hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
宇宙環境下熱流動現象の理解に基づく機能的熱流体制御デバイスの創出

2018年度は高熱流束化に向けた基礎的理解ならびに高熱流束化指針が明らかにされたこと,凝縮素過程を観察する装置が完成し,その基礎データが得られるとともに,新たな知見が得られたことから,概ね順調に進展していると判断した。本研究では,前述した目的を達成するために,多孔体内沸騰限界の解明に基づく高熱流束型LHPの実現,輻射冷却凝縮過程の解明に基づくラジエータの小型軽量化,熱流体制御ネットワークの検討を進める。まず,将来宇宙機の熱要求である熱輸送距離1m以上,熱流束20W/cm2以上を達成するため,蒸気溝形状,多孔体細孔径,浸透率,濡れ性とシステムの圧力損失の関係を明らかにし,蒸発器蒸気溝と蒸発熱伝達の関係を明らかにするとともに,20W/cm2以上を達成し得る具体的な蒸気溝チャネル構造,特性を同定する。次に昨年度構築した宇宙環境を模擬した装置を用いて,LHP凝縮素過程をハイスピードカメラ(可視域)で観察し,凝縮様式を明らかにするとともに,物理モデルを提案する。また,ラジエータ全体の温度分布を詳細に計測することで,流路断面積,流路間隔,基盤の熱伝導率を考慮したフィン効率の最適化を図る。さらに,小型・軽量化要求に厳しい超小型衛星を対象とし,超小型衛星の熱要求を具体的に達成する熱制御ネットワーク構成を提案するとともに,それを実現するためのハードウェアの製作を行う。
救急初期診療の可視化に基づいたチーム医療のシミュレーション教育システムの研究

研究期間中187件の実処置例の3次元撮影を行い、そのデータを動線と会話分析で解析する手法の開発を行った。その解析結果を踏まえて、ER内で、心肺蘇生シミュレーション教育を継続的に50回実施した。そして、その動線と会話を繰り返し解析することで、ER内で実施するシミュレーション教育の雛型を確定させた。具体的には、心肺停止例を対象として、(1)事前教育方法、(2)シミュレーション人形の利用方法、(3)処置時間、(4)メンバー構成とその役割などを確定し、教育の標準化や評価の正規化を図った。このシミュレーション教育プログラムは、初期研修医を受け入れている全国の救命センターで利用可能である。【平成25年度実施概要】[実処置例の継続的なアーカイブ]東京医科大学病院救命救急センターに、1つのストレッチャーを取り囲むように複数台のステレオカメラからなるシステムが実装されており、そのシステムを改良しながら実処置例のアーカイブを行った。そして、録画データから会話と同期させながら、医療者動線を抽出した。これまでの主な対象患者は、CPA(心肺停止)であったが、意識障害もの対象に含むことで、アーカイブの拡張を行った。[評価解析手法の開発]目標とした移動距離やその動きパターンから、対応疾患を識別するために、人の動線のパターン別定量化を実現した。具体的には、初期診療場面から集めた動線を移動と停滞に分類、その移動時の動線をだけを集めて35次元の動線(35種類のパターン)に自動分類した。この手法により、個別の処置例に関して、どのパターンの動線がどれだけ見られたのかを特徴量にし、処置例間や参加者間などの比較を実現した。同時に会話分析の手法を使って,指導医から初期研修医に対する「質問」が,(1)相手の所見/判断を引き出す,(2)次の医行為に取りかかる「促し」として利用されていることを明らかにし,診療場面においても,新参者が参加している場合,知識の差がやりとりの資源として使われていることがわかり、「チーム医療」のコミュニケーションを捉えるための重要な示唆を得た.同様に,救急シミュレーション場面の会話分析をし,指導医と研修医のコミュニケーションの特徴をそれぞれ抽出し,比較/評価を可能にした.[シミュレーション教育用シナリオの策定]今までの知見を反映させ、心肺停止事例、交通外傷例、熱傷例の3例に関して,シミュレーション教育用のシナリオ作成を行った。そして、そのシナリオに基づいてシミュレーションを行なった。この動線と会話の分析結果から、シミュレーション教育の評価手法に関して検討を開始した。初期研修医のシミュレーション教育を1年間ER内において、初期研修だけでなく、専門医の実施例も含めて21件実施し、同時にその状況を3D撮影として撮影した。また、初年度から継続している実処置例の3D撮影も継続実施した。これら実データと実際のシミュレーションデータを比較検討した。具体的な比較手法は、動線に関しては、昨年度開発したword法による35クラスに動線を分類し、心肺停止に関する実処置50データのうち開胸心マを行わない計41件から基礎データを作成し、その動線の分布状況で実処置との比較を行った。ただし、比較過程の中では様々なことが問題となった。特に、1)治療に参加する医療者の数、2)左右どちらの手からライン確保するか、3)比較時間単位、4)シミュレーション人形の種類、によって大きく動線のパターンが異なることが明らかになった。そこで、個人別移動総距離、役割別移動距離、AW完了、ライン完了などランドマークとなり得る時間単位での比較を繰り返しながら、各種比較条件を探った。そして、基本的には移乗時から6分間を比較対象とする、シミュレーション人形の選定とそのプログラム、各種実験条件など詳細条件を決定した。その結果、実処置例と、シミュレーション例の動線が近づき、よりリアルな実験条件を作ることが出来た。また同時に、そのシミュレーション教育のビデオ映像から、会話を起こし、会話分析も並行して実施した。初期段階の観察としては、治療シミュレーション中の参加者達が、緻密な調整をしながら、指示や依頼を行っていることが分かった。さらに、ER以外でも実行可能なシミュレーションの応用例として、救急隊員の傷病者搬送のシミュレーションを行った。救急隊員は、できる処置が限られているため、実利用がより容易である可能性が低いこと、また、救命バッグなどの道具の初期配置によって大きく移動効率が変わることを突き止めた。最終年度は、初期研修医の心肺停止処置に関するシミュレーション教育を1年間ER内で継続実施した。そして、最終目標であるERという実環境におけるシミュレーション教育の雛型を完成させた。そのため今年度は、初期研修のシミュレーション教育事例28件を3次元で撮影するとともに、会話も同時録音した。また、初年度から行っている実処置例の3D撮影も並行して継続した。これら3次元画像からは、治療に参加数する全医療者の動線を取得し、動線分析を行った。一方、会話は全て文字化をし,会話分析の手法を使って分析を行った。シミュレーション教育の動線分析においては、1)医療者の移動距離の評価、2)移乗完了から各処置完了までの時間、3)実処置との違い、4)シミュレーション条件の正規化、5)プレテストと動きの関連、6)1ヶ月目-2ヶ月目との違い、7)メンバ構成による違い、8)指示と動線,医行為の関係について動線を評価した。また、会話分析に関しては、動線分析の結果を踏まえながら、9)指示と依頼産出のタイミング調整、10)診療全体構造への志向性、11)手順を行う際の「相談」活動の分析を行った。

