hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
羊膜由来間葉系幹細胞の眼表面疾患モデルにおける効果

以前、我々は羊膜由来間葉系細胞が羊膜の持つ効果にどのように影響を与えているか明らかにするため、in vitro上皮創傷治癒モデルへの影響を観察し、羊膜由来間葉系細胞にも創傷治癒促進効果があることを報告した。本研究において昨年度は羊膜由来間葉系細胞を分離・培養し、その解析を行うと共に、羊膜由来間葉系細胞の培養上清を点眼または結膜下注射することにより、ウサギ創傷治癒モデルにおける上皮化への効果を観察した。本年度は、昨年度同様にウサギ角膜上皮欠損モデルに対する羊膜由来間葉系細胞培養上清の効果を観察した。当院の羊膜バンクより供給された羊膜から間葉系細胞を分離・培養し、その培養上清を用いてin vivo実験を検討した。In vivo創傷治癒モデルはウサギ角膜中央部に8mmトレパンで上皮欠損を作成したものを使用した。羊膜もしくは羊膜由来間葉系細胞の培養上清ならびに培養前の培地をコントロールとして、ウサギ創傷治癒モデルへ点眼または結膜下注射し、上皮化過程を経時的に観察した。AMMCsの培養上清点眼回数を増加させることにより、ウサギ創傷治癒モデルにおける上皮化が有意に促進された。一方、結膜下注射においては、ウサギ創傷治癒モデルにおける上皮化を促進する傾向は観察されたが、有意な差は見られなかった。これは培養上清の眼表面における暴露時間の違いによるものと推察された。以上のことから羊膜の持つ創傷治癒促進効果は羊膜に存在する間葉系細胞が一部役割を担っている可能性が考えられた。これまでに、羊膜由来間葉系細胞の培養上清を使うことで、角膜上皮培養シートならびにウサギ角膜において、創傷治癒モデルを作成し、創傷治癒促進効果を示すことができたため、概ね順調に進呈していると考えられる。今後さらに羊膜由来間葉系細胞の特性解析を進めると共に、さらに角膜上皮に対する創傷治癒促進効果を観察していく予定である。また、羊膜の本来持つ特性と比較しながら、そのメカニズムについても検討していく予定である。本研究において本年度は、さらに羊膜から分離培養した間葉系細胞(AMMCs)を解析し、ウサギ角膜上皮欠損モデルに対する羊膜由来間葉系細胞培養上清の効果を観察した。当院の羊膜バンクより供給された羊膜から間葉系細胞を分離・培養し、フローサイトメトリーにて発現解析を行った。また、その培養上清を用いてin vivo実験を検討した。フローサイトメトリーにおいて、AMMCsはいわゆる間葉系幹細胞と少し異なる発現パターンを示し、炎症性物質分解酵素であるCD10や神経堤由来関連因子(CD49d、PDGFRa)、線維芽細胞マーカー(FSP-1)の発現が観察された。造血系(CD14、CD34、CD45)や血管内皮のマーカー(CD31)の発現は観察されなかった。AMMCsの培養上清を点眼または結膜下注射することにより、ウサギ創傷治癒モデルにおける上皮化が促進される傾向を観察した。これまでに、羊膜由来間葉系細胞の培養上清を使うことで、角膜上皮培養シート

ならびにウサギ角膜において、創傷治癒モデルを作成し、創傷治癒促進効果を示すことができたため、概ね順調に進呈していると考えられる。組織学的解析においてはヘマトキシリン・エオジン(H.E.)染色並びに移植したhAM-MSCsの存在を確認するため、SPIONを鉄染色で使用するベルリンブルーで染色を行う。炎症細胞に対する影響を観察するため、CD45、CD3、CD4、CD11cなどの表面抗原を検出して免疫組織学的に観察する。また、血管新生への影響を観察するため、CD31などの抗体を用いて免疫染色を行う。上皮欠損モデルでは上皮化した時点で家兎の角膜を摘出し、凍結切片を作成する。組織学的観察は上記と同様にH.E.染色とベルリンブルー染色を行う。また、上皮化促進効果を観察するため、細胞増殖時に多く観察されるKi67などの免疫染色を行って比較検討する。mRNAレベル、タンパクレベルでの解析においては家兎の角膜を摘出の際、組織の一部をmRNAレベル、タンパクレベルでの解析を行うため分取し、それぞれサンプルの調整を行う。hAM-MSCsの影響を観察するため、免疫調節系サイトカイン( TNF-a, MIP-1a, MCP-1)、抗炎症性サイトカイン(TGF-b)、血管新生関連分子(VEGF、MMP-2、TSP-1)などの測定をReal-time PCRまたはELAISA等で行う予定である。今後さらに羊膜由来間葉系細胞の特性解析を進めると共に、さらに角膜上皮に対する創傷治癒促進効果を観察していく予定である。また、羊膜の本来持つ特性と比較しながら、そのメカニズムについても検討していく予定である。試薬を節約して使うことができたため、次年度使用額が多少発生いたしました。次年度においてはその分、試薬として合わせて使うよてである。3月に論文校正ならびに投稿し、その分の額を本年度に予定していたが、来年度に計上することになったため、次年度使用額が発生いたしました。次年度においてはその分、校正料ならびに投稿料として使用する予定である。
惑星の中心星への落下:惑星近傍の原始惑星系円盤ガスと惑星の重力相互作用

2.多重格子法を用いたガス惑星へのガス降着流の3次元流体シミュレーション:これまでに我々が行ってきた2次元計算では得ることの出来ない降着流の構造を調べるために、計算効率の高い多重格子法を用いてシミュレーションを行った。この結果は6月にワシントンDCにて行われた国際会議"Scientific Frontiers in Research on Extrasolar Planets"にて"Gas Capturing Growth of Gas-giant Planets via Subdisk Accretion in Protoplanetary Disk"というタイトルで発表した。研究費の多くを、ガス惑星形成・軌道進化についての研究を重点的に行うため、関連研究者との研究討論、および研究成果発表のための旅費に当てた。
日本近代前期における一般女性の生活と社会進出-大正時代の婦人雑誌を中心に-

