hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
北太平洋長期淡水化の随伴逆探索による原因解明

海洋データ同化システムにより作成した海洋モデル・観測統合データの解析から、北太平洋亜熱帯循環の広い範囲で数10年規模の淡水化トレンドが見られ、特に東北沖の黒潮、親潮混合域でその傾向が大きいことが明らかとなった。また、アジョイントモデルを用いた水塊逆追跡の結果などから、上記混合域で淡水化した海水が、黒潮に移流された後、東経160度付近の亜熱帯循環の副循環に取り込まれることにより、亜熱帯循環全体の淡水化を生じていることが示唆された。1気象研究所所有の海洋データ同化システムによる19502007年までの長期再現実験結果(モデル・観測統合データ)を用いて、淡水化の検出を北太平洋で行った。淡水化(あるいは海域によっては高塩分化)の空間分布を把握した。特に、北太平洋の中層(深度800m付近を中心とする層)での淡水化に伴う水塊の水平分布は、亜熱帯循環の中にいくつかの流れの筋を示唆する結果が得られた。21.の分布から、東北沖あたりが淡水化の起源域に近いことがわかったため、モデル・観測統合データを用いて、亜熱帯系の黒潮水(高温高塩分)と亜寒帯系の親潮水(低温低塩分)との混合の比率、及びその海域での塩分流量の収支を求めて、淡水化への混合過程の影響を評価した。東北沖で親潮と黒潮の混合の比率が長期間にわたり変化しているために淡水化が北太平洋の中層で進行していることがわかった。また、淡水化に対する大気からの外力の各要素の寄与を評価する予定であったが、現在の海洋数値モデルの計算結果を解析してみると、淡水化のシグナルを求めるには中層の塩分場の再現性の精度が不足していることがわかり、この実験は中止することにした。そのため、次年度は、1.と2.前半の成果のまとめ及び、次の3.の実験に集中する。32.の成果から東北沖での黒潮・親潮混合域での混合比率に淡水化のシグナルが現れているため、その伝播と原因を明らかにするために、データ同化手法で用いられる随伴モデルの開発に着手した。この随伴モデルは、時間を遡って現象の原因がどの海域にあるか(随伴逆探索)という情報を得ることができ、次年度以降の逆探索実験で用いる基礎ができた。気象研究所海洋データ同化システムによる再解析データの解析から、北太平洋の亜熱帯域に広く分布する北太平洋中層水(NPIW)に低塩化トレンドが見られることが明らかになり、特に日本東方の親潮・黒潮混合域でそのトレンドが大きいことがわかった。この海域へ流入、流出する海水と塩分の収支を解析したところ、黒潮の流入量が長期的に減少していることが、この低塩化トレンドの主な原因になっていることがわかった。また、日本南岸でのNPIWの低塩化と親潮・黒潮混合域の関連を調べるため、アジョイントモデルを用いて、海水粒子の移動を、時間をさかのぼって追跡する解析を行った。粒子の一部は、亜熱帯循環内部の流れをさかのぼりゆっくり北東方向へ移動した後、黒潮続流域で頻繁に発生する傾圧不安定擾乱に伴い、黒潮続流を南から北へと横切ることがわかった。計算の結果、日本南岸のNPIW付近に分布していた粒子の510%が、10年前には黒潮・親潮混合域に存在していた。また、一部の粒子については、さらに親潮や津軽暖流に運ばれ、噴火湾、オホーツク海、ベーリング海、日本海まで達していた。この結果から、日本東方沖での低塩化トレンドが黒潮続流を南に横切って10年程度で日本南岸に達するという経路により、少なくても日本南岸の低塩化トレンドの30%程度が説明されることが示唆された。のこりの70%程度については、より時間をかけて、黒潮続流が消滅する北太平洋東部まで大きく迂回して日本南岸まで到達する経路も考えられるが、モデルの渦表現が不十分であるために、黒潮を横切る粒子の量が過小評価されている可能性もあり、今後、より高解像度のモデルによる調査が必要である。昨年度までの研究で、北太平洋の亜熱帯域に広く分布する北太平洋中層水(NPIW)に低塩化トレンドが見られることが明らかになり、特に日本東方の親潮・黒潮混合域でそのトレンドが大きく、この海域への黒潮の流入量の長期的な減少が、その原因であることがわかった。また、日本南岸のNPIWの低塩化は、親潮・黒潮混合域内の低塩化した水塊が、この海域に到達するためと考えられる。そこで、昨年度後半より、水塊が到達するまでのルートを明らかにするため、アジョイントモデルを用いて、海水粒子の軌跡に関する解析を開始した。特に、本年度は、アジョイントモデルの計算結果と、通常の移流拡散モデルの計算結果を組み合わせることにより、ある過去の時刻にある海域内を出発し、ある未来の時刻にある特定の海域に到達粒子の軌跡を確率密度分布で算出する方法を開発し、日本南岸のNPIWのうち、10年前に北緯37.5度以北、塩分34.0以下の亜寒帯域にいた水塊の軌跡を解析した。

その結果、上記の水塊は、主に、オホーツク海、もしくは、ベーリング海を起源とし、親潮に移流され、クリル諸島、及び、日本の東岸を南下し、その後、黒潮により東へと移流されるが、主に東経160度のシャツキライズ付近で、傾圧不安定に伴い、黒潮の流れから南にそれ、今度は再循環流にのって、日本の南岸まで到達していることがわかった。上記の解析により、低塩分水が、親潮から黒潮を横切りNPIWに到達するルートが明らかになった。また、到達までの時間が10年程度であることから、親潮・黒潮混合域での低塩化の影響が比較的早く(およそ10年程度)、日本の南岸にまで及ぶごとが示された。
チューイングによるストレス性骨粗鬆症進行抑制機構の賦活

