hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
17世紀・釜山窯の成立過程とその展開

さらに近代期の論文収集のなかで発見した釜山窯の古地図や記録にもとづいて、現地の研究者の協力のもと現地踏査を行った。これらの踏査や資料調査に関して韓国文物研究院、釜山市立博物館、釜山近代博物館の関係者の方々から多くのご教示を賜った。国内調査では釜山窯と対州窯に関する文献調査を行い、近現代における釜山窯の調査についての小稿と文献リストおよび解題を作成した。その結果、従来は見落とされていた文献の発見にいたり、東亜大学校博物館所蔵の陶片の発掘経緯を再現することが可能となった。以上のような成果にもとづいて、研究協力者の永井正浩氏とともに東亜大学校博物館の釜山窯片について資料分析を行った論文を学会誌に投稿し、現在は査読中である。また国内調査に基づいてまとめた成果物については、浅川伯教『釜山窯と対州窯』の復刊に合わせて発表予定である。本年度は助成の最終年度であったが、過年度まで含めた研究の意義は、従来まったく注目されてこなかった窯詰めの技術考察から、当初は朝鮮王朝の在地式であったものが、17世紀後半から日本と朝鮮の技術を混合、改良することによって新たな茶陶を生み出したことを明らかにしたことにある。さらに美術史研究の可能性として、狩野元信が下絵にかかわったと目される作例をいくつか抽出するに至った。本結果の重要性は、文献上のみで指摘されてきた「細工唐人」の実態を明らかにしたことにある。窯道具にみられる技術交流は「細工唐人」と対馬から派遣された陶工たちのものづくりを通した誠心の交わりともいえるであろう。釜山窯における朝鮮系から日本の技術へ変化するに至る年代や作例など具体的な証拠資料を収集するにいたったため。24年度が最終年度であるため、記入しない。平成24年度で科研費における研究は終了するが、詳細な報告のない釜山窯の陶片資料について、本研究で得られた確かな年代資料とともに紹介することを試みる予定である。
高温加工法による高温超伝導材料の成形および特性評価

高温超伝導体の線材化の一つの方法と考えられる高温加工法の基礎的研究として,Y系超伝導体の高温方形挙動を調べた。変形は二つの方法,一つは普通の一軸圧縮,他の一つは側面拘束した圧縮試験で行った。これらの試料は温度が高いほどまた変形速度が遅くなると大きな変形が可能になり、930°C,1.3×10^<ー5>/Sの歪速度で変形すると50%以上の大きな変形ができた。変形後の配向性を光顕観察およびECP法による結晶方位分布観察などにより調べた。ECP法では焼結体の結晶の方位の分布は全くランダムであるが,普通の一軸圧縮でもまた側面拘束圧縮後の圧縮面の(001)極点図ではともに30°以内に大多数の結晶が分布しており,C軸配向が強いことがわかった。しかし,C面内の双晶と側面拘束角度とのずれを光顕組織の画像処理により調べると側面拘束変形した試料の方がa軸あるいはb軸方向が拘束面に平行方向により多いひん度で並んでいることが明らかになった。現在,これら圧縮後の試料のJcを調べている。一方,現在高いJcが得られているBi系超伝導体で配向性とJcとの関係を検討するため,Agシ-ス線材を作製して4.2Kおよび77Kで試料面に垂直におよび平行に磁場をかけて調べた。77Kでは0.1Tまでの磁場で試料面に平行な場合はJcは約半分に低下するが,垂直の場合はO磁場の5分の1に低下する。しかし,磁場の上げ下げによるJcのヒステリシスはほとんどない。一方,4.2Kでは110Tの磁場がJcはほとんど変化せず01Tの間で急激に低下し,またヒステリシスがみられた。これらの現象は粒界のweak linkと断面組識の不均一性,すなわちAgシ-ス近くの配向性の良い部分と内部の無配向性組織の混在から説明した。
DNA中の8-オキソグアニンの酸化による周辺残基の変異

種々の配列の8-オキソグアニン(オキソG)含有DNA12merを機械合成し,片端を標識した.これらのDNAを一本鎖状態あるいは相補鎖と二本鎖を形成させた状態でリン酸緩衝液中(pH7.0)25°C,15分間,KMnO4と処理し,ピペリジンと加熱処理後,電気泳動(PAGE)で生成物を分析し,損傷部位を鎖の切断部位として同定した.なおアデニンの損傷は鎖の切断を誘起しないことが,酸化反応物のPAGE分析およびヌクレオシドへの分解とHPLC分析により示された.損傷部位の解析から,オキソGが最も反応性が大きく,その周辺残基の中でGの反応性がTやCに比べて非常に高いことが明かとなった.また二本鎖では周辺残基の損傷反応は起こりにくいことが判明した.一方,生体内で存在可能な水酸ラジカルとの反応として,Gに富み,オキソGを中央に含むDNA12merにX線を照射(N_2O存在下)した.ピペリジン処理後のDNAはオキソGの位置で他の残基に比べて高率で切断され,オキソG隣接位のGもコントロール鎖(未修飾G含)中の対応するGに比べて損傷を受けやすいことが明らかとなった.この反応の配列依存性を調べるためにオキソG-G部位の周辺に4種の塩基を比較的均等に含むDNAを用いて反応を行ったところ,オキソGは他の残基に比べて非常に損傷を受けやすかったが,隣接Gの損傷は上記の鎖に比べてコントロール鎖との差が小さかった.従ってX線照射ではオキソム周辺残基の損傷に配列依存性があると考えられる。鉄イオンを含む水酸ラジカル発生系を用いたときにオキソGは他の残基よりも損傷を受けやすい傾向にあったが、X線照射でのような損傷の位置選択性は観察されなかった.オキソGの隣接Gの損傷に関してはコントロール鎖との間に差はほとんど認められなかった.オキソGの酸化で誘起されるDNA周辺残基の損傷には鎖中の電子移動過程が含まれていると推定され,メカニズムの研究が進行中である.種々の配列の8-オキソグアニン(オキソG)含有DNA12merを機械合成し,片端を標識した.これらのDNAを一本鎖状態あるいは相補鎖と二本鎖を形成させた状態でリン酸緩衝液中(pH7.0)25°C,15分間,KMnO4と処理し,ピペリジンと加熱処理後,電気泳動(PAGE)で生成物を分析し,損傷部位を鎖の切断部位として同定した.なおアデニンの損傷は鎖の切断を誘起しないことが,酸化反応物のPAGE分析およびヌクレオシドへの分解とHPLC分析により示された.損傷部位の解析から,オキソGが最も反応性が大きく,その周辺残基の中でGの反応性がTやCに比べて非常に高いことが明かとなった.また二本鎖では周辺残基の損傷反応は起こりにくいことが判明した.一方,生体内で存在可能な水酸ラジカルとの反応として,Gに富み,オキソGを中央に含むDNA12merにX線を照射(N_2O存在下)した.ピペリジン処理後のDNAはオキソGの位置で他の残基に比べて高率で切断され,オキソG隣接位のGもコントロール鎖(未修飾G含)中の対応するGに比べて損傷を受けやすいことが明らかとなった.この反応の配列依存性を調べるためにオキソG-G部位の周辺に4種の塩基を比較的均等に含むDNAを用いて反応を行ったところ,オキソGは他の残基に比べて非常に損傷を受けやすかったが,隣接Gの損傷は上記の鎖に比べてコントロール鎖との差が小さかった.従ってX線照射ではオキソム周辺残基の損傷に配列依存性があると考えられる。鉄イオンを含む水酸ラジカル発生系を用いたときにオキソGは他の残基よりも損傷を受けやすい傾向にあったが、X線照射でのような損傷の位置選択性は観察されなかった.オキソGの隣接Gの損傷に関してはコントロール鎖との間に差はほとんど認められなかった.オキソGの酸化で誘起されるDNA周辺残基の損傷には鎖中の電子移動過程が含まれていると推定され,メカニズムの研究が進行中である.
低分子量Gタンパク質Rac3のノックアウトマウスの作製と解析