大正時代は、女性が社会意識に目覚めた時代であるといわれている。進歩的な女性の場合はさておき、一般大衆の女性はどのようであったかということを『主婦の友』調査した。婦人雑誌が大量に出版されるようになったのは、女学校の増加にとない中等教育をうけた若い女性が増えたことによる。『主婦の友』は、こうした中等教育をうけた中産階級の女性を対象に出版された婦人雑誌である。大正6年に『主婦の友』を起こした石川武美は、当初からその読者層を、「中流の下」を想定していたといわれる。そのためか、創刊時からして実用記事が多いのが特徴である。家政家計関係、内職、女性の職業(雇用される形態)、自営業(商店経営など)、女性論や社会論などで、その他に小説、グラビア、染色手芸などである。大正8年になると、洋裁・和裁関係の記事が出現し、育児・出産、健康衛生、教育、恋愛・結婚などその内容は多岐にわたるようになっていく。地方在住の女性もこの雑誌のおもなる読者として把握しているのが記事の内容からして理解できる。洋裁や手芸の講習会を東京や北海道や関西で開催し、作品の販売などもおこなうなど積極的な啓蒙活動をおこなっているのが注目される。次第に量的に洋裁関係の記事がおおくなっていくが、これと同時に女性の職業に関する記事(探訪記事・手記・専門的技術の習得等)が具体的なかたちで表れてくるのである。女性論や社会論は、名士が執筆しているが、婦人参政権運動や女性の自立に関する記事は、多数の、さまざまな立場の執筆者の記事により、印象がうすめられ、鮮明な社会意識は見られないが、職業とか子供の家庭教育などをとうして、程度の差はあるが社会に目覚め、社会意識を得るようになったとかんがえられる。婦人雑誌は、女性に実用的知識の普及と娯楽と、社会への関心を持つことを提供したといえる。
中・近世アイヌ民族の農耕活動の実態について-発掘された畠跡と種子をもとにして-

14世紀から18世紀の、23個所の集落跡から検出された作物種子、17個所の畠跡、6遺跡から出土した鉄製農具の検討から、次のことが明らかになった。(1)14世紀から18世紀初頭の遺跡から鋤・鍬といった鉄製農具が出土しており、アイヌ民族は18世紀初頭まで鉄製農具を使用した広幅の畝からなる畠を造成していた。(2)該当期の畠跡は、アイヌ民族によったことが明らかな土地の傾斜に関係なく各方向に畝を造り、同じ台地上で場所を変えながら小規模な畠を継続していたものと、東北地方のアラキ型焼畑との関係を示す、傾斜地に火入れを行い傾斜に沿って縦畝を造成したものや、溝だけの畠を造った二つのグループに区分でき、後者はアイヌ民族によったものではなく、東北地方北部から渡道もしくは季節的に渡道した和人によったものと考えられる。(3)炭化種子が出土した大部分の遺跡からヒエとアワを主とした14種類の作物種子が出土しており、特にヒエが多く出土し、アイヌ民族の伝承にもあるようにヒエとアワが重要な作物であったことが判明した。(4)擦文文化期にはアワとキビが主要作物であったが、14世紀以降主要作物からキビが脱落して、ヒエとアワが主要作物となるが、その背景には気候の悪化があったものと考えられる。(5)18世紀末には川原端で、農具を使用せず木の股や刀子で土を耕して畠を造った姿が描かれているが、その要因として「シャクシャインの戦い」以後の松前藩によった刀狩り、鉄の供給制限、鉄製品の粗製化と、交易形態が「場所請負制度」に変わり、アイヌ民族の労働力の収奪が行われた結果と考えられる。これまでに、虻田町、伊達市、八雲町、森町、七飯町、千歳市、稚内市で17世紀中頃から18世紀初期に噴出した火山灰で埋積された畠跡が発見されている。平成17年度は別海町、北斗市(旧上磯町)、上ノ国町で新たに発見された畠跡の調査を行った。北斗市と上ノ国町の畠跡は、10世紀中頃に降下した白頭山火山灰を切り、1640年に噴出した駒ヶ岳d火山灰によって直接に埋積されたもので、別海町の畠跡は19世紀の加賀屋文書に耕作の記録があるものに該当する。また、上ノ国町で発掘された畠跡から採取した土壌試料のフローテーション作業を行って得られた浮遊物から、作物種子の発見に勉めたが畑地雑草のアカザ属やタデ属種子が検出されただけで、作物種子は検出されなかった。平取町イルエカシ遺跡、ピパウシ遺跡で、樽前b軽石で覆われた住居跡内外から出土したオニグルミ、ヒエ、近世の可能性が強い小樽市塩谷3遺跡の土墳から出土したオオムギとソバの^<14>C年代測定を行った。その結果、イルエカシ遺跡のオニグルミカが265±20y.B.P.、ピパウシ遺跡出土のオニグルミが225±20y.B.P.、ヒエが255±20y.B.P.、塩谷3遺跡のオオムギとソバが265±20y.B.P.という実年代値が得られ、全てが近世前半期に位置づけられることが明らかになった。さらに、平取町と虻田町の協力を得て花粉分析を行った。

平取町では町内26個所で樽前b軽石上下で採取した土壌を、虻田町では畠跡が確認された高砂遺跡傍を流れる河川沿いで深掘りして採取した土壌を対象として花粉分析を行った結果、平取町を流れる額平川沿いの河岸段丘上の1個所で樽前b軽石下の土壌からソバ属花粉が検出され、近世前半期にソバを栽培していたことが明らかになった。これまでに発掘調査された20個所の畠跡に関するデーターの集約を行うとともに、18遺跡の集落跡・墓墳等から出土した作物種子の集約を行った。また、厚真町モエ遺跡の17世紀の鹿送り跡から出土した炭化キビの小塊調査を行い、キビの小塊は煮沸して団子状に丸めたもので、鹿送りに際して儀式的に使用されたものであることを明らかにした。同様なキビ小塊は厚真町厚幌1遺跡の、やはり17世紀頃の鹿送り跡から裸性オオムギとともに出土したものと同様な役割を担った可能性が強い。北見市常呂町TK73遺跡の、擦文時代の住居跡上層を利用した灰送り跡(18世紀頃)から採取された土壌の浮遊選別作業で得られた炭化物の調査を行い、ササ属穎果、ヤマブドウ種子、キハダ果実・種子、コナラ亜属子葉と裸性オオムギが含まれていたことを明らかにした。これまで、アイヌ民族によって裸性オオムギが利用されていたのは17世紀まで辿ることができていたが、今回の出土例から18世紀まで利用されていたことが確認された。オオムギが利用されていた実年代を明らかにするため、共に出土したヤマブドウ種子を用いて年代測定を行った結果、B.P.225±20y.B.P.(PLD-6842)の値が得られ、1780年頃のものであるとの結果が得られた。洞爺湖町高砂貝塚の平成18年度分布確認調査で発掘された畠跡から採取された土壌と、畠跡脇を流れる小河川沿いで行った深堀調査で得られた有珠b火山灰直下の泥炭の花粉分析を行った。畠跡の土壌から栽培植物の花粉は検出されなかったが、畑地の随伴雑草の花粉が検出され、泥炭層からは栽培種の可能性が強いイネ科花粉が検出され、畠での作物の一つがイネ科(ヒエ・アワ・キビ)であったことを明らかにした。1.畠跡調査:平成18年度から発掘調査が行われている伊達市有珠4遺跡で、有珠b火山灰(1663年降下)で埋積された畠跡の調査を行った。有珠4遺跡で発掘された畠跡では、放棄された畠部分に土壙墓が造成されていること、切り返しが行われていない単年度耕作の畠であったこと、有珠b火山灰降下直後にも農耕活動を行ったことを示す耕作痕が有珠b火山灰表層に刻まれていたことなどが明らかになった。2.出土種子調査:道東で唯一のアイヌ文化期の作物種子が出土した網走管内常呂町で出土状況の確認を行った。出土したのは擦文化化期の竪穴住居埋積後の窪地を利用した「灰送り場」からで、野生種のササ属、キハダ,ヤマブドウの果実や種子、コナラ亜属子葉、ネギ属鱗茎に混じって「裸性オオムギ」が出土したものである。また、時代が不明であった古宇郡泊村堀株1遺跡のアイヌ民族の土壙墓から出土した炭化コムギの年代測定を行い、暦年較正用年代値577±21y.B.P.(PLD-9977)を得、アイヌ文化期初期に該当する墓壙で、出土した作物構成が擦文文化期の構成を引きずったものであることが明らかになった。3.データーの集約:報告書を作成するためのデーター集約を行い、該当期の26遺跡から出土した17種の作物種子の出土状況と鉄製農具の出土状況、17遺跡で確認された畠跡の規模、時期、畝の大きさ・方向東濃耕作、炭化物・プラントオパールの出土状況、出土作物種子等について集約し、成果報告書作成の準備を行った。
高速動き・距離検出イメージセンサの開発と車載用画像処理システムへの応用

