hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
バイオ人工腎臓のためのヒト尿細管上皮細胞の新しい増殖法とその制御法の確立

その手法として、細胞周期の停止に関与する因子に対するRNA干渉法により、その機能を抑制することを試みた。前年度のアンチセンスオリゴDNAによる研究と同様の標的遺伝子(p53、Rb、p16INK4A)に対するsiRNAを用い、初代培養をおよそ12週間おきに50nMの濃度で処理して継代を続けたところ、p53とp16INK4Aに対するRNA干渉により、35回以上の分裂回数(population doublings)を得ることができた。陰性対照siRNA処理あるいは非処理のヒト近位尿細管上皮細胞ではその分裂寿命はおよそ15回であったので、RNA干渉により2の20乗(約100万)倍の細胞が得られる計算となり、バイオ人工尿細管の作製に使用する近位尿細管細胞の獲得には一応の目途がついた。一方で、ヒト腎より得られた多種の細胞集団をそのまま培養した後に中空糸に播種して作製した人工尿細管デバイスをヤギに接続して体外循環を行い、尿細管機能評価の条件設定を試みた。中空糸内部には濾過血漿を流し、外部には血液を流して物質の移動、リーク率、水分の再吸収などを測定しながら、約2週間の体外循環を維持する条件を設定した。以上の成果により、実際にヒト近位尿細管細胞を播種したバイオ人工尿細管デバイスを作製し、動物を用いた体外循環によりそのデバイスの尿細管機能の評価を行う系に必要な基礎的な技術が確立された。
自己発見型学習やPBLのためのドイツ語初中級者向けプロジェクト課題データベース

計画の2年目の年度である2018年度は、前年度の研究を通じて作成したドイツ語学習用リソース一覧(各種公共機関の青少年向けサイトやいわゆるleichte Spracheのサイトを含む20分野、約310個のドイツ語学習用Webページから成る)とドイツ語学習応用可能ソフト一覧(原則として無料ですべて、または一部の機能が利用可能な11分野約70個のソフトから成る)を踏まえ、プロジェクト課題データベースのひな形を作成するとともに、必要なワークシート類や教員用の指導マニュアルの作成を試みた。具体的には1)「スピーキングとリスニング」、「ライティングと文法」、「リーディングと語彙」という異なる技能分野を対にした3つの領域を設定し、リサーチ課題やプロジェクト課題をそれぞれの領域ごとに整理・分類し、目標としてのリサーチ課題集やプロジェクト課題集のひな形を作った。また、個々の課題を実現するための、EL(自己発見型学習)やPBL(プロジェクト型学習)を支援する教員向けの指導マニュアルの開発を試みた。2)最終目標としてのリサーチやプロジェクト課題を実現するための下位の課題を整理し、それらの解決をサポートするワークシート群の構成を考えるとともに、それぞれのELやPBLを実施するための参考情報をまとめた。3)目標としてのリサーチやプロジェクト課題集を、コアとなる素材の提供サイト、学習用ツール、領域、学習目的、個々の目標としての下位の課題、ワークシート、難易度、課題達成に要する時間(目安)等の指標とともに登録したプロジェクト課題データベースのひな形を作成した。メディア系の情報提供サイトはリンク先の変更が比較的多いのでアップデートのための定期的なチェックを今後どう効率化するかという課題や、オンライン上で提供されているツールの無料で使える機能の突然の変更や制限などにどう対応するかという課題など、いくつかの問題はあるが、全体として計画は順調に進展している。本研究の最終年度である2019年度には、2018年度に作成したプロジェクト課題データベースのひな形(目標としてのリサーチやプロジェクト課題集を、コアとなる素材の提供サイト、学習用ツール、領域、学習目的、個々の目標としての下位の課題、ワークシート、難易度、課題達成に要する時間(目安)等の指標とともに登録)を利用したELやPBLを、研究代表者らが中心となって実験的な形で行う。また、これらの実践の評価を通じて、今年度に作成したひな形の改善・充実を図り、最終的に公開可能な課題データベースを構築する。また、その成果を積極的に発信する。計画の初年度である平成29年度は、まず本研究で用いるドイツ語素材サイトとドイツ語学習用ツールの選定・分類作業を行うとともに、プロジェクト型学習の様々なタイプに関する実例を集めことに努めたた。具体的には、ドイツ語の様々な情報サイトの中から、たとえばドイツ人の青少年向けの情報サイト、主要な放送局が提供する青少年用のニュースサイト、青少年用の学習支援サイト、あるいは各種の公共機関等が提供する「やさしいドイツ語」で書かれた情報提供サイトなど、難易度の調整されたドイツ語素材を始め、様々な内容と難易度の言語素材(テクスト、単語集、音声、静止画、動画等)を含む素材提供サイトをリストアップし、歴史、政治、国際交流、地域研究、学生生活、映画、音楽、ファッション、観光、家族,人間関係、ドイツ語学習等の分野を示す20個程度のキーワードを使って分類した。実地調査としては、英語系の発表が主であるJALT2018に参加し、プロジェクト型学習やそのツールの開発/紹介に関連する発表を中心に情報を収集した。また、ドイツ文化センターが国際的に行っているプロジェクト型学習をテーマとしたベルリンでの現職教員用セミナーに参加し、プロジェクト型学習の様々な事例を調査するとともに、ドイツ語圏事情(Landeskunde)の領域におけるプロジェクトをWWWを利用することで日本国内にいながら効果的に行う可能性を検討した。また、オンライン上で無料で使えるフリーソフトの中から、音声認識エンジン、音声読み上げソフト、オンライン辞書、コーパス検索ソフト、翻訳メモリ、学習管理システム等々のEL(自己発見型学習)やPBL(プロジェクト型学習)用のツールとして使えそうなものを各分野ごとに抽出・分類した。

