hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
イヌの発情行動発現に関わる脳内メカニズムとその人為調節に関する研究

イヌの発情行動発現に関わる脳内メカニズムを内分泌学的に検討するとともに、性腺刺激ホルモン放出ホルモン(GnRH)の類似体(GnRH-A)の徐放剤を用いて、雌イヌの繁殖促進方法を検討し、以下の結果を得た。1.雌イヌにおいては、発情開始に先立って血中黄体形成ホルモン(LH)の分泌パターンが変化し、その分泌量が増加した後、エストロジェンおよびプロジェステロンの分泌量が増加していることが明らかとなった。2.発情開始前のLH分泌量の増加は、視床下部からGnRH放出量の増加に起因することが明らかとなった。3.無発情期の後期GnRH放出量の増加をもたらす要因の一つとして、視床下部中エストロジェンレセプター遺伝子の発現量の増加が示唆された。さらに、エストロジェンレセプターの発現調節は、エストロジェンの濃度に依存することが明らかとなった。4.無発情期の後期に下垂体のGnRHに対する反応性が増加し、この増加はGnRHレセプター遺伝子の発現量の増加に起因することが示唆された。5.発情前期の雌イヌでは、エストロジェンは子宮に働きかけ、自身の子宮内レセプター量を増加させることにより、子宮の感受性を高め、発情期の準備を行っていることが示唆された。6.無発情期の雌イヌに、GnRG-Aの徐放剤を1回投与することにより発情回帰をはやめることができた。以上、本研究の結果から、雌イヌの発情行動発現の脳内メカニズムの一つとして、無発情期の後期かた視床下部のエストロジェンレセプター遺伝子の発現量が徐々に増加してGnRH放出を促進し、同時に下垂体のGnRHに対する反応性が増大することにより、LH分泌量の増加をもたらす。増加したLHは卵巣や子宮の活動の再開を促し、それにともなって発情が回帰するという一連の可能性が示唆できた。さらに、GnRH-Aの徐放剤を用いて雌イヌの繁殖機能の人為的調節ができるものと期待される。イヌの発情行動発現に関わる脳内メカニズムを内分泌学的に検討するとともに、従来の下垂体ホルモン系とは異なる視床下部ホルモン(性腺刺激ホルモン放出ホルモン:GnRH)の類似体(GnRH-A)の徐放剤を用いて、新しい角度からより効果的な雌イヌの繁殖促進方法を検討し、以下の結果を得た。1.雌イヌにおいては、発情開始に先立って血中黄体形成ホルモン(LH)の分泌パターンが変化し、その分泌量が増加した後、卵巣からのエストロジェンおよびプロジェステロンの分泌量が増加していることが明らかとなった。2.発情開始前のLH分泌量の増加は、視床下部からのGnRH放出量の増加に起因することが明らかになった。3.無発情期の後期にGnRH放出量の増加をもたらす要因の一つとして、視床下部中エストロジェンレセプター遺伝子の発現量の増加が示唆された。4.無発情期の雌イヌに、GnRHの徐放剤を1回投与することにより発情回帰をはやめることができた。以上の結果より、イヌの発情行動発現の脳内メカニズムの一つとして、無発情期の後期から徐々に増加するエストロジェンが視床下部の自身のレセプター量を増加させ、その感受性を高めることにより、GnRH放出を促進し、下垂体からのLH放出量の増加をもたらす可能性が示唆できた。さらに、GnRH-Aの徐放剤を用いて雌イヌの繁殖を一応促進できることが明らかになり、現在さらに本実験を継続して検討中である。

イヌの発情行動発現に関わる脳内メカニズムを内分泌学的に検討し、以下の結果を得た。1.雌イヌの発情周期中における下垂体の性腺刺激ホルモン放出ホルモン(GnRH)に対する反応性の変化および下垂体中GnRHレセプター(GnRH-R)遺伝子の発現量をcompetitive PCR法を用いて検討した結果、下垂体のGnRHに対する反応性は無発情期の後期に増加していた。また、下垂体中GnRH-R遺伝子の発現量も同様に無発情期の後期に高値を示した。これより、無発情期の後期の雌イヌでは下垂体中のGnRH-R遺伝子の発現量が増加し、そのレセプター量が増加することにより、GnRHに対する反応性が増加することが示唆された。2.雌イヌの発情周期中における子宮内エストロジェンレセプター(ER)量の動態およびその調節因子について検討した結果、子宮中の総ER量(細胞質内および核内の総和)は発情前期に最高値を示した。このうち、作用発現の指標となる核内ER量についても、総ER量の変化とほぼ並行して発情前期で最高値を示した。卵巣を摘出したイヌにエストラジオール・ベンゾエート(EB)を投与し、子宮内ER量について検討した結果、少量のEB投与群では、核内および細胞質内ともに有意に増加したが、多量のEB投与群では増加の程度は小さいものであった。これより、発情前期の雌イヌにおいては、エストロジェンが子宮に働きかけ、自身のレセプター量を増加させることにより、子宮の感受性を高め、発情時の準備を行なっていることが示唆された。以上の結果より、雌イヌの発情行動発現の脳内メカニズムの一つとして、無発情期の後期から下垂体のGnRHに対する反応性が増大することにより、LH分泌量の増加をもたらす。増加したLHは卵巣からのエストロジェン等の分泌を促進する結果、子宮のホルモンに対する感受性が高められ、それにともなって発情が回帰するという一連の可能性が示唆できた。
臍帯血由来樹状細胞とCMV特異的ペプチドを用いたCMVワクチンの開発

