hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
腸管症型T細胞リンパ腫の臨床病理学的研究及び国際共同研究

本邦のEATLは形態学的に腫瘍細胞の大きさにばらつきを認めるものの、CD8(+)/CD56(+)を示し、またTCR(T-cell receptor)αβ, TCRγδ, TCR silentにかかわらず9q34の増幅が高頻度であるという点では均一な性質を示すことが明らかとなった。TypeI, TypeIIで高頻度な9q34gainを本邦のEATLでも確認した。未だ報告のない染色体領域の異常を認め、欧州例とは異なる異常が本邦のEATL発生に関与している可能性がある。小腸もしくは大腸に発生する予後不良なT細胞リンパ腫である腸管症型T細胞リンパ腫(Enteropathy-type T-cell lymphoma, EATL)はCeliac病を基盤として発生するTypeIとde novoに発生するTypeIIに分類され、本邦のEATLは欧州と異なりほとんどがTypeIIとされる。免疫形質や遺伝子異常に関して欧州例との異同を明らかにするために2014年は本邦のEATL20例に対して、臨床病理学的、免疫組織化学的、遺伝子学的解析を前年度に引き続き行った。本邦のEATLは免疫組織学的にCD8+, CD56+を示すものが多くTypeIIの性質を持つことが示唆されたが、腫瘍細胞の大きさにはばらつきが見られ、欧州のTypeIIと異なっていた。TypeIおよびTypeIIで高頻度に認める9q34の増幅を認めた。TypeIIに特徴的とされる8q24 gainは目立った異常ではなかった。さらに2015年度はTCRβおよびγのdouble negative症例9例(6例+追加3例)における特徴を検討した。TCR double negative 9例についても組織像および免疫形質に大きな差異を認めなかった。FISHでは1q21.3, 6q16.3, 7p22.3, 9q33.3, 9q34.4のgainをそれぞれ8/8, 2/7, 3/7, 2/7, 5/9の症例に認め、1q21, 6q16, 9q33のlossはみられなかった。当初目標としていた50例には未だ達していないが、本邦のEATL 20例について免疫組織化学とISH、FISH、さらにaCGH解析を行うことができた。計画通り、自ら作成したprobeを用いたFISHを施行できており、概ね順調と考えている。病理学症例の収集を継続して同様の手法を用いた解析を継続するとともに、TCRβおよびγのdouble negative症例に対してFISH解析が不十分であるため、追加検討を行う。さらにこれまでの研究成果をまとめ、国際学会で発表する予定である。当初目標としていた50例には未だ達していないが、本邦のEATL 20例について計画通りに免疫組織化学とISH、FISHを行うことができた。また、計画には組み入れていなかったaCGH解析を行うことができたので、90%程度の達成度と考えている。初年度に引き続き、本邦の症例を用いた解析を継続する。aCGHから得られた結果を踏まえて9q34以外の遺伝子座数個について自らprobeを作製し、FISHを行う。またその領域に含まれる遺伝子について免疫組織化学で蛋白発現の確認、もしくはRT-PCRでRNA量の確認を行う。本邦例の臨床病理学的、免疫組織化学的、遺伝子学的解析の結果を完成させたい。
高分子の結晶化におよぼすトポロジー的斥力の役割

高分子の結晶では結晶相とアモルファス相が混在するのが普通であるが、アモルファス相の構造についてはまだあまり良く分かっていない。ここでは、高分子が融液から結晶化する際、高分子間の絡み合いが結晶相から追い出されてアモルファス相に濃縮され、それに伴ってアモルファス相の自由エネルギーが急激に増大し、結晶化を妨げるという新しい仮説を提案した。この仮説を検証するために、絡み合いが高度に濃縮された状態の計算機シミュレーションを行った。このようなアモルファス相のモデルとして,環状高分子が絡み合って形成される,いわゆるカテナ網目を用いた。絡み合い状態,高分子数,およびエレメントの濃度を一定に保ったままで鎖長を変化させ,多数の絡み合い濃度の異なる平衡サンプルを作り,その構造や,熱力学的,機械的性質を求め,結晶性高分子固体の構造と性質について考察した。以下,その結果を箇条書きに記す。1)アモルファス中のエレメントの化学ポテンシャルを絡み合い濃度の関数として数値計算し、このポテンシャルが「局所結び目」間の斥力に由来することを明らかにした。2)この化学ポテンシャルと結晶化エントロピーを用いて、結晶化温度と結晶化率の関係を求め、既存の測定結果を良く説明できることを見いだした。3)アモルファス相中で、高分子鎖は異常な状態にあり、高分子鎖の全体の形状(Rgなと)はあまり変わらないが、局所的に伸びた形態を取っていることを見いだした。溶融高分子が結晶化する過程において、高分子の絡み合いが解かれることなくアモルファス部に濃縮され、それが高分子結晶の構造や機械的性質を決めている考えに基づいて、絡み合いの濃度の関数として高分子エレメントの化学ポテンシャルを計算機シミュレーションの方法で求め、高分子の結晶層とアモルファス層の自由エネルギーの釣合の式から、高分子結晶の構造の研究を行った。アモルファス層の高分子のモデルとして多数の環状高分子が絡み合ったいわゆるカテナ網目を考える。まず初めに、トポロジー的平衡にあるカテナ網目をを従来の方法で作り、エレメント濃度と高分子間の絡み合い(トポロジー状態)を保存したまま、系の体積を変え外界と高分子エレメントの流入・流出平衡のシミュレーションを行った。エレメントの化学ポテンシャルは、系内のエレメントの流入・流出確率の比から求め、アモルファス層の化学ポテンシャルを絡み合い濃度(局所結び目濃度)の関数として求めた。一方、結晶層の化学ポテンシャルは結晶の融解温度と融解エントロピーの既存の実験値を用いて計算し、系全体の自由エネルギーの極小条件を用いて、アモルファス層の分率を温度の関数として定めた。その結果は、高分子の結晶構造のこれまで知られている様々の事実を良く説明できるものであることが分かった。また、絡みやすい高分子ほど結晶化しにくいという、これまで知られていない結果が得られた。現在は、より広い条件下でこのシミュレーションを行い、また高分子結晶化のモデルをより精密化して、絡み合いが高度に濃縮されたアモルファス部の性質を研究する事に行っている。

2)この化学ポテンシャルと結晶化エントロピーを用いて、結晶化温度と結晶化率の関係を求め、既存の測定結果を良く説明できることを見いだした。3)アモルファス相中で、高分子鎖は異常な状態にあり、高分子鎖の全体の形状(Rgなど)はあまり変わらないが、局所的に伸びた形態を取っていることを見いだした。さらに現在、アモルファス相の剛性率などの機械的性質をシミュレーションで計算している。
網膜における血管―神経ワイヤリング破綻機構の解明と予防・回復法の確立