3)目標としてのリサーチやプロジェクト課題集を、コアとなる素材の提供サイト、学習用ツール、領域、学習目的、個々の目標としての下位の課題、ワークシート、難易度、課題達成に要する時間(目安)等の指標とともに登録したプロジェクト課題データベースのひな形を作成した。メディア系の情報提供サイトはリンク先の変更が比較的多いのでアップデートのための定期的なチェックを今後どう効率化するかという課題や、オンライン上で提供されているツールの無料で使える機能の突然の変更や制限などにどう対応するかという課題など、いくつかの問題はあるが、全体として計画は順調に進展している。平成30年度は、前年度の研究に踏まえ、プロジェクト課題データベースのひな形を作成するとともに、必要なワークシート類や教員用の指導マニュアルの作成を目指す。具体的には1)「スピーキングとリスニング」、「ライティングと文法」、「リーディングと語彙」という異なる技能分野を対にした3つの領域を設定し、リサーチ課題やプロジェクト課題をそれぞれの領域ごとに整理・分類する。また、個々の課題を実現するための、EL(自己発見型学習)やPBL(プロジェクト型学習)を支援する教員向けの指導マニュアルの開発を目指す。2)最終目標としてのリサーチやプロジェクト課題を実現するための下位の課題を整理し、それらの解決をサポートするワークシート群を作成するとともに、それぞれのELやPBLを実施するための参考情報をまとめる。3)目標としてのリサーチやプロジェクト課題集を、コアとなる素材の提供サイト、学習用ツール、領域、学習目的、個々の目標としての下位の課題、ワークシート、難易度、課題達成に要する時間(目安)等の指標とともに登録したプロジェクト課題データベースのひな形を作成する4)上記の課題データベースのひな形の開発と並行してそれを利用したELやPBLを、研究代表者らが中心となって実験的な形で行い、その評価を通して、課題データベース自体の改善を図る。また、中間段階での成果を積極的に発信する。本研究の最終年度である2019年度には、2018年度に作成したプロジェクト課題データベースのひな形(目標としてのリサーチやプロジェクト課題集を、コアとなる素材の提供サイト、学習用ツール、領域、学習目的、個々の目標としての下位の課題、ワークシート、難易度、課題達成に要する時間(目安)等の指標とともに登録)を利用したELやPBLを、研究代表者らが中心となって実験的な形で行う。また、これらの実践の評価を通じて、今年度に作成したひな形の改善・充実を図り、最終的に公開可能な課題データベースを構築する。また、その成果を積極的に発信する。2345円の差額が生じたが、これは金額的には予算額の0.33%に過ぎず、誤差の範囲内である。翌年度の予算の中で適切に使う。最終年度に必要となるデータベース構築のために必要な予算が当初の計画より多くなりそうだったため、それを確保するため今年度予定していた謝金等の使用を押さえた。
高温において不安定な固体金属硫化物の低温液相合成と物性

6核クロムクラスター錯体[Cr_6S_8(PEt_3)_6]と硫黄単体をトルエン中で反応し、核クラスター錯体から1分子のトリエチルホスフィンを引き抜くことにより、12各クラスター錯体[Cr_<12>S_<16>(PEt_3)_<10>]を合成した。構造解析の結果、2個の6核クラスター単体がμ_4-S...>Cr結合および、弱いCr-Cr結合で連結した構造の化合物であることが明らかになった。この結合形式はモリブデンジェブレル相化合物に一般的に見られるものであり、「クロムシェブレル相」低温合成の第一段階を達成したものである。混合原子価クラスターである6核クロムクラスターの二量化により、混合原子価系が広がっていることは、電気化学測定、および磁化率の測定から明らかである。モリブデンにおいても類似の12核クラスターが生成することが示された。新規形式のクラスター単位重合反応として、3核モリブデンクラスターの還元的二量化による梯子型6核クラスター錯体[Mo_6E_8Cl_6(PEt_3)_6](E=S,Se)を合成した。これらも興味深い混合原子価系クラスターであり、特異な酸化還元挙動を示す。既に合成している4核梯子型クラスター錯体と合わせ、クラスター価電子数と縮合芳香族化合物のπ-電子数に注目すべき対応関係があることを見出し、「Isoelectronic Analogy」と名付け、その意味を研究中である。M_6E_8(M=Cr,W;E=S,Se)骨格を有する伝導性固体化合物のクラスター錯体からの合成を最終目的として、出発クラスター錯体の合成法の確立と基本的性質の解明をめざした。CrCl_2,PR_3(R_3=Me_3,Et_3,Me_2Ph,MePh_2),Na_2Seの反応により〔Cr_6Se_8(PR_3)_6〕を合成・単離してX線単結晶構造解析をおこなった。クロムの骨格構造がトリアルキルホスフィンのアルキル基に依存して顕著な歪みを示すことが明らかになった。配位ホスフィンにおけるリン原子の正八面体の歪みが結晶充填の効果を直接的に示すとみなして、クロム骨格の歪みを解析した結果、リン八面体の歪みを引きずる部分とCr_6Se_8の電子構造に基づくJahn-Teller効果の相乗作用が働いていることが示された。電子構造はDV-Xα法分子軌道計算により求めたが、軌道準位が金属間距離に極めて敏感であること、モリブデン類似体と比べ金属間結合が弱いことが分かった。またモリブデン類似体と異なり、温度依存の常磁性を示す。固体化合物の低温合成の第一歩として、配位トリアルキルホスフィンを段階的に除去することを試みた結果、(9-BBN)_2共存下、トルエン中で錯体を還流加熱することにより、新種クラスター錯体が生成した。予備的X線単結晶構造解析の結果、2個のクラスター錯覚が連結してCr_<12>核を形成するクラスターであることが判明した。6核クロムクラスター錯体〔Cr_6S_8(PEt_3)_6〕と硫黄単体をトルエン中で反応し、各クラスター錯体から1分子のトリエチルホスフィンを引き抜くことにより、12核クラスター錯体〔Cr_<12>S_<16>(PEt_3)_<10>〕を合成した。構造解析の結果、2個の6核クラスター単位がμ_4-S--->Cr結合および、弱いCr-Cr結合で連結した構造の化合物であることが明らかになった。この結合形式はモリブデンシェブレル相化合物に一般的に見られるものであり、「クロムシェブレル相」低温合成の第一段階を達成したものである。混合原子価クラスターである6

核クロムクラスターの二量化により、混合原子価系が広がっていることは、電気化学測定、および磁化率の測定から明らかである。モリブデンにおいても類似の12核クラスターが生成することが示された。新規形式のクラスター単位重合反応として、3核モリブデンクラスターの還元的二量化による梯子型6核クラスター錯体〔Mo_6E_8Cl_6'PEt_3)_6〕(E=S,Sc)を合成した。これらも興味深い混合原子価系クラスターであり、特異な酸化還元挙動を示す。既に合成している4核梯子型クラスター錯体と合わせ、クラスター価電子数と縮合芳香族化合物のπ-電子数に注目すべき対応関係があることを見出し、「Isoelectronic Analogy」と名付け、その意味を研究中である。
睡眠障害を中心課題とした慢性疾患セルフマネジメントプログラムの構築と有効性の検討

