hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
地域難病患者会を核とした災害時にも対応できるネットワークの構築

本研究の最終目的は、「地域難病患者会を核とした災害時にも対応できるネットワークのあり方を明らかにすること」である。熊本地震時、難病患者は、食事・トイレ・薬等における様々な問題を抱えた。熊本県内には、2次医療圏ごとに地域難病患者会が存在する。そこで、この地域難病患者会を研究参加者として、アンケート調査、フォーカスグループインタビュー等を実施し、熊本地震の経験を元に、地域難病患者会を活かした災害時にも有効に機能するネットワークの構築を検証する。
マルチフォトン共焦点レーザー顕微鏡による蛍光分子糸球体機能解析

糸球体濾過を可視化して定量化することが出来た。糖尿病の初期からアルブミン程度の分子量の物質がラットにおいて漏出していることが判明した。その程度は糖尿病の罹病期間に応じて経時的に進行する。糖尿病誘発後2ヶ月ほどでスリット膜を構成する蛋白分子の配列に乱れが生じている。スリット膜を構成するポドシンとCD2APは、均等に配列不正が生じるのではなく、それぞれが局所的に構造変化を来していることが判明した。腎臓は、生体のホメオスタシスの要となる臓器の一つである。メタボリック症候群は、我国の健康課題であり社会的急務あるが、慢性腎不全に至り透析への導入となる例は、増加しつつある。糖尿病はその透析導入理由第一位を占めるが、早期には過剰濾過の状態に陥っている。今回我々はこの濾過を分子レベルで評価すべく、蛍光色素を用いて多光子共焦点レーザー顕微鏡(Leica TCS SP2 MP)を用いて、生理的条件化で可視化することを試みた。WistarラットにSTZ(50mg/kg)を投与することで糖尿病を誘発した。対照群には、生理的食塩水を静脈内投与した。セボフレン吸入麻酔科のラットに、Texas Redで標識した3,10,40,70kDaのデキストランを尾静脈から投与して、約7、8秒で濾過される様子を、生理的条件下で可視化した。FITCで標識した500KDaのデキストランは、血管内を緑色に描出するため、Hoechstは細胞の核を青く染色するために投与した。濾過される色素量は、分子量が大きくなると減少することが判明した。フィルトレート(濾液)を数値で評値で評価することも可能であることが判明した。糖尿病早期では4週から40kDa分子が漏れ出ており、8週ではさらに70kDaの分子も漏れ出すことが判明した。結論として、糖尿病早期には、過剰濾過の状態であるが、蛋白はすでに漏れ出している。糖尿病腎症の治療は、今後は早期から必要であることが示唆される。目的:本研究では、腎症の病態ラットを用いて生理的条件下(in-vivo)における濾過機能を経時的に解明することを目的とする。従来、腎微小循環の可視化については、摘出サンプルによるか病的な病態モデル等を用いたものに限られていた。我々のグループは、CCD生体顕微鏡を開発することにより、ノーマルな実験動物を用いてin-vivo観測での腎微小循環の可視化への道を独自に開いて来た。しかし、血管内皮や血球などサイズが10ミクロン程度の細胞の詳細な観察は困難であった。結果:早期糖尿病は、hyperfiltrationを呈し、コントロールラットに比して、低分子量の3k、10kのデキストランでは差はないが、より大きい分子量の40k、70kのデキストランは多く濾過されており、その程度は8週モデルで著しくなっていた。つまり、糖尿病の罹病期間が長くなるにつれて、糸球体におけるアルブミンと同サイズの分子の濾過も増化するので、糸球体濾過機能の障害が糖尿病早期から生じており、その程度が、増悪して行くことを意味する。結論:糖尿病早期のhyperfiltrationを可視化することが出来た。糖尿病の早期からすでに蛋白濾過の障害が生じており、罹病期間が長くなるにつれ、その障害も進行すると考えられた。本研究の目的は、経時的に病態が糸球体濾過に及ぼす影響と、経時的に病態が尿細管再吸収に及ぼす影響を調べることであった。結果としては、大きな成果として糸球体濾過を可視化するだけでなく定量化することが出来た。このことによって、糖尿病の初期からアルブミン程度の分子量の物質がラットにおいて漏出していることが判明した。これは、対照群と糖尿病群と比較することで明らかとなり、薬物によって誘発したI型糖尿病ラットモデルにおいて、その漏出の程度は糖尿病の罹病期間に応じて経時的に進行することも明らかとなった。しかし研究期間中に、糖尿病早期ではこのような漏出した分子が尿細管で再吸収されていることが報告され、蛋白尿として表面化して明らかな慢性腎不全を呈するのは、もっと後のステージであるということが判明した。そこで、この比較的大きな分子の糸球体からの漏出のメカニズムを探索すべく、濾過の現象に最も深く関わる篩としての機能を果たす、スリット膜の構造を蛍光抗体染色によって調べた。すると、糖尿病誘発後2ヶ月ほどでスリット膜を構成する蛋白分子の配列に乱れが生じていることが分かった。さらに6ヶ月の糖尿病ラットモデルを用いると、スリット膜を構成するポドシンとCD2APは、均等に配列不正が生じるのではなく、それぞれが局所的に構造変化を来していることが判明した。更に、濾過のビデオ画像を解析してみると、その局所的な構造変化を反映して、濾過そのものが均等ではなく不均一になっていることも判明した。
歯周病原性細菌Porphyromonas gingivalisの多剤排出ポンプ