網膜における血管ー神経相互依存性破綻モデルを用いた薬効評価系を確立して、血管ー神経相互依存性破綻の予防法・回復法を見出すことを目的として、本年度は、新生仔期ラットを用いた検討を行い、次のような成果を得た。1.網膜における血管ー神経相互依存性について検討するために、7日齢のラットにVEGF受容体阻害薬を2日間投与し、その後の網膜血管形成の様子を35日齢まで観察した。処置ラットでは、速やかに網膜の血管新生と毛細血管の脱落が生じた。11日齢時から血管新生が再開し、14日齢では中心動脈の蛇行と非常に密な血管網が認められるようになった。これらの血管異常は21日齢で更に悪化したが、28日齢以降は正常化に向かった。観察期間の35日齢まででは網膜神経の組織学的変化は認められなかった。処置ラット14日齢時の網膜ではVEGF発現が上昇しており、血管内皮細胞における2型VEGF受容体発現が亢進していた。異常血管形成はVEGFR阻害薬を投与すること、ならびにNMDA硝子体内投与により著しく視神経節細胞を脱落させることにより全く観察されなくなった。新生仔期ラットにおける異常血管形成に、視神経節細胞由来のVEGFが重要な役割を演じている可能性が示唆された。2.血管ー神経相互依存性破綻の予防法・回復法については、NMDA硝子体内投与後に生じる網膜の神経と血管の変化に対するMMP阻害薬の効果を検討した。MMP阻害薬は、神経傷害に対しては、影響を及ぼさないものの、血管傷害を有意に抑制した。従って、網膜神経傷害後に生じる血管傷害にはMMPが関与していることが示唆された。MMPの活性調節が血管ー神経相互依存性破綻の悪循環を回避するための手段になり得る可能性が示された。26年度が最終年度であるため、記入しない。本研究は、後天性失明や視力低下の原因として大きな割合を占める緑内障と糖尿病網膜症の新規予防・治療戦略を提案するために、網膜における血管ー神経相互依存性破綻モデルを用いた薬効評価系を確立して、血管ー神経相互依存性破綻の予防法・回復法を見出すことを目的としている。本年度は、次のような成果を得た。1.新生仔期ラットにストレプトゾトシンを単回投与し1型糖尿病を発症させて28週間後に、糖尿病の網膜神経と網膜血管に与える影響ついて検討を行った。その結果、糖尿病の期間が4週間を超えると神経傷害が認められないものの毛細血管が脱落し始め、その血管傷害の程度は糖尿病期間に依存して大きくなることが示された。これまでに、NMDAを硝子体内に投与すると網膜神経が網膜血管に先行して傷害されることを明らかにしているが(神経障害先行型破綻モデル)、糖尿病の場合は血管障害が先行する破綻モデル(血管障害先行型破綻モデル)であることが示された。前述の1型糖尿病モデルラットの硝子体内にNMDAを投与した後に観察される神経と血管傷害の程度について検討を行ったが、対照ラットにNMDAを投与した場合以上に神経と血管が傷害されることは観察されなかった。2.これまでに網膜循環改善作用を有するβ3-アドレナリン受容体(β3-AR)刺激薬にNMDA誘発網膜神経傷害を抑制する作用があることから、β3-AR刺激を介する網膜血流量の増加が網膜神経の生存を促している可能性を示唆してきたが、β3-ARの網膜内分布は不明であった。β3-AR mRNAの網膜内分布をラット網膜whole-mount in situ hybridizationにより検討し、網膜中心動脈にβ3-AR mRNAが発現していることを示した。

26年度が最終年度であるため、記入しない。1.「血管ー神経相互依存性破綻モデルを用いた薬効評価系の確立」については、糖尿病が血管障害先行型の血管ー神経相互依存性破綻を引き起こす可能性が明らかになった。そして、糖尿病時に観察される血管ー神経相互依存の破綻様式の解析が進んだ。2.「血管ー神経相互依存性破綻の予防法・回復法」に関しては、β3-ARが網膜中心動脈において発現していることを示せたことから、β3-AR刺激薬の作用点が明らかになった。またこの結果は、網膜血管に作用し拡張作用を示す網膜循環改善薬が血管ー神経相互依存性破綻の予防薬となり得る可能性をより一層高めることに繋がった。β3-AR mRNAのwhole-mount in situ hybridizationを行うための準備(β3-AR cDNAクローニング、プローブ作製)に時間を要したが、神経傷害時ならびに血管傷害時におけるβ3-AR mRNA発現変化について検討可能となったことは今後の研究推進のために意義深いものであると考えられる。以上のことより、研究はおおむね順調に進展していると判断した。1.網膜における血管ー神経相互依存性破綻のメカニズム網膜における血管と神経の個々の時間的・空間的変化とその変化の分子基盤について、継続して検討を進める。特に、wortmannin硝子体内投与後の変化、糖尿病発症後の経時変化、それらに対する個体成熟度の影響について、精力的に解析する。2.網膜における血管ー神経相互依存性破綻の予防法・回復法申請者らが見出してきた網膜循環改善薬[β3-AR刺激薬(CL316243)・EP2受容体刺激薬(ONO-AE1-259-01)・PDEIV阻害薬(rolipram)]および神経保護薬[donepezil・cilnidipine]の血管ー神経相互依存性破綻に及ぼす影響について、破綻モデルを用いた検討を継続する。
ヒト咀嚼運動系における運動調節ストラテジーに関する研究-予測の関与について-