単独で対策が講じられることの多い睡眠障害について、我々がこれまでに構築した慢性疾患管理の手法を基盤に、企業の健康経営、慢性疾患管理、ケースマネジメントの視点からとらえ直し、4つの研究を実施した。睡眠障害を有する集団を把握する方法を検討した。睡眠障害に至るプロセスとパターン/要因を定量的・定性的に分析した。睡眠障害を有する慢性疾患患者に対するプログラムを作成した。睡眠障害を有する慢性疾患患者と従業員に対してプログラムを実施し、プログラムの有効性と改善についての示唆を得た(現在も進行中)。これまで単独で対策が講じられることの多かった睡眠障害について、研究者らが長年にわたって構築してきた慢性疾患管理の手法を基盤に、企業の健康経営、慢性疾患管理、ケースマネジメントの視点からとらえ直し、睡眠障害の1簡便な定量的な把握方法の開発とパターン分類、2ターゲット集団の抽出、3リスク特性に応じた個別介入のための予防・改善プログラムの構築、4健康経営への提案を行い、睡眠を基盤とする慢性疾患管理を構築、検証するものである。平成27年度は、睡眠障害のターゲット集団の把握の仕組みを構築するために、1企業の約3000名分の診療報酬データを用いて、メンタル疾患罹患者数と向精神薬の処方状況調査を行い、睡眠薬や抗うつ薬などの向精神薬を内服しながら企業で働く者の実態を明らかにした。結果として、企業で行うメンタル疾患対策やプレゼンティズム対策には、うつ病に加えて睡眠障害に対する介入が必要であることが示された。続いて、睡眠障害を有し就労している人30人に対して、面接調査と睡眠・活動・抑うつ気分の測定を行った。面接調査の結果、睡眠障害による仕事への影響と睡眠障害を発症するプロセスが明らかとなった。また測定の結果から、抑うつ得点が高いが精神科の受診歴はなく、睡眠障害の自覚を持ち就労している人が存在していることが明らかになった。さらに測定の結果より、睡眠計・活動量計・質問紙を用いて睡眠障害を有する人を抽出できる可能性が示された。以上の結果から、今後の看護介入について、睡眠障害があり生産性の低下が予測される人を簡便で定量的に抽出し、構造的な介入が可能となる睡眠障害疾病管理プログラムに向けた重要な示唆が得られた。(研究1)睡眠障害ターゲット集団の把握の仕組みの構築及び(研究2)睡眠障害の客観的・定量的な把握方法の構築(パターンの特定)が終了し、(研究3)睡眠障害の改善を追加した慢性疾患セルフマネジメントプログラムの構築を現在行っている。平成28年度後半から介入研究をスタートする計画である。慢性の睡眠障害について、研究者らが構築してきた慢性疾患管理の手法を基盤に、企業の健康経営、慢性疾患管理の視点からとらえ直し、睡眠障害の1簡便な定量的な把握方法の開発とパターン分類、2ターゲット集団の抽出、3リスク特性に応じた個別介入のための予防・改善プログラムの構築、4健康経営への提案を行い、睡眠を基盤とする慢性疾患管理を構築、検証するものである。平成28年度は、平成27年度の研究1、2の結果に基づき、(研究3)慢性疾患と睡眠障害のテキスト「質の悪い睡眠と病気との関係を断ち切るために」と介入プログラム「睡眠障害の改善を追加した慢性疾患セルフマネジメントプログラム」を作成した。プログラムの特徴は、慢性疾患(糖尿病性腎症)の疾病管理プログラムに加えて、初回に睡眠障害のアセスメントと原因の探索を実施し、アルゴリズムに基づいて介入するものである。睡眠障害の原因は、生理学的な問題に加え、心理・社会的問題--<仕事・仕事上の人間関係・職場環境><時差ぼけ/起床時刻の差による時間認識のずれ><睡眠に対する考え方や信念><個人の性格や気質><身についた行動習慣><体調の変化や不調/体調に関する強い不安><人生や生活の不安や葛藤><社会や個人の問題や葛藤><家庭の問題(葛藤・怒り・不安)><家事や育児><家族の病気や介護>に分類され、それぞれに対して対策を示したのが特徴である。また、3種類の調査票を用いて睡眠障害をスクリーニングし、それに基づいて睡眠計と活動量計、パルスオキシメーターで睡眠障害の可能性を抽出する手順を構築した。広島市在住の広島市国民健康保険被保険者、広島県在住の広島県の組合国保被保険者、全国健康保険協会広島支部及び健康保険組合連合会広島の加入者で糖尿病性腎症の23期の者に対して、一群前後比較研究デザインで本プログラムを実施中である。研究1「睡眠障害ターゲット集団の把握の仕組みの構築」及び研究2「睡眠障害の客観的・定量的な把握方法の構築(パターンの特定)」は予定通りに実施した。研究3「睡眠障害の改善を追加した慢性疾患セルフマネジメントプログラムの構築」については、研究1及び研究2の結果に基づいたプログラムとテキストを作成した。研究4「睡眠障害の改善を追加した慢性疾患セルフマネジメントプログラムの効果測定」は、研究3で構築したプログラムの効果測定であるが、対象者の抽出(リクルート)において、研究1の方法では困難なことが明らかとなり、リクルート方法や実施場所の検討に時間を要した。また、広島県からの類似した研究依頼が入り、その研究の実施に時間を取られて開始が遅れた。研究4の介入研究については、フィールドを変え、対象者のリクルートの方法を変更し(まず、慢性疾患「糖尿病性腎症」を有する者をリクルートし、その対象者に睡眠障害の有無を測定してもらい、睡眠障害を有する人に糖尿病性腎症疾病管理プログラムに加えて、睡眠障害への対応を行うようにした。)、平成28年1月からリクルートをスタートし、現在、順次、介入(プログラム)を展開している。

睡眠障害について、研究者らが構築してきた慢性疾患管理の手法を基盤に、企業の健康経営、慢性疾患管理の視点からとらえ直し、睡眠障害の1簡便な定量的な把握方法の開発とパターン分類、2ターゲット集団の抽出、3リスク特性に応じた個別介入のための予防・改善プログラムの構築、4健康経営への提案を行い、睡眠を基盤とする慢性疾患管理の構築と検証を目的に実施した。平成29年度は、(1)広島市国民健康保険・広島県組合国保被保険者、全国健康保険協会広島支部及び健康保険組合連合会広島の加入者で糖尿病性腎症13期の者に対して「睡眠と活動の視点を加えた糖尿病性腎症重症化予防プログラムの運用可能性と効果」(一群前後比較試験)を継続実施した(終了)。質問紙で睡眠障害を有する者(46%)を把握し、糖尿病管理の中で睡眠改善のプログラムを展開、睡眠計と尺度によって効果を測定した。結果(6月後)、糖尿病の指標は有意に改善したが、睡眠については4人が改善、2人が身体症状との関連で悪化した。一方で、睡眠プログラムの評価は高かった。結果の詳細分析や健康経営との関係は分析中である。加えて、(2)睡眠障害を自覚している企業の従業員に直接介入する「睡眠困難を自覚する就業者のワークエンゲージメントに対する職域睡眠保健指導の有効性に関する非ランダム化単群時系列デザイン試験」を実施している。睡眠認知行動療法を基盤とした、また研究1と2の結果に基づいた、症状の発生要因や増悪因子のアセスメントと心理社会的な問題解決の視点を加えた職域睡眠保健指導を開始し、介入を実施することで非介入期と比べてワークエンゲージメントが向上するか否か、労働生産性の向上や睡眠指標の改善が得られるかを検証する(単群で非介入期(2か月間)と介入期(2か月間))。登録者数は100人を予定し、現在も介入実施中である。単独で対策が講じられることの多い睡眠障害について、我々がこれまでに構築した慢性疾患管理の手法を基盤に、企業の健康経営、慢性疾患管理、ケースマネジメントの視点からとらえ直し、4つの研究を実施した。睡眠障害を有する集団を把握する方法を検討した。睡眠障害に至るプロセスとパターン/要因を定量的・定性的に分析した。睡眠障害を有する慢性疾患患者に対するプログラムを作成した。睡眠障害を有する慢性疾患患者と従業員に対してプログラムを実施し、プログラムの有効性と改善についての示唆を得た(現在も進行中)。平成28年度前半は、睡眠障害の改善を追加した慢性疾患セルフマネジメントプログラムの構築を行う(研究3)。研究2で見出した要因/パターンから、対処方法をマッチングさせ、そのアルゴリズムを盛り込んだ慢性疾患セルフマネジメントプログラムを構築する。基本は6ヶ月のプログラムとし、2クール(12ヶ月)とする予定。プログラムの基礎としては、睡眠障害の要因の特定とそれに合致した対処方法を示すものであるが、一方で行動変容としてのリスク要因の理解とセルフマネジメントスキルの獲得を促す(内発型動機付け)。アクションプランの作成と定期的評価により自己効力感を向上させる。セルフモニタリングを促す。
錯覚を利用した感覚運動統合リハビリテーションシステムの開発

