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基幹放送化後のコミュニティ放送　世代交代にみる理念の継承と変革の可能性

まず2016年コミュニティ放送全国調査以後に行ってきた制度創設以後の分析を継続し、各局の創設時期を以下の三分類に当てはめ、萌芽期(黎明期)19922001、展開期20022010、転換期2011以降を検討した。そして、それぞれの時期に、情報提供⇒双方向参加型⇒議論循環・地域世論形成型というメディア・コミュニケーションの質の変化を捉え、妥当性を検討した。また、コミュニティ放送の時間的な推移と併せた世代交代、理念継承の実態検証の必要性を再確認するとともに、初年度の研究会では実証研究に入るために研究計画自体の調査要素を凝縮する検討を行った。以下は、確認した調査項目である。(1),開局時における創設者の「理念・物語・記憶」、地域における使命や役割。(2),創設以後の代表者、スタッフ、パーソナリティらの創設当時の「理念・物語・記憶」。(3),コミュニティ資源の保全者・課題解決の共同管理者としての役割についての考え方、等である。そこで本年は、萌芽期(黎明期)に創設された局に注目した。とくに近年相次いで開局20周年を迎えていることを鑑み、制度創設1992年当時に開局した局だけでなく、阪神淡路大震災後、各地に創設が相次いだ時期に開局した局から調査局を選んだ。そこで、地元自治体出資比率(綾部市出資61%)が高いことで注目されてきた株式会社エフエムあやべ(京都府)の第一回ヒアリングを実施した。また被災した熊本シティエフエムの担当者が来洛され講演を聴講した。さらに、調査のまとめから近年のコミュニティ放送の仕事がソーシャルワークの要素を持つことや、コミュニティ放送世代交代の研究序説として、メンバーはそれぞれの検討内容を紀要にまとめた。複数年の調査・研究の初年度ということもあり、出来るだけ事前の資料整理および仮説構築に重きを置いた。その際にはかつて研究活動を共にした「日本型コミュニティ放送の成立条件と持続可能な運営の規定要因」における研究会のメンバーの協力を得てディスカッションを2017年6月龍谷大学にて行うことができた。調査実績に報告したように、調査すべき対象局の再検討の結果、開局20年以上となる局「エフエムあやべ(綾部市)」のヒアリングや聞き取り調査を実施している。また、北海道地域については分担者が、「三角山放送局(札幌市西区)」「ラジオニセコ(ニセコ町)」「FMじゃが(帯広市)」「FMもえる(留萌市)」「FMりべーる(旭川市)」「さっぽろ村ラジオ(札幌市東区)」「FMえどがわ(江戸川区)」「レインボータウンFM(江東区)」へのヒアリングを行った。これ以外に、北海道開発協会主催(北海道札幌市)による第13回助成研究発表会、東京都豊島区市民講座「としまコミュニティ大学」での講義およびニセコ町観光協会主催(北海道ニセコ町)のラジオニセコフォーラム2017で講演とディスカッションにパネラー参加し今回の世代交代に触れた。代表者・分担者ともに、多くは前年度までに継続して行ってきた「全国コミュニティ放送調査2016」の再検討
社会的適応に及ぼす「自己概念の柔軟さ」と「文化的自己観」の機能

自己概念に関する従来の諸知見を整理し、規範意識としての"Should"self,行動傾向としての"actual"self,能力認知としての"can"selfの3次元から自己概念を測定する尺度を作成した。これら異なる次元の自己観得点の高さから組合せたタイプを一貫タイプと非一貫タイプとして捉え、さらに"can"selfの高低によってpositiveかnegativeに分類した。日本人大学生122名とアメリカ人大学生119名を対象として、対人行動に関わる自己概念と精神健康度(GHQ尺度)を測定した。予測どおり、positive非一貫タイプ(中低高)は精神健康度が最も高く、nagative非一貫タイプ(高高低)は精神健康度が最も低かった。Positive一貫タイプ(高高高)の健康度はpositive非一貫タイプより有意に低く、negative費一貫タイプとは有意差がなかった。文化差に関して、自己観のタイプと精神健康度との関係を吟味したところ、国の主効果も国とタイプの交互作用も認められず、組合せタイプの主効果のみが認められた。Positiveなevaluative valenceを備える場合の「柔軟な自己概念」が、硬直した自己一貫タイプよりも社会的適応に有意であることが示唆された。つぎに、日本の看護職245名を対象に自己概念の「道具性」と「表出性」という視点から同様の吟味を行った。"should"self,"actual"self,"can"self×「道具性」「表出性」の6側面の一貫性・非一貫性の効果を検討したところ、上記と同様にpositiveな非一貫性タイプの精神健康度が最も高く、生活満足度も高い傾向が見られた。すなわち、positive非一貫性タイプの適応度の高さが示唆された。本研究の目的は、自己概念に関する従来の諸知見を、「自己概念の柔軟さ」と「文化的自己観」という概念道具を用いて統合的に説明することである。具体的には、(1)自己概念の分化度、自己概念の柔軟性、役割葛藤について、東西文化圏に共通する測定尺度を作成し、概念定義を明確化する。(2)性役割同一性をめぐる役割葛藤において「自己概念の分化×柔軟さ」および「分化した自己の諸領域の重みづけ」が果たす機能を明らかにする。(3)「自己の相互協調性」と「自己概念の分化度」の関連を明らかにする。本年度は目的(1)に重点を置き、尺度構成と標準化を行うための基礎データを収集した。相互独立-相互協調的自己観に関する既存の尺度項目、他者志向性と自己呈示変容能力の測定項目、および精神的・身体的健康状態尺度25項目の択一式質問と、二十答法による自己概念の自由記述からなる質問紙の日本語版と英語版を作成した。英語版はミシガン大学ユージン・バーンシュタイン教授の校閲を受けた後、ミシガン大学生119名に実施した。日本語版は広島大学生122名に個別実施した。さらに質問紙の一部は中国語に翻訳して中国南京市の東南大学生133名に実施した。得られた結果を暫定的に共構造分散分析にかけたところ、文化的自己観の因子構造が国別で異なることが確認された。自己概念の分化度および精神的・社会的適応との関連を検討中である。これまでの知見を用いて目的(2)の具体的実施計画を立案中である。目的(3)についての知見を含め、アジア社会心理学会において成果を報告する予定である。自己概念に関する従来の諸知見を整理し、規範意識としての"should"self,行動傾向としての"actual"self,能力認知としての"can"selfの3次元から自己概念を測定する尺度を作成した。これら異なる次元の自己観得点の高さを組合せたタイプを一貫タイプと非一貫タイプとして捉え、さらに"can"selfの高低によってpositiveかnegativeに分類した。

