hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
温度受容体TRP受容体を活性化する食品成分とエネルギー代謝

19種の温熱・寒涼性食品からTRPV1を活性化する成分を培養細胞系で探索し、温熱性食品のタマネギとミョウガ、寒涼性食品のコムギのヘキサン抽出物からモノグリセリドを見出した。ついで、コショウ中のTRPV1活性化成分数種を同定した。また、マウスで肥満を誘発させる実験系でモノグリセリドおよびコショウが内蔵脂肪の蓄積を抑制する事を明らかにした。さらに、TRPA1を活性化する成分を培養細胞で探索し、ニンニクとミョウガ、コショウ中に新たな活性化成分を見出した。温熱・寒涼性食品から19種類を選び、ヘキサン、酢酸エチル、メタノール抽出物を作成し、分注機能付き蛍光マイクロプレートリーダーであるセルベースワークステーションFlexStationIIを用いてratTRPV1を異所的に発現させた細胞に対する活性化画分をスクリーニングした。温熱性食品であるネギ属植物、ミョウガ、および寒涼性食品に分類される小麦のヘキサン抽出物に高活性が認められた。小麦ヘキサン画分中の成分の単離・精製をおこない、1-アシルモノグリセロール(MG)が活性成分であることを明らかにした。ネギ属植物のうちタマネギと、ミョウガの活性として1-MGを単離した。ミョウガにはさらに2-MGが活性成分として含まれていた。ついで、1-MGがin vivoでもTRPV1を活性化するかをラット足裏皮下への投与試験から検討し、辛味関連行動を引き起こしたことからin vivoでの活性を明らかにした。また、辛味との相関が知られているラットの目への滴下試験において、1-MGが無辛味であることを確認した。さらに、市販1-MGを用いて、1-MGの構成脂肪酸の種類と活性の関係を調べ、鎖長と不飽和度が活性に影響することを見出した。これらのことから、1-MGはTRPV1を活性化する無辛味食品成分であることが明らかとなった。また、これまでに得ていたヒトTRPA1 cDNAを安定的に発現する細胞系を樹立することができた。次年度はこの細胞を用いて、TRPA1を活性化する食品成分の探索を行う。マウスでのin vivo実験と、培養細胞によるin vitro試験を実施した。1.肥満を誘発するモデル系として、マウスに高脂肪・高ショ糖食を添加する系をまず確立した。この系にTRPV1の活性化成分である1-モノオレインを添加してペアフィーディングにて一ヶ月飼育し、体脂肪蓄積や血中成分などの分析からエネルギー代謝への影響を検討した。その結果、体脂肪の蓄積は抑制される傾向を示し、また、肩胛骨間褐色脂肪中のUCP1量が有意に増大した。これらのことから、1-モノオレインはエネルギー消費を高め、体脂肪の蓄積に抑制的に作用することが示唆された。2.ヒトTRPA1遺伝子を安定的に導入した細胞と、分注機能付き蛍光マイクロプレートリーダーであるセルベースワークステーションFlexStationIIを用いて、TRPA1を活性化する食品成分を探索し、ニンニク中の含硫化合物が高い活性を示すことを見出した。中には、ワサビの辛味成分であるアリルイソチオシアネートより高活性な化合物もみられた。また、これらの化合物は弱いながらTRPV1に対する活性も示した。その他、ショウガ類の化合物数種と、サンショウ中のTRPA1活性を検討した。さらに、同様の実験系でTRPV1活性化成分を引き続き検討したところ、コショウ中からピペリン以外の活性化成分6種を新たに単離し,構造決定した。3.齧歯類のTRPA1のクローニングを試み、TRPA1らしき遺伝子の取得に成功した。今後、細胞に異所的に導入してタンパク質を発現させ機能解析をしてTRPA1であることを確認する必要がある。まず、昨年度見出したコショウ中のTRPV1活性化成分について、ヒトTRPA1に対する活性化能を、TRPA1をHEK細胞に異所的に安定的に導入した細胞と、細胞内カルシウム濃度の指示薬Fluo-4および分注機能付傾向マイクロプレートリーダーFlexStation II (Molecular Device)を用いて、セル・ベース・アッセイにより検討した。コショウ成分19種を用いた結果、TRPV1活性化能の見られた化合物は概ねTRPA1を活性化した。TRPA1の特異的阻害剤により細胞内カルシウム濃度の上昇が抑えられ、かつTRPA1を発現していないHEK細胞ではカプシ有無濃度の上昇がみとめられなかったことから、細胞内カルシウムイオン濃度の上昇はTRPA1を介したものであることが明らかとなった。用いた化合物の中で、N-イソブチルー(2E, 4E)-テトラデカ-2,4-ジアミドだけは、TRPA1のみを活性化した。コショウ中にTRPV1だけでなくTRPA

1を活性化する成分も見出されたことから、次に、高脂肪高ショ糖食で肥満を誘発する系に、黒コショウまたはコショウ辛味成分ピペリンを添加して、体脂肪蓄積や血液成分への影響を検討した。脂質エネルギー比48%、ショ糖エネルギー比25%の高脂肪高ショ糖食に、0.03と0.05%のピペリンまたは1%の黒コショウを添加した食餌を、マウスに1ヶ月間ペアフィーディングにて与え、体重、各臓器重量、各血清パラメータを測定した。ピペリンまたは黒コショウの添加は体重にはほとんど影響を及ぼさなかったが、内蔵脂肪の蓄積を低減した。また、肩胛骨間褐色脂肪組織中のUCP1量の増大をもたらした。さらに、黒コショウの方が、ピペリンよりもこれらの効果が強いことが明らかとなった。また、マウスのTRPM8遺伝子の取得と細胞での一過的発現に成功した。
急性前骨髄球性白血病の15;17転座における染色体転座形成分子機構の研究

急性前骨髄球性白血病に特異的に認められる15;17染色体転座の17番染色体レチノイン酸受容対α遺伝子内の転座切断点集中領域であり遺伝子組換えのホットスポットである50塩基対の領域ERRを含む148塩基対のDNA断片に特異的に結合する蛋白質が、NIH3T3細胞株およびヒト白血病細胞株であるKasumi-3、Kasumi-5細胞株において少なくとも2種類存在することをゲルシフト法を用いて証明した。これらの蛋白質は、マウス組織では脳のみで認められた。NIH3T3細胞を用いた細胞増殖状態との関連の解析により、これらの蛋白質は細胞増殖期より増殖停止期に多く存在していることが明らかとなった。また、マウス肉腫細胞株における遺伝子組換えレポーター導入実験によりERRを含むDNA断片は、非相同組換えのみならず相同組換えにも関与している可能性が示唆された。
フェノール性水酸基をフッ素陰イオンで求核置換する手法の開発と創薬への応用

