hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
シリアに発生するジャガイモYウイルスに変異の多様性とその発生メカニズム

研究目的は、これまでの研究でシリアのジャガイモのウイルス病ではジャガイモYウイルス(PVY)が最重要病原であることが明らかとなっているので、研究対象をPVYに絞り込み、まず、新しいリコンビナント系統であるPVY^<SYR>のシリアでの発生状況をより詳細に解析し、その特異的な検出法を確立するとともに、ジャガイモのえそ輪紋症状を引き起こすPVY^<SYR>の遺伝子部位を逆遺伝学の技法で解明することである。(1)初年度にPVYの新しい系統PVY^<NTN>とその特異的な検出法報告した。そこで本年度は、シリアと日本におけるPVY^<NTN>発生状況をより詳細に解析した。(2)次に、PVYN^<NTN>の感染性クローンの構築に成功したので、論文として投稿中である。またここまでの成果を第14回ヨーロッパジャガイモ研究連合ウイルス部門会議(EAPR2010)で口頭発表した。(3)しかしながら、PVYが世界中に分布しているにもかかわらず感染性クローンの報告が世界中でないのは、PVYの全長cDNAが大腸菌に致死的な影響を与えるためであることが本研究で判明した。(2)の感染性クローンは、それを保有する大腸菌が変異して耐性になったためと考えられた。本研究は本エンドで終了する。このようなこの一連の研究は、シリアにおけるジャガイモのウイルス病の防除法を確立するための検出法の確立という基礎的な技術を提供すると共に、ジャガイモの栽培時期を見直し、新系統出現を阻止することにより安定的なジャガイモ栽培を持続させることにつながると考えられた。(1)初年度はまず、これまでの材料とともにシリアで新たに採集したサンプルも加えて、ジャガイモでは新系統のジャガイモYウイルス(PVY)がこれまでのPVY系統のリコンビナントとして出現し、えその輪紋症状による被害を引き起こしていることを解明した。その新系統の性状を明らかにし、その名称をPVY^<NTN-NW>として投稿論文として報告した。(2)次に、この新系統PVY^<NTN-NW>と他の系統を特異的に識別・同定するためのPCR用プライマーを選抜し、最終的にマルチプレックスPCR法を確立し、やはり投稿論文として報告した。(3)さらに、えそを引き起こすウイルス遺伝子を塩基配列のレベルまで解明し、最後に系統間で遺伝子を組換えてリコンビナントが生じる条件を解明することを目的として、まずPVY^<NTN-NW>の感染性クローンの構築をめざした。これまで世界中で、PVYの感染性クローン構築の成功例は1報告しかなく、今回の研究では困難を極めたが、最終的に感染性全長cDNAクローンの構築に成功し、タバコおよびジャガイモでえそ症状が再現された。
理論計算によりオリゴ糖の立体配座解析とそれに基づく作用機構の解明及び合成法の開発

本研究では、植物防御機構上重要なファイトアレキシン合成のエリシタ-作用を有するHexaーβーDーglucopyranoーsylーDーglucitol(1)の活性発現の動的機構及び特異な抗腫瘍活性から注目を集めているネオカルチノスタチン(NCS)ークロモフォア(2)のアミノ糖の役割を分子レベルで解明することを目的として,平成2年度は以下の事項について検討した。<分子力場計算を用いたオリゴ糖の立体配座解析>___ー:自由度の大きいオリゴ糖の立体配座解析にモンテカルロ法を応用し、MM2力場を用いて構造最適化を行った。その結果、MM2力場がExoーAnomeric効果を再現し、3、6ー、4、6ートリーβグリコシドでは高度な水素結合のネットワ-クが形成していることが確かめられた。<パラジウム触媒を活用したオリゴ糖の合成>___ー:分岐糖合成の新手法として、グリコシル化の位置選択性をスペ-サ-分子で制御する分子内グリコシル化の検討を行っている。この鍵となるスペ-サ-分子の導入をパラジウム触媒を用いたカルボニル化で達成することができた。また、Allyloxycarbonyl基がグルコ-ス2位あるいは6位の水酸基に位置選択的に導入できること、パラジウム触媒存在下、ぎ酸を用いた還元反応により官能基選択的に脱保護できることを見いだした。<NCSーアミノ糖の分子認識機構の解明>___ー:NCSクロモフォアの分子認識機構の解明には、不安定なNCS骨格に対するアミノ糖、ナフトエ-ト基の導入が不可欠である。本年度は、これらの導入に必要な水酸基を有する12員環エ-テル3__ーの合成ル-トを確立した。今後、種々の糖の導入法について検討を行う予定である。
B型肝炎ウイルスの感染許容能に関わる宿主因子の同定と機能解析