これら動線と会話分析の結果を踏まえながら、A)シミュレーション教育の開催時期(3週と7週目に基本実施)、B)シミュレーション時間(6分間までは実施)、C)教育前にプレテスト(ペーパー試験)の実施、D)ブリーフィングとデブリーフィングの教育内容など、ER内で実施する特色を活かした内容を策定した。また、忙しいER内で実施するために、多くの病院が使っているシミュレーション人形を簡易に準備、片付けるためのノウハウ、またその人形の動作ログを利用方法も含め、ER内で行うシミュレーション教育の基本雛型を完成させた。これは、研究実施した大学病院の救急救命センターだけでなく、全国の初期研修医教育を行う救急救命センターで利用可能と考えている。研究期間中187件の実処置例の3次元撮影を行い、そのデータを動線と会話分析で解析する手法の開発を行った。その解析結果を踏まえて、ER内で、心肺蘇生シミュレーション教育を継続的に50回実施した。そして、その動線と会話を繰り返し解析することで、ER内で実施するシミュレーション教育の雛型を確定させた。具体的には、心肺停止例を対象として、(1)事前教育方法、(2)シミュレーション人形の利用方法、(3)処置時間、(4)メンバー構成とその役割などを確定し、教育の標準化や評価の正規化を図った。このシミュレーション教育プログラムは、初期研修医を受け入れている全国の救命センターで利用可能である。当初予定通りに、ルーチンワークとして初期研修医のシミュレーションを実施し、そのデータを撮りため、解析を行った。その過程で、解析手法の適切さに関して、様々な問題(比較を可能にするため正規化、標準化の問題)にぶつかったが、それを具体的に解決してきた。また、実際の教育を実施する中で、特にブリーフィングとデブリーフィング(事前教育と事後教育)を重視し、シミュレーション中のビデオ映像を直後に見ながら、最初に自分自身で考える手法などに取り組み、データ取得や解析だけでなく、実際の教育手法と密接に関連しながら研究を進めた。ここで特に問題となったのは、初期研修医の基礎知識の差であった。具体的には、初期研修医が麻酔科の研修を終えてから来る場合と、そうでない場合の知識と技術の差、さらに救急科に在籍する時期による経験値の差、この違いによって、個人個人の対応力が明らかに異なっていた。この初期研修医が持っている経験値に応じて、教育方法や評価に関してより細かい個別対応を余儀なくされ、これも難しい問題となった。この問題に対しては、事前に初期研修医の基礎知識を測定し、その基礎知識に応じた複数のシナリオを用意すれば、解決可能であるという方法に思い至った。また、会話分析に関しては、ERの治療中だけでなく、家族対応(インフォームド・コンセント)に関する会話のあり方についても実施している。これは、実問題として、ERにおいても最重要な問題の1つであり、ER内のシミュレーション教育を多角的に捉えて研究を進めることが出来ている。27年度が最終年度であるため、記入しない。
老齢期における心理・社会的ストレスの行動・内分泌学的基礎研究

本研究のテ-マは老齢ザルの心理・社会的ストレスに対する行動・生理・免疫学的反応の特徴を彼らの個体性を加味しながら解析しようとするものである。以下のことが明らかになった。(1)20歳以上の老齢ザルは10歳以下の若齢個体に比べ、オペラント学習課題にのりにくいし、餌の強化がなくなるとより急速に課題に対する興味を失う。しかしながら、周囲の環境に対する探索的行動には老若間の差はなく、むしろ若齢個体の方が自閉的な常同行動を頻発し課題の遂行が妨げられることが多かった。一方、老齢個体が学習課題にのりにくいのは、彼らの行動が単一的で、探索に用いられる行動レパ-トリ-の狭さに起因するのではないかと考えられた。(2)暗室に24時間隔離し、30分に3分間80デシベルのFM雑音とストロボ光に暴露すると、24時間後老齢ザルは血中コ-ツゾルレベルの上昇が認められたが、若齢では個体差が見られた。アドレナリンとノルアドレナリンの2種のカテコ-ルアミノは、いずれの個体も拘束直後に急激に増加し、以後下がるパタ-ンをとることがわかったため、今回の装置では受けたストレスを測定して個体差を検討することはできなかった。しかし、物理的ストレスの指標としては注目すべきものであることがわかった。(3)未知個体との出会いと同居は若齢個体にはコ-チゾルの上昇と不安行動の増加をもたらし心理的ストレスとなっていることが推測されたが、老齢ではそれが見られなかった。しかし、同居期間が進むと若齢の方がやや優位となり、老齢にもステレオ行動や恐れ・回避の傾向が現れた。しかし、老若の組み合せでは親和的な関係にはなかなか至らなかった。行動と内分泌との相関は、有意な相関を示したものもあったが母子分離の時のように抑欝と攻撃に限定はされなかった。本研究の中心的テ-マは、社会的に孤立する傾向をもつ老齢ザルの社会的ストレス、すなわち未知個体との出会い、に対する行動・内分泌・免疫学的反応を調査することである。若齢個体16頭の出会せによる社会的ストレス場面の行動観察より、血中コ-チゾル濃度の変化と抑うつ行動が(16頭中5頭)、また同じく血中コ-テゾルと攻撃行動が(16頭中3頭)それぞれ高い正の相関を示した。さらにU5、CD16ポジティブなどのリンパ球サブセットの変化と抑うつ行動、恐れ、活動性などの行動との間に高い相関を示した個体が同頭数みられた。しかし、中には負の相関を示す個体もみられ、コ-テゾルでみられたようなきれいな分類はされなかった。一方、これらの成果は、心理的ストレスに対する生体系の反応にはかなりの個体差が認められることを示している。つまり、社会的ストレスに対する反応傾向をみるにあたっては、心理的ストレス全般に対する反応の個体差を尺度化する必要がある。そこで、(1)暗室24時間隔離という心理・物理的ストレスに対する内分泌的反応と、(2)新奇刺激を報酬とした学習場面による新奇事態への心理・行動学的反応を個別に測定した。(1)についてはまたコ-テゾル等の内分泌学的指標の測定がすんでいないので考察はできないが、あまり年齢的な影響を受けないようであった。(2)に関しては、10歳以下の若い個体に比べ、20歳を超える個体は学習課題にのりにくく、また静止画とリズム音だけの強化事態での反応は急速に減衰することが明らかになったことから、老齢個体の新奇場面への適応は全般的に劣ることが予想される。次年度は、他固体と出会せによる社会的ストレスに対する老齢個体の反応について分析を行なうことになっている。
胃-肝臓におけるステロイド代謝連関による生体制御機構の分子形態学的解析