平成17年度は平成16年度に引き続きRac3ノックアウトマウス作製するため、Rac3遺伝子座にloxP及びloxP-dsRedの挿入されたコンディショナルアリルを持つF1マウスと生殖腺にCre酵素を発現するトランスジェニックマウスEIIa-CreTgマウスと交配させることにより、Rac3遺伝子のマウスゲノム上よりの除去を試みた。しかしながら、Rac3遺伝子座にloxP及びloxP-dsRedの挿入されたコンディショナルアリルを持ち、更にEIIa-CreTgを持つマウスは生まれてきているのだが、Cre酵素によりRac3のcodingregionが全て欠失したヌルアリルを持つヘテロマウスを得ることは出来なかった。そこで新たにRac3遺伝子座の全コーディングエクソンをネオマイシン耐性遺伝子によって破壊するターゲッティングベクターを構築し直し、ES細胞への導入を行ない、相同組み換え体を単離した。また小脳顆粒細胞特異的にCre酵素を発現するトランスジェニックマウスを作製するために、小脳顆粒細胞特異的に発現するNMDA型グルタミン酸受容体のε3サブユニット(NR2C)遺伝子の5'上流領域10kbの下流にCre遺伝子を挿入したベクターを構築し、マウスの受精卵に注入し、NR2C-CreTgマウスを作製した。得られた2系統のTgマウスをCre酵素が働くとβ-galactosidaseが発現するCAG-CAT-LacZ reporter Tgマウスと交配させ、Cre酵素の発現を確認した。得られた2系統の内、1系統は全くβ-galactosidaseの発現が確認出来ず、別の1系統はほぼ脳全体にβ-galactosidaseが発現していた.そこで、新たにTgマウスを作製し直すために、NR2C-CreTgの上流及び下流に周りのプロモーターやエンハンサーの影響を排除するinsulator配列を挿入したベクターを構築した。まずRac3ノックアウトマウス作製のためのターゲッティングベクターとして、Rac3遺伝子の開始コドンの5'上流にloxPを挿入し、さらにpolyA付加シグナルの下流にloxP-dsRedを挿入したベクターを構築し、ES細胞へ導入し、相同組換え体を単離した。この相同組換え体を胚盤胞期胚へインジェクションし、キメラマウスを作製した。次にキメラマウスを生殖腺にCre酵素を発現するトランスジェニックマウスEIIa-CreTgマウスと交配させることにより、Rac3遺伝子のマウスゲノム上よりの除去を試みた。しかしながら、Rac3遺伝子座にloxP及びloxP-dsRedの挿入されたコンディショナルアリルを持ち、更にEIIa-CreTgを持つF1マウスは生まれてきているのだが、Cre酵素によりRac3のcodingregionが全て欠失したヌルアリルを持つヘテロマウスを得ることは未だに出来ていない。得られた2系統の内、1系統は全くβ-galactosidaseの発現が確認出来ず、別の1系統はほぼ脳全体にβ-galactosidaseが発現していた。そこで、新たにTgマウスを作製し直すために、NR2C-CreTgの上流及び下流にinsulator配列を挿入したベクターを構築した。得られた2系統の内、1系統は全くβ-galactosidaseの発現が確認出来ず、別の1系統はほぼ脳全体にβ-galactosidaseが発現していた.

そこで、新たにTgマウスを作製し直すために、NR2C-CreTgの上流及び下流に周りのプロモーターやエンハンサーの影響を排除するinsulator配列を挿入したベクターを構築した。
ガングリオシド糖脂質クラスター上におけるアミロイドβの構造転換の精密解析

固体NMR法を用いて、リン脂質膜および糖脂質クラスターに結合したアミロイドβ(Aβ)の構造解析を行った。その結果、脂質膜上において、AβのN末端領域は特定の二次構造をとらないが、C末端領域はβストランドを形成していることが明らかとなった。この構造は、Aβがαへリックス構造からクロスβシート構造へと至るα-β転移の過程で一過的に生じる中間体構造であると考えられる。また、家族性変異型Aβについて、NMR解析および速度論的解析を実施した。その結果、1アミノ酸残基の置換によって引き起こされるAβのガングリオシドクラスターへの結合特性の変化が、アミロイド凝集核の構造形成に影響を与えることが示された。1.ガングリオシド含有膜上におけるAβ-Aβ分子間相互作用の同定、α-β転移の構造基盤の解明:脂質膜に結合したAβの固体NMR解析を実施した。その結果、平面性の高いリン脂質膜上において、AβのN末端領域は特定の二次構造をとらないが、C末端領域は安定なβストランドを形成していることが明らかとなった。また、C末端領域のβストランドは分子間で相互作用しており、平行βシート構造を形成していることが示された。2.家族性アルツハイマー病における変異型Aβの糖脂質認識の特異性の構造基盤の解明:Flemish変異型Aβ(A21G)および野生型Aβについて、NMR解析および速度論的解析を実施した。チオフラビンT蛍光を用いた速度論的解析の結果、A21G変異はアミロイド線維の伸長過程よりも核形成過程に大きな影響を及ぼすことが明らかとなった。また、NMR解析の結果、GM1ガングリオシドミセルに結合したFlemish型Aβは、C末端側のαへリックスは野生型と同様に保持されているが、N末端側のαへリックスが野生型に比べて非常に緩まっていることが明らかとなった。これらの結果から、1アミノ酸残基の置換によって引き起こされるAβのGM1ガングリオシドクラスター上での構造変化が、アミロイド凝集核の構造形成に影響を与えることが示された。平成27年度に計画していた1.ガングリオシド含有膜上におけるAβ-Aβ分子間相互作用の同定、α-β転移の構造基盤の解明、および2.家族性アルツハイマー病における変異型Aβの糖脂質認識の特異性の構造基盤の解明に関しては、予定通り達成することができ、それぞれ論文発表に至っている[PLoS ONE, 11, e0146405 (2016)およびBio. Pharm. Bull, 38, 1668-16672 (2015)]。さらに、平成28年度に研究実施予定であった、ガングリオシドクラスターを含む機能的生体膜環境の精密構造解析に関してもすでに着手している。以上、総合的に判断して極めて順調に研究は進展している。申請者はこれまで、クラスター化したGM1ガングリオシドがアミロイドβ(Aβ)を特異的に補足し、その構造変化を促す触媒場としてアルツハイマー病の発症に関与することを明らかとしてきた。しかしながらこれまでの研究では、GM1ミセルに安定に結合した状態のAβを溶液NMR解析の対象としてきたため、膜上におけるAβの構造変化に関する構造情報は得られていなかった。そこで、より生体膜に近い糖脂質膜を構築し、固体NMR法を用いた解析を実施し、ガングリオシド膜上におけるアミロイド線維形成過程を分子構造論的に理解することを目指した。アルツハイマー病を引き起こす環境依存的なAβの凝集過程の本質を体系的に明らかにするために、Aβの構造変化を規定する膜環境場側の情報を得ることを試みた。ガングリオシドの濃度を変化させたリポソームを作製し、固体NMR法を用いてガングリオシド含有膜上に結合したAβの構造を同定した。その結果、ガングリオシドの含有量に依存してAβのC末端領域の二次構造が変化することが判明した。ガングリオシド膜上におけるアミロイド線維形成過程の分子構造論的理解:アルツハイマー病を引き起こす環境依存的なAβの凝集過程の本質を体系的に明らかにするために、Aβの構造変化を規定する膜環境場側の精密構造情報を得ることを試みる。そのために必要な、安定同位体標識や部位特異的に選択ラベルされた糖脂質の調製を行う。さらに、糖脂質の濃度を変化させた膜モデルを調製し、溶液および固体NMR法を用いて糖脂質クラスター側の動的構造情報を抽出する予定である。

