hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
κ-オピオイド関連薬物を用いた遅発・進行性の学習・記憶障害治療薬の開発研究

我々は、コリン作動性神経系の機能低下が生じるモデル動物に対して、dynorphin Aなどのκ-オピオイド受容体作動薬が、学習・記憶障害を改善することを報告してきた。また、dynorphin Aと相同性が高いnociceptinが、opioid receptor like-1(ORL1)受容体を介さない機序で学習・記憶障害を改善する可能性を示唆した。ORL1受容体ノックアウトマウスの海馬では、κ「オピオイド受容体mRNAの発現量が減少し、逆に、dynorphin A前駆体タンパクやnociceptin前駆体タンパクのmRNA発現量が有意に増加していた。これら変化は、β-amyloid peptideを投与したマウスでも同様にみられた。ORL1受容体ノックアウトマウスにβ-amyloid peptideを投与すると、投与1週間後の海馬におけるdynorphin A前駆体タンパクのmRNA発現量が有意に減少した。遅発性の学習・記憶障害モデルとして、拘束水浸ストレス負荷モデルおよびリポポリサッカライド(LPS)投与により誘発される学習・記憶障害モデルを用い、dynorphin Aおよびnociceptinの作用を検討した。拘束水浸ストレスを負荷すると、負荷5日後に有意な短期記憶障害が惹起され、7日後においても受動的回避学習が障害された。この障害は、アセチルコリン分解酵素阻害薬であるtacrineや、抗うつ薬であるdesipramineにより有意に寛解された。また、catechinなどの抗酸化作用を持つ化合物の連続投与によっても障害が寛解された。一方、LPSを側脳室内に投与することにより誘発された遅発性の学習・記憶障害に対し、catechinの連続投与によって障害が寛解された。今後、今回用いたモデルマウスに対するこれら神経ペプチドの効果を検討する予定である。我々は、コリン作動性神経系の機能低下により学習・記憶障害を生じるモデル動物に対して、ダイノルフィンAなどのκ-オピオイド受容体作動薬が、学習・記憶障害を改善することを報告してきた。1995年に発見された脳内神経ペプチドであるノシセプチンは、ダイノルフィンAと相同性が高く、また、これまでの我々の研究結果から、ダイノルフィンAと同様に、コリン作動性神経系の機能障害モデルに対し改善作用を示すことを明らかにしている。本年はまず、メカミラミンによる学習・記憶障害モデルラットに対する低用量のノシセプチンの作用を検討した。ノシセプチン10fmol/ratをラット側脳室内投与すると、メカミラミンによる学習・記憶障害が改善され、この作用は、ノシセプチン受容体であるopioid receptor like-1(ORL1)受容体拮抗薬、[NPhe^1]ノシセプチン(1-13)NH_2を投与しても拮抗されなかった。脳内微量透析法において、メカミラミン(49μmol/kg,s.c.)による海馬内でのアセチルコリン遊離量の減少は、ノシセプチン(10fmol/rat,i.c.v.)の投与により有意に改善された。次に、ORL1受容体ノックアウトマウスを用いて、ステップダウン型受動的回避学習法およびY字型迷路法により学習・記憶機能の検討を行った。ノシセプチンは、ノシセプチン受容体であるORL1受容体がノックアウトされているにも関わらず、1fmol以下の用量で、スコポラミンによる学習・記憶障害を有意に改善した。以上の結果より、ノシセプチンはORL1受容体を介さない機序でコリン作動性神経機能障害による学習・記憶障害を改善する可能性があることを明らかにした。

また、dynorphin Aと相同性が高いnociceptinが、nociceptin受容体であるopioid receptor like-1(ORL1)受容体を介さない機序でコリン作動性神経機能障害による学習・記憶障害を改善する可能性を示唆した。今回は、ORL1受容体ノックアウトマウスを用い、関連する遺伝子発現の変化をRT-PCR法で検討した。ORL1受容体ノックアウトマウスの海馬では、対照群と比較して、κ_1-オピオイド受容体mRNAの発現量が減少し、逆に、dynorphin前駆体タンパクやnociceptin前駆体タンパクのmRNA発現量が有意に増加に増加していた。ORL1受容体ノックアウトマウスの前脳皮質ではdynorphin前駆体タンパクおよびnociceptin前駆体タンパクmRNAの発現量が有意に増加していたが、κ_1-オピオイド受容体mRNAの発現量は増加傾向に留まった。これら変化は、β-amyloid peptide(25-35)を投与したマウスでも同様にみられた。ORL1受容体ノックアウトマウスにβ-amyloid peptide(25-35)を投与すると、投与1週間後の海馬におけるdynorphin前駆体タンパクのmRNA発現量が有意に減少した。対照群であるC57BL/6Jマウスにβ-amyloid peptide(25-35)を投与すると、有意ではないが海馬におけるdynorphin前駆体タンパクおよびκ_1-オピオイド受容体タンパクのmRNA発現量にも減少傾向がみられた。これら変化で、ORL1受容体ノックアウトマウスにおけるnociceptinによる記憶障害改善作用を説明できないため、ORL1受容体を介さない機序でコリン作動性神経機能障害による学習・記憶障害を改善する機序について,さらに詳細に検討する必要がある。我々は、コリン作動性神経系の機能低下が生じるモデル動物に対して、dynorphin Aなどのκ-オピオイド受容体作動薬が、学習・記憶障害を改善することを報告してきた。今回は、遅発性の学習・記憶障害モデルとして、拘束水浸ストレス負荷モデルおよびリポポリサッカライド(LPS)投与により誘発される学習・記憶障害モデルを用いて、dynorphin Aおよびnociceptinの作用を検討するための基礎実験を行った。拘束水浸ストレスを負荷すると、負荷5日後に有意な短期記憶障害が惹起され、7日後においても、受動的回避学習が障害された。この障害は、アセチルコリン分解酵素阻害薬であるtacrineや、抗うつ薬であるdesipramineにより有意に寛解された。また、catechinなどの抗酸化作用を持つ化合物の連続投与によっても障害が寛解された。一方、LPSを側脳室内に投与することにより誘発された遅発性の学習・記憶障害に対し、catechinの連続投与によって、障害が寛解された。
運動野―体性感覚野の境界形成メカニズム

