hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
内因性カンナビノイドによる脳発達の臨界期制御メカニズム

脳は生後初期の臨界期に様々な機能を獲得する。哺乳類の視覚系では、臨界期の開始に抑制性神経回路の成熟が関わるが、そのタイミング調節メカニズムはいまだ不明な点が多い。本課題は抑制性シナプス伝達の調節因子である内因性カンナビノイドが、視覚系での抑制性神経回路の成熟に関与するかどうかを機能的・形態的に検討し、その臨界期調節因子としての役割を明らかにする。これまでの研究で内因性カンナビノイドの合成酵素diacylglycerol lipase(DGL)αの欠損動物では、大脳皮質視覚野の代表的な可塑性である眼優位可塑性の臨界期のタイミングが早くなっていることを報告している。さらにDGL-α欠損動物の視覚野の機能発達について検討し、それぞれの眼からの入力への反応選択性が統合されるBinocular matchingという過程が未熟なままであることを見出した。次に、視覚野の抑制性神経回路発達を調べるため、まず抑制性ニューロン、特に臨界期の開始と関わるparvalbumin発現細胞の成熟を示す種々の分子マーカー(GABA合成酵素、parvalbumin、ホメオタンパク質OTX2、細胞外構造perineuronal netなど)の発現を、免疫組織化学的に評価している。これまでに各種マーカーを検出するための条件検討を行い染色プロトコルをほぼ確立した。今のところDGL-α欠損動物と野生型の間に明瞭な差異は認めていないが、個々の動物の染色程度に若干のばらつきが残っているため、プロトコルを改善し精度を上げることを試みている。本課題では内因性カンナビノイドの臨界期調節因子としての役割を明らかにするため「DGL-α欠損動物の視覚野での抑制性神経回路の発達に変化はあるか」「内因性カンナビノイドの量を操作することで臨界期タイミングは影響を受けるか」の2点を明らかにする。前者についてはまず抑制性ニューロン、特に臨界期の開始と関わるparvalbumin発現細胞の成熟を示す種々の分子マーカー(GABA合成酵素、parvalbumin、ホメオタンパク質OTX2、細胞外構造perineuronal netなど)の発現を、免疫組織化学的に評価している。これまでに各種マーカーを検出するための条件検討を行い染色プロトコルをほぼ確立し、DGL-α欠損動物と野生型の比較を開始している。これまでのところ両者に明瞭な差異は認めていないが、個々の動物の染色程度に若干のばらつきが残っているため、プロトコルを改善し精度を上げることで差異の有無を確定したい。後者については、DGL-α欠損動物に内因性カンナビノイド作動薬を投与することで、臨界期のタイミングを正常に戻すことができることを見出した。このことは内因性カンナビノイドの量により臨界期タイミングを早めたり遅らせたりできることを示唆している。引き続き、野生型動物において同様の実験を行うことでこの点を明らかにできる。「現在までの進捗状況」に述べたように、本課題では内因性カンナビノイドの臨界期調節因子としての役割を明らかにするため「DGL-α欠損動物の視覚野での抑制性神経回路の発達に変化はあるか」「内因性カンナビノイドの量を操作することで臨界期タイミングは影響を受けるか」の2点に取り組んでいる。前者については免疫組織化学染色による抑制性神経細胞マーカーの検索を行っており、今後さらに手法の洗練と例数の確保により結論を出す。また視覚野での抑制性神経伝達の機能評価を準備中である。当初の計画では入力刺激で視覚野に誘発される集合電位のうち抑制性成分を反映すると思われる成分を指標として実験を行う予定であった。しかし抑制性シナプスの機能をより精密に評価できるホールセル記録が可能となったため、単一の視覚野細胞で抑制性シナプス電流を記録することで、抑制性入力の多寡や強度を見積もる予定である。これを臨界期前後の動物で行うことで、DGL-α欠損動物において抑制性シナプスの発達が変化しているかどうかを明らかにする予定である。さらにDGL-α欠損動物に抑制性伝達物質受容体の逆作動薬を投与することで抑制性シナプス伝達を抑制し、臨界期タイミングが正常に戻るかどうかを検討する。このことで内因性カンナビノイドが抑制性神経回路の発達を介して臨界期調節にかかわるかどうかを明らかにする予定である。また後者については、前項に記載のように、野生型動物に内因性カンナビノイド作動薬を投与することで臨界期のタイミングを変化させられるかを検討する。そのことで臨界期のタイミングが皮質内の内因性カンナビノイドの量により調節されているかを明らかにする予定である。

次に、視覚野の抑制性神経回路発達を調べるため、まず抑制性ニューロン、特に臨界期の開始と関わるparvalbumin発現細胞の成熟を示す種々の分子マーカー(GABA合成酵素、parvalbumin、ホメオタンパク質OTX2、細胞外構造perineuronal netなど)の発現を、免疫組織化学的に評価している。これまでに各種マーカーを検出するための条件検討を行い染色プロトコルをほぼ確立した。今のところDGL-α欠損動物と野生型の間に明瞭な差異は認めていないが、個々の動物の染色程度に若干のばらつきが残っているため、プロトコルを改善し精度を上げることを試みている。本課題では内因性カンナビノイドの臨界期調節因子としての役割を明らかにするため「DGL-α欠損動物の視覚野での抑制性神経回路の発達に変化はあるか」「内因性カンナビノイドの量を操作することで臨界期タイミングは影響を受けるか」の2点を明らかにする。前者についてはまず抑制性ニューロン、特に臨界期の開始と関わるparvalbumin発現細胞の成熟を示す種々の分子マーカー(GABA合成酵素、parvalbumin、ホメオタンパク質OTX2、細胞外構造perineuronal netなど)の発現を、免疫組織化学的に評価している。これまでに各種マーカーを検出するための条件検討を行い染色プロトコルをほぼ確立し、DGL-α欠損動物と野生型の比較を開始している。これまでのところ両者に明瞭な差異は認めていないが、個々の動物の染色程度に若干のばらつきが残っているため、プロトコルを改善し精度を上げることで差異の有無を確定したい。後者については、DGL-α欠損動物に内因性カンナビノイド作動薬を投与することで、臨界期のタイミングを正常に戻すことができることを見出した。このことは内因性カンナビノイドの量により臨界期タイミングを早めたり遅らせたりできることを示唆している。引き続き、野生型動物において同様の実験を行うことでこの点を明らかにできる。「現在までの進捗状況」に述べたように、本課題では内因性カンナビノイドの臨界期調節因子としての役割を明らかにするため「DGL-α欠損動物の視覚野での抑制性神経回路の発達に変化はあるか」「内因性カンナビノイドの量を操作することで臨界期タイミングは影響を受けるか」の2点に取り組んでいる。前者については免疫組織化学染色による抑制性神経細胞マーカーの検索を行っており、今後さらに手法の洗練と例数の確保により結論を出す。また視覚野での抑制性神経伝達の機能評価を準備中である。当初の計画では入力刺激で視覚野に誘発される集合電位のうち抑制性成分を反映すると思われる成分を指標として実験を行う予定であった。しかし抑制性シナプスの機能をより精密に評価できるホールセル記録が可能となったため、単一の視覚野細胞で抑制性シナプス電流を記録することで、抑制性入力の多寡や強度を見積もる予定である。これを臨界期前後の動物で行うことで、DGL-α欠損動物において抑制性シナプスの発達が変化しているかどうかを明らかにする予定である。さらにDGL-α欠損動物に抑制性伝達物質受容体の逆作動薬を投与することで抑制性シナプス伝達を抑制し、臨界期タイミングが正常に戻るかどうかを検討する。
サイトカインの産生と応答能からみた子宮内膜症の発症・進展機序の解明

