hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
高血圧の発現機序と予後因子の分子・遺伝子レベルにおける検討

(1)高血圧とプロティンキナ-ゼCとの関連について自然発症高血圧ラット(SHR)の血小板プロティンキナ-ゼC(PKC)活性は上昇しており降圧治療により低下する。SHR大動脈のPKC活性も上昇しており降圧治療により低下し、血圧との間にr=0.84の相関をみた。このPKC活性の上昇はαーPKCーmRNAの増加によるαーPKC蛋白(74K,77K)の合成の亢進によりもたらされている。(2)ホスホリパ-ゼCの遺伝子レベルの変異についてSHR,SHRSP,WKYラットのホスホリパ-ゼC(PLC)α,β,γ_1,γ_2δの遺伝子の変異の有無についてRFLPを検討することにより行った。PLCαではSHRSPとSHR,WKY間に変異を認めた。PLCβでもSHRSPとSHR,WKY間に変異を認めたが,PLCα,では三者共に変異を認めた。しかしPLCーγ_2では3者間に変異を認めなかった。PLCーδではSHRSP,SHRとWKYに変異を認めた。以上SHRSPとSHR,WKYのPLC遺伝子あるいはその近傍には遺伝子の変異が生じている事が明らかとなった。(3)SHR大動脈における成長因子の遺伝子発現について高血圧に伴う動脈硬化に重要な血管平滑筋の増殖にどの成長因子の関与があるかを検討するため,SHR,WKYの大動脈における各種成長因子の遺伝子発現の差異について検討した。PDGFーA,PDGFーB TNF,ILー6,TGFーβのうちでPDGFーAがSHRの大動脈において4週,8週,15週,54週の各調迄においてWKYとの差異が最も多く出現している事が判明し、高血圧に伴う血管の増殖にPDGFーAが関与している事が示唆された。(1)高血圧に対するプロティンキナ-ゼCの関与について自然発症高血圧ラット(SHR)の血小板のミオシン軽鎖(MLC)のリン酸化は4週令ではSHRとWKYに差を認めないが、10週令ではSHRにおいて有意に亢進している。MLCのProtein kinase C(PKC)によるリン酸化はSHRで70%WKYで60%でありMLCキナ-ゼによるリン酸化はそれぞれ30%、40%でPKCによるMLCのリン酸化がSHRで亢進していた。一方10週令SHRをアンギオテンシン交換酵素阻害薬エナラプリル25mg/kg p.oで降圧すると2週後に有意な降圧を示したがMLCのリン酸化の低下は認められなかった。しかし、二次元ペプタイドマッピングではエナラプリル投与群でCキナ-ゼによるMLCのリン酸化は45%と減少し、MLCキナ-ゼによるリン酸化は55%と増加していた。血小板Cキナ-ゼ活性も減少しており血圧と正相関を示した。又、PKC阻害薬スタウロスポリンを0.3mg/kg.i.v.投与してもSHRは有意な降圧を示し、血小板のMLCのリン酸化はエナラプリル投与と同様に、PKCによるリン酸化の減少、MLCキナ-ゼによるリン酸化の増加を示した。これらの結果からPKCが高血圧の維持機構に関与している事が示され、一方、MLCのMLCキナ-ゼによるリン酸化は高血圧の維持にはあまり関与していない事が示唆された。(2)フオスフォリパ-ゼCの遺伝子レベルでの変異についてPCR法にてラットのフオスフォライペ-スC(PLCーγ)のcDNAを直接クロ-ニングし(1Kbp)、SHRとWKYの肝より精製したgenomicDNAの各種制限酵素処理後サザ-ンブロットを行い、PLCーγのcDNAをプロ-ブとしてRFLPを検索した。BamHLとEcoRIにてSHRとWKYとの間に多形性がみられた。

PLCーγあるいはその近辺の遺伝子にSHRとWKYでは異っていることが示唆された。(1)高血圧とプロティンキナ-ゼCとの関連について昨年度の研究で高血圧と自然発症高血圧ラット(SHR)の血小板プロティンキナ-ゼC(PKC)とは密接な関連をもつことが認められたが,今年度はSHRの大動脈平滑筋におけるPKCと血圧との関連について検討した。12週令のSHR大動脈平滑筋細胞質のPKC活性は同週令のWKYラットに比して有意に上昇していた(P<0.01)。この上昇していたPKC活性は降圧薬エナラプリル(25mg1kg)を2週間投与した同週令のSHRではWKYと同程度に低下することを認めた。血圧と大動脈PKC活性との間にはr=0.84の高い正相関を認めた。この関係はDEAEクロマトグラフィ-で標品を部分精製しても同様であった。膜分画のPKC活性はSHRにのみ認められた。RKCのα,β型に特異的なモノクロ-ナル抗体を用いPKC蛋白の半定量をイムノブロットを行い検討したがSHRでWKYに比し有意に増加し,エナラプリル治療群ではWKY程度に低下していた。これらの結果よりSHR大動脈のPKC活性,含量は血圧と密接に関連していることが明らかとなった。2)フォスフォリパ-ゼC(PLC)の遺伝子レベルでの変異についてラットのPLCーα,β,γ_1,γ_2,δのそれぞれのCDNAをPCRを用いてダイレクトクロ-ニングを行いプロ-ブとして使用した.SHRとWKYより得たDNAについてRFLPを検討した所,PLCーα,γ_2には差を認めなかったが,PLCーγ,β,δについてはSHRとWKYの間にRFLPを認め,これらの遺伝子あるいはその近傍にSHRとWKYの間には変異が生じていることが示唆された.(1)高血圧とプロティンキナ-ゼCとの関連について自然発症高血圧ラット(SHR)の大動脈のプロティンキナ-ゼC(PKC)活性は上昇し血圧とr=0.84の密接な相関を示した。DEAEカラムにより精製した標品においてもやはりSHRはWKYラットに比しPKC活性が高く、αーPKCに対するモノクロ-ナル抗体を用いてのイムノブロットでSHRでは77K,74KのPKC蛋白がWKYに比し多く、また、エナラプリルでSHRを降圧した群に較しても多量に存在し、αーPKCのmRNA量もSHQで多量に発現しており,WKY,SHrーエナラプリル降圧群ではαーPKCのmRNA量の発現は低下していた。これらの事よりSHRの大動脈のPKC活性の上昇はαーPKCの合成の亢進により生じ,この亢進は血圧の上昇に関連している事が明らかとなった。(2)SHR大動脈における成長因子の遺伝子発現について高血圧の予後因子として大きな役割を果す動脈硬化の成因に血管平滑筋の増殖が重要である。SHRの大動脈において各種成長萎子の発現がWKYに較しどのように異っているかを,RTーPCR法にて大動脈における各種成長因子のmRNA量を定量した。PDGFーA,PDGFーB,IGFーII TNF,TGFーβ,ILー6について検討したが,PDGFーAがSHRの大動脈でWKYと比して最も差異をもって多量に発現していた。PDGFーBは大動脈中膜での発現は認めなかった。また、エナラプリルで降圧したSHRの大動脈でPDGFーAの発現は抑制された。これより高血圧に伴う動脈硬化,血管平滑筋の増殖にPDGFーAが関与している事が示唆された。
昆虫の年間世代数に見られる地理的クラインを利用した表現型可塑性の維持コスト評価

