hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
染色体分離を制御するノンコーディングＲＮＡとその作用機序の解明

Sat RNAのFISHにより、このRNAが細胞核内でドット上の局在を示すことを明らかにした。現在このドットがセントロメアと一致するか否かを免疫染色によって検討中である。2(2). Sat RNAに結合する因子の探索。キーファクターであるAurora Bが細胞周期のM期特異的にSat RNAに結合することを明らかとした。またM期以外の時期に結合する因子の一つとして、スプライシング因子DHX38を同定した。さらに結合因子を同定するため、M期およびM期以外の細胞周期のステージからそれぞれSat RNA-タンパク質複合体を精製することに成功し、現在それに含まれる因子を質量分析により解析中である。3(1).Sat RNA過剰発現させたときの染色体分離への影響。Sat RNA過剰発現させる系を構築したが、染色体分離への影響は観察されなかった。この結果はSat RNAがCisにのみ機能し、Transには働かないことを示唆している。次年度においても本研究申請で立案した研究計画に沿って進める。具体的な内容は以下の通り。1(1). Sat I RNAノックダウンが染色体分離のどのステップに阻害が出じるかを明確にし、RNAの作用機序を探る。そのために前年度で同定したSat RNA結合因子の挙動への影響を精査する。1(2).in vitro系の構築。ヒト培養細胞核抽出液を用いてSat RNA-結合因子の複合体がin vitroで再構築できないかを検討し、Sat RNAが細胞内で機能するために必要な性質を探るための足がかりを作る。2(1). Sat RNA-タンパク質複合体の全体像の解明。前年度で同定したSat RNA結合因子群について、それぞれのタンパク質同士の結合様式をIP実験で検証する。3(1). Sat配列を持たせたプラスミドを導入し、そのプラスミド上でセントロメア領域と同様な挙動(ヘテロクロマチン化や周辺因子群の会合など)を、再現出来るか検討する。この計画については外部から過剰発現したSat RNAが細胞に影響を及ぼさないという結果を得たため、変更する。次年度はSat RNAノックダウン時におけるセントロメア領域のクロマチン状態を精査しヘテロクロマチン形成に影響がないかを検討する。3(2). Sat RNA機能の生物保存性の検討。ヒトにおいて同定したSat RNA結合因子群について、マウスでも保存されているかをIP実験およびノックダウン実験等にて検討する。本研究計画の遂行に必要となる、RNAノックダウンに用いるアンチセンスオリゴおよびRNAiのためのsiRNA合成費用、細胞への核酸導入試薬購入費、抗体染色用の各種抗体購入費などに充てる。
細胞周期調節分子の分解制御に関する研究 - Yeast three-hybrid法の確立と応用 -

細胞周期を調節するサイクリンとサイクリン依存性キナーゼ(CDK)に直接結合し、機能抑制するCDK阻害分子(CDK inhibitors;CKI)であるP27はユビキチン化を受けることにより、その発現レベルが調節されている。本研究は、p27のユビキチン化に関与するE3が存在すると仮定し、p27とUBC3と3分子複合体を形成する新たなる遺伝子を同定することを目的とした。さらに、本研究では、3分子が複合体を形成するときに、目的とする第3の遺伝子をクローニングする方法であるYeast three-hybrid法を開発した。また、p53、p27を始め、細胞周期を調節する分子(サイクリン、CKIなど)の発現が合成のみならず、分解(特にユビキチン化)により制御されていることが報告され始めている。特に、酵母における先駆的研究により、Skp1/CUl-1/E-box蛋白複合体(SCF複合体)は、CKIを含む細胞周期調節分子をはじめ、さまざまな細胞機能に関与する分子の発現調節を行っていることが報告されている。我々は、酵母におけるアナロジーを利用して、マウスにおけるSkp1、Cul-1及び複数のF-box蛋白を同定した。我々がFWD1として同定したF-box蛋白は、免疫学上重要であるNF-κBの抑制分子であるIκBαと、大腸癌に関与するβ-cateninのユビキチン化、及び分解に関与していることが明らかとなった。この結果は、酵母以外の真核細胞におけるSCF複合体によるユビキチン化介在性分解の初めての報告となる。
データ再利用に基づくビデオ圧縮/伸張システムの最適化

本年度は、昨年度に提案した圧縮/伸張技術に基づき、プロトタイプ・ソフトウェア・システムを構築した。また、本手法による効果を向上するためのプロセッサ・アーキテクチャ技術に関する研究も行った。そして、最終的には、プロトタイプ・システム全体に対して検証・評価を行った。詳細は以下の通りである。1.MPEG方式に基づいてデオ画像の圧縮・伸張のプロトタイプ・ソフトウェア・システムの構築とその開発を行った。このシステムは画像データの圧縮/伸張において、マクロブロックごとに処理を行い、データの再利用を行うことで不要な動き補償演算、DCT演算、量子化演算などの処理やメモリ・アクセス処理を削減した。そのシステムの評価をベンチマークの動画像で行い、効果を調べた。2.データ再利用技術による効果を向上するための画像圧縮/伸張用のハードウェア・アーキテクチャに関する研究も行った。ここでは、プロセッサ内部である演算装置や、レジスタ・ファイル、キャッシュメモリなどの消費電力を下げる手法を開発し、構成最適化手法を提案した。3.プロトタイプ・システム全体に対して検証・評価を行った。高性能ワークステーション上で標準ビデオ・ベンチマークを用いてアルゴリズム・レベルでのシミュレーション、ならびに、検証を行った。実験結果は、画像圧縮/伸張化の複雑さが画像品質と性質に問題なく最大8割を削減可能なことを示している。本年度は、ビデオ圧縮/伸張ハードウェアの低消費電力(低消費エネルギー)化を目的とした、データ再利用技術を開発した。1.到達目標の設定。消費電力低減に対して最適化したビデオ圧縮/伸張ハードウェアにより可能となる諸特性の改善度を定量的に検討し、到達目標を明確にした。また、ビデオ圧縮/伸張ハードウェアの最適化手法に関する要求仕様を決定した。2.アルゴリズムの開発。提案したビデオ圧縮/伸張最適化手法を実現するためには、画像ブロックの特徴を抽出する手法とメモリ最適化手法を確立する必要がある。データ再利用技術を用いたビデオ・エンコーディング手法において、必要となる機能を調査ならびに整理した。画像ブロックの特徴を抽出するための手法に関する検討を行い、そのアルゴリズムを確立した。そして、動きベクトル検出処理実行中、「変化のないブロック」群の中から、「変化のあったブロック」を検出するための手法を確立した。また、「変化のないブロック」が検出された場合、エンコードに必要となる演算処理やメモリ・アクセス処理を停止(削除)するための技術を考案した。さらに、データ転送能力を考慮して、「変化のないブロックの検出アルゴリズム」を開発した。その上に、データ再利用技術を用いたキャッシュ・メモリおよびレジスタ・ファイルの最適化手法を開発した。3.アルゴリズムの評価。今年度に購入した高性能ワークステーション上で標準ビデオ・ベンチマークを用いてアルゴリズム・レベルでのシミュレーション、ならびに、検証を行った。本年度は、平成14年度に開発した圧縮手法に基づき、「データ再利用技術を用いたビデオ画像の伸張の開発」を行った。また、提案手法の効果を実証した。1.アルゴリズムの開発本研究では、ビデオ画像の伸張アルゴリズムの開発を行った。画像データ・ストリーム中から、「変化のないブロック」を検出するための手法を開発した。実際には、「変化のあったブロック」が検出された場合には通常のデコード処理を行い、「変化のないブロック」が検出された場合にはデコード処理をメモリ・アクセス処理に変更する、といった動作を実現するための技術とそのアルゴリズムを確立した。また、ゼロ値予測に基づくDCT演算数削減手法を提案した。2.メモリ最適化手法の開発ここでは、フレームメモリにおける書込み/読出しデータを再利用するためのシステムアーキテクチャを提案し、その最適化手法を開発した。また、メモリ・アクセスにおいて、ビット遷移回数を削減するためのデータ符号化技術に関しても研究開発を行った。さらに、シミュレーションによりメモリ最適化手法に関する検証を行った。標準ビデオ・ベンチマークを用いてアルゴリズム・レベルでのシミュレーション、ならびに、評価とその検証を行った。

