hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ＴＴウイルス～常在ウイルス叢としての宿主防御における役割は？

五島コホートの登録は予定の2割に留まった。網羅的病原ウイルス検索の予備研究は進み、PCR手技は整った。ベトナムのTTV陽性児は追跡調査中。タイHIVコホートでは、以下の結果を得た。1)HIV感染者が非感染者よりTTV遺伝子群G1,G4,G5感染率が有意に高かった。2)HIV感染者におけるCD4細胞数又は血漿HIVコピー数とTTV感染とは、どの遺伝子群も関連しなかった。3)TTV血漿コピー数と無治療感染者のHIVコピー数との間は有意に相関し、CD4細胞数との間は有意に逆相関した。4)TTVコピー数又はTTV遺伝子群G4の感染はHIV感染者の生存に寄与した。五島出生コホートにおける登録状況が思わしくなく、年間出生200-300のうちの2割程度しか登録できていない。五島中央病院における網羅的病原ウイルス検索のためのパイロット研究は進んでおり、multiplex PCRとreal-time PCRの手技は整っている。倫理委員会申請はこれからの段階である。ベトナムコホートにおけるTTV陽性児の追跡調査は実施計画中である。タイHIVコホートにおけるTTV感染がHIV-1感染者に及ぼす影響については解析が進んでおり、以下の結果が得られている。五島出生コホートにおける登録状況が思わしくなく、年間出生200-300のうち2割程度に留まっている。倫理委員会申請準備段階である。タイHIVコホートにおけるTTV感染がHIV-1感染者に及ぼす影響については解析が進み、以下の結果が得られた。五島コホートにおける研究の立ち上げに支障をきたしている。主たる理由は、人事上での目論見が狂い、五島中央病院に配置する小児科医の数が本来の定数を確保できず、研究活動協力に時間を充てることができないところにある。ベンチリサーチに関わる部分の基礎的な準備は整ったが、コホート登録のための体制作りにはさらに努力が必要な状況である。一方、タイHIVコホートの研究は順調に進んでおり、必要な解析はほぼ終了した。以上を総合的に判断し、「やや遅れている」とした。ウイルス学五島コホートにおける研究の推進に、常勤の小児科勤務医や協力を願う産科医の負担がかからない方法を模索している。妊婦に対して研究参加を、効果的なパンフレットの配布で呼び掛ける他、研究補助員の動員を検討している。また急性呼吸器・消化管感染症の網羅的病原ウイルス検索とTTV検出を行うフィールドとして、同様に地域唯一の小児入院可能な総合病院である県立島原病院を擁することも視野に入れて検討中である。
脂質輸送－脂質代謝連関による膜ドメイン機能の制御機構とその腫瘍生物学的意義の解明

細胞膜ドメインはがん細胞の悪性形質発現に極めて重要な役割を果たしているが、その機能調節機構に関する知見は乏しい。本研究では、脂質輸送と脂質代謝の連関を明らかにするとともに、脂質代謝変化が膜ドメイン機能に与える影響を解析することで、脂質輸送ー脂質代謝連関ががんやその他の疾患に及ぼす影響について明らかにすることを目的としている。昨年度に引き続き、がん細胞等における脂質代謝に関する解析を中心に行った。コレステロール代謝産物である酸化ステロールは、コレステロール恒常性を制御する極めて重要なコレステロール代謝産物である。また、酸化ステロールは膜構造及び膜機能に影響を与えることが報告されている。しかしながら、内因性の酸化ステロールに関する解析報告は少なく、酸化ステロールの産生調節や酸化ステロールががん細胞に与える影響等についてさらに解析を行う必要がある。そこで、内因性の酸化ステロール産生が、がん細胞の悪性形質や脂質代謝に及ぼす影響について検討するため、コレステロールの25位、27位、7位をそれぞれ水酸化するCH25H、CYP27A1、CYP7A1の発現がコレステロール恒常性制御の中心的な転写因子であるSREBP及びLXRの活性に与える影響について解析を行った。その結果、産生される酸化ステロールの種類によって、SREBPやLXRの活性に与える影響が異なることが示された。現在、より詳細な解析を行っている。また、CYP27A1はミトコンドリア内膜に局在する酵素であるが、ミトコンドリア外膜から内膜にコレステロールを輸送するタンパク質StarD1が、27-ヒドロキシコレステロールの産生に重要であることを示唆する結果を得た。がんや動脈硬化におけるコレステロール代謝や輸送に関する論文を海外研究者と共同で、Frontiers in Endocrinologyに報告した。がん細胞におけるSREBP制御機構やコレステロール代謝に関する新しい知見が得られつつあり、来年度は更なる発展が十分に期待できる。乳癌等のがん細胞では、27-ヒドロキシコレステロールが、がん細胞の悪性形質に関与することが報告されている。コレステロール代謝の中心的な制御因子である酸化ステロールに着目し、個々の酸化ステロールやその産生酵素とがん細胞の悪性形質との連関について、より詳細な検討を実施する。また、ABCトランスポーターや小胞輸送を介した細胞内コレステロール輸送がSREBPの活性を制御する分子機構について解析を進める。本研究では、脂質トランスポーターの発現が脂質代謝変化を誘導する分子機構並びに、脂質代謝変化が膜ドメイン機能を制御する分子機序を明らかにし、脂質輸送ー脂質代謝連関ががんやその他の疾患に及ぼす影響について明らかにすることを目的としている。ABCA1トランスポーターは、細胞膜におけるコレステロール及びリン脂質の輸送体として機能している。研究代表者らは、ABCA1が細胞膜ドメインの構造と機能に重要な役割を果たしていることを最近報告した。そこで、本年度は、がん細胞におけるABCA1の発現及び転写因子SREBPの活性化レベルを複数のヒトがん細胞を用いて解析を行った。その結果、ほとんどのがん細胞でABCA1の発現が検出されなかった一方、SREBPの活性化はほとんどの細胞で認められた。がん細胞におけるABCA1を介した脂質輸送と脂質代謝との連関を解析には、がん細胞へのABCA1の強制発現が必要であることが示唆された。2016年7月に名古屋大学から東京大学に異動し、現所属先の研究環境のセットアップに時間を要した。特に、SREBPがmTORシグナルによって制御されていることが示される他、mTORが小胞体のコレステロール含量を制御することを示唆するデータを得た。コレステロール代謝産物である酸化ステロールは、コレステロール合成の最も強力な抑制因子の一つである。しかしながら、内因性の酸化ステロールに関する解析報告は少なく、酸化ステロールの産生調節や酸化ステロールががん細胞に及ぼす影響等についてさらに解析を進める必要がある。そこで、内因性の酸化ステロール産生ががん細胞の悪性形質や脂質代謝に及ぼす影響について検討するため、コレステロールの25位に水酸基を付加する酵素(CH25H)を安定発現する細胞株を樹立した。その結果、CH25H発現細胞株では、SREBPの活性化抑制が認められた他、細胞の増殖も抑制されることが示された。酸化ステロールを産生する酵素は複数あるため、今後は個々の酸化酵素や酸化ステロールががん細胞の脂質代謝や膜ドメイン機能、悪性形質に与える影響等について解析を進める必要がある。2016年7月に東京大学に異動後、研究環境のセットップも順調に進み、実験結果が着実に蓄積されている。がん細胞におけるSREBP制御機構について新しい知見も得られつつあり、来年度は更なる発展が十分に期待できる。

