hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
代謝解剖学的アプローチによるガス分子受容・生成系を標的とした脳血流制御機構の解明

外因性の多量の一酸化炭素(CO)は細胞の機能を障害するが、脳内で恒常的に産生されているCOは、酸素が十分にある時は、マウスの脳皮質細動脈をやや収縮させており、急な酸素不足の時に拡張させる予備能を付与する「緊急対応」の鍵分子として働くことを発見した。基礎CO量が野生型の約半分のHO-2欠損マウスを用い、代謝物の分布と局所濃度を網羅的にイメージングできる質量顕微鏡の技術により、エネルギー代謝物の動態を検証した。HO-2欠損マウスの脳は正常酸素下では、野生型よりATPレベルが高いが、低酸素になるとATPは約半分に低下するのに対し、野生型のマウスではATPが維持されることが判明した。低酸素時における血管拡張反応は脳での重要な局所血流調節機構のひとつであるが、その全貌は未解明である。そこで本研究では脳での酸素センサー分子の候補として頚動脈小体の酸素センサー分子であり一酸化炭素(CO)生成酵素であるheme oxygenase(HO)-2と、COの標的分子として硫化水素(H_2S、強力な血管拡張物質)の生成酵素であり脳での高発現が認められたcystathionine β-synthase(CBS)に着目し「脳組織においてHO-2は酸素センサーとして機能し、低酸素時にCO生成を減少させることによりCBSの活性を定常的な抑制から解除し、H_2S産生量を増加させ局所の血流を上昇させる。」という仮説の立証を試みた。まずfull lengthのラットCBS遺伝子を大腸菌に発現・分離精製し、in vitroでCOのCBS活性に及ぼす効果を検証した。その結果、数μMの低濃度のCOがCBS活性を阻害したのに対し、NOでは数百μMの高濃度でも阻害がかからないことから、CBSがCOの特異的なレセプタであると考えた。次にCOによる脳局所血流調節機能の修飾作用を検証するためCBSが高発現するP15-P18のステージの小脳のスライスを作製し,COによる細動脈血管作動性を径20micron以下の細動脈を対象として解析した。HOの拮抗阻害剤であるzincprotoporphyrin-IXを灌流し内因性のCO産生を抑制すると、血管径は60分間で約1.6倍まで一定の速度で徐々に拡張した。一方CBSのKOマウスを用いて同様のCO産生阻害を行ったところ、野生型のマウスで見られたような血管拡張は惹起されず,COに対する感受性は完全に消失した。また、低酸素時の血管拡張反応にCOによるCBSの活性調節が関与しているかを、酸素濃度低下時の小脳のスライスの細動脈で検証したところ、HO-2 KOマウス、CBS KOマウスでは野生型マウスに比べ低酸素応答能が低下していた。さらにHO-2とCBSの免疫組織染色を行った結果、HO-2は神経細胞に、CBSはグリア細胞に強い発現が見られた。また観察対象とした細動脈周辺にはNG2陽性の周皮細胞が認められた。これら結果は仮説を支持するものであり、中枢神経系で産生されるCOとH_2Sによる神経、グリア、周皮細胞に亘るシグナル伝達が、脳局所血流調節の一機序であることが示唆された。本研究の目的は、中枢神経系(CNS)で産生される低分子ガス状メディエータの生成・受容機構を探究し、ガス分子による脳局所血流調節のメカニズムを解明することである。NO、CO、H_2Sは細胞機能を調節するガスメディエータとして知られているが、これらのガス分子の生体高分子による受容機構の全貌は明らかにされていない。マウス肝臓組織を用いた先行研究の結果から、transsul furation経路の律速酵素であり、H_2Sの主要生成酵素であるcystathionine β-synthase(CBS)がheme oxygenase(HO)によって産生されるCOの特異的受容体として同定された(Shintani et al.,Hepatology 2009)。一方、脳は恒常的にCOを構成型酵素であるHO-2から生成しているが、COの脳における生理作用は不明であった。HOが分子状酸素を基質としてCOを生成する酸素添加酵素であることを鑑み、脳が低酸素に晒された際にCOが低下することにより局所血流制御をするという仮説の検証を試みた。小脳の生スライスを95% O_2,5% CO_2でバブリングしたartificial cerebrospinal fluid(ACSF)を灌流させたチャンバーに入れ、これを定常酸素状態とし、その灌流液を95% N_2,5% CO_2でバブリングしたACSFに切り替えることで低酸素状態とした。その結果、HO-2あるいはCBSの欠損マウスの系では低酸素による血管拡張反応が略完全に消失した。

野生型マウスの脳細動脈は定常時と比較して約66%拡張したが、CBS KOマウスではこの低酸素性の血管拡張は有意に減弱した(34%)。また小脳ではHO-2は神経細胞、CBSはアストロサイトに局在して発現していること、HO-2欠損マウスではCO生成が、CBS欠損マウスではH_2S生成の基質となるcystathionineが著減していることが明らかになった。以上のことから神経細胞への酸素供給の低下が起こると、同細胞でのCO生成の低下として変換され、パラクリン的にアストロサイトのCBS抑制を解除し血管拡張作用を有するH_2Sが増加することによって、局所の細動脈の拡張が起こることが示唆された。これらの結果から、HO-2とCBSは脳微小循環におけるhypoxia-induced vasodilatationにおいて重要な役割を担う可能性が示唆された。本研究の最終目標は、中枢神経系(CNS)で産生される低分子ガス状メディエータの生成・受容機構を探究し、ガス分子による脳局所血流調節及び代謝リモデリングのメカニズムを解明することである。脳ではneuronに局在するhe皿eoxygenase(HO)-2により、マイクロモルレベルの一酸化炭素(CO)が産生されることが分かっていたが、COの生理学的な意義は不明だった。我々は、COを受容する蛋白質としてcystathionineβ-synthase(C8S)に着目した。CBSはastrocyteに高発現しており、血管拡張作用のある硫化水素(H_2S)を生成していること、脳では正常酸素時にはCOがCBSを恒常的に抑制することによってH2Sの産生量が抑制されているため血管が収縮した状態にあることが分かった。脳皮質においては、neuronに局在するHO-2は脳実質組織の酸素センサーとして機能し(0_2に対するKm=35μM)、CO-C8S経路とリンクして、低酸素時に脳実質細動脈を秒オーダーで拡張させる即効型・可逆的な多元的ガス依存性シグナリングを形成していることを発見した(PNAS,109,1293,2012)。さらに、基礎CO量が野生型の約半分のHO-2欠損マウスを用い、代謝物の分布と局所濃度を網羅的にイメージングできる質量顕微鏡の技術により、エネルギー代謝物の動態を検証した。その結果、驚いたことにHO-2欠損マウスの脳は、正常酸素下では野生型よりATPレベルが高いことが明らかになった。ところが一旦低酸素になると、HO-2欠損マウスのATPは極端に低下するのに対し、野生型のマウスではほぼ完全に維持されることが判明した。酸素が低下するとCOの低下が齎され、H_2Sの増加が起こり、血管拡張が起こるという情報伝達経路の発見は、ガス分子が代謝システムを精妙に制御することの証左ともなった。
並列分散処理を自律的に支援する機能を持つクラスタ向けネットワークの研究