ヤナギルリハムシの多化性個体群はヤナギの質が低下すると産卵を抑制する性質を持っている。この性質は葉の質が最も低下する主に夏に発現するため、夏には産卵数が著しく減少し、それに伴って成虫の個体数も減少する。やがて秋にヤナギのシュートが成長し、新葉が展開すると、葉の質はよくなるため産卵は再開し、成虫の個体数もそれに伴って増加する。この性質は幼虫の生存や発育に不適な時期を乗り切るための適応と考えられる。しかし、この性質は発育や繁殖に利用できるシーズンが長い多化性の個体群では、世代間で寄主の質が大きく変動するため適応的であるが、1化性の個体群では適応的ではない。なぜならば、1化性個体群は1年に1世代しかないため、繁殖を抑制する時間的な余裕がないだけでなく、寄主の質が1世代の間だけではそれほど大きく変動することはないと考えられる。そのため、このような寄主の質に反応して繁殖を抑制する季節的な表現型可塑性は、1化性個体群では不必要な性質であると考えられる。もし表現型可塑性に維持コストが存在するとすれば、1化性個体群では表現型可塑性は不必要なだけでなく、コストまでかかる形質として消失しているはずである。ところが、北海道石狩市の石狩川河川敷に生息するヤナギルリハムシは年1化、あるいはできてもせいぜい2化であるにもかかわらず、累代飼育実験の結果、このような性質をもっていることが明らかとなった。野外調査の結果では、北海道石狩では、シーズン終了までに本種のメス成虫は繁殖不活性状態を発現させることはなかった。これらの結果は、寄主の質に反応して繁殖活性を変化させるという可塑的性質には維持コストがない、あるいはあっても小さいことを示唆した。多化性の昆虫に見られる休眠や季節多型といった季節的な表現型可塑性は、1年に1回だけ発生する1化性個体群では不必要な形質である。もし表現型可塑性に維持コストが存在するとすれば、1化性個体群では表現型可塑性は不必要なだけでなくコストまでかかる形質として消失しているかもしれない。そこで、昆虫における季節的な表現型可塑性に維持コストがあるか否かを評価するために、南方の多化性個体群で観察される可塑的反応が北方の1化性個体群では維持されているかを調べた。まず、年間世代数に地理的クラインが見られるヤナギルリハムシで、具体的にどのような選択圧が本種に表現型可塑性を進化させたかを知るために、本種の生活環と本種を取り巻く環境の季節的変化を北海道石狩と和歌山県九度山の2地点で把握した。その結果、北海道石狩では本種の年間世代数は年12化で、幼虫発育時の気温や寄主植物の質などの環境変動が世代間で小さかったのに対して、和歌山県九度山では年4化以上で、これらの環境変動が世代間で大きかったため季節的な表現型可塑性が進化しやすい環境条件であることが明らかになった。さらに、野外調査と平行して室内飼育実験も行った結果、多化性の九度山個体群だけでなく石狩個体群でも可塑的な休眠誘導の光周反応が示された。また、どちらの個体群も寄主植物の質に敏感に反応し、質の悪い葉を摂食したメス成虫はすぐに産卵を抑制した。これらの性質は季節的に変動する環境に適応した結果進化した表現型可塑性であるが、北海道石狩個体群は完全に1化の個体群ではないため、表現型可塑性の維持コストについてまでは評価できなかった。来年度は、より北方に生息する完全1化性のヤナギルリハムシ個体群を研究対象とすることで表現型可塑性の維持コストについて評価するだけでなく、他の昆虫種でも調べることで結果が普遍的なものであるかどうかまで確認する予定である。
ヒメツリガネゴケの幹細胞化における新奇DNA合成の分子機構の解明

植物の再生過程でおこる細胞運命転換には細胞周期の再開が必須であるが、どのように細胞運命転換が細胞周期の進行・再開によって制御されているのは不明である。ヒメツリガネゴケの葉細胞は、傷害刺激により細胞周期が再開し幹細胞へと変化する。この過程において、細胞周期の進行に依存した新奇なDNA合成がおこり、このDNA合成が幹細胞化に必要であることが分かっている。そこで本研究では、新奇DNA合成の意義を明らかにすることで、細胞周期と細胞運命転換を結びつける分子機構の解明を目的としている。本年度では、以下の実験を行った。(1)新奇DNA合成が開始される領域の特定:新奇DNA合成が開始される箇所では、DNA合成・修復に関わる因子が結合することが考えられた。そこで、DNA合成・複製のマーカーとして、DNA複製に関わるPCNAをコードする遺伝子にGFP遺伝子をノックインさせ、PCNA-GFP融合タンパク質を発現する形質転換体を作製した。切断葉の細胞内局在変化を調べたところ、幹細胞化の過程で核内でドット状にGFPシグナルが検出された。これらのことから、PCNA-YFPが幹細胞化の過程でゲノムDNA領域に結合していることが示唆された。またGFP抗体を用いて、PCNA-YFPタンパク質を免疫沈降させることができることを確認した。一方、DNA修復のマーカーとして、RAD51-GFPノックインラインを作製した。(2)新奇DNA合成領域の特定:チミジンアナログであるEdUを切断葉の幹細胞化している細胞のみに取り込ませる実験方法を確立し、超並列シーケンサー解析用のライブラリー作製の準備を行った。またNanoporeシーケンス技術により、EdUを取り込ませたゲノムDNAを直接読むことができる可能性が示唆されたため、その条件検討を開始した。PCNA-YFP、RAD51-YFPラインの作製が完了し、特にPCNA1-GFPラインを用いたChIP-seq解析を行うことができる環境が整った。また、EdUを幹細胞化している葉細胞のみに取り込ませる方法がほぼ確立できたため、次年度でライブラリー作製を行い、超並列シーケンサーで解析することが可能になった。平成30年度に引き続き、石川が研究全体を統括し、研究協力者である大学院生とともに実験をすすめる。(1)新奇DNA合成の開始点の同定:PCNA1-GFPラインの切断葉を用いて、GFP抗体を用いたChIP-seq解析を行い、DNA複製機構が結合している部位を同定する。同様に、RAD51-ラインについてもChIP-seq解析を行うための条件検討を行い、条件が整い次第、ChIP-seq解析を行う。(2)切断葉からEdUを取り込んだゲノムDNA断片を回収し、ライブラリー作製を行う。その後、超並列シーケンサーで解析し、ゲノム上にマッピングすることで、どの領域でDNA合成が起こっているのかを明らかにする。また、PCNA-GFP、RAD51-GFPの結合部位を考慮することで、新奇DNA合成が複製・増幅・修復のいずれかに該当するのか推察する。その結果に基づき、DNA複製や修復に関わる因子をノックダウンさせ幹細胞化における新奇DNA合成の有無、表現型を調べる。また、NanoPoreシーケンス技術を用いた新奇DNA合成領域の特定についても、引き続き条件検討を行う。(3)改変したCRISPR-Cas9システムを用いて、遺伝子座ごとのシスエレメントに結合するタンパク質を回収し、網羅的にタンパク質を同定する方法の開発に着手する。