本研究は、2眼ステレオカメラで取得した画像から被写体の距離や相対速度を検出する画像処理システムの構築を目指して検討した。二つのカメラの焦点を異なる位置に設定し、二つの画像のぼけ量の違いと視差の情報から距離等を推定する方式を提案し、その有効性を確認した。さらに、多眼撮像用に試作したCMOSイメージセンサとFPGA等を用いて画像処理システムを構築し、リアルタイムで画像処理を実施できるようにした。本年度は、高フレームレート画像の特徴を生かして動きを検出する手法と、距離を検出する手法について検討した。主な検討項目は以下の通りである。●高フレームレート画像を用いた動き検出方式の検討ハードウエア化することを前提とした、高速動き検出手法について検討した。フレームレートが高いため、動き検出のためのブロックサイズと探索範囲は狭くてよいと考え、小ブロックあるいは1画素によるマッチングについて検討した。また、走行中は画面中に様々な動きがあるため、自車両の進路の障害となる物体の動きを選択的に検出する方法について、主に検討した。さらに、自車両の振動による動きのキャンセルや、同じ進路を走行する前方車両の追跡を行うために、サイズ可変のブロックを任意の位置に配置し、動きを検出する手法について検討し、評価実験を行った。●高フレームレート画像を用いた距離推定方式の検討ハードウエア化することを前提とした、高速距離推定手法について検討した。2眼カメラを用いて、ステレオの情報とボケの情報を組み合わせて推定する。2つの時刻の4つの画像を用いて、物体の距離と相対速度を求める手法について、新たに考案した。本年度は、ボケ情報による推定について中心に検討したので、次年度はステレオ情報との融合を図る予定である。●車載カメラの構成に関する検討障害物の動き検出や距離計測に適したカメラの配置方法、画角・フレームレート・距離・速度の関係を検討した。昨年度に引き続き、車載前方画像のボケの情報から距離を検出する手法について検討するとともに、高フレームレートステレオ画像の視差情報と動き情報から距離を検出する手法について検討した。また、本システム用に開発したイメージセンサを複数用いた、画像処理ボードについて検討した。●車載前方画像からの距離推定方式の検討焦点ボケの情報を用いて距離を推定する方式について引き続き検討した。さらに、焦点位置の異なる2つのカメラを平行にステレオ配置し、ボケの情報に加えて視差情報を用いた距離推定方式について新たに検討した。連続する2つのフレーム×2眼の合計4枚の画像から、前方車両の距離と接近速度(相対速度)を推定する。●高フレームレートステレオ画像からの距離推定方式の検討焦点位置が同じである2つのカメラを用いて、その視差情報と動き情報から距離を推定する方式について併せて検討した。高いフレームレートの画像ではフレーム間の動きを高い精度で検出できることに着目し、連続する2つのフレーム×2眼の合計4枚の画像から動きと視差を同時に求めることで、距離を推定する。●本システム用のイメージセンサLSIを用いた画像処理ボードの開発本システムに有用な機能を集積したイメージセンサLSIを4つ使用し、センサLSIの制御および画像処理に用いるFPGA等を実装した、画像処理ボードを設計した。処理に必要なセンサは2つであるが、センサ間の距離を変えて実験ができるように、水平方向に4つのセンサを配置することにした。次年度は、この画像処理ボードを用いて、提案方式の検証を行う予定である。昨年度に引き続き、本システム用に開発したイメージセンサを用いた、画像処理ボードについて検討した。また、他の車両との追突を回避するために、画像中から車両の位置を検出する手法について検討した。●車載用カメラシステムの開発昨年度検討した画像処理ボードについて、メモリなどの部品実装について再度設計見直しを行った。その際、センサ間の距離(基線長)を調整できるように三つのイメージセンサLSIを使用することにし、ボードの小型化を図った。FPGAの周辺に複数のメモリを配置させ、リアルタイム処理の実現と、その拡張が可能な構成となるように留意した。一般のボード作成サービスを用いて、画像処理ボードの製造を行った後、キャリブレーションが可能な仕組みを有する光学系を作成し、画像処理ボード上に実装した。●車載用カメラシステムの評価上記で、開発したカメラシステムを、インタフェースボードを介してコンピュータに接続し、リアルタイムで画像を表示する環境を整えた。このシステムを用いて、ステレオ画像の撮像実験を行った。様々な、フレームレートでの撮像を行い、距離推定に十分な画質の画像を取得できることを確認した。●衝突回避のための車両検出についての検討片側のイメージセンサで取得した画像情報から、他の車両の位置を検出し追跡する方式について検討した。●研究の総括本研究のこれまでの成果とその問題点をまとめ、今後の課題とその改善方法について検討した。
対照談話論による日本語談話の発想と表現の研究

