hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
鶏の筋胃漬瘍原因物質ジゼロシンの胃酸分泌促進機構

鶏に筋胃潰瘍を起こさせる物質ジゼロシンは,生体に投与すると胃酸分泌を亢進させることを筆者らは既に明らかにしている.本研究は,単離胃粘膜細胞を用いて,この胃酸分泌亢進作用の機構を明らかにしようとしたものである.まず,胃酸分泌亢進を酸素消費量で測定する方法により,ジゼロシンの作用を調べた.その結果,ジゼロシンはヒスタミンに匹敵する濃度で細胞の酸素消費を亢進する作用があることが確認された.そして,この作用は,ヒスタミンのH_2-レセプターのアンタゴニストであるシメチジンによって完全に制御されることを示した.次に,ジゼロシンが細胞内の環状アデニル酸濃度を上昇させることにより胃酸分泌を亢進させる可能性を調べるため,環状アデニル酸を分解する酵素ホスホジエステラーゼの阻害剤の存在下で酸素消費量を測定したところ,非存在下に比べて,大幅な酸素消費の亢進が認められた.この結果はジゼロシンのセカンドメッセンジャーが環状アデニル酸であることを示唆していた.さらに,ジゼロシンのこの作用を実証する目的で,細胞内の環状アデニル酸量をラジオイムノアッセイ法により測定した.その結果,ジゼロシンは,実際に細胞内の環状アデニル酸濃度を上昇させること,その作用はヒスタミンと比べて約1000倍大きいこと,この作用はシメチジンにより阻害され,ピリラミンでは弱い阻害しか受けないこと,等を明らかにした.以上の結果にもとずき,ジゼロシンの胃酸分泌促進作用は,まずジゼロシンが,胃粘膜細胞のヒスタミンH2-レセプターに作用し,細胞内の環状アデニル酸濃度を上昇させることによって行われるものと結論した.鶏に筋胃潰瘍を起こさせる物質ジゼロシンは,生体に投与すると胃酸分泌を亢進させることを筆者らは既に明らかにしている.本研究は,単離胃粘膜細胞を用いて,この胃酸分泌亢進作用の機構を明らかにしようとしたものである.まず,胃酸分泌亢進を酸素消費量で測定する方法により,ジゼロシンの作用を調べた.その結果,ジゼロシンはヒスタミンに匹敵する濃度で細胞の酸素消費を亢進する作用があることが確認された.そして,この作用は,ヒスタミンのH_2-レセプターのアンタゴニストであるシメチジンによって完全に制御されることを示した.次に,ジゼロシンが細胞内の環状アデニル酸濃度を上昇させることにより胃酸分泌を亢進させる可能性を調べるため,環状アデニル酸を分解する酵素ホスホジエステラーゼの阻害剤の存在下で酸素消費量を測定したところ,非存在下に比べて,大幅な酸素消費の亢進が認められた.この結果はジゼロシンのセカンドメッセンジャーが環状アデニル酸であることを示唆していた.さらに,ジゼロシンのこの作用を実証する目的で,細胞内の環状アデニル酸量をラジオイムノアッセイ法により測定した.その結果,ジゼロシンは,実際に細胞内の環状アデニル酸濃度を上昇させること,その作用はヒスタミンと比べて約1000倍大きいこと,この作用はシメチジンにより阻害され,ピリラミンでは弱い阻害しか受けないこと,等を明らかにした.以上の結果にもとずき,ジゼロシンの胃酸分泌促進作用は,まずジゼロシンが,胃粘膜細胞のヒスタミンH2-レセプターに作用し,細胞内の環状アデニル酸濃度を上昇させることによって行われるものと結論した.1.ニワトリヒナの腺胃粘膜細胞をコテゲナーゼ消化法により分離調製し、その分離細胞を用いて、細胞の酸素消費量を指標に胃酸分泌量を推定する条件を確立した。この細胞系を用いて、ヒスタミンおよびジゼロシンによる胃酸分泌促進を解析し、ジゼロシンとヒスタミンはほぼ同程度の活性で分泌促進効果を示すことを明らかにした。また、環状AMP存在下で分泌活性を測定すると、その活性が著しく促進されることから、ジゼロシンによる胃酸分泌促進機構は、ヒスタミンと同様、アデニル酸シクラーゼの活性化による環状AMPの生成促進であると結論した。2.胃粘膜細胞表面のジゼロシンレセプターの性質を解析する目的で、上記単離細胞に対するジゼロシンの分泌促進効果が、ヒスタミンの【H_1】レセプター、【H_2】レセプターのいずれによって阻害されるかをしらべたところ、【H_2】レセプターの拮抗阻害剤であるシメチジンによって、ジゼロシンの効果が顕著に抑制されることを認めた。この結果は、invivoで認められるジメチジンの効果とよく一致していた。この結果から、ジゼロシンは、胃粘膜細胞表面のヒスタミン【H_2】レセプターに結合し、作用発現するものと結論した。3.上記のニワトリヒナによる結果をふまえ、ジゼロシンの哺乳動物におよぼす効果を明らかにするため、ラツトにジゼロシンを投与する実験を行った。ラツトに、ジゼロシンを投与すると明らかに胃酸分泌が促進されることが、胃内容液のPH測定、および総酸度測定で明らかになった。ジゼロシンの活性は、ヒスタミンの約10倍と推定された。ジゼロシンと同時に、インドメタチンを投与して、胃潰瘍発症の有無を調べたところ、病理学的に明確な胃潰瘍の発症は認められなかった。哺乳類では、鳥類と異り、胃酸過剰の場合に対する防御機構が十分作用するものと推測しているが、今後より詳細な解析が必要と考え、研究を進めている。
「プラダクシナー・パタ」の空間的性格とその意味-建築学から仏教学への架橋-

