hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
口臭原因物質の病原性の解明と新しい治療法の開発

これらの結果から、S.anginosusはtranssulfurationおよびdirect sulfhydrylation経路によりホモシステインの合成をすることが示唆された。現在これらの酵素を失活した変異株を作製し、硫化水素の病原性の解明を進めつつある。本研究では、口臭原因物質の一つである揮発性硫化物の病原性の解明と新しい治療法の開発を目指して、まず口腔内細菌の硫化水素産性能について調べた。その結果、口腔内常在菌であるStreptococcus anginosusは、歯周病細菌と同等の高い硫化水素産生能を持つことが明らかとなった。またこのグループに属する他の2菌種(S.intermedius, S.constellatus)も、同様に高い硫化水素産生能を持つことが認められた。このS.anginosusグループの菌は膿瘍から高頻度に回収されることから、化膿性炎症病巣において生体の防御機構に抵抗する因子を持っていることが予測された。そこで今年度は同菌の膿瘍形成能を調べるためのマウス実験モデルを確立した。プラークそのものをマウス皮下に注入して経日的にその膿瘍形成状態を調べ、膿瘍中に含まれる菌種を調べたところ、S.anginosusグループに属する3菌種が高頻度に回収された。またこのグループに属するそれぞれの菌単独でも高い膿瘍形成能が認められた。生体防御因子との反応を調べるためヒト好中球による貪食のされ方を他の菌種と比較したところ、S.anginosusグループの菌は好中球に対して高い抵抗性を示すことが認められた。この抵抗性と硫化水素産生能との関係を調べるため、硫化水素産生酵素であるL-システイン分解酵素(βC-S lyase)の遺伝子を欠失した変異株を作製して野生株との比較を行う試みを継続している。一方、歯周病細菌の一つであるPorphyromonas gingivalisのメチルメルカプタン産生能と歯周病の程度の相関を調べる目的で、歯周ポケット内の同菌の数を定量する方法をリアルタイムPCRを用いて確立した。その結果、同菌の数と歯周状態に高い相関があることが認められメチルメルカプタンの為害性の関与が示唆された。
在宅ケアにおけるテレケアのアウトカム評価と効果効率的な利用法

本研究の目的はFOMAによるテレビ電話を用いて利用効果がでやすい在宅ケアニーズ・利用にあたってのコミュニケーション方法・指導やケア技術内容、を高齢者側とケア提供者の調査により明らかにした。テレケアの有用性評価は37ニーズ項目中27項目にケア効果がみられた。医療処置を多く要する利用者ほど、テレケアの利用によりケアニーズが「改善」あるいは「解決」に向かう傾向がみられた。また本人からは、テレケア機器があることで「訪問看護師とつながっている感じがする」「安心感がある」などの意見が多く聞かれた。また利用者よりもさらに看護師の方がテレケアに対する有用性の評価が高かった。機器を利用することによるケア項目別の有用性の評価で本人が高い上位項目は、「早期発見」「コミュニケーション」「観察」であった。看護師では、「相談」「観察」「早期発見」であった。医療依存度の高い利用者ほど両者ともに「早期発見」「観察」の項目が高かった。FOMAの利用は家族介護者よりも看護師において有効度と満足度がより高い変化を示した。FOMAを用いることを仮定した意識調査では本人の期待値が看護師より高かったが、実際利用するとその逆の傾向が見られた。家族介護者はFOMAの画面が小さすぎて見にくいとの声もあり、高齢者には画面拡大により効果・満足度が高められることが示唆された。本年度研究の目的は、東京都内の訪問看護ステーションでテレケア機器を用いて実際にテレケアを行い、利用効果がでやすい対象者とニーズ・利用にあたってのコミュニケーション方法・ケア上の観察点・指導やケア技術内容、を利用者側とケア提供者・機関側からの調査により明らかにする。またさらに利用者・サービス提供者と機関にとっての機器利用効果を分析し・テレケアと訪問によるケアの相乗的な効果を導くにはどのようにすべきか、今後わが国での普及が期待されるテレケアの効果効率的利用方法について提言することである。東京都内のH訪問看護ステーションを利用している利用者(家族介護者)4名と、利用者を担当している訪間看護師4名を対象とし、NTTドコモのFOMA(P2101V)を両者に使用してもらい、調査を実施した。その結果、機器の有用性の総合評価(100点満点)では、利用者(家族介護者)は、平均値79.625、看護師は平均値69.625で、利用者の方がテレケアに対する有用性の評価が高いことがわかった。機器利用による利用者の効果は、37項目のケアニーズ中、平均26.5項目のケアニーズがあり、ニーズ解決状況は「解決」「改善」がほとんどであった。利用者4名中3名は医療的処置を多く要する対象者であった。1名は医療処置がほとんどなく、他動運動によるリハビリを希望しておりその利用者については「維持」が多くみられた。病状変動があり、医療処置を多く要する利用者ほど、テレケアの利用によりケアニーズが「改善」あるいは「解決」に向かう傾向がみられた。また利用者からは、テレケア機器があることで「訪問看護師とつながっている感じがする」「安心感がある」などの意見が多く聞かれた。今後は対象者を増やし、サービス提供者と機関にとっての効果も分析していく。また、現在諸外国との国際比較調査も進行中である。本研究の目的は、関東地区内の訪問看護ステーションでテレケア機器を用いて実際にテレケアを行い、機器の利用が有効な利用対象者とニーズをさらに明確化し、機器の使用におけるコミュニケーション方法、ケア上の観察点、指導や心身のケア技術を、利用者側とケア提供者からの調査により明らかにすることを目的とした。また前年度の調査結果を踏まえ、医療依存度の高い利用者にテレケア機器を用い利用者にとっての効果、サービス提供者と機関にとっての効果を分析した。結果は、関東地区内の5機関の訪問看護ステーションにおいて利用者(家族介護者)と、利用者を担当している訪間看護師11名を対象とし、テレケア機器はNTTドコモのFOMA(P2101V)を両者に2ヶ月間使用してもらった。

