hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
主観的幸福度アプローチと仮想離散選択実験による相対効用効果の推定

社会効用効果の推計に関連し、以下の3つのテーマで研究を行った。(1)幸福度データを用いたexperienced utilityapproachにより、日本とインドでの社会効用の特性を分析した。(2)仮想離散選択実験によるdecision utilityapproachを考え、日本、アメリカ、イギリスでの分析を行った。特に英米ではランダム介入実験を行い、比較態度を変化させることが可能か検証した。(3)日本のデータを用い、2つの異なるアプローチが社会効用推計の結果の違いをどのようにもたらすかについての研究を行った。これにより、幸福度データの経済学的な解釈の基礎付けを行う研究を完了させた。24年度の研究成果は以下の通り:(1)日本の幸福度データ、真の参照群所得とノイズを伴った参照群所得代理変数を用いたHappiness Regression研究についてはワーキングペーパーとしては完成したもののジャーナル掲載には至らなかった。引き続き国際査読付き雑誌への掲載を目指して投稿を行う。(2)インドの幸福度サーベイ・データを用いた相対効用仮説の実証分析については新たにワーキングペーパーとして完成し、共著者がIZAの総会で学会報告を行った(インド)。今後は査読付き国際雑誌への投稿を行う。(3)申請者の開発した、仮想離散選択実験による相対効用効果の推計について、Journal of Economic Behavior and Organization誌への掲載が決定した。さらに、同じ実験のデータを用いて、他者との比較を行う相対効用効果において、比較を差の形式で行うのか比の形式で行うのかを統計的に検証した。結果は差の形式で比較を行うことをサポートしており、この結果をもとに経済の長期不況を理論的に説明しうる動学分析の理論論文を新たにワーキングペーパーとして纏めた。今後はこの研究についても国際学会での発表、国際査読付き雑誌への掲載を目指して改訂を重ねる。本研究は相対効用効果の政策的含意を提供することを目的としている。これまで明らかにしたことにより、GDP(国内総生産)による従来的な厚生評価は相対効用効果の分だけ(具体的には約44%)過大評価になっている可能性を指摘している。また、相対効用の発現を検証した結果、それが長期不況状態の原因となりうることを理論、実証の両面から示した。これは長期不況状態からの脱却を考える新しい知見であり、大きなイノベーションとなっている。本年度は、社会効用の離散選択実験をアメリカとイギリスに於いて実施した。当初予定されていたドイツ、フランスでサーベイを実施しなかったのは、円安による被験者報酬の高騰という要因と、サーベイ委託会社の技術的な要因がある。調査は公募入札の結果選定された委託会社である、日経リサーチ株式会社の協力のもとで行われた。被験者の選別については、海外サンプルを保有するSurveyMy社の登録サンプルから社会的代表性をもったサンプル特性にするための層化ランダム抽出を行い、年齢、性別、学歴、居住地域といった属性について公的統計のデータに合うように募集した。調査は2014年3月24から31日の一週間で行われ、英米でそれぞれ4500件以上のクリーン・データを得た。ここでクリーン・データとは、回答時間が極端に短い被験者(今回はパイロットテストのフィードバックから4分未満とした)、離散選択実験に同じ回答番号で答え続けた被験者、離散選択実験の回答を全て「わからない」とした被験者の情報を除いたものである。サーベイ実査進行中も回答データを逐一精査することにより、インターネット調査で特に問題となる回答抵抗のあるデータを排除したことは、意味のある分析結果を得る上で重要である。今回の社会効用の国際比較実験にあっては、単に効用パラメーターを推計し国際比較するだけでなく、効用パラメーター自体が頑健であるかの追加実験も行った。具体的には、情報トリートメントを3種類用意し、被験者にランダムにそれぞれのトリートメントを割りて、トリートメント間でパラメーター変化に差がないか調べた。これにより、政府が効用パラメーター自体を動かすことが可能か、その手掛かりを与える。プロジェクトの最終段階として2点の取り組みを完了した。1点目として、仮想離散選択実験による社会効用効果の国際比較について論文化を完了させた。2点目に、社会効用効果の代表的な2つの推計方法--幸福度データを用いたexperienced utilityapproachと離散選択実験によるdecision utilityapproach--の結果の比較を行い、幸福度データの経済学的な解釈の基礎付けを行う研究を完了させた。26年度が最終年度であるため、記入しない。社会科学26年度が最終年度であるため、記入しない。本研究課題のメインとなる実験パラダイムを用いた研究が国際的に評価の高い雑誌に掲載が決定した。また、予定されていた幸福度データを用いた研究も国内データ・国外データともに順調にワーキングペーパーとして纏めることができた。最後に、本来3年目に行うはずであった実験結果をもとにした理論研究の一部を初年度に行うことができた。

本研究計画は、幸福度と仮想離散選択実験という2つのアプローチで相対効用効果の推計を行い、幸福度データの政策応用可能性を検討することが目的がある。研究年度2年目までに、計画されていた実験は予定通り完了し、研究計画の遂行に必要なデータを全て準備することができた。従って、分析の準備は万全である。データ解析という観点では、幸福度データ解析は全て完了しているので研究計画通りに進行していると言える。また、論文化の作業も全て完了し、それぞれ国際査読誌に投稿し、査読申請中である。一方、仮想離散選択実験データについては、国内データについては分析が完了しているが、国際比較研究についてはデータが得られたばかりであり、解析が残された作業となる。アウトプットの観点からいうと、幸福度データの分析については(1)日本の幸福度データを用いた相対効用仮説の検証研究について、ワーキングペーパーとして完成したもののジャーナル掲載には至っていない。引き続き国際査読付き雑誌への掲載を目指して改定を行う。(2)インドの幸福度サーベイ・データを用いた相対効用仮説の実証分析についてはWorld Development誌から改訂要求があり、改訂後再投稿し、現在再査読申請中である。(3)幸福度データと仮想離散選択実験という二つの手法で計測した日本の相対効用効果を比較する研究について、当分野の第一人者であるClark教授と共同で論文化を行い、現在国際雑誌に査読申請中である。次に仮想離散選択実験の研究については、(1)国内データを用いた研究は前年度にJournal of Economic Behavior and Organization誌に掲載された。(2)(1)の予備実験の結果をまとめたものを新たに追加し、現在国際雑誌に査読申請中である。(3)国際比較の研究については、これからデータ解析を行う。26年度が最終年度であるため、記入しない。当初の予定通り、次年度は離散選択課題による相対効用効果の推計を国際比較のために行う。そのための調査票は24年度のうちにほぼ確定されており、共同研究者とともに実査を行う。「現在の達成度」欄でも述べた様に、今後は仮想離散選択実験による相対効用効果の国際比較研究についての分析、及び結果の論文化と、全ての研究の国際査読付き雑誌への出版が課題となる。国際実験データに関する研究以外は論文化まで完了しているので、査読の完了を待ちつつ、研究年度内での掲載を国際ジャーナル出版を目標に努力する。従って、今年度の実質的なエフォートは国際実験データの解析と論文化であり、それを早急に完了させた上で国際学会での報告を行うことを目標とする。学会でのフィードバックが得られた上で、それに基づいて論文化を完了させ、国際査読付き雑誌へ投稿する。
性器クラミジアIII型分泌エフェクターの効率的発現システム構築と病態形成機構解析