トランスクリプトーム解析によりB型肝炎ウイルス(HBV)感染許容性/非許容性細胞で遺伝子発現プロファイルの異なる宿主因子を選抜し、HBV感染許容性細胞で発現の高い宿主因子を選抜した。さらにこれらの因子に対するsiRNAを用いてHBV感染感受性を制御する宿主因子をスクリーニングした結果、HBV吸着/侵入/核移行に影響を与える因子を同定した。これらの因子に関してHBV吸着過程への影響をpreS1-probeを用いて評価した結果1つの因子をノックダウンした細胞でHBV吸着過程が阻害されることが示され、またHBV感染受容体NTCPの胆汁酸トランスポーター活性も阻害されることが示唆された。また1つの因子をノックダウンした細胞ではHBV吸着過程およびNTCPトランスポーター活性は阻害されないことが示された。HBV吸着過程に影響を与えた因子に関してさらにその制御メカニズムを解析した結果、この因子をノックダウンした細胞では細胞表面のNTCP量、細胞内のNTCPタンパク質量およびmRNA量が減少していることが示され、この因子はNTCPを発現レベルで制御することが示唆された。またHBVの吸着およびNTCP活性に影響を与えなかった因子に関してその制御メカニズムを解析した結果、この因子をノックダウンした細胞ではNTCPの総タンパク質量に変化はないが細胞膜上のタンパク質量が増加していた。またこの因子をノックダウンした細胞ではHBVの細胞内への侵入過程が阻害され、HBVと共に観察されるNTCPの内在化も阻害されることが示された。同様の現象はエンドソームと細胞膜間のタンパク質輸送を制御する因子をノックダウンした場合にも観察されたため、同定した因子はNTCPの細胞膜ー細胞質間の輸送を制御に関与することが示唆された。これまでにB型肝炎ウイルス(HBV)感染許容性/非許容性細胞を用いてトランスクリプトーム解析し、HBV感染許容性HepG2-hNTCP-C4細胞で発現の高い23因子を同定した。siRNAを用いたHBV感染実験から、これらのうち4因子がHBV感染感受性を低下させることを見出している。今回はこれらのうち2因について、1) HBV生活環のどのステップを阻害するのか、2)HBV感染受容体NTCPの局在や発現量に影響を与えるかに関して主に解析した。1)HBV生活環の吸着過程を評価するため、HBVエンベロープタンパク質の一部を蛍光標識したペプチドを用いて検討した。また、侵入以降から核輸送過程について、D型肝炎ウイルス(HDV)を用いて検討した。1つの因子についてsiRNAを用いての内在性発現を低下することでHBVの吸着、HDV感染の低下が観察されたことから、この因子はHBV生活環の吸着過程に関与することが示唆された。もう一方の因子の内在性発現を低下することでHDV感染は低下するがHBVの吸着低下は観察されなかったことから、この因子はHBV生活環の侵入以降から核輸送過程に関与することが示唆された。2)前者の因子の内在性発現を低下することで細胞膜に局在するNTCP、NTCPタンパク質発現量の低下が観察された。NTCP mRNA量には影響しないことが示唆されたため、この因子はNTCPタンパク質分解制御に関与することが示唆された。また、後者の因子の内在性発現を低下することでNTCPタンパク質発現量、NTCP mRNA量の低下は観察されなかったが、細胞膜に局在するNTCPの増加、およびウェスタンブロットにおけるNTCPの移動度の変化が観察されたことから、この因子はNTCP局在および翻訳後修飾に関与することが示唆された。今回の結果よりHBV感染許容性を規定する4因子を同定した。これまでHBVの感染許容性を規定する宿主因子およびHBVのNTCP吸着後のイベントを制御するメカニズムに関しては多くが明らかになっていない。またNTCPの局在・翻訳後修飾を制御する因子やメカニズムについてもほとんど明らかになっていないが、今回の結果より2因子がNTCPの局在・翻訳後修飾、タンパク質分解制御に関与する因子であることが示唆された。これらのメカニズムを解明するために有用な知見である。本研究結果に関する論文作成に必要な結果は近々全て得られると期待できる。また、HBVの侵入から核輸送過程を標的としHBV感染を阻害するcilnidipineは、HBVの膜と細胞の膜成分との融合には影響しないという結果を得ており、侵入過程を標的とする新しいメカニズムを有するHBV侵入阻害剤であることが示唆された。本研究結果に関する論文作成に必要な結果も近々全て得られると期待できる。従って本研究は当初の予定通りに進行している。siRNAを用いたHBV吸着/侵入/核移行を制御する宿主因子のスクリーニングの結果、4因子が再現よくHBV感染を阻害した。これら4因子に関してHBV吸着過程への影響をpreS1-probeを用いて評価した結果2つの因子をノックダウンした細胞でHBV吸着過程が阻害されることが示され、またNTCP胆汁酸トランスポーター活性も阻害されることが示唆された。残りの2因子をノックダウンした細胞ではHBV吸着過程およびNTCPトランスポーター活性は阻害されないことが示唆された。

HBV吸着過程およびNTCPトランスポーター活性に影響を与えた2つの因子のうち1因子に関してNTCP発現量への影響を解析した結果、この因子をノックダウンした細胞では細胞表面のNTCP量、細胞内のNTCPタンパク質量およびmRNA量が減少していることが示され、この因子はNTCPを発現レベルで制御すること尾が示唆された。もう一方の因子をノックダウンでは細胞表面のNTCP量は減少するが細胞内NTCP量には影響をあたえないことが示され、この因子はNTCPの膜局在あるいは分解を制御することが示唆された。また、ノックダウン細胞においてHBV吸着過程およびNTCPトランスポーター活性を阻害しなかった2因子の1つは、細胞表面NTCP局在量の上昇を認めたが、細胞内NTCPタンパク質量およびmRNA量には影響はなかった。この因子をノックダウンした細胞ではHBVの細胞内への侵入、およびHDV感染の低下が認められ、NTCPの細胞膜局在を制御しHBVの細胞内への輸送を制御することが示唆された。これまでHBVの感染許容性を規定する宿主因子およびHBVのNTCP吸着後のイベントを制御するメカニズムに関しては多くが明らかになっていない。またNTCPの局在・翻訳後修飾を制御する因子やメカニズムについてもほとんど明らかになっていない。本研究で同定した2因子がNTCPの局在およびタンパク質分解制御に関与する因子であることが示唆された。今後これらの因子に関与するメカニズムを解析することにより、NTCPの制御メカニズムを解明できると考えられる。本研究結果に関する論文作成に必要な結果は近々全て得られると期待できる。また、HBVの侵入から核輸送過程を標的としHBV感染を阻害するcilnidipineは、侵入過程を標的とする新しいメカニズムを有するHBV侵入阻害剤であることが示唆された。本研究結果に関する論文作成に必要な結果も近々全て得られると期待できる。本研究は当初の予定より遅れているが、本年度中にまとめることができると考える。トランスクリプトーム解析によりB型肝炎ウイルス(HBV)感染許容性/非許容性細胞で遺伝子発現プロファイルの異なる宿主因子を選抜し、HBV感染許容性細胞で発現の高い宿主因子を選抜した。さらにこれらの因子に対するsiRNAを用いてHBV感染感受性を制御する宿主因子をスクリーニングした結果、HBV吸着/侵入/核移行に影響を与える因子を同定した。これらの因子に関してHBV吸着過程への影響をpreS1-probeを用いて評価した結果1つの因子をノックダウンした細胞でHBV吸着過程が阻害されることが示され、またHBV感染受容体NTCPの胆汁酸トランスポーター活性も阻害されることが示唆された。また1つの因子をノックダウンした細胞ではHBV吸着過程およびNTCPトランスポーター活性は阻害されないことが示された。HBV吸着過程に影響を与えた因子に関してさらにその制御メカニズムを解析した結果、この因子をノックダウンした細胞では細胞表面のNTCP量、細胞内のNTCPタンパク質量およびmRNA量が減少していることが示され、この因子はNTCPを発現レベルで制御することが示唆された。
新たな焼死体の生活反応のマーカーの検討:血中高熱分解産物のGC-MSによる分析