最終年度にあたり、残された下記の課題について、分析考察することができた。(1)は、日本語を他言語と対照させたソトからの視点で巨視的に捉えられる日本語談話の発想と表現の特徴、(2)は、各地方言を対照させることでウチの視点から日本語談話の発想と表現の変異の特徴を記述したものである。(1)前年度までは、主として日本語と韓国語の2言語を対象に対照談話論的な分析考察を行ってきた。本年度は、日本語、韓国語、中国語の3言語の談話を対照させる視点を抽出することができた。具体的には、談話の同時結節モデルに基づき、意識態度の層における談話構築態度に焦点をあてることで、3言語対照を行うことができた。話し手と聞き手の関係および場面の捉え方に着目すると、次のような談話構築態度の相違が得られた。日本語談話は、自他を分別し、三項関係に立ち、場面意識が高い。韓国語談話は、自他が向かい合い、相手を巻き込むことが重要で、場面意識は低い。中国語談話は、話し手と場の一体性、自世界注視、自他同化的理解を行っている。以上を明らかにすることで、談話使用の具体的事例の異なりを、談話構築態度の差異から説明することができた。(2)待遇表現体系をとりあげ、東京共通語談話と長野県松本方言談話の発想と表現の異なりを記述した。松本方言に豊富にみられる敬意終助詞に着目し、談話構築態度の差を敬語使用の軸の相違という視点から比較考察した。敬意終助詞は、地域社会の顔の見える関係のなかで、やや目上の相手に対して敬意と親しみを同時に表わすことができるのに対して、共通語敬語は、知らない相手への敬意ある待遇を可能にするが親しみを同時に表わす機能はない。こうした待遇表現体系の差から、松本方言では、畏まり・寛ぎ/親しみ・改まりの2軸で待遇的談話使用が構築されるのに対して、共通語では、上下/親疎の2軸で待遇的談話使用が構築されていることを論じた。本研究の目的は、1)対照談話論の観点からみた日本語談話の記述、2)日本語談話の発表と表現に関する特徴の抽出、の2点にある。これに関わる本年度実績は、以下の通りである。(1)本年度は、海外共同研究者、連携研究者とともに、中国黒龍江大学にてハルビン会議(2015年8月28日31日)を持った。依頼談話を対象に、中国語談話、韓国語談話、日本語談話における発想と表現の特徴を対照させる観点について確認し、これまでの国際共同研究で得た定性的研究の成果を検証するために、検証調査を行う方途を模索した。(2)日中依頼談話の発想と表現に関する研究成果を、沖裕子・趙華敏(2015)「日中依頼談話の特徴と日本語教育」(趙華敏主編『跨文化理解与日語教育』高等教育出版社、北京)に発表した。負の母語干渉(負の転移)は、語や文法だけではなく、談話レベルでもおきている事実を指摘し、具体的に、社会文化、意識態度、談話内容、談話表現から、日中依頼談話の特徴を記述説明したものである。日本語社会と中国語社会では、共同体の作り方がそもそも異なっているため、依頼に対する意識が異なっていることが、接触場面におけるミスコミュニケーションを生む要因となっていた。日本社会では、互助的関係は築いても互恵的関係を築く習慣がないのに対し、中国社会では、個人間で積極的に依頼しあってお互いの情と紐帯を深めていくグァンシーと呼ばれる互恵関係を構築する社会文化がある。そのため、日本語社会では、私的依頼が相手に迷惑をかける行為であると捉えられているのに対し、中国語社会では、グヮンシーがあれば私的依頼の交換は当然であり、個人間の情を深めるよい手立てになると捉えられていることが分かった。こうした社会文化と意識態度の異なりによって、依頼の談話内容と談話表現の異なりが日中で生じていることを具体的に指摘し、発想と表現の記述を行った。当初の計画以上に進展している部分と、やや遅れている部分がある。日本語依頼談話と中国語依頼談話に関する特徴とその記述について、一応の成果をみた点が進展している部分である。それに対して、日本語依頼談話と韓国語依頼談話に関する特徴の分析が、やや遅れている。理論的分析結果の検証についても、これに合わせて遅れをみている。日本語談話の発想と表現に関する特徴の抽出は、話し言葉であることから、方言を対象とした研究が必須である。発想と表現という点からみて、文法レベルと談話レベルの相互的影響関係について分析する必要があるという見通しをたてることができた。これは、当初の計画以上に進展をみた点である。本年度の研究に関する具体的内容は、次の2点である。第1には、中国語母語話者の日本語依頼談話に談話レベルの負の転移があることを明らかにし、それをふまえて日本語教育方法への提言を行った。まず、中国語母語話者が産出する日本語依頼談話には、共通した問題点があることを指摘し、その要因を発想と表現から説明した。日本社会では、依頼は相手に迷惑をかけることだと考えるのに対して、中国社会では互恵的に依頼をする文化がみられ、依頼は人間関係を強化する望ましい行動だと考えられていた。こうした社会文化と意識態度が、依頼談話の内容や表現にも影響をあたえ、間接的な内容構築と表現で展開する日本語依頼談話と、依頼の要点を明確に述べる直接的な内容構築と表現で展開する中国語依頼談話の差を生んでいた。

そのため、談話的に負の転移が起きること、日本語教育においては、社会文化、意識態度、談話構造、談話表現の4層にわたって注意しながら指導する必要性を指摘した。談話レベルの母語干渉が存在することを実証的に指摘したこと、新たな日本語教育方法の開拓を提言したことに、意義と重要性があると考える。第2には、日本語方言変種の対照から、終助詞文の発想と表現の記述を行った。表現レベルにおける音声、語彙、文法、談話の同時結節観を用いて、東京共通語と松本方言を対照し、日本語文法においては、終助詞と述語のムードが同じ類型をもつことを実証した。表現レベルの同時結節観の方法的有効性を確認できたこと、また、日本語談話の発想と表現にかかわる重要な結節のひとつである文末ムードについて新知見を述べ、記述成果をあげえたことに意義と重要性があると考える。本年度の研究成果については、予想以上に進展した点、順調に進展した点、やや遅れている点の、いずれもがみられた。外国語と対照させた日本語の発想と表現の研究においては、同時結節観に立った日中依頼談話の記述について、十分な成果をあげえた。その成果を日本語教育への応用につなげて提言できたため、中国における日本語教育方法の開発に一定の寄与ができたと思われることは、予想以上の進展である。それに対して、日韓談話の発想と表現の対照研究は、有効な分析観点の抽出がやや遅れている。しかしながら、今年度は、なぜ分析が困難になるのか、その理由の把握ができた点は前進であった。国内の方言変種の対照による日本語の発想と表現の研究については、おおむね順調に進展している。言語表現における、音声、語彙、文法、談話の同時結節観を用いることによって、従来とは異なった視点から記述的成果をあげえた。日本語は文末に発話者の意図がよくあらわれ、この結節点が、談話全体の発想と表現に与える影響は強いと考えられるが、東京共通語談話と松本方言談話を対照させることで、文末の終助詞の性質を再考することができた。文末イントネーションと終助詞のムードを関係づけた記述は、文法論、談話論の両者において新知見を提示しえたと考える。また、日本語談話の発想と表現の特徴を抽出するための基礎的研究ともなった。本年度の研究に関する具体的内容は、次の2点である。第1には、韓国語談話と対照することにより、日本語談話の発想と表現について、分析考察を行った。韓国語母語話者と日本語母語話者が、日本語を媒介語としてコミュニケーションを行う場合に、情緒的違和感を感じる場合があることが知られている。これは、主として日韓のコミュニケーションスタイルの異なりによって異文化接触問題が起こると説明されてきた。これに対して、発想と表現の観点から、なぜ情緒的な違和感を感じるのか、コミュニケーションスタイルの異なりとはどのようなことをいうのか、説明するモデルを検討した。その結果、日本語談話と韓国語談話の、談話構築態度が異なっていることにより説明できる場合があることを明らかにした。松本方言の終助詞語彙全体を体系的に考察することで、述語が持つ文末ムードと同様の種類のムード体系を終助詞が担っていることを明らかにした。このことにより、談話の組み立てにおける発想と表現を支配する、より下位の単位の言語的性格を明らかにしたといえる。また、松本方言においては、敬語の働きをする敬意終助詞の存在が報告されている。
ソボレフ不等式の離散化と工学への応用

