hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
保育者の発達障害児の支援に関する実践的研修プログラムの開発

本研究の目的は,地域の幼稚園・保育所において発達障害児の支援を行うことができるよう,保育者の専門的力量形成をねらった実践的研修プログラムを開発することである.今年度は,1.試験実施の課題を踏まえた研修プログラムの内容・方法の再検討,2.研修プログラムの実施とその課題について研究を行った.以下にその概要を示す.1.試験実施の課題を踏まえた研修プログラム内容・方法の再検討試験実施を行った研修プログラムの構成と同様,(1)専門家介在型プログラム,(2)自主研修型プログラム,(3)(1)(2)両方からなる総合型プログラムを開発した.(1)専門家介在型研修プログラムは,発達障害児の特性,行動分析の基本原理,保育場面における対象児のアセスメント,問題解決を目的とした個別の発達支援計画の立案を中心にレクチャーやカンファレンス形式で月1回の3回連続研修とした.特に保育的視点の話題やセルフチェックの向上をめざしたビデオフィードバックの導入,簡便に記入できる教材などの改善を図った.(2)自主研修型プログラムは,省察の視点を示したセルチェックシートと具体的な問題解決策を示したリーフレットを中心にカンファレンス形式とした.2.研修プログラムの実施1(1)専門家介在型プログラムを実施した結果,保育的発達理解の話題や教材の工夫が行動分析理論の理解を促進し,対象児の標的行動や保育者の行動にも変容が見られた.また,事後アンケートらかは,プログラムの具体性や現場実践を測定し省省察するなど本研修プログラムの実践的な特徴が有用であることが示された.今後の課題として,現場において可能な変数統制をした効果の検討,プログラムの実施,及び効果測定の頻度の検討が求められる.さらに自主研修型プログラムに継続する総合型プログラムを多数実施し,継続してデータの蓄積を行う予定である.本研究は,地域の幼稚園・保育所において発達障害児の支援を行うことができるよう,保育者の専門的力量形成をねらった実践的研修プログラムを開発することを目的としている.その視点として,幼稚園・保育所の保育場面で効果をあげられるプログラム内容,保育者が個別に抱える問題を解決する力量の獲得,専門家の介在を極力控えた,保育者のOJTとして実施可能な効率的で簡便な方法,の3点に主眼をおいて検討しプログラムを作成している.今年度は,1.研修プログラムの内容・方法の検討,2.研修資料の作成,3.研修プログラムの試験実施を行った.以下にその概要と成果を示す.1.研修プログラムの内容・方法の検討プログラム内容は,発達障害児の特性,行動分析の基本原理,保育場面における対象児のアセスメント,問題解決を目的とした個別の発達支援計画の立案を中心にレクチャーやカンファレンスなど専門家介在タイプのものと,保育者自身によるビデオモニタリングやセルフチェック等,自主研修タイプの2種を作成した.2.研修資料の作成専門家介在タイプのプログラムでは,行動分析の基本原理や基本的技法の資料,保育場面における対象児のアセスメント資料,発達支援計画立案の資料などを作成し,また,自主研修タイプでは,短時間で実践を省察できる簡便なセルフチェックの資料などを作成した.3.研修プログラムの試験実施1で作成した専門家介在タイプの研修プログラムを5回連続の講座として実施した.その結果,参加者のアンケートから研修効果の高さがうかがえたが,講座への継続参加が困難であったことから,実施方法としては,保育者が参加しやすい時期や日程,回数の調整の更なる検討を要することが明らかになった.また,研修内容としては,レクチャーの中にこどもが環境とかかわるプロセスを重視する保育的発達理解の視点を組み入れること,研修資料は,出来る限り短時間で簡便に記入できるワークシート様式等の検討の必要性が示された。本研究の目的は,地域の幼稚園・保育所において発達障害児の支援を行うことができるよう,保育者の専門的力量形成をねらった実践的研修プログラムを開発することである.今年度は,1.試験実施の課題を踏まえた研修プログラムの内容・方法の再検討,2.研修プログラムの実施とその課題について研究を行った.以下にその概要を示す.1.試験実施の課題を踏まえた研修プログラム内容・方法の再検討試験実施を行った研修プログラムの構成と同様,(1)専門家介在型プログラム,(2)自主研修型プログラム,(3)(1)(2)両方からなる総合型プログラムを開発した.(1)専門家介在型研修プログラムは,発達障害児の特性,行動分析の基本原理,保育場面における対象児のアセスメント,問題解決を目的とした個別の発達支援計画の立案を中心にレクチャーやカンファレンス形式で月1回の3回連続研修とした.特に保育的視点の話題やセルフチェックの向上をめざしたビデオフィードバックの導入,簡便に記入できる教材などの改善を図った.(2)自主研修型プログラムは,省察の視点を示したセルチェックシートと具体的な問題解決策を示したリーフレットを中心にカンファレンス形式とした.2.研修プログラムの実施1(1)専門家介在型プログラムを実施した結果,保育的発達理解の話題や教材の工夫が行動分析理論の理解を促進し,対象児の標的行動や保育者の行動にも変容が見られた.また,事後アンケートらかは,プログラムの具体性や現場実践を測定し省省察するなど本研修プログラムの実践的な特徴が有用であることが示された.今後の課題として,現場において可能な変数統制をした効果の検討,プログラムの実施,及び効果測定の頻度の検討が求められる.さらに自主研修型プログラムに継続する総合型プログラムを多数実施し,継続してデータの蓄積を行う予定である.
戦略的な射精行動をもたらす神経メカニズムの解明

動物のオスは射精の際に交尾経験や体サイズなどの配偶相手の状態に応じて、放出する精子の量を変化させることが知られている。この現象は「戦略的な射精行動」と呼ばれ幅広い動物種で観察されている。本研究では、キイロショウジョウバエを用いて戦略的な射精行動を実現する神経メカニズムを明らかにすることを目指す。キイロショウジョウバエでは、感覚情報処理の神経メカニズムが明らかになりつつある。本種を用いることで、射精とそれに伴う戦略をもたらす仕組みを高い解像度で理解できるのではないかと考えた。この目的を達成するために、キイロショウジョウバエの雄の行動を詳細に観察可能な実験系を確立することが重要である。そこで、一匹の雄個体を拡大して子細に観察できる行動記録系を立ち上げた。さらに、先行研究によって射精を引き起こすことが知られている神経細胞群にチャンネルロドプシンを発現させ、光遺伝学的にこの細胞群を強制活性化することで、射精の際の雄個体の行動を観察することに成功した。今後は、この系をさらに発展させることで、射精の際に雄がとる行動を観察するとともに、雌に由来するどのような感覚刺激を受けて射精が引き起こされるのかを調べる。これによって、キイロショウジョウバエを用いて戦略的な射精行動をもたらす神経メカニズムの理解を目指す。翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。
ほ乳類の網膜桿体経路におけるTRPM1チャネルの機能的役割

