hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
キスゲ属における夜咲き種の花の進化-その遺伝的基礎の解明と初期過程の野外実験

キスゲ属のハマカンゾウは昼咲き種で、赤色を帯びたオレンジ色の花冠を持ち、昼行性のアゲハ類によって送粉される。一方、近縁種のキスゲは夜咲き種で、薄いレモン色の花冠と甘い香りを持ち、夜行性のスズメガ類によって送粉される。本研究は、送粉昆虫に適応した-連の花形質群の進化機構を解明することを目的とし、特に、平成21年度は親種・F1・F2雑種を用い、特に2種間で違いが顕著な形質である開花時間と花色の遺伝的構造について調べ、主要な遺伝子座の変化による適応的進化を示唆する研究をまとめた。F2の開花時刻は朝と夕方に集中し、二峰型分布を示した。朝と夕方の比率は1:1からずれてはいなかった。閉花時刻については、夕方と朝の比率は3:1からずれてはいなかった。開花時刻が主要には1個の遺伝子によって制御されていることが示唆された。一方、閉花は、開花時刻を制御する主要遺伝子とは別の主要遺伝子によって制御されていると考えられる。以上の成果は、日本時間生物学会誌とAmerican Journal of Botany誌に掲載され、国際的にも高く評価されている。キスゲの花弁にはアントシアニンは無かった。F2では、アントシアニン色素量の変異があり、無:微量:淡赤:濃赤=61:33:20:10であった。よって、少なくとも2遺伝子座支配による可能性が考えられた。カロテノイド色素についてはF1は中間色であった。F2では、オレンジ色・中間色・レモン色に分離し、中間色が多かった。よって、主要な遺伝子座の関与が示唆され、ヘテロ接合で中間色になったと考えられる。また、アントシアニン色素とカロテノイド色素の合成系の酵素遺伝子について、RT-PCRで花弁における発現を比較したところ、キスゲではいくつかの酵素遺伝子の発現量が減少していた。以上の成果は、第73回日本植物学会・第41回種生物シンポジウム・第57回日本生態学会にて発表し、第57回日本生態学会ではポスター賞を受賞した。近縁な2種、キスゲ属の夜咲き種キスゲと昼咲き種ハマカンゾウは、花の寿命がたったの半日であり、キスゲは、スズメガ媒花であり、黄色い花冠、匂いあり、長い花筒という特徴である。ハマカンゾウは、チョウやハナバチ媒花であり、赤色を帯びた花冠、匂いなしという特徴がある。対照的な花形質群をもつが、2種の雑種は高い稔性を示し、人工的に雑種作成が可能であるため、花形質の遺伝的基礎を明らかにするのに適した材料である。本研究は、送粉昆虫に適応した一連の花形質群の進化機構を解明することを目的とし、今年度は、夜咲き種の花形質群が、どのような遺伝的構造によって生じたか?を明らかにするために、雑種F2世代における花形質(開花時間・花色・花香)の解析を中心に以下の研究成果が得られた。開花時間については、雑種F2では開花開始時刻は、朝と夕方の顕著な二峰型分布を示し、開花開始時刻が量的遺伝子だけでなく、主要遺伝子によって制御されていることが示唆された。花色については、HPLC(高速液体クロマトグラフィ)を用いて、物質の特定をし、ハマカンゾウ花弁に含まれるアントシアニン色素はデルフィニジンであり、キスゲ花弁には含まれないことが明らかになった。そして、分光光度計を使用して雑種F2世代におけるアントシアニン色素量の定量を行っている。花香については、花香サンプルを収集し、GCMS(ガスクロマトグラフ質量分析計)を用いて、親種における物質の組成の違いと雑種世代における分離について解析中である。そして、花のつぼみ組織由来ESTの情報をもとにプライマー設計を行い、花色・花香に関連する配列に親種間で多型がないか解析し、マーカー開発を行っている。本研究は、送粉昆虫に適応した一連の花形質群の進化機構を解明することを目的とし、[1]夜咲き種の花形質群(開花時間・花色・花香)が、どのような遺伝的構造によって生じたか?[2]進化の初期状態を野外で実験的に再現し、送粉昆虫の選好性と花形質への自然選択、について明らかにする。平成20年度は花色の物質レベルでの解析を進め、分光光度計を使用して雑種F2世代におけるアントシアニン色素量の分離を調べ、主要遺伝子の関与が示唆された。これらの遺伝子を特定するために、キスゲ・ハマカンゾウ・F2の花弁組織からRNAを抽出し、アントシアニ色素に関する遺伝子について、半定量的RT-PCRで発現を調べた。花香については、花香サンプルを収集し、GCMS(ガスクロマトグラフ質量分析計)を用いて、親種における物質の組成の違いを調べたところ、リナロールがキスゲで特異的な成分であることが明らかになった。夜咲き種の花色・花香が、主要な遺伝子の変化によって生じた可能性が示唆された。今後、進化の初期状態を野外で実験的に再現し、花色・花香の遺伝子について解析し、送粉昆虫の選好性と花形質への自然選択を解明する。

キスゲ属のハマカンゾウは昼咲き種で、赤色を帯びたオレンジ色の花冠を持ち、昼行性のアゲハ類によって送粉される。一方、近縁種のキスゲは夜咲き種で、薄いレモン色の花冠と甘い香りを持ち、夜行性のスズメガ類によって送粉される。本研究は、送粉昆虫に適応した-連の花形質群の進化機構を解明することを目的とし、特に、平成21年度は親種・F1・F2雑種を用い、特に2種間で違いが顕著な形質である開花時間と花色の遺伝的構造について調べ、主要な遺伝子座の変化による適応的進化を示唆する研究をまとめた。F2の開花時刻は朝と夕方に集中し、二峰型分布を示した。朝と夕方の比率は1:1からずれてはいなかった。閉花時刻については、夕方と朝の比率は3:1からずれてはいなかった。開花時刻が主要には1個の遺伝子によって制御されていることが示唆された。一方、閉花は、開花時刻を制御する主要遺伝子とは別の主要遺伝子によって制御されていると考えられる。以上の成果は、日本時間生物学会誌とAmerican Journal of Botany誌に掲載され、国際的にも高く評価されている。キスゲの花弁にはアントシアニンは無かった。F2では、アントシアニン色素量の変異があり、無:微量:淡赤:濃赤=61:33:20:10であった。よって、少なくとも2遺伝子座支配による可能性が考えられた。カロテノイド色素についてはF1は中間色であった。F2では、オレンジ色・中間色・レモン色に分離し、中間色が多かった。よって、主要な遺伝子座の関与が示唆され、ヘテロ接合で中間色になったと考えられる。また、アントシアニン色素とカロテノイド色素の合成系の酵素遺伝子について、RT-PCRで花弁における発現を比較したところ、キスゲではいくつかの酵素遺伝子の発現量が減少していた。以上の成果は、第73回日本植物学会・第41回種生物シンポジウム・第57回日本生態学会にて発表し、第57回日本生態学会ではポスター賞を受賞した。
脳卒中片麻痺者・高齢者の嚥下動作支援用機能的電気刺激システムの基礎的研究開発

