hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
生理的条件で効率よく機能する化学発光型センサー分子の開発

(2) 7-ヒドロキシクマリンの5位に1,2-ジオキセタン環を導入した分子を合成し、その化学発光能のpH依存性を検討: 7-ヒドロキシクマリンは、中性付近でも強い蛍光強度をしめすため、本骨格の利用を検討した。目的化合物は、合成に工夫が必要で、種々の合成経路を検討する必要があったが、検討した結果、合成に成功した。本化合物の化学発光能のpH依存性についても検討を加え、期待通りpH 7付近でも発光能をかなり保っていることを明らかにできた。また、発光の半減期はかなり長く、2時間ではほとんど減衰は見られなかった。年度初めに計画していた分子内水素結合を施したフェノール性化学発光分子及び7ーヒドロキシクマリン型化学発光分子については、合成と化学発光能のpH依存性の検討については、共に当初の計画通り遂行することができたため、評価を(2)とした。後者の合成には種々の検討を要したために、予想より時間がかかったことより、(1)の評価に足る成果にまでは至らなかった。化学発光プローブは、それ自身蛍光プローブより感度が格段に高く、また、励起光が必要のない点、簡便に計測可能な利点を有している。一方で、酵素活性や刺激に応答できるものでは、多くはフェノキシドの生成を引き金にするため、中性条件ではほとんど発光しないことや、水中では発光強度が極端に低下することが課題である。平成29年度には、ジオキセタン型フェノールであるAMPDとフェノール性水酸基のオルト位にアセタミド基を導入した1を合成し、pHプロファイルについて期待通りの結果を得ている。平成30年度は、実際のクロモフォアとなる3ーヒドロキシ安息香酸メチル(A)の4位に各種のアシルアミド基を導入した化合物を合成し、有機溶媒中及び中性から弱塩基性の各pHにおけるバッファーでのそれらの蛍光スペクトルを測定し、そのプロファイルを比較した。アセトニトリル中では、4位にアセタミド基を導入した化合物(B)が最も蛍光強度が大きかった。また、バッファー中では、蛍光のプロファイルが(A)よりも(B)の方が約pH1だけ、中性側に有利な結果となり、前年度行った化学発光分子の特性とよい相関を示した。また、平成30年度は、AMPDと1の化学発光におけるpHプロファイルをさらに詳細に実験的に解析した。特に、水溶液中で分子内のNH-O水素結合が予想通り起きているかどうかについては、Bの1H NMRでアセタミド基の隣のベンゼン環水素のシフトから、NH-O水素結合を形成する向きにアミド基が向いていることが示された。さらに、DFT計算による理論的な面でも分子内水素結合が確かに生じていることを支持する結果を得た。これらの結果を合わせて、研究結果をOrganic Lettersにて公表した。この過程で、化学発光分子1の単位時間当たりの発光量がAMPDより50倍大きく、一方熱安定性は3倍高いという興味深い結果を得た。フェノール性水酸基に対して分子内水素結合を形成するように設計した分子1のpHプロファイルが、そのような水素結合を形成しないAMPDと比較して約1酸性側にシフトすることを、実際のクロモフォアを合成してそれらの蛍光スペクトルの比較によっても同様の振る舞いが確認できた。1で分子内水素結合が実際に形成されているかどうかについても、NMR実験とDFT計算の両方がそのことを支持する結果が得られたことから、確認できた。平成30年度は、化学発光能について検討した結果、化合物1の方がAMPDに比較して半減期は60分の1と遙かに短く、それを反映して単位時間当たりの発光量は50倍大きかった。
膵癌におけるケモカインを介したがん間質(CAF)との相互作用メカニズムの解明

当教室では多くの膵癌細胞株と、そのGemcitabine耐性株や放射線耐性細胞株を有しており、さらに膵癌切除標本からprimaryのCAFを分離培養する実験系も確立している。また当教室は年間60例の膵癌切除を行っており、これは全国的にみても有数の切除症例数を誇っている。これらを用いて、以下に示す実験計画に沿って、膵癌とCAFとのinteractionのメカニズムの解明と、nab-PTXなどの現存治療を用いた有効な治療戦略の構築、さらにchemokineおよびchemokine receptorをtargetにした、新規治療薬の開発を行う。
FPC発症におけるがん遺伝子とガン抑制遺伝子の役割

我々はFPCの腺腫および癌を解析した結果、非遺伝性大腸癌と同様に、Kーras遺伝子の点突然変異、第5、17、18染色体のヘテロ接合性の消失、p53遺伝子の点突然変異、DCC遺伝子の発現異常を認め、さらには癌へと進行する過程においては第22染色体のヘテロ接合性の消失が重要であることを示し、FPC患者における大腸癌発症に寄与する少なくとも5個の遺伝的事件を観察した。これらの観察に基づき、FPCおよび大腸癌発現に必要充分な遺伝的事件とその順序を決定し、発癌の分子機構の解明とそれにのっとった治療法の開発を目的とした。この目的を達成するために、gene targetingの手法を用いて大腸癌細胞株における癌遺伝子、癌抑制遺伝子の破壊と置換、さらにtargeting mouseの作製を計画した。まず、癌遺伝子、癌抑制遺伝子に点突然変異をもつ大腸癌細胞株に対し、その遺伝子の破壊および置換をするための系を確立し、Kーras遺伝子の^<13>Gly→^<13>Aspの点突然変異、p53遺伝子の^<241>Ser→^<241>Pheの点突然変異、およびDCC遺伝子、cーmyc遺伝子の発現異常などの変異を持つ大腸癌細胞株を対象とした。Kーras遺伝子に変異を持つ細胞株(DLDー1,HCT116,HCT15)を用い、その変異遺伝子を破壊した細胞株をクロ-クングし、細胞形態の変化、およびin vitro,in vivoでの腫瘍特性の消失を認めた。このことよりこれらの細胞株におけるKーras遺伝子の点突然変異の大腸癌発生過程における重要な役割を確認した。さらに、破壊されたKーras遺伝子を再度、点突然変異( ^<12>Gly→^<12>Cys)をもつ遺伝子と置換し、腫瘍特性の回復を検討中である。また、これらの親細胞株とKーras遺伝子の破壊されたクロ-ンにおいて、他の癌遺伝子、癌抑制遺伝子の発現等を比較することは、大腸癌発生の分子機構を解明する上で有用であると考えられた。
分配と支援の未来

