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戦後日本政治形成に関する断絶性又は連続性 -アメリカとの関連性とその比較-

本調査研究は、「戦後日本政治形成に関する断絶性又は連続性-アメリカとの関連性とその比較-」を課題とするものである。この課題遂行にあたって立てられたアメリカでの関係資料の調査・収集及び関係者へのインタヴュー計画を、以下の要領で今般実施したのでここに報告する次第である。1.塩崎:アメリカの対日政策立案と、それに関連する対日情報収集、対日人脈ネットワーク等にみられる戦前・戦中期から戦後期にかけての断絶性又は連続性に関する資料調査・収集を行った。〈調査・収集資料と機関〉外交問題評議会対日関係資料(外交問題評議会文書室)、フォード財団対日関係資料(フォード財団文書室)、カ-ネ-ギ平和財団・太平洋問題調査会対日関係資料(コロンビア大学文書室)、ロックフェラ-財団対日関係資料(ロックフェラ-文書センター)、シェパ-ドソン文書(ローズベルト図書館)、外交政策協議会対日関係資料(ウィスコンシン州歴史協会)、コールグローブ・マクガバン文書(ノースウェスタン大学文書室)。2.木村:日本の特に地方の政治団体や商工会議所に代表される経済団体に関するアメリカ側の戦前と戦後の関連資料の調査・収集及び関係者へのインタヴューを行った。〈調査・収集資料と機関〉ジャパン・ソサィティ関係資料(ジャパン・ソサィティ文書室)、日本の地方政治・経済団体に関するアメリカ側関係資料((ニュヨ-ク市立図書館),〈インタヴュー〉フォーブス夫人他日米通商評議会関係者2.山室:日本の政治イデオロギー又は政治活動に関するアメリカ側の戦前と戦後の関連資料及びアメリカ側所蔵の日本関係資料の調査・収集を行った。〈調査・収集資料と機関〉日系アメリカ人関係資料(日系アメリカ人博物館、ロサンゼルス市立図書館、カリフオルニア大学ロサンゼルス校)、日本内務省関係資料(米議会図書館)、戦前期日本の新聞・雑誌(メリ-ランド大学プランゲ文庫)、太平洋問題調査会日本関係資料(コロンビア大学文書室)、外交問題評議会日本関係会議録(外交問題評議会文書室)、外交政策協議会日本関係会議録ウィスコンシン州歴史協会)、大山郁夫文書(ノースウェスタン大学文書室)4.福永:日本の政党政治及び選挙制度に関するアメリカ側の戦前と戦後の関連資料及び占領改革に係わるアメリカ側所蔵の日本関係資料の調査・収集及び関係者へのインタヴューを行った。〈調査・収集資料と機関〉サザ-ランド文書(米国立公文書館)、ウィロビ-文書(ゲチスバーグ大学文書室)ウィロビ-・リッジゥェイ文書(米陸軍戦史研究所)、ケ-ディス・ウィリアムズ文書(メリ-ランド大学文書室),〈インタヴュー〉S.ファィン、C.ケ-ディス。5.季武:日本の政治家又は政治構造に関するアメリカ側の戦前と戦後の関係資料及びアメリカ側所蔵の日本関係資料の調査・収集を行った。〈調査・収集資料と機関〉戦前期の日本政治関係資料(サンフランシスコ市立図書館、カリフォルニア大学ロサンゼルス校)、太平洋問題調査会日本関係資料(コロンビア大学文書室)、外交問題評議会対日調査関係資料(外交問題評議会文書室)、占領期日本の地方新聞(メリ-ランド大学プランゲ文庫)、日本内務省関係資料(米議会図書館)、ローズベルト大統領個人文書(ローズベルト図書館)、外交政策協議会対日調査関係資料(ウィスコンシン州歴史協会)。以上、本研究組織の役割分担によってえられた資料収集、インタヴュー等の成果を鋭意分析した上で、現在学術報告が果たせるように準備中である。また調査・収集した関係資料及びインタヴュー等を整理・分類し、広く関係者の利用に応えるべく合わせて準備中である。〈調査・収集資料と機関〉日系アメリカ人関係資料(日系アメリカ人博物館、ロサンゼルス市立図書館、カリフオルニア大学ロサンゼルス校)、日本内務省関係資料(米議会図書館)、戦前期日本の新聞・雑誌(メリ-ランド大学プランゲ文庫)、太平洋問題調査会日本関係資料(コロンビア大学文書室)、外交問題評議会日本関係会議録(外交問題評議会文書室)、外交政策協議会日本関係会議録ウィスコンシン州歴史協会)、大山郁夫文書(ノースウェスタン大学文書室)

4.福永:日本の政党政治及び選挙制度に関するアメリカ側の戦前と戦後の関連資料及び占領改革に係わるアメリカ側所蔵の日本関係資料の調査・収集及び関係者へのインタヴューを行った。〈調査・収集資料と機関〉サザ-ランド文書(米国立公文書館)、ウィロビ-文書(ゲチスバーグ大学文書室)ウィロビ-・リッジゥェイ文書(米陸軍戦史研究所)、ケ-ディス・ウィリアムズ文書(メリ-ランド大学文書室),〈インタヴュー〉S.ファィン、C.ケ-ディス。5.季武:日本の政治家又は政治構造に関するアメリカ側の戦前と戦後の関係資料及びアメリカ側所蔵の日本関係資料の調査・収集を行った。〈調査・収集資料と機関〉戦前期の日本政治関係資料(サンフランシスコ市立図書館、カリフォルニア大学ロサンゼルス校)、太平洋問題調査会日本関係資料(コロンビア大学文書室)、外交問題評議会対日調査関係資料(外交問題評議会文書室)、占領期日本の地方新聞(メリ-ランド大学プランゲ文庫)、日本内務省関係資料(米議会図書館)、ローズベルト大統領個人文書(ローズベルト図書館)、外交政策協議会対日調査関係資料(ウィスコンシン州歴史協会)。以上、本研究組織の役割分担によってえられた資料収集、インタヴュー等の成果を鋭意分析した上で、現在学術報告が果たせるように準備中である。また調査・収集した関係資料及びインタヴュー等を整理・分類し、広く関係者の利用に応えるべく合わせて準備中である。
HTLVーI産生細胞におけるIa抗原発現に関する免疫電顕的研究

