hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
災害復興過程の地域的特質と住民意識―オーラル・ヒストリーの実践的活用―

本研究の目的は、危機的状況におかれた地域が過去や現状をどのように受け止め、何を回復しようとするのか、どのような暮らしを望ましいものとして創造しようとするのか、地元の論理に基づいて掬い上げていくことであった。玄界島(福岡県)の調査では、収集した語りと、被災以前の生活を知る手がかりとなる住民の日記の内容とを重ねて、早期復興および復興後の生活を支える基盤となった要素を生活全体の中で把握した。同時に、状況を肯定的に捉えようとする語りや他地域の災害被災者への共感も確認できた。三宅島(東京都)では、全島避難時における島民の集落を越えた交流や、帰島後の小中学校の統廃合による子ども同士の新たな交流が感情的紐帯に変化を生じさせていた。それが被災体験の語り方に影響していることが考えられた。東日本大震災の被災地である女川町(宮城県)は復興途上であるが、悲しみと絶望の中から生活再建へ向かおうとする語りや実践が生まれている。また、中越地震の被災地である新潟県の長岡市と小千谷市のイベントや施設も視野に入れ、被災体験伝承のための展示の有効性や語りに表出される記憶による連帯感についても確認した。さらに比較文化的視点から、異なる社会的・文化的背景を有し、津波による被災を経験したスリランカにおける復興過程も取り上げた。住民の語りを軸に日本の状況と比較することで、出来事の民族誌でも論じられる災害の記憶やその伝承方式の比較文化的研究が可能になった。年度の後半は、論文等の成果公開に向けて、事前に地域の方による内容の確認、許諾のやりとりをしながら準備を進め、成果の一部を公開することができた。文化人類学・民俗学2年目の研究目的は、「インタビューの継続」と「その文字起こしと内容確認」であった。オーラル・ヒストリーの蓄積をするなかで、語りの傾向を捉える(トピック毎の分類、整理)ことを目的しており、これらについては継続中であるが、おおむね順調に進展している。ただし、宮城県の女川町の調査に関しては、事前調整に時間を要し、4月から複数回にわけて実施することになっている。調査にあたっての地元の方との調整は終了した。なお、このような現地における聞き取り調査の場合、地域ごとに重点を置くポイントを多少変更する必要が生じているが、研究の目的自体に大きな変更はない。現地での聞き取りのなかでオーラル・データ以外の予期しない資料が見つかることもあった。玄界島では住民の約20年にわたる詳細な日記の存在が明らかになった。既に博物館に寄贈されており未公開のため、博物館で日記の内容確認を進めている。これにより、被災前の生活を把握しやすくなることが考えられる。玄界島に関しては記録資料がきわめて少なく、このような文字資料が残っていたことで、島の生活の変遷を知るうえでは大いに参考になった。三宅島と島原市はこれまでメディア等での注目度が高く、災害関係の記録資料は多い。それらの資料を精査しながら収集した。前年度の調査データとあわせて、資料全体の内容検討と整理、分析に重点を置いた。なお、宮城県の石巻や女川の調査のための準備をすすめるなかで、地元の若者たちのアートを介した復興活動が積極的に展開され始めたことが明らかになった。衣食住という生活基盤の整備に加え、被災者自らの表現活動は、海外におけるアートを介した地域再生活動と多くの類似点が見いだされる。このような活動が広く展開されているサンパウロ(ブラジル)での調査も実施した。これらの成果の一部を学会発表等で外部にむけて公開することもできた。
小児の上気道閉塞性と術後夜間呼吸状態に関する研究

本研究の目的は、特に1歳以下の小児において、術後夜間の上気道閉塞による低酸素血症の頻度・重要性や検討や、成人と比較してその上気道閉塞の特殊性を検討することであった。残念ながら、術後夜間の低酸素血症に関する研究は、小児の睡眠中の体動の多さとそれに伴うパルスオキシメーターの測定値の信頼性低下により十分な研究を遂行することができなかった。しかし、小児における術後夜間呼吸障害の研究の重要性を示唆させる貴重な症例を経験し、これを報告した。今後、モニター測定精度・安定性の向上がこのような研究には必須であると実感した。気道閉塞性に関する研究は、特に新生児期に咽頭閉塞性が高いことや、うつ伏せ寝により咽頭閉塞性が増加することなど、科学的にも臨床医学的にも非常に有意義な研究成果をあげることができた。術後上気道閉塞のリスクは、新生児・うつ伏せ寝による管理により増加するものと考えられる。うつ伏せ寝は、現在Sudden Death Infant Syndromeの危険因子とされているが、なぜ、うつ伏せ寝でSIDSが発生しやすいのか、その機序は不明である。今回の研究結果は、うつ伏せ寝による咽頭閉塞性の増加による上気道閉塞がその病態に関与することを示唆するものである。今回の研究は全身麻酔下筋弛緩状態という非常に特殊な状況での研究であったが、実際には生体は上気道筋活動により上気道を維持する神経学的調整系が発達していることが知られている。我々のデータを他の異なった研究系でのデータと比較すると、新生児は特にこの神経学的調節系が発達していることが示唆される。このことは、逆に新生児期の睡眠時無呼吸症やSIDSの発症に、この神経学的調節系の障害も関与することを示すもので、今後この方面からの研究も重要であると考えられる。成人で術後のsleep studyを行った以前の我々の研究では、術後夜間睡眠時の低酸素血症は、術前より存在する睡眠時呼吸障害の程度に大きく依存し、特に術前の睡眠時無呼吸症合併の有無を検索することが重要であることが指摘された.今回の研究では、対象を0-10才の小児として、検討した。最終的な結論ではないが、1才以下の新生児・乳児では、それ以上の年齢相と比較して異なる結果が得られている。研究対象の中には、小児期の閉塞性睡眠時無呼吸の原因となる高度のアデノイド増殖症や扁桃肥大の患者が含まれないため、2才以上の小児の夜間呼吸状態は臨床的に問題となる低酸素血症を来すことはなかった。これは、全身麻酔下咽頭内視鏡検査で得られたこれらの患者の咽頭閉塞圧が低いことと良く一致していた。これに対し、1才以下の患者では、術当日に無呼吸を伴う低酸素血症を来すこともまれではなかった。また、これらの患者の咽頭閉塞圧は、それ以上の年齢層の小児に比較して有意に高く上気道閉塞が術後睡眠時の低酸素血症に強く関与することが示唆されている。今後症例数を増やすと伴に睡眠時の体位とも関連づけて研究を進める。1才以下の新生児において、全身麻酔下筋弛緩状態で咽頭の閉塞性を調べた。その結果、2-3ヶ月の新生児では、咽頭の閉塞性圧は、-1から-2cmH2Oと大気圧以下ではあるがやや高く、その閉塞部位は軟口蓋レベルであった。年長の新生児になるに従い、咽頭の閉塞庄は低下し、1才時には-10cmH2O近くにまで低下していた。咽頭壁のコンプライアンスも同様で、年齢が進むにつれて低下した。このように、咽頭の閉塞性は、生後一年以内に急速に低下し、睡眠時あるいは全身麻酔時にも上気道閉塞が起こりにくくなる事が判明した。

