hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
細菌毒素感染機構を利用したドラッグデリバリーシステムの試作

糖鎖構造が少しずつ異なる変異体が得られることを見いだし、等温滴定カロリメトリー他を用いてそれら変異体の各種糖に対する結合定数等を数値化して各変異体ごとの詳細な糖結合特異性を明らかにした(この成果は現在投稿中).本年度は,これらの変異体を全てストレプタグフュージョン体として大腸菌で発現させる系,及び精製法を確立し,ワイルドタイプも含めて五種類の糖鎖認識が異なるHA1分子を大量に精製・取得した.一方,ストレプトアビジンに変異を加えストレプタグ付きHA1を強力に結合できるように改変したストレプトアビジン変異体も大量に発現,精製し,これらをポリマー化して1分子に結合できるHA1を多価としたものを作製した.現在は,用いるHA1の種類や混合比を変えることによる各種ムチンや糖鎖への結合力の変化を検討しており,ヒトや小動物でのターゲットとする部位へ特異的に結合できるHA1複合体の作製準備段階にある.
酸化活性ルテニウム-オキソ錯体の合成及び反応性と分子認識遷移金属錯体触媒の合成

三脚型配位子であるTPA(TPA=トリス(2-ピリジルメチル)アミン)を有するルテニウム(II)錯体を用いたアルカンの触媒的酸化反応において、新たな知見を得ることができた。すなわち、複核錯体[RuCl(TPA)_2](ClO_4)_2(1)と新たに単核錯体[RuCl(TPA)(DMSO)]ClO_4(2)を合成しその反応挙動を比較検討した。錯体2は錯体1の半分の構造を有している。この2つの錯体はm-クロロ過安息香酸を共酸化剤としたアダマンタンの酸化反応において、塩素化及び酸素化における3級/2級C-H結合に対する選択性が共に良い一致を示すことから、錯体1はアルカン酸化反応において単核中間体に誘導され、錯体2と同じ酸化活性種を生成することが明らかとなった。また塩素化と酸素化でその選択性が異なることから、それぞれの反応の活性種は異なることが示された。また、t-ブチルヒドロペルオキシドを共酸化剤として用いる場合、アルカン酸化反応はラジカル連鎖反応で進行し、錯体の反応性はその酸化還元電位に依存することが明らかとなった。これらの結果については現在論文投稿中である。一方、ルテニウム(III)単核錯体である[RuCl_2(TPA)]ClO_4(3)を水溶液中でAgNO_3で処理した後、Ce(IV)と反応させると緑色溶液が紫色溶液となり、徐々に元の緑色溶液に戻ることが観測された。その紫色溶液中で準安定な高原子価状態の錯体を形成していると考えられるが、現在その単離同定は成功しておらず、低温での合成など今後さらに検討を進める。分子認識金属錯体を指向した配位子の合成に関しては、TPAの2つのピリジン環上に1-ナフトイル基を有する配位子の合成を遂行し、現在その最終段階の条件設定を行っており、近日中にはその合成を完了する予定である。
北方林における更新動態:実生・稚樹の定着過程と集団の遺伝的変異から見た多種の共存機構

本研究では、北海道の亜寒帯林の更新・維持機構に対する実生と稚樹の定着過程の役割を解明し、今後、北方域の森林全体の更新・維持の動態を研究するための基礎とする。さらに、地球温暖化は北方林の更新・維持機構にどのような影響を及ぼすのか?といったような将来の地球環境問題を考えるための基礎研究とする。北海道・大雪山・大雪湖付近の、エゾマツ、アカエゾマツ、トドマツ、ダケカンバなどが共存する亜寒帯林に1ha規模の調査用プロットを設置し、実生と稚樹の個体群動態、生長動態、遺伝的変異に関する調査を行った。まずその調査用プロット内に2x2mのサブプロットを30個設定してその中に出現する各樹種の実生および稚樹にすべてマークし、倒木更新などの実生の定着過程、各樹種の実生と稚樹の生長動態とその環境条件を調査した。同時に遺伝的解析用の葉のサンプリングを行い、実験室で遺伝的解析(酵素多型、DNA-RAPD,DNA-AFLPなど)を行っている。我々の仮説「亜寒帯林での多種の共存にとっては、樹冠木個体間の競争過程よりも実生や稚樹の生長生存過程が重要である」を検証すべく、どのような遺伝的特性を持ったものが実生の段階から生き残って樹冠木にまで生長してゆくのかなど、実生・稚樹の生長動態と遺伝的変異の変化を各種間および各生長段階(エイジ)間で比較し、それぞれの種の生育する環境(倒木、土壌、林床のササ密度など)との関連で解析している。また、実生と稚樹の生長過程に関しては、「定着場所と根の形態の関係が重要である」という仮設のもとに、定着場所の環境条件(倒木上のコケの状態、ササの状態、水分条件、照度条件、周りの樹冠木の胸高断面積合計など)と各種の実生・稚樹のサイズと根の形態などの相関関係も解析している。多量(約3000)のサンプルのDNA解析を行わなければならないので、完成までにあと数ヶ月かかる予定である。北海道・大雪山・大雪湖付近の、エゾマツ、アカエゾマツ、トドマツ、ダケカンバなどが共存する亜寒箒林に1ha規模の調査用プロットを設定し、実生と稚樹の個体群動態、生長動態、遺伝的変異に関する調査を行った。まずその調査用プロット内に2x2mのサブプロットを30個設置してその中に出現する各樹種の実生および稚樹にすべてマークし、倒木更新などの実生の定着過程、各樹種の実生と稚樹の生長動態とその環境条件を調査した。我々の仮説「亜寒帯林での多種の共存にとっては、樹冠木個体間の競争過程よりも実生や稚樹の生長生存過程が重要である」を検証すべく、どのような遺伝的特性を持ったものが実生の段階から生き残って樹冠木にまで生長してゆくのかなど、実生・稚樹の生長動態と遺伝的変異の変化を各種間および各生長段階(エイジ)間で比較し、それぞれの種の生育する環境(倒木、土壌、林床のササ密度などの環境など)との関連で解析している。また、実生と稚樹の生長過程に関しては、「定着場所と根の形態の関係が重要である」という仮説のもとに、定着場所の環境条件(倒木上のコケの状態、ササの状態、水分条件、照度条件、周りの樹冠木の胸高断面積合計など)と各種の実生・稚樹のサイズと根の形態などの相関関係も解析している。

また、実生と稚樹の生長過程に関しては、「定着場所と根の形態の関係が重要である」という仮設のもとに、定着場所の環境条件(倒木上のコケの状態、ササの状態、水分条件、照度条件、周りの樹冠木の胸高断面積合計など)と各種の実生・稚樹のサイズと根の形態などの相関関係も解析している。多量(約3000)のサンプルのDNA解析を行わなければならないので、完成までにあと数ヶ月かかる予定である。
再発性腎癌に特異的な遺伝子異常の同定と解析

