hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ノックアウト・エクスプレッション法を用いた新しいグリオーマモデルマウスの作出

脳腫瘍モデルマウスを作製するために、Trp53遺伝子が全身で欠失し、Nf1遺伝子が脳内細胞選択的に欠損するマウスを作製した。そのために、組み換え酵素Creを脳内細胞選択的に発現する3種類のCreマウス(1GFAP-Cre、2Nestin-Cre、及び3NG2-Creマウス)を用いた。いずれの場合にも、得られたマウスは多くが9ヵ月齢までに死亡し、脳腫瘍の発生が高い確率で認められた。中でも、NG2-Creマウスを用いてNG2グリア選択的にNf1遺伝子を欠損させた場合には、89%(32/36)という高率に脳腫瘍が認められ、その組織像はoligodendrogliomaが多いという特徴があった。TP53遺伝子が全身で欠失しNf1遺伝子が細胞選択的に欠損するマウスを作製するために、これまでに作製したTP53-null/Nf1-floxマウスを、3種類のCre発現マウス(Nestin-Creマウス、GFAP-Creマウス、NG2-Creマウス)と交配して、得られたマウスを解析した。その結果、(1) Nestin-Creマウスと交配した場合には、ホモのマウスは胎生致死であり、ヘテロマウスもほとんどが9ヶ月齢までに死亡した。脳腫瘍はヘテロマウスの34%(11/32)に認められた。(2) GFAP-Creマウスと交配した場合には、ホモのマウスは5ヶ月例までに全例が死亡し、60%(3/5)に脳腫瘍が認められた。一方、ヘテロのマウスは全例が14ヶ月例までに死亡し、58%(14/24)で脳腫瘍が認められた。生じた脳腫瘍の組織像は、(1)(2)の場合共に、Anaplastic astrocytoma、Oligodendroglioma、PNET(primitive neuroectodermal tumor)など、多彩であった。(3) NG2-Creマウスと交配した場合は、ホモのマウスは胎生致死であり、ヘテロマウスはほとんどが9ヶ月齢までに死亡した。脳腫瘍の発生頻度と組織像については、現在解析中である。また、TP53遺伝子が全身で欠失しPTEN遺伝子が細胞選択的に欠損するマウスを作製するために、TP53-KO/GFAP-CreベクターとPTEN-floxベクターを作製し、相同組換えES細胞を選択して、マウス初期胚へのインジェクションによりキメラマウスを作製した。しかし、germinal transmissionの効率が悪くF1マウスが得られなかったために、ES細胞を取り直して再度F1マウスの作製に取り組んでいる。脳腫瘍モデルマウスを作製するために、Trp53遺伝子が全身で欠失しNf1遺伝子が細胞選択的に欠損するマウスを作出した。そのために、Trp53-null/Nf1-floxマウスを細胞選択的に組み換え酵素Creが発現するマウスと交配して、得られたマウスを解析した。前年度までに、アストログリア細胞選択的にCreを発現するGFAP-Creマウスと、神経幹細胞でCreが発現するNestin-Creマウスを用いた場合の結果を報告したが、今年度は、NG2グリア細胞選択的にCreが発現するNG2-Creマウスを交配に用いて解析を行った。Trp53-null/Nf1-floxマウスとNG2-Creマウスを交配してできたマウスは、ホモの遺伝子改変マウスは胎生致死であり、ヘテロマウスもほとんどが9か月齢までに死亡した。死亡したヘテロマウスマウスには、高率(33/36; 91.7%)に脳腫瘍が検出され、組織学的に検索すると、oligodendorogliomaまたはAnaplastic oligodendorogliomaの組織像を呈するものが多かった。また、TP53遺伝子が全身で欠失し、PTEN遺伝子がアストログリア選択的に欠損するマウスを作製するために、TP53-KO/GFAP-CreマウスとPTEN-floxマウスの作成を試みた。PTEN-floxマウスについては相同組み換えES細胞をマウスの初期胚にインジェクションして得られたキメラマウスからF1のヘテロマウスを得ることができた。しかし、TP53-KO/GFAP-Creマウスについては、キメラマウスは得られたものの、F1マウスは得られなかったので、平成26年度まで事業期間延長の申請をしたところである。本年度は、TP53欠失:Nf1細胞選択的欠損マウスを作製するために、我々がこれまでに作製したTP53-null/Nf1-floxマウスを、脳内細胞で選択的にCreを発現するNestin-Creマウスと交配した。

また、新たにグリア細胞で選択的にCreを発現するGFAP-Creマウス、及びNG2-Creマウスを作製し、TP53-null/Nf1-floxマウスとの交配を行なった。従って、Nf1遺伝子の失活する細胞が異なる3種類のコンディショナルノックアウトマウスを作製することができた。これらのマウスは、脳腫瘍モデルマウスとして利用できる可能性が高いと考えられ、現在、これらのマウスの観察を行なって、実際に脳腫瘍が形成されるかどうかを解析している。また、TP53欠失:PTEN細胞選択的欠損マウスと、TP53欠失:p16INK4a欠損マウスを作製することを目的として、癌抑制遺伝子TP53のエクソン5-9をアストログリア選択的なGFAP-Creの発現ユニットで置き換えたTP53-KO/GFAP-Creベクター、及びPTEN-floxベクターとp16INK4a-floxベクターを作製した。これらのベクターをマウスES細胞(RENKA株)に導入して、Southern blot法でスクリーニングすることにより、相同組換えES細胞を得ることができた。現在、これらの相同組換えES細胞をマウス初期胚にインジェクションして、キメラマウスの作製を行なっている。脳腫瘍モデルマウスを作製するために、Trp53遺伝子が全身で欠失しNf1遺伝子が脳内細胞選択的に欠損するマウスを作製した。そのために、Trp53-null/Nf1-floxマウスと3種類の組み換え酵素Creを発現するマウス(GFAP-Cre、Nestin-Cre、及びNG2-Creマウス)とを交配し、解析を行った。(1)神経幹細胞選択的にCreを発現するNestin-Creマウスを用いた場合、ホモのマウスは胎生致死であり、ヘテロのマウスはほとんどが9ヵ月齢までに死亡し、その34%(11/36)に脳腫瘍が発生した。生じた脳腫瘍の組織像は、Anaplastic astrocytoma、Oligodendroglioama、PNET(Primitive Neuroectodermal Tumor)に相当していた。(2)アストログリア細胞選択的にCreを発現するGFAP-Creマウスを用いた場合には、ホモのマウスは5ヵ月齢までに全例が死亡し、60%(3/5)に脳腫瘍が認められた。また、ヘテロのマウスは全例が14ヵ月までに死亡し、58%(14/24)で脳腫瘍が認められた。発生した脳腫瘍の組織像は、Nestin-Creマウスを用いた時に認められた3種類の組織型以外に、NeurocytomaやChloid Plexus Palpillomaも認められ、多様であった。(3)NG2グリア細胞選択的にCreを発現するNG2-Creマウスを用いた場合には、ホモのマウスは胎生致死であり、ヘテロのマウスはほとんどが9ヶ月例までに死亡して89%(32/36)という高率で脳腫瘍の発生が認められた。また、その組織像はOligodendrogliomaの組織型が多いという特徴があった。本研究を通して、癌抑制遺伝子を脳内細胞選択的に欠失させることで、優れた脳腫瘍のモデルマウスを作製できることが示された。分子神経病理学TP53-null/Nf1-floxマウスを、Nestin-CreマウスまたはGFAP-Creマウスと交配し、TP53遺伝子が全身で欠失しNf1遺伝子が細胞選択的に(Nestin陽性細胞またはGFAP陽性細胞で)欠損するマウスを作製して、解析した。得られたマウスでは、高率(3460%)に脳腫瘍が発生していた。
１８～１９世紀パリにおける小売業の展開と服飾関連業