運動調節のストラテジーを"予測の関わり"の観点から観察する為,高齢有歯顎群(平均72歳,5名),高齢総義歯装着群(65歳,3名),青年有歯顎群(25歳,9名),青年有歯顎同時2課題負荷群(24歳,9名)に対し,最頻値1.3Hzランダム音信号負荷下顎タッピング運動を行わせた.同時2課題群については下顎タッピングと同時にパソコン画面上の一定間隔をおいて現れる単語を覚えるよう指示した.音信号負荷下顎タッピング運動時のMKG vertical,咬筋表面筋電図,音司令信号を同時記録し,以下の結果を得た.1.同時2課題群の過剰タッピング出現率は,1.3Hzの連続程度に関係なく,1.3Hzx2の音信号後で著しく少なかった.また,同群の開口距離は小さい傾向にあった.2.1.3Hzx2の音信号後における過剰タッピンゲは,直前信号からほぼ1.3Hz後の時点で生じており,ある程度課題が進行してから出現し始めていた.3.直前信号から1.3Hz後の予測音時点過剰タッピングMn burst onsetの時間差は,1.3Hzに後続する過剰タッピングで平均値が小さく,音信号を確認前にMnの放電が始まっている様子が窺えるが,1.3Hzx2音信号に後続して発生した過剰タッピングについては,平均値が大きく,特に両高齢者群において,ほぼ音信号を確認してから放電を始めていることが窺えた.4.開口距離は,同時2課題群以外,1.3Hzの連続が多いほど大きくなる傾向がみられた.5.以上より,次のことが推測された.同時2課題群では,第2課題は注意散乱条件としてではなく覚醒条件として働いている.最もよく現れる頻度が記憶され易く,過剰タッピングもその周期で出現することが多い.完全な過剰タッピングは両高齢者群で多く見られ,不完全過剰タッピンゲは青年群で多く見られる傾向にあるが,これは,運動時の"予測"への依存の強さによるものである.運動調節のストラテジーを"予測の関わり"の観点から観察する為,高齢有歯顎群(平均72歳,5名),高齢総義歯装着群(65歳,3名),青年有歯顎群(25歳,9名),青年有歯顎同時2課題負荷群(24歳,9名)に対し,最頻値1.3Hzランダム音信号負荷下顎タッピング運動を行わせた.同時2課題群については下顎タッピングと同時にパソコン画面上の一定間隔をおいて現れる単語を覚えるよう指示した.音信号負荷下顎タッピング運動時のMKG vertical,咬筋表面筋電図,音司令信号を同時記録し,以下の結果を得た.1.同時2課題群の過剰タッピング出現率は,1.3Hzの連続程度に関係なく,1.3Hzx2の音信号後で著しく少なかった.また,同群の開口距離は小さい傾向にあった.2.1.3Hzx2の音信号後における過剰タッピンゲは,直前信号からほぼ1.3Hz後の時点で生じており,ある程度課題が進行してから出現し始めていた.3.直前信号から1.3Hz後の予測音時点過剰タッピングMn burst onsetの時間差は,1.3Hzに後続する過剰タッピングで平均値が小さく,音信号を確認前にMnの放電が始まっている様子が窺えるが,1.3Hzx2音信号に後続して発生した過剰タッピングについては,平均値が大きく,特に両高齢者群において,ほぼ音信号を確認してから放電を始めていることが窺えた.4.開口距離は,同時2課題群以外,1.3Hzの連続が多いほど大きくなる傾向がみられた.5.以上より,次のことが推測された.同時2課題群では,第2課題は注意散乱条件としてではなく覚醒条件として働いている.最もよく現れる頻度が記憶され易く,過剰タッピングもその周期で出現することが多い.完全な過剰タッピングは両高齢者群で多く見られ,不完全過剰タッピンゲは青年群で多く見られる傾向にあるが,これは,運動時の"予測"への依存の強さによるものである.自覚的,他覚的にほぼ健全な平均年齢71.5歳の高齢有歯顎群5名(女性2名,男性3名)と,25.3歳の青年有歯顎群9名(女性3名,男性6名)に対し,1.3Hzと0.3Hzの定頻度音信号負荷下顎タッピング,最頻値1.3Hzランダム音信号負荷下顎タッピング運動を行わせ,負荷音信号,MKG,咬筋表面筋電図を同時記録した.以下,ランダム信号負荷時の過剰タッピング(誤試行)における観察結果を述べる.1.全過剰タッピング数は,高齢者群が青年群より多い傾向にあった.その中でも,同周期の音信号が多く連続した方が,過剰タッピング出現頻度が高い傾向にあった.また,これら過剰タッピング出現率は,1.3Hzや0.3Hz定頻度音信号を負荷した時よりも青年高齢両群で差が大きい傾向にあった.2.1.3Hz同周期音信号連続後の過剰タッピングでは,高齢者群で,直前試行の歯牙接触時点過剰タッピング歯牙接触時点間時間が,平均74.8msec.過剰タッピングの予測信号負荷時点Mm burst onsetが平均2.4msecであり,青年群では,順に平均72.6msec,平均-0.1msecであった.3.(2×1.3)Hz同周期

音信号連続時の過剰タッピングは,ほぼ音信号負荷途中に出現しており,高齢者群で,直前試行の歯牙接触時点過剰タッピング歯牙接触時点間時間が,平均81.1msec,過剰タッピングの予測信号負荷時点(1.3Hz間隔)Mm burst onsetが平均16.7msecであり,青年群では,順に平均85.3msec,平均5.6msecであった.これらより両群ともに,1.3Hzの2倍の周期の音信号が連続しても,前試行からの周期1.3Hz分を予測してタッピングしていることが窺えた.今後,誤試行後の立ち直りの様相,高齢青年両群の違いについて観察する予定である.運動調節のストラテジーを"予測の関わり"の観点から観察する為,高齢有歯顎群(平均72歳,5名),高齢総義歯装着群(65歳,3名),青年有歯顎群(25歳,9名),青年有歯顎同時2課題負荷群(24歳,9名)に対し,最頻値1.3Hzランダム音信号負荷下顎タッピング運動を行わせた.同時2課題群については下顎タッピングと同時にパソコン画面上の一定間隔をおいて現れる単語を覚えるよう指示した.音信号負荷下顎タッピング運動時のMKG vertical,咬筋表面筋電図,音司令信号を同時記録し,以下の結果を得た.1.同時2課題群の過剰タッピング出現率は,1.3Hzの連続程度に関係なく,1.3Hz×2の音信号後で著しく少なかった.また,同群の開口距離は小さい傾向にあった.2.1.3Hz×2の音信号後における過剰タッピングは,直前信号からほぼ1.3Hz後の時点で生じており,ある程度課題が進行してから出現し始めていた.3.直前信号から1.3Hz後の予測音時点過剰タッピングMm burst onsetの時間差は,1.3Hzに後続する過剰タッピングで平均値が小さく,音信号を確認前にMmの放電が始まっている様子が窺えるが,1.3Hz×2音信号に後続して発生した過剰タッピングについては,平均値が大きく,特に両高齢者群において,ほぼ音信号を確認してから放電を始めていることが窺えた.4.開口距離は,同時2課題群以外,1.3Hzの連続が多いほど大きくなる傾向がみられた.5.以上より,次のことが推測された.同時2課題群では,第2課題は注意散乱条件としてではなく覚醒条件として働いている.最もよく現れる頻度が記憶され易く,過剰タッピングもその周期で出現することが多い.完全な過剰タッピングは両高齢者群で多く見られ,不完全過剰タッピングは青年群で多く見られる傾向にあるが,これは,運動時の"予測"への依存の強さによるものである.
時系列モデルを用いた個人の基準価格についての研究

