hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ループス自己抗原反応性T細胞レセプターの遺伝子ワクチネーションによる病態の制御

4+Th1細胞を用いたワクチネーションがSLEのモデルマウス(MRL/1prマウス)の治療として有効で、その機序としてT細胞レセプター(TCR)のVβ-CDR3に対する抑制抗体と自己反応性T細胞傷害性CD8およびCD4陽性T細胞が誘導されることを報告してきた。昨年度は、ループスのモデルマウスであるMRL/1prマウス脾細胞から自己反応性T細胞(ART-S)を新たにライン化し、それをMRL/1prマウスに繰り返し移入することにより同T細胞ラインに対する抗イディオタイプ抗体を誘導した。さらにそのマウス脾細胞を用いてB細胞ハイブリドーマを作成した。フローサイトメトリーによるスクリーニングにより、ART-Sの表面抗原を特異的に認識するIgGを産生するハイブリドーマが8種類えられた。また同様に抗核抗体を産生するハイブリドーマが4種類得られた。間接免疫蛍光法ではヒトSLEで認められる染色パターンと全く同じであり、本来の目的とは異なるが、今後抗核抗体の病因的意義を追求するために貴重なハイブリドーマであると考えられる。本年度はそのハイブリドーマ特異性を検討したところ、少なくとも3種類のハイブリドーマに分けられた。1)#1、11,121はいずれもRNA-IPP(免疫沈降法)でU1RNAを、蛋白-IPPで抗U1RNP抗体と同様のパターンを示したが、ELISAでは陰性であった。2)#104はRNA-IPPでU1RNAを沈降し、ELISAにて抗U1RNP抗体/抗U1-C抗体が陽性であった。また3)#64はRNA-IPP、蛋白-IPPでは陰性であったが、ELISAにて抗U1RNP抗体/抗U1-70K抗体が陽性であった。免疫プロット法(IB)では、#64は70kDa蛋白よりも45kDa蛋白に強く反応し、apoptotic U1-70Kに対する抗体である可能性が示唆された。今後これらのB細胞ハイブリドーマから分泌されるIgGを限界希釈法により単離精製した上でIgGサブクラスを確認し、in vitroおよびin vivoにおいて病原性を調べるため、免疫複合体の作成を行う予定である。全身性エリテマトーデス(SLE)における特異的な免疫抑制療法の開発のため、申請者はループス自己抗原反応性T細胞を用いたワクチネーションを行い、ループス自己抗原(ヌクレオソーム)反応性CD4+Th1細胞を用いたワクチネーションがSLEのモデルマウス(MRL/1prマウス)の治療として有効で、その機序としてT細胞レセプター(TCR)のVβ-CDR3に対する抑制抗体と自己反応性T細胞傷害性CD8およびCD4陽性T細胞が誘導されることを報告してきた。ループスのモデルマウスであるMRL/1prマウス脾細胞から自己反応性T細胞(ART-S)を新たにライン化し、それをMRL/1prマウスに繰り返し移入することにより同T細胞ラインに対する抗イディオタイプ抗体を誘導した。また同様に抗核抗体を産生するハイブリドーマ(Hy)が4種類得られた。Hy64はU1-70K蛋白を認識するモノクローナルIgMであり、患者抗U1-70K抗体を競合した。しかし免疫ブロット法(IB)では、Hy64-IgMは70kDa蛋白よりも45kDa蛋白に強く反応し、抗apoptotic U1-70K抗体とも異なった。
自然な文を出力する文生成システムの研究

自然な文を生成するシステムの研究開発を行った。特に対話システムに対して有効な方法として、コーパスから獲得される知識と人手で与えられた知識の融合を図った。本研究において次のような成果が挙げられた。1柔軟な構文解析システムの構築語の用法は構文構造から獲得される.特に副詞は人間とコンピュータとの自然言語対話において用いられることが多く、そのような環境においては従来扱いが困難であった非文が出現することが多い。このため、Nグラムを用いた柔軟な構文解析技法を開発し、理論的にすべての文を許容でき、再現率が英語に対し85%以上、日本語に対し76%以上と従来の人手で構築された構文解析と同等の性能を得ることができた。2副詞についてのモデル化、統計的情報の獲得本研究においては時間副詞に関する知識を開発した。このモデルにおいては、述語(名詞、動詞、形容詞、形容動詞のいずれかで構成される文の意味を表す主要な要素)のタイブによってどのような意味が副詞によって規定されるかを表すことができる。述語のタイプは用言の種類、アスペクト、テンス、ムードによって分類される。これを一般の副詞に拡張し、知識データベースを構築した。知識データベースを構築する上で、どのような述語と共起するかをコーパスで調査し、副詞が付加する意味をこの共起情報によって分類した。この方法はオノマトペまで含む広い副詞的な表現に拡張可能な方法である。3対話システムの構築従来形態素情報に基づく手法によって、事例に基づく対話システムを構築してきた。これを拡張し、構文的な要素によって、入力文と事例とのマッチングを行う方法を開発した。これによって、文の中心的な意味を表すキーワードだけでなく、係り受け関係を用いた事例の選択を行うことができた。また,係り受け情報を使い,従来のスロット方式の文生成に比べてより広い範囲の自然な文を生成することが可能になった.本研究は,自然言語対話システムを実現するにあたって必要となる文生成メカニズムについて研究を行っている.特に,自然な自然言語文を生成することに焦点を当て,意味的な定義と構文的な定義の関係を一般的には見いだすことが困難な副詞の用法について研究を進めている.平成12年度における研究実績を以下に示す.(1)時間副詞を扱うモデルの実現とモデルに基づく副詞を使った文生成副詞を使った文を生成するとき,名詞や動詞などと同じような方法,すなわち類義語などを表した意味的な階層構造から語を選択するのは困難である.そのため,「もう」および「まだ」という典型的な二つの副詞に焦点をあて,その意味表現モデルとモデルの文生成における利用法について議論を行った.(2)頑健な係り受け解析の研究コーパスからの自動的な意味獲得,用例獲得のためには,頑健であり高精度な構文解析手法が必要である.そのための方法として,Nグラムを用いた構文解析手法を提案し,従来の句構造文法を利用したものと精度的にはほとんど同等で,頑健な処理が実現できることを示した.本手法はコーパスからの副詞の用法に関する知識の獲得,および対話システムにおける発話の解析に用いられる.(3)副詞コーパスの作成新聞からのコーパス作成を行っている.副詞の出現頻度は名詞などに比べて相対的に低いので,ホームページからの獲得などを計画している.(4)事例ベースを使った文生成メカニズムの実現対話システムの手法として,事例ベースを用いた自由対話系の設計,開発を行った.今後,本研究の文生成システムを組み込み,対話実験に用いる予定である.自然な文を生成するシステムの研究開発を行った。また,係り受け情報を使い,従来のスロット方式の文生成に比べてより広い範囲の自然な文を生成することが可能になった.
