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ジェンダー視点から見た家庭科教育の現状と課題

本研究はジェンダーの視点から家庭科教育の現状と課題を確認し、展望を明らかにすることを目的として行われた。結果、戦後1989年の学習指導要領に対応した高校教科書では、1民主的な家族の基盤としての女子特性教育が強調された時期、2女子のみ必修によって、就業による経済的自立を希望する女子にも特性教育を定着させようとした時期、3高校は女子のみ必修のままだが内容を変化させつつあった共修への移行期4男女共修によって、ジェンダー平等を意識した記述が増える時期に区分し、聞き書き調査と対応させたが、性規範や家族等の内容と対応した語りは見られていない。課題として4以降を含む内容編成に注目した分析が残された。家庭科教育(戦前の前身である裁縫等を含む)の教科書および指導書、各民間団体における授業実践報告を収集し、家庭科におけるジェンダー/セクシュアリティに関する記述がどのような変遷をたどっているかについて、分析作業を行っている。合わせて韓国より収集した教科書および教材を翻訳し、共通した課題とは何かを明らかにした上で、教科としてどのような形で発展しうるか、展望を明らかにすることを目的とした作業を進めている。本年度は、戦後の家庭科教育において、選択性や多様性を含む学びへと発展していったのかという点と、家庭科教員はどのように位置付けてきたか/いるかについて現状と課題を整理することを目的とした。なお1年次のプレ調査をもとに、家庭科の内容が大きく変わったとされる戦後直後、高度経済成長期、家庭科の男女共修前後の時期にわけることとした。◆家庭科教員への聴き書き調査:主に退職した家庭科教育を主な対象とした聴き書き調査を実施した。戦後から近年にかけて家庭科教育がライフスタイルを考え行動する上でどのような教科として位置づいてきたか/いるかを質問項目として設定した。現在、分析作業中である。聴き書き調査結果と戦後の家庭科から一部結果(セクシュアリティに関わる内容)をふまえ、教員を対象の書籍において紹介している。◆基礎資料の収集:また分析する上での基礎資料として、戦後の家庭科教科書ならびに指導書と、当時、もとめられていた人間像(特に女性像)やライフスタイルに関する資料を収集した。◆韓国調査の実施:韓国調査を実施し、教員等との情報交換を行うとともに、中高等学校の家庭科教科書等の収集、翻訳作業、分析を進めている。分析にあたり、韓国における福祉と家族、教育制度の現状と課題に関する資料を収集した。◆授業分析:授業分析については、協力校の選出を行い、分析手法をディスコース分析とし、最終年度の参観及び分析に向けた作業を進めている。昨年度に引き続き、1国内における資料収集と、2教員への聞き書き調査を実施した。昨年度の研究結果を踏まえ、3韓国と台湾の関連教材を収集し、分析作業中である。1は戦後の教科書ならびに指導書、検定意見結果等を収集し、家庭科における家族、性の記述の変遷を通して、人権がどのように位置づけられてきたか/いるかについて、分析作業中である。家庭科はライフプランニングに関わる内容を多く含む教科であり、また分析においても同時代の史料分析と合わせて作業を進める必要がある。とりわけ1970-80年代の社会背景を明らかにするために、労働、結婚に関わる一次資料、史料、関連文献を収集している。また人権や性に関わる内容は保健、社会の内容の変遷と併せて行う必要性があることが明らかとなったことから、関連教科の戦後史を(内容項目、教科書内容を中心として)整理する作業を新たに加え、進めている。なお、一部結果については来年度、学術雑誌(Sex education)に投稿予定である(すでにエントリー済み)。2教員への聞き書き調査は主に関東を中心として継続して行っている。1と対応させる形で戦後の家庭科教育に関わった教員がどのように性や人権を位置づけてきたかについて分析作業中である(とりわけ民間団体や人権擁護の活動に関わっていた個人を対象としている)。3は12の分析を深め、さらに東アジア全体の共通性を整理するために行っているが、一部、台湾調査で予定をしていた教員へのインタビュー調査ならびに大学生を対象とした量的調査は次年度に変更とした。すでに教科書の収集は終えている。自然災害と現地調査協力者の事情によって、昨年に引き続き、調査予定が大幅な遅れとなった。次年度に計画を練り直し、調査、分析を継続する予定である。昨年度に引き続き、戦後の教科書ならびに指導書、検定意見結果等を行った。これまでの作業に加え、戦前戦中の家庭科の前進教科の資料収集を行った。これらの作業を通して、家族、性の記述の変遷を整理し、教科において人権がどのように位置づけられてきたか/こなかったのかについて分析した。新たな作業課題も明らかとなった。一つは家庭科を分析するにあたって、人権や性に関わる内容が含まれる「保健」「社会」の内容の変遷と併せて行う必要性があるという点であり、資料収集を加えて行うこととした。二点目としては関連資料は収集・分析作業にあたって分析視角をより明確化するために、国際的な基準を押さえる必要があった。そこでユネスコの国際セクシュアリティ教育ガイドライン(2009年)の翻訳・分析を行った(2017年出版確定)。戦後の資料収集の結果の一部は、Gender and Education Associaton Conferenceにおいて、そのプレワークショップで報告(スウェーデン)した。また学習指導要領の変遷に対応させて世代別のインタビュー結果と対応させた結果はSex educationに投稿した。また第6回アジア性教育学術会議にて一部報告した(台湾、樹徳技術大学)。韓国調査を踏まえた内容は2017年度中に出版を予定している。

