hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
中国の国有企業改革と失業問題に関する実態調査研究

本研究は、北京、上海、瀋陽、蘭州の4都市で下崗労働者といわれる人々各々12001500人に対し、33項目にわたるアンケート調査を行い、その解析を行ったものである。下崗労働者とは、失業者とほぼ同義であるが、企業との契約状態は残っている人々をさす。比較的経済状況がよい北京・上海と、国有企業が経済の中心であるがゆえに経済状況がよくない瀋陽・蘭州でどのような違いが生じるかを分析した。下崗状態のときの生活費や再就職の実態など、4都市、あるいは下崗労働者の属性の違いによってどのような差があるかを明らかにしたものである。下崗状態になるのはどのような人々であるのか(前職の企業の経営状態や、その人の職務、学歴など)、再就職できたのはどのような人々であったのか(性別、年齢、学歴によって、前職による違いなど)などについて解析を行い、その結果学歴や性別、都市別に違いがあり、再就職においても差があることが認められた。さらに中国の政策立案者が下崗問題をどのように考え、再就職を促すための政策、下崗労働者の不満をどのように押さえ込もうとしているのかという政策面の研究も行った。また下崗労働者が多く出現するようになったのは、国有企業改革が本格化した98年以降のことであるので、国有企業の改革の状況および失業者に対する社会保障問題についてもあわせて考察を行ったものである。今年度では、中国国有企業の改革と労働市場に関する文献研究を行ったうえ、北京と上海の国有企業改革と失業問題を中心に調査を行った。具体的に、まず今村は中国国有企業の全体的な基本状況を反映するデータを収集し、中国政府が国有企業の改革について提案した基本方針を把握したうえ、「中国の労働(失業)問題と失業保険」というタイトルの論文を作成した。その論文では、失業および下崗(レイオフ)の実際の状況を検証しなおすとともに、下崗職工の業種別・省別の実態、および労働のミスマッチ現象を明らかにした。それとともに今後中国経済のなかで非正規就業がどのような役割を示していくか、さらに現在過度的な状況にある失業保険の実態と問題点、今後失業の増加は不可避と考えられることから、失業問題が中国経済の制約要因となることを示した。その次に、馬は聞取り調査の対象企業の労働者へのアンケート調査について、中国人民大学の協力者と連絡をとりながら、聞き取り調査をアンケート調査の具体案を企画した。それに基づき、今村と北京に渡航し、中国人民大学の専門家に意見聴取を行ったうえ、協力者である中国人民大学の趙国慶教授と共同でアンケート調査を作成した。そして、趙国慶教授にアンケート調査を10月から12月にかけてアンケート調査を実施してもらい、1月に調査データを入手した。現在、統計分析を行っているところである。また、馬は11月下旬、再度中国に渡航し、上海と藩陽での予備調査を行った。(1)上海の協力者である上海杜会科学研究院の王振助教授と周海旺助教授とアンケート調査の内容と配布対象を確認し、調査を依頼した。現在、上海でのアンケート調査のデータを集計しているところである。(2)藩陽で遼寧大学人口研究所の研究者と接触し、現地での聞き取り調査とアンケート調査を依頼し、次年度の本調査のための準備活動を行った。なお、本研究の実施をもっと着実に進めるため、来年度から研究協力者で王振氏の代わりに、上海仕会科学院人口研究所の周海旺助教授に研究協力を依頼する予定である。13年度に北京、上海でアンケート調査したのに引き続き、14年度は甘粛省蘭州および遼寧省瀋陽にて、下崗労働者に対するアンケート調査を行った。さらに蘭州および瀋陽で労働局の担当者に当該地での下崗労働者の実態についてのヒアリングを行い、また蘭州では2つの国有企業を訪問し、労働(下崗)問題について調査した。また瀋陽では下崗労働者にインタビューを行った。13,14年度の調査およびアンケートを解析した結果をもとに、馬駿らは02年10月に中国・西安で行われた中国経済学年度報告大会にて、報告を行った。

また03年1月に富山大学極東地域研究センター主催のワークショップで「中国経済の強さと弱さ」という共通テーマのもと、「中国の失業問題」について、中国人民大学労働人事学院姚裕群教授らを招いて次のような報告を行った。「中国の失業問題」(今村弘子)「中国の国有企業改革と失業問題」(姚裕群)「失業問題の実態調査研究」(馬駿)と題して各々報告を行い、大阪経済大学経済学部山本恒人教授がコメントを行った。アンケート調査から明らかになったのは、(1)いづれの都市も40代の女性の下崗労働者が多いこと、(2)北京、上海では労働市場が発達していることから、若年層では再就職が比較的容易であること、(3)下崗期間が長くなるほど、再就職が困難であること、(4)北京、上海では企業業績が良好であるのに下崗された者は、本人の能力の問題から再就職が難しいこと、などが観察された。今後は国有企業改革と下崗労働者の問題、および失業保険の実態を明らかにすると共に、アンケート調査に関し、なお詳細な解析を行うこととする。13年度に北京、上海で、14年度に甘粛省蘭州、遼寧省瀋陽で、各々10001300名の下崗(レイオフ)労働者に33項目にのぼるアンケート調査を行い、また下崗労働者にインタビューし、国有企業でヒアリングを行った。上記アンケート調査をもとに解析を行うとともに、国有企業改革や中国の労働問題についての全体像を把握すべく、資料収集および分析を行った。上記調査に基づいて、馬駿は、2003年12月、上海復旦大学で開催された中国経済学会第三回大会で「上海市と瀋陽市の下崗労働者の失業期間に関する比較研究アンケート調査をもとにして」(中国語)を発表した。アンケート調査の解析の結果、(1)いづれの歳でも40代の女性の下崗労働者が多いこと、(2)北京、上海では労働市場が発達していることから、若年層では再就職が比較的容易であること、(3)下崗期間が長くなるほど、再就職が困難であること、(4)北京、上海であっても、企業業績が良好であるのに、下崗された者は、本人の能力に問題がある場合が多く、再就職が難しいことが、明らかになった。さらに国有企業改革によって、下崗労働者が増加している実態、再就職訓練センターが順次廃止されていくなかで、失業保険の整備が急務であるが、失業保険を給付されている人は5割にも満たないにもかかわらず、失業者の数が増していることから、基金が減少しており、今後益々深刻になること、また失業問題は、中国では「都市」の問題とされていたが、実際には農村でも深刻であり、今後都市における建設ブームが下火になったときに、出稼ぎ労働者の受け皿がなくなり、かつ農村での社会保障が極めて不十分であることから、社会不満が高まる可能性も明らかにした。
多言語コーパスを利用した語義の瞹昧さ解消と続報記事抽出への適用