火災で発生する熱分解物すなわち煙成分を焼死体の血液から証明する研究をした。方法としては、固相マイクロ抽出を使って揮発性成分を抽出し、低温濃縮ガスクロマトグラフィー質量分析法を使った。この方法により、熱分解産物であるフェニルアセチレン、スチレン、インデン、ナフタレンが熱傷を伴う焼死体の血液から検出されることがわかった。すなわち、この分析において、焼死体の血液から火災で発生した煙成分を証明することができる。煙成分の検出は火災発生時において焼死体が生存していた証拠になる。火災現場等で発見される焼死体が火災発生時に生存していたか、すなわち呼吸をしていたかを、火災発生時の高熱で物体が熱分解され発生する揮発性成分を血液から検出することで証明することが、本研究の目的である。その研究目的を達成するため、1.血液中揮発性成分のガスクロマトグラフィー・質量分析(GC/MS)法の確立、2.剖検例での血液中成分の分析による熱分解物の検索、3.熱分解物の由来の考察を行う。平成21年度はイ.焼死体の血液から揮発性成分を分析するGC/MS法の条件の確立、ロ.対象となる熱分解物の検索を行った。当初計画していた物質の熱分解物発生の実験は、器具の材質の選択などで、装置を準備するところまでになった。【研究の経過】イ.GC/MS法の条件の検討:試料の処理として、気化平衡法固相マイクロ抽出を利用することにした。試料の均一化のため、アルカリ水で処理する方法を新しく採用した。GC/MS測定の条件としては、低温オーブン濃縮を効率良く行うため、カラムに短いガードカラムを付けた。結果として、ピーク幅が狭くなり、検出感度が安定した。ロ.イの測定条件で検出できる熱分解物は、フェニルアセチレン、スチレン、インダン、ナフタレン、メチルナフタレンであった。しかし、ナフタレンは石油成分中に含まれており、石油関連焼死体ではその検出は参考にはなるが、有用ではないことがわかった。当初の計画にはなかったが、尿、末梢血中の分析を行い、結果を比較することで、発生した熱分解物を確認できる可能性がある知見を得た。火災現場等で発見される焼死体が火災発生時に生存していたか、すなわち呼吸をしていたかを、火災発生時の高熱で物体が熱分解され発生する揮発性成分を焼死体の血液からガスクロマトグラフィー・質量分析法による分析で証明することが、本研究の目的である。その目的を達成するため、平成21年度に確立している血中の揮発性炭化水素の分析法により実務分析、また、有機溶媒抽出法を開発し、その方法により、実務試料中の揮発性炭化水素以外の分析を行い、焼死体の生活反応マーカー候補となる熱分解産物を探索した。実務分析に当たって、法医病理所見を参考にした。1.揮発性炭化水素の分析:この分析では、主に助燃剤になる石油成分とカーペットなどの石油製品から熱分解で発生するフェニルアセチレン、スチレン、インデン、ナフタレンが検出された。法医病理で焼死の生活反応の特徴の所見が得られたものでは、ほとんどの剖検試料からフェニルアセチレン、スチレン、インデン、ナフタレンが検出された。しかし、法医病理では焼死の生活反応が認められない一例から、石油成分と熱分解産物が検出された。露出した部分から、これらの炭化水素が浸入することが示唆され、化学分析を評価するのに、法医病理所見が重要であることがわかり、これまで、石油成分が死体血から検出されれば、火災発生時に生存していたとされていた事に注意を与える所見が得られた。2.有機溶媒抽出を開発し、揮発性炭化水素以外の分析を検討した。実務分析した中に、上記の炭化水素が検出されなかった例で、ポリアクリロニトリルの熱分解産物と思われるニトリル誘導体を検出することができ、法医病理所見を補うことができた事例があった。1,2の結果から、揮発性炭化水素とニトリル誘導体の検出が、法医病理所見と一致すれば、焼死体の生活反応を示す有用なマーカーになることが予想される。平成23年度は、このことを明らかにする研究を行う。生前に火災に巻き込まれ死亡したのか(焼死体)、死後に焼却されたのかの鑑別診断をすることは極めて重要である。火災などの高熱下で発生する熱分解物を血液から証明することで、その鑑別診断ができると考え、本研究の着想に至った。ガスクロマトグラフィー質量分析法(GC-MS)を使い、焼死体血液中の熱分解物を検索し、前年度までにフェニルアセチレン、スチレン、インデン、ナフタレンとニトリル誘導体が高熱で発生する物質であろうと推定できた。平成23年度の目的は、実務試料の分析から、これらの化学物質が、焼死体の生活反応の新しいマーカーになり得るかを検討した。

●低温気化平衡・固相マイクロ抽出、低温オーブン濃縮GC-MSによりフェニルアセチレン、スチレン、インデン、ナフタレンの分析を行った。(揮発性分析)●有機溶媒抽出、通常の条件のGC-MSにより、ニトリル誘導体の分析を行った。結果●肉眼的に熱傷が確認できる焼死体中の血液からは、ほとんどの例で、スチレン、インデンが検出された。●ニトリル誘導体については、明確にできたのが1例のみであった。簡素な熱発生装置(器具)を作製して、石油系樹脂の熱分解物を確認する計画(初年度)であったが、十分な高温が得られず、実験的確認はできなかった。しかし、熱分解の専門分野における文献から、上記化合物が高熱の作用で発生することがわかり、本分析の妥当性が裏付けられた。ナフタレンは、石油系燃料にも含まれているので、ナフタレンのみの検出では、判定できないことがわかった。ニトリル誘導体は検出頻度が少ないので、その検出を実務的に行うには無理があると判断した。したがって、揮発性分析の実用性が高いことがわかったので、その実用化を検討している。
「視線」の哲学