さらに、Aβ側の高次構造解析、速度論的解析および計算科学的解析などを組み合わせることにより、アミロイド線維形成へと至る構造変化のプロセスを詳細に捉え、糖脂質膜上でのAβのアミロイド線維伸長メカニズムの実体を明らかにすることを目指す。生物物理学申請時にはクロマトグラフィーシステム一式を設備備品費に計上していたが、採択時には他予算にてすでに購入済みであり、本研究課題の予算により購入する必要がなくなったため。平成28年度は消耗品費、旅費、および論文投稿費用として使用する予定である。固体NMR解析を進めるにあたり、安定同位体標識を施したタンパク質および糖脂質膜調製に必要な試薬が当初の想定以上に大量に必要となることが判明した。したがって、翌年度分として請求した助成金のおおくは、安定同位体標識化合物(13Cグルコース、15NH4Cl、13C/15N標識アミノ酸、重水など)および糖脂質膜調製に必要な試薬(ガングリオシド、コレステロール、DMPCなど各種脂質)の購入費用に充てる予定である。
新規キラル超原子価ヨウ素試薬の合成研究

新規キラル超原子価ヨウ素試薬の合成を目指して、今年度は研究実施計画に基づき、環構造に不斉を導入した新規環状超原子価ヨウ素試薬の合成研究を行った。その結果、現在のところラセミ体ではあるが、非対称環状ヨウ素試薬を合成し、他の環状試薬と同程度の反応性を有することが分かった。また、環状試薬も含めた超原子価ヨウ素試薬の活性化法の開発についても検討した。超原子価ヨウ素試薬の活性化に関しては不活性なヨードソベンゼンをBF_3・Et_2Oで活性化する以外はほとんど知られていなかった。そこで申請者は活性なphenyliodine (III) bis (trifluoroacetate)(PIFA)と種々のルイス酸との組み合わせによりいかなる効果が発現するかを調べた。その結果、フェノールエーテル類の分子内フェノールカップリング反応においてPIFA-BF_3・Et_2Oの使用により著しく収率が向上した他、(J.Org.Chem.,1996,61,5857 ; Chem.Commun.,1996,1481.)PIFA-BF_3・Et_2Oとベンジルチオアルキル側鎖を有するフェノールエーテル類との反応により含硫黄複素環化合物類を高収率で得ることに成功した。(Chem.Commun.,1996,2225.)また、TMSOTfで活性化させたPIFAを用いた場合にもアルキルアジド側鎖を有するフェノールエーテル類の分子内閉環により合成化学上有用なキノンイミン類及びキノンイミンモノアセタール類を短工程かつ収率良く得ることが出来た。(Chem.Commun.,1996,1491.)このようにルイス酸の添加により従来にない高い反応性と特異な反応性(特に1電子酸化反応)を発現させることができたので、現在、これらの知見に基づき、光学活性リガンドの合成並びにキラルなルイス酸による触媒的な活性化などによる新規な不斉酸化反応を検討中である。
脳部位特異的に発現するエストロゲン受容体サブタイプの遺伝子発現制御と機能

エストロゲン受容体(ER)サブタイプ(α,β)は、性ステロイドホルモンが果たす神経内分泌機構の分化という側面において重要な役割を担っていると考えられている。我々は、エストロゲン受容体βの性差が認められる領域として、視索前野脳室周囲核(AVPV)のあることを明らかにしているが、視床下部腹内側核も含まれることを見出した(Orikasaet.a1,2004)腹内側核での性差は、新生仔期のステロイドホルモンの影響で成立し、成体においても維持されることを明らかにした。雌雄の成体ラットにおいて性腺摘出後、エストロゲンを投与すると、腹内側核では雌雄共に、エストロゲン受容体βのmRNAとタンパクが両者とも発現の減少が認められた。同様に、他の脳領域での発現についても調べた。視索前野脳室周囲核では、エストロゲン受容体βmRNAの発現は、性腺摘出後のエストロゲン投与によって減少していたが、エストロゲン受容体β免疫陽性細胞の数は、対照群と比して変わらず、腹内側核での発現調節とは異なっていた。扁桃体内側核では、エストロゲン受容体βのmRNAとタンパク両者ともに発現は対照群と比して変わらなかった。以上の結果から成体において、エストロゲン受容体βの発現は脳領域特異的に制御されていることが示唆された。さらに、我々は先行研究において、排卵調節に重要とされているAVPVにアンチセンスを投与し排卵の排止を認めた。これらのことから、ERβによって駆動される雌固有の神経回路があり、性分化の過程で形成されるだろうとの仮説を立てた。このような神経回路に特異的な神経伝達物質の候補を網羅的に調査するため、ラットのマイクロアレイ法によって検索した。出生直後の雄ラットを去勢し、雌型の発現パターンをもつ雄脳から、2時間以内に視床下部を採取した。対照群と遺伝子発現において差がみいだされたものにソマトスタチン遺伝子があった。視索前野性的二型核(SDN-POA)にソマトスタチンの発現を見出し、性差がみとめられること、周生期のホルモン環境に依存することを明らかにした(Orikasaet.a1,appearedonline2006)。当該研究者は、エストロゲン受容体βの性差が認められる領域に、視床下部腹内側核も含まれることを見出した。腹内側核での性差は、新生仔期のステロイドホルモンの影響で成立し、成体においても維持されることを明らかにした。当該研究者はすでに、エストロゲン受容体βの性差の認められる領域として、視索前野脳質周囲核があることを明らかにしているが、この領域についても、成体におけるエストロゲン受容体βのmRNAとタンパクの発現について検討した。その結果、エストロゲン受容体βmRNAの発現は、性腺摘出後のエストロゲンを投与によって減少していたが、エストロゲン受容体β免疫陽性細胞の数は、対照群と比して変わらず、腹内側核での発現調節とは異なっていた。

