hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ベータアミロイド蛋白の細胞膜侵入に続く細胞内アクチン凝集と軸索輸送障害

アルツハイマー病の主要原因物質であるベータアミロイド蛋白は、脳組織の細胞外に蓄積し神経細胞の変性を引き起こす。本申請者らは、細胞外に投与されたベータアミロイド蛋白が、細胞内の骨格蛋白であるアクチンを凝集させ、その結果、軸索輸送(神経細胞内の物質輸送を担う重要な神経細胞機能)を障害することを明らかにした。本研究では、細胞外のベータアミロイド蛋白がどのようにして細胞内のアクチンを凝集させるか明らかにすることを目的とした。本研究結果は以下の通りである。培養ラット海馬神経細胞において、1)ビデオ増感顕微鏡はベータアミロイド蛋白が順行性・逆行性の軸索輸送を進行性、不可逆に抑制することを示した、2)ベータアミロイド蛋白は神経線維径を減少させるなど、神経線維の形態変化を起こした、3)ベータアミロイド蛋白による軸索輸送障害はアクチン脱重合薬で阻止され、アクチン重合薬で模倣された、4)蛍光染色と蛍光顕微鏡による観察は、ベータアミロイド蛋白は細胞に強く付着し、細胞内アクチンを凝集させたことを示した、5)ガラス板上でベータアミロイド蛋白はGアクチン(単量体球状アクチン)と結合し凝集させた、ことを示した。これらの結果と、ベータアミロイド蛋白が細胞膜に干渉するという他者の報告から、ベータアミロイド蛋白が細胞膜を貫通し、細胞内アクチンに直接干渉して凝集させる可能性があること、さらに、これらの一連の反応の結果、軸索輸送の障害が引き起こされる可能性が示唆された。本申請者らは、細胞外に投与したベータアミロイド蛋白が細胞骨格蛋白であるアクチンを凝集させ、その結果、軸索輸送(神経細胞内の物質輸送を担う重要な神経細胞機能)が阻害されることを明らかにした。本研究では、細胞外のベータアミロイド蛋白がどのようにして細胞内のアクチンを凝集させるのかを明らかにすることを目的とした。培養ラット海馬神経のアクチンおよびベータアミロイド蛋白をそれぞれファロイディンと抗体を用いて蛍光標識し、蛍光顕微鏡下で観察したところ、ベータアミロイド蛋白が細胞膜を貫通し、細胞内でアクチンに直接結合していたことを見出した。このような現象は、ベータアミロイド蛋白の各種フラグメントを用いた実験においても観察された。ベータアミロイド蛋白及びこれらのフラグメントは細胞内アクチンを凝集させ、軸索輸送を障害させた。これらの実験から活性アミノ酸配列は31-35付近にあると推定された。さらに、人工細胞内環境下in vitroでアクチンとベータアミロイド蛋白をインキュベートし、両者を蛍光染色して観察したところ、アクチンにベータアミロイド蛋白が結合する可能性を示唆するデータが得られた。今後、SDS-PAGEゲル電気泳動等を用いて、アクチンとベータアミロイド蛋白の結合の有無を確認する予定である。以上より、細胞外のベータアミロイド蛋白が直接細胞内アクチンと結合し、その結果、アクチンが凝集し軸索輸送を障害させることが示唆された。アルツハイマー病の主要原因物質であるべータアミロイド蛋白は、脳組織の細胞外に蓄積し神経細胞の変性を引き起こす。本申請者らは、細胞外に投与したべータアミロイド蛋白が細胞骨格蛋白であるアクチンを凝集させ、その結果、軸索輸送(神経細胞内の物質輸送を担う重要な神経細胞機能)が阻害されることを明らかにした。本研究では、細胞外のべータアミロイド蛋白がどのようにして細胞内のアクチンを凝集させるのかを明らかにすることを目的とした。平成17年度中に、培養ラット海馬神経において、べータアミロイド蛋白が細胞膜を貫通し、細胞内でアクチンに直接結合していることを見出した。このような現象は、べータアミロイド蛋白の各種フラグメントを用いた実験においても観察された。べータアミロイド蛋白及びこれらのフラグメントは細胞内アクチンを凝集させ、軸索輸送を障害させた。

これらの実験から活性アミノ酸配列は31-35付近にあると推定された。さらに、人工細胞内環境下in vitroでアクチンとべータアミロイド蛋白をインキュベートし、両者を蛍光染色して観察したところ、アクチンにべータアミロイド蛋白が結合する可能性を示唆するデータが得られた。本年度(平成18年度)では、SDS-PAGEゲル電気泳動等を用いて、アクチンとべータアミロイド蛋白の結合の有無を確認した。以上より、細胞外のべータアミロイド蛋白が直接細胞内アクチンと結合し、その結果、アクチンが凝集し軸索輸送を障害させることが示唆された。本年度は、これらのデータを図表化し、論文作成を開始した。
びまん性軸索損傷に対する新たな経時的画像評価と高次脳機能障害回復過程の関連性検討