感覚入力を受容する大脳皮質の第4層のニューロンは、領野特異的神経回路の形成において中心的な機能をもつと考えられているが、これらニューロンの分化機序についてはこれまで不明な点が多く残されてきた。本研究は哺乳類で高度に保存され、細胞構築の違いが明瞭である一次運動野と一次体性感覚野間の境界に焦点をあて、大脳皮質第4層ニューロンの分化と領野の決定機構を明らかにすることを目的としている。今年度は前年度の結果を受け、第4層ニューロンの分化を制御する分子実体を明らかにするために、転写制御因子Foxg1の遺伝子発現操作およびトランスクリプトーム、ChIP解析から絞り込んだ新たな標的遺伝子COUP-TFIに焦点をあてて解析を行った。特にCRISPR/Cas9システムを用いたCOUP-TFIのモザイクノックアウトと異所的発現により、COUP-TFIがFoxg1の下流で第4層ニューロンの分化を規定することを明らかにした。さらにChIP解析より同定したFoxg1のCOUP-TFI結合領域の欠失により、COUP-TFIの発現が脱抑制されることで4層ニューロンへの分化が促進されることを見出した。これらの一連の解析から、Foxg1-COUP-TFIを介した4層ニューロン分化における転写ネットワークとその制御の分子実体が明らかになった。今年度は転写制御因子Foxg1とその標的遺伝子の第4層ニューロンの分化における機能を明らかにし、その制御のしくみを明らかにした。研究は概ね順調に進展しているといえる。これまでの解析により、大脳皮質におけるFoxg1とCOUP-TFIの相補的な遺伝子発現が第4層ニューロンの分化を制御していることが示された。そこでこれら転写制御ネットワークの領野形成における機能を明らかにするため、今年度はこれら転写因子の遺伝子操作を行い、レポーターマウスを用いた配置パターンの解析とライブイメージングにより領野特異的細胞の統合パターンの解析を進める。これら一連の実験により、一次体性感覚野と一次運動野に寄与する第4層ニューロンの時空間動態を明らかにすることで、大脳皮質領野形成機構を明らかにする。末梢器官からの感覚入力を受容する大脳皮質の第4層ニューロンは、領野特異的神経回路の形成において中心的な役割を担うと考えられているが、第4層ニューロンの発生機序については不明な点が多く残されている。本研究は大脳皮質の領野決定のしくみを解明するために、第4層ニューロンの分化機構に着目し、哺乳類で高度に保存された一次運動野と一次体性感覚野間の境界形成機構を明らかにするものである。今年度は第4層ニューロンの分化を制御する転写制御ネットワークに焦点をあて、マウスを用いたトランスクリプトームおよびChIP解析を行った結果、Foxg1が発生期大脳皮質におけるCOUP-TFIの発現を抑制し、Foxg1とCOUP-TFIの相補的なパターンが第4層ニューロンの分化を制御している可能性が示唆された。これを検証するために、Foxg1のノックアウトマウスを用い生体内でFoxg1の発現操作を行った結果、大脳皮質上層ニューロンにおけるFoxg1の発現抑制が、COUP-TF1陽性細胞を誘導することが見出され、これら転写因子間の相互作用が層特異的なニューロンの分化を制御していることが示された。またこれと並行して、発生期大脳皮質における第4層ニューロンの動態を可視化するために、生体において第4層ニューロンを遺伝学的に標識する手法を用い、時期特異的なタモキシフェン投与によるレポーター遺伝子の組み換え効率について評価し、大脳皮質スライスを用いたライブイメージングの条件検討を行った。今年度はノックアウトマウス、トランスクリプトームおよびChIP解析を組み合わせることで、第4層ニューロンの分化決定を担う新たな転写制御ネットワークの存在が示され、今後の研究の展開へとつながった。

これまでのFoxg1の遺伝子発現操作によるトランスクリプトームとChIP解析の結果から、大脳皮質におけるFoxg1とその標的遺伝子の相補的な遺伝子発現が第4層ニューロンの分化を制御している可能性が示された。そこで今後は第4層ニューロンの分化におけるFoxg1と標的遺伝子の発現動態の解析、コンディショナルノックアウトマウスおよびCRISPR/Cas9システムを用いた各転写制御因子の発現操作による機能獲得/機能欠失実験、また生化学的実験を用い、第4層ニューロン分化を規定するFoxg1を介した転写制御ネットワークの分子実体を明らかにしていく。これと並行して遺伝子改変マウスを用いたライブイメージングにより、領野特異的ニューロンの統合パターンについても解析を進める。これまでの解析により、大脳皮質におけるFoxg1とCOUP-TFIの相補的な遺伝子発現が第4層ニューロンの分化を制御していることが示された。そこでこれら転写制御ネットワークの領野形成における機能を明らかにするため、今年度はこれら転写因子の遺伝子操作を行い、レポーターマウスを用いた配置パターンの解析とライブイメージングにより領野特異的細胞の統合パターンの解析を進める。これら一連の実験により、一次体性感覚野と一次運動野に寄与する第4層ニューロンの時空間動態を明らかにすることで、大脳皮質領野形成機構を明らかにする。
臨床ポジティブ心理学にもとづく若年層自殺予防プログラムの開発

研究課題の核心をなす学術的な「問い」は、「自殺を予防し人を生き永らえさせる心理的特性(自殺の保護因子)がどのようなものであり(問1)、その特性はどのようにすれば涵養することが可能か?(問2)」というものである。この問いの背景には、既存の自殺予防戦略が主として自殺の危険因子を除去することに偏重してきたという問題点がある。本研究では上述の問題を解消するために、ポジティブ心理学の知見を自殺予防のために臨床応用するという立場をとる。今年度の目的は、問1に対する暫定的な回答を得て、保護因子を涵養するプログラムの下地を作ることであった。そこで、今年度は二度の調査を実施し、自殺念慮と強み特性との関連を探索的に検討した。大学生を対象とした調査では(N = 195)、自殺念慮(1項目)があった/あることと関連があるのは(ロジスティック回帰)、女性、精神科受診(現在)、「独創性」の高さ、であることが示唆された。そのため、自殺念慮の保護因子となる要因は確認されなかった。20-60代を対象としたインターネット調査会社への登録モニターへの調査では(N = 2000)、結(人と積極的にかかわることができる)、愛(愛し愛されることができる)、危(リスクを負うことをいとわない)といった強み特性が自殺念慮と関連することが示唆された。ここから、人と積極的にかかわり、愛し愛される関係性を形成することが自殺念慮の保護因子となると考えられた。初年度に自殺念慮と強み特性との関連を検討するという当初目標を達成することができたため。研究計画の変更の必要性は生じていない。今後は、自殺念慮と関連のある強み特性として明らかになった要素を中心にした自殺予防プログラムの策定を実施する。インターネット調査会社の登録モニターに対する調査費用を抑えることができたために、若干の次年度使用額が発生した。この金額は、自殺予防プログラムの作成のための人件費・謝金として用いる予定である。
クロロフィルオリゴマーの構造制御と機能発現