初年度に当たる平成19年度には7月14日より7月25日の間、中国においてプラダクシナー・パタに関するフィールドワークを行った。ここでは龍門石窟について報告する。造営時期が北魏前期に当たる雲岡では石窟中央にある塔柱が垂直の中心軸をなし、その周りの空間がプラダクシナー・パタとなっていることは既に了解されていた。この塔柱が北魏後期に造営された龍門石窟では消失する。塔柱の周囲を回るプラダクシナー・パタも同時に消失したかに見える。プラダクシナー・パタは消えたのか、これが調査の一つのポイントとなった。石窟の周壁は彫像で埋め尽くされ、ひとはそれらを礼拝しつつ見て回ることになる。そしてほとんどの石窟において天井の中央に蓮華のレリーフが大きく一つ彫り出されている(天蓮華)。このことから、消失した塔柱の代替として天蓮華が表現されたのではないかとの仮説が考えられた。塔柱は存在しなくても、天蓮華を中心とし、彫像のある周壁に沿ってひとが歩く時、周壁沿いの空間がプラダクシナー・パタに変容すると解釈される。そして窟空間の全体は天蓮華を中心とする3次元のマンダラをなす。蓮華のイメージは密教胎蔵マンダラ図絵に顕著だが、これに先行して3次元のマンダラが石窟において表現されていることが見出された。その後に展開された唐期の龍門石窟において天蓮華の直下、台座の上に載る本尊仏が窟中央に据え置かれるようになったことが認められた。本尊仏と天蓮華はイマジナリーに垂直の中心軸をなしている。これは、塔柱による垂直中心軸の変容したものと見なすことが出来、先の仮設を補強するものとなった。周壁には羅漢像や千体仏が密度高く彫り出されている。これらを次々に礼拝しつつ歩く時、ひとは天蓮華-本尊仏の周りをも回る。すなわち、天蓮華-本尊仏を中心とし、その周囲をプラダクシナー・パタが回っているのであり、ここでも3次元のマンダラが認められた。以上の知見建築学においても仏教学においても従来なかったものである。
企業規模が生成する労働市場における社会的地位の制度的格差に関する研究

本研究の目的は、企業という組織レベルの要因を1つの社会制度と見なし、それを労働市場における社会的地位の格差の生成メカニズムとみなした実証研究を行うことである。本研究では、以下の2点を明らかにした。(1)企業規模は、内部労働市場における技能形成の機会を通じて、収入の蓄積的な格差を生み出している。(2)企業規模は、人々の収入の平均だけではなく、ばらつきに影響し、大企業に従事する人々における安定性をもたらしている。本研究の目的は、企業という組織レベルの要因をひとつの社会制度と見なし、それを労働市場における社会的地位の格差の生成メカニズムとみなした実証的な検討を行うことである。本研究では、(1)企業規模による社会的地位の格差がどのようにに変化しているか、(2)企業規模による社会的地位の格差は因果的なものとみなせるか、すなわち個人の能力や選好とは区別した社会制度の影響が見られるかを検証する。個人の能力や選好と社会制度の区別が、先行研究では明示的にモデル化されてこなかったことを乗り越え、日本の労働市場において企業規模が格差の生成プロセスに影響している役割を実証的に明らかにすることが目指される。上記の課題を遂行するにあたって、採用初年度にあたる平成26年度は当初の研究計画に基づき、(1)文献の収集およびレビュー、(2)分析モデルの検討、(3)基礎的な知見の成果報告を行った。(1)については、社会階層論・比較政治経済学・労働経済学の分野における関連する文献を検討した。(2)については、パネルデータにおける個人の観察されない異質性と企業規模が交互作用を持つモデルおよび、個人が異なる企業規模へ入職するというランダムでないセレクションがその後の移動に影響を与えることを想定したモデルの検討を行った。(3)については、第87回日本社会学会大会にて「観察されない個人間の異質性が企業規模と賃金の関係に与える影響」と題する口頭報告、および第59回数理社会学会大会において「Multiprocessモデルを用いた職歴移動の分析」と題するポスター報告を行った。以上のように、採用最終年度である平成27年度に向けた課題遂行の基礎的作業を行うことができた。本研究課題では、企業という組織レベルの要因を1つの社会制度と見なし、それを労働市場における社会的地位の格差の生成メカニズムとみなした実証的な検討を行うことを目的としてきた。前年度には、(1)文献の収集レビュー、(2)分析モデルの検討、(3)基礎的な知見の成果報告を行ってきた。(1)については、企業内において人々が身につけた訓練が蓄積する影響に注目した。訓練の効果は一時的かつ即時的なものではなく、内部労働市場を通じて時間的に蓄積しうる。これが企業規模と相互作用を持ち、異なる不平等を生み出すことを明らかにした。この成果は、東京大学で行われたパネルデータ分析の報告会などで発表をした。(2)については、同一の社会的属性を持つ人々の間における内部の収入格差に注目することで、企業規模と安定的な働き方の関係を分析した。大企業・官公庁で働く人々は、平均的な収入が高いだけではなく、その内部における格差も小さいことを、グループ内の分散に注目するモデルによって明らかにした。この成果としては、「社会的属性と収入の不安定性ーグループ内の不平等に注目した分析」と題する論文を、数理社会学会の学会誌に発表した。申請を行った段階の研究計画と照らしあわせ、「研究実績の概要」に記載した(1)から(3)のいずれにおいても進捗が見られたため。27年度が最終年度であるため、記入しない。社会階層論おおむね順調に研究が進展していると考えられるため、平成27年度も研究計画に沿って進めてゆく。当該年度が最終年度であることを踏まえ、学会誌への投稿など成果の発信により重点を置いてゆく。
東アジアに渡来・起源した作物資源の遺伝的評価と開発的研究