◇ものや行為が生産され消費されるその過程のどこで、何が、どのように分配され提供されるべきか、それを社会のどの領域が担当するか。広義の分配的正義について、関連する事実・言説を収集・整理し、公表した。そして規範的な論を構築した。◇各主題について文献表、文献紹介、年表、等を作成、http://www.arsvi.comに掲載。随時更新。年間ヒット数約900万件。以下主題例。多文化主義・多言語主義、クローバリゼーションなど国家・国境に関わるもの。ベーシック・インカム等所得保障政策関連。ワークフェア、労働の義務、女性と労働等、労働と社会政策関連。ビジネスエシックス、社会的責任投資等、市場のあり方に関わるもの。パターナリズム、介助等、介入・決定や社会サービスに関わるもの。リベラリズム、リバタリアニズム、共同体主義、等、政治哲学・規範理論の諸潮流。アフリカのHIV/AIDS。ALS(筋萎縮性側索硬化症)、神経難病の人の介助やコミュニケーション。日本の障害者運動の歴史。高齢者福祉政策・医療政策。治療停止・尊厳死を巡る事態の推移・議論。◇多くの著書・論文が発表された。立岩の単著・共著では『ALS』『所有と国家のゆくえ』『希望について』『良い死』『流儀』『唯の生』。後3者は2008・2009年の刊行だが、本研究の成果。他に2005年開始の『現代思想』連載をもとにした著作が2009年、2010年と刊行される。後藤の論文・学会報告等も多数。上農の『言語』での連載「バベルの呼び声」が2008年に開始・終了(全12回)。◇他に(書店では販売されない)報告書として、『貧しい国々でのエイズ治療実現へのあゆみ--アフリカ諸国でのPLWHAの当事者運動、エイズ治療薬の特許権をめぐる国際的な論争』(第1部縲恆4部)『生存の争い--のために・1』『闘争と遡行・1--於:関西+』『<障害者自立支援法案>関連資料』『社会運動研究の現代的課題』『「高度成長」再論』を刊行。随時更新。以下主題例。・研究の初年度として、幾つかの基本的なテーマについて基礎的な情報を収集、整理し、ホームページに掲載した。・テーマとしては、グローバリゼーション、多文化主義、など国家・国境に関わるもの。ベーシック・インカム等所得保障政策に関するもの。ワークフェアなど労働と社会政策に関わるもの。そしてアフリカのHIV/AIDS、ALS(筋萎縮性側索硬化症)、日本の障害者運動の歴史、等。・作成・掲載した文書・ファイルは、各主題についての文献リスト、本の概要の紹介、諸論者の著作や主張の紹介、関連事項に関する年表、等。

掲載したのは立岩のホームページ(http://www.arsvi.com→「50音順索引」等)、立命館大学大学院先端総合学術研究科のホームページ(http://www.ritsumei.ac.jp/acd/gr/gsce/→「データベース」→「事項索引」「人」「文献」「歴史」等)。その一部については英語への翻訳作業を開始した。・とくにアフリカ、とくにサハラ砂漠以南のHIV/AIDSについては、その概況、薬品の特許権を巡る企業、国家、国家間の動向、国連、国家、民間組織による国際的な支援の動きについて、この領域で活動するNGO(アフリカ日本協議会)とともに、資料を収集し、ひとまずの整理を終えた。資料集を刊行する予定。・立岩の著作として『ALS--不動の身体と息する機械』が刊行された。・研究の第2年度として、幾つかの基本的なテーマについて基礎的な情報を収集、整理し、ホームページに掲載した。既に掲載されているものについて更新、拡充した。・テーマとしては、グローバリゼーション、多文化主義、など国家・国境に関わるもの。ベーシック・インカム等所得保障政策に関するもの。ワークフェア、家事労働、性別分業など労働と社会政策に関わるもの。ビジネスエシックス、社会的責任投資等、市場のあり方に関わるもの。パターナリズム、介助等、介入・決定や社会サービスに関わるもの。リベラリズム、リバタリアニズム、共同体主義、等、政治哲学・規範理論の諸潮流。そしてアフリカのHIV/AIDS、ALS(筋萎縮性側索硬化症)、日本の障害者運動の歴史、等。・作成・掲載した文書・ファイルは、各主題についての文献リスト、本の概要の紹介、諸論者の著作や主張の紹介、関連事項に関する年表、等。・とくにアフリカ、とくにサハラ砂漠以南のHIV/AIDSについては、その概況、薬品の特許権を巡る企業、国家、国家間の動向、国連、国家、民間組織による国際的な支援の動きについて、この領域で活動するNGO(アフリカ日本協議会)とともに、資料を収集し、ひとまずの整理を終え、資料集を刊行した。・「障害者自立支援法」制定過程を調査し、資料集を刊行した。・日本、とくに関西の障害者運動の歴史の記述と、とそこに浮上した論点について考察する論稿とを合わせた冊子を刊行した。・安楽死・尊厳死を巡る事実経過を略述した上で、そこについての考察をまとめた冊子を刊行した。・幾つかのテーマについて情報を収集、整理し、ホームページに掲載する作業を継続。ワークフェアなど労働と社会政策に関わるもの。
ギリシア悲劇-現代の上演の研究

本研究は、ギリシア悲劇の現代上演について、欧米と日本に分けてその概要を検証した後に、それぞれにおいてメルクマール的な役割を果たす二つの上演、日本については東京大学ギリシヤ悲劇研究会における実質的なギリシア悲劇の初演(1958-)と、欧米については「現代」上演を導入したと言って良いシェクナーのDionysus in69(1968)について、文献及び映像資料を用いてその実態を解明し、現代的意義を明らかにしようとしたものである。最初の概要に関しては、日本の上演では鈴木・蜷川以降を中心に戦後のギリシア悲劇上演を総括し、欧米に関しては、1968年のシェクナーとリヴィング・シアターを一つの転機として、ギリシア悲劇のポストドラマ的上演が一般的になったことを示した。ギリシヤ悲劇研究会の上演に関しては、それが文献学的知見を駆使して、「古代様式の復元」を標榜しつつも復古的上演を目指したものではなく、あくまで現代における上演意義を念頭に置いていたこと、他方、彼らがこだわった舞台とオルケストラの分離が、演劇的にはうまく機能していなかったことを示した。Dionysus in 69に関しては、この上演が演劇というシステムを祭祀の側へ引き戻そうとするポストドラマ的意識に貫かれていたこと、そのために演技のある種の様式性を利用するのではなく、演技という行為を自明化せず、常に俳優と役割と観客の間の関係に揺さぶりをかけていたことを明らかにした。本年度は、ポストドラマ演劇の状況の下でのギリシア悲劇の上演についての資料を収集し、調査を行った。問題は、ドラマの終焉という時代認識の下で、演劇上演がギリシア悲劇に何を求めたかである。シェクナーのPerformanceGroupは1968年に、観客を巻き込むグロトフスキー流祭祀演劇としてエウリピデスの『バッコスの信女たち』を上演した。また、その少し前に、ジュディス・マリーナとジュリアン・ベックのThe Living Theatreは、ソフォクレスの『アンティゴネ』をヘルダーリンがドイツ語訳したもののブレヒトによる改版を用い、それを英語化し、テキストにさらに改変を加えることで、独自の、ポリフォニー的な演劇を作り上げることに成功した。彼らはこの上演を実に20年近くにわたって続けていたが、67年のアメリカでのこの作品の上演は、『アンティゴネ』のアメリカでの上演としては20世紀のもっとも早いものの一つである。70年代に入ると、彼らほど前衛演劇の意識を前面に出さないペーター・シュタインの現代的な上演と、テキストの大胆な改変と再構成という点ではシェクナーを上回る鈴木忠志の一連のギリシア悲劇上演が、ドラマの週末状況をギリシア悲劇の持つ一種の原ドラマ性、あるいは祭祀性によって打開しようとする試みとして重要であることが確認された。祭祀性とポリフォニー性という二つの上演傾向は、1989年の太陽劇団による『タウリケのイフィゲネイア』と『オレステイア』の上演によって結合され、前衛的な劇団によるギリシア悲劇の可能性の追求の頂点を迎えることになるが、その過程の検討が次年度の課題である。本年度は、前年に引き続き、ポストドラマ演劇状況の中でのギリシア悲劇上演という状況認識に基づく欧米の代表的な上演についての資料調査を行い、シェクナーとパフォーマンス・グループについての研究を論文化すると共に、リヴィング・シアターの『アンティゴネ』上演について学会発表をおこなった。シェクナーにおいてギリシア悲劇がその祭祀性において現代演劇にとって重要性を持っていたのに対し、シェクナーと同じ68年に初演されたリヴィング・シアターの『アンティゴネ』上演では、同時代的視点ではむしろそのアナルコ・サンディカリズム的傾向だけが重視されていたが、演劇のポリフォニー的展開が見いだされた。これは、すでに『アンティゴネ』に、イデオローグとしての登場人物による解決なき葛藤として萌芽的に見いだされ、エウリピデスの後期作品において全面的に展開することになる可能性であった。リヴィング・シアターが用いたブレヒトのテキスト自体はこのギリシア悲劇のポリフォニー的傾向をむしろ抑圧するものだったが、彼らが、ブレヒトがリハーサル用に用いた別テキストの混入、登場人物と俳優の意図的な分離と結合を通じて、ソフォクレスのサブテクストを前景化することに成功したことを、発表で示した。