光合成の光収穫系アンテナ部に見出される秩序だった色素配列を模倣して、数と空間配置をコントロールしたクロロフィル集積体を構築し、その構造と機能の解明を行った。クロリン骨格にアセチレン部位を導入する手法を開発し直鎖状2量体を合成したところ、共役系の拡張に伴う吸収スペクトルの変化が観測された。また、エステル鎖で架橋された環状の2,3,4量体クロリンを合成したところ、4量体が特異的にフラーレンを認識して取り込むことを見出した。光合成集光アンテナのモデル系構築を目的として、クロリンの環状オリゴマーを合成した。クロロフィル-aを出発原料としてメチルピロフェオフォルバイド-aへと誘導し、つづいて3位のビニル基をヒドロキシメチル基に変換した。この3^1位の水酸基と17^2位上のメチルエステルを、トルエン溶媒中スズ触媒を用いて分子間でトランスエステル化反応させた。得られた環状化合物はGPCカラムにより分離精製し、FAB-MSおよび^1H-NMRにより2,3,4量体の同定を行った。また、非環状の参照化合物を別途合成し、CDおよび可視吸収スペクトルにより構造を検討した。その結果、環状4量体はクロリン環同士が分子内でスタックする傾向が強く、色素分子の空間配置は2量体に近いことが分かった。一方、環状3量体はクロリン環で形成される空孔内にフラーレンを特異的に内包できることが明らかとなった。クロロフィルよりも長波長領域に吸収をもつバクテリオクロロフィル-aに着目し、バクテリオクロリン環の3位に様々な置換基を有する一連の誘導体の合成ルートを確立した。比較的不安定とされるバクテリオクロリン環に対しても、酸化反応などが適用できることが明らかとなった。また3位置換基を変換することにより、最長波長ピーク(Q_y帯)の位置を717nmから790nmの範囲でチューニングすることができた。クロロフィル色素分子の秩序だった空間配置形成に主要な役割を果たす中心金属への配位挙動を調べるために、ガリウム(III)クロリン類を合成し、NMRを用いて不斉アキシャル配位についての検討を行った。クロロフィル色素は不斉面を有するため、五配位錯体の形成によって二種の立体異性体を生じ、^1H-NMRスペクトルでは比率の異なる二種類の混合物としてシグナルが観測された。このように、これまで固体の結晶構造解析でのみ異性体が識別されていた不斉配位錯体を、溶液中でも実験的に観測することに成功した。光合成の光収穫系アンテナに見出される秩序だった色素分子配列を模倣したクロロフィルオリゴマーの構築を目的として、天然のクロロフィル-aを出発原料に自己会合性のバクテリオクロロフィル誘導体を合成した。クロリン環の7,8位にシスジオール構造を持つ亜鉛バクテリオクロリンについて、吸収・蛍光およびCDスペクトルにより水溶液系での会合挙動を検討したところ、ミセル中の疎水環境においてこれらの亜鉛錯体は秩序だった自己集積体を形成していることが示された。これまでに合成した自己会合型クロリンと比較して、今回作製した亜鉛バクテリオクロリンは会合に伴うQyピークの長波長シフトが大きく、900nmを超える近赤外領域までのシフトを実現した。一方で、20-位にメチル基を有するバクテリオクロロフィル-cは培養細菌から少量しか抽出できないため、容易に入手できるクロロフィル-aからの有機合成的な変換ルートを確立した。20-位への選択的なブロモ化と鈴木カップリングによるメチル化を組み合わせることにより、それまで10段階収率3%(文献値)の過程を3段階収率60%へと大幅に改善することに成功した。天然のクロロフィルを利用した機能性色素の開発例として、3位にトリフルオロアセチル基を導入したクロリンを合成した。この色素分子はアミン類と非プロトン性溶媒中で可逆的なヘミアミナール付加体を形成し、それに伴って色調が茶色から紫色へと変化することを確認した。平衡が温度依存性を示すことから、分光学的手法により熱力学パラメーターの算出も行った。光合成の光収穫系アンテナを人工的に再構築したモデル系の作製を目的として、クロロフィル-aより合成したmethyl pyropheophorbide-aの3位ビニル基を3位エチニル基へ変換する手法を開発した。エチニル基同士は銅触媒を用いないアセチレンカップリングを行うことにより、クロリンのQy軸上にパイ共役系が伸長したクロロフィル2量体を合成することができた。このクロリン2量体では長波長領域での吸収(696nm)と蛍光(700nm)、高い蛍光量子収率(0.34)といった特徴が見られた。また、エチニル基へ種々のアジド化合物を環化付加反応させることにより、クロリンの3位にトリアゾール環をもつ誘導体を作製した。これらのトリアゾール化合物のスペクトル特性は、原料の3-ビニルクロリンと類似していることが明らかとなった。

一方、3位、7位および8位にカルボキシル基を持つクロリン誘導体を合成し、酸化チタン微粒子上へ自己集積させることで、色素増感太陽電池に応用した際の機能発現についても検討した。これらの増感色素は、それぞれ対応するホルミル誘導体の次亜塩素酸ナトリウムによる酸化で合成した。グレッツェル型セルによる光電変換効率の評価を行ったところ、Qy軸上にカルボン酸を持つクロリンが最も高い変換効率を示した。3位にカルボキシル基を持つバクテリオクロリン類似体も同程度の効率を示したものの、クロロフィル-cのフリーベース体(ポルフィリン誘導体)の効率はクロリン類に比べて低いことが分かった。
郊外戸建住宅地の管理・運営システムの構築に関する研究

