hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
新しい消化器癌治療を目指した異常p53のバックアップ機構の解明

消化器系癌を含む悪性腫瘍の多くは,癌抑制タンパクであるp53の機能が欠落している.また,Chk2(hCds1)はp53タンパクの機能を制御することで,DNA傷害時にアポトーシスおよび細胞周期チェックポイントに機能していると考えられている.一方,申請者らは各種細胞株におけるp53機能とChk2の発現の検討から,p53がChk2発現を負に制御していることを報告している.このことは,Chk2によってp53の機能が制御されるメカニズムのnegative feedback機構とも考えられるため,Chk2の発現制御は,DNA傷害時における細胞周期の調節機構およびアポトーシス誘導に極めて重要な意義をもつと考えられる.このため,申請者らはp53によるChk2発現抑制の分子機構の解明を試みた.p53誘導細胞株を用いてp53とChk2発現をNorthernとWestern解析で検討したところ,Chk2の転写は,p53の発現を誘導すると著明に抑制されたp53によるChk2の発現抑制に重要な領域を,Chk2プロモーター領域を変異させたレポーター遺伝子を作成し解析したところ,p53によるChk2の転写制御には,Chk2プロモーター領域の-152^--138にあるCCAAT boxが必要であった.さらに,Gel Shift Assayで,そのCCAAT boxは転写因子NF-Yが結合することが分かり,NF-Yのdominant negative mutantを過剰発現させるとp53によるChk2の負の転写制御は消失した.最後に,p53に影響を受けないプロモーターを持つChk2発現ベクターを用いて,Chk2を発現させたp53正常細胞では,放射線を照射することによりG2/M期の細胞周期停止から再び細胞周期に入るのが遅れた.以上から,Chk2の転写は転写因子NF-Yを介してp53により抑制され,その転写制御は,DNA傷害による細胞周期停止から,再び細胞周期に入るために重要な役割を持つことが判明した.消化器系癌を含む悪性腫瘍の多くは,癌抑制タンパクであるp53の機能が欠落している.また,Chk2(hCds1)はp53タンパクの機能を制御することで,DNA傷害時にアポトーシスおよび細胞周期チェックポイントに機能していると考えられている.一方,申請者らは各種細胞株におけるp53機能とChk2の発現の検討から,p53がChk2発現を負に制御していることを報告している.このことは,Chk2によってp53の機能が制御されるメカニズムのnegative feedback機構とも考えられるため,Chk2の発現制御は,DNA傷害時における細胞周期の調節機構およびアポトーシス誘導に極めて重要な意義をもつと考えられる.このため,申請者らはp53によるChk2発現抑制の分子機構の解明を試みた.p53誘導細胞株を用いてp53とChk2発現をNorthernとWestern解析で検討したところ,Chk2の転写は,p53の発現を誘導すると著明に抑制されたp53によるChk2の発現抑制に重要な領域を,Chk2プロモーター領域を変異させたレポーター遺伝子を作成し解析したところ,p53によるChk2の転写制御には,Chk2プロモーター領域の-152^--138にあるCCAAT boxが必要であった.さらに,Gel Shift Assayで,そのCCAAT boxは転写因子NF-Yが結合することが分かり,NF-Yのdominant negative mutantを過剰発現させるとp53によるChk2の負の転写制御は消失した.最後に,p53に影響を受けないプロモーターを持つChk2発現ベクターを用いて,Chk2を発現させたp53正常細胞では,放射線を照射することによりG2/M期の細胞周期停止から再び細胞周期に入るのが遅れた.以上から,Chk2の転写は転写因子NF-Yを介してp53により抑制され,その転写制御は,DNA傷害による細胞周期停止から,再び細胞周期に入るために重要な役割を持つことが判明した.ヒトChk2遺伝子はS-G2-M期におけるDNA障害チェツクポイント機構に作用していると考えられている.様々なDNA障害存在下においてヒトChk2遺伝子産物はATM依存的および非依存的経路によりリン酸化を受けて活性化されるが,ヒトChk2遺伝子産物の量的制御もチェックポイント機構に重要な役割を果たすと考えられている.我々の研究からヒトChk2遺伝子はS-M期にかけて細胞周期依存的に発現することとp53よりヒトChk2遺伝子の転写が負に制御されていることが明らかになった.さらに、ヒトChk2 cDNAをプローブとして用いてヒトゲノムライブラリーのスクリーニングを行い,ヒトゲノム遺伝子を得た.そして転写開始点を同定し,Chk2の転写制御機構についてP53との関連を中心に解析を行った.その結果,開始点から-208から-194の位置に存在するCCAAT boxが,P53 dependentなregulationに重要な役割を有することを見いだした.さらに,NF-YがこのCCAAT boxに結合することが確認でき,NF-YのChk2遺伝子発現における意義が今後の研究課題として注目された.また,ヒトの臨床サンプルにおけるp53とChk2の発現を免疫組織化学的に検討した.すなわち,手術切除胃癌組織を抗p53および抗Chk2抗体で,免疫染色した結果,異常p53が核内に蓄積する例に,Chk2が検出できる例が存在することが明らかになりつつある.目的:消化器系癌を含む悪性腫瘍の多くは,癌抑制タンパクであるp53の機能が欠落している.

また,Chk2 (hCds1)はp53タンパクの機能を制御することで,DNA傷害時にアポトーシスおよび細胞周期チェックポイントに機能していると考えられている.一方,申請者らは各種細胞株におけるp53機能とChk2発現の検討から,p53がChk2発現を負に制御していることを報告している.このことは,p53がChk2によって安定化されるメカニズムのnegative feedback機構とも考えられるため,Chk2の発現制御は,正常あるいは癌細胞を問わずDNA傷害時における細胞周期の調節機構およびアポトーシス誘導に極めて重要な意義をもつと考えられる.このため,申請者らは今回,p53によるChk2発現抑制の分子機構の解明を試みた.結果:1)Chk2の転写は,p53の発現を誘導すると著明に抑制された.2)p53によるChk2の転写制御には,Chk2プロモーター領域の-152-138にあるCCAAT boxが必要であった.3)Chk2のプロモーター領域に存在するCCAAT boxは転写因子NF-Yと結合し,さらにdominant negative mutantMF-Yによりp53によるChk2の負の転写制御は消失した.結論:1.Chk2の転写はp53により抑制され,その転写制御には,転写因子NF-Yが重要な役割を有すると考えられた.2.このp53とChk2の相互の発現調節は,DNA傷害時に重要な意義を有するものと考えられた.
いのちとこころに関わる現代の諸問題の現場に臨む臨床人間学の方法論的構築

