hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ヒト網膜動脈および静脈血管内皮細胞のエピゲノム解析

本研究は、ヒト網膜動脈および静脈血管内皮細胞の免疫学的特性を解明する目的で、ヒト眼球から網膜血管内皮細胞を動脈、静脈それぞれから採取し、遺伝子発現解析およびエピゲノム解析を行う。まず我々はブタ眼球を用いて網膜動脈、網膜静脈血管からそれぞれの血管内皮細胞の初代培養系を確立した。次に、その手技を応用して眼窩腫瘍などで眼球摘出となった患者の眼球から、網膜動脈内皮細胞、静脈内皮細胞の初代培養を試みた。まず、網膜動脈血管・静脈血管を別々に採取し、血管内皮細胞の初代培養を試みた。しかし、細胞増殖は不良であった。そこで他の方法として採取した網膜動脈血管・静脈血管からMagnetic-Activated Cell Separation(MACS)を用いてCD31抗体付着ビーズでCD31陽性血管内皮細胞の単離を試みた。しかし、得られる細胞数は少なく、細胞のviabilityが低く、RNA解析は不能であった。これまでの研究で、ヒト摘出眼球からの網膜血管内皮細胞の採取は、1条件検討で使用してきたブタと比較しヒトのサンプルの場合高齢であることや、抗がん剤の治療歴がある症例も含まれるため細胞培養が困難であること、2採取した網膜血管をコラゲナーゼ処理して、血管内皮細胞をMACSで直接採取する方法を用いても、一眼から得られる細胞数は極めて少なく更なる条件検討が必要だと考えられる。今後はヒト摘出眼球からの網膜動脈・静脈それぞれの血管内皮細胞の単離の試みを続行すると同時に、ヒト網膜毛細血管内皮細胞株を用いた研究も同時に進行する方針とする。まず我々はブタ眼球で網膜動脈、網膜静脈血管からそれぞれの血管内皮細胞の初代培養系を確立した。次に、その手技を応用して眼窩腫瘍などで眼球摘出となった患者の眼球から、ヒト網膜動脈内皮細胞、静脈内皮細胞の初代培養を試みた。2019年2月28日までに国立がん研究センター中央病院で眼球摘出となった7例7眼について、患者・家族の同意のもと摘出眼球から網膜血管内皮細胞の採取を試みた。7眼中2眼は眼内腫瘍・増殖性糖尿病網膜症のため血管の採取は困難であった。残りの眼球に対し、以下の研究を行った。まず、網膜動脈血管・静脈血管を別々に採取して血管内皮細胞の初代培養を試みた。1眼球から1.0-5.0x10^3個程度のCD31陽性細胞が得られた。しかし、抽出されたRNAの断片化が進んでいたため、トランスクリプトーム解析用のライブラリー作成には至らなかった。これは細胞数が少ないことと操作中のRNaseの影響が原因と考えられた。ヒト網膜血管内皮細胞をMACSで直接採取する方法でも、得られる細胞数は極めて少なく、かつ実験手技に時間がかかるためRNAを壊れない状態で抽出することは極めて難しいことが明らかとなった。今後は操作時間の短縮と温度管理を徹底してヒト摘出眼球からの網膜動脈・静脈血管内皮細胞の単離の試みを継続しつつ、ヒト網膜毛細血管内皮細胞株を用いた研究も試みる方針とする。これまでの研究でブタ眼球から網膜動脈、網膜静脈に分けた網膜血管内皮細胞の採取は成功しているが、ヒト眼球からの動脈、静脈に分けた網膜血管内皮細胞の分離・培養には成功していない。ヒトで成功しない理由として、眼球摘出になる患者の眼球は高齢者が多く、かつ抗がん剤などの影響で細胞増殖しにくいためと推測する。そのため、今後はヒト摘出眼球からの網膜動脈・静脈血管内皮細胞の単離の試みを継続しつつ、バックアップの研究としてヒト網膜毛細血管内皮細胞株(ACBRI 181、Cell systems)を用いた研究も行うこととした。ヒト網膜毛細血管内皮細胞株に対してTNFαなどのサイトカイン刺激を行い、ヒト網膜毛細血管内皮細胞の反応を4つのエピゲノム解析(1RNA-seqによるトランスクリプトーム解析、2主要なヒストン修飾6種類、3DNAメチル化解析、4網羅的オープンクロマチン領域解析)を行う実験を一部開始している。

これまでの研究で、ヒト摘出眼球からの網膜血管内皮細胞の採取は、1条件検討で使用してきたブタと比較しヒトのサンプルの場合高齢であることや、抗がん剤の治療歴がある症例も含まれるため細胞培養が困難であること、2採取した網膜血管をコラゲナーゼ処理して、血管内皮細胞をMACSで直接採取する方法を用いても、一眼から得られる細胞数は極めて少なく更なる条件検討が必要だと考えられる。今後はヒト摘出眼球からの網膜動脈・静脈それぞれの血管内皮細胞の単離の試みを続行すると同時に、ヒト網膜毛細血管内皮細胞株を用いた研究も同時に進行する方針とする。本研究は、ヒト網膜動脈および静脈血管内皮細胞の免疫学的特性を解明する目的で、ヒト眼球から網膜血管内皮細胞を動脈、静脈それぞれから採取し、遺伝子発現解析およびエピゲノム解析を行う。まず我々はブタ眼球で網膜動脈、網膜静脈血管からそれぞれの血管内皮細胞の初代培養系を確立した。次に、その手技を応用して眼窩腫瘍などで眼球摘出となった患者の眼球から、ヒト網膜動脈内皮細胞、静脈内皮細胞の初代培養を試みた。2019年2月28日までに国立がん研究センター中央病院で眼球摘出となった7例7眼について、患者・家族の同意のもと摘出眼球から網膜血管内皮細胞の採取を試みた。7眼中2眼は眼内腫瘍・増殖性糖尿病網膜症のため血管の採取は困難であった。残りの眼球に対し、以下の研究を行った。まず、網膜動脈血管・静脈血管を別々に採取して血管内皮細胞の初代培養を試みた。しかし、細胞増殖は不良であった。そこで他の方法として採取した網膜動脈血管・静脈血管からMagnetic-Activated Cell Separation(MACS)を用いてCD31抗体付着ビーズでCD31陽性血管内皮細胞の単離を試みた。1眼球から1.0-5.0x10^3個程度のCD31陽性細胞が得られた。しかし、抽出されたRNAの断片化が進んでいたため、トランスクリプトーム解析用のライブラリー作成には至らなかった。これは細胞数が少ないことと操作中のRNaseの影響が原因と考えられた。ヒト網膜血管内皮細胞をMACSで直接採取する方法でも、得られる細胞数は極めて少なく、かつ実験手技に時間がかかるためRNAを壊れない状態で抽出することは極めて難しいことが明らかとなった。今後は操作時間の短縮と温度管理を徹底してヒト摘出眼球からの網膜動脈・静脈血管内皮細胞の単離の試みを継続しつつ、ヒト網膜毛細血管内皮細胞株を用いた研究も試みる方針とする。これまでの研究でブタ眼球から網膜動脈、網膜静脈に分けた網膜血管内皮細胞の採取は成功しているが、ヒト眼球からの動脈、静脈に分けた網膜血管内皮細胞の分離・培養には成功していない。ヒトで成功しない理由として、眼球摘出になる患者の眼球は高齢者が多く、かつ抗がん剤などの影響で細胞増殖しにくいためと推測する。そのため、今後はヒト摘出眼球からの網膜動脈・静脈血管内皮細胞の単離の試みを継続しつつ、バックアップの研究としてヒト網膜毛細血管内皮細胞株(ACBRI 181、Cell systems)を用いた研究も行うこととした。ヒト網膜毛細血管内皮細胞株に対してTNFαなどのサイトカイン刺激を行い、ヒト網膜毛細血管内皮細胞の反応を4つのエピゲノム解析(1RNA-seqによるトランスクリプトーム解析、2主要なヒストン修飾6種類、3DNAメチル化解析、4網羅的オープンクロマチン領域解析)を行う実験を一部開始している。
周産期からの子ども虐待予防推進のための助産師対象現任教育プログラムの実証的研究