本研究では、脂質輸送と脂質代謝の連関を明らかにするとともに、脂質代謝変化が膜ドメイン機能に与える影響を解析することで、脂質輸送ー脂質代謝連関ががんやその他の疾患に及ぼす影響について明らかにすることを目的としている。昨年度に引き続き、がん細胞等における脂質代謝に関する解析を中心に行った。コレステロール代謝産物である酸化ステロールは、コレステロール恒常性を制御する極めて重要なコレステロール代謝産物である。また、酸化ステロールは膜構造及び膜機能に影響を与えることが報告されている。しかしながら、内因性の酸化ステロールに関する解析報告は少なく、酸化ステロールの産生調節や酸化ステロールががん細胞に与える影響等についてさらに解析を行う必要がある。そこで、内因性の酸化ステロール産生が、がん細胞の悪性形質や脂質代謝に及ぼす影響について検討するため、コレステロールの25位、27位、7位をそれぞれ水酸化するCH25H、CYP27A1、CYP7A1の発現がコレステロール恒常性制御の中心的な転写因子であるSREBP及びLXRの活性に与える影響について解析を行った。その結果、産生される酸化ステロールの種類によって、SREBPやLXRの活性に与える影響が異なることが示された。現在、より詳細な解析を行っている。また、CYP27A1はミトコンドリア内膜に局在する酵素であるが、ミトコンドリア外膜から内膜にコレステロールを輸送するタンパク質StarD1が、27-ヒドロキシコレステロールの産生に重要であることを示唆する結果を得た。がんや動脈硬化におけるコレステロール代謝や輸送に関する論文を海外研究者と共同で、Frontiers in Endocrinologyに報告した。がん細胞におけるSREBP制御機構やコレステロール代謝に関する新しい知見が得られつつあり、来年度は更なる発展が十分に期待できる。ABCA1の発現を人為的に操作したがん細胞を作成し、脂質代謝やがん細胞の悪性形質に与える影響を解析する。また、ABCA1の発現に伴う膜ドメインの構造や組成の変化について解析する。がん細胞におけるSREBPの制御機構について、小胞体コレステロールの調節メカニズムを中心に解析を進める。また、ABCトランスポーターの発現が小胞体コレステロールレベルの制御に果たす役割について、ABCA1だけでなくステロール輸送活性を有するABCGファミリー分子も解析対象として、ABCトランスポーターの発現ががん細胞の脂質代謝や悪性形質に与える影響について解析を進める。乳癌等のがん細胞では27-ヒドロキシコレステロールが、がん細胞の悪性形質に関与することが報告されている。コレステロール代謝の中心的な制御因子である酸化ステロールにも着目し、個々の酸化ステロールやその産生酵素とがん細胞の悪性形質との連関についても検討する。乳癌等のがん細胞では、27-ヒドロキシコレステロールが、がん細胞の悪性形質に関与することが報告されている。
ミャンマーとバングラデシュにおける家畜と野生小型哺乳動物の住血性寄生虫の分子疫学