さらに、生殖において性的覚醒に重要とされる、扁桃体内側核におけるエストロゲン受容体βについても調査した。扁桃体内側核におけるエストロゲン受容体βでの遺伝子発現は多く、エストロゲン受容体αとの発現領域と一部一致していた。上記2つの脳領域とは異なり、エストロゲン受容体βのmRNAとタンパク両者ともに発現は対照群と比して変わらなかった。以上の結果から、成体において、エストロゲン受容体βの発現は脳領域特異的に制御されていることが示唆された。一方で、腹内側核から中脳中心灰白質への投射は雌の性行動に重要であることが知られている。腹内側核に出現するエストロゲン受容体βが、このような雌の性行動の調節系に関与しているものかについて、形態学的な手法を用いて検討した。中脳中心灰白質外側部にFluolo-Goldをイオン泳動法にて注入し逆行性にラベルしエストロゲン受容体βニューロンから中脳中心灰白質外側部に投射があるかどうかの検討を行った。腹内側核に発現するエストロゲン受容体βの一部のニューロンはFluolo-Gold免疫陽性であることを見出した。現在、同一の脳領域でのエストロゲン受容体αの投射についてはどうか、検討を行っている。エストロゲン受容体βの生殖生理における役割が近年注目を集めている。我々は、性ステロイドホルモンが受容体を介して神経内分泌機構の分化と機能の維持に果す役割について一連の解析を進めてきたなかで、排卵におけるERβの関与を明らかにすることができた。さらに、エストロゲン受容体βの性差が認められる領域に、視床下部腹内側核も含まれることを見出し、新生仔期のステロイドホルモンの影響下にあり、成体においても調節をうける領域であることを明らかにした。雌雄の成体ラットにおいて性腺摘出後、エストロゲンを投与すると、腹内側核では雌雄共に、エストロゲン受容体βのmRNAとタンパクともに発現の減少が認められた。しかし、視索前野脳質周囲核では、エストロゲン受容体βmRNAの発現は、性腺摘出後のエストロゲンを投与によって減少していたが、エストロゲン受容体β免疫陽性細胞の数は、対照群と比して変わらず、腹内側核での発現調節とは異なっていた。扁桃体内側核に発現するエストロゲン受容体βは、上記2つの脳領域とは異なり、エストロゲン受容体βmRNAとタンパクともに発現は対照群と比して変わらなかった。さらに、腹内側核でのエストロゲン受容体βの生理学的な解析を目的に、エストロゲン受容体βのアンチセンスオリゴヌクレオチドを投与し、性嗜好性テストを含めた性行動の解析を行なった結果、アンチセンスオリゴヌクレオチド投与群において対照群と比して、雌性行動の変化を認める知見が得られた。そこで、現在、アンチセンスオリゴヌクレオチドの手法にとって代わり有効な手法としてのsiRNAの脳室内投与の適用を試みている。組織化学によって、siRNAの投与による細胞内エストロゲン受容体βが局所的にノックアウトされているかの検討を行ない、性嗜好性テストを含め雌性行動全般にわたり詳細に解析を進めている。エストロゲン受容体(ER)サブタイプ(α,β)は、性ステロイドホルモンが果たす神経内分泌機構の分化という側面において重要な役割を担っていると考えられている。申請者らは、ERβ発現の性差が新生仔期のエストロゲンの影響化で成立するとの知見を報告している。
肺線維症における抗炎症性脂質メディエーターの有用性とその役割

肺線維症は国が難治性疾患のひとつに指定している治療難渋な肺疾患のひとつである。今回我々は魚油に多く含まれるEPA由来抗炎症性脂質メディエーターレゾルビンE1(RvE1)ならびに高容量EPAをブレオマイシン誘導性マウス肺線維症モデルに投与し抗炎症効果ならびに肺線維化抑制効果を明らかにした。また高容量EPAを投与した肺を用いて網羅的脂質解析を行ったところRvE1以外の脂質メディエーターが検出され、これらが抗線維化作用をもつメディエーターである可能性が示唆された。(目的)治療に難渋する肺線維症において線維化の進行を抑制できる薬剤の開発が注目されている。一方魚脂に多く含まれるエイコサペンタエン酸(EPA)が生体内の炎症部位でレゾルビンE1(RvE1)に生成され、強い抗炎症性作用をもつ物質であることが明らかになった。今回我々はブレオマイシン誘発性マウス肺線維症モデルを用いて線維化期におけるRvE1の効果について検討した。(方法)ブレオマイシン(1mg/kg)を経気道的にC57BL/6マウスに投与し、ブレオマイシン誘発性肺線維症モデルを作成した。ブレオマイシン投与後14日から20日までRvE1(100ng/マウス)を連日腹腔内投与した。21日目にマウスの気管支肺胞洗浄(BAL)を行い白血球数および蛋白量について検討した。また肺組織を取り出し組織学的な検討およびコラーゲン量を測定し、線維化の程度を検討した。さらに同日の肺機能の測定を行った。(結果)PBSを連日腹腔内投与したコントロールマウスに比べRvE1投与マウスはブレオマイシン投与21日目のBAL中の炎症性細胞ならびに蛋白の減少を認めた。またRvE1投与マウスは組織学的に線維化の程度あるいは肺内のコラーゲン産生量が減弱していた。さらにRvE1群においてマウス肺機能(Lung Elastance)の改善を認めた(結語)抗炎症性脂質メディエーターRvE1はマウスブレオマイシン誘発性モデルの線維化期においてその抑制効果があることが示唆された。魚油に含まれるエイコサペンタエン酸(EPA)由来のレゾルビンE1(RvE1)は強い抗炎症性作用と組織保護作用をもつ。ブレオマイシン誘発性肺線維症モデルを用いて線維化期にRvE1(100ng/mouse)を腹腔内に連日投与(7日間)することによって肺内の炎症細胞の減少、組織学的に線維化の程度あるいは肺内のコラーゲン産生量の減弱、マウス肺機能(Lung Elastance)の改善を認め、RvE1は肺線維症動物モデルにおいて線維化期を抑制する可能性が示唆された。同モデルを用いて線維化期に前駆体であるEPA(1000mg/kg)を大量投与した。結果RvE1投与と比較すると上記に認めた結果よりその効果はやや劣るものの、肺線維化の抑制効果を認めた。次にEPA投与により肺内でどのような脂肪代謝産物が産生されているか検討した。同モデルのEPA投与後の肺を摘出し、共同研究者である東京大学大学院薬学系研究科有田誠准教授の協力のもとLC-MS/MSを用いて肺内での産生されるEPAに由来する数百種類の代謝産物である脂質メディエーターについて解析した。結果RvE1の増加のみならず線維化抑制に関与する脂質メディエーター産生が促進されている可能性が示唆された。EPA大量投与によって肺線維化が抑制された結果と今回のメタボローム解析の結果から今後はこれに関与すると考えられるRvE1やこれまで報告されている脂質メディエーター以外の代謝産物の線維化抑制への寄与について検討する。(目的)ブレオマイシン誘発性マウス肺線維症モデルを用いて線維化期におけるエイコサペンタエン酸(EPA)由来抗炎症性脂質メディエーターレゾルビンE1(RvE1)の有効性について検討した。ブレオマイシン投与後14日から20日までRvE1(100ng/マウス)およびEPA(100mg/kg or 1000mg/kg)を連日腹腔内投与し21日目に評価を行った。また高容量EPA投与群の肺を用いてLC-MS/MSを用いたメタボローム解析を行った。(結果)昨年度の検討ではRvE1投与マウスはブレオマイシン肺線維症においてBAL中の炎症性細胞ならびに蛋白の減少さらに組織学的な線維化の程度あるいは肺内のコラーゲン産生量が減弱、さらにマウス肺機能(Lung Elastance)の改善を示した。さらにBAL中メディエーターにおいてIL-6およびCysLTsなど炎症メディエーターの抑制を認めた。さらにRvE1投与によりマウスの体重減少の抑制を認めた。