老化促進モデルマウスSAMP8を用いて、咀嚼運動(チューイング)によるストレス性骨粗鬆症の改善効果を解析した。対照群に比べ、ストレス群では、血中ストレスホルモンが上昇し、骨形成の抑制と骨吸収の促進による骨量が有意に低下した。ストレス群に比べ、チューイング群では血中ストレスホルモン量および骨形成と骨吸収の動的バランスが改善され、骨量がある程度回復した。これらの結果より、ストレスは骨リモデリングに悪影響を与え骨形成の抑制と骨吸収の促進により骨量が低下し骨粗鬆症に陥る。チューイングが神経系におけるストレス反応を緩和し、骨形成と骨吸収を改善し、ストレス性骨粗鬆症の進行を抑制しているものと考えられる。2012年度はストレス条件下でチューイングさせたマウス(チューイング群)とチューイングさせなかったマウス(ストレス群)における骨形成と骨吸収のパラメーターの定量解析を行い、またストレスと交感神経の関連因子についての定量的分析を行った。無処置の対照群に比較して、ストレス群では骨形成パラメーターである骨芽細胞数、骨芽細胞面、骨形成速度、血中オステオカルシン濃度は有意に低下し、骨吸収パラメーターであるTRAP陽性破骨細胞数、破骨細胞面、血中I型コラーゲン架橋N-テロペプチド濃度は有意に上昇した。一方、チューイング群の骨形成パラメーターはストレス群に比し有意な高値を示し、骨吸収パラメーターは有意な低値を示した。ストレス群の血中コルチコステロンとノルエピネフリン濃度は対照群に比較して、有意に上昇した。チューイング群の血中コルチコステロンとノルエピネフリン濃度はストレス群に比し有意な低値を示した。以上の結果から、5週間の慢性ストレスをかけると、交感神経系、視床下部-下垂体-副腎系が活性化され骨形成の抑制と骨吸収の促進により骨量が低下し骨粗鬆症に陥る。ストレス負荷中のチューイングによりストレスが緩和され、骨形成と骨吸収の動的バランスが改善され性骨粗鬆症の抑制につながっているものと考えられる。自発的な咀嚼運動(チューイング)による慢性ストレス性骨粗鬆症の改善効果を解析した。ストレス条件下でチューイングさせたマウスとチューイングさせなかったマウスにおける骨の三次元画像解析、骨代謝マーカーの測定、ストレス関連因子の分析を実施し、以下の結果を得た。1.無処置の対照群に比較して、ストレス群では、(1)大腿骨と腰椎の骨量、骨梁幅、骨梁数が有意に低下し、骨梁間隙が有意に増加した。(2)骨芽細胞数、骨芽細胞面、骨形成速度および血中オステオカルシン濃度が有意に低下した。(3) TRAP陽性破骨細胞数、破骨細胞面、血中I型コラーゲン架橋Nーテロペプチド濃度が有意に上昇した。(4)副腎重量が有意に上昇し、血中コルチコステロンとノルエピネフリン濃度が有意に上昇した。2.ストレス群に比較して、チューイング群では、(1)大腿骨と腰椎の骨量、骨梁幅、骨梁数が有意な高値を示し、骨梁間隙が有意な定値を示した。(2)骨芽細胞数、骨芽細胞面、骨形成速度および血中オステオカルシン濃度が有意に増加した。(3) TRAP陽性破骨細胞数、破骨細胞面、血中I型コラーゲン架橋Nーテロペプチド濃度が有意に低下した。(4)副腎重量が有意に減少し、血中コルチコステロンとノルエピネフリン濃度が有意に低下した。これらの結果より、慢性ストレスにおいて、視床下部-下垂体-副腎系および交感神経系が過剰に活動し、骨リモデリングに悪影響を与え骨形成の抑制と骨吸収の促進により骨量が低下し骨粗鬆症に陥る。チューイングが神経系におけるストレス反応を緩和し、骨形成の抑制と骨吸収の促進を改善し、ストレス性骨粗鬆症の進行を抑制しているものと考えられる。2011年度はストレス条件下でチューイングさせたマウス(チューイング群)とチューイングさせなかったマウス(ストレス群)の大腿骨と腰椎をX線マイクロCTにより観察し、骨形態計測パラメータを三次元画像解析法により定量的に分析した。ストレス負荷群の大腿骨と腰椎の骨量は対照マウス群に比較して有意に低下した。一方、チューイング群の骨量はストレス群に比し有意な高値を示した。以上の結果から、ストレス負荷中のチューイングはストレス性骨粗鬆症を抑制することが示唆された。おおむね研究計画の通り順調に進展している。2013年度は研究計画の通りに、骨の微細構造の解析を行い、全ての実験データを総合的に分析する。

本研究結果を学会発表するとともに学術雑誌に投稿する予定である。今年度は研究計画の通りに、ストレス関連分子の解析、および骨の微細構造の解析を行う予定である。主に顕微鏡解析用器具・試薬の購入、学会発表のための旅費、論文投稿費用などに使用予定である。主にストレス関連分子解析用試薬、顕微鏡解析用器具・試薬の購入、学会発表のための旅費などに使用予定である。
選択的オートファジーにおけるユビキチン様蛋白質Atg8の役割

オートファジーは、細胞が限られた栄養条件下を生き抜くために必須の応答機構である。オートファジーが誘導されると、オートファゴソームと呼ばれる二重膜構造が細胞質成分を包み込み、それらをリソソーム/液胞といった分解コンパートメントに輸送し分解する。オートファゴソームによる包み込みは基本的に非選択的であるが、近年、特定の蛋白質やオルガネラを選択的に取り込むタイプのオートファジーが複数例報告され、注目を集めている。しかし、その分子機構についてはほとんど明らかとなっていない。本研究では、出芽酵母をモデル生物として、オートファゴソーム形成に必要なAtg8というユビキチン様蛋白質に着目し、オートファゴソームへの"積荷"の選択的取り込み機構を明らかにすることを目的とした。構造生物学的解析および系統的変異解析から、オートファゴソームに選択的に取り込まれる積荷である酵母のアミノペプチダーゼI(API)の受容体蛋白質であるAtg19とAtg8との相互作用を原子レベルで明らかにし、さらにその相互作用様式がヒトを含む高等真核生物にまで保存されていることを示す結果を得ることができた。本研究では、出芽酵母をモデル生物として、オートファゴソーム形成に必要である、Atg8というユビキチン様蛋白質に着目し、オートファゴソームへの"積荷"の選択的取り込み機構を分子レベルで明らかにすることを目的とする。酵母のアミノペプチダーゼI(API)は、Atg19受容体蛋白質と結合し、オートファゴソームに選択的に取り込まれる積荷である。一方、Atg8はオートファゴソーム膜に局在し、Atg19と相互作用することから、オートファゴソームへのAPIの選択的取り込みに関与する可能性が示唆されている。申請者は、Atg8にAtg19との相互作用に重要な部位を同定した。この部位は、ヒトに至るまで完全に保存されており、種を越えて様々な選択的オートファジーに機能している可能性が考えられる。本年度は、Atg8とAtg19との相互作用様式に関して、in vitroで詳細に調べるため、Atg19およびそのホモログであるYol083w(積荷は明らかとなっていない)の大腸菌での発現・精製系を確立した。今後これら精製標品を用いて具体的な解析を進めていく予定である。
アルク転座肺癌の臨床病理学的特徴および分子病理学的特徴の解明

ALK転座肺癌に注目し、EML4-ALK肺癌の検出方法、新たなvariantの検出、臨床病理学的特徴・遺伝子学的特徴の解析、他のALK転座肺癌の検出を試みた。cDNAスクリーニング法やmultiplexRT-PCR系の構築などにより、あらたなEML4-ALKvariantを発見した。EML4-ALK肺癌の臨床病理学的特徴は若年者発症、非・軽度喫煙者、TTF-1陽性celllineage、acinarstructurewithmucinが特徴の中低分化腺癌であった。遺伝子学的にはEGFR変異、KRASと相互排他的であった。また新規の高感度免疫染色法を開発することにより、新たなEML4-ALKvariantや新たな転座遺伝子KIF5B-ALKを発見した。現在、癌の薬物療法は分子標的治療薬へと移行しつっあり、最近の肺癌研究の大きな発見はEGFR変異とGefitinibに関するものである。EGFR変異を有する肺癌は分子標的治療薬であるGefitinibが有効で、治療に直結する大きな発見であった。その後、EGFR変異を有するものの特徴的な臨床所見および病理組織像が明らかになってきた。これは肺癌の個別化の大きな一歩であり、遺伝子変異の有無、臨床病理学的所見により治療有効性の有無が判明し、臨床的にも大きな貢献を果たすこととなるに違いない。2007年の8月、肺非小細胞癌の一部はEML4-ALKという染色体転座を有していることがNature誌に発表(Soda et al.Nature 2007)され話題となった。EML4-ALK転座肺癌は非常に強い癌原性を持つALKが活性化状態にあるため、活性化したALKを抑制する分子標的治療薬に高感受性であることが期待されている。このように発癌メカニズムがわかると、その発癌経路を標的とした治療が可能となるため、臨床的にも非常に重要である。
アディポネクチン産生細胞シートを用いた心不全治療法の開発

