hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ヒトiPS細胞由来ドーパミン神経細胞がパーキンソン病に耐性であるメカニズムの解明

ヒトiPS細胞からドーパミン神経細胞を作製するために、これまでに実施してきた浮遊培養系の中脳オルガノイド形成法に加えて、細胞単位の評価が容易となる接着培養系のドーパミン神経細胞培養法を実施した。浮遊培養系と比較して、接着培養系においてもαシヌクレイン遺伝子の発現上昇が認められた。また、ドーパミン神経細胞を特徴付けるマーカー分子として、これまではチロシン水酸化酵素を用いてきたが、より詳細に中脳領域におけるドーパミン神経細胞としての特性を評価するため、解析に使用する標的分子の数を増加した。今後は、細胞単位の評価が容易な接着培養系を主に用いて、中脳ドーパミン神経細胞内におけるαシヌクレインの発現動態を評価する。昨年度まで、浮遊培養系の中脳オルガノイドを用いたドーパミン神経細胞の評価系の構築に主に取り組んできたが、初期の中脳原基を接着培養系に移行することにより、細胞単位でαシヌクレインの発現動態を評価し得ることが示唆されたため、おおむね順調に進展していると判断する。今年度確立した接着培養系のドーパミン神経細胞培養法を用いることで、細胞単位でαシヌクレインの発現動態評価が可能となり、この培養系に合わせて中脳特異的低酸素培養環境の構築を進める。また、健常人iPS細胞由来ドーパミン神経細胞を薬剤処理によって病的ドーパミン神経細胞に変換するだけでなく、直接的にパーキンソン病の病態メカニズムの解明に結び付けるために、パーキンソン病患者由来iPS細胞の導入を検討する。ヒトiPS細胞由来ドーパミン神経細胞がin vitroでパーキンソン病に耐性を示すメカニズムについて明らかにするために、平成29年度は、(1)中脳オルガノイド形成法および培養法、(2)ニューロメラニン定量法、(3)パーキンソン病モデル中脳オルガノイド作成法、(4)レビー小体同定法、の4つの基礎技術の導入と確立を計画し、特に中脳オルガノイド形成法および培養法の最適化を中心に実施した。フィーダー細胞フリーの培養法で培養された正常ヒトiPS細胞から多数の均一な細胞塊を形成し、TGFβ/BMPシグナル経路抑制下で、FGF/Shh/Wntシグナル経路を活性化させることで効率的に中脳底板(中脳原基)を誘導した。得られた中脳原基を長期間にわたり振とう培養することで、中脳オルガノイドを形成させた。その結果、ドーパミン神経細胞のマーカー分子の1つであるチロシン水酸化酵素の発現上昇や、パーキンソン病で生じるレビー小体の構成因子であるαシヌクレイン遺伝子の発現上昇が確認できた。しかしながら、αシヌクレインタンパク質の凝集はほとんどみられなかった。このことから、正常ヒトiPS細胞由来ドーパミン神経細胞は、αシヌクレインタンパク質の凝集を抑制するメカニズムを保持している可能性が示唆された。今後、中脳特異的酸素濃度(1%酸素以下)においても同様の結果が得られることを確認するとともに、パーキンソン病モデル中脳オルガノイドを誘導し、αシヌクレインタンパク質の凝集やレビー小体の形成過程について評価することを計画している。(1)平成29年度の計画の中心に据えていた、中脳特異的酸素濃度(1%酸素以下)において、中脳オルガノイドを安定して培養する方法を確立できなかった。中脳原基の作成は通常酸素濃度下で実施しているため、得られた中脳原基を低酸素培養へ安定して移行する方法、および移行時期については、さらなる検討が必要である。(2)(1)と並行実施していた通常酸素濃度下における中脳オルガノイドの培養では、ドーパミン神経細胞のマーカー分子であるチロシン水酸化酵素の発現上昇に加えて、パーキンソン病で生じるレビー小体の構成因子であるαシヌクレイン遺伝子の発現上昇について確認できた。しかしながら、これまでに実施した約80日間の培養ではニューロメラニンの出現が認められず、本研究の特色の1つである、ニューロメラニンの定量に至っていない。これは、オルガノイド内におけるドーパミン神経細胞の割合を増加させるために、既報の方法にNotchシグナル経路阻害法を組み合せたことに起因することが考えられ、早急に対策を講じたい。(3)パーキンソン病モデル中脳オルガノイド作成法、およびレビー小体同定法に関しては、前述の培養系の確立を優先したため、必要な試薬類の準備段階に留まっている。

まず、中脳原基を中脳特異的酸素濃度下(1%酸素以下)へ安定して移行する方法、および移行時期のさらなる最適化を行うとともに、ロテノン処理を利用した病的オルガノイドの作成に取り組む。また、ニューロメラニンの出現に関しては、Notchシグナル経路阻害法の効果を検証する。Notchシグナル経路阻害を行わない場合は、ドーパミン神経細胞の割合がオルガノイド内で低くなることが想定されるため、健常オルガノイドとロテノン処理により誘導した病的オルガノイドについての網羅的遺伝子発現解析法により同定したい有用なマーカー遺伝子が見出せない可能性がある。そこで、ゲノム編集技術を用いて、ドーパミン神経細胞のマーカー分子であるチロシン水酸化酵素を発現した細胞のみを光らせ、それらの細胞を対象に網羅的遺伝子発現解析を適用する系の構築を進める。今年度確立した接着培養系のドーパミン神経細胞培養法を用いることで、細胞単位でαシヌクレインの発現動態評価が可能となり、この培養系に合わせて中脳特異的低酸素培養環境の構築を進める。また、健常人iPS細胞由来ドーパミン神経細胞を薬剤処理によって病的ドーパミン神経細胞に変換するだけでなく、直接的にパーキンソン病の病態メカニズムの解明に結び付けるために、パーキンソン病患者由来iPS細胞の導入を検討する。研究の進行状況から、細胞培養用培地や消耗品に計上した分の支出、旅費、およびその他の支出が当初の予定より減ったため。研究の進行状況から、旅費およびその他の支出が当初の予定より減ったため。
ユニタリ群U(1,n;C)の離散部分群の研究

神谷茂保は、ユニタリ群U (1, n; C)の離散部分群の分類および特徴づけのためにH-座標を導入し、放物型の元の挙動について研究した。point of approximationの性質等を研究しFuchs群の場合との差違等を広島大学での研究集会において発表した。また清水の補題に対応する結果およびユニタリ群U (1, n; C)の離散部分群のDirichlet polyhedronについての結果などを岡山での研究集会および京都大学数理解析研究所における研究集会において発表した。島田信夫は、Kontsevich-Vassliev不変量の圈論的構成を理論的にも具体的にも明瞭化するため、先行諸研究に修正を施しdualityの概念を一般化すること等によってCartier関手の再構築を試みた。坂本薫は、組み糸をリスト構造として生成しその生成したリストの集まりをプロローグによって位相的に等価な組み糸をのぞいてポストスクリプトによってその線画を描いた。大原一孝は、非局所移流項をもつ非線形拡散方程式の定常解の存在に関する問題を研究した。特に正値対称定常解の存在する条件についての解析を行った。浜谷義弘は、拡散項をもつ積分微分方程式の有界解の大域的吸引性についての研究をした。
複合系の反応試剤の開発

