hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
筋骨格モデルの動力学計算による神経筋疾患の診断・リハビリテーション支援手法の開発

1.神経筋骨格モデルおよびそのための順・逆動力学計算法の開発と神経医療における知見を基にした検証と改良従来の筋骨格モデルに比べて極めて詳細(155自由度の骨格と約1000本の筋)な筋骨格モデル,および脊髄神経から筋までの神経-筋ネットワークをモデル化した神経筋骨格モデルを開発した.また,体性反射や筋ダイナミクスなど生理学的な知見をもとに高精度な筋張力推定アルゴリズムを開発した.2.計算・シミュレーション結果の可視化と低次元化による診断・リハビリテーション支援への応用計測された運動データ,計算された筋張力などを三次元モデルやグラフとして可視化し,神経筋疾患の診断やリハビリテーションを支援するツールを開発した.また,多次元のデータを低次元化して容易に理解できるように提示する技術を開発した.3.神経筋骨格モデルパラメータを非侵襲に同定する手法の開発骨格モデルの運動学・質量パラメータ,関節粘弾性パラメータ,筋モデルパラメータ,神経-筋ネットワークパラメータを,非侵襲な運動・筋電計測データのみにより同定する手法を開発した.4.新しい非侵襲運動計測システム技術の提案従来の球状マーカを用いた光学式モーションキャプチャに代わる運動計測システムのプロトタイプを開発した.具体的には,平面状のメッシュマーカを用いて計測点数を増加するとともに安全性を高めた方法と,カラー画像を用いてマーカレスに運動とトポロジーの取得を同時に行う方法を実現した.1.神経筋骨格モデルおよびそのための順・逆動力学計算法の開発と神経医療における知見を基にした検証と改良従来の筋骨格モデルに比べて極めて詳細(155自由度の骨格と約1000本の筋)な筋骨格モデル,および脊髄神経から筋までの神経-筋ネットワークをモデル化した神経筋骨格モデルを開発した.また,体性反射や筋ダイナミクスなど生理学的な知見をもとに高精度な筋張力推定アルゴリズムを開発した.2.計算・シミュレーション結果の可視化と低次元化による診断・リハビリテーション支援への応用計測された運動データ,計算された筋張力などを三次元モデルやグラフとして可視化し,神経筋疾患の診断やリハビリテーションを支援するツールを開発した.また,多次元のデータを低次元化して容易に理解できるように提示する技術を開発した.3.神経筋骨格モデルパラメータを非侵襲に同定する手法の開発骨格モデルの運動学・質量パラメータ,関節粘弾性パラメータ,筋モデルパラメータ,神経-筋ネットワークパラメータを,非侵襲な運動・筋電計測データのみにより同定する手法を開発した.4.新しい非侵襲運動計測システム技術の提案従来の球状マーカを用いた光学式モーションキャプチャに代わる運動計測システムのプロトタイプを開発した.具体的には,平面状のメッシュマーカを用いて計測点数を増加するとともに安全性を高めた方法と,カラー画像を用いてマーカレスに運動とトポロジーの取得を同時に行う方法を実現した.(1)低侵襲モーションキャプチャシステムの開発従来の球状マーカの代わりにメッシュ状のマーカを用いる光学式モーションキャプチャシステムを開発した.突起がないため転倒時の危険が少なく,より低侵襲に運動を計測することができる.また,球状マーカに比べて数倍の計測点が得られ,身体による隠れの影響が少ない.(2)筋骨格モデルの動力学計算法の改良神経内科の臨床診断で用いられる動作を健常者に行わせた運動データを用いて,筋骨格モデルの検証を行った.また,計算される筋張力がより現実的になるように,モデルおよび計算法を改良した.具体的には,骨と筋の干渉による筋の経路変化,および筋活動度の時間的連続性を考慮するモデルとした.(3)筋および関節パラメータ推定手法の開発神経疾患を定量的に診断する一手法として,筋の静的・動的パラメータおよび関節の受動特性パラメータの推定手法を開発した.計測データとしてモーションキャプチャと表面筋電位のみを用いるため,非侵襲的で臨床応用の可能性が高い手法である.(4)リンクパラメータ推定手法の開発骨格モデルの各部位(リンク)の質量・慣性モーメントを推定する手法を開発した.人体寸法データベースから各部位の寸法の関係を解析し,その結果をもとに身長・腰回りなど代表的な寸法を計測することにより各リンクの長さ・直径を推定し,それに基づき各リンクの質量・慣性モーメントを推定する.(5)筋機能の提示手法の開発筋の幾何情報だけでなくリンクの慣性パラメータまで考慮した場合の,各筋が関節に発生させる運動の方向を直感的に提示する手法を開発した.これにより,幾何情報のみを考慮した場合とはまったく異なる機能を持つ場合があることを示した.1.詳細人体筋骨格モデルおよびその計算法(1)反射を含む神経筋骨格モデルの構築:モーションキャプチャによる運動計測,筋骨格モデルの動力学計算に基づき,伸長筋反射など単純な反射モデルを含む神経・筋骨格モデルを構築した.(2)モデル固体化手法の開発:肘・肩関節を対象として,神経内科の臨床診断で用いられる動作を用いて粘弾性パラメータを非侵襲に同定する手法を開発した.光学式モーションキャプチャによる運動計測と腕のリンク機構モデルによる動力学計算に基づき,ロボティクス分野で開発された関節パラメータ同定手法を適用した.(3)骨格モデルの運動シミュレーション法の開発:多自由度の骨格モデルの動力学シミュレーションを高速に行うための並列順動力学計算法を開発した.これにより,複雑な筋骨格モデルの動力学シミュレーションがほぼリアルタイムで実行可能となった.2.運動データベースの構築:光学式モーションキャプチャシステムを用いて,健常者の標準運動データベースを作成した.また,軽度の神経筋疾患患者を対象とした同様の計測を行うための申請を医学部附属病院の倫理委員会に行い,承認された.3.モーションキャプチャシステムの開発

