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米国における苦学生の実態的研究─明治期から大正期にかけて

本研究は、明治から大正期にかけてアメリカに渡り、東部の大学で学んだ日本人私費留学生の実態を明らかにするものである。研究のきっかけとなったのは、挑戦的萌芽研究「明治に出版された渡米の手引書に関する研究」(研究課題番号:25580060)を実施する過程で、ラトガース大学に在籍していた日本人学生たちの姓名と出身背景を特定できたことである。調査結果から、当時の東海岸の大学に私費留学の勤労学生が複数いることがわかり、さらに彼らが苦学を推奨する雑誌や新聞などに生活状況を投稿し、それが渡米ブームの一端を担っていたことも発見した。アメリカ東部の大学は、当時の日本の私費留学生にとって金銭面、学力の面でハードルが高いものであった。しかしながら数多くの日本人の若者が米国留学に挑戦していることが分かったため、本研究では対象を広げ、イエール大学、ハーバード大学、ボストン大学に残るアーカイブを調査した。資料から見えてきたのは、困難に屈せず長い期間をかけて学費を準備し、働きながら英語力を高めた勤労学生たちの姿であり、そしてまた、彼らが構築した現地のアメリカ人や他大学に在籍する日本人たちとの豊かな人的ネットワークであった。平成29年度から30年にかけて、研究のために赴いたのは上記の三大学であり、平成30年度後半は、これらに加えてボストン近郊の女子大学においても調査を行った。対象としたのは東部女子大の名門校であるウェルズリー大学とシモンズカレッジである。これらの女子大のアーカイブにおいても、興味深い発見があった。人名事典などですでに知られている卒業生の他、半年間や一年間の短期の在籍者も複数おり、この時代における女性の高等教育への挑戦を知る良い資料として位置づけられる。この資料については今後さらに調査を進めたい。平成27年度は国内外で発行された新聞と、雑誌『力行世界』に投稿された記事を収集し、明治から大正期にかけての日本人留学生をめぐる状況を分析した。その過程で、大勢の若者が高等教育を受けることを目的として渡米した後、英語力を身につけるために滞在先の小学校に入学し、働きながら学資を蓄えている姿を確認した。特に『力行世界』に投稿されている通信文からは、私費留学生が季節労働をして学資を蓄えたり、アメリカ人の小学生に交じって学ぶことについての感想など、彼らの物理的な生活環境だけでなく内面についても詳細な様子を読み取ることができた。また、『力行世界』に複数回投稿していた若林捨一という人物が、ラトガース大学を卒業し、その後ハワイに移民し農園経営者となっていることも明らかにできた。これは、私費留学生の成功モデルとして捉えることができるだろう。平成28年度は、引き続き国内外の新聞と雑誌『力行』、『力行世界』、そして『成功』に掲載されている米国の私費留学生像を調査するとともに、ハーバード大学に赴き、在籍者名簿や日本人私費留学生についての文献調査を進める。平成27年度は日本国内で収集可能な出版物を中心に調査していた。これまでのところ、国内外の新聞についてはすべて閲覧可能であり、また雑誌についても復刻版が出版されるなど、資料に恵まれた状況にあり、調査は予定通りに進んでいる。ただし、実際に発行された旅券や、各都道府県に残された海外出国者の記録調査については時間がかかることが予想されるため、平成28、29年度にかけて実施する予定である。平成28年度は、日本国内の資料収集に集中し、多くの苦学生を渡米させた日本力行会の機関誌『救世』、『力行』、『力行世界』を調査し、移民の流れをたどることができた。また、排日が移民の動きに影響を与え、アメリカ本土からハワイ、そして満州への流れが作られていったことを資料で確認した。調査の中で、日系人社会でリーダー的な立場で活躍した人物の名が埋もれ、彼らの活躍や影響が看過されているケースがあることに気づいた。彼らの名前は、日本側の力行会関係の資料だけでなく、アメリカやハワイの現地の新聞にも載っているが、日本で出版されている人物事典には見当たらない。一例を挙げると、力行会から渡米した若林捨一という人物がいる。この人物は苦学しながらアメリカ本土で学位を取得し、その後にハワイへ渡り、さらに満州へ移民している。当時の情勢でやむを得ない満州移民であったが、その後若林は政府系機関発行の出版物の中で、アメリカ・ハワイで排日に苦しむ同胞へ満州移民を呼びかけている。そしてそれが日本政府の意図であると述べている。若林の名は、日本、アメリカ本土、ハワイ、満州で、それぞれ異なる出版物に、個人もしくは公人として出てくるが、実は一人の人物であることがわかった。成功を夢見て渡米した明治の苦学生の足跡を、満州移民までつなげることができたのである。このように、「日系移民史」を「苦学生の歴史」という視点からみることで発見できる事柄が他にもあると思われる。この調査結果は、『近代文学資料研究』(近代文学資料研究の会、2017年6月発行)に掲載予定である。平成29年度も、苦学生の歴史に様々な角度からアプローチし、調査を継続して実施する予定である。平成28年度は、連携研究者として平成28年8月から共同で調査を行っているラージ・ラキ・セン氏(平成28年度は筑波大学研究員、平成29年度より東京外語大学教員)とともに国際学会での発表や、米国での資料収集を実施する予定であったが、ヨーロッパ情勢や米国における新政権成立の影響など、現地での調査環境に不安要素が生じたために渡航を見合わせ、平成28年度の予定を次年度に延期することとした。

このため、資料収集が当初の予定よりも遅れている。平成29年度は、米国に赴き現地調査を実施した。ハーバード大学、イエール大学、ボストン大学において在籍者名簿、卒業者名簿、学生手帳、そして学生クラブの写真等を確認することができた。これらの資料の中には複数の日本人名が掲載されており、且つ人物事典等で確認できない名前も存在したため、日本側の資料と照合する作業を今後進める。特にボストンには日本人学生の校友会が存在しており、大学をまたいだ日本人同士の交流や地域のアメリカ人を取り込んだ活動が活発だった地域である。その活動を記録した資料が一部が残っているため(『ボストン日本人学生会の記録』として三好彰氏により調査報告されている)、これを重要な資料として位置づけ、照合作業を進める。また、イエール大学では日本人留学生の記録がかなり早い段階から整理・保管されていること、しかしながら未整理の資料もあり、そこには日本人に関する情報も眠っている可能性があることが分かった。この資料については、平成30年度に調査を続行する。28年度には「ある渡米苦学生ー『力行世界』からの発見」『近代文学資料研究』NO2.を発表した。執筆作業を進める中で、日本人留学生が東海岸の大学で学ぶうちに、他大学に移っているケースが少なくないこと、そして進路の決定権を持つのは全ての費用を自分で賄っている私費留学生の特権であるということもわかってきた。私費留学生の中には、『力行世界』のような留学生支援の雑誌に日々の暮らしぶりや将来の進路の選択、迷いや後進への励ましなどを綴っており、私費留学生の生活だけでなく、心のうちまで垣間見ることができた。これらを次のステップに進む基盤とし、最終的な研究目標「米国における苦学生の実態的研究ー明治期から大正期にかけて」の達成につなげていく。平成27年に欧州でテロがあり、オーストラリアでの比較文学会世界大会で研究発表を予定していたが、それができなくなったこと、そして社会情勢への不安がアメリカにおいても強まったため、現地調査を延期したため遅れた。特にアメリカでの調査については、分担研究者に日本国籍以外の研究者がおり、欧米諸国に入国の際に問題が生じた事例を聞いていたため、自分自身ばかりでなく分担研究者の安全のために渡米を見送った。そのため、研究に必須の一次資料の収集が遅れた。平成29年度にはアメリカでの資料収集を行うことができたが、予想を上回る未整理の資料の存在が明らかになったため、もう少し時間をかけて整理・分析作業を行うつもりである。本研究は、明治から大正期にかけてアメリカに渡り、東部の大学で学んだ日本人私費留学生の実態を明らかにするものである。研究のきっかけとなったのは、挑戦的萌芽研究「明治に出版された渡米の手引書に関する研究」(研究課題番号:25580060)を実施する過程で、ラトガース大学に在籍していた日本人学生たちの姓名と出身背景を特定できたことである。調査結果から、当時の東海岸の大学に私費留学の勤労学生が複数いることがわかり、さらに彼らが苦学を推奨する雑誌や新聞などに生活状況を投稿し、それが渡米ブームの一端を担っていたことも発見した。アメリカ東部の大学は、当時の日本の私費留学生にとって金銭面、学力の面でハードルが高いものであった。
鱗および耳石の安定同位体・微量元素組成によるサケの沖合生活期における生態の解明

1980年代と2010年代に岩手県津軽石川に遡上したサケ鱗の安定同位体比(δ15N、δ13C)から両年代のサケの餌生物に変化がないことを明らかにした。また、2011年に北海道の河川に遡上したサケ鱗の安定同位体比から若齢(2歳)・小型で遡上した個体の栄養段階が他の年齢群に比べて高く、その回遊経路や摂餌環境が異なる可能性を示した。また、2011、2012年に本州、北海道の各河川に遡上したサケの耳石微量元素の成長に伴う変化を調べ、Ba/Ca、Li/Ca、Sr/Caに周期的変化がみられること、またBa/Ca、Li/Caのピークの位置と高さが由来河川で異なり、サケの回遊経路が多様であることを示した。【鱗の安定同位体分析】まず、サケ鱗の安定同位体分析方法を確立するため、洗浄と酸処理が分析結果に与える影響、分析に必要な試料重量、同一個体における鱗間の安定同位体比のばらつき、overplatingが同位体比に及ぼす影響を確認した。その結果、分析前処理として5%H2O2ー5%NaOH混合液による洗浄のみを行うこと、分析には0.1mg(鱗1/2枚に相当)以上が必要である、同一個体における鱗間のδ15N、δ13Cに大きな差がないことを確認した。また、回帰1年前における回帰年のoverplatingの割合は4歳回帰魚で0.62、5歳魚で0.63であった。すなわち、最外縁部以外の部位におけるoverplatingが分析値に与える影響が大きく、最外縁部以外の部位の分析値はそのままでは利用できないことが判った。以上の結果を踏まえて、岩手県津軽石川(宮古市)に19821984年、2011年2013年に回帰した36歳魚の鱗最外縁成長帯のδ15N、δ13Cを分析した。分析の結果、鱗のδ15Nが体サイズと正相関すること、高齢回帰魚ほどδ15N、δ13Cが低い傾向があることが判った。また、1980年代と2010年代の回帰魚の安定同位体比に大きな違いがないことも明らかになった。【耳石の安定同位体分析】北海道沿岸域で採捕された回帰魚とベーリング海で採集された未成魚の耳石微量元素組成の生活史断面における変化パターンを調べた。併せて、耳石微量元素や安定同位体比による回帰個体の由来(孵化場)の判別手法を検討した。分析の結果、Sr:Ba比が周期的に大きく変動することが明らかになった。このことは回遊経路と関係するものと考えられ、今後さらに詳細を検討することにより、北太平洋におけるサケの回遊に新しい知見が得られるものと期待される。また、微量元素組成により同一地域の孵化場判別が高い精度で可能であることが判った。鱗分析については、分析方法を確立し、実際に鱗の安定同位体比分析を開始することができた。また、最外縁部の分析からδ15Nが体サイズと相関すること、δ15N、δ13Cとも岩手県での回帰状況が良かった年代と近年の回帰低水準期の間で大きな違いがないことも明らかにした。これらの成果はいずれも新知見であり、今後さらに検討を加え、確実なものとする予定である。耳石分析については、津軽石川と北海道太平洋側沿岸に回帰した個体に加えてベーリング海で採捕された未成熟魚の分析を行った。それぞれ分析個体数は当初計画に比べて限定的であったものの、耳石Sr:Ba比の変化に周期性があることを見出した。なお、ベーリング海で採集された未成魚試料の分析は、当初の計画には入っていなかったが、入手する機会を得たこと、また回遊履歴の解析には重要と考えられることから、追加したものである。また、微量元素組成による孵化場判別が可能であることを示したことは、今後の回帰個体の回遊履歴解析には重要である。以上、鱗分析については、計画以上に進展していると考えるが、耳石については検体数が計画に比べて少なかったものの、新知見が得られていることから、ほぼ計画通りに進展していると評価できる。これより、課題全体としては、当初計画通りに進展していると評価した。【鱗の炭素・窒素安定同位体比分析】前度に確立した分析手法によりサケ回帰個体数が高水準であった1982年1984年と低水準の2011年2013年に津軽石川(岩手県)に回帰したサケ回帰魚の鱗の炭素(δ13C)・窒素(δ15N)安定同位体比を分析した。両同位体比とも年代間で有意な違いはなく、摂餌環境に明瞭な違いはなかったものと推察された。δ15Nについては、高齢で回帰した個体で高く、また体サイズの増加と共に上昇する傾向がみられた。また、北海道静内川など北海道内の8河川から集めた回帰魚(27歳魚)48尾の鱗についても同様の分析を行った。この分析の結果、δ13Cは年齢、体サイズ、直近の成長量に関わらず一定の値を示したが、δ15Nは体サイズとの間に正の相関が認められた。これは成長に伴い栄養段階の高い生物を摂餌するようになることを示唆する。さらに2歳回帰魚では小型個体がむしろ大型個体よりも高い値を示した。

この要因として小型個体で回帰する個体の摂餌海域の違いや代謝速度などの生理的要因が考えられる。【耳石の微量元素、安定同位体比分析】日本産サケの回遊経路における係群間の違いを明らかにすることを目的として、日本国内(北海道4地域、本州日本海側、岩手県)の河川に回帰したサケ4歳魚計47個体の耳石の微量元素組成を分析した。分析にはLA-ICP質量分析法を用い、それぞれの個体について微量元素組成(Ca、Li、Na、Mg、K、Mn、Zn、Sr、Ba)の生活史断面を求めた。その結果、沖合生活期に対応する耳石部分においてBa/Ca、Li/Ca、Sr/Caに周期的な変化が認められ、さらにBa/Ca、Li/Caのピーク位置と高さに系群間で違いが認められた。このことは日本産サケの回遊経路に系群による違いが存在することを示唆し、サケの沖合域における回遊が従来考えられていたよりも多様であることを示唆する。平成27年度の成果に基づいてサケ回帰魚の鱗の安定同位体比分析を実施し、回帰高水準期と低水準期での摂餌環境に明瞭な違いがないこと、また回帰年齢や体サイズの違いによる窒素安定同位体比の違いなど重要な知見を得た。耳石の微量元素分析からは日本産サケの沖合域における回遊経路に多様性がある可能性を示唆する結果を得た。鱗、耳石の分析に関して、いずれも未だ分析個体数が十分とはいえず、今後分析個体数を増やすことにより結果の信憑性を高める必要がある。しかし、鱗、耳石の分析からいずれもサケの回遊と資源変動機構を理解する上で重要な知見が得られたことから、ほぼ計画通りに進展していると評価できる。これより、課題全体としては、当初計画通りに進展していると評価した。【鱗の安定同位体比分析】北海道静内川に回帰したサケ(26歳魚)の鱗縁辺部の窒素同位体比(δ14N)と炭素同位体比(δ13C)を分析し体長、年齢、鱗縁辺部の相対成長との関係を調べた。δ14Nは9.513.4‰、δ13Cはー17.6ー14.3‰であり、δ14Nと体長の間に正の相関がみられた。δ13Cではいずれとの間にも相関は見られなかった。2歳魚の中の小型個体が大型個体に比べて鱗縁辺部のδ14Nが高い傾向がみられ、また大型個体は3歳以上のより高齢の個体と同様の安定同位体比を示した。このことは、2歳で回帰する早期回帰個体群の中の小型個体の成長水域(回遊履歴)が2歳で回帰する大型個体やより高齢で回帰する個体と異なることを示唆する。鱗の安定同位体比分析に関する上記成果については、英語論文としてまとめ、国際学術誌に投稿中である。【耳石の微量元素分析】沖合域生活期に対応する耳石部分の微量元素は、昨年度までの研究成果と同様に各個体間での組成にBa/Sr以外に大きな相違は認められなかった。個体間にみられた耳石Ba/Srの変動については海洋環境の水域間の違いに基づいて検討する必要があるが、本課題の中では検討することができず将来の課題として残された。また、本州日本海側、北海道の各孵化場の放流稚魚の耳石微量元素組成(K/Ca, Na/Ca, mg/Ca, Zn/Ca, Mn/Ca, Sr/Ca, Ba/Ca)による産地判別については、本州の太平洋側と日本海側の間での誤判別が多く、さらに酸素・炭素安定同位体比(δ14N、δ13C)を含めた判別分析の成績はさらに低下した。これより、耳石微量元素組成に基づく産地判別は困難であるものと考えられた。1980年代と2010年代に岩手県津軽石川に遡上したサケ鱗の安定同位体比(δ15N、δ13C)から両年代のサケの餌生物に変化がないことを明らかにした。また、2011年に北海道の河川に遡上したサケ鱗の安定同位体比から若齢(2歳)・小型で遡上した個体の栄養段階が他の年齢群に比べて高く、その回遊経路や摂餌環境が異なる可能性を示した。
神経回路形成の動態を制御する新規細胞間シグナルの解析

発生期に、神経細胞は、分化誘導、軸索ガイダンス、シナプス形成を制御するシグナルを受容し、機能的な回路網を作り上げる。本研究は、ヘパラン硫酸の6位を脱硫酸化するスルファターゼ遺伝子(SulfFP1とSulfFP2)と細胞外でリゾフォスファチジン酸を合成するEnpp2遺伝子に注目し、ノックアウトマウスの解析を通して、糖鎖と脂質メディエーターを介した制御が神経回路形成に重要であることを明らかにした。神経回路形成過程において、神経細胞は、周囲の細胞や環境から種々のシグナルを受容し機能的な回路網を作り上げる。本研究は、新規のスルファターゼ遺伝子(SulfFP1とSulfFP2)とENPP2(オートタキシン)遺伝子の機能解析を通じて、細胞外シグナル伝達の要である糖鎖と脂質メディエーターを介した神経回路形成の動的な制御機構を明らかにすることを目的としている。これまでのin vitroの研究から、SulfFPがヘパラン硫酸(HS)の6位の硫酸基を中性pHで特異的に分解するエンドスルファターゼ活性を持つことが明らかにされている。一方、HSが種々の細胞増殖因子や軸索ガイダンス分子によるシグナル伝達を制御し、そのリガンド結合に特定の硫酸基が必須であることが知られている。そこで、SulfFPがHSの硫酸化パターンを変化させ、ヘパリン結合性分子を介した情報伝達を制御している可能性が示唆されているが、その生理的な役割は不明である。そこで、我々は、SulfFP遺伝子を破壊したノックアウトマウスを作成した。その結果、SulfFP1とSulfFP2の単独破壊では大きな異常が認められなかったが、ダブルノックアウトマウスは生後直ぐに死亡することが明らかになった。約1割のマウスで著明な水頭症が見られ、それ以外のマウスのでも一部の軸索走行に異常が認められた。更に、SulfFPノックアウトマウスの脳から抽出したHSを解析した結果、6-硫酸を含む二糖単位の割合が増加していた。以上の結果から、SulfFPが作り出す正常のHSの硫酸化パターンが、神経回路形成の重要な鍵になっていることが明らかになった。ENPP2は、細胞外でリゾフォスファチジン酸やスフィンゴシン1-リン酸を合成する酵素であり、細胞増殖、分化、生存、移動などを制御すると考えられるが、神経発生や神経機能における働きは不明である。ENPP2ノックアウトマウスを作成したところ、卵黄嚢の血管形成不全により胎生9日頃に死亡し、神経発生については十分な検討ができないことが明らかになった。神経回路形成過程において、神経細胞は、分化、軸索ガイダンス、シナプス形成のシグナルを受容する。本研究は、この過程に関与すると考えられるスルファターゼ遺伝子(SulfFP1とSulfFP2)とオートタキシン遺伝子に注目し、神経回路形成の動的な制御機構を明らかにすることを目的としている。ヘパラン硫酸は、種々の細胞増殖因子や軸索ガイダンス分子と結合し、シグナル伝達において重要な役割を担う。SulfFPは、ヘパラン硫酸内部の6-硫酸を中性pHで特異的に分解するエンドスルファターゼ活性を持つことから、ヘパラン硫酸の硫酸化パターンを変化させ、ヘパリン結合性分子の情報伝達を制御する可能性を持つが、その生理的な役割は不明である。そこでノックアウトマウスを作成した結果、SulfFP1またはSulfFP2の単独破壊では大きな異常が認められなかったが、ダブルノックアウトマウスは生後直ぐに死亡した。脳の異常を調べたところ、特定の神経走行に特徴的な異常が認められた。更に、ノックアウトマウスのヘパラン硫酸組成を解析した結果、6-硫酸を含む二糖単位が増加していた。以上より、SulfFPが作り出すヘパラン硫酸の硫酸化パターンが、正常な神経回路形成に必要であることが明らかとなった。オートタキシンは、細胞外でリゾフォスファチジン酸を合成する酵素であり、細胞増殖、分化、生存、移動などを制御すると考えられるが、神経発生や神経機能における働きは不明である。オートタキシンノックアウトマウスは、卵黄嚢の血管形成不全により胎生9日頃に死亡するため、神経発生については検討できなかった。そこで、オートタキシンfloxedマウスを作成し、Nestin-Creトランスジェニックマウスとの交配により、脳特異的にオートタキシンを破壊する実験を始めた。本研究は、スルファターゼ遺伝子(SulfFP1とSulfFP2)とオートタキシン遺伝子に注目し、糖鎖と脂質メディエーターを介した神経回路形成の動的な制御機構を解明することを目的としている。SulfFP1、SulfFP2単独ノックアウトマウスでは大きな異常が認められなかったが、組織から抽出したヘパラン硫酸の二糖組成を解析したところ、ホモマウスで6-硫酸を含む三硫酸化された二糖単位の割合が増加していた。

成獣臓器毎に三硫酸化された二糖単位の増加率が異なり、SulfFP1ホモマウスでは正常組織でのSulfFP1の発現量が多い組織ほど増加率が高かったが、SulfFP2ホモマウスでは正常組織でのSulfFP2の発現量と増加率に相関が見られなかった。従って、SulfFP1とSulfFP2で活性の調節や機能に違いがあると考えられた。一方、ダブルノックアウトマウスは生後直ぐに死亡し、特定の神経軸索走行に異常が認められた。この異常は、電気穿孔法でSulfFP cDNAを導入することにより回復可能であったが、酵素活性部位に変異を持つcDNAでは回復が見られなかった。従って、SulfFPが働いて特定の硫酸化パターンを持つヘパラン硫酸を作り出すことが正常な神経回路形成に必要であると考えられた。オートタキシンノックアウトマウスは、卵黄嚢の血管形成不全により胎生89日頃に死亡する。この時期にオートタキシンを多量に発現する卵黄嚢臓側内胚葉細胞を調べたところ、細胞内小胞や大型リソソームに異常が見られた。更に、脳特異的オートタキシンノックアウトマウスが成獣まで成長し、神経系でオートタキシンの発現が消失していることを見出し、今後、オードタキシンの成獣脳における役割を明らかできることを明らかにした。発生期に、神経細胞は、分化誘導、軸索ガイダンス、シナプス形成を制御するシグナルを受容し、機能的な回路網を作り上げる。本研究は、スルファターゼ遺伝子(SulfFR1とSulfFP2)とEnpp2遺伝子に注目し、糖鎖と脂質メディエーターを介した神経回路形成の動的な制御機構を解明することを目的としている。SulfFP1、SulfFP2単独ノックアウトマウスでは大きな異常が認められなかったが、ダブルノックアウトマウスは生後直ぐに死亡し、特定の神経軸索走行に異常が認められた。この異常は、電気穿孔法でSulfFP cDNAを視床下部から中脳に導入することにより回復可能であったが、酵素活性部位に変異を持つcDNAでは回復が見られなかった。従って、SulfFPが作用して特定の硫酸化パターンを持つヘパラン硫酸を作り出すことが正常な神経回路形成に必要であると考えられた。更に、SulfFPによるヘパラン硫酸リモデリングにより影響を受け、皮質ニューロンの誘導に関わる軸索ガイダンス分子を同定した。通常のEnpp2ノックアウトマウスは、卵黄嚢の血管形成不全により胎生8-9日頃に死亡する。この時期にオートタキシンを多量に発現する卵黄嚢臓側内胚葉細胞を調べたところ、細胞内小胞やリソソームに異常が見られた。更に、脳特異的オートタキシンノックアウトマウスを作成したところ、成獣まで成長し、神経系でオートタキシンの発現が消失していること、あるシグナル分子に過剰なリン酸化が起こることを見出した。本研究は、ヘパラン硫酸の6位を脱硫酸化するスルファターゼ遺伝子(SulfFP1とSulfFP2)と細胞外でリゾフォスファチジン酸を合成するEnpp2遺伝子に注目し、糖鎖と脂質メディエーターを介した神経回路形成の動的な制御機構を解明することを目的とした。SulfFP1、SulfFP
大学と地域の連携による江戸伝統音楽・芸能の継承支援：新たなインリーチを求めて

大学附設の民族音楽アーカイブを拠点とし、地域の邦楽器製作者や販売者らとの協働を前提に、邦楽専門家を擁する拠点大学の地の利を生かして、当該地域の児童生徒や学内学生むけ地域文化プログラムの開発と提案を行った。具体的には、下町の邦楽器製作業者/職人への取材をもとに、楽器製作や技の継承をめぐる今日的課題を明らかにし、これに関する問題意識を次代を担う若い世代に喚起すべく、展示と実演の場を設けた。同時に、邦楽を含む下町の伝統芸能や儀礼について、広義の担い手・上演場所・機会を項目とするデータベースを作成し、邦楽を育んだ土壌を通時的に俯瞰する手だてを、アーカイブから発信する準備を整えた。a.「江戸伝統音楽・芸能データベース」の作成に先立つ、邦楽器製作者へのインタビュー実施インタビュー対象候補として、台東区、足立区、江東区内の邦楽器製作、販売業者から以下10か所を選定(有限会社南部屋五郎右衛門、宮本卯之助商店、株式会社岡田屋布施、株式会社太鼓センター東京支店、小倉楽器店、菊岡三絃店、[有]大岡楽器、[有]大塚竹管楽器、きせん楽器店、[株]トンボ楽器製作所)。このうち取材承諾を得た以下2氏にインタビューを実施した。(1)有限会社南部屋五郎右衛門(台東区、太鼓と神輿製造)の15代目当主、石渡司郎氏(昭和16年生まれ)、(2)菊岡三絃店(台東区、長唄三味線製造)3代目、堀1米敏雄氏(昭和13年生まれ)。この結果、(1)については、歴史的に、皮製造業が集中する地域に、太鼓の生産が強い関連を持つことが再確認された。(2)では、明治昭和30年代の邦楽隆盛を背景に、三味線を含む邦楽器が1大量消費された状況が、改めて明らかになった。同店での技術伝承の概要や、素材提供業者との繋がりも把握できた。邦楽需要の減少と職人の老齢化により、技術継承は非常に危い状況にある。b.楽器製作過程の記録撮影(1)有限会社南部屋五郎右衛門で両面太鼓の皮張り作業を録画。(2)大鼓(能楽用)の指皮作成の過程を、大鼓奏者、佃良太郎氏の協力を得て撮影。ウェブサイト「アジアの楽器図鑑」で公開ずみ。c.楽器の素材調査:絹弦製造業者の丸三ハシモト株式会社(滋賀県伊香郡木之本町木之本1049番地)で、箏用の絹弦製造過程について説明を受けた。近世以降、地場産業となった養蚕・製糸業や、京都の楽器産業を背景として、明治期以降、楽器糸生産に特化した地立地、歴史的状況が明らかになった。a.「江戸伝統音楽・芸能データベース」入力項目の再検討b.楽器製作過程などの記録撮影1三線(沖縄):三味線との比較対象として、桃原栄仁氏(胴の製作)、又吉真也氏(全体の組立)の作業を収録した。また、三線の型の種類など基礎情報と、製作者の経歴や三線製作技術の伝承問題についてインタビューを行った。三線製作は父子相伝とは限らず、元大工の桃原氏のように、木工技術を楽器作りに活かす例もある。同氏によれば、三線製作を志す若者は近年減り続け、技術の伝承が危ぶまれるという。2胡弓(沖縄):琉球舞踊の地謡で主要な楽器。上掲の又吉氏がこの楽器の製作も兼ねるため、組立の工程を収録した。3四つ竹(沖縄):琉球舞踊で舞踊手が持つ楽器。小道具作りも手掛ける舞踊手の海勢頭あける氏から、製作工程の説明を受け、製作経過の部材も入手した。さらに琉球舞踊「四つ竹舞」を、久高さおり氏の実演で収録した。4絹弦製作過程の収録:昨年度に予備調査を行った丸三ハシモト株式会社(滋賀県)で、絹弦(義太夫三味線用、長唄三味線用、筝用)の製作過程を収録した。c.26年度企画展「邦楽器が受け継ぐ技・形・音:こめられた丹精」の計画開始24年度以来、調査対象としてきた三味線と太鼓をメインに、これらの製作過程に焦点をあてた企画展の概要を、以下のとおり決定した。1展示期間:平成26年11月20日(水)11月30日(日)(予定)。2場所:東京藝術大学美術館正木記念館、3展示内容:長唄三味線の製作工程。他ジャンルの三味線も比較材料として展示し、これらが使う絹弦の製作過程も動画(26年度製作予定)で紹介。4実演とワークショップ1:研究分担者(小島)による長唄三味線の実演+演奏法のワークショップ。三味線製作工程の実演も行う(菊岡三絃店)。5実演とワークショップ

2:太鼓の製作過程のデモンストレーション(南部屋五郎右衛門)+太鼓を含む囃子伴奏を交えた上方落語(林家染雀)の上演。a)邦楽器製作者への聞取り調査を通じて、現代の日本社会で楽器職人が技術伝承において直面する課題を明らかにした。具体的には、下町を根拠地とする下記邦楽器店を対象とした。あわせて“技術伝承"の実情に迫るため、楽器の製作過程を記録撮影した。製査先と撮影内容は以下:1株式会社岡田屋布施(太鼓、下座楽器類の試演。雨うちわ他の製作)。2大塚竹管楽器(篠笛)。3篠原まるよし風鈴(ぽっぺん)。4宮本卯之助商店(主に創業史調査)。多くの製作者が指摘する問題点は、1世代間の技術継承、2素材調達を阻む自然環境や社会倫理の変化、3邦楽愛好者人口の減少と楽器受容の低減、4急速に市場に出回る廉価な外国製品との競合、等である。江戸時代から、三味線はインドや東南アジアの輸入木を使うなど、邦楽器はもともと単純な“地産地消"の産物ではない。だが、世界規模の経済流通を前提とする今、製品と原材料にみる需要供給バランスの崩れは深刻で、職人が、技術継承のために安定した環境を保ち得ない現状が確認された。b)企画展「邦楽器が受け継ぐ技・形・音:こめられた丹精」の実施本展では、上記aに類する初年度以来の調査と記録撮影にもとづき、現代の邦楽器製作をとりまく問題に焦点をあてた。三味線と仲間、篠笛、太鼓、鳴り物、絹弦ほかに展示項目を分け、楽器職人の製作実演も実施した。期間:平成26年11月19日30日、場所:東京藝術大学大学美術館正木記念館、来館者数:1900人。c)「江戸伝統音楽・芸能データベース」のプロトタイプ構築上掲aを含む邦楽器店、音楽芸能を含む娯楽の上演者/提供者、興行場所、事績ほかを主要な項目として、江戸から現在までの変遷をたどるDBのプロトタイプを、専門業者に委託し製作した。26年度が最終年度であるため、記入しない。音楽民族学26年度が最終年度であるため、記入しない。1)楽器製造業では、江戸期以来の伝統を持つ太鼓製造や、近現代の邦楽の盛衰を映す三味線製作の実態をつぶさに把握できた。調査件数は少ないものの価値ある情報を得られた。2)上記1の情報収集は、江戸伝統音楽・芸能データベース制作の見通しを立てる上で、重要な基礎となった。1.当初予定していた台東・江東・足立区内の邦楽器製作・販売業者へのインタービューが、要務繁多のためスケジュールが合わず、実施できなかった。2.「江戸伝統音楽・芸能データベース」の原データが、参考資料の不足で抽出できていない。1)江戸伝統音楽・芸能データベースのプロトタイプ試作、2)左記DBに、楽器製造業者への調査と、明治大正期の音楽芸能従事者調査の諸データを実装。3)公的博物館におけるインリーチの動向をさぐるため、国外楽器博物館で調査を実施。4)地域とアーカイブが連動したレクチャー&デモンストレーション実施を目指す。1.台東・江東・足立区内の邦楽器製作・販売業者へのインタービューは実施するが、対象をある程度限定する。2.「江戸伝統音楽・芸能データベース」の構想を当初より簡素化するとともに、物理的なDB製作を専門業者に委託するなど、時間短縮をはかる。1)データベース実装の人件費とする。2)研究分担者4名に振り分ける。1.25年度の計画時には、国外楽器博物館調査を予定したため、旅費が150万円を上回った。しかし、残念ながら分担者間でスケジュール調整がつかず国外調査を断念した。
近傍銀河の遠赤外線高精度画像データを用いた銀河の宿命の総合理解

本研究は、赤外線天文衛星「あかり」による「銀河系・近傍銀河の星間物質」観測プログラム、および、全天サーベイ観測プログラムによって得られたデータを用いて進められた。とくに遠赤外線画像データ処理の方法を確立し、近傍銀河のさまざまな星間環境における固体微粒子(ダスト)の特性を調べ、星間空間における物質の変成・進化を明らかにした。とくに、「あかり」で感度が向上し、全天を観測したため、早期型銀河や銀河ハローなど、これまで調べられてこなかった銀河環境でのダストの振る舞いが明らかになった。その結果、ダストの破砕・破壊や、有機物(PAH)の生成・進化に対して新しい知見をもたらした。本研究は、赤外線天文衛星「あかり」で得られた近傍銀河の赤外線画像から、空間分解された銀河ダストの特性を系統的に調べるものである。とくに天文衛星の赤外線データは、広がった銀河の研究を行うにはいくつか問題があり、研究遂行の妨げとなっている。本研究3年計画の初年度である昨年度は、地上フォローアップ実験にもとづく検出器理論モデルを用いて、遠赤外線画像データの補正を行った。データ補正処理(過渡応答補正など)を高速に行うためのデータ解析専用の計算機サーバーを名古屋大学で購入した。その結果、指向観測で得られたサンプル銀河の画像作成は、近・中間遠赤外線に対して、ほぼ終了した。また、中間赤外線画像に対するdeconvolution(PSFに画像分解)処理に成功した。さらに、画像データの解釈に補助的な役割を果たす分光データの処理が進み、およそ半数のサンプル銀河の銀河中心領域に対し、近・中間赤外線あるいは遠赤外線のスペクトルを得た。これらの作業と平行して、「あかり」データとの比較研究に用いるSpitzer衛星の観測プログラム(PI:金田)で得られたデータの解析を進めた。得られた「あかり」データを詳細に解析した結果、横向きスターバースト銀河M82に対して、銀河ハローへ広く拡がったダスト放射を世界で初めてクリアに検出することに成功した。また、楕円銀河NGC4589とNGC4125に対して、「あかり」からダスト放射の空間分布を定量的に求め、Spitzerデータと比較した結果、星や有機分子との空間分布の違いを発見した。これらの成果は投稿論文や国際学会などで発表した。本研究は、赤外線天文衛星「あかり」で得られた近傍銀河の赤外線データを駆使して、空間分解された銀河星間物質の系統的研究を行うものである。赤外線衛星データは、宇宙環境によるさまざまな影響で、とくに広がった天体に対するデータの解析が困難であり、バックアップ検出器の地上実験などによる検出器物理の知識を導入してデータ処理を行う必要がある。平成23年度は、3年計画の2年目にあたる。「あかり」全天画像めデータ処理を高速に行うための計算機サーバーを名古屋大学で購入した。データ処理はほぼ終了し、現在は、近・中間遠赤外線に対して近傍銀河のマップを作成中である。また、画像データの解釈に補助的な役割を果たす分光データの処理を終え、銀河の近・中間赤外線あるいは遠赤外線スペクトルをまとめた。さらに、全天赤外線画像を作成の際に、宇宙放射線帯を通過するときに受ける出力オフセット変化や、検出器が温度ドリフトすることに伴う感度変化を補正するための方法を確立し、それぞれを査読付き雑誌論文などで報告した。特筆すべき科学成果は、(1)年老いた古い銀河において、ダスト放射の空間分布を詳細に決定し、有機分子との分布の違いをクリアに示したこと、(2)炭化水素ダストが、衝撃波領域で破砕・変性を受けているとの直接的な証拠を得たことと、(3)銀河内のさまざまな領域で、ダストマントル上に成長した水や二酸化炭素の氷を検出したこと、である。これらは銀河内物質が、銀河の進化とともにどう変化しているかを知る上で全くの新しい知見となった。本研究代表者は、平成24年2月に韓国済州島で行われた、第2回「あかり」国際会議を主催し(会議の開催は別予算)、本研究で得られた成果の多くをまとめて発表した。また、成果の一部は、査読付き雑誌論文で発表した。「あかり」中間・遠赤外線全天サーベイデータの最新版を用いて、近傍銀河(視野角が10分角以上の大きさのもの)約100個の画像を作成し、データベースを作成した。波長は、9、18、65、90、140、160ミクロンの計6バンドである。とくに、M82やNGC253といった有名な銀河で、「あかり」指向観測データが存在するものに関しては、サーベイ・指向データを結合させてS/Nを向上させるための処理手法を開発した。また、点源像をkernelとして、銀河に付随する広がった赤外線放射をdeconvolutionする方法を開発し、データに適用した。

Deconvolution後に、共通のGaussian kernelでconvolutionすることで解像度を揃え、銀河を空間分解して、領域ごとにSpectral Energy Distribution(SED)を求めた。SEDを標準のダストモデルでフィッティングすることで、各種ダスト成分の空間分布を求め、銀河の星間環境を議論した。また、これらの近傍銀河に対して、「あかり」近赤外線スペクトルデータを解析した。とくに炭化水素ダストや水・二酸化炭素氷ダストのスペクトルバンドを詳細に調べ、それらの化学状態に関する情報、および、銀河内の空間依存性を議論した。その結果、銀河の星形成活動性とダストの変成に関連性があることを発見した。近赤外線スペクトルデータについても、系統的なデータベースを構築した。以上の得られた成果は、査読付き論文や、台湾で行われたダストの国際研究会、国内の研究会・学会などで報告した。スペクトルデータのアーカイブ化はほぼ終了した。また画像データの処理はほぼ終了し、系統的に銀河データをまとめていく作業が残るのみである。科学成果は、本研究代表者が主催した平成24年2月の国際会議がモーチベーションとなり、多くの論文成果が出つつある。25年度が最終年度であるため、記入しない。近傍銀河を視直径で分類してデータを系統的にまとめていく。個々の天体の成果に加えて、カタログ的な成果を論文にまとめる。銀河データをどのようにアーカイブ化したデータを公開するか、サーバーをどう管理するかが、検討すべき項目である。
グローバル化における『狩猟採集民』と『農耕民』関係の再考

本研究は、グローバル化における『狩猟採集民』と『農耕民』の関係について再考することを目的としている。本年度は、研究期間の4年目にあたるため成果の取りまとめや発信、そしてマレーシアにおける現地調査を中心に研究を遂行した。(1)マレーシア・サラワク州ラジャン川上流における『狩猟採集民』と『農耕民』の関係現地調査:2018年9月にマレーシア・サラワク州ラジャン川上流において現地調査を行った。狩猟採集民シハンの集落を中心に、おなじく狩猟採集民であるプナン・ブラガンとの歴史的な関係について聞き取り調査を行った。また、周辺の農耕民であるカヤン、シカパン、クジャマンなどとの婚姻関係や擬家族関係についてインタビューを行った。(2)研究成果の国際発信:2018年8月に、ブラジル・ベレンで開催された第16回International Society of Ethnobiology Congressにおいて口頭発表を行った。マレーシアとインドネシアの狩猟採集民と農耕民における野生動物の狩猟について研究成果を発表した。また、英文書籍に掲載する論文を執筆した。論文は、狩猟採集民と農耕民の狩猟の比較に関するもので、2020年に刊行される予定である。(3)研究成果の国内発信:狩猟採集民と外国人を含めた周辺民族との社会関係について、日本語書籍に掲載する論文を執筆した。書籍は2020年に刊行される予定である。2018年10月には、日本文化人類学会北陸人類学研究会においてマレーシアの狩猟採集民シハンの社会性について研究成果のまとめを口頭発表した。また成果の一部を日本文化人類学会北陸人類学研究会ニューズレターに掲載した。さらに、マレーシア・ラジャン川流域における狩猟採集民と農耕民が観光に関わるプロセスについて福井県立大学公開講座で講演を行った。研究計画に沿って着実に成果を残しつつある。2018年度は研究期間の4年目であるため、研究成果のまとめに多くの時間を費やした。日本語と英語、両方の書籍に掲載する論文を執筆した。書籍は、研究期間中には刊行されないが、来年度刊行される予定である。次年度は研究成果の取りまとめに力を注ぐ予定である。本研究は、グローバル化社会における『狩猟採集民』と『農耕民』の現代的な関係性を再検討することを目的としている。2015年度は、国内における文献調査、マレーシアにおける現地調査、調査結果の分析、および国内外の学会における研究成果の発表や情報収集、そして研究結果の執筆を行った。(1)マレーシアにおける現地調査2015年8月にマレーシア・サラワク州で現地調査を実施した。都市部に居住する内陸部出身の、クニャ、カヤン、シハン、プナンなどの複数の民族集団出身者を対象に調査を行った。調査では、都市部における社会関係の築き方について参与観察とインタビューをおこなった。その結果、都市部においても内陸部でみられた社会関係を継続している事例が観察された。一方、若い世代では様々な民族集団と日常的にオープンな関係を形成していることが明らかになった。(2)国内外の学会における研究成果の発表と情報収集、研究ネットワークの構築ボルネオの内陸先住民コミュニティに、フィリピン人やインドネシア人などの外部者が取り込まれるプロセス、そして外部者がコミュニティにもたらす社会的インパクトについて第49回日本文化人類学会で発表した。この学会では、分科会「多元的結合と下からの共生ーアジアにおける移民・難民の視点から」を組織し、タイ、日本、アメリカなどさまざまな移民社会を対象とした研究者と事例を比較検討し、議論した。また、第11回国際狩猟採集社会会議では、現代的な状況における狩猟採集民の狩猟活動の位置づけとアイデンティティの関係について研究成果の報告を行った。この会議では、ボルネオで研究をする海外の研究者と研究結果の解釈について有意義な議論を行うことができた。その他、国内で開催された複数の学会や研究会に出席し情報収集を行った。研究計画に沿って、着実に成果を蓄積しつつある。2015年度は、前半は国内における文献調査を中心に行い、夏にはマレーシアにおける現地調査を実施した。文献調査では、ボルネオ社会に関する文献資料、人類学におけるエスニック・アイデンティティ研究の文献を収集し、主として理論面での研究を進めた。現地調査では参与観察を行う上で不可欠なラポールを作ることに努め、複数の民族集団を対象にインタビューをおこなった。その結果、多角的な情報を収集することができた。年度の後半は、調査結果の分析と国内外の学会における研究成果の発表や論文執筆をおこなった。そして1年を通して、研究会などに積極的に参加し、情報収集と研究ネットワークの構築に努めることができた。2016年度は、マレーシア・サラワク州およびインドネシア東カリマンタン州と北カリマンタン州における現地調査を計画した。(1)マレーシア・サラワク州における民族間関係の現地調査2016年8月にマレーシア・サラワク州ビントゥルとブラガで調査を行った。町における狩猟採集民と農耕民の民族間関係に着目し、教会での行事を通じてシハンがどのようにカヤンやクニャなど近隣の人々と関係性を構築しているのか、観察とインタビューを行った。近年、当地域ではBorneo Evangelical Missionの宣教活動が再び始まっている。教会ではカヤン、ダンジョンといった他民族集団と一緒に活動し、他の地域の教会や村を訪問する機会が増えている。教会活動を通じて築かれる、より開かれた関係性を明らかにした。

(2)インドネシア・東カリマンタン州及び北カリマンタン州における民族間関係の現地調査2016年9月にインドネシア・北カリマンタン州にて現地調査を実施した。カヤン・ウル郡およびカヤン・スラタン郡の複数のケニャの村を訪れて、農耕民の側から見た狩猟採集民との関係史について聞き取り調査を行った。続いて、北カリマンタン州マリナウ市において定住した狩猟採集民であるプナン・マリナウやプナン・アプットに口承史や言語について聞き取り調査を実施した。また、東カリマンタン州サマリンダ市近郊のスンガイ・クンジャン地区において、マハカム川上流域から都市に働きに出ているプナン・トゥブ、リスム、ブケットの人々に都市での生活と村の歴史、言語についてインタビューを行った。今後重要となる協力者やインフォーマントを見つけることができた。また、現地の大学を訪問し、地元の研究者と協力関係を築いた。研究計画に沿って、着実に成果を蓄積しつつある。2015年度は、前半は国内における文献調査を中心に行い、夏にはマレーシアにおける現地調査を実施した。文献調査では、ボルネオ社会に関する文献資料、人類学におけるエスニック・アイデンティティ研究の文献を収集し、主として理論面での研究を進めた。現地調査では参与観察を行う上で不可欠なラポールを作ることに努め、複数の民族集団を対象にインタビューをおこなった。その結果、多角的な情報を収集することができた。年度の後半は、調査結果の分析と国内外の学会における研究成果の発表や論文執筆をおこなった。そして1年を通して、研究会などに積極的に参加し、情報収集と研究ネットワークの構築に努めることができた。本研究はグローバル化における『狩猟採集民』と『農耕民』関係について再考することを目的としている。2017年度は、サラワク中央部における「狩猟採集民」と「農耕民」の社会関係について、8月にマレーシア・サラワク州の複数の村落を訪れて現地調査を行った。特に狩猟採集民の村落におけるインドネシア人などの外部者との関係を明らかにするための調査を行った。また、文献調査として、ボルネオ研究読書会を組織した。2017年度は8回の読書会を開催し、ボルネオ研究に重要な英文書籍を精読した。研究成果のうち、狩猟採集民の村落におけるインドネシア人居住者との関係について『マレーシア研究』より論文を刊行した。定住した狩猟採集民が持つ他民族集団に対する認識について、現地雑誌Ngingitより論文を刊行した。また、定住した狩猟採集民ブカタンと農耕民イバンの歴史的な関係を考察し、同じ九現地雑誌Ngingitより論文を刊行した。研究計画に沿って着実に成果を残しつつある。2017年度は、文献調査による情報収集と、現地調査によるデータの収集を両軸として研究を進めることができた。文献調査では、近年刊行されたボルネオに関する重要な英文書籍の精読を通して、研究動向を検討した。
凝固VIII因子A、Bサブユニットノックアウトマウスの遺伝子治療による病態と機能の解析

1.アデノ随伴ウイルス(AAV)ベクターを用いた遺伝子治療の試み昨年度、ヒトXIIIA、XIIIB cDNAを組み込んだAAVベクターをXIIIA、XIIIBノックアウトマウスあるいは野生型マウスに筋肉内注射によって投与したが充分な発現が得られなかったので、今年度は尾静脈からの注入を試みた。肝臓より抽出したRNAのRT-PCR解析により、導入したcDNAからのmRNAの発現が確認された。血漿についてはウエズタンブロット解析によるXIIIA、XIIIBタンパク質の増加は認められなかった。アミン取り込み活性のわずかな上昇が血漿で検出されたが、フィブリン架橋結合反応の明らかな増強は観察されなかった。組織切片の免疫染色でAAV-XIIIAを注入したXIIIA欠損マウスの肝臓において、低頻度ながら肝細胞内でのXIIIAの発現が確認された。AAV-XIIIBを注入したXIIIB欠損マウスでは、肝組織におけるXIIIBの染色は認められなかった。そこで、培養細胞系を用いてAAVベクターによるXIIIA、XIIIBの発現効率を検討した。高コピー数のAAV-XIIIAを添加したBHK細胞溶解検体にわずかながらXIIIAタンパク質が検出されたが、培養培地中には全く認められなかった。AAV-XIIIBを添加した場合も、高コピー数においてのみ培地中にわずかなXIIIBが確認された。2.組換えタンパク質補充の試みAAVベクターを用いた遺伝子治療の試みが有効でなかったので、その原因を明らかにする目的を兼ねて組換えタンパク質補充を実施した。rXIIIAをXIIIA、XIIIBそれぞれの欠損マウスに尾静脈より注入したところ、6時間後にXIIIA欠損マウスにおいて、血漿アミン取り込み活性は野生型マウスの約50%に上昇した。XIIIB欠損マウスではrXIIIAが血漿中に検出されたが、XIIIA欠損マウスと比べて低レベルであり、活性の増加も軽微であった。ノックアウト動物の外観、皮下や各種の内臓結合織の組織学的所見、その生化学的組成などの解析を行なったところ、野生型との明確な相違は認められなかった。特に、LPSなど炎症惹起物質投与による各種臓器の結合織の病理学的変化を観察したが、大きな違いは認められなかった。8週齢のXIIIA KOマウスのホモ接合体、ヘテロ接合体、野生型マウスの各2匹の背部を剃毛し、メスで真皮層まで1x1cmの範囲で切除した。創は開放のままSuper Pathogen Free (SPF)室で飼育を継続して施術7日後に比較したところ、ヘテロ接合体、野生型マウスの背部の傷痕は全体が乾燥した褐色の痂皮に覆われていた。一方、ホモ接合体マウスの傷痕は潰瘍化して深く、その表面は湿潤で赤燈色、不規則、軟弱であった。ヘテロ接合体、野生型マウスの背部の傷痕の組織学的な所見は、好中球を主体とする炎症性細胞の集積がみられるものの肉芽組織と瘢痕組織が切除部の一部を充たしていた。創との境界部の再生表皮は、真皮との連続性を保ちつつ伸長していた。一方、ホモ接合体マウスの傷痕の断面には、高度の肉芽組織の集積がみられ、瘢痕組織の発達は極めて低調であった。潰瘍性病変は皮下組織を超えて一部筋層まで到達し、水平方向にも拡大していたので、伸長の悪い境界部の表皮の下層に真皮の欠損部が存在する。遺伝子治療の開発の準備として、XIII因子のcDNAをアデノ随伴ウイルスベクターに挿入し、遺伝子導入ベクターを作製した。1.XIII因子欠損マウスの性状:突然死したXIII因子欠損マウスの病理学的解析突然死したXIIIA-/-雄マウス11匹(今年度)のうち3匹に胸腔内出血と心嚢血腫が見られ、残る8匹についてもヘモジデリン沈着を伴ったfibrosisや心筋内でのinterstitial hemmorrhage等、心臓組織における出血性の病変が観察された。XIIIB-/-雄マウスについては1匹のみが突然死したが、このマウスにおいてもヘモジデリン沈着を伴ったmyocardial fibrosisが認められた。また、2匹のXIIIA-/-雌マウスが交配/妊娠中の子宮からの出血を伴って死亡し、そのうち1匹にmyocardial fibrosisが確認された。2.遺伝子治療の検討ヒトXIIIAもしくはXIIIB cDNAを組み込んだアデノ随伴ウイルスベクター(AAV-FXIIIA、AAV-FXIIIB)を1x10^<10>、3x10^<10>、1x10^<11>v.g./mouseと量を変えてXIII因子欠損マウスの前脛骨筋に注入し、血漿XIII因子量の変化を経時的に検討した。XIIIB欠損マウスに1x10^<11> v.g./mouseのAAV-FXIIIBを注入した場合、注入4日後の血漿に極微量のXIIIBの発現を認め、わずかながらXIIIAの増加も観察されたが、注入10日後にはXIIIBは消失していた。一方、XIIIB欠損マウスにAAV-FXIIIAを注入した場合には、いずれのtiterにおいてもXIII因子の増加は検出されなかった。XIIIA欠損マウスについては、AAV-FXIIIA、AAV-FXIIIBいずれを注入した場合とも血漿XIII因子の増加は観察されなかった。このように、脛骨筋に注入した場合には治療効果は極めて低かったので、尾静脈からの注入法に切り替えた予備実験を継続中であり、現在結果を解析しているところである。

1.アデノ随伴ウイルス(AAV)ベクターを用いた遺伝子治療の試み昨年度、ヒトXIIIA、XIIIB cDNAを組み込んだAAVベクターをXIIIA、XIIIBノックアウトマウスあるいは野生型マウスに筋肉内注射によって投与したが充分な発現が得られなかったので、今年度は尾静脈からの注入を試みた。肝臓より抽出したRNAのRT-PCR解析により、導入したcDNAからのmRNAの発現が確認された。血漿についてはウエズタンブロット解析によるXIIIA、XIIIBタンパク質の増加は認められなかった。アミン取り込み活性のわずかな上昇が血漿で検出されたが、フィブリン架橋結合反応の明らかな増強は観察されなかった。組織切片の免疫染色でAAV-XIIIAを注入したXIIIA欠損マウスの肝臓において、低頻度ながら肝細胞内でのXIIIAの発現が確認された。AAV-XIIIBを注入したXIIIB欠損マウスでは、肝組織におけるXIIIBの染色は認められなかった。そこで、培養細胞系を用いてAAVベクターによるXIIIA、XIIIBの発現効率を検討した。高コピー数のAAV-XIIIAを添加したBHK細胞溶解検体にわずかながらXIIIAタンパク質が検出されたが、培養培地中には全く認められなかった。AAV-XIIIBを添加した場合も、高コピー数においてのみ培地中にわずかなXIIIBが確認された。2.組換えタンパク質補充の試みAAVベクターを用いた遺伝子治療の試みが有効でなかったので、その原因を明らかにする目的を兼ねて組換えタンパク質補充を実施した。rXIIIAをXIIIA、XIIIBそれぞれの欠損マウスに尾静脈より注入したところ、6時間後にXIIIA欠損マウスにおいて、血漿アミン取り込み活性は野生型マウスの約50%に上昇した。XIIIB欠損マウスではrXIIIAが血漿中に検出されたが、XIIIA欠損マウスと比べて低レベルであり、活性の増加も軽微であった。