hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
日本語音声の地域差・世代差の音韻論的・音響学的分析

一方,最近急速に発達した実験音声学的手法による研究が,方言音声に適用され始めているが,未だ断片的である.本研究では,これまでにない広がりと深さをもって,現代日本の方言音声の実態を解明することを目的とした.最近の共通語化と日本語音韻の長期的変化傾向にも着目して,将来の変化をも見通すことによって,音声学・方言学・国語教育学に資することができる.62年度には,次のような研究を実施した.a.音声分布調査ー前年度の調査で収集したテープを分担して聞き取った.またいくつかの項目については電子計算機にデータを入力し,日本全体の音声分布図として出力した.調査の方法・項目を再検討し,全国約30高校で第2次調査を行った.高校教師を通じて調査票・カセットテープ等を配布し,高校生および地元出身の老人に各種の音声をテープに吹きこんでもらった.集まったテープ約100本で,老年層と高校生あわせて,約200人の音声データが得られた.これを調査項目ごとに別テープに編集しなおしている.b.重点調査ー全国用の音韻調査票が完成し,印刷して分担者などに配布した.全国的にみて重要と思われる3地点を選んで地域分担の研究者が出向いて,音韻論的分析を行った.c.音響学的に理想的な環境で,分析に耐えうる良質な録音をとった.得られた資料から順に,ソナグラフまたは電子計算機による周波数分析などを施している.奄美方言の分析がもっとも進んでいる.d.打ち合わせ会ー年2回開き,調査・分析方法を検討し,各自の分担について成果を発表すると共に,次年度の調査の計画を進めた.本研究では、これまでにない広がりと深さをもって、現代日本の方言音声の実態を解明することを目的とした。63年度には、次のような研究を実施した。a.音声分布調査-全国約20高校で第3次調査を行った。高校教師を通じて調査票・カセットテープ等を配布し、高校生および地元出身の老人に各種の音声をテープに吹き込んでもらった。集まったテープ約50本で、老年層と高校生あわせて、約100人の音声データが得られた。これを調査項目ごとに別テープに編集しなおしている。前年度までの調査で収集したテープの聞き取りをアルバイターに頼んだ。また聞き取りの終った分についてはほぼ全項目を電子計算機にデータ入力し、日本全体の音声分布図として出力した。b.重点調査-全国用の音韻調査票が完成し、印刷して分担者などに配布した。全国的にみて重要と思われる3地点を選んで地域分担の研究者が出向いて、この調査票を用いて音韻論的分析を行った。c.音響分析-音響学的に理想的な環境で、分析に耐えうる良質な録音をとった。得られた資料から順に、ソナグラフまたは電子計算機による周波数分析などを施している。琉球方言・東北方言については、音韻分析とも関連させて、公表した。d.打ち合わせ会-年2回開き、調査・分析方法を検討し、各自の分担について成果を発表すると共に、最終的なまとめと公表の計画について話し合った。e.報告書-3年間の成果のまとめとして、報告書を公にした。また分担者により、論文または口頭発表の形で、成果の報告が行われた。研究自体はさらに、整理の期間が必要でありまた続行の価値があるので、何らかの形で共同研究を進める態勢ができている。
水中作業機械用高度遠隔操作インタフェースに関する研究

港湾工事における水中作業は潜水士に依存している.そこで重量物を把持固定し同時に加工する作業を想定し,精密な動作を行える電動アームをフォークグラブアタッチメントに追加することとした.新たに左手用のインタフェースを製作し,その機構や作業性についてミニショベルによる実験を行ない,鋼材把持と溶断の同時作業を実現した.本技術を活用することで,水中での安全で効率的な機械化作業が期待できる.港湾工事における水中作業は潜水士に依存している.そこで重量物を把持固定し同時に加工する作業を想定し,精密な動作を行える電動アームをフォークグラブアタッチメントに追加することとした.新たに左手用のインタフェースを製作し,その機構や作業性についてミニショベルによる実験を行ない,鋼材把持と溶断の同時作業を実現した.本技術を活用することで,水中での安全で効率的な機械化作業が期待できる.港湾施設はその大部分が水面下に構築されるため,その整備や点検・診断,維持・補修の多くは水中での作業となるが,現状ではこれらの作業について潜水士に依存している.そこで,過年度に行った水中バックホウの遠隔操作に関する成果を基に,維持補修を目的とした重作業用マコピュレータとして,水中バックホウの利用を提案し研究を行う.本研究では,フォークグラブアタッチメントに軽作業用電動アームを取り付け,水中で重量物を把持しながら,溶断・孔開け等の作業が行える作業機械システムを遠隔操作するインタフェースについて研究を行ない,水中作業における機械化・無人化に繋ぐものてある.平成21年度はベースとなる当所所有の水中バックホウのフォークグラブ操作を行なう左手インタフェースを開発し,複数の制御方法について実験を行なった.(研究成果)利き手ではない側での操作の場合,複雑な操作入力や情報呈示は混乱を招く恐れがある.そこで直動スライダにより位置情報を呈示,押付け力を入力とする操作インタフェースを製作した.これは左手首の力を力センサで感知,Slaveの移動速度とし,Slaveの位置とインタフェースの位置を合わせることでSlaveの位置情報を呈示するインタフェースである.しかしSlaveの運動をエミュレーションした実験の結果,遅延がある場合に手首の力入力に強弱か発生し,発振のようた現象が確認できた.そとでSlave側にも力センサを設置し,無負荷状態では位置対称型制御,負荷状態では力帰還型制御とすることで,この問題を解決することとした.次年度は,電動式アーム(Slave)を製作し,ドリル等の作業工具により,孔開け作業を対象にシステムの作業性や精度を陸上実験により検証する.港湾施設はその大部分が水面下に構築されるため,その整備や点検・診断,維持・補修の多くは水中での作業となるが,現状ではこれらの作業について潜水士に依存している.そこで,過年度に行った水中バックホウの遠隔操作に関する成果を基に,維持補修を目的とした重作業用マニピュレータとして,水中バックホウの利用を提案し研究を行う.本研究では,フォークグラブアタッチメントに軽作業用電動アームを取り付け,水中で重量物を把持しながら,溶断・孔開け等の作業が行える作業機械システムを遠隔操作するインタフェースについて研究を行ない,水中作業における機械化・無人化に繋ぐものである.平成21年度はベースとなる当所所有の水中バックホウのフォークグラブ操作を行なう左手インタフェースを開発し,複数の制御方法について実験を行なった.平成22年度はバークホウフォークグラブに3軸自由度の電動アームを設置し,前年度成果のインタフェースによる制御を行った.(研究成果)利き手ではない側での操作の場合,複雑な操作入力や情報呈示は混乱を招く恐れがある.そこで直動スライダにより位置情報を呈示,押付け力を入力とする操作インタフェースを製作した.これは左手首の力を力センサで感知,Slaveの移動速度とし,Slaveの位置とインタフェースの位置を合わせることでSlaveの位置情報を呈示するインタフェースである.本インタフェースによりバックホウに新たに設置した電動アームを制御し,重量物を把持しつつ溶断など複雑な作業を実現した.
発育急進期における積極的な身体活動が、呼吸器系の発育・発達に及ぼす影響について