このシステムは画像データの圧縮/伸張において、マクロブロックごとに処理を行い、データの再利用を行うことで不要な動き補償演算、DCT演算、量子化演算などの処理やメモリ・アクセス処理を削減した。そのシステムの評価をベンチマークの動画像で行い、効果を調べた。2.データ再利用技術による効果を向上するための画像圧縮/伸張用のハードウェア・アーキテクチャに関する研究も行った。ここでは、プロセッサ内部である演算装置や、レジスタ・ファイル、キャッシュメモリなどの消費電力を下げる手法を開発し、構成最適化手法を提案した。3.プロトタイプ・システム全体に対して検証・評価を行った。高性能ワークステーション上で標準ビデオ・ベンチマークを用いてアルゴリズム・レベルでのシミュレーション、ならびに、検証を行った。実験結果は、画像圧縮/伸張化の複雑さが画像品質と性質に問題なく最大8割を削減可能なことを示している。
棒状高分子液晶の電場により誘起されるバンド構造と非線型挙動

棒状高分子液晶溶液(ポリ-γ-ベンジルL-グルタメート/4塩化エタン溶液;濃度0.19v/v)を試料とし、電極として金を部分的に蒸着した2枚のガラス板の間に試料溶液を挟み、左右(ガラス板に平行)に低周波交流電界を印加し、電界反転に伴うバンド構造の出現、消滅機構を解明することを試みた。その過程の偏光顕微鏡画像をビデオに録画し、この画像の明暗をグレイスケールでデジタル化し、画素単位の透過光強度に換算して再記録した。画像処理プログラムを用いて、記録画像より特定の1ライン(電場に平行)を取り出し、そのラインの透過光強度の時間変化より画素単位での分子ディレクターの変化を解析することができた。その結果、印加交流の波形(三角波、矩形波、サイン波)、周波数および電圧の変化に伴い、3種類の応答挙動が観察された。周波数0.05Hz以下では、1周期に4回のバンド構造の出現が観察され、この領域で矩形波を印加し、隣接ドメイン内でのディレクター回転方向及び回転速度の相関、1個のドメイン内でのディレクターの時間的、空間的揺らぎおよびその電圧依存性についての情報を得た。
日本人高齢者における骨格筋量と筋血流量の関連

加齢に伴う筋量の減少(サルコペニア)の原因は未だ不明である。食後の筋血流量の増加は加齢に伴い鈍化することが知られており、これと筋タンパク合成量が相関する。しかしながら、全身・部位別筋肉量との関連やサルコペニアとの関連については不明な点が多い。また、多くの研究はBMIが25kg/m2を超える欧米人を対象に行われており、標準体型をもつ日本人において同様か否かも不明である。本研究は、日本人高齢者における骨格筋量と血流量の関係を明らかにすることを目的とする。初年度の実績として、若年者と高齢者の比較を行うために、それぞれの対象者の測定を行った。筋肉量は生体電気インピーダンス法(Inbody,インボディ社)を用いた。血流量の測定はドップラー超音波エコーを用いて、大腿動脈を測定した。食後の血流量増加を評価するため、食事負荷試験を実施した。対象者は前日に規定食による夕食を摂り、夜9時翌朝8時までは水以外を摂取しないようにした。試験当日に体重や骨格筋量、血圧など基礎的データを測定し、30分間の座位安静をとり筋血流量を測定する。その後朝食(450kcal、P:F:C=1:1:3)を摂取し、30分毎に筋血流量を測定した。当初の予定と異なった点として、倫理委員会の審議によって予定採血量を採取することがが認められず、採血を断念することにした。測定人数は予定の3分の1を達成しており、当初の予定どおりであった。上記の通り、研究実施内容の変更が生じたものの本研究が主目的としている内容は遂行出来ている。また、3年計画において初年度の目標は達成出来ている。そのため、おおむね順調に進展しているものと考えている。研究実施内容の変更があったものの、大まかな実施内容には影響が無いため、計画通りに進めていく予定である。また、被験者の勧誘が最大のボトルネックとなるため、勧誘に注力していく。研究実施内容の変更に伴い当該年度に残金が生じた。残高については翌年度に繰り越し、実験を実施するに伴い必要となる被験者謝金や物品費、旅費として使用する予定である。
質的な筋力の向上に着目した肩周囲筋のトレーニング方法に関する研究

