hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
表面量子状態制御による人工原子・分子の構築

本研究では、STM探針を用いたSi(111)√3x√3-Ag表面へのナノサイズ閉曲線の書き込み、およびAg(111)超薄膜表面に核形成したナノ島への表面電子状態の量子閉じ込めにおいて、閉じ込め構造のサイズ・形状を変化させることで原子・分子様な任意の離散的電子状態を人工的に制御形で実現できることを検証した。また任意のサイズ・形状の閉じ込め構造に対する量子状態の数値計算ツールの開発した。さらに形状がナノサイズレベルの場合には、量子構造は室温においても観測できること、および閉じ込めポテンシャルを評価する際のS波近似の適用限界を明らかにし、さらにこれを超えるS+P+D波近似での評価方法を開発した。本研究の目的は、i)以上に述べたSTM探針を用いた表面への閉曲線の書き込みによる人工原子の実現をSTMをベースとした分光(STS)とdI/dVマッピングにより、閉曲線内に閉じ込められた2次元電子の量子準位とその固有波動関数の実空間分布を観測することにより確認すること、ii)人工原子デザインのために任意の閉曲線内に閉じ込められた2次元電子状態の数値計算ソルバーを開発すること、iii)これらを通し、人為的にデザインした人工原子を√<3-Ag>表面に実現する方法を確立すること、およびiv)√<3-Ag>表面に複数の人工原子を描画し、その形状・間隔・オーバーラップなどをコントロールすることで、artificialな人工原子のデザインと作成を、例えば次頁の図中のpreliminaryな計算結果に示した量子状態波動関数分布を持つような、"人工分子"へと発展させることである。本年度はこれらの中で、まずはじめに2次元電子ガス状態を持つSi(111)√<3x>√<3-Ag>表面上に、STM探針を用いて部分的に√<3>構造が破壊された数nm以下の線分を描画するための最適条件を確立した。またこの条件を用いて実際に√<3-Ag>表面上に直径20nmサイズの閉曲線構造を描画し、この中に閉じ込められた表面2次元電子の量子状態を、STMをベースとしたdI/dVマッピングにより室温で実空間観察することに成功した。さらにこの閉曲線図形内に閉じ込められた表面2次元電子の量子状態を、有限要素法をベースとした2次元音場解析プログラムを利用して数値計算し、実際に実験で観測された量子状態の空間分布やエネルギー位置と比較検討を行った。本研究の目的は、i)以上に述べたSTM探針を用いた表面への閉曲線の書き込みによる人工原子の実現をSTMをベースとした分光(STS)とdI/dVマッピングにより、閉曲線内に閉じ込められた2次元電子の量子準位とその固有波動関数の実空間分布を観測することにより確認すること、ii)人工原子デザインのために任意の閉曲線内に閉じ込められた2次元電子状態の数値計算ソルバーを開発すること、iii)これらを通し、人為的にデザインした人工原子を√3-Ag表面に実現する方法を確立すること、およびiv)√3-Ag表面に複数の人工原子を描画し、その形状・間隔・オーバーラップなどをコントロールすることで、artificialな人工原子のデザインと作成を、例えば次頁の図中のpreliminaryな計算結果に示した量子状態波動関数分布を持つような、"人工分子"へと発展させることである。本年度は、1)√3x√3-Ag表面へのSTM描画方法を用いて、√3x√3-Ag表面に対称性を故意に崩した形状のナノサイズ閉曲線を描画し、その中に閉じ込められて量子化された電子のエネルギー状態密度をSTMを用いたdI/dVマッピングの方法により、室温においてナノスケール実空間観察した。2)上で得られた結果を、昨年度までに開発した有限要素法をベースにした任意形状2次元人工原子の電子状態の数値計算ソルバーによって、まず有限メッシュとして良好に表現しうる要素数を確定して上で計算した結果と比較検討した。これにより、どの程度複雑な形状の表面2次元人工原子の電子状態まで、数値計算ソルバーにより予測可能であることが検証できた。3)室温における量子状態観察の明瞭姓とサイズの関係を調べ、これを元に室温で動作する人工原子構築の際のキーパラメーターとなる表面電子-格子相互作用による電子寿命を定量的に評価した。本研究の目的は、i)STM探針を用いた表面への閉曲線の書き込みなどによる人工原子の実現をSTMをべースとした分光(STS)とdI/dVマッピングにより、閉曲線内に閉じ込められた2次元電子の量子準位とその固有波動関数の実空間分布を観測することにより確認すること、ii)人工原子デザインのために任意の閉曲線内に閉じ込められた

2次元電子状態の数値計算ソルバーを開発すること、iii)電子の量子状態への閉じ込めを支配する閉じ込めポテンシャルを、正確に評価する方法を確立することである。本年度は、1) √<3>x√<3->Ag表面上の点欠陥の散乱ポテンシャルをその周囲の電子定在波パターンから評価する際に、従来使われていたS波近似の適用できる散乱体のサイズや電子エネルギーを明らかにし、さらにS波近似が適用できない場合により高次の部分波を含むS+P波およびS+P+D波近似を適用する方法を開発した。また実際に開発したS+P+D波近似により、S波近似が適用できないサイズの欠陥の散乱ポテンシャルを数値的に評価した。2) Si(111)表面にエピタキシャル成長させたナノメートル厚さのAg(111)超薄膜表面に核形成したナノサイズ島中への表面2次元電子系の閉じ込めを、STMをベースとしたdI/dV観察およびSTS観察により明らかにした。
四重極組込ナノポアを用いた繰り返し１粒子検出法に関する研究

低アスペクト比ポアの周囲に四重極電極を配置したデバイスを用いて、1個の粒子に対して捕捉→イオン電流計測による粒子形状分析のプロセスを繰り返すことで同一粒子についてイオン電流波形を多数回取得する。得られる結果を有限要素解析によるイオン電流シミュレーション結果と照合し、イオン電流応答における1粒子泳動ダイナミクスのバラつきの寄与を明らかにすると共に、電流波形から粒子形状を導出するプロトコルを構築する。以上より、数十nm数百nmサイズの粒子をターゲットとした単一粒子形状解析法を創成する。
動脈硬化血管の収縮異常と血管平滑筋型ATP感受性K^+チャネル

