hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
広範な疾患と投与量の個別化に利用できるアルブミンバイオマーカーの探索技術の開発

修飾アルブミンを疾患や投与量個別化に利用できるバイオマーカー群と位置付け、これらを選択的に検出可能な蛍光プローブとアルブミン群を精密分離可能なキャピラリーカラムを開発した。修飾アルブミンは本来の機能(抗酸化能や物質結合能など)が大きく変化することから、本研究ではこれらが広範な疾患や薬物投与量の個別化に利用できる汎用性の高いバイオマーカー群になると位置付けている。新たなバイオマーカー探索法として、キャピラリー電気クロマトグラフィー(CEC)、アルブミンを選択的に認識する蛍光プローブ、超高感度検出が可能なレーザー誘導蛍光検出器(LIF)、エレクトロスプレーイオン化質量分析装置(ESI-MS)を連結した総合分析システム(CEC-LIF-ESI-MS)を開発し、修飾アルブミンの超高感度精密一斉分析を目指す。平成22年度は、開発した蛍光プローブ4-[4-(4-dimethylaminophenyl)-5-phenyl-1H-imidazol-2-yl]benzoic acid methyl ester (DAPIM)がヒト血清アルブミンとの特異的な結合でその蛍光が著しく増大する蛍光特性を見出し、酸化・還元アルブミンの定量に有効であることを確認した。さらに現在、DAPIM-アルブミン複合体のX線結晶構造解析を継続中であり、結合様式の解明を通じてDAPIMの構造改変により結合能の向上を図っている。また、修飾アルブミンの一斉分離を目的にモノリス型キャピラリーカラムを新たに調製し、キャピラリー電気クロマトグラフィーを用いて評価した。ここでは、タンパク質分離でしばしば問題となる塩基性タンパク質の分離能改善を目的に、弱酸性のmethacrylic acid (MAA)を用いてモノリスカラムを調製し、分離能・ピーク形状について調べた。まず、カラム性能を調べたところ、MAAで高い分離能が認められた(thiourea, 49,000plate/m; aniline, 31,000plate/m)。さらにMAA含量を10倍、50倍と変化させたところ、50倍のMAAを用いた際に最大の分離能(thiourea, 126,000plate/m; aniline, 89,000plate/m)が得られた。平成23年度は、先に開発した蛍光プローブDAPIMのヒト血清アルブミン(HSA)への特異性を検証するため、競合結合試験及びScatchard plotにより結合サイトの特定及び結合定数の算出を行った。その結果、DAPIMはHSAのsite IIに結合し、結合定数は3.65x10^6M^<-1>であった。特に結合定数は、これまでに報告されているHSA用プローブに比べ10-100倍以上高く、DAPIMが極めて特異性の高いプローブであることが明らかとなった。次に、アルブミンバイオマーカーの探索では蛍光プローブの定量性が極めて重要であることから、DAPIMを用いてHSAの定量を行った。HSA標品を対象に定量性を確認した後、ヒト血清試料中のHSAを定量し、従来法であるブロモクレゾールグリーン法(BCG法)と比較した。DAPIMを用いた定量結果は、BCG法で得られた結果と良好な相関性を示した。このことから、DAPIMが血清中でも選択的にHSAと結合し、その結合量がHSA量に依存的であることが明らかとなり、アルブミンバイオマーカー探索においてDAPIMが有用であることが明らかとなった。しかし、今回得られた検出感度は、DAPIMの高い結合定数から想定していた感度に比べ低かったため、極微量のマーカーを探索対象とするには現在進行中のDAPIMのX線構造解析の結果を基にした、DAPIMの構造改変が必要と思われる。一方、前年度にアルブミンバイオマーカーの精密分離を目的に調製したポリマーモノリスカラムについて、作製条件(モノマー種類・反応時間等)の最適化を行い、分離能が約2倍改善した。以上の研究成果から、アルブミンバイオマーカーを特異的に検出可能な蛍光プローブと多種類のアルブミンを分離可能と予想される高性能モノリスカラムが得られ、両者を備えたアルブミンバイオマーカー探索用分析システムの開発につながる成果となった。
日本の医療機関における身体診察の効果に関する人類学的研究

検査技術の発達により、現在の医療現場では身体診察が省略される傾向にある。本研究は身体診察の医師・患者関係に及ぼす影響を、総合診療・家庭医療の現場におけるフィールドワークをもとに検討した。患者の年齢や性別等による多様性はあるものの、身体診察はその儀礼的効果と知覚的直接性・二面性により患者の安心感や納得度に影響を与え、医師・患者関係の形成や維持につながることが示唆された。当該年度は、身体診察や医療人類学に関する先行研究の渉猟を行うとともに、東京大学医学部附属病院・王子生協病院(東京都)・名古屋大学医学部附属病院・かとう内科並木通り診療所(岡山県)で予備調査を行った。年度の前半は、主に各施設での研究協力者との打ち合わせ及び倫理審査申請に充てた。また、名古屋大学医学部において授業見学を行い、医学生の教育課程における身体診察の位置づけ及びそれに伴って伝達される価値についての知見を得た。その上で後半は、各施設で診療の見学を行った。それにより、調査対象である総合診療・家庭医療という領域の特殊性、医師による身体診察方法の多様性、診療過程における身体診察のルーティン性といったことが明らかになった。また、身体診察は問診や雑談をしながら行われることが多いこと、身体診察により患者が自らの身体状態について納得しやすくなることがあること、身体診察は患者の情動的側面に作用することがあることなども看取することができた。これらの予備調査により、身体診察は医師が医学的情報を得る以外の効果を生み、医師・患者関係に影響を与えるが、効果や影響の内容は状況により多様性があることが明らかになった。この結果をもとに、次年度は本調査を進めていく。さらに、身体診察の先行研究に関しては、診察・診断技術や教育手法に関する研究は多いものの、身体診察と医師・患者関係に関する研究は不十分であることを確認した。これについて、研究協力者の一人である東京大学の錦織宏氏とともにレビュー論文を準備中であり、次年度は学会発表も行う予定である。前年度の予備調査に基づき、王子生協病院(東京都)で計9日間、名古屋大学医学部附属病院で計12日間、かとう内科並木通り診療所(岡山県)で計13日間本調査を行った(この3か所で十分と判断し、当初調査地に含まれていた東京大学医学部附属病院は調査地から外すこととした)。引き続き総合診療・家庭医療における外来診療・病棟回診・在宅診療の場面の観察を行うとともに、身体診察についての感じ方・考え方について、医師・患者・医学生に半構造化インタビューを行った。インタビューは合計医師31人(研修医4人・後期研修医10人を含む)・患者46人(外来24人・入院18人・在宅4人)・学生6人に対して行われた。上記の調査により、多くの医師達が、患者が症状を訴える際、身体診察を行うことを期待されていると感じることや、問診で診断がついたために身体診察を省略したところ患者から不満や疑問を訴えられた経験について聞きとることができた。また、身体診察を通じて患者が自らの状態を体感・把握することにより納得・安心をすることに加え、患者の家族も安心感を得ることがある点や、身体の状態を患者と医師が同時に感知することを通じ、問題を医師と共有化することを望む患者がいることも明らかになった。また、身体診察に関する先行研究について、研究協力者の錦織宏氏(東京大学)とともに検討を行い、その結果を日本医学教育学会で発表した。これをもとにレビュー論文を執筆中である。さらに、調査結果に関する中間報告を日本文化人類学会中国・四国地区研究懇談会にて行った。これについても各方面から建設的な意見を得ることができた。前年度の調査を補足するため、王子生協病院(東京都)で1日、名古屋大学医学部附属病院で計3日間、かとう内科並木通り診療所およびその近隣地域(岡山県)で計4日間、調査を行った。引き続き診療場面の観察を行うとともに、身体診察についての感じ方・考え方について、医師・患者・医学生にインタビューを行った。今年度、インタビューは合計医師4人(後期研修医2人を含む)・患者10人(入院6人・在宅4人)・学生5人に対して行われた。上記も含め、これまで行った調査で得られたデータを整理・分析した。その結果、患者の年齢や性別等による多様性はあるものの、身体診察はその儀礼的効果と知覚的直接性により患者の安心感や納得度に影響を与え、医師・患者関係の形成や維持につながることが示唆された。これらの結果を、日本文化人類学会、日本医学教育学会、Society for East Asian Anthropology(SEAA)Conferenceにて発表した。研究協力者からも要望された日本医学教育学会での発表では、身体診察について医学とは違った人類学的な視点から知見を提供することができた。また、SEAAの学会では'Medicalized Modernity in Japan and South Korea'(日韓における医療化された近代)というパネルで発表を行い、日本と韓国における医療の状況の共通点や相違点にも議論が発展した。分野の異なる学会や国際学会で発表することにより、多方面から貴重な意見を得ることができた。現在、本研究の成果をまとめた論文を投稿準備中である。
極低放射能モレキュラーシーブス開発による暗黒物質探索実験におけるラドン削減