2014年度に発足した「糸・布・衣の循環史研究会」の活動を発展させ,内外の諸分野研究者の協力を得ると共に,科学研究費補助金・基盤研究(B)「1820世紀の糸・布・衣の廉価化をめぐる世界史」を獲得し,活動範囲を広げた。7月には角田が中心となってワークショップを開催,78月には国際シンポジウムを開催して角田も発表した。2016年23月に渡欧し,パリ市内で史料収集を行い,リヨンとミュルーズの染織関係博物館を見学する他,昨年に続き現地研究者と面会,商業年鑑共同データベース作成に向けて話し合った。現在は現地研究者作成分とのデータ連結や地理情報との連動の作業中である。なおパリの後にはウィーンでパサージュのフィールド・ワークを行った。成果公表については,商業年鑑関係は計画より大幅に内容を拡大したため3年次までには実現しなかったが,年次計画の「百貨店やオート・クチュールという新しい商業形態が19世紀後半に具体的にどのように成立していくか」については,2016年5月に論文を刊行予定である。また19世紀のモード商帳簿に基づく論文は2016年4月に書籍掲載論文の形で出版した。全体の研究目的である「18世紀末から19世紀の服飾品関係小売業の経営方法などの実態を明らかにし,小売業の歴史全体にそれを位置付ける」ことに関しては,グローバルなファッション産業の中でのフランスの生地製造業とパリの衣服製造業の位置付けと存在意義についての論考を2015年6月に公表し,また服飾品の製造・小売システムと「ファッション」創出の構造について2015年8月の前述国際シンポジウムで口頭発表を行った。計画の中で掲げていた生データの共有と研究のためのツールの活用については,共同データベース作成や,地理学研究者の協力を得ての地理情報関連ソフトウェアの活用により果たせているものと考える。27年度が最終年度であるため、記入しない。(1)研究活動: 2013年67月に渡欧,パリ市内の文書館で史料収集をした。またこの際にフランス,スイス,イタリア, 10月に京都でガラス屋根付き商業施設のフィールド・ワークを行った。11月には国際会議「グローバルな消費・再流通・再受容の歴史」で口頭発表を行い,内外の諸分野研究者と交流した。また年明けから経済史研究者らと勉強会を開いている。(2)成果:商業年鑑データ完成を初年度に予定していたが,達成できなかった。「18世紀末から19世紀の服飾品関係小売業の経営方法などの実態を明らかにし,小売業の歴史全体にそれを位置付ける」という目的をより確実に達成するため,計画にはなかった課題を設定したためである(詳細は(3))。同じく計画していた19世紀初頭の服飾関係業者ルロワの帳簿分析は論文にまとめた。データ共有については口頭発表で意義と案を示した。データ共有実現については海外研究機関と連携する計画を検討中であり,個人公開はさしあたり控える。ただし,一部の生地関連データは織物産業を扱う研究者らと共有することとした。成果公表については,上述国際会議の口頭発表の他,次年度中に出版予定のものが複数ある。(3)内容:ルロワについては,前世紀のモード商との流通段階に占める位置の違いを示し,後のオート・クチュールとの直接的・質的な繋がりを明らかにした。また,計画にはなかったが,新たに古着を考察対象と設定したことで,注文服と古着しか衣服の選択肢がなく,社会層に応じたファッションのタイムラグが生じていたが, 19世紀初頭に初の都市内産業として既製服製造業が始まり,このラグを埋めたことを理解した。このように注文服・古着・既製服の3軸から捉えると,新品既製服が流入し始めた現在の途上国や既製服製造が工業化された20世紀の状況と共通点もあり,他の時代・地域での既製服導入後の状況も踏まえて当時のパリの衣服製造・流通状況を捉える必要性を認識した。2014年度初,経済史研究者3人と共に「糸・布・衣の循環史研究会」を発足。大きな流れとしては,当研究会による活動が主なものとなった。世界史的視点から「糸・布・衣」の生産,流通,消費,所有,使用,再利用についての統合的考察を目指すもので,日米独仏共同研究拠点形成計画Global History Collaborative(国内拠点:東京大学東洋文化研究所,国内主催者・同羽田正教授,国内資金源:日本学術振興会研究拠点形成事業・新しい世界史ーグローバル・ヒストリー共同研究拠点の形成)のサブ・プロジェクトである。当研究会は内外の諸分野研究者と共にワークショップやシンポジウムを開催する他,繊維製品製造・流通史,特に生地名称を巡るデータ共有を目指す。角田がこれまでに作成した帳簿データも共有データベースに一部反映を始めている。7月26日に第1回研究会「ロシア更紗とアジア商人」(於和光大学ポプリホール鶴川)を開催,19世紀ロシア綿織物業に関する基調報告に対して,中央アジア市場に対するロシアの更紗デザイン開発イニシアティヴなどに関するコメントを行った。10月25日には第2回研究会「個人とファッションのはざま:現代ムスリム女性のヴェール着用」(於東京大学)を開催,口頭発表を行う。他,生地・衣服関係の製造・流通史などに関する勉強会を月1回程度開いている。2015年1月には地理学研究者からGISデータの作成方法について技術指導を受けた。