ソーシャルワークの特性に関する実証的研究-ケアマネジメントとの関連をもとに

ソーシャルワークとケアマネジメントとの関係について整理すると、ソーシャルワークの主要な方法がケアマネジメントであるとことを明らかにした。さらに、このケアマネジメントが明らかになることで、ソーシャルワークの内容が部分的ではあるが明らかになってきた。ただし、ソーシャルワークを構成するためには、地域社会を対象とした支援が必要であり、その部分での方法の明確化が不十分であることが明らかになった。そのため、地域社会への支援過程について研究を行い、結果として、ケアマネジメントと同様にplan→do→check→actionの流れで展開していること、さらにはそのでは、地域住民との信頼関係の構築が重要であること、同時に支援計画の内容にはいくつかの種類の活動に分かれることを明らかにした。(1)ケアマネジメントとソーシャルワークの関係を理論的に整理するだけではなく、現実にソーシャルワーカーとケアマネジャーの業務の違いを明らかにする。(2)ケアマネジメントでは行っていないソーシャルワークの業務を抽出する。(3)ソーシャルワーク独自の業務の方法を明確にする。(4)ソーシャルワークとケアマネジメントの関係を明らかにする。ケアマネジメントとの関係でソーシャルワークの特性を捉えるために、研究チームを総論的研究と各論的研究に分けて、研究を進めてきた。さらには、初年度として、日本国内だけでなく、アメリカおよび韓国についても研究の対象を広げて研究を進めた。具体的には、総論的なグループは日本国とアメリカおよび韓国を対象に2グループ、各論グループは6グループとした。各論グループについては、高齢者、精神障害者、知的障害、児童、医療の5グループであった。研究手法は、それぞれのグループごとに、文献研究、フィールド調査研究、質的分析研究、量的分析研究など多様な手法でもって、ソーシャルワークとケアマネジメントの関係が浮かび上がらせることを目的にしてきた。研究成果としては、ソーシャルワークとケアマネジメントの関係については、現実には類似性と相違点を有していることが明らかになり、同時に両者を比較すると、それぞれがメリットとデメリットを有していることも示された。さらには、新たに参入してきたケアマネジメントに対して、ソーシャルワーカーはそれを受け入れることに対して、肯定的な態度と否定的な態度が存在することが分かった。また、アメリカの研究では、一時期ケアマネジメントがどの専門職に属すかの緊張した議論が、ケアマネジメントの創設期にはあったが、現状では看護系と福祉系が独自性を有しながら業務を行っていることが分かった。韓国の研究では、社会福祉館(community center)の活動内容に取り入れられ、ソーシャルワーカーの業務として定着化していることが明らかになった。本年度の研究成果を踏まえて、さらに両者の関係について研究を深めていきたい。とりわけ、海外での両者の関係についての調査を進め、日本においては、両者の関係についての理解を超えて、統合できる部分について整理することで、ソーシャルワークの専門性をいかに高めていくかに、徐々に研究の方向をギアチェンジしていきたいと考えている。今年度は、総論的な研究を3グループで、各論的な研究を2グループで実施した。総論のグループでは、ケアマネジメントとソーシャルワーク機能の類似点と相違点を具体的に明示することを目的に研究を行った。具体的には、日本と韓国でのコミュニティ・ソーシャルワーカーの職務分析が行われ、日韓での職務の相違や、日本国内でのソーシャルワーカーとケアマネジャーの職務の現状と役割意識についての相違が明らかになった。具体的には、両国ともに、ソーシャルワーカーは地域社会でのネットワーキングや資源開発の機能が弱いことが明らかになった。これらの職務を強化するための方策について検討した。もう1グループでは、利用者の主体性の構造について質的研究を行った。結果として、ソーシャルワーカーが利用者の主体的適応力を高めるためには、5つのポイントがあることを示した。各論の研究では、精神保健福祉領域でのソーシャルワークについては、ストレングスに焦点をあてることで、ソーシャルワーク・ケアマネジメントの特徴を、フディリティ尺度を用いて、明らかにした。児童領域では、児童虐待についてケアマネジメントをもとに事例分析し、ケアマネジメント援用の可能性を検証した。同時に、行政の児童虐待対応ネットワーク連絡会議とケアマネジメントの関係について整理した。ソーシャルワークとケアマネジメントの違いは、前者は個人だけでなく、地域を対象にして活動することに相違があるが、現実のソーシャルワークは理論的にも実践的にも極めて弱いことが明らかになった。そのため、本年度は地域に焦点を当てたソーシャルワークの理論的研究を行い、一方で、地域を対象としてネットワーク実践について質的分析を行った。また、これについて児童、高齢者、患者、障害者についても同時に、このことは韓国ソウルおよび中国上海においても類似の調査研究を行った。研究結果として、ソーシャルワークが関わっているネットワークには地域住民を巻き込んだ住民主体ネットワーク活動と、様々な地域の課題に対応する専門職のみで形成された専門職ネットワークの2パターンが存在することが明らかになった。

住民主体ネットワーク活動の実施には、<地域住民の主体的な意思>が必要不可欠であり、そのためソーシャルワーカーは<自発的な住民活動に対する側面的支援>や<住民活動の段階に応じた関わりの調整>といった【ネットワーク推進のための専門職としての支援】を行っていた。住民主体ネットワーク活動が定着した後は、<確立したネットワーク活動の拡充>や<確立したネットワークをモデルとした他地域でのネットワーク展開>等、ネットワークを広げるために様々な実践を行っていることが示された。また、【住民主体ネットワークによる影響】として、<地域の要援護者の早期発見>や<住民同士の結束の強化>等の効果を持っていることが明らかになった。また、専門職ネットワークは、<個別ケースの対応・業務を通じた関係作り>にから始まり、<地域福祉を推進するための専門職間の連携>により確立されるプロセスが明らかになった。この専門職ネットワークは住民主体ネットワークに比して多くのソーシャルワーカーが実践しており、比較的形成しやすいネットワークであることが分かった。ケアマネジメントとの関連で、ソーシャルワークの特性を明らかにし、その実践方法を提示することが目的であるが、結論として、地域に焦点を当て、地域ニーズの解決に向けて、計画的に支援することであり、今回はそれを実施えきるための具体的な方法を提示することができた。