腎細胞癌の進行(転移)に関わる遺伝子を同定する目的で、原発巣を手術し得た腎細胞癌症例のうちで、転移により再発し、かつ転移巣を手術的に切除し得た症例20例について原発巣と転移巣のゲノム異常をアレイCGH解析により比較した。その結果、9p24.1-p13.3領域が転移巣であらたにゲノムの欠失を引き起こすことを見出した。腎癌細胞株を用いてこの領域の遺伝子発現を網羅的に調べたところ、NDUFB6遺伝子がgenecopy-lossにより発現低下することを見出した。同遺伝子の発現低下した腎癌細胞株に同遺伝子を導入すると増殖抑制を引き起こすことからNDUFB6が新しいがん抑制遺伝子であることを発見した。本研究は再発性腎癌に特異的な遺伝子異常を同定し機能を明らかにすることで治療標的としての有用性を評価することを目的とする。24年度までの研究では腎細胞癌20症例の原発巣と転移巣におけるゲノム異常をアレイComparative Genomic Hybridization (CGH)により網羅的に解析することで、9p21.1-p13.3領域の欠失が腎癌の再発転移に関与する可能性を示した。また、原発巣と転移巣からRNAを抽出し、その領域に存在する58遺伝子についてリアルタイムPCRで発現を比較することで、2つの遺伝子(NDUFB6とLRRC19)が9p欠失により発現が低下することを明らかにした。本年度は引き続いてこれらの遺伝子が腎細胞癌の癌化能に関与するか明らかにするために、2つの遺伝子のcDNAを単離し、遺伝子導入するためのベクター(レンチウィルス)へ組み込み、組換えレンチウィルスを作製した。さらに、この組換えレンチウィルスベクターを培養腎癌細胞へ感染させたところ、レンチウィルスは効率よく腎癌細胞へ感染することができ、目的の蛋白質も期待通りに発現することを明らかにした。26年度はまず、作製した組換えレンチウィルスを用いてNDUFB6とLRRC19が発現低下している腎癌細胞株へこれらの遺伝子を過剰発現させることで癌化能に変化が見られるか、解析を行う。さらに、もしこれらの遺伝子の過剰発現により癌化能が抑えられた場合、どのようなメカニズムで抑えられたのか明らかにする。これらの解析により、NDUFB6とLRRC19の再発性腎癌の治療標的としての有用性を評価することができ、将来的に臨床応用への研究につなげることができると期待される。遺伝子の絞り込みに関しては、腎細胞癌症例20例について原発巣と転移巣におけるアレイCGH解析によって転移巣で有意にgene-copy number lossを認めた領域として、9p24.1-p13.3領域を同定し、その領域に存在する約200個の遺伝子の内で発現低下する遺伝子を凍結腎細胞癌組織を用いてトランスクリプトーム解析した。さらに腎癌培養細胞を用いてアレイCGH法により解析して、9p24.1-p13.3領域のlossを認める細胞株と認めない細胞株に分け、さらにmRNA発現をトランスクリプトーム解析によって網羅的に調べて、9p24.1-p13.3領域に存在する遺伝子のうちで、これらの領域のlossによって発現低下する遺伝子を抽出した。その結果、2つの候補遺伝子の同定に成功した。これらのgene-copy number lossと発現低下はリアルタイムPCRを用いた解析で確認した。当初の計画では24年度は遺伝子の絞り込みと発現低下に関して、リアルタイムPCRによって確認するところまでを計画していたが、遺伝子発現低下する遺伝子が思いのほか少なかったため、計画をさらに前倒しした。すなわち、これらの二つの遺伝子のcDNAを遺伝子導入するための組み換えウィルス(レンチウィルス)ベクターに組み込み、組み換えレンチウィルスを作製した。したがって、24年度中に25年度の遺伝子導入実験の準備実験が終了し、達成することが出来た。25年度までに転移性腎がん症例の原発巣と転移巣のアレイCGH解析によって9p24.1-p13.3領域のlossが転移巣に有意に高頻度であったことから、この領域の遺伝子発現をしらべ、9p24.1-p13.3領域のlossによって発現低下する遺伝子を抽出した。そして抽出された遺伝子の発現低下の有無と患者の予後(recurrence-free survival)を比較し、2つの遺伝子NDUFB6とLRRC19の発現低下が予後不良をもたらすことを見出した。そこで、26年度以降は、その機能の解析を進めた。9p24.1-p13.3領域のgenomic lossを認め、かつ両遺伝子の発現低下を認める腎がん細胞786-Oと769-Pに両遺伝子をそれぞれ組み換えレンチウィルスを作製して両細胞に感染させることで遺伝子導入したところ、LRRC19は増殖能には影響せずかつ、Boyden-chamber法を用いて浸潤能を比較しても影響は認めなかった。一方、NDUFB-6は同じ方法で比較したところ、浸潤能には影響しなかったが、増殖能の低下をもたらした。

したがって、NDUFB-6は原発巣では異常が少ないが、転移巣で9p24.1-p13.3のlossにより発現低下し、それが転移巣のがん細胞の増殖力を高め、それが患者の予後(recurrence-free survival)の短縮に関わっていることが強く示唆された。分子病理学24年度までの研究によって、腎がんでは、原発巣の外科的切除後に再発する症例においては、有意に9p24.1-p13.3の領域のゲノムコピー数の減少を認めている。25年度はこの成果を踏まえて、この領域に存在する遺伝子について、9p24.1-p13.3 lossを認める腎がん組織を用いて、遺伝子発現が有意に低下する遺伝子を検索した。その結果、解析した58遺伝子のうち、遺伝子発現が有意に低下する遺伝子を2つ同定した。非常に幸運なことに、ゲノムコピー数の低下によって発現低下する遺伝子が2つのみ(NDUFB6とLRRC19)であったため、その2遺伝子のcDNAをコードする組み換えウィルス(レンチウィルス)を作製した。当初は24年度は腎癌組織と腎細胞癌細胞株を用いて、アレイCGH解析とトランスクリプトーム解析をおこない、gene-copy number lossを認める領域の特定、さらにgene-copy number lossによって発現低下する遺伝子を同定することを目標にしていたが、計画がきわめて順調に進展したため、25年度の実験計画を前倒しして実施して、遺伝子導入のための組み換えウィルス作製まで達成した。25年度の成果、つまり腎がんの再発によってゲノムコピー数の低下とそれによる遺伝子発現低下を起こす2遺伝子の同定し、その2遺伝子を細胞や組織で発現させるための組み換えウィルスの作製に成功したこと、に基づき、26年度は、この2つのウィルスを腎がん培養細胞に感染させることで、2遺伝子が発現低下している腎がん細胞に2遺伝子を遺伝子導入する。そして、その細胞増殖能の変化、細胞死誘導能の変化を明らかにすることで、2遺伝子の機能を明らかにする。その結果をもとに2遺伝子のどちらが腎がんの再発に関わるがん抑制遺伝子であるのかを解明する。9p24.1-p13.3領域の転移抑制遺伝子候補の遺伝子導入による機能解析実験24年度に作製した組み換えウィルスを9p24.1-p13.3領域のlossを有しかつ候補遺伝子が発現低下している細胞株に遺伝子導入して一過性発現させ、細胞増殖能をコントロール細胞と比較する(MTS assay)。次いで細胞増殖能が有意に低下する遺伝子を特定する(転移抑制遺伝子候補の絞り込み)。同様にBoyden-Chamber法により、癌細胞の浸潤能を解析する。候補遺伝子が発現低下している細胞株に遺伝子導入して浸潤能が低下するか否かを解析する。転移抑制遺伝子候補のsiRNAを用いた発現抑制解析上述の実験で、遺伝子導入によって、a)細胞増殖の低下、b)浸潤能の低下を認めたものについては以下の実験を追加する。発現低下を認めなかった細胞株に対して、shRNAを発現させる組み換えレンチウィルスを作製して、感染させて候補遺伝子をノックダウンすることによって、a)増殖能の亢進、b)浸潤能の亢進を示すか否かを解析する。
化学アフィニティーを利用した分子構造認識型固相抽出剤の開発と残留農薬分析への応用