本研究は、極低放射能のモレキュラーシーブスを独自に開発し、それを用いて暗黒物質検出器からの放射性不純物ラドンの削減をし、暗黒物質探索の感度向上を目指す研究となる。暗黒物質探索にターゲットとして代表的なものとして、液体キセノンや、フッ素を含んだ化合物ガスなどがある。これらには、暗黒物質探索のバックグラウンドとなる放射性ラドンが検出器部材から湧き出ることから、ラドンの除去が重要な研究課題となっている。暗黒物質探索検出器は、低バックグラウンド・エネルギー実験として、太陽ニュートリノ観測、0νββ探索にも大変有望なものであり、本研究による検出器の低バックグラウンド化が非常に重要となる。
筋力トレーニングによる効果の個人差を規定する骨格筋遺伝子の探索

本研究では,筋力トレーニングにみられる効果の個人差と関連する遺伝子を包括的に検索するために,DNAマイクロアレイ法を用いてトレーニングによる遺伝子発現の動態を明らかにし,筋力トレーニング効果大と効果小の被験者において発現に差がみられる遺伝子を検索することを目的とした。H14年度では、健康な中高齢男性15名を対象に筋力トレーニングを行い、効果が大きかった被検者(n=3)と効果が小さかった被検者(n=3)間において、トレーニング後の骨格筋における遺伝子発現動態を検討した。またH15年度では、新たに中高齢男性11名を対象に筋力トレーニングを行い、効果の大きかった被検者2名と小さかった被検者2名においてそれぞれ、トレーニング前後での遺伝子発現動態を検討した。その結果、効果大小間での骨格筋遺伝子発現では、効果大において共通して遺伝子発現が1/2倍であった遺伝子は3つ検出され、2倍であった遺伝子は6つ検出された。またトレーニング前後において遺伝子発現を検討した結果においては、トレーニング効果大で共通してトレーニング後に発現が変動した遺伝子は3つ検出され、トレーニング効果小で共通してトレーニング後に発現が変動した遺伝子は5つ検出された。これら2つの実験において、検出された遺伝子で共通のものはなかったが。これらの遺伝子がトレーニング効果に影響を及ぼしている可能性は十分考えられる。今後、これら遺伝子において、プロモータ領域あるいはそれら遺伝子の発現を調節する因子において遺伝子多型を検索し、トレーニング効果の個人差との関連を明らかにすることにより、個別至適化されたトレーニングプログラムの提供につながる重要な基礎データとなるであろう。運動を行った際、その効果には個人差が認められるが、この個人差には遺伝的要因が関与していることが明らかとなっている。本研究ではこの個人差を規定する遺伝子を探るため、高齢男性(n=15)を対象に、筋力トレーニングを実施した。筋力トレーニングは、等速性筋力測定器(Biodex)を用い、両脚の等速性膝・股関節伸展/屈曲運動を行った。トレーニング期間は12週間であった。その結果、膝関節伸展筋力は約11%の増加を示した。このトレーニング効果には、1.3%33.1%もの個人差が認められた。これら個人差における遺伝的要因を検討するため、15名の被検者のうち、効果の少なかった被検者3名および効果の大きかった被検者3名を対象に、トレーニング後において、大腿部の外側広筋より筋生検を行い、筋サンプルを得た。この筋サンプルにおける遺伝子発現を検討するため、本研究では、DNAチップを用いる。本研究で用いるDNAチップには、約30,000遺伝子がスポットされている既存のDNAチップを用いることとした。現在は、このDNAチップにハイブリさせるRNAを調整中である。また、これら個人差に関与する環境要因として日常活動量が考えられるが、個人差に日常活動量がどの程度関与しているかを検討するため、その日常活動量をライフコーダにて調べた。その結果日常活動量には50kcal/dayから557kcal/dayと大きな個人差が認められた。これら日常活動量のトレーニング効果に対する貢献度も現在検討中である。H15年度では、さらに被検者数を増やし、同様に検討を行っていく。また、トレーニング効果にみられる個人差と関連のみられた遺伝子変動について、その遺伝子のプロモータ領域における多型の解析を行っていく予定である。
地中海島嶼社会のマイクロエコロジー構造と海域研究の方法と視角