○研究目的体力面での中学生期の現状には憂うるものがある。そこで、特に呼吸機能の発育・発達の促進をはかるためには,発育急進期である中学生期においてどのような運動に関わる生活を行うことが大切であるのか,且つまた,有効であるのかという指針を得ることとした。○研究方法・手順1.対象:広島大学附属福山中学校366名1年生(女61名男61名)2年生(女61名男61名)3年生(女61名男61名)2.期間:2008年6月11月3.事前調査:肺活量の計測(1回目=6月)事後調査:肺活量の計測(2回目=11月)・健康や運動に対する基礎調査肺活量計を用いて前後2回の測定を行うとともに,文部科学省が2008年度に実施した「全国体力・運動能力,運動習慣等」の調査項目に準じて実態調査を行い,短期間ではあるが,肺活量の増加に授業以外の運動回数が及ぼす影響を分析した。○研究成果(1)週当たりの運動時間を,体育の授業以外に週3日以上確保すること。(2)そのときに、1時間以上運動することが,発育急進期の中学生にとっては好結果をもたらす。と結論づけられる。運動の質としては、有酸素運度を継続して行うことを日常生活の中に取り入れて行い,肺活量を増大させるだけでなく,酸素摂取能力などの心肺機能の向上や毛細血管の増加等を目的として運動を行うこと。環境としては、授業以外の運動クラブの活性化や,それに属さない生徒の積極的な参加を促す体育的行事,また,生徒への啓発活動など,日常的に運動量を確保することの工夫と改善が急がれるべきであると言える。と結論づけられる。
自己組織化ハニカム構造によるフォトニック結晶導波路のラピッドプロトタイピング

本研究では、ボトムアップナノテクノロジ-のキ-技術である自己組織化によるナノ・ミクロ構造形成と、成熟した技術である無電解メッキを組み合わせることで、全湿式プロセスによるラピッドプロトタイピングが可能であることを示すことができた。また、マイクロメ-タ-スケ-ルの細孔を有するハニカム様多孔質フィルムが赤外領域でフォトニック結晶になりうることを確認しており、細孔径のサブミクロン化によって可視光領域でのフォトニック結晶が可能となる。金属化により、高屈折率化と力学強度にすぐれた材料が期待される。本研究課題の目的は、高分子溶液を高湿度下でキャストして製膜することで、結露した水滴を鋳型として形成されるハニカム状多孔質膜をフォトニック結晶とし、これに光架橋製樹脂を包埋、レーザにより導波路を形成することで、簡便にフォトニック結晶導波路を作製する技術を提供することにある。今年度はハニカム状多孔質膜の無電解メッキを用いた金属化により、高屈折率・高導電率・高耐久性のフォトニック結晶マトリクスの作製と構造制御を行った。ハニカム状多孔質膜は高分子から作製されるため、フォトニック結晶として必要な空気との屈折率差を得ることが難しい。また、耐熱性や耐溶剤性に乏しい。高屈折率化と高耐久化のために、パラジウムを触媒とした無電解メッキによりハニカム膜の金属化を試みた。50nm程度の厚みの白金/パラジウム(Pt/Pd)膜をスパッタリングによりポリスチレンからなるハニカム状多孔質膜表面に形成し、これを硝酸銀とヒドラジンのバッファ溶液中に浸漬することで銀をPt/Pd膜上で還元し、析出させた。X線光電子分光(XPS)により表面での銀の析出を確認し、導電性原子間力顕微鏡測定(cAFM)により膜が高い導電性を持っていることを確認した。溶剤処理および加熱処理(焼成処理)により、鋳型高分子を除去することが可能なことを見いだした。さらに金属化したハニカム膜が高い視野角制限効果があること、ハニカム状多孔質膜の上面を剥離することで得られるピラー構造を金属化することで、電界放出素子や表面増強ラマン散乱(SERS)基板への応用が可能となることが示唆された。以上の結果をまとめ、論文を2報、特許を4件報告した。そのほか、ハニカム膜の作製手法および応用に関し、論文を2件、書籍を1つ出版した。本研究の目的は、空気中から結露した水滴を鋳型として形成される自己組織化ハニカム状多孔質膜を金属メッキして屈折率を制御するとともに、光架橋樹脂と組み合わせることで、フォトニック結晶等への応用を計るものである。本年度は無電解メッキ・無電解析出を用いてハニカム状多孔質膜および関連微細構造の金属化を行い、多様な金属構造(酸化物も含む)を作製した。その結果、以下の成果を得た。(1)銀などの導電性金属だけではなく、透明導電膜材料として期待されている酸化亜鉛をハニカム膜表面に形成することが出来ること見いだした。(2)孔が上下に貫通したハニカム状多孔質膜を銀メッキにより金属化し、光透過性の角度依存性について検討したところ、透過率の入射角依存性があることを見いだした。(3)ハニカム状多孔質膜を鋳型としてスパッタリングと金属メッキを行うことにより、シリコンやガラス等の固体基板やポリマーフィルム等のフレキシブル基板上に周期的な金属ドット構造を作製できることを見いだした。ドット構造形成後にポリマーフィルムを溶解させることで、金属ディスク構造の作製も可能となることを見いだした。(4)光架橋性樹脂からもハニカム状の多孔質膜を形成することに成功し、実用材料としての耐久性の向上が期待される。本研究成果を基に論文を3報報告した。本研究の目的は空気中から結露した水滴を鋳型として形成される自己組織化ハニカム状多孔質膜を金属メッキして屈折率を制御し、光架橋樹脂と組み合わせることで、フォトニック結晶等への応用をはかるものである。本年度はハニカム状多孔質膜を熱収縮フィルム上に形成し、その後熱収縮させることで異方的に膜を収縮させ、その結果表面の多孔構造の制御を行った。ハニカム状多孔質膜の空孔サイズは基本的にはマイクロメーターサイズであるため、可視光の波長を制御するには空孔の微細化が必要である。過去の研究からハニカム状多孔質膜を延伸処理により変形させ、その空孔の形状を制御する事を報告していたが、今回はゴム性のポリマーであるポリブタジエンからハニカム膜を作製し、熱収縮フィルム上で収縮させることにより、空孔の形状制御とサイズの縮小の両立を検討した。その結果、収縮の方向とハニカム状多孔質膜の空孔配列の組み合わせにより、楕円や矩形、あるいは三角形などの形に空孔を制御できること、空孔サイズを可視光の波長程度である数百ナノメートル程度まで縮小できることを見いだした。