医薬,農薬などの生物活性物質にフッ素を導入することで,活性の増強,安定性,脂溶性,生体内利用率の向上,毒性の軽減などの好結果が得られることが多い.従って,医薬品開発研究に於いて,活性化合物の所望の位置にフッ素原子を導入できる反応開発は極めて重要である.本研究では,入手容易なフェノールやカテコール類を原料にして,フッ素陰イオン型反応剤を用いる2種類の求核的脱酸素フッ素化反応を開発した.また,フッ素導入と架橋ビアリール骨格形成の連続反応を開発した.これらの成果を抗腫瘍活性アロコルヒチン類の含フッ素誘導体合成や抗精神病薬リスペリドンの収束合成に応用し,本法の実践性を検証した.本申請研究の目的は,入手容易なフェノールやポリフェノール類を原料にして,その水酸基を位置選択的にフルオロ基ヘイプソ置換する方法論を開発することである。本研究では,電子豊富なフェノール環ヘフッ素陰イオンを反応させる,という一見,非常識な反応を可能にする。さらに,フッ素導入と置換基導入(炭素骨格形成)の連続反応も開発する。創i薬に於ける含フッ素化合物の重要性を鑑み,また,フルオロ基は水酸基のbioisostereという視点から,創薬研究に資する含フッ素芳香族化合物の簡便合成法を提供する。平成24年度実施計画に基づき以下の成果を得た。1.ビアリール環形成を伴うデオキシフルオロ化法の開発:架橋ビアリール骨格に酸素置換基が多数置換し,顕著な生物活性を有する天然化合物や医薬品が多数知られている。本研究では,この酸素置換基の一つをフルオロ基にイプソ置換するデオキシフルオロ化法を開発した。すなわち,置換カテコールを酸化・環化して2種類のフルオロ化前駆体を作り分けた。そのうち,一方にフッ素陰イオン等価体Deoxofluorを反応させると,求核的フルオロ化反応と転位を経るビアリール骨格形成反応が連続進行し,目的のビアリール環を有するフルオロ体を得た。もう一方のフルオロ化前駆体に酸化一求核的フルオロ化一還元の一連の変換を行うことで,上記フルオロ体の位置異性体を得た。次に,本法を応用して抗腫瘍活性物質N-acetylcolchinolならびにNSC51046の新規含フッ素誘導体を数種類合成し,本法の実践性を明らかにした。2.ベンザインを経るフルオロ化:オルトシリルフェノールにNfFを反応させてフェノール性水酸基を反応系中で脱離基(ONf)に変換した。これにフッ素陰イオンが反応してベンザインを発生後,再度フッ素陰イオンを求核付加させることで水酸基をフルオロ基にイプソ置換するデオキシフルオロ化法を開発した。この際,ベンザインのフルオロ化にBu4NF・(tBuOH)4を用いることが,フッ素体を収率良く生成する鍵となることを見出した。また,この一連の反応をone-potで進行させることにも成功した。更に,ベンザインの隣接位の置換基によって,フルオロ化の反応位置が制御できることを見出した。3.フェノールの水酸基からフルオロ基への求核置換:フェノールのパラ位酸化と続くフッ素陰イオンの求核的導入を現在,検討中である。本申請研究の目的は,合成素子(合成中間体)として,また天然化合物として入手容易なフェノールやポリフェノール類を原料にして,その水酸基を位置選択的にフルオロ基へイプソ置換する方法論を開発することである。具体的には,フェノールおよびカテコールを酸化することで生じる求電子性カルボニル中間体への求核的フルオロ化法(A法)と,フェノールから発生させたベンザインを経る求核的フルオロ化法(B法)を開発する。平成24年度にこれら2つの方法論の基礎検討を行い、いずれの方法もその進行を確認することができた。平成25年度は,以下の成果を得た。1.Allocolchicineやjerusalemine等の強力な抗腫瘍活性を示す天然化合物は架橋ビアリール環構造を共通骨格として有する。A法を基に独自に開発した含フッ素架橋ビフェニル合成法を応用して,本天然物群のC環部にフッ素を置換した各種誘導体を合成した。また,反応条件を変えると,同じ中間体から酸素置換基の位置や数が異なる誘導体も合成できた。これらの化合物のがん細胞増殖阻害活性を評価し,有望な化合物を見出した。現在,この成果の論文発表の準備中である。2.B法を,1つのベンゼン環内の2ヶ所に三重結合を順次発生させることのできる1,3-ベンズジイン等価体に応用した。さらに,アジドとの(3+2)環化付加反応と求核的フッ素化を順次行って,含フッ素縮合ヘテロ芳香族化合物の合成法を見出した。本法によって,抗精神病薬risperidoneの主骨格を位置選択的に短工程で完成し,創薬基盤研究に資する合成手法を提示した。3.B法にマイクロフローリアクターを適用して,ベンザインの発生とフッ素化反応を効率的に進行させることができた。医薬,農薬などの生物活性物質にフッ素を導入することで安定性,脂溶性,生体内利用率などが劇的に変化し,望ましい薬効が発現する例が多数見出されている。そのため、フッ素導入法は創薬研究に於いて極めて重要な反応であるが、電子豊富な芳香環へのフッ素化は未だ十分ではない。本課題の目標は、生物活性(天然)化合物として、また、合成中間体として入手容易なフェノール類を原料にして,その水酸基を位置選択的にフルオロ基へイプソ置換する方法論を開発することである。

具体的には、フェノール類の酸化で生じるカルボニル中間体への求核的フルオロ化法(A法)と,フェノール誘導体から発生させたベンザインを経る求核的フルオロ化法(B法)を開発する。本年度は、以下の成果を得た。1.一端の水酸基を保護したピロガロールを基質に用いてA法を行った。その結果、保護基の電子的な性質によって、求核的フルオロ化の反応位置が2通りに制御できることが分かった。現在、この方法を、種々の置換様式のピロガロールや、アミノ基が置換したカテコールに適用し、保護基による位置制御法の一般化を進めている。2.B法において、ベンザインの隣接位の置換基によって求核的フルオロ化の反応位置が制御できることがわかった。医薬、農薬などの生物活性物質にフッ素を導入することで安定性、脂溶性、生体内利用率などが劇的に変化し、望ましい薬効が発現する例が多数見出されている。そのため、フッ素導入法の開発は創薬研究に資する極めて重要な課題である。市販の医薬品では、芳香環にフッ素が置換した構造を有するモノが一番多いが、電子豊富な芳香環への位置選択的なフッ素化は未だ十分ではない。本課題の目標は、生物活性(天然)化合物として、また、合成中間体として入手容易なフェノールやポリフェノール類を原料にして、その水酸基を位置選択的にフルオロ基へイプソ置換する方法論を開発することである。そのために、フェノールおよびカテコールを酸化することで生じる求電子性カルボニル中間体への求核的デオキシフルオロ化法(A法)と、フェノールから発生させたベンザインを経る求核的フルオロ化法(B法)を開発する。1.一端の水酸基を保護したピロガロールを基質に用いてデオキシフルオロ化を行うA法を検討した。当初、生成物の収率が低かったが、それは、オルトキノン反応中間体の不安定性に起因することが判明した。適切な置換基を導入した基質ではその問題は解消し、生成物の収率が改善した。2.アミノ基を含むアルキル鎖が置換したカテコールにA法を適用し、デオキシフルオロ化と環化が連続進行して含フッ素キノリン誘導体を合成する方法論を開発した。3.B法において、従来はベンザイン前駆体を調製するために入手容易なフェノールから多工程を要していたが、フェノールからone-potでベンザインを発生する方法が見つかった。医薬,農薬などの生物活性物質にフッ素を導入することで,活性の増強,安定性,脂溶性,生体内利用率の向上,毒性の軽減などの好結果が得られることが多い.従って,医薬品開発研究に於いて,活性化合物の所望の位置にフッ素原子を導入できる反応開発は極めて重要である.本研究では,入手容易なフェノールやカテコール類を原料にして,フッ素陰イオン型反応剤を用いる2種類の求核的脱酸素フッ素化反応を開発した.また,フッ素導入と架橋ビアリール骨格形成の連続反応を開発した.これらの成果を抗腫瘍活性アロコルヒチン類の含フッ素誘導体合成や抗精神病薬リスペリドンの収束合成に応用し,本法の実践性を検証した.年度当初の課題の一つであるフッ素化の反応位置制御に関して、A法とB法の両方で目的に適う方法を見出し、大きな進展があった。
機械学習法を駆使した金融テクニカル分析の科学的妥当性の検証