本研究はジェンダーの視点から家庭科教育の現状と課題を確認し、展望を明らかにすることを目的として行われた。結果、戦後1989年の学習指導要領に対応した高校教科書では、1民主的な家族の基盤としての女子特性教育が強調された時期、2女子のみ必修によって、就業による経済的自立を希望する女子にも特性教育を定着させようとした時期、3高校は女子のみ必修のままだが内容を変化させつつあった共修への移行期4男女共修によって、ジェンダー平等を意識した記述が増える時期に区分し、聞き書き調査と対応させたが、性規範や家族等の内容と対応した語りは見られていない。課題として4以降を含む内容編成に注目した分析が残された。聴き書き調査が複数にわたった点や海外調査の実施時期との関わりから、調査結果の分析にまでいたらなかった点、また授業分析については対象校の選出のみに留まることとなった。最終年度にこれらの作業と結果の還元を行う予定である。海外調査を含む場合は、現地協力者は必須であるが、諸事情(災害等)により変更せざるを得ない場合がある。その場合も見越して、幅広いネットワークの構築が必須であると思われる。本年度は昨年度実施予定だった授業分析と聴き書き調査の継続、分析に焦点化して作業を進める予定である。また韓国、台湾調査は家庭科(または日本の家庭科に関連する内容、とりわけライフスタイルに関わる内容を含む教科内容を担当する教員)を対象とした聴き書き調査を実施する予定である。これらを前半期に終了し、後半は分析および学会誌等への報告を計画している。収集作業に時間を要してしまい、分析作業が遅れてしまった。一方で、当初、2年次に実施する予定である韓国の資料収集については進めることができた。前年度の計画が本年度実施となったことによる内容の変更と、自然災害による現地協力者の諸事情による。聴き書き調査の対象が高齢であり、日程を分ける必要が生じたことと、韓国調査の実施記事が調査先の予定との関係で年度末になったことにより、調査計画全体に遅れが生じた。それでも計画通りに進めることは可能ではあったが、研究分析を丁寧に進めていく必要性を感じたことから次年度使用額が生じることとなった。年度内の海外調査(台湾、韓国)と、関連学会における報告を予定している。また国内調査の分析作業を継続して行う。・9月までに資料分析作業を終えることを第一としたい。・8月にはインタビュー調査の対象者の選定を進めるが、それに先立ち、プレ調査を実施し、質問項目の妥当性について確認する。今年度前期から夏にかけて韓国、台湾調査を計画することとした。また前年度の課題についても前期期間中に遂行できるよう手配している。史料収集に時間を要したことから、インタビュー調査および韓国調査を実施できなかったことによる。2年次は初年に計画していた調査を実施する予定である。
発現クローニング法によるES細胞増殖因子の同定と分化機構への関与に関する研究

ES細胞は、多分化能をもったまま培養可能な唯一の幹細胞であり、再生医療や遺伝子治療への応用が期待されている。しかし、マウスにおいてはLIF(leukemia inhibitory factor)の培地中への添加により、ES細胞を未分化な状態に保ったまま培養することが可能であるが、ヒトをはじめ、他の動物種においては、その効果がみられず、ES細胞の樹立自体が非常に困難を極めている。また、LIF以外にもES細胞の未分化状態を維持することのできる因子が存在することがLIF欠損マウスの細胞を用いた実験から示されており、そのような因子を同定することは、今後の再生医療の実用化にも大きな貢献をするものと考えられる。現在、マウスES細胞を用いた実験から、LIFと、その下流のgp130-Stat3の経路、さらに転写因子Oct-3/4がES細胞の未分化状態の維持に重要な役割を担っていることが示されているが、Oct-3/4とLIFのシグナル伝達経路とがどのような関係にあるのかについては不明であり、また、Oct-3/4がES細胞内で機能するためには、共役する因子の存在が必要であることもわかっている。そこで我々は、Oct-3/4と共役する因子を同定することで、LIFのシグナル経路とOct-3/4とを関連付けるような細胞内シグナル伝達経路、あるいはES細胞の未分化状態の維持に必要な新規の経路を見出すことを目的とした。未分化細胞特異的に発現の見られるRex-1遺伝子のプロモーター領域にはOct-3/4が結合するが、そのすぐ近傍にRoxと名づけられた未知の因子が結合することがわかっている。この因子を等電点電気泳動と、SDS-PAGEとを組み合わせることによって蛋白精製により同定した。得られたペプチドの内部配列をLC-MASによって調べ、対応する遺伝子を同定した。現在この因子の発現をsiRNAを用いて抑制し、ES細胞の未分化状態にどのような影響がでるかについての検討を行っている。幹細胞は、多分化能と自己複製能を持つ細胞であり、中でもES細胞は、多方向への分化能を保ったまま培養液中で増殖させることが可能な細胞で、再生医療や遺伝子治療への応用が期待されている。ところがES細胞の多分化能がどのような細胞内機構によって実現されているのかに関する情報は十分ではない。これまでにleukemia inhibitory factor(LIF)とその下流のgp130-Stat3経路、転写因子Oct-3/4とが多分化能の維持にとって重要な役割を担っていることが示されてはいるが、これらが互いにどのようなかかわりをもつのか、これらの因子が何を起こすことで、細胞の多分化能が維持されるのかについてはいまだ不明である。また、マウス以外の動物種においては、細胞の多分化能維持に対するLIFの作用が小さいこと、LIF遺伝子欠損マウスの細胞からもES細胞の増殖を維持する因子が出されていることから、LIF以外の因子によるシグナル伝達経路の存在も示唆されている。そこで本研究においては、Oct-3/4と共役して機能する因子の同定を行うことで、上記の因子を互いに関連付けるような細胞内シグナル伝達経路、あるいは新規の経路を見いだすことを目的とした。未分化細胞特異的に発現する遺伝子Rex-1のプロモーター領域に見られるOct-3/4の結合部位の近傍に、未知の因子が結合することに着目し、タンパク精製と酵母のワンハイブリッド法によりこの因子の同定を試みた。その結果、タンパク精製からは、この因子が60kDの大きさを持つことがつきとめられた。現在ペプチドシークエンスによる遺伝子同定のために、等電点電気泳動を利用したさらなる精製を進めている。また、ワンハイブリッドスクリーニングからもいくつかの候補遺伝子があがってきており、現在目的の因子であるかどうかの検定を進めている。
スーパーエンハンサーを介した遺伝子発現制御によるHPV関連中咽頭癌発癌機構の解明

本研究は,HPV関連中咽頭発癌機構における,スーパーエンハンサーを介した遺伝子発現制御の詳細を明らかにするために以下の研究を行う。2.スーパーエンハンサーにより発現制御される遺伝子の機能解析3.スーパーエンハンサー阻害剤,ならびにスーパーエンハンサー領域を欠失させた際の影響本研究は,HPV関連中咽頭発癌機構における,スーパーエンハンサーを介した遺伝子発現制御の詳細を明らかにするために以下の研究を行う。2.スーパーエンハンサーにより発現制御される遺伝子の機能解析3.スーパーエンハンサー阻害剤,ならびにスーパーエンハンサー領域を欠失させた際の影響
少子高齢社会に対応した居住空間の空聞構造の組み換え可能性に関する実験研究