ソボレフ不等式の離散化と離散ソボレフ不等式の最良定数および最良ベクトルの計算を行った。完全2部グラフの離散ラプラシアンは(m+n)次正方行列で与えられ、固有値ゼロをもち対応する固有空間は1次元である。離散ラプラシアンのペンローズ=ムーア一般化逆行列つまりグリーン行列を求めた。次にグリーン行列は(m+n)次元ヒルベルト空間を適切に設定すると再生核行列となる。また再生等式にコーシー=シュワルツの不等式を適用すると、離散ソボレフ不等式を得ることができる。また離散ソボレフ不等式において最良定数はグリーン行列の対角線値の最大値で与えられる。さらに対角線値の最大値を与えるのがグリーン行列の(j0, j0)成分であるとすると、離散ソボレフ不等式において等号を成立するベクトル、つまり最良ベクトルはグリーン行列の第j0列の列ベクトルであることがわかった。特にm=nの場合について,グリーン行列、最良定数、最良ベクトルの公式を得て、最良性の証明を与えた.本研究結果は論文執筆中である。本研究の主たる目的は、基礎科学の諸分野に登場する微分方程式、差分方程式の境界値問題のグリーン関数を求め、その再生核としての性質を調べることによって,ソボレフ不等式または離散ソボレフ不等式を導出すること.またグリーン関数の各種ノルムや対角線値を計算して,ソボレフ不等式の最良定数および最良関数(不等式において等号を達成する関数)を具体的に計算すること、以上2点である.これまでに得られた研究実績は主に以下の2点である。(1)連続版トムソンケーブルと関連するソボレフ型不等式の最良定数連続版トムソンケーブルモデルにおいて、出力電圧の最大値を入力電圧のL2ノルムで評価する新たな不等式を導出し、その最良定数を各種回路定数の有理関数として具体的に表記を求めた。拝見には熱方程式の初期値問題があり、そのグリーン関数(n次修正ベッセル関数で表される)が最良定数計算において重要な役割を果たす。本研究成果は1編の論文として発表した。(2)離散化された糸のたわみ問題と離散ソボレフ不等式の最良定数糸のたわみ問題を記述する2階差分方程式の各種境界値問題を考え、その離散化されたグリーン関数(グリーン行列)を計算した。次に得られたグリーン行列の応用として離散ソボレフ不等式の最良定数を求めた。最良定数はチェビシェフ多項式を用いて表される。副産物としてチェビシェフ多項式(三角関数)についての非自明で興味深い恒等式を得た。本研究成果は数学会年会(学習院大学)で発表し,1編の論文として現在投稿中である。本研究課題は基礎科学の諸分野に登場する微分方程式、差分方程式の境界値問題のグリーン関数を求め、その再生核としての性質を調べることによって,ソボレフ不等式を導出するものである.またグリーン関数の各種ノルムや対角線値を計算して,ソボレフ不等式の最良定数および最良関数を具体的に計算する.2014年度は特に以下の2点を中心に研究した.(1)切頂正多面体上の離散ソボレフ不等式の最良定数:工学の諸分野での応用が指摘されているC60バッキーボールフラーレンをはじめとする5種類の切頂正多面体上の離散ソボレフ不等式を研究した。具体的には各種多面体上の離散ラプラシアンを導入し、そのグリーン行列を求めた。またグリーン行列の再生核構造を調べ、離散ソボレフ不等式を導出しその最良評価を行った。本研究成果について2編の論文を執筆し現在投稿中である。本研究課題はソボレフ不等式の最良定数を具体的に求めて,その理工学への応用を目的とするものである。具体的には基礎科学および工学の諸分野に登場する微分方程式および差分方程式の境界値問題を設定し,そのグリーン関数(グリーン行列)を求める.次にグリーン関数(行列)の再生核としての構造を調べて,再生等式を導出する.次に再生等式からソボレフ不等式を導出する.最後にグリーン関数(行列)の各種ノルムや対角線値などを調べることによって,ソボレフ不等式の等号成立条件,言い換えると最良定数および最良関数(ベクトル)を求める.2015年度は主に切頂多面体の離散ソボレフ不等式に着目した.各種切頂多面体の離散ラプラシアンを設定し,そのグリーン行列または擬グリーン行列を求めた.(擬)グリーン行列を起点として離散ソボレフ不等式を導出し,その最良定数を求めた.切頂多面体の各頂点に原子,各辺に古典バネが配置されているとすると,離散ソボレフ不等式は原子の平衡点からの撓みの最大値をポテンシャルエネルギーの定数倍で評価する不等式である.また最良定数が小さいほど多面体が撓みにくいことを表しており,最良定数は物質の「かたさ」を表す1つの指標である.はじめに,切頂4,6,8面体についてそれぞれ離散ソボレフ不等式を導出し,その最良定数を求めた.本研究業績は1編の論文として日本応用数理学会論文誌に発表した.次に化学や工学の分野で注目を集めているC60バッキーボール・フラーレン,つまり切頂20面体についても,離散ソボレフ不等式を導出し最良定数を求めることで,物体のかたさに関する1指標を与えた.本研究業績は1編の論文としてJournal of Physical Society of Japanに発表した.

