hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
上皮バリアのホメオスタシスにおける細胞競合の役割とその分子機構の解明

そこで、今年度は、接着結合における張力感知に重要な役割を果たすα-catenin/Vinculin経路とAfadinとの関係を検討した。その結果、張力依存的な構造変化が不全となるような変異α-cateninを発現する細胞、およびVinculinをKOした細胞においてはバリア破綻細胞の除去効率が顕著に低下した。さらに、Afadinはクローン境界へのVinculinの集積に必須であったが、一方でα-catenin/Vinculin経路はAfadinの集積には必須ではなかった。これらの結果から、Afadinはα-catenin/Vinculin経路の上流で機能すると考えられた。そこで、正常細胞とバリア破綻細胞の境界面へのAfadinの集積機構をさらに検討するために、Afadinの構造機能解析を行った結果、Afadinの集積にはRas/Rap GTPase結合ドメインが重要であることが示唆された。また、バリア破綻細胞の除去に関わるシグナル伝達経路を明らかにするために、前年度に化合物スクリーニングを行った。今年度は、それらのシグナル伝達の関与についてさらに検討を進めた結果、バリア破綻細胞の除去にROCKが重要であることが明らかとなった。また、バリア破綻細胞においては正常細胞では認められないアクトミオシンのケーブル上の構造が頂端部側に形成されることを見出した。これらの結果を総合して、上皮シート内に上皮バリアが破綻した細胞が出現すると、バリア破綻細胞における張力制御の異常が隣接する正常細胞の接着結合を介してAfadin依存的に検知されることにより、バリア破綻細胞の除去が起こると考えられた。これまでの結果から、接着結合による張力感知が正常細胞と異常細胞の境界面へのAfadinの集積に関与する可能性が考えられる。そこで、今後、接着結合におけるメカノセンシングにおいて中心的な役割を果たすα-カテニン/Vinculinに注目し、α-カテニンの構造変化およびVinculinの集積がAfadinの局在およびバリア破綻細胞の除去にどのような役割を果たすかを検討する。具体的には、α-カテニンのKO細胞を作成し、そこに張力依存的な構造変化やVinculinもしくはAfadinとの結合が不全となるような変異α-カテニン分子を発現することにより、接着結合におけるメカノトランスダクションがバリア破綻細胞の除去に果たす役割を検討する。また、これらの細胞を用いてタイム・ラプス・イメージングを行い、バリア破綻細胞の除去過程の解明を進める。また、CLEM法を用いて正常細胞とバリア破綻細胞の境界面の微細構造を特に細胞骨格の再編成に注目して明らかにする。また、平成29年度の化合物スクリーニングによりいくつかのシグナル伝達経路がバリア破綻細胞の除去に関わる可能性が示唆されている。そこで、これらのシグナル伝達経路の阻害剤を改めて購入し、その阻害剤の作用について濃度依存性を含めて検討する。
中性K中間子を用いたCP非保存の研究

1.中性K中間子を用いたCP非保存の実験この研究の目的はCPの非保存を中性K中間子を用いて調べることである。これには2つの方法を用いる。一つは、K_L、K_Sがそれぞれπ^0π^0、π^+π^-に崩壊する4つの分岐比の比を精密測定する事により、直接的なCPの非保存の有無を調べる実験(E832)である。もう一つは、直接的なCPの破れの効果の大きいK_Lの稀崩壊を探索する実験(E799)である。更にこの実験ではその他にも約十数種類の稀崩壊を観測・探索する事ができる。まず、1996年夏までかけて実験の準備を行った。その中で、我々はCsI結晶を用いた電磁カロリメータの光電子増倍管の試験、超高速データ収集システムの開発、γ線検出器の開発、試験を行った。1996年8月末には初めて中性K中間子のビームを得、設計通りの非常にきれいなビームであることを確かめた。1996年10月末からはまず、実験E832のデータを約2ヶ月収集した。1997年1月半ばからは実験E799を開始した。高いビーム強度とそれに耐える測定器、データ収集システムのおかげで、約1週間でほとんどの崩壊について現存の世界記録の感度を越えることができた。現在順調にデータ収集を続けており、まず3月末まで走る。4月からはまたE832に切り替えて夏までデータ収集を行い、その後またE799に切り替えて9月半ばまで走る予定である。実験の解析はまだ始まったところである。いくつかの崩壊については暫定的な結果が1996年末までに出せる予定である。既に、12月半ばに1日取った特別なデータから、K_L→π^0υυの分岐比の上限値を30倍下げる新たな結果が得られ、2月にサンタモニカで開かれた国際会議で発表した。また、前回行った実験の結果をいくつか論文発表した。2.新しいCP非保存のための測定器開発B中間子を用いたCP非保存の実験のため、シリコンストリップを用いた超高精度の位置検出器を開発した。コンピュータシミュレーションを用いた検出器の設計・評価を行った。また赤外レーザーを用いた試験装置も開発した。更に、各種の試作品を試験、比較した結果最終的な設計を選び、まもなく大量生産に入る。フェルミ研究所E799-II及びE832の実験準備E799-II及びE832は中性K中間子を用いてCP非保存の起源を探る実験である。本年度は測定装置の搬入をほぼ終えた。現在実験開始に向けて測定器の読み出し、電子回路の調節など最終的な準備を行っている。阪大の担当した物について述べると、CsIカロリメータ用の光電子増倍管の試験は全て終えた。また、データ収集システムは既に稼働しており、ソフトウェア開発も約9割終えた。また、カロリメータの中心部に備え付けるγ線検出器についても、実機がほぼ完成した。