HTLVーI産生又は非産生性T細胞株につき、ABC法を用いて、HLAーD抗原やT細胞受容体の発現状況を主体に免疫電顕法により検索した。まず、ウイルス産生性長期培養T細胞では、OKIal、HLAーDR、ーDPやーDQ抗体はいずれも、ILー2レセプタ-抗体と同様に細胞膜表面やウイルス被膜に陽性であるが、CD3やCD4は殆ど陰性であった。又、T細胞受容体については、TCRα/β抗体やα鎖抗体は陰性であったが、β鎖抗体はごく々一部の細胞にて粗面小胞体や被膜に陽性であった。HAMに由来したウイルス産生性T細胞では、OKIalやHLAーDR抗体、ILー2レセプタ-抗体の他にCD3も陽性でありウイルス被膜も標識された。CD3は、細胞表面の他に核膜や粗面小胞体に陽性であった。興味深い事に、TCRα/β抗体は、ごく一部に陽性を示すのみであったが、β鎖抗体は、核膜や粗面小胞体に陽性、α鎖抗体は全く陰性という結果を得た。即ち、CD3のみ発現が強く、TCRのαやβ鎖については、βのみ存在するというデ-タを得た。正常人やHTLVーI抗体価陽性キャリア-については、α鎖、β鎖各抗体共に核膜や粗面小胞体にのみ陽性であり、TCRα/β抗体は細胞表面のみに反応を認めた。これらの結果から、HTLVーl産生細胞においては、ウイルス被膜はTCRαーβ、α鎖、β鎖いずれでも標識されない。CD3とTCRα/βの発現には解離がみられるが、HLAーDやILー2レセプタ-は常に発現しており、TCRα/βについては、まずα鎖が減弱消失し、ついでTCRα/βは陰性となり、β鎖のみがかなり長期間胞体内に検出され続けるという経過をとることが明らかとなった。ウイルス被膜上の抗原発現については、HLAーD、ILー2レセプタ-の他に、CD3やCD4は細胞膜に認められる限りにおいて被膜上にも存在し得るという結果を得た。TCRのαやβ鎖については、分子生物学的デ-タを支持する結果であった。
微小構造体の量子光学

この企画調査では,量子光学現象を利用した能動素子がフォトニック結晶中に配列されることを前提として,実現され得る光学回路の特性,および,従来法と比較したときの得失を調べた。また,この結果に基づいて能動素子設計の基礎に関する国際共同研究を企画した。具体的には,まず,下記の調査を行って素子設計ならびに素子作製技術の現状を調べた。(A)文献調査:学術文献データベースによる文献検索,(B)国際会議・国内学会での情報収集(1)CLEO国際会議(ボルチモア,平成11年5月)(2)CLEO環太平洋国際会議(ソウル,平成11年8月)(3)秋季物理学会(盛岡,平成11年9月),(4)PECS国際会議(仙台,平成12年3月)(5)春期物理学会(吹田,平成12年3月),(C)内外の大学・研究機関の訪問調査(1)信州大学武田三男教授,谷口彬教授,(2)ドイツ・カールスルーエ大学K.Busch研究員(3)ドイツ・マックスプランク研究所W.Hergert教授,R.Wehrspohn研究員(4)スペイン・バレンシア科学技術大学F.J.Meseguer教授(5)スペイン・マドリード大学J.Sanchez-Dehesa教授その結果,光波領域(波長1μ以下)で機能するフォトニック結晶の作製と受動素子として特性解析が進展する一方,能動素子としての特性解析は緒についたばかりであることが判った。そこで,量子光学現象に関する理論研究に力点を置いて研究を進めているカナダ・トロント大学のS.John教授と共に,能動素子設計に関する国際共同研究を企画し,基礎研究(B)として提案した。
造血系悪性腫瘍における低酸素反応性とアポトーシス耐性獲得機構の分子解析

細胞の癌化過程で最も深刻な悪性獲得形質は、細胞の無秩序な増殖能と細胞死シグナルの無能力化によるアポトーシス耐性能である。本研究では、造血系悪性腫瘍細胞におけるミトコンドリア由来内因性アポトーシス経路の無能力化機構および低酸素環境下での細胞機能維持機構を解析し、殺癌より制癌作用を発揮する分子標的薬の探索を行い、NF-κBの活性化によりアポトーシス耐性が誘導されるメカニズムや低酸素反応性因子(HIF)とのクロストークに関して解析した。1.Bcl-2ファミリータンパクの発現と相互作用の解析イヌ及びヒトの造血系悪性腫瘍細胞株に関して、様々なBcl-2ファミリータンパクの発現動態とその相互作用を、ウェスタンブロット法、免疫沈降法、免疫染色法を用いて解析し、細胞種による主たるアポトーシス抑制性及び促進性Bcl-2ファミリータンパクの組み合わせを探索した。特に肥満細胞腫瘍では、細胞周期調節因子サイクリンD3が高発現しており、そこにサイクリン依存性キナーゼ2あるいは4が結合して細胞周期を進行させていること、およびアポトーシス抑制性Bcl-2ファミリータンパクのうち特にMcl-1の発現が高いことなどが、動物種を問わず確認された。2.低酸素反応性遺伝子解析造血系悪性腫瘍細胞株を正常酸素濃度下または低酸素濃度下で培養し、低酸素反応性因子(HIF)の発現や関連遺伝子の発現動態を調べた。また、シグナル伝達経路の阻害により、低酸素濃度下における反応がどのようなシグナルカスケードで誘導されるのか、プロテインアレイ法で解析している。さらに、免疫不全マウスを用いた移植実験系とレーザードップラー血流画像化装置を用いて、経時的に移植した癌組織における血流量の変化を調べるとともに、移植マウスから様々なタイミングで腫瘍サンプルを採取して低酸素反応性転写因子群(HIF)やその制御下にある血管増殖因子などの発現動態を網羅的に解析した。得られた成果は第148回日本獣医学会で発表するとともに、学術雑誌に論文として掲載され、さらに現在論文投稿中の研究成果もある。1)Bcl-2ファミリータンパクの制御研究・造血系悪性腫瘍細胞株を用いて、発現の亢進するアポトーシス抑制性Bcl-2ファミリータンパクや、それに対応するアポトーシス抑制性BH3-onlyタンパクに関し、細胞周期進行やアポトーシス耐性への関与を解析している。・肥満細胞腫で特に発現が亢進するcyclin D3について、数種のsiRNAを作製し、予備試験を実施、阻止効率の高いsiRNAを選択している。・本学動物医療センターにて、臨床症例から提供を受けた造血系悪性腫瘍組織におけるBc-2ファミリータンパクの発現プロファイルを解析している。2)低酸素反応性分子及び関連因子の発現動態解析・HIFに対するsiRNAを設計、低酸素濃度下のin vitro実験系に導入してHIF抑制効果を確認した。また、当該siRNAがin vivoでも効果を発揮することをマウスやラットのモデルで確認した。免疫不全マウスへの移植実験系を用いて、経時的に癌組織における血流量の変化や浸潤・拡大動態を、経時的に調べた。また、様々なタイミングで腫瘍サンプルを採取して低酸素反応性転写因子群やその制御下にある血管内皮増殖因子などの発現動態をクロマチン免疫沈降法やリアルタイムRT-PCR法で検索し、血管新生にbFGFやHGFの発現が重要な役割を果たしていることを突き止めた。1.Bcl-2ファミリータンパクの制御研究1)造血系悪性腫瘍細胞株を用いて、発現の亢進するアポトーシス抑制性Bcl-2ファミリータンパクや、それに対応するアポトーシス抑制性BH3-onlyタンパクに関し、細胞周期進行やアポトーシス耐性への関与を解析し、肥満細胞腫株では、Mcl-1の発現亢進とMcl-1と結合してその機能を抑制するBimの発現低下が認められ、これが無秩序な細胞周期進行に関与している可能性が示された。2)細胞死誘導効果が比較的低く細胞周期停止効果の高い標的分子としてD型サイクリンに着目し、その活性を阻害したところ、肥満細胞腫細胞の増殖が抑制された。3)細胞株を用いて得られた結果を自然発症例でも起こっている事象であることを確認するために、本学動物医療センターにて、臨床症例から提供を受けた肥満細胞腫組織におけるBcl-2ファミリータンパクの発現プロファイルを解析し、同様の結果を得た。2.グルココルチコイド感受性に関する転写制御について、肥満細胞腫細胞を用いて検討したところ、NF-kappaBの活性化とこれに連動するスプライシング因子SRp30cにより調節されていることがわかった。3.低酸素反応性分子及び関連因子の発現動態解析1)肥満細胞の低酸素培養を行い、経過時間的に細胞増殖や分化程度を調べた。この実験は現在まだ継続中であり、浮遊性の肥満細胞を低酸素培養することで接着性となり、接着因子の発現プロファイルに変化が起こることを突き止めた。3)免疫不全マウスへの腫瘍細胞移植実験系を用いて、経時的に癌組織における血流量の変化や浸潤・拡大動態を経時的に調べた。