ソボレフ不等式は20世紀の偏微分方程式論の発展において重要な役割を果たしてきたが,その厳密な評価については未解決な問題を多く含んでいる.本研究は各種微分方程式の境界値問題を設定し,そのグリーン関数を求め,詳細に調べることで,ソボレフ不等式の厳密な評価を与えるものであり,数学的に興味深い結果と思われる.本研究は数学のみならず理工学の諸分野への応用を目指している.10年程度前から,ソボレフ不等式の離散化と不等式の最良評価を考えることによって,数理工学への応用を試みてきた.2015年度の切頂多面体に関する結果は新たな工学的応用が期待される.特に正20面体,つまりC60バッキーボール・フラーレンに関する離散ソボレフ不等式の最良評価は不等式の工学的および化学的意味づけを与えるものである.言い換えると,離散ソボレフ不等式の最良定数は物質の「かたさ」を表すものであり,工学や化学の分野における貢献が期待できる.本研究課題の目的は基礎科学の諸分野に登場する微分方程式および差分方程式の境界値問題のグリーン関数(グリーン行列)を求め、対応するソボレフ不等式および離散ソボレフ不等式の最良定数を求めることである.平成28年度は多面体や各種グラフ上の離散ソボレフ不等式を導出して,その最良定数を厳密に求め,さらに不等式の等号を達成する最良ベクトルも計算した.さらに,最良定数の工学的な意味付けについても考察した.主要な結果は以下の通りである.(1)重み付きテープリッツグラフ上の2種の離散ソボレフ不等式と最良定数:重み付きテープリッツグラフ上の一般化離散ラプラシアンからグリーン行列および擬グリーン行列を求めるとともに,その再生核構造を調べ,再生等式から2種類の離散ソボレフ不等式を導出した.またの不等式の最良定数を(擬)グリーン行列の固有値の調和平均として厳密に計算した.本研究は1編の論文として,Linear Algebra and its Applications 504(2016) pp. 344--355に掲載された.(2) C60フラーレンとその異性体に関連する離散ソボレフ不等式と最良定数:切頂20面体(C60フラーレン)および低次のフラーレンおよびその異性体について,離散ラプラシアンを導出,その(擬)グリーン行列の再生核構造を調べ,離散ソボレフ不等式を導出し,最良定数を計算した.最良定数の大小によって頂点数の同じフラーレンを分類した.本研究は最良定数はその力学的な安定性,言い換えれば最良定数の値が小さいということは該当するフラーレンがより硬いということを表し,最良定数は応用上も重要な指標を与えることを示唆している.本研究結果については現在論文を作成中である.本研究課題であるソボレフ不等式の離散化は,ベルヌーイ多項式の離散版の導出とその応用としての周期格子上の離散ソボレフ不等式の最良定数および等号を達成するベクトル(最良ベクトル)の構成に関する論文(2008年Funkcialaj Ekvaciojに掲載)から始まった.離散ソボレフ不等式の研究はそこで終わることなく,その後も完全グラフ,正多面体,切頂正多面体,...と発展し続けた.近年は切頂20面体(つまり,C60フラーレン)およびその異性体に関する離散ソボレフ不等式の最良定数および最良ベクトルの計算が進んでいる.これらの結果は数学的に不等式のよりシャープな評価を与えるという意味で重要であるとともに,応用数理的側面においても最良定数は物質の硬さに関する指標を与えることが分かった.
運動視及び両眼視における透明面知覚機序の基礎的研究

人の持つ透明面知覚機能がどのようなメカニズムで実現されているのかという問題は,脳の視覚情報処理を明らかにする上で本質的に重要である.本研究は,運動視及び両眼視モジュールに焦点を絞り,その細胞集団(ポピュレーション)の符号化特性を数理的に明らかにするとともに,対応する心理物理学実験を実施することで,透明面知覚の機序の解明を目指したものである.本年度は,大きく分けて二つの研究を平行して進めた.1.多重表面検出におけるニューロン間相互作用異なる特徴選択性を持つニューロン間には様々な相互作用が存在し,透明面知覚への寄与も示唆されている.本研究では,様々な運動刺激における透明面知覚精度を心理物理学的に測定し,この精度特性を説明する数理モデルを構築した.この結果,透明面知覚精度はニューロン間の正規化メカニズムの影響を受けること,および検出された多重運動の統合機構は二種類存在し,大域統合は単純なプーリングで実現されるが,局所統合はエネルギーモデルで近似される非線形応答特性の影響を受けることを明らかにした.2.両眼視における多重表面分離方略両眼視における透明面知覚機構はほとんど明らかになっていない.本研究では,ハイブリッド符号化を行う両眼性細胞を用いるとポピュレーション応答の全体形状から透明面を検出でき,人の知覚特性と合致することを示した.またこのモデルから,ローパスフィルタをかけた刺激ではattraction/repulsion effectが増大すること,及び同一ドットパターンを重畳した刺激では対応ドットのコントラスト反転率により知覚が変化することが示唆される.これらに対応した心理実験も行い,モデル予想が人の知覚でも生じることを明らかにした.人の透明面知覚がどのようなメカニズムで実現されているのかという問題は,脳の視覚情報処理を明らかにする上で本質的に重要である.本研究では,運動視及び両眼視モジュールに焦点を絞り,その細胞集団(ポピュレーション)の透明面符号化の特性や限界を理論的に明らかにするとともに,対応する心理物理学実験を行うことで透明面知覚機序の解明を目指している.本年度は,大きく分けて二つの研究を並行して進め,以下のような成果を得た.1.多重表面検出の拘束条件とmetamer錯視の導出物理的には異なるが,ポピュレーション応答が類似しているために区別できない刺激の組をmetamerと呼ぶ.本研究では,任意の二刺激に対する応答の類似度を定量的に評価する数理モデルを構築するとともに,様々な類似度を持つ二重運動と三重運動の刺激組を実際に構成し心理実験を行った.この結果,類似度が一定の値を超えると表面数の少ない面が知覚されやすくなることを明らかにした.この知見から,脳ではスパースネスの条件がsoft constraintの形で用いられ,常に最も近い二重運動が知覚されるのではないことが示唆された.2.表面間干渉の心理物理学的研究一般に透明面は単一面に比べて知覚し難いことが知られている.本研究では,運動方向の知覚精度を心理実験により測定し,このデータを定量的に説明するモデルを構築した.その結果,透明面検出のコストは,脳のノイズ除去機構が透明面では機能しないために生じていることが示唆された.また,重畳パターン間に相関のある特殊な刺激(LPD刺激)では運動視,両眼視ともに透明面を正しく検出できず,パターンの相関を下げると再び透明視が生じることを心理実験で明らかにした.この結果は,エネルギーモデルで生じる表面間干渉応答で説明できる.これらの知見から,脳には透明視に特化した表面検出機構が存在しないことが示唆された.人の持つ透明面知覚機能がどのようなメカニズムで実現されているのかという問題は,脳の視覚情報処理を明らかにする上で本質的に重要である.本研究は,運動視及び両眼視モジュールに焦点を絞り,その細胞集団(ポピュレーション)の符号化特性を数理的に明らかにするとともに,対応する心理物理学実験を実施することで,透明面知覚の機序の解明を目指したものである.本年度は,大きく分けて二つの研究を平行して進めた.1.多重表面検出におけるニューロン間相互作用異なる特徴選択性を持つニューロン間には様々な相互作用が存在し,透明面知覚への寄与も示唆されている.本研究では,様々な運動刺激における透明面知覚精度を心理物理学的に測定し,この精度特性を説明する数理モデルを構築した.この結果,透明面知覚精度はニューロン間の正規化メカニズムの影響を受けること,および検出された多重運動の統合機構は二種類存在し,大域統合は単純なプーリングで実現されるが,局所統合はエネルギーモデルで近似される非線形応答特性の影響を受けることを明らかにした.2.両眼視における多重表面分離方略両眼視における透明面知覚機構はほとんど明らかになっていない.本研究では,ハイブリッド符号化を行う両眼性細胞を用いるとポピュレーション応答の全体形状から透明面を検出でき,人の知覚特性と合致することを示した.またこのモデルから,ローパスフィルタをかけた刺激ではattraction/repulsion effectが増大すること,及び同一ドットパターンを重畳した刺激では対応ドットのコントラスト反転率により知覚が変化することが示唆される.これらに対応した心理実験も行い,モデル予想が人の知覚でも生じることを明らかにした.
ＭＯＦ－ｏｎ－ＭＯＦ多層薄膜の合成で実現する室温動作可能なケミレジスタセンサ