従来の海外における研究ではCMV特異的ペプチドは、HLA-A*0201特異的ペプチドが殆どであったが、近年MHCスタビライゼーションアッセイとELISPOT,CTLアッセイを用いて、pp65蛋白のうちでHLA-A*2402特異的ペプチドQYDPVAALFがクローニングされている(Kuzushima et al.Blood.2001;98:1872-1881.)我々はこれとは別に、コンピュータスクリーニングを用いてHLA-A*2402101に親和性が高いと考えられるアミノ酸配列をCMVpp65蛋白のなかから決定した。すなわち2番目にタイロシン、9番目にフェニルアラニンかロイシンを含む以下のアミノ酸ノナマー配列が抗原決定基になると推察した。すなわちVYALPLKML(第100108アミノ酸)、VYYTSAFVF(第167175アミノ酸)、QYVKVYLESF(第209218アミノ酸)、そして既知のQYDPVAALF(第328336アミノ酸)である。我々は、補体結合反応用CMV抗原で健常人ドナーリンパ球、及びCMV感染患者リンパ球を刺激し、細胞質染色でインターフェロンγ(以下IFN-γ)とパーフォリンの分泌を測定し、上記の論文と異なるデータを得た。現在、追加データを収集中で論文執筆中である。また樹状細胞、臍帯血リンパ球についても異なる研究を行った。樹状細胞がケモカインRANTES刺激で遊走能や凝集能が高まること(Microbiol Immunol.2001;45:639-647.)、未熟樹状細胞ではCCR-1,3,5を介したシグナルが主流であるのに対して、成熟樹状細胞ではCCR-7からのシグナルが優位になること(Int Immunol.2001;13:167-179.)などを報告し、ヒトにおけるin vivoワクチネーションを考える上で重要な指針を示した。また臍帯血T細胞に関しても、成人末梢血T細胞に比較してCXCケモカインレセプターの発現は差が無いが、CCR-1,3,5の発現が低いにも拘らずCCR-7の発現が高いことから、GVHD等の炎症局所よりは所属リンパ節にホーミングし易いこと(J Immunol.2001;166:1659-1666.)、この性質を応用して大量放射線被曝患者における急性放射線障害治療において、GVHDや急性放射線障害増悪を起こしにくい性質から臍帯血移植が有効であり、経過中に起こったCMV感染症もT細胞の回復によって容易に治療可能であったことなどを報告している。
ランダムネットワーク中のP波超流動体

直径100nmの細孔がランダムネットワーク構造をなす多孔質ガラス中の液体ヘリウム3の超流動転移を観測した。細孔表面にはヘリウム4膜を数原子層のせて境界条件を制御した。鏡面的なときは、細孔内部の液体ヘリウム3はバルクと同様の超流動相へ転移した。一方、ヘリウム4膜が薄い拡散的なときは、超流動転移温度がバルクより30μK程度高くなった。このとき細孔表面のヘリウム4層に混じってヘリウム3が一部固化しており、細孔中の液体ヘリウム3に大きなスピン揺らぎを伝達することが、転移温度上昇の誘因となっていることと推察される。また、磁気共鳴映像法の開発により超流動ヘリウム3のテクスチャーの可視化に成功した。ランダムネットワーク構造を持つ多孔質ガラスを超流動体も透過することのない樹脂に埋め込んだ状態で、細孔中に液体ヘリウムを充填することのできる特殊構造セルの開発に成功した。そのことにより、多孔質ガラス内の細孔内部に充填された液体ヘリウム3のNMR信号を細孔外部からのバルク信号の混入を避けて取得することに成功した。また、超流動ヘリウム3の転移温度2mKより充分低温まで冷却し、細孔中の液体ヘリウム3がバルク同様に超流動転移をおこすことを確認した。純粋なヘリウム3を充填した場合には多孔質ガラスの下地に含まれている磁性不純物の効果が顕著に現れ、NMR信号の吸収線幅は増大したが、少量のヘリウム4をガラス表面に優先的に固着させてから細孔中に液体ヘリウム3を導入することで、下地の磁性不純物効果は除去された。また、ヘリウム4層の厚さをコントロールすることで、細孔中に閉じ込められた液体ヘリウム3の細孔壁での境界条件を拡散的から鏡面的に変化させることができた。これらの開発成果を元にして、超流動ヘリウム3の巨視的波動関数の位相についてのフラストレーションや局在BCS相の出現が期待されるパラメータ領域を探索することとした。限られた予算配分の元で大量に寒剤を消費する大型希釈冷凍機を運転可能な時間は限られており、ベストをつくした探索を行ったが、興味深い兆候を発見することはできなかった。また、コヒーレンス長の数倍程度の口径をもつ細孔中では、Tc近傍でPolar相が安定化する可能性も期待されていたが、実験測定の結果からはバルクで安定なABM状態とは異なる状態になっていることを示唆するデータは得られなかった。限られた予算配分のなか、可能な限りの運転測定時間を確保して研究計画を進めている。直径100nmクラスの細孔がランダムネットワーク構造をなす多孔質ガラス中に充填された液体ヘリウム3のNMR測定を多孔質ガラス外のバルク液体のNMR信号と分離して測定することで、細孔内部の超流動転移を実験観測した。細孔表面にはヘリウム4膜を数原子層レベルでのせて境界条件を制御し、鏡面的な境界条件から拡散的な境界条件まで変化させたときの効果を検証した。液体ヘリウム3の圧力を2.4MPaに設定したときは、ヘリウム4膜が3原子層程度以上あるときは鏡面的になり、細孔内部の液体ヘリウム3はバルクとほぼ同様の超流動相へと転移温度の変化なしに転移することがわかった。一方ヘリウム4膜をより薄くしていくと、拡散的境界条件にちかづくものの、超流動転移温度がバルクの液体ヘリウム3より30μK程度とわずかではあるが高くなることを発見した。このとき細孔表面の数原子層のヘリウム4に混じってヘリウム3が一部固化していることが、NMR信号による帯磁率測定あるいはスピン拡散測定より確かめられた。この高密度固体ヘリウム3が高速直接スピン交換により細孔中の液体ヘリウム3に大きなスピン揺らぎを伝達することが、転移温度上昇の誘因となっていることが推察される。一方、このとき得られた超流動相がバルクで安定な超流動相と異なる対称性を持つことを示唆するデータは得られなかった。また、ランダム細孔中で期待された位相フラストレーションや局在BCS相の発現は探索したパラメータの範囲内では発見されなかったが、限られたパラメータ領域のみでの探索であり、存在可能性そのものが否定されたことにはならず、今後の予算措置による再挑戦が望まれるところである。一方、この研究とも関連して磁気共鳴映像法の開発により、超流動ヘリウム3の空間構造の可視化に成功し、空間不均質な相に到達した場合に有力な研究手段を完成させた。今年度も継続してパラメータを変えた測定を行うことで、当初目的に沿った成果を追求する。低温物理学本計画による出費の大半は冷凍機運転のための高額な寒剤費用であり、1週間当たり5万円に相当するが、実験測定自体には1セットのデータ当たり数週間の期間がかかり、予算の範囲内で実験を終了するためには、多少の半端がでることはやむを得ない。
フィギュアスケートの多回転ジャンプの成否を決定するものは何か