研究協力者は,川崎医科大学,椿原彰夫教授,清水五弥子医師,大学院生(黒川直也(修士),山本直輔(博士課程,九州工大))などである.本年度では,以下の検討を行った.第一に表面電極型刺激による上喉頭神経内枝の刺激については,下顎部筋刺激部位の再検討を進め,ワイヤー電極刺激などで遠心性反応として輪状甲状筋により筋電位を確認した.一方,更に刺激反応の安定化を図るために,甲状軟骨側頭部における挟み込み機能を持たせた表面電極型干渉波刺激の検討を進め,干渉波刺激には1つの刺激部位に2チャンネル同時刺激が必要となり,刺激装置の改良法についても検討した.第二に,顎二腹筋の前・後腹の解剖学的検討を行い,中間腱がNetterの解剖書にあるように,繊維性滑車機能の有無を調べた.岡山大学解剖学教室の協力により授業に利用した死体4体で確認したが,中間腱は舌骨に付着している事を確認した,日本の比較的古い解剖関連文献でも同様の結果であった.しかしながら当該部,特に前腹はは異型が多い様であるので刺激に当たっては確認が必要である第三に,顎下/舌骨周囲部刺激電極固定用簡易装具の試作については,頸部喉頭部からスプリング材を利用した方式などを試すと共に,形状記憶合金などの応用可能性を検討した.顎二腹筋後腹の刺激では一定の押圧力が重要となるので適正な押圧力について調べた.押下力調整機能を持たせる必要があるかどうかを,被験者数を増やすなど今後の検討課題である.第一に,顎二腹筋の電気刺激による舌骨・喉頭部挙上について,解剖学的な視点から前・後腹の機能は分離して考える事が可能である事を示し,当該筋の異型に対応するために導入時に機能を確認するものとした.後腹部の刺激による舌骨・喉頭部挙上運動の実用的な獲得は,我々が最初である.第二に,上喉頭神経内枝の感覚神経刺激について,表面電極による刺激が可能である事を示し,前記の顎二腹筋とのタイミングを調整した共同刺激が可能である事を示した.第三に,顎下/舌骨周囲部刺激電極固定用簡易装具の製作では,顎二腹筋後腹刺激時の押下力が刺激出力安定化に有用である事を示し,頸部に取り付ける装具の基本的設計を行った.第四に,刺激装置の一部改造を進め,刺激装置の実用化に向けた可能性を示した.今後のH2526年度の研究概要は以下の通りである.第1には,安定な顎二腹筋刺激の実用化を積極的に進めるために,出力の安定化を図る装具による検討を更に進める.スプリング材の他,プラスティック,形状記憶合金など幾つかの材料を利用して試作を進める.人における実験では,健常青年の他,川崎医科大学の大学院生などの協力を得て,臨床介入実験を進める.第2には,上喉頭神経内枝の刺激手法の検討を行い,上記の顎二腹筋を合わせて刺激を行える様にする.干渉波刺激が必要となる場合には刺激装置の改造を,他の研究費を獲得する事も含めて,積極的に進める方策を検討する.第3に,上喉頭神経内枝の感覚神経刺激と,顎二腹筋刺激運動神経刺激を同時に行う方法について臨床試用を進め,誤嚥防止の効果について評価を行う.第4に,臨床試用結果をふまえて,日常の嚥下動作を支援する事の可否を調べていく.我々が今まで実施してきた動作筋電位などを活用する事を基本とするが,脳波などを活用したセンシング技術についても有効性を確認する.第1に顎二腹筋,上喉頭神経内枝の電気刺激を実施するための装具の試作改良費に30万円程度を利用.第二には臨床介入研究のための謝金に10万円程度,その他などに利用研究協力者は,川崎医科大学,椿原彰夫教授,清水五弥子医師,大学院生(黒川直也(修士),山本直輔(博士課程,九州工大))などである.本年度では,以下の検討を行った.第一に表面電極型刺激による上喉頭神経内枝の刺激については,下顎部筋刺激部位の再検討を進め,ワイヤー電極刺激などで遠心性反応として輪状甲状筋により筋電位を確認した.一方,更に刺激反応の安定化を図るために,甲状軟骨側頭部における挟み込み機能を持たせた表面電極型干渉波刺激の検討を進め,干渉波刺激には1つの刺激部位に2チャンネル同時刺激が必要となり,刺激装置の改良法についても検討した.第二に,顎二腹筋の前・後腹の解剖学的検討を行い,中間腱がNetterの解剖書にあるように,繊維性滑車機能の有無を調べた.岡山大学解剖学教室の協力により授業に利用した死体4体で確認したが,中間腱は舌骨に付着している事を確認した,日本の比較的古い解剖関連文献でも同様の結果であった.しかしながら当該部,特に前腹はは異型が多い様であるので刺激に当たっては確認が必要である第三に,顎下/舌骨周囲部刺激電極固定用簡易装具の試作については,頸部喉頭部からスプリング材を利用した方式などを試すと共に,形状記憶合金などの応用可能性を検討した.顎二腹筋後腹の刺激では一定の押圧力が重要となるので適正な押圧力について調べた.押下力調整機能を持たせる必要があるかどうかを,被験者数を増やすなど今後の検討課題である.

第一に,顎二腹筋の電気刺激による舌骨・喉頭部挙上について,解剖学的な視点から前・後腹の機能は分離して考える事が可能である事を示し,当該筋の異型に対応するために導入時に機能を確認するものとした.後腹部の刺激による舌骨・喉頭部挙上運動の実用的な獲得は,我々が最初である.第二に,上喉頭神経内枝の感覚神経刺激について,表面電極による刺激が可能である事を示し,前記の顎二腹筋とのタイミングを調整した共同刺激が可能である事を示した.第三に,顎下/舌骨周囲部刺激電極固定用簡易装具の製作では,顎二腹筋後腹刺激時の押下力が刺激出力安定化に有用である事を示し,頸部に取り付ける装具の基本的設計を行った.第四に,刺激装置の一部改造を進め,刺激装置の実用化に向けた可能性を示した.今後のH2526年度の研究概要は以下の通りである.第1には,安定な顎二腹筋刺激の実用化を積極的に進めるために,出力の安定化を図る装具による検討を更に進める.スプリング材の他,プラスティック,形状記憶合金など幾つかの材料を利用して試作を進める.人における実験では,健常青年の他,川崎医科大学の大学院生などの協力を得て,臨床介入実験を進める.第2には,上喉頭神経内枝の刺激手法の検討を行い,上記の顎二腹筋を合わせて刺激を行える様にする.干渉波刺激が必要となる場合には刺激装置の改造を,他の研究費を獲得する事も含めて,積極的に進める方策を検討する.第3に,上喉頭神経内枝の感覚神経刺激と,顎二腹筋刺激運動神経刺激を同時に行う方法について臨床試用を進め,誤嚥防止の効果について評価を行う.第4に,臨床試用結果をふまえて,日常の嚥下動作を支援する事の可否を調べていく.我々が今まで実施してきた動作筋電位などを活用する事を基本とするが,脳波などを活用したセンシング技術についても有効性を確認する.第1に顎二腹筋,上喉頭神経内枝の電気刺激を実施するための装具の試作改良費に30万円程度を利用.第二には臨床介入研究のための謝金に10万円程度,その他などに利用
交差反応性イディオタイプ陽性T細胞抗原リセプタ-の分子免疫学的研究