いのちとこころに関わる現代の諸問題に関わる臨床人間学に取り組むのが私たちの目標であるが、今回の補助金によって課題としたのは、なかでも、そのための方法論を具体的場面のなかから構築することであった。そこで、医療技術と生命倫理、精神医療と臨床心理、宗教意識と芸術活動という三つの場面を採り上げ、研究分担者を三つのグループに分けてそれぞれに取り組んだうえで、お互いの成果をつき合わせて意見交流を図り、それらを全体へと統合させていく、という方法をとった。研究成果として、山崎(松田)(1年目は研究代表者であったが、海外研修の機会をえたため、2年目は研究協力者となった)はドイツの生命倫理学の最先端の議論を現場からまとめ、田中は私たちの計画に近い先行研究である臨床哲学と臨床倫理学についての批判的考察のなかから臨床人間学の方法を「対話」へと導き、矢吹は臨床心理の場での聴くことの意味を考察し、浜渦は精神科医との長年の共同作業をもとに対話とケアのあり方を研究協力者の協力もえながら考察し、上利は調査も含めて芸術を制作過程・社会文化的背景・日常生活において考察することから芸術によるケアへと視野を広げ、山下は市民との積年の読書会のなかから市民の宗教に関わる問題意識を汲み上げるなかで宗教のもつケアの力をともに考えてきた。こうしたそれぞれの現場につながる試みをつきあわせるなかで、対話が重要な役割を果たしたが、それは唯一の方法として確立されたわけではなく、さまざまな課題を残したままである。私たちは、この共同研究を進めていくなかで、とりわけ「ケア」の問題に共通の具体的テーマを見いだすようになり、今回の「方法論的構築」を踏まえたうえで、今後の研究の目標として、「いのちとこころのケアの諸問題に取り組む臨床人間学の展開」ということを計画している。今回の研究によって、とりあえず、そのための足場は得られたと考えている。元来代表者を務めていた松田(山崎)が長期海外研修のため、平成13年2月に浜渦が代表者を引き継いだ。そのため、この報告書は、松田(山崎)の研究も含めたものである。松田(山崎)は、学内の発生生物学者からの聞き取り調査を行い、新潟への出張などで生命倫理学関係の貴重な資料も収集し、その成果をすでに論文にまとめ、まもなく公表される。田中は、医療における倫理的決定のための「新たな実践的アプローチ」とされる臨床倫理学に関する資料の収集を行うと共に、日本における斯学の推進者との情報交換を行った。山下は、「生と死を考える会」の研究会に参加し、最新のテーマ等に関する情報収集を行った。また庶民の中に息づく仏教を、妙好人等の研究を通して考察するため、島根及び比叡山で調査を行った。上利は、県内の芸術家(16名)及び県内外の文化施設(9カ所)を訪問し、アトリエ等でビデオで録画しながら、芸術活動の意義や社会との関わり等をインタヴュー。同時に、県中部のギャラリー十数ケ所を定期的に訪問・調査した。依頼により袋井市文化政策を賛助。矢吹は、主観と客観がさまざまなレベルで入り組んでいる心理療法に対して、対象に客観的に接近し、診断、治療するような医療モデルは通用しない。主観というこころの現象の領域内でのこの仕事は、いわばこころの思考(臨床の知)によってとらえられる。「こころの相談室」で実際に心理療法を行い、この知のあり様を具体的に検討した。浜渦は、県内外の精神科医・臨床心理士との隔月の研究会にて意見交換を重ねるとともに、時間研究および情報倫理の研究との関連におけるこころの問題について意見交換・情報収集してきた。

以上を踏まえて、共同研究者全員参加の合宿にて、お互いの研究成果について、また、「いのちとこころに関わる現代の諸問題の現場に臨む臨床人間学の方法論的構築」という全体的テーマへのそれぞれの寄与と統合のあり方について、徹底的な討議を重ねた。と同時に、松田(山崎)の海外研修(ドイツ)にともない、浜渦が代表者を代わって引き受けることとし、交代のための引き継ぎも綿密に行った。いのちとこころに関わる現代の諸問題に関わる臨床人間学に取り組むのが私たちの目標であるが、今回の補助金によって課題としたのは、なかでも、そのための方法論を具体的場面のなかから構築することであった。そこで、医療技術と生命倫理、精神医療と臨床心理、宗教意識と芸術活動という三つの場面を採り上げ、研究分担者を三つのグループに分けてそれぞれに取り組んだうえで、お互いの成果をつき合わせて意見交流を図り、それらを全体へと統合させていく、という方法をとった。研究成果として、山崎(松田) (1年目は研究代表者であったが、海外研修の機会をえたため、2年目は研究協力者となった)はドイツの生命倫理学の最先端の議論を現場からまとめ、田中は私たちの計画に近い先行研究である臨床哲学と臨床倫理学についての批判的考察のなかから臨床人間学の方法を「対話」へと導き、矢吹は臨床心理の場での聴くことの意味を考察し、浜渦は精神科医との長年の共同作業をもとに対話とケアのあり方を研究協力者の協力もえながら考察し、上利は調査も含めて芸術を制作過程・社会文化的背景・日常生活において考察することから芸術によるケアへと視野を広げ、山下は市民との積年の読書会のなかから市民の宗教に関わる問題意識を汲み上げるなかで宗教のもつケアの力をともに考えてきた。こうしたそれぞれの現場につながる試みをつきあわせるなかで、対話が重要な役割を果たしたが、それは唯一の方法として確立されたわけではなく、さまざまな課題を残したままである。私たちは、この共同研究を進めていくなかで、とりわけ「ケア」の問題に共通の具体的テーマを見いだすようになり、今回の「方法論的構築」を踏まえたうえで、今後の研究の目標として、「いのちとこころのケアの諸問題に取り組む臨床人間学の展開」ということを計画している。今回の研究によって、とりあえず、そのための足場は得られたと考えている。
鳥類胚消化管内胚葉はアクチビンにより胚盤葉上層から誘導されるか