テレケア機器の有用性の総合評価(100点満点)では、利用者(家族介護者)は、平均値60.55で、看護師は平均値69.59であり、看護師の方がテレケアに対する有用性の評価が高かった。機器を利用することによるケア項目別の有用性の評価(有用=1、有用でない=0)を大項目別に平均値でみると、利用者で平均値の高い上位項目は、「早期発見」「コミュニケーション」「観察」であった。看護師では、「相談」「観察」「早期発見」であった。医療依存度の高い利用者ほど両者ともに「早期発見」「観察」の項目が高いことが理解できる。16年度はさらに対象者を増やし、また現在調査進行中の諸外国との国際比較を加え、テレケア評価と利用方法について提言できるようにする予定である。研究の目的は、東京都内の訪問看護ステーションでテレケア機器を用いて実際にテレケアを行い、利用効果がでやすい対象者とニーズ・利用にあたってのコミュニケーション方法・ケア上の観察点・指導やケア技術内容、を利用者側とケア提供者・機関側からの調査により明らかにする。またさらに利用者・サービス提供者と機関にとっての機器利用効果を評価し、テレケアと訪問によるケアの相乗的な効果を導くにはどのようにすべきか、今後わが国での普及が期待されるテレケアの効果効率的利用方法について提言することである。16年度研究はテレビ電話による看護の効果と利用可能性について検討したものである。平成16年度は研究成果は、テレビ電話FOMAを用いて、この機器の2ヶ月間利用の有用性を評価した。対象は高齢者の家族介護者とし、受持看護師と対応させて、評価を行った。ここではAHPモデルによる在宅テレナーシングの効果変化を測定した。その結果、FOMAの利用は家族介護者よりも看護師において有効度と満足度がより高い変化を示した。FOMAを用いることを仮定した意識調査では利用者の期待値が看護師より高かったが、実際利用するとその逆の傾向が見られた。家族介護者はFOMAの画面が小さすぎて見にくいとの声もあり、高齢者には画面拡大により効果・満足度が高められると考えられる。しかし、サービス利用の家族介護者はより長く継続的に3ヶ月FOMAを利用した者はより効果と満足度が高いことが明らかになった。FOMAは本研究を開始した14年度はまだ一般化されていなかったが、16年度には拡大しつつあり、在宅ケア用として、日常的に使用できる可能性が大きいことが示唆された。そこで看護や介護用としては画面サイズとカラーを含めた画像の鮮明さを研究することが必要である。
集合論の証明論的研究

主として集合論の公理系を証明論的に研究した。集合論は数学がよって立つ基盤であり、そこでの証明を何回、どのような操作を繰り返して分析できるのかを考察した。集合の公理とは集合に関して正しいと現在考えられている命題の集まりを指す。証明は集合論に限らず、数学では欠くことのできない行為である。そのような数学での基礎的な対象について知見を深めた。従来の帰納的巨大順序数の公理系の帰納的順序数による証明論的研究に含まれる技法と構成方法を精査し、それらが当該の帰納的巨大順序数がそれの帰納的類似物たる巨大基数の証明論的解析に転用できることを、スコーレム関数を証明図の解析と順序数の表示の双方に導入することで示していく。これは、対象とする巨大基数が大きくなればなるほど技術的に困難になるであろうが、帰納的巨大順序数の公理系の帰納的順序数による証明論的研究における経験から考えて乗り越えることができない障壁ではない。更に、構成可能性公理V=Lと矛盾する巨大基数(例:可測基数)へと研究対象を広げていく。本年度は、先ず、証明の長さについての研究を行った。ひとつには、計算量理論での並列計算での時間量が入力の長さの対数で抑えられるクラスである$NC^{1}$、およびそれに対応する新井による限定算術AID、そして命題論理の体系Fregesystemの関係がS.Cook, S.Buss,新井らにより知られていた。集合のtraceに関するBollob\'{a}sの定理がFrege systemで多項式の長さで証明できるかという未解決問題を野崎、新井紀子とともに肯定的に解決した。ふたつめは、述語論理での証明の長さに関するもので、カット消去による証明によりsuper-exponentialな上界が知られていたいくつかの結果について、その上界が本質的に下げることができないことを示した。具体的には、2階イプシロン計算、2階可述的論理計算、不動点論理によるそれぞれの1階述語論理上のspeed-upsである。これらの結果は、主に集合に関する定理の証明論的研究に属する。つぎに行った研究は、集合論の証明論的研究である。これは例えば、Zermelo-Fraenkelの集合論からベキ集合の公理を取り除いた公理系において証明できる$\Pi_{2}$-論理式の限界を決めるもので、手法としては、無限公理付きのKripke-Platek集合論の証明論にSkolem関数を導入して得られた。強い集合論の証明論的研究としては、初めての成果であり、当研究課題の本丸の一部が達成されたことになる。ひとつめの証明の長さに関する成果は、ふたつの論文にまとめて発表し、ふたつめの集合論の証明論的研究は、金沢で行われた国際研究集会において講演により発表し、現在、論文を準備中である。帰納的マーロ作用素の繰り返しによって反映的順序数の集合論の証明論的強さが近似できることを示した。証明は、証明論的な手法(カット消去)と自分でつくった証明論的順序数の体系の整礎性の当該の集合論内部での実行による。例えば弱コンパクト基数の帰納的な類似物であるところの$\Pi_{3}$-反映的順序数の集合論を帰納的マーロ作用素の繰り返しで近似するには自然数上の$\Sigma_{1}$で定義される整礎的関係に沿って帰納的マーロ作用素を繰り返すことが必要かつ十分である。また、$\Pi_{4}$-反映的順序数については、帰納的マーロ作用素を繰り返すべき順序は自然数上のふたつの整礎的順序によって定まるベキの順序になる。このベキを取る回数及び自然数上の整礎的順序の個数が$\Pi_{2+n}$-反映的順序数なら$n$個必要になる。こうして反映的順序数の集合論を証明論的に帰納的マーロ作用素の繰り返しで近似するには、1階の自然数論の証明論において順序数構造$\varepsilon_{0}$が現れた(G.Gentzen)ように、同様のベキの繰り返し構造が出現することを突き止めた。さらに直観主義論理に基づくある自然数上の不動点に関する公理系がある範囲の論理式に関して直観主義算術の保存拡大であることを、G.Mintsによるカット消去の本質が整礎的木のKleene-Brouwer順序に沿って行われることを用いて示した。また証明論的順序数が分かっている公理系に関して、そこで$\Delta^{0}_{2}$であることが証明できるのは、その集合がErshov階層の証明論的順序数以下のレヴェルに属す事が証明できることと同等であることを示した。これによって当該の自然数上の帰納的順序数体系が$\Pi_{n+1}$-reflecting ordinalsの集合論の証明論に必要でもあることが示された。後者の$\Pi_{n+1}$-reflecting ordinalsの集合論での証明は、$\Pi_{i+1}