実験は1996年7月よりビームを得、約2ヶ月かけて各種調整を行った後、データ収集に入る。まず一回目のランは1997年5月まで行い、9月より2回目のランを始める。また、依然の実験で取ったデータの解析も行い、論文発表した。シリコン検出器の開発将来の実験で用いるシリコンストリップ検出器はポーランドのクラコ-と共同開発を行っており、プロトタイプの試験を行った結果、十分仕様を満たすものができた。CP非保存の研究の国際現状同じくK中間子を用いてCP非保存のパラメータを測定するヨーロッパCERNの実験NA48を視察した。この実験は現在カロリメータを除いてほぼできておりビームを用いて試験を行っているが、本番の実験は1998年開始の予定である。また、Cornel,SLACなどB中間子を用いる実験の視察も行なった。1.K中間子を用いたCP非保存の実験まず、8月までE799/E832の準備を行った。このうち、特にCsIカロリメータの結晶の積み上げ、カロリメータの中心部に取り付けるγ線検出器の組み込み、超高速データ収集装置の仕上げ、γ線検出器のノイズ対策と稼働、等を行った。8月末に初めて中性Kビームを出した。超高速データ収集装置を用いてビームの位置と形をオンラインで求め、ビームが設計通りであることを確かめた。また、不用な粒子の少ない、非常にきれいなビームラインであることがわかった。その後10月までかけて各種測定器の修理とチューニングを行った。10月末よりまずE832実験を開始した。これは、K_L、K_Sがそれぞれπ^0π^0、π^+π^-に崩壊する4つの分岐比に比を精密測定する事により、直接的なCPの非保存の有無を調べる実験である。各測定器とも予定通りのエネルギー分解能等を得た。崩壊の収集量もほぼ予定通りであった。また、超高速データ収集システムのおかげで、4つの崩壊を再構成したKの普遍質量分布を初め、様々な物理量、測定器の状態をモニターするグラフなどが一目でわかるように表示され、問題発生から1分以内にそれを知ることができた。12月の半ばには4日間かけてもう一つの実験E799のトリガーの試験を行った。この結果、予測していたレートよりもはるかに低いレートであることがわかった。また、K_L→π^0υυのための特別のデータ収集を1日行った。12月末から1月半ばまでかけて、CsIカロリメータの読み出し回路の改良、真空と大気の間を切る大きな膜の取り替え、各種測定器の修理、実験の切替えを行った。特にカロリメータの回路は1995年で不調だったLSIのチップを約1100個取り替えるという作業を短時間で行った。このため、カロリメータを設計通りの速さで読み出すことができるようになった。1月半ばよりもう一つの実験、E799を開始した。山中はこの実験の責任者である。これはK_Lの稀崩壊を用いてCP非保存を探る実験であり、その他にも約十数種類の稀崩壊を観測・探索する事ができる。この実験では当初ビームの大きさをE832の場合の1.8倍にする予定であったが、カロリメータへの放射線量が予測よりも3倍以上高かったため、E832と同じビームの大きさに急遽戻した。しかし、E799はビームを得てから1週間以内で物理のデータ収集に入った。高いビーム強度とそれに耐える測定器、データ収集システムのおかげで、約1週間でほとんどの崩壊について現存の世界記録の感度を越えることができた。現在順調にデータ収集を続けており、まず3月末まで走る。
アジアにおける女性運動の理論的検討-日韓比較研究-

19年度は2年間収集した文献とデータを分析し、比較女性運動の理論化を探りながら執筆に勤めた。この研究プロジェクトは、韓国と日本における「国家と市民社会の関係」「国家形成と女性団体の関係」、「女性団体の組織的特徴と資源」の違いが韓国と日本での女性運動の性格や女性運動の政治的なパワーの違いを生み出す重要な要因であることを比較政治学の視点から明らかにした。韓国の女性団体は、80年代にフェミニズム女性運動としての独立的なアイデンティティを形成し、政治的民主化以降登場した新しい「市民社会」の重要なメンバーとして参加し、他の市民団体と連携しながらも独立的な立揚を形成することに成功した。つまり、韓国の「協力的な国家-市民社会の関係」、「女性団体の国家政策決定への参加」、「連帯と組織化」という女性団体の資源は、韓国の女性運動が国家に対して直接的圧力を与える運動を行う背景になる。一方日本の場合は、1960年代の学生運動以降、独立的社会運動が極めて周辺化し、組織的な社会運動は政党に従属される一方、既存のジェンダー規範に抵抗する新しい女性運動は社会運動としての位置づけより、「個人の解放」にもっと取り組む傾向となっている。このような日本のフェミニズム運動は、日本国家権力への抵抗として直接的な交渉や対抗より、抵抗的公共圏の模索や日常的な抵抗というより微視的な運動の形を取っていると見られる。以上の研究成果を下のような国際学術大会やシンポジウムで報告した。1)現代日本学会(韓国、ソウル)2007年11月23日2)ソウル大学米国学研究所シンポジウム(韓国、ソウル)2007年11月3日1.18年度は2年連続研究プロジェクトの開始年で、主に関連文献収集や資料整理、およびインタビュー調査に取り組んだ。そのために、日本における女性運動の歴史やフェミニズム発展に関する文献、最近の男女共同参画政策を含む女性政策の展開に関する文献収集を行った。さらに、女性運動団体の全国大会やロビー活動に参与観察を行い、同時に男女共同参画センターの活動に対してもインタビューを行った。2.19年度は以上で収集した文献とデータを分析し、比較女性運動の理論化を探りながら執筆に勤める予定である。今の段階で注目している点は、日本と韓国における国家と市民社会の関係である。韓国は民主化運動を行った社会勢力と1990年代以降登場した新しい市民運動団体が、いわゆる「市民社会」を形成し、国家権力に影響を及ぼしてきた。そうしたなか、女性運動も進歩的社会勢力となり市民社会の重要なメンバーとして参加し、他の市民団体と連携しながらも独立的な立場を形成することに成功した。しかし、日本の場合は、1960年代の学生運動以降、独立的社会運動が極めて周辺化し、組織的な社会運動は政党に従属される一方、既存のジェンダー規範に抵抗する新しい女性運動は社会運動としての位置づけより、「個人の解放」にもっと取り組む傾向となっている。その傾向は、社会隅々まで浸透する日本国家権力への対抗として自ら選択した戦略でもあり、抵抗的公共圏の不在の結果でもある。それらの特徴を、「国家と市民社会の関係」「国家形成と女性団体の関係」、「女性団体の組織的特徴と資源」として概念化し、韓国と日本での女性運動の性格や女性運動の政治的なパワーの違いを生み出す重要な要因として理論化を進めて行きたい。3.以上の研究成果を国際および国内の学術大会やシンポジウムで報告した。2)比較家族史学会、東京、2006年5月19年度は2年間収集した文献とデータを分析し、比較女性運動の理論化を探りながら執筆に勤めた。1)現代日本学会(韓国、ソウル)2007年11月23日2)ソウル大学米国学研究所シンポジウム(韓国、ソウル)2007年11月3日
小児肝移植におけるリンパ球及びその遊走因子の解析による免疫監視システムの開発