また、様々なタイミングで腫瘍サンプルを採取して低酸素反応性転写因子群やその制御下にある血管内皮増殖因子などの発現動態をクロマチン免疫沈降法やリアルタイムRT-PCR法などで検索、FGFやHGFの高発現を確認した。
内耳機能回復におけるラセン靭帯の役割について

1.障害されたマウス内耳ラセン靭帯における細胞増殖についてマウス卵形嚢を硫酸ストレプトマイシンにて障害し、マウスの皮下に浸透圧ポンプを埋め込み、BrdUを持続投与した。障害後、一週間および二週間後のマウス内耳のラセン靭帯における細胞増殖について、免疫組織学的にBrdUを同定することにより検討した。その結果、障害されたマウス内耳ラセン靭帯において、細胞増殖が認められ、これらの反応は、内耳の可塑性に関連しているものと考えられた。2.内耳への薬物輸送システムに関する動物モデルの作成モルモットに浸透圧ポンプを埋め込み、内耳への薬物輸送システムの動物モデルを作成した。このモデルは、内耳障害を生じないことを確認した。また、前庭機能および蝸牛機能を測定する方法も開発・検討した。3.騒音負荷に対するaFGFの障害軽減効果についてaFGFを投与したモルモットにおいては、コントロールにくらべて騒音による障害が軽減された。可逆的障害を生ずる程度の騒音負荷においては効果の発現を認めたが、不可逆的な障害を生ずる強大音負荷にたいしては、はっきりとした効果は認めなかった。4.薬物輸送システムを用いたアミノグリコシド系抗生物質による内耳治療法の開発動物モデルにおいて、薬物輸送システムを用いた硫酸ストレプトマイシンの投与の効果についてまず検討した。その後、米国において実際に臨床応用されている薬物輸送システムを用い、メニエール病患者に対し検討を行なった。この結果、薬物輸送システムは広く臨床応用に用いることができることを検証した。1.障害されたマウス内耳ラセン靭帯における細胞増殖について今回、マウス卵形嚢を硫酸ストレプトマイシンにて障害し、マウスの皮下に浸透圧ポンプを埋め込み、BrdUを持続投与した。2.障害されたマウス内耳ラセン靭帯におけるFGFレセプターおよびコネクシンの発現について障害された内耳のラセン靭帯において、細胞増殖が認められた部位に、特に、FGFレセプターおよびコネクシンの発現を認めた。このことは、ラセン靭帯における線維芽細胞の細胞増殖にFGFおよびコネクシンが関与していることを示唆する所見と考えた。1.モルモット内耳鼓室階へのaFGF直接的投与によるラセン靭帯への細胞増殖効果についてモルモット内耳へ浸透圧ポンプを用い,持続的に鼓室階にaFGFを投与した.至適濃度の投与により,ラセン靭帯において線維芽細胞の増殖を認めた.これら新たに増殖した細胞が機能を持つかについて検討した.その結果,aFGF投与後一週間の時点では新たに増殖した細胞にははっきりとした酵素活性を認めないが,長期観察において検討中である.2.騒音負荷に対するaFGFの障害軽減効果についてaFGFを投与したモルモットにおいては,コントロールにくらべて騒音による障害が軽減された.可逆的障害を生ずる程度の騒音負荷においては効果の発現を認めたが,不可逆的な障害を生ずる強大音負荷にたいしては,はっきりとした効果は認めなかった.これらの作用機序について,分子生物学的に検討中である.1.内耳への薬物輸送システムに関する動物モデルの作成モルモットに浸透圧ポンプを埋め込み、内耳への薬物輸送システムの動物モデルを作成した。2.騒音負荷に対するaFGFの障害軽減効果についてaFGFを投与したモルモットにおいては、コントロールにくらべて騒音による障害が軽減された。

3.薬物輸送システムを用いたアミノグリコシド系抗生物質による内耳治療法の開発動物モデルにおいて、薬物輸送システムを用いた硫酸ストレプトマイシンの投与の効果についてまず検討した。その後、米国において実際に臨床応用されている薬物輸送システムを用い、メニエール病患者に対し検討を行なった。この結果、薬物輸送システムは広く臨床応用に用いることができることを検証した。
徳川儒学思想と外国-日本文化の多元化-