地中海島嶼社会(イビサ(スペイン)、マルタ(マルタ)、ナクソス(ギリシャ)、シーワ・オアシス(エジプト))を分析しながら、海域研究のための理論的、方法論的考察を行った。現地調査では、(1)現地マイクロエコロジーの構造分析(生存物資の調達方法やその範囲、自然環境との共存関係)、(2)現地集落(村落/町/より広域的な生活圏)内での経済活動状況、社会関係のサンプリング調査、1978年以降の人工動態・社会変動(社会関係)分析、(3)周辺島嶼を含むネットワークの中での当該島嶼の役割(対外関係)分析、(4)各国内での当該島嶼の政治・経済的位相(対外関係)分析、(5)都市圏への移民状況(対外関係)分析、を推進し、資料の収集、現地インフォーマントよりの情報収集・分析に努めた。調査所見として以下の諸点が確認された。(1)1970年代以降のツーリズムの進展によって、現地の経済構造変容が加速された、(2)人口構造(外来者の定着状況を含む)にも注目すべき変化が看取された。資料分析の結果からも、以上の諸点は強く認識された。本研究では、未着手の調査観点に関する情報の収集に努めながら、調査研究項目の調整、および調査対象島嶼に関する文献調査、統計資料収集・分析を実施した点に特徴である。インフォーマントへの調査結果はなお分析余地があり、研究作業を今後も継続する予定でいる。なお、研究成果は一橋大学で月例の研究会で、各研究分担者が担当する分野に即した資料分析の結果を持ち寄ることで遂行された。この月例研究会では、海域研究の視覚と方法についても議論を深めた。成果は、欧文の論集Mcditcrranean World 19ほかで公刊した。本年度は、17年度以降の本調査に向けての理論的、方法論的な予備分析を行った。主に、調査研究項目の策定、および調査対象島嶼に関する文献・統計資料調査と、現地での調査定点設定について検討した。16年7月までは、一橋大学での月例研究会において、各研究分担者の担当する分野から実施される研究文献、統計資料分析の結果を持ち寄った。これにより、各島嶼社会についての共通認識が共有されたと考える。この過程で、併せて、研究史批判に立った方法・概念の一般的検討にも着手した。89月には、数名の研究分担者が、研究対象地域において、マイクロエコロジー構造および関連諸項目分析を推進するための予備調査を行った。各島における観察拠点構築、統計省庁、地方統計局等を訪問して資料の収集を行い、すでに関係形成に着手していた現地インフォーマントとの打合せを行うことができた。その際の調査項目は以下の通りである。(1)現地のマイクロエコロジー構造(生存物資の調達方法やその範囲、自然環境との共存関係)、(2)現地集落(村落/町/より広域的な生活圏)内での経済活動状況、社会関係のサンプリング調査、1978年以降の人工動態・社会変動(社会関係)、(3)周辺島嶼を含むネットワークの中での当該島嶼の役割(対外関係)、(4)各国内での当該島嶼の政治・経済的位相(対外関係)、(5)都市圏への移民状況(対外関係)。9月には、ヴェネツィア大学との共催で現地においてワークショップを開催し、関係外国研究者をも交えた研究報告とともに、今後の課題について関係研究者と調整を行った。10月以降には、17年度以降の本調査に向けた方法上の検討と、統計資料の分析を推進した。なお、当初想定した調査対象のうちサルディニアを、「砂漠の島」としてのシーワ・オアシス(エジプト)に変更し、当初マルタ担当予定であった分担者をシーワに、サルディニア担当者をマルタ担当とした。

平成17年度より、島嶼社会分析のための理論的、方法論的考察を積み重ねつつ、現地調査に着手した(89月期)。調査を開始したのは、ナクソス島(ギリシャ)と、「砂漠の島」としてのシーワ・オアシス(エジプト)である。現地では、未着手の調査地に関する情報を勘案しながら、調査研究項目の策定、および調査対象島嶼に関する文献調査、統計資料収集・分析を行った。調査現地では、拠点構築、統計省庁等を訪問して資料の収集、現地インフォーマントとの打合せを行った。その際の主な調査項目は、(1)現地のマイクロエコロジー構造(生存物資の調達方法やその範囲、自然環境との共存関係)、(2)現地集落(村落/町/より広域的な生活圏)内での経済活動状況、社会関係のサンプリング調査、1978年以降の人工動態・社会変動(社会関係)、(3)周辺島嶼を含むネットワークの中での当該島嶼の役割(対外関係)、(4)各国内での当該島嶼の政治・経済的位相(対外関係)、(5)都市圏への移民状況(対外関係)、である。本年度の調査所見として、(1)1970年代以降のツーリズムの進展によって、現地の経済構造変容が加速されたと見えること、(2)人口構造(外来者の定着状況を含む)にも注目すべき変化が看取されたこと、である。なお、上記調査期間以外にあっては、一橋大学での月例研究会において、各研究分担者が担当する分野に即した資料分析の結果を持ち寄った。これにより、各島嶼社会についての認識共有がさらに深まったと考えている。また、10月には、国外研究協力者であるジョアン・アルマンゲ博士(カリアリ大学)と、ミケーラ・ダル・ボルゴ博士(ヴェネツィア文書館)を招聘し、一橋大学、東京外国語大学、愛知県立大学、京都大学で一般公開形式のワークショップを開催した。彼ら、及び他の研究協力者との情報交換によって、18年度以降の調査に向けた方法上の検討も推進することができた。平成17年度より着手した、島嶼社会分析のための理論的、方法論的考察をさらに積み重ねつつ、89月期に現地調査を行った。調査地は、ナクソス島(ギリシャ)と、「砂漠の島」としてのシーワ・オアシス(エジプト)である。現地では、未着手の調査地に関する情報を勘案しながら、調査研究項目の策定、および調査対象島嶼に関する文献調査、統計資料収集・分析を推進した。調査現地では、拠点構築、統計省庁等を訪問して、資料の収集、現地インフォーマントとの打合せを行った。主な調査項目は以下の通りである。(1)現地のマイクロエコロジー構造(生存物資の調達方法やその範囲、自然環境との共存関係)、(2)現地集落(村落/町/より広域的な生活圏)内での経済活動状況、社会関係のサンプリング調査、1978年以降の人工動態・社会変動(社会関係)、(3)周辺島嶼を含むネットワークの中での当該島嶼の役割(対外関係)、(4)各国内での当該島嶼の政治・経済的位相(対外関係)、(5)都市圏への移民状況(対外関係)。昨年度の調査所見として確認された、(1)1970年代以降のツーリズムの進展によって、現地の経済構造変容が加速されたこと、(2)人口構造(外来者の定着状況を含む)にも注目すべき変化が看取されたこと、が本年度の調査によりさらに深く認識された。なお、8月下旬には、研究班の大半の者がエジプト・カイロに集い、国際ワークショップを開催した。
ダイオキシンによる間葉系幹細胞の多分化能のかく乱とそのメカニズム