本研究では、高性能クラスタコンピュータの実現を目指し、並列処理における通信処理を自律的に支援するネットワークハードウェア、およびソフトウェアの開発を行った。開発したネットワークインタフェースは、PCIバスを介してPCに接続される。ネットワークインタフェースとスイッチには、高い自律性を持たせるため高性能プロセッサを搭載し、メッセージ転送専用ハードウェアと密に結合することにより、PC本体の処理に頼ることなくネットワークインタフェース側で通信処理の一部を効率良く支援できるアーキテクチャとした。メッセージ転送専用ハードウェアにおいては、物理層のバンド幅を極力引き出すためのプロトコルを開発し、実装した。また、共有メモリを想定した並列プログラムから共有変数へのアクセス情報を抽出するソフトウェアの開発を行った。本ソフトウェアは、並列プログラムにおける同期情報に基づいて、その前後で発生する依存関係のある変数アクセスを抽出し、同期前に書き込みを行うプロセッサから同期後に読み出しを行うプロセッサへのデータ転送命令の生成を行うものである。さらに、本ハードウェアの機能を利用し、高スループットで低レイテンシの通信を行える通信ライブラリ、標準的な通信プロトコルであるTCP/IP、および並列プログラミングにおいて標準的に利用されているMPIを本ネットワーク環境上に開発した。本システム上でベンチマークを用いて性能評価を行った結果、本ハードウェア、およびソフトウェアを利用することで、物理層のスループットの88%を引き出せることが分かった。また、MPIやTCP/IPを用いた性能評価より、本システムは従来のネットワークより高い性能を有することを確認し、本ネットワークアーキテクチャは、高性能クラスタ向けネットワークとして有効であることを明らかにした。本研究は、クラスタコンピュータの性能の飛躍的な向上を目指し、(1)並列分散処理における通信に伴う処理を自律的に支援する機能を持つネットワークの開発、(2)共有メモリを想定した並列分散プログラム中のデータ更新、読み出しアクセスを解析し、本ネットワークの自律通信機能を活用するための情報を抽出するアクセス解析ソフトウェアの開発、(3)本システムの性能評価、を目的とする。本ネットワークが自律的に支援する処理は、送信処理に関しては、送信プロセッサがどのデータを更新し将来送信することになるかの送信データ決定処理、PC本体からネットワークインタフェースへの転送処理、転送粒度の決定処理である。受信処理に関しては、受信プロセッサが将来読み出すことになるデータの決定処理、受信データための領域確保、アプリケーション領域への受信データ転送処理、である。ネットワーク自身が、アクセス解析ソフトウェアによる静的解析情報を用いながら、PC本体の計算と並行してこれらの通信処理を行う。本ネットワークを用いてPCを結合し、通信に要する時間の大幅な隠蔽が可能なクラスタコンピュータの実現を目指す。平成14年度は、以下の研究・開発を行った。1.ネットワークインタフェース、およびスイッチの開発3.デバイスドライバ等基本ソフトウェアシステムの開発4.C言語で利用できる通信ライブラリの設計・開発5.デバッグ、および基本性能の評価6.共有オブジェクトに対するアクセスを解析し、通信コードを生成するアクセス解析ソフトウェア開発本研究は、クラスタコンピュータの性能の飛躍的な向上を目指し、(1)並列分散処理における通信に伴う処理を自律的に支援する機能を持つネットワークの開発、(2)共有メモリを想定した並列分散プログフム中のデータ更新、読み出しアクセスを解析し、本ネットワークの自律通信機能を活用するための情報を抽出するアクセス解析ソフトウェアの開発、(3)本システムの性能評価、を目的とする。本ネットワークを用いてPCを結合し、高い通信性能を実現するとともに通信に要する時間の大幅な隠蔽が可能なクラスタコンピュータの実現を目指す。本研究では、ネットワークインタフェース、スイッチのハードウェア、およびデバイスドライバや通信用APIなど関連ソフトウェアを開発し、評価を行った。本年度の成果は以下の通りである。1.ネットワークインタフェース、およびスイッチ上のプログラム開発2.アクセス解析ソフトウェアとのインタフェースソフトウェアの開発3.MPIやTCP/IPなど、標準的な通信ソフトウェアの開発4.性能評価性能評価の結果、本ネットワークは、3.6μsecの低いレイテンシと2.8Gbits/secの高スループットを達成できることが分かった。すなわち、本ネットワークの高い自律性と専用ハードウェアの機能により、物理レイヤの88%のスループットを引き出すことが可能であることが確認できた。
現代日本のフリースクールにおける道徳規範の生成と変容に関する実証的研究

