hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
直腸癌術前VMAT治療中の線量分布変化

直腸癌術前照射32症例で放射線治療中の日々の直腸の動きを調べた。1症例につき、治療日のD1+7+13+19+25の5回施行。計画CTの直腸の中に含まれる割合は20.7%、3mmマージンの中に含まれる割合は7.2%、5mm:3.9%、7mm:2.1%、10mm:0.7%、15mm:0.1%であった。日々の直腸の動きを全て含めるためには15mmあればマージンとして十分であろうと結論付ける。本研究では、局所進行の直腸癌に対する、回転型強度変調放射線治療(VMAT)を用いて骨盤部への術前照射を実施し(局所進行下部直腸癌に対する術前照射は標準治療の一つである)、治療直前のkV cone beam CT (CBCT)で対象内の構造を同定した上で、実際に標的ならびに危険臓器に与えられた線量を評価することを目的としている。さらに、照射後の手術標本を用いて、実際の線量分布と腫瘍効果とを比較した。(1)局所進行直腸癌に対する術前照射におけるVMAT治療中に収集した投影画像からCBCT画像の再構成を行った。(2)再構成した治療中における対象内構造から全治療回数分の標的や臓器の同定を行い、実線量分布を作成した。(3)治療計画の線量分布と治療中の実線量分布とを治療実施回数分(25回分)比較した。キロボルト(kV)のCBCT上で、標的(直腸腫瘍と骨盤内リンパ節)ならびに危険臓器(小腸)をコンツーリングし、それを治療計画用CT(ヘリカル型CT)に乗せ、治療計画用CT上で線量計算を行った。各治療日での線量分布が1症例につき25セット得られた。その各Dose Volume Histogram(DVH)を評価した。(4)抗腫瘍効果との比較として、術前照射後に引き続いて(照射終了後5-6週間後に)施行される、根治手術時の病理標本で、術前照射の抗腫瘍効果と照射毎25回で標的に実際にどのくらいの線量が当たっていたかとの相関を調べた。32症例の直腸癌術前症例で、VMAT-IMRT直前の位置合わせのCBCTを用いて直腸と膀胱の容積ならびに直腸の位置を調べた。CBCTは各症例の治療日1・7・13・19・25日目のものを使用。標的体積を直腸が超えていた割合は、20.7%であった。3mmのマージンに入らなかった割合は7.2%、5mmで3.9%、7mmで2.1%、10mmで0.7%、15mmで0.1%はみ出ていた。膀胱容積とはみ出る割合には相関関係は見られなかった。放射線治療5段階の研究内容であるが、1年間で3段階まで終了しているので、おおむね順調に研究は進展していると思います。照射中の副作用の発生頻度・重症度と照射毎の動きの大きさとの相関を調べるという研究が残っています。照射中ならびに直後の副作用(主に下痢、肛門周囲の粘膜炎、膀胱炎・尿道炎)の発生頻度・重症度(グレード)と照射毎25回で危険臓器に実際にどのくらいの線量が当たっていたかとの相関を調べていきます。2900円と端数になってしまったため使用しきれませんでした。本年度のと合わせて使用させていただきます。
肝発癌機構の解明を目指したエピゲノム異常蓄積とその生成機序の探索

シトシン脱アミノ化酵素であるAIDの過剰発現に伴う遺伝子異常・DNAメチル化異常を解析するため、AIDトランスジェニックマウスに低濃度チオアセトアミド投与による薬剤性の慢性肝炎を惹起させることにより、AIDの異常による肝発癌マウスモデルを作成した。このマウスを用いてまず遺伝子変異の蓄積状況を、次世代シーケンサーを用いて網羅的に解析したところ、AIDによる遺伝子変異の蓄積を確認した。さらにDNAメチル化状態の検討について、MBD-seqにより網羅的に解析したところ、AIDトランスジェニックマウスと野生型マウスの間で、DNAメチル化状態に差があると思われる遺伝子群を検出した。ここで検出された、炎症発癌過程でAIDによって異常が生じている可能性がある遺伝子領域に関して、バイサルファイトシーケンスやメチル化特異的PCR法などにより、複数マウスからの検体を用いてメチル化状態の実態を検討した。しかしながら、次世代シーケンサーを用いた解析から予測されたメチル化変化が他個体では検出されず、AIDによって生じたと考えられる、炎症発癌を促進するようなメチル化異常を同定することができなかった。ただ、AIDトランスジェニックマウスへの薬剤投与以外の肝炎モデルとして、並行して作成を試みていたマウスモデルの研究が進み、新たにB型肝炎モデルマウスを作成することが出来た。また、その結果は国際雑誌へ論文が掲載された。今後はこのB型肝炎モデルマウスを用いて、炎症環境下でのDNAメチル化異常蓄積状況がさらに明らかとなることが期待できる。28年度が最終年度であるため、記入しない。DNA脱メチル化の異常と肝発癌の関連を明らかにすることを目的として、DNA脱メチル化に関わる遺伝子としてTET1・TET2・AIDに着目し、これらを肝臓で欠損・過剰発現するマウスを作成しその腫瘍発生の表現形を解析することを計画している。平成26年度は以下を中心に行った。1. TET2の全身ノックアウトマウスは慢性骨髄単球性白血病様の骨髄腫瘍を4カ月以内という早期に発症することが知られているため、TET2の異常と肝発癌への影響を明らかとするためには、臓器特異的なTET2ノックアウトマウスの作成が必要となる。そこでまずTET2 floxedマウスをジャクソン研究所より入手した。そして入手したTET2 floxedマウスをCreマウスと交配させることで、TET2を肝臓でノックアウトしたマウスを作成した。これらのマウスについては交配が順調に進み、現在、経過観察を行っているところである。2. TET2と同様に発癌との関わりが想定されているTET1についてもfloxedマウスを作成し、TET2 floxedマウスと組み合わせることで、臓器特異的TET1・TET1ダブルノックアウトマウスを作成することを計画している。TET1 floxedマウスは既報がないため、現在、TET1 floxedマウスの作成作業を行っているところである。3. AIDを全身で過剰発現するAIDトランスジェニックマウスに低濃度チオアセトアミドを経口投与することにより、AIDの異常による肝発癌マウスモデルを作成した。これらのマウスを用いてまず遺伝子変異の蓄積について次世代シーケンサーを用いて網羅的に解析したところ、AIDによると思われるC to Ttransition変異が蓄積していることを確認した。今後は同マウスの検体を用いてDNAメチル化異常を網羅的に解析し、遺伝子変異解析の結果と統合的に検討する予定である。DNA脱メチル化の異常と肝発癌の関連を明らかにすることを目的として、DNA脱メチル化に関わる遺伝子としてTET1・TET2・AIDに着目し、マウスを用いてその腫瘍発生への関わりを明らかとする研究を行っている。特に、AIDが変異を導入している標的遺伝子の特徴について解析したところ、特に炎症に伴って転写が上昇した遺伝子への変異生成が促進していた。以上より、炎症による遺伝子の発現亢進がAIDによる変異導入の危険性を増加させ、その結果生じたゲノム異常の生成亢進が肝発癌に促進的に作用するという分子機構の存在が示唆された。以上の結果について論文をまとめ、国際雑誌へ掲載することができた(Carcinogenesis. 36(8), pp.904-913, 2015.)。現在は、これらの遺伝子群のうちいくつかの遺伝子に着目し、AID・肝炎の有無により実際にDNAメチル化状態に変化が生じているのか、バイサルファイトシークエンスを行うことで検討しているところである。また、TET1・TET2と肝発癌の関連についても現在、肝特異的にこれらの発現を欠損するマウスを作成し、肝発癌を来すかどうか検討しているところである。AIDと肝発癌の関わりについて、順調にデータを蓄積することができている。TET1・TET2についても、マウスの交配が比較的順調に進んでいる。シトシン脱アミノ化