平成30年度に引き続き、石川が研究全体を統括し、研究協力者である大学院生とともに実験をすすめる。(1)新奇DNA合成の開始点の同定:PCNA1-GFPラインの切断葉を用いて、GFP抗体を用いたChIP-seq解析を行い、DNA複製機構が結合している部位を同定する。同様に、RAD51-ラインについてもChIP-seq解析を行うための条件検討を行い、条件が整い次第、ChIP-seq解析を行う。(2)切断葉からEdUを取り込んだゲノムDNA断片を回収し、ライブラリー作製を行う。その後、超並列シーケンサーで解析し、ゲノム上にマッピングすることで、どの領域でDNA合成が起こっているのかを明らかにする。また、PCNA-GFP、RAD51-GFPの結合部位を考慮することで、新奇DNA合成が複製・増幅・修復のいずれかに該当するのか推察する。その結果に基づき、DNA複製や修復に関わる因子をノックダウンさせ幹細胞化における新奇DNA合成の有無、表現型を調べる。また、NanoPoreシーケンス技術を用いた新奇DNA合成領域の特定についても、引き続き条件検討を行う。(3)改変したCRISPR-Cas9システムを用いて、遺伝子座ごとのシスエレメントに結合するタンパク質を回収し、網羅的にタンパク質を同定する方法の開発に着手する。(次年度使用額が生じた理由)幹細胞化している葉細胞のみにEdUを取り込ませる方法を確立するため、様々な条件検討が必要であると考えていたが、想定よりも早く実験条件が決まったため、試薬等の購入を抑制することができ、当該次年度使用額が生じた。(使用計画)Nanoporeシーケンスの条件検討を行うための物品・試薬の購入費にあてる。
不規則性のある超伝導-モット絶縁体量子相転移のスケーリングによる普遍性の実施

銅酸化物超伝導体の特徴として,伝導面であるCuO_2面とキャリアを供給するブロック層が積層した構造になっていることがあげられる.そのため,キャリアを供給しているブロック層の組成を変化させることでCuO_2面自体の組成を変化させることなくCuO_2面のキャリア濃度を制御することが可能である.そこで,本研究は電子相関の強い2次元電子系において金属・絶縁体転移が存在するか否かを調べることを目的として,キャリア濃度を制御した銅酸化物Bi_<2+x>Sr_<2-x>CuO_y単結晶を用いてコンダクタンスとホールさん係数の温度依存性を測定した.実験の結果,以下のことがわかった.試料のキャリア濃度に応じて、コンダクタンスの温度依存性は可変領域ホッピング型(キャリア濃度が小)から温度の対数に比例(キャリア濃度が大)と移り変わった.コンダクタンスが低温において温度の対数に比例する結果を与えるモデルとしてはアンダーソン局在の弱局在,近藤効果,電子間相互作用が知られている.しかし、コンダクタンスに加えてホール係数の温度依存性,磁気抵抗効果,非線形伝導の測定結果を詳細に検討したところ,その3者のいずれでも説明ができないことを示した.さらに,2次元系で初めてモビリティエッジの存在する系であることをホール係数の測定結果より明らかにした.つまり,下部臨海次元が2次元ではないことを明らかにした.これは,2次元系では超伝導・絶縁体転移,量子ホール液体・絶縁体転移に次ぐ第3の量子相転移の示唆するものであり,非常に重要な結果であることを意味する.銅酸化物超伝導体の特徴として,伝導面であるCuO_2面とキャリアを供給するブロック層が積層した構造になっていることがあげられる.そのため,キャリアを供給しているブロック層の組成を変化させることでCuO_2面自体の組成を変化させることなくCuO_2面のキャリア濃度を制御することが可能である.そこで,本研究は電子相関の強い2次元電子系において金属・絶縁体転移が存在するか否かを調べることを目的として,キャリア濃度を制御した銅酸化物Bi_<2+x>Sr_<2-x>CuO_y単結晶を用いてコンダクタンスとホールさん係数の温度依存性を測定した.実験の結果,以下のことがわかった.試料のキャリア濃度に応じて、コンダクタンスの温度依存性は可変領域ホッピング型(キャリア濃度が小)から温度の対数に比例(キャリア濃度が大)と移り変わった.コンダクタンスが低温において温度の対数に比例する結果を与えるモデルとしてはアンダーソン局在の弱局在,近藤効果,電子間相互作用が知られている.しかし、コンダクタンスに加えてホール係数の温度依存性,磁気抵抗効果,非線形伝導の測定結果を詳細に検討したところ,その3者のいずれでも説明ができないことを示した.さらに,2次元系で初めてモビリティエッジの存在する系であることをホール係数の測定結果より明らかにした.つまり,下部臨海次元が2次元ではないことを明らかにした.これは,2次元系では超伝導・絶縁体転移,量子ホール液体・絶縁体転移に次ぐ第3の量子相転移の示唆するものであり,非常に重要な結果であることを意味する.
はめあい寸法公差の設計基準の製作とはめあい体験学習システムの構築に関する研究

○研究目的:本校機械工学科の低学年学生は、創造総合実習の授業内、およびロボットコンテスト用マシン製作等において、設計・製図、およびものづくりを行う機会がある。しかし、設計初心者の低学年が設計・製図を行なう場合、特に、はめあいの寸法公差記入が困難であり、どの設計場面でどのはめあいを使用したら良いか判断がっかない。また、加工経験が少ないため、寸法公差値の大きさにも実感が持てない。そこで、学生自身がはめあい具合を体験できる各種はめあい実物教材を製作する。また、実際の各設計場面で必要となる、はめあい寸法公差の設計基準を製作し、はめあい設計の容易化をはかる。○研究方法:はめあいには軸基準と穴基準があるが、軸を加工するほうが精度良く加工できるため、本研究では、一般的な穴基準を用いた。また、例えば同じすきまばめでも公差域クラスによって、様々なはめあいがある.。そこで、各それぞれのはめあいの軸と穴の現物を製作し、はめあい具合が体験できるようにした。製作したものは、すきまばめ(緩合・軽転合・転合、精転合)、中間ばめ(滑合・押込・打込・軽圧入)、しまりばめ(圧入・強圧入)である。さらに、各書籍を参考にして、各用途を記入したはめあい表を作成した。○研究成果:製作したはめあい教材とはめあい表を学生に試してもらい、無記名のアンケートをとった。その結果、各種はめあいの違いの理解、各種はめあいの用途がよくわかるようになった。
神経幹細胞を用いたウイルス性脳障害モデル