近年,人工知能技術の実務への応用が加速しているが,本研究では特に金融業務への応用としてFinTechに関する投資運用モデルをいくつか提案した.提案モデルでは,深層学習・集団学習・異常検知など様々な技術を用いるが,投資判断は過去の株価情報のみに基づくためテクニカル分析の一種とみなし,それらの妥当性を投資シミュレーションおよび統計的仮説検定に基づいて調査した.その結果,単にまぐれでは解釈できないほどの収益性を確認でき,これは伝統的経済学の基盤をなす効率的市場仮説の反証になり得る可能性を指摘した.これらの成果は学術論文1編,国際会議論文4編,国内発表7件に示し,今後は実用化を見据えてブラッシュアップする.特に今年度において重要視した試みとして,大和証券投資信託委託株式会社と共同で集合知AIの応用可能性を検討し,同社の定例発行物(9編)を通じて集合知AIの基本コンセプトを広く世に発信した.なお集合知AIとは,人工知能と集団学習を組み合わせた独自のアルゴリズムトレーディングモデルであり,予測しやすい銘柄を臨機応変的に選択することができる.さらに株式市場のみならず,各種企業との共同研究(マネックス証券株式会社,株式会社プロトコーポレーション,など)により,外国為替市場や中古車オークション市場についても人工知能や機械学習のアプローチが通用するのか検討し,ある程度の可能性を確認できた.引き続き次年度において,より詳細な検討を行う.学術論文1編,国際会議論文4編,国内発表7件,解説9編,受賞2件,報道13件などを鑑み,順調に研究成果を挙げていると考えられる.国際会議および国内発表した研究テーマについて内容をよりブラッシュアップし,2019年度中に学術論文誌に投稿する.その他,進行中の研究テーマについては国内外で成果を発表し,外部の専門家らによる意見を伺いブラッシュアップを図る.近年,人工知能技術の実務への応用が加速しているが,本研究では特に金融業務への応用としてFinTechに関する投資運用モデルをいくつか提案した.提案モデルでは,深層学習・集団学習・異常検知など様々な技術を用いるが,投資判断は過去の株価情報のみに基づくためテクニカル分析の一種とみなし,それらの妥当性を投資シミュレーションおよび統計的仮説検定に基づいて調査した.その結果,単にまぐれでは解釈できないほどの収益性を確認でき,これは伝統的経済学の基盤をなす効率的市場仮説の反証になり得る可能性を指摘した.これらの成果は学術論文2編(内アクセプト1編),国際会議論文3編,国内発表5件に示し,今後は事業化を見据えてブラッシュアップする.特に人工知能と集団学習を組み合わせた「集合知AI」を提唱し,予測しやすい銘柄を臨機応変に選択するためのテクニカル指標(コンセンサスレシオ)を開発した.これまでの集団学習では主に平均値のみに着眼したが,多数決の度合いに相当する標準偏差も重要な情報であるため,標準偏差が小さい(コンセンサスが高い)銘柄を優先的に選択する投資運用モデルを提案した.この成果が国際テクニカルアナリスト協会が主催する年間最優秀論文と認められ,2016年度ジョン・ブルークス賞を受賞した.さらに深層学習を用いた投資運用モデルでは,異常検知の方法としてオートエンコーダを活用した.異常検知では予測値と実測値の乖離を利用して異常度を評価するが,そもそも予測が難しいシステムではほとんどの値が異常になってしまう.そこで現在と未来の関係を学習する一般的な機械学習モデルではなく,現在と現在の関係を自己学習するオートエンコーダなら異常検知に活用しやすいと考え,実際の株価変動の異常検知に活用した.その結果,異常な株価変動の直後は反転しやすい傾向(アノマリー)を発見し,これが収益を得る機会になる可能性を示した.学術論文2編(内アクセプト1編),国際会議論文3編,国内発表2件を鑑み,順調に研究成果を挙げていると考えられる.近年,人工知能技術の実務への応用が加速しているが,本研究では特に金融業務への応用としてFinTechに関する投資運用モデルをいくつか提案した.提案モデルでは,深層学習・集団学習・異常検知など様々な技術を用いるが,投資判断は過去の株価情報のみに基づくためテクニカル分析の一種とみなし,それらの妥当性を投資シミュレーションおよび統計的仮説検定に基づいて調査した.その結果,単にまぐれでは解釈できないほどの収益性を確認でき,これは伝統的経済学の基盤をなす効率的市場仮説の反証になり得る可能性を指摘した.これらの成果は学術論文2編(内アクセプト1編),国際会議論文1編,国内発表3件に示し,今後は事業化を見据えてブラッシュアップする.特に人工知能と集団学習を組み合わせた「集合知AI」を提唱し,予測しやすい銘柄を臨機応変に選択するためのテクニカル指標(コンセンサスレシオ)を開発した.これまでの集団学習では主に平均値のみに着眼したが,多数決の度合いに相当する標準偏差も重要な情報であるため,標準偏差が小さい(コンセンサスが高い)銘柄を優先的に選択する投資運用モデルを提案した.この成果が国際テクニカルアナリスト協会が主催する年間最優秀論文と認められ,2016年度ジョン・ブルークス賞を受賞した.さらに深層学習を用いた投資運用モデルでは,異常検知の方法としてオートエンコーダを活用した.異常検知では予測値と実測値の乖離を利用して異常度を評価するが,そもそも予測が難しいシステムではほとんどの値が異常になってしまう.そこで現在と未来の関係を学習する一般的な機械学習モデルではなく,現在と現在の関係を自己学習するオートエンコーダなら異常検知に活用しやすいと考え,実際の株価変動の異常検知に活用した.