日本人大学生122名とアメリカ人大学生119名を対象として、対人行動に関わる自己概念と精神健康度(GHQ尺度)を測定した。予測通り、positive非一貫タイプ(中低高)は精神健康度が最も高く、negative非一貫タイプ(高高低)は精神健康度が最も低かった。Positive一貫タイプ(高高高)の健康度はpositive非一貫タイプより有意に低く、negative非一貫タイプとは有意差がなかった。文化差に関して、自己観のタイプと精神健康度との関係を吟味したところ、国の主効果も国とタイプの交互作用も認められず、組合せタイプの主効果のみが認められた。Positiveなevaluative valenceを備える場合の「柔軟な自己観念」が、硬直した自己一貫タイプよりも社会的適応に有利であることが示唆された。つぎに、日本の看護職245名を対象に自己概念の「道具性」と「表出性」という視点から同様の吟味を行った。"should"self,"actual"self,"can"self×「道具性」表出性」の6側面の一貫性・非一貫性の効果を検討したところ、上記と同様にpositiveな非一貫タイプの精神健康度が最も高く、生活満足度も高い傾向が見られた。すなわち、positive非一貫タイプの適応度の高さが示唆された。
魚類の脳下垂体糖タンパクホルモンの化学分類と活性

I.魚類生殖腺刺激ホルモン(GTH)の2元性:シロサケ脳下垂体から、α鎖とβ鎖からなるGTH-IとGTH-IIを単離し、一次構造を決定した。また、サブユニットのcDNAを同定した。GTH-IIが既知で、GTH-Iが新規の分子である。β鎖のウサギ抗体による免疫染色で両者は別々の細胞で産生されるが、生殖腺の発達に応じ、GTH-I細胞が出現し、GTH-IIが続いて発現する。GTH-Iの血中及び脳下垂体量は卵黄・精子形成期に高く、GTH-II量は排卵・排精期に高い。両者の分泌はGTH放出ホルモンによって調節される。卵黄形成を促進するエストラジオール17βの産生能において有意の差はないが、卵成熟を促進する17α、20β-diOHprogの産生能はGTHIIの方が高い。さらに、コイとカツオにも2種類のGTHを同定したことにより、魚類のGTHの2元性を確立した。II.GTHの作用機構:GTHは卵成熟期の卵胞の莱膜細胞で、17α、20β-diOHprog前駆体の生成と顆粒膜細胞での変換酵素20β-HSDの合成を促進する。一方、この卵成熟誘起ホルモンは雄では排精を誘起する。精巣での合成には体細胞と精子が必要であり、精子に、20β-HSDが局在する。卵黄・精子形成期には、GTHはエストラジオール17βおよび11-ケトテストステロンの合成を促進する。G Hによる莱膜細胞、顆粒膜細胞、精巣におけるステロイドホルモンの生成には細胞内cAMPの上昇を伴うことから、GTH作用はGTH受容体・アデニレードシクラーゼcAMP系を介して発現することを示唆する。III.甲状腺ホルモン:ニジマス稚魚の血中チロキシン濃度の増大を指標として、甲状腺刺激ホルモンの生物検定法を確立し、部分精製した。甲状腺ホルモンは未受精卵の卵黄に含まれること、シロサケ組織中、血中レベルが降海直前に増大すること、ヒラメの変態を促進することなどから、各種魚類において初期発生、変態あるいは回遊など生活環境が変わる際に重要な作用を有するといえる。(1)生殖腺刺激ホルモン(GTH)の単離と物理化学的性質:シロサケの脳下垂体をアルコール抽出し、invivoでニジマスの生殖腺刺激活性を示す2種類のホルモン,GTH【I】とGTH【II】,を単離した。両者はいずれもα鎖とβ鎖からなる糖タンパクであった。【I】βと【II】βの一次構造を決定した。【I】βは114残基,【II】βは119残基からなり、両者のアミノ酸配列の相同性は約44%であった。以上の結果から、魚類においてとGTHは2種類の分子が存在することが初めて明らかになった。(2)ステロイドホルモン産生能:GTHIおよび【II】のアマゴ卵におけるエストラジオール17β産生能は等価であるが、アマゴ卵濾胞組織の顆粒膜細胞層におけるステロイド-20β-水酸基脱水素酵素の活性化能およ莢膜細胞層における17αOHプロゲステロンの産生能はGTH【II】の方が高かった。

(3)ラジオイムノアッセイ(RIA):両者のβ鎖に対する抗体を調製し、GTH【I】とGTH【II】のRIA系を確立した。これらのアッセイ系を用いて血中および脳下垂体中のホルモン量を測定すると、卵黄形成期のサケ科魚類ではGTH【I】が高値を示し、排卵,排精後の魚ではGTH【II】が高値を示した。これらの結果はGTH【I】は精子および卵黄形成期に、またGTH【II】は最終成熟期に重要な機能を有することを示唆している。(4)免疫組織染色:GTH【I】βと【II】βの抗体は最終成熟期のアマゴ脳下垂体の塩基好性細胞と反応した。【I】β抗体では一部の塩基好性細胞と反応するのみであるが、【II】β抗体では全ての塩基好性細胞が染色された。また、染色性には雌雄の差は認められなかった。これらの結果は、最終成熟期の魚類の脳下垂体にはGTH【I】と比べてGTH【II】の産生細胞も多いことが明らかになった。同時に、両者が同一細胞で産生されることを示唆している。(5)シロサケ脳下垂体のCDNAライブラリーを作成し、DNAを合成してGTHβ鎖遺伝子を検索中である。(6)甲状腺刺激ホルモン(TSH)を検索するための生物検定法を確立した。(1)免疫組織染色:新たに調製したGTHーIβ抗体, GTHーIIβ抗体,およびヒトTSHβ抗体はサケ科魚類の脳下垂体のそれぞれ異なる細胞を特異的に染色したことから, 3種類の糖タンパクが異なる細胞で産生されることが示唆された.また,配偶子形成期にはGTHーI細胞が多く,成熟期にはGTHーII細胞が著しく増加することが明かとなった.(2)脳下垂体のGTH含量:GTHーIおよびGTHーIIの酵素免疫測定法により,サケ科魚類の脳下垂体のGTH含量を測定した.配偶子形成期ではGTHーI含量はGTHーII含量も高いが,成熟期ではGTHーII含量が著しく増加した.この結果は,上記の免疫組織化学的研究によって得られた知見と一致する.(3)GTHの分泌調節:GTH放出ホルモンは配偶子形成期および成熟期のニジマス脳下垂体から, in vitroで,それぞれ, GTHーIおよびGTHーIIを特異的に放出させた.(4)ステロイド産生能:ニジマスの卵巣と精巣におけるGTHーIとGTHーIIの17α,20βージヒドロキシー4ープレグネンー3ーオン(17α,20βdiOH prog)を量大量生成するために必要なGTHーIIの最小濃度はGTHーIの最小濃度よりも低かった.従って, 17α,20βdioH progの生成に関してGTHーIIはGTHーIよりも活性が高いことが明かとなった.(5)GTH遺伝子のクローンニング:昨年度作成したcDNAライブラリーより, GTHーIIβのアミノ酸配列を基にしたオリゴヌクレオチドと相同性のあるクローンを得た.一方, GTHーIβのアミノ酸配列を基にして合成したオリゴヌクレオチドに対して,陽性のクローンを得た.(6)シロサケ甲状腺刺激ホルモン(sTSH)の同定:シロサケ脳下垂体をアルコール抽出し, in vivoで甲状腺刺激活性を示す糖タンパクを分画した.この標品は,ヒトSHβと特異的に交叉したことから, sTSHと同定した.(1)魚類の生殖腺刺激ホルモン(GTH)の2元性:コイ及びカツオの脳下垂体から、シロサケGTHIとIIにホモロガスな2種類の分子を単離し、構造を決定して、GTHの2元性が魚類に普遍的であることを証明した。
代数系のグレブナー基底とホモロジー・ホモトピーの研究