具体的には、(1)コミュニティソーシャルワーカーを対象にした質的研究から、「地域に知ってもらうこと」と「地域を知ること」での地域住民との関係づくりを土台にして、アセスメント、支援計画の作成、支援計画の実施、評価を含めたモニタリングを行っていることを抽出し、計画的な変化(planed change)がポイントであることを示した。これは、韓国のコミュニティセンター職員の活動分析や中国でのひとり暮らし高齢者の見守り活動の分析においても実証することができた。さらに、このような活動をソーシャルワーカーが実施していくためのマニュアルの作成も可能になった。同時に、そうした活動の不十分さが、困難事例を生み出している一因であり、そうした活動にどの程度の時間を費やしているかも明らかにした。(2)これらの活動を遂行していくために、専門職に対して研修を実施していく必要性があるが、その内容分析を行い、具体的な研修内容の提案を導き出している。(3)結果として、専門職のコンピテンシーを高めるために指標化し、自己評価票の作成を試みている。(4)具体的な方法として、利用者側が主体的に活動するために、ソーシャルワーカーの対応方法について、指標化の試みを行っている。それを利用者のストレングスということに着目し、精神病院の退院支援に焦点を当てて、具体的な展開を行っている。
脳内移植モデルを用いたリンパ腫の浸潤機構の解明と新規治療の考案

脳原発悪性リンパ腫の増殖、浸潤に関与する分子を探索する目的で、臨床サンプルを用いて、細胞の代謝に関与するglucose transporter 1(Glut1)、fatty acidsynthase(F AS)、接着や浸潤に関与するα2,6-sialyltransferaseの発現解析をそれぞれの抗体を使った免疫組織染色にて行った。α2,6-sialyltransferaseは、脳原発リンパ腫25例中23例、全身性リンパ腫脳内浸潤9例すべてに陽性であった。さらにF ASの発現は解析した27例中70.3%に認め、Glut1は44.4%に発現していた。これらの分子は、悪性リンパ腫において新たな治療標的になりうることが示唆された。本研究では脳原発悪性リンパ腫の病態を解明し、既存の治療に対する耐性の克服、さらに病態解明に基づいた新規治療法の開発により、治療成績および治療後のQOL改善を目的としている。まずリンパ腫の細胞死の抑制や増殖に関わる分子として、転写開始因子であるeukaryotic initiation factor 4E(eIF4F)に着目した。この分子は、脳原発リンパ腫症例の腫瘍サンプルにおいて高発現がみられ、培養細胞株(HKBML)において、eIF4Eの活性を制御するMNK1キナーゼの阻害剤により増殖抑制および細胞死が誘導された。さらに免疫不全マウスの皮下にHKBML細胞を移植した皮下腫瘍モデルにおいても増殖抑制効果があることを明らかにし、報告した(Muta D.J Neurooncol. 2011)。次に悪性リンパ腫の生物学的特徴である脳内へ広範囲に浸潤することに着目した。細胞の浸潤にはまず組織への定着が必要であり、細胞表面の接着分子およびその制御分子が重要である。CD22はB細胞リンパ球の表面抗原であり、細胞の活性化、組織への接着などの機能を持ち、B細胞性リンパ腫のマーカーにもなっている。CD22を介した接着は、α2,6-sialyltransferaseによるシアリル化により制御される。またα2,6-sialyltransferaseは乳がん細胞においては血液脳関門の透過性を亢進させ、細胞が脳内に浸潤することに関与することも報告されている。そこでα2,6-sialyltransferaseが、リンパ腫の脳内への浸潤にも関与する可能性を考え、組織での発現を解析した。生検術を施行し、B細胞性リンパ腫と診断した脳原発リンパ腫25例、全身性リンパ腫の脳内浸潤9例を抗2,6-sialyltransferase抗体を用いて免疫組織染色を行ったところ、α2,6-sialyltransferaseは、脳原発リンパ腫25例中23例、全身性リンパ腫脳内浸潤9例すべてに陽性であった。この結果は、日本脳腫瘍病理学会にて報告した。悪性腫瘍では、細胞内の解糖系や脂質合成などの代謝が亢進し、増殖に必要なエネルギーを産生している。よってそれらの代謝に関連する分子を制御することは、有効な治療手段になり得ると考えられる。リンパ腫においても、glucose transporter 1(Glut1)の発現増加によりグルコースの取り込みが亢進し、糖代謝は活性化している。さらに近年、脂肪酸合成に関与するfatty acid synthase (FAS)の発現が亢進していることも報告され、治療標的分子として注目されている。これらの代謝関連分子に着目し、発現解析を行った。生検術にて組織診断を確認した脳内リンパ腫において、Glut 1およびFASの発現を検討したところ、FASの発現は70.3%に認め、Glut1は44.4%に発現していた。この結果は、日本脳腫瘍学会にて報告した。さらにFASの発現を、膠芽腫、髄膜腫でも検討したところ、膠芽腫では67.7%に発現していた。更に髄膜腫では、悪性髄膜腫(grade IIおよびIII)では62.9%と、良性髄膜腫(grade I)の29.8%に対して優位に高発現していた(p<0.001)。良性髄膜腫の中でも、細胞増殖の指標であるMIB-1が10%を超えるものや周囲の骨、筋肉に浸潤しているものには、発現がみられた。これらの結果より、FASは増殖、浸潤能の高い腫瘍に発現しており、悪性度の指標として用いることができ、リンパ腫も含め、悪性脳腫瘍の新たな治療標的となり得ることが示唆された。この結果は、日本脳神経外科学会学術集会および日本分子脳神経外科学会で報告した。

