hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
耳朶皮膚線条の成立機序と心血管疾患との関係及び臨床応用に関する研究

以前から耳朶線条(earlobe creases, ELC)と冠動脈疾患との関係が報告されてきた。しかしELCの程度と動脈硬化の程度の関係は明らかではなかった。そこで我々はELCの定量法を開発しこれらの関係を明らかにした。光学3次元皮膚性状測定装置によりELCの深さを定量化することにより、ELCの深さが頸動脈プラークの進展と強く相関していることを明らかにした。ELCの深さが動脈硬化の程度を予測する簡便な指標であることが示唆された。【具体的研究内容】耳朶線条(Earlobe creases、以下ELC)の簡易定量化を達成し、ELCの程度と動脈硬化進行度との正の相関関係を明らかにした。皮膚しわの定量方法には、従来からあるシリコンゴムを用いたシワのレプリカ作成による間接的計測法と、最新の光学3次元測定装置(ドイツGFM社製PRIMOS, PICO)を用いた3次元計測法とがある。我々はこれらの方法でELCを計測し3次元測定法がELC測定において有用であるかを検討した。ELCを有する外来または入院患者10名を対象とし、レプリカ法による間接測定と3次元直接測定法にてELCの平均深さの測定を行った。統計学的解析により両者に極めて高い相関を認めた(相関係数r=0.979、寄与率R^2=0.958; P<0.001)。次に我々は、ELC患者13名に頸動脈超音波エコー検査を行い、内膜中膜複合体厚(IMT)・プラークナンバー(PN)・プラークスコア(PS)の計測を行った。その結果、それぞれELCと正の相関関係が認められた(IMT ; r=0.569, R^2=0.323, P<0.043、PN ; r=0.771, R^2=0.594, P<0.002、PS ; r=0.797, R^2=0.635, P<0.001)。寄与率から判断すると、ELCの程度とPS>PN>IMTの順に強い関係が認められた。[意義・重要性]これまでELCの程度の評価は視診によるものしかなく、生体での定量的な計測はなかった。そのため研究者間の評価法の違いにより動脈硬化の指標との関連性を述べるにあたってはその信頼性に問題があった。光学3次元計測装置は小型軽量であり非接触性・短時間のELC計測が可能である。今後、多数の患者のELC測定に有用と考えられた。本研究でELCの簡易定量化が可能となったことから、これまで不明であったELCの程度が動脈硬化の程度と相関することが明らかになった。ELCの程度が動脈硬化の程度を予測し得るかどうか、さらに多人数での検討を行う予定である。[具体的研究内容]最新の光学3次元皮膚性状測定装置(ドイツGFM社製PRIMOS,PICO)を用い耳朶線条(Earlobe creases、以下ELC)の深さを定量化する方法を開発した。平成22年度は、本システムを用い患者対照研究を行った。ELC患者26名と対照患者20名の耳朶線条深さを測定。さらに頚部超音波エコー検査による頚動脈硬化の程度を内膜中膜複合体厚(Max-IMT)・プラークナンバー(PN)・プラークスコア(PS)の計測にて評価した。相関分析の結果、ELC深さと正の相関関係が認められた(Max-IMT;r=0.393,P=0.007、PS;r=0.560,P<0.001、PN;r=0.495,P<0.001)。ステップワイズ多変量回帰分析の結果、ELC深さを従属変数とするとPSが独立した因子と判断された(R^2=0.313,P<0.001,β=0.560,F=19.2).さらに次式ELC=134.0+24.1PSが成立することから、PSが1増加するとELCの深さが24.1μm増加するという直線式が得られた。[意義・重要性]ELCの深さはこれまで視診で評価していたが、本研究に用いた光学3次元計測装置は直接ELC深さを計測することができるため、より詳細な検討が可能となった。ELC深さが頚動脈硬化、特にプラークの程度と正の相関関係にあることが明らかになったことから、頚動脈硬化のプラークの進展状態をELCで推測できる可能性が示唆された。小型軽量であり非接触性・短時間でELC計測可能な本システムを使用することにより、頸動脈プラークの進展した脳梗塞発症リスクの高い患者の早期発見に有用と考察される。今後は、ELC深さが頸動脈プラークの進展と強く相関していることから両者の共通の成立メカニズムの解明が必要と考えられる。[具体的研究内容]

前年度までの研究にて、光学3次元皮膚性状測定装置(ドイツGFM社製PRIMOS,PICO)による耳朶線条(earlobe creases)の深さを定量化する方法を開発した。それにより耳朶線条の深さが頸動脈プラークの進展と強く相関していることを明らかにした。しかし、耳朶の形状変化(耳朶線条)が動脈硬化の程度を反映する機序は不明であった。今年度は、耳朶線条が他の部位の皮膚の形状変化と関連しているかを、目尻と前腕屈側部の皮膚形状を比較して検討した。1.光学3次元皮膚性状測定装置で測定した皮膚の前腕屈側部の皮膚表面平均荒れ度(Ra :a verage roughness)は年齢と良い相関関係があり、加齢の指標となることが確認された。2.目尻の皺と耳朶線条の平均深さには相関は認められなかった。3.目尻の皺平均深さと頸動脈硬化の指標(超音波検査で計測したプラークスコア)とは相関関係が認められなかった。4.Ra,目尻の皺、耳朶線条による多変量解析にてプラークスコアの独立した変数は耳朶線条の深さのみであった。[意義・重要性]加齢の指標には前腕のRaが、動脈硬化の指標には耳朶線条が有用であった。同じ頭部の皮膚の変化でも、顔面表情筋上にある目尻の皺と静止部位の耳朶線条では、形成過程や成因が違うことが示唆された。老化にて皮膚の皺(前腕屈側部)は形成されるが、目尻の皺はそれ以外の外的要因(日光照射や表情筋による進展や収縮)の影響を強く受けると考えられる。また、目尻の皺は動脈硬化とは関連が認められない。以上から、耳朶線条は頭部の皮膚で動脈硬化を反映する特異な存在であることが明らかになった。
岩盤不連続面における透水経路の観察および貯留特性に関する研究