ピナシジル・ニコランジルなどのいわゆるK^+チャネル開口薬(KCO)は、心筋・骨格筋・膵β細胞などの古典的K_<ATP>チャネルの細胞内ATP感受性を低下させて、これらのチャネルを活性化する。ところが、KCOの生体内の主たる作用点である血管平滑筋細胞のK_<ATP>チャネルは、古典的K_<ATP>チャネルと異なり、自然開口を欠き、細胞内ATPにより活性化される特性を有する。そこで、スルフォニルユレア受容体(SUR)2Bと2回膜貫通型K^+チャネルサブユニット(Kir)6.1をHEK293T細胞に共発現し、再構成された血管平滑筋型K_<ATP>チャネルに対するKCOの作用機序をパッチクランプ法で検討した。インサイドアウトパッチ内で、細胞内ATPはチャネルに対して二相性の効果を示した。すなわちATPは、100μMから3mMの範囲で濃度依存性にチャネルを活性化し、10mMでは弱い抑制効果を示した。ピナシジルは濃度依存性に細胞内ATPの活性化のポテンシーを高めたが、抑制のポテンシーを変化させなかった。ATPの代わりにADP・GTP・GDPを用いてもほぼ同様の結果が得られたが、ヌクレオシド-燐酸・ヌクレオシドはピナシジル存在下でもチャネルを活性化しなかった。一方、UTP・UDPは活性化効果のみを示し、抑制効果を示さなかった。そこで、種々の濃度のUTPとピナシジルが共存する時、チャネルノイズの解析を行うと、ピナシジルはチャネルの速い開閉のキネティックスを変化させず、開口可能なチャネル数を増加させてチャネル電流を増大すると考えられた。このようなKCOのSUR2B/Kir6.1チャネルに対する作用機序は古典的K_<ATP>チャネルに対する作用機序と全く異なる。しかし血管平滑筋細胞膜におけるK_<ATP>チャネルの発現密度が低いためか、この事実はこれまでほとんど認識されていなかった。このような作用機序の差異を利用すれば、血管平滑筋細胞特異的に作動する新しい動脈硬化血管の収縮異常の治療薬の開発が可能となるのではないかと考えられた。
マイクロチャンネル管群内気液二相スラグ流を用いた高効率流体輸送システムの基礎研究

マイクロチャンネル内の気液二相流の特性を利用して、わずかな吐出圧で液体を高い位置まで効率的に輸送する装置の開発とそのために必要となるマイクロチャンネル内気液二相流の流動特性の研究を行った。まずマイクロチャンネル内の液体スラグの静的な特性についての実験と解析を行った。マイクロチャンネル内では表面張力により液体スラグは外力を加えることなく保持される。これは、液体スラグの上下面の後退接触角と前進接触角の差によるものであり、液体スラグの長さと、接触角の関係を実験的に測定した。液体スラグな長くなるにつれ前進接触角は大きく増加し、後退接触角はわずかに減少した。この測定結果は、表面張力と重力のバランスからの液体スラグの界面形状の解析結果と良い一致を示した。また、固体(この場合にはガラス)表面のわずかな性状の違いにより、接触角、液体スラグの保持特性が大きく影響を受けることが明らかとなった。次に、マイクロチャンネル内に気液二相スラグ流を流動させ、ボイド率、スラグ速度を様々に変化させて、気液界面構造の観察並びに、摩擦圧力損失を測定した。その結果、マイクロチャンネル内の摩擦圧力損失は、液体スラグ部分の剪断力による圧力損失のみではなく、気液界面における圧力損失も考慮する必要があることが明らかとなった。気液界面における圧力損失は気液界面の数と界面の速度の関数となり、また、界面の接触角は、静止状態のスラグと大幅に異なり、スラグ先端では接触角が90度、スラグ後端では、スラグ速度と共に大きく減少する事が明らかとなった。こうした、流動するスラグの圧力損失を評価するため、測定されたスラグ先端と後端の接触角を用いて気液界面形状を与え、液体スラグ内での流れの3次元数値シミュレーションを行った。その結果、二次流れの影響による界面での圧力損失が増加することが示されたがその値は実験によって得られた値よりもかなり小さいことが明らかとなった。流動するスラグ流では表面張力や固体界面との濡れによる力は静止状態とは大きく異なる可能性がありこうした効果を考慮した解析が必要であることが示された。次に、こうしたマイクロチャンネル内の気液二相流の特性を利用した高効率液体輸送装置の開発を行った。電磁弁とタイマーを用いて、気液混合装置を作成しマイクロチャンネル内に任意の気相スラグ長さ、液相スラグ長さ、気液二体積割合の気液相スラグ流を作りだし、それによって、低い吐出圧で液を高い位置まで輸送する装置を作成した。この装置を用いて、1mの静水圧で10mの高さにまで液体輸送することが可能であることを示した。これにより、実験室レベルでのマイクロチャンネル内の気液二相流を利用した高効率液体輸送装置の実現可能性が示された。今後、より高い位置までの液体輸送方法の開発、マイクロチャンネルをバンドル化して実用的な液体の輸送流量を実現する方法の開発を行うことにより、本装置を省エネルギー高効率液体輸送装置として、低水位差エネルギーを用いた発電システム等への応用することが考えられる。次に、マイクロチャンネル内に気液二相スラグ流を流動させ、ボイド率、スラグ速度を様々に変化させてその摩擦圧力損失を測定した。こうした、気液界面の圧力損失を評価するため、気液界面近傍での流れの数値シミュレーションを行い、そこでの二次流れの効果があることを明らかにした。しかしながらマイクロチャンネル内の垂直気液二相流では、気液二相スラグ流のによる静圧の低減効果が大きく、少ない圧力で液体を高いまで輸送することが可能であることが実験的に示された。また、こうしたマイクロチャンネル内の気液二相流の特性を利用した高効率液体輸送装置の開発のため、自律的に気液を混合する混合部を作成した。

この測定結果は、表面張力と重力のバランスからの液体スラグの界面形状の解析結果と良い一致を示した。また、固体(この場合にはガラス)表面のわずかな性状の違いにより、接触角、液体スラグの保持特性が大きく影響を受けることが明らかとなった。次に、マイクロチャンネル内に気液二相スラグ流を流動させ、ボイド率、スラグ速度を様々に変化させて、気液界面構造の観察並びに、摩擦圧力損失を測定した。その結果、マイクロチャンネル内の摩擦圧力損失は、液体スラグ部分の剪断力による圧力損失のみではなく、気液界面における圧力損失も考慮する必要があることが明らかとなった。気液界面における圧力損失は気液界面の数と界面の速度の関数となり、また、界面の接触角は、静止状態のスラグと大幅に異なり、スラグ先端では接触角が90度、スラグ後端では、スラグ速度と共に大きく減少する事が明らかとなった。こうした、流動するスラグの圧力損失を評価するため、測定されたスラグ先端と後端の接触角を用いて気液界面形状を与え、液体スラグ内での流れの3次元数値シミュレーションを行った。その結果、二次流れの影響による界面での圧力損失が増加することが示されたがその値は実験によって得られた値よりもかなり小さいことが明らかとなった。流動するスラグ流では表面張力や固体界面との濡れによる力は静止状態とは大きく異なる可能性がありこうした効果を考慮した解析が必要であることが示された。次に、こうしたマイクロチャンネル内の気液二相流の特性を利用した高効率液体輸送装置の開発を行った。電磁弁とタイマーを用いて、気液混合装置を作成しマイクロチャンネル内に任意の気相スラグ長さ、液相スラグ長さ、気液二体積割合の気液相スラグ流を作りだし、それによって、低い吐出圧で液を高い位置まで輸送する装置を作成した。この装置を用いて、1mの静水圧で10mの高さにまで液体輸送することが可能であることを示した。これにより、実験室レベルでのマイクロチャンネル内の気液二相流を利用した高効率液体輸送装置の実現可能性が示された。今後、より高い位置までの液体輸送方法の開発、マイクロチャンネルをバンドル化して実用的な液体の輸送流量を実現する方法の開発を行うことにより、本装置を省エネルギー高効率液体輸送装置として、低水位差エネルギーを用いた発電システム等への応用することが考えられる。
歯根膜ルフィニ神経終末の発生・再生に関わる新規イオンチャネルの役割

