hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
親と暮らしていた脳性麻痺者のひとり暮らしとしての自立生活実現過程に関する研究

本年度は、脳性麻痺者のひとり暮らしとしての自立生活実現過程における社会福祉支援者の支援を質的研究によって解明し、ソーシャルワークの観点から考察した研究成果を3つ発表した。そのひとつは、脳性麻痺者本人の自助を原則に、障害者ピアサポートと本人のプロセスのコントロールを重視した「セルフマネジメント型」という方法が適用された支援のありようである。ソーシャルワークの個別化原則に基づくアセスメントと支援計画立案・実施が欠如していたゆえに、この方法が用いられたこと、および、その背景をも示した。さらにこの結果を、ストレングスモデルに基づくアセスメント、および、自立生活理念による支援への影響という観点から考察した。2つめの研究では、本人に対して不適切なパワー行使を伴った関わりをしていた支援者が、自立生活に移行する過程をともに経験するなかで、知的障害者分野で提唱されつつある「本人中心」を価値化する様を明らかにした。この結果を、クリティカル・ソーシャルワークや、坪上宏(1983)によるソーシャルワーカーと利用者の関係を表す「一方的関係」「循環的関係」という概念によって、考察した。3つめは、社会福祉支援者による自立生活支援の方法として「セルフマネジメント型」とともに見いだした「支援者支援型」という2つの方法について、双方成立の背景、特徴、違い等を記した研究である。実証的な研究成果の蓄積が皆無に等しい当該分野において、それぞれの研究成果は障害者の自立生活支援をソーシャルワークと関連づけながら明らかにした実証的研究であり、本研究課題の目的のひとつである、障害者の自立生活実現過程におけるソーシャルワークの方法に関する知識の創造に寄与できた。2009年度は、調査対象としている脳性麻痺者Aさんの1996年から1998年頃に絞って、Aさんが通所する障害者福祉サービス事業所の職員が、Aさんのひとり暮らしとしての自立生活実現に向けて、どのように関わっていたのか明らかにするために研究を実施した。研究計画段階では、2000年から2002年のAさんのプロセズを解明する計画を立てたが、フィールドワークを実施する中で、それ以前の事業所職員による支援内容を明らかにしなければ、以降のAさんのプロセスを記述・説明できないことが明白になったため、計画を変更した。データ分析の結果、職員はAさんに対して、"本人任せ"と呼べる関わり方をしていたことが、明らかになった。本人任せは、障害者のピアサポートと本人によるプロセスの統制を重視した関わりであり、障害者の自立生活パラダイムを基盤にしている。しかしそれは、自立生活パラダイムの直輸入ではなく、一部の主張が緩和され事業所の文脈にフィットするよう調整されて受容されたものだった。また、本人任せの背景には、利用者の主体性の尊重と個別性配慮の欠如という、ソーシャルワークで重視される価値が関係していた点も明らかになった。自立生活実現過程の支援の実際を明らかにできた点、さらに、ソーシャルワークの観点からその支援を考察できた点は、当該年度の研究の意義である。また本研究では、ソーシャルワークにおける研究法としての事例研究法の試案を編み出すことも研究目的としていたが、現段階での試案を論文として示すことができた。利用者のライフヒストリーや人と環境の相互作用というソーシャルワークで重視される視点、及び、フィールドワークや概念の生成・転用など質的研究法の特性、この双方を組み合わせて事例研究の方法論を示せた点は、これまでにない独自性と新規性を兼ね備えたものだと考える。平成22年度は,調査対象である脳性麻痺者Aさんの自立生活実現に向けての職員の支援に関して,論文を2本完成させた(平成23年度中に発刊予定).ひとつは昨年度からの継続のもので,Aさんの一過程で見られたセルフマネジメント型によるひとり暮らし実現支援の実態とその問題点を明らかにした.セルフマネジメント型という支援方法は,他のひとり暮らし希望者との比較のなかで浮上し,Aさんの個別性に注目したソーシャルワークのアセスメント・支援計画立案に基づくものではなかったことを示し,Aさんのストレングスや限界を丁寧にアセスメントした支援計画の立案の必要性を考察した.もうひとつは,自立生活理念や自立生活を実践しようとする障害者が,支援者を変容させる様子を,Aさんの事例をもとに描いた.欠陥志向のソーシャルワークや支援者中心思考からAさんを評価していた支援者が,自立生活理念や本人主体という理念に出逢い,支援者としての役割や自分の態度にジレンマを感じながらも,Aさんとの関わりを通じてジレンマを脱し,パーソン・センタード,障害者「本人中心」という価値観を養った経験を記述しその意義を考察した.また,アメリカの質的研究の国際学会で,Aさんの自立生活実現の最初の過程である介助者の家庭派遣をめぐって起こった親との葛藤・権力関係に関する研究成果を報告した.障害者が親から自立/自律する過程で経験する親との葛藤や権力・抑圧関係は,国境を越えて普遍的であることが確認できた.また.報告後の質疑応答の中で,自立生活の概念定義が,国によって異なることもわかり,本研究の今後の方向性に関して示唆を得た.本年度は、脳性麻痺者のひとり暮らしとしての自立生活実現過程における社会福祉支援者の支援を質的研究によって解明し、ソーシャルワークの観点から考察した研究成果を3つ発表した。

さらにこの結果を、ストレングスモデルに基づくアセスメント、および、自立生活理念による支援への影響という観点から考察した。2つめの研究では、本人に対して不適切なパワー行使を伴った関わりをしていた支援者が、自立生活に移行する過程をともに経験するなかで、知的障害者分野で提唱されつつある「本人中心」を価値化する様を明らかにした。この結果を、クリティカル・ソーシャルワークや、坪上宏(1983)によるソーシャルワーカーと利用者の関係を表す「一方的関係」「循環的関係」という概念によって、考察した。3つめは、社会福祉支援者による自立生活支援の方法として「セルフマネジメント型」とともに見いだした「支援者支援型」という2つの方法について、双方成立の背景、特徴、違い等を記した研究である。実証的な研究成果の蓄積が皆無に等しい当該分野において、それぞれの研究成果は障害者の自立生活支援をソーシャルワークと関連づけながら明らかにした実証的研究であり、本研究課題の目的のひとつである、障害者の自立生活実現過程におけるソーシャルワークの方法に関する知識の創造に寄与できた。
散乱理論を用いた地球内部応力状態推定の研究

