hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
RNA結合蛋白質Musashiのショウジョウバエ光受容細胞分化における機能の解析

RNA結合蛋白質による遺伝子発現の転写後制御は神経系の初期発生における細胞運命決定に重要な役割を果たすことが報告されている。RNA結合蛋白質Musashi(MSI)は、ショウジョウバエ複眼の神経細胞分化において神経分化抑制因子TTKの発現を制御することにより特定の神経細胞分化を促進する一方、その他の神経細胞の成熟や生存の維持に重要な役割を果たす(Hirota et al.,1999)。代表者は昨年度、MSIと類似した発現パターンを示すP因子挿入系統を得てその近傍に位置する遺伝子tincarをクローニングした。今年度は引き続きtincar遺伝子の発現制御に関する研究を行った。tincar遺伝子は新規の膜8回貫通型蛋白質をコードし、その遺伝子産物は細胞膜に主に存在することを明らかにした。tincar遺伝子の光受容細胞分化における機能を明らかにするために、生体内でRNA干渉法を行った結果、光受容細胞の分化に異常が引き起こされたことから、tincar遺伝子が光受容細胞の分化に関与することが示唆された。さらに、tincar遺伝子は光受容細胞や中枢神経系に発現するとともに、発生過程の心臓においても非常に興味深い細胞サブセット特異的な発現を示すことに注目した。tincar遺伝子の心臓での発現パターンを詳細に解析し、その発現が核内受容体型転写因子Seven-upおよびホメオドメイン型転写因子であるTinmanによって制御されていることを明らかにした(Hirota et al.,2002)。これらの研究成果により、新規膜蛋白質であるTincarが神経系および心臓という異なる組織の発生過程に関与することが示唆された。
江戸版本の読解を支援する運筆特徴を考慮したつづき文字の認識に関する研究

本研究では、近世に刊行された江戸版本である黄表紙(草双紙)に表出するつづき文字を対象に、文字認識システム開発のための基礎的研究を行った。主として、文字認識システム検討のための基礎文字データの整理保管、字母である漢字と仮名文字との表出頻度に関する統計分析、文字パターンに基づく文字認識手法の精度に関する検証、つづき文字を信号として処理する文字認識手法の開発に取り組んだ。以下にその成果をまとめる。1.文字認識に関する研究を進めるための基礎データとして、分析対象のつづき文字約9000文字を1文字単位に分割し、画素データ、ビットデータとその翻刻とを一対にして整理保管した。2.個別文字のパターン識別手法による文字認識方法の検討とその精度の分析として、最近隣法とニューラルネットワーク、最短距離法を用いた文字認識を行い、それぞれ83%、77%の結果を得た。この結果をもとにつづき文字による文字認識の困難性について考察した。3.字母となる漢字の筆順に依存した仮名文字の運筆を波形として扱うことによる崩し方の程度や文字間のつづきに関して頑健な文字認識手法の提案を行った。53%と低い認識率であったが、文字分割を前提としない手法としての適用可能性について考察した。4.古典籍を特徴づける要因の分析を目的として、鳥居清経が関わる安永期の黄表紙仕立噺本を対象に、平仮名と漢字の構成比率や文字種の出現確率などの統計分析を行った。その結果、発刊年別の十種の古典籍を分析した結果、漢字が平仮名に、複数の字母を持つ仮名が特定の平仮名に置き換えられる傾向を確認した。本研究では、古典籍に含まれる文書に対する自動読み取りシステムの開発を目的としている。古典籍には、文字や画像が含まれ、文書によっては画像と文字が混合して構成されているため、図と文字の領域分割が必要である。また、文字は現代の活字体とは異なって「くずし字」からなっており、さらに時間の経過による原著の劣化や印刷技術の低さから古典関内の文字はかすれ、しみ、しわを有している。以上の前提を踏まえ、古典籍から文字情報を抽出するために、本年度は以下の調査研究を進めた。1.本研究で対象とする古典籍の収集をおこない、含まれる文字のかすれ、しみ、しわなどの画像劣化の程度を把握するために古典籍(安永期の鳥居清経が関わった黄表紙仕立噺本)の収集を行った。収集した古典籍に対してデジタル画像化および画像の規格化を行った。2.古典籍における文字認識は連続する文字に対する認識であるが、基礎的データとして分割された文字(約1100文字)に対する文字認識実験を行い約92%の認識率を得た。3.文字に関する静的な情報のみならず、動的な情報として古典籍の文字のなぞりから運筆情報を収集し周波数特徴を抽出するシステムを開発した。仮名文字のくずしの程度を変化させたときの周波数特性の変化を量的に評価した。4.古典籍に含まれる文章を1文字単位に分割し現代仮名との対比を容易に行える補助システムを開発し、文字単位での仮名文字データをデータベース化した。また、文字は現代の活字体とは異なって「くずし字」からなっており、さらに時間の経過による原著の劣化(汚れ・虫損)や印刷技術の低さから古典籍に含まれる文字はかすれ、しみ、しわを有している。古典籍に含まれる文字認識の精度向上には文字画像パターンを要素とする判別だけでなく、平仮名と漢字の構成比率や文字種の出現確率などの統計情報の活用が考えられる。また、古典籍に含まれる文字は、現在のような活版印刷ではなく、同一文字でも種々の崩し方やその程度によって多くの字形が存在する。そのため「崩し」に対する頑健制が求められる。

以上の前提を踏まえ、古典籍から文字情報を抽出するために、本年度は以下の調査研究を進めた。1.鳥居清経が関わる安永期の黄表紙仕立噺本の文字情報について報告を行い、現在継続中の文字認識システム構築のための基本データ収集を行った。発刊年別の十種の古典籍を分析した結果、漢字が平仮名に、複数の字母を持つ仮名が特定の平仮名に置き換えられる傾向を確認した。2.仮名文字の運筆は字母となる漢字の筆順に依存しており、これを波形として扱うことで、崩し方の程度による文字形状の変化、および、文字間のつづきによる影響を軽減した文字認識システムが構築できる。そのためにまず、仮名文字のくずしの程度を変化させたときの周波数特性の変化を量的に評価した。そして、古典籍に含まれる仮名つづき文字に対して、手作業により運筆情報の抽出を行い、テンプレートとの絶対値差分和による文字認識の可能性を確認した。3.つづき文字やくずし文字に対する文字認識のアプローチ1文字分割後に文字認識を行う方法と、分割をおこなわずに連続する文字一つのパターンとして認識する方法が考えられる。つづき文字やくずし文字の分割処理の不要な連続文字認識の認識精度を確認するために、連続2文字の認識手法の検討を行った。古典籍に含まれる文字は、現代の活字体とは豊なって「くずし字」からなっており、さらに時間の経過による原著の劣化(汚れ・虫損)や印刷技術の低さから古典籍に含まれる文字はかすれ、しみ、しわを有している。古典籍に含まれる文字認識の精度向上には文字画像パターンを要素とする判別だけでなく、平仮名と漢字の構成比率や文字種の出現確率などの統計情報の活用が考えられる。また、古典籍に含まれる文字は、現在のような活版印刷ではなく、同一文字でも種々の崩し方やその程度によって多くの字形が存在する。そのため「崩し」に対する頑健性が求められる。以上の前提を踏まえ、本研究では、古典籍における文字認識システム構築のための基礎的研究として、分析対象のデータベース化を行い、それに基づく文章を構成する文字についての統計分析、運筆に着目した文字認識、パターンマッチング手法を平成18年度までに行ってきた。平成19年度では、これらをさらに推し進め、古典籍を特徴づける要因についての分析を行った。本年度は以下の調査研究を進めた。
柔軟性プラスチックの濡れ性の制御とフレキシブル・ヒートパイプへの応用展開