夜間のオキシメトリーの結果も咽頭閉塞性とまったく同じで、年齢が進むに従い低酸素の頻度が低下した。以上のように、これまでの研究結果から、1才以後は上気道閉塞性は決して高くないが、一才以下特に2-3ヶ月以内は上気道閉塞の可能性も高いので注意を要すると考えられた。平成12年度は、当初の計画通り、この咽頭閉塞性が体位や首の位置によりどのように影響を受けるかを検討する。本研究の目的は、特に1歳以下の小児において、術後夜間の上気道閉塞による低酸素血症の頻度・重要性の検討や、成人と比較してその上気道閉塞の特殊性を検討することであった。残念ながら、術後夜間の低酸素血症に関する研究は、小児の睡眠中の体動の多さとそれに伴うパルスオキシメーターの測定値の信頼性低下により十分な研究を遂行することができなかった。しかし、小児における術後夜間呼吸障害の研究の重要性を示唆させる貴重な症例を経験し、これを報告した。今後、モニターの測定精度・安定性の向上がこのような研究には必須であると実感した。気道閉塞性に関する研究は、特に新生児期に咽頭閉塞性が高いことや、うつ伏せ寝により咽頭閉塞性が増加することなど、科学的にも臨床医学的にも非常に有意義な研究成果をあげることができた。術後上気道閉塞のリスクは、新生児・うつ伏せ寝による管理により増加するものと考えられる。うつ伏せ寝は、現在Sudden Death Infant Syndromeの危険因子とされているが、なぜ、うつ伏せ寝でSIDSが発生しやすいのか、その機序は不明である。今回の研究結果は、うつ伏せ寝による咽頭閉塞性の増加による上気道閉塞がその病態に関与することを示唆するものである。今回の研究は全身麻酔下筋弛緩状態という非常に特殊な状況での研究であったが、実際には生体は上気道筋活動により上気道を維持する神経学的調節系が発達していることが知られている。我々のデータを他の異なった研究系でのデータと比較すると、新生児は特にこの神経学的調節系が発達していることが示唆される。このことは、逆に新生児期の睡眠時無呼吸症やSIDSの発症に、この神経学的調節系の障害も関与することを示すもので、今後この方面からの研究も重要であると考えられる。
ヒト胚性幹細胞から造血幹細胞移植治療のための造血幹細胞への分化誘導法の開発

我々は、ヒト胚性幹細胞(ES細胞)から分化誘導された造血幹細胞の臨床応用をめざして、動物細胞、動物血清に依存しない分化誘導法の確立を試みた。そこでまず、ヒトES細胞をゼラチンコートプレートに播種し、5%ヒトplatelet lysate、または血清を含む培養液で培養することにより、ストローマ細胞を分化誘導した。このヒトES細胞由来ストローマ細胞とヒトES細胞を無血清の条件下で2週間共培養することにより、動物細胞、動物血清非依存的に多能性造血細胞を分化誘導することに成功した。1.ヒト胚性幹細胞(ES細胞)から多能性造血細胞への分化誘導法の確立胎生1415日のマウス胎仔肝からストローマ細胞を培養し、ヒトES細胞と樹立されたストローマ細胞との共培養を試みた。この共培養系においては、培養23日間は、ヒトES細胞は未分化な形態を維持しつつ増殖を続けたが、培養35日目頃より分化を開始した。培養1112日目頃には、cobble stone area(CSA)が出現し、その数は次第に増加した。CSA数が最大となる培養14日頃に、共培養されたヒトES細胞を、エリスロポエチン、トロンボポエチン、interleukin(IL)-3、IL-6、SCF(stem cell factor)、G-CSF(granulocyte colony-stimulating factor)存在下で、コロニー培養すると、赤血球、顆粒球、マクロファージ等、様々な血液細胞を含む血液細胞コロニーが形成された。この結果は、マウス胎仔肝由来ストローマ細胞を用いた共培養系により、ヒトES細胞から多能性造血細胞が分化誘導されたことを示している。2.ヒトES細胞由来ストローマ細胞の分化誘導動物由来血清及び細胞に依存しないヒトES細胞から多能性造血細胞への分化誘導法を確立するために,マウス胎仔肝由来ストローマ細胞の代替物として、ヒトES細胞自身から、動物血清非依存的に、造血支持能を有するストローマ細胞への分化誘導することを試みた。ウシ胎仔血清も代替物としては、ヒト血清、ヒト血漿、ヒトplatelet lysateなどを用いて検討した。1)ヒト胚性幹細胞(ES細胞)からストローマ細胞への動物血清および細胞非依存的分化誘導方の開発マウス胎仔組織由来ストローマ細胞に依存しないヒトES細胞から造血/血液細胞への分化誘導法を確立するために、マウス胎仔組織由来ストローマ細胞の代替細胞として、ヒトES細胞からのストローマ細胞を樹立することを試みた。マウス繊維芽細胞(MEF)との共培養により維持されたヒトES細胞コロニーをピックアップし、MEFをコートしていないゼラチンコートプレートで1コロニーずつ再培養した。以後、platelet lysate(PL)を5%vol含む培養液(PL培養液)を用いて継代培養した。PL培養液の交換は週2回行い、7-14日間隔で継代した。その結果、ヒトES細胞からadherentなストローマ様細胞が生成された。数代継代後には、MEF由来のマウス細胞や未分化なヒトES細胞は、PCRレベルでも認められなくなった。フローサイトメトリーによる表面抗原の解析では、CD105,CD166陽性、CD45,CD34,CD14陰性であったことより、これらのストローマ細胞は間葉系幹細胞であると考えられ、骨、軟骨、脂肪細胞などの間葉系細胞への分化能力を有することも確認された。2)ヒトES細胞由来ストローマ細胞を用いたヒト造血/血液細胞の分化誘導上記の方法でヒトES細胞から分化誘導されたストローマ細胞との共培養により、未分化なヒトES細胞から造血/血液細胞への分化誘導を試みた。ヒト胚性幹細胞(ES細胞)から分化誘導された多能性造血幹細胞の臨床応用のためには、異種動物由来血清やストローマ細胞に非依存的な分化誘導法の確立が必須と考えられる。そこで本年度は、昨年度の本研究で確立したヒトplatelet lysate (PL)を用いた方法で、ヒトES細胞から動物血清に非依存的に分化誘導されたストローマ細胞をヒトES細胞と共培養することによって、多能性造血細胞を分化誘導することを試みた。【方法】ヒトES細胞を、PLを5%vol含む培養液を用いて、ゼラチンコートプレートで培養することによりストローマ細胞を分化誘導した。そのヒトES細胞由来ストローマ細胞を放射線処理した後、種々のサイトカインを含む動物血清非依存的血液細胞誘導培地で、ヒトES細胞を共培養し、血液細胞への分化誘導を試みた。【結果】分化誘導後10-14日目にヒトES細胞コロニー中に敷石状細胞群が確認され、その後小型円形細胞の増殖が認められた。それらの細胞をヒト血清を含む培養条件でコロニーアッセイを施行すると、多能性造血細胞由来の混合コロニーを含む種々の血液細胞コロニーが形成された。