本研究では、各種金属化合物複合系を基盤とし、新しい反応試剤の開発を目的に研究を進めている。本年度は、以下に述べる新しい金属系反応試剤の創製とその基本的な応用について検討した。1スズ、チタン、パラジウム化合物と不斉配位子(キラルなジアミン、ジオール、ホスフィンなど)との複合系キラル錯体の調整と応用について検討し、各種不斉炭素骨格形成法を開発することができた。不斉アルドール、付加環化反応などが極めて高い不斉収率で進行し、生成物がほぼ光学的に純粋に得られる。またHeck反応においても、効果的な不斉誘起が見られることがわかった。さらに、不斉ヒドロホウ素化反応などの不斉官能基化法を見出した。こられの反応は、いずれも触媒量のキラルな複合系反応剤を用いるだけで反応を行うことができ、合成手法としても優れた特徴を持つ。(向山、奈良坂、柴崎、鈴木)2炭素骨格形成法についても、複合系金属試剤を活用することによって、特徴ある反応を見出すことができた。ホウ素化合物と遷移金属複合系による立体選択的アリルアルコール合成法、クロム錯体による立体選択的シリルエノールエーテル合成法、マンガン錯体と基質相互作用を利用するラジカル種の分子間付加反応など、選択性の高い炭素骨格形成法を開発した。(鈴木、柴崎、奈良坂)3複合系反応剤として新規PtならびにMo,Ruクラスターの合成に成功し、さらに白金錯体がオレフィンのエホキシ化に利用できることが示された。その他、分子識別能を持つ反応剤の開発について、基本的な知見を得ることもできた。(松本、奈良坂)本研究では、各種金属化合物複合系を基盤とし、新しい反応試剤の開発を目的に研究を進めている。(松本、奈良坂)
圧力誘起量子常誘電状態の動的出現機構の統一的解明

SrTi^<16>O_3の40K以下で実現されると思われる量子常誘電状態の動的出現機構を詳細に調べる目的で光散乱実験を行った。量子常誘電状態では、素励起が存在するはずのない横波音響波よりも低い周波数領域に、"ブロード・ダブレット"(BD:約20GHz)という光散乱ピークが現れる。1.BDの平均自由行程から、量子常誘電相を特徴づける長さのスケール(27Kで50nmのオーダー)が在りそうだと結論した。2.酸素を^<18>Oで置換したSrTi^<18>O_3(T_c25Kで強誘電性相転移をすると考えられている)の強誘電相で、部分的にソフト化する横波音響フォノンの光散乱スペクトラムがSrTi^<16>O_3のBDのものと極めて類似していることを見いだした。すなわち、SrTi^<16>O_3の量子常誘電相の中には動的に50nm程度の長さのスケールを持った強誘電体領域(SrTi^<18>O3の強誘電相と同じ対称性を持つ)がすでに存在しており、BDはその中を進むソフト化した音響フォノンである可能性が高いという仮説を提唱することができた。3.さらに、ごく最近、自由電子(Nb^<5+>)をドープしたSrTi^<16>O_3において、量子常誘電相だけで励起されている新たな光散乱ピーク(NP:約140GHz)を発見した。そして、NPの平均自由行程は、やはり長さのスケールの存在を示唆している。しかも、BDとNPとから求まる長さのスケールは、温度依存性と異方性をも含めて、両者で極めて類似していることも明らかにした。つまりSrTi^<16>O_3の"量子常誘電状態は異方性を持つ単一の長さのスケールで特徴づけられている"と判断される。以上のことからも分かるように、量子常誘電状態そのものの基礎情報が、まだまだ不足していると判断しており、圧力下でのスペクトル解析に優先して、常圧で実験を遂行している。STO16において040Kの温度範囲で発現していると考えられている量子常誘電状態で、そして横波音響フォノンよりも低い振動数領域で、"ブロード・ダブレット"と呼ばれる励起(BD)が観測されている。本来、この周波数領域では素励起は存在できないので、その起源を巡って多くの研究者の注目を集めている。第2音波が起源であるとする仮説があったが、我々は光散乱実験にて、その仮説が間違いであることを実証した。また、STO18はTc25Kで強誘電体相転移を起こすが、2540Kまでの温度範囲だけでBDが存在することを見いだした。これは量子常誘電状態が実現している温度範囲が強誘電体相転移のために狭まったことを示唆している。さらに、STO18では横波音響フォノンがTc以下の温度で、その周波数を半減し約20KでBDに極めて似た光散乱スペクトルを与えることを発見した。

この発見から、STO16で観測されるBDの起源は"量子常誘電状態で存在する局所的強誘電体領域内を伝搬する横波音響フォノン"である可能性が高いと結論づけた。○ダイヤモンドアンビル・セルによる高圧光散乱実験STO18に静水圧を印可してゆくと強誘電相がなくなる。これに伴い、量子常誘電状態が存在すると思われる温度範囲(2540K)が040Kまでに拡大し、BDがこの誘起された量子常誘電状態(025K)で現れると予想している。現在、4.5GPaの圧力下で40Kまでの光散乱スペクトルは得ているが、さらなる温度低下については今後の課題である。本年度は、SrTi^<16>O_3の40K以下で実現されると思われる量子常誘電状態の動的出現機構を詳細に調べる目的で光散乱実験を行った。量子常誘電状態では、素励起が存在するはずのない横波音響波よりも低い周波数領域に、"ブロード・ダブレット"(BD:約20GHz)という光散乱ピークが現れる。1.BDの平均自由行程から、量子常誘電相を特徴づける長さのスケール(27Kで50nmのオーダー)が在りそうだと結論した。2.酸素を^<18>Oで置換したSrTi^<18>O_3(T_c25Kで強誘電性相転移をすると考えられている)の強誘電相で、部分的にソフト化する横波音響フォノンの光散乱スペクトラムがSrTi^<16>O_3のBDのものと極めて類似していることを見いだした。すなわち、SrTi^<16>O3の量子常誘電相の中には動的に50nm程度の長さのスケールを持った強誘電体領域(SrTi^<18>O_3の強誘電相と同じ対称性を持つ)がすでに存在しており、BDはその中を進むソフト化した音響フォノンである可能性が高いという仮説を提唱することができた。3.さらに、ごく最近、自由電子(Nb^<5+>)をドープしたSrTi^<16>O_3において、量子常誘電相だけで励起されている新たな光散乱ピーク(NP:約140GHz)を発見した。そして、NPの平均自由行程は、やはり長さのスケールの存在を示唆している。しかも、BDとNPとから求まる長さのスケールは、温度依存性と異方性をも含めて、両者で極めて類似していることも明らかにした。つまりSrTi^<16>O_3の"量子常誘電状態は異方性を持つ単一の長さのスケールで特徴づけられている"と判断される。以上のことからも分かるように、量子常誘電状態そのものの基礎情報が、まだまだ不足していると判断しており、圧力下でのスペクトル解析に優先して、常圧で実験を遂行している。
なぜダイニンは片足が死んでいても、正常な二足歩行ができるのか?