「田園調布」のような歴史的な戸建て住宅地の場合、大きな敷地、生け垣環境などが敷地分割、景観変貌の「危機」に直面していることが明らかとなった。/個々の新しい戸建て住宅では、必ずしも高齢化、単身化、「消滅」といった過程をとるものではなく様々な可能性があることが分かった。/戸建てコーポラティブ住宅地の場合、家族生活を越えた「共同生活」的側面をももち、管理運営にもプラス的に働いている。/社会福祉協議会は、一義的に住宅地の管理運営組織ではないが、社会福祉的視点から住宅地管理運営的働きも一定可能であることが分かった。本年度は、共同では歴史的な郊外戸建住宅地「田園調布」へ現地視察、聞き取り調査に出かけ、宅地細分化、景観変動などの問題点を見出した。また、研究代表者としては、関西における郊外戸建住宅に住む主として高齢者世帯に対して、現在までの生活や住まい、今後の生活の見通しや住まいへの対処、課題等について聞き取り調査を行った。未だ十例以内に留まっているので、明確な方向性は見えなかった。ただ聞き取りの課程を通じて課題を認識することは出来たと考える。来年度は、独自の課題の他に、継続として、本年度聞き取り調査を基にさらに聞き取りを続け、方向性を見出したい。研究分担者は、本年度は、郊外戸建住宅地を含む広範囲の地域を総括し、広く住民の生活やコミュニティ活動の支援を行っている広島市安佐南区の大塚・伴南学区社会福祉協議会の活動を事例として調査を行った。学区の社会福祉協議会役員と広島市都市整備局西風新都整備部職員に活動や地域の現状について聞き取り調査を実施するとともに、学区居住者に社会福祉協議会の活動やまちづくりについてアンケート調査を実施した。その結果、社会福祉協議会が地域に果たす役割、社会福祉協議会の取り組みの課題、住宅地の管理・運営を円滑に行っていくための可能性が明らかになった。今年度は二つの調査を行った。一つは、郊外戸建住宅地を含む地区の社会福祉協議会の果たす住宅地管理・運営機能を検証し、将来の可能性を探った。もう一つは、戸建のコーポラティブ住宅地における個々の居住者の将来の自分の住宅の扱い(広い意味での管理のあり方)についてケーススタディをした。前者は広島において、後者は関西において行った。前者では、地区の社会福祉協議会は、名前のように社会福祉事業を行う団体であるが、広域的に様々な活動を包括している点を生かして福祉(いわゆる子ども、高齢者、障害者を対象とした支援)を超えた広い意味での住民サポートが展開できることが分かった。例えば、買い物の御用聞きと配達、留守中の家屋や庭の管理、活動拠点として空き家や空き地の活用など、多様な側面から戸建住宅地の管理・運営問題に対応できる可能性がある、と結論できる。後者では、年齢や家族形態(夫婦、単身等)で、将来見通しは様々だが自らの高齢化が進む中で社会的な高齢者住宅や施設に入ろうとする傾向は強くない。これは、長年、協力して住宅地を形成してきたことから、家族を超えた近所の「助け」(福祉的介助ほではなく、長期不在の時の住まいの見守りなど)が期待でき、日常的な気軽な付き合いや地域活動の存在が大きいであろう。また子供達も「コーポラティブ戸建住宅」の意義も理解している場合が多く、一つの事例では、関東出身で滋賀県の戸建コーポラティブ住宅に入居した家族では、関東に住んでいた子供たちが両親の「引力」と戸建コーポラティブ住宅の「引力」にひかれて次々と近所に引っ越してきて、週末や休みは大家族風になっていた。郊外戸建住宅地では、集合住宅地の管理組合のような「強い」管理・運営システムがすぐには出来ないが、社会福祉協議会や自治会などを通じて「ゆるい」管理・運営システムの形成は可能である。
Bcl-2 family 蛋白 Mcl-1 による破骨細胞制御機構の解明

破骨細胞は生体内で唯一骨吸収能を有する細胞である。生体内の骨代謝は骨形成と骨吸収のバランスによって保たれているが、このバランスが崩れることで骨粗鬆症、炎症性疾患における関節破壊、人工関節の緩みなどが引き起こされる。これまでに破骨細胞の生存・骨吸収にはアポトーシスのミトコンドリア経路に関与するBcl-2ファミリーが重要な働きをしていることが報告されている。今回申請者は、Bcl-2ファミリー蛋白の1つであるMcl-1の破骨細胞における働きについて研究を行った。Mcl-1は破骨細胞の細胞生存能の延長に強く働いている一方、骨吸収能には抑制の働きを持つことが明らかとなった。マウスの骨髄細胞をM-CSF/RANKL系で培養し、各分化段階のMcl-1 mRNA量の定量を行った。破骨細胞におけるMcl-1 mRNAの発現は分化初期から大量ではないが存在し、各分化過程においても一定量を保っていることが明らかとなった。破骨細胞内のMcl-1代謝に関して、時間毎の蛋白を回収しWesternblottingにて発現量を評価した。Mcl-1は同じanti-apoptotic Bcl-2ファミリーのBcl-XLより早い蛋白代謝を受けていたが、生存シグナルの除去によりその代謝速度の差はさらに顕著となった。新たに合成されるMcl-1の影響を取り除くため、RNA合成阻害剤であるアクチノマイシンDを添加して同様に実験を行ったところMcl-1は90分後には元の半分以下にまで蛋白発現が低下しており、破骨細胞におけるMcl-1の蛋白半減期は90分未満ときわめて速い代謝を受けていることが明らかとなった。Mcl-1の代謝に関してはプロテアソーム系、カスバーゼによる断片化などが報告されているが、破骨細胞においてどの代謝機構が主に働いているかは未知であった。プロテアソーム阻害剤MG132を用いた実験を行ったところ、プロテアソーム阻害剤の添加によりMcl-1の代謝が大きく阻害され、Mcl-1の蛋白代謝にプロテアソーム系が関与していることが確認された。また、MG132を添加した破骨細胞の蛋白で免疫沈降を行ったところ、Mcl-1がユビキチン化を受けた際にはバンドがみられ、このことより破骨細胞における早いMcl-1蛋白代謝にはBimと同様にユビキチン・プロテアソーム系が関与していることが明らかとなった。破骨細胞特異的にMcl-1をノックアウトしたマウスを作出した。次年度以降に骨形態計測などを用いて評価を行う。破骨細胞におけるMcl-1の働きを解明するために破骨細胞にレトロウイルスを用いてMcl-1の発現強制および発現抑制の遺伝子導入を行い、細胞分化・細胞骨格形成、生存能を調べた。Mcl-1の発現強制・発現抑制を行っても破骨細胞の細胞分化・細胞骨格形成には明らかな変化は見られず、これらに関してはMcl-1の関与は否定的であった。一方、破骨細胞の生存能に関してはMcl-1の強制発現で著明に延長し、また反対にその発現抑制で有意に低下した。このことから破骨細胞においてMcl-1は細胞生存能を正に制御することが明らかとなった。Mcl-1 floxマウスから採取した骨髄細胞にレトロウイルスあるいはアデノウイルスを介してCre遺伝子の導入を行い、Cre-loxPシステムを発動させMcl-1ノックアウト破骨細胞を作製、この細胞においての細胞分化・細胞生存能・骨吸収能について検討した。細胞分化に関してはやはり明らかな変化は見られずMcl-1の関与は否定的であった。Mcl-1ノックアウト破骨細胞においては細胞生存能の低下が見られた。一方骨吸収能においてはMcl-1ノックアウト破骨細胞のほうがcontrol破骨細胞より亢進しており、Mcl-1は骨吸収能に対して負に制御を行っていることが明らかとなった。骨代謝学マウスのin vitroでの実験が順調に進んでおり、引き続きvitroの解析とMcl-1 floxマウスを用いた解析を進めている。Mcl-1 floxマウスから採取した骨髄細胞にレトロウイルスあるいはアデノウイルスを介してCre遺伝子の導入を行い、Cre-loxPシステムを発動させMcl-1ノックアウト破骨細胞を作製、この細胞においての細胞分化・細胞生存能・骨吸収能について検討していく。概ね研究が順調に進み、次年度計画のための資金とした。マウスを用いたMcl-1発現に関するin vitroの解析とMcl-1 creマウスの解析を行う。マウスの維持管理のための費用や各種抗体、試薬準備費用を要する。
複合金属フラビン酵素における分子内電子伝達機構