ミャンマーでイヌのバベシアとネコのトキソプラズマという寄生虫の調査を行い、それらの分布、感染の経路、遺伝的関係などについての新しい知見が得られた。野生の小型哺乳動物を捕獲して遺伝子を調べたところ、ハツカネズミ類は多様であること、ジャコウネズミは2つの系統が棲息していることが分かった。バングラデシュのイヌの血液を次世代シーケンス解析したところ、流血中を循環する細胞フリーDNAの検出が寄生虫検査に有用であることが分かった。こうした研究によって、ミャンマーやバングラデシュの小動物家畜や野生小型哺乳類における寄生虫感染の一端が明らかになり、アジアにおける寄生虫の移動や進化についての理解が深まった。動植物相の豊かなミャンマーは、インド亜大陸と東アジアを結ぶインドシナ半島の地理的要所である。しかし、寄生虫や媒介節足動物に関する疫学的調査は散発的な状況にとどまっている。申請者らは平成22-25年度の海外学術調査基盤研究Bの補助をうけて、ミャンマー各地における牛のタイレリア原虫、バベシア原虫および肝蛭の感染状況とこれらの寄生虫の遺伝子型を明らかにした。本研究は、その発展的継続疫学研究であるが、平成26年度においては、まず、イヌにおけるバベシア原虫の感染状況を調査した。すなわち、河口にある旧首都ヤンゴンの飼育犬46頭ならびに内陸部にある首都ネピドー近郊の飼育犬20頭の末梢血DNAについて、バベシア属の18S rRNA遺伝子を標的としたnested PCRならびにBabesia gibsoni特異的nested PCRを実施したが、どちらの検査においても全頭陰性であった。また、野生小型哺乳動物については、Mus属19個体、Rattus属19個体、Bandicota属7個体、Suncus属1個体から血液DNAを抽出することができた。現在、バベシア属原虫をはじめとする各種血液原虫感染の有無について特異的PCRによって検査を進めている。一方、ミャンマー中央部の農場で飼育されているヤギを対象として、トキソプラズマ感染の血清疫学に関するパイロットスタディを実施した。その結果、抗体陽性率は11.4%であり、農場における他の動物の飼育やネコの棲息がトキソプラズマ感染に関わる危険因子であることが示唆された。一方、バングラデシュにおける野犬のリーシュマニア症の疫学については、新規血清診断用抗原の特定を目的として、イヌ血清を用いたウエスタンブロッティング解析を進めている。申請者らは平成22-25年度の海外学術調査基盤研究Bの補助をうけて、ミャンマー各地における牛のタイレリア原虫、バベシア原虫および肝蛭の感染状況とこれらの寄生虫の遺伝子型の特性を明らかにした。本研究は、その発展的継続研究であり、平成27年度の研究実績は次のとおりである。(1)イヌにおけるバベシア原虫の感染状況を再検査したところ、旧首都のヤンゴンおよび内陸部の首都のネピドー近郊の飼育犬のそれぞれ約50%と30%からBabesia gibsoni原虫をnested PCR法で検出することができた。また、ネピドー近郊の飼育犬からはBabesia vogeli原虫のDNAも検出できた。(2)野生小型哺乳動物については、平成26年と27年の調査でMus属54個体、Rattus属24個体、Bandicota属8個体から血液DNAを抽出することができた。バベシア属原虫DNAはどの個体からも検出できなかったが、Trypanosoma lewisi原虫のDNAをRattus属およびBandicota属から検出することができた。(3)ミャンマー中央部の農場で飼育されているヤギについては、抗トキソプラズマ抗体の検出を報告したが、今回、ネコの糞便中オーシストからトキソプラズマ原虫のDNAを検出することに成功した。以上の結果は、ミャンマーにおけるイヌバベシア、Trypanosoma lewisiおよびToxoplasma gondiiの存在をDNAレベルで初めて実証したものである。(1)ヤンゴン大学、ピイー大学、マンダレー大学、ミャンマー獣医科学大学との連携のもとに、野生小型哺乳類の捕獲が順調にすすんでいる。(2)ミャンマーにおけるイヌバベシア、Trypanosoma lewisiおよびトキソプラズマの存在をDNAレベルで初めて証明することができた。平成28年度は、イヌのバベシア原虫の感染状況についてPCRの条件を変更して再検討した。その結果、Babesia gibsoniならびにBabesia vogeliを検出することに成功した。また、抗トキソプラズマ抗体陽性を示したヤギが飼育されている農場地区のネコの糞便中からオーシストを検出した。オーシストのPCR検査を行ったところ、このオーシストはトキソプラズマ由来であることが判明し、ネコとヤギの間でトキソプラズマの感染環が成立していることが明らかとなった。ミャンマー産の野生小型哺乳動物については、ラット類(Rattus属とBandicota属)から、ヒトでの感染も報告されているTrypanosoma lewisiのDNAを検出することができた。ラット類およびハツカネズミ類(Mus属)を分子系統学的に解析した結果、ラット類およびMus musculusは周辺国のものと遺伝的類縁性は高かったが、Mus nitidulusのように系統学的独自性を長い進化過程の中で維持した種も存在することが判明した。

ジャコウネズミのミトコンドリア遺伝子の解析では、日本のジャコウネズミは東シナ海の大陸を経由した外来種であるのに対して、ミャンマーでは複数の遺伝系統が移入していることが明らかになった。一方、バングラデシュにおける野犬のリーシュマニア症の疫学については、イヌ血漿中にリーシュマニア原虫由来のcell-free DNAが存在することを明らにした。ミャンマーでイヌのバベシアとネコのトキソプラズマという寄生虫の調査を行い、それらの分布、感染の経路、遺伝的関係などについての新しい知見が得られた。野生の小型哺乳動物を捕獲して遺伝子を調べたところ、ハツカネズミ類は多様であること、ジャコウネズミは2つの系統が棲息していることが分かった。バングラデシュのイヌの血液を次世代シーケンス解析したところ、流血中を循環する細胞フリーDNAの検出が寄生虫検査に有用であることが分かった。こうした研究によって、ミャンマーやバングラデシュの小動物家畜や野生小型哺乳類における寄生虫感染の一端が明らかになり、アジアにおける寄生虫の移動や進化についての理解が深まった。(1)ミャンマー獣医科学大学とミャンマー獣医協会の協力のもとに、ミャンマーの2大主要都市で合計66頭のイヌの血液検体を採取することができた。(2)ヤンゴン大学、パテイン大学、ピィー大学の協力のもと、野生小型哺乳動物の種類別捕獲頭数も順調に増加している。(3)当初の計画書には取り上げていなかったが、ヤギおよび猫におけるトキソプラズマ感染の疫学調査も順調に進んでいる。(1)ミャンマーにおける野生小型哺乳動物の調査については、未調査の北部での調査を実施する。(2)トキソプラズマ原虫の遺伝子解析を進めていく。(3)当初の計画には盛り込んでいなかったが、大型半野生動物であるアジアゾウの寄生虫感染の予備的な調査を実施する。28年度が最終年度であるため、記入しない。獣医寄生虫学(1)ミャンマーの牛のタイレリアおよびバベシア感染については、媒介ダニの特定に焦点を絞る。(2)ミャンマーにおける野生小型哺乳動物の捕獲については、各地域での捕獲数の増加を目指す。(3)野生小型哺乳動物の血液原虫については、トリパノソーマ属原虫も検査・解析する。(4)ミャンマーのトキソプラズマ症については、原虫の遺伝子解析を進めていく。(5)バングラデシュにおける調査時期と調査場所については、政情とカウンターパートの都合をふまえて、適切に判断する。使い切る必要性がなかったので、わずかの次年度使用額が生じた。予定していたバングラデシュでの調査が実施できなかったことなどから、次年度使用額が生じた。次年度の消耗品にあてる。海外旅費や技術補助員の人件費などに充てる。
乳歯・幼若永久歯の歯髄細胞の活性化に関する研究