本研究では,はじめに,ヒートパイプに関する基礎実験を行い,その上で,グラフェンを混入させたプラスチック素材を用い,3Dプリンターを使用して自励振動式ヒートパイプを製作した.作動液には素材との濡れ性が良好なエタノールを使用した.実験結果から,ヒートパイプを曲げた場合(角度:20度)と曲げない場合を比較し,ヒートパイプを曲げると加熱量が5.0Wと6.0Wのとき熱輸送性能が少し低下するが,いずれの場合も内部で作動液が流動し,ヒートパイプが作動して定常的な熱輸送が行われていることを確認した.プラスチック材料を用いてヒートパイプを製作し,二種類の作動液を用いて,熱輸送に関する実験を実施した.本年度は基礎的なデータを取得するために,プラスチック材料にポリカーボネートを,作動液に水とエタノールを用いた.ヒートパイプは,断面5.0mm×3.0mm,長さ101mmの直管状で熱サイフォン式とし,ヒートパイプの加熱にはマイクロセラミックヒーターを,冷却には水冷ジャケットを使用した.実験では,加熱量を変圧器と電力計で2.0W,4.0W,6.0Wと変え,冷却温度を低温恒温槽で20°Cに設定し,ヒートパイプ各位置の温度の経時変化を熱電対で測定した.特に本実験では,プラスチック表面の濡れ性にも着目し,ヒートパイプ内の現象を捉えるために高速度ビデオカメラを用いた.高速度ビデオカメラでの撮影により,作動液に水を用いた場合,エタノールを用いた場合と比較して,ヒートパイプの蒸発部で作動液がより激しく沸騰する様子が確認できた.また,温度分布の測定結果から,いずれの作動液を用いた場合もヒートパイプは安定的に作動するが,作動液に水を用いた場合,エタノールを用いた場合と比較して蒸発部と凝縮部の温度差が小さくなることが確認された.蒸発部での現象の相違ならびに作動液の潜熱の相違の影響があらわれていると考えられる.なお,ヒートパイプの簡易伝熱モデルで有効熱伝導率を評価すると,作動液に水を用いた場合,最大で1363W/(m・K),エタノールを用いた場合,最大で964W/(m・K)であった.プラスチック材料は一般的に熱伝導率が低いため,ヒートパイプのコンテナとして使用する場合,加熱部と冷却部ではその伝熱抵抗を軽減させる必要がある.本研究では,平成26年度に製作したヒートパイプの実験装置のうち,加熱部ならびに冷却部のプレートをCFRP(carbon fiber reinforced plastic)の薄板に変更し,熱輸送特性に関する実験を行った.具体的には厚さ0.2mmと0.4mmのCFRP板を使用した.これらのCFRP板は非常に薄いため,手で簡単に曲げることができる.実験ではまず,冷却ジャケットと恒温槽を用いてヒートパイプの冷却部を冷却し,一様温度となった後,マイクロセラミックヒーターでヒートパイプの加熱部を加熱して,ヒートパイプ各位置の温度の経時変化を熱電対で測定した.設計条件としてヒートパイプの断面積を2.0mm×2.0mm,4.0mm×4.0mm,8.0mm×8.0mmと変化させ,使用条件としてヒーター加熱量を0.9W,1.8W,2.7Wと変化させた.なお,ヒートパイプの長さは100mm,恒温槽内の冷却水温度は20°Cとし,作動液には水を用いた.実験結果から,いずれの実験条件下においても,ヒートパイプ全体の温度差のうち加熱部の温度差が非常に大きく支配的であることを確認した.また,4.0mm×4.0mmおよび8.0mm×8.0mmの断面積の場合と比較して,2.0mm×2.0mmの断面積の場合,ヒートパイプの有効熱伝導率が最も高くなり,厚さ0.2mmのCFRP板を使用したとき最大で771W/(m・K),厚さ0.4mmのCFRP板を使用したとき最大で405W/(m・K)の有効熱伝導率の値が得られた.平成26年度に製作したヒートパイプの実験装置を使用し,一部に改良を加えて,ヒートパイプの熱輸送特性と設計条件,熱輸送特性と使用条件の関係に関する基礎的な実験データを取得した.本年度は,ヒートパイプの加熱部ならびに冷却部にCFRPの薄板を使用したが,おおむね良好な実験結果を得ることができた.また,並行して柔軟性プラスチックに関する検討も進めており,今後,ヒートパイプに応用展開する計画である.以上の研究進捗状況から,研究目的の達成度について「おおむね順調に進展している」と評価した.グラフェンを含むプラスチック材料を用い,3Dプリンターを使用して自励振動式ヒートパイプを製作し,熱輸送特性に関する実験を行った.具体的には,厚さ2.5mmの平板上に10本の矩形溝(断面積:1.5mm×1.5mm,長さ:80mm)で蛇行流路を設け,その上に厚さ0.4mmの薄板を3Dプリンターで付加して自励振動式ヒートパイプを製作した.十分な気密性を確保するために,ヒートパイプ表面に銅メッキを施した.また,本プラスチック材料と各種液体との濡れ性を調べ,濡れ性が良好なエタノールを作動液として使用した.実験では,ヒートパイプに加熱ヒーターと冷却ジャケットを取り付け,まず,恒温槽から冷却ジャケットに冷却水を流した.次に,ヒートパイプがほぼ一様温度になった後,ヒーターによる加熱を開始して,ヒートパイプの蒸発部温度,断熱部温度,凝縮部温度,ならびに,冷却ジャケット入口・出口温度の経時変化を熱電対で測定した.