酵素であるAIDの過剰発現に伴う遺伝子異常・DNAメチル化異常を解析するため、AIDトランスジェニックマウスに低濃度チオアセトアミド投与による薬剤性の慢性肝炎を惹起させることにより、AIDの異常による肝発癌マウスモデルを作成した。このマウスを用いてまず遺伝子変異の蓄積状況を、次世代シーケンサーを用いて網羅的に解析したところ、AIDによる遺伝子変異の蓄積を確認した。さらにDNAメチル化状態の検討について、MBD-seqにより網羅的に解析したところ、AIDトランスジェニックマウスと野生型マウスの間で、DNAメチル化状態に差があると思われる遺伝子群を検出した。ここで検出された、炎症発癌過程でAIDによって異常が生じている可能性がある遺伝子領域に関して、バイサルファイトシーケンスやメチル化特異的PCR法などにより、複数マウスからの検体を用いてメチル化状態の実態を検討した。しかしながら、次世代シーケンサーを用いた解析から予測されたメチル化変化が他個体では検出されず、AIDによって生じたと考えられる、炎症発癌を促進するようなメチル化異常を同定することができなかった。ただ、AIDトランスジェニックマウスへの薬剤投与以外の肝炎モデルとして、並行して作成を試みていたマウスモデルの研究が進み、新たにB型肝炎モデルマウスを作成することが出来た。また、その結果は国際雑誌へ論文が掲載された。今後はこのB型肝炎モデルマウスを用いて、炎症環境下でのDNAメチル化異常蓄積状況がさらに明らかとなることが期待できる。TET2のコンディショナルノックアウトマウスは当初の予定通り順調に交配が進み、現在経過観察中である。AID異常発現による肝発癌マウスの系も既に構築できており、来年度の計画も予定通り実行できるものと期待される。MBD-seqで認められたAIDによるDNAメチル化異常に着目し、それらが本当にAIDによる異常なのかどうかを検討を進めるとともに、このメチル化異常と肝発癌の関わりも明らかとする。TET欠損と肝発癌の関わりについては、経過観察を終えたマウスの表現型の解析を順次行っていく予定である。28年度が最終年度であるため、記入しない。肝臓特異的なTET1・TET2ダブルノックアウトマウスを作成する。また、既に交配が先行している臓器特異的TET2ノックアウトマウスについて表現型の解析を順次行っていく。さらに、腫瘍組織及び非腫瘍部組織、コントロールマウスの肝臓よりDNAを抽出し、DNAメチル化異常について、ゲノムワイドに解析を行う予定である。
二酸化炭素地中隔離技術における長期安定性予測手法の研究

地球温暖化現象の要因として二酸化炭素の排出増加が挙げられ、その対応策として各種隔離技術の研究が進められている。しかしながら、二酸化炭素の長期的挙動は解明されていないのが現状である。地下帯水層に圧入された二酸化炭素は気相・液相・固相となって安定するが、液相に溶解した二酸化炭素は帯水層内を移流分散により拡散する。その際孔隙レベルの不均質性が移流分散挙動に与える影響を評価することが必要となる。本研究では、地下帯水層の岩質を想定してベレア砂岩、炭酸塩岩、またガラスビーズを用いた実験を行った。流動モデルとして移流分散(CDE)モデル、ならびに流れ部分と淀み部分を考慮したCoats-Smithモデルを採用し、実験結果とのマッチングを行った。ガラスビーズやベレア砂岩についてはCDEの適用ができた。また、得られた分散係数はサンプルの種類に関係なく流速に比例することが確認できた。一方、ドロマイトに対してはCDEの適用ができなかった。これは続成作用の過程によって形成される二次孔隙が存在し、孔隙レベルでの不均質性のためと考えられる。これを反映した分散モデルであるCoats-Smithモデルを適用したところ、良好なマッチング結果を得た。本実験で使用したサンプルでは淀み部分が40%程度含まれており、孔隙レベルの不均質性を有する岩石は同じ粒径でもそれを有さない岩石やガラスビーズと比べて大きい分散係数を持つ可能性があることがわかった。孔隙レベルの不均質性を有する帯水層に対して、分散をCDEで表現する現状のシミュレータを用いる場合、Coats-Smithモデルから導かれる分散係数を用いることは大きな誤差を生じさせる危険があり、近似的予測結果を得るためには見かけ上大きな分散係数を設定する必要がある。CO2地中隔離の実用を考えた場合、帯水層に圧入したCO2が長期的(数百年のオーダー)に安定して隔離され得るか、また、これが否の場合、どの程度の速度で逸散するかを予測する手法は未だ確立されていない。このような観点から、CO2の多様な性状の地層水に対する拡散・分散効果に関する実験・分析と成分物性を反映させた多成分型シミュレータによる流動予測が不可欠と考え、今年度は以下の研究項目を実施した。1.CO2-水系室内実験結果の整理ならびに数理モデルの選定これまでに国内外で実施されたCO2-水系の実験結果を調査・整理し、特に溶解度のデータを蓄積した。これを再現する数理手法を調査し、会合状態方程式を用いるものと、ヘンリー則を用いるものとの比較試験を行った。その結果、流動を伴うシミュレーションモデルのモジュールとして組み込むには、ヘンリー則を用いたものが適切であるとの結論を得た。2.地層水内拡散に関する室内実験拡散による特定分子の広がり現象を把握する目的で、多孔質媒体内のNaClの拡散実験装置を組み立て、予備的試験を実施した。塩分濃度は伝導率により測定することとし、濃度-伝導率の関係を求めた。3.室内実験結果の分析実験結果を再現するためのシミュレーションモデルを構築するために、まず、打切り誤差と拡散の理論上の関係を導き、実際のシミュレーション結果との整合性を確認した。