AhRノックアウトマウスには肝臓への脂肪の蓄積ならびに背骨の彎曲が観察される。このことはAhRが間葉系幹細胞からの脂肪細胞分化ならびに骨芽細胞分化に関与していることを示唆するとともに、これら細胞分化がダイオキシン類の影響を受けることを示唆している。我々はダイオキシン類が間葉系幹細胞の骨・脂肪細胞への分化をかく乱することを見出した。間葉系幹細胞は骨組織ならびに脂肪組織のみならず、骨格筋、心筋や軟骨組織へと分化し、これらの恒常性の維持や修復・再生に機能していることから、ダイオキシン曝露による脂肪組織の減少、骨形成不全あるいは心筋障害等も組織再生能力の低下が主因のひとつであると推察される。本研究で見出した間葉系幹細胞の多分化能の阻害をはじめとする多くのダイオキシン類の毒性発現はダイオキシン類の受容体であるAhRによって媒介される。そこで次にTCDDに対し高い感受性を持つ3T3-L1細胞に着目し、脂肪細胞分化におけるAhRの量的変化、ならびにその発現調節機構に関する検討を行った。3T3-L1細胞の脂肪細胞分化におけるAhRタンパク質量は、脂肪細胞分化に伴い減少した。またこのAhRタンパク質の減少に対して、プロテオソーム阻害剤の影響は見られなかった。さらに、AhR mRNAの発現量を検討した結果、AhRタンパク質とほぼ同様に脂肪細胞分化に伴い減少することが示された。さらに、脂肪細胞分化におけるAhR mRNAの発現抑制機構を解明するために、AhR遺伝子のプロモーター解析を行った。5'上流を段階的に欠失させたAhR遺伝子プロモーター領域をリポーター遺伝子に繋ぎ、その活性の比較により分化感受性領域を検討した結果、脂肪細胞分化により-399/-339および-296/-217部位の活性の低下がみられた。そこで、これらの領域に結合する因子の検索を行った結果、前駆脂肪細胞で確認された因子が脂肪細胞では明らかに減少していることが示された。これらのことから脂肪細胞分化に伴うAhR mRNA発現量の減少には、-399/-339および-296/-217の領域が関与し、これらの領域上に結合する何らかのトランス活性化因子の分化に伴う量的減少、あるいは活性の低下が関与していることが示唆された。ダイオキシンの毒性はその特異的な受容体であるAhレセプターを介して発現する。Ahレセプターはその構造内にbHLH/PASドメインを有する転写因子であり、他の多くの転写因子とファミリーを形成している。そこで本年度はヒト間葉系幹細胞を脂肪細胞、骨芽細胞ならびに軟骨芽細胞に分化誘導し、その分化能に対する2,3,7,8-Tetrachlorodibenzo-p-dioxin (TCDD)の影響を検討した。まずTCDD存在下において幹細胞を脂肪細胞へと分化誘導し、その分化の程度をオイルレッドOによる脂肪滴の染色ならびにマーカー遺伝子の発現より検討した。その結果、TCDDに曝露した細胞において脂肪滴蓄積の抑制、さらにマーカー遺伝子であるPPARγ2ならびにaP2の発現量の低下が認められた。すなわちTCDDによる脂肪細胞分化の抑制が示された。

その一方で、TCDD存在下において骨芽細胞へと分化誘導した際には、骨芽細胞のマーカー遺伝子であるosteopontinの発現量の増加が観察され、顕微鏡下においても骨芽細胞への分化の促進が観察された。また軟骨芽細胞分化に対してTCDDは影響を与えなかった。以上の結果よりTCDDはヒト間葉系幹細胞の多分化能に対して、脂肪細胞分化を抑制し、その一方で骨芽細胞への分化を促進することが示された。脂肪細胞分化の抑制因子としてMAPキナーゼが知られているが、この因子は同時に骨芽細胞分化の促進因子であることが知られている。我々は以前、TCDDならびにAhレセプターがMAPキナーゼの活性を高めることを見出した(Shimba et al.,2001)。したがって本研究で見い出されたTCDDによる多分化能のかく乱においてMAPキナーゼが関与することが推察された。ダイオキシンは75種類の構造異性体があり、そのなかでも2,3,7,8-四塩化ダイオキシン(TCDD)は最強の生体影響力を持つ。その作用は多岐にわたり、体脂肪ならびに筋肉組織の減少を伴う体重の減少、心不全、骨形成の異常、催奇形成、繁殖抑制、免疫抑制などを示すとともに、発ガンプロモーター作用をも有することが知られている。2,3,7,8-TCDDの毒性を検討する上で細胞レベルでの解析は有効であると考えられ、われわれはヒト間葉系幹細胞の多分化能が影響を受けることを見出した。前年度の研究において、TCDD曝露により間葉系幹細胞の脂肪細胞分化の抑制、ならびに骨芽細胞への分化の促進が観察された。本年度はTCDDならびにAhレセプターがそのタンパク質量を変えることなくMAPキナーゼの活性を高めることを見出した。さらにTCDD曝露により相反する変化を示す遺伝子群をDNAアレイを用いて検索したところ、細胞周期関連因子の発現量が顕著に増加した。これらの結果よりTCDDによるMAPキナーゼの過度の活性化が分化の方向を骨芽細胞分化に有利な方向に細胞を向けるとともに、細胞増殖を刺激することにより分化のプログラムのかく乱を引き起こすと考えられる。
異種金属多核錯体からの合金ナノ粒子の作製と電極触媒への応用