作動液の封入率を50%,恒温槽内の冷却水の温度を2.5°C,流量を0.25L/minとし,ヒーターによる加熱量を2.0Wから20分おきに1.0Wずつ増加させ,蒸発部温度が90°Cとなるまで実験を継続した.ヒートパイプを曲げた場合(角度:20°)と曲げない場合(角度:0°)について,同様に実験を行った.実験結果から,ヒートパイプを曲げると,曲げない場合と比較して熱輸送性能が少し低下するが,いずれのヒートパイプについても内部で作動液が流動し,ヒートパイプが作動して熱輸送が行われていることを確認した.本研究では,はじめに,ヒートパイプに関する基礎実験を行い,その上で,グラフェンを混入させたプラスチック素材を用い,3Dプリンターを使用して自励振動式ヒートパイプを製作した.作動液には素材との濡れ性が良好なエタノールを使用した.実験結果から,ヒートパイプを曲げた場合(角度:20度)と曲げない場合を比較し,ヒートパイプを曲げると加熱量が5.0Wと6.0Wのとき熱輸送性能が少し低下するが,いずれの場合も内部で作動液が流動し,ヒートパイプが作動して定常的な熱輸送が行われていることを確認した.加熱系,冷却系,測定系から構成される実験装置を準備し,プラスチック材料にポリカーボネートを,作動液に水とエタノールを用いて,基礎的な実験データを取得した.高速度ビデオカメラでの撮影も予定通り進めることができ,実験結果から,ヒートパイプ内での現象と熱輸送特性が明らかとなった.また並行して,柔軟性プラスチックの表面制御に関する検討も進めており,今後,ヒートパイプに応用展開する計画である.以上の研究進捗状況から,研究目的の達成度について「おおむね順調に進展している」と評価した.平成26年度ならびに平成27年度の実験結果を踏まえた上で,柔軟性を有するプラスチックを使用し,表面の濡れ性等も考慮した上で,ヒートパイプの熱輸送特性に関する実験を実施する.これまでに構築した実験装置を利用し,熱輸送特性と設計条件,熱輸送特性と使用条件の関係に関する基礎データを蓄積して,ヒートパイプの最適化を進める.最終的には,フレキシブル・ヒートパイプの形成に最適な条件を確定する計画である.熱工学平成26年度の実験結果を踏まえた上で,まず,濡れ性などのプラスチックの表面制御とヒートパイプの作動との関係について検討を進める.また,プラスチックは一般的に熱伝導率が低いため,加熱部と冷却部では表面制御と同時にプラスチックを薄くし,伝熱抵抗を軽減する計画である.次に,以上の検討結果を応用展開し,柔軟性を有するプラスチックを用いてヒートパイプを製作して,その最適化を進める.平成26年度に準備した実験装置を利用し,熱輸送性能と設計条件,熱輸送性能と使用条件の関係を明らかにする.最終的には,フレキシブル・ヒートパイプの形成に最適な条件を確定する計画である.次年度使用額(B-A)は,平成27年度の物品費を抑えることにより生じたものである.次年度使用額(B-A)は,高速度ビデオカメラ(平成26年度購入物品)のスペックを絞り込むことにより生じたものである.次年度使用額(B-A)は,平成28年度の物品費に充てる計画である.次年度使用額(B-A)は,研究成果を国際会議で発表するための旅費に充てる計画である.
fMRIを用いた生理的多型性に基づく養育行動の神経基盤に関する研究

本研究では、2ー3歳の子どもをもつ親を対象に食事場面の動画を用いたfMRI実験により、他人の子と比較したわが子に対する脳活動を計測し、特に養育行動の動機づけ(親のわが子への愛情)に重要とされる前頭眼窩皮質、中脳水道周囲灰白質/背側縫線核、前島皮質、腹側淡蒼球の4領域について、父親と母親の違いを検討した。その結果、母親で有意な活動を示し、父親では認められなかった領域は、報酬系の制御や報酬の価値判断に中枢的な役割を果たす前頭眼窩皮質であった。前頭眼窩皮質を含む母親の脳メカニズムは、日常の育児において効果的で適応的な応答を支えていることが示唆された。親という個体や集団の特性と養育行動に関する脳機能の関係性や、育児ストレスに対する親の機能的潜在性がどのように表現されるかは、生理的多型性に基づく人間の適応性を多面的にみる点で重要な課題である。本研究の目的は、健常な2-3歳児をもつ父親と母親を対象に、子どもの摂食場面に対する親の脳活動を機能的磁気共鳴画像(functional MRI: fMRI)で計測し、個体間の特性や育児ストレスなどの評価との関連性および集団間の共通/差異部分を明らかにすることである。本年度は、次年度以降に計画している本実験に向けて、適切なシステムを構築する事項を下記のように遂行した。1.実験システムの構築:fMRI実験の刺激提示の作成方法を検討した。被験者や乳幼児の負担を最小限に留め、効果的な提示刺激を作成するための撮影方法および編集方法を吟味し、必要な機器やソフトの選定を行った。また親の特性や育児ストレスに関する質問紙の選定を行った。2.情報収集:効果的な実験刺激の作成のために、実際の育児場面における親の意識に関して聞き取り調査を行った。また、養育行動の脳科学研究の現状調査や関連する研究の情報を収集するために国内の学術集会に参加および研究発表を行い、情報収集や意見交換を行った。3.被験者のリクルート:定型発達児(2ー4歳)を持つ健常な父親と母親の募集を開始した。研究代表者がこれまで実施してきた別の研究に対する協力者の複数のコミュニティーに広く募集している。本年度は、実験刺激用の動画撮影を開始した。また、fMRI実験デザインを構築し、予備実験を行った。さらに、国際会議に出席し、広く情報収集や意見交換を行った。具体内容を次に記す。国際会議に出席し、育児行動にも関連する脳領域に焦点を当てた研究発表や解析方法など広く情報を収集できたことは、本研究課題の実験システム構築に大いに役立った。そのため本年度の計画通り質問紙の選定や刺激動画の撮影や編集、予備実験などの遂行が可能となった。従って本研究課題は、現在までおおむね順調に進展しているといえる。本研究の目的は、健常な2-3歳児をもつ養育者を対象に、子どもの摂食場面に対する親の脳活動を機能的磁気共鳴画像(fMRI)で計測し、個体間の特性や育児ストレスなどの評価との関連性および集団間の共通/差異部分を明らかにすることである。本年度は、被験者の募集、刺激動画の作成を行い、fMRI実験および質問紙調査を開始した。また、親子関係や子どもの養育環境について国内の学術集会を中心に情報収集を行った。具体的内容を以下に記す。1.刺激画像作成:子どもがスナックを食べる場面を撮影し、30秒の動画に編集した。3.fMRI実験:自分の子どもと見知らぬ子どもの動画をランダムに表示するブロックデザインを用い、実験を行った。4.情報収集:心理・発達・生理・神経など幅広い分野での情報収集を行った。育児に欠かせない共感性や意思決定などの認知神経機構に対象者や状況によるバイアスが大きく影響していることや、ハード面や子どもの特性、支援者と養育者の役割など養育環境をとりまく複雑な要因を再認した。養育行動の神経基盤をテーマにした本研究課題であるが、科学的根拠を明確に示すと同時に生活上の複雑な要因を考慮する必要性を痛感した。実験を開始し、現在のところ大きな問題もなく遂行できている。また、幅広い分野の学術集会に出席し、情報収集や意見交換を行えたことは、本研究課題の重要性を再認するとともにデータ解析や成果をまとめるうえで大いに考慮すべき視点を意識することとなった。1.目的:親という個体や集団の特性と養育行動に関する脳機能の関係性がどのように表現されるかは、生理的多型性に基づく人間の適応性を多面的にみる点で重要な課題である。