びまん性軸索損傷(DAI)は高次脳機能障害を呈するものの、従来の画像診断では異常所見を検出することが困難である。本研究では拡散テンソル画像(DTI)と機能的近赤外分光法(fNIRS)を用いて高次脳機能障害を呈するDAI患者の脳損傷所見を形態的および機能的に描出した。1年後の再評価では高次脳機能障害の改善を認めたが、DTI所見には変化を認めなかった。fNIRSによる評価は機器が故障したため評価不能であったが、高次脳機能障害が改善していることから、fNIRS所見は改善など何らかの変化を示している可能性が考えられた。びまん性軸索損傷(diffuse axonal injury ; DAI)は様々な高次脳機能障害を呈するものの、従来の画像診断技術では異常所見が検出されにくい。しかし近年Diffusion Tensor Imaging(DTI)やfunctional Near Infrared Spectroscopy(fNIRS)などの新しい脳画像評価法により、その病変部位の描出が可能となってきている。しかしこれら新しい脳画像評価法により得られた所見が、経時的な高次脳機能障害の改善に伴い、どのように変化していくのかについてはいまだ不明である。そこで本研究では、高次脳機能障害を呈するDAI患者に対しDTI、fNIRSを用いた画像評価を経時的に行い、脳の形態的および機能的変化と高次脳機能障害の回復過程との関連性について検討することを目的とした。平成21年度はまず、4名の健常者においてDTIの撮影およびTrail Making Testpart B(TMT B)を脳賦活課題としたfNIRSの測定を行い、それぞれの健常パターンを検討した。fNIRSの測定部位は前頭葉部とした。同時にDAI患者のエントリーを開始した。エントリー基準としては全身状態良好で、高次脳機能障害を有するが従来の画像診断では異常所見に乏しい慢性期DAI患者とし、全身状態および精神状態不良で課題施行困難な例は除外とした。来年度も引き続き健常群の正常パターンの検討を行う。またエントリーされたDAI患者の高次脳機能障害評価と、健常者同様の方法でDTIおよびfNIRSを測定し、健常群の正常パターンとの比較を行うことで、DAI患者の脳の形態的および機能的な異常を明らかにする。さらにDAI患者の高次脳機能障害評価、DTIおよびfNIRSによる脳障害評価を経時的に行い、DAI患者の脳の形態的および機能的変化と高次脳機能障害の回復過程について検討していく予定であるびまん性軸索損傷(diffuse axonal injury ; DAI)は様々な高次脳機能障害を呈するものの、従来の画像診断技術では異常所見が検出されにくい。しかし近年Diffusion Tensor Imaging (DTI)やfunctional Near Infrared Spectroscopy (fNIRS)などの新しい脳画像評価法により、その病変部位の描出が可能となってきている。平成22年度はエントリー基準にのっとった1名のDAI患者においてDTIの撮影およびTrail Making Test part B (TMT B)を脳賦活課題としたfNIRSの測定を行った。fNIRSの測定部位は健常者と同様に前頭葉部とした。また同時に神経心理学検査による高次脳機能障害評価を行った。来年度も引き続きDAI患者のDTIおよびfNIRS評価を行い、健常群の正常パターンとの比較を行うことで、DAI患者の脳の形態的および機能的な異常を明らかにする。さらにDAI患者の高次脳機能障害評価、DTIおよびfNIRSによる脳障害評価を経時的に行い、DAI患者の脳の形態的および機能的変化と高次脳機能障害の回復過程について検討していく予定である。本研究の目的は、従来の画像診断では異常所見が描出しがたい高次脳機能障害を呈するびまん性軸索損傷(DAI)患者に対し、Diffusion Tensor Imaging(DTI)とfunctional Near Infrared Spectroscopy(fNIRS)を用いることで形態的および機能的な脳の異常所見を描出し、また描出された所見と高次脳機能障害の継時的な変化の関連性を検討することである。平成23年度は新たに2名の健常者においてDTIの撮影およびfNIRSの測定を前年度と同様の方法で行った。また1名のDAI患者において健常者と同様の方法でDTIの撮影およびfNIRSの測定、また神経心理学検査による高次脳機能障害評価を行った。また前年度に評価を行った1名のDAI患者の継時的な画像評価および高次脳機能障害評価を行った。

2名のDAI患者は注意障害、記憶障害、遂行機能障害といった高次脳機能障害を認めたが、従来のMRIでは異常所見を認めなかった。DTIによる評価では、健常者と比較して脳内の神経線維の描出が不良であり、脳損傷所見が描出された。fNIRSによる評価では、健常者と比較して脳機能が低下している所見が認められた。また1名のDAI患者で行った経時的評価では、注意障害、記憶障害、遂行機能障害の改善を認めたが、DTI所見は変化を認めなかった。fNIRSに関しては機器が故障したため継時的な評価は行えなかった。以上より、DTIおよびfNIRSを用いることで、DAI患者の脳損傷所見を描出することが可能であった。継時的な評価では、高次脳機能障害は改善を認めたが、DTIによる脳の形態評価に関しては変化を認めなかった。fNIRSによる脳機能の継時的な画像評価は行えなかったが、高次脳機能障害が改善していることから、fNIRSによる脳機能画像所見は改善など何らかの変化を示している可能性が考えられた。
酵母～ヒトで保存されたカルパインPalBHの膜輸送系における新規機能の解析

「カルパイン」はヒトでは15遺伝子にコードされる、細胞内カルシウム依存性タンパク質切断酵素のファミリーである。カルパインは生体が健康に維持されるように機能し、例えば、カルパイン2や3の遺伝子に変異が入ると、それぞれ致死および筋ジストロフィーを発症してしまう。本研究では、今まであまり研究されていない、しかし酵母からヒトまで保存されたCAPN7(PalBH)に注目してその機能を解析した。その結果、CAPN7は膜輸送系に機能し、その不全により致死を生じることが明らかとなった。カルパインはヒトで15種類の遺伝子にコードされるCa^<2+>-要求性細胞内Cysプロテアーゼである。約半数は主にマウス遺伝学から、様々な生物現象とリンクすることが示されている。特に組織普遍的m-カルパインの遺伝子欠損で胚性致死となるため、カルパインの重要性は明確である。しかし、遺伝学的知見を説明する生理機能・作用機序に関しては、決定打が無くブレイクスルーが切望される。そのような中、胃特異的カルパインnCL-2は膜輸送に関与するCOPI小胞サブユニットβ-COPを基質とし、切断によりその機能を修飾することを見出した。哺乳類カルパインと膜系との関係は、研究黎明期から示唆されていたが、詳細は不明であり、分子レベルでの記述は初めてであった。一方、酵母S.cerevisiaeにはカルパインCpl1が一種類存在し、アルカリ適応系においてエンドソーム膜上で膜輸送系のVps蛋白質群と協同し、Rim101を切断する。Cpl1はカビのカルパインPalBのホモログであり、酵母・カビ・ヒトで唯一保存されているカルパインである。酵母、カビでは、その生理機能及び作用機序が分子レベルでほぼ解明されたが、ヒトPalBH/カルパイン7の解析はほぼゼロである。そこで、PalBH遺伝子ノックアウトマウスを用いて、カルパインの新しい機能としての膜輸送系への関与の解析を目的とした。今年度は、まずCapn7^<-/->マウスのバッククロスの完成をめざし、N=10を達成した。また、胎生致死の可能性を考慮して、解剖によりその死亡時期の特定を行った結果、少なくとも出生するホモ個体の存在を確認した。今後はさらに、詳細な表現型の解析を行っていきたい。そのような中、胃腸特異的に発現するカルパイン8(nCL-2)は膜輸送に関与するCOPI小胞サブユニットβ-COPを基質とし、切断によりその機能を修飾することを見出した。一方酵母S.cerevisiaeにはカルパインRim13/Cpl1が一種類存在し、アルカリ適応系においてエンドソーム膜上で膜輸送系のVps蛋白質群と協同し、Rim101を切断する。Rim13/Cpl1はカビのカルパインPalB及びヒトのカルパイン7(PalBH)のホモログであり、酵母・カビ・ヒトで唯一保存されているカルパインである。酵母、カビでは、その生理機能及び作用機序が分子レベルでほぼ解明されたが、ヒトカルパイン7の解析はほぼゼロである。そこで、PalBH遺伝子欠損マウスを用いて、カルパインの新しい機能としての膜輸送系への関与の解析を目的とした。今年度は、Capn7^<-/->マウスの細胞から樹立したMEF細胞を用いて、主にオートファジーとカルパイン7の関係を解析した。その結果、以前から報告されているESCRTタンパク質群との関連は示唆されたものの、オートファジーとの直接の関連は残念ながら見出されなかった。