消化管の1つである胃は、これまで摂取した食物の消化器官として考えられていたが、ラットを用いた我々の研究から、女性ホルモンであるエストラジオールが胃酸分泌細胞として知られている壁細胞で多量に産生され、門脈血中に分泌されることを見出している。壁細胞ではエストロゲン合成酵素であるアロマターゼの蛋白とmRNAが存在し、高いアロマターゼ活性を示すことを、免疫組織化学、電子顕微鏡、in situ hybridization、RT-PCR、薄層クロマトグラフィー、GC-MS法などの手法を用いて明らかにしている。さらに、胃壁細胞におけるステロイド代謝酵素のmRNAの局在を調べ、雄ラットではP450_<17α>、17β-HSD type III、P450_<arom>が主として存在し、17β-HSD type II、5α-reductase type I、3α-HSDの発現は弱く、P450_<scc>、3β-HSD、P450_<c21>、P450_<11β>、P450_<AS>は見られないことを明らかにしている。動脈血にはプロゲステロンとテストステロンの濃度が高いことから、ラット胃壁細胞は動脈血中のプロゲステロンあるいはテストステロンかアンドロステンジオンから、17β-エストラジオールとエストロンを合成し門脈血中に放出していることが示唆された。さらに、発達に伴うラット胃壁細胞でのアロマターゼの発現を調べ、出生後の哺乳開始からアロマターゼが発現し始めることを見出した。また、ヒトとサルの胃では、ラットとは異なるステロイド代謝経路が存在することを示す結果を得ており、胃の壁細胞におけるステロイド代謝には動物種差があることが考えられるので、この点について現在検討を進めているところである。我々は、これまでにラットを用いた研究(Endocrinology 143:3162-3170,2002)で、摂取した食物を消化する消化管の一つとして考えられていた胃から、女性ホルモンであるエストラジオールが門脈血中に多量に分泌され、胃酸の分泌細胞として知られている壁細胞には、エストロゲン合成酵素であるアロマターゼの蛋白およびmRNAが存在し、高い酵素活性を示してエストロゲンを合成・分泌していることを、免疫組織化学、電子顕微鏡、in situ hybridization、RT-PCR、薄層クロマトグラフィー、GC-MS法など各種の手法を用いて明らかにしている。本年度は、この結果をふまえて、ラット胃でのステロイドの代謝経路の全体像を明らかにするために、ステロイド代謝酵素のmRNA局在と発現とともに、胃から門脈血中にエストロゲン以外にどのようなステロイドが分泌されているかを調べた。その結果、雄ラットの胃ではP450_<17α>、17β-HSD type III、P450_<arom>が主として発現し、これら3種の酵素が壁細胞に局在することを見出した。17β-HSD type II、5α-reductase type I、3α-HSDの発現は弱く、P450_<scc>、3β-HSD、P450_<c21>、P450_<11β>、P450_<AS>の発現は認められなかった。動脈血中には、プロゲステロンとテストステロンの濃度が高く、門脈血中には、17β-エストラジオールとエストロンの濃度が高かった。アンドロステンジオン濃度は、動静脈間で差がなかった。以上の所見から、ラット胃では、壁細胞が、動脈血中のプロゲステロン、あるいはテストステロンまたはアンドロステンジオンから17β-エストラジオールとエストロンを合成し、門脈血中に放出していることが明らかとなった(Life Sci 74:2327-2337,2004)。

消化管の1つである胃は、これまで摂取した食物の消化器官として考えられていたが、ラットを用いた我々の研究から、女性ホルモンであるエストラジオールが胃酸分泌細胞として知られている壁細胞で多量に産生され、門脈血中に分泌されることを見出している。壁細胞ではエストロゲン合成酵素であるアロマターゼの蛋白とmRNAが存在し、高いアロマターゼ活性を示すことを、免疫組織化学、電子顕微鏡、in situ hybridization、RT-PCR、薄層クロマトグラフィー、GC-MS法などの手法を用いて明らかにしている。さらに、胃壁細胞におけるステロイド代謝酵素のmRNAの局在を調べ、雄ラットではP450_<17α>、17β-HSD type III、P450_<arom>が主として存在し、17β-HSD type II、5α-reductase type I、3α-HSDの発現は弱く、P450_<scc>、3β-HSD、P450_<c21>、P450_<11β>、P450_<AS>は見られないことを明らかにしている。動脈血にはプロゲステロンとテストステロンの濃度が高いことから、ラット胃壁細胞は動脈血中のプロゲステロンあるいはテストステロンかアンドロステンジオンから、17β-エストラジオールとエストロンを合成し門脈血中に放出していることが示唆された。本年度は、発達に伴うラット胃壁細胞でのアロマターゼの発現を調べ、出生後の哺乳開始からアロマターゼが発現し始めることを見出した。さらに、ヒトとサルの胃では、ラットとは異なるステロイド代謝経路が存在することを示す結果を得ており、胃の壁細胞におけるステロイド代謝には動物種差があることが考えられるので、この点について現在検討を進めているところである。
電気的交代現象の成因としての心筋細胞内カルシウム動態異常とその不整脈源性の解明