本研究の目的は、健常な2-3歳児をもつ養育者を対象に、子どもの摂食場面に対する親の脳活動を機能的磁気共鳴画像(fMRI)で計測し、個体間の特性や育児ストレスなどの評価との関連性および集団間の共通/差異部分を明らかにすることである。本年度は、fMRI実験及び解析を中心に行った。2.方法:2ー3歳の定型発達児を持つ健常な母親と父親15組、母親のみ13名を対象に自分の子または見知らぬ他人の子の食事場面の動画を見ている間の脳活動を機能的磁気共鳴画像法で計測した。さらに母親から育児ストレス尺度への回答を得た。(1)母親28名に対し、自分の子と他人の子に対する脳活動について解析し、2つのコントラストについて(自分の子>他人の子、他人の子>自分の子)全脳解析を行った。有意に活動を示した領域について機能的関心領域を設定し、育児ストレス尺度と回帰分析を行った。(2)15組の父親・母親それぞれに対し、2つのコントラストについて(自分の子>他人の子、他人の子>自分の子)全脳解析を行い、(1)で有意な結果が示された子どもへの愛情や育児の動機付けに関する4領域(Noriuchi, 2008)を関心領域として設定し、父親と母親の脳活動の違いを検討した。3.成果(1)他人の子と比較して自分の子に対して有意に賦活した脳領域のうち育児ストレスと負の相関を示したのは、右前頭眼窩皮質(OFC)であった。(2)さらに我が子への愛情や育児の動機付けに関する4領域について検定した結果、母親でのみOFCの活動が有意に認められ、親の性別の違いと育児支援に有益となり得るターゲット領域が示唆された。本研究では、2ー3歳の子どもをもつ親を対象に食事場面の動画を用いたfMRI実験により、他人の子と比較したわが子に対する脳活動を計測し、特に養育行動の動機づけ(親のわが子への愛情)に重要とされる前頭眼窩皮質、中脳水道周囲灰白質/背側縫線核、前島皮質、腹側淡蒼球の4領域について、父親と母親の違いを検討した。その結果、母親で有意な活動を示し、父親では認められなかった領域は、報酬系の制御や報酬の価値判断に中枢的な役割を果たす前頭眼窩皮質であった。前頭眼窩皮質を含む母親の脳メカニズムは、日常の育児において効果的で適応的な応答を支えていることが示唆された。研究代表の所属機関の変更により、研究の開始が多少遅れた。また、使用予定のMRI装置の不具合により予備実験が行えない状況であった。しかし、情報収集やシステムの構築を丁寧に行ったことで、今後の研究の推進に向けた準備は計画通り進展している状況である。引き続き被験者募集を行い、実験刺激用の動画撮影スケジュールを組んでいく。同時に、予備実験のデータから最適な解析方法を検討し、本実験の準備を進める。さらに、国内の学術会議に出席し、生理人類学や神経科学のほかに発達心理学など広く情報収集や意見交換を行う予定である。(今後の推進方策)引き続き被験者募集を行い、fMRI実験を行う。また、収集した脳画像データおよび質問紙データを本研究課題の目的に沿って効果的に処理できるよう、解析方法を検討する。さらに、幅広い分野で国内外の学術会議に出席し、広く情報収集や意見交換を行う予定である。発達認知神経科学,生理人類学刺激作成に必要なシステム構築のために要する物品・ソフト等を購入する。同時に、最適な解析方法やfMRI実験デザインを検討し、予備実験を行う。
虚血神経細胞死におけるモードスイッチの分子基盤に関する研究

本年度はより詳細なモードスイッチ分子基盤の解明を行うべく検討を行った。これまで培養開始直後から無血清低密度培養にすることでネクローシスが誘導され、高密度培養ではアポトーシスが誘導されることを見いだした。さらに高密度培養上清(CM)およびCMより発見したNDIを添加することで低密度培養の細胞死がアポトーシスにモードスイッチし、この機構にプロテインキナーゼC(PKC)が関与することを明らかにした。今回、ネクローシスを起こす無血清低密度培養時には、細胞膜上に存在するグルコーストランスポーター(GLUT)が細胞内に局在を変えることで、グルコース取込みが低下し、細胞内ATP量が急激に減少することを見いだした。これに対してNDIを処置した細胞ではGLUTを細胞膜上に局在化させることで、グルコース取込みを増加させ、細胞内ATPを維持することでネクローシスを抑制していることを明らかにした。さらにこのメカニズムにはG_i蛋白質、ホスホリパーゼCおよひPKCが重要な役割を果たすことを薬理学的、免疫組織学的手法を用いて明らかにした。一方、アポトーシス誘導はBaxの発現増加によりmitochondria経路を介し、引き起こされることを明らかにした。NDIとは別に、細胞内ATPを維持するためクルコース量を増加させた培養液を用いて検討したところ、ネクローシス抑制だけではなく、Baxの発現増加を介したアポトーシス誘導により細胞死モードスイッチが起こることが示されたが、グルコース同様、ATP原料になるピルビン酸の場合では、ネクローシスを抑制するのみでアポトーシス誘導が見られなかった。この結果、NDIおよびグルコース処置で見られる細胞死モードスイッチには細胞内ATP量の維持によるネクローシスの抑制だけではなく、Baxを介したアポトーシスの誘導が必要であることが示唆された。本年度は本研究目的である虚血神経細胞におけるモードスイッチの分子基盤の解明を行うべく、初代培養神経細胞を用いて検討を行った。神経細胞を培養開始直後から無血清低密度で培養するとネクローシスが引き起こされ、培養密度を高密度にすることで細胞死がアポトーシスにモードスイッチすることを見出した。細胞死モードスイッチは高密度培養上清(CM)を添加した低密度神経細胞でも認められた。CMによる細胞死モードスイッチのメカニズムの解析によって、CMがプロテインキナーゼC(PKC)の活性化を介して細胞内ATPを上昇させネクローシスを抑制する一方で、ミトコンドリアからのチトクロームcの遊離を引き起こしアポトーシスに細胞死をモードスイッチさせることを生化学的、免疫組織化学的な手法さらに電子顕微鏡観察により明らかにした。さらにCMより発見していたNDIについても同様のメカニズムを介して、細胞死モードスイッチ作用を示すことを見出した。NDIはミクログリアにおいて細胞内[Ca^<2+>]i濃度の上昇を示し、このメカニズムにGi蛋白質とホスホリパーゼCが関与することが明らかとなった。ネクローシスについてその分子機構は殆ど明らかにされていないが、この細胞内ATPの減少を補う目的で培養液中のグルコースを増加させた時、偶然にもネクローシス抑制に加え、アポトーシス誘発が観察された。アポトーシスの誘導にはBaxの発現上昇に続く、ミトコンドリアからのチトクロームcの遊離を引き起こすメカニズムが明らかになり、このメカニズムにPKCが関与することも示唆された。そこで動物個体レベルでのモードスイッチを介した神経保護効果を解析するためマウス網膜虚血によって起きる神経細胞死の系を用いて検討した結果、グルコースの硝子体内投与により、虚血前投与だけではなく虚血後24時間後の投与によっても顕著な神経細胞死保護効果を有することが明らかになった。
二重交換相互作用に基づく異種金属一次元多核錯体での強磁性発現