鶏胚胚盤葉期以降の内胚葉形成について調べた結果、原条形成直前に明域後縁部の胚盤葉上層から新たな内胚葉細胞が出現して胚盤葉下層に侵入し原条の伸長と共に既存の下層を胚外の明域前縁部に押しやりながら前方に拡大すること、原条形成後ヘンゼン結節から既報と異なり主に前方へ向かって内胚葉が侵入することが示され、両内胚葉共に胚内(消化管)内胚葉へ寄与する可能性が示された。胚盤葉期鶏胚前半へのアクチビンの局所投与による異所性の原条(二次胚)誘導の確認と詳細な解析により、アクチビンは投与近傍部で内在性誘導因子発現を引き起こしこれにより原条を誘導する可能性が示された。この原条の結節部分からの正常発生同様の前方へ拡がる内胚葉の出現を確認し、アクチビンにより(恐らく間接的に)誘導された二次胚において胚盤葉上層から胚内内胚葉形成が起こる可能性を示した。インビトロでアクチビン処理した胚盤葉上層前部小片の培養により、顕著でないものの濃度依存的な各種中胚葉の分化を確認した(よって、他因子の誘導を介する間接的なアクチビンの作用である可能性とも矛盾しない)。この小片は内胚葉である下層細胞も一部含むためアクチビンによる内胚葉誘導は確証できない(アクチビンによる中胚葉誘導が報告されている、内胚葉を含まないはずの原条期胚の各部からも、本実験条件下で無処理で内胚葉が分化することが分かり、鶏胚でインビトロ系でアクチビンの内胚葉誘導作用を調べる事は困難であると思われた)ものの、脊索の分化時に多量に出現する多様な消化官上皮は胚内内胚葉形成の可能性も示唆した。しかし、脊索による下層由来内胚葉への部域化誘導(別の実験よりの知見)の可能性もある。膵臓の分化は背側中胚葉の分化に関わらず高濃度のアクチビン処理で見られ、アクチビンが膵臓内胚葉の出現に関与する可能性が示された。鳥類胚では、原条の形成位置は胚盤葉下層後部あるいは胚盤葉上層後縁部の影響により決まる。これらの領域からはVg1産物などの内在性因子が放出され近傍の胚盤葉上層細胞に作用することにより、中胚葉の形成を伴う原条の形成が起こると考えられるが。消化管内胚葉もまた形成されるのかについては不明である。そこで本研究では、胚盤葉期鶏胚を用い、内在性因子の作用を模倣すると思われるアクチビンにより本来と異なる位置に実験的に2次胚の形成を誘導し、消化管内胚葉の形成が起こるか検討した。アクチビン処理による2次胚と胚内内胚葉の形成:胚盤葉期鶏胚の前半部(本来消化管内胚葉には寄与しない)を後半より切り離し、その明域前縁部にアクチビンA(500μg/ml)で処理したAG1-X2ビーズを移植し1日間培養したところ、高率でHNF3β陽性のヘンゼン結節を持つ異所性の原条がビーズの近傍より形成された(対照のBSA処理ビーズの場合にはビーズの近傍よりの異所性原条の形成はわずかしか見られなかった)。この時、胚断片各部の上層細胞をDiI等の蛍光色素で標識しておくことによりビーズに近い領域で2次胚の胚内内胚葉に寄与することが示された。

2次胚胚内内胚葉の消化管内胚葉への分化:2次胚の原条を含む範囲を切り出し鶏3日胚体腔内に移植して長期間培養し、2次胚が本当に胚体/消化管内胚葉を形成するか検討したところ、神経などの外胚葉組織や軟骨などの中胚葉組織の他、食道・胃(ペプシノゲン陽性)・腸(シュクラーゼ陽性)などの消化管上皮が分化した。以上より、本来消化管内胚葉には寄与しない胚盤葉上層前部の細胞はアクチビンの作用により消化管内胚葉になり得ることが示された。胚盤葉期鶏胚の各部を蛍光色素で標識しインビトロで原条期までの発生を追跡した結果、原条形成とその伸長に伴い、Koller's sickle付近の明域後縁部の胚盤葉上層から新たな内胚葉細胞が現れ、それまでに既に形成されていた胚盤葉下層の細胞を前方に押しやりながら拡大し(胚中央部では新たな内胚葉は伸長する原条前端部ヘンゼン結節を通って下層に侵入する)、その一部は消化管内胚葉に寄与すると推定された。本来胚内内/中胚葉には寄与しない胚盤葉期鶏胚の前半部にアクチビン吸着ビーズを置き異所的に形成させた原条/2次胚(昨年報告)において細胞の由来をさらに検討したところ、ビーズから離れた部分が結節に寄与すると示された。即ち、アクチビンによる2次胚誘導はVg1などの別の因子の発現が誘導されて起こる可能性がある。次いで、鶏胚においてアクチビンが直接あるいは間接に本来内胚葉にならない細胞から内胚葉を誘導できるのか確認するため、内胚葉細胞の移動終了後とされる原条期の明域前端部の外胚葉片を用い、アクチビン処理により内胚葉細胞が生じるか検討した。インビトロ培養ではアクチビン処理外胚葉片から無処理の場合には生じないHNF3β陽性の内胚葉細胞が小数例ながら現れ、さらに体壁板中胚葉と結合して体腔内で培養したアクチビン処理済外胚葉片から腸や胃的上皮が出現した。しかしながら体腔内で培養した無処理の外胚葉片においても微量の腸上皮の出現が見られた。以上より、原条期胚の前部外胚葉には胚盤葉下層細胞と思われる内胚葉になる細胞が残存していると思われ、アクチビンにより内胚葉予定細胞を含まない鶏胚(予定)外胚葉から内胚葉が誘導されるかは証明されなかった。
ソフトな都市私法の構築