本研究では、クラミジアタンパク質発現を、従来の大腸菌を用いた方法ではなく、Brevibacillus分泌発現システムにより導入し、効率的な発現系を確立するために研究を進めようと試みた。性器クラミジアの近縁種で取り扱いが容易なパラクラミジアのタンパク質をBrevibacillus分泌発現システムを用いて発現させるべく実験を進めたが、タンパク質を発現させるまでには至らなかった。クラミジアタンパク質をコードする特徴と大腸菌やBrevibacillusの特徴が異なる可能性があるかなどについて検討していく必要があるが、クラミジアタンパク質発現が困難なことが再確認され、今後のクラミジア研究の一助になった。Chlamydia trachomatis(以下、性器クラミジア)は性感染症の主要な原因菌としてわが国だけでなく、世界的な問題となっている。これまでクラミジアの研究といえば、クラミジアが持つ偏性細胞内寄生性という特異な性質のために、細胞内生存様式や細胞修飾機構に対する研究が主体であった。しかしながら、クラミジアの病態形成機構をより詳細に把握するためには、クラミジアの持つタンパク質の作用や機能を明らかにすることが必要となると考えられる。しかしながら、クラミジアのタンパク質研究はそこまで進んでおらず、大腸菌による発現系では十分に目的タンパク質を得ることが困難であった。そこで、本研究では、クラミジアのタンパク質発現系を、従来の大腸菌を用いた発現システムではなく、Brevibacillus分泌発現システムにより導入し、効率的なクラミジアタンパク質の発現系を確立するために研究を進めている。まず、クラミジアの機能がある程度明らかになっているタンパク質をBrevibacillus Expression System II(Takara-bio)を用いて導入・発現させる。そのために、性器クラミジアの近縁種で取り扱いが容易であるParachlamydia acanthamoeba(以下、パラクラミジア)を用いて、Brevibacillus分泌発現システムへの導入をさせるべく実験を進めてきた。しかしながら、未だパラクラミジアのBrevibacillus分泌発現システムへの導入は成功していない。今現在は、パラクラミジアのタンパク質のBrevibacillus分泌発現システムにおけるタンパク質導入・発現条件を検討しているところである。昨年度は、クラミジアの機能既知タンパク質をBrevibacillus Expression System II(Takara-bio)を用いて導入・発現させるための前実験として、まず初めに取り扱いが性器クラミジアに比べてはるかに容易であり、性器クラミジアの近縁種で、過去の研究でも使用してきた環境クラミジアParachlamydia acanthamoeba(パラクラミジア)の既知タンパク質のBrevibacillusを用いた発現系への導入を検討してきた。しかしながら、現時点でパラクラミジアのタンパク質の発現系の確立には至っていない。現在の研究状況としては、Brevibacillus分泌発現システムの取り扱いを、いくつかのパラクラミジアタンパク質で検討しているところである。また、Brevibacillus分泌発現システムにおけるタンパク質導入・発現条件をBrevibacillusの培養条件やプラスミドの作成条件などを検討しているところである。Chlamydia trachomatis(以下、性器クラミジア)は日本だけでなく、世界的に性感染症の主要な原因菌として問題となっている。これまでのクラミジア研究は、クラミジアが人工培地で増殖させることができず、ヒトなどの細胞内でしか増殖させることができないという特異な性質のために、細胞内での生存様式や細胞修飾機構などの研究が主体であった。しかし、クラミジアの病態形成機構をより詳細に把握するためには、クラミジアが有するタンパク質の作用や機能を明らかにすることが必要となると考えられる。しかしながら、クラミジアのタンパク質研究はクラミジアの持つ性質のために十分には進んでおらず、大腸菌による発現系では十分に目的タンパク質を得ることが困難であった。そこで、本研究では、クラミジアのタンパク質発現系を、従来の大腸菌を用いた発現システムではなく、Brevibacillus分泌発現システムにより導入し、効率的なクラミジアタンパク質の発現系を確立するために研究を進めようと試みた。まず、クラミジアの機能がある程度明らかになっているタンパク質をBrevibacillus Expression System II(Takara-bio)を用いて導入・発現させるために、性器クラミジアの近縁種で取り扱いが容易であるParachlamydia acanthamoeba(以下、パラクラミジア)を用いて、Brevibacillus分泌発現システムへの導入をさせるべく実験を進めてきたが、タンパク質を発現させるまでには至らなかった。クラミジアのタンパク質をコードする遺伝子配列の特徴と大腸菌やBrevibacillusの特徴が異なる可能性が影響しているのではないかなどについて検討していく。本研究によって、クラミジアのタンパク質発現が困難であることが再確認され、今後のクラミジア研究の一助になった。今後の研究としては、まず初めにBrevibacillus分泌発現システムの培養条件の最適化のために、パラクラミジアの機能既知なタンパク質を新規に選択し、培養条件やタンパク質発現条件の検討をしていく。十分なBrevibacillus分泌発現システムの利用が可能となれば、パラクラミジアの機能未知なIII型分泌装置エフェクター候補タンパク質で発現実験を行い、対象のタンパク質の取得を目指す。エフェクター候補タンパク質が得られたら、パラクラミジア宿主であるアメーバと、性器クラミジアの宿主細胞となるヒト上皮系細胞への影響を検討する。