平成10年度は,モルタルと岩盤破砕面の樹脂レプリカを用いて,その隙間(以後,き裂と呼ぶ)を流れる流体の挙動を,室内実験により観察した.その結果,き裂内を流れる流体の挙動は,面状に流れる領域と線状に流れる領域に大別され,時間とともに面状に流れる領域が縮小することが認められた.これより,平成11年度においては,この現象を基にき裂内の流体の挙動を定式化し再現するため,数値解析を行った.き裂を流れる流体の基礎方程式をこれまで一般的に用いられてきたダルシー則と質量保存則の2つの法則に加え,エネルギー保存則を導入した.これは,き裂内の流体に与える外部からのエネルギーを「流体の圧力エネルギー」,「き裂内を移動する流体の運動エネルギー」,「破砕面から岩盤内部に浸透するための運動エネルギー」,「流体の圧力エネルギーによってき裂が開口する運動エネルギー」および「その他熱エネルギー」の総和によって表し,これらのエネルギーは保存されるというものである.本研究においては,このうち,「き裂を開口させるための運動エネルギー」および「その他熱エネルギー」を0とおいて基礎方程式を構成し,差分法による数値解析を行った.これより,き裂内の流体の挙動は,その周辺岩盤の地下水の存在によって大きく異なることが認められた.つまり,き裂内に人工的に与えた水圧によって流体を流す場合,時間とともにき裂内から岩盤への流体の浸透割合が小さくなり,最終的には岩盤内には浸透せずき裂内のみの流れとなることが認められた.この解析結果と平成10年度に行った透水実験の結果を検討すると,き裂内の流体の挙動はエネルギー保存則に従っていると考えられ,き裂内の圧力エネルギーと水頭によるき裂表面への圧力エネルギーが釣り合っていない場合,き裂内には面状の流れ領域が現れ,釣り合うとともに線状の流れに変化すると言え,この現象を数値解析によって表現できた.平成9年度において,モルタルと岩盤の接合面中を流れる流体の透水挙動の径時変化を観察した.本研究は花崗岩採石場より採取した岩塊を割岩し,その破砕面を用いて精密な岩盤レプリカ(以下レプリカと呼ぶ)を作成した.このレプリカにモルタを打設し,レプリカとモルタルの接合面中に着色水(トレーサー)を圧入した.実験に際しては,平成8年度に作成したき裂の透水挙動観察装置を用いた.着色水の接合面への圧入は,コンプレッサーを用いて着色水の入った圧力タンクに空気圧を作用させることにより行った(実験は注入圧0.1および0.2Mpaで行った).また,モルタルを打設した供試体は,実験装置に設置された水槽内で行ったため,含水飽和状態である.着色水の流域拡大の径時変化はデジタルビデオカメラで録画した.得られた原画像からでは着色水の流域拡大の様子を肉眼で確認することは非常に困難であった.そのため,原画像にコンピュータを用いて画像処理を施すことにより,着色水の流域拡大の様子を鮮明に得ることに成功した.得られた画像処理後の流域拡大の様子およびその透水経路は非常に興味深いものであった.本研究において得られた知見を以下に示す.1.接合面中の流れは着色水の流域拡大の様子から,面状に拡大する領域と線状に拡大する領域の2種類の領域が同時に存在することが認められた.面状に拡大する領域は主に注入孔付近で発生し,注入孔よりある程度離れた位置では線状に拡大する領域へと変化することが認められた.2.接合面中の流れは,線状に拡大する領域でのみダルシー則を適用することが可能であることが認められた.3.線状に拡大する領域においては,一定流速で流れる流れと,停留・移動を繰り返す流れが認められた.また,それらの流れが同時に発生していることも認められた.平成10年度は,モルタルと岩盤破砕面の樹脂レプリカを用いて,その隙間(以後,き裂と呼ぶ)を流れる流体の挙動を,室内実験により観察した.その結果,き裂内を流れる流体の挙動は,面状に流れる領域と線状に流れる領域に大別され,時間とともに面状に流れる領域が縮小することが認められた.これより,平成11年度においては,この現象を基にき裂内の流体の挙動を定式化し再現するため,数値解析を行った.き裂を流れる流体の基礎方程式をこれまで一般的に用いられてきたダルシー則と質量保存則の2つの法則に加え,エネルギー保存則を導入した.これは,き裂内の流体に与える外部からのエネルギーを「流体の圧力エネルギー」,「き裂内を移動する流体の運動エネルギー」,「破砕面から岩盤内部に浸透するための運動エネルギー」,「流体の圧力エネルギーによってき裂が開口する運動エネルギー」および「その他熱エネルギー」の総和によって表し,これらのエネルギーは保存されるというものである.本研究においては,このうち,「き裂を開口させるための運動エネルギー」および「その他熱エネルギー」を0とおいて基礎方程式を構成し,差分法による数値解析を行った.これより,き裂内の流体の挙動は,その周辺岩盤の地下水の存在によって大きく異なることが認められた.つまり,き裂内に人工的に与えた水圧によって流体を流す場合,時間とともにき裂内から岩盤への流体の浸透割合が小さくなり,最終的には岩盤内には浸透せずき裂内のみの流れとなることが認められた.

この解析結果と平成10年度に行った透水実験の結果を検討すると,き裂内の流体の挙動はエネルギー保存則に従っていると考えられ,き裂内の圧力エネルギーと水頭によるき裂表面への圧力エネルギーが釣り合っていない場合,き裂内には面状の流れ領域が現れ,釣り合うとともに線状の流れに変化すると言え,この現象を数値解析によって表現できた.
肺がんと血小板の関係に着目した新たな分子標的薬耐性機構の解明と克服

血小板は大腸がんや乳がんにおいて上皮間葉移行(EMT)を誘導し、浸潤・転移、血管新生を促進する。一方、EGFR遺伝子変異陽性肺がんでは、EGFRチロシンキナーゼ阻害薬(EGFR-TKI)に対する耐性機序としてEMTが報告されている。この研究では、血小板によるEMT誘導やEGFR-TKI感受性への影響を分子メカニズムまで含めて検証する。また抗血小板薬のEMT誘導やEGFR-TKI感受性に対する効果も検討を加える。肺がんと血小板の関連に着目した研究はほとんど行われておらず、世界に先駆けて血小板の新たな役割を明らかにし、血小板を標的とした新たな治療への応用を目指す。
マウス脳継代により獲得されたウマヘルペスウイルス1型神経病原性の分子基盤