燃料電池をはじめとする電気化学プロセスは、環境に優しいエネルギー及び物質変換システムの基本プロセスとして期待されているが、多くの場合化学結合の形成、解裂を含む多電子プロセスであり、高度な機能を持った電極触媒を開発する必要がある。例えば、幅広い利用が見込まれている直接形メタノール燃料電池の実用化における最大の課題はPt触媒の被毒抑制であるが、Pt近傍にRuを配置することで、COの脱離を促進し、被毒を抑制できる。現在、このような合金ナノ粒子は、各々の金属塩化物をソースとして担体上に電析することで作製されているが、一様な形状・組成を有する合金粒子の作製は困難である。本研究では初めから特定の機能を持っ複数の金属が近接しており、かつ規定比を有するヘテロ金属多核錯体を合成し、これを原料として、均一形状及び組成を有する活性合金ナノ粒子触媒の作製を目指した。2,5-dimercapto-1,3,4-thiadiazole(DMcTH_2)を配位子に用い、それぞれのチオール基の反応性の違いを利用することで、段階的にPt-Ru錯体、Pt-Pt錯体、Pt-Pd錯体などを合成することができる。本年度はPt-PtおよびPt-Ru錯体を原料とする微粒子触媒の調製と評価を行った。これら錯体を金(111)単結晶電極表面上に吸着させた後、加熱分解、電気化学的分解、UV-オゾンクリーナーによる分解を試みたが、酸素雰囲気下、300°Cにて焼成することにより有機配位子の脱離・分解に成功した。このようにして作製した白金微粒子修飾金電極を作用極として、0.1M過塩素酸水溶液中で水素発生(HER)領域の電気化学測定を行ったところ、水素発生電流が観測された。さらに正電位を印加した後、再び水素発生領域まで還元したところ、HER電流の顕著な増加が見られ、熱分解と電気化学的酸化の組み合わせにより高い触媒活性を実現できた。
老年病と性ステロイドホルモンの関係についての研究

高齢者剖検例についてestrogen receptor (ER)-βの代表的な遺伝子多型の一つであるESR2 CA repeat多型を調べ、生前臨床情報および剖検時病理所見を比較し、各種老年病罹患頻度との関係を調べた。女性における大腸癌発症頻度の、ESR2 CA repeat遺伝子多型による差が顕著だったが(P< 0.0001)、男性ではそのような差は認められず、女性の大腸癌発症におけるESR2 CA repeat遺伝子多型およびエストロゲンの重要性が示唆された。遺伝子多型解析Estrogen receptor-β(ER-β)遺伝子(ESR2)のCA repeat長多型と種々の老年病との関係を調べた。CArepeat長25以上のalleleを有する高齢者では有意に高頻度にアルッハイマー病の発症が見られ、これは、性、年齢、ApoE遺伝子多型等、確立されたアルッハイマー病発症予測因子を考慮した多変量解析を行っても独立した発症予測因子であった。特にESR2,CA repeat長のアルツハイマー病発症予測因子としての重要性は女性で際立っていた。アルッハイマー病は女性に有意に発症頻度が高く、また従来、estrogenとの関係が指摘されていた疾患であるが、今回の結果は、ESR2,CA repeat長多型が女性におけるアルツハイマー病の発症に関与している可能性を示唆するものである。脳の免疫組織化学的検索20年度に行う脳のmRNA解析に用いる部位の選択もかね、アルッハイマー病13例および対照12例、計25例を対象に、脳の5部位について、ER-α,ER-β1(ER-β,wild type),ER-β2(ER-βのisotypeの一つ),progesterone receptor (PR),androgen receptor (AR),aromataseの免疫染色を行った。ER-α,PR,ARについては免疫組織化学レベルでの検出は困難であることがわかり、20年度のmRNA解析に期待することとした。前頭葉および扁桃体について観察したところ、アルツハイマー病ではER-βの発現が低い傾向にあり、aromataseは逆の傾向にあった。これらの結果および虚血等の影響の少なさ、そして構造の単純さなどを考慮し、mRNA解析には前頭葉を用いることとした。近年、性ステロイドホルモンは生殖ホルモンとしてだけでなく、生理機能の維持に重要であることが明らかとなり、種々の老年病の発症にも関わっていることが示唆されている。本研究では特に、estrogen receptor-β(ER-β)およびエストロゲン代謝酵素群というこれまであまり研究されてこなかった視点から種々の解析を行い、老年病との関係を明らかにすることを目的とした。遺伝子多型解析1488剖検例(男性799例、女性689例)について、ER-β遺伝子、ESR2のイントロン5に位置するCA repeat遺伝子多型と種々の老年病の発症頻度との関係を調べた。ESR2 CA repeat数により、各alleleを短鎖(S)と長鎖(L)に分け、SS、SL、LLの3群に分類して各群における疾病罹患頻度を比較した。各種老年病のうち、女性における大腸癌発症頻度の、ESR2 CA repeat遺伝子多型による差は顕著で、女性の大腸癌発症におけるESR2 CA repeat遺伝子多型およびエストロゲンの重要性が示唆された。アルツハイマー病の免疫組織化学的検索
新生児期の遺伝子診断の功罪-遺伝カウンセリングシステム構築のために-