また、収縮率が高すぎると、膜の表面が座屈することで、多孔質膜の形状が3次元的に変形することも見いだした。その他にも界面張力がハニカム状多孔子膜の形成プロセスに与える影響について検討を行い、溶液の界面張力が一定の範囲内にある場合に均一性の高いハニカム状多孔質膜が得られることを見いだした。以上の成果を論文として報告した。
発話のメカニズムから見た身振りと発話の協調に関する研究

発話と、手を使って図像的に概念を表すことができる身振りの関連性について、発話処理の過程で、二つのモジュールが独立しているのか、相互にモニタリングを介して結びついているのか調べた。手を板に固定して身振りの産出を制限する条件と、自由に身振りが使用できる条件のもとで、説明課題に参加してもらうことによって、話し手の流暢性、擬音語・擬態語の頻度、声の質など、発話の側面に変化が生じるかどうか明らかにした。身振りが発話に与える影響を探るため,本研究では,発話中の話し手の身振りを制限することによって,発話に含まれる言語的特徴に違いが生じるかどうか調査する。当年は,パイロットデータの収集、実験、そして,映像・音声データのコーディングを行った。実験には,短いアニメーションクリップの内容を描写してもらう説明課題を用いた。手袋を板の上に固定したものを用意し,実験の参加者のうち半数のグループには,手袋をはめた状態で課題を遂行してもらい(身振り制限条件),残りの参加者には,手袋なしで自由に話してもらった(身振り非制限条件)。研究開始当初は,参加者はビデオカメラに同かって一人ずつ説明してもらう予定であった。しかし,話し手がビデオに向かって語りかける場合,身振りが大幅に抑制きれる傾向があることがパイロット実験から明らかになった。そのため,二人一組で実験に参加してもらうことによって,一方のグループには,一人ずつビデオカメラに向かって説明をしてもらい,もう一方のグループには,一方の参加者がもう一方の参加者に語りかける形で,説明してもらった。実験の様子は,3台のビデオカメラによって撮影した。データのコーディングには、発話情報と身振り情報をそれぞれ音声分析ソフトPraat,そして,映像を用いた分析ソフトElanを用いた。発話については,休止によって区切られる単位,文節,さらに助詞や助動詞などの形態素情報をコードした。また,一部の形態素に対しては,擬音語・擬態語,名詞,動詞,形容詞,格助詞など,品詞情報を付与した。身振り情報については,自由に身振りが出来る条件で観察された身振りをいくつかの意味的・語用論的カテゴリーに分類しながらコーディングを行っているところである。前年度収集したデータをもとに、引き続き、発話と発話に伴って現れる身振りのコーディングを行った。3つの角度から撮影された映像を同時に参照しながら、身振りが使用される位置をコードし、発話における休止の位置、文節ごとに区切られた発話の内容などとの相対的な生起関係を参照することを可能にするため、コーディングには映像と音声ファイルをリンクすることができる身振り分析ソフトを使用した。データは、自由に身振りを使用できる条件と、板に固定された手袋を使用することで、身振りを抑制された条件とで収集された。身振りと意味的に対応する発話要素の有無についてのデータを整備する以外にも、身振りを制限された状況において、どのように言語が変化するか調べるため、助詞、名詞、形容詞などの品詞情報、および使用される動詞の種類についても、コーディングを行った。今後、発話と身振りに関する分析を進めていく予定であるが、現時点での結果の一つとして、身振りの有無によって発話のピッチが変化しないことがわかった。手を自由に動かせる条件と比較して、身振り抑制条件では、手以外の身体部位(頭、胴体、腕)の動きが活発になったことから、1.身振りが発話と不可分の要素であり、2.手による身振りが抑制された場合、手よりも意味表出可能性が低いと思われる頭や胴体などが手にとって代わることができること、を示している。また、この身振りの転移によって、発話のピッチが変化しなかった可能性も否定できない。発話のピッチが変化しなかった点については、擬音語・犠声語についても同様であった。「身振りの制限による発語への影響」は、身振りを制限して行ったアニメーションの説明課題による実験から得られた研究成果のまとめである。両手を板に固定することで、発話にどのような変化が生じるかという点について、特に身振りと連動して生起することが多いとされるオノマトペ(擬音語・擬態語)を対象に分析を行った。その結果、身振りの制限の有無にかかわらずオノマトペの頻度は一定であることが明らかになった。また、声の局さや言い淀みの頻度についても同様の結果が得られた。このことは、身振りと発話が一部独立したプロセスのもとに産出されている可能性を示唆している。しかし、両手を固定された場合、手以外の身振りが増加し,それらの身体動作とオノマトペとが同時に現れる確率が高いことがわかった。これは、オノマトペと身振りの結びつきの強さを示すものであり、身振りを手以外の身体部分に現れる自由度の高いモダリティーとして捉えなおす必要性を示している。次に、発話と身振りの結びつきを対話者の空間の使用という観点から分析するため、対話者が幾何学パズル課題を使って実験を行った。

その際、対話者がお互いの身振りを見ることができる低い衝立と、完全に視野を遮る高い衝立を使うことで、コミュニケーションにおける身振りの役割と空間の使用について調査した。その結果、高い衝立がある場合には、身ぶりが伝達機能を失うことから、身振りは机の上の位署で行われることが多かった。一方、低い衝立しかなく、お互いの身振りを参照できる状況では、対話者の身振りが、顔の前面近くで行われる頻度が増加した。意味伝達を補助する手段として身振りが積極的に利用され、視覚的により焦点化された位置が用いられやすくなったといえる。対話者が相互に身振りを参照しつつ、理解しやすい形態を選択することで、発話と身振りを連携させた効率的な意味伝達が行われていると考えられる。
“みどりの香り"の酵素的生成機構の解明

本年度交付申請書の研究実施を計画に従って報告する。1).イ)チャ葉リポキシゲナ-ゼの精製穏和な抽出条件で得たチャ生葉膜画分より各種界面活性剤によるリポキシゲナ-ゼの可溶化を試みたが、いずれの場合もリポキシゲナ-ゼは可溶化されなかった。このことはリポキシゲナ-ゼが膜に結合していることを活性発現の必要条件としていることを示唆する。現在、ダイズ種子リポキシゲナ-ゼに特異的な抗体を作成し、チャ葉リポキシゲナ-ゼとの交差反応を試みている。ロ)酵素修飾モデル酵素であるダイズ種子リポキシゲナ-ゼ-1のアルギニン残基を修飾して活性発現様式の変化を追ったところ、アルギニン残基を修飾したリポキシゲナ-ゼは修飾しないものと比較してその活性が反応液のイオン強度に大きく左右されることを明らかにした。2)基質構造異性体を用いてLox活性及びHPOLyase生成物特異性の解析等基質として各々の酵素の親水領域及び疎水領域の検索のため前者に対してはω6,ω9のジエン系及びω3,ω6,ω9のトリエン系でω10位よりカルボン酸側へ炭素鎖を延長したC_<14>-C_<24>構造異性体(以下気質A,Bグル-プと略称)を合成、また後者についてはα位より数えて1424まで炭素鎖を延長したカルボン酸構造異性体(Cグル-プ)を合成した。そして、まずLOX活性はAグル-プに対してω6位へO_2添加の相対活性はリノ-ル酸(C_<18>)を100とし、C_<20>:120にピ-クをもつこと、Bグル-プは各々に対してC_<20>:140にピ-クを示し、活性は両側でかなりブロ-ドな値を示した。一方Cグル-プはC_<18>を100とし、それ以外ではいずれも10%以下で非常に特異性がはっきり示された。また、各生成物の幾何異性性や光学異性性について分析結果を出し、その反応に関する解析がなされ公表した。
矮性ネピアグラスによる省力的・環境保全的な繁殖牛飼養体系の九州沖縄地域への普及

