hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
感覚入力制御のニューロン機構と分子機構に関する実験形態学的研究

1.ラットの三叉神経脊髄路核尾亜核において、P物質受容体(NK1)を介する一次神経情報の伝達が、少なくとも部分的にはnon-synapticに行われることを示唆する形態学的知を得た。2.ラットの三叉神経脊髄路核尾側亜核において、三叉神経核視床路ニューロンにおけるカルシウム結合蛋白質の共存関係を形態学的手法により検討した。3.ラット三叉神経中脳路ニューロンについて、以下の事項を確証した。(1)セロトニン作動性入力線維を縫線核群から受ける。(2)GABA作動性シナプス終末を受ける。4.ラットの三叉神経脊髄路核尾側亜核の浅層において、P物質含有軸策がGABA作動性ニューロンおよびグリシン作動性ニューロンにシナプスすることを形態学的に証明した。5.ラットの三叉神経脊髄路核尾側亜核のスライス標本について、細胞内記録法と細胞内染色法を併用して、内在性ニューロンの形態と電気的性質を調べ、それに基づいて、4種類の内在性ニューロンを見出した。また、I層の投射ニューロンの形態と電気的性質を調らべた。6.ラット背側縫線核ニューロンのなかに、軸索側枝によって、線条体と大縫線核・巨大細胞網様核α部に同時に投射するものがあることを発見した。また、スライス標本を用いて、背側縫線核ニューロンのセロトニン免疫活性、形態、電気的性質を調らべた。7.ラット三叉神経脊髄路核尾側亜核の侵害受容関連ニューロンの多くがprotein kinase C-gammaを発現することを示唆する所見を得た。1.ラットの三叉神経脊髄路核尾側亜核において、P物質受容体を介する一次神経情報の伝達が、少なくとも部分的にはnon-synapticに行われることを示唆する形態学的知見を得た。2.ラットの三叉神経脊髄路核尾側亜核において三叉神経核視床路ニューロンにおけるカルシウム結合蛋白質の共存関係を形態学的手法により検討した。3.ラットの三叉神経中脳路ニューロンの細胞体にシナプスするセロトニン作動性軸索終末の存在を電子顕微鏡レベルで証明するとともに、これらの軸索終末が主として大縫線核・巨大細胞性網様核アルファー部・背側縫線核のセロトニン作動性ニューロンに、また、一部は不確縫線核・橋縫線核・正中縫線核のセロトニン作動性ニューロンに由来することを実験形態学的に証明した。以上は、頭顔部からの固有感覚性入力が、一次感覚性ニューロンの細胞体のレベルでセロトニン系のコントロールを受けることを示す知見である。4.フットの三叉神経脊髄路核尾側亜核の浅層において、P物質含有軸索がGABA作動性ニューロン、およびグリシン作動性ニューロンにシナプスすることを形態学的に証明した。5.ラットの三叉神経脊髄路核尾側亜核のスライス標本について、細胞内記録法と細胞内染色法を併用して、I層の投射ニューロンの形態と電気的性質を調べた。6.ラットの三叉神経脊髄路核尾側亜核のスライス標本について、細胞内記録法と細胞内染色法を併用して、内在性ニューロンの形態と電気的性質を調らべ、それに基づいて、4種類の内在性ニューロンを見出した。7.ラットの三叉神経中脳路ニューロンの細胞体にシナプスするGABA作動性軸索終末の存在を電子顕微鏡レベルで確認した。1.ラットの三叉神経脊髄路核尾側亜核において、P物質受容体(NK1)を介する一次神経情報の伝達が、少なくとも部分的にはnon-synapticに行われることを示唆する形態学的知見を得た。(1)セロトニン作動性入力線維を縫線

核群から受ける。(2)GABA作動性シナプス終末を受ける。4.ラットの三叉神経脊髄路核尾側亜核の浅層において、P物質含有軸索がGABA作動性ニューロンおよびグリシン作動性ニューロンにシナプスすることを形態学的に証明した。5.ラットの三叉神経脊髄路核尾側亜核のスライス標本について、細胞内記録法と細胞内染色法を併用して、内在性ニューロンの形態と電気的性質を調べ、それに基づいて、4種類の内在性ニューロンを見出した。また、1層の投射ニューロンの形態と電気的性質を調べた。6.ラット背側縫線核ニューロンのなかに、軸索側枝によって、線条体と大縫線核・巨大細胞網様核α部に同時に投射するものがあることを発見した。また、スライス標本を用いて、背側縫線核ニューロンのセロトニン免疫活性、形態、電気的性質を調べた。7.ラット三叉神経脊髄路核尾側亜核の侵害受容関連ニューロンの多くがprotein kinase C-gammaを発現することを示唆する所見を得た。
保育士のリアリティショックの測定尺度開発と早期退職を防ぐプログラムの提案