これまで、細胞質ダイニンは二つの重鎖が交互に構造変化して力発生を行うことで、微小管上を二足歩行していると予想されてきた。ところが、これまでの私の研究により、一方の重鎖を構造変化及び力発生をしない「死んだ」重鎖に代えても、微小管上を一方向へと二足歩行することが明らかになった。昨年度までに、細胞質ダイニンの2つの重鎖に別々の蛍光色素または量子ドットを導入することで、2つの重鎖の動きを高時間・空間分解能で追跡するシステムが整った。本年度このシステムを利用することで、2つの重鎖が交互にステップするだけでなく、一方の重鎖が連続してステップする場合があること、野生型の重鎖が「死んだ」重鎖を物理的に微小管から引き剥がしていることが明らかとなった。それでは、細胞質ダイニンの動作に一方の重鎖の寄与は必要ないかというとそうではない。光ピンセットを用いた計測から、ダイニンが負荷に抵抗して力を発生させるためには、両方の重鎖が構造変化することが重要だということもわかった。また、重鎖の構造変化自体は6pN以上という強い力を出しうるが、少なくとも細胞性粘菌のダイニンでは、微小管との結合が大きな負荷に耐えられず、これが細胞質ダイニンの発生させる力を規定していることも示唆された。これらの特性が、「片足が死んでも二足歩行可能」という細胞質ダイニンのユニークな性質を生み出している。真核細胞の細胞質では、微小管のプラス端方向への物質輸送に関わるキネシンは多くの種類が存在するのに対し、反対側への輸送を司る細胞質ダイニンは一種類だけである。そのため、細胞質ダイニンはさまざまな状況に応じて、その運動を調節できるものと考えられる。本研究は、これまでに得られた一つの重鎖の構造情報や反応キネティクスと、実際の二量体としての運動や力発生の仕組みとを結び、細胞質ダイニンの細胞内での調節機構研究の基盤となるものと評価できる。これまで細胞質ダイニンは2つの頭部が交互に力発生することで、微小管上を二足歩行していると予想されてきた。しかし私は、一方の頭部をモーター活性を完全に失った「死んだ」頭部に代えても、元の4割程度の速度で微小管上を二足歩行するという現象を見いだした。このような挙動は従来のモデルでは説明できないため、片足が死んだダイニンの歩行様式を詳細かつ定量的に調べることで、分子モーターの新たな動作機構を発見できると期待される。本年度、私はまず全反射型蛍光顕微鏡を用いてダイニンの運動を詳細に追跡した。観察には量子ドットを用い、ナノメートルオーダーの正確さでダイニンの位置を決定した。その結果、片足が死んだダイニンも野生型ダイニンとほぼ同じステップサイズで運動していることが明らかとなった。このことは死んだ足と生きている足を交互に前方へと移動させてダイニンが運動していることを示唆している。ダイニンがどのような運動機構でこの移動を行っているのか知るために、さらなる詳細な検討が必要である。また死んだ頭部はそれ自身では微小管から解離しないため、ダイニンが前方に進むためには正常な頭部が死んだ足を微小管から引き剥がすことが必要だと考えられる。その際には、2つの頭部が物理的に結合している尾部を介して分子内張力がかかっているものと予想されたため、柔軟なリンカーを挿入することで尾部を介した分子内張力を低減させたダイニン組換え体を作製した。その組換え体の運動の様子を観察したところ、片足が死んだダイニンでも野生型でもリンカー挿入による影響はなかった。したがってダイニン分子内の2つの頭部は尾部以外の部分でも、直接相互作用していることが示唆された。これらは2つの頭部が協調して微小管上を長距離運動するというダイニンの性質の分子機構を調査するうえで非常に重要な知見である。細胞質ダイニンは一分子で微小管から解離することなく長距離進行することができるモータータンパク質である。この性質を達成するためには、ダイニンは二つの頭部を協調的に運動させる必要があり、本研究はダイニンがいかにして二つの頭部を協調させているのか明らかにすることを目的としている。本年度、私は1.尾部を介した張力を低減させたダイニンでも、実際に二つの頭部を交互に前方へ移動させているか、あるいは両方の頭部とも微小管の中の一本のプロトフィラメント上を進行するのか2.どのような向きで2つの頭部が並んでいるのかという2点について調べるため、二つの頭部に異なる波長の蛍光を発する色素を結合させ、各頭部の動きを同時に高精度で追跡する、あるいは蛍光エネルギー移動(FRET)を用いて一分子内の2つの頭部管の距離を測ることを試みた。その結果、高い時間・空間分解能で2つの蛍光色素または量子ドットを追跡する顕微鏡システムのセットアップに成功し、現在、徐々に運動中の2つの頭部の振る舞いに関するデータが得られつつある。このデータが十分量得られたならば、これまで未知であった細胞質ダイニンのステップ機構が明らかになるだけでなく、2つの頭部間での制御機構についても、どの領域を介して制御が行われているのかなど、具体的に記述することが可能になると期待される。特に2つの頭部管での制御に関しては、ダイニンが属するAAA+ファミリーには2つのAAAリングを結合させて機能するものが存在するため、ダイニン研究のみならずAAA+ファミリーの機能発現研究においても大きなインパクトを持つものと予想される。

これまで、細胞質ダイニンは二つの重鎖が交互に構造変化して力発生を行うことで、微小管上を二足歩行していると予想されてきた。ところが、これまでの私の研究により、一方の重鎖を構造変化及び力発生をしない「死んだ」重鎖に代えても、微小管上を一方向へと二足歩行することが明らかになった。昨年度までに、細胞質ダイニンの2つの重鎖に別々の蛍光色素または量子ドットを導入することで、2つの重鎖の動きを高時間・空間分解能で追跡するシステムが整った。本年度このシステムを利用することで、2つの重鎖が交互にステップするだけでなく、一方の重鎖が連続してステップする場合があること、野生型の重鎖が「死んだ」重鎖を物理的に微小管から引き剥がしていることが明らかとなった。それでは、細胞質ダイニンの動作に一方の重鎖の寄与は必要ないかというとそうではない。光ピンセットを用いた計測から、ダイニンが負荷に抵抗して力を発生させるためには、両方の重鎖が構造変化することが重要だということもわかった。また、重鎖の構造変化自体は6pN以上という強い力を出しうるが、少なくとも細胞性粘菌のダイニンでは、微小管との結合が大きな負荷に耐えられず、これが細胞質ダイニンの発生させる力を規定していることも示唆された。これらの特性が、「片足が死んでも二足歩行可能」という細胞質ダイニンのユニークな性質を生み出している。真核細胞の細胞質では、微小管のプラス端方向への物質輸送に関わるキネシンは多くの種類が存在するのに対し、反対側への輸送を司る細胞質ダイニンは一種類だけである。そのため、細胞質ダイニンはさまざまな状況に応じて、その運動を調節できるものと考えられる。本研究は、これまでに得られた一つの重鎖の構造情報や反応キネティクスと、実際の二量体としての運動や力発生の仕組みとを結び、細胞質ダイニンの細胞内での調節機構研究の基盤となるものと評価できる。
体腔内における、内臓器官の三次元的配置を決定する遺伝的機構に関する研究

