hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
c-kit遺伝子改変マウスを用いたGISTの病態研究

germlineのc-kit遺伝子突然変異により発生するヒト家族性多発性GIST(Gastrointestinal stromal tumor)のマウスモデルとして、傍細胞膜領域に突然変異を持つタイプおよびチロシンキナーゼ領域Iに突然変異を持つタイプのトランスジェニックマウスを作成したが、期待されるカハールの介在細胞(Interstitial cell of Cajal ; ICC)のびまん性増殖や多発性GISTの発生は認めなかった。より家族性多発性GISTに近いモデルマウスとして、チロシンキナーゼ領域IIに突然変異を持つノックインマウスの作成を試み、現在ほぼ完成しつつあり、今後この解析を行っていく。GIST研究に関連して、多発性GIST患者に見られるICCのびまん性増殖巣はpolyclonalな細胞から構成される過形成であることを明らかにした。また、多発性GIST患者にみられるキナーゼ領域IIのc-kit遺伝子の突然変異は、選択的チロシンキナーゼ阻害薬イマチニブによる抑制が不十分で、下流のシグナル伝達物質のリン酸化の抑制も弱いことを明らかにした。また、c-kit遺伝子に突然変異を持たないGISTの腫瘍化機序について検討し、その約半数にはPDGFレセプターアルファの機能獲得性突然変異が存在することをみつけた。突然変異は傍細胞膜領域とチロシンキナーゼ領域IIにみつかり、イマチニブは傍細胞膜領域の突然変異を効率的に抑制し、チロシンキナーゼ領域IIの突然変異は十分に抑制しないことを示した。また、イマチニブ耐性となった再増殖GIST病巣には、原発巣にみられるc-kit遺伝子変異に加え、イマチニブ耐性の原因と考えられる新たなc-kit遺伝子の突然変異が存在することを明らかにした。さらに、von Recklinghausen病でみられる多発GISTでは、腫瘍にc-kit遺伝子の機能獲得性突然変異が見られないことを示した。消化管ストローマ細胞腫瘍(Gastrointestinal stromal tumor, GIST)は消化管の間葉系腫瘍の大部分を占める腫瘍である。我々は受容体型チロシンキナーゼをコードしているがん原遺伝子c-kitにおける機能獲得性変異がGISTの発生に重要な働きをしていることをみつけ、さらにGISTの多発する家系を見つけ、この家系にはその原因と考えられるgermlineにおけるc-kit遺伝子の機能獲得性突然変異が見られることを示した。この家系ではGISTが多発するほか、その前駆病変と考えられるカハールの介在細胞(Interstitial cells of Cajal ; ICCs)の過形成像がみられた。germlineにおけるc-kit遺伝子の突然変異がマウスにおいてもICCsの過形成を基盤とした多発性のGISTを引き起こし、ヒトの家族性多発性GISTのモデルとなるかどうかを調べるために、,機能獲得性c-kit遺伝子変異をマウスに導入することを試みた。ジーンターゲティング法によりノックインマウスを作る予定であるが、現在まだターゲティングベクターの作成段階であり、これに先立って今回はまず傍細胞膜領域のタイプの突然変異を持つトランスジェニックマウスを作成した。現在その解析を始め、近いうちに結果が得られるものと思われる。GIST症例の検討過程で、キナーゼドメインIIに機能獲得性突然変異を持つヒトの家族性多発性GIST家系をみつけた。突然変異を持つ患者にはやはりICCsのびまん性過形成を基盤とした多発性GISTが見られた。患者のほとんどが明らかな食道の狭窄性病変を伴わないにも関わらずアカラシア様の嚥下困難を示したためこの原因について調べた。患者の胃食道

接合部にはICCsの過形成と考えられる像が、超音波内視鏡で観察され、これがアカラシア様の嚥下困難の原因と考えられた。今後このタイプのノックインマウスやトランスジェニックマウスも作成したい。germlineのc-kit遺伝子突然変異により発生するヒトの家族性多発性GIST(Gastrointestinal stromal tumor)のマウスモデルの作成を試みた。傍細胞膜領域とキナーゼドメインIに突然変異を持つトランスジェニックマウスを各々作成した。どちらのマウスでもRT-PCRにより変異型mRNAの発現が確認されたが、Western blotでは十分量の蛋白は検出できず、現在までカハールの介在細胞(Interstitial cell of Cajal ; ICC)のびまん性増殖や多発性GISTの発生は認めていない。よりヒト家族性多発性GISTに近いモデルマウスとして、傍細胞膜領域とキナーゼI領域の各々の突然変異を持つノックインマウスを作成しつつあり、キナーゼI領域のタイプではコンストラクトが完成し、ES細胞に導入している段階である。この研究に関連して、多発性GIST患者に見られるICCのびまん性増殖巣のクロナリティーについて調べた。多発性GISTはmonoclonalな腫瘍であったが、この病変はpolyclonalな細胞から構成されるびまん性過形成であることを明らかにした。また、多発性GIST患者にみられるキナーゼ領域IIのc-kit遺伝子の突然変異は、他の部位の突然変異に比べて選択的チロシンキナーゼ阻害薬イマチニブによる活性抑制が不十分であり、下流のシグナル伝達物質のリン酸化の抑制程度も弱いことを明らかにした。我々は、ヒト消化管筋層に発生するGastrointestinal stromal tumor(GIST)にc-kit遺伝子が高率に発現し、その多くにc-kit遺伝子の傍細胞膜領域の機能獲得性突然変異が存在することを見つけ、GISTがカハールの介在細胞(Interstitial cell of Cajal ; ICC)に由来する腫瘍であることを提唱した。さらにヒト消化管にICCのびまん性増殖を基盤とした多発性GISTがみられる家系は、germlineでのc-kit遺伝子の傍細胞膜領域(exon11)の機能獲得性変異が原因であることも明らかにした。多発性GIST家系の原因としてキナーゼドメインI(exon13)やII(exon17)でのgermlineのc-kit遺伝子の機能獲得性変異も見つかった。本研究は、c-kit遺伝子の変異を持つモデルマウスを作成し、これらのマウスに消化管のICCsのびまん性増殖を基盤とした多発性GISTの発生がみられるかどうかを調べることを目的とした。現在までに、exon11とexon13の変異を持つトランスジェニックマウスの作成を終えたが、現在までの経時的な観察によりICCのびまん性増殖やGISTに相当する消化管腫瘍の発生は見られていない。より生理的なノックインマウスの作成は現在、exon17の突然変異を導入したキメラマウスが得られた段階であり、今後この解析を行う。
環境適応型ハイブリッドべん毛モーターのトルク特性と固定子の結晶構造解析