作物が東アジアへと伝播した経路上の国々において,本研究班を構成する4グループ(オオムギ,コムギ,ダイズおよびメロン)が合計12回の現地調査を行い,各作物の在来品種や近縁野生種などの新規遺伝資源を収集・導入した.これら遺伝資源の多様性に関する遺伝学的解析により,各作物の進化・伝播・適応について数々の新知見を得ることができ,論文や図書などにより公表した.さらに,実用的に重要な形質(品質,早晩性,各種ストレス耐性など)の改良に有用な遺伝資源を特定できたことから,品種改良への応用ならびに新規遺伝子の解明という基礎研究の展開を可能にした.作物が東アジアへと伝播した経路上の国々において,本研究班を構成する4グループ(オオムギ,コムギ,ダイズおよびメロン)が合計12回の現地調査を行い,各作物の在来品種や近縁野生種などの新規遺伝資源を収集・導入した.これら遺伝資源の多様性に関する遺伝学的解析により,各作物の進化・伝播・適応について数々の新知見を得ることができ,論文や図書などにより公表した.さらに,実用的に重要な形質(品質,早晩性,各種ストレス耐性など)の改良に有用な遺伝資源を特定できたことから,品種改良への応用ならびに新規遺伝子の解明という基礎研究の展開を可能にした.本研究班を構成する下記の4グループが中国および周縁国を訪問し,のべ4回にわたって現地調査を行うとともに,現地研究者を招聘して共同研究を実施した.その概要は下記の通りである.1.オオムギ・コムギグループ;中国科学院昆明植物研究所の協力の下に,中国内モンゴル自治区においてオオムギおよびコムギ遺伝資源の調査・収集を2012年8月29日から8日間行った.採集地点は標高1052m2047mの33カ所で,コムギ・オオムギの栽培種合計135点を収集した.本調査の経費は,新疆ウィグル自治区での調査中止により繰り越した2011年度予算による.また,カザフスタン植物バイオテクノロジー研究所の副所長ならびに学生を岡山大学資源植物科学研究所に招聘し,同国の栽培・野生オオムギ196点を導入し,DNAフィンガープリンィングを行った.2.ダイズグループ;2011年12月7日から17日まで(11日間),インドールのJICA本部,セホール大学,ICRISATを訪問し,ダイズ栽培の現地調査並びにダイズ耐乾性遺伝資源評価に関する共同研究の打ち合わせを行った.また,2012年2月28日から3月9日まで(11日間),昆明植物研究所の協力の下,中国雲南省南西部のダイズ遺伝資源調査を行い,計28点(主に在来系統)を収集した.収集された系統の中には,野生ダイズ並みの極小粒系統などが含まれていた.3.メロングループ;2011年8月9日から24日まで(16日間),ロシア・N.I.ヴァヴィロフ研究所の協力の下,カザフスタン南部においてウリ科作物の現地調査を行い,5地域より計157点のウリ科作物遺伝資源を収集した.現地の栽培メロンは主にGroup Inodorusに属するものであり,多様な果実形質を具備していた.カザフスタンがシルクロードの要衝であることから,収集したメロンは栽培メロンの成立を解明する上で重要な材料となる.本研究班を構成する下記の4グループが中国周縁国を訪問し,のべ4回にわたって現地調査を行うとともに,現地研究者との共同研究を実施した.また,世界種子貯蔵庫を訪問して遺伝資源の長期保存に向けた準備を進めた.その概要は下記の通りである.1.オオムギ・コムギグループ;キルギス共和国での調査をN.I.バビロフ研究所ならびに同国の研究者とともに7月に実施し,多くのコムギ近縁野生種ならびに祖先型野生オオムギを収集した.栽培ムギ類は改良品種とみられた.2月下旬,北極圏のスピッツベルゲン島にある世界種子貯蔵庫を訪問し,本プロジェクトの収集種子の預託条件を確認するとともに,岡山大学のオオムギ575系統を我が国から初めて預託した.加えて,同貯蔵庫の6周年を記念する会議において関係者らと面談して有益な交流を図ることができた.2.ダイズグループ;ICRISATのVadez博士の協力の下でダイズの土壌乾燥抵抗性試験を雨季作と乾期作に実施した.両作季の後期(2013年9月7-12日,および2014年1月11-18日)にICRISATを訪問し,試験調査を行うとともに実験結果に関する意見交換をした.雨季作では,乾燥ストレス耐性の指標となる日蒸散量に系統間差異が存在し,また,灌水区と乾燥区で異なった反応を示す系統が見いだされた.3.メロングループ;2013年11月2-23日に,ミャンマー西部と東部においてウリ科作物の現地調査を行い,計130点のウリ科植物遺伝資源を調査した.山岳部の栽培メロンは変種未同定に属するものであり,隣接する周辺諸国の栽培メロンとの関係が推察された.また,メロンやキュウリと近縁な野生種について,標高差による果実形質の変異を確認した.南アジアがウリ科の多様性中心であることから,収集したウリ科植物遺伝資源は起源の解析のみならず抵抗性育種の素材として重要である.本研究班を構成する下記の4グループが中国および周縁国を訪問し,のべ5回にわたって現地調査を行うとともに,現地研究者との共同研究を実施した.その概要は下記の通りである.1.オオムギ・コムギグループ;

グルジア共和国での現地調査をN.I.バビロフ研究所ならびに同国の研究者とともに7月に実施し,オオムギおよびコムギの在来品種および近縁野生種を収集した.8月にはカザフスタンの乾燥地域における乾燥および塩類耐性の遺伝資源調査を実施した.カラガンダおよびアルマティの農業試験場を訪問するとともに少数ながらムギ類の近縁野生種を調査収集した.さらに,中国科学院昆明植物研究所との共同研究で内モンゴル自治区の栽培ムギ類の収集を8月下旬に実施した.大部分が改良品種とみられたが裸性オオムギなど在来品種も認められた.3.メロングループ;2012年11月3-21日に,インド東部のメガラヤ州,アッサム州およびナガランド州においてウリ科作物の現地調査を行った.栽培メロンはGroup Momordicaおよび変種未同定のメロンに属するものであり,それぞれ低地および高地において特異的に利用されていた.また,メロンやキュウリの近縁野生種について,自生と果実形質の多様な変異を確認した.オオムギ・コムギグループは中国新疆ウイグル自治区において現地調査を行う予定であったが,2011年7月時点で現地の治安状況が悪化していたために,経費を繰り越して2012年度での調査に備えた.しかしながら,状況の改善が見られなかったために2012年度は調査地域を中国内モンゴル自治区に変更し,貴重な遺伝資源を収集することができた.ダイズグループ,メロングループについては当初計画通りに現地調査ならびに遺伝資源の収集を行うことができ,作物資源の遺伝的評価と開発的研究のための研究基盤を拡充することができた.25年度が最終年度であるため、記入しない。ダイズグループは,ICRISATにおける土壌乾燥抵抗性試験を2012年乾期作から開始する予定であったが,植物遺伝資源を巡る国際環境の変化を反映して,現地研究機関からのダイズ種子の入手に難航し,現地での播種適期に間に合わなかったため,実験を次年度に繰り越した.そのため,圃場使用料などの研究経費を次年度に繰り越した.オオムギ・コムギグループおよびメロングループについては,当初計画通りに現地調査ならびに遺伝資源・情報の収集を行うことができ,作物資源の遺伝的評価と開発的研究のための研究基盤を拡充することができた.作物遺伝資源の現地調査においては,現地研究者との信頼・協力関係ならびに現地政府機関の許可が不可欠である.従って,基本的には当初計画通りに実施する予定であるが,状況に応じて調査地域・時期などを変更するなどの対応を考える予定である.25年度が最終年度であるため、記入しない。作物遺伝資源の現地調査においては,現地研究者との信頼・協力関係ならびに現地政府機関の許可が不可欠である.従って,基本的には当初計画通りに実施する予定であるが,状況に応じて調査地域・時期などを変更するなどの対応を考える予定である.
殺虫剤ピレスロイドおよび関連化合物の分子レベルにおける作用機構に関する研究