歯周病の原因菌のひとつとされる細菌Porphyromonas gingivalisの多剤排出ポンプについて、以下のような事柄が明らかになった。すなわち、1.グラム陰性偏性嫌気性桿菌Porphyromonas gingivalisにはRND型多剤排出ポンプをコードする遺伝子群が2つ存在する(xepCAB、xepEFG)。そのうちのひとつXepCABは、生菌で実際に機能し種々の構造的に共通性がない薬剤(ノルフロキサシン、アクリフラビン、臭化エチジウム、SDSなど)を能動的に排出している。さらに、基質には複雑な構造をした薬剤のみならず、重金属イオンである銀イオンも含まれる。XepCABは偏性嫌気性菌におけるRND型多剤排出ポンプとしては、初めての例である。2.能動排出のエネルギーはプロトンの電気化学ポテンシャルに依存している。3.多剤排出ポンプを持つことから、しかも現在の歯周病の治療薬であるミノサイクリンもこのポンプの基質となることから、将来、耐性菌が生じる可能性が示唆される。4.コンピュータ解析によるとP. gingivalisは二成分制御系を6つ持っていると推定される。それらのうちのふたつ(∫imS∫imRとgppXについては、XepCABの発現制御への関与を示唆するデータは得られなかった。残りの4つの制御系については、その機能は不明である。5.P. gingivalisに存圧するMATE型多剤排出ポンプのホモログのうち、PG1117およびPG0636は種々の薬剤や重金属イオンの排出に関与していなかった。6.Pseudomonas aeruginosaのRND型多剤排出ポンプを阻害する薬剤MC-207,110は、XepCABも阻害し得ることを示唆した。歯周病原性細菌Porphyromonas gingivalls (Pg)には大腸菌のRND型多剤排出ポンプの遺伝子acrBに高い相同性をもつ遺伝子(ORF)がふたつ存在していた。さらに、その周辺にはRND型ポンプを構成する膜融合蛋白質(MFP)および外膜成分(OMF)と予想されるORFも存在し、オペロンを形成していると推定された。これらのことは、薬剤に対する感受性が比較的高いとされる本菌でも、acr系多剤排出システムが異物排出機構として機能していることを示唆していると考えられた。そこで、Pg標準株ATCC33277を用いて一段階の変異で多剤に対して耐性を獲得し得るかを調べたところ、多剤耐性株を分分離することができた。この株が耐性を示す薬剤のスペクトルはRND型ポンプの基質とある程度共通していた。そこで、Pgに多剤排出ポンプが存在することを確かにするために、まず、見出したORFに薬剤カセットを相同組み換えで導入することにより、遺伝子特異的変異株を作製した。これらの株に対する種々の薬剤の最小発育阻止濃度(MIC)を測定したところ、一方の遺伝子xepB及びその周辺遺伝子の変異株に対してはリファンピシン、エチヂウムブロマイド、ピューロマイシン、テトラサイクリン、SDSなどのMICが低下していた。もう一方のxepF及びその周辺遺伝子に変異を導入しても、MICに変化はなかった。蛍光色素アクリフラビンの親株ATCC33277とxepβ変異株における菌体内蓄積量は、変異株の方が約2倍多くなっていた。さらに、プロトンの脱共役剤CCCPを用いて、排出ポンプの駆動エネルギーがプロトンの電気化学ポテンシャルであることを示した。当初の目的のうち(1)薬剤排出ポンプ遺伝子の存在(変異株の作製とMIC測定)、(2)薬剤の菌体内蓄積、(3)駆動エネルギーの三点を明らかにした。

この研究により、偏性嫌気性菌でRND型排出ポンプの存在と機能を初めて示した(投稿中)。1.XepEFGの機能P.gingivalisに存在するふたつのRND型薬剤排出ポンプXepCABとXepEFGのうち、その機能が不明であったxepEFGをpBR322にクローニングし薬剤に超感受性の大腸菌KAM3株とAG102AX株とに導入した。すると、重金属イオンNi^<2+>、Co^<2+>に対する最小発育阻止濃度(MIC)がベクターのみを導入した株に対するそれらと比較して2倍に上昇した。即ち、金属イオンの排出への関与を示唆した。2.薬剤耐性と2成分系との関わりP.gingivalisが有する2成分系のうちPG1431/PG1432とPG1797の変異株について種々の薬剤や金属イオンに対するMICを測定した。それらは親株ATCC33277に対するMICと差はなかった。従って、これら二つの2成分系は薬剤耐性の発現調節には関与していないと考えられる。3.XepCAB/XepEFGの金属イオン耐性との関連XepCAB、XepEFGの変異株に対する重金属イオンのMICを測定したところ、XepCAB変異株に対するAg^+のMICが親株に対するそれに比べて1/2になっていた。つまりXepCABは銀イオンを排出している可能性が示唆された。種々の化学療法剤とともに重金属イオンも基質にするRND型多剤排出ポンプが初めて見出された。4.金属イオン耐性に関わる遺伝子とその変異株czcDはRND型重金属イオン排出Czcポンプ(Ralstonia sp.CH34)の機能発現に関わる遺伝子である。P.gingivalisにはそれに相同なPG1408が存在する。その変異株を作製し種々の薬剤のMICを測定したところ、Zn^<2+>のMICが親株のそれと比較して下がっていた。但し、他の薬剤のMICには殆ど変化がなかった。PG1408が重金属イオン排出に関わる可能性が示唆された。
モニタリング方略の使用を促進する心理学的要因の解明と介入手法の開発

「意味が分からなくなった」という,現在進行中の課題における理解状況の自己診断,すなわち「自己モニタリング(self-monitoring)」は,効率的かつ正確な文章読解において必要不可欠な認知機能の一つである(Pressley & Ghatala,1990)。なぜなら我々は,自分はここがわかっていないという状況を正確に把握できてはじめて,推理小説をそこから2,3ページ前まで戻って読み直してみる,登場人物の関係について少し頭の中で整理してみるというような,わからなくなった感覚から抜け出すための何らかの対処や工夫が可能となってくるからである。本研究では,読解活動における「自己モニタリング方略」の児童生徒への定着の困難さを問題として掲げ,これを解決するための介入方法の提案を目指した。本年度は,理論的知見および実践的意義から,介入内容として「方略知識の教授」と「学習観への介入」の2つに特に着目する。教育効果を測定するテストとしては、自己モニタリング方略の使用度が反映されやすい,英文全訳課題を採用した。具体的には、東京都・福岡県・愛知県・大分県の高校生約2000名を対象とし,「プレテスト→教育介入→直後テスト→3ヵ月後テスト→7ヵ月後テスト」というデザインによる時系列的調査をおこない,以下の3点について明らかにした。(1)学習観への介入は、自己モニタリング方略を直接的には促進しないこと。(2)方略知識を教授することによって、自己モニタリング方略の使用は一時的に促進されるが、長期持続は困難であること。(3)方略知識と推論方略を併せて教授することによって,自己モニタリング方略がはじめて長期的に使用され続けるようになること。「分からなくなった」「ここまでは分かる」という,現在進行中の課題における理解状況の自己診断,すなわち「自己モニタリング(self-monitoring)」は,効率的かつ正確な文章読解において必要不可欠な認知機能の一つである(Pressley & Ghatala,1990)。本研究は,読解活動における「自己モニタリング方略」の児童生徒への定着の困難さを問題として掲げ,これを解決するための介入方法の提案を目指した。介入の内容としては、理論的知見および実践的意義から,「方略知識の教授」と「学習観への介入」の2つに着目した。またテストは、自己モニタリング方略の使用度が反映されやすい,英文全訳課題を採用した。高校生820名を対象とし,「プレテスト→教育介入→直後テスト→3ヵ月後テスト→7ヵ月後テスト」というデザインによる時系列的調査をおこなった結果,次のようなことが明らかになった。(1)学習観に介入するだけでは自己モニタリング方略の使用には効果がないこと。(2)方略知識を教授することによって,自己モニタリング方略は一時的に使用されるようにはなるが,教授後3ヶ月以上経過すると使用されなくなること。(3)方略知識と推論方略を併せて教授すれば,7ヵ月後の時点においても自己モニタリング方略はよく記憶され使用され続けること。以上から,自己モニタリング方略の使用を長期間にわたって定着させるためには、学習観への介入および方略知識の教授のどちらも十分ではなく、方略知識に推論方略を併せて教えることが必要であることが明らかになった。文章を読んでいる途中でだんだん意味がわからなくなる,このような経験は誰にでもあるだろう。例えば長い推理小説を読んでいるとき,話の展開が複雑すぎて途中から筋を追えなくなってしまうことがある。このような,「あれ,いま分からなくなった」「ここまでは分かっている」という,現在進行中の課題における理解状況の自己診断,すなわち「自己モニタリング(self-monitoring)」は,効率的かつ正確な文章読解において必要不可欠な認知機能の一つである(Pressley & Ghatala, 1990;辰野,1997)。なぜなら我々は,自分はここがわかっていないという状況を正確に把握できてはじめて,推理小説をそこから2,3ページ前まで戻って読み直してみる,登場人物の関係について少し頭の中で整理してみるというような,わからなくなった感覚から抜け出すための何らかの対処,工夫,試行錯誤が可能となってくるからである。もしも,この自己モニタリングという機能が全くなかったとしたら,最終ページまでとりあえず読み終えてはみたものの,自分が「分かったのか分からなかったのか」よく分からないという状態に陥ってしまうであろう。本研究は,この「自己モニタリング方略」の重要性および児童生徒への定着の困難さを問題として掲げ,これを解決するための介入方法の提案を目指したものである。一連の実験の結果,(1)方略志向の学習観を促すだけでは自己モニタリング方略の使用には効果がないこと,(2)方略知識を教授することによって,自己モニタリング方略は一時的に使用されるようにはなるが,教授後3ヶ月以上経過すると使用されなくなること,そして,(3)方略知識と推論方略を併せて教授すれば,7ヵ月後の時点においても自己モニタリング方略はよく記憶され使用され続けること,が明らかになった。