本研究では、好アルカリ性細菌Bacillus clausiiの環境適応型ハイブリッドべん毛モーター固定子MotAB複合体の結晶化およびx線構造解析を行い、イオン選択性における原子レベルでのメカニズムの解明とべん毛モーターの回転機構の解明を目的とした。さらに、共役イオンが変化する環境適応型べん毛モーターのビーズアッセイ法による1分子回転計測を行うことで、エネルギー変換における新たな知見を得ることを目指した。結晶構造解析においては、B.clausiiのMotAB複合体とともに好アルカリ性Bacillus属細菌に共通の固定子Motps複合体の両方を結晶構造解析のターゲットタンパク質とした。Motps複合体に関しては、よく単分散した高純度精製サンプルの調製に成功し結晶化を試みてきたが、得られた結晶はすべて界面活性剤由来のもので、タンパク結晶はまだ得られていない。現在、他の界面活性剤を検討するとともに、脂質膜を用いた2次元結晶の作製を行っている。一方、B.clausiiのMotAB複合体に関しては複合体での発現が困難であるため、モーターへの組み込みに重要とされているMotBタンパク質のC末端側ドメインの精製および結晶化を試みた。その結果、いくつかの条件下においてタンパク結晶が得られたが、構造解析に至るほどの分解能を有していなかった。現在、結晶化条件の最適化を行い、構造解析に適した結晶の作製を行っている。1分子回転計測では、H^+とNa^+をそれぞれ共役イオンとして利用する固定子MotABとMotPSの両方を持つBacillus subtilisの系で測定を試みた。その結果、MotPSはMotABに比べ、最大トルクおよび最高速度が低いことが分かり、べん毛基部体に組み込まれにくく、チャネル活性も低いことが示唆された。現在、これらを指標に、B.clausiiのMotABを発現させ、測定中である。本研究では、好アルカリ性細菌Bacillus clausiiの環境適応型ハイブリッドべん毛モーター固定子MotAB複合体の結晶化およびX線構造解析を行い、イオン選択性における原子レベルでのメカニズムの解明とべん毛モーターの回転機構の解明を目的とした。さらに、共役イオンが変化する環境適応型べん毛モーターのビーズアッセイ法による1分子回転計測を行うことで、エネルギー変換における新たな知見を得ることを目指している。結晶構造解析においては、B.clausiiのMotAB複合体とともに好アルカリ性Bacillus属細菌で共通の固定子MotPS複合体の両方を結晶構造解析のターゲットタンパク質とし、まず大腸菌を用いた高発現系を確立した。さらにMotPS複合体に関しては、20種類の界面活性剤を用いて可溶化効率を検討した。その中でよく構造を保持したまま可溶化できる界面活性剤が5種類あった。これらの界面活性剤を用いて精製を試みたところ、よく単分散した高純度の精製サンプルの調製に成功した。現在、これらのサンプルを用いて結晶化を試みている。またビーズアッセイ法においては、B.subtilisのべん毛構成タンパク質に対する抗体を用いてビーズ接着の高効率化を試みた。結果、従来の未修飾ビーズに比べて効率的にべん毛フィラメントに接着することが分かった。しかし、現段階の効率では、ハイスループットな測定をまだ実現するには至っておらず、現在、さらに効率的な方法を検討している。本研究では、好アルカリ性細菌Bacillus clausiiの環境適応型ハイブリッドべん毛モーター固定子MotAB複合体の結晶化およびX線構造解析を行い、イオシ選択性における原子レベルでのメカニズムの解明とべん毛モーターの回転機構の解明を目的とした。MotPS複合体に関しては、20種類の界面活性剤を用いて可溶化効率を検討した。またB.clausiiのMotAB複合体に関しては複合体での発現が困難であるため、引き続き発現系の構築を行っていると同時に、イオン選択性に特に重要なMotBの膜貫通ドメインを削ったフラグメントの結晶構造解析も行っている。一方、ビーズアッセイ法においては、これまでB.subtilisのべん毛構成タンパク質に対する抗体を用いてビーズ接着の高効率化を試みていたが、最近、べん毛構成タンパク質を改変することで、抗体なしで効率的にべん毛フィラメントにビーズを接着させることに成功した。現在、B.subtilisの持つ固定子MotABおよびMotPSをそれぞれ発現させた株の回転計測を行っている。これらの固定子が出力するトルクを指標に、今後、B.clausiiのMotABのイオン選択性とエネルギー変換機構の解明に挑戦していく。

結晶構造解析においては、B.clausiiのMotAB複合体とともに好アルカリ性Bacillus属細菌に共通の固定子Motps複合体の両方を結晶構造解析のターゲットタンパク質とした。Motps複合体に関しては、よく単分散した高純度精製サンプルの調製に成功し結晶化を試みてきたが、得られた結晶はすべて界面活性剤由来のもので、タンパク結晶はまだ得られていない。現在、他の界面活性剤を検討するとともに、脂質膜を用いた2次元結晶の作製を行っている。一方、B.clausiiのMotAB複合体に関しては複合体での発現が困難であるため、モーターへの組み込みに重要とされているMotBタンパク質のC末端側ドメインの精製および結晶化を試みた。その結果、いくつかの条件下においてタンパク結晶が得られたが、構造解析に至るほどの分解能を有していなかった。現在、結晶化条件の最適化を行い、構造解析に適した結晶の作製を行っている。1分子回転計測では、H^+とNa^+をそれぞれ共役イオンとして利用する固定子MotABとMotPSの両方を持つBacillus subtilisの系で測定を試みた。その結果、MotPSはMotABに比べ、最大トルクおよび最高速度が低いことが分かり、べん毛基部体に組み込まれにくく、チャネル活性も低いことが示唆された。現在、これらを指標に、B.clausiiのMotABを発現させ、測定中である。結晶化に関しては、MotPS複合体の精製法を確立し、現在、結晶化スクリーニングまで至っている。MotAB複合体は、大量発現系がまだ確立できていないが、MotBのフラグメントの精製法を確立し、結晶が得られており、現在解析中である。一方、回転計測に関しては、枯草菌を使った計測系が確立できたので、現在測定中である。以上の観点から、おおむね順調に進展していると判断した。MotPS複合体に関しては、結晶化スクリーニングを行っているが、得られた結晶はすべて界面活性剤由来のもので、タンパク結晶をまだ得られていない。今後、他の界面活性剤を検討する予定である。また、MotP、MotSそれぞれ単独の結晶化も試みる予定である。MotAB複合体に関しては、大量発現系がまだ確立できていないため、今後、他の細菌由来のMotABも含めて、大量発現系と精製法の確立を行う予定である。また、MotABのプロトンチャネンル活性の影響で大量発現が困難であると考えられるため、チャネル活性を失った変異体を作製し、大量発現が可能か試みる予定である。
超高速ＵＦＬＣ／リニアイオントラップタンデムＭＳシステムの法医学的応用