本研究はアトピー性皮膚炎の病勢マーカーとして臨床利用されている血清中TARC(CCL17)濃度が、免疫寛容を誘導しうるTreg白血球の遊走因子であることに着目し、生体肝移植術後の免疫抑制状態の患者(患児)の血清TARCと臨床経過を比較検討することで、TARCの免疫抑制マーカーとしての可能性を検討したものである。TARCは生体肝移植患者において幅広い値をとったが、想定された拒絶や自己免疫性肝炎発症との相関は認めず、免疫マーカーとしての有用性は限定的であると考えられた。TARCはアトピー性皮膚炎の重症度を鋭敏に反映する指標としてすでに臨床で使用されている血清蛋白である。また、TARCはCCL17とも呼ばれ、免疫寛容を誘導する制御性T細胞(Treg)の遊走因子の一つでもある。肝移植術後患者は免疫抑制剤の使用が必須であるが、免疫抑制剤は過量投与で感染を惹起し、投与量が不足すればグラフト拒絶に至るため、至適使用量の設定が重要であるが、現状での血中濃度測定に基づいた投与量設定では、依然として感染・拒絶の発生がみとめられている。今回我々は、肝移植術後の患者のTARCを測定することで、TARCが免疫抑制の指標となりうるか、また、感染・拒絶の指標となりうるか、について検討を行った。50名の患者より採取した161検体の測定を行い、その臨床経過との相関を検討した。肝移植後患者におけるTARCは測定限界(100pg/ml)以下から、異常高値(5000pg/ml超)まで、様々な値をとった。異常高値が持続する患者については、臨床的にアトピー性皮膚炎症状を有する症例とそうでない症例があった。同一患者における増減(変化幅)は最大で500%程度あり、その数値の変動は比較的急峻であると考えられた。ステロイドパルスや免疫抑制剤の増量でTARCは低下するのが認められた。TARCの上昇は免疫抑制剤の不足にともなう拒絶と相関し、TARCの低下は免疫抑制剤方に伴う感染の存在と相関する可能性があると考えられた。今後の臨床情報を収集を継続し、結果の解析を行っていく必要がある。当科における肝移植術後患者50名より採取した、計161検体についてTARCの測定を行い、臨床経過との相関を検討した。経過中に2名の患者が拒絶を発症し免疫抑制剤の増量、ステロイドパルスを行われた。うち1名はDe Novo AIH(自己免疫性肝炎)を発症した。これらの臨床経過とTARCの変化を記録した。現在までに明らかとなったのは、1移植後患者のTARC値には個人差あったこと。2TARC値は比較的短期間(数日)で変動する場合があったこと。3TARC値は免疫抑制剤の増量、ステロイドパルス後に減少する場合が多かったこと。以上、3つのことであった。一方で、TARC値の高値または増加が拒絶のエピーソードと相関するか、また、TARC値の減少が感染症の発症と相関するか、については症例数・観察期間が少なく、わからなかった。昨年度に引き続き、肝移植後の患者のTARC測定と臨床情報の比較を継続した。肝移植後患者の血清中TARC濃度は、測定限界(100pg/ml以下)から、異常高値(5000pg/ml)まで様々な値をとった。異常高値症例はアトピー性皮膚炎様の皮膚所見を呈する場合もあるが、この皮膚所見は肝臓移植術前には認めていなかった症例も認められた。肝臓移植に用いられるタクロリムスはT細胞を抑制することによりその免疫抑制効果を実現しているが、T細胞におけるTh1細胞とTh2細胞の免疫抑制に不均衡が生じ、食物アレルギーを発症するということが近年言われている。近年の報告では、タクロリムス内服開始にともない、成人の1.5%、小児では10から17%で新規の食物アレルギーを呈する場合があると報告されており、アナフィラキシーショックで発症された症例についても報告がある。TARCはアトピー性皮膚炎の指標として開発された経緯があるが、Th1、Th2の不均衡による食物アレルギー発症を早期に検知できる指標となる可能性も示唆された。自験例では食物アレルギーを呈する症例は認めていないが、移植後よりTARC異常高値を呈する場合は食物アレルギー発症の前段階を検知している可能性も考えられる。経過中に拒絶を発症した症例がなかったため、拒絶との相関は今年度は検討できていないが、来年度のデータも踏まえ、検討・解析を行っていく方針である。生体肝移植後の症例の経過を観察し、TARCを測定することで、拒絶、感染とTARCの相関の評価を行う方針であるが、経過観察中の症例に異常を呈する症例がなかったため、今年度は安定時のデータを収集するにとどまっている。本研究においては、肝臓移植患者の移植周術期および移植後フォローアップ期間における血清中TARC濃度(以下TARC)を測定することで、移植後の免疫抑制評価におけるTARCの有用性を検討した。肝移植患者のTARCは測定限界(100pg/ ml以下)から、異常高値(5000pg/ml)まで様々な値をとったが、大半は基準範囲内であり、有意高値となったのは15%の一部症例のみであった。同一患者における経時的変化の追跡では、高値症例以外では経過中の変化はわずかであった。TARC高値となった症例では術後の上昇とステロイド使用に伴う減少を認めたが、TARCと急性期拒絶、術後感染所見との相関は確認されなかった。また、経過中に拒絶を認めた症例でもTARCの変動は認めなかった。

TARCはアトピー性皮膚炎の病勢マーカーとして広く使用されているが、今回測定にて異常高値を認めた症例にはアトピー性皮膚炎を伴った症例と伴わない症例が含まれていた。また、経過をたどることができた症例のうち1例は、移植後からTARC高値となり皮膚炎症状を発症した。今日臓器移植の免疫抑制の中心的薬剤となっているFK506は、T細胞を抑制することによりその免疫抑制効果を実現しているが、同時にT細胞におけるTh1細胞とTh2細胞の免疫抑制に不均衡が生じるとされ、食物を中心としたアレルギーを発症することが指摘されている。近年の報告では、成人の1.5%、小児の10から17%で新規の食物アレルギーを発症するとされ、アナフィラキシーショックを呈した報告もあった。以上より、本研究の範囲内では肝臓移植患者におけるTARCの免疫抑制のマーカーとしての有用性は限定的であると結論した。一方で、TARCはFK506内服を行う患者におけるアレルギー発症を早期に検知できる指標となりうると考えられた。本研究はアトピー性皮膚炎の病勢マーカーとして臨床利用されている血清中TARC(CCL17)濃度が、免疫寛容を誘導しうるTreg白血球の遊走因子であることに着目し、生体肝移植術後の免疫抑制状態の患者(患児)の血清TARCと臨床経過を比較検討することで、TARCの免疫抑制マーカーとしての可能性を検討したものである。TARCは生体肝移植患者において幅広い値をとったが、想定された拒絶や自己免疫性肝炎発症との相関は認めず、免疫マーカーとしての有用性は限定的であると考えられた。TARCは肝移植術後患者において、患者ごとに異なる値を示し、また、同一患者内においても、その数値はダイナミックに変動する場合がある確認された。拒絶・感染の発症は一定数存在するため、経過観察を行いながら、定期的にTARC測定を行っていくことで、それらの発生前後の測定値を記録し、TARCが免疫抑制の指標となりうるか、また、感染・拒絶の指標となりうるか、について検討を行っていく方針である。TARC計測を続行するとともに、経過中のエピソードと数値の変動を記録し、拒絶、アレルギー症状の有無の情報とともに、解析をすすめる方針である。固形臓器移植TARC値の高値または増加が拒絶のエピーソードと相関するか、また、TARC値の減少が感染症の発症と相関するか、についての検討が継続中であるため。移植後検体のTARC測定について、検体不良が多く測定の回数が予想よりも少なかったため。定期的にTARC測定を行っていくことで、それらの発生前後の測定値を記録し、TARCが免疫抑制の指標となりうるか、また、感染・拒絶の指標となりうるか、について検討を行っていく。TARC測定の続行、結果解析、発表に使用していく方針である。
入力支援に看護実践用語標準マスターを用いた訪問看護支援システムの構築

