hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
赤血球のグルタチオンとグルタチオン抱合体輸送に関与する新しい膜ATPaseの意義

ヒト赤血球膜に存在する新しい膜酵素である酸化型グルタチオン(GSSG)で活性化されるATPase(GSSG-ATPase)を精製するとともに、酵素学・物理化学・免疫学・生理学的面から検討を加えた。本酵素は分子量は同一であるが、GSSGやATPに対する親和性が異なる2つのアイソザイムに分類された。高親和性アイソザイム(I型)と低親和性アイソザイム(II型)各々に対するポソクロナ-ル抗体を家兎で作製したところ、I型とII型では抗原性が同一であった。ヒト肝の細胞膜画分をSucrose濃度勾配による超遠沈法で調整し、トリトンX-100で可容化した後、mancini法で検討したところ赤血球酵素に対する抗体と交叉反応を示したことより、肝細膜にも同様の酵素が存在すると考えられた。精製したI型、II型アイソザイムとも細胞膜の反転小胞と抗体が結合したことから、抗原決定部位が膜の内側に存在していると考えられた。各アイソザイムをリン脂質で調整した人工膜に再構築し、グルタチオン輸送活性と酵素活性を測定したところ、I型の人工膜では輸送活性が25nmol/mg protein/min、GSSG-ATPase活性が25_<7L>mol pi released/mg protein/min。II型の人工膜では輸送活性が248nmol/mg protein/min、GSSG-ATPase活性が133nmol pi released/mg protein/minと、両アイソザイムとも酵素活性とGSSG輸送活性を示した。還元型グルタチオン(GSH)を添加しても酵素活性と輸送活性を示さなかったことから、本酵素はGSSG輸送に関与するものであると考えられた。更に病態的意義を知る目的で、赤血球を反転させて、荷電粒子表面に結合させた膜反転粒子を調整し、GSSG-ATPase活性を測定することが可能となった。ヒト赤血球膜より酸化型グルタチオン(GSSG)とグルタチオンS-拘合体で活性化を受ける新しいMg^<2±>ATPaseを見出し、その生化学的、酵素学的性状を検討した。(方法)新鮮ヒト静脈血より洗浄赤血球を調整し、10mMトリス塩酸緩衝液、PH7.4で洗浄して溶血させ、遠沈にて膜成分をとり出した。更に0.5%トリトンX-100で処理した膜成分を超遠沈にかけて、蛋白の可溶化を行い、次にS-ヘキシルグルタチオンを結合したセファロース4Bカラムを用いて酵素を分画し、更にセファクリルS-400カラムを用いて精製した。(結果)アフィニティーカラムからの溶出でS-ヘキシルグルタチオンに対して異なる親和性を有する2つの酵素画分が得られた。各々の画分は比活性約1000nmolpi放維/mg蛋白/分で、100ml赤血球を原料として約100mgずつ得られた。この酵素標品の分子量は15万で85,000と65,000の2ケのサブユニットを有していた(SDS-電気泳動)。アフィニティーカラムから最初に溶出されるI型アイソザイムはGSSGを基質としてKmが150μM、後から溶出されるII型アイソザイムが2mMであった。ATPに対してはI型が80μM、II型が140μMのKmを示した。これらの酵素はNa^+-K^+-ATPase活性やCa^<2±>ATPase活性を示さず、ウワバインやFGTAで抑制されなかったことから、即に知られているイオン輸送を司る膜ATPaseとは異なるものである。

II型アイソザイムはP-クロロマーキュリベンゾエイトNEMで阻害され、ジチオスレイトールの添加で活性化を受けたが、一方I型はこれらチオール剤添加で活性変化を示さなかった。これら酵素はS拘合体によっても同様に活性化されたが、還元型グルタチオンでは活性化を受けなかった。即に赤血球膜にはATPを利用するグルタチオン輸送系が存在することが知られているが、その輸送系と本酵素の性状が極めて類似していることから、本酵素がGSSGなどの膜輸送に関与していることが強く示唆された。ヒト赤血球膜に依存する新しい膜酵素である酸化型グルタチオン(GSSG)で活性化されるATPase(GSSG-ATPase)を精製するとともに、酵素学・物理化学・免疫学・生理学的面から検討を加えた。本酵素は分子量は同一であるが、GSSGやATPに対する親和性が異る2つのアイソザイムに分類された。高親和性アイソザイム(I型)と低親和性アイソザイム(II型)各々に対するポリクタナ-ル抗体を家兎で作製したところ、I型とII型では抗原性が同一であった。ヒト肝の細胞膜画分をSucrose濃度勾配による超遠沈法で調整し、トリトンX-100で可溶化した後、Mancini法で検討したところ赤血球酵素に対する抗体と交叉反応を示したことより、肝細膜にも同様の酵素が存在すると考えられた。精製したI型、II型アイソザイムとも細胞膜の反転小胞と抗体が結合したことから、抗原決定部位が膜の内側に存在していると考えられた。各アイソザイムをリン脂質で調製した人工膜に再構築し、グルタチオン輸送活性と酵素活性を測定したところ、I型の人工膜では輸送活性が25nmol/mg protein/min,GSSG-ATPase活性が25nmol pi released/mg protein/min。II型の人工膜では輸送活性が248nmol/mg protein/min、GSSG-ATP活性が133nmol pi released/mg prtein/minと、両アイソザイムとも酵素活性とGSSG輸送活性を示した。還元型グルタチオン(GSH)を添加しても酵素活性と輸送活性と示さなかったことから、本酵素はGSSG輸送に関与するものであると考えられた。更に病態的意義を知る目的で、赤血球を反転させて、荷電粒子表面に結合させた膜反転粒子を調整し、GSSG-ATPase活性を測定することが可能となった。
集団内協力と集団間攻撃:間接互恵性モデルと共進化モデルが予測する人間の利他性