本研究は,コンピュータグラフィックス(CG)を用いた複合現実感技術や,接触感覚や反力等の力触覚提示技術を応用し,運動錯覚を想起させることで脳に刺激を与え,脳の可塑性を誘発する効果的な感覚運動統合リハビリテーションシステムの開発を目的としている.本年度は,視触覚ボール回しシステムを用いた場合の運動錯覚誘発の評価,および上肢を対象とした運動触覚ミラーセラピーシステムの改良を行った.視触覚同時提示ボール回しシステムは,上部のモニタにボールを回している動画を提示すると共に,下部には実際にボールを配置し,動画と同期させてモータ制御によりボールを回転させ.被験者がモニタの下に手を挿入し,下部のボールを軽く握ることで,自分でボールを回している様な錯覚を感じさせる.本年度は,脳波による錯覚の評価を行った.上部のボールの映像と下部のボールの回転を同期させた運動錯覚生起条件と,非同期の運動錯覚非生起条件について,α波,β波,γ波の活動を,パワースペクトラム密度(PSD)を用いて評価した.α波は,頭頂部から後頭部にかけてのPSDが大きく減少した.β波は,後頭部のPSDが大きく活動しているほか,頭頂部から後頭部にかけて,α波同様PSDの減少が見られた.γ波は,頭頂部左のC3電極においてPSDが減少したほか,左後頭部および左前頭部にPSDの増加を確認した.以上より,α波の解析から運動錯覚によって運動野の活動が活発になり,同時にγ波の解析から,運動野と視覚野が関連して活動したことがわかった.運動錯覚ミラーセラピーシステムは,先行開発したシステムを改良し,手関節の外転/内転動作に対して触覚提示を行うミラーシステムを開発し,触覚提示の有無が運動主体感の誘発にどの程度影響するのかを評価した.平成30年度が最終年度であるため、記入しない。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。これまで,脳卒中発症後6ヶ月程度経過すると機能回復はプラトーと考えられ,その後は機能維持訓練が行われてきた.ところが脳には,神経細胞が破壊されても生き残った神経細胞が役割を代行する能力,可塑性があり,これを利用して神経路に新たな役割を分担させたり強化したりすることで,維持期に至っても麻痺した手足の機能を回復することができる.本研究では,コンピュータグラフィックス(CG)を用いた複合現実感技術や,対象物との接触感覚や反力等の力触覚提示技術を応用し,身体所有感の転移などの錯覚を想起させることで脳に刺激を与え,脳の可塑性を誘発する効果的な感覚運動統合リハビリテーションシステムを開発する.本年度は,手指を対象とした視触覚同時提示ボール回しシステムの開発,および上肢を対象とした運動触覚ミラーセラピーシステムの開発を行った.手指動作を対象とした視触覚同時提示ボール回しシステムは,上部の映像提示部と下部の触覚提示部で構成した.上部のモニタに健常者がボールを回している動画を提示すると共に,下部に実際にボールを配置し,動画と同期させてモータ制御によりボールを回転させた.被験者は,モニタの下に手を挿入し,下部のボールを軽く握ることで,自分でボールを回している様な錯覚を感じた.本システムを用いて,健常者に対するボール回し技能の訓練効果を検証した.また,MRI対応システムを開発し,運動錯覚誘発時の脳機能の解明を行うための基礎実験を行った.上肢協調運動を対象とした運動触覚ミラーセラピーシステムは,鏡,運動提示部,および触覚提示部で構成した.運動提示部は,車輪で前後に移動可能かつベルトープーリ機構とスライダを用いることで左右鏡像運動を可能とし,運動提示部の下には表面に様々な凹凸を有する触覚提示部を設置した.プロトタイプを改良し,病院での検証実験用の機器を開発した.手指動作を対象とした視触覚同時提示ボール回しシステムを開発し,健常者に対するボール回し技能の訓練効果を検証した.また,MRI対応システムを開発し,運動錯覚誘発時の脳機能の解明を行うための基礎実験を行った.また,上肢協調運動を対象とした運動触覚ミラーセラピーシステムについて,プロトタイプを改良し,病院での検証実験用の機器を開発した.以上の結果から,本研究はおおむね順調に進展している.これまで,脳卒中発症後6ヶ月程度経過すると機能回復はプラトーと考えられ,その後は機能維持訓練が行われてきた.