一方、酵母S.cerevisiaeにはカルパインRim13/Cpl1が一種類存在し、アルカリ適応系においてエンドソーム膜上で膜輸送系のVps蛋白質群と協同し、Rim101を切断する。Rim13/Cpl1はカビのカルパインPalB及びヒトのカルパイン7(PalBH)のホモログであり、酵母・カビ・ヒトで唯一保存されているカルパインである。酵母、カビでは、その生理機能及び作用機序が分子レベルでほぼ解明されたが、ヒトカルパイン7の解析はほぼゼロである。そこで、PalBH遺伝子欠損マウスを用いて、カルパインの新しい機能としての膜輸送系への関与の解析を目的とした。今年度は、Capn7^<-/->マウスの細胞から樹立したMEF細胞を用いて、カルパイン7の欠損が細胞機能に及ぼす影響を調べた。その結果、カルパイン7は翻訳系の調節に関与する可能性が示唆された。
バンドフィリング制御による分子性多次元金属の構築

(1)シクロヘキセン環とセレノメチル基を有するテトラチアペンタレンドナー,CHSM-TTPが,選択的にD : A=2:1の金属相,(CHSM-TTP)_2MCl_4(PhCl)_x(M=Ga, Fe)を与える事を見出した。これらの塩はいずれも対応するCHTM-TTP塩と同型であり,ドナー分子はface-to-face型に積層してカラムを形成し,そのカラムが分子短軸方向に2本並んだラダー構造をとる,といった特異な分子配列を有する。これらの塩は室温で1.9-11Scm^<-1>の伝導性を示し,160-250Kまで金属的な挙動を示した後,半導体へ転移する。(2)チオメチル基を有するTTPドナー,BTM-TTPから(BTM-TTP)_2X(X=PF_6,SbF_6,TaF_6)の組成を有する3種のラジカルカチオン塩を得た。これらのうち,PF_6塩とTaF_6塩(共に針状晶)はβ型配列をとり,'SbF_6塩(板状晶)はθ型配列をとることが明らかとなった。バンド計算によると,β型塩は擬一次元的なフェルミ面を,SbF_6塩は二次元的なフェルミ面を有することが示唆された。電気伝導度測定を行ったところ,β型塩は5Kまで金属的な温度依存性を示したが,SbF_6塩は室温から半導体的挙動を示した。(3)TTP分子中の一つのTTF部位をテトラチアフルバレン(TSF)に置き換えた新規TTP系分子の合成に成功した。CV測定を行ったところ,ラジカルカチオン状態においては,主にTTF側に陽電荷が分布し,第二酸化はTSF部位の寄与が大きいと考えられる。これらのドナーを用いた分子性錯体の導電性について検討したところ,TSFとビニローグTTFから成る類縁体がTCNQ錯体およびI_3塩の加圧成型試料と高伝導性(σ_<rt>=8・36Scm^<-1>)を示し,活性化エネルギー(0.02-0.05eV)が非常に小さいことから単結晶では金属的旗伝導性が期待される。シクロヘキセン環とチオメチル基を有するテトラチアペンタレンドナー,CHTM-TTPは,対イオンの形状により,様々な分子配列をとるばかりか,GaCl_4塩は2種の半導体と1種の金属が同じバッチから生成することがわかっている。半導体のGaCl_4塩は共にドナー(D)とアニオン(A)の比が1:1であり,ドナー分子が完全にイオン化していることが明らかとなっていた。そこで,金属的な塩の良質な単結晶を育成し,X線結晶構K解析を行った。ドナー分子はface-to-face型に積層してカラムを形成しており,そのカラムが分子短軸方向に2本並んだラダー構造をとっている。カラム内においてドナー分子は若干二量化しており,隣接した2本のカラム間にはカラム内の数分の一程度の相互作用が存在すると思われる。

一方,CHTM-TTPのセレノメチル類縁体CHSM-TTPは選択的にD:A=2:1の金属相,(CHSM-TTP)_2MCl_4(PhCl)_x(M=Ga,Fe)を与える事が明らかとなった。これらの塩はいずれも対応するCHTM-TTP塩と同型であり,室温で1.9-11Scm^<-1>の伝導性を示し,160-250Kまで金属的な挙動を示した後,半導体へ転移することが明らかとなった。(CHSM-TTP)_2MCl_4(PhCl)_xの磁化率測定を行ったところ,磁化率の温度依存性はキュリーワイス則に従い,分子間に弱い反強磁性的相互作用(Θ=-3.1K)が存在することが明らかとなった。本年度は,ビス(アルキルカルコゲノ)基をもつ一連のTTP誘導体ならびにビス(セレノメチル)-TTP(BSM-TTP)を合成し,それらをドナーとして用いた分子性導体の構造と物性について検討した。(BTCn-TTP)I_3(n=4,5):BTC_4-TTPならびにBTC_5-TTP塩共にドナーとアニオンの組成比は1:1であり,お互いにほぼ同じ分子配列を有している。これらの物質では,二量化したドナー分子平面の真上にアニオンが存在するといったDDADDA型の交互積層構造を形成している。また,ドナー分子から成るダイマーのside-by-side方向にはI_3-アニオンが存在するため,この方向の伝導パスは存在しない。従って,伝導パスはa,c方向に形成している2本の擬カラム方向に存在すると思われる。これらの塩は室温において,10^<-4>-10^<-3> Sem^<-1>の伝導性を示し,活性化エネルギーは0.18-0.23 eVと大きな値を示した。(BSM-TTP)_2SbF_6:ドナーとアニオンの組成比は2:1であり,ドナー分子は一般位置,アニオンは対称心上にある。BSM-TTP分子は擬カラム構造を有するβ"型配列をとっている。硫黄類縁体であるBTM-TTPはSbF_6アニオンとの間にβ型およびθ型構造を有する2種の2:1塩を与えることが明らかとなっており,分子配列に対するセレン原子の効果について今後検討していく必要がある。この塩は室温において,60 Scm^<-1>の伝導性を示し,5 Kまで金属的な温度依存性を示した。バンド計算によると二次元的な閉じたフェルミ面を有することが示唆された。完全にイオン化された有機物質は強い電子相関のために通常Mott絶縁体と呼ばれ,低い電気伝導性を示す。しかしながら,本研究者らが開発したテトラチアペンタレン(TTP)系導体においては,最もポピュラーなテトラチアフルバレン(TTF)系導体に比べ,広いバンド幅(W)と小さなオンサイトクーロン反発(U)のために高伝導性の半導体を与えるばかりか,中には金属的な伝導性を示すものも得られている。本年度は,バンド巾の増大を目指した分子系として,TTP分子中の一つのTTF部位をテトラセレナフルバレン(TSF)に置き換えた新規TTP系分子(1)の合成を行い,その性質について検討した。1の合成は,チオレートの保護基をつけたTSF誘導体にTHF-MeOH中,CsOHを加え脱保護し,ZnCl_2,TBA・Brを加えた後,THF中,トリホスゲンを加えることによりTSFが融合した1,3-ジチオール-2-オンとし,これと1,3-ジチオール-2-チオン誘導体とをP(OMe)3を用いてクロスカップリング反応をさせることにより達成した。無置換体はビス(メトキシカルボニル)誘導体をHMPA中,LiBr・H_2Oと加熱することにより得られた。ベンソニトリル中でCV測定を行ったところ,いずれも四対の酸化還元波が観測された。1の第一酸化電位は対応するTTPよりも若干低く,第二酸化電位は逆に高くなっている。以上より,ラジカルカチオン状態においては,主にTTF側に陽電荷が分布し,第二酸化はTSF部位り寄与が大きいと考えられる。
動脈硬化症の関連分子であるLTBP-1の細胞遊走に関わる部位決定とその応用