インターネットの普及により,膨大,かつ多様な情報がネットワーク上に溢れている.このような状況において,膨大な情報の中からユーザが指定した出来事に対し,その発生から後の経過を示す一連の内容を自動的に提示する技術(続報内容の抽出)は,ユビキタス情報社会における知的アクセス基盤を提供するだけでなく,過去の事例から将来起こりうる問題を予測し,実際に問題が発生する前に対処するための知識発見の技術としても発展が期待できる.続報内容の抽出に関する研究は,統計手法や機械学習を用いて続報を示すラベルが付与された少数から成る事例の特徴抽出を行なう方法が主流となっている.しかしこのような時系列データでは,ある特定の機関においてユーザが指定した出来事を示す事例(正の事例)数は,それ以外の事例(負の事例)数に比べ極端に少ない.従って,統計や機械学習だけを用いた手法では精度面で限界があり,多様なコンテンツを扱う現実世界において充分に対処可能な枠組を提供しているとはいえない.この問題を解決するためには意味を中心に据えた自然言語処理技術が必須となる.本研究では,実システムとして膨大な情報の中からユーザが指定した出来事に対し,その発生から後の経過を示す一連の内容を自動的に提示する技術(続報内容の抽出)に焦点をあて,続報内容の抽出精度に役立つ言語知識を抽出する手法を提案した.具体的には,(1)続報内容の分類に必要となる分野名の誤りを自動的に修正する手法,(2)高精度で続報内容を抽出するために必要となる分野階層の自動生成,(3)話題推移の抽出に有効な言語知識の調査,(4)日本語及び英語を対象としたコンパラブルコーパスからの対訳語義の抽出と関連記事抽出の手法を提案し,各手法において関連研究との比較を含めた手法の有効性を示した.インターネットの普及により,膨大,かつ多様な情報がネットワーク上に溢れている.このような状況において,膨大な情報の中からユーザが指定した出来事に対し,その発生から後の経過を示す一連の内容を自動的に提示する技術(続報内容の抽出)は,ユビキタス情報社会における知的アクセス基盤を提供するだけでなく,過去の事例から将来起こりうる問題を予測し,実際に問題が発生する前に対処するための知識発見の技術としても発展が期待できる.続報内容の抽出に関する研究は,統計手法や機械学習を用いて続報を示すラベルが付与された少数から成る事例の特徴抽出を行なう方法が主流となっている.しかしこのような時系列データでは,ある特定の機関においてユーザが指定した出来事を示す事例(正の事例)数は,それ以外の事例(負の事例)数に比べ極端に少ない.従って,統計や機械学習だけを用いた手法では精度面で限界があり,多様なコンテンツを扱う現実世界において充分に対処可能な枠組を提供しているとはいえない.この問題を解決するためには意味を中心に据えた自然言語処理技術が必須となる.本研究では,実システムとして膨大な情報の中からユーザが指定した出来事に対し,その発生から後の経過を示す一連の内容を自動的に提示する技術(続報内容の抽出)に焦点をあて,続報内容の抽出精度に役立つ言語知識を抽出する手法を提案した.具体的には,(1)続報内容の分類に必要となる分野名の誤りを自動的に修正する手法,(2)高精度で続報内容を抽出するために必要となる分野階層の自動生成,(3)話題推移の抽出に有効な言語知識の調査,(4)日本語及び英語を対象としたコンパラブルコーパスからの対訳語義の抽出と関連記事抽出の手法を提案し,各手法において関連研究との比較を含めた手法の有効性を示した.本研究では,多言語(英語・日本語・韓国語・中国語)から成るコンパラブルな報道記事コーパスに注目し,(1)話題の推移を示す動詞単語の多義を解消する(2)解消された多言語コーパスから正の事例に関連する事例を高精度で抽出する(3)正の事例を用いて大量の負の事例を細分類する(4)(2),及び(3)の結果を用いてユーザが指定した出来事に関する話題の推移を高精度で抽出し,提示することを目的とする.本年度は,(2)においては,多言語コーパスの対応づけとして,N-gramモデルを用いて,辞書に記載されていない対訳語を自動的に抽出する手法を提案した.具体的には,英語と日本語それぞれのコーパスに対して,N-gram統計モデルを適用することで,複合名詞を認識した.次に複合名詞で置き換えたコーパス中の単語に対して,カイ2乗を適用し,その値が高い英単語と日本語単語の組を抽出することで,半自動で対訳語を抽出した.さらに,対訳語で置き換えたコンパラブルコーパスに対して,余弦尺度を適用することで,英文記事と意味的に類似した日本語記事を抽出することで正の英語事例に関連する日本語事例を足し合わせることで,続報記事を高精度で抽出することに成功している.現在,複合名詞については,毎日新聞14年分,Reuters'96の1年分の記事を利用することで,抽出が終了している.また,対応記事とそれを用いた続報記事の抽出においては,TDT3コーパスと毎日新聞を用いた定量的な評価を試みている.さらに現在は,タイトル情報を利用した正の事例に関連する事例抽出の高精度化を図っている.(3)においては,K-means+EMアルゴリズムを用いることで負例の記事を細分類する手法の提案を行った.(3)に関してもTDT3コーパスを用いた定量的な評価を行っている.今後は,多言語として中国語,及び韓国語に対して提案手法を適用することで,多言語に対する定量的な評価を行う予定である.

本研究では,多言語(英語,日本語,韓国語,中国語)から成るコンパラブルな報道記事コーパスに注目し,(1)話題の推移を示す動詞単語の多義を解消する(2)解消された多言語コーパスから正の事例に関連する事例を高精度で抽出する(3)正の事例を用いて大量の負の事例を細分類する(4)(2)と(3)の結果を用いてユーザが指定した出来事に関する話題の推移を高精度で抽出し,提示することを目的とする.本年度の研究実績上記(3),及び(4)であり,具体的には以下の通りである.3.多言語を用いて抽出された正の事例を用いて大量の負の事例を再分類する.3-2.分類数を決定するための評価関数BICの導入4.ユーザが指定した出来事に関する話題の推移を高精度で抽出し,提示する.4-1.前年度実施した多言語コーパスからの対訳語抽出結果を用いた対訳文書の抽出4-2.上記3の手法を用いた訓練データの精製j4-3.出来事に関する続報記事の抽出上記手法を英日のコンパラブルコーパスに適用し,英語に関する正の事例と対となる各言語の事例を抽出した.なお各データは,英語としてReuters'96,TDT3,4のデータ,日本語は毎日新聞と読売新聞を用いた.日本語データについては,TDT3,及び4の報道機関に限定し,TDTで定義されている出来事を含むそれぞれの続報記事を研究補助者2名の協力を得,評価データを作成した.手法の評価では,前年度実施した名詞単語クラスの有効性,動詞単語に関する多義解消の有効性の検証に加え,新たに多言語コーパス利用の有効性を検証するため,(i)コンパラブルコーパスの個数による精度比較を行うことで,続報記事抽出に有効な正の事例に関する抽出の効果を検証した.これらを成果報告として論文にまとめ,公開した.
Hprt遺伝子座の欠失パターンを指標にした重粒子線のトラック構造の解明