本研究課題では、動物の体腔内における内臓器官が、遺伝的に制御された空間的位置関係をたもって配置される一般的な現象の基本原理を理解することを目的として研究をおこなった。我々は、遺伝学的アプローチを用いた研究が展開できるショウジョウバエの消化管が、種固有の三次元パターンで配置されていることに着目してきた。ショウジョウバエの消化管は、発生上の由来が異なる、前、中、後腸の3つの部分からなる。前、中、後腸は、はじめ、正中線にそって左右対称に形成されたのち、背腹軸方向への屈曲と同時に、決められた方向に一定角度だけ回転することで、結果的に、一貫した左右非対称性を示すようになる。本研究では、このような消化管の明瞭な左右非対称性に焦点をあてた。消化管の左右性に異常を示す突然変異体の遺伝的スクリーンや、遺伝子発現パターンを指標とした左右非対称に発現する遺伝子のスクリーンによって、消化管の左右非対称な三次元配置を制御する遺伝子を、全ゲノムのなかからシステマティックに検索した。その結果、これまでに、前腸に逆位が起こる突然変異体を、2系統同定できた。このうちの1つについて、突然変異の原因遺伝子を同定したところ、inscuteableであることが明らかになった。Inscuteableには、2つの機能がある。1つは、分裂軸の方向の決定であり、もう1つは、特定のタンパク質を一方の細胞極に集め、非対称に分配する機能である。そこで、inscuteableの下流で機能し、細胞運命を決定するタンパク質の非対称な分配に必須なmirandaの突然変異体を調べたところ、逆位は観察されなかった。このことから、inscuteableでみられる逆位は、非対称分裂の異常による細胞運命決定の誤りに由来するのではなく、分裂軸の方向の異常によるものだと考えられた。現在、上で述べた2つのスクリーンを、大規模におこなっている。
層状ナノ粒子・ポルフィリン複合体におけるナノレベル構造制御と光機的性

これまでに、主にピリジニウム型のカチオン性ポルフィリンを用いて、吸着の配列、配向制御について検討を行なってきた。これらのポルフィリンにおいては周囲の溶媒極性を変化させることで、1層状化合物上での吸着配向制御が行なえることが明らかとなってきている。しかしながら、その原理、詳細については十分解っていない。そこで、新規2価カチオン性ポルフィリンを合成し、これらの吸着配向挙動について検討した。これらのポルフィリンでは、カチオン周囲の立体環境がお互いに異なっており、その吸着配向への効果に興味が持たれる。実際の配向角は、偏光子を備えた表面・界面分光装置により定量的に評価した。有機溶媒中での配向角は70°前後と求まり、水中の10°以下と比べて大きな配向変化を起こす事を明らかとした。さらには配向変化の起こしやすさについて検討した。層状化合物はその表面に負電荷を帯びている。従って、分子内にアニオン性部位を有する事から、配向変化を非常に起こしやすいと予想されたが、予想通り、多種多様な有機溶媒において配向変化が起きる事が明らかとなった。極めて環境に敏感な色素分子として有用である事が解った。特に、他のカチオン性ポルフィリンと混在させる事により、水平配向、非水平配向が混在した複合体の形成に成功した。ポルフィリン分子は配向を変えると色調が変化する事から、ソルバトクロミズム材料として興味深い材料を得ることができた。カチオン性ポルフィリン類をゲスト分子、カチオン交換性無機層状化合物をホスト材料として、両者からなる無機有機複合体の構造制御について検討した。両者からなる複合体においては、ポルフィリン分子は高密度に吸着しながら、全く会合を伴わないという興味深い挙動を示した。すなわち、複合体中のポルフィリン分子は、励起状態の励起寿命が失活を受けず、反応活性な状態を維持している。この様な特異な挙動は、ポルフィリン分子内でのカチオン電荷間距離と、層状化合物上における平均アニオン電荷間距離の一致が重要である事を見出し、"Size-Matching Rule"と名付けた。通常の溶液中ではポルフィリン分子は、その分子面を層状化合物表面に平行な配向を示す。非プロトン性の溶媒雰囲気においては、ポルフィリン分子は吸着配向を変化させ、層状化合物表面に非平行な状態で吸着していることを明らかとした。導波路ガラス上にポルフィリン-層状化合物複合体をモノレーヤーの状態で配置した。この試料におけるポルフィリンの吸収スペクトルを導波路上に発生するエバネッセント波を用いて観測した。通常の分光法では、モノレーヤーの試料では吸光度が小さすぎ観測が困難であるが、導波路上の測定では光の多重反射を利用することで高感度な測定が可能である。この分光法に偏光分光を併せ用いる事でポルフィリンの配向角を定量的に見積もった。偏光の二色比の測定より、ポルフィリンの水中では配向角は層状平面に対して5度以下、ジオキサンなどの非プロトン性溶媒中では約70度と求める事ができた。この現象を利用し、三種の異なるポルフィリンが共吸着した試料について検討を行った。その結果、三種のポルフィリンをそれぞれ独立に配向制御できる事を発見した。以上の様に分子レベルで複合体構造を制御し、その挙動を定量的に観測する事に成功した。
乳幼児期におけるHHV-7侵襲状況と関与する疾病の調査研究

乳幼児期におけるHHV-7侵襲状況と関与する疾病の解明を目的として次のことを実施。出生時より1年から1年6カ月、経時的に母児より血液、唾液を採取。HHV-7抗体とともにHHV-7 DNAをPCP法で測定、HHV-6と比較。なお母乳についても両ウイルスDNAの検討を行った。結果を以下のようにまとめる。1)まず本学で分離したHHV-7 FG7-5株を米国NCI, Dr. Lussoより分与された樹立T細胞(SupT1)に感染培養。12スポットのスライド上に固定。蛍光法により測定抗体がHHV-7特異的であることを確認。2)27例からの母乳中HHV-7 DNAは5例(19%)に検出されたがHHV-6 DNAは全例陰性であった。3)観察期間中母親唾液にはHHV-7 DNAが79-100%検出されたが、HHV-6 DNAは44-62%の頻度であった。4)出生時の児の唾液にはHHV-7 DNAが4%検出され、その後頻度は上昇、1歳時には約半数に認められ、HHV-6 DNAが生後3-4カ月に初めて検出されるのに比べHHV-7は早期に感染の成立することが認められた。5)しかし1-2歳児の抗体陽性率からみるとHHV-7はHHV6より低く、感染効率の差異が認められた。6)感染成立の際の臨床症状をみるとHHV-7では発疹および、あるいは発熱を認めるものは3/14でHHV-6の5/7に比べ不顕性感染率の高いこと確認された。7)観察期間中にHHV-7の初感染による肝機能異常遷延例、小脳失調症状を示す中枢神経系合併例を確認した。以上の成績よりHHV-7の早期侵襲と特殊臨床経過例を確認することができた。
相対論的量子力学における経路積分とその関連する諸問題の研究