本研究の目的は,肩外旋運動中の力発揮速度(Rate of Force Development;RFD)及び肩外旋筋群の筋活動動態が各種トレーニングによってどのように変化するかを検討することであった。その結果,ヘビーメディシンボールを用いた肩外旋筋トレーニングは,RFDを有意に向上させた。したがって,最大筋力のみならずRFDをトレーニング前後で評価することは,トレーニング効果を判定する上で有用な一指標となると推察された。本研究は,肩関節運動時の筋活動レベルや筋出力(トルク)の大小ではなく,(1)運動開始局面の筋活動様相(EMGonset)及び(2)筋出力中の筋力増加率(Rate of Force Development ; RFD)・とその時の筋活動動態に焦点を当て,これら(1)及び(2)を評価指標に肩周囲筋に対する各種トレーニング方法の有効性を明らかにすることを目的としている。そこで本年度(平成20年度)は,肩関節に既往歴を有さない健常成人男性を対象に等尺性収縮による肩外旋運動を行わせ,上述の(1)及び(2)を検討した。肩外旋運動については,外転角度(20°・45°・90°・120°の各角度)及び回旋角度(内旋15°・内外旋中間位(0°)・外旋15°・30°・45°・60°の各角度)を変えて複数の運動肢位で実施した。そして,上述の(1)及び(2)を検討するために,多用途筋機能運動評価装置(BIODEX)を使用し運動時の筋出力を測定するとともに,肩外旋運動に関連する棘下筋,三角筋中部・後部線維,僧帽筋上部・中部・下部線維,前鋸筋及び上腕二頭筋から表面筋電図を導出した。結果の詳細な考察については,今後さらに加えていく必要があるものの,(1)肩外旋運動開始局面の各筋のEMGonset及び(2)RFDとその時の筋活動動態は,次年度(平成21年度)に実施する複数のトレーニング器具を使用した肩外旋筋群に対するトレーニングの有効性を検証するための評価指標になりうると考えられた。本研究は,筋活動レベルや筋出力(トルク)の大小ではなく,肩関節運動時の(1)運動開始局面の筋活動様相(EMG onset)及び(2)筋出力中の筋力増加率(Rate of Force Development ; RFD)とその時の筋活動パターンに焦点を当て,これら(1)及び(2)の評価指標から肩周囲筋に対する各種トレーニング方法の有効性を明らかにすることを目的としている。平成20年度は,上述の各指標が肩外旋筋群の機能的特性を捉え,トレーニング効果を評価しうるか否かについて検討した。本年度(平成21年度)は,複数のトレーニング器具(ダンベル及びヘビーメディシンボール)を使用して異なる肩外旋筋群に対するエクササイズを一定期間行い,トレーニングによる(1)及び(2)の各指標の変化を検証した。被験者は,左右の肩関節に既往歴を有さない健常成人男性を対象とした。評価指標を得るための運動課題は,等尺性収縮による肩外旋運動とし,20°及び90°外転位の各運動肢位で実施した。計測には,多用途筋機能運動評価装置(BIODEX)及び筋電計(MyoSystem 1200)を使用し,肩外旋トルク値及び肩外旋運動に関連する棘下筋,三角筋中部・後部線維,僧帽筋上部・中部・下部線維,前鋸筋及び上腕二頭筋から表面筋電図を記録した。結果の詳細な考察については,今後さらに検討を加える必要があるが,上述の指標からみられる肩外旋筋群の機能的特性は,トレーニング実施方法により,異なった変化を呈する可能性が高いと推察された。引き続き平成22年度も,複数のトレーニング器具を使用して肩外旋筋に対するエクササイズを実施し,本研究の目的である肩周囲筋に対する各種トレーニング方法の有効性を検証していく。本研究は,筋活動レベルや筋出力(トルク)の大小に加えて,肩関節運動時の(1)運動開始局面の筋活動様相(EMG onset)及び(2)筋出力中の筋力発揮率(Rate of Force Development ; RFD)とその時の筋活動パターンに焦点を当て,これら(1)及び(2)の評価指標から肩周囲筋に対する各種トレーニング方法の有効性を明らかにすることを目的としている。本年度は,20セッションの肩外旋筋群に対するエクササイズを複数のトレーニング器具(ダンベル及びヘビーメディシンボール)を使用して行い,トレーニングによる(1)及び(2)の各指標の変化を検証した。評価指標を得るための運動課題は,等尺性収縮による肩外旋運動とし,20゚及び90゚外転位の各運動肢位で実施した。

また,各評価指標の計測はトレーニング開始前,トレーニングを10回終了した時点(トレーニング中),トレーニング終了後に行った。肩外旋筋トレーニング実施の結果,特に筋力発揮率(RFD)の変化に関しては,トレーニング実施方法によって,顕著な相違を示した。そのため,肩外旋筋トレーニングにおいても,効果を判定する際には,最大トルクだけでなくRFDも考慮して評価をする必要があると推察された。
チェックポイントキナーゼを標的とする抗真菌物質の基礎的研究

本研究では抗真菌薬の標的候補因子に深在性真菌症の原因菌として知られるCandida albicansの生存に必須なプロテインキナーゼであるCaMps1p(mono-polar spindle-1)に着目し、その活性阻害物質として得られたLY83583について解析を行った。LY83583はヒトホモログであるhMps1pへの活性阻害効果は持たず、CaMps1p特異的に作用し、C. albicansの増殖に影響を与えていることを明らかにした。新しい作用機序を持つ抗真菌物質の発見と同時に、既知のグアニル酸シクラーゼ阻害剤であるLY83583の新しい標的分子の発見に繋がる研究となった。新しい抗真菌薬開発を目的として、本研究では標的候補因子に深在性真菌症の原因菌として知られるCandida albicansの生存に必須で且つ、チロシンとセリン・スレオニンの両方を特異的にリン酸化するプロテインキナーゼであるCaMps1p(mono-polar spindle-1)に着目した。CaMps1pのリコンビナントタンパク質を作製し、in vitroでの活性評価系を構築しCaMps1pキナーゼ活性阻害物質の探索を行った結果、LY83583をヒット化合物として得た。LY83583はC.albicansの増殖抑制効果を持ち、CaMps1pの発現調節株を用いた実験からその効果はCaMps1p発現量が少ない程大きいことが判明した。更に、LY83583はCaMps1pのヒトホモログであるhMps1p(又はTTK)や他のチロシンキナーゼ(ヒト由来のEGFR, VEGFR)の活性は阻害しなかった。これらの結果から、LY83583はCaMps1p選択的に活性を阻害し、C. albicansの増殖に影響を与えている可能性が高いことが明らかになった。また、EY83583はグアニル酸シクラーゼ阻害剤として知られているが、C.albicansにはグアニル酸シクラーゼをコードする遺伝子についての報告がない。そして、他のグアニル酸シクラーゼ阻害剤(methylene blue, ODQ)はCaMps1p活性に影響を与えなかった。つまり、LY83583はグアニル酸シクラーゼ阻害機序とは異なる作用機序でCaMps1p活性を特異的に阻害していることが示唆された。よって、LY83583とCaMps1pとの特異的な立体相互作用の解析からより理想的な抗真菌薬候補のデザインが可能となることが示された。新しい抗真菌薬開発を目的として、深在性真菌症の原因菌として知られるCandida albicansの生存に必須なプロテインキナーゼであるCaMps1p(mono-polar spindle-1)を標的候補分子とし、そのキナーゼ活性阻害物質の探索から得られたLY83583について更に解析を進めた。これまでの研究から、LY83583はCaMps1pのヒトホモログであるCaMps1pへの活性阻害効果は持たず、CaMps1p選択的に活性を阻害し、C. albicansの増殖に影響を与えていることを明らかにした。LY83583はグアニル酸シクラーゼ阻害剤として知られているが、C. albicansにはグアニル酸シクラーゼをコードする遺伝子についての報告がない。そして、他のグアニル酸シクラーゼ阻害剤はCaMps1p活性に影響を与えなかった。また、hMps1pの阻害剤(SP600125,staurosporine)はCaMps1pの活性阻害作用を示さなかった。LY83583そのものはヒト正常細胞、がん細胞共に細胞毒性を示し、そのままでは抗真菌剤として使用できない事が確認されたが、LY83583とCaMps1pとの特異的な結合様式を解明することが新抗真菌薬開発につながるラショナルドラッグデザインに貢献できることが予想された。既にhMps1ではいくつかの阻害剤との結合様式の報告がなされている。それを元にした計算ソフトによるシミュレーション解析からCaMps1についてもLY83583との結合に関わるアミノ酸が推定された。これらについての解析及び、CaMps1の結晶構造の解明に向けた解析が進行している。
新規の結核感染診断法の特許開発および臨床応用