ネピアグラス矮性晩生品種(DL)の南九州地域への適応性とDL草地の省力的、永続的な繁殖牛飼養体系の確立を3ヵ年間検討した。その結果、南九州低標高地ではDLは越冬期間の最低気温の極値が-6.2°C以下で越冬率が急減する(石井ら2006 ; Ishii et al. 2008)が、DL-追播イタリアンライグラス草地は、造成2年目以降年間約130160日間輪換放牧可能で、DLの草高を約100110cmに保てば、造成後少なくとも5ヵ年間、家畜増体性(約0.5kg/日)と利用率(約50%)の高い草地を維持でき(石井ら2007)、このことは南九州の平均的頭数の繁殖牛群でも実証された(石井ら2009)ことから、和牛繁殖の新たな飼養体系として提起された。1.南九州の低標高地における矮性(DL)ネピアグラスの地域適応性を,宮崎県宮崎市,熊本県水俣市,五和町,合志町および長崎県有明町の放牧あるいは採草利用条件下で,造成の13年目に比較した。DLネピアグラスの越冬率は概ね90%以上であったが,合志町では,20032004年に17%,20052006年に10%と低く,これは最低気温の極値が-7°C以下と低いことが原因と考えられた。また,連続放牧利用を行った場合には越冬率が低下し,20042005年の五和町では73%,20052006年の水俣市では9%であった。したがって,1)DLネピアグラスの越冬率は越冬期間の最低気温に大きく影響を受け,最低気温の極値が-6.2°Cを下回ると越冬率が急減すること,2)連続放牧利用では同一気温条件下の輪換放牧利用に比して越冬率が大きく低下することが明らかとなった。このことから,DLネピアグラスの多年利用可能な地域とその利用形態が明らかとなった(石井ら2006)。2.5aのDL草地を6区(計0.3ha)造成し,肉用繁殖育成牛3頭を,20032006年の4カ年の6月下旬(7月上旬)10月下旬(11月上旬)までの約120日間放牧利用できた。この全期間の日増体量はそれぞれ,0.44,0.43,0.56,0.21kg/日であった。放牧前の草量と被食量はほぼ連動したが,放牧前の草量の年度間変動(7651830gDM/m^2)に比べて,被食量の変動(6321014gDM/m^2)は縮小した。周期別の日増体量は,何れも初回では低く,特に乳用種で低くなったが,これは被食量の低さとは完全には連動しなかった。年間合計の草量と被食量との間には正の相関関係があり,初回放牧開始時の草量確保が,年間を通じた被食量を高めるために必須であった。したがって,DL-追播IR草地は,造成2年目以降年間約130160日間輪換放牧可能で,初回放牧開始時のDLの草高を約110cmに保てば,造成後少なくとも5ヵ年間,家畜増体性(約0.5kg/日)と利用率(草量に対する被食量の比率が約50%)の高い草地を維持できるが,初回放牧時における家畜生体重の維持と草地利用率の向上が課題であることが明らかとなった(石井ら2007)。南九州における省力的で永続的な粗飼料生産体系を確立する一貫として,過去数年間の試験から,南九州の低標高地では盛夏期間の約4カ月間に,多年的にネピアグラス(Pennisetum Purpureum)の矮性晩生品種(DL)を輪換牧利用できることが確認されている。この家畜飼養体系としては,生体重300kg前後の黒毛和種育成牛(繁殖後継牛)を,10a当り約1頭の放牧強度で,従来補助飼料を給与せずに輪換放牧していたが,育成牛の日増体量(LWG)が0.43,0.42kg/日と低いため,本体系における濃厚飼料補給の影響を2007年では検討した。LWGは2007年の全期間平均では0.57kg/日であり,放牧後速やかにLWGは増加に転じ,放牧後期の速度低下も抑制された。これは第1,3周期の被食量がほぼ同程度であったことから,濃厚飼料補給の効果と考えられた。

初回放牧開始時における草量を確保することが,年間を通じた被食量の増加に必須であり,極端な草高の増加は草地の利用率を低下させた。したがって,DL草地の約120日間の輪換放牧において,給与基準の約1/3量の濃厚飼料補給でLWGを約0.6kgに維持できることが明らかとなり,和牛繁殖経営における育成・繁殖後継牛の新たな飼養体系となりうることを提起した。次いで,南九州の宮崎県(2箇所),熊本県(3箇所),鹿児島県(5箇所)に倭性ネピアグラスを実証展示栽培し,1番草および2番草の生育と消化率,粗タンパク質含量などと土壌の化学性を調査した。その結果,離島を含む実証展示試験地のいずれににおいても,矮性ネピアグラスはよく適応でき,満足しうる粗飼料収量と飼料品質を挙げることが実証された。【目的】南九州における省力・永続的な粗飼料生産体系の確立を目指し,平成20年度は標準規模繁殖牛農家に合致した黒毛和種繁殖牛群を,ネピアグラス(Pennisetum purpureum Schumach)の矮性晩生品種(以下DL)草地とDLの畦間に追播したイタリアンライグラス(IR)草地に輪換放牧した。【材料と方法】宮崎大学農学部附属住吉フィールド(31.59°N)で,2006年5月25日に栄養繁殖で造成したDL放牧草地0.66haに,2007年12月8日にIR(品種エース)を追播した。黒毛和種成牛10.6頭(放牧開始時平均406kg/頭)と子牛4.1頭(同58kg/頭)を,IRには2008年3月31日から断続的に3周期(計30日間),DLには7月14日10月31日に4周期(計71日間)輪換放牧した。DLの休牧期間は4週間で,各牧区退牧後に自給粗飼料を24日間給与(舎飼)し,各牧区の入/退牧時にDLの草高,茎数,草量,部位別乾物重を,各周期の開始/終了時に放牧牛の体重を各々測定した。【結果と考察】13.2aのDL草地計5区(0.66ha)により,自給粗飼料を舎飼中8.3kgDM/頭/日給与したが,10.6頭の繁殖成牛群を7月中旬10月下旬の71日間(舎飼と合わせて110日間)輪換放牧できた。この期間の放牧前草量は389703gDM/m^2/年,被食量は214484gDM/m^2/年,草地利用率は4485%の牧区間変動を示した。成牛の日増体量(DG)はDL草地放牧期間の平均では0.22kg/頭/日で,第34周期目では0.740.77kg/頭/日であり,牧養力は891CD/haと算出された。以上のことから,DL草地は盛夏期間の約3カ月半,IRは春期の1カ月輪換放牧でき,繁殖牛群の体重は維持できることから,和牛繁殖経営の新たな飼養体系が提起された。
外部ベース層下エッチングを特徴とする超高速コレクタアップInP系HBT