当初実験系としてラット歯髄由来細胞の培養系を用いる予定であった、しかし各種刺激に対する反応性においてラットとヒト歯髄由来細胞は反応性において異なること,ヒト歯髄由来細胞の無血清培地での培養系も確立できたため,ヒト歯髄由来細胞を用いた培養系で実験を行った。1.目的歯髄の硬組織自己治癒反応である象牙質形成機序を解明するためヒト乳歯及び永久歯の培養歯髄細胞を用いて石灰化能に関する検討を行った。2.方法1)歯髄細胞採取ヒト歯髄細胞より,初代培養を20%FBS含有αMEM培地を用いて37°C,5%CO2気相下で行った。得られた細胞を28代継代したものを実験に供した。2)培養3)ALPase活性の測定4)石灰化物形成量の測定石灰化物形成量の測定にはOCPC法を用いて行った。また,位相差顕微鏡下でノジュール形成を観察した。3.結果および考察ALPase活性はTGF-β,IGFIの添加により低濃度で上昇したが高濃度では抑制された。また,経時的には低濃度では2日群に比べ7日群の方が大きく活性が上昇していた。石灰化物形成量の測定ではいずれの群において明らかなノジュール形成は認められず,カルシウム量への影響もALPase活性と類似した傾向を示した。bFGFでは濃度変化による活性への影響が最も少なかった。今回,石灰化物の形成は認められなかったが,ALPase活性では成長因子による調節の関与が示唆された。これらの成長因子は,生体内において歯髄細胞による石灰化組織形成の調節を行っている可能性が示された。当初実験系として胎生・新生ラットの歯髄由来細胞の培養系を用いる予定であった、しかしサイトカインやグロースファクターによる各種刺激に対する反応性においてこれらラット歯髄由来細胞はヒト歯髄由来細胞と反応性において異なることが最近の文献等において報告されている。またヒト歯髄由来細胞の無血清培地でえの培養技術も進み培養系も確立されつつある。このため本研究ではヒト歯髄由来細胞を用いた培養系で実験を行った。ヒト乳歯歯髄および永久歯歯髄由来線維牙細胞また、比較対象として肺由来線椎牙細胞を培養し、これらの細胞の各種成長因子に対する反応性を形態的変化・生化学的活性を指標に検討しているが、採取組織により初代培養時の増殖にかなり差がみられ安定した歯髄由来腺維牙細胞のクローニングを行うことが困難である。このため基礎培地の選択、添加血清や成長因子の選択により安定して初代培養ができる条件を検討した。歯髄由来腺維芽細胞の至適培養条件の検討ヒト抜去歯牙より採取した腺維芽細胞の発育を他臓器由来(肺・歯根膜)の腺維芽細胞と比較し、培養用培地の選択と必要成長因子の検討を行った。乳歯歯髄は交換期の抜歯,外傷による抜歯による抜去歯が由来であったが,低年齢児の外傷由来の歯髄よりの初代培養が最も高い増殖能を示した。一方晩期残存歯由来では初代培養は可能なもののクローニング後の増殖能が低く実験に適した細胞系が得られにくかった。培地にはαMEM, DMEM, ASF301, RPM11640を使用し, ASF301以外はFBSを10%添加したものも使用した。クローニング後の細胞を2.5×10^6/mlの濃度で培地に接種し増殖をみるとFBS非添加ではαMEM以外では増殖を示さなかったが,コンフルエント到達以降FBS非添加培地での培養は可能であり,この実験系でのサイトカインやグロースファクターの増殖や分化への関与の検討が可能であることが示唆された。当初実験系としてラットの歯髄

由来細胞の培養系を用いる予定であった、しかし各種刺激に対する反応性においてラットとヒト歯髄由来細胞は反応性において異なること、ヒト歯髄由来細胞の無血清培地での培養系も確立できたためヒト歯髄由来細胞を用いた培養系で実験を行った。1.目的歯髄の硬組織自己治癒反応である象牙質形成機序を解明するため、ヒト乳歯及び永久歯の培養歯髄細胞を用いて石灰化能に関する検討を行った。2.方法1)歯髄細胞採取ヒト歯髄細胞より、初代培養を20%FBS含有αMEM培地を用いて37°C、5%CO2気相下で行った。得られた細胞を28代継代したものを実験に供した。2)培養3)ALPase活性の測定4)石灰化物形成量の測定石灰化物形成量の測定にはOCPC法を用いて行った。また、位相差顕微鏡下でノジュール形成を観察した。3.結果および考察ALPase活性はTGF-β、IGFIの添加により低濃度で上昇したが高濃度では抑制された。また、経時的には低濃度では2日群に比べ7日群の方が大きく活性が上昇していた。石灰化物形成量の測定ではいずれの群においても明らかなノジュール形成は認めらず、カルシウム量への影響もALPase活性と類似した傾向を示した。bFGFでは濃度変化による活性への影響が最も少なかった。今回、石灰化物の形成は認められなかったが、ALPase活性では成長因子による調節の関与が示唆された。これらの成長因子は、生体内において歯髄細胞による石灰化組織形成の調節を行っている可能性が示された。
新規な含高周期典型元素ｄ－π電子共役系の構築と機能に関する基礎研究

有機電子材料として期待されている、遷移金属元素ユニットと有機π電子共役系を連結した「d-π電子系化合物」は主に炭素を中心とした第二周期元素からなるπ電子系から成る。新規物性の探索という観点で、第二周期元素ではない高周期典型元素の利用を考え、本研究課題では、ケイ素やリンなどの高周期典型元素π電子系で遷移金属d電子系を架橋した「新規な含高周期元素d-π電子系化合物」を合成し、それらの性質・特性を解明した。今回開発したかさ高いフェロセニルユニットは、高周期元素d-π電子系の構築に有効であり、またこれらは、従来の第二周期元素の系と比較して、元素特有の性質を反映したユニークな性質を有することが分かった。本研究は、遷移金属のd電子系を高周期典型元素π電子系で架橋した新規なd-π電子系の構築とその物性解明を行い、典型元素π電子系と遷移金属元素の相乗効果の解明を目的としている。しかし、P=Pなどに代表される高周期典型元素π電子系は、非常に反応活性であるため、安定な化合物として取り扱うためには、かさ高い置換基を導入する必要がある。そこで本年度は、系統的に安定な含高周期典型元素d-π電子系化合物を合成するための置換基として、遷移金属ユニットをフェロセンとし、フェロセンユニットに立体保護能を付与したかさ高いフェロセニルユニットの設計・合成を行った。まず、2,5位にかさ高いアリール基として3,5-ジメチルフェニル基(Dmp基と略記)を有するヨードフェロセン類を合成することとした。フェロセンを出発物質とし、スルポキシド部位の導入につぐオルトリチオ化と根岸カップリング反応を活用することで、2-Dmp-1-S(0)Ph-ferroceneを合成した。次いで、還元・再酸化によりS-0の立体を反転させた後、同様にオルトリチオ化、根岸カップリングを施すことで、2,5-Dmp2-S(0)Ph-ferroceneの合成に成功した。n-BuLiによりスルホ穂キシド部位のリチオ化を行いヨウ素を加えることで、目的とするかさ高いヨードフェロセン2,5-Dmp2-1-iodo-ferroceneを合成することに成功した。X線結晶構造解析の結果、中心が二つのDmp基によって効率よく保護されていることが分かり、十分な立体保護能を有するフェロセニルユニットであることが分かった。さらに、このヨードフェロセンに対しt-BuLiを作用させることで、対応するリチオフェロセンが効率よく発生することが分かり、中心部位に種々の元素が導入可能であることが分かった。本研究は、遷移金属のd電子系を高周期典型元素π電子系で架橋した新規なdーπ電子系の構築とその物性解明を行い、典型元素π電子系と遷移金属元素の相乗効果の解明を目的としている。昨年度までに、安定な含高周期典型元素dーπ電子系化合物を合成するための置換基としてフェロセンユニットに立体保護能を付与したかさ高いフェロセニルユニットを合成している。さらに、これを活用して、P=P, Sb=Sb, Bi=Biユニットで二つのフェロセニルユニットを架橋した初めての含高周期15族元素dーπ電子系化合物の合成・単離に成功した。このフェロセニル置換基は高周期15族元素π電子系の安定化に有効なことが分かったので、本年度は、この新規なフェロセニル基の適用範囲をひろげ、また高周期14族元素π電子系を含む新規なd-π化合物への展開として、まずは低配位ケイ素化合物への置換基導入を試みた。その結果、開発したかさ高いフェロセニル置換基を導入したジクロロシラン、ジブロモシランなど種々のハロシラン類を合成することに成功した。通常は取り扱い困難なハロシラン類であるが、今回合成したかさ高いフェロセニルハロシラン類は空気中で取り扱い可能なほど安定な化合物であることが分かった。昨年度、安定な含高周期典型元素dーπ電子系化合物を合成するための置換基として合成に成功した、フェロセンユニットに立体保護能を付与したかさ高いフェロセニルユニットを活用して、高周期15族元素π電子系のπスペーサーとしての評価を行うこととした。