保育士の早期離職の原因の1つに、予期と現実とのギャップによって生じる「リアリティショック」がある。本研究は、まず、保育士へのインタビューからギャップの内容を抽出した。次に、新人保育士のギャップとそれへの反応を測定する尺度を開発し、新人保育士のリアリティショックの推移と先行要因との関連を検討した。ギャップの認知4因子、反応2因子、さらにそれらの推移の3類型を見出した。予防プログラムとして、子どもとの関わりにおける周囲のサポート、自己効力感・保育士効力感・ソーシャルスキル・就労や子どもへの肯定的なイメージの醸成が必要であることが示された。本研究は、潜在保育士問題の要因の1つとして、保育士が就職前に抱いていたイメージと現実とのギャップによって心理社会的・身体的ショック反応が生じる「リアリティショック」に着目した。リアリティショックの測定尺度を開発し、それを用いた調査によって、保育士のリアリティショックの高リスク要因を抽出し、保育士養成校や保育施設向けの「リアリティショック予防プログラム」を提案することを目的としている。平成27年度は、リアリティショックに関わる概念を整理し、リアリティショック測定尺度の項目収集のため、保育士に対するヒアリングを行った。当初の計画では、新卒で就職して1年目の保育士のみにヒアリングを行う予定であったが、保育現場では就職後2年目以降に初めて経験する仕事もあることから、新卒保育士8名に加え、2年目から4年間までの保育士それぞれ3名ずつを対象とした。ヒアリングでは、「就職する前の仕事のイメージと就職してからの実際との間のギャップ」「それにより感じたこと、考えたこと」「それによる行動の変化」「周囲からのサポート」等を聴取した。聴取内容を逐語化し、KJ法を参考に分析を行い、就職前の就労イメージと就職後の実際とのギャップの認知、および、心理社会的・身体的反応等を抽出した。ここから予備尺度の項目を作成中である。27年度の成果を、28年度に開催される国際学会で発表するため、3件の発表を申し込んだ。また、本研究の根拠となる、リアリティショック研究の潜在保育士問題解消への寄与可能性について論じた論文一篇を発表した。ヒアリングについては、当初予定していた新卒後就職1年目の保育士だけでなく、就職2年目から4年目の保育士に対象を拡げた。そのため、当初予定よりヒアリングに時間を要した。予定では、ヒアリングの内容をもとにリアリティショックの予備尺度を作成し、予備調査を実施することになっていたが、予備調査の作成に至ることができなかった。しかし、就職2年目以降の保育士による回想の形で、渦中にいる1年目の保育士が気づかない内容を聴取することができた。また、保育施設における勤務は、年間の行事スケジュールに沿ったものである。1年のサイクルを経験した2年目以降の保育士から、より多岐に渡るリアリティショックの内容を得ることができた。これらによって、より有用な尺度の開発につながったと考えている。28年度には、新卒保育士のリアリティショックを測定し、先行要因との関連を検討する予定であった。ここで予備尺度を使用することで、尺度開発のための予備調査を兼ねることができ、27年度の遅れを取り戻すことが可能と考えている。リアリティショックの測定尺度を開発し、それを用いた調査によって、保育士のリアリティショックの高リスク要因を抽出し、保育士養成校や保育士施設向けの「リアリティショック予防プログラム」を提案することを目的としている。平成28年度は、保育士へのヒアリングの結果を分析し、就職前の予想と就職後の実際の経験の間のギャップの内容を捉えた。ギャップへの認知、心理社会的・身体的反応を抽出したうえで、クラスター分析を用いてそれらをカテゴリー化した。さらにカテゴリーの分類軸を見出すため、多次元尺度法による分析を行い、他職種のギャップとは異なる保育士に特有のギャップの側面を見出した。見出されたギャップが新人保育士のリアリティショックを引き起こすと考えられる。得られたカテゴリーからリアリティショック測定尺度の予備尺度項目を作成した。続いて、就職1年目の保育士を対象に、予備尺度を用いた調査を行った。調査データに対する因子分析、項目分析等の手続きによって、複数の下位尺度で構成される測定尺度を作成中である。また、就職直後の保育士を対象にリアリティショック尺度のリスク要因を調査し、その後のリアリティショックを把握するための追跡調査を実施中である。国際学会で3件、国内学会で2件の発表を行い、論文一篇を発表した。さらに国内学会1件の発表申し込みを行った。また、論文一篇の投稿を準備中である。28年度は、新人保育士のリアリティショックを測定し、予備尺度に対し項目分析を行い本尺度項目の選定を行うとともに、リアリティショックのリスク要因となりうる先行要因との関連を検討を完了する予定であった。項目分析による本尺度項目の選定はほぼ完了しつつある。しかし、リアリティショックのリスク要因となりうる先行要因との関連を検討するためのサンプル数を十分確保し、より確実な結果を得るため、今年度も同様の調査を繰り返すことにした。新人保育士の早期離職の原因の1つである保育士リアリティショックの予防を目的とした研究である。リアリティショックにおける,予想と現実のギャップをストレッサー,反応をストレス反応とみなすことにした。保育士へのインタビューからギャップの内容を抽出するとともにその分類軸を見出した。

また抽出した内容からギャップを測定する保育士リアリティショック尺度(RS尺度)と,反応を測定する保育士リアリティショック反応尺度(RS反応尺度)を開発した。新人保育士を対象に調査を行い両尺度の項目の因子分析を行った。保育士RSショックの下位尺度として4因子,保育士RS反応尺度の下位尺度として2因子が抽出された。それぞれ内容に関連のある既存の尺度との間に相関があり妥当性が示された。新人保育士の就職後3ヶ月,6か月,9カ月後のRS尺度得点,RS反応得点を算出し相関係数から先行要因との関連を検討した。時間の経過に伴い,先行要因との相関関係が見られなくなる傾向であった。また,RSの「業務負担の重さ」とRS反応の「表出反応」は就職後3ヶ月後より6カ月後に大きくなることが示された。結果からは,新人の段階で子どもとの関わりにおける周囲からのサポートを得られないことにより保育士としての職業アイデンティティを揺るがす状況となることが懸念された。新人保育士のサポートマニュアルを作成するとともに,子どもとの関わりに困難を感じる時期に,自治体単位で新人保育士を対象とする研修会を開催するなどの方策も必要と考えられる。最終年度は国内学会で2件の発表を行い,論文一篇を発表した。また論文一篇の投稿を準備中である。保育士の早期離職の原因の1つに、予期と現実とのギャップによって生じる「リアリティショック」がある。本研究は、まず、保育士へのインタビューからギャップの内容を抽出した。次に、新人保育士のギャップとそれへの反応を測定する尺度を開発し、新人保育士のリアリティショックの推移と先行要因との関連を検討した。ギャップの認知4因子、反応2因子、さらにそれらの推移の3類型を見出した。予防プログラムとして、子どもとの関わりにおける周囲のサポート、自己効力感・保育士効力感・ソーシャルスキル・就労や子どもへの肯定的なイメージの醸成が必要であることが示された。平成28年度は、リアリティショックの先行要因と考えられる変数と、保育士として就労することで経験するリアリティショックとの関連を調査する。まず、新卒で就職したばかりの保育士に、年度始めに調査を行い、先行要因を測定する。その後、追跡調査で就職後に経験するリアリティショックと就労状況を把握する。先行要因とリアリティショックとの関連、さらに離職との関連を検討する。追跡調査の時期は、就職後3カ月後、6か月後、9か月後、12か月後とする。先行要因として、就労イメージ、子ども観、自己効力感等を測定する。リアリティショックの把握には、27年度のヒアリングに基づき作成した予備尺度を用いる。調査データの項目分析を行い、本尺度として採用する項目を選定し、リアリティショックの程度を得点として算出する。平成29年度は、28年度の結果をもとにリアリティショックの高リスク要因を抽出し、リアリティショック高リスク者への対策の検討と指針の作成を行い、「リアリティショック予防プログラム」を提案する。
森林火災が北方ユーラシアの生物圏・凍土圏の生物多様性と炭素循環に与える影響の研究