我々は、脂肪組織由来間葉系幹細胞から脂肪細胞への分化を誘導することで、アディポネクチン産生細胞シートを開発した。本シートはアディポネクチンや肝細胞増殖因子(HGF)などの心筋保護因子の産生能を有し、T細胞性自己免疫を主病態とするラット自己免疫性心筋炎においてCD4陽性エフェクターT細胞/ CD68陽性マクロファージの減少による免疫抑制効果、Foxp3陽性制御性T細胞による免疫寛容を誘導し、心筋炎の進展を抑制した。以上の事からアディポネクチン産生シートが、予後不良な劇症型心筋炎において有効な治療法となる可能性が示唆され、そのような点で本研究の社会的意義・貢献は大きいと考えられる。本研究ではアディポネクチンの障害心筋への直接的なDelivery法としてアディポネクチンを心筋組織に長期的に供給する新しいアディポネクチン(APN)産生シートを開発、ヒト劇症型心筋症の動物モデルである自己免疫性心筋炎ラットにおけるAPN産生シートの有用性を検討した。APN産生シートは多量のアディポネクチンだけでなく、VEGF,HGFを産生する特徴を有し、in vivoの心臓生理学的評価ではAPN産生シート群ではSham群に比しSystolic functionが有意に改善(APN産生シート群vs.Sham群EF(%):52.9±1.08vs.432±1.34)、また病理組織学的検討では心筋炎の重症度の指標である炎症細胞浸潤・心筋症の進展の指標である心筋線維化を抑制した。それらの機序としては心筋炎・心筋症誘導因子であるTh1サイトカイン(IFNγ,IL2)の産生抑制、Th2サイトカイン(IL10,IL6)の産生促進、profibrotic cytokine(TGFβ,TIMP1)の産生抑制、inflammatory cytokine(TNFα,MCP1)の産生抑制が関与、APN産生シートではSham群に比し心筋炎急性期の21日目においてアディポネクチン,VEGF及びHGFなどの心保護因子を有意に心筋組織に供給した事から、これらのパラクライン効果によるものと考えられた。以上の事からAPN産生シートが、予後不良な劇症型心筋炎において有効な治療法となる可能性が示唆され、そのような点で本研究の社会的意義・貢献は大きいと考えられる。これまでの検討において、脂肪由来前駆細胞から人工的に分化誘導したアディポネクチン産生シートがラット実験的自己免疫性心筋炎モデルにおいて、急性期の炎症および免疫抑制効果、慢性期の線維化抑制効果を介して心筋炎の進展を抑制することを確認した。細胞シートから産生されるアディポネクチン、HGF、VEGFのパラクライン効果がその主要な機序と考えられた。また分化誘導を行っていない脂肪由来前駆細胞から作成した細胞シート(脂肪由来前駆細胞シート)はIN VITROにおいてアディポネクチン産生能を認めなかった。さらにIN VIVOにて分化誘導を行ったアディポネクチン産生シートが脂肪由来前駆細胞シートに比し自己免疫性心筋炎ラットの進展を有意に抑制することを確認した。本年度はラット実験的自己免疫性心筋炎の進展において中心的役割を果たすCD4陽性T細胞に対するアディポネクチンおよびアディポネクチン、HGF、VEGFを含有するシート産生サイトカインの効果を検証した。自己免疫性心筋炎を導入したラット脾臓よりCD4陽性T細胞および樹状細胞を単離後、共培養を行った。特異的抗原刺激にてCD4陽性T細胞の活性化を認めるも、アディポネクチンおよびシート産生サイトカイン存在下ではT細胞活性化が有意に抑制された。またT細胞産生サイトカイン(IFNr・IL17)の減少も確認した。以上よりアディポネクチンおよびシート産生サイトカインが直接的にCD4陽性T細胞免疫を制御する可能性が示唆された。
超疎水性高分子表面の創製と機能発現

複合材料ならびに生体材料において表面・界面は重要な役割を果たしている。従って,界面・表面の制御は重要な研究課題であり,表面・界面自由エネルギーは重要なパラメーターとして,高エネルギー化を目指した数多くの研究がなされている。しかしながら一方,生体適合性を考える上でも,また,剥離・非汚染性の上でも,表面・界面自由エネルギーを低下させることは重要である。表面・界面自由エネルギーは負の値になることはないので,低エネルギー化の極限の姿はOerg/cm2である。一方,実際の材料おいてはポリテトラフルオロエチレン(PTFE)の18erg/cm2が報告されている。また,-CF3を利用すれば6erg/cm2まで低下すると言う推定がなされている。そこで本研究においてはPTFEを越える超低表面エネルギー,言い換えれば超疎水性,超撥水・撥油性高分子表面の創製を目的として研究を行った。低エネルギー化に当たって,具体的には2つのアプローチを試みた。・パ-フルオロ高分子のブレンドによる低エネルギー化・フッ素化試薬による低エネルギー化対象としては,ポリメタクリル酸メチル(PMMA),ポリビニルアルコール(PVA),ポリエチレンテレフタレート(PET)を取り上げた。その結果,PVAの表面をフッ素化試薬で修飾することにより,表面自由エネルギーは16erg/cm2となり,元来親水性である高分子の表面の疎水化に対して本手法が有効であることを示すことができた。PMMAに対しては,わずか1%のパ-フルオロ高分子をブレンドするだけで表面自由エネルギーは16erg/cm2となり,PTFEを越える低自由エネルギー表面を得ることに成功した。この際,PMMAとしての優れた光透明性,力学特性性を損なうことなく超疎水性が付与できたことから,眼内レンズなどのバイオマテリアルへの展開の道を開くことができた。
ベイズ統計学の予測理論としての再構築とその応用