ところが脳には,神経細胞が破壊されても生き残った神経細胞が役割を代行する能力,可塑性があり,これを利用して神経路に新たな役割を分担させたり強化したりすることで,維持期に至っても麻痺した手足の機能を回復することができる.本研究では,コンピュータグラフィックス(CG)を用いた複合現実感技術や,対象物との接触感覚や反力等の力触覚提示技術を応用し,身体所有感の転移などの錯覚を想起させることで脳に刺激を与え,脳の可塑性を誘発する効果的な感覚運動統合リハビリテーションシステムを開発する.本年度は,手指を対象とした視触覚同時提示ボール回しシステムおよび上肢協調運動を対象とした運動触覚ミラーセラピーシステムの効果の検証,および伸張反射を利用したガイドとタイミングを組み合わせた楽器型リハビリテーションシステムの開発を行った.手指動作を対象とした視触覚同時提示ボール回しシステムは,開発したシステムを用いた前後での脳波計測を実施し,事象関連脱同期の検証を実施した.上肢協調運動を対象とした運動触覚ミラーセラピーシステムは,検証実験用機を用いて病院での評価を実施した.楽器型リハビリテーションシステムは,画面に映像を提示することで運動を想起させ,空気圧アクチュエータを用いたトランペット型デバイスを用いることで運動の意図と指の動きを位置レベルで一致させたり,伸張反射を誘発して筋活動レベルで一致させたりすることができる.本システムを用いることで,健常者を対象とし,運動学習効果の検証を行った.手指動作を対象とした視触覚同時提示ボール回しシステムについて,使用前後での脳波を計測することで,被験者への効果の定量的な評価を実施した.上肢協調運動を対象とした運動触覚ミラーセラピーシステムについて,検証実験機を開発し,病院において効果の検証実験を実施した.また,ガイドとタイミングを組み合わせることで,伸張反射により筋活動を誘発する楽器型リハビリテーションシステムの開発を行った.以上の結果から,本研究はおおむね順調に進展している.本研究は,コンピュータグラフィックス(CG)を用いた複合現実感技術や,接触感覚や反力等の力触覚提示技術を応用し,運動錯覚を想起させることで脳に刺激を与え,脳の可塑性を誘発する効果的な感覚運動統合リハビリテーションシステムの開発を目的としている.本年度は,視触覚ボール回しシステムを用いた場合の運動錯覚誘発の評価,および上肢を対象とした運動触覚ミラーセラピーシステムの改良を行った.視触覚同時提示ボール回しシステムは,上部のモニタにボールを回している動画を提示すると共に,下部には実際にボールを配置し,動画と同期させてモータ制御によりボールを回転させ.被験者がモニタの下に手を挿入し,下部のボールを軽く握ることで,自分でボールを回している様な錯覚を感じさせる.本年度は,脳波による錯覚の評価を行った.上部のボールの映像と下部のボールの回転を同期させた運動錯覚生起条件と,非同期の運動錯覚非生起条件について,α波,β波,γ波の活動を,パワースペクトラム密度(PSD)を用いて評価した.α波は,頭頂部から後頭部にかけてのPSDが大きく減少した.β波は,後頭部のPSDが大きく活動しているほか,頭頂部から後頭部にかけて,α波同様PSDの減少が見られた.γ波は,頭頂部左のC3電極においてPSDが減少したほか,左後頭部および左前頭部にPSDの増加を確認した.以上より,α波の解析から運動錯覚によって運動野の活動が活発になり,同時にγ波の解析から,運動野と視覚野が関連して活動したことがわかった.運動錯覚ミラーセラピーシステムは,先行開発したシステムを改良し,手関節の外転/内転動作に対して触覚提示を行うミラーシステムを開発し,触覚提示の有無が運動主体感の誘発にどの程度影響するのかを評価した.今後は,手指動作を対象とした視触覚同時提示ボール回しシステムについて,リハビリテーション効果の検証を行うと共に,MRI対応システムを用いて運動錯覚誘発時の脳機能の解明を行う.上肢協調運動を対象とした運動触覚ミラーセラピーシステムは,検証実験機を用いた実験を実施し,リハビリテーション効果の検証を行う.また,平成29年度以降は,得られた結果に基づき,下肢リハビリテーションシステムの開発や,姿勢制御を対象とした訓練システムの開発を推進する.今後は,手指動作を対象とした視触覚同時提示ボール回しシステムについて,システム使用中における脳波計測も実施し,運動錯覚誘発時の脳機能の解明とリハビリ効果の検証を実施しする.上肢協調運動を対象とした運動触覚ミラーセラピーシステムは,検証実験機を用いた実験を継続して実施し,実用化について検討する.また,伸張反射により筋活動を誘発する上肢および下肢を対象としたリハビリテーションシステムの開発と検証を実施する.平成30年度が最終年度であるため、記入しない。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。
ニホンイヌワシの保全を目指した比較ゲノムアプローチ

ニホンイヌワシは、国内の推定個体数がわずか500羽と、絶滅が危惧されており、繁殖成績も芳しくない。本研究では、同じく絶滅の危機に陥ったものの、現在は個体数が回復しつつある北ヨーロッパの亜種の調査グループと国際連携し、イヌワシで唯一公開されている北米の亜種のゲノム配列をリファレンスとして、ゲノムリシーケンスを行い、生態学的な差異や、病原体に対する感受性の差異と、ゲノム配列の差異を比較して、関与する遺伝子の機能を解明し、ニホンイヌワシの亜種の特性を明らかにする。さらに、無限分裂細胞株を樹立し、ゲノム解析で明らかになった生理学的機能差を細胞レベルで検証する。加えて、個体ごとの遺伝子型の情報により、飼育や繁殖への貢献を目指す。本年度は、培養細胞の整備と活用、ゲノムリシーケンス、生態・獣医学的調査、機能遺伝子の検出、を行い、以下の成果が得られた。1)ニホンイヌワシ由来の培養細胞を作製し、遺伝子導入によってiPS化を試みた。2)ニホンイヌワシのゲノムリシーケンスを行い、スコットランドの亜種、北米の亜種と比較した。亜種間でのゲノム配列の相違度からニホンイヌワシは系統的に北米の亜種に近縁であった。飼育下個体の遺伝的多様性にもとづき、個体群の存続をシミュレートした結果、繁殖つがいの増加と野生からの導入が存続に必要であることがわかり、環境省や飼育施設に情報を提供した。3)スコットランドのイヌワシの研究者3名を招聘し、日本の生態学、獣医学の研究者を交えつくばと盛岡でセミナーと観察会を実施し、情報交換した。インフルエンザウイルスの増殖を抑制するMxタンパク質をコードする遺伝子(Mx遺伝子)のクローニングを、イヌワシの培養細胞およびゲノム情報を活用して実施した。4)免疫にかかわるMHC遺伝子、つがい形成に関わるバソトシン受容体遺伝子について、亜種間および個体間の多様性を解析した。本年度は、1)培養細胞の整備と活用、2)ゲノムリシーケンス、3)生態・獣医学的調査、4)機能遺伝子の検出を行った。1)ニホンイヌワシイヌワシからの初代培養細胞を入手し、培養の条件を最適化し、Kav-1培地を使用することで最も細胞増殖が良いことを明らかにした。さらにiPS化を試みた。加えて絶滅危惧種のヤンバルクイナやアカウミガメの細胞を効率的に増殖させる方法を見出し、原著論文として発表した。2)鳥類15種のゲノムデータをDNAデータバンクに登録し、一部は公開済みである。ORFを確定するため鳥類13種のRNAseq解析をおこない、データを解析中である。またニホンイヌワシ3個体のゲノムリシーケンスを行い、スコットランド、北米の亜種と比較した。亜種間でのゲノム配列の相違度は、ニホンイヌワシと北米の亜種で0.145%、ニホンイヌワシと英国の亜種間では0.15%であり、ニホンイヌワシは系統的に北米の亜種に近縁であることが示された。飼育下個体の遺伝的多様性にもとづいて、多様な条件で個体群の存続をシミュレートした結果、繁殖つがいの増加と野生からの導入が存続に必要であることがわかり、環境省や飼育施設に情報を提供した。3)スコットランドのイヌワシの研究者を招聘し、日本の生態学、獣医学の研究者とともにセミナーと観察会を実施し、情報交換した。インフルエンザウイルスの増殖を抑制するMxタンパク質をコードする遺伝子(Mx遺伝子)のクローニングを、イヌワシの培養細胞およびゲノム情報を活用して実施し全長配列を決定した。4)機能遺伝子のうち、免疫にかかわるMHC遺伝子、つがい形成に関わるバソトシン受容体遺伝子について、配列情報に基づいてプライマーを設計し、亜種間や個体間の多様性を解析した。以上により、計画は順調に進展している。培養細胞の整備と活用については、飼育動物園および野外観察者の協力で、生体の羽軸や皮膚、孵化前死亡胚、死亡個体の組織を採取して初期培養を行い、無限分裂を誘導する。iPS化の確認の実験を行う。ゲノムリシーケンスについては、ゲノム配列の比較から、SNPを検出し、北米、北ヨーロッパ、日本の亜種間で、分岐年代や過去の個体数を推定する。とくに亜種間で変異の多い領域について詳細な比較を行い、生態情報との関連を解析する。生態・獣医学的調査については、特に深刻な感染症であるトリインフルエンザ、ニューカッスル病、サルモネラ症などの感染状況を、PCR増幅により調査する。今後感染が国内に広がった場合、個体群への深刻な影響が懸念されるウエストナイルウイルスについても遺伝子検査を実施する。機能遺伝子の検出については、繁殖に関わるメソトシンやアンドロゲンなどのホルモン受容体遺伝子、および他の鳥類で情報のある産卵数や、兄弟殺しに影響する攻撃性の遺伝子に着目して亜種間で比較し、遺伝子変異と繁殖数の関連についても解析する。国内の研究者とともにスコットランドを訪問して、猛禽類の保全の実態を見学するとともに、セミナーを開催して情報交換を行う。ニホンイヌワシは、北半球に広く分布するイヌワシの6亜種のひとつで、国内の推定個体数がわずか500羽と、絶滅が危惧されており、繁殖成績も芳しくない。