薬毒物による中毒、医療現場における誤投薬事故など法医学ならびに救急医学の領域では、死因究明および救急救命において中毒原因物質を迅速かつ確実に同定することが要求される。本研究では、32種類のベンゾジアゼピン系薬剤、8種類のバルビツール酸系薬、13種類の非ステロイド系抗炎症薬(NSAIDs)及び5種類のカルバペネム系抗菌薬についてUFLC-MS/MSによる迅速・簡便かつ高感度なハイスループット分析システムを開発した。本年度は以下の結果を得た。1.ベンゾジアゼピン系向精神薬、非ステロイド系抗炎症鎮痛薬について生体試料直接注入UFLC/MS/MS迅速分析システムの確立および最適化32種類のベンゾジアゼピン系薬物にはカラムスイッチング法を用い、13種類の非ステロイド系抗炎症鎮痛薬については順相カラムを用いた直接注入法をそれぞれ応用し、selected reaction monitoring (SRM)の設定を行い、高感度定量法の最適化をを行った。ESI法を用いたSRM測定により32種類のベンゾジアゼピン系薬物は7分以内に感度良く検出された。回収率は83ー95%で、5200 pg/0.1 mlの範囲で良好な直線性が得られた。検出限界は25 pg/0.1 mlであった。また、13種類の非ステロイド系抗炎症鎮痛薬は3.5分以内に感度良く検出された。回収率は主ね62%以上で、検量線は1250 ng/20μlの範囲で良好な直線性が得られた。検出限界は0.52.5 ng/20μlであった。2.バルビツール酸系薬物について生体試料直接注入UFLC/MS/MS迅速分析システムの確立Barbitalを始め8種類のバルビツール酸系薬物はAPCI法を用いたNegative Modeが最適であった。各薬剤のフラグメンテーションの解析を行い、MS、MS/MS、EPI、およびMS/MS/MS等のマススペクトルライブラリーの作成を行った。8種類のバルビツール酸系薬物は3分以内に分離良く検出され、回収率は8092%であった。また、1500 ng/0.1 mlの範囲で良好な直線性が得られ、検出限界は0.1-1 ng/0.1 mlであった。本法は、ヒト血漿中バルビツール酸系薬物の迅速・簡便かつ高感度なハイスループット分析が可能であった(Forensic Toxicol 31巻,9-20頁,2013)。1.平成2324年度の研究結果を基にした実際例への応用2.カルバペネム系抗菌薬について生体試料直接注入HPLC/MS/MS迅速分析システムの確立5種類のカルバペネム系抗菌薬(Biapenem、Panipenem、Imipenem、DoripenemおよびMeropenem)はESI法を用いたPositive Modeが最適であった。5種類のカルバペネム系抗菌薬は3分以内に分離良く検出され、回収率は24-84%で、50-2000ng/0.02mlの範囲で良好な直線性が得られ、検出限界は25ng/0.02mlであった。更に、ボランティア2名ずつ(昭和大学倫理委員会承認番号:1250)にMeropenem (1g)およびDoripenem (1g)をそれぞれ経静脈投与し、実際例分析を試みたところ、MeropenemおよびDoripenemの未変化体は投与4時間後も感度良く検出され、血漿中濃度がそれぞれ59-64および64-82ng/0.02mlであった。本年度はベンゾジアゼピン系向精神薬、非ステロイド系抗炎症鎮痛薬について以下の検討を行った。1.最適なイオン化法の検討並びにMS/MSマススペクトルライブラリーの作成分析装置は島津UFLCとPE SciexAPI4000 Q Trap MS/MS、各薬物標準品並びに移動相類の保存には三洋電機製研究用保冷庫(MPR-721、設備備品費により購入)を使用した。各薬物標準品について、ESIおよびAPCI2種類のインターフェースによるイオン化法を検討したところ、bromazepamなど32種類のベンゾジアゼピン系薬剤およびalminoprofenなど8種類の非ステロイド系抗炎症鎮痛薬はUFLC/MS-ESI正イオンモードが最適であった。また、UFLC/MS-ESI負イオンモードにはibuprofenなど8種類の非ステロイド系抗炎症鎮痛薬が最適であった。全ての薬物は[M+H]+或いは[M-H]-の擬分子イオンがベースピークとして認められた。ベースピークとなった[M+H]+或いは[M-H]-ををプリカーサーイオンとして、各薬剤のフラグメンテーションの解析を行い、MS、MS/MS、EPI、およびMS/MS/MS等のマススペクトルライブラリーの作成を行った。2.分析対象の各薬物についてUFLCによる分離条件の検討

ベンゾジアゼピン系薬剤についてカラムスイッチング法を応用し、また、非ステロイド系抗炎症鎮痛薬については直接注入法を応用して分離カラム並びに移動相などの最適分析条件を検討したところ、32種類のベンゾジアゼピン系薬物は7分以内、16種類の非ステロイド系抗炎症鎮痛薬は5分以内にいずれの薬物も感度良く検出された。今後、薬物と代謝物を血液および尿に添加し、設定した分離条件を最適化し、簡便かつ高速高感度な分析法の開発を行う予定である。H24年度「研究目的」の達成度は70%であった。ベンゾジアゼピン系向精神薬、非ステロイド系抗炎症鎮痛薬について生体試料直接注入UFLC/MS/MS迅速分析システムの確立および最適化ができた。バルビツール酸系薬物については生体試料直接注入UFLC/MS/MS迅速分析システムの確立を行い、ヒト血漿中バルビツール酸系薬物の迅速・簡便かつ高感度なハイスループット分析が可能であった。H23年度「研究目的」の達成度は50%であった。東日本大震災、相次ぐ余震、さらに節電等の影響で主要分析機器であるUFLC/MS-MSの稼動が大幅に遅れた。今年度は32種類のベンゾジアゼピン系向精神薬および16種類の非ステロイド系抗炎症鎮痛薬についてMS、MS/MS、EPI、およびMS/MS/MS等のマススペクトルライブラリーの作成を行った。また、最適な分離条件の検討も行った。平成25年度:1)平成2324年度の研究結果を基にして、ベンゾジアゼピン系向精神薬、非ステロイド系抗炎症鎮痛薬について動物実験で得られた生体試料、または死体検案、法医解剖および救急医療現場に得られた人体試料から、本研究で確立したUFLC/LIT MS/MSシステムを用いて法医学上問題となる各薬物並びに代謝物の同定と定量を行う。また、分析結果と死体検案所見、解剖所見あるいは治療経過等をふまえ、本研究の法医学および救急医療領域での有用性を検討する。2)本研究で得られた結果を研究成果としてまとめ、関連する学術集会で発表し、考察を加え論文として学術雑誌に投稿する。3)抗アレルギー剤およびカルバペネム系抗菌薬についても最適なイオン化法の検討並びにMS/MS等のマススペクトルライブラリーの作成を行い、最適な分離条件を検討する。さらに、薬物と代謝物を血液および尿に添加し、カラムスイッチング法および直接注入法を応用し、最適なカラムおよび分析条件を検討し、簡便かつ高速高感度な分析法の開発を行う。平成24年度:1)平成23年度の研究結果を基にして、ブロムワレリル尿素系薬物およびバルビツール酸系薬物についても最適なイオン化法の検討並びにMS/MS等のマススペクトルライブラリーの作成を行い、最適な分離条件を検討する。2)最適なカラムスイッチングおよび直接注入条件、分離法およびマススペクトルライブラリーを組み合わせたUFLC/LIT MS/MS法による迅速かつ高感度な各薬物およびそれらの代謝物について同定定量分析システムを完成させる。3)夾雑物等によるイオン効率の変化を充分に留意し、必要ならば設定した分析条件の修正を行う。さらに、各薬物のフラグメントパターンから最もイオン強度の高いベースピークを選択し、SRMとEPI或いはAPCI法を組み合わせて各薬物の高感度かつ高精度定量法を確立する。
胎児行動研究用自動解析装置の開発