1.地層水内分散に関する室内実験拡散による特定分子の広がり現象を把握する目的で、多孔質媒体内のNaClの拡散実験装置を作成し、ガラスビーズ、ベレア砂岩、炭酸塩岩サンプルを用いた実験を行った。分散の強さを表す分散係数と流速の間の線形関係を確認し、また炭酸塩岩については、孔隙レベルの不均質性のために移流分散式の適用が困難であることを見出した。2.孔隙レベルの不均質性を加味した数理モデルの開発孔隙レベルの不均質性に起因する淀みを考慮するために、Coats-Smithモデルを数値モデルとして開発した。その際、打切り誤差に起因する数値分散を陽的に分散係数に反映させる手法を考案した。開発したモデルのより、炭酸塩岩を用いた実験結果を再現できることを確認した。3.二酸化炭素-水系の置換現象に関する各種物性敏感度解析二酸化炭素地中隔離において、二酸化炭素による地層水置換に各種物性が及ぼす影響度を数値モデルを用いて調査した。影響度の大きなものとして相対浸透率と高浸透率層の存在が挙げられ、今後の研究対象としてその重要性を確認した。CO2地中隔離の実用を考えた場合、帯水層に圧入したCO2が長期的(数百年のオーダー)に安定して隔離され得るか、また、これが否の場合、どの程度の速度で逸散するかを予測する手法は未だ確立されていない。このような観点から、CO2の多様な性状の地層水に対する拡散・分散効果に関する実験・分析とシミュレータによる流動予測が不可欠と考え、今年度は以下の研究項目を実施した。1.流線追跡アルゴリズムの開発多次元流動をストリームチューブに分割するために、多次元流動の流線追跡アルゴリズムを開発する。その際、各追跡点での移流速度を合わせて評価する。媒体には任意の位置に天然亀裂を含むことができる機能を付加する。これにより、二酸化炭素の亀裂に沿った選択的流れや対象層外への漏洩をシミュレートすることができる。2.速度依存移流・分散解の適用移流速度に依存する分散係数を反映した一次元移流・分散解を、各ストリームチューブに適用するアルゴリズムを開発する。これにより、二酸化炭素の分散による拡がりをシミュレートすることができる3.流れの可視化上記1.と2.を組み合わせて、移流・分散によるC02の逸散を計算し、これを容易に認識できるような可視化モジュールを開発する。
星間分子の超音速ジェットフーリエ変換マイクロ波分光

本研究の目的は、不安定分子種に適応したセンチ波領域での実験室分光によって、星間空間中における未知分子の帰属・同定に不可欠な分光学的情報を提供することである。これまでに、フーリエ変換マイクロ波分光法を超音速ジェット中での放電と組み合わせることにより、多くの不安定分子種について研究を行ってきた。本年度は、星間空間における金属元素の存在形態を明らかにする上で重要な、金属原子を含む多原子ラジカルに適用することを目指した。対象としたのは、不飽和型鉄カルボニルラジカル,Fe(CO)_n(n=1,3,4),である。これらをFe(CO)_5を超音速ジェット中でパルス的に放電することにより生成させ、その回転スペクトルを測定した。FeCOのスペクトルは、大きなスピン分裂を持つ3重項直線分子に典型的なパターンを示した。スペクトルの強度は極めて強く、^<56>FeCOばかりでなく自然比で存在する^<54>Fe,^<57>Fe同位体種も観測することができた。また、^<12>CO,^<12>C^<18>Oを試料ガス中に混ぜることによって、Fe^<12>CO,Fe^<12>C^<18>Oについてもスペクトルを測定した。以上5つの同位体種の回転定数から、Fe-C,C-O結合距離を精密に決定することができた。特にFe-C間距離は親分子のFe(CO)_5に比べて0.02Å以上も短く、COの不対電子のσ供与およびFeのd電子のπ逆供与がFeCO中ではより効率的に起こっていることを示す。Fe(CO)_3のスペクトルからは、このラジカルが三角錐型の構造(C_<3V>対称)を持ち、電子基底状態は3重項であることが明らかになった。Fe(CO)_4については、密集していて複雑なスペクトルであり現在解析中であるが、歪んだ四面体構造(C_<2V>対称)を持ち3重項電子基底状態であるという、分子軌道計算による予想と一致したものであると考えられる。
正の選択を制御するペプチドの解析

適応免疫応答の中枢を担うT細胞は胸腺の中で増殖・分化するが、この際ランダムな遺伝子再編成により作り出された多様なT細胞の中から、有用な細胞のみを生存させる"正の選択(ポジティブセレクション)"と、自分の身体の成分と強く反応する細胞を消去する"負の選択(ネガティブセレクション)"の2段階の選択が行われる。これまで、胸腺髄質上皮細胞(mTEC)において組織特異的抗原を発現させる転写因子AIREの発見やmTECの分化に必要なシグナルの同定など負の選択の機構の理解は進んでいたが、胸腺皮質上皮細胞(cTEC)で行われる正の選択の具体的なメカニズムは殆ど不明であった。申請者らはcTECに特異的に発現するプロテアソームの新規触媒サブユニットβ5tおよび特異な酵素学的性質を持つ"胸腺プロテアソーム"を発見し、CD8^+ T細胞の分化に必須であることを見出した。プロテアソームによるタンパク質分解産物は主要組織適合性複合体(MHC)クラスIに提示される抗原ペプチドとして利用され、CD8^+細胞傷害性T細胞が自己と非自己を識別するための旗印となることから、胸腺プロテアソームが正の選択のための特別なペプチドレパートリーを作り出している可能性が強く示唆される。本年度はβ5tが胸腺特異的に発現する機構に関して解析を行った。まず、ルシフェラーゼアッセイを用いたプロモーター解析を行い胸腺特異的な発現に必要なプロモーター領域を同定した。次にβ5tを発現していない細胞でβ5tを発現させるような転写因子を探索し、候補蛋白質としてFoxN1を同定した。現在、cTEC細胞において実際にFoxN1がβ5tの発現に関与しているのかどうか検討中である。申請者らはcTECに特異的に発現するプロテアソームの新規触媒サブユニットβ5tおよび特異な酵素学的1生質を持つ"胸腺プロテアソーム"を発見し、CD8^+T細胞の分化に必須であることを見出した。プロテアソームによるタンパク質分解産物は主要組織適合性複合体(MHC)クラス1に提示される抗原ペプチドとして利用され、CD8^+細胞傷害性T細胞が自己と非自己を識別するための旗印となることから、胸腺プロテアソームが正の選択のための特別なペプチドレパートリーを作り出している可能性が強く示唆される。本年度はTCRトランスジェニックマウスとの交配を行い、胸腺プロテアソームが特殊なペプチドを作り出していることを明らかにした(論文投稿中)。また、免疫プロテアソーム、胸腺プロテアソームが構成型プロテアソームに対して優先的に形成されるメカニズムも明らかにした(投稿準備中)。
超高速界面顕微振動分光法による生体反応の分子・速度論的解明