本年度のもう一つの課題は、これも昨年から引き続いてのものであるが、古代劇場遺跡を利用したギリシア悲劇上演の可能性の研究である。昨年度、ギリシアの古代劇場遺跡における上演を調査したが、本年度は、イタリアのシラクサにおける、より、娯楽化・大衆化した上演形式を調査した。古代劇場は、それだけでなく、例えばストロープとユイエに見られるように、演劇の異化効果を高めるための重要な手段であることも検討課題として浮かび上がってきた。本年度は、主として日本におけるギリシア悲劇上演の歴史を調査するとともに、欧米を中心とした海外のギリシア悲劇の現代上演を、1968年のシェクナーのDionysus in 69および同年のLivint Theareのブレヒト版アンティゴネを起点として、イデオロギー性と形式性の二つの観点から研究した。日本においては、特に1958年から13年間に及んだ東京大学ギリシヤ悲劇研究会の上演実践について、その「古代様式の復元」の実態がいかなるものだったのかを、特に最初の五年間を中心に詳細に検証し、その後の鈴木・蜷川を中心とする日本の上演の検討をおこなった。欧米に関しては、イデオロギー的契機と様式的契機のそれぞれについて、シェクナー、リヴィング・シアター、ペーター・シュタイン、太陽劇団など、時代を画する上演の検討を行い、時代状況への反応が鋭い様式的意識と結びつくときにギリシア悲劇の上演が影響力が大きなものになることを確認した。特にリヴィング・シアターの『アンティゴネ』に関しては、場面ごとの分析を通じてその上演の持つ大きな意義を検証した。これは一年目にシェクナーのDionysus in 69についておこなったのとほぼ同じ方法を用いている。この方法での研究は、鈴木の「悲劇-アトレウス家の崩壊」に関してもおこなった。文献だけでなく映像資料に非常に大きく依存する方法であり、研究対象の初期に位置する60年代の上演については映像資料が断片的であることに困難が認められたが、全体としては価値ある研究になりえた。これらの研究に基づいて、三月に、研究成果の報告書を作成した。
地層処分では変質は悪なのか？－ベントナイトの変質に着目した天然バリアの物性の解明

地層処分において,人工バリア材の変質による膨潤性能や透水性能の低下は,緩衝材の性能を劣化させる負の効果である反面,変質によるベントナイトの粘性の低下等により,天然バリア材中の亀裂を閉塞させてバリア機能を高めるといった正の効果と捉えることもできる.本研究では,人工バリア材(ベントナイト)の性能劣化に及ぼす変質タイプの影響を明らかにするとともに,変質ベントナイトの亀裂閉塞による岩盤の性能向上の関係性を明らかにする.地層処分において,人工バリア材の変質による膨潤性能や透水性能の低下は,緩衝材の性能を劣化させる負の効果である反面,変質によるベントナイトの粘性の低下等により,天然バリア材中の亀裂を閉塞させてバリア機能を高めるといった正の効果と捉えることもできる.本研究では,人工バリア材(ベントナイト)の性能劣化に及ぼす変質タイプの影響を明らかにするとともに,変質ベントナイトの亀裂閉塞による岩盤の性能向上の関係性を明らかにする.
ミトコンドリア酸素・カルシウム制御におけるミトフュージン機能の解明