結核感染診断に有用な新たな診断法の試み1)感度、特異度を高めるため、炎症局所から採取した検体を用いて、単核球を分離後、結核菌特異抗原で刺激し、産生されたIFN-γ産生細胞数を定量化測定した。その結果、胸水を用いた場合、他の診断法に比して高い感度が得られていた。2)結核菌特異蛋白抗原で刺激された上清中の複数のサイトカインやケモカインを測定した結果、IFN-γ以外にIP-10、MIGが活動性結核と他疾患の鑑別に有用であった。一方、IL-2は最も成績が不良であった。今後、IFN-γとともにIP-10、IL-2を同時測定できるキットができれば活動性と陳旧性、潜在性結核の鑑別も可能となるかもしれない。2.活動性が高いと思われる炎症局所からの検体として胸水、心嚢水、気管支肺胞洗浄液(BALF)を採取し、分離された単核球に対して結核菌特異蛋白抗原(ESAT-6、CFP-10)で刺激して産生されるIFN-γ産生細胞数を定量化して測定した。特に、結核性胸膜炎が疑われる症例には、確診例と疑診例、他疾患例で胸水を用いたT-SPOT.TBを行った結果、胸水中ADA、末梢血でのQFTやT-SPOT.TBと比較して、最も高い感度が得られていたことを学会で報告し、論文も投稿中である。心嚢水に関しては症例数が少ないため、症例を増やしている途中であり、BALFに関しては検体採取量が少ないため、測定不可となる症例も多く、今後の継続を検討中である。3.結核感染診断は、これまでIFN-γを測定する方法が中心であったが、最近IFN-γに関連したケモカイン(IP-10、MIG、MCP-2など)や違うサイトカイン(IL-2やTNF-αなど)を測定して良好な成績が得られたとの報告されている。私共も、まずケモカインとしてIP-10、MCP-2、MIGを確診例と他疾患例で測定し、確診例で有意に高値をとっていたことを2013年の学会で報告する予定である。今後、症例数を増やしてどのケモカインやサイトカインが感度、特異度に最も優れているのか、また組み合わせによる診断成績見関しても検討する予定である。1.結核感染診断法interferon-γrelease assay (IGRA)のうち、2012年に本邦に導入されたT-SPOT.TB (ELISPOT法)の診断法をマスターした。そして、活動性が高いとされる炎症局所からの検体として胸水、気管支肺胞洗浄水(BALF)を採取し、分離された単核球に対して、結核菌特異蛋白抗原(ESAT-6、CFP-10)で刺激して産生されるIFN-γ産生細胞数を定量化して測定した。特に、結核性胸膜炎の症例には確診例と疑診例、他疾患例で胸水を用いてT-SPOT.TBを実施した結果、胸水中ADA、末梢血QFTやT-SPOT.TBと比較して、最も高い感度が得られていたこと論文で報告した。しかし、BALFに関しては採取できる検体量が少ないため、欧米の報告のようにBALF生食投与量を増やそうとしたが、倫理上、本邦では困難なため、統計学的解析も困難であり、中止とした。2.これまで、末梢血を用いた結核感染診断は結核菌特異蛋白抗原に対するIFN-γを測定する方法が中心であったが、近年はIFN-γに関連したケモカイン(IP-10、MIG、MCP-2など)や他のサイトカイン(IL-2など)を測定し、結核確診例では他疾患に比して有意に上昇すると報告されている。私共も、結核菌特異蛋白抗原と反応した単核球が産生するケモカインとしてIP-10、MIGを結核確診例と他疾患例で測定し、従来からあるIGRA(QFTとT-SPOT.TB)の成績と比較しながら、確診例では他疾患例に比して有意に高値をとっていたことを2013年の学会で報告した。その後、症例数も増えてきたため、血清中のケモカインやサイトカインの濃度も測定し、QFT上清中のケモカイン、サイトカインの方が有意に高値をとっていることも2014年の学会で報告する予定である。どの診断法が最も診断精度に優れているか、またすべての診断法を併用した場合に診断率がどの程度向上するかも検討し、論文を作成中である。1.まず、結核感染診断法のinterferon-