ウマヘルペスウイルス1型(EHV-1)の神経向性は他のヘルペスウイルスに比較して非常に弱いことが知られているが、脳継代によって作出したEHV-1神経馴化株(NHH1)は親株(HH1)に比べて強い神経病原性を示す。脳継代による変異領域を同定する目的で、両ウイルス株のDNAを比較解析した。LA-PCR法によって13Kbに至るウイルスDNA断片を複数増幅し、RFLP解析を行ったが、両ウイルス間に差異は検出されなかった。平成14年度の解析により、NHH1はHH1に比べてより広範囲な組織向性を示すことが明らかとなっているため、細胞への吸着、侵入に関与するエンベロープ蛋白に変異が生じている可能性が考えられた。そこで、NHH1、HH1のgB遺伝子、gD遺伝子をそれぞれシークエンスしたが、両ウイルス株間でコードされるアミノ酸配列に相違は認められなかった。平成14年度に行った解析により、NHH1、HH1の示す神経侵襲性の差異が脳血管内皮細胞への感染性によって一部規定される可能性が考えられた。また、馬のEHV-1脳脊髄炎においても血行性にCNSに到達したウイルスが脳血管内皮細胞に感染することが知られている。そこで、馬、マウスの大脳皮質より脳微小血管内皮細胞(BMEC)を分離、培養し、HH1株に対する感受性を検討した。その結果、馬BMECはEHV-1感受性であり、エンドサイトーシスによってウイルス取り込みが生じるのに対し、マウスBMECはEHV-1非感受性であり、ウイルスが細胞内にほとんど侵入しないことが明らかとなった。この結果はin vivoにおけるウイルス感受性の差異を再現するものであり、BMECは今後EHV-1の神経病原性を研究する上で、有用なモデル系であると考えられた。以上に加え、EHV-1感染馬胎盤におけるウイルス遺伝子発現プロファイルを解析し、報告した。ウマヘルペスウイルス1型(EHV-1)の神経向性は他のヘルペスウイルスに比較して非常に弱いことが知られている。本研究は、脳継代によって作出したEHV-1神経馴化株(NHH1)と親株(HH1)を比較することにより、獲得された神経病原性の本態を解明することを目的とする。NHH1、HH1のマウスに対する神経侵襲性の差異を解析・比較するため、6日齢のBALB/cマウスにそれぞれのウイルスを腹腔内接種し、接種後0日から9日目まで経時的に全身諸臓器の病理学的検索を行った。NHH1接種マウスでは接種後1、2日目に脾臓、肺のマクロファージと大網脂肪細胞にウイルス抗原が検出されたが、HH1接種マウスではこれらの所見は認められなかった。また、NHH1接種マウスでは接種後1日目から3日目まで細胞随伴性ウイルス血症が検出されたのに対し、HH1接種マウスでは認められなかった。NHH1接種マウスでは接種後4日目に脳幹、脊髄の一部の血管内皮細胞と多数の血管周囲グリア細胞にウイルス抗原陽性像が観察され、接種後5日目以降にウイルス抗原陽性細胞数は増加した。一方、HH1接種マウスでは接種後4日目に脊髄の少数の神経細胞に神経細胞にウイルス抗原が認められたが、それ以外にウイルス抗原は検出されなかった。以上の結果から、NHH1は血行性にCNSへ侵入したことが示された。また、EHV-1の神経侵襲性は脳継代により増強し、それは末梢組織における増殖能に関連していることが示唆された。
有機希土類金属化合物触媒による高選択的酸素酸化反応

有機希土類金属化合物の合成を系統的に行ない,それらの合成ル-トの確立を試みた。特にランタニド金属の内セリウム化合物の触媒的応用を酸素酸化反応について行なった。ヒドロキシ芳香族アルデヒドガクレゾ-ル誘導体からマイルドな条件下に高選択的に合成できることを見い出し論文発表した。有機金属化合物の配位子としてはシクロペンタジェニル誘導体を用い,他の共役系の配位子と合せて合成した。非水系反応であるのでN_2ガス中の微量水分によりかなりの分解が起った事で,更に厳密なバキュ-ムラインが必要である事が判った。芳香族のクロスカップリング反応の内,ナフト-ルの反応はこれまでも生物系反応と共に注目されてたが本研究では触媒的カップリングが起る事を実証したので現在投稿準備中である。この反応は比較的容易に反応し,極めて高収率であるなどの利点がある。金属錯体のみならず金属イオン自体の原子価に関しては今の所高原子価ではなく,3価が妥当であるという結果が得られたが直接の測定は高分解能の機器にて測定依頼する必要がある。しかしながら酸素分子との配位により3価以上の部分荷電により触媒的活性が基質との相関を促がし新しいメカニズムで進むものと考えている。これらの解明は今後鋭意に進めていくつもりである。これらの成果は基任からの中古液クロ装置にて(借用中)行なったが分取HPLCの必要性が大いに感じられた。
七世紀倭王権における支配者集団統合儀礼の研究