吸着剤として用いられる相互作用は、強い相互作用だけではなく、弱い相互作用も十分機能することを明らかにした。距離依存性の小さな強い相互作用が、溶質を官能基まで引き付け、距離依存性の大きな弱い相互作用で溶質と官能基間の距離が最短となることで、捕捉に必要となる十分のポテンシャルエネルギーが得られる。一旦、弱い相互作用で捕捉されてしまえば、溶質の脱着は容易ではなくなる。この性質を利用し、吸着剤表面に捕捉された溶質を脱着することなく、固相蛍光法で定量する「オンレジン測定法」を開発した。この方法による蜂蜜中の抗菌剤、テトラサイクリン類の簡易スクリーニング法を確立した。前年度に引き続き、溶質の吸着に関与する分子間の相互作用として、非常に弱い相互作用である分散力の評価を行った。種々の臭素化フェノキシ基を導入した重原子型吸着剤をLCカラムに充てんし、対照化合物との分離度を比較することで導入率の影響を取り除いた純粋な相互作用の比較を行った。その結果、重原子型分離剤ではハロゲン化フェノールのみならず、ハロゲン化ベンゼンに対しても明らかな選択性を発現することを明らかにした。特に、移動相有機溶媒組成の高い、いわゆる順相モードで強い選択性が発現した。昨年度の溶質の有機双極子の影響に加え、溶媒和の影響が溶質の保持に大きく影響を及ぼすことを明らかにした。重原子型吸着剤を発展させたp-ニトロフェノキシ基を導入した双極子型吸着剤(PNP)を使った「オンレジン蛍光分析法」による応用研究も継続した。PNP吸着剤は、ネオニコチノイド系薬剤に対して選択性を発現する。一方、ネオニコチノイド類のイミダクロプリドは蛍光性を持たないが、アルカリ条件下光照射で蛍光性を示すことが知られている。この光誘起オンレジン蛍光装置にPNP吸着剤をインラインに組み込んだ分析系を構築した。光照射時間や溶離液pHの最適化を図ることで、農産物中の0.5 ppmイミダクロプリドを確認することができた。溶質の吸着に関与する分子間の相互作用として、弱い相互作用の評価を行った。今年度は双極子の作用について検討した。大きな永久双極子を持つp-ニトロフェノキシ基を導入した吸着剤と種々置換フェノールとの相互作用では、ハロゲン置換されたフェノールで強い吸着が認められ、その強さは溶質の電子分極率、すなわち屈折率と有意な相関が認められた。これは、双極子を持った官能基による溶質の誘起双極子が吸着に大きく係わっているためと考えられ、種々の双極子モーメントを持った官能基を導入して吸着特性を評価しているところである。一方、この双極子-誘起双極子を発現する選択的吸着剤の応用研究も展開した。テトラサイクリン系抗菌剤、この化合物は両性イオン体であり、ベタイン型の吸着剤に非常に強い親和性を有し、容易に脱着できなくなる。この性質を利用して、固相蛍光による「オンレジン蛍光分析法」を開発した。オンレジン法とは、固相抽出剤による目的物の捕集・洗浄後、目的物を溶出させることなく固相表面上で検出する新規スクリーニング法である。テトラサイクリン類は、近紫外部に励起波長を持った発蛍光性化合物であるため、カートリッジ外よりLEDで照射、励起することで可視蛍光の測定が可能であった。オンレジン用の試作装置を自作し、蜂蜜試料へ適用したところ、我国の残留基準である0.3 ppmを確認することができた。固相抽出やクロマトグラフィーにおける溶質の保持・分離にとって大きな役割を果たさないと考えられていた弱い分子間相互作用、例えば分散力や双極子モーメントを利用することで、溶質の選択的捕捉に関する検討を試みた。選択性は分離剤官能基と溶質間に複数の相互作用が同時に発現されることで生じる、と考えれば両者の間には近接関係が不可欠となる。すなわち吸着現象である。官能基・溶質の分子間距離の接近は、弱い相互作用といえども無視できなくなる。また、溶液中での吸脱着平衡では官能基、溶質とも溶媒和を受けた三体間現象であり、溶媒和に強い相互作用が関与する限り、その相互作用は溶質の吸着には影響を及ぼさず、ますます弱い相互作用の役割が重要となる。そこで、ハロゲン置換基を有するフェノキシ官能基を導入した吸着剤を合成・評価したところ、官能基の持つ配向双極子性が近接した溶質に誘起双極子を誘導し、大きなモル屈折率を有する溶質に対する選択的吸着を示すことを見出した。更に、双極子モーメントの大きなp-ニトロやp-シアノフェノキシ基を導入することで、この傾向は顕著になり、双極子-双極子による極めて選択性の高い保持特性を得ることに成功した。これら吸着剤は、食品や臨床分析において有効に機能することを証明した。