EPA1000mg/kg投与群においてもコラーゲン産生量の低下を認めたため、高容量EPA投与によるブレオマイシン誘発性肺における脂肪酸代謝物のプロファイルを検討したところRvE1の産生は認められず、またアラキドン酸系の代謝物には影響を与えなかったがレゾルビンE系活性代謝産物であるRvE2を始めとした他のEPA代謝産生の増加を認めた。(結語)抗炎症性脂質メディエーターRvE1はマウスブレオマイシン誘発性モデルの線維化期においてその抑制効果があることが示唆された。一方高容量EPAにおいても線維化期の抑制を認めたが、その機序としてEPA由来の他の活性代謝産物が産生され抗線維化作用を有している可能性が示唆された。現在EPA代謝産物の肺線維化への寄与については研究を進め結果を得ているが、同じく魚油に含まれているDHA代謝産物に関しての研究は取り組んでいない。24年度が最終年度であるため、記入しない。上記にように現在EPA代謝産物による肺線維化抑制への結果の集積が得られつつある。今後は当初の計画にあったDHA代謝産物に関する検討との同時進行ではなく、優先的に現行の研究を施行していく予定である。
4区間交換変換の力学的性質について

私はNegative Slopeアルゴリズムに対してNegative Slopeアルゴリズムによる展開列が無限に続くような初期条件に対して、帰納極限群を具体的に表し次元群を具体的に構成することに成功しました。またその証明の中で、展開列が無限に続くような初期条件を与える無理数の近似分数をNegative Slopeアルゴリズムの表現行列の成分で表すことに成功しました。このことは、単純連分数展開に続く無理数の新しい近似分数を与えるものであると考えます。報告者は4区間交換変換について、先行研究からも知られているようにRauzy inductionを繰り返しほどこすと、あるダイアグラムが完成することを確かめた。このとき、ある周期的なパスを1つ選択し、その表現行列がPisot条件を満たすようなものを探したが、うまく見つけることはできなかった。その中で、Pisot条件に一番近い条件を満たす周期的なパスを1つ固定し、表現行列のincidence matrixからsubstitutionを不動点をもつように構成し、4文字からなるsubstitutionに対して不動点となる点列を作り、それによって得られるn次元上の点の集合を構成した。その集合の各点を、incidence matrixの最小固有値の固有ベクトル方向に垂直な平面上に射影したところ、ひと続きのジグザグの線分が現れた。さらにこの線分は4つの交わらない線分の和集合となっていることも確かめられた。しかしながら、induced transformationの構成には至らなかった。報告者は学会活動として、Workshop「数論とエルゴード理論」を伊藤俊次氏の平成19年度科学研究費補助金基盤研究(B)「準周期タイリングの数理とその応用」(代表者金沢大学大学院自然科学研究科伊藤俊次)とともに2010年3月6日及び7日に開催した。その中で、報告者は「A constructon of the dimension group of degree 3」というタイトルで講演を行い、日本大学文理学部上席研究員田村純一氏、文京学院大学湯浅久利氏および東京大学大学院特任研究員中石健太郎氏を同Workshopに招聘し、講演をしていただいた。報告者は講演の中で、これまで先行研究においてはほとんど存在しない、ランク3の次元群の具体例について発表した。次元群としてどんなものがあるか具体例を構成することは、この研究分野に大きな貢献ができることが期待される。報告者は、Negative Slopeアルゴリズムに対してNegative Slopeアルゴリズムによる展開列が無限に続くような初期条件に対して、帰納極限群を具体的に表し次元群を具体的に構成することに成功した。またその証明の中で、展開列が無限に続くような初期条件を与える無理数の近似分数をNegative Slopeアルゴリズムの表現行列の成分で表すことに成功した。このことは、単純連分数展開に続く無理数の新しい近似分数を与えるものである。またこれらの内容を論文として発表すべく執筆中である。この結果について、報告者は2010年度東京力学系セミナー「夏季集中セミナー」において発表した。しかしながら、Negative Slopeアルゴリズムに対応して構成した次元群に対応するadic変換の構成については未だ成功していないため、もとの3区間交換変換の位相的拡大であることの証明に至ることはできなかった。報告者は学会活動として、6月に京都大学数理解析研究所で行われた研究集会「準周期秩序の数理」と、7月に京都大学数理解析研究所において開催されたJapan-Korea Workshop on Number Theory and Ergodic Theory、さらに8月に関西セミナーハウスで行われたSummer School on the Theory of Uniform Distribution研究集会に参加した。また、伊藤俊次氏の平成22年度科学研究費補助金基盤研究(C)「準周期タイリングの構成理論とエルゴード理論」(代表者金沢大学大学院自然科学研究科伊藤俊次)とともにWorkshop「数論とエルゴード理論」を2011年2月18日及び19日に開催した。同Workshopに東京大学大学院特任研究員中石健太郎氏を招聘し、講演をしていただいた。
高結晶性合金触媒による六方晶窒化ホウ素多層シートの大面積合成法の開発