$-reflectingであれば、$\Pi_{i}$-recursively Mahlo operationsが超限的に繰り返せるという事実、そしてこれから$\Pi_{n}$-reflbctingであれば、そこで$\Pi{2}$-recursively Mahlo operationsがある高さのtower上の順序に沿って繰り返せることによる。順序そのものは$\Sigma_{1}$で定義されるが、reflecting ordinalsではこれが集合ではなくクラスのなってしまう。さらに直観主義自然数論上にあるかたちの正論理式により定義される不動点の存在を許す公理系がある種の論理式に対しては直観主義自然数論と証明可能性において同値である、すなわち保存拡大になることを示した。証明はカット消去によるが、その証明はKleene-Brouwer順序に沿った帰納伝によった。PLS(Polynomial Local Search)を拡張したnested PLSというクラスを導入し、nested PLSが有界算術$T^{2}_{2}$での証明つき計算可能関数のクラスと一致することを示した。PLSはS, Bussらにより$T^{1}_{2}$に対応することが示されていた。またepsilon processesの長さの限界を正確に超限帰納法による計算($\alpha$-recursion)によって与えた。次にintuitionistic logicでのstrictly positive formulasのcut消去は指数関数による証明の長さの増大しかもたらさないことを示し、これによりstrictly positive operatorsによるintuitionistic logicに基づく不動点理論がintuitionisticarithmeticの保存拡大であることを証明した。Intuitionistic logicに基づく不動点理論に関する従来知られていた証明論的諸結果すべてを包含するものである。さらに$\Delta∧{0}_{2}$でああることが証明できる集合をErshov hierarchyのどこに位置するかを、その証明が形式化できる公理系によって分類した。これは関数の収束性がある順序数からの下降列の非存在から導かれるということである。また、その多くの部分が未だ出版されていない順序数論の証明論の概略と近況を述べた。証明論的順序数が決定できているすべての公理系に対して、そこでDelta-0-2であることが証明できるような自然数の部分集合はその証明論的順序数の弱下降列の安定性により収束が証明できること、逆にそのようにして収束が証明できる列の極限となっている集合は当該の公理系でDelta-0-2であることが証明できることを示した。また構成可能公理と矛盾しない集合論の公理系は順序数の公理系に埋め込めるので、順序数の公理系を証明論的に解析してその証明論的限界を確定する「順序数の証明論」の現時点での概要を公表した。さらに集合論ZFで存在が証明できる可算順序数の限界を明らかにした。これはKPiの証明論のZF版である。Skolem関数について閉じているようにすることで正則順序数をcollapseしてZFの証明論的限界を明らかにした。
溶接部形成過程でのナノオキサイドメタラジーの確立

溶接金属組織の微細化過程を、最先端のその場観察技術等を利用して明確化することにより、優れた性質をもった材料を開発する指導原理を提案し、高強度溶接構造物の製造技術研究に寄与する。溶接熱サイクルに沿って、溶湯、凝固、固相変態をそれぞれ解析対象として、粒子凝集・分散挙動の可視化、溶融池シミュレーションモデルの開発、凝固組織中の粒子分散挙動解析、固相変態機構の解明等に取り組み、組織形成過程を系統的に研究・総括することで、ナノオキサイドメタラジー技術を確立した。本来不純物とされるナノサイズの酸化物を添加した際の溶接金属組織の微細化過程を、最先端のその場観察技術等を利用して明確化することにより、レアアース等の資源に頼らずに優れた性質をもった材料を開発する指導原理を提案し、高強度溶接構造物の製造技術研究に寄与するのが本研究の目的である。溶接熱サイクルに沿って、溶湯、凝固、固相変態をそれぞれ解析対象として、粒子凝集・分散挙動の可視化、溶融池シミュレーションモデルの開発、凝固組織中の粒子分散挙動解析、固相変態機構の解明等に取り組み、組織形成過程を系統的に研究・総括することで、ナノオキサイドメタラジー技術を確立する。平成23年度は、まず透過型三次元可視化システムを用いて溶湯中のナノ粒子の分散挙動可視化を試みた。しかし、粒子が微細すぎて本装置では観察分解能が不足であることが判明した。そこで、溶接中に溶融スズを注ぎ、溶融池を凍結し、凍結された溶融池からFIBにより薄膜を作製し、ナノ粒子の凝集・分散状態を解析した。その結果に基づいて介在物の浮上による消滅、介在物同士の衝突による凝集機構を考察した。介在物の浮上速度、溶接プロセスによる乱流、ファンデルワールス引力は変化させることができない物性値であるが、界面の濡れ性は添加元素によって左右される値であり、介在物を微細に分散させるためにはこれらの影響を理解する必要があると考えられた。さらに、新規導入したブルーレーザ顕微鏡を用いて、介在物を核とした微細粒アシキュラーフェライト生成挙動を観察する条件を確立した。今後、固相変態時の結晶学的解析を進め、生成メカニズムを検討する。ナノサイズの酸化物を添加した際の溶接金属組織の微細化過程を、最先端のその場観察技術等を利用して明確化することにより、レアアース等の資源に頼らずに優れた性質をもった材料を開発する指導原理を提案し、高強度溶接構造物の製造技術研究に寄与するのが本研究の目的である。平成23年度は、溶接中に溶融池を凍結し、凍結された溶融池からFIBにより薄膜を作製し、ナノ粒子の凝集・分散状態を解析した。平成24年度は、レーザ溶融池のその場観察を行い、介在物の浮上による消滅、介在物同士の衝突による凝集機構を考察した。また、レーザ顕微鏡を用いた微細粒アシキュラーフェライト生成挙動の観察は計画通り進展した。さらに、介在物と微細粒アシキュラーフェライト間の結晶方位関係を検討し、界面エネルギーの効果を考察した。平成25年度は大型放射光施設(SPring-8)からの高輝度単色X線を利用して、試験片に対し上面及び側面からファイバーレーザーを照射し、形成した溶融池内部対流挙動の直接観察により過渡特性を評価した。さらに溶融凝固から固相変態にいたるミクロ組織変化をレーザ顕微鏡により観察し、組織形成メカニズムを提案した。これらの成果を国内および国際会議で発表するとともに学術論文として発表した。