本研究は、助産師が助産という法的業務に加えて、虐待予防に関わるためにどのような専門性を磨く必要があるかを検討したものである。修正プログラムによる研修効果は認められたが、更なる専門性として、ハイリスク要因を持つ親への気づき、養護力のない親への支援とアセスメント、関係機関への情報提供と連携、社会的養護、社会資源活用が求められた。今後は臨床的課題に加えて新規領域の事業内容理解と連携強化が必要がある。さらに、研修の長期効果を図るための取り組みが今後の課題である。本研究は著しく増加してきた0歳児の子ども虐待ならびに死亡事例の発生予防に資するための周産期医療に関わる助産師の教育プログラムを策定することである。そのための根拠として本来の法的業務に加えて、更なる専門性として、有効で効率的な活動のために助産師が何をどこまで押さえておけばよいのか、その標準を明らかにすることである。助産師の子ども虐待予防のサブ・スペシャリティを明らかにするために、分担者各人の専門領域において以下のことに取り組んだ。1.『子ども保護のためのワーキング・トゥギャザー児童虐待対応のためのイギリス政府ガイドライン』を中心とした文献研究により、下位専門分野の活動経緯について整理した。次年度、さらなる現状把握の必要性が明確になった。2.全国の子ども虐待防止活動家への横断調査の準備のために、2011年日本子ども虐待防止学会(つくば市)において民間の子ども虐待防止活動のパネル発表を確認した。また、国の動きや制度的枠組みの進展についての確認も同時に行うことができた。3.助産師の子ども虐待予防のサブ・スペシャリティが明らかになるようなワークショップの企画について検討会議を実施した。また、国際的視野から求められる力量形成、多職種間連携の必要性ならびに対策が性的虐待にまで行き着いていない日本の現状があるため性的虐待対応の手法を学ぶRIFCR研修を受け情報を把握した。さらに、虐待発生予防の観点から、ニュージーランドにおける理想的な出生前後の地域母子保健管理システムとして助産師のリードする主体的管理について現地にて基盤情報を得た。1.研究開始当初の背景:児童虐待防止法が施行されて10余年。法整備や死亡した子どもの事例検証などにより予防体制が進みつつある中、周産期の問題が浮き浮き彫りになっている。2.研究の目的:本研究は助産師本来の法的業務に加えて、虐待予防に関わる場合の更なる専門性を明確にし、研修プログラム試案が有効で専門的なものかを明らかにすることである。3.研究の方法:1)日本子ども虐待防止学会第18回学術集会分科会2)修正プログラム案を用いた助産師研修受講による効果判定自己評価からの分析3)A県全自治体の子ども虐待担当者アンケート調査による分析4.研究成果:1)助産師が助産という専門性を持ちながら虐待予防に関わっていくときには、思春期保健におけるいのちの教育、周産期ケアの力量アップ、養護力のない親への支援・アセスメント力、親の状況を把握力の力量形成が必要である。2)研修会受講前後調査の分析。使用した教育プログラムは、すべての項目の必要性と教育効果が確認された。同時に助産師に強化すべき点が明らかになった。3)地方自治体調査では、担当者の96.1%が虐待問題への対応経験有り。経験年数の上昇とともに虐待問題への対応件数が有意に上昇した。助産師が虐待問題に関わるためにさらに求められる能力として、ハイリスク要因を持つ親に早く気づき保健師への情報提供、母親へのサポート体制、アセスメント、社会資源活用、各種の家庭訪問との連携理解の必要性が示された。以上のことから、助産師の現任教育としての今回のプログラムは知識・理解においては効果的であることが明らかになった。今後、臨床的課題に加えて新規領域の事業内容理解と連携強化が必要であり、実践力につながるための展開方法の検討が必要である。子ども虐待死亡事例の分析では未婚、若年妊娠など望まない妊娠による出生当日に死亡する割合が依然高い現状にある。背景には貧困の問題が横たわってはいるものの産科領域における社会的ハイリスク要因の増加も挙げられ、周産期医療における支援のあり方が重要視されている。ハイリスク者のスクリーニング法の導入はほぼ浸透し、地域との連携が図られるようになってきたが、妊娠期のケアや出産後の指導法、フォローなど虐待予防の観点から見るとあまり変化したとは言えない。産科医療機関と接点を持たない出産を除き、ほとんどの出産が産科施設で行われる今日、安全な出産支援を基盤にして虐待予防に看護職が関わっていく場合の現任教育のあり方多角的に検討する必要がある。そこで、助産師としての子ども虐待問題に周産期の領域から専門的に関わる場合どのようなことが求められるのかを今一度明らかにすべく、日本子ども虐待防止学会(高知)分科会において共同研究者と共に発表を行い、意見交換を行った。その中で、1.特定妊婦としての支援2.退院前支援3.出産施設への「おめでとう」