外部ベース層下エッチングにより高性能なコレクタアップ構造GaInAs/InP系HBTを実現することを目的として、その様な構造作成を可能にするためのプロセスを開発した。具体的には、以下の2つの結果を得た。1.外部ベース層下のInPエミッタを化学エッチングで選択的に除去する際のアンダーカットによるメサ形成に関して研究を行った。最小幅として360nmを確認し、ここまでは縮小可能であることが明らかになった。また、アンダーカットのエッチング量の制御性はメサ形成を全て化学エッチングで行った場合に較べて、メサ形状をドライエッチングにより形成した後、アンダーカットのみを化学エッチングで行った場合の方が偏差が少ないことが明らかになった。2.通常の光リソグラフィを用いた場合、露光時の余裕から、外部のコンタクトパッドとベースを電気的に結合するために必要なベースパッドに2μm以上の幅を持った領域が必要であり、不要なベースパッド下エミッタを除去するために大きな障害となっていたが、電子ビーム露光による合わせ精度(100nm程度)で、200nm以下のコンタクト穴開けを可能にした。技術的には、電子ビーム露光によりポリイミドをopeningするプロセスであり、スピンオングラスを中間材料に用い、ここにEBレジストのパターンをRIEで一度転写し、その後ガス種を変えたRIEでポリイミドをopeningする手法を用い、400nm程度の厚さの160nmの微細コンタクト穴開けを可能にした。実際にホットエレクトロントランジスタを測定し、ガンメルプロット特性から、電気的に穴開けが行われていることを確認した。
カルシウム結合タンパク質Ｅｆｐ遺伝子改変マウスを用いた自己免疫性関節炎の研究

本課題では、自己免疫性関節炎発症の根幹である自己反応性T細胞の発生機構を明らかにすることを目指す。以下に、【1】胸腺におけるT細胞レパトア制御機構の解析と、【2】末梢T細胞の活性化に寄与する翻訳後修飾分子の解析について報告する。【1】カルシウム結合タンパク質Efpによる胸腺細胞の分化制御:Efp欠損による胸腺細胞の正負の選択への影響の評価、及びEfpの下流分子の特定に取り組んだ。Efp下流分子に関しては、特に関節リウマチの疾患感受性が報告されている遺伝子に着目し、EfpによるT細胞レパトア制御に関わる因子の検討を進めた。具体的な方法としては、Efp欠損胸腺細胞にて発現上昇した遺伝子をレトロウイルスベクターにより胸腺細胞に導入した後、胎児胸腺器官培養系にて分化させることで、過剰発現により正負の選択が障害される遺伝子を選定した。今後、候補遺伝子に対する遺伝子欠損マウスの作製し、T細胞レパトア制御を生体レベルで検証することを目指す。【2】新規翻訳後修飾分子によるT細胞の活性制御:TCR刺激に伴って発現上昇する、特定の翻訳後修飾酵素のT細胞特異的遺伝子欠損マウスの解析を行った。当該分子は、iNKT細胞の早期分化と、末梢のCD4およびCD8T細胞の活性化に重要であることが示された。さらにRNA-seq解析やフローサイトメトリー法を用いて、当該分子の下流で制御される遺伝子や、翻訳後修飾の基質を特定した。以上の結果により、当該翻訳後修飾分子の制御異常が、末梢T細胞の異常な活性化に関連する可能性が考えられた。29年度が最終年度であるため、記入しない。本年度は、胸腺におけるT細胞レパトア制御機構の解明を目的とし、以下2つの側面から研究を行った。1カルシウム結合タンパク質EfpのT細胞における機能解析:T細胞特異Efp欠損マウスの胸腺細胞にin vitroでTCR刺激を誘導し、TCRシグナル下流分子のリン酸化状態を解析した。さらに、現在トランスクリプトーム解析結果やリアルタイムPCR法を用いて、胸腺細胞の生存や増殖、分化に関連する既知遺伝子の発現を検証している。2翻訳後修飾によるT細胞レパトアの制御:T細胞にTCR刺激を誘導すると、ある種の翻訳後修飾が増加することを見出した。着目した翻訳後修飾機構は、転写制御やスプライシング制御など様々な生命現象を担っているが、T細胞における実態は不明である。今回、我々はこの翻訳後修飾を媒介する修飾酵素の発現も、TCR刺激に伴って上昇することを認めた。本修飾酵素のT細胞レパトア制御における機能を検証するために、我々は本修飾酵素の該当遺伝子のfloxedマウスを独自に作製した。本マウスとT細胞特異的にCreを発現するマウスを交配させ、T細胞特異的欠損マウスを得た。今後、T細胞特異的欠損マウスを用いて、胸腺T細胞レパトア制御における当該タンパク質の機能を検証していく。本研究は、T細胞レパトアの新たな制御機構を提唱するものであり、自己免疫疾患発症メカニズムの分子基盤の提供へと繋がる。申請時の計画どおりに、T細胞特異Efp欠損マウスより胸腺細胞を単離し、in vitroでTCR刺激を誘導してTCRシグナル下流分子のリン酸化状態を解析した。また、T細胞特異Efp欠損マウスの胸腺細胞を用いたトランスクリプトーム解析やリアルタイムPCR法の結果から、胸腺細胞の生存や増殖、分化に関連する既知遺伝子の発現を検証することによって、胸腺細胞におけるEfp関連シグナルの解析を進めている。一方、ある種の翻訳後修飾酵素がTCRシグナル下流で発現上昇するという興味深い知見を認めた。当該タンパク質のT細胞における機能を検証するために、T細胞特異的遺伝子欠損マウスを作製した。胸腺におけるT細胞レパトア制御機構の解明を目的とし、以下2つの側面から研究を行った。【1】カルシウム結合タンパク質Efpによる胸腺細胞の分化制御:T細胞特異的Efp欠損マウスをTCRトランスジェニックマウスと交配し、胸腺におけるT細胞の正負の選択が正常に機能しているかどうかを検証している。T細胞特異的Efp欠損マウスの胸腺DP細胞にて、有意に発現増加した複数の遺伝子を同定し、各遺伝子のレトロウイルスベクターを作製した。胎児胸腺器官培養系にて遺伝子を導入し、DP細胞への分化誘導を試みる。本実験によって、T細胞の正負の選択に関わるT細胞レパトア制御因子を探索する。【2】T細胞レパトア制御における翻訳後修飾の意義:TCR刺激に伴って発現上昇する、特定の翻訳後修飾酵素のT細胞特異的遺伝子欠損マウスの解析を行った。胸腺のDP, CD4SP, CD8SP細胞数は正常であったが、末梢のCD4およびCD8T細胞数が顕著に減少していた。末梢のCD4およびCD8T細胞にTCR刺激を誘導した結果、細胞増殖および生存が顕著に障害された。現在、胸腺細胞および末梢T細胞におけるTCRレパトアの解析を行っている。また、当該マウスの胸腺細胞におけるTCRシグナルが正常かどうか検証した。当該マウスでは胸腺および末梢におけるNKT細胞がほぼ欠失していた。