2015年2月に渡欧,パリ市内の文書館で史料収集,近郊の更紗博物館等を見学する他,英国・カーディフ及びリーズ,ドイツ・ベルリン及びライプツィヒでガラス屋根付き商業施設や類似の19世紀建造の商業施設のフィールド・ワークを行った。またパリでは,現地の商業史研究者と面会,1819世紀パリの小売業研究について情報交換とデータ共有の計画を行った。2014年度に発足した「糸・布・衣の循環史研究会」の活動を発展させ,内外の諸分野研究者の協力を得ると共に,科学研究費補助金・基盤研究(B)「1820世紀の糸・布・衣の廉価化をめぐる世界史」を獲得し,活動範囲を広げた。7月には角田が中心となってワークショップを開催,78月には国際シンポジウムを開催して角田も発表した。2016年23月に渡欧し,パリ市内で史料収集を行い,リヨンとミュルーズの染織関係博物館を見学する他,昨年に続き現地研究者と面会,商業年鑑共同データベース作成に向けて話し合った。現在は現地研究者作成分とのデータ連結や地理情報との連動の作業中である。なおパリの後にはウィーンでパサージュのフィールド・ワークを行った。成果公表については,商業年鑑関係は計画より大幅に内容を拡大したため3年次までには実現しなかったが,年次計画の「百貨店やオート・クチュールという新しい商業形態が19世紀後半に具体的にどのように成立していくか」については,2016年5月に論文を刊行予定である。また19世紀のモード商帳簿に基づく論文は2016年4月に書籍掲載論文の形で出版した。全体の研究目的である「18世紀末から19世紀の服飾品関係小売業の経営方法などの実態を明らかにし,小売業の歴史全体にそれを位置付ける」ことに関しては,グローバルなファッション産業の中でのフランスの生地製造業とパリの衣服製造業の位置付けと存在意義についての論考を2015年6月に公表し,また服飾品の製造・小売システムと「ファッション」創出の構造について2015年8月の前述国際シンポジウムで口頭発表を行った。計画の中で掲げていた生データの共有と研究のためのツールの活用については,共同データベース作成や,地理学研究者の協力を得ての地理情報関連ソフトウェアの活用により果たせているものと考える。初年度に予定していたが遅れていた1840年までの商業年鑑データ作成は完了した。19世紀後半に結びつけるため,加えて1850年分も作成することとしたが,これはさらに膨大な量となるためまだ途中である。しかしこのデータベースについては,研究計画を上回る成果達成の足掛かりを得た。1.上記,フランスの研究者が作成した18世紀データとの連結による統合的データベース化,2. GISを利用した地図データとのリンク,の2点である。パリ史料調査では19世紀前半のタンプル古着市場関係の情報が得られたが,一方で,19世紀以降のパリ衣服製造・流通業を巡る商業文書,特に帳簿類はまとまった形では現存しないことも判明した。成果公表については,「糸・布・衣の循環史研究会」での活動から,グローバルな生地・服飾品製造・流通業の展開の中でパリ,あるいはフランスのそれの存在意義を捉え直す必要を感じ,グローバルなファッション産業史を巡る論考を2014年10月に公表,また生地・アパレル産業の歴史におけるフランスの存在意義についての論考を2015年5月に公表予定である。なお,19世紀初頭のモード商の帳簿に基づく論文は初年度中にすでに書籍掲載論文として執筆済みだが,出版社の事情により出版が遅れている。
資産市場における価格形成についての理論的・実証的研究

日本の株式市場に合理的バブルが存在するかどうかの分析を試みたところ、合理的バブルが存在しないための十分条件を日本の株価は満たしていることが確認された。ところがほかの文献において、日本の株価は合理的バブルが存在しないための必要条件を満たしていないことが示されている。具体的には、株価と配当の間の共和分関係が存在しないことが確認されている。論理的に、合理的バブル非存在の十分条件を満たすものの、合理的バブル非存在の必要条件を満たさないということはありえない。そこで、この2つの矛盾する結論について考察したところ以下の3つの結果を得た。第1に、株価と配当の間の共和分関係の成立は時間によって一定の割引率を仮定した時にのみ成立する条件であり、可変割引率のもとでは合理的バブル非存在の必要条件とはならないことが示された。第2に、可変割引率のもとでの必要条件は、配当と株価が等しい和分の次数を持つことであることが示された。第3に、日本の株価は可変割引率のもとでの必要条件をみたしており、日本の株価は合理的バブル非存在の必要条件を満たしていることが確認された。以上の結論から、日本の株価は合理的バブル非存在の必要条件及び十分条件をみたしていることが確認された。このことは、日本の株価変動が、ファンダメンタルズによって説明される可能性が高いことを示しており、日本の株価収益率の変動が消費資産価格モデルにより説明可能であるとする最近の研究結果とも整合的である。
針葉樹の樹高成長を規定する生理学的要因の解明