フレンドウイルス誘発腫瘍FBLー3に対する同系B6マウスのCTL反応系では、抗TCR交差反応性イディオタイプモノクロ-ナル抗体N9ー127と反応性を有するCTLが高頻度に出現する。この抗体で認識されるイディオタイプ(127Id)陽性TCRは全てVα1Jα112ー2/Vβ10Dβ2.1Jβ2.7から成るα鎖β鎖から構成されていた。しかしV(D)J結合部領域の塩基配列は個々のクロ-ンで異なっていたものの、推定されるアミノ酸配列はよく保存されており、127Id陽性CTLクロ-ンはVβ鎖のN末より99番目のアミノ酸がグリシンかアスパラギン酸である2群に分類されることが判明した。前者に属するクロ-ンは後者に比較しより低能度(約1/25)のN9ー127抗体でその細胞障害活性が阻止された。127Id陽性CTLクロ-ンのTCRVα鎖、Vβ鎖に体細胞突然変異がみられるか否かを、生殖細胞型Vα1、Vβ10を分離し比較した結果、解析した8クロ-ンに使用されているVβ10は生殖細胞型とまったく同一の塩基配列を示した。一方Vα1については、2クロ-ンでリ-ダ部位、CDR1ー3に相当する領域に塩基の置換が存在し、体細胞突然変異の存在する事が示唆された。127Idを発現するCTLが生体内で実際にFBLー3腫瘍の拒絶に作用しているであろうことを、腫瘍塊浸潤リンパ球には127Id陽性CTLのα鎖、β鎖と同一のあるいは類似したTCR遺伝子が使用されている事をPCR法を用いて明らかにした。この127Id陽性集団の他にも特定のTCRα鎖、β鎖から構成され、個体レベルでみた場合クロ-ナルに増殖し高頻度に発現するCTL集団があり、FBLー3に特異的なこのようなCTLがどのような腫瘍抗原を認識しているかについて解析中である。1.交差反応性イディオタイプ(CRI)陽性TCRに於けるsomatic hypermutationの存否:CRI陽性CTLクロ-ン(8クロ-ン)からα、β鎖遺伝子を採取し、その塩基配列を生殖細胞型と比較した。その結果、2クロ-ン由来のα鎖ではCDR(IーIII)にsomatic hypermutationの存在する事が示された。2.CRI陽性CTLクロ-ンに由来するTCR遺伝子の結合部領域は、α、β鎖とも塩基配列は各クロ-ンに固有であり多様性を示すが、推定されるアミノ酸配列はα鎖では同一、β鎖のみN末から99番目がグリシンかアスパラギン酸のいずれかであり、2種類に限定された。3.腫瘍細胞FBLー3に対するMLTC細胞につきJβ断片をプロ-ブとしてサザ-ン解析をした結果、明確な再配列バンドを示すものが存在した。樹立したCTLクロ-ンの大部分がMLTCで見られたと共通の再配列バンドを示す例が存在したので、このTCR遺伝子を解析した結果、これらのCTLクロ-ンは全てVα11Jα2B4/Vβ14Dβ2.1Jβ2.1であった。結合部領域の塩基配列を解析することにより、これらのクロ-ンが単一の祖先由来であるか否かを現在解析している。4.CRI陽性CTLクロ-ンに由来するTCRα、β鎖の各々を組み込んだプラスミドを作製した。遺伝子を発現させ、抗CRI抗体との反応性に就き現在解析中である。フレンドウイルス誘発腫瘍FBLー3に対する同系B6

マウスのCTL反応系では、抗TCR交差反応性イディオタイプモノクロ-ナル抗体N9ー127と反応性を有するCTLが高頻度に出現する。この抗体で認識されるイディオタイプ(127Id)陽性TCRは全てVα1Jα112ー2/Vβ10Dβ2.1Jβ2.7から成るα鎖β鎖から構成されていた。しかしV(D)J結合部領域の塩基配列は個々のクロ-ンで異なっていたものの、推定されるアミノ酸配列はよく保存されており、127Id陽性CTLクロ-ンはVβ鎖のN末より99番目のアミノ酸がグリシンがアスパラギン酸である2群に分類されることが判明した。前者に属するクロ-ンは後者に比較しより低能度(約1/25)のN9ー127抗体でその細胞障害活性が阻止された。127Id陽性CTLクロ-ンのTCRVα鎖、Vβ鎖に体細胞突然変異がみられるか否かを、生殖細胞型Vα1、Vβ10を分離し比較した結果、解析した8クロ-ンに使用されているVβ10は生殖細胞型とまったく同一の塩基配列を示した。一方Vα1については、2クロ-ンでリ-ダ-部位、CDR1ー3に相当する領域に塩基の置換が存在し、体細胞突然変異の存在する事が示唆された。127Idを発現するCTLが生体内で実際にFBLー3腫瘍の距絶に作用しているであろうことを、腫瘍塊浸潤リンパ球には127Id陽性CTLのα鎖、β鎖と同一のあるいは類似したTCR遺伝子が使用されている事をPCR法を用いて明らかにした。この127Id陽性集団の他にも特定のTCRα鎖、β鎖から構成され、個体レベルでみた場合クロ-ナルに増殖し高頻度に発現するCTL集団があり、FBLー3に特異的なこのようなCTLがどのような腫瘍抗原を認識しているかについて解析中である。
高速多重衝突噴流の圧縮燃焼原理に基づく多用途・高効率エンジンの原理研究