これまでの申請者の研究から、潅流液の温度を室温から体温に変えると、網膜杆体経路におけるAIIアマクリン細胞のシナプス電流(EPSC)の振幅とinter-event intervalが有意に増加することがわかっている。TRPチャネルブロッカーであるRuthenium redを潅流液に1020 micro M加えて記録したところ、AIIアマクリン細胞で観察された温度依存性のEPSCの振幅とinter-event intervalが有意に減少した。また、AIIアマクリン細胞のシナプス前細胞である杆体双極細胞は、Ruthenium redの投与により膜電位が過分極側にシフトした。これらの結果から、AIIアマクリン細胞の温度依存性EPSCはTRPチャネルを介したものであることが示唆される。潅流液の温度を室温から体温に変えたところ、野生型では杆体双極細胞の膜電位が20 ±3.7 mV上昇したのに対し、TRPM1 KOマウスでは15 ±4.2 mVしか上昇しなかった。この5 mVの差はTRPM1チャネルを介した温度上昇である可能性が高い。これらの結果から以下のメカニズムが考えられる:室温と比べて体温付近では、杆体双極細胞に発現しているTRPM1チャネルの開口確率が上がることで細胞内により多くの陽イオンが流入する→光が当たって杆体双極細胞が脱分極した際、シナプス小胞からより多くのグルタミン酸が放出できるようになる→体温付近ではAIIアマクリン細胞のEPSC(杆体双極細胞から放出されるグルタミン酸を反映)の振幅とinter-event intervalが増大する。すなわち、体温によって神経伝達物質の放出量のダイナミックレンジが上がることで、より精細な視覚情報を得ることが出来ると考えられる。2016年度から2017年度にかけて行った、当該研究から新たに展開した研究(2017年に論文として発表済み)により、全体的に遅れている。全体的に遅れているので、当初の計画に追いつくよう研究を進めていく。引き続きTRPM1 KOマウスを使った実験をおこない定量的な解析を進めるとともに、来年度は論文として発表する。野生型マウス網膜のAIIアマクリン細胞にwhole-cell patch-clamp法を適用し、潅流液の温度を変えてシナプス電流を記録したところ、温度を上げるとシナプス電流が増大した。この電流成分は、抑制性シナプスやギャップ結合のブロッカーを潅流液に投与してもほとんど変化が無かったこと、mGluR6の選択的ブロッカーであるL-AP4で抑制されたこと、反転電位が0mV付近であったことから、杆体双極細胞からのグルタミン酸放出によるものであることが明らかになった。また、20度から35度に潅流液の温度を上げると電荷量は3倍以上になり、振幅やinter-event intervalにも有意差が見られた。これらの結果から、潅流液の温度上昇によって、杆体双極細胞に発現しているTRPM1チャネルの開口確率が増大することで杆体双極細胞が脱分極しグルタミン酸放出量が増え、その結果、シナプス後細胞であるAIIアマクリン細胞で記録されたシナプス電流が増大したことが示唆された。加えて、TRPM1 KOマウスを使用して次年度のための予備実験を行ったところ、潅流液の温度を変えてもAIIアマクリン細胞のシナプス電流にあまり変化は見られなかった。TRPM1 KOマウスに関しては次年度も実験を継続し、野生型と比較するため、より多くのデータを集めたい。また、TRPM1 KOマウスを使った実験を行った際、AIIアマクリン細胞の樹状突起が縮こまっており、杆体双極細胞の軸索終末も小さくなっていることがわかった。これらのことから、TRPM1チャネルは網膜杆体経路の正常な神経回路を作る上で重要な因子の1つであることが考えられる。これは当初、予期していなかったことであるが、この点についても明らかにしていきたい。whole-cell patch-clamp法に加え、今年度は細胞内タンパクなどがピペット内に流出しないperforated patch-clamp法でも杆体双極細胞から膜電位を記録し、温度と膜電位の関係を調べる予定だったが、技術的な問題から、まだ数例しか成功していない。ピペット内に入れる薬品にはGramicidinやAmphotericin Bなど何種類かあるので、その選定と、それらの濃度を変えることで最適な記録条件を探る必要がある。それ以外は順調に進展している。TRPM1 KOマウスのAIIアマクリン細胞にwhole-cell patch-clamp法を適用し記録したところ、野生型と異なり、潅流液の温度を変えてもAIIアマクリン細胞のシナプス電流(振幅とinter-event interval)に大きな変化は見られなかった。この結果と前年度の薬理学実験のデータから、野生型で観察されるAIIアマクリン細胞のシナプス電流の温度依存的な増大は、杆体双極細胞に発現しているTRPM1チャネルを介したものだと考えられる。次に、perforated patch-clamp法を用いて杆体双極細胞の膜電位と潅流液の温度との関係を調べたところ、温度依存的に膜電位が上昇したが、mGluR6のagonistであるL-AP4を灌流投与すると膜電位の上昇が抑えられた。

L-AP4によってmGluR6の下流でGタンパクが生成され、TRPM1チャネルを閉じることによって杆体双極細胞の膜電位の上昇を抑えていることが考えられ、これらの結果は、これまでAIIアマクリン細胞で観察された現象と一致する。前年度にTRPM1 KOマウスを使った実験を行った際、AIIアマクリン細胞の樹状突起が退縮しており、そのシナプス前細胞である杆体双極細胞の軸索終末も小さくなっていることがわかった。杆体双極細胞に発現しているTRPM1チャネルをKOすると何故このような事が起こるのか明らかにするために、大阪大学と共同研究をおこなった。さまざまな種類の遺伝子改変マウスを用いた実験の結果、杆体双極細胞に発現しているTRPM1チャネルが開くことが、杆体双極細胞とAIIアマクリン細胞との正常なシナプス形成に必要であることを見出した。前年度にTRPM1 KOマウスを用いた実験を行った際、AIIアマクリン細胞の樹状突起が縮こまっており、杆体双極細胞の軸索終末も小さくなっていることがわかった。これらの観察結果は予想していなかったことであったが、TRPM1が両細胞間の正常なシナプス形成に一役買っているという仮説の元で新たに研究を展開し、その結果を論文として発表した。当該年度はこの解析にも時間を費やしたため、当初の計画通りに進めるための時間がやや足りなかった。これまでの申請者の研究から、潅流液の温度を室温から体温に変えると、網膜杆体経路におけるAIIアマクリン細胞のシナプス電流(EPSC)の振幅とinter-event intervalが有意に増加することがわかっている。TRPチャネルブロッカーであるRuthenium redを潅流液に1020 micro M加えて記録したところ、AIIアマクリン細胞で観察された温度依存性のEPSCの振幅とinter-event intervalが有意に減少した。また、AIIアマクリン細胞のシナプス前細胞である杆体双極細胞は、Ruthenium redの投与により膜電位が過分極側にシフトした。これらの結果から、AIIアマクリン細胞の温度依存性EPSCはTRPチャネルを介したものであることが示唆される。潅流液の温度を室温から体温に変えたところ、野生型では杆体双極細胞の膜電位が20 ±3.7 mV上昇したのに対し、TRPM1 KOマウスでは15 ±4.2 mVしか上昇しなかった。この5 mVの差はTRPM1チャネルを介した温度上昇である可能性が高い。これらの結果から以下のメカニズムが考えられる:室温と比べて体温付近では、杆体双極細胞に発現しているTRPM1チャネルの開口確率が上がることで細胞内により多くの陽イオンが流入する→光が当たって杆体双極細胞が脱分極した際、シナプス小胞からより多くのグルタミン酸が放出できるようになる→体温付近ではAIIアマクリン細胞のEPSC(杆体双極細胞から放出されるグルタミン酸を反映)の振幅とinter-event intervalが増大する。すなわち、体温によって神経伝達物質の放出量のダイナミックレンジが上がることで、より精細な視覚情報を得ることが出来ると考えられる。2016年度から2017年度にかけて行った、当該研究から新たに展開した研究(2017年に論文として発表済み)により、全体的に遅れている。
水素吸蔵合金における水素と金属の相互作用