本年度は昨年度に引き続き、外集団への攻撃性が生じうるかを検討する実験を行った。昨年度はコスト祖を支払った攻撃性を測定する経済ゲームとして新たに先制攻撃ゲームを開発したが、そもそもの攻撃率が低いという問題があった。そこで今年度はまず、ゲームの内容を改善し、さらにゲームでの攻撃行動が防衛のための攻撃であることを示すための実験を行った。具体的には以下の通りである。参加者は二人一組で1500円を元手としてゲームを行い、一方が攻撃のボタンを押すとボタンを押したほうが100円を支払い、押されたほうは1000円を失うこととなった。両者がボタンを押しても結果は早押しで決まり、後から押した場合は自分・相手に対して何の影響もなかった。実験では二人一組の双方がボタンを押せる双方向条件と、一方だけがボタンを押す権利があり、もう一方はボタンを押せない一方向条件を参加者間で配置した。先制攻撃ゲームにおけるボタン押し行動が「相手がボタンを押すかもしれない」という恐怖に基づくものであれば一方向条件ではボタンを押し行動が生じないと予測されるが、実験の結果はこの予測を支持した。双方向条件での攻撃率は50%であったが、一方向条件では4%であった。双方向条件においてかなりの攻撃率が観察されたため、次の実験ではこの攻撃率が内集団相手と外集団相手で異なるのかを確かめる実験を行った。132人を実験参加者とし、最小条件集団を用いて相手の所属集団を操作した結果、攻撃率は相手が内集団の場合は約29%、外集団の場合は約32%であり、統計的な有意差は見られなかった。つまり、昨年度実施したゲームを改良し、攻撃率が高まるようにしても、昨年度の結果と同様に外集団に対して特に攻撃的になるという現象は観察されなかった。これは「ヒトには外集団に対する攻撃性が身についている」と主張する共進化モデルの予測とは明確に反する結果である。1度の実験結果によって共進化モデルの予測の妥当性に結論付けるのは早急である。従って、昨年度に観察された結果を、実験パラダイムの改良を経て再検討することは重要である。この可能性は申請書において既に想定され、その旨記述されている。従って、研究は順調に進展していると考えられる。コストを支払った攻撃行動がある程度観察される状況においてでも、共進化モデルが予測するように、外集団への攻撃行動が生じるわけではないことが昨年度と今年度の実験において示された。二つの側面から今後の推進方策が考えられる。ひとつは共進化モデルのさらなる妥当性の検証という側面から、今回用いているゲームを応用し、参加者が内集団への協力と外集団への攻撃の両方を同時に意思決定できる状況を用いた実験を行うことである。もうひとつは社会心理学的な側面から、防衛目的の外集団への先制攻撃がどのような状況で生じるのかを検討する実験である。いずれも新奇な実験というだけでなく、理論的に重要な実験だと考えられる。本年度は集団内への協力性を生起するメカニズムを検証する実験と、外集団への攻撃性を生起させるメカニズムを検証する実験の両面から研究を行なった。まず、北海道大学との共同研究として、経済学的合理性に反してでも他者を攻撃するかを測定する実験パラダイムを開発した。この実験において参加者は一定時間内に元手の1000円から100円を犠牲にしてボタンを押し、相手の利得を500円引き下げることができる。相手も同じ決定を行うことができるが、どちらか一方が先にボタンを押すと、もう一方は後から仕返しをすることができず、その時点で実験が終了となる。お互いにとって最も良い結果はお互いがボタンを押さないという結果である。お互いが自己利益最大化を目指していると考えると、相手はボタンを押さないと予測できるが、それ以外の何らかの理由で相手がボタンを押すと考えるならば相手よりも先に押したほうが得である。こうした状況下で人々はボタンを押すかを検証したところ、約20%の参加者が実際にボタンを押すという結果を得た。そのうえで、ここで示された攻撃性が外集団に対してより強く働くのかを検証するために、社会心理学で伝統的に用いられてきた最小条件集団パラダイムを用い、内集団相手と外集団相手への攻撃率を比較したところ、両者に差が見られなかった。これは集団淘汰モデルあるいは共進化モデルからの予測に反する結果である。ただし、ここにはもともと攻撃性が発揮されにくい実験状況だったという問題がある。そこで現在、よりボタンを押しやすい実験状況を開発し、これを最小条件集団パラダイムに応用する実験を計画中である。こうした実験計画と同時に、内集団への協力を高める要因として集団淘汰モデルから予測され、実証された結果を、間接互恵性モデルからも説明可能であるかを検証する実験計画を実施中である。これは現在、プレテストを終了し、本実験を行う予定である。

参加者は二人一組で1500円を元手としてゲームを行い、一方が攻撃のボタンを押すとボタンを押したほうが100円を支払い、押されたほうは1000円を失うこととなった。両者がボタンを押しても結果は早押しで決まり、後から押した場合は自分・相手に対して何の影響もなかった。実験では二人一組の双方がボタンを押せる双方向条件と、一方だけがボタンを押す権利があり、もう一方はボタンを押せない一方向条件を参加者間で配置した。先制攻撃ゲームにおけるボタン押し行動が「相手がボタンを押すかもしれない」という恐怖に基づくものであれば一方向条件ではボタンを押し行動が生じないと予測されるが、実験の結果はこの予測を支持した。双方向条件での攻撃率は50%であったが、一方向条件では4%であった。双方向条件においてかなりの攻撃率が観察されたため、次の実験ではこの攻撃率が内集団相手と外集団相手で異なるのかを確かめる実験を行った。132人を実験参加者とし、最小条件集団を用いて相手の所属集団を操作した結果、攻撃率は相手が内集団の場合は約29%、外集団の場合は約32%であり、統計的な有意差は見られなかった。つまり、昨年度実施したゲームを改良し、攻撃率が高まるようにしても、昨年度の結果と同様に外集団に対して特に攻撃的になるという現象は観察されなかった。これは「ヒトには外集団に対する攻撃性が身についている」と主張する共進化モデルの予測とは明確に反する結果である。本研究計画では外集団への攻撃を測定する実験パラダイムを慎重に計画し、適切に攻撃を測定できることを確かめることが根本的に重要である。本年度はいくつかの実験を繰り返し、そうした実験パラダイムが開発できるめどがついたという意味で当初の予定通りに進展している。またそれと同時に、集団内への協力に関する新たな実験も進行中であり、この部分に関しては当初の予定を超えた進展であるといえる。1度の実験結果によって共進化モデルの予測の妥当性に結論付けるのは早急である。従って、昨年度に観察された結果を、実験パラダイムの改良を経て再検討することは重要である。この可能性は申請書において既に想定され、その旨記述されている。従って、研究は順調に進展していると考えられる。当初の予定通り、外集団への攻撃行動を発現させる社会的選好を人々が保持しているのかを確認する実験を行い、もしそれが認められたならば共進化モデルの予測どおり、それが内集団への協力性と相関するのかを確かめる実験を行う。これらの実験は適切な実験施設が無ければ実施不可能なため、様々な研究機関と連絡を取り合い、実施を検討していく。コストを支払った攻撃行動がある程度観察される状況においてでも、共進化モデルが予測するように、外集団への攻撃行動が生じるわけではないことが昨年度と今年度の実験において示された。二つの側面から今後の推進方策が考えられる。ひとつは共進化モデルのさらなる妥当性の検証という側面から、今回用いているゲームを応用し、参加者が内集団への協力と外集団への攻撃の両方を同時に意思決定できる状況を用いた実験を行うことである。もうひとつは社会心理学的な側面から、防衛目的の外集団への先制攻撃がどのような状況で生じるのかを検討する実験である。いずれも新奇な実験というだけでなく、理論的に重要な実験だと考えられる。
西洋資料の外国語としての視点からアプローチする近代“官話”の総合的研究