本研究は重粒子線がもたらす大きな生物効果を明らかにすることを目的としている。重粒子線誘発フリーラジカルの寄与を明らかにするため、OHラジカル除去剤としてDMSOを用い、hprt遺伝子座における突然変異誘発頻度と突然変異体の欠失パターンを調べた。突然変異誘発における間接作用の寄与率は、X線で約80%、炭素線で約50%となり、重粒子線においても間接作用の関与が少なくないことが示唆された。突然変異体におけるhprt遺伝子の欠失パターンを調べると、重粒子線ではフリーラジカル除去の有無に関わらず同様の欠失パターンを示し、重粒子線誘発突然変異体は直接作用が主要因であると示唆された。重粒子線がもたらす大きい生物効果を明らかにする手段として、重粒子線誘発突然変異の欠失パターン解析を行い、重粒子線の線質の違いと欠失パターンの関係を明らかにし、低および高LET粒子線の飛跡(トラック)構造の特徴を明らかにするため、以下の3つを具体的な目的とした。1)X線と低および高LET炭素線のhprt遺伝子座における突然変異誘発頻度を求め、炭素線の突然変異誘発におけるRBEならびにLET依存性を明らかにする。2)X線と低および高LET炭素線のhprt遺伝子座の欠失パターン解析を行う。3)OHラジカル除去剤を用いて放射線誘発突然変異頻度へのOHラジカルの寄与を求め、hprt遺伝子座の欠失パターンとOHラジカルの関連を調べる。平成27年度は(1)の炭素線誘発突然変異におけるRBEならびにLET依存性を明らかにすることを目的とし、放射線誘発突然変異頻度の測定を行うため、まず突然変異体のコロニー形成の条件を検討した。次に、X線誘発突然変異頻度を測定し、炭素線誘発突然変異との比較対象とした。X線誘発突然変異頻度測定と同条件で炭素線誘発突然変異頻度を測定し、突然変異誘発へのLET依存性と炭素線誘発突然変異におけるRBEを明らかにした。平成28年度以降はX線または重粒子線誘発突然変異体の変異型解析を行い、hprt遺伝子座の欠失パターンを比較する。また、OHラジカル除去剤を用いて同様の実験を行い、フリーラジカルによる突然変異誘発への影響を調べる予定である。平成27年度はX線と低および高LET炭素線のhprt遺伝子座における突然変異誘発頻度を求め、炭素線の突然変異誘発におけるRBEならびにLET依存性を明らかにすることを目的とし、放射線誘発突然変異頻度の測定を行った。突然変異体のコロニー形成に最適な照射線量、6-チオグアニン濃度、使用する細胞数の検討を行い、使用したチャイニーズハムスター卵巣由来のCHO細胞では自然誘発突然変異頻度が低いことも確認した。今後は突然変異頻度が最大となった線量で突然変異体のDNAを抽出し、変異型解析を行う。重粒子線による大きな生物効果を明らかにする手段として、X線及び炭素線誘発突然変異を解析し、放射線の線質の違いと突然変異誘発の関係を明らかにすることを目的としている。また、低および高LET粒子線の飛跡(トラック)構造の特徴とDNA欠失パターンの関係を明らかにするため、以下の3つを具体的な目的とした。(1)X線と低および高LET炭素線のhprt遺伝子座における突然変異誘発頻度を求め、炭素線の突然変異誘発におけるRBEならびにLET依存性を明らかにする。(2)X線と低および高LET炭素線のhprt遺伝子座の欠失パターン解析を行う。(3)OHラジカル除去剤を用いて放射線誘発突然変異頻度へのOHラジカルの寄与を求め、hprt遺伝子座の欠失パターンとOHラジカルの関連を調べる。平成27年度はX線と炭素線の突然変異誘発におけるRBEならびにLET依存性を明らかにした。平成28年度は(3)のOHラジカル除去剤を用いて放射線誘発突然変異へのOHラジカルの寄与を明らかにすることを目的とし、まず使用するOHラジカル除去剤の濃度を検討した。次に、OHラジカル除去剤存在下でX線及び炭素線誘発突然変異頻度を測定し、OHラジカルの寄与率を明らかにした。平成29年度以降はX線または重粒子線誘発突然変異体の変異型解析を行い、hprt遺伝子座の欠失パターンを比較する。平成28年度はOHラジカル除去剤存在下でのX線と低および高LET炭素線のhprt遺伝子座における突然変異誘発頻度を求め、炭素線の突然変異誘発におけるRBEならびにLET依存性へのOHラジカルの影響を明らかにすることを目的とし、放射線誘発突然変異頻度の測定を行った。使用したX線及び炭素線による突然変異頻度はOHラジカル除去剤存在下では有意に減少し、OHラジカル除去による細胞保護効果が確認できた。X線と低LET炭素線ではOHラジカル除去剤濃度依存的な細胞保護効果を示したが、高LET炭素線では一定の細胞保護効果を示した。放射線誘発突然変異へのOHラジカルの寄与率はX線では約80%、低及び高LET炭素線では約50%となり、間接効果の寄与はLET非依存的と示された。本研究は重粒子線による大きな生物効果を明らかにする手段として、放射線の線質の違いと突然変異誘発の関係を明らかにし、さらに低および高LET粒子線の飛跡(トラック)構造の特徴とDNA欠失パターンの関係を明らかにすることで、粒子線のトラック構造を放射線化学ならびに放射線生物学の視点から解明するため、以下の3つを具体的な目的とした。

(2)X線と低および高LET炭素線のhprt遺伝子座の欠失パターン解析を行う。(3)OHラジカル除去剤を用いて放射線誘発突然変異頻度へのOHラジカルの寄与を求め、hprt遺伝子座の欠失パターンとOHラジカルの関連を調べる。平成27年度はX線と炭素線それぞれの誘発突然変異頻度を測定し、突然変異誘発へのLET依存性と炭素線誘発突然変異におけるRBEを明らかにした。平成28年度はOHラジカル除去剤存在下でX線および炭素線誘発突然変異頻度を測定しOHラジカルの寄与率を求めた。平成29年度はX線または炭素線誘発突然変異体の変異型解析を行い、hprt遺伝子座の欠失パターンを比較した。また、OHラジカル除去剤使用時のhprt遺伝子座の欠失パターンを解析し、重粒子線誘発突然変異体へのOHラジカルによる間接作用の影響を明らかにした。本研究は重粒子線がもたらす大きな生物効果を明らかにすることを目的としている。重粒子線誘発フリーラジカルの寄与を明らかにするため、OHラジカル除去剤としてDMSOを用い、hprt遺伝子座における突然変異誘発頻度と突然変異体の欠失パターンを調べた。突然変異誘発における間接作用の寄与率は、X線で約80%、炭素線で約50%となり、重粒子線においても間接作用の関与が少なくないことが示唆された。突然変異体におけるhprt遺伝子の欠失パターンを調べると、重粒子線ではフリーラジカル除去の有無に関わらず同様の欠失パターンを示し、重粒子線誘発突然変異体は直接作用が主要因であると示唆された。本研究は、低および高LET粒子線のトラック構造を明らかにするため、hprt遺伝子座における突然変異誘発頻度を調べ、さらにその欠失パターンを生物影響の指標として粒子線の線質の違いおよび放射線誘発フリーラジカルの寄与の関係を明らかにすることで、粒子線のトラック構造を放射線化学ならびに放射線生物学の視点から解明することを目的としている。平成27年度はX線と炭素線のhprt遺伝子座における突然変異誘発頻度を求め、突然変異誘発のLET依存性と炭素線誘発突然変異のRBEを明らかにした。平成28年度以降はX線と低および高LET炭素線のhprt遺伝子座の欠失パターンを解析し、重粒子線特異的な突然変異体形成の有無を明らかにする。また、OHラジカル除去剤としてDMSOを用いて放射線誘発突然変異頻度へのOHラジカルの寄与を求め、放射線誘発突然変異への間接作用の寄与率を調べる。平成28年度はOHラジカル存在下でのX線と炭素線のhprt遺伝子座における突然変異誘発頻度を求め、放射線誘発突然変異へのOHラジカルの寄与を明らかにした。平成29年度以降はX線と低および高LET炭素線のhprt遺伝子座の欠失パターンを解析し、重粒子線特異的な突然変異体形成の有無を明らかにする。
ウイルス由来microRNAに着目したDIHSの病態解明と新規診断法の開発