衛生分析化学本研究の目的は、固相抽出における吸着剤官能基と溶質間に働く相互作用の影響調査とその制御である。従来固相抽出とは、水素結合や親油性相互作用のような比較的強い力が支配する分離の場であり、序でに弱い副次相互作用も利用する程度の認識しかなかった。申請者らは、重原子に基づく分散力の吸着に及ぼす影響を調べる目的で臭素化フェノキシ基を導入した分離剤を合成・評価し、強い相互作用が働かない溶液条件においては非常に弱い相互作用である分散力も主相互作用になりうることを初めて実証しえた。一方で、臭素化フェノキシ基の持つ永久双極子がもたらす溶質への誘起効果が非常に大きいことも明らかにし、より大きな双極子を有するp-ニトロフェノキシ基を導入した吸着剤の開発へと繋がった。これら選択的吸着剤を使った食品分析への適用も進展した。複雑なマトリクスを有する食品分析において、これら弱い相互作用が発現する吸着剤の有用性を明らかにできたものと考える。本来、吸着剤上で作用する相互作用は、水素結合や疎水性相互作用のような比較的強い力が利用されてきた。二次あるいは三次といった副次相互作用を利用する、いわゆる多足型吸着剤においては、主保持機構とは別に、より強い相互作用を発揮する官能基を疎に導入することで選択性を高めてきた経緯がある。今回の研究は、主保持機能を持った官能基とほぼ当量の弱い相互作用を発現する官能基を導入した吸着剤が発現する新たな選択性追及を目的としたものである。遠くの溶質まで影響力を及ぼすlong-range官能基、例えばクーロン力は強い吸引力を示すが、電気二重層によって近接できないためポテンシャルエネルギーはさほど大きくなく、容易に他の電解質によって置換される。一方、van der Waals力のような弱い相互作用は、遠くの溶質に影響力を与えることはできないが、溶質間の距離が縮まること、また関与する原子数が増えることで相対的に強い吸着力になりうる。すなわち、強いlong-range相互作用官能基と弱いshort-range相互作用官能基を組み合わせることで新たな吸着選択性が発現することを始めて実証できた。この相互作用を利用した選択的吸着剤から溶質が容易に脱着できないことを逆手に取った「オンレジン分析法」は、これまでになかった簡易スクリーニング法として、複雑なマトリクスを有する食品や臨床、環境といった分野での微量危害因子分析に大きく貢献できるものと考える。上述のように、分散力が主相互作用として働く分離の場構築を目指して吸着剤の開発を行ってきた。ここで派生した吸着剤が双極子に基づく相互作用を有する吸着剤で、様々な分野への応用が可能な優れた特性を発揮した。官能基としての芳香環は、親油性やπ-π相互作用を発現させるために不可欠であるが、双極子を生じてしまう。そこで平成26年度には、ポリチオアミド型の吸着剤を合成・評価する予定である。合成方法としては、鎖状のポリエチレンイミンを導入した後に、Kindler反応でチオベンズアミド型への誘導を図る。これによって双極子の影響は相殺され、純粋に分散力が評価できるものと考えている。一方でオンレジン分析への適用は、研究最終年として新規の吸着剤も含めて広く展開していきたい。ネオニコチノイド系殺虫剤は、イミダクロプリド以外の光誘起蛍光法を確立しており、包括的なネオニコチノイドスクリーニング法として確立していきたい。
英国大戦間期の主体構築研究--女性作家による戦争自伝伝記文学作品の考察

本研究の目的は、20世紀初頭の英国での自己表象をめぐる過程を、「審美的」文学の文脈(モダニズム)と歴史的文脈(大戦間期)とを接続したうえで、同時期の自伝的テキストの調査、収集、および分析を通じて検証することにある。本研究では、正典とされる作品とともに、非正典とされてきた作品を論じる。それは両者の区分ではなく共通点に注目するからであり、両者をともに論じることで、女たちの自己表象モデルを多角的に捉えることを目指した。とくに英国にとってナショナルな第一次大戦に関連する作品を中心に、ジェンダー/セクシュアリティ理論に基づき考察する。前年度の研究で、大戦間期に発表された自伝および伝記的作品を女性作家を中心に考察した結果、英国国内の女性運動において人種概念が女性の主体構築において重要な影響を与えていることを新たに指摘した。そこで継続性が重要となる女性運動を踏まえて、過去と未来の両者の視点を考察する重要性を認識した。したがって本年度はおもに次の二点を中心に研究をおこなった。第一に、未来が投影されると考えられる少女の自己形成の物語の分析と、第二に、大戦間期からみた過去にあたる第一世界大戦中に国家に奉仕する従軍女性の役割について考察をおこなった。まず大戦間期の少女像については、少女がフェミニズムのどの点を受容し、その思想を継続したのかを、"Girls' Feminism in the British Interwar Period"と題して、論文として発表した。つぎに、従軍女性のうちとくに看護婦に関する言説・表象が文学作品のなかだけでなく歴史的資料においても定まっていない点に注目し、資料調査をおこない、"Nursing Culture during the Interwar Period in Britain"として口頭発表した。この点については、2012年度内にはまとめられなかったものの、2013年度中に論文執筆をおこなう予定である。さらに前年度に続けてジャンヌ・ダルク表象の研究をつづけ、論文として発表する予定である。ほかに、日本の女性従軍女性の自伝的伝記作品に関する書評を前年度におこなったが、女性運動が国際的であったことを考えると、20世紀初頭の従軍女性表象を多角的に比較検討する必要性を確認することができたと考えられる。これらの研究成果を出すに当たり、英国および国内にておこなった資料調査が大いに役立った。このように、科学研究費助成金によって研究を進展させることができたことに深く感謝する。本研究の目的は、ジェンダー体制を利用しながら振るわれる戦争という暴力をとおして、20世紀初頭の英国の「人間の領域」がどのように画定されるのか、を明らかにすることにある。本研究の初年度として平成23年度は、異国人を切り口に20世紀初頭の英国女性の国民概念および国民意識の形成を明らかにすることに主眼を置いた。とくにフランスのナショナリズムのアイコンであり、また異性装のヒロインでもあるジャンヌ・ダルクの、英国における受容過程を考察することによって、英国女性のナショナル・アイデンティティが歴史的文化的文脈のなかで、人種/ジェンダーの概念に影響されながら、どのようなかたちに構築されていったかをたどった。本年度の研究成果は国内外における学会において発表した。まず、第一次大戦以前のジャンヌ受容を英国女性参政権運動から分析し、米国The 10th Annual Hawaii International Conference on Arts and Humanitiesにて成果報告をおこなった。次に、第一次大戦以後の表象の変遷については、バーナード・ショーの『聖ジョーン』から明らかにし、早稲田大学ジェンダー研究所の例会にて研究発表をおこなった。本研究については、次年度に論文として公表する予定である。本年度はまた、次年度に向けて第一次世界大戦の女性従軍者の手記、伝記、回想録等についての調査を着手し、欧州の大戦に関する米国女性の出版物に、有益な文献を発見することができた。これによって次年度以降の研究に向けて新たな視座を獲得が可能となった点で意義深い。本研究においてはおもに3点((1)大戦間期の女性従軍者による、また女性従軍者に関する資料収集、(2)大戦中の女性従軍者の自伝・伝記文学の分析、(3)自伝伝記文学運動とフェミニズムの関係調査)を明らかにすることを目的とした。このうち、前者の二点については上記研究概要に述べたとおり、大部分が達成されたといえる。三点目については、次年度以降も継続しておこなう予定である。当初の研究計画との変更もあった。2011年3月11日におこった東日本大震災およびその後の計画停電の実施によって、勤務校の学年暦が大幅に変更され、また長期休暇期間が縮小された。そのため、当初予定していた渡英調査が本年度に実施することが難しくなり、次年度に繰り越しすることとなった。ただし、研究を滞らせないために、所属先図書館および国内図書館を通じて英国から資料を取り寄せる調査方法に変更することによって、研究の進ちょくが滞ることを回避した。