本研究課題では、生活支援サービスを受けながら自立した生活を行う場合の居住空間の空間構造と、生活支援サービスを受けずに自立した生活を行う場合の居住空間の空間構造の組み換え可能性を検証することを目的とする。少子・高齢社会の移行期にあるわが国においては、生活単位が個人化するとともに、育児・家事・介護など、これまで家族がその役割を担ってきたことを、外部の生活支援サービスに委ねる機会が増加すると考えられる。少子高齢社会に対応した居住空間は、自立した個人が生活の一部を共同化する場合の居住空間の空間構造を実現するだけではなく、育児・家事・介護などを生活支援サービスに委ねながら自立した生活を行う居住空間の空間構造にも組み換えることができる必要がある。今年度の研究実績としては、前年度に実施した生活支援サービスを受けながら生活の一部を共同化する場合の居住空間の空間構造の理論的検討を踏まえ、「支援行為」という行為モデルにも対応した空間構造モデルを開発した。さらに、少子高齢社会において検討すべき家族モデルとして「高齢者の共同居住」「シングルファーザーの子育て」のという2つのモデルを抽出し、「少子高齢社会に対応した居住空問においては、全ての単位空間に社会から直接アクセスできる主動線があり、さらに、主動線と交わらないサービス用動線を確保する必要がある」という条件に対応した居住空間の空間構成を提示した。これらを踏まえて、前述の2つの家族モデルの生活像から抽出されるサービスを受けながら自立した生活を行う場合の居住空間の空間構造、及び、サービスを受けずに自立した生活を行う場合の居住空問の空間構造のいずれにも組み換えることのできる住戸計画の検討を行った。今年度の研究実績としては、生活支援サービスを受けながら生活の一部を共同化する場合の居住空間の空間構造の理論的検討を行った上で、少子高齢社会に対応した住宅計画に関連する国内外の研究動向を整理するとともに、わが国の少子高齢社会の現状について、平成17年度に実施された国勢調査に基づく都道府県・市町村別人口・世帯のデータを用いた分析を通じて少子化・高齢化に関連する社会動向の把握を行った。また、育児・家事といった生活支援サービスを受けることを希望している子育て期の夫婦を対象として、生活支援サービスを受けながら自立した生活を行っている個人の具体的な生活像の検討を行った。
日伊学際領域研究プログラム-自然と人間生活-

研究代表者(今西幸男)が平成6年9月4日から9月9日までイタリア国シエナ大学に滞在して、第3回京都/シエナシンポジウムKSS-3及び関連事業について打合せた。9月5日。シエナ大学学長Berlinguer教授は政界への転進のため大学を辞した。後任にはPiero Tosi教授が選ばれた。Tosi新学長に面会しKSS-3に対する支援をお願いし快諾を得た。また、シエナ大学博物館蔵のレオナルド・ダ・ヴィンチの工作物を、日本での展示会のため貸し出しを認めるようお願いしたところ、検討するとの回答を得た。9月6日。KSSの趣旨に賛同し、KSS-3に参加を表明している関連企業を訪問し、研究打合せ会議を開いた。Biocine(株)ではDr.Rappuoliが、Sclavo(株)ではDr.Scoglioが研究所の案内と研究打合せの責任者であった。9月7日、8日。2日間にわたってKSSイタリア組織委員会とKSS-3のプログラム編成を行った。7月4日-7日シンポジウム研究発表イタリア側22件、日本側10件研究発表イタリア側5件、日本側10件研究発表イタリア側7件、日本側3件7月7日円卓討論、ツアー9月8日。シエナ市長を表敬訪問し、市内に日本庭園を作る計画のあることを聞いた。研究分担者の一人(齊藤泰弘)は、平成7年1月10日から3月30日までの予定で、調査研究のためイタリア国シエナ大学に派遣された。齊藤氏は同大学のArezzoキャンパスにおいて「レオナルドにおける自然と人爲の研究」を進めるかたわら、同大学において日本語の講義を行っている。平成7年には京都市においてKSS-4が開催される予定となっているが、同年には京都大学創立100周年に当たるため、これを記念する充実したシンポジウムにすることが計画されている。計画の一環として、シエナ大学所蔵のレオナルド・ダ・ヴィンチ工作品の日本における展覧会開催が考えられていた。この展覧会の開催には、シエナ大学前学長のL.Berlinguer教授が非常に積極的であったため、後任のTosi学長の教授にも開催許可を強く働きかけていた。ところが、KSSイタリア側委員長のR.Barbucci教授から、この展覧会についてはフィレンツェの科学博物館館長のP.Galluzzi教授と交渉すべきであるとの指示が伝えられ、齊藤泰弘氏に交渉を委託した。交渉の結果は以下のように厳しいものであった。すなわち、新しい展覧会「レオナルド以前のレオナルド」は、以前の「レオナルド以前」展とは全く異なる展覧会であるとの認識が必要である。以前のものはシエナ大学がスポンサーであったが、新しいものはフィレンツェ国立科学博物館とイタリア大手製造業のフィンメカニカ社が中心の全く新しい展覧会で、シエナ大学のものは展示品全体の20%程度を占めるに過ぎない。フィンメカニカ社は、スポンサーとしての巨額の投資を国際的な巡回展により回収しようと考えているようである。彼らは企業とタイアップして、国際的なビジネスとして展覧会を巡回し運営しようと考えており、もはや大学間交流の次元では理解できない所へ来てしまっている。現在、打開策や善後策を検討中である。9月5日。9月6日。9月7日、8日。

ところが、KSSイタリア側委員長のR.Barbucci教授から、この展覧会についてはフィレンツェの科学博物館館長のP.Galluzzi教授と交渉すべきであるとの指示が伝えられ、齊藤泰弘氏に交渉を委託した。交渉の結果は以下のように厳しいものであった。すなわち、新しい展覧会「レオナルド以前のレオナルド」は、以前の「レオナルド以前」展とは全く異なる展覧会であるとの認識が必要である。以前のものはシエナ大学がスポンサーであったが、新しいものはフィレンツェ国立科学博物館とイタリア大手製造業のフィンメカニカ社が中心の全く新しい展覧会で、シエナ大学のものは展示品全体の20%程度を占めるに過ぎない。フィンメカニカ社は、スポンサーとしての巨額の投資を国際的な巡回展により回収しようと考えているようである。彼らは企業とタイアップして、国際的なビジネスとして展覧会を巡回し運営しようと考えており、もはや大学間交流の次元では理解できない所へ来てしまっている。現在、打開策や善後策を検討中である。第2回京都-シエナシンポジウムは、平成5年9月27日午後5時、京大会館における開会式でその幕を切って落とした。本シンポジウムにおける日伊学際領域研究は、(1)自然科学部門、(2)経済学部門、(3)人間・芸術・文学部門の3部門から成っており、研究発表シンポジウムは9月28日と29日の全日、および30日の午前中に行われた。それぞれの内容は次のとおりである。(1)自然科学部門主題:人間生活の向上のための科学の進歩研究発表講演は日本側12件、イタリア側10件。(2)経済学部門主題:環境と資源の制約のもとでの産業経済の諸問題研究発表講演は日本側9件、イタリア側6件。(3)人間・芸術・文学部門主題:人間学におけるイメージの役割:文化交流人類学的アプローチ。研究発表講演は日本側11件、イタリア側9件。これら3部門における研究発表に対して熱心な討論が行われ、それぞれの研究分野における研究の進展に対して強いインパクトが与えられた。文化交流フォーラム「21世紀の都市のイメージ」においては、5名のパネラ-により、学際的な観点から現代の都市、特に京都市、が抱える現実的な問題について活発な討論が行われた。文化交流事業として、日本の民族舞踊と音楽の紹介や、文化財の見学、観賞、訪問などを行い、異文化交流の実を挙げた。第2回京都-シエナシンポジウムは、平成5年10月2日午前10時、京大会館における閉会式でその幕を閉じた。
婦人科癌における発生誘導転写因子異常と癌細胞正常化の検討