その結果、P=P, Sb=Sb, Bi=Biユニットで二つのフェロセニルユニットを架橋した初めての含高周期15族元素dーπ電子系化合物の合成・単離に成功した。これらの分子構造および酸化還元挙動を解明することで、高周期15族元素π電子系は、それぞれの元素の特性が反映されたユニークなπスペーサーとして機能することが明らかとなった。本研究の最初の重大な課題は、目的とする高周期典型元素d-π電子系を安定な化合物として系統的に合成・評価するための置換基開発にある。遷移金属ユニットはフェロセンに限られるものの、様々なアリール基を2,5位に導入したヨードフェロセンの合成方法を確立したことにより、今後立体保護能のチューニングも迅速に行うことができる。さらにこのヨウ素部位の金属交換反応も効率よく進行することが確認できているので、今後は種々の元素の導入が容易に行える。基盤となる汎用性の高い置換基開発を一年で達成できたので、おおむね順調に進展していると考えている。25年度が最終年度であるため、記入しない。本研究の最初の重大な課題は、目的とする高周期典型元素dーπ電子系を安定な化合物として系統的に合成・評価するための置換基開発にある。遷移金属ユニットはフェロセンに限られるものの、様々なアリール基を2,5位に導入したヨードフェロセンの合成方法を確立し、すでに二種類のかさ高いフェロセニルユニットの開発に成功し、一連の高周期15族元素が導入可能であることを実証している。また合成が困難とされているリン、アンチモン、ビスマスといった一連の15族元素間の二重結合化合物をもつdーπ電子系の創製にも成功し、高周期15族元素π電子系のそれぞれの元素特性を反映したπスペーサーとしての機能を明らかとした。今後の基盤となる一般性の高い知見を二年目で得ることができたという点で、おおむね順調に進展していると考えている。置換基開発を達成できたので、今後は実際に典型元素の導入とπ電子系(不飽和結合)の構築を行う。中心元素の導入及び不飽和結合の構築は、これまでの知識・技術の蓄積が十分活用できるものと考えている。まずは一連の高周期15族元素(P=P、As=As、sb=sb、Bi=Bi)について検討を行い、系統的な知見を得る。その後、14族元素へと展開をはかる。最終的にはフェロセン以外の遷移金属ユニットへと展開する。化合物の安定性に問題があった場合、置換基のかさをあげ、立体保護能を強化した置換基を合成する。合成法はH23年度に確立した合成法をそのまま活用できると考えている。物性評価は、X線結晶構造解析、各種スペクトル解析、電気化学測定等により、詳細に基礎的な知見をまとめることにより行う。高周期15族元素πスペーサーの機能を明らかとしたので、次に、これまで得たかさ高いフェロセニルユニットをモチーフとした研究展開として、高周期14族元素へと展開する。すなわち、これらふたつのフェロセニルユニットを、ケイ素やゲルマニウム、スズ、鉛といった高周期14族元素のπ電子系で架橋した新規dーπ電子系を構築し、その酸化還元挙動と高周期14族元素π電子系のπスペーサーとしての機能を系統的に明らかとする。このかさ高いフェロセニルユニットの立体保護能は、すでにBiといった第六周期元素π電子系の安定化にも十分対応できるほど優れたものであることが実証できているので、14族元素の系でも一連のπ
大学におけるセクシュアルマイノリティ学生への包括的支援モデル構築の検討

