hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
化学反応で駆動する自律機械の研究と「ケモメカトロニクス」の提案

本研究提案では,機器の高性能化に伴い部品点数の増加や,組み立ての複雑さなどの問題をかかえている機械設計について,化学反応というリソースを用いて簡略化し配線や機械部品を廃した新しい機械設計を提案することにある.具体的には,従来の歯車やモータなどの機械部品を所要の目的に向かって繋げていく機械設計ではなく,化学反応によって生じる物理現象を機械要素に見立て,化学反応のループや開始と停止する条件をセンサにして機械設計を確立するである.さらにその化学反応から設計を考える設計思想をケモメカトロニクスと名付け,この実証実験のために光という外環境に応答してレンズの焦点を自律して駆動するセルフフォーカスマシンを作製する.本年度では主にセルフフォーカスマシンのアクチュエータ部に用いるElectrohydrodynamicの現象について深く調査を行った.Electrohydrodynamicとは,油やエタノールといった電気を通さない絶縁性流体に高電界を印加すると流動が生じるという電気化学反応である.このElectrohydrodynamicを利用したデバイスは数多く開発されているが,原理がいまだ完全には理解されておらず,最適化などの妨げとなっている.そこで,誘電性流体に働く電気的な力の式からシミュレーションを行い,実際の流路と比較検討して一方向流れの発生メカニズムについての理解を深めた.一方向流れの発生要因としては電極付近で発生する渦が影響しており,この渦をコントロールすることによって低電圧化を達成し,セルフフォーカスマシンに組み込みやすい低電圧Electrohydrodynamicデバイスを開発していく.本年度では初年度の研究計画である低電圧Electrohydrodynamic(EHD)デバイス開発のために,一方向流れの発生メカニズムについて研究した.メカニズム解明のために大きく2つのアプローチをとった.1つ目は一般的に知られている理論式からFEMシミュレーションを行いどのように流れが発展していくかを確認することである.2つ目は非接触可視化手法であるシュリーレン法により,デバイス内の流れを可視化することによって実現象ではどのように流れが発展しているかを観察することである.まず,理論式からFEM解析した結果,電界に依存した体積力が発生することが確認された.電極近傍で最も電界が強くなるため,その電界に応じた体積力が発生する.流体が引きずられた結果,負圧が発生しその圧力差によって電極近傍で渦が発生する.その渦が時間発展と共に成長していき,渦が接触して流れを生じさせることによって一方向流れが発生していることが分かった.次に流路内をシュリーレン法にて可視化を行った結果,電極近傍で渦が発生してから流れが発生していることが確認された.また,これは先行研究でも電極近傍で渦が発生していることが確認されているため妥当である.以上から,一方向流れの発生メカニズムの仮定を立てることができた.今後の研究の推進方策としては,一方向流れの発生メカニズムについて確認実験を行い,低電圧マイクロElectrohydrodynamic(EHD)デバイスを作製する.FEM解析で使用した流路と同じ設計の流路を3Dプリンターで作製し,電極を銅板で設ける.作製したデバイスにEHDでよく用いられている作動溶液と微粒子で満たし,長いタイムスケールでの流動を可視化する.そこから低電圧化に適した流路形状と電極配置を設計する.また,最終年度に向け,エネルギー部かつセンシング機構となるマイクロ光化学電池デバイスの施策を行う.マイクロ光化学電池は上記の低電圧マイクロEHDデバイスで駆動可能な最小電圧を元に出力を設計し,組み込みやすいようフォトリソグラフィ技術を用いて適切な形状へ集積化を行う.本研究提案では,機器の高性能化に伴い部品点数の増加や,組み立ての複雑さなどの問題をかかえている機械設計について,化学反応というリソースを用いて簡略化し配線や機械部品を廃した新しい機械設計を提案することにある.具体的には,従来の歯車やモータなどの機械部品を所要の目的に向かって繋げていく機械設計ではなく,化学反応によって生じる物理現象を機械要素に見立て,化学反応のループや開始と停止する条件をセンサにして機械設計を確立するである.さらにその化学反応から設計を考える設計思想をケモメカトロニクスと名付け,この実証実験のために光という外環境に応答してレンズの焦点を自律して駆動するセルフフォーカスマシンを作製する.本年度では主にセルフフォーカスマシンのアクチュエータ部に用いるElectrohydrodynamicの現象について深く調査を行った.Electrohydrodynamicとは,油やエタノールといった電気を通さない絶縁性流体に高電界を印加すると流動が生じるという電気化学反応である.このElectrohydrodynamicを利用したデバイスは数多く開発されているが,原理がいまだ完全には理解されておらず,最適化などの妨げとなっている.そこで,誘電性流体に働く電気的な力の式からシミュレーションを行い,実際の流路と比較検討して一方向流れの発生メカニズムについての理解を深めた.一方向流れの発生要因としては電極付近で発生する渦が影響しており,この渦をコントロールすることによって低電圧化を達成し,セルフフォーカスマシンに組み込みやすい低電圧Electrohydrodynamicデバイスを開発していく.本年度では初年度の研究計画である低電圧Electrohydrodynamic(EHD)デバイス開発のために,一方向流れの発生メカニズムについて研究した.メカニズム解明のために大きく2つのアプローチをとった.1つ目は一般的に知られている理論式からFEMシミュレーションを行いどのように流れが発展していくかを確認することである.2つ目は非接触可視化手法であるシュリーレン法により,デバイス内の流れを可視化することによって実現象ではどのように流れが発展しているかを観察することである.まず,理論式からFEM解析した結果,電界に依存した体積力が発生することが確認された.