なぜなら我々は,自分はここがわかっていないという状況を正確に把握できてはじめて,推理小説をそこから2,3ページ前まで戻って読み直してみる,登場人物の関係について少し頭の中で整理してみるというような,わからなくなった感覚から抜け出すための何らかの対処や工夫が可能となってくるからである。本研究では,読解活動における「自己モニタリング方略」の児童生徒への定着の困難さを問題として掲げ,これを解決するための介入方法の提案を目指した。本年度は,理論的知見および実践的意義から,介入内容として「方略知識の教授」と「学習観への介入」の2つに特に着目する。教育効果を測定するテストとしては、自己モニタリング方略の使用度が反映されやすい,英文全訳課題を採用した。具体的には、東京都・福岡県・愛知県・大分県の高校生約2000名を対象とし,「プレテスト→教育介入→直後テスト→3ヵ月後テスト→7ヵ月後テスト」というデザインによる時系列的調査をおこない,以下の3点について明らかにした。(1)学習観への介入は、自己モニタリング方略を直接的には促進しないこと。(2)方略知識を教授することによって、自己モニタリング方略の使用は一時的に促進されるが、長期持続は困難であること。(3)方略知識と推論方略を併せて教授することによって,自己モニタリング方略がはじめて長期的に使用され続けるようになること。
非線形分散型方程式に現れるパターンの安定性解析，特に平面孤立波の研究

空間2次元の長波長近似モデルであるKP-II方程式の単一の線ソリトンの安定性を研究した.1線ソリトンはその進行方向には指数的に減衰する一山のパルスで,進行方向と鉛直な方向には一様な進行波解である.前回の課題で1-line solitonが空間的に指数減衰する摂動に対して安定であることを示したが,線ソリトン解に摂動を加えて生ずる擾乱をline solitonの尾根の周辺にあるものと他の部分に分けて扱うことで,多項式オーダーで減衰する摂動を含むより広いクラスで安定性を証明した.同じく空間2次元の長波長近似モデルであるBenney-Luke方程式の平面孤立波の線形安定性を研究した.KP-II方程式は浅い水面波の運動を記述する空間2次元の完全可積分系のモデルであり,直線状の波形が交差する様子を記述する特殊解(multi-line soliton)を持つ.KP-II方程式無限個の保存量を持つものの,ハミルトニアンやさらに高次の保存量の主要部が不定であるため,変分構造を用いて安定性を証明することは難しい.またKdV方程式や水平方向に周期性を課したKP-II方程式の場合,可積分系の方程式が持つベックルンド変換がソリトン解の近傍と自明解の近傍の同型写像を与えるが,全平面でKP-II方程式を考える場合は,ベックルンド変換の線形化作用素は無限次元の核と余核を持ち,同様の性質は期待出来ない.本年度は主として2-line soliton解の安定性の研究に取り組んだ.二本のline solitonの高さと位相のずれを記述する4つの未知関数の偏微分方程式系によって記述されると予想されるが,解の挙動の主要部を記述する線形化作用素の4本の連続スペクトルを線形化Miura変換の核を計算することで求めた.またTzvetkov氏との共同研究で,KdV方程式の1-soliton解の2乗可積分な空間での安定性を方程式の変分構造や可積分性を使わずに,その重み付空間における強線形安定性を使って証明した(可積分構造を用いたMerle-Vega '03の別証明).Pego-Weinstein'94がソリトン解の線形安定性を使って重み付空間におけるKdV方程式のソリトン解の証明しているが,Tzvetkov氏との共同研究では,解をソリトン解の周辺の部分と伝播速度の遅い部分に分けて調べることで重みなしの2乗可積分な空間での安定性を証明できた.空間異方性のない関数空間におけるKP-II方程式のline soliton解の安定性を研究した.KP-II方程式は空間1次元の長波長近似モデルであるKdV方程式に波の進行方向と垂直な横方向の空間変数を加えた方程式であり,1 line soliton解はKdV方程式の1 soliton解を横方向に一様に拡張した解である.KdV方程式の1-soliton解の重み付空間における漸近安定性はPego-Weinstein('94)により知られており,KdV1-soliton解のKP-II方程式の解としてのtransverse stabilityは一昨年度に私自身により証明されている.その研究においてはPego-WeinsteinのKdV方程式の論文と同様にline solitonの進行方向に指数的に増大する重み関数を用いて証明したため,得られた結果ではline solitonの前方に加える摂動に強い制約があった.'00年頃にMartel, Merle氏らはKdV方程式の変分構造を利用してKdV 1-solitonのエネルギー空間における漸近安定性を証明しているが,KP-II方程式のエネルギー汎関数は解の時間大域的な挙動を調べる上で役に立たないため,彼らの方法を用いて重み関数の制約を解消することは難しい.今年度の研究では長波長近似モデルの特性を利用して,解を変調するline soliton,伝播速度の遅いKP-II方程式の微小解とみなせる部分,さらにその残りの部分に分けるて解析することで,「KP-II方程式の解の3乗可積分空間におけるノルムが時間大域的に小さなままであるような初期データ」をline soliton解に摂動として加えた場合には安定であることが証明できた.今後は括弧内の性質が成り立つような初期値のクラスを調べることが課題になる.KP-II方程式は浅い水面波の運動を記述する空間1次元のKdV方程式を空間2次元に拡張したモデルであり,KdV方程式のソリトン解の横断安定性を説明するモデルとして知られている.一昨年度の研究ではKdV方程式の1-ソリトン解を横方向に一様に拡張した線ソリトンは,波の進行方向に指数減衰する摂動に対して安定になることを証明したが,本年度は多項式オーダーの重み付き空間に属する摂動などより広いクラス摂動に対して線ソリトンが横断安定であることを示した.KP-II方程式は長波長近似モデルの一つであり,線ソリトン解に摂動を加えた後十分に時間が経つと,解は線ソリトンの部分とそのずっと後方でKP-II方程式の微小解のように振る舞う部分に分離すると考えられる.後者の部分を粗っぽく「初期時刻において線ソリトン解に加えた摂動を初期値」とするKP-II方程式の微小解で表わすことにすると,残りの摂動部分は指数的な重み付き空間に属する.そのため,この部分は一昨年度の結果と同様に指数的な重み付き空間における線ソリトンの線形安定性の結果を使って評価することができた.