1.水素吸蔵合金中の水素濃度を測定するためのジーベルツ装置を製作した。装置の水素リークレートは4.83×10^<-4>Pa dm^3s^<-1>であり、装置に要求される精度を十分満たすものであった。2.本装置を用いて水素吸蔵合金、LaNi_<4.5>Co_<0.5>の10、45、55、65°Cにおける圧力等温線(PCT線)を測定した。3.上記PCT線から、水素吸蔵に伴うエンタルピー変化(ΔH)及びエントロピー変化(ΔS)が、それぞれ-32.7 kJ mol(H_2)^<-1>及び-113 J mol(H_2)^<-1>と求められた。4.LaNi_5と水素の相互作用を調べる目的で、分子軌道(DV-Xα)法を用いて、LaNi_5の電子状態及びα-LaNi_5H_x(x≦0.2)相、β-LaNi_5H_x(x=6)相の電子状態を計算した。計算はクラスターモデルについて行い以下の結果を得た。(1)α-LaNi_5H_x(x≦0.2)相では、水素は原子間距離が最も近いNi(1)と特に強く相互作用することがわかった。しかし、LaとNi(2)は他の原子に比べて水素との距離が短いにも関わらず、ほとんど水素と結合していないことがわかった。(2)β-LaNi_5H_x(x=6)相についてもH(2)-Ni(1)及びH(2)-Ni(3)間に比較的強い相互作用が認められ、その強さは両者の原子間距離に依存することがわかった。(3)単体金属ではNiよりもLaの方が水素化物を形成しやすいことが知られているが、合金の電子状態の計算結果は必ずしも、これと一致した結果は得られなかった。(4)LaNi_5のNiをCoで置換したLaNi_5合金では、Ni-Co間の結合が若干強化され、LaNi_<4.5>Co_<0.5>合金では金属の微粉化が抑制されるとういう実験結果を支持する結果が得られた。装置の水素リークレートは4.83X10^<-4>Padm^3s-1であり、装置に要求される精度を十分満たすものであった。2.本装置を用いて水素吸蔵合金、LaNi_<4.5>Co_<0.5>の10、45、55及び65°Cにおける圧力等温線(PCT線)を測定した。3.上記PCT線から水素吸蔵に伴うエンタルピー変化(ΔH)及びエントロピー変化(ΔS)をそれぞれ一32.7kJmol(H_2)^<-1>及び-113Jmol(H_2)^<-1>と求めた。4.平成12年度には他の水素吸蔵合金についてもPCT線を測定して、ΔH及びΔSを求めて比較検討したい。5.水素吸蔵合金と水素の相互作用を調べる目的で、水素吸蔵合金LaNi_5の電子状態及びα-LaNi_5H_X(x≦0.2)相、β一LaNi_5H_X(x=6)相の電子状態を、分子軌道法の一種であるDV-Xα法によって計算した。(1)α-LaNi_5H_X(x≦0.2)相では固溶した水素はNi(1)と相互作用することがわかった。(2)β一LaNi_5H_X(x=6)相についてもH(2)-Ni(1)及びH(2)-Ni(3)間に比較的強い相互作用が認めら、その強さは両者の原子間距離に依存することがわかった。(3)平成12年度はクラスターの大きさをさらに大きくして合金内の環境に近い状態のクラスターモデルについて計算を試みると同時に、LaNi_<4.5>Co_<0.5>-H系についても同様の計算を行い、熱力学データーとの比較検討を行う。

しかし、LaとNi(2)は他の原子に比べて水素との距離が短いにも関わらず、ほとんど水素と結合していないことがわかった。(2)β-LaNi_5H_x(x=6)相についてもH(2)-Ni(1)及びH(2)-Ni(3)間に比較的強い相互作用が認められ、その強さは両者の原子間距離に依存することがわかった。(3)単体金属ではNiよりもLaの方が水素化物を形成しやすいことが知られているが、合金の電子状態の計算結果は必ずしも、これと一致した結果は得られなかった。(4)LaNi_5のNiをCoで置換したLaNi_5合金では、Ni-Co間の結合が若干強化され、LaNi_<4.5>Co_<0.5>合金では金属の微粉化が抑制されるとういう実験結果を支持する結果が得られた。1.水素吸蔵合金中の水素濃度を測定するためのジーベルツ装置を製作した。装置の水素リークレートは4.83×10^<-4>Padm^3s^<-1>であり、装置に要求される精度を十分満たすものであった。2.本装置を用いて水素吸蔵合金、LaNi_<4.5>Co_<0.5>の10、45、55、65°Cにおける圧力等温線(PCT線)を測定した。3.上記PCT線から、水素吸蔵に伴うエンタルピー変化(ΔH)及びエントロピー変化(ΔS)が、それぞれ-32.7kJmol(H_2)^<-1>及び113Jmol(H_2)^<-1>と求められた。4.LaNi_5と水素の相互作用を調べる目的で、分子軌道(DV-Xα)法を用いて、LaNi_5の電子状態及びα-LaNi_5H_x(x≦0.2)相、β-LaNi_5H_x(x=6)相の電子状態を計算した。計算はクラスターモデルについて行い以下の結果を得た。(1)α-LaNi_5H_x(x≦0.2)相では、水素は原子間距離が最も近いNi(1)と特に強く相互作用することがわかった。
「その場観察」手法を駆使したNaNbO3系反強誘電薄膜の動的挙動観察