中国儒学思想の重要な概念である「礼」の本質を明かにし、近世日本の儒学思想における「礼」の発想、あるいは現代日本における人間の行動を決める規範としての「礼」という概念の使い方と対比した。さらに、ヨーロッパの思想と比較して、とりわけドイツには振る舞い方の規則を名付けるものとしてどのような言葉があったかということを調査し、中国ないしは日本の「礼」に相当する思想はあるのかという問題に取り組んだ。その結果、ヨーロッパまたはドイツには「礼」と同等のものはないことが明かになった。翻訳上の難しさは、「礼」にぴったりあてはまる言葉がないため、場合に応じて様々な言葉で訳さなければ、意味を誤ってしまうことである。どんな文化圏においても、人間の交際に関しては普遍的な法則が望まれているが(例えば孔子の「己の欲せざるところを人に施すことなかれ」、カントの「定言的命令」)、しかし、その内容である交際の法則をどのように現実化するかということは文化圏によって相違がある。ヨーロッパでは啓蒙主義の時代以来、人間は道徳的な価値を得るために、積極的に努力しなければならないとされているのに対して、日本近世の思想は伝統に固執して、個人を問題にしなかった。東洋の道徳性の要素である「礼」は宗教的ないしは儀式的な背景から生まれたが、西洋の道徳性は社会的な要請として生まれ、個人にも高い要求を出す。東洋の「礼」は、支配の手段としても、社会全体が調和的に働くためにあったが、西洋の交際形式は最終的に人間の個人としての成功のためでもあった。
真菌類の糖脂質代謝酵素の構造と機能に関する研究

s研究代表者らは、糖脂質のオリゴ糖鎖とセラミド間のグリコシド結合を加水分解する酵素(エンドグリコセラミダーゼ、EGCase)の真菌ホモログとしてエンドグリコセラミダーゼ関連タンパク質(EGCase-related protein, EGCrP1)を同定していた。また、EGCrP1が従来報告のあるEGCaseと全く異なり、グルコシルセラミドに特異的なグルコセレブロシダーゼであることを明らかにしていた。本研究では、このホモログ遺伝子が真菌に広く分布しており、特に、世界の4大真菌症(クリプトコッカス症、アスペルギルス症、ムコール症、カンジダ症)の原因菌に普遍的に存在することを見いだした。クリプトコッカスのみならず、アスペルギルス、カンジダのEGCrP遺伝子をクローニングし、大腸菌で発現させたリコンビナント酵素を用いて基質特異性等を詳細に検討した。その結果、異なる真菌に存在するEGCrPはすべてグルコシルセラミドを分解することを確認した。クリプトコッカスには、EGCrP1以外にもう1つのホモログ遺伝子EGCrP2が存在した。EGCrP2をクローニングし、大腸菌で発現して諸性質を調べたところ、本酵素はグルコシルセラミドに特異的なEGCrP1と異なり、パラニトロフェニール-β-グルコシド等にも作用する特異性の広いβ-グルコシダーゼであることが分かった。EGCrP1およびEGCrP2遺伝子の欠損したクリプトコッカスを作製したところ、EGCrP1欠損変異株では合成途上のグルコシルセラミドが蓄積するのに対して、EGCrP2欠損変異株ではエルゴステリル-β-グルコシドが蓄積することが示された。つまり、EGCrP1はin vivoではグルコシルセラミド合成の品質管理に携わり、EGCrP2はエルゴステリル-β-グルコシドの代謝に関与していることが明らかになった。EGCrP1欠損変異株は莢膜の形成異常、EGCrP2の欠損変異株は細胞分裂の異常が観察され、これらの酵素の阻害剤は抗真菌薬として有望なことが示唆された。また、EGCase Iの放線菌での大量発現系を構築し、糖脂質の構造解析に用いることを可能にした。さらに、EGCase Iのモデリングを行い、EGCase IIとの特異性の違いを構造面から明らかにした。クリプトコッカス症の原因菌Cryptococcusneoformansのグルコシルセラミド(GlcCer)は、4/8位に二重結合、9位にメチル基を持つ真菌特異的な長鎖塩基を有し、増殖や感染に重要であることが示されている。我々は真菌類のGlcCer分解酵素としてEGCase-related Protein 1 (EGCrP1)を同定した。C. neoformansのEGCrP1欠損株(EGCrP1 KO)では、二重結合やメチル基を持たない未成熟なGlcCerが蓄積することから、EGCrP1は合成系と連動してGlcCerの品質管理に関わっていることが示唆される。一方、酸性条件下ではEGCrP1 KOにおいてもGlcCer分解活性が残存していたことから、新たにGlcCer分解酵素を探索した結果、EGCrP1のホモログであるEGCrP2を見出した。大腸菌で発現させたEGCrP2は、C6-NBD-GlcCerのみならず、様々なβ-グルコシドを分解し、GlcCerのみを分解するEGCrP1とは異なる特異性を示した。EGCrP2の生物機能を明らかにするために作製したEGCrP2欠損株(EGCrP2 KO)とEGCrP1/EGCrP2二重欠損株(DKO)は、EGCrP1 KOと異なり、エルゴステリル-β-グルコシドが蓄積しており、野生株に比べて対数増殖期の後半から増殖の抑制と細胞の肥大化が観察された。また、これらの変異株の液胞は肥大化していた。以上の結果は、EGCrP2はエルゴステリル-β-グルコシドの分解(異化)経路の責任酵素であることを示している。EGCrP2の欠損は、C. neoformansの増殖に影響を与えることからEGCrP2は抗真菌薬のターゲットとしても有望と考えられる。真菌類のEGCrP1, EGCrP2の分布を詳細に調べると、EGCrP2は真菌類に広く分布し、EGCrP1はCryptococcus neoformansなど限定して存在していることが分った。また、それらのグルコシルセラミド(GlcCer)の長鎖塩基の多様性を調べると、EGCrP1を持つ真菌のGlcCerは真菌特異的な長鎖塩基(methyl 18:2)だけを持つセラミドを有しているが、EGCrP1を持たない真菌のGlcCerは合成途上の長鎖塩基(18:0, 18:1, 18:2)を持つセラミドを有していることが明らかになった。そこで、EGCrP1を持たないPichya pastrisにEGCrP1を発現させた。その結果、P. pastrisのGlcCerは、C. neoformansと同様に、真菌特異的な長鎖塩基(methyl 18:2)のセラミドのみを保有するようになった。この実験結果は、EGCrP1がGlcCer合成系と共役して未成熟な長鎖塩基を持つGlcCerを排除し、GlcCerの品質管理を行っている決定的証拠の1つと考えられる。EGCrP2のX線結晶構造解析に成功した。