超音波ドプラ胎動計は、胎動を客観的、連続的に胎児心拍数と同時記録でき、胎児健常性の評価に広く応用されている。胎動はスパイク状信号で胎動図に記録され、胎児の行動学的状況や胎児心拍数一過性頻脈に関係深い胎児の粗大運動ではスパイクが集合し、胎動バーストとして記録される。本研究では迅速で客観的な胎動自動診断ができるよう胎動のコンピュータ解析を行った。まず超音波ドプラ胎動計で検出される胎動、胎児心拍数、陣痛の各信号をAD変換器でサンプリングし、コンピュータ(NEC PC-98XA)に入力し、データ用フロッピに収録した。ついで胎動解析専用プログラムで、フロッピに収録されたデータを再生し解析実行した。コンピュータ解析では胎動バースト基準を設定して胎動スパイク及びバースト間隔時間、胎児心拍数、陣痛の15分間同時表示を行った。その結果、胎児行動学的状況の認識が容易になり、その有用性が認められたので、次に胎児行動各期のスパイク分布を検討した。胎児活動期、安静期、呼吸様運動の各時期に分類し、主に5分区画単位で、設定した11段階のレベルでのスパイク振幅、間隔の平均±SDおよび間隔のヒストグラムを検討した。活動期で振幅の平均値は高く、SDも大きく、間隔のヒストグラムでもばらつきが大きかった。安静期のスパイク振幅は最低レベルのみに分布し、呼吸様運動では比較的低いレベルで間隔の短い部分に分布していた。次に、スパイクピーク点を結ぶエンベロープ表示では、活動期にバーストに一致してピークがみられ、安静期では低く平滑であった。呼吸様運動期のエンベロープは低く平滑であるが、安静期よりは高いレベルで表示された。以上の検討により、胎動スパイク分布やエンベロープ表示で胎児行動各期の特徴が見出され、胎動のコンピュータ自動解析の有用性が示唆された。胎動は胎児の生存状態を示す一指標であるが、最近では各種の方法で胎動の検出が行われ、胎児の健康の指標として胎動が注目されている。われわれは前田の考案した、長時間客観的に胎動および胎児心拍数を同時に記録できる、超音波ドプラ胎動計(TOITSU MT-320)でえられた胎動記録を、コンピュータによって解析する方法を試みた。コンピュータ解析に先立ち、マニユアル計測し解析を行った。胎動図上にスパイク状波形として記録される胎動のうち、胎児体幹の回転運動を中心とした粗動運動は比較的高いスパイクの集合として記録される。これを胎動バーストとし,その発生間隔時間(【I】秒)を計測しヒストグラムを作成した。妊娠36週以降で、【I】のピークが1520秒にみられた。さらに各症例において、瞬時胎動バースト数60/【I】(【I】分)を経時的に曲線として記録すると、胎動バーストの発生状況が明らかとなった。子宮内胎児発育遅延例では、【I】や瞬時胎動バースト数曲線に異常を認めるものがあり、潜在性胎児仮死における胎動減少を、客観的に表示することができた。コンピュータ解析は,MT-320でえられた胎動、心拍、陣痛の各信号を胎動収録装置(TOIISU MF-7100)でAD変換後にフロッピーディスクに収録し、専用のプログラムでコンピュータ解析した。解析結果として、心拍数曲線、陣痛曲線、胎動スパイク、瞬時胎動数曲線、胎動バースト、瞬時胎動バースト数曲線、瞬時胎動ヒストグラムの各指標を15分ごとに表示することが可能となった。

今後さらに、短時間で正確に解析可能であるコンピュータの特長を生かし次年度には多数の症例について解析を行い、詳細に胎動発生状況を解明する予定である。今後の研究によって、胎動行動学の方面から、胎児診断、周産期管理に貢献したい。
メタボリック症候群の改善をねらいとした高強度間欠的低酸素トレーニングの試み