[研究の目的]近年我々は,迅速で少量の血液で診断が可能な,早期診断に有用と思われるPrader-Willi症候群(PWS)の遺伝子検査を考案した.一方,PWS患児に対し種々の治療法が試みられているものの,完全に予防できる手段は未だない.このような状況の中で,遺伝子検査により早期に診断をつけることが,患者・家族にとって本当にメリットがあるかを明らかにする目的で,早期遺伝子検査に対するPWS患児の親の考え方を調査した.[対象と方法]PWS親の会の事務局を通して全会員(281名)にアンケート用紙を送付した.回答が得られた157名(回答率56%)につき,記載内容を分析した.[研究の結果]全患者のうち,94%が遺伝学的検査で診断されていた.そのうち98%が染色体(含FISH)検査であった.遺伝学的検査の結果は,90%が染色体欠失,6%が片親性ダイソミー,4%が不明であった.検査時期は2歳未満(早期群)が69%,2歳以降(非早期群)が31%であった.両群を比較したところ,1)告知に関しては,早期群の方に当初ショックが大きかったが,その後疾患に前向きに取り組めたとの回答が多かった.2)症状では「肥満」「行動異常」は早期群の方が有意に少なかった(それぞれ45%:95%,41%:84%),3)治療法では,早期群では運動療法を,非早期群では食餌療法を受けている例が多かった.両群を通じて早期検査の意義があるという回答が多い反面(95%:81%)、早期診断時には親の精神的ケアを求める意見も多かった.[研究の結論]PWSの早期診断は,肥満のみならず行動異常を軽減できる可能性があり有用と考えられた.ただし診断後,親の精神的ケアを含めた適切なフォローアップが極めて重要と考えられた.I.変更事項本研究の主旨である「早期遺伝子診断の功罪」についての検討をより適切に行うため、以下の2点の変更を行った.1.対象疾患を、フロッピーインファント全般からその代表的な疾患であるプラダ-ウィリ症候群(PWS)にしぼった,その理由は、本疾患では正確な遺伝子診断法が確立しており、この結果にしたがって適切な遺伝カウンセリングができるからである.2.対象症例を、これから遺伝カウンセリングを行うPWS児(前向き研究)だけではなく、乳児期までに遺伝子診断され小児病院等で適切な遺伝カウンセリングを受けたPWS児(後向き研究)も含めることにした.その理由は、期間内に検討に値するだけの症例数を確保するためである.II.平成10年度の研究実績前向き研究1.全国数ヵ所の大学病院小児科または小児病院の遺伝科に、PWS新生児・乳児診断基準を作成し送付した.2.上記基準に該当する症例の血液サンプルを、信州大学医学部衛生学教室まで送ってもらうよう依頼した.3.今後該当症例に遺伝子診断を行い、陽性者には後日その両親に遺伝子診断の功罪に関するアンケートの協カを要請する.後向き研究1.新生児・乳児期に遺伝子診断され遺伝カウンセリングを受けたPWS児の有無について、小児病院遺伝科等に問い合わせた.2.今後該当症例にはその両親に,主治医を通じて遺伝子診断の功罪に関するアンケートの協力を要請する.3.さらにこれまで信州大学医学部衛生学教室にPWS診断の依頼のあった症例のうち、乳児期までに診断がつけられたものについても、主治医を通じてその両親に遺伝子診断の功罪についてのアンケートの協力を要請する.1.変更事項本研究の主旨である「新生児期の早期遺伝子診断の功罪」についての検討をより適切に行うため,以下の2点の変更を行った.(1).新生児期に遺伝子検査を施行する疾患のうち遺伝子検査が比較的普及しているプラダーウィリ症候群に対象疾患をしぼり,この検査による早期診断に関する調査用紙を作成した.(2).研究期間内に多数の調査対象を得るために,プラダーウィリ症候群患者の全国組織に研究協力を依頼し,患者の会の事務局を通して全会員に上記の調査用紙を送付した.2.平成11年度の研究実績患者の会の会員281名のうち157名(56%)から回答が得られ,以下のことが判明した.94%が遺伝学的検査で診断され,その検査時期は,新生児期から2歳まで(早期群)が69%,2歳以降(非早期群)が31%であった.両群を比較したところ(1)告知に関しては早期群の方に,当初ショックが大きかったが多かった.ただその後疾患に前向きに取り組めたとの例も多かった.(2)肥満や行動異常という症状では,早期群の方が少なかった.(3)治療法では,早期群では運動療法を,非早期群では食餌療法を受けている例が多かった.(4)両群を通じて早期検査の意義があるという回答が多かった.以上の結果から,新生児期などの早期診断は,肥満のみならず行動異常を軽減できる可能性があり有用と考えられた.ただし診断後の適切なフォローが極めて重要と考えられた.[研究の目的]近年我々は,迅速で少量の血液で診断が可能な,早期診断に有用と思われるPrader-Willi症候群(PWS)の遺伝子検査を考案した.一方,PWS患児に対し種々の治療法が試みられているものの,完全に予防できる手段は未だない.このような状況の中で,遺伝子検査により早期に診断をつけることが,患者・家族にとって本当にメリットがあるかを明らかにする目的で,早期遺伝子検査に対するPWS患児の親の考え方を調査した.[対象と方法]

PWS親の会の事務局を通して全会員(281名)にアンケート用紙を送付した.回答が得られた157名(回答率56%)につき,記載内容を分析した.[研究の結果]全患者のうち,94%が遺伝学的検査で診断されていた.そのうち98%が染色体(含FISH)検査であった.遺伝学的検査の結果は,90%が染色体欠失,6%が片親性ダイソミー,4%が不明であった.検査時期は2歳未満(早期群)が69%,2歳以降(非早期群)が31%であった.両群を比較したところ,1)告知に関しては,早期群の方に当初ショックが大きかったが,その後疾患に前向きに取り組めたとの回答が多かった.2)症状では「肥満」「行動異常」は早期群の方が有意に少なかった(それぞれ45%:95%,41%:84%),3)治療法では,早期群では運動療法を,非早期群では食餌療法を受けている例が多かった.両群を通じて早期検査の意義があるという回答が多い反面(95%:81%)、早期診断時には親の精神的ケアを求める意見も多かった.[研究の結論]PWSの早期診断は,肥満のみならず行動異常を軽減できる可能性があり有用と考えられた.ただし診断後,親の精神的ケアを含めた適切なフォローアップが極めて重要と考えられた.
液胞プロセシング酵素による高等植物の細胞内分解の制御機構

植物細胞の持つ分化転換能力を分子レベルで解明することは、植物細胞の基本的な特性を理解する上で重要である。植物細胞が機能的な転換を図ろうとするとき、不要になった細胞内成分を分解していくことが必須となるが、この際の速やかな分解には液胞内の分解装置が機能していると考えられる。本研究は、液胞内の分解装置のプロセシングによる制御が細胞の分化転換に重要な要因として働いていることを明らかにすることを目的とした。液胞プロセシング酵素VPE(Vacuolar processing enzyme)は、様々な液胞の機能分子の成熟化や活性化に関与していることを明らかにした。VPE分子自体は不活性な前駆体として合成されるが、自己触媒的にC末端側のプロペプチドの除去とそれに続くN末端側のプロペチドの除去が酵素の活性化に必須であることを酵母の発現系およびバキュロウィスルを介した昆虫細胞における発現系を用いて解明した。細胞死やストレス条件下の細胞における液胞プロセシング系の役割について解析を行い下記の結果を得た。Arabidopsis thaliana(シロイヌナズナ)の葉は細胞死に至る過程で、細胞内の不要成分の分解のため液胞内にプロテアーゼ(RD21)を蓄積する。このRD21前駆体分子の成熟化にVPEが関与していることが判明した。即ち、VPE自体が不活性な前駆体として合成され、自己触媒的に液胞内で活性型に変換した後、様々な液胞の機能分子の活性化を制御するという"液胞内プロセシング系"の実体を明らかにすることができた。
病原性酵母クリプトコックス・ガッティは日本の環境中から分離されるか