その結果,異常な株価変動の直後は反転しやすい傾向(アノマリー)を発見し,これが収益を得る機会になる可能性を示した.学術論文2編(内アクセプト1編),国際会議論文1編,国内発表3件を鑑み,順調に研究成果を挙げていると考えられる.近年,人工知能技術の実務への応用が加速しているが,本研究では特に金融業務への応用としてFinTechに関する投資運用モデルをいくつか提案した.提案モデルでは,深層学習・集団学習・異常検知など様々な技術を用いるが,投資判断は過去の株価情報のみに基づくためテクニカル分析の一種とみなし,それらの妥当性を投資シミュレーションおよび統計的仮説検定に基づいて調査した.その結果,単にまぐれでは解釈できないほどの収益性を確認でき,これは伝統的経済学の基盤をなす効率的市場仮説の反証になり得る可能性を指摘した.これらの成果は学術論文1編,国際会議論文4編,国内発表7件に示し,今後は実用化を見据えてブラッシュアップする.特に今年度において重要視した試みとして,大和証券投資信託委託株式会社と共同で集合知AIの応用可能性を検討し,同社の定例発行物(9編)を通じて集合知AIの基本コンセプトを広く世に発信した.なお集合知AIとは,人工知能と集団学習を組み合わせた独自のアルゴリズムトレーディングモデルであり,予測しやすい銘柄を臨機応変的に選択することができる.さらに株式市場のみならず,各種企業との共同研究(マネックス証券株式会社,株式会社プロトコーポレーション,など)により,外国為替市場や中古車オークション市場についても人工知能や機械学習のアプローチが通用するのか検討し,ある程度の可能性を確認できた.引き続き次年度において,より詳細な検討を行う.学術論文1編,国際会議論文4編,国内発表7件,解説9編,受賞2件,報道13件などを鑑み,順調に研究成果を挙げていると考えられる.国際会議で発表した3つの研究テーマについては,それぞれの内容をブラッシュアップしつつ,2017年度中に学術論文誌に投稿する.アクセプトされた学術論文については事業化できる可能性があるため,論文が公表される前に特許を出願する(5月末を予定).その他の進行中の研究テーマについては国内外で成果を発表し,外部の専門家らによる意見を伺いフラッシュアップを図る.国際会議および国内発表した研究テーマについて内容をよりブラッシュアップし,2018年度中に学術論文誌に投稿する.既に公開された学術論文については事業化を通じて机上の空論ではないことを実証する(特許申請済み).その他,進行中の研究テーマについては国内外で成果を発表し,外部の専門家らによる意見を伺いフラッシュアップを図る.国際会議および国内発表した研究テーマについて内容をよりブラッシュアップし,2019年度中に学術論文誌に投稿する.その他,進行中の研究テーマについては国内外で成果を発表し,外部の専門家らによる意見を伺いブラッシュアップを図る.計算機が安価になり,想定額より安く購入できたため,次年度使用額が生じた.H30年度には,この使用額を利用して計算機を追加購入し,実験環境の改善を図る.最終年度である2018年度において学内業務が忙しく,研究計画の最終工程である論文投稿までに至らなかった.そこで補助事業期間延長を申請し承認されたため,残額については次年度の論文投稿等に使用する.
遺伝子発現解析にもとづく腎細胞癌の再発予測モデルの構築

腎細胞癌は生物学的特性の全く異なる複数の腫瘍亜型から構成されていることが明らかになりつつある。我々はこれまでにマイクロアレイ解析を用いて、最も頻度の高い淡明細胞型腎癌で高発現している遺伝子群を100ヶ以上抽出してきた。それらの中でadipose-differentiation related protein (ADFP)が、淡明細胞型で特異的に高発現していることをreal-time PCR法、免疫染色法で確認した。今回この遺伝子の発現レベルをreal-time PCRで定量し、淡明細胞腎癌の臨床病理および患者予後との関係の詳細について検討した。ADFPは正常腎ではほとんど発現が検出されず、一方腫瘍では発現が亢進すること、また腫瘍のgrade, stageが低い群で発現が高く、それらが上がるにつれて発現量が落ちていた。またADFPはVHL/HIFの下流で転写調節をうけていると考えられるが、それを裏付けるように、VHL変異(-)群に比べ、変異(+)の淡明細胞腎癌で発現量が有意に高かった。さらにADFP高発現群は単変量、多変量解析で有意に予後良好であった。VHL/HIFの下流に存在するADFPは、淡明細胞腎癌の有用な診断・予後マーカーの一つになりうると考えられた。引き続き淡明細胞型で高発現しているもう一つの遺伝子としてVCAM1も同様にreal-time PCR法で発現レベルを検出、患者の臨床病理像との詳細な関係について調べた。VCAM1は淡明細胞腎癌の初発時無症状群、low stage, low grade,脈管浸潤(-),VHL変異(+)群で発現レベルが有意に上昇していた。さらに高発現群で有意に根治切除後の再発頻度が低いことが多変量解析で明らかとなった。このことからVCAM1は術後再発を判定する良い指標になるものと考えられた。さらに今回の研究で我々は様々な細胞組織型を含む腎癌約500例からなるcDNA poolを作成した。このcDNA poolを用いて、腎癌の組織型特異的な発現遺伝子、再発や予後と関連する重要な新規遺伝子群の定量的発現解析、臨床諸因子との詳細な関係の解析を系統的に進め、これらの遺伝子の重み付けの定量化と、遺伝子発現解析による再発、予後予測モデルを構築予定である。その中でadipose-diffentiation related protein(ADFP)が、淡明細胞型で特異的に高発現していることをreal-time PCR法、免疫染色法で確認した。今回この遺伝子の発現レベルと淡明細胞腎癌の臨床病理および患者予後との関係の詳細について検討した。散発例の淡明細胞腎癌312例をretrospectiveに解析、ADFPの発現はreal-time PCRで定量した。ADFPは腫瘍のgrade, stageが低い群で発現が高く、それらが上がるにつれて発現量が落ちていた。またADFPはVHL/HIFの下流で転写調節をうけていると考えられるが、それを裏付けるように、VHL変異(-)群に比べ、変異(+)の淡明細胞腎癌で発現量が高かった。