本研究は、T細胞レパトアの新たな制御機構を提唱するものであり、自己免疫疾患発症メカニズムの分子基盤の提供へと繋がる。申請時の計画どおりに、T細胞特異的Efp欠損マウスをTCRトランスジェニックマウスと交配し、現在胸腺における正負の選択への影響を検討中である。また、T細胞の正負の選択に関わるEfp下流の候補因子の生理的機能を検証できる段階である。一方、T細胞レパトア制御に関連すると推測される特定の翻訳後修飾酵素のT細胞特異的遺伝子欠損マウスの解析を進めた。当該遺伝子の欠損により傷害を受ける細胞集団の特定を着実に進めている。本課題では、自己免疫性関節炎発症の根幹である自己反応性T細胞の発生機構を明らかにすることを目指す。以下に、【1】胸腺におけるT細胞レパトア制御機構の解析と、【2】末梢T細胞の活性化に寄与する翻訳後修飾分子の解析について報告する。【1】カルシウム結合タンパク質Efpによる胸腺細胞の分化制御:Efp欠損による胸腺細胞の正負の選択への影響の評価、及びEfpの下流分子の特定に取り組んだ。Efp下流分子に関しては、特に関節リウマチの疾患感受性が報告されている遺伝子に着目し、EfpによるT細胞レパトア制御に関わる因子の検討を進めた。具体的な方法としては、Efp欠損胸腺細胞にて発現上昇した遺伝子をレトロウイルスベクターにより胸腺細胞に導入した後、胎児胸腺器官培養系にて分化させることで、過剰発現により正負の選択が障害される遺伝子を選定した。今後、候補遺伝子に対する遺伝子欠損マウスの作製し、T細胞レパトア制御を生体レベルで検証することを目指す。【2】新規翻訳後修飾分子によるT細胞の活性制御:TCR刺激に伴って発現上昇する、特定の翻訳後修飾酵素のT細胞特異的遺伝子欠損マウスの解析を行った。当該分子は、iNKT細胞の早期分化と、末梢のCD4およびCD8T細胞の活性化に重要であることが示された。さらにRNA-seq解析やフローサイトメトリー法を用いて、当該分子の下流で制御される遺伝子や、翻訳後修飾の基質を特定した。以上の結果により、当該翻訳後修飾分子の制御異常が、末梢T細胞の異常な活性化に関連する可能性が考えられた。今後はカルシウム結合タンパク質EfpがT細胞レパトアを制御する分子メカニズムをより詳細に解明していく。Efpとビッグデータ解析に基づく関節リウマチ感受性遺伝子との関連性の解析を実施していくことを予定している。また、翻訳後修飾酵素のT細胞特異的欠損マウスを用いて、当該タンパク質のT細胞、特にレパトア制御における機能を検証していく。Efpの下流分子のうち、T細胞のレパトア制御因子を特定する。当該遺伝子の遺伝子改変マウスを作出することで、生体レベルでの当該遺伝子の重要性を示していく。また、翻訳後修飾酵素のT細胞レパトア制御における機能について詳細に検討していく。29年度が最終年度であるため、記入しない。
脳虚血再灌流障害におけるATMキナーゼ経路の役割解明と新たな脳梗塞治療への応用

我々はメタボローム解析により,脳虚血再灌流においてペントースリン酸経路(PPP)が大きく変動することを見出した.その分子機構を調べると,Ataxia telangiectasia mutated kinase (ATMK)を上流とするSignaling pathwayが,Heat shock protein 27 (HSP27)をリン酸化することで,PPPの律速酵素であるglucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PD)を活性化しNADPHを増加させ,内因性抗酸化機構として働いていると考えられた.実際,ATMKを阻害すると脳梗塞のサイズが増大した.以上のことより,HSP27リン酸化促進を介するG6PDの活性化によるNADPHの増加が脳虚血再灌流障害に対する内因性の抗酸化機構として働いている可能性が示された.GGAは,この抗酸化作用を増強することで再灌流障害に対する治療につながるかもしれない.実臨床への応用を目指すため,投与時期・投与経路のさらなる検討を行っていく.上述のごとく,脳虚血再灌流の際にペントースリン酸経路が亢進して内因性抗酸化機構として働いていることをATMKの阻害実験まで行って,ほぼ同定できた.この抗酸化機構において,HSP27はG6PDの活性化という重要な役割を果たす.そこで,治療への応用の可能性を探るために,HSP27の誘導役であるGGAを投与したところ,脳梗塞のサイズが縮小することを確認できた.それ以外の生化学的指標も虚血に対する保護を示唆する結果であり,我々の仮説を支持するものであった.現在これらの結果をまとめた論文を執筆中である.以上のごとく,順調に進捗していると考える.上述の結果より,GGAによるHSP27の誘導が中大脳動脈閉塞後再灌流により引き起こされた脳梗塞のサイズを縮小させることが判明した.この分子機構を明らかにするために,HSP27の増加自体が有効なのか,あるいはそのリン酸化が有効なのかを決定する必要があり,HSP27のリン酸化酵素であるMAPKAPK-2の阻害実験などを行う予定である.また,前述の実験のGGA投与は虚血前である.臨床応用のために虚血後にGGAを投与した場合の効果を見る必要がある.また,脳室内投与は臨床応用が困難であり,静脈内投与の効果を見る必要もある.これらに関する研究も行う予定である.さらには,HSP27を誘導する他の薬剤,すなわち,celastrol, FLZ, carbenoxoloneなどの薬剤の投与下での脳虚血再灌流時の代謝変化や梗塞サイズの変化,機能予後に対する影響を調べ,脳梗塞治療の新たなターゲットを明らかにしていきたい.我々はメタボローム解析により,脳虚血再灌流においてペントースリン酸経路(PPP)が大きく変動することを見出した.その分子機構を調べると,Ataxia telangiectasia mutated kinase (ATMK)を上流とするSignaling pathwayが,Heat shock protein 27 (HSP27)をリン酸化することで,PPPの律速酵素であるglucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PD)を活性化しNADPHを増加させ,内因性抗酸化機構として働いていると考えられた.実際,ATMKを阻害すると脳梗塞のサイズが増大した.以上のことより,HSP27リン酸化促進を介するG6PDの活性化によるNADPHの増加が脳虚血再灌流障害に対する内因性の抗酸化機構として働いている可能性が示された.GGAは,この抗酸化作用を増強することで再灌流障害に対する治療につながるかもしれない.実臨床への応用を目指すため,投与時期・投与経路のさらなる検討を行っていく.上述のごとく,脳虚血再灌流の際にペントースリン酸経路が亢進して内因性抗酸化機構として働いていることをATMKの阻害実験まで行って,ほぼ同定できた.この抗酸化機構において,HSP27はG6PDの活性化という重要な役割を果たす.そこで,治療への応用の可能性を探るために,HSP27の誘導役であるGGAを投与したところ,脳梗塞のサイズが縮小することを確認できた.それ以外の生化学的指標も虚血に対する保護を示唆する結果であり,我々の仮説を支持するものであった.現在これらの結果をまとめた論文を執筆中である.以上のごとく,順調に進捗していると考える.上述の結果より,GGAによるHSP27の誘導が中大脳動脈閉塞後再灌流により引き起こされた脳梗塞のサイズを縮小させることが判明した.この分子機構を明らかにするために,HSP27の増加自体が有効なのか,あるいはそのリン酸化が有効なのかを決定する必要があり,HSP27のリン酸化酵素であるMAPKAPK-2の阻害実験などを行う予定である.また,前述の実験のGGA投与は虚血前である.臨床応用のために虚血後にGGAを投与した場合の効果を見る必要がある.また,脳室内投与は臨床応用が困難であり,静脈内投与の効果を見る必要もある.これらに関する研究も行う予定である.さらには,HSP27を誘導する他の薬剤,すなわち,celastrol, FLZ, carbenoxoloneなどの薬剤の投与下での脳虚血再灌流時の代謝変化や梗塞サイズの変化,機能予後に対する影響を調べ,脳梗塞治療の新たなターゲットを明らかにしていきたい.(理由)消耗品などの費用が当初の予定より安価であったため(使用計画)次年度の本来の予算と合わせて消耗品などに使用する予定である.
粒子線がん治療装置のスポットスキャニング照射のための高速ビーム取出し制御の研究