1、ピレスロイド、メトキシクロル、およびカルモジュリン阻害剤の神経生理活性の比較ピレスロイドやDDTはカルモジュリン依存性の酵素群を阻害することを報じた論文を参考にして、数種のピレスロイド、メトキシクロル(DDT類縁体)、およびW-7を代表とするカルモジュリン阻害剤のアメリカザリガニ巨大軸索膜に対する効果を検討した。膜電位レベルでは、殺虫剤およびW-7は活動電位の下降相に互いに良く似た形状の脱分極性後電位を誘起したが、W-7以外のカルモジュリン阻害剤は脱分極性後電位を誘起しなかった。膜電位固定法によって殺虫剤とW-7の膜電流におよぼす効果を解析したところ、殺虫剤はナトリウムチャネルの不活性化を遅らせるのに対し、W-7はカリウム電流の増大を抑制することがわかった。これらの事実より、ピレスロイドとDDTの作用はカルモジュリンを介して発現するのではないと推定した。2、ピレスロイドとしての活性を有する光親和性標識化合物の合成ピレスロイドのレセプターを究明するため、酸部分を3-methyl-2-(4-azidophenyl)butanoic acidとし、アルコール部分をN-hydroxymethyl-4-methoxyphthalimideとするエステルを合成した。化合物はシュークロースギャップ法で測定されるアメリカザリガニ巨大軸索膜のナトリウム電流の不活性化過程を阻害し、パッチクランプ法によって観察される種々の培養神経細胞のナトリウム電流の開状態時間を引き伸ばすことを確認した。以上の生理活性は、これまでに報告されているピレスロイドの生理活性と同様のものであることから、新たに合成した化合物はピレスロイドと同じレセプターに作用するものと考えた。今後、本化合物の酸部分が持つ光親和性官能基とアルコール部分が発する蛍光を利用して、ピレスロイドのレセプターを同定する予定である。
後期ルネサンス以降の遠近法史の展開についての研究

本研究課題の研究期間は当初、三年間で計画されていた。このたび、所属研究機関を退職して資格を喪失したことにより、計画は二年目の途中で中断された。以下、当該(最終)年度における研究実績を報告する。一、文献収集と解読:計画通り、初年度に入手したレオナルドと彼以降の遠近法の展開を知るに有益な文献の解読と、ノート作成を順調に消化し、将来的な研究継続のための下地とした。二、現地調査:初年度の後半(平成23年12月28日から平成24年1月5日にかけて)におこなった、スペインにおける後期ルネサンスからバロックにかけての教会装飾(特に天井画)の撮影および資料収集の成果をうけ、それらに基づき、これまで遠近法史的研究がほとんどなされてこなかったそれら対象(教会装飾)について、主題選択・作図段階・壁面投影段階の三段階の分析に利用可能な「天井画写真、画面配置・主題特定などの情報」を整理し、今後の研究継続のための下地とした。三、一方、当該年度に予定されていた文献購入と現地調査は、上記の理由により中断されたため、おこなっていない。これは将来的な研究継続機会を待ちたい。四、中断以前の研究成果の一部は、下記リストに記載したとおり、発表をおこなった。本研究課題の研究期間は三年間で計画されている。当該年度は三年計画の初年度にあたる。以下、当該年度における研究実績を、交付申請書に記載した「研究計画・方法」に沿って報告する。一、文献収集と解読:計画通り、レオナルドと彼以降の遠近法の展開を知るに有益な文献を選定、購入した。解読とノート作成も順調に消化し、次年度(計画二年目)の下地としている。二、現地調査:平成23年12月28日から平成24年1月5日にかけて、スペインにおける後期ルネサンスからバロックにかけての教会装飾(特に天井画)の撮影および資料収集をおこなった。特に、イタリアからルカ・ジョルダーノがスペインに招かれた後、現地で独自の発展がみられたものの、不思議なことにこれまでそれらを対象とした遠近法史的研究はほとんどなされていない。そのため、今回の調査によって、多くの教会装飾について、主題選択・作図段階・壁面投影段階の三段階の分析に利用可能な「天井画写真、画面配置・主題特定などの情報」を得ることができた。下記に取材対象の一部を列記するが、これらのほとんどが、これまで写真さえ我が国に入ってきていないものである。Iglesia de San Antonio de los Alemanes, Las Calatravas, Nuestra Senora del Carmen y San Luis, San Cayetano, Parroquia de Santa Barbara, Real Basilica de San Francisco el Grande, San Andres (Capilla del Mismo Santo), Iglesia de San Martin本研究課題の研究期間は当初、三年間で計画されていた。応募申請時の研究計画(三年間)において、初年度に達成すべき内容は、ほぼ計画通り消化できているため。一、文献収集と解読:初年度の成果をうけて、二年次に追加収集が必要となる文献リストを夏前に決定し、入手に入る。これまでの研究実績から、次年度は初年度の半数の文献を必要とするものと予想され、よって15冊程度に上るものとする。解読も初年度の半数の分量となるが、文献解読の半減で得られるエフォートは、そのまま以下の<三>へと利用される。二、現地調査:初年度同様、夏か冬に一二度、一三週間程度の現地調査を必要とするものと予想される。ここでも日程の半分は作品撮影や計測などの現地調査にあて、残る半分は研究拠点にて文献調査および現地研究者との意見交換などにあてることになる。三、第一次成果の発表と第二次成果のまとめ初年度の研究計画遂行によって得られた第一次成果について、具体的な発表準備に入る。形式は口頭発表や論文の形をとる。調査旅行の費用として、欧州への渡航費を15万円から25万円の範囲と予想している。出発日時や航空会社によって価格が一定しないため、正確な予想は困難であるが、可能であれば上記の範囲内で二度の調査ができれば研究遂行に大いに資すると考えられる。費用が予想範囲を下回れば、当然ながら物品費や次年度の研究費に繰り込むことになる。謝金として、3万円程度の支出の必要性が考えられる。

これは当初の申請段階では考慮していなかったが、初年度の研究遂行にあたってデータ整理と分析の補助者の必要性が生じたため、すでに初年度末に一度、13,500円の謝金を支出した。その経験から、次年度はおよそその23倍の謝金を必要とするものと考えている。残額は、ほぼすべて物品費として、追加収集の対象となる文献の購入にあてられる。おおよそ1520万円ほど確保できれば、最低限の必要性は満たせるものと考えている。
電磁場の空間勾配計測によるRFIDタグの定位法