Transforminggrowthfactor-β( TGF-β)は平滑筋細胞やマクロファージに対して多様な作用を示すため、動脈硬化症において、重要な役割を担っていることは明らかである。本研究では、このTGFを制御する分子として、TGF-β複合体の一成分であるLatent TGF-βbinding protein-1 ( LTBP-1 )に着目し、遺伝子組み換え技術を用いてタンパク質の部分発現によるLTBP-1変異体の精製を行い、それらの機能を明らかにする。
はじき出し閾値エネルギーの影響因子解明による太陽電池の放射線劣化予測精度の向上

現在人工衛星に使用されている3接合太陽電池には、インジウムガリウムリン(InGaP)太陽電池が使用されており、これまでの劣化予測モデルでは125 keV未満のエネルギーの電子は理論的にInGaP太陽電池の劣化に寄与しないと考えられてきた。一方、申請者は、60 keVの低エネルギー電子線照射によってInGaP太陽電池の劣化が生じることを突き止め、これがこれまで定数と考えられてきた電池中のPのはじき出し閾値エネルギー(Ed)の変化に起因していることを発見した。しかしEdの変化の具体的原因に関してはいまだ未解明である。そこで本研究ではEdが太陽電池の材料に依存しているという仮説を実験的に検証し、これを元に新たな劣化予測モデルを構築することを目的とした。該当年度において、昨年度準備したInGaPおよびアルミインジウムガリウムリン(AlInGaP)の照射用試料を加工し、照射試験を実施する。照射試験では、大阪府立大学のコッククロフト・ウォルトン型電子線加速器を用いる。試料の照射条件を決定するため、試料照射台における線量分布を測定した。その結果、試料とビームモニター用のファラデーカップとの線量が一致していることが明らかになった。そのため、ビームモニターによって試料に照射される電子線フルエンスを解析できることが明らかになった。しかし、照射試料を加工するために使用する計画であったフォーカスイオンビームの装置が故障した。そのため、試料の加工を十分に行えず、電子線によって生成される欠陥を十分に解析することができなかった。一方、AlInGaP太陽電池に関しては、低エネルギーでの電子線における劣化現象において新しい知見が得られた。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。現在、人工衛星の動力源として太陽電池が利用されているが、人工衛星は高エネルギーの電子と陽子に満ちたヴァン・アレン帯を通過するため、これらの放射線の影響で太陽電池の起電力は低下する。ミッション終了までの期間必要な電力を供給する必要があるため、太陽電池の劣化予測は工学的に重要である。該当年度において、照射環境の整備および試料の購入を行う予定である。照射環境では、大阪府立大学のコッククロフト・ウォルトン型電子線加速器による電子線照射環境に関して、試料温度の制御システムや、試料照射用治具の整備を行った。また、試料調達においては、InGaP太陽電池を購入した。また、材料依存性を考慮するため、元素を一つ増やしたアルミニウムインジウムガリウムリン(AlInGaP)太陽電池を、JAXAより提供して頂いた。次年度では、この2種類の半導体へ、低エネルギー電子線を照射することにより、半導体中の種類の数に対する太陽電池の劣化傾向の違いを解明する。本年度に予定していた研究計画は、1太陽電池の提供、2太陽電池の購入3加速器の利用申請および整理の3つである。以下に3つに関しての進捗状況を記載する。1太陽電池の提供においては、研究協力者のJAXA今泉氏の協力の下、AlInGaP太陽電池を提供していただいた。試料の大きさは、1平方cmであった。

また、試料表面がベア構造のため、そのままの構造で電子線照射による劣化を観察できる構造であった。また、提供されたAlInGaP太陽電池の特性を、測定するための光電流電圧測定の装置を作製した。作製した装置を使用して、AlInGaP太陽電池の特性を取得したところ、すべての試料において、太陽電池の発電効率が10%を超える性能を有していることが明らかになった。2太陽電池の購入において、MO産業の協力の下、InGaP太陽電池となる4インチのInGaP半導体のp-n接合ウエハーを購入した。構造の詳細では、GaAs基盤上に、p層1 μmおよびn層30 nmのInGaPをエピタキシャル成長させた仕様となっている。キャリア濃度に関しては、p層が17乗のドーパントを注入し、n層には、18乗のドーパントを注入した。3加速器の利用申請において、大阪府立大学(OPU)コッククロフトウォルトン型電子線加速器は60 - 600 keVの連続的にエネルギーが変更可能な加速器である。本年度は、研究協力者の大阪府立大学秋吉先生の協力により、この加速器に関しての利用手続きを行った。また、試料の照射のために、試料温度の制御システムの整備や、絶縁ガスの補充が必要であることが明らかになった。そのため、試料温度測定用の温度モニターを購入し、加速器に導入できるように整備した。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。次年度では、1太陽電池の試料の加工、2加速器による照射試験、3試料中の照射欠陥の解明の3つである。以下に3つに関しての推進方策を記載する。1太陽電池の試料の加工において、JAEAでは、試料加工用装置としてフォーカスイオンビーム(FIB)がある。FIBは、直径数nmのガリウムイオンビームを試料へ照射することにより、試料表面を数nmの精度でスパッタすることが可能である。InGaPウエハーについては、4インチから、2平方mmの範囲にFIBにより切り出す。AlInGaP太陽電池については、1平方cmから、2平方mmの範囲にFIBにより切り出す。2加速器による照射試験において、大阪府立大学のコッククロフト・ウォルトン型電子線加速器で照射試験を行う。まず、試料へ照射される線量を評価するため、試料照射用治具を用いて線量評価を行う。そして、均一な線量で試料に照射できることが確認された場合、試料へ電子線を照射する。試料の劣化を観察するために、電子線の照射前後で、試料の電流電圧特性について取得する。3試料中の照射欠陥の解明において、深い順位静電容量過渡応答スペクトル(DLTS)を測定することにより太陽電池に生成された欠陥を取得する。DLTSを取得するためには、太陽電池の静電容量を2000pC以内にする必要がある。これまでの研究では、2平方mmの試料面積の静電容量は、この静電容量の制限の範囲に収まることが明らかである。そのため、1で実施される試料の加工ができた場合、照射されたサンプルによるDLTSによる測定が可能となる。
慢性腎臓病進展におけるTRPC6、NFκB、NFATの分子連関の役割の解明