マウスCNS幹細胞へのMCMV-IE遺伝子導入法の確立:ウイルスベクターを用いて幹細胞にMCMV-ie1遺伝子の導入を試みた。ウイルスベクターは当初用いていたアデノ随伴ウイルス(AAV)からマウスレトロウイルス(MSCV)に変更した。MSCVのLTRの制御下で蛍光蛋白(EGFP)のみを発現するベクターと、IRESを挟んでEGFPとMCMV-IE1蛋白を同時に発現するベクター(bicistronic vector)を設計した。これらのベクタープラスミドをパッケージング細胞(PT67)に導入し、ピューロマイシン耐性とEGFPの蛍光をもとにレトロウイルス産生細胞株を比較的短期間で効率良く樹立することができた。さらに、レトロウイルスベクターで幹細胞に遺伝子導入する際に、幹細胞を機械的に分散させ遠心法によって効率良く遺伝子導入する方法を開発した。導入遺伝子発現幹細胞を薬剤耐性とフローサイトメトリーにより選択的に分離し、100%近くまで濃縮することに成功した。IE遺伝子産物のCNS幹細胞機能に及ほす影響の解析:上記遺伝子導入実験に平行して、導入されたie遺伝子産物の幹細胞機能に及ぼす影響の解析を行った。まず、遺伝子導入された幹細胞を付着させ分化誘導させる培養条件(細胞密度、血清濃度、増殖因子濃度)を確立した。さらに、幹細胞から分化した、神経細胞及びグリア細胞を免疫染色によって同定した。その結果、IE1蛋白は幹細胞の神経細胞への分化を抑制することが明らかとなった。今後は、この現象をフローサイトメトリー、ウェスタンブロット、免疫沈降法、RT-PCR等を用いて詳細に解析する予定である。遺伝子導入幹細胞の新生児・胎児脳、脳スライス培養系への移植実験:幹細胞の移植実験に先だって、マウス新生児脳への遺伝子導入実験及び新生児脳へのウイルス感染実験を行った。遺伝子銃を用いた遺伝子導入によって脳室周囲の幹細胞・前駆細胞に遺伝子導入が可能であることを実証した。また、感染実験によってCMV脳室脳炎におけるinnate immunityの役割を明らかにした。これらの成果をLab Invest及びAm J Patholに掲載することができた。マウスCNS幹細胞へのMCMV-IE遺伝子導入法の樹立:ウイルスベクターを用いて幹細胞にMCMV-ie1遺伝子の導入を試みている。ウイルスベクターはアデノ随伴ウイルス(AAV)とレトロウイルスについて検討した。HCMVプロモーターの下流にMCMV-ie1を組み込んだAAVを作成し幹細胞への遺伝子導入を試みた。導入後2日で30%の幹細胞にIE1蛋白の発現を認めたが、発現は一過性で継代すると消失した。AAVは幹細胞への遺伝子導入には適さないと考えられた。一方、マウスレトロウイルスのMSCVにie1遺伝子を組み込んで幹細胞への導入を試みた結果、AAVと比較すると遺伝子導入後継代しても発現が持続することが判った。現在、ウイルス価の高いMSCVの作成法を検討し、導入効率を上げる試みを行っている。IE遺伝子産物のCNS幹細胞機能に及ぼす影響の解析:上記の遺伝子導入実験と平行して、遺伝子導入された幹細胞の分化誘導実験を行っている。現在は幹細胞を分化誘導するための培養条件の検討とその解析法の検討を行っている。幹細胞の分化誘導に最も適した、細胞密度、血清濃度、線維芽細胞増殖因子濃度を決定する事ができた。現在、分化の状態をレーザー顕微鏡とフローサイトメトリーを用いて解析する準備を進めている。

遺伝子導入幹細胞の新生児脳、胎児脳スライス培養系への移植実験:幹細胞の移植実験に先立って、マウス新生児脳スライス培養系への遺伝子導入実験を行っている。遺伝子銃を用いた遺伝子導入によって、脳室周囲の幹細胞・前駆細胞に遺伝子導入が可能であることが明らかとなった。この結果の一部はアメリカ・カナダ病理学会の機関誌であるLaboratory Investigationに投稿し、修正後再投稿の予定である。マウスCNS幹細胞へのMCMV-IE遺伝子導入法の確立:ウイルスベクターを用いて肝細胞にMCMV-ie1遺伝子の導入を試みた。ウイルスベクターは当初用いていたアデノ随伴ウイルス(AAV)からマウスレトロウイルス(MSCV)に変更した。MSCVのLTRの制御下で蛍光蛋白(EGFP)のみを発現するベクターと、IRESを挟んでEGFPとMCMV-IE1蛋白を同時に発現するベクター(bicistronic vector)を設計した。これらのベクタープラスミドをパッケージング細胞(PT67)に導入し、ピューロマイシン耐性とEGFPの蛍光をもとにレトロウイルス産生細胞株を比較的短期間で効率よく樹立することができた。さらに、レトロウイルスベクターで幹細胞に遺伝子導入する際に、幹細胞を機械的に分散させ遠心法によって効率良く遺伝子導入する方法を開発した。導入遺伝子発現幹細胞を薬剤耐性とフローサイトメトリーにより選択的に分離し、100%近くまで濃縮することに成功した。IE遺伝子産物CNS幹細胞機能に及ぼす影響の解析:上記遺伝子導入実験に平行して、導入されたie遺伝子産物の幹細胞機能に及ぼす影響の解析を行った。まず、遺伝子導入された幹細胞を付着させ分化誘導させる培養条件(細胞密度、血清濃度、増殖因子濃度)を確立した。さらに、幹細胞から分化した、神経細胞及びグリア細胞を免疫染色によって同定した。その結果、IE1蛋白は幹細胞の神経細胞への分化を抑制することが明らかとなった。今後は、この現象をフローサイトメトリー、ウェスタンブロット、免疫沈降法、RT-PCR等を用いて詳細に解析する予定である。遺伝子導入幹細胞の新生児・胎児脳、脳スライス培養系への移植実験:幹細胞の移植実験に先だって、マウス新生児脳への遺伝子導入実験及び新生児脳へのウイルス感染実験を行った。遺伝子銃を用いた遺伝子導入によって脳室周囲の幹細胞・前駆細胞に遺伝子導入が可能であることを実証した。また、感染実験によってCMV脳質脳炎におけるinnate immunityの役割を明らかにした。これらの成果をLab Invest及びAm J Patholに掲載することができた。
骨髄間葉系幹細胞の分化誘導シグナルとなる担体の研究