致死性不整脈の発生に先立って発生する電気的交代現象における細胞内カルシウム(以下Ca)動態異常の関与を検証するため、ラット摘出灌流心における心筋細胞のCa動態と膜電位変化につき単一細胞レベルでの光学的同時記録を試み、以下の成果を得た。1.2波長高速共焦点レーザ顕微鏡システムの確立これまでCa動態解析に用いていたin situ共焦点レーザ顕微鏡の走査系を高速化し、蛍光を2波長成分に分離するシステムを構築し、ラット摘出灌流心の細胞内Ca(Fluo4/AM)動態と細胞膜電位(RH237)の細胞レベルでの高速・同時記録に成功した。その結果、正常心では興奮に伴い個々の心筋で均一な活動電位(action potential,AP)とCa^<2+>濃度の一過性上昇(Ca transient,CaT)を生じた。2.Ca動態の変化に伴う細胞膜活動電位変化の光学的記録(1)房室解離により徐脈に陥った心筋では個々の細胞内でCaWが散発したが、CaWには有意な脱分極を伴わなかった。これに対し、心臓を低K灌流下にisoproterenol投与し、高頻度駆動すると、撃発活動に続いて振動性のCaWと脱分極が発生した。こうした撃発活動は、ryanodineやNa-Ca交換機構阻害剤SEAO400により消失した。(2)Ryanodineにより筋小胞体からのCa放出を抑制するとCaTの振幅は漸減したが、明らかな交代現象の誘発は困難であった。一方、心臓を4-5Hzの高頻度で駆動すると、CaTの振幅の交代性増減が生じ易くなった。しかしCaTに伴うApには一拍毎の波形に明らかな変化は認められず、膜電位の空間的不均一性も明らかではなかった。以上の結果より、撃発活動におけるCaWの役割が明らかになった。Ca交代現象に伴う心筋のAPの交代性は、心臓内では周囲の細胞との電気緊張性機序により相殺される可能性がある。致死性不整脈の発生に先立って発生する電気的交代現象の機序として、細胞内カルシウム(Ca)動態異常が重要であるとの仮説を立て、これを検証するために心筋細胞内のCa動態と同時に膜電位の変化の単一細胞レベルでの光学的記録を試み、以下の成果を得た。1.2波長高速共焦点レーザ顕微鏡システムの確立これまでCa動態の解析に用いていたin situ共焦点レーザ顕微鏡の高速走査化と、蛍光を2波長の成分に分離するシステムの設置により、ラット摘出灌流心における細胞内Ca(Fluo4)動態と細胞膜電位(RH237)の細胞レベルでの高速・同時記録システムを確立し、両シグナルの関係を検討した。Ca蛍光指示薬Fluo4/AMと膜電位感受性色素RR237で心臓を負荷した後、心外膜下組織を高速励起し各蛍光成分を2波長蛍光分岐モジュールにて分離した。健常心では、興奮に伴い個々の心筋で均一な活動電位を発生し、同時にCa濃度の一過性上昇(Caトランジェント;CaT)を生じた。CaTは灌流液のCaを除去すると消失したが、活動電位は保持された。他方、テトロドトキシンにより心筋の興奮を抑制すると活動電位もCaTも消失した。2.Ca動態の変化に伴う細胞膜活動電位変化の光学的記録低カリウム液とイソプロテレノールの灌流により、心筋は細胞内Ca過負荷に陥り、細胞内Ca濃度の自発性・周期性の伝播(Ca波)を示したが、膜電位には有意な変化を示さなかった。

これに対しCa波が個々の細胞で同時多発すると膜電位にも振動性の脱分極が生じ、自発性の活動電位が生じた。また心臓を高頻度(>3Hz)で興奮させると、しばしば個々の心筋細胞は不均一なカルシウム動態を示し一拍毎にそのピークが交代性に増減したが、高頻度興奮のため活動電位の持続時間が短く、有意な不均一性は生じなかった。致死性不整脈の発生に先立って発生する電気的交代現象における細胞内カルシウム(以下Ca)動態異常の関与を検証するため、ラット摘出灌流心における心筋細胞のCa動態と膜電位変化につき単一細胞レベルでの光学的同時記録を試み、以下の成果を得た。1.2波長高速共焦点レーザ顕微鏡システムの確立これまでCa動態解析に用いていたin situ共焦点レーザ顕微鏡の走査系を高速化し、蛍光を2波長成分に分離するシステムを構築し、ラット摘出灌流心の細胞内Ca(Fluo4/AM)動態と細胞膜電位(RH237)の細胞レベルでの高速・同時記録に成功した。その結果、正常心では興奮に伴い個々の心筋で均一な活動電位(action potential,AP)とCa^<2+>濃度の一過性上昇(Ca transient, CaT)を生じた。2.Ca動態の変化に伴う細胞膜活動電位変化の光学的記録(1)房室解離により徐脈に陥った心筋では個々の細胞内でCaWが散発したが、CaWには有意な脱分極を伴わなかった。これに対し、心臓を低K灌流下にisoproterenol投与し、高頻度駆動すると、撃発活動に続いて振動性のCaWと脱分極が発生した。こうした撃発活動は、ryanodineやNa-Ca交換機構阻害剤SEAO400により消失した。(2)Ryanodineにより筋小胞体からのCa放出を抑制するとCaTの振幅は漸減したが、明らかな交代現象の誘発は困難であった。一方、心臓を4-5Hzの高頻度で駆動すると、CaTの振幅の交代性増減が生じ易くなった。しかしCaTに伴うAPには一拍毎の波形に明らかな変化は認められず、膜電位の空間的不均一性も明らかではなかった。以上の結果より、撃発活動におけるCaWの役割が明らかになった。Ca交代現象に伴う心筋のAPは、心臓内では周囲の細胞との電気緊張性機序により相殺される可能性がある。
コリプレッサーSkiによるMybの転写抑制機構の解析

平成15年度にMybはコリプレッサー群と結合し、その活性を制御していることを明らかにするとともに、C末側の負の制御領域を欠失している細胞がん化活性の高い変異体はコリプレッサーと共存してないこと、また互いに結合してないことを発見した。これらのことはMybによる細胞がん化のメカニズムを理解する上で貴重な成果となった。平成16年度ではこれらの結果をふまえ、生体内で実際にMybとコリプレッサーが相互作用しているのかをショウジョウバエの系を用いて明らかにすることを試みた。その結果、コリプレッサーTIF1βが結合する部位を欠失したMyb変異体を持つ個体にTIF1βを導入したところ、野生型とは異なる表原型を示すことが見い出され、遺伝的相互作用をしていることが証明された。これを前年度の結果と併せてJ.Biol.Chemに筆頭著者として報告した。またMybの活性を正負に制御するシグナル機構を解析していたところHipk2(ホメオドメイン結合タンパクキナーゼ)が結合することを発見した。これによってMybに働くシグナルとして動物の初期発生や形態形成に作用するシグナル分子Wnt-1まで遡って見い出すことができた。すなわちWnt-1がレセプターであるFrizzledに結合するとTAK1、Hipk2、NLKへとシグナルが伝わり最終的にMybがリン酸化される。リン酸化されたMybはさらにユビキチン化されプロテオソームによって分解されることが明らかになった。またがん遺伝子タイプのv-MybはC末のリン酸化部位を欠失しているため分解されにくいため、細胞がん化の1因となっていると考えられた。以上の結果は石井を筆頭著者として、Genes Dev.とJ.Biol.Chem.に発表するに至った。平成15年度に計画していた実験は1部を残してほぼ終了した。すなわちSki及び他のコリプレッサーがMybどの領域に結合するのかを調べたところ、Ski、Sin3A,そしてN-coRはMybのN末側のDNA結合部位に、TIF1βはC末側の負の制御領域に結合することを明らかにするとともに、免疫沈降実験によって実際にこれらのコリプレッサーとMybが細胞内で結合していることを確認した。また細胞内での局在を免疫染色法と共焦点レーザースキャン顕微鏡を用いて観察したところ、細胞核内でコリプレッサーとMybがdot状の構造物を作って共存していることが明らかになった。さらにMybの負の制御領域を欠失した転写活性と細胞がん化活性の高い変異体ではコリプレッサーと共存してないこと、また互いに結合してないことを発見した。さらに細胞内で実際にMybを含むコリプレッサー複合体が結合しているのかを調べるため、マウス骨髄芽球細胞M1に野生型と負の制御領域を欠失した変異型Mybを安定的に発現する細胞株を樹立して、クロマチン沈降実験を行った。Mybの標的遺伝子プロモーターとしてMyc遺伝子のプロモーターを用い、このプロモーター上に乗っているSki、Sin3A,そして、N-coRの量を2つの細胞株で比較検討した。その結果野生型の株では3つのコリプレッサーが確かにプロモーター上に存在するが、変異型の株ではこれに比べて格段に少ないことが判明した。以上のことからMybの転写活性と細胞がん化活性がこれに結合するSkiを含むコリプレッサー群によって制御されていることが示唆された。前年度にMybはコリプレッサー群と結合し、その活性を制御していることを明らかにするとともに、C末側の負の制御領域を欠失している細胞がん化活性の高い変異体はコリプレッサーと共存してないこと、また互いに結合してないことを発見した。