公益財団法人若狭湾エネルギー研究センター(WERC)のシンクロトロンを用いてビーム実験を実施することを目的に、広周波数帯域の高周波ノックアウト(RFKO)装置を試作した。具体的には、新しく調査し購入したフェライトコアを使ったインピーダンス変換器(IT)の試作と、WERCシンクロトロンで使われているRFKO電極を模擬した電極の設計試作と全域通過回路(APN)の設計試作をそれぞれ2台行い、回路パラメータの最適化実験を通して必要な周波数帯である1ー14MHzでビーム実験に使用できる電気的性能を達成した。更に、購入した2台の40Wの広帯域高周波アンプとこれらを接続して装置全体の調整後に高電圧実験を行い、今回の原理実証ビーム実験において約30%程度のビームを取り出せる電圧を印加できることを確認した。この装置をWERCに送って、現地にて組み立て、シンクロトロンのRFKO電極に接続し電気的特性を測定した結果、ノイズ等の影響を受けることなく正常に動作することを確認した。翌25日にエネルギー55MeV/uの炭素ビームの取り出し実験を行った。結果は、ビームシミュレーション研究で予測した通り、RFKOの高周波信号を広帯域化することによりシンクロトロンからの取出しビーム(スピル)の強度変化は著しく低下した。大学にてWERCのRFKO電極を模擬した電極を試作し、WERCにおいてビーム取り出し実験を行うためのプロトタイプを組み立て、ビーム実験ができる電気的性能が得られるように調整した。それをWERCに搬送して再組立て、WERCのRFKO電極に接続して実験したが、多くの高電力機器が動作する中、ノイズ等の影響を受けることなく正常に動作した。ビーム実験では、RFKOの高周波信号に含まれるベータトロン共鳴帯のバンド数を増やすに従い(広帯域化)、取り出しビーム(スピル)強度の変化が小さくなった。これはビームシミュレーション研究から予測されたもので、本取出し法の原理が実証されたことを示す。現有の高周波アンプでより多くのビームを取り出せるように、IT,APNの高性能化、カラードノイズ信号のピーク値をさらに下げる工夫等を行い、さらに周波数帯域を狭めても平坦なスピルが得られるカラードノイズデータの選択についてビームシミュレーション研究を行い、これらについてWERCにてビーム実証実験を行う。また、スピルの平坦度がビームシミュレーション研究から予測された値よりも広帯域側で大きいため、その原因究明を行う。旅費が予想した金額よりも下回ったために生じた。翌年度は海外出張を予定しており、また研究補助も当初予定よりも増える予定なため人件費にあてる。
倫理学基礎語彙の倫理思想史的研究-用法の公共性を索めて-

当初の計画に沿い、具体的にな方法として、ある限定された倫理学基礎語彙について、(1)その近代以前の意味用法、(2)翻訳語としての定着過程および意義・用法を、(1)日本倫理思想史の知見、(2)明治大正期の倫理学研究の中での意味概念、(3)個別の語彙についての個別論文の一覧の作成、という手法による資料集を構築し、それをもとにそれらの公共的方法のミニマムな規定および、その解釈上、使用上のヴァリエーションを考察するという手法をとった。研究に先立って選んだ語彙は、道徳・倫理・義務・責任・良心・家族・人格・社会・愛・自由・正義・寛容・公平・徳など主として、対他的な関係を含意するものであった。以上の視点から研究を進め、それら語彙が現代的な場面でいかに把握され、どうような倫理的局面で用いられるかを、まずもって、確認し、その実践的場面へ、西洋倫理学の知見、東洋・日本倫理思想史の知見を参照し、位置づけるという試みを進めた。とくにこれら語彙の内、家族・責任については、単に資料集、データベースの構築におわらず、論文という形で、その意図を具体化できたことは、一つの成果であると考える。この種の研究は本来多人数での共同作業が欠かせないだろう。今回は、限定した語句について方法的な吟味を加えるという形ですすめたが、、将来の共同研究の手がかりを得ることができた。今後は資料を整理すると共に、残る語彙についても、総合的な論文の形で、成果を公刊したい。研究題目中、倫理学基礎語彙として挙げた基礎語彙中、とくに家族、責任の二つについて、初年度の試行的な意味を込めて、着手した。責任については、責任という用語の、中国語としての淵源をたずねること、西洋の責任概念を整理して、現実の責任概念の考察に加味した。これらは、機会を得て、刊行書の一論文に発表した。責任という語は中国においては清朝の官僚制のなかで、用語として使用されるようになったこと、その用法が近代日本に直接的に影響を与えることになったなどを論じ、西洋個人主義の責任概念などと比較しつつ検討した。家族については、近代日本の家族概念を中心に、古代からの歴史的考察を加え、日本倫理思想史の全体の見通しのなかにおきつつ考察を続けた。これらの成果は、機会を得て、日本倫理学会において『「いえ」の解釈-和辻倫理学における家族の原型』として発表、また『倫理学会年報』(1997年3月刊行予定)に論文として掲載される。また、この主題は、和辻倫理学においては「人格」概念と深い関わりをもつものであり、上記発表・論文においてはその点もいささか論じることをした。残る基礎語彙については、以上の実績で得た方法上の知見、知識、考察を生かして、さらに遂行してゆく。本年度は、初年度の計画、すなわち、ある限定された倫理学基礎語彙について近代以前の意味用法、(2)翻訳語としての定着過程および意義・用法を、(1)日本倫理の知見、(2)明治大正期の倫理学研究の中での意味概念、(3)個別の語彙のついてのの一覧の作成、という手法による資料集を構築し、それをもとにそれらの公共的方法のミニマムな規定および、その解釈上、使用上のヴァリエーションを考察するという方法による研究を引き続き継続した。初年度は、そのうち家族などにつき、得られた知見を論文の形で公刊したが、今年度はとくに、それら語彙が現代的な場面でいかに把握され、どのような倫理的曲面で用いられるかの理解に重点をおき、その実践的場面へ、西洋倫理学の知見、東洋・日本倫理思想史の知見を参照し、位置づけるという試みを進めた。それはとくに責任という語彙についての考察などに結実した。また、伝統から近代の日本の倫理学への連続的理解という点から得られ知見を、無常、諦観の分析の中に盛り込み、方法的に進化させることができたのは、本研究の派生的なせいかであった。
口腔癌の増殖・転移に関連したリンパ管新生に関する実験的研究