卵巣癌および子宮体癌において、過剰発現したHOX遺伝子の発現を抑制することで浸潤を停止させることができたことの意義は大きい。とりわけ卵巣癌で過剰発現のある8遺伝子の内、2個を抑制するだけで浸潤が完全抑制できたことは臨床応用の点でより簡便な方法が適応できることを意味している。一方子宮体癌でHOXB13遺伝子を用いてエストロゲンに対する反応を検討したところ、HOXB13の濃度依存的に発現が制御されることが判明した。このことは子宮体癌の治療においてホルモン剤投与などによるエストロゲン抑制治療は結果的にHOX遺伝子の過剰発現を抑制して癌浸潤に抑制的に作用することが示唆される結果となった。さらにHOX遺伝子はβ-cateninおよびE-cadherinの機能を通して癌浸潤転移を直接制御していることが示唆された。Β-cateninおよびE-cadherinは通常は正常細胞においても発那溜められるため、これらを直接制御することで癌の浸潤を抑制しようとすると、正常細胞に対しても副作用として機能抑制が出現し結果的に臨床応用が困難であることが知られている(例としてMMP抑制薬剤など)。HOXを抑制してこれらを間接的に制御する利点は、HOXが癌細胞にのみ発現しておりこれを抑制して間接的に浸潤関連遺伝子の発現を抑制できることにある。すなわち正常で発現していないHOXではこれを抑制しても正常細胞には影響のないことが予測される点において、臨床応用に有望であることが期待される。一方HOX関連遺伝子の検索においては多数の遺伝子を検討したが結果的には卵巣癌細胞株ではDLX1が、子宮体癌細胞株ではTBX1が発現異常を起こしていることが示唆された。1初年度に予定していたHOXB7,B13のダブルアンチセンス導入の製作を行った。B7およびB13のそれぞれのアンチセンスを導入した後、セレクションマーカーをneomycinとhygromycinとすることで同時ダブルアンチセンス導入細胞の単離を行った。コントロールにはmock細胞を作製しそれを用いた。シングルアンチセンスの導入に比較しダブルアンチセンスではその浸潤抑制率はほぼ2倍近く抑制され、結果的に浸潤率は0%となった。このことはHOX遺伝子の癌浸潤に対する影響は相加的であることを示しているとともに、2つ以上のHOXを制御すれば浸潤を停止させることができる可能性を示唆している。2子宮体癌においてはAN3CA株をいてこれに対してエストロゲンを投与しその後の時間および濃度依存的なHOXB13の変動について。細胞株から遺伝子を抽出しその発現量の差を比較した。すると時間依存では約8時間後に、濃度依存では約10の5乗モル濃度以降に急激な発現の上昇が認められた。このことは子宮体癌の浸潤に対するHOXB13の変動はエストロゲン依存的であることを示唆しており子宮体癌の進行自体がエストロゲン依存的であることと併せて考えるとエストロゲンの制御が癌の浸潤に大きな影響を与えることが理解される。3卵巣癌および子宮体癌の癌浸潤に重要なHOXB7およびB13について、HOXが転写因子であることから直接浸潤に影響を与えるいかなる遺伝子を制御しているかを調べるため、アンチセンスを導入した細胞としていない細胞からそれぞれ可能性のある遺伝子を抽出し、発現を比較した。検討した遺伝子はMMP2,EST-1,uOA, PAI, beta-catenin, E-cadherinである。その結果be-ta cateninおよびE-において著明な発現の差を認め、HOXはこれらの因子の発現量の変化を間接的に制御することで癌浸潤に影響していることが示唆された。以上について、2004年米国癌学会、2005年日本産科婦人科学会総会学術講演会で報告し、2006年米国癌学会でも2報の採用が認められ報告予定である。

本年度は前年度の研究成果である卵巣癌における過剰発現HOX遺伝子抑制化による卵巣癌に対する転移浸潤抑制の影響の原因をより詳しく調査した。すなわちHOX遺伝子が転移浸潤に関する遺伝子に直接ないしは間接的に影響することで、その接着機能を制御している可能性があるかどうか転移に関する関連遺伝子の検討を行うとともに、昨年度検討しきれなかった他のHOX候補遺伝子についても検討を行った。まず、昨年作製した癌浸潤転移についての解析を行ったアンチセンス導入卵巣癌細胞のうち、シングルアンチセンス導入細胞を用いてこれを発現抑制基準細胞とした。さらにこれに対してオリジナル細胞、すなわちHOX発現過剰細胞であるSKOV3との間で、発現量の異なる遺伝子があるかどうか以下の遺伝子プライマーを作成して検討した。これらはBMP-4,brachyury, CXCR-4,ほか合計23の遺伝子である。これらはすべて細胞接着に関与することが示唆されているか、子宮卵巣の発生に関与していると考えられている遺伝子である。しかしながらこれらの遺伝子にはアンチセンスあるいは非アンチセンス導入細胞問での発現の差は認められなかった。一方、これらの遺伝子を正常卵巣細胞と卵巣癌細胞であるSKOV3あるいは子宮体癌細胞と子宮体癌細胞株との間でその発現量の違いを観察すると、スクリーニングの結果卵巣癌ではDLX1が、子宮体癌ではTBX1が発現異常を起こしていることが示唆された。どちらも過剰発現によりHox遺伝子とは別個にそれぞれの癌化や癌の進展に寄与している可能性が示唆された。18年度の研究の成果は2006年日本産科婦人科学会総会(横浜)、2006年米国癌学会(ワシントンDC)、2006年日本癌学会(横浜)で報告された。また、卵巣癌の研究成果については17年度の子宮体癌に引き続き外国の英文雑誌への掲載がなされた。
ゲノム刷込み領域の構造特性と疾患遺伝子の探索