異種金属一次元鎖錯体で強磁性を実現するために、第一遷移金属を白金でサンドイッチした三核錯体を原料に、一次元多核化を検討した。鉄を組み込んだ一次元鎖錯体は合成できなかったものの、その原因が三核錯体と二核二量体との平衡反応にあることを明らかにした。コバルトを用いて常磁性異種金属一次元鎖錯体の合成に成功し、異種金属結合を介して、コバルト間で反強磁性的相互作用することを見出した。また、銅を用いて、新規環状四核錯体および六核錯体を合成し、その諸物性を明らかにした。続いて、2と[Rh2(O2CCH3)4](酢酸ロジウム)を混合し、Pt-Fe-Pt-Rh2-Pt-Fe-Ptと並んだ一次元多核錯体の合成を試みた。溶媒はMeOH、EtOH、Me2CO、THF、MeCNとし、カウンターイオンとして、NaNO3、NaClO4、NaPF6、NaCF3CO2、NaCF3SO3を添加したが、希望の単結晶を得ることができていない。2と[Rh2(O2CCH3)4]を混合したMeOH溶液の経時変化を、ESRで追跡したところ、ESRシグナルが時間とともに減少した。また、溶液を蒸発すると1の単結晶が析出した。このことから、2に[Rh2(O2CCH3)4]を加えると、1とPt-Rh-Rh-Pt四核錯体が生成することがわかった。cis-[Pt(NH3)2(NHCOtBu)2]とFe(II)Cl2、もしくはFe(III)(ClO4)3から、白金-鉄多核錯体を確かに合成できていること、また、それらの諸物性を追跡し、多核錯体中の酸化状態とスピン状態を明らかにしている。また、[Rh2(O2CCH3)4]と混合すると、Pt-Rh結合が形成することがわかっている。しかし、Pt-Rh結合することで、Pt-Fe間が不安定となるので、反応条件の見直しが必要となっている。平成28年度は、以下の2つに関して実験を進めた。1. cis-[PtCl2(NCtBu)2]とtrans-[PtCl2(NCtBu)2]を合成し、CuCl2をMeOH中1:1で混合し、KOHを加えると、緑色結晶の1と青緑色結晶の2が析出した。単結晶X線構造解析の結果、1はpiamによりPtとCuがシス位で架橋され、複核化していた。さらに、-OCH3で架橋し、全体で環状四核構造を形成していた。一方、2では、PtとCuがpiamと-OCH3によって架橋され、Cu-Pt-Cuと三核化していた。さらに、Cuを-OCH3が架橋して,全体で環状六核構造を形成していた。1の300 KでのχMTは0.78 cm3molー1Kで、四核構造あたり2つの不対電子があることがわかった。この値は低温までほぼ一定で、10 K以下でわずかな減少がみられ、J = ー0.22 cmー1と、銅間で非常に弱い反強磁性的相互作用を示すことがわかった。一方、2では、300 KでのχMTは0.32 cm3molー1Kと、予想される六核構造あたり4つの不対電子よりも小さい値であった。χMTは100 Kまでゆるやかに減少し、50 K以下で急な減少がみられた。2中の銅は、隣接分子とアキシャル位で相互作用しており、これらを考慮したモデルでフィッティングすると、六核構造内の二核部位の銅間で、J = ー46 cmー1と、比較的強い反強磁性的相互作用を示すことがわかった。一昨年度までは、白金-鉄三核錯体を中心に合成を進めていたが、希釈溶媒中で三核構造を維持できず、分解することを昨年度見出した。そこで、鉄よりも原子番号が1つ上のコバルトを用いて、新たに合成検討をしたところ、白金-コバルト三核錯体を確かに合成できたこと、さらに、比較的低電位で準可逆な酸化還元波がみられたことから、目的達成に近づいたと考えている。また、白金-コバルト三核錯体と酢酸ロジウムを混合して、幾つかの一次元鎖錯体の合成にも成功している。2と[Rh2(O2CCH3)4]から1とPt-Rh-Rh-Pt四核錯体の反応が進行することがわかっている。2の酸化状態はPt(II)-Fe(III)-Pt(II)なので、2を1電子還元したPt(II)-Fe(II)-Pt(II)を単離し、[Rh2(O2CCH3)4]との一次元多核化をねらう。その際、合成を嫌気下でおこない、溶媒や温度、濃度、塩の添加を最適化する。また、1と[Rh2(O2CCH3)4]を多核化することもおこなう。

1と2中の配位子のNH3を、エチレンジアミン(en)に変えて、キレート配位による安定化を図る。また、架橋配位子のNHCOtBuをNHCOCH3にし、溶解度に関する検討もする。白金-コバルト三核錯体と酢酸ロジウムからなる一次元鎖錯体の、XPSと帯磁率等の物性測定をすることで、各金属の酸化状態とスピン状態を明らかにする。また、不対電子間の相互作用の強さを評価する。また、新規合成では、白金-コバルト三核錯体と[Ru2(O2CCH3)4](酢酸ルテニウム)、マンガンを用いた白金-マンガン三核錯体と、扱う金属を変えて一連の一次元鎖錯体を合成していく。金属錯体化学
糸球体腎炎における細胞外基質発現の動的調節機構の解析

腎および肺組織における硬化/線維化におけるHeat shock protein 47(HSP47)の役割について、実験モデルやヒト材料を用いて分子病理学的解析を行なった。老化モデル(Fischer344ラット)どゲンタマイシン腎障害のいずれも、硝子化糸球体と間質の線維化部において、HSP47の発現が強くなった。また、α-smooth muscle actin (SMA)は間質に強く発現し、vimentinは線維化を示す間質とその周囲の尿細管上皮に強く発現した。HSP47との二重染色では、HSP47発現細胞の局在は表現型転換細胞、即ち、SMC陽性の間質細胞やvimentin陽性の尿細管上皮細胞と一致していた。この結果より、老化モデルラットやゲンタマイシン腎障害の硬化/線維化過程においては、間質尿細管細胞の形質転換が惹起され、HSP47を発現し、線維化に関与すると考えられた(Intj.Exper,Pathol.79:125-162,1998;Cell Tissue Res.293:471 -478,1998)。ヒトの糖尿病性腎症とIgA腎症ではcollagenIIIとIVの増生はHAP47の発現に関連して出現していた。これはヒトの腎炎で初めHSP47の線維化機序における役割を明らかにした研究である(Nephron80:434-443,1998)。実験モデルやヒトの慢性線維性肺疾患を用いて、線維化におけるcollagen I,IIIの産生と沈着がHSP47の発現と関連していることを示し、肺の線維性病変におけるHSP47の関与を明らかにした(Mod.Pathol,11:1183-1188,1998)。各種の腎疾患の進行に糸球体硬化と間質の線維化は重大な役割を果たしているが、腎組織における硬化/線維化には多くの因子が関与している。その因子として新たに注目されているHeat shock protein 47(HSP47)の線維化機序における役割について、老化モデル(Fischer 344ラット)の腎変化とゲンタマイシン腎障害を用いて検討した。今回の結果より、老化モデルラットやゲンタマイシン腎障害の硬化/線維化過程においては、α-SMA陽性の間質細胞やvimentin陽性の尿細管上皮細胞の出現などの間質尿細管細胞の形質転換が惹起され、これらの細胞がHSP47を発現し、線維化に関与するすると考えられた。老化モデル(Fischer 344ラット)とゲンタマイシン腎障害のいずれも、硝子化系球体と間質の線維化分において、HSP47の発現が強くなった。また、α-smooth muscle actin(SMA)は間質に強く発現し、vimentinは線維化を示す間質とその周囲の尿細管上皮に強く発現した。