研究の最終年度(第3年度)にあたり、これまで2年間にわたって検討を行ってきた、7世紀倭王権の統合論理と仏教の関係を引きつづき検討を行った。あわせて、これまで充分に検討を行い得なかった、神祇的祭祀と倭王権の関係の検討を行った。また、7世紀段階の政権の所在地である飛鳥の構造について、宮都中枢部とその周縁部の関係を構造的に把握するための検討を行った。これらの研究遂行にあたって必要な図書を購入し、また各地の遺跡踏査を行い、研究者との意見交換を行った。昨年度までの研究を通じて、七世紀倭王権の統合論理を前代までの統合論理と比較し、その特質を明らかにする必要があることが認識されたが、この点についての検討を行い、両者の間には質的な相違があり、同列に論じ得ないことを主張できると考えた。次に、宮都の所在地の相違による統合中枢の相違にいかなる意味があるのかについて検討を行ったが、史料が比較的豊富な飛鳥・難波について行い得たにとどまり、大津については今後の課題とせざるを得なかった。第三に、七世紀倭王権の統合論理のその後の展開として、奈良時代以降の統合論理との比較が必要であることが認識されたが、この点について、聖武・孝謙・称徳期を中心に検討を行い、奈良時代における仏教中心の統合論理と、飛鳥時代の統合論理との共通点と相違点を確認した。以上の研究成果は、次年度の公開を目標として、昨年度研究成果を中心にまとめた学位請求論文『七世紀倭王権における統合論理の研究』の補訂・修正を行った。研究の初年度として、七世紀倭王権の支配者集団統合儀礼の研究を進化させる上で必要な基礎的図書・備品を購入し、既存図書とあわせてデータの収集に努めた。また、研究を深化させる上で必要な国内の古代寺院遺跡、官衙遺跡等の出張調査を行った。その他、2003年7月には、「四月・七月斎会の構造-七世紀倭王権の統合論理と仏教-」と題して、研究報告を行った(八・九世紀研究会)他、2004年3月には東アジア王権儀礼研究会に参加し、情報収集・意見交換に努めた。これまでの研究を通じて、七世紀倭王権段階の支配者集団統合儀礼の中核に位置するのが、四月八日の仏誕会、七月一五日の盂蘭盆会という仏教儀礼と、元日朝賀儀礼であるという見通しを得た。仏教儀礼が統合儀礼の中核に位置するという存在形態は、祖先祭祀が中核となる中国・南北朝時代、朝鮮・三国時代の統合儀礼とはかなり異質であるが、倭の場合、仏教を媒介として支配者集団が君主に対する奉仕を誓願するという論理を作り上げることにより、前代までのウヂを単位とする個別的・分断的な統合の段階を止揚することができたと考えられる。このような論理を顕示するための統合中枢として、王宮と寺院が一対の関係で機能したことを検討した。このように、七世紀倭王権の統合論理は、きわめて仏教色の強いものであったと考えられるが、それを列島諸地域に波及させる手段として、伽藍を持つ寺院の他、官衙的施設に附属する仏堂、銅鋺や香炉といった携帯可能な仏具を持った僧尼による仏事の執行など、多様な方法があり得たのではないかと考えた。研究第2年度にあたり、ひきつづき基礎的な参考文献および研究状況を把握するための参考文献を購入した。文字資料の撮影に必要な備品等の購入も行った。また、博物館等の関連する展示の展観、研究会への参加を通じて、情報収集に努めた。6月には、七世紀倭王権の統合論理に大きな影響を与えた中国、北朝の都城遺跡、仏教寺院の踏査を行い、山西省考古研究所を中心とする研究者との交流を行った。5月には、研究成果を主要な部分とする『七世紀倭王権における統合論理の研究』を執筆し、大阪市立大学に学位請求論文として提出し、審査を経て12月に学位を得た(博士〔文学〕)。平成17年2月には、日本史研究会古代史部会において研究成果を報告し、参加者との意見交換を行った(「七世紀倭王権の君臣統合」)。本年度の研究成果として、初年度に検討した、仏教儀礼が七世紀倭王権の統合儀礼として果たした役割の大きさを、さまざまな資料から再検証する作業を行った。課題として、前代、すなわち古墳時代の統合論理との相違、また宮都の所在地の相違による統合中枢の相違の問題、奈良時代以降の統合儀礼の展開の問題などを検討すべきことが明らかとなった。これらについては最終年度である第3年度に検討したい。なお、平成16年10月27日平成17年2月20日まで、大阪歴史博物館および北九州市立自然史・歴史博物館で開催された特別展「古代都市誕生-飛鳥時代の仏教と国つくり-」では、研究代表者も企画の中心に加わり、研究成果の還元に努めた。

昨年度までの研究を通じて、七世紀倭王権の統合論理を前代までの統合論理と比較し、その特質を明らかにする必要があることが認識されたが、この点についての検討を行い、両者の間には質的な相違があり、同列に論じ得ないことを主張できると考えた。次に、宮都の所在地の相違による統合中枢の相違にいかなる意味があるのかについて検討を行ったが、史料が比較的豊富な飛鳥・難波について行い得たにとどまり、大津については今後の課題とせざるを得なかった。第三に、七世紀倭王権の統合論理のその後の展開として、奈良時代以降の統合論理との比較が必要であることが認識されたが、この点について、聖武・孝謙・称徳期を中心に検討を行い、奈良時代における仏教中心の統合論理と、飛鳥時代の統合論理との共通点と相違点を確認した。以上の研究成果は、次年度の公開を目標として、昨年度研究成果を中心にまとめた学位請求論文『七世紀倭王権における統合論理の研究』の補訂・修正を行った。
重力波天体の多様な観測による宇宙物理学の新展開

2016年2月11日にa-LIGOは「2015年9月14日にGW150914と呼ばれる質量が太陽質量の約30倍のブラックホールからなる連星の合体に伴って放射される重力波の初の直接観測に成功した。」という発表をした。本領域の理論の計画研究による、宇宙で最初に出来た金属のない種族III星説がa-LIGOの論文でも有力なGW150914の起源として高く評価された。この取りまとめ期間中にもGW150914と同様の質量の大きなブラックホールがさらに2イベント検出された。また、原始ブラックホール説も本領域は提案した。a-LIGOとMOUを交わしていた本領域のX線、光・赤外の計画研究は速報を受けて追観測を実施したが、電磁波対応天体はないという結果を得た。ニュートリノ観測も実施したが、未検出であった。理論的にもブラックホール連星の合体からの電磁波・ニュートリノ放射は考えにくいので、無矛盾な結果である。a-LIGOとa-Virgoは2016年10月から2017年8月にかけて、さらに感度を上げ、O2(Observing run 2)を実施した。O2では、連星中性子星の合体で重力波と電磁波の両方が放射されることが期待されると我々は予言していたが、その通り8月17日に連星中性子星合体が見つかった。本領域の文科省での最終ヒアリングは9月8日であったので、それに向けて領域取りまとめの研究会を取りまとめ予算で8月24-26日に開催した。MOUでの約束から、連星中性子星の合体の解禁日が10月16日であったので、取りまとめの研究会と最終ヒアリングでは各計画研究が多くの論文を用意していたにも拘らず連星中性子星の合体には全く触れられなかった。2017年8月末までの成果を353ページの報告集にまとめて、国内の関係研究者に配布した。29年度が最終年度であるため、記入しない。」という発表をした。
腎癌の予後を規定するシアル酸転移酵素の役割とその発現調節機構