子宮内膜症患者腹水中に高濃度存在するサイトカインが本症の病態と増殖・進展に及ぼす影響を検討した.腹水中濃度に相当する50pg/ml以上のIL-6添加は,マウス1細胞期胚の胚盤胞への発生を濃度依存性に阻害した.ヒト精子はgp130遺伝子を発現するが,IL-6とIL-6可溶性受容体を併用添加すると精子運動率は有意に低下した.したがって,IL-6は初期胚発生や精子運動能を阻害して本症の妊孕能低下に関与することが示唆された.Northern blot法により,内膜症間質細胞でIL-6遺伝子発現が観察された.TNF-αの添加はIL-6遺伝子発現を有意に増強した.子宮内膜間質細胞においてはIL-6遺伝子発現は僅かであり,TNF-αによる誘導もみられなかった.内膜症間質細胞培養上清中のIL-6濃度は高く,TNF-αは濃度依存性にIL-6の産生を促進し,1ng/ml以上の添加でその産生は有意に促進された.免疫染色において,内膜症間質細胞にはIL-6蛋白の発現が明瞭に観察されたが,子宮内膜間質細胞においては弱い染色性を認めるにとどまった.腹腔マクロファージと内膜症間質細胞のIL-6産生能を比較検討した結果,培養細胞数当たりのIL-6蛋白産生は同程度であった.IL-6の添加は分泌期子宮内膜間質細胞の増殖を有意に抑制したが,内膜症間質細胞の増殖には影響を与えなかった.^3H-チミジンの取り込みやMTTアッセイで検討した成績から,IL-8は内膜症間質細胞の増殖促進作用を有することが明らかとなった.TNF-αの添加は内膜症間質細胞のIL-8遺伝子発現を増強し,IL-8産生を増加し,内膜症間質細胞の増殖を促進した.TNF-αの細胞増殖促進作用は抗IL-8抗体の併用添加で中和された.したがって,子宮内膜症患者腹水中に高濃度に存在するTNF-αは,活動性病変におけるIL-8の遺伝子発現と産生を誘導して本症の増殖・進展に関与することが示唆された.以上の成績より,子宮内膜症細胞がIL-6遺伝子を発現し,IL-6を産生することを初めて示し,本症患者における妊孕能低下へのIL-6の関与を示唆した.子宮内膜症細胞におけるIL-8の増殖促進作用と,IL-6に対する応答機構の逸脱が本症の増殖・進展を促す可能性が示唆された.子宮内膜症患者腹水中に高濃度存在するサイトカインが本症の病態と増殖・進展に及ぼす影響を検討した.腹水中濃度に相当する50pg/ml以上のIL-6添加は,マウス1細胞期胚の胚盤胞への発生を濃度依存性に阻害した.ヒト精子はgp130遺伝子を発現するが,IL-6とIL-6可溶性受容体を併用添加すると精子運動率は有意に低下した.したがって,IL-6は初期胚発生や精子運動能を阻害して本症の妊孕能低下に関与することが示唆された.Northern blot法により,内膜症間質細胞でIL-6遺伝子発現が観察された.TNF-αの添加はIL-6遺伝子発現を有意に増強した.子宮内膜間質細胞においてはIL-6遺伝子発現は僅かであり,TNF-αによる誘導もみられなかった.内膜症間質細胞培養上清中のIL-6濃度は高く,TNF-αは濃度依存性にIL-6の産生を促進し,1ng/ml以上の添加でその産生は有意に促進された.免疫染色において,内膜症間質細胞にはIL-6蛋白の発現が明瞭に観察されたが,子宮内膜間質細胞においては弱い染色性を認めるにとどまった.腹腔マクロファージと内膜症間質細胞のIL-6産生能を比較検討した結果,培養細胞数当たりのIL-6蛋白産生は同程度であった.IL-6の添加は分泌期子宮内膜間質細胞の増殖を有意に抑制したが,内膜症間質細胞の増殖には影響を与えなかった.^3H-チミジンの取り込みやMTTアッセイで検討した成績から,IL-8は内膜症間質細胞の増殖促進作用を有することが明らかとなった.TNF-αの添加は内膜症間質細胞のIL-8遺伝子発現を増強し,IL-8産生を増加し,内膜症間質細胞の増殖を促進した.TNF-αの細胞増殖促進作用は抗IL-8抗体の併用添加で中和された.したがって,子宮内膜症患者腹水中に高濃度に存在するTNF-αは,活動性病変におけるIL-8の遺伝子発現と産生を誘導して本症の増殖・進展に関与することが示唆された.以上の成績より,子宮内膜症細胞がIL-6遺伝子を発現し,IL-6を産生することを初めて示し,本症患者における妊孕能低下へのIL-6の関与を示唆した.子宮内膜症細胞におけるIL-8の増殖促進作用と,IL-6に対する応答機構の逸脱が本症の増殖・進展を促す可能性が示唆された.正所性および異所性子宮内膜細胞におけるIL-6の発現、次にIL-6遺伝子ならびに蛋白発現に及ぼすTNF-αの作用を検討し、加えて、内膜疾患者腹腔のマクロファージと内膜症間質細胞におけるIL-6産生能を比較検討した。