競技歴12年でバッジテスト7級の男子フィギュアスケート選手(21歳、身長163cm、体重51.5kg)1名を対象とした。シャッター同期された2台の高速度ビデオカメラ(120fps)を用いて、ジャンプ動作を撮影した。2台のカメラの光軸間角度は約90度であった。実施したジャンプは、フィギュアスケート競技で行われる全6種のジャンプで、2.5回転のダブルアクセル、および3回転のトーループ、サルコウ、ループ、フリップ、ルッツである。ジャンプの難易度はこの順に高くなる。DLT法を用いて身体各部の3次元座標変化を求めた。両脚の股関節、膝関節、足関節の角度変化、身体重心位置、さらに肩および腰の水平面内での回転角度を求めた。その結果、ジャンプの難易度とは関係なく、トーループ、フリップ、ルッツという3種のトージャンプの跳躍高が高く、アクセル、サルコウ、ループというエッジジャンプの跳躍高が低いという傾向が認められた。また踏み切り脚の下肢3関節の角度変化に注目すると、トージャンプでは最大屈曲が保たれた状態からトーを突くと同時に膝関節と足関節がほぼ同時に伸展し、股関節の伸展がそれにやや遅れて続くことがわかった。それに対してエッジジャンプでは3関節の伸展のタイミングがほぼ同期している傾向が認められた。これら2.5回転および3回転の6種のジャンプにおいては、空中にある間の水平面内での身体の回転は2.22.3回転程度であった。すなわち1325%程度の回転は踏み切り動作中および着氷後に行われていた。実験を行う予定にしていた大学所有のサブリンク(40m×20m)の閉鎖により、メインリンク(60m×30m)で全ての実験を行うことになった。そのため、動作分析のためのキャリブレーションをはじめ、データ取得の方法について再検討した。高速度ビデオカメラを用いて撮影する場合の、リンク上でのキャリブレーションについてまず検討した。測量器具(トータルステーション)を用いた方法により、誤差と所要時間を縮小できることがわかった。光学式反射マーカーを用いたモーションキャプチャシステムを用いる場合には、カメラから対象までの距離が長くなることに伴い、高精度のデータを得るためにカメラ位置の調整とリンク上へのカメラケーブルの敷設が必要なことがわかった。インソール型の足圧測定システムについては、同時に用いる高速度カメラとの同期のためのLEDランプの取り付け、さらに氷上での転倒の際の機器の破損を防ぐためのスイッチ部の位置変更や緩衝ケースの調整を行った。ここまでに約8か月を要し、想定したより少し時間はかかった。しかし、実験方法について十分な検討ができ、今後の実験が円滑に行える準備が整ったので、結果的には良かった。その後は特に光学的方法(高速度ビデオカメラ、モーションキャプチャ)を用いて実際に高難度のジャンプについてデータ取得を行い、分析を行って上記研究実績の概要のような結果が得られている。本研究の最終的な目的は、3回転あるいは4回転という多回転ジャンプを成功させるための技術を明らかにし、選手の技術向上に資する提言を得ることである。ここまでの検討の結果、6種類のジャンプによってその戦略は異なることが予想された。すなわち、離氷から着氷までの間に同じ回転数を完遂させるにしても、高いジャンプ高で滞空時間をかせぐことによるものと、滞空時間は短くても回転スピードを上げることによるもの、あるいはその中間のものなどが存在していると考えられる。さらに選手によっても同じように戦略は異なっていることが考えられる。そこで、分析対象者の範囲を広げ、また対象者数を増やすことにする。男女の選手両方を対象とし、しかもそれぞれ複数人の分析を行う。次に、6種のジャンプのそれぞれについて高いジャンプ高を得るために適切な踏切動作を検討する。ルッツとフリップは左足での後ろ向き滑走から右足のトーを突いて離氷し、回転後に右足で着氷してから後ろ向きで滑走するという点では全く同じ経過をたどるジャンプである。踏み切り時の左足がインエッジ(フリップ)かアウトエッジ(ルッツ)かだけが異なっている。ところがこの両者でも踏み切り脚下肢3関節の伸展のタイミングがわずかに異なっている傾向が認められた。そのようなわずかな違いを明らかにするためには、高い分析精度が保証されるモーションキャプチャシステムの使用を中心として用いていく。それによって身体の角運動量も精度良く測定することが可能になる。さらにインソール型足圧測定システムを用いて、特にアプローチ中と踏み切り動作中のそれぞれで、身体に反時計回り方向の大きな角運動量を発生させる方法について検討していく。

また踏み切り脚の下肢3関節の角度変化に注目すると、トージャンプでは最大屈曲が保たれた状態からトーを突くと同時に膝関節と足関節がほぼ同時に伸展し、股関節の伸展がそれにやや遅れて続くことがわかった。それに対してエッジジャンプでは3関節の伸展のタイミングがほぼ同期している傾向が認められた。これら2.5回転および3回転の6種のジャンプにおいては、空中にある間の水平面内での身体の回転は2.22.3回転程度であった。すなわち1325%程度の回転は踏み切り動作中および着氷後に行われていた。実験を行う予定にしていた大学所有のサブリンク(40m×20m)の閉鎖により、メインリンク(60m×30m)で全ての実験を行うことになった。そのため、動作分析のためのキャリブレーションをはじめ、データ取得の方法について再検討した。高速度ビデオカメラを用いて撮影する場合の、リンク上でのキャリブレーションについてまず検討した。測量器具(トータルステーション)を用いた方法により、誤差と所要時間を縮小できることがわかった。光学式反射マーカーを用いたモーションキャプチャシステムを用いる場合には、カメラから対象までの距離が長くなることに伴い、高精度のデータを得るためにカメラ位置の調整とリンク上へのカメラケーブルの敷設が必要なことがわかった。インソール型の足圧測定システムについては、同時に用いる高速度カメラとの同期のためのLEDランプの取り付け、さらに氷上での転倒の際の機器の破損を防ぐためのスイッチ部の位置変更や緩衝ケースの調整を行った。ここまでに約8か月を要し、想定したより少し時間はかかった。しかし、実験方法について十分な検討ができ、今後の実験が円滑に行える準備が整ったので、結果的には良かった。その後は特に光学的方法(高速度ビデオカメラ、モーションキャプチャ)を用いて実際に高難度のジャンプについてデータ取得を行い、分析を行って上記研究実績の概要のような結果が得られている。本研究の最終的な目的は、3回転あるいは4回転という多回転ジャンプを成功させるための技術を明らかにし、選手の技術向上に資する提言を得ることである。ここまでの検討の結果、6種類のジャンプによってその戦略は異なることが予想された。すなわち、離氷から着氷までの間に同じ回転数を完遂させるにしても、高いジャンプ高で滞空時間をかせぐことによるものと、滞空時間は短くても回転スピードを上げることによるもの、あるいはその中間のものなどが存在していると考えられる。さらに選手によっても同じように戦略は異なっていることが考えられる。そこで、分析対象者の範囲を広げ、また対象者数を増やすことにする。男女の選手両方を対象とし、しかもそれぞれ複数人の分析を行う。次に、6種のジャンプのそれぞれについて高いジャンプ高を得るために適切な踏切動作を検討する。ルッツとフリップは左足での後ろ向き滑走から右足のトーを突いて離氷し、回転後に右足で着氷してから後ろ向きで滑走するという点では全く同じ経過をたどるジャンプである。踏み切り時の左足がインエッジ(フリップ)かアウトエッジ(ルッツ)かだけが異なっている。
超臨界乾燥における自発的なナノ構造形成と材料合成への応用