腎癌の悪性度に関連した主要なガングリオシドであるstage-specific embryonic antigen-4(SSEA-4)の合成酵素が、シアル酸転移酵素のST3Gal IIであることを見いだした。ST3Gal II mRNAレベルは、ノーザンブロッティング上、調べた腎癌細胞株8種類中7種類で高く、同一の症例で正常腎と比較できたヒト腎癌組織6例中6例で増加していた。このことから、ST3Gal IIは腎の癌化に関連しているものと考えられた。さらに、腎癌27例を用いて定量的PCRで検討したところ、27例の殆どで正常部に比してST3Gal IIのmRNAレベルの増加が認められた。また、ST3Gal IIに対するantisense-cDNA(AS)をtransfectした細胞ではRT-PCRでmockに比して約20%の抑制を認め、siRNAを導入した細胞ではdisordered siRNAに比して約70%発現が抑制されていた。ST3Gal IIの発現レベルを抑制することで、薄層クロマトグラフィー上MSGb5の発現が抑制された。MSGb5低発現の細胞はコントロール細胞に比して増殖能・浸潤能ともに有意に低下した。また、Nude miceにASとmockを導入した細胞を皮下注入して腫瘍系を測定したところ、mockでは有意に腫瘍サイズの増大を認めた。われわれが腎癌においてその発現を確認した糖鎖抗原であるRM2抗原(モノクローナル抗体RM2の認識抗原)は、最新のNMR技術により新規の糖鎖であるβ1,4-GalNAc-disialyl Lc4であり、極めてユニークなハイブリッド構造をしている。多数例の腎細胞癌の凍結切片で検討したところ、RM2抗原は114例中、15例(13%)において陽性であり、それらのうち、初診時転移がみられたのは9例、経過中に2例の計11例に転移がみられ、悪性度に強く関連していた。さらに、RM2抗原の構造上の特徴が前立腺癌の生物学的な特徴を反映していると考えられたため、組織免疫学的な検討を行ったところ、前立腺癌ではRM2抗原は良性腺管では発現しないか発現レベルが弱いこと、HGPINでは同一症例で比較した場合、RM2抗原発現レベルは癌部に比して弱いこと、前立腺癌の悪性度(Gleason pattern)を反映して発現が高くなること、特にGleason pattern 3と4ではその発現レベルに明らかな違いがあることが判明した。さらに、RM2抗原の高発現群では、低発現群に比して5年PSA無再発生存率が有意に低かった。腎癌転移に関連した主要なガングリオシドであるstage-specific embryonic antigen-4(SSEA-4)の合成酵素が、シアル酸転移酵素のST3Gal IIであることを見いだした。すなわち、ST3Gal IIはCOS-1に対する一過性発現で、SSEA-4の細胞表面における発現を有意に増加させ、アイソトープ(^<14>C-CMP-NeuAc)を用いたシアル酸転移酵素活性測定において、ST3Gal IIは、SSEA-4の他、尖端構造が同じasialo-GM1,GM1aにもシアル酸を転移することが判明した。

さらに、ST3Gal II mRNAをアンチセンスで安定発現させた腎癌細胞株ACHNより糖脂質を抽出し、薄層クロマトグラフィーにて分析した結果も、アンチセンス導入ACHN細胞においてSSEA-4の量的レベルの低下がみられた。ST3Gal II mRNAレベルは、調べた腎癌細胞株8種類中7種類で高く、同一の症例で正常腎と比較できたヒト腎癌組織6例中6例で増加していた。このことから、ST3Gal IIは腎の癌化に関連しているものと考えられ、その後の悪性進展の基になっている可能性が示唆された。また、ST3Gal II mRNAをアンチセンスで安定発現させSSEA-4発現レベルが低下した腎癌細胞株ACHNは、ベクターのみを安定発現させたのと比較して、遊走能、浸潤能ともに低下することが判明した。以上のことから、ST3Gal IIは、腎の癌化・悪性進展への解明の他、SSEA-4が胚性幹細胞(ES細胞)のマーカーであることから、ES細胞研究や再生医学に役立つことが期待される。SSEA-4は、精巣腫瘍の前癌病変とされるintratubular germ cell neoplasiaunclassified(IGCNU)の8例全例において発現し、セミノーマにおいても9例全例で発現していることが判明した。このことは、IGCNUはセミノーマの前癌病変であるという仮説を支持するものと考えられた。一方、ノンセミノーマでは、胎児性癌の約半数でSSEA-4発現がみられ、セミノーマからノンセミノーマに脱分化する過程でSSEA-4の発現が低下するものと考えられた。【方法】すでに、われわれはST3Gal IIがSSEA-4(MSGb5)合成酵素であることを明らかにし、腎の癌化との関連を示唆した(Saito S.et al.:J Biol Chem 278(29):26474-26479,2003)。【結果】腎癌の27例の殆どで正常部に比してST3Gal IIのmRNAの増加が認められた。また、ST3Gal IIに対するAS cDNAをtransfectした細胞ではRT-PCRでmock cDNAに比して約20%の抑制を認め、siRNAを導入した細胞ではdisordered siRNAに比して約70%発現が抑制されていた。薄層クロマトグラフィーでST3Gal IIの発現レベルを抑制することでMSGb5の発現が抑制された。MSGb5低発現の細胞はコントロール細胞に比して増殖能・浸潤能ともに明らかに低下していた。Nude miceにAS cDNAとmock cDNAを導入した細胞を皮下注入して腫瘍系を測定したところ、mockでは腫瘍は明らかに大きかった。【結論】ST3Gal IIによる糖鎖の変化はヒト腎癌細胞の悪性度に関連していることが示唆された。AS cDNAやsiRNAを利用した糖鎖解析は、癌化や分化において根本的な役割を担っている糖鎖の発見や治療の第一歩になると考えられた。【目的】
放射光光電子分光とSTMの複合による、表面ナノ構造の電子状態研究

本研究計画は、既存のSTM装置を当施設の保有する放射光施設の光電子分光ビームラインに設置できるようにすることにより、自己組織化により半導体表面や金属表面に作成した、ナノ構造物や表面欠陥などの構造をSTMを用いて評価し、表面上のナノ構造の電子状態を直接光電子分光法で調べる事を目的としている。計画遂行にあたり、まずSTM装置を振動や電気的なノイズの多い放射光施設内で利用できるようにするため、エディーカレントダンパーなどを用いることにより十分な除振対策を施したSTM吊り架台付きチャンバーを設計、作成した。また既存の光電子分光装置を用いてSTMで観測したサンプルをそのまま搬送し測定できるように、サンプルホルダーを光電子分光装置と互換できるように特殊なサンプルホルダーレセプターを作成した。一方、装置を立ち上げる作業に平行し、別のチャンバーに於いてSTM装置の動作テスト、STMを放射光施設で利用する場合の問題点の洗い出しとその対策を行った。その結果放射光施設の環境下でも原子分解能でSTMの観察が可能であることなどを確認した。また、光電子分光で測定する自己組織化によるナノ構造物の作成テスト及びSTM観察を行い、測定サンプルの作成条件だしを試みた、またそれらのサンプルについて光電子分光測定のテストも行った。
体内吸収性スペーサーを用いた膵臓癌の空間可変放射線治療の開発