六方晶窒化ホウ素(h-BN)の多層膜は原子レベルの平坦性と低極性の光学フォノンを有し、ダングリングボンドフリーであるため、二次元材料のポテンシャルを引き出す理想的な絶縁層として注目を集めている。今後のデバイスなどへの応用に向けて、大面積合成が可能な化学気相成長(CVD)法が期待されている。しかし、多層h-BNの均一成長は現在まで達成されておらず、極めてチャレンジングな課題であった。そこで本研究では、CVD反応中の固溶・析出過程に着目して、その制御のために単結晶基板上にスパッタリングで製膜したNi-Fe合金を触媒として、多層h-BNの均一成長に取り組んできた。Ni単体ではほとんどh-BNが成長せず、Fe単体では多層h-BNが得られるものの、その均一性は低かった。一方で、Ni-Fe合金触媒を用いることで、均一な約3 nm厚さの多層h-BN膜が成長していることが光学顕微鏡観察、断面TEM観察、ラマン分光測定等を通じて明らかとなった。これは合金化することで、ホウ素と窒素をバランス良く固溶し、Fe単体で見られるCVD中における触媒の結晶構造変化を抑制したことが要因であると考えられる。また興味深いことに、Ni-Fe合金の結晶方位が多層h-BNの均一成長に強く影響を及ぼしていることも分かった。さらに、得られた多層h-BN上に二次元材料の一つである二硫化タングステン(WS2)を積層させて、フォトルミネッセンス測定を行ったところ、SiO2基板上に堆積したWS2と比較して、発光ピーク強度が10倍以上強く、ピーク半値幅は半分以上小さい値となっていた。従って、合成した多層h-BNは二次元材料の基板として、優れていることが明らかとなった。h-BNは様々な二次元材料の特性を大幅に向上できるため、本研究の成果は、今後の応用研究を大きく促進するものと期待される。翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。
注視点を指標としたマルチメディア・コンテンツの教育効果に関する研究

本研究では、第1の目的として、マルチメディア・コンテンツを含むeラーニング教材の視聴時における注視点を記録し、その分析に基づいて教育効果を認知過程の観点からとらえることを目指しており、そのための実験を実施した。ナック・イメージテクノロジー社のアイマークレコーダEMR-NL8を使用して取得した注視点データを、解析ソフトEMR-dFactoryで分析した。このソフトウェアでは、実験協力者が見ている画面をAVI形式でデータとして取り込むことができるため、注視点の位置をピクセル単位で出力する従来の機能に加え、指定した領域内で停留した回数や時間のデータの出力と画像表示、停留点の移動パターンの図示などが行える。実験から以下のことが明らかになった。まず、テキスト情報の表示に関しては、注視時間や注視の回数が記憶を促進せず、注意を喚起するような色付けやマーク付与を行ったとしても、後のテストにおいて成績を高める効果が得られなかった。また、アニメーションを使った図示では、講師の話と連携し講義を補足するような画面提示がある場合には、図と講獅の顔とにバランスよく注視が配分され、よく理解され記憶されるものの、講師の話をうまく補足しない場合には注視の効果が見られないことが示された。第2の目的であるマルチメディア・コンテンツの作成については、オーサリングソフトXpertを用いて、効果的なeラーニング教材の作成を試みた。教材の作成に当たっては、まずパワーポイントによるスライド作成を行うが、講義内容との連携が必要なので、アニメーションの設定を慎重に行った。その後、スライドはHTML形式で保存し、講義画像の録画と同期させて保存した。「心理学の基礎」の中で視知覚の情報処理過程を取り上げたが、テキスト表示にもアニメーションを使用し、図による表示と合わせて効果的な教材を作成することができた。研究期間の1年目である平成18年度は、マルチメディア・コンテンツの作成準備と、注視点計測のための実験体制の構築を行った。マルチメディア・コンテンツの作成に当たっては、「心理学の基礎」と「統計の基礎」を効果的に学ぶための学習プログラムを設計し、視覚教材を中心にコンテンツ作成のための資料収集を行った。いずれの課題においても教材の視覚提示が効果的であるが、どのような情報と組み合わせてどのように提示するかにより、学習効果は異なるものと考えられる。当初は、eラーニングのオーサリング・ソフトを用いて、具体的にさまざまなコンテンツを作成する予定であったが、市販のソフトの中から何を選択するかについては検討すべき要因が多く見出されたため、慎重に選択を行い平成19年度の初めに実施することにした。本研究では、コンテンツの作成とともに、注視点計測の実験が重要なテーマとなっている。当初の計画では、視線の移動を分析するソフトウェアの導入を平成19年度としていたが、平成18年度中に導入することにした。ナック・イメージテクノロジー社のアイマークレコーダEMR-NL8を使用して、パソコン画面上の注視点データを取得する実験体制はすでに整っていたが、本研究では解析ソフトの新製品であるEMR-dFactoryを導入して、取得したデータの効率的な分析を可能とした。このソフトウェアでは、実験協力者が見ている画面をAVI形式でデータとして取り込むことができるため、注視点の位置をピクセル単位で出力する従来の機能に加え、指定した領域内で停留した回数や時間のデータの出力と画像表示、停留点の移動パターンの図示などが行えるようになった。したがって、当初の計画では平成19年度に予定していた実験実施とデータ分析のための体制を、平成18年度に整えることができた。今年度は2年間の研究期間の最終年度であり、研究目的としているマルチメディア・コンテンツを含むeラーニング教材の視聴時における注視点を記録し、その分析に基づいて教育効果を認知過程の観点からとらえるための実験を実施した。

まず、テキスト情報の表示に関しては、注視時問や注視の回数が記憶を促進せず、注意を喚起するような色付けやマーク付与を行ったとしても、後のテストにおいて成績を高める効果が得られなかった。また、アニメーションを使った図示では、講師の話と連携し講義を補足するような画面提示がある場合には、図と講師の顏とにバランスよく注視が配分され、よく理解され記憶されるものの、講師の話をうまく補足しない場合には注視の効果が見られないことが示された。そこで、今年度購入したオーサリングソフトXpertを用いて、効果的なeラーニング教材の作成を試みた。教材の作成に当たっては、まずパワーポイントによるスライド作成を行うが、講義内容との連携が必要なので、アニメーションの設定を慎重に行った。その後、スライドはHTML形式で保存し、講義画像の録画と同期させて保存した。「心理学の基礎」の中で視知覚の情報処理過程を取り上げたが、テキスト表示にもアニメーションを使用し、図による表示と合わせて効果的な教材を作成することができた。
次世代カルシウムイメージング法による視床下部温度感受性ニューロンの時空間応答解析