気体とも液体とも相境界を持たない超臨界状態を経由して湿潤なゲルを乾燥させる方法を超臨界乾燥といい、通常の乾燥では避けられない気液界面張力が発生しないため、ゲル内部の微細構造を変化させずに溶媒だけを除去してくれる手法として知られている。ところが研究代表者は、ある種のポリマーゲルを超臨界乾燥すると、もともとのゲルには見られないナノ構造が自発的に形成する系を発見した。本研究では、超臨界乾燥を含む種々の乾燥プロセスとナノ構造形成機構との関係を探究し、その背後にあるサイエンスの解明に取り組む。
リンパ球の皮膚への移住の分子基盤と移住能獲得のメカニズム

体外から侵入しようとする感染性病原体に対して最初のバリアーとして機能するのが、体の外面を覆う「皮膚」である。皮膚には定常時にもメモリーT細胞が存在するが、感染時にはエフェクターT細胞が速やかに動員され感染防御において中心的役割を担う。また、皮膚に浸潤するT細胞はアレルギー性接触性皮膚炎、乾癬、アトピー性皮膚炎などの炎症性皮膚疾患の病因・病態に関与することが示されている。私たちはこれまでに、エフェクター/メモリーT細胞の炎症皮膚への動員は皮膚血管内皮に発現するP-セレクチンとE-セレクチンにより媒介されること、またT細胞上のPSGL-1がP-セレクチンの唯一のリガンドとして機能するだけでなくE-セレクチンのリガンドの一つとしても機能することを明らかにしてきた。しかし、皮膚へのT細胞動員におけるPSGL-1以外のE-セレクチンリガンドの実体については理解がすすんでいない。本研究では、E-セレクチン-IgGキメラタンパク質を用いたアフィニティ精製により、マウスTh1細胞から新規E-セレクチンリガンドとしてCD43を同定した。そこで、CD43が生体内でE-セレクチンリガンドとして機能するか明らかにするため、PSGL-1とCD43の一方および両者を欠損するマウスの解析を行った。その結果、Th1細胞のE-セレクチン結合活性は両分子を欠損する場合に最も低下し、接触性過敏症モデルにおけるこれらの細胞の炎症皮膚への集積も両分子を欠損する場合に最も低下した。さらに、生体内で感作されたリンパ球のE-セレクチン結合活性および炎症皮膚への集積も、PSGL-1およびCD43の両者を欠損する場合に最も低下した。以上から、CD43がPSGL-1と共にE-セレクチンリガンドとして機能し、T細胞の炎症皮膚への移住を媒介することが示された。本研究では、マウスTh1細胞表面をビオチン標識後可溶化し、E-セレクチン-IgGキメラタンパク質を用いてアフィニティー精製を行い、新規E-セレクチンリガンドと考えられる約130kDの分子を見いだした。糖類切断酵素を用いた実験から、この130kD分子がシアル酸を有していること、シアル酸が130kD分子とE-セレクチンとの結合に必要であることを見いだした。また130kD分子はO-シアロ糖タンパク質分解酵素により切断されることから、セレクチンリガンドとして機能する可能性が極めて高いことを予想し、生化学的解析からこの分子がシアロムチンCD43であることを明らかにした。また、ヒト活性化T細胞に発現するCD43もマウスTh1細胞上のCD43と同様にE-セレクチンと結合することを示した。

さらに、特定の糖鎖修飾を受けたCD43が生理的なフロー条件下でE-セレクチン依存的なローリングを媒介することを明らかにした(J. Immunol.,2005)。体外から侵入しようとする感染性病原体に対して最初のバリアーとして機能するのが、体の外面を覆う「皮膚」である。皮膚には定常時にもメモリーT細胞が存在するが、感染時にはエフェクターT細胞が速やかに動員され感染防御において中心的役割を担う。また、皮膚に浸潤するT細胞はアレルギー性接触性皮膚炎、乾癖、アトピー性皮膚炎などの炎症性皮膚疾患の病因・病態に関与することが示されている。私たちはこれまでに、エフェクター/メモリーT細胞の炎症皮膚への動員は皮膚血管内皮に発現するP-セレクチンとE-セレクチンにより媒介されること、またT細胞上のPSGL-1がP-セレクチンの唯一のリガンドとして機能するだけでなくE-セレクチンのリガンドの一つとしても機能することを明らかにしてきた。さらに昨年度、本研究課題において、マウスTh卜細胞に発現するCD43がE-セレクチンと結合することを見いだした。そこで、CD43が生体内でE-セレクチンリガンドとして機能するか、またPSGL-1とCD43がどのように機能分担するか明らかにするため、両分子を欠損するマウスを作製した。PSGL-1またはCD43を欠損するマウスからin vitroで作製したTh1細胞ではE-セレクチン結合活性が低下したが、PSGL-1とCD43の両者を欠損するマウスのTh1細胞では結合活性がさらに低下した。また、接触性過敏症モデルにおけるTh1細胞の炎症皮膚への集積は、両分子を欠損する場合に最も低下した。同様に、生体内で感作されたリンパ球のE-セレクチン結合活性および炎症皮膚への集積も、PSGL-1およびCD43の両者を欠損する場合に最も低下した。以上から、CD43がPSGL-1と共にE-セレクチンリガンドとして機能し、T細胞の炎症皮膚への移住を媒介することが示された(J.Immunol.,2007)。
蛍光カエルを使った細胞系譜の構築と臓器形成パターンの3D画像化