本研究では、申請者が独自に開拓してきたSpray型Layer-by-Layer(LbL)法を活用し、電気伝導性MOF (EC-MOF: Electronically Conductive MOF)の上に更に高いガス吸着選択性を示すMOFを積層させた、多層積層型MOFケミレジスタ型ガスセンサを開発する。これまでのMOF細孔を利用したケミレジスタ型センサは、室温においても高感度が得られる一方で、基質選択性については満足の行くものではなかった。本プロジェクトで開発する多層型センサでは、下層のEC-MOFにガス検出を担わせ、上層のMOF層にはガスの分離選択を担わせることで、高感度かつ高選択性を実現する。本年度は、(1)新規のEC-MOFの開発と(2)ケムレジスタ型ガスセンサの立ち上げを行い、本課題を遂行するにあたり柱となる研究内容が大きく進展した。より具体的には、まず従来、高伝導性が報告されてきた二次元シート構造のEC-MOFの系において、混合配位子型のEC-MOFの初めて合成に成功した。混合配位子型とすることで、この系の物性のより幅広いチューニングが可能となる。さらにケムレジスタ型ガスセンサの立ち上げを行うことで合成した新規EC-MOFが実際にケミレジスタ型ガスセンサとして高い特性を有することを確認した(論文投稿予定)。本年度は、新規のEC-MOFの開発とケムレジスタ型ガスセンサの立ち上げを行い、本課題を遂行するにあたり柱となる研究内容が大きく進展した。従来、高伝導性が報告されてきた二次元シート構造のEC-MOFの系において、混合配位子型のEC-MOFの初めて合成に成功した。以上から、本年度は目標として掲げる室温動作可能なケミレジスタセンサの実現のためにおおむね順調に進展していると評価する。今後はガスの分離選択を担わせるMOFの選定及びMOFナノシートの作成を行い、本年度に得られたECーMOFと組み合わせたMOF-on-MOF薄膜の合成に挑戦する。さらに、本年度立ち上げを行ったガスセンサデバイスを用いて、合成したMOF-on-MOF薄膜のケミレジスタ型ガスセンサとしての特性の評価を行う。
弱双曲型偏微分方程式及び系の解の構造

1.重複特性根をもつ双曲型作用素(大矢)2.偏微分作用素としてみたSchrodinger作用素(大矢・多羅間)3.偏微分作用素としてみた分散型(Korteweg-de Vries)作用素(多羅間)在来は、2)は主として作用素論の立場で3)は非線型問題としてP. D. Lax等による興味深い性質が示されてきた。上記を線型偏微分作用素としてみた時、最も素朴にEnergy不等式を導いても解の性質を反映する情報は得られない。実際、1)については、E. E. Levi条件2)についてはgauge変換に関わる適当な条件を与える必要がある。加えて単にEnergy不等式を得るという観点からでは2)と3)には強い類似性が見られる。初期値問題がC^∞級関数の枠で適切であることにより双曲性を決定する(特徴付ける)問題は、多くの研究者の興味を引いている。ここ20年ほどの研究代表者等の成果は本質的に変数係数に対しては、顕著な結果を与えているが、定数係数との関連迄こめて考えると、未だ難しい問題が多く残されていると言わざるを得ない。例えば重複度一定の極めて簡単な作用素であるに係わらず、低階として楕円形作用素を付加したとき適切になることが判っている。猶研究方法は同じであるが最近P. D′Ancona-S. Spagnoloにより非線型初期値問題の大域解の存在問題に対して作用素に双曲性を仮定するとき大域解の存在時間を係数に解析性を仮定すれば評価可能であることか示されている。即ち、係数の解析性は仮定するが双曲性が如何なる主張をするか知ろうとするわけである。著者達はFourier変換を使う為、空間変数には依存しないとの条件を課しているがこの除去に目的をしぼっている。
MRSA感染防御を誘導する新規自然免疫リガンドと受容体の同定