エルゴステリルグルコシドとの結合モデルを作成し、エンドグリコセラミダーゼ(EGCase)とGM3の共結晶構造と比較したところ、オリゴ糖セラミドを分解するEGCaseと比較して基質クレフトの糖結合部位のスペースが極めて狭いことが明らかになり、基質特異性を構造の面から裏づけることができた。出芽酵母にEGCrP2が存在することを見出し、その精製と諸性質の検討を行った。また、遺伝子KO株を作製したところ、エルゴステリルグルコシドの蓄積と液胞の形成不全が起こることを見出した。26年度が最終年度であるため、記入しない。生化学26年度が最終年度であるため、記入しない。EGCrP1のホモログEGCrP2を同定し、その特異性を明らかにした。また、両酵素の欠損変異株を作製することで、EGCrP1はin vivoではグルコシルセラミド合成の品質管理に携わり、EGCrP2はエルゴステリルーβ-グルコシドの代謝に関与していることを示した。EGCrP1欠損変異株は英膜の形成異常、EGCrP2の欠損変異株は細胞分裂の異常が観察され、これらの酵素の阻害剤は抗真菌薬として有望なことを示した。以上のように、当初の研究計画通りに進捗していると判断した。EGCrP1, EGCrP2遺伝子のノックアウト株および両遺伝子のダブルノックアウト株の取得に成功している。これらの解析からEGCrP1はGlcCer分解酵素、EGCrP2はステリルグルコシド分解酵素と同定することができた。どちらも真菌類では初めての酵素である。EGCrPI,EGCrP2の生理機能と構造を解明し、それらの阻害剤を開発する。本年度は、EGCrP1, 2の阻害剤の探索および両酵素のX線結晶構造解析を試みる。EGCrP1,EGCrP2の局在、生理機能を調べるとともに、それらの結晶構造を解明する。低分子化合物ライブラリーを用いて、阻害剤のスクリーニングを行う。本年度は最終年となり、研究を取り纏める必要がある。取り纏めに必要な実験経費(物品費)として繰り越した。物品費として使用する。
各種感覚に対する特異的感覚情報伝達物質の存在の有無について

免疫組織学的研究より,一次知覚神経には,サブスタンスP・(SP), CGRP(Calxitonin gene-rolated peptide),ソマトスタチン等のペプチドが存在することが明らかにされ,痛覚情報との関連において注目されているものの,どの様な役割を分担しているのかは不明である.本研究では,各種感覚刺激の違いにより一次知覚神経から感覚特異性を有する情報伝達物質が遊離されるのではないかという考えにもとずき,まず歯痛伝達物質を同定する目的で歯痛伝導路の第一次中継核である三叉神経脊髄路核尾側亜核浅層領域(SpVc-I,II)にpush-pull cannulaを挿入,人工脳脊髄液にて潅流し歯髄刺激時,潅流液中に遊離される一次知覚神経含有ペプチドの同定ならびに遊離調節機構の解明を行った.1.歯髄電気刺激(40V)によりSPおよびMet-ewkophalinの著明な遊離増加が認められた. SPと同じタキキニンであり一次知覚神経にも存在が見いだされているサブスタンスK(SK)の遊離は観察されなかった.またSPとの共存が知られているCGRP遊離は歯髄刺激に伴い増加する傾向を示した.2.歯髄刺激に伴うSP遊離増加は,オピオイド前処置により抑制された.3.無刺激時,潅流液中でエピネフリンおよびセロトニン遊離が観察され,このセロトニン遊離は,モルヒネ投与により著明に増加した.4.SpVc-I,IIへのセロトニン直接投与により歯髄刺激に伴うSP遊離は著明に抑制された.以上の実験成績より歯髄伝導路の第一次中継核SpVc-I,IIでの歯髄伝達物質は主としてSPであることが明らかにされた.また,この一次知覚神経中枢端より歯髄刺激に伴い遊離されるSPは,エンケファリン系(髄節性制御機構)ならびにセロトニン系(下行性制御機構)によって調節されている可能性も明らかにされた.免疫組織学的研究より,一次知覚神経には,サブスタンスP・(SP), CGRP(Calxitonin gene-rolated peptide),ソマトスタチン等のペプチドが存在することが明らかにされ,痛覚情報との関連において注目されているものの,どの様な役割を分担しているのかは不明である.本研究では,各種感覚刺激の違いにより一次知覚神経から感覚特異性を有する情報伝達物質が遊離されるのではないかという考えにもとずき,まず歯痛伝達物質を同定する目的で歯痛伝導路の第一次中継核である三叉神経脊髄路核尾側亜核浅層領域(SpVc-I,II)にpush-pull cannulaを挿入,人工脳脊髄液にて潅流し歯髄刺激時,潅流液中に遊離される一次知覚神経含有ペプチドの同定ならびに遊離調節機構の解明を行った.1.歯髄電気刺激(40V)によりSPおよびMet-ewkophalinの著明な遊離増加が認められた. SPと同じタキキニンであり一次知覚神経にも存在が見いだされているサブスタンスK(SK)の遊離は観察されなかった.またSPとの共存が知られているCGRP遊離は歯髄刺激に伴い増加する傾向を示した.2.歯髄刺激に伴うSP遊離増加は,オピオイド前処置により抑制された.3.無刺激時,潅流液中でエピネフリンおよびセロトニン遊離が観察され,このセロトニン遊離は,モルヒネ投与により著明に増加した.4.SpVc-I,IIへのセロトニン直接投与により歯髄刺激に伴うSP遊離は著明に抑制された.以上の実験成績より歯髄伝導路の第一次中継核SpVc-I,IIでの歯髄伝達物質は主としてSPであることが明らかにされた.また,この一次知覚神経中枢端より歯髄刺激に伴い遊離されるSPは,エンケファリン系(髄節性制御機構)ならびにセロトニン系(下行性制御機構)によって調節されている可能性も明らかにされた.一次求心性線維には、substance P(SP)をはじめとして数種のペプチドが存在することが免疫組織化学的研究より明らかにされている。本研究では、これらのペプチドが感覚特異性を有する情報伝達物質として各種感覚刺激により一次求心性線維から特異的に遊離されているのではないかという考えに基づき、本年度は、主として三叉神経系の体性感覚第一次中継核である脊髄路核(痛覚と温度感覚の第一次中継核)での感覚情報伝達機構における一次求心性線維含有ペプチドの役割について検討した。雄性家兎を用い、三叉神経脊髄路核尾側亜核浅層領域にpush-pull cannulaを挿入、人工脳脊髄液にて灌流し、歯髄刺激時、灌流液中に遊離される一次求心性線維含有ペプチドの変動を検討した。1.この遊離ペプチドの同定および定量のため一次求心性線維に関連するペプチドの抗体作製を行い、met-enkephalin(met-Enk)、SPおよびsubstance K(SK)に、それぞれ高い親和性を有する抗体を得た。
LIMドメイン蛋白及びLdb2の肺発生分化・肺癌発症への関与の解析