本研究は機械受容性イオンチャネルとして注目されるacid-sensing ion channel (ASIC) familyの歯根膜ルフィニ神経終末における発現を成体および発生過程におけるタンパクおよび遺伝子レベルで追求することを第一の目的としている。今年度は成体ならびに発生過程におけるASIC familyの局在の追求を行った。実験動物としてマウスを用いた。(1)三叉神経節におけるASIC familyの遺伝子発現の検討ASIC1,2,3,4の遺伝子発現を歯根膜ルフィニ神経終末を支配する三叉神経節で検討したところ、いずれの遺伝子発現が確認された。遺伝子発現結果および市販のASIC抗体のデータベース検索、western blot法により、標的イオンチャネルをASIC3に設定した。(2)三叉神経節におけるASIC3の免疫細胞化学的同定ASIC3抗体を用いた免疫細胞化学により、約25%の三叉神経節ニューロンがASIC3陽性を示し、陽性ニューロンの面積を画像解析法で検索すると、そのうち38%が400-800μm^2の中型ニューロンであった。(3)三叉神経節におけるASIC3の遺伝子化学的同定(4)歯根膜におけるASIC3タンパクの局在の検討免疫染色により樹枝状を示すルフィニ神経終末がASIC3強陽性を示した。神経要素マーカーあるいはシュワン細胞マーカーとの二重蛍光染色により、ASIC3はルフィニ神経終末の軸索に局在していた。以上の結果から、三叉神経節の機械受容を担う中型ニューロンで合成されたASIC3が歯根膜ルフィニ神経終末に運ばれることが示唆された。ルフィニ神経終末の再生時におけるASIC3の役割を明らかにする目的で、雄性ウィスター系ラットに片側下歯槽神経切断術を施し、歯根膜および三叉神経節で同タンパクの発現変化を経日的に追求し、以下の結果を得た。下歯槽神経切断3日後、切歯歯根膜のPGP9.5免疫陽性神経は完全に消失した。7日後には歯根膜神経の再生が始まり、数珠状のPGP9.5陽性の神経線維がわずかに認められた。14日後にはPGP9.5陽性神経は樹枝状の分岐を開始し、21日後には典型的なルフィニ神経終末の構造を呈するようになった。切断後28日目には歯根膜ルフィニ神経終末は形態学的に再生を完了した。一方、歯根膜ルフィニ神経終末におけるASIC3の免疫反応は、神経切断からルフィニ神経終末の再生の完了する28日後まで、全く認められなかった。対照群の三叉神経節において、ASIC3はPGP9.5免疫陽性の神経細胞に発現し、さらに衛星細胞の細胞質にも弱いASIC3免疫陽性反応が認められた。また、ASIC3陽性神経細胞には、侵害受容神経のマーカーであるCGRPに免疫陰性であるものもあったが、わずかながらCGRP陽性神経細胞も存在していた。下歯槽神経切断後の再生期間を通して、非切断側の三叉神経節における衛星細胞にASIC3発現様式の変化は生じなかった。歯根膜神経が消失した神経切断3日後、切断側三叉神経節の神経細胞体と衛星細胞にASIC3免疫陽性反応が認められ、非切断側と顕著な差異はなかった。神経線維が再生を開始した7日後、切断側の衛星細胞に明瞭な輪状のASIC3の発現を認め、14日後になると、衛星細胞のASIC3陽性反応はさらに増強した。切断後21日からASIC3陽性反応は次第に弱くなり、切断後28日には対照群と同程度となった。切断側と非切断側の神経細胞におけるASIC3の発現様式の相違は認められなかった。前年度の結果より、目的分子をASIC3に決定し、以下の実験を行った。1ラットルフィニ神経終末の発生過程をASIC3の免疫染色で追求したところ、成熟するまでASIC3タンパクの発現はみられなかった。しかしながら、動物が成熟するまでは細い歯根膜神経線維にASIC3陽性反応が認められ、これらは侵害受容器と考えられた。微細局在を調べたところ、ASIC3の反応は刺激受容に重要な役割を果たしているaxonal spine存在しなかったことから、成熟した機械受容器ではASIC3は機械受容器の興奮に重要な役割を果たしているカルシウムイオンの代謝に関与していることが明らかとなった。2神経傷害後のASIC3の変動を検討するために、waldo法による歯の移動実験、下歯槽神経の部分切除実験、下歯槽神経結紮実験の3種類の傷害モデルを用いた。予備実験として各3種の神経傷害刺激を与え、経日的に三叉神経節を取り出し、ASIC3の免疫染色を行った。また、歯根膜神経線維の変化をprotein gene product 9.5 (PGP9.5)の免疫染色で確認した。その結果、PGP9.5の免疫染色ではすべての神経傷害モデルで我々の既報通りの神経の変性、再生過程を追求できたが、三叉神経節でのASIC3の経日的変化は、waldo法による歯の移動実験と下歯槽神経結紮実験では著名ではなかった。従って、次年度に計画予定の神経傷害モデルには下歯槽神経の部分切除実験を用いることとした。3ASIC3ノックアウトマウス頭部を台湾の研究者より分与してもらい、同歯根膜をASIC3抗体で染色したところ、神経線維はPGP9.5陽性であったが、ASIC3は陰性であり、また前年度の二重染色の結果からASIC3タンパクは軸索に局在することが明らかとなった。