一瀬は,相対論的Weyl量子化ハミルトニアンの一般の特異性を許すベクトルポテンシャルを持つときの新たな定義を与え,その自己共役作用素としての実現の問題や以前に得た虚数時間経路積分表示の有効性について研究してきた.土田哲生とともに、その本質的自己共役性をベクトルポテンシャルが局所2+δ(δ>0)乗可積分のときに,2次形式としてその自己共役作用素の実現をベクトルポテンシャルが局所1+δ乗可積分のときに確立した.虚数時間経路積分については,近く一般のベクトルポテンシャルの場合に解決の見込みである.さらに他方では,核電荷Z,電子数Nを持つ原子やイオンや分子に対する多体問題において,Liebの負イオン化上界N<2Z+1を導くのに用いられた運動エネルギー作用素に関する不等式を,非相対論的,相対論的両ケースについて一般的且つ統一的証明を与えた.田村博志は,4次元ユークリド空間にランダムに分布し互いにクーロン相互作用している閉曲線達の統計力学を考え,この熱力学的極限によって得られるGibbs測度を得て次の問題を鋭意研究中である.林田和也は,中谷政夫と共に,Yamabeの問題を双曲空間で考え,球対称解の大局的存在を論じた.藤本坦孝は,3次元ユークリド空間内の2つの完備平坦極小曲面M,M′の間の共形的微分同相写像Φの存在を仮定したとき,Mのガウス写像Gと,ΦとM′のガウス写像の合成G′の逆像が異なる7つの値で一致すれば,GXIG′であることを示した.古田孝臣は,代数体の拡大体において完全分解する素イデアルの類別について,非アーベル拡大(有理数体上(2,2)型アーベル拡大に関する非アーベル中心拡大)の場合に,そのような類別を得た.森下昌紀は,A.Weilによる古典的な非アーベル関数に関する結果のいくつかの代数体における類似物を追求し,論文を一篇まとめた.一瀬は,相対論的Weyl量子化ハミルトニアンの一般の特異性を許すベクトルポテンシャルを持つときの新たな定義を与え,その自己共役作用素としての実現の問題や以前に得た虚数時間経路積分表示の有効性について研究してきた.土田哲生とともに、その本質的自己共役性をベクトルポテンシャルが局所2+δ(δ>0)乗可積分のときに,2次形式としてその自己共役作用素の実現をベクトルポテンシャルが局所1+δ乗可積分のときに確立した.虚数時間経路積分については,近く一般のベクトルポテンシャルの場合に解決の見込みである.さらに他方では,核電荷Z,電子数Nを持つ原子やイオンや分子に対する多体問題において,Liebの負イオン化上界N<2Z+1を導くのに用いられた運動エネルギー作用素に関する不等式を,非相対論的,相対論的両ケースについて一般的且つ統一的証明を与えた.田村博志は,4次元ユークリド空間にランダムに分布し互いにクーロン相互作用している閉曲線達の統計力学を考え,この熱力学的極限によって得られるGibbs測度を得て次の問題を鋭意研究中である.林田和也は,中谷政夫と共に,Yamabeの問題を双曲空間で考え,球対称解の大局的存在を論じた.藤本坦孝は,3次元ユークリド空間内の2つの完備平坦極小曲面M,M′の間の共形的微分同相写像Φの存在を仮定したとき,Mのガウス写像Gと,ΦとM′のガウス写像の合成G′の逆像が異なる7つの値で一致すれば,GXIG′であることを示した.古田孝臣は,代数体の拡大体において完全分解する素イデアルの類別について,非アーベル拡大(有理数体上(2,2)型アーベル拡大に関する非アーベル中心拡大)の場合に,そのような類別を得た.森下昌紀は,A.Weilによる古典的な非アーベル関数に関する結果のいくつかの代数体における類似物を追求し,論文を一篇まとめた.
ほ乳類・鳥類の酸性キチナーゼ　（Ｃｈｉａ）　における機能特性と食性に関する研究

キチンは、N -アセチル-D-グルコサミン(GlcNAc)の重合体で、昆虫、甲殻類、真菌類などの多様な生物の主要構成成分である。昆虫をはじめとするキチン含有生物の飼料化が提案されているが、キチンの難消化性への懸念から、実用化には至っていない。申請者はこれまでに、キチン分解酵素である酸性キチナーゼ(Chia)が、ニワトリとブタの胃で大量に発現し、胃と腸の条件でキチンを分解すること、また、食性が動物の胃におけるChiaの発現レベルとキチンの分解性を決めることを明らかにした(Tabata et al., 2017; Tabata et al., 2017; Tabata et al., 2018)。本年度は、家畜のみならず、霊長類を含めた幅広い動物・食性種におけるChiaを解析した。イヌ(肉食性動物)のChiaのキチナーゼ活性低下原因の解明のため、活性の高いマウス(雑食性動物)のChiaとのキメラ体を作製、解析することで、不活性化の要因となる領域を特定した(Tabata et al.,論文準備中)。また、非ヒト霊長類のコモンマーモセット(食虫性動物)のCHIAの転写レベルと酵素活性を解析し、CHIAがコモンマーモセットの胃で大量に発現し、消化器系条件下でキチンを分解することを明らかにした(Tabata et al., 2019)。さらに、家畜であるブタの胃からChia酵素を精製し(Tabata et al., 2018)、ブタの体内で、キチンがChiaによって分解され、健康に良いとされているキトオリゴ糖が生成することを明らかにした(Tabata et al.,投稿中)。以上の結果は、Chiaの消化酵素としての生理的役割の理解を深め、キチン含有生物の飼料化を推進する基礎的データとなり得る。・当初の計画どおり、マウスChia配列の一部を導入することで、イヌChiaを活性化した。よって、イヌChia不活性化の要因となる領域、アミノ酸を絞り込むことができた。・当初の計画には無かったが、非ヒト霊長類であるコモンマーモセットのCHIAが、胃で多量に発現し、体内でキチンを分解できることを明らかにした。この研究成果は、国際学術誌Scientific Reportsにて報告した。・家畜であるブタの体内で、脱アセチル化度の高いキチンがChiaによって分解され、キトオリゴ糖を生成することを示した。本研究内容も、当初の計画には無かったが、論文にまとめ、現在、国際学術誌に投稿中である。1イヌおよびウシ(肉食、草食性動物)のChiaのキチナーゼ活性低下の原因の解明昨年度は、キチナーゼ活性が高いマウスと、活性の低いイヌのChiaを構成する、触媒ドメインと、キチン結合ドメイン上の配列をエクソン単位で入れ替えた、キメラ体Chiaを6種類構築した。マウスとイヌのWild-type 2種類を含む、8種のタンパク質を大腸菌で発現させ、キチナーゼ活性を測定し、エクソン6-7がコードする領域に、イヌChiaの活性低下の要因があった。今後は、この結果に基づき、イヌChiaの不活性化領域のさらなる絞り込みに取り組む。その後、イヌChia不活性化の要因となるアミノ酸を同定し、原因アミノ酸の進化の過程における保存性を、様々な食性の動物のChiaと比較し、肉食性動物におけるChiaの不活性化の原因とその必然性を明らかにする。マウスとウシChia間のキメラタンパク質6種はすでに作製済みである。同様に、これらのキメラタンパク質の解析を行い、活性低下領域の特定に取り組む。2胃におけるChiaの活性化機構に関する研究申請者はすでに、マウスChiaが、pH 2.0において、Cl濃度依存的に活性化する結果を得た。他方、ニワトリではほとんど活性化しない。本年度は、pH 7.0におけるChiaのClによるマウス、ニワトリChiaの活性化の有無を検討し、ChiaのClによる活性化が、プロトンおよびClイオンが豊富な胃の環境に特有の現象かどうかを明らかにする。また、これらの実験を、低分子量発色基質に加えて、高分子量キチン基質でも検討する。さらに、多様な食性・動物種(ブタ、ウシ、イヌ、コモンマーモセット)のChiaのClによる活性化を検討する。