有限個の生成元と有限個の定義関係で決まる代数系(有限表示代数系)の様々な決定問題は、近年、計算科学との関連もあり、盛んに研究されるようになってきている。本研究では、有限表示代数系、特に、モノイドと結合的代数を、書換えシステム(Groebner基底)の手法を用いて研究した。代数系が完備書換えシステムを持つための条件、および、そのホモロジー、ホモトピーとの関係を調べた。モノイドが有限完備書換えシステムをもてば、ホモロジー有限性FP3およびホモトピー有限性FDTが成立することは、Squierによって示されている。また、Prideにより、ホモロジー有限性FHTの概念が導入され、FDTからFHTが従うことが示された。第3論文では、有限表示モノイドでは、FHTと両側FP3が同値であることを示した。有限表示モノイドの多くの性質が決定不能問題であることはよく知られているが、これが、線形時間で語の問題が可解であるモノイドにおいてもそうであることを、第1論文で示した。さらに、前出のホモロジカルな性質についても同様であることを第2論文で示した。群および群代数の中心の決定問題の不可能性についての結果は出版予定である(第6論文)。第4論文では、Enriques曲面をEnriques latticeを通じて調べる方向を示した。第5論文ではGroebner基底の理論を書換え理論の立場から、一般の結合的代数とその両側加群上に展開し、自由分解を構成する手法を完成し、代数のHochschildコホモロジーの計算に適用した。これは本研究における最大の成果であり、今後の応用が期待される。平成14年2月に京都大学数理解析研究所において、12月に神奈川工業大学において、平成15年12月には東邦大学において、代数系の計算論に関する研究会を開催し、その成果を報告集(図書1)にまとめた。有限表示代数系(特に、モノイドと結合的代数)を、主として、書換えシステム(Grobner基底)の手法で研究した。完備書換えシステムを持つための条件、および、そのホモロジー、ホモトピーとの関係を調べた。モノイドが完備書換えシステムをもてば、ホモロジー有限性FP_3およびホモトピー有限性FDTが成立することは、Squierによって示されている。第1論文では、モノイドの有限表示から定義される関係加群、ホモトピー加群を調べ、それらが大きな完全図式のなかに位置づけられることを示した。そのことにより、上記の有限性が互いに関係し合う仕組みを明らかにした。論文では、モノイド代数を扱ったが、Grobner基底の理論を用いて、一般の結合的代数に展開できると考えられ、その研究は進行中である。代数系の部分系がいつ有限表示または完備有限表示をもつか、またその逆に、いつ代数系が(完備)有限表示系に埋入できるかという問題を研究した。第2論文では、有限表示もつ系の部分系が有限表示を持つための必要条件を与え、その自然な例として、組紐逆モノイドを調べた。そこには組紐群が有限指標を持って含まれ、そのことから、自然にモノイドの有限表示が求められる。組紐群は完備有限表示を持つことが知られているので、組紐逆モノイドも完備有限表示を持つかが今後の問題となる。有限表示代数系(特に、モノイドと結合的代数)を、書換えシステム(Grobner基底)の手法で研究した。

また、Prideにより、ホモロジー有限性FHTの概念が導入され、FDTからFHTが従うことが示された。第4論文では、有限表示モノイドでは、FHTと両側FP_3が同値であることを示した。最近、Pride-Ottoにより、FHTからFDTは従わないことが示され、これらの性質の間の関係が詳しく知られることとなった。有限表示モノイドの多くの性質が決定不能問題であることはよく知られているが、これが、線形時間で語の問題が可解であるモノイドにおいてもそうであることを、第2論文で示した。これは、前出のホモロジカルな性質についても同様であることを第3論文で示した。Grobner基底の理論を用いて、一般の結合的代数のHochschildコホモロジーの計算手法も完成しつつあり、論文にまとめ発表予定である。昨年12月に東邦大学で代数系の計算論に関する研究会を開催し、関連分野の研究者と意見交換を行った。その成果は報告集(図書1)にまとめた。有限表示代数系(特に、モノイドと結合的代数)を、主として、書換えシステム(Grobner基底)の手法で研究した。結合的代数およびその両側加群のGrobner基底の理論を、書換え理論の立場から展開した。それを利用し、代数の自由両側分解を効率的に構成する方法を開発した。それは、自由両側加群上の完備書換えシステムの危険対から、1つ上の次元のシステムの書換え規則を帰納的に構成することで得られる。このことにより、代数のHochschildコホモロジーを有効的に計算することを可能にした。この成果は第1論文に詳しく報告した。この手法は、パス代数や次数代数にも拡張し適用できると考えられ、今後の研究課題となる。自由分解が得られても、それから実際にコホモロジーを計算するのが困難な場合も多い。0次元のHochscildコホモロジーは、その代数の中心であるが、モノイドの中心が分かっているときでさえ、モノイド代数の中心を決定することが不可能である。この結果は第2論文に発表予定である。
D-アミノ酸を新たな分子標的とする糖尿病網膜症のメカニズムの解明