近年,ユビキタスコンピューティング環境の普及につれ,様々な物体にRFIDタグが貼り付けられている.現在のところ,RFIDタグのついた物体の定位には別途位置センサが必要である.しかしながら,RFIDタグとの交信に用いる電磁場そのものを適切に計測・処理し,タグ位置を電磁場源の位置として推定することができれば,ロケーションアウェアネスを有するアプリケーションの実現が容易となる.本研究では,135kHz,13.56MHzのパッシブタグのみならず,300MHzのアクティブタグを定位するため,1)定位センサが固定されている場合,2)定位センサが観測者とともに磁場源に接近している場合,の2つの状況を想定し,タグにより遠方場が生成されている場合の定位手法を開発した.まず1)の場合,磁場の空間勾配からなるテンソル量,および磁場強度を観測量とすることにより,磁場源位置に関する線形な方程式が導出できることを示した.これは静磁場のときとほぼ同様の式となるため,直交ループコイル,平面型直交グラディオメータ,および軸方向グラディオメータからなる局部的センサユニットにより定位が実現できる.さらに,磁場と電場の双対性から,900MHz帯域,あるいは2.45GHz帯の電気ダイポールアンテナを有するRFIDタグの場合でも,電場およびその空間勾配を計測することで,線形逆問題の解として,タグの姿勢によらない3次元定位が実現できることを示した.また2)の場合,観測者-磁場源の直線上で移動しても,磁場ベクトルの向きは一定である,という性質を用い,効率良く磁場源に接近する手法を開発した.近年RFIDタグが様々な物体にはられるようになり,タグの定位がロケーションアウェアインタフェース実現のキーとして注目されている.135kHz,13.56MHzのタグはループコイルにより電磁場を交信するため,磁気双極子の定位ができればよい.本年は,1)通常のように磁場の空間分布を計測するためにセンサアレイを用いることなく,磁場の空間勾配を計測することでコンパクトなセンサを用い,2)観測量から,反復演算なく直接磁気双極子位置を推定する高速なアルゴリズムを開発する,以上の2点を目的とした.まず,空間中の一点における磁場,および磁場の空間一階微分からなる勾配テンソルにより,磁気双極子位置を直接書き下す再構成公式を導出した.この式は双極子姿勢によらずに成立するものであるため,タグの向きによらない定位が可能となる.さらに勾配テンソルを計測するために,1)テンソルの独立な6成分を直接計測する手法,2)テンソルの主値(固有値),主方向(固有ベクトル)を計測する手法,の二つを開発した.1)の手法では,3対の平面型8の字コイルと,3対の軸方向8の字コイルを直交して組み合わせ,50mm角のセンサユニットを開発した.一方,2)の手法では,単一のループコイルを,双極子-センサ間距離に対して十分小さい距離を回転半径とする円周軌道上を走査させた.このとき,円周の法線をコイル法線と一致させておけば,得られる変調信号のフーリエ係数は,勾配テンソルの主値,主方向の全情報が含まれることを理論的に示し,また実験的に確認した.以上2つの手法において,80mmから150mm程度のレンジにおいて,5mm程度の精度で磁気双極子の定位が可能であることを実験で検証した.近年,ユビキタスコンピューティング環境の普及につれ,様々な物体にRFIDタグが貼り付けられている.現在のところ,RFIDタグのついた物体の定位には別途位置センサが必要である.しかしながら,RFIDタグとの交信に用いる電磁場そのものを適切に計測・処理し,タグ位置を電磁場源の位置として推定することができれば,ロケーションアウェアネスを有するアプリケーションの実現が容易となる.本研究では,135kHz,13.56MHzのパッシブタグのみならず,300MHzのアクティブタグを定位するため,1)定位センサが固定されている場合,2)定位センサが観測者とともに磁場源に接近している場合,の2つの状況を想定し,タグにより遠方場が生成されている場合の定位手法を開発した.まず1)の場合,磁場の空間勾配からなるテンソル量,および磁場強度を観測量とすることにより,磁場源位置に関する線形な方程式が導出できることを示した.これは静磁場のときとほぼ同様の式となるため,直交ループコイル,平面型直交グラディオメータ,および軸方向グラディオメータからなる局部的センサユニットにより定位が実現できる.さらに,磁場と電場の双対性から,900MHz帯域,あるいは2.45GHz帯の電気ダイポールアンテナを有するRFIDタグの場合でも,電場およびその空間勾配を計測することで,線形逆問題の解として,タグの姿勢によらない3次元定位が実現できることを示した.また2)の場合,観測者-磁場源の直線上で移動しても,磁場ベクトルの向きは一定である,という性質を用い,効率良く磁場源に接近する手法を開発した.
ドイツ・ゴシック彫刻と『雅歌』の花嫁神秘主義

西洋中世の聖母マリア美術における、彫刻のイメージの成立について、聖母マリア崇拝とキリスト教神秘主義のきわめて重要な主要原典であった、旧約聖書『雅歌』との関連から考察する。とくに、13世紀の南ドイツの美術ーバンベルク大聖堂、ナウムブルク大聖堂、マグデブルク大聖堂、マイセン大聖堂などを対象とし、歴史的背景を考慮しつつ、聖母マリア崇拝の図像との比較をしながら、『雅歌』の花嫁神秘主義のイメージの象徴性を当時の女性性の問題から考察することにより、彫刻群の表現内容を明らかにすることを目的とする。多大な影響を及ぼしたフランス・ゴシックの聖母マリア崇拝の「聖母戴冠」の図像や皇帝崇拝の図像の影響なども調査する。
生後の海馬で起こるニューロン新生と神経回路形成を調節する因子の解明