重症薬疹の一つである薬剤性過敏症症候群(DIHS)の病態形成に、HHV-6再活性化の関与が示唆されているが、その機序については不明な点が多い。本研究では、近年ヘルペスウイルスの潜伏感染維持や再活性化へのスイッチにウイルス由来microRNA(miRNA)が関わっているという証拠が蓄積してきていることに着目し、DIHSの各ステージにおいて発現するHHV-6由来miRNAを同定・解析することにより、ウイルス再活性化や病態形成プロセスの解明と診断・治療への応用を目指している。初年度には、DIHS急性期においてHHV-6再活性化時に血清中および単核球中にHHV-6前初期遺伝子のアンチセンスにコードされているhhv6b-miR-Ro6-2とhhv6b-miR-Ro6-3が検出されることを見出し、さらにhhv6b-miR-Ro6-2、-3の発現と有熱期間との間に有意な相関を認め、hhv6b-miR-Ro6-2のレベルは皮疹重症度とも関連することを明らかにした。今回の研究では、DIHS発症後長期に渡りHHV-6の持続感染がみられた8症例について、HHV-6由来各種miRNAならびにmRNAの発現、臨床症状、血清中サイトカインの発現について解析した。その結果、HHV-6持続感染群では、間質性腎炎、関節炎、甲状腺炎などの慢性炎症性疾患を合併する頻度が高く、sIL-2Rが持続的に高値を示すことが判明したが、HHV-6の遺伝子発現については、一部にimmediate early gene(U90)mRNAが検出されたものの、hhv6b-miR-Ro6-14の発現は認められなかった。以上の結果から、HHV-6持続感染は宿主免疫に影響を及ぼし、慢性炎症性疾患の発症に関わっている可能性が示唆されたが、HHV-6由来miRNAの病態への関与については、現時点では明確な証拠は得られていない。これまで、HHV-6由来miRNAについてはin vitroでの研究報告がいくつか存在するものの、生体内における発現を検討した報告はなかった。初年度の研究で、hhv6b-miR-Ro6-14の各々のmiRNAについて、DIHSにおける発現時期とHHV-6再活性化時期との間に一定の関係がみられることが判明したことから、これらのmiRNAがHHV-6再活性化において何らかの重要な役割を果たしている可能性が示唆された。また、hhv6b-miR-Ro6-2、-3については、HHV-6再活性化以前から発現を認め、臨床症状との相関も見られたことから、DIHSの早期診断マーカーや疾患活動性の指標になり得る可能性が示唆された。今回の研究では、DIHS発症後にHHV-6の持続感染がみられた患者について、その臨床的・免疫学的特徴とHHV-6関連遺伝子発現との関係について検討した。その結果、HHV-6の持続感染群では、sIL-2Rの高値が持続し、慢性炎症性疾患を合併する頻度が高いことが判明した。一方、HHV-6関連遺伝子については、immediate early gene(U90)mRNAのみが検出され、hhv6b-miR-Ro6-14の発現は認められなかった。HHV-6関連遺伝子の発現については、現在、DIHSの各ステージでの発現パターンについて、さらに詳細な解析を進めている。DIHSでは、急性期の症状が落ち着いてからも、HHV-6の活動が長期間にわたり持続する症例や、自己免疫症状を呈する症例が少なからず存在することが知られている。今回の研究では、DIHS発症後の慢性期の患者において、その病態とHHV-6由来の4種類のmiRNA(hhv6b-miR-Ro6-14)との関わりを明らかにすることはできなかったが、現在、DIHSの各ステージにおいてHHV-6関連遺伝子発現について、より詳細な解析を進めている。さらに、βヘルペスウイルス由来の他のmiRNAの発現についても解析を進め、DIHS慢性期におけるウイルスの関与を解明してゆく計画である。薬剤性過敏症症候群(DIHS)の病態形成には、HHV-6の再活性化が重要な役割を担っているものと考えられているが、再活性化機序やHHV-6の病態への関わりについては、不明な点が多い。本研究では、近年ヘルペスウイルスの潜伏感染維持や再活性化へのスイッチに、ウイルス由来microRNA(miRNA)が関わっているという証拠が蓄積してきていることに着目し、DIHSの各ステージにおいて発現するウイルス由来miRNAを同定・解析することにより、ウイルス再活性化や病態形成プロセスの解明と診断・治療への応用を目指している。今回の研究では、まずDIHS患者10名について、急性期に経時的に採取した末梢血単核球および血清を用いて、HHV-6由来miRNA(hhv6b-miR-Ro6-14)の発現を解析し、臨床症状や検査所見との関係について検討した。その結果、HHV-6前初期遺伝子のアンチセンスにコードされているhhv6b-miR-Ro6-2とhhv6b-miR-Ro6-3が、HHV-6再活性化の前あるいは再活性化とほぼ同時に血清中および単核球中に検出されることを見出した。一方、hhv6b-miR-Ro6-1,-4は、hhv6b-miR-Ro6-2,-3よりも数週間遅れ、HHV-6再活性化後に発現することが判明した。次に、各miRNAの発現と臨床症状との関係について検討した結果、hhv6b-miR-Ro6-1,-2,-3のレベルとDRESS scoreとの間に正の相関を認めた。