この結果より、老化モデルラットやゲンタマイシン腎障害の硬化/線維化過程においては、間質尿細管細胞の形質転換が惹起され、HSP47を発現し、線維化に関与すると考えられた(Int.J.Exper.Pathol.79:125-162,1998;Cell Tissue Res.293:471-478,1998).ヒトの糖尿病性腎症とIgA腎症ではcollagen IIIとIVの増生はHAP47の発現に関連して出現していた。これはヒトの腎炎で初めてHSP47の線維化機序における役割を明らかにした研究である(Nephron 80:434-443,1998)。また、collagen VIのヒトの慢性腎炎での細胞外基質としての意義や発現部位を明らかにした(Histochem.Cell Biol.111:1-9,1999)。実験モデルやヒトの慢性線維性肺疾患を用いて、線維化におけるcollagen I,IIIの産生と沈着がHSP47の発現と関連していることを示し、肺の線維性病変におけるHSP47の関与を明らかにした(Mod.Pathol.11:1183-1188,1998)。
生体内DNA組み替えの光制御技術の開発

テーマ)厳密制御Tet-Cre発現システムの構築複数のテーマを同時進行で進めた中で、本年度はこのテーマにおいて最も大きな成果を得ることができた。我々はすでにジフテリア毒素遺伝子において、2重制御系の有効性を確認している。転写制御のみや分解制御のみでは、dox非添加時においても毒素の発現がもれてしまっているため細胞は死滅するが、2重制御の場合にのみ、dox非添加時に細胞が生き残り、厳密な発現調節が実現できていることがわかる。そこで本研究ではこれをCreの発現調節に応用し、厳密な制御と高感度な発現誘導を試みた。昨年までに、二重制御でかつ、発現誘導時にも毒性を防ぐことができる新しい発現系の構築には成功したが、逆に誘導時に高発現を実現できるベクターは未完成である。光誘導によるdoxは低濃度になることが予想されるため、高感度発現系も必要である。そこで本年度にはこの発現系の構築を試みた。分解制御系に用いるタンパク質と転写調節に用いるタンパク質が相互作用していることによって、昨年度までのようなブレーキ機能が働いているため、これを排除し別々に働くようにすることによって、高感度誘導発現系を構築することを試みた。その結果、転写のみ、タンパク質分解のみ、ではそれぞれ10倍程度の誘導率しか得られないのに対して、新たに開発したシステムでは数十倍の誘導発現を実現できることが明らかとなった。これによりCreによる組換えを高感度に制御することが可能となった。テーマ1)厳密制御Tet-Cre発現システムの構簗すでにジフテリア毒素遺伝子において、2重制御系の有効性を確認している。転写制御のみや分解制御のみでは、dox非添加時においても毒素の発現がもれてしまっているため細胞は死滅するが、2重制御の場合にのみ、dox.非添加時に細胞が生き残り、厳密な発現調節が実現できていた。さらにこれに自己組み替えをも組み込んだ3重綱御系も構築した。3重制御システムとは、上述め2重制御系に加えて、Cre機能を部分阻害するアミノ酸配列をCreタンパク質のC末にloxPに挟んだ状態で、かつloxP部分も正しく翻訳されるように付加する。これによりたとえCre融合タンパク質の発現がモレたとしても、生合成されたタンパク質は充分に機能できずシャットオフされる。ここにdoxが存在すると、大量のCre融合タンパク質が産生されて組み替えが始まり、部分的な機能阻害配列はCre遺伝子上から除かれてしまうため、さらに完全にCreが機能することになり、ごく微量のdoxが短期間存在するだけで高感度にCreが機能する。これと合わせてモニタリング用ベクターも同時に開発し、同時に細胞に導入する組み合わせ解析法によって構築した発現系を用いて実際に詠魚の厳密さや、薬物濃度に対する定量生などについて詳細に検討した。その結果、当初の目的の通り、厳密かつ高感度に発現調節できるシステムを構築することに成功した。
天然放射能・特に隕石中の宇宙線生成放射能の測定

昨年度本研究費で改良した本館既設の質量分析計を用いて、E3に属する頑火輝石球粒隕石、やまと6901隕石と清鎮隕石中に存在する長寿命放射性核種、^<87>Rb,^<87>Srを測定した。隕石をその構成鉱物成分に分けて各成分中の主成分元素を定量すると共に、上記^<87>Srを質量分析したところ、両隕石とも、幾種類か存在する珪酸塩鉱物から抽出した上記核種はすべて2×10^9年という年代を示す直接上にくるのに対して、硫化鉱物から抽出したものは親核種である^<87>Rbが娘核種である^<87>Srに対して極端に少ない方向に直接から大きく外れること、これら各点のデ-タすべてを足し合わせたもの、隕石全体を分離することなく測定したものは、共に普通の球粒隕石の年代である4.5×10^9年を示す線上にくることを示した。現在、他の長寿命放射性核種対である^<147>Sm-^<143>Ndの測定を行い、両結果を合わせてこの隕石の成因に関する結論を出したいと考えている。1984年青森県に落下した青森隕石中の宇宙線生成放射性核種の測定は、当時まだ本館に低バックグラウンド放射能測定装置が設置されていなかったので、試料を理化学研究所に持ち込んで測定してもらった。その結果の一部は宇宙線生成ヘリウムやネオンなどの安定希ガスのデ-タと大きな不一致を示し、どうにも納得できなかった。そこで一昨年度本研究費で整備した微量放射能測定装置を用いて測定し直した。その結果上記不一致は解消されたので、現在研究報告をまとめているところである。これまで続けていた、1986年に香川県落下した国分寺市隕石中の宇宙線生成放射性核種の測定、及び山形大学の高岡宣雄教授と西ドイツマックスプランク研究所のL.Shultz教授に測定を依頼していた宇宙線生成希ガスの測定はすべて完了したので、青森隕石の報告書に引続き、報告書をまとめるために準備をしている。γ線検出器周辺よりの放射能及び宇宙線の進入を防護する設備を初期の目的通りに整えることが出来た.例えば101ー200kevに現れるバックグラウンド値は無防護では18,595カウントあったものを266カウントまで即ち始めの値の約1.5%に,また自然界に存在する^<40>Kの放射能からのバックグラウンドは無防護では355カウント,これまでの防護でも5ー10カウントあったものを1.3ー1.5カウントまで低くすることが出来た.これにより隕石中の天然放射能の測定等天然物質中の放射能をより正確に行うなこが出来るようになった.昭和61年夏に四国に落下した国分寺隕石中に宇宙線により生成した半減期5.5日の^<52>Mnから7×10^5年の^<26>Alまでの種々の寿命を持つ15個の放射性核種の測定を上記測定器を用いて行った.その結果この隕石は宇宙空間に存在していた間は直径25cm,重量の200kg以上もある大きな物体であったが,地球大気に突入し,大気中を進む間に大気に向かってきた全面はその衝突の衝撃,摩擦熱の為に消散してしまい,背面の一部約10kgのみが地表に到達したのではないかということが推論された.