本研究課題では、「都市に生きる」ことがもたらすいくつかの問題を、主として私法的観点から分析することを試みた。とりわけ都市生活の「ソフトな側面」「都市における市民生活のあり方」に焦点をあわせ、具体的には、近隣関係における問題(相隣関係・区分所有など)、現代家族に関する問題(新しい家族の形態、高齢化・少子化など)、各種の団体活動・奉仕活動に関する問題(生協・自治会・PTA、スポーツ文化団体、市民運動、無償契約・事務管理など)をとりあげて、これらを素材に、旧来の地縁・血縁とは違った「都市における人と人との新たな絆」を支えるために、民法・民法学がなしうることを検討した。本研究では、「都市に生きるということがもたらすいくつかの問題を、主として私法的観点から分析することを試みている。その対象となりうる法規範・法現象を広く「都市私法」と呼んでいるが、とりわけ、これまで必ずしも十分には研究のなされていない都市生活の「ソフトな側面」、「都市における市民生活のあり方」に焦点をあわせている。上記の「都市私法」の概念は仮のものであり、その内包も外延も定まっていない。そこで、「都市私法」の名のもとに、研究対象とすべき事項を洗い出す(対象の範囲を確定し問題状況を明らかにする)ことがまず第一の課題となる。本年度は主としてこのような作業を行った。さしあたり、近隣関係に関する問題(相隣関係、区分所有など)現代家族に関する問題(新しい家族の形態、高齢化・少子化など)各種の団体活動・奉仕行為に関する問題(生協・自治会・PTA、スポーツ=文化団体、市民運動、無償契約・事務管理など)などを念頭におきつつ、内外の関連文献の収集・検討に努めた。その際に、「ソフトな側面」だけでなく「ハードな側面も一定の程度まで考慮に入れる必要があったため、住居・安全・消費に関する問題も対象に含めた。作業の成果はまとまった形で発表するには至っていないが、その部分は、19992000年の期間に行った在外研究の結果を補充するために利用された(在外研究自体の結果は『フランスの社交と法』として公刊の予定である)。本研究では、「都市に生きる」ということがもたらすいくつかの問題を、主として私法的観点から分析することを試みている。昨年度は、「都市私法」の名のもとに、研究対象とすべき事項を洗い出す(対象の範囲を確定し問題状況を明らかにする)ことをまず第一の課題とし、近隣関係に関する問題(相隣関係・区分所有など)、現代家族に関する問題(新しい家族の形態、高齢化・少子化など)、各種の団体活動・奉仕行為に関する問題(生協・自治会・PTA、スポーツ=文化団体、市民運動、無償契約・事務管理など)などにつき、内外の関連文献を収集・検討にした。本年度は、上記の諸問題に関する(民法を中心とした)私法の対応につき、社会的な背景を考慮に入れつつ、さしあたりの整理をすることに精力を注いだ。この結果を、本研究のいわば中間報告として、『生活民法入門--暮らしを支える法』と題する単行書にとりまとまめて公刊した。また、本年度は、フランスに出張して、家族や近隣に関する最新の文献・情報の収集にも努めた。その結果の分析はまだ十分に行っていないが、ここから得られるだろうと思われる知見をもとに、次年度の研究を進める予定である。本研究においては、「都市に生きる」ということがもたらすいくつかの問題を、主として私法的観点から分析することを試みた。とりわけ都市生活の「ソフトな側面」「都市における市民生活のあり方」に焦点をあわせ、具体的には、近隣関係における問題(相隣関係・区分所有など)、現代家族に関する問題(新しい家族の形態、高齢化・少子化など)、各種の団体活動・奉仕活動に関する問題(生協・自治会・PTA、スポーツ=文化団体、市民運動、無償契約・事務管理など)をとりあげて、これらを素材に、旧来の地縁・血縁とは違った「都市における人と人との新たな絆」を支えるために、民法・民法学が何をなしうるかを検討することを課題とした。この計画は、もともと申請者の構想する「生活民法」と重なりあうものであり、「消費生活」「家族生活」を視野におきつつ、「社交生活」とも呼ぶべき第三の領域の存在を抽出することを目的としていたが、このような観点からの検討の成果は、平成14年度末に著書『生活民法入門-暮らしを支える法』としてまとめることができた(「都市私法」という視点との関連については、結章「生活民法、これから」で触れている)。なお、これには方法論的な補足が必要であったが、この点に関しては、平成15年度の半ばに論文「日常生活の法的構成」UP2003年9月号10月号をとりまとめた。
小児期発症の髄膜炎症例から分離したインフルエンザ菌の分子疫学的解析

平成10年度はb型インフルエンザ菌(Hib)の多形性解析RFLPsに可能性のある各種分子疫学的解析法の至適化を試みた。パルスフィールドゲル電気泳動(PFGE)法については泳動条件を主体に検討した。Smal消化後にHib菌は12-15の制限酵素切断断片となり、RFLPs解析をするのに十分な情報量が得られた。LA_PCR法では非莢膜型で開発されたについても複数の制限酵素で検討を行い遺伝的多型性の出やすく、バンドの認識のしやすい条件の検討を行った。しかし、非莢膜型で見られたような多型性はHibでは見られなかった。3.randomly amplified polymorphic DNA(RAPD)解析ではprimerのデザインの改良とともに温度勾配の検討を行い、至適温度条件の検討を行った。比較的生物型に特徴的なバンドの検出に成功し、PFGE-RFLPs法ほどでは無いが、ある程度の有用性は持たせることが出来た。平成11年度はおもに髄膜炎症例より分離されたインフルエンザ菌の各種分子疫学的解析を行い得られた各種遺伝的多型性解析の結果をコンピュータによる遺伝的系統樹dendrogram作成解析プログラムを作成した。PFGE法で千葉・神奈川・東京・愛知より分離された約30株の検討結果、いくつかの地域間での分離菌に特徴がみられ、今後の耐性菌に対する疫学解析の基礎が築かれた。検討結果は国際誌に掲載された。平成10年度の研究内容として、b型インフルエンザ菌(Hib)の多型性解析RFLPsに可能性のある各種分子疫学的解析法の至適化を試みた。1.パルスフィールドゲル電気泳動(PFGE)法:まず、泳動条件を主体に検討した。SmaI消化後にHib菌は12-15の制限酵素切断断片となり、RFLPs解析をするのに十分な、情報量が得られた。この後、各種臨床分離株での疫学解析の検討を開始した。2.LA-PCR法:非莢膜型で開発されたについても複数の制限酵素で検討を行い遺伝的多型性の出やすく、バンドの認識のしやすい条件の検討を行った。3.randomly amplified polymorphic DNA(RAPD)解析:primerのデザインの改良とともに温度勾配の検討を行い、至適温度条件の検討を行った。解析法の検討を本年度で終了し、今後は臨床分離株の検討に入る予定である。まず、関東・東海地区より分離された30株を主体にPFGE-RFLPs解析とRAPD解析を行う。さらに、その後全国分離株約100株について検討を加え、薬剤耐性傾向と分子疫学的解析手段の関係につて検討を加える予定である。(1)インフルエンザ菌の各種分子疫学的解析法有用性を評価・比較:インフルエンザ菌をはじめインフルエンザ菌の分子疫学的解析法の手段としてのパルスフィールド電気泳動法pulsed-field gel electrophoresis(PFGE)、random amplified polymorphic DNA analysis(RAPD)、long and acculate polymerase chain reaction(LAPCR)で分離同定されたインフルエンザ菌を解析した。その結果、RAPD解析法では一部のbiotypeに特徴的なバンドの出やすいことが、判明した。しかし、LAPCR法ではb型インフルエンザ菌の多型性が出しにくいことが判明した。最終的に国内の分離菌の地域分布を解析するにはPFGE法が最も適切と考えられた。(2)インフルエンザ菌の各種分子疫学的解析法の結果判定のデータベース化:得られた各種遺伝的多型性解析の結果をコンピュータによる遺伝的系統樹dendrogram作成解析プログラムを行い、それぞれの検査法の比較検討を行った。検討結果は国際誌に」掲載された。
近世日本関係欧文文書群の史料学的研究