能動関な性質を持つ構造における、地震波の散乱問題を、理論と観測の両面から調べた。まず、境界要素法を用いた数値実験により、地震波動場を調べた。弾性波である地震波の伝播する媒質に、波を散乱させる散乱体としてのクラックと、波の伝播に伴う応力変化で破壊が誘発される内部震源を配置した。これは地震波に対して能動的な構造を表現している。この波動場問題には、クラックによる地震波の散乱問題と、クラックの破壊問題が同時に存在する。これらの問題は、これまでにそれぞれ独立に解かれていた。しかし、両問題が同時に存在する時には相互作用を考慮しなければならず、本研究により初めて解かれた。この構造に弾性波を入射させた時、計算された波のコーダ部分に、内部震源を配置しなかった場合に比べて大きな振幅がみられる。能動的な構造における波動場は、いかなる散乱体のみを配置しても再現され得ないことが分かり、また地震波の多重散乱の重要性を再認識させた。これまで地震波の減衰に関わる研究では、内部減衰と散乱減衰を議論することがあっても、不減衰を考慮することはなく、本研究により波動場における不減衰の重要性も指摘した。このような能動的な構造を持つと思われる阿蘇火山において、火口近傍での地震観測の連続記録を用いて、能動的性質を持つと思われる証拠を見出した。遠地地震波の到達時前後の記録を解析することにより、地震波到達直後から、普段から時折観測される孤立型火山性微動が頻発することを確認した。また1999年集集地震の振幅の大きい遠地表面波によって、火口下で微小地震が誘発された。このようなダイナミックトリガリングが観測され、能動的性質が現れるのは、火山活動と密接な関係を持っていることが分かった。
ナノ粒子による中枢神経系への影響解析に基づく、うつ病発症との連関解明

近年の疫学研究により、PM2.5といった環境中微粒子が呼吸器系のみならず、脳・神経系にまで影響をおよぼす可能性が指摘されている。しかし、その分子機構を科学的に追究した事例は少なく、外因性微粒子の動態に基づく神経細胞応答の理解という観点が欠如していた。そこで本研究では、環境中微粒子とうつ病の発症・悪化に関する疫学研究に着目し、外因性微粒子への曝露に起因するうつ病の発症機序の解明を試みる。
東アジア階層モデルの探究

職業と教育を中心とした不平等の東アジアを基点とした国際比較研究を進めるために、計量調査にもとづいて東アジア的特徴を分析するための視点、概念、方法論の工夫を行い、それを東アジア階層モデルとして提示した。高学歴化と急速な後発産業発展を共通枠組みとしながら、同時に教育制度、労働制度や経済組織、ジェンダー、社会集団などに関する歴史的・制度的相違の影響を捉えることが、東アジアの特性を捉えるために重要である。第一に、2005年SSMデータを用いた日本・韓国・台湾の国際比較分析の成果を、国内外の学会大会や研究会で公表し、様々なコメントを得た。それをふまえて各自が次の段階の仮説の検討とデータ分析に取り組んできた。そこでは、国際的な発信力を増すためにも、SSMに関連する他の国際比較調査の二次活用を積極的に行っている。第二に、主に研究代表者が、比較分析方法論を推進する目的で、事例にもとづく理論化方法としての類型論の一般的問題を検討した。その結果、類型の背後にある社会的プロセスが理論化の鍵であることを確認し、フォーマルなモデルを援用してそのプロセスに解釈的にアプローチする方法を検討してきた。階層構造や社会移動パターンの類型化において、どのような援用モデルがあり得るかが目標課題である。第三に、より実質的な分析モデルの論点を、教育制度、雇用・経営慣習、社会保障・福祉制度などの、階層および労働市場の制度的な文脈に焦点をおいて検討した。文献レビューや、それらの論点とデータ分析との関係づけを主題とし、研究会を二度開催して議論を重ねた。同時に、計量的階層論のレビューを行い、国際比較の論点とのすりあわせを行った。これらは、東アジア階層モデル推進グループと西欧階層モデルの再検討グループが共同して行った。第四に、韓国および台湾の研究者を招聘して国際会議を開催し(2009年1月、福岡)、東アジア比較階層研究の課題について議論するとともに、SSMと他のデータとの突き合わせについて検討した。参加者とは今後も共同研究体制を維持していくことで合意を得た。第一に、昨年度に引き続いて、2005年SSMの日本・韓国・台湾データ、および他の国際比較データの二次分析によって、東アジアに焦点をおいた国際階層比較の成果を蓄積し、国内外の学会大会や研究会で公表して有意義なコメントを得た。とくに、国際社会学会階層部会の春季大会(2009年5月、北京・中国人民大学)では、ある程度まとまった成果を公表することができ、活発な議論とともに国際的なプレゼンスを高めることができた。第二に、分析方法論について、類型の背後にある社会的プロセスが理論化の鍵であることを昨年度の研究で確認したところであるが、今年度はそれをふまえて、職業の獲得機会や教育機会の国際比較に、マルコフ連鎖やファジィ集合質的比較分析(fsQCA)を応用して、具体的な方法を開発した。これらは、ある程度類似性をもつ対象グループ内部の異同を浮き彫りにするので、東アジア比較階層研究に適した分析モデルであることが示された。第三に、これも昨年度に引き続き、階層および労働市場の制度的な文脈に焦点をおいた比較階層論の進展を図った。今年度はとくに、若年層の労働市場への参入および就労形態の多様化に着目した分析と議論、および、年金制度と社会階層との関係に着目した分析と議論を集中的に行った。これらの成果も国内外の学会大会や研究会で公表して、多くのコメントを得た。以上の3点にわたる成果を12月の全体研究会に持ち寄って報告会を行い、研究会全体として到達点と問題点を確認・共有した。なお、海外研究者との連携は、今年度は個別的に行いそれを各自の研究成果に反映させた。これまで継続してきた3つの研究、すなわち、1)既存の国際比較階層研究のレヴュー、2)2005年SSM日本・韓国・台湾調査データの二次分析による重要変数コーディングに関わる問題を軸にした分析モデルの検討、3)2005年SSMデータ分析をふまえた西欧階層モデルにもとづく標準的な分析の問題の検討、以上のとりまとめを、分析モデルの側面は研究代表者が、比較階層論の側面は研究分担者が主導して進め、6月19-20日に福岡で開催した本プロジェクト全体研究会議において共有化を図った。その際、台湾から研究者を招いて講演をお願いし、上記3点に関わる総合的議論を深めることができた。上記の会議で教育・職業階層論、ジェンダー・世代論、社会移動論の班編成を確認し、以後はこれらの班を中心に、主に日本・韓国・台湾の「異・同」を一貫的に捉えるための解釈図式の精緻化と展開を進めた。その成果を、国際学会としては7月にスウエーデンで開催された国際社会学会(ISA)世界大会等、国内学会としては11月に名古屋大学で開催された日本社会学会大会等において報告し、多くのコメントを得た。また、それらの学会を利用して班別の研究会や打ち合わせ会議をもち、課題の共有と研究連携の実質化を図った。

それをふまえて各自が英語論文の執筆を進め、それらをとりまとめた研究成果報告書を冊子体とCD版で作成し、国内外の関連研究者・機関に配布して、本プロジェクト3年間の最終的な研究成果の公表とした。
癌患者の骨髄・末血中における遺伝子発現解析よりみた転移機構の解明