これらの血液細胞コロニー中の赤血球系細胞の約80%は、αグロビン及びβグロビンが発現しており、これらの赤血球は成人型ヘモグロビンを合成していると考えられた。【結論】動物由来血清やストローマ細胞非存在下で、ヒトES細胞から分化誘導されたストローマ細胞との共培養により、ヒトES細胞から多能性造血細胞が分化誘導できた。我々が確立したヒトES細胞から血液細胞への動物血清・細胞非依存的分化誘導法は、ヒトES細胞由来血液細胞の臨床応用に有用と考えられた。
高齢うつ病の病態生理の解明(EEG/ERP)の双極子解析とMRIによる統括的研究

脳波の側頭部徐波をbiomarkerとして高齢うつ病の病態解明を目指した。双極子追跡法により健常者・うつ病者ともに側頭葉内側面にこの徐波の信号源が推定された。側頭部徐波を有する群では、脳形態学的に差はみられないものの海馬に信号源があるP3の潜時延長がみられ、この徐波は側頭葉内側面の機能不全を示唆すると考えられた。さらに側頭部徐波を有する健常者とうつ病者の脳形態学的差異(左海馬の萎縮)は興味深い。側頭部徐波を有する高齢うつ病は海馬の機能低下に加えて委縮がその発症に関与するのかもしれない。高齢うつ病においては脳器質的要因が大きく関与するということは周知のことであり、MRI所見をもとにVascular Depressionという疾患概念も提唱されている。本研究では、まだ十分に解明されていない高齢うつ病の病態生理について脳波/事象関連電位とMRIを組み合わせて包括的解析を試みる。これまで我々の教室では、脳波における側頭部徐波が微細な脳血管障害を示唆する所見であることを明らかにするとともに高齢うつ病においてその出現頻度が高く、さらに所謂EEG-defined Vascular Depressionとしてその臨床的特徴を報告してきた。本年度はまず、60歳以上の健常者を対象に双極子追跡法を用いて側頭部徐波の脳内信号源推定を行い、一部の症例においては被験者自身のMRI上に推定された信号源をplotした。側頭部徐波の信号源が側頭葉内側面(海馬や海馬傍回付近)に存在することが明らかとなり、新たな3次元の精神生理学的指標を確立した。認知機能バッテリーとして聴覚事象関連電位のひとつであるP300の測定およびSPMによる統計学的画像解析に向けたMRI撮像については予備的実験に続いてdata収集を開始した。平成21年度以降もdata収集を継続し、統計学的解析を行い、新たな3次元の指標の臨床的意義を深める。さらに健常者で得られた解析結果を基盤とし、高齢うつ病の病態について新たな指標を用いて治療反応性も含めた多角的な解析を目指す。我々の教室では、高齢者にみられる側頭部徐波が微小脳梗塞のような微細な脳血管性障害と関連がある(Inui et al., 1994; Inui et al., 2001)、高齢うつ病においてその出現頻度は高く、この脳波所見を有するうつ病の臨床的特徴(Motomura et al., 2002)について報告してきた。更に双極子追跡法を用いて、この側頭部徐波の信号源が側頭葉内側面(海馬や海馬傍回)にみられることを明らかにした。高齢うつ病には器質的要因が大きく関与することは周知のことであり、本研究の目的は、脳波/事象関連電位とMRIを組み合わせ、これまで報告してきた側頭部徐波を指標として高齢うつ病の病態について包括的解析を試みることであり、1)側頭部徐波の神経生理学的意義の解明;2)その指標を用いた高齢うつ病の病態解明の2本柱で研究を進めている。平成21年度は21名の健常者を対象として3テスラMRI装置により撮像を行い、得られたT1強調画像から3次元データを再構成した。側頭部徐波の有無によって2群に分け、SPM2によるvoxel based morphology法を用いた脳形態画像解析を行った。この側頭部徐波の信号源である側頭葉内側面の灰白質において両群に差はみられなかった。側頭部徐波は海馬や海馬傍回のatrophyなどの解剖学的変化を伴わない機能変化を示唆するという可能性が考えられる。まだ少数例での検討のため、引き続きdata収集および解析を行う。更に、この徐波の信号源が海馬付近にみられるということから認知機能バッテリーとして聴覚事象関連電位のP300についてもdata収集を開始した。最終年度には統計学的画像解析と事象関連電位の所見を組み合わせ、側頭部徐波の3次元精神生理学的所見として確立し、さらに健常者とうつ病患者との比較を行い、高齢うつ病の病態解明を目指す。高齢うつ病はその他の年代にみられるうつ病とは異なり、なんらかの脳器質的要因が関与する可能性は周知のことである。我々は高齢者にみられる側頭部徐波が単なる加齢による変化ではなく、なんらかの脳血管性障害と関連することを報告した(Inui et al.,1994;Inui et al.,1998,Inui et al.,2001)。さらにこの脳波異常と高齢うつ病者の検討を行い、この脳波所見を精神生理学的指標として高齢うつ病のある一群を抽出できないかと考えている(Motomura et al.,2002;Motomura et al.,2003)。