ゲノム刷込み(インプリンティング)を受ける哺乳類遺伝子がゲノムの特定の場所にクラスターを形成することは、これが染色体の機能ドメインを解析するよいモデルとなることを示唆している。マウス第7染色体遠位部(7F4/F5)の刷込み領域は、糖尿病、Beckwith-Wiedemann症候群、Wilms腫瘍などの刷込み関連疾患の責任領域であるヒト第11染色体短腕(11p15.5)と相同である。ヒトの刷込み関連疾患の解析を支援するため、本年度は、このマウスの刷込みドメイン(およそ1Mbに10個余のインプリンティング遺伝子がある)の全塩基配列を佐賀医大向井ら、理研服部らと共同で決定した。ヒトの当該領域と比較した結果、例えばKvLQT1のイントロン内に進化的に保存された配列があり、それらが制御配列である可能性が示された。さらに、H19周辺の保存された配列を実際にレポーター測定法やゲルシフト法により調べ、組織特異的エンハンサーや刷込みに関わるインスレーター蛋白質の結合配列であることを報告した。また、このドメインの配列と一致するESTをBLASTを用いて検索したり、エクソン予測ソフトを行い、新規遺伝子の可能性のある配列を多数見つけた。しかし、これらの転写物の詳細な解析はこれからである。今後、同定された遺伝子や調節配列をマウス個体でノックアウトするなどにより、刷込みの制御機構やヒト刷込み疾患の発症機構を明らかにしていく予定である。
雄しべの分化に伴うプラスチドの分化機構の研究

1.タペートソーム・エライオプラストの可視化と発達過程の追跡生きている細胞内でのタペートソームやエライオプラストの発達及び分解の過程を詳細に観察するため、タペートソームに蓄積するGRP17-GFPとエライオプラストに蓄積するFBP1-GFPをそれぞれタペート細胞で発現するシロイヌナズナ植物体を作製した。GRP17-GFPの蛍光はステージ10/11から小さな顆粒状に見え始め、ステージ12前期では大きな顆粒となってタペート細胞内に分布した。これらの顆粒の形や大きさはタペートソームとよく一致することから、タペートソームの形成過程を追跡できていると結論した。タペート細胞の崩壊に伴ってGRP17-GFPの蛍光は葯室中に広がり、やがて花粉表面に沈着した。一方FBP1-GFPはステージ9から見え始め、ステージ12前期までは顆粒状に観察できるが、タペート細胞の崩壊とともに急速に消失した。これも電子顕微鏡観察による観察結果とよく一致した。これらの植物体は、今後、可視化されたオルガネラの単離・生化学的解析や、両オルガネラの発達過程に異常を示す突然変異体のスクリーニング等に用いる。2.ポレンコートの主要タンパク質EXLの機能解析EXL4とEXL6の機能を明らかにするため、T-DNA挿入による遺伝子破壊とRNAiにより両遺伝子の発現を同時に抑制したシロイヌナズナを作製した。この植物体はポレンコートの形成に異常を示し、花粉稔性が低下していた。電子顕微鏡観察の結果、タペート細胞が崩壊する際のオルガネラの分解が正常に進行しないことがわかった。EXL4、EXL6はタペート細胞特異的に発現することが確認できた。3.ジャスモン酸生合成経路で働くリパーゼの解析DAD1を葉で過剰発現させると葉緑体のチラコイド膜が崩壊することが電子顕微鏡観察から明らかになった。DAD1の基質はチラコイド膜のガラクトリピドであると推定される。また、DAD1のホモログは、共同してジャスモン酸生合成経路で働いていることが明らかになった。1.エライオプラストとタペートソームの形成機構の解析HMG-CoAシンターゼはメバロン酸経路を構成する酵素である。この酵素の遺伝子が変異を起こしたシロイヌナズナの突然変異体flakypollen1-1(fkp1-1)の花粉はポレンコートを欠失し、稔性を失うことから、ポレンコート形成にはメバロン酸経路の働きが必須である。ではメバロン酸経路はポレンコート形成のどの段階に必要なのだろうか。GUSレポーターを用いたFKP1の発現解析や、タペート細胞特異的プロモ-ターでFKP1遺伝子を発現させる実験から、fkp1-1のホモ接合体ではFKP1の発現が特にタペート細胞で著しく低下しており、それがポレンコート欠失の原因になっていることがわかった。そこでタペート細胞を透過型電子顕微鏡で観察したところ、ポレンコートの原料を蓄積するタペート細胞に特異的な2種類のオルガネラ、エライオプラストとタペートソームの構造がいずれも異常になっていた。エライオプラストはメバロン酸経路の最終産物の一つであるステロールを蓄積するオルガネラであることから、ステロールが十分生合成できないことが構造異常の原因となっているのだろう。一方タペートソームはステロールを蓄積しないにもかかわらず構造異常がさらに著しく、発達初期の複雑な膜構造の形成にメバロン酸経路の何らかの産物が役割を持っているようである。このほか、同様にポレンコートに異常が現れるcer1,cer3,cer6についても電子顕微鏡による解析を行った。さらに、エライオプラストやタペートソームの主要タンパク質であるFIB、EXLおよびGRPの発現解析と、GFP融合による局在部位の可視化を試みた。2.ジャスモン酸生合成に関与する葉緑体リパーゼの解析ジャスモン酸生合成経路の反応を触媒するリパーゼDAD1と、そのホモログDAL1DAL6について解析を進めた。異所発現の実験から、少なくともDAL3とDAL6がジャスモン酸生合成に関与する可能性を示した。さらに、花糸で発現させたDAD1-GFPが花糸の葉緑体に局在することを確かめた。

2.ポレンコートの主要タンパク質EXLの機能解析EXL4とEXL6の機能を明らかにするため、T-DNA挿入による遺伝子破壊とRNAiにより両遺伝子の発現を同時に抑制したシロイヌナズナを作製した。この植物体はポレンコートの形成に異常を示し、花粉稔性が低下していた。電子顕微鏡観察の結果、タペート細胞が崩壊する際のオルガネラの分解が正常に進行しないことがわかった。EXL4、EXL6はタペート細胞特異的に発現することが確認できた。3.ジャスモン酸生合成経路で働くリパーゼの解析DAD1を葉で過剰発現させると葉緑体のチラコイド膜が崩壊することが電子顕微鏡観察から明らかになった。DAD1の基質はチラコイド膜のガラクトリピドであると推定される。また、DAD1のホモログは、共同してジャスモン酸生合成経路で働いていることが明らかになった。
タンパク質構造に隠された生体機能ペプチド「クリプタイド」による生体調節機序の解明