電極近傍で最も電界が強くなるため,その電界に応じた体積力が発生する.流体が引きずられた結果,負圧が発生しその圧力差によって電極近傍で渦が発生する.その渦が時間発展と共に成長していき,渦が接触して流れを生じさせることによって一方向流れが発生していることが分かった.次に流路内をシュリーレン法にて可視化を行った結果,電極近傍で渦が発生してから流れが発生していることが確認された.また,これは先行研究でも電極近傍で渦が発生していることが確認されているため妥当である.以上から,一方向流れの発生メカニズムの仮定を立てることができた.今後の研究の推進方策としては,一方向流れの発生メカニズムについて確認実験を行い,低電圧マイクロElectrohydrodynamic(EHD)デバイスを作製する.FEM解析で使用した流路と同じ設計の流路を3Dプリンターで作製し,電極を銅板で設ける.作製したデバイスにEHDでよく用いられている作動溶液と微粒子で満たし,長いタイムスケールでの流動を可視化する.そこから低電圧化に適した流路形状と電極配置を設計する.また,最終年度に向け,エネルギー部かつセンシング機構となるマイクロ光化学電池デバイスの施策を行う.マイクロ光化学電池は上記の低電圧マイクロEHDデバイスで駆動可能な最小電圧を元に出力を設計し,組み込みやすいようフォトリソグラフィ技術を用いて適切な形状へ集積化を行う.
高水準仮想化機能をもつAugmentedリアルビッグデータ利活用基盤の構築

ビッグデータ処理では,蓄積データやストリーム等の様々な大規模リアルデータに対して,結合・集約処理等に加え,機械学習等を用いた補完・推定処理等の多様なデータ処理を有機的に適用することが求められている.このような複合的データ処理を支援する上で,データ構造や処理の詳細を隠ぺいする仮想化技術が極めて重要である.本研究では,実世界から直接観測・取得されるリアルデータと,機械学習,メタデータ推論,シミュレーション等を適用することにより元データを大幅に拡充・補填するAugmentedデータをシームレスに統合する仮想化技術を確立し,それに立脚したAugmentedリアルビッグデータ利活用基盤の構築を目指す.ビッグデータ処理では,蓄積データやストリーム等の様々な大規模リアルデータに対して,結合・集約処理等に加え,機械学習等を用いた補完・推定処理等の多様なデータ処理を有機的に適用することが求められている.このような複合的データ処理を支援する上で,データ構造や処理の詳細を隠ぺいする仮想化技術が極めて重要である.本研究では,実世界から直接観測・取得されるリアルデータと,機械学習,メタデータ推論,シミュレーション等を適用することにより元データを大幅に拡充・補填するAugmentedデータをシームレスに統合する仮想化技術を確立し,それに立脚したAugmentedリアルビッグデータ利活用基盤の構築を目指す.
Ｈダイバリオンの研究

この研究の目的は新しいタイプの3次元飛跡検出器(TPC)を開発して、未発見の粒子であるHダイバリオンの探索実験を行うことである。この粒子はK中間子と原子核の反応で生成されラムダ粒子などの短寿命の粒子に複雑に崩壊すると考えられる。これらの崩壊粒子を精密かつ高効率で測定するには標的を内蔵し高強度のビームで動作するTPCが理想的である。我々は新しいガス増幅部(GEM)を持つプロトタイプのTPCを制作し、高強度のビームでTPCの動作を研究し1MHzの強度のビームでも問題なく動作させることに成功した。この研究に基づいて実際の実験のためのTPCを設計製作し、J-PARCにおける実験の準備を整えた。Time Projection Chamber (TPC)を使った大立体角のハイペロンスペクトロメーターを製作し、6クォーク(uuddss)からなるHダイバリオンをJ-PARC大強度Kビームを用いて探索することがこの研究の目的である。まずこの実験の詳しいsimulationを行いLL共鳴として測定されるとした時の質量分解能や検出効率を調べた。この結果をJ-PARC課題審査委員会に報告し、実験提案が正式に採択された。TPCのUVレーザーによる校正システムを作り、プロトタイプのTPCを使ってテストしその動作を確認した。さらに0.7Tの磁場中でのTPCの動作をこのレーザーを使って調べた。その結果3mm幅のパッドでも複数のパッドで信号が得られ十分な一分解能が得られることを確認した。この結果に基づいて、フルサイズのTPCの設計・製作をスタートした。パッドの幅は2.5mmで直径50cm、パッド総数は約6000である。電子増幅はGEMを用いる。電極を分割した直径50cmのGEMを設計・製作した。TPCの読み出しにはAGETと呼ばれるチップを用いたシステムを導入するこを決め、そのテストのためのテスト基板を製作した。これまでTPCの製作に関してはほぼ順調に研究が進展している。TPCを入れるHelmholtz型の超電導電磁石については、3次元磁場計算を用いた磁石の設計を行い、TPCの全有感領域にわたって1Tの磁場を1%以下の一様性で作ることができることを確認した。今年度も継続して研究課題であるHダイバリオン探索実験の中心的検出器であるTime Projection Chamberの開発研究を行った。前年度までのプロトタイプでのテスト結果と検出器のsimulation計算を踏まえて、実物サイズのプロトタイプ検出器を設計して製作を行った。また信号読み出しシステムをGETというフランスで開発されたICチップを用いることに決定し、引き続くデータ処理システムもこれに合わせて決定し、その製作にはいった。同時にテスト基板によるテストを開始した。26年度はじめにこれらが納入され、いよいよフルサイズTPCの動作テストに入る。またTPCをいれる超伝導Helmholtz磁石の設計をすすめほぼその仕様を決めるところまできた。これまでの大強度ビームでのTPCのテスト実験をはじめとする、プロトタイプTPCを用いた開発研究の結果を論文にまとめて投稿した。このHダイバリオン探索実験に用いるテェレンコフ検出器、TOF検出器やシンチレーションホドスコープなどの検出器の開発・製作も進んだ。Hダイバリオン探索実験のための中心実験装置であるハイペロンスペクトロメータの開発がこの研究の中心課題である。26年度は、そのための3次元飛跡検出器Time Projection Chamber(TPC)とそれを入れる超電導ヘルムホルツ磁石の設計をすすめた。TPCについてはこれまでの開発研究を踏まえて6000チャネルのパッド読み出し部分の制作やGEMガス増幅の制作を開始した。磁場と電場の計算をしながらTPCの電場整形器と超電導磁石の詳細設計を行った。電場と磁場の性能がTPCの位置分解能に大きく影響することが分かっている。予算とも照らしながら何度も計算と設計を繰り返してこれらの仕様をほぼ決定できたことは大きな成果である。ただこれらの計算に時間がかかり電場整形器の制作が年度内には終わらずその分の予算を次年度に繰り越した。またこれらの仕様決定にともないHダイバリオン探索実験の全体設計も行い、これまでより精度のたかい実験のシミュレーションを行い、当初の想定より少し大きな効率と当初どおりの質量分解能でHダイバリオンを探索できることを示したことは大きな成果といえる。またこれまでプロトタイプのTPCを用いて行ってきたさまざまなテスト実験などの開発研究の成果を公表論文にまとめたこともその実績をしめすものである。この研究の主題である、Hダイバリオン探索実験とそのためのTime Projection Chamber (TPC)を中心とするハイペロンスペクトロメータの開発が研究の中心課題である。現在までTPCについてはprototype TPCを用いて大強度ビームも利用してさまざまなテストを行い、結果を論文にまとめることができた。その結果とシミュレーション計算に基づいて実機のTPCの設計を行いその制作をおこなった。カギとなるガス増幅器のGEMやパッド読みだしなどを決定して制作を行った。電場整形機や超電導磁石については、シミュレーションによる電場磁場の計算を行い、設計を完了した。このTPCは標的内臓で高強度のビームが直接はいるという極めてユニークなもので、開発研究の内容が極めて多い。それを考慮するとこれまでの進捗状況はおおむね順調といえるだろう。27年度も継続してHダイバリオン探索実験の中心的検出器であるGEMを用いたTime Projection Chamberの制作およびそのテストを行った。Chamber本体とその約6000チャネルのPadの信号読み出しのシステムも完成させたことは大きな成果である。