精神生理学的指標としての意義を確立するために、聴覚事象関連電位のひとつであるP300、脳構造学的検討として3T MRI装置によって撮像を行い、得られたdataをSPM2によるvoxel based morphometry(VBM)法を用い、健常者を対象としてこの脳波所見の有無によって2群に分類して検討を行った。健常者における脳波所見の有無において統計画像解析上は差がみられないものの、この側頭部徐波を有する健常者においてP3の潜時に延長がみられた。P3の信号源は側頭部徐波のそれと同じく側頭葉内側面(海馬)と考えられており、側頭部徐波はおそらく海馬の機能異常を示唆するものと考えられた。少数例ではあるが、この徐波を有する健常者と高齢うつ病者の差異を検討したところ、高齢うつ病者群において海馬灰白質体積の減少がみられた。側頭部徐波を有する高齢うつ病は海馬の機能低下に加えて海馬委縮を伴う器質的要因の強い一群である可能性が示唆された。今後更に症例数を増やし、この仮説について引き続き検討を行う予定である。
植物における生殖障害、アポミクシスの細胞分子遺伝学的アプローチ

細胞学的展開:一昨年、昨年の両年に引続バヒアグラスとギニアグラスを材料に用いて、ノマルスキー微分干渉顕微鏡による胚のう分析を実施し、アポミクシス率の推定を各系統毎に求めた。一方各系統の組織を培養し、不定胚形成能の系統別差異を見出した。また、アルファルファーおよびイネの不定胚形成に関わる遺伝子プローブを利用して、接合胚の各発育段階のmRNAレベルのin situ bybridizationを実施した。しかし、なお技術的改善が得られる、明確な差異を見出すまでに至っていないのが現状である。分子遺伝学的展開:ギニアグラスの条件的アポスポリー形成過程を発育ステージで定め、簡易DD法によって候補となるDNAを単離・クローニングし、ノーザンハイブリダイゼーションで確認し得た。他の当該遺伝子とのホモロジー検索を行ったが、類似性は望め得たものの、同一遺伝子だと判定するまでには至っていない細胞学的展開:一昨年、昨年の両年に引続バヒアグラスとギニアグラスを材料に用いて、ノマルスキー微分干渉顕微鏡による胚のう分析を実施し、アポミクシス率の推定を各系統毎に求めた。他の当該遺伝子とのホモロジー検索を行ったが、類似性は望め得たものの、同一遺伝子だと判定するまでには至っていない1.細胞学的展開:条件的アポミクトであるバヒアグラス(Paspalum notatum)とギニアグラス(Panicum maximum)を用いて、ノマルスキー微分干渉顕微鏡による胚嚢分析を行い、アポミクシス率の推定を行った。一方、各系統の組織培養によって不定胚形成成能の系統監査を調査した。これらの結果は、これまで当育種学研究室で行われた結果とほぼ同一傾向を示した。手許にあるアルファルファーおよびイネの不定胚形成に関する遺伝子のプローブを用いて、接合胚の各発育段階の組織のmRNAレベルのin situ hybridizationを試みた。今までの所技術的改善を加えつつある状態である。2.分子遺伝学的展開:上記細胞学的データに基き、アポミクシス性植物の発育ステージと組織培養による胚発生のステージからRNAを抽出し、RT-PCP法による、簡易DD法でそれぞれのステージに特異的に発現するcDNA断片とのノーザンハイブリダイゼーションで確認した。また、イネ、アルファルファー由来の不定胚形成に関する遺伝子を用いてギニアグラスのアポミクシス性を異にする8遺伝子型とのサザーンハイブリダイゼーションを実施した。遺伝子型間に多型を見いだすことの出来るプローブもあったが、現時点では不定胚形成能とアポミクシス程度とのポジティヴな関係を示唆するバンドを見いだすまでには至っていない。1.細胞学的展開:昨年度に引き続きバヒアグラスとギニアグラスを材料にノマルスキー微分干渉顕微鏡による胚のう分析を用い、アポミクシス率の推定を行った。一方、各系統の組織培養によって不定胚形成能の系統観察を調査した。その結果、これまでの当研究室のデータをより証差することが判明した。また、アルファルファーおよびイネの不定胚形成に関する遺伝子プローブを用いて、接合子胚の各発育段階のmRNAでのin situ hybridizationを試みた。しかし、昨年同様技術的改善を要する必要性があり、明確な結果を得ていない。2.分子遺伝学的展開:ギニアグラスのアポスポリー形成過程を発育ステージで分け、簡易DD法によって候補となるcDNAを単離・クローニングし、ノーザンハイブリダイゼーションでも確認した。一方、組織培養による不定胚発生・非発生のサンプルからRNAを抽出し、同様に簡易DA法を用いたcDNA断片をもとに、遺伝子型間に多型を見だすものもあった。イネ、アルファルファー由来の不定胚形成に関する遺伝子プローブとのホモロジーテストも実施したが今のところ明確な違いを見出すまでには至っていない。細胞学的展開:引続きバヒアグラスとギニアグラスを材料としてノマルスキー微分干渉顕微鏡による胚のう分析を行ない、アポミクシス率の推定値を求めた。一方では、各系統の組織を培養することによって不定胚形成能の系統別差異を見出した。さらにアルファルファーおよびイネの不定胚形成に関わる遺伝子プローブを利用して接合胚の各発育段階のmRNAレベルのin situ hybridizationを実施した。しかしなお技術的改善が得られず明確な差異を得るまでには至らなかった。分子遺伝学的展開:ギニアグラスのアポスポリー形成過程を発育ステージで分け、簡易DD法で候補となるcDNAを単離・クローニングし、ノーザンハイブリダイゼーションで確認し得た。他の当該遺伝子とのホモロジー検索を行ったが類似性を認めるまでには至らなかった。
癌治療における薬剤の適正選択と増幅効果に関する研究