高木の樹高成長は既往の理論的研究から樹冠上部の水ストレスが主要因となり制限されると考えられてきたが、申請者は樹高世界一のセコイアメスギの高所の葉における水ストレスへの適応と樹冠内の葉の水分特性の恒常性を明らかにし、高木の最大樹高の決定機構として「樹冠内水分恒常性仮説」をたてた。これが高木種に普遍的にあてはまるかを検証するため、樹高50mの秋田スギでも樹冠内の様々な高さの葉について形態特性・水分特性・組織構造を測定した結果、同様の樹冠内水分恒常性がみられた。さらに、高所の葉の貯水機能が高くなるメカニズムには、針葉樹に特有のTransfusion組織が日中の水分供給源および再水和時の貯水スペースとして寄与することが示唆された。ヒノキ科高木種においては、高所の葉は根からの吸水よりも貯水性を優先した組織構造の変化によって樹冠内の葉の水分恒常性が維持されることが考えられる(Azuma et al. 2015)。また、葉内の水分生理特性や貯水機構をさらに明らかにするため、葉内の水の物理化学特性に着目して定量化・可視化する技術研究をおこなった。秋田スギの葉の横断面切片を、顕微赤外分光法により葉の内部の化学特性を可視化する手法の検証から取り組み、水分や糖類の定量的データを葉横断切片の分布とあわせて二次元的に可視化することができた。また、スペクトル解析からは葉の水分保持メカニズムの一因として多糖類が寄与する作業仮説が得られた(Azuma et al. in review)。また、樹体全体を用いて作成したWhole-tree pressure-volume(WT-P-V)曲線から樹体内貯留量を求めるため、WT-P-V曲線とシュートP-V曲線の水分特性値を比較した。その結果、10年生スギ個体においては、木部ポテンシャルの低下にともない消失した樹体内貯留水のうち約90%が葉の貯留水であることが試算され、早朝時の個体の水不足の緩和に大きく寄与していることが示唆された。27年度が最終年度であるため、記入しない。高木の樹高成長は,樹冠上部の水ストレスが主要因となり制限されると考えられてきたが,樹高世界一のセコイアメスギでは針葉が受ける水ストレスが高さによらず一定であることが示された(Azuma, et al. inreview)。この「樹冠内水分恒常性仮説」がセコイアメスギに特異的であるのか,様々な種に共通する機構であるのかを検証すること,いまだ未解明な点の多い高齢・巨木の生理機能を明らかにするとを目的とし,当該年度は秋田県の250年生スギ林,長野県・高知県・滋賀県の100300年生ヒノキ林,山梨県の250年生アカマツ林において,調査地の設定および対象木を選定した。また,樹高50mの秋田スギにロープをかけて登り,樹冠内のさまざまな高さの枝葉を採取し水分特性・形態特性・解剖特性を測定した。樹冠内恒常性仮説で予測された通り,高木・高齢の秋田スギにおいて,高さにともなう葉の生理・形態的順化反応として通水から貯水への機能変化がみられた。樹冠上部ほど葉の貯水機能が高くなり,葉内の貯水や通水に寄与すると考えられるTransfusion tissueの断面積割合が増大していた。一方,薪たな研究展開として,大阪大学理学部との共同研究に取り組み,顕微分光法を用いて葉の内部の水の状態を可視化することに成功した。3調査地の高齢ヒノキにおいては,葉が枝に密着した特異な鱗状葉に着目して形態特性を測定した。最大樹高に達した高齢ヒノキでは,鱗状葉スケールで高さ及び光環境にともなう形態的可塑性がみられ,樹冠上部の鱗状葉は相似的に小型化するが,伸長成長が遅いことが示唆された。水ストレスなどの生理的成長制限,もしくは光・水・風などの環境条件の変動に対する適応であると考えられる。高木の樹高成長は樹冠上部の水ストレスが主要因となり制限されると考えられてきたが,樹高世界一のセコイアメスギでは針葉が受ける水ストレスが高さによらず一定であることが明らかになり,論文にまとめた(Ishii and Azuma et al. 2014)。昨年度の樹高50mの秋田スギの調査結果では,樹冠上部ほど葉の貯水機能が高くなり,葉内の貯水や通水に寄与すると考えられるTransfusion組織の断面積割合が増大していた。当該年度は,夜明け前と日中に梢端と最下枝の葉を液体窒素によって樹上で凍結固定し,cryo-SEMを用いて葉内の組織と水を同時に観察した。すると,日中の水需要の高い際のTransfusion組織は細胞内の水が減少して細胞が収縮しており,蒸散停止後の夜明け前には再水和が起こって細胞の形状は復元していた。つまり、Transfusion組織はスポンジのように細胞の形状が変化して水を出し入れしており,水の貯留と供給の両方の生理機能を有することが示唆された(Azuma et al. in review)。昨年度の3調査地の高齢ヒノキ林でみられた鱗状葉スケールでの高さ及び光環境にともなう形態的可塑性についてより詳細を明らかにするために,当該年度は毎月のシュートの定点観測(写真撮影)をおこなった。

今後,さらに1年間定点観測を継続し,画像解析により鱗状葉の形成過程の垂直変化を明らかにする。山梨県のアカマツ林では,最大樹高に達した樹齢100年および300年の個体において樹冠の様々な高さにある葉の光合成や水分生理特性などを調査し,高さと樹齢の影響を明らかにした。両樹齢において高さに応じた葉の生理的な順化がみられた一方で,高さにともなう水供給の困難に対する乾燥回避パターンが樹齢間で異なっていた。外的要因(樹形の変化による水分供給の変化など)と内的要因(老化による影響)が考えられる。高木の樹高成長は既往の理論的研究から樹冠上部の水ストレスが主要因となり制限されると考えられてきたが、申請者は樹高世界一のセコイアメスギの高所の葉における水ストレスへの適応と樹冠内の葉の水分特性の恒常性を明らかにし、高木の最大樹高の決定機構として「樹冠内水分恒常性仮説」をたてた。これが高木種に普遍的にあてはまるかを検証するため、樹高50mの秋田スギでも樹冠内の様々な高さの葉について形態特性・水分特性・組織構造を測定した結果、同様の樹冠内水分恒常性がみられた。さらに、高所の葉の貯水機能が高くなるメカニズムには、針葉樹に特有のTransfusion組織が日中の水分供給源および再水和時の貯水スペースとして寄与することが示唆された。ヒノキ科高木種においては、高所の葉は根からの吸水よりも貯水性を優先した組織構造の変化によって樹冠内の葉の水分恒常性が維持されることが考えられる(Azuma et al. 2015)。また、葉内の水分生理特性や貯水機構をさらに明らかにするため、葉内の水の物理化学特性に着目して定量化・可視化する技術研究をおこなった。秋田スギの葉の横断面切片を、顕微赤外分光法により葉の内部の化学特性を可視化する手法の検証から取り組み、水分や糖類の定量的データを葉横断切片の分布とあわせて二次元的に可視化することができた。また、スペクトル解析からは葉の水分保持メカニズムの一因として多糖類が寄与する作業仮説が得られた(Azuma et al. in review)。また、樹体全体を用いて作成したWhole-tree pressure-volume(WT-P-V)曲線から樹体内貯留量を求めるため、WT-P-V曲線とシュートP-V曲線の水分特性値を比較した。その結果、10年生スギ個体においては、木部ポテンシャルの低下にともない消失した樹体内貯留水のうち約90%が葉の貯留水であることが試算され、早朝時の個体の水不足の緩和に大きく寄与していることが示唆された。昨年度の結果を受けて調査を展開し、それぞれ結果を得ることができた。アカマツ調査においては,当初の目的である高さにともなう葉の生理特性の変化を明らかにするだけでなく,樹齢の差異がもたらす影響についても研究を展開できた。27年度が最終年度であるため、記入しない。秋田以外でおこなった屋久島での高齢の屋久スギおよび高知での高木のヤナセスギ調査の結果について解析をすすめ,異なる地域における種内変異を明らかにする。高齢ヒノキの伸張成長に関わる鱗状葉形成過程について,当該年度に引き続きシュートの定点観測(毎月の写真撮影)をおこない,その後の画像解析により梢端と最下枝の葉で葉の形成過程を比較する。異齢アカマツの研究では,樹齢間の葉の水分特性の違いの要因として考えられた外的要因および内的要因について,今後詳細に調べていく必要がある。研究実施計画で予定していた調査地設定をおおむね完了できた。秋田スギの成長制限に関する新たな知見を得ることができた。さらに当初は予定していなかった共同研究へ展開できた。
機能的に対応するが意味的には対応しないサイン表現の日独比較