本研究は、近代西洋人による官話課本と官話訳聖書等の記述に基づき、彼らが外国語として学習した官話像を考察したものである。近代西洋人の官話の認識については、当時の英仏を中心に、代表的な課本に記述された定義の変化を概観した。個別の官話研究については、メドハースト、エドキンズ、ロプシャイド等の記述を考察し、彼らが北方、南方、その他の官話の相違点に関する認識を継承・発展させた過程を指摘した。また、メドハーストの官話訳聖書と官話課本が19世紀半ばの官話の特徴を考察する際に有用であることを指摘した。さらに、主に西洋料理のレシピや問答書の本文を資料として、近代西洋人が記述した官話文の特徴についても考察した。26年度は、代表者(塩山正純)と分担者(朱鳳)がそれぞれ収集・整理した資料をもとに分析を行った成果のうち主なものは以下の3点である。(1)漢訳聖書を資料とする分析19世紀の宣教師メドハーストの官話訳聖書と、同じくメドハーストによってその前後に出版された官話会話集を資料として、南北差のキーワードとなる特徴的語彙の使用状況から、各資料の「官話」の言語的特徴について考察に着手した。これについては27度以降もより詳細な分析を継続する。また、漢訳聖書本文に使用されている音訳語の継承関係と訳語創造の特徴についても考察した。(2)会話教科書を資料とする分析19世紀の宣教師エドキンズの中国語会話教科書Progressive Lessons in the Chinese SpokenLanguageの初版から5版までの各版の本文を翻字・電子テキスト化し、その語彙的特徴に関する考察に着手した。(3)官話・漢語の周縁に関する分析日本の幕末維新期における唐通事の英語学習と宣教師の交流という観点から官話・漢語の周縁事情に関する考察を行った。27年度(2年目)については、代表者(塩山正純)と分担者(朱鳳)が主に1年目のポルトガル現地調査(関西大学外国語学部教授・奥村佳代子氏との共同調査)にて収集した官話会話課本その他の資料と、期間中に随時収集した資料を整理し、以下の3方面について分析・考察し、その成果の一部を論文・口頭報告のかたちでそれぞれ発表した。(1)官話課本・英華・華英字典を資料とする分析まず、19世紀の英語と中国語を対象とするテキスト、字典類における官話に関する記述を抽出・分析し当時の(近代における)外国人の目から見た官話像の考察と再現を試みた。さらに、ゴンサルベスの会話稿本を資料として同書での官話の文法記述の特徴に関する考察を行った。(2)漢訳聖書を資料とする分析西洋諸語を原語とする聖書語彙の中国語への異文化翻訳について特に音訳語を対象として考察した。(3)官話・漢語の周縁に関連する資料の分析西洋の文化を中国語で理解するために官話によって執筆・編纂された書物(料理解説書)を資料として、語学学習・研究を目的としない周縁文献における官話の文体的特徴と訳語の創出と定着に関する考察を行った。また、28年3月にはオックスフォード大学図書館、大英図書館、ライデン大学図書館にて資料調査を行い、幾つかの資料を収集した。27年度については、前年度(26年度)の現地調査にて収集した資料について、メンバー間で写真PDFデータを共有し、順次整理・分析をすすめて、一部ではあるが口頭報告として成果をまとめることができた。またその他の資料についても、同じく可能な限り共有し、各自の視点(「訳語」「官話」をキーワードとして)から資料を扱って考察をすすめ、幾つかの具体的な成果として公表することができた。個別の事項については、上記実績と業績に記述する通りである。また、前年度に5種の版本を収集したエドキンズのテキストについて分析・考察を進め、その成果の一部を、28年5月(予定)の国際シンポジウムで発表予定であり、継続的にさらに詳細に考察する予定である。28年度(3年目)については、27年度末(2年目)に代表者(塩山正純)と分担者(朱鳳)がイギリス(オックスフォード大学図書館、大英図書館)及びオランダ(ライデン大学図書館)における現地調査(関西大学外国語学部教授・奥村佳代子氏、北陸大学国際コミュニケーション学部講師・伊伏啓子氏との共同調査)と28年度(3年目)夏にバチカンにおける現地調査によって収集した官話会話課本、西洋人が官話で執筆した各種のテキスト其他の資料と年度中に収集した資料を整理・テキスト入力し、前年度と同様に以下の3つの方面について分析・考察をおこなった。その研究成果は後述する論文・口頭報告によって発表した。なお、数本の論文については投稿中のため後述の成果の欄には反映していない。(1)官話課本の記述に関する分析前年度は字典類におけるキーワードとしての官話に関する記述を分析したが、今年度は主に19世紀に出版された英語による官話課本・研究書を対象として、引き続き西洋人による"官話"像について考察した。また個別資料については、塩山がエドキンズの課本の初版から第五版を対象として、語彙・音声面の記述の特徴について考察し、朱鳳がモリソンの課本本文を資料とする考察をおこなった。(2)漢訳聖書を資料とする分析西洋諸語の聖書原典と漢訳のうち文理訳本文を比較対照の資料として、異文化翻訳の一つの事例としての時間表現に関して考察した。