1.癌化学療法において、作用増強を期待して、抗癌剤併用療法を使用するためには、細胞内活性化物質を含めた薬剤の細胞内動態と、細胞内核酸代謝との相互関係を考慮することが必要である。3.MTX-AraC、5FU併用療法において、MTX先行投与により細胞内ara-CTP、5Fluoro-UTPレベルを高めた。これらの作用はMTXによりpurine de novo合成経路が抑制され、細胞内PRPPレベルが増大したこと、ならびにMTX投与により細胞内dCTPが減少し、dCTP/araCTP比が上昇したことによるものであった。4.6MP投与後の細胞内active metabolitesではThio-IMPのみであったが、6TG投与後の細胞内active metabolitesではThio-GMP以外にThio-GDP、Thio-GTPが認められた。rNTP poolについては6TG、6MPいずれも同じ傾向を示したが、dNTP poolsについては異なっていた。6.プロテインキナーゼC、ホルボールエステルがVCR、ADRなどの多剤耐性化機序に関与していることを証明した。また、ホルボールエステルがglucocorticosteroidoによる細胞増殖抑制に一部関与していることも証明した。(1)標識した抗癌剤を用いてL1210およびP388マウス白血病細胞の膜輸送を検討した。河井、井戸らは、ビンクリスチン、アドリアマイシン耐性細胞では標識した抗癌剤のeffluxが増大していることを証明し、さらに、この耐性化機序に対しては、【Ca^#】拮抗剤が有効であることを確認し、発表した。(2)ara-C,5FUの細胞内活性化産物であるara-CTP,F-UTPを他の細胞内核酸プールと共に、高速液体クロマトグラフィ法により同時分析が、新しく購入した多波長検出器を用いることによって、可能となった。この方法を用いて佐藤,櫻井らは、MTX-ara C,MTX+5FU併用療法後の細胞内核酸代謝に及ぼす影響を検討したところL/2/0細胞ではMTXをいずれも、3-6時間先行投与することにより、これら細胞内活性化産物であるara-CTP,F-UTPの産生増加を認めた。(3)MTX投与後のara-CTP増加のメカニズムについては、MTX投与によるdTTPの減少の結果起こったものではなくむしろ、MTX投与によるプリンde novo合成経路の阻害による細胞内ATP,GTPプールの減少がCTPsynthetase,CDP reductaseを抑制したためと考えられた。(4)MTX+5FU併用療法においては、MTX投与によるプリンde novo合成経路の阻害による細胞内PRPPプールの増加が、MTX投与後のF-UTP増加のメカニズムと考えられるが、5FU単独投与と較べてMTXを併用しても細胞内dTTP濃度は、特に有意差は認めなかった。(5)これらの結果からara-C,5FUにMTXを併用することによりみられたこれらの細胞内代謝産物の産生増加がMTX-araC,MTX+5FU併用療法における作用増強のメカニズムであることを見いだした。(1)MTX-5FU併用療法ではMTXを先行投与した時のみ抗腫瘍効果が増強され、これはMTX投与後のPRPPレベル上昇により5FUのリン酸化が促進されるためであることを発表したが、この併用療法は臨床的にも5FU単独投与より高い有効率を示す一方で、下痢などの副作用も多くロイコボリン投与の是非が問題となっている。本研究ではMTX-5FU併用療法にロイコボリンを後投与した時のFUTP,dTTP,ATP,GTPプールの変化を検討したが、ロイコボリン投与により、ATP,GTPプールの減少は回復したが、FUTP,dTTPプールはロイコボリン投与の影響をうけず、ロイコボリンは抗腫瘍効果を弱めることなく副作用の軽減に役立つものと考えられた。(3)Li2i0マウス白血病細胞でara-C耐性細胞を樹立し、耐性化機序を検討した。耐性株ではara-C感受性が約1/1000に低下しており、ara-CTP産性能は約1/100に低下していた。感受性株ではCytidine deaminase blackerであるTetra hychouridineの添加により殺細胞効果の増強と細胞内ara-CTPレベルの増加を認めたが、耐性株では殺細胞効果、ara-CTPともにTetrahycho uridineの影響を受けなかった。

またこの耐性株のdCTPプールは感受性株の62%に減少していた。これらのことからこの耐性株の耐性化機序はdeoxy cytine kinaseの活性低下であると考えられた。またこの耐性株は3deaza uridineに対し親株以上の感受性を示し、ara-C耐性症例への3DAVの有効性が示唆された。1.P388マウス白血病細胞を用いて, Etoposide(VPー16)耐性細胞を樹立した.この耐性細胞は,ビンクリスチン,アドリアマイシン等についても友差耐性を示した.これらの細胞の耐性メカニズムにおいて, Ca^<2+>リン脂質依存性プロティンキナーゼCの役割を検討するために,細胞の特異的ホルボールエスチルレセプターを調べた. VPー16耐性細胞では,ホルボールエステルレセプター数は,正常の52.6%にまで減少していることを証明し,これらホルボールエスチルレセプター,プロティンキナーゼCが薬剤の多剤耐性に関係していることを証明した.2.高速液体クロマトグラフィに,多波長検出器をつけることにより,チオプリン系抗腫瘍剤の細胞内活性化物質を同定し,これらの活性化物質が, 6ーメリカプトプリン, 6ーチオグアニンでは異なっていることを証明し,核酸代謝に対しても, 6ーチオグアニンがdcTPプールを減少させるのに対して, 6ーメルカプトプリンでは,デオキシ3リン酸プールは全体に増加傾向であることを確認した.したがって, 6ーチオグアニンは主として, DNAに対して作用し6ーメルカプトプリンでは,チオIMPを介してプリン新生経路を抑制し, RNA合成を,主として抑性すると考えられた.1.初発時、あるいは、再発時の急性骨髄性白血病患者(AML)および急性リンパ性白血病患者(ALL)の末梢白血病細胞を採取して細胞内ara-CTP産生能を測定してみると、寛解導入療法にara-Cを用いるAML例では初発時に較べて再発時では有意にara-CTP産生能は低下していた。こういう症例に対しては、むやみにara-C投与量を上げずに細胞内dCTPレベルを下げるMTX-ara-C併用療法が有効と考えられる症例を経験した。これらの症例が、他の多くの薬剤に抵抗性であったことを考えるとMTX-ara-C併用療法が有効であったと考えられた。したがって臨床的にara-C耐性となっても核酸代謝プールを分析してMTXのbiochemical modulationを利用することによって耐性を克服できると考えられた。3.L1210マウス白血病細胞を用いた実験においてもVP16-araーC併用療法はMTX-ara-C併用療法と同じくVP16を同時投与よりもsequentialに併用することによって抗腫瘍効果の増加を認めた。4.プロテインキナーゼC、ホスボールエステルがVCR、ADRなどの多剤耐性機序に関与していることを証明した。5.ホスボールエステルがglucocorticosteroidによる細胞増殖抑制に一部関与していることを証明した。
メカノセンサー分子p130Casを介する糖代謝維持機構の解析