本研究の目的は、日本とドイツの対応する公共空間に設置されている看板などに印字されたサイン表現を利用して、日独でほぼ同一の機能を果していると見なされる定型的な言語表現を収集し、その中から意味情報の異なるものを選定し、日独において提供される意味情報がどのように異なるのかを明らかにした上で、その理由を考察しようというものである。前年度の平成29年度は、申請時の予定を変更し、日独対照の枠組みの設定とドイツにおけるドイツ語資料の収集と分類を実施したので、今年度の平成30年度は、得られたドイツ語資料を基準に、それと機能的に対応するが、意味情報の異なる日本語表現を収集した。調査地は金沢と東京である。昨年度設定した日独で対応する表現を対照するための枠組みをいくつかの用例とともに論文にまとめ、関連する学会の社会言語科学会の機関誌『社会言語科学』に投稿した。その結果、掲載が決まり、出版された。機能的には対応するが、意味的には異なる日独の表現のいくつかを試みに比較した結果を2018年7月にシカゴで開催された国際異文化コミュニケーション学会で口頭発表した。また、その内容を論文にして、当該学会の機関誌Intercultural CommunicationStudiesに投稿した結果、採択され、掲載が決定した。現在、印刷中である。現在、日独の対応するが、意味情報の異なる表現を分類しながら、分析している段階である。ドイツ語表現の分析に思いのほか時間がかかり、得られた日本語資料の分析が不十分である。日本語の分析の継続と、その結果のドイツ語対応表現との比較作業を実施する予定。本研究の目的は、日本とドイツの対応する公共空間に設置されている看板などのサイン表現を利用して、日独でほぼ同一の機能を果たすと考えられる定型的な言語表現を収集し、その中から意味情報の異なるものを選定し、日独において提供される情報がどのように異なるのかを明らかにした上で、その理由を考察しようというものである。平成29年度は、申請書の記述によれば、機能的に対応するが、意味的に異なるサイン表現の対照研究のための基本的な枠組みを設定し、それに基づいて日本語資料を収集し、その分類を行う予定であった。しかしながら、実際に実施したのは、対照研究の枠組みの設定とドイツ語資料の収集と分類であった。日独サイン表現の対照研究するための枠組みを検討していて、ドイツ語のほうがサイン表現の種類や量が少ない可能性があることに思い当たった。もしそうだとするなら、それを確認することも含めて、ドイツでのドイツ語の資料を先に収集したほうが、日本語の対応する資料が収集しやすくなると考えられる。そこで、資料収集の順序を逆にし、ドイツ語資料を今年度に収集することにした。調査を実施したのは、2017年9月7日から9月18日までの期間である。調査した地域は、フランクフルト、リューデスハイム、フロイデンベルク、ヒルデスハイム、ベルリン、バウツェン、トレンデルベルク、マールブルクなど大中章小都市である。現在、その資料を分類している段階である。調査地域の収集予定の順が逆になったが、現在のところ、順調といえる。現在、印刷中である。平成30年度は、継続してドイツ語資料の整理をする。それに基づき、日本語資料の収集と分類も実施する。そして、部分的な比較を行ない、一部を国際学会などで発表する予定である。本来、物品費として使用する分をドイツ出張旅費に回したために、差額が生じた。この額は、次年度の物品費に加算して執行する予定である。ドイツでの調査を前年度に実施し、本年、その成果の一部を海外で発表する予定だったが、適当な学会が見つからず、次年度に発表することにしたため。
プロトプラストを利用した界面活性剤の研究

キュウリ及びウリ類炭疽病菌並びにそれらのプロトプラストを非イオン性界面活性剤4種、アニオン性活性剤2種で処理して、プロトプラストによる界面活性剤の細胞学的検定法を検討した。各供試活性剤でプロトプラストを処理したところ、非イオン性活性剤は、細胞膜に作用しプロトプラストを破裂させるグル-プとこの作用を示さないグル-プに分けられた。アニオン性活性剤はいずれもこの作用が極めて強い。細胞膜に作用する非イオン性活性剤で処理すると、プロトプラストは破裂前に膨潤するのに対し、アニオン性活性剤で処理すると突然破裂した。これらの結果から、前者は細胞膜透過性に作用するが、後者は細胞膜の構造そのものを破壊すると推定された。電子顕微鏡観察によって、葉緑体ラメラやミトコンドリアのクリステは活性剤の変化をうけやすいことが示され、細胞内の膜系によって活性剤感受性が異なることが示唆された。また、同じ濃度で処理しても細胞質に現れる影響は生物種によって異なることが明らかになった。次に、キュウリ子葉を活性剤で処理すると、クチクラ層の存在によって活性剤の浸透が妨げられているので、プロトプラスト系で得られた結果は、反映されないことが明らかとなった。しかし、剥離表皮片を裏側から、あるいは炭疽病菌胞子を直接処理すると、プロトプラスト系とほぼ同じ結果が得られたので、細胞壁の存在そのものは活性剤の浸透に顕著な影響を及ぼさないと考えられる。以上のように、プロトプラスト系は調製に時間を要するが、細胞に対する界面活性剤作用性を細胞学的に解析するために鋭敏で有効な系であると考えられる。ただし、高等植物に対する作用を検討する時には、クチクラ層に対する透過性に関して問題があるので、この点については別途検討する必要がある。農薬に主に混入されている非イオン性界面活性剤(以下,非イオン性と略記)19種類,アニオン性界面活性剤(以下,アニオン性)4種類を,イネいもち病菌プロトプラストに作用させ,細胞膜の破裂を基準として選別を行った.活性剤の供試濃度は,一般に農薬に混入される濃度,すなわち非イオン性は100ppm,アニオン性は1000ppmを中心として各3濃度とした.その結果,非イオン性では, i)100ppmでプロトプラストを破裂させないグループと, ii)一部のプロトプラストを破裂させるグループとに分かれた.また,アニオン性では, iii)すべての供試濃度でプロトプラストを破裂させるグループと, iv)1000ppmでも一部のプロトプラストを破裂させるにとどまるグループに分かれた.上記の各グループから,化学構造の異なる活性剤を2種類ずつ選び出し,菌体試験によって, i)のグループは静菌的に, ii)-iv)のグループは殺菌的に菌糸生育を抑制することが明らかにされた.