3年間にわたり調査した永久凍土上のカラマツ林は純林状の一斉林型をしており、林齢22年生で平均樹高5m前後、10,000本/ha、120年生で10m前後、約6000本/ha、200年生以上の成熟林で913m、2,000本/ha前後となっている。地上部現存量は120年生林までは単調に増加し、16.2149.6t/haとなり、200年生の成熟林では減少していた。既存のデータも含めた31林分から推定したヤクーツク周辺のカラマツ林における最大林分現存量はおよそ150t/haとなった。現存量および林分葉量と胸高断面積合計の間には有意な正の関係がみられ、現存量中の葉量の割合は120年以上で2%前後と小さい。成熟林の林床には、コケモモ、低木ツツジ類、地衣類などが優占し、アラス草地では高いpHや湿地に特異的な植物種の出現が見られる。また、菌類は7科25属30種を同定した。主要な土壌動物であるトビムシ類は火災直後ではそれほど減少せず、ササラダニ類が減少し、それぞれ6年目で最低となり、森林の回復に伴い再び増加していた。相対比率は火災直後でトビムシが、森林回復に伴いササラダニがそれぞれ優占していた。推定した年間の土壌呼吸量および純一次生産量から、カラマツ成熟林が吸収するCO_2量(生態系純生産NEP)は129(gCm^<-2>y^<-1>)で、既報の亜寒帯林と同程度であり、大気のCO_2を吸収するシンクとして振る舞っている。しかしながら、強い森林火災を受けた地点ではNEPが負(-88gCm^<-2>y^<-1>)であり、大気へのCO_2ソースとなっている。火災履歴に関わらず、砂質ポドゾル土壌の地点において、土壌は大気CH_4を吸収していた。この吸収フラックスは、ヨーロッパ北方林と同程度であり、ロシアの非永久凍土地帯乾性ポドゾル性土壌におけるCH_4吸収フラックスよりも小さかった。一方、湿地化したアラス水際の地点ではCH_4放出が認められた。本年は初年度なので調査地選定のために概査を行い、ヤク-ツク郊外で調査地として適した森林火災跡地と対照地を選定した。火災後1年目、5年目の調査地各1カ所と隣接する対照地1カ所、他に代表的なカラマツ林1カ所を対照地として選び計4カ所を調査地とした。各調査地では、植生調査、毎木調査(対照地のみ)、土壌呼吸量の測定、土壌の理化学性調査用の土壌サンプル及び土壌動物調査用の土壌サンプルを採取した。1年目の火災跡地は地表火によるものなので上木が残っているが、5年目の調査地は樹冠火により無立木状態となっている。1年目の火災跡地の下層植生は、裸地状の所とコケモモがパッチ状に分布しており、徹底的に燃えたと思われる5年目の火災跡地ではヤンギランが優占し、永久凍土の融解に伴う地下水の上昇によりコケ類が多くなっている。対照地の下層植生はコケモモが圧倒的に優占し、ツツジやスゲを随伴している。

対照地2カ所の上木の密度は2,104本/haと2,234本/haで、胸高直径(cm)・樹高(m)の最大値ー最小値(平均値)はそれぞれ41.80ー0.10(8.65)・19.50ー1.30(8.15)、34.50ー0.10(9.30)・17.5ー1.30(8.97)となっている。土壌呼吸量は火災跡地で明らかに低下している。土壌動物のダニ類は対照地で1315種観察されているが、火災跡地では種数も密度も半数以下に低下している。トビムシ類も同様の傾向を示しているが、湿地化している5年目の跡地での減少が大きい。このように永久凍土地帯での森林火災の影響は、土壌呼吸や土壌動物に大きな影響を与えている。昨年に続き、ヤクーツク郊外で火災後25年経ったカラマツ林の林分バイオマスを推定した。また、北海道京極町のカラマツ人工林で同様の樹高のサンプル木9本を選定して地上部器官量を測定し、シベリア永久凍土地帯のカラマツとの比較を行った。火災後25年目のカラマツ林は平均樹高4.7m、胸高直径3.1cm、10000本/haの高密度林分であり、火災後数年で一斉更新したと考えられる。平均直径成長は1.5mm/年と北海道の約1/6で、非常に成長が遅い。シベリアのカラマツの個体あたりの器官量は枝葉への配分が少なく幹へ約8割が配分されており、厳しい環境条件以外に、同化器官の少ないことが成長量を少なくしている一因と考えられる。しかし、林分バイオマスは12.5トン/haで北海道のカラマツ林と同様の値となっている。火災履歴の異なるカラマツ林5地点において、植物の根呼吸と微生物呼吸から構成されている土壌呼吸について検討した。火災を受けていない地点と比較して、カラマツが焼失した地点では、土壌の微生物呼吸が高かった。その理由として、土壌への日射の増加による地温の上昇と鉱質土壌への有機物の供給が考えられた。しかしながら、カラマツが焼失した地点では、土壌呼吸の著しい低下が認められた。その理由として、樹木の根および根呼吸の減少が考えられた。このように、森林火災は土壌植物系の炭素循環に大きな影響を与えていた。微生物呼吸に貢献する菌類は7種が採取・同定された。この中には、シベリア永久凍土地帯で初めて発見されたと思われるツチクラゲが含まれている。トビムシ類は火災直後ではそれほど減少せず、5年目では減少していた。25年たつと再び増加していた。1.バイオマス推定のための林分調査を継続し、新たに23年生林、50年生林、120年生林、成熟林(230年以上)の毎木調査を行った。推定された地上部現存量は、それぞれ20t/ha、31t/ha、150t/ha、139t/haとなり、既往のデータを含めると、ヤクーツク周辺のカラマツ林の最大現存量は150t/ha前後と推定される。葉量は1.52.5t/haであり、日本のカラマツ林と比べると小さい。地上部の二酸化炭素固定量は120年生林で約270t/haとなる。2.調査地周辺で観察した木本種と草本種はそれぞれ16種と89種であった。森林火災後の林分に共通する優占種はヤナギランであるが、高木種の侵入や蘚苔類の優占度は異なっていた。成熟林からアラス草地接する林縁部は林内と草地の植物種が混在して種多様度が高くなっており、草地では土壌水分の乾湿や高いpHに対応する指標性のある草本種が見られた。3.火災履歴に関わらず、砂質ポドゾル土壌の地点において、土壌は大気CH_4を吸収していた。この吸収フラックスは、ヨーロッパ北方林と同程度であり、ロシアの非永久凍土地帯乾性ポドゾル性土壌におけるCH_4吸収フラックスよりも小さかった。一方、湿地化したアラス水際の地点ではCH_4放出が認められた。N_2Oフラックスは、これまで熱帯および温帯の森林で測定された放出フラックスよりも小さい値であった。4.これまでの調査から、植物-土壌生態系が大気から正味に吸収するCO_2量を算出した。
重遷移金属元素の協同効果により発現する新規光物性の創出