(1)光学式モーションキャプチャシステムの改良:現行の球状マーカを用いた光学式モーションキャプチャシステムを改良し,メッシュ状のマーカを用いたシステムを開発した.マーカが平面であるため,転倒時にも安全性が確保されるという特徴を持つ.(2)マーカレスモーションキャプチャシステムの基礎研究:マーカを用いず,カラーカメラによるシルエット検出による運動計測手法の基礎研究を行った.この手法では,複数の姿勢において,視体積交差法を用いて被験者の三次元形状を計測することにより,関節の位置および角度を推定することができる.(1)筋骨格モデルの高速動力学計算法の開発骨格モデルのための高速並列順動力学計算法を開発・実装し,155自由度の詳細な骨格モデルのシミュレーションをほぼリアルタイムで実行することに成功した,また,二次計画法に基づく筋張力計算法を従来法に比べて大幅に高速化した。その他,モーションキャプチャデータから関節角データを計算するための計算法,筋と骨の干渉計算などのライブラリを整備した。(2)神経筋骨格モデルの構築運動神経を介した筋への指令と体性反射を含む神経筋骨格モデルを構築した。体性反射ループへの感覚入力として筋長,筋張力が利用でき,外力に対する反応などをシミュレートできるようになった。(3)健常者および神経筋疾患患者の運動データベースの構築モーションキャプチャにより健常者9人と神経筋疾患患者6人の運動データを計測し,データベースを構築した。健常者については筋電データも取得し,上記逆動力学計算により得られた筋張力情報をデータベースに加えた。このデータベースより,同種の動作であれば健常者の筋張力比に一定の相関があることを示し,それを用いて筋電データなしで生理的に妥当な筋張力を推定する手法を開発した。また,同一の動作における筋張力パターンを比較することで神経筋疾患の定量的診断が可能となる。(4)リハビリテーション支援手法の開発大量のモーションキャプチャデータを解析して運動の検索や可視化のためのデータベース構築手法を開発・実装した。これにより,・計測した運動と健常者の運動との類似度を定量的に評価し,診断に利用する・類似した運動を検索して病態に合わせたリハビリテーション支援に利用するなどの応用が可能となる。また,昨年度までに開発した関節粘弾性同定法を応用して,神経筋疾患の定量的診断のための手法を提案した。
導電性高分子の電子・光物性と機能性出現機構に関する研究

1、ポリ(3ーアルキルチオフェン)は溶液状態、フィルム状態いずれにおいても、温度により著しい吸収スペクトルの変化を示し、ルミネッセンスは異常で温度と共に強くなる。これは次の様に考えられる。温度が上昇していくと、まず、側鎖のアルキル基のコンフォメ-ション変化により主鎖にねじれが生じ、共役系の平面性が低下するので、実効的に共役長が変化することから、吸収スペクトルが変化し、ルミネッセンスの温度依存性を示す。一方、ポリ(3ーアルキルフラン)ではアルキル鎖のコンフォメ-ションの変化が起こっても、主鎖のねじれが小さくスペクトル変化も観測されない。2、ポリ(3ーアルキルチオフェン)フィルムのX線回折、赤外吸収とその温度依存性を測定した結果、鎖間の距離はアルキル鎖長と共に大きくなる事、アルキル鎖が温度上昇と共にトランスゴ-シュの転移を示す事、主鎖のチオフェン環の平面性が崩れる事等が明らかとなり、上記(1)の推察が正しい事が証明された。3、ポリ(3ーアルキルチオフェン)をゲル化したものは溶媒、温度による体積変化にともなってルミネッセンス強度も大きく変わる事を見い出した。これは収縮状態に対し、膨張状態では主鎖の平面性が低下して主鎖間の相互作用が弱くなり、その距離が長くなっていると考えれば説明できる。このことは、X線回折測定より確認できた。4、ポリ(3ーアルキルチオフェン)フィルムを電極上にキャスティングにより作成し、電気化学的にド-ピング、脱ド-ピングを行ったところ、サイクリックボルタモグラムの電流値、ド-パントの拡散係数ともにサイクル数と共に増大し、やがて一定値に飽和する事を見い出した。これはド-ピング、脱ド-ピングサイクルによるモルフォロジ-の変化の為であると考えられる。5、ポリ(3ーアルキルチオフェン)のショットキ-接合の整流特性は温度によって大きく変化し、これは電子状態の変化として説明される。
縄文時代の石器利用体系を総合的に解明するための実証的研究

平成14年度は、北白川追分町遺跡出土の石皿を中心とした礫石器の観察を基に、その利用体系を解釈し、また、同遺跡出土の剥片石器の利用体系とも比較を行った。その結果、石器の管理度・消耗度は石材の搬入の難易度が決定する可能性がある、という展望を得た。以下に、石器の基礎的な観察結果と利用体系についての解釈を略記する。石皿機能面は使用による磨滅・光沢が破損面際まで著しいので、欠損は磨滅形成後である。破損面の観察によれば、意図的に壊された痕跡を力学的に見出し易いものは多くない一方、複数の破損面において多段階表面変化が確認できることが多いので、破損面形成は断続的である。固定の要求される石皿の側面は支持による磨耗が生じやすいので、破損している石皿の多くは、機能的な法量限界点まで使用され続けた結果と言える。石材産地との距離や残存する大型品の重量を考慮すれば、集落内やその作業場への搬入の労働負荷は高い。従って、出土する石皿の様相や原石産出地点との距離によって、その遺跡の利用度、ひいては定住度ないし定着度がうかがい知れる可能性がある。磨石・敲石石材産出地が近くで、遺跡からは完形品こそ少ないものの破損面の少ないものが多く多段階表面変化もほとんど確認できない。重量・用途を考慮すれば、集落内で使用し、機能的限界を超える過小法量に至る以前に破損等によって廃棄された。剥片石器チャートとサヌカイトがある。前者は石材産出地が近い。チップの出土は殆どなく製品の占める割合が高いが、絶対量が少なく5cm以下の小型品に限られる。集落外で製作後、稀に集落内に道具として搬入された。一方サヌカイト石器は、石材産出地が遠い。チップの出土が多いので製品の占める割合が低いが絶対量は多く、剥片も5cm以上のものも目立つ。最大で小児人頭大の原石の搬入後、集落内でも製作・管理を行った。平成13年度は、北白川追分町遺跡出土の縄文時代の石皿や磨石などのいわゆる礫石器を観察した。このうち、磨石・敲石は完形ないし破損面が一面のみのことが多いけれども、石皿は先学の指摘の如く、破損したものばかりであり多段階表面変化の存在が期待できるので、石器表面の磨滅の段階設定に際しては石皿を主たる対象とした。主たる着眼部は、破損面の凸部、および機能面と破損面との接線として構成される稜線である。破損面の観察では、その面内の鉱物などの凸部の磨滅の程度を視覚的に3段階に分類した。破損面の平滑さが、(1)肉眼でも充分に確認できる、(2)実体顕微鏡による10倍程度の検鏡で確認できる、(3)10倍程度では確認できない。稜線の観察では、同様に以下の3段階区分をした。磨滅による平坦面が、(1)肉眼でも確認できる、(2)実体顕微鏡による10倍程度の検鏡で確認できる、(3)10倍程度では確認できない。破損面ごとに磨滅の程度を見てみると、破損面が複数ある場合はそこに多段階表面変化が確認できることが多い。そして、破損面の段階と稜線の段階とは必ずしも一致こそしないが、一つの個体内にあっては、その組合せにおいて相対的順位に入れ替わりはない、つまり磨滅度が低い破損面はその面と機能面とが構成する稜線の磨滅度も高くはない。一方、礫石器の石材は、火成岩では花崗斑岩や閃緑岩が多い。また石皿には、砂岩などの堆積岩が用いられることも多い。これらの石材は、遺跡付近を流れる高野川の現在の礫種組成においておよそ4割を占めていることがわかっているので、縄文時代でも獲得は容易だったと思われる。以上より、石材や使用時の力学的作用もおよそ同じであるこれらの礫石器でも、必要な法量・形態をはじめとする諸要因によって、器種毎にライフヒストリーの長短が存在することが想定された。