これらのことはMybによる細胞がん化のメカニズムを理解する上で貴重な成果となった。平成16年度ではこれらの結果をふまえ、生体内で実際にMybとコリプレッサーが相互作用しているのかをショウジョウバエの系を用いて明らかにすることを試みた。その結果、コリプレッサーTIF1βが結合する部位を欠失したMyb変異体を持つ個体にTIF1βを導入したところ、野生型とは異なる表原型を示すことが見い出され、遺伝的相互作用をしていることが証明された。これを前年度の結果と併せてJ.Biol.Chemに筆頭著者として報告した。またMybの活性を正負に制御するシグナル機構を解析していたところHipk2(ホメオドメイン結合タンパクキナーゼ)が結合することを発見した。これによってMybに働くシグナルとして動物の初期発生や形態形成に作用するシグナル分子Wnt-1まで遡って見い出すことができた。すなわちWnt-1がレセプターであるFrizzledに結合するとTAK1、Hipk2、NLKへとシグナルが伝わり最終的にMybがリン酸化される。リン酸化されたMybはさらにユビキチン化されプロテオソームによって分解されることが明らかになった。またがん遺伝子タイプのv-MybはC末のリン酸化部位を欠失しているため分解されにくいため、細胞がん化の1因となっていると考えられた。以上の結果は石井を筆頭著者として、Genes Dev.とJ.Biol.Chemに発表するに至った。
三次元軸配向した多結晶シリコン薄膜の開発とその結晶成長メカニズムの解明

本研究は、無定形の石英基板上に堆積された多結晶シリコン薄膜における結晶粒がほぼ均一の大きさで三次元軸配向して成長することを本グループが初めて発見したことをきっかけに、その成長のメカニズムを明らかにする目的で、基板温度、ガスの圧力と流れ、そしてプラズマの役割などについてこの研究補助金のもとに行ったものである。まだ不明な点が多いが、一年間の研究で次のようなことが分かっている。1、X線回折の結果より、670-690°Cの基板温度で作製された膜は強い(110)配向であるが、より高い或いは低い温度では(110)配向が弱くなり、それに伴い原子間顕微鏡(AFM)で観察した表面に出る結晶粒の形状が長方形から崩れて行く。2、AFMの観察より、0.15-0.4Torrのガス圧力で作製された膜では、結晶粒は形状よく配列しているが、圧力をさらに変えると、特に、ガス圧力が0.4-1.0Torrの場合、X線回折の(110)ピーク強度が増えるにもかかわらず結晶粒の形状が崩れていく。なお、長方形の結晶粒はその長い辺がガスの流れ方向(プラズマの伸びる方向)に沿うように配列している。3、プラズマはRFパ-ワが20ワット付近で最適であり、それより減らしていくと粒形が崩れ、プラズマの無い場合、膜内の結晶粒の配向がランダムになり、その形状もいろんな形を取っている。一方、成膜中におけるイオンや原子、ラジカルなどの種類はそれらの発光スペクトルは、実験で触れた条件によって大差が見られなかったので、影響が小さいと考えられる。これらの結果より、膜内の結晶粒が一定の形に成長するためには、三次元的に成長速度が一定の割合に保てる成長環境が不可欠であることが分かる。基板温度、ガス圧力の他に、プラズマが結晶配向や粒形の整えに極めて重要な役割を果たしているので、RF電磁場が結晶面の自由エネルギー従って各結晶面の成長速度に影響を与えると考えられる。一方、膜の電気特性を正確に測定するために、表面効果の大きい荒い表面をさらに処理する工夫が必要である。
「平和都市」概念の生成と広島の戦後復興政策：通称「原爆スラム」を検討主題として