本研究では,多様な置換基を有するピラゾラト配位子が白金原子と銅,銀,金などの原子を架橋した混合金属錯体の開発を行った。本研究により, 3種類の遷移金属元素からなる混合金属錯体ならびに(ジイミン)白金ユニットと11族金属イオンからなるZ型混合金属錯体の合成に成功した。また,混合金属錯体の発光エネルギーに与える白金イオンに配位した塩化物イオンの影響を明らかにすることにも成功した。本研究では,新たな「白金と11族元素からなる混合金属錯体」の開発を目指し,(1)非対称な構造のピラゾラト配位子を用いた混合金属錯体と,(2)異なるピラゾラト配位子を分子内に含む混合金属錯体の合成を行ない,それらの発光特性を調べた.具体的には,(1)については,非対称な構造のピラゾラト配位子として,3-イソプロピル-5-メチルピラゾール(iPrMepzH)を架橋配位子として用い,白金-銀混合金属錯体[Pt_2Ag_4(iPrMepz)_8]の合成を試みた.白金の出発原料である[RtCl_2(C_2H_5CN)_2]にiPrMepzHを反応させると,主として2つの異性体が生成することが分かった.これらは,4つ全ての配位子がメチル基に近い方のN原子で配位した構造の錯体とメチル基に近い方のN原子とイソプロピル基に近い方のN原子がそれぞれシスに配置した構造の錯体であった.これらの2つの異性体をそれぞれ塩基で処理したのち銀イオンと反応させると,両異性体とも2つの白金ユニットが二量化し,それぞれのユニット間に銀イオンを4つ含んだ混合金属錯体が得られた.これらの混合金属錯体は若干異なる発光エネルギーを示すことより,置換基の向きの違いによる微妙な構造変化も発光エネルギーに影響を与えることが明らかになった.また,(2)については,インダゾールとジメチルピラゾールを架橋配位子とする混合金属錯体の合成に成功した.(1)の例でも分かるように,アルキル基を持つピラゾール誘導体と[PtCl_2(C_2H_5CN)_2】との反応では,4つのアルキルピラゾールが配位した単核錯体が得られる.しかし,インダゾール(BzpzH)はアルキルピラゾールに比べて塩基性が低く,[PtCl_2(C_2H_5CN)_2】との反応では,分子内に2つの塩化物イオンが配位した単核錯体[PtCl_2(BzpzH)_2]が生成する.[PtCl_2(BzpzH)_2】の塩化物イオンは,ジメチルピラゾールと置換反応が進行し,[Pt(Bzpz)_2(Me_2pzH)_2]が得られた.また,この単核錯体は銀イオンや銅イオンと反応させることで[Pt_2M4(Bzpz)_4(Me_2pz)_4](M=Ag,Cu)が得られた.Pt_2Cu4錯体は赤色の発光を示した.我々は,白金と11族の金属イオンからなるピラゾラト配位子が架橋した混合金属錯体が,発光量子収率が高いにも関わらず,EL特性が十分得られない原因の一つとして,これらの混合金属錯体の吸収帯が300nmより短波長側にしか存在しないことに注目している.吸収帯を長波長側にシフトさせる方法の1つとして,混合金属錯体中の白金イオンへのジイミン配位子の導入が考えられる.最近我々は,ビピリミジンがキレート配位した二核白金錯体[Pt_2(bpym)_2(μ-R_2pz)_2]^<2+>(R=H,Me)の発光がPt...Pt距離の違いに依存しており,^3LC/MLCT (R=H)からの発光の場合と^3MMLCT(R=Me)からの発光の場合が存在することを明らかにした.これらの錯体は、353nmおよび377nmにそれぞれMMLCTに由来する吸収帯を持つ.3-t-ブチルピラゾールを用いて類似錯体の合成を試みたところ,単核錯体[Pt(bpym)(3-^tBupzH)_2](PF_6)_2が生成することが分かった.この単核錯体では,3-t-ブチルピラゾールがプロトンを解離することなく配位している.そこで,この錯体にトリエチルアミン存在下,Ag^+イオン,Au^+イオン,Cu^+イオンをそれぞれ作用させることにより,混合金属錯体[Pt_2M_2(bpym)_2(3-^tBupz)_4](PF_6)_2(M=Ag,Au,Cu)の合成・単離に成功した.さらに,キレート配位子の違いにより混合金属錯体の諸性質にどのような違いがみられるかを調べるために,ビピリジン(bpy)についても類似錯体の合成を行い,ビピリミジン錯体との比較を行った.Pt_2Ag_2錯体およびPt_2Au_2錯体についてそれぞれX線構造解析を行ない,構造を明らかにした.

bpym錯体,bpy錯体とも比較的強い発光を示し,bpym錯体は,黄緑色(Ag),青緑色(Au),黄色(Cu)の発光,bpy錯体は,黄緑色(Ag),黄色(Au),黄色(Cu)の発光をそれぞれ示した我々は,白金と11族の金属イオンからなるピラゾラト配位子が架橋した混合金属錯体が,発光量子収率が高いにも関わらず,EL特性が十分得られない原因の一つとして,これらの混合金属錯体の吸収帯が紫外部にしか存在しないことに注目している。吸収帯を長波長側にシフトさせる方法の1つとして,混合金属錯体中の白金イオンへのジイミン配位子の導入が考えられる。昨年度に引き続き,様々なジイミン配位子を用いて置換基の効果やヘテロ金属イオンの効果を検討した。その結果,ジイミン配位子として2,2'-ビピリジンおよび4,4'-ジメチルー2,2'-ビピリジンを用い,ヘテロ金属イオンとして銀イオンを含む場合に発光量子収率が高くなることが分かった。金イオンや銅イオンを含む混合金属錯体に比べて銀イオンを含む錯体の方が強発光性錯体を与えやすい理由は現時点では不明であるが,経験則として重要な知見が得られたと考えている。また,ジフェニルピラゾールが配位した単核錯体を塩基で処理することにより,ジフェニルピラゾールがシクロメタル化および架橋した二核錯体が2種類生成し,一方の錯体は11族の金属イオンを導入することにより混合金属錯体に変換することが可能であり,もう一方の錯体は,ビス(ジフェニルボスフィノ)メタンのようなホスフィン配位子との反応により,シクロメタル化したジフェニルピラゾールとホスフィン配位子からなる単核白金錯体を与えた。後者の錯体は,有機EL素子への応用が可能であることが分かった。
Klf5による幹細胞維持機構

BTEB2/Kruppel-like factor 5(Klf5)は、胚性幹(ES)細胞などの幹細胞・個体の維持に必要不可欠な役割を果たすことを申請者らが明らかにしてきている(Ema et al., Cell Stem Cells, 2008)。しかしながら、Klf5による幹細胞維持の分子機構は殆ど分かっておらず、以下に述べるサブプロジェクトを遂行することにより、幹細胞維持におけるKlf5の役割を明らかにすることが目的である。1)Klf5遺伝子の標的遺伝子は現在の所殆ど不明であるため、マイクロアレイおよびChip-on-chip assayにより得られた候補遺伝子群を解析し、siRNAを用いたノックダウン実験やプロモーター解析等により直接の下流遺伝子であるかどうか同定する事を目的とした。H20年度は、Klf5ノックアウトES細胞で減少している転写産物としてE-Rasを見出し、その発現低下を定量RT-PCRによって評価した。2)Klf5コンディショナルノックアウトマウスを用いて、各種組織幹細胞におけるKlf5の役割を解析する事を目的とした。H20年度は、Klf5コンディショナルノックアウトマウスと腸管上皮特異的なCre発現マウスを交配した結果、腸管上皮の構造に異常が生じることを見出した。BTEB2/Kruppel-like factor 5(Klf5)は、胚性幹(ES)細胞などの幹細胞・個体の維持に必要不可欠な役割を果たすことを申請者らが明らかにしてきている。1)Klf5遺伝子の標的遺伝子は現在の所殆ど不明であるため、マイクロアレイおよびChip-on-ohip assayにより得られた候補遺伝子群を解析し、siRNAを用いたノックダウン実験やプロモーター解析等により直接の下流遺伝子であるかどうか同定する事を目的とする。H20年度は、マイクロアレイ解析によりKlf5ノックアウトES細胞で減少している転写産物を綱羅的に単離し、Tcll-Aktlシグナルが下流に存在することを見出した。2)Klf5コンディショナルノックアウトマウスを用いて、各種組織幹細胞におけるKlf5の役割を解析する事を目的とする。H20年度は、Klf5コンディショナルノックアウトマウスと各種組織特異的Creマウスと交配し、表現型を観察した。腸管上皮特異的なCre発現マウスである、Villin-Creと交配した結果、多くは胎内で致死となっていることが判明したため、今後は胎児期での表現型観察を行っていくこととする。
口腔がん細胞のＤＮＡ損傷応答におけるＨＩＦ－ＤＥＣ経路の意義