慢性腎臓病の進展機序解明のために、先天性巣状糸球体硬化症の原因遺伝子として同定され、後天性疾患においてもその役割が示唆されているTRPC6と、その情報伝達に関わるNFAT、NFκBの役割をラットの腎障害モデルで検討した。その結果、最近、慢性腎臓病進行を促進することが示されているアルドステロンによる腎障害モデルではNFκB活性化抑制薬が腎障害進行を軽減したが、TRPC6、NFATの関与は明らかではなかった。以上より、NFκB活性化が一部の慢性腎臓病において重要な役割を果たし、その阻害薬が治療に有用である可能性が示された。慢性腎障害モデル動物におけるNFκB、NFAT、TRPC6の役割を検討するために、アルドステロン持続投与・食塩負荷マウスにおいて下記の検討を行った。特に、腎における細胞内Ca^<2+>調節に関与するTRPC6のmRNA発現量を経時的に観察した。その結果、アルドステロン投与3週目に軽度のTRPC6発現量増加を認めたが、統計学的に有意ではなかった。この結果から、アルドステロンの腎障害発症機序には、TRPC6、NFAT系は重要な役割を果たしていないことが明らかとなった。今後、他の慢性腎障害モデル動物でのNFκB、NFAT、TRPC6の役割を検討する予定である。Dominant negativeNFATの足細胞特異的過剰発現マウスの作成を行った。NFAT3のアミノ酸1-130(dnNFAT)はdominant negatlveな作用を有し、NFATファミリーの1-4、全ての活性を抑制することがin vivo、in vitroの研究から知られており、T-cell特異的に発現した場合、NFATの活性化が抑えられることも過去の報告で明らかとなっている。そこで、NFATの細胞特異的役割検討のために、足細胞特異的発現promotorであるnephrin promotorの下流にdnNFAT蛋白遺伝子を組み込んだconstructを作成し、マウス卵母細胞への打ち込みを行い足細胞特異的にNFAT活性を抑制したマウスを作製した。Western blottingによりdnNFATの腎内発現が3系統のマウスにおいて確認され、その中で発現量の多い2系統を継代中である。また、dnNFAT遺伝子にcMyc遺伝子を接合したconstructを作成して打ち込みを行っていることから、免疫組織で腎内cMyc発現部位を検討し、糸球体に弱い発現を認めた。(1)慢性腎障害モデル動物におけるNFκB、NFAT、TRPC6の役割の検討慢性腎障害モデル動物におけるNFκB、NFAT、TRPC6の役割を検討するために、アルドステロン持続投与・食塩負荷ラットにおいて、TRPC6のmRNA発現量を、心臓と腎臓で検討した。NFκBは、腎、心ともに活性化が見られたが、TRPC6のmRNA発現量には有意の変化を、両組織において認めなかった。一方、NFκBの影響を受けると考えられるangiotensin converting enzyme2、およびclusterinは、前者が減少傾向、後者が増加傾向を認め、さらにNFκB活性化阻害薬を用いて検討を進めている。(2)dnNFATとTRPC6の足細胞特異的過剰発現マウスによる検討昨年度作成したdominant negative NFATの足細胞特異的過剰発現マウスの2系統を継代中であり、cMyc遺伝子を接合したconstructを用いていることから、免疫組織で腎内cMyc発現部位を検討した。継代当初の世代では糸球体に弱い発現を認めたが、継代とともに発現が低下傾向にあり、その有用性を引き続き検討している。また、TRPC6の足細胞特異的過剰発現マウスが2系統得られ、その内の1系統について解析を行った。免疫組織学的には、足細胞に加えて、一部のメサンギウム細胞への発現が示唆された。一方、尿アルブミン排泄の上昇は見られず、これがTRPC6発現量が少量であるためか、あるいはTRPC6発現が足細胞障害を生じないのかを、現在検討中である。(1)慢性腎障害モデル動物におけるNFκB、NFAT、TRPC6の役割の検討片腎摘出後抗Thy1.1抗体-回投与慢性腎炎モデルラットにおいて、抗体投与8週後まではNFκB阻害薬(IMD-1041)投与群で有意の尿蛋白減少と血圧の低下が見られたが、10週後には抗体単独群と有意差を認めなかった。抗体投与10週後の腎でのNFκB活性は抗体単独群でIMD-1041投与群と比べ高い傾向を認めたが、有意ではなかった。また、NFAT活性、TRPC6のmRNA発現量は、対照群、抗体単独群で有意差を認めず、このモデルにおける腎障害にはNFAT活性化、TRPC6発現変化は関与しないことが示された。一方、アルドステロン持続投与

・食塩負荷ラットではIMD-1041は著効し、腎障害の進展を抑制し、ACE2発現を正常化した。アルドステロンの腎障害においてNFκB活性化が重要な役割を果たすことが示された。(2)dnNFATとTRPC6の足細胞特異的過剰発現マウスによる検討TRPC6過剰発現マウスを作成、mRNA発現は明らかな増加を示すものの、蛋白発現量は少ない2系統が得られ、アンジオテンシン負荷、アルドステロン負荷を行ったが、野生型と比べ腎障害の程度に差は無かった。TRPC6蛋白発現量が多くないことに起因すると考えられ、新たな強制発現マウスを作成する必要があると考えられた。(3)血管石灰化におけるNFATの役割の検討培養平滑筋細胞を用いて、高リン培地、高カルシウム培地、IL-6、LPSの各添加下において細胞の石灰化を各々検討した。いずれの培地においても石灰化が見られたが、NFκB阻害薬(IMD0354)、NFAT阻害薬(cyclosporin)のいずれも石灰化に有意の影響を与えなかった。一方、透析患者における慢性炎症が高リン血症と相加的な作用により血管石灰化を促進することが明らかとされた。
TGF-β細胞内情報伝達系の制御を介した肝線維化抑制剤の開発

肝硬変症に代表される肝線維症は、慢性肝疾患の終末像を形つくる特徴的な病態であり、現在これに対する有効な治療法は開発されていない。肝線維化の形成過程においては、transforming growth factor-β(TGF-β)と呼ばれるサイトカインによる肝星細胞の刺激が重要な鍵を握っていることが明らかにされている。本研究では、プラスミン・血漿カリクレインといったセリンプロテアーゼによりTGF-βが活性化されることを明らかにし、この活性化が肝線維化や肝再生不全の病態形成に重要な役割を担っていることを明らかにした(Gastroenterology 2001およびGastroenterology 2002)。またこの研究成果を踏まえ、セリンプロテアーゼ阻害剤が、TGF-βの活性化を阻害し、肝線維化の治療薬となりうる可能性を培養星細胞実験および動物実験モデルにて明らかにした。慢性肝疾患に特徴的な2つの病態(肝再生不全と線維化)を司る最も重要なサイトカイン、transforming growthfactor(TGF)-βの制御を介した治療薬の開発を展開している。今年度は、種々のセリンプロテアーゼインヒビターの中でもTGF-βの活性化を最も強力に抑制し得たcamostat mesilateに注目し、培養肝星細胞を用いた研究を行った。その結果、camostat mesilateは単にTGF-βの活性化を抑えるのみでなく、星細胞の形質転換をも抑制した。さらにcamostat mesilateは活性型TGF-β自体の星細胞への作用をも抑制することが明らかとなった。この機序としては、細胞内情報伝達蛋白であるSmadのリン酸化の抑制などが想定され、今後の研究課題となった。また、肝線維化動物モデルにおいても、camostat mesilateは肝線維化を改善させることが明らかとなり、現在その機序がTGF-βの活性化を抑制によるものか、TGF-βの細胞内情報伝達の阻害によるものかについての検討を進めている。今年度は、camostat mesilateに注目し、動物モデル(ブタ血清誘発肝線維化モデル)を用いた研究を行った。その結果、生体においてもcamostat mesilateは単にTGF-βの活性化を抑えるのみでなく、星細胞の形質転換をも抑制した。この機序としては、細胞内情報伝達蛋白であるSmadのリン酸化の抑制などが想定され、更に今後の研究課題となった。TGF-βの細胞内情報伝達の阻害についての検討を進めている。またこの研究成果を踏まえ、セリンプロテアーゼ阻害剤がTGF-βの活性化を阻害し、肝線維化の治療薬となりうる可能性を培養星細胞実験および動物実験モデルにて明らかにした。
Er .YAGレーザーを用いた保存修復技法の確立とその臨床応用