本研究の目的は、日本のフリースクールでのフィールドワークと、フリークールに関する文献・資料研究という2つの手法から、現代日本社会における道徳規範の変容と生成の過程を考察することにある。こうした課題設定のもと、平成21年度は、1)フリースクールでの参与観察と、2)フリースクールに関する文献研究を実施した。1)フリースクールでの参与観察について。本年度は関東地区を中心にフリースクールでの参与観察と、オルタナティブ教育に関する日本最大規模の研究大会であるJDEC2010(日本フリースクール大会)での聞き取り調査とをおこなった(前者:(1)2009年4月-2010年3月に京都市南区、(2)2009年11月に東京都葛飾区、(3)2010年3月に東京都北区と世田谷区で実施。後者:東京都渋谷区で2010年1月に実施)。JDEC2010では、日本のフリースクール・スタッフだけでなく韓国のオルタナティブ・スクールである「代案学校」のスタッフからも聞き取り調査をおこなった。2)文献・資料研究(理論研究)について。本年度は、フリースクールにおける道徳規範の変容ならびに生成過程を分析するための理論的視座として、「教育の公共性」の生成過程に関する文献を収集し分析をおこなった。本研究において生成論的な観点から公共性(公共空間)のあり方を考察することは、これまで公教育制度から「排除」されてきた「不登校」児童生徒をはじめ、義務療育の「未修了者」や外国籍の「不就学」児童生徒たちに対して、より開かれた道徳規範(学校規範や学校空間)のあり方を構想するという点で、きわめて重要な意味をもっている。本研究の目的は二つある。第一の目的は、日本社会におけるフリースクールが公立学校や教育委員会、心理カウンセラーといった外部社会との間で繰り広げる、子どもにとってのあるべき教育をめぐる主導権争いに焦点をあわせ、これらが相互にどのような道徳規範(教育理念)を構成しながら、主導権の獲得を目指し葛藤していくかを明らかにすることである。第二の目的は、こうしたフリースクールによる道徳規範をめぐる主導権争いの過程を、フリースクールの利用者自身が、日々の生活の中でいかに活用していくかについて考察することである。以上の研究目的をふまえ、平成19年度の研究計画は、3年間にわたる研究の基礎作業として、先行研究では見逃されてきた、日本社会におけるフリースクールの多様性について、フィールドワークと、文献・資料収集を通して実態把握を行うことであった。以下、これら二つの研究方法ごとに、研究実績の概要を説明する。第一に、フィールドワークについて。まず、研究代表者は、修士課程進学以降、京都市所在のフリースクールにおいて参与観察を行ってきたが、これまでの調査結果の要点をまとめた研究報告を、2007年に関西社会学会で行った。こうした研究の意義は、従来、行政機関に対抗的なものだと考えられてきたフリースクール像とは対照的に、行政機関や他の民間教育施設などと協働することで、子ども達のニーズに柔軟に応えながら、自らの教育理念を日常的に実践していくフリースクール像を明らかにした点にある。第二に、文献・資料収集について。先行研究では、日本のフリースクールは、不登校問題に特化するという意味で、欧米などのそれと比べ「特殊」であるとされてきた。そのため、国内外の関連文献および資料を収集し精読を進めることで、その特殊性について再検討を行い、こうした文献研究の成果を、社会学の雑誌である『京都社会学年報』に投稿した。以上の研究目的を実施するため、平成20年度の研究計画では、1)これまで蓄積してきた調査結果の学術雑誌への論文投稿と、2)新たなフィールドワークの開始という2つの課題を設定した。1年間の研究内容を振り返った際、これら課題は達成されたといえる。以下、平成20年度の研究成果について説明する。第一に、学術雑誌への投稿については、これまで調査を継続してきた、教育委員会と連携するフリースクール(京都市南区)の教育活動や教育理念について分析し、社会学専門雑誌の『ソシオロジ』に投稿した結果、投稿論文として掲載された。第二に、新たなフィールドワークの展開としては、日本のフリースクールの特徴(民間教育施設)を精密に把握するため、フリースクール以外の教育活動との比較研究を行った。具体的には、地域住民参加型の公立学校である「コミュニティ・スクール」を比較対象として取り上げ、三重県南牟婁郡御浜町で現地調査を実施した。こうした調査結果については、日本社会学会で研究発表を行い、報告者たちとフリースクールにおける地域住民の参加可能性という観点から、意見交換を行った。同時に本比較調査の内容については、京都大学文学研究科GCOEプログラム主催の国際ワークショップにおいて研究報告を行い、その成果を英語論文としてまとめた。

本年度は関東地区を中心にフリースクールでの参与観察と、オルタナティブ教育に関する日本最大規模の研究大会であるJDEC2010(日本フリースクール大会)での聞き取り調査とをおこなった(前者:(1)2009年4月-2010年3月に京都市南区、(2)2009年11月に東京都葛飾区、(3)2010年3月に東京都北区と世田谷区で実施。後者:東京都渋谷区で2010年1月に実施)。JDEC2010では、日本のフリースクール・スタッフだけでなく韓国のオルタナティブ・スクールである「代案学校」のスタッフからも聞き取り調査をおこなった。2)文献・資料研究(理論研究)について。本年度は、フリースクールにおける道徳規範の変容ならびに生成過程を分析するための理論的視座として、「教育の公共性」の生成過程に関する文献を収集し分析をおこなった。本研究において生成論的な観点から公共性(公共空間)のあり方を考察することは、これまで公教育制度から「排除」されてきた「不登校」児童生徒をはじめ、義務療育の「未修了者」や外国籍の「不就学」児童生徒たちに対して、より開かれた道徳規範(学校規範や学校空間)のあり方を構想するという点で、きわめて重要な意味をもっている。
固体地球―大気系常時自由振動論の観測に基づく展開

本計画の目的は、常時地球自由振動現象を大気圧と地震計の観測データにもとづき、その共鳴メカニズムを解き明かすことである。以下大気圧観測と、地震計データの解析から明らかになったことをのべる。1,固体地球と共鳴する音波を検出することを試みるため、昨年度末別途科研費で超高精度気圧測装置20台を東大千葉演習林に南北にほぼ等間隔にアレーとして設置した。本年度はそれに続き、7台の気圧計を直行方向に展開し、十字アレーを完成させた。アレー観測によって得られた気圧計データを解析し、以下に述べる3種類の波動の存在を明らかにした。(1)南東方向から到来する周期約5秒の音波の脈動を検出した。観測された脈動の振幅は近傍の海洋波浪に強く影響されおり、脈動の励起源は海洋波浪であると考えられる。(2)北東方向から到来する周期50秒程度の音波を検出した。観測された音波は常に励起されている。その励起源は現在のところ分かっていない。(3)局所的な構造を反映した重力波が北西方向から到来していることがわかった。その活動は局所的な大気の成層度に強く依存している。2,常時地球自由振動現象は周波数領域でのみ解析されてきたため,議論が可能なのは周期200秒より長周期側のみであった.そこで本研究では空間の情報を使い波数周波数スペクトルを計算することにより,解析する周波数帯域を周期50秒まで広げた.その結果,バックグラウンド・ノイズの大きさがレーリー波の定常励起で説明できることを示した(Nishida et al., 2002).本計画の目的は、常時地球自由振動現象を大気圧と地震計の観測データにもとづき、その共鳴メカニズムを解き明かすことである。2,常時地球自由振動現象は周波数領域でのみ解析されてきたため,議論が可能なのは周期200秒より長周期側のみであった.そこで本研究では空間の情報を使い波数周波数スペクトルを計算することにより,解析する周波数帯域を周期50秒まで広げた.その結果,バックグラウンド・ノイズの大きさがレーリー波の定常励起で説明できることを示した(Nishida et al., 2002).
mNkd遺伝子のマウス個体における胚発生や腫瘍形成への役割の解析