糖尿病角膜症において基底膜がD-アミノ酸を含むようになることが疾患の引き金となることを分子レベルで明らかにした.さらに糖尿病網膜症の硝子体液においてD-アミノ酸含有蛋白質が増大し,病勢を反映していた.最後にD-アミノ酸含有蛋白質や蛋白糖化最終産物の凝集によって生じる角膜ジストロフィーのin vitroモデルを作成し,光線力学療法を開発した.糖尿病角膜症において基底膜がD-アミノ酸を含むようになることが疾患の引き金となることを分子レベルで明らかにした.さらに糖尿病網膜症の硝子体液においてD-アミノ酸含有蛋白質が増大し,病勢を反映していた.最後にD-アミノ酸含有蛋白質や蛋白糖化最終産物の凝集によって生じる角膜ジストロフィーのin vitroモデルを作成し,光線力学療法を開発した.【糖尿病網膜症の硝子体手術検体のライブラリー構築】糖尿病網膜症の硝子体切除検体約200症例を含む,約300症例分の硝子体手術検体を採取し,血糖値・BA1c・血圧・透析の有無・性別・年齢などのデータを入力することで,世界最大規模の硝子体検体のライブラリーを構築できた.糖尿病網膜症の中でも黄斑浮腫を呈する症例においては,酸価ストレスの亢進とともにVEGFなどのサイトカインの発言が増加していることを明らかにした.【D型アミノ酸含有タンパク質が引き起こす眼疾患の同定】D型アミノ酸含有タンパク質が異常凝集を起こすことによって,加齢性変化の代表である瞼裂斑や,赤道部付近における失明の大きな原因であるclimatic droplet keratopathyが引き起こされることを証明し,学術論文に掲載された.【D型アミノ酸によるアミロイド線維形成過程の評価法の開発】角膜に混濁が生じ,失明に至る遺伝性疾患である第角膜ジストロフィーにおけるアミロイド線維形成過程をin vitroで評価する系を確立した.さらに角膜ジストロフィーの原因物質であるTGFBIにラセミ化が生じてD型アミノ酸を含むことがアミロイド形成を促進することを証明した.すなわち,TGFBIのラセミ化を抑制することが角膜ジストロフィーの予防につながる可能性を見いだすことができた.・D-アミノ酸含有タンパク質が「角膜ジストロフィー」「翼状片」の原因であることを明らかにした.角膜ジストロフィーはTGFBIの遺伝子の変異で生じることが知られているが,なぜ角膜にアミロイドが沈着するのか不明なままであった.我々は角膜ジストロフィーにおいて,変異型TGFBIがラセミ化を受けてD-アミノ酸を含むようになることで,アミロイド化が促進されることを見いだした.さらに加齢性眼疾患の代表である翼状片におけるelastotic degenerationと呼ばれる異常凝集タンパク質がD-アミノ酸含有タンパク質の塊であることを見いだした.・「角膜ジストロフィー」のin vitroモデルを作成し,角膜ジストロフィーの光線力学療法の基礎を確立した.我々は,変異型TGFBI由来のペプチドを合成し,様々な条件下でアミロイド化を観察した.その結果,格子状角膜ジストロフィーおよびAvellino角膜ジストロフィー由来のペプチドはアミロイド形成を起こしやすいことを見いだした.これは,現在までin vivoモデルの無い角膜ジストロフィーに対して,新しいin vitroモデルを作成したこととなる.さらにチオフラビンTという色素を用いてアミロイドを標識して,レーザーを照射することで,アミロイド線維のみが特異的に分子レベルで分解されることを見いだした.この成果は,従来は角膜移植しか治療法が無かった角膜ジストロフィーに対して,新しい治療の選択肢を与えることとなる.【糖尿病網膜症におけるタンパク質の翻訳後修飾の解析】糖尿病網膜症およびそれ以外の疾患(黄斑前膜,網膜剥離,増殖硝子体網膜症)の硝子体切除検体において,タンパク質の翻訳後修飾の中でもタンパク糖化最終産物(AGE:advanced glycation end products)およびD-アミノ酸含有タンパク質の量をELISA法で定量した.その結果,糖尿病網膜症において非糖尿病眼と比較して有意にAGE:およびD-アミノ酸含有タンパク質の量が増加しており,病勢と反映していた,よって,AGEだけではなくD-アミノもまた糖尿病網膜症のバイオマーカーとなり得ると考えられた.【タンパク質の翻訳後修飾がもたらす眼疾患のメカニズムの解明】白内障において,アルファおよびベータクリスタリン分子におけるD-アミノ酸の局在を同定し,白内障発生の分子メカニズムの一端を解明した.加齢に伴う眼疾患であるClimatic Droplet KeratopathyがAGEおよびD-アミノ酸を豊富に含むタンパク質の異常凝集によって生じることを明らかにした.遺伝性疾患で角膜が進行性に混濁する角膜ジストロフィーが,AGEおよびD-アミノ酸を豊富に含むタンパク質(主にラクトフェリンとTGFBI)の凝集物であることを見いだした.さらに角膜ジストロフィー由来のTGFBI合成ペプチドを用いて,アミロイド形成をin vitroで解析することにより,角膜ジストロフィーにおけるアミロイド形成過程を詳細に明らかにすることができた.さらにTGFBI由来の合成ペプチドをチオフラビンTを用いて標識した後に442nmのレーザーを照射することにより,アミロイド線維を特異的に破壊することに成功した.この成果は,角膜ジストロフィーの光線力学療法に道を開いたこととなる.
超遠心法による分画抽出血清を用いた新規硬組織形成誘導法の開発