骨髄間葉系幹細胞を移植することによる歯周組織再生療法が有用であることは既に明らかとなっているが、硬組織の再生に関しては改善すべき点が残っていた。本研究の目的は、骨髄間葉系幹細胞を用いて歯周組織再生を行う際に,より効率良く再生を誘導できる,シグナルの機能を有する担体を探索することである。平成19年度は、培養間葉系幹細胞(以下MSC)を用いて、β-TCPがMSCの形質に及ぼす影響について、細胞接着と骨形成に関与する遺伝子発現およびタンパク発現について検討した。MSCを培養する際、ディッシュ内にβ-TCPを入れて培養を行ったところ、6日間で細胞接着に関与するαV・β3 integrinのmRNA発現の有意な上昇が確認できた。さらに骨形成に関与する細胞外基質であるosteopontinのmRNAおよびタンパク発現の促進も確認した。以上のことより、β-TCPは、MSCの細胞接着および骨分化に影響している可能性を示唆できた。平成20年度は、実験動物を用いて、歯周組織再生により有用であるかを検討した。実験動物は雌性ビーグル犬とし、下顎臼歯の根分岐部にセメント質・歯周靭帯を含めた3級の歯槽骨欠損を作成した。その後、アルジネート印象財を填入し、炎症を惹起させる。その後、間葉系幹細胞・アテロコラーゲン複合体に加えてβ-TCPを移植した群と複合体のみの移植およびβ-TCPのみ填入した群を作成し、経時的に比較検討した。その結果、複合体とβ-TCPを併用した群では、歯槽骨骨頂が根分岐部まで到達するのは、複合体のみの群と比較して有意に早かった。これは、β-TCPの併用が、骨の形成に有利であったと推察できる。また、β-TCPのみ填入した群では、ほとんどの個体でアンキローシスが認められた。以上のことから、β-TCPのみの使用では、アンキローシスを誘発しやすくなり、やはり、MSCとの併用が歯周組織再生により有用であることを明らかにできたと言える。β-TCBのシグナリングモルキュールとしての機能を解析するために、骨髄間葉系幹細胞(MSC)とTCPをトランズウェルで隔離した状態での培養を行つた。TCPは氣孔率が60%もしくは70%のものを用意した。培地はDMEM+10%FCSである。適宜培地交換を行い、1週間培養行った結果、骨の形成に関与するOsteopontin (OPN) Alkaline phosphatase(AP) Bone Morphogeneteic Protein (BMP)-2いずれの遺伝子発現についても有意差は認められなかった。次に、TCPと細胞を隔離ぜずに培養した。TCPの気孔率は先の2種類である。培地はDMEM+10%FCSと、骨分化培地を使用した。気孔率60%のTCPでは、DMEM+10%FCSにおいて、OPNのmRNA発現が有意に上昇した。骨分化培地ではさらに顕著な結果どなった。APとBMP-2についでは、有意差は認められなかつた。気孔率75%でまは、有意差はあるが気孔率60%程ではなかった。0PNの発規か上昇しているみこ逆から、TCPは、細胞接着には有利なツールであることが推察できる。しかし、骨分化に関しては影響していない可能性が高い。TCPディスク内に、MSCが遊走し、その後接着しているかを検討するために、1週間培養後、TCPディスクの表面と割断面を走査型電子顕微鏡で観察した。

気孔率によっで、内部の空洞の大きさに差はあるが、割断面内には細胞の付着は認めちれなかった。現在、ビーグル犬を用いた、MSCとTCPを移植する実験を行っている段階である。骨髄間葉糸幹細胞を移植することによる歯周組織再生療法か有用であることは既に明らかとなっているが、硬組織の再生に関しては改善べき点が残っていた。本研究の目的は、骨髄間葉糸幹細胞を用いて歯周組織再生を行う際に,より効率良く再生を誘導できる,シグナルの機能を有する担体を探索することである。平成19年度の研究成果によって、培養間葉糸幹細胞に対して、β-TCPは骨形成に関与する遺伝子発現を促進する事を明らかにした。よって本年度は、実験動物を用いて,歯周組織再生により有用であるかを検討した。実験動物は雌性ビーグル犬とし、下顎臼歯の根分岐部にセメント質・歯周靭帯を含めた3級の歯槽骨欠損を作成した。その後、アルジネート印象財を填入し、炎症を惹起させる。その後、間葉系幹細胞・アテロコラーゲン複合体に加えてβ-TCPを移植した群と複合体のみの移植およびβ-TCPのみ填入した群を作成し、経時的に比較検討した。その結果、複合体とβ-TCPを併用した群では、歯槽骨骨頂が根分岐部まで到達するのは、複合体のみの群と比較して有意に早かった。これは、β-TCPの併用が、骨の形成に有利であったと推察できる。また、β-TCPのみ填入した群では、ほとんどの個体でアンキローシスが認められた。以上のことから、β-TCPのみの使用では、アンキローシスを誘発しやすくなり、やはり、骨髄間葉系幹細胞との併用が歯周組織再生により有用であることを明らかにできたと言える。
2倍体イチゴを用いた四季成り性遺伝子の単離と利用

イチゴのように,同一種内で短日性と長日性の系統が利用されている植物は,生産上および学術上,貴重である.本研究では,2倍体のワイルドストロベリーをイチゴ属のモデル植物として供試した.四季成り性の系統を供試し,自家受粉や交雑して得られた実生の中には長日条件で開花に至った個体があり,これらの個体は四季成り性である可能性が示唆された.イチゴのように,同一種内で短日性と長日性の系統が利用されている植物は,生産上および学術上,貴重である.本研究では,2倍体のワイルドストロベリーをイチゴ属のモデル植物として供試した.四季成り性の系統を供試し,自家受粉や交雑して得られた実生の中には長日条件で開花に至った個体があり,これらの個体は四季成り性である可能性が示唆された.イチゴ(Fragaria×ananassa.8倍体)には,一季成り性品種(一般に質的短日性)と,四季成り性品種(一般に量的長日性)がある.イチゴのように,同一種内で短日性と長日性の品種や系統が利用されている植物は,生産上および学術上,大変貴重である.そこで,本研究では,イチゴの一季成り性品種と四季成り性品種の花成関連遺伝子を単離・比較することにより,四季成り性の分子機構を明らかにし,育種等への利用に資することを目的とする.しかし,イチゴの栽培種は,高次倍数体で遺伝子の解析が困難である.そこで,本年度は,イチゴ属のモデル植物として2倍体のワイルドストロベリー(F.vesca)の一季成り性の系統と四季成り性の品種などを供試した.ワイルドストロベリーの花成の光周性に関する情報は不十分であり,温度と日長を制御して,各品種・系統の日長反応性を確認する必要があったことから,'Alexandra',ミグノネット',ワイルドストロベリーの変種(F.vesca var.vesca)の系統を供試し、実生から栽培した.昼温(618時)/夜温(18翌6時)を25/20°Cに設定した自然光型ファイトトロン内で,自然日長(10.516時間)で栽培した.'Alexandra'と'ミグノネット'はほぼ1年を通して開花し続けた.一方,F.v.var.vescaの系統は,栽培期間中に開花しなかったが,ランナーを発生した.以上の結果,二つの品種は四季成り性であると考えられた.また,F.v.var.vescaの系統で開花しなかったのは,8倍体のイチゴの一季成り性品種と同様に,花芽形成をさせるためには低温に遭遇させる必要があることが推察された.四季成り性関連遺伝子は,'Alexandra'と'ミグノネット'から単離できることが期待される.イチゴ(Fragaria×ananassa. 8倍体)には,一季成り性品種(一般に質的短日性)と,四季成り性品種(一般に量的長日性)がある.イチゴのように,同一種内で短日性と長日性の品種や系統が利用されている植物は,生産上および学術上,大変貴重である.そこで,本研究では,イチゴの一季成り性品種と四季成り性品種の花成関連遺伝子を単離・比較することにより,四季成り性の分子機構を明らかにし,育種等への利用に資することを目的とする.しかし,イチゴの栽培種は,高次倍数体で遺伝子の解析が困難である.そこで,本年度は,イチゴ属のモデル植物として2倍体のワイルドストロベリー(F.vesca)の一季成り性の系統と四季成り性の品種などを供試した.ワイルドストロベリーの花成の光周性に関する情報は不十分であり,温度と日長を制御して,各品種・系統の日長反応性を確認する必要があったことから,'Alexandra','ミグノネット',ワイルドストロベリーの変種(F.vasca ver.vesca)の系統を供試し、実生から栽培した.昼温(618時)/夜温(18翌6時)を25/20°Cに設定した自然光型ファイトトロン内で,自然日長(10.516時間)で栽培した.'Alexandra'と'ミグノネット'はほぼ1年を通して開花し続けた.一方,F.v.ver.vescaの系統は,栽培期間中に開花しなかったが,ランナーを発生した.以上の結果,四季成り性であると考えられた2つの品種について,自家受粉と交雑を行って,それぞれで種子を得た.また,RNAの抽出とPCRによる花成関連遺伝子のクローニングも引き続き行う.イチゴ(Fragaria ×ananassa.8倍体)には,一季成り性品種(一般に質的短日性)と,四季成り性品種(一般に量的長日性)がある.イチゴのように,同一種内で短日性と長日性の品種や系統が利用されている植物は,生産上および学術上,大変貴重である.そこで,本研究では,イチゴの一季成り性品種と四季成り性品種の花成関連遺伝子を単離・比較することにより,四季成り性の分子機構を明らかにし,育種等への利用に資することを目的とする.しかし,イチゴの栽培種は,高次倍数体で遺伝子の解析が困難である.