今年度は,多重衝突パルス噴流圧縮原理の根幹である「非燃焼状態における中心点圧力の上昇度」について,実験と数値解析の両方について定量的に評価した.実験では,衝撃波管内にエンジンを設置し,その噴流群衝突位置付近の圧力(中心点圧力)を測定した.エンジンへの流入全圧,および,衝撃波管高圧室初期圧力に対する中心圧力の上昇度を評価したところ,圧力がかなり上昇すること確認した.これは,本圧縮原理の有効性を裏付ける重要な証拠となる.数値解析では,大阪大学のスーパーコンピュータを借用し,実験で用いた圧縮装置と同形状での噴流群の衝突圧力値を,三次元計算により求めた.センサの測定特性などを考慮したうえで,上記2つの方法で求めた衝突点付近の圧力上昇度を比較したところ,ある程度の一致を確認した.更に,衝突する噴流の本数や直径を増やして得られる温度・圧力も数値計算によって求めた.これによって定量化した多重噴流の衝突点付近の圧力上昇度を,米国航空宇宙学会の会議で発表した.さらに,ロケットエンジンへの適用を想定した燃焼実験も行った.安全装置を複数個所に追加したフェイルセーフな燃焼実験系において,始動時・短時間燃料噴射条件での推力を繰り返し測定できた.実測推力は,従来型の小型のロケットエンジンに比べるとかなり大きな値を示唆している.それを換算した比推力は従来の大型ロケットエンジンと同等レベルの可能性も見出した.また,燃焼室壁面での圧力が燃焼によって上がっている時間帯に壁面温度が上がっておらず,多重衝突パルス噴流による大幅な断熱効果も確認できた.なお,数値解析方法の研究もおこなってきており,亜音速・超音速流の解析を高精度化する独自の方法論(密度に対する非線形な補正法)を確立し,世界的に著名な国際会議で発表した.本年度は,3つのカテゴリーの重要研究課題について,期待以上の研究成果を出し,大きな進展を得ることができた.1つめは,多重衝突パルス噴流圧縮原理の根幹である「非燃焼状態における中心点圧力の上昇度」についての実験と数値解析の両者を行い,「超高圧縮,かつ,低騒音」が可能であるという直接的な証拠を得たことである.また,噴流群の衝突後のシュリーレン法での可視化も実験と計算で一致し,共著者として査読有学術論文1編をPublishした.2つめは,始動時・短時間燃料噴射の燃焼実験を行い,「ほぼ完全な断熱,かつ,大きな推力値」を繰り返して得て,1つめの成果を更に後押しする結果だと判断できたことである.これらの成果には,今まで連携がなかった自動車やロケットに関係する複数の企業・組織が新たに関心を示し,共同研究開発段階に入ったところである.3つめは,広範囲の条件において高精度な数値解析を可能にする理論・方法を研究代表者が独自に提案し,その有効性を丁寧に検証した点である.2018年度には,以上の3つの課題に対して主著者として国際会議での発表を複数行った.また,共著者として査読有学術論文も複数Publishすることができた.理論,数値解析,実験の3軸から成果を出すことができた点も評価に値する.今後は,多重衝突パルス噴流圧縮燃焼原理による熱効率向上の肝となる,燃焼時の中央一点自己着火と気体断熱効果を,実験と数値解析の両方について定量的に評価する.実験では,ガソリン燃料を用いたプロトタイプ機の燃焼実験において,燃焼室中央で衝突圧縮していることを確認する.また,燃焼室壁面での温度測定で熱流束を算出することで断熱効果の定量的評価を行い,排気温度,壁面圧力と推力の測定も実施する.さらに,推力実測値をもとに,他の小型ロケットエンジンとの比較を行い,大型ロケットエンジンと同条件において比推力の比較検討も行う.数値解析では,大阪大学のスーパーコンピュータを借用し,高精度化した燃焼計算を含む解析モデルをプロトタイプ機形状で計算し,中央一点自己着火,燃焼後の高温ガスが壁面に届かない断熱効果,および推力・効率を確認する.C-CUP法ベースのLarge Eddy Simulationモデルを用いて,格子点数5000万点程度で行う.また,燃焼効率と比推力を高める燃料噴射方式も検討する.また,今年度行った非燃焼状態での衝突点付近の圧力上昇度の定量化についても,これまで学内の実験設備では安全上の観点から3気圧程度にしか上げられなかった上流圧を,国立研究所で借用する実験設備において10気圧程度にすることで,より実用化に近い条件での圧力上昇度を測定する実施計画がほぼ完成し,そのための装置の制作段階に入った.なお,燃焼実験についても,国立大学と共同で,より実用化に近い条件(上流圧および酸素濃度の上昇,水素酸素燃料系の使用)で行うことを検討しており,その準備も進める.今年度行った非燃焼での研究と今後の燃焼研究結果を総合的に整理することで,物理的因子群のエンジン性能への影響を考察し,メカニズム全体の把握を試みる.今年度は,多重衝突パルス噴流圧縮原理の根幹である「非燃焼状態における中心点圧力の上昇度」について,実験と数値解析の両方について定量的に評価した.実験では,衝撃波管内にエンジンを設置し,その噴流群衝突位置付近の圧力(中心点圧力)を測定した.エンジンへの流入全圧,および,衝撃波管高圧室初期圧力に対する中心圧力の上昇度を評価したところ,圧力がかなり上昇すること確認した.

これは,本圧縮原理の有効性を裏付ける重要な証拠となる.数値解析では,大阪大学のスーパーコンピュータを借用し,実験で用いた圧縮装置と同形状での噴流群の衝突圧力値を,三次元計算により求めた.センサの測定特性などを考慮したうえで,上記2つの方法で求めた衝突点付近の圧力上昇度を比較したところ,ある程度の一致を確認した.更に,衝突する噴流の本数や直径を増やして得られる温度・圧力も数値計算によって求めた.これによって定量化した多重噴流の衝突点付近の圧力上昇度を,米国航空宇宙学会の会議で発表した.さらに,ロケットエンジンへの適用を想定した燃焼実験も行った.安全装置を複数個所に追加したフェイルセーフな燃焼実験系において,始動時・短時間燃料噴射条件での推力を繰り返し測定できた.実測推力は,従来型の小型のロケットエンジンに比べるとかなり大きな値を示唆している.それを換算した比推力は従来の大型ロケットエンジンと同等レベルの可能性も見出した.また,燃焼室壁面での圧力が燃焼によって上がっている時間帯に壁面温度が上がっておらず,多重衝突パルス噴流による大幅な断熱効果も確認できた.なお,数値解析方法の研究もおこなってきており,亜音速・超音速流の解析を高精度化する独自の方法論(密度に対する非線形な補正法)を確立し,世界的に著名な国際会議で発表した.本年度は,3つのカテゴリーの重要研究課題について,期待以上の研究成果を出し,大きな進展を得ることができた.1つめは,多重衝突パルス噴流圧縮原理の根幹である「非燃焼状態における中心点圧力の上昇度」についての実験と数値解析の両者を行い,「超高圧縮,かつ,低騒音」が可能であるという直接的な証拠を得たことである.また,噴流群の衝突後のシュリーレン法での可視化も実験と計算で一致し,共著者として査読有学術論文1編をPublishした.2つめは,始動時・短時間燃料噴射の燃焼実験を行い,「ほぼ完全な断熱,かつ,大きな推力値」を繰り返して得て,1つめの成果を更に後押しする結果だと判断できたことである.これらの成果には,今まで連携がなかった自動車やロケットに関係する複数の企業・組織が新たに関心を示し,共同研究開発段階に入ったところである.3つめは,広範囲の条件において高精度な数値解析を可能にする理論・方法を研究代表者が独自に提案し,その有効性を丁寧に検証した点である.2018年度には,以上の3つの課題に対して主著者として国際会議での発表を複数行った.また,共著者として査読有学術論文も複数Publishすることができた.理論,数値解析,実験の3軸から成果を出すことができた点も評価に値する.今後は,多重衝突パルス噴流圧縮燃焼原理による熱効率向上の肝となる,燃焼時の中央一点自己着火と気体断熱効果を,実験と数値解析の両方について定量的に評価する.実験では,ガソリン燃料を用いたプロトタイプ機の燃焼実験において,燃焼室中央で衝突圧縮していることを確認する.また,燃焼室壁面での温度測定で熱流束を算出することで断熱効果の定量的評価を行い,排気温度,壁面圧力と推力の測定も実施する.さらに,推力実測値をもとに,他の小型ロケットエンジンとの比較を行い,大型ロケットエンジンと同条件において比推力の比較検討も行う.数値解析では,大阪大学のスーパーコンピュータを借用し,高精度化した燃焼計算を含む解析モデルをプロトタイプ機形状で計算し,中央一点自己着火,燃焼後の高温ガスが壁面に届かない断熱効果,および推力・効率を確認する.
哺乳動物細胞の人為的リプログラミング誘導に関する研究