(A)布教関係史料イエズス会史料について、諸写本のうち、リスボン市アジュダ図書館所蔵の写本集「アジアのイエズス会士」の関係部分について目録作成を行なった。2006年度には日本学士院の事業との連携により、スペイン所在のフランシスコ会関係史料の調査を実現した。(B)東インド会社関係史料(1)オランダ東インド会社文書のうち「バタフィア発信書翰控簿」の目録データを蓄積し、1620年代から1790年代に至る約42500件のデータの外注入力がほぼ完成した。現在その一部についてを史料編纂所の所蔵史料目録データベースを介して公開を開始した。(2)日本商館の基幹史料の一つである『商館長日記』について、異本一覧という形で、目録情報をすべて年次毎に集載することで、全体像を把握することを試みた。(3)ハーグのオランダ国立文書館所蔵文書に加えて、ユトレヒト国立文書館所蔵ハイデコーペル家文書中のオランダ東インド会社関係文書を調査し、マイクロフィルムを入手した。(4)英国図書館所蔵旧インド省文書内のイギリス東インド会社関係史料の調査を行ない、主に17世紀後半の対日政策に関わる若干の関連文書の補遺を行なった。(C)オランダ東インド会社解散後の史料18世紀末の会社解散前後の過渡期以降、文書の作成、伝達、受領、保管の全過程に起こった大きな変化について、オランダ国立文書館所蔵の東インド貿易・植民地委員会文書、植民省文書、インドネシア国立文書館所蔵オランダ領東インド政庁一般書記局文書などの調査・検討を行なった。(D)関連国内史料について、佐賀県立図書館、長崎歴史文化博物館、国立文書館内閣文庫、北九州市個人宅などにおいて、史料調査を行なった。これらの調査・検討により、新たな目録情報を提供するとともに文書相互の関係について様々な知見を得ることができた。A布教関係史料:イエズス会史料に関する補足及び他修道会史料に関する情報収集のための調査を行ない、書籍・目録類及び史料複製などを蒐集した。諸写本の検討についてはアジュダ図書館所蔵「アジアのイエズス会士」、について既焼付分の整理・目録化を進めるとともに、本年度は同館所蔵番号49-V-18,19の写真焼き付けを作成した。B東インド会社史料:各国東インド会社に関する先行研究、文書館の目録、辞書等の工具類の充実に努めた。木村は前年の在外研究の成果をもとに、オランダ国立中央文書館以外に所蔵される同国東インド会社関係史料について整理を行ない、所内研究会において報告を行なった。オランダ東インド会社解散前後の過渡期について、東インド貿易・植民地委員会文書Comite Oost-Indische Handel en Bezittingenの日本関係文書について検討を開始した。この時期は、それまで規則的に各地商館からバタフィアの政庁を経由して本国重役会まで到達していた情報伝達の流れが混乱し、日本発の文書がどこまでどれだけ到達していたのかの追跡が必要である。また、科学研究費「16-18世紀日本関係欧文史料の目録化及びデータベース化の研究」(平成9-12年度代表者松井・分担者松方・五野井隆史・浅見雅一、協力者木村ほか290万円)において開始したオランダ東インド会社文書のうちバタフィア発信書翰控簿のデータ蓄積を続行し、本年度は約1万件の入力を行ない18世紀前半までをほぼ終えた。C日本国内史料.:佐賀県立図書館、長崎市立シーボルト記念館(校費出張と連携)において、対外関係史料の調査を行ない、写真焼付による史料蒐集を行なった。A布教関係史料:前年度に引き続き、アジュダ図書館所蔵「アジアのイエズス会士」、について既焼付分の整理・目録化を進めた。また、布教活動と密接に関わっていた貿易に関するものを含め、在マドリッドのマカオと日本との関係についての史料の検討

・学会報告を行なった。B東インド会社史料:各国東インド会社史料に関しては、大英図書館所蔵旧インド省文書内のイギリス東インド会社関係史料、オラシダ国立ユトレヒト文書館所蔵ハイデコーペル家文書中の東インド会社関係史料、オランダ国立中央文書館所蔵オランダ東インド会社文書の調査を行ない、前二者についてはマイクロフィルムを入手した。イギリス東インド会社関係史料については、日本に商館が設置されていた時期のみならず、17世紀全体の対日政策史料を調査した。また日蘭関係を研究するオランダ人研究者を招いての研究会を行なった。オランダ東インド会社解散後の時期については、研究分担者松方冬子の科学研究費「日蘭双方の史料から見たオランダ風説書の史料学的研究」(14710228)と連携し、オランダ国立中央文書館、インドネシア国立文書館において、史料の調査蒐集を行ない、当該期の情報の流れについての研究を進めた。科学研究費「16-18世紀日本関係欧文史料の目録化及びデータベース化の研究」(平成9-12年度)において開始したオランダ東インド会社文書のうちバタフィア発信書翰控簿のデータ蓄積を続行した。A布教関係史料:前年度に引き続き、アジュダ図書館所蔵「アジアのイエズス会士」、について既焼付分の整理・目録化を進めた。B東インド会社史料:各国東インド会社史料に関しては、前年度に入手した大英図書館所蔵旧インド省文書内のイギリス東インド会社関係史料、オランダ国立ユトレヒト文書館所蔵ハイデコーペル家文書中の東インド会社関係史料の目録化の作業に着手した。本年度は特に、科学研究費「16-18世紀日本関係欧文史料の目録化及びデータベース化の研究」(平成9-12年度)において開始し、以後継続的に行なってきたオランダ東インド会社文書のうちバタフィア発信書翰控簿のデータ蓄積に重点を置き、18世紀後半部分について、1万件余りの入力を行なった。これにより、来年度には、1620年代から1790年代に至るおよそ4万件規模のデータの入力がほぼ完成する見込みとなった。オランダ東インド会社解散後の時期については、研究分担者松方冬子の科学研究費「日蘭双方の史料から見たオランダ風説書の史料学的研究」(14710228)と連携し、オランダ国立中央文書館において、史料の調査蒐集を行ない、植民省文書のうちgeheim verbaalのIndex全体をマイクロフィルムで入手し、一部について写真焼付けを作成した。C国内史料:国立公文書館内閣文庫、長崎歴史文化博物館、北九州市内個人宅において、日本側史料の調査を行ない、一部については写真撮影による蒐集を行なった。特に、個人宅における調査では、長崎における対外関係の担い手として重要な役割を果たした町乙名に関わる史料を蒐集することができた。アジュダ図書館所蔵「アジアのイエズス会士」についてこれまで作成した目録の整理を行なった。イエズス会以外の修道会の布教活動については、日本学士院の事業との連携により、スペイン所在のフランシスコ会関係史料の調査を実現した。
可視光領域の直接ギャップを有するSiGe混晶クラスレートの物性解明