本研究において、我々はLIMK2遺伝子及びLIMK2に結合するLdb2を単離し解析を進めた。(1)N末側の異なる2種のisoform LIMK2a・2bの組織特異的発現制御機構の解明を目指して各プロモーターを解析し、核内レセプターRORαと転写因子MZF1との関与が示唆された。LIMK2bとRORαで発現の相関が見られ、RORα遺伝子導入により、レチノイン酸存在下でLIMK2bレポーターの転写促進が認められた。一方、MZF1もLIMK2aレポーターに対し転写活性化を示し、RORα・MZF1が実際にLIMK2 isoformの発現制御に関与することが示唆された。(2)LIMK2a・2b isoformの機能的差異を正常肺上皮細胞株を用いて検討した。LIMK2発現誘導により、細胞質拡大・被膜突起形成と共に強い増殖抑制が見られ、LIMK2発現制御異常が癌発症に関与する可能性が示唆された。しかし、この作用に於いてisoform間の差異は見られなかった。(3)Ldb2の結合特異性を検討したところ、細胞質LIMドメイン蛋白に比して、核内LIMドメイン蛋白に強い特異性を示し、核内LIMドメイン蛋白の転写制御機能への関与が示唆された。又、Ldb2及び相同遺伝子Ldb1の発現を検討したところ、Ldb2の発現は正常肺組織に比して肺癌組織で低下していた。逆に、Ldb1は、正常肺組織に比して肺癌組織で強い発現が見られ、肺癌発症におけるLdb1とLdb2の機能的差異が示唆された。(4)Ldb2の肺癌発症への関与を検討するため遺伝子変異を検索したが、肺癌細胞株には遺伝子異常は検出されなかった。更に肺癌組織で検出されるLdb2 isoformを検討すべく、肺癌細胞株からcDNAライブラリーを作成して解析を進めている。我々はLIMドメインとキナーゼドメインを持つLIMK2遺伝子を単離し、このLIMK2にはN末側の異なる2a・2bの2種のisoformが存在し、各々のisoformの発現が組織特異的に制御され、癌細胞において発現制御異常が見られることを報告した。本年度は、このLIMK2 isoformの組織特異的な発現制御機構の解明を目指して、2種のisoform各々のプロモーター領域を単離し解析を進めた。転写制御部位を同定するため、各プロモーターの種々の領域を持つレポーターを作成し、レポーター解析を施行した。その結果両プロモーターに複数の転写活性化部位・転写抑制部位を認めた。LIMK2bの転写活性化領域には、一部の脳細胞の発生分化に必須と報告される核内レセプターRORαの結合部位が見られ、LIMK2b高発現細胞株においてRORαの発現が亢進していた。更に、RORα発現ベクターをLIMK2bレポーターと同時導入したところ、転写促進作用が認められ、RORαが実際にLIMK2遺伝子のisoformの発現制御に関与していることが示唆された。この転写促進はレチノイン酸存在下でのみ認められ、RORαはレチノイン酸受容体と共同して作用する可能性も示唆された。一方、LIMK2aの転写活性化領域とLIMK2bの転写抑制領域に細胞分化に関与するMZF1の結合部位が見られた。更に、MZF1を各レポーターと同時導入し解析したところ、LIMK2aレポーターに対し軽度ながら転写活性化作用を示し、MZF1もLIMK2 isoformの発現制御に関与することが示唆された。今後さらに、LIMK2遺伝子及び我々が単離したLIMドメインに結合し機能制御するヒト

Ldb2遺伝子の細胞生物学的作用を、Tet-Off発現系でLIMK2a・2bを発現誘導できる正常肺上皮細胞株等を用い検討していく予定である。我々はLIMドメイン蛋白LIMK2とLIMK2に結合するLdb2を単離し解析を進めた。(1)昨年度の検討に続き、本年度では、LIMK2遺伝子をTet-Off系により発現制御できる正常肺上皮細胞株を用いて、LIMK2遺伝子の機能解析をLIMK2a・2b isoform間で比較しつつ進めた。LIMK2を発現誘導すると、細胞質の拡大・被膜突起形成が見られると共に、強い増殖抑制が見られた。この結果から、LIMK2が細胞増殖制御に深く関与し、LIMK2発現制御異常が癌発症に関与する可能性が示唆された。この作用に於いてisoform間の機能的差異は見られなかった。(2)Ldb2のLIMドメイン蛋白との結合特異性を検討したところ、核内LIMドメイン蛋白に強い特異性を示し、細胞質LIMドメイン蛋白には弱い結合しか示さなかった。Ldb2は核に強い局在を示すことから、核内LIMドメイン蛋白の転写制御を微細に調節している可能性が示唆された。(3)Ldb2及びLdb2の相同遺伝子Ldb1の発現を検討したところ、Ldb2の発現は正常肺組織に比して肺癌組織で低下していた。逆に、Ldb1は、正常肺組織に比して肺癌組織で強い発現が見られ、肺癌発症におけるLdb1とLdb2の機能的差異が示唆された。(4)Ldb2の肺癌発症への関与を検討するため遺伝子変異の有無を検討したが、検討した肺癌細胞株24例には遺伝子異常は検出されなかった。又、Ldb2のalternative splicingによるisoformと考えられる肺癌組織でのみ検出される転写産物の癌発症への関与を検討すべく、肺癌細胞株からcDNAライブラリーを作成して、スクリーニングを進めているが、今のところLdb2 isoform由来と考えられるcDNAは単離されておらず、他の単離方法も検討している。
緑膿菌PcrV-CpG(K3)-SPGワクチンの開発と前臨床試験