我々は、Creリコンビナーゼ蛋白の作用により、体の色が緑色蛍光から赤色蛍光に置換することが期待されるトランスジェニック(Green/Red-Tg)カエルを用いて、新たな細胞系譜の作製、並びに器官形成や組織の構築パターンを立体的な3次元画像として視覚化することを目標に研究を進めた。先ずCre/loxPシステムによる遺伝子発現誘導系がアフリカツメガエルで機能することを、レポーター遺伝子とCre遺伝子を受精卵に共導入し、胚の蛍光色が切り替わることで確認した(Satoh et al, Dev. Dyn., 2005)。次に、樹立したGreen/Red-Tgカエルを、心筋アクチンープロモーター制御下にCreを発現する(CAR-Tg)カエルと交配させて子孫を作り、それら個体の筋肉組織が緑色蛍光から赤色蛍光に置換するか調べた結果、筋肉組織が全て赤色蛍光に変換していることを認めた(Waldner et al, Dev. Dyn., 2006)。Green/Red-Tg系統は、Cre/loxPシステムによる遺伝子発現誘導を調べる上で、有用なモデル動物となることを明らかにした。さらにCremRNAを効率よく生体に導入するための手法について検討し、エレクトロポレーション(EP)法が優れていることも見出した。現在、胚の片側にEP法でCre mRNAを導入し、左右非対称性を示す心臓や膵臓などの臓器形成過程、或いは神経細胞の左右を交叉した伸長化における蛍光タンパクの発現様式について調べており、器官形成や臓器形成に左右の領域がどのように寄与するのか、今後解析結果をまとめ公表したい。我々は、Creリコンビナーゼ蛋白の作用により、体の色が緑色蛍光から赤色蛍光に置換することが期待されるトランスジェニック(Tg)カエルを樹立した。本研究では、このレポーター用Tgカエルを用いて、新たな細胞系譜の作製、並びに器官形成や組織の構築パターンを、立体的な3次元画像として視覚化することを目的とする。今年度は、Tgカエル由来の受精卵にCre mRNAを導入することで緑色蛍光から赤色蛍光への変換効率を調べ、Cre/loxPによるコンディショナルな遺伝子発現誘導系が両生類で機能するか検討した。Cre mRNAの適性導入濃度を決定後、Tgカエル由来の4卵割胚の背側片側にCre mRNAを導入し、幼生にまで発生した個体について赤色に変換した細胞或いは細胞集団を調べた。現時点では均一な蛍光の変換は認められないものの、Cre mRNAを導入した卵割由来の一部の細胞において赤色蛍光が観察され、左右非対称な蛍光パターンが確認された。また3次元画像解析により、消化器官が全て赤色蛍光に変わった胚も見出した。今年度の研究によりCre/loxPによる遺伝子発現誘導系が両生類で有効であることが明らかとなった。しかし、Cre mRNA導入後、体の片側半分が全て赤色に変換した個体は認められていないため、より効率良く組み換え誘導を行う必要がある。また我々が作製したレポーター分子は、胚発生過程において遺伝子組み換えを容易に識別する上で有効であることが佐藤らによって報告された(Dev.Dyn.2005)。今後本年度の研究成果を踏まえ、Creによる組み換え効率の条件をさらに検討し、左右非対称性を示す臓器(心臓・膵臓・脾臓)や神経細胞の左右を交叉した伸長パターン化について研究を進め、器官形成や臓器形成に、左右の領域がどの程度寄与するのか画像解析データを基に立体的な呈示方法で明らかにしたい。昨年度は、Green/Red-Tgカエル由来の受精卵において、Cre mRNAの注入による緑色蛍光から赤色蛍光への組み換え効率を調べた。Cre mRNAを導入した胚では、極一部の細胞においてのみ赤色蛍光が観察されたが、組み換え効率が悪かった。

その原因を探るために、本年度は先ずGreen/Red-Tgカエルにおいて、Cre/loxPによる遺伝子発現誘導系が正常に機能するか検討した。さらに、Cre mRNAを効率よく生体に導入するための手法についても検討した。心筋アクチン-プロモーター制御下にCreを発現する(CAR-Tg)カエルをGreen/Red-Tgカエルと交配させて子孫を作り、それら個体の筋肉組織が緑色蛍光から赤色蛍光に置換するか調べた結果、筋肉組織が全て赤色蛍光に変換しており、Green/Red-Tg系統においてCreによる組み換えが効率良く起きることを確認した(Waldner et al. Dev.Dyn.,2006)。次にCre mRNAの導入方法について検討した結果、マイクロインジェクション法よりもエレクトロポレーション(EP)法が優れていることが判明した。現在、胚の片側にEP法でCre mRNAを導入し、左右非対称性を示す心臓や膵臓などの臓器形成過程、或いは神経細胞の左右を交叉した伸長化における蛍光タンパクの発現様式について調べており、器官形成や臓器形成に左右の領域がどのように寄与するのか、今後解析結果をまとめ公表したい。
情報技術関連製品に関する競合型市場拡散モデルの解析

論旨は、先ず現時点で、需要予測モデルとして採用されることの多い一般的モデルを、検討する。「第1章:需要予測と市場行動に関する考察」において、企業で利用の多い「マーケティングシミュレーション技法」を比較検討し、企業の市場戦略モデルとして本旨に適する「企業の市場行動モデル」を策定する。更に、このモデルにおいて課題となる「市場データ分析におけるトラッキング・シグナル」の問題を検討する。第2章「製品技術と需要構造分析」においては、特に「製品需要予測と市場連結分析」で需要予測モデルと市場との連結度の問題を考察する。これは需要モデルの有効性を実証する際の指標となると考えられる。半導体製品の応用事例を扱い「精密光学機器の市場特性分析」にて、製品需要の特質を考察する。最後に第3章「半導体関連技術製品と市場シミュレーション」において需要予測実測を「製品市場拡散シミュレーション分析」であつかい、「半導体関連技術製品の市場特性」において研究の総括をおこなう。本研究では新たに企業間競争を前提とした競合型市場製品拡散モデルを構築し、シミュレーションにより当該モデルの精度を確認することを目的とする。研究の意義として、製品需要創造のための新たな企業間競争のモデル化を柱に、製品技術寿命データ解析によりマーケット・シェア予測モデルの構築を行い、競合モデルを構築し、情報関連製品技術のライフサイクル・マネジメントに有益な示唆を与えることを目標にする。技術関連製品の、主に半導体製品の用途開発と関連技術の需要について市場予測をおこなう為のモデルを解析し、経営戦略の立場から予測誤差管理について研究した。その導入部分は以下の論文に掲載した。(1)「需要予測と市場行動に関する考察」日本福祉大学経済学会紀要経済論集第23号2001年6月需要分析、特に製品市場予測の中心的役割を果たすシミュレーション技法を比較検討し、寡占市場段階での半導体製品メーカーの市場行動、市場戦略の観点から、ゲーム理論モデルの導入までを論じた。(研究項目)市場行動モデルの系譜、需要予測の手法分析、シミュレーション分析の比較検討、等。(2)「需要予測と経営戦略モデル-市場データ分析におけるトラッキングシグナル-」日本福祉大学福祉社会開発研究紀要現代と文化」2002年4月需要予測モデルの戦略上の運用にあたり、予測誤差管理手法を論じ、市場データの分析での問題を解析した。(研究項目)需要予測と経営戦略モデル、指数平滑法、予測誤差管理、トラッキングシグナル、等。特に研究導入平成13年度では、主に研究分析に最適な市場シミュレーションモデルの設定をおこなった。平成14年度では、市場データの収集とモデルへの適応、評価、結果検討をおこなう。情報技術関連製品(半導体応用)の市場拡数について、本年度は主に精密光学製品のIT(デジタル)化の要因の市場インパクトについて調査した。本内容の一部は「プロダクト・デザインに関する-考察-精密光学機器の市場拡散」日本福祉大学紀要「現代と文化」第108号へ論文掲載申請中である。従来のプロダクトライフサイクル政策に製品計画を置く製品市場が、技術革新(IT化)要因によりどのような影響、効果があるか、デジタル製品の市場投入による事例を中心にして、コンジョイント分析した。特に精密光学機器製造業ニコン社、キャノン社及び京セラ社、在日独系メーカー、代理店をヒアリング調査し、今後の市場動向と技術開発について一定の成果を得た。これまでに得てきた研究成果である競合型bass-modelを用いると、技術革新(IT化)要因は、プリテストマーケティングモデルとして、尚実勢値との検定作業により信頼性を高める必要がある。
新しい紛争処理形態についての実証的研究