横方向の幅が有限の場合と異なり, KP-II方程式の線ソリトンの尾根に沿って摂動が伝播する様子は,常微分方程式系ではなく,線ソリトンの局所的な進行速度と傾きを未知関数とするBurgers方程式系で記述される.本年度の研究では2乗可積分な初期値に対して,このBurgers方程式系の解が時間大域的に単調性公式をみたすことを証明できたため,線ソリトンに加える摂動の鉛直方向の減衰条件は2乗可積分であれば十分なことが分かった.線ソリトンに対する摂動を伝播速度の違う部分を分けて取り扱うことで従来用よりも広いクラスの摂動に対して線ソリトンの横断安定性を証明できた.空間2次元の長波長近似モデルの一つであるBenney-Luke方程式の平面孤立波解の線形安定性を研究した.これまでの研究で空間2次元の代表的な長波長近似モデルであるKP-II方程式の線ソリトンが摂動によって変調する様子は,線ソリトンの周りでの線形化作用素の原点付近に現れるレゾナント連続固有値の族と関係があり,対応する連続固有モードの時間発展する様子がBurgers方程式系によって記述されることが分かっている.KP-II方程式は完全可積分系なため,線ソリトン解の周りでの線形化作用素のスペクトルは具体的に求積出来るが,空間2次元のBenney-Luke方程式を含む他の3次元水面波の長波長近似モデルの場合は,その平面孤立波解の周りでの線形化作用素を具体的に求積することはできない.またKP-II方程式が波の主な進行方向と鉛直な方向には波が緩やかに変化することを前提とした空間異方的なモデルであるのに対して, Benney-Luke方程式は水面波の基礎方程式同様に空間等方的である.本年度の研究では空間2次元のBenny-Luke方程式の平面進行波解の線形化作用素の原点付近に現れるレゾナント連続固有値を空間1次元のBenney Luke方程式の孤立波解の周りでの線形化作用素の持つ0固有値が横断方向への長波長の摂動によって分岐したものと理解することによって近似的に求めることが出来た.また振幅の小さい平面孤立波はKP-II方程式の線ソリトンと類似のスペクトル構造を持ち線形安定であることを証明した.さらに原点付近にあるレゾナント連続固有値に対応する連続固有モードが線形化方程式に従って時間発展する様子は,KP-II方程式の線ソリトンが摂動を加えた時に変調する様子と類似していることも分かった.空間2次元の長波長近似モデルであるKP-II方程式の単一の線ソリトンの安定性を研究した.1線ソリトンはその進行方向には指数的に減衰する一山のパルスで,進行方向と鉛直な方向には一様な進行波解である.前回の課題で1-line solitonが空間的に指数減衰する摂動に対して安定であることを示したが,線ソリトン解に摂動を加えて生ずる擾乱をline solitonの尾根の周辺にあるものと他の部分に分けて扱うことで,多項式オーダーで減衰する摂動を含むより広いクラスで安定性を証明した.同じく空間2次元の長波長近似モデルであるBenney-Luke方程式の平面孤立波の線形安定性を研究した.複数のline solitonが交差する多ソリトン解の安定性が最も興味深い問題であるが,その前段階としてKdV方程式の多ソリトン解のKP-II方程式の解としての横断的安定性の研究を開始した.以前のFermi-Pasta-Ulam方程式の研究では,多ソリトン解の安定性を証明する際に,解を伝播速度の異なる部分に分解して議論する必要があった.長波長近似モデルという共通の特性を持つKP-II方程式も同様であると考えられ,今年度の研究はその雛形として重要である.
衣類洗浄および染色に応用する泡の粘弾性特性ならびに電気的性質の測定装置の試作研究

泡膜の物性はディメンションが小さく,また多くの因子が相互に関与するため非常に複雑であるが,本試験研究ではまず泡沫のぬれ現象,排液現象,安定性,流動特性のほか泡膜の粘弾性,界面活性剤の吸着特性などの解明を目的として静電容量測定法による泡沫の泡倍率測定装置(泡沫水分体積分率測定装置)および泡膜排液測定装置と,泡膜の粘弾性測定装置,泡接触角測定装置,動的泡膜張力測定装置,液体膜2軸延伸装置および泡膜の動的ぬれ抵抗測定装置などを試作し,改良を重ねてきた。従来精密な測定が不可能だった泡沫などの気液界面の物性はエレクトロニクス技術,センサ-技術の導入によって計測システムが開発された結果,総合的に測定が可能になる方向を見出している。水系洗浄および染色の利点を生かした気液系の泡沫洗浄ならびに泡沫染色においては泡沫の物理化学的挙動がその効果に大きな関連を有していることが明らかになった。最も難度の高い泡膜の粘弾性測定用の試作装置については当初共鳴振動現象によって泡膜を崩壊させ,振動の数学的解析から求める方向で計画し検討したが,当初の計画を大幅に変更し,本試験研究ではアナログメ-タの可動コイルを利用して直接泡膜の粘弾性(表面ずり粘弾性および面積粘弾性)を測定する装置を試作した。なお泡膜の粘弾性測定は動的泡膜張力測定装置を用い,気泡内外部における差圧を測定し,気泡膜の面積の変化量およびその変化速度との関連から算出する方法でも検討した。粘弾性を測定するのには泡膜に変形を与えなければならないが,変形を起させる力をできるだけ大きくして測定可能な量にすることが必要で,今後さらに検討する余地が多く残されている。また泡膜の厚さの変化は泡の形成,生長,崩壊など泡の一生を探る上で重要なパラメ-タであるため,その測定にあたっては今後連続自動化の方向で光散乱法による測定も考慮している。水系洗浄および染色の利点を生かした気/液系の泡沫洗浄および染色では泡膜の粘弾性特性や種々の泡沫の物性などが洗浄ならびに染色効果に大きな関連を有することを明らかにしてきた。しかし泡沫の物性を詳細に解明する既存の測定装置がないため筆者らはまず泡膜の粘弾性特性や薄膜の排液速度、泡沫密度、泡膜の厚さ、泡沫による繊維、布およびフィルムなどの基質のぬれ速度などを測定する装置を試作している。泡膜の粘弾性特性は粘性と弾性を表わすパラメ-タ-がそれぞれin-dependentではなく、複合された所謂Rheologicalな性質として直並列回路(複合回路)で表わされる。泡膜の粘弾性測定は単分子膜の表面特性の測定と原理的には同じであるが、測定対象が基本的に異るところに問題がある。まず大小の同心Ringに泡膜を張り、Outerringを固定してInnerringを回転させ、その抵抗を検知する方法を試みている。抵抗の度量としては電気測定用analog meterのmovingcoil部を利用し回転に要する電流と角度を精度よく測定する装置を設計している。なお内外側ringの2つのholderはそれぞれ微動装置につけて配置し、X,Y,Z軸を微動調整することができ、内外側ringのcenteringを行う。本装置は測定技術の限界に挑む実験として極めて興味深いが、Ptringが薄膜におおわれているためにhydroplane現象によるSlipを考慮するなどの問題も残されている。また薄膜の排液速度の測定装置としては造膜枠に張った液体薄膜を静電コンデンサの極板間に配置し、時間とともに変化する液体薄膜の静電容量を測定する方法を考案している。