手術時に摘出した子宮(増殖期4例、分泌期3例)および卵巣チョコレート嚢胞壁(卵胞期9例、黄体期4例)から、正所性内膜および異所性内膜間質細胞をOsteenらの方法を用いて分離培養した。子宮内膜症患者(3例)の腹腔鏡検査時に採取した腹水より、Lymphocyte Separation Mediumを用いてマクロファージを遠心分離し、培養した。IL-6の遺伝子発現はNorthern blot法で、蛋白発現は抗IL-6抗体を用いた免疫染色ならびにELISA法により評価した。内膜症間質細胞においてIL-6遺伝子発現が観察された。1ng/ml以上のTNF-α添加はIL-6遺伝子の発現を有意に増強した。子宮内膜間質細胞においてはIL-6遺伝子発現は僅かであり、TNF-αによる誘導もみられなかった。子宮内膜間質細胞培養上清中のIL-6濃度は低く、10ng/mlTNF-αの添加により産生が誘導された。一方、内膜症間質細胞培養上清中のIL-6濃度は高く、TNF-αは濃度依存性に産生を促進し、1ng/ml以上の添加でIL-6産生は有意に促進された。免疫染色において、内膜症間質細胞にはIL-6蛋白の発現が明瞭に観察されたが、子宮内膜間質細胞においては弱い染色性を認めるにとどまった。腹腔マクロファージと内膜症間質細胞のIL-6産生能を比較検討した結果、培養細胞数当たりのIL-6蛋白産生は同程度であった。本研究成績から、子宮内膜症病変で観察されたIL-6の遺伝子と蛋白の過剰発現が本症の病態に関与することが示唆された。1)子宮内膜症の増殖・進展におけるサイトカインの役割IL-8は好中球の走化能をもつケモカインであり,血管新生因子としても知られている.^3H-チミジンの取り込みやMTTアッセイで検討した成績から,IL-8は子宮内膜症間質細胞の増殖促進作用を有することが明らかとなった.TNFαの添加は培養間質細胞のIL-8遺伝子発現を増強し,IL-8産生を増加し,培養間質細胞の増殖を促進した.TNFαの細胞増殖促進作用は抗IL-8抗体の併用添加で中和された.したがって,子宮内膜症患者腹水中に高濃度に存在するTNFαは,活動性病変におけるIL-8の遺伝子発現と産生を誘導して本症の増殖・進展に関与することが示唆された.2)子宮内膜症性不妊症におけるサイトカインの作用子宮内膜症患者腹水は妊孕能低下に働くことが知られている.しかしながら,サイトカインが妊孕能を損なうか否かについては明らかでないため,IL-6が胚発生や精子運動能に及ぼす影響について検討した.B6C3F1雌マウスを過排卵処理した後,同系雄マウスと交配させ,24時間後に卵管より1細胞期胚を採取し72時間後の胚盤胞への発生率を検討した.50pg/ml以上のIL-6添加は,マウス1細胞期胚の胚盤胞への発生を濃度依存性に阻害した.ヒト正常精子をパーコール・swim upで処理したのち,RT-PCR法でIL-6受容体とgp130遺伝子発現を検討した.ヒト精子にはIL-6受容体の遺伝子発現はみられなかったが,gp130遺伝子発現が確認された.IL-6(200pg/ml)あるいはIL-6可溶性受容体(50ng/ml)の単独添加は精子の運動率を低下させなかったが,これらの併用添加は精子運動率を有意に低下した.したがって,IL-6は初期胚発生や精子運動能を阻害して本症の妊孕能低下に関与することが示唆された.
ヒト腫瘍に発現するalien抗原の基礎並びに臨床的研究

本年度の成果は,糖脂質抗原のエピトープ,ヒトMoAb産生およびこれらの抗原に対する免疫応答に必須なMHCの発現と機能解析が主なものである.I糖脂質抗原のエピトープ:消化器癌およびメラノーマ組織より分離・精製したH-D抗原活性をもつ六つの糖脂質分子種:GM3(NeuGc), 4-OAc GM3(NeuGc), GD3(NeuGc), GM2(NeuGc)およびネオラクトシリーズに属するH-D5とH-D7の構造を決めた.メラノーマから分離したGD3(NeuGc)はシアル酸が両者共にNeuGcであるもの,一方のみNeuGcであるものに分かれ,後者とH-D抗体および抗-GD3(NeuAc)MoAbとの反応性の比較から, NeuGcが分子の外側に位置することがH-D抗原性に必須条件であることが証明された. IIヒトMoAb産生:ヒト脾リンパ球をConA刺戟細胞の培養上清を加えて培養し,抗ーμAhとGM3(NeuGc)で刺戟しヒト骨髄腫株KR-12と融合し,六つのH-D抗体産生ハイブリドーマクローンを得た.これらのクローンは1gM抗体を2μg/mlの濃度で分泌し,刺戟に用いた抗原に極めて高い特異性を示し, NeuGcをもつが糖鎖が延長した構造をもつH-D5やH-D7には殆ど反応しない.さらに別なアプローチ, EBV-transformationと新たな融合パートナーによるハイブリドーマ法により1gGクラスのH-D MoAbの産生に成功した.IIIクラスIIMHC抗原:HLA DR, DPおよびDQ抗原の胃癌細胞株での発現をFlowoytometryで同定し,昨年報告した胃癌組織と同じくDR→DP,DQのみ方向性をもつ"discordant"な発現様式を示すことが明かとなッた.DRのみを発現する株にIFN-γを投与するとDR発現量の増幅とDPとDQの新たな発現がみい出され, DR抗原がallo-MLRの刺戟能をもつことが証明された.さらにこれらの抗原の癌細胞上でのフェノタイプと発現量が,それぞれの遺伝子のRNA転写レベルと対応している事が確かめられた.本年度の成果は,糖脂質抗原のエピトープ,ヒトMoAb産生およびこれらの抗原に対する免疫応答に必須なMHCの発現と機能解析が主なものである.I糖脂質抗原のエピトープ:消化器癌およびメラノーマ組織より分離・精製したH-D抗原活性をもつ六つの糖脂質分子種:GM3(NeuGc), 4-OAc GM3(NeuGc), GD3(NeuGc), GM2(NeuGc)およびネオラクトシリーズに属するH-D5とH-D7の構造を決めた.メラノーマから分離したGD3(NeuGc)はシアル酸が両者共にNeuGcであるもの,一方のみNeuGcであるものに分かれ,後者とH-D抗体および抗-GD3(NeuAc)MoAbとの反応性の比較から, NeuGcが分子の外側に位置することがH-D抗原性に必須条件であることが証明された. IIヒトMoAb産生:ヒト脾リンパ球をConA刺戟細胞の培養上清を加えて培養し,抗ーμAhとGM3(NeuGc)で刺戟しヒト骨髄腫株KR-12と融合し,六つのH-D抗体産生ハイブリドーマクローンを得た.これらのクローンは1gM抗体を2μg/mlの濃度で分泌し,刺戟に用いた抗原に極めて高い特異性を示し, NeuGcをもつが糖鎖が延長した構造をもつH-D5やH-D7には殆ど反応しない.さらに別なアプローチ, EBV-transformationと新たな融合パートナーによるハイブリドーマ法により1gGクラスのH-D MoAbの産生に成功した.IIIクラスIIMHC抗原:HLA DR, DPおよびDQ抗原の胃癌細胞株での発現をFlowoytometryで同定し,昨年報告した胃癌組織と同じくDR→DP,DQのみ方向性をもつ"discordant"な発現様式を示すことが明かとなッた.DRのみを発現する株にIFN-γを投与するとDR発現量の増幅とDPとDQの新たな発現がみい出され, DR抗原がallo-MLRの刺戟能をもつことが証明された.さらにこれらの抗原の癌細胞上でのフェノタイプと発現量が,それぞれの遺伝子のRNA転写レベルと対応している事が確かめられた.
霊長類の聴覚と音声に関する研究(ヒトの音声言語進化の視点から)