口腔扁平上皮がん細胞HSC-2を用いた網羅的遺伝子発現解析により,24時間低酸素刺激により発現低下した22のDNA修復遺伝子のうち,BRCA1,RAD51,MBD4,MRE11A,MLH1,MSH2の低酸素下での転写調節機構を解析した。結果,HIF-1下流で働く転写因子DECはこれら遺伝子プロモーター活性を抑制した。さらに,低酸素前処理を行ったがん細胞の損傷応答および修復は,DEC2依存的に遅れた。一方,低酸素前処理を行ったがん細胞のガンマ線感受性は,siRNAによるDEC2抑制により増加し,低酸素前処理による放射線感受性低下機構にHIF-1-DECを介した機構が関与していることが示唆された。機能温存による口腔がん患者のQOL向上に向けて,より効果的で安全な治療法を開発すべく,転移や再発の芽となり得る低酸素下がん細胞の放射線や抗がん剤によるDNA損傷応答機構における転写因子HIF-1およびその下流の転写抑制因子DECの意義解明をめざす。さらには,HIF-DEC経路を分子標的とした治療法,治療増感法を開発するための解析基盤を構築する。これまでに,1)網羅的遺伝子発現解析により、低酸素下がん細胞にて、非常に多くのDNA損傷応答、修復関連遺伝子発現が低下することを明らかにした。2)低酸素下でのDNA修復関連遺伝子発現制御機構の解析を行い、HIF-1やDECの関与,特に、DEC2の重要性を明らかにした。3)低酸素がん細胞は放射線に耐性を示すが、DEC2の遺伝子ノックダウンにより感受性が増加する事を明らかにした。本年度は遺伝子操作ではなく,薬剤化合物によるDEC制御法を探索し治療応用の可能性を検討する。本申請では,低酸素下がん細胞における放射線や抗がん剤によるDNA損傷応答機構における転写因子HIF-1およびその下流の転写抑制因子DECの意義解明をめざし,1)低酸素下でのDNA修復関連遺伝子発現制御機構の詳細を明らかにする。特に,HIF-1やDECの関与についての解明,2)様々な低酸素環境下口腔がんをはじめとする複数種のがん細胞株の放射線や各種抗がん剤感受性の変化とHIF-1-DEC経路の活性の比較,3)低酸素環境のDNA損傷応答への影響を,DNA損傷認識やアポトーシス誘導へのシグナルの変化に注目して比較,4) HIF機能レポーター実験系を構築に取り組んだ。HIF-1-DECを介したDNA損傷・応答機構の詳細を明らかにし,放射線治療効果の増強のみならず,新しい防護法の開発への応用が期待された(論文準備中)。能温存による口腔がん患者のQOL向上に向けて,より効果的で安全な治療法を開発すべく,転移や再発の芽となり得る低酸素下がん細胞の放射線や抗がん剤によるDNA損傷応答機構における転写因子HIF-1およびその下流の転写抑制因子DECの意義解明をめざす。特に本年度は,1)網羅的遺伝子発現解析により、低酸素下がん細胞にて、非常に多くのDNA損傷応答、修復関連遺伝子発現が低下することを明らかにした。2)低酸素下でのDNA修復関連遺伝子発現制御機構の解析を行い、HIF-1やDECの関与について詳細に示した。特に、DEC2の重要性を明らかにした。これまでの当初計画では、1)DNA損傷応答機構にかかわる遺伝子および低酸素応答(誘導)遺伝子の発現変動について,様々ながん細胞株や正常細胞などを用いて,正常酸素分圧下(21% pO2)と低酸素分圧下(1-5% pO2)にて4-96時間培養し,microarrayおよびreal-time RTPCR法にて比較検討する。2)上記培養条件下細胞株におけるDNA損傷応答機構にかかわる因子および低酸素応答(誘導)因子の発現変動について,western blotting法にて比較検討する。3)上記培養条件下細胞株の放射線(X線,γ線)照射,DNA障害性薬剤(Bleomycin,CDDP,CBDCA,CPT-11など)に対する感受性の変化をMTT法にて比較検討する。4)上記実験系をHIF1AおよびDEC1,DEC

2特異的siRNA導入によりノックダウンして再検討する。5)DNA損傷応答機構にかかわる遺伝子のプロモーター領域をサブクローニングし,解析用ルシフェラーゼレポーターを構築する(既に構築済みも含む)。さらに,点変異,欠失変異体を解析目的に応じて作製する。6)上記プロモーターレポーターとHIF-1αやDECなどの発現プラスミドベクターと共遺伝子導入し,また,さらに様々な薬剤やsiRNAを処理し,プロモーター制御機構を明らかにする。ことを予定していたが、1)ー5)は概ね解析が終了し,6)は実験進行中である。本年度内で,一定のまとめが出来るめどがたった。当初計画では、1)DNA損傷応答機構にかかわる遺伝子および低酸素応答(誘導)遺伝子の発現変動について,様々ながん細胞株や正常細胞などを用いて,正常酸素分圧下(21% pO2)と低酸素分圧下(1-5% pO2)にて4-96時間培養し,microarrayおよびreal-time RT-PCR法にて比較検討する。2)上記培養条件下細胞株におけるDNA損傷応答機構にかかわる因子および低酸素応答(誘導)因子の発現変動について,western blotting法にて比較検討する。3)上記培養条件下細胞株の放射線(X線,γ線)照射,DNA障害性薬剤(Bleomycin,CDDP,CBDCA,CPT-11など)に対する感受性の変化をMTT法にて比較検討する。4)上記実験系をHIF1AおよびDEC1,DEC2特異的siRNA導入によりノックダウンして再検討する。ことを予定していたが、1)、2)、4)は概ね解析を行い、3)、5)、6)は実験を開始することができた。1)上記実験を引き続き継続する。2)上記実験にて見いだされたHIF-1やDEC応答配列を含むレポーターを,それぞれの機能レポーターとし,既存の抗がん剤,その他の医薬品,化合物,さらに,天然物質などからHIF-DEC経路の阻害物質スクリーニングを行う。3)上記HIF-DEC経路阻害物質の治療応用への可能性を,放射線照射,既存の抗がん剤,さらには分子標的薬などと様々な条件下にて(投与スケジュールのもと)組み合わせて,培養細胞および独自に開発した腫瘍自然発生をきたすHIF1A tgマウスなどを用いて検討する。これらの結果を論文化する。2)上記実験により特徴的な遺伝子,蛋白発現を示す細胞,特徴的な放射線や薬剤応答を示す細胞を選択し,比較実験に供する。
歯根膜の恒常性 : 咀嚼刺激によるpreosteoclastの血管外遊走に着目して