他者との関係性を語る観点として、サルトルの「視線」とレヴィナスの「顔」は一見するとよく似た着眼であるように見える。しかしながら、これらは重要な点で異なっている。サルトルの「視線」の論理によっては他者との倫理的な関係性を語ることができないと考えられるからである。そこで、「視線」の論理では語ることのできないものが「顔」の論理によって語られているという解釈をもとに、レヴィナスの難解な倫理思想を読み解くという読解の方針がえられる。この方針にそってレヴィナスの読解を試みた。この読解が目指しているのは、レヴィナスのいう倫理的なものとは何かという問いかけに回答することである。ただし、この問いかけに対してストレートな回答をえることはおそらく不可能である。少なくとも今回の考察はそこまで達していない。むしろ、サルトルとの対比をとおしてレヴィナスの倫理思想の特色を鮮明に認識し、読解の方向づけを行なうというところまでが今回の考察の範囲である。その結果を以下に要約する。1サルトルの「視線」の論理に欠けているものは他者の抵抗という局面である。他者の抵抗とは私が自己の暴力性を自覚し、それを抑制することを学びとるほとんど唯一の契機であると考えられる。2レヴィナスのいう倫理的なものを構成する第一段階は暴力性そのものの自己否定にある。3この段階を踏まえ、第二段階として他者を「迎え入れる」という段階がある。4この段階は私が私の世界を他者に明け渡すという形で遂行されるものである。これは極論すれば私の世界の否定であり、さらにいえば私の存在が私にとって自明であるという信念の否定である。だからこそ、私が何者であるかを知るためにも他者を「迎え入れる」ことが必要なのだ。5その結果として「共感」にもとづかない世界が構想されるというのが最後に提案される。対象の知覚および模倣に関する近年の実証的研究成果は、三項関係を人間の認知活動の基本的な構造として認めるという点で共通している。したがって、次の点が課題となる。(1)この構造を存在論的な角度から考察し、一般モデルを構築すること。(2)このモデルを使って他の認知現象を解明する論理を構築すること。その際、参照すべき哲学はサルトル(Jean-Paul Sartre:1905-1980)の哲学である。この研究課題を追求する手始めとして、研究代表者のこれまでの研究を発展させるという手法を採用し、「ミラーニューロン」を存在論的な視点から考察することにした。「ミラーニューロン」が活性化するのは三項関係においてである。サルトルの『弁証法的理性批判』における「集列性」の概念を使ってモデル化をおこなった。上記(1)を部分的に構築し、次年度へつなげる。その具体的な内容は以下の通りである。ガレーゼは、「ミラーニューロン」が自己と他者のあいだに「共鳴」を作り出すことによって、他者の意図することが身体的なシミュレーションによって感得されるという考えを提案し、それを「身体化されたシミュレーション(embodied simulation)」と名付けた。このアイデアによって、古典的な他我認識のアポリアを乗越えようとした。しかし、「ミラーニューロン」の活動が生み出しているのは、人間が匿名性のなかで誰でもない存在として存在するという社会的存在様態であろう。つまりサルトルのいうように、自分が自分にとってさえ「他」であるという存在様態である。自分にとって「他」であるということは、もともと自分の外からきた行為が自分のなかに生み出されているということである。それが事実であるとすれば、それを可能にしている機構がなければならない。「ミラーニューロン」がその機構であると考えることができる。三項関係にかんする実証科学の研究成果を哲学的な概念を駆使してモデル化するという作業を、ミラーニューロンにかんする実証研究を対象にしておこなった。その試みは学会で発表された。従来のミラーニューロンの哲学的解釈に対する批判をおこない、かつ対案を提示することが発表の趣旨である。「シミュレーション」とは私が他者になったふりをして他者の意図を理解するという意味であり、自己と他者を区別した上で成り立つ操作である。ところが、「ミラーニューロン」の「共鳴」は他者のふりではなく、自己と他者の人称的な区別なしに生じる過程にほかならない。これは「シミュレーション」とはいえない。ガレーゼは「身体化されたシミュレーション」といっているが、身体化されていようがいまいが、この過程は「シミュレーション」ではありえないことは明白である。したがって、「ミラーニューロン」によって可能になっているのが「マインドリーディング」による相互理解であるという解釈は成立しない。この解釈で問題になっているのは、「ミラーニューロン」のはたらきを二項関係においてではなく三項関係においてとらえ直すことにある。「シミュレーション」解釈は二項関係のなかで「ミラーニューロン」を理解しており、その点で批判されなければならないと考えられる。質疑においては、このような哲学的な解釈の実証科学へのフィードバックがどのようなものなのかについて質問があった。重要な論点であるが、今回は十分な回答をすることができなかった。この点は、さらに基本的なレベルで三項関係のモデルを構築した上であらためて検討すべき論点である。この点を含め、今回は主題的に検討しなかった「視線」を中心にした探求が必要となる。その研究成果は次年度学会発表を予定している。

(一)日本哲学会第76回大会(一橋大学、2017年5月20日)において「視線の哲学:知覚の理論としてのサルトルの他者論」を口頭発表した。「対象」知覚においては他者の「視線」が重要な役割を果たしているという着眼にもとづいて、サルトルの「視線」の理論を「対象」知覚のモデルとして再解釈した。三項関係における他者の視線の効果を考察した。「私」の存在を事物との癒合関係から切り離し、「対象」として設定するという効果が見出された。この問題点を明確にした点にこの研究の意義が認められる。「視線の哲学」の研究の目的は、(1)自己=他者=対象という三項関係を存在論的な角度から考察し一般モデルを構築することおよび(2)このモデルを使って他の認知現象を解明する論理を構築することである。今回の発表によって(1)について見通しをえることができた。すなわち、三項関係を存在論的に問い直す際に、知覚論を考慮しなければならないという点である。(二)西日本哲学会第68回大会(福岡大学、2017年12月2日)において「視線と顔:サルトルをとおしてレヴィナスを読み直す」を口頭発表。サルトルの「視線」の論理とレヴィナスの「顔」の論理を比較し、三項関係の存在論に含まれる倫理的問題点を検討した。サルトルの「視線」の論理が倫理を語ることができないという点に注目し、その理由を存在論的な次元で明らかにした。三項関係のモデルの説明力は倫理的な関係性の理解にまで波及するという点を示した。この発表内容は上記の「視線の哲学」の研究の目的(2)に関連する。今年度の研究計画のひとつは、サルトル・モデルを軸にして、伝統的な哲学を批判的に検討し、三項関係を本質的なものとする哲学的論理を構築することである。伝統的な哲学として検討されるのは、デカルト(Descartes)、ライプニッツ(Leibniz)、ヒューム(Hume)、カント(Kant)の諸説である。デカルトおよびライプニッツの哲学においては、知覚者=対象=神という三項関係が認められる。ところが、ヒュームおよびカントの哲学においては、神をという項が欠けているため、明らかに二項関係の認知モデルが採用されている。とくにカントの知覚論を三項関係に書き直すことが重要である。「視線の哲学:知覚の理論としてのサルトルの他者論」ではこの点が示されている。自我と事物の癒合状態を解消するのは他者の「視線」にほかならない。ところが、「デフォルト・ネットワーク」に関する神経科学の実証研究を援用すると、他者から「見られている」という認知は外的な刺激に依存しない自己言及的な認知過程であると考えられる。三項関係とは自己=事物=他者のあいだの外在的関係ではなく認知に内在する関係性である。ということは、「対象」は内的な認知過程の結果として成立すると考えられる。哲学的には観念論的な認知過程である。カントに代表される従来の哲学的観念論は独我論と結びついてきたが、観念論はむしろ他者の存在を含むものであることがこの研究によって示された。他者との関係性を語る観点として、サルトルの「視線」とレヴィナスの「顔」は一見するとよく似た着眼であるように見える。
食事由来フラボノイドが有する機能性の次世代伝承性