ベイズ統計学において必要となる事前分布を,条件付相互情報量と呼ばれる量を最大化することにより構成する研究を行った.特に,統計的検定の問題を,帰無仮説を0,対立仮説を1として,0であるのか1であるのかを予測する問題として定式化し,ベイズ予測の理論の枠組みから研究を行った.従来のベイズ検定で自然とされ想定されていた対立仮説に関する事前分布の枠に当てはまらない事前分布が自然に現れることを示した.さらに,計算統計学的な手法として,条件付き相互情報量を最大化することにより事前分布を構成するアルゴリズムの開発研究を行った.ベイズ統計学において必要となる事前分布を,条件付相互情報量と呼ばれる量を最大化することにより構成する研究を行った.特に,統計的検定の問題を,帰無仮説を0,対立仮説を1として,0であるのか1であるのかを予測する問題として定式化し,ベイズ予測の理論の枠組みから研究を行った.従来のベイズ検定で自然とされ想定されていた対立仮説に関する事前分布の枠に当てはまらない事前分布が自然に現れることを示した.さらに,計算統計学的な手法として,条件付き相互情報量を最大化することにより事前分布を構成するアルゴリズムの開発研究を行った.ベイズ予測においては,Fisher情報行列に基づく計量(Fisher-Rao計量)とそれに基づく体積要素であるJeffreys事前分布が基本的な役割を果たすことが従来の研究により知られていた.本研究では,観測される確率変数の確率分布と予測する確率変数の確率分布が,同じパラメータをもつ異なる統計モデルに属するときのベイズ予測では,従来知られていたFisher情報行列に基づく計量とは異なる新しい計量構造が自然な役割を果たすことを発見した.この設定は統計学においては,回帰モデルなどでしばしば現れる自然なものである.新しい計量をもつリーマン多様体に基づく考察により,従来知られていなかった性能の良いベイズ予測・推測を構成することが可能となった.統計的検定の問題を,帰無仮説を0,対立仮説を1として,0であるのか1であるのかを予測する問題として定式化し,ベイズ予測の理論の枠組みから考察を行った.従来ベイズ検定で自然とされ想定されていた対立仮説に関する事前分布の枠に当てはまらない事前分布がミニマックス予測の観点から自然に現れることを示した.事前分布は,従来想定されていた,単峰型や一様分布型とは異なり,特異な分布となる.また,この方法により求められる仮説の事後確率と,従来のベイズ検定による事後確率,さらに頻度法によるp値とを比較検討した.また,事前分布を構成するアルゴリズムの開発研究を行った.観測される確率変数の確率分布と予測する確率変数の確率分布が,同じパラメータをもつ異なる統計モデルに属するとき,ベイズ予測の漸近理論に関して,従来知られていたFisher情報行列に基づく計量とは異なる計量が自然な役割を果たすこと本研究で明らかにしている.この設定により,回帰分析などの応用上重要な問題を扱うことが可能になる.この結果を多変量ポアソン分布の予測問題に適用し,その有限サンプルにおける性質を調べた.観測されるデータと予測する量が,同じパラメータを持つある異なる多変量ポアソン分布にしたがう問題において,新しい計量に基づく優調和関数に基づく事前分布を構成した.この事前分布に基づくベイズ予測・推定が従来の方法に比べ,より良い性能をもつことを証明した.観測される確率変数の確率分布と予測する確率変数の確率分布が,同じパラメータをもつ異なる統計モデルに属するとき,ベイズ予測に関して,従来知られていたFisher情報行列に基づく計量とは異なる計量が自然な役割を果たすことを発見した.これは当初の研究計画では予想していなかったことであり,当初の計画以上の進展といえる.25年度が最終年度であるため、記入しない。観測される確率変数の確率分布と予測する確率変数の確率分布が,同じパラメータをもつ異なる統計モデルに属するとき,ベイズ予測の漸近理論に関して,従来知られていたFisher情報行列に基づく計量とは異なる計量が自然な役割を果たすこと本研究で明らかにしている.これを用いて,多変量ポアソン分布の場合に,有限サンプルの場合に理論の有効性を示した.これは,研究の順調な進展といえる.本研究で明らかになった,新しい計量構造に基づく情報幾何学的なアプローチにより,具体的な問題について,従来の手法よりも優れた推測・予測手法に関する研究・開発を進めて行く.25年度が最終年度であるため、記入しない。新しい計量構造に基づく情報幾何学的アプローチにより,他の具体的な問題について,従来の手法よりも優れた推測・予測手法に関する研究・開発を進めて行く.また条件付相互情報量に基づくベイズ理論の再構築の研究を進める.
ルネサンス詩学と王朝歌学に見られる模倣理論の比較文化史

ルネサンス詩学は,「模倣理論」を展開する中で,キケロ主義に基づく修辞学と韻律論を発展・変容させることにより,イタリアやフランスのネオ・ラテン及び俗語詩論に新たな表現原理を導き出した。一方,王朝歌学に於いても,漢語の詩学を選択的に導入することにより,大和言葉の詩学を構成し,「学問の移動」という周辺文化のシステムとしての「模倣理論」を有していたことにルネサンス詩学との共通性が認められる。ローマ大学の修辞学教授マルク=アントワーヌ・ミュレは,プレイヤード派の詩学に示唆を与え,1572年「開講演説」に於いては,キケロ主義の模倣理論に批判を加え,折衷主義的な「新・キケロ主義」へと端緒を開いた。それは,トレント公会議体制下で,イエズス会ローマ学院の修辞学にも応用され,「キケロの模倣」に対する「キリストの模倣」の優位性が,ペドロ・フアン・ペルピーニャ『講演集十八篇』のオラツィオ・トルセリーノによる序文でも主張されている。ウェルギリウスを扱った「開講演説」では,アリストテレスに基づくミメーシスとしての模倣理論を論じており,「文学的模倣」の基盤として,人間の本性に根差した「自然の模倣」を追求している。イエズス会巡察使ヴァリニャーノは,1583年『日本諸事要録』に於いて,キケロ及び異教の詩によるラテン語の教授を制限しており,これは,トレント公会議体制下のローマの修辞学に於ける「新・キケロ主義」の日本への波及であると捉えられる。ミュレとヴァリニャーノの間には,キリスト教的修辞学思想が共有されており,東西文化交流史の中で,連動した文学史が構成されている。紀貫之の『新撰和歌』序に於ける「花實相兼」は,『古今集』に見られる六朝風艶情詩様式の和歌に対抗する「模倣理論」であり,ペトラルキスムを巡るルネサンス詩学の「模倣理論」との平行関係が想定できる。1、ルネサンスの人文主義の中で形成された詩学は、キケロ主義的な古典修辞学及び韻律論の伝統と、イタリアやフランスの俗語詩論(vernacular poetics)を発展・変容させて、「模倣理論」(imitatio)によるネオ・ラテン及び母国語の新たな表現原理を導き出した。2、1572年、ローマ大学の修辞学担当教授となったマルク=アントワーヌ・ミュレ(Marc-Antoine Muret,1526-1585)は、それまで本国のフランスではプレイヤード派の詩学に示唆を与えてきたが、その年度の開講演説に於いてキケロ主義の模倣理論を批判することにより新キケロ主義へと端緒を開き、トレント公会議後(1563年終結)のローマ教皇庁及びイエズス会の修辞学にも影響を与えている。1579年の唯一ウェルギリウスを扱った開講演説に於いては、主にアリストテレスに基づいたミメーシスとしての模倣理論について論じており、「文学的模倣」(literary imitation)の基盤として人間の本性に基づく「自然の模倣」(imitation of nature)に関しても追求していることが窺える。3、1560年代よりイエズス会のローマ学院に於いて検討され始めたラテン語文法・修辞学・人文学の教育方法は、1580年代に編纂作業が加速され、1599年にそのRatio studiorum決定版が出版されたが、ローマ大学でギリシア語とラテン語の平行授業を行なっていたミュレの教育法が1586年に参照されている。