鉄のX線を用いたテストではほぼ満足すべきエネルギー分解能があることを確認するとともに、宇宙線の飛跡を確認し、Time Projection Chamberとして動作していることも確認した。足掛け5年にわたる開発研究の成果としてこの革新的な飛跡検出器が完成したことは大変喜ばしい。またこの検出器を入れる超電導ヘルムホルツ磁石についても、磁場計算などの設計を終えて27年度末に制作納入された。これでHダイバリオンの崩壊粒子を測定するハイペロンスペクトロメータがほぼ完成したことになる。震災や事故でJ-PARCのビームタイムの予定が遅れて残念ながら期間中に本実験は行えなかったが、その分スペクトロメータ開発研究に時間をかけることができた。また実験の準備もほぼ整えることができたことは大きな成果といえる。さらにこの研究で制作したこの装置を利用した、ほかのハドロン物理実験についても検討が進んでいることは、この装置のユニークさと有効性をしめしている。この研究の目的は新しいタイプの3次元飛跡検出器(TPC)を開発して、未発見の粒子であるHダイバリオンの探索実験を行うことである。この粒子はK中間子と原子核の反応で生成されラムダ粒子などの短寿命の粒子に複雑に崩壊すると考えられる。これらの崩壊粒子を精密かつ高効率で測定するには標的を内蔵し高強度のビームで動作するTPCが理想的である。我々は新しいガス増幅部(GEM)を持つプロトタイプのTPCを制作し、高強度のビームでTPCの動作を研究し1MHzの強度のビームでも問題なく動作させることに成功した。この研究に基づいて実際の実験のためのTPCを設計製作し、J-PARCにおける実験の準備を整えた。今後の研究方策としては、期間内にHダイバリオン探索実験の中心測定装置であるハイペロンスペクトロメータを完成させることが最も重要である。さいわい設計はすべて26年度に終えた。TPCについては次年度に繰り越した電場整形機を完成させ、TPC全体が完成する。その後放射線源、宇宙線、実際のビームでのテストを行い、データ解析のプログラムを完成させて実験に備えることになる。J-PARCではハドロンホールの放射線もれ事故のためにビーム利用の予定が大幅に遅れている。Hダイバリオン探索実験も遅れることが予想されるが、いつでも実験できるよう研究期間内に万全の準備を整えるつもりである。27年度が最終年度であるため、記入しない。原子核物理学研究の最終目的のHダイバリオン探索実験のカギとなる標的内臓型TPCの開発製作が大きな仕事である。2年間で完成することを目指している。今年度はプロトタイプのTPCを用いたテスト実験に基づいて、フルサイズのTPC本体の設計をほぼ完了し、その製作を開始することができたので、これに関して計画は順調に進展していると考える。
非球面レンズ創成のための新3次元レーザマイクロ加工法に関する研究

光通信やIT産業の著しい発展に伴って、超精密微細光学部品の需要が高まっており、非球面レンズなどの加工法が問題となっている。国際競争力を付けるためには、多品種少量生産にも対応し、低コストなクリーンな超精密微細加工法の開発が強く望まれている。そこで、本研究では非球面レンズ創成のための新3次元レーザマイクロ加工法として、新しい加工法を提唱し、その確立を目指した。線膨張係数の急激な変化を利用した凸非球面レンズ創成法...レーザで局部を急加熱し、転移点以上の温度にすることで凸部が形成できる。この時のビーム強度分布や熱拡散を考慮して球面レンズの創成を試みた。また、型やスタンピングなど塑性加工と併用することも試み、非球面レンズ創製の可能性を探った。その結果、正確な球面の創製が可能であることが分かった。さらに、スタンピングが可能であり、平面の転写や型の転写が可能であった。これにより、非球面創成の可能性を得た。本研究を遂行中、レーザを重複させることでYAGレーザを透過しやすいガラス材料に対しても凸レンズが形成容易であることを見出した。さらに、一度に硝子板の表裏に2個のレンズを創成でき、導光板などの応用についても検討した。国際競争力を付けるためには、多品種少量生産にも対応し、低コストでクリーンな超精密微細加工法の開発が強く望まれている。そこで、本研究では非球面レンズ創成のための新3次元レーザマイクロ加工法として、2つの加工法を提唱し、その確立を目指している。○装置の構築:基礎的な加工システムを構築した。(1)レーザ発振器...既存のCW YAGレーザ,購入したCO2レーザを用いた.(2)加工ヘッド...YAGレーザを用いた装置の加工ヘッドは改造した光学顕微鏡を用いてレーザ集光装置とした.CO2レーザはガルバノミラー,fθレンズを組み込んで加工ヘッドとした.○張係数の急激な変化を利用した凸面レンズ創成法の開発...レーザで局部を急加熱し、転移点以上の温度にすることで凸部が形成できた。この時のビーム強度分布や熱拡散を考慮して曲率を制御できることが分かった.今後は凸非球面レンズの創成を試みる。また、型やスタンピングなど塑性加工と併用することも試みる。○歪みの精密微細制卸による凹球面レンズ創成法の開発...パルスレーザを照射すると、凹面形状に熱歪みが生じ、ある境界面で引っ張り応力が発生することが分かった,これにより,凹球面レンズの創成が可能であった.今後は,これを基にしてビーム強度分布を制御、もしくはCWビームスポット高速走査によるエネルギー分布制御によって、精密微細熱歪み分布を形成し、非球面マイクロレンズの創成を試みる。以上より,本研究は当初の計画通り順調に遂行されており,何ら問題はない.今後も計画に従って研究を遂行する.光通信やIT産業の著しい発展に伴って、超精密微細光学部品の需要が高まっており、非球面レンズなどの加工法が問題となっている。そこで、本研究では非球面レンズ創成のための新3次元レーザマイクロ加工法として、2つの加工法を提唱し、その確立を目指す。1.線膨張係数の急激な変化を利用した凸非球面レンズ創成法・・・レーザで局部を急加熱し、転移点以上の温度にすることで凸部が形成できる。この時のビーム強度分布や熱拡散を考慮して凸非球面レンズの創成を試みる。本加工法を以降「マイクロ塑性法」という。2.熱歪みの精密微細制御による凹非球面レンズ創成法・・・ある条件でパルスレーザを照射すると、凹面形状が創成される。これは熱歪みが生じ、ある境界面で引っ張り応力が発生するためである。