本研究では結晶配向性の異なるNaNbO3系非鉛型反強誘電薄膜を作製し,結晶構造・電気特性評価を行う.具体的には(1)非鉛型反強誘電薄膜のドメイン構造と結晶方位・電気特性との関係を検討する.(2)電場・温度によるドメインと局所構造の動的挙動を「その場観察」することにより構造と動的挙動の関係を解明する.上記2つの検討を行うことでドメインならびに局所構造制御技術の確立を行う.得られた知見をフィードバックし,ドメイン・局所構造を精密制御した薄膜を用いて,構造と電気特性の関係を解明する.以上の検討を進めることで,高性能反強誘電薄膜開発のための設計指針を築くことを本研究の目的とする.本研究では結晶配向性の異なるNaNbO3系非鉛型反強誘電薄膜を作製し,結晶構造・電気特性評価を行う.具体的には(1)非鉛型反強誘電薄膜のドメイン構造と結晶方位・電気特性との関係を検討する.(2)電場・温度によるドメインと局所構造の動的挙動を「その場観察」することにより構造と動的挙動の関係を解明する.上記2つの検討を行うことでドメインならびに局所構造制御技術の確立を行う.得られた知見をフィードバックし,ドメイン・局所構造を精密制御した薄膜を用いて,構造と電気特性の関係を解明する.以上の検討を進めることで,高性能反強誘電薄膜開発のための設計指針を築くことを本研究の目的とする.
鶏の膵臓におけるPP細胞に関する研究

成鶏の膵臓を4%paraformaldehydeで潅流固定し、pancreatic polypeptide(PP)の他、ホルモン・神経両ペプチド及びモノアミン生合成酵素の抗体全部で14種類を用い、免疫組織化学的染色を行った。またFALCKーHILLARP法によった材料を蛍光顕微鏡で観察後、同一切片をPP抗体で染色した。一方KARNOVSKYーROOTS法によりacetylcholinesterase(AChE)反応を行い、コリン作動性神経の分布を観察した。PP抗体に陽性反応を示すPP細胞は、外分泌部に単独で散在し、膵臓尾部には数少く、頭部に向って増数し、しかも腹葉よりも背葉に数多く認められた。しかし興味深いことにA細胞の存在する脾葉及び腹葉背側部には、PP細胞は殆ど認められなかった。PP細胞は多角形で多数の突起をもち、それらを毛細血管に迄伸長させていた。また葉を問わず、A・B等どの膵島中にもPP細胞は見られず、Glu、InsとPP相互の間には全く共存関係はなかった。Som抗体陽性細胞は膵島の内外に見られるが、連続切片ではPPとの共存は見られなかった。PP細胞は連続切片で検索した限り、ドーパ脱炭酸酵素(DDC)及びセロトニン抗体に対し陽性反応を示し、PP細胞にセロトニン生合成系の共存が示された。一方四種のカテコラミン生合成酵素抗体のうちDDCを除いて、PP細胞は陽性反応を示さず、カテコラミン生合成系は含まれないと推測された。FALCKーHILLARP法で処理した切片では、蛍光顕微鏡下で明るい黄色蛍光を発し、孤立し、多角形を示す多数の細胞が見られたが、この同一切片をPP抗体で免疫染色しても陽性反応を示す細胞は見られなかった。多分PP細胞はセロトニンを含有するが、その量はFALCKーHILLARP法では検出できない程少いものと推測される。AChE陽性神経線維は主に腺房間に分布していたが、PP細胞に対し特に密な分布をするという証拠はない。比較のためにPP抗体で染色した〓鳥では、PP細胞の分布様式は鶏と根本的に相違し種差の大きいことが判明した。成鶏の膵臓をBouin,Zamboni又は4%parafo rwalde hyde液で固定し, pancreatie polypeptide(PP),glucagon(Glu) insulin(Tns)及びsomafostatin(Som)に対する抗血清を用い,免疫組織化学的染色を行い,膵島ホルモン相互の関係を調べ,さらにPP含有細胞中に共存する生理活性アミンを同定するために,連続切片を用いPP並びにアミン生合成酵素に対する抗血清で染色した.またFALCK-HILLARP法により,凍結乾燥し,蛍光顕微鏡で検索後,同一切片をPP抗血清で染色した.1.PP含有細胞は免疫組織化学的には多角形で,複数の突起をもち,時折その突起は毛細血管に迄達していた.本細胞は膵島中には見られず,殆ど外分泌部に単独で散在していた.膵臓尾部には数少く,頭部に向って増数し,しかも腹葉よりも背葉に数多く認められた.2.Glu及びIns抗血清に陽性反応を示す細胞は,殆ど膵島内に限局し,一方PP抗血清に免疫反応する細胞は膵島中には見られず, Glu,Ins及びPP相互間には全く共存関係はなかった.

Som抗血清に染る細胞は,膵島の内外に見られたが,連続切片ではPPとの共存は確認されなかった.3.PP含有細胞は連続切片を検索した限りでは, dopa decarboxylase及び5-hydroxyt rypfamlneの抗血清に対し陽性の免疫反応を示し, PP含有細胞にseroto nine生合成系の共存が示された.一方tyrosine hydroxylase及びdopamine-β-hydroxylaseに対する抗血清に, PP含有細胞は免疫反応を示さず,従ってcatecholamine生合成系は含有されていないと推測された.4.FALCK-HILLARP法で処理した膵臓切片には,蛍光顕微鏡下で明るい黄色蛍光を発する多くの孤立した細胞及び細胞群が見られた.これらの細胞は円形から多角形まで多様な形態を示した.この同一切片をPP抗血清で免疫染色したが,陽性反応を示す細胞は殆ど見られなかった.恐らくPP含有細胞はFALCK-HILLARP法で検出されうる程のserotonineを含まないと推測した.成鶏の膵臓を4%paraformaldehydeーリン酸緩衝液で灌流固定し、paraplast包埋、5μmの連続切片を作り、Pancreatic Polypeptide(PP)他三種類の膵島ペプチドホルモン(Glu、Soni等)Substance P他五種類の神経ペプチド、及び5ーhydroxytriptamine(5ーHT)他四種類のモノアミン生合成酵素(AADC等)に対する抗血清を種々組合せて、PAP法またはABC法により免疫組織化学的染色を行った。又KARNOVSKYーROOTS法により、鶏膵臓の凍結切片にAcetylcholinesterase(AChE)反応を行い、ユリン作動性神経の分布を観察した。昨年度の研究実績報告書に記述したように、PP細胞はPP抗血清に陽性反応を示す他、AADCと5ーHT抗血清にも陽性反応を示し、モノアミンとして5ーHT.とその生合成酵素AADCを含むことが確認されたが、それ以外の上記ペプチド及びモノアミン生合成酵素の抗血清には陰性であった。しかし興味深いことに主にGlu細胞からなるA島の見られる領域、脾葉と腹葉背側部には、PP細胞は非常にわづかしか認められず、PPとGluの共存はあり得ない。またAChE陽性神経線維がPP細胞に特に分布することもなかった。比較のために同じPP抗血清を用いて、免疫組織化学的染色を行った蛇鳥及び山羊の膵臓におけるPP細胞の分布様式は、鶏のそれと根本的に相違した。蛇鳥ではどの膵島にもいくつかのPP細胞が存在し、その分布様式はSom細胞のそれに類似していたが、PPとSomとが同一細胞に共存することはなかった。一方山羊ではPP細胞を全く含まない膵島、二三のPP細胞を中央に含むもの、十数個のPP細胞を周辺に含むもの、及び膵島全体が殆どPP細胞からなるもの等非常に多様であったが、腺房内・間に散在するPP細胞は、殆ど見られなかった。しかも一部の硬骨魚の如くPPとGluの共存、更にIns及び80mとの共存も認められなかった。PP細胞の分布様式の動物種間での相違は、今後比較形態学的にも、比較栄養生理学的にも解決されるべき重要な課題である。
イメージング法を用いた神経細胞樹状突起の興奮性制御メカニズムの解明