本研究は、タンパク質等の生体分子が実際に生きて存在する水環境下での生体分子周辺の水の構造および水との間に働く相互作用(水素結合など)をリアルタイムで追跡することで、タンパク質の構造と機能発現におよぼす水の影響について速度・分子論的に解明することを目的としている。二次の非線形光学現象にもとづく和周波発生(SFG)分光法は、反転対称性の欠如をもつ界面(表面)のみの情報を選択的に得ることが可能な振動分光法であり、特に固体/液体および液体/液体界面の水のプローブには従来の分光法と異なりバルクの水の影響を考える必要がないため、SFG分光法が適している。本研究では、カルシウム受容性タンパク質のひとつであるカルモジュリン(CaM)を固体基板上へ固定化させるほ法を確立し、カルシウムイオン存在下でのタンパクの構造変化に伴う周囲の水の構造およびCaM自身の構造変化を界面振動分光法により評価した。CaMがカルシウムイオンと結合することでCaM周囲に配向していた水分子の水素結合性が弱くなることを示唆する結果が得られた。これは、CaMの疎水性部位の露出により水分子の配向性が乱れたことに起因するものと考えている。同様な測定をマグネシウム存在下でも行ったが、マグネシウムイオンの添加による界面水の構造変化は観測されなかった。以上の結果から、今回観測された結果はカルシウムイオンとの結合によって引き起こされたCaMの構造変化によるものであることが明らかとなった。交付額本研究は、タンパク質等の生体分子が実際に生きて存在する水環境下での生体分子周辺の水の構造および水との間に働く相互作用(水素結合など)をリアルタイムで追跡することで、タンパク質の構造と機能発現におよぼす水の影響について速度・分子論的に解明することを目的としている。交付額生体分子は水環境の中にあり(人体のおよそ60%は水)、生命活動を支える多くの化学反応には水が積極的に関与している。例えば、タンパク質がその機能を発現するためには、タンパク質自身の構造変化と共に、その周囲の水の構造も大きく変化することが知られている。しかしながら、タンパク質の反応場である水分子がタンパク質の構造変化にどのような影響をおよぼしているのか、またどれくらいのタイムスケールでタンパク質が構造変化するのかといった点についてはいまだ不明な点が多く存在する。そこで本研究は、タンパク質等の生体分子が実際に生きて存在する水環境下での生体分子周辺の水の構造および水との間に働く相互作用(水素結合など)をリアルタイムで追跡することで、タンパク質の構造と機能発現におよぼす水の影響について速度・分子論的に解明することを目的としている。本年度は複雑な高次構造を持つタンパク質を、その性質を壊すことなく固体表面に化学的に固定化する方法を確立した。具体的にはCaイオン受容性タンパクであるカルモジュリンをHis-Tag法により活性を保った状態で固体基板上に固定化することに成功した。また、カルモジュリン受容性ペプチドの一つであるマストパランとの結合・解離過程にともなうタンパクの構造変化を溶液中で振動分光学的にその場追跡可能とした。今後は、タンパク周囲の水の構造変化をSFG分光法により追跡を行う予定である。二次の非線形光学現象にもとづくSFG分光法は、反転対称性の欠如をもつ界面(表面)のみの情報を選択的に得ることが可能な振動分光法であり固体/液体および液体/液体界面の水のプローブには従来の分光法と異なりバルクの水の影響を考える必要がないため、SFG分光法が適している。本年度は、カルシウム受容性タンパク質のひとつであるカルモジュリンを固体基板上へ固定化させ、カルシウムイオン存在下でのタンパクの構造変化に伴う周囲の水の構造をSFG分光法により評価した。カルモジュリンがカルシウムイオンと結合することでカルモジュリン周囲に配向していた水分子の水素結合性が弱くなることを示唆する結果が得られた。これは、疎水性部位の露出により水分子の配向性が乱れたことに起因するものと考えている。

同様な測定をマグネシウム存在下でも行ったが、マグネシウムイオンの添加による界面水の構造変化は観測されなかった。以上の結果から、今回観測された結果はカルシウムイオンとの結合によって引き起こされたカルモジュリンの構造変化によるものであることが明らかとなった。
新たなCNCファミリー因子Nrf3の機能解析

DrosophilaのGAGAやmod(mdg4)をはじめとするBTBタンパク質はクロマチンやDNAの構造を制御していることが知られており、Bach因子にもそのような分子制御機構が存在する可能性が高い。そこでBach2のBTBドメインに結合する因子を検索し、MAZR(MAZ-related factor)を単離した(A.Kobayashi etal.(2000)Mol.Cell.Biol.)。MAZRはBTBドメインを有するZn finger型転写因子であり、発現様式と生化学的データから判断しBach因子と協調的に造血発生過程において機能していることが予想される。またMAZRはc-myc遺伝子の発現も顕著に活性化するが、GAL4 DBD融合系を用いた解析において分子内に典型的な転写活性化ドメインが見い出されなかった。すなわち、MAZRはGAGAのような構造転写因子(architectural transcription factor)として機能する可能性が示唆された。血球細胞特異的な転写囚子NF-E2の関連因子として、Nrf3(NF-E2-related factor 3)を単離した。その発現様式と構造的相似性から、これら因子も造血細胞発生過程において機能することが示唆される。現在までに以下の知見を得た。2 Nrf3は、小Maf因子群のMafKとヘテロ二量体を形成し、MAREに結合し、それらの親和性は関連因子群の中では中程度であった。3 Nrf3遺伝子は、他のNF-E2関連因子と同様にヒト染色体上でHox遺伝子クラスターの近傍に位置していた。この事実は、これら関連因子が共通の祖先遺伝子からchromosome duplicationにより派生したという仮説を支持した。今後の方針の一つとしては、現在進行中のNrf3ノックアウトマウスの作製を完了し、詳細な発現解析を元に変異形質を解析して、Nrf3の生理機能をさらに明らかにする。
東アフリカにおける高卒若年滞留層のライフコースと地方定着化／再流動化モデルの構築