Wnt-β-catenin-TCF (Wnt)経路は様々な生物の発生や腫瘍形成にとって極めて重要である。マウスNaked Cuticle (mNkd)遺伝子はWntシグナルに誘導され、またantagonistをコードしてWnt経路に拮抗的に作用する。mNkd蛋白はEF-hand (calcium-binding motif)を介してDishevelled (Dvl)に結合する。しかしmNkdの生体内での役割及びその機構についてはまったく明らかにされていない。そこでmNkd遺伝子のマウス個体における発生や癌発生への役割を調べるため、ジーンターゲティング法を用いてmNkdEF-hand欠損マウスの作製を試っている。前回の実績報告書では、ターゲティングベクターを作製し、相同組み換え体をPCR法やサザンブロットハイブリダイゼーション法にて選択し相同組み換え体を得られた。この相同組み換え体ES細胞を初期胚にマイクロインジェクション法により導入し、発生させ、キメラマウスを作製した。そしてキメリズムがほぼ100%のキメラマウスを用いて交配によりmNkdheterozygous (Nkd+/-)マウスを得た段階まで歩んだ。その後、Nkd+/-マウス同士の交配を行って、homozygous (Nkd-/-)マウスを獲得した。Nkd+/-マウス及びNkd-/-マウス全てはPCR法やサザンブロットハイブリダイゼーション法にてgenotypeを確認した。またNorthern Blot、R-PCR及びsequencing法にてNkd-/-マウスの肺や精巣などからEF-handを飛ばした転写産物が認められ、この欠損領域にはmNkdがWnt経路への拮抗作用に重要な残基が含まれる。さらに蛋白質産物を確認するため、mNkdに対する特異的な抗体を作成した。この抗体を用いてNkd-/-マウスにおいてはWestern Blot法でも正常なmNkd蛋白質産物が消失し、その代りEF-hand欠損されたmNkd蛋白質産物の出現を確認できた。ここまではmNkd EF-hand欠損マウスの作製に成功した。Nkd-/-マウスは正常に発生し、現在20週齢になった。この結果からmNkdが胚発生に必須ではないことがわかった。また解剖学の解析を行ったところ、wild typeやNkd+/-マウスに比べ、Nkd-/-マウスにおいては特に大きな異常は見出されないが、精巣の重量やlitter sizeが減少したことを見出した。その機構を探るため、精巣上体から精子を取り出し、精子の数、運動能力、さらに精巣切方にて染色法で精子形成異常の有無を調べている。またmNkd発現している臓器を知るため、脳、肺、精巣を含め12種の臓器のmRNAに対してNorthern Blotを行った結果、肺では非常に高い発現、脳、皮膚、胃、腎臓、及び精巣にも高い発現、小腸や心臓に弱い発現していることがわかった。これらのmNkd発現している臓器に着目し、マウスの成長に伴って生化学的、組織学的、病理学的各解析を行い、特に腫瘍形成の有無の調査を展開して行く。Wntシグナルは様々な生物の発生や腫瘍形成にとって極めて重要である。mNkd蛋白は単一なEF hand (calcium-binding motif)を介してDishevelled (Dvl)に結合する。しかしmNkdの生体内での役割及びその機能についてはまったく明らかにされていない。そこでmNkd遺伝子のマウス個体における発生や癌発生への役割を調べるため、ジーンターゲティング法を用いてmNkdノックアウトマウスの作製を試みている。ESTデータベース検索より得たcDNA断片を用いて、cDNAライブラリーよりクローニングした全長mNkd cDNAは報告されたものと一致し、さらにXenopus laevis系に導入することによって典型的なWnt経路やplanar cell polarity (PCP)経路に作用することを確認した。また初期胚や生体各種組織での発現も検出し、特に肺、心臓、精巣などにおいては高い発現を認めた。さらにApc変異マウス小腸において発生するpolypでの発現を調べたところ、正常腸管より十倍以上の発現を見出した。同じくcDNA断片を用いて、ゲノムライブラリーよりmNkd遺伝子をクローニングし、遺伝子やゲノム遺伝子構造地図を作製した。その地図をもとに相同組み換えを起こすのに必要な領域のDNAをサブクローニングし、EF handが含まれる領域を欠損させるターゲティングベクターを作製した。作製したターゲティングベクターをRW4胚幹細胞(ES細胞)へエレクトロポレーション法により導入し、geneticin薬剤選択した耐え性cloneをPCR法やサザンブロットハイブリダイゼーション法にて選択及び確認し相同組み換え体を得ることに成功した。B6系統マウスの交配後4日後での胚盤胞を採取し、マイクロマニュピレーターを用いてこの相同組み換え体ES細胞を胚盤胞期胚に注入し、再び、偽妊娠させた♀マウス子宮に移植して発生させた。現在は発生させた後に得られたキメラマウスを用いてB6系統マウスと交配によりヘテロマウスを取っている。マウスNaked Cuticle (mNkd)

遺伝子はWntシグナルに誘導され、またantagonistをコードしてWnt経路に拮抗的に作用する。mNkd蛋白はEF-hand (calcium-binding motif)を介してDishevelled (Dvl)に結合する。しかしmNkdの生体内での役割及びその機構についてはまったく明らかにされていない。そこでmNkd遺伝子のマウス個体における発生や癌発生への役割を調べるため、ジーンターゲティング法を用いてmNkdEF-hand欠損マウスの作製を試っている。前回の実績報告書では、ターゲティングベクターを作製し、相同組み換え体をPCR法やサザンブロットハイブリダイゼーション法にて選択し相同組み換え体を得られた。この相同組み換え体ES細胞を初期胚にマイクロインジェクション法により導入し、発生させ、キメラマウスを作製した。そしてキメリズムがほぼ100%のキメラマウスを用いて交配によりmNkdheterozygous (Nkd+/-)マウスを得た段階まで歩んだ。その後、Nkd+/-マウス同士の交配を行って、homozygous (Nkd-/-)マウスを獲得した。Nkd+/-マウス及びNkd-/-マウス全てはPCR法やサザンブロットハイブリダイゼーション法にてgenotypeを確認した。またNorthern Blot、R-PCR及びsequencing法にてNkd-/-マウスの肺や精巣などからEF-handを飛ばした転写産物が認められ、この欠損領域にはmNkdがWnt経路への拮抗作用に重要な残基が含まれる。さらに蛋白質産物を確認するため、mNkdに対する特異的な抗体を作成した。この抗体を用いてNkd-/-マウスにおいてはWestern Blot法でも正常なmNkd蛋白質産物が消失し、その代りEF-hand欠損されたmNkd蛋白質産物の出現を確認できた。ここまではmNkd EF-hand欠損マウスの作製に成功した。Nkd-/-マウスは正常に発生し、現在20週齢になった。この結果からmNkdが胚発生に必須ではないことがわかった。また解剖学の解析を行ったところ、wild typeやNkd+/-マウスに比べ、Nkd-/-マウスにおいては特に大きな異常は見出されないが、精巣の重量やlitter sizeが減少したことを見出した。その機構を探るため、精巣上体から精子を取り出し、精子の数、運動能力、さらに精巣切方にて染色法で精子形成異常の有無を調べている。またmNkd発現している臓器を知るため、脳、肺、精巣を含め12種の臓器のmRNAに対してNorthern Blotを行った結果、肺では非常に高い発現、脳、皮膚、胃、腎臓、及び精巣にも高い発現、小腸や心臓に弱い発現していることがわかった。これらのmNkd発現している臓器に着目し、マウスの成長に伴って生化学的、組織学的、病理学的各解析を行い、特に腫瘍形成の有無の調査を展開して行く。
「医療体操史」構想のための基礎的研究