なお、これは今後さらに官話訳聖書にまで考察範囲を広げていく上での基礎となる作業として位置づけている。(3)上記以外の官話・漢語の資料を対象とする分析本研究は近代西洋人にとっての官話研究をメインテーマとするが、28年度はこれに関連して近代の日本人による官話学習についても考察をおこない、官話課本、旅行記における記述について分析した。28年度(3年目)については、前年度と当該年度の現地調査にて収集した資料について、メンバー間でPDFデータを共有し、整理を経て分析・考察の一部成果を後述する論文・口頭報告のかたちで公表することができた。さらに今年度についても、現在継続中の研究の成果を複数の国際学会(海外)で報告予定である。29年度(4年目・最終年度)については、代表者(塩山正純)がバチカン図書館、大英図書館、関西大学東西学術研究所、国立国会図書館その他機関で調査収集した資料と、分担者(朱鳳)がサンフランシスコ大学での在外研究の機会に調査収集した官話関連資料、西洋人が官話で執筆した各種のテキスト其他の資料を整理・テキスト入力し、前年度と同様に以下の3つの方面について分析・考察をおこなった。その研究成果は後述する論文・口頭報告として発表した。なお、投稿中の論文数篇については、後述の成果の欄には反映していない。(1)個別官話課本の記述に関する分析前年度は字典類におけるキーワードとしての官話に関する記述を分析したが、今年度は主に19世紀に出版された英語による官話課本・研究書を対象として、引き続き西洋人による"官話"像について考察した。また個別資料については、塩山がエドキンズの課本の初版から第五版を対象として、語彙・音声面の記述の特徴について考察し、朱鳳がモリソンの課本本文を資料とする考察をおこなった。(2)漢訳聖書を資料とする分析前年度に続いて、西洋諸語の聖書原典と漢訳のうち文理訳本文を比較対照の資料として、異文化翻訳の一つの事例としての時間表現について考察した。これについては、さらに官話訳聖書にまで考察範囲を広げていくことを課題として位置づけている。(3)上記以外の官話・漢語の資料を対象とする分析本研究課題がメインテーマとしている近代西洋人にとっての官話研究の根幹である官話認識について、19世紀前半のフランス語による研究書の記述の変遷を考察した。さらに、関連して近代の日本人による官話学習についても考察をおこない、官話課本(『北京官話全編』)、旅行記(『東亜同文書院大旅行誌』)における記述について分析した。本研究は、近代西洋人による官話課本と官話訳聖書等の記述に基づき、彼らが外国語として学習した官話像を考察したものである。近代西洋人の官話の認識については、当時の英仏を中心に、代表的な課本に記述された定義の変化を概観した。個別の官話研究については、メドハースト、エドキンズ、ロプシャイド等の記述を考察し、彼らが北方、南方、その他の官話の相違点に関する認識を継承・発展させた過程を指摘した。また、メドハーストの官話訳聖書と官話課本が19世紀半ばの官話の特徴を考察する際に有用であることを指摘した。さらに、主に西洋料理のレシピや問答書の本文を資料として、近代西洋人が記述した官話文の特徴についても考察した。
ヘモグロビン協同性発現へのタンパク質の大振幅揺らぎと低波数振動の寄与の実験的検証

本研究課題は,ヘモグロビンの酸素親和性の高低がヘモグロビン分子の主鎖のゆらぎの振幅の大きさと相関があるのかについて実験的に検証すること(分子動力学による計算結果からそのゆらぎの振動はGHzから数十THzと予想されている.),またα鎖のFe-Hisのheterogenietyが何によって引き起こされているのかを明らかにすることにある.2017年度の実績報告において,0.15 - 1.5 THzの範囲では酸素親和性の高低に対応する吸光度差を観測できなかったことを報告した.そこで,0.15 THzよりもさらに低波数域を測定するためにベクトルネットワークアナライザーを用いた系の構築を行い,75 - 141 GHzで実験を行ったが,酸素親和性の高低に対応する吸光度差は観測できなかった.また,水溶液のみならず,水(比誘電率80)よりも比誘電率の小さいグリセリン(比誘電率47)が80%存在するヘモグロビン溶液を用いて,酸素親和性の高低に対応する試料を調製して測定を行ったが,2017年度の0.15 - 1.5 THzの範囲の測定と同様,有意な吸光度差はみられなかった.α鎖のFe-Hisのheterogenietyに関しては,2017年度の実績報告で「ヘモグロビンのT, R四次構造のうちT構造の時に出現し,その2つのバンドの波数は,酸素親和性とは相関がないことが明らかになった.」と記した.四量体についてはこの通りであるが,Hb Aのβ鎖のHis92をGlyに変異させ,イミダゾールを加えた変異Hb(rHb(βH92G))において四量体が解離してαβ二量体を形成するヘモグロビンのFe-Hisバンドにおいてもα鎖のFe-Hisのheterogenietyが観測された.α鎖のFe-Hisのheterogenietyの起源の研究において重要な結果であり,今後詳細を調べていく.2017年度は,5 - 50 cm-1(0.15 - 1.5 THz)の範囲を,2018年度はベクトルネットワークアナライザーを用いた系の構築を行い,75 - 141 GHzで実験を行った.しかしながらいずれの場合も,酸素親和性の高低(最大の酸素親和性差は1000倍)に対応する吸光度差は観測できなかった.また,水溶液のみならず,水(比誘電率80)よりも比誘電率の小さいグリセリン(比誘電率47)が80%存在するヘモグロビン溶液を用いて,酸素親和性の高低に対応する試料を調製して測定を行ったが,0.15 - 1.5 THzの範囲の測定と同様,有意な吸光度差はみられなかった.このように,水溶液を含む,比誘電率が高い溶媒中にのテラヘルツ吸収分光及びベクトルネットワークアナライザーを用いた系の測定では,溶媒の吸収のため,「タンパク質のゆらぎの振幅の大きさの違いが存在する」としても「ゆらぎの振幅の大きさの違い」を観測するのが非常に困難であるということが明確に示された.一方,このことは比誘電率の大きい溶媒を使用しなければ「タンパク質のゆらぎの振幅の大きさの違いを観測する」可能性を示している.そこで,現在,そのような系として(溶媒として存在する水分子を排除するという観点から),ナノスケールの細孔(シリカゲル)にHb A分子(6.4 ×5.5 ×5.0 nm)を閉じ込め,細孔に入ったHb Aの測定を試みることを考えている.予備実験で無色のシリカゲルをHb A水溶液に加えて自然ろ過して溶液を取り除くと,シリカゲルが赤色になることを確かめている.このことは,シリカゲルの細孔内にHb A分子が取りこまれていることを示唆している.また,細孔のサイズの大きさが異なると,Hb A分子の取りこまれやすさが異なることも予備実験で確かめている.比誘電率が高い溶媒中にのテラヘルツ吸収分光及びベクトルネットワークアナライザーを用いた系の測定では,溶媒の吸収のため,「タンパク質のゆらぎの振幅の大きさの違いが存在する」としても「ゆらぎの振幅の大きさの違い」を観測するのが非常に困難であるということが明確に示されたことから,溶媒として存在する比誘電率の大きい水分子を排除するという観点から,ナノスケールの細孔(シリカゲル)にHb A分子(6.4 ×5.5 ×5.0 nm)を閉じ込め,細孔に入ったHb Aの測定を試みることを考えている.シリカゲルを用いた予備実験では,Hb A水溶液に無色のシリカゲルを加えて半日ほど置き,シリカゲルをろ過して溶液を取り除くと,シリカゲルが赤色になることを確かめている.このことはからシリカゲルの細孔内にHb A分子が取りこまれていることが示唆される.このHb Aが取り込まれたことが期待できるシリカゲルを用いて,これまでに溶液で行ってきたテラヘルツ吸収分光及びベクトルネットワークアナライザーを用いた系の測定を行う計画である.本研究課題は,ヘモグロビンの酸素親和性の高低がヘモグロビン分子の主鎖のゆらぎの振幅の大きさと相関があるのかについて実験的に検証することにある.