【目的】これまでに得られた高強度運動トレーニングの結果をもとに、30年度は常酸素環境下と低酸素環境下において高強度間欠的運動トレーニングを実施し、メタボリックシンドロームの諸危険因子に及ぼす効果について検証することを目的とした。【方法】被検者は健康な成人男性20名(21±2歳)とし、ベースラインが同等となるように、常酸素群と低酸素群の2群(各10名)に分けた。トレーニングは、175%VO2max強度における15秒の運動を10秒の休息をはさんで6回繰り返す間欠的運動トレーニングとし、これを20分の休息を挟んで1日2回、週4日の頻度で4週間行った。尚、低酸素群は海抜2500m相当の低圧低酸素環境下でトレーニングを実施した。トレーニング前後に、血圧、動脈スティフネス、身体組成、血中脂質、耐糖能を評価した。【結果】低酸素群では安静時、最大下強度運動時における拡張期血圧、平均血圧、および動脈スティフネスの有意な低下が認められた。身体組成(体重、体脂肪率、腹壁皮下脂肪厚、腹膜前脂肪厚)、中性脂肪は両群ともに有意に低下した。耐糖能については、常酸素群においてのみ有意な改善が認められた。【考察及び結論】低酸素環境下における高強度間欠的運動トレーニングが血圧や動脈スティフネスなどの心血管系指標を改善させたことについては、低酸素刺激による血管内皮機能の改善に起因すると考えられる。一方、常酸素環境下でのトレーニングにおいてのみ改善が認められた耐糖能については、より高い強度で実施されていたこと、あるいは仕事量が大きかったことに起因しているかもしれない。身体組成や血中脂質においては両群で同程度の改善がみられたことから、環境刺激よりも、高強度トレーニングそのものの効果を反映する可能性が示唆された。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。【目的】本年度の研究目的は、低強度持続的運動と高強度間欠的運動を低圧低酸素環境で実施し、それぞれの運動が循環代謝諸指標に及ぼす影響について,比較検討することであった。【方法】被検者は健康な成人男性16名(22±2歳)とし、無作為に2群に分けた。被検者は、50%VO2max強度で30分間の低強度持続的運動(低強度群)、あるいは30秒程度で疲労困憊に至る強度で10秒の運動を10秒の休息を挟みながら6回繰り返す高強度間欠的運動(1日2回:高強度群)のいずれかを、海抜2500m相当の低圧環境において実施した。運動はいずれも自転車エルゴメータ運動とし、週に5日、2週間実施した。トレーニング前後に、最大下強度運動時の循環系応答、動脈スティフネス、身体組成、耐糖能等を測定した。【結果】トレーニング後、低強度群では、運動時の1回拍出量、心拍出量の有意な増大、血圧、総末梢抵抗(平均血圧/心拍出量)の有意な低下が認められた。さらに、動脈スティフネスも有意に低下した。さらに、糖負荷試験によって評価されたインスリン感受性の有意な改善が認められ、体重、体脂肪率、腹膜前脂肪厚も有意に低下した。一方、高強度群では、運動時の1回拍出量の有意な増加、末梢抵抗の低下傾向、および腹膜前脂肪厚の有意な低下が認められたが、インスリン感受性、体重等には有意な変化は認められなかった。【結論】本結果より、海抜2500m相当の低圧低酸素環境において、低強度持続的運動では心血管、代謝諸指標に関する有意な改善が認められたが、短時間高強度運動では持続的低強度運動と同様の効果が得られるまでには至らなかった。ただし、本結果には、被検者のトレーニング前の身体状況(全員が健康で正常範囲内)が影響していたことも考えられ、今後は運動強度、運動時間、トレーニング期間などを変えて、多角的な検討が必要と思われた。28年度は、従来の低強度持続的運動トレーニングと高強度間欠的運動トレーニングの両方を低酸素環境下で実施し、その成果を比較するまでに至った。必ずしも仮説通りの結果ではなかったが、ひとつの原因としては、用いた被検者が体育学専攻の健康な大学生ばかりであり、トレーニング前の値も、すべての指標において極めて優良な正常値であったことが上げられる。トレーニングプロトコールの見直しを含め、多角的な再検討が必要とであると思われるが、研究としては一定の成果を得たため、概ね順調に進展していると判断した。【目的】本年度の研究目的は、3つの高強度間欠的運動トレーニングを実施し、それぞれの運動がメタボリックシンドロームの諸危険因子に及ぼす影響について比較検討することであった。【方法】健康な成人男性25名(22±2歳)を無作為に3群に分け、各群は以下のいずれかのトレーニングを行った;1)220%VO2max強度で10秒の運動を10秒の休息を挟みながら6回繰り返す運動(1日2回:Tr1)、2)150%VO2max強度で20秒の運動を40秒の休息を挟みながら10回繰り返す運動(Tr2)、3)100%VO2max強度で1分の運動を1分の休息を挟みながら10回繰り返す運動(Tr3)。運動は自転車エルゴメータ運動とし、週に4日、4週間実施した。

トレーニング前後に、血圧、動脈スティフネス、身体組成、血中脂質、耐糖能の測定を行った。【結果】トレーニング後、Tr1群では、腹膜前脂肪厚以外、すべての指標において有意な変化は認められなかった。Tr2群では、体重、腹膜前脂肪厚に有意な低下が認められ、さらに安静時血圧、インスリン感受性においても群内1、2名を除き、改善傾向が示された。Tr3群においても、Tr2群と類似した傾向が示されたが、必ずしも統計上有意な変化には至らなかった。【考察及び結論】高強度トレーニングがメタボリックシンドローム該当者の危険因子改善に有効であることは、多くの先行研究で報告されている。しかしながら、本結果は必ずしもそれらを支持するものではなかった。本実験における強度は、100%220%VO2maxに至る高強度であったが、数分程度の運動では効果が得られにくかったのかもしれない。また、本実験の被検者は、すべての指標においてもともと正常範囲内であったことから、その影響も考えられる。今後は、対象者、運動時間、トレーニング期間などを変えて、多角的な検討が必要と思われた。29年度は、28年度の実験成果を参考にし、30秒数分程度維持できる高強度を用い、3種類のプロトコールによる間欠的運動トレーニングを実施した。昨年同様、必ずしも仮説通りの結果(先行研究を支持する結果)ではなかったが、その原因としては、用いた被検者が体育学専攻の健康な大学生であり、かつトレーニング前の値も、すべての指標において正常値であったことが上げられる。また、実運動時間が短いことも要因として考えられた。したがって、次年度は効果の得られる条件を見つけるために、多角的な検討が必要と思われる。ただし、研究の進行としては一定の成果が得られたため、概ね順調に進展していると判断した。【目的】これまでに得られた高強度運動トレーニングの結果をもとに、30年度は常酸素環境下と低酸素環境下において高強度間欠的運動トレーニングを実施し、メタボリックシンドロームの諸危険因子に及ぼす効果について検証することを目的とした。【方法】被検者は健康な成人男性20名(21±2歳)とし、ベースラインが同等となるように、常酸素群と低酸素群の2群(各10名)に分けた。トレーニングは、175%VO2max強度における15秒の運動を10秒の休息をはさんで6回繰り返す間欠的運動トレーニングとし、これを20分の休息を挟んで1日2回、週4日の頻度で4週間行った。尚、低酸素群は海抜2500m相当の低圧低酸素環境下でトレーニングを実施した。トレーニング前後に、血圧、動脈スティフネス、身体組成、血中脂質、耐糖能を評価した。【結果】低酸素群では安静時、最大下強度運動時における拡張期血圧、平均血圧、および動脈スティフネスの有意な低下が認められた。身体組成(体重、体脂肪率、腹壁皮下脂肪厚、腹膜前脂肪厚)、中性脂肪は両群ともに有意に低下した。耐糖能については、常酸素群においてのみ有意な改善が認められた。【考察及び結論】低酸素環境下における高強度間欠的運動トレーニングが血圧や動脈スティフネスなどの心血管系指標を改善させたことについては、低酸素刺激による血管内皮機能の改善に起因すると考えられる。一方、常酸素環境下でのトレーニングにおいてのみ改善が認められた耐糖能については、より高い強度で実施されていたこと、あるいは仕事量が大きかったことに起因しているかもしれない。
有機強誘電体/半導体界面への逐次パルス印加とニューロン回路への応用可能性