キサンチン酸化酵素とキサンチン還元酵素とは同一遺伝子由来の複合金属フラビン蛋白質である。本酵素は哺乳動物においては本来還元酵素として存在しているが、精製中に酸化酵素に変換する。本酵素は同一サブユニットよりなる二量体であり、尿素生成の最終2段階に働くとともに活性酸素種(過酸化水素、スーパーオキシドアニオンなど)生成にも関与する。サブユニットの分子量は約150000Da、各サブユニットには1つのモリブドプテリン、2つの非ヘム鉄および1つのFADが含まれる。酵素反応中これら補欠分子間を電子が伝達される。すなわち分子内に電子伝達機構をもつ特異な酵素である。従って、より複雑なミトコンドリアやミクロソームの電子伝達機構の理解に有益な示唆を提供すると思われる。本研究では、本酵素の反応機構および反応調節機構をより詳細に解析することを目的とした。キサンチン酸化酵素はモリブドプテリン・非ヘム鉄・FADを補欠分子族とする特異な複合フラビン酵素である。酵素内電子伝達機能をもち他のより複雑な異分子間電子伝達のよいモデルとして興味がもたれている。またこの酵素は生体内ではNADを電子受容体とする脱水素酵素であるが、哺乳類由来の酵素は酵素蛋白部分の修飾により容易に酸素を電子受容体とする酸化酵素型へ変換する。本年度は酵素のX-線結晶解析の予備結果およびcDNA発現系による部位得意的変異による解析のためcDNAの改変型の構築をおこなった。またパルスラジオリシスによる分子内電子伝達速度の測定を行った。1)ミルクキサンチン酸化酵素の結晶条件検討と予備結果今までわれわれが結晶化に成功しているミルクキサンチン酸化酵素の結晶条件検討を行った。酵素の精製法を改良した。結晶について筑波高エネルギー研究所においてデータの収集をおこなった。また、二つの重金属置換体についてデータ収集をおこなった。2)cDNA改変型の作成脱水素酵素型/酸化酵素型の変換に関与するSH基および非ヘム鉄に関与するSH基に対応する塩基の改変型を作成しそれぞれをベクターに組み込む作業をおこなった。現在培養細胞で発現実験をおこなっている。3)パルスラジオリシスによる分子内電子伝達速度の測定サリチル酸ラジカルを用いモリブデンからフラビンに至る分子内電子伝達速度を測定した。その速度定数は510/秒であり、律速段階より著しく速いことが判明した。キサンチン酸化酵素は4つの反応中心(1つのモリブドプテリン、2つの非ヘム鉄および1つのフラビン)を有する特異な複合フラビン酵素であるが、酵素反応中これらの反応中心間を電子が伝達されるという分子内電子伝達機構をもつ特異な酵素でもある。したがってより複雑な異分子間電子伝達機構を解析するモデルとして興味がもたれる。また本酵素は生体内ではNADを電子受容体とする脱水素酵素であるが、ホ乳類由来の酵素は酵素蛋白部分の修飾により、酸素を電子受容体とし活性酸素種を生成する酸化酵素型へ容易に変換する。本年度は各補欠分子族およびNADの結合部位、その環境の反応性における役割等をさらに明らかにするため、遺伝子組み換え実験による野生型および変異型酵素発現系の作成およびその精製法の確率にとりくんだ。また本酵素による尿酸代謝調節とともに活性酸素種の生体内での機能についての情報をえるため、活性酸素消去系酵素であるスーパーオキシドデイスムターゼについても遺伝子組み換え実験により野生型および変異型酵素を作成し、精製酵素の反応速度定数の解析にとりくみ次の結果をえた。1)キサンチン酸化酵素野生型および変異型酵素のバキュロバイラス系での発現に成功し、現在その精製法の確立を行っている。2)スーパーオキシドデイスムターゼ野生型および変異型酵素の大腸菌での発現に成功し、その精製法を確立した。3)スーパーオキシドデイスムターゼ野生型および変異型酵素について、パルスラジオロシス法による各酵素の各反応速度定数解析を行い、基質を活性中心にガイドする機構に関与するアミノ酸残基の検討を行った。したがってより複雑な異分子間電子伝達機構を解析するためのモデルとして興味ある酵素である。また本酵素は生体内ではNADを電子受容体とする脱水素酵素であるが、哺乳類由来の酵素は酵素蛋白部分の修飾により、酸素を電子受容体とし活性酸素種を生成する。

活性酸素種はその高い反応性から酸素障害への関与が示唆されており、生体にはこの活性酸素種消去に関与すると考えられるスーパーオキシドデスムターゼが存在している。本年度我々は、次の結果を得た。1)遺伝子組み換え実験により野性型および2つある非ヘム鉄のうちの一方を欠いた変異ラットキサンチン酸化酵素を昆虫細胞を用い発現させた。発現した野性型の酵素、及び変異酵素を電子スピン共鳴法にて解析を行い、その結果、変異酵素は2種ある非ヘム鉄の内の1方に由来するシグナルを欠いていることを確認した。得られた変異酵素の活性を測定し、野性型の酵素との比較を行った。その結果、変異酵素は野性型の酵素と同様、活性酸素を生成しており、この変異酵素で欠失している非ヘム鉄は同酵素の活性酸素生成能には影響を与えていないことがわかった。2)遺伝子組み換え実験により得た野性型および変異型ラットMn-スーパーオキシドデスムターゼの反応速度定数を測定した。本酵素には基質を活性中心へ誘導するためのガイド機構が存在する。29位リジン及び173位アルギニン残基がこの機構において重要な働きを有している。34位チロシン残基は本酵素活性のpH依存性に関与している。
フランス文学における歴史記述の総合的研