個人の特性を踏まえたクラスタリングの手法に関して、研究を行った。クラスタリングに関しては、k-mean法などの古くから知られた手法がある。しかしながら、これらの手法では、クラスター数をどのように決定するかは、恣意的な場合が多く、確立された科学的な手法がないのが現状である。そこで、確率ブロックモデルを例に赤池情報量基準を用いて、客観的にクラスター数を決定する手法を確立した。確率ブロックモデルは、クラスターを持つ確率的に生成されるネットワークのモデルとして一般的なモデルであり、このことから本研究の結果は、限定されたモデルの考察ではあるが広範なモデルにも応用可能な議論であり、また本研究の結果そのものも、広範な応用が可能である。本研究は、データに潜む消費者の価値判断基準を明らかにする統計数理的な手法を確立することを目的としている。価値判断基準は、個人による違いがあることや時間的に変動をすることが予想される。このような現象を捉えるために、クラスター分析や多変量解析、そして時系列解析などの統計的分析手法を融合的に用いることを予定している。上記のような研究を推進するために、初年度としては、データ分析環境の整備、データの初歩的な分析、時系列モデルによる個人の価格基準を分析する手法の考案を行うことができた。本年度に実施したデータ分析は、今後の研究のための予備な分析の側面もある。このデータ分析を通して、必要な環境と計算資源を見積もることができた。今後、さらに高度な分析を行うことを想定しているが、その際に実行可能な手法を見極めるために重要な情報を得ることができた。また、実際のデータに基づいて、価格による人間の購買行動を分析するための時系列モデルの作成を行った。これにより、本件研究で今後さらなる分析を行うための基礎を築くとこができた。さらに、価格に対する反応は、当初想定したよりもかなり複雑なものであることが明らかとなった。また、既存の時系列解析の手法を用いた分析を行うことで、既存の手法による限界や問題点も明らかにすることができた。また、既存の手法に関しても、多くの新しい発見をすることができた。これらの知見は、今後新たなモデルを作成するための、重要な情報であると思われる。当初予定した1年目の研究予定の多くを達成できたと思っている。また、多くの問題点も明らかとなったことから、今後の研究の発展を期待できる。一方で、論文等の研究成果の発表に関しては、想定よりもやや遅れている感がある。ただし、現在論文を執筆中であり、近く発表できると考えられる。このようなことを総合的に勘案すると、上記の通り、判断できる。計算時間が当初想定よりも掛かることが明らかとなったことから、今後、分析環境を見直す必要性があると思われる。具体的な対策としては、今後多面的な角度から検討をしていきたいと思っている。前年度後半に、比較的大きな予算が取得できたため、備品費を大幅に圧縮できたことと、雇用環境が変化したために、旅費の執行状況が変化したことによるものである。今後とも、研究計画に従って研究を推進し、研究費を計画的かつ効率的に使用していく予定である。
国際比較にみる児童虐待対応制度の構想

本研究の目的は、児童虐待対応制度について国際比較をおこなうことにより今後の日本の児童虐待対応法制度のあり方について構想することである。今年度は以下4点の研究課題を設定した。第1にQualitative Comparative Analysis(QCA)を用いた国際比較分析から制度成立のための社会条件を明らかにすること、第2に当事者である子どもの経験から望ましい制度のあり方を明らかにすること、第3に理論から望ましい制度のあり方を明らかにすること、第4に課題1から課題3の結論から日本の今後の法制度のあり方を構想することである。第1の課題はデータの限界から実施できなかった。第2の課題には、日本の元社会的養護当事者へのインタビュー調査から当事者の参加を保障する制度が望まれているとの結論を得た。第3の課題では、パターナリズムの理論の検討から虐待対応においても当事者の参加や自律性は理論的に正当化されることが明らかとなった。以上より、第4の課題について、今後の日本の児童虐待対応法制度は子どもの参加または子どもと親の参加を保障する方向で改正されることが望ましいと結論づけられる。近年児童虐待対応においても子どもの参加権の保障の重要性は指摘されているものの、その根拠について当事者である子ども自身の経験や支援の理論的基礎の一つであるパターナリズムの理論から検討したものは管見の限りごくわずかである。子ども自身の経験は、児童虐待対応制度が子どもの福祉を目的とする限り今後の制度を構想する際の重要な指針の一つになりうるものであり、これを明らかにしたことに本研究の意義がある。また、パターナリズムに基づく介入が要求される虐待対応において、同理論から当事者の自律性の担保が要請されることを明らかにしたことは、当事者の自律性をほとんど保障しない日本の現行制度のあり方に再考を促すものとして意義がある。27年度が最終年度であるため、記入しない。本研究の目的は、児童虐待対応制度について国際比較をおこなうことにより、日本の制度の改正の方向性について示唆を得ることである。この目的のため、平成26年度は2つの小課題を設定した。第1に、児童虐待対応制度を改正する際の望ましい方向性を明らかにすること、第2に、第1で明らかにされた方向性について、日本・アメリカ・フランス・スウェーデンの児童虐待対応制度がどの程度達成しているのかを比較検討することである。(1)については、法哲学、社会哲学、倫理学の領域から、児童虐待対応の原理の一つであるパターナリズムとオートノミーに関する知見の整理をおこなった。パターナリズムの正当化根拠をめぐる議論からは、児童虐待対応ではパターナリスティックな介入が認められかつ求められることが確認された。一方、制度政策論および援助論領域においては、児童虐待対応においても親・子のオートノミーを確保することが望ましいとの議論もあり、哲学・倫理学領域における議論との間にずれが生じている。この点については、平成27年度に引き続き検討をおこなう。(2)については、国連子どもの権利委員会の一般的意見および各国への勧告書からオートノミー指標を作成し、これを日本・アメリカ(50州の州法)・フランス・スウェーデンの児童虐待対応で使用される法律に適用して、各国の児童虐待対応における親と子のオートノミーの程度を得点化した。そして、この得点についてfsQCA(fuzzy-sets Qualitative Comparative Analysis)のキャリブレーションをおこない、各国の得点を標準化して比較検討した。その結果、日本は他の3ヶ国に比べ極端にパターナリスティックな制度であることが明らかとなった。この結果は、児童虐待対応に関する議論で主流ともいえるより強力な介入を求める議論に一石を投じるものになるだろう。平成26年度は2つの課題を設定した。