また、同時に、対象のタンパク質が性器クラミジア遺伝子上に存在するかを検討する。また、現在までの状況として、Brevibacillus分泌発現システムのクラミジアタンパク質への応用が十分に可能ということはいえないので、大腸菌を用いた分泌発現システムの条件検討も併せて行い、クラミジアタンパク質の実験に使用可能なレベルでの効率的な発現を目指す。29年度が最終年度であるため、記入しない。細菌学29年度が最終年度であるため、記入しない。
看護・介護ケアの質保証を目的とした地域包括ケア病棟における位置検知技術の応用研究

本研究は、(1)位置検知技術を用いた看護・介護職の動線等のデータ取得、(2)この動線等のデータと医療情報システム等のデータ結合による看護・介護ニーズと介入の定量的分析、(3)看護・介護ニーズの予測を通じた看護・介護の質向上の効果測定の3段階で構成する。
食品中メイラード反応生成物の生成機構および生体内における消化・吸収性に関する解明

ペプチドのグルコース修飾パターンにおいては、グルコース修飾ペプチドLEKFDよりピリリウムイオンまたはヒドロキシメチルフリリウムイオンの生成の可能性が示唆された。食品中におけるAGEsの生成については、牛ひき肉をモデルとして用いた結果、フライパン焼きではCMLや蛍光性物質の生成が認められたがオーブン焼きではあまり認められなかった。グルコース修飾タンパク質のin vitroおよびin vivoにおける消化・吸収性については、in vitroでは修飾タンパク質が未修飾よりも消化しにくい結果であったのに対し、in vivoでは修飾タンパク質が未修飾よりも速やかに消化・吸収された。食品の加工・貯蔵・調理の過程において、タンパク質は糖などによりメイラード反応を起こして修飾タンパク質を生じる。これまで修飾タンパク質の栄養学的な研究は数多く行われきたが、メイラード反応生成物の生成機構や生体内における修飾タンパク質の消化・吸収性に関する研究はあまり行われていない。そこで23年度は、β-ラクトグロブリンの構造中に含まれるペプチドを用いてグルコース修飾反応の解明を行った。また、食品中AGEsの生成についても明らかにすることを試みた。24年度は引き続きペプチドのグルコース修飾パターンの解析を行い、さらにβ-ラクトグロブリンを用いてグルコース修飾タンパク質のin vitroおよびin vivoにおける消化・吸収性について検討した。グルコース修飾ペプチドの修飾パターンについては、ペプチドLEKFDKALKAよりペプチド1分子当りグルコース1分子および2分子によって修飾されたペプチドの存在が明らかとなり、グルコース結合部位が異なる複数の修飾ペプチドが生成していることが示唆された。またペプチドLEKFDよりペプチド1分子当りグルコース1分子によって修飾されたペプチドの存在が明らかとなり、さらにピリリウムイオンまたはヒドロキシメチルフリリウムイオンである可能性が示唆された。食品中におけるAGEsの生成については、CMLの定量および蛍光性の度合いによって明らかにした。牛ひき肉を用いてオーブン焼きおよびフライパン焼きにより加熱した結果、フライパン焼きではCMLや蛍光性物質の生成が認められたがオーブン焼きではあまり認められなかった。食品の加工・貯蔵・調理の過程において、タンパク質は糖や脂質、あるいはそれらの分解生成物によりメイラード反応を起こし、修飾タンパク質を生じる。これまで修飾タンパク質の栄養学的な研究は数多く行われてきたが、メイラード反応生成物の生成機構に関する研究はあまり行われていない。そこで23年度は、乳清タンパク質の一種であるβ-ラクトグロブリンの構造中に含まれるアミノ酸配列LEKFDおよびLEKFDKALKAを用い、グルコース修飾反応のメカニズムの解明を行った。さらに、食品中においてどの程度AGEsが生成しているかを明らかにすることを試みた。グルコース修飾合成ペプチドのグルコース修飾パターンの解析では、HPLC、ESI-MS/MS、MALDI-MS/MSを用いて分析を行い、グルコースの結合数および結合部位について検討を行った。その結果、修飾ペプチドLEKFDからはグルコースが結合したペプチドの存在を明らかにすることができなかったが、修飾ペプチドLEKFDKALKAより、ペプチド1分子あたりにグルコースが1分子および2分子によって修飾されたペプチドの存在が明らかとなった。さらにグルコースの結合数および結合部位の異なる複数の修飾ペプチドが生成していることが判明した。食品中におけるAGEsの定量では、AGEsの一種であるCMLを定量することにより、食品中においてどの程度AGEsが含まれているかを明らかにした。またAGEsは蛍光性を有するものがあるため、食品中における蛍光性の度合を明らかにした。モデルとして牛ひき肉を用いてオーブン焼きとフライパン焼きの2種の調理法により030分加熱した。その結果、フライパン焼きにおいてはAGEsや蛍光性物質の生成が認められたがオーブン焼きでは認められなかった。フライパン焼きでは短時間でAGEsが生成されるが、その後AGEsは分解される可能性が示唆された。グルコース修飾合成ペプチドのグルコース修飾パターンの解析では、修飾ペプチドLEKFDKALKAよりグルコースが結合したペプチドの存在が明らかとなった。また、グルコースの結合数および結合部位の異なる複数の修飾ペプチドが生成していることが判明した。今後は、グルコースの結合部位を明らかにすることにより、グルコース修飾パターンをさらに解明することが可能であろう。一方、修飾ペプチドLEKFDからはグルコースが結合したペプチドの存在を明らかにすることができなかった。今後、グルコースの糖化条件を再検討する必要がある。食品中におけるAGEsの定量では、モデルとして牛ひき肉を用い、オーブン焼きとフライパン焼きの2種の調理法により加熱し、CMLの定量および蛍光性の度合を測った。今後は、調理法によってなぜAGEsや蛍光性物質の生成に違いがみられるのか、そのメカニズムを解明する必要がある。23年度における研究を引き続き行い、グルコース修飾合成ペプチドのグルコース修飾パターンの解析を検討する。