フランスにおける、「文学」と「歴史」という二つの隣接ジャンルの美学的、認識論的境界の推移と、具体的文学作品での歴史認識の表出を、17世紀から20世紀までのいくつかの特徴的局面に注目して検証した。2011年11月には国内外から文学と歴史の専門化を招いて日仏国際シンポジウム「フィクションはどのように歴史を作るかー借用・交換・交差」を京都日仏学館で開催した。その内容を来年度を目途にフランスで出版するべく準備を進めている。平成21年度はフランスにおける「歴史と「文学」いいう二つのディシプンの成立とその後の推移、その過程での相互の影響関係を理論的に検証する作業を開始した。まず当プロジェクトの4年間の事業内容と各研究分担者の役割についての確認、研究分担者が提案する研究テーマの相互調整をはじめに行い、それを受けて各人が具体的な資料調査と分析に入った。具体的な調査の進行については、適宜研究会で中間報告を行った。また第4回目の研究会では、折から講演旅行で日本に滞在中の、ケンブリッジ大学名誉教授セシル・コートネー氏に、18世紀の著述家レナルの著作『両インド史』についての講演を依頼した。本年度の研究会は、次の通り。第一回(7月15日午後6時30分より文学部仏文研究室)研究打ち合わせ研究計画の概要を代表者田口から研究分担者にあらためて説明し、各自の役割分但と活動計画について調整を行い、全体のロードマップを決定した。第二回(9月28日午後4時30分より文学部仏文研究室)報告者田口紀子(研究代表者)「1820年代のフランス歴史小説の特徴-史実からトークンとしてのエピソードヘ」第三回(11月26日午後2時30分より文学部第一講義室)報告者辻川慶子(研究協力者)「ネルヴァルと歴史のエクリチュール-『塩密輸人たち』を中心に」第四回(3月19日午後4時30分より文学部仏文研究室)平成22年度は昨年度に引き続き、「歴史」と「文学」という二つのディシプリンが、フランスにおいてどのように確立したか、その後いかに相互に影響を与えながら別のエクリチュールを持った学問分野へと展開したかを検証する作業を行った。年度末にはその成果の一端を、「フランス文学における歴史記述総合書誌」としてとりまとめた。内容は順次充実させていく予定である。また分担者の担当領域の個別的調査研究に加えて、以下の研究会を公開講演会として開催した。1) 6月17日(木)午後17時報告者エリック・アヴォカ(京都大学文学研究科准教授)「ジョレスによるフランス革命:社会主義的歴史と文学的エクリチュール」2) 11月9日(火)午後16時30分報告者リーズ・アンドリエス(フランスCNRS主任研究員)「18世紀における山賊:古文書から小説へ」3) 12月1日(水)午後17時報告者フランソワ・ラスティエ(フランスCNRS主任研究員)「バルザックの登場人物たち:リアリズムか強迫観念か?テクストの意味論と解釈学」4) 1月31日(月)午後4時報告者王寺賢太(人文科学研究所准教授)「レナル『戦争史』におけるヨーロッパ近代の系譜学」具体的行事として行ったのは以下の通りである。公開講演会として2011年7月20日に研究分担者である多賀茂氏による「フーコーにおける歴史記述」(於仏文研究室)の講演と討議を行った。現代思想についての議論を行う機会はこれまでなかったので、活発な意見交換が行われた。11月18日(金)から20日(日)までの3日間、関西日仏学館稲畑ホールを会場に、これまでの本科研研究活動の成果を公にするために、国内外から招いた13人の専門家と合同で国際シンポジウム「フィクションはどのようにして歴史を作るのか-借用・交換・交差Comment la fiction fait histoire-Emprunts, echanges, croisements」を開催した。(研究分担者の発表内容については13.研究発表の欄を参照のこと。)国内外から50名を超す参加者を得て、報告者間にとどまらず、各世紀のフランス文学、思想、歴史、精神分析といった幅広い分野の専門家からも貴重な指摘や意見が寄せられ、改めて本テーマの射程の広さが確認された。本研究が総括の最終年度を迎える前に、それぞれの分担者の成果を公にし、必要な部分の強化を行い、場合によっては軌道修正を考えるための機会となったことも、本年度の大きな成果といえる。たとば、代表者の田口が担当する文体論・ジャンル論を例にとれば、1820年代のロマン主義の流れのもとで、「歴史」というテーマを中心に「小説」「演劇」「歴史記述」という各ジャンルが非常に接近した。

その事実を、歴史小説における事件のらち外の語り手による分析的語りの採用、目の前で繰り広げられるように事件を再現する演劇的な小説文体、上演されることを前提としない「歴史的場面scenes historiques」というジャンルが革命劇以降発生し、3人称の語りにつながったことなど、相互浸透的運動として実証できたのは大きな成果であった。しかしこの結節点から諸ジャンルがいかに独自の形式と目的とを発展させていったのかをさらに調査、分析し、特に「歴史」の文体がどのようにその真実性を担保しようとしたのかを検証する必要があるだろう。シンポジウム以降は、各自がシンポジウムでの新たな問題提起や、それまで十分に検討していなかった領域の掘り下げを行い、最終年の総括の準備に取りかかった。本年は過去3年間の活動の総括の年でもあるので、これまでやや手薄だった詩の分野の研究を補う意味で、フランスのコレージュ・ド・フランス教授アントワーヌ・コンパニョン氏を迎え、5月29日に「ジャーナリズム詩人としてのボードレール」というタイトルで公開講演会を開催した。19世紀の象徴主義を代表する詩人が実は同時代のジャーナリズムに深くコミットしていた事実をめぐり有意義な意見交換を行った。10月2日にはナンテール・ラ・デファンス大学教授マリ・レカ=ツィオミス氏による公開講演会「サン=シモンの『回想録』と復活としての歴史」を開催し、「回想録」というジャンルがもつ歴史的・文学的側面と、作者にとっての実存的意義について議論を行った。また3月18日には同じく公開講演会として、増田真氏が「ヴォルテール『風俗試論』における歴史と政治」、辻川慶子氏が「ネルヴァルにおける歴史と宗教:「預言者の時代」から『幻視者たち』へ」についての発表を行った。これらの講演会と平行して、一昨年11月に開催した日仏国際シンポジウム「フィクションはどのように歴史を作るか:借用・交換・交差」の発表原稿をとりまとめる作業を行った。平成24年度中には間に合わなかったが、25年度末を目途に、フランスの出版社からの刊行を計画している。4年間の活動を通して、歴史記述がフランス文学作品の創造において果たした意義を、部分的にではあれ明らかすることができた。ナポレオン戦争や第二次世界大戦、ドレフュス事件といった歴史的事件がトポスとして文学生産の契機になったのみならず、作家にとって個人的、公的な過去の事実を記すという行為自体が文学創造につながる経緯を、個別の事例に即して確認することができた。本来の歴史叙述の「物語」的側面については十分に検討することができなかったが、これは残された課題として次の機会に取り組みたいと考えている.17世紀から20世紀の文学作品ならびに文体論・ジャンル論について、それぞれの研究分担者が調査、分析を進め、その成果を11月に開催した国際シンポジウムで報告し、国内外からの招待報告者を交えて討論することができた。また全国から多数のフランス文学の専門家の参加も得られ、フロアーからの質問やそれに基づく討議も活発に行われた。同時にm、これまで世紀別、作家別の研究が通常であったフランス文学の領域で、専門を異にする研究者が「文学と歴史の物語性」を共通の問題とし実りある議論が実現したことで、このテーマの普遍的有効性を広く示すことができたと考える。24年度が最終年度であるため、記入しない。来年度は最終年であり、本年度の国際シンポジウムの成果の刊行を準備しながら、さらに個々の分野での調査・分析を進める。併せてこれまであまり研究が進んでいないテーマに関しては、国内外の専門家を招き、公開講演会を開催することで、さらなる充実を図りたい。
静岡県における中小企業の下請構造分析と先駆的メッシュ化企業の特徴