蛍光タンパクCa^<2+>センサー遺伝子を発現させた視索前野スライス培養を用い、Ca^<2+>イメージング実験を行なった。まず、ヒスタミン受容体の刺激実験を試み、(i)ヒスタミン1-100μMは用量依存的に内側視索前野(mPOAH)ニューロンの細胞内Ca^<2+>を増加させること、(ii)H1ブロッカーであるクロロフェニラミンの投与が、このCa^<2+>応答を抑制すること、また、(iii)ヒスタミン応答性ニューロンの多くは5°Cの温度変化(5°Cの潅流液温度変化)に対して細胞内Ca^<2+>^<2+>を増加させる傾向があることが明らかとなった。さらに、ファイバー光源からの赤外線スポット照射により、細胞体や樹状突起などの刺激実験を試みたが、局所刺激では細胞内Ca^<2+>レベルに有意な変化は引き起こさなかった。照射する赤外光の強度が十分であるかどうかなど、今後の研究課題が残された。また、体内時計である視交叉上核を含むスライス培養において、一日の様々な時刻でヒスタミン刺激を試みたが、応答の大きさに有意差は無かった。体温調節や睡眠覚醒リズム調節におけるmPOAHの役割をさらに解析するために、微小ワイヤー電極東を慢性的にラットに埋め込み、この部位から観察される自発的な神経発火頻度を連続的に解析した。その結果、in vivoでのmPOAH神経活動は、覚醒レベル(頸部筋電図を指標に解析)と非常に高い相関を示した。また、クロロフェニラミンの腹腔内投与は、大多数のmPOAH神経活動を抑制することも明らかとなった。これらのことは、mPOAHの温度感受性ニューロンがヒスタミン神経の支配により、活動レベルを変化させていることを示唆している。クロロフェニラミンの経口投与には睡眠促進作用があることが報告されているので、体温と睡眠の調和的な制御のために、mPOAHが果たす役割について今後検討する必要があるものと思われる。これまでの様々な研究により、神経細胞における温・冷刺激の多くが、Ca^<2+>流入を伴う多様なイオノトロピック受容体により受容されることが報告されている。近年、海外のグループにより、YC2.1を強制発現させたショウジョウバエを用いて、温感受性ニューロンの画像化が可能であることが報告された。しかしながら恒温動物における同様の解析はまだ行われていない。そこで本研究では、温度制御や遺伝子導入が容易で、且つ、すでに作成に成功しているマウス視床下部スライス培養を用いて、哺乳動物の温度感受性ニューロンの特性を詳細に解析することを試みる。YC3.6を発現しているPOAHニューロンのカルシウムイメージングが正しく行なわれていることを確認するために、まず内側視索前野mPOAHに多く存在することが報告されているヒスタミン受容体の刺激実験をおこなった。ヒスタミン1-100μMは用量依存的にmPOAHニューロンの細胞内Ca^<2+>を増加させ、こうした応答は約3割のmPOAHニューロンにおいて観察された。また、これらのうちの幾つかのニューロンでは、アデノシン刺激より細胞内Ca^<2+>を減少させるものもあった。温・冷刺激では、温刺激(5°C)に対して細胞内Ca^<2+>を増加させるものが観察されたが、一貫した結果が得られず、今後、標本レベルの温度制御をより正確に行なうための実験装置のセットアップをもう少しつめる必要があるものと思われる。
障害者施設職員のメンタルヘルス予防対策の検討ー福祉現場の職階に視点をあてて

障害者施設においても、一般労働者とほぼ同じく約6割の職員がメンタル不調であった。しかしその実態や問題は顕在化していない。そのストレスは、改善したいができないというものであり、要因を個人の能力や責任に帰すべきではなく、職員の集団としての力を発揮できるようにする対策が必要である。対策は、障害や発達観だけではなく人生観や社会観も含めて多様な考え方をもつ職員を迎えることができるようになった段階に即して講じられなければならない。職員の多様な考え方を尊重する会議の在り方の改善、管理能力の向上も、部下を信頼し支えられて育つ、長期的な積み重ねによるという視点が重要である。本研究は、障害者施設従事者のメンタルヘルス予防対策の検討を目的とする。研究視点としては、事前の量的調査から、20歳代の中堅職員と40歳代の管理職とくに女性に不全状況が集中していることから、成人期の発達、職階などのキャリア発達、家族・家庭での役割発達とおいた。1年目は、これらの視点を、構成員の主たる分野である福祉・福祉臨床・精神保健でそれぞれに文献等で深める基礎作業とともに、20歳代の中堅職員のメンタルヘルス実態と課題を、発達、キャリア発達に即して検討することを主たる課題にした。20歳代の中堅職員のメンタル不全の背景には、量的調査から、仕事量の多さからくる職業的アイデンテイテイの揺れや評価に対する不安があると明らかにされてきた。さらに今回実施した32人のインタビュー調査から、それらが3年目、5年目の課題として見られることが明らかになった。具体的には、仕事量の多さを背景としつつも、仕事を振り返られるようになって新たな責任を担うようになる3年目と、それに加えて結婚や子育ての責任が生じる5年目の課題である。20歳代の中堅職員のメンタル不全についても、アイデンテイテイの揺れという発達、職業的なそれの揺れ、さらに家族・家庭役割の発達が、輻輳的に関係しており、主因の転換で節目が形成されてくると明らかにされた。したがって、これらを現場職員の講習会(必要な気づき、必要な対応、などを講義とロールプレイで実施)で検証してきたが(中堅、管理職、若手で階層別に実施)、当事者の発達、キャリア発達など職業生活に関することではおおむね有効性が確かめられてきたが、家族・家庭の役割発達という私生活に関する課題に対しては今後の課題になったと言える。本年度の課題は、メンタルヘルス講習用テキストの改定、全国(施設管理者対象)および大阪京都調査(職員対象の意識調査)の分析、および最終的な提言まとめであった。講習用テキストについては、講習実践および調査研究を経て、ストレスの潜在化に視点を当てた顕在化、および予防も含めて「現職に就いて3ー5年未満」職員が焦点であること、この2点を中心に若い・現職経験の少ない職員が「疲れた」と堂々と言えることを意図した図書として刊行した。障害福祉現場に即したものが必要と考え公刊した。二つの調査結果については、最終的な提言も含めて小冊子にまとめ、刊行した。全国調査結果(1500事業所対象、回収率43%)は、想定した通り、管理者の職員メンタルヘルスに関する現状認識の弱さが明らかにされた。回収数を高めることを意図した調査であり設問数も限定したので、その要因は統計的に明らかにされなかった。但し管理者はストレス要因を職員の考え方や能力の問題に帰する傾向があり、次に述べる調査結果のような解決の展望は持ち得ていない。大阪京都調査(1777人対象、回収率60%)では、ストレス度合い意識では、必ずしも管理職(中間含む)だけにストレスが集中しておらず全般にあることが明らかにされた。管理職を「支えられない」、「議論を噛み合わせて結論を導くこと、管理職のリード発揮をできにくくしている」というストレスを全般が持っていることが明らかにされた。従って最終提言の柱は、多様な人間観等の考え方や能力を持った職員の、それぞれの意見表明や持ち味の発揮を職員相互でどれだけ尊重できるのか、さらに管理職はリード・マネジメントする能力だけではなく、その多様さから新しい発展が作られるという職員への信頼度が重要になる、とした。本研究は、障害者施設で働く従事者のメンタルヘルスに関する量的調査結果を踏まえて、その職階の在り方を中心に予防対策を検討する。2012年度の研究実績は、以下のようになった。(1)量的調査から、職務上の課題として、実践における議論による成長と、管理能力の育ちに焦点をあてて、大阪・京都の障害者施設職員に意識調査を設計し実施した。予備調査等を経て2013年2月に配布し、3月に1777名のうち1069名から回答を得た(回収率60.2%)。今後この分析によって、職員の職務上の成長及びキャリアパス上の育ちの矛盾が明らかにされ、予防対策が検討できる。