面会による関係づくり4.1か月健診未受診者の通報についての具体的な取組の重要性があげられた。今後、これらの点を助産師が力量アップしていくための研修法を検討する必要がある。一方、イギリスで100年前から活動を行ってきているロンドンのNSPCCを訪問し、その活動と専門職(とくに看護職)の連携や法的枠組み、虐待予防活動の実際などについて視察研修も実施し、情報を収集してきた。横断調査実施のための準備として、倫理委員会に諮る必要があるが、職場異動したためシステムが整備されていないことがわかった。現在そのシステムづくりを依頼中である。ワークショップについては、予定していた学会の企画が確定していたため、参加が不可能となったことによる。25年度が最終年度であるため、記入しない。新職場において、研究補助者の雇用ができる環境になかったことは研究の推進を阻む大きな要因であった。ネット上での入力システム環境が整っていないため時間を要してしまうこと。倫理委員会を現職場で立ち上げていくためのシステムづくりに参画する予定である。また、ワークショップについては、本年度に別研修会と抱き合わせで実施することを申し合わせており、研究分担者の協力体制には問題等ない。米国の取組で虐待予防効果を上げている家庭訪問について日本との違いやその実態を把握する。この情報と過去に作成したプログラムを組み合わせ、プログラムを修正する。倫理審査を終えた上で、国内における子ども虐待防止活動の民間活動団体への全国的なアンケート調査を実施する。最終的にそのプログラムの効果について評価判定を行う予定である。検証方法は、修正プログラムを用いた研修会を実施し、前後調査の比較並びに研修会参加者の意見を類型化してまとめ、更なる課題を明らかにした最終報告書を作成予定である。並行して、学会発表、論文投稿も進めることとする。
ボトムアッププロテオミクスを応用した多因子遺伝性疾患感受性遺伝子検索

主に本態性高血圧症、脳梗塞、心筋梗塞、糖尿病の78症例を収集した。同意書取得後に採血しゲノムDNAを抽出した。家族歴を正確に聴取することで、遺伝性の関与を検証した。臨床データは、性別、年齢、当該疾患家族歴、身長、体重、Body mass index、総コレステロール、中性脂肪、HDLコレステロール、尿酸、血糖、尿データ、心電図、喫煙歴、飲酒歴をインプットした。血漿はディープフリーザに保存しMALDI-TOF MSによるプロテオミクス解析に使用した。ゲノミクス解析についてはエクソーム解析およびターゲットシークエンスに次世代シークエンサーを使用、個々の遺伝子の解析にはサンガー法を用いた。本研究でのターゲットになっている多因子遺伝性疾患のうち本態性高血圧症、脳梗塞、心筋梗塞、糖尿病ついて、末梢血サンプル収集が進んでいる。遠心後血漿を分離し、ー70からー80°Cのディープフリーザーに凍結保存している。バフィーコートの白血球からゲノムDNAを抽出した。一部のDNAは濃度調整し、今後すぐに使用可能な状態にある。これらのサンプルについては特に家族歴を正確に聴取することで、遺伝性が関与しているか否かを検証できるようにしている。臨床データベースのインプットについてはこれまで記録してきた臨床データで多因子遺伝性疾患感受性遺伝子検索に必要なものである性別、年齢、当該疾患家族歴、身長、体重、Body mass index、総コレステロール、中性脂肪、HDLコレステロール、尿酸、血糖、尿データ、心電図所見、喫煙歴、飲酒歴聴取はそのまま継続している。プロテオミクス解析実施に用いるMALDI-TOF MSはすでに運用されており、蛋白質データベースなど必要機器、ソフトウェアを用いている。ゲノミクス解析については次世代シークエンサーが初年度の途中に配備され、運用が開始となった。特にエクソーム解析実施および、特定領域における多検体解析に力を発揮できる。また、個々の遺伝子解析についてはキャピラリーシークエンサーが用いられている。今後もサンプル収集を継続していくとともに過去に収集したサンプルについてデータのインプット作業をこなし、更に解析可能なサンプル数を増やしていく予定である。ハプロタイプ関連解析にはSNPAlyze softwareを用いる予定で、過去に使用経験があり習熟度については問題ない。研究分担者同士は本研究のために進捗状況や研究結果について意見交換し本研究のスムーズな進行に努めている。最終的に論文化によって世界に発信していきたいと考えている。本研究でのターゲットになっている多因子遺伝性疾患のうち本態性高血圧症、脳梗塞、心筋梗塞、糖尿病について、末梢血サンプルの収集が進んでいる。研究者によって研究説明し、同意書にサインをいただいた後に採血、バフィーコートの白血球からゲノムDNAを抽出した。分離された血漿は分析までは-80°Cのディープフリーザの中に保存し、必要時にプロテオミクス解析に使用した。本研究でのターゲットになっている多因子遺伝性疾患のうち本態性高血圧症、脳梗塞、心筋梗塞、糖尿病ついて、申請者が平成27年度末までにサンプルを集めることができたのは、上記疾患を中心に78症例で研究者によって研究説明し、同意書にサインをいただいた後に採血、バフィーコートの白血球からゲノムDNAを抽出した。一部のDNAは濃度調整し、今後すぐに使用可能な状態となっている。臨床データベースのインプットについてはこれまで記録してきた臨床データで多因子遺伝性疾患感受性遺伝子検索に必要なものである性別、年齢、当該疾患家族歴、身長、体重、Body mass index、総コレステロール、中性脂肪、HDLコレステロール、尿酸、血糖、尿データ、心電図所見、喫煙歴、飲酒歴聴取である。プロテオミクス解析実施に用いるMALDI-TOF MSを運用し、蛋白質データベースなど必要機器、ソフトウェアを用いている。ゲノミクス解析については次世代シークエンサーが配備され、運用が開始となった。また、個々の遺伝子解析についてはサンガー法によるキャピラリーシークエンサーが用いられている。ハプロタイプ関連解析にはSNPAlyze softwareを用いた。

研究分担者同士は本研究のために進捗状況や研究結果について意見交換し本研究のスムーズな進行に努めている。最終的に論文化によって世界に発信していきたいと考えている。主に本態性高血圧症、脳梗塞、心筋梗塞、糖尿病の78症例を収集した。同意書取得後に採血しゲノムDNAを抽出した。家族歴を正確に聴取することで、遺伝性の関与を検証した。臨床データは、性別、年齢、当該疾患家族歴、身長、体重、Body mass index、総コレステロール、中性脂肪、HDLコレステロール、尿酸、血糖、尿データ、心電図、喫煙歴、飲酒歴をインプットした。血漿はディープフリーザに保存しMALDI-TOF MSによるプロテオミクス解析に使用した。ゲノミクス解析についてはエクソーム解析およびターゲットシークエンスに次世代シークエンサーを使用、個々の遺伝子の解析にはサンガー法を用いた。サンプル収集に係る労力以外には、必要機器、ソフトウェアはすでに導入されている。個々のサンプルの臨床情報入力については学内の臨床データベース利用が一括して解析可能体制になっている。研究分担者間の連携も順調で、随時研究進捗状況についてお互いに報告し合っている。研究成果については、ゲノム解析、プロテオミクス解析を通して疾患感受性マーカー、感受性遺伝子をいくつかピックアップしている。臨床遺伝学研究分担者同士は本研究のために進捗状況や研究結果について意見交換し本研究のスムーズな進行に努めている。最終年度になり、サンプル収集を継続していくとともに、引き続きゲノミクス解析、プロテオミクス解析ともに進めたい。そして過去に収集したサンプルについてデータのインプット作業をこなし、収集したデータをもとに疾患マーカーの同定および疾患感受性遺伝子同定について一定の成果を上げたい。今後もサンプル収集を継続していくとともに過去に収集したサンプルについてデータのインプット作業をこなし、更に解析可能なサンプル数を増やしていく予定である。サンプルからのDNA抽出にかかる費用が予測よりも安価となり、余裕が出来た。平成26年度に収集したサンプルのDNA抽出などに使用する。
戦後イタリア芸術が産業デザインに与えた影響に関する研究