本研究の大きな目的は、医学的合理性から価値づけられてきた体育の様相について、従来の西洋医学における評価にとどまらず、東洋医学的な観点からの評価に関しても広く状況を把握することにあった。今回はそのための資料の探索がまず行なわれた。古代中国をはじめ、古代インドのアーユルヴェーダやアラビアの医学書に見られたのは、身体の全体論(ホ-リズム)的なとらえ方であり、これまで体育の医学的合理性について論じられるにあたり、欠落していた部分がこうした視点であることが明らかになった。たとえば、ホ-リズムの概念は、南アフリカの哲学者ジャン・スマッツ「ホ-リズムと進化」(1926)にはじまるがこれは、複雑な人間のシステムや器官をあまりに単純化しずぎる当時の科学や医学の「還元主義的な傾向」に対して異論を唱えたものであり、ホリスティック・ム-ブメントに千鞭が付けられた。以降たとえばホリスティック医学、ホリスティックヘルスというような用語が用いられるようになっている。科学的で部分修繕的な現代医学の弱点を補填するために出現したホリスティック医学の視点は、新しい人間観や身体観の構想を必要とし、現在および将来の人間存在に関わる大きな問題となっている。こうした視点はさらに、ホリスティックな人間観とスポーツあるいは身体運動という問題を我々に投げかけてもいる。今回のこうした基礎資料作成において、人間と医療と身体運動の関係性を新たにとらえなおす契機を示唆されたことは非常に重要な収穫であり、これらをふまえて、医療体操史を構想していくことが今後の課題である。
都市部地域プライマリ・ケアにおける高度実践看護師による家庭看護活動モデルの開発

患者・家族の高度実践看護師に対するニーズは、1最新の医療に対する情報提供、2最新の看護実践技術の提供、3家族に対するケアの3点であった。地域プライマリケアに関わる専門職の高度実践看護師に対するニーズは、1身体・精神的な状況が複雑な事例への積極的な看護介入、2独居や超高齢者世帯などの生活困難事例への積極的看護介入の2点であった。高度実践看護師が地域プライマリケアを基盤においた活動を実践するには、専門外の高度実践看護師、他職種、市行政との共同・連携が欠かせなかった。地域で働く高度実践看護師は少ないことから、就職先に留まることなく、「高度実践看護師は地域の資源である」という仕組みが急務であった。24年度は、高度実践看護師(専門看護師、認定看護師)への調査、訪問看護スペシャリストへのインタビュー、および健康福祉事務所において難病相談を実施した。調査から、家庭看護活動として高度実践看護師が関わることが必要な領域は、1認知症、2難病、3在宅見取り、4退院支援が挙げられた。また、家庭看護活動モデルには、高度実践看護師の上記領域における活動指針を明確にすることに加え、活動地域におけるリソースネットワークに組み込んでいく必要があることも明らかになった。インタビューからは、プライマリーケアの状況は、地域によって大きく異なり、持っている資源の状況、ネットワーク状況により、家庭看護活動モデルの範囲、内容が異なるのではないかということが明らかになった。本研究では、都市部の特徴の中で検討していく必要性が明らかになった。難病相談では、30名の療養者・ご家族の相談を受け、そのうち6名への継続相談・訪問により、プライマリケアの視点での看護活動のあり方を考察中であるが、本来地域の中で果たされているケアに加え、家庭の中で感じている・起こっている事柄を直接ケア提供者ではない看護職が関わり、傾聴することの重要性が見出された。この相談機能は、重要なモデルの視点であると考える。本研究の目的は、都市部地域プライマリケアにおいて課題となっている現象に対する高度実践看護師による看護活動の提案である。カナダエドモントンによる調査、健康福祉事務所での難病相談、在宅看取りに向けたA地域での看護相談、訪問看護ステーションに勤務する高度実践看護師(専門看護師、認定看護師)への調査結果から、以下を報告する。高度実践看護師に対する患者・家族の要望は、家族ケア、最新の医療処置についての情報や技術提供であった。地域で働く他職種は、多問題・困難事例への看護介入、生活困難事例への看護介入を求めていた。高度実践看護師は、地域プライマリケアを基盤において活動をするには、自信の専門性を追求する一方、他の看護専門資格者との相互作用、他職種との連携(特に医師会との連携)、市行政との連携が欠かせないと考えていた。さらに、活動を続ける中で保健医療福祉を超えたその地域での暮らし(生活)を見据えた関わりがメインとなっていくこと、利用者やその地域の窓口となる看護としての役割を充実していくこと、地域のシステムづくりの中で看護の役割を発揮していくことにつながっていた。専門性の高いケアや専門資格を有する人的資源の地域プライマリケアにおけるニーズは多大であり、数少ない専門看護師や認定看護師等の専門資格者を地域の重要な資源と位置付け、地域全体で活用し育成していくことが大切であると考えられた。しかし、専門看護師・認定看護師ともに地域に少数で、地域偏在も顕著な現状であり、専門資格者の活動が自らの事業所内に留まることなく、地域で共有できる地域プライマリケアシステムを構築していくことが重要であると考えられた。今後、地域プライマリケアにおける看護専門資格者の増加を図る必要があると同時に、そのためには地域行政と地域医療における地域単位のプライマリケアシステムの中で地域をサポートしていくことが必要であると考える。23年度は、23および24年度以降の詳細な研究計画を立案した。それに伴い、研究計画を変更し、23年度は、カナダ・エドモントンでの調査を実施した。エドモントンでは、Foot care Clinic,Home Health Service,Central Health Services,community centerでの調査を行い、カナダ・エドモントンにおける地域プライマリ・ケアの現状把握を行った。さらに、アルバータ大学の留学生にもインタビューを行い、エドモントンにおける地域プライマリ・ケアについての情報収集を行った。さらに、24年度に実施する日本における地域プライマリ・ケアの現状調査(アンケート調査・インタビュー調査)の内、アンケート調査の準備をおこなった。日本における調査は、医療施設を視点に行うよりも、疾患を限定した状況で調査していくほうがよいだろうと検討会議で集約された。例えば、ALS等の難病、独居高齢者、超高齢世帯、就労している乳幼児のいる母親の世帯などである。