【目的】HIV陽性者が現在でも増え続けている日本において、クリプトコックス症はAIDS患者のみならず、免疫力の低下している患者にとって驚異となる病原性真菌である。クリプトコックス症はCryptococcus neoformansあるいはC. gattiiの胞子や乾燥した酵母を吸い込むことによって起こる感染症である。このうちC. gattiiは熱帯、亜熱帯地方に限局して存在し、日本には存在しないとされてきた。しかし、2007年、日本国内でC. gattiiに感染したと思われる症例報告があった。さらに、2008年、海外渡航歴のない患者からC. gattiiが分離されたが、これらの感染経路は不明である。すでにカナダやアメリカの温帯地域で患者や動物、さらに環境からC. gattiiが分離されており、病原性の強いタイプが出現しているとの報告がある。日本の環境中にもC. gattiiが存在していると予想される。しかし、現在まで環境からの分離報告はなく、調査を行っていないというのが現状である。今回の研究は、日本の環境中にC. gattiiが既に存在しているかどうかを確認することを目的として行った。【方法】1.植物の葉の表面を綿棒でぬぐい取ることにより、サンプルを集めた。また、周辺の土も採集した。採集したサンプルは採集時に保存用培地で持ち帰り、その後、数種類のクリプトコックス選択培地で培養した。クリプトコックス特有の集落が認められた場合には、これらを純培養し生化学的性状、および遺伝子学的手法を用いて同定を行った。2.採集場所:東京(C. gattii感染の症例報告有り)夢の島公園、兵庫県神戸市(C. gattii感染の症例報告有り)、兵庫県淡路島、長崎県五島市、千葉県千葉市で採集を行った。【成果】今回の研究で採集した113サンプルからCryptococcus属菌は数株分離されたが、C. gattiiは分離されなかった。現状では日本の環境中に広く分布している状況ではないことが分かった。しかし、採集場所、および採集時期が限られていたため、さらにいろいろな場所、時期に採集を行い、調査する必要があると思われた。
障害学生支援における学生相談カウンセラーの組織コンサルテーション機能に関する研究

本研究の目的は、障害学生支援プログラムの実践や支援システムの整備における学生相談カウンセラーの機能、役割を明らかにし、組織コンサルテーションにおける学生相談カウンセラーの役割・機能をモデル化することである。組織コンサルテーションとは、心理学の専門家等が、学校コミュニティのメンバー(教職員など)と協力して、学校組織全体やシステムの課題に対処することである。障害学生支援におけるプログラム評価や学生相談カウンセラーの役割を検証する実践研究、専門家へのインタビュー調査、質問紙調査を行い、それらの結果、学生相談カウンセラーが実効的な組織体制の構築に貢献できることを明確化することを目指す。
FGF18による歯髄・骨芽細胞分化誘導メカニズムの解明とその臨床化

Fibroblast growthfactors (FGF)18は、骨・軟骨組織の発生・分化に関与する成長因子として有名であるが、FGF18の歯髄細胞および骨芽細胞分化について検討した。FGF18はヒト歯髄幹細胞およびマウス頭蓋骨由来しょ第培養細胞、株化骨芽細胞様細胞MC3T3-E1の増殖を促進した。また、FGF18はヒト歯髄幹細胞アルカリフォスファターゼおよびDSPP mRNA発現の亢進を誘導した。以上の結果より、FGF18は硬組織分化を正の方向に制御する機能を有し、臨床において象牙芽細胞あるいは骨芽細胞の分化および石灰化を効率的に誘導する可能性が示唆された。Fibroblast Growth Factors (FGFs)は代表的な成長因子であり、特にFGF2は細胞増殖にかかわっている。申請者はFGFsのメンバーの一つであるFGF18に着目し、FGF18が歯髄組織および歯髄細胞に高い発現が認められることを明らかにした。またFGF18欠損は骨に異常および歯の発育不全が認められる。このことから、FGF18は歯髄細胞および骨芽細胞において細胞の硬組織形成細胞への分化を誘導していると推察されるFGF18による歯髄細胞および骨芽細胞分化のメカニズムの一端を解明するとともに、臨床におけるFGF18を用いた歯髄組織あるいは骨組織における硬組織誘導の可能性を探るのが本課題の目的である。本年度は歯髄細胞および骨芽細胞へのFGF18タンパクの強制発現およびFGF18タンパク添加により硬組織形成性細胞への分化誘導を検討するとともに、FGF18下流のシグナルカスケードを検討する。そのために、骨芽細胞および歯髄細胞としてマウス骨髄ストローマ細胞由来のKusaA1およびマウス歯乳頭細胞由来のMDPを使用する。FGF18発現ベクターは、FGF18のORFを含むcDNAクローンベクターよりORF部分をPCRにて増幅し、さらにエントリーベクターにサブクローニングする。最終的にはV5タグを有する発現ベクターに組み換える。また、テトラサイクリンでOnOffできるシステムの使用も検討する。これらのベクターをKusaA1およびMDPにトランスフェクションし、骨芽細胞マーカーおよび象牙芽細胞マーカーの発現について検討する。さらにFGF18リコンビナントタンパクを添加し、同様に分化への影響について検討する。FGF(Fibloblast growth factor)ファミリーには23のメンバーが存在するが、その中でFGF8サブファミリーに属するFGF18は特に骨・軟骨の分化に関与すると報告されている。これまでに、我々はFGF18がマウスおよびヒト歯髄内において発現していることを報告した。また、FGF18ノックアウトマウスにおいて、切歯の成長が阻害されることも報告した。しかし、FGF18が歯髄の発生および機能にどのように関与しているのかについては未だ不明である。FGF18をin vitroの実験系において歯髄細胞に添加したところ、代表的なFGFメンバーであるFGF2と同様に細胞の増殖活性が増加することが明らかになった。しかし、FGF18を株化歯髄細胞(MDPC23)に添加しても、硬組織系マーカー発現の誘導は確認できなかった。これは、株化歯髄細胞であるMDPC23は未分化な細胞であり、FGF18には硬組織形成細胞である象牙芽細胞へのコミットメントを誘導する機能は有していないために、硬組織マーカーの発現が誘導できなかった可能性が高い。そのため、BMP2といった硬組織形成細胞への誘導が可能な成長因子にて、コミットメントを確立した上でのFGF18の機能について解析していくことを検討している。また、正常歯髄においける発現のみの解析にとどまっていることから、窩洞形成といった侵襲後の歯髄内におけるFGF18の変動を見ることで、象牙芽細胞分化におけるFGF18の役割についても検討できるものと期待される。さらに、FGF18の機能について解明を進めるとともに、その臨床応用の可能性についても検討する予定である。申請者はFGFsのメンバーの一つであるFGF18に着目した。FGF18はFGF8、FGF17とともに一つのファミリーを形成するが、特にFGF18はノックアウトすると骨形成が阻害されることから、硬組織形成に関与するFGFとして注目されている。これまでに、FGF18が歯髄組織および歯髄細胞に高い発現が認められることを明らかにした。またFGF18欠損マウスにて、歯の形成について観察したところ、歯の形成そのものに異常は認められないものの、歯の形成が全般的に抑制されている傾向にあった。このことから、象牙芽細胞あるいはエナメル芽細胞といった歯の硬組織形成を担う細胞の分化方向の決定、すなわちコミットメントにはあまり関与しないものの、細胞の成熟あるいは硬組織形成に関与している可能性が推察される。FGF18による歯髄細胞の硬組織形成への誘導およびそのメカニズムの解明を検討するとともに、硬組織形成時における代表的なシグナルであるWntシグナルの動態についても明らかにする。さらに、BMPは、硬組織形成を誘導する最も普遍的なメディエーターであるが、BMPシグナルとの関連についても明らかにする。FGF18による歯髄細胞および骨芽細胞分化のメカニズムの一端を解明するとともに、臨床におけるFGF18を用いた歯髄組織あるいは骨組織における硬組織誘導の可能性を探る。ヒト健全抜去歯歯髄より分離した歯髄細胞を用い、FGF18添加により、ALP、DMP-1といった硬組織マーカー発現が亢進することを確認した。