γrelease assay(IGRA)の方法のうち、本邦では導入されていないT-SPOT.TB(ELISPOT法を用いて行う)の検査法をマスターし、末梢血を利用して肺結核の鑑別診断に従来からあるツベルクリン反応(TST)、QuantiFERON(QFT)の第2世代と第3世代、T-SPOT.TBのいずれが有用か検討し、T-SPOT.TBが最も感度が優れていることを論文で報告した。2.次に、末梢血のみでなく、活動性が高いと思われる炎症局所からの臨床検体として胸水、心嚢水、気管支肺胞洗浄液を採取し、分離された単核球に対して結核菌特異蛋白抗原で刺激して産生されるIFN-γ産生細胞数を定量化して測定した。ただ、胸水および心嚢水に関しては検体量が十分あるため、局所におけるIFN-γ産生細胞数を測定でき、TST、ADA、末梢血からのQFTやT-SPOT.TBに比して有意に高値を呈し、高い陽性率をとっていた。しかし、気管支肺胞洗浄液に関しては検体採取量が症例によっては少ないため測定不可となる症例もあり、今後症例数を増やしていきながら、この点を考慮する予定である。3.結核感染に対してはTh1細胞を中心とした免疫機構が働いており、サイトカインではIFN-γのみでなく、TNF-α、IL-2など、ケモカインではIP-10、MCP-2などが重要な役割を果たしていると報告されている。まず、末梢血を中心に他の臨床検体もまじえながら、新たに結核菌特異蛋白抗原としてQFT第3世代に導入されたTB 7.7も従来からあるESA-6、CFP-10とともに刺激させて、産生されるサイトカインやケモカインでいずれが結核感染診断の感度、特異度に最も優れているかを検討するための準備ができてきている。私共は感度を上げるため、炎症局所からの検体として、胸水や気管支肺胞洗浄液(BALF)から分離された単核球に対して、結核菌特異蛋白抗原で刺激し、産生されたIFN-γ産生細胞数を定量化して測定した。その結果、特に胸水を用いての結核性胸膜炎の診断には胸水中ADA、末梢血QFTやT-SPOT.TBと比較して最も高い感度が得られることを学会や論文で報告した。2.最近の結核感染診断においては、結核菌特異蛋白抗原で刺激された上清中に含まれるIFNーγのみでなく、他のサイトカインやケモカインを測定することにより、結核性疾患と他疾患の鑑別などに有用なバイオマーカーも報告されてきている。私共も最初はHuman cytokine ELISA plate assayを用いることにより、多数のバイオマーカーを少量の検体で測定してみようと試みたが、多額の費用でかかるため断念し、有用性が高いバイオマーカーと報告されたIL-10、MIGといったIFN-γ関連ケモカインを測定することにより、感度が94%にまで上昇させることができ、学会や論文で報告した。他に、有用と報告されるIL-2、TNF-α、MCP-1、MIP-1β等に関しても測定した結果、MCP-1、MIP-1βについてはほぼ同等の成績ではあったものの、IL-2は感度、特異度ともに不良であった。IL-2は最近、活動性結核よりも潜在性や治療後の陳旧性結核において高値を呈するとの報告がなされていることから、IFN-γとともにセットで測定することにより、活動性結核と陳旧性、潜在性結核の鑑別が可能性が秘められており、このことも学会で報告した。医歯薬学結核感染診断法で有用とされるIGRAのうち、感度がいいとされるELISPOT法を用いたT-SPOT.TBを末梢血のみでなく、胸水を用いてIFN-γ産生細胞数を定量化することができるようになったため、結核性胸膜炎の確診例、疑診例、他疾患例の3群間で胸水中ADAや末梢血QFT、末梢血T-SPOT.TBとの診断成績を比較検討した研究を学会発表を終えて、論文投稿中としている。あと、他の臨床検体として予定していた心嚢水に関しては症例数の不足から今も症例数の増加を行っており、肺結核に対するBALFも検体量が少ないため、測定ができる症例が少なく、今後の研究を継続するか検討中である。
歯状核赤核淡蒼球ルイ体萎縮性(DRPLA)の臨床病理学的研究

歯状核赤核淡蒼球ルイ体萎縮性(DRPLA)は常染色体優性遺伝を示し、小脳歯状核系と淡蒼球外節ルイ体系に病変の主座をもつ多系統変性症である。臨床的には小脳失調、舞踏病様運動、ミオクローヌス等の神経症状とともに痴呆や人格変化がしばしば出現し、皮質下痴呆をきたす代表的疾患の1つとされている。しかし従来DRPLAの痴呆を含む精神症状に関する報告は少なく、その臨床的特徴は明らかではない。また、DRPLAの痴呆の責任病巣は皮質下病変に基づくだけのものとは考えにくく、本症に認められる画像所見や脳萎縮、脳重量の減少から大脳皮質、大脳白質を含む広範な障害が推察されるが、神経病理学的には変化に乏しくこの矛盾点は解明されていない。今回我々は、DRPLAの2症例を経験し、痴呆や人格変化、精神症状に着目し、その特徴について精神医学的、画像診断学的に検討を加えた。症例1は46歳女性。小脳性運動失調で発病し、舞踏病アテト-セ様付随意運動、ミオクローヌス、痴呆に加え幻視、幻聴、被害妄想、精神運動興奮などの精神分裂病様の症状をはじめとする多彩な精神分裂病様症状を呈し、臨床的には明らかな遺伝歴をもたず、第12染色体短腕のCAG repeatの延長を確認することによってDRPLAと診断できた。DRPLAの遺伝子異常が発見されてまもないため、本例のように遺伝子解析で確認された孤発例の報告は少なく興味ある例であった。症例2は47歳男性。明らなか遺伝歴を持ち、舞踏様アテト-ゼ様不随意運動、小脳性運動失調で発病し、遺伝子解析でCAG repeatの延長を認め、経過途中で幻聴、幻視が出現した1男性例である。従来、ハンチントン病と比べDRPLAの精神分裂病様症状についての報告は少ない。本例の分裂病様症状は被害的多彩が少なく体系化された妄想は認めず、割合と単純な内容であり、症状が変動しやすいという特徴を持っていた。CT,MRI,SPECT等の画像学的所見や遺伝子解析における特徴と精神症状との関連について検討し報告した。さらに、本例の痴呆や精神症状の特徴について検討した。今後、神経病理学的所見に精神症状との関連について検討を加える予定である。症例1は46歳女性。症例2は47歳男性。
動脈硬化巣での原因歯周病菌の検出と同定による虚血性心疾患予防へのアプローチ