脳原発悪性リンパ腫の治療に関しては大量メソトレキセート療法が標準的治療として行われているが、治療に抵抗性がある症例、早期に再発・進行を来す症例がみられる。これまでに治療を行った91例の治療成績を検討し、転帰に関わる因子を解析した。その結果、薬物抵抗性や副作用による中断で治療が完遂できなかった症例が、有意に転帰不良であった。この結果は、日本脳神経外科学会学術総会シンポジウムで発表した。さらに薬物抵抗性であった症例の組織サンプルを用いて、分子発現の違いを解析中である。脳内に浸潤性に広がる病変の鑑別は画像診断だけでは困難であり、組織採取による組織診断が必要である。しかし組織診断目的の生検術により得られるサンプルは少量であり、鑑別診断に苦慮することが多い。そこで我々は、神経膠腫において高頻度に変異しているisocitrate dehydrogenase1 (IDH1)に着目し、変異型IDH1を特異的に認識する抗体を用いた免疫組織染色により非腫瘍性病変との鑑別を行った。瀰漫性星細胞腫などの腫瘍細胞のみ陽性であり、検査した非腫瘍性病変はすべて陰性となり、鑑別に有用であった。この結果は、日本脳腫瘍病理学会で報告した。さらに悪性腫瘍との鑑別を明らかにする目的で、脂肪酸合成に関与し、様々ながんで発現の亢進が報告され、我々も悪性髄膜腫において高発現を確認しているfatty acid synthase (FAS)の発現を検討した。膠芽腫、悪性神経膠腫、リンパ腫ではいずれも70-80%で発現陽性であり、非腫瘍性病変(20%)との鑑別に有用であった。この結果はBrain Tumor Pathologyに報告した。免疫不全マウスの脳内に腫瘍細胞を移植する実験において、安定したモデルの作製ができなかった。24年度が最終年度であるため、記入しない。患者検体において、悪性リンパ腫を始め、悪性神経膠腫および悪性髄膜腫において、脂肪酸合成酵素であるfatty acid synthaseが高発現していることがわかった。このことより、fatty acid synthaseが、悪性脳腫瘍において治療標的分子となる可能性が示唆された。(2)培養細胞株を免疫不全マウスの皮下に移植した皮下移植モデルを作製し、fatty acid synthase阻害剤を腹腔内に投与し、増殖抑制および細胞死誘導効果を調べる。
糖化産物レセプターRAGEに着目した食用植物抽出成分による糖尿病性血管障害の抑制

糖尿病状態における血管内皮に与える傷害の影響が、様々な症状や合併症を与える根源になっている。これらの血管内皮に与える影響を、食用植物抽出成分(MEEP)によって緩和・抑制することが本研究の目的である。MEEPが、8-oxoGの蓄積を抑制するか否か検討した。方法:50種の総phenol量の結果から、選択したSample30種はメタノール抽出、DMSO溶解した。ヒト血管内皮培胞を一定量まき、MEEP及び4.5g/L濃度のグルコースを投与し、培養した。培養後、DNA抽出を行い、加水分解後、8-oxoG測定した。2)MEEPが高血糖状態の組織内におけるReactive Oxygen Species(ROS)量を低下させるのか。細胞中のDNA傷害を引き起こすROS量を検討することにより、ROSに対するMEEPの影響を検討した。方法:1)と同様に選択、調製したSampleを細胞に投与し、グルコース(4.5g/L)を加え、培養した。その後、化学発光法によりROS量測定した。2)細胞内ROS量測定:コントロールより高かったのは、Cow pea、Kaiware-daikonで、減少させたのは、Onionであった。以上の検討から、MEEPによるラジカル消去効果により、DNA傷害が抑制されたものと、ROS量に影響を与えず、8-oxoGの抑制が行われたものが存在していた。糖化産物レセプターRAGEに着眼し、full-RAGE及びes-RAGE量の測定を行った。ヒト血管内皮細胞を使用し、高血糖状態を想定した高グルコース環境下において、30種の食用植物抽出成分を投与し、2タイプのRAGE発現に影響を与えるか否かスクリーニングを行った。Samples30種は、先に食用植物50種において検討したphenolic compounds量の高いSamplesから30種を選択した。[調製]1.Samplesの調製:30種のSamplesは、24時間メタノール浸潰しdry-up後、DMSOにて溶解した。[結果]1.full-RAGEの測定:full-RAGEは、終末糖化産物(AGE)をbindingし血管細胞膜を貫通してAGEを体内に取り込む働きがある。糖尿病の場合、これが増加することが報告され、余剰なAGEを取り込むことが考えられている。30種のSamples投与の結果、コントロールに対し有意に高い結果を示したのは、Bittermelon seeds、Small sweet papaerであり、平均5.05倍、3.60倍それぞれ高い値であった。2.es-RAGEの測定:es-RAGE(内在性)は、AGEとBindingしても構造上のC末端を欠いているため、血管細胞膜を通過出来ず体外へ排出される。コントロールより有意に高いのは、1/10希釈のKaiware-daikonであり、平均3.85倍高い結果を示した。[平成19年度及び今後の実験計画]さらに、平成19年度は、引き続き高グルコース状態においてのDNAに対する傷害、細胞内radical量の観点から検討を行う計画である。2タイプのRAGEにおいて影響を与えずとも、高グルコース状態に伴うDNA傷害(細胞障害)を引き起こしている可能性もあることから、phenolic compoundsを含有するSamplesの効果を期待する。AGEとbindingして体外排出する働きを行うes-RAGEの発現に影響を示したSample中の成分については、別に検討をすすめる予定である。
X線CT画像と写真を用いた花の3次元モデリングの研究

花は,その美しさと多様性から,国内外の研究・教育・趣味と密接な関わりを持ち,コンピュータグラフィクス研究業界でも,そのモデリングは重要な課題となっている.しかし,花は遮蔽構造を持つため,既存のステレオ視やレンジスキャナはそのモデリングに適用しにくい.そこで本研究では,X線CTと写真を利用する.具体的には,花のX線CT画像を撮影し,これを領域分割することで三次元形状モデルを構築する.さらに複数の視点からサンプルを撮影した写真を用いて,モデル表面のテクスチャを復元する.研究成果は,権威の高い学会・論文誌に採録されている.本研究は,X線CT画像と写真を利用した花の3次元モデリング手法に関するものである.具体的には,1)花のX線CT画像を領域分割して3次元モデルを構築できる技術,2)複数の写真から花表面の模様(テクスチャ)を合成する技術,及び,3)生成したモデルの直感的な可視化環境の確立を目指すものである.提案法はX線CT画像を応用するため,従来法では困難であった遮蔽の多い花のモデリングが可能になる.構築した3次元モデル群は,直観的な可視化環境と統合して公開する予定であり,研究成果は,コンテンツ作成・研究・教育・趣味など幅広い分野での活用が期待できる.25年度は,以下のサブ課題に注力した.(a)25年度前半(CTの導入前)は,一般的な三次元画像処理の研究として『曖昧な境界を持つ領域のための輪郭線制約を用いた領域分割法』を研究開発した.この手法を用いると,ユーザが配置した輪郭線制約が満たされ,画像の強いエッジを通るような境界面が自動生成される.境界面計算にはHermite Radial Basis Functionのゼロセットを活用するモデルを提案した.