日本における中小の製造業は、完成品メーカーを頂点とした系列的な下請け取引構造として長い間特徴づけられてきた。しかしグローバル化の進展の伴い、系列外の企業との取引を拡大し幅広く多面的に多数の企業との取引とを行うメッシュ化を模索している。静岡県におけるこの実態を分析した。第一はものづくり基盤技術をもつ中小企業の現状分析を行い、第二にメッシュ化の先駆的な企業あるいはグループへのヒアリング調査を実施した。メッシュ化先進的企業について他県における先行事例の調査を実施した。福井県福井市に所在する清川メッキメッキ工業株式会社における調査を2008年7月に実施した。その調査に関する成果については、大脇史恵「清川メッキ工業株式会社ヒアリング調査」において発表している。同社は、従来、先代創業者が福井市において一番数の少ない企業であったメッキ企業に着手し、その後大手企業のメッキの下請企業として発展していった。しかしISO14001の取得とともにメッキにおける廃液の環境負荷を削減するために廃液を循環させ資源化するという逆転の発想によりブレークスルーを成し遂げた。最近では、携帯端末における極小部品への粉体塗装独自技術の確立により下請企業からの脱却を果たし、営業部を持たない稀な会社として発展している。これはメッシュ化の分析視座を探る上で、非常に有効なケースとしてとらえることができる。今後、静岡県内企業の例示を含め研究の取りまとめを計画している。なお、静岡県内の文献およびヒアリングによる下請構造分析については現在継続的に進めており、この成果については次年度に取りまとめる。また、Web調査についてはすでにサーバーを立ち上げ、ホームページを開設した。Webアンケートは2つの視点から、すなわち完成品メーカー側からとサポーティングインダストリー(下請企業)からの両面からの調査を実施し、その整合性を図るべき工夫をしている。すでに実施体制は整っており、現在はその準備段階として、ホームページにアンケートを掲載し、試行的にWebアンケートを実施している。本年度は静岡県における下請構造分析のための予備的考察として、「ものづくり基盤技術」の集積度の分析を行った。『静岡県会社要覧』の「企業データ」からサポーティングインダストリー307社を抽出し、これら企業について東部、中部、西部における「ものづくり基盤技術」の集積の実態を分析した。この結果、輸送機器関連を中心とする基盤技術、特に金型等が3地域において集積し、西部地域に際立って集積していることが確認できた。この成果については、静岡大学『経済研究』第14巻に発表している。Webアンケートを開始した。環境関連団体と経営者協会に依頼し、会員へのアンケートを呼び掛けたが、リーマンショックの影響もあり、この調査は芳しくなかった。急遽、郵送方式(回答はファックス)に切り替え先のサポーティングインダストリー307社へ依頼し、61社からの回答を得た(回答率20%)。これについては既にエクセルによる単純集計が完了している。この集計データに基づき、次年度クロス分析を含め、下請構造の変化(メッシュ化等の進展度合いを含む)について考察する。上記2つの分析結果により静岡県の下請構造の実態が浮き彫りになることが期待できる。西部地区に基盤技術が集積していることから、「西部地域しんきん経済研究所」と「サンヨーエンジニアリング」(金型製造)にヒアリング調査を実施した。スズキの傘下企業は系列化、その他についてはいわゆるメッシュ化されていることが判明した。静岡県と比較するため自動車産業を振興している九州地区の実態について「福岡県中小企業振興センター」と「九州経済産業局」へヒアリング調査を実施した。九州における産業の変遷からくる「ものづくり基盤技術」の下請構造とは静岡県の中小企業の下請構造が異なることが明確となった。本年度はモノづくり基盤技術を担う下請中小企業、特に静岡県下においてはその技術は自動車関連産業に傾斜しているので、かかる企業のうち先駆的メッシュ化企業の特徴を調査した。また、昨年度アンケートした静岡県下におけるサポーティング・インダストリーの調査結果(単純集計結果)についてWeb上で公開をした。アンケート結果ではメッシュ化のさらなる進展は静岡県下においては顕著な傾向にないことが分かった。これは、昨年度の静岡西部地域しんきん経済研究所における西部地域メッシュ化の実態をヒアリング調査をした際、メッシュ化が行われているものの、スズキ等の系列化の強い親企業の存在があることとも符合している。静岡県西部地域におけるメッシュ化の先駆的企業の事例として、従業員8名程の木工メーカー、タカヤナギの一人乗り電気自動車の開発と日本で最初に超硬チップソーを開発したチップソー中堅メーカーのオリオン工具製作所を中核とする9社の航空機産業への参入計画「共同受注グループ浜松航空機産業プロジェクトSOLAE」がある。この2社のトップに対にヒアリング調査を実施し、メッシュ化への特徴を探求した。次世代の産業として有望視されている航空産業に関しては、コアの基盤技術を基に、日本で最初に共同受注体制を確立した長野県飯田市の中小企業を中心とした「飯田航空宇宙プロジェクト」の中核的存在である同プロジェクトマネージャー松島氏に対するヒアリング調査を実施し、メッシュ化の課題についての知見を得ることができた。
糖尿病性腎症に対する運動療法および食事療法の功罪-NIDDMモデルOLETFラットによる糖代謝能および腎機能、腎の組織・形態学的研究-