チンパンジ-とニホンザルの聴覚の基本特性については、両種ともW字型の聴感度曲線をもち、ヒトと比較すると、低音への感度が劣るものの、高音への感度は優れていた。また、2ー6 kHzで感度の低下がみられた。この中程度の周波数での感度の低下の起源を、外耳道の共鳴、蝸電図・聴性脳幹反応により検討した結果、それが鼓膜一蝸牛有毛細胞の間のいずれかにあることがわかった。また、周波数と強度弁別闘はヒト、チンパンジ-、ニホンザルの順序で小さくなった。強度弁別については、種間で数デシベル(SPL)の違いであった。母音知覚については、チンパンジ-は[i]ー[u]、[e]ー[o]の対を混同することがあり、類似して聴取していると推定された。これはかれらが第1ホルマントにより母音弁別を行っているためであり、さらにそれにはW字型の聴感度が関与すると考えられた。この点はかれらの種特異的な母音的音声でも確認した。子音知覚に関しては、調音様式が知覚構造を決めるのに重要であり、破裂子音の知覚からは、有声・無声の相違が調音場所の相違よりも重要であった。これも聴覚の基本特性が関与すると考えられた。母音知覚における正規化、破裂化音のカテゴリカル知覚が、チンパンジ-やニホンザルにあることを明らかにした。チンパンジ-、ニホンザルの音声知覚に耳(半球)優位があるかどうかを検討した。ヒトの言語音、かれらの種特異的な音声の弁別にラテラリィティはみられなかった。チンパンジ-とヒトの乳幼児の音声発達を比較したところ、cooingは両種に共通してみられたが、babbling(喃語)はチンパンジ-になく、ヒトに特有であった。音声言語の成立にとって喃語は必要な条件であると推定された。また母音的な音声については、[u]、[o]、[a]はあったが、[i]、[e]は殆ど発せられなかった。これはかれらの喉頭が高く、咽頭部が小さいためと考えられた。聴覚の基本特性については、ニホンザル、チンパンジーともにW字型の聴力曲線を示し、ヒトとは異なっていた。感度の低下はニホンザルで6kHz、チンパンジーでは4kHzでみられた。周波数、強度の弁別閾については、ヒト、チンパンジー、ニホンザルの順序でともに上昇する。1kHz、70dBでの周波数弁別閾はヒトが約3Hz、チンパンジーが約12Hz、ニホンザルが約40Hzであった。同じ条件での強度弁別閾は各々約0.5dB、1.5dB、2.5dBであった。母音知覚については、ヒトと異なりチンパンジーは[i]と[u]、[e]と[o]が類似して聞こえていることが分った。すなわちチンパンジーは第2ホルマントの区別が困難であった。これは上記のW字型の聴感度によるものと考えられる。閉鎖子音の知覚については、有声ー無声の区別はチンパンジーにとって比較的容易であるが、すなわち、[b]ー[p]、[d]ー[t]、[g]ー[k]、は、弁別できるが、調音場所の区別、すなわち、[bーdーg]、[pーtーk]の弁別はより困難であった。

半球優位については、ニホンザルのcoo音の弁別で検討している。現在進行中であるが、一方の耳(すなわち半球)がより優位であるという現象はみられていない。今後チンパンジーも導入して、さらに条件を増やし検討する予定である。チンパンジーとヒトの音声発達については、以下の点が明らかになった。チンパンジーの乳幼児は生後24時間以内に比較的平静な音声を発する。そのような音声は初めの3週間は比較的頻発するが、40日前後で減少する。その後55日齢頃より発声頻度が急激に上昇する。しかし120日齢頃より減少し、その後は低いレベルで安定する。ヒトの場合は第1期の喃語が減少し、その後第2期の喃語になり、それが音声言語に結びつく。チンパンジーには第2期の喃語がないと考えられる。聴覚の基得性については、ニホンザルで蝸牛のマイクロ電位(CM)聴神経集合電位(AP)、聴性脳幹反応(ABR)を記録し、それぞれの閾値と行動的に測定された閾値を比較した。とくに6kHzでみられた感度低下の起源に焦点を当てた。その結果その感度低下は、これらの誘発反応全てにみられ、起源は鼓膜一蝸牛有毛細胞の間にあると推定された。チンパンジ-の母音知覚における正規化を、[o]-[a]の連続体を合成し、男女の母音での境界の移動から検討した。その結果チンパンジ-もヒトと同様に正規化の能力を持ち、話者にかかわらず、ある母音を同一の母音として聴取していることがわかった。チンパンジ-は有声・無声([g]-[k])、調音場所の異なる([b]-[d])破裂子音の対をカテゴリカルに知覚しているとがわかった。チンパンジ-、ニホンザルで音声知覚の半球優位が、左右の耳に別々に提示される音声の弁別の成績から検討された。チンパンジ-では機能的には異なるが、音響的には類似しているgruntとwhimperの弁別で右耳(左半球)優位の傾向が見られた。ニホンザルのearly high cooとlate high cooの弁別では優位性はみいだされなかった。ヒトとチンパンジ-の音声発達を比較した。ヒトでは前、後期のなん語があるといわれている。チンパンジ-の発声は自発性に乏しく、単調であった。生後55日前後で発声量が増加し、これはヒトの前期のなん語に対応すると考えられた。しかし、その後発声量は減少、音声言語に結びつく後期のなん語はみられなかった。また母音的な音声では[u]、[o]、[a]が観察されたが、[i]、[e]は発せられなかった。本年度はチンパンジ-の種特異的音声の知覚を中心に研究を行なった。チンパンジ-の母音的な音声(grunt)は、[u]、[o]、[a]と聴取されるものが主であるが、各々から2つの音声を選び、計6つの音声間の弁別をさせたところ、同じカテゴリ-に属するものは、区別するのに長い反応時間を要し、チンパンジ-にとっても類似していると推定された。またこれらの母音的音声を線型予測方式による分析にかけて、第1、2ホルマントを同定した。これらの母音では、第2ホルマントはほぼ同じ周波数で、第1ホルマントのみが異なっていた。これらの音声のどの周波数要素が知覚に重要かを検討するために、個々の基音や倍音、その組み合わせ、第1、2ホルマントを、ディジタルフィルタ-で除去しもとの音声と弁別させた。その結果、これら各母音的音声において、第1ホルマントやそれを構成する倍音が重要であることがわかった。これはチンパンジ-に[i]と[u]、[e]と[o]の区別が難しいことと一致する。さらに、基本周波数が異なるwhimperとsqueakの知覚を検討した。
痴呆性高齢者と家族の精神的ストレス分析と生活支援プログラムの開発に関する研究