本年度計画では発生過程におけるASICの変動を追求する予定であったが、標的物質をASIC3に絞ることに時間を要し、またASIC3のcRNAプローベの作成に時間を要したため、発生過程における変動の解明が遅れ気味であった。しかしながら、特異性の高いcRNAプローベが完成したことにより、この遅れは次年度に挽回可能であると考えている。25年度が最終年度であるため、記入しない。in situ hybridization法による末梢神経レベルでのASIC3遺伝子を、前年度作成し、三叉神経節で遺伝子の同定が可能だったプローベを用いて同定を試みたが、脱灰した歯根膜標本ではbackgroundのノイズが激しく、特異性に不安を感じたため、再度、cRNAプローベを作成し直した。そのため、当初計画が予定より遅れたため、研究費の一部を繰り越した。繰越承認期間中に末梢組織で遺伝子シグナルが同定できたので、次年次以降、研究の暮れが挽回可能と考える。ASIC3にターゲットを絞ることができたことから、今後の研究遂行は容易に進むと考えられる。また、研究計画2,3年目に実施予定であるASIC3ノックアウトマウスの解析は、当初、自作する予定であったが、国際学会で意見交換を行った研究者からASIC3ノックアウトマウスの試料を提供してもらうことが可能となったため、研究計画の遅れが挽回でき、当初の研究目標は十分達成可能と考えている25年度が最終年度であるため、記入しない。ASIC3にターゲットを絞ることができ、また神経傷害モデルとして下歯槽神経切断モデルがASIC3の機能解析に有用であることが明らかとなったことから、今後の研究遂行は容易に進むと考えられる。また、歯根膜組織等の非神経組織で遺伝子同定が可能となったことから、タンパク、遺伝子レベルの両面からの研究アプローチが可能となると思われる。
精神分裂病患者の自動的脳情報処理過程の研究:Temporal Window of Integration Theoryに基づく

MMN(mismatch negativity)というERP(事象関連脳電位)は、脳内情報処理の初期の記憶過程(sensory memory traceとdeviated eventsとの前注意的な比較過程)を反映する。MMNは自動的反応であるにも関わらず、求心性感覚入力そのものでなく、記憶過程の反映である。研究代表者らは、特殊な刺激欠落MMNパラダイムを考案することにより、MMNの反映する極小の記憶単位が、約200ms以内の時間的統合機能(Temporal Window of Integration:TWI)を有し、これが知覚の単位に相当する可能性を示してきた。一方、従来より精神分裂病の前注意的な情報処理障害が指摘されてきたが、まさにこれはMMNが関与する事象であると考えられた。本研究では、平成9年度の前半は、脳磁図による局在性同定が行われると共に(Psychophysiology印刷中)、このintegrating windowのtemporal durationの詳細な決定の為に当てられた。刺激自体のdurationによる誤差を防ぐ目的で使用されたclick音によるMMNの発生が検討されたが、結果はTWIの範囲に含まれる短い刺激間隔の場合のclick音の欠落に対しては明瞭なMMNが誘発された(第27回日本脳波筋電図学会発表)。本研究のERP dataの精度向上に、研究代表者が提案したmedian methodが、時間領域における精度の問題、とりわけlatency jitteringに有用である事が確認された(第14回国際臨神経生理学会発表、Special Issues on ERP in BRMIC印刷中)。通常の50ms tone pipsを用いた実験では、Tempora Windowの大きさは150-170msと推測されていたが、click音の実験でも160ms前後という結果が得られた(第6回国際誘発電位シンポジウム発表予定、雑誌投稿中)。以上の結果を踏まえて、平成9年度秋より約30名の精神分裂病患のBPRS、TWIの機能などの測定が行われた(投稿準備中)。以上の結果を踏まえて、精神分裂病患者のBPRS、TWIの機能の測定が行われている(投稿準備中)。
画像解析装置を用いた口腔白板症のmalignant potentialの解析

(対象と方法)当科を受診した口腔白板症79症例を対象として、DNA ploidyおよび細胞周期と、病理組織学的所見および発癌率との関連を検索した。また、口腔扁平上皮癌59症例のDNA ploidyおよび細胞周期も検索し、白板症のそれと比較検討した。DNA ploidyの検索にはFlow cytometryを、また細胞周期の測定にはFlow cytometryとそれに接続した画像解析装置を用いた。(結果および考察)異数倍数体の出現率は、白板症(20/79)では扁平上皮癌(25/59)と比較して有意(p<0.05)に低かった。しかし、S-phase fractionは白板症(15.3%)と扁平上皮癌(16.3%)との間に明確な差は認められなかった。白板症における異数倍数体の出現率は、病理組織学的に高度の上皮異形成を示した症例(13/28)では、軽度の異形成を示した症例(5/33、p<0.01)および異形成を示さなかった症例(2/18、p<0.02)と比較して有意に高かった。さらに、二倍体症例においては、高度異形成症例(23.9%)では軽度異形成症例(12.4%)と比較してS-phase fractionが有意(p<0.001)に高かった。以上の結果は、口腔白板症においては病理組織学的所見がDNA ploidyおよび細胞周期が密接に関連することを示すものであり、細胞動態がmalignant potentialと関連する可能性が示唆された。39症例中、異数倍数体は9例(23%)であり、異数倍数体症例のDNA indexの平均は1.34であった。異数倍数体の出現率は高度異形性症例では8/17(47%)であり、軽度異形性症例(1/15、7%)および異形性を示さなかった症例(0/7、0%)と比較して有意に高かった。二倍体症例30例のG_0/G_1、S、G_2+M期はそれぞれ78.3%、16.3%、5.4%であった。また、異数倍数体症例9症例における二倍体cloneのG_0/G_1、S、G_2+期はそれぞれ84.8%、9.3%、5.8%であり、異数倍数体cloneでは75.3%、17.2%、7.5%であった。異数倍数体cloneでは二倍体cloneと比較して、G_0/G_1期が低く、S期およびG_2+M期が高かったが、有意差はなかった。他方、二倍体症例中、高度異形性症例(n=9)のG_0/G_1、S、G_2+M期はそれぞれ71.7%、23.0%、5.3%であり、また、軽度異形性症例(n=14)でははそれぞれ82.0%、12.4%、5.6%、異形性を示さなかった症例(n=7)では79.3%、15.5%、5.3%であった。高度異形性症例では軽度異形性症例と比較して、G_0/G_1期が有意に低く、S期が有意に高かった。以上、口腔白板症においてはDNA ploidyのみならず、細胞周期も組織学的所見と密接に関連することが認められ、FCMによる解析がmalignant potentialの検索に有用である可能性が推測された。