さらにADFP高発現群は単変量、多変量解析で有意に予後良好であった。VHL/HIFの下流に存在するADFPは、淡明細胞腎癌の有用な診断・予後マーカーの一つになりうると考えられた。さらに淡明細胞型で高発現している遺伝子の一つとしてnicotinamide N-methyltransferase(NNMT)も同様にマイクロアレイ解析で見い出した。real-time PCR法ではこの遺伝子は淡明細胞型でのみ特異的に高発現がみられ、正常腎および他の非淡明細胞型腎癌ではほとんど発現が検出されなかった。この遺伝子の発現レベルとstage, grade等の臨床因子、予後との関係では明らかなものは見出せなかったものの、淡明細胞型ではユビキタスに高発現しているものと考えられた。このことから淡明細胞腎癌の新規の診断マーカーとしての可能性が考えられた。腎細胞癌は生物学的特性の全く異なる複数の腫瘍亜型から構成されていることが明らかになりつつある。我々はこれまでにマイクロアレイ解析を用いて、最も頻度の高い淡明細胞型腎癌で高発現している遺伝子群を100ヶ以上抽出してきた。その中でadipose-differentiation related protein(ADFP)が、淡明細胞型で特異的に高発現していることをreal-time PCR法、免疫染色法で確認した。今回この遺伝子の発現レベルをreal-time PCRで定量し、淡明細胞腎癌の臨床病理および患者予後との関係の詳細について検討した。ADFPは腫瘍のgrade, stageが低い群で発現が高く、それらが上がるにつれて発現量が落ちていた。またADFPはVHL/HIFの下流で転写調節をうけていると考えられるが、それを裏付けるように、VHL変異(-)群に比べ、変異(+)の淡明細胞腎癌で発現量が高かった。さらに淡明細胞型で高発現している遺伝子の一つとしてVCAM1も同様にreal-time PCR法で発現レベルを検出、患者の臨床病理像との詳細な関係について調べた。VCAM1は淡明細胞腎癌の初発時無症状群、low stage, low grade,脈管浸潤(-),VHL変異(+)群で発現レベルが有意に上昇していた。さらに高発現群で有意に再発頻度が低いことが多変量解析で明らかとなった。このことからVCAM1は術後再発を判定する良い指標になるものと考えられた。さらに今回の研究で我々は様々な細胞組織型を含む腎癌約500例からなるcDNA poolを作成した。このcDNA poolを用いて、腎癌の組織型特異的な発現遺伝子、再発や予後と関連する重要な新規遺伝子群の定量的発現解析、臨床諸因子との詳細な関係の解析を系統的に進めていく予定である。
振動miRNA制御を介した高効率血小板放出システムの開発

血小板産生の親細胞である巨核球が生体骨髄の血管外から血管内に細胞質を出し、血流刺激下に血小板を産生する画像を特殊なベクトル解析によってさらに詳細に再検証した。その結果、血小板産生イベントが持続的に観察される骨髄巨核球の細胞壁に対しては血流中に乱流が起きていることを見出した。この観察結果を実証する新規モデルの培養槽を準備し、乱流概念中のどの物理パラメーターによって、巨核球のリモデリングが制御され、血小板産生が促進されるかのメカニズムの一端を明らかにした。この成果は、乱流刺激が制御する血小板産生機構解明という新規の研究領域を創出した。(1)In vivoでの血小板放出状態を解析するための技術の改良および解析ソフトの開発に成功した。その結果、“ずり応力"も関与するものの、“ずり応力"以外の物理法則が血小板放出、血小板産生に寄与していることを示唆するデータを取得した。本データを基に生体外での大型血小板製造用バイオリアクターの開発を進め、次年度でのバイオリアクター完成に繋がる成果を得た。(2)巨核球成熟に関与するbeta1 tubulin遺伝子座にvenusレポーターをノックインした巨核球細胞株を作製し、巨核球成熟促進化合物・血小板放出促進化合物のドラッグスクリーニングを実施して新規の薬物、物質のリスト化を達成した。(1)2光子顕微鏡と遺伝子改変マウスを用いた血小板産生“場"の分子機構解明(2)in vitro培養下血小板産生に寄与するフィーダー細胞由来の因子(群)データベースの構築(理由)巨核球成熟に関与するbeta1 tubulin遺伝子座にvenusレポーターをノックインした巨核球細胞株を作製し、巨核球成熟促進化合物・血小板放出促進化合物のドラッグスクリーニングを実施して新規の薬物、物質のリスト化を達成した。本結果は、巨核球成熟・血小板放出/産生の分子機構を明らかにすることに繋がる成果である。本研究課題の目的は、生体内に存在する特定の細胞の特異的ニッチ機構の解明を通じ、生体外での人工ニッチ再構成によって生体内と同じ構造、機能をもつ細胞を多能性幹細胞等から分化・成熟させることにある。具体的な標的は、生体内と同じ機能をもつ血小板を高効率で放出産生させる“巨核球成熟・血小板放出"人工ニッチを再構成することである。そこで本年度は、(1)生体内、特に骨髄内の血小板産生の場の画像取得、その血流および細胞膜周囲の流体解析データから得られる複数の物理パラメーターおよび流体ベクトルデータの取得、(2)生体内血小板産生環境における細胞外基質特性解析等を実施した。血小板産生前駆細胞である巨核球が生体骨髄の血管外から血管内に細胞質を出し、血流刺激下に血小板を産生する現象について、血管内を流れる大量の赤血球及び血管壁近傍を流れる血小板、血管壁との相互作用によって生じる物理刺激作用である“血流依存性のずり応力“が唯一の血小板産生起点として報告されている(Junt, Science, 2007)。一方、本研究課題では“血流依存性のずり応力“以外の特定の物理因子が働いて血小板産生が起きていることを、マウス骨髄の血管観察によって捉えることに成功した。さらに、新たに発見した物理条件のパラメーターに関し、その数値を再構成可能なバイオリアクターを選別した上で、生体データを基に一部を改変した。その結果、当該リアクターによる血小板産生は、静置培養時の血小板産生の約10倍の高効率を達成した。生体内血流条件の観察方法、解析技術の改良に伴う新規の血流物理条件を見出し、生体外での血小板産生系の再構成に成功しつつある。最終年度に向け、本条件(複数パラメーター)の負荷された巨核球での細胞質分断機構の解明、血小板産生機構の詳細な分子機構の解明へと進展することが期待される。本研究課題の目的は、生体内に存在する特定の細胞の特異的ニッチ機構の解明を通じ、生体内と同じ機能をもつ血小板を高効率で放出産生させる“巨核球成熟・血小板放出システム"の構築である。前年まで、物理刺激、特に従来から想定されているshear stress刺激によって放出されるエクソゾーム由来のmiRNAが巨核球に働きかけて、巨核球のリモデリングを通じて成熟を促進するとの仮説に基づく検証研究を実施した。しかしながら、miRNAは細胞増殖期の単核巨核球の機能には関与する証拠が得られたが、成熟期の多核巨核球への関与を明らかにできかった。そこで平成29年度は前年度までの観察結果である、血小板産生の親細胞である巨核球が生体骨髄の血管外から血管内に細胞質を出し、血流刺激下に血小板を産生する画像を、特殊なベクトル解析によってさらに詳細に再検証した。この新たな知見を実証するため新規モデルの培養槽を準備し、乱流概念中のどの物理パラメーターによって、巨核球のリモデリングが制御され、血小板産生が促進されるかのメカニズムの一端を明らかにした(論文投稿中)。この結果、8Lスケールの培養槽を用いることで1000億個の血小板を産生可能な条件を見出すことに成功した。