イヌ(肉食性動物)のChiaのキチナーゼ活性低下原因の解明のため、活性の高いマウス(雑食性動物)のChiaとのキメラ体を作製、解析することで、不活性化の要因となる領域を特定した(Tabata et al.,論文準備中)。また、非ヒト霊長類のコモンマーモセット(食虫性動物)のCHIAの転写レベルと酵素活性を解析し、CHIAがコモンマーモセットの胃で大量に発現し、消化器系条件下でキチンを分解することを明らかにした(Tabata et al., 2019)。さらに、家畜であるブタの胃からChia酵素を精製し(Tabata et al., 2018)、ブタの体内で、キチンがChiaによって分解され、健康に良いとされているキトオリゴ糖が生成することを明らかにした(Tabata et al.,投稿中)。以上の結果は、Chiaの消化酵素としての生理的役割の理解を深め、キチン含有生物の飼料化を推進する基礎的データとなり得る。・当初の計画どおり、マウスChia配列の一部を導入することで、イヌChiaを活性化した。よって、イヌChia不活性化の要因となる領域、アミノ酸を絞り込むことができた。・当初の計画には無かったが、非ヒト霊長類であるコモンマーモセットのCHIAが、胃で多量に発現し、体内でキチンを分解できることを明らかにした。この研究成果は、国際学術誌Scientific Reportsにて報告した。・家畜であるブタの体内で、脱アセチル化度の高いキチンがChiaによって分解され、キトオリゴ糖を生成することを示した。本研究内容も、当初の計画には無かったが、論文にまとめ、現在、国際学術誌に投稿中である。1イヌおよびウシ(肉食、草食性動物)のChiaのキチナーゼ活性低下の原因の解明昨年度は、キチナーゼ活性が高いマウスと、活性の低いイヌのChiaを構成する、触媒ドメインと、キチン結合ドメイン上の配列をエクソン単位で入れ替えた、キメラ体Chiaを6種類構築した。マウスとイヌのWild-type 2種類を含む、8種のタンパク質を大腸菌で発現させ、キチナーゼ活性を測定し、エクソン6-7がコードする領域に、イヌChiaの活性低下の要因があった。今後は、この結果に基づき、イヌChiaの不活性化領域のさらなる絞り込みに取り組む。その後、イヌChia不活性化の要因となるアミノ酸を同定し、原因アミノ酸の進化の過程における保存性を、様々な食性の動物のChiaと比較し、肉食性動物におけるChiaの不活性化の原因とその必然性を明らかにする。マウスとウシChia間のキメラタンパク質6種はすでに作製済みである。同様に、これらのキメラタンパク質の解析を行い、活性低下領域の特定に取り組む。2胃におけるChiaの活性化機構に関する研究申請者はすでに、マウスChiaが、pH 2.0において、Cl濃度依存的に活性化する結果を得た。他方、ニワトリではほとんど活性化しない。本年度は、pH 7.0におけるChiaのClによるマウス、ニワトリChiaの活性化の有無を検討し、ChiaのClによる活性化が、プロトンおよびClイオンが豊富な胃の環境に特有の現象かどうかを明らかにする。また、これらの実験を、低分子量発色基質に加えて、高分子量キチン基質でも検討する。さらに、多様な食性・動物種(ブタ、ウシ、イヌ、コモンマーモセット)のChiaのClによる活性化を検討する。
含フッ素β2-アミノ酸の触媒的不斉合成と機能評価

近年合成素子として需要の高まっているβ2-アミノ酸類をターゲットとして本研究を展開した.具体的にはβ-アラニン等価体として設定した環状ヒドロキシルアミンを用いた触媒的不斉反応の開発に注力し,1)パラジウム触媒を用いた不斉アリル化反応,2)ケチミンへの不斉Mannich型反応が高選択的に進行することを見出した.得られた成績体はともにFmoc固相合成法へと容易に展開可能であり,α/β-ハイブリッド型ペプチドを高収率で得ることができた.本研究成果で得られたβ-アミノ酸類はほぼ全てが新規化合物であり,低分子医薬品・農薬等の関連分野におけるビルディングブロックとしても有用であると考える.本研究課題では、有用でありながらも効率的な合成法が全く確立されていないβ2ーアミノ酸の供給を触媒的不斉合成によって達成すること、及び得られたアミノ酸を短鎖ペプチド鎖へと導入し、分光学的手法によりその高次構造へと与える影響を明らかとすることを通じて、ペプチドミメティクス分野における新たな知見を見出すことを目指している。研究初年度であった平成28年度は、まずβーアラニン等価体として設計した環状ヒドロキシルアミンの性質を精査した。すなわち、求核種はα位プロトンの酸性度が低いカルボン酸誘導体であることから、穏和な塩基性条件下での脱プロトン化を伴うエノラート形成が可能か否かを調査した。検討により本基質は触媒量の塩基により活性種であるエノラートの生成が可能であることが確認されたので、続いて各種求電子剤の検討を行った。生成したエノラートは様々な基質と反応することを見出しているが、本年度は触媒的不斉アリル化反応に関して特に集中的に検討を行った。これは不斉アリル化反応成績体が、セリン・アスパラギン酸・グルタミン酸・リジン・ロイシンをはじめとする各種天然型側鎖を有するβ2ーアミノ酸へと容易に誘導可能な共通中間体となりうることに起因する。なおこれらβ2ーアミノ酸類は化学量論量のキラル補助基を用いた多段階合成を経て別個に合成されており、触媒的不斉合成を用いた共通中間体から誘導する本結果は学術的インパクトが大きく、関連分野への波及効果も期待できると考えている。本年度は新規に設計したbeta-アラニン等価体を用いた触媒的不斉反応の検討を行い、金属触媒を用いる不斉アリル化反応が良好な選択性にて進行することを見出した。これは研究計画初年度の「設計した基質を用いた触媒的不斉反応の開発」に相当することから当初の計画通りに進行していると評価する。近年ペプチドミメティクス手法の合成素子として需要の高まっているbeta2-及びbeta2,2-アミノ酸をターゲットとして本研究を展開した.ペプチド化学においてはFmoc固相合成法によるペプチド鎖伸長がデファクトスタンダードであり,その開発フローに即座に適用可能な形での供給を行うことができれば,今後の応用展開を円滑に進めることができると考え反応設計を行った.特に本研究課題においては触媒的不斉合成による新たな合成手法の確立を目指した.具体的にはbeta2-アミノ酸等価体として設定した環状ヒドロキシルアミンを用いた触媒的不斉反応の開発に注力し,パラジウム触媒を用いた不斉アリル化反応が高選択的に進行することを見出した.得られた成績体はアリル基の反応性を活かすことで種々の新規アミノ酸へと変換可能であった.またFmoc固相合成法へも容易に展開可能であり,標準的な実験プロトコールによってalpha/beta-ハイブリッド型のペプチドを高収率で得ることができた.本研究成果で得られたbeta-アミノ酸類はそのほぼ全てが新規化合物であり,低分子医薬品・農薬等の関連分野におけるビルディングブロックとしても有用であると考える.さらに予備的知見ながら,beta2-,beta3-,及びbeta2,2-アミノ酸をそれぞれalpha/beta-ハイブリッド型ペプチドへと導入した際に,異なる高次構造を形成する例を見出している.本結果の一般化を進めていくことで今後の分子設計における重要な知見が得られると期待する.近年合成素子として需要の高まっているβ2-アミノ酸類をターゲットとして本研究を展開した.具体的にはβ-アラニン等価体として設定した環状ヒドロキシルアミンを用いた触媒的不斉反応の開発に注力し,1)パラジウム触媒を用いた不斉アリル化反応,2)ケチミンへの不斉Mannich型反応が高選択的に進行することを見出した.得られた成績体はともにFmoc固相合成法へと容易に展開可能であり,α/β-ハイブリッド型ペプチドを高収率で得ることができた.本研究成果で得られたβ-アミノ酸類はほぼ全てが新規化合物であり,低分子医薬品・農薬等の関連分野におけるビルディングブロックとしても有用であると考える.平成29年度は研究計画に基づき、1)得られた不斉反応成績体のbeta2-アミノ酸への誘導、2)得られた非天然型アミノ酸を用いたペプチド合成、及び3)それらペプチド群の高次構造評価を行っていく。進捗状況が比較的順調であることから、継続的にアリル化反応成績体を供給していくことに加えて、新たな求電子剤の探索も行うことで本研究によって得られる非天然型アミノ酸・ペプチドライブラリーの拡充を狙っていく。有機化学触媒条件の検討が予想以上に進行したため、触媒検討用に計上していた配位子購入費用が見積もりよりも少なくなった。最適な配位子はやや高価なため、今年度の合成素子供給段階において前年度未使用額も配位子購入に充てる予定である。
戦没者祭祀と祖先観の変容に関する民俗学的研究-新潟県佐渡の墓碑・忠魂碑・護国神社-