4、日本では、1580年に巡察使ヴァリニャーノによって「神学校内規」(Regimento que se ha de guardar nossemynarios)が発令され、ラテン語の教育法が示されたが、模倣理論については、『こんてむつすむん地』に於いてキリストの模倣という宗教的文脈の中で伝播している。1.イエズス不会巡察使ヴァリニャーノは、1583年『日本諸事要録』に於いて、キケロ、及び、異教の詩によるラテン語の教授を制限しているが、これは、「適応主義」に基づいたものという以上に、トレント公会議体制下のローマの修辞学(rhetorique post-tridentine)に見られる「新・キケロ主義」(neo-ciceronianisme)の日本への波及であると捉えられる。2.1588年、トリノで出版されたペドロ・ファン・ペルピーニヤ(1530-1566)の『講演集十八篇』(Orationes duodeviginti)は、『日本使節記』と『マルク=アントワーヌ・ミュレ追悼演説』を含み、オラツィオ・トルセリーノ(1545[44]-1599)による序文の中で、より洗練された文学に対する熱意を持って、ただキケロを模倣する方法だけを学ぶのではなく、敬虔なキリスト教の雄弁の形をも我々[イエズス会]は追求する」旨が記されている。3.ローマ大学の修辞学担当教授マルク=アントワーヌ・ミュレは、1572年「開講演説」に於いて、狭い意味でのキケロの模倣に批判を加え、折衷主義的な「新・キケロ主義」の発端となったが、ルネサンスの「キケロ主義」の発端となったが、ルネサンスの「キケロ主義論争」の流れの中で、イエズス会ローマ学院の修辞学教育に応用され、「キケロの模倣」(imitatio ciceroniana)に対する「キリストの模倣」(imitatio Christi)の優位性に道を開いたことに特色がある。4.ミュレとヴァリニャーノの間には、トレント公会議体制下のキリスト教的修辞学思想が共有されており、ペルピーニャ等のイエズス会関係資料から、東西文化交流史の中で、連動した文学史が構成されていると考えられる。1.ローマ学院の修辞学教授ファミアノ・ストラーダ(1572-1649)による『ローマ学院開講演説』(Prolusiones Academicae, oratoriae, historicae, poeticae, Roma,1617;Audomari, Apud Carolum Boscardum,1619),第二巻第二及び第三演説(Muretus)に於いて,ローマ学院の修辞学教育の伝統を築いたマルク=アントワーヌ・ミュレ(1526-1585),及び,フランチェスコ・ベンチ(1550[42]-1594)について論じられている。2.ジョヴァンニ・ピエトロ・マッフェイ(1533[38]-1603)の『インド史十六巻』(Historiarum Indicarum libri XVI, Firenze,1558;Lugduni, Ex Officina iunctarum,1589;Histoires desIndes, Lyon, Iean Pillehotte,1603),第十二章に於いて日本に関する記述が見られ,日本語の文章の特徴について触れられている。3.ハビアン『妙貞問答』及び『破提宇子』の比較から,論理学・修辞学に基づいて説明される教義としてのキリスト教に対して,相反する見解が見られることが分かる。これは,日本と西欧の宗教的対立の問題というよりも,言語の表現理論の相違という観点から捉えられる。つまり,西欧の修辞学の方法が,日本では適合し得なかったということである。
長時間着座のための連動型腰椎用持続他動運動装置の開発

長時間着座時の腰痛を緩和するために我々が開発してきた持続受動運動(CPM)装置は椅子の背もたれと座面に可動式エアバッグを設置したものである。一方の縮小時に他方が拡大する連動逆位相型と同時収縮する連動同位相型とがあるが、いずれも健常者では腰痛予防効果は従来型のCPMと比較して、腰痛予防効果は優れている。今回の検証で逆位相型は腰椎・骨盤の動きが大きく同位相型は重心の移動が大きい特徴を有し、両者の腰痛予防機序が異なることが明らかとなった。しかし深部静脈血栓の予防効果や腰痛患者に対する腰痛予防効果は限定的であり、さらなる動作様式の工夫が必要である。1.長時間着座時の腰痛を予防する機器として持続他動運動(Continuous passive motion: CPM)装置を開発してきた。従来型の椅子のLumbar supportにのみ収縮性エアバッグを設置したCPM(単一型)では腰痛予防効果が限定的である。一方、Lumbar supportと座面の両面にCPM装置を設置し両者の動きを連動させた連動型CPMは極めて有効であることを示してきた。本研究では連動型の有効性の根拠となるCPMによる身体の動きを検証した。対象は健常男子学生23人とした。(1)CPMによる全身の動きをX線で計測した。腰椎アライメント(T12-S1前弯角)は立位で平均52±22°であるのに対し、着座により13±21°と前弯が減少した。CPMによる変化量は単一型で10±5°、連動型は13±7°であり、仙骨の傾斜角の変化量はCPMによる変化は単一型で2±14°、連動型は5±9°と両群間に有意差なく僅かに連動型で拡大した。連動型の効果は腰椎や骨盤の動態角差の大きさに依存するものではないことが明らかとなった。(2)上記の予備実験として立位のバランスをX線で評価する際の上肢の肢位の条件に関して検討した。最も上肢自然下垂に近いとされる拳を鎖骨に置く姿勢(fists-on-clavicles)でも、C7 plumb lineは大きく後方へと変位することを示した。脊椎アライメントおよびバランスを評価する際に上肢の肢位の条件設定が重要であることを示した。(3)座面の接触面積の変化量は単一型では23.3±15.7cm^2であったのに対し、連動型は62.1±58.4cm^2と有意に拡大していた。2.腰痛患者を対象とした腰痛予防効果を現在検証中であり、今年度中にデータ解析する。3.深部静脈血栓症の予防効果を検証するために長時間着座前後に採血し、D-dimersや血液粘度などを測定予定である。1.長時間着座時の腰痛を緩和するための持続受動運動(CPM)装置を開発してきた。従来法は背もたれにCPMを装置するもの(腰CPM)であるが、我々は座面にもCPMを設置し一方の縮小時に他方が拡大する連動逆位相型と同時収縮する連動同位相型を開発し、健常人における有効性を確認してきた。今回、連動型CPMの有効性の根拠を明らかとするために、X線計測により姿勢の変化をBig Matにより座面の圧分布の変化を検証した。対象は健常学生13人とした。腰CPMと比較し連動逆位相型では腰椎・骨盤傾斜角度の変化量が有意に大きく、一方で連動同位相型は重心の変位量が有意に大きかった。2.腰痛患者における本装置の有効性を検証した。対象は腰痛患者39人(平均63.9歳,RDQ平均12.0点)とした。連続1時間着座後の腰痛のvisualanalogue score(cm)ではCPMなし(平均5.1)、腰CPM(平均3.4)、連動同位相CPM(平均3.7)、連動逆位相CPM(3.4)であった。逆位相CPMが最も有効であったが、他の稼働条件との有意差はなく、腰痛患者に対する有効性は低いと結論づけた。3.座位脊柱姿勢をX線計測するための基準となる立位脊椎撮像法では至適な上肢肢位の撮像条件が明らかでない。最適な上肢肢位を決定するために健常男子21人を対象として上肢位5条件で立位全脊柱側面像を撮像した。腹部の前で手を組む肢位が最も上肢自然下垂に近く、姿勢の評価に適することが明らかとなった。4.健常学生4人を対象として連動型CPMによる深部静脈血栓症の予防効果を検証した。連続4時間の着座実験後のD-dimerや血液粘度を各種CPMの稼働条件で比較した。
高校における学校体験と20代初めの時点での進路分化-沖縄県における調査研究