1つ目の課題である望ましい制度のあり方に関する課題については引き続きの検討が必要となったが、この点は平成27年の研究課題である児童虐待対応の経験的側面に関する研究が進むことでクリアされると予想される。また、もう一方の課題である制度の国際比較については、予定していた2つの方法論のうち結果を得られたのは1つのみであり遅れが生じているが、来年度の課題であるインタビュー調査を先取りで開始したことで相殺できると考える。そのため、おおむね順調に進展しているものと考える。27年度が最終年度であるため、記入しない。平成27年度は、3つの小課題を設定する。第1に、諸外国の児童虐待対応制度について、QCA(Qualitative Comparative Analysis)の一つであるfsQCAおよびMDSO-MSDOを用いて、制度成立のための社会的条件を明らかにすることである。主たる研究方法は文献研究であり、9月から1月の間に取り組む。第2に、親・子のオートノミーが本人へ与える影響および効果について、日本・アメリカ・フランス・スウェーデンでのインタビュー調査から明らかにすることである。本課題については、5月から1月の間で実施する。第3に、第1、第2で得られた知見から、児童虐待対応の理論的基礎となるパターナリズムとオートノミー関係の最適なバランスについて示唆を得ることである。本課題については、2月・3月に取り組む。第3の結論をもって、本研究課題の結論とする。
施設高齢者の活動や夜間睡眠に影響を与える仮眠とは～時間・場所・体位に着目して～

本研究は施設高齢者を対象に、短時間仮眠が仮眠後の活動や夜間睡眠に与える影響を明らかにするとともに、短時間仮眠と仮眠区間内の居場所、体位との関連を検討することを目的とした。対象者にアクティグラフと行動観察を用い、仮眠指標、睡眠指標、居場所、体位、活動量、活動内容を測定し、これらを仮眠区間内に30分未満の仮眠を取った短時間仮眠群とそれ以上の長時間仮眠群で比較した。短時間仮眠は夜間睡眠や活動量には影響せず活動内容に影響していた。また、短時間仮眠群は居室にいる時間が短かった。左記より、施設高齢者に短時間仮眠を促すことは日中の活動性を高めると示唆され、そのためには仮眠環境を整えるケアが必要と考えられた。本研究は、施設高齢者を対象に仮眠の実態調査を行い、短時間仮眠が、施設高齢者の仮眠後の活動や夜間睡眠に与える影響を明らかにするとともに、短時間仮眠の有無と仮眠区間内の居場所、体位との関連を検討することを目的とした。意思疎通が可能な施設高齢者25名を調査対象とし、アクティグラフ(AMI社製・RC型)と行動観察法を用い、3日間、仮眠指標(仮眠区間内の総睡眠時間)、睡眠指標(夜間の総睡眠時間、睡眠効率、中途覚醒回数、入眠潜時)、仮眠区間内の居場所(居室、居室以外)や動作(動的、静的)、体位(臥位、座位)、仮眠後の活動量および活動内容を測定した。また、属性として性別、年齢、NMスケール、Barthel Index、睡眠剤服用の有無を調査した。これらを仮眠区間内に30分未満の仮眠を取った短時間仮眠群と同じ区間内に30分以上の仮眠を取った長時間仮眠群の2群に分け比較した。その結果、短時間仮眠群は、長時間仮眠群と比較して、NMスケール、Barthel Indexの値が高かった。また、短時間仮眠は夜間睡眠や仮眠後の活動量には影響を与えていなかったが、仮眠後の活動内容には影響があった。加えて、短時間仮眠群は長時間仮眠群と比較して、仮眠区間内の動きや体位に差は見られなかったが、仮眠区間中に居室にいる時間は短かかった。以上のことから、施設高齢者に短時間仮眠を促すことは、夜間睡眠の質の向上には影響しないが、夜間睡眠に影響を与えることなく日中の覚醒を促し、施設での日常生活における活動性を高める可能性があることが示唆された。それとともに、施設高齢者の日中の眠気を解消し、生活の質を高める仮眠を提供するには、環境作りに目を向け工夫することが重要であると考えられた。本研究の目的は施設高齢者を対象に仮眠の実態調査を行い、仮眠が日中の活動性や夜間睡眠に与える影響を明らかにするとともに、仮眠中の体位、場所と仮眠との関連性を検討することである。対象者18名のうち、男性は8名、女性は10名であり、平均年齢は85.9歳であった。また、13時から15時における仮眠時間の平均は32.7分であり、3日間の調査期間中に全く仮眠を取っていない対象者はいなかった。対象者を【30分未満の仮眠群】と【30分以上の仮眠群】の2群に分け、認知機能、ADL、睡眠薬服用の有無、レクリエーション参加の有無、趣味や日課の有無、夜間の睡眠状況(中途覚醒回数・睡眠効率・総睡眠時間・入眠潜時)、仮眠後の活動量、仮眠後の活動内容(無為・睡眠、生理的行為、文化的行為、医療的行為)のそれぞれにおいて比較した。その結果、仮眠後の活動量および仮眠後の活動内容のうちの文化的行為においてそれぞれ仮眠と有意な関連(p<0.05)が認められ、【30分未満の仮眠群】が【30分以上の仮眠群】と比較し、仮眠後の活動量が多く、文化的行為に充てる時間が長いことが明らかになった。施設高齢者の仮眠は仮眠後の活動量のみでなく活動内容にも影響を与えることが明らかになり、適切な仮眠を取り入れることで、日中の生活の質を高めることが示唆された。今後は調査を継続しデータ数を増やすことで、結果を確実なものにするとともに、意図的に仮眠を取らない施設高齢者の日中の活動性や夜間睡眠との比較や、施設スタッフの仮眠に対する認識についても調査、分析を行い、高齢者施設における効果的な仮眠を取り入れたケアシステムの開発についても検討していきたいと思う。一方、本研究の目的の1つでもある、仮眠の体位、場所と仮眠の関連性に関しては本年度検討していく予定である。