目標としたメカノセンサーの骨格筋、血管内皮、及び、骨細胞特異的遺伝子改変マウスの作製が期間内に達成された。これらのマウスはすべて胎生致死とならず成体となることが確認できたため、それら各々のマウスの表現形を10週齢にて確認した。その結果、骨特異的遺伝子改変マウスでは、骨代謝に異変が生じていることが確認された。血管特異的遺伝子改変マウスも同様に血管形成に異常が生じていることが観察された。しかし、その違いは微細な構造にて顕著であるため、本研究ではまずその血管構造の違いを確定する手法の開発も進め、現在表現形の違いを確定しつつある。骨格筋特異的遺伝子改変マウスについては目立った表現形は確認されなかった。(1)メカノセンサー分子の組織・細胞特異的遺伝子改変マウスの、糖脂質代謝と糖脂質代謝を制御する器官・組織、具体的には骨格筋・脂肪組織・肝臓における表現型を解析する。(2)メカノセンサー遺伝子改変マウスの、耐糖能、運動負荷及びインスリンに対する感受性を検討する。(3)メカノセンサー遺伝子改変マウスの筋組織のin vitroでの糖取り込み・インスリン感受性を解析する。(4)メカノセンサー遺伝子改変マウスの筋組織におけるインスリンシグナル・グリコーゲン合成シグナル、及び、グリコーゲン量に対する運動負荷の効果とインスリン感受性を解析する。1年目である平成26年度は骨格筋、血管内皮、骨細胞のそれぞれで特異的にメカノセンサー分子Casの発現を欠失する遺伝子マウスを作製した。血管内皮細胞特異的にCasを欠損するマウス(Cas cKOマウス)を用いて、耐糖能・インスリン抵抗性を評価した。これらのCas cKOマウスに糖代謝異常を呈するものがあることが分かった。そこで、骨格筋、血管内皮、骨細胞におけるCasの発現及びリン酸化を免疫染色にて検討した。研究代表者のグループでは、Casの免疫染色に関してはこれまで培養細胞でのみ行ってきたので、マウス組織におけるCasの染色法の最適化を行った。その結果、骨格筋、血管内皮、骨細胞におけるCasの発現とリン酸化はそれらの組織・器官に加わるメカニカルストレスと関連した傾向・特徴があることが分かった。昨年度は骨格筋、血管内皮、骨細胞のそれぞれで特異的にメカノセンサー分子Casの発現を欠失する遺伝子マウスを作製し、耐糖能・インスリン抵抗性を評価した。そこで、今年度は骨格筋、血管内皮、骨細胞におけるCasの発現及びリン酸化を免疫染色にて検討した。研究代表者のグループでは、Casの免疫染色に関してはこれまで培養細胞でのみ行ってきたので、まず、マウス組織におけるCasの染色法の最適化を行った。その結果、骨細胞におけるCasの発現は荷重負荷の影響を受けることがわかった。骨格筋組織では間質の細胞にCasリン酸化が認められた。われわれのプロジェクトでは、血管内皮特異的と考えてきたCreマウス(Tie2-Creマウス)は血管内皮特異的な遺伝子改変の作製には適さないことがわかった。骨格筋、血管内皮、骨細胞におけるCas cKOマウスの作製を完了し、それらの耐糖能異常に関する一通りの評価を完了した。マウスの骨格筋、血管、骨におけるCasの発現とリン酸化を定量的に評価する手法を最適化した。骨細胞におけるCas cKOマウスの表現型の解析は、その一部を論文として投稿できる段階となっている。以上より現在まで概ね順調に進展していると考えている。メカノバイオロジー1)マウス内皮細胞・血管組織を用いたメカニカルストレス実験マウスから内皮細胞あるいは血管組織を単離・培養し、伸展・シェアストレスなどのメカニカルストレスを加えて、Cas機能の変化を観察する。またインスリンシグナルに関わる分子の発現・活性を、由来するマウス間(血管内皮特異的Cas KOマウスと対照マウス)で比較する。2) Cas機能修飾分子のスクリーニングの条件決め・最適化培養内皮細胞を用いて、メカニカルストレス、サイトカインなどの刺激を加え、Cas機能の変化を検出するスクリーニングに適した条件を検討し最適化する。Casリン酸化によるインスリンシグナル抑制が想定されるが、Casのリン酸化抑制刺激はCasの核内移行を促進するので、現時点では、Casの核局在をスクリーニングのread-outとする計画である。3) Cas機能を修飾する分子の一次スクリーニング上項で決めた条件のもと、東京大学が保有しているゲノムワイド低分子二本鎖RNAと化学化合物のライブラリーを用いて、Cas機能修飾分子の1次スクリーニングを行う。解析には、高い客観性とハイスループット性を兼ね備えた自動イメージアナライザーを用いる。
開胸法によるラット一過性脳虚血モデルを用いたMRSによる脳エネルギー代謝の研究-低温の脳保護効果の評価-

開胸法によるラット一過性脳虚血モデルを用いたMRSによる脳エネルギー代謝の研究-低温の脳保護効果の評価-1)開胸法によるラット全脳虚血モデルの作製:胸骨正中切開し、両側鎖骨下動脈を結紮、そのうえで両側総頚動脈をsnareする方法(開胸法)で可逆性全脳虚血モデルを作製した。2)ラット体温(直腸温)の調節:温度調節ブランケットの上にラットを置くことおよび氷嚢による体表面冷却法にて目標の体温(20°C、37°C)に調節できた。20°CにてもVFとならず血行動態の維持が可能であった。3)各直腸温におけるコントロールおよび脳虚血時のMRS測定:OtsukaElectronicsUSA社製^<31>P-MRSspectrometerを用い、無機リン(Pi)、クレアチニンリン酸(PC)、ATP(α、β、γ)濃度を測定した。各濃度の、虚血前コントロール値からの変化率およびPC/ATP比、PC/Pi比およびPC/Pi比を算出した。遮断時間は30分および60分とし、再潅流後の測定は120分まで行った。4)結果30分虚血:PCは、20°C群では、前値の60%の低下にとどまったのに対し、37°C群では40%まで有意差を持って減少し、虚血解除後の回復にも差を認めた。両者とも虚血解除後120分の時点では、ほぼコントロール値まで復帰した。60分虚血:20°C群ではPC、ATPとも90分後には前値に復帰したが、37°C群では回復しなかった。5)結論:20°Cの超低体温は30分ないし60分の脳虚血に対し、脳エネルギー代謝面からみて脳保護効果を有している。
太平洋島嶼地域における戦争の記憶の複合的比較研究