本研究では訪問看護領域での看護実践用語標準マスターを用いて入力支援システムを構築することが目的である。構築した訪問看護入力支援システムの運用を通し、当初計画していたシステムから不備な点、改善すべき点や要望に基づき追加する点などが明確になり多くの改良を施してきた。また通信状況不良の為に個人情報を入力しない工夫(単純匿名化)のもとモバイル端末に最低限のデータを一時保存し、後にデータの転送ができるように変更した。このようなシステムの改良のもと、協力先ステーションからもより使いやすくなったの評価を受け、実用的なシステムになってきた。本研究は訪問看護領域での看護実践用語標準マスターを用いて入力支援システムを構築することが目的である。そのうち本年度の到達目標は、昨年度構築した訪問看護入力支援システムの運用を通して不備な点や改善すべき点を明確にし改良し、より使いやすいシステムの構築を行う事である。実際運用を始めると、協力先ステーションから一部の訪問先では通信状況が悪く、通信の範囲内であるにも関わらず室内では入力できず室外での入力を行わざるを得ない等の事例が発生するなどの報告が出たため、個人情報を入力しない範囲でモバイル端末に1回分の最低限のデータを蓄積し、通信状態が良い所でデータの同期が出来るように変更する等、より実用的になって来た。その内本年度における到達目標は、入力支援システムを活用出来る訪問看護支援システムを構築することである。本年度の当初において複数の訪問看護ステーションでの聞き取りの結果、システム化するには業務のばらつきが多いことが判明した。最初から全てのステーションの要望を聞き入れ構築するには、システムが肥大化してしまい実用的なシステム構築が出来ない可能性が考えられる。その為、新たに平成25年度に開設するステーションに的を絞り、まずは基本的なシステムを構築する事とした。本年度中の到達目標である入力支援システムに看護実践用語標準マスターを使用した訪問看護入力システムの試作版は予定通りサーバーシステムを構築し、モバイル端末よりアクセス可能な状態になった。特に看護実践用語標準マスターを利用した入力支援は、看護行為、看護観察内容をボタンで選択出来るパネルタイプとした。但しこれら看護行為、看護観察用語は看護実践用語標準マスターの全用語を含んでいるため、訪問看護領域に必要ない用語も多く、当該領域に必要な用語を絞り込むことが実用性を上げるポイントの一つと考えている。また当初予定していたセキュリティ対策であるログインパスワードやVPN構築も予定通り組み込むことができ、さらに個々の端末自体を認証する機能も追加した。現段階の試作システムは、まだ実用域には達していないことより、協力ステーションの意見を取り入れ、さらなる改善をを行う。構築した訪問看護入力支援システムの運用を通して、当初計画していたシステムから不備な点、改善すべき点や要望に基づき追加する点などが明確になってきた。実際運用を始めると、協力先ステーションから一部の訪問先の通信状況が悪く、入力が困難な地点もあることが明確になり、多くの改良を施している。これらの通信状況の対応の為に個人情報を入力しない工夫(単純匿名化)のもとモバイル端末に最低限のデータを保存し、通信状態が良い場所でデータの同期ができるように仕様を変更した。このようなシステムの改良のもと、協力先ステーションからもより使いやすくなったとの評価を受け、かなり実用的なシステムになってきたと確信している。しかしながら、制度変更に対応するために今後とも継続的な改良が必要と考えている。医療情報研究計画通り、サーバーとモバイル端末を利用した訪問看護入力支援システムの基本部分はすでに完成し、現在協力先訪問看護ステーションの使用感、操作感、要望等を聴取しながら、細部の改善を行っている。【目標:アプリケーションソフトの要求調査】おおむね達成出来た。実施内容:看護師等が独自で運営し、訪問看護システムを導入していない訪問看護ステーションへの調査し、必要なシステムの概要を調べた。【目標:アプリケーションソフトの設計及び構築】順調に進展している。実施内容:アプリケーション作成はおおむね順調であるが、まだ実用域には達していない。サーバー構築、HDDのRAID化、データーのバックアップの自動化、VPN接続などシステムの基本機能は順調に構築出来た。【目標:試作システムの構築】順調に進展している。実施内容:試作システムを構築した後、基本的な動作試験・動作確認を行い、確認した。今後ともより実用的なシステムを目指すため細部の改善を進める必要がある。とくに看護実践用語標準マスターを使用した入力支援の部分は、訪問看護師の入力内容とずれがあるようで何らかの改善策を考える必要があると思われる。基本的な仕組みはほぼ完成したので、今後の改善がシステムの使い勝手に大きく影響すると考える。1実証用システムの試験的運用:調査に協力したステーションの中で協力してくれる事業所に実証用システムを持ち込み使用してもらう。

あるいはサーバーを公開し、各ステーションのPCやモバイル端末よりアクセスしてもらう。2実証用システムの運用調査:実際に使用してもらった感想や不備な点について、利用者にアンケート或は面接調査等を行う。3アプリケーションソフトの実証実験:不備な点等の修正を行い、配布用パッケージを構築する。希望するステーションに配布用アプリケーションを導入してもらい、動作等の検証を行う。検証等で問題が無ければ、配布用アプリケーションの配布を実施する。十分な期間を考慮し物品の発注を行ったが、メーカー在庫切れ等の理由により3月末までに納品できなかった物品がある為使用額に差額が生じた。上記物品が4月中に納品される予定である為、実質的には次年度使用額は当初予定額と同額になる予定。次年度以降も引き続きアプリケーションの改善を行うと共に、1実証用システムの試験的運用:調査に協力したステーションの中で協力してくれる事業所に実証用システムを持ち込み使用してもらう。
電気・磁気応答性有機ゲルを用いた人工筋肉の創製