重量・用途を考慮すれば、集落内で使用し、機能的限界を超える過小法量に至る以前に破損等によって廃棄された。剥片石器チャートとサヌカイトがある。前者は石材産出地が近い。チップの出土は殆どなく製品の占める割合が高いが、絶対量が少なく5cm以下の小型品に限られる。集落外で製作後、稀に集落内に道具として搬入された。一方サヌカイト石器は、石材産出地が遠い。チップの出土が多いので製品の占める割合が低いが絶対量は多く、剥片も5cm以上のものも目立つ。最大で小児人頭大の原石の搬入後、集落内でも製作・管理を行った。
三木露風の詩と童謡研究-その童謡観と児童観-

研究の成果は2つ。第1に、三木露風の詩と童謡についてその関係を明らかにした。三木露風は、詩人として成功した後に、童謡の創作を始めた。そして、「童謡は詩である」と明言している。象徴詩人として晦渋とさえ言われた彼の詩が、童謡と同じであろうか、あるいは詩がいかなる影響を童謡に及ぼしたのかという観点から、三木露風の詩と童謡の関係を研究した。第2と3に、三木露風の新資料の収集と整理、そして新資料の分析を通じての三木露風作品への新しいアプローチである。既に、新資料の研究から露風の創作上の問題や、作品創作の手順などを解明していたが、今回は、第2の成果として露風の代表童謡集『真珠島』研究。初出雑誌・作品分析の草稿→雑誌→童謡集へと作品が改稿されていくことによって、露風の童謡がどう深まりを見せていくかを研究した。第3に「露風はなぜ『赤い鳥』童謡欄の選者を断ったか」、「弟の死は露風の創作上いかなる影響を与えたか」などを、新資料黒革ポケット手帳や創作ノート、手書き原稿などから解明した。研究の成果は2つ。1論文「三木露風が「『赤い鳥』童謡欄の選者を断った理由」を学会紀要に発表した。日本児童文学学会『児童文学研究』第39号2006,12,15内容要約なぜ露風は鈴木三重吉に『赤い鳥』童謡欄の選者を依頼された時、断ったかという疑問が、児童文学研究には従来からあり、藤田圭雄・弥吉管一・滝沢典子・畑中圭一などが様々に検証していたが、決定打がなかった。本研究者は、様々な資料を再検証し、露風の新資料の「黒革のポケット手帳」に、日記風に書き付けてある「勉門司にあり。病躯を抱いて窮迫せる......」という4月17日の記録を発見したのを手がかりに、当時の露風の生活の様子を検証した。その結果、露風は、病気の弟勉を引き取って看病してやらねばならず、その治療費を稼ぐために『浮世絵板画傑作集解説』の仕事を引き受け、月給を貰う身となっていた。つまり、「児童のための新しい童謡というジャンルを創作しリードしていけるだけの余裕が、精神的にも、経済的にもなかった」ということを実証し論じた。くしくも『浮世絵板画傑作集解説・北斎派風景画』の出版は、『赤い鳥』創刊と同じ1918(大正7)年の7月であった。弟は、9月に亡くなり、同月に2冊目の『浮世絵板画傑作集解説・春章・文調』を出版されたのを機に、露風は解説の仕事を辞めて、以降は童謡創作に没頭した。vol3 2007,3,1代表福嶋朝治上記論文を一般の人向けに内容の要約を紹介した。研究助成金による研究であることを明記した。3露風の資料や、児童・童謡に関する資料を収集し、研究を進めた。三木露風の新資料を研究し、論文に纏めることが主な目的であったが、その成果として博士号請求論文「三木露風の詩と童謡研究-詩からの連続性と童謡の独自性-」を書き、博士号を取得した。論文名「三木露風詩と童謡研究-詩からの連続性と童謡の独自性-」内容三木露風の詩と童謡は関連して考察されたことがなかったが、象徴詩を完成させた後に創作された童謡は、詩の技法や文学性を強く受け継いだものであった。しかし、詩においては晦渋とさえ言われる露風の詩から、童謡はいかなる影響(連続性)を受け、かつ童謡としての独自のあり方があったのかを調査、分析した。また、童謡に関して総体を研究した先行研究もなかったので、『真珠島』『お日さま』『小鳥の友』の童謡集の詳細を分析した。さらに、新資料研究によって解明された新事実で、従来の疑問を解決した論文を含んでいる。意義従来の研究ではなかった詩と童謡という2方向からの研究をしている。新資料を使った新しい視点を持ち込んでいる。露風童謡の総体を俯瞰し、その上に立脚した分析・鑑賞を行っている。公聴会講演2008年3月4日題目「三木露風詩と童謡研究-詩からの連続性と童謡の独自性-」

内容上記論題で、その中の最も詩から影響を受けている童謡数編を紹介し、分析結果を述べた。また本研究を通じて得られた、三木露風の童謡観や児童観について述べた。資料公開新資料の複写に解説をつけたもの、論文調査上の写真や文献、「三木露風館」コンテンツを印刷したものなどを展示して一般に供した。研究の意義三木露風の新資料は、東京三鷹市(窓口は山本有三記念館)と、たつの市霞城館の両方に寄託されているので、相互に付き合わせながら資料の内容を確認し、整理していく。これらの基礎研究のうち、童謡創作に関して大まかな流れが整理できた。資料の読み取りから、三木露風の池袋時代の生活と作品の背景、個々の作品の草稿と改稿後などの作品研究が進んだ。これらの作業は、地道な作業であるが、三木露風研究の基礎を固める上で重要な研究である。具体的内容(1)三木露風の新資料を整理して、そこから読み取れることを論文にまとめた。研究代表者は東京三鷹市とたつの市霞城館の両方を、訪問して寄託されている資料の内容を整理した。その結果、自筆ノート類に関しては大正13年頃までのものは、三鷹資料に、それ以降のものは龍野資料に多い。手帳・原稿類は、双方に分散していた。例えば、黒革手帳の大正7年分の上半期分は龍野資料、下半期のものは三鷹資料の中にあることが分かった。それらを閲覧し、複写したもの読み取り内容を検討した結果、なぜ三木露風が「『赤い鳥』の童謡欄の選者を断ったかという謎が19年度の研究で解明された。本年度は、それに加えて「弟の死」という草稿の発見と解明があり、19年度研究の内容がさらに裏打ちされた。加えて弟勉と露風との関係、露風の池袋時代の生活と作品の背景が解明された。(2)童謡草稿の流れが掴めたので、真珠島所収作品の初出雑誌、作品の創作年代の絞り込みがされた。さらに、草稿なので、改稿過程において注目される作品も多く、作品解釈にも新しい見解が加わった。重要性新資料の整理・分類の重要性は言うまでもないが、幾つかの新事実が発見され、研究が進展した。
治療抵抗性尿路上皮癌幹細胞標的免疫療法開発