さらに、Lアスコルビン酸、βグリセロリン酸、デキサメタゾンの存在下で、石灰化結節誘導を行ったところ、FGF18は石灰化結節形成を促進する傾向にあった。なお、細胞増殖を検討したところ、FGF18にはFGF2と同様に細胞増殖を促進する作用がある。石灰化結節形成が、細胞増殖が亢進した結果なのか、分化が誘導されたのかについては十分に検討する必要がある。今後さらにBMPとの協調作用について検討する予定である。BMP下流のSmadシグナルとFGF下流のRas/Raf/MAPKやPI3K/Akt/mTOR経路とのかかわりについて検討する。さらにWntシグナルとのクロストークについても検討する予定である。Fibroblast Growth Factors (FGFs)は代表的な成長因子であり、特にFGF2は細胞増殖にかかわっている。申請者はFGFsのメンバーの一つであるFGF18に着目し、FGF18がそのリセプターであるFGFR2および3ととも歯髄組織および歯髄細胞に高い発現が認められることを明らかにした。さらにFGF18欠損マウスにおいて、歯の発育不全が認められることも確認した。FGF18は骨芽細胞において分化を促進する方向に誘導することが報告されている。また、FGF18産生には、Runx2およびWntシグナルが関与していることも報告されている。しかし、象牙芽細胞分化における役割については十分に解明されていない。FGF18はFGF2と同程度の細胞増殖誘導能を歯髄細胞に対して示すことを確認した。さらにFGF18には、骨芽・象牙芽細胞マーカーであるAlkaline PhosphataseおよびDentin Matrix Protein 1発現を促進する機能を有していていることを確認した。しかし、FGF18がそのリセプターであるFGFR2および3に結合することにより誘導されるPI3K-Akt、MAPK等にシグナルについて解析が不十分であり今後の課題である。マウス歯乳頭細胞はBMP2存在下で培養することで象牙芽細胞へ分化するが、その際Wnt5a、Wnt11のmRNA発現が誘導される。またWntシグナル阻害薬により象牙芽細胞へ分化が抑制されることから、Wntシグナルも象牙芽細胞分化において重要な役割を担っていると考えられる。これらの所見から、FGF18シグナルとWntシグナルのクロストークが象牙芽細胞への分化誘導過程で起きていると推察される。Fibroblast growth factors (FGF)18は、骨・軟骨組織の発生・分化に関与する成長因子として有名であるが、FGF18の歯髄細胞および骨芽細胞分化について検討した。FGF18はヒト歯髄幹細胞およびマウス頭蓋骨由来しょ第培養細胞、株化骨芽細胞様細胞MC3T3-E1の増殖を促進した。また、FGF18はヒト歯髄幹細胞アルカリフォスファターゼおよびDSPP mRNA発現の亢進を誘導した。
色から光と空間へ-ロマン主義崇高論の射程

本研究では、A.ダントーの「騒乱」(Disturbation)の概念がロマン主義崇高論の現代における展開とその意義を考察する重要な鍵となった。Disturbationとは、ダントーの造語であり、MasturbationとDisturbanceとの両義を含み、Masturbationからは、想像力が身体(現実)を震憾させる力、Disturbanceからは、掻き乱し不安にする働きを継承する。騒乱的な芸術とは、内容的に反社会的、扇情的であるだけでなく、アートと現実との境を突き破る形で見るものを震憾させる、あるいは従来の見るものと芸術との関係を決定的に変更するような作品(パフォーマンス)である。ダントーはこうした芸術はそのディオニュソス祭的な力を再現する試みとみなす。面白いことにこの「騒乱」的な芸術は、否定を介したより高い存在あるいは他者との遭遇という構造を崇高と共有している。こうした「騒乱」と崇高の構造的な一致は、崇高美が太古に起源を持ち、古代以来美と並んで、制御された形態を突き破る人間の根元的な欲求を表現してきたと考えられる。したがって、崇高美は現代におけるパフォーマンス、またパフォーマンス的な働きを求める芸術と通底し、ロマン主義の時代に制限されないアクチュアリティーを持ち続けている。さらに、彩色(Kolorit)がデッサンに対する比重を増し始めたのは、ロマン主義の時代であるが、空間への広がりを潜在的に内包する風景画の登場と不可分な関係にある。またその色彩の概念は、色彩を光のメタモルフォーゼとみなし、固体化に抗する傾向を内包している。歴史画や人物画から風景画への転換は、形態美を規範とする芸術概念から非言語的(感性的)、「脱概念」的、空間的な芸術への移行を示している。彩色論、無形、パフォーマンスはロマン主義の崇高概念と重なり、現代芸術に様々な崇高概念の実践を認めることができる。まずカントの自由美と崇高との関係を考察し直し、カントの自由美とロマン主義の美の概念との関係を明らかにした。検討の結果、カントの自由美において中心的な役割を果たす、構想力の自由は対象の形態の所与性を解消し、無規定性ないしは無形(カント自身はUnform, formlosの区別をしていない)に向かう傾向を持つことが明らかになった。カントが美に「人倫性の象徴」という性格付けを与えたのはまさにこの感性的な所与からの構想力の自由に依ると考えられる。こうした構想力の自由とロマン主義的なものとの関係は、とくにJ.Paulの『美学入門』におけるロマン主義の説明に明確に現れており、パウルによれば、ロマン主義的なものとは単に崇高のみではなく(彼によれば崇高や悲劇的なものは古典主義にもすでに見られる)、無規定性あるいは無限性であり、ロマン主義が開いた無規定的な美と構想力の自由とは不可分に結びついている。ロマン主義における美の概念は、シュレーゲル、ゾルガー、シェリング共通して、美の概念のうちに崇高を含むが、それは一方では、カントの崇高美の影響でもあるが、他方で、カント的自由美のさらなる展開あるいはデュナミークの性格をも持つ。今回の科研のテーマはシェリングを中心とするロマン主義の美の概念が、古典主義的調和美からの逸脱であり、現代的な美への第一歩であることを一つには示そうとしているが、今回の研究で構想力の自由が本来的に無形への傾向を持つことがある程度証明されたように思える。