分子動力学による計算結果からそのゆらぎの振動はGHzから数十THzと予想されているので5 - 50 cm-1(0.15 - 1.5 THz)の範囲のテラヘルツ時間領域分光法(TDS-THz)による測定を実施した.その結果,現時点では5 - 50 cm-1(0.15 - 1.5 THz)の範囲では酸素親和性の高低(最大の酸素親和性差は1000倍)に対応する吸光度差を観測できなかった.さらには,水よりも比誘電率の小さいグリセリン(水の約0.6倍)が80%存在するヘモグロビン溶液を用いて酸素親和性の高低に対応する試料を調製して測定を行ったが,有意な吸光度差はみられなかった.そのため,さらに低波数域を測定するためにベクトルネットワークアナライザーを用いた系の構築を進めつつある.一方でヘモグロビンのαサブユニット(α鎖)のFe-His振動のheterogeneity(ヘテロ性:ここでは2つの振動バンドの存在のことを意味する)はヘモグロビンのT, R四次構造のうちT構造の時に出現し,その2つのバンドの波数は,酸素親和性とは相関がないことが明らかになった.意外なことではあるが,αサブユニットの酸素親和性の差異はT構造においてヘテロ性が観測されるαサブユニットのFe-His結合(ヘム鉄と近位ヒスチジン結合)の強さ(波数の違い)ではなく,βサブユニットの三次構造の違いによってもたらされていることが示唆された.この内容は2017年10月にアメリカ化学会のBiochemistry誌に受理された.本研究課題であるヘモグロビンの主鎖のゆらぎの測定については外部から溶液を交換できるセルを用いたテラヘルツ時間領域分光法(TDS-THz)により,アーティファクトの入らない測定系を構築し,酸素親和性の異なる試料,さらにはα鎖のみに酸素が結合できる天然の変異ヘモグロビンであるHb M Milwaukeeを用いて実験を行った.その結果,5 - 50 cm-1(0.15 - 1.5 THz)の範囲では酸素親和性の高低に対応する吸光度差を観測できなかった.一方,αサブユニットのFe-His振動バンドのheterogeneity(ヘテロ性)に関して,βサブユニットには酸素を結合することのできないFe3+の変異ヘモグロビンを用いてαFe2+βFe3+のヘムをもつ試料を用いて,αサブユニットの酸素親和性と2つのFe-His振動バンドの波数の相関を調べたところ,四次構造がT構造の時には酸素親和性の変化に応じた2つのFe-His振動バンドの波数の変化がみられなかった.なお,R構造になると2つのFe-His振動バンドよりもさらに高波数域にFe-His振動バンドが観測されたが,これは四次構造がR構造に変化したことによるもので過去に報告された内容と一致した.そのため,αサブユニットの酸素親和性の制御は(私が以前に発表したβ鎖のヘムとF-ヘリックス間の共有結合のない変異変異ヘモグロビンにおいてはαサブユニットの酸素親和性が上昇したという結果;S. Nagatomo, et al., PLoS ONE 10(8), e0135080 (2015)を踏まえると)βサブユニットの三次構造変化によってもたらされていることが示唆された.このことについてもっと詳細に検討していく予定である.本研究課題は,ヘモグロビンの酸素親和性の高低がヘモグロビン分子の主鎖のゆらぎの振幅の大きさと相関があるのかについて実験的に検証すること(分子動力学による計算結果からそのゆらぎの振動はGHzから数十THzと予想されている.),またα鎖のFe-Hisのheterogenietyが何によって引き起こされているのかを明らかにすることにある.2017年度の実績報告において,0.15 - 1.5 THzの範囲では酸素親和性の高低に対応する吸光度差を観測できなかったことを報告した.そこで,0.15 THzよりもさらに低波数域を測定するためにベクトルネットワークアナライザーを用いた系の構築を行い,75 - 141 GHzで実験を行ったが,酸素親和性の高低に対応する吸光度差は観測できなかった.
顔色-表情知覚の相互作用の文化・世代間比較

本研究は、顔色・表情知覚におけるそれぞれの潜在的な影響を調べるために、顔色と表情認知の相互作用に関わる心理物理学実験を、文化間、世代間で横断的に行い、その普遍性・特異性を調べた。表情認知に顔色が影響を与えるのであれば、あいまいな表情の判断を行う場合に顔色の情報が大きく影響を及ぼすと考えられる(例えば、怒っているのか、怯えているのかがあいまいな表情の場合、顔色が赤みを帯びていれば怒り、顔色が青みを帯びていれば怯えの表情と判断される)。そこで、2つの表情をモーフィングし、あいまいな表情画像を作成した上で、顔色を操作することにより、表情判別が変化するかどうかを調べた。表情の組み合わせは、恐怖-怒りとし、2つの典型的な表情画像をモーフィングし、表情の割合が段階的に変化した表情の連続体を作成した。それらの顔画像の顔色を操作し,「赤みがかった顔色,自然な顔色」の顔色2種の表情連続体を作成した。顔画像を1枚ずつ参加者にランダム呈示し、強制選択(選択肢は表情連続体の両端の表情)の表情判別課題を課した。顔色の効果については、主観的等価点(PSE)を用いて判断する。実験では、実験協力者群の広がりを考慮し、スワイプ操作で簡単に二肢強制選択できるようなタブレット版のアプリを開発し、用いた。2018年9月に、マレーシアにおいて、成人および小学生を対象に実験を行った。2019年1月より、日本人小学生を対象に実験を開始し、その結果を基に、実験プログラムを改良し、2019年3月に、マレーシアにおいて、成人および小学生を対象に再実験を行った。当初の予定通り、初年度において、マレーシアにおける実験を行うことができたため。引き続き、日本人小学生を対象とした実験を進めるとともに、ヨーロッパ(ノルウェー)における成人及び小学生を対象とした実験も進めていく予定である。
視線が一致するTV会議システムを利用した遠隔教育の教授方略研究