当初の計画通り、施設に入所する高齢者のうち、意思疎通が可能なこと、自力歩行が困難なために車イスを使用していること、65歳以上であることの全てを満たし、3日間の連続調査が可能なものを対象に調査が行えている。また、調査の際にはアクティグラフ(AMI社製・RC型)を使用し、継続的かつ非侵襲的に睡眠・覚醒リズムを測定するとともに、瞬間観察法を用いた行動観察を行い、日中の活動内容に関してもデータ収集が行えている。加えて、これらのデータを活用して仮眠が施設高齢者の日中の活動性や夜間睡眠に与える影響に関し、適切な仮眠が仮眠後の活動量を増加させ、仮眠後の活動内容のうち文化的活動に充てる時間を延ばすことが明らかになった。今後は、仮眠中の体位や場所と仮眠との関連性を明らかにする予定であるが、左記についても当初の計画に沿っており、順調に達成していると考える。一方、1施設における対象者の人数は限られており、現在、予定していたデータ数の約半分しか取れていない状況にある。そこで、今年度も調査を継続する予定であるが、協力施設もいくつか決定しており計画していたデータ数は確保できると考えられる。H25年度は継続して施設高齢者を対象にデータ収集を行う予定である。それとともに、集めたデータを用いて、1仮眠と日中の活動性や夜間睡眠への影響についての分析結果をより確実なものにする予定である。また、2施設高齢者の仮眠中の体位、場所と仮眠との関連性を研究協力者とともに分析する予定である。2に関しては、仮眠中の体位(臥位、座位等)と場所(ベッド上、車イス等)における仮眠との関連性を仮眠指標および主観的仮眠評価から算出、分析する予定である。そして、高齢者施設における効果的な仮眠を取り入れたケアシステムの開発についての検討を始める準備を進める予定である。H25年度は、継続してデータ収集や分析を行う予定である。左記に関しては、研究協力者との協力を視野に入れているため、それも含めた交通費および人件費が必要である。加えて平成25年度は学会発表や論文投稿を予定しており、交通費や通信費、資料作成のための物品購入費が必要である。
液体金属の粒界浸透処理によるアルミニウム合金の粒界脆性破壊の抑制

Al-Mg系合金は高温でNaの粒界偏析によって粒界脆化現象を生じる。この脆化を抑制するための手法として、Naと親和力の高い元素の添加が有効であることが報告されている。本研究では、これまで実施されたことのない添加元素の方法として、液体金属浴にAl-Mg合金を一定時間浸漬する、という方法で、高温脆化の抑制の可能性を調査した。その結果、液体Biへの浸漬によって、高温脆化が抑制されることが明らかになった。また液体Inへの浸漬処理では、浸漬させる温度によってその効果が異なることも見いだされた。Al-Mg系合金は、300°C程度の高温度域で粒界のNa偏析による粒界脆化現象を生じる事が明らかにされている。この粒界のNa偏析の影響を無害化するための方法の一つに、Naと親和力の高い元素の添加が有効であることがこれまで報告されている。本研究では、合金元素としての添加を金属材料を液体の金属に浸漬する処理によって実施する手法で、Al-Mg系合金の高温粒界破壊の抑制に及ぼす添加元素の影響を調査した。その結果、Naを2ppm程度含むAl-5%Mg合金を液体のIn中(200°C)に一定時間浸漬させてから、高温引張り試験を行うと、粒界破壊が抑制することが明らかになった。ただし、浸漬するInを高温で長時間浸漬させると、粒界でのInが液相となることで従来いわれているようなInによる液体金属脆性も発現することが明らかになった。Al-Mg系の実用合金である5083合金についても同様の検討を行う事によって、InやBiを液体金属とした浴に浸漬することによって、高温での延性が大きくなることが明らかになった。この場合でも、Al-5%Mg合金と同様に、液体金属に浸漬する前の材料の組織の違いによって、影響の度合いが大きく変化することが明らかとなった。これまで、材料の特性改善を目的とした合金元素の添加は、材料を製造するときの溶解や鋳造といったプロセスでのみ行われてきたが、本研究で明らかにされたように、バルク固体の材料の表面から、液体金属の粒界拡散現象を用いて合金化し、さらには特性の改善に繋げることができることを世界で初めて明らかにした。
モデル植物シロイヌナズナの高DNAメチル化表現型を示す変異体の選抜と解析

研究課題の3年目で最終年度であった本年度は、当初の計画通りに1年目、2年目に単離されてきた変異体の詳細な解析を行った。私が本研究課題「モデル植物シロイヌナズナの高DNAメチル化表現型を示す変異体の選抜と解析」を遂行するにあたって、ゲノム中の複数の遺伝子座を高メチル化のターゲット候補として調べたが、その一つに我々がBONSAI(BNS)と呼ぶ遺伝子座がある。この遺伝子座は野生型では低メチル化状態にあるが、近傍にレトロトランスポゾンが挿入されており、このトランスポゾン配列は配列特異的に高度なDNAメチル化を受けている。我々は、このレトロトランスポゾンのエピジェネティック制御が阻害された状況下では近傍のBNS遺伝子が高メチル化を受けてジーンサイレンシングを引き起こすことを見いだしている(佐瀬ら、未発表)。本研究課題で私が単離した変異体にはDNAメチル化酵素、新規のピストン修飾酵素の変異を原因とするものが含まれるが、これらの変異体の背景ではやはりこのBNS遺伝子座に高メチル化が引き起こされることを明らかにしている。このDNAメチル化がどのような因子によって引き起こされているのか、シロイヌナズナの既知の変異体との二重変異体を作製し現在解析を進めている。また、これらの変異体は不稔性、葉の形態変化など様々な発生異常を示すことから、ゲノム中の他の遺伝子座にもエピジェネティック制御の変化を引き起こしていることが推察される。これらの遺伝子座を同定するために発現マイクロアレイ解析を行い、これまでに複数の発現が変化している遺伝子座候補を見いだしている。私は本研究課題において、生物ゲノム中では内在性トランスポゾンやリピート配列にDNAメチル化が偏在していることに注目し、DNAメチル化の標的となる配列とならない配列の特異性を決定している機構とはどのようなものか?という問題に3年間取り組んできた。一般にDNAメチル化は遺伝子発現を抑制し、トランスポゾンの不活化に重要な働きをもつ。一方、DNAメチル化によって生存に必須な遺伝子がサイレンシングを受けてしまった場合、生物にとって重大な脅威となる。私が今回単離してきた変異体の解析結果から推察されるのは、トランスポゾン配列以外の領域へのDNAメチル化の広がりを抑制するような機構の存在である。競争の激しい研究領域でもあるので、今回の研究成果の早期の論文発表を目指している。本研究課題の第一年目であった今年度は、研究目的であるDNA高メチル化変異体の選抜のスクリーニング系の確立のための予備実験を行い、またその後当初の研究計画通りに実際の変異体選抜のスクリーニングを開始し、現在までに複数のDNA高メチル化変異体の候補を単離している。変異体の選抜にあたってはArabidopsis thalianaの種子をEMS処理しゲノム中にランダムに変異が導入された植物体を用いた。またより多くの個体を効率よくスクリーニングするために複数のM2変異体から抽出したゲノムDNAをプールし、Methylation-Specific PCRで解析後positiveを示すような変異体を単離出来るよう条件検討を行い実験系を最適化した。今回作成されたEMS変異体のDNAプールのコレクションは本研究のみならずArabidopsisのゲノム動態の様々な変異体の解析に応用が可能なものである。本研究課題の目的は野生型ではメチル化されていないようなゲノム上の領域が異所的にhypermethylationを受けているような変異体を単離することにあるが、そうした変異体を効率的且つ網羅的に選抜するためにメチル化のtargetとなるゲノム配列については1)内在性トランスポゾンの近傍配列、2)microsatelliteなどのrepeat配列、3)通常遺伝子の転写が不活性なヘテロクロマチン領域に存在しながらも発現が観察されている遺伝子配列、などゲノム上に複数設定した。このようなスクリーニング系を用いて、現在までにおよそ3000の独立したM2変異体株を解析し、30以上の候補を一次スクリーニングから単離し、解析を行っている。現在は遺伝子マッピングのための変異株と他系統との掛け合わせを行っており、今後系統間の遺伝的多型マーカーを用いて連鎖解析を行い原因遺伝子の同定を目指す予定である。研究課題の2年目である本年度は、当初の申請計画通りに初年度に単離されたシロイヌナズナ高DNAメチル化変異体の候補の中から有望な変異体について、表現型を引き起こしている原因遺伝子を連鎖解析によって同定することを試みた。一つの候補変異体ではシロイヌナズナゲノム中のある特定の内在性トランスポゾンの近傍配置に高DNAメチル化が引き起こされることが観察されている。この変異体と他系統の交配から得たF2植物およそ1100個体について遺伝的多型マーカーを用いて遺伝子マッピングを行い、原因遺伝子をシロイヌナズナ第3番染色体のおよそ144kbの領域内にマップした。この領域にはおよそ40のORFがコードされていたが、シークエンス解析から変異体ではこれらのORFの一つにコードされる遺伝子に一塩基置換が生じ、その結果一残基のアミノ酸変異を引き起こしていることを見いだした。この遺伝子の変異が高DNAメチル化を引き起こす原因となっているかを確認するために、シロイヌナズナの変異体コレクションから当該遺伝子に外来遺伝子が挿入された遺伝子破壊株を複数入手し解析を行った。その結果、これらの変異株でも内在性トランスポゾンの近傍に高DNAメチル化が確認された。また、これと平行してRNAiを利用した当該遺伝子のKnock-down系統も作製しており、さらなる表現型の解析を行っている。この変異株はF2分離集団で表現型がおよそ1/4で観察されることから、loss-of-function型の変異と考えられる。