ポリグルコール酸(PGA)手術用吸収性縫合糸を不織布に加工した生体吸収性スペーサーを独自に開発した。非臨床試験、物理試験、小動物を使った有効性と安全性試験、大型動物試験の検討結果を踏まえて臨床試験の段階まで進んでいる。最適仕様の決定には埋植後の厚みの85%の維持期間を達成できるものを最適仕様とした。ラットを用いた実験やカニクイザルを用いた動物実験においてスペーサーは顕著な毒性や有害事象の原因となることなく、生体内に埋植され、徐々に吸収されることを確認した。同スペーサーを臨床試験仕様に一部改変し、現在は有効性と安全性を追求する臨床試験を実施中である。a本研究の目的は粒子線治療において、独自開発した吸収性スペーサーを用いて、治療期間時のみ空間創造・可変させ、これまでにない次世代放射線治療を確立することである。その中で以下の4項目を本年度の計画に据えた。1.吸収性スペーサーの作製と最適仕様の決定。2.体内吸収性スペーサーを用いた空間可変粒子線治療の物理的特性、安全性の確認。3.本治療法の小動物(マウス・ラット)実験による生物的安全性の確認。4.大型二本足動物(カニクイザル)を用いた長期安全性試験。そのうちスペーサーの製造法に関して改良に改良を重ね、最適の弾性を有し、粒子線治療に則した吸収速度のスペーサーを開発するに至った。動物実験ではある吸収性スペーサーでは体重減少や死亡例は認めないものの、ラットの剖検で腸管や腸間膜との癒着がやや強い印象があり、次年度以降に関して、製造法や埋植法に関して改良が望まれた。また物理的特性が100 Gyの陽子線、炭素イオン線で損なわれないとの基礎的データは有しているが、更に100 Gyの照射直後に小動物に吸収性スペーサーを埋植したが、観察上はこれまでの非照射の吸収性スペーサーと弾性や吸収速度など殆ど変化がなかった。カニクイザルを用いて8か月間の長期安全性試験を実施したが吸収性スペーサー埋植による毒性や有害反応は確認できなかった。これらの結果を含め、マウス・ラット実験による生物的安全性の確認をスペーサーの厚み・面積とスペーサーの体内吸収速度の関係の検証、スペーサー材質が吸収された後の腸管壁の損傷の有無、炎症細胞の浸潤の程度にフォーカスをあて検討していく。本年度は粒子線照射後のスペーサーの性状変化、厚みの変化に関しても検討した。炭素イオン線照射24時間以内の被験物質が神戸大学に到着後ただちに8週齢の雄のラットの正中腹部に埋植し、動物用CT撮影装置を用い、毎週1回のスペーサーの消褪速度(厚みの変化を)計測し記録した。埋植後9週間までの経時的な厚みの変化を各週におけるCT画像を用いて計測した。CT撮像は0.15mm間隔で撮像し、スペーサーの断面像の中で最大の厚みのCT画像を用い、CT装置付属のソフトウエアを用いて計測した。データは各群6匹の厚みの平均値はスペーサーの厚みは埋植後8週間経過しても85%以上維持していた。これまでの前臨床試験の結果からPGAスペーサーの最適な密度を決定した。脊索腫などの骨軟部腫瘍では治療期間が約6週間かかるため、術後炎症が沈静化する期間を考慮すると埋植時から最長8週間のスペーサーの厚みの保持が必要であると判断した。その観点から、最適なPGAスペーサーの仕様を0.2 g/cm3と判断した。また、臨床試験に準備するスペーサーの厚みは前述の密度で5mm, 10mm, 15mmのものとし、挿入の困難さに応じて個々の症例で選択あるいは併用することとした。スペーサーの密度を調整し、臓器に優しくフィットする柔軟性と臓器間圧力でも潰れない耐圧性とを両立する改良スペーサーを開発し、特許出願を完了している(2013年12月出願)。ヒト臨床試験の準備を進めている。さらに柔軟性と耐圧性を両立する改良スペーサーに係る特許出願を2013年12月に完了し、2014年12月に当該特許出願を基礎出願とする優先権主張を伴う国際特許出願を完了した。2014年12月に治験実施施設である神戸大学医学部附属病院及び兵庫県立粒子線医療センターで治験審査委員会(IRB)での承認を得て2015年1月から両施設において臨床治験を開始している。本研究は放射線治療・粒子線治療において、従来は危険臓器との位置関係のため根治的線量を照射することが困難であった膵臓癌等の疾患の治療に際して、腫瘍と近接する正常臓器の距離・位置関係を独自開発した吸収性スペーサーを用いて、治療期間時のみ空間創造・可変させ、これまでにない次世代放射線治療を確立することを目的とすることであるが、研究の方法として以下の5項目を挙げた。項目別に結果を示す。1.吸収性スペーサーの作製と最適仕様の決定に関しては80日間という長期にも厚みの保持できるためには0.2g/cm3の不織布が最適と考えられた。2.体内吸収性スペーサーを用いた空間可変粒子線治療の物理的特性、安全性に関しては陽子線、炭素イオン線共に100Gyという高線量を照射してもスペーサーの特性に変化がないことを確認した。また、物理評価的にも吸水したスペーサーの厚みだけの飛程の変化があったことを確認できている。3.本治療法の小動物(マウス・ラット)

実験による生物的安全性の確認では炭素イオン線照射におけるスペーサーの遮断効果は一定であり、粒子線ビームをスペーサーに照射したときのスペーサーからの線量の漏えいなどがないことが確認できた。4.大型二本足動物(カニクイザル)を用いた長期安全性試験ではGLP準拠施設での非臨床試験として実施し、安全性が確認された。5.本治療法の臨床試験は神戸大学にて臨床治験を実施中であるが、現在では大きな有害反応は認められず、本療法とスペーサーの有効性と安全性が確認できたと考えている。ポリグルコール酸(PGA)手術用吸収性縫合糸を不織布に加工した生体吸収性スペーサーを独自に開発した。非臨床試験、物理試験、小動物を使った有効性と安全性試験、大型動物試験の検討結果を踏まえて臨床試験の段階まで進んでいる。最適仕様の決定には埋植後の厚みの85%の維持期間を達成できるものを最適仕様とした。ラットを用いた実験やカニクイザルを用いた動物実験においてスペーサーは顕著な毒性や有害事象の原因となることなく、生体内に埋植され、徐々に吸収されることを確認した。同スペーサーを臨床試験仕様に一部改変し、現在は有効性と安全性を追求する臨床試験を実施中である。現時点ではPGAスペーサーにおける最適仕様が決定され、臨床治験まで辿り着いており、今後は臨床的有用性と安全性の検討を行っていく予定である。27年度が最終年度であるため、記入しない。放射線腫瘍学現時点で、我々が開発した生体適合性で吸収性スペーサーは世界最先端といっても過言ではない。今後は手術術式に応じた次世代型のスペーサーの開発や、手術手技の標準化などが望まれる。吸収性スペーサーの安全性、有効性の検証が、ほぼ実験計画通り進行しており、最適使用の決定に近づきつつある。吸収性スペーサーの仕様が決定し、前臨床段階で使用する物品費は少なくて実験が遂行できた。次年度以降は更なる改良を重ねて次世代型のスペーサーの安全性を検証する予定である。スペーサーの吸収率を遅らせるための、製造条件の改良が望まれる。現在のPGAを用いた不織布吸収性スペーサーに関しては臨床試験にてその有用性を検討していくが同時にその固定方法や適切な体内の部位の確定を動物実験にて実施する。また次世代スペーサーに関してはその到達方法も異なることから体内空間での展開方法、固定方法、厚みや剛性などの特質の調査のための試作や動物実験を行う予定であるが、次世代スペーサーの作製費用、実験動物費用、組織解析費用などに繰り越しした研究費を使用していく予定である。研究の実行は予定通り遂行できたが、研究打ち合わせのために申請した旅費が、学内で打ち合わせが可能であったので、一部次年度に繰り越した。本研究は世界初の試みであり、検証を重ねる必要と、意見交換が必要なので、研究打ち合わせを次年度以降、より計画し、外部有識者の意見も取り入れていく。
医薬品適正使用の基盤：薬物代謝酵素間の機能的相互作用のin vivoでの検証