活動電位の樹状突起への逆伝播は、アセチルコリン受容体のうちのムスカリン性受容体の活性化によって促進され、逆伝播によって惹起される樹状突起での細胞内カルシウム濃度増加も大きくなることが、平成9年度に実施された研究により示された。この現象の基にあるメカニズムを明らかにするために、本年度は、アセチルコリン受容体のアゴニストであるカルバコールの投与により活性化する細胞内情報伝達系の寄与について、特定のGタンパクを欠損させたノックアウト・マウス等を併用して調べた。その結果、1)3量体Gタンパクのうち、Gqのαサブユニットが欠損したミュータントでは、ムスカリン性受容体の活性化による逆伝播の促進が起こらないこと、2)ワイルド・タイプでは、細胞外に蛋白質キナーゼの活性剤であるホルボール・エステルを投与すると、ムスカリン性受容体の活性化と同様な促進反応が見られることが分かった。そこでムスカリン性受容体の活性化がGqの活性を高め、イノシトールリン脂質代謝系を介して蛋白質キナーゼC(PKC)が活性化する、という経路が重要と思われた。しかしながら、3)蛋白質キナーゼの阻害剤であるH-7を予め投与しておくと、ホルボール・エステルの効果は消失するが、ムスカリン性受容体の活性化による促進反応は阻害されないことが分かり、経路は単一ではないことが示唆された。さらに、4)ワイルド・タイプ、ミュータントともに、樹状突起に大きなカルシウム流入があると、カルモジュリン依存性キナーゼII(CaMKII)の活性化により逆伝播が促進されることがわかり、PKCの関与するものとCaMKIIの関与するものの、少なくとも2つの独立した興奮性制御系が存在することが示された。海馬錐体細胞における活動電位の樹状突起への逆行性伝播に関して、以下の2点を明らかにした。1)遠位樹状突起への逆伝播とそれに伴う樹上突起内のカルシウム濃度増加は、分子・果粒層への電気刺激で誘発されるIPSPにより抑制されることがわかった。抑制性入力の後4-6ms以内の活動電位の振幅が小さくなり、膜の過分極の程度より、抑制性入力と活動電位との時間関係が重要であった。またBicuculline 10μMを投与すると抑制が消失した。これらの結果から逆行性伝播の抑制はGABA_A受容体の活性化によるClコンダクタンスの一過性の増大が膜のシャンティングをひき起こしたために起こると考えられる。従来IPSPの樹状突起における役割は、EPSPによる膜の脱分極に桔抗して膜を過分極させることにより活動電位の発生を抑えるものと認識されていたが、この結果により、それ以外に一旦発生した活動電位の伝播を止めるという役割があることが明らかになった。遠位樹状突起に入力を送る抑制性の介在ニューロンがその役割の担い手かもしれない。2)樹状突起への逆伝播は、アセチルコリン受容体のうちのムスカリン性受容体の活性化によって促進され、逆伝播によって惹起される樹状突起での細胞内カルシウム濃度増加も大きくなることがわかった。このメカニズムを明らかにするために、現在Gタンパクを介する細胞内情報伝達系の寄与について調べているところである。
マウス・ゲノム刷り込み制御配列のエピゲノムダイナミクス

マウス胎性16.5日胚の、雄生殖細胞におけるH19-ICR周辺領域の転写(3'側からの一方向転写の報告あり;EMBO J.31:606-615,2012)を詳細に検証したところ、他グループの報告とは異なり、両方向の転写が観察された。これらのうち、我々は新規である5'側からの転写を終結させる目的でpolyA-ノックインマウスを作成し、その精子におけるH19-ICRのメチル化刷り込みは正常に確立することを示した。したがって、少なくともH19-ICRの5'側からの転写は、精子におけるメチル化に必須ではないことが考えられた。さらに、我々が見いだした受精後刷り込みメチル化現象に必須の、内在H19-ICRの一部配列をCRISPR-Cas9法により欠損させたマウスを作成した。精子における刷り込みメチル化の解析の結果、同配列は生殖細胞における刷り込みメチル化には必須でないことが明らかとなった。27年度が最終年度であるため、記入しない。これまでの申請者、あるいは他グループの研究結果により、H19-ICR配列の精子における刷り込みメチル化のためには、2.9-kb領域の外側の配列が必要であると考えられた。そこで、まず、外側配列からヒストン修飾(ヘテロクロマチン化に関わるH3K9Me3など)が伝播し、これがDNAメチル化のトリガーとなっていることを想定し、chicken βグロビンHS4配列(cHS4インスレーター)を、内在H19-ICRの両側に挿入したマウスを作製した。同マウスの解析の結果、精子における内在H19-ICRのメチル化が阻害されていた。この結果、本来、野性型のH19-ICRにおいては解析することの出来ない受精後刷り込みメチル化活性の有無を検証する途が開けた。次に、H19-ICRの周辺領域の転写(他グループからの報告あり)が精子における刷り込みメチル化に関与する可能性について検証するために、転写終結シグナル(polyA signal)を、内在H19-ICRの3'側に挿入したマウスを作製した。同マウスの解析の結果、精子での内在H19-ICRのメチル化は正常に確立したことから、領域の転写は(あったとしても)、内在H19-ICRの精子における受精後刷り込みメチル化には必要ないことが明らかとなった。当初の研究計画、あるいは、年度初めの研究実施計画に記した研究目的を順調に遂行し、期待の成果を得ることが出来たため。論文公表も視野に入れたい。H19-ICRの精子におけるメチル化刷り込みの確立メカニズムは未だ明らかにされていない。我々は、平成26年度の成果として、内在H19-ICR配列の両側にクロマチンインスレーター配列を挿入することにより、精子における同反応を阻害できることを明らかにした。同阻害メカニズムをより詳細に解析することにより、確立の分子基盤を明らかに出来る可能性が出てきた。また、同精子における不完全なDNAメチル化状態が、受精後にどうなるのかを調べることにより、内在H19-ICRにおける受精後刷り込みメチル化活性の有無を検証できる途が開けた。平成27年度は、後者について集中的な解析を行うと同時に、H19-ICRの外側から伝播するエピジェネティックなシグナルの実体を明らかにするために、CRISPR-Cas9ゲノム編集システムを用い、内在複数候補配列の欠損とそれらがメチル化刷り込みに及ぼす影響について解析する予定である。
高解像度の海浜海底地形環境評価法の開発と砂浜海岸保全への適用