本研究は、卵細胞質から調整した無細胞抽出系を用いて、哺乳動物体細胞のリプログラミング誘導と細胞分化制御系の開発を目的とした。本年度は、(1)抽出液処理によってリプログラミングを誘導した細胞の、体細胞核移植におけるドナー細胞としての有用性の検討と(2)ブタ卵を用いた無細胞抽出系の開発と幹細胞の作出、に重点をおいて実験を行う計画を立てた。アフリカツメガエル卵抽出液で処理した細胞を核移植のドナー細胞として用いたところ、顕著な発生能の向上は認められなかったため、(2)の研究を中心に行った。昨年度に開発したブタ卵抽出系は、哺乳類で初めての機能的な卵抽出系であり、この実験系のさらなる発展は意義深い。昨年度までの研究において、ブタ卵抽出液で処理した細胞は部分的に脱分化するのだが、長期間の培養には失敗していた。この細胞を人工多能性細胞(iPS細胞)作出に用いられる細胞培養条件下におくことによって、長期培養に成功した。現在この脱分化細胞の株化を行っている。また、ブタ卵抽出系を卵内リプログラミング因子の同定のために応用した。卵抽出液処理前後で体細胞核内へと取り込まれるタンパク質をプロテオーム解析により20個以上同定した。このうち、1つのタンパク質に注目し、リプログラミングにおける役割を調べた。卵細胞質におけるこのタンパク質の機能を阻害した結果、核移植胚特異的な発生能の低下がみられ、同定タンパク質が卵内に存在するリプログラミング因子である可能性が示唆された。哺乳類卵内でリプログラミングに係る因子はほとんど同定されていない現状からも、本研究の重要性が考えられる。当初アフリカツメガエル(Xenopus)卵抽出系を用いて、ブタ体細胞にリプログラミング誘導を試みた。その結果、ブタ体細胞核が卵型の修飾を受けることがわかり、未分化マーカー遺伝子を発現するよう変化した。これらの反応は、Streptolysin 0という細胞膜に穴をあける試薬を用いて、体細胞核が抽出液中の成分と接しやすい環境を作り上げることによって、初めて観察される。しかしこの試薬は再現性に問題を抱えているため、Digitoninという界面活性剤を用いて、同様の効果が観察されるかを試した。その結果、Digitonin処理によっても可逆的な細胞膜透過が誘導でき、同様のリプログラミング現象の再現に成功した。これは、抽出液中での体細胞へのリプログラミング誘導の系を確立する上で、新たな手法として使用されることが期待される。このようにXenopus卵子無細胞抽出系を、哺乳類体細胞のリプログラミング誘導に応用し、成果をあげてきた。しかし、Xenopusと哺乳類は異種であり、同種の卵子でのみ正常なリプログラミングが誘導されることから考えても、この系では正確にリプログラミングを評価できない可能性がある。そこで、哺乳類卵子を用いて無細胞抽出系の構築を図った。哺乳類卵子由来の無細胞抽出系は、卵子サイズの小ささ等から困難とされてきた。しかし、多くのブタ卵巣から卵子を採取し(GV期卵)、体外培養によってMII期卵まで成熟させた。このGV期、MII期卵からえた抽出液中で体細胞を培養することによって、核移植後に体細胞に起こる現象を再現した。さらに、この細胞を培養に用いたところ、未分化マーカー遺伝子を安定に高発現するようになり、コロニー形成も観察された。以上のように、機能的な卵抽出系の作製に哺乳類で初めて成功した。
Helicobacter heilmanniiの壁細胞、胃粘膜幹細胞に対する作用:酸分泌抑制剤および胃ガン形成との関連

研究代表者らは、赤毛猿より分離されたHhをC3Hマウスに持続感染させることにより、Helicobacter heilmannii (Hh)の菌体は、Mongolian gerbilに感染したHpと比べて、粘膜表層に加えて粘膜深部、特に分化帯の位置する腺頸部および胃底腺腺腔内および壁細胞の細胞内小管に存在し、酸分泌が低下することを明らかにした。この所見に加え、Tunel法、caspase 3,8,9免疫組織化学の検討から、Hh陽性壁細胞がapoptosis陽性所見を示し、さらにPCNA, Musashi-1陽性細胞が存在することが明らかとなった。この所見は、Hh感染が、壁細胞からの酸分泌を直接抑制し、前ガン状態と考えられる低酸、無酸状態をもたらすことおよび分化帯に存在する胃粘膜幹細胞に作用することを示すと考えられた。さらに、昨年Hhに特異的なprimerが報告されたことから、その配列を用いて、従来用いてきた菌および猫における胃粘膜内の感染状態をPCR法により検討した。その結果、我々の菌および用いた家猫の菌がいずれもHhであると、明確に同定された。また、胃潰瘍症例の胃粘膜内におけるurease陽性者のうち、Helicobacter pylori抗体が陰性者を中心にPCR法、in situ hybridization法を施行した結果、本邦においても、MALTリンパ腫以外の症例においてもHh感染者が存在し、Hpとの混合感染も含めて、病原性にも関係することが明らかとなった。次に、H2 blockerのcimetidine(30mg/kg),proton pump inhibitorのlansoprazole(10mg/kg)を3日間連続して経口投与し、その翌日に胃組織を採取し、胃粘膜上皮細胞の変化をapoptosisおよび脱分化の点から検討した。すなわち、apoptosisは、Tunel法、caspase 3,caspase 8免疫活性、脱分化は、Brdu投与、免疫組織化学およびMUsashi-4免疫活性の点から主にH,K-ATpase免疫活性との比較より検討した、その結果、H2 blocker投与群において、壁細胞のapoptosisに陥る確率の有意の上昇を認めた。また、逆に一部の壁細胞では2核の細胞の割合が増加し、BrdU陽性所見も認め、壁細胞の脱分化を示す所見と考えられた、これは、HHLO感染持続は、胃粘膜組織の安定性の低下をもたらし、酸分泌抑制剤、特にH2 blocker投与前の除菌が必要であることを示唆すると考えられた。HHLO培養に関しては、O2 tension、CO2 tension,培地の変更などを行ったが、いずれも早期に生菌が消失しており、いまのところはっきりした結果は得られていない。しかし、胃組織を用いたsemiorgan culture系では数時間の培養が可能となっており、Helicobacter pyloriと比較した際に粘膜深部への侵入というHHLOに特異的な所見が再現された、この点については、その方法などについてさらに改良中である。研究代表者らは、赤毛猿より分離されたHhをC3Hマウスに持続感染させることにより、Helicobacter heilmannii(Hh)の菌体は、Mongolian gerbilに感染したHpと比べて、粘膜表層に加えて粘膜深部、特に分化帯の位置する腺頸部および胃底腺腺腔内および壁細胞の細胞内小管に存在し、酸分泌が低下することを明らかにした。