Er:YAGレーザーの保存修復への応用法の確立を目的として以下の検討を行った。切削性に関する検討では、抜去歯について、レーザー照射による歯質除去効果を検討した。切削試験はレーザー装置(ML22:HOYA、MORITA、現有設備)を用いた。出力、パルス、照射距離、角度等を変化させて測定を行い、これらの因子と切削性の関係について検討した。Er:YAGレーザーの歯質除去量は出力とほぼ比例した。出力150mJ、10ppsでの歯質除去能率はエナメル質でエアタービンの1/3、象牙質ではほぼ1/2であった。照射面では、歯質の熱による変化や亀裂は観察されなかった。照射角度については照射面に90°C(垂直)から30°Cまで偏向させた範囲では除去能率の変化は生じなかった。照射チップの先端形状と切削性の関係について先端部の形状を変化させたチゼル型の試作チップ(ECSCチップ)を作成し、検討を加えたところ、照射分布に拡散性を加えたチップにおいて、平坦で均質な蒸散面が得られることが判明し、鋳造修復窩洞形成への応用について可能性が認められた。臨床検討においては附属病院外来患者200余症例に保存修復処置、特にコンポジットレジン修復時の形成を中心にレーザーを応用して、成績調査した。その結果、成形修復処置についてはレーザーを応用した処置では、ほとんどの症例で形成時または術後において疼痛、不快事項の発現が認められなかった。以上の検討結果から、歯質除去能率の向上による形成時間の短縮化の実現によるEr:YAGレーザーを応用した窩洞形成による無痛修復の一般診療への導入の可能性が期待される。平成9年度はEr:YAGレーザーの保存修復への応用法の確立を目的として以下の検討を行った.切削性に関する検討では、抜去歯について、レーザー照射による歯質除去効果を試作切削試験装置(現有設備)により検討した。切削試験はレーザー装置(ML22:HOYA、MORITA、現有設備)とその比較対照として、エアタービン、電気エンジンを用いた。レーザーについては出力、パルス、照射距離、角度等を変更させて測定を行い、これらの因子と切削性の関係について検討した。Er:YAGレーザーの歯質除去効果は出力とほぼ比例関係をとった。照射チップの先端形状と切削正の関係については、現在、先端部の形状を変化させた試作チップを作成し、検討中である。臨床検討においては附属病院外来において特に協力を得られた患者100余症例をを対象に保存修復処置、特に成形修復時の形成を中心にレーザーを応用して、術中術後の所感、不快事項、治癒経過成績等を調査検討した。その結果、成形修復処置についてはレーザーを応用した処置では、ほとんどの症例で形成時に疼痛の発現が認められなかった。また形成所用時間はエアタービンと比較して35倍(24分程度)であったが、切削に伴う振動や、高周波音がほとんど生じないため、患者の受ける不快感は少ないことが認められた。術後経過については現在最長例で1年6ケ月を経過しているがこれまでのところ不快事項は生じていない。切削性に関する検討では、抜去歯について、レーザー照射による歯質除去効果を試作切削試験装置(現有設備)により検討した。

レーザーについては出力、パルス、照射距離、角度等を変化させて測定を行い、これらの因子と切削性の関係について検討した。Er:YAGレーザーの歯質除去効果は出力とほぼ比例関係をとった。出力150mJ、10ppsでの歯質除去能率はエナメル質でエアタービンの1/3、象牙質ではほぼ1/2であった。照射面では、歯質の熱による変化や亀裂は観察されなかった。照射角度については照射面に90°C(垂直)から30°Cまで偏向させた範囲では除去能率の変化は生じなかった。次に照射チップの先端形状と切削性の関係について先端部の形状を変化させた試作チップを作成し、検討を加えたところ、照射分布に拡散性を加えたチップにおいて、平坦で均質な蒸散面が得られることが判明した。現在、実用化を目指して、また、鋳造修復窩洞形成への臨床応用についても検討中である。臨床検討においては附属病院外来患者200余症例に保存修復処置、特にコンポジットレジン修復時の形成を中心にレーザーを応用して、成績調査した。その結果、成形修復処置についてはレーザーを応用した処置では、ほとんどの症例で形成時に疼痛の発現が認められなかった。、術後経過については現在最長例で3年6ヶ月を経過しているがこれまでのところ、不快事項は生じていない。
骨病変における非コラーゲン骨蛋白の動態と意義に関する基礎的研究