タンパク質や生理活性ペプチドが生合成され、また代謝・分解される段階では、同時に多数の断片ペプチドが生成されるが長い間これらは機能を持たない代謝産物であると考えられてきた。本研究では先行研究により発見されていた好中球活性化ペプチド、マイトクリプタイド-1に加えて、新たにマイトクリプタイド-2およびマイトクリプタイド-3をブタ心臓から単離・同定し、それらがミトコンドリアタンパク質由来の新規好中球活性化ペプチドであることを明らかにするとともに、これらマイトクリプタイドの受容体およびその細胞内情報伝達機構を明らかにした。本研究は、我々が生体から単離・精製することにより多数存在することを明らかにした、タンパク質構造に隠された新しい内因性生理活性ペプチド、「クリプタイド」(Peptide Revolution, 2003, 554, 2004 ; Biopolymers, 88, 190, 2007 ; J.Biol.Chem., 283, 30596, 2008)を系統的、網羅的に同定する方法論を確立し同定するとともに、クリプタイドが関与する生体情報伝達機構を明らかにするため、それらの受容体タンパク質を同定、細胞内情報伝達系を解析し、クリプタイドの生理的存在意義を明らかにすることを目的としている。本年度はブタ心臓より好中球に分化したHL-60細胞からのβ-ヘキソサミニダーゼ分泌を指標にして、新しい好中球活性化ペプチド、mitocryptide-2(MCT-2)の単離、構造決定に成功した。またその細胞内情報伝達機構の解析を行った結果、G_<i2>タイプGタンパク質がその情報伝達に関わっていることが明らかとなった。またMCT-2の受容体について解析したところ、Gタンパク質共役型受容体FPRまたはFPRL1のどちらか一方に特異的に結合し、その活性を発現することが示唆された。さらにGタンパク質活性化ペプチドの構造情報を整理、解析することで、タンパク質の配列よりGタンパク質活性化ペプチドとなりうる、異なる配列を持つペプチド(クリプタイド)20種を予測、化学合成し好中球活性化能を検討した。その結果、選択した活性クリプタイドを予測するための物理学的パラメーターを満たす15種は好中球を活性化したが、条件を満たさないものは活性化しないことが示された。本研究は、我々が生体から単離・精製することにより多数存在することを明らかにした、タンパク質構造に隠された新しい内因性生理活性ペプチド、「クリプタイド」(Peptide Revolution, 2003, 554, 2004 ; Biopolymers, 88, 190, 2007 ; J. Biol. Chem., 283, 30596, 2008)を系統的、網羅的に同定する方法論を確立し同定するとともに、クリプタイドが関与する生体情報伝達機構を明らかにするため、それらの受容体タンパク質を同定、細胞内情報伝達系を解析し、クリプタイドの生理的存在意義を明らかにすることを目的としている。本年度は昨年度同定した新しい好中球活性化ペプチド、mitocryptide-2 (MCT-2、J. Immunol., 182, 5072, 2009)の受容体分子の同定と細胞内情報伝達機構の解析を行った。その結果、アミノ末端がホルミル化されたペプチドであるMCT-2が、Gタンパク質共役受容体であるホルミルペプチド受容体FPRL1に特異的に結合するが、そのホモログであるFPRやFPRL2には結合しないこと、MCT-2による刺激は、FPRL1を特異的に活性化し、細胞内カルシウム濃度上昇やMAPキナーゼの活性化を起こすことで、好中球機能であるβヘキソサミニダーゼ分泌や遊走を惹起すること、それらの細胞内情報伝達にはG_<i2>タイプのGタンパク質が関わっていることが明らかとなった。さらにGタンパク質活性化ペプチドの構造情報を解析することで、タンパク質の配列よりGタンパク質活性化ペプチドとなりうる、異なる配列を持つペプチド(クリプタイド)10種を新たに同定した。現在これらペプチドが集積することにより起る新たな生体調節機構について解析している。本研究は、我々が多数存在することを明らかにした、タンパク質構造に隠された新しい内因性生理活性ペプチド、「クリプタイド」(Peptide Revolution, 2003, 554, 2004; Biopolymers, 88, 190, 2007; J. Biol. Chem., 283, 30596, 2008)を系統的、網羅的に同定する方法論を確立し同定するとともに、クリプタイドが関与する生体情報伝達機構を明らかにするため、それらの受容体タンパク質を同定、細胞内情報伝達系を解析し、クリプタイドの生理的存在意義を明らかにすることを目的としている。

昨年度までの研究により、好中球を活性化する新しいクリプタイドmitocryptide-2(MCT-2)をブタ心臓から単離精製することにより同定し(J. Immunol., 182, 5072, 2009)、さらにその受容体がGタンパク質共役受容体であるホルミルペプチド受容体FPRL1であること、MCT-2による刺激は、FPRL1を特異的に活性化し、細胞内カルシウム濃度上昇やMAPキナーゼの活性化を起こすことで、好中球機能であるβヘキソサミニダーゼ分泌や遊走を惹起すること、それらの細胞内情報伝達にはG_<i2>タイプのGタンパク質が関わっていることを明らかにしている(Biochem. Biophys. Res Commun., 404, 482, 2011)。本年度は、新しいさらにGタンパク質活性化ペプチドの構造情報を解析することで、タンパク質の配列よりGタンパク質活性化ペプチドとなりうる、異なる配列を持つペプチド(クリプタイド)20種を新たに同定した。またこれら同定したペプチドのうち、チトクロムcのC末端由来ペプチドを実際にブタ心臓から単離・精製することに成功し、活性予測したクリプタイドが生体に実在することを示した(Prot. Pept. Lett., in press)。現在これらペプチドが集積することにより起る新たな生体調節機構、すなわち「accumulative signaling」機構についてさらに解析している。
各種増殖因子の細胞内動態を指標とした皮膚損傷の分子細胞生物学的エイジング