4年間の研究成果は以下の点である。1.新しい紛争処理形態としての「修復的司法」に対する一般の人々の意識を日豪において明らかにした。日本人は修復的司法導入の目的として「再犯防止」を第1にあげたのに対して、オーストラリアの人々は「犯罪の被害者にとって重要である」と考えていることが判明した。2.オーストラリアは、1997年ごろから各州において「修復的司法」制度を導入してきたが、それが刑事政策(犯罪防止)にとってどのような効果をおさめているかについての評価研究は必ずしも十分なものではない。なかでも首都のACTおよびSAにおいては評価研究が行われてきた。3.日本は、制度としては導入していないが、一つは少年矯正施設、二つは保護観察、三つはNGOを中心とした対話の会などで試験的に実施されているが、その評価については何もなされていないことが判明した。4.平成15年11月8日、9日の二日間にわたって行った「公開研究会」は、豪から研究協力者の二人を招き、出席者も100人を超えるほど盛会であった。研究会は第1日目は日豪調査の結果について日豪の研究者が分析を行った。2日目は豪の研究者による特別報告、実務家、被害者自身、研究者による実施プログラムの紹介と課題について広く議論を重ねた。5.今後、アジア諸国(韓国、台湾、香港、シンガポール、タイ)について各地の伝統的な文化と近代的な紛争処理の形態との調和・軋轢などについて解明していきたい。6.わが国において修復的司法を公的に導入すろためにはいろいろな壁があるが、それを克服するために今回の調査では一般人の他に実務家(弁護士、保護観察官、警察官、臨床心理技官)を対象に調査を行ったが、分析については現在進行中である。今年度は、以下の4つの活動を行った。(1)全体研究会:分担者・協力者全員(海外の研究者を除く)による研究会を5回実施した。第1回研究会(H.12.7.2,東洋大学、出席者11名、)、第2回研究会(H.12.7.22,東洋大学、出席者12名)、第3回研究会(H.12.8.27、東洋大学、出席者11名)、第4回研究会(H.12.12.17、東洋大学、出席者11名)、第5回研究会(H.12.3.10実施予定)(2)海外で開催された学会・シンポジウムに出席:Conference of Restorative Justice and Domestic Violence(オーストリア・キャンベラ:細井発表)、国際被害者学会第10回大会(カナダ・モントリオール:西村、諸沢、細井出席)、Real Justice第2回大会(カナダ・モントリオール:細井、西村出席)、少年非行と関係修復的司法第2回国際会議(ドイツ・チュービンゲン:細井、西村、高橋出席)これらの会議において豪州の研究協力者〔旅費は自弁〕と研究会を開催し、加えて諸外国の専門家との交流を通して資料、情報の収集をおこなった。(3)豪側の研究協力者のP.グラボスキー博士の講演会:H.12.11.9,東洋大学にて「最近の凶悪な少年犯罪に対するゼロ・トレランス政策の成果と問題点」と題した講演会を実施し、また来年度の調査の理論的枠組みについて話し合った。(4)平成13年度に実施予定の日豪比較の意識調査準備:日本側の調査チームを立ち上げ(責任者・津冨・細井)、先方の豪研究チーム(責任者・ストラング)と数回にわたって情報を交換し、実施に向けて準備作業を行った。本年度の研究実績の概要今年度は、研究実施計画に沿って、以下の作業を行なった。

1.日本側の研究分担者および研究協力者全員による研究会:第6回(平成13年4月28日、13:0018:00)、第7回(平成13年6月10日、13:0019:00)、第8回(平成13年10月7日、午後13:0018:00)の3回実施した。2.上記の全体会以外に、オーストラリアの研究協力者、Dr.Guy Mastersを囲んで、日豪の比較調査のための研究会を実施し(平成13年**、平成13年^<**>)さらに日本側のメンバーだけで調査票作成の作業を行なった。3.調査は、一般調査(A)と特別調査(I)の二種類からなるが、一般調査についてはオーストラリアとの調整を重ねて、調査方法、および調査票について、最終の合意に達し、3月はじめに両国において実施を開始した。特別調査については、日本側のみで実施することもあり、平成14年度に引き続き行なう。4.国内においては、事例研究も進めた。具体的には、裁判所、保護観察所、NPO、仲裁センターにおいて、数例であるが、実施した。5.国際的な学会へ積極的に参加し、加えて各地のRJのプログラムを観察し、各国の取り組みについて理解を深めた。今年度は以下の活動を行った。1.昨年実施した日豪の一般住民調査の結果について、分析をおこなった。2.日豪の一般住民調査をベースにして、さらに受刑者調査、実務家調査、被害者調査のための調査項目を検討した。3.細井と西村が、アメリカ合衆国のミネソタで開催されたReal Justiceの第4回会議に出席したほか、ポートランドにおいて実施されている種々のプログラムを視察した。4.研究協力者の小長井はノールウェイに、矢野はスウェーデンに、それぞれの国で実施されているプログラムを視察した。5.研究分担者の津富は、南アフリカに赴き、そこで実施されているプログラムを視察した。6.オーストラリアの研究協力者J.Braithwaite教授を招聘し、日本の実情について意見交換をした。7.日本の刑事司法機関の各所(保護観察所・家庭裁判所)で試験的に実施された被害者と加害少年、家族の対話の状況について事例研究を行った。8.民間の機関(少年の対話の会および和解仲裁センター)で実施された具体的な事件について、事例報告をおこなった。今年度は昨年度からの継続研究として受刑者調査および実務家調査を計画・実施した他,最終年度として過去4年間の研究の成果を発表する公開研究会を実施した。具体的には,1.受刑者調査:平成15年6月7月に全国の刑務所28箇所、1,350人を対象に調査票を用いたアンケート調査を実施した。分析可能な有効数は222であり、これについて二変量検定を行った結果,前科の無い者のほうが、前科がある者と比べて<修復的司法への支持が高い>ことが判明した.今後さらに詳細な分析をする予定である.2.実務家調査:弁護士、検察官、警察官,保護観察官について全国規模の調査を実施中である。3.公開研究会:4年間の成果を発表するために、豪の研究分担者二人を招聘し,平成15年11月8日,9日の二日間にわたって,東洋大学白山校舎スカイホールにて開催し,延べ200人強の参加者をえて,盛大に行われた.一日目は日豪調査の結果について両国の研究分担者によって報告された.全国規模の一般住民を対象に調査票を配布し,最終的には日本1544人,豪1967人から有効回答を得ることができた。分析の結果,「加害者・被害者の話し合いの意義」について日豪において顕著な違いを引き出すことができた。
ゲノム情報解析にもとづく性差構築機構の解明