これらの研究成果は、乱流刺激が制御する血小板産生機構解明という新規の研究領域を創出し、次期基盤研究推進のための新規の提案を行うことに繋がった。血小板産生の親細胞である巨核球が生体骨髄の血管外から血管内に細胞質を出し、血流刺激下に血小板を産生する画像を特殊なベクトル解析によってさらに詳細に再検証した。その結果、血小板産生イベントが持続的に観察される骨髄巨核球の細胞壁に対しては血流中に乱流が起きていることを見出した。この観察結果を実証する新規モデルの培養槽を準備し、乱流概念中のどの物理パラメーターによって、巨核球のリモデリングが制御され、血小板産生が促進されるかのメカニズムの一端を明らかにした。この成果は、乱流刺激が制御する血小板産生機構解明という新規の研究領域を創出した。(1)H27年度には、1血小板産生に必須な環境条件、特に流体状況下にある巨核球細胞周囲の物理現象を数値化して捉えることに成功した。したがって、今後はこのデータを元にin vitroで再構成可能な流路、流体工学を再構築できるバイオリアクターの開発を引き続き、実施していく。(2)その血小板放出促進のために、H27年度に発見した新規薬物を活用する。(3)miRNAの発現と物理条件の変化との関連を中心に解析し、miRNA発現データの抽出を行う。(4)血小板産生に関するheterogeneityを呈する巨核球に対して、miRNAスイッチ(Cell Stem Cell, 2015)を用いた選別を試みる。この方法によって、より血小板産生の効率が上昇すると期待できる。今までの解析とその再構成系は、マウス骨髄血流、及び100mL, 1Lスケールでのバイオリアクターを用いた解析データであり、これらを実製造に応用するためには10L, 50Lスケールでの再現性を実証することが必須である。したがって、生体内の正常血小板製造での物理条件データと、100mL, 1Lスケールでの解析データとの相関を再度検証し、そのデータ条件を10L, 50Lまでのスケールアップに適用する妥当性を検証する。同時に、こうした物理条件がなぜ、高効率で正常機能をもつ血小板を産生可能なのか?巨核球細胞での分子機構の解明を進める。29年度が最終年度であるため、記入しない。幹細胞、再生医療29年度が最終年度であるため、記入しない。
自律・協調学習を促進する英語ライティングシステムの構築: 学習支援の可視化

本年度は、本研究チームで開発した英語ライティングシステムCoconuts上に構築した学習者のポートフォリオと使用語彙の評価ページ(語彙スコア)を基に、語彙評価指標値について日本人大学生の英語学習者と英語話者との比較を行った。また、授業コースでの運用後、語彙スコアに基づく学習者自身の語彙使用への気づきについて質問調査を行った。さらに、学習者の各語彙指標値が学習コミュニティ内でどのぐらいの位置を示しているのかわかるようにコミュニティ内の平均値を表示するように改訂し、授業で活用した。1)語彙評価指標値の日本人大学生の英語学習者と英語話者との比較:分析に使用した素材がEメール文だったため、フォーマルなEメール文とインフォーマルなEメール文に分けて、システム内の指標やunigramsを基に比較分析したところ、内容語における学習者の語彙レベルの数値は英語話者よりかなり低いが、インフォーマルなメール文では、学習者と英語話者の使用語彙のType/Token、内容語数/語数の平均値、中央値は近似値を示した。インフォーマルなメール文は、話し言葉に近く、使用語彙における語の多様性については、日本人学生と英語話者間で大きな差はないと推定される。2)学習者自身の語彙使用への気づき:語彙スコアに対する学習者自身の気づきに関する質問調査では、自身の語彙不足や使用語彙の傾向を自覚して語彙学習への意欲を示している学生が観察された。本システムの語彙スコアが自律学習を促進する可能性を示したとも言える。3)学習コミュニティ内の各語彙指標の平均値の表示:2018年度後期の授業で、各語彙指標に学習コミュニティ内の平均値を表示した語彙スコアのページを活用した。平均値の表示による学習者への影響については、分析中である。平成30年度の計画の要点は、実装したライティングシステムを授業等で運用し、ライティングシステムの効果検証を行い、随時改良を行うことであった。全体としては、概ね予定通りであったが、語彙スコアの実装やシステムの改訂(学習コミュニティ内の各語彙指標の平均値の表示)について、少々時間がかかったため、クラスでの運用期間や分析期間が不十分であった。そのため、1年延長して、分析を詳細に行い、結果等を学会等で発表することとした。科学研究費助成を受けられる最終年であるので、国内外での学会で研究結果を発信していく。また、学習コミュニティと自律学習に関連する分野の学会等に参加し、知見を広げていく。本年度は、既に運用されている英語ライティングシステムCoconuts上に、学習者が自分のライティングを振り返られるポートフォリオと自己評価のページ(語彙スコア)を構築し、実際に授業で運用した。具体的に以下の手順を踏んだ。1)ポートフォリオに関しては、学習者毎に自分が投稿したライティングにリンクできるページを作成し、振り返ることができるようにした。2)学習者の自己評価については、ライティングの評価指標(使用語彙の豊かさ、文の複雑さなどの指標)や見せ方について検討し、実装した。現段階では、評価指標は、語数(Token)、異なり語数(Type)、異なり語数/語数(Type/Token)、文数、平均語数/文、平均JACETランク(JACET8000での順位に基づく学習者の使用語彙の平均順位)とし、その評価ページは語彙スコアの名前とした。語彙スコアのページでは、学習者が語彙使用について視覚的に評価できるように、JACET8000を基にレベルを4段階に分け、ライティングの使用語彙をオープンソースの自然言語処理ライブラリを利用してレベル毎に色分けした。さらにJACET8000の1000位毎に使用語彙数をグラフで表示した。3)平成28年度後期に大学でのライティングの授業で上記のように改訂したCoconutsを運用した。現在は、学習者の語彙スコアページの結果分析を行っており、また、評価指標の妥当性や語彙処理の信頼性についても検討している。これらの結果を基に、次の改訂につなげる予定である。4)平成29年度でのCoconutsのユーザビリティの向上を目指し、Coconutsの学習者のアイコンやフォーマットのデザインの変更も検討中である。平成28年度の計画の要点は、英語ライティングシステムCoconutsに学習者が視覚的に自己評価できるライティングの評価指標(使用語彙の豊かさ、文の複雑さなどの指標)を検討し、試験的に実装することであった。実際に、評価指標はライティングの使用語彙に焦点を置き、JACET8000を基に使用語彙を4段階に分け、オープンソースの自然言語処理ライブラリを利用して、語彙処理をして色分けした。次に、試験的にCoconutsにそれらの評価指標を伴う評価ページ(語彙スコア)を実装し、大学のライティング授業で運用した。現段階では、評価指標の妥当性や語彙処理の信頼性について検討中であり、研究はおおむね順調に進行していると言える。本年度は、本研究チームで開発した英語ライティングシステムCoconuts上に構築した学習者のライティングのポートフォリオと使用語彙の評価ページ(語彙スコア)を大学のライティングの授業で活用し,学習者のライティング分析や学習者を対象にアンケート調査を行った。また,Coconutsのデザイン改訂や仮想メンバーであるBotの役割の見直しも行った。詳細は以下の通りである。1)ポートフォリオと語彙スコア:語彙スコアでは、学習者のライティングが新JACET8000(大学英語教育学会基本語リスト)を基にした4レベル毎に色分けされ、各レベルの語の使用状況が平易に把握できるように可視化してある。同時に、語彙スコアでの評価指標に基づいて学習者のライティングが自動分析される。

