添加量の増加に伴い,t.h.の強度が低下し,その代わりにr.c.のピ-ク強度の増加が認められる.このことよりHEMAはコラ-ゲンを膨潤・溶解することがわかる.また,HEMAの水酸基とPro^2のC=Oとの水素結合形成に伴う,高磁場側へのシフトが観測された.以上の結果より,カルボキシル基を有するメタクリル酸とHEMAの接着機構は異なることがわかった.