そこで,電子顕微鏡観察によってプロトプラストの細胞膜及び細胞質に対する各活性剤の作用を検討した結果,菌体に殺菌的に作用する活性剤は細胞膜を分断し,さらに細胞質を完全に変性させる傾向が強く,静菌的に作用する活性剤は,細胞膜に顕著な影響をひきおこすことがなく,細胞質基質を疎にしたり,ミトコンドリアの膨潤をひきおこすにとどまることが明らかになった.以上の結果から,アニオン性活性剤は菌の細胞膜への影響が強く,非イオン性活性剤はその影響が比較的少ないこと,および細胞膜破壊がおこるか否かが殺菌的,静菌的作用の分かれ目になると推定された.以上の他に,イネいもち病菌の宿主であるイネからプロトプラストを調製し,これに対する各活性剤の影響の検討を試みたが,分離プロトプラストの活性を維持することが極めて難しく,目下鋭意検討しているところである.イネいもち病菌プロトプラストに及ぼす影響を目途に昨年度供試した23種の界面活性剤から選別した6種の活性剤を供試した。供試活性剤は非イオン性活性剤4種、ノニルフェニルエーテル(A)、ラウリルエーテル(B)、オレイルエーテル(C)、ステアリルエーテル(D)およびアニオン性活性剤2種、ジオクチルスルホサクシネート・Na塩(E)、ジブチルナフタレンスルホン酸・Na塩(F)である。これらがキュウリ及びウリ類炭疽病菌のプロトプラストに及ぼす影響を細胞学的に検討した。各供試剤でプロトプラストを処理し、光学顕微鏡観察した。非イオン性活性剤は、細胞膜に作用しプロトプラストを破裂させるグループ(A、B)とこの作用を示さないグループ(C、D)に分けられた。アニオン性活性剤はいずれもこの作用が極めて強いことが明らかになった。さらに、A及びBで処理すると、破裂前にプロトプラストが膨潤するのに対して、E及びFでは膨潤せずに突然破裂した。これらの結果から、非イオン性のA及びBは細胞膜透過性に作用するが、アニオン性のE及びFは細胞膜の構造そのものを破壊すると推定された。次に電子顕微鏡観察によって細胞質に及ぼす影響を検討した。非イオン性活性剤で処理したキュウリプロトプラストでは、いずれも葉緑体に顕著な形態異常が現れ、細胞質が疎になる傾向が強く、アニオン性活性剤で処理すると細胞は完全に破壊された。一方、炭疽病菌プロトプラストを非イオン性活性剤で処理すると、ミトコンドリアの膨潤やクリステの異常などの構造変化が現れ、細胞質基質には顕著な変化は現れなかった。しかし、アニオン性活性剤では細胞は完全に破壊された。総合的にみると、アニオン性活性剤は細胞膜や細胞質に激しい破壊作用を示すが、非イオン性活性剤はその作用が穏やかであると判断される。また、同じ濃度で処理しても細胞質に現れる影響は生物種によって異なることが明らかになった。キュウリ及びウリ類炭疽病菌並びにそれらのプロトプラストを非イオン性界面活性剤4種、アニオン性活性剤2種で処理して、プロトプラストによる界面活性剤の細胞学的検定法を検討した。各供試活性剤でプロトプラストを処理したところ、非イオン性活性剤は、細胞膜に作用しプロトプラストを破裂させるグル-プとこの作用を示さないグル-プに分けられた。アニオン性活性剤はいずれもこの作用が極めて強い。細胞膜に作用する非イオン性活性剤で処理すると、プロトプラストは破裂前に膨潤するのに対し、アニオン性活性剤で処理すると突然破裂した。これらの結果から、前者は細胞膜透過性に作用するが、後者は細胞膜の構造そのものを破壊すると推定された。電子顕微鏡観察によって、葉緑体ラメラやミトコンドリアのクリステは活性剤の変化をうけやすいことが示され、細胞内の膜系によって活性剤感受性が異なることが示唆された。次に、キュウリ子葉を活性剤で処理すると、クチクラ層の存在によって活性剤の浸透が妨げられるので、プロトプラスト系で得られた結果は、反映されないことが明らかとなった。しかし、剥離表皮片を裏側から、あるいは炭疽病菌胞子を直接処理すると、プロトプラスト系とほぼ同じ結果が得られたので、細胞壁の存在そのものは活性剤の浸透に顕著な影響を及ぼさないと考えられる。
癌関連遺伝子のエピジェネティックな不活化の分子病態解明