これを基にしてビーム強度分布を制御、もしくはCWビームスポット高速走査によるエネルギー分布制御によって、精密微細熱歪み分布を形成し、非球面マイクロレンズの創成を試みる。本加工法を以降「マイクロ割断法」という。以上の新3次元レーザマイクロ加工法の信頼性を向上させ、実用化できるよう育成する。本年度は初年度の研究成果に基づいて、2つの加工法を高機能化すべく実験を主体として活動した。1.非球面創成のための装置構築:ビーム整形レンズの作製のための装置構築が完了した。2.マイクロ割断のための本実験:YAGレーザによる割断実験、レーザ吸収率の制御に成功した。3.マイクロ塑性のための本実験:ビーム走査による塑性加工に成功した。4.理論計算:マイクロ割断、マイクロ塑性のシミュレーションを行い、大方の傾向が示せた。光通信やIT産業の著しい発展に伴って、超精密微細光学部品の需要が高まっており、非球面レンズなどの加工法が問題となっている。国際競争力を付けるためには、多品種少量生産にも対応し、低コストなクリーンな超精密微細加工法の開発が強く望まれている。そこで、本研究では非球面レンズ創成のための新3次元レーザマイクロ加工法として、2つの加工法を提唱し、その確立を目指した。1.線膨張係数の急激な変化を利用した凸非球面レンズ創成法...レーザで局部を急加熱し、転移点以上の温度にすることで凸部が形成できる。この時のビーム強度分布や熱拡散を考慮して球面レンズの創成を試みた。また、型やスタンピングなど塑性加工と併用することも試み、非球面レンズ創製の可能性を探った。その結果、正確な球面の創製が可能であることが分かった。さらに、スタンピングが可能であり、平面の転写や型の転写が可能であった。これにより、非球面創成の可能性を得た。本研究を遂行中、レーザを重複させることでYAGレーザを透過しやすいガラス材料に対しても凸レンズが形成容易であることを見出した。さらに、一度に硝子板の表裏に2個のレンズを創成でき、導光板などの応用についても検討した。2.熱歪みの精密微細制御による凹非球面レンズ創成法...ある条件でパルスレーザを照射すると、凹面形状が創成される。これは熱歪みが生じ、ある境界面で引っ張り応力が発生するためである。これを基にしてビーム強度分布を制御、もしくはCWビームスポット高速走査によるエネルギー分布制御によって、精密微細熱歪み分布を形成し、非球面マイクロレンズの創成を試みた。その結果、冷却によって応力を大きくすることで、凹面レンズ創成条件を広げることができた。さらにFEM解析によって、応力分布を求め球面創成が可能であることを予測できた。しかし、球面の底部にへそのように凹凸が残留し、正確な凹面形状は得られなかった。しかし、この加工法の研究を通して新しい加工法を考案することができたので3.として以下に示す。3.自己収束型凹レンズ創成法...球面凹レンズを創成する手法として、エッチングとレーザ加工を組み合わせた加工法を考案し、実証した。ガラスは化学エッチングに対し、等方性であるため何処も同じ量だけ除去される。したがって、レーザでガラス表面にいい加減な窪みを創成し、その後のエッチングによって球面が仕上がってしまうのである。4時間のエッチング後では球面誤差は0.1μm以下であった。この手法を利用してレーザを再度照射し、エッチングを行うことで非球面創成が可能になるものと期待される。
咬合力による骨組織改造の高精度予測