我々はこれまで、in vitro培養で安定した形質を示す膀胱癌幹細胞クローンを膀胱癌細胞株UM-UC-3から樹立した。本研究において、膀胱癌幹細胞株を用いて、どのような抗原ペプチドが提示されているか、HLAリガンドーム解析により明らかとする。また、膀胱癌幹細胞を標的とした免疫療法が有効か、in vitroおよびin vivo実験系にて評価する。
口腔バイオフィルムのゲノム解析による歯周疾患発症機構の解明

口腔バイオフィルムのゲノム解析の基盤となる口腔内レンサ球菌のゲノム多型性の解明およびmobilegenomi celement解明するための全ゲノム解析を行った.また、歯周病変から高頻度で分離されるII型線毛遺伝子を保持するP.gingivalisの上皮細胞に対する影響について解析を行った.(1)口腔レンサ球菌のゲノム多型性についての解析口腔バイオフィルムを形成するレンサ球菌の代表的な菌としてう蝕病原性細菌であるStreptococcus mutansについて、従来の血清型には分類されないk型を分離した.この左型の菌株では菌体表層の糖鎖合成酵素に異常があり、現在までに報告されている血清型には分類されず、また血清型kを示す菌株の系統学的おおび進化的な情報は得られていない。そこで、S.mutansで報告されているc, e, f, k型の臨床分離株102株について、8種類のハウスキーピング遺伝子についてmultilocuss equencetyping(MLST)を行いS.mutansの系統解析を行った.その結果、S.mutansの血清型e, fおよび左型は、MLST解析では明確なクラスターを形成し、血清型cをからそれぞれ派生したことが明らかとなった.S.mutansに関しては、日本で分離された血清型cのNN2025株について全ゲノム解析を行った.NN2025は全長200791bpからなり、既に報告されているUA159株とほぼ同様のゲノムサイズを示した.しかし、NN2025株では多数の接合伝達によって得られたと考えられる他菌種由来の外来性遺伝子を獲得し、さらに分裂開始点から均等な位置に存在するリボソーマルオペロンでゲノム構造がレプリコア間で入れ替わっており、ゲノム構造が大きく入れ替わっていることが明らかとなったII型線毛遺伝子を保持するP.gingivalisの病原性についての解析を行ったところ、P.gingivalisは宿主細胞と結合組織との結合を阻害することにより、上皮組織の修復過程を阻害することになった.さらに、この阻害は、細胞内に侵入した菌が、細胞内でインテグリンに結合するFocal adhesion kinaseなどのタンパク質を特異的に分解することにより組織修復を遅延させることが明らかとなった.口腔バイオフィルムのゲノム解析の基盤となる口腔内レンサ球菌のゲノム多型性の解明およびmobilegenomi celement解明するための全ゲノム解析を行った.また、歯周病変から高頻度で分離されるII型線毛遺伝子を保持するP.gingivalisの上皮細胞に対する影響について解析を行った.(1)口腔レンサ球菌のゲノム多型性についての解析口腔バイオフィルムを形成するレンサ球菌の代表的な菌としてう蝕病原性細菌であるStreptococcus mutansについて、従来の血清型には分類されないk型を分離した.この左型の菌株では菌体表層の糖鎖合成酵素に異常があり、現在までに報告されている血清型には分類されず、また血清型kを示す菌株の系統学的おおび進化的な情報は得られていない。そこで、S.mutansで報告されているc, e, f, k型の臨床分離株102株について、8種類のハウスキーピング遺伝子についてmultilocuss equencetyping(MLST)を行いS.mutansの系統解析を行った.その結果、S.mutansの血清型e, fおよび左型は、MLST解析では明確なクラスターを形成し、血清型cをからそれぞれ派生したことが明らかとなった.S.mutansに関しては、日本で分離された血清型cのNN2025株について全ゲノム解析を行った.NN2025は全長200791bpからなり、既に報告されているUA159株とほぼ同様のゲノムサイズを示した.しかし、NN2025株では多数の接合伝達によって得られたと考えられる他菌種由来の外来性遺伝子を獲得し、さらに分裂開始点から均等な位置に存在するリボソーマルオペロンでゲノム構造がレプリコア間で入れ替わっており、ゲノム構造が大きく入れ替わっていることが明らかとなったII型線毛遺伝子を保持するP.gingivalisの病原性についての解析を行ったところ、P.gingivalisは宿主細胞と結合組織との結合を阻害することにより、上皮組織の修復過程を阻害することになった.さらに、この阻害は、細胞内に侵入した菌が、細胞内でインテグリンに結合するFocal adhesion kinaseなどのタンパク質を特異的に分解することにより組織修復を遅延させることが明らかとなった.病態に関わる細菌種のこの歯周炎と特定の細菌種との病院論的解明は,歯科医学の最大の関心事の1つであり,細菌学・分子生物学および免疫学の様々な実験技術を駆使して病原細菌の探索が行われてきた.特に,嫌気性細菌の培養技術の進歩に伴って,ヒトの歯周炎と特定の細菌群,すなわち特定のグラム陰性偏性嫌気性菌との相関を細菌学的に定量的に解析することが積極的に行われている.しかし,全ゲノムが解析された歯周病原性細菌でも個々の遺伝子についての解析がなされているのみで,包括的な病原遺伝子解析には程遠いのが現状である.本研究では,歯周疾患の発症の原因を細菌"叢"として捕らえてその解析を行うことに特色がある.この観点より,今期は種々の患者サンプルに存在する歯周病原性細菌の分布とその付着に関する研究および新規の血清型を持つ口腔レンサ球菌の分布およびその糖鎖の違いによる病原性の関与に関して解析を行った.