SiGe混晶クラスレートNax(SiyGe1-y)136については、Na量をほぼゼロ(ゲストフリー化)にするための手段として、真空熱処理およびイオン液体を組み合わせる手法が有効であることが確認できた。これにより、様々なSi/Ge組成比の前駆体Na(SiyGe1-y)から、クラスレート化を行い、Geリッチ(0.2<y<0)又はSiリッチ(0.8<y<1)領域でのゲストフリークラスレートの作製に成功した。得られた粉末試料に対して行ったXRD測定とリートベルト解析により、Si、Geが占めやすい結晶サイトの存在を確認した。一方、Si/Ge比が1:1に近い場合、非晶質成分が非常に多い試料が得られ、結晶化が困難であることが分かった。Geクラスレート(NaxGe136)については、透明なサファイア基板上への薄膜作製法を確立した。ゲストNa量を効率よく減少させるため、電界を印加する方法を試行した。結果は良好であり、十分にNa量が減少したゲストフリーGeクラスレートを得ることに成功した。得られた試料に対し、赤外・可視光吸収測定を行った結果、吸収端および自由キャリア吸収による光吸収をはっきりと観測した。また、オーミック接触を形成する電極金属を見出したうえで、ホール効果測定を行い、電気抵抗率、キャリア密度、移動度をはじめて見積もることに成功した。Siクラスレート薄膜の高品質化のため、前駆体NaSi膜からクラスレート化する際の真空熱処理に工夫を施した。それにより、Naの減少スピードを制御することにより生成する膜の性質や構造が異なることを見出した。Geクラスレート薄膜のゲストフリー化のため、開発した電界を印加してNaを減ずる手法は、SiやSiGe混晶クラスレートにも応用できる画期的な方法である。この手法により半導体的性質を示すゲストフリークラスレート薄膜を容易に得ることが可能になった。作製したゲストフリーGeクラスレート膜を用いた各種測定により、光学物性と電子物性が明らかになりつつある点を考えると、研究は飛躍的に進んだと言えよう。一方で、SiGeクラスレートでは、現状ではまだ薄膜化に至っていないが、出発材料としてのSiGe薄膜の作製は行っており、本年度中には作製できると考えている。以上の事から、研究の進捗は、概ね順調に推移していると考えている。SixGe1-x混晶クラスレート薄膜作製法の確立を行い、さらに薄膜の評価を行う。具体的には以下の項目からなる。1.前駆体Na(SixGe1-x)膜の作製と評価:SiGeクラスレートの前駆体であるジントル相化合物Na(SixGe1-x)薄膜を以下の手順で作製する。1各種基板(サファイア、Si、金属)上への非晶質SixGe1-x薄膜の蒸着。2ステンレス製密閉容器内で、Na蒸気との反応からNa(SixGe1-x)を得る。2.クラスレート化真空熱処理の最適化:各種真空熱処理条件により、品質の高いクラスレート薄膜材料の作製法を確立する。これは、Si、Ge、SixGe1-xの各クラスレート薄膜に関して行う。また、Naを完全に除去する方法について電界を印加する方法により行う。3.クラスレート薄膜の評価:得られたクラスレート薄膜のキャラクタリゼーションを行う。XRD、ラマン散乱、SEM、赤外可視紫外吸収測定、EDXなど試料評価を行うと共に、ホール測定など電子物性評価を行う。実験的に得られた、光学物性データ(光吸収係数、屈折率、発光スペクトル)、電子物性データ(キャリア密度、移動度など)を第一原理計算に基づく予測と比較を行い、クラスレートの物性理解を深める。SiGe混晶クラスレート作製:SiGe混晶クラスレート作製のための前駆体Na(SixGe1-x)の作製について、粉末に関してはほぼ全組成での合成が確認された。一方、真空熱処理によりクラスレート化を行った結果、x0.5付近では非晶質になることが分かった。また、x=0.1に固定しGeリッチ側でのゲストフリーSiGeクラスレートの作製をイオン液体を用いて行った。その結果、クラスレート化が確認され、現在詳しい試料の評価を行っている。クラスレート化真空熱処理の最適化:新規に真空熱処理装置を立ち上げ、従来の真空下における処理だけでなく、HClやH2Oとの反応によるクラスレートの作製を可能にした。この装置を用い、ゲストフリーGeクラスレート薄膜を効率よく作製できることを確認した。Geクラスレート薄膜の評価と光物性:サファイア基板上に作製したGeクラスレート薄膜について、その構造、元素組成を評価したうえで、光吸収測定を赤外・可視・紫外分光を用いて行った。その結果、ほぼNaが抜けていることが確認できた。吸収スペクトルには、バンド間遷移による吸収の立ち上がりの他に、低エネルギー側に向かって吸収が増加する自由キャリア吸収が強く観測された。これは、わずかに残存しているNaから生じた自由電子キャリアによるものと解釈される。今後、吸収スペクトルを、第一原理計算と比較を行い、バンド構造や状態密度に関する議論を行う予定である。今年度の成果について、国際論文、国際会議、国内学会等で発表を行った。SiおよびGeクラスレートの作製に関して、効率良く作製できる方法を見出し、従来の方法から一歩進んだといえる。SiGe混晶クラスレートの作製については、作製が難しい混晶組成の領域があるため、その組成での作製は苦戦しているが、それ以外ではおおむね順調に進展している。

SiGe混晶クラスレートNax(SiyGe1-y)136については、Na量をほぼゼロ(ゲストフリー化)にするための手段として、真空熱処理およびイオン液体を組み合わせる手法が有効であることが確認できた。これにより、様々なSi/Ge組成比の前駆体Na(SiyGe1-y)から、クラスレート化を行い、Geリッチ(0.2<y<0)又はSiリッチ(0.8<y<1)領域でのゲストフリークラスレートの作製に成功した。得られた粉末試料に対して行ったXRD測定とリートベルト解析により、Si、Geが占めやすい結晶サイトの存在を確認した。一方、Si/Ge比が1:1に近い場合、非晶質成分が非常に多い試料が得られ、結晶化が困難であることが分かった。Geクラスレート(NaxGe136)については、透明なサファイア基板上への薄膜作製法を確立した。ゲストNa量を効率よく減少させるため、電界を印加する方法を試行した。結果は良好であり、十分にNa量が減少したゲストフリーGeクラスレートを得ることに成功した。得られた試料に対し、赤外・可視光吸収測定を行った結果、吸収端および自由キャリア吸収による光吸収をはっきりと観測した。また、オーミック接触を形成する電極金属を見出したうえで、ホール効果測定を行い、電気抵抗率、キャリア密度、移動度をはじめて見積もることに成功した。Siクラスレート薄膜の高品質化のため、前駆体NaSi膜からクラスレート化する際の真空熱処理に工夫を施した。それにより、Naの減少スピードを制御することにより生成する膜の性質や構造が異なることを見出した。Geクラスレート薄膜のゲストフリー化のため、開発した電界を印加してNaを減ずる手法は、SiやSiGe混晶クラスレートにも応用できる画期的な方法である。この手法により半導体的性質を示すゲストフリークラスレート薄膜を容易に得ることが可能になった。作製したゲストフリーGeクラスレート膜を用いた各種測定により、光学物性と電子物性が明らかになりつつある点を考えると、研究は飛躍的に進んだと言えよう。一方で、SiGeクラスレートでは、現状ではまだ薄膜化に至っていないが、出発材料としてのSiGe薄膜の作製は行っており、本年度中には作製できると考えている。以上の事から、研究の進捗は、概ね順調に推移していると考えている。昨年度導入した赤外線ランプ加熱装置を本格稼働し、品質の高い薄膜クラスレートを作製する。また、物性測定の量と種類を増やし、より詳細な物性を明らかにする。第一理論計算との比較を通じてSixGe1-x混晶クラスレートの物性(バンドギャップ、光吸収係数、キャリア密度、キャリア移動度、キャリア寿命)を明らかにする。同時に、ダイヤモンド構造SiやGeとの相違点、類似点を整理し、特異な物性発現のメカニズムを解明する。SixGe1-x混晶クラスレート薄膜作製法の確立を行い、さらに薄膜の評価を行う。具体的には以下の項目からなる。1.前駆体Na(SixGe1-x)膜の作製と評価:SiGeクラスレートの前駆体であるジントル相化合物Na(SixGe1-x)薄膜を以下の手順で作製する。1各種基板(サファイア、Si、金属)上への非晶質SixGe1-x薄膜の蒸着。
生殖細胞表面抗原に対する単クロ-ン抗体の利用