これまで、北大長田義仁グループでは、生物様運動を行う高分子ゲルの創製を世界に先駆けて行い、これを用いた様々なアクチュエータを開発してきた。本研究では、電圧印加により駆動する新規導電性高分子ゲルの創製を行い、新しいアクチュエータ用材料を開発する。アクチュエータ用合成高分子として、優れた電気化学的性質を有し、かつ3-置換ポリチオフェン類のような位置規則性を考える必要のないN-置換ポリピロールを選んだ。まずN位にカルボン酸基を有するピロール誘導体を合成し、これをモノマーとする水溶性ポリピロールを酸化重合法により合成した。得られた高分子はpH9.0で可溶となった。次に、この高分子のpHの変化に伴う水溶性の変化をより詳細に検討し、水溶液中における電気化学的性質、光学的性質を測定した。さらに、スピンコート法によりITOガラス基板上にポリピロール薄膜を作製し、その薄膜の電気化学的性質、光学的性質した。この薄膜のエレクトロスペクトロメトリーを行うことで、電気化学的酸化状態での酸化種の評価を行った。また、電気伝導機構の検討を目的として、4端子法により高分子薄膜の未ドープ状態、ドープ状態、および含水状態での直流並びに交流電圧印加時の電気伝導度の測定を行った。このように、得られたポリピロール誘導体の基礎物性を評価した。次に架橋剤によるポリピロール鎖間の橋かけを行い、ハイドロゲルを作製した。橋架け密度、界面活性剤の濃度を系統的に変化させ、これらに電圧印加を行ったときのハイドロゲルの物性評価を行い、アクチュエータ作製の基礎データを得た。さらに、電圧印加に対する応答特性向上をドーピング率向上により達成するため、高い水溶性が期待できるN-置換ポリピロール類(N位にリン酸基、ポロン酸基あるいはスルホン酸基を有するピロール誘導体)を合成し、その基礎物性を評価した。以上のように、電気刺激応答型アクチュエータ用材料としての応用が可能な新規導電性高分子ゲルを創製することができた。
日本財閥の経営史的研究ー三井・三菱・住友の事例を中心としてー

日本の工業化の経済主体として、国際的にも著名な日本財閥の形成過程を経営史的側面から実証的に明らかにすることを課題として、三井・三菱・住友を中心として史料の発掘・整理・分析を進めてきた。本年度はそのなかで、三菱財閥の形成過程に関する第一次史料の採集において大きな成果をあげることができ、今後も引き続いて史料採集を行う予定である。内容は、同財閥の多角化と資本蓄積において最も基底的な役割を果たしてきた同財閥の炭砿業、金属鉱業、重工業部門、ならびに中枢部門たる本社関係の史料である。これらは、新たに発掘したものであり、現在すでに非公開となっているが、三菱系各機関の特別の配慮によって閲覧できたものである。これらの史料は、現在なお整理中であるが、分析が進めば、日本の財閥史にとってだけではなく、日本の近代化、工業化に関する実証的研究の画期となるべきものである。また、旧帝国大学や旧高等工業学校に所蔵されている史料の調査も行なってきたが、京都大学、大阪大学、九州工業大学、九州大学では予算の許す限り史料の複写を行なった。これらもかなりの量に達するが、東京大学のみ学外者に対する複写を許可しなかったため、実証研究に利用できる形での史料の入手は、同大学では行なえなかった。遺憾とするところである。以上、史料の調査・整理・分析に大きな成果をあげ得たが、研究対象は今後も継続的調査・史料収集を必要とするほど巨大であり、その全体像の歴史的特質を実証レベルで提供することは一挙には大きな無理があるため、順次研究成果を公表していくこととしたい。まずは、炭砿業、金属鉱山業、そして本社部門の経営内容を検討し、研究成果として発表していく予定てある。日本の工業化の経済主体として、国際的にも著名な日本財閥の形成過程を経営史的側面から実証的に明らかにすることを課題として、三井・三菱・住友を中心として史料の発堀・整理・分析を進めてきた。本年度はそのなかで,三菱財閥の形成過程に関する第一次史料の採集において大きな成果をあげることができ、今後も引き続いて史料採集を行う予定である。これらは、三菱系各機関の特別の配慮を得たもので、現在非公開の史料である。これらは、新たに発堀したものであり、現在なお整理中であるが、今析が進めば、日本の財閥史にとってだけでなく、日本の近代化、工業化に関する実証的研究水準の画期となるべきものである。また、旧帝国大学・旧高等工業学校に所蔵されている史料の調査も行なってきたが、京都大学、大阪大学、九州工業大学、九州大学で予算の許す限り史料の複写を行なった。これらもかなりの量に達するが、東京大学のみ学外者に対する複写を許可しなかったため、実証研究に利用できる形での史料入手はできなかった。遺憾とするところであった。以上、史料の調査・整理・分析に大きな成果をあげ得たが、研究対象は今後数年におよぶ継続的調査・研究を必要とするほど巨大であり、その金体像の歴史的特質を実証レベルで提供することは一挙には無理があるため、順次研究成果を公表していくこととしたい。まずは、炭砿業、金属鉱山業、そして本社部門の経営内容を検討し、成果を発表する予定である。
GSK-3β/β-カテニン/プレセニリンネットワークと細胞死のシグナル伝達

Wntシグナル伝達経路は細胞の増殖や分化、初期発生時の体軸形成を制御する他に、神経ネットワーク形成にも関与する可能性が示唆されているが、その分子レベルの作用機構は明らかではない。また、Wntシグナル伝達経路の構成因子GSK-3βやβ-カテニンは、プレセニリン1やタウと複合体を形成することが報告されているが、神経細胞死のシグナル伝達におけるWntシグナル伝達経路の役割は明らかにされていない。そこで、Wntシグナル伝達経路においてGSK-3βの活性を制御するDvlに注目し、Dvlと相互作用してWntシグナルを活性化するカゼインキナーゼIε(CKIε)の作用機構を解析した。CKIε、Axin、Dvlは三者複合体を形成し、CKIεとDvlは相乗的に作用して、β-カテニンを安定化させ、TCF転写活性化を促進した。CKIεと結合しないDvl変異体はTCF転写活性化を促進するが、TCF転写活性化に対してCKIεとの相乗作用を示さなかった。Axinと結合できないDvl変異体はCKIεの存在にかかわらず、TCF転写活性化を促進しなかった。さらに、DvlとCKIεはアフリカツメガエル初期胚で相乗的に二次体軸形成を促進した。したがって、DvlとCKIεは相乗的にWntシグナル伝達経路を活性化して体軸形成を促進することと、この活性化にはDvlとCKIε、Axinの三者複合体形成が必要であることが明らかとなった。さらに、Dvl結合蛋白質を検索し、Synaptotagmin XIと新規蛋白質を見出した。前者のSynaptotagminは、神経細胞等の分泌や小胞輸送を制御することが知られており、WntシグナルがDvlを介して小胞輸送系を制御する可能性が見出された。後者の蛋白質については、そのC末端側にDvl結合領域が見出されるが、現在その全長cDNA配列を決定している段階である。したがって、本年度の計画は概ね達成されたと考えられる。
ベクトル束を用いた高次元代数幾何符号の構成