その結果、当初の予算配分では旅費を中心としていたが、資料収集への予算配分の比重が高くなった。1)資料収集:文学および表象を研究対象とする本研究においては、資料は必須である。平成23年度において文献調査を実施したが、引き続き、本研究をさらに多角的に捉えるために、該当時代の定期購読雑誌などの資料収集をおこなう。2)作品分析:収集した資料をもとに、作品分析をおこなう。3)当該研究の先行研究の調査:国内外の研究者の先行研究を調査し、当該研究の妥当性を高めるとともに、当該研究分野の貢献に尽くす。4)研究成果の発表:平成23年度からの研究成果を、国際学会での口頭発表および所属する学会誌にて論文発表する。1)資料収集:資料を収集するための費用として、国内外の資料館・図書館への旅費、資料複写代に使用する。2)研究成果発表の旅費:研究成果を発表するための学会参加費用に使用する。3)論文執筆のための消耗品等を購入する。4)論文執筆のため英文校正に使用する。
遠隔画像診断に適した透かしの強度と画質劣化を考慮した電子透かし方法

電子透かしのエラー訂正に必要な機能を洗い出し、エラー訂正技術の基礎検討を行った。以下の3項目について、研究した。(1)透かしの埋め込み方法、(2)透かしの検出方法、(3)透かしが画質に与える影響・研究に使用する画像を収集し、画像データベースを構築した。単純X線、CT画像、MRI画像、核医学画像などについて合計100症例、画像を選定し収集した。・処理前の収集画像は、白黒階調.を10244096持っており、透かしの研究には適さないため階調変換を行い、白黒256階調に変換し、この画像に電子透かしを埋め込んだ。・電子透かしの埋め込みを行うプログラムを開発した。このプログラムは、JAVAで作成した。また、同時に透かし固有情報を検出するプログラムを開発した。画像処理として平滑化、輪郭強調やJPEG(DCT)、JPEG2000(DWT)圧縮を用い、透かしを埋め込んだ画像を処理し、埋め込んだ透かし固有情報の検出率を調べた。透かし固有情報の検出率は、すぐに80%を切り、画像処理に強く影響を受けることが分かった。・透かしのエラー訂正として以下の方法を考案した。(1)組織的な画像全面に透かしを埋め込み、局所的なエラーを無視する方法(2)数学的に冗長性を持たせて透かし情報の誤りを訂正する方法(BCH法)・デジタル透かしを埋め込んだ画像を、信号対雑音比率で評価し、40dB以上を示す透かし埋込を、評価した。複数の放射線科医による評価で、画質が保たれている画像は、ほぼ40dBを示した。このような信号対雑音比と医師による評価で最適のパラメータを検討した。Range法による埋め込みパラメータは、DCT法のDCT係数(1,1)でR=8または16、DWT法では、分解レベル4or5LL成分でR=24が推奨される値であった。これらの値は、圧縮耐性と画質劣化との両面から検討した値である。・処理前の収集画像は、白黒階調を10244096持っており、透かしの研究には適さないため階調変換を行い、白黒256階調に変換し、この画像に電子透かしを埋め込んだ。さらに、画像処理として平滑化、輪郭強調やJPEG圧縮を透かしを埋め込んだ画像に作用させ、埋め込んだ透かし固有情報がどのくらい、検出できるかを調べた。

複数の放射線科医による評価で、画質が保たれている画像は、ほぼ40dBを示した。このような信号対雑音比と医師による評価で最適のパラーメーターを検討した。胸部X線画像と腹部CT画像を対象として、DCT(Discrete Cosine Transform)法とDWT(Discrete Wavelet Transform)法を用いて、電子すかしを埋め込む方法を開発した。DCT法やDWT法では、係数の取りうる値が0または1ではなく、有理数であるため、すかし情報に対応して0/1を埋め込む方法は利用できない。そこで、ある係数に対してレンジRを定義し、このレンジRの前半と後半ですかし情報を判断する方法を考案した。この方法をレンジ法と呼ぶ。DCT法では、係数を第1次係数C1,1に埋め込むことにした。また、DWT法では周波数軸を等しい帯域幅で均等分割するサブバンド符号化に基づいている.分解された各サブバンドは,分解レベルとLL,HL,LH,HHの周波数での記号を組み合わせて表される。LLは、水平・垂直方向ともに低域通過フィルタリングを行ったものであり、この部分にすかし情報をレンジ法で埋め込んだ。電子透かしエラー訂正コンピュータを購入し、電子透かしが埋め込まれた画像から透かし情報を検出するプログラムを開発した。DCT法とDWT法を比較すると、非可逆画像圧縮に対する耐性を比較し、DWT法はJPEG2000の非可逆圧縮に強く、DCT法は、JPEGの非可逆圧縮に比較的強い耐性を示した。電子すかし情報を埋め込んだ画像に対して、医師による画質評価では、3段階から4段階のDWT法による電子すかしでは、アーチファクトが強く認められた。以上より総合的に判断すると、DWT法による階層34のLL成分にRange=8で埋め込む電子すかしが望ましいと考えられた。
註釈家スティラマティと法相教学の安慧とヴァラビーの堅慧の関係性の総合的解明