また、食品中におけるAGEsの定量については、そのメカニズムを解明するため、調理中における肉の内部温度の測定、およびAGEs以外のメイラード物質の測定を検討する。次に、グルコース修飾タンパク質の修飾程度について検討を行う。モデルタンパク質としてβ-ラクトグロブリンを用い、グルコース修飾タンパク質とする。アミノ酸アナライザーを用いて未修飾および修飾タンパク質の修飾程度を測定する。さらに、グルコース修飾タンパク質のin vitroにおける消化・吸収性について検討を行う。モデルとしてグルコース修飾β-ラクトグロブリンを用いる。未修飾および修飾タンパク質は、ペプシン・パンクレアチンにより消化する。生成した消化物を限外ろ過により分画し、収量を量る。またHPLCを用いて分析を行う。グルコース修飾タンパク質のin vivoにおける消化・吸収性についても検討を行う。Wistar系ラットに調製した未修飾および修飾タンパク質を経口投与する。試料を投与してから20分、60分後に解剖し、胃・小腸上部・小腸下部において残存する内容物をそれぞれ回収する。消化管内残存物を限外ろ過により分画して収量を量る。また、HPLCを用いて各画分の残存物をそれぞれ分析する。グルコース修飾合成ペプチドのグルコース修飾パターンの解析を引き続き行うため、合成ペプチドを購入する。また、HPLC、MS/MSの実験に用いる薬品、器具を購入する。なかでも特に、グルコース修飾ペプチドを大量に分取・精製するため、分取用カラムの購入が必須である。食品中メイラード反応生成物の生体内における消化・吸収性について検討するため、タンパク質標品、ラットおよびラット飼料を購入する。また、アミノ酸アナライザー、HPLC、ELISA法の実験に用いる薬品、器具を購入する。さらに、in vitroの消化実験に必要な試薬、およびin vivoの動物実験に必要な器具を購入する。
膜内配列切断酵素ＳＰＰの基質認識メカニズム解明に向けた構造機能解析

膜内配列切断プロテアーゼ(Intramembrane cleaving proteases ; I-CLiPs)ファミリー分子は、発生分化や脂質代謝調節など幅広い生命現象において重要な機能を担うとともに、その切断活性の異常は様々な病気の発症メカニズムと関連することが知られている。I-CLiPsは、その活性中心部位が脂質二重膜内に存在する親水性ポア構造に面することで、一見起こり得ない「疎水性環境における加水分解」を行っていることが明らかとなっている。しかし、もともと疎水性環境に存在する基質がどのようにI-CLiPsに認識され、どのように親水性環境へとリクルートされるのか、どのように切断されるか等、具体的な基質認識機構には迫れていない。本研究は、I-CLiPsファミリー分子の1つであるSPP(Signal Peptide Peptidase)をターゲットとし、その詳細な基質認識機構を明らかにすることを目的とする。本年度は昨年度に引き続き、SPPの構造解析および生化学的解析に向けた準備を行った。さらに申請者は、アルツハイマー病の発症に寄与すると報告されているI型一回膜貫通蛋白質SorLAを第二のターゲットとした。申請者はこれまでに、野生型SorLAのVpslOpドメインはアルツハイマー病発症の原因分子と考えられているアミロイドβ(Aβ)と結合する一方、Vps10pドメイン内に家族性アルツハイマー病連鎖変異の1つG511Rを導入すると、Aβと結合できなくなることを見出した。この結果は、G511R変異はSorLAのAβ結合能を失わせ、Aβを分解系へと輸送できなくさせることでアルツハイマー病発症につながる変異である可能性を示すものである。本研究の成果は昨年度、Science Translational Medicineに受理されるに至った。本年度は、I-CLiPsファミリー分子の1つであるγ-secretaseを構成する蛋白質の1つとして知られるnicastrin(Nct)を第三のターゲットとした。Nctはこれまでに、γ-secretase基質の「受容体」であることが知られており、Nctを解析することでI-CLiPsの基質認識機構解明に大きく近づくことができると考えた。本年度はNctのX線構造解析に向けて精製条件の検討を進め、条件を確立させることに成功した。SPPの構造解析および生化学的解析に向けて系の構築を行うとともに、新規のターゲットSorLAの研究を進めてきた。申請者は採用一年目にしてSorLA内に同定されている家族性アルツハイマー病変異の構造的病因に迫る発見をし、二年目においてScience Translational Medicineに受理された。またnicastrinという第三のターゲットの構造解析にも着手しており、おおむね順調に進展していると言える。SPPのX線結晶構造解析を目指すとともに、生化学的手法を用いたSPPと基質との相互作用様式の理解を目指す。新規ターゲットとして進めているSorLAの研究に関しては、家族性アルツハイマー病変異効果の結果を基に、変異が構造に与える影響の検討など構造学的観点から研究を進め、SorLAとアルツハイマー病の関連についての理解を深めていく。さらに、I-CLiPsファミリー分子の基質認識機構解明に向けた更なるアプローチとして、SPPと同じI-CLiPsファミリー分子の1つγ-secretaseを構成する蛋白質の1つであるnicastrinについてもX線結晶構造解析を進めていく予定である。膜内配列切断プロテアーゼ(Intramembrane cleaving proteases;I-CLiPs)ファミリー分子は、発生分化や脂質代謝調節など幅広い生命現象において重要な機能を担うとともに、その切断活性の異常は様々な病気の発症メカニズムと関連することが知られている。I-CLiPsは、その活性中心部位が脂質二重膜内に存在する親水性ボア構造に面することで、一見起こり得ない「疎水性環境における加水分解」を行っていることが明らかとなっている。本研究は、I-CLiPsファミリー分子の1つであるSPP(Signal Peptide Peptidase)をターゲットとし、その詳細な基質認識機構を構造生物学的手法と生化学的手法を組み合わせて明らかにすることを目的とする。本年度は、相互作用検出系の構築、哺乳類細胞を用いたタンパク質高発現株取得の系の構築など、構造解析および生化学的解析に向けた準備を行った。さらに申請者は、I-CLiPsファミリー分子の1つであるγ-secretaseの基質、SorLAを第二のターゲットとした。SorLAはγ-secretaseと同じくアルツハイマー病の発症に寄与すると報告されており、SorLAを対象とした研究はアルツハイマー病発症機構にもつながり得る。申請者は、SorLAの細胞外領域に位置するVps10pドメインと、アルツハイマー病発症の原因分子と考えられているアミロイドβ(Aβ)との結合を生化学的に解析した。野生型SorLA Vps10pドメインはAβと結合する一方、Vps10pドメイン内に家族性アルツハイマー病連鎖変異の1つG511Rを導入すると、Aβと結合できなくなることを見出した。