初年度は,硬組織形成細胞の増殖、分化に対する、超遠心法により得られたウシ胎児血清(Fetal Bovine Serum :以下FBS)分画の影響を検討することから研究を開始した。FBSは,超遠心分離機にて100,000g×18時間超遠心し,3層に分かれた分画をそれぞれ回収し,最上方を第1層,中間層を第2層,最下層を第3層として使用した。まず,それぞれの分画を10%含む培地にて歯原性上皮細胞(SF2)の培養を行い、増殖試験を行った。細胞数のカウントでは,コントロールと比較して,第1層の使用で,細胞の増殖は有意に抑制され,第2層と第3層の使用で細胞の増殖が有意に促進された。BrdU陽性細胞率では,コントロールと比較して,第1層の使用で有意に減少し,第3層の使用で有意に増加した。次に,分化について検討するためAmelogenin・Ameloblastinを用いて,免疫染色を行った。その結果,Ameloblastinにおいて,その発現範囲が,第1層の使用で,コントロールと比較して有意に広かった。これらの結果より,超遠心法により得られたFBS分画抽出液により,歯原性上皮細胞の細胞増殖は,第1層で抑制され,第3層で促進された。その一方で,第1層では細胞分化が促進された。次に歯原性間葉細胞(mDP)を用いて、増殖試験を行った。細胞カウントの結果,コントロールと比較して,第1層の使用で,細胞増殖は有意に抑制され,第2層と第3層の使用で細胞増殖が有意に促進された。次に,分化について検討するためアリザリンレッド染色を行った。結果は第1層の使用で,通常より早い時期に石灰化が開始する傾向を認めたが,はっきりとはしなかった。これらの結果から,超遠心法により得られたFBS分画は硬組織形成細胞の増殖や分化に好影響を与える可能性が示唆された。初年度は,硬組織形成細胞として、骨芽細胞株、軟骨細胞株、歯原性間葉細胞株、歯原性上皮細胞株を用いて,硬組織形成を促進する因子の同定を目指す予定であった。まず,歯原性間葉細胞株と歯原性上皮細胞株を用いて増殖や分化についての影響を確認するための実験を開始した。歯原性上皮細胞を用いた実験の後,歯原性間葉細胞の増殖について確認し,10%FBSを用いて,分化について実験を始めたところ,第1層の使用で,早期から石灰化が開始される傾向を認めたものの,第3層を10%含む培地の使用では,ガラスボトムディッシュを使用しても細胞が剥がれてしまい石灰化の十分な評価ができなかった。そこで,10%FBS中に,各分画を5%含むFBSを使用することに変更して同様の実験を行ったが,第1層の使用で,早期から石灰化が開始される傾向を認めたものの,明らかな結果は得られなかった。この歯原性間葉細胞の石灰化の評価に時間を要し,細胞遊走試験やその他の骨芽細胞株、軟骨細胞株を用いた実験が進まなかった。また,歯原性間葉細胞と歯原性上皮細胞への超遠心したFBS各分画の影響を確認後,硬組織形成細胞へのリポ蛋白(HDL、LDL、超低比重リポ蛋白(VLDL)、カイロミクロン)の影響の検討を予定していたため,歯原性間葉細胞への各分画の分化への影響が確認できなかったため,硬組織形成を促進する因子を同定するための実験ができなかった。細胞増殖については一定の影響が確認されたため,増殖についてのみ先に,リポ蛋白の影響を検討してもよかったかもしれない。前年度の研究で,超遠心法により得られたFBS分画の第1層に,歯原性間葉細胞の石灰化を促進する傾向が認められたため,今年度は歯原性間葉細胞の石灰化を促進する第1層の至適濃度を網羅的に検討後,各分画の歯原性間葉細胞の分化に与える影響を検討することから研究を開始する。また,骨芽細胞株や軟骨細胞株についても,超遠心法により得られたFBS分画の増殖や分化に与える影響を検討する。各硬組織形成細胞へのリポ蛋白(HDL、LDL、超低比重リポ蛋白(VLDL)、カイロミクロン)の影響を,増殖試験(細胞カウント、BrdU)、ALP活性、アリザリンレッド染色、細胞遊走試験にて検討する。これらの試験により、目指す因子が同定されない場合にはさらにFBSの他の成分について網羅的に検討し、硬組織形成細胞の増殖や分化を促進する分子の同定を行う。併せて,今年度の研究では,Western blotting法やreal time RT-PCR法を用い、それぞれの細胞に発現するタンパクや遺伝子の解析を行い、硬組織形成促進のメカニズムを解明する。また,効果的な石灰化誘導法の開発や効率的な硬組織形成の促進方法の開発を目指し,細胞培養系や、頭蓋冠開削モデルまたは歯の歯髄露髄モデルマウスを用いて、石灰化誘導促進効果や硬組織再生促進効果について検討を行い、臨床応用を目指す研究を実践したい。

FBSは,超遠心分離機にて100,000g×18時間超遠心し,3層に分かれた分画をそれぞれ回収し,最上方を第1層,中間層を第2層,最下層を第3層として使用した。まず,それぞれの分画を10%含む培地にて歯原性上皮細胞(SF2)の培養を行い、増殖試験を行った。細胞数のカウントでは,コントロールと比較して,第1層の使用で,細胞の増殖は有意に抑制され,第2層と第3層の使用で細胞の増殖が有意に促進された。BrdU陽性細胞率では,コントロールと比較して,第1層の使用で有意に減少し,第3層の使用で有意に増加した。次に,分化について検討するためAmelogenin・Ameloblastinを用いて,免疫染色を行った。その結果,Ameloblastinにおいて,その発現範囲が,第1層の使用で,コントロールと比較して有意に広かった。これらの結果より,超遠心法により得られたFBS分画抽出液により,歯原性上皮細胞の細胞増殖は,第1層で抑制され,第3層で促進された。その一方で,第1層では細胞分化が促進された。次に歯原性間葉細胞(mDP)を用いて、増殖試験を行った。細胞カウントの結果,コントロールと比較して,第1層の使用で,細胞増殖は有意に抑制され,第2層と第3層の使用で細胞増殖が有意に促進された。次に,分化について検討するためアリザリンレッド染色を行った。結果は第1層の使用で,通常より早い時期に石灰化が開始する傾向を認めたが,はっきりとはしなかった。これらの結果から,超遠心法により得られたFBS分画は硬組織形成細胞の増殖や分化に好影響を与える可能性が示唆された。初年度は,硬組織形成細胞として、骨芽細胞株、軟骨細胞株、歯原性間葉細胞株、歯原性上皮細胞株を用いて,硬組織形成を促進する因子の同定を目指す予定であった。まず,歯原性間葉細胞株と歯原性上皮細胞株を用いて増殖や分化についての影響を確認するための実験を開始した。歯原性上皮細胞を用いた実験の後,歯原性間葉細胞の増殖について確認し,10%FBSを用いて,分化について実験を始めたところ,第1層の使用で,早期から石灰化が開始される傾向を認めたものの,第3層を10%含む培地の使用では,ガラスボトムディッシュを使用しても細胞が剥がれてしまい石灰化の十分な評価ができなかった。そこで,10%FBS中に,各分画を5%含むFBSを使用することに変更して同様の実験を行ったが,第1層の使用で,早期から石灰化が開始される傾向を認めたものの,明らかな結果は得られなかった。この歯原性間葉細胞の石灰化の評価に時間を要し,細胞遊走試験やその他の骨芽細胞株、軟骨細胞株を用いた実験が進まなかった。また,歯原性間葉細胞と歯原性上皮細胞への超遠心したFBS各分画の影響を確認後,硬組織形成細胞へのリポ蛋白(HDL、LDL、超低比重リポ蛋白(VLDL)、カイロミクロン)の影響の検討を予定していたため,歯原性間葉細胞への各分画の分化への影響が確認できなかったため,硬組織形成を促進する因子を同定するための実験ができなかった。細胞増殖については一定の影響が確認されたため,増殖についてのみ先に,リポ蛋白の影響を検討してもよかったかもしれない。前年度の研究で,超遠心法により得られたFBS分画の第1層に,歯原性間葉細胞の石灰化を促進する傾向が認められたため,今年度は歯原性間葉細胞の石灰化を促進する第1層の至適濃度を網羅的に検討後,各分画の歯原性間葉細胞の分化に与える影響を検討することから研究を開始する。また,骨芽細胞株や軟骨細胞株についても,超遠心法により得られたFBS分画の増殖や分化に与える影響を検討する。各硬組織形成細胞へのリポ蛋白(HDL、LDL、超低比重リポ蛋白(VLDL)、カイロミクロン)の影響を,増殖試験(細胞カウント、BrdU)、ALP活性、アリザリンレッド染色、細胞遊走試験にて検討する。
校内授業研究モデル構築のための支援プログラムの開発