同定された原因遺伝子はおよそ1000アミノ酸をコードする新規の遺伝子であり、哺乳類から植物まで幅広く保存された機能ドメインを持つことが分かっているが、DNAメチル化との関与についてはこれまでのところ報告がなされていない。この変異株は発生段階でも様々な形態異常を示しており、ゲノム上の複数の遺伝子座が影響を受けていることが推察される。現在、当初の研究計画に基づいてより詳細な解析を行っている。研究課題の3年目で最終年度であった本年度は、当初の計画通りに1年目、2年目に単離されてきた変異体の詳細な解析を行った。私が本研究課題「モデル植物シロイヌナズナの高DNAメチル化表現型を示す変異体の選抜と解析」を遂行するにあたって、ゲノム中の複数の遺伝子座を高メチル化のターゲット候補として調べたが、その一つに我々がBONSAI(BNS)と呼ぶ遺伝子座がある。この遺伝子座は野生型では低メチル化状態にあるが、近傍にレトロトランスポゾンが挿入されており、このトランスポゾン配列は配列特異的に高度なDNAメチル化を受けている。我々は、このレトロトランスポゾンのエピジェネティック制御が阻害された状況下では近傍のBNS遺伝子が高メチル化を受けてジーンサイレンシングを引き起こすことを見いだしている(佐瀬ら、未発表)。本研究課題で私が単離した変異体にはDNAメチル化酵素、新規のピストン修飾酵素の変異を原因とするものが含まれるが、これらの変異体の背景ではやはりこのBNS遺伝子座に高メチル化が引き起こされることを明らかにしている。このDNAメチル化がどのような因子によって引き起こされているのか、シロイヌナズナの既知の変異体との二重変異体を作製し現在解析を進めている。また、これらの変異体は不稔性、葉の形態変化など様々な発生異常を示すことから、ゲノム中の他の遺伝子座にもエピジェネティック制御の変化を引き起こしていることが推察される。これらの遺伝子座を同定するために発現マイクロアレイ解析を行い、これまでに複数の発現が変化している遺伝子座候補を見いだしている。私は本研究課題において、生物ゲノム中では内在性トランスポゾンやリピート配列にDNAメチル化が偏在していることに注目し、DNAメチル化の標的となる配列とならない配列の特異性を決定している機構とはどのようなものか?という問題に3年間取り組んできた。一般にDNAメチル化は遺伝子発現を抑制し、トランスポゾンの不活化に重要な働きをもつ。一方、DNAメチル化によって生存に必須な遺伝子がサイレンシングを受けてしまった場合、生物にとって重大な脅威となる。私が今回単離してきた変異体の解析結果から推察されるのは、トランスポゾン配列以外の領域へのDNAメチル化の広がりを抑制するような機構の存在である。競争の激しい研究領域でもあるので、今回の研究成果の早期の論文発表を目指している。
無機リン酸イオン調節の多階層的制御機序解析