薬物の薬効・毒性の発現には、体内での薬物濃度と活性代謝物(薬理活性が増強された代謝物ないし毒性代謝物)の濃度が重要な決定因子となる。薬物代謝の個体差(フェノタイプ)を、遺伝的多型(ジェノタイプ)で理解しようとするアプローチは有効だが、一方で、予測不能の事例があり、責任遺伝子のジェノタイプのみでは限界がある。本研究では、薬物代謝酵素間のタンパク質間相互作用、特にシトクロムP450 (P450, CYP)とUDP-グルクロン酸転移酵素(UGT)のタンパク質間相互作用による薬物代謝の制御が、in vivoでも個体差の要因として重要である可能性を示すと共に、その分子機構解明にむけた検討を行った。本研究では、薬物代謝酵素間のタンパク質間相互作用、特にシトクロムP450 (P450, CYP)とUDP-グルクロン酸転移酵素(UGT)のタンパク質間相互作用による薬物代謝の制御が、in vivoでも個体差の要因として重要であることを示すと共に、その分子機構を解明することを目的とする。平成25年度は以下の成果を得た。Baculovirus-Sf9発現系を用いCYP3AとUGTの機能的相互作用について検討した。1)エピトープタグを導入したCYP3A4を用い、pull-down法でUGT2B7とのタンパク質間相互作用が起こること再検証した。2) UGT2B7と同様にtype-I型小胞体膜結合タンパク質であるカルネキシンとはCYP3A4は機能的相互作用をしなかったことから、CYP3A4-UGT2B7相互作用は特異的であることが示唆された。さらに、UGT2B7のC末端cytosolic tail欠失変異体を用いて、CYP3A4機能制御におけるUGT2B7のcytosolic tailの役割について検討した結果、CYP3A4制御に重要な役割をもつことが示唆された。3) CYP3A4がUGT1Aサブファミリーの機能に影響を及ぼすこと、その影響に分子種特異性があることが示唆された。主要な機器として購入した(株)日立ハイテクノロジーズ社製HPLCシステムは、組換え酵素機能の高感度解析に用いた。これらの成果は、国内の研究会および学会で報告した。UGT2B7によるCYP3A4機能の調節について、UGT2B7のどのドメインが重要であるのかについて詳細に検討を行った。UGT2B7のC末端領域の部分欠失変異体の発現系を構築し、P450機能へのUGTの影響を解析し、相互作用に重要なドメイン構造、相互作用部位の同定を目指した。平成25年度までに、UGT2B7のcytosolic tailの重要性を見出していたが、今年度は、同じくtype-I型膜タンパク質であるカルネキシン(CNX)とのキメラタンパク質を用いて検討を行ったところ、C末端領域の親水性領域部分は、CNXのそれと置換してもCYP3A4機能の抑制作用が残ることが分かった。さらにUGT2B7のC末端近傍の部分欠失変異体を用いた検討により、UGT2B7のC末端近傍の疎水性領域がCYP3A4機能調節に重要な役割をもつことが明らかになった。これらの成果は、ドイツスタットガルトにて行われたミクロゾームと薬物の酸化に関する国際シンポジウム(招待講演)にて報告した。また、North American ISSX/JSSX (サンフランシスコ)にて研究協力者の大学院生が報告し、Graduate/Pre-Doctoral Poster Awardsを受賞した。また、CYP3A1がラットUGT2B3に及ぼす影響等についても検討を行い、P450 Biodiversity学会(国際学会、京都)では、ポスターからシンポジストに選ばれた。CYP3A4がヒトUGT1A7に及ぼす影響における、UGT1A7側の重要な領域についても検討を進めており、国内学会にて報告した。シトクロムP450 3A4 (CYP3A4)との相互作用に、UDP-グルクロン酸転移酵素(UGT)の内部配列に存在する疎水性の高い領域が関与するか検討した。UGTと同様なtype-I型小胞体膜結合タンパク質のcalnexin (CNX)の内部配列とUGT2B7の200番目アミノ酸付近の内部配列を置換したキメラは、CYP3A4機能の抑制能を失っていた。従って、UGT2B7の200番目付近の疎水性領域がCYP3A4と相互作用する新たなドメインとして見出された。また、CYP3A4は、wild-type UGT1A7*1 (208Trp)機能を促進させるのに対し、UGT1A7*4 (208Arg)機能は抑制した。このことから、UGT1A7の208番目のアミノ酸のTrpからArgへの変異は、CYP3A4によるUGT1A7の調節を正か負かに決定する鍵となることが明らかになった。この変異では、UGT機能自体の変動はほとんどない。しかし、in vivoでは、CYP3A4が共存するため、CYP3A4との相互作用の結果、UGT1A7遺伝的多型による機能変動が現れる可能性が示唆された。さらに、UGT1A7とCYP3A4の生細胞中でのタンパク質間相互作用を蛍光共鳴エネルギー移動(FRET)により評価した。UGT1A7とCYP3A4をそれぞれ、AcGFPおよびmCherryと融合させたものを、共発現した場合、CNXの場合に比べ有意かつ強いFRETが生細胞内で観察された。