(1)ハムスター頬袋の単一微小血管モデルにおける血管内の剪断応力を、計算力学的手法を用いて検討した。弾性静解析、流体力学解析を用いて解析した結果、変形した血管における剪断応力は、変形した部位の上流、下流双方で増加し、またその応力は血流の変化のみならず、血管壁の圧縮や曲げにより強く生じることが明らかとなった。(1997顎顔面バイオメカVol.3)(2)ハムスター頬袋の単一細静脈を生体顕微鏡で観察する手法を用い、血管に変形を加え、血流中を流れる単球(preosteoclast)を含む白血球の動態を定量的に計測した。その結果、変形を加えた上流下流50μmの範囲において白血球の転がり、粘着が増加することが観察された。加えて若齢と老齢の動物で比較し検討したところ、若齢の動物に比較して老齢の動物においては、変形によって増加する白血球の転がり、粘着の数が少なく、また、変形を解除した後の回復が遅いことが明らかとなった。(1997J.Jpn.Orthod.Soc.Vol.56)(3)間欠的な機械的刺激の血管への影響を明らかにするため、ラット臼歯の歯根膜を用い、咬合力を除去したものと咬合している歯根膜の微小血管の様相を、免疫組織学的手法を用いて3カ月まで定量的に計測した。その結果、機械的刺激が除去されると微小血管はその血管径が減少し、3カ月に至ると有意に血管数が減少することが観察された。(1998 Orthod Waves Vol.57)(4)微小血管と組織学的に密接な関係をもち、外からの機械的刺激を微小血管に伝播すると考えられる歯根膜のoxytalan線維の加齢による変化を、ラット歯根膜を用いて組織学的に検討した。その結果、oxytalan線維の走行は加齢によりcomplexity,irregularityが増すことが明らかとなった。(1999 J.Med.Dent.Sci.Vol.46)(1)ハムスター頬袋の単一微小血管モデルにおける血管内の剪断応力を、計算力学的手法を用いて検討した。(1999 J.Med.Dent.Sci.Vol.46)2,免疫組織学的検討3,微小血管周囲の応力分布の計算力学的解析上記1,で観察した微小血管を想定した有限要素モデルを作製し、弾性静解析を用いて変形による剪断応力を、また、流体力学解析を用いて血流による剪断応力をそれぞれ算出し、検討した。(圧迫された微小血管における応力分布-計算流体力学解析を用いて-.顎顔面バイオメカニクス学会誌.vol3.(1) : 1-2,1997)(1)ハムスター頬袋の単一微小血管モデルにおける血管内の剪断応力を、計算力学的手法を用いて検討した。

加えて若齢と老齢の動物で比較し検討したところ、若齢の動物に比較して老齢の動物においては、変形によって増加する白血球の転がり、粘着の数が少なく、また、変形を解除した後の回復が遅いことが明らかとなった。(1997 J.Jpn.Orthod.Soc.Vol.56)(3)間欠的な機械的刺激の血管への影響を明らかにするため、ラット臼歯の歯根膜を用い、咬合力を除去したものと咬合している歯根膜の微小血管の様相を、免疫組織学的手法を用いて3カ月まで定量的に計測した。その結果、機械的刺激が除去されると微小血管はその血管径が減少し、3カ月に至ると有意に血管数が減少することが観察された。(1998 Orthod Waves Vol.57)(4)微小血管と組織学的に密接な関係をもち、外からの機械的刺激を微小血管に伝播すると考えられる歯根膜のoxytalan線維の加齢による変化を、ラット歯根膜を用いて組織学的に検討した。その結果、oxytalan線維の走行は加齢によりcomplexity,irregularityが増すことが明らかとなった。(1999 J.Med.Dent.Sci.Vol.46)
大強度中性子ビームによる中重核の元素起源の研究

鉄より重い元素のかなりの部分は遅い中性子捕獲反応過程(s過程)で生成されている。アイソマーはs過程において、元素合成の流れの分岐点となりうるため重要である。その一つがCd-113の半減期が約14.1年のアイソマーであり、その流れの一つはSn-115に到着する。Sn-115の天体起源は未解明の問題である。その理由の一つが、アイソマーへの分岐比が計測されていないからである。そこで、J-PARCの大強度中性子ビームを用いてCd-113アイソマーへの分岐比の計測を行った。太陽系に存在する約290核種のうち、天体起源(核反応及び、天体環境)が不明な核種は8核種である。その8核種のうちの一つがSn-115である。この領域の核種は中性子捕獲反応とベータ崩壊によるs過程ないし、r過程の後の中性子過剰領域からベータ崩壊で生成される。Sn-115を除く核種(同位体)の太陽組成は、これらの元素合成過程で説明できる。しかし、0.34%の同位体組成を持つSn-115の起源については不明であった。申請者は、Cd-113アイソマー経由の元素合成が良く考慮されていないことに気がついた。これまで、Cd-112からCd-113のアイソマーへの中性子捕獲反応断面積が計測されておらず、それが無視できるほど小さいと仮定されていたためである。仮に、この反応断面積が有意な量を持つ場合には、Cd-113アイソマーからSn-115が生成されることになる。そこで、本研究では、熱外中性子領域で、中性子ビームを用いてCd.112から中性子捕獲反応によるCd.113の基底状態とアイソマーへの生成比を測定する。そのためJ-PARCの大強度ビームラインの一つBL04および、核データ計測に最適化されたガンマ線計測システムANNRIを用いて中性子照射実験を行った。Cd-112同位体濃縮試料にパルス中性子ビームを照射し、Cd試料の中性子捕獲反応にともなって放出されるガンマ線を、ANNRIを構成する2台のクラスター型大容量Ge半導体検出器を用いて測定した。ガンマ線の信号と、ガンマ線を検出した時間信号をリストデータモードで計測した。目的とするCd.113のガンマ線だけでなく、不純物のCd-114のガンマ線が測定された。また、太陽系形成の初期に発生したと仮説がある超新星爆発の核共鳴蛍光散乱を検証するために、ファイバーレーザーを購入した。そこで、本研究では、熱外中性子領域で、中性子ビームを用いてCd-112から中性子捕獲反応によるCd-113の基底状態とアイソマーへの生成比を測定する。ANNRIを用いて中性子照射実験を平成25年度に行う予定であったが、J-PARCのハドロン実験設備の放射性物質の被ばく及び外部への拡散事故のために、J-PARCは長期間運転停止となった。一方、太陽系形成時には存在していたことが明らかになっていた長寿命放射性同位体Nb-92の天体起源が超新星ニュートリノであるとの仮説を立て、ニュートリノ-原子核反応率を計算した上で、超新星爆発モデルに組み込みNb-92の生成量を計算し、宇宙核時計の計算を行い太陽組成を説明できることを明らかにした。現在、定量的に説明できるただ一つの仮説である。超新星ニュートリノがTa-180やLa-138の起源と考えられており、その寄与があるのはほぼ確実である。太陽系に存在する約290核種のうち、天体起源が不明な核種は8核種である。