本研究は美術運動が産業デザインの発展と多様性に寄与した一つの様相を明らかにする事を目的とし,1960年代にイタリアで発祥した美術運動アルテ・プログランマータ(Arte Programmata)を研究対象とした。この美術運動は当時先進的な情報科学技術であった「プログラミング」を芸術へ応用することを試み,ブルーノ・ムナーリ(Bruno Munari)とウンベルト・エーコ(Umberto Eco)が企画した展覧会がヨーロッパとアメリカ各地を巡回,美術史においてキネティック・アートと位置づけられている。2008年度にイタリアとドイツで現地調査を行い,イタリア人作家ブルーノ・ムナーリ,エンツォ-マーリ(Enzo Mari),ジェトゥリオ・アルヴィアー二(Getulio Alviani),グルッポT(Gruppo T),グルッポN(Gruppo N)について資料収集した。2009年度はこれら作家がグラフィック・デザインやプロダクト・デザイン的な作品も制作していく点に注目しその背景と要因について考察した。具体的には,この運動がデザイン文化に力を入れるオリヴェッティ社の支援で始まった事,制作過程で工業生産という手段に関わる事,多くの作家が当時急速に産業都市として発展したミラノに関わりがあった事,作品のコンセプトとして「オブジェ」「マルチプル」というキーワードを掲げ,思想的背景として旧来の芸術への批判精神から「共同研究」「共同制作」を行い,従来の芸術と異なる観客との関係を模索していた事,一人の享受者ではなく大衆へ開かれた作品を目指していたこと等である。また,こうした立場を国際舞台で他芸術家や研究者らと交流・議論し再確認した「新しい傾向」への参加が後の制作姿勢に影響を与える過程を調査した。本研究は,他国のキネティック・アートに見られない特徴,デザインへの展開の過程を考察し,美術史的視点のみにとどまらない文化的側面から再考察した点に意義が有る。戦後イタリア美術が産業デザインに与えた事例について調査しイタリアにおけるアートとデザインの相互関係を明らかにするという目的のもと,美術運動「アルテ・プログランマータ」の調査研究を行った。1.この運動の中心的作家「グルッポT」の展覧会が開催され,現地で調査を行った(『ミリオラマ15 1959-2008グルッポT』ヴァルモール美術スタジオ,イタリア・ヴィチェンツァ, 2008年2月29日5月15日)。展示作品の写真・映像記録を撮ると共に,画廊オーナーに展覧会開催経緯・作家との交流・収蔵作品についてインタビューした。また当画廊で過去に開催されたアルテ・プログランマータ作家の展覧会図録を収集した。調査結果はデザイン史研究会で口頭発表(2009年3月6日,デジタルハリウッド大学),日本デザイン学会論文誌「デザイン学研究」に投稿・査読審査済みである(第56巻3号掲載予定)。2.先行研究文献,当時の展覧会(及び近年の回顧展)カタログ,映像・写真資料について新たに史資料収集を行った。これを過去に収集したデータと合わせ,展覧会参加作家・出品作品一覧リストの作成,及び制作技術・表現内容による分類作業に着手した。今後はアートとデザインの共通項・相違点に着目しながらアルテ・プログランマータの芸術性・機能性を考察し,成果は2009年度に論文にまとめる。3.アルテ・プログランマータが国際的に評価される契機となった美術展「新しい傾向」に関する回顧展が開催され,現地調査を行った。(『ビット・インターナショナルー[新しい]傾向』ZKM : Center for Art and Media Karlsruhe,カールスルーエ・ドイツ, 2008年2月23日2009年1月18日)展示作品を写真・映像に記録し,美術館付属図書館で文献資料・カタログを収集した。調査研究の成果は2009年度に論文にまとめる。

本研究は美術運動が産業デザインの発展と多様性に寄与したある様相の解明を目的とし,1960年代イタリアで発祥したアルテ・プログランマータ(Arte Programmata)を対象としている。これは科学技術「プログラミング」の芸術への応用を試み,ブルーノ・ムナーリ(Bruno Munari)とウンベルト・エーコ(Umberto Eco)が企画した展覧会としてヨーロッパとアメリカ各地を巡回し,美術史においてキネティック・アートと位置づけられてきた。2009年度は文献解読のほか前年の現地調査をもとに,イタリア人作家ブルーノ・ムナーリ,エンツォ・マーリ(Enzo Mari),ジェトゥリオ・アルヴィアーニ(Getulio Alviani),グルッポT(Gruppo T),グルッポN(Gruppo N)について研究した。特にグラフィックやプロダクト・デザイン的な制作をしていく点に注目しその要因を考察した。具体的には,この運動がデザイン文化に力を入れるオリヴェッティ社の支援で始まった事,工業生産という手段に関わる事,多くの作家が産業都市ミラノと関わった事,コンセプトに「オブジェ」「マルチプル」を掲げ,旧芸術への批判精神から「共同研究・制作」を模索し,従来の芸術と異なる観客との関係を成立させようとした事,一人の享受者ではなく大衆に開かれた作品を目指していた事等である。またこうした立場を国際舞台で他の芸術家や研究者と議論した「新しい傾向」への参加が後の制作姿勢に影響を与える過程を調査した。本研究はこれまでキネティック・アートに位置づけられ近年ヨーロッパでArte programmata e cinetica(プログラムされた動的な芸術)と再評価されるこの運動が,他のキネティック・アートに見られない特徴,デザインへの展開を見せた過程を文化的側面から再考察した点に意義が有る。
ヘビサイド関数の解析多重積分に基づく新しい界面捕獲アルゴリズムの創成