1低酸素ストレスによる脳血管内皮細胞の異常な細胞増殖は、血液脳関門を破綻させ、低酸素脳症の悪化に関与することが知られているが、その分子機構については不明な点が多い。これまでの研究で、脳血管内皮細胞株であるt-BBEC117細胞は、低酸素ストレスによりストア作動性Ca2+流入を増大させるが、その分子実体であるOrai1/Orai2のタンパク質発現量は変化させなかった。本研究では、脳血管内皮細胞の膜電位制御に関与する内向き整流性K+チャネルであるKir2.1チャネルとその発現を調節するダイナミン2に注目した。低酸素ストレスによって、ダイナミン2の発現は増加した。ダイナミン阻害薬は、低酸素ストレス誘発性Kir2.1チャネルの発現増加と活性上昇を抑制した。低酸素ストレスによるダイナミン2を介したKir2.1チャネルの活性増大が、脳血管内皮細胞の異常な細胞増殖を起こすことから、この機構が低酸素脳症における血液脳関門の破綻に関連することが示唆された。2平滑筋Ca2+マイクロドメインはタンパク質複合体のプラットフォームであり、効率的なシグナル伝達に重要であると認識されている。本研究では、筋小胞体とミトコンドリアを近接させるミトフュージン2の細胞内Ca2+動態における役割の解明を目指した。ミトフュージン2のノックダウンによって、アゴニスト誘発性Ca2+増加に伴う細胞質Ca2+緩衝能は緩徐になり、ミトコンドリアCa2+取り込み能は低下した。ミトフュージン2のmRNA発現は酸化ストレスにより増加し、その発現亢進は活性酸素のスカベンジャーによって抑制された。活性酸素誘発性のミトフュージン2発現亢進はミトコンドリアの融合を促進した。平滑筋Ca2+マイクロドメインにおいて、筋小胞体とミトコンドリアの機能連関を促進するミトフュージン2は、細胞内Ca2+制御におけて重要な機能を果たしていると考えられる。28年度が最終年度であるため、記入しない。1低酸素培養(酸素濃度45%、72時間)のウシ脳血管内皮細胞株(t-BBEC117)において、Kir2.1のタンパク及び機能発現が増加していることを明らかにした。更に、低酸素培養により、ストア作動性Ca2+流入(SOCE)が増強すること、この増強の一部が100μM Ba2+によって減少することを明らかにした。一方、SOCEを起こす分子実体として知られるOraiやSTIM、TRPチャネルのmRNA・タンパクの発現は、低酸素によって影響を受けなかった。低酸素下で培養されたt-BBEC117は通常酸素下の場合と比べて有意に細胞増殖が促進した。この作用は100μM Ba2+によるKir2.1の阻害により減少した。以上より、脳血管内皮細胞の低酸素培養は、Kir2.1の発現・機能上昇を引き起こし、細胞膜の過分極によってSOCEを増大させている可能性が示唆された。2血管平滑筋細胞株であるA10を用いて、ミトフュージン2(Mfn2)の機能を調べた。Fluo-4/AMとRhod-2/AMを用いて、細胞質内Ca2+濃度とミトコンドリア内Ca2+濃度を共焦点レーザー顕微鏡で同時に測定した。siRNAによりMfn2を選択的にノックダウンしたところ、100 nMバソプレシンによっておこる細胞質内Ca2+濃度上昇の持続時間の延長とミトコンドリアへのCa2+取り込みの減少が観察された。この結果は細胞内のCa2+緩衝能に対してMfn2が重要な役割を担っていることを示唆している。また、種々のストレスによるMfn2発現変化について調べた。A10に対してH2O2で刺激を行うと、細胞死が起こる濃度域でMfn2の発現上昇が観察された。一方、昇圧ホルモンや無血清培養などの弱いストレス下ではMfn2の発現上昇が見られた。A10の細胞増殖に対するMfn2の影響を調べたところ、Mfn2のノックダウンにより細胞増殖が減弱したことから、Mfn2は平滑筋の増殖に対して正の働きを持つことが判明した。これらの結果は細胞ストレス下での平滑筋リモデリングに対してMfn2が寄与する可能性を示している。1低酸素下培養(酸素濃度45%、72時間)という生体内で起こりうるマイルドなストレス刺激によって、脳血管内皮細胞モデルにおいてKir2.1発現が増大し、細胞増殖に対して正に寄与するということを世界で初めて明らかにした。この研究成果は国際誌に投稿中である。2これまでに、Mfn2がミトコンドリアと小胞体の間の物理的・機能的な連関に対して、正に働くという報告と、負に働くという報告の2つがある。我々のsiRNAを用いた検討では前者を支持する結果を得た。また、種々の細胞ストレスによってMfn2の発現が下での平滑筋リモデリングに対してMfn2が寄与する可能性を示した。

ダイナミン阻害薬は、低酸素ストレス誘発性Kir2.1チャネルの発現増加と活性上昇を抑制した。低酸素ストレスによるダイナミン2を介したKir2.1チャネルの活性増大が、脳血管内皮細胞の異常な細胞増殖を起こすことから、この機構が低酸素脳症における血液脳関門の破綻に関連することが示唆された。2平滑筋Ca2+マイクロドメインはタンパク質複合体のプラットフォームであり、効率的なシグナル伝達に重要であると認識されている。本研究では、筋小胞体とミトコンドリアを近接させるミトフュージン2の細胞内Ca2+動態における役割の解明を目指した。ミトフュージン2のノックダウンによって、アゴニスト誘発性Ca2+増加に伴う細胞質Ca2+緩衝能は緩徐になり、ミトコンドリアCa2+取り込み能は低下した。ミトフュージン2のmRNA発現は酸化ストレスにより増加し、その発現亢進は活性酸素のスカベンジャーによって抑制された。活性酸素誘発性のミトフュージン2発現亢進はミトコンドリアの融合を促進した。平滑筋Ca2+マイクロドメインにおいて、筋小胞体とミトコンドリアの機能連関を促進するミトフュージン2は、細胞内Ca2+制御におけて重要な機能を果たしていると考えられる。1低酸素培養によってKir2.1の発現が増大する分子メカニズムを解明する。これまでの検討から、mRNAレベルではKir2.1の発現量は変化しないものの、タンパク質量が増大することを明らかにしている。Kir2.1の分解経路として、リソソーム分解系が知られている。従って、低酸素培養下におけるリソソーム分解系に関わる分子群の発現・活性変化を明らかにする。また、低酸素ストレスによってダイナミン2の発現が減少することが報告されている。そこで、低酸素培養されたt-BBEC117細胞におけるダイナミン2の発現変化とKir2.1の細胞内への取り込みへの影響について明らかにする。2Mfn2の細胞内Ca2+緩衝能に対する影響をより詳細に明らかにする。これまでは細胞質内とミトコンドリア内のCa2+濃度の2色の同時測定であったが、更に小胞体内のCa2+濃度も同時に測定し、アゴニスト刺激によって誘発されるCa2+シグナリングの各オルガネラ間の共役をリアルタイムで可視化する。この共役に対するMfn2の働きをsiRNAによるノックダウン実験で明らかにする。3低酸素刺激時および平滑筋の分化・脱分化時のMfnの発現変化を明らかにし、平滑筋リモデリングに対するMfnの役割を明らかにする。28年度が最終年度であるため、記入しない。
膜の相分離によるリポソームの変形機構を利用した新規薬剤送達システムの開発