その結果,(1)P.gingivalisの分布は患者の年齢層を問わずII型線毛を有する菌が優位に検出されたため,歯周疾患の誘発にはII型線毛を有するP.gingivalisの存在が重要であること(2)II型線毛を有するP.gingivalisの産生するベシクルは,他型の線毛を有するベシクルよりも宿主細胞内に高頻度で侵入し,細胞に対して為害作用を有していること(3)新規の血清型を有するレンサ球菌(血清型k)を有する菌はう蝕原性が低いことが示された.口腔バイオフィルムのゲノム解析の基盤となる口腔内レンサ球菌のゲノム多型性の解明およびmobile genomic element解明するための全ゲノム解析を行った.また、歯周病変から高頻度で分離されるII型線毛遺伝子を保持するP. gingivalisの上皮細胞に対する影響について解析を行った.(1)口腔レンサ球菌のゲノム多型性についての解析口腔バイオフィルムを形成するレンサ球菌の代表的な菌としてう蝕病原性細菌であるStreptococcus mutansについて、従来の血清型には分類されないk型を分離した.このk型の菌株では菌体表層の糖鎖合成酵素に異常があり、現在までに報告されている血清型には分類されず、また血清型kを示す菌株の系統学的おおび進化的な情報は得られていない.そこで、S. mutansで報告されているc, e, f, k型の臨床分離株102株について、8種類のハウスキーピング遺伝子についてmultilocus sequence typing(MLST)を行いS. mutansの系統解析を行った.その結果、S. mutansの血清型e, fおよびk型は、MLST解析では明確なクラスターを形成し、血清型cをからそれぞれ派生したことが明らかとなった.S. mutansに関しては、日本で分離された血清型cのNN2025株について全ゲノム解析を行った.NN2025は全長200,791bpからなり、既に報告されているUA159株とほぼ同様のゲノムサイズを示した.しかし、NN2025株では多数の接合伝達によって得られたと考えられる他菌種由来の外来性遺伝子を獲得し、さらに分裂開始点から均等な位置に存在するリボソーマルオペロンでゲノム構造がレプリコア間で入れ替わっており、ゲノム構造が大きく入れ替わっていることが明らかとなったII型線毛遺伝子を保持するP. gingivalisの病原性についての解析を行ったところ、P. gingivalisは宿主細胞と結合組織との結合を阻害することにより、上皮組織の修復過程を阻害することになった.さらに、この阻害は、細胞内に侵入した菌が、細胞内でインテグリンに結合するFocal adhesion kinaseなどのタンパク質を特異的に分解することにより組織修復を遅延させることが明らかとなった.
高強度レーザーに誘起される再衝突電子を用いた分子のアト秒イメージングの理論的研究

近年のレーザー技術の発展に伴い、絶対位相を制御した高強度数サイクル超短パルスレーザーといった新しい光源が実用化され、光と物質との相互作用についての新しい研究の方向性が切り開かれた。近赤外の高強度レーザーを分子に照射すると、レーザー電場がピークとなる時に分子ポテンシャルが極度に歪められ、量子力学的なトンネル効果によって分子内電子がイオン化する。そして、このトンネルイオン化した電子は、レーザー電場によって加速される。さらにレーザー電場の位相の反転に伴い、もとの位置まで戻ってきて分子イオンと衝突する。こうした高強度レーザーによって誘起される「再衝突過程」においては、放出される高次高調波や光電子が分子の構造についての情報を含んでおり、再衝突過程を利用しアト秒領域の超高速「分子イメージング」について数多くの研究がなされている。最近、分子イメージング法を確立するためには、最初のステップであるトンネルイオン化の精確な記述が重要視されてきた。受け入れ研究グループでは、静電場中の原子のトンネルイオン化に関して「シーガート法」という新しい計算手法を開発した。そこで、本研究では、このシーガート法をより複雑な分子系へと拡張し、トンネルイオン化の配向依存性について分析を行った。シーガート法によって強電場中の分子の量子状態を精確に計算するコードを開発し、最も基礎的である水素分子イオンH2+について、エネルギー準位(シュタルクシフト)とイオン化レートの配向依存性の研究を行った。エネルギーの最も低い基底状態と、分子軸を含む面内に波動関数の節をもつ励起状態について調べた。電場強度が小さい領域では、解析的な近似理論である、摂動論と弱電場漸近理論との比較を行った。また、分子の核間距離について、平衡核間距離に加えて大きい核間距離の結果を吟味した。得られた結果をまとめて学術雑誌に発表した。["Molecular Siegert states in an electricfield", L.Hamnou, T.Morishita, and O.I.Tolstikhin, Phys.Rev.A 86,013412(2012)]。さらに2電子系の水素分子についても理論を拡張し、予備的計算を行った。これまでの研究においては、一電子近似内の静的一様電場における原子のシーガート状態についての計算が行われている。シーガート状態は、規格化可能な散乱波境界条件を満たす定常シュレーディンガー方程式の解法と定義されている。一電子近似の範囲でさまざまな原子について複素エネルギー固有値および固有関数の計算が行われている。本研究ではシーガート法をより複雑な分子についての拡張を進めている。分子について一電子近似でのハミルトニアンを用い、静的な一様電場について。R行列法を用いて定常シューレディンガー方程式を解く。対称性を考慮して、放物線座標を用いた。R行列法では、空間を内部と外側の2つの領域に分けられる。内部領域は動径座標に沿ってNsecセクタに分け各セクタに定常状態のシューレーディンガー方程式のR行列法の基底関数を構築する。基底関数として、シューレディンガー方程式をルジャンドル離散変数表示基底で表わす。外側領域では分子ポテンシャルはクローン型に置き換えられることから、方程式の解は放物座標空間では、変数分離が可能となり、各々の変数に関して独立な方程式の解に帰着させることで、安定で高精度な計算手法を提供できる。本研究では、有効1電子近似の範囲で、強電場中の原子についてのシュレーディンガー方程式について、外向き境界条件と解の正則性を課し、複素エネルギーと複素波動関数を精確に計算するための理論と数値計算アルゴリズムを確立した。電場中の分子状態を記述するのに適した双極座標を用い、散乱理論で用いられるR行列法を複素変数に拡張した。R行列法において、離散変数表示の基底関数を用いて、遅変数離散法によって散乱チャネル間の結合を評価することによって計算精度の向上を図った。分子から十分に遠方での解析解と接続することにより、複素エネルギーを求め、その虚部であるイオン化レートを計算するプログラムを構築した。

そして、このトンネルイオン化した電子は、レーザー電場によって加速される。さらにレーザー電場の位相の反転に伴い、もとの位置まで戻ってきて分子イオンと衝突する。こうした高強度レーザーによって誘起される「再衝突過程」においては、放出される高次高調波や光電子が分子の構造についての情報を含んでおり、再衝突過程を利用しアト秒領域の超高速「分子イメージング」について数多くの研究がなされている。最近、分子イメージング法を確立するためには、最初のステップであるトンネルイオン化の精確な記述が重要視されてきた。受け入れ研究グループでは、静電場中の原子のトンネルイオン化に関して「シーガート法」という新しい計算手法を開発した。そこで、本研究では、このシーガート法をより複雑な分子系へと拡張し、トンネルイオン化の配向依存性について分析を行った。シーガート法によって強電場中の分子の量子状態を精確に計算するコードを開発し、最も基礎的である水素分子イオンH2+について、エネルギー準位(シュタルクシフト)とイオン化レートの配向依存性の研究を行った。エネルギーの最も低い基底状態と、分子軸を含む面内に波動関数の節をもつ励起状態について調べた。電場強度が小さい領域では、解析的な近似理論である、摂動論と弱電場漸近理論との比較を行った。また、分子の核間距離について、平衡核間距離に加えて大きい核間距離の結果を吟味した。得られた結果をまとめて学術雑誌に発表した。["Molecular Siegert states in an electricfield", L.Hamnou, T.Morishita, and O.I.Tolstikhin, Phys.Rev.A 86,013412(2012)]。さらに2電子系の水素分子についても理論を拡張し、予備的計算を行った。分子のシーガート法に基づく計算コードの開発を行い、その収束性等のチェックを行った。シーガート法に基づく計算コードを利用して、水素分子イオンなどの基礎的な分子のイオン化レートの配向依存性について調べていく。
知識システム群の協調メカニズムに関する基礎研究