VOF型界面捕獲法は、各格子セルにおいて、界面を特性関数χ(x,y,z,d)(dは界面位置指標)で近似し、χのセル平均値Cを時間発展的に求める方法である。Cおよび、χのセルへの流束は、χの体積分から計算される。最終的にCと流束はdのみの関数で表される。界面捕獲法を構築する要は、1体積分が解析的に求まるχを選び、2精度良く、簡単にCからd、dからχの流束を求めるところにある。筆者は多次元Heaviside関数の体積分を解析的に求める方法を見出した。本研究の目的は、(a)これに基づく新しい界面捕獲アルゴリズムを創成する、(b)これを応用した気液二相流の高精度シミュレーションツールを構築することである。研究実施計画の第3段階前半の内容を計画通りに実施し、予期の成果を得ることができた。具体的に、前年度研究の問題点を系統的に整理し、2次元版気液二相流プログラムに対する検証・改良を終えた。本研究の過程で、従来の界面を滑らかな特性関数で表す方法に対する質量中心近似による簡易計算法も考案した。これらの研究成果を国際会議(2回)と国内会議(1回)に発表した。さらに、ヘビサイド関数とその逐次積分関数、デルタ関数に収束する解析的に微分・積分可能なサブグリッド補間関数群を簡単に構築する方法を新たに発見した。第3段階後半の内容をほぼ計画通りに実施してきた。アルゴリズムを3次元版に拡張し、剛体回転および単一渦による界面変形問題等の単純移流問題に対するプログラムの作成・検証を終えた。3次元版気液二相流プログラムの作成・検証は5割終えているところに来ている。平成29年度では、参加予定の研究協力者は健康上の事情により研究に参加できず、その影響で研究に一定程度の遅れが生じた。平成30年度では、その遅れの大部分を取り戻すことができたが、アルゴリズムの3次元気液二相流への拡張・応用への対応に若干な遅れが出ている。3次元気液二相流のシミュレーションツールを仕上げる。3次元応用問題を解き、従来の方法に対する優位性を実証する。本研究の成果を学術誌に投稿しているが、査読結果に伴う修正等に対応する。本研究の新しい成果を国内外の学会で追加発表する。また、学会誌・学術誌に投稿することにより、研究成果を社会に還元する。必要に応じて、追加検証を行う。また、さらなる発展性についても考察していく。研究実施計画の第1段階の内容を計画通りに実施し、予期の成果を得ることができた。具体的に、新しい界面捕獲アルゴリズムのコア部分に関するプログラムを作成・改良し、検証を終えた。剛体キー回転問題および単一渦による界面変形問題に適用し、その有効性を確認した。新しいアルゴリズムは界面法線方向の数値拡散を排除し、界面を1格子間隔で捕え続けることができる。従来の界面を滑らかな特性関数で表す方法と比較して、界面の変形をより正確に再現することができ、質量保存性も優れている。第2段階の内容を計画通りに実施し、予期の成果を得ることができた。具体的に、新しいアルゴリズムを、筆者が以前に開発した気液界面が存在する2次元非圧縮性流れの解析プログラムに導入した。Dam-break問題を用いて詳細な検証計算を行い、従来の方法に対する本アルゴリズムの優位性を確認した。研究実施計画の第1段階と第2段階の内容を計画通りに実施し、予期の成果を得ることができた。

本研究の過程で、従来の界面を滑らかな特性関数で表す方法に対する質量中心近似による簡易計算法も考案した。これらの研究成果を国際会議(2回)と国内会議(1回)に発表した。さらに、ヘビサイド関数とその逐次積分関数、デルタ関数に収束する解析的に微分・積分可能なサブグリッド補間関数群を簡単に構築する方法を新たに発見した。第3段階後半の内容をほぼ計画通りに実施してきた。アルゴリズムを3次元版に拡張し、剛体回転および単一渦による界面変形問題等の単純移流問題に対するプログラムの作成・検証を終えた。3次元版気液二相流プログラムの作成・検証は5割終えているところに来ている。研究実施計画の第3段階前半の内容を計画通りに実施し、予期の成果を得ることができた。平成29年度では、参加予定の研究協力者は健康上の事情により研究に参加できず、その影響で研究に一定程度の遅れが生じた。平成30年度では、その遅れの大部分を取り戻すことができたが、アルゴリズムの3次元気液二相流への拡張・応用への対応に若干な遅れが出ている。前年度研究の問題点を系統的に整理し、改良を続ける。2次元版のアルゴリズムを3次元版に拡張した気液二相流の高精度シミュレーションツールを構築する。複雑な3次元応用問題を解き、従来の方法に対する優位性を実証する。これまで得られた成果を系統的に整理し、国内外の学会で発表し、学会誌・学術誌に投稿することにより、研究成果を社会に還元する。必要に応じて、追加検証を行う。また、さらなる発展性についても考察していく。3次元気液二相流のシミュレーションツールを仕上げる。3次元応用問題を解き、従来の方法に対する優位性を実証する。本研究の成果を学術誌に投稿しているが、査読結果に伴う修正等に対応する。本研究の新しい成果を国内外の学会で追加発表する。また、学会誌・学術誌に投稿することにより、研究成果を社会に還元する。当初、研究の効率化およびスピードアップを図るために、大学院生1名を研究補助者として研究に参加させる予定であったが、諸事情により実現に至らず、人件費・謝金の支出がなかった。その影響で研究が若干遅れた。重要な研究成果が出始めたのは平成30年1月頃であったので、当初予定してあった研究成果発表の旅費等も使用しなかった。これらは平成30年度で使用する予定である。3次元気液二相流シミュレーションツールの作成・検証に大学院生1名を研究補助者として研究に参加させる。これまでの人件費・謝金の未使用部分を使用する。これまでの消耗品費の未使用部分を、解析データを保存するためのハードディスク等の記憶媒体および、新たに必要となった研究図書の購入に使用する。本研究の新しい成果を国内外の学会で追加発表するための旅費を使用する。研究成果を学会誌・学術誌に掲載する際の論文別刷費、さらに成果報告書等の印刷・製本費を使用する。
接触アレルギーにおけるSTAT6シブナル伝達系の分子生物学的な役割の解析