4月7月は前年度までの収集データの整理、学会での関連研究の論点把握につとめた。8月中旬9月上旬、ケニアの地方都市エルドレットにて参与観察とインタビュー調査をおこない、若年高学歴女性の(1)結婚(2)母村家族内での活動についての事例データを得た。(1)10人のうち2人が、2017年夏からの1年間に結婚し、結婚を予定していた1人は破局した。かれら3人から結婚(破局)にいたる経緯、家族形成のビジョンについてインタビュー調査をおこなった。siblingsのなかでも姉妹どうしはお互いの(教会式)結婚式に熱心に出資したこと、結婚後もキャリアアップ志向が持続するが、結婚相手とはかならずしも共有していないことが分かった。(2)ある姉妹は互助講式の共同出資で積立てをおこないながら、母村家族敷地内にコンクリ基礎の干煉瓦造り家屋(`permanent')の建設をすすめていた。これは第1には、結婚する姉妹の事前儀礼(`introduction')会場建設としてであり、第2には、近隣と比しても簡素な土壁の小屋で長年過ごしてきたのちの教育の成果顕示の意味をもち、第3には、母村家族における自らの発言力維持という家族内政治の含意がある。最終年度である今年度は、おもに女性に焦点化した調査をおこなった。このことにより事業期間全体を通じ、高学歴若年層の現状について、「延長された独身時代」における地元農村と地方都市の広がりのなかでのかれらの生計維持活動と社会関係の維持との見取り図を描くこと、そしてその男女別の実践の変異をみることができた。2015年度:4月6月は地域間移動についての先行研究を収集して論点を整理した。8月にウガンダ共和国調査地農村部にて現地調査をおこない、以下(a)(c)の資料を収集した。(a)調査地若年層(小学校卒業後)のセカンダリー進学・就職状況(約50名分)、(b)進学状況、セカンダリーでの勉学・寮での生活などについて進学者個人への聞き取り(抽出した数名)、(c)セカンダリー進学者の将来展望について個人への聞き取り(抽出した数名)。進学状況などの経年データを得るため、(d)調査地県内セカンダリースクール、代表的進学先である隣県のセカンダリースクールでの所属学生学籍票などの文書資料収集も試みたが、旧い資料の保存状況が芳しくなく(散逸)、また近年のものは個人情報保護の観点から閲覧が難しかった。9月帰国後、現在に至るまで収集した調査資料(a)(c)の整理をすすめている。ウガンダ共和国調査地周辺では、この20年間で私立の小学校およびセカンダリー(中学・高校)が増設されており、「教育の質」や学費の多寡をめぐって小学校・セカンダリーともに転校する生徒も多い。農村部のセカンダリー進学志望率は男女それぞれで7割を越えており、かれらのなかには大学進学志望者も少なくなく、高学歴志向は農村部でもすすんでいることが判った。かれらは、親が学費を賄えるかどうかがセカンダリー、大学への進学の可否を決める決定項だと表明する。実際には、セカンダリーに入学し、学費滞納によって休学ないし退学する者が多数いる。また、セカンダリー卒の進学・就職待機者もいる(本研究ではかれらを「若年滞留層」と呼ぶ)。地方都市での就職口が期待できない農村部若年層にとっては、結婚・進学が現実上の選択肢であるが、親にとって子どもの結婚には家財分与(男子には土地・ウシの一部の仮相続、女子には婚資)が、進学には出費(学費等)がともなう。そこには若年滞留層の若者とかれらの親とのあいだの駆け引き・交渉が生じている。こうした状況の中で、農村部若年層は親族(オジ・オバ・イトコ)、他出したキョウダイ、外村・他地域出身の学校の友人など、自分の周囲から情報収集し、おもに家の経済的状況に左右されながら進学先などを決定していく。セカンダリーの中途(前半の中学卒業相当)で高校(セカンダリー後半)への進学から教員養成校や専門学校進学に切り替える者もいる。これらの進路バリエーションと、具体的なかれらの進路戦略と将来像の形成について、聞き取り調査によって明らかにした。5月7月は、2015年度の現地調査で収集したデータの整理、関連研究の論点把握につとめた。2016年8月中旬より9月上旬にかけて、ケニア共和国の首都近郊部および地方都市エルドレットにて現地調査をおこなった。調査目的は、(1)高学歴若年層の生活実態や未就業状況、知人・友人関係の把握、(2)大学進学や留学・就職についてのアスピレーションの把握であった。現地では、セカンダリースクール・専修学校卒業者、大学学部在学者・卒業者にインタビューをおこない、とくに女子に絞って姉妹と友人のネットワークを活用した生活実態について参与観察による事例調査をすすめた。未就業状況については統計的に把握しづらいが、大学学部卒でもパブリック・セクターに就職している者は一握りのようである。ほとんどのセカンダリー卒以上の未就業の農村部出身者は卒業後も帰郷して就農(男子)や結婚(女子)という道を避け、都市部に滞留しインフォーマルセクターで雑業に従事する。たとえば参与観察をおこなった女子については古着行商、学生相手のタイピング代行やレター・レポート代筆業、零細雑貨店経営などであり、複数業のかけもちもみられる。それら雑業の一部は、従来は高学歴者は従事しないものと目されていた。

また、業種選択には姉妹や友人をフォローするという影響傾向が顕著であることがわかった。しかし、こうした雑業からさらなる進学の資金を捻出するまでの収入は見込めず、ここにそうした現実のなかでのアスピレーション維持という課題が生ずる。10月以降は現地調査で得たデータの整理につとめている。また、2017年3月には英国国立文書館(The National Archives)およびロンドン大学SOAS(東洋アフリカ研究学院)にて、東アフリカ地域の中等教育普及などについての植民地期(1900-1960年代前半)と独立直後(1960年代後半-1970年代)の文書資料を収集した。当初予定していた聞き取り調査だけではなく、参与観察も合わせておこなうことができ、調査対象である若者たちの日常生活の実態や意識に迫る効果的な調査が実施できた。昨年度からの成果の一部を、ウガンダ国立マケレレ大学での国際セミナーで発表した。また、現在は投稿論文を執筆中である。57月は、2016年度の現地調査で収集したデータの整理、文化人類学会での関連研究の論点把握につとめた。8月中旬より9月中旬にかけて、ウガンダ共和国の地方小都市カプチョルワにて聞き取りによる現地調査をおこなった。また、首都カンパラの国立マケレレ大学にてセミナーに出席、調査成果の一部を報告した。同国地方辺縁部エルゴン山域では、セカンダリ休学・卒業の農村出身の青少年らは、県庁の町カプチョルワあるいは山麓の商都ムバレに滞留して復学・進学・就職待機する。こうした滞留若年層のなかで、居場所の家賃をみずから(あるいは親が)支払うことのできる者はほとんどおらず、親族宅、学生友人宅に同居するか、キリスト教者であれば教会施設に寝泊まりする者もいた。昨年度までのケニア・ウガンダ両国の現地調査で浮上した課題は、滞留若年層の生活生計戦略の実態と、滞留期(就職・進学待機)のたしかな見込みが持てない状況下でのアスピレーションの維持・管理であった。ケニアに比べてウガンダの調査地は人口・経済規模が小さく、インフォーマルセクターの雑業に従事し生計維持する機会は限られていること(機会は女性よりも男性が少ない)、兄弟間の事例では昨年度ケニア調査の姉妹間の事例に比べて情報交換や協同が少なく、むしろそれぞれ独自の友人関係を活用していることが分かった。例えば、姉妹間の一時的同居はみられても、兄弟間のそれはみられない。また、地方都市においては若年層男女が30歳台まで未婚というケースは近年増加傾向にあるが、帰村した場合には周囲から逸脱者としての興味でまなざされる。農村部Uターンは「いったん退出した村のライフコースへの途中復帰」としてかれらに忌避され、地方都市暮らしを続けるよう方向づけられる。10月以降は、これまでに現地調査で得たデータの整理につとめ、3月には成果の一部を共編著のうちの1章のかたちで公刊した。ケニア調査と同様に、ウガンダ調査についてもインタビュー聞き取りのインフォマントを得て詳細な情報を得ることができた。また、かれらインフォマントの語った内容を調査データとして公刊することについても同意を得られている。4月7月は前年度までの収集データの整理、学会での関連研究の論点把握につとめた。8月中旬9月上旬、ケニアの地方都市エルドレットにて参与観察とインタビュー調査をおこない、若年高学歴女性の(1)結婚(2)母村家族内での活動についての事例データを得た。
神経因性疼痛に対するGDNF関連分子による治療法開発の基礎的研究

