hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
教師のライフコースに関する継続的縦断的調査研究

本縦断的継続的調査から指摘しうるのは、日常の教職生活に内在し、教師たちの発達を支え促していく機能の存在である。勤務校における子どもたちとの出会いと交流、その経験過程で得られる先輩教師たちからの援助や助言、あるいは自分の子どもの出産や育児といった私的経験までもが、教師としての力量形成に大きな影響を与えている。このような教師としての力量形成と発達を支え促しているのが「発達サポート機能」である。現在、教職生活が多忙化し、職場や地域で授業研究活動に取り組むゆとりが失われてきている傾向にある。一人一人の教師の発達と力量形成を支え促していくためにも、その「発達サポート機能」の回復が必要である。2014(平成26)年度は、これまで継続的に取り組んできた調査研究作業と密接な連続性を有している質問紙調査とその量的統計的分析が中心的研究作業課題であった。具体的には、静岡大学教育学部を卒業し静岡県下の小・中学校教師となっていった現職教師たちを継続的な同一対象として、1984年8月実施の第1回目調査とそれ以降5年間隔で実施してきた6回の調査に続く第7回目の質問紙調査を、2014年8月に実施した。教師の養成と現職研修に関する政策的展開とコーホートの大幅な入れ替えが生まれることによる教師文化と意識の変容という新しい時代的変化の下での新たなデータを収集・分析・蓄積していく必要とともに、それらを過去6回の質問紙調査や過去2回のインタビュー調査のデータとも比較考察する必要があるため、対象者の選定や質問内容などの点で大幅な変更は行わず、これまでのものを基本的に踏襲した。従来の調査対象者から退職後10年を経過する第14コーホートを外し、第512コーホートと新しく入職して新任期にある第13コーホートを調査対象者とし、総計2064名に対し自己記入方式質問紙票を郵送し、返信用封筒にて回答・返送を依頼した。宛先不明者を除く全体の回収票数と回収率は、676票(35.7%)であった。調査を重ねるごとに回収率が低下してきているが、それでもいまだ郵送法としては比較的良好であったといえる。分析作業は、これまでの調査結果と比較しながら、現在進行中であるが、今回新しく加えた「自らのライフコース上の転機を語る言葉・思いに着目して、経験の中で蓄積されてきた実践知を明らかにしようとする質問」には、自由記述でありながらも全体回答者数の67.5%から回答記述が寄せられた。分析作業は、2015年7月までには終え、報告書を作成していく予定である。本申請研究は、これまで1984年第1回調査以来約30年間に継続的に実施してきた6回の質問紙調査とその量的統計的分析、2回のインタビュー調査とその質的事例的分析を踏まえ、第7回目の質問紙調査と第3回目のインタビュー調査を実施し、過去のデータとの比較分析を行うものである。研究初年度のH26年度は第7回目の質問紙調査を実施し、その結果分析を進めた。H27年度はその報告書を作成し、回答者に結果を還元した。またH27年度の中心的な研究作業は、第3回目のインタビュー調査の実施とその分析であった。調査は、89月にかけて、9名の現職教師に対して実施した。その内訳は、第812コーホートに属する7名がこれまでのインタビュー調査の約510年後の追跡調査にあたるものであり、新たに対象者に加えた第13コーホートに属する2名が新任期若手教師に対する第1回目の調査にあたるものであった。9名のうち5名(男3名、女2名)が40歳代の中堅段階に入っていたが、家族や自分自身に降りかかる様々な問題(病気、家事・育児、我が子のいじめ・不登校など)に直面し、「個人時間」や「家族時間」での経験が教職生活に大きな影響を与えていた。また、いわゆる「中堅教師」となり、職場でのリーダー役、若手からの相談役を担う段階に入り、新たな教職生活の仕方を模索しつつあった。残りの4名(男2名、女2名)は、20歳代の若い教師たちであるが、特に新任23年目にある2名の教師は制度化された研修制度の中で指導を受けながら自立した教師としての一歩を踏み出そうとしている状況にあった。背景としての時代状況とも関連させながら、さらに詳細な質的事例的分析を行っていく予定である。研究初年度における研究計画であった質問紙調査とその量的統計的分析に関しては、まずは基礎的分析を終え、研究2年目にその報告書を作成、回答者に送付・還元することができた。研究2年目における研究計画であったインタビュー調査とその質的事例的分析に関しては、当初予定していた対象者すべてに対して実施することができなかったが、40歳代および20歳代9名の現職教師に対して実施することができた。そのインタビュー記録をもとに、本研究メンバーによって集団的な分析と討議のための研究会を開催した。平成28年度は、「教師の力量形成に関する質問紙継続調査(第7回目調査、H26年8月実施)」の再分析作業を行うとともに、インタビュー継続調査の残り分の補充調査を行い、あわせて研究の総まとめを行う計画であった。前者については、特に自由記述箇所の整理・分析を行った。

例えば「教職に就く以前に読んだ本・雑誌等の中で、職業として教職を選択したことに影響を及ぼしたと思われるものは何か」という質問に対して、20歳代の若い卒業コーホート(H20-22年3月及びH24-26年3月卒業者、第12及び13GC)は、年齢が上のGCと異なってコーホート内成員の多数から指摘されるものが認められず、世代共通の理想的教師像形成がなされていないことが特徴であった。また、今回の調査では、新たに教師の「実践知(実践的な知・信念)」についての探索的な質問(「教職生活に転機をもたらすきっかけとなった言葉や思い」を自由記述で回答)に対しては、3つの内容的カテゴリー(1:実践の在り方としての目指すべき状態が示唆されているもの、2:実践者の姿勢としての目指すべき状態が示唆されているもの、3:目指すべき状態に向けて変化を生み出すための具体的な助言」)に分類することができ、今後の継続的な本格調査の足掛かりを得ることができた。後者については、第7GC(1983年3月卒)に属する小学校男性教師に1995年・2004年に続いて3回目の継続的縦断的インタビュー調査を実施することができた。同教師は、すでに50歳代に入り、小学校長職に在った。今回の調査によって、一人の教師のライフコースを、追跡法によっても明らかにすることができ、第1・2回目調査の内容とともにあわせて再整理・分析することができ、「選択的変容型」発達のひとつの典型例を確認・提示することができた。今回の調査を含めて過去7回にわたる質問紙調査のデータを再整理・分析する作業課題と、過去にインタビューを実施した対象者に対する継続的縦断的インタビュー調査を実施する作業課題とを並行して行ってきた。しかし、前者は一定程度進めることができたものの、後者はインタビュー予定者との連絡・調整がつかない場合が多く、未実施のままとなってしまっている。全体的な最終報告書作成のためには、両者の作業完了が必要であるため、研究期間を1年延長して再度試みることにした。研究の終了年度の課題は、これまで継続的にライフコースの聞き取りを行ってきた対象者(現職教師)に対して前回調査以後の経験を聞き取る補充調査を行うことと、その結果と照らし合わせながら、研究初年度に実施した質問紙調査結果の再分析を行いつつ、今日、教師たちの職業生活上及び私生活上の抱える諸問題、生涯にわたって教師として発達し力量形成を遂げていく上で必要とされる事柄等を整理すること、さらには教師が実践経験の中で自己形成していく専門的力量の内実(実践知)の解明も試みることであった。第7回目(5年間隔)にあたる質問紙調査は、年齢・性の異なる676名から回答が寄せられ(回収率:32.8%)、今回は特に、教育実