STAT6欠損マウスにおける接触アレルギーの解析STAT6欠損マウスとワイルドタイブマウスに種々のハプテンで経皮感作して惹起後の耳介腫脹反応を経時的に比較検討した。その結果、STAT6欠損マウネでは耳介腫脹反応が減弱していた。STAT6欠損マウスでの耳介腫脹反応の減弱の機序を解析するため、腫脹した耳介の病理組織学的、免疫組織学的名解析を試た。その結果好酸球、好中球、リンパ球などの炎症細胞の浸潤がSTAT6欠損マウスでは著明に減弱していた。さらに耳介局所のIL-4,IL-5,IFN-gなどのサイトカインの発現程度をELISAで比較したところSTAT6欠損マウスではIL-4,IL-5が皮膚局所で検出できなかった。IgG1,IgG2,IgE抗体産生も誘導すろハプテンで経皮感作しSTAT6欠損マウス、WTマウスの血清中のレベルを比較検討したところIgEはSTAT6欠損マウスではほとんど検出できなかった。以上の結果よりSTAT6欠損マウスでは接触過敏症誘導においてTh2細胞が欠損することにより抗原特異的なIgEの産生が抑制され好酸球、好中球などの浸潤も抑制されることにより炎症反応が抑制される可能性が示唆された。ランゲルハンス細胞の役割を解析するためSTAT6欠損マウス,WTマウスの表皮よりランゲルハンス細胞を調整、異なる腫のマウスのTリンパ球と混合培養しLCのアロ抗原刺激能を比較検討したが差は認められなかった。また、欠損マウスとWTのLCの細胞表面抗原(Ia,CD80,CD86,CD23)をFACSで解析したが差は認められなかった。今回の結果、接触アレルギー反応の誘導にSTAT6が重要な役割を果すことが明らかにされた。さらに、STAT6を抑制する薬剤により接触アレルギーを抑制しうる可能性が示唆された。マウスにおける接触過敏症誘導でのIL-41L-13などのTh2サイトカインの役割はまだ明らかにされていない。今回、IL-4,IL-13のシグナル伝達に必要なSTAT6欠損マウスを用いて接触過敏症におけるIL-4,IL-13の役割を検討した。マウス接触過敏症にSTAT6シグナルが関与するかどうかを明らかにするため種々のハプテンを用いてSTAT6欠損マウスに経皮感作した後耳介に惹起した。TNCB,Oxaでは全体的に耳介腫脹反応が減弱し72時間後をピークとする反応が認められた。DNFBではSTAT6欠損マウスでは耳介腫脹反応は非常に減弱していた。このことより、接触過敏症ではハプテシにかかわらずSTAT6シグナルが必要であることがわかった。次に、刺激皮膚炎においてSTAT6が必要であるかを検討した。1%クロトン油を耳介に塗布した時は24時間後には欠損マウスでは減弱の傾向にあったが48時間後にはむしろ亢進していた。100%クロトン油では差が認められなかった。このことより刺激皮膚炎ではSTAT6シグナルは関与しないと考えられた。さらに、sheepの赤血球を皮下に投与することにより遅発反応を誘導した。6日後に足底にSRBCで惹起した。STAT6欠損マウスとワイルドタイプの間に有意差は見られなかった。このことよりDTHではSTAT6シグナルは必要ないと考えられた。

以上、接触過敏症の誘導にのみSTAT6が重要な役割を果たし、刺激反応、DTHでは関与しないことより表皮の免疫担当細胞の検討をした。epidermal sheetを作成して表皮中のランゲルハンス細胞、Thy1DECのポピュレーションを検討したがSTAT6欠損マウスとワイルドタイプとの間に有意差は見られなかった。さらに、ランゲルハンス細胞を12時間培養した後の表面マーカーを検討したが、CD80の発現が軽度増強しているのみであった。STAT6シグナルは接触過敏症誘導に必要なシグナルだがどの因子の誘導に関与しているか検討が必要である。マウスにおける接触過敏症誘導でのIL-4IL-13などのTh2サイトカインの役割はまだ明らかにされていない。今回、IL-4,IL-13シグナル伝達に必要なSTAT6欠損マウスを用いて接触過敏症におけるIL-4,IL-13の役割を検討した。マウス接触過敏症にSTAT6シグナルが関与するかどうかを明らかにするため種々のハプテンを用いてSTAT6欠損マウスに経皮感作した後耳介に惹起した。TNCB,Oxaでは全体的に耳介腫脹反応が減弱し72時間後をピークとする反応が認められた。DNFBではSTAT6欠損マウスでは耳介腫脹反応は非常に減弱していた。このことにより、接触過敏症ではハプテンにかかわらずSTAT6シグナルが必要であることがわかった。さらに、クロトン油による刺激皮膚反応、羊赤血球を用いた遅延型反応(DTH)も検討したが、両者タイプの間に有意差は見られなかった。このことにより刺激皮膚反応、DTHではSTAT6シグナルは必要ないと考えられた。以上、接触過敏症の誘導にのみSTAT6が重要な役割を果たし、刺激反応、DTHでは関与しないことが明らかにされたが、そのメカニズムをTNCBによる接触過敏症で検討した。まず、TNCBで感作したマウスを惹起後の耳介部の皮膚反応を病理組織学的に検討した。ワイルドタイプ(WT)マウスでは惹起部の皮膚は著明な浮腫とリンパ球、好酸球、好中球の浸潤を、認めたが、STAT6欠損マウスでは浮腫性の変化は乏しく特に好中球、好酸球の浸潤が減弱していた。また、TNCBで経皮感作後5日目に惹起したマウスの血清中の免疫グロブリンを検索したところ、STAT6欠損マウスではIgG1,IgEの産生が認められなかった。さらに、TNCBで惹起した耳介部位の皮膚を切除し抽出液中のサイトカインの動態を検討したところ、STAT6欠損マウスではIL-4,IL5が検出できなかったが、WTマウスでは検討できた。これらの結果より、接触過敏症誘導にSTAT6シグナル伝達によるTh2サイトカインが重要な役割を果たす可能性が考えられた。来年度は、さらにSTAT6が接触過敏症の感作誘導に重要な役割を果たすのか、惹起において重要な役割を果たすのか、受動転嫁実験にて検討してゆく予定である。STAT6欠損マウスにおける接触アレルギーの解析STAT6欠損マウスとワイルドタイプマウスに種々のハプテンで経皮感作して惹起後の耳介腫脹反応を経時的に比較検討した。その結果、STAT6欠損マウスでは耳介腫脹反応が減弱していた。
iPS細胞由来巨核球細胞および疾患特異的M蛋白を用いたPOEMS症候群の病態解明