なお静電容量の測定にはいくつかの方法があるが、本実験ではAC矩形波による電流変化をFollowする方法を採用し、液体薄膜の排液による膜厚さの低下を測定している。このほかぬれ促進用測定装置、泡沫密度測定用装置を合わせ試作している。気/液系媒体の利点を生かした泡沫洗浄ならびに泡沫染色においては泡沫の種々の物性が洗浄性,染色性に大きく関連することを明らかにしてきた。筆者らはこれまで泡沫の物性を詳細に解明する既存の測定装置がないため,まず泡膜の動的表面張力,気泡膜の拡張粘弾性,薄膜の排液速度,泡沫密度,液体膜の厚さなどを測定する装置を試作している。本年度はこれら測定装置を用いて界面活性剤水溶液(または酸性染料,分散染料を含むバルク液)から生成した泡の動的物性について種々検討し,測定装置を部分的に改良するとともに,泡沫による繊維,布およびフィルムなどの基質のぬれ速度などを測定する装置を試作した。本装置はガラス管内の単一泡膜による動的ぬれを測定する装置で,(1)泡膜を形成し移動させるガラス管固定部,(2)リニアヘッドとシリンジからなる気体流動調節部,(3)圧力センサ-とアンプからなる検圧部,(4)泡膜によるガラス管のぬれにともなう抵抗力を計算するためのデ-タ処理部などから構成されている。熱力学的には完全に拡張ぬれを示すはずの界面活性剤水溶液/基質の組み合わせであっても,溶液が泡沫状態ならばぬれ広がることなく,かなりの仕事を加えなければ泡沫を基質表面に広げることはできない。この泡沫によるぬれに関する研究としてはT.G.Sveda,Jr(1986)らの剪断下における泡沫/布間の相互作用に関する研究などが挙げられるが,その機構の解明のためには泡沫を形成する単一泡膜と基質間にある動的性質について検討することが必要と考えられる。泡沫の流動もまた泡沫洗浄,泡沫染色および泡沫加工をはじめ種々の泡沫利用の基礎となる重要な問題点であるが,その解明についても泡沫を形成する泡膜と基質との間での動的な性質が基本となると考えられる。泡沫密度測定装置については前年度からひきつづき検討している。泡沫を応用する洗浄ならびに染色などの種々の工程においては泡沫の物理化学的挙動の解明が多く必要とされるが,泡沫,気泡などの気液界面の特性のうち特に動的特性を把握する精密な測定が従来不可能なため市販の測定装置がない。泡膜の物性はディメンションが小さく,また多くの因子が相互に関与するため非常に複雑であるが,本試験研究ではまず泡沫のぬれ現象,排液現象,安定性,流動性のほか泡膜の粘弾性,吸着特性などの解明を目的として静電容量測定法による泡沫の泡倍率測定装置(泡沫水分体積分率測定装置)および泡膜排液測定装置と,泡膜の粘弾性測定装置,泡接触角測定装置,動的泡膜張力測定装置,液体膜2軸延伸装置および泡膜の動的ぬれ抵抗測定装置などを試作し,さらに改良を重ねてきた。その結果,従来精密な測定が不可能だった泡沫などの気液界面の物性はエレクトロニクス技術,センサ-技術の導入によって計測システムが開発され,総合的に測定が可能になる方向を見出している。なお最も難度の高い泡膜の粘弾性測定用の試作装置については当初共鳴振動現象によって泡膜を崩壊させ,振動の数学的解析から求める方向で計画し検討したが,当初の計画を大幅に変更し,本試験研究ではアナログメ-タの可動コイルを利用して直接泡膜の粘弾性を測定する装置を試作した。
近代アジアと日本の女性の社会観の形成における国際教育修道会の影響に関する比較研究

近世以来、アジア地域のカトリシズムの中心地となっており、また、主な比較対象国であるフィリピンにおける国際教育修道会の教育について、その歴史と実践及び修道会・関係施設現地研究者たちとの面談調査を実施、また、現地の教育関係者の大会において研究発表を行い、今後の研究方向について意見交換を実施した。また、現地調査では、アジア地域のカトリックの神学生や修道者たちが集うマニラ地域の学校において、アジアにおける国際修道会・宣教会の教育に関する移動などについて調査を実施し、今後の調査のためのラポールを形成した。さらにはこれらの現地調査を通じて、今まであいまいであった当時アジアにおける拠点であったマニラ及び東アジアの資料が現存する古文書館を特定することができ、次年度以降の研究の発展の基盤をすえることができた。なお、比較としての日本に関する研究においては比較対象として同じいくつかの国際教育修道会に関する資料整理、デジタル化を実施した。資料が散逸する時期となっていることから、デジタル化された資料を基に個々の歴史資料の判別・整理作業を実施している。また、アジア・太平洋戦争下におけるカトリシズムに基づく諸学校の動向について、とりわけ国際修道会及びローマ教皇庁などとの関係や影響について研究を実施するとともに、アジアにおけるカトリシズムの教育に大きな影響を与えたパリ外国宣教会の日本における活動についての基本的知見を整理し、史料状況の探索を開始した。フィリピンでの国際教育修道会における教育実践の調査・分析とともに、アジア諸国の修道者の養成地としてのフィリピンにおける修道者の交流・移動に関する調査を実施、分析、また、それらを発表する場を得たことにより、現地研究者との意見交換が可能となったことは共同研究の醸成という意味でも大きな収穫であったと考える。日本との複雑な関係もあるフィリピンにおける史的研究を進めるうえでのラポールを得ることができたことも今後の研究を進めるうえでの大きな助けとなった。大きな枠組みとしてのアジアにおけるパリ外国宣教会の影響に関して、今までの広域での研究に加え、それらが日本国内の教育事業にどのような影響を与えてきたかについてとらえなおすための史料状況の探索が開始されたことで次年度以降の研究の進展への基盤が整いつつある。日本の教育行政的な視点からも国際教育修道会の教育事業への海外からの影響、およびその歴史的におかれた立ち位置などについて研究を進展させることができた。今年度に引き続き、国際教育修道会における教育実践、およびその諸アジア地域との交流などを確認するとともに、研究を進める中でマニラ及び東アジア地域の国際教育修道会に関する歴史資料が保存されている古文書館の特定ができたことから、次年度は研究協力者の協力を得て、そこでの資料収集のための実地調査を検討している。国内のカトリシズムに基づく教育事業に関する研究は今年度同様、日本における国際教育修道会の教育実践とローマ教皇庁や国際教育修道会本部など海外からの影響を歴史的に明らかにするとともに、この時代のアジアにおけるカトリシズムの宣教及び教育事業に関して大きな力をもったパリ外国宣教会の影響、とりわけ、近代におけるパリ外国宣教会のアジア宣教活動における女子教育の位置づけを中心に検討を行う。