DNA ploidyの検索にはFlow cytometryを、また細胞周期の測定にはFlow cytometryとそれに接続した画像解析装置を用いた。(結果および考察)異数倍数体の出現率は、白板症(20/79)では扁平上皮癌(25/59)と比較して有意(p<0.05)に低かった。しかし、S-phase fractionは白板症(15.3%)と扁平上皮癌(16.3%)との間に明確な差は認められなかった。白板症における異数倍数体の出現率は、病理組織学的に高度の上皮異形成を示した症例(13/28)では、軽度の異形成を示した症例(5/33、p<0.01)および異形成を示さなかった症例(2/18、p<0.02)と比較して有意に高かった。さらに、二倍体症例においては、高度異形成症例(23.9%)では軽度異形成症例(12.4%)と比例してS-phase fractionが有意(p<0.001)に高かった。以上の結果から、口腔白板症においては病理組織学的所見が、DNA ploidyおよび細胞周期が密接に関連することが認められ、これらの細胞動態がmalignant potentialと関連する可能性が示唆された。
脊髄損傷におけるリハビリテーション効果促進に繋がる分子メカニズムの解明

脊髄損傷後のリハビリテーションが運動機能回復へ与える影響についてそのメカニズムを解明するため、歩行訓練によるリハビリテーション効果の差が確認できる2種類の動物実験モデルを確立した。リハビリテーション効果を除去したモデルを解析した結果、損傷後早期の後肢の荷重感覚入力は運動機能回復に明らかなに影響を及ぼしたことより、リハビリテーション効果を促進する重要な因子である可能性が示唆された。申請者は当該年度、2種類の動物モデルを作成するために、Tail-suspention法のための特殊ケージの作成、実験の機序、懸垂が与える影響などについて基礎検討を行った。まず、リハビリテーション完全除去モデルを作成するための検討を行った。SDラットの第10胸髄に圧挫損傷を与え、後肢の荷重が回復する損傷後約714日目よりTail-suspention法にて脊髄損傷ラットの後肢挙上を開始した。経過中は自発運動を抑制せず、特殊ケージ内で2週間飼育した。後肢挙上による影響として、骨萎縮・関節拘縮について調べたが、明らかな所見を認めなかった。挙上終了後、通常ケージ内で2週間飼育し、脊髄・後肢の筋組織を採取した。通常ケージ内のみで同期間飼育した脊髄損傷ラットと運動機能・体重・筋量について比較検討した。後肢の運動機能は、挙上したラットにて痙性が増強し、運動機能評価(BBBスコア)が低下する傾向を示した。また、体重・筋量は、明らかな差を認めなかった。以上の結果より、急性期から亜急性期の期間、後肢の荷重感覚入力を挙上によって欠損させることにより、損傷後の運動機能回復に明らかな差異が生じる可能性が示唆され、リハビリテーション完全除去モデルの確立に近づくことができた。さらに、リハビリテーション負荷モデルを作成するために、損傷後4日目よりトレッドミル装置による歩行訓練を導入し、条件検討を行っている。申請者の以前の研究における経験より、次年度に予定している脊髄機能変化時の発現遺伝子の網羅的解析の成否については、比較解析に用いるサンプルの選定により大きく影響されることが想定される。つまり、臨床データに近い結果を得るためには、より適切な動物モデルが必須となり、運動機能評価にて大きな差が生じる条件を導き出す必要がある。引き続き検討を行い、妥当性を検証した上で、その後の解析に繋げていく予定である。申請者は当該年度、脊髄機能変化時の発現遺伝子の網羅的解析に用いる適切な2種類の動物モデルを作成し、妥当性を検証した。条件検討の結果、リハビリテーション完全除去モデルの作成は、SDラットの第10胸髄に軽症の圧挫損傷を与え、後肢の荷重が回復する損傷後約7日目よりTail-suspention法を用いた後肢挙上を2週間継続し、挙上終了後は通常ケージ内にて6週間飼育して妥当性を検証した。通常ケージ内にて同期間飼育した脊髄損傷ラットを比較コントロールとして運動機能・体重・筋量について比較検討したところ、後肢の運動機能評価(BBBスコア)は有意に低下し、体重・筋量は明らかな差を認めず、リハビリテーション完全除去モデルとしての妥当性を評価した。しかし、個体数の増加に伴い、後肢挙上終了後より強い痙性が残存するラットの発生を一定の割合で認め、運動機能評価が困難な個体を認めた。重症の圧挫損傷ラットでは自然経過中に痙性を示す傾向があることより、より適切なモデル群を作成するためには後肢挙上前に重症度についてスクリーニングを行い、損傷度の個体間差を減少させる手段が必要であると考えた。スクリーニングの手段として電気生理学的解析法やバイオマーカー測定などを今後検討していく予定である。さらに、痙性と運動機能回復との関連については今後の研究課題となった。また、損傷部の組織学的評価では既知の軸索伸長関連分子を中心に複数のマーカーについて解析を進めているがこれまでに明らかな変化を認めず、網羅的解析へ進めるための分子の探索を継続している状況である。結果として実施計画に準じ期間内に到達目標に達することは出来なかったが、解析を可能とするモデルの作成に成功し、損傷早期からの後肢の荷重感覚入力が損傷後の運動機能回復に影響を及ぼす可能性を示すことができた。今後は今回獲得した知見およびモデルを用いてこの研究を包括的に解析し、リハビリテーション効果促進に繋がる分子の同定を目指して解析を進めていく所存である。
唾液腺腺房細胞の開口分泌に関わる分子の発現と動態解析