本研究の目的は,環境条件による相分離を利用した新規リポソームDDS(薬剤送達システム)の開発である.研究代表者はリポソーム内で無細胞タンパク質合成を行わせることにより,目的のタンパク質のみを発現させたリポソームが構築可能であることを示してきている.最近,細胞間で相互の物質輸送を担う膜タンパク質・コネキシンをリポソーム膜に発現・提示しうるとの実験結果を得た.この結果を利用し,細胞へのDDSへの利用可能性を求めた.サイズおよび組成の異なるリポソーム環境で膜タンパク質を組み込み,培養細胞に水溶性蛍光色素を非破壊的に輸送することに成功した.またペプチド薬剤をモデルとして細胞内に輸送し,細胞内の遺伝子発現の制御が可能であること,異なるタイプのコネキシンの発現により標的選択性が得られることを示した.本研究の目的は,環境条件による相分離を利用した新規リポソームDDS(薬剤送達システム)の開発である.研究代表者はリポソーム内で無細胞タンパク質合成を行わせることにより,目的のタンパク質のみを発現させたリポソームが構築可能であることを示してきている.最近,細胞間で相互の物質輸送を担う膜タンパク質・コネキシンをリポソーム膜に発現・提示しうるとの実験結果を得た.この結果を利用し,細胞へのDDSへの利用可能性を求めた.サイズおよび組成の異なるリポソーム環境で膜タンパク質を組み込み,培養細胞に水溶性蛍光色素を非破壊的に輸送することに成功した.またペプチド薬剤をモデルとして細胞内に輸送し,細胞内の遺伝子発現の制御が可能であること,異なるタイプのコネキシンの発現により標的選択性が得られることを示した.本研究の目的は,環境条件による相分離を利用して,ステルス性と標的選択性とを両立させる新規リポソームDDS(薬剤送達システム)の開発である.申請者らのグループはこれまでにリポソーム内で無細胞タンパク質合成を行わせることにより,目的のタンパク質のみを発現させたリポソームが構築可能であることを示してきている.最近,細胞間でギャップジャンクション(GJ)を形成して物質輸送を担う膜タンパク質・コネキシンをリポソーム膜に発現・提示しうるとの実験結果を得た(論文投稿中).この結果を細胞への物質輸送に脂質分子の相分離現象に着目し,部分的に細胞選択性部位を露出することで選択性を求めた.複数成分の脂質からなる巨大リポソームを用い,二重蛍光染色と共焦点顕微鏡観察によって相分離を,また温度制御ステージを用いて温度依存性の確認を行った.巨大リポソームでの組成としてDMPC/SM/DOPCを用い,相分離の確認を行った.さらに,埋め込まれた膜タンパク質が相分離構造に応答しうることを抗体染色によって確認した.しかしながら,当初の予想と異なりエクストルーダを用いて形成された小サイズリポソーム(直径200-300nm)の環境においては異なる組成を調査する必要が生じた.DDSとしての利用には,このサイズで機能することが望ましい.そのため,当初の予定より期間を延長し,小サイズリポソーム環境で膜タンパク質が組み込まれたリポソームの活性測定を行った.その結果,小サイズのリポソームにおいてもコネキシンの機能活性を示しうる条件が求められた.本研究の目的は,環境条件による相分離を利用して,ステルス性と標的選択性とを両立させる新規リポソームDDS(薬剤送達システム)の開発である.申請者らのグループはこれまでにリポソーム内で無細胞タンパク質合成を行わせることにより,目的のタンパク質のみを発現させたリポソームが構築可能であることを示してきている.最近,細胞間でギャップジャンクション(GJ)を形成して物質輸送を担う膜タンパク質・コネキシンをリポソーム膜に発現・提示しうるとの実験結果を得た.この結果を細胞への物質輸送に用いるべく,脂質分子の相分離現象に着目し,部分的に細胞選択性部位を露出することで選択性を求めた.前年度までに,複数成分の脂質からなる巨大リポソームを用い,二重蛍光染色と共焦点顕微鏡観察によって相分離を,また温度制御ステージを用いて温度依存性の確認を行った.その知見を用いて,小サイズリポソーム環境で膜タンパク質が組み込まれたリポソームの活性測定を行った.その結果,小サイズのリポソームにおいてもコネキシンの機能活性を示しうる条件が得られた.この条件において,培養細胞(コネキシンを発現)の内部空間に水溶性蛍光色素(Calcein)を40-60%の効率で輸送することに成功した.加えて,巨大リポソームにコネキシンを発現させた系において培養細胞内にペプチド薬剤を輸送し,細胞環境の遺伝子発現の制御が可能であることを示し,さらに異なるタイプのコネキシンを発現させることにより,選択性を示しうることを報告した(Biomaterials,印刷中).
分裂酵母ミトコンドリアDNA結合タンパク質の機能解析と進化的考察

分裂酵母S. pombeで、我々が初めて同定したミトコンドリアDNA(mtDNA)結合タンパク質Cmb1と、出芽酵母S. cerevisiaeのミトコンドリア核様体(mt核様体)を構成する主要なDNA結合タンパク質Abf2pを比較することで、mtDNA結合タンパク質の進化を考察した。Abf2pとCmb1では、アミノ酸配列の保存性は非常に低く、Abf2pはDNA結合ドメインであるHMG boxを2つ保持するが、Cmb1はC末端側に1つだけ保持するという違いがある。Abf2p欠損株が示すmtDNAの不安定性を、Cmb1の高発現により相補できたことから、両者の機能に共通性があることが明らかになった。一方、ABF2プロモーターを用いて1コピーのCmb1遺伝子を発現させると、Abf2pの機能を相補できないことなどから、Abf2pとCmb1にはmtDNAの安定性に及ぼす作用に違いがあることが明らかになった。また、分裂酵母の37°Cでの高温培養において、Cmb1の欠損がmt核様体の凝集を引き起こすが、Cmb1の有無が呼吸活性自体には影響を及ぼさないことが明らかになった。これらの性質はS. cerevisiaeのAbf2p欠損株の性質とは異なっていた。Schizosaccharomyces属酵母4種のうちの1種S. japonicusからmt核様体を単離した。そして、mt核様体からHMG boxを2つ保持するmtDNA結合タンパク質(Abf2pホモログ)を新規に同定した。この結果から、分裂酵母の種によって、Abf2pホモログがもつHMG boxの数が異なることが明らかになった。本研究から、酵母のmtDNA結合タンパク質であるAbf2pホモログにはアミノ酸配列の多様性のみならず、mtDNAの安定性に対する作用にも違いがみられることが明らかとなった。代表的な出芽酵母Saccharomycescerevisiaeではミトコンドリア核様体(mt核様体)を構成する主要なDNA結合タンパク質として20 kDa Abf2pが同定され、ミトコンドリアゲノムの維持に必要なタンパク質であることが明らかになっている。Abf2p欠損株はエチジウムブロミド(EB)処理に対して高い感受性があり、EB処理により野生株よりも容易にmtDNAを失い呼吸欠損株になる。そこで、本研究では、分裂酵母のCmb1がAbf2pの機能をどのように相補するかを明らかにするために、Abf2p欠損酵母でCmb1を発現させて、EB感受性を調べた。その結果、Cmb1の発現によって、Abf2p欠損株はEB感受性が野生株と同じレベルに回復し、その効果はAbf2p自身を発現させるよりも高いことが分かった。また、EB処理によるmt核様体の消失もCmb1により抑制されることがわかった。この結果から、EB処理に対して、Cmb1は十分にAbf2pの機能を相補できることが初めて明らかになった。次に、Cmb1欠損によって分裂酵母にどのような障害がもたらされるかを解析した。Cmb1を欠損した酵母は、30°Cでの培養でミトコンドリアおよびmt核様体に目立った形態的変化が見られない。しかし、培養温度を37°Cに上げると、mt核様体の凝集が野生株よりも顕著におこる。そこで、30°Cと37°Cで培養した野生株とCmb1欠損株の酵母の呼吸活性を測定したが、Cmb1欠損によりmt核様体が凝集した酵母においても、呼吸活性は野生株と同等のレベルを維持していることが分かった。また、Cmb1欠損におけるシスプラチン感受性、EB感受性をスポットアッセイで調べた結果、意外にもCmb1欠損による顕著な感受性の増加はみられないことが判明した。平成27年度当初の計画どおり、出芽酵母Saccharomyces cerevisiaeのミトコンドリアDNA結合タンパク質Abf2p欠損による障害を、分裂酵母Cmb1が相補できるかについて調べることができた。また、分裂酵母Cmb1欠損株が示すミトコンドリア核様体形態の異常、薬剤感受性について明らかにした。一方、Cmb1欠損によるmtDNAコピー数の変動の解析、Cmb1がミトコンドリア以外にも局在する可能性の検証はまだ進行中であり、平成27年度当初の計画よりはやや遅れている。平成28年度は、まず、分裂酵母Schizosaccharomyces pombeのmtDNA結合タンパク質Cmb1の欠損が遺伝子発現にどのような影響を及ぼすかを検証した。S.pombe核遺伝子のアクチン遺伝子の発現を基準として、ミトコンドリアゲノムにコードされたATPaseサブユニットatp6および21S rRNA遺伝子の発現量をRT-PCR法により検出した。その結果、野生株とCmb1欠損株においてミトコンドリア遺伝子の発現量に差がほとんど認められないことが明らかになった。Cmb1の欠損がミトコンドリア遺伝子発現にどのような影響を及ぼすかを、引き続き検討中である。次に、Cmb1の発現が出芽酵母SaccharomycescerevisiaeのミトコンドリアDNA (mtDNA)結合タンパク質Abf2pの欠損による障害をどのように相補するかを詳しく解析した。これまでは、S. cerevisiaeにおけるCmb1の高発現の影響を調べてきたが、今回はシングルコピープラスミドpRS316にAbf2pのプロモーターで発現するCmb1遺伝子を組み込んで、同じ条件でのAbf2pの発現による影響とを比較した。