情報を通信する過程では通常雑音によって誤りが生じる。これらの誤りを訂正するための数学的手法は誤り訂正符号とよばれ、コンパクトディスクの再生から火星探査機との交信に至るまで広く用いられている。中でも現在最も性能の良い符号は、多項式の共通零点が表す図形である代数多様体の幾何学を用いた代数幾何符号である。当研究では、ベクトル束とよばれる対象を用いる事によって高次元の代数多様体から新しいタイプの誤り訂正符号を構成し、その性質を解明する事に成功した。本年度では、相対的Reed-Muller符号の基礎的性質を考察することを主な目的として研究を行った。その結果、以下に述べる様な成果を挙げることができた。我々が得た成果の一つ目は、大域切断で生成された曲線上のベクトル束の場合に、付随する射影束内の部分多様体から定まる相対的Reed-Muller符号の最小距離の下からの評価式を得たことである。この結果は、標準直線束がnefであるという事実を用いて、多様体上の因子の交点理論から証明される。二つ目の成果は、与えられたパラメータをもつ相対的Reed-Muller符号を曲線上の射影束から構成したことである。この構成の鍵となるのは、与えられた階数と次数を持ち、大域切断で生成された曲線上の安定束の存在である。我々は、有限体上定義されたFano多様体が常に有理点をもつというEsnaultの定理を安定束のモジュライ空間に対して適用することによって、この様な安定束の存在を証明することができた。更に、この安定束に付随する射影束から定まる相対的Reed-Muller符号に対してRiemann-Rochの定理を用いて次元の計算を行うことができた。以前の研究に於いては、同様の結果を楕円曲線上の半安定ベクトル束の場合に得ていたが、今回の研究によって任意種数の曲線上の場合にまで一般化されたことになる。最後の成果として、上に述べた符号の存在定理を用いることにより、相対的Reed-Muller符号の列で情報伝送率と相対最小距離が共に正の値に収束するものを構成することに成功した。この様な漸近的に良い符号列は、従来の曲線から得られる代数幾何符号以外では例が殆ど知られていなかったため、我々の得た結果は大変興味深いと考えられる。前年度では,曲線上の射影束の部分多様体から定まる相対的Reed-Muller符号に関する基礎的研究を行った。今年度では,この研究を更に発展させて以下に述べる様な成果を得た。第一の結果は.部分多様体がファイバー構造をもつとき,ファイバーのReed-Muller符号と全空間の相対的Reed-Muller符号の最小距離を関係付ける不等式を証明したことである。これによってファイバーの有理点の個数と直線束の交点数を用いて最小距離の評価を与えることができる様になった。第二に,射影束内の完全交叉多様体から定まる相対Reed-Muller符号のパラメーターを決定できた。具体的には,射影空間の完全交叉多様体の有理点の個数に関するGhorpade-Lachaudの定理と上記の不等式を併せて用いることにより,ベクトル束に対する適当な安定性の仮定の下で相対的Reed-Muller符号の最小距離に対して具体的な評価式を得た。また,直線束の大域切断のべクトル空間の次元をRiemann-Rochの定理を用いて計算し,符号の長さを決定した。最後に,一般の二次超曲面の族や楕円曲面から定まる相対的Reed-Muller符号の長さと最小距離についても具体的な評価式を求めた。これらは,以前の研究に於いて非特異なファイバーをもつ多様体に対して得られた結果を特異点を許した場合にまで拡張したものである。今年度の研究に於いて得られた成果は,通常のReed-Muller符号と相対的Reed-Muller符号の関係を明らかにしたという点で重要である。これにより,非特異なファイバーをもつ多様体に限らず,より多くの種類の代数多様体に対して相対的Reed-Muller符号のパラメーターを決定することが可能になると期待される。本年度の当研究の目的は、相対的Reed-Muller符号の漸近的性質を解明することであったが、この課題に関して以下の様な成果を挙げることができた。第一の結果として、有限体上定義された曲線上のベクトル束Eに対して、それに付随した射影束P(E)から得られる相対的Reed-Muller符号のパラメーターに関する多くの事実を解明した。我々は、安定でかつ大域切断で生成されるベクトル束が存在するための階数と次数についての条件を決定することによってP(E)上のnef直線束の存在を証明した。次に、射影空間内の完全交叉多様体の有理点の個数に関するGorphade-Lachaudの結果を用いて、P(E)内の完全交叉多様体から定まる相対的Reed-Muller符号の最小距離の下からの評価式を得ることに成功した。更に、楕円曲面と2次超曲面族の場合には最小距離のより精密な評価を得た。

第二の結果として、Garcia-Stichtenothによって導入されたArtin-Schreier曲線族上で相対的Reed-Muller符号の無限列の漸近的挙動を解明した。特に、適当な階数と次数をもつベクトル束Eを用いることにより、付随した射影束P(E)から漸近的に良い符号列を構成することができた。本年度の研究により、相対的Reed-Muller符号が従来の代数幾何符号と同様に良い漸近的性質をもつことが明らかになった。今後の課題としては、更に相対的Reed-Muller符号の性能の向上を図ることが重要であると思われる。
表現型クラスター化と超高次元変数選択法による自閉症スペクトラム障害の原因解明