痴呆性高齢者を抱える家族の実態は、いくつかの調査結果から以下のような傾向が見られる。(1)痴呆性高齢者の年齢の高齢化に伴い、その介護者の年齢も高齢化してきている。(2)全体の約7割が自宅で介護を受けている。(3)介護者のほとんどが女性であるが、昨今の傾向として、夫あるいは息子による介護が増加している。こうした小規模家族・老老介護という傾向は、今後増々進行することが予測される。さらに、事例分析を通して明らかになったことは、介護者の孤立化の問題である。物理的、身体的な過重だけでなく、周囲からの理解や協力が不十分なことによる「孤立感」、介護の長期化と常時見守りが必要であるための「拘束感」、いつまで続くのかなどという「不安感」などがストレス主要因となっているのである。介護者のストレス解消(レスパイト・ケア)へのとりくみは、制度・サービスにおいては充分に行なわれてはおらず、例えば施設への一時入所、あるいはデイサービスセンターへの通所というような事業にみられるように、高齢者との距離と空間を分離するという方法によるものである。介護者のレスパイトを意図したプログラムの実践はほとんど見られなかった。また、施設ケアにおける痴呆性高齢者の対応は、療法の開発と取り組みはみられるものの、その効果測定プログラムの開発までには至っていない。施設ケアの現状としては、痴呆高齢者を集団ケアの中でいかに分離し、特別なケアを行なっていくかということに集中しがちになっており、痴呆性高齢者のアクティビティを施設全体として高めていこうという(アクティビティプログラム)動きはあまりみられなかった。(1)先行研究、実践の収集整理については、学術雑誌、学会報告はもとよりのこと、今回はとくに当事者(介護者)による介護手記や、ケアの実践現場から発信されている事例集、ブックレットなどを収集、家族の介護過程の分析を試みた。介護期間はおよそ3段階にわけられることが判明してきた。その段階ごとに介護者が求めているサービスの量や質に差異が生じるということが認められた。このことを裏づけるために、岐阜県下の2地域で、「介護者の集い」を開催し、その参加者にヒアリング調査を行った。(2)家族介護者からの事例の提出、ヒアリング調査の結果から、(1)痴呆性高齢者と介護者との共依存関係(2)1人の介護者による「抱こみ介護」という現状が明らかになった。(3)在宅での介護をよりよく継続させていくための援助方法について、現場の担当者からのヒアリングを行った。とくに在宅介護支援センターの職員から援助事例を提出してもらい、検討会をもって、個別の援助過程についての検討を行った。(4)援助方法について、最新の研究についてサーベイを行い、ケア方法に関するハンドブック等を入手学習中である。なかでも、1999年にアメリカで出版された「Dementia,Aging,and Intellectual Disabilities」はすぐれており、早急に抄記を行うつもりでいる。(1)平成12年度に岐阜県内の2カ所で行った「介護者の集い」に集まって下さった家族・介護者へのヒアリングを、13年度も継続して実施(この経費については、中部学院大学共同研究費によった)。そこで明らかになったことは、(1)痴呆性の老親や配偶者の介護を継続させるには、介護者自身の居場所を家庭の外に持つこと。(2)痴呆性高齢者が日中45時間、自宅以外で過ごす場所が確保されていること。(3)すなわち、介護する側もされる側も「自宅」以外の関係持てる場所があること。(4)しかも、痴呆性高齢者にとっては、その場所や関係がなるべく固定していること。外出する時間、外部で過ごす時間などが規則的であること。(5)また、その他にホームヘルプサービス等社会福祉サービスを適宜利用することで、介護負担を軽減している。(6)かかりつけ医が常に状態を把握し、緊急対応を可能にしているものはもちろんのこと

介護者の相談の窓口となっているなどであった。(2)以上のことをふまえると、痴呆性高齢者が定期的に恒常的に通うことができるところといえば、現在ではデイサービスセンター、宅老所などがある。そこで本年度は、これらの中で、痴呆性高齢者に対して積極的な受け入れをし、なお高齢者個々人のニーズに則したプログラムを展開し、成果をあげているところへのヒアリングを実施した。この場合、高齢者が受けている様子を収録し、状態の変化について継続的に参与観察し、記録化するという方法を採った。現在分析中であるが、一部明らかとなったことは、小集団による作業への集中により、行動の変容、食欲の増進、介護者への対応の柔和さなどがみられるようになってきている。(3)アメリカ、イギリスで開発されている痴呆性高齢者への環境的精神的アプローチの方法について、文献研究を行っている。(1)咋年度から継続して、「痴呆性老人を抱える家族の会」参加者へヒアリングを実施した。在宅で重介護状態にある痴呆性の高齢者を、長期間介護していくためには、どのような地域支授が有効であるのかを介護者のストレスの状態との関連で明らかにしようとした。その結果、1)介護の継続にあたっては、介護する側が高齢者の状態把握が充分にできているということが重要であり、そうした状況分析についての適切なアドバイスが不可欠である。2)また近隣からの側面的援助が必要であり、近隣・地域住民が高齢者のボケの症状を充分に理解しているという実感が、家族・介護者にとっては重要である。そのためには、地域社会が「痴呆症状」の的確な理解がなされるのに充分な情報が提供されていることが必須である。3)岐阜県のS町では保健福祉センターが中心となって、痴呆症に関する学習の機会を開催することにより痴呆症に対する理解度が高く、成果を上げてきている。4)長期に痴呆性高齢者を在宅で介護している家族では、デイサービス、ショートステイの利用については、積極的であるが、特別養護老人ホームヘの入所は考えられないとしており、多くは、いざという時は「病院」への入院で対応することを考えているとのことであった。(2)本年度は、まとめの年度でもあることから、後半では近年のこの分野での研究・実践の成果の収集と評価を行った。1)全国老人福祉施設研究協議会の過去10年間の実践研究報告から先進的なケアについての分析を行った。2)デイケア、デイサービスにおける痴呆プログラムとくにアクテイビイテイプログラムを中心に収集、ヒアリング謝査を実施した。3)精神医療の分野における近々の研究動向を整理分析を行った。これらについては、現在作業を続行中であり、まだ充分な整理には至っていない。
セルバンテス生誕450周年と日西交流

セルバンテスの生誕450周年に当たり、「日西交流450周年」というパースペクティブの中で、日西両国の交流とセルバンテスについて研究、討議された。およそ450年に及ぶ日西交流史はザビエル来日に始まる南蛮時代と明治以降の現代交流時代に分かれる。南蛮時代は日欧交渉史の一部として研究されてきたが、キリシタン的接触と実証主義的考証学を重視するあまり、西欧世界の歴史的コンテクストの中での研究が欠如している。現代交流時代では、日本側のイニシアティブによる経済交流が中心で、文化面での交流は立ち遅れている。21世紀に向けて文化交流の促進が急がれる。「セルバンテスの言語」として知られるスペイン語は、日本語とともに、今後の日本とスペイン語圏の経済・文化交流の重要な鍵となるであろう。セルバンテス文学研究では、第1に『ドン・キホーテ』の中に現れる挿絵の歴史的分析を通じて作品の新しい解釈が提示された。第2に、セルバンテスの詩の中に多用される表象に注目し、これをセルバンテスの豊かな言語表現の知的機能として考察された。第3に、セルバンテスを文学理論家・批評家として捉える従来の解釈に対して、スペイン最初の国民文学史家として捉えるという新しい見解が示された。セルバンテス研究は今後、「スペイン黄金世紀」というより広い枠組みの中で行うことが提案された。ナバラ大学アレジャーノ教授の下に「スペイン黄金世紀プロジェクトチーム」が最近発足したからである。これは最新の科学技術を駆使した一大情報センター構想であり、インターネット等の活用による大学間協力研究の推進は、今後のセルバンテス研究と日西交流に質と量の両面において大きな変革をもたらすことであろう。セルバンテスの生誕450周年に当たり、「日西交流450周年」というパースペクティブの中で、日西両国の交流とセルバンテス研究について討議した。南蛮時代は日欧交渉史の一部として研究されてきたが、キリシタン的接触と実証主義的考証学を重視するあまり、西欧世界の歴史的コンテクストの中での研究が欠如したことが指摘された。現代交流時代では、日本側のイニシアティブによる活発な経済交流に対して、文化面での交流が著しく立ち遅れており、21世紀ではラテンアメリカを含むスペイン語圏全体との文化交流の推進が強調された。セルバンテス研究では、第1に「ドン・キホ-テ」の中に現れる挿絵の歴史的分析を通じて作品の新しい解釈が提示された。また、言語面では、「セルバンテスのスペイン語」の原点に立ち返るとともに、その将来についても考察された。これは最新の科学技術を駆使した一大情報センター構想であり、インターネット等の活用による大学間協力研究の推進は、セルバンテス研究と日西交流に質と量の両面において大きな変革をもたらすことであろう。
真正粘菌の老化と短命死に係わるミトコンドリアゲノム損傷の分子細胞形態学的研究