人工呼吸器関連肺炎や敗血症の高頻度起炎菌である緑膿菌が多剤耐性化し、致死的な院内感染発生が頻発している。緑膿菌の病原性を抑制できる標的としてV抗原PcrVが発見された。本研究では臨床応用可能な緑膿菌PcrV・CpG-oligodeoxynucleotidesアジュバントワクチン(PcrV-CpGワクチン)を開発し、前臨床試験として安全性と有効性を確かめた。動物実験にてPcrV-CpGワクチンの経鼻投与により、緑膿菌に対する免疫効果が獲得できて、致死量の緑膿菌肺感染に対して予防効果を示すことが示された。本研究は、PcrV-CpGワクチンのヒトへの臨床応用に展望を示した。近年、多くの他の病原性グラム陰性菌と同様に緑膿菌にもIII型分泌システムの存在が発見され、緑膿菌性肺炎に続発する急性肺傷害や敗血症の病態発生に深く関わっていることが解明されてきた。加えて、III型分泌システムが関わる病原性を抑制できる標的として緑膿菌V抗原PcrVが発見され、欧米では緑膿菌感染に対してV抗原を標的とした抗体療法の開発が進められている。本研究では、ヒトへ臨床応用可能な緑膿菌PcrV・CpG-oligodeoxynucleotidesアジュバント複合体ワクチンを開発した。臨床応用の観点から、大腸菌遺伝子組み換え緑膿菌PcrVフラグメント(rPcrV139-294)を精製用のタグを分解できるシステムとして生成した。アジュバントにはCpG-ODNを用いて、ワクチンの効果をマウスに致死量の緑膿菌肺感染を起こすことで評価した。異なる投与ルート(皮下、経鼻)でワクチン投与したマウスに対して、血清中の抗PcrV抗体価を測定し、致死的な緑膿菌肺感染を引き起こし、急性肺傷害の程度や、敗血症病態、生存率を観察し、その効果を検討した。その結果、経鼻投与により致死的な緑膿菌肺感染症に対して、有意な保護効果を発揮できる免疫力が得られることが解った。すべての実験計画が順調に進んでおり、当初の予定が達成されている。緑膿菌株PAO1よりpcrV遺伝子クローニングを行い、遺伝子組換えPcrVタンパクの生成をこれまでの実験で行なってきた。遺伝子組み換えPcrV精製のためにカラム精製のためHexahistidine-tag(6xHis)付きのタンパクを用いて実験を行ってきたが、臨床応用を目指すために、精製タグを持たない遺伝子組み換えPcrV生成用のベクター作成(Tagzyme pQE2::pcrV)を行った。このタンパクの精製用のN末端6xHisタグアミノ酸配列は、IMACカラムで精製後にDAPase酵素処理にて、タグ部分を分解できる。申請者らは、このタグレス遺伝子組み換えタンパク精製システムを用いて、タグレス遺伝子組み換えPcrVの生成に成功した。今回は、全長のアミノ酸配列を含む遺伝子組み換えPcrV#1-#294で動物実験を行っているが、遺伝子組み換えPcrV#139-#294についても同様の効果が期待できるため、今後は精製効率や抗体価の上昇などの効果を判定して、臨床試験に用いる配列を最終決定する予定である。これまでの研究で、申請者の研究室にて生成した前臨床試験動物実験用の遺伝子組み換えPcrVタンパクとCpG(K3)アジュバントの混合ワクチンのマウスへの経鼻投与により、Alhydrogelアジュバント(以下Alum)との比較において、マウス緑膿菌肺炎モデルにおいて、遺伝子組み換えPcrV#1-#294ワクチンと経鼻投与による予防効果を調べた。CpG(K3)をアジュバントとして用いて、経鼻投与した群では、アジュバントを含まない群、並びにAlum群との比較において、有意な抗PcrV抗体価の上昇と、その後の感染実験での有意な生存率改善の効果が確認できた。PcrV+CpG(K3)経鼻ワクチンは、PcrV+Alum経鼻ワクチン及びアジュバントを含まないPcrV経鼻ワクチンとの比較において、有意な抗PcrV抗体価の上昇をもたらし、致死量の緑膿菌感染に対する高い免疫力を発揮することが確認できた。当初の予定通り、効果的な抗緑膿菌ワクチン・アジュバントの開発に成功している。本研究では、ヒトへ臨床応用可能な緑膿菌PcrV・CpG-oligodeoxynucleotidesアジュバント複合体ワクチンを開発し、前臨床試験として動物にて安全性と有効性を確かめた。今回開発した緑膿菌PcrVワクチン抗原は、本プロジェクトにおいて前臨床試験として動物モデルを用いて有効性と安全性を示し、今後のヒト臨床試験第1相施行に繋げていく計画である。これまでの研究でPcrVワクチンには十分な有効性が示されており、アジュバントとの組み合わせにおいて、臨床応用の適応性と安全性とを評価してきた。

近い将来的には、多剤耐性菌の発生が院内で認められた場合や、重篤な緑膿菌感染症が発生した場合、更には予防的に術後の人工呼吸管理が予想しうる大手術を受ける患者や、術前化学療法を行う手術予定の担癌患者などのハイリスク群を対象に、このワクチン療法を提供できることを目標とする。病原毒性の強い緑膿菌に対する免疫力を選択的に高め、感染が重篤化したり、院内感染が致死化・集団化しないように対処していくことにある。人工呼吸器関連肺炎や敗血症の高頻度起炎菌である緑膿菌が多剤耐性化し、致死的な院内感染発生が頻発している。緑膿菌の病原性を抑制できる標的としてV抗原PcrVが発見された。本研究では臨床応用可能な緑膿菌PcrV・CpG-oligodeoxynucleotidesアジュバントワクチン(PcrV-CpGワクチン)を開発し、前臨床試験として安全性と有効性を確かめた。動物実験にてPcrV-CpGワクチンの経鼻投与により、緑膿菌に対する免疫効果が獲得できて、致死量の緑膿菌肺感染に対して予防効果を示すことが示された。本研究は、PcrV-CpGワクチンのヒトへの臨床応用に展望を示した。短期間で有効な効果が得られるPcrVワクチンの具体的な経鼻投与方法を見つけ出し、さらに臨床応用につながるための毒性テスト等を動物モデルを用いて進めていく。さらには免疫不全マウスモデルを用いて、ワクチンの効果を判定する。臨床試験実施に向けた必要な前臨床試験の計画を推進していく。特に大型動物を用いた前臨床試験等の実施や、ヒトへの臨床使用可能なレベルの精製度の薬剤を開発するためには、本研究資金だけでは不十分であり、さらに大型の研究資金獲得に向けた努力を行う予定である。29年度が最終年度であるため、記入しない。集中治療医学、予防医学29年度が最終年度であるため、記入しない。
FPGAに実装された人工知能の支援による原子接合の作製技術と量子状態の制御

本研究では、人工知能(Artificial Intelligence: AI)を用いて金属細線でのエレクトロマイグレーション(EM)現象を制御し、金属原子を室温で一つずつ移動させることが可能な、AIに支援された原子の移動・操作技術の開発を行う。具体的には、フィードバック制御型エレクトロマイグレーション(FCE)法へのAIの適用を目指す。ここでは、AIがFCE法の実験パラメータを自律知能的に決定し、原子スケールの接点構造である「原子接合」や原子スケールのギャップ構造である「原子ギャップ」を作製する。これらの技術を応用し、原子1個数個の島電極を有する単電子トランジスタである「“単原子"トランジスタ」の実現を目指す。これより、“エレクトロマイグレーション"という簡単な手法を用いてAIに支援された原子スケールデバイス技法の開拓を行い、人間の経験に頼らない、AIを利用した単一原子機能の発現・制御手法の確立を目指す。初年度(平成30年度)では、AIシステム(学習・評価・推論エンジン)の構築とAI支援型FCE法の開発を行った。具体的には、金属細線におけるEMの発現強度を印加電圧のフィードバック手法により制御し、急激なEMの進行を抑制しながら徐々に金属原子を移動させるFCE法を開発した。さらに、FCE法での各種実験パラメータをAIに自律決定させるための学習エンジン・評価エンジン・推論エンジンを構築した。これら3種類のAIエンジンをFPGAに実装することで「AI支援型FCEカスタムハードウェア」を開発した。これより、新たにFCE実験を行うたびにデータベースが増強され、推論エンジンの学習強度が上がるため、実験を行えば行うほど、原子接合の形成により適したFCE実験の実行が可能になる。本システはFPGAに実装されており、AIの学習からFCEの実験制御までを高速なハードウェアタイミング分解能(マイクロ秒)で実行できることが明らかとなった。従来、FCE法による原子接合や原子ギャップの作製では、各種・多量な実験パラメータの調整を人間の経験や試行錯誤的な作業に頼っていた。初年度(平成30年度)は、AIによりFCE実験パラメータの自律知能的な設定を行い、人間が介在せず、過去の実験データに基づいて機械(AI)が自律的・知能的に研究や実験を遂行するシステム:AI支援型FCEカスタムハードウェアを開発した。過去50サンプル分のデータにより構成されたデータベースを用いたAu原子接合の作製実験では、本システムにより、Au細線のコンダクタンスG(量子化コンダクタンスG0(=2e2/h)で規格化)が量子化しながら200ミリ秒以内に1G0以下まで減少していることが確認された。次年度(平成31年度)では、AIの支援によるFCE法を用いた原子接合や原子ギャップの作製を行う。具体的には、FPGAに実装されたAI支援型FCEカスタムハードウェアにより、Auの金属細線に対してAI支援型FCE法を適用し、室温でのコンダクタンス量子化をその場で観測しながら原子を一つずつ移動させ、「原子接合」や「原子ギャップ」を作製する。