機械学習手法を用い、17人の自閉スペクトラム症児のうちでビタミンB6に反応するサブグループの同定を試みた。音への過敏、言語の表出障害、不器用さ、広汎性発達障害評定尺度(PARS)スコア、血中アミノ酸濃度を用い、統計学的検定及び機械学習アルゴリズムを適用したところ、音への過敏と不器用さを同時に有し、血中グルタミン濃度が低値であることがビタミンB6反応性を示唆することを見出した。本研究結果は自閉スペクトラム症を治療反応性によって個別化する精密医療の先駆けとなるものであり、本研究の成果はSci Rep. 2018Oct 4;8(1):14840.に公表した。次に自閉スペクトラム症をその特徴に応じてクラスタリングし、クラスター毎の原因遺伝子を同定することを行った。対象者はSimons Simplex Collectionの登録者である白人男児、症例:592人、対照:336人である。症例を自閉症診断面接改訂版(ADI-R)のスコアとビタミンB6による治療の有無を用いて機械学習の一つであるk-means法でクラスタリングした。解析の結果、全症例vs対照では有意な遺伝子座は観察されなかった。一方、クラスター毎の有意な遺伝子座の数は、クラスター数が2と3では0、4と5では2、10では16、15では84、20では199と分類したクラスター数の増加に伴い増加傾向であった。このうち2つのクラスターで既報の候補遺伝子と一致する5つの遺伝子が有意であることを見出し(MED13L、LRFN2、FHIT、DOCK1、GSK3B)、論文を投稿中である。最後に、自閉スペクトラム症と診断され、ビタミンB6に反応する児・者の責任遺伝子を同定するため、家族を含め合計16人分の全エクソーム解析を行った。今後は塩基変異の特定を行い、遺伝因子に基づいた自閉スペクトラム症の治療法を確立する予定である。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。第一段階としてAGRE及びSSCの表現型データを用い、機械学習によるクラスター化を行った。表現型の捉え方に関する戦略は、多様な表現型の同定と薬物・サプリメント反応性等によるクラスター化である。表現型の同定の基本はADI-R等の国際的なゴールドスタンダードとされている指標を主に用いた。表現型に関する多様な変数に関して機械学習によるクラスター分析を行い、Affinity Propagationアルゴリズムを用いて、133個のクラスターに分割した。ビタミンB6反応性を予測する因子研究(文部科学研究費補助金等)のデータを用いた研究では、研究代表者がこれまでに収集したデータを用い、日本人小児における表現型クラスター化を検討した。すべてのデータがそろっている17人の自閉スペクトラム症と診断された児を対象としたデータベースデータを用い、Affinity Propagationアルゴリズムを適用して、ビタミンB6反応性を有する集団の同定に成功した。現在論文執筆中である。さらに、新たにビタミンB6に反応している子どもたちとその家族を対象とした遺伝子解析を行うべく、倫理申請を行い、承認された。その他のデータベースについても、データの整理とクリーニングを完了した。AGRE(Autism Genetic Resource Exchange)及びSSC(Simons Simplex Foundation)のデータ解析においては、予定通り必要とされるすべてのデータを入手し、クラスター分析を実施して、133個のクラスターを同定している。ビタミンB6反応性を予測する因子研究(文部科学研究費補助金等)のデータを用いた研究では、やはり機械学習によってビタミンB6に反応するグループを同定しており、論文執筆を開始している。また、新たなデータを取得するための準備も整った。他のデータベースにおいても、データを使うことが可能となっている。

最後に、自閉スペクトラム症と診断され、ビタミンB6に反応する児・者の責任遺伝子を同定するため、家族を含め合計16人分の全エクソーム解析を行った。今後は塩基変異の特定を行い、遺伝因子に基づいた自閉スペクトラム症の治療法を確立する予定である。17人の自閉スペクトラム症児のうちでビタミンB6に反応するサブグループの同定を試みた。音への過敏、言語の表出障害、不器用さ、広汎性発達障害評定尺度(PARS)スコア、血中アミノ酸濃度を用い、統計学的検定及び機械学習アルゴリズムを適用したところ、音への過敏と不器用さを同時に有し、血中グルタミン濃度が低値であることがビタミンB6反応性を示唆することを見出した。自閉スペクトラム症と診断され、ビタミンB6に反応する児・者の責任遺伝子を同定するため、家族を含め合計8人分の唾液を収集した。今後さらに他施設における8人分の唾液を収集し、全エクソーム解析を行う予定である。自閉スペクトラム症をその特徴に応じてクラスタリングし、クラスター毎の原因遺伝子を同定する研究においては、Simons Simplex Collection財団より必要なデータを入手し、解析に取り掛かっている。17人の自閉スペクトラム症児のうちでビタミンB6に反応するサブグループの同定を試みる研究では、解析結果は出そろい、論文発表の準備を行っている。自閉スペクトラム症と診断され、ビタミンB6に反応する児・者の責任遺伝子を同定する研究では、他施設の倫理審査の遅れなどから一部検体取集が遅れていたが、今後速やかに残りの8人分の唾液を収集できる見込みである。ビタミンB6反応性を予測する因子研究(文部科学研究費補助金等)のデータを用いた研究では、新たな参加者からのデータを加え、ビタミンB6反応性を有する自閉スペクトラム症の子どもたちの責任遺伝子を解明する。上記で得られた知見を他のデータベースにおいて検証し、自閉スペクトラム症の全貌解明を行うものである。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。17人の自閉スペクトラム症児のうちでビタミンB6に反応するサブグループの同定を試みる研究では、論文執筆にとりかかっている。自閉スペクトラム症と診断され、ビタミンB6に反応する児・者の責任遺伝子を同定する研究では、合計16人分の唾液を全エクソーム解析に供し、責任遺伝子の同定を行う予定である。自閉スペクトラム症をその特徴に応じてクラスタリングし、クラスター毎の原因遺伝子を同定する研究においては、速やかにデータ解析ののち、結果を論文発表する。
ヒト乳がん抑制遺伝子の解析