腫瘍細胞の浸潤・転移と微小循環系の新生と構築,特にリンパ管網との関係を明らかにする目的で,ハムスター誘発舌癌を作成して組織化学的に検索した.【材料と方法】実験動物には生後8週(体重110120g)の雄性ゴールデンハムスターを用いた.発癌操作としてエーテル麻酔下に舌を歯科用クレンザー(抜髄針)で擦過,10-dimethyl-1,2-benzanthracene(DMBA)を塗布した.一定期間後,採取した舌組織を微小脈管の5'-nucleotidase(5'-Nase), alkaline phosphatase (ALPase)などの酵素組織化学染色し光顕・電顕観察を行った.さらに脈管内皮細胞増殖因子などの免疫組織化学染色を行い光顕観察した.同様にリンパ節も調べた.【結果と考察】実験開始後,1216週より実験群の舌に種々の段階の腫瘍形成がみられた.光顕およびSEM反射電子像で腫瘍と健常部の境界領域の組織内に管腔の拡大した5'-Nase反応陽性リンパ管が認められた.これら腫瘍細胞周囲のリンパ管内皮細胞の5'-Nase活性はTEMでも確認された.TEM観察では腫瘍細胞は類円形または不整型な核をもち,また細胞質内に豊富なトノフィラメントが観察された.また,VEGF-CのレセプターであるFlt-4の発現が5'-Nase陽性リンパ管にみられ,腫瘍周囲結合組織内でのリンパ管新生が示唆された.リンパ節転移ついては,頚部リンパ節をHE染色ならびにKeratin等免疫組織染色し検索したが,転移は明かでなかった.腫瘍細胞の浸潤・転移と微小循環系の新生と構築,特にリンパ管網との関係を明らかにする目的で,ハムスター誘発舌癌を作成して組織化学的に検索した.【材料と方法】実験動物には生後8週(体重110120g)の雄性ゴールデンハムスターを用いた.発癌操作としてエーテル麻酔下に舌を歯科用クレンザー(抜髄針)で擦過,10-dimethyl-1,2-benzanthracene(DMBA)を塗布した.一定期間後,採取した舌組織を微小脈管の5'-nucleotidase(5'-Nase), alkaline phosphatase (ALPase)などの酵素組織化学染色し光顕・電顕観察を行った.さらに脈管内皮細胞増殖因子などの免疫組織化学染色を行い光顕観察した.同様にリンパ節も調べた.【結果と考察】実験開始後,1216週より実験群の舌に種々の段階の腫瘍形成がみられた.光顕およびSEM反射電子像で腫瘍と健常部の境界領域の組織内に管腔の拡大した5'-Nase反応陽性リンパ管が認められた.これら腫瘍細胞周囲のリンパ管内皮細胞の5'-Nase活性はTEMでも確認された.TEM観察では腫瘍細胞は類円形または不整型な核をもち,また細胞質内に豊富なトノフィラメントが観察された.また,VEGF-CのレセプターであるFlt-4の発現が5'-Nase陽性リンパ管にみられ,腫瘍周囲結合組織内でのリンパ管新生が示唆された.リンパ節転移ついては,頚部リンパ節をHE染色ならびにKeratin等免疫組織染色し検索したが,転移は明かでなかった.腫瘍の増殖・転移の重要な局面であるリンパ管の新生について酵素組織化学,免疫組織化学的手法を用いて検索した.1.材料と方法実験動物には110120g,6週齢の雄ゴールデンハムスター27匹を用いた.3)走査電顕(SEM)試料の作成:光顕用に薄切した残りの凍結ブロック(切片面)を5'-Nase反応し,反射電子像を観察し,次いで微細構築を対比観察した.4)透過電顕(TEM)試料作成:酵素組織化学反応後の微細構造を透過電顕で観察した.2.結果及び考察肉眼的にはハムスター舌は,6週頃より処置部は粗造感を呈し12週頃より多くの例で乳頭腫瘍の腫瘤が出現,増殖を示した.一方,組織化学的観察で,舌内には発達した密なリンパ管網が認められた.腫瘍組織周辺では癌組織を取り囲むような毛細リンパ管の新生像とリンパ管口径の拡大が認められた.SEM反射電子像において腫瘍周囲リンパ管が5'-Nase反応陽性のhighlight像として描出され,TEMではリンパ管特有な内皮細胞の細胞接着が観察された.腫瘍の増殖,血管の増生に伴う多量の組織液の排導に関連してリンパ管機能が亢進したと考えられた.本年度までに以下の研究を行った.【目的】腫瘍細胞の浸潤・転移と微小循環系の新生と構築,特にリンパ管網との関係を明らかにする目的で,ハムスター誘発舌癌を作成して組織化学的に検索した.【材料と方法】生後8週(体重110120g)雄性ゴールデンハムスターを用いた.発癌操作としてエーテル麻酔下に舌を擦過,10-dimethy1-1,2-benzanthracene(DMBA)を塗布した.一定期間後,採取した舌組織を微小脈管の5'-nucleotidase(5'-Nase),alkaline phosphatase(ALPase)などの酵素組織化学染色し光顕・電顕観察を行った.さらに脈管内皮細胞増殖因子などの免疫組織化学染色を行い光顕観察した.同様にリンパ節も調べた.【結果と考察】