本研究課題は以下の4つの研究実施計画からなる.それぞれの研究成果を以下にまとめた.I)変形体寿命株の確立:多数の変形体株を作出し,寿命を4つのカテゴリー(超短命,短命,通常,長寿)に分類した.また,これら4種の寿命株は,それぞれれ複数回交配しても安定して超短命あるいは短命になることを明らかにした.さらに,ヘミン含有量の少ない貧鉄培地を用いて,鉄分不足がミトコンドリア機能の減退を招き,その結果として変形体の寿命を短縮することを見出した.II)老化進行とミトコンドリアゲノム損傷:真正粘菌のmtDNAは,生体内で,部位特異的な一本鎖切断を受けていることを明らかにした.こうしたミトコンドリアゲノム損傷と変形体の老化との関係を,サザンハイブリダイゼーション法とプライマーエクステンション法を用いて,塩基配列レベルで詳細に検討した.その結果,老化進行にともなって,部位特異的一本鎖切断の頻度が上昇することを見出した.III)ゲノム損傷とミトコンドリア形態・機能不全の検出:変形体の老化進行にともなうミトコンドリアの機能変化を,酸素消費量を経時的に測定することでモニターした.その結果,変形体の酸素消費量は,超短命,短命,通常,長寿株いずれにおいても老化とともに暫時減少しており,ミトコンドリアの機能不全が変形体の老化進行とともに起こっていることを明らかにした.IV)ゲノム損傷誘導によるミトコンドリアの形態・機能不全と短命死:mFプラスミドの導入により,ミトコンドリアゲノムの高頻度組換えを誘発できる.アメーバ株を交配(mFxmF^+)することで,mFを変形体に導入して,超短命(寿命1060日)株を単離した.こうした株のほとんどで,mFが介在するミトコンドリアゲノムの高頻度組換えが起こっており,組換えによるミトコンドリア遺伝子の分断化も認められた.これらは,ミトコンドリアゲノム損傷が,短命死の原因になりうることを示している.本研究課題は以下の4つの研究実施計画からなる.それぞれの研究成果を以下にまとめた.I)変形体寿命株の確立:多数の変形体株を作出し,寿命を4つのカテゴリー(超短命,短命,通常,長寿)に分類した.また,これら4種の寿命株は,それぞれれ複数回交配しても安定して超短命あるいは短命になることを明らかにした.さらに,ヘミン含有量の少ない貧鉄培地を用いて,鉄分不足がミトコンドリア機能の減退を招き,その結果として変形体の寿命を短縮することを見出した.II)老化進行とミトコンドリアゲノム損傷:真正粘菌のmtDNAは,生体内で,部位特異的な一本鎖切断を受けていることを明らかにした.こうしたミトコンドリアゲノム損傷と変形体の老化との関係を,サザンハイブリダイゼーション法とプライマーエクステンション法を用いて,塩基配列レベルで詳細に検討した.その結果,老化進行にともなって,部位特異的一本鎖切断の頻度が上昇することを見出した.III)ゲノム損傷とミトコンドリア形態・機能不全の検出:変形体の老化進行にともなうミトコンドリアの機能変化を,酸素消費量を経時的に測定することでモニターした.その結果,変形体の酸素消費量は,超短命,短命,通常,長寿株いずれにおいても老化とともに暫時減少しており,ミトコンドリアの機能不全が変形体の老化進行とともに起こっていることを明らかにした.IV)ゲノム損傷誘導によるミトコンドリアの形態・機能不全と短命死:mFプラスミドの導入により,ミトコンドリアゲノムの高頻度組換えを誘発できる.アメーバ株を交配(mFxmF^+)することで,mFを変形体に導入して,超短命(寿命1060日)株を単離した.こうした株のほとんどで,mFが介在するミトコンドリアゲノムの高頻度組換えが起こっており,組換えによるミトコンドリア遺伝子の分断化も認められた.これらは,ミトコンドリアゲノム損傷が,短命死の原因になりうることを示している.本研究課題は以下の4つの研究実施計画からなるが、培養条件の検討によって寿命を短縮できたとしても、老化が進行し死滅直前になった変形体を実験用に一挙に揃えるのは難しい。そこで、初年度においても4つの研究実施計画を同時進行させた。I)変形体寿命株の確立:(i)多数の変形体株を作出し、各変形体株に固有の寿命を決定した。(ii)寿命を4つのカテゴリー(超短命、短命、通常、長寿)に分類し、4種の寿命の株を確立した。(iii)適当な生理条件下で寿命を短縮する培養条件を検討し、実験期間の短縮化を試みている。II)老化進行とミトコンドリアゲノム損傷:真正粘菌のmtDNAは生体内で部位特異的な一本鎖切断を受けているが、こうしたミトコンドリアゲノム損傷と変形体の老化との関係を、サザンハイブリダイゼーション法とプライマーエクステンション法を用いて塩基配列レベルで詳細に検討した。III)ゲノム損傷とミトコンドリア形態・機能不全の検出:変形体の老化進行にともなう、ミトコンドリアの形態異常の有無や頻度、ミトコンドリアの機能不全との関係などを調べる目的で、変形体の酸素消費量を測定し、ミトコンドリアゲノム損傷とミトコンドリア機能不全手の関係を調べた。IV)ゲノム損傷誘導によるミトコンドリアの形態・機能不全と短命死:mFプラスミドの導入により、ミトコンドリアゲノムの高頻度組換えを誘発できる。mF