消化器癌の転移・再発の成立においては、癌側因子と宿主側因子とが転移形成に必須の新たな「転移巣社会」を形成すると推察されるため、両面から俯瞰的研究により転移再発機構を解明し、診断・治療の標的を求めることが重要である。われわれはその観点から、特に、1)癌細胞における転移再発促進機構および2)宿主側におけるその幇助機構の二つの側面から検討している(Ann Surg Oncol 2009 16:1070-1)。今年度中に報告しえた成果は、癌細胞より直接分泌され浸潤・転移に重要な役割を担うu-PAR/u-PA (胃癌Br J Cancer 2008 ; 100:159-3、乳癌Ann Surg Oncol 2009 in press)、MT1-MMP(Ann Surg Oncol 2008 ; 15 : 2934-42)の胃癌における重要な意義を明らかにした。また、MMP1については血清における蛋白測定の意義を明らかにした(Clin Cancer Res投稿中)。さらに大腸癌において癌細胞のEMTを誘導する新規分子を同定したが同分子は、特にCD133陽性細胞において過剰発現した場合造腫瘍能を有することを明らかにした(Nat Med投稿中)。さらに胃癌においてもEMT誘導が生じることも明らかにしており、VEGFR1を発現する胃癌細胞が骨髄中において過剰発現することが高い悪性度に関与することを示した(Gut, revise中)。細胞周期関連分子としては、G0期を誘導する分子の原発巣における役割を明らかにした(Cancer Res 2009 in press)。一方、宿主側の転移幇助機構としては、癌幹細胞のニッチとなる骨髄前駆細胞由来のVEGFR1の意義を明らかにしたが(Clin Cancer Res 2008 ; 14 : 2609-16)、血管内皮前駆細胞由来のId1の臨床的意義を明らかにした(Br J Cancer, minor revise中)。【はじめに】消化器癌治癒切除術後の転移再発の-因として微量癌細胞(遊離癌細胞ITC)の存在が示唆される。転移はITC(癌細胞側)因子単独ではなく宿主側要因も重要と考えられている。本報告では胃癌転移陽性症例の宿主側発現遺伝子profileを求めた。【対象と方法】1)転移陽性6症例-陰性3症例間で全骨髄血液におけるmicroarrayを実施した。2)2001年4月より国立がんセンター胃外科の臨床病理学的因子が揃った810例の骨髄および末血よりtotal RNAを抽出しCEA・CK19・CK7を標的として各3回ずつ定量し、3つのうち少なくともひとつが陽性である症例をITC陽性とした。3)microarrayを施行。転移陽性症例特異的に認められた遺伝子もITC同様に解析し両者を比較検討した。【結果】1)VEGFR1の他にMTIMMP、u-PARが転移陽性症例において高い発現を示した。2)骨髄中ITC陽性はstage Iでも230例(46.7%)も陽性例を認めた。3)特に、VEGFR1に着目したところ腫瘍径、遠隔転移と相関し、独立した転移予測因子であった。手術時および再発時肝肺転移における危険率を比較した結果、骨髄中ITC陽性+VEGFR-1陽性が最も高く(p<0.0001,odds ratio 227)、ついでVEGFR-1単独(p<0.0001,26.2)、ITC単独(ns)の順であった。

一方、腹膜播種症例についても骨髄中ITC陽性+VEGFR-1陽性が最も高かったが、その危険率は血行性転移の解析において顕著であった。【考察】ITCは胃癌早期の段階で循環している可能性が高く、それ自体は治療対象患者の選定や治療標的分子にはなりえない。ただし実験的な報告同様に癌細胞側因子とVEGFR-1発現細胞との共存により転移を成立しうることを臨床検体を用いて初めて明らかにした。消化器癌の転移・再発の成立においては、癌側因子と宿主側因子とが転移形成に必須の新たな「転移巣社会」を形成すると推察されるため、両面から俯瞰的研究により転移再発機構を解明し、診断・治療の標的を求めることが重要である。われわれはその観点から、特に、1)癌細胞における転移再発促進機構および2)宿主側におけるその幕助機構の二つの側面から検討している(Ann Surg Oncol2009 16:1070-1)。今年度中に報告しえた成果は、癌細胞より直接分泌され浸潤・転移に重要な役割を担うu-PAR/u-PA(胃癌Br J Cancer2008;100:159-3、乳癌孟Ann Surg Oncol2009in press)、MT1-MMP(Ann Surg Oncolg2008;15:2934-42)の胃癌における重要な意義を明らかにした。また、MMP1については血清における蛋白測定の意義を明らかにした(Clin Cancer Res投稿中)。さらに大腸癌において癌細胞のEMTを誘導する新規分子を同定したが同分子は、特にCD133陽性細胞において過剰発現した場合造腫瘍能を有することを明らかにした(Nat Med投稿中)。さらに胃癌においてもEMT誘導が生じることも明らかにしており、VEGFR1を発現する胃癌細胞が骨髄中において過剰発現することが高い悪性度に関与することを示した(Gut, revise中)。細胞周期関連分子としては、GO期を誘導する分子の原発巣における役罰を明らかにした(Cancer Res2009in press)。一方、宿主側の転移幇助機構としては、癌幹細胞のニッチとなる骨髄前駆細胞由来のVEGFR1の意義を明らかにしたが(Clin Cancer Res 2008;14:2609-16)、血管内皮前駆細胞由来のId1の臨床的意義を明らかにした(Br J Cancer,minor revise中)。今後、本助成による関連の報告は、平成21年度中にさらに15編以上行える見込みである。
血液凝固系および線溶系・キニン系の開始反応機構-負電荷高分子物質の接触によるセリンプロテアーゼ前駆体の活性化反応とその生物学的意義