語彙スコアの評価指標は、昨年度実装した語数(Token)、異なり語数(Type)、異なり語数/語数(Type/Token)、文数、平均語数/文、平均JACETランク(新JACET8000での順位に基づく学習者の使用語彙の平均順位)に加え、本年度は、機能語と内容語を判定するよう自動タグ付け機能の仕様を改良して、内容語数/語数、平均内容語数JACETランクも加えた。また、語彙密度等の作文の評価指標について、スコア算出方法を検討した。授業コースの最終回には、学習者に自分の語彙スコアについてアンケート調査を行った。比較材料として、学習者には、テキストのサンプル英文や数名の英語話者のライティングの語彙スコアも提示した。現在、アンケート結果や英語話者の語彙評価指標の数値との比較について分析中である。2)Coconutsのデザイン改訂:学習者のアイコンやフォーマットのデザインを学習者が取り組みやすいように改訂した。3) Botの役割の見直し:モデルライティングを提示するBotの他に、助言を行うBotも投入した。平成29年度の計画の要点は、語彙評価指標の基準値等の視覚化と助言を行うBotの開発であった。語彙指標の基準値については、テキストのサンプル英文や英語話者のライティングの数値と比較しており、実装形態を検討中である。Botについては、モデルライティングを提示するBotの他に、助言を行うBotも投入し、各Botの活用度について調査中である。また、当初計画していた学習者の投稿に合わせたBotの自動出現については技術面を研究中である。以上の点から、研究はおおむね順調に進行していると判断できる。本年度は、本研究チームで開発した英語ライティングシステムCoconuts上に構築した学習者のポートフォリオと使用語彙の評価ページ(語彙スコア)を基に、語彙評価指標値について日本人大学生の英語学習者と英語話者との比較を行った。また、授業コースでの運用後、語彙スコアに基づく学習者自身の語彙使用への気づきについて質問調査を行った。さらに、学習者の各語彙指標値が学習コミュニティ内でどのぐらいの位置を示しているのかわかるようにコミュニティ内の平均値を表示するように改訂し、授業で活用した。1)語彙評価指標値の日本人大学生の英語学習者と英語話者との比較:分析に使用した素材がEメール文だったため、フォーマルなEメール文とインフォーマルなEメール文に分けて、システム内の指標やunigramsを基に比較分析したところ、内容語における学習者の語彙レベルの数値は英語話者よりかなり低いが、インフォーマルなメール文では、学習者と英語話者の使用語彙のType/Token、内容語数/語数の平均値、中央値は近似値を示した。インフォーマルなメール文は、話し言葉に近く、使用語彙における語の多様性については、日本人学生と英語話者間で大きな差はないと推定される。2)学習者自身の語彙使用への気づき:語彙スコアに対する学習者自身の気づきに関する質問調査では、自身の語彙不足や使用語彙の傾向を自覚して語彙学習への意欲を示している学生が観察された。
感性の民族誌的研究－タイ文化圏における音文化の変容

生活に密着した伝統芸術の担い手たちは、時代の趨勢のなかでいかに芸術実践を調整し、また変革に働きかけるのか。本研究の目的は、人びとの、芸術実践を生み、享受する感性に着目し、その変化を民族誌的研究から明らかにするものである。本研究は、中国徳宏タイ族の声と音の文化と、タイ北部の即興歌の民間芸能ソーについて参与観察調査を行い、個人の体験から社会を照らし返す微視的研究とともに、巨視的研究から両地域を比較分析し、タイ系民族の感性的特徴を考察する。研究成果は、人々の経験や語りに寄り添って考察・記述する民族誌の執筆と、芸術体験における情動や感覚的表現を映し出す民族誌映画の制作を目指す。今年度は、タイ王国北部チェンマイ県にて、主にソー歌謡の実践の現場、師の精霊を祀るワイクー儀礼、雨安居期間の若手歌手たちの学習、即興技法の練習と教授方法などに関する参与観察と現役の歌手たちへのインタビューによる民族誌データの収集に努めた。中国雲南省では、主に即興歌の技能を聴取や朗誦の基礎にする上座仏教の朗誦文化と文字文化の復興運動に関して民族誌データを収集した。調査研究により、下記について明らかになった。1ソー芸能では専業化が進むとともに、昔ながらの芸の感性は北部地域における文化的媒介者としてのものだけでなく、タイ王国の「伝統芸能」として価値づけるべく、感性の洗練・革新が試みられていた。2徳宏タイ社会では、急速な現代化にともない世代間の感性の差異が著しく大きいが、なかには老人と若者が協働して文化を客体化し、その伝承形態の変革を試みる事例もあった。こうした状況下では両世代にその差異を感じとる感性が育まれるとともに、差異を架橋しようとする実践活動の試行錯誤が続けられていた。3インターネットとSNSの普及、交通網の発達により、タイ系民族間でのトランスナショナルな交流が促進され、文化的模倣や混淆が促進されていた。29年度が最終年度であるため、記入しない。伝統芸術に従事する実践者は、いかに芸術活動を社会の情勢に対応させ、また変革に作用しているのか。本研究の目的は、人びとの、芸術実践を生み、享受する文化的感性に着目し、その変化を民族誌的研究から明らかにするものである。具体的事例として、先行研究の中国雲南省徳宏タイ族の音文化と、タイ北部の即興歌の伝統芸能ソーについて参与観察調査を行い、個人の体験から社会を照らし返す微視的研究とともに、巨視的研究から両地域を比較分析し、タイ系民族の感性的特徴を考察する。前年度は研究対象の社会的、文化的文脈を把握する基礎調査期間と位置づけ、タイ王国チェンマイ県にてソー芸能の活動状況と歌手や伴奏者の現状、伝承形態等に関して調査を実施した。また、調査経過を踏まえ、中国でも比較調査を行った。タイ北部では近年の文化政策や、草の根の文化復興運動により、多くの若者が職能者として伝統芸能に従事している。老練の職能歌手たちの創意工夫により、教授方法はデジタルメディア等を積極的に活用しており、歌手たちの歌の技法やジャンル、実践形態は依頼者の嗜好性の拡大によって多様化していた。これに比べ、中国側タイ族地域の即興歌の芸能は、タイ北部のような教授方法や職能を支える文化的システムが未だ確立されておらず、伝承の危機的状況にあった。ただし、近年政府による様々な支援も試行されてきており、民間歌手たちは地域社会において職能化や活動の機会を新たに切り開こうと試行錯誤していた。このように両地域とも急速な社会変化に細やかに対応していた。だがそれは危機感を募らせた実践者たちの創意工夫によるものであり、また現代に伝統文化の価値を再解釈し、位置づけなおそうとする試みの成果であることもわかった。タイ北部における現地調査は基礎的段階ではあったが、パフォーマンスや伝承活動が活発であることもわかり、実践者たちの多岐に渡る創意工夫を目のあたりにすることができた。伝統芸能ソーでは上座仏教の行事や、比喩を多用した男女の掛け合い、そして時事などが方言によって歌われるが、歌詞の理解には報告者の語学力の向上が課題として残っている。中国側タイ族地域の研究については、タイ北部における調査の進展が新たな比較の視座や疑問へとつながり、新たな民族誌的データの発見にもつながった。発表を予定していた国際学会は開催日程変更によって出席できなかったが、国内学会等での発表も行い、これまでの研究成果や現在の研究状況を議論する機会を持つことができた。今後は、発表だけでなく学会誌などにおいて調査成果を公開できるように考察を進めたい。具体的に、これまで研究してきた中国徳宏タイ族の声と音の文化と、タイ北部の即興歌の伝統芸能ソーについて参与観察調査を行い、個人の体験から社会を照らし返す微視的研究とともに、巨視的研究から両地域を比較分析し、タイ系民族の感性的特徴を考察する。