具体的には、FPGAに実装されたAI支援型FCEカスタムハードウェアにより、Auの金属細線に対してAI支援型FCE法を適用し、室温でのコンダクタンス量子化をその場で観測しながら原子を一つずつ移動させ、「原子接合」や「原子ギャップ」を作製する。
モンスーンアジアの生存基盤　―指標研究と地域研究の融合―

本研究では、1モンスーンアジアにおける生存基盤データベースの構築、2現地調査を踏まえた地域生存基盤指数の構築、3サステナビリティ研究をリードする海外研究機関での研究発表により持続型生存基盤パラダイムの深化とその国際的展開を推進することを主な目的としている。1については、モンスーンアジア13ヶ国における県レベルの各種資料を収集して時系列分析を可能とするために、これらの国々における19902017年の間の行政区界の変更について精査し、分析を行うための空間単位の設定とベースマップの作成を行った。次に、2012年以降更新されていなかった国レベルの生存基盤指数について、最新データを用いて更新を行った。この結果、県レベルでのデータ収集が困難なデータの存在も明らかになったが、同指数のコンセプトを維持しつつ適宜対応して来年度以降データ収集を集中的に進めてゆく予定である。2については、インド・タミルナードゥ州およびインドネシア・パプア州においてフィールドワークを行い、各地域における生存基盤に関しての知見を深めることが出来た。また、京都で2回、弘前で1回、科研研究会を開催した。この研究会で、既存の生存基盤指数に準拠した共通の質問表を作成し、これをいくつかの地域での調査に用いることで、地域生存基盤指数の構築に関する議論を活性化させてゆくことが確認された。生存基盤データベースの構築に関し、研究員・アルバイトの雇用することで対応する予定としていたが、適切な人材を確保するのに時間を要し、当初の予定ほどのデータ収集は進んでいない。ただし、3回の国内研究会と国際機関での発表に向けた準備によって、一定程度のデータ収集を完了させると共に、今後の研究推進の方向性について確認することが出来ているため、「やや遅れている」という自己評価を行うこととした。今後は、弘前大学に雇用した研究機関研究員を中心として生存基盤データベースの充実をはかっていくほか、先に述べた共通質問表を用いた現地フィールドワークを実施し、地域生存基盤指数の構築に着手する。また、国際的展開の推進に向けて、年度末にアメリカのWorld Resource Instituteで研究発表を行う予定で、現在準備を進めている。さらに、最終成果として既に構築済みのホームページの更新についての議論も開始する。分担者・連携研究者による研究の進捗報告と今後の研究推進方策について議論するために、今年度も2回程度の国内研究会を実施する予定である。
C^*環論と位相力学系の相互作用の研究

研究計画における力学系のC^*環論の側面からの研究については富山は従来の可換群の作用の研究の枠を超えて非可換群の作用の解析を行ない、力学系Σ=(X,G,α)に附随したC^*環A_Σ=C(X)XGの単純性については完全条件を得た。即ちX_Σ={xεX1tx=x}(tはGの元)とおくとA_Σが単純である必要十分条件は作用が極小でかつX_tが各十について内点を持たないことである。prime性については必要条件は得られたがまだ完全条件であることの証明にはいたっていない。一方青木の力学系そのものからの研究は拡大写像を許す距離化可能なコンパクト群の構造の決定やAnosov可微分写像等の種々の特徴のある写像の軌道構造の解析において大きな進展をみた。無理数回転環A_θに端を発するBaumーConnes予想については高井は葉層化多様体と十分滑らかな力学系について更に豊富な計算例を提示している。位相力学系Σの微分方程式また関数論的な面からの解析については限定された空間上の種々な様相について村田山下による別記の発表論文がある。C^*環A_Σは非可換な作用素環として所謂行列論的構造と呼ばれる重層構造をもちそこでの重層的順序構造の解析も欠かせないものの一つであるが富山はその面の研究も行ない関連する線形写像の正値性度を決定した。今後の課題としてはA_ΣのPrime性の完全条件を確立したい。またC^*環A_θの構造の力学系の条件についてはほとんど解析が進まなかったのでこの面で新らしい展開を望んでいる。ΣとA_Σとの関係についてA_Σの構造をもっと直接的に反映する被覆位相力学系を求めることが一つの具体的方策として考えられる。
カドヘリンの細胞接着活性制御における膜貫通ドメイン隣接領域の役割

カドヘリンの細胞質ドメインのうち、カルボキシ末端側の領域にはカテニンが結合することが明らかになっていたが、膜に近い領域(membrane-proximal region,以下略してMP領域)がいかなる機能をしているのかはこれまで不明であった。我々は、この領域がカドヘリンの二量体化を抑さえることにより、カドヘリン活性の負の制御に関与していることを見い出した(J.Cell Biol.,142,1605-1613,1998)。この領域は細胞内分子との結合を通じて制御に関わっていると考えられたので、この領域に結合する分子の同定を通してその機能を明らかにしようとした。その結果、以下の事柄が明らかになった。1.カドヘリンの細胞質ドメインのうち、MP領域に結合してカドヘリンの活性制御に関与する細胞内分子としてp120を同定した。2.p120のカドヘリンへの結合それ自体はカドヘリンの活性を制御しないが、カテニンを介してアクチン骨格系と結合できない変異カドヘリン、あるいはアクチン骨格系の破壊された細胞にある野生型カドヘリンは、結合しているp120のセリン/スレオニンリン酸化により活性が低下する。3.アクチン骨格系に繋がった野生型カドヘリンもp120のチロシンリン酸化により活性が低下する。4.アミノ末端を欠失、あるいは特定のチロシン残基をフェニルアラニンに置換したp120を共発現させると、これらの分子はドミナント・ポジティブに作用し、低下していたカドヘリンの活性が上昇した。