わが国では海岸侵食により、毎年160haにおよぶ砂浜面積が消失し、沿岸域の環境・防災上、深刻な課題になっている。その背景には、河川から海に供給される土砂量の減少や、海岸保全構造物の設置による沿岸漂砂(海中での砂の汀線に平行な動き)の分断化が挙げられる。このような海岸(孤立した漂砂系)においては、暴浪時に堆積物が沖合に流出すると、砂浜の地形を長期的には維持できないおそれがある。本研究では、孤立漂砂系に遷移した砂浜海岸の典型例として大潟海岸を取りあげる。海底地形の変化を高解像度で計測することにより、汀線の動きからは読み取るのが難しい海底の地形変化の特性(顕著な海底侵食の進行)を明らかにしている。本研究では、イベント過程を織り込んだ、数十年から数百年オーダーの海浜地形変化を高解像度で予測し得る方法論の確立を目指す。そのため、本年度は以下の研究を行った。1)広域海水流動・波浪場予測の適用;上越地域海岸を対象として、能登半島及び佐渡ケ島によって囲まれた海域の冬季風浪場解析に着手した。その成果の一端として、2008年2月24日発生の高波場を精度高く追算することに成功した。2)海浜海底地形情報のインテグレーション;海岸侵食に悩む上越地域海岸において土砂収支の詳細検討を可能とするため、古地形図、深浅測量成果、貯水池堆砂データ等の空間情報を収集するとともに、GISを活用して海岸保全施設の修築、災害復旧史の整理を行った。3)イベント堆積過程の研究;大潟海岸における波状海底地形の遷移過程と正味の堆積物輸送との係りを明らかにするために、一連の波浪水槽実験を行った。4)音波探査による海底堆積層の成層構造の把握;イベント層を含む海底堆積層の成層構造を調べるために、音波探査(STRATABOXによる)を田辺湾で試行した。オールコアボーリング結果との突合せにより、音波探査による海底堆積層成層構造の同定能力を確かめることができた。5)養浜砂浜域における不圧地下水の動態と遡上帯土砂移動の係りを調べるために、実海浜において現地調査を行った。1)広域海水流動・波浪場解析法の適用;ナウファス観測網の一つである直江津港で観測された2001年2005年の波高、波向、周期および海上風データの統計解析を行い、上越地域海岸の中・長期の海浜変形評価に供し得る波浪・風特性のモデル化を行った。2)底面境界層における土砂の取込み及び輸送モデルの開発;暴浪イベントによって底質が流動化し、高濃度の底面境界層を形成する可能性に着目して、水中堆積物解析コードLIQSEDFLOWの拡張と水槽実験結果に基づく検証を行った。さらに、海底微小音響に基づく底質移動速度の同定に関する基礎実験を行った。3)海浜海底地形情報のインテグレーション;大潟海岸域を対象として、地形図情報をGIS化し、過去80年間の汀線位置の変遷を明らかにした。それによると、1990年代初頭まで汀線は顕著な後退傾向を示していたが、それ以降はほぼ落ち着いている。これは、侵食対策として実施された一連の海岸保全事業の効果の表れとみることができる。しかし、海底の地形変動は依然ダイナミックであり、注視に価する。4)海底地形変動の詳細計測;そこで、2008年7月27-30日に大潟海岸において三次元サイドスキャンソナー(C3D)計測を実施し、格子間隔2mの3次元座標群データ(水深の計測精度は10cm程度)を取得した。その結果、地形変化限界水深(8m)を超える沖合に大規模な湾入状の海底地形(侵食域)が形成されていることが明らかになった。5)遡上帯における土砂輸送に及ぼす海岸地下水の影響評価;養浜工は砂浜地形の復元にとどまらず、淡水地下水レンズの再生に繋がることから、その回復速度の予測式を誘導した。さらに、干満サイクルにおける淡塩境界のダイナミックな動きの連続観測に成功した。1)海底地形変動の詳細計測;昨年度に引き続き大潟海岸において三次元サイドスキャンソナー(C3D)計測を行った。

すなわち、地形変化限界水深を越えた沖合への土砂流出機構を視野に入れて、水深5m20mの範囲の岸沖測線、計6測線(測線A測線F)をカバーした。その結果、人工リーフの沖合(水深8m以上)においても海底地形変化(侵食)が顕著であることを確認した。2)底質のバイブロコアリングと海底砂漣の形態観測;漂砂の動態を明らかにするために、測線Cに沿って10地点、測線Fに沿って2地点で底質のバイブロコア採取を行った(コア長は0.4m-1.lm)。合わせて。砂漣の形態観測を実施した。特筆されるのは、当海域は砂礫主体であるにもかかわらず、測線Cの水深9m地点から、粘土塊とシルト層試料が採取されたことである。当地は潟町砂丘が最も発達した地点の沖合に当たるが、1961年帝国石油報告書記載の海上ボーリング柱状図ともつきあわせると、当海底域には古砂丘体が埋没していると判定できる。当海底は過去50年の間に約3m、侵食されている。そのため、古砂丘体上面のエスチャリー性堆積物がバイブロコアリングによって採取可能になったものである。大潟海岸域では海底地形変化(侵食)が周辺海域よりも顕著であり、その要因の一つとして埋没古砂丘が現世の漂砂源になっている可能性がある。(3)後浜-砂丘斜面における物理探査;大潟海岸後浜-砂丘斜面系における表層堆積環境を同定するために、牽引式比抵抗探査および表面波探査を実施した。その結果、砂浜後背の海岸砂丘が果たしてきた自然の砂貯留機能について興味深い知見が得られた。海岸砂丘の自然の砂貯留機能は、暴浪イベントによる砂浜の急激な地形変化にもかかわらず、砂浜海岸が長年月にわたって持続し得る特性(resilience)の物理過程の本質に繋がることを強調しておきたい。
分譲マンションの成立と存続に影響する社会構造及び都市構造の変化について