(1)新しい協調メカニズムの設計とその評価:本研究の報告者らは,計算機による談話理解技術と知識システム群による協調メカニズムの類似性に着目し,協調メカニズムをもつ知識システムのモデルを設計し,それに基づいた知識システム群を実装してきた.このモデルの問題点は,「知識システム群の協調的な振舞いの根源は各知識システムの推論メカニズムに有り」との立場から設計されていることから,モデルが複雑なものとなっていること,および知識システムが環境に対して適応的に振舞えないことである.本研究では「協調メカニズムはこのような複雑な推論メカニズムよりはむしろ各知識システムの経験的知識の蓄積に有り」との立場から,協調的問題解決事例に基づくモデルを設計し,少数の知能ロボット群の分散的かつ協調的な制御問題への適用を通して,その簡潔性および環境への適応性などを確認した.(2)協調プロトコル再構成メカニズムの要素技術の検討:協調プロトコルの再構成には,パラメ-タの微調整から,知識システムへの役割の割当てや新規なプロトコルの生成に至るまでの種々のレベルのものがあり,そこで適用すべき要素技術そのレベル毎に異なってくる.本研究では特に(A)プロトコルの骨格は固定したままパラメ-タの最適化を行なうための要素技術(主としてニュ-ラルネットおよび適応制御に関するもの)および(B)新規なプロトコルを経験的に獲得するための要素技術(主としてエピソ-ド記憶に関するもの)に焦点を当て,それらの適用可能性について検討を行なった.(1)新しい協調メカニズムの設計とその評価:本研究の報告者らは,計算機による談話理解技術と知識システム群による協調メカニズムの類似性に着目し,協調メカニズムをもつ知識システムのモデルを設計し,それに基づいた知識システム群を実装してきた.このモデルの問題点は,「知識システム群の協調的な振舞いの根源は各知識システムの推論メカニズムに有り」との立場から設計されていることから,モデルが複雑なものとなっていること,および知識システムが環境に対して適応的に振舞えないことである.本研究では「協調メカニズムはこのような複雑な推論メカニズムよりはむしろ各知識システムの経験的知識の蓄積に有り」との立場から,協調的問題解決事例に基づくモデルを設計し,少数の知能ロボット群の分散的かつ協調的な制御問題への適用を通して,その簡潔性および環境への適応性などを確認した.(2)協調プロトコル再構成メカニズムの要素技術の検討:協調プロトコルの再構成には,パラメ-タの微調整から,知識システムへの役割の割当てや新規なプロトコルの生成に至るまでの種々のレベルのものがあり,そこで適用すべき要素技術そのレベル毎に異なってくる.本研究では特に(A)プロトコルの骨格は固定したままパラメ-タの最適化を行なうための要素技術(主としてニュ-ラルネットおよび適応制御に関するもの)および(B)新規なプロトコルを経験的に獲得するための要素技術(主としてエピソ-ド記憶に関するもの)に焦点を当て,それらの適用可能性について検討を行なった.
中世伊勢神宮史の基礎的研究

筆者は、中世伊勢神宮や伊勢神道を扱った従来の研究が、神宮の社会経済史ならそれのみを、また神道思想ならそれだけを取り上げて検討する傾向に疑問を感じ、中世伊勢神宮史を踏まえた上で、神宮及びその周辺のことを体系的に関連づけてみたい、と考えてきた。このような視点に立って、3年間の研究期間中に、研究課題を遂行するために必要な基礎作業と、事実関係の確認を試みた。その概要としては、まず伊勢神宮史にとって重要な時期であった鎌倉初期の文治建久年間と、鎌倉中期の弘安年間を重点的に検証した。そして、それらの時に、神宮祠官が活発に仏者などと交流していることを明らかにし、伊勢神道史上において、重要な時期であったことを確認した。同時期は、また遷宮の点でも留意すべき時で、前者の時期には神宮作所が必ず置かれるようになったこと、後者の時には、鎌倉幕府に遷宮財源の一部の装束神寳用途の徴収を依存するようになっていること、などを明らかにした。初期伊勢神道書が文治建久の頃には成立していた確証は依然つかめていないが、可能性は高い。さらに、神宮作所の分析を通じて、内宮祠官と外宮祠官が対立していたとする通説を否定し、度会行忠がその作所職に就いていた意味を問うた。また、神宮と鎌倉幕府や朝廷との関係についても考察を加えた。神宮祭主の補任状況や、遷宮時の役夫工上卿の補任またその家系などについても概観したが、意味づけはやや不十分であり、今後の課題として残った。以上のような諸検討とともに、前期伊勢神道に関する研究史の整理を試み、あわせて中世伊勢神宮史略年表を作成した。まず、古代から中世への変革期とみられる文治建久年間(11851199)の神宮を分析し、神宮に関する案件が京都の朝延で極めて重視されている様子を概観した。そして、開府間もない鎌倉幕府もまた、初代将軍・源頼朝に神宮尊重の気持ちが強く、建久年間の諸遷宮は、朝廷と幕府が良く協調して実施されたことを明らかにした。これは、神宮側の祭主、宮司また祠官達に、強い自覚を促したことが容易に類推できるものである。次に、このような頼朝の神宮重視の姿勢が何に影響されどのように形成していくのかを、鎌倉幕府の基本史料である『吾妻鏡』から、伊勢神宮関係記事を抽出することによって検討を加え、頼朝のそれが、彼の伊豆配流中に東国に下向していた神宮祠官との交流を通じて形成されていく様子を、源氏嫡流に近い波多野氏に焦点をあてて論じた。しかし、頼朝以後は急速に神宮祠官と将軍家との関係が希薄になっており、逆に、神宮側としてもそれでは困ると考えたのであろうか、六波羅探題や、ことには幕閣で重きをなした安達氏に何らかの期待するところがあったことを明らかにした。また、その成立時期を中心に、抜本的に見直しを進める必要がある伊勢神道(思想)について、これまでの研究史をまとめつつ、その問題点を明らかにすると同時に、今後の課題を指摘した。ことに、上記の如く、平安後期から鎌倉初期にかけての神宮側の自覚が、伊勢神道説の形成と何らかの関係があることが予測されることは、今後解明せねばならない重要な論点である。また、守覚法親王など、当該期の仏教界の中心人物やその周辺との接点も、さらに探っていかなければならないテーマである。続いて、従来研究の少ない鎌倉期の祭主について、鎌倉中後期にかけて、それがしばしば交替している理由を問うた。それを明らかにすることは困難だったが、南北朝期に、醍醐三宝院門跡がこの祭主補任に関与している事例があることを示し、かかることが問題解明の鍵を握っていそうなことを指摘した。