遺伝性乳癌の約60%がBRCA1、またはBRCA2遺伝子の変異により発生すると推測されており、この結果は遺伝性乳癌の発症前診断を確立するためには第3原因遺伝子の同定が必要であることを示唆している。BRCA1、BRCA2の関連遺伝子の中に第3の原因遺伝子が存在する可能性を考え、BRCA2に注目し酵母のTwo-hybrid法によりこの遺伝子産物に特異的に結合する標的蛋白の検出を試み、さらに単離されたBRCA2結合分子については遺伝性乳癌の原因遺伝子である可能性を検討した。すでにBRCA2との結合を報告したRAD51遺伝子は、組織別発現パターンがBRCA2と極めて類似していることなどから遺伝性乳癌の原因遺伝子である可能性が強く、乳癌家系における胚細胞遺伝子変異のスクリーニングを行った。その結果、2例の同時性両側性乳癌患者にコドン150のアミノ酸置換を同定し、一般乳癌、大腸癌300例の解析でこの変化が認められなかったことより発癌の原因となる遺伝子変異と考えられた。また、C端領域(コドン3119-3418)に結合する候補として乳癌発生に関与するAmphiphysinおよびBIN1と高度の相同性を認める分子が単離されBRAP1とした。ゲノム構造を決定し乳癌組織、および乳癌家系においてそれぞれ体細胞変異、胚細胞変異の解析を行い変異は同定されなかったが、各種ヒト癌細胞株における発現を検討した結果、乳癌細胞株、膵臓癌細胞株において高頻度にその低下が認められ、これら臓器の発癌機構に関わる遺伝子として解析を進めている。RAD51遺伝子が一部の両側性乳癌の原因遺伝子である可能性を示したが、遺伝性乳癌の約40%はまだ原因遺伝子不明であり、さらに重要な責任遺伝子の単離が必要と考えている。遺伝性乳癌の約60%はBRCA1、あるいはBRCA2遺伝子の変異により発生すると推測されている。日本人家族性乳癌家系78例の検討では、BRCA1、あるいはBRCA2遺伝子の異常により発生するものは約40%程度と欧米に比較すると低頻度であることを報告したが、これらの結果は第3の原因遺伝子が存在する可能性を強く示唆するものである。この原因遺伝子がBRCA1、あるいはBRCA2の関連遺伝子の中に存在する可能性を考え、酵母のTwo-hybrid法によりBRCA2,遺伝子産物に結合するタンパク質の同定を試みた。さらに単離されたBRCA2結合分子については遺伝性乳癌の原因遺伝子である可能性を検討するために、遺伝性乳癌家系における遺伝子変異のスクリーニングを行った。このBRCA2結合分子の単離はBRCA2の機能解析にもつながるものである。N端付近の領域1からRNApolymeraseIIのelongation factorであるELL1、ELL2、およびELL1、ELL2に相同性を示す新規遺伝子を単離した。また、C端付近の領域8では、PPAR-γが、領域2では、CAF-1のp150subunitが結合候補遺伝子として同定された。すでにBRCA2,とのinteractionを報告したRAD51遺伝子は、組織発現パターンがBRCA2ときわめて類似していることなどから遺伝性乳癌の原因遺伝子である可能性が強く、エクソン-イントロン境界領域を含むゲノム構造を決定し、遺伝性乳癌家系での胚細胞遺伝子変異のスクリーニングを行った。2例の同時性両側性乳癌患者にコドン150のアミノ酸置換を同定し、約300例の解析でこの変化がこの2症例以外認められないことから発癌の原因となる遺伝子変異と考えられた。

BRCA1、BRCA2の関連遺伝子の中に第3の原因遺伝子が存在する可能性を考え、BRCA2に注目し酵母のTwo-hybrid法によりこの遺伝子産物に特異的に結合する標的蛋白の検出を試み、さらに単離されたBRCA2結合分子については遺伝性乳癌の原因遺伝子である可能性を検討した。すでにBRCA2との結合を報告したRAD51遺伝子は、組織別発現パターンがBRCA1と極めて類似していることなどから遺伝性乳癌の原因遺伝子である可能性が強く、乳癌家系における胚細胞遺伝子変異のスクリーニングを行った。その結果、2例の同時性両側性乳癌患者にコドン150のアミノ酸置換を同定し、一般乳癌、大腸癌300例の解析でこの変化が認められなかったことより発癌の原因となる遺伝子変異と考えられた。また、C端領域(コドン3119-3418)に結合する候補として乳癌発生に関与するAmphiphysinおよびBIN1と高度の相同性を認める分子が単離されBRAP1とした。ゲノム構造を決定し乳癌組織、および乳癌家系においてそれぞれ体細胞変異、胚細胞変異の解析を行い変異は同定されなかったが、各種ヒト癌細胞株における発現を検討した結果、乳癌細胞株、膵臓癌細胞株において高頻度にその低下が認められ、これら臓器の発癌機構に関わる遺伝子として解析を進めている。RAD51遺伝子が一部の両側性乳癌の原因遺伝子である可能性を示したが、遺伝性乳癌の約40%はまだ原因遺伝子不明であり、さらに重要な責任遺伝子の単離が必要と考えている。
細胞内で内在性遺伝子の発現を促進する人工転写因子の開発

水溶性の向上と低分子化を実現したレンチノロール類縁体の合成に成功した。転写活性化能を有する化合物10を合成し、ストレプトアビジン-ビオチン系の転写活性化アッセイによってこの化合物をアッセイした。その結果、この系ではこれらの化合物が転写の活性化をしないことがわかった。デキサメタゾン-コルチコイドレセプター系を用いて、化合物10の転写活性化能を調べた。この系でも化合物10は転写を活性化しない事がわかった。本研究では細胞内で内在性遺伝子の転写を促進させることのできる小分子人工転写因子の開発を目的としてレンチノロールの改良、および小分子転写活性化ドメインの組み合わせによる転写促進活性の増強を試みた。はじめに、転写促進活性と細胞膜透過性を改善した化合物の開発を目的として新たに6種類のレンチノロール類縁体の合成を試みた。具体的には、分子サイズの縮小と細胞内標的分子への選択性の増加を指向して、主にレンチノロールの分子内にあるアダマンタン基をより小さいアルキル基に置換した化合物を合成した。これらの化合物の細胞膜透過性を評価するために細胞毒性を測定した。その結果、アダマンタン基をトシル基に置換した類縁体にレンチノロールと匹敵するぐらいの高い細胞毒性を有することがわかった。さら、細胞内標的分子であるSur2への結合を評価するために、この類縁体とビオチンの結合化合物を合成した。現在、申請者らが以前に確立した細胞内の転写活性化試験を用いて、この結合化合物の転写活性化能を検討中である。レンチノロールと他グループが開発した転写活性化化合物を組み合わせることにより転写促進活性が増強されるかどうかを調べることを目的としてMappらが報告したイソキサゾリジン骨格を有する化合物(Buhrlage et al. 2009. ACS Chem.Biol.)を論文に従い合成した。現在、この化合物と上記のレンチノロール類縁体の相加効果が見られるかを検討するためのアッセイ系の最適化に取り組んでいる。前年度までに、転写促進活性と細胞膜透過性を改善した化合物の開発を目的として新たに6種類のレンチノロール類縁体の合成を完了した。さらに、これらの化合物の細胞膜透過性を評価するために細胞毒性を測定し、アダマンタン基をトシル基に置換した類縁体にレンチノロールと匹敵する細胞毒性を見出した。本年度は、細胞内標的分子であるSur2への結合を評価するために、この類縁体とビオチンの結合化合物を合成した。さらに、申請者らが以前に確立した細胞内の転写活性化試験を用いて、この結合化合物の転写活性化能を検討中した。しかしながら、本研究で見出した類縁体は細胞内で転写を活性化することは無かった。また、前年度までに合成を完了しているイソキサゾリジン骨格を有する化合物の細胞内の転写の活性化能を調べた。残念なことに、このすでに論文に転写活性化能が報告されている化合物においても、報告どおりの転写活性化能を見出すことができなかった。これらの事実から、申請者の行っている実験条件に問題があるのでないか?と考え、このアッセイ系が本当に機能しているかどうか確かめた。具体的にはポジティブコントロールとして転写因子を発現するプラスミドを用いてアッセイを行った。このプラスミドはきちんとした結果を与えたことから、アッセイ系には問題が無いことがわかった。