国内のカトリシズムに基づく教育事業に関する研究は今年度同様、日本における国際教育修道会の教育実践とローマ教皇庁や国際教育修道会本部など海外からの影響を歴史的に明らかにするとともに、この時代のアジアにおけるカトリシズムの宣教及び教育事業に関して大きな力をもったパリ外国宣教会の影響、とりわけ、近代におけるパリ外国宣教会のアジア宣教活動における女子教育の位置づけを中心に検討を行う。海外古文書館調査が日程の関係で次年度に移動されたため。
シリサイド環境半導体材料による固体コジェネレーション素子の開発

本研究は、省資源・省エネルギー・環境低負荷等を視野に入れたシリサイド環境半導体である熱電変換材料マグネシウム・シリサイド(Mg_2Si)を対象としている。本研究の目的は以下に示すものである。(1).Mg_2Siバルクの基礎物性・キャリア伝導機構の解明これらをふまえ,当該年度は,(1).任意形状結晶育成法によるMg_2Siへの不純物導入とp形・n形導電性の制御(2).結晶学的、電気的物性、熱電特性の研究について基礎的な所見を得ることを主として行った。その結果,以下に示す知見が得られた。(1).任意形状結晶育成法において、特定の物質をるつぼ内壁へコーティングすることにより融液の「濡れない」環境が顕著となり,単結晶Mg_2Si試料作製の条件が明らかとなった。(2).このるつぼ内壁へのコーティング材から結晶育成時におけるMg_2Siへの不純物の混入はほぼ無く、高純度なバルクMg_2Siの育成が可能となった。(3).従来は難しいとされていたp形Mg_2Siの育成について、不純物種を変え導入実験を行い、特定の不純物においてドーピング特性に優れることが見いだされた。(4).任意形状結晶育成法において、原材料の装填状態と育成結晶の熱伝導特性に相関のあることが見いだされた。これら知見は,再現性良くp形・n形のキャリア伝導を制御しつつ,高品質な一体成型Mg_2Siバルク多結晶を製作するプロセス上重要であり,高効率・高性能熱電変換素子の試作につながるものであると考えられる。(1).Mg_2Siバルクの基礎物性・キャリア伝導機構の解明これらをふまえ,当該年度は,(1).ブリッジマン法をベースとした任意形状結晶育成法による高純度多結晶Mg_2Siバルク材結晶育成の条件抽出(2).育成バルク基板の熱電気的物性評価について基礎的な所見を得ることを主として行った。(1).任意形状結晶育成法実現に不可欠な「濡れない」るつぼ材の探索を行い,数種類の素材が同育成法に有効であることが確認された。(2).高純度な多結晶バルクMg_2Siが育成できる条件の抽出ができ,Mg_2Si本来の熱電特性が明らかとなった。これにより,従来より報告されているグラファイト系で育成されていた結晶の熱電特性は,Cが導入された効果を内包している可能性があることが明らかとなった。(3).従来は難しいとされていたp形Mg_2Siの育成に成功した。これら知見は,次年度以降,再現性良くp形・n形のキャリア伝導を制御しつつ,高品質な一体成型Mg_2Siバルク多結晶を製作するプロセス上重要であり,高効率・高性能熱電変換素子の試作につながるものであると考えられる。
発達障害の自己・周囲の認識の差からみた2次障害の予防策の検討