本研究では、マリアナ諸島におけるアジア・太平洋戦争の記憶をめぐる様々な動きを現地の人々(チャモロやカロリニアン)の視点を軸にしながら、日米を含めた三者関係の分析・考察を目指してきた。具体的には、マリアナ諸島(グアム及びサイパン)におけるLiberation Paradeや戦時中に同島で命を落とした人々への追悼・慰霊の諸行事をフィールドワークすることで、グアム-北マリアナ諸島間における戦争の記憶の表象を比較分析することができた。また、メリーランド州カレッジ・パークにあるNational Archives(Archives II)での資料調査では、マリアナ諸島を含むミクロネシア地域における戦争の記憶の表象を考える上で、重要な要素の一つである米国立公園局のマスタープランの資料等を収集した。これにより、米国がマリアナ諸島でアジア・太平洋戦争の記憶をいかに扱ってきたかという点を分析するきっかけを手にすることができた。本研究の目的を踏まえてみても、非常に参考になりうる資料をレビューできたといえる。これまでのフィールドワーク・資料収集の成果を基にして、2016年5月19日21日までグアムにて開催された第22回Pacific History Association Conferenceにおいて、Entangled war memories in Guam: Aspects of “commemorative" and “memorial" eventsと題する研究報告を行った。さらに、2016年12月には、グアムにおけるアジア・太平洋戦争の「戦跡」についてまとめたものを新井隆「グアムにおける追悼・慰霊の空間ー「想起の場」としての戦跡を考える」渡辺尚志編『アーカイブズの現在・未来・可能性を考えるー歴史研究と歴史教育の現場から』法政大学出版局として、刊行するなどした。28年度が最終年度であるため、記入しない。具体的には、グアムにおけるLiberation Paradeや戦時中に同島で命を落とした人々への追悼・慰霊の諸行事に足を運ぶとともに、北マリアナ諸島サイパンでは、島内に散在する各種戦跡の残存状況を直接確認した。これらのフィールドワークから、各種記念行事の主催者や参加者に注目することで、戦争の記憶を想起するという行為の中で、マリアナ諸島の歴史的背景や日米の植民地的まなざしが浮き彫りになってくることがわかった。また、公立図書館での新聞資料収集を行うことで、マリアナ諸島における記念・追悼・慰霊の諸行事ならびにアジア・太平洋戦争関連の記念碑建立の歴史的変遷を追うことができた。戦争の記憶に関わる諸活動の歴史的変遷を押さえることで、マリアナ諸島におけるアジア・太平洋戦争の位置づけが少しずつ見えてきた。加えて、これらのフィールドワーク・資料収集の成果を基にして、2015年11月21日には近現代史研究会で「グアムにおける追悼・慰霊の空間ー「想起の場」としての戦跡を考える」(於:名古屋大学東山キャンパス)と題した口頭発表を行った。さらに、2016年1月23日にも日本オセアニア学会関西地区例会にて、「グアムにおける戦争の記憶の「もつれ」ー追悼・慰霊と記念・顕彰のはざまで」(於:京都大学吉田南キャンパス)という内容で口頭発表を行った。いずれの発表もグアムにおける戦争の記憶の想起のされ方における「複雑さ」に着目したものであり、グアムと北マリアナ諸島が辿ってきた歴史的背景も視野に入れながら、島内各地に散在している戦跡やそこで行われる追悼・慰霊の諸行事を取り上げている。平成27年度の研究活動においては、グアムと北マリアナ諸島サイパンでのフィールドワーク・資料収集を計3回、国内の学会・研究会における研究発表を計2回行った。前者の活動の中では、当初の狙い通り、マリアナ諸島でのアジア・太平洋戦争に関する記念行事や追悼・慰霊の式典等に参加することで、同諸島における戦争の記憶の表象の一端を明らかにした。さらに、各種記念行事に参加することで、一部の主催者と人的つながりを形成することができ、今後研究活動を円滑に進める上でも、重要な成果となった。また、これまでの研究活動から継続して、マリアナ諸島でのフィールドワークを実施できたことは、グアムのLiberation Paradeなど特定の記念行事を定点的に観察・分析することも可能にした。こうした継続的な視点から、戦争の記憶を想起する活動を見ていくことは、本研究の目的を達成するためにも重要な作業となってくる。以上のことを踏まえれば、同年度の研究活動は、おおむね順調な進捗状況であるということができる。ただ一方で、一部先述したグアムでのフィールドワーク及び資料収集において、島内の移動費が当初想定していたよりも多くかかってしまった。そのため、もう一つの調査先として挙げていたメリーランド州カレッジ・パークにあるNational Archives(Archives II)での資料収集(ミクロネシアにおける戦後補償関連資料)を別の機会に移さざるを得なかった。そうした事情もあり、平成27年度内の米本土における調査をいったん取り止め、代わりに北マリアナ諸島サイパンでの戦跡調査並びに公立図書館での新聞資料収集に切り替えた。