低分子量GTPaseであるRabはGAPとGEFの働きにより、GDP/GTPサイクルを巡って膜輸送に係わっている。本研究ではRab27がエフェクター分子群と共同して耳下腺腺房細胞の開口分泌に関与しているか、GDP/GTPサイクルにRab27-GAPおよびGDIが関わっているか、さらに不活性型Rab27(GDP型)を活性型(GTP型)にするRab27-GEFについて調べた。これにより開口分泌にはMADDがRab27に対して円滑にGDP型からGTP型に移行させることが重要であることが明らかとなった。耳下腺腺房細胞におけるRab27のGDP/GTPサイクルの全容を示すことができた。超高齢社会を迎え、唾液分泌量の低下による口腔乾燥症を訴える患者が増加している。咀嚼、嚥下、会話、齲蝕予防、感染予防など、QOL(クオリティー・オブ・ライフ)を考える上では唾液分泌は重要な要素である。本研究では腺房細胞(外分泌細胞)における分泌顆粒の形成から放出後まで細胞内膜輸送の必須因子ある低分子量GTPase (Rab)を中心としたネットワークおよび開口分泌時の分子の動態を解明することを目的とした。咀嚼、嚥下、会話、齲蝕予防、感染予防など、QOL(クオリティー・オブ・ライフ)を考えるでは唾液タンパク質分泌は重要な要素である。本研究では、腺房細胞(外分泌細胞)における分泌顆粒の形成から放出後まで、細胞内膜輸送の必須因子である低分子量GTPase(Rab)を中心としたネットワークおよび開口分泌時の分子の動態を解明することを目的とした。【目的】耳下腺腺房細胞において低分子量Gタンパク質であるRabファミリーのRab27が開口分泌に関わっていることを明らかにしてきた。今年度はRab33Aの細胞内局在とアミラーゼ分泌を指標として、Rab33Aが開口分泌に関わっているかを調べた。【方法】ラット耳下腺腺房細胞よりmRNAおよび細胞膜画分を調製し、RT-PCRおよびWestern blottingを行った。さらに抗Rab33A、抗VAMP2および抗GM130抗体を用いて免疫組織化学を行った。また抗Rab33A抗体、GST融合Rab33A TN (GDP型)およびRab33A QL (GTP型)リコンビナントタンパク質をSLO処理した膜透過性腺房細胞に導入し、イソプロテレノール刺激時のアミラーゼ分泌を測定した。【結果】RT-PCRおよびWestern blottingの結果、Rab33Aは耳下腺腺房細胞に発現していた。また、免疫組織化学の結果、Rab33Aと分泌顆粒のマーカーであるVAMP2および一部Rab33Aとゴルジ体のマーカーであるGM130が共局在していた。一方、アミラーゼ分泌実験において抗Rab33A抗体とGST融合Rab33A TNを腺房細胞内に導入した場合、分泌抑制がみられた。【考察】耳下腺腺房細胞においてRab33Aは分泌顆粒膜およびゴルジ体に存在しており、抗体および不活性型Rab33Aリコンビナントタンパク質導入によりアミラーゼ分泌が抑制された。以上のことよりRab33Aが開口分泌に関わっていることが示唆された。口腔生化学当初の計画ではRab27を中心にその多くのエフェクターがどこでどういう働きをしてRab27のサイクルを回しているのか解明することことを目的としていた。しかし、ここまでの研究のデータから分泌顆粒が成熟するまでの過程にRab33が関わっている可能性が示唆された。これは当初の計画を超える成果と言える。耳下腺腺房細胞のエクソサイトーシスにRab27が重要な役割を果たしている。しかし耳下腺腺房細胞内での挙動は明らかにされておらず、どのようなエフェクターが関与してRab27を制御しているのかも不明であった。現在までに耳下腺Rab27のGAP(GTPase活性化因子)はEPI64であること、GEF(GDP/GTP交換因子)はDENNDファミリーのMADDであることを突き止めた。本研究により、これまで明らかにしてきたRab27のエフェクターであるSlac2-c, Slp4, Noc2およびGDIと共にRab27の耳下腺腺房細胞でのおおよそ一連の挙動を推測できる段階にまで達することができた。耳下腺腺房細胞中でアミラーゼを含む分泌顆粒が成熟していく過程に本当にRab33が関わっているのか精査する。それがRab33AまたはRab33Bなのか、ウエスタンブロッティングおよび免疫組織化学を駆使してその挙動を経時的に観察する。

また、どの程度のアミラーゼ分泌に影響を及ぼすものか検討する。(1)IPR刺激による耳下腺腺房細胞中の各種Rabとエフェクター類のmRNA発現変化の網羅的解析および各発現量の定量化ーマイクロアレイによる解析。発現量に変化のあるRabおよびエフェクターを選別し、リアルタイムPCRにより定量化。(2)経時的な各種Rabとエフェクターの細胞内局在変化の解析ー免疫組織化学的手法を用いてβ刺激前後のRabとRab/エフェクター複合体の挙動を観察する。器具購入時にメーカーのキャンペーンがあり、予定していた金額より安く購入できた。次年度は消費税が上がり価格の上昇が懸念される。そのため、物品費として試薬等の購入に充てる。平成25年度の研究計画を継続して行い、更に(3),(4)および(5)の実験を開始する。(3)経時的なRabのGTP型、GDP型の割合変化の検索ーGTPまたはGDP結合Rabを特異的に結合できる解析ツールを用いpull down assayによりGTP型とGDP型Rabの割合を算出する。(4)唾液腺腺房細胞内に発現しているRab27以外のRabをサイクルさせるための因子、GDP/GTP交換反応促進因子(GEF)、GTPase活性化タンパク質(GAP)、GDP/GTP交換反応抑制タンパク質(GDI)、GDP解離促進因子(GDF)の同定ーRT-PCR,ウエスタンブロッティング,免疫組織化学を駆使して、腺房細胞内発現と局在、刺激後の挙動を明らかにする。(5)分泌顆粒消失後から再生までのRabとエフェクターの挙動追跡ーβ刺激により分泌顆粒を全て放出させ、そこから顆粒再生までをウエスタンブロッティング,免疫組織化学を駆使してRabとエフェクター挙動を経時的に観察する。
フランス自動車産業の発達と政府の産業政策に関する研究

(1)研究課題に関連する基礎的統計・資料・文献の収集ならびにデータベース化作業。文献資料については、日本でのフランス研究で比較的手薄なEC共通市場開設前の戦後復興期に重点を置き、日本の研究成果をサーベイすると同時に、とくに海外の英仏語図書ならびに研究論文の体系的な収集に努めた。これらのデータベース化にはパソコンソフト「dBASEIV」を使用し、プログラミングにより各文献にノートを書き加える仕様とし、キーワードによる文献名・ノートの検索が出来るよう工夫した。現データベース化した文献資料数は790にのぼる。(2)戦後復興期における政府の自動車産業政策と仏有力企業の対応について基礎的分析。とりわけ共通市場開設直前の50年代末において輸出を奨励する政府政策に対して、国有ルノ-公団の企業戦略と私企業プジョーのそれとを対比させ、併せてドイツVW社の動向を加味する中で、いかなる海外事業展開を果たしたのかという問題に焦点を絞り検討を加えた。考察の結果、ドイツVW社の事業展開は堅実かつ入念な準備を経ているのに対して、フランス企業は拙速かつ他律的である姿が浮き彫りになった。これらは近日中に公表したいと考えている。(3)80年代以降成熟期に入ったフランス自動車産業の今日的動向について、日本自動車産業との対比において検討した。その作業の一環として、フランス経済計画庁研究助成基金による研究論文集『フォード主義VSトヨタ主義-日仏自動車生産システムにおける近代化の道』の翻訳に取り組んだ。この論文集は、日仏システムをフォード主義・トヨタ主義をキーワードにした、時宜にかなうトピックを扱っている比較研究であり、フランス研究者が日仏自動車産業発達史をいかなる目で見ているかを示す興味深い論文集である。これについては共訳書として近く公刊される予定である。
中世日本の貨幣システムの研究