内因系血液凝固の開始反応は,セリンプロテアーゼ前駆体であるXII因子が,負電荷高分子物質との接触により,活性型プロテアーゼに変換することによりひき起こされる.この反応は,線溶液およびキニン系の開始反応でもあり,生体恒常性維持に重要な役割を持っていると考えられているが,その生物学的意義は明らかでない点が多い.本研究の目的は, (1)セリンプロテアーゼ前駆体が,負電荷高分子物質と接触すると,どうして限定分解反応がひき起こされるのか, (2)XII因子の活性化反応は, invivoで,どのような生物学的意義を持っているのか,を明らかすることにある.本研究により得られた研究成果は以下の通りである.(1)精製した凝固因子を組み合せ,内因系凝固の開始反応を再編成し, XII因子の活性化反応を測定する反応系を確立した.この反応系を用いて, XII因子の活性化反応を解析したところ,活性化反応は,カオリンやサルプチド,多糖硫酸エステルの濃度や各セリンプロテアーゼ前駆体の濃度に依存するだけでなく,金属イオン,とくに亜鉛イオンにより著しく促進され,また食塩濃度によっても大きく変化し,また,血小板は強く阻害的に作用することが明らかとなった.(2)正常および高分子キニノーゲン欠損ラットを用い,種々の炎症により血漿中に著しく増加するキニノーゲン(オーキニノーゲン)の構造解析をすると共に,ラジオイムノアッセイ法を確立した.また,ラット以外に各種実験動物の血漿の内因系凝固反応を,ヒトと比較しながら解析し,非常に活性化されやすい動物(モルモットおよびラット)と,非常に活性化されにくい動物(ウサギおよびスンクス)があることを明らかにし, XII因子の活性化反応の生物学的意義を明らかにするために必要な基礎的データを得た.内因系血液凝固の開始反応は,セリンプロテアーゼ前駆体であるXII因子が,負電荷高分子物質との接触により,活性型プロテアーゼに変換することによりひき起こされる.この反応は,線溶液およびキニン系の開始反応でもあり,生体恒常性維持に重要な役割を持っていると考えられているが,その生物学的意義は明らかでない点が多い.本研究の目的は, (1)セリンプロテアーゼ前駆体が,負電荷高分子物質と接触すると,どうして限定分解反応がひき起こされるのか, (2)XII因子の活性化反応は, invivoで,どのような生物学的意義を持っているのか,を明らかすることにある.本研究により得られた研究成果は以下の通りである.(1)精製した凝固因子を組み合せ,内因系凝固の開始反応を再編成し, XII因子の活性化反応を測定する反応系を確立した.この反応系を用いて, XII因子の活性化反応を解析したところ,活性化反応は,カオリンやサルプチド,多糖硫酸エステルの濃度や各セリンプロテアーゼ前駆体の濃度に依存するだけでなく,金属イオン,とくに亜鉛イオンにより著しく促進され,また食塩濃度によっても大きく変化し,また,血小板は強く阻害的に作用することが明らかとなった.(2)正常および高分子キニノーゲン欠損ラットを用い,種々の炎症により血漿中に著しく増加するキニノーゲン(オーキニノーゲン)の構造解析をすると共に,ラジオイムノアッセイ法を確立した.また,ラット以外に各種実験動物の血漿の内因系凝固反応を,ヒトと比較しながら解析し,非常に活性化されやすい動物(モルモットおよびラット)と,非常に活性化されにくい動物(ウサギおよびスンクス)があることを明らかにし, XII因子の活性化反応の生物学的意義を明らかにするために必要な基礎的データを得た.内因系血液凝固の開始反応は、セリンプロテアーゼ前駆体である【XII】因子が、負電荷高分子物質との接触により、活性型プロテアーゼに変換することによりひき起こされる。この反応は、線溶系およびキニン系の開始反応でもあり、生体の恒常性維持に重要な役割を持っていると考えられているが、その生物学的意義は明らかでない点が多い。本研究の目的は、(1)セリンプロテアーゼ前駆体が、負電荷高分子物質と接触すると、どうして限定分解反応がひき起こされるのか、(2)【XII】因子の活性化反応は、in vivoで、どのような生物学的意義を持っているのか、を明らかにすることにある。本年度は、これらの問題を明らかにする第一歩として、ラット血漿より、【XII】因子、プレカリクレイン、高分子キニノーゲンを精製し、それらを組み合せて、活性化反応を測定する反応系を確立した。一方、正常および高分子キニノーゲン欠損ラットを用い、種々の炎症により血漿中に著るしく増加するキニノーゲン(T-キニノーゲン)を精製し、それらの構造を明らかにすると共に、ラジオイムノアッセイ法を確立した。この高分子キニノーゲン欠損ラットは【XII】因子の活性化反応の生物学的意義を明らかにする上で、極めて有用と考えられるが、我々は、今年度、さらに別のモデル実験動物を発見した。スンクス(ジャコウネズミ)は、最近開発されつつある新しい実験動物で、ラットとは異なり、食虫目に属するが、我々は、スンクスの血漿が、カオリンによって活性化されるが、他の動物と異なり、エラジン酸やサルファチド、多糖硫酸エステルによって活性化されないことを発見した。このことは、スンクス血漿より【XII】因子を部分精製し確認した。このスンクスは、ヒトやウシ、ラットなどの【XII】因子と比較して、異常な性質を示し、【XII】因子の活性化反応の生物学的意義を明らかにする上で、極めて有用であると考えられる。
鉄による沿岸性珪藻の記憶喪失性毒生産制御メカニズム

記憶喪失性毒domoic acid (DA)生産能を持つ沿岸性珪藻Pseudo-nitzschia multiseriesを越喜来湾から分離して培養株を作成し、鉄濃度を0.5100nMの10段階に設定してバッチ培養実験を継続して行い、増殖を制限する鉄濃度を詳細に検討した。P.multiseriesの増殖は、培養液中の無機鉄イオン濃度(有機配位子として添加したEDTAとの化学平衡およびFeEDTAの光還元による2価鉄イオンの生成を考慮して算出)が0.5nM以下になると制限され、0.1nMにおいて比増殖速度が最大値の約半分にまで低下した。この増殖を制限する無機鉄イオン濃度は、他の沿岸性珪藻と同様なレベルにあったが、無機鉄イオン濃度が0.02nM以下になると、一般的な沿岸性珪藻はまったく増殖を示さないのに対して、P.multiseriesは0.2-0.3d^<-1>程度の比増殖速度を維持することが明らかになった。次に、DAの存在が低い鉄濃度条件下におけるP.multiseriesの増殖に寄与しているかを明らかにするために、鉄制限下の培養株にDAを添加したところ、比増殖速度に明瞭な変化は認められなかった。また、真核植物プランクトンの鉄取り込みを阻害する鉄キレート物質のデスフェリオキサミンBを過剰に添加して鉄制限を強化したところ、P.multiseriesの比増殖速度は低下せず、逆に約2倍に増加した。この時、細胞のDA含量には明瞭な変化は見られず、培養液中のDA濃度は検出限界以下であった。従って、鉄欠乏はP.multiseriesのDA生産要因の一つとなり得るが、著しい鉄欠乏状態に移行すると、有機錯体鉄を効率的に取り込む機構を発現する可能性があり、この取り込み系の変化はDAの生産量増加もしくは細胞外放出を伴わずに起こりうるものと結論された。大船渡湾および越喜来湾から分離した、記憶喪失性毒domoic acid生産能を持つPseudo-nitzschia multiseries、P.delicatissimaと、domoic acid生産能を持たないP.pungensについて、有機配位子として10μMのEDTAを培養液に添加し、0.1100nMの鉄濃度条件で培養を行った。いずれの種も100nMの鉄濃度条件下で最大の増殖速度を示したが、低鉄濃度域での増殖については差が見られた。P.multiseriesは1nMの鉄濃度でも僅かに増殖したが、P.delicatissimaは1nM以下の鉄濃度ではまったく増殖しなかった。一方、P.pungensは0.1nM以下の鉄濃度においても1nMで見られたのと同様のゆっくりとした増殖速度を示した。これらのことから、domoic acid生産能を持つP.multiseriesとP.delicatissimaは鉄要求量が大きく、ブルーム形成には高い鉄濃度環境が必要であることが示唆された。2.鉄欠乏ストレスによるdomoic acidおよび有機鉄配位子の生産と鉄取り込みへの影響鉄欠乏ストレスによるdomoic acid生産の変化について、P.multiseriesのバッチ培養実験により、non-axenic培養とaxenic培養を比較した。non-axenic培養では、培地中の鉄濃度が急激に低下し定常期に達した数日後から細胞あたりのdomoic acid含有量が急激に増加し、21日目で最高値1.5pgに達した後減少した。一方、axenic培養のdomoic acid生産量は、24日目まで小さく、その後やや上昇したが最高で0.1pg/cellであり、non-axenic培養に比べて極めて低い値であった。しかし、axenic培養の1週間目の細胞を鉄無添加培地に移して培養したところ、3週間後にnon-