その結果、Abf2pの欠損によりおこるミトコンドリア核様体数の減少やミトコンドリア核様体の凝集は、Abf2pの発現により野生株の状態に回復するが、同じ条件でのCmb1の発現では回復せず、Cmb1の高発現条件下でのみ回復することが明らかになった。一方、Abf2pを高発現するとミトコンドリア核様体の凝集がおこった。この結果から、Abf2pとCmb1はmtDNAの安定化と維持において、機能的に異なる性質を持っていることが明らかになった。平成28年度は計画通り、Cmb1がミトコンドリアゲノムの遺伝子発現を制御している可能性を明らかにするために、野生株とCmb1欠損株のミトコンドリア遺伝子の転写活性を調べることができた。また、出芽酵母S. cerevisieのabf2遺伝子欠損株でみられるミトコンドリア核様体の凝集などの異常形態を、Abf2pとCmb1の発現により正常型に戻すことができるかを調べた実験から、Abf2pとCmb1はmtDNAの安定性に対して異なる機能を持っていることを明らかにできた。出芽酵母S. cerevisiaeのAbf2p欠損株では,37°Cでの高温培養において顕著なミトコンドリア核様体数の減少がおこる。また,30°Cでの培養でエチジウムブロミド処理に対して高い感受性を示し呼吸能を失う。平成29年度は,当初計画したようにCmb1タンパク質の全長だけでなく,Cmb1タンパク質のN末端側半分とC末端側半分を別々にS. cerevisiae Abf2p欠損株で発現させて,Abf2p欠損株が示すミトコンドリアDNA (mtDNA)の不安定性を相補するかを調べた。その結果,Cmb1タンパク質の全長を発現させた場合は,高温でのミトコンドリア核様体の減少とエチジウムブロミド感受性の両方を相補することができるのに対して,Cmb1タンパク質のN末端側半分とC末端側半分を別々に発現させた場合は,高温でのミトコンドリア核様体の減少だけを相補することができることが分かった。この性質は,出芽酵母S. cerevisiaeのミトコンドリアDNA結合タンパク質Abf2pの性質とは異なることから,Cmb1はS. cerevisiaeにおいてはAbf2pとは異なる機能をもつことが分かった。分裂酵母Schizosaccharomyces属の4種の酵母のうち,新たな分裂酵母としてS. japonicusを研究材料に選び,生活環におけるミトコンドリアとミトコンドリア核様体の形態を明らかにした。また,S. japonicusは,S. pombeに比べてミトコンドリア核様体の観察が非常に容易であることを明らかにした。そして,S. japonicusからのミトコンドリア核様体の単離方法を検討した結果,単離ミトコンドリア核様体から新規なmtDNA結合タンパク質を発見することができた。平成29年度の予定として計画したように,出芽酵母S. cerevisiaeのAbf2p欠損株を用いて,Cmb1タンパク質の全長だけでなく,Cmb1タンパク質のN末端側半分とC末端側半分の遺伝子配列を別々にプラスミドに組み込んで,S. cerevisiae Abf2p欠損株で発現させて,ミトコンドリアDNA (mtDNA)の不安定性を相補するかを調べた。
がんサバイバーの身体活力回復プログラ厶の構築と評価研究

乳がん治療後の体重増加と死亡率との関連が米国で指摘され、身体活動が推奨されている。本研究は日本人乳がん化学療法中の患者を対象に、2施設に介入群(身体活動積極的推奨群)と非介入群をおき、平均88.7日間身体活動量を計測した。この結果、一日平均歩数は6836.7歩、観察期間中平均体重増加率は3.3%、体重増加率と3.OMETs(metabolic equivalent)以上の一日平均身体活動時間と有意な負の相関にあり、1.5METs未満平均活動時間と抑うつ得点は強い相関があった。さらに治療後の体脂肪率の高さは身体的健康観の低さと有意に関連し、身体活動量の低下は体脂肪率の増加と心身の不調に関連していた。(1)がん治療中、治療後の人々(以下、がんサバイバー)は侵襲的な治療(手術、化学療法など)による影響で治療後に体力の低下による脆弱感、倦怠感をもち、これにより抑うつ的気分を持ちやすく、集中力、注意力などの認知的機能も低下しやすく、これらががんサバイバーのQOLの低下をまねく要因となっている。本研究では化学療法を受けるがんサバイバーに対して積極的な身体活動量を促す支援実施群と非支援群の2群比較により、支援の効果を評価する。支援の効果評価指標は日常的な身体活動量、下肢筋力などの身体機能、倦怠感、抑うつ、不安などの心理的機能、集中力などの認知的機能、全体的健康観とする。これらの指標について介入前、介入後数ヶ月間の変化を評価する。(2)(1)の2群間比較試験を実施するにあたり、対象者の療養生活や日常生活活動量を継続的にモニタリングし、適切なアドバイスを提供するシステムを構築する。1.がんサバイバーに対する運動療法に関する知見や海外動向の検討(1)文献検討:がん治療中、治療後の人々への運動プログラムに関する文献検索を行い、運動目的、運動内容(運動場所、強度、時間、頻度、実施期間)、対象選択基準、効果評価指標とその結果、アドヒアランス維持についてデータ収集し、71文献を吟味した結果を、総説「がんサバイバーの健康生成のための運動プログラムの開発文献レビュー」と題し学会誌に投稿し、現在査読中である。結論としてサバイバーに対する運動は自然回復力を高める身体調整能力を引き出し、自己モニタリングが強化されセルフケア能力の向上をもたらす効果が期待できる。(2)海外の運動療法の現状の視察:米国ヒューストンのM.D.Andersonがんセンター、英国マンチェスター大学およびChristieがん専門病院を視察し、各施設のリハビリテーション部門長、上級実践看護師(Advanced Nurse Practitioner,Nurse Clinician)とがんサバイバーへの運動療法の現状について討議した。両国ともサバイバーへの運動は積極的に推奨され、これにより医療費の削減と身体活力の早期回復がもたらされ、また運動による有害事象の発症はほとんど認められず、わが国においても積極的に推進していくべきであると確認した。2.運動プログラム内容の決定、内容紹介のための対象者配布用DVDの作成1.で得られた知見をもとに運動プログラムを作成した。乳がんで術前化学療法後に手術を受けたサバイバーを対象とし、心肺機能強化としてエアロビクス、筋力強化としてチューブトレーニング、身体調整方法としてのストレッチについて実施方法と留意事項を紹介したDVD作成に向け撮影をした。1.研究成果誌上発表:「がんサバイバーの健康生成のための運動プログラムの開発文献レビュー」と題する総説を日本がん看護学会誌に掲載した。2.運動プログラム内容紹介DVDの作成:運動プログラム実施群に向けた有酸素運動、筋力トレーニング、ストレッチングの内容紹介DVD「より健康にあなたらしくなるためのエクササイズ」の作成と、コントロール群に向けたDVD「さわやかに、しなやかにストレッチ・ムーブメント」を作成した。3.運動効果評価方法に関する認知・神経科学領域からの情報収集:米国イリノイ大学(Urbana-Champaign校)のHillmann博士と紙上敬太博士を訪問し、認知・神経科学領域での運動の効果について討議した。中等度の有酸素運動により、注意力が向上し、遂行機能テスト得点の向上が認められており、主観的評価指標のみならず脳波など神経学的指標を用いて、がんサバイバーの治療後の抑うつ気分や集中力の低下に対する効果を評価する方法について示唆を得た。また運動群とコントロール群間で生じるコンタミネーションへの予防策とその発生後の対処・統計解析方法など研究計画立案に向けたより具体的な部分での解決策を得た。さらにイリノイ大学シカゴ校を訪問し、Hacker博士らによる運動プログラム、データ管理方法について討議した。複数のリサーチナースにより正確なデータ収集のためのマニュアルやデータ収集用紙の作成方法について示唆を得た。