本研究の目的は、カリキュラムの改編や指導法の改善などを目的とした校内授業研究モデルの開発の基礎資料を得るために、授業研究活動のシステムの分析することである。具体的には、(1)校内授業研究の研究枠組みを修正していくために必要な情報と手続きを同定し、それらの構造化を図る(2)重点単元には、教師集団のどのような協議を経るのかを記述しながら、研究授業(提案授業)を支えるシステム(学年別、研究テーマ別の小集団による研究体制)の促進要因を洗い出す。(3)校内授業研究のシステムの構成要素や各要素の機能は、それぞれの教師がもつ認識体系(授業観、学習観など)とどのように対応づけられるのかを明らかにすることであった。今年度に得られた知見としては、次の3点が挙げられる。まず、研究会(校内・公開)への参加や事前・事後の協議会への参加によって、「研究活動にかかる抵抗力」と「研究活動の桁「マクローミクロ」の2軸からなる授業研究活動のフローが図示できた。さらに、研究グループ間の関係性として、学校全体ではレビューと開発の2方向性をもちつつも、内部では生産的な対立構造をもつことが明らかになった。一方、過去の教育過程に関する研究指定校への質問紙調査によって、授業研究をとりまく諸活動との関連性もある程度明らかになった。さらに校内研究会への複数回の訪問調査によって、研究組織の機能が教師集団内に共通理解なされていない場合に、グループの機動性が損なわれることが明らかになった。しかし、データ不足の印象が拭えない面もあることから、今後、授業研究方法や体制の調査枠組みのシステム化が求められる。
転写調節因子IκBζとその結合因子による免疫応答の制御機構

我々は、IκBζに結合する因子として転写因子JunBを同定した。これまでにJunBは胎盤形成や骨形成に重要であることが知られていたが、免疫細胞における役割はほとんど不明であった。ヘルパーT細胞のサブセットの一つであり、種々の炎症性疾患に関与するTh17細胞の分化においてIκBζが重要な役割を果たすことが知られていたため、我々はCD4陽性細胞特異的にJunBを欠損するマウスを作成し、その解析をおこなった。JunB欠損マウスから調製したナイーブCD4陽性細胞をin vitroで各ヘルパーT細胞サブセットに分化誘導したところ、Th17細胞への分化が抑制されていることが判明した。また、このマウスに、Th17細胞が主要な責任細胞としてはたらく実験的自己免疫性脳脊髄炎モデル(experimental autoimmune encephalomyelitis, EAE)を誘導したところ、一例も発症しなかったことから、JunBはTh17細胞の分化に必須であることが明らかになった。また、CD4陽性細胞特異的JunB欠損マウスは、CD3に対するアゴニスト抗体を投与して誘導される小腸炎モデルにおいても病態の軽減が認められたことから、T細胞依存的に誘導される炎症性疾患の発症に必要であると考えられた。一方、自然免疫系が主導で誘導される炎症モデルにおけるJunBの役割は不明であったため、次に我々はデキストラン硫酸ナトリウム(Dextran sulfate sodium, DSS)の投与によって誘導される大腸炎モデルを実施したところ、CD4陽性細胞特異的JunB欠損マウスでは予想に反して病態の増悪が認められた。このマウスの大腸組織全体では、腸炎に対して防御的にはたらくTh17サイトカインの発現が低下していなかったため、他のヘルパーT細胞について詳細に検討したところ、制御性T (Treg)細胞の数が減少してた。さらに我々は、JunBがIL-2シグナルを介してTreg細胞の分化を調節することを見出している。網羅的なプロテオーム解析により同定したIκBζ結合因子の機能解明に注力し、一定の成果を得ることができた。in vitroの細胞分化系を用いた解析と、病態モデルを用いた個体レベルでの解析を中心に、今回同定した分子がTh17細胞の分化に重要な役割を担うことを明らかにした。未解明な点が多いヘルパーT細胞の分化機構の解明に寄与することができた。研究代表者は、IkappaBzetaに結合する分子としてJunBを同定した。最近IkappaBzetaが、Th17細胞の分化に必要であることが示されたことや、JunBがTh17細胞で強く発現していたことから、JunBがTh17細胞の分化に関与する可能性を検討した。まず、IL-6とTGF-betaの存在下に、抗原刺激によってTCRを活性化することによりin vitroでTh17細胞への分化を誘導する系による解析をおこなったところ、JunB欠損マウス由来のナイーブCD4陽性細胞はTh17への分化能をほぼ完全に失っていた。また、RNA-seq法などによる遺伝子発現解析の結果、JunBを欠損したCD4陽性T細胞は、Th17細胞に特異的な一群の遺伝子の発現が障害されていた。一方、JunBの欠損により、ヘルパーT細胞の他のサブセットであるTh1細胞、Th2細胞、制御性T細胞(Treg細胞)への分化には影響が認められなかった。また、Th17細胞が主要な責任細胞としてはたらく病態モデルである実験的自己免疫性脳脊髄炎を誘導してもJunBの欠損マウスでは一例も臨床スコアの上昇が認められなかったことから、JunBがTh17細胞の分化に必須であることがin vivoでも明らかになった。JunBは、c-Jun、JunDと共にJunタンパク質ファミリーの一員であり、個体発生などにおいてはこれらが重複した役割を担っているが、Th17細胞の分化においては、JunBの発現が、他のJunファミリータンパク質であるc-JunやJunDと比較して有意に高いことや、JunBだけがTh17細胞の分化に必要であることが示されているBATFと協調してTh17関連遺伝子の転写を活性化できることが明らかになった。