さらに、無限分裂細胞株を樹立し、ゲノム解析で明らかになった生理学的機能差を細胞レベルで検証する。加えて、個体ごとの遺伝子型の情報により、飼育や繁殖への貢献を目指す。本年度は、集団の遺伝的多様性にもとづく個体数予測、ゲノムリシーケンス、獣医学的調査を行い、スコットランドの亜種に関する情報交換を行った。マイクロサテライト多型にもとづいて飼育集団の個体数予測を行い、200年後まで集団の遺伝的多様性が維持される条件を推定した。ニホンイヌワシ2個体について、それぞれHiseqXによる150塩基のペアエンドの全ゲノムのショットガンシーケンスをおこなった。それぞれ約50Gbのデータを取得した。全ゲノム情報にもとづき、数百万年から1万年前の過去の有効集団サイズを推定した。イヌワシの野生個体群に影響を与える可能性がある感染症として高病原性鳥インフルエンザに着目し、国内の発生状況に関する情報を収集した。また、これまで報告されている鳥インフルエンザウイルスの亜型判定用のプライマーで、国内に侵入するウイルスのタイプ分けが可能か、評価を開始した。さらに英国スコットランドを訪問して、イヌワシの保全に携わる研究者らと情報交換を行った。北米のイヌワシの全ゲノムショットガンシークエンスデータを取得し、イヌワシのリファレンス配列にマッピング後、SNPsの情報を取得して、PSMCによる有効集団サイズの歴史的変遷の解析を行った。解析に必要となる1世代あたりの遺伝子突然変異率を9.9x10-9乗、イヌワシの世代時間を飼育下のイヌワシの繁殖記録から25年とした。解析の結果、北米のイヌワシは100万年前をピークとして減少を続けていたことがわかった。ニホンイヌワシでも同様の解析を行ったところ、10万年前には20万羽が生息していたが、1万年前には5000羽と、個体数が大きく減少したことが推定され、現状の生息数500羽は危機的な状況にあることがうかがえた。さらに英国スコットランドを、村山、大沼が、大学院生とともに訪問して、当地のイヌワシの保全に携わる研究者らと情報交換を行った。以上より、計画は順調に進展している。ニホンイヌワシは、国内の推定個体数がわずか500羽と、絶滅が危惧されており、繁殖成績も芳しくない。
近世後期古典注釈の探索と国学者の学芸に関する研究

本研究では、幕末の加賀金沢藩士であり国学者・歌人であった高橋富兄(たかはしとみえ)の著作『住吉物語問答』『枕草紙箋』を主たる研究対象として、高橋富兄の学芸と注釈がいかなるものであったのか明らかにする。具体的には、『住吉物語問答』『枕草紙箋』の書誌的な調査をし、その注釈内容を吟味することで、高橋富兄の学説がいかなるものであるかを検証する。幕末から近代に至る時期の金沢において、高橋富兄の果たした役割を明らかにし、得られた研究成果を斯界に提供する。
虚血に対する内側前庭神経核ニューロンの一過性過分極メカニズム

眼振発現の中心的役割を果たす内側前庭神経核ニューロンに一過性虚血を与えた時の自発発火の変化をパッチクランプ法により、電気生理学的側面から観察した。持続的に自発発火するニューロンは一過性虚血により一時的に膜電位が過分極して自発発火を停止したが、生理的条件に戻すと速やかに発火は再開した。この現象はシナプス伝達を遮断しても観察されることから、ニューロン自身の内因性膜特性によるものと考えられた。さらにこの一過性過分極は、ATP感受性カリウムチャネルによる外向きカリウム電流によるものであることを薬理学的に確認した。また、ニューロンタイプ別にはタイプBニューロンの方がタイプAより虚血に鋭敏に反応した。椎骨脳底動脈循環不全症は高齢者におけるメマイの原因としてしばしば遭遇する疾患であり、内側前庭神経核(Medial Vestibular Nucleus; MVN)を含む脳幹・小脳への一過性虚血に起因する可逆性の病態である。内側前庭神経核は前庭動眼反射・眼振解発の中心的な役割を果たす神経核である。VBIの病態解明のため、3週齡のWistar ratから脳幹スライス標本を作製し、Whole-cell patch-clamp法を用いてMVNニューロンに5分間虚血負荷を与えた時の膜特性の変化を観察したところ、多くのニューロンで内因性膜特性の変化により一過性過分極が生じて自発発火を停止し、生理的条件下に戻すことで自発発火を回復することがわかった。一方で過去の文献から、MVNは均一なポピュレーションではなく、数種類の異なるニューロンから構成されていることが分かっている。自発発火パターンの差異から1Type Aニューロン、2Type Bニューロンに大別されている。前者は前庭入力に対してTonicな発火応答を示す一方、後者は、Phasic-tonicな応答を呈し、機能的にも異なるとされている。本年度は、ニューロンのタイプにより虚血への電気生理学的な反応に差異があるかを、これまでと同様の電気生理学的手法で検討した。その結果、一部のニューロンでは虚血負荷を行っても自発発火を継続するニューロンも観察された。このような虚血抵抗性のニューロンはType Aニューロンの約3割で確認された。一方、Type Bでは約1割程度であった。このことから、眼球位置を維持するようなTonicな特性を持つType Aニューロンでは比較的虚血に耐性があり、一方、眼球運動初期に対応するPhasic-tonicな特性をもつType Bニューロンのほうが虚血に対して敏感に反応すると考えられた。内側前庭神経核(Medial Vestibular Nucleus;MVN)ニューロンは5分間の無グルコース無酸素の一過性虚血を受けると、膜電位が過分極して自発発火を停止する。その後、生理的条件下に戻すと速やかに膜電位は再分極して自発発火を開始する。このメカニズムが内因性あるいは外因性によるものかを区別する目的で、一過性虚血時の内側前庭神経核ニューロンの自発性抑制性シナプス後電位(spontaneous Inhibitory PostSynaptic Current;sIPSC)を測定した。外因性要因であればsIPSCが増大することでMVNニューロンの膜電位が過分極するはずである。しかし実験では、虚血前のコントロール状態、虚血中、虚血後に明らかなsIPSCの増大変化を認めなかった。そこで次、内側前庭神経核ニューロンへの興奮性・抑制性入力を阻害剤で遮断した状態、すなわち外因性要因を一切排除した条件下で、MVNニューロンに一過性虚血負荷を与えたところ、膜電位の過分極とこれに引き続く自発発火停止が記録できた。このことは、虚血に対する膜電位変化は、外因的な要因でなく、ニューロン自体がもつ内因性の膜特性に起因することが明らかになった。次の段階として、MVNニューロンの膜電位を過分極させつようなイオンコンダクダンスを検討した。無酸素無グルコース負荷によって生み出される細胞内環境はATPの枯渇である。またニューロンの膜電位を過分極さるイオンコンダクタンスとしては、Kイオンがまず考えられる。ATPとKイオンに関連するイオンチャネルとしてATP感受性Kイオンチャネルがある。そこで、このイオンチャネルの阻害剤存在下で、同様の虚血実験を施行したところ膜電位の過分極はみられなかった。このことは、虚血に対する膜電位変化はATP感受性Kイオンチャネルに起因する可能性が高いことが示唆された。高齢者によくみられるメマイ疾患として、一過性脳虚血発作である椎骨脳底動脈循環不全症(Vertebrobasilar Insufficiency; VBI)が挙げられる。