進行した歯周病を有する人では歯周病菌あるいは歯周病菌が出す毒素が時に歯肉内の血液循環に入り込んでおり、血流により全身へ運ばれた歯周病菌や毒素が動脈局所に作用して動脈硬化巣の形成を促進する。本研究では歯周病菌の動脈硬化プラーク形成への関与を検討した。歯周病菌の動脈から検出の検討において、顔面動脈から3種類の歯周病菌を検出した。それらの歯周病菌に対する抗体価の血中濃度が歯周病の重症度と相関していた。また、血中抗体価の上昇は全身の炎症反応とも関連していた。さらに歯周病抗体価は患者の血圧とも関連していることがわかった。これらのことは動脈硬化および虚血性心疾患と歯周病との関連性を裏付けることになる。歯科口腔外科にて腫瘍切除の際に顔面動脈が切除される。通常は廃棄される組織であるが、患者さんの同意を得て無菌的に収集し、すぐに凍結保存する。収集した顔面動脈を3つに分けて1つは文献より歯周病菌特有のプライマーを準備しPorphyromonasgingivalis、Prevotella intermedia、Aggregatibacter actimomycetemitansといった歯周病菌のDNA検索を行った。もう1つは歯周病菌のmRNAの検索を行い動脈内の歯周病菌の有無について検討した。その結果、顔面動脈内に歯周病菌がいることが推定できた。そこで残りの組織を用いて免疫組織染色を行い動脈組織内の歯周病菌の同定を行った。しかしながら歯周病菌の染色は明確に断定できるデータを得ることはできなかった。歯周病菌に対する抗体を変えるなどの工夫が必要と思われる。歯科口腔外科で口腔内腫瘍切除の際に顔面動脈が切除され、そのまま廃棄される。その顔面動脈を患者さんの同意を得て無菌的に収集し、すぐに凍結保存した。その顔面動脈から3つの歯周病菌Porphyromonas gingivaris, Prevotella intermedia, Aggregativactor actinomycetemcomitansに対し、組織染色による動脈内の歯周病菌の検出、各歯周病菌特有のプラーマーを用いて歯周病菌のDNAおよびmRNAの検出を試みた。染色に際し前処置や温度設定など工夫をして免疫科学組織染色を行ったが、確定的な結果を得ることはできなかった。各歯周病菌に対する抗体の特異性が低かったためと思われる。また、これらの歯周病菌の顔面動脈内のDNA、mRNAの検出では、Porphyromonas gingivarisが最も頻度が多く、つぎにPrevotella intermediaでありAggregativactor actinomycetemcomitansはほとんど検出されなかった。このように顔面動脈内の歯周病菌の存在が確認できた。冠動脈形成術を行った患者のバルーンから歯周病菌のDNAやmRNAによる検出を行った。Porphyromonas gingivarisが検出されたが、検出頻度の安定性が低く、この手法では動脈組織を用いたDNAやmRNAによる検出に比べて検出力は低いと考えられた。循環器内科入院中の虚血性心疾患患患者さんにおいて本研究に協力の得られた患者さんに歯科口腔外科受診していただき歯周病の有無および程度をPPRD (periodontal pentagon risk diagram by Renvert S, et al, J Clin Periodontal, 2003)のcode分類によりスコア化して評価した。診察していただいた項目としては、残存歯数、全歯の歯周ポケットの深さがどのくらいか(4 mm未満、4 mm以上、6mm以上)、歯4面のプラークの残存程度、プロービングによる歯周組織からの易出血性の有無、動揺歯の有無、歯肉の状況、パモントグラフィーを用いて歯槽骨の骨吸収の程度が歯根長の1/2以上に達するかどうか等である。また、歯周病菌のうちPorphyromonas gingivalis、Prevotella intermedia、Aggregatibacter actimomycetemitansについてELISA法を用いて抗体価測定を行った。口腔内腫瘍で歯科口腔外科入院患者さんにも歯周病の検査をしていただいた。腫瘍切除の際に顔面動脈が切除される。収集した顔面動脈から歯周病菌特有のプライマーを準備し前述3つの歯周病菌のDNA検索を行った。さらに歯周病菌のmRNAの検索を行い動脈内の歯周病菌の有無について検討した。残りの組織を用いて免疫組織化学染色を行い動脈組織内の歯周病菌の同定を行った。まだ結論を出せるだけのデータは集まっていないが顔面動脈に歯周病菌の存在は確認できたと考える。

顔面動脈組織を用いて免疫組織染色を行い動脈組織内の歯周病菌の同定を行ったが、歯周病菌の染色は明確に断定できるデータを得ることはできなかったため、歯周病菌に対する抗体を変えるなどの工夫が必要と思われる。冠動脈形成術に際し、粥種は破綻し冠動脈プラーク内容物の一部はバルーンに付着しているとされている。冠動脈形成術を施行された患者さんからの使用済みバルーンを回収し、このバルーン付着物に歯周病菌の遺伝子が含まれていないかを検討する。バルーンの付着物を洗浄して回収し、polymerase chain reactionにより歯周病菌遺伝子の検出を試みるとしていたが、これはまだ結論が出せるほどデータが集まっていないため、25年度も継続して行う予定である。循環器内科入院患者さんの入院時採血所見および心電図、心臓超音波、冠動脈造影所見および冠動脈CT所見の把握は順調である。歯科口腔外科入院患者さんについては研究開始が少し遅れたため、口腔内腫瘍で手術適応となる症例が期待したよりやや少ない状況である。よって循環器内科入院患者さんの歯科口腔外科での歯周病の有無および程度をPPRDのcode分類によりスコア化して評価することは順調であるが、歯科口腔外科の入院患者さんでは予定よりやや少なめとなっている。歯科口腔外科にて腫瘍切除の際に一緒に切除される顔面動脈を患者さんの同意を得て収集し、Porphyromonas gingivalis、Prevotella intermedia、Aggregatibacter actimomycetemitansといった歯周病菌のDNA検索および歯周病菌のmRNAの検索を行っている。対象症例数がまだ多くないが歯周病菌の検出はできており、24年度はさらに症例数を多くして歯周病菌のある症例と無い症例について比較検討していく。また、DNAおよびmRNAとして歯周病菌が検出された残りの組織を用いて少しの症例に対してだが、免疫化学組織染色を行い動脈組織内の歯周病菌の同定を行っている。この検討はまだこれからであるが一部の標本から歯周病菌が検出できている。同意を得た患者さんの血清を用いて歯周病菌のうちPorphyromonas gingivalis、Prevotella intermedia、Aggregatibacter actimomycetemitansについてELISA法を用いて抗体価測定を行っているが十分ではない。種々のマーカーとの関連があるようであり、今後症例数が増すとはっきりしてくると思われる。歯周病の程度と白血球の活性化の程度の関連性については、現時点ではっきりとした検出はできていないが、今後も検討を進めていく。白血球が活性化し、様々なサイトカインを放出するが、その中でも組織因子は血液凝固の開始因子である。心血管イベントの発症予測因子でもあるため、その血中レベルと歯周病の程度や顔面動脈からの歯周病菌の検出の有無、歯周病抗体価との関連性を検討する。冠動脈プラーク内容物の一部は冠動脈形成術で用いるバルーンに付着しているとされている。このバルーン付着物に歯周病菌の遺伝子が含まれていないかを検討する。バルーンの付着物を洗浄して回収し、polymerase chain reactionにより歯周病菌遺伝子の検出を試みる。
大気安定度を考慮した建物外表面濃度予測モデルの開発及び汚染防除ガイドラインの作成