インド・グジャラート州のヴァラビー(現ヴァラビープル)から出土した銅板碑文にSthiramatiの名前があり、これが玄奘『大唐西域記』ヴァラビーの項目の「堅慧」という人物と同一視されてきた。現代の仏教学界で常識となったのはビュラーが両者を「間違いない」と同定したことを発端とする。しかしヴァラビープルの現地を調査すると、ヴァラビーにはナーランダーに匹敵するような僧院があったとは到底思えない感覚に襲われる。しかも玄奘の『大唐西域記』にも、そのような記述はない。かつて僧院が存在していたとしても、考古学的にもその他の分野の研究からも、それがナーランダーに匹敵するほどの壮大な僧院であったとは考えられない。また碑文研究の研究から考えても銅板碑文に名前があるSthiramatiが多くの註釈書を残したSthiramatiと同一人物とすることには無理があることが判る。ビュラーの研究により両者を同一視することを何故に仏教学界が受け入れてしまったかを探ると、日本の江戸時代の普寂の記述に発端を持つことが判った。さらにその淵源を遡ると玄奘が『大唐西域記』の中でSthiramatiを注意深く「安慧」ではなく「堅慧」と漢訳したにも関わらず、玄奘の弟子の窺基が「安慧」と訳し直し、しかもこの「安慧」が『阿毘達磨雑集論』の著者であるという説明文を付け加えたことで、註釈家Sthiramatiであるとしたことが確定してしまった。これらの経緯を国際仏教学会(カナダ)と日本印度学仏教学会(東洋大学)で発表した。現在のヴァラビープルを現地調査したことに基づき、この地で出土した銅板碑文のSthiramatiが註釈家Sthiramatiとは別人である可能性が高まった中、両者を同一人物とすることを決定づけたビュラーなどヨーロッパの仏教学の成果を再検討した。再検討の過程でビュラーなどの前提となった背景資料を精査してゆくうちに、その発端が江戸時代の日本の普寂の記述に発端があり、日本の近代仏教学の研究史の中で徐々に下地が出来上がっていったことにあることが思いの外早く見つかった。さらにその淵源を中国唯識教学に遡ってゆくと、玄奘の弟子である窺基が意図的にか否かは定かでないが、玄奘『大唐西域記』のヴァラビーの項のSthiramatiを「堅慧」と漢訳し、その人物像については一切記さなかった玄奘の意図を汲まずに、窺基の著作の中で「安慧」と訳し直し、玄奘が『阿毘達磨雑集論』の著者として「安慧」とした註釈家Sthiramatiとして描いたことがもともとの出発点であることが濃厚となった。この点まで早く辿り着けたのは研究協力者の協力のたまものである。安慧ー真諦と繋がる如来蔵思想系と護法ー戒賢ー玄奘系の中国唯識教学・日本法相教学の流れがどうして定着してしまったかも判ってきているので、この点をさらに明確化すると共に、玄奘はナーランダーでそもそもどのような瑜伽行唯識思想を学んできたか、それが中国に帰国し翻訳活動をする中でナーランダーで学んだものと異なる傾向の思想へと変化したのではないかという疑問が生まれてきている。さらにはそもそも瑜伽行派と呼ばれる所以であるヨーガの修行者の姿はどこに消えたのかは、玄奘の弟子の日本からの留学僧道昭の存在を再確認する必要も生まれてきている。このような新たな課題に向かう研究の準備を進めることにする。『大唐西域記』のヴァラビーの項に玄奘が記した堅慧という人物を註釈家Sthiramatiと同一人物と決定づけたのは1884年のBealの英訳である。これは1857-58年のJulienの仏訳が堅慧をSthiramatiとしたことに加え、当時ヴァラビーで発掘された銅板碑文にSthiramatiの名前があったことで、1877年にBuehlerが「同一人物であることに間違いない」と報告したことを受けたものである。近年の梵文写本研究から『中辺分別論』『唯識三十頌』に加え『五蘊論』『倶舎論』の註釈者のSthiramatiが同一人物であることが明確になっている。しかし、その人物とヴァラビーの銅板碑文のSthiramatiと結びつける根拠は『大唐西域記』はじめ玄奘の報告のどこにも見当たらない。そこで玄奘がヴァラビーのSthiramatiをわざわざ「堅慧」とした意図を探求すべく銅板碑文の意義に加え、グジャラート州の発掘を手がけている考古学の研究者と密に連絡を取り、また衛星写真を元に地質などから現地の遺跡の可能性を探る研究者とも連携して、ヴァラビーの地形や遺跡の可能性を考慮して、この地にはナーランダーに匹敵する大きな僧院があったとは考えにくいと考えるべきことに自信を得た。玄奘は堅慧については名前を徳慧とともにヴァラビーとナーランダーに関連づけて示すが、徳慧には詳しい説明があるものの、堅慧は名前のみしか記載しない。『慈恩伝』の安慧もこれとは関連することなく別な形で登場させるのみである。

考古学的見地からも碑文研究の観点からも、玄奘がヴァラビーにSthiramatiという人物がいたと認識していたとしても、註釈者とは別人であると意図して「安慧」ではなく「堅慧」とわざわざ『西域記』の記述者弁機に指示した可能性が極めて高いと結論づけたいと思う段階に達した。「安慧」ではなく「堅慧」と玄奘が意図して記述者弁機に指示したとする根拠付けは極めて慎重を有するものである。インドを専門とする考古学研究者を見つけるのに時間がかかり、その研究者を通じてヴァラビーの発掘調査の主たる担い手であるバローダ大学の研究者にコンタクトを取っている。別に衛星写真を使用して遺跡の可能性を調査する研究者とコンタクトを持つことができ、ヴァラビーとナーランダーの現在の状況と重ね合わせて推測することで、ヴァラビーに壮大な僧院の後が見つかる可能性が低いと考えられる。そのためグジャラートでは近年仏教遺跡の発見があるにもかかわらず、考古学分野でもこの地の発掘に期待を持っていないことが裏付けられる。玄奘がヴァラビーのSthiramatiの名前を現地に行かず情報のみから得た可能性もあるなかで、玄奘自身が『大乗阿毘達磨集論』の註釈者にあげる安慧と碑文のSthiramatiを少なくとも別人と意識していた可能性が高い。玄奘は現在発見されているSthiramatiの梵文写本テキストをどのくらい知っていたかは検証が必要であるが、後の唯識教学・法相教学の安慧とは全くの別人である可能性が見えてきた。玄奘の意図を確定するにはなお難しい点もあるが、これを結論とすることで学界の了解を得られる所まで来ていると思われるので、おおむね順調に進んでいると報告した。インド・グジャラート州のヴァラビー(現ヴァラビープル)から出土した銅板碑文にSthiramatiの名前があり、これが玄奘『大唐西域記』ヴァラビーの項目の「堅慧」という人物と同一視されてきた。現代の仏教学界で常識となったのはビュラーが両者を「間違いない」と同定したことを発端とする。しかしヴァラビープルの現地を調査すると、ヴァラビーにはナーランダーに匹敵するような僧院があったとは到底思えない感覚に襲われる。しかも玄奘の『大唐西域記』にも、そのような記述はない。かつて僧院が存在していたとしても、考古学的にもその他の分野の研究からも、それがナーランダーに匹敵するほどの壮大な僧院であったとは考えられない。また碑文研究の研究から考えても銅板碑文に名前があるSthiramatiが多くの註釈書を残したSthiramatiと同一人物とすることには無理があることが判る。ビュラーの研究により両者を同一視することを何故に仏教学界が受け入れてしまったかを探ると、日本の江戸時代の普寂の記述に発端を持つことが判った。さらにその淵源を遡ると玄奘が『大唐西域記』の中でSthiramatiを注意深く「安慧」ではなく「堅慧」と漢訳したにも関わらず、玄奘の弟子の窺基が「安慧」と訳し直し、しかもこの「安慧」が『阿毘達磨雑集論』の著者であるという説明文を付け加えたことで、註釈家Sthiramatiであるとしたことが確定してしまった。これらの経緯を国際仏教学会(カナダ)と日本印度学仏教学会(東洋大学)で発表した。現在のヴァラビープルを現地調査したことに基づき、この地で出土した銅板碑文のSthiramatiが註釈家Sthiramatiとは別人である可能性が高まった中、両者を同一人物とすることを決定づけたビュラーなどヨーロッパの仏教学の成果を再検討した。再検討の過程でビュラーなどの前提となった背景資料を精査してゆくうちに、その発端が江戸時代の日本の普寂の記述に発端があり、日本の近代仏教学の研究史の中で徐々に下地が出来上がっていったことにあることが思いの外早く見つかった。
口腔感染症における嫌気性菌の役割 Prevotella intermedia細胞表層構造の画像計測