本年度の研究実施状況に関して、研究成果に照らし合わせながら、以下4点に即して記載する。【1.基町地区におけるフィールドワーク】本研究課題の最終目標である、原爆スラム/相生通りがかつて存在した、基町高層アパートのフィールドワークおよび関連する史資料分析・戦前期の実態調査を長期で実施した。広島市役所など各ステークホルダーとも連携し、最終的なアウトプットにつながる知見を多く得ることができた。この成果はNHKでの番組の企画協力などを通して既に公開された。【2.シンポジウム「復興と文化の創造を描く」での研究報告】シンポジウム「復興と文化の創造を描く:被爆都市広島のビジュアル・エスノグラフィの試みから」にて研究報告を行った。ここではギュンター・アンダースやロバート・リフトンなどの議論を射程に入れた「ヒロシマ」研究の文脈の再定位を試みた。【3.シンポジウム「ノーモアヒロシマズ、だが、ヒロシマはいたるところに」での研究報告】東京大学にて開催されたシンポジウム「ノーモアヒロシマズ、だが、ヒロシマはいたるところに」に、批評家の東琢磨氏、写真家の笹岡啓子氏、カリブ海文学研究の中村隆之氏らと登壇し、「平和と原爆のない広島を研究するその布置について」と題した研究報告を行った。本報告では、戦前から2010年代に至る広島研究の系譜を遡行し、とりわけ近年英米圏で隆盛するEast Asian Studiesの知見を取り込むことで、新たな地域研究の争点の場としての「ヒロシマ」の位相を指摘した。【4.その他】明治大学大城直樹教授らと「ポスト・アーバニズム・プロジェクト」研究会を企画運営した。本研究を国際的な都市研究へと接続すべく、フィールドワークの成果および理論研究報告を当研究会では行い、成果の一部は『空間・社会・地理思想』21号の「特集プラネタリー・アーバニゼーション」という形で公開された。29年度が最終年度であるため、記入しない。本年度は事前の研究計画から進展し、複数の研究成果をあげることができた。以下にて詳述する。【1.日本都市社会学会での報告・同学会年報への投稿】第33回日本都市社会学会にて、「原爆スラム」に関する学会報告を行った。本学会では、フロアからも多数の質疑を受け、事例研究に留まらない都市・歴史社会学に寄与するところへの視座を獲得することができた。報告後には複数の研究会への参加・報告依頼を頂き、さらに議論を発展する機会を得た。こうした議論と現地での追加史料調査から論文を書き上げ、同学会年報へ投稿した。【2.石丸紀興元広島大教授らと史料調査に関する共同プロジェクト実施】石丸紀興元広大教授ならびに1970年に「原爆スラム」の実態調査を行った矢野氏・千葉氏、そして広島市公文書館のもと、「原爆スラム」を主題としたプロジェクトを実施した。当プロジェクトでは40年以上前の実態調査時資料を再発見し、本研究にとって重要な資料が利用可能となった。中間報告の機会として、2015年12月に「〈原爆スラム〉と基町研究に関する報告と徹底討論そして今後展望の会」を設け、アカデミズムのみならず多様な人びとによる議論の場をつくった。本会は開催前に中国新聞で取り上げられ、また当日は基町地区関係者やメディア・公文書館関係者など多様な方々が参加するなど、研究の進展に大いなる刺激となった。【3.その他】「平和都市」の「観光都市」化が進むなかで焦点化される「原爆スラム」を対象とした本研究は、その「観光都市」化の源流を見出す成果を生み出すこともできた。社会学者、小山栄三に関する学会報告および論考がそれにあたる。「平和都市」・「原爆スラム」という対照的な都市理念が構築される中で、重要なキー・タームの一つとなる「観光都市」化の論理を、戦前・戦中から戦後に至る日本の社会学史的文脈の中から救いとる作業を行った。上記実績を鑑み、事前の初年度研究計画で想定していた成果をおおよそ達成することが出来たため、「(2)おおむね順調に進展している」に設定した。「原爆スラム」研究へのアーカイブは本年度に多くが利用可能となり、本資料の調査を継続的に行っていく。一方で、「原爆スラム」と語句的に表裏をなす「平和都市」としての復興プロセスを対象とした研究は、報告・論文投稿までに至っていないこともあり、その点も来年度は重視していく。初年度から引き続き、本年度も事前の研究計画から進展した成果をあげることができた。以下では代表的な研究実績を以下の3点に即して記述する。【(1)『現代思想』誌での論文掲載】戦後広島の復興過程における「原爆スラム」の生成及び消滅に着目した本研究の一つの到達点として、『現代思想』誌に「日々の喪失、平和の喧伝:相生通りと動員される『平和都市』」を寄稿した。本稿では、単なる「原爆スラム」の社会的困難性を指摘するのではなく、相生通りとしての日常生活及び形成過程に焦点を置き、また、生成から除却に向けたプロセスを「平和都市」理念の形成と都市復興に即して読み解くことを試みた。【(2)人文地理学会第122回地理思想研究部会・第18回政治地理研究部会合同研究部会での研究報告】同学会にて「なぜ『原爆スラム』は『平和都市』を構成しえなかったのかー広島の戦後都市復興における相生通りに着目して」という題目で研究報告を実施した。

都市地理学の専門家を中心に30名ほどの研究者が集い、「平和都市」と「原爆スラム」に関する本報告を複合的な都市研究領域の俎上へとあげる機会を得た。【(3)第34回日本都市社会学会大会での研究報告】昨年度からの課題である「平和都市」理念と都市景観への反映に関する研究報告(「『平和都市』空間の誕生ー戦後広島復興期におけるメディア・イベントを検討主題として」)を日本都市社会学会にて行った。本報告では、とりわけ「平和(都市)」を冠した戦後初期のメディア・イベントを主題に、その比較検討及び実際の「平和都市」が都市空間上に転写されるプロセスを明らかにした。当初の想定以上の研究成果をコンスタントに公表することが出来ており、「(2)おおむね順調に進展している」に設定した。また、上記の実績(1)を機に、広島の地方紙である『中国新聞』から著者インタビューを受けたこともあり、公文書館及び市役所等のステークホルダーからも関心をあつめ、研究者間のみにはとどまらない広域な研究ネットワークを構築することができた。この点は、本年度から実施予定の、「原爆スラム」がかつて存在した基町地区を対象とする、長期にわたる聞き取り調査・参与観察の実施に向けた、協力体制の整備につながっている。本年度の研究実施状況に関して、研究成果に照らし合わせながら、以下4点に即して記載する。【1.基町地区におけるフィールドワーク】本研究課題の最終目標である、原爆スラム/相生通りがかつて存在した、基町高層アパートのフィールドワークおよび関連する史資料分析・戦前期の実態調査を長期で実施した。広島市役所など各ステークホルダーとも連携し、最終的なアウトプットにつながる知見を多く得ることができた。この成果はNHKでの番組の企画協力などを通して既に公開された。【2.シンポジウム「復興と文化の創造を描く」での研究報告】シンポジウム「復興と文化の創造を描く:被爆都市広島のビジュアル・エスノグラフィの試みから」にて研究報告を行った。ここではギュンター・アンダースやロバート・リフトンなどの議論を射程に入れた「ヒロシマ」研究の文脈の再定位を試みた。【3.シンポジウム「ノーモアヒロシマズ、だが、ヒロシマはいたるところに」での研究報告】東京大学にて開催されたシンポジウム「ノーモアヒロシマズ、だが、ヒロシマはいたるところに」に、批評家の東琢磨氏、写真家の笹岡啓子氏、カリブ海文学研究の中村隆之氏らと登壇し、「平和と原爆のない広島を研究するその布置について」と題した研究報告を行った。本報告では、戦前から2010年代に至る広島研究の系譜を遡行し、とりわけ近年英米圏で隆盛するEast Asian Studiesの知見を取り込むことで、新たな地域研究の争点の場としての「ヒロシマ」の位相を指摘した。【4.その他】明治大学大城直樹教授らと「ポスト・アーバニズム・プロジェクト」研究会を企画運営した。本研究を国際的な都市研究へと接続すべく、フィールドワークの成果および理論研究報告を当研究会では行い、成果の一部は『空間・社会・地理思想』21号の「特集プラネタリー・アーバニゼーション」という形で公開された。本研究は、基本的には本年度の成果を基にしながら、事前の研究計画に即した展開を予定している。
可解リー群とそのコンパクト拡大上の調和解析