モハメッド研究員は平成16年11月に来日し、大場指導教授の下で、平成18年度は下記の作業を行なった。1.ストリートキャニオン内部の流れと拡散に関する風洞実験市街地汚染ガス拡散における基本の大気安定度は中立である。この状況を対象に環境系境界層型風洞を使用して拡散模型実験を行った。市街地はストリートキャニオンを想定し、煙源は道路線源とした。道路幅と風向角を系統的に変化させて、街区空間の鉛直濃度分布を測定した。また、方向成分の風速が検出できるスプリットプローブを用いて気流場の風速ベクトル分布と乱流エネルギーを測定し、ストリートキャニオン内部の気流データを蓄積した。2.単独高層建物後流域の拡散性状に関する風洞実験濃度変動に着目して、高応答型炭化水素分析計で詳細に測定した。建物後流域では、乱流混合により速度境界層の発達が抑制され、建物から離れるに従い、地点間の濃度差が減少することがわかった。3.ストリートキャニオン内部の流れと拡散に関するCFD解析風洞実験データを基に、k-ε系RANSモデルの精度検証を行った。CFDは中立大気の風洞実験の平均風速、乱流エネルギーの結果を良く再現できることを示した。4.大気安定度の流れ場での単独建物周りの汚染拡散と流れの風洞実験次に大気安定度の流れを再現できる本学の温度成層風洞を用いて、単独模型周りの拡散実験を実施した。屋根形状はエジプトの現代住宅を模した数種類を作成した。気流の温度勾配は床面冷却パネルと気流加熱装置により作成し、汚染質拡散を抑制する安定流れと汚染質拡散を増大させる不安定流れを風洞内に形成した。作成したバルクリチャードソン数は±0.02である。煙源は建屋煙突とし、大気安定度のバルクリチャードソン数と汚染質拡散の関係を調べた。建物近傍汚染防除・軽減策に関する基本的なガイドラインを作成する上で、貴重なデータを集積した。モハメッド研究員は平成16年11月に来日し、大場指導教授の下で、下記の作業を行なった。1.温度成層制御装置の操作方法に関する検討気流の温度勾配は床面冷却パネルと気流加熱装置により作成し、汚染質拡散を抑制する安定流れと汚染質拡散を促進する不安定流れを風洞内に定常的に形成する。そのための最適な温度制御装置の操作方法を取得した。2.濃度データ取得のための風洞周辺機器の整備温度成層風洞で拡散実験を今回始めてスタートするので、濃度計測機器と実験ガス類が未整備である。実験室内で漏洩のないガス配管の実施及び濃度計測のプログラム作成した。3.数値シミュレーションのスタート商用コードフレーエントを用いて、矩形モデル廻りの拡散状況を標準型乱流モデルで解析し、風洞実験と比較した。4.学術誌への投稿モハメッド研究員は平成16年11月に来日し、大場指導教授の下で、平成17年度は下記の作業を行なった。1.高層建物が流れと拡散に及ぼす影響に関する風洞実験単独高層建物後流域の拡散性状について、濃度変動に着目して、高応答型炭化水素分析計で詳細に測定した。2.CFD解析風洞実験データを基に、k-ε系RANSモデルの精度検証を行った。CFDは風洞実験の平均風速、乱流エネルギーの結果を良く再現できることを示した。3.風速・温度の同時計測システムの開発拡散性状のパラメーターである風速、温度、濃度の各フラックスを同時に計測することが、乱流構造を分析する上で、重要である。気流の温度変化に対応するために、熱線プローブと冷線プローブを同時に校正する装置を作成し、その特性を検討した。4.大気安定度流れ場での汚染拡散上記の冷線・熱線式温度流速計の校正装置ができたので、温度成層風洞を用いて、大気安定度流れ場での汚染拡散を測定するために、測定系システムを構築中である。

気流の温度勾配は床面冷却パネルと気流加熱装置により作成し、汚染質拡散を抑制する安定流れと汚染質拡散を増大させる不安定流れを風洞内に形成した。作成したバルクリチャードソン数は±0.02である。煙源は建屋煙突とし、大気安定度のバルクリチャードソン数と汚染質拡散の関係を調べた。建物近傍汚染防除・軽減策に関する基本的なガイドラインを作成する上で、貴重なデータを集積した。
体節形成過程ににおける分節化開始機構の解析

脊椎動物の基本構造を形成する脊椎骨、それを支持する筋肉、皮膚はすべて体節から由来する。体節は原腸陥入直後の側体軸中胚葉が分節化を伴って形成する基本単位でありその分節化のメカニズムはまだ解明されていない。転写因子Mesp2は分節直前の中胚葉に特異的に発現し、そのノックアウトマウスにおいては分節化がおこらなくなり、その分子メカニズムに深く関与する重要な遺伝子だと考えられる。この研究計画は、Mesp2がどのように作用し、脊椎動物の基本構造である体節形成をもたらす分節化をどのような機構で開始させるのかを発生工学的手法を用いて解明していこうとするものである。今年度はゼブラフィッシュのMesp2ホモログと考えられるmespb遺伝子をMesp2遺伝子座にノックインしたマウスを作製しその解析を行った。その結果、mespb遺伝子ノックインマウスは正常な体節形成をしめし、生存し生殖も可能であり、Mesp2の欠損はほぼ完全にレスキューされた。ただ、尾部に必ず変形を伴い、kink tailの表現形をしめすことがわかった。しかし、組織切片、いくつかの分子マーカーで解析した結果は体節の形成は正常におこり、その体節内の前後極性もほぼ正常であると思われた。またこのマウスの作製過程で形成された、hypomorphicなマウスは異常な表現型を呈した。特にその脊椎骨の癒合はひどく、Mesp2の欠損がほとんどレスキューされていないと考えられた。ところが驚いたことに、体節の分節は正常におこり、体節形成は一見して正常に進行しているように見られた。さらに分子マーカーを用いて解析したところ、前後極性を反映したパターンを示すuncx4.1の発現には著しい乱れがみられたが、体節の分節そのものに関与すると考えられるlunatic fringeの発現は比較的正常であった。その結果、Mesp関連遺伝子は体節の上皮性分節とその後の硬節にみられる再分節に異なった機構で関与している可能性が示唆された。
構分・意味解析融合方式における非単調依存に関する研究

1.事象の事実性を用いた日本語の複文解析日本語の1文は一般に接続表現によって連結された複数の単文から成るが,複文の構文および意味構造を示唆するような形態的あるいは構文的特徴が表層には全くないため,複文構造の決定はスクリプトやプランーゴールなどの知識を用いて行なわれることが多い.しかし,言語による知識獲得などを考慮した場合,動詞や接続表現の語彙情報からボトムアップ的に複文構造を同定することも極めて重要である.本研究では,第1に,動詞の意味属性として従来から日本語解析に利用されてきた意志性とアスペクト素性が複文解析にも一部利用可能であることを示した.第2に,複文を形成する各単文を話者が事実と仮定しているか否かの判断と接続表現との関係を利用することにより,単文間の係り受けが制限され,複文構造がある程度決定可能であることを示した.単文が事実か命題かの区別を事象の事実性と呼ぶ.この事実性と意志性・アスペクト素性を用いた複文構造の解析手法について研究した.2.自然言語文解析のための汎用型問題解決機PSA2.0我々は従来より, "読みの優先"により,多くの解釈の可能性のうち,その時点で最も自然と考えられる解釈を選択するやり方で自然言語文を解析するシステムの作成を行なってきた.このような処理はオブジェクト指向の考えを用いた解析方法により実現されているが,本年度はこのような解析にも使用できる汎用型問題解決機PSA2.0を作成した.3.知的操作環境としての自然言語インタフェース従来より実現されてきたカナ漢字変換システムや,ウィンドウ表示システムというような操作環境を,より知的な技術に発展させた知的操作環境につき,とくに自然言語インタフェースの側面から考察した.1.事象の事実性を用いた日本語の複文解析日本語の1文は一般に接続表現によって連結された複数の単文から成るが,複文の構文および意味構造を示唆するような形態的あるいは構文的特徴が表層には全くないため,複文構造の決定はスクリプトやプランーゴールなどの知識を用いて行なわれることが多い.しかし,言語による知識獲得などを考慮した場合,動詞や接続表現の語彙情報からボトムアップ的に複文構造を同定することも極めて重要である.本研究では,第1に,動詞の意味属性として従来から日本語解析に利用されてきた意志性とアスペクト素性が複文解析にも一部利用可能であることを示した.第2に,複文を形成する各単文を話者が事実と仮定しているか否かの判断と接続表現との関係を利用することにより,単文間の係り受けが制限され,複文構造がある程度決定可能であることを示した.単文が事実か命題かの区別を事象の事実性と呼ぶ.この事実性と意志性・アスペクト素性を用いた複文構造の解析手法について研究した.2.自然言語文解析のための汎用型問題解決機PSA2.0我々は従来より, "読みの優先"により,多くの解釈の可能性のうち,その時点で最も自然と考えられる解釈を選択するやり方で自然言語文を解析するシステムの作成を行なってきた.このような処理はオブジェクト指向の考えを用いた解析方法により実現されているが,本年度はこのような解析にも使用できる汎用型問題解決機PSA2.0を作成した.3.知的操作環境としての自然言語インタフェース従来より実現されてきたカナ漢字変換システムや,ウィンドウ表示システムというような操作環境を,より知的な技術に発展させた知的操作環境につき,とくに自然言語インタフェースの側面から考察した.
マクロファージによる感染防御、炎症反応の制御機構