axenic培養と同様なdomoic acid生産量の急激な上昇が観察されことから、non-axenic培養においても鉄欠乏ストレスに呼応してdomoic acid生産が起こることが示された。このような鉄欠乏ストレス実験系における有機配位子の役割について、Pseudo-nitzschia属珪藻と細菌との間における鉄取り込みの競合の問題も含めて、さらに解析を進めている。記憶喪失性毒domoic acid(DA)生産能を持つ沿岸性珪藻Pseudo-nitzschia multiseriesを越喜来湾から分離して培養株を作成し、鉄濃度を0.5100nMの10段階に設定してバッチ培養実験を継続して行い、増殖を制限する鉄濃度を詳細に検討した。P.multiseriesの増殖は、培養液中の無機鉄イオン濃度(有機配位子として添加したEDTAとの化学平衡およびFeEDTAの光還元による2価鉄イオンの生成を考慮して算出)が0.5nM以下になると制限され、0.1nMにおいて比増殖速度が最大値の約半分にまで低下した。この増殖を制限する無機鉄イオン濃度は、他の沿岸性珪藻と同様なレベルにあったが、無機鉄イオン濃度が0.02nM以下になると、一般的な沿岸性珪藻はまったく増殖を示さないのに対して、P.multiseriesは0.2-0.3d^<-1>程度の比増殖速度を維持することが明らかになった。次に、DAの存在が低い鉄濃度条件下におけるP.multiseriesの増殖に寄与しているかを明らかにするために、鉄制限下の培養株にDAを添加したところ、比増殖速度に明瞭な変化は認められなかった。また、真核植物プランクトンの鉄取り込みを阻害する鉄キレート物質のデスフェリオキサミンBを過剰に添加して鉄制限を強化したところ、P.multiseriesの比増殖速度は低下せず、逆に約2倍に増加した。この時、細胞のDA含量には明瞭な変化は見られず、培養液中のDA濃度は検出限界以下であった。従って、鉄欠乏はP.multiseriesのDA生産要因の一つとなり得るが、著しい鉄欠乏状態に移行すると、有機錯体鉄を効率的に取り込む機構を発現する可能性がありこの取り込み系の変化はDAの生産量増加もしくは細胞外放出を伴わずに起こりうるものと結論された。
ローヤルゼリー由来細胞増殖因子様物質ロイヤラクチンの抗疲労作用機構の解析

本年度は次のような項目において研究を実施した。1,神経化学的解析による疲労の分子機構の解明ロイヤラクチンの抗疲労作用を総合的に評価するため疲労の新たな評価系の構築を目指し、脳内における疲労の分子機構の解明に着手した。疲労の発現に大きく関与する脳を中心に疲労前後のマウスにおいて発現が変動している遺伝子を解析した結果、流水遊泳装置を用いて疲労させた後の海馬において発現が上昇する因子として、興奮性のシナプス伝達に関与するAMPA型グルタミン酸受容体(AMPAR)α1サブユニット(GluR1)と神経細胞においてアポトーシスのシグナル伝達に関与するB-cell receptor-associated protein 31(Bap31)を新たに見出した。一方拘束水浸ストレスを与えたマウスでは、GluR1とBap31の遺伝子発現に変化は見られなかった。従って、GluR1とBap31は精神ストレスではなく疲労の時にのみ発現が誘導される因子である可能性が考えられた。2,ローヤルゼリーの抗コレステロールの作用機構の解明ローヤルゼリー(RJ)は肝臓に対する様々な薬理活性を有す。しかし、その作用メカニズムやRJ中の有効成分は未だ明らかになっていない。そこで今年度は、RJの肝臓に対する薬理作用のメカニズムの解明にも着手した。その結果、RJの抗コレステロール作用は、コレステロール合成に関与するスクアレンエポキシダーゼの発現を転写レベルで抑制し、コレステロールの肝臓への取込みに関与するLow density lipoprotein receptor (LDLR)の発現を増強することに起因していることが明らかとなった。3,ロイヤラクチンが作用する肝細胞の受容体の同定昨年度、バインディングアッセイによる解析から57kDaローヤルゼリータンパク質(ロイヤラクチン)ははトランスフォーミング増殖因子(TGF)-αのアゴニストとして、肝細胞表面の上皮増殖因子(EGF)受容体に作用している可能性があることを報告した。さらに、ラット肝臓cDNAライブラリーを対象として酵母Two hybrid systemを用いた解析を行ったところ、ロイヤラクチンと相互作用するタンパク質としてRhomboidというタンパク質が新たに見出された。Rhomboidは、ショウジョウバエ(Drosophila)においてSpitzというTGF-α様のリガンドを切断し、EGF受容体を活性化している因子である。現在のところ、哺乳類細胞におけるRhomboidのホモログは見つかっているが、Spitzと相同性を示すタンパク質はいまだ見つかっていないことから、TGF-α様のロイヤラクチンが疑似的にRhomboidと結合したものと考えられた。しかし、ロイヤラクチンは蜜蜂においてRhomoboid-Spiz経路を活性化するという新たなシグナル経路を形成している可能性が示唆された。現在、Drosophilaを用いてロイヤラクチンが同経路の活性化しているか否かについての検討を行っている。ローヤルゼルー(RJ)中に含まれる57kDaタンパク質(ロイヤラクチン)は肝細胞に対して細胞増殖因子様作用及び抗疲労作用を示す。ロイヤラクチンの構造と肝細胞に対する生理作用との関係は未だ明らかになっていないことから、本年度は、ロイヤラクチンの構造と作用点の明確化に着手した。1,ロイヤラクチンの一次構造の決定と大腸菌発現ロイヤラクチンの細胞増殖因子様作用の解析ロイヤラクチンのcDNAのクローニングを試みたところ、ロイヤラクチンのN末端及び内部アミノ酸配列は、蜜蜂の加齢に伴い発現が変化する遺伝子である56kDa bee-milk protein (p56kP-4)の遺伝子産物のそれと同一であり、p56kP-4遺伝子産物は抗ロイヤラクチン抗体と交差したことから、ロイヤラクチンのcDNAはp56kP-4のcDNAと同一であることが分かった。ロイヤラクチンのcDNAは413アミノ酸をコードする1239bpの読み枠からなっていた。更に、大腸菌によるロイヤラクチン遺伝子産物のラット初代培養肝細胞に対する影響を検討した結果、ロイヤラクチン遺伝子産物は、RJ由来のロイヤラクチンと同様にDNA合成促進作用、抗アポトーシス作用を示し、細胞内のMAPキナーゼとプロテインキナーゼB(Akt1)を活性化していた。2,ロイヤラクチンが作用する肝細胞の受容体の同定ロイヤラクチンをリガンドとして用いたバインディングアッセイによる解析によりロイヤラクチンが作用する肝細胞の受容体の同定を試みた。その結果、ロイヤラクチンの肝細胞に対する結合は、トランスフォーミング増殖因子(TGF)-αによってのみ特異的に阻害された。TGF-αは、上皮増殖因子(EGF)受容体に作用し細胞内シグナルを活性化することから、ロイヤラクチンが作用する受容体はEGF受容体である可能性が明らかとなった。