多くの地方都市で中心市街地の空洞化が進行している。既存マンションの足元の店舗も閉店・休業が多い。シャッター街、空き家群の中に新築の分譲マンションが建てられると市街地の再生を望む地域の人々は、これで活気が取り戻せるのではないかと淡い期待を持つ。しかし、期待を込められた新築マンションがたとえ完売しても、さして時間を置かずに低価格化し不良住宅化する懸念を抱かざるを得ない。一方目を郊外に転じると、市街化調整区域と隣接町村では官民が競って宅地造成と戸建て住宅建設に長く邁進してきた。大都市圏に比べて戸建ての敷地は広く価格も安い。住宅市場における分譲マンションの人気が低く、多数の住宅が賃貸住宅に転じている。20年経っても多くのマンションの修繕積立金は当初の低い金額に据え置いたままで大規模修繕を先送りしている。廃墟に等しいマンションも生まれた。群馬県では大都市圏より遅れて分譲マンション開発が進み、大都市圏より早く問題住宅化するが、個人資産の問題としてこれまで行政が積極的に対応したことはない。このような状況では健全な街づくりが困難である。そこで本研究は地方都市における分譲マンションが都市崩壊のキーワードとなるか、都市再生のキーワードとなるかを確認すべく実施した。願うべくは都市再生である。なお従来の分譲マンション研究の大半は大都市圏内で行われてきた。地方都市ではマンション戸数そのものが少ないだけでなくマンション研究者すら殆どいない。地方のマンション実態を明らかにすることはマンションと都市計画との関係を検証する機会となろう。群馬県における分譲マンションの状況について政府統計等の分析結果と現地確認等で得られた情報の分析結果を報告する。本年度に行った研究は以下の通りである。(1)、群馬県内の各市町村の変貌を捉えるため人口、産業、通勤事情、就業、所得、地価変動等に関する分析を行い、さらに市街化調整区域の開発状況、市街化繰り入れ状況を長期間のデータ-を整理し分析した。自動車社会が市街地の拡散を加速したかに見えるが、公的機関の活動が市街地拡散を加速した側面も大きいことが判明した。群馬県は50万人を超える大規模都市がなく、中小の都市が互いに人口を引き合う中で市街地が薄く拡大した側面もあり、都市の分散状況が全国一にマイカー通勤率を引き上げたようだ。(2)、平成12年に県内のマンションの全てを訪問調査したが再度訪問調査をし、全リストを確認するとともに、12年以降17年までに供給されたマンションを確認した。入居状況、中古価格、借家数、計画店舗数と空き店舗数、空き住宅状況を調査分析した。近年東京のマンション供給数が頭打ちになったためか、群馬でも新築マンションが急増しているが、実需に対して供給計画がなされたわけでなく首都圏で供給活動が行き詰まった企業活動のはけ口として新築されるのだから、ストックの空き家増加に繋がる恐れが強い。(3)、平成12年9月17年9月までの群馬県内で生じた分譲マンションの競売状況(述べ720件)を分析した。(3)のデータ-と(1)、(2)のデータ-を結び付け、どのような属性のマンションが競売になりやすいかを明らかにした。競売が止め処も無く出されるマンションがあったが、これらは管理の崩壊と結びついている。地方のマンションストック数は大都市圏に比べると圧倒的に数が少なく、市民や行政の維持管理に関する関心が低い。管理組合団体など管理をサポートする組織もない。従って新たに供給されるマンションも適正に管理されるか否か懸念材料が多い。本年度の研究は国勢調査結果(17年)が公表されたことを受けて15年実施された住宅統計調査の結果と合わせ分譲マンションの立地上の諸問題を解析した。さらに介護保険事業報告書のデーター、人口問題研究所の2030年までの人口予測と合わせて介護面、人口変動から見たマンションの都心集中、郊外の衰退予測からマンション立地から生じるマンション問題を予測した。その結果はマンション学会等に報告した。

マンションの成立と衰退に強く影響する地方都市の変貌を現地見学やマンション管理組合へのヒヤリングを通して分析した。群馬県においては筆者の呼びかけで結成した群馬マンション研究会参加の10管理組合会員マンションの個別データーを収集し、国の統計を解析する方法では得られない生身の状況を把握した。横浜市、千葉ニュータウン、茨城県の龍ヶ崎ニュータウン、広島市、仙台市などの長期経過したマンションにも出向き観察と分析を行った。今後東京大都市圏では人口の高齢化少子化の影響で郊外の衰退が予想される。公共交通機関の乗降人口は乗り合いバスで特に顕著で、場所によっては鉄道の乗降人口が激減している。理由は都心への人口のユーターンだけでなく、郊外居住者のマイカー通勤の増大が上げられる。未婚、離婚の増加もマンション居住者象を大きく変える可能性が高い。東京都心では持ち家共同住宅居住者の中で単身率が急増しているが、これは居住者の高齢化だけで生じた訳でなく、若年、壮年未婚者がマンション需要者に民間賃貸アパートから転入した結果による。都心ではねぐら型居住者が増えることでマンション管理はますます困難化しつつある。一方郊外では中古需要の減退から居住者の低所得化が進行しつつあり、建物の維持保全はおろか健全なコミュニティーの維持を困難にしつつある。郊外、さらに地方都市では空き家化したマンションもふえつつあり、緊急で持続的な対策が必要と思われる。研究の対象・方法:(1)群馬県の全分譲マンションリストの作成から取り組んだ。現地訪問し現状を確認すると共に関係者にヒヤリングを加えた。リスト作成には新聞、広告、IT情報を利用し、また不動産業者、管理組合役員等の協力を得た。(2)同様に中古価格や管理費、修繕積立金、駐車場料金等の情報を収集整理した。(3)平成12年9月平成17年9月までに生じた群馬県内マンションの競売情報を収集した。(4)市街地の拡大を把握すべく用途地区の面積拡大、指定変更とその理由、開発事業者についての基礎情報を集めた。(5)本研究に資する国・自治体の統計資料を収集した。(1)(5)については可能な限り各種データーを連結し相互の関係明らかにすることに努めた。(6)都市再生やマンション管理の実態、空きマンションや空きビル活用のコンバージョンの実態を把握するため群馬県以外の主要都市町村に出向き資料収集、観察・ヒヤリングを実施した。これによって群馬県の現状の位置付けと将来取るべき対策を検討するための基礎的資料を得た。主な研究成果:地方都市においては(1)マンションの供給は県外業者に依存する度合いを強めているものの業者の大半は進出撤退を繰り返し、持続的安定供給を望めない。分譲時点でマンション管理を撹乱し阻害する要因を多数内在させる結果となった。
歯髄におけるKLKB1刺激によるPAR-1を介した炎症の解明