無機リン酸イオン(以下リン)はエネルギー(ATP)、核酸合成、細胞膜や骨格形成に必須のイオンである。加齢や腎臓病によりリン代謝異常が惹起され骨疾患、心臓病、腎不全や寿命短縮などを引き起こす為、その破綻は生体に重大な問題となる。特に血中リン濃度上昇による恒常性の破綻は、慢性腎臓病患者の生命予後を悪化させることが知られおり、リン恒常性維持機構の解明研究の重要性が認識されている。本研究において、全身性のリン恒常性維持機構を多臓器にわたり多面的に捉えることを目的としているため、骨細胞と多臓器を結ぶ新しいリン代謝制御、および血中リン濃度感知機構の解明を中心に取り組んだ。骨細胞は骨代謝制御のみならず、腎臓、腸管、副甲状腺、肝臓、脳などとの臓器連関を介してリン代謝の制御に関わることを明らかにした。骨細胞死滅マウスでは体内でのリン/カルシウム保持機構が破綻することを見いだした。さらに骨細胞死滅マウスにリン負荷食を与えると、正常マウスに比して腎臓からのリン排泄が抑制されることより、骨細胞数の減少は食餌性リン応答を抑制する可能性が示唆された。また、リン負荷応答細胞の一つが骨細胞である可能性を明らかとした。さらに、骨細胞は当初の想定以外の役割を果たすことを見いだした。骨細胞減少マウスでは、1.腎臓の繊維化を引き起こすこと、2.肝臓、腸管に作用し脂質/胆汁酸代謝を亢進させること、3.摂食行動異常などの表現型が認められ、骨細胞はリン代謝制御の中核細胞としての役割以外の重要生理学的役割を持つと考えられた。また、血中リン濃度を制御する新たな因子である、Namptの活性化が骨細胞減少マウスのミネラル、脂質代謝を制御する可能性も示唆されたた。今後さらなる研究の継続を行なう必要があると考えられた。26年度が最終年度であるため、記入しない。本研究では、体内小分子である無機リン酸イオンをモデルにし、骨細胞と多臓器を結ぶ新しいリン代謝シグナル、リンの恒常性維持機構を解明する。そして複数臓器の支配するリンホメオスターシスを多階層的に理解する分子基盤を構築することを目的としている。平成25年度は、1.骨細胞を死滅させたマウスにおけるリン代謝を詳細に解析し、2.血中リン恒常性維持を担う液性因子の探索を行なうためのシステムを立ち上げることを中心に取り組んだ。1.骨細胞死滅マウスにおけるリン代謝骨細胞死滅数と尿中リン排泄の程度には正の相関があることが明らかとなった。さらにリン利尿因子として、血清FGF23濃度の著しい低下と血漿PTHの上昇が見いだされた。これらのホルモンの濃度変化も骨細胞死滅数に応答していることが分かった。また腎臓でリン再吸収を担うナトリウム依存性リン酸トランスポーター(NaPi-IIa, NaPi-IIc)の減少、腸管リン吸収を担うNaPi-IIbタンパク質の減少も骨細胞の死滅数に依存することが明らかとなった。最近我々は新しいリン代謝経路としてニコチンアミド/Nampt経路を見いだした。骨細胞死滅マウスにおいても、この経路の活性化による、NaPi-IIa,NaPi-IIc, NaPi-IIb発現減少の可能性を見いだした。2.骨細胞死滅マウスにおける血中リン恒常維持を担う血中液性因子の探索我々は、骨細胞死滅マウスにおいてナトリウム依存性リン酸トランスポータータンパク質の発現量が減少することから、腸管に絞って網羅的な遺伝子発現解析を行なった。興味深いことに、複数のホルモン作用を持つ因子の変動や脂質代謝関連因子の変動を見いだした。この中から、骨細胞死滅マウスの血中リン濃度維持に関与する因子の同定のため培養細胞系(腸管、腎臓)を用いて検討している。また、血中リン濃度を制御する新たな因子である、Namptの活性化が骨細胞減少

マウスのミネラル、脂質代謝を制御する可能性も示唆されたた。今後さらなる研究の継続を行なう必要があると考えられた。26年度が最終年度であるため、記入しない。平成25年に計画していた研究はおおむね着手することが出来た。また、本研究成果から、リン恒常性維持機構において骨細胞と腎臓および腸管には臓器連関があることが明らかとなった。現状では、おおむね実験計画にそっておおむね順調に進展している。そのため研究推進方策としては、当初の実験計画に沿って研究を進める。平成26年度は最終年度となるため、これまでの成果をまとめることも重要である。研究成果を用いて、リンホメオスターシスを多階層的に理解するための分子基盤構築を目指す。
腸管定着因子としてのカンピロバクター走化性鞭毛運動の解析

細菌の運動性は、細菌の腸管への定着にとって重要な機能を果たしている。その機能は、走化性運動に裏打ちされていることも明らかになっている。同じ運動性であっても単毛の細菌と周毛の細菌とでは運動性にどのような違いがあるのか、同じ単毛の菌でもビブリオ、カンピロバクターと緑膿菌とでは運動性にどのような違いがあるのかなど、細菌の運動の詳細な解析をビデオトラッキング法を用いて行った。その結果、運動速度はビブリオが最も早く、次いで緑膿菌、カンピロバク-であった。ビブリオは秒速約64umで泳ぐことができる。一つの菌の運動性は菌種により様々で、特に緑膿菌、ビブリオとカンピロバクターとでは著しい違いが見られた。この研究により、ビデオトラッキング法で細菌を観察分析するのに必要な技術を身につけることができた。また、数種類の細菌の基本的な運動のパターンを知ることができ、今後の粘液中での運動パターンの変化の追跡、抗体処理により運動性の変化を追跡するための基本的なデーターを収集することができた。同じ運動性であっても単毛の細胞と周毛の細胞とでは運動性にどの様な違いがあるのか、同じ単毛の菌でもビブリオ、カンピロバクターと緑膿菌とでは運動性にどの様な違いがあるのかなど、細菌の運動の詳細な解析をビデオトラッキング方を用いて行った。その結果、運動速度は、ビブリオが最も早く、ついで緑膿菌、カンピロバクタであった。ビブリオは、秒速約64umで泳ぐことができる。一つの菌の運動性は、菌種により様々で、特に緑膿菌、ビブリオとカンピロバクタとでは著しい違いがみられた。この研究により、ビデオトラッキング法で細菌を観察分析するに必要な技術を身につけることができた。また、数種類の細菌の基本的な運動のパターンを知ることができ、今後の粘液中での運動パターンの変化の追跡、抗体処理により運動性の変化を追跡するための基本的なデータの収集することができた。ビデオトラッキング装置を用いて、細菌の運動を画像上に軌跡として記録する基本的手技を確立した。その方法の概要は次のごとくである。液体培地で培養した対数増殖期の細菌を使用する。菌は培地の影響を避けるため遠心で集め、リン酸緩衝液に再浮遊する。菌の量は、顕微鏡で観察した際に一視野に1-2個の菌が見られる程度まで希釈する。きれいに洗浄した新しいスライドグラスに菌液を1滴乗せ、カバーグラスで覆う。菌液の層の深さをできるだけ浅くするため、指でカバーグラスを軽く押さえ、周りを指の爪に塗るマニキュア液で封じてしまう。この状態で暗視野顕微鏡で対物レンズ10-40倍、接眼レンズ10倍で観察し、運動性の菌を探す。菌液の希釈が適当であれば、一視野に1-2個の菌が見えるようになる。菌がこれ以上に多いと運動性のトラックが交差して以後の解析が困難となる。適当な視野が見つかれば、ビデオトラッキング装置を作動させて運動の軌跡をビデオテープに記録する。解析には、テープを再生させ、必要な視野をプリンターに出力する。運動速度は、プリントしたトラックから測定した時間を勘案して計算で算出する以上の方法で算出した幾つかの細菌の運動速度は、次の通りであった。コレラ菌、70μm/sec、緑膿菌70μm/sec、サルモレラ45μm/sec