4.研究実施施設での倫理審査委員会に研究計画書を提出する準備:上記2、3の結果を踏まえ、運動プロラムの研究計画書作成のため研究実施施設とシステム構築に向けた協議を行い、次年度早期の研究申請準備を進めた。1.がん化学療法を受ける患者のQOL指標である健康観は、日常生活活動量や倦怠感の影響を受けると予測され、治療中または治療後に積極的に身体活動量を増やすことは健康観を高めるという仮説検証が本研究の目的である。そこでパイロット・スタディとして、乳がん術後化学療法を受けている者を対象に化学療法の実施クールの間(約1ヶ月)の短期間の日常生活活動量、倦怠感、健康観の関連性、さらに化学療法の種類、健康維持への自己統制感などの背景因子を含めた関連検証研究を計画し、研究者所属施設の倫理審査委員会で承認済み(研究実施機関で審議中)であり、平成23年6月よりデータ収集開始予定である。2.身体活動量の評価にはPanasonic製アクティマーカー(EW4800)を使用する。これは3軸加速度計として信頼性と妥当性の検証がなされ、加速度から算出される消費エネルギー量、活動強度(Mets)、活動時間、歩数を測定する。健康被験者3名、がん化学療法経験者1名による1週間のこの器材の装着体験を実施した。この結果、安全性および装着に伴う心理的負担に問題がないことが確認できた。1.乳がん化学療法を受けた31名を対象に化学療法終了後2日から2週間の日常生活活動量と倦怠感を測定した。この結果平均歩数は約3,800歩、活動強度は2Mets未満(座って作業)の時間が総活動時間の7割を占め、3Mets以上の(平均4.0km/時で歩行)の活動時間は平均約20分/日だった。以上より対象は治療クールの合間、座りがちな生活スタイルであり、治療全期間(平均46ヶ月)にこのような不活動状態が継続することは体重増加や筋力低下をもたらすことが予測された。米国の先行研究では乳がん化学療法後の身体不活動や体重増加は予後不良のリスクファクターであることが明らかにされており、わが国でも身体活動量増加支援の必要性が高いことが明確となった。2.日常生活活動量促進支援群と非支援群の2群をおき、対象者は身体活動量計を17週間装着し、日々の歩数、活動強度別活動時間(分)等のデータを得る。促進支援群には抗がん剤投与後13日目以降をめどに1日5,000歩以上のとなるよう活動量を増やす努力を促し、さらにスポーツ・インストラクターによる筋力トレーニング法のセッションを提供し、活動量維持の動機づけを高める支援を提供する。非支援群では通常の療養支援と身体活動量計測を行う。支援プログラムの提供の有無が身体活動量、身体組成(筋蛋白量)、下肢筋力、抑うつなどの気分状態に及ぼす影響を2群間比較で検証する研究計画書について、現在、研究倫理審査委員会審議中である。3.研究成果の誌上およびシンポジウム発表:造血幹細胞移植を受けた患者の退院後2ヶ月までの下肢筋力、歩数との関連性を誌上発表し、さらにこの結果および乳がん患者での身体活動量計を用いた活動量データを国際乳がん会議(Global Breast Cancer Conference 2011)(韓国、ソウル)で発表した。1.乳がん
在宅療養者と家族のＱＯＬ向上を目指した小地域基盤型ケアコミュニティの開発