癌におけるエピジェネティックな異常,特にDNAメチル化は近年盛んに研究されているが,その背景にあるメカニズムは依然不明である。本研究者は癌細胞におけるRNAi経路とDNAメチル化との関連を解析するため,大腸癌細胞HCT116およびDICERノックアウトHCT116細胞(HCT116ex5)における遺伝子サイレンシングの状態を比較した。SFRP1,-2,-5,CHFRなど既知の遺伝子の発現抑制およびメチル化に変化はなかった。しかし,SFRP4のCpGアイランドのメチル化減少および発現上昇がHCT116ex5細胞で認められた。そこで次にマイクロアレイ解析により発現プロファイルを比較した。その結果,DICERex5細胞ではWTと比較して約2200個の遺伝子発現上昇が認められた。そのうち約1000個は,WT細胞をDNAメチル化阻害剤5-aza-2'-deoxycytidtneで処理した際に上昇する遺伝子と一致した。さらにマイクロアレイにより同定された遺伝子の中から,ICAM1など8遺伝子のCpGアイランドをbisulfiteシークエンス解析した結果,メチル化の消失あるいは減少が認められた。またChIP解析の結果,DICER ex5細胞のICAM1およびSFRP4のCpGアイランドにおいてヒストンメチル化レベルの変化が認められた。これらの結果から,癌細胞におけるエピジェネティックな遺伝子サイレンシングの維持にDICERが必要であることが示唆された。本研究の結果は,ヒト癌細胞においてエピジェネティックな遺伝子サイレンシングにRNAi経路が関与している証拠となりうると考えられる(Cancer Research,in press)。癌におけるエピジェネティックな異常、特にDNAメチル化異常は近年盛んに研究されている分野である。その背景にあるメカニズムは依然不明であるが、それを解明する手段のひとつとしてDNAメチル化酵素の機能的解析が挙げられる。哺乳類細胞ではDNA methyltransferase 1(DNMT1)が維持メチル化、DNMT3a及びDNMT3bがde novoメチル化を司るとされているが、癌におけるそれぞれの役割は不明な点が多い。これまでの報告では、DNMT1とDNMT3bをノックアウトした大腸癌細胞はゲノムワイドに脱メチル化を来たし、野生型においてサイレンシングを受けている遺伝子の発現回復が見られることが知られている。今回、本研究者は米国ジョンズホプキンス大学との共同研究でde novoメチル化酵素であるDNMT3aとDNMT3b遺伝子をノックアウトした大腸癌細胞(親株はHCT116)を作成した。ヒトTIMP3遺伝子のCpGアイランドと同一の配列を基質として用いた解析から、このノックアウト細胞がde novoメチル化活性を維持していることが明らかとなった。またDrosophila melanogaster細胞にヒトDNMT1とヒト遺伝子CpG配列を同時に導入したところ、ヒトCpG配列のメチル化が認められたが、Drosophilaゲノムはメチル化を受けなかった。更にDNMT1とDNMT3bをノックアウトしたDKO細胞(double knockoutの略,親株はHCT116)は前述のようにゲノムワイドな脱メチル化を示しているが、この細胞にアデノウイルスベクターを用いてDNMT1を過剰発現させた結果、遺伝子CpGアイランドの再メチル化が確認された。以上の結果から、DNMT1が癌における遺伝子CpGアイランドメチル化に主要な役割を果たしていることが示唆された。癌におけるエピジェネティックな異常、特にDNAメチル化は近年盛んに研究されている分野である。その背景にあるメカニズムは依然不明であるが、ひとつの仮説として転写活性が高い遺伝子プロモーターはメチル化による不活化を受けにくいと考えられている。これを証明するため、本研究者は類似した機能をもつファミリー遺伝子間のメチル化頻度の違いを解析した。これまで本研究者は、Wnt阻害蛋白である分泌型Frizzled関連蛋白(SFRP)遺伝子ファミリーが大腸癌(Nat Genet,2004)・胃癌(Oncogene,2007)において高頻度にメチル化し、Wntシグナル活性化の一因であることを報告した。次いで本研究者は別のWnt阻害蛋白であるDICKKOPF(DKK)ファミリー遺伝子の大腸癌におけるメチル化異常を解析した。DKKファミリー遺伝子のうち、DKK1とDKK2はどちらもWnt阻害作用を持つとされている。本研究においても、DKK1とDKK2はどちらも大腸癌細胞に対して増殖抑制効果を示した。しかしながら今回、DKK1とDKK2の大腸癌細胞におけるメチル化頻度がそれぞれ約20%、約90%と大きく異なることが明らかになった。DKK1とDKK2のプロモーターにはいずれもCpGアイランドが存在する。興味深いことにDKK1プロモーターにはβ-catenin/TCF結合配列が存在し、DKK1はWntシグナルのネガティブフィードバックとして働く。ルシフェラーゼアッセイによるプロモーター解析からも、DKK1プロモーター活性がWntシグナル活性と相関することが確認されたが、DKK2プロモーターはWntシグナルに影響をうけなかった。以上の結果から、DKK1は腫瘍抑制遺伝子としての機能を有するが、遺伝子の転写はむしろWntシグナルの活性化により上昇するためメチル化を受けにくい可能性が示された(論文投稿中)。

しかし,SFRP4のCpGアイランドのメチル化減少および発現上昇がHCT116ex5細胞で認められた。そこで次にマイクロアレイ解析により発現プロファイルを比較した。その結果,DICERex5細胞ではWTと比較して約2200個の遺伝子発現上昇が認められた。そのうち約1000個は,WT細胞をDNAメチル化阻害剤5-aza-2'-deoxycytidtneで処理した際に上昇する遺伝子と一致した。さらにマイクロアレイにより同定された遺伝子の中から,ICAM1など8遺伝子のCpGアイランドをbisulfiteシークエンス解析した結果,メチル化の消失あるいは減少が認められた。またChIP解析の結果,DICER ex5細胞のICAM1およびSFRP4のCpGアイランドにおいてヒストンメチル化レベルの変化が認められた。これらの結果から,癌細胞におけるエピジェネティックな遺伝子サイレンシングの維持にDICERが必要であることが示唆された。本研究の結果は,ヒト癌細胞においてエピジェネティックな遺伝子サイレンシングにRNAi経路が関与している証拠となりうると考えられる(Cancer Research,in press)。
ブレイクの複合芸術における女の裸体の表象

イギリスロマン派詩人・画家ウィリアム・ブレイク(William Blake)の複合芸術作品に頻出する「女」の裸体の意味を、絵画史における女の裸体の伝統に照らし合わせながら解明することが、本研究の目的であった。そのさい、「女」と「男」の裸体の表象を比較しながら、乳房と性器において「男」とはっきり異なる「女」の裸体にブレイクがつぎつぎに付与した意味が、どのように多層化し複雑化していくかを、初期から後期の作品において明らかにした。こうした目的をもつ本研究は、ジェンダー意識を研究のパースペクティヴに入れようと努力する点において、1970年代のフェミニズム批評がやりかけて放棄してしまった試みを継承するもの、といえる。具体的には、ブレイクの作品に描かれた裸体の女たちをひとつずつ分析し、なぜ彼女たちが裸にさせられたかを考察した。そのさい、男の裸体と女の裸体に付与された意味の違いを明らかにした。さらに、ブレイクの「女の裸体」の表象の典拠となった可能性のある「アフロディテ」表象の伝統も考察した。アフロディテは芸術作品に女の裸が登場した最初の例であるばかりでなく、ブレイクが女のポ-ズを描くときに参照した可能性が高かったからである。自ら美術界に身をおき、美術関連の力タログや批評書に広く目を通していたブレイクが、そうした美術作品からアフロディテの表象を学び、そして極めたことは、じゅうぶんに考えられると思ったからだ。ブレイクとジェンダー論が交差する領域は、ブレイク研究のなかで開拓が遅れているものである。ブレイク研究における裸体といえば、「男」の裸体の研究が主流であり、「女」の裸体に関する研究は希薄であった。この立ち遅れが目立つ「女」の裸体の表象研究に領域に、本研究は小さくはあっても大切な貢献をなしたと思う。イギリスロマン派詩人・画家ウィリアム・ブレイク(William Blake)の複合芸術作品に頻出する「女」の裸体の意味を、女の裸体の伝統に照らし合わせながら、解明することが、本研究の目的である。そのさい、「女」と「男」の裸体の表象を比較しながら、乳房と性器において「男」とはっきり異なる「女」の裸体にブレイクがつぎつぎに付与した意味が、どのように多層化し複雑化していくかを、初期から後期の作品において明らかにする。こうした目的をもつ本研究は、ジェンダー意識を研究のパースペクティヴに入れようと努力する点において、1970年代のフェミニズム批評がやりかけて放棄してしまった試みを継承するもの、といえるだろう。初年度である本年度は、18世紀に流通していた医学書や美術作品のうち「女の裸体」の描写を含むもので、かつブレイクの目に触れたと予想されるものを収集した。そして、それらのなかに見られる「女の裸体」の表象を検出する作業を行った。そのために、18世紀英国資料を豊富に所蔵しているイエール大学英国芸術センターへデータ収集に出かけ、(1)ジョゼフ・ジョンソン経由の18世紀出版物、(2)18世紀に流布していた美術作品・カタログ、という二種類のデータを重点的に集めた。なかでも、ブレイクの「女の裸体」の表象の典拠となった可能性のある「アフロディテ」表象の伝統にじゅうぶん注意を払ったつもりである。アフロディテは芸術作品に女の裸が登場した最初の例であり、紀元前350年にクニドス市が購入したプラクシテレス制作のアフロディテ像以来、さまざまなバリエーションがつくられた重要なテーマであるからだ。