この成果は,Computer Graphics Forum (Eurographics 2013)に採録された.(b) 25年度後半(CTの導入前)は,『CT画像から花の構成要素(茎・花托・雌しべ・雄しべ・花弁・がく片)を半自動的にモデリングできる手法』を実現した.具体的には,花の各要素に特化したユーザインタフェースと動的輪郭モデルに基づく曲線・曲面計算法を拡張した手法を提案した.提案手法では,比較的単純な構造を持つ離弁花ならば,数十分のモデリング時間で三次元モデルを構築できる.現在提案法の発表準備に注力している.本研究は,三次元コンテンツが充実した花のデジタル図鑑の実現を目指し,X線CT画像と写真を用いた花の3次元モデリング手法を開発するものである.具体的には,1)花のX線CT画像を領域分割して3次元モデルを構築できる技術,2)複数の写真から花表面の模様(テクスチャ)を合成する技術,及び,3)生成したモデルの直感的な可視化環境の研究開発を行う.提案法はX線CT画像を応用するため,従来法では困難であった遮蔽の多い花のモデリングが可能になる.構築した3次元モデル群は,直観的な可視化環境と統合して公開する予定であり,コンテンツ作成・研究・教育・趣味など幅広い分野での活用が期待できる.26年度前半は,前年度(25年度)に開発を行った『CT画像から花の構成要素(茎・花托・雌しべ・雄しべ・花弁・がく片)を半自動的にモデリングできる手法』のブラッシュアップを行った.この手法は,画像の局所特徴量に応じて定義されるリーマン空間の最短距離問題を解くことで,CT画像から花の各要素(花弁やしべなど)の軸やふちを半自動的に抽出する.26年度前半は,この部分の高速化やリファクタリングを行った.加えて,撮影されたCTデータと提案法により生成された花の三次元モデルをweb上で公開する作業も行った.本研究成果は,Graphics業界最高峰の学会であるSIGGRAPHにフルペーパーとして採録された.26年度後半は、花のモデリングに取り掛かる準備段階として前年度(25年度)に開発を行っていた医用画像の領域分割に関する手法をブラッシュアップし、そのweb公開に関する作業を行った.現在、提案システムは,VoTracerというソフトウエア名で申請者web pageよりダウンロード可能であり、複数の医療機関・研究機関において利用されている.また,この手法の実応用に関する研究発表も行った.本年度は,花表面のテクスチャ復元に関する研究に注力するともに,Webブラウザにより花三次元モデルを閲覧できる環境の構築,および,花のCT撮影作業に取り組んだ.1.花のテクスチャ復元.本研究では,遮蔽の多い花の形状モデリングのため, X線CT装置を用いる.しかし,このX線CTには,テクスチャ情報を取得できないという課題がある.そこで,花のCT撮影を行った後に複数視点から写真も撮影しておき,この写真からテクスチャ情報を復元する手法を開発する.具体的には,CTから構築できる三次元モデルを複数視点からレンダリングし,このレンダリング画像と写真を比較することで,『三次元モデルと写真の相対的な位置関係』を取得する.さらに,写真を三次元モデルに逆投影することで,テクスチャを復元する.花・昆虫を用いた実験を行い,提案手法により詳細なテクスチャが得られることを確認している.残念ながら研究期間中に論文公開へ至らなかったが,現在,手法をまとめ論文投稿準備を進めている.2.花モデルの閲覧環境.本研究により得られたCT画像と三次元モデルは,研究代表者のWebページにて公開されている[1].このデータを一部の専門家だけでなく,教育・趣味目的に広く利用できるよう,一般的なwebブラウザを用いて花三次元モデルを閲覧できるツールを開発した.開発成果は既に,研究代表者ページ[1]に導入されている.3.花のCT撮影.

現在,研究代表者のページ[1]には,11種の花のCTと三次元モデルが公開されている.このページを更に充実させるため,複数の花のX線CT・写真撮影作業を行った.得られたデータは,上記(1)の研究に利用しており,この研究の論文発表と同時に公開する予定である.花は,その美しさと多様性から,国内外の研究・教育・趣味と密接な関わりを持ち,コンピュータグラフィクス研究業界でも,そのモデリングは重要な課題となっている.しかし,花は遮蔽構造を持つため,既存のステレオ視やレンジスキャナはそのモデリングに適用しにくい.そこで本研究では,X線CTと写真を利用する.具体的には,花のX線CT画像を撮影し,これを領域分割することで三次元形状モデルを構築する.さらに複数の視点からサンプルを撮影した写真を用いて,モデル表面のテクスチャを復元する.研究成果は,権威の高い学会・論文誌に採録されている.本年度は,花の三次元モデリング手法のブラッシュアップし,関連ソフトウエアと花の三次元モデル群の公開を完了した.ただし,現在生成できているモデル数は10例程度と少ないため,さらに意欲的な研究活動が必要である.27年度が最終年度であるため、記入しない。コンピュータグラフィクス26年度までに,花のCT画像の領域分割と三次元モデル構築部分は達成されている.本年度は,主に『画像から半自動的にテクスチャを抽出し三次元モデルにマップする部分』と『直感的な可視化環境』の開発に従事する.特に,半自動テクスチャ抽出では,写真と三次元画像との自動位置合わせ手法,三次元モデルのパラメタリゼーション,及び,遮蔽部分のテクスチャ類推の三件の要素技術を開発する必要がある.各要素技術について,グラフィクス業界ではさまざまな既存手法が発表されおり,それらを応用し花の構造に特化した技術を提案する必要がある.可視化環境については,より幅広い層のユーザが利用できるよう,汎用的な利用環境を想定して実装を進める予定である.さらに上記に加えて,本年度は,花サンプルの撮影も行い,モデルの種類を増やしその公開に関する作業にも従事する予定である.X線CT装置の導入が10月末日と当初の予定より遅れたが,CT画像処理の手法の開発経験があったことと、提案した計算法(動的輪郭モデル)が堅固に動いたことから、当初の計画通り花の3Dモデルを構築する部分を達成できた.さらに,このCT画像を用いた花のモデリングに関する研究成果は,権威の高い国際学会にConditionally acceptされており(2014/04/29現在)発表の準備が進んでいる.27年度が最終年度であるため、記入しない。27年度が最終年度であるため、記入しない。25年度に達成した花のモデリング手法は,対象が離弁花に限られるため,まずこの手法を拡張して拡張して合弁花への対応を目指す。これと平行して,写真からのテクスチャ合成法と花モデルの可視化環境の開発に注力する予定である.27年度が最終年度であるため、記入しない。