本研究は大学におけるセクシュアルマイノリティ学生への効果的な支援体制構築のため,大学の相談・支援担当者,当事者それぞれから,調査によって現状とニーズを把握することで,包括的な支援の在り方の検討を行うものである。H30年度は日本の全大学を対象に,調査1として「大学におけるセクシュアルマイノリティ学生支援に関する質問紙調査」を郵送によって実施し,242大学(回収率31.9%)から回答を得た。大学の形態や学生数,最もセクシュアルマイノリティ学生の相談・支援を行っている機関,各種相談の有無,啓発活動実施の有無,学内他部署・学外機関への紹介の有無,学内教職員からの相談の有無,LGBT以外のセクシュアルマイノリティ学生からの相談の有無が,それぞれどのように関連しているのか探るため多重応答分析を行い,二次元座標平面にプロットした。学生数の多さと各種「相談あり」に関連が見られた。またトランスジェンダーに関する相談は保健管理センターの近く,同性愛・バイセクシュアル・LGBT以外の相談は学生相談室やキャンパスサポートセンターの近くに布置され,関連性が示された。さらに,啓発活動を実施していると各種の相談があり,他部署や他機関を紹介している傾向が見受けられた。これらの事から,日本の大学でセクシュアルマイノリティ学生への支援は,どこの部署がどのような相談に応じているのかや,学生数や啓発活動実施との関連性が明らかになった。また調査1では,各大学でセクシュアルマイノリティ学生から受けた相談が自由記述で得られたので,その内容を分類して項目を作成し,H31年度に実施する調査2の当事者学生への調査に利用する。H29年度に実施予定であった調査1「大学における支援体制と支援内容の把握」が,研究倫理委員会の設立の都合で実施がH30年度になったため,H30年度に実施予定の調査2がH31年度実施予定にずれたため。一方で,H31年度に実施予定であった,啓発活動による間接的支援について,H30年度に実施した調査で各大学の実施状況を先取りして調査することができたため。H31年度は,調査2「セクシュアルマイノリティ学生の支援ニーズの把握」をまず実施し,その後大学の就職支援部門を対象とした調査3「セクシュアルマイノリティ学生の就職支援と学内連携の把握」の2つの調査の実施を行う。また,調査4「海外の大学におけるセクシュアルマイノリティ支援の様子の把握」を同時並行で行う。研究成果の発表として,調査1で得られた結果を健康心理学会で発表するとともに,H29年度に実施した調査の結果を論文にまとめて発表する。本研究は大学におけるセクシュアルマイノリティ学生への効果的な支援体制構築のため,大学,当事者,支援者,啓発活動等の間接的支援についてそれぞれ現状とニーズを把握し,包括的な支援の在り方について検討を行うものである。セクシュアルマイノリティ学生への支援は,これまで主にトランスジェンダー学生への支援が中心で,それ以外の性的指向等のマイノリティ学生への支援の必要性や実施状況の研究はほとんど見られなかった。そこで今年度は,日本の全大学を対象に「調査1:大学における支援体制と支援内容の把握」の郵送調査を実施するため,これまでの相談・支援例や大学の支援部署が発行しているパンフレット等を参考に,支援に関する質問紙を作成し,実施の準備を進めた。また研究4で予定していた,啓発活動等の間接的支援について,実際に大学で講演会・展示等の啓発活動を実施する機会があったため,その効果を測る調査を参加学生に実施した。その結果,啓発活動の参加後は同性愛者に対する嫌悪感の程度が有意に減少し,セクシュアルマイノリティ当事者である講演会講師と同じ属性への抵抗感が有意に減少していた他,参加者の半数が日本におけるセクシュアルマイノリティの割合(%の数字)を1週間後も正しく覚えていたことが明らかとなり,間接的支援の効果を探ることができた。次年度は調査1の実施と結果の分析を行うとともに,当事者学生への調査と支援者への調査を行っていく。当該年度に実施予定であった調査1「大学における支援体制と支援内容の把握」が,新組織の研究倫理審査委員会の設立の都合で実施が遅れていたが,次年度の4月に調査を実施することができたため。その間,先にH31年度実施予定の研究の一部を実施する機会があったので実行した。

これらの事から,日本の大学でセクシュアルマイノリティ学生への支援は,どこの部署がどのような相談に応じているのかや,学生数や啓発活動実施との関連性が明らかになった。また調査1では,各大学でセクシュアルマイノリティ学生から受けた相談が自由記述で得られたので,その内容を分類して項目を作成し,H31年度に実施する調査2の当事者学生への調査に利用する。H29年度に実施予定であった調査1「大学における支援体制と支援内容の把握」が,研究倫理委員会の設立の都合で実施がH30年度になったため,H30年度に実施予定の調査2がH31年度実施予定にずれたため。一方で,H31年度に実施予定であった,啓発活動による間接的支援について,H30年度に実施した調査で各大学の実施状況を先取りして調査することができたため。次年度は研究計画通り,当事者と支援者の双方を対象とした,調査2「セクシュアルマイノリティ学生の支援ニーズの把握」と調査3「支援体制の構成メンバーによるセクシュアルマイノリティ学生支援の把握」の2つの調査の実施を行う。また調査1で得られた結果の分析し,成果発表の準備を進めていく。H31年度は,調査2「セクシュアルマイノリティ学生の支援ニーズの把握」をまず実施し,その後大学の就職支援部門を対象とした調査3「セクシュアルマイノリティ学生の就職支援と学内連携の把握」の2つの調査の実施を行う。また,調査4「海外の大学におけるセクシュアルマイノリティ支援の様子の把握」を同時並行で行う。研究成果の発表として,調査1で得られた結果を健康心理学会で発表するとともに,H29年度に実施した調査の結果を論文にまとめて発表する。所属機関の研究倫理審査委員会設立の都合により,調査1の郵送調査が本年度中に実施できなかったためだが,翌年度の4月に実施し,5月中には調査終了予定で,次年度使用額はその調査実施に使用する。所属機関の研究倫理審査委員会設立の都合により,調査1の実施が1年遅れ,それに伴って調査2と3がH30年度中に実施できなかったためであるが,調査の準備は進んでおり,どちらの調査もH31年度中に完了予定で,次年度使用額はそれらの調査実施に使用する。
強磁場による強相関電子系の制御と高エネルギー分光研究の理論的展開