咬合力によって起こる骨組織の改造を、正確に予測することができるシミュレーションモデルの確立を目的として、ラットにインプラントを埋入し、上部構造を装着して咬合力を加えることができるモデルを構築した。このモデルを用いて、インプラントおよび周囲組織をマイクロCTにて撮影し、そのデジタルデータを3次元有限要素法プログラムに取り込み、荷重を加えるシミュレーションを行った。有限要素法による解析結果と組織切片で観察される組織変化の相関性を検討した結果、応力集中部位に骨組織変化が起こる可能性が示され、3次元有限要素法による骨組織の改造予測が十分に可能であることが示された。現時点でその精度については検証中であり、今後の継続的な研究が必要である。(1)実験系を確立するための予備実験としてラットを用いた動物実験を行なう。本研究は天然歯とインプラントを対象として行なう予定である。天然歯はラット上顎の臼歯を対象とし、通常通り固形飼料を与えて咬合機能を担う臼歯と、対合歯を抜去して咬合力を排除した臼歯を組織学的に比較し、必要に応じて免疫組織化学による骨関連タンパクの発現を検索する。(2)一方、ラット上顎への純チタンインプラント植立は既に藤井らによって確立されている方法に従って行なう。これに関しても、対合歯を抜去して咬合を与えないものと、埋入したインプラントがオッセオインテグレーションを獲得した後に金属板を合着して咬合力を負荷するものとで同様に比較する。(3)実験系を確立した後、ラット上顎臼歯歯根周囲の骨をマイクロCTにて撮影し、その画像データを3次元有限要素法の解析ソフトに入力する。応力分布の検索は、実際にかかる咬合力(固形飼料を砕く際の測定値を使用)を中心に、数種類の咬合負荷をプログラム上で想定して行なう。この結果得られた応力分布と、上記で得られた実際の組織学的観察結果を比較検討し、両者の相関を検索して、in vivoで起こる骨改造に相関する応力分布を示す条件を特定する。(4)インプラントを埋入する患者様、特に自家骨移植併用による上顎洞底挙上後にインプラントを埋入する患者様のCT撮影を行い、埋入直後の撮影データを上記実験と同様に3次元有限要素法解析ソフトに入力し、一定条件で応力解析を行なう。この結果と、1年経過後のCT像とを比較することで、想定された応力分布に対して実際にどのように骨改造が行なわれたかを検索する。本研究の目的は、天然歯およびインプラントにかかる咬合力がそれら周囲の骨構造の変化に及ぼす影響と結果を高精度に予測することが可能であるか否かを検索し、可能であればその予測方法を確立することである。平成20年度はラットのインプラント植立・咬合モデルを確立するために、径1.5mm長さ2mmの純チタン製インプラントを作製し、これに適合するクラウンを用いることでこのインプラントが長期に亘ってラットの口腔内で機能することを確認した。さらにラット上顎臼歯を抜歯後4週間経過し、抜歯窩が治癒した状態の上顎骨と、インプラント埋入直後の上顎骨を取り出し、マイクロCT撮影を行った。このCTデータを3次元有限要素法解析ソフトに入力し、インプラントに対して垂直方向に荷重をかけた場合の応力解析を行った。抜歯後のラット上顎骨は厚み約2mmでそのほとんどが緻密な骨である。その結果、インプラントの周囲の骨より、上顎骨の基部周囲に応力が集中することが分かった。このことはインプラント周囲での骨改造と有限要素法による解析結果との関連性を示すことが難しいことを示している。しかしながら、本研究の目的は、有限要素法による解析結果が実際の骨改造とどのように相関するかを検索することである。目的達成に向けて、大きな問題とはならないと考えられる。今後は、一定期間機能させたインプラント埋入部位に近接する上顎骨基部の骨変化を組織学的に観察し、有限要素法による解析結果との関連性を検索する予定である。平成21年度はラットのインプラント植立・咬合モデルを確立するために、径1.5mm長さ2mmの純チタン製オーダーメイドインプラントを使用し、これに適合するクラウンを用いてインプラントを最長4週間咬合させた。さらにラット上顎臼歯を抜歯後4週間経過し、抜歯窩が治癒した状態の上顎骨標本10個を対象としてマイクロCT撮影を行い、平均的な抜歯後の上顎骨の形態を統計学的手法によって求めた。また、インプラントを埋入するために最も周囲骨の量が確保できる位置を算出した。

このCTデータを3次元有限要素法解析ソフトに入力し、インプラントに対して垂直方向に荷重をかけた場合の応力解析を行った。その結果、インプラントの周囲の骨より、上顎骨の基部周囲に応力が集中することが分かった。実際にインプラントを埋入したラットの組織切片を観察したところ、前年度の結果とは異なり、オッセオインテグレーション成立後には、必ずしもインプラント周囲に骨改造が起こらないことが示され、インプラント周囲での骨改造と有限要素法による解析結果との関連性を示すことが可能であることを示している。今後は、各種条件下での有限要素法による解析結果と組織学的所見との関連性をさらに検索する予定である。本研究の目的は、天然歯およびインプラントにかかる咬合力がそれら周囲の骨構造の変化に及ぼす影響と結果を高精度に予測することが可能であるか否かを検索し、可能であればその予測方法を確立することである。平成22年度は前年度のラットのインプラント植立・咬合モデルを改良し、径1.5mm長さ2mmの純チタン製オーダーメイドインプラントにねじ止めできるアバットメントを使用し、これをカンチレバー形態にしてインプラントに過度な咬合力を与えた。その結果、インプラント埋入後4週間でカンチレバー形態のアバットメントを装着したものでは、7日から15日後にインプラントからやや離れた領域に骨吸収が活発に観察され、インプラント表面に成立したオッセオインテグレーションの破壊は限定的であった。一方、過度な咬合力がかからない、円形のアバットメントを装着したものでは、このような変化は観察されなかった。これらの条件でインプラントに咬合力を加えた際の、応力分布を解析するために、標本をマイクロCTにて撮影し、このCTデータを3次元有限要素法解析ソフトに入力して、インプラントに対して斜め45度方向に荷重をかけた場合の応力解析を行った。その結果、応力の集中は従来のデータとは異なる部位に起こる可能性が示唆された。これにより、インプラント周囲での骨改造と有限要素法による解析結果との関連性を示すことの可能性がさらに高まったと考えられる。今後も、各種条件下での有限要素法による解析結果と組織学的所見との関連性をさらに検索する予定である。平成23年度は径1.5mm長さ2mmの純チタン製オーダーメイドインプラントにねじ止めできるアバットメントを使用し、これをカンチレバー形態にしてインプラントに過度な咬合力を与えた。その結果、インプラント埋入後4週間でカンチレバー形態のアバットメント上に滑沢面が出現し、ラットが主に咬合していると思われるポイントを同定できることが判明した。この条件でインプラントに咬合力を加えた際の、応力分布を解析するために、標本をマイクロCTにて撮影し、このCTデータを3次元有限要素法解析ソフトに入力して、実際に咬合しているポイントにおいてインプラントの軸方向に荷重をかけた場合の応力解析を行った。また、インプラント埋入そのものによるインプラント先端の骨形成やラットの成長による影響を排除するために、これらに関する詳しい分析も行った。一方、CT撮影を行った同じ個体のインプラント周囲組織を組織切片とし、応力分析の結果と比較した。
沈み込み帯におけるメタン・水の循環モデルへのヨウ素同位体年代法の応用