モノアミン動態への薬理学的介入による虚血・再灌流時心筋細胞傷害軽減の検討

麻酔下ラットに心臓マイクロダイアリシス法を用い、心虚血(冠動脈閉塞30分)・再灌流時におけるヒドロキシラジカル産生をトラッピング法によってモニターし、心筋細胞傷害の指標として心筋間質ミオグロビン濃度をモニターした。虚血部において、ヒドロキシラジカル産生、およびミオグロビン放出は虚血時に上昇し、再灌流でさらに上昇した。また、モノアミンオキシダーゼ阻害薬の局所投与により、ヒドロキシラジカル産生、およびミオグロビン放出は虚血時、再灌流時ともに抑制され、心虚血・再灌流時において、モノアミンオキシダーゼは、ヒドロキシラジカル産生および心筋細胞傷害に関与していることが解明された。心虚血・再灌流時モノアミン動態に関して、麻酔下ラットにおいて、心臓マイクロダイアリシス法を用い、心虚血(冠動脈閉塞30分)・再灌流時の虚血部において、心筋間質セロトニン濃度と、そのモノアミンオキシダーゼによる代謝物である心筋間質5-HIAA濃度を同時モニターし、虚血・再灌流時のセロトニンの放出、再取り込み、代謝に関する動態を明らかにした。ヒドロキシラジカルのモニタリングに関して、麻酔下ラットにおいて、心臓マイクロダイアリシス法を用い、ダイアリシスプローブに4-hydroxylbenzoic acidをtrapping reagentとして灌流し、ヒドロキシラジカルとの反応によって生成される3,4-DHBAをHPLCにて測定することによって、心筋間質におけるヒドロキシラジカル産生をモニタリングする方法を確立させた。その後、麻酔下ラットにおいて同法を用い、心虚血(冠動脈閉塞30分)・再灌流時の虚血部心筋間質ヒドロキシラジカル産生をモニターし、虚血・再灌流時にヒドロキシラジカルが上昇することをin vivoにおいて捕らえた。心虚血・再灌流時におけるヒドロキシラジカル産生に関して、麻酔下ラットにおいて、心臓マイクロダイアリシス法を用い、ダイアリシスプローブに4-hydroxylbenzoic acidをtrapping reagentとして灌流し、ヒドロキシラジカルとの反応によって生成される3,4-DHBAをHPLCにて測定することによって、心虚血(冠動脈閉塞30分)・再灌流時の虚血部において、ヒドロキシラジカル産生をモニターした。虚血・再灌流時にヒドロキシラジカル産生は上昇し、モノアミンオキシダーゼ阻害薬の局所投与により、その産生が抑制されることを明らかにした。心虚血・再灌流時におけるモノアミン代謝による心筋細胞傷害に関して、麻酔下ラットにおいて、心臓マイクロダイアリシス法を用い、心虚血(冠動脈閉塞30分)・再灌流時の虚血部において、心筋間質ミオグロビン放出をモニターした。虚血・再灌流時に心筋間質ミオグロビンは上昇し、モノアミンオキシダーゼ阻害薬の局所投与により、その放出が抑制されることを明らかにした。以上のことから、心虚血・再灌流時において、モノアミンオキシダーゼによってモノアミンは代謝されるが、その際に産生された活性酸素は心筋細胞傷害を引き起こし、モノアミンオキシダーゼ阻害薬はその心筋細胞傷害を抑制することが解明された。申請書の現在までの研究計画は、マイクロダイアリシス法により虚血部心筋間質モノアミン動態、および虚血部ヒドロキシラジカル産生動態を解明し、心虚血・再灌流時にモノアミン代謝によるヒドロキシラジカル産生が起きているか、また、その活性酸素により心筋細胞傷害が起きているかどうか解明することであり、現在までに研究は申請書の予定通り順調に進んでいる。心虚血時、心臓交感神経からはノルエピネフリンが、血小板からはセロトニンが大量に放出され、これらのモノアミンはモノアミンオキシダーゼにより代謝される。この代謝過程で過酸化水素を発生するが、過酸化水素から生成される活性酸素ヒドロキシラジカルは、心虚血・再灌流時の心筋細胞傷害を引き起こすことが示唆されている。我々は麻酔下ラットの心臓にマイクロダイアリシス法を用い、trapping agentとして4-HBAをマイクロダイアリスプローブより局所投与し、4-HBAの心筋間質hydroxyl radicalとの反応物である3,4-DHBAを組織から回収して、HPLCを用いて測定することにより、心筋間質におけるヒドロキシラジカル産生をin vivoでモニターすることを可能にした。次に麻酔下ラットの左室虚血部において、心虚血・再灌流時のhydroxyl radical産生をモニターしながら、マイクロダイアリシスプローブを介してモノアミンオキシダーゼ阻害剤pargylineを局所投与し、モノアミン代謝を阻害することにより、再灌流時のヒドロキシラジカル産生が減少することを明らかにした。また、マイクロダイアリシス法による心虚血・再灌流時のミオグロビン放出モニターは、心筋細胞傷害の指標となることを示してきたが、この方法を用いて、麻酔下ラットの左室虚血部において、pargylineの局所投与によりモノアミン代謝を阻害することにより、再灌流時の心筋細胞傷害が減少することを明らかにした。すなわち、心虚血・再灌流時に心臓交感神経終末から放出されるノルエピネフリン、および血小板から放出されるセロトニンは、receptorを介して心筋細胞傷害を引き起こすだけでなく、モノアミンオキシダーゼを介してヒドロキシラジカルを産生して心筋細胞傷害を引き起こすことが明らかになった。

また、モノアミンオキシダーゼ阻害薬の局所投与により、ヒドロキシラジカル産生、およびミオグロビン放出は虚血時、再灌流時ともに抑制され、心虚血・再灌流時において、モノアミンオキシダーゼは、ヒドロキシラジカル産生および心筋細胞傷害に関与していることが解明された。申請書の現在までの研究計画は、マイクロダイアリシス法により心虚血・再灌流時の虚血部心筋間質モノアミン動態を解明すること、また、マイクロダイアリシス法による心筋間質ヒドロキシラジカル濃度のモニタリングを確立させ、心虚血・再灌流時の虚血部心筋間質ヒドロキシラジカル産生動態を解明することであり、現在までに研究は申請書の予定通り順調に進んでいる。申請書に記載した通り、モノアミン代謝によって活性酸素が産生され心筋細胞傷害を引き起こすが、そのpathwayのいずれかを薬理学的に介入して心筋細胞傷害を軽減できるかの検討を、予定通り進めていく方針である。循環生理学申請書に記載した通り、虚血・再灌流時に虚血部心筋間質に大量に放出されるモノアミンの代謝が、心虚血・再灌流時の虚血部心筋間質ヒドロキシラジカル産生にどれだけ関与しているか、またそのモノアミンオキシダーゼ由来のヒドロキシラジカルは心虚血・再灌流時の心筋細胞傷害にどれだけ関わっているか、またその傷害を薬理学的に軽減できるかの検討を、予定通り進めていく方針である。人件費が予定より大きくなったため、予定の物品が購入できず、次年度使用額が生じた。物品費、人件費が予定より大きくなったために、予定の設備備品が購入ができず、次年度使用額が生じた。翌年度分とあわせて、主として実験動物、薬剤、HPLC消耗品、ダイアリシスプローブ材料等の消耗品の物品費に使用する予定である。翌年度分と合わせて、設備備品を購入予定である。