特に、hhv6b-miR-Ro6-2,-3の発現と有熱期間との間に有意な相関がみられ、さらにhhv6b-miR-Ro6-2のレベルは皮疹の重症度とも関連していることが判明した。以上の結果から、HHV-6由来miRNAはDIHSにおけるHHV-6の再活性化ならびに臨床症状に深くかかわっている可能性が示唆された。これまで、HHV-6由来miRNAについてはin vitroでの研究報告がいくつか存在するものの、生体内における発現を検討した報告はない。今回の研究で、hhv6b-miR-Ro6-14の各々のmiRNAについて、DIHSにおける発現時期とHHV-6再活性化時期との間に一定の関係がみられることが判明したことから、これらのmiRNAがHHV-6再活性化において何らかの重要な役割を果たしている可能性が示唆された。また、hhv6b-miR-Ro6-2,-3については、HHV-6再活性化以前から発現を認め、臨床症状との相関も見られたことから、DIHSの早期診断マーカーや疾患活動性の指標になり得る可能性が示唆された。今回の研究で得られた知見は、HHV-6由来miRNAの研究が、DIHSの病態解明の手がかりとなる可能性や、新規早期診断法や疾患活動性マーカーの開発につながる可能性を示唆しており、DIHS研究における重要な一歩であろうと考えられる。重症薬疹の一つである薬剤性過敏症症候群(DIHS)の病態形成に、HHV-6再活性化の関与が示唆されているが、その機序については不明な点が多い。本研究では、近年ヘルペスウイルスの潜伏感染維持や再活性化へのスイッチにウイルス由来microRNA(miRNA)が関わっているという証拠が蓄積してきていることに着目し、DIHSの各ステージにおいて発現するHHV-6由来miRNAを同定・解析することにより、ウイルス再活性化や病態形成プロセスの解明と診断・治療への応用を目指している。初年度には、DIHS急性期においてHHV-6再活性化時に血清中および単核球中にHHV-6前初期遺伝子のアンチセンスにコードされているhhv6b-miR-Ro6-2とhhv6b-miR-Ro6-3が検出されることを見出し、さらにhhv6b-miR-Ro6-2、-3の発現と有熱期間との間に有意な相関を認め、hhv6b-miR-Ro6-2のレベルは皮疹重症度とも関連することを明らかにした。今回の研究では、DIHS発症後長期に渡りHHV-6の持続感染がみられた8症例について、HHV-6由来各種miRNAならびにmRNAの発現、臨床症状、血清中サイトカインの発現について解析した。その結果、HHV-6持続感染群では、間質性腎炎、関節炎、甲状腺炎などの慢性炎症性疾患を合併する頻度が高く、sIL-2Rが持続的に高値を示すことが判明したが、HHV-6の遺伝子発現については、一部にimmediate early gene(U90)mRNAが検出されたものの、hhv6b-miR-Ro6-14の発現は認められなかった。以上の結果から、HHV-6持続感染は宿主免疫に影響を及ぼし、慢性炎症性疾患の発症に関わっている可能性が示唆されたが、HHV-6由来miRNAの病態への関与については、現時点では明確な証拠は得られていない。これまで、HHV-6由来miRNAについてはin vitroでの研究報告がいくつか存在するものの、生体内における発現を検討した報告はなかった。
安全性評価法考案に向けたベッド上横移動動作の定量的動作分析

脳卒中などによって運動機能障害が生じたリハビリテーション対象患者は,頻回にベッド上の移動を行っているにも関わらず,横移動動作の安全性に関する評価バッテリはない.本研究は健常者および脳卒中片麻痺患者を対象としたベッド上横移動動作の動作特性を検証し,横移動動作の評価方法の提案とその妥当性を検討するものである.脳卒中の重症度によっても,動作遂行能力の差異や転倒・転落のリスクファクターに違いが生じるものと思われ,これらを明らかにすることで的確な安全管理や患者指導に繋げることができる.本研究での評価法検討は,リハビリテーション医療での評価としての新たな視点を創造する.脳卒中などによって運動機能障害が生じたリハビリテーション対象患者は,頻回にベッド上の移動を行っているにも関わらず,横移動動作の安全性に関する評価バッテリはない.本研究は健常者および脳卒中片麻痺患者を対象としたベッド上横移動動作の動作特性を検証し,横移動動作の評価方法の提案とその妥当性を検討するものである.脳卒中の重症度によっても,動作遂行能力の差異や転倒・転落のリスクファクターに違いが生じるものと思われ,これらを明らかにすることで的確な安全管理や患者指導に繋げることができる.本研究での評価法検討は,リハビリテーション医療での評価としての新たな視点を創造する.
可視化による膜交通の分子機構の解明と植物高次システムへの展開