海洋環境においてヨウ素は有機物との強い親和性を持つ。有機物とともに堆積し、埋没もしくは沈み込んだヨウ素は、有機物が続成分解する際にメタンなどの炭化水素とともに間隙水中に放出される。そのため海洋堆積物の間隙水のヨウ素濃度は海水に比べて2桁以上高い。また天然環境でヨウ素には安定同位体(^<127>I)のほか1570万年の半減期を持つ放射性同位体(^<129>I)が存在する。そのため間隙水中の^<129>I/^<127>I比を測定することによって、ヨウ素が取り込まれている有機物が海水から切り離された時間、すなわち堆積年代を決定することできる。ヨウ素をプロクシとしメタンや間隙水の移動過程に時間軸を組み込むことになり、水を通じた物質循環が活発な大陸縁辺域での物質移動量を定量化することが可能である。これまでの研究で海底での活発なメタンプルームや塊状メタンハイドレートの露出が観察されている上越沖の海域でヨウ素同位体比を測定し、メタンの起源となる有機物は日本海形成のごく初期に堆積したものであることを見出した。本年度は深部から供給されるメタン(ヨウ素)と現在堆積しつつある海洋有機物から供給されるヨウ素を区別し、より正確な年代決定が行えるよう、浅堆積物中での有機物続成過程の定量化を間隙水に溶存する酢酸の挙動から試みた。酢酸は有機物などからメタンが生成するための重要な前駆体であり、特にその炭素同位体組成はどのような反応が起きているのかを知るための重要な指標となる。これまでの研究成果からは、海底面直下では酢酸生成が、200cm以深ではメタン生成反応が卓越していることが明らかになった。また、酢酸生成は特に浅部で有機物の発酵分解が、やや深部で二酸化炭素の還元が起きていることが示唆された。ヨウ素は海洋有機物に強く吸着する性質を持ち、その有機物が埋没または沈み込みによって分解する過程で、間隙水中に炭化水素とともに放出されるため、沈み込み帯における油ガス田かん水、温泉水を始め、ガスハイドレート鉱床中の間隙水に濃集する。本研究ではそれらの水試料中(又は堆積物)にごく微量に存在する放射性ヨウ素同位体(129I)量を測定し、有機物の堆積年代を決定し、沈み込み帯におけるメタンや水の移動モデルに年代議論を取り入れることを目的とする。平成19年度はガスハイドレート地域を中心に間隙水の採取、ヨウ素同位体比測定のためのヨウ素濃度の定量を、日本海、オホーツク海、バイカル湖で行った。特に日本海では深海底による海底面の直接観察から、ガスハイドレートが露出していたり、海底面からガスバブルが噴出していたりするところなど、微細な地形変化を考慮した試料採取を行うことができた。また、バイカル湖では比較的低ヨウ素濃度の間隙水が予想されるため、計画立案段階からの準備により、大量に間隙水試料を採取し、ヨウ素同位体比測定に十分な量の試料を確保した。これらの試料は来年度以降、順次アメリカのPurdue Universityで同位体測定を行う予定である。また、沈み込み帯の堆積物中で水の循環を大きく支配していると考えられる、断層活動による循環モデルを具体的に評価するため、南海トラフで行われた地震発生帯掘削調査(NanTroSEIZE)に参加し、巨大分岐断層地域から深部間隙水を採取した。この間隙水試料についてはヨウ素濃度・同位体のほか、酸素・水素同位体組成紐を測定中であり、深部流体の起源についても解明予定である。本年度は主に南海トラフで行われた地震発生帯掘削(NanTroSEIZE)で採取された間隙水試料のヨウ素同位体年代を測定した。その結果、前弧海盆の中心部のサイトでは海盆堆積物と下位の付加体堆積物中でほぼ30Maの均質なヨウ素同位体年代が測定された。一方、より海側のサイトでは、付加体堆積物中では同様の年代を示したが、海盆堆積物では浅部ほど間隙水のヨウ素同位体年代が若くなる傾向が見られた。海側のサイトのみで海盆-付加体堆積物の境界で顕著な間隙率の低下が見られることから、間隙水がその境界を流路として移動していることが示唆される。間隙率の異なる堆積物境界を流体が移動していることが流体の年代差として初めて捕らえることが出来た。また、昨年度から引き続き日本海東縁のガスハイドレート地域で潜航調査、ピストンコアリングを行った。引き続き間隙水のヨウ素

同位体分析を行うほか、浅い堆積物中での有機物続成過程を定性化・定量化するため、酢酸の濃度と同位体測定を予定している。海洋環境においてヨウ素は有機物との強い親和性を持つ。有機物とともに堆積し、埋没もしくは沈み込んだヨウ素は、有機物が続成分解する際にメタンなどの炭化水素とともに間隙水中に放出される。そのため海洋堆積物の間隙水のヨウ素濃度は海水に比べて2桁以上高い。また天然環境でヨウ素には安定同位体(^<127>I)のほか1570万年の半減期を持つ放射性同位体(^<129>I)が存在する。そのため間隙水中の^<129>I/^<127>I比を測定することによって、ヨウ素が取り込まれている有機物が海水から切り離された時間、すなわち堆積年代を決定することできる。ヨウ素をプロクシとしメタンや間隙水の移動過程に時間軸を組み込むことになり、水を通じた物質循環が活発な大陸縁辺域での物質移動量を定量化することが可能である。これまでの研究で海底での活発なメタンプルームや塊状メタンハイドレートの露出が観察されている上越沖の海域でヨウ素同位体比を測定し、メタンの起源となる有機物は日本海形成のごく初期に堆積したものであることを見出した。本年度は深部から供給されるメタン(ヨウ素)と現在堆積しつつある海洋有機物から供給されるヨウ素を区別し、より正確な年代決定が行えるよう、浅堆積物中での有機物続成過程の定量化を間隙水に溶存する酢酸の挙動から試みた。酢酸は有機物などからメタンが生成するための重要な前駆体であり、特にその炭素同位体組成はどのような反応が起きているのかを知るための重要な指標となる。これまでの研究成果からは、海底面直下では酢酸生成が、200cm以深ではメタン生成反応が卓越していることが明らかになった。また、酢酸生成は特に浅部で有機物の発酵分解が、やや深部で二酸化炭素の還元が起きていることが示唆された。
血液透析患者の低乳酸・高ケトン体症のメタボロミクスによる解明と個別医療の検討