VBIでは、前庭動眼反射vestibulo-ocular reflex(VOR)の中心的役割である内側前庭神経核とその周辺領域に一過性の虚血が生じることで回転性メマイを生じる。本研究ではこの点に着目して、内側前庭神経核ニューロンの電気生理学的特性が一過性虚血によりどのように変化するかを検討した。前年度までの研究より、一過性虚血を受けた内側前庭神経核ニューロンは自発発火を一時的に休止することが明らかとなっていた。別の先行研究から、内側前庭神経核ニューロンはType AニューロンとType Bニューロンに大別されていたが、これはあくまで、定性的な分類であった。このため、まず、ニューロンのスパイク特性を定量的に評価するため、スパイク形状の一時微分係数(dV/dt)を算出し、時間経過とdV/dtの関係からType A,Type Bニューロンを規定した。そのうえで、5分間の無酸素無グルコース負荷を与えたときの、1)自発発火停止までの時間、2)発火停止時間、3)虚血終了から自発発火再開までの時間について、ニューロンのタイプ別に調査した。その結果、Type Bニューロンは全体の90%が、一方、Type Aニューロンでは68%のニューロンが虚血に反応して自発発火を停止したが。各パラメーターで比較すると、2)、3)ではニューロンタイプによる差異はみとめられなかったが、1)の自発発火停止までの時間は、Type Bニューロンの方が有意に速い結果となった。このことは、よりPhasicな特性をもつType Bニューロンの方が、tonicな性格のType Aニューロンよりも、素早く虚血に反応し、このことが眼球運動・眼振解発に深く関連していることが示唆された。医歯薬学耳鼻咽喉科平成25年度は内側前庭神経核ニューロンのneuronal typeに応じた虚血への反応性の差異を観察した。同じ神経核内のニューロンでも虚血への反応が異なることを電気生理学的に示すことができた。眼球運動への関与の違うニューロンが虚血に対して異なる反応を呈する可能性を提示するとことができた。このことは、平成25年度の研究・実験計画の根幹であり、研究は遅滞なく、おおむね順調といえる。平成24年度の研究計画では、内側前庭神経核ニューロンの虚血に対する反応(一過性過分極による自発発火の停止)が内因性変化あるいは外因性変化によるものかを同定することが最大の目的であった。今年度の実験で、内側前庭神経核ニューロンの虚血に対する反応はニューロン自身がもつ内因性膜特性の変化によるものであることが確認できた。さらに、膜電位が過分極する原因となるイオンコンダクタンスがATP枯渇に附随して活性化されるATP感受性Kイオンチャネルである可能性が高いことが、阻害剤を用いた実験から示唆できた。上記の実験結果は、平成24年度の研究実施計画通りであり、事前に想定していた通りの結果がえられたことから、本研究の進行具合・到達度としては、おおむね順調と思われる。本研究でこれまでに観察できた現象がさらに多くのニューロンでも観察可能かを調べる。また、TypeA、TypeBニューロンにそれぞれ、セロトニン、メイロン、ATPなどの薬剤負荷をかけた時に、虚血耐性がどのように変化するかを調査する。
殺虫剤抵抗性昆虫におけるシトクロムP450の過剰発現機構に関する遺伝学的研究

ピレスロイド抵抗性のネッタイイエカJPal-per系統では,シトクロムP450遺伝子Cyp9m10が感受性蚊に比べ260倍過剰発現していた。本系統のCyp9m10構造遺伝子座では,その0.2kb上流域にMITE様トランスポゾンが挿入され,転写開始点を含む上流の1.1kbを一方の端点とする約100kb長を増幅単位とする遺伝子重複が生じていた。Cyp9m10の過剰発現はシス作用性遺伝的変異によりもたらされたこと,さらに,倍化したCyp9m10のハプロタイプはピレスロイド抵抗性に強く連鎖することを戻し交配実験により明らかにした。シトクロムP450モノオキゲナーゼ(P450)は,昆虫生理活性物質と外来性毒物質の代謝を担う酵素である。その過剰発現は,多様な殺虫剤化合物に対する解毒活性亢進をもたらし,殺虫剤抵抗性の要因となっている。しかし,各P450分子種の各種殺虫剤に関する触媒作用とその過剰発現をもたらす遺伝的変異については,はほとんど未解明である。ネッタイシマカJPP系統の終齢幼虫は,作用点の低感受性とP450の活性亢進が主要因となり,ピレスロイド系殺虫剤であるペルメトリンに関し,感受性系統(OGS)の蚊に対して10^3レベルの抵抗性を示すが,成虫期には抵抗性比が10^1レベルに低下した。この低下はP450解毒機構の成虫期における消失によるものであることを,P450の阻害剤を用いた共力試験で明らかにした。JPP系統におけるCYP9M10とCYP4H34の二つのP450遺伝子の終齢幼虫期における転写量は,OGS蚊に比べ,それぞれ,約300倍と17倍あることが示されていたが,いずれの遺伝子もJPP系統の蛹期と成虫期では発現していないことを定量PCRで示し,両遺伝子は発育ステージに依存して発現調節を受けることを明らかにした。両系統を用いた戻し交配実験を行い,両系統,そのF_1,およびF_1の戻し交配子孫を用い,CYP9M10の転写レベル,遺伝子量,および両系統で異なるP450コード配列のハプロタイプに関する遺伝子型を調べ,次のことを明らかにした。i)CYP9M10の過剰発現は,約6倍の遺伝子増幅と約50倍と推定される転写活性の増大という二つの要因の相乗効果でもたらされている。ii)増幅したP450遺伝子は互いに強く連鎖している。iii)転写活性の増大に関する突然変異は,半優性の効果およびシス作動性を示す。これらの結果から,JPP蚊でCYP9M10遺伝子の転写活性が増大する要因は,転写調節領域に生じた突然変異によるものと推定された。ピレスロイド抵抗性のネッタイイエカJpal-per系統の終齢幼虫期において、シトクロムP450の活性増大がピレスロイド解毒代謝の主要因となっている。この系統で特異的に高発現しているP450の分子種がこれまでにいくつか特定されたが、その中でもCYP9M10分子種は、殺虫剤感受性の小笠原(OGS)系統と比べ、mRNAで300倍という非常に高い発現量を示す。CYP9M10遺伝子の高発現にはゲノム中のコピー数増大と転写調節機構における変異の双方が関わり、また、過剰転写の遺伝子的要因はシス作動性である。過剰転写をもたらす変異を明らかにするために、今年度は、両系統のCYP9M10構造遺伝子の周辺配列を解析した。JPal-per系統からは、強い連鎖関係にあるが上流の近傍配列が異なる2種類の配列タイプ(type1と2)が見つかった。また、Jpal-per系統とOGS系統のCYP9M10遺伝子近傍配列を比較したところ、いくつかの特徴的な挿入/欠失が見つかった。そのうち1つは、JPal-per系統の2つの配列タイプに共通して存在し、転写開始点の上流1kb以内に位置する約0.7kbのDNAトランスポゾン様配列の挿入であった。CYP9M10構造遺伝子の配列に含まれるNot I制限酵素認識配列の上流と下流のそれぞれの近傍配列をプローブとして用い、パルスフィールド電気泳動に基づくサザンプロッド解析を行った結果、type2配列を含む増幅単位のサイズは約100kbであり、その増幅単位はhead to tailの向きでタンデムに並んでいることが示された。これまでに,CYP9M10は,ネッタイイエカのピレスロイド抵抗性JPal-per系統で過剰発現をしているいくつかのP450遺伝子の中で最も高い発現比(感受性系統に対し約250倍)を示すとともに,その翻訳産物は,異種細胞発現系においてピレスロイドのペルメトリンを代謝することを確認している。CYP9M10の構造遺伝子はJPal-per系統のゲノム上で重複していることが,これだけでは250倍という発現比は説明できない。