酵母と植物を材料に用い,高性能化した超解像共焦点ライブイメージング顕微鏡(SCLIM)を駆使して,膜交通を可視化し,小胞体ーゴルジ体間,ゴルジ体内,ゴルジ体以降,およびエンドサイトーシスのさまざまな過程における選別輸送の分子機構を詳細に解析した。積荷の受け渡しを直接可視化することに成功し,従来信じられていたモデルを大きく覆す結果を得た。SCLIMについては,さらに劇的な性能向上に成功し,個々の小胞の空間ダイナミクスをリアルタイムに解析するスペックを達成した。膜交通が植物の高次機能に果たす役割についてもさまざまな解析を行い,トランスゴルジ網が病原菌応答に重要な役割を担っていることを明らかにした。1.膜交通の可視化による選別分子機構の解明:酵母を材料に用い,超解像共焦点ライブイメージング顕微鏡(SCLIM)をさらに高性能化し,次のような研究を進めた。(1)ゴルジ体槽成熟の分子機構:積荷マーカーと同時に小胞体,ゴルジ体マーカーを発現する株で,積荷が小胞体→ゴルジ体(cis→trans)と進んでいくタイムコースを詳細に調べた。(2)小胞体からゴルジ体シス槽を形成する分子機構:小胞体のCOPII小胞出芽部位(ERES)とゴルジ体cis槽マーカーのkiss & runの際に積荷の受け渡しが行われていることを定量的なデータで示した。(3)ポストゴルジ交通網:エキソサイトーシスとエンドサイトーシスの交差点の理解:一群のRab/Ypt GTPaseの機能分担について,Rab cascadeの観点から詳細な可視化を進めた。(4)共焦点レーザー顕微鏡の改良開発:製作した多波長ダイクロイックミラーとバンドパスフィルターを実装したSCLIMで,実際に多色観察できる株を確立し,励起,増感の条件を検討した。2.植物における膜交通の研究:膜交通が組織,個体レベルでの高次機能で果たす役割を解析した。(1) Rab5 GTPaseをツールとした植物膜交通の研究:2種のRab5の機能分担を分子レベルで明らかにするために,それぞれのGTP型特異的に結合するエフェクターの解析を行った。(2)植物のゴルジ体とトランスゴルジ網(TGN)が担う膜交通の制御:小胞出芽の阻害剤を加えて一旦ゴルジ体とTGNを崩壊させ,薬剤を除いて再生させる系を用い,TGN-エンドソーム間輸送のメカニズムを詳細に調べた。(3)細胞極性形成と維持:シロイヌナズナに存在するミオシンXIとミオシンVIIIの役割分担について,ライブイメージングによる研究を行った。1.膜交通の可視化による選別分子機構の解明:主に酵母を材料に用い,開発した超解像共焦点ライブイメージング顕微鏡(SCLIM)をさらに高性能化し,これを駆使して次のような研究を進めた。(1)ゴルジ体槽成熟の分子機構:積荷マーカーを可視化し,同時に小胞体,ゴルジ体マーカーを発現する株で,小胞体→ゴルジ体(cis→trans)と進んでいく様子をさらに詳細に観察した。(2)小胞体からゴルジ体シス槽を形成する分子機構:小胞体のCOPII小胞出芽部位(ERES)にゴルジ体cis槽が接触し,その際に積荷の受け渡しが行われていることを証明した。このメカニズムを“hug and kiss action"と名付けた。(3)ポストゴルジ交通網:エキソサイトーシスとエンドサイトーシスの交差点の理解:一群のRab/Ypt GTPaseの機能分担について,Rab cascadeの観点からさらに詳細な可視化を進めた。(4)共焦点レーザー顕微鏡の改良開発:イメージインテンシファイアーのノイズ軽減とさらなる増感に成功し,製作した多波長ダイクロイックミラーとバンドパスフィルターを実装したSCLIMで,実際に多色観察できる株を確立し,励起,増感の条件を検討した。2.植物における膜交通の研究:植物の利点を大いに生かしたメカニズム研究を進めると同時に,膜交通が組織,個体レベルでの高次機能で果たす役割を解析した。(1) Rab5 GTPaseをツールとした植物膜交通の研究:保存型ARA7/RHA1,植物固有型ARA6の2種のRab5の機能分担を分子レベルで明らかにするために,それぞれのGTP型特異的に結合するエフェクターの解析をさらに進めた。(2)植物のゴルジ体とトランスゴルジ網(TGN)が担う膜交通の制御:ゴルジ体とTGNの空間的な関係とダイナミクスについてライブイメージングによる詳細な研究を行った。(3)細胞極性形成と維持:シロイヌナズナに存在するミオシンXIとミオシンVIIIの役割分担について,ライブイメージングによる研究を進めた。SCLIMを用いた超解像ライブイメージングで,小胞輸送の実態について教科書を書き換える大きな発見があった。細胞内のオルガネラ間輸送は小胞を介して行われるとされ,たとえば小胞体からゴルジ体への輸送では,小胞体から形成されたCOPII小胞が細胞質中を漂っていってやがてゴルジ体に到達すると考えられていて,教科書にもずっとそのように記載されていた。しかし本研究で我々は,酵母ゴルジ体のSCLIM観察により,ゴルジ体cis槽が小胞体のCOPII形成部位(ER exit site; ERES)に近づいていって接触し,そこでCOPII小胞に詰め込まれた積荷タンパク質を直接手渡しで受け取ることを明らかにした(Kurokawa et al. Nat. Commun. 2014)。これは,小胞が細胞質をさまようよりはるかに安全で効率がよい方法である。

この現象をゴルジ体のハグ&キスアクションと名付けた。植物細胞でも,ゴルジ層板が常に小胞体ERESに隣接する状態で存在し(Ito et al. Mol. Biol. Cell 2012; Ito, Uemura and Nakano Intl. Rev. Cell Mol. Biol. 2014; Ito and Nakano, unpublished),ハグ&キスを常時行っているものと推定される。動物細胞でも同様の現象が見られることが最近欧米のグループから発表されている。小胞輸送という概念のパラダイムシフトにつながる可能性がある。1.膜交通の可視化による選別分子機構の解明:主に酵母を材料に用い,開発した超解像共焦点ライブイメージング顕微鏡(SCLIM)をさらに高性能化し,これを駆使して次のような研究を進めた。(1)ゴルジ体槽成熟の分子機構:積荷マーカーと同時に小胞体,ゴルジ体マーカーを発現する株で,積荷タンパク質が分泌経路を進んでいく過程を詳細に調べ,輸送装置の変異体等を用いてそのメカニズムを探った。(2)小胞体からゴルジ体シス槽を形成する分子機構:小胞体のCOPII小胞出芽部位(ERES)とゴルジ体cis槽マーカーのhug & kissのメカニズムをさらに解析した。可視化マーカーを増やし,超解像4D解析(高分解能3D +高速ライブ)による解析を進めた。(3)ポストゴルジ交通網:エキソサイトーシスとエンドサイトーシスの交差点における分子選別を理解するために, Rab/Ypt GTPasesや繋留分子の可視化をさらに進めた。(4)共焦点レーザー顕微鏡の改良開発:さらに一段と感度を増した次世代SCLIMで,高速超解像観察の実証実験を進めた。2.植物における膜交通の研究:植物の利点を大いに生かしたメカニズム研究を進めると同時に,膜交通が組織,個体レベルでの高次機能で果たす役割の理解を目指した。(1) Rab5 GTPaseをツールとした植物膜交通の研究:2種のRab5の機能分担を分子レベルで明らかにするために,それぞれのエフェクター分子や新たな相互作用分子の解析をさらに進めた。(2)植物のゴルジ体とトランスゴルジ網(TGN)が担う膜交通の制御:SCLIMを用い,タンパク質の選別輸送の分子機構と膜ドメインのダイナミズムを詳細に調べた。(3)細胞極性形成と維持:シロイヌナズナに存在するミオシンXIとミオシンVIIIの膜交通における役割について,ライブイメージングによる研究をさらに進めた。SCLIMを用いて安定に3色をライブ観察できるようになり,情報量が劇的に増えてきた。2つの区画を2色で標識し,さらに積荷を3色目で追うことにより,選別輸送の仕組みを精密に理解できそうである。引き続き,酵母と植物での解析を進める。(1)ゴルジ体槽成熟の分子機構:積荷マーカーと同時に小胞体,ゴルジ体マーカーを発現する株で,積荷タンパク質が分泌経路を進んでいく過程を詳細に調べ,輸送装置の変異体等を用いてそのメカニズムを探る。
3Gネットワークを使用したモバイル道路交通情報システムの開発