本研究の成果は、The 11^<th> International Conference On Alzheimer's & Parkinson's Diseasesにて発表し、現在論文を投稿中である。膜内配列切断プロテアーゼ(Intramembrane cleaving proteases ; I-CLiPs)ファミリー分子は、発生分化や脂質代謝調節など幅広い生命現象において重要な機能を担うとともに、その切断活性の異常は様々な病気の発症メカニズムと関連することが知られている。I-CLiPsは、その活性中心部位が脂質二重膜内に存在する親水性ポア構造に面することで、一見起こり得ない「疎水性環境における加水分解」を行っていることが明らかとなっている。しかし、もともと疎水性環境に存在する基質がどのようにI-CLiPsに認識され、どのように親水性環境へとリクルートされるのか、どのように切断されるか等、具体的な基質認識機構には迫れていない。本研究は、I-CLiPsファミリー分子の1つであるSPP (Signal Peptide Peptidase)をターゲットとし、その詳細な基質認識機構を明らかにすることを目的とする。本年度は昨年度に引き続き、SPPの構造解析および生化学的解析に向けた準備を行った。さらに申請者は、アルツハイマー病の発症に寄与すると報告されているI型一回膜貫通蛋白質SorLAを第二のターゲットとした。申請者は昨年度、野生型SorLAのVps10pドメインはアルッハイマー病発症の原因分子と考えられているアミロイドβ(Aβ)と結合する一方、Vps10pドメイン内に家族性アルツハイマー病連鎖変異の1つG511Rを導入すると、Aβと結合できなくなることを見出した。この結果は、G511R変異はSorLAのAβ結合能を失わせ、Aβを分解系へと輸送できなくさせることでアルツハイマー病発症につながる変異である可能性を示すものである。本年度は、本研究の成果を、Science TransIational Medicineに投稿し、再実験を重ねて受理されるに至った。本研究は、I-CLiPsファミリー分子の1つであるSPP(Signal Peptide Peptidase)をターゲットとし、その詳細な基質認識機構を明らかにすることを目的とする。
微分方程式と微分幾何学の特異点論的研究

1.微分方程式への特異点論的研究について(1)Implicitな2階常微分方程式に対して,方程式超曲面を覆う2パラメーター族の幾何学的解(完全解)を持つための必要十分条件を求めました.また,ある条件のもとで完全解を持つための条件を接触特異点集合の言葉で書くことが出来ました。さらに2階の方程式の特徴的な解である1パラメーター族の特異解(完全特異解)を持つための必要十分条件を求めました.これらの結果を11月のフランスでの研究集会「Singularities Grand Sub」と1月の旭川での研究集会「接触構造・特異点・微分方程式およびその周辺」において発表しました.(2)滑らかな正規微分方程式に対しては局所的に一意的に解が存在することが知られていますが,一般的に正規系ではないimplicitな場合は成り立ちません.そこでimplicitな2階常微分方程式に対して局所的に一意的な幾何学的解が存在する条件を求めました.この結果は様々な応用があると思われ次年度は応用についても考察したいと思います.この研究を2月の北大での研究集会「第9回北海道-ソウル大学ジョイントシンポジウム」と3月の沼津での「第14回沼津研究集会」において発表しました.2.微分幾何学への特異点論的研究について(1)ミンコフスキー空間内の3つの擬球面(双曲空間・光錐・ドシッター空間)の中の空間的超曲面に対して,それぞれのCaustics(焦面)とWave font (波面)をグラフ的写像を用いることにより同値関係レベルで関係を記述しました.さらに,ユークリッド空間の超曲面の場合に応用し,球との接触の様子をより詳しく調べることが出来ました.この結果を6月の山口大学での研究集会「特異点論-局所対大域」と11月のフランスでの研究集会「Hayashibara forum on Singularities」において発表しました.(2)3次元双曲空間内のホロ平坦曲面の幾何学的性質やホロ球的接線曲面の特異点の分類を行いました.1.微分方程式への特異点論的研究について(1)Implicitな2階常微分方程式に対して,方程式超曲面を覆う2パラメーター族の幾何学的解(完全解)を持つための必要十分条件を求めました.また,ある条件のもとで完全解を持つための条件を接触特異点集合の言葉で書くことが出来ました。さらに2階の方程式の特徴的な解である1パラメーター族の特異解(完全特異解)を持つための必要十分条件を求めました.これらの結果を11月のフランスでの研究集会「Singularities Grand Sub」と1月の旭川での研究集会「接触構造・特異点・微分方程式およびその周辺」において発表しました.(2)滑らかな正規微分方程式に対しては局所的に一意的に解が存在することが知られていますが,一般的に正規系ではないimplicitな場合は成り立ちません.そこでimplicitな2階常微分方程式に対して局所的に一意的な幾何学的解が存在する条件を求めました.この結果は様々な応用があると思われ次年度は応用についても考察したいと思います.この研究を2月の北大での研究集会「第9回北海道-ソウル大学ジョイントシンポジウム」と3月の沼津での「第14回沼津研究集会」において発表しました.2.微分幾何学への特異点論的研究について(1)ミンコフスキー空間内の3つの擬球面(双曲空間・光錐・ドシッター空間)の中の空間的超曲面に対して,それぞれのCaustics(焦面)とWave font (波面)をグラフ的写像を用いることにより同値関係レベルで関係を記述しました.さらに,ユークリッド空間の超曲面の場合に応用し,球との接触の様子をより詳しく調べることが出来ました.この結果を6月の山口大学での研究集会「特異点論-局所対大域」と11月のフランスでの研究集会「Hayashibara forum on Singularities」において発表しました.(2)3次元双曲空間内のホロ平坦曲面の幾何学的性質やホロ球的接線曲面の特異点の分類を行いました.
ポリフェノール類の機能性と安全性評価のための標的分子の解析