目的:一般に成体の脳ではニューロンの新生は起こらないが、海馬では例外的にニューロンが新生されている。この現象は神経組織の再生医療を考える上で興味深い。本研究では、神経前駆細胞の性質とその発生初期過程について検討した。結果:新生後1-3日では多くの増殖性細胞はクラスターを形成していた。また、クラスターを形成している増殖細胞の多くは、アストロサイトやニューロンに対する分子マーカーを同時に発現していた。クラスター内で、新生細胞は突起を伸ばし、隣接した細胞に接触していた。その後、細胞周期から抜けた新生細胞は、クラスター内の細胞との接触を保ちながら主に水平方向に移動した。新生後5-7日目には、新生細胞の多くはクラスターから周囲へ移動していたが、結論:成体海馬で活発に増殖している神経前駆細胞の大部分は、アストロサイトとニューロンのマーカー分子を同時に発現している特殊な細胞である。神経前駆細胞の増殖と分化には細胞同士の接触が重要な役割を果たしているのかもしれない。目的:海馬歯状回の顆粒細胞層の内側では,成体になってもニューロンの新生が続いている。神経幹細胞の移植実験などからこの部位ではニューロン新生を調節する微小環境が存在することが推測されている。本研究ではニューロン新生時の細胞間相互作用について検討した。対象および方法:生後6-12ヶ月令のWistar RatにThymidine類似物質のbromodeoxyuridine(BrdU)を投与し,1,3日目にラットを還流固定した。増殖細胞を抗-BrdUや抗-Ki67により,未熟なニューロンを抗-ポリシアル酸(PSA)により検出した。結果:新生後1日目には,BrdU陽性増殖細胞はクラスターを形成した。この増殖細胞のクラスターの近傍には,先に分化したPSA陽性未熟なニューロンが2つの様式で存在していた:(1)増殖細胞と未熟なニューロンは一緒にクラスターを形成している(2)増殖細胞のクラスターに未熟ニューロンの水平な突起が接触している。新生後3日目には,増殖細胞の多くがPSA陽性の未熟なニューロンとなった。この新生後3日目のPSA/BrdU陽性細胞の周囲には,PSA陽性細胞(おそらく新生後3日以上たったもの)が存在し,クラスター内に突起を伸ばしていた。結論:以上の結果からニューロン新生の過程を次のように推測した。分裂後,増殖細胞はクラスターを形成するが,まもなくニューロンに分化する。しかし分化後もしばらく(3日間ぐらい)の間クラスター内にとどまり増殖細胞と密着している。その後,突起をクラスター内に接触させたまま周囲に移動する。今後は増殖細胞と先に分化した未熟ニューロンの間で細胞間相互作用が起こっている可能性について検討したい。目的:海馬では成体になってもニューロンの新生が続いている。したがって海馬には成体でも神経前駆細胞が存在すると考えられる。また、ニューロン新生には微小環境(液性因子や細胞間相互作用)が必要であることが示唆されている。本研究では、成体海馬の神経前駆細胞が、どのような細胞と関係を持ちながらニューロンへ分化するのかを検討した。方法:実験には生後5-6ヶ月のWistarラットを用いた。新生細胞は、チミジン類似物質のブロモデオキシウリジン(BrdU)を用いて標識・追跡した。また、増殖細胞は、細胞周期(lateG1,S,M,G2)のマーカーであるKi67の免疫組織化学によって検出した。結果:BrdU投与後1-3日では、BrdU陽性新生細胞の大部分はクラスターを形成していた。BrdU陽性新生細胞の一部は、グリア線維酸性タンパク(GFAP)やポリシアル酸(PSA;未熟ニューロンのマーカー)に陽性であった。しかし、そのいずれにも陰性の細胞も多く見られた。また、BrdU陽性細胞の一部は、Ki67陽性で、BrdU陽性細胞とKi67陽性細胞は一緒にクラスターを形成していた。したがってこのクラスターの中で増殖・分化が起こっていると考えられる。クラスターの周囲には、クラスターから遊離したと思われるPSA陽性未熟ニューロンが見られたが、この未熟ニューロンは、クラスター内に突起を残しながら移動しているように見えた。また、新生後7日経ってもKi67陽性増殖細胞のクラスター内には、7日前に新生したPSA陽性新生ニューロンが残っていた。

結論:以上から、増殖性の神経前駆細胞はクラスターを形成し、未熟なニューロンやアストロサイトと接触しながらニューロンへ分化すると考えられる。目的:一般に成体の脳ではニューロンの新生は起こらないが、海馬では例外的にニューロンが新生されている。この現象は神経組織の再生医療を考える上で興味深い。本研究では、神経前駆細胞の性質とその発生初期過程について検討した。結果:新生後1-3日では多くの増殖性細胞はクラスターを形成していた。また、クラスターを形成している増殖細胞の多くは、アストロサイトやニューロンに対する分子マーカーを同時に発現していた。クラスター内で、新生細胞は突起を伸ばし、隣接した細胞に接触していた。その後、細胞周期から抜けた新生細胞は、クラスター内の細胞との接触を保ちながら主に水平方向に移動した。新生後5-7日目には、新生細胞の多くはクラスターから周囲へ移動していたが、結論:成体海馬で活発に増殖している神経前駆細胞の大部分は、アストロサイトとニューロンのマーカー分子を同時に発現している特殊な細胞である。神経前駆細胞の増殖と分化には細胞同士の接触が重要な役割を果たしているのかもしれない。
ゲル状食品の離漿現象に関する研究

離漿は,ゲルの骨格を形成する鎖状分子からなる三次元的な網目構造が,時間の経過とともに収縮し,これが原因となって生ずるといわれている.しかし,その機構については十分に明らかにされてはいない.離漿の機構を考える手懸かりを得るために,ゲル中の水分の移動現象を把握することを試みた.食品用の圧密試験器を作製し,アガロースゲルの透水係数を求めた.あわせて,レオロメーターマッタスを用いて破断測定値を測定し.さらに,走査型電子顕微鏡によるゲルの網目構造の観察を行った.試料は,アガロース濃度を0.8%,1.0%,1.2%の3段階にして調製した.アガロース濃度の高いゲルほど,間隙比の値が高く,沈下量が平衡に達する時間は短い.また,透水係数は荷重強度の増加にともない徐々に減少する.アガロースゲルでは,二重らせんによって形成される接合領域が多く,この中に多くの水分子を保持している.圧密を行うと,まず水に力が伝わり自由水がゲルの外に放出され,次に網目構造に変形が生じる.アガロース濃度の高いゲルでは,アガロース分子と結合している水分子が多いことから,枚出される自由水は少ないため間隙比の減少は少ない.また,すぐに最終沈下量に達するため,平衡時間は短くなり透水係数の減少は僅かとなる.破断特性値は,圧密後のゲルは,48時間放置して離漿させたゲルに比べ,破断応力は顕著に高くなる.また,最終沈下量に達した後.吸水させたゲルは,圧密後のゲルに比べ破断応力の値は低くなる.アガロースゲルの網目の大きさは.アガロース濃度の高いゲルほど小さい.圧密により,アガロース濃度の低いゲルほど網目の動半径は顕著に減少する.アガロース濃度0.5%ゲルを用いて圧密前後の網目の大きさを測定し,計算式から求めた値とばぼ一致した.ゲル状食品のなかには,製造後時間が経つにつれて離漿が見られるものがあるが,その機構については十分に明らかにされてはいない.離漿の機構を明らかにするために,各ゲルの離漿の速度論的解析,離漿前および離漿後の各ゲルの物性の変化の測定および微細構造の観察を行った.多糖類ゲルとしてアガロースゲル,動物性タンパク質ゲルとしてヨ-グルトを調製して,離漿の経時的変化を測定した.アガロースゲルのアガロース濃度,ヨ-グルトのタンパク質凝固補助剤(トランスグルタミナーゼ:TG)の添加量に関係なく,これらのゲルの離漿は,dM/dt=k(1-M)^2(ここで,M=m/m_∞,m_∞:平衡離漿量,m:保持時間tにおける離漿量,k:離漿速度定数)の式で表すことができる.離漿速度は,アガロースゲルではアガロース濃度が高くなると速くなるが,ヨ-グルトではTG添加濃度が高くなると遅くなった.アガロースゲルは離漿にともない貯蔵弾性率,初期弾性率,破断応力,破断エネルギーの値は減少した.一方,ヨ-グルトでは,貯蔵弾性率,初期弾性率,破断エネルギーの値は増加したが,破断応力の値は減少した.構造観察では,アガロースゲルは離漿すると,網目構造を構成しているアガロース分子が絡み合って不均一な網目となり,大きな空間を作っていた.この不均一な網目構造が離漿にともなって弾性率を減少させていると考えられる.ヨ-グルトは離漿すると,均一な空隙で結合していたタンパク質粒子がこの空隙に落ち込み,コンパクトな構造をつくっていた.ヨ-グルトは離漿にともない空隙のない詰まった構造になって弾性率が増加すると考えられる.離漿は,ゲルの骨格を形成する鎖状分子からなる三次元的な網目構造が,時間の経過とともに収縮し,これが原因となって生ずるといわれている.しかし,その機構については十分に明らかにされてはいない.離漿の機構を考える手懸かりを得るために,ゲル中の水分の移動現象を把握することを試みた.食品用の圧密試験器を作製し,アガロースゲルの透水係数を求めた.あわせて,レオロメーターマッタスを用いて破断測定値を測定し.さらに,走査型電子顕微鏡によるゲルの網目構造の観察を行った.試料は,アガロース濃度を0.8%,1.0%,1.2%の3段階にして調製した.アガロース濃度の高いゲルほど,間隙比の値が高く,沈下量が平衡に達する時間は短い.また,透水係数は荷重強度の増加にともない徐々に減少する.アガロースゲルでは,二重らせんによって形成される接合領域が多く,この中に多くの水分子を保持している.圧密を行うと,まず水に力が伝わり自由水がゲルの外に放出され,次に網目構造に変形が生じる.アガロース濃度の高いゲルでは,アガロース分子と結合している水分子が多いことから,枚出される自由水は少ないため間隙比の減少は少ない.また,すぐに最終沈下量に達するため,平衡時間は短くなり透水係数の減少は僅かとなる.破断特性値は,圧密後のゲルは,48時間放置して離漿させたゲルに比べ,破断応力は顕著に高くなる.また,最終沈下量に達した後.吸水させたゲルは,圧密後のゲルに比べ破断応力の値は低くなる.アガロースゲルの網目の大きさは.アガロース濃度の高いゲルほど小さい.圧密により,アガロース濃度の低いゲルほど網目の動半径は顕著に減少する.
IS-A知識を高度利用するためのデータベースプログラミング言語に関する研究