その結果、我々の菌および用いた家猫の菌がいずれもHhであると、明確に同定された。また、胃潰瘍症例の胃粘膜内におけるurease陽性者のうち、Helicobacter pylori抗体が陰性者を中心にPCR法、in situ hybridization法を施行した結果、本邦においても、MALTリンパ腫以外の症例においてもHh感染者が存在し、Hpとの混合感染も含めて、病原性にも関係することが明らかとなった。
不均一プラズマにおける乱流輸送の無次元数と相似則の研究

不均一プラズマにおける乱流輸送のモデルとして、板状プラズマにおけるインターチェンジモード乱流を取り上げた。この不安定性は磁場に閉じ込められた不安定性として普遍的であり、また、レーリー・テーラー不安定性やベナ-ル対流との類似性もあり、流体物理における知見を活用できるからである。インターチェンジモード乱流を記述する電磁流体モデルには、無次元数として、レーリー数とプラントル数が含まれている。この2つの数は、ベナ-ル対流の分類においても用いられている。また、乱流輸送の評価は無次元数であるヌッセルト数を用いた。さらに、本研究では多くの場合プラントル数は1と仮定した。本研究で得られた成果を要約すると、以下のようになる。1.レーリー数が10^4以上になると、非線形インターチェンジモードの飽和レベルは鋸歯状の振動を示し、定常的ではなくなる。2.レーリー数が10^5を越えると、鋸歯状振動の振幅の増大とともに、シア-流成分が渦成分より大きくなる。3.レーリー数が10^5以上では、乱流輸送に対応するヌッセルト数が間欠的に増大し、レーリー数の上昇とともに、ヌッセルト数が大きくなるが、バーストの周期は長くなる。一方、時間平均をとると、ヌッセルト数の平均値はレーリー数に依存せず一定になる。4.上記の非線形インターチェンジモードの挙動は、トカマクやステラレータプラズマにおいて、閉じ込めの良いHモードで観測されているEdge Localized Modesの特性と対応している。不均一プラズマの乱流輸送を調べるために、本研究では非線形インターチェンジモードに注目した。インターチェンジモードは、トカマクプラズマやステラレータプラズマの表面近傍において不安定になり易い不安定性である。非線形インターチェンジモードを記述するモデル方程式を非圧縮MHD方程式系から導出し無次元化すると、無次元数として、レーリー数とプラントル数が表れる。また、非線形インターチェンジモードによる乱流輸送を特徴づける無次元数としてヌッセルト数を用いることができる。導出したモデル方程式系に基づく数値シュミレーションにより、インターチェンジモードが非線形発展するとレイノルズ応力によりプラズマ中にシア-流が形成されることを見出した。このようなプラズマ流を特徴づける無次元数としては、マッハ数を用いる。数値シュミレーションにより見出された結果は次のようにまとめられる。1.レーリー数が10000を越えると、非線形インターチェンジモードによるシア-流の形成が顕著になり、インターチェンジモードによる渦とレイノルズ応力によるシア-流の相互作用が強くなり、乱流エネルギーに緩和振動が表れる。レーリー数を大きくするほど、緩和振動はより明確になり、インターミッテントな挙動を示すようになる。2.レーリー数およびプラントル数を変化させて、乱流エネルギーの緩和振動の形状と周期を見ると、トカマクにおいてL-H遷移が生じた後、Hモードにおいて観測されているELM(Edge Localized Mode)と類似の挙動を示している。3.乱流輸送に対応するネッセルト数の最大値はレーリー数の増大とともに大きくなるが、緩和振動の周期が長くなるので、時間平均を行って評価した乱流輸送はほとんど変わらない。

3.レーリー数が10^5以上では、乱流輸送に対応するヌッセルト数が間欠的に増大し、レーリー数の上昇とともに、ヌッセルト数が大きくなるが、バーストの周期は長くなる。一方、時間平均をとると、ヌッセルト数の平均値はレーリー数に依存せず一定になる。4.上記の非線形インターチェンジモードの挙動は、トカマクやステラレータプラズマにおいて、閉じ込めの良いHモードで観測されているEdge Localized Modesの特性と対応している。
ヒジキＤ型アスパラギン酸の生理機能および代謝機構