食生活における自己管理力を育てるための家庭科食教育カリキュラムの開発と評価

生涯にわたって安全で健康的な生活を送るためには,現在はもちろん将来,社会や生活や環境が変化したとしても,その変化に対応できる力が必要である。そのためには,生活者一人一人が自分の生活の課題を的確に捉え,自分で課題を解決することができる自己管理力を育てていかなければならない。食生活についてみれば,食事は生きるために必須であるが,一方で食事のとり過ぎや不適切な食事は健康問題を引き起こす。このように生活における課題を解決するためには,問題や課題を一面的に捉えるのではなく,多面的・多角的に捉え,安全や健康を重視しつつ,生活スタイルや自分の指向に合った,生活者としての合理的で実現可能な意思決定をしていかなければならない。こうした問題意識のもと,本研究においては,生涯にわたって安全で健康的な食生活を送るための自己管理力を育てるための家庭科における食教育カリキュラムを開発することを目的とする。本年度においては,食生活上の具体的場面として食品購入時における食品選択場面に焦点をあて,その実態を把握することを目的とした。具体的には,食品選択場面における学生の食品選択行動の実態を捉えるとともに,食品選択行動を左右する要因やその背景について検討した。その結果,日常生活における食品選択行動の実態及びその行動に影響を与える要因について把握することができた。これらの研究結果より,食生活における自己管理力を高めるためのカリキュラムを開発する上での重要な示唆を得ることができた。学生を対象とした食品選択行動の実態及びその行動の背景について知見を得ることができた。これらの知見は,研究の目的である食生活における自己管理力を育てるためのカリキュラム開発に重要な示唆を与えるもので,得られた知見を基盤として,自己管理力を育てるための食教育カリキュラムの開発の構想を進めることができる。文献や資料から得られたリスクやリスクマネジメントに関する知見,食生活におけるリスクやリスクマネジメントに関する知見,学生を対象とした食品選択場面における選択行動の実態調査により得られた知見等に基づいて,食生活における自己管理力を育てるための食教育カリキュラムを開発する。また,自己管理力を育てるための効果的な学習教材及び学習方法,例えば,階層分析法やピラミッド型ランキングを用いた学習方法の導入を検討し,食生活を自己管理できる自立した生活者を育てるための家庭科における学習内容や学習方法についても提案する。家庭科では家庭生活を中心とした人間の生活を直接の学習対象としている。そのため,社会や生活の変化に応じて教育内容を見直していかなければならないし,また学校での学習が,将来社会や生活が変動してもそれに対応できる自立した生活者を育てることにつながっていかなければならない。自立した生活者を育てるためには,生活者一人ひとりが自分の生活課題を的確に捉え自分で課題を解決することができる自己管理力を育くむことが重要となる。生活上の問題や課題を解決するためには,問題や課題を一面的に捉えるのではなく,多面的・多角的に捉え,生活上の種々の制約のある中で,合理的で実現可能な意思決定をしていかなければならない。本研究では,生涯にわたって安全で健康的な食生活を送るための自己管理力を育てるための,家庭科における食カリキュラムを開発することを目的とする。本年度においては,食生活の課題をリスクと捉え,社会学や経済学におけるリスク研究をはじめリスク管理に関する基礎的文献及び資料を収集し,リスク管理の理論と方法について知見を得た。また,得られた知見から,生活における課題をリスクと捉えることの妥当性,生活におけるリスクの構造やリスク管理のアプローチ方法について検討した。その結果,生活におけるリスクの捉え方や考え方について視座を得るとともに,一般的なリスク管理の方法を生活におけるリスク管理に適用することの可能性について検討することができた。食生活における自己管理力を育むための教育の内容と方法について検討するため,リスク管理に関する基礎的文献及び資料を収集し,リスク管理に関する知見を得ることができた。また,一般的なリスク管理やリスク管理の方法を生活におけるリスク管理やリスク管理方法に適用することの可能性について検討することができた。自立した生活者を育てるためには、生活者一人ひとりが自分の生活課題を的確に捉え自分で課題を解決することができる自己管理力を育むことが重要となる。生活上の問題や課題を解決するためには、問題や課題を一面的に捉えるのではなく、多面的・多角的に捉え、生活上の種々の制約のある中で、合理的で実現可能な意思決定をしていかなければならない。本研究では、生涯にわたって安全で健康的な食生活を送るための自己管理力を育てるために、家庭科における食カリキュラムを開発することを目的とする。本年度においては、食生活上の課題をリスクと捉え、社会学や経済学におけるリスク研究をはじめリスク管理に関する基礎的文献および資料を収集し、リスク管理の理論と方法について検討した。その結果、危機とリスクの概念について、危機管理とリスクマネジメントの概念について、国家レベル、企業レベル、家庭レベル等の危機管理主体によって対応対象となる危機やリスクは異なり、またリスク回避方法やリスク処理手段も異なることなど、リスクの捉え方と考え方に関する基礎的知見を得ることができた。食生活レベルのリスクにおいても、いくつかのレベルの異なるリスクが想定でき、それぞれのリスクに応じて、処理方法や処理手段、リスク予防方法は異なることなど、食生活におけるリスクの捉え方・考え方及びリスク管理の特徴について整理することができた。こうした理論的研究により食生活における自己管理力を育てるためのカリキュラムを開発する上での構想を得ることができた。危機とリスクの概念および危機管理とリスクマネジメントの概念について知見を得ることができた。また危機の管理主体によって対応対象となる危機やリスクが異なり、リスク回避方法やリスク処理手段も異なることなど、リスクの基本的捉え方・考え方に関する知見を得ることができた。