これまでに、通常の遺伝子欠損マウスが胎生致死となるSTAT3の機能を、マクロファージで特異的に欠失させると、IL-10の作用が消失しマクロファージは異常活性化を示すことを明らかにした。さらに、このSTAT3変異マウスは、強いTh1反応を示し、IL-10欠損マウスと同様に慢性腸炎を発症した。このことから、マクロファージでのIL-10によるSTAT3活性化が、マクロファージの機能抑制、さらには慢性炎症の抑制に必須であることを明らかにした。そして昨年度、STAT3変異マウスとSTAT1,TNFα,IL12の各欠損マウスとの二重変異マウスを作製し、その病態の変化を解析することにより、慢性腸炎の発症にはマクロファージ系細胞からの異常なIL-12産生が、強力なTh1反応を生体レベルで誘導することが大きな要因であることを明らかにしてきた。今年度は、STAT3の非存在下では、いかなる機構でマクロファージが異常活性化にいたるかを検討した。マクロファージ系細胞は、Toll-like receptor(TLR)ファミリーが病原体構成成分を認識することにより活性化されることが明らかになってきている。そこで、リポ多糖を認識するTLR4との二重変異マウスを作製した。TLR4/STAT3二重変異マウスでは、慢性腸炎の発症が優位に抑えられ、Th1反応も軽減されていた。この結果は、STAT3欠損マクロファージでは、TLR4を介したシグナルにより異常活性化状態になり、慢性炎症の引き金になることを示している。
野生チンパンジーの社会的相互行為の諸形式とその発達過程

2016年8月から10月にかけて、タンザニア・マハレでフィールド調査を実施し、野生チンパンジーの「リーフクリッピング」および「パントグラント」を中心に行動データを収集した。これまでの調査で得られたデータとあわせて分析をおこない、リーフクリッピングの長期データを用いた行動生起の社会的文脈についての共著論文を作成中である。また、動画資料の分析結果については、2017年夏に国際学会で成果を発表し、その内容を国際学術誌に投稿する予定である。その他の成果として、2015年の調査時に観察した新奇行動である「相互性皮触り」について事例報告を執筆し、英文学術誌に投稿・出版した。同じく2015年の調査で観察した野生チンパンジーとセンザンコウとの遭遇事例について、2016年7月の日本霊長類学会大会で報告し、短報を執筆中である。また、2016年の調査時に観察した金環日食時の野生チンパンジーの行動について共著論文を執筆し、英文学術誌に投稿・出版した。また、2017年2月には、人類学者との共同研究の成果として、英文書籍"Institutions: The Evolution of Human Society" (Kyoto University Press & Trans Pacific Press)を分担執筆・出版した。2016年8月の国際霊長類学会大会では、「対角毛づくろい」行動の変異と集団内伝播過程に関する共同研究の成果を発表し、さらに投稿論文を準備中である。28年度が最終年度であるため、記入しない。本研究では,タンザニア・マハレの野生チンパンジーM集団を対象にフィールド調査をおこない,「パントグラント」と呼ばれる発声をともなう相互行為,および「リーフクリップ」と呼ばれる道具使用をともなう相互行為について,それらの行動が利用される社会的な文脈を詳細に記載し,さらにその発達過程を検討することを目的とする。2014年度は,研究実施計画にしたがって2度(計約3ヶ月)の現地調査を実施し,主にパントグラントとリーフクリップの映像データを収集した。この収集データは,暫定的な結果をフィードバックするために予備的な分析を現在進めているところである。また,1994年から2012年までの5人の研究者による長期データから,リーフクリップの使用される社会的文脈に関する量的な傾向を分析し,2014年8月に国際霊長類学会(ベトナム・ハノイ)にて口頭発表をおこなった。分析結果として,(1)リーフクリップはこれまで考えられてきた「求愛誇示」の文脈で用いられることは全体の約半数であり,求愛以外の文脈でも広く用いられれていること,(2)他地域の野生チンパンジー集団のリーフクリップと比べて,マハレではメスがリーフクリップをする割合が高いこと,などが明らかになった。リーフクリップが広い社会的文脈で用いられているという結果は,この行動が単一のシグナルではなく,受け手側の反応によって多義的な社会的意味をもちうることを示唆しており,今後受け手側の反応についての詳細な分析を進めていく予定である。2015年11月12月にかけてタンザニア・マハレM集団のチンパンジーを対象に野外調査を実施した。研究実施計画にもとづき、「リーフクリップ」および「パントグラント」を中心に行動データを収集した。その他にも、対角毛づくろいや水遊び、狩猟や新奇行動などの事例についても、補足的にデータを収集した。とくに2015年の調査では、複数の新奇行動の観察に恵まれたため、これらの観察結果をまとめて短報を執筆中である。リーフクリップに関しては、長期データを統合して、当該行動が発現する社会的文脈についての共著論文を執筆中である。また、動画資料について、動画解析ソフトを使用して、リーフクリップやパントグラントが生起する相互行為場面について詳細な分析を進めている。リーフクリップの社会的文脈に関しては、おおむねデータの分析を終え、論文執筆に差し掛かっている。リーフクリップをともなう相互行為場面の詳細な分析を進める必要があるが、分析の基礎資料はおおむね整った。パントグラントについてはまだ十分にデータが集まっていないため分析が遅れているが、新奇の挨拶行動を発見するなど、当初の想定を上回る観察結果も得られている。