2年目のタイ王国における調査では、主に、仏教儀礼や新築儀礼などにおけるソー歌謡の実践の現場、師の精霊を祀るワイクー儀礼、小学校における特別授業、雨安居期間の若手歌手たちの学習、即興技法の練習と教授方法、現役の歌手たちへのインタビューなどについて、参与観察による民族誌データの収集に努めた。現在、行政との関わりのなかで伝統芸能としての位置づけとあり方に対処する様々な議論と動きが展開している。そのなかで教授方法と学習方法は大きく変化しており、師弟関係を越えた文字テクストの活用学習が目立った。中国雲南省における調査では、主に上座仏教の朗誦文化と文字文化の復興運動に関して民族誌データを収集した。行政による伝統文化の目録化や博物学的な物収集が行われる一方で、ビルマ側タイ族地域の宗教活動の影響を受けた草の根の交流も活発化し、高齢の知識人たちによる文化実践の記録への取り組みが始まっている。従来の伝承方法にたいする反省と再考から、感覚的技巧の言語化が意識され、積極的に映像などデジタルメディアや文字による記録や記述が試られていることが分かった。タイ王国北部と中国雲南省にて参与観察にもとづくフィールドワークを継続し、順調に民族誌データを収集できた。研究の途中経過は、中国昆明市で開催された源生郷村音楽歌舞芸術節学術論壇にてデジタルメディアによってもたらされた文化変容に関して報告し、アメリカ・ロサンゼルスで開催された国際学会CHIMEにてシャマニズムと上座仏教における声の文化に関する研究を報告した。日本では、アウトリーチ活動として、機織りの音文化に関する研究報告や実演などを行った。また、徳宏タイ族のシャーマニズムにおける即興うたに関する著書を脱稿した。現在は論文と民族誌映像の発表に向けて着実に準備を進めている。生活に密着した伝統芸術の担い手たちは、時代の趨勢のなかでいかに芸術実践を調整し、また変革に働きかけるのか。本研究の目的は、人びとの、芸術実践を生み、享受する感性に着目し、その変化を民族誌的研究から明らかにするものである。本研究は、中国徳宏タイ族の声と音の文化と、タイ北部の即興歌の民間芸能ソーについて参与観察調査を行い、個人の体験から社会を照らし返す微視的研究とともに、巨視的研究から両地域を比較分析し、タイ系民族の感性的特徴を考察する。研究成果は、人々の経験や語りに寄り添って考察・記述する民族誌の執筆と、芸術体験における情動や感覚的表現を映し出す民族誌映画の制作を目指す。今年度は、タイ王国北部チェンマイ県にて、主にソー歌謡の実践の現場、師の精霊を祀るワイクー儀礼、雨安居期間の若手歌手たちの学習、即興技法の練習と教授方法などに関する参与観察と現役の歌手たちへのインタビューによる民族誌データの収集に努めた。中国雲南省では、主に即興歌の技能を聴取や朗誦の基礎にする上座仏教の朗誦文化と文字文化の復興運動に関して民族誌データを収集した。調査研究により、下記について明らかになった。1ソー芸能では専業化が進むとともに、昔ながらの芸の感性は北部地域における文化的媒介者としてのものだけでなく、タイ王国の「伝統芸能」として価値づけるべく、感性の洗練・革新が試みられていた。2徳宏タイ社会では、急速な現代化にともない世代間の感性の差異が著しく大きいが、なかには老人と若者が協働して文化を客体化し、その伝承形態の変革を試みる事例もあった。
代謝制御とがん組織微小環境を結ぶネットワーク機構の解明

組織微小環境は、がん、生活習慣病をはじめとするヒト疾患の発症・進展・治療反応性に重要である。近年、タンパク質恒常性維持ネットワーク(PN)が代謝制御、炎症・免疫応答、小胞体ストレス応答シグナル経路と相互作用し、組織微小環境の構築と維持に寄与することが報告されている。BAT3は分子シャペロンとアポトーシス制御、プロテオソーム機能、免疫応答に関与するという一連の報告が我々と他のグループからなされている。しかしながら現在まで、BAT3の個体レベルでの機能は十分に解明されていない。独自に作成したコンベンショナルノックアウトマウスを作成し解析した結果、Bat3のコンベンショナルノックアウトマウスは胎児性致死を引き起こすことが明らかとなった。そこで我々は、組織特異的BAT3ノックアウト(Bat3KO)マウスを独自に作成した。当該年度はC57BL/6J遺伝背景を有する肝特異的Bat3KOマウス(Bat3LKO: Bat3flox/flox;Albumin-Cre)と膵臓β細胞特異的Bat3KOマウス(Bat3BKO: Bat3flox/flox;Ins-Cre)の樹立を試みたが、順調にマウスの交配が進行し、それぞれのラインを樹立することができた。Bat3の欠損が肝臓あるいは膵臓β細胞の機能にどのような影響を与えるかを明らかにする目的で、正常食、高グルコース食、高脂肪食で摂餌し、継続的な体重、随時血糖測定を行い、肥満と耐糖能異常の有無を比較した。また、それぞれの摂餌条件から得られるサンプルから抽出したRNAを用いて、遺伝子発現の網羅的解析を行い、Bat3欠損特異的に上昇あるいは低下している遺伝子群の候補を同定する予定である。さらに例数を増やし、これまで得られているデータと合わせて解析し、Bat3特異的な信号伝達系を同定することを予定している。細胞株、マウス等の樹立は当初予想していた以上に順調に進行することができた。当該年度はマウスコロニー樹立に多くの時間を費やしたが、順調に樹立することができたので、今後さらに計画した実験を継続して行ってゆく予定である。Bat3欠損マウスの組織学的・生化学的解析はほぼ予定通り進んでおり、次年度以降につながる結果が得られていると考える。今後さらに例数を増やすことを予定している。がんモデルマウスを並行して行い、最初のコーホートデータを得ることを急ぎたいと考えている。マウスを用いた実験は交配に時間が取られるので、がんモデルマウスのライン確立のため、マウススペースを効率的に活用し、IVF等を適宜用いて、スピードアップを計りたいと考えている。