これら、特定した対象を軸に、家庭看護活動としてどのようなモデルの検討が必要なのか、そのためにはどのような調査が必要なのかについての検討を研究分担者、研究連携者含めた会議を3回実施した。討議の中で、看護職によるまちの保健室において果たしている地域プライマリ・ケアへの役割・意義は深いものがあり、病院・診療所・訪問看護ステーション等の医療機関以外の調査場所として、「まちの保健室」の地域プライマリ・ケアという視点での調査ガ必要と考える。24年度は、調査、インタビュー、継続相談により、家庭看護活動モデルの構築に向けたファーストステップを十分に実施している。さらには、24年度からの継続相談を今後も行うことで、モデルの開発に向けた検討が十分に実施できると考えるため。23年度と24年度の研究計画を入れ替え、23年度は、カナダにおける調査と、地域プライマリケアにおける現状把握のアンケート調査の準備を行った。24年度にアンケート調査、インタビュー調査を実施し、25年度にモデルの開発に着手すれば、研究目的は達成できると考えている。25年度は、24年度までの研究成果の分析から家庭看護活動モデルの開発を行う。同時に、相談事業の継続から開発したモデルの実施可能性、エキスパートによるパネルを繰り返し、モデルの精錬を行う予定である。24年度には、23年度の実施予定であったアンケート調査、インタビュー調査により、日本における都市部地域プライマリ・ケアの現状把握を行う。25年度には、家庭看護活動モデルの開発とエキスパートパネルによるモデルの構築を行う。24年度より、1名地域・プライマリケアに精通した研究者が研究分担者として追加となる予定であり、より成果が期待される。エキスパートパネルの旅費、インタビューデータの入力などの人件費、24年度の成果発表における旅費、パネル資料の印刷費、物品費が必要である。24年度は、アンケート調査のための郵券代金、インタビューのための旅費、粗品代金、アルバイトによるデータ入力にかかる謝金を研究費として使用する予定である。
選択的遺伝子領域の動的ヘテロクロマチン化誘導機構

分化刺激により活性化された成熟B細胞は形質細胞へ分化し、車軸状核と呼ばれる特徴的なヘテロクロマチン構造を呈する。一般的に、ヘテロクロマチン構造は種々の細胞において遺伝子抑制と関連することが明らかとなっている。本研究では、形質細胞への分化に伴い特定の遺伝子領域がヘテロクロマチン化される分子機構に着目した。成熟B細胞が形質細胞へ分化するためには転写因子IRF4が必須であり、その分化過程でIRF4はZinc finger型転写因子Ikarosと新規同定DNA結合モチーフZinc finger-IRF composite elements(ZICEs)に結合し、B細胞活性化に関連する遺伝子群の発現を抑制する。そして、IRF4のZICEへの結合にはIkarosの存在が必須であり、Ikaros-IRF4はヘテロクロマチン関連因子群およびクロマチン制御因子PC4と複合体を形成することから、Ikaros-IRF4によるDNA配列依存的なヘテロクロマチン化機構を想定した。一方、B細胞特異的PC4遺伝子欠損マウスを作出しB細胞におけるPC4機能の重要性について検討したところ、同マウスでは成熟B細胞の数が減少し形質細胞への分化能が低下することを見出した。このことから、PC4は成熟B細胞と形質細胞分化の双方に重要であることが明らかとなった。さらに、ZICEを保持するIkaros-IRF4抑制標的遺伝子上へのPC4結合が認められたことから、形質細胞分化過程ではZICEを介した遺伝子領域の選択性が生じ、その後PC4によるヘテロクロマチン化が誘導されると予想された。これらの知見は、細胞分化過程において特定の遺伝子領域がヘテロクロマチン化される分子機構解明に貢献すると考えられる。29年度が最終年度であるため、記入しない。本研究では、転写因子IRF4による特異的DNAモチーフ認識を起点としたへテロクロマチン化誘導機構を解析する。IRF4はB細胞の形質細胞分化誘導に必須であり、この分化過程ではヘテロクロマチン構造である車軸状核形成が誘導される。先行研究より、形質細胞分化を誘導したプライマリーB細胞におけるIRF4複合体を精製し、HP1(heterochromatin protein 1)を含むヘテロクロマチン関連因子を同定した。本研究で着目するPC4(positive activator 4)はIRF4複合体に含まれ、RNA Pol IIによる転写活性化の協調的作用およHP1との結合を伴うへテロクロマチン化への関与が示されているが、免疫系細胞における機能はほとんど明らかとなっていない。PC4のB細胞分化における重要性を検討するため、B細胞特異的PC4遺伝子ノックアウト(cKO)マウスを作成し、B細胞分化および形質細胞分化の異常有無をFACS解析にて検討した。その結果、野生型マウスと比較しPC4 cKOマウスでは骨髄・脾臓における成熟B細胞数の顕著な減少、形質細胞分化誘導時における分化頻度の低下が認められた。PC4 cKOにおける遺伝子発現異常を明らかにするため、成熟B細胞を用いたマイクロアレイ解析をおこなった。すると、野生型と比較しPC4 cKO成熟B細胞では他血球系細胞への分化誘導因子の異所的発現が認められた。これらの結果より、PC4による遺伝子抑制機能はB細胞分化に重要であると推測された。そこで、形質細胞分化誘導に伴ったIRF4-PC4複合体が関連するヘテロクロマチン化標的遺伝子の抽出を試みた。ChIPシークエンス法を用い、分化誘導刺激を与えた脾臓B細胞におけるPC4およびヘテロクロマチンマーカーであるヒストン3リジン9トリメチル(H3K9me3)修飾のChIPシークエンスを遂行した。研究開始時、B細胞特異的なPC4コンディショナルノックアウト(cKO)マウスとしてCD19-Cre:PC4 floxを用いた解析を計画したが、CD19-Creではときに標的遺伝子欠損の効率が不十分であることがわかった。そこで、近年B細胞特異的ノックアウトとして用いられるようになってきたMb1-Creを理研・黒崎知博教授より分与いただいた。CD19-CreマウスではプレB細胞からの標的遺伝子欠損が生じるが、Mb1-CreではプレB細胞よりも早いB細胞段階であるプロB細胞初期からの標的遺伝子欠損が生じる。そこで、Mb1-Cre:PC4 floxマウスを樹立して分化異常の有無を検討した。すると、Mb1-Cre:PC4 floxマウスではCD19-Cre:PC4 floxマウスよりも重度のB細胞分化障害を認められ、形質細胞分化頻度も顕著に減少していた。これらの新知見から本研究のPC4 cKOマウスを用いた解析はMb1-Cre:PC4 floxマウスに移行したが、遂行する研究内容に大きな変更はなくマイクロアレイ解析を含め、初年度に計画していた解析は既に完了した。