プラスミドを導入したアメーバ株を交配することで、超短命(通常ほぼ1年の寿命が3060日程度になってしまう)な変形体株を単離した。これらの株を用いて、高頻度組換えあるいは一本鎖切断によるミトコンドリアゲノム損傷部位の特定と超短命死の関係を調べている。本研究課題は以下の4つの研究実施計画からなる.本年度は最終年度となるため,これまで蓄積したデータをまとめ,それぞれの研究実施計画を完成させるよう努力した.I)変形体寿命株の確立:多数の変形体株を作出し,寿命を4つのカテゴリー(超短命,短命,通常,長寿)に分類した.また,これら4種の寿命の株のそれぞれを複数回の交配しても,安定して超短命あるいは短命になる交配組合せを見出すことができた.さらに,ヘミン含有量の少ない貧鉄培地を用いて,鉄分不足がミトコンドリア機能の減退を招き結果として変形体の寿命を短縮することを明らかにした.II)老化進行とミトコンドリアゲノム損傷:真正粘菌のmtDNAは生体内で部位特異的な一本鎖切断を受けていることを明らかにした.こうしたミトコンドリアゲノム損傷と変形体の老化との関係を,サザンハイブリダイゼーション法とプライマーエクステンション法を用いて,塩基配列レベルで詳細に検討し,老化進行にともなって部位特異的一本鎖切断の頻度が上昇することを明らかにした.III)ゲノム損傷とミトコンドリア形態・機能不全の検出:変形体の老化進行にともなうミトコンドリアの機能変化を,酸素消費量を経時的に測定することでモニターした.その結果,変形体の酸素消費量は,超短命,短命,通常,長寿株いずれにおいても老化とともに暫時減少しており,ミトコンドリアの機能不全が老化振興とともに起こっていることを明らかにした.IV)ゲノム損傷誘導によるミトコンドリアの形態・機能不全と短命死:mFプラスミドの導入により,ミトコンドリアゲノムの高頻度組換えを誘発できる.mFプラスミドを導入したアメーバ株を交配することで,超短命(通常ほぼ1年の寿命が3060日程度になってしまう)な変形体株を単離した.こうした株のほとんどで,mFプラスミドが介在するミトコンドリアゲノム高頻度組換えが起こっており,この高頻度組換えによって誘起されるミトコンドリアゲノム損傷が短命化の原因であろうと推定できた.
新しい基底膜様構造フラクトンの機能と脳室下帯神経幹細胞の分化制御

脳実質内の毛細血管の連続した構造体fractoneを構成する分子の解析を行なった。また、マウス脳室下帯より神経幹細胞の同定と分離、さらにはその分化の制御機構を解析することを試みた。[1]新しい基底膜様構造フラクトンの分子細胞生物学的解析基底膜分子に特異的抗体を用いて免疫染色をすると、fractone構造にはラミニン、IV型コラーゲン等の分子が存在することが明らかとなった。しかし、それらの各鎖の分布には偏りが認められた。基底膜の周りに存在するfibronectinはfractone特有の染色像を示さなかった。脳や脊髄におけるfractoneの分布について調べたところ、脳室のほぼ全周に分布していたが、第三脳室の一部、第四脳室の一部では存在していなかった。また、このfractone構造は生後すぐの脳室周囲では観察されず、生後7日目から現れはじめ、生後14日目では脳室の外側壁に偏った分布を示した。さらに、特異抗体を用い免疫電子顕微鏡による解析を行ない、fractone構造に基底膜分子が存在することを認めた。[2]マウス脳室下帯より神経幹細胞の同定と分離成体マウス脳室下帯より神経幹細胞の分離を試みた。分離した神経幹細胞の基本的培養条件の設定を行い、bFGFなどのサイトカインを付加した接着性基質上での単層培養条件において、ニューロンへの分化誘導、アストロサイトへの分化誘導を試みた。さらに、マトリックス基質の調整のための基礎的な実験を行なった。成体マウスと胎児期マウスの側脳室壁神経幹細胞の分離を行い、安定したneurosphereを得ることができるようになった。また、増殖因子の除去を行ってから単層培養を行ない各種に基質上で細胞の分化誘導の解析の条件設定ができるようになった。基底膜の機能に関する研究として、私どもは以下の研究結果を得ることが出来た。1)IV型コラーゲン特異抗体による解析:マウス脳室周囲に存在する上衣細胞下帯のneurogenic zoneに見いだされた新しい基底膜様構造フラクトンの解析として、私どもは以下の研究結果を得た。α1-α6(IV)鎖に対する特異抗体によりフラクトンと思われる部位を染色したところ、陽性所見を得ることが出来た。染色パターンから推定すると、α1α1α2鎖からなる分子とα3α4α5鎖からなる分子が存在するらしいことがわかった。その分布は、α1α1α2鎖からなる分子は基底膜様構造フラクトンの存在する部位総てに陽性所見として検出された。それに比べα3α4α5鎖からなる分子は、その一部にのみ検出されることから、局在の特異性とその周囲環境としてどのような細胞が存在するかについて、明らかにすべきであると思われる。2)α1α2遺伝子発現停止マウスの作製:col4a1遺伝子とcol4a2遺伝子のプロモーター部位は、head-to-headで互いに共有して存在するが、そのプロモーター部位を含めた上流域を欠失したマウスを作製すると、胎児発生の10.5-11.5日で基底膜異常で致死的になることがわかった。基底膜を調べると、α3,α4,α5,α6鎖は存在するが、α1/α2鎖が欠如することを代償する反応は起こっていないことがわかった。さらに、ラミニンとナイドジェンは存在し、不完全な基底膜ができており、それはとくにReichert膜に機能異常として捉えられた。成体マウス脳室周囲の領域において、α1(IV),α2(IV)はlaminin γ1鎖と同じような染色像が得られた。α3(IV)、α4(IV)、α5(IV)は染色されるfractoneの数が少なく、α6(IV)は殆ど検出できなかった。

基底膜周囲に存在するfibronectinはfractone特有の染色像を示さなかった。脳や脊髄におけるfractoneの分希について調べたところ、脳室のほぼ全周に分布していたが、第三脳室の一部と第四脳室の一部では存在していなかった。また,このfractone構造は生後すぐの脳室周囲では観察されず、生後7日目から現れはじめ、生後14日目では脳室の外側壁に偏った分布を示した。これらのことから、fractoneはlaminin, IV型collagenのような基底膜を構成する分子で構成されていることが判明した。成体においてfractoneの観察されなかった部位は、軟膜によって脳室壁が作られるような部位(第三脳室および第四脳室)であり、fractoneの存在は少なくとも上衣細胞のある場所に限定されることがわかった。しかし、第三脳室腹側のように上衣細胞層が存在する部位においてもfractoneが観察されない領域があり、必ずしも上衣細胞の存在とfractoneの存在は一致しておらず、その分布はほかの要因によって決定されている可能性が示唆された。また脳室周囲が神経幹細胞のプールとなり、ここから神経新生が起こっているという報告が数多くあり、脳室周囲に存在し成長とともに出現するfractoneは神経新生の制御に関する役割を持っている可能性が考えられた。
放射性廃棄物中の高濃度アルカリ塩によるセメント硬化体の長期劣化現象と対策の提案