これまで、視線が一致する多様な教授法における双方向遠隔教育の研究事例はない。本研究では、視線が一致する大画面TV会議システムを利用し、双方向遠隔教育における多様な教授法を実施し、実践的な教育効果測定を行なった。また、現行の視線が一致しないTV会議システムおよび対面教育との3要因の比較分析を行うことにより、多様な教授法や学習環境の違いにおける各学習効果の差異を明らかにするとともに、各学習環境における教授方略を示した。本研究では、以下の4つの研究を実施している。研究I「一斉講義形式の遠隔授業における学習者特性別教育効果の精査と基準化」一般的な一斉講義形式による教授法を、以下の研究II IIIの教授法と比較する基準とするため、これまでの先行研究により得られた知見やデータを精査し、あらためて共分散構造分析手法により分析評価し、比較可能な因果モデルを導いた。本成果は、電子情報通信学会総合大会2009で発表し、現在論文執筆中である。研究II「学習者間の討論を主体とした遠隔授業における教育効果測定」学習者間の討論を主体とする教育活動を、TV会議システムを介した環境で実施した。本研究では、実対面および視線が一致する場合としない場合の3形態における比較教育効果測定を行い、共分散構造分析手法により分析評価し、教育効果の差異を明らかにすることを目的とした。研究Iの成果との比較可能なモデルを分析中であり、研究Iの一斉講義形式より視線が一致する重要性が顕著に現れることが分かった。現在論文執筆中である。研究III「学習者間の遠隔協調学習による教育効果測定」卒業研究において、2大学間の学生同士を混成したグループを形成し、TV会議システムを利用して、視線が一致する場合と不一致の場合における遠隔協調学習を実施中である。本研究では、学習者主観評価を中心に、教育効果の差異を明らかにすることを目的とした。これまでの調査により、研究I IIよりも、特徴的な要因が学習者コミュニティーの形成に寄与しており、研究途中ではあるが速報として、学会発表を行う。研究IV「双方向遠隔教育の教授方略研究」研究IIIIで得た結果をもとに、主要な教育活動である一斉講義・討論・協調学習における、比較教育効果分析を行い、効果的な双方向遠隔教育教授方略をまとめる。研究IIIIにおいて比較可能なモデルを構築できる見込みが立ったことから、次年度には意義ある教授方略をまとめることが期待できる。本研究では、以下の4つの研究を実施した。本成果は、電子情報通信学会総合大会2009で発表し、教育システム情報学会論文誌27巻3号に採録が決定した。研究II「学習者間の討論を主体とした遠隔授業における教育効果測定」学習者間のディベート学習活動を、TV会議システムを介した環境で実施した。本研究では、実対面および視線が一致する場合としない場合(それぞれ画面サイズ15インチと30インチ)の5形態における比較教育効果測定を行い、共分散構造分析手法により分析評価し、研究Iの成果との比較可能なモデルを構築し、教育効果の差異を明らかにした。研究Iの一斉講義形式より視線が一致する重要性が顕著に現れることが分かった。本成果論文は、教育システム情報学会論文誌に投稿中である。研究III「学習者間の遠隔協調学習による教育効果測定」2大学間の卒業研究において、TV会議システムを利用し、視線が一致する場合と不一致の場合における遠隔協調学習を実施した。これまでの調査により、研究IIIよりも、特徴的な要因が学習者コミュニティーの形成に寄与していることがわかった。本成果は、教育システム情報学会第34回全国大会で発表し、現在論文執筆中である。研究IIIIにおいて比較可能なモデルを構築できたことから、教授方略としてまとめる。
含ニッケル・ラテライトプロファイルの風化過程における元素の挙動

含ニッケル・ラテライト鉱床の風化過程における元素の挙動に関しておもにフィリピンのいくつかの同型鉱床での産状,鉱床プロファイル,基盤岩との関連,構成鉱物の性状,化学成分,生成過程などについて研究をおこなった。超塩基性岩に由来するこれら風化残留鉱床はおもに原岩の構成鉱物や化学組成およびラテライト化/サプロライト化作用の変質程度などに規制され,さらに地形・氣侯などの要因も加わってより複雑な過程を経て生成されるのであろう。含ニッケル・ラテライト鉱床プロファイルの基盤岩→サプロライト層→ラテライト層の区分で,その風化作用過程下で構成して元素が地表から下部へそれぞれの条件に適した所へ再配分され結果として地表より深部へいくつかの分帯が形成される。したがってこれらの要因の影響は鉱床プロファイルでの深度別の試料の構成鉱物や化学組成などにあらわされていることが考えられる。ラテライト層中のニッケルの形態はおもに水酸化物の形で針鉄鉱にともなわれ,サプロライト層中では1部含水ニッケル・鉄・マグネシウムけい酸塩の形で存在すると思われる。化学成分的に,上述のプロファイルの3区分で基盤岩からラテライト層にかけてFe_2O_3の増加,SiO_2,MgOの減少という主成分の移動は,一般的にいわれているラテライト化作用での傾向と同じではあるが,局部的に2次的のSiの濃集帯があったり,ニッケル成分のとくに高い帯があったりして,生成作用の過程での複雑性を示している。鉱床プロファルの深度による各層での磨はくpH値はサプロライト,基盤岩でアルカリ性,ラテライト層ではより酸性を示し,各層での元素の移動・集積の挙動と関連している。ラテライト化作用のメカニズムは極めて複雑で、多くの要因が組み合わされており、同一のニッケル・ラテライト鉱床においても水平的・地下深度別によるプロファイルでの元素の濃集度や構成鉱物に差異がみられ、普遍的な法則性を見出すことは困難である。本研究では比島のリオ・チバおよびヒナトワンニッケル鉱山におけるラテライト・ガ-ニエライト層での構成鉱物・化学組成・性状・生成過程などの比較検討を行っている。ラテライト層では、リオ・チバ鉱山で深度が増すにつれて構成鉱物のX線回析ピ-ク強度が弱く、ブロ-ドになっていくに対して、ヒナトワンではその強度が大きく形もシャ-プになる傾向を示し、風化進行過程での差がみられ、基盤岩の迸入時期、地形、気候などの諸因子の影響も考えられる。両鉱山での深度別の化学組成の元素の挙動にはほとんど差がみられないが、ラテライトからサプロライト層にかけて一般的にFe,Mn,Al_2O_3の減少、Ni,MgO,SiO_2の増加がみられ、この増減は両者の境付近でいちじるしい。Ni成分はサプロライト層で当然高くなるが、ヒナトワン鉱山では特に同層中で局部的に濃集している部分がみられる。またPH値はその化学成分と関連しているようで、ラテライト層ではその値が低く、サプロライト層では高くなっている。両鉱床とも構成鉱物はラテライト層では針鉄鉱が主で多少のクロム鉄鋼を含む。サプロライト層にみられるガ-ニエライトにはX線的に7Åを示す蛇紋石類似、10Åの滑石類似鉱物がみられ、それらの7Å型はNiーchrysotileーPecoraite,NiーLizarditeーNepouite、Antigoriteまた10Å型はKeroliteーPimeliteであると考えられる。その他に7・10Åの混合型に分類されるガ-ニエライトも両鉱山に少量みられ、これらの含ニッケル鉱物の生成条件の差異を検討している。