この領域の核種は中性子捕獲反応とベータ崩壊によるs過程ないし、r過程の後の中性子過剰領域からベータ崩壊で生成される。Sn-115を除く核種(同位体)の太陽組成は、これらの元素合成過程で説明できる。しかし、0.34%の同位体組成を持つSn-115の起源については不明であった。申請者は、Cd-113アイソマー経由の元素合成が良く考慮されていないことに気がついた。これまで、Cd-112からCd-113のアイソマーへの中性子捕獲反応断面積が計測されておらず、それが無視できるほど小さいと仮定されていたためである。仮に、この反応断面積が有意な量を持つ場合には、Cd-113アイソマーからSn-115が生成されることになる。そこで、本研究では、熱外中性子領域で、中性子ビームを用いてCd-112から中性子捕獲反応によるCd-113の基底状態とアイソマーへの生成比を測定する。ANNRIを用いて中性子照射実験を平成25年度に行う予定であったが、J-PARCのハドロン実験設備の放射性物質の被ばく及び外部への拡散事故のために、J-PARCは長期間運転停止となった。約1年間の停止期間後に中性子発生装置MLFについては運転が再開された。予備的に計測できた実験データの解析をすすめたところ、熱外領域ではアイソマーに崩壊するガンマ線を確認でき、基底状態に崩壊するガンマ線を複数確認できた。こられの強度比は、中性子のエネルギーによって異なることが判った。定量的に評価するため、ビームタイムを要求して約5日間のビームタイムが確保された。しかし、今度はミューオンの火災事故発生し、数週間に亘ってMLFが停止した。ビームタイムが停止期間中に含まれており実験は延期になった。また、複数のγ線実験を行った。26年度が最終年度であるため、記入しない。実験核物理学26年度が最終年度であるため、記入しない。当初の予定通り、J-PARCの中性子ビームラインを用いて、Cd-112同位体濃縮試料に対する中性子照射実験を行った。J-PARCのハドロン実験設備の放射性物質の被ばく及び外部への拡散事故のために、中性子装置MLFも含めJ-PARCは長期間運転停止となり、予定されていた実験はキャンセルされた。J-PARCを使わない実験方法の検討を行ったが、研究用原子炉も東日本大地震の影響のため運転停止中であり実験を行うのが困難な状況であった。順調に進行しているので、計画通りすすめる。幸いなことに平成26年度の4月より、J-PARCの中性子実験装置は運転が再開されたので、平成26年度中に必要な実験を終わらせ、解析をすすめる。J-PARCが放射性同位体の漏えい事故を起こし、実験できなかったため。平成26年度で実験を行う際に使用する。
身近な台地造成地の簡易地形変動追跡システムの構築

1背景と意義石川工業高等専門学校(以下本校)は,石川県河北郡津幡町北中条地内の「陣ケ台」と呼ばれる台地を掘削盛土し造成された.造成から50年余が経過し,各所で法面の部分崩落や陥没などがみられる.外周道路(町道)に面する約1.2kmにわたる境界は,約60%が擁壁(土留め壁)であり,継ぎ目部分では最大2cmのずれ等も確認できる.正門のある最低部から学寮のある最高部までは,南北方向約300mで約20mの高低差があり,法面や階段内部の土砂の流出等も随所にみられる.このような事象を踏まえ,これまでなされてこなかった本校の危機管理も含めた地形地盤の変化を見える化できるよう研究課題として取り上げた.2経過本校敷地の最高部に位置する学寮面について,水準測定用の測点を8点設置した.標高およそ30mであり,国土地理院設置の基準水準点がある.定期的に水準測量を実施し,データを蓄積していく予定である.また,標高25m付近にある本校校舎(3号館)前には,昭和40年代に職員によって埋設された,コンクリート製の水準点(2級相当)があり,基本的にはこの2点を基準として展開する予定である.法面や擁壁については目視による確認作業を行い,変化の規模や位置などを電子データとして保存し,随時確認作業を行う.3今後の予定長期的なデータの蓄積が必要となるため,当該年度の経費によって準備と基本作業を行った.今後はこれに基づき実施していく.また,本校環境都市工学科のカリキュラムには,測量学,土質工学といった実践的な単位もあり,学生諸子にも活用できないか模索していく.1背景と意義石川工業高等専門学校(以下本校)は,石川県河北郡津幡町北中条地内の「陣ケ台」と呼ばれる台地を掘削盛土し造成された.造成から50年余が経過し,各所で法面の部分崩落や陥没などがみられる.外周道路(町道)に面する約1.2kmにわたる境界は,約60%が擁壁(土留め壁)であり,継ぎ目部分では最大2cmのずれ等も確認できる.正門のある最低部から学寮のある最高部までは,南北方向約300mで約20mの高低差があり,法面や階段内部の土砂の流出等も随所にみられる.このような事象を踏まえ,これまでなされてこなかった本校の危機管理も含めた地形地盤の変化を見える化できるよう研究課題として取り上げた.2経過本校敷地の最高部に位置する学寮面について,水準測定用の測点を8点設置した.標高およそ30mであり,国土地理院設置の基準水準点がある.定期的に水準測量を実施し,データを蓄積していく予定である.また,標高25m付近にある本校校舎(3号館)前には,昭和40年代に職員によって埋設された,コンクリート製の水準点(2級相当)があり,基本的にはこの2点を基準として展開する予定である.法面や擁壁については目視による確認作業を行い,変化の規模や位置などを電子データとして保存し,随時確認作業を行う.3今後の予定長期的なデータの蓄積が必要となるため,当該年度の経費によって準備と基本作業を行った.今後はこれに基づき実施していく.また,本校環境都市工学科のカリキュラムには,測量学,土質工学といった実践的な単位もあり,学生諸子にも活用できないか模索していく.
MRI拡散テンソル画像による脳神経線維束描出の研究