本研究は受傷後経過時間の推定,すなわち創傷の陳旧度の判定および受傷時期の生前,死後の鑑定法といった法医学特有の問題意識から,有用なマーカーの検索とその評価を目指したものである.なお,皮膚を主として検討したが,脳,骨をも検討対象として加えた。研究の進めかたとしては,まず実験モデルを作成し,免疫染色法,リアルタイム定量PCR法,in situ hybridization法,beads suspension array法などの技法を用いてサイトカインの発現動態を遺伝子レベル、タンパクレベルで検討した.さらに受傷時期の明らかなヒト切創,刺創,裂創,挫創を対象とし定量解析を行い,また具体的な鑑定法の構築を行った.まず17種のサイトカインにつきタンパクレベルでの発現解析をおこなったところ, IL-5, IL-10, IL12p70, IL13, IL17, GM-CSF, IFN-Y, TNF-αの受傷後早期の,IL-6, MCP-1の中期の,またIL-1β, IL-2, IL-4, IL-8, G-CSF, MIP・1βの受傷後中期から後期にかけての発現の上昇を認めた.なお,IL-7は傷治癒過程で発現が抑制されていた.IL-5, IL-10, IL12p70, IL13, IL17, GM-CSF, IFN-Y, TNF-αは急性期の指標となることが示唆され,皮膚損傷受傷後経過時間推定においては,免疫組織学的手法に加え,定量解析も推定の一助になると考えられた.さらに法医実務への応用を視野に入れ,サイトカイン検査を外注で行うことを試みた.すなわち本邦の臨床検査会社におけるサイトカイン検査体制を調査した上で,本検討でのデータを考察し,法医実務で有用と考えられるサイトカイン10種, IL1β, IL4, IL6, IL8, IL10, G-CSF, GM-CSF, IFNγ, MCP1, TNFαを選定した.本研究は受傷後経過時間の推定,すなわち創傷の陳旧度の判定および受傷時期の生前,死後の鑑定法といった法医学特有の問題意識から,有用なマーカーの検索とその評価を目指したものである.なお,皮膚を主として検討したが,脳,骨をも検討対象として加えた。研究の進めかたとしては,まず実験モデルを作成し,免疫染色法,リアルタイム定量PCR法,in situ hybridization法,beads suspension array法などの技法を用いてサイトカインの発現動態を遺伝子レベル、タンパクレベルで検討した.さらに受傷時期の明らかなヒト切創,刺創,裂創,挫創を対象とし定量解析を行い,また具体的な鑑定法の構築を行った.まず17種のサイトカインにつきタンパクレベルでの発現解析をおこなったところ, IL-5, IL-10, IL12p70, IL13, IL17, GM-CSF, IFN-Y, TNF-αの受傷後早期の,IL-6, MCP-1の中期の,またIL-1β, IL-2, IL-4, IL-8, G-CSF, MIP・1βの受傷後中期から後期にかけての発現の上昇を認めた.なお,IL-7は傷治癒過程で発現が抑制されていた.IL-5, IL-10, IL12p70, IL13, IL17, GM-CSF, IFN-Y, TNF-αは急性期の指標となることが示唆され,皮膚損傷受傷後経過時間推定においては,免疫組織学的手法に加え,定量解析も推定の一助になると考えられた.さらに法医実務への応用を視野に入れ,サイトカイン検査を外注で行うことを試みた.すなわち本邦の臨床検査会社におけるサイトカイン検査体制を調査した上で,本検討でのデータを考察し,法医実務で有用と考えられるサイトカイン10種, IL1β, IL4, IL6, IL8, IL10, G-CSF, GM-CSF, IFNγ, MCP1, TNFαを選定した.【目的】皮膚受傷後経過時間推定に対するサイトカイン発現動態の有用性はこれまでも,動物実験やヒト組織を用いた免疫組織学的解析により報告されてきた.今回,剖検例についてサイトカイン遺伝子発現を定量的に分析し,法病理的診断への応用の可能性を探った.平成18年度は皮膚全層における遺伝子発現動態の解析を試みた.【方法】岩手医科大学医学部法医学講座の法医解剖例より受傷後経過時間が明らかで死後36時間以内に採取可能であった創周囲の皮膚を計102検体を採取し,試料とした.常法に従い,RNAを抽出し,cDNAを合成し,ABI PRISM 7500 Sequence Detectorを用いて,IL4 mRNA, IL10 mRNA, TNFαmRNA, VEGF mRNA, PDGF mRNAを定量した.【結果および考察】受傷後早期から変動していたのはIL10 mRNAで,受傷後12時間から発現量が上昇に転じた.またIL4 mRNAは受傷後中期から後期に変動しており,受傷後33時間以降に上昇していた.受傷後後期に発現量が上昇していたのはVEGF mRNA, PDGFm RNAで,受傷後71時間以降に発現量が上昇していた.なおTNFαmRNAには治癒過程における発現量の有意な変動を認めなかった.今回検討した因子のうち,IL10 mRNAは急性期の指標となることが示唆された.【今後の計画】laser microdissection法を用いて,皮膚を表皮,真皮,皮下組織に分割し,それぞれの部位における上記サイトカインの発現動態を解析し,分割して定量した際の有用性を検討する。

また病理学的にも,皮膚全層のサイトカインデータおよび皮膚を分割して得られたそれを比較することにより、皮膚創傷治癒過程において、サイトカイン発現動態に強く影響を与えている部位を定量的に明らかにする.【目的】損傷の受傷後経過時間は法医学的に重要な情報の一つである。従来、皮膚損傷受傷後経過時間推定に関する検討は、主として免疫組織学的手法を用い定性的に行われてきた。今回、サイトカイン発現を多因子について遺伝子レベル、タンパクレベルで定量的に分析し、法病理的診断への応用の可能性を探った。【方法】受傷時期の明らかなヒト切創、刺創、裂創、挫創を対象とし、剖検時、創縁を含めて幅5mmの部分を採取した。組織学的検索を目的として、細胞マーカーを用いた免疫染色を行った。また17種のサイトカインについてbeads suspension arrayを用い、タンパクレベルでの定量的検討を行った。さらにquantitative PCRを用いて、サイトカイン13種の遺伝子発現解析を行った。【結果および考察】組織学的には、好中球、マクロファージの受傷後中期からの、TおよびBリンパ球の後期からの浸潤を、また線維芽細胞の後期における強い増殖を認めた。タンパクレベルでのサイトカイン定量解析では、IL-5、IL-10、IL12p70、IL13、IL17、GM-CSF、IFN-γ、TNF-αの受傷後早期からの、IL-6、MCP-1の中期の、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-8、G-CSF、MIP-1βの受傷後中期から後期にかけての発現の上昇を認めた。また、IL-7は創傷治癒過程で発現が抑制されていた。なお、遺伝子レベルでの発現動態に関しては、検討を続行中である。タンパクレベルにおいては、IL-5、IL-10、IL12p70ねIL13、IL17、GM-CSF、IFN-γ、TNF-αは急性期の指標となることが示唆された。皮膚損傷受傷後経過時間推定における免疫組織学的手法の有用性に関しては諸家により報告されているが、本定量的検討で経時的変動が認められたことから、定量解析も推定の一助になると考えられたる。
ミオシンファイブの歩行機構:足首の角度制御の仕組み