本研究によって以下の知見を得た。1.神経因性疼痛モデルを用いて疼痛発症時における栄養因子のタンパク発現量を各組織において測定した。成熟ラットの片側坐骨神経を緩く結紮することによって慢性絞扼性障害を惹起した。行動学的に疼痛が惹起されていることを経時的に確認し、結紮2週後に、ラットから組織を摘出、抽出後、グリア細胞株由来神経栄養因子(GDNF)および神経成長因子(NGF)などの栄養因子を定量した。栄養因子の微量タンパク分子測定のために、two-site enzyme immunoassay法を導入した。坐骨神経結紮部位において健側同部位に比べNGFの著明な低下が見られ、正常なNGF輸送が障害されていることが明らかとなった。皮膚で産生されたNGFの輸送経路が障害されているにもかかわらず後根神経節では発現が増加していたことから、一部異所性にNGFが産生されている可能性が考えられた。一方、GDNFの発現量は後根神経節では変化がなかった。以上の結果から、神経因性疼痛発症時に一次求心性線維の生存を維持するふたつの栄養因子の発現パターンが異なっていることがわかり、このことが病態に関与している可能性が示唆された。2.痛覚伝達に関与すると考えられているタキキニン受容体の変化を神経因性疼痛モデルにおいて検討するために、競合RT-PCR法を開発した。この方法によって脊髄のタキキニン受容体を定量したところ、障害側でタキキニン受容体NK-1mRNAの発現が変化している可能性が示唆された。3.成人ヒト骨格筋において、GDNF受容体分子の一つであるGFRα-1の発現が神経筋接合部および筋内有髄神経軸索にみられることがわかった。骨格筋においてGDNFが産生され、筋から分泌されたGDNFは神経筋接合部においてGFRα-1と結合することによって神経終末から取り込まれ、軸索内を輸送されると考えられた。神経因性疼痛に対するグリア細胞株由来神経栄養因子(GDNF)関連分子による治療法の開発の基礎研究を行い、以下の知見を得た。1.ラットを用いて神経因性疼痛モデルを作製した。成熟ラット片側坐骨神経を緩く結紮することによって慢性絞扼性障害を惹起した。Von Frey法によって行動学的に神経因性疼痛のひとつの症状と考えられる異痛症allodyniaの発現を観察した。数日後より対照側と比べ異痛症が生じ始め、2週間後に明らかな差異を示した。3.痛覚伝達に関与すると考えられているタキキニン受容体の変化を神経因性疼痛モデルにおいて検討するために、競合RT-PCR法を用いて定量的に高感度にタキキニン受容体を測定する方法を開発した。この方法によって脊髄のタキキニン受容体を定量したところ、神経因性疼痛モデルにおいて、障害側でsubstance Pに高親和性を持つタキキニン受容体NK-1 mRNAの発現が変化している可能性が示唆された。4.成人ヒト骨格筋において、GDNF受容体分子の一つであるGFRα-1の発現を免疫組織化学的に検討し、GFRα-1様免疫反応が神経筋接合部および筋内有髄神経軸索にみられることがわかった。PT-PCR解析によって運動ニューロンでGFRα-1分子が産生されている可能性が示唆された。

以前報告したように、GDNF様免疫反応性が筋線維、特に神経筋接合部に集積していることから、骨格筋においてGDNFが産生され、筋から分泌されたGDNFは神経筋接合部においてGFRα-1と結合することによって神経終末から取り込まれ、軸索内を輸送されると考えられた。神経因性疼痛に対するグリア細胞株由来神経栄養因子(GDNF)関連分子による治療法の開発の基礎研究を行い、以下の知見を得た。前年度に確立した神経因性疼痛モデルを用いて疼痛発症時における栄養因子のタンパク発現量を各組織において測定した。成熟ラットの片側坐骨神経を緩く結紮することによって慢性絞扼性障害を惹起した。Von Frey法によって行動学的に神経因性疼痛のひとつの症状と考えられる異痛症allodyniaの発現を観察した。数日後より異痛症が生じた。また、熱輻射反応潜時を測定し、温度覚過敏を検討し、障害側で軽度の過敏状態を観察した。疼痛が惹起されていることを経時的に確認し、結紮2週後に、ラットから組織を摘出、抽出後、GDNFおよび神経成長因子(NGF)などの栄養因子を定量した。栄養因子の微量タンパク分子測定のために、two-site enzyme immunoassay法を導入した。本方法で、10pg/wellまで測定可能であった。坐骨神経結紮部位において健側同部位に比べNGFの著明な低下が見られたが、結紮部位より近位側および後根神経節では低下していなかった。正常では、NGFは皮膚で産生され、一次求心性線維中を運ばれ作用すると考えられている。本研究の結果から、結紮によって、この正常なNGF輸送が障害されていることが明らかとなった。また正常の輸送経路が障害されているにもかかわらず、神経近位端および後根神経節ではNGFの減少が見られないことから、一部異所性にNGF産生がおきている可能性が考えられた。一方、坐骨神経結紮部位において、GDNFの発現量はNGFに比べ低下は少なかった。おそらく結紮部位においてGDNFは神経を取り囲むグリア細胞からも供給されているためと考えられる。以上の結果から、慢性疼痛の発症時に、侵害受容性一次求心性線維の生存を維持する2つの栄養因子の動態に差が認められた。
ドライバの状態監視を行うハプティック・ステアリング・ガイダンス制御