近年,哺乳動物の生殖細胞の増殖分化の機構や,受精の機構に関する研究が生化学や分子生物学の手法を用いて急速に進展している。その中で,X精子とY精子とを分離しようとする試みがヒトを中心になされてきたが,未だその目的は十分に達成されていない。本研究においては,実用性の高い大型家畜(牛),マウス,ラットの精子表面抗原に対する単クロ-ン抗体産生ハイブリド-マを樹立し,X精子とY精子とに特異的に反応する単クロ-ン抗体を取得し,両精子を分別する方法論を開発することを第一の目的とした。更にこの過程で得られた単クロ-ン抗体の中には,精子の機能(生体反応,運動能,受精能)に関連するもの,あるいは,精子の分化成熟に関連するものも含まれていることが予想される。このような単クロ-ン抗体の認識する精子表面抗原の物質的,構造的実態を明らかにすることを本研究の第二の目的とした。1.牛精子より得た成熟精子を抗原としてマウスに投与し,ハイブリド-マを調製した。その結果,精子にのみ特異的に反応する3種類の単クロ-ン抗体生産株を得た。これらはウシ,マウス,ラットなどの精子と反応し,部位特異的であった。すなわち,1つは精子先端部,1つは腹部,1つは尾部に反応する抗体であった。これらの抗体が精子の受精能力にいかなる影響を与えるか検討した。2。未成熟マウス及びラットの精巣を抗原としてハイブリド-マを作製した。その結果,精原細胞ないしは精母細胞,セルトリ細胞,ライディヒ細胞などに特異的に結合する単クロ-ン抗体を取得することが出来た。これらの抗体の認識する抗原の同定,これらの抗原の精細胞分化段階における発現,そして抗原の機能の解明を目的として研究を行い,また,これらの抗原のcDNAのクロ-ニングを行った。2。雄精子と雌精子とを分画することが出来れば,家畜の性をコントロ-ルすることが可能となり食糧資源の効率の良い生産法を開発することになる。現在のところ両精子を分画する方法は確立されていない。もし雄精子と雌精子の表面に存在する物質(主に蛋白質)が異なっており,それぞれの物質に対する単クロ-ン抗体を調製することが出来たならば,両精子を完全に分別することが可能である。またたとえ両精子に特異的な物質を認識する抗体でなくとも得られた抗体は,生殖細胞の分化増殖ならびに受精過程の機構の研究に非常に有用である。本年度はまず精子に対する単クロ-ン抗体の調製を試み以下の成果を得た。1.牛精巣より得た成熟精子を抗原としてマウスに投与し,ハイブリド-マを調製した。これらの抗体が精子の受精能力にいかなる影響を与えるか検討中である。2.未成熟マウスの精巣を抗原としてハイブリド-マを作成した。これらの抗体の認識する抗原の同定,これらの抗原の精細胞分化段階における発現,そして抗原の機能の解明を目的として研究を行っている。また,これらの抗原のcDNAのクロ-ニングを行っている。雄

精子と雌精子とを分画することが出来れば,家畜の性をコントロ-ルすることが可能となり食糧資源の効率の良い生産法を開発することになる。現在のところ両精子を分画する方法は確立されていない。もし雄精子と雌精子の表面に存在する物質(主に蛋白質)が異なっており,それぞれの物質に対する単クロ-ン抗体を調製することが出来たならば,両精子を完全に分別することが可能である。またたとえ両精子に特異的な物質を認識する抗体でなくとも得られた抗体は,生殖細胞の分化増殖ならびに受精過程の機構の研究に非常に有用である。前年度は,主に牛精巣より得た成熟精子を抗原として使用し,精子にのみ特異的に反応する単クロ-ン抗体生産株を得た。本年度は,未成熟マウス及びラットの精巣を抗原として単クロ-ン抗体生産細胞を作成し,生産される単クロ-ン抗体の認識する抗原を解析し,以下のような抗原を認識する抗体を得た。1.すべての精子細胞に共通して存在する抗原。2.精子細胞細胞質と間質細胞に存在する抗原。3.先体(イディオゾ-ム,アクロゾ-ム)に存在する抗原。4.精子細胞の分化初期過程に存在する抗原。5.精子細胞の分化後期過程に存在する抗原。6.精子尾部に存在する抗原。7.間質細胞に存在する抗原。8.セルトリ細胞に存在する抗原。マウス精巣よりcDNAライブラリ-を作製し,これを大腸菌中で発現させ,上記の単クロ-ン抗体を用いてスクリ-ニングを行った。その結果いくつかのポジティブクロ-ンが得られ,その塩基配列を決定した。
プロテオームによる環境変動に応答するSUMO化タンパク質の解析