高効率透析中の患者の代謝応答を血液のメタボロミクスにより観察した。低分子代謝物(乳酸、アラニン、ケトン体など)はNMR法を用い定量し、インスリン定量は血漿の外注検査で、水溶性ビタミンであるビオチンはELISA法および、新規にMS法を開発してインタクトビオチンのみ定量した。糖尿病患者は透析後半に乳酸値が低く、ケトン体(3-ヒドロキシ酪酸)値が高くなる症例を発見した。低血糖でないのにこの症状が観測され、インスリンの透析による流出と関係した。透析中にインスリンと栄養を補充する治療により代謝が回復したことも見出した。透析患者の体内にビオチン代謝物が蓄積し、透析合併症との関連があることがわかった。H27年度研究成果:「意義・重要性」近年本邦で使用されているIVおよびV型ダイアライザーを用いた血液透析では、重要な有機酸、アミノ酸、脂肪酸、ホルモン、ビタミンなども高効率で漏出する。各回の透析に於ける中低分子量代謝物および生理活性物質の大量漏出がもたらす、透析治療中に惹き起こされる患者代謝への擾乱はほとんど研究されてこなかった。すでにわれわれはNMRメタボロミクス法を開発し、本法で透析治療4-5時間の患者血漿と廃液の測定によって、患者の個別の代謝応答をモニターすること成功した。この結果、糖尿病患者の代謝応答は透析後半に乳酸、ピルビン酸が低値のままであり、ケトン体値が跳ね上がることを見出した。これは解糖系働きが滞り、脂肪酸酸化によって糖新生経路が動く飢餓状態の代謝と同様であることを示す。糖尿病患者が毎回の透析でこの特異な代謝を繰り返すことは予後にも影響があることが示唆される。インスリンなどの低分子蛋白やビタミンの除去やなどが原因となることも予想される。メタボロミクスで代謝物動態を調べることは予後改善の手掛かりを得る上で重要であろう。「内容」先行研究では糖を含まない透析液を用いた透析において、同様の代謝を示す例があり飢餓状態であるとの報告はあるが、本例は150 mg/dlの糖濃度透析液を用いており透析液で糖濃度が保持されているにもかかわらず、飢餓状態を示している。この例は近年の透析条件では報告がない。そこでこの代謝を詳しく調べるために透析治療中のアミノ酸やインスリン値などあるいはサイトカイン類の測定を行う。また最近LC/MS/MS/をもちいて透析患者血中のビオチン測定に成功した。これを用いてビオチンとその代謝物の動態を調べ合併症としての痙攣との関係を調べる。さらにこれらのプロファイルを見る事で透析による除去を補う補液や治療法を検討する。理由:1.緑の里クリニックの協力が得られた。これによって病因別の(糖尿病患者、非糖尿病患者)あるいは透析中のインスリンや栄養治療のあるなしの区分別の検体と情報を収集出来た。2.透析中血漿と廃液のアミノ酸やIRIの検査により病態による代謝応答の違いを見出すことが出来た。3.緑の里クリニックですでに透析中の補液の試みや、インスリン治療の試みを行っておりこの検体を入手し測定解析を行っている。4.ビオチンとその代謝物の関係を調べるためLC/MS/MS系を開発し、代謝物と区別してビオチンを定量することに成功し、透析合併症である痙攣との関係を見出した。「意義」近年の高効率血液透析は、α1MGやβ2MGの尿毒素の除去を目指すため、これより小さい有用物質も透析によって漏出する。アミノ酸やアルブミンの流出による栄養障害は指摘されるが、インスリンや水溶性ビタミンの流出とその影響はほとんど検討されてこなかった。後者の喪失は代謝系全体に影響を及ぼし、特に代謝異常をもつ糖尿病患者にとっては重大な負荷となることに着眼した。「方法」我々は独自の研究方法としてNMRメタボロミクスを用いて、透析中の患者血中代謝物の濃度を定量し、動態を観察してきた。「結果と考察」非糖尿病患者は透析中の乳酸、ピルビン酸、アラニンは増加し、除去を補う補償反応があることをすでに発見した。またこの代謝応答パタンは個人によって異なり固有であることも発見しこれは個別医療への道を拓く可能性を持っている。一方糖尿病患者は透析後半に乳酸などの血中レベルが低下し、かつケトン体(3-ヒドロキシ酪酸)が急増すること(低乳酸・高ケトン体症)を発見した。透析液の糖濃度100-150mg/dlであるのに飢餓の代謝に陥ること、この原因にインスリンが透析後半に大きく除去されることがあると突き止めた。そこで透析中にインスリンやアミノ酸の補充療法を試み、患者の血中代謝物動態を観測したところ、補充は代謝を回復させることも明らかにした。また水溶性ビタミンであるビオチンはエネルギー代謝に関わる補酵素である。先に我々はビオチンとビオチン代謝物の蓄積が透析患者の合併症であるけいれんに大きく関係することも明らかにしている。本研究ではインタクトビオチンをその代謝物から分離してMS法で測定することに成功し、けいれんを持つ透析患者はビオチンの代謝物が血中により蓄積していることを見出した。ビオチン投与によって糖尿病患者のコレステロール値が変化することも見出し、ビオチンと糖尿病性透析患者との関連も示唆した。

低分子代謝物(乳酸、アラニン、ケトン体など)はNMR法を用い定量し、インスリン定量は血漿の外注検査で、水溶性ビタミンであるビオチンはELISA法および、新規にMS法を開発してインタクトビオチンのみ定量した。糖尿病患者は透析後半に乳酸値が低く、ケトン体(3-ヒドロキシ酪酸)値が高くなる症例を発見した。低血糖でないのにこの症状が観測され、インスリンの透析による流出と関係した。透析中にインスリンと栄養を補充する治療により代謝が回復したことも見出した。透析患者の体内にビオチン代謝物が蓄積し、透析合併症との関連があることがわかった。糖尿病性透析患者の示す「低乳酸、高ケトン体症」という特徴について、さらに検体を収集しNMR測定を行い解析する。また透析導入期数年間の代謝応答の変化についても測定する。非糖尿病患者は透析中に乳酸の増加があるがケトン体は低下しておりこれらの相違を特定する。IRI, Cpeptide,サイトカイン類、アミノ酸の検査値を収集し代謝変化を検討する。これにより糖尿病に特有の蛋白異化の亢進について検討する。ビオチンと代謝物の定量については透析合併症の痙攣との関係をさらに検討する。腎臓内科論文投稿したが査読が遅れたため受理まで至らなかった。投稿料は次年度に使用する。さらに今年度の成果をまとめ、学会発表と論文化を行う。日本透析医学会、HDF研究会、メタボロームシンポジウムなどに発表、また海外では欧州腎臓学会に発表するために旅費を使用する。これらの発表に対する質疑討論を活かして論文化する。英文校閲と投稿料を使用する。
エピジェネティクスに基づく脳の性分化メカニズムの解明