しかし、粒子が微細すぎて本装置では観察分解能が不足であることが判明した。そこで、溶接中に溶融池を凍結し、凍結された溶融池からFIBにより薄膜を作製し、ナノ粒子の凝集・分散状態を解析した。平成24年度は、レーザ溶融池のその場観察を行い、介在物の浮上による消滅、介在物同士の衝突による凝集機構を考察した。介在物の浮上速度、溶接プロセスによる乱流、ファンデルワールス引力は変化させることができない物性値であるが、界面の濡れ性は添加元素によって左右される値であり、介在物を微細に分散させるためにはこれらの影響を理解する必要があると考えられた。また、レーザ顕微鏡を用いた微細粒アシキュラーフェライト生成挙動の観察は計画通り進展した。さらに、介在物と微細粒アシキュラーフェライト間の結晶方位関係を検討し、界面エネルギーの効果を考察した。透過型三次元可視化システムによる観察は出来なかったものの、凍結された溶融池からのナノ粒子の凝集・分散状態の解析、新規導入したブルーレーザ顕微鏡を用いた微細粒アシキュラーフェライト生成挙動の観察は計画通り進展した。25年度が最終年度であるため、記入しない。レーザ溶融池のその場観察を行い、介在物の浮上による消滅、介在物同士の衝突による凝集機構を観察することに成功した。これらの成果を査読付論文8件ならびに17件の学会発表として公表した。次年度は液相/固相間やδ/γ変態などのメカニズムやカイネティックスを検討する。導入した顕微鏡システムの加熱炉によりオーステナイト域まで逆変態させ、その後溶接中の冷却速度を再現して組織形成過程を直接観察する。逆変態時のオーステナイト粒粗大化抑制(ピン止め)効果と冷却時のフェライト粒の生成挙動の把握を行う。異相界面の解析をと組織形成のシミュレーション手法の構築を推進する。これらにより組織形成過程を総括的に理解し、ナノオキサイドメタラジー技術の確立を図る。次年度は、介在物を核とした微細粒アシキュラーフェライト生成挙動を観察する条件をふまえて、固相変態時の結晶学的解析を進め、生成メカニズムを検討する。また、液相/固相間やδ/γ変態などのメカニズムやカイネティックスを検討する。溶融状態を凍結することによるオキサイド組成変化状況の観察や、導入した顕微鏡システムの加熱炉によりオーステナイト域まで逆変態させ、その後溶接中の冷却速度を再現して組織形成過程を直接観察する。異相界面の解析をと組織形成のシミュレーション手法の構築からナノオキサイドメタラジー技術の確立を目指す。
遺伝子発現プロフィルを指標にしたリンパ節形成機構の解析

【1】MAdCAM-1^+HEVの精製および3'末端特異的cDNAライブラリの作製と塩基配列の決定酵素消化により得たマウスリンパ節ストロマ細胞画分から、抗MAdCAM-1抗体(MECA-367)を用いた磁気ビーズ法により約90%の純度でHEV細胞を精製した。3′末端特異的cDNAライブラリを作製し、無作為に選択した2,101クロンの塩基配列を決定し、塩基配列の相互比較と出現頻度解析から遺伝子発現プロフィルを得た。これらのクロンは1,304種類の遺伝子に分類され、このうち926種が新規遺伝子であることが示された。【2】MAdCAM-1^+HEV特異的新規遺伝子の探索上記の遺伝子発現プロフィルとCD31^+血管内皮細胞やCD4^+T細胞およびB220^+B細胞などの遺伝子発現プロフィルとの比較を通じて、MAdCAM-1^+ HEVに特異的に発現する411種の遺伝子を同定した。データベース検索の結果、このうち311種は新規遺伝子であった。dbESTおよびTIGRデータベースを用いた5′端配列の取得を通じて、MUC18やTGFβreceptorに関連する分子群を見い出しつつある。これらについては別に作製したcDNAライブラリを用いて、全長を含むcDNAクローンの単離を試みている。リンパ組織の発生に関わる遺伝子を同定することを目的とし、本年度はリンパ節ストロマ細胞のうちリンパ球を選択的に結合し、血管系からリンパ節へ移行させるHigh Endothelial Venule(HEV)に焦点をしぼり、その形質を遺伝子発現パターンとして把握することを試みた。【1】MECA-79^+HEVの精製および3'末端特異的cDNAライブラリの作製と塩基配列の決定酵素消化により得たマウスリンパ節ストロマ細胞画分から、末梢リンパ節HEV特異的抗体MECA-79を用いた磁気ビーズ法により約90%の純度でHEV細胞を精製し、mRNAを調整した。Qkuboらの方法に準じて3'末端特異的cDNAライブラリを作製し、1,658クロンの塩基配列を無作為に決定した。塩基配列の相互比較と出現頻度解析から遺伝子発現プロフィルを得た。1,658クロンは763種類の遺伝子に分類され、このうち455種が新規遺伝子であることが示された。【2】HEV特異的遺伝子の探索上記の遺伝子発現プロフィルとCD31^+血管内皮細胞やCD4^+T細胞およびB220^+B細胞などの遺伝子発現プロフィルとの比較を通じて、MECA-79^+HEVに特異的に発現する215種の遺伝子を同定した。データベース検索の結果、このうち171種は新規遺伝子であった。また、HEV特異的に発現する既知遺伝子には細胞の接着や運動および炎症に関連した分子群が見い出された。新規分子についてはdbESTおよびTIGRのデータベース検索を通じて、5'端配列の取得を試みており、von Willebrand factorやtype XV collagenなどに関連する分子群を見い出しつつある。
キノコによる急性脳症発症の分子機構解明