自然界にはL-アミノ酸のみが存在しているものだと考えられていたが,分析技術の発展により海藻を含む様々な真核生物から遊離D-アミノ酸が存在していることが明らかにされてきた。海藻では特にヒジキに多量のD-アスパラギン酸が存在しているが,葉部では中心部に局在しており,環境の状況に応じて増減することが明らかになった。低酸素条件下およびその状態から通常の酸素を含む状態への回復条件下において,ヒジキアミノ酸の増減を調べたところ,D-およびL-アスパラギン酸のみが増減した。これらのことからヒジキD-アスパラギン酸は低酸素下でのエネルギー代謝と関係があることが予想された。「ヒジキD型アスパラギン酸の生理機能および代謝機構」という課題の中で,H25年度は「ヒジキD-AspとL-Aspの局在の比較」を行った。まず,H24年度に作製した抗L-Asp抗体とすでに保有している抗D-Asp抗体を用いてヒジキの局在を調べ,局在を比較することによって,両者の働きの違いを明確にすることができ,生理機能のより核心に迫る結果を得られると考えた。その結果,ヒジキのD-AspおよびL-Aspはともに細胞質に含まれていることが明らかになった。しかし,D-Aspがヒジキの中心部に局在しているのに対して,L-Aspは組織全体に分布していることが示唆され,機能が異なる可能性がある。また,「D-Asp合成経路の探索」については,D-Aspの合成にアスパラギナーゼが関与している可能性があるため,前駆物質となるD-Asnの存在を検討する必要があった。OPA-N-アセチル-L-システインプレラベルHPLC法でD-およびL-Asnの検出が可能になり,ヒジキのD-Asn含量を調べた所,存在が認められなかったため,D-Aspの起源はアスパラギナーゼによるものでないことが示唆された。そこでD-Aspを合成する可能性のある別の酵素であるAspラセマーゼによる合成の可能性を検討した。しかし,褐藻であるヒジキには粘質多糖が多く含まれていることと,元々タンパク質含量が少ないため酵素タンパク質の抽出が困難であり,粗酵素液から多糖を除去する工夫が必要であった。「ヒジキD型アスパラギン酸の生理機能および代謝機構」という課題の中で,H24年度は「ヒジキD-AspとL-Aspの局在の比較」を予定しており,まず,抗L-Asp抗体の作製を行った。なお,抗D-Asp抗体は以前ウサギで抗体を作製したため有している。抗D-Asp抗体を用いて局在を調べる一方で,抗L-Asp抗体を調製し,D-AspとL-Aspの局在を比較することによって,両者の働きの違いを明確にすることができる。そうすることによって,生理機能のより核心に迫る結果を得られると考えている。D-Asnは微量であるか光学分割が完全でないため存在を確認できていない。したがって,現在行っている光学分割のためのアミノ酸誘導体化試薬とは別の試薬を用いるか,または,キラルカラムによるHPLC光学分割検出を試みる必要があったが,H24年度はまずヒジキからアミノ酸を抽出する方法を再検討した。なぜならば,アミノ酸の抽出に酸を用いると,AsnおよびGlnはそれぞれAspおよびGluに変化してしまうため,Asnが検出されない可能性があったからである。そこで,エタノールで除タンパク質を行ったところ,現在行っているOPA-N-アセチル-L-システインプレラベルHPLC法でD-およびL-Asnの検出が可能になった。ヒジキのD-Asn含量を調べた所,存在が認められなかった。したがって,D-Aspの起源はアスパラギナーゼによるものでないことが示唆された。ヒジキD型アスパラギン酸(Asp)の生理機能および代謝機構という課題の中で,1ヒジキD-AspとL-Aspの局在の比較,2ヒジキD-Aspの生理機能の解明,3D-Asp合成経路の探索を行った。D-AspとL-Aspの局在の比較であるが,抗D-Asp抗体と抗L-Asp抗体を作製し,それぞれについて輪切りにしたヒジキを染めたところ,ヒジキのD-Aspが中心部に局在していたのに比べると,L-Aspはそのような現象は認められなかった。輪切りにした時の中心部は陸上維管束植物の師管に相当する部分で,D-Aspはここを通って藻体全体に移送されていることが推察された。

次に,ヒジキD-Aspの生理機能であるが,ヒジキを低酸素条件下に置いたところ,時間の経過とともにD-Aspは減少していき,12時間で1/2程度まで減少した。その後,24時間まで実験を行ったが,それ以上の減少は認められなかった。一方,エアレーションを入れた水槽ではD-Aspの減少は認められなかった。24時間後に低酸素条件下のヒジキをエアレーションを入れた水槽に入れたところ,48時間でコントロールと同量まで回復が認められた。以上の実験はすべて暗条件下で行った。したがって,ヒジキのD-Aspは低酸素条件下でのエネルギー源として利用されることが示唆された。D-Aspが短時間で増減したことから,D-Aspはヒジキ自身で生合成されていることが推測された。水産化学申請書通りに進展しているため。申請書に記入した通りの計画を達成できているため。D-Asp合成酵素は予想したものと異なる可能性があるため,H26年度は別の合成酵素であるAspラセマーゼの存在を確かめたいと考えている。褐藻であるヒジキには粘質多糖が多く含まれていることと,元々タンパク質含量が少ないため酵素タンパク質の抽出が困難であるが,疎水性クロマトグラフィー用担体に粗酵素液をバッチ吸着させ,多糖を除去する方法をほぼ確立しつつあるため今後の研究を遂行する上での課題は解決されつつある。ヒジキと同様にアカガイはD-Aspが多量に存在するきわめて稀な生物であるが,アカガイのD-Aspは低酸素条件下で減少することが報告されている。H26年度は低酸素条件下でヒジキのD-Aspが変動するか調べ,D-Aspと低酸素条件との関係を調べる予定である。抗D-Asp抗体のみならず抗L-Asp抗体を手に入れることができたので,H25年度は両抗体でヒジキ切片を染色し,D-AspとL-Aspの局在を比較することによって,両者の働きの違いを明確にする。そうすることによって,生理機能のより核心に迫る結果を得られると考えている。また,ヒジキと同様にアカガイはD-Aspが多量に存在するきわめて稀な生物であるが,アカガイのD-Aspは低酸素条件下で減少することが報告されている。H25年度は低酸素条件下でヒジキのD-Aspが変動するか調べ,D-Aspと低酸素条件との関係を調べる予定である。該当なし
地中特有の酸化還元反応が有害物質の溶出挙動に及ぼす影響解明と評価試験法への展開

再生資材の有効利用や土壌汚染対策完了の判断において地下水汚染リスクを評価する際、地中固有の環境条件において土ー間隙水界面で生じる有害物質の吸着・脱着作用、およびその結果としての有害物質の溶出挙動の把握が必須である。様々な要因が溶出挙動に影響することが知られているが、室内試験での評価が依然として困難である酸化還元反応の影響に着目し、影響が支配的となる条件(対象地盤材料、有害物質の形態、環境条件)の同定、評価試験方法の確立を目的とした実験的検討を行うものである。
エコ・カルチャー理論による障害児及び健常児を持った日米家族比較研究