本研究ではケルセチンやカテキンといった日常摂取する代表的なポリフェノールの生体内標的部位の探索を行うことで、その機能性や安全性に関わる分子機構の解析を試みた。ケルセチン抱合体やエピカテキンガレートを認識する特異的モノクローナル抗体を樹立し、これらがヒト動脈硬化発症に関わるマクロファージに選択的に作用しうることをin vivo及びin vitroで示すことに成功した。本研究では、ポリフェノールやその代謝物を検出する新規プローブとしての抗体開発とその応用手法を構築し、食品として摂取したポリフェノール類の体内動態および生体内標的部位・標的分子を解析することにより、その機能性発現機構と安全性を評価する基礎的情報を得ることを目的としている。本年度は、食品中に幅広く含まれるポリフェノールであるケルセチンの抗動脈硬化作用機構に着目し、その生体内動態と作用機構との関係を明らかにすることを目的とした。まず、ケルセチンのヒト血中主要代謝物であるケルセチン3グルクロン酸抱合体(Q3GA)を認識する特異モノクローナル抗体を用いた免疫組織化学的検出法を確立し、ケルセチン代謝物の体内動態の解析が可能となった。本法をヒト大動脈組織切片へ応用することにより、Q3GAがヒト動脈硬化病巣において泡沫化マクロファージに特異的に存在する事実を見出した。これにより、これまで生体内において不明であった食品ポリフェノールの標的部位の一つが活性化マクロファージであることが示唆された。そこで、Q3GAによる抗動脈硬化作用を明らかにするため、培養マクロファージ細胞RAW264を用いた検討を試みたところ、Q3GAは動脈硬化病巣形成に必須な分子であるマクロファージスカベンジャー受容体の一つ(SR-A)の遺伝子発現を顕著に抑制することが明らかとなった。さらに、Q3GAによるこの抑制作用にはβグルクロニダーゼやメチル化酵素COMTなどマクロファージに特徴的な酵素活性によるQ3GAの活性化が必要であることが示された。よって、元来外来異物として解毒代謝・不活性化されると考えられてきたポリフェノールが生体内でその活性を発揮するための新たな分子機構が示唆された。今回検討を行ったSR-A以外にもQ3GAの標的遺伝子は存在すると考えられるため、次年度においてはマイクロアレイによる網羅解析を含めた検討が必要である。19年度において食品ポリフェノールの抗動脈硬化作用に関わる標的細胞としてマクロファージが示唆された(Kawai, et.al., J. Biol. Chem. 2008, 283, 9424)。そこで20年度は食品ポリフェノールのマクロファージへの作用機構について詳細な検討を行った。ポリフェノールとしてケルセチンに加えカテキンに着目した。カテキンの一種であるエピカテキンガレート(ECg)を認識するモノクローナル抗体を作製し、ヒト動脈硬化病巣の免疫染色を行ったところ、ECgはケルセチン抱合体同様マクロファージに特異的に蓄積することが明らかとなった。よってマクロファージは少なくともケルセチンおよびカテキンの共通の標的細胞となりうることが示唆された。培養マクロファージ細胞を用いて作用分子機構の検討を行ったところ、ケルセチン抱合体およびECgいずれもマクロファージ細胞に顕著に蓄積し、動脈硬化促進的に働くスカベンジャー受容体や酸化酵素ミエロペルオキシダーゼの発現と活性をそれぞれ阻害することが明らかとなった。このように、食品ポリフェノールは標的細胞であるマクロファージに対して特異的に作用し抗動脈硬化作用を発揮することが示唆された。一方、食品ポリフェノールの標的となる老化や疾病に関与する遺伝子・タンパク群を網羅的に探索するため、米国国立衛生研究所(NIH)との共同研究としてToren Finkel博士(National Heart Lung Blood Ihstitute)の研究室に一時滞在し、最新の技術およびデータの習得を行った。平成19-21年度の研究からケルセチンやカテキンなど食品中に多く含まれるポリフェノールが動脈硬化病変部位においてマクロファージ細胞へ特異的に相互作用し、マクロファージの炎症作用を制御しうることを、抗ポリフェノール抗体や培養細胞実験から明らかとなった。このように、食品由来のポリフェノールは生体内で選択的に標的となる細胞へ作用することが示唆されたが、この選択性に寄与する分子については不明であった。21年度においては、マクロファージ細胞以外にも、脳組織への移行に重要な役割を担う血液脳関門細胞へのケルセチンの特異的な蓄積を免疫組織化学的に見出した。そこで脳関門モデル細胞(脳血管内皮細胞)を対象とし、ポリフェノール類の標的細胞への蓄積機構を検討したところ細胞膜表面に存在するアニオン結合タンパク質の存在を示唆するに至った。結合タンパクの同定を試みるためのポリフェノールプロテオミクスの開発を試み、ケルセチン代謝物をプローブとしたタンパク質の同定が可能となりつつある。一方、ポリフェノール類の新たな機能性としてミトコンドリア機能やオートファジーに対する影響に着目した。近年、オートファジー欠損は種.々の疾病の発症に関わることが示唆されており、食品成分の新たな標的として期待される。そこで、オートファジー評価系について、米国国立衛生研究所(Toren Finkel博士との共同研究)に滞在し、その手法についての習得を行った。

22年度では本評価系を用いたスクリーニングを実施し、オートファジー制御能を有する新規食品素材の探索を試みる予定である。本研究課題最終年度である22年度においては、ポリフェノールの生体内代謝物の活性化に関わるマクロファージの炎症機構の検討を進めた。前年度までの検討から、ポリフェノールの一種であるケルセチンのグルクロン酸抱合体はマクロファージに蓄積するとともに脱抱合化反応を受け、活性の高いアグリコンとなり作用する可能性が示唆された。そこで、マクロファージ細胞RAW264を用いて脱抱合酵素を探索したところ、βグルクロニダーゼが分泌'されていることが同定された。βグルクロニダーゼ発現量についてマウス各組織間で比較したところ、本酵素はマクロファージにおいて最も顕著に発現していることが示された。さらに、その分泌量はマクロファージの炎症状態と密接に関与しており、各種阻害剤を用いた検討から、カルシウムイオンやMAPキナーゼ経路が重要な役割を担っていることが示唆された。一方、マクロファージの活性化・炎症反応にオートファジーが関与することが最近報告されたことから、ポリフェノールによるオートファジーへの影響を検討したところ、ケルセチンをはじめとするフラボノイド類に顕著なオートファジー活性化作用が認められた。さらに、ケルセチンはRAW264からのβグルクロニダーゼの分泌を顕著に抑制した。よって、ケルセチン代謝物は活性化マクロファージによって脱抱合され、オートファジー誘導を介した抗炎症作用を示し、炎症を鎮静化させうることが示唆された。以上の結果より、ケルセチンをはじめとするポリフェノールは代謝物として安全に生体内を循環し排出される一方、炎症部位においてはマクロファージによって選択的に活性化され、抗炎症作用を介して抗動脈硬化作用を発揮することが示された。
駐防八旗と民族問題-清代の都市文化形成における満漢関係の研究