我々は「スギヒラタケによる急性脳症は,キノコ中の高分子2成分(PPLとB3)複合体がプロテアーゼ活性を示し,血液脳関門(BBB)を破壊した後,低分子毒プレウロサイベルアジリジン(PA)によって発症する」という仮説をもつ。この仮説のもとに,以下の結果を得た。1)PAはB3とPPL共存下ではその分解が抑制される。2)プレウロサイベルアジリジンはオリゴデンドロサイトに特異的に細胞毒性を示す。3)スギヒラタケゲノムデータベースの構築した。4)活性型recombinant PPL/recombinantB3発現系を構築した。5) rB3とrPPL複合体のプロテアーゼ活性を確認し,BBBを破壊する。2013年度は,前述した目的を達成するために,以下の研究を行った。1)プレウロサイベルアジリジンの合成化学的アプローチ:プレウロサイベルアジリジンを大量合成し,各実験に供給した。また。体内動態あるいは脳中の作用部位を知るために,蛍光プローブを合成を試みた。2)プレウロサイベルアジリジンのオリゴデンドロサイト特異的細胞毒性の機構解明:初代培養系を用い,プレウロサイベルアジリジンのオリゴデンドロサイト特異的毒性について確認を行った。またオリゴデンドロサイト特異的毒性の機構は明らかにされていないが,プレウロサイベルアジリジンのメチルエステルは毒性がないことに着目し,有機アニオン輸送体の細胞毒性における作用について検討を行った。3)スギヒラタケのゲノムデータベースを構築:次世代シークエンサーシステムを用いて,スギヒラタケのゲノムデータベースを構築し論文にまとめた。4)活性型recombinant PPL発現系の構築:レクチン活性及びB3との複合体形成によりプロテアーゼ活性を示すrPPL発現系の構築を行った。宿主には担子菌Phanerochaete sordida YK-624株を用い,宿主由来のmanganese peroxidaseとの融合タンパク質としての発現を試み,さらに,細胞外分泌型シグナルペプチドを付加し,細胞外に融合タンパク質として分泌させる系を構築した。この結果は論文にまとめた。研究代表者は,スギヒラタケによる急性脳症の発症機構に関する以下の仮説をもつ:「スギヒラタケ中の高分子2成分が複合体を形成することによってプロテアーゼ活性が現れ,そのプロテアーゼの作用によって血液脳関門が破壊される。そして,不安定性ゆえに単離はできなかったが合成化学的にこのキノコ中にその存在を証明した低分子毒プレウロサイベルアジリジンによってこの急性脳症に特有な脱随病変が惹起された」。また,この複合体のプロテアーゼ活性は全く基質特異性をもたないというこれまでに無い性質をもつ。この基質非特異性の発現機構も明らかにする。2012年度は,前述した目的を達成するために,以下の研究を行った。1)プレウロサイベルアジリジンは徐々に分解する。そこで様々な条件下(単独,B3共存下,PPL共存下,B3とPPL共存下,様々なpH下など)でのプレウロサイベルアジリジンの安定性と生じる分解物をNMRによって経時的に詳細に検討した。2)プレウロサイベルアジリジンを大量合成した。また。体内動態あるいは脳中の作用部位を知るために,蛍光プローブの合成を試みた。3)より生体に近い初代培養系を用い,プレウロサイベルアジリジンのオリゴデンドロサイト特異的毒性について確認を行った。4)次世代シークエンサーシステムを用いて,スギヒラタケのゲノムデータベースを一部構築した。5)活性型recombinant PPL発現系の構築:レクチン活性及びB3との複合体形成によりプロテアーゼ活性を示すrPPL発現系の構築を行った。6) 2成分系あるいは3成分系での脳への影響の評価:BBBをin vitroで再現した市販のBBBキットによって,高分子2成分,あるいは高分子2成分と低分子毒の3成分系での作用を詳細に検討した。研究代表者は,スギヒラタケによる急性脳症の発症機構に関する「スギヒラタケ中の高分子2成分が複合体を形成することによってプロテアーゼ活性が現れ,そのプロテアーゼの作用によって血液脳関門が破壊される。そして,不安定性ゆえに単離はできなかったが合成化学的にこのキノコ中にその存在を証明した低分子毒プレウロサイベルアジリジンによってこの急性脳症に特有な脱随病変が惹起された」という仮説をもつ。本研究では,この仮説を立証し,酵素活性の基質非特異性の発現機構も明らかにする。2015年度は,以下の研究を行った。1)プレウロサイベルアジリジンの合成化学的

アプローチ:L-セリンから誘導したWeinrebアミドに対し、Grignard試薬(MeMgBr)と長鎖アルキルセリウム試薬の付加反応を経てリンカー鎖を有するβ-ヒドロキシバリン誘導体を合成した。続いて、標識分子との結合に足がかりとなる窒素原子を、ノシルアミドの光延反応による導入にて達成した。2)プレウロサイベルアジリジンのオリゴデンドロサイト特異的細胞毒性の機構解明:CG4-16モデル細胞系において確認していたプレウロサイベルアジリジン毒性の有機アニオン輸送体依存性およびミトコンドリア障害に関わるカスパーゼ-9依存性について、初代培養のオリゴデンドロサイトにおいても同様の経路を介していることが確認された。3) Recombinant B3発現系の構築:酵母Two-Hybrid法により、PPLと相互作用を示す5つのB3候補遺伝子を取得し、その中から最も可能性の高い候補遺伝子1つを選抜した。本遺伝子を酵母による異種発現を行い、目的タンパク質の取得に成功した。得られた目的タンパク質とrPPLを混合しinsulin分解実験に供した結果、insulinの分解が認められた。26年度が最終年度であるため、記入しない。天然物化学26年度が最終年度であるため、記入しない。全ての項目について所期の目的をほぼ達成している。所期の目的,方法で進めていく予定である。当初の目的,方法で進めていく予定である。
ファノ多様体のK安定性の明示的研究

与えられたファノ多様体にいつケーラー・アインシュタイン計量が入るのかどうかという問題を主として考察した。これまで多くの人の寄与により、ファノ多様体上のケーラー・アインシュタイン計量の存在と、「K安定性」という純代数的な条件が同値であることが知られている。この研究課題は、上記のK安定性を如何に簡単なものに言い換えるか、という点で議論を行った。具体的には、K安定性と同値な「付値判定法」の理論を使い勝手の良いように発展させた。与えられたファノ多様体がいつK安定かどうかを明示的な方法で調べられるような一般論を構築することを目的とする。ファノ多様体のK安定性は、ケーラー・アインシュタイン軽量の存在問題と同値な問題であることが知られ、代数幾何・複素幾何に於いて重要な問題である。まず一つには、Berman氏によって導入された「Gibbs安定性」を、正標数のテクニックを用いて計算しよういう試みがある。これについては至る所で講演、議論などを通し、鋭意考察中である。また、私とLi氏によって独立に得られた「付値安定性」という、K安定静と同値な概念をより洗練し、具体的なファノ多様体に応用しようという試みがある。これについては今年度様々な進展があり、複数の論文にすることに成功した。具体的には、Tian氏によって導入されたα不変量と付値安定性の関連を、きわめて精密な形で得ることに成功し、特にこれまでK半安定しか知られていなかった多くのファノ多様体が実際にK安定であることを証明できた。また、極小モデル理論にて重要な、Shikurov氏やProkhoov氏などによって多く研究されている「PLT爆発」の言葉を用いて、K安定性(というか付値安定性)を言い換えることに成功し、これにより多くの具体例への応用を得た。特に、射影平面のK半安定性は、純代数的な証明としては非常に簡単かつ純双有理的な別証明を得ることに成功した。これら今年度得られた二つの結果は、いずれも発表し、受理済みである。まず、Tian氏によって導入されたα不変量と「付値安定性」との関係性を詳細に論じ、それにより多くのファノ多様体のクラスがK安定であることを証明することができたことは特筆すべき進展であると思われる。また、「付値安定性」を「PLT爆発」という極小モデル理論の言葉で言い換えることができたことも重要で、特に曲面(特異デルペッツォ曲面)に対し多く応用できるのではないかと思われる。「Gibbs安定性」の簡略化・詳細な理解については現在構想段階であるが、今後の課題の一つとしたい。具体例を念頭に置き、多くのファノ多様体に対し実際に判定可能な理論の創設を目標とした。しかしながらK安定性のオリジナルの定義は複雑で、扱いが難しい。この研究課題に取り組む少し前に、ファノ多様体のK安定性を体積函数や対数的食い違い係数といった双有理幾何学の言葉で言い換えることに成功し、「付値判定法」と名付けた。この理論を具体例に応用できるような理論に言い換えることをこの研究課題では主として行った。具体的な研究実績としては、対数的ファノ多様体のK安定性の判定は全てのPLT爆発を見ることで判定できるということを証明したり、ファノ多様体や標準因子が豊富な射影代数多様体に対しての(反)標準因子の周りでの一様K安定性の開性(openness)を証明したり、また超平面配置対数的ファノ多様体に対してのK安定性の完全な解答、特に古典的なGIT安定性とK安定性が完全に一致したことを証明したりした。このPLT爆発の論文と超平面配置対数的ファノ多様体の論文により、未だ全てのファノ多様体に対し即座に判定可能なものではないが、付値判定法の基礎理論はひとまず完成したといってよい段階に到達できた。私とLi氏によって導入された「付値安定性」については、一般論としてはほぼ満足のいく最終形を得ることができたのではないかと思っている。今後は、この理論を(ファノ超曲面のような)非常に具体的なファノ多様体に対し、どのように計算・評価していくのか、という点が大きな問題点の一つである。双有理剛性の理論などで蓄積された、超曲面上の因子の特異性を計るテクニックを如何にして付値安定性に応用していくかを、今後の研究の推進方策の一つとしたい。29年度が最終年度であるため、記入しない。代数幾何学29年度が最終年度であるため、記入しない。
沖縄島に生息するコウモリのウイルス感染環における重要性の検討