日本と米国で異なる文化的背景を持つ家族群で、それぞれの家族の日常生活の構築の仕方に違いが認められた。この調査から、子育てに関して、日本人の父親が費やす時間や関わりが、米国の家族と比較して少なかった。また、父親が家事に使う時間も、米国の家族と比べて非常に短かった。しかしながら、婚姻や生活の満足度(QOL)には差は認められなかった。これは、今回インタビューを行った日本人家族で、文化的信念や価値観を反映したライフスタイルを構築しているからと言えよう。さらに、障がいのある子どもを持つ家族と持たない家族との比較では、日本人の家族は母親が一人で家事や子育てに奮闘している姿が浮き彫りになった。引き続き北海道(札幌)地区の親の会、クローバー、エジソンクラブでの打ち合わせと被験者のリクルートを続けた。インタビューをお願いする被験者リクルートをお願いすることもあり、家族会でのストレス・マネージメントを継続し、交流を続ける。今回は、健常児の家族リクルートのミーティングを札幌で設定したが(12月)、悪天候のためJR札幌駅周辺の鉄道が止まり、ミーティングが中止となった経緯があった。その際出張を延長することができず、健常児家族の被験者を集める件は、今年度(平成25年度)見送った。沖縄県での発達障害児を持つ家族(アスペルガー友の会)のリクルートについて、沖縄国際大学の知名准教授との打ち合わせを行った。沖縄方言でのインタビューについて助手をお願いする件は、予算の関係上難しいという結論となった。被験者の家族は、標準語のみでインタビューを行うこととする。関西地区の被験者リクルートについては、京都大学(医学部、児童精神科)から名古屋大学に岡田俊教授が移転し、今年度のスケジュール調整が来年度以降になる予定になったことから、奈良教育大学の岩坂秀巳教授とミーティング(東京)を行い、奈良教育大のペアレント・トレーニングでの被験者リクルートへの変更について検討した。今年度は、インタビュー調査を主に沖縄件で行った。インタビュー調査は沖縄本島全域で行った。実施地域は、南部地区(那覇市)、中部地区(うるま市、沖縄市)、北部地区(名護市、大宜味村、今帰仁村)。沖縄国際大学のC准教授の協力を得、ペアサポート、発達障害児の親の会、および沖縄国際大学でのリクルート、およびインタビュー調査を行った。さらに、南部地区では発達障害親の会「NPOわくわくの会サポートセンター」の協力で、被験者のリクルートをおこなった。中部地区の発達障害児親の会「ペアサポート」では、インタビュー調査に加え、研究者によるストレス・マネージメント講座を地区のクリニックで開催し、次年度に向けてのリクルート活動も行った。北部地区では大宜味村、名護地区のPTAの協力を得、比較群である健常児の家族のインタビューを行った。また、地区の学校カウンセラーらの協力を得て、発達障害児を持つ家族のインタビューを行った。那覇地区、中部地区では、地域の児童精神科クリニックの協力で、インタビュー調査を実施した。他の調査予定地域では、引き続き平成26年度のインタビュー調査に向け、リクルート活動を行った。北海道(札幌)発達障害児の親の会、クローバー、エジソンクラブとの協力を要請。結果、親の会からのりクリート協力の承諾を得て、次年度にインタビュー調査を開始する運びとなった。さらに、奈良のポップコーン親の会からの協力を得られることとなり、次年度のインタビュー調査に参加の協力を得た。関西地区のリクルートについては、N大学でのペアレント・トレーニングでのリクルートとインタビュー調査協力の予定がたった。さらに、山陰地区の大学でのペアレント・トレーニングからの協力を得ることもできた。山陰地区は申請時、予定にはなかったが、協力を得たため、関西地区と合せて次年度インタビューを行う予定となった。北海道(札幌)での親の会(クローバー、エジソンクラブ)での打ち合わせ。インタビューをお願いする家族のリクルートのため、家族会での講演、ストレスマネージメントなどについての親の会訪問を数回行い、信頼関係構築に務める。また、札幌市内の障害施設、麦の子への訪問と院長ミーティングなどを行い、家族紹介、リクルートの打ち合わせを行う。コントロール・グループ(健常児)の家族リクルートのため、札幌市内の小学校(栄小学校・西栄小学校)の教頭、PTA役員などとの打ち合わせを数回行う。東京、小平市にて東京での後日のインタビューによるデータコレクションについて研究協力者と打ち合わせを2回行う。UCLAの研究者からの連絡により、新しいタブレット型のデータ入力に切り替えの連絡。数回にわたるスカイプ・ミーティング及び電話ミーティングを行う。予算的な制約もあることから、今回はタブレット型PCでのインタビューは断念する決定。この研究後、継続して検討することとなった(UCLA Neuropsychiatric Institute, Tom Weisner, Ph.D).沖縄のアスペルガー当事者の会責任者との電話打ち合わせを数回行う。沖縄でのデータコレクションについて検討する。2012年11月からのインタビュー開始に向け、準備に入る。現地インタビューにつき、沖縄方言についての助手の検討について話し合いを持つ。(沖縄現地では離島の住民インタビューを望んでいるが、研究者の都合で沖縄本島でのリクルートを検討中)。引き続き打ち合わせを行う予定。京都でのインタビューにつき、研究協力者(京都大学医学部、岡田俊)の名古屋大学病院への移転により、拠点を京都から名古屋に移すかどうかの研究打ち合わせを2度にわたり行う。引き続きミーティングで検討の必要あり。今年度、沖縄地区(本島全域:南部地区、中部地区、北部地区)での追加インタビュー調査を行った。前回インタビュー調査を行った家族の中で、特にもう一度話したいという要望のあった3家族について、さらに詳しいインタビューを行った。

質問紙等は前回終了していたが、被験者(発達障害児の養育者)の強い希望で、さらに話を聞いて欲しいとのことでの再訪となった。データ収集の補足以上ではあったが、倫理上、希望に応えた。昨年度、研究計画になかった山陰地区を追加するという研究計画変更について報告し、その準備を行っていたが、前年度後期、協力者の都合により、データ調査を行うことができなかったため、断念した。従って、元来の研究計画通りということに戻った。北海道地区は、悪天候のため交通事情でデータ収集の期日をいったんキャンセルし、延期としたが、その後のスケジュール変更日に、被験者団体の協力者の都合が悪くなり、会合をキャンセルせざるを得なくなった。以上の理由から、研究期間の延期を申請した。今年度、全ての地域での面接調査(データ収集)が終了した。研究計画の通り、データ収集を行った地域は、北海道地区(札幌)、関東地区(東京)、関西地区(京都・奈良)、沖縄地区(那覇地区、中部、北部)で、全ての地域での調査が終了したことになる。健常児を持つ家族についても各地域で面接調査を終了した。今回の調査では、研究代表者が一人で全ての面接を行ったため、面接者間の信頼性(Inter-rater reliability)は同一者のものでr=1.0となるため、信頼性の高いデータを集めることができた。収集したデータの入力及び分析はSPSS(Version22)を使って行った。面接調査のデータは数値化された項目ごとのデータとテキストデータの両方を入力した。数値化された面接調査データと質問紙のデータ、及び人口動態データは、それぞれに分析を行い、その後相関や比較分析などを行った。尚、当初の研究計画ではテキストデータの収集は予定していなかったが、実際の面接の中で貴重な知見や情報を含む回答が多くあったため、テキストとして記録を残した。研究報告終了後であってもテキスト回答データを質的統計分析を行って、研究計画の量的データ分析に加えて統合することにより、より詳細で包括的な報告を行えたらと考えている。本調査での学会発表は2011年の日本心理学会(第75回大会、於:日本大学)のみであったが、今後、この調査・分析の結果を各学会発表(今年度11月、日本子育て学会大会第7回大会での発表決定他)及び学会誌への投稿などを行う予定である。学会での発表の他に、今年度ご協力いただいた札幌発達障害児の親の会、及び奈良障害児の親の会で本研究に関する小講演会を行ったが、今後、ご協力をいただいたそれぞれの親の会での研究報告会を予定している。親の会に所属していない親御さん達へのグループミーティングなどでも報告を行う予定である。