ハードウェアの高性能化とそれにともなう応用の高度化により,データベースシステムにも高度な機能が要求されるようになってきた.特に,堅固な数学的基盤に基づく演繹推論の機能を備えた演繹データベースと,柔軟な実世界のモデリング能力を備えたオブジェクト指向データベースの両者の機能を統合して,より高度な応用プログラムの開発を容易にすることが重要になってきている.このような背景から本研究では,自然言語処理,エキスパートシステムなど高度な知識処理を必要とする応用分野に着目し,それをもとに知識処理プログラミング言語の側から高度な知識処理機能と柔軟なプログラミング機能を提供することを目的とした.具体的には,知識処理機構とプログラム処理機構の高度なマッチングを可能にするために,両者のパラダイムを十分吟味したのち,応用面から見て満足のゆく解決となるような両者の統合を試みた.まず,本研究では,オブジェクト指向の継承の概念を両者の境として,知識処理側でIS-A知識に基づく継承計算を行い,プログラム処理機構側では得られた継承計算結果をプログラムモデルに反映した.このようなアプローチによって,知識処理部分とプログラム処理部分の分離が可能となり,両者を別々に取り扱いながら,応用システムにおいて両機能を統合的に使用することが可能になった.平成6年から2年間にわたる研究の結果,主に,推論機構,プログラミング手法,アプリケーションシステム開発という三つの側面から,IS-A知識を高度利用するためのデータベースプログラミング言語の基礎技術を構築することが可能になった.知的アプリケーションを構築する上で,IS-A知識の利用は今後益々重要な研究テーマになるものと考えられ,さらにモデルの見直しや改良,アプリケーション開発環境の整備,アプリケーションの開発を行なうことによって,この分野への先駆的な貢献ができたものと考えている.ハードウェアの高性能化とそれにともなう応用の高度化により,データベースシステムにも高度な機能が要求されるようになってきた.特に,堅固な数学的基盤に基づく演繹推論の機能を備えた演繹データベースと,柔軟な実世界のモデリング能力を備えたオブジェクト指向データベースの両者の機能を統合して,より高度な応用プログラムの開発を容易にすることが重要になってきている.このような背景から本研究では,自然言語処理,エキスパートシステムなど高度な知識処理を必要とする応用分野に着目し,それをもとに知識処理プログラミング言語の側から高度な知識処理機能と柔軟なプログラミング機能を提供することを目的とした.具体的には,知識処理機構とプログラム処理機構の高度なマッチングを可能にするために,両者のパラダイムを十分吟味したのち,応用面から見て満足のゆく解決となるような両者の統合を試みた.まず,本研究では,オブジェクト指向の継承の概念を両者の境として,知識処理側でIS-A知識に基づく継承計算を行い,プログラム処理機構側では得られた継承計算結果をプログラムモデルに反映した.このようなアプローチによって,知識処理部分とプログラム処理部分の分離が可能となり,両者を別々に取り扱いながら,応用システムにおいて両機能を統合的に使用することが可能になった.平成6年から2年間にわたる研究の結果,主に,推論機構,プログラミング手法,アプリケーションシステム開発という三つの側面から,IS-A知識を高度利用するためのデータベースプログラミング言語の基礎技術を構築することが可能になった.知的アプリケーションを構築する上で,IS-A知識の利用は今後益々重要な研究テーマになるものと考えられ,さらにモデルの見直しや改良,アプリケーション開発環境の整備,アプリケーションの開発を行なうことによって,この分野への先駆的な貢献ができたものと考えている.本年度の研究計画調書に基づいて、三つの課題に関して以下に記したような研究成果を得た。1.さまざまな知識処理応用システムにおいて、タクソノミを格納するプラットホームとして、IS-A知識を対象とした知識表現と推論方式の方法論、特に、正規表現を用いた無限集合を含む集合を対象として知識を表現する手法を確立した。さらに確立した手法に基づく試作システムを構築し、手法の有効性を立証した。2.IS-A知識に基づくデータベースプログラミングを容易にし、より柔軟な知識処理プログラミングを可能にするために、まず、知識ベースと応用プログラミング言語の独立性の概念を明確にし、それを実現する知識プログラミングの方法論を確立した。さらに確立した方法論をさまざまなプラットホームにおいて実現し、手法の正当性を立証した。3.1,2で述べたIS-A知識ベースシステムの実用性/適用可能性を高めるために、大量に蓄積されたIS-A知識の格納方式を見直し、推論処理機構を改良することにより、IS-A知識ベースシステムの性能向上を行なった。このように本年度は、IS-A知識を利用するアプリケーションのための基盤を構築することにより重点をおいた。知的アプリケーションを構築する上で、IS-A知識の利用は今後益々重要な研究テーマになるものと考えられ、さらにモデルの見直しや改良、アプリケーション開発環境の整備、アプリケーションの開発を行なうことによって、この分野への先駆的な貢献ができるものと考えている。本年度の研究計画調書に記載された三つの課題に関して以下のような研究成果を得た.1.平成6年度に開発したIS-A知識ベースシステムおよびそれに基づくプログラミング言語の有効性を検証するために,「知識処理分野における応用システム」の開発を行った.具体的には,次の三つの応用システムを開発した.(1)柔軟な分配,検索,分類機構を有する電子メール管理システム(2)自然言語シナリオからアニメーションを生成するメディアコンバーアシステム(3)管理者の異なるネットワークドメイン間でのルーティングのためのポリシ-記述システム2.上記の応用システムの開発の過程を通じて得られた知見をもとに,推論システムおよびプログラミング環境の改良を行った.