【研究目的】カーナビゲーションシステムは、多くの機種でVICS(道路交通情報通信システム)により渋滞中の道路や交通規制の情報を得ることができる。しかし、渋滞が起きている地点のライブ映像を得るようなシステムとはなっていない。また、北海道や東北地方のような寒冷地では、冬期における積雪や路面の凍結が渋滞やスリップ事故等を招く原因となるが、VICSでは積雪量や路面の滑りやすさの参考となる気温等の気象データも提供されていない。そこで、最寄りの地点や進行方向上に位置する道路のライブ映像や気象情報を車上の端末に表示する新たな交通情報システムが提供できれば、更なる渋滞や事故の低減を図ることができるのではなかろうか。研究開発の大きな目的は、以下について検証を行うことである。1.ライブカメラと気象観測装置、3Gネットワークによる新たな交通情報システムの有効性の検証2.GPSにより現在地から最も近い地点または進行方向上にあるライブカメラの映像を送信する手法の確立3.高速移動時における移動体データ通信に最適なデータ転送量の確認とデータ転送手法の確立【研究方法】本研究では、以下の方法により研究開発を行った。1.監視カメラの映像、気象観測装置からの気象データの収集と公開を行うWebサーバの構築2.監視カメラと気象観測装置を観測点に設置し、サーバへデータを転送するプログラムの作成3.監視カメラからの映像(静止画および動画)や気象データのWebでの一般公開4.3Gネットワークを使用してGPSを内蔵するPCから位置情報をサーバに送信し、最寄り地点や進行方向上に位置する道路のライブ映像や気象データを自動的に表示するプログラムの作成【研究成果】公開用のサーバを構築し、気象情報と監視カメラの映像(静止画およびリアルタイム動画)を配信する手法を確認した。また、PCおよびGPSユニットにより、位置情報を3Gネットワークによってサーバへ送信することが可能であることを確認した。
廃棄物専用特殊三軸圧縮試験装置の開発

本研究は、土質力学的観点に立って、廃棄物による埋立地の様々な問題の解決法を探ろうとするものである。廃棄物専用の大型土質試験装置を試作し、埋立地で問題になっている廃棄物の土質力学特性について調べた。そして、試作したこれらの装置の実用化について検討である。特に、試作した三軸圧縮試験装置は体積変化、間隙水圧の測定方法の精度について検討改良を進め、現在、廃棄物のデ-タを蓄積中である。更に、デ-タを蓄積して、その装置の実用化に向けて改良を進めていく予定である。本研究によって得られた、新たな知見の主なものは次の通りである。(1)各研究機関で実施された、廃棄物に関する土質試験の情報収集作業の結果、この分野の研究の概要が把握され、この分野の研究は緒についたばかりであることが明かとなった。(2)焼却灰の大型締固め試験によると、繰返し法と非繰返し法では最大乾燥密度において、0.060.18t/m^3もの差が生じた。これは、粒子破砕によるものでなく、焼却灰中に含まれる空き缶類の偏平化によって密度増加をきたしたものであり、この現象は焼却灰特有の性質である(3)焼却灰に対するプラスチックの混入率(重量比)が15%までは、混入率の増加は、土質力学特性に大きく影響するが、混入率が15%を越えると、その影響度に差異がない。(4)軟質プラスチックのような、非常に高圧縮性の廃棄物は三軸圧縮試験中に大きな体積変化が生じ、せん断初期とせん断応力のピ-ク時では供試体の状態(密度)が大きく変化する。よって、精度の高いせん断強度を求めるためには、大容量でかつ高精度の体積変化測定装置の開発が必要である。現在、各研究分担者の成果をとりまとめて、報告書を作成中である。本研究は、廃棄物による埋立地の様々な問題について、土質力学的観点に基づいてその解決法を探ろうとするものであり、そのために廃棄物専用の大型土質試験装置を試作し、本年度は実際の埋立地で問題になっている浮遊性物質(プラスチック類)が他の廃棄物(焼却灰)に混入した場合の土質力学特性への影響について調べた。また、本装置を他の廃棄物(破砕ごみ)に対しても適用し、これらの装置の実用化について検討中である。特に、三軸圧縮試験装置は体積変化、間隙水圧の測定方法の精度について検討改良中である。今後、デ-タを蓄積して、その装置の実用化に向けて研究を進めていく予定である。本研究によって得られた新たな知見の主なものは次の通りである。(1)各研究機関で実施された廃棄物に関する土質試験の既往のデ-タの収集により、この分野の研究は緒についたばかりであることが明かとなった。(2)焼却灰を用いた大型締固め試験において、繰返し法と非繰返し法では最大乾燥密度において、0.060.08t/m^3もの差が生じた。これは、粒子破砕によるものでなく、焼却灰中に含まれる空き缶類が偏平化することによって密度増加をきたすためであることが明かとなった。(3)焼却灰にプラスチックが混入すると、重量比で15%までは、その混入率が増加すると、土質力学特性に大きな変化をきたし、影響度が大きいが、混入率が15%を越えると、土質力学特性への影響度に差異がないことが明かとなった。(4)焼却灰の透水係数は10^<ー3>cm/sec程度で、砂質土に近いと言える(5)焼却灰にプラスチックが混入すると、密詰めでは、混入率が増加するとせん断強度は低下するが、緩詰めでは、混入率に無関係である。各研究分担者はそれぞれのテ-マで、現在鋭意研究を続継中である。

よって、精度の高いせん断強度を求めるためには、大容量でかつ高精度の体積変化測定装置の開発が必要である。現在、各研究分担者の成果をとりまとめて、報告書を作成中である。
トランスポーター膜蛋白質の機能解明を目指した活性天然物の探索

ABCトランスポーターは、ATP加水分解エネルギーを利用して栄養素や老廃物の能動輸送を行う細胞の重要な膜タンパク質群であるが、それら機能のメカニズムに不明な点が多い。このような背景から本研究では、ABCトランスポーターの特異的な阻害剤を探索し、それらを鍵化合物としてABCトランスポーターの機能メカニズムの解明を行う。我々は、ABCトランスポーターの中でもがん多剤耐性に関わりの深いP-糖蛋白(P-gp)やmultidrug-resistant associated protein 1(MRP1)に焦点を当て、これら2種の膜タンパク質を過剰発現する多剤耐性がん細胞を用いた阻害剤探索のアッセイ法を構築している。そして、それら膜タンパク質に特異的に作用する阻害剤をサンゴ礁生物の抽出エキスから探索し、現在までに、P-gpの機能阻害物質としてXestospongia属海綿から大環状二量体アルカロイドaraguspongine類を、Sinularia属軟サンゴからセンブラノイドを、Briareum属ヤギ目八放サンゴからジテルペノイドbriantheinAを見出した他、Spongia属海綿からP-gpとMRP1の両方の機能を阻害するステロイドagosterolAを見出している。中でも、強力な耐性克服作用を有するステロイドagosterolAについて、さらにその類縁化合物やそれらから調製できる種々の誘導体の耐性克服作用の有無を検討し、構造と活性の相関を解析した結果、3個のアセトキシル基と2個の水酸基のいずれもが活性発現に関与していることが明らかになった。また、市販のergosterolを出発物質とするagosterolAの合成研究に着手し、agosterolAの4-deacetoxyl体の化学合成を達成した。さらに、短工程で化学合成が可能なラジオアイソトープ光親和性標識体を合成し、現在、MRP1への結合部位を解析している。
糖尿病における血管の緊張や細胞増殖の調節機構の破綻に関する分子細胞生物学的研究。