平成9年度までの研究において、非I型可解リー群と、それに自己同型として作用するコンパクト群の対がゲルファント対になるための条件を可解リー群の既約表現の十分大きな族を用いた与えた。これを学術論文として平成9年度雑誌に投稿し、平成10年度発表された。このとき十分大きいということを、函数の分離可能性という形で定義したが、構造的な意味付けが可能であるかが重要な問題である。そこで特に非I型であるという性質を考慮して、原始イデアル全体のなす構造空間を用いて特徴づけるという着想を得た。上記の内容を整理するために、C^*-群代数を用いた具体的には、群の可跡因子表現の固定部分郡およびその絡表現を求め、それらの作る半直積群の表現の交換子代数の可換性を判定条件とした。これらを記述するには、C^*-群代数の跡から構成される可跡表現と、標準フォンノイマン代数の理論が必要となる。一般にC^*-代数の自己同型をフォンノイマン代数へ拡張するにはギャップがあるが、今研究の対象である非I型連結可解リー群では、このギャップを埋めることができた。特にマウトナー群では、表現の2種類の直積分分解の興味深い関係を得ることができた。また、前述の学術論文において、既約表現の十分大きな族を用いて、非I型可解リー群上の球函数をすべて記述できることを示したが、さらにマウトナー群等において、可跡表現と絡表現の組み合わせとしての半直積表現の直積分分解を、その十分大きな族を用いて得た。平成8年度の研究において、非I型可解Lie群と、それに自己同型として作用するコンパクト群の対がGelfand対になるための条件を、可解Lie群の既約表現の十分大きな族を用いて与え、それを学術論文にまとめ、本年度雑誌に投稿した。その過程において、十分大きいということの構造的な意味付けが問題となった。そこで、非I型という性質を考慮して、原始イデアル全体のなす構造空間を用いて特徴づけた。具体的には、構造空間と1対1の対応があるtraceable因子表現全体のなす族を用いた。上記の内容を整理するために、今まで用いてきた群上の可積分函数全体のなすBanach^*-代数ではなく、そのC^*-完備化であるC^*-群代数を用いた。具体的には、群のtraceable因子表現の固定部分群およびそのintertwining表現を求め、それらの作る半直積群の表現の交換子代数の可換性が判定条件となるが、それらを記述するために、C^*-群代数やvon Neumann代数を用いた。そのC^*-群代数の可換性から得られる正定値球函および球表現を記述する際C^*-代数の理論を適用した。これらのことは、従来用いられていた規約表現を用いた理論を包括するものであり、また非I型可解Lie群だけではなく、一般の非I型群や、群代数が対称ではない群にも適用できる。これは、本研究の重要性を示すものである。以上のことを非I型可解Lie群の具体例に適用した結果、既約表現の十分大きな族が、traceable因子表現の既約分解に現れることが分かり、確固たる構造的意味付けを与えることができた。同時に、球表現もtraceable因子表現を用いることにより、群自身の言葉で精密に記述することが可能となった。
一酸化窒素によるエピジェネティクス調節機構と薬物制御

エピジェネティクスに深く関わる酵素が一酸化窒素(NO)の標的であることを明らかにした.その中でも,DNAメチル化酵素に関して解析を進めたところ,NOによって活性中心のCys残基が修飾されることで酵素活性が著しく低下することを明らかにした.この結果より,NO刺激に伴って遺伝子制御機構が破綻することが予想されたため,発現量が変化する遺伝子をDNAアレイから網羅的に探索した.本スクリーニングから,有力な遺伝子を複数単離することに成功した.次に,それらの遺伝子上流のメチル化の有無をバイサルファイト法から解析したところ,NOによって劇的に脱メチル化される部位が存在することがわかった.まず初めに,各種エピゲノム調節酵素のNOによるSーニトロシル化修飾とその活性への影響を解析した.HDACならびにEZH2はNOの濃度依存的,時間依存的にSーニトロシル化されることがわかった.また,標的Cys残基を特定するために酵素活性部位近傍に存在するシステイン残基をセリン残基に置換した各種変異体(Cys→Ser)を用いた解析を行い,特異的修飾部位を決定した.つぎに,NO処理によるS-ニトロシル化修飾の酵素活性への影響を特異的メチル化ヒストン認識抗体やアセチル化抗体によるウェスタンブロット解析から検討した.その結果,NO処理によってHDAC活性は顕著に抑制されるものの,EZH2活性はまったく変化しなかった.このことから,生体内で発生するNOは脱アセチル化に対しては抑制的に作用する一方,ヒストンメチル化には影響しないことがわかった.つぎに,細胞をサイトカインなどで刺激して誘導型NO合成酵素を発現させて,大量のNOを産生させた.この時,HDACのニトロシル化が亢進し,かつ,タンパク質アセチル化量は増加することがわかった.また,これらの応答はNO産生酵素特異的阻害薬であるL-NAME処理によって著明に抑制されることを確認した.以上の成果より,細胞内あるいは細胞外で産生されたNOはエピゲノム調節因子をSーニトロシル化することで活性を調節している可能性が示唆された.これらの結果を基にして,S-ニトロシル化のみを効果的に抑制する化合物の単離をin silicoスクリーニングを駆使して展開しているところである.エピゲノムに関わる酵素が一酸化窒素の標的になることを初めて明らかにした.その詳細な酸化作用様式ならびに酵素活性への影響について細胞レベルで検討をしている.現在は,マイクロアレイ法によって網羅的な標的遺伝子の単離を進め,病態形成との関わりについて調査している.加えて,その作用様式が明らかになったことから,in silicoスクリーニングを展開することで,酵素分子特異的に作用する複数の酸化抑制化合物の単離に成功した.この化合物を利用して,NOのエピゲノム調節機構を解析しているところである.DNAメチル基転移酵素(DNMT)はエピゲノムに関わる重要な酵素である.この作用様式を調べたところ,酵素活性にはシステイン残基が重要であることが報告されていた.そこで,本システイン残基が一酸化窒素(NO)の標的になる可能性を推定した.ビオチンスイッチ法を行ったところ,DNMT1, 3A, 3BともにNOの濃度依存的に活性中心システインがS-ニトロシル化(酸化)されることがわかった.また,この反応には細胞質タンパク質であるGAPDHによるトランスニトロシル化が関与していることを明らかにした.DNMTは酸化修飾によって,酵素活性が著しく低下することを見出した.次に,NOによって発現が上昇する遺伝子のプロモーター部のメチル化を検討したところ,NO処理によってメチル化が消失することがわかった.以上より,DNMTはレドックス,とくにNOによって活性が調節され,これが遺伝子の転写レベルに影響を及ぼすことが明らかとなった.この成果をさらに発展させ,酸化抑制薬の開発に着手した.DNMTの活性中心システインを直接の標的にすると,酵素活性自体が阻害されてしまう可能性がある.そこで,目的化合物は酵素活性には影響せずに,Sーニトロシル化のみを選択的に阻害するものを候補とした.DNMT3Bの構造を利用してin silicoスクリーニングしたところ,対象となる400万化合物ライブラリーから,上位100種を選定した.それらについてSーニトロシル化阻害能を検討した結果,有力な化合物の単離同定に成功した.本化合物は,NOによるDNA脱メチル化を濃度依存的に回復させることを確認した.また,DNMT3Bに特異的に作用し,IC50値は100 nano M以下であった.現在,本化合物のガン形成抑制効果を細胞や動物レベルで解析しており,さらに,最適化を目指すべく誘導体の作成に取り組んでいるところである.DNMTが一酸化窒素によって酸化修飾され,酵素活性調節に関与していることを初めて明らかにすることに成功した.この調節はおそらく定常状態においても機能し,遺伝子の転写に重要な働きをしていることが予想された.一方,これまでのNOの病態生理的役割から,過剰量あるいは慢性的な暴露によって,プロモーターCpGのメチル化が抑制されることで遺伝子制御機構が破綻し,疾患発症が惹起される可能性を示唆する結果であった.これらのことを確認するために,薬理学的なアプローチが有効であると考え,in silicoスクリーニングを遂行し,分子特異的Sーニトロシル化阻害薬の単離に成功した.このような標的特異的なSーニトロシル化阻害効果を示す化合物は報告されていない.現在.病態モデル細胞や動物に適用し,その効果を調べているところである.