(2)前記調査は、この間に量的調査を実施し、それによる講習等の試行を重ねてきた対象への調査である。したがって全国の実態とは言い難い。それゆえに、全国から、就労継続B型及び生活介護事業1500を抽出し、管理者からの実態把握調査を実施した。2013年2月に実施し、3月に646か所からの回答を得た(回収率43.1%)。今後この分析によって、ほとんど対策が講じられていない障害者施設への提言課題も明らかにされる。(3)量的調査ですでに明らかにされてきた20歳代後半からの中間管理職、及び40歳代後半の管理職特に女性のストレス課題については、職場の「気づき」と早期対応、すでに治療が必要になっている人の対策を重点課題にし、5回の障害者施設職員を対象にしたモデル講習(講義・グループワーク)を経て、テキストの第一次案を作成し刊行した。「福祉現場におけるメンタルヘルス研修用テキスト(第一次案)」44ページ、「障害者施設におけるメンタルヘルス不調者への労務管理ガイドライン(第一次案)」151ページ。(4)これらをもとに、障害者制度改革の動向を踏まえて提言を作成したい。当初は量的調査から典型施設を抽出し集中的に介入していく方法を構想していたが、現場との議論で断念せざるを得なくなった。しかしそれに代わって、個別調査の広がりへの協力と、その現場での検証としての講習会という現場の協力体制を組むことができた。そして20歳代の中堅職員に対してそれらを実施し、新たな課題と予防方策の在り方を明らかにできた。したがって、今後の主たる課題、40歳代の管理職とくに女性への予防対策、職場復帰プログラム作成についても、20歳代と同様な方法で実施できる。25年度が最終年度であるため、記入しない。当初の計画通り、3つの班(1職調査班ー職務上の意識調査、全国実態調査、2早期対応の講習会用テキスト作成班ー20歳代の若者・中間管理職と40歳代の管理職・徳に女性を中心に、3不調者対策のガイドライン作成班ー復帰プログラムまで)を構成し、文献検討、現場ヒヤリング、模擬講習などをそれぞれに実施し、かつ全体会では障害者福祉の動向を学習したうえで進行を調整してきた。その結果、当初の予定通り、1調査班では、調査の実施と、分析に足る回収数を得てきた。2講習用テキスト班では、第一次案を刊行できた。3ガイドライン作成班も、第一次案を刊行できた。引き続き、仮説に即した20歳代・40歳代・休職状態になった人という層を設定し、より多数の個別インタビュー調査と事例検討をすすめ、その結果分析の現場との往復による検証(講習会の実施、手引きの作成)もすすめていく。しかしこれらは質的な調査であり、普遍化するためには、量的調査の裏付けが必要となる。したがって前記の作業から明らかにされた点を中心に、全国の事業所を対象とするメンタルヘルス実態と対策等の質問紙法・選択肢法による調査を実施する。さらに大阪障害者センター加盟施設の職員に対する職階・キャリア発達の実態と意識に関する質問紙法による調査を実施する。なお職員のメンタルヘルス状況を大きく規定する労働条件に関する制度改革は、さらに続くと想定される。動向の実際を見極める研究も重要な課題にせざるを得ない。障害者福祉制度改革は引き続き続いている。
バラ科・ナス科植物の自家不和合性における自他識別機構の分子レベルでの解析

1.バラ科植物ウメのS-RNase、SLFにそれぞれ異なる蛍光蛋白質を融合したものを発現するベクターを作成し、タバコBY-2細胞に導入したところ、S-RNaseは核周辺の細胞質に存在し、SLFは細胞質全体に均一に存在することが明らかとなった。また、S-RNaseとSLFを共発現させると、SLFは核周辺の細胞質に移行し、S-RNaseと共局在した。このことは、S-RNaseとSLFが相互作用することを示唆するものであるが、Sハプロタイプの違いによる共局在の異同は見られなかった。2.ナス科植物栽培ペチュニアS_<B1>ハプロタイプの花粉管ESTから、花粉側因子として機能することが既に知られている野生ペチュニアのPiSLF_2と相同性を示すクローンが得られた。また、この配列をもとにプライマーを設計し、他のSハプロタイプの花粉管cDNAをテンプレートにPCRを行ったところ、S_<D1>、S_<D2>ハプロタイプのものから、相同な配列が得られた。これらのクローンを、pB1SLF、pD1SLF、pD2SLFと名付けた。また、PiSLF_2の配列をもとに設計したプライマーを用いたRT-PCRにより、S_<B1>、S_<B2>ハプロタイプからそれぞれ1種類、S_<D1>、S_<D2>ハプロタイプからそれぞれ2種類のPiSLF_2に相同な配列が得られた。これらをrB1SLF、rB2SLF、rD1SLF1、rD1SLF2、rD2SLF1、rD2SLF2と名付けた。これらのうち、S_<B1>ハプロタイプのpB1SLF、rB1SLFと、S_<D1>ハプロタイプのpD1SLF、rD1SLF1、S_<D2>ハプロタイプのpD2SLFの遺伝子を植物に導入した。これらのうち、pD2SLFを導入した植物のみで、自家不和合性が打破されていた。このことは、pD2SLFが花粉側認識物質として働くことを示唆する。2.ナス科植物ペチュニアS_<B1>ハプロタイプの花粉管cDNAクローンを2746個シークェンスしたところ、花粉側因子として機能することが既に知られている野生ペチュニアのPiSLF_2と相同性を示すクローンが得られた。また、この配列をもとにプライマーを設計し、他のSハプロタイプの花粉管cDNAをテンプレートにPCRを行ったところ、S_<D1>ハプロタイプのものから、相同な配列が得られた。これらのクローンを、pB1SLF、pD1SLFと名付けた。