こうしたリスクに関する理論的研究を援用して、食生活レベルにおけるリスクの捉え方および特徴を整理することができ、食生活における自己管理力を育てるためのカリキュラムを開発する上での理論的基盤を得ることができた。生涯にわたって安全で健康的な生活を送るためには,現在はもちろん将来,社会や生活や環境が変化したとしても,その変化に対応できる力が必要である。そのためには,生活者一人一人が自分の生活の課題を的確に捉え,自分で課題を解決することができる自己管理力を育てていかなければならない。食生活についてみれば,食事は生きるために必須であるが,一方で食事のとり過ぎや不適切な食事は健康問題を引き起こす。このように生活における課題を解決するためには,問題や課題を一面的に捉えるのではなく,多面的・多角的に捉え,安全や健康を重視しつつ,生活スタイルや自分の指向に合った,生活者としての合理的で実現可能な意思決定をしていかなければならない。こうした問題意識のもと,本研究においては,生涯にわたって安全で健康的な食生活を送るための自己管理力を育てるための家庭科における食教育カリキュラムを開発することを目的とする。本年度においては,食生活上の具体的場面として食品購入時における食品選択場面に焦点をあて,その実態を把握することを目的とした。具体的には,食品選択場面における学生の食品選択行動の実態を捉えるとともに,食品選択行動を左右する要因やその背景について検討した。その結果,日常生活における食品選択行動の実態及びその行動に影響を与える要因について把握することができた。これらの研究結果より,食生活における自己管理力を高めるためのカリキュラムを開発する上での重要な示唆を得ることができた。学生を対象とした食品選択行動の実態及びその行動の背景について知見を得ることができた。これらの知見は,研究の目的である食生活における自己管理力を育てるためのカリキュラム開発に重要な示唆を与えるもので,得られた知見を基盤として,自己管理力を育てるための食教育カリキュラムの開発の構想を進めることができる。食生活におけるリスクやリスク管理にかかわる意識を把握する。また,学習指導要領および教科書から食生活に関する内容を抽出し,学習内容の構造とそれらの学習が実際の生活にもたらす意味について検討し,食生活における自己管理力を育むための学習内容と学習方法について検討する。学生を対象とした食品行動観察調査を行う。食品選択場面を設定し、食品購入行動を観察し、食品購入時における食品評価の視点や評価方法に関する知見を得る。その結果をもとに、食生活の実態に基づいた食生活における自己管理力を育てるための学習内容と学習方法について検討するとともに、効果的な教材を開発するための視点を得る。
ヒト骨肉腫細胞においてRor2シグナルが制御するがん細胞浸潤の分子機構

ヒト骨肉腫SaOS-2細胞において、Wnt5a-Ror2(Ror2 : Wnt5a受容体)シグナルは、Dishevelled2, Rac1, JNK等のシグナル分子及び転写因子AP1を活性化する。その後、がん細胞の浸潤と密接に関わる細胞外基質分解酵素をコードするMMP-13遺伝子の発現が誘導される。本シグナルは、マウス胚における軟骨内骨化にも関わり、発生過程における新たな役割が示唆された。【研究成果の内容】培養細胞において、Wnt5a/Ror2(Ror2:Wnt5a受容体)シグナルを介して、JNK/AP1経路が活性化される一方、細胞外マトリックス分解酵素をコードするMMP-13遺伝子の発現誘導が確認されている(Oishi I et al., Genes Cells 2003 : 8 ; 645-654 : Enomoto M et al., Oncogene 2009 : 28 ; 3197-3208)。また、軟骨組織におけるMMP-13の重要な役割が明らかにされている(Hou CH et al., Bone 2009 ; 44 : 233-242)。我々は、プロモーター解析および定量性RT-PCR法により、ヒト骨肉腫細胞SaOS-2においてWnt5a/Ror2シグナルは少なくともJNK/AP1を活性化し、MMP-13遺伝子発現を誘導することを見出した。また、免疫組織化学解析により、マウス軟骨組織においてRor2シグナルはMMP-13遺伝子発現に大きな役割を果たすことが示唆された。【意義】Wnt5aおよびRor2は骨肉腫疾患だけでなく前立腺がんや腎細胞がん等の悪性腫瘍疾患の細胞浸潤・転移を制御することも知られており(Yamamoto H et al., Oncogene 2010 : 29 : 2036-46 : Wright TM et al., Oncogene2009 ; 28 ; 2513-2523)、骨肉腫細胞で得られる知見は関連研究分野にもたらす波及効果も高く、意義深い研究と考えられる。【重要性】骨肉腫は小児の罹患率が高く、細胞浸潤能が高い疾患である。本研究により骨肉腫培養細胞の浸潤を規定する分子制御機構の一端が解明された。in vitroで解明された遺伝子発現制御機構は骨肉腫の病態と密接に関連するとともに、本研究の成果は骨肉腫の診断および治療の標的として重要な知見をもたらすと考えられる。【研究成果の内容】ヒト骨肉腫(OS)細胞において、液性因子Wnt5aとその受容体Ror2から成るシグナルの活性化により、細胞外基質分解酵素をコードするMMP-13遺伝子の発現が誘導され、OSの細胞浸潤に寄与することが明らかにされている(Oncogene 2009; 28; 3197)。それを踏まえ、前年度に、骨肉腫SaOS-2細胞において、MMP-13遺伝子発現を制御するWnt5a-Ror2シグナル伝達因子として、Dishevelled2、Rac1およびJNK等をはじめ、多数同定した。今年度、Ror2遺伝子欠損マウス胚(E15.5)の軟骨組織標本を用いて、免疫染色等の解析を行った。Ror2発現陽性の骨組織において、MMP-13発現陽性および上腕部軟骨内骨化が観察された。一方、Ror2遺伝子欠損により、軟骨内骨化が遅れると共に、MMP-13発現が消失していた。骨形成制御におけるRor2シグナルの重要な役割を見出した(j.Biol. Chem. 2012; 287; 1588)。【意義】Wnt5aおよびRor2遺伝子欠損マウスは四肢短小化を呈することが知られていた。本研究により、MMP-13発現を介して、発生段階の骨形成制御を司る(Wnt5a-)Ror2シグナルの重要な役割を初めて明らかにすることができた。【重要性】Wnt5a-Ror2シグナルは発生段階の骨形成制御機構と密接に関連するとともに、本研究の成果は関連分野の研究に重要な知見をもたらし、今後の解析の重要な基盤になると考えられる。