そこで,本年度は,イチゴ属のモデル植物として2倍体のワイルドストロベリー(F. vesca)の一季成り性の系統と四季成り性の品種などを供試した.前年度の試験で,ワイルドストロベリーの四季成り性系統であると考えられた`Alexandra'と`ミグノネット'について,自家受粉や交雑して得られた実生の四季成り性の判定を試みた.昼温(618時)/夜温(18翌6時)を25/20°Cに設定した自然光型ファイトトロン内で,自然日長(1216時間・310月)で栽培したところ,試験期間中に開花に至った個体があり,これらの個体は四季成り性である可能性が示唆された.本試験では充分な数の実生が得られなかったことから,ワイルドストロベリーにおける四季成り性の形質の遺伝については,F2世代を得ることも含めて今後も検討する必要があるが,これを明らかにすることができれば,高次倍数体である栽培種への応用も可能になると考えられる.また,花成関連遺伝子のクローニングも検討の余地がある.3月中旬頃の東日本大震災で,一時期断水や停電で植物育成装置が停止した際に,植物体に何らかの生理的な変化があったのか,四季成り性の品種や系統が当初の予定通りに開花しなかったため,交配などを行う時期が遅くなった.24年度が最終年度であるため、記入しない。やや遅れが生じたものの,その後は,植物体は順調に生育しており,計画通りに研究を行う予定である.24年度が最終年度であるため、記入しない。
宇宙磁場の生成と構造形成に及ぼす影響

宇宙磁場の起源と構造形成に及ぼす影響を調べた。具体的な成果としては、(1)磁場を生み出すベクトル成分が生じる可能性として、Einstein-aether重力理論を考えた場合、位相欠陥であるグローバル・テクスチャーや宇宙紐の場合について各々、生成される磁場を予測し、観測からモデルパラメターに対して得られる制限を明らかにした。(2)密度揺らぎの2次摂動が磁場を生み出すことから、その膨張宇宙での時間発展をすべての項を取り入れて計算することに初めて成功し、宇宙磁場の種となり得ることを明らかにした。(3)活動銀河核からの放射によって磁場が作られる可能性に着目し、生成される磁場の現実的な見積もりを与えた。本年度は、密度揺らぎのベクトルモードに注目して、研究を進めた。とくに、宇宙膨張の加速を説明するために、ダークエネルギーの代わりに近年しばしば導入される修正重力理論において、ベクトルモードがどのように生成され、磁場形成へとつながるかについて、検討を行なった。具体的には、Einstein-aether重力理論において、aetherがベクトルモードのソースとなることに着目し、まず、ベクトルモードの揺らぎを精密に計算した。その結果得られた宇宙マイクロ波背景放射の温度揺らぎとBモード偏光についてWMAPの観測と比較し、aether場に対する制限を得る事に成功した。さらに、期待される磁場のパワースペクトルを計算し、特徴的なピークが3000万光年スケールに現れることを見出し、そこでの磁場が最大で10-22Gとなることがわかった。これは非常に小さい値だが、その後のダイナモ過程などを考慮すれば、現在の銀河磁場の「種」となるには十分な大きさかもしれない。一方で、観測的に銀河間空間、とくにヴォイドと呼ばれる銀河の少ない領域での磁場の強度に制限をつける研究も進めた。具体的には、Mrk421というブレーザー(活動銀河核)から出されるTeVとGeVのガンマ線に着目した。MrK421から我々までの間に、エネルギーの高いTeVガンマ線は赤外線背景放射と相互採用を起こし、電子・陽電子対を生む可能性がある。電子・陽電子が宇宙マイクロ波背景放射の光子にエネルギーを与える事で、GeVガンマ線となって我々までに伝播する。もし磁場があると、電子・陽電子の経路を曲げ、GeVガンマ線到着に時間の遅れを生じる。GeVガンマ線そのものがFERMIガンマ線衛星に見られない事から、少なくとも10-20.5G以上の磁場があり、到着遅れを生じさせていると推論できるのである。本年度は、初期磁場が存在する場合に、宇宙での構造形成にどのような影響がでるかを中心に、研究を進めた。まず宇宙での晴れ上がり以降、最初期星形成の時期までの間に磁場が存在していれば、これまで我々が調べて来たようなローレンツ力による密度揺らぎの増幅が構造形成の時期を早める効果以外に、磁場のエネルギー散逸による、宇宙の熱史の改変が生じる可能性がある。エネルギー散逸による影響を将来の赤方偏移された中性水素の21cm線の観測で受かるかどうかを調べた結果、影響は非常に小さいスケールでのみ現れ、磁場の効果は、これまでのローレンツ力によるものが支配的であることがわかった。次に、磁場が存在している場合の電離したガス雲の重力収縮について、数値シミュレーションと解析的取扱いの両者によって詳しく調べる研究を行った。その結果、磁場によるガス雲収縮の阻害効果が、特に高赤方偏移で顕著であることを示し、ハローの存在量についての予想を示した。続いて、昨年度も注目した、磁場を生成する可能性のある密度揺らぎのベクトルモードについて、最新の宇宙マイクロ波背景放射の偏光のBモード(パリティが奇の成分)の観測を用いて制限する研究を行った。このBモードは、初期揺らぎ起源のものが、観測的に見つかったという報告があり大いに注目を集めたところであった。Bモードに関しては、重力波成分に対する制限・測定も得られることから、将来における重力波直接観測の予測も行った。一方で、これまで我々は密度揺らぎの2次摂動から、磁場が生成されるというシナリオを提案してきている。本年度は、この2次摂動をすべての項をきちんと入れて解くための準備を行った。その課程で、ガスやニュートリノ流体の非等方圧力の2次揺らぎが、重力波成分を生成することに注目し、先のBモード偏光の観測結果と比較を行う研究をまとめた。本年度は、まず、これまでに我々が提案してきた、初期磁場の生成が密度揺らぎの2次摂動から生成される、というシナリオを徹底的に検証した。宇宙全体は平均的には一様等方であり、局所的に現れる密度揺らぎも、宇宙初期には小さなものであったと考えられる。そこで、現在の近くになって、揺らぎが重力的に十分成長するまでは、揺らぎの1次までしか考ずに計算することが可能である。このことは揺らぎの成長の計算を容易なものとする。しかし、1次までの揺らぎでは、磁場を作り出すのに必要なベクトルモード(回転成分)が成長しないために、磁場を生み出すことができない。そこで2次の揺らぎの効果を取り入れる必要が出てくるのである。これまでは、我々を含めて、計算の困難さから、2次揺らぎの一部の項しか取り入れずに生成される磁場の評価を行ってきた。ここで、初めて、すべての項をきちんと入れて、2次揺らぎによる磁場の完全な評価を行うことができたのである。その結果、2次の項同士の間に一部打ち消し合う効果が生じており、これまで考えられていたよりも生成される磁場が小スケールでは小さくなることが明らかになった。