野菜や果物などの植物性食品に含まれているフラボノイドを日常的に摂取することが,肥満や糖尿病などの生活習慣病の予防につながる可能性が報告されている。本研究では,母体のフラボノイド摂取が胎児・乳児体内の生理機能に与える作用を解析し,この時に受けた変化による発達期の糖や脂質などの代謝系および行動に対する影響と,肥満や糖尿病などの疾患リスクとの関連を明らかにすることを目的に研究を推進している。これまでの研究において,代表的なフラボノイドの一つであるケルセチンを被験物質として用い,・妊娠期間中にケルセチンを摂取した母マウスから生まれた次世代マウスの体重増加量は,コントロール食を食べた母体から生まれたマウスと比べて抑制される。・出産後の母マウスの血中脂質量は低下する。乳児マウスの血中脂質量についても同様の傾向を示す。・測定した9種類の血中サイトカイン類の中では,IL-1αのみが,ケルセチンを摂取した母マウスより生まれた乳児マウスにおいて顕著な低下傾向を示す。などの成果を得ている。平成30年度は,昨年度まで用いたC57BL/6マウスとは異なる系統(ICRマウス)でも同様の変化を示す結果を得た。また,母体と乳児を比較すると,血中のトリグリセリドが高値,グルコースが低値を示すことから,胎児や乳児にとってはグルコースよりもむしろトリグリセリドが生命を維持するために重要である可能性があること,ケルセチン摂取により,母体の血中トリグリセリドは顕著に低下するが,その効果は母体から胎児に伝わるが,その効果は弱まることを見出した。さらに,摂取したケルセチンが成体内に吸収さえていることを示した。以上の結果より,母マウスが摂取したケルセチンの作用が次世代に伝わる可能性が示唆されたが,今後,より詳細な研究が必要である。本研究課題の最終目的である「母体が摂取したフラボノイドの機能性が次世代に与える影響」の解明へ繋がる成果の一つとして,代表的なフラボノイドの一つであるケルセチンを母体が摂取することが次世代マウスへ影響を与えることを見出すとともに,現在,その意義に踏み込んだ研究に突入している。本課題最終年度である令和1年度は,(1)脂質代謝への影響がみられそうであることから,脂質代謝への影響に特化した研究を推進する。具体的には,高脂肪食を摂取させた場合の影響を追跡する。(2)成長に伴った継時的な生体影響評価:母子間移行するフラボノイド画分を含んだ食餌を摂取した母体から出生した子どもに,発達とともに表現してくる変化を解析する。具体的には,離乳したマウスを,通常の精製食あるいは母体が摂取したフラボノイド画分を含んだ食餌を継続的に摂取させ,継時的にサンプリングをおこない,肝臓を試料として脂質・糖質代謝系に及ぼす影響をリアルタイムPCR等を用いて評価する。(3)これまで得た成果を集約するとともに,今後の展開に向けた取り組みを開始する。野菜や果物などの植物性食品には,ポリフェノールの一種であるフラボノイドが豊富に含まれている。近年の研究において,ある種のフラボノイドを日常的に摂取することが,肥満や糖尿病などの生活習慣病の予防につながる可能性が報告されている。一方,母体が摂取したフラボノイドが微量ではあるが母子間移行するにもかかわらず、母子間移行したフラボノイドが、胎児・乳児の生理機能に与える変化と、成長に伴って表現してくる肥満などの症状への影響とを結び付けた研究は皆無である。本研究では、母体のフラボノイド摂取が胎児・乳児体内の生理機能に与える作用を解析し、この時に受けた変化による発達期の糖や脂質などの代謝系および行動に対する影響と、肥満や糖尿病などの疾患リスクとの関連を明らかにすることを目的に研究を推進している。平成28年度は,代表的なフラボノイドの一つであるケルセチンを被験物質として用い,以下の成果を得た。1.ケルセチンを含む食餌を妊娠母体に与えた。出産後はケルセチンを含まないコントロール食を与え成長を追跡したところ,妊娠期間中にケルセチンを摂取した母マウスから生まれた次世代マウスの体重増加量は,コントロール食を食べた母体から生まれたマウスと比べて抑制された。一方,両群間で摂食量には差異は見られなかった。2.次世代マウスの解剖時の血液生化学検査の結果,ケルセチン摂取群の血中脂質量は予想に反して,コントロール食摂取群と比較して上昇した。本研究課題の最終目的である「母体が摂取したフラボノイドの機能性が次世代に与える影響」の解明へ繋がる成果の一つとして,代表的なフラボノイドの一つであるケルセチンを母体が摂取することが次世代マウスへ影響を与えることを見出している。一方,体重の変動と血液生化学指標の動きが同調しないとの結果であったため,早急に再現性をとる試験を実施する必要がある。近年の研究において,ある種のフラボノイトドを日常的に摂取することが,肥満や糖尿病などの生活習慣病の予防につながる可能性が報告されている。一方,母体が摂取したフラボノイドが微量ではあるが母子間移行するにもかかわらず,母子間移行したフラボノイドが,胎児・乳児の生理機能に与える変化と,成長に伴って表現してくる肥満などの症状への影響とを結び付けた研究は皆無である。

本研究では,母体のフラボノイド摂取が胎児・乳児体内の生理機能に与える作用を解析し,この時に受けた変化による発達期の糖や脂質などの代謝系および行動に対する影響と,肥満や糖尿病などの疾患リスクとの関連を明らかにすることを目的に研究を推進している。本プロジェクトでは,これまでの研究において,代表的なフラボノイドの一つであるケルセチンを被験物質として用い,1)妊娠期間中にケルセチンを摂取した母マウスから生まれた次世代マウスの体重増加量は,コントロール食を食べた母体から生まれたマウスと比べて抑制されることを見出している。さらに平成29年度は,以下の成果を得た。2)妊娠期間中の母体がケルセチンを含有した食事を摂取しても体重に対する影響は見られない。3)出産後の母マウスの血中脂質量は低下する。乳児マウスの血中脂質量についても同様の傾向を示す。母マウスおよび乳児マウスの肝臓中トリグリセリド代謝を司っている遺伝子の発現量が上昇する。4)測定した9種類の血中サイトカイン類の中では,IL-1αのみが,ケルセチンを摂取した母マウスより生まれた乳児マウスにおいて顕著な低下傾向を示した。以上の結果より,母マウスが摂取したケルセチンの作用が次世代に伝わる可能性が示唆されたが、今後,より詳細な研究が必要である。本研究課題の最終目的である「母体が摂取したフラボノイドの機能性が次世代に与える影響」の解明へ繋がる成果の一つとして,代表的なフラボノイドの一つであるケルセチンを母体が摂取することが次世代マウスへ影響を与えることを見出している。野菜や果物などの植物性食品に含まれているフラボノイドを日常的に摂取することが,肥満や糖尿病などの生活習慣病の予防につながる可能性が報告されている。これまでの研究において,代表的なフラボノイドの一つであるケルセチンを被験物質として用い,・妊娠期間中にケルセチンを摂取した母マウスから生まれた次世代マウスの体重増加量は,コントロール食を食べた母体から生まれたマウスと比べて抑制される。・出産後の母マウスの血中脂質量は低下する。・測定した9種類の血中サイトカイン類の中では,IL-1αのみが,ケルセチンを摂取した母マウスより生まれた乳児マウスにおいて顕著な低下傾向を示す。などの成果を得ている。平成30年度は,昨年度まで用いたC57BL/6マウスとは異なる系統(ICRマウス)でも同様の変化を示す結果を得た。また,母体と乳児を比較すると,血中のトリグリセリドが高値,グルコースが低値を示すことから,胎児や乳児にとってはグルコースよりもむしろトリグリセリドが生命を維持するために重要である可能性があること,ケルセチン摂取により,母体の血中トリグリセリドは顕著に低下するが,その効果は母体から胎児に伝わるが,その効果は弱まることを見出した。さらに,摂取したケルセチンが成体内に吸収さえていることを示した。以上の結果より,母マウスが摂取したケルセチンの作用が次世代に伝わる可能性が示唆されたが,今後,より詳細な研究が必要である。
脳および膵臓における神経ペプチドPACAPの分子薬理学的機能解析