オステオカルシン(Bone Gla-protein,BGP)の抗体(pro-BGP,N-,C末端部分に対する)を用いて、自然流産による胎児5例(胎令713週)の四肢と胸壁,多指症3、非腫瘍性骨形成性病変(仮骨3、化骨性筋炎3、線維性異形成7など)骨形成性腫瘍(骨芽細胞腫5、骨肉腫29、骨外性骨肉腫5)、悪性線性組織球腫などを中心に、免疫組織化学的に検索した。(結果)1.発生過程の骨芽細胞、骨細胞にはBGP活性が確認された。pro-BGPはN末端、C末端のものよりも前骨芽細胞の状態から認められ、かつ活性がより高かった。2.未熟間葉性細胞にはBGP活性はなかった。3.発生過程の軟骨細胞には増殖性の部分でBGP活性が証明された。4.(類)骨マトリックスは概して陰性であったが、BGP活性が証明される場合もあった。5.外骨膜内層の線維芽細胞様細胞にもpro-BGPが陽性であった。6.仮骨や化骨性筋炎などでも、活動性の骨芽細胞は強い陽性反応を示したが、肉芽組識は陰性であった。7.BGPの陽性度は類骨と石灰沈着を伴う部分での差は見い出しがたかった。8.骨形成性腫瘍の場合には、腫瘍細胞がBGP活性が証明されたが、(類)骨マトリックス形成が目立つ例では陽性度が高く、fibroblastic typeや悪性線維性組識球腫と鑑別を要する骨肉腫では陽性強度が低かった。9.BGPは軟骨主体の骨肉腫と純粋な軟骨肉腫との鑑別、単純な膠原線維と腫瘍性類骨との客観的な区別に役立つものと思われた。10.牛骨からのOsteonectinの抽出・精製はなされたが抗体作成に手間取り、免疫組識化学的にBGPと対比することは出来なかったが、さらに研究続行し、その生物学的性状に関する成果を公表する。以上から、BGPは骨芽細胞、骨細胞に、一部増殖能の目立つ軟骨細胞で特異的に活性が認められ、骨マトリックスの形成に関与しているものと思われたが、石灰化に直接関与する証拠は得られなかった。(研究目的)非コラ-ゲン性骨蛋白の一つである骨グラ蛋白(以下BGP)について、免疫組織化学的に検索し、その分布と意義について検討した。(材料と方法)ウシの成熟骨から電気泳動法、イオン交換法の組み合わせによりBGP(分子量:約5,700)を分離、精製した。アミノ酸分析により純度の高いことを確認した。アジュバントと共に、家兎に免疫を繰り返したが、抗体価は充分上がらなかった。これに代わり、ProーBGP、BGPのN末端、C末端の抗体が得られたので、それぞれについて、ABC法による免疫染色を行った。ヒト胎児(自然流産による、811週)、正常骨、軟骨組織、種々の骨腫瘍において、低温脱灰(4°C)を行い、一部非脱灰パラフィン切片を用いた。(結果)1.胎生期の膜内化骨、軟骨内化

骨と共に骨芽細胞、骨細胞に、BGPが証明された。前骨芽細胞にも弱陽性であった。2.非脱灰よりも、適切な低温脱灰で染色性が最も良好であった。3、石灰沈着とBGPの染色性、その染色強度との間に直接の関係は得られなかった。4.BGPは正常の軟骨細胞やマトリックスには観察されなかった。5.ProーBGPは概して骨芽細胞や前骨芽細胞に染色され易く、NやC末端のものは骨細胞に一層強く染色され易い傾向が窺われた。6.類骨マトリックスは概して染色されなかった。7.骨形成性病変(線維性異形成、骨化性線維腫、骨芽細胞腫等)では骨芽細胞、骨細胞にBGPが証明された。線維性異形成の聞質細胞にも強陽性であった。8.骨肉腫はosteoblastic typeは無論のこと、fibroblastic typeの腫瘍細胞にもBGPが証明された。(結語)BGPは正常の骨(芽)細胞のみならず種々の病的な骨形成時の骨(芽)細胞に証明されたが、石灰沈着に直接関わりあう証拠は得られなかった。オステオカルシン(Bone Glaーprotein,BGP)の各種抗体を用いて、自然流産によって得られた胎児(胎令812週),多指症、非腫瘍性骨形成性病変(仮骨、化骨性筋炎など)、骨形成性腫瘍(骨芽細胞腫、骨肉腫、軟部骨肉腫など)を中心に、ABC法にて検索した。主にBGP proーpcptideのポリクロナ-ル抗体を用いた結果について報告する。(結果)1.骨細胞、骨芽細胞は胞体内に顆粒状に陽性であった。2.(類)骨マトリックス,軟骨マトリックスは陰性であった。3.胎児骨組織では、活動性の骨芽細胞ばかりでなく、骨組織に近接する未分化間葉骨胞の中にも陽性となる骨胞が観察された。4.骨幹部の外骨膜内層の線維芽細胞様細胞にも陽性であった。5.関節軟骨は全層にわたり軟骨細胞は陰性であったが、胎生期にみられる軟骨島の軟骨膜細胞、軟骨芽細胞は陽性であった。6.仮骨や化骨性筋炎などでも、活動性の骨芽細胞は強い陽性反応を示したが、軟骨芽細胞の一部や前骨芽細胞に相当する細胞にも陽性となるものがみられた。7.BGPの陽性度と石灰沈着との関係は見い出しがたかった。8.骨形成性腫瘍の場合には、腫瘍細胞がBGP陽性を示す例が少なからずあったが、(類)骨マトリックスの形成が目立つ例(ostcoblastic type)では陽性となり易く、fibroblastic typeや悪性線維性組織球腫と鑑別を要する骨肉腫ではostcoblastic typeに比べて陽性像は弱く、結果の評価には注意を要する。しかし、単純な膠原線維と腫瘍性類骨との区別に役立つものと思われた。以上から、骨組織の形成に関与する細胞は、BGPが常に陽性なのに対して、軟骨形成の場合は極く初期にのみ陽性であることが判明した。オステオネクチンの精製と抗体作成は、進行中であり、特異性の高い抗体が得られれば、BGPと対比することにより、その生物学的作用を解明する予定である。オステオカルシン(Bone Gla-protein,BGP)の抗体(pro-BGP,N-,C末端部分に対する)を用いて、自然流産による胎児5例(胎令713週)の四肢と胸壁、多指症3、非腫瘍性骨形成性病変(仮骨3、化骨性筋炎3、線維性異形成7など)、骨形成性腫瘍(骨芽細胞腫5、骨肉腫29、骨外性骨肉腫5)、悪性線性組織球腫などを中心に、免疫組織化学的に検索した。(結果)1.発生過程の骨芽細胞、骨細胞にはBGP活性が確認された。pro-BGPはN末端、C末端のものよりも前骨芽細胞の状態から認められ、かつ活性がより高かった。2.未熟間葉性細胞にはBGP活性はなかった。3.発生過程の軟骨細胞には増殖性の部分でBGP活性が証明された。
自己認識のポジティビティとストレス評価の信念に関する健康心理学の研究と実践