放射性廃棄物からの高濃度アルカリ塩によるコンクリートのアルカリシリカ反応(ASR)とその防止対策を、各種ナトリウム塩に浸漬したモルタルバーの膨張挙動より実験的に検討した。その結果,外部から浸透するナトリウム塩の種類により,モルタルバーの膨張量が相違することや、高濃度のナトリウム塩の浸透によるモルタルのASR発生機構を解明できた。さらに,ポゾラン材料(フライアッシュおよび高炉スラグ微粉末)を多量に混和することがその防止対策として有効であった。放射性廃棄物からの高濃度アルカリ塩によるコンクリートのアルカリシリカ反応(ASR)の発生機構を調べるために、各種ナトリウム塩(硫酸塩、硝酸塩、酢酸塩および蟻酸塩)に浸漬したモルタルバーの膨張挙動とASRゲルの生成状況との関連性をASTM C1260に準拠した促進試験法(温度80°Cの各種溶液に浸漬する方法)によって実験的に検討した。本研究により得られた主要な研究成果は以下に示す通りである。(1)反応性のシリカ鉱物(クリストバライト)のみから構成される焼成フリント骨材は高濃度のナトリウム塩溶液によるASRの発生機構を調べるのに適した材料であった。(2)外部から浸透するナトリウム塩の種類により、モルタルバーの膨張量が大きく相違した。すなわち、1N溶液の濃度条件では、硝酸ナトリウム、水酸化ナトリウム=塩化ナトリウム、硫酸ナトリウム、蟻酸ナトリウム=酢酸ナトリウムの順番で、モルタルバーの膨張率が増大した。(3)塩化ナトリウムおよび硝酸ナトリウム溶液に浸漬した場合、溶液濃度が1Nから5Nになると、モルタルバーの膨張率が大きく増大した。この反応はアルミネート相のフリーデル氏塩の生成反応に関係していた。(4)促進試験におけるモルタルバーの膨張率と酢酸ウラニル蛍光法によるASRゲルの発色面積率、偏光顕微鏡による薄片試料のASRゲル及びひび割れの観察結果とは良く一致していた。(5)示差走査熱量分析(DSC)、X線回折分析(XRD)によって求めた水酸化カルシウムや新たな水和生成物の同定結果より、ナトリウム塩によるASRの発生機構を説明することができた。以上放射性廃棄物から浸出する高濃度アルカリ塩によるコンクリートのアルカリシリカ反応(ASR)の発生機構とその対策を検討するために、各種ナトリウム塩に浸漬したモルタルバーの膨張挙動とASRゲルの生成状況との関連性についてASTM C1260に準拠した促進試験法(温度80°Cの各種溶液に浸漬する方法)によって実験的に検討した。また、各種ナトリウム塩によるASRの防止対策として、ポゾラン材料(フライアッシュおよび高炉スラグ微粉末)の多量使用によるASRの抑制対策の効果についても検討した。(1)焼成フリント骨材を使用したモルタルバーの膨張挙動を比較することにより、外部から浸透するナトリウム塩の種類により、モルタルバーの膨張量が相違することが確認できた。すなわち、1Nの濃度条件では、硝酸ナトリウム→水酸化ナトリウム冨塩化ナトリウム→硫酸ナトリウム→蟻酸ナトリウム=酢酸ナトリウムの順番でモルタルバーの膨張率が増大しており、モルタルの膨張量は酢酸ウラニル蛍光法により測定したASRゲルの生成量および偏光顕微鏡による薄片試料のASRゲル及びひび割れの観察結果と良く一致していた。(2)モルタル薄片のEPMAによる分析により、ASRゲルの生成に寄与するアルカリ雰囲気(NaやKイオンの生成過程)を確認することができるとともに、示差走査熱量分析DSC)やX線回折分析(XRD)によって求めた水酸化カルシウムの減少と新たな水和生成物(複塩)の同定結果より、高濃度のナトリウム塩によるモルタルのASRの発生機構を説明できた。(3)高濃度のナトリウム塩によるASRの発生を防止するためには、ポゾラン材料(フライアッシュおよび高炉スラグ微粉末)を多量に使用し、かつ前養生期間を長く設定することにより、モルタル中の水酸化カルシウムの生成量を低減することが有効であった。放射性廃棄物から浸出する高濃度アルカリ塩によるコンクリートのアルカリシリカ反応(ASR)の発生機構とその対策を検討するために、各種ナトリウム塩に浸漬したモルタルバーの膨張挙動とASRゲルの生成状況との関連性についてASTM C1260に準拠した促進試験法(温度80°Cの各種溶液に浸漬する方法)によって実験的に検討した。また、各種ナトリウム塩によるASRの防止対策として、鉱物質混和材(フライアッシュおよび高炉スラグ微粉末)の多量使用によるASRの抑制対策の効果についても検討した。さらに、各種リチウム化合物におけるLiイオンのセメント硬化体への拡散性状とリチウムによるASRの抑制機構についても検討した。すなわち、1Nの濃度条件では、硝酸ナトリウム→水酸化ナトリウム=塩化ナトリウム→硫酸ナトリウム→蟻酸ナトリウム=酢酸ナトリウムの順番でモルタルバーの膨張率が増大した。

(2)モルタル薄片のEPMAによる分析により、ASRゲルの生成に寄与するアルカリ雰囲気(NaやKイオンの生成過程)を確認することができるとともに、示差走査熱量分析(DSC)やX線回折分析(XRD)によって求めた水酸化カルシウムの減少と新たな水和生成物(複塩)の同定結果より、高濃度のナトリウム塩によるASRの発生機構を解明した。(3)高濃度のナトリウム塩によるASRの発生を防止するためには、ポゾラン材料(フライアッシュおよび高炉スラグ微粉末)を多量に使用し、かつ前養生期間を長く設定することにより、モルタル中の水酸化カルシウムの生成量をできるだけ低減することが有効であった。(4)拡散セル法により測定した硝酸リチウムと亜硝酸リチウムにおけるLiイオンの拡散性状はほぼ同じであり、経済性とASR抑制効果の両観点から、硝酸リチウムの使用が有利であった。
わが国の現代の経営環境に適応した原価理論の条件を探るための実態調査

日本の現代の経営環境に適した原価理論を再構築する準備を行うことを目的として、現在の通説的ドイツ原価理論で仮定されているさまざまな前提が現在のわが国の経営にどの程度あてはまるかを業種ごとに明らかにするための質問票調査を行った。質問票は、我が国の製造業の上場会社の中から250社を選択して、発送した。業種は、水産・農林、鉱業、建設、繊維、食料品、繊維、パルプ・紙、化学、石油・石炭、ゴム、窯業、鉄鋼、非鉄金属、金属製品、機械、電気機器、輸送用機器、精密機器、その他である。質問票の設計にあたり、従来のドイツにおける原価理論の文献の整理から、通説的原価理論を構成する様々な理論とその理論が前提としている経営現象を要素に分解し、それが現在の経営環境においてどの程度観察されるかを知る質問を行った。たとえば、現在の原価理論において極めて重要な概念である強度という概念が、各業種ごとに現在の経営環境でどのように観察されるかを質問した。また、現代のわが国の経営環境で経理担当者がとくに重要と感じ、原価計算に反映させたいと感じている現象は何かについても質問した。質問票が回収できた企業は、そう多くはなかったため、必ずしも普遍妥当性をもつ結論は得られなかったが、我が国の環境にあった原価理論を構築するうえで、きわめて重要な示唆が得られた。通説的原価理論において重要な概念であった強度は、今日ではサイクルタイムという形でやはり経営の重要な概念として存在していることが確認された。しかしながら、強度と燃料消費量の関係のような技術的関係については関心が低いことが確認された。アウトプットの測定理論のような新たに原価理論モデルに組み込む必要があるわが国に特徴的な問題がいくつか確認されたが、具体的にどのようなモデルを作ったらよいかについては、今後さらに聞き取り調査等を行っていく必要がある。