そして、IRF4のZICEへの結合にはIkarosの存在が必須であり、Ikaros-IRF4はヘテロクロマチン関連因子群およびクロマチン制御因子PC4と複合体を形成することから、Ikaros-IRF4によるDNA配列依存的なヘテロクロマチン化機構を想定した。一方、B細胞特異的PC4遺伝子欠損マウスを作出しB細胞におけるPC4機能の重要性について検討したところ、同マウスでは成熟B細胞の数が減少し形質細胞への分化能が低下することを見出した。このことから、PC4は成熟B細胞と形質細胞分化の双方に重要であることが明らかとなった。さらに、ZICEを保持するIkaros-IRF4抑制標的遺伝子上へのPC4結合が認められたことから、形質細胞分化過程ではZICEを介した遺伝子領域の選択性が生じ、その後PC4によるヘテロクロマチン化が誘導されると予想された。これらの知見は、細胞分化過程において特定の遺伝子領域がヘテロクロマチン化される分子機構解明に貢献すると考えられる。本年度は、分化誘導時におけるIRF4・PC4・LBR・H3K9me3の経時的核内局在変化の定量化を遂行し、転写因子依存的な選択的遺伝子領域ヘテロクロマチン化モデルの構築を目指す。選択的遺伝子領域のクロマチン構造変換の動的モデルを構築するために、初年度に得られたPC4およびH3K9me3修飾のChIPシークエンスデータと取得済である転写因子IRF4 ChIPシークエンスデータを統合解析する。そして、IRF4によって選択される遺伝子領域のうちPC4依存的かつヘテロクロマチン化される遺伝子領域を抽出する。さらにこれらの遺伝子領域のうち、形質細胞分化にともなって発現が低下する遺伝子群を抽出する。抽出した遺伝子制御領域のヘテロクロマチン化を追跡するために、定量免疫染色法を活用する。標的遺伝子領域に対するDNA-FISHプローブを設計し、分化時における経時的な核内局在変化を検討する。このとき、IRF4、PC4、IRF4-PC4複合体に含まれる因子であるHP1や核膜タンパク質などの共染色を行い、IRF4-PC4複合体による遺伝子領域選択的なヘテロクロマチン化の分子機構を明らかにする。29年度が最終年度であるため、記入しない。
化学的に改変した光合成超分子複合体の励起エネルギー移動・散逸機構の解明

光合成初期過程では、光捕集アンテナ複合体が光合成機能の効率化のために光エネルギーを集めるとともに過剰なエネルギーは捨てるというインテリジェンスな機能を有する。このような光捕集アンテナ超分子複合体の高効率の光捕集・励起エネルギー移動と過剰エネルギーの散逸による光保護機能の理解は光生命化学の発展に寄与するとともに、人工的な光エネルギー変換システムを開発するうえで有用な情報を与えうると考えられる。そこで本研究では、化学的に改変し摂動を与えた光合成超分子複合体を構築し、それらの機能を解析することによって光合成初期過程で重要な機能を理解することを目的とした国際共同研究を推進した。本年度はオランダのアムステルダム自由大学で光合成初期過程に関して顕著な成果を挙げている研究室に滞在し、光合成の光捕集に関わる複合体に関して共同研究を実施した。光捕集アンテナ超分子複合体において重要な役割を果たしているクロロフィル類やカロテノイド類を再構成的方法論によって超分子複合体に導入し、得られたアンテナ超分子複合体のエネルギーフローに関する情報を得ることを目指した。そのため、光合成生物からクロロフィル類とカロテノイド類を単離精製し、光捕集アンテナ超分子複合体との再構成挙動を調べるととも、改変したアンテナ超分子複合体を生化学的手法で精製した。その結果、光捕集アンテナ超分子複合体への色素導入に対する分子種の依存性に関する情報を得ることができた。また、新たに得られた光捕集アンテナ超分子複合体の基本的な分光特性や励起エネルギー移動の特性を明らかにした。渡航先外国機関であるオランダ・アムステルダム自由大学において、光合成系の化学的改変と機能解析に関する研究を順調に推進することができたため。平成30年度に得られた研究成果をもとに、さらなる機能解析や他の光合成系の改変を進める。また、得られた研究成果をまとめる予定である。内定年度:2017光合成初期過程では、光捕集アンテナ複合体が光合成機能の効率化のために光エネルギーを集めるとともに過剰なエネルギーは捨てるというインテリジェンスな機能を有する。
表情、視線、観察者の性格が顔認知に与える影響

本研究では、笑顔と怒り顔では笑顔のほうが記憶に残りやすいという先行研究に基づき、86名の大学生に笑顔と怒り顔を記憶してもらい、後に真顔で呈示されたそれらの顔を再認してもらう実験を行った。参加者の社会不安の程度を質問紙で図り、人と関わるときに感じる不安の程度が顔記憶に及ぼす影響も調べた。結果、社会不安が高い人達の間では怒り顔の再認率が笑顔の再認率より低かったが、低群では両表情の再認率に差はなかった。社会不安の高い人達は脅威を与える刺激に敏感で、怒り顔の表情の分析に注意力を注いだために、個人を特定するために必要な顔の普遍的な特徴を十分に分析できず、怒り顔の再認率が低下したと考えられる。本研究は顔認識における顔の表情と視線の影響、およびそれらと観察者の性格の交互作用を調べることを目的とする。近年の研究で、顔の視線の向きが覚えやすさに影響することが示されており、視線が観察者と合う顔のほうが合わない顔よりも覚えやすいといわれる。また、表情も認知の重要な手がかりとなり、笑った顔の方が怒り顔よりも覚えやすいといった報告がされている。しかし、視線と表情が顔の覚えやすさにどのような交互作用をもつのかは深く研究されていないため本研究ではそこをテーマにする。それと同時に観察者の性格、特に社会不安や自意識の高さの度合いが顔の認知にどのような影響を与えるかにも着目する。視線が合う顔の方が覚えやすい要因の一つは、その顔が「観察者と社会的な関係を気づく意思」があることを示すからだと言われるが、社会不安が高く、視線を合わせることに消極的な人たちにおいてはその要因が顔の記憶を促進しない可能性がある。実験では参加者にまず笑顔または怒った顔で視線がまっすぐのものと横にずれた顔をいくつか記憶してもらい、その後それらの顔の再認率を測定する。平成25年度は刺激の準備と実験のプログラミングを行った。中国人の顔500人以上が収められたCAS-PEALデータベースと白人の顔60人ほどが収められたRAFDデータベースを取得した。両データベースから、予備調査によって実験に使用するのが適切とされる顔を選び、背景削除や視線の操作を行った。合計864枚の顔写真を作成した。これらの写真を心理学実験用ソフトウェア(e-prime)を使って呈示できるようプログラミングを行った。また、社会不安を測定するための質問紙の妥当性や回答時間などを事前調査で把握した。本研究では、顔の表情と視線の位置、そして観察者の社会不安の程度が顔記憶に及ぼす影響を調べた。本年度は実験実施、結果分析、学会発表、論文執筆を行った。まず86名の大学生に笑顔と怒り顔を記憶してもらい、後に真顔で呈示されたそれらの顔を再認してもらうという実験を行った。先行研究では、笑顔で学習された顔のほうが怒り顔で学習された顔よりも再認率が高いという結果が出ている。今研究では顔の表情だけでなく、視線の位置と参加者の社会不安の程度が顔記憶に与える影響を調べたため、各参加者が人と関わるときにどれだけ不安を感じるかを質問紙で測定し、また記憶すべき顔の視線がまっすぐ前を向いている条件と、横にそれている条件を用意した。実験結果では、社会不安が高い人達の間では怒り顔の再認率が笑顔の再認率より低かったが、社会不安が低い人達の間では両表情の再認率に差はなかった。また、視線の位置の影響は全く見られなかった。社会不安の高い人達は自分が脅威を感じる刺激に敏感であることが今まで様々な研究で明らかになっている。今回の実験では、社会不安の高い人達がこの敏感性のために怒り顔の表情の分析に注意を注いでしまい、個人を特定するために必要となる顔の普遍的な特徴を十分に分析できず、怒り顔の再認率が低下したと考えられる。社会不安の程度という個人のパーソナリティ特性が、顔記憶における個人差を生み出す一つの要因となることを示した重要な結果といえる。これらの結果について二つの国際学会で発表し、他の専門家からの意見を得た。そしてそれらのフィードバックを考慮して論文を執筆し、国際誌のCognition and Emotionに投稿した。論文は現在査読中である。26年度が最終年度であるため、記入しない。認知心理学26年度が最終年度であるため、記入しない。研究開始当初は白人の顔を使用する予定ではなかったが、同人種では笑顔の方が覚えやすいのに対し異人種の場合は怒った顔が覚えやすい可能性を調べるため白人の顔を刺激に加えることにした。そのため準備に多少遅れが出たが、大きな支障はない。平成26年度の研究計画は以下のとおりである。