黄色ブドウ球菌感染において誘導されるIL-23はその感染防御に重要であるが、細菌性リガンド分子は明らかではない。我々は株化されたヒト樹状細胞を用い、IL-23の誘導能を検出するバイオアッセイ系を確立した。これにより黄色ブドウ球菌には細胞壁タイコ酸画分とそれ以外の、少なくとも2種のIL-23誘導物質があることが示唆された。細胞壁タイコ酸の合成変異株由来の細胞壁画分を用いた解析からは、IL-23分泌能に細胞壁タイコ酸の完全な修飾構造体は必要ないことが示唆された。株化されたヒト樹状細胞株2種を入手し、黄色ブドウ球菌細胞壁画分によるIL-23の誘導能、及び分泌能をqRT-PCR、及びELISAにより測定し検証した。同時に、IL-23の誘導に関わる細菌性リガンドの必須構造領域の決定を目的として、細胞壁タイコ酸の合成に関わる黄色ブドウ球菌遺伝子の変異株を6株構築した。細胞壁画分は、フレンチプレスによる菌体破砕の後、ペプチドグリカンと細胞壁タイコ酸を主な構成要素とする不溶性画分として調製した。非特異的に結合するタンパク質、脂質、核酸等は、界面活性剤を用いて洗浄除去した。TLR2のリガンドである細菌リポプロテインは、リポプロテインの脂質修飾の変異株を用いることにより除去している。種々の条件検討の結果、樹状細胞株をサイトカインで前処理することにより、細胞壁画分によるIL-23の誘導能、分泌量が著しく増大する条件が見出された。さらに、検証した細胞壁タイコ酸の変異株一株から調製した細胞壁画分ではIL-23分泌能が失われることが見出された。先行研究ではマウス個体への細胞壁画分の投与によって樹状細胞からIL-23が誘導されることを見出していたが、これをin vitroの実験系で再現できた。これにより、再現性良く、そして安価に、IL-23の誘導に関わる細菌性リガンドの必須構造領域の決定、並びに宿主受容体の同定を行うことが可能となった。株化されたヒト樹状細胞を用い、黄色ブドウ球菌の細胞壁画分によるIL-23分泌能を測定する実験系を構築できた。IL-23の誘導に関わる細胞壁タイコ酸の必須構造領域の同定を目的として、実験に用いる黄色ブドウ球菌変異株を6株構築した。このうち検証した細胞壁タイコ酸合成の変異体の一株では、IL-23分泌能が失われることを見出した。黄色ブドウ球菌の細胞壁画分によるIL-23分泌能を、in vitroで評価する実験系が構築できたので、おおむね順調に進展していると判断した。株化されたヒト樹状細胞株を対し、黄色ブドウ球菌細胞壁画分がIL-23誘導能を有することを、mRNAレベル、タンパク質レベルで確認した。他のサイトカインについて調べたところ、IL-6も分泌誘導されることが確認された。これらサイトカインの誘導に関わる細胞側のシグナル分子を同定する目的で、遺伝子発現の抑制方法について検討した。Anti-MYD88 shRNAを発現するレトロウイルス(ネオマイシン耐性)を作出し、ヒト樹状細胞株に感染させてネオマイシンで選択した後にMYD88の発現量を定量したところ、抑制率は最大で50%程度で、期待に添うものではなかった。IL-23の誘導に関わる細菌性リガンド分子の同定を目的として、黄色ブドウ球菌の細胞壁タイコ酸の合成変異株を作出し利用した。細胞壁タイコ酸の変異株の一株について細胞壁画分に由来する可溶化画分を調製したところ、IL-23分泌能が失われることが確認された。一方、細胞壁タイコ酸のある種の修飾酵素の欠損株は活性を保持しており、IL-23分泌に細胞壁タイコ酸の完全な修飾構造体は必要ではないことが示唆された。予想に反し、細胞壁タイコ酸画分のIL-23分泌能は失われるにも関わらず、粗抽出液画分ではIL-23分泌能が親株と同等に見出された。従って、IL-23の誘導能を有する細菌性リガンドは、細胞壁タイコ酸以外にも存在し、少なくとも2種類あることが示唆された。この第二因子をカラムクロマトグラフィーを用いて精製し、生化学的に同定することを試みたが、活性因子の同定には至っていない。樹状細胞にIL-23分泌能を有するリガンドは少なくとも2種類あることを見出した。細菌側の欠損株が活性を失う表現型から、第一のリガンドは細胞壁タイコ酸であると考えられる。一方、第二因子の同定には至っていない。Anti-MYD88 shRNAを発現するレトロウイルスベクターを用いたノックダウンの試みは期待に添わず、方法論の変更を余儀なくされた。宿主側因子を同定する方法論の改変が必要である。株化されたヒト樹状細胞を用い、細胞壁画分によるIL-23の誘導能を検出するバイオアッセイ系を確立した。黄色ブドウ球菌の細胞壁の構成因子の欠損株を用いたリガンド解析から、IL-23誘導能は細胞壁タイコ酸の他、細胞壁タイコ酸以外にも存在することが示唆された。そこでこの第2因子を生化学的に同定することを試みた。第二因子の活性は不溶性の細胞壁画分を複数のペプチドグリカン加水分解酵素で可溶化した後にも認められた。しかしながらクロマトグラフィーの溶出画分にはその活性を回収できなかった。

本研究は細胞壁タイコ酸-ペプチドグリカン共有結合体をマウス皮内接種後のサイトカイン群発現解析を起点とし、共有結合体のマウス腹腔投与における樹状細胞のIL-23発現に着想を得て開始した。その再現性の調査の過程で、可溶化した細胞壁画分は、可溶化前の不溶性画分に比べてMRSA感染防御能が低いことが分かった。つまり細胞壁画分は不溶性でも可溶化後でも腹腔投与12時間後をピークとして腹腔への好中球や単球の浸潤が認められるが、その程度は可溶化により1/4以下に低下した。好中球走化性因子の腹腔内量は細胞壁画分の投与後3時間をピークに増大したが、可溶化画分は1/10以下であった。細胞壁画分の腹腔投与後12時間後にMRSA株を腹腔感染させてマウスの生死を観察した結果、不溶性画分を事前投与したマウスは90%がMRSAによる感染死を免れたが、可溶化画分ではその効果は減弱した。FITCにて蛍光修飾した不溶性細胞壁画分は、腹腔投与後に貪食されリンパ節に集積する像が観察された。細胞壁には複数の自然免疫リガンドがあるが、不溶性画分ではこれらが集まり、また拡散が妨げられて局所的な濃度が高まることで免疫系をより活性化できるのかもしれない。自然免疫リガンドを同定出来たのちの応用に際しては、複数のリガンドを粒子化するメリットを検討したい。黄色ブドウ球菌感染において誘導されるIL-23はその感染防御に重要であるが、細菌性リガンド分子は明らかではない。我々は株化されたヒト樹状細胞を用い、IL-23の誘導能を検出するバイオアッセイ系を確立した。これにより黄色ブドウ球菌には細胞壁タイコ酸画分とそれ以外の、少なくとも2種のIL-23誘導物質があることが示唆された。細胞壁タイコ酸の合成変異株由来の細胞壁画分を用いた解析からは、IL-23分泌能に細胞壁タイコ酸の完全な修飾構造体は必要ないことが示唆された。研究計画に基づき、構築したアッセイ系を用いて、樹状細胞にIL-23分泌を誘導する黄色ブドウ球菌リガンドの必須構造領域を決定する。また、宿主側の受容体の同定を試みる。研究計画に基づき、構築したアッセイを用いて、樹状細胞にIL-23分泌を誘導する黄色ブドウ球菌リガンドの必須構造を決定する。宿主細胞の遺伝子発現の抑制方法については、レトロウイルスベクターのレンチウイルスベクターへの変更、選択薬剤のPuromycinへの変更により、実験系の確立を目指す。微生物薬品化学翌年度分として請求した助成金と合わせて遠心機を購入するため、計画的に次年度使用額を生じさせた。分光光度計の購入予定であったが大学内の事情の変化から購入不要となった。翌年度分として請求した助成金と併せて、シークエンス解析用ソフトや低分子精製用の高分離能のカラムを購入する。卓上マイクロ遠心機と専用ローターをセットで購入する。これまで使用してきたシークエンス解析用ソフトのバージョンが古く、パソコンの新しいOSに対応しない状態でやりくりしてきたが限度があるので、新規購入したい。