国際的に頻用されるメンタルヘルススケールであるASEBAの日本版を全年齢層に対して整備し、それぞれ論文化するとともに一般に利用可能な状況とした。解析結果からは、児童では、米国に比べ問題行動の指摘は概して少ないが、低学年男児の攻撃的行動、思春期のひきこもりが申告されやすかった。成人では、発達特性が高い群では、自己が認識する特性が他者からの認識よりも高く、その差が大きいほどメンタルヘルスの自己評価は悪く他者評価は軽く、特に女性にその傾向が見受けられた。受診群ではその差は少なく、発達特性が強いが受診に至っていない人は、周囲から理解されにくく、その一方でカモフラージュして生活していることも窺われた。自閉症をはじめとする発達障害は、生来の特性に加え、うつ、神経症、不眠、引きこもり、更には、反社会行動、妄想、パーソナリティなどの2次障害を併発しやすいことは知られている。同じような生得的特性であっても、その後に社会適応するか、2次障害、中でも重篤な精神障害・反社会行動をきたすかは極めて大きな違いであり、少なくとも重篤な2次障害は事前に予防策をとる必要がある喫緊の重要な課題である。このため、生来の特性と、その後のメンタルへルスとの関係を解析し、予防を目指すのが本研究の目的である。まず、国際的に頻用されるメンタルへルススケールであるASEBAの日本版の標準化を行い、その論文化、また配布できるよう整備を行った。乳幼児から高齢者、自己評価・他者評価の計9様式があるが、そのうち、27年度は、全国3600例に及ぶ児童用の保護者評価と、741例分の教師評価から、それぞれの標準値を完成させた。また、これら一般データに加え、京都大学医学部附属病院精神科神経科への受診患者にも調査を行い、特性と睡眠を中心とした2次的な問題との関連性につき解析を行った。外来患者データでは、欠損値を認めるデータを除外したところ、309名、初診時平均年齢は19.9歳(SD11.8)であった。一般的な知見同様、年齢は睡眠時間(r=-0.34、p<0.01)、ADHD症状(多動:r=-3.1、p<0.01及び不注意:r=-0.14、p<0.05)に負の相関を認め、睡眠リズム障害(r=0.18、p<0.01)にも有意に正の相関を認めた。年齢を制御変数として影響を除外したところ、睡眠時間ー多動(r=0.12、p<0.05)と睡眠リズム障害ー不注意(r=0.23、p<0.01)に正の相関を認めた。発達障害とメンタルへルスを測定する評価スケールの確立は、各年齢層に応じて、着々と整備し、順次、論文公表に至っている。それらの関係性の解析についても、まずは、睡眠、ADHDという観点から、患者群と一般群を比較しながら、方向性を探り、得られた結果の学会発表を行った。今年度は昨年度に引き続き、まず、国際的に頻用されるメンタルヘルススケールであるASEBAの日本版の整備を継続させた。乳幼児(保護者評価、保育士評価、言語発達評価)、児童(保護者評価、教師評価)、思春期自己評価、成人(自己評価、他者評価)、高齢者(自己評価、他者評価)の計10様式があるが、児童の両様式、乳幼児の保護者評価は、全国数千例のデータと、臨床群100ー200例からの標準化を終え、信頼性、妥当性の検証もそれぞれに行い、論文も完成した。その他は、一般群の標準値作成は完成し、論文もほぼ終えているが、臨床群を収集し比較検討を開始した。得られたデータからわかったことは、以下のようであった。特に18-35歳女性の自己評価の「不安/抑うつ」は他の群に比べ有意に高く、また、他者評価、米国の自己評価よりも高く、日本人の若手女性のメンタルヘルスに対する理解の不足が伺えた。保護者による児童の評価では、男児では「注意の問題」、「規則違反的行動」、「攻撃的行動」において,女児では「不安/抑うつ」と「身体愁訴」に問題が指摘される傾向があった。また、低年齢群では「不安/抑うつ」,「社会性の問題」,「思考の問題」,「注意の問題」,「規則違反的行動」、「攻撃的行動」に,高年齢群では「引きこもり/抑うつ」の問題が指摘されやすかった。教師評価では、女児に問題は指摘されず、男児が「引きこもり/抑うつ」,「社会性の問題」,「注意の問題(不注意および多動・衝動性)」,「規則違反的行動」、「攻撃的行動」が指摘されやすかった。自己評価では、男児が「注意の問題」、「規則違反的行動」、「攻撃的行動」が高かった。概して、日本人の子どもは、米国と比べて、問題が低く見積もられていた。また、今年度は、客観的なデータとして感覚入力の脳反応の解析も追加した。発達障害とメンタルヘルスの自己評価、他者評価を測定するツールは、ほぼ完成に近づいている。それらの集計を、系統立てて行い、それぞれに論文化、また海外との比較も行った。今年度は、国際的に頻用されるメンタルヘルススケールであるASEBAの日本版を完成させた。

乳幼児(保護者評価、保育士評価、言語発達評価)、児童(保護者評価、教師評価)、思春期自己評価、成人(自己評価、他者評価)、高齢者(自己評価、他者評価)の計10様式があるが、計15000例のデータを全国から収集し、標準値を定め、論文を様式ごとに発表した。さらに、臨床群を追加した、標準値も作成し、販売に向けて、整備している。また、この全国データを収集する際に、成人に対してはASSQ(Autism Spectrum Screening Questionnaire)やWHO-QOLも同時に配布した。発達特性は本来、幼少期の発達歴聴取による幼少期の特性で評定、診断をするために、成人に対しても子どもの頃を回想してASSQを記入いただいた。ASSQが19より高い群と低い群に分けると、高い群では、自己が認識する特性が、他者が認識する特性よりも高い傾向にあった。そして、その差が大きいほど、メンタルヘルスの自己評価は悪く、他者評価は軽かった。中でも、女性にその傾向が見受けられた。以上は非臨床群のデータであるが、精神科受診患者で同様の調査を行ったところ、特性の強さやメンタルヘルスの悪さは高かったが、自他評価の差は少なかった。これらより、発達特性の強い人のうち、受診に至っていない人は、周囲からの理解や支援が得られにくく、また、それをカモフラージュして、生活していることも窺われた。その苦しい状況から破綻していかないよう、今後は、受診していない発達特性の強い人への支援が望まれる。国際的に頻用されるメンタルヘルススケールであるASEBAの日本版を全年齢層に対して整備し、それぞれ論文化するとともに一般に利用可能な状況とした。解析結果からは、児童では、米国に比べ問題行動の指摘は概して少ないが、低学年男児の攻撃的行動、思春期のひきこもりが申告されやすかった。成人では、発達特性が高い群では、自己が認識する特性が他者からの認識よりも高く、その差が大きいほどメンタルヘルスの自己評価は悪く他者評価は軽く、特に女性にその傾向が見受けられた。受診群ではその差は少なく、発達特性が強いが受診に至っていない人は、周囲から理解されにくく、その一方でカモフラージュして生活していることも窺われた。順次、全国調査からの解析を進める。成人用と児童用が完成しており、次に、乳幼児保護者、乳幼児保育者、思春期自己評価、高齢者用と進める予定である。その上で、一般群と患者群を比較しながら、ADHD、睡眠以外の特性にも視野を広げて、関係性の解明を行う。発達障害の要素は、スペクトラムの性質を持つため、特性ごとに程度を考慮して、フィールドデータ、受診患者データの質についても検討する。尺度の標準化、論文化に加え、発達特性とメンタルヘルスに関する解析結果の論文公表も行っていく。ツールの整備と全国データの収集、それらの集計はほぼ完了したので、次には、臨床群のデータを収集し、発達特性と、その認識度の差、その後のメンタルヘルス、また客観的に認知機能、脳反応との関連を多角的に解析する。児童精神医学代表者の異動に伴い、繰越のできない運営費が発生し、当該研究の予定使用額は、その費用からの補てんを行った。また、28年度にフィールド調査を控えているために、まとまった額を28年度に組んでおくことが実用的と判断した。これらのため、研究遂行自体は予定通り順調に遂行しているが、費用の面では繰越とした。最終年度である次年度に臨床群の収集や集計のための人件費が予想されること、また、予期しない出費がかさむことを想定し、節約しながら進めたところ、30万円ほどの繰越金が生じた。メンタルヘルスと発達障害評価尺度の同時評価の調査をフィールドと精神科受診患者で引き続き行う。フィールドは、幼稚園、学校、成人など、ライフステージごとに分けて行う。その際の、調査費、旅費、人件費、謝金への使用を予定している。
胃におけるGATA転写因子の制御機構とクロライドイオン輸送の解析