具体的には,次の二つの拡張を行った.(1)推論システムに関しては,知識の変更の可能性を並列に処理するための多重世界機構の実現,自然言語の意味論に則した否定表現の導入を行った.(2)プログラミング環境に関しては,より多様な演繹オブジェクト指向プログラミングを可能とするために,知識にしたがって動的にマルチキャストを行う機構構造を変更する機構を追加した.3.最後に本研究のとりまとめとして,システム全体の評価を行った.2で拡張した機能を用いて、1で開発したシステムの再開発を行い,IS-A知識を高度に利用することが可能であることを確かめた.以上のように本年度は,IS-A知識を実際に利用するアプリケーション開発に重点を置いた.知的アプリケーションを構築する上で,IS-A知識の利用は今後ますます重要な研究テーマになるものと考えられ,二年間にわたる研究によって,この分野への先駆的な貢献ができたものと考えている.
多能性幹細胞由来血管前駆細胞の骨髄移植による戦略的血管再生療法の開発

骨髄由来血管前駆細胞の代替としての、ES細胞由来血管前駆細胞の血管再生細胞ソースとしての有用性に関し検討を行った。我々の方法で誘導されたES細胞由来血管平滑筋細胞はその分化が不充分であり、マイクロRNA(miRNA)-145導入により、より分化した平滑筋細胞となった。また、我々のES細胞由来血管平滑筋細胞は、継代初期は抗老化性を示すものの、比較的早期の継代で細胞老化を起こすことが明らかとなり、ES細胞を用いた血管再生療法の確立には、より至適な血管前駆細胞誘導法の樹立が必要と考えられた。近年、虚血性心疾患、脳梗塞、あるいは末梢動脈閉塞といった虚血性疾患に対し、従来の内科・外科的治療に加え血管再生療法が臨床応用されつつある。特に末梢血において血管内皮前駆細胞(endothelial progenitor cell : EPC)が発見されて以降、その細胞移植による虚血改善効果が報告されている。喫煙や糖尿病、加齢と共に血中EPCは減少するという報告は、動脈硬化疾患患者由来EPCを用いた細胞移植は、細胞の質的・量的問題により虚血改善効果に限界があると想像される。本研究は加齢、リスクファクター等により機能低下に至った骨髄由来EPCの代替として、多能性幹細胞由来血管前駆細胞(VPC)を骨髄あるいはそれに代わる部位に移植することで、虚血・動脈硬化部位に血管再生作用をもったVPCを恒常的に供給するシステムを確立し、虚血性・動脈硬化性疾患の根本的治療を目指すことをその目的としている。そこで、平成21年度は、慶應義塾大学との共同研究により、ヒトES細胞からVPCおよび血管内皮や平滑筋細胞といった血管構成細胞に至る各分化段階由来の細胞において、マイクロアレイを用いた多能性幹細胞由来中胚葉細胞から血管構成細胞に至る発生系統的遺伝子発現プロファイル解析を行った。このプロファイルデータに加え、これまで既報のマウスES細胞を用いた同様の検討と比較し、骨髄血管構成前駆細胞の代わる生着性に優れた多能性幹細胞由来血管前駆細胞の同定を目指した候補表面抗原マーカーを絞り込み、これらの各分化過程における経時的な発現変化を経時的に解析した。(1)多能性幹細胞由来中胚葉細胞から血管構成細胞に至る発生系統的遺伝子およびマイクロRNA(miRNA)発現プロファイル解析慶應義塾大学腎臓内分泌代謝内科との共同研究により、ヒトES細胞から血管内皮や平滑筋細胞といった血管構成細胞に至る各分化段階由来の細胞において、マイクロアレイを用いた網羅的遺伝子およびマイクロRNA(miRNA)発現プロファイリングを構築した。このプロファイリングには、成人由来各種血管細胞のデータを加えて、相互比較検討を行った。その結果、最近血管平滑筋細胞の分化誘導に重要なmiRNAとして注目されているmiR-145が、ヒトES細胞由来血管内皮および平滑筋細胞の分化誘導過程において、特徴的な発現変化を示すことを見いだした。即ち、ヒトES細胞由来平滑筋細胞系では著明なmiR-145発現が認められるのに対し、同内皮細胞系では全くその発現を認めず、ヒトES細胞からの血管細胞誘導におけるmiR-145の重要性が示唆された。(2)多能性幹細胞由来血管前駆細胞の効率的血管構成細胞分化誘導法の確立上記(1)の解析から、miR-145がES細胞からの血管平滑筋細胞誘導に有用な因子である可能性が示唆されたことから、その詳細な検討を行った。即ち、ヒトES細胞由来平滑筋細胞にmiR-145の前駆体であるpre-miR-145を導入した場合の平滑筋分化を、各種血管平滑筋マーカー(calponin, caldesmon, SM-MHC)発現、細胞増殖性(MTTアッセイ)、細胞収縮性(カルバコール)により評価した。miR-145はES細胞由来平滑筋細胞において、大動脈血管平滑筋細胞と同等の強い発現を認めた。各種平滑筋マーカー発現は、ES由来平滑筋細胞においてmiR-145導入によりその発現増強を認めた。また、同細胞における細胞増殖性はmiR-145導入により低下し、収縮性に関しては逆に亢進を認めた。逆に、ヒトES細胞由来血管内皮細胞において、pre-miR-145を過剰発現させても、内皮機能に変化はなかった。以上から、ES細胞由来平滑筋細胞分化において、miR-145はその誘導をより促進させる重要な因子であることが示された。本研究で得られた知見は、今後のES細胞からの効率的な血管構成細胞分化誘導法の確立につなげていきたい。