この解析を介して,de novo DNAメチル化(脱メチル化)が病態形成に関与しているのか,このような修飾を受けるDNAに部位特異性があるのか,さらには,NO感受性を示す遺伝子のプロモーターに特異性・感受性の違いがあるのか,などが明らかになる.これまでに,このような問題提起はなされておらず,注目を集めると考えている.以上の成果に関して,本年3月に特許出願(NOによるDNMT酵素活性制御機構と特異的酸化阻害剤開発のためのスクリーニング法に関して)を行った.それらをまとめた成果を速やかにジャーナルに投稿する予定となっている.エピジェネティクスに深く関わる酵素が一酸化窒素(NO)の標的であることを明らかにした.その中でも,DNAメチル化酵素に関して解析を進めたところ,NOによって活性中心のCys残基が修飾されることで酵素活性が著しく低下することを明らかにした.この結果より,NO刺激に伴って遺伝子制御機構が破綻することが予想されたため,発現量が変化する遺伝子をDNAアレイから網羅的に探索した.本スクリーニングから,有力な遺伝子を複数単離することに成功した.次に,それらの遺伝子上流のメチル化の有無をバイサルファイト法から解析したところ,NOによって劇的に脱メチル化される部位が存在することがわかった.今後は,各種癌細胞においてNO依存的に発現が変化する遺伝子をマイクロアレイから網羅的に特定すること,ならびに,ヒト消化器系の中で感染・炎症によって惹起される胃癌や大腸癌組織における酵素のS-ニトロシル化の有無を調べることが必要と考える.加えて,種々の癌モデル動物を使用して,癌発生時からのSーニトロシル化されるエピゲノム調節酵素の動向を詳細に検討するとともに,対象遺伝子プロモーターのメチル化の推移や癌形成との関わりについて検討する予定である.現在,基本リード化合物に対して様々な官能基を導入することで誘導体を作成し,構造活性相関を明らかにすることを試みている.これらを順次,Sーニトロシル化阻害活性測定アッセイに供し,薬物の最適化を測る.加えて,溶解性や合成経路にも着目し,簡便で,かつ,安価で得られる化合物を選定する予定である.動物実験に供するためにも数グラム単位で合成することも計画している.さらに,これまでに実施してきたin vitroや細胞レベルでの薬効の確認に加えて,種々の病態モデルへの適用を行う予定である.具体的には,マウス炎症性ガン,胃ガン,大腸ガンなどに対する効果を調べる予定である.薬理学
音響外傷後の創傷治癒過程における蝸牛内サイトカイン発現

音響外傷後のダメージを受けた蝸牛内には、創傷治癒機転による白血球浸潤がみられたがその数は少数であった。炎症性サイトカインの代表的なもののひとつであるIL-6の発現を免疫組織化学的に調べたが、IL-6の発現はみられなかった。生体は強大音に曝露されると、内耳が障害され難聴をきたす。この難聴の主因は感覚細胞である有毛細胞のダメージであるが、蝸牛内の非感覚細胞からなるラセン靭帯や血管条も同時にダメージを受ける。これらダメージを受けた組織では創傷治癖機転が起こり、マクロファージを中心とした白血球が蝸牛内に浸潤する。マクロファージの大きな役割のひとつに、TNF-α、IL-1、IL-6、TGF-α、TGF-β、PDGF、IGF-1といったサイトカインの分泌があり、これらサイトカイン発現の時間的推移、蝸牛内局在部位、および発現している細胞の同定を行うことが当実験の目的である。マウスに110120dBの強大音を2時間曝露させ、その12、24時間後、および2、4、7、14日後に蝸牛を摘出し、連続凍結切片を作成した。形態的変化の観察のため、ヘマトキシリン・エオジン染色を行ったところ、蝸牛血管条の浮腫性変化、ラセン靱帯内の細胞の変性を認めた。次に白血球のマーカーであるCD45、マクロファージのマーカーであるF4/80の発現を免疫組織化学的に調べたところ、音響外傷によりダメージを受けた蝸牛内に白血球、なかでもマクロファージの浸潤がみられた。サイトカインの発現に関しては、炎症反応の惹起に重要なproinflammatory cytokineであるIL-1の発現が増強する傾向がみられた。他のサイトカインは今後検証予定である。この難聴の主因は感覚細胞である有毛細胞のダメージであるが、有毛細胞以外にラセン靭帯や血管条も同時にダメージを受ける。これらダメージを受けた組織では創傷治癒機転が起こり、マクロファージを中心とした白血球が蝸牛内に浸潤する。サイトカインの発現に関しては、炎症反応の惹起に重要なproinflammatory cytokineであるIL-1、TNF-α、IL-6の発現が増強する傾向がみられた。マクロファージの大きな役割のひとつに、TNF-α、IL-1、IL-6、TGF-α、TGF-β、PDGF、TGF-1といったサイトカインの分泌があり、これらサイトカイン発現の時間的推移、蝸牛内局在部位、および発現している細胞の同定を行うことが当実験の目的である。次に白血球のマーカーであるCD45、マクロファージのマーカーであるF4/80の発現を免疫組織化学的に調べたところ、音響外傷によりダメージを受けた蝸牛内に、マクロファージを中心とした白血球の浸潤がみられた。サイトカインの発現に関しては、炎症反応の惹起に重要なproinflammatory cytokineであるIL-1、TNF-α、IL-6の発現が増強する個体が少数見られたが、全ての個体にみられたわけではなく一定の傾向は得られなかった。