なお、『大日本史料』第四編、第五編(既刊分)、第六編(既刊分)より、伊勢神宮関連の網文を選び出して年表を作成した。基礎作業としては、中世伊勢神宮史の詳細な年表を作成すべく、昨年度に引き続いて『大日本史料』及び『史料綜覧』から、伊勢神宮関連の綱文を選び出して年表を作成し、補足した。さらに、『鎌倉遺文』のなかから神宮関係文書の蒐集整理につとめ、ここでもまとまった事件や事柄と思われるものについては一部綱文化を試みた。『三重県史』資料編として既に中世関係の2冊が刊行されているが、それはまた神宮文庫及び神宮徴古館また同農業館が所蔵する文書を活字化したものであり、今回学界に初めて提供されたものも少なくないので、これについても一部綱文化の作業を進めた。次に、伊勢神宮側で、20年に一度の遷宮の際に、次回以降の遷宮の参考に供する目的で、日記や日次記また関連文書を整理しつつ編纂された中世の各遷宮記に順次あたり、なかでも遷宮実務を直接担当した「作所」職の存在に注目し、分析検討を加えた。その結果、鎌倉期の場合であるが、内宮遷宮時の「内宮作所」に、意外にも、外宮祠官度会氏のなかからその職に補任されている複数の事例を得た。このことは、内宮遷宮行事が、内宮祠官荒木田氏だけではなしに、外宮祠官度会氏その他の全面的な協力のもと実施されたことを窺わせるものであって、従来からいわれているような、万事を内宮と外宮に分けて考え、また両宮祠官が対立関係にあったとする見方を覆すに足る十分な論拠となり得るものである。さらに、遷宮に際しての「祭主使」や「内宮使」にも、度会氏の補せられている事例を抽出、外宮祠官度会氏でありながら「内宮権禰宜」である人物の存在を確かめ、以上の見方を補強し、論文化した。基礎作業としては、中世伊勢神宮史の年表を完成すべく、昨年度に引き続いて『大日本史料』及び『史料綜覧』から、伊勢神宮関連の綱文を選び出して年表を作成し、補足した。次に、中世伊勢神宮遷宮神寳用途の徴収に鎌倉幕府がどのように関与しているかを分析した。その結果、鎌倉中期までは朝廷側でどうにか賄っていたものが、文永また弘安の正遷宮時に幕府に一部負担してもらうようになり、次の嘉元時には相当程度を幕府に依存している状況を確認した。同様なことは、一国平均役の造伊勢大神宮役夫工米制度にもある程度あてはまることかと考え、朝廷側でそれを担当していたとおぼしき役夫工上卿の検出を試みた。さらに、3年の研究のまとめとして、中世伊勢神宮史に関する戦後の研究動向やそれにともなう諸課題を概観し、また神宮と朝廷(京都)、幕府(鎌倉)の関係についても、上記の役夫工上卿を中心として神宮上卿、神宮伝奏なども含めて、それらの設置や補任状況を検討しつつ、若干の考察を加えた。そして、遷宮行事を介して、中世にあっては神宮と朝廷また幕府が協調していること、従来は対立関係ととらえる視点に立ってきたため見落とされていた内外両宮祠官が良く協力していること、度会行忠による伊勢神道思想の提唱が文永弘安期という遷宮財政の転換期になされたことは偶然とは言えないであろうこと、をこれらの諸検証を通じて明らかにした。鎌倉期から南北朝期にかけての伊勢神宮をめぐる研究は、これらの諸点が判明したことによって、新たな段階に入るのではなかろうか。
近代日本における反宗教運動と仏教の論争についての基礎的研究

報告者は、近代日本における反宗教運動と仏教の論争を研究課題として、その論争の全体像を再構成すべく史料を調査・発掘し、蒐集した史料の分析作業を進めた。分析の結果、1マルクス主義の宗教批判は宗教者の社会的立場に集中していたこと、2仏教徒による宗教批判への応答は、宗教の内面的・精神的次元を強調するものであったこと、3したがって反宗教運動と仏教との論争が理論的次元では全くかみ合っていなかったこと、4反宗教運動が宗教界に衝撃を与えたのは、宗教者の社会的地位や経済的優位性に対する不満が社会に広範に存していたからであったこと、をあきらかにした。近代日本における反宗教運動と仏教の論争の全体像をあきらかにするという目的のもと、2013年度は、1反宗教運動の関係史料の調査・蒐集、2マルクス主義の衝撃を受けた人々による宗教批判、3マルクス主義の宗教論に対する批判、という3点から研究を進めた。1については、龍谷大学図書館・法政大学大原社会問題研究所・東京大学近代日本法制史料センターなどの関係機関への出張などを通して、貴重な史料を数多く蒐集することができた。反宗教闘争同盟準備会と日本反宗教同盟など、反宗教運動の中心的役割を果たした運動体の機関誌については目録を作成した。2については、「戦後親鸞論への道程ーマルクス主義という経験を中心にー」(『仏教文化研究所紀要』第52集、龍谷大学仏教文化研究所、2014年)と題した論文を執筆し、そのなかで1930年の『中外日報』紙上における三木清と服部之総による「マルクス主義と宗教」論争と、反宗教運動のなかで形成された親鸞像について考察を加えた。反宗教論の理論的次元の検討は、おそらくこの三木・服部論争が頂点であり、その後の反宗教論が、眼前の現実との格闘を経ずに、宗教=阿片論を機械的に振り回す教条的性格を脱しえなかったと指摘した。ただし、具体的にどのような議論の応酬がったのか、あるいは運動がどう展開したのかについては、引き続き分析・検討する必要がある。3については、上記の論文で、反宗教論を積極的に受容した妹尾義郎と柏木義円を分析したほか、戦後にマルクス主義の宗教論に対する批判を通じて、みずからの仏教史研究の方法を構築していった二葉憲香の親鸞論を検討し、龍谷大学仏教文化研究所第4回談話会、日本宗教学会第72回学術大会(於國學院大学)その他で報告した。また、そのほかに、『天皇制国家と「精神主義」ー清沢満之とその門下ー』(法藏館、2013年6月)と題した単著を刊行し、研究成果を世に問うた。2014年度は、前年度に引き続き、資料蒐集を進めるとともに、その成果を踏まえて、以下の研究発表・原稿執筆を行った。まず、5月17日に龍谷大学アジア仏教文化研究センター・2014年度第1回国内シンポジウム「近代日本仏教と親鸞」で、「親鸞と社会主義ー解放と阿片ー」と題して報告した。この報告は、龍谷大学アジア仏教文化研究センター発行の『近代日本仏教と親鸞』に同題の論文として掲載された。本稿は、社会主義との関連で描き出された親鸞像を辿りながら、明治末年から戦後までの親鸞論のひとつの系譜を描き出し、戦後親鸞論へ流れ込む水脈のひとつを浮かび上がらせたものである。また、9月13日には日本宗教学会第73回大会で「近代日本における反宗教運動と仏教の論争」と題する報告を行った。同題の報告要旨が『宗教研究』第88巻別冊に掲載された。さらに、12月13日に国際ワークショップ「アジア仏教:複数の植民地主義と複数の近代性ー第3回ワークショップ」(Asian Buddhism:Plural Colonialisms and Plural Modernities)で、"Marxism and Buddhism in Modern Japan:The Anti-Religion Movement"と題して報告した。両報告では、1930年代のマルクス主義者と仏教界との論争を分析・検討し、マルクス主義者が1920年代後半より、海外から導入した宗教批判理論(宗教=阿片論)に基づき、反宗教運動を出発させたのに対し、仏教界からは歓迎論から全面否定論まで様々な反応があったことをあきらかにした。そして、反宗教運動を批判する仏教徒の議論から、当時の典型的な仏教理解を抽出した。思想史初年度は、反宗教闘争同盟準備会および日本反宗教同盟など、1930年代に出発した反宗教運動の関係史料の蒐集を中心に行った。これについては、関係機関の協力もあって、貴重な史料を多く蒐集できた。特に、福嶋寛隆氏(龍谷大学名誉教授)と中西直樹氏(龍谷大学教授)の協力によって、史料蒐集については当初予定していた以上の成果を上げることができた。他にも、法政大学大原社会問題研究所での調査では、研究所の客員研究員をつとめる大谷栄一氏(佛教大学准教授)の協力のもと、多くの関係史料の蒐集に成功した。