POEMS症候群患者および多発性骨髄腫患者の骨髄中の形質細胞をSingle cell sortingした上で、cDNAライブラリー作成を行った。その結果、免疫グロブリン軽鎖および重鎖の配列が相同な複数の細胞が検出され、特にPOEMS症候群患者においては既報の特定の軽鎖が認められた事から、POEMS症候群の腫瘍クローン由来の配列と推定し、重鎖および軽鎖のクローニングを行った。その後、腫瘍クローン由来の重鎖および軽鎖を元に293T細胞内で抗体の産生を行い、その精製を行った。精製された抗体と各種細胞株を用い、フローサイトメトリーやウェスタンブロッティング法で抗体の認識する抗原のスクリーニングを行い、抗体が認識する候補蛋白として蛋白質Aを同定した。その作用や意義については不明である。また、imMKCLによる血小板産生については、共同研究者と連携し、feeder freeの方法を用いて血小板産生を行うことに成功した。その後、Anagrelideによる血小板産生抑制がどのように起きているかを確認するためにアポトーシスの有無、細胞周期の解析やRNA sequenceを行った。Anagrelideの投与を行うことでimMKCLにおいても血小板産生抑制が起こることを明らかにし、既報でAnagrelideによって発現が低下するとされるPF4などの遺伝子発現は低下していることが確認でき、また、アポトーシスは誘導しないこと、細胞周期に関連する遺伝子群の発現を変化させていることを確認できた。POEMS症候群に関連した遺伝子の一つであるVEGFの発現に関してはAnagrelideの投与前後で変化を認めなかったが、定常状態での評価であったことから病的にVEGFの産生亢進を起こしている状況での検討については今後条件検討を行う予定である。POEMS患者の骨髄中の形質細胞をSingle cell sortingし、cDNAライブラリーを作成する部分が技術的に最も困難と考えられたが、この1年の間にこの点をクリアーし、抗体産生ならびに標的候補の蛋白質の同定まで行うことが出来ている。また、imMKCLによる血小板産生も当初は実験系が不安定であり血小板産生が確認できない状態が続いたが、細胞培養の試薬などを連携研究者と協議しながら調整する事で実験系を安定させることができ、Anagrelideによる作用機序を明らかにすることが出来た。Anagrelideによる血小板産生抑制機構については2018年12月の米国血液学会総会にて発表を行い、また、現在Haematologicaに投稿中である。精製された抗体と各種細胞株を用い、フローサイトメトリーやウェスタンブロッティング法で抗体の認識する抗原のスクリーニングを行っているが、これまでのところ抗体が認識する抗原の同定には至っていない。また、imMKCLによる血小板産生については、当初は細胞の増殖や分化は問題なく行えていたものの、最終段階で血小板の産生をフローサイトメトリーにて確認したところ、成熟血小板が確認できなかった。このため、実験条件を連携研究者と相談しながら検討した結果、細胞培養の方法をFeeder freeの方法に変更したり、血小板産生の段階でShedding阻害剤を追加する事で繰り返し血小板産生が出来る様に実験系が安定したため、Anagrelideの添加実験を開始した。Anagrelideの添加濃度、タイミングの調整を現在行っており、既報でAnagrelideによって発現が低下するとされるPF4などの遺伝子発現をリアルタイムPCRで検討し、既報通りの発現低下を認めており、この条件で追加検討を行う予定である。POEMS患者の骨髄中の形質細胞をSingle cell sortingし、cDNAライブラリーを作成する部分が技術的に最も困難と考えられたが、この1年の間にこの点をクリアーし、抗体産生まで行う事が出来ている。また、imMKCLによる血小板産生も当初は実験系が不安定であり血小板産生が確認できない状態が続いたが、細胞培養の試薬などを連携研究者と協議しながら調整する事で実験系を安定させることができた。

また、imMKCLによる血小板産生については、共同研究者と連携し、feeder freeの方法を用いて血小板産生を行うことに成功した。その後、Anagrelideによる血小板産生抑制がどのように起きているかを確認するためにアポトーシスの有無、細胞周期の解析やRNA sequenceを行った。Anagrelideの投与を行うことでimMKCLにおいても血小板産生抑制が起こることを明らかにし、既報でAnagrelideによって発現が低下するとされるPF4などの遺伝子発現は低下していることが確認でき、また、アポトーシスは誘導しないこと、細胞周期に関連する遺伝子群の発現を変化させていることを確認できた。POEMS症候群に関連した遺伝子の一つであるVEGFの発現に関してはAnagrelideの投与前後で変化を認めなかったが、定常状態での評価であったことから病的にVEGFの産生亢進を起こしている状況での検討については今後条件検討を行う予定である。POEMS患者の骨髄中の形質細胞をSingle cell sortingし、cDNAライブラリーを作成する部分が技術的に最も困難と考えられたが、この1年の間にこの点をクリアーし、抗体産生ならびに標的候補の蛋白質の同定まで行うことが出来ている。また、imMKCLによる血小板産生も当初は実験系が不安定であり血小板産生が確認できない状態が続いたが、細胞培養の試薬などを連携研究者と協議しながら調整する事で実験系を安定させることができ、Anagrelideによる作用機序を明らかにすることが出来た。Anagrelideによる血小板産生抑制機構については2018年12月の米国血液学会総会にて発表を行い、また、現在Haematologicaに投稿中である。POEMS症候群患者の骨髄形質細胞から同定し、人工合成した抗体を用いた抗原のスクリーニングを引き続き行っていく。また、imMKCLのRNAシークエンスを行い、Anagrelideによる遺伝子発現の変化を確認していく。実験試薬に要する予算が他に確保できたため。次年度の学会発表の際に旅費として使用する予定
涙液安定性の向上を目的とした新しいマイボーム腺機能改善装置の開発

明らかなマイボーム腺機能不全(meibomian gland dysfunction ; MGD)を有さないが、ドライアイに関する愁訴を有する者19例38眼を対象とし、アイマスク型の温熱マッサージ器「アイマッサー」を1回5分、1日2回、2週間毎日使用させ、自覚症状、涙膜破壊時間などの眼機能の変化、一般所見などを観察した。対象は男性2名、女性17名。平均年齢33.4歳(±6.9歳)。短期間効果:5分間使用し、前後の変化(眼瞼角膜温度、涙液膜破壊時間(BUT)など)を評価した。治療的効果:1日5分使用を1日に2回行い、2週間続けた。結果BUTは短期間調査、治療的調査ともに著明改善した(P<0.01)。多くの症状が2週間の治療後に改善をみせた。DR-1上、干渉像の変化はないものから、厚みのある油層が観察されるようになる症例まで様々であった。5分間の温熱療法後、上眼瞼温度は1.6°C、角膜温度は1.3°C上昇した(P<0.01)。視力、眼圧、シルマー値に変化は認められなかった。調査した多くの自覚症状項目(瞼の重い感じ(p<0.001)、眼が疲れる、眼が乾燥する、異物感、充血する、不快感がある(以上5項目、p<0.01)、瞬きが多い、めやにが出る、眼がほてった感じがある(以上3項目、p<0.05))で改善が認められた。総合評価でも良好な成績が得られた。また、本試験では併せて眼精疲労に関する愁訴についてもアンケート調査を行ったが、これについても調査した症状の項目の半数以上で改善が認められるなど、良好な成績が得られた。これらのことからアイマッサーはドライアイ及び眼精疲労に関連した愁訴に対して有効であると考えられた。現在、論文執筆中である【目的】マイボーム腺機能不全(以下MGD)では、脂質の分泌が低下することによる蒸発亢進型ドライアイになると言われている。温熱圧迫療法は固形化した脂質を融解し、MGDの治療に有効であるとされている。今回、ドライアイ症状を有するが、臨床所見上MGDを伴わない成人に対して、新しい温熱圧迫器具(BEM-III)を用いて、MGD以外のドライアイに対する温熱圧迫療法の臨床的有効性を評価した。【方法】対象はドライアイに関する愁訴を有する19例38眼(平均年齢33.4±6.9歳)である。新しい空気式温熱圧迫器具を5分間使用し、前後の変化を測定した。また、1日2回5分間を2週間、同様に使用し、自覚症状変化と他覚所見を検討した。そして、眼瞼・角膜温度、BUT、シルマーテスト、マイボーム腺梗塞の有無、涙液油層の厚み、ドライアイ症状、視力、眼圧、角膜染色所見、眼底所見を評価した。【結果】温熱圧迫療法にて、BUTは、3.9±2.4秒から6.6±1.9秒へと改善を認めた。また、2週間の使用により、3.9±2.4秒から5.9±2.5秒へと改善した。また、涙液油層の厚みは増加した。また、ドライアイ関連愁訴も多く改善した。【結論】温熱圧迫療法は、マイボーム腺脂質を融解させ、分泌を促すことにより、涙液油層を改善させる。涙液安定性をさせることは、MGDに限らず、ドライアイ治療に対し、有用であると考えられた。今回の成果をふまえ、より効率の良い条件の設定を検討していく予定である。
シュウ酸カリウムを用いた象牙質知覚過敏処置-生成結晶の分析と梁部到達度の検討-