1中世の古文書・古記録・文学・思想的著作等の調査を行った。その中で、16世紀初期の京都で嘉定通宝という南宋銭が珍重されていたという興味深い事実が検出され、16世紀中期以降の永楽銭・洪武銭など特定銭種の基準貨幣化の先蹤として注目される。また今年度は特に未撮影・未翻刻史料の収集に努め、近畿地方の近江湖東地域・南山城地域、九州の佐賀平野周辺などに重点を置いて、室町・戦国期文書の調査・撮影を実施した。2出土銭や鋳造関連遺跡の情報収集・調査を進めた。特に最近、15世紀末期の堺の貿易商人が大量の銭貨を琉球に持ち込んでいた事実が紹介されたことから、沖縄の遺跡に注目して現地調査を行ったところ、当該地域においては数千枚を超える大規模一括銭の出土が未だなく、何人かの発掘担当者から聞いた限りでは、将来発見される可能性も低いという意見が強かったのが印象的であった。なぜ琉球では銭貨埋蔵が少ないのか、また逆になぜ中世日本では数万数十万規模のものまであるのか、その社会的あるいは文化的な意味・背景を対比的に突き詰めていくことが、今後の課題として浮上した。出土銭としては他に信濃や四国地方の主要なものを実見し、また博多・京都などの銭貨鋳造遺跡については、その中世における地理的位置を意識しつつ調査を行った結果、いずれも住人の多い都市的景観の中で、意外に大っぴらに銭貨私鋳が行われていた可能性が見出された。3考古資料と文献史料とを連関させながら、中世貨幣の実像を捉え直してみた。その成果の一部は、中世国家の貨幣に対する姿勢に注目しつつまとめたほか、中世経済に関する書評の中でも言及した。と同時に、1の嘉定通宝が珍重された理由や2で触れた諸点など、今後究明すべき課題も明らかになった。渡来銭の受容については、貨幣価値が銅地金としての価値の34倍に達することを見出し、貨幣商品説では説明できないことを確かめた。また、中世公権力の貨幣政策については、建武新政期の貨幣発行計画のほか、対立する北朝朝廷も貨幣統制に乗り出している事実が確認され、14世紀中・後期の国家指導層全体に貨幣発行権への関心が広がっている事実が検出できた。2中世の先進地帯で、未撮影・未翻刻史料の多い滋賀県に出張し、「上坂文書」「下坂文書」「全長寺文書」「丹生神社文書」などの調査・撮影を行った。3出土銭や鋳造関連遺跡の情報収集・調査を進めた。折よく出土銭貨研究会下関大会シンポジウム「わが国における銭貨生産」にパネラ-として参加し、古代・中世の銭貨鋳造について比較・討論する機会を得て、併せて長登銅山遺跡(山口県美東町)などを実現し、中世以前の銅採掘・精錬に関する最新情報に接した。国内における独自貨幣の鋳造について研究を進めるためには、今後さらに銅の生産・流通の実相を究明していくのが不可欠である。またこれより先、浪岡城(青森県浪岡町)・志苔館(北海道函館市)など、大量の銭貨出土で知られる遺跡を巡見し、特に浪岡では発掘調査担当者の話を直接聞くことができた。それによれば銭の埋納には宗教的色彩が濃厚であり、1で触れたこととも関わるが、中世の人々が渡来銭を用いた背景を探ろうとすれば、彼らが銭の中に見出していた呪力の問題を避けて通れないことが明白になった。
新規な立体保護基を用いた高反応性有機スズ化合物の安定化とその構造・性質の解明

まず高反応性有機スズ化合物の速度論的安定化の第一段階として、立体保護基として用いる2,4,6ートリス[ビス(トリメチルシリル)メチル]フェニル基(Ar基)に含スズ官能基を導入するため、ArBrから容易に調製が可能なArLiに対し求電子試薬としてSnCl_4を作用させることでArSnCl_3を安定な結晶として合成した。また、ArLiとSnCl_2との反応も検討し、溶液中に生成したArSnClに対し、さらにTipLi(Tip=2,4,6ートリイソプロピルフェニル基)を作用させることでこれまでに報告例のない溶液中室温でも安定なジアル-ルスタニレンであるAr(Tip)Sn:を合成することができた。次に、スズ-カルコゲン二重結合化合物の合成の前駆体として、まず得られたArSnCl_3からさらに官能基変換を行いジヒドロスタナンAr(R)SnH_2に導いた後,これと単体硫黄あるいはセレンとの反応によりスズを含む新規な環状ポリカルコゲニド(Ar(R)SnY_4;Y=S,Se)を安定に合成単離し、これらの特異な分子構造をX線結晶解析により明らかにすることができた。次いで得られた環状ポリカルコゲニドの熱、光或はリン試剤等による脱カルコゲン化反応を種々検討したところ、目的とするスズ-カルコゲン二重結合化合物であるスタナンチオン(Ar(R)Sn=S)やスタナチオスルフィン(Ar(R)Sn=S=S)及びそのセレン類似体の生成に成功した。一方、先に合成した安定なジアリ-ルスタニレンであるAr(Tip)Sn:を基質に用い、これにカルコゲン源としてエピスルフィド及びエピセレニドを反応させたところ、この手法によってもスタナンチオン(Ar(Tip)Sn=s)及びスタナンセロン(Ar(Tip)Sn=Se)が得られることを見出した。得られた新規な有機スズ化合物については、各種スペクトルの測定によりその性質を詳細に検討するとともに、その不飽和結合の特異な反応性を利用した様々な付加環化反応を行い、これまでに合成単離例のない1,3ージチアー2ースタネタンー4ーチオン、1,2ーチアスタネト、及び1,2ーセレナスタネト等のスズ及びカルコゲン元素を含む新規な高歪み複素小員環化合物を多数合成することに成功した。
標準的治療を受ける進行非小細胞肺がんを持つ人のライフサポートプログラム開発