2,ローヤルゼリーの抗コレステロールの作用機構の解明ローヤルゼリー(RJ)は肝臓に対する様々な薬理活性を有す。しかし、その作用メカニズムやRJ中の有効成分は未だ明らかになっていない。そこで今年度は、RJの肝臓に対する薬理作用のメカニズムの解明にも着手した。その結果、RJの抗コレステロール作用は、コレステロール合成に関与するスクアレンエポキシダーゼの発現を転写レベルで抑制し、コレステロールの肝臓への取込みに関与するLow density lipoprotein receptor (LDLR)の発現を増強することに起因していることが明らかとなった。3,ロイヤラクチンが作用する肝細胞の受容体の同定昨年度、バインディングアッセイによる解析から57kDaローヤルゼリータンパク質(ロイヤラクチン)ははトランスフォーミング増殖因子(TGF)-αのアゴニストとして、肝細胞表面の上皮増殖因子(EGF)受容体に作用している可能性があることを報告した。さらに、ラット肝臓cDNAライブラリーを対象として酵母Two hybrid systemを用いた解析を行ったところ、ロイヤラクチンと相互作用するタンパク質としてRhomboidというタンパク質が新たに見出された。Rhomboidは、ショウジョウバエ(Drosophila)においてSpitzというTGF-α様のリガンドを切断し、EGF受容体を活性化している因子である。現在のところ、哺乳類細胞におけるRhomboidのホモログは見つかっているが、Spitzと相同性を示すタンパク質はいまだ見つかっていないことから、TGF-α様のロイヤラクチンが疑似的にRhomboidと結合したものと考えられた。しかし、ロイヤラクチンは蜜蜂においてRhomoboid-Spiz経路を活性化するという新たなシグナル経路を形成している可能性が示唆された。現在、Drosophilaを用いてロイヤラクチンが同経路の活性化しているか否かについての検討を行っている。
ミオパチーにみられる眼病変と遺伝子異常との関連

さまざまなミオパチー、網膜変性、視神経症などの症例の臨床所見を集積し、遺伝子所見を検索した。得られた結果からミオパチーにみられる眼病変と遺伝子異常との関連について総括した。1.網膜変性とmtDNA:mtDNAの欠失を示すKSSおよびCPEO計7例に網膜変性所見を認めた。mtDNA点突然変異を示す疾患では、MELASの6例中2例、MERRFの3例中1例およびレ-ベル病20例中2例に黄斑変性を認めた。mtDNAの欠失および点突然変異はともに網膜変性と関連する。2.視神経症とmtDNA:両眼性視神経症40例の末梢血試料についてmtDNAを検索した。20例にnp11778変異(ND4変異)を認め、レ-ベル病と確定診断した。mtDNA/np3460,np15257変異は全例が陰性であった。本邦ではND4変異以外の点突然変異の検出頻度は低い。ホモロジー解析によると、ND4変異は酵素基質との結合能を低下させることが示唆された。レ-ベル病4例に長期間の呼吸鎖補完療法を行って視野の経過をみると、投与開始2年を経過した時点から徐々に改善する傾向がある。レ-ベル病症例で24時間心電図(Holter心電図)を記録すると、睡眠時の洞性不整脈を認める症例があった。不整脈の他にミオパチーや多発性硬化症などの所見を示す症例があることから、レ-ベル病はmtDNA異常を基盤とする全身疾患とみなされる。3.糖尿病とmtDNA変異:糖尿病の症状および検査所見を主病像とする2症例の骨格筋あるいは眼組織試料にMELASに検出されるmtDNAnp3243点突然変異が検出された。ミトコンドリア異常症のあらたな側面として、症例を蓄積して検討する価値がある。4.筋緊張性ジストロフィ:筋緊張性ジストロフィ11例の眼科的所見および遺伝子異常(19番染色体上のCTG-repeat延長)を検討した。眼科的徴候として、白内障および網膜変性が高頻度にみられた。数百ベース程度のCTG-repeat延長を示す成人発病例において多彩な眼科的徴候を示す傾向がある。当初に計画した調査検討の対象となるさまざまなミオパチー症例、網脈絡膜変性症例および視神経症症例の臨床所見およびDNA試料を蓄積することができた。また、点突然変異のスクリーニングとしてSSCP(single strand conformation polymorphism)による検索方法を確立することができた。筋緊張性ジストロフィの遺伝子異常(CTG-repeat延長)については、PCRおよびサザンブロツトで検索することが可能になつた。定型的ミトコンドリア異常症(KSS,MELAS,MERRF,レーベル病)では、特異的なmtDNAの異常が高率に検出された。MELASの臨床所見を示さない糖尿病症例1例にMELAS(mtDNA/np3243)の点突然変異が検出された。このことは、ミトコドリア異常症のあらたな側面として、検討する価値がある。