含ニッケル・ラテライト鉱床の風化過程(ラテライト化作用)は極めて複雑で,多くの要因が組み合されており,同一地域の鉱床においても地下深度別によるプロフアイルでの元素の濃集度や構成鉱物に差異がみられ,普遍的な法則性を見出すことは困難である。本研究ではおもにフイリピンのPulot,Rio Tuba,Hinatoiuan鉱山の鉱床プロファイルにおける地表からの深度別試料での構成鉱物・化学組成・生成過程などの比較檢討をおこなつている。1)鉱床プロファイルでは,地表からラテライト層,サプロライト層,基盤岩に区分される。2)ラテライト層とその下位のサプロライト層ではその化学組成,構成鉱物などに大きな差異がみられる。3)ラテライト層はL_1,L_2,L_3の3つのsub-zoneに区分が可能であるが,ラテライト層の主部はL_3 sub-zoneで占められ,地域によつてL_1,L_3は非常に薄いかまたは存在しない場合もある。4)ラテライトとサプロライト層の境界は明瞭な境をもつ例はまれで,一般に数cm数10cmの漸移帶とよぶべき部分が観察される。5)プロファイルの深さにともなう化学組成の変化でラテライト層中のL_1,L_2 sub-zoneでは変化に乏しく,Feの高い値,MgO SiO_2の低い値で特徴づけられるが,L_3および漸移帶ではSiO_2,MgOの急激な上昇,Feの急な減少がみられる。6)サプロライト層は化学組成の面では比較的安定しており,ほゞ一定したSiO_2,Fe,MgOの値を示す。8)深度別のそれぞれの層中でいくつかの微量元素の挙動に変化がみられる。一方ラテライトとその変質母岩との間の微量成分の分布に差異がみとめられず成因的に密接な関係を示す。7)クエン酸ソーダ処理によるラテライト中のNiはNi(OH)_2の形で針鉄鉱に,サプロライト層のNiは含水Mgーけい酸塩鉱物として存在する。8)深度による磨はくpH値で,サプロライト層は(7.29.0),ラテライト層では(5.66.0)を示す。
染色体脆弱部位におけるファンコニ貧血蛋白質群の機能解明

siRNAライブラリーを用いたポストゲノム的なアプローチにより複製ストレス応答制御機構に機能する遺伝子群の同定を行った結果、クロマチンリモデリングに機能する複数の遺伝子を同定し、そのうちの一つはファンコニ貧血原因蛋白質であるFANCD2と結合することを明らかにした。この遺伝子(D2RP:D2 related protein)の機能の解析を行ったところ、D2RPはFANCD2と結合するが、DNA損傷時におけるFANCD2の損傷部位への移行には関与していないことを明らかにした。siRNAライブラリーを使用したポストゲノム的なアプローチを用いて、複製ストレス応答に働く遺伝子群の同定とその機能解析を目的とした実験を行ってきました。その結果、現在までにクロマチンリモデリングに機能する複数の遺伝子を同定し、そのうちの一つであるヒストンアセチル基転移酵素についてはファンコニ貧血原因遺伝子であるFANCD2と結合することを明らかにしました。この遺伝子(D2RP:D2 related protein)の機能の解析を行ってきました。まず、D2RP遺伝子の発現抑制時におけるMMCやシスプラチンなどのDNA架橋剤に対する感受性を解析したところ、コントロールと比較して有為に感受性が増加していることがわかりました。しかしながらD2RP遺伝子の発現抑制時おいてもFANCD2のクロマチン上への移行も増加しており、さらにフォーカスの形成も増加が認められました。このことよりD2RPはFANCD2と結合しますが、FANCD2のDNA損傷部位への移行には関与していないことが明らかになりました。さらに、H2AXのリン酸化レベルの増加や、DNA損傷修復経路と複製フォークの安定性維持機構の2つのネットワークに共通する因子であるRad51タンパク質のフォーカス形成の増加が認められることからD2RP1発現抑制によるDNA損傷の亢進がひきおこされることがわかりました。さらに、D2RP1の変異体を作製し、細胞内に発現させたところD2RP1のN末端欠損変異体ではFANCD2との共局在がみられないことを明らかにしています。これらの結果からD2RP1がN末端でFANCD2と結合し、新たなDNA損傷修復反応経路に機能していることを明らかにしています。複製ストレス応答に関連している遺伝子をポストゲノム的なアプローチにより同定することを目的に実験を行っており、クロマチンリモデリングに機能する複数の遺伝子を同定してきました。そのうちの一つであるヒストンアセチル基転移酵素についてはファンコニ貧血原因遺伝子であるFANCD2と結合することを明らかにしており、この遺伝子(D2RP:D2 related protein)の機能解析を行ってきました。D2RP遺伝子の発現をsiRNAによって抑制し、MMCなどのDNA架橋剤に対する感受性を解析したところ、コントロールsiRNAを導入したときと比較して有為に感受性が増加していることがわかりました。またそのときのMMC投与後にみられるFANCD2のfocus数もコントロール時と比較して増加しており、FANCD2のクロマチン上への移行も増加していることを明らかにしました。これらの結果よりD2RPはFANCD2と結合しますが、DNA損傷部位への移行には関与していないことが考えられます。さらに、D2RP1発現抑制時においてはDNA複製ストレス応答反応におけるH2AXのリン酸化レベルの増加や、DNA損傷修復経路と複製フォークの安定性維持機構の2つのネットワークに共通する因子であるRad51タンパク質のフォーカス形成の増加が認められることも明らかにしました。このことからD2RP1発現抑制によるDNA損傷の亢進が示唆されることより、D2RP1がFANCD2と結合し、新たなDNA損傷修復反応に機能している可能性があります。本研究において、DNA損傷後における複製ストレス応答制御機構を解明することを目指して実験を行ってきました。まず、複製ストレス応答の異常が発症の大きな要因となるファンコニ貧血の原因遺伝子群の機能解析を目的として、抗癌剤や放射線への感受性を用いた遺伝学的解析によってファンコニ貧血遺伝子群の詳細な機能解析を行いました(Cell Reports, 2014)。さらに、siRNAライブラリーを使用したポストゲノム的なアプローチによって、複製ストレス応答制御機構に機能する遺伝子群の同定を行いました。その結果、現在までにクロマチンリモデリングに機能する複数の遺伝子を同定し、そのうちの一つについてはファンコニ貧血原因遺伝子であるFANCD2と結合することを明らかにし、この遺伝子(D2RP:D2 related protein)の機能の解析を行ってきました。D2RP遺伝子の発現抑制時におけるMMCやシスプラチンなどのDNA架橋剤に対する感受性を検討したところ、コントロールと比較して有為に感受性が亢進していましたが、FANCD2のクロマチン上への移行増加が認められました。これら結果より、D2RPはFANCD2と結合しますが、DNA損傷時におけるFANCD2の損傷部位への移行には関与していないことが明らかになりました。さらに、D2RP遺伝子の発現抑制時にはH2AXのリン酸化レベルの増加や、FANCD2のフォーカスだけではなく、DNA損傷修復経路と複製フォークの安定性維持機構の2つのネットワークに共通する因子であるRad51蛋白質のフォーカス形成の増加が認められることからD2RP1発現抑制によりDNA損傷の亢進がひきおこされることがわかりました。