1. Prevotella intermedia ATCC 25611,ATCC 33563およびPorphyromonas gingivalis 381を二重固定法(化学固定法)と凍結置換法(FS,物理固定)で固定し,透過電子顕微鏡で観察後,ル-ゼックスFSで画像計測した。二重固定した25611細胞表層構造の幅は,細胞質側から細胞膜13.0,その内葉4.6,中層2.7,外葉3.6,ペリプラズマ間隙2.1,ペプチドグリカン層(PG)6.2,ペリプラズム間隙7.1,外膜9.2,その内葉2.7,中層3.1,外葉3.1nmであった。FS固定した細胞ではPGはみられず,細胞膜11.9,その内葉3.8,中層4.4,外葉3.3,ペリプラズマ間隙8.6,外膜11.0,その内葉3.1,中層3.7,外葉3.7nmであった。化学固定法でPGが観察されると,ペリプラズム間隙の幅は外膜側で大きかった。2.患者の了解のもとに採取した全閉鎖性膿瘍内容物から細菌が分離された。0s0_4蒸着試料の走査電顕像では,細菌細胞表層に微細な線維様構造(加速電圧1Kv,10万倍)が認められた。透過電顕像を入力して画像計測した結果,ファゴソームに対する細菌の占有面積率はグラム陰性菌では33.0%,グラム陽性菌では43.8%,細菌細胞に対する莢膜の占有面積率はグラム陰性菌では33.0%,グラム陽性菌では26.7%,グラム陰性菌の外膜由来小胞の直径は平均26.0nm,面積は平均541.0nm^2であった。好中球およびファゴソームに対するリソソームの占有面積率は20.5%と21.1%であった。これらの事実は,莢膜保有細菌が食細胞内で増殖することや外膜由来小胞が内毒素や組織破壊酵素を口腔組織内に分散させることが,膿瘍形成の一因になることを示唆している。また,デジタル画像計測法で細菌細胞表層構造の幅や宿主の抵抗性因子および細菌の病原性因子を量的・質的に数値化出来ることを示している。Prevotella intermedia ATCC25611(P.i25611)およびATCC33563とPorphyromonas gingivalis 381を二重固定法(グルタルアルデヒドと四酸化オスミウム、化学固定)、KR法(Kellennberger-Ryter法、四酸化オスミウム単独固定、化学固定)および凍結置換法(液化プロパンで瞬間凍結固定、四酸化オスミウム-アセトンに置換、物理固定、FS)で固定後、エポキシ樹脂混合液に包理した。超薄切片を作製後二重染色してから電子顕微鏡で観察し、写真を撮影した。実験区毎に1020枚のフイルムを用いて1545万倍に引き延ばした写真を用意し、ル-ゼックスFSに3CCDカメラで入力した。画像計測は目的構造物を2値化したのち、水平方向平均切片長のパラメータで測定した。二重固定法で固定したP.i25611

細胞表層構造の幅は、細胞質側から細胞膜13.0、その内葉4.6、中層2.7、外葉3.6、ペリプラズム間隙2.1、ペプチドグリカン層(PG層)6.2、ペリプラズム間隙7.1、外膜9.2、その内葉2.7、中層3.1、外葉3.1nmであった.FSではPG層はみられず細胞膜11.9、その内葉3.8、中層4.4、外葉3.3、ペリプラズム間隙8.6、外膜11.0、その内葉3.1、中層3.7、外葉3.7nmであった。ペリプラズム間隙の幅は物理固定法より化学固定法で大きかった。細胞膜と外膜の幅はデジタル画像計測法では固定法によって差位はみられなかったが、手動測定法のノギスではKRが他の2方法より小さかった。化学固定法でPG層が観察されたとき、ペリプラズム間隙の幅は外膜側で大きくなっていた。以上の結果は、デジタル画像解析処理装置を用いて最近細胞の表層構造を詳細に計測できることを示唆している。2.1%グリコーゲンをマウス腹腔に注射後4日に腹腔マクロファージを採取し、上記菌株を貧食させた結果、ウエル当たりの細菌数は減少し、ディフクイックで染色すると、細菌の取り込み像が観察された。3.患者の了解のもとに閉鎖性膿瘍内容物を採取し、細菌検査と電子顕微鏡観察を行った。細菌はすべての症例から分離された。走査電顕像では、好中球に付着した桿菌や球菌が観察され、オスミュウム蒸着法では、細菌細胞表層に微細な線維様構造(加速電圧1kv,10万倍)が認められた。透過電顕像では、好中球内でグラム陰性菌やグラム陽性菌が観察された。これらの写真を入力してル-ゼックスFSで画像計測した結果、ファゴソームに対する細菌の占有面積率はグラム陰性菌では33.0%、グラム陽性菌では43.8%を示した。細菌細胞に対する莢膜の占有面積率はグラム陰性菌では33.0%、グラム陽性菌では26.7%であった。また、グラム陰性菌の外膜由来小胞の直径は平均26.0nm,面積は平均541.0nm^2であった。好中球およびファゴソームに対するリソソームの占有面積率は20.5%と21.1%であった。これらの事実は、莢膜を有する細菌が食細胞内で殺菌機構に抵抗して増殖することやグラム陰性菌の小胞形成能が高くなり、内毒素や組織破壊酵素が口腔組織内に分散さされることが膿瘍形成の一因になることを示唆している。また、デジタル画像計測法で宿主の抵抗性因子と細菌の病原性因子を量的・質的に数値化出来ることを示している。
ウイルス認識とその抑制の最前線で働く未知の自然免疫システムの全貌を解く