次世代シーケンサーの性能向上などの技術革新により、比較ゲノム解析やエピゲノム解析が急速に進展した。このようなハイスループットなゲノム解析をもとに、基本的な生命現象である「性差」を対象とし、特にそこに見られる遺伝子発現制御をゲノムワイドに包括的に解明することを目的として研究を行った。その結果、性差に関連する様々な事象、たとえば、体細胞に見られる男女差や、妊娠時の子宮内膜に見られる大きな遺伝子発現の変化を明らかにした。また、この過程で、性差だけでなく、広く分子医科学研究に有用な方法論の開発を行った。種々の脊椎動物種におけるゲノム配列の解読完了や、次世代シークエンサーの開発などの技術革新により、比較ゲノム解析、エピゲノム解析や発現制御の解析などが急速に進展した。それらのデータ解析を通して、ゲノムスケールで具体的かつ基本的な生命現象である「性差」を解析対象とすることが可能になった。本研究は、ゲノム情報の解析にもとづき、脊椎動物全般に共通、あるいは動物種に固有の性差構築メカニズムを解明することを目的として、以下の研究を行う:(1)性差構築を支配するシスエレメントと遺伝子の同定.(2)性差構築を支配するシスエレメントと遺伝子の比較ゲノム解析.(3)性差構築を支配するシスエレメント群や遺伝子群を協調的に機能させるメカニズムの解明.本年度は、ゲノムアライメントおよび次世代シークエンサーから得られ公開されているトランスクリプトームのデータ解析から、選択的スプライシングの制御に関与したシスエレメントの同定をおこない。論文として発表した(Suyama et al.Nucleic Acids Res.38 : 7916-7926, 2010)。ここで得られた結果は、直接、性差に関与するものではないが、今後、性差特異的なスプライシング様式の検出への応用が期待できるものである。さらに、性特異的遺伝子発現を制御するシスエレメントの探索に向け、次世代シークエンサーのデータ処理のための計算機システムを整備し、必要なプログラムの開発および実装をおこなってきた。中でも、ほかには見られない優れた視覚化プログラム群の開発は特筆に値する。このプログラム群により、ゲノム上の特徴を広範囲にわたり、迅速に精査することが可能になった。現在、このプログラム群を用い、主に計画研究1(諸橋)と計画研究5(山田)によって得られた転写因子結合部位に関する解析を進めている。本研究は、ゲノム情報の解析にもとづき、脊椎動物全般に共通、あるいは動物種に固有の性差構築メカニズムを解明することを目的として、以下の研究を行う。(1)性差構築を支配するシスエレメント群や遺伝子群を協調的に機能させるメカニズムの解明(2)トランスクリプトームに見られる性差(3)エピゲノムに見られる性差本年度は、これまでに計画研究1(諸橋)や計画研究5(山田)のところで得られているChIP-seqやRNA-seqのデータをもとに、生殖細胞での特異的遺伝子発現に関与しているエンハンサーの同定を進めた。また、これまでヒトB細胞における大規模RNA-seqデータをもとに遺伝子発現に見られる性差の解析を行なってきており、ヒトB細胞においても遺伝子レベルで有意な発現差の存在を示すことができた。今後はさらに詳細な解析、すなわち遺伝子毎から一歩進め、スプライスバリアント毎に性差が存在するかについての解析を進める。遺伝子毎の解析では転写活性のみが対象となっていたが、スプライスバリアント毎の解析を行なうことで、スプライス制御における性差に関する知見が得られるものと期待できる。さらに、計画研究6(田中)と協力して、メダカにおける性差とDNAメチル化の解析に着手した。種々の動物種におけるゲノム配列の解読完了や、次世代シークエンサーの開発などの技術革新により、比較ゲノム解析や発現制御解析などが急速に進展した。本研究は、ゲノム情報解析にもとづき、動物種全般に共通、あるいは動物種に固有の性差構築メカニズムを解明することを目的としている。以下に平成25年度における具体的な研究実績を挙げる:1性差構築を支配するシスエレメントと遺伝子の同定:ChIP-seqのデータからピークを同定し、そのピーク領域に相当するゲノムアライメントを高速に取得するためのプログラムの開発を行った。今後、このプログラムをウェブサーバに実装し公開することで、その有用性を広くアピールする。さらにこのプログラムを用い、エストロゲンレセプターなど、性差に直結すると考えられる転写因子の結合部位について、その進化的保存性についての解析を進める。