希土類元素化合物には、希土類イオンの価数が整数として定まらない物質群がある。この場合、希土類インは2つの価数状態の重ね合わせとして表現され、この重ね合わせが原因で特異な物性を示すことが多い。これらは混合原子価状態と呼ばれ、局在した希土類元素の4f電子と遍歴している伝導電子が織り成す現象と解釈され、強相関電子系多体問題として興味を集めている。本研究は、混合原子価状態における磁気的価数状態と非磁気的価数状態の量子力学的重ね合わせ状態が、原子選択性、殻選択性という特徴を持つミクロな観測手段、高エネルギーX線吸収分光(XAS)やX線磁気円2色性(XMCD)により、如何に観測されるかを明らかにする目的で行われた。具体的には、混合原子価状態を示す物質EuNi2(Si0.18Ge0.82)2やその関連物質で観測された"磁場誘起価数相転移"が、XASやXMCDによりどのように観測されるかを、理論的モデルを構築し、そのモデルによる定量的なスベクトルの計算により明らかにした。モデルは、局在した4f電子と遍歴している伝導電子の系から成り、それらの間の混成や電子相関が考慮されている。モデルでは、異なった価数状態、Eu3+(非磁性状態)とEu2+(磁性状態)、の間の混成を、角運動量の保存則に注意して取り入れられた。このことは、特にXMCDに関して重要となる。逆に言えば、XMCDはそのような波動関数の詳細についての情報を与えることが明らかにされた。従って、混合原子価物質のXMCD観測は、原子選択性、殻選択性に加えて、波動関数の成分選択性という特異な選択性が加った一層ミクロな測定手段と言える。以上の研究により、磁場誘起価数相転移の物理的基礎付による、新たな電子材料開発への新たな道の開拓が期待される。幾つかの希土類元素(Ce, Yb, Eu, Smなど)化合物では、希土類イオンの原子価が整数として定まらず、中途半端な値をとる。このことが原因となり、それらの物質は様々な特異な物性を示すことが多い。このような現象は混合原子価状態と呼ばれ、局在した希土類元素の4f電子と遍歴している伝導電子間の混成や電子相関に深く関係し、物性研究者の興味を集めている。一方、強磁場の生成法が最近格段に進歩し、例えば、40テスラの磁場印加により、混合原子価化合物として知られているEuNi 2(SiO. 18GeD. 82)2において磁場誘起価数相転移が観測されるという画期的な実験が日本で行われた。そして、その磁場誘起価数相転移が原子選択性、殻選択性という他には見られない特徴を持つミクロな観測手段、高エネルギーX線吸収分光(XAS)やその磁気円2色性(XMCD)により観測されたのである。本研究では、実験で研究されたEu化合物を例にして、その電子状態を局在した4f電子と遍歴している伝導電子の系として考慮し、それらの間の混成や電子相関を取り入れたモデルを構築した。そして、この物質が示す磁場誘起価数相転移を再現すると共に、XASやXMCDスペクトルをそのモデルに基づいて定量的に計算した。このような研究により、磁場誘起価数相転移における電子状態変化の詳細とXAS及びXMCDスペクトルとの関連を明らかにし、これらの実験から得られる電子系に対する詳細な情報がどのようなものであるかを明らかにした。このことにより、価数相転移の物理的基礎付けやこれらの理論に基づく電子材料の開発に新たな道を開くことが期待される。
生理的および病理的条件下におけるC型レクチンMincle発現細胞の特定と機能解析

結核菌認識受容体Mincleの遺伝子座にGFPを組み込むことにより、Mincle発現細胞をGFPでモニターできるレポーターマウスを作製した。生理的条件下においては、末梢血、骨髄、脾臓、リンパ節、肺等の組織にはGFP陽性細胞は観察されなかった。ところが当該マウスに結核菌糖脂質のTDMを投与して肺胞肉芽腫を誘導したところ、肺胞肉芽腫中に著量のGFP陽性細胞の集積が観察された。これらのGFP陽性細胞はCD11b陽性Gr1陽性の好中球であった。これらの結果より、TDMによる肺胞肉外腫形成においてMincle発現細胞が重要な役割を果たしている可能性が示唆された。Mincle遺伝子の開始コドンに合わせてGFP-IRES/DTRを組み込んだノックインマウスのターゲッティングコンストラクトを作製した。共同研究先の岩倉洋一郎教授(東大医科研)の研究室にてES細胞にターゲッティングコンストラクトを遺伝子導入して、得られた489クローンをサザンプロットにより解析して、正しい相同組換えクローンを選抜した。選抜したES細胞を用いて凝集法により個体作製を行いキメラマウスを取得した。得られたキメラマウスをサザンプロットにより、正しい相同組み換えを確認し、C57BL/6Jマウスと交配してた。得られたF1をPCRによりジェノタイピングを行いgerm line transmissionを確認した。◆生理的条件下におけるMincle発現細胞の検出および欠損誘導GFP-IRES/DTRノックインマウスから調整した、腹腔細胞、末梢血細胞、脾臓細胞、骨髄由来マクロファージをin vitroにおいてLPSで刺激することによりMincieの発現を誘導し、GFP発現を検討した。その結果、Mincle陽性細胞がGFP陽性になることが確認された。またジフテリア毒素を加えることにより、GFP陽性細胞が消失したことから、ジフテリア毒素受容体も発現していることが確認された。さらにLPSを尾静脈投与してin vivoにおいてMincleの発現を誘導したところ、マクロファージや好中球においてGFPの発現が認められ、これらの細胞はジフテリア毒素の投与により消失した。以上の結果より、Mincle発現細胞をGFPによりモニターし、さらにそれらをジフテリア毒素の投与により欠損させることのできるマウスが樹立できた。◆結核菌構成成分による肉芽腫形成におけるMincle陽性細胞の検出結核菌の細胞壁構成成分のひとつであるTDM (trehalose dimycolate)は古くよりコードファクターと呼ばれ、それ単独投与により、結核菌感染の特徴である肺胞肉芽腫形成を引き起こすことが知られている。我々はこれまでにこの肺胞肉芽腫を形成している細胞にはMincle陽性細胞が含まれることをin situ hybridyzationにより明らかにしている。そこで肺胞肉芽腫におけるMincle陽性細胞の役割を解明するために、昨年度に作製したMincle発現細胞をGFPによりモニターでき、さらにMincle陽性細胞を特異的に除去できるマウス(Mincle遺伝子座にGFP-IRES/DTRを組み込んだノックインマウス(Mincle-GIDマウス))を用いた解析を行った。Mincle-GIDマウスにTDMを尾静脈投与して、肺胞肉芽腫が十分に形成ざれた7日後に肺を回収し、コラゲナーゼ処理により肺胞肉芽腫に含まれる細胞を回収して、EACSにより解析を行った。その結果、肺胞肉芽腫に含まれる細胞の約80%はCD11b陽性CD11c陽性のミエロイド系の細胞であり、そのうち約30%がGFP陽性(Mincle陽性)であることが明らかとなった。またこのマウスを用いることにより、GFPを指標に、肺胞肉芽腫中のMincle陽性細胞を分取して機能解析を行うことが可能であることが明らかとなった。
コミュニケーション困難児・者の事象関連電位による認知機能検査に関する基礎的研究