本研究では、ニューロン素子を模倣した学習型デバイス創成を目標に、その基本セルとなるMFS型電界効果トランジスタを開発するためSiトランジスタのチャネル直上に有機強誘電体を堆積し、入力パルスに応じた分極ドメイン形成とドレイン電流変調に挑戦した。P型Siウエハー(比抵抗110Ωcm)上にソース・ドレイン領域を形成し、チャネル部がむき出しになったトランジスタを試作した。強誘電体層として真空蒸着可能なフッ化ビニリデンオリゴマーを用いることで、可能な限り清浄環境下でSiと強誘電体の直接界面を形成した。最後にAlゲート電極を作製し、金属(M)/強誘電体(F)/半導体(S)キャパシタ素子とした。パルス電圧入力によるトランジスタ基板上での分極反転ドメイン形成を検証するため、電界-電流密度特性を測定した結果、非対称性ある分極反転電流ピークを観測した。負極性側の分極反転電流ピークはブロードかつ高電圧シフトしており、Si中での空乏層形成を示唆した。チャネル直上に形成した有機強誘電体の分極方向を上向き、下向きと変化させてドレイン-ソース間に流れる電流変化を測定した所、ドレイン電圧3V掃引に対して電流値のON/OFF比は約10^5倍であった。入力信号としてのゲート電圧パルスをパラメータとして実験した結果、データ保持特性は1000sec以下と短いものの極性に応じた電流挙動を確認できたことから、有機分極相互作用によるSi半導体変調の可能性を示し、パルス入力によるMSF-FET駆動に成功した。本研究は、有機強誘電性分子を用いた金属/強誘電体/半導体型電界効果トランジスタ(MFS-FET)の駆動可能性を探り、強誘電体膜内での分極方向やドメインサイズを制御することで、学習型人工ニューロン素子の基本概念獲得を目指すものである。本年度は、真空蒸着可能なビニリデン・フルオライド(VDF)オリゴマー及び強誘電体液晶を用いてSi基板上に積層型のMFS構造を形成し、その直接界面の構造・電気特性を評価した。P型Si基板(比抵抗58Ωcm)上に作製したVDFオリゴマー薄膜(170nm)においては、明瞭なD-Eヒステリシス特性が得られ、残留分極量は125mC/m^2であった。分極反転電流のピーク位置は正電圧側で+27V付近、負電圧側で-21V付近と異なり、p型Si内での空乏層が形成が示唆された。容量-電圧(CV)特性は電圧掃引方向に対して履歴特性を示し、メモリウインドウ9V、容量ON/OFF比:2.2であった。測定値から算出される空乏層幅は約700nmであり、使用したSiウエハの理論的最大空乏層幅とほぼ等しい。CV曲線は測定周波数に対して複雑に変化を示したが、詳細解析によりMOSキャパシタとしての振る舞いに加え有機強誘電体の誘電分散特性が重畳していることが分かった。総じて、有機強誘電体VDFオリゴマー自発分極により外部電力なしに強誘電体/Si半導体界面での反転層形成が示唆された。他方、P型Siウエハーとラビング処理ITO基板から構成した液晶セルに封入した強誘電性液晶の場合、半導体基板の比抵抗および測定周波数により電気特性が大きな変化を示した。これは強誘電性液晶の分極揺らぎとSi半導体内キャリアとの相関性を示すものである。
学校生活における最新気象情報の利活用を通した気象防災教育

(研究目的)最新気象情報の利活用促進には、最新気象情報を必要とする場面作りが必要である。現在、スマホの内蔵センサーを利用した安価な気象観測装置が開発されており、専用アプリを用いれば瞬時に観測結果がGPS情報をもとにネット上の地図に表示できる。また、スマホはGPSカメラとしての機能も備えている。そこで、スマホを活用した最新気象情報を必要とする新たな生徒参加型のイベントを実施し、それらが気象情報の利活用促進に有効であることを示すことを目的とする。(具体的内容)(1)スマホを用いた一斉風観測プロジェクト:スマホ用風観測器を生徒に貸し出し、台風接近時等に最新気象情報を確認させ、自宅周辺で気象観測と空の撮影を行わせた。観測指示や観測結果の共有は、SNSの「LINE」のグループ機能を用いた。(2)スマホを用いた雲の写真コンテスト:スマホ等で撮影した雲の写真をインターネット上のアルバムにメール等で添付投稿させ、全員で共有するコンテストを全校生徒対象に実施した。(研究成果)(1)降水予想図を活用して雨の合間をみて観測するなど、最新気象情報の高度な活用に有効であった。全員の観測結果をアメダスとリアルタイムで比較することも可能であった。また、SNS機能により観測者間の連帯感が生まれ、観測が楽しくなる効果が顕著であった。(2)雲の出現を知るための最新気象情報の活用に有効であった。また、空を眺める機会を増やす効果が極めて高かった。(意義)多数の観測器を学校で準備するには、相当な費用と管理が従来は必要であった。しかし今回、生徒の所持率が100%近いスマホを観測器として借用して利用したことで、予算面や管理面での問題が共にクリアできた。今後、スマホを活用することで、“学校を離れた日常を気象教育の場に"できる可能性を示すことができた意義は大きいと考える。
肝細胞癌における血中癌幹細胞の同定と標的治療の開発