神経ペプチドPACAPは、神経伝達物質、神経栄養因子として種々の生理機能に関与すると予測されている。本研究は、精神疾患、糖尿病の分子レベルでの病態発現におけるPACAPの関与を、遺伝子の発現変化とその機能解析により究明し、これら病態の新規創薬標的分子の同定ならびに治療薬開発に資することを目的として計画・実施し、以下の知見を得た。1.PACAP遺伝子欠損(KO)マウスの異常表現型として、概日リズムの光同調障害、海馬神経可塑性の異常、神経因性疼痛および炎症性疼痛の欠如、エタノール感受性の低下など、多岐の中枢機能変化を見出し、中枢神経機能におけるPACAPの予測外の働きを明らかにした。2.KOマウスが示す種々の異常行動が、精神興奮薬アンフェタミンで改善されること等から、PACAPとヒト注意欠陥多動症(ADHD)との関連を示し、更なる薬理学的解析から、本病態の治療効果に5-HT_<IA>受容体が重要な働きを担うことを示唆した。また、PACAPとIL-6のKOマウスを用いた検討から、外因性・内因性のPACAPによる脳傷害保護作用にIL-6が大きく関与することを明らかとした。4.ベルギーとの国際共同研究により、PACAPが責任因子である初めてのヒト症例を見出し、その病態とPACAP遺伝子改変動物の解析から、内因性のPACAPが血小板活性化の抑制因子として働くことを明らかとした。本研究は、精神疾患、糖尿病の分子レベルでの病態発現におけるPACAPシグナル系の関与を、遺伝子の発現変化とその機能解析によって究明し、これら病態の新しい創薬標的分子の同定ならびに治療薬の開発に資することを目的として計画・実施し、本年度は以下の各知見を得た。1.定型抗精神病薬ハロペリドールはPACAP-KOが示す多動や異常なジャンプ行動は抑制するが、prepulse inhibition障害に対しては改善効果を示さないのに対して、非定型抗精神病薬リスペリドンは認められる全ての表現型に対して改善効果を示すことを見い出し、本マウスが種々の抗精神病薬に対して異なった感受性を示す複数の精神機能異常を呈することを明らかにした。2.PACAP受容体の遺伝子欠損マウスにおいてもPACAP-KOと同様にin vivo LTPが障害されていることを見い出した。また行動薬理学的解析からPACAP-KOでは海馬が関係する記憶・学習機能が障害されており、特に記憶の保持に大きな障害が認められることを明らかにした。3.PACAP-KOではNMDAによるアロディニア(異疼痛)の発現が完全に消失する一方AMPAによる発現は不変であったことから、PACAPがNMDA型グルタミン酸受容体の機能修飾を介して慢性疼痛の発現制御に関する可能性を示した。また神経性疼痛モデルの脊髄でPACAPが著しく誘導されることを見い出した。4.トリメチルスズによる海馬歯状回障害モデルにおいて、神経細胞新生が始まる時期に先立って一過性のPACAP発現増加が惹起されることを見い出し、歯状回神経新生へのPACAPの寄与を示唆した。5.糖尿病モデルマウスKKAyとPACAP過剰発現マウス(PACAP-Tg)との交雑実験において、糖尿病発症に伴う膵島の過形成がPACAP過剰発現によって抑制されることを見い出し、PACAPが膵島β細胞の増殖を両方向性に調節しうる可能性を示した。本研究は、精神疾患、糖尿病の分子レベルでの病態発現におけるPACAPシグナル系の関与を、遺伝子の発現変化とその機能解析によって究明し、これら病態の新しい創薬標的分子の同定ならびに治療薬の開発に資することを目的として計画・実施した。本年度は、初年度に同定した遺伝子改変動物の異常表現型について分子薬理学的解析を行い、それらの発現メカニズムの一部を解明した。1.精神刺激薬であるアンフェタミンが、PACAP遺伝子欠損マウス(PACAP-KO)の示す多動性や注意力障吉を逆脱的に改善することを見出した。一方、アンフェタミン投与による前頭皮質のドパミン・セロトニン遊離の促進作用については、本マウスで異常を認めなかった。2.PACAPの急性脳室内投与によって、PACAP-KOの記憶障害は改善されるのに対し、ジャンプなどの精神行動異常はほとんど影響を受けないことを見出した。

本成績によりPACAPの高次脳機能への関与が、前者ではリアルタイムで、後者では発達過程で及ぼされることを示唆した。4.PACAP-KOにおける摂食量の低下、および本表現型へのNPY神経の関与を見い出した。5.PACAP-KOと膵臓特異的PACAPトランスジェニックマウス(PACAP-Tg)との交雑ではPACAP-KOの生後早期の致死性がレスキューされないことを明らかとし、本マウスの致死性が中枢組織におけるPACAP欠損によってもたらされる可能性を示した。6.PACAP-Tgと糖尿病モデルマウスKKAyとの交雑で得られたマウスから膵臓切片を作製し、膵β細胞特異的に回収したRNAを用いてマイクロアレイ解析を行った。Ayアレルの導入、あるいはAyおよびPACAPトランスジーン両方の導入により、それぞれ特異的に発現増加する遺伝子群を同定した。本研究は、精神疾患、糖尿病の分子レベルでの病態発現における神経ペプチドPACAPの関与を、遺伝子の発現変化とその機能解析により究明し、これら病態の新規則薬標的分子の同定ならびに治療薬開発に資することを目的として計画・実施した。本年度は、各種遺伝子改変動物の異常表現型の発現メカニズム解明を進めると共に、2年時に同定したPACAPシグナルの主要介在分子の機能解析を行なった。1.精神興奮薬のアンフエタミンが、PACAP遺伝子欠損マウスの多動、新奇探索傾向、異常ジャンプ行動、プレパルス抑制(PPI)の障害を改善すること、これらの作用がセロトニン5-HT_<1A>受容体に依存することを見出し、ヒト注意欠陥多動症の薬物治療メカニズムの一端を明らかにした(J.Neurosci.,in revised)。2.上述の表現型を指標とした解析から、新たに本マウスにおける5-HT_2受容体機能異常を見出した。3.さらに、本マウスの脳神経核特異的なマイクロアレイ解析から、グルタミン酸(Glu)とPACAPにより特異的に誘導される分子群を同定し、上述の異常行動発現へのGlu-PACAPの協調作用の関与を示唆した。4.ヒト精神疾患とPACAPの一塩基多型との関連解析から、統合失調症、うつ病との有意な関連を認めた。5.PACAPおよびIL-6の遺伝子欠損マウスを用いた検討から、外因性および内因性のPACAP-IL-6シグナルの活性化が脳虚血障害に対して保護的に働く直接的証拠を得た(PNAS,in press)。7.同解析で同定した機能未知遺伝子が、細胞増殖に対し促進的に働くことを明らかにした。以上より、脳および膵臓におけるPACAPの生理・病態的な重要性、PACAPシグナルの主要介在分子(5-HT)の存在を明らかにすることに成功し、統合失調症やうつ病、注意欠陥多動症などのヒト精神疾患の病態発現や薬物治療効果とPACAPとの関連を強く示唆することができた。
チューブリン・微小管結合蛋白質相互作用を阻害する低分子化合物の解析