このことからたとえ宇宙空間に存在している間に表面近くに存在していたと考えられる隕石を我々が手にいれてもこの隕石がもともと小さかったとか,この隕石は空気による摩耗を受けなかったと推論するのは早計であると断言できる.これらの結果については近々研究報告を然るベき学術雑誌に投稿する予定である.また上記の結論は更に宇宙線生成安定核種の測定及び隕石鉱物中に印された宇宙線による飛跡の程度を検出することにより確証できるものと考えている.本館に設置されているγ線測定装置と質量分析計に別々のデータ記録設備などを接続することができたので,それぞれに必要なプログラムを新しく作り,宇宙線生成放射性核種,隕石中の長寿命核種及びその娘核種,安定核種の測定が平行して行えるようになった.昨年度本研究費で整備したγ線測定器を用いて、昭和61年夏に四国に落下した国分寺隕石中に宇宙線により生成した比較的長寿の放射性核種の測定を続行した。そしてγ線測定器整備以前に測定したデータから得られた結果、この隕石は宇宙空間に存在していた間は直径25cm、重量200kg以上もある大きな物体であったが、地球大気に突入し、大気中を進む間に大気に向かってきた全面はその衝突の衝撃、摩擦熱の為に消散してしまい、背面の一部約10kgのみが地表に到達したのではないか。従ってこのことから、たとえ宇宙空間に存在している間に表面近くに存在していたと考えられる隕石を我々が手にいれても、この隕石がもともと小さかったとか、この隕石は空気による摩擦を受けなかったと推論するのは早計であるという推論の確証を行っている。この確証の為の方法としては、放射能測定以外に、この隕石中に宇宙線で生成された希ガスの測定を西ドイツマックスプランク研究所に以来して行った。また希ガス以外の宇宙線生成安定核種の測定も行い始めている。宇宙線生成放射性核種が壊変してできた安定核種を測定する為に、本年度は特に本館に設置されている質量分析計の整備を行った、本館に設置されている質量分析計は、本来有機試料用に設計されていたものを改造した非常に小型の機器である。これまではどちらかというと古典的な方法でデータをとっていたが、今回市販のパーソナルコンピューターの中に、質量分析計の磁気走査を自動的に制御できるようなインターフェイスを作って挿入し、ピークジャンピングにより測定できるようにした。また同時に、得られたデータも自動的に計算処理できるようなプログラムを作製した。この為、0.1%程度の精度で同位体比を測定できるよになった。現在これらの新設付加装置のテストが終っていよいよ本格的に宇宙線生成核種の測定を始めようとしているところである。昨年度本研究費で改円した本館既設の質量分析計を用いて、E3に属する頑火輝石球粒隕石、やまと6901隕石と清鎮隕石中に存在する長寿命放射性核種、^<87>Rbからβ壊変で生成した^<87>Srを測定した。隕石をその構成鉱物成分に分けて各成分中の主成分元素を定量すると共に、上記^<87>Rb、^<87>Srを質量分析したところ、両隕石とも、幾種類か存在する珪酸塩鉱物から抽出した上記核種のすべて2×10^9年という年代を示す直線上にくるのに対して、硫化鉱物から抽出したものは親核種である^<87>Rbが娘核種である^<87>Srに対して極端に少ない方向に直線から大きく少れること、これら各点のデ-タすべてを足し合わせたもの、隕石全体を分離することなく測定したものは、共に普通の球粒隕石の年代である4.5×10^9年を示す線上にくることを示した。現在、他の寿命放射性核種対である^<147>Sm-^<143>Ndの測定を行い、両結果を合わせてこの隕石の成因に関する結論を出したいと考えている。
19世紀ヨーロッパ自由主義勢力と議会制-オランダを中心に-