今年度は,JPal-per系統におけるCYP9M10の過剰発現にはどのような機構が関わっているのか,また,それはピレスロイド抵抗性の原因となり得るかという二つの問題について,遺伝学的な手法から検討した。まず,JPal-per系統と感受性の小笠原系統を掛け合わせたヘテロ接合体(F1)を作った。このF1個体における両系統由来のCYP9M10対立遺伝子の発現比を調べたところ,JPal-per系統由来の対立遺伝子が小笠原系統由来の対立遺伝子に比べ約250倍多く発現していた。一方,JPal-per系統由来の構造遺伝子数の比は小笠原系統由来に対し2倍もしくは3倍に過ぎなかった。従って,Jpal-per系統におけるCYP9M10の過剰発現は構造遺伝子周辺のcis-elementの変異が主な原因であり,それに加え遺伝子量の増大が多少関与することが示された。また,F1と小笠原系統を掛け合わせた戻し交配世代において,CYP9M10の遺伝子型とピレスロイド抵抗性の間には明らかな連関があることを確認した。これらの結果から,CYP9M10の過剰発現はJPa1-per系統のピレスロイド抵抗性の原因である可能性が非常に高いと考えられる。JPal-per蚊の縦列重複したCYP9M10遺伝子のハプロタイプは,少なくとも,シンガポール,サウジアラビア,ケニヤ産の蚊に共通に保有されることを確認し,本種においてピレスロイド抵抗性を検出するための分子標的となる可能性も示された。
家族の個別化現象と家族的価値再発見の動向に関する実証的調査

家族の私事化、個別化問題に関して、地域や分化、階層、業種などの点で性質を異にするいくつかの社会セクターをとりあげ、これを比較することでどのような社会的セクターに個別化がよりはっきりと観察されるのか、その条件はいかなるものかを調査研究した。調査対象は、最も個別化が進行しているセクターとして高学歴・有職女性のグループを設定し、これとの比較で、零細自営業者や労働者階級の多い東京下町地域の家族グループをとりあげた。さらにこの中間に、第一次調査(1990年)との関連性をにらんで阪神地域の女子短大生をもつ両親グループも設定した。この結果、個別性への志向は高学歴・有職女性のグループに明らかに高く、下町サンプルと短大生両親サンプルはほぼ類似の傾向にあった。また個別化への志向性と共同性への志向も同時存在することが確認された。ただし、その志向性バランスは社会的セクター各々によって、あるいは妻と夫の間で微妙に異なっていた。二分法的理解を超えた複層的理解が求められる結果であった。さらに前回調査では、むしろ個別化は情緒的な絆の強化に結びつかないことも明らかにされたが、この点について今回調査の結果は選択的に個別性志向をとり得る階層では、家族の個別化が必ずしも夫婦の情緒的絆を弱めるわけではなさそうなことが明らかにされた。今回の調査研究では、人々は個別性を志向するとともに共同性も志向するという、個別性と共同性の二元性を確認できた意味は大きい。今後、情報化などの新しい社会の動きが家族関係に与える影響も視野に取り込むことによって、新たな家族共同性を構想することも肝要な点であり、これらの理論的深化の課題追求とあわせて、われわれの喚起する「個別化する私事化」概念の歴史的意味づけもより一層明らかなものとなるだろう。申請書に記した研究目的に立脚し、個別化・私事化状況を、世代間比較、階層間比較、地域間比較を主軸にして、今、家族にどのような変化が起こりつつあるのか、あるいはいないのかを、より具体的に、かつ今後の傾向をも明らかにする事を目的として検討してきた。その結果、右記の枠組みを設定した。また質問項目は、意識次元のみならず、行動次元をも析出する点に留意して、1、情緒関連項目2、個別化・共同化(2次元操作化)3、夫婦・家族生活への評価4、経済状況変化5、家族境界意識にみる個別化・共同化関連項目を検討している。仮説として、「個別化に関する選好が高ければ」、1、個別化の実態もより高い。2、個別化実態への評価(家族、夫婦関係満足感)高い。3、情緒の重視これらは「共同化に関する選考性が高い」時も同様であろう。「選好性と実態が食い違う場合」は、1、個別化実態への評価は低く2、個別と共同の統合化努力行動も少ない3、情緒の重視が低い(?)4、FSOCも低い等が、挙げられる。(項目、仮説は検討中)。なお、今年度末にプリテストを行うべく準備を整えていたが、その直前の阪神大震災のため、次年度へと繰り越さざるを得なくなった。また、本調査の対象地も変更せざるを得ないと考えている。本年度は、個別化・私事化状況をめぐる実査と分析が課題であった。個別化・私事化状況は豊かさを背景に、高学歴もしくは有職の女性と関連する傾向があることは既に報告した。そこでクラスター分析の精度を高めるためにも予備調査等を少々丁寧にしたく当初は昨年度末に設定していたが、震災の影響で今年度になって簡単に行うなど予定を大幅に変更せざるを得なくなった。また、調査対象地も設定しなおした。