沖縄島では固有の生態系が存在している。近年の新興・再興感染症のほとんどが、人獣共通感染症であることから、野生動物のウイルスとの関係が注目されている。沖縄島ではコウモリがヒトの居住地でも頻繁に目撃され、ヒトとの距離は遠くない。沖縄に生息するコウモリは稀少動物に指定されているため捕獲には慎重を期している。今回、野生動物であり、数と生息域を拡大し、沖縄島の生態系バランスを壊し、また居住地にも生息するマングースに関しても検討を行った。1.オリイオオコウモリ2匹、オキナワコキクガシラコウモリ1匹の死骸(いずれも推定死後1日)体内の血液、脳、脾臓、肝臓からウイルス分離を試みたが、分離は出来なかった。2.洞窟性コウモリの糞(オキナワコキクガシラコウモリ72プール、リュウキュウユビナガコウモリ20プール)からウイルス分離を試みたが、分離は出来なかった。3.オキナワコキクガシラコウモリの繁殖洞の洞口で3回、CDCトラップでの蚊の採集を試みた。Culex pipiens2個体,Aedesalbopictus2個体,Culex pallidothrax1個体が採集された。いずれも、吸血しておらず、個体数が少なかったため、ウイルス分離は試みなかった。4.オリイオオコウモリ2匹の血液中に日本脳炎ウイルス(JEV)抗体を検出した。狂犬病ウイルス抗体は検出されなかった。5.新たに2004年7月から2005年5月に捕獲されたマングース84検体血清中のJEV(4株使用)抗体、及び狂犬病ウイルス抗体を測定した。84検体中16検体(19.0%)がJEV4株いずれかに対する抗体を有した。以上より、沖縄島においてオオコウモリ、マングースはJEVに感染する事が判明した。しかしながら、ウイルスが分離されておらず、増幅動物としての役割は、今後の継続した調査に委ねられる。今回、野生動物であり、居住地に近く数の多いマングースに関しても検討を加えた。1.オオコウモリ2004年12月に野外1匹の病死1日(推定)の体内の血液、脳、脾臓、肝臓を採取し、-70°Cに保存した。2.オオコウモリの糞尿採取はできなかった。3.洞くつ性コウモリは5月から8月まで繁殖期を迎え、繁殖洞と呼ばれる数カ所のみで繁殖、子育てを行うことが、東洋蝙蝠研究所沖縄支部の生態調査からわかっている。オキナワコキクガシラコウモリの繁殖洞2ケ所とリュウキュウユビナガコウモリの繁殖洞1ケ所が特定されており、いずれも沖縄島中南部に位置している。これら、3ケ所を含む計8ケ所の洞くつから約70プールの糞を採取し、-70°Cに保存した。4.洞くつ性コウモリの捕獲はできなかった。5.オキナワコキクガシラコウモリの繁殖洞の洞口にCDC CO2トラップにて計4回、蚊の採集を試み、2匹のやぶ蚊を採取した。6.琉球大学農学部が採取した、2001年から2004年にかけて捕獲されたマングース102頭から血清で日本脳炎ウイルス(JEV)の中和抗体を測定したところ24.5%が陽性であった。マングースがJEVに感染した報告は未だなく、新しい知見である。しかし、1頭以外は抗体価が100以下であったことから、血清型が近縁のフラビウイルスに感染した可能性も否定できない。また、定点マングース3頭から毎週採血し1頭で中和抗体価の変動が見られた。(この結果は、2004年の日本比較免疫学会、日本ウイルス学会、日米ウイルス部会で報告した。)沖縄島では固有の生態系が存在している。

狂犬病ウイルス抗体は検出されなかった。5.新たに2004年7月から2005年5月に捕獲されたマングース84検体血清中のJEV(4株使用)抗体、及び狂犬病ウイルス抗体を測定した。84検体中16検体(19.0%)がJEV4株いずれかに対する抗体を有した。以上より、沖縄島においてオオコウモリ、マングースはJEVに感染する事が判明した。しかしながら、ウイルスが分離されておらず、増幅動物としての役割は、今後の継続した調査に委ねられる。
マルチテンプレート手法とドラマタイプ手法に基づく生物応答調節