自然免疫系ではRNAヘリケース分子のRIG-I likereceptor(RLR)が細胞質に侵入したウイルスが産生したヒトの細胞には通常存在しない構造を持った核酸を認識し、I型インターフェロンをはじめとするシグナルを誘導することが知られており、シグナル経路に必要な分子の同定やRIG-Iの分子レベルでの活性化メカニズム等は詳細な研究が行われている。しかし、RLRがウイルス由来核酸を認識する際の詳細なメカニズム、とくに核酸認識に関わる未知の分子群についてはまだ明らかになっていない。そこで、私の所属する研究室ではウイルス感染時に発現誘導される新規のRNAヘリケース分子DDX60が初期のウイルス認識に関与していると考え、解析を行ってきた。様々なウイルス感染時のDDX60のI型インターフェロン誘導に対する影響をノックダウン、過剰発現系を用いて解析し、DDX60がウイルス感染時にRLRと相互作用し、インターフェロン誘導に重要であり、そしてDDX60はRIG-Iのアダプター分子IPS-1より上流で機能していることを明らかにした。また、これまでRNA分解複合体エキソソームとDDX60が結合することを示してきたがウイルス感染時にDDX60/エキソソーム結合が見られなくなることを明らかにした。このことから、ウイルスが感染する以前の定常状態でDDX60がエキソソームによるRNA分解系とリンクしている可能性が示唆された。また、DDX60ノックアウトマウスが完成し、今後はウイルス感染においてDDX60のin vivoでの重要性について検討していくことが望まれる。自然免疫系では細胞内でウイルスを認識する分子はRIG-I,MDA5,LGP2(RIG-I like Receptor, RLR)であり、これらの分子がIPS-1を介してI型インターフェロンの産生を行うと考えられています。さらにウイルス感染により核酸やタンパク質分解機構が動き、宿主分子によるタンパク質の翻訳等が起こり、ウイルスが増殖することが可能になります。これまで、これらのI型インターフェロン産生、ウイルス分解系、ウイルス増殖に関わる宿主の分子がどのように協調して働くかはほとんど示されていません。本研究では、これらの三つの過程の連携を結びつける分子群がまだ発見されていないのではなかと考え、ヒトの自然免疫の中でRLRと並んであるいは一緒に働き、細胞に侵入したウイルスを最も初期に認識する分子を単離しその機能を明らかにすることが、ウイルス感染に対するヒトの自然免疫機構を明らかにする上で非常に重要であると考え研究を進めました。その結果、ウイルス感染によって発現誘導される新規抗ウイルスRNAヘリケース分子DDX60を発見し、既知のI型インターフェロン認識分子との関連性や、ヒト細胞でのDDX60ノックダウンを行うことで、dsRNAの認識にDDX60が重要な役割をすることを明らかにしました。また、DDX60がRNA分解複合体エキソソームと結合することを明らかにし、このエキソソームとDDX60結合はその機能解析に重要であると考え、その結合部位の詳細な検討を行いました。自然免疫系ではRNAヘリケース分子のRIG-I likereceptor (RLR)が細胞質に侵入したウイルスが産生したヒトの細胞には通常存在しない構造を持った核酸を認識し、I型インターフェロンをはじめとするシグナルを誘導することが知られており、シグナル経路に必要な分子の同定やRIG-Iの分子レベルでの活性化メカニズム等は詳細な研究が行われている。今年度は様々なウイルス感染時のDDX60のI型インターフェロン誘導に対する影響をノックダウン、過剰発現系を用いて解析し、DDX60がウイルス感染時にRLRと相互作用し、インターフェロン誘導に重要であり、そしてDDX60はRIG-Iのアダプター分子IPS-1より上流で機能していることを明らかにした。また、これまでRNA分解複合体エキソソームとDDX60が結合することを示してきたがウイルス増殖抑制とDDX60/エキソソーム結合の関連については示されなかった。DDX60ノックアウトマウスの作製を進めており、完成し次第ウイルス感染においてDDX60のin vivoでの重要性について検討していく予定である。

また、これまでRNA分解複合体エキソソームとDDX60が結合することを示してきたがウイルス感染時にDDX60/エキソソーム結合が見られなくなることを明らかにした。このことから、ウイルスが感染する以前の定常状態でDDX60がエキソソームによるRNA分解系とリンクしている可能性が示唆された。また、DDX60ノックアウトマウスが完成し、今後はウイルス感染においてDDX60のin vivoでの重要性について検討していくことが望まれる。
常時微動計測に基づく伝統木造住宅における振動特性の長期的変化

昨年度の検討から、検討対象住宅の下屋が住宅の振動特性に影響を与えている可能性が示唆された。そこで、本年度は、住宅の振動特性の長期的な変化を把握するために必要となる基本的な振動性状を把握するため、まずは1回の常時微動計測の結果を用いて、特に住宅の下屋が振動モードに与える影響について検討を行った。まず、構造調査結果を基に、住宅の主屋と下屋の各通りに質点を設けた簡単なせん断質点系の解析モデルを作成した。次に、鉛直構面(全面土壁)の剛性kvに対する水平構面(茅葺屋根)の基準剛性khの比kh/kvをパラメータとした固有値解析を行い、得られた1次固有モードの形状と常時微動計測により得た1次振動モードの形状との対応を示した。得られた知見を以下に示す。1)調査対象住宅は、茅葺屋根の主屋とそれを取り囲むように桟瓦葺屋根の下屋が配される。北側の下屋は住宅竣工時から存在する従来下屋で、東、西及び南側の下屋は住宅竣工後に増築された増築下屋である。2)常時微動計測で得られた1次固有振動数は、梁間方向で2.7Hz、桁行方向で3.4Hzであった。1次振動モードは、梁間方向では主屋の西側よりも東側の方が振幅が大きく、桁行方向では概ね並進振動している。3)梁間方向では増築下屋がある構面は主屋の構面と連成振動していないことが推察される。このとき、kh/kvの値は1.0程度で固有モードと振動モードの形状が概ね一致する。桁行方向では従来下屋がある構面は主屋の構面と連成振動していることが推察される。このとき、kh/kvの値は1.02.0程度で固有モードと振動モードの形状が概ね一致する。4)梁間方向では、増築下屋を含めて耐震性能を評価すると、危険側に評価するおそれがある。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。本研究では、伝統木造住宅の耐震性能を常時微動計測によって簡略的に推定可能にすることを目指し、微動レベルで振動特性に影響を与える要因の分析と変化量の評価を行う。なお、本研究は、今後、長期間の連続計測を行うための予備的な調査として位置付けるものである。本年度は、まず、主に1常時微動計測の定期的な実施開始と、2調査対象住宅の安全性の現地調査による現状把握を目的に下記の研究を行い、その成果を発表論文(日本建築学会大会学術講演梗概集・掲載予定)としてまとめた。現地調査は、2017年11月9日、12月15日、2018年2月8日と1,2ヶ月に1度実施することができた。1に関しては、定期的な常時微動計測を行うとともに10台程度の温湿度計を住宅の各所に設置することで、振動特性の長期的な変化を掴む準備をある程度整えることができたと考えている。また、住宅の基本的な振動特性(固有振動数と振動モード)を得ることが出来た。2に関しては、現地調査にて構造的な観点から平・断面図を描き得られた情報に基づき住宅の耐力や重量を算定し、住宅のベースシア係数や偏心率などの耐震性能を把握することができた。各構面に設置した計測器の常時微動計測結果により得られた振動モードと、住宅の構面ごとのベースシア係数との対応を確認することで、住宅の主屋と下屋が梁間方向では一体的に挙動していない可能性が示唆された。調査対象住宅の耐震性能は低く、ねじれ振動を生じているが、主屋と下屋の一体性を高めれば、耐震性能を高めるとともに偏心を抑えることができる可能性があることがわかっている。12ヶ月程度の間隔で定期的に常時微動計測を実施するとともに、現地調査により得られた情報から耐震性能評価を実施することができた。また、それらの成果を発表論文として投稿し、研究成果の発表(掲載予定)も行っている。

3)梁間方向では増築下屋がある構面は主屋の構面と連成振動していないことが推察される。このとき、kh/kvの値は1.0程度で固有モードと振動モードの形状が概ね一致する。桁行方向では従来下屋がある構面は主屋の構面と連成振動していることが推察される。このとき、kh/kvの値は1.02.0程度で固有モードと振動モードの形状が概ね一致する。4)梁間方向では、増築下屋を含めて耐震性能を評価すると、危険側に評価するおそれがある。今後も継続して常時微動計測を実施し、1年間程度のデータを蓄積するとともに、長期的な振動特性の変化とその要因について分析を行う。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。