一方、自然免疫系が主導で誘導される炎症モデルにおけるJunBの役割は不明であったため、次に我々はデキストラン硫酸ナトリウム(Dextran sulfate sodium, DSS)の投与によって誘導される大腸炎モデルを実施したところ、CD4陽性細胞特異的JunB欠損マウスでは予想に反して病態の増悪が認められた。このマウスの大腸組織全体では、腸炎に対して防御的にはたらくTh17サイトカインの発現が低下していなかったため、他のヘルパーT細胞について詳細に検討したところ、制御性T (Treg)細胞の数が減少してた。さらに我々は、JunBがIL-2シグナルを介してTreg細胞の分化を調節することを見出している。IκBζBP1を欠損するナイーブT細胞は、Th17細胞への分化が障害されることが明らかになったため、この分子がTh17細胞分化においてどのような役割を果たすかを明らかにする。まず、Th17分化条件下における種々のTh17関連因子(IκBζなどの、これまでにTh17細胞への分化に必要であることが報告された一連の因子:IκBζ, RORγt, RORα, AhR, BATF, IRF4など)の発現を検討する。次に、in vitroにおけるTh17分化はIL-6とTGF-β1の同時刺激によって誘導されるので、IκBζBP1の欠損細胞においてIL-6やTGF-β1のシグナル伝達が正常であるかについて、Stat3やSmad2/3のリン酸化を指標にして検討し、IκBζBP1自体の発現に関わるシグナル伝達経路についても明らかにする。また、Th17分化時には、Th17細胞の運命決定因子であるRORγtやRORαが、Th17細胞に特異的な遺伝子(Il17a, Il17f, Il23r, Il21など)の発現調節領域にリクルートされることが知られているので、このリクルートがIκBζBP1の欠損によって障害されるかどうかをクロマチン免疫沈降法(ChIP)によって明らかにする。本研究課題におけるこれまでの解析により、JunBがTh17細胞の分化に必須であることが明らかになった。一方、当初IkappaBzetaが重要であることが示された自然免疫系での遺伝子発現調節におけるJunBの役割については不明な点が多い。今後は、JunB欠損マウス由来のマクロファージや樹状細胞を用いて、Toll-like receptorのリガンドとなる病原微生物由来の物質による遺伝子発現プログラムの変化にJunBがどのように関与するかを明らかにする。また、IkappaBzetaの欠損細胞で見られた表現型がJunBの欠損や過剰発現によりどのような影響を受けるかを検討する。さらに、IkappaBzetaとJunBの二重欠損マウスを用いた解析も実施し、遺伝子発現調節におけるこの二者の因子の協調作用も明らかにする。また、EAEの病態モデルの発症にJunBが必須であることが明らかになったが、他の病態におけるJunBの役割は明らかではない。そこで、JunB欠損マウスに対して炎症性の病態を中心とした種々の病態モデルを誘導し、表現型を解析する。これまではJunBの役割に関して主にin vitroの解析を実施してきたので、種々の病態モデルにおいてJunBがin vivoでは他のサブセットのヘルパーT細胞の機能を調節する可能性についても検討する。
モノサイクル光パルスに基づく光イオン化量子制御と時間分解光イオン化分光法の研究

本研究は気体中の非線形伝搬に基づく手法を発展させた高強度モノサイクル光パルス列発生法の研究と、それを基にした新たな光イオン化量子制御とモノサイクル時間分解光イオン化分光の実現を目的とする。つまり、これまでにない簡便かつ安定な高強度モノサイクル光パルス発生手法とそれに基づく新しい光イオン化分光法の開拓である。平成27年度は高強度モノサイクル光パルス列発生法の研究とその波形計測法の研究に重点を置いた。特に、イオン化分光研究への移行を念頭におき、応用に直結した光源と計測法を方針とした。具体的には、波長800 nm、1200 nmの2色の高強度フェムト秒レーザーパルスを空気中に集光して多色フェムト秒レーザー光を発生させ、それらをフーリエ合成した。先行研究よりも高い強度の入射フェムト秒レーザー光を用い、集光条件、2色のフェムト秒レーザー光間の時間遅延等諸条件に対する依存性を研究した。効率が大幅に向上し、深紫外域まで多数の多色光が発生した。光イオン化量子制御においては高強度の多色光を含むモノサイクルパルス列が必要となり、高効率の多色光発生は不可欠な要素である。また、空気中でのフィラメント形成が観測され、長い相互作用長が実現されていると同時に異なる相互作用が生じていることが裏付けられた。次に、モノサイクルパルス列を形成する多色光の相対位相計測法を研究した。既存手法の周波数分解光ゲート法をモノサイクルパルス列位相解析に適用した場合解析が容易ではなく、迅速性と簡便性に乏しい。光源を分光応用する際この点は大きな障害となる。そこでモノサイクルパルス列を結晶に入射して透過光のスペクトルを計測する、非常に簡素化された手法を研究した。得られた結果と数値シミュレーション結果を比較したところ、両者が良好に一致し、相対位相を非常に簡易に評価できることが明らかとなった。
遺伝子多型に基づいた膵癌薬物療法の効果・副作用発現を予測するアルゴリズムの開発