本研究の目的は,健康で安心できる生活の実現,生活の質の向上をめざした小地域基盤型ケアコミュニティの開発であった.そのために,我々は健康増進および介護予防に関するプログラムを取り入れ,人びとの交流の場となるサロンを開設した.サロンの存在価値として,【健康に関する情報を得る場】【保健行動変容のきっかけの場】【ストレス発散・癒しの場】【参加者自身の人生の語りの場】【人との交流の場】【精神的活動の場】【外出する機会の確保の場】【主体的な役割行動の場】の8カテゴリが見出された.地域住民と看護専門職者が協働したこの取り組みは,高齢者の健康的な生活の拠り所となり,地域活性化に繋がった.本研究の目的は,健康で安心できる生活の実現,生活の質の向上をめざした小地域基盤型ケアコミュニティの開発であった.そのために,我々は健康増進および介護予防に関するプログラムを取り入れ,人びとの交流の場となるサロンを開設した.サロンの存在価値として,【健康に関する情報を得る場】【保健行動変容のきっかけの場】【ストレス発散・癒しの場】【参加者自身の人生の語りの場】【人との交流の場】【精神的活動の場】【外出する機会の確保の場】【主体的な役割行動の場】の8カテゴリが見出された.地域住民と看護専門職者が協働したこの取り組みは,高齢者の健康的な生活の拠り所となり,地域活性化に繋がった.(1)A市の概要調査、(2)関係諸機関との調整、(3)A氏における療養者と家族の生活状況およびニース調査、(4)サロン型ケアコミュニティ開催におけるプログラムの作成、(5)サロン開催地の決定、(6)サロンの開催と評価を予定していた。A市の概要および関係諸機関との調整では、市役所、社会福祉協議会、ボランティア市民活動センターに足を運び、本研究の目的・意義について理解・協力を頂くよう求めた。ボランティア市民活動センターはA市内のNPO活動の拠点であり、A市における本研究の意義と課題について示唆を得た。意見をもとに開催候補地を検討し、商工会議所や空き家、知人を通じて家主との交渉を進めたが、市中心部における家賃事情から予定場所を確保できず再調整する必要性が生じ、当該年度におけるサロン開催に結びつかなかった。A市における療養者と家族の実態調査は2010年9月までに資料収集および調査票の作成を行った。プレテストの実施、倫理審査を受けた後、2011年1月に調査協力者を得るためにA市内の訪問看護ステーションを中心に依頼した。8か所からの協力を得、対象者の選定、アンケート票の配票にむけて準備をすすめた。当初案では、本年度中に分析まで実施する予定であったが配票のみとなってしまった。一方で、介護者へのインタビューを行い現状と課題を分析した。介護者が自らの介護を肯定的に意味づけできるよう専門家のみならず周囲のサポートが重要であること、地域の中で生活者として存在することの重要性が見出された。これについては学会発表を行うとともに開催地であった韓国にある嶺南理工大学看護科の教員との意見交換を行うことができた。コミュニティ形成において、日本における地縁による人々の結びつきの良さを活かしていくと同時に、新しい世代が求めるつながりのあり方を検討し、モデル開発につなげていきたいと考えている。当該年度における課題は、(1)健康に関する知識や技術を高めること、憩いやおしゃべりの場としてのサロン型ケアコミュニティの運営、(2)情報通信技術を活用したネット型ケアコミュニティの開設準備、(3)住民主体の健康づくりをめざしたヘルスサポートボランティアの育成であった。1.サロン型ケアコミュニティの運営4月5月においてサロン開催地の最終決定を行い、地域のニーズ把握を実施した。市内の中でも高齢化率の高い地域でもあったため、対象者を在宅療養者とその家族のみに限定することなく広く住民に門戸を開くこととした。広報活動は町内会やコミュニティセンターなどに呼びかけを行い、9月より月1回のペースで開催した。3月まで計7回、述べ43名(412名/月)の利用があった。利用者のうち要介護者1名、介護者4名であり、その他は独居高齢者であった。年齢構成は4080代であり、27名中21名が65歳以上、後期高齢者は8名であった。高血圧、高脂血症、腰痛・膝関節痛のいずれかがあり、健康チェック(血圧測定、体脂肪測定)、健康相談、介護相談、健康教育として健康講話を実施した。うち3名は緊急性を要し、提携する病院へとつなぐことができた。定期的な利用者が56名であり、「何でも相談できる」「人と話す機会ができる」「健康関連の知識が増える」「自分の健康法に自信がもてる」等の意見がみられた。2.ネット型ケアコミュニティの開催準備情報提供の場としてのHPの開設、スカイプを活用した健康相談の実施に向け検討をした。サロン利用できない療養者や家族のニーズが高く、会員制での運用を次年度から開始することになっている。3.ヘルスサポートボランティアの育成月1回6か月コースの少人数制研修会を企画し、参加者を募集している。Teaching of teaching方式で学習したことを活かせる(実際に演習ができる)場の確保を行った。当該年度の課題は、1健康づくり・仲間づくり・介護予防(サロン型ケアコミュニティの継続運営と評価、ニュースレターの発行)

2住民主体の健康づくりに向けたヘルスサポートボランティアの育成とサロンの自主運営化、3他機関との連携による地域ネットワークの強化、であった。1.健康づくり、仲間づくり・介護予防:サロンは11回(月1回)開催、利用者数延べ86名(男性16名、女性70名)であった。利用者の年齢は5586歳、平均73.8±6.1歳、昨年度より1.6ポイント高くなっていた。健康チェック(血圧測定:79件、体重測定:68件、体脂肪測定:60件)、骨密度測定23件、健康相談76件、アロママッサージ1件、足指力測定・指導20件、健康講話11件を実施した。サロンでは健康情報交換会を実施し、利用者同士の交流を促すとともに、知識・情報の共有を図ることにより、住民同士が励まし合い、互いに刺激を受ける場となってきた。また、住民が新規利用者を連れてくるようになった。健康情報を載せたニュースレターは10回発行した。1回あたりの配布数は100部、関連病院や訪問看護ステーションでの配架、住民によって外出機会の少ない高齢者宅への配布が実施された。2.ヘルスサポートボランティアの育成:6回コースの講座を開催、参加者数5名。受講後はサロン内で、利用者の話し相手や簡単な測定を実施して頂いた。「勉強になった」「地域での活動に活かしている」「ヘルパーの仕事でも役立てている」などの感想があった。受講生が中心となり、自主運営に向けた準備をすすめ、2014年6月開催にこぎつけている。3.地域ネットワークの強化:関連病院やかかりつけ医、地域包括センター、地域コミュニティセンター等との必要時の連携はとれたが、決して十分でなく課題を残すこととなった。今後も、研究者らは自主運営サロンにかかわっていく予定であり、継続課題としたい。当該年度における課題は、1健康に関する知識や技術を高めること、憩いやおしゃべりの場としてのサロン型ケアコミュニティの運営・評価、2情報通信技術を活用したネット型ケアコミュニティの開設、3住民主体の健康づくりに向けたヘルスサポートボランティアの育成、4ニュースレターの発行であった。【サロン型ケアコミュニティの運営】月1回のペースで開催し、計12回、述べ100名(412名/月)の利用があった。利用者は独居高齢者もしくは高齢者世帯の方であった。年齢構成は6080代であり、22名中20名が65歳以上、後期高齢者は11名であり、昨年度より利用者の年齢は上昇していた。高血圧、高脂血症、心臓疾患、腰痛・膝関節痛、脳血管障害後遺症による構音障害やうつ症状を有し、健康チェック(血圧測定、体脂肪測定)、健康相談、介護相談、健康教育として健康講話を実施した。新たに足指力測定と運動を取り入れ介護予防への取り組みを強化した。さらに、リラクゼーション目的のアロママッサージを実施した。いずれも好評を得、健康づくりおよび仲間づくりの場の機能している。さらに、要支援が必要なケースを関連機関へとつなげることもできた。【ネット型ケアコミュニティの開催準備】
感情と態度を表す日本語語彙文法の研究：言語使用域の多様性を通じて

感情や態度などの意味は、精神医学やマーケティング分析等でその仕組みの理解が求められてきたが、言語学においては語彙をその意味に即して分類する研究が主流であり、それらの意味が文脈の中でどのような語彙-文法によって実現されるのかについての体系的な研究は行われていない。本研究では、選択体系機能言語学の観点から、様々な言語使用域における語彙-文法のプロファイルを作成・対照し、その類似点や差異についての考察を通じて感情を表わす日本語の語彙-文法体系の全体像を明らかにする。データに「大規模日常会話コーパス」と「現代日本語書き言葉均衡コーパス」を用いて質的かつ量的な分析を行い、再利用可能な言語資源を構築する。