本年度の研究行なった。具体的には以下の示す。1、転写囚子GATA-GTlまたはGATA-GT2と相互作用するタンパク質の検索融合タンパク質を用いた因子の検索:GATA-GTl、GATA-GT2と直接的に相互作用するタンパク質を調べるために、HA(ヘマグルチニン)タグを付けたGATA-GTlまたはGATA-GT2との融合タンパク質を大腸菌で大量に調製した。そのれら融合タンパク質をプローブとして、胃粘膜組織より調製したcDNAライブラリーの発現系を用いて、相互作用するタンパク質の分離を行なった。スクリーニングにより複数の陽性クローンを分離し、その塩基配列の決定した。幾つかの新規のクローンの中に、ノーザンブロットなどにより組織特異的発現が観察されるものがあった。現在は酵母Two-hybrid法滋を用いて相互作用に必要な領域を検討中である。2、胃におけるクロライドイオンの輸送とそのチャンネルの同定胃のクロライドチャンネルを同定するために、アフリカツメガエルの卵を用いた発現クローニングを行なった。胃粘膜より調製したcDNAをアフリカツメガエルの卵に打ち込み、クロライドイオンの透過を電気生理学的に測定したが、これまでに特異的なクローンは得られていない。胃粘膜のcDNAの再調製と測定感度について再度検討しなおしたが、チャンネル活性を示すクローンは同定できなかった。融合タンパク質を用いた因子の検索:GATA-GT1、GATA-GT2と直接的に相互作用するタンパク質を調べるために、HA(ヘマグルチニン)タグを付けたGATA-GT1またはGATA-GT2との融合タンパク質を大腸菌で大量に調製した。それら融合タンパク質をプローブとして、胃粘膜組織より調製したcDNAライブラリーの発現系を用いて、相互作用するタンパク質の分離を行なっている。現在までに、複数の陽性クローンを分離できた。さらに、この方法によって分離されたクローンの塩基配列の決定を進めるとともに、ノーザンブロットなどを用いて得たクローンを選別していく予定である。2、胃におけるクロライドイオンの輸送とそのチャネルの同定胃のクロライドチャネルを同定するために、アフリカツメガエルの卵を用いた発現クローニングを行なった。胃粘膜より調製したcDNAをアフリカツメガエルの卵に打ち込み、クロライドイオンの透過を電気生理学的に測定したが、現在までにこの方法により、特異的なクローンは得られていない。今後は、胃粘膜のcDNAの再調製と測定感度について再度検討しなおし、チャネルを同定を進めていく予定である。
肥満・加齢に関連した慢性腎臓病悪化進展因子の同定

本研究は肥満や加齢に伴う腎疾患の予後悪化、特に腎予後を規定する尿蛋白の増加に起因した尿細管病変の悪化に関連する新規慢性腎臓病進展因子を同定し、その機能解析、臨床応用への可能性を検討する事を目的としている。これまでに実施した肥満や加齢に関連したマウス腎疾患モデルを用いた網羅的遺伝子解析から、近位尿細管細胞における炎症、線維化、細胞死を制御しうる慢性腎臓病関連遺伝子としてGene X遺伝子を新たに同定することに成功した。本研究は肥満患者の増加ならびに高齢化社会を背景に増加し続ける慢性腎臓病の病態を解明し、新たな治療標的分子を同定することにある。肥満マウスならびに加齢マウスに対し尿蛋白負荷尿細管間質病変モデルを作製すると若年非肥満マウスに比し尿細管間質病変の程度が有意に増加する。そこで、若年非肥満マウス、若年非肥満マウスに尿蛋白負荷を行った群、肥満マウスに尿蛋白負荷を行った群、加齢マウスに尿蛋白負荷を行った4群から摘出した腎における遺伝子発現をDNA maicroarray法を用い、肥満と加齢に伴う尿蛋白誘導性腎障害の増悪に関連しうる9つの候補遺伝子を同定した。さらに、これら9遺伝子に対するsiRNA(遺伝子発現)ならびに過剰発現レトロウイルスを作製し、培養尿細管細胞における抗炎症作用、抗細胞死作用を検討した。結果、9つの候補遺伝子のうち一つの遺伝子発現変化が蛋白尿類似刺激による近位尿細管細胞の炎症(炎症性サイトカインの増加)、アポトーシスを制御しうる遺伝子であることが明らかとなった。この新規遺伝子に対する近位尿尿細管特異的トランスジェニックマウスならびにコンディショナルノックアウトマウスの作製を行い、現在F2マウスまでの獲得に成功している。本実験により肥満や加齢に伴う尿細管間質病変悪化に関わる新規尿細管障害関連遺伝子の同定に至った。今後マウスでの病態への関わりを検討することで、同遺伝子の新規治療標的としての可能性を更に追求する。腹腔内アルブミン連日注入により作成した尿蛋白モデルを用いた検討で、非肥満若年マウスに比し、肥満及び24ヵ月齢(加齢)マウスでは、尿蛋白による腎尿細管病変が顕著に増悪した。そこで、これら4群の摘出腎から作成したcDNAを用いDNA Microarray行った結果、肥満と加齢に共通した尿細管病変増悪関連遺伝子として57遺伝子のスクリーニングに成功した。その中で、9遺伝子に関しては腎疾患との関連は報告されていなかったため、培養近位尿細管細胞を用いこれら9遺伝子の機能解析を行った。候補遺伝子9遺伝子の過剰発現レトロウイルスならびにsiRNAを作製し、培養近位尿細管細胞に感染、遺伝子導入し、尿蛋白刺激により惹起される細胞障害に対し各遺伝子の発現変化が及ぼす影響を検討した。結果、9遺伝子中の1遺伝子、GeneXの発現変化が細胞障害に影響を及ぼすことが明らかとなり、GeneX遺伝子が肥満や加齢による尿蛋白関連尿細管障害の増悪に関わる新規遺伝子である可能性が示された。近位尿細管特異的Inmt欠損マウスならびに過剰発現マウスの作製に成功し、今後病態モデルにおける解析を予定している。肥満や加齢が発症進展に大きく影響を及ぼす糖尿病性腎症症例コホートにおけるSNPs解析を行ったが、GeneX遺伝子内に慢性腎臓病の代表的疾患である糖尿病性腎症のリスクalleleは存在し得なかった。予定していた細胞実験により新規尿細管障害関連遺伝子としての可能性を有する1遺伝子の同定に成功している。また、同遺伝子に対する近位尿細管特異的トランスジェニックマウスならびにコンディショナル(Flox)ノックアウトマウスの作製に成功している。24年度が最終年度であるため、記入しない。本年度に作製した新規尿細管関連遺伝子に対する遺伝子改変マウス(尿細管特異的トランスジェニックマウス、尿細管特異的ノックアウトマウス)における遺伝子発現を確認する。また、同遺伝子改変マウスに尿蛋白モデルを作製し、尿蛋白誘導性尿細管間質病変を惹起する。この際の尿細管病変の進展程度を比較検討し、同定遺伝子の発現増強あるいは発現抑制が尿細管間質病変の進展に及ぼす影響を結論づける。これまでに同様のモデルでの検討を行ってきており、本実験を進めるにあたり現時点で問題点はないと考えている。