本研究は、1994年度に沖縄県内の高校に入学した若者たち約1800名(かつて私は、彼ら/彼女らが高校生だった頃、学校体験、進路意識等について質問紙調査を行っている)を対象にした調査を通じて、沖縄の若者たちの進路分化やその際の意識のあり方等を掴むことを目的としたものである。作業は、(1)統計的調査、(2)インタビュー調査、(3)理論的研究の3つの分野にわたって進められた。(1)については、2001年度末に質問紙を配布し、2002年度前半に質問紙回収から第1次分析までの作業を行った。(2)については、(1)の回答者を学歴及び現在の職業を基準に類型化し、それを踏まえて対象者を選定し、インタビュー調査を実施した。(3)については、イギリスの社会学者A・ギデンズの著書の読解を通じて、「後期モダニティ」の時代において、今回の調査の対象者である若者たちの「自己アイデンティティ」がどのように構成されているか、この時代のグローバル化の進展という情況との関わりの中、「沖縄」というローカリティが彼ら/彼女らの自己アイデンティティの中でどのように意味づけられているのかという、私にとっては新しい分析の視点が得られた。『研究成果報告書』では、主として(1)の結果について、上の第1次分析を発展させた形で報告した。そこでは、回答者である若者たちが、「どのような自己イメージを抱いているか」、「職業生活についてどのような考えをもっているか」、「自分の人生にとってどのようなことを重要なこととして考えているか」、「今現在自分が置かれている状況をどのように見ているか」、「『沖縄』に対してどのような思いを抱いているか」、それら全体から推測される彼ら/彼女らの「自己アイデンティティ」の有り様、性の違いによるそれらの差異、分化した進路の違いによるそれらの差異などについて、得られた知見を提示した。本研究は、1994年度に沖縄県内の高校に入学した若者たち約1800名(かつて私は、彼ら/彼女らが高校生だった頃、学枝体験、進路意識等について質問紙調査を行っている)を対象にした調査を通じて、沖縄の若者たちの進路分化やその際の意識のあり方等を掴むことを目的としたものである。本年度当初の時点では、(1)統計的調査、(2>インタビュー調査、(3)理論的研究の3分野にわたって研究を進める計画を立てていた。実際の研究のプロセスは、必ずしも計画通りには進まなかった。(1)については、上記の対象者に対する新たな質問紙調査の準備を進め発送の段階までこぎ着けた。(2)については、今年度は実施できなかった。(3)については、イギリスの社会学者ギデンズの著書の読解を通じて、当初の時点では予定していなかった、私にとっては新しい分析の視点を得ることができた。ギデンズは、今日の後期近代の時代においてグローバリゼーションが加速化すること、しかしそのことによって人間たちの生活のローカルな次元が消滅するわけではなくその再編がされる(時として、ローカルなものが以前にもまして活性化する場合もある)のであることを指摘している。こうした指摘に触発されて、今回の調査研究の対象者である若者たちにとって、グローバリゼーションの進展という情況との関わりの中、沖縄というローカルがどのように意味づけられているのか、それが彼ら/彼女らの意識や行動をどのように規定しているのか、これらの点をも分析の視点に加えてみようと考えている。(1)の質問紙にも、その視点にもとづく質間項目を設けることができた。また、上記のようなギデンズの見解をも生かした、イギリスの若者研究の成果にも触れることができ、今後そこから得た知見や触発された発想を生かすこともできることと思う。

本研究は、1994年度に沖縄県内の高校に入学した若者たち約1800名(かつて私は、彼ら/彼女らが高校生だった頃、学校体験、進路意識等について質問紙調査を行っている)を対象にした調査を通じて、沖縄の若者たちの進路分化やその際の意識のあり方等を掴むことを目的としたものであった。作業は、(1)統計的調査、(2)インタビュー調査、(3)理論的研究の3つの分野にわたって進められた。(1)については、昨年度末に質問紙を配布し、今年度前半に質問紙回収から分析までの作業、さらに中間報告書の作成を行った(主に、調査に回答してくれて、かつ受領を希望した人たちに送付)。より分析を発展させたものを「研究成果報告書」にて報告する。(2)については、(1)の結果にもとづき(1)の回答者を類型化し、それを踏まえて対象者を選定し、インタビュー調査を実施した。(3)については、イギリスの社会学者ギデンズの著書の読解を通じて、今回の調査研究の対象者である若者たちにとって、グローバル化の進展という情況との関わりの中、沖縄というローカリティがどのように意味づけられているのか、それが彼ら/彼女らの意識や行動をどのように規定しているのかという、私にとっては新しい分析の視点を、昨年度得ることができた。本年度は引き続き、ギデンズ本人の研究、ギデンズについての研究、ギデンズの理論を活用した若者研究に当たり、そこから学んだことを上記(1)(2)に生かしていくことができた。2カ年間にわたる本研究の成果は、今後、後期モダン社会を生きる沖縄の若者たちのアイデンティティの構築・再編のプロセスを、特にそのプロセスにおいて沖縄というローカリティがどのような意味を有しているかに焦点を当てながら、明らかにすることを目的とした新たな研究へとつなげていきたいと考えている。そのための足場となるデータ・視点等を、この2カ年間を通じて獲得することができたと言える。
カベオリン１発現調節による固縮軽減の試み－ラット脊髄虚血モデルにおける検討－