複製ストレス応答に機能している新たな遺伝子を同定する目的で実験を行っていますが、現在までにFANCD2に結合し、複製ストレス応答に機能する新たなヒストンアセチル化酵素であるD2RP遺伝子の機能解析をすでに行っており、FANCD2との機能の関連について解析を進めています。D2RPは核内においてはフォーカス形成が認められますが、このフォーカスにおけるFANCD2との共局在と機能関連を明らかにしています。さらにD2RPの予測される機能ドメインの解析を、D2RP変異体を作製することによってすでに行っています。D2RPはN末端にセリンリッチ領域があり、C末端にアセチル-CoA結合部位がありますが、これらの部位を欠失させた変異体を作製し、FANCD2との結合を確認したところ、セリンリッチ領域部位変異体においてはFANCD2との結合の減少が認められましたが、アセチル-CoA結合部位変異体に関してはFANCD2との結合に変化が認められませんでした。次にこれらの変異体の核内におけるフォーカス形成における機能をみたところ、野性型D2RP蛋白質は核内にフォーカスを形成し、FANCD2と共局在しますが、セリンリッチ領域変異体では核内フォーカスの減少と、FANCD2との共局在の明らかな減少が認められました。しかしながらアセチルCoA結合部位変異体についてはフォーカスの形成やFANCD2との共局在には変化が見られませんでした。これらの結果より、D2RPの核内フォーカス形成とFANCD2との結合にはD2RPのN末端セリンリッチ領域が重要であるが、その結合はアセチル化には依存しないことより、FANCD2と結合してDNA損傷修復反応経路に機能するときにはD2RPのセリンリッチ領域が重要である可能性が考えられます。その理由(最大800文字、改行は5回まで)FANCD2結合ヒストンアセチル化酵素であるD2RP遺伝子の機能解析を行ってきましたが、FANCD2との機能の関連について解析を既に進めています。D2RPはMMC投与後においてはフォーカス形成が認められますが、このフォーカスにおけるFANCD2との共局在を明らかにしています。さらに、D2RPはN末端のセリンリッチ領域にリン酸化部位、C末端にアセチル-CoA結合部位がありますが、これらの部位を欠失させた変異体を作製し、FANCD2との結合を確認したところ、リン酸化部位変異体においてはFANCD2との結合の減少が認められましたが、アセチル-CoA結合部位変異体に関してはFANCD2との結合に変化が認められませんでした。またD2RPのリン酸化部位変異体についてはMMC投与後におけるフォーカス形成の減少がみられましたが、アセチル-CoA結合部位変異体についてはフォーカス形成の変化は見られませんでした。
Adipose tissue flap creation in an in vivo Tissue Engineering Chamber in rabbit

本研究の目的は、in vivo TECで「より効率的にadipose flapを再生するための至適条件」を検証することである。1)本研究ではまず、移植血管束(脂肪を可及的に除去)モデルと血管束に脂肪を付着したadipose tissue attached血管束とに実験群を分け、それぞれの再生脂肪組織量を比較した。また、2)血管束として用いる血管のポテンシャルの違いによって、再生組織量が異なるかの比較実験を、Vascular sourceとして、浅下腹壁動静脈と副伏在動静脈(既存データ有)を用いた実験も終了し、データの解析中である。実験結果は、血流量の多い血管(副伏在動脈)の方が、組織再生量が多いことが示されそうである。以上、臨床応用に当たっての血管束の条件が実験データーから明らかにされる。これまでの実験研究は、当初の予測通りであり問題なく行うことが出来た。周囲脂肪組織を除去したモデルにおける再生脂肪組織量と周囲脂肪組織を温存した再生脂肪組織量(既存データ有)とを比較する実験は、現在進行中です。また、(血流量が少なく)再生脂肪組織量が少ない場合に、再度collagen sponge, PRPとbFGFを追加投入することで脂肪増生が可能かについては,上記実験が終了後に予定している。動物実験数が予定より少なく、支出が少なくなりました。今年度、その分の実験を行うので余剰額は使用することになります。