4月から7月:データ収集、集まったデータの集計。8月から12月:データの解析の、学会発表。データのとり直しが必要な場合はデータ収集。1月から4月:取り直したデータの解析、まとめ、学会発表、学会でのフィードバックを盛り込んで論文作成。
新型肝炎ウィルスG型とTTV型の感染と口腔部悪性腫瘍

平成12年度に口腔癌(195名)と口腔嚢胞患者(256名)におけるHBs抗原、HCV抗体、HGVRNAの陽性率を検討した。口腔癌患者では口腔嚢胞患者に比べHCV抗体陽性頻度(癌8.6%:嚢胞4.0%)が高く、HBs抗原率(癌0%:嚢胞2.1%)は低かった。HGVRNAは両群(癌3.2%:嚢胞2.8%)で差がなかった。平成13年度には、口腔癌と口腔嚢胞患者でTTV DNAの率を比較した。2つの疾患で陽性率に差はなかった(癌29.7%:嚢胞32.1%)が陽性率は両疾患とも30%程度と非常に高頻度の感染が認められた。平成14年度は口腔癌と口腔嚢胞以外の疾患で頻度が多く、若年者がかかりやすい疾患として埋伏歯と顎変形症を選びHBs抗原、HCV抗体、HGV RNA, TTV DNAの陽性率を比較した(HBs抗原、埋伏歯1.1%、顎変形0%:HCV抗体、埋伏歯4.1%、顎変形3.2%:HGVRNA、埋伏歯1.8%、顎変形0%:TTVDNA、埋伏歯22.9%、顎変形21.4%)。これらの4つの肝炎ウイルス感染率は埋伏歯と顎変形症患者間に差がなかった。以上のように、新型肝炎ウイルスであるG型肝炎とTTV型肝炎の感染率を口腔癌と口腔嚢胞患者を中心に、一部埋伏歯と顎変形症の患者でも、測定し比較検討した。特にTTVは他のウイルスに比べ著しく感染率が高いことが分かった。また、一部のウイルスでは口腔疾患別に感染率の差が認められたが、その疾患別の感染率の差は疾患による年齢差が一部関与していた。当大学附属病院入院患者の中から口腔部癌と口腔部嚢胞の患者を選択し、冷凍保存血清を用いてG型肝炎ウイルス(HGV RNA)、B型肝炎ウイルス(HBs抗原)、C型肝炎ウイルス(HCV抗体)の有無を検討した。測定したサンプルは全体で451本で口腔癌195本、口腔嚢胞256本であった。451名中24名に手術の既往があった。この内1名に腎移植の既往があった。全体サンプルの陽性率はHGV-RNA2.9%、HBs抗原1.2%、HCV抗体6.0%であった。対象者の平均年齢は50.7歳でHGV-RNA陽性者55.8歳、陰性者50.5歳と差がなかったが、HBs抗原陽性者は41.2歳、陰性者51.1歳とHBs抗原陽性者が若かった。HCV抗体は逆に陽性者が60.6歳で陰性者50.0歳とHCV抗体陽性者が高齢であった。口腔癌患者は62.7歳、口腔嚢胞患者は41.5歳と前者が高齢であった。HGV-RNA、HBs抗原、HCV抗体のいずれの陽性率にも性差は認められなかった。HBs抗原陽性者ではHGV-RNA陽性率が20%とHBs抗原陰性者のHGV-RNA陽性率2.4%よりも高値であった。口腔癌患者のHGV-RNA陽性率は3.2%、口腔嚢胞では2.8%と同程度の陽性率であったが、HBs抗原は癌患者が0%、嚢胞患者が2.1%と嚢胞患者に陽性率が高く、逆にHCV抗体は癌8.6%、嚢胞4.0%と癌患者に陽性率が高かった。肝機能検査の血清GOT、GPT、γGTP濃度はHGV-RNA、HBs抗原、HCV抗体の有無に拘わらず同程度であった。

以上から、口腔癌の患者のHCV抗体陽性率はこれまでの我々の報告や他の施設の報告と同様に高値であったが、逆にHBs抗原陽性率は癌患者で低く、HGV-RNA陽性率は癌患者と嚢胞患者で同程度であった。すなわちC型肝炎ウイルスは口腔癌との関連が強いが、B型肝炎ウイルスやG型肝炎ウイルスと口腔癌の関連は低い事が示唆された。平成12年度は、口腔部癌と口腔部嚢胞の患者のG型肝炎ウイルス(HGV RNA)、B型肝炎ウイルス(HBs抗原)とC型肝炎ウイルス(HCV抗体)感染の有無を検討した。平成13年度はTransfusion transmitted virus (TTV)感染の有無を比較検討するために口腔癌と口腔嚢胞患者血清中のTTV DNAを441サンプル(口腔癌192本、口腔嚢胞249本)で測定した。441名中137名が陽性(31.1%)であった。このTTV感染率は昨年報告したHBV感染率1.2%、HCV抗体6.0%よりも明らかに高頻度であった。TTV DNA陽性者と陰性者では年令や性別に差を認めなかった。昨年報告したB型やC型肝炎ウイルスでの結果(HBs抗原陽性者は若年者が多く、HCV抗体は高齢者が多い)とは異なる結果であった。192名の口腔癌患者中57名(29.7%)が、249名の口腔嚢胞患者中80名(32.1%)にそれぞれTTV感染が認められた。口腔癌と口腔嚢胞患者のTTV DNA陽性率には差がなかった。HBs抗原陽性者とHBs抗原陰性者におけるTTV感染率、HCV抗体陽性者と陰性者におけるTTV感染率ともに差が認められなかった。血清GOT、GPT、γ-GTP値はTTV感染者と陽性者で差がなかった。以上から、TTV感染率は口腔癌と口腔嚢胞患者で同程度であったが、31.1%といった著しい高頻度のTTV感染率はBやCやG型肝炎ウイルスとは異なった感染ルートの可能性を示唆するものである。