1.研究目的:ヒト2型糖尿病に腎症を合併したモデルOLETFラットを用いて,糖・脂質代謝および腎の機能的・組織形態学的所見により運動療法と食事療法の影響を比較する。2.研究方法:OLETFラット32匹(OLETF-Pre,n=8;OLETF-Sed,n=8)および正常対照雄性LETOラット14匹(LETO-Pre,n=6;LETO-Sed,n=8)を用い,21および32週齢時にブドウ糖経口負荷試験(OGTT)を実施し,2231週齢までの10週間運動または食事療法を行った。療法期間中体重,血圧,尿中クレアチニン,アルブミン(Ualb),NAG(UNAG)および総蛋白排泄量(UTP)を測定した。運動療法には回転ケージによる自発運動を用い、食事療法では運動療法群の体重と同じになるように給餌量を制限した。療法前後のOGTT終了34日後に全血液量採取による屠殺後各臓器,体脂肪および各筋重量秤量した。血液検体を用い空腹時血糖,IRI,血清フルクトサミン,TC,HDL-C,TG,EC濃度およびLCAT活性などを測定した。3.研究結果:(1)Ex群のUalb,UNAGおよびUTPはDiet群より有意に高く,Sed群よりは有意に低い値で推移した。(2)各療法期間中の体重変化にはExとDiet群間にまったく差異はなかったが,Sed群に比較し有意な低値であった。また,Ex群の血圧はDiet,SedおよびLETO-Sed群に比較し高値傾向であった。(3)各療法終了後のExおよびDiet群の糖認容能はSed群に比較し有意に改善したが,Ex,Diet群間ではまったく差はなかった。(4)Sed群に比較し療法後のExおよびDiet群の体重当たり体脂肪量が少なく筋重量は多かったが,Ex,Diet2群間に差はなかった。Ex群のTC,HDL-C,LDL-C,ECおよびLCAT活性はDietおよびSed群に比較し有意な低値であった。血清TG濃度にはEx,Diet2群間には差はなかったが,これらの群の値はSed群に比較し有意な低値であった。(5)ExおよびSed群の腎重量はDiet群に比較し有意な高値であった。Sed群のA^^-(G)およびV^^-(G)はEx,Diet群に比較し有意な高値であり,Ex,Diet間の比較ではEx群が高値傾向を示した。GBA厚には3群間に有意差はなかったが,Sed群が高値傾向を示した。4.結論:運動および食事療法にはDN進展抑制効果があるが,運動療法の効果は少なく,運動によるDN進展促進と運動を介した糖・脂質代謝改善によるDN進展抑制効果が相殺され,結果的には食事療法の効果には及ばなかった。しかし,ヒト糖尿病患者では骨や骨格筋などの廃用性萎縮防止およびQOLの維持という点からも日常生活における運動は必須であり,血圧上昇および腎症進展を惹起しない運動処方の作成が必要と思われる。

Sed群のA^^-(G)およびV^^-(G)はEx,Diet群に比較し有意な高値であり,Ex,Diet間の比較ではEx群が高値傾向を示した。GBA厚には3群間に有意差はなかったが,Sed群が高値傾向を示した。4.結論:運動および食事療法にはDN進展抑制効果があるが,運動療法の効果は少なく,運動によるDN進展促進と運動を介した糖・脂質代謝改善によるDN進展抑制効果が相殺され,結果的には食事療法の効果には及ばなかった。しかし,ヒト糖尿病患者では骨や骨格筋などの廃用性萎縮防止およびQOLの維持という点からも日常生活における運動は必須であり,血圧上昇および腎症進展を惹起しない運動処方の作成が必要と思われる。1.研究目的:糖尿病性腎症による血液透析への移行は腎疾患に次いで第2位を占めている。インスリン非依存型糖尿病(NIDDM)は運動療法の適用と考えられている。運動によってインスリン感受性が亢進し,脂質代謝が改善することは周知のことである。一方,血糖コントロールが悪いと,インスリン抵抗性が高まり,網膜や腎糸球体などの細動脈血管系が硬化することが報告されている。ヒト腎臓の場合,血管障害の進展状況を的確に把握することは難しく,尿中に微量排泄されるアルブミン(MAU)によって推測せざるを得ない。適切な運動療法によって病態が改善すれば,腎血管系への障害も軽減し,MAUは減少するかも知れないが,不適切な場合は腎への負担が増し,運動は逆に増悪因子となる可能性も生じる。本研究では,ヒトの肥満・糖尿病モデルとされるOLETFラットを用い,食事療法と運動療法をそれぞれ単独に施行した場合の糖代謝能および腎機能,腎の組織・形態学的観察を行う。2.研究方法:被検動物としてヒトNIDDMモデルOLETFラット24匹(Ex群8匹,Diet群8匹,Cont群8匹)および正常対照安静LETラット8匹(NC群)を用いた。10週齢から実験室で飼育し,2130週齢まで尿検体採取装置付き回転ケージ(シナノ製作所)を用い自由運動を課し,回転数(運動量)を記録した。また,飲料および粉末飼料(CE-2;日本クレア)を自由摂取させ,残量を秤量し一日あたり摂食量を求めた。尚,実験期間中は朝6時から夕方6時までの12時間を明期,他を暗期とし,飼育室温は23.0±2.0°C(湿度5570%)に維持した。体重,血圧(SoftronBP98)測定および採尿は,10,15,20,23,26,29,30週齢時に行い,糖負荷試験はトレーニング終了後に行った。ブドウ糖1g/kgを胃ゾンデを介して経口投与(OGTT)し,眼静脈から投与前,30,60,120分後に採血しIRIおよびBS濃度を測定した。糖負荷試験終了1週間後にネンブタール麻酔下で放血,屠殺し各臓器重量測定後ホルマリン固定し,病理標本を作製した。ヘパリン採血した検体を用い,血液学的成分(RBC,WBC,PLT,Hct)および生化学的成分(TC,TG,HDL-C,クレアチニン(Cr),尿酸)を測定した。尿成分は,電解質類,アルブミン(uAlb),β_2M,Crおよびカテコールアミン濃度を測定した。3.研究結果:飼育経過中の体重は,Ex,Diet群差がなく,31週齢ではそれぞれ平均492,478gであり,Cont群に比較し有意に低値であった。各療法終了時(32週齢)の臓器重量を体重あたりで比較すると,腎重量はCont群に比較し,Ex,Diet群が多かった。心臓はExが有意に重かった。腸管膜,副睾丸周囲および後腹膜脂肪重量はContに比較し,Ex,DietとくにEx群が低値であった。
有機ニトロキシルラジカル－遷移金属ハイブリッド触媒に基づく精密有機分子構築

本研究は、「有機ニトロキシルラジカルー遷移金属ハイブリッドシステム」に潜在する合成化学的機能性の開発を機軸として、常温・常圧の大気中の分子状酸素を触媒的に活性化して、世界でも前例のない高度な官能基選択性を発現する酸化的分子変換法の創出を目指すものである。本研究の推進により、有機ニトロキシルラジカルと遷移金属とのレドックス特性の統合に基づく多官能性複雑分子の新規効率的合成法が誕生する。