我々はこれまでCD44+細胞が間葉系の細胞特性を有し、肝細胞癌(HCC)の発育進展に重要であることを報告したが、CD44が血中癌細胞(CTC)の特性維持に重要であるかをin vitroの実験で確認した。血管内で上皮細胞は物理的細胞ストレスにより、anoikisを来たし細胞死へと誘導されるが、一部の癌細胞はこれを回避し、血液中を循環し続ける。そこで、我々は複数のHCC細胞株を用いて、CD44+細胞を分離し、非接着性のdishを準備し、非接着環境下にて細胞接着非依存性細胞生存能をアポトーシスアッセイにて確認した。CD44+細胞は非接着環境下にて、CD44-細胞と比較すると有意にアポトーシス耐性を有し、生存する細胞数も多かった。また、同様の実験で、細胞のstem cellの特性を確認する手法でsphere formation assayを行い、CD44+細胞がCD44-細胞と比較してsphere形成能が非常に高いことを見いだした。これらの特性は、間葉系の特性を制御するTwist1によって制御されており、ヒトHCC原発腫瘍においてもCD44、Vimentin、Twist1の発現のco-localizationが確認された(Okabe etal. Br J Cancer2013)。並行して、血中の癌細胞の遺伝子を確認するための予備実験として、ダイレクトシークエンス法の感受性を調べるために、細胞株を用いて基礎実験を行った。βCateninのpointmutationを有するSNU398細胞株を用いて、ヒトhealthy volunteerから採取した血液1mlにこの細胞を100個、1000個、10000個混入し、カラムを用いた分離でPBMCの除去を行った。FACSと比較すると、細胞障害が少ないことと、簡便であることから、カラム分離に取り組んだ。結果、細胞100個を混入した血液サンプルより分離したCTC DNAの1/20のサンプルをシークエンス解析に用いて、mutationを検出することが可能性あり、ヒトCTCの遺伝子変異解析にこの方法が十分有用であることが確認できた。この結果は複数の遺伝子解析が可能であることを示唆する。まず肝細胞癌の原発巣の特性として、CD44が肝細胞癌の間葉系の性質と相関し(Vimentinの発現とCD44の発現は相関し、E-Cadherinの発現とは逆相関)、TGFβsignalの下流に存在すること、またヒト肝細胞癌症例において、CD44陽性腫瘍は予後不良であることを報告した(Mima et al. Cancer Res 2012)。今研究の血中癌細胞の検出方法にはFACS AriaIIを用いたSortingによる分離を行った。肝細胞癌患者(StageIII、StageIV)血液7mlを用いて解析を行った。CD90+CD44+細胞の割合は0.1%をcut-offとして(Sheung TF et al. Ann Surg 2011)、これを超える症例を6例中2例認め、この細胞をSortingで分離し、RNAを分離してMajor populationであるCD44-CD90-細胞とのmRNAにおける発現差を比較した。肝細胞の分離の確認としてAlbの発現を比較すると、CD44+CD90+細胞のみにAlbの発現を認めた。細胞数は非常に少なかったため(<300個)、蛋白レベルでの発現確認は困難であった。更に、血中癌細胞の特性を固形腫瘍と比較するため、固形癌からの癌細胞分離に取り組んでいる。固形腫瘍にて細胞がもっともviableな状態でsingle cell separationを遂行できる反応時間や消化酵素の濃度条件をコラゲナーゼ(II、IV)・ヒアルロニダーゼ・DNase・Miltenyi Cell Separation Deviceなど種々な消化酵素を用いて検証中である。また、これらの細胞からMutataionを検出するため、肝細胞癌に典型的なMutationを有する細胞株を用いて、ダイレクトシークエンス法を用いたMutationの検出に必要な細胞数の検証を行っている。これまでの課題として、組織からの死細胞の分離法が最重要であった。目的細胞の分離に用いる特異的なマーカーでsortする前に、Propidium iodide (PI)陰性細胞をまず除去することとした。PI陰性細胞を分離後、特異的なマーカーで染色を行い、分離を行った。これにより、CD45-CD44+CD90+細胞のFACSにおける分布は陽性患者と陰性患者の2極化し、分離した細胞のCD44の発現を調べると、FACSの発現に一致した発現パターンが得られた。次に、血液から回収したCD45-CD44+CD90+細胞のmRNA発現パターンと対比すると、興味深いことに、アルブミンの発現はこれらの癌細胞において保たれており、健常者のCD45+細胞にはアルブミンの発現は検出できなかった。さらに、組織から得られたこれらの癌細胞と比較して、血中癌細胞におけるCD44、およびVimentinの発現は著明に上昇し、E-cadherinの発現は劇的に減少した。CD44とVimentinの発現パターンはまったく同じであり、これまで得られたCD44がEMT markerとして有用であるという我々の報告(Mima K, Okabe H et al. Cancer Res 2012)と矛盾しない結果が得られた(Okabe H et al. Br J Cancer 2014)。今回用いたCD44, CD90は何れも間葉系のマーカーであり、EpCAMといった上皮系のマーカーとは発現パターンが排他的であることが報告されている。

したがって、今回検出したCD45-CD44+CD90+細胞を認める肝細胞癌患者は、EpCAM陽性患者と分子生物学的に異なる集団を検出していると考えられる。EpCAM発現細胞とこれらの間葉系の特性を有する血中癌細胞のゲノム上の特性やシグナル解析を進めていく必要がある。消化器外科学組織・血液からの分離のプロトコールを簡便化するため、血中癌細胞についてはカラムを用いた分離に取り組み、これを完成させた。組織に関してはdebri除去や、肝細胞のviabilityの向上など課題はのこされているものの、マウスを用いた基礎実験で、肝臓組織消化プロトコールの最適化に現在取り組んでいる。血中癌細胞の検出法については、癌細胞の個数とその特異性についてはまだ確証できていない部分はあるものの、mRNA解析に必要な細胞個数に届いているものと考えられる。抗体の検証・情報収集やSortingを主軸とした実験環境の整備に時間を要した。研究計画に沿って、現在すすめている実験として、組織からの細胞分離プロトコールの最適化、sortして得られた癌細胞の蛋白解析のための細胞ブロック固定もしくは、サイトスピン固定、免疫染色の条件探し等にとりくんでいる。得られたDNA解析に関して、p53やAxin1等を含めた様々なprimerおよびシークエンス解析のプロトコールの確立にも時間を要している。現在存在する重要な課題としては、FACS sort時のpick up markerの選択で、すべての症例に共通する細胞表面マーカー(今研究で用いているのはいくつかのこれまで報告される癌幹細胞マーカー)は存在せず、いかに複数の癌幹細胞マーカーを有効に用いるかのstrategyを確立する必要がある。症例の蓄積はこれらの条件やプロトコールが整ってから行う予定である。血中癌細胞の特性を明らかにするためには、固形組織における癌細胞の特性を比較する事が必須である。従って、固形組織からの腫瘍細胞分離を同時に行っているが、組織からの癌細胞分離における問題点としては、酵素分解した細胞のほとんどが死細胞(トリパンブルー陽性)であることである。肝腫瘍が切除されてから迅速にその細胞を分離する必要があると考えられ、当施設の特徴として、手術室・組織標本整理室・FACS解析を行う棟がすべて別に分かれており、切除されたタイミングから標本整理・腫瘍組織消化開始までの時間が少なくとも30分以上かかることが大きな壁である。今後死細胞の除外を行うことで解析のQualityを上げる工夫を試みたい。これらの課題を乗り越え、RNA・DNA・蛋白レベル個々の詳細な解析を行う予定である。当初想定していたより安価にて購入ができたため。発表を予定していた国際学会出張旅費を別の予算にて支出することができたため。組織からの細胞分離プロトコールの最適化、sortして得られた癌細胞の蛋白解析のための細胞ブロック固定もしくは、サイトスピン固定、免疫染色の条件探しを行ううえで、今年度以上に試薬消耗品の使用が予測される。また、実験を進めるうえで、研究結果のとりまとめ、関係書類の作成を行っていただく補佐員が必要であるため、その人件費にしようしたいと考える。
保型表現とL関数の研究