Tauの微小管結合ドメインは3つ、または4つのリピート構造(R1R4)と、そのN末側に2つ、C末側に1つのproline-rich dmain(P1,P2,P')から形成されており、R1R4でチューブリンと結合すると考えられている。微小管と微小管結合蛋白質との相互作用に影響を与える小分子化合物の作用を解析するため、昨年度に引き続き、解析に必要なTauの微小管結合ドメインの大腸菌発現系の構築・精製を行うとともに、各ドメインのチューブリン重合能と結合能の解析を行った。昨年度は各ドメインをGST融合蛋白質として発現・精製を行った。しかしながらGST融合蛋白質ではGST領域に依存した二量体化活性がチューブリン重合活性及び結合に正に寄与する可能性が考えられる。そこで新たにネイティブな配列のみを精製可能なeXactタグを用いた発現・精製系に切り替え、検討を行った。精製したP1,P2,R1,P'の各ドメイン、及びP1P'のチューブリン重合能・結合能を検討したところ、P1P'の連続したドメイン領域は両活性を示したが、単独のドメインではいずれの活性も確認出来なかった。したがって単独のドメインのみでは結合が無いあるいは極めて弱いと考えられる。一方tauと微小管相互作用を阻害する小分子化合物tryprostatin A(TPS-A)を用いて解析を行ったが、生産菌から新たに精製したTPS-A、及びその類縁体では活性が認められなカった。今後はTPS-Aの代わりに同様の活性が報告されているBis-ANSを用いて引き続き検討を行う予定である。微小管と微小管結合蛋白質との相互作用に影響を与える小分子化合物の作用を解析するため、本年度は解析に必要なチューブリン精製、Tauの微小管結合ドメインの大腸菌発現系の構築・精製を行うとともに、チューブリンとTau微小管結合ドメインとの結合解析を行った。チューブリンの精製は、定法に従い、豚脳からHigh-molarity bufferを用いて精製した(純度>98%)。Tauの微小管結合ドメインは3つ、または4つのリピート構造(R1R4)と、そのN末側に2つ、C末側に1つのproline-rich domain(P1,P2,P')から形成されており、R1R4でチューブリンと結合すると考えられている。本研究では微小管と微小管結合ドメインとの結合を単純化するため、まず一つのリピートドメインのみでチューブリンと結合するか否かの検討を行った。P1,P1/P2,P1/P2/R1,P1/P2/R1R4,P1/P2/RlR4/P',R1,R1R4,R1R4/P',P'の各ドメインをGST融合蛋白質として発現・精製し、チューブリンとの結合を検討した。その結果、リピートドメインを含まないP1,P2,P1/P2ではチューブリンと結合せず、R1ドメインを含む融合蛋白質で結合が見られた。しかしP1,P2ドメインを含まない融合蛋白質は不安定で、分解産物が見られたため、安定に発現・精製できるP1/P2/R1融合蛋白質を今後の研究に用いることに決め、チューブリンとの結合パラメーターの取得を行った。
免疫担当細胞および免疫抑制剤による神経栄養因子産生を介する脊髄損傷修復の基礎研究

免疫抑制剤には本来の免疫抑制作用のほかに神経栄養効果が報告されてきた。本研究によってシクロスポリンAやタクロリムスが脳由来神経栄養因子(BDNF)やグリア細胞株由来神経栄養因子(GDNF)の産生を促進しこれを介して神経栄養を発揮することを明かにした。しかし神経保護作用を期待するとき免疫抑制作用は生体に不利益をもたらす恐れがある。そこで本年度は免疫抑制作用をもたないイムノフィリンリガンドリガンドの探索と薬効判定を試みた。タクロリムスがイムノフィリン(FKBP12)に結合する構造に注目し、これと類似した構造を持つLeu-Ileジペプチドとその類縁物質「A」について検討した。両物質は神経栄養因子の産生を促進し、培養下で神経細胞死を抑制すること、さらに培養脾臓細胞によるインターロイキン2の産生を抑制しないことを明らかにした。以上の結果よりいずれの物質も免疫抑制作用をもたない新しいイムノフィリンリガンドであると考えられたので、胸髄を半切断した脊髄損傷ラットを作製し、「A」物質を腹腔内に毎日投与した。投与開始3日目から歩行能力が回復し23日後にはほぼ損傷前のレベルにまで運動機能が回復した。無処置の脊髄損傷群も時間の経過に伴い緩やかに運動機能が上昇したが投与群より低いレベルにとどまり、16日後以降の回復は観察されなかった。以上、[A]物質は脊髄損傷の修復に有効であることが示唆された。Leu-Ileジペプチドについても現在検討中である。これらの免疫抑制作用をもたないイムノフィリンリガンドをリード化合物してさらに強力な活性物質が創製できれば、脊髄損傷をはじめとする中枢神経疾患の治療薬の開発につながるものと期待される。モータリゼーションの発達により交通事故の犠牲者は増加の一途をたどっている。特に脊髄にダメージを受けた場合は4肢の自由を失い、当事者のみでなく家族やまわりの者の生活を破壊してしまう。21世紀を迎え、質の高い生活を送れる生活を提供することが我々医学・薬学研究者の責務といっても過言ではない。しかし、脊髄にダメージを受けた患者に対しては奏功を持つ治療法が全くないのが現状である。そこで本研究では、神経細胞死に対して保護効果を持つことが報告されている神経栄養因子を脊随障害に対して応用できないか試みた。グリア細胞株由来神経栄養因子(glialcell line derivedneurotrophic factor; GDNF)や脳由来神経栄養因子のような神経栄養因子が脊髄の障害に対して保護的に働くことが動物実験レベルでは明らかである。しかし、このような神経栄養因子は高分子蛋白であり血中で代謝されやすく、しかも標的部位へ到達する保証もない。そこでこのような因子の発現べクターを構築し、生体で自ら産生させることを試みた。すでに報告されているGDNFのcDNAの配列をもとに、発現ベクターを作成した。このベクターをCOS細胞等に遺伝子導入すると、GDNFが過剰に発現することを免疫染色や酵素免疫測定法で明らかにした。次にこのベクターを免疫担当細胞であるマクロファージに導入することを試みた。なぜならば、このような免疫担当細胞は生体がダメージを受けたときにその部位に集結する性質を持つことから、今までにないドラックデリバリーシステムとして応用しようと考えている。しかし、マクロファージヘの遺伝子導入はその他の株化細胞の場合と比べて各段に困難で、本年度の研究では成功していない。そこで次年度以降は、効率のよいマクロファージヘの遺伝子導入法に力点を置いて研究を進めたいと考えている。前年度は脊髄損傷モデルラットの確立およびGDNFの酵素免疫測定法(Enzyme immuno assay : EIA)の確立に成功した。また免疫抑制剤の総称であるイムノフィリンリガンドがGDNF産生促進効果をもつことを明らかとした。