本報告は、コミュニケーション因難児・者、特に、重症心身障害者の言語認知機能を事象関連電位(ERP)を用いて他覚的に検査することを目的に行った基礎的研究である。初年度の2つの研究から、無課題下で種々のERP成分の測定が可能であり、その応用可能性が大きいこと、および、無課題下での言語認知を検討する場合の有意味語と無意味語の選択条件が明らかになった。また、有意味語と無意味語の違いが、それぞれERPのN_<100>、P_<200>、P_<300>、N_<400>、LPC成分に反映され、特にP_<300>以後の成分に有意味語と無意味語の違いが顕著に反映されることが明らかになった。これらの結果を踏まえ、2年度度に行った健常者に関する研究と重症心身障害者に関する研究から、以下の点が明らかになった。まず、健常者の場合、有意味語にはP_<300>とLPCが出現するがN_<400>は出現せず、逆に、無意味語には、N_<400>が出現するがP_<300>とLPCが出現しないことが明らかになった。また、重症心身障害児を、言語理解能力の良好群と不良群の2群に分類した結果、良好群の場合、有意味語では、健常者と同様にP_<300>とLPCが出現しN_<400>は出現しないが、無意味語では、健常者に出現したN_<400>が出現しなくなることが明らかになった。一方、不良群の場合には、明瞭なERP成分が得られなかった。これらの研究結果から、ERPのN_<100>、P_<200>、P_<300>、N_<400>およびLPC成分の振る舞いを見ることによって、重症心身障害者のようなコミュニケーション手段をほとんどもたない人々の言語認知機能を他覚的に知り得ることが示唆された。本研究は、コミュニケーション困難を示す重症心身障害児・者の認知機能を、教示なしのP_<300>(passive P_<300>)を用いて測定することを目的とした基礎的研究である。本年度は、健常児・者40名を対象にpassive P_<300>の測定を行い、その振舞いについて検討し、重症心身障害児・者にpassive P_<300>を適用するための基礎資料の収集を行った。具体的には、種々の有意味語(目標刺激)とその語順を入れ替えた無意味語(非目標刺激)とを1対1の割合でランダムにヘッドホーンより両耳呈示し、有意味語に対するpassive P_<300>を被験者の語彙関心度(親密度)との関係で検討した。同時に、passive P_<300>と通常のP_<300>との比較から、両者の相違点、波形の特性などについての基礎データを収集した。その結果、以下の点が明らかになった。1.passive P_<300>は、課題を荷す通常条件のP_<300>より低振幅であるが、形態的にも潜時的にも類似性が高いことからpassive P_<300>は通常のP_<300>と同じ心理過程を反映しているものであることが示唆された。2.passive P_<300>は、有意味語に対して明瞭に出現する。また、その有意味語は、被験者にとって関係の深い語でより明瞭な波形が出現することが明らかとなった。

本年度の基礎データの結果から、重症心身障害児・者のpassive P_<300>が測定できることが示唆され、また、彼らへの刺激語としては、彼らが日頃聞かされている言葉(名前など)を有意味語として用い、この有意味語の語順を入れ替えたものを無意味語として用いることが適切であることが示唆された。この方法を用いて次年度には、重症心身障害児・者に対して実際にpassive P_<300>の測定を行い、その波形の出現状態を検討することにより、彼らの認知機能を知るため基礎資料を得る。本報告は、コミュニケーション困難児・者、特に、重症心身障害者の言語認知機能を事象関連電位(ERP)を用いて他覚的に検査することを目的に行った基礎的研究である。初年度の2つの研究から、1.無課題下で種々のERP成分の測定が可能であり、その応用可能性が大きいこと、および、2.無課題下での言語認知を検討する場合の有意味語と無意味語の選択条件が明らかになった。また、3.有意味語と無意味語の違いが、それぞれERPのN_<100>、P_<200>、P_<300>、N_<400>、LPC成分に反映され、特にP_<300>以後の成分に有意味語と無意味語の違いが顕著に反映されることが明らかになった。これらの結果を踏まえ、2年度度に行った健常者に関する研究と重症心身障害者に関する研究から、以下の点が明らかになった。まず、健常者の場合、有意味語にはP_<300>とLPCが出現するがN_<400>は出現せず、逆に、無意味語には、N_<400>が出現するがP_<300>としてLPCが出現しないことが明らかになった。また、重症心身障害児を、言語理解能力の良好群と不良群の2群に分類した結果、良好群の場合、有意味語では、健常者と同様にP_<300>とLPCが出現しN_<400>は出現しないが、無意味語では、健常者に出現したN_<400>が出現しなくなることが明らかになった。一方、不良群の場合には、明瞭なERP成分が得られなかった。これらの研究結果から、ERPのN_<100>、P_<200>、P_<300>、N_<400>およびLPC成分の振る舞いを見ることによって、重症心身障害者のようなコミュニケーション手段をほとんどもたない人々の言語認知機能を他覚的に知り得ることが示唆された。
ミトコンドリアATP合成酵素の活性調節因子の前駆体とその受容体

ミトコンドリア蛋白の大部分は、細胞室でpresequenceをアミノ末端にもつ前駆体として合成され、膜を通過してミトコンドリア内に移行する。我々は、酵母ミトコンドリアの【F_1】【F_0】ATPアーゼ活性を調節する三種の蛋白について、前駆体の構造とそれらのミトコンドリアへの移行を調べてきた。そのうち、ATPアーゼインヒビター蛋白のpresequence構造は、酵母のチトクロームCペルオキシダーゼやペプチド伸長因子のものと一致する部分をもつことに注目し、このペプチド(Arg-Leu-Leu-Pro-Ser-Leu-Gly)を化学合成し、ミトコンドリアの忍識する信号機能について調べた。この合成ペプチドは、ミトコンドリアのみに特異的に結合し、膜と強い疎水性相互作用をすることを見出した。さらにATPアーゼインヒビター前駆体のミトコンドリアへの結合を強く阻害することを観察した。これらのことは、ミトコンドリア上に前駆体の信号構造としてのこのペプチドを忍識する受容体が存在することを示唆する。また、ミトコンドリアを軽くトリプシン処理するとペプチドは結合しなくなり、蛋白性受容体といえる。同様のことがラット肝ミトコンドリアでもみられ、前駆体の信号、その認識機構は、生物種間で共通と想像される。上記合成ペブチドの信号機能としての構造を解析するため、種々の合成ペプチドを用いて、ミトコンドリアへの結合、前駆体のプロセシングに対する影響を調べた結果、アルギニン残基が必須であることがわかり、このことは、多くのpresequenceに含まれる塩基性アミノ酸が前駆体の膜透過に重要な役割を果たしていることを示すと考えられる。以上の結果から、ATPアーゼインヒビターなどのpresequenceに含まれるこの合成ペプチドは、前駆体蛋白がミトコンドリアの受容体と直接相互作用する信号としての機能をもつ構造であると結論される。