本研究の目的は,自己認識のポジティビティ(i.e.,自己を肯定的に評価したり,ポジティブ感情とネガティブ感情のバランスを適切に保ったりする個人の特性)とストレス評価の信念(i.e.,ストレスの存在や影響性を見積もる個人の考え,態度)がストレス-コーピング過程にどのように関連しているのか,1)その作用メカニズムを,質問紙調査などにより心理学的に明らかにするとともに,2)自己認識のポジティビティとストレス評価の信念に通底すると目される生物学的基礎過程を精神神経内分泌免疫系の指標から解明することにあった。そこで,今年度はとくに,自己認識のポジティビティをCaprara et al.(2012)のポジティブ志向尺度を使用して,ポジティブ志向がGeneral Health Questionnaire (GHQ)によって評価される心身の健康にどのように関連しているのか,10代から70代の日本人約200名(男女半数ずつ)を対象にオンライン調査会社を通じてインターネット調査によって,また大学生約400名を対象に質問紙調査を行った。媒介分析の結果,1)ストレスの自覚はポジティブ志向とポジティブ感情およびネガティブ感情との関係を媒介すること,2)ポジティブ志向はストレスの自覚を媒介して精神的健康のみに影響し,身体的健康とは関連のないことなどを明らかにできた。またストレス評価の信念については,昨年度の本研究の成果として開発したマインドセット邦訳版(米田ら,2019)を使用して,ストレス評価の信念いかんによって心理的ストレス反応がどのように異なり,その作用メカニズムがどのようになっているのか,大学生235名を対象に質問紙調査を行った。媒介分析の結果は,情動表出によるコーピングがストレス有害マインド・セットと苛立ち-怒りなどの心理的ストレス反応との間の関連性を媒介することを明らかにするとともに,ストレス有用マインド・セットはこれらの関連性にはまったく関係がなかった。自己認識のポジティビティとストレス評価の信念の生物学的基礎過程を精神神経内分泌免疫系指標にして解明を目指す点については,これらの要因を適切に評価する尺度の開発が遅れたため,生物学的基礎過程を検討する上で,適切な対象者の選抜が行えなかったため。自己認識のポジティビティとストレス評価の信念を適切に評価する尺度が開発されたことより,その生物学的基礎過程についての検討を加速度的に行う実験系の整備をおこないながら当初の目的を達成する。本研究の目的は,自己認識のポジティビティ(自分を肯定的に評価したり,ポジティブな感情とネガティブ感情のバランス体験を保ったりする心の特質)とストレス評価の信念(ストレスの存在や影響性を見積もる個人の態度)がストレス過程(ストレッサーの認知とコーピングが健康-病気の結果に及ぼす一連のプロセス)にどのような影響を及ぼしているのか,その生物心理社会的機能の解明を目指す実証的研究とこれらのポジティビティ心性を高めるストレスマネジメント行動変容の介入実践を統合した健康心理学的研究を行うことにある。今年度は,1)自己認識のポジティビティとストレス評価の信念を包括的に評価できる尺度の検討を行い,2)ストレス過程におけるこれらのポジティブ心性の作用機序を,フィールド観察-実験科学を統合したアプローチによって,統合心理生理学的な視点から明らかにすることを目指した。その結果,自己認識のポジティビティとストレス評価の信念は,1)「いきいき度質問表」(津田・田中, 2009),「主観的幸福感尺度」(島井ら, 2004),「心理的ウェルビーイング尺度」(西田, 2000),「ストレスの過小評価の信念尺度」(井澤ら, 2013),「Stress Mindset Measure」(Crum et al., 2013),「Positivity Scale」(Vittorio et al., 2012)などの項目で評価できること,2)ストレッサーに対するコントロールの認知的評価を介して発動される問題焦点型コーピングと情動焦点型コーピングによって強められたり,ポジティブおよびネガティブな自動思考に影響を受けたりすること,3)指動脈拡張能検査によって測定される血管内皮機能や眠りモニターによって評価される睡眠の質,メンタルストレステストによって誘発されるコルチゾール分泌の減弱と関連していることを明らかにした。自己認識のポジティビティとストレス評価の信念の個人差を統合生理心理学的な視点から解明するために、実験室でメンタルストレステストを負荷したときの生物心理ストレス反応を測定することとしていた。しかしながら、連続血行動態を評価できるPortapres(米国からの輸入であり、Finapres Medical System社からの納入が遅れた)と瞳孔対光反応(縮瞳率)測定装置(製造元の浜松ホトニクスでの生産が注文の増加に追いつかない状況が続いたため)の納期が遅れたため、自律神経系の変化を検討する実験系の確立が遅れ、脳-心臓相関が十分に検討できなかっため。本研究の目的は,自己認識のポジティビティ(自己を肯定的に評価したり,ポジティブな感情とネガティブな感情のバランス体験を保ったりする心の特質)とストレス評価の信念(ストレスの存在や影響性を見積もる個人の態度)がストレス過程(ストレッサーの認知とコーピングが健康ー病気の結果に及ぼす一連のプロセス)にどのような影響を及ぼしているのか,その生物心理社会的機能の解明を目指す実証的研究とこれらのポジティビティ心性を高めるストレスマネジメント行動変容の介入実践を統合した健康心理学的研究を行うことにある。今年度は自己認識のポジティビティとストレス評価の信念を包括的に測定する尺度の信頼性と妥当性の検討に加えて,標準化の作業を進めた。心理社会的属性の異なる多様な対象者の比較を可能にするためである。

まず,因子分析によって求められた適合度は許容範囲内の値を示した。妥当性に関しては,「主観的幸福感尺度」(島井ら,2004),知覚されたストレス尺度(鷲見,2006),改訂版楽観性尺度(坂本ら,2002),大学生用ストレス自己評価尺度(尾関,1991),SF-8(福原,2005),日本語版PANAS(佐藤ら,2001)を用いて求められた併存的妥当性,弁別的妥当性,基準関連妥当性すべてにおいて良好な結果が見られた。信頼性に関しても,内的整合性,再検査信頼性共に示された。よって,大学生の自己認識のポジティビティとストレス評価の信念を正確に測定する質問紙を確立することができたといえる。自己認識のポジティビティとストレス評価の信念の個人差を生理心理学的な視点から解明するために,実験室でメンタルストレステストを負荷したときの生物心理ストレス反応を測定することとしていた。しかしながら,自己認識のポジティビティとストレス評価の信念を測定する包括的尺度の標準化に,計画よりも時間を要したことから,生理心理学的実証研究に取り掛かることができなかった。本研究の目的は,自己認識のポジティビティ(i.e.,自己を肯定的に評価したり,ポジティブな感情とネガティブな感情のバランスを保ったりする個人の特性)とストレス評価の信念(i.e.,ストレスの存在や影響性を見積もる個人の態度)がストレス-コーピング過程にどのように関連しているのか,1)その作用メカニズムを明らかにするとともに,2)自己認識のポジティビティとストレス評価の信念に通底すると目される生物学的基礎過程を精神神経内分泌免疫系の指標からその関連性を探究することにある。今年度はとくに,「マインドセット日本語版」を開発し,研究1)その信頼性と妥当性を検討するとともに,研究2)ストレス-コーピング過程におけるマインドセットの役割と機能について明らかにすることができた。研究1:384名の大学生を対象に,Crum et al.(20131)の原版を日本語訳(逆翻訳し内容の適切性を確認)(8項目)した質問紙は,原版と同じ1因子構造,有意に高いα係数と再検査時の級内相関,ネガティブ情動の予測などの結果から,信頼性と妥当性を有していることを明らかにした。研究2:235名の大学生を対象にした質問紙調査の結果より,プラスのストレスマインドセット(ストレスは有用であるという信念)は抑うつ-不安,苛立ち-怒り,無力感などの心理的ストレス反応の低さと相関していたが,この関連性は情動表出及び情緒的社会的支援の希求,問題解決的コーピングの少なさを媒介していた。一方,ネガティブなマインドセット(ストレスは問題であるとする信念)は心理的ストレス反応の高さと相関したが,この関連性はコーピング反応の多さを媒介して生じていた。これからの研究より,ストレス-コーピング過程におけるマインドセットの役割と機能ならびに作用メカニズムなどが解明されたと考える。