2領域内における共同研究の推進:研究計画1(諸橋)との共同研究で、Y1細胞におけるAd4BP/SF-1のChIP-seq解析およびRNA-seqによる発現解析のデータをもとに、その標的遺伝子のバイオインフォマティクス的な解析から、Ad4BP/SF-1が解糖系の一連の酵素群の発現制御を行っていることを見いだした(Baba et al. 2014)。計画研究5(山田)とは器官形成において重要な働きをすると考えられる転写因子の新たな発現制御機構を解明した(Villacorte et al. 2013)。計画研究6(田中)とはメダカの性決定に重要と考えられるDNAのメチル化解析を進めているが、平成25年度はRNA-seqによる発現解析も同時に進め、それらの複合的解析を開始した。本研究では、性差の発現・維持の分子基盤を明らかにすることを大きな目的としている。また、本領域の特徴として、早い段階から次世代シーケンサーを積極的に活用してきたことが挙げられる。そこで、本研究においては、領域内の各グループが産出するこれらのハイスループットデータの解析を積極的に進め、それを応用した研究の推進および普及に努めて来た。以下に平成26年度における具体的な研究実績を挙げる:1性差構築を支配するシスエレメントと遺伝子の同定:ChIP-seqのデータからピークを同定し、そのピーク領域に相当するゲノムアライメントを高速に取得するためのプログラムを行ってきた。今年度は、このプログラムをウェブサーバーに実装し、一般に公開した(Sato and Suyama, 2014)。このプログラムを用い、研究計画5(山田)のグループと外性器形成に重要な役割を果たすと考えられる進化的に保存したシスエレメントの同定を進めている。2子宮内膜間質細胞のヒストン修飾の解析:脱落膜化過程における子宮内膜間質細胞のゲノムワイドな遺伝子発現変化とそれに伴うヒストン修飾変化を調べるため、脱落膜化を誘導した培養細胞におけるRNA-seq解析およびH3K27acやH3K4me3のChIP-seq解析を行った(Tamura et al., 2014)。その結果、脱落膜化においてこれらのヒストン修飾は多くの領域において増加する傾向を示した。これらのデータをもとにしたパスウェイ解析から、脱落膜化において発現亢進する遺伝子はインスリンシグナリングに関与するものが多いことが明らかになった。これは脱落膜化において必要となるグルコースの取り込みが活性化されることを示していると考えられる。種々の動物種におけるゲノム配列の解読完了や、次世代シークエンサーの開発などの技術革新により、比較ゲノム解析や発現制御解析などが急速に進展した。それらのデータ解析を通して、ゲノムスケールで具体的かつ基本的な生命現象である「性差」を解析対象とすることが可能になった。本研究は、ゲノム情報解析にもとづき、動物種全般に共通、あるいは動物種に固有の性差構築メカニズムを解明することを目的としている。以下に平成24年度における具体的な研究実績を挙げる:
Ｃｒｅａｔｉｎｇ　ａｎ　Ｏｎｌｉｎｅ　Ｓｔｕｄｙ　Ａｂｒｏａｄ　Ｃｅｎｔｅｒ

この研究プロジェクトは、自主性を促進するためのオンライン自己学習センターの調査および英語圏での留学を準備している日本人大学生をサポートする「Online Study Abroad Center (OSAC)」の設立を目的とする。多くのOSAC教材の保管場所を専用ウエブサイトから移動させInteractive Study Abroad Text (ISAT)の中に組み入れることとした。過去の研究により得られた学生が認知している必要性に基づき、10種類の教材を作成した。OSACやISATの利用により、学生は試験の点数やコミュニケーション能力全体が驚くほど改善したと述べていた。今年度は主に以下の3つのことを行った。1)OSACの内容を改善した。以前作成した視聴覚教材を改善した。特に、基礎から上級まで様々なレベルのリスニング問題を、学生たちが挑戦的に取り組めるように作成した。学生たちが行うプレゼンテーションの例や学習ガイドを加えた。2)新しいファイルやデータを収集した。新しい視聴覚教材や文書教材を作成した。追加したデータは英国、シンガポール、日本で収集した。英国の教師や大学教授とのインタビューや、日常生活の様子を録画して、問題作成や自己学習教材に使用した。3)試験的に用いる"iBook Author"の内容を作成した。iBooksの内容を、以前の研究のための渡航中に集めたデータを用いて作成した。学生たちがホームステイ中に経験したことを話しているビデオや英国の教師や教授からのアドバイスなど、様々な内容を入れて作成した。さらに、文化や言語についてのアドバイスだけでなく、語彙やリスニングのクイズも含めた。2011年度は、本研究の試験段階として準備段階となる多くの課題を行った。1)オンライン学習や自己学習センターについての文献を検索し、全体的な評価を行った。2)海外施設を利用したオンライン学習(online study abroad center, OSAC)の開設およびその教材作りに関して、オンライン学習分野を専門とする研究者からアドバイスを得た。3)教材作成の準備段階として、イギリスおよびオーストラリアにおいてビデオ撮影を行った。4)専用教材の内容についての意見を得るために、海外にて学習を行った生徒たちへのインタビューあるいはオンラインアンケートを実施した。5)以上を踏まえ、まずはOSAC教材をさらに利用しやすい書式(ibook書籍など)にできるかどうかを試みた。本研究の第二段階として計画を立てていたが、日本、シンガポールおよび英国におけるITの専門家と、OSAC作成およびiBooks Authorの使用について検討および議論を行った。研究のための試験段階としては、ほとんどが初めの計画通りに行うことができた。時間とスケジュールの都合により、専門家における討議は次の段階とし、より多くの専門家に意見をもらえるようにした。この討議会は実際に開催するか、またはオンラインにて行うかもしれない。アップル社の新しいLion Operating Systemの登場やibook書籍ソフトにより、新しい対話環境にOSACを置くこと目指した研究が可能である。本研究の最終段階として、内容の最新化および改良を重ねた教材をOSACおよび専用のiBooks Authorテキストに載せてアップロードする。これらの教材の作成が終わったら、試験的に一部の学生に利用できるようにする。視聴覚教材は、本研究をさらに発展させられるような今後の研究プロジェクトのためにも収集を続ける。新しいibook書籍ソフトやタッチパネル技術の到来により、OSACをipadやiphoneでダウンロードできるマルチメディア教材の形式で取り入れられる可能性を検証する。本研究の第二段階として、次のことを行っていく。1)高価な専用のサーバーの代わりに、OSACを対話型の教科書を用いることができるかを検証する。2)リスニングや語彙訓練のような自己学習教材をさらに作成する。3)講義や日常会話のような他の海外学習のビデオに使われる脚本のような、文化的背景を含んだ教材を作成する。2012年度末にイギリスで行った資料収集にかかる旅費の支払いを2013年度に行うこととなったため、残額が生じたことから、まずは当該旅費を支払う。イギリスでの資料収集で得た成果に基づき、イギリス旅費支払後の2012年度の残金と2013年度の研究費を使用して、カナダで行う予定の研究協力者との議論・討論にかかる旅費に充てる。2013年度は最終年度のため、当該研究で得た成果をまとめるためのPCの購入とWEBサイト作成にかかる謝金として使用予定である。次年度の研究費は、ibook教材のためのソフトウェアおよびハードウェアの購入に使用する予定である。さらに、行うことのできなかった討議会を開催するためにも使用する予定である。