標準的治療を受ける進行非小細胞肺がん(Non-Small Cell Lung Cancer:以下、NSCLC)患者の症状クラスターを中心にすえた因果モデルを修正し、ライフ(生・生活)の充実を図るケアプログラム開発を目指した。100人の進行NSCLC患者がMDアンダーソン症状評価表(日本語版)などに回答した。症状クラスターの識別は、探索的・確認的因子分析、重回帰分析などを行った。結果、新4症状クラスターを識別し、修正BとE症状クラスター因果モデルから有効性を期待できるケアプログラム開発に示唆を得た。したがって、BとE症状クラスターに焦点化したケアプログラム開発の継続と適用評価が継続課題である。本年度の研究目的は、昨年度の遅れている1)進行期の非小細胞肺がん(Non-Small Cell Lung Cancer:以下、NSCLC)を持つ人の症状クラスター基本モデルの修正と因果モデルの検討とその結果を踏まえた、2)がん患者の症状クラスターに関するケアの文献、「ライフサポートプログラム」素案の考案と欧米の実地による情報収集と推奨適用方法の検討である。1)については、研究協力の得られた2施設において、適格条件の対象者のエントリーとデータ収集を進め、サンプル計N=34(当初N=60予定)と予備研究結果(N=60)を合計しN=94(平成25年3月31日現在)でSPSS20.0、AMOS20.0を使用し吟味した。研究協力者94名(男性60.6%)は、平均年齢(SD)63.7(10.8)歳、中央値64.0歳であった。診断からの日数は、平均(SD)368.6(552.2)日、中央値162.0日、PS平均(SD)1.0(0.6)、中央値1.00であり、機能的状態が一昨年度より良好に保たれたメンバーシップとなった。症状の深刻さの平均値(SD)は、上位5項目で、だるさ疲れ3.4(2.8)、眠気2.9(2.7)、食欲不振2.8(2.8)、足の弱り2.5(2.6)、口の渇き2.4(2.8)、不安2.4(2.7)と続き順位が変化した。以上のスコアに基づき、3症状クラスターの可能性が示唆された。そこで、3症状クラスター基本モデルと昨年度の5症状クラスター基本モデルのそれぞれのGFI(適合度指標)、RMSEA(平均2乗誤差平方根)を比較し、適合性の評価をすすめている。2)については、適合性の評価結果に基づき、それぞれのクラスターのコアとなる症状を推定し、各症状に関するケアの文献を中心に文献検討を進めている。そのため、欧米実地による推奨適用方法については、来年度実施へ修正とした。本年度の目的は、1)進行期の非小細胞肺がん(Non-Small Cell Lung Cancer:以下、NSCLC)を持つ人の症状クラスター基本モデルの修正と因果モデルの検討。2)その成果に基づく彼らの症状クラスターに関するケアの文献検討に基づく「ライフサポートプログラム」素案の考案。3)欧米実地による情報収集と推奨適用方法の検討である。1)については、研究協力の得られた2施設において、対象者のエントリーとデータ収集を継続し、総計N=100出SPSS20.0、AMOS20.0を使用し吟味した。研究協力者100名(男性62%)は、腺がん90%、StageIV(75%)、平均年齢(SD)63.22(10.7)歳。診断からの日数は、平均(SD)374.56(SD546.01)日とより延命しPS平均(SD)1.0(0.6)と機能的状態が良好なメンバーシップとなった。症状の深刻さの平均値(SD)は上位から、だるさ疲れ3.28(2.76)、眠気2.89(2.61)、食欲の喪失2.71(2.79)、足の弱り2.49(2.56)などと続き下位に変化が見られた。以上に基づき精度を高めた(N=100)15症状項目の探索的因子分析の結果、N=60の時点で指摘された4症状クラスターのうち、2症状クラスターが再識別され、このB症状クラスター(だるさなどの5症状)などが、進行期NSCLC患者に典型的と示唆された。この新4クラスターモデルは5症状クラスター基本モデル1(N=60)に比し、GFI(適合度指標)0.815、0.735、RMSEA(平均2乗誤差平方根)0.111、0.122と精度が高まり、修正モデル候補とした。続き、因果モデルの検討を進めている。2)1)の成果に基づきB症状クラスターの症状項目に焦点化して、文献検討を続けている。3)MDアンダーソンCancer Centerでの情報収集を平成26年3月17日21日に実施した。

したがって、BとE症状クラスターに焦点化したケアプログラム開発の継続と適用評価が継続課題である。本年度の研究目的である、進行期の非小細胞肺がん(Non-Small Cell Lung Cancer:以下、NSCLC)を持つ人の症状クラスター基本モデルの修正と因果モデルの検討について、研究協力の得られた2施設において、適格条件の対象者のエントリーとデータ収集を進めた。前年度までの予備研究結果と本年度の動向に基づき、2施設(合計対象者数N=60予定へ修正)した。結果、計24名(目標達成40%)のデータを得て、症状クラスター基本モデルについては、同適格条件対象者であった予備研究結果(N=60)を加え、計N=84としてSPSS20.0,AMOS20.0を使用し、吟味した。研究協力者84名(男性62%)は、平均年齢(SD)63.7(10.4)、診断を受けてから平均(SD)395.9(572.1)日であった。現在の治療内容は、第一次治療者が52.4%で、PS平均(SD)1.1(0.6)と比較的機能的状態が良好に保たれた、予備的研究の集団とほぼ類似したメンバーシップであった。症状の深刻さ平均点(SD)は、上位5項目でだるさ疲れ3.6(2.9)、眠気3.1(2.7)、食欲不振3.0(2.9)、口の渇き2.6(2.9)、不安2.6(2.8)と続いた。各症状の存在率(%)に大きな動向の変化はなかった。以上のスコアに基づき、探索的因子分析(主因子法、プロマックス回転、クラスター分析)と確認的因子分析によって、予備研究成果に基づく4症状クラスター基本モデル1・2と5症状クラスター基本モデル1を作成し、検討を進めた。結果、4症状クラスター基本モデル1と5症状クラスター基本モデル1では、それぞれGFI(適合度指標)0.802,0.735、RMSEA(平均2乗誤差平方根)0.130,0.122となり、適合度の数値から、5症状クラスターモデルの適合が良い傾向が示唆された。平成23年度科研費実施に当たる助成金交付が8月1日になったことで、研究開始時期が4月から9月にずれ込み、本研究の進捗は約5カ月遅れた。平成24年度には、各施設における担当者の変更や手続きの更新のため、遅れが重なり、サンプル数の少ない進行非小細胞肺がん(NSCLC)患者を対象とする本研究の基盤となる基本モデルの評価に継続した影響を与え因果モデルの検討が遅れている。その遅れを受け、欧米実地による推奨適用方法については、来年度実施へ修正とした。平成23年度科研実施に当たる助成金交付が8月1日になったことで、研究開始時期が当初予定の4月から9月にずれ込んだため、研究開始が最大で5か月遅れた。平成24年3月31日現在、当初予定のデータ収集予定数(N=60予定)40%にとどまっている。そのため、基本モデルの解析に必要なサンプルサイズとしては、信頼性が十分な段階ではないため修正モデルの解析の途中であり、因果モデルの検討までは至れていない。今後は、平成25年度の計画進捗と合わせて、遅れているデータ収集を継続し、予定サンプルサイズに近づける努力によって、サンプル数が100台になることで、共分散構造分析の精度を高め、修正モデルの検討から因果モデルの考案までの研究プロセスの進捗をはかる。このことは、平成25年度の計画である症状深刻さスコアを基に重症度分類を行い、クラスター分析によって、QOL低下を招くリスク集団を特定することの進捗を図ることにつながると考えられ、遅れを修正する。