両眼性視神経症の症例については、これまでに検索してきたmtDNA/np11778およびnp3460点突然変異に加えて、np15257点突然変異を検索した。調べた症例ではnp15257点突然変異は検出されなかつた。網脈絡膜変性を示す症例では、ロドプシンおよびペリフェリンの遺伝子異常検索とともに、網膜色素変性を伴うミトコンドリア異常症(neurogenic ataxis and reti-nitis pigmentosa)に検出されるmtDNA/mp8993点突然変異を検索したが、これまでのところ陽性の症例はない。mtDNAに特異的な異常が検出されない症例については、SSCPによる検索開始した。また、筋緊張性ジストロフィの遺伝子異常(CTG-repeat延長)は、定型的症例に高率に認められた。これまでにえられた解析試料からは、CTG-rpeatの延長程度と眼科的所見の発現との相関は不明である。さまざまなミオパチー、網膜変性、視神経症などの症例の臨床所見および遺伝子所見を検討・総括した。1.網膜変性とmtDNA:mtDNAの欠失を示すKSSおよびCPEO計7例に網膜変性所見を認めた。mtDNA点突然変異を示す疾患では、・MELASの6例中2例、MERRFの3例中1例およびレ-ベル病20例中2例に黄斑変性を認めた。mtDNA欠失およびmtDNA点突然変異は網膜変性と関連する。2.視神経症とmtDNA:両眼性視神経症40例の末梢血試料について、mtDNAを検索した。20例にno11778変異(ND4変異)を認め、レ-ベル病と確定診断した。mtDNA/np3460, np15257変異は全例が陰性であった、本邦では、ND4変異以外の点突然変異の検出頻度は低い。ホモロジー解析によると、ND4変異は酵素基質との結合能を低下させることが示唆された。レ-ベル病症例で24時間心電図(Holter心電図)を記録すると、睡眠時の洞性不整脈を認める症例があった。不整脈の他にミオパチーや多発性硬化症などの所見を示す症例があることから、レ-ベル病はmtDNA異常を基盤とする全身疾患とみなされる。薬物療法の可能性を検討する目的で、レ-ベル病4例に長期間の呼吸鎖補完療法を行って視野の経過をみた。投与開始2年を経過した時点から徐々に改善する傾向がある。3.糖尿病とmtDNA変異:糖尿病の症状および検査所見を主病像とする2症例の骨格筋あるいは眼組織試料にMELASに検出されるmtDNA np3243点突然変異が検出された。ミトコンドリア異常症のあらたな側面として、症例を蓄積して検討する価値がある。4.筋緊張性ジストロフィ:筋緊張性ジストロフィ11例の眼科的所見および遺伝子異常(19番染色体上のCTG-repeat延長)を検討した。眼科的徴候として、白内障および網膜変性が高頻度にみられた。数百ベース程度のCTG-repeat延長を示す成人病において多彩な眼科的徴候を示す傾向がある。
超音波印加加工処理によるアルミニウム合金板材の成形性および表面品質の向上

自動車ボディパネル材料として使用されているAl-Mg系合金板材は、引張変形やプレス成形、張出し成形などによって板表面にストレッチャ・ストレイン(SS)マークと呼ばれるひずみ模様が生じ、製品の外観が損なわれることが問題となっている。そこで本研究では、まず結晶粒径ならびに合金組成の違いがSSマークの形成に与える影響を明らかにし、その後新たな試みとして、電子スペックルパターン干渉法によるSSマークの動的観察、形成挙動評価を行った。さらに、得られた実験結果をもとに、Al-Mg系合金板材のセレーションの出現ならびにSSマークの形成機構についての提案も行った。自動車ボディパネル材料として使用されているアルミニウム合金板材のプレス成形性の同上ならびに成形時に発生するストレッチャ・ストレイン(SS)マークなどの表面欠陥を抑制する新規「超音波印加加工処理技術」を開発するために、まず「超音波発生装置を組み込んだ万能試験機」を自作した。これは、引張変形や張出し成形などの塑性変形中に常に試料内を超音波が伝播するよう、平板試験片表面に超音波ホーン(周波数28kHz、振幅34μm)が直接接触して加振する構造となっており、原子の拡散促進効果やコットレル雰囲気消霧効果、ナノクラスタ復元効果などが期待できる。5022合金(Al-44%Mg-0.44%Cu)冷間圧延材および778K60s熱処理材を引張変形すると、応力-ひずみ曲線上にSSマークの発生に対応したセレーションを確認することができ、熱処理を施すことで振幅が小さく、頻度が高い細かなセレーションとなってSSマークが目立たなくなることがわかった。これは、再結晶によって転位が移動しやすくなり、溶質原子雰囲気を形成しにくくなるためと考えられる。また、冷間圧延材を引張変形中に超音波を印加すると、セレーションの出現するひずみ量が0.058から0.069に増加し、本系合金板材の成形限界が向上することが明らかになった。この機構については、今後TEMによる微視的組織観察などを行って明らかにするが、このような表面品質に優れた高成形性アルミニウム合金板材を創製することで、ボディパネルへのアルミニウム合金板材の適用拡大、自動車重量軽減による燃費改善、さらには地球温暖化・エネルギー問題にも寄与できるものと期待される。Al-Mg系合金(5000系合金)は、強度と延性のバランスが良く、耐食性、成形加工性、溶接性などにも優れるために、自動車用ボディパネル材として用いられている。しかしながら、プレス成形時に板表面にストレッチャ・ストレインマーク(SSマーク)と呼ばれるひずみ模様が生じ、製品の外観を損ねることが問題となっている。本研究では、SSマークならびに応力-ひずみ曲線上に現れるセレーションに注目し、それらの発現機構や結晶粒径、国溶Mg量、他の添加元素の影響などを明らかにすることを目的とした。その結果、5022合金(Al-4.40%Mg-0.44%Cu)と5182合金(Al-4.47%Mg-0.03%Cu)では、機械的強度だけでなく、セレーションの発生挙動が異なることがわかった。すなわち、0.2%耐力を比べると、5022合金は155MPa、5182合金は140MPaであり、これはCu固溶量の違いが原因であると考えられる。一方、セレーションの発生するひずみ量をε_c、セレーションの平均応力振幅をΔσとすると、5022合金では塑性変形が始まるとすぐにセレーションが発生し(ε_c=0.007)、その後応力振幅が増大(Δσ=6MPa)するのに対して、5182合金では、塑性変形が始まると同時に降伏現象を示し、一旦セレーションが観察されなくなった後に、ε_c=0.047で降伏点付近よりも大きな応力振幅(Δσ=10MPa)が発生する。このような相違は、固溶Mg量だけでなくCu原子の影響によるものと考えられ、現在コットレル雰囲気形成効果、ナノクラスタとの相互作用の観点から考察を行っている。自動車ボディパネル材料として使用されているAl-Mg系合金板材は、引張変形やプレス成形、張出し成形などによって板表面にストレッチャ・ストレインマーク(SSマーク)と呼ばれるひずみ模様が生じ、製品の外観が損なわれることが問題となっている。SSマークの形成機構については、応力-ひずみ曲線上に現れるセレーションとの対応からいくつか報告がなされているが、その詳細な形成挙動、形成原理については未だ不明な点が多い。そこで本研究では、新たな試みとして電子スペックルパターン干渉法(ESPI法)による、引張試験中のSSマークの動的観察ならびに形成挙動評価を行い、表面品質に優れた高成形性Al-Mg系合金板材を創製するための指針を得ることを目的とした。まず、結晶粒径ならびに合金組成の違いがSSマークの形成に与える影響を板表面のマクロ観察によって調べた。結晶粒径依存性に関しては、従来知られている傾向と同様、結晶粒径が大きいほどSSマークが目立たなくなった。