以上の成果を踏まえ、重要な史料については目録を作成することができた。反宗教運動の関係史料の蒐集には大きな成果があったが、仏教徒による反宗教運動批判の関係史料については、今後も継続して蒐集に努める必要がある。ただし今後は、蒐集した史料の分析作業を本格化しなければならない。すでに中西直樹氏(龍谷大学教授)や斎藤信行氏(龍谷大学非常勤講師)らの協力もあり、蒐集した史料の整理を進めているので、早急に分析作業に着手したいと考えている。2014年度も、いくつかの研究会や学会での研究発表も予定しているので、そうした機会を活用しつつ、論文等の成果にまとめる予定である。残額があまりに少額であったため、本研究に相応しい使用方法および今年度中に使用しなければならない必然性がないと判断した。上記のような理由なので、使用計画に大きな変更はない。
遺伝子解析に有効なホルマリン固定・パラフィン包埋標本の作製法の開発

DNAの低分子化を抑制するホルマリン固定液の処方を目的とし、種々のホルマリン固定液(10%v/v)により組織を固定し、抽出されるDNAサイズおよび各種ローカスのアリル増幅に対する影響を検討した。9年度:(1)ホルマリン、(2)中性緩衝ホルマリン(いずれも10%v/v)を対照とし、これにEDTA〈5mM、50mM)、MeOH(10%)、NaCl(150mM)およびFlavonoid(1%、2.5%)を各々添加した固定液でのヒト臓器組織中のDNAの保存性(1.2kbp以上のDNAの定量)およびDlS80ローカスの増幅を検討した。EDTA、NaClおよびFlavonoid添加群の順にDNA分解抑制効果があり、7日以内の固定でいずれも鋳型として必要なサイズのDNAが残存し、アリル増幅も良好だった。11年度:組織DNAの保存効果が良好であったEDTAおよびNaCl添加の2種類に限定して、2年間固定を続けたところ、長期固定中(最長2年)の臓器(肝、腎、肺)については、EDTA添加群が最も良好で1.2kbp以上のDNAも相当量残存していた。剖検体の実際例を想定して、ややDNA分解の進行した臓器についても検討したところ、添加濃度は、腐敗の進んだ組識に対処するためにも5mMが適当と考えられた。DNAをサイズ別に分画採取しTemplateとすると、1.2kbp以上のDNAが採取された場合にはDlS80型の判定が、500bp以上のDNAが残存していた場合には、TPOX,vWA,THOl型いずれのalleleも増幅できた。以下の12種類のホルマリン固定液(濃度はすべて10%v/v)により組織を固定し、DNAの保存性およびD1S80型のアリル増幅に対する影響を検討した。(1)ホルマリン、(2)中性緩衝ホルマリン、(3)50mMEDTA加中性ホルマリン、(4)50mMEDTA加中性ホルマリン+Flavonoid、(5)中性緩衝ホルマリン+Flavonoid、(6)150mMNaCl加中性緩衝ホルマリン、(7)マイルドホルム(和光)、(8)50mMEDTA加マイルドホルム、(9)150mM NaCl加マイルドホルム、(10)Flavonoid 1%加マイルドホルム、(11)Flavonoid 2.5%加中性緩衝ホルマリン、(12)5mMEDTA加中性緩衝ホルマリン【結果】48時間固定でのgenomic DNAに対する保存性は(1)はDNAが消失し、(7)ではDNA収量の著しい減少を認めた。その他の固定液では分解が進行しなかった。DNase I活性に対する抑制効果はEDTAおよびFlavonoidに認められた。組織内DNAの保存性は、EDTA、NaClおよびFlavonoidそれぞれにDNA分解抑制効果が認められた。D1S80のアリル増幅(24,31)を行うと、(5)、(6)、(8)および(9)で固定した組織内のDNAは比較的安定で、型判定が可能であった。今後、STR、アメロゲニン、AB0遺伝子型の判定も検討する予定である。9年度は12種類のホルマリン固定液(濃度はすべて10%v/v)(1)ホルマリン、(2)中性緩衝ホルマリン、(3)50mMEDTA加中性ホルマリン、(4)50mMEDTA加中性ホルマリン+Flavonoid(1%)、(5)中性緩衝ホルマリン+Flavonoid(1%)、(6)150mMNaCl加中性緩衝ホルマリン、(7)マイルドホルム、(8)50mMEDTA加マイルドホルム、(9)150mM NaCl加マイルドホルム、(10)Flavonoid