本研究は、新潟県佐渡という地域社会において、戦没者に対する祭祀や供養が、その地域の祖先観にどういう影響を与えたかという点を、フィールドワークに基づいて、明らかにしようというものであり、以下、本研究によって得られた新たな知見を箇条書きする。(1)佐渡東北部の相川地区は、かつて墳墓に永続的な墓石を建立しない地域であったが、日清日露戦争以来、戦没者の碑(墓碑と顕彰碑の区別は暖昧)を建立することが契機となり、それ以外の家族の墓碑をも併せて、先祖代々之墓として建立するようになっている。これが戦没遺族以外にも先祖代々之墓を波及させた蓋然性が高い。(2)戦没者の碑は日清・日露の頃までは、集落の共同墓地域内に建立する地域が多かったが、シベリア出兵以降になると、道路脇や寺堂境内など公共の場に建立する傾向に移っていき、それが墓碑的性格から顕彰・戦勝祈願的性格を帯びていく。(3)各集落では当初は従来の義民に対する供養と同形式で、戦没者を慰霊・鎮魂していたが、(2)とも関連して、行政町村(寺院等での合同慰霊祭)や佐渡全体で祀る形式(護国神社)も現われ、戦没者の慰霊は重層化している。(4)忠魂碑や戦没者祭祀の施設は、むしろ戦後に建立される方が事例的に多く、特に当地の最終年忌である50回忌に合わせ、神社境内に統合されたりする一方、戦没者碑を破壊し、祖霊一般に融合させようとする遺族もあり、その対応(儀礼的処理)は多様であった。今年度は3年計画の初年度であり、新潟県佐渡全般の戦没者慰霊に関するジェネラル・サーベイを行なった。佐渡の場合、日清・日露戦争の戦没者を祀った明治紀念堂から発展した、佐渡護国神社が昭和27年に設立され、新潟県護国神社と重複する形で存在する。明治紀念堂は金井町の得勝寺の僧侶によって建立されたものであるが、戦没者慰霊に関わる同様な仏教的施設は、両津市安照寺の偲巽堂(昭和63年以降は、両津市平和祈念戦没者慰霊塔の方で戦没者祭祀が行われる)ほか、各旧村レベルの寺院で合同慰霊祭が行われている実態が明らかになった,このほか、集落単位で戦没者の合同供養を、念位堂などで行なっている例も多く、その祭祀のあり方は、それまで行われていた義民供養など、異常死をめぐる伝統的な民俗慣行との共通性かうかがわれ、次年度以降、調査を民俗学的に深めていくべき、課題として浮かび上がってきた。また一般に、招魂碑・忠魂碑等の神道的施設は、戦前の遺物と捉えられがちであるが、佐渡島内に現存する、その実態は、平和の礎といったものを含めると、43例中、22例が戦後建立されたものであり、現在進行形の習俗であるといった認識の必要性を痛感させられた。なかには佐和田町二宮の菖魂社や、両津市椎泊の忠魂社のように、戦後神社として建立されたものもあり、従来の研究のイデオロギー的偏りが、実態を見誤らせてきたのではないかと、改めて、本研究の課題を再認識した次第である。前年度に引き続き、上記の研究課題に応えるため、新潟県佐渡における民族学的フィールドワークを進める一方、今年度は視角を広げるため、日本における招魂祭祀の起源とされる、山口県下関市の桜山神社と京都市東山の霊山神社の実態調査も試みた。既存の研究においては、今日の靖国神社・護国神社形式の人神祭祀に連なる招魂祭祀の嚆矢を、桜山神社としたり、霊山神社に求めたりと、二説が混在していたが、その実態調査および文献的考証から、後者の場合、坂本竜馬等の遺体が埋葬された場所でもあり、いわば墓地が慰霊のための祭祀場化して、神社形式に展開したこと。一方、桜山神社の場合、全国各地に散った長州藩士の霊魂を招魂するための施設として発展していることがわかった。