このことから、UGT1A7とCYP3A4の相互作用がin vivoでも生起している可能性が示唆された。これらの研究の成果をとりまとめて、2015年6月に東京で行われた国際P450会議(招待講演)および、2016年3月の毒性学会(米国ニューオーリンズ)、また国内学会でも報告した。薬物の薬効・毒性の発現には、体内での薬物濃度と活性代謝物(薬理活性が増強された代謝物ないし毒性代謝物)の濃度が重要な決定因子となる。薬物代謝の個体差(フェノタイプ)を、遺伝的多型(ジェノタイプ)で理解しようとするアプローチは有効だが、一方で、予測不能の事例があり、責任遺伝子のジェノタイプのみでは限界がある。本研究では、薬物代謝酵素間のタンパク質間相互作用、特にシトクロムP450 (P450, CYP)とUDP-グルクロン酸転移酵素(UGT)のタンパク質間相互作用による薬物代謝の制御が、in vivoでも個体差の要因として重要である可能性を示すと共に、その分子機構解明にむけた検討を行った。平成26年度の研究では、P450-UGTのタンパク質間相互作用を、特にCYP3A4-UGT2B7について解析し、UGT2B7のC末端近傍の疎水性領域が相互作用に重要であることを明らかにした。CYP3A4-UGT2B7相互作用において、UGT側の相互作用に重要な部位の候補を見出すことが出来た。また、UGT1A7についても解析し、CYP3A4と他のUGT分子種との相互作用を検討することを通じて、CYP-UGT相互作用の分子メカニズムの更なる解明に向けて、着実に成果が出ていると考えられる。また、CYP3A4による調節におけるUGT1Aサブファミリー上の重要な残基についても明らかになりつつある。さらには、UGTの糖鎖の有無とCYP3Aとの相互作用についても理解が深まっている。これらの研究を通じて、CYP3A4-UGT相互作用による多様なUGT機能の制御機構が明らかになりつつあるため27年度が最終年度であるため、記入しない。薬物代謝学UGTとCYP3A4の機能的相互作用について、UGT側のどのドメインが重要であるのかについて更なる検討を行う。相互作用に重要なドメイン構造、相互作用部位を同定する。また、CYP3A4とUGTとの相互作用における分子種特異性を解析する。CYP3A4がUGT1Aサブファミリーの機能に及ぼす影響についても検討するとともに、さらに、初代培養肝細胞を用いて、UGTをノックダウンし、CYP3A活性をcell based assayにて評価する。Cyp3aノックアウトマウス(KOマウス)の肝臓ミクロゾームを用いて、UGTによって代謝される薬物のクリアランスを調べ、P450-UGT相互作用、UGT-UGT相互作用について検討を行う。これらの検討で確立した実験系を用いて低分子性の環境因子、制御因子の影響についても検討する。これらの取り組みを通して、薬物代謝酵素の機能的相互作用による個体差の要因を明らかにするとともに、得られた結果をとりまとめて、東京にて行われる国際P450会議(招待講演)にて成果の発表を行うとともに、国際毒性学会(ニューオーリンズ)、また国内学会でも報告する。27年度が最終年度であるため、記入しない。(平成26年度)UGT2B7によるCYP3A4機能の調節について、UGT2B7のどのドメインが重要であるのかについて詳細に検討を行う。
心理学実験とコネクショニストモデルによる広汎性発達障害児の認知機能の検討

1.実験研究小学校中学年中学生の高機能広汎性発達障害児約70名を対象に,2つの実験を実施した。(1)逆ストループ課題の応用実験:前年度研究で実施した課題とほぼ同じ課題を使用し,結果の安定性を検討した。(2)Navon (1977)流のグローバル情報とローカル情報の混在呈示による干渉測定:2種の情報間での抑制機能の検討と,グローバル情報の優越性からの中枢性統合機能の障害に関する検討を行った。その結果,広汎性発達障害児においてもグローバル情報のローカル情報に対する優越性は大きかった。また文字と図形の2種の刺激を用いた結果,刺激間で干渉の働き方に違いが見られ,文字では不適切情報による妨害効果が顕著であるが,図形では冗長刺激の促進傾向が主に見られた。今後さらに,健常児のデータとの比較,抑制機能と中枢性統合の関係,広汎性発達障害児の中での特性の個人差傾向,などの分析を行っていく必要がある。2.モデル検討ストループ干渉に関するコネクショニストモデルの先行研究等を中心としたモデルの調査と,広汎性発達障害児を対象とした実験結果の,ネットワークパラメータ操作による記述可能性の検討を進めた。この検討では,あらかじめ研究者側が設定した結合ウェイトの違いによって,同発達障害の認知特性を記述することは可能であるが,発達障害の原因メカニズムを探るには限界があると考えられた。今後は,発達研究の分野で検討され始めている,ネットワークの学習によって発達メカニズムをモデル化するアプローチを用い,ネットワークの初期状態や学習特性等の効果から発達障害の発生メカニズムを探ることが重要であると考えられた。1.実験研究広汎性発達障害児を対象に,その認知機能を検討するための心理学実験を行った.特に,複数の情報が共存する場面での認知機能の検討のため,逆ストループ課題を元にした実験研究を進めている.課題として,色名単語の判断を用い,単語自体あるいは単語の上または下へ呈示するパッチに色をつけた場合の,単語判断への影響を検討した.これは,藤田・川上・行廣(2002)の実験の条件等を整備し,より詳細なデータを収集することを目指している.実験の結果,広汎性発達障害児でも逆ストループ干渉が見られた.さらに,大学生による対照実験では,パッチへの着色は単語自体への着色よりも影響が小さかったが,広汎性発達障害児では,パッチへの着色からの干渉も大きいという傾向が見られた.また,単語/パッチへの着色の干渉量およびその差には個人差が大きかった.これは測定誤差である可能性もあるが,他の認知指標との関連から,広汎性発達障害児の集団内での個人差の要因検討も進めていく予定である.2.シミュレーション研究上記実験研究に関連したストループ干渉,および,既にデータを収集している虚記憶等の実験に関連した,コネクショニストモデルによるシミュレーション研究の文献調査を行っている.また,発達障害およびその他の認知障害を,コネクショニストモデルによってシミュレートした研究に対する文献検討も進めている.これらのシミュレーションモデルを参考として,発達障害の特徴をコネクショニストモデル内で表現することを次年度に向けた検討課題と考えている.1.実験研究小学校中学年中学生の高機能広汎性発達障害児約70名を対象に,2つの実験を実施した。