具体的に得られた磁場の強度は、銀河程度のスケールで、5 10^-24ガウスという値であった。次に、初期宇宙で位相欠陥が生成された場合について、それによって生み出されるベクトルモードからの磁場生成を詳細に検討した。まず、グローバル・テクスチャーと呼ばれる位相欠陥について、非線形σモデルを用いて解析を行い、磁場強度のスケール依存性を求めた。次に、コズミック・ストリングについても、同様な解析を進め、磁場強度のスケール依存性を求めた。ここでは、主に、ストリングが集まってネットワークを作る場合について検討を行った。その結果、これら位相欠陥が生み出す磁場が、現在観測されている磁場のシードとなり得ることがわかった。これまで段階を踏み、項ごとに取り扱うことで、手順を踏んで、また時間をかけて計算をすすめてきた2次摂動による磁場生成機構について、すべての2次揺らぎの項をきちんと取り入れた完全な取扱いに成功し、磁場強度のスケール依存性(パワースペクトル)を計算できたことは特筆に値する。またその結果は、さまざまな2次揺らぎの項の単純な足し合わせではなく、項同士の間のキャンセルが起きるなど、予想より複雑な挙動をしており、得られたスペクトルも事前の予想と異なったものであったことは、興味深い。この結果は、査読付き国際学術誌(Physical Review D)に掲載されている。また、初期宇宙の位相欠陥から生成される磁場についても、テクスチャーとコズミック・ストリング・ネットワークの場合について、きちんと評価して、パワースペクトルを得ることができた。こちらも、テクスチャーについては、査読付き国際学術誌に掲載されており、コズミック・ストリング・ネットワークは現在査読中である。さらに、最初期星形成に伴う宇宙再加熱の時期での磁場形成についても研究を進めたが、こちらは共同研究者がフランスにおり、テロの影響で共同研究を完全にまとめるところまで至らなかった。現在も継続して研究を進めているところである。平成28年度は、前年度パリで起きたテロによって共同研究を進めることが困難となっていた、最初期の星形成に伴う、宇宙再加熱の時期での磁場形成について、研究をまとめることに注力した。これは、名古屋2名、パリ南大学2名で行なってきた国際共同研究である。ここで考えるのは、初期宇宙に最初に形成された活動銀河核などから、紫外線が放射され、周囲の銀河間空間のガスをイオン化するという状況である。もし、この周囲のガスが非一様に分布していると、そこで電荷の分離が生じる。この分離によって、電場を作り、そこから磁場を生成する、というシナリオである。このシナリオ自身は、個別の天体に付随した磁場を生み出すに過ぎないが、標準宇宙論の構造形成理論に基づいて、活動銀河核の数密度の時間進化を理論的に評価することで、宇宙全体に生じる磁場の強度を見積もることが可能となる。その結果、最初期星形成の頃に、少なくとも、10^-18ガウスの磁場が作られることを確認した。この結果は、ガンマ線伝播から最近つけられた、銀河間空間の磁場の最低強度、10^-19ガウスと良い一致を示しており、興味深い。この結果は、現在、学術論文としてまとめ、査読付き学術誌に投稿中である。
演劇とドラマトゥルギー　テクスト、上演作品、劇場の見地から考察する新たな関係