ハプティック・ステアリング・ガイダンスとは、ドライバがハンドル操作をしている際に、そのトルクよりも小さい操舵トルクをハンドルに与えることにより、操舵を誘導し、より安全で、滑らかな操舵を実現する運転支援システムである。ドライビングシミュレータを用いて、カーブを曲がる際にドライバがどこを見ているのかを計測し,その結果を基に制御器設計を行い,操舵のしやすさを評価した.また,ハプティックによる擾乱をドライバに与え,それに対する反応からドライバの状態監視を行うことを提案し,実験を通じて妥当性を評価した.効果的な運転支援とドライバの状態推定をおこなうことができるシステムを構築した.ハプティックガイダンスステアリングの制御器設計法を検討した。制御器においては、図目標軌道に対して、横方向の偏差と車体の速度の方向と軌道の角度偏差をフィードバックして、アシスト操舵トルクを決めている。10名の実験協力者を得て行ったドライビングシミュレータ実験によって、そのフィードバックゲインの適切な値を検討した。片側1車線道幅6mの道路において、右左折をそれぞれ10回づつ繰り返すコースを,音声による暗算タスクPASATを課されない通常状態(Normal)と課される状態(PASAT)で運転を行う.アシストトルクを小さい順に、弱、中、強と定め、実験を行い、PASATが課された状態の方が効果はあること、また、アシストトルクは必ずしも大きいほど良いわけではなく、人によって適切な大きさが異なることがわかった。力学支援操舵を,交差点および車線変更等における進路誘導に利用することも提案し、交差点右折前に車線変更を誘導するシーンを考えた。交差点停止線の手前500mに到達した時点で, 3秒程度の音声による車線変更の指示がだされ、運転者はその指示のもと車線変更を行うが,この音声指示と同時に,隣の右側車線の中心線を目標軌跡とする力覚操舵支援を機能させる.5名の実験協力者の協力を得て,ドライビングシミュレータ(以下DS)による実験をおこなった.ハプティックガイダンスステアリングによって、車線変更のタイミングは早くなること、また、その効果は、必ずしもトルクが大きいほど良いのではなく、個人差があることが分かった。それ以外には、グリップ力センサを購入し、センサ出力の検定を行った。これにより、緊張度、ハンドルを握る力、ハプティックガイダンスステアリングによるドライバーステアリング系の剛性の関係を調べることができるようになる。ドライバの状態推定の可能性検討を実験に入る準備ができた。平成26年度においては、ハンドルの把持力とドライバの腕のやわらかさ(アドミッタンス)の関係を求めた。ドライビングシミュレータにおいて、実験協力者に一定の把持力でハンドルを握らせ、外乱トルクを与えて、その応答を測定した。データにはばらつきがあるものの,把持力が強いほど、ハンドルを握る腕の等価的な剛性は高くなることがわかった。また,運転中にPASATなどの計算タスクを与えた際にはアドミッタンスは低下する傾向があり,眠気を感じている時は上昇する傾向があることがわかった.ステアリングが発生するトルクに対する応答から、ドライバの状態を推定できることを示すデータが得られた。また、前方注視点の位置と軌道の差からハプティックガイダンストルクを決めることができる新しい制御器を設計した.今までは車両重心位置と軌道の差をフィードバックする手法であったが、これにより、実際のドライバが操舵を行う感覚に近いハプティックガイダンストルクを発生することができるようになる。ドライビングシミュレータ実験を通じて、様々なゲインを設定して、ドライバの感覚に合い、自動車の挙動も向上する制御器を探索した。ヨー回転角とヨーレートのフィードバックゲインを大きくしすぎると,かえって操舵特性を悪化させることなどがわかった(MOVIC2015にて発表予定).人間の感覚は複雑であり、最適なゲインを見つけるには至っておらず、2015年度以降の研究の課題である。また,ハプティックガイダンスを車線移動支援に用いることを提案し,その際の軌道育成(Path planning)法も含めて,システム設計法を検討した.ハプティックガイダンスの性能向上と、それによるドライバの状態推定に関する研究を進めており、対外発表も順調に行っている。平成27年度においては、ハプティックガイダンスコントロールの制御ゲイン調整を検討した。車両重心位置での横方向偏差とヨー角偏差をフィードバックしていたが、実際のドライバは、進路の少し先を見て、その場所(前方注視点)と追従する予定の軌道との偏差をフィードバックして運転していると思われる。そのため、予見時間3秒と仮定して前方注視点を計算し、その位置を基準にした偏差をフィードバックするシステムに変更した。ステアリングの滑らかさ、軌道追従性など具体的に有意な変化は得られなかったが、明確な性能向上を得るためには、適切な予見時間、ヨー角と横変位偏差に対するゲインの選定が重要であることがわかった。今後の検討課題とする。また、ドライバの状態と腕のやわらかさ(アドミッタンス)の関係を求めた。ドライビングシミュレータにおいて、実験協力者に長時間の漫然運転を行わせ、眠気を感じ始めた時に、ステアリングに外乱トルクを与えて、その応答を測定し、アドミッタンスを求めた。眠気を感じていない時と比較して、眠気を感じた時に、アドミッタンスが有意に高くなることを示した。ハプティックガイダンスコントロールのように、ステアリングにトルクを入力した際のステアリングの角度の応答を測定することにより、ドライバの状態推定が可能であることを示した(ITS世界会議2016)。一方、与えるトルクの大きさによって、同定されるアドミッタンスの値が変わってくることもわかった(IEEE SMC 2016)。同一ドライバのデータの中での変化を見ることは有効であるが、全てのドライバに適用できるような閾値を設定する子は難しいと考えられる。