エピジェネティクスに基づく外傷後ストレス障害(PTSD)の病態解明22年度より開始した本実験ではPTSDの動物モデルであるSPSラットを使用し、脳内のストレス関連因子の発現解析を行ってきた。海馬におけるグルココルチコイド受容体の発現変化は認められなかった。ストレス反応の要となるHPA軸においても、CRHの発現変化は捉えられなかったが、不安反応に関与深いする扁桃体領域においてCRHの発現上昇を示唆する結果を、定量的real time PCR法、酵素抗体法による組織染色およびimageJ画像解析より得た。この結果は、PTSD発症後情動記憶の中枢である同領域において、不安惹起作用を示すCRHの発現異常が定常状態で起こっていることを示し、再負荷された急性ストレスに対する応答性についても影響を与えている可能性が考えられた。そこで23年度は作出されたPTSDモデルラットに対して強制水泳を再負荷し、ストレスや不安行動に関連する室傍核(PVN)、分界条床核(BNST)、扁桃体中心角(CeA)の三つの領域においてCRHの発現レベルを免疫組織化学的に調査した。ストレス再負荷2時間後において、PTSDモデルラットはコントロールラットと比較してPVN、CeAにおいて有意差を認めなかったものの、BNSTにおいて有意に高いCRH免疫陽性反応を認めた。本結果よりCeA-BNST間の神経繊維連絡を通したCRHの分泌異常が予想され、不安様関連行動の増加を伴なうPTSD病症の、内分泌学的理解に繋がると考えられる。なお、前年度申請書記載の「扁桃体CRH発現異常のエピジェネティクスに基づく分子基盤解明」については、1)DNAメチル化について、ChIPおよびバイサルファイトシークエンス法に調査中、2)行動試験については、不安様行動関連の評価に沿い高架式十字迷路試験を検討中である。23年度実験計画の、「PTSDモデルラットにおける扁桃体中心核CRHのプロモーター領域のDNAメチル化」については、サンプリングおよび試薬の準備は終了しているものの未解析の状態であり、行動試験に関してもinjectionやソフトを使った行動評価など実験手技の整備をある程度行っているものの、本試験に至っていない。メチル化解析を今年度中に終了させ、論文投稿を行う。計画案にあった行動試験についても随時進めるが、進度に応じて論文内容への追加を検討・吟味する。臨界期の脳におけるエピジェネティクス変化を特にヒストンアセチル化に注目して調査を行った。エストロゲン受容体α(ERα)遺伝子やアロマターゼ(Arom)遺伝子のプロモーター領域のアセチル化の修飾度を、免疫クロマチン沈降法により、雌雄間で比較検討を行った。ヒストン4のアセチル化について一.ERαIbプロモーターでは胎生21日目(E21)雄において雌より高アセチル化状態にあったが、生後3日目(P3)では逆転した。AromIIプロモーターではE21において雌雄差はなかったが、P3において雄は雌より低アセチル化状態にあった。ヒストン3のアセチル化について一Arom IfプロモーターではE21雄において高アセチル化状態にあったが、P3では雌より低アセチル化状態に変化した。性差構築に関連すると考えられる対象遺伝子それぞれのプロモーターについて、臨界期における雄のヒストン3、4のアセチル化状態が雌よりも概して修飾度が低く、実際にエピジェネティックな変化に性差のあることを分子レベルで解明した。このアセチル化状態の変化が、成体における雄性行動の引き金となるのかを個体レベルで引き続き検証する。1)臨界期の脳におけるエピジェネティクス変化について21年度実験において臨界期性分化機構に関与深いエストロゲン受容体αおよびアロマターゼの遺伝子プロモーターのアセチル化状態をChIPにて調査した。胎生21日に雄は雌より高アセチル化状態にあったが生後3日目で逆転した。22年度は、この臨界期のアセチル化状態の性特異的変化を受けて成体における性特異的行動が発現されるか調査した(別実験者が担当)。臨界期雄ラットにヒストン脱アセチル化酵素であるTSAを脳室内投与し、成体における雄性行動を観察したところ挿入率の低下他マウント行動や射精の潜時が有意に増大し、性差形成におけるエピジェネティクス変化の重要性が行動レベルでも示された。2)エピジェネティクスに基づく外傷後ストレス障害(PTSD)の病態解明22年度より開始した本実験ではPTSDの動物モデルであるSPSラットを使用し、脳内のストレス関連因子の発現解析を行ってきた。ストレス反応の要となるHPA軸においても、CRHの発現変化は捉えられなかったが、恐怖不安反応に関与する扁桃体領域においてCRHの発現上昇を示唆する結果を、定量的real time PCR法、酵素抗体法による組織染色およびimage J画像解析より得た。現在ELISA法により定量解析中で、観察された発現変化がエピジェネティクス変化(DNAメチル化)に起因するか、ChIPおよびバイサルファイトシークエンス法により検討する。また、SPSラット扁桃体へのCRHアンタゴニスト局所投与を行い、恐怖条件付け試験によりPTSD病症におけるCRH発現変化の重大性を行動レベルでも評価したい。

ストレス反応の要となるHPA軸においても、CRHの発現変化は捉えられなかったが、不安反応に関与深いする扁桃体領域においてCRHの発現上昇を示唆する結果を、定量的real time PCR法、酵素抗体法による組織染色およびimageJ画像解析より得た。この結果は、PTSD発症後情動記憶の中枢である同領域において、不安惹起作用を示すCRHの発現異常が定常状態で起こっていることを示し、再負荷された急性ストレスに対する応答性についても影響を与えている可能性が考えられた。そこで23年度は作出されたPTSDモデルラットに対して強制水泳を再負荷し、ストレスや不安行動に関連する室傍核(PVN)、分界条床核(BNST)、扁桃体中心角(CeA)の三つの領域においてCRHの発現レベルを免疫組織化学的に調査した。ストレス再負荷2時間後において、PTSDモデルラットはコントロールラットと比較してPVN、CeAにおいて有意差を認めなかったものの、BNSTにおいて有意に高いCRH免疫陽性反応を認めた。本結果よりCeA-BNST間の神経繊維連絡を通したCRHの分泌異常が予想され、不安様関連行動の増加を伴なうPTSD病症の、内分泌学的理解に繋がると考えられる。なお、前年度申請書記載の「扁桃体CRH発現異常のエピジェネティクスに基づく分子基盤解明」については、1)DNAメチル化について、ChIPおよびバイサルファイトシークエンス法に調査中、2)行動試験については、不安様行動関連の評価に沿い高架式十字迷路試験を検討中である。23年度実験計画の、「PTSDモデルラットにおける扁桃体中心核CRHのプロモーター領域のDNAメチル化」については、サンプリングおよび試薬の準備は終了しているものの未解析の状態であり、行動試験に関してもinjectionやソフトを使った行動評価など実験手技の整備をある程度行っているものの、本試験に至っていない。メチル化解析を今年度中に終了させ、論文投稿を行う。計画案にあった行動試験についても随時進めるが、進度に応じて論文内容への追加を検討・吟味する。