また、メリーランド州カレッジ・パークにあるNational Archives(Archives II)での資料調査では、マリアナ諸島を含むミクロネシア地域における戦争の記憶の表象を考える上で、重要な要素の一つである米国立公園局のマスタープランの資料等を収集した。これにより、米国がマリアナ諸島でアジア・太平洋戦争の記憶をいかに扱ってきたかという点を分析するきっかけを手にすることができた。本研究の目的を踏まえてみても、非常に参考になりうる資料をレビューできたといえる。これまでのフィールドワーク・資料収集の成果を基にして、2016年5月19日21日までグアムにて開催された第22回Pacific History Association Conferenceにおいて、Entangled war memories in Guam: Aspects of “commemorative" and “memorial" eventsと題する研究報告を行った。さらに、2016年12月には、グアムにおけるアジア・太平洋戦争の「戦跡」についてまとめたものを新井隆「グアムにおける追悼・慰霊の空間ー「想起の場」としての戦跡を考える」渡辺尚志編『アーカイブズの現在・未来・可能性を考えるー歴史研究と歴史教育の現場から』法政大学出版局として、刊行するなどした。今後(平成28年度)における研究の推進方策としては、当初計画していたマリアナ諸島での調査活動に加えて、平成27年度中に実施できなかったメリーランド州カレッジ・パークにあるNational Archives(Archives II)での資料収集(ミクロネシアにおける戦後補償関連資料)を行うものとする。さらに引き続き、定点的な視角からマリアナ諸島における戦争の記憶の表象について、分析・考察を進めるとともに、グアム-北マリアナ諸島間での比較を重点的に行う。両者は同じ諸島に属しているものの、それぞれの歴史的背景を辿ってみると、日米を含む大国から植民地支配や戦争により政治的・精神的に「分断」されてきたことがわかる。この分析視角は、本研究の軸を成すものであり、マリアナ諸島における戦争の記憶を掘り起こす際には、避けて通れないものであると言える。すなわち、比較史の視点を用いることで、マリアナ諸島における戦争の記憶の表象をより精緻に分析・考察することを目指す。また、National Archives(Archives II)での資料調査からミクロネシア地域の戦後補償の流れと併せて、戦争の記憶をめぐるアメリカの同地域に対するスタンスについても分析・考察していくものとする。ミクロネシア地域に対する戦後補償政策は、アメリカだけに限らず日本も大いに関わっているため、マリアナ諸島に対する日米の関与の歴史を投影するトピックの一つであると言える。加えて、これらの調査活動で得られた知見を基にして、国内外の学会・研究会で研究成果の発表を行うとともに、学術雑誌などへも論考を積極的に投稿していく。
シナプス小胞のリサイクル機構の解明

本研究課題での2年間(平成18年4月1日-平成20年3月31日)の研究の結果、神経末端におけるシナプス小胞のリサイクルについて、以下の4点が明らかになった。1)。ショウジョウバエ運動神経末端には、2つの異なるエンドサイトシス経路が存在し、二つの経路が協調的に働くことによって、高頻度の長期間のシナプス伝達を維持していること。2)。二つのエンドサイトシス経路は、異なったCa2+チャネルによって制御されており、active-zoneとnon-active zoneで、エンドサイトシスが起こること、active-zoneエンドサイトシスは、straitjacket遺伝子がエンコードするCa2+チャネルが制御していることを同定した。3)。細胞骨格蛋白のうち、神経終末で、アクチンの存在は確認されていたが、チュブリンは、存在しないとされていた。GFP-チュブリンを神経に発現するハエを作成した。その結果、神経末端でもチュブリンが存在し、神経活動に応じて、ダイナミックにその存在が変化し、その変化は、シナプス小胞のエンドサイトシスに関係していることが明らかになった。4)。ショウジョウバエ個体の活動が亢進後、運動神経、筋のシナプスで、信号伝達の増強がおこること、その増強には、二つのステップがあることが明らかにされた。以上の如く、神経末端のシナプス小胞のリサイクルの最初のステップのエンドサイトシスの機構およびシナプス伝達における役割、個体での可塑性の機構がかなり明らかになってきた。1)。2)。3)。4)。本年度(平成18年4月1日-19年3月31日)、神経終末におけるシナプス小胞のリサイクル機構に関して、以下の2点を明らかにした。1)ショウジョウバエ運動神経終末には、二つのエンドサイトシス経路が存在し、二つの経路が協調的に働くことによって、高頻度のシナプス信号伝達を維持している。カルシウム拮抗薬、PLTXIIとLa3+は、神経終末での蛍光色素FM1-43の取り込(エンドサイトシス)を抑制する。第一のエンドサイトシス経路は、PLTXIIで抑制され、active-zone(小胞のエキソサイトシス部位)で起こり、ダイナミン依存的であるが、クラスリンは形成されない。プロテインキナーゼ括性化で、抑制され、不活性化で増強される。第二の経路は、La3+で抑制され、non-active zoneでおこり、ダイナミン依存的、クラスリンが形成される。プロテインキナーゼ活性化で増強、不活性化で抑制される。高頻度刺激の初期では、第一のエンドサイトシス経路が主に働き、後期では、両方のエンドサイトシス経路が働く。2)ショウジョウバエ個体の活動が高まった後、シナプス信号伝達の増強が観察された。その増強ステップには、二つの段階があることが発見された。第一の段階では、シナプス単位の増大がみられる。これは、Reserve poolから大きい単位のシナプス小胞が放出されるためである。第二の段階では、小胞単位は、通常な大きさにもどるが、放出される小胞の数が増加する。このことは、研究代表者が、細胞レベルで明らかにした(Kuromi and Kidokoro,いずれもNeuron,1998,2000,2003)シナプス小胞のReserve poolの役割を個体レベルで確認した最初の知見である。本年度(平成19年4月1日-20年3月31日)は,神経末端におけるシナプス小胞のリサイクル機構に関して,以下の点を明らかにした。1)シナプス小胞のエンドサイトシスには,active-zone endocytosisとnon-active-zoneendocytosisの二つがある(18年報告)が,straitjacket遺伝子がエンコードするカルシウムチャネルがactive-zone endocytosisを制御していることを,この遺伝子の変異株を利用して同定した。また,エンドサイトシスを引き起こすCa2+は,dynaminによる小胞のちぎれを起こす前段階の状態を作り出すことに必須である。このCa2+流入は,non-active zoneでは,protein kinasesを活性化し,エンドサイトシスに必要分子のリン酸化,分子の集合を起こすか,または,小胞がちぎれるための細胞膜の曲性を作り出すかと考えられる。

2)これまで,神経末端では,アクチンは確認されているが,チュブリンは確認されず,チュブリンは,神経末端では,機能していないとされてきた。GFP-チュブリンを神経終末に発現させたハエを作成し,神経末端での機能を明らかにしようとした。神経を刺激すると神経末端のチュブリンの分布の変化が見られた。チュブリンの安定化を起こす,タキソール処理およびチュブリンの安定化が更新しているnc33変異株では,エンドサイトシスした小胞は,未処理および野生型の時と違って,神経終末の内部に分布し,この小胞は,刺激によって容易に,放出されなかった。Shibire変異株で,小胞のエンドサイトシスを遮断した時,小胞は,膜にトラップされるが,その時チュブリンが細胞膜に存在することが見つけられた。これらの結果は,チュブリンは,神経終末でダイナミックに変化しており,神経活動は,その変化を促進し,シナプス小胞のエンドサイトシスおよびその後の小胞の運命に重要な役割を果たしていることが示唆された。