池田保の主な研究成果としてはジーゲル保型形式に関する宮脇の予想の部分的解決、エルミート保型形式のリフティングの構成がある。また市野篤史との共同研究でグロス・プラサド型の周期に関する予想を提出した。また市野篤史、平賀郁との共同研究では局所体上の表現の形式次数に関する予想を提出した。平賀郁と斎藤裕は特殊線型群の内部形式の上の保型表現を研究した。吉田敬之はアルティンL関数の微分の特殊値を研究した。吉田はアルティンL函数の対数微分の特殊値に関する研究を進めており既に多くの研究成果を発奏表している。吉田は今年度は白馬村で開かれた研究集会、九州大学で開かれた国際シンポジウムでこの研究を口頭発表した。吉田はこの研究に関して2005年度の日本数学会代数学賞を受賞した。平賀と斎藩は代数群の内部形式における保型表現の重複度を跡公式を用いて研究し、この研究を国際シンポジウムで発表したプロシーディング(査読つき)を発表した。ジーゲル保型形式に関して池田が構成したリフトはアイゼンシュタイン級数の類似物とみなすことができ、これを対角集合への制限を核関数とすることにより別の種類のリフトを得る。池田はこの方法で今日宮脇型のリフトと言われるものを構成し、さらに宮脇型のリフトの内積を与える予想を定式化し論文を雑誌に発表した。市野は斎藤・黒川リフトの対角型集合への制限を研究し、この制限と一変数の保型形式の内積を与える公式を証明した。この公式は上記の宮脇型のリフトに関する池田の予想を特別な場合に解決したものである。市野のこの研究をまとめた論文は雑誌に掲載された。一変数の保型形式に関する3重L関数についてはギャレットによる積分表示公式の発見以後、多くの研究者によって研究されている。市野と池田は、3重L関数の不定値の特殊値がエルミート型のマース・リフトと齋藤・黒川リフトの内積によって表されることを示した。この結果はグロス・プラサッドの予想から予言される結果とほぼ整合する。この結果について池田と市野は論文を執筆し現在投稿中である。また市野と池田は上記の研究をさらに進め、グロス・プラサッドの予想を精密化し直交群、ユニタリ群上の保型形式の周期とL関数の特殊値を結び付ける研究を遂行中である。この内容に関して池田と市野は白馬村で開かれた研究集会、数理解析研究所および九州大学で開かれた国際シンポジウムで口頭発表し、論文を執筆中である。また平賀、市野、池田は、局所体上の簡約可能代数群の2乗可積分表現の形式次数を随伴型のガンマ因子を結びつける公式を予想として定式化し、特別な場合にはこれを証明した。平賀、市野、池田はこの結果を数理解析研究所で開かれた国際シンポジウムで口頭発表し、論文を執筆中である。高橋は大阪府立大学の川添充氏らと共同で楕円曲線暗号の研究を精力的に進めている。吉田敬之はアルティンのL函数の導関数の特殊値に関する研究を精力的に進めている。とくに大阪市立大学の加塩朋和氏との共同研究によるp進的な類似は興味深いものである。平賀郁と斎藤裕は代数群の内部形式における保型表現の重複度を跡公式を用いて研究し、この研究に関する論文を執筆中である。ジーゲル保型形式に関して池田保が構成したリフトはアイゼンシュタイン級数の類似物とみなすことができ、これを対角集合への制限を核関数とすることにより別の種類のリフトを得る。さらに、池田はもともとのリフトを局所的な条件付ながらもアデール群上の保型表現のリフトに一般化し、この結果を数理解析研究所において口頭発表し、現在論文の執筆中である。またエルミート型の保型形式への類似に関しても論文を執筆中である。市野篤史は3重L函数の中心点における特殊値に関する非常に一般的な結果を得た。これはハリスとクドラによる結果をさらに精密にしたものであり、非常に興味深いものであると思われる。この結果について市野は論文をまとめ、現在雑誌に投稿中である。この結果についての池田と市野の論文は雑誌に掲載されることが決定した。この内容に関して池田と市野は多<の実例を含んだ論文を執筆中である。

また平賀、市野、池田は、局所体上の簡約可能代数群の2乗可積分表現の形式次数を随伴型のガンマ因子を結びつける公式を予想として定式化し、特別な場合にはこれを証明した。平賀、市野、池田はこの結果を論文にまとめ、その論文は雑誌に掲載されることが決まっている。高橋哲也は大阪府立大学の川添充氏らと共同で楕円曲線暗号の研究を精力的に進めている。吉田敬之はアルティンのL函数の導関数の特殊値に関する研究を精力的に進めている。とくに京都大学の加塩朋和氏との共同研究によるp進的な類似は興味深いものである。平賀郁と斎藤裕は代数群の内部形式における保型表現の重複度を跡公式を用いて研究し、この研究に関する論文を完成し現在投稿中である。池田保はジーゲル保型形式に関して以前に構成したリフトを、さらに一般化し局所的な条件付ながらもアデール群上の保型表現のリフトに一般化し、この結果を数理解析研究所において口頭発表し、現在論文の執筆中である。またエルミート型の保型形式への類似に関しても論文を投稿中である。市野と池田は、3重L関数の不定値の特殊値がエルミート型のマース・リフトと齋藤・黒川リフトの内積によって表されることを示した。との結果はグロス・プラサッドの予想から予言される結果とほぼ整合する。この結果についての池田と市野の論文が雑誌に掲載された。また市野と池田は上記の研究をさらに進め、グロス・プラサッドの予想を精密化し直交群、ユニタリ群上の保型形式の周期とL関数の特殊値を結び付ける研究を遂行中である。この内容に関して池田と市野は多くの実例を含んだ論文を投稿中である。平賀、市野、池田はこの結果を論文にまとめ、雑誌に掲載された。池田保は総実代数体上の2次の射影一般線型群の保型表現から高次のシンプレクティック群またはメタプレクティック群上の保型表現へのリフティングの存在をある種の条件のもとで証明した。これは一変数の保型形式から偶数次のジーゲル保型形式へのリフティングの一般化である。この研究成果をまとめた論文は現在投稿中である。市野篤史(連携研究者)と池田保は直交群上の保型形式のグロス=プラサド型の周期とL関数の特殊値を明示的に結びつける公式を予想として提出し、論文を発表した。この論文は学術誌"Geom. Funct. Anal."に掲載が決定している。市野篤史はこの予想を3次と4次の直交群に関する周期の場合に解決し、論文を発表した。平賀郁(研究分担者)と斎藤裕(研究分担者)は特殊線型群の内部形式に関する共同研究を進めている。この成果の一部をまとめた論文は現在投稿中である。吉田敬之(研究分担者)は加塩朋和氏との共同研究でp進CM周期の研究を進め、2編の論文を発表した。高橋哲也(連携研究者)は大阪府立大の川添充氏と楕円曲線暗号の研究を精力的に進めている。