【研究目的】現在、シュウ酸カリウムを用いた象牙質知覚過敏処置法として、D.H.Pashleyらの30%シュウ酸カリウムと3%シュウ酸水素カリウムを用いた塗布法(以後塗布法と略記する.)と池田らの30%シュウ酸カリウムを用いたイオン導入法(以後イオン導入法と略記する.)の2つの処置法が報告されている.本研究では30%シュウ酸カリウムと3%シュウ酸水素カリウムを用いた塗布法と30%シュウ酸カリウムのイオン導入法により象牙質に生成する結晶に関する検討を行った.【材料と方法】歯髄を抜去したウシ下顎前歯I1を1ヶ月以内に被験歯として用いた.被験象牙質面に内径6mm孔のマスキングテープを貼り面積を規定した.その後50%クエン酸水溶液4mlを15秒間作用させた後、下記の2条件の実験群に分けた.1. 30%シュウ酸カリウムと3%シュウ酸水素カリウムを用いた塗布法被験象牙質面に30%シュウ酸カリウム20mlを含んだ小綿球を2分間、静置後、脱イオン水にて軽く水洗し、小綿球にて乾燥し、3%シュウ酸水素カリウム20mlを含んだ小綿球を2分間静置した.2. 30%シュウ酸カリウムのイオン導入法被験象牙質面に30%シュウ酸カリウム20mlを含んだ小綿球を置き、電流30μA、8分間陰極性通電を行った.○結晶のX線分析RINT2000で縦型ゴニオメータ(株式会社リガク社製,40kV,30mA)にて分析を象牙質表層に生成された結晶について行った.【結果】象牙質表層に生成された結晶を歯科用探針にて採取し、結晶のX線分析を行ったところ被験象牙質面上に生成された結晶は塗布法,イオン導入法ともにシュウ酸カリウムー水和物であることが判明した.【研究目的】30%シュウ酸カリウムと3%シュウ酸水素カリウムを用いた湿布法と30%シュウ酸カリウムのイオン導入法により象牙細管内に生成する結晶の象牙質表層部から歯髄側への距離、生成する結晶に関する検討を行った。【材料と方法】歯髄を抜去したウシ下顎前歯T1を1ケ月以内に被験歯として用いた.被験象牙質面に内径6mm孔のマスキングテープを貼り面積を規定した.その後50%クエン酸水溶液4mlを15秒間作用させた後、下記の2条件の実験群に分けた.1.30%シュウ酸カリウムと3%シュウ酸水素カリウムを用いた湿布法被験象牙表面に30%シュウ酸カリウム20mlを含んだ小綿球を2分間、静置後、脱イオン水にて軽く水洗し、小綿球にて乾燥し、3%シュウ酸水素カリウム20mlを含んだ小綿球を2分間静置した.2.30%シュウ酸カリウムのイオン導入法被験象牙質面に30%シュウ酸カリウム20mlを含んだ小綿球を置き、電流30μA、8分間陰極性通電を行った.〇象牙細管内に生成した結晶の象牙質表層部から歯髄側への距離の測定内径6mm孔のマスキングテープを貼った被験象牙質面を含むように硬組織切断機にて切り出し、割断した.通法に従い被験象牙質割断面に白金蒸着を施し、SEM観察を行い、生成された結晶の被験象牙質表層からの距離を測定した.【結果】1.30%シュウ酸カリウムと3%シュウ酸水素カリウムを用いた湿布法象牙質処理面から歯髄側への象牙細管内での結晶生成距離は平均46.200μmであった.2.30%シュウ酸カリウムのイオン導入法象牙質処理面から歯髄側への象牙細管内での結晶生成距離は平均83.490μmであった.またイオン導入法では湿布法に比べ象牙細管内により多くの結晶が観察された.イオン導入法により湿布法よりもシュウ酸イオンが象牙細管歯髄側へ移動し、結晶を生成するためと考えられた.【研究目的】現在、シュウ酸カリウムを用いた象牙質知覚過敏処置法として、D.H.Pashleyらの30%シュウ酸カリウムと3%シュウ酸水素カリウムを用いた塗布法(以後塗布法と略記する.)と池田らの30%シュウ酸カリウムを用いたイオン導入法(以後イオン導入法と略記する.)の2つの処置法が報告されている.本研究では30%シュウ酸カリウムと3%シュウ酸水素カリウムを用いた塗布法と30%シュウ酸カリウムのイオン導入法により象牙質に生成する結晶に関する検討を行った.【材料と方法】歯髄を抜去したウシ下顎前歯I1を1ヶ月以内に被験歯として用いた.被験象牙質面に内径6mm孔のマスキングテープを貼り面積を規定した.その後50%クエン酸水溶液4mlを15秒間作用させた後、下記の2条件の実験群に分けた.1. 30%シュウ酸カリウムと3%シュウ酸水素カリウムを用いた塗布法被験象牙質面に30%シュウ酸カリウム20mlを含んだ小綿球を2分間、静置後、脱イオン水にて軽く水洗し、小綿球にて乾燥し、3%シュウ酸水素カリウム20mlを含んだ小綿球を2分間静置した.2. 30%シュウ酸カリウムのイオン導入法

被験象牙質面に30%シュウ酸カリウム20mlを含んだ小綿球を置き、電流30μA、8分間陰極性通電を行った.○結晶のX線分析RINT2000で縦型ゴニオメータ(株式会社リガク社製,40kV,30mA)にて分析を象牙質表層に生成された結晶について行った.【結果】象牙質表層に生成された結晶を歯科用探針にて採取し、結晶のX線分析を行ったところ被験象牙質面上に生成された結晶は塗布法,イオン導入法ともにシュウ酸カリウムー水和物であることが判明した.