両者に関するより詳細な調査は、今回の課題範囲からは少し逸脱してしまうので、次回の課題に回さざるを得ないが、今年度調査した主たる調査地の佐渡護国神社の場合、護国「神社」としての基本形態は、桜山神社の系統を受容していると思われるが、神社境内内に、鎮霊殿と称して、遺骨の安置施設が併設されており、両者の系統を一概にどちらが初めかといった起源論的な既存研究は、受容する地方や民衆のレベルではあまり意味がないことだといえる。本年度は最終年度であり、補充的なフィールドワークと史料的な整理を中心に研究を遂行した。前者において主として行なったのは、新潟県佐渡郡の全体的な戦没者祭祀を統括する佐渡護国神社(金井町に設置)、および佐和田町二宮の菖魂社や両津市椎泊の忠魂社のような、より地域的な戦没者慰霊施設の設立過程、また各市町村で現在も社会福祉協議会の主催で続けられている合同慰霊祭と、各集落レベルで執行されている各種慰霊行事、これら相互の歴史的系譜関係や、その相互の社会的連関性、かつ遺族会との関わり等を全体的に把握できるように努めた。一方、後者においては、より個別的な戦没者慰霊の実態を把握するため、相川町に調査対象を絞って、町立相川文書館に保管されている、厚生省管掌の援護法該当者を対象化した「戦没者調査票綴」等を収集し、その分析を行なって具体的な個人レベルの把握を企図した。また同館に保管されている「支那事変一周年記念行事ニ関スル件」等の史料も収集し、戦前・戦中期になされた諸種の儀式・儀礼の把握に努め、戦後の慰霊行事に連なる要因・背景を検討した。また以上の、佐渡という一地方の戦没者祭祀の展開と、中央政府の政策との関連を捉えるため、全国各地の招魂社・護国神社の傾向性を分析するほか、今年度は佐渡同様に満州開拓団を多く輩出した長野の、松本市にある長野県護国神社のあり方との比較し、さらに今日、災害や大事故犠牲者に対して盛んに行われる、慰霊とは何なのか、慰霊形式の発生についても歴史・民俗学的考察を深めた。
「中国絵画総合図録」増補改訂版制作のための日本国内の中国絵画調査

平成4・5年度を中心に、東京国立博物館・京都国立博物館・仙台市博物館・鍋島報効会・沖縄県立博物館・岡山県立美術館や、個人コレクションなど、関東・関西・東北・九州・沖縄・中国の公私のコレクションに所蔵される中国絵画の第二次包括的調査を実施し、昨平成9年度に至って、4・5年度に調査・撮影した写真資料すべての整理を完了した。調査作品点数等の概要は、以下のとおりである。調査作品1、489点」4"X5"白黒写真2、848枚」35mm白黒写真8、772枚」35mmカラースライド6、818枚」本資料は、従来から収集されてきた無慮20万点に及ぶ中国絵画写真資料に追加のうえ、東京大学東洋文化研究所東アジア美術研究室において保管・公開されている。また、その目録となる『日本所在中国絵画目録続編』は、平成10年3月に、東洋文化研究所附属東洋学文献センターより、東洋学文献センター叢刊別輯22として刊行され、広く内外の研究機関や、個人研究者等に配布済みである。研究成果報告書に代わる出版物であり、『中国絵画総合図録続編:巻3日本篇』(東京大学出版会、平成11年3月刊行予定)の前提となる目録である。科学研究費補助金を得て、平成4年度は、日本所在中国絵画調査において、京都・九州・沖縄地区の調査を行った。京都調査では、京都国立博物館及び同館寄託の中国絵画の調査、写真撮影を行った。同館に寄託中の社寺・個人コレクションは、知恩院、天龍寺(京都)、長母寺(名古屋)、柳孝コレクション、新見忠夫コレクション、薮本コレクション、中山善次コレクション等である。この京都調査の調査撮影作品件数は、96点、撮影枚数は、全図4X5約460枚、部分35mm約880枚、部分カラースライド約750枚であり、現在では現像・焼付けは終わり、写真資料整理の作業が順調に進捗中である。次に、九州調査においては、日程の都合から1回の調査では終了することが出来なかった為、2月下旬から3月上旬にかけて、沖縄を含めた2回目の調査を進行中である。前回と今回とを合わせた作品の所蔵者・機関名は、鹿児島県立歴史資料センター黎明館、松井文庫(熊本)、大慈寺(熊本)、長崎県立美術博物館、佐賀県立博物館寄託品、福岡市立博物館、福岡市美術館、石坂コレクション(福岡)、沖縄県立博物館、観宝堂(沖縄)等であり、調査撮影作品件数は、約200点に達すると思われる。平成5年度には、関西地区の残りと中部・関東・東北地区の調査を今年度と同様の方式で行い、写真資料の収集に努め、「中国絵画総合図録」刊行より10年余を経て、前回の調査に漏れたコレクションや調査済みコレクションの新収品等を増補した改訂版の作成に対する要望に応えたい。東北・関西地区及び東京の寺院、公私美術館・博物館、個人コレクションについて所蔵される中国絵画を調査した。主な調査対象としては、山形美術館・仙台市博物館・薮本公三氏、大阪市立美術館、岡山県立美術館、出光美術館などが挙げられる。それと並行して、調査・撮影した写真資料の整理を継続的に行なっている。これらは整理がついた順に本学東洋文化研究所東アジア美術部門にある中国絵画アーカイヴにおいて公開されている。しかし、今年度調査・撮影を行なった写真資料を含めて、その量は膨大であり、その整理には、当然、労力・時間を多く必要とすべきものである。今年度行なった調査・撮影の成果を含めた『国内所在中国絵画目録』改訂増補版は、東洋文化研究所付属東洋学文献センターより東洋学センター叢刊として、『海外所在中国絵画目録』に引き続いて刊行される予定である。
人間ー環境系研究のための計測評価法の開発と応用

人間ー環境系に関する研究は極めて広範囲であり、学際性に富んだ研究組織においてはじめて可能になる総合的学術研であるが、実験科学的手法を必要とする研究課題においては、あらゆる環境物質に関する詳細・緻密な情報の取得が必要不可欠である。本研究班は、上記のような各種環境物質情報を計測評価するために、(1)ガスクロマトグラフ質量分析法(GCーMS)、(2)誘導結合プラズマイオン化質量分析法(ICPーMS)、(3)誘導結合プラズマ(ICP)発光分析法、(4)分析電子顕微鏡(AEM)、(5)サブミクロン二次イオン質量分析法(SIMS)など、5種類の新しい計画法を開発整備するとともに、これらの装置を十分な管理下に置いて広く環境科学研究者の利用に供し、それぞれの研究の発展に寄与することを目的としている。(1)高分解能ガスクロマトグラフ質量分析計を用いた環境汚染物質の分析法の開発と毒性評価今年度は、PCDDおよびPCDFの毒性と高相関を示す鶏胚肝臓薬物代謝酵素であるERODを指標して河川底質中のEROD誘導物質の検索を行った。(2)誘導結合プラズマ質量分析法/高速液体クロマトグラフィ-連結による環境試料の高性能計測手法の開発水圏で食物連鎖の原点に位置するラン藻を試料とし、培地への亜鉛などの重金属添加によるメタロチオネイン様物質の体内誘導挙動について検討した。(3)プラズマ発光法による環境中微量重金属の存在状態研究法の開発を行なった。(4)分析電子顕微鏡による環境汚染生物試料の微量測定と測定技法の開発を継続した。(5)化学イオン化を利用するガスクロマトグラフ質量分析法による環境計測評価法の開発大気浮遊粉麈中の多環芳香族炭化水素の測定、ゴルフ場農薬の測定などを行ない、CIスペクトル集を作成した。(6)サブミクロン二次イオン質量分析法による大気中浮遊粒子状物質の粒別ならびに断面分析サブミクロンSIMSの走査型イオン顕微鏡ならびに高空間分解能元素分布観察装置としての性能の向上に加え、微粒子を対象とした定量分析法の確立ならびに断面の分析すなわち三次元局所分析の開発に重点をおき研究を推進した。