一方、合金組成については、5022合金と5182合金で有意な差は認められず、板表面のマクロ観察だけでは引張試験中のSSマークの形成挙動の差異を明らかにすることはできなかった。次に、ESPI法によって引張試験中のSSマークの動的観察を行った。いずれの5000系合金でもホワイトバンドと呼ばれる干渉コントラストが観察され、これがSSマークと完全に対応することが確かめられた。そのため、引張試験中のホワイトバンドの形成挙動を解析することで、SSマークの形成挙動を伝播ステージ、ランダムステージ、停滞ステージの3つに分類することができ、さらにホワイトバンドの内部構造についても、伝播ステージでは縞構造、ランダムステージ以降では一本線構造になることが明らかになった。ESPI法の適用により、SSマークの形成挙動を可視化することに本研究で初めて成功したといえる。結晶粒径の制御条件の選定に時間がかかってしまったが、SSマークや応力-ひずみ曲線上に現れるセレーションの発現機構について、いくつかの新たな知見が得られている。本研究の目的である「塑性変形時に超音波を印加することで、原子の拡散促進効果やコットレル雰囲気消霧効果、ナノクラスタ復元効果などを生じさせ、SSマークやせん断帯の発生・発達を抑制する」ことが本当にできれば、ボディパネルへのアルミニウム合金板材の適用拡大、自動車重量軽減による燃費改善、さらには地球温暖化・エネルギー問題にも寄与できるものと期待される。24年度が最終年度であるため、記入しない。これまでの研究で、自動車ボディパネル材として使用されている5022合金冷間圧延材を引張試験した際に得られる応力-ひずみ曲線上のセレーションは、SSマークやせん断帯などの表面欠陥の形成と強い相関があることが明らかになった。今後は、これまでに用いてきたマクロ撮影用ビデオカメラに加えて、変形が局在化した際に現れる帯状のホワイトバンドを検出することができる電子スペックルパターン干渉法を用いて、表面欠陥の形成過程をさらに定量的に評価し、塑性変形で導入された可動転位と固溶溶質原子との相互作用の観点から、SSマークの発生起源について明らかにする予定である。
コレステロール代謝からみた単球系血球分化の解析

本研究の成果として、1)家兎大食細胞での各リポ蛋白受容体測定法の確立、2)家兎及びヒトコレステロール代謝の指標としてのacejl CoA cholesteroltransferase(ACAT)活性測定法の確立、3)各リポ蛋白添加培養におけるACAT活性とoid redO染色によるコレステロール染色の関連の明確化が達成された。特に、各リポ蛋白受容体やACAT活性の測定が大量の細胞を必要とするのに対し、Oil red O染色による検討は個々の細胞についての検討を可能とするため、大量の細胞が入手困難な正常ヒト単球系細胞でのリポ蛋白及びコレステロール代謝の検討を可能とした。本法による検討は、さらに他の細胞化学や表現型解析と同じlevelでの解析を可能とした点で優れている。これらの方法による検討から、mouse、家兎、ヒトによりacetyl-LDLの取り込みが異なることが示された。mouseではacetyl LDL>LDL,家兎LDL>acetyl-LDL,ヒトacetyl LDL≧LDLであり、単球-大食細胞分化を検討するにあたって十分に留意されるべき知見であった。正常ヒト単球の検討では、新鮮細胞、phorbol ester添加細胞において、他の細胞化学、表現型に大きな変化は観察されなかったのに対し、acetyl-LDL添加培養系ではphorbol ester添加培養細胞で形態の泡沫化に伴いOil red O染色の陽性度が高まり、本検索法が単球系分化の指標となりうる結果が得られた。しかし、現在単球系分化のモデルとされている骨髄球系細胞株ではLDLの取り込みは認められるものの、acetyl LDLの取り込みは認められず、これらの細胞株が真に大食細胞へ分化をしていない可能性が示唆された。この現象は急性単球性白血病細胞でも認められ、今後の重要な課題として残された。以上のように、単球一大食細胞系分化におけるコレステロール代謝の解析は従来からの細胞化学や免疫学的手法と同様に、この細胞系の機能と分化を解明するうえで極めて重要であることが確認された。
各種応力下における木材の変形挙動と圧電現象

木材の荷重-変形曲線の弾性領域における圧電現象を詳しく調べるために、この領域における繰り返し圧縮-振動複合応力試験(以下、圧縮試験と呼ぶ)を行った。供試材料にはヒノキ(Chamaecyparis obtuse Endl.)を用い、木取りは、繊維方向が試験体の長さ方向に対して0゚、45゚、30゚、45゚、60゚とした。その結果、応力(σ)-変形(D)曲線は、負荷時、除荷時いずれの場合も、ほぼ同じ履歴をたどり、曲線形状はいずれの場合も、立ち上がりで下に凸な曲線を示すものの、それ以降はほぼ直線的に増加する傾向が認められた。一方、圧電気出力(P)-変形(D)曲線は、先のσ-D曲線同様、負荷時と除荷時いずれの場合もほぼ同じ軌道を通り、それぞれピーク値または、極値を有する曲線を示した。すなわち、弾性領域内での圧電気出力の挙動は、弾性現象であると考えられた。ここで、各繊維傾斜角での圧電気挙動とσ-D曲線の微分値との関係について調べた。各々の繊維傾斜角度において両者をプロットするとそれらの間には比較的良い直線関係が認められた。すなわち、圧電気出力が木材中の結晶部分(天然セルロース結晶)の挙動を反映した結果であることを考慮に入れると、σ-D曲線の初期に現われる下に凸な曲線領域は、結晶領域そのものが非線形弾性であるため、木材全体としても同じく非線形弾性として現われたことを示唆している。また、P-D曲線におけるピーク値、あるいは極値における応力値と線維傾斜角との関係を調べたところ、線維傾斜角が増大するにつれて減少することが分かった。この傾向はHookeの関係式からえられたヤング率、あるいはHankinsonの式からえられた圧縮強さと線維傾斜角度との関係と非常に類似していた。(1)材料試験機を用いた木材の変形過程における力学挙動と圧電気挙動との関係。油圧制御式サーボパルサーを用いて、圧縮-振動複合応力試験を行った。荷重-変形曲線の弾性領域内において、変形に伴って検出された試験体表面の圧電気出力の履歴挙動を調べ、それが弾性現象であることを明らかにした。(2)材料試験機内蔵型の走査電子顕微鏡(WET-SEM)を用いたセル構造の構造解析および力学挙動の把握。低真空観察機能付き走査電子顕微鏡(WET-SEM)に材料試験機を組み込んだ装置を用いて、圧縮-振動複合応力試験を行い、セル壁の微視的変形過程を直接可視化すると共に、変形に伴う試験体表面の圧電気出力を検出した。この場合、SEM画像は直接ビデオ入力し、リアルタイムの実測データとして保存した。えられた保存画像から、木材をハニカム構造体とみなした半剛接構造解析を行い、セル壁の変形過程をシミュレートし、圧電情報との対応関係を調べた。(1)、および(2)の結果をもとに、木材の荷重-変形曲線の細部、特に従来、弾性領域と呼ばれている部分の挙動を明らかにすると共に、再定義を行った。