翻訳後修飾機構の一つであるSUMOは個体発生プログラムの制御と環境ストレス応答や病原菌の感染応答に関与し植物の安定的な生長を下支えする。しかし、植物細胞ではSUMOがどのようなタンパク質を修飾し機能制御を行っているかはほとんどわかっていない。本研究ではSUMOによる生長制御の全容を明らかとするため、ストレス環境下でSUMO化されるタンパク質を網羅的に単離同定する。環境変動時の生長制御にSUMOがどのように関与しているかを解明することを目標に研究を行った。本年度は、前年度作成したタグ付きSUMO発現形質転換体を用いてSUMO化タンパク質の精製法の検討を行った。高度変性条件下におけるHis-IMACと免疫沈降による二段階精製により、バックグラウンドノイズが少ないSUMO化タンパク質群の精製法を確立した。その後、同法を用いてSUMO化タンパク質を濃縮し、LC/MS/MSによるSUMO化タンパク質の同定を行った。植物サンプルとしては、高度にSUMO化が促進される低温ストレスに曝露したものを用いた。結果として、200超のペプチド断片が同定され、一部には変異を導入したSUMO修飾の痕跡を含むものが検出された。この結果より、in vivoにおけるSUMO化標的タンパク質を得られたものと考えている。さらに、SUMO化の痕跡が検出されたペプチド断片をコードする遺伝子のクローニングを行い、大腸菌を用いたsemi-in vitroSUMO化系によってSUMO化の検証を行った。その結果、少なくとも6種類のタンパク質がSUMO化されうることを確認した。これらのタンパク質は、いずれもSUMO化に関する報告はなく、本研究によってはじめて、SUMO化の可能性を提起したものである。26年度が最終年度であるため、記入しない。この系統を用いて、ストレス条件への曝露実験を行い、His-Strep-SUMO(H89R)によるSUMO化が起きることを確認した。少なくとも低温処理や深水処理によって有意にSUMO化が誘導された。また、同条件を用いてSUMO化タンパク質を精製するためのプロトコールの検討を行った。さらに、確立したSUMO1p: His-Strep-SUMO(H89R)形質転換体を用いてカルスを作製し、さらにそこから培養細胞系統の作製を試みた。これまでに複数系統の培養細胞系統確立に成功している。また、これらの系統ではトランスジーンを保持していることも確認している。今後は増殖効率の検討や導入タンパク質の発現確認を行う必要があるが、次年度以降の研究に供する材料を作製することができたことから、研究を推進するための基盤整備ができたものと考えている。当初計画していたSUMO化タンパク質の精製手法の確立と環境変動に暴露した条件下においてSUMO化されるタンパク質の網羅的な単離精製に関しては研究の遂行に若干の遅れが生じた。主な原因は、条件検討に用いる予定であったタンパク精製キットの相次ぐ製造・販売中止により方針転換を余儀なくされたことである。しかし、連携研究者・研究協力者からの助言をもとに改変プロトコールの検討に注力した結果、新法の確立に一定の目途をつけることができた。今後はマイナーな調整を行いつつ、網羅的な単離精製を進めていく計画である。

一方、研究機関を移動したことにより、植物体の育成に利用できる広いスペースを確保することができた。いくつかの実験を同時並行できるようになり、総合的な研究計画の達成度は良好なものになった。このため、当初計画で予定していた培養細胞系統の作製を多数並行させることができたため、よりスムーズに進めることができた。これらの成果により、次年度以降のサンプル作成のための基盤整備ができたものと考えている。本年度研究において確立したSUMO1p:His-Strep-SUMO(H89R)系統、及び培養細胞系統を用いて、SUMO化タンパク質の精製を行い、質量分析による同定を進める計画である。タンパク質の精製法については本年度検討した条件を活用し、スムーズに進めてゆきたいと考えている。また、現時点で確認ができている低温や深水条件下でのSUMO化タンパク質の精製に加えて環境刺激や薬剤・エリシター処理など刺激の種類を幅広く検討し、各種条件下でのSUMO化タンパク質の精製と同定を進めていく。その後、得られたデータを統合したデータベースを作成する。十分量のデータを集積した段階で、このデータベースと共に新規手法による植物のSUMO化タンパク質の知見として報告したいと考えている。
人工知能を応用したアブレシブジェットの3次元計測

高速度の水噴流によって固体材料を加工するウォ-タ-ジェット技術の発展型として、水噴流にガ-ネット等の固体の砥粒を混入させ加工能力を大幅に向上させたアブレシブジェット技術が新しい材料加工法として注目されている。ウォ-タ-ジェット加工においては水噴流が加工を行うのに対し、アブレシブジェット加工においては高速水噴流に運ばれる砥粒が加工の主役となってることが最近の研究から明らかになりつつある。そこで砥粒(アブレシブ)の飛行速度を測定し、砥粒の加速特性に関する知見を得ることはアブレシブジェット加工技術において極めて重要な課題となっている。しかしながら最大速度が秒火200300メ-トルに達する高速性、噴流中心部の水柱、周辺部の水滴・砥粒の混在等が障壁となり、砥粒の飛行速度を測定するのは極めて因難であるとされている。本研究において我々は2台のストロボスコ-プを2方向から同時に短時間に2度発光させ、2台のカメラで同時に2重露光することで砥粒の飛行速度とその時の砥粒の3次元的な位置を測定する技術の開発を行った。開発途中において、もう一方に悪影響を及ぼさない有効な照明方法の開発が因難でかなりの試行錯誤をくり返したが、最終的には2方向からの同時撮影になんとか成功を収めた。そして砥粒の3次元的な速度分布を求めることができた。しかしながら、この研究より得られた砥粒の3次元的な分布結果を検証し、測定値の信頼性を実証することが今後の課題として残されている。
局所麻酔・抜歯が心機能に及ぼす影響:処置後24時間の心拍・血圧・ECGの測定

従来施行してきた研究は、局所麻酔、抜歯といった小外科処置が心・循環系にいかなる影響を与えるかに関するもので、心拍数、血圧、心電図所見の3項目について、術前・術中・術後20分という短時間であったが、本研究では上記項目について、処置後24時間まで循環動態を追求することができた。被験者は14名であった。即ち、コントロールとして、心疾患もなく、かつ口腔外科的処置をも受けず、単にホルター心電計と血圧計のみをつけた1例、心疾患を有しない患者8名で、処置の内容は抜歯を主体とした処置6名、下唇血管腫に対するクライオサージェリーを施行した1例、嚢胞摘出術を施行した1例であった。心疾患を有する症例は全症例で5例で、人工弁を装着した症例3例、高血圧症1例、高血圧と狭心症を合併した1例について、心電図、心拍、血圧の変動について検討したが、(1)処置内容にばらつきがあった点(抜歯、嚢胞摘出、クライオサージェリー、移植骨除去術)、(2)処置時間にもばらつきが強すぎた点(10分114分)、(3)静脈鎮静剤の使用の有無など、症例が少ないにもかかわらず、多くのファクターが加わったため、明確な解析はできなかった。本研究の優れた点は、自覚症状のない患者や、心電図異常発現の条件が明らかでない虚血性心疾患や一過性の不整脈を一日のサイクルにおいて把握した、即ち日常の心機能の一つを知ることができた点である。しかし被検者は、歯科治療を受けたストレスも加わっているので、真の意味での処置侵襲度ストレスが処置後どれだけ心血管系に影響するのか判定は困難であった。今後は症例数を増やし、特にホルターの心電図観察を行い、他の検査法では、検出の困難な心電図異常の発見や、小口腔外科処置が、1日サイクルで検討すれば、どのようなストレスになっているかを正常人、心疾患患者と比較検討を続けたい。