ミオシンファイブはアクチン線維上を-方向に運動する代表的な二本'足'型分子モーターである。足首の角度変化を光学顕微鏡で初めて直接観察した。ATPの結合により角度変化が開始すること、変化した足首の角度が数十秒間安定に保たれた後、元の角度に戻ることを明らかこした。この角度の安定性により、負荷存在下においてもミオシンファイブが一方向に運動できることを説明し、新たな運動機構を示した。ミオシンVは二本の`足'をもつリニアモーター蛋白質であり,アクチン線維から解離した後足をアクチン線維に結合している足の前方に着地させることにより,一見人間のように`歩く'と考えられている.この前方着地を保証するには,アクチン線維から解離した足の`つま先'が下がる(足の裏が前方でアクチン線維に結合できる向きになる)ように`足首'の角度が制御されていることが重要だと考えられるが,その仕組みを明らかにしようとしている.光学顕微鏡を用いてミオシンV-分子の足首角度変化の連続観察を試みている.足首の角度変化を見るには,足(足首より下)または`脚'のどちらか一方を基盤に固定し,他方に角度を検出できるプローブを結合させることが必要である.足にタグを挿入した片足ミオシンVを米国Yale大学De LaCruz研究室に遺伝子工学を用いて作製していただき,活性があることを確認した.また,ミオシンVの脚に結合している軽鎖にもタグを挿入し,この軽鎖を上記のタグつきミオシンVの脚に結合させた.そして,チャンバー内で,足,または脚の一方を基盤に固定し,他方に向きがわかるビーズを結合させることができた.角度変化がヌクレオチドに依存していることを明確に示すため,UVフラッシュシステムを顕微鏡に導入し,Caged ATPを用いて瞬間的にATP濃度を上昇させることができるようにした.ミオシンVがATP結合によりアクチンから解離する性質を利用して,Caged ATPとUVフラッシュシステムが機能していることを確認した.数例であるが,UVをフラッシュした瞬間に角度変化するビーズが観察できた.今後はこの動きが確かにミオシンVの動きであることの確認をするとともに,必要であれば基盤への固定法やプローブの結合法をさらに改良し,観察例を増やして動きの特性を解明する.ミオシンVは二本の`足'をもつリニアモーター蛋白質である。ATPが結合してアクチン線維から解離した後足を、アクチン線維に結合している足の前方に着地させることにより、一見人間のように`歩く'と考えられている。この前方着地を確実にするには、アクチン線維から解離した足の`つま先'が下がる(足の裏が前方でアクチン線維に結合できる向きになる)ように`足首'の角度が制御されていることが重要だと考え、その仕組みを明らかにしようとしている。Caged ATPとUV照射を用いて任意のタイミングでATPを産生した直後に、足首の動きを反映していると考えられるビーズが角度変化し(元の角度→二つ目)、平均約40秒後に元の角度に戻ることが観察された。生化学的な方法により測定した反応速度の値と比較することにより、二つ目の角度の滞在時間はリン酸の解離が律速であることが分かった。構造の研究から示唆されていた、ヌクレオチドに依存した二つの角度が存在することが確認されたと同時に、リン酸解離待ちの二つ目の角度(これまでの研究からつま先を下げた構造だと考えられる)が安定して存在することが明らかになった。これは歩行中において、アクチン線維から解離した足がつま先を下げた構造を保ち、結合していた部位(後方)に再結合するよりも前方に着地する確率を高めていることを示唆している。ミオシンVはATPの加水分解サイクルから得られるエネルギーを用いてアクチンから離れたときの足首の角度を積極的に制御し、一方向性運動を確実にしていると考えられる。これらの成果を投稿準備中である。
樹木年輪年代学によるインドシナ半島部過去1000年の気候復元

ベトナム北部ムーカンチャイ(21°40'N,104°06'E)にてフッケンヒバ(Fokienia hodginsii)の老齢木40個体から計80本のコアサンプルを採取した。年輪の絶対年代の特定,年輪幅の計測,および加齢に伴う成長減衰傾向の除去を経て,全サンプルの年輪幅時系列を平均し遡及期間867年(A.D.1381-2003)の標準年輪年代曲線を構築した。次いで,この標準曲線と北緯1520°・東経100105°内の観測気候を統合したグリッド気候データ(月別気温・降水量)を用いて,樹木の成長に効く気候要素とその作用時期を調べた結果,年輪幅は当年3,4月および前年5,6月の気温に対して負の,当年4月および前年5,6月の降水量に対して正の有意な相関を示した。ベトナム北部の気候は,亜熱帯モンスーンの影響を強く受け,雨期(58月)と乾期(9翌年4月)の明瞭な季節変化を示す。したがって,乾期終盤34月の高温と相対的寡雨は土壌の乾燥を促し,フォッキニアの肥大成長を抑制すると考えられる。また,前年の気温・降水量に対する応答も当年のそれと同じ傾向を示しており,前年5,6月の水分不足もまた相応にフォッキニアの成長を抑制していることが分かった。こうして明らかになった年輪-気候の対応関係から,応答関数の逆関数を決定し過去867年の4月の気温を復元した。復元気温全体としては,周期数十年で変動していることが確認できるほか,復元の信頼度が高い1450年以降の気温変化を概観すると,1540年から1720年までの寒冷化,それに続く1900年までの跛行的温暖化と,過去100年の寒冷化が認められるが,これは北半球中高緯度地域で顕著な近年の温暖化傾向とは明らかに異なる。昨年度にラオス北部ホアパン省の2サイトから採取した,総計286本のフッケンヒバ(Fokienia hodginsii)の年輪試料を細胞レベルで観察した結果,年輪構造について,1)晩材を構成する仮道管が放射方向に2,3列並んだだけの極端に狭い年輪が多い,2)早材から晩材への移行が緩慢,3)多量の樹脂細胞が接線方向に並び年輪と間違いやすい,4)同一年輪内での幅の変動が著しいこと,などが特徴として把握できた.これらの構造から,年輪の形成された絶対年代を完全に特定することは困難であったが,年輪試料の一部をもとに時系列長623年(A.D.1381-2003)および550年(A.D.1454-2003)の暫定的な年輪幅の標準曲線をサイト別に構築した.フッケンヒバの標準曲線の構築自体がこれまで報告されていないことに加え,これまで報告されている東南アジア産の標準曲線の遡及期間を,今回構築した標準曲線の両者とも上回ることができた.次にこれら標準曲線を解析した結果,周期数十年の卓越した年輪幅変動が確認できたほか,北東50kmに位置する測候所の10年足らずの気候データと対比すると,年輪幅は35月の平均気温に対して有意な正の相関を示すことから,この期間に多発する霧による水分供給が成長変動に効いているのではないかと推察された.以上の内容は,2004年度日本熱帯生態学会で発表した.昨年度の調査から,フッケンヒバはラオスに限らずヒマラヤ山脈東端からインドシナ半島に伸びる大褶曲山脈の標高15002000m域に分布しているという見通しを得ていたので,本年度は北ベトナムでフッケンヒバの年輪試料を採取した.ベトナム北部ムーカンチャイ(21°40'N,104°06'E)にてフッケンヒバ(Fokienia hodginsii)の老齢木40個体から計80本のコアサンプルを採取した。

復元気温全体としては,周期数十年で変動していることが確認できるほか,復元の信頼度が高い1450年以降の気温変化を概観すると,1540年から1720年までの寒冷化,それに続く1900年までの跛行的温暖化と,過去100年の寒冷化が認められるが,これは北半球中高緯度地域で顕著な近年の温暖化傾向とは明らかに異なる。