今年度は脊髄損傷モデルに対するイムノフィリンリガンドの効果について検討した。タクロリムス、ジペプチドおよびサイクロスポリン等について検討したところ、脊髄損傷による四肢の麻痺を有意に改善した。また、そのときの脊髄中のGDNF含量は有意に増加していた。脊髄中に蛍光色素を注入して軸策輸送について検討したところ、脊髄損傷ラットでは完全に断絶している、または断絶していない繊維でも輸送が非常に遅いところをジペプチド投与群では。断絶繊維の数が有意に少なく、また残っている繊維も充分に機能を果たしていた。これらの実験結果から、イムノフィリンリガンドは脊髄損傷について有効であると考えられた。次年度は、イムノフィリンの神経修復メカニズムについて検討したいと考えている。免疫制御剤には本来の免疫抑制作用のほかに神経栄養効果が報告されてきた。本研究によってシクロスポリンAやタクロリムスが脳由来神経栄養因子(BDNF)やグリア細胞株由来神経栄養因子(GDNF)の産生を促進しこれを介して神経栄養を発揮することを明らかにした。しかし神経保護作用を期待するとき免疫抑制作用は生体に不利益をもたらす恐れがある。そこで本年度は免疫抑制作用をもたないイムノフィリンリガンドリガンドの探索と薬効判定を試みた。タクロリムスがイムノフィリン(FKBP12)に結合する構造に注目し、これと類似した構造を持つLeu-Ileジペプチドとその類縁物質「A」について検討した。両物質は神経栄養因子の産生を促進し、培養下で神経細胞死を抑制すること、さらに培養脾臓細胞によるインターロイキン2の産生を抑制しないことを明らかにした。以上の結果よりいずれの物質も免疫抑制作用をもたない新しいイムノフィリンリガンドであると考えられたので、胸髄を半切断した脊髄損傷ラットを作製し、「A」物質を腹腔内に毎日投与した。投与開始3日目から歩行能力が回復し23日後にはほぼ損傷前のレベルまで運動機能が回復した。無処理の脊髄損傷群も時間の経過に伴い緩やかに運動機能が上昇したが投与群より低いレベルにとどまり、16日後以降の回復は観察されなかった。以上、[A]物質は脊髄損傷の修復に有効であることが示唆された。Leu-Ileジペプチドについても現在検討中である。これらの免疫抑制作用をもたないイムノフィリンリガンドをリード化合物してさらに強力な活性物質が創製できれば、脊髄損傷をはじめとする中枢神経疾患の治療薬の開発につながるものと期待される。
宿主免疫および集団免疫をかいくぐり繁栄するウイルスの生存戦略を解く

実データの背後に潜む法則性や基本原理を知るためには、実データを生み出すシステムの非線形ダイナミクスを知る必要がある。膨大な組み合わせの進化経路を全て実験解析から探索し、「進化ルール」を見つけ出すことは不可能であるが、計算機実験と進化理論による大規模な擬似配列データ解析を援用することで達成される。加えて、ドライ解析から得られた知見はウェット解析を用いて検証する。公募研究で開発する独創的な数理科学基盤は、対象ウイルスに制約がなく汎用的である点もネオウイルス学の研究領域に貢献できる特徴である。ネオウイルス学的解析の新規アプローチを開発する。
在宅呆け老人の8年間の死亡者と家族の追跡調査-遡及調査による死亡関連要因と家族支援の分析-

昭和59年に所沢市の65歳以上の在宅老人1万5千人を対象に全数調査を実施し、306人の呆け老人を把握した。その後、8年間に死亡した老人は228人、生存者41人、転居など把握不明者37人であった。平成5年に看取りの後の家族に対して電話による聞き取り調査を行い、有効数105人を得た。平成6年にはケースの背景やサービスの状況を調査し、その結果についての分布を行った。調査内容は老人のぼけの発症から死亡に至るまでの期間とその経過、居所の動き,ADLの変化、介護状況、保護福祉サービスの状況である。〈研究結果〉(1)老人の状況発症から死亡にいたるまでの期間は平均7年前後、10年以上のものは約1/3であった。その期間に入院を経験のあるものは1/3、おむつ使用者は81.0%、じょく創のある者44.8%,死亡2-3ヶ月前の移動能力はほぼ寝たきりが56.25%,歩ける者は19.1%であった。死亡した場所は、自宅が38.1%であった。(2)介護者、サービスの利用状況介護者の健康状態の悪い者は1/3,介護を替わってもらった者は約1/2であった。利用した主なサービスは、訪問看護23人、ヘルパー4人、ディサービス7人、ショートステイ9人、入浴サービス22人であった。看取り後の介護者の今後の介護への意識では、家族には44.7%,近所・友人には36.1%,ボランティアとしては20.9%の者が世話をしたいと答えた。以上の結果から、ボケ老人の介護の困難さ、複雑さ、経過の長さが浮き彫りにされた。しかし、介護経験者である家族が、今後も又お世話をしたいと答えている者が3-4割いる本調査の結果は、今後の地域ケアの方向に重要な示唆を示しているということができる。在宅呆け老人の8年間の追跡調査を実施し、介護状況を含めてその実態を把握した。調査対象は昭和59年に埼玉県所沢市において把握した306人の呆け老人のうち、死亡が確認された228人の介護家族とし、電話による聞き取る調査を行った。介護者の死亡、家族の転居などにより調査ができた家族は105人であった。なお8年間の老人の動静は図のとおりである。《調査結果》聞取り調査によって把握できた回答数は105人(46.1%)で、介護者の内訳は嫁54.3%、妻19.0%、娘18.1%であった。対象老人は男36%、女64%で、死亡時の平均年令は男81.8歳、女85.1歳であった。昭和59年以降入院経験のある老人は67.0%と多数にのぼっており、又亡くなる23ケ月前のADL状況では「寝たきり」が56.2%、おむつの利用者が81.0%を占めていた。介護状況については、介護者の心身の状況の変化により、途中で介護者や老人の居所が変る者も多かった。次年度は、これらの結果をもとにさらに必要な資料収集と分析を行う。本研究は、在宅呆け老人とその家族を長期にわたって追跡し、死亡や介護状況を調べ、死亡関連要因を探るとともに、地域における保健医療福祉サービスの方向を探ることを目的として行った。〈研究方法・期間・調査内容〉