Wang Lipngは,駐防八旗についての志書をはじめ,八旗の知識人および彼らと具体的な交際をもった漢人の残した詩文,碑伝,新聞記事などをひろく収集した.その作業は,京都大学人文科学研究所,文学研究科,附属図書館,東洋文庫,東京大学東洋文化研究所などでおこなわれた.こうした文献資料にもとづいて,満漢間の相互作用の実態解明をおこなった。とくに杭州・武昌の駐防八旗の満州人が,居住都市のなかでいかにして共同社会を形成し土着していったかという点に着目し,文化人類学の分野から発想を得た「場所作り」place makingの概念とその分析方法を,八旗の満州人たちが地域にたいするアイデンティティと共同社会を形成する過程の分析にとりいれることを試みた。Wangは,2005年7月30日,大阪市立大学COEプログラム「都市文化創造のための人文科学的研究」の一環として開催されたシンポジウム「海外における中国都市史研究の現状」において,「アメリカにおける中国都市文化研究の現状」と題する報告をおこなった。岩井が担当する1644以前の時代については,満州語文献,漢文文献のほか,档案資料のなかから,漢人の帰順,収容(拉致などを含む)の過程およびかれらが遼東社会の変容や清朝の帝国化のなかで果たした政治的・軍事的役割などについての資料を収集し,分析を加える作業を継続した。こうした研究の一端を,2005年10月1日,京都大学文学研究科COEプログラムの一環として開催された「東アジアにおける国際秩序と交流の歴史的研究」研究会において「朝貢,会盟と互市--非「朝貢システム」論の試み--」と題して報告した。また,2005年11月12日,史学会シンポジウム「18世紀の秩序問題」の講演者として招かれ,「東アジアの十八世紀と「通商の時代」」と題して報告した。また,2006年2月4日,大阪経済法科大学が主催した国際ワークショップ「15世紀19世紀の東アジアにおける商人集団・商業ネットワーク・商業思想」に招かれ,「1618世紀の東アジアにおける国際商業と互市体制」と題して報告した。清朝は,巨大な中国社会を統治するうえで,八旗を支配の中核として維持する政策を採用した。しかし,支配を社会のなかに浸透させるためには,たかだか20万にすぎない八旗の軍事力やその人的資源のみに依存することは不可能であり,統治の正統性を確立するためにも,入関前の軍事国家の体制を維持しながら,統治機構の全体を中国化させざるを得なかった。世宗雍正帝は「夷」と「華」が「一家となった」(『大義覚迷録』)と主張して,清朝の統治を中華の伝統のなかに位置づけた。このような体制の中国化と,八旗という特異な集団の維持との間には,さまざまな矛盾が生じざるを得なかった。マンジュやモンゴルの言語や慣習の継承を求められる一方で,中国社会の中で生活し,その文化や制度に沿って行動する必要があったからである。八旗の人びとが,民族的・身分的に隔絶される一方で,中国社会の構成員として同化(清朝滅亡後,その趨勢は決定的となる)する過程にあったという点に着目するならば,八旗集団が周囲の漢人社会とどのような相互作用を発生させたかという問題が解明すべき課題となる。これは,清代中国に固有の歴史的問題であるのみならず,エスニック的な差異と文化変容,自己認識の形成と遷移など,普遍的な問題の理解に寄与することが期待される。外国人特別研究員Wang Lipingは,杭州,広州のほか,西安(陝西省),荊州(湖北省)の駐防八旗について,八旗志,地方志,旗人の詩文などの資料から関連資料を収集するとともに,人類学・人文地理学の研究成果から,この課題の解明に資する研究方法を探るため,理論的な検討をおこなった。岩井は1644年の入関以前,ヌルハチの勢力が遼東における商業・軍事集団から帝国を形成するまでの期間について,大量の漢人農民および兵士,知識人を受けいれることによって生じたエスニック集団間の差異と融合・協力が,清朝の国家形成と遼東という辺境社会の発展に,どのような特質をもたらしたかを明らかにする作業をすすめつつある。

こうした研究の一端を,2005年10月1日,京都大学文学研究科COEプログラムの一環として開催された「東アジアにおける国際秩序と交流の歴史的研究」研究会において「朝貢,会盟と互市--非「朝貢システム」論の試み--」と題して報告した。また,2005年11月12日,史学会シンポジウム「18世紀の秩序問題」の講演者として招かれ,「東アジアの十八世紀と「通商の時代」」と題して報告した。また,2006年2月4日,大阪経済法科大学が主催した国際ワークショップ「15世紀19世紀の東アジアにおける商人集団・商業ネットワーク・商業思想」に招かれ,「1618世紀の東アジアにおける国際商業と互市体制」と題して報告した。
「債権者等の組分け」からみた事業再建手続の基本的課題の再検討

株式会社などの企業が過剰債務を負って事業再建手続を進める場合、株主、一般債権者、担保債権者など、多様な利害関係者が交渉して再建計画案を策定し、それを実行する。本研究は、それらの多様な利害関係人が合理的な交渉を行うための枠組みとしての「組分け」のあり方(主として、再建計画案に対する決議や権利者間の平等取扱い等に関して論じられてきたが、より幅広い意義や機能を持つと考えている)について、わが国の制度・法解釈や、伝統的に活発な議論がみられる英米法諸国における議論状況の分析などを通して検討を加え、わが国の事業再建手続の将来について提言を行おうとするものである。
韓国人学習者の「なまり」を取り日本語の「流れ」を身につけさせる理論と方法の構築

日本語話者は1拍目の長さを聞き取るとそれをものさしとして2拍目以降をカウントするのではないか、という仮説に基づき、前年度までの実験をふまえ2つの実験を行なった。実験1では、VV、VVVの1拍目から2拍目のアクセント変化の影響をみるため、全体長を固定した音声を用い、実験2では、刺激としてVCV、VCVVを用い、1拍目と2拍目の切れ目がピッチ変化によるものではなく、明確に無音部が存在する場合の拍知覚関する聴取実験を行った。これら二つの実験により、拍知覚に対する1拍目の影響と、母語の違いによる拍知覚の違いを検討した。実験音は、標準語話者の発話を基に、実験1ではKAY社のDSP Sona-Graph 5500及び同社LPC分析合成プログラムを用いて分析合成を行なったものを用い、また実験2では名古屋大学で研究開発されているPICOLAを承認のもとに用いた。実験1では、2拍長母音において日本語を母語とする被験者は拍を知覚する際にアクセント変化によって1拍子目を知覚し、それによってあとの拍数をカウントする傾向が見られ、韓国語、英語を母語とする被験者には見られなかった。しかし、3拍長母音についてはこのような傾向は見られず、その原因として、2、3拍目母音のピッチの定常部の存在の有無が拍の知覚に何らかの影響を及ぼしていることが考えられる。実験2においては、拍知覚に対する1拍目の影響は見られなかった。しかし、単に1拍目の長さが伸びた時に、韓国語、英語話者はこれを2拍と知覚したのに対し、日本人語話者は、1拍のままだった。このことから、韓国語、英語話者はCを境としてそれぞれのVまたは、VVの音の絶対的な長さを基準として、全体を知覚しており、一方日本語話者は絶対的な長さのみで拍数を知覚することはないといえる。以上の二つの実験から、我々の仮説の通り、拍の知覚には長さ以外にもアクセントが影響しているという結果が得られた。
生殖内分泌系器官における組織の破壊と再構築の制御メカニズムの解明