ヒト歯髄培養細胞を用いて、KLKB1によるPAR-1を介した細胞内カルシウムイオン濃度([Ca2+]i)上昇およびCOX-2発現とPGE2産生、そしてplasminによるCNを介したCOX-2発現およびPGE2産生について検討した。ヒト歯髄培養細胞において、KLKB1の添加により[Ca2+]iは上昇した。またKLKB1はCOX-2遺伝子発現量を濃度および時間依存的に促進し、その効果はPAR-1 antagonistであるSCH79797で抑制された。KLKB1の添加によりCOX-2タンパク質量も増加したが、SCH79797で抑制された。KLKB1の添加により培養上清中のPGE2量は増加し、その効果はSCH79797で抑制された。Plasminの添加により時間依存的に培養上清中のPGE2量は増加した。またplasminはCOX-2遺伝子発現量を時間依存的に促進し,その効果はcalcineurin antagonistであるFK506で抑制された。Plasminの添加により核タンパク質画分中の転写因子NFATc1量が増加し、COX-2タンパク質発現量も増加したが、いずれもFK506で抑制された。PAR-1活性化剤であるSFLLRNでもほぼ同様の結果が得られた。以上の結果からKLKB1は基質を分解しkininを産生させるだけでなく、PAR-1を介してCOX-2遺伝子発現量、タンパク質量、PGE2産生を促進することにより、歯髄炎を進行させる因子の1つではないかということが示唆された。またplasminはPAR-1を介してCOX-2、PGE2を産生することで歯髄炎の進行に関与する可能性があり、またその細胞内シグナル伝達経路においてCN/NFATc1経路が関与することが示唆された。歯髄の生死はその歯の寿命に大きく関与しているのは臨床上周知の事実であるが、歯髄の炎症時における細胞機能的な特徴については不明な点が多く残されている。申請者は歯髄炎の病態の確立、新薬開発、既存の薬品の応用を目的として、ヒト歯髄細胞を用いてplasma kallikrein(KLKB1)が細胞膜に存在するprotease activated receptor-1(PAR-1)を活性化させ、細胞内カルシウムイオン濃度[Ca2+]iを上昇させ、PGE2の産生を促進することを解明した。KLKB1によるPAR-1活性化におけるIL-1βやTNF-α産生、そしてCOX-2産生によるPGE2合成促進は炎症を引き起こす一方で、歯髄では修復象牙質の形成に関与する可能性がある。本研究では、KLKB1によるCOX-2発現において報告済みのplasminと比較しながら産生機序を明らかにしていく。calcineurin(CN)で前処理したヒト歯髄培養細胞にKLKB1を添加することでCOX-2の発現がどのように変化するか遺伝子レベル(RT-PCR法、リアルタイムRT-PCR法)、タンパクレベル(Western blot法)にて確認した。結果として、KLKB1はPAR-1を介してCOX-2、PGE2を産生することで歯髄炎を増悪させる可能性があり、またその細胞内シグナル伝達経路においてCNが関与することが示唆された。今後の展望として, CNは活性化することで転写因子であるNF-ATcの脱リン酸化することで核内転写因子を形成することが報告されているため, KLKB1刺激時においても同様の経路を辿り炎症性サイトカイン遺伝子のプリモーター領域を活性化させるのかを検討していく予定であるKLKB1によるCOX-2発現において報告済みのplasminと比較しながら産生機序を明らかにしていく。CNで前処理したヒト歯髄培養細胞にKLKB1を添加することでCOX-2の発現がどのように変化するか遺伝子レベル、タンパクレベルにて確認した。しかし、KLKB1刺激時のNFATの脱リン酸化の同行確認として核タンパク質の抽出キットNE-PER Nuclear and Cytoplasmin Extraction reagents(Thermo Scientific, Massachusetts, USA)を用いて核内と核外のタンパク質量を比較する予定についてはまだ結果がでておらず、実験は遅れている。

以上の結果からKLKB1は基質を分解しkininを産生させるだけでなく、PAR-1を介してCOX-2遺伝子発現量、タンパク質量、PGE2産生を促進することにより、歯髄炎を進行させる因子の1つではないかということが示唆された。またplasminはPAR-1を介してCOX-2、PGE2を産生することで歯髄炎の進行に関与する可能性があり、またその細胞内シグナル伝達経路においてCN/NFATc1経路が関与することが示唆された。言語の研究の推進方向としては、KLKB1によるPAR-1活性化におけるIL-1βやTNF-α産生、そしてCOX-2産生によるPGE2合成促進は炎症を引き起こす一方で、歯髄では修復象牙質の形成に関与についての研究と、前年度にて実験予定であったKLKB1刺激時のNFATの脱リン酸化の同行確認として、核内と核外のタンパク質量を比較していく予定である。
大型コンピュータ用多層セラミックス基板の精密鏡面研削技術の開発

大型コンピュータシステムの高速化を実現するためには,LSI素子の高密度実装が必要不可欠である.そのために,マルチチップパッケージ用の実装基板として,新しい多層セラミックス基板が開発され,注目に集まられている.その多層セラミックス基板を大型コンピュータシステムに実装するために,その取り付け部の基板表面の精密鏡面研削が要求されている.ところが,複合材である多層セラミックス基板の配線用スルーホールの軟質貴金属の導体部と,セラミックスとしてのマトリックスとの材料特性および切削機構が全然異なるため,通常のダイヤモンドホイールを使って研削すると,ホイールの摩耗が不均一で,その基板表面の精密鏡面研削が非常に困難である.また,通常のダイヤモンドホイールを用いる多層セラミックス基板の研削では,配線スルーホール導体部の軟質貴金属によるホイールの目づまりを起こし易く,研削熱の発生が多い問題も抱えている.そこで,本研究では新しいベルト研削方式として,CBNエンドレスベルトと外径拡張式コンタクトホイールを用いたスローアウェイ型CBNホイールを開発し,さらに工作物に低周波振動を付加することによって,多層セラミックス基板の精密鏡面研削におけるホイールの目づまりと研削熱の発生,ホイールの摩耗の不均一及び加工精度などの問題を解決した.さらに,♯800ダイヤモンドベルトによるスローアウェイ型ホイールを用いて,切込量△=0.1mm/Passの高能率の加工条件で,面粗さがRa0.02μmで面性状が良好な鏡面が得られた.それで,本研究の成果として大型コンピュータ用多層セラミックス基板の精密鏡面研削に成功した.大型コンピュータシステムの高速化を実現するためには,LSI素子の高密度実装が必要不可欠である.そのために,マルチチップパッケージ用の実装基板として,新しい多層セラミックス基板が開発され,注目に集まられている.その多層セラミックス基板を大型コンピュータシステムに実装するために,その取り付け部の基板表面の精密鏡面研削が要求されている.ところが,複合材である多層セラミックス基板の配線用スルーホールの軟質貴金属の導体部と,セラミックスとしてのマトリックスとの材料特性および切削機構が全然異なるため,通常のダイヤモンドホイールを使って研削すると,ホイールの摩耗が不均一で,その基板表面の精密鏡面研削が非常に困難である.また,通常のダイヤモンドホイールを用いる多層セラミックス基板の研削では,配線スルーホール導体部の軟質貴金属によるホイールの目づまりを起こし易く,研削熱の発生が多い問題も抱えている.そこで,本研究では新しいベルト研削方式として,CBNエンドレスベルトと外径拡張式コンタクトホイールを用いたスローアウェイ型CBNホイールを開発し,さらに工作物に低周波振動を付加することによって,多層セラミックス基板の精密鏡面研削におけるホイールの目づまりと研削熱の発生,ホイールの摩耗の不均一及び加工精度などの問題を解決した.さらに,♯800ダイヤモンドベルトによるスローアウェイ型ホイールを用いて,切込量△=0.1mm/Passの高能率の加工条件で,面粗さがRa0.02μmで面性状が良好な鏡面が得られた.それで,本研究の成果として大型コンピュータ用多層セラミックス基板の精密鏡面研削に成功した.