生物活性物質を効率的に創出するための手法として、マルチテンプレート手法(生理活性物質および、それと相互作用する受容体の3次元的な形状に着目した分子設計法)ならびにドラマタイプ手法(動的に変化するタンパク質の時空間依存的な存在状態に着目する分子設計法)を提案した。本法を確立し、その有用性を実証するために、核内受容体リガンドや,サリドマイド派生化合物群など、様々な生理活性物質を創製した。特徴的な化合物については、生命現象解明のための試薬として販売している。これまでの,合成レチノイドAm80の白血病治療薬としての上市の成功等の成果を受け,機能する標的分子の動的な状態を標的とする創薬手法(ドラマタイプ手法)ならびに,共通の基盤骨格をスキャフォールドとする多様な活性拡張手法(マルチテンプレート手法)を提案した。両手法を駆使し,核内受容体リガンドならびにサリドマイド関連活性に着目した構造展開研究を遂行した。その結果,1)内在性アポトーシス阻害蛋白の自己ユビキチン化の誘導による分解促進活性(寿命制御)に基づく,新規アポトーシス増強剤の創製に成功し,「機能蛋白の細胞内寿命制御剤」の概念を新たに提案した。2)3,3-ジフェニルペンタン型の,ハイドロキシフルタミドに勝る活性を有する抗アンドロゲン.活性型ビタミンD_3に勝る活性を有するビタミンDアゴニスト.ならびに前立腺癌の増悪因子たる5α-リダクターゼの阻害剤,等の創製に成功し,3,3-ジフェニルペンタン骨格のステロイド代替骨格としての有用性を,核内受容体のリガンド創製のみならず,酵素阻害剤の創製においても示すことができた。3)サリドマイドを基盤とした新規の強力なキナゾリン型抗プロゲステロンの創製に成功した。4)新規ベンズヒドロール型の白血病細胞増殖阻害剤.アポトーシス誘導剤の創製に成功し,その定量的構造活性相関解析に成功した。5)代謝性核内受容体LXRがグルコースをリガンドとするとの報告から,LXRリガンドとα-グルコシダーゼ阻害剤との構造的関連性を解析し,新規デュアル活性化合物ならびに当該両活性の分離に成功し,多様なLXRアンタゴニストの創製に成功した。6)代謝性核内受容体であるPPARやFXRの新規リガンドの創製に成功した。等の成果をあげた。マルチテンプレート手法ならびにドラマタイプ手法の有用性の実験的な実証を一段と進展させることができた。化合物として、医薬リードとなりうる特徴的な生物応答調節剤も多数創製することができた。1.マルチテンプレート手法[質の高い化合物ライブラリーの創製手法](1)ジフェニルペンタン(DPP)については、多種の核内受容体リガンドはもちろん、同テンプレートの応用にてステロイド関連酵素阻害剤が効率的に創製できることを実証した。ケイ素誘導体にも演繹した。(2)DPPを、ステロイド代替え骨格のみならず、幅広い生理活性化合物テンプレートして設定することにより、NFκB阻害剤、アポトーシス誘導剤、抗ウイルス剤(特許出願準備中)等が新たに創製できた。2.ドラマタイプ手法[タンパク質のフォールディングを小分子により制御する手法](1)点突然変異により耐性を獲得した核内受容体に対して有効なリガンドの創製手法を確立するとともに、タンパク質部分構造との動的な相互作用を念頭に、メタボリックシンドローム薬の標的としても注目される核内肝臓X受容体に対して、様々な特性を有する三環性のリガンドを創製した(特許出願)。(2)タンパクの異常フォールディング(網膜色素変性症の原因となる点突然変異ロドプシン)を正常化する生物応答調節剤創製のための活性評価システムの構築に成功した。合成展開が進行中である。マルチテンプレート法・ドラマタイプ法の有用性の実験的な実証を、さらに一段と進展させることができた。1.マルチテンプレート手法[質の高い化合物ライブラリーの創製手法](1)サリドマイドをマルチテンプレートに設定し、仮想構造展開によって得たγ-カルボリン骨格の構造展開により、活性強度nMオーダー、選択係数3桁の抗牛ウイルス性下痢ウイルス剤の創製に成功した。(2)DPPを、ステロイド代替え骨格のみならず、幅広い生理活性化合物テンプレートして設定することにより、抗牛ウイルス性下痢ウイルス剤(特許出願)、スタチンなどが新たに創製できた。(3)共通マルチテンプレートをもとに創製した肝臓X受容体リガンドならびに糖関連酵素阻害剤ついて、構造修飾による活性分離に成功し,この構造要因の解明に一定の解答を得た。(4)合成レチノイドとサリドマイドをマルチテンプレートに設定し、抗C型肝炎ウイルス剤の創製に成功した(特許出願)2.ドラマタイプ手法[タンパク質のフォールディングを小分子により制御する手法](1)タンパク質の異常フォールディング(網膜色素変性症の原因となる点突然変異ロドプシン)による細胞内局在以上を修正するロドプシンリガンドの創製に成功した(特許出願)。

(2)細胞内アポトーシス阻害タンパクの持つユビキチン化活性を利用したCRABPタンパク分解誘導剤の創製に成功し、タンパク質の細胞内寿命を制御する小分子の一般的創製法に向けての基礎知見を得た。
拡散集団の起源・系統(自然人類学)

1.北中国人頭骨171例につき20項目の形態小変異の出現頻度を調査した。統計的分析により、北中国人は渡来系の弥生人以上に古墳時代以降の日本人に近いことが判明した。日本人の起源問題を解明するためには、弥生人の動向を詳細に研究する必要があるという結論を得た(百々)。2.日本で発見された更新世人類化石である港川人頭骨の形態学的特徴を再検討して、それが数万年前の初原モンゴロイドの状態を留めている可能性を指摘した(馬場)。3.中国福建省の少数民族ショアの血液160検体につき17種類の遺伝標識を調査した。遺伝距離分析により、ショアは海南島のフイ族に近いが、日本人とはそれほど近くないことを明らかにした(尾本)。4.中国北京地方漢族100家系と東北地方日本人140家系より得た血液資料について、HLA型を検査しMHCハプロタイプを決定した。この結果と東アジア諸集団のデータに基づいてMHCのハプロタイプの分布を推定すると、祖先集団が日本列島に至る複数の移住ルートの依存が考えられた(十字・徳永)。5.血液中より精製したDNAを用いて直接ALDHの遺伝子型を検出する方法を開発した。日本人、韓国人および中国人についてALDH遺伝子型検索を行なった結果、人種差を示すデータが得られた(原田・村松)。6.アジアとアメリカのモンゴロイド諸集団について10標識の遺伝子頻度のデータベースを作成した。これらを画像表示ソフトにより世界地図上に円グラフで表示した(平井)。7.ミトコンドリアDNAの遺伝的多型データを基に15集団間の遺伝的距離を推定した。その結果、広義のモンゴロイド集団は遺伝的にきわめて近縁であることが判明した(斉藤)。
細胞内代謝機構オートファジー制御に基づいた消化器難病疾患への新規治療戦略