2018年度、研究代表者は日本演劇学会紀要第66号(6月刊行)の特集「ドラマトゥルクとドラマトゥルギー」の責任編集を務め、投稿された論文4本の査読を担当するとともに、イントロダクションを執筆した。日本外務省・国際交流基金が中心となって「ジャポニスム2018響き合う魂」がフランスで開催されたのを機に、フランス語圏を代表する演劇専門誌Alternatives theatralesの特別号Scene contemporaine japonaise(9月刊行)の共同責任編集者をクリストフ・トリオーとともに務めた。「公共性」の概念に照らして現代日本演劇の特徴を論じる論文を執筆し、5編のアーティスト・インタビューの聞き手を務め、インタビュー内容を再構成するとともに、全原稿(論文・インタビュー)の査読・校閲にあたった。さらに近年の先進諸国における舞台芸術のための公的助成制度の近年の改革の傾向について論文にまとめ、専門誌『地域創造』に寄稿し、掲載された(12月刊行)。そのほかにも、特別研究期間を取得してパリに1年間滞在したことを生かして、フランス演劇の2018年を回顧するテクスト(2019年3月刊行)をITI(国際演劇協会)の国際演劇年鑑に、日本外務省・国際交流基金が中心となってフランスで開催された「ジャポニスム2018響き合う魂」の舞台芸術プログラムの成果を検証するテクスト(同3月刊行)をウェブジャーナル『をちこち(遠近)』に投稿し、掲載された。日本演劇学会が編集にあたる『西洋演劇論アンソロジー』(2019年6月刊行予定)にアドルフ・アッピア、ジャン・ヴィラール、ジャン・ジュネ、ロラン・バルト、ベルナール・ドルトについて解説を執筆し、バルトを除く著者の論考を日本語に翻訳した。2017年度は、シンガポールのセンター42およびエスプラナードで開催されたアジアン・ドラマトゥルク・ネットワークの設立記念シンポジウム(英語による発表2件)、オーストラリアのメルボルン大学で開催されたパフォーマンス・スタディーズ・インターナショナルの年次大会(英語による発表)、早稲田大学で開催された日仏国際演劇シンポジウム「越境する翻訳・翻案・異文化交流」(企画実行委員も務めた)、明治学院大学で開催されたシンポジウム「アングラ・小劇場演劇の課題」において、研究成果を口頭で発表した。出版された研究成果としては、雑誌『地域創造』、鈴木理映子(編)『現代演劇のレッスン拡がる場、越える表現』、日仏国際演劇シンポジウム成果報告集(上記の口頭発表をもとに論文にまとめたもの)に論文・論考を発表した。ITI(国際演劇センター)が発行する『国際演劇年鑑』に掲載された論考「フランス演劇の2016年<テロ以後>の舞台芸術の行方」にはフランス研究出張の成果が生かされている。また、ワジディ・ムワワド作『岸リトラル』の上演のために戯曲を翻訳した。現代演劇のテクストのドラマトゥルギーの変容を特徴づける「フィギュール」概念について論文を執筆中であるほか、2018年3月に刊行予定の日本演劇学会紀要のドラマトゥルギー特集号の責任編集を務めることとなり、その準備を進めている。そのほか、フランス、ベルギーから4名の演劇実践者(ホームレスをめぐる現代ドキュメンタリー演劇を演出するドミニク・フェレ、現代サーカスの演出家ジョアン・スワルトヴァゲール、戯曲/テクストを必ず取り上げつつも、演出家をおかないことで知られる俳優集団tg STANのフランク・ヴェルクルイセンとヨレンテ・ドゥ・ケースマイケル)を講師に迎えて、舞台芸術の実践の見地からドラマトゥルギーを再考する公開研究会を3回にわたって開催した。本研究計画に関連して、4つの国際研究集会(うち2つは国外)で成果を発表し、複数の論文・論考を出版するなど、順調に成果を上げていると判断される。だが、いささか学会発表の数が多すぎて、論文の執筆に時間を確保することが難しかったことが反省点である。2017年度は、6月にドイツ・ハンブルクで開かれたパフォーマンス・スタディーズ・インターナショナルの年次大会(英語による発表)、2018年3月にストラスブール大学で開かれた国際シンポジウム(フランス語による発表)において研究成果を口頭で発表した。出版された研究成果としては、ピーター・エカソル、エドワード・シアと共同で編集したThe Dumb Type Readerが刊行され(論文も所収)、『早稲田大学文学研究科紀要』63号に論文「演劇と公共性フランスと日本の比較を通じて」を発表した。ITI(国際演劇センター)が発行する『国際演劇年鑑』に掲載された論考「フランス演劇の2017年安定への兆しのなかで」にはフランス研究出張の成果が生かされている。現在、進行中のものとしてはピーター・エカソルとヘレナ・グレアンが共同で編集する著書に論文(英語)を投稿し、掲載が認められた(2018年秋刊行予定)。日本演劇学会紀要(2018年6月刊行予定)の特集「ドラマトゥルク/ドラマトゥルギー」の責任編集を務め、4本の論文を査読し、執筆者に助言を与え、巻頭辞(解説)を執筆した。同じ日本演劇学会が2019年5月に刊行する予定の『西洋演劇論アンソロジー』(仮)のためのテクストの翻訳、解説の執筆も進めている。フランス語圏を代表する演劇研究誌Alternatives Theatrales特別号(2018年9月刊行予定)において、現代日本演劇のドラマトゥルギーを特集することになり、共同責任編集者を務めるクリストフ・トリオーを2018年2月に日本に招聘し、打ち合わせを行い、編集の準備を進めるとともに同時に特集号に掲載される予定の論文の執筆に取り組んだ。

そのほか2017年11月8日にピーター・エカソルとヘレナ・グレアン、2018年1月10日に高桑和巳を講師に迎え、2回の公開研究会を開催した。2017年度には1冊の共編著書(英語)、2本の論文(英語、日本語)が出版され、国際シンポジウムで英語およびフランス語で計2回の発表を行い、学術誌(日本語)の特集責任編集を準備し、演劇研究誌(フランス語)の責任編集と論文(フランス語)の執筆を準備するなど、忙しい中でも高水準の生産性を維持できたものと判断している。2018年度、研究代表者は日本演劇学会紀要第66号(6月刊行)の特集「ドラマトゥルクとドラマトゥルギー」の責任編集を務め、投稿された論文4本の査読を担当するとともに、イントロダクションを執筆した。日本外務省・国際交流基金が中心となって「ジャポニスム2018響き合う魂」がフランスで開催されたのを機に、フランス語圏を代表する演劇専門誌Alternatives theatralesの特別号Scene contemporaine japonaise(9月刊行)の共同責任編集者をクリストフ・トリオーとともに務めた。「公共性」の概念に照らして現代日本演劇の特徴を論じる論文を執筆し、5編のアーティスト・インタビューの聞き手を務め、インタビュー内容を再構成するとともに、全原稿(論文・インタビュー)の査読・校閲にあたった。さらに近年の先進諸国における舞台芸術のための公的助成制度の近年の改革の傾向について論文にまとめ、専門誌『地域創造』に寄稿し、掲載された(12月刊行)。そのほかにも、特別研究期間を取得してパリに1年間滞在したことを生かして、フランス演劇の2018年を回顧するテクスト(2019年3月刊行)をITI(国際演劇協会)の国際演劇年鑑に、日本外務省・国際交流基金が中心となってフランスで開催された「ジャポニスム2018響き合う魂」の舞台芸術プログラムの成果を検証するテクスト(同3月刊行)をウェブジャーナル『をちこち(遠近)』に投稿し、掲載された。日本演劇学会が編集にあたる『西洋演劇論アンソロジー』(2019年6月刊行予定)にアドルフ・アッピア、ジャン・ヴィラール、ジャン・ジュネ、ロラン・バルト、ベルナール・ドルトについて解説を執筆し、バルトを除く著者の論考を日本語に翻訳した。2016年度には学会発表を引き受けすぎてしまったため、2017年度は学会参加・口頭発表の数を抑えて、論文の執筆により力を入れて取り組みたい。2018年度は特別研究期間を取得してフランスに滞在する予定であり、これまでになく研究に時間を割くことができる見込みである。事前に充分な準備をして過ごしたい。tg STANの俳優を講師に招いた研究会開催のための費用が不足しそうになったため、前倒し支払い請求を行ったが、実際の不足額が請求額を下回ったため、余剰が生じたものである。上記の理由のために、2017年度の配分額は実際には当初よりも減少しているため、問題なく費消予定である。