前年度までに、第一次世界大戦までに確立されたオランダ議院内閣制の特徴を、他の大陸ヨーロッパと比較しつつ明らかにしたが、今年度はその制度が第一次世界大戦後、すなわち戦間期にどのように機能し得たのかについて研究を行った。オランダ議院内閣制の特徴は、19世紀自由主義において是とされた政府と議会との相互自律制が、20世紀に入り、大衆組織政治が行われるようになっても形を変えながら継続していた点にある。このような制度は、政府-議会間の対立を招き、政治的不安定をもたらし得るが、戦間期のオランダでは、政権の継続期間は長かった。その理由は当時政権に就いていた宗派諸政党の組織構造にあった。宗派政党は、社会経済政策について多様な利益を包摂しており、議会を媒介として特定の社会経済政策を推進すると、党が分裂する危険性があった。そのため、党と議員団とは主として宗教的利益の擁護-戦間期に入ると、推進するというより既存の権利が侵害されないことに重点がおかれた-を担い、その一方で経済利益は省庁の審議会や、閣僚レベルが行いそれに干渉しないことで、党の一体性を保っていたのである。2010年6月に日本比較政治学会大会で「戦間期オランダにおける政党と議会」と題し、政府と議会との関係が戦間期を通じて次第に政府優位になっていく過程を報告した。その後、8月から2011年3月までアムステルダム大学人文学部に滞在し、現地の研究者との交流、史料の収集をする機会を得た。滞蘭中の成果は、2011年6月に開催される日本比較政治学会大会で報告される予定である。本年度は、修士論文の加筆修正を行い、岸本由子「オランダにおける議院内閣制の成立」『日蘭学会会誌』第33巻1号を公表した。本稿において、オランダの事例を中心に、ヨーロッパの比較の観点から、二元的議会制から議院内閣制への移行を検討し、その中で自由主義勢力が果たした、エリート主義的な側面を明るみにした。すなわち、自由主義勢力は、君主の持つ執行権を容認し、あるいは維持すべきであると積極的にとらえていたのであり、時には議院内閣制化を抑制する働きも持ったのである。その後の研究の進捗状況としては、19世紀自由主義勢力の影響のもとその基礎が構築された現在のオランダの政治制度が持つ非議院内閣制的な側面、すなわち、執行府と立法府とが事実上それぞれ自律的に行動するという側面(二元主義的政治慣行)についての研究を行っている。その成果は、2009年9月に公表される予定である。本年度はそれに加えて、日本の自由主義の論客であった吉野作造が、第一次世界大戦中に東京大学法学部で行った講義を、当時の学生、赤松克麿らのノートから翻刻し、検討する研究会に参加した。その成果は『国家学会雑誌』に「吉野作造講義録」として連載中である。吉野作造が、その政治論説の基礎として、フランス革命以来のヨーロッパの政治的展開に肉薄し、政治史的な検討を重ねた様子を詳細に知ることができたのは、日本におけるヨーロッパ政治史研究の源流をたどる上で貴重であった。また、さまざまな年度の講義録が存在することによって、吉野作造がさまざまな具体的事実の解釈につき、重点が変化していく跡をたどることもできる。これらの成果、特に後者に関しては、2009年6月に『国家学会雑誌』の解題で公表される予定である。今年度は、第一次世界大戦までのオランダの議院内閣制化について研究した。作内はオランダ型議院内閣制の特徴を、政府と議会とが相互に自律的である点(二元主義的政治慣行(dualisme))と捉え、その形成過程を明らかにした。二元主義的政治慣行は、議院内閣制の前段階である二元的議会制、すなわち君主と議会とがそれぞれ正統性を持ち、並び立っている議会制の特徴が、議院内閣制下においても残存することによって成立した。オランダにおいて相互自律的な特徴が残った理由は2つある。第一に、君主権が弱く、君主-議会間に深刻な対立のないまま早期に(1868年)議院内閣制に移行したことである。第二に、大衆組織化が進み、民衆の政治参加が活発化した時期に、利益団体が大衆政党組織形成に関与しなかったことである。利益団体が政党組織に組み込まれた場合、その政策形成は政党組織に一元化され、閣僚と議員とを拘束し、政府と議会与党とが一体化する。政治学界では近年、首相の権限の増大を、リーダーシップの発露として歓迎する意見もある反面、その圧倒的権力を危惧する主張も多い。これらの議論に対して、議会が執行府とどのようにバランスをとっていくのか、という視座、さらに言えば立法府の執行府に対する復権とも言うべき視座を与えることができる。来年度は戦間期にこのような相互自律的な議院内閣制がどのように運用されてきたかを検討する予定である。そのため、2月に2週間ほど短期渡蘭し、デン・ハーグ国立文書館、ナイメヘンカトリック文書センターで史料収集を行った。

オランダ議院内閣制の特徴は、19世紀自由主義において是とされた政府と議会との相互自律制が、20世紀に入り、大衆組織政治が行われるようになっても形を変えながら継続していた点にある。このような制度は、政府-議会間の対立を招き、政治的不安定をもたらし得るが、戦間期のオランダでは、政権の継続期間は長かった。その理由は当時政権に就いていた宗派諸政党の組織構造にあった。宗派政党は、社会経済政策について多様な利益を包摂しており、議会を媒介として特定の社会経済政策を推進すると、党が分裂する危険性があった。そのため、党と議員団とは主として宗教的利益の擁護-戦間期に入ると、推進するというより既存の権利が侵害されないことに重点がおかれた-を担い、その一方で経済利益は省庁の審議会や、閣僚レベルが行いそれに干渉しないことで、党の一体性を保っていたのである。2010年6月に日本比較政治学会大会で「戦間期オランダにおける政党と議会」と題し、政府と議会との関係が戦間期を通じて次第に政府優位になっていく過程を報告した。その後、8月から2011年3月までアムステルダム大学人文学部に滞在し、現地の研究者との交流、史料の収集をする機会を得た。滞蘭中の成果は、2011年6月に開催される日本比較政治学会大会で報告される予定である。
ダリエー病SERCA2b変異遺伝子導入トランスジェニックマウスの解析

ダリエー病は常染色体優性遺伝の角化異常症で、原因遺伝子は染色体12q24.1領域のATP2A2で本体は小胞体カルシウムポンプ(SERCA2b)である。多くのダリエー病患者の解析により、われわれの発見したものも含め現在までに多くの遺伝子変異が同定されている。われわれは、告のあるSERCA2b点突然変異51種類のmutantを全て作成し、Cosl細胞に導入する系を用いてカルシウムポンプ機能を解析し、その異常がいくつかの群に分けられることを過去に見出している(Sato.Miyauchi Iizuka etal: J Biol Chem 2004;Miyauchi, Daiho, Iizuka, et al:J Biol Chem 2006)。この中で、L321F変異、I274V変異、M719I変異はわれわれが日本人家系から見出したもので、各々、単純なhaploinsufficiencyではなく、カルシウムポンプにおけるkinetics上の異常を示す。本年度の研究においてはL321F変異導入transgenic mouseの解析を行った。本変異は、endplasmic reticulum(ER)のカルシウムポンプ機能そのものには異常はないが、ポンプに対するfeedback inhibitionがかからないため、ER内のカルシウム濃度が異常に高く設定されてしまうユニークな変異で、このためER内腔の機能のみならず、細胞質内カルシウム濃度にも結果的に異常が引き起こされ種々の変動が引き起こされる。この変異は、原理的にカルシウムポンプの異常としてはassay系で検出されないため、遺伝子変異があるにもかかわらず、ポンプ機能が一見保持されているように見えてしまい、さらに何らかの負荷をかけたときに初めて異常が顕在化してくるという特性が予想され、タリエー病の病態を考える上で、単なるhaploinsufficiencyとは異なる機構を説明するプロトタイプと思われる。genomicに導入したL321F transgenic mouseにおいてはっきりした表現形の異常は、温渡負荷、運動負荷、さらにテープストリッピングによる創傷負荷では確認されなかったが、本transgenic mouse由来の細胞を用いたポンプの機能解析では、予想通り、feedback inhibitionの異常が確認された。また作成したtransg enic mouseの表皮細胞につきカルシウムシフトによる角化様式を検討したところ、Transgeni c mouse由来の表皮細胞は、0.05mMから0.1mM,さらに1mMへの段階的カルシウムシフトにより;正常表皮と比べ、早期に角化マーカーを発現することを見出した。このことは小胞体カルシウムポンプの異常が角化に変動を与えることを示しているが、in vivoにおける異常が見出されないことは、少なくともマウスにおいては、別の代償機構が存在することを示唆している。ダリエー病は小胞体カルシウムポンプ遺伝子ATP2A2の変異により発症する角化異常症である。ATP2A2の転写産物であるSERCA2b(sarcoendoplasmic reticulum calcium-ATPase type 2b)はATPを加水分解し、カルシウムを細胞質から小胞体内腔へ輸送する。