脳神経外科領域の適切な手術計画において重要な神経線維路の把握は、術後の神経学的合併症を避けるためにも重要なことである。最近脳神経領域の術前評価に拡散テンソル画像が応用されているが、拡散テンソル画像では上縦束などの神経線維束の重なりにより手や顔面などの錐体路の描出が低下することが指摘されている。マルチテンソル法を用いることでその描出が改善される可能性は理論的に示されているが、実際の高磁場MRI臨床機では行なわれていない。3T MRI装置で正常ボランティア5人を用いてマルチテンソル法を施行し、解剖の教科書を参照しながら下肢、体幹部、手、顔面、舌の錐体路を作成した。シングルテンソル法では、体幹部の錐体路は5人全例、手の錐体路は3例のみに描出され、他の錐体路は描出できなかった。一方、マルチテンソル法では5人ともおのおのの部位の錐体路が描出可能であった。1つの大脳半球において、描出された全ての錐体路線維束の総数に対する体幹部以外の錐体路線維束の総数を線維束比として計算すると、シングルテンソル法が2.4±4.4%、マルチテンソル法が25.0±9.4%で、マルチテンソル法を使用することで体幹部以外の錐体路の描出が有意に改善された。この基礎的データから、現在脳神経外科と共同研究に入り、手術におけるマルチテンソル法の有用性を明らかにすべく、術中に得られたデータとマルチテンソル法で描出された錐体路の関係を検討した。その結果、マルチテンソル法での描出された錐体路は実際の錐体路とほぼ一致することが確認された。3TMRI装置で正常ボランティア5人を用いてマルチテンソル法を施行し、解剖の教科書を参照しながら下肢、体幹部、手、顔面、舌の錐体路を作成した。この基礎的データから、現在脳神経外科と共同研究に入り、手術におけるマルチテンソル法の有用性を明らかにすべく、術中に得られたデータとマルチテンソル法で描出された錐体路の関係を検討中である。

シングルテンソル法では、体幹部の錐体路は5人全例、手の錐体路は3例のみに描出され、他の錐体路は描出できなかった。一方、マルチテンソル法では5人ともおのおのの部位の錐体路が描出可能であった。1つの大脳半球において、描出された全ての錐体路線維束の総数に対する体幹部以外の錐体路線維束の総数を線維束比として計算すると、シングルテンソル法が2.4±4.4%、マルチテンソル法が25.0±9.4%で、マルチテンソル法を使用することで体幹部以外の錐体路の描出が有意に改善された。この基礎的データから、現在脳神経外科と共同研究に入り、手術におけるマルチテンソル法の有用性を明らかにすべく、術中に得られたデータとマルチテンソル法で描出された錐体路の関係を検討した。その結果、マルチテンソル法での描出された錐体路は実際の錐体路とほぼ一致することが確認された。
ヒト大腸癌微小肝転移巣に対するradioimmunotherapyの効果

平成12年度は,ヒト大腸癌微小肝転移モデルと用いて,I-131を標識したmAb H-15を投与群と爆治疲群を設定し,動物の生存ならびに転移の程度を指標に両者を比較した.脾臓内移植後2,3,4週目に屠役し,肝転移移巣の重量を比較した結果では,I-131標識mAbH-15高線量役与群が同低線量投与群と無治療群に比較して有意に少なかった.またI-131高線量群の肝転移:肝臓比と肝転移:血液比は、低線量群に比較して有意に高かった.生存率においては、I-131標識mAb H-15の高線量群と低線量群が無治療群に比校して有意に高く,解剖の結果,肝転移を来さないことが生存率向上の原因と判断された.平成13年度は,I-131標識mAb15高線量投与群,5-FU/LV低投与量,ならび5-FU/LV高投与量群を比較した場合,I-131標識mAb15高線量投与群の肝転移の重量は,投与1週後,2週後,3週後のいずれも,5-FU/LV低投与量群らび同高投与量群に比較して,有意に少なかった.一方,5-FU/LVの低投与量群と高投与量群の比較では,肝転移の重量にに差を認めなかった.また,マウスの生存率に関しても,I-131標識mAb15高線量投与群が,5-FU/LV低投与量群ならび高投与量群に比較して良好であった.本研究では大腸癌の補助療法としてのI-131/mAb H-15投与の有用性が証明できた.放射性同位元素を標識したmAbを大腸癌切除後の補助療法として臨床応用を行う前には,最も効果が期待できるmAbと放射性同位元素の組合せを明らかにする前臨床試験が必要と考える.今後,最適のmAbと放射性同位元素の組合せを明らかになり,臨床応用されることが期待される.平成12年度は,ヒト大腸癌微小肝転移モデルと用いて,I-131を標識したmAb H-15を投与群と爆治疲群を設定し,動物の生存ならびに転移の程度を指標に両者を比較した.脾臓内移植後2,3,4週目に屠役し,肝転移移巣の重量を比較した結果では,I-131標識mAbH-15高線量役与群が同低線量投与群と無治療群に比較して有意に少なかった.またI-131高線量群の肝転移:肝臓比と肝転移:血液比は、低線量群に比較して有意に高かった.生存率においては、I-131標識mAb H-15の高線量群と低線量群が無治療群に比校して有意に高く,解剖の結果,肝転移を来さないことが生存率向上の原因と判断された.平成13年度は,I-131標識mAb15高線量投与群,5-FU/LV低投与量,ならび5-FU/LV高投与量群を比較した場合,I-131標識mAb15高線量投与群の肝転移の重量は,投与1週後,2週後,3週後のいずれも,5-FU/LV低投与量群らび同高投与量群に比較して,有意に少なかった.一方,5-FU/LVの低投与量群と高投与量群の比較では,肝転移の重量にに差を認めなかった.また,マウスの生存率に関しても,I-131標識mAb15高線量投与群が,5-FU/LV低投与量群ならび高投与量群に比較して良好であった.本研究では大腸癌の補助療法としてのI-131/mAb H-15投与の有用性が証明できた.放射性同位元素を標識したmAbを大腸癌切除後の補助療法として臨床応用を行う前には,最も効果が期待できるmAbと放射性同位元素の組合せを明らかにする前臨床試験が必要と考える.今後,最適のmAbと放射性同位元素の組合せを明らかになり,臨床応用されることが期待される.【目的】平成12年度はヒト大腸癌微小肝転移モデルと用いて、I-131をラベルしたH-15を投与群と無治療群を設定し、動物の生存ならびに転移の程度を指標に、補助療法としての有用性を検討した。【方法】(1)MAb:HT-29LMM株に特異的なmAb H-15を用いた。MAb H-15は米国Memorial Sloan-Kettering Cancer Centerより供与を受けたマウスIgG1クラスに属するmAbで、細胞表面糖蛋白(200kd)に反応する。MAb H-15はchloramine-T法でI-131を標識した。(2)投与法:生後34週のBALB/c雌ヌードマウス(マウス)を用いた。脾臓内移植1週間後に、1μg/100μCiのI-125を標識したmAbH-15(0.5ml)を静脈内に注入する群(低線量投与群:n=60)と、1μg/500μCiのI-125を標識したmAbH-15(0.5ml)を静脈内に注入する群(高線量投与群:n=60)を設定した。また無治療群(n=60)も設定した。