自ら美術界に身をおき、美術関連のカタログや批評書に広く目を通していたブレイクが、そうした美術作品からアフロディテの表象を学び、そして極めたことは、じゅうぶんに考えられる。こうして収集し、解析した「女の裸体」のデータは、次年度にすぐ取り出して活用できるようにしてある。イギリスロマン派詩人・画家ウィリアム・ブレイク(William Blake)の複合芸術作品に頻出する「女」の裸体の意味を、絵画史における女の裸体の伝統に照らし合わせながら解明することが、本研究の目的であった。そのさい、「女」と「男」の裸体の表象を比較しながら、乳房と性器において「男」とはっきり異なる「女」の裸体にブレイクがつぎつぎに付与した意味が、どのように多層化し複雑化していくかを、初期から後期の作品において明らかにした。こうした目的をもっ本研究は、ジェンダー意識を研究のパースペクティヴに入れようと努力する点において、1970年代のフェミニズム批評がやりかけて放棄してしまった試みを継承するもの、といえる。二年度目であり最終年度にあたる今年度は、ブレイクの作品に描かれた裸体の女たちをひとつずつ分析し、なぜ彼女たちが裸にさせられたかを考察した。ブレイクの「女の裸体」の表象の典拠となった可能性のある「アフロディテ」表象の伝統も考察した。アフロディテは芸術作品に女の裸が登場した最初の例であるばかりでなく、ブレイクが女のポーズを描くときに参照した可能性が高かったからである。自ら美術界に身をおき、美術関連のカタログや批評書に広く目を通していたブレイクが、そうした美術作品からアフロディテの表象を学び、そして極めたことは、じゅうぶんに考えられると思ったからだ。ブレイクとジェンダー論が交差する領域は、ブレイク研究のなかで開拓が遅れているものである。ブレイク研究における裸体といえば、「男」の裸体の研究が主流であり、「女」の裸体に関する研究は希薄であった。この立ち遅れが目立つ「女」の裸体の表象研究に領域に、本研究は小さくはあっても大切な貢献をなしたと思う。最後にもうひとつ付け加えるなら、本研究はブレイク作品を「詩」と「絵」の合体した「複合芸術」として分析する新しい批評方法の流れを汲んだもの、と位置づけられる点をあげておきたい。
In Vivoパッチクランプ法を用いたカプサイシン皮膚塗布の作用に関する研究

平成17年度はin vivo patch clamp法を用いて正常動物とカプサイシン塗布モデル動物の比較を行った。カプサイシン塗布モデル動物はラットの後足に0.075%カプサイシンを1日4回、毎日塗布することによって作成した。カプサイシン塗布開始1週間後および4週間後のラットと正常ラットの腰部脊髄後角第2層細胞からウレタン麻酔下にパッチクランプ記録を行い、膜電位を-70mVに固定して細胞の自発性興奮性シナプス後電流(EPSC)とカプサイシン塗布した部分の後枝皮膚刺激(触刺激および痛み刺激)によって誘発される反応(EPSC)を観察した。自発性EPSCおよび下肢触刺激、痛み刺激で誘発されるEPSCの発生頻度・平均振幅は塗布開始1週間後ラットでは正常ラットと4週間後ラットに比べて有意に増加していた。一方、塗布開始4週間後のラットでは自発性EPSCの発生頻度・平均振幅は正常ラットと比べて有意な変化はなかったが、痛み刺激で誘発される発生頻度・平均振幅が減少していた。以上の結果から、カプサイシン塗布開始後、少なくとも1週間程度までは脊髄後角第2層細胞の興奮性は増加しているが、4週間後には逆に興奮性は低下し、特に痛み刺激に対する反応が減弱することがわかった。これら現象がカプサイシンの鎮痛作用に関与している可能性がある。平成16年度は脊髄スライス標本を用いて正常動物とカプサイシン塗布モデル動物の比較を行った。ラットの後足に0.075%カプサイシンを1日4回、4週間塗布して作成したカプサイシン長期塗布ラットと正常動物から脊髄を取り出して後根付き脊髄スライス(L4またはL5レベル)、脊髄後角第2層細胞からin vitroホールセルパッチクランプ記録を行った。後根刺激は吸引電極によって行った。刺激強度によって後根のAβ,Aδ,C線維の刺激を行い、それぞれの刺激強度で後角細胞に誘発される反応に関してカプサイシンラットと正常ラットを比較した。後根Aβ線維の刺激を行うと、カプサイシンラット及び正常ラットでは約10%の細胞でAβ線維を介する他シナプス性EPSC(興奮性シナプス後電流)が検出され、両者にほとんど違いは認められなかった。Aδ線維刺激を行うと、正常ラットでは約80%の細胞でAδ線維を介するEPSCが記録され、その内の約半数は単シナプス性のEPSCであった。カプサイシンラットでもAδ線維刺激を行うと約80%の細胞でAδ線維を介するEPSCが記録された。しかし、単シナプス性のEPSCは非常に少なく(10%以下)、ほとんどが他シナプス性のEPSCであった。また、正常ラットでは約50%の細胞でC線維を介する単シナプス性または多シナプス性のEPSCが記録されたが、カプサイシンラットではC線維によるEPSCはほとんど検出されなかった(3%以下)。以上の結果から、カプサイシン長期塗布により、Aδ線維及び無髄C線維に何らかの変性あるいは可塑的変化が生じている可能性があることがわかった。この現象がカプサイシンの鎮痛作用に関与してる可能性がある。