切除不能進行膵癌を対象に、自らの先行研究に基づく候補遺伝子解析及びゲノム網羅的解析を行った。先行研究で候補になった3つの薬物代謝酵素関連の遺伝子多型の検証を行った。その結果、SLCO1B1のrs4149086は治療効果予測因子であり、rs4149086がAGまたGGを有する患者は、塩酸ゲムシタビンよりも経口フッ化ピリミジン系抗悪性腫瘍剤を中心とした治療を行うと効果が期待できることからがわかった。また、ゲノム網羅的関連解析から膵癌の予後や有害事象と関連する候補SNPsを同定した。さらに、ゲノム網羅的関連解析を実施する新たな統計手法の開発を行った。切除不能進行膵癌を対象に第III相多施設共同ランダム化比較試験GESTが実施され、GEST参加者のうち遺伝子解析の同意が得られた188名を対象に、自らの先行研究に基づく候補遺伝子解析及びゲノム網羅的解析を行った。先行研究で候補になった3つの薬物代謝酵素関連の遺伝子多型をGESTサンプルを用いて検証を行った。その結果、ゲムシタビン群でSLCO1B1の遺伝子多型AG + GGを有する被験者の生存期間中央値(MST)は6.7ヶ月、AAを有する患者のMSTは9.6ヶ月で有意差があった(HR = 3.75 [95% CI: 1.30 - 10.8], p = 0.008)。一方、経口フッ化ピリミジン系抗悪性腫瘍剤(TS-1)群では、AG + GGを有する被験者のMSTは14.4ヶ月、AAのMSTは10.7ヶ月で有意差はなかった(HR = 0.77 [95% CI: 0.33 - 1.81], p = 0.55)。同様に、ゲムシタビンとTS-1群の併用群では、AG+GGのMSTは15.9ヶ月, AAのMSTは10.8ヶ月で有意差はなかった(HR = 1.18 [95%CI: 0.46-3.00], p = 0.72)。したがって、SLCO1B1の多型は治療効果予測因子であり、SLCO1B1の多型がAGまたGGを有する患者は、塩酸ゲムシタビンよりも経口フッ化ピリミジン系抗悪性腫瘍剤を中心とした治療を行うと効果が期待できることからがわかった。さらに、最新のSNPアレイ(Illlumina OmniExpress BeadChip、約73万個の遺伝子多型)を用いたゲノム網羅的解析を行った。全生存期間、腫瘍縮小効果や有害事象と遺伝子多型との関連解析をマンハッタンプロットなどでスクリーニングを実施し、それらのアウトカムと関連する候補遺伝子を同定した。切除不能進行膵癌の第III相ランダム化比較試験(GEST)が実施され、GEST参加者から遺伝子解析の同意が得られた188名を対象に、最新のSNPアレイ(Illumina OmniExpress BeadChip約73万個の遺伝子多型)を用いたゲノム網羅的関連解析を行った。主要評価項目である全生存期間と73万SNPsとの関連を調べた結果,3つのSNPsが同定された(p<10-7)。Cox回帰分析で治療法と遺伝子多型の交互作用を評価したところ,これらのSNPsの交互作用は有意でなかったことから、予測因子ではなく予後因子としての機能を果たすと考えられた。さらに、副次評価項目である無再発生存期間や腫瘍縮小効果と73万SNPsとの関連をCox回帰分析及びロジスティック回帰分析を用いて実施した。その結果、全生存期間と関連があった3つのSNPsはこれらの評価項目とは関連が見られなかった。平成27年度の研究計画は、1膵癌の薬剤反応性遺伝子同定のための生物情報学及び生物統計手法の開発2膵癌薬物療法に対する効果及び安全性を予測するアルゴリズムを構築であった。1に関しては、複数の遺伝素因がどのように薬剤反応性に関与するか、遺伝子間相互作用かつ遺伝子-環境因子相互作用をCox回帰モデルに解析を行った。また、73万回の検定を実施することから、検定の多重性の問題に対処するため、近傍の遺伝子多型間の連鎖不平衡を考慮した多重性の調整法の検討を行い、シミュレーション実験により評価を行った。2に関しては、NCI CTCAEのグレード基準3以上の有害事象や血液毒性とSNPsとの関連解析を実施した。同定されたSNPを用いて、遺伝子多型情報及び臨床情報から有害反応を予測するための数理モデルを検討した。平成27年度の研究計画通りに進捗しており、研究成果が投稿論文にまとまっていることを鑑みるとおおむね順調に進んでいる。切除不能進行膵がんの第III相ランダム化比較試験(GEST)が実施され,Illumina BeadChipアレイを用いたゲノム網羅的関連解析を行った.副次評価項目である有害事象と73万SNPsとの関連をExactロジスティック回帰分析で解析を行った.スクリーニングの有意水準を1.0×10-6とした.その結果,非血液毒性は有意な項目はなかったが,血液毒性は,ALT上昇と関連するrs4074123(p = 7.1×10-7),AST上昇と関連するrs711441(p = 4.2×10-7),ヘモグロビン減少と関連するrs4661553(p = 6.4×10-7),好中球減少と関連するrs11629344(p = 9.2×10-7),4つの候補SNPsを同定した。

これらのSNPsは全生存期間や無増悪生存期間とは直接関連しないことから,有効性と安全性を同時に考慮した予測モデルを構築することは困難であった.そこで,方針を変更し,膵臓がんの予後や有害事象と関連があると報告されたSNPsを本データから同様の結果が確認できるか検討をおこなった.しかし,既報のSNPsはIllumina BeadChipアレイに搭載されていないものが多く,imputation法を適用し,それらの遺伝子型の推定を行った.シミュレーションにより,fastPHASE法(fP法)、IMPUTE2法、Minimac3法の3つの手法の比較を行い,一致率が一番高い推定法を最良な推定法と評価した.その結果,fP法が遺伝子型の一致率が90%以上と最も高かった.白人集団で同定されたSNP(rs11644322; G/A)に対して,fP法を本データに適用し推定したところ,日本人ではすべてGアレルのホモ接合と推定された.そのため,白人とは異なる結果が得られ,予後や有害事象との関連は示唆されなかった.切除不能進行膵癌を対象に、自らの先行研究に基づく候補遺伝子解析及びゲノム網羅的解析を行った。先行研究で候補になった3つの薬物代謝酵素関連の遺伝子多型の検証を行った。その結果、SLCO1B1のrs4149086は治療効果予測因子であり、rs4149086がAGまたGGを有する患者は、塩酸ゲムシタビンよりも経口フッ化ピリミジン系抗悪性腫瘍剤を中心とした治療を行うと効果が期待できることからがわかった。また、ゲノム網羅的関連解析から膵癌の予後や有害事象と関連する候補SNPsを同定した。さらに、ゲノム網羅的関連解析を実施する新たな統計手法の開発を行った。平成26年度の研究計画は、1膵癌薬物療法の予後因子・効果予測因子の探索・同定を行う、2膵癌の薬剤反応性遺伝子同定のための生物情報学及び生物統計手法の開発である。1については、生命予後と遺伝子多型との関連を調べるために生存時間解析を行った。また、Cox回帰分析により治療法と遺伝子多型との交互作用を評価し、同定された多型を予後因子、効果予測因子の検討を行った。さらに、有害反応に影響を与える遺伝子多型を調べるために、ロジスティック回帰分析を行い、治療法と遺伝子多型との交互作用を評価した。結果を視覚化するために、全ゲノムのマンハッタンプロットを作成した。2については、ゲノム網羅的研究のデータ解析において、標本変動による偽陽性及び偽陰性を少なくするために、基準とする統計量と判定限界値の多くの組合せについて、生物統計学的考察と計算機シミュレーション実験を行った。平成26年度の研究計画通りに進捗しており、研究成果が投稿論文にまとまっていることを鑑みるとおおむね順調に進んでいる。前年度に引き続き、膵癌薬物療法に対する効果及び安全性を予測するアルゴリズムを構築を行う。本年度は、最終年度であることから、これまでの結果を総括し、研究結果をもとに、遺伝子多型情報及び臨床情報から薬効強度及び有害反応を予測するための数理モデル・アルゴリズムを構築し、ソフトウェアを開発する。さらに、開発した予測モデルを実臨床に利用し、モデルの予測精度の評価を行う。本研究では、機能解析を実施することはできないことから、同定した遺伝子多型や予測モデルを公刊論文やデータベース等に積極的に公開することで、予後不良群を規定するバイオマーカの基礎的情報を提供する。生物統計前年度に引き続き、膵癌の薬剤反応性遺伝子同定のための生物情報学及び生物統計手法の開発を行う。