近年、増加しつつある非アルコール性脂肪性肝疾患ではリソソームの蛋白発現が変化しオートファジー機能障害が誘導されることを明らかにした。この現象は動物だけでなくヒトの肝臓でも同様に生じている。オートファジー機能障害は変性蛋白蓄積や傷害オルガネラ蓄積によって細胞死を誘導するものと考えられるが、一方で、肝細胞死を抑制するスイッチや肝再生を促進させるスイッチも起動することがわかった。これらの複雑な機構は、臓器保護という側面からは生体に対し有益に作用するが、逆に遺伝子損傷細胞にも保護的に作用するため発癌を誘導する方向にも作用する可能性があると考えられた。脂肪肝モデルマウスにおけるカテプシン強制発現による病態変化の検証脂肪性肝炎モデル(ob/obマウス、PTENノックアウトマウス)とコントロールマウスの肝組織にカテプシンLを強制発現させ、肝組織脂肪化(中性脂肪測定)や肝機能障害の変化について検討を行った。カテプシンL強制発現によってp62蛋白蓄積は有意に軽減していた。しかしながらカテプシンL発現によって肝脂肪沈着は改善傾向にあったが非常に軽度で、肝機能障害は増悪傾向にあった。現在までのところ、肝脂肪化によって生じるカテプシンL発現低下は肝細胞保護的に作用しているものと考えられた。P62蛋白発現低下によってNrf2を介した抗酸化蛋白誘導が抑制されたため、肝障害増悪に作用した可能性があると判断し、肝組織の酸化ストレスマーカーを解析しているところである。脂肪肝モデルマウスの肝リソソーム膜蛋白解析脂肪性肝炎モデル(KKAyマウス、ob/obマウス)より単離したリソソーム蛋白を抽出しコントロールマウスとの比較解析を行ったところリソソーム酸性化に関わるプロトンポンプであるv|ATPase発現が肝脂肪化によって低下していた。脂肪肝マウスの肝細胞ではオートファジーを介した蛋白分解機構が破たんしておりその背景にリソソーム酸性化を介したリソソーム機能不全が関与している可能性が示唆された。現在、他の脂肪肝マウスモデルでも同様の結果であるかを追試している。脂肪肝モデルマウスにおけるカテプシン強制発現による病態変化の検証脂肪性肝炎モデル(KKAyマウス)とコントロールマウスの肝組織にカテプシンLを強制発現させたところ、カテプシンL強制発現によって肝機能障害が増悪した。肝組織中のGSH低下が観察され、p62発現が低下したことからカテプシンL発現低下は肝細胞保護的に作用しているものと考えられた。一方で、カテプシン欠損マウスにおいて肝虚血再灌流モデルを作成したところワイルドタイプと比べ肝組織壊死が増加し血清ALT値の増加が観察され、カテプシンL発現抑制によって肝虚血再灌流による肝障害が増悪する可能性が示唆された。以上のことから肝病態によってカテプシンLの役割が異なり、カテプシンL低下は細胞保護的にも障害的にも作用する2面性を有することが分かった。現在、カテプシンL欠損マウスを用いて他の肝疾患モデルを作成し肝病態とカテプシンの役割について引き続き検証を続けている。脂肪肝モデルマウスの肝リソソーム膜蛋白解析脂肪性肝炎モデル(KKAyマウス、ob/obマウス)より単離したリソソーム蛋白を抽出しコントロールマウスとの比較解析を行ったところリソソーム酸性化に関わるプロトンポンプであるv-ATPaseサブユニット発現が肝脂肪化によって全般的に低下することが分かった。また肝脂肪化によって発現が変化する他のリソソーム膜関連蛋白も検出されたためこれら蛋白についても再度検証を行い再現性について確認を行っている。脂肪肝モデルマウスの肝リソソームvATPase解析脂肪性肝炎モデル(KKAyマウス、ob/obマウス)とコントロールマウス肝組織よりリソソーム蛋白を抽出し、リソソーム酸性化に関わるプロトンポンプv-ATPase発現を解析したところ肝脂肪化によってリソソームのv-ATPase発現が低下することがわかった。肝組織のv-ATPase mRNA発現も低下しており、さらに単離肝細胞のオートファジー・リソソーム酸性化をLysotracker Redによって評価したところ肝脂肪化によってオートファジー・リソソーム酸性化がv-ATPase発現低下と相関して障害されていることがわかった。臨床検体におけるリソソーム蛋白分解酵素発現とオートファジー機能の関連性についての解析。脂肪性肝疾患、B型肝炎、C型肝炎、原発性胆汁性肝硬変患者から採取された臨床検体を使用し、免疫染色によるカテプシンB, L発現変化とp62蛋白発現変化を調べた。脂肪性肝疾患においてのみカテプシンB,L発現が低下し、肝細胞へのp62蛋白蓄積が生じていることがわかった。電子顕微鏡観察によるオートファジー小体数的解析では、脂肪性肝疾患においてのみ肝細胞内のオートリソソーム数の増加が観察された。

以上のことから肝脂肪化は、リソソーム機能障害を介した機序でオートファジー蛋白分解を抑制し、肝細胞内オートリソソームやp62蛋白蓄積を誘導する可能性が示唆された。26年度が最終年度であるため、記入しない。消化器病26年度が最終年度であるため、記入しない。カテプシンL発現モデルも作成完了し解析も順調である。また肝脂肪化によって変化するリソソーム膜蛋白も検出されている。また肝脂肪化によって変化するリソソーム膜蛋白も検出されており、臨床検体を用いた解析も進んでいる。今のところ順調に解析は進んでおり体制などもこのままで研究を推進する。また研究計画の変更は予定にはない。動物モデル解析だけでなく次年度は臨床検体を用いた解析も併せて行う予定となっている。24年度に作成したマウスモデルからの肝組織サンプルを使用し、酸化ストレスマーカー発現に関して免疫染色やCSH/CSSC比測定を行いカテプシンL発現と酸化ストレスの関連について〓〓を行う。昨年度に肝虚血再還流モデルにおけるサイトカイン産生変化を測定する予定であったが、次年度作成する肝再生モデルと同時に測定し、モデル間の違いを評価することとなったために次年度にELISAキット購入費用を持ち越すこととなった。昨年度作成した肝虚血再還流モデルと今年度作成する肝再生モデルより採取した血清中のサイトカイン産生をELISAキットを購入し測定を行う。