ラット下肢麻痺モデルを作成し神経を成長させる因子であるカベオリンを脊髄神経で多く産生させることで麻痺の改善が得られるか検討を行った。手術は我々が開発した「軟膜下投与法」を実施することで脊髄を傷つけることなく治療を完遂することができた。手術手技を改良し、新たな注入用の機材(新しい針)を開発し報告した。神経細胞上でカベオリンは多く産生され、神経は成長していたが運動は改善しなかった。一過性脊髄虚血後痙性麻痺モデルラットに対するカベオリン1過剰発現による鎮痙効果アデノ随伴ウイルスを用いた遺伝子導入によるCav1の過剰発現による固縮の改善を電気生理学的に検討した.痙性対麻痺モデルの作成:雄性SDラットを空気+イソフルランによる麻酔後, 2F Fogatyカテーテルを左大腿動脈から挿入した(約11cmで胸部下行大動脈へ到達).左内頚動脈から20Gテフロン針を挿入した.Fogatyカテーテルの先端バルーンを膨らませ大動脈を遮断し,同時に左内頚動脈から脱血し低血圧にすることで10分間の脊髄虚血を行った。虚血後麻酔から覚醒させ,数日間観察し,痙性対麻痺を呈したラットを使用した.CAV1過剰発現のためのウイルス注入と鎮痙効果の評価:痙性麻痺をきたしたラットを空気+イソフルランによる麻酔後,顕微鏡下にTh10-11椎弓切除術を施行した.椎弓切除後に硬膜および軟膜を切開した.軟膜切開部位よりポリエチレン性細径カテーテル( PE-5 )を1.0cm尾側に向けて挿入した。経カテーテル的にAAV9-Syn-CAV1を注入した(対照群としてAAV9-Syn-RFP/GFPを用いる).ウイルス注入後はカテーテルを抜去し,閉創した.本年度中に手術法(ウイルス注入方法)に関して以下の通り改良した.手術法の改良:手術に際し、注入用カテーテルで神経障害をきたした経験はなかったものの,より低侵襲な遺伝子導入を目指しポリエチレンPE-5カテーテルよりもさらに細い35G注入針を開発した.(研究協力者とともに論文投稿中)痙性対麻痺の評価:運動機能評価法であるBBB scoreを用いて評価した後,運動誘発電位を用いて痙性の強さと脊髄における電気生理学的状態を評価した.その結果BBBスコアが改善する傾向を示した.一方で運動誘発電位は有意差がなく,さらなる検討が必要な状況である.当初の計画では電気生理学的検討まで終了する予定であったが、生理学的検討が終了していいない.その理由として上に示した通り、手術手技の改良を行いより神経損傷が少ない手術手技を開発したためである。今後は新たな手技により安定した結果がえられる事が期待される.その結果、当該年度は進展がやや遅れていると判断した.痙性対麻痺モデルの作成:雄性SDラットを空気+イソフルランによる麻酔後,2F Fogatyカテーテルを左大腿動脈から挿入した(約11 cmで胸部下行大動脈へ到達).左内頚動脈から20Gテフロン針を挿入した.Fogatyカテーテルの先端バルーンを膨らませ大動脈を遮断し,同時に左内頚動脈から脱血し低血圧にすることで10分間の脊髄虚血を行った。虚血後麻酔から覚醒させ,数日間観察し,痙性対麻痺を呈したラットを使用した.CAV1過剰発現のためのウイルス注入と鎮痙効果の評価:痙性麻痺をきたしたラットを空気+イソフルランによる麻酔後,顕微鏡下にTh10-11椎弓切除術を施行した.椎弓切除後に硬膜および軟膜を切開した.軟膜切開部位より35G注入針を0.5cm尾側に向けて挿入した.経カテーテル的にAAV9-Syn-CAV1を注入した(対照群としてAAV9-Syn-RFP/GFPを用いた).ウイルス注入後は抜去し,閉創した.痙性対麻痺の評価(再現実験):.運動機能評価法であるスコアが改善する傾向を示した.一方で運動誘発電位は有意差がなく,さらなる検討が必要な状況である.痙性対麻痺ラット脊髄におけるCav1の過剰発現による痙性の改善に関する電気生理学的検討に加え,分子生物学的・組織学的検討を行うAAV9-Syn-CAV1によるCav1組織学的変化についての検討:痙性対麻痺ラット脊髄を用い検討した.脊髄虚血後前,虚血後1日,遺伝子導入後7日,遺伝子導入後21日,遺伝子導入後42日で検討した.脊髄凍結切片を用い,Cav1,Synaptphysinを用いて免疫組織染色を施行した.ウイルス投与群において早期から脊髄全体でのCav1の増加を認めた.Synaptpysinの密度増加も合わせて確認することができた.ラット下肢麻痺モデルを作成し神経を成長させる因子であるカベオリンを脊髄神経で多く産生させることで麻痺の改善が得られるか検討を行った。

痙性対麻痺ラット脊髄におけるCav1の過剰発現による痙性の改善に関する電気生理学的検討に加え,分子生物学的・組織学的検討を行うAAV9-Syn-CAV1による組織中でのCav1組織学的変化についての検討:痙性対麻痺ラット脊髄を用い検討する.脊髄虚血後前(n=6),虚血後1日(n=6),遺伝子導入後7日(n=6),遺伝子導入後21日(n=6),遺伝子導入後42日(n=6)で検討を行う.ラットは全身灌流固定後に脊髄を摘出し,凍結切片を作成する.凍結切片を用い,Cav1,Synaptphysin,MAP2各種抗体やNeuN、GFAPとIba1を用いて免疫組織染色を施行する予定である.それぞれの経時変化,局在性を顕微鏡下(蛍光およびレーザー共焦点顕微鏡下)に観察する.AAV9-Syn-CAV1による遺伝子導入によるCav1過剰発現に関する分子生物学的検討:痙性対麻痺ラット脊髄を用い検討する。脊髄虚血後1日,遺伝子導入後7日,遺伝子導入後42日で検討を行う.ラットから新鮮脊髄組織(腰髄膨大部)を採取する.採取した新鮮脊髄組織からmembrane lipid raft上のCav1の量を計測するため,蔗糖密度勾配遠心法でfraction4及び5の分画のCav1の量を定量する計画である.これらの検討により,CAV1による神経軸索伸長促進が痙性麻痺に及ぼす影響を詳細に検討することができると確信している.以上の検討は当施設あるいは協力施設(具体的にはカリフォルニア大学サンディエゴ校,奈良県立医科大学)において全て実施可能な検討である.神経科学
金属肺の発生、進展に関連する決定機構-種差のある動物モデルにおける一酸化窒素、活性酸素、DNA障害、アポトーシスの役割-

喘息や肺炎などのアレルギー性呼吸器疾患の一因に、ニッケルやコバルトなどの感作性金属がある。これらは、肺線維症、肺癌の起因物質でもあり、発症には個体の感受性も示唆されている。そこで、その動物モデルとして、超微細なニッケル、コバルト金属粉末の経気道的な一回投与により、持続的肺炎を主体とする金属肺(ニッケル肺、コバルト肺)をラットにおいて作成した。その持続性炎症の結果、早くも投与1ヶ月後に於いて、肺の線維化が進行していることを、病理学的に確認した。回収した肺胞洗浄液中の細胞を培養し、その上清中に存在する亜硝酸濃度を計った。すると、投与したニッケルの量に比例して、亜硝酸が生成されていることがわかった。かつ、プラスミドDNAアッセイにてDNA損傷が認められた。以上から、ニッケル、コバルトは、活性酸素、特にNOを介して、DNAを含む組織を障害することが示唆された。同時に、肺胞洗浄液中に、腫瘍壊死因子アルファ(TNF-α)が、多く遊離されていることがわかった。さらに、ニッケル肺において、コバルト肺よりも多かった。従って、TNF-αの高値なることが、重度な炎症を起こさしめ、かつ持続させることが示唆された。直接の実験事実は未だ得ていないが、TNF-αが、活性酸素の算出に関わる遺伝子の発現を促すのであろう。そして、活性酸素がさらに組織やDNAの損傷をもたらすものと推測される。アポトーシスに関しては、それを引き起こすBcl-2蛋白表現は、肺のマクロファージ、肺上皮細胞で起きており、従って、コバルト、ニッケルの強い毒性、肺線維化能は、肺のマクロファージおよび間質細胞内で強いBcl-2蛋白表現と関連あることが示唆された。発ガンの機序にまでは至らなかったものの、これら金属の肺毒性が分子生物学的に明らかにされた。本研究では、申請者が作成した金属肺の動物モデル(ラット)において、炎症、線維増殖、発ガンに関与する一酸化窒素(NO)、活性酸素の役割を明らかにすることを目的にしている。また、アポトーシスの関与を調べ、アレルギー性呼吸器疾患における役割の解明を求める。一方、損傷の指標である肺組織中のDNA断片化も調べることを目的にした。三年間の計画の中で、第一年目は、金属肺のメカニズムとして、活性酸素による組織障害の可能性、その結果としてのDNA障害の有無を調べた。ニッケル肺、コバルト肺それぞれにおいて炎症の最も盛んな段階で、肺胞洗浄液中の亜硝酸濃度を調べた。NOについては、金属肺から肺胞洗浄により得られた免疫担当細胞を培養し、上清中の硝酸を測定するグリーン法をとった。また、ニッケル、コバルトに曝露された肺組織から産生されるフリーラジカルがDNAを損傷する指標として、プラスミドDNAアッセイを行った。超微細なニッケル、コバルトのラット気管内一回注入にて、持続的な肺炎がもたらされていることを、肺胞洗浄液中の細胞数と分画、LDHなどの逸脱酵素の濃度などにより確認した。