1.血管平滑筋細胞の細胞増殖に関する研究。(1)単一細胞レベルで細胞周期を同定する方法を確立した。血小板由来増殖因子による血管平滑筋細胞のG_0期⇒G_1期進行作用に細胞質Ca^<2+>濃度([Ca^<2+>]i)の上昇は、必須でないことがわかった。(2)高グルコース自体は、G_0期の細胞には全く影響がなく、G_0期⇒G_1期進行作用はなかった。しかし、G_1期細胞においては、[Ca^<2+>]iに影響を与えずに、細胞周期をG_1期⇒S期/M期へ進行させた。C-キナーゼの関与が示唆された。(3)サイクリックAMP/Aキナーゼ情報伝達系の活性化により、[Ca^<2+>]iは低下するにも拘らず、プロトオンコジーンが発現し、細胞周期はG_0期⇒G_1期へ進行することがわかった。2.血管内皮細胞の[Ca^<2+>]i調節に関する研究。血管内皮細胞では、エンドセリン-1(ET-1)は、百日咳毒素(IAP)感受性G蛋白の活性化を介して、細胞外Ca^<2+>流入を引き起こし、また、IAP非感受性G蛋白の活性化を介して、細胞内貯蔵部位からのCa^<2+>放出を引き起こして、[Ca^<2+>]iを上昇させることを明かとした。3.血管緊張制御・緊張亢進の成因に関する研究。(1)アンジオテンシン(AT-II)、C-キナーゼおよびA-キナーゼはAT-II受容体mRNAの発現を調節していること、および、受容体mRNAの増加は生理学的反応性([Ca^<2+>]i上昇)と良く相関することがわかった。(2)ET-3は収縮系のCa^<2+>感受性には影響を与えないが、ET-1は増強作用を示すことがわかった。更に[Ca^<2+>]iと張力の経時変化の相違から、ET-3による収縮はET-1に比べてCa^<2+>情報伝達系への依存度が高いと考えられた。(3)セロトニンは、収縮の全経過中に収縮系のCa^<2+>感受性にはほとんど影響を与えないが、ノルエピネフリンは、収縮の後半相において、収縮系のCa^<2+>感受性を増加させることがわかった。高濃度ブドウ糖が初代培養血管平滑筋細胞の細胞周期とCa^<2+>動態に及ぼす影響を検討し、以下の結果を得た。1)無血清培養によって得られたG0期細胞に高濃度ブドウ糖を与えても、細胞周期の進行は認められなかった。2)血小板由来増殖因子(PDGF)刺激によって得られたG1期細胞に高濃度ブドウ糖を与えると、細胞周期はS期・M期へ進行した。3)G0期およびG1期細胞において、高濃度ブドウ糖は、Ca^<2+>動態に全く影響がなかった。4)ブドウ糖と同濃度のマンニトールは、細胞周期・Ca^<2+>動態共に影響がなかった。

以上のことから、1)高濃度ブドウ糖は、血管平滑筋細胞において、コンピテンス増殖因子(G0期->G1期)ではないが、プログレッション増殖因子(G1期->S/M期)であること、2)高濃度ブドウ糖のプログレッション作用は、細胞質Ca^<2+>動態に非依存性であることが明かとなった。平成5年度の研究によって、高濃度ブドウ糖自体が、血管平滑筋細胞の細胞周期を促進させるプログレッション増殖因子であることが解った。in situの体細胞は、普段は細胞周期回転から外れた増殖静止期(G0期)にあるが、高濃度ブドウ糖は、このG0期細胞には影響がない。しかし、PDGF刺激などでG1期へ進行した細胞においては,高濃度ブドウ糖は、細胞周期をS期/M期へ進行させることができる。これまで、高濃度ブドウ糖の細胞周期へ対する直接作用を検討した報告はなく、上記の平成5年度の研究成果は、糖尿病における網膜症や動脈硬化症の発症機序を解明する上で重要であると考える。また、高濃度ブドウ糖による細胞周期促進作用は、細胞質Ca^<2+>濃度の増加を必要としないことが解ったが、平成6年は、この細胞周期促進作用の細胞内情報伝達機序を解明したい。1.血管平滑筋細胞の細胞増殖に関する研究。(1)単一細胞レベルで細胞周期を同定する方法を確立した。血小板由来増殖因子による血管平滑筋細胞のG_0期⇒G_1期進行作用に細胞質Ca^<2+>濃度([Ca^<2+>]i)の上昇は、必須ではないことがわかった。(2)高グルコース自体は、G_0期の細胞には全く影響がなく、G_0期⇒G_1期進行作用はなかった。しかし、G_1期細胞においては、[Ca^<2+>]iに影響を与えずに、細胞周期をG_1期⇒S期/M期へ進行させた。C-キナーゼの関与が示唆された。(3)サイクリックAMP/Aキナーゼ情報伝達系の活性化により、[Ca^<2+>]iは低下するにも拘らず、プロトオンコジーンが発現し、細胞周期はG_0期⇒G_1期へ進行することがわかった。2.血管内皮細胞の[Ca^<2+>]i調節に関する研究。血管内皮細胞では、エンドセリン-1(ET-1)は、百日咳毒素(IAP)感受性G蛋白の活性化を介して、細胞外Ca^<2+>流入を引き起こし、また、IAP非感受性G蛋白の活性化を介して、細胞内貯蔵部位からのCa^<2+>放出を引き起こして、[Ca^<2+>]iを上昇させることを明かとした。3.血管緊張制御・緊張亢進の成因に関する研究。(1)アンジオテンシン(AT-II)、C-キナーゼおよびA-キナーゼはAT-II受容体mRNAの発現を調節していること、および、受容体mRNAの増加は生理学的反応性([Ca^<2+>]i上昇)と良く相関することがわかった。(2)ET-3は収縮系のCa^<2+>感受性には影響を与えないが、ET-1は増強作用を示すことがわかった。更に[Ca^<2+>]iと張力の経時変化の相違から、ET-3による収縮はET-1に比べてCa^<2+>情報伝達系への依存度が高いと考えられた。(3)セロトニンは、収縮の全経過中に収縮系のCa^<2+>感受性にはほとんど影響を与えないが、ノルエピネフリンは、収縮の後半相において、収縮系のCa^<2+>感受性を増加させることがわかった。
個々人の体内時計制御に基づくオーダーメイド型の食事内容の提案と臨床応用

生活習慣病予防に個々人の体内時計を考慮した食事内容や食事タイミングを考える時間栄養学的視点が必要となる。多様な生活様式や社会生活を求められる中で、各個人の生体リズム・体内時計に基づく食事内容や食事時刻を検討することは重要と考えられる。本研究課題では、1)各個人の体内時計(朝型・夜型などのクロノタイプ、社会的時差ボケ、時計遺伝子発現リズム)を評価し、異なる食事タイミングにおける糖・脂質代謝との関連性を検討し、2)糖尿病リスクの高い対象者あるいは耐糖能異常者への臨床応用の可能性を明らかにする。これらの検証により、個々人の体内時計制御に基づくオーダーメイド型の食事内容の提案と臨床応用を目指す。