細胞増殖,機能発現ならびにアポトーシス(細胞死)は,細胞から分泌されるホルモンや成長因子,サイトカイン等のシグナル分子や,細胞外マトリックスなどの細胞外環境からのシグナルによって制御される。本研究では,マウス下垂体や子宮内膜における細胞増殖とアポトーシスについて解析した。細胞増殖を促進する成長因子やホルモンの遺伝子の発現制御機構と,成長因子やホルモン作用を調節する因子について解析した。生体の器官の構造と機能は,構成する組織の破壊と再構築,機能発現がバランスよく制御されることにより維持されている。器官における破壊(細胞死),再構築(細胞増殖)と機能発現の一連の過程を司るシステムを,哺乳類の生殖内分泌系器官である子宮と内分泌中枢である下垂体に注目して解析した。<子宮内膜に関する研究>マウス子宮内膜の細胞増殖に関わるインスリン様成長因子I(IGF-1)の遺伝子発現制御機構をプロモーター解析により調べた。class 1 IGF-I mRNAを制御するプロモーターを特定し,機能解析を行った。また,cAMP投与によりプロモーター活性が上昇することを明らかにした。子宮内膜には,膜結合型でGタンパク質共役型発情ホルモン受容体mRNAおよび受容体タンパク質があることを発見し,発情ホルモン投与によりcAMP濃度も増加した。このことから子宮内膜では,発情ホルモンはcAMPを介してIGF-I遺伝子の転写を促進する可能性が示唆された。IGFBP-3mRNAおよびタンパク質が子宮内膜に存在し,子宮内膜間質細胞では発情ホルモンによりIGFBP-3の発現が低下していた。IGFBP-3はIGF-Iと結合し,IGF-I作用を抑制するので,発情ホルモンはIGFBP-3を介して,IGF-I作用を増強することが示唆された。Runx3 KOマウスの子宮では子宮内膜の発達は未熟であり,発情ホルモンへの反応性が低下していたので,Runx3 KOマウスを用いて子宮内膜の崩壊過及び増殖へのRunx3の関与を解析した。Runx3 KOマウスでは,発情ホルモン受容体αのmRNA発現が低下していた。<下垂体前葉に関する研究>αメラノサイト刺激ホルモン(αMSH)が,プロラクチン産生細胞の増殖を促進するので,その受容体であるメラノコルチン3受容体のプロモーター解析をおこない,転写制御機構を明らかにした。生体の器官の構造と機能は,構成する組織の破壊と再構築,機能発現がバランス良く制御されることにより維持されている。<子宮内膜に関する研究>マウス子宮内膜細胞の増殖はインスリン様成長因子1(IGF1)によって制御される。マウスIGF1遺伝子のプロモータ-解析を行ったところ,従来知られていた領域の他にもcAMP刺激の応答領域がある可能性が明らかになった。また,IGFBP3の発現は主に発情ホルモン受容体αを解することを明らかにした。膜受容体型の発情ホルモンGPR30の発現について解析したところ,マウス卵巣と子宮にタンパク質の発現が認められた。GPR30の特異的アゴニストG1を用いて,GPG30の機能解析を行った。さらに,転写因子Runx3は子宮内膜上皮細胞に発現し,発情ホルモン依存性の増殖制御に関与していることを明らかにした。また,発情周期にともなうマウス子宮内膜細胞の細胞分裂と細胞死についても解析した。本研究により,IGF1遺伝子の転写制御機構の一端が明らかとなった。<下垂体前葉に関する研究>α-MSHは,下垂体前葉プロラクチン産生細胞の増殖促進因子の一つである。α-MSHの受容体であるメラノコルチン3受容体遺伝子のプロモーター解析を行った。ゲルシフト解析,フットプリンティング解析により核タンパク質結合領域を解析した。また,発情周期にともなうマウス下垂体前葉細胞の細胞分裂と細胞死についても解析した。生体の器官における破壊(細胞死),再構築(細胞増殖)と機能発現(細胞分化)の一連の過程を司るシステムを,マウス子宮内膜と下垂体に注目して解析した。子宮内膜において,IGF-1は子宮内膜細胞の増殖を促進し,IGFBP-3はIGF-1の細胞増殖作用を阻害した。IGF-1遺伝子はcAMPにより転写が"促進された。プロモーター領域内のcAMPシグナルの入力部位は不明であるので,プロモーターコンストラクトの欠失をおこない,プロモーターの機能解析を行い,cAMP産生を促進する因子とIGF-1発現の相関を解明した。さらに,子宮内膜間質細胞では,発情ホルモンはTGF αの遺伝子発現を促進し,IGFBP-3の遺伝子発現を抑制することを発見した。したがって,発情ホルモンはIGFBP-3発現を抑制して、間接的にIGF-1作用を高めることが示唆された。また,子宮内膜において発情周期依存的にアポトーシスが生じていることがわかった。転写因子Runx3のノックアウトマウスでは,無排卵で,子宮内膜の発達が未熟で,発情ホルモンによる子宮内膜の細胞増殖が認められなかった。

In situ hybridizationにより子宮内膜細胞にRunx3遺伝子が発現していることを明らかにした。以上の結果より,子宮内膜細胞の発情ホルモン依存性増殖の制御におけるRunx3の関与が示唆された。下垂体前葉においても,発情周期に応じてアポトーシスが生じていた。前葉細胞の増殖に関係するメラノコルチン3受容体(MC3R)遺伝子の発現制御機構の解析をMC3Rのプロモーターの機能解析により行った。転写を促進する領域並びに抑制する領域を明らかにするとともに,ゲルシフト解析により核タンパク質の結合領域を明らかにした。