超微細なニッケル、コバルト金属粉末の経気道的な一回投与により、持続的肺炎を主体とする金属肺モデル(ニッケル肺、コバルト肺)をラットにおいて作成した。恐らくはその持続性炎症の結果、早くも投与1ヶ月後に於いて、肺の線維化が進行していることを、病理学的に確認した。同時に、急性炎症がピーク(投与1日後)を超して、亜急性に移行する頃(3日後)を選んで、ニッケル肺ラット、コバルト肺ラットの肺胞洗浄を行った。その液中に、腫瘍壊死因子アルファ(TNF-α)が、生理食塩水のみを投与したコントロールに比べ、有意に多く遊離されていることがわかった。さらに、ニッケル肺において、コバルト肺よりも多かった。なお、無処置ラットから得た肺胞マクロファージを、試験管内にて、コバルトと培養して、その濃度、培養時間を変えつつ、上澄みの中のTNF-αを測定したところ、優意な遊離が認められた。従って、TNF-αの高値なることが、ニッケル肺ににおいてコバルト肺よりも重度な炎症を起こさしめ、かつ持続させることが示唆された。直接の実験事実は未だ得ていないが、TNF-αが、活性酸素の算出に関わる遺伝子の発現を促すのであろう。そして、活性酸素がさらに組織やDNAの損傷をもたらすものと推測される。この機序を研究する予定である。なお、従来のウィスター系のみならず、アレルゲンに感受性ある茶色ノルウェー系(Brown Norway系)ラットを用い、その肺胞マクロファージに水銀を用いて培養する系を、予備的に確立した。ニッケル、コバルトを用いる予定である。超微細なニッケル、コバルト金属粉末を経気道的に一回投与することにより、持続性肺炎を主体とする金属肺モデル(ニッケル肺、コバルト肺)をラットにおいて作成した。具体的には、7ないし8週齢のウィスター系雄性ラットに、1mgの超微細なニッケルまたはコバルト金属粉末を気管内注入した。既に、肺炎、肺線維化は、病理学的に確認してある。投与後の1,3,7日目に、過剰量のペントバルビタールを腹腔内に投与して屠殺した。肺を気管支と共に取り出し、10%ホルマリン液で保存した。組織のパラフィン泡埋ブロックから薄切切片を作り、ポリーL-リジンでコーティングしたスライドガラスに接着させた。シランコートスライドガラス上に進展した4μmパラフィン切片をキシレンで脱パラフィンし、エタノール系列により親水処理した後、最後に蒸留水に5分間浸した。反応は正常血清にて5分間室温でブロッキングした後、pH7.2のPBSで8倍に希釈した一次抗体の抗Bcl-2抗体(DAKO,Denmark)を用い、4°Cの氷室に切片を静置した。翌日、PBSにて5分間3回洗浄後、100倍に希釈したPBSにて2分間3回洗浄後、DAB発色し、hematoxylineで染色した。その結果、肺のマクロファージ、肺上皮細胞のBcl-2蛋白表現は、ニッケル、コバルト投与で、コントロールに比し、高かった。従って、コバルト、ニッケルの強い毒性、肺線維化能は、肺のマクロファージおよび間質細胞内で強いBcl-2蛋白表現と関連あることが示唆された。
勤務スケジューリング　―最適化アルゴリズムと現場実施をつなぐ情報提供技術の開発―

ナース・スケジューリングを代表とする勤務スケジューリングにおいては,勤務表作成者が持つ潜在的な制約条件や評価尺度などの暗黙知について「事前に知ること」や「たたき台として与えた解に反映すること」が難しい.本研究では,解の修正を支援する「最適解の分布」情報を得ることに加え,解が持つ「バランス」(勤務者の負荷等,勤務表を構成する要素の平準化,公平性)と「入力変更に耐えうる解のロバスト性」に焦点をあて,それらを考慮した解を高速に得るためのアルゴリズムを構築する.具体的には,研究目的に挙げた(課題1)最適解の分布を提供,(課題2)公平性を持つ解を提供,(課題3)ロバストな解を提供,に取り組む.ナース・スケジューリングを代表とする勤務スケジューリングにおいては,勤務表作成者が持つ潜在的な制約条件や評価尺度などの暗黙知について「事前に知ること」や「たたき台として与えた解に反映すること」が難しい.本研究では,解の修正を支援する「最適解の分布」情報を得ることに加え,解が持つ「バランス」(勤務者の負荷等,勤務表を構成する要素の平準化,公平性)と「入力変更に耐えうる解のロバスト性」に焦点をあて,それらを考慮した解を高速に得るためのアルゴリズムを構築する.具体的には,研究目的に挙げた(課題1)最適解の分布を提供,(課題2)公平性を持つ解を提供,(課題3)ロバストな解を提供,に取り組む.
オンサイト分析を指向した幻覚性キノコ成分の新規アッセイシステム構築

規制薬物の乱用の取り締まりに貢献すべく、簡便・迅速で現場への可搬性に優れ、かつ高感度な検出を可能とするオンサイト免疫測定法の構築に資する新規抗体の作製を目指す。今回対象とする幻覚性キノコ成分のシロシビンおよびシロシンは分子量が小さく、高親和力抗体の調製が極めて難しい。そこで、免疫抗原の適正デザインや遺伝子工学的手法を駆使して、実用的なモノクローナル抗体を創出し、簡便で高感度な免疫測定法を確立する。また、蛍光免疫センサーとして機能する「クエンチ抗体(Q-body)」を作製し、よりオンサイト検出に適した測定系(サンプルと混合してその溶液の蛍光を測定するだけで抗原量を測定できる)の開発に挑戦する。