今後は、各ドライバの特性を考慮して状態推定を行うことも必要と思われる。本研究の主な目的を挙げると、ハプティックガイダンスコントロールによるドライバ状態の推定と、その制御ゲインの最適化の2つである。その二点において、研究が行われ、実験を通じて新たな知見が得られた。特にドライバ状態推定において、眠気を感じているドライバのアドミッタンスが向上すること実験データが得られたことは大きな成果である。また、ドライバによってアドミッタンスが変化することもわかった。ドライバ特性を考える必要性は実験計画の段階から想定されていたことであり、そのことが示されたことは研究が順調に進展していることを示すものである。制御ゲインの最適調整については、前方中心点を考慮するという新たな切り口が試された。まだ十分な結果は得られているとは言い難いが、まだ研究機関を1年残していることを考えると十分に進展していると言える。よって研究の進行度を「おおむね順調に進展している」と判断した。前方注視点の変化を考慮した力覚操舵支援を検討した.曲線半径100m, 300m,1000mの3種類のカーブの前方注視点をドライビングシミュレータ実験によって求めた.右カーブについては,25m, 32m, 40mと半径が長くなるにしたがい,前方注視距離が長くなるが,左カーブにおいては,30-32mで曲線半径によらなかった.力覚操舵支援を,前方注視点と目標軌跡の横変位およびヨー角の偏差をフィードバックすることによって行った.効果を横方向変位標準偏差(SDLP),ヨー角加速度2乗,主観評価等により評価した.実際の前方注視点よりも長い注視点で制御を行う方が,結果は良かった.力覚支援がドライバの状態に与える影響を調べた.力覚支援が疲労を感じているドライバの運転特性に与える影響をドライビングシミュレータ実験により調べた.運転時間が長くなり疲労を感じると,SDLP,Time toLane Crossing(車両の方向と車線が交差するまでの距離,長い方が良い)が悪くなるが,力覚支援操舵を行うと回復する.また,整理指標として,疲労を感じると長くなると言われている瞳を閉じている時間の割合(PERCLOS)および,LF/HFの計測を行い,力覚支援操舵に状態が回復することが確認できた.車輪とハンドルを接続しないステア・バイ・ワイヤの使用を前提として,車両の挙動に影響を与えずに,力覚操舵支援を行うインダイレクト方式を検討した.文献調査を中心に,実現可能性を検討した.小型電気自動車(コムス)の操舵軸に電気モータを取り付け,力覚操舵支援ができるように改造し,実車実験を行った.主観評価により,力覚操舵はトルクが大きければよいわけでなく,適度なレベルがあることが確認できた.
全ゲノム解析による緑内障点眼薬の眼圧下降作用にかかわるバリアントの同定

1.データベースから点眼薬と眼圧下降効果のデータの抜出、整理:原発開放隅角緑内障の全ゲノムのバリアントデータ取得済みのサンプルを833例のうち、昨年度でデータ確認が終わった症例は211例であったが、本年度は全症例の確認および入力が完了した。833例のうち今回の研究対象となる薬剤処方で、その処方前後に点眼内容が変化しないで3回の眼科受診の眼圧があった症例は303例(男女比148:155、平均年齢61.9±12.7歳)であった。そのうちプロスタグランジン(PG)製剤点眼は194例で、「1ラタノプロスト(LA)追加群」は90例、「2LAへの切り替え群」は18例、「3LA以外のPGを追加群」は16例、「4LA以外のPGに切り替え群」は70例、「5ベータブロッカー製剤点眼(β)追加群」は47例、「6β切り替え群」119例、「7炭酸脱水酵素阻害剤(CAI)追加群」は43例、「8CAI切り替え群」は8例となった。それぞれの平均眼圧下降効果は12.7±1.9mmHg、21.6±3.5mmHg、32.0±2.9mmHg、41.0±1.9mmHg、51.1±2.3mmHg、6日60.3±1.9mmHg、71.2±3.2mmHg、8-0.2±2.1mmHgであった。2.点眼薬の眼圧下降に寄与するバリアントの解析1から8の中で多数症例だったのは1のLA追加効果でN=90、次いで4のLAからビマトプロストへの切り替え効果N=34、ついで7のCAI追加でブリンゾラミドの追加効果N=39、ついで5のカルテオロール追加効果N=28であった。その他はN数が10以下であった。上記の各薬剤で眼圧下降効果と1000Kの全ゲノム解析を現在解析中である。3.新規症例の収集およびデータ整理現在、1000Kではなく別のチップの全ゲノム情報のある適応症例を400例程度保持しており、その薬剤情報を収集中。現時点で、1000Kのバリアントデータを持つ広義原発開放隅角緑内障833例の薬剤のデータ確認及び効果は整理でき、症例数は少ないながら予定通り薬剤と眼圧下降効果にかかわるバリアントを同定すべく全ゲノム解析を解析中である。しかしながら薬剤の種類が多岐にわたり、薬剤別で分類していくとN数が少なくなり、そのため有意なバリアントが同定できていない可能性があるので、各薬剤で細かく分けず、「プロスタグランジン」、「βブロッカー」、「炭酸脱水酵素阻害剤」という大きなくくりなどでも眼圧下降効果のバリアントを同定できるよう、現在解析を進めている。現時点で予定通りの広義原発開放隅角緑内障833例の薬剤のデータ確認及び眼圧下降効果は整理できた。そのデータをもとに全ゲノム解析中である。その結果が得られたら、別集団で1000Kではないが全ゲノム情報を約400例ほど保持しているのでそれを再現性取得実験として解析を行う予定である。データベースから点眼薬と眼圧下降効果のデータの抜出、整理(池田・森・上野・外園・佐藤が担当)既に原発開放隅角緑内障の全ゲノムのバリアントデータ取得済みのサンプルを833例保有している。各症例の薬剤処方歴、眼圧については1受診ごとのデータを保有しているが、これらのデータはファイルメーカーに入力されているが、実際のカルテでも確認が必要である。そのためカルテ内容を確認し、データの入力作業を行っている。現時点での入力作業が終わった症例は211例であり、そのうち今回の研究対象となる薬剤処方で、その処方前後に点眼内容が変化しないで3回の眼受診の眼圧があった症例は33例84眼(男女比8:23、平均年齢59.3±11.9歳)であった。そのうちプロスタグランジン製剤点眼は29例56眼(男女比8:21、平均年齢58.2±11.8歳)、βブロッカー製剤点眼は9例17眼(男女比3:6、平均年齢63.4±12.9歳)、炭酸脱水酵素阻害剤点眼は8例11眼(男女比1:7、平均年齢65.4±9.0歳)であった。それぞれの眼圧下降効果はプロスタグランジン製剤: 0.7±2.9mmHg、βブロッカー製剤:2.3±3.5mmHg、炭酸脱水酵素阻害剤:1.2±1.8mmHgであった。今年度で症例のデータ検討および入力が遅れているため、次年度ではデータ検討および入力作業に力を入れて30年度前半には完了を目指す。2.新規症例の収集およびデータ整理引き続き再現性取得実験用の症例収集を行い、症例ごとの点眼処方および眼圧下降に関するデータを収集する。最終年度に十分な症例数で狭義原発開放隅角緑内障・正常眼圧緑内障ともに多数例でのサブクラス解析が行えるように引き続き新規症例は収集を続け、信頼性の高い結果を取得できるようにする。新規症例の収集については順調に行っており、昨年度で狭義原発開放隅角緑内障47例、正常眼圧緑内障106例収集できている。引き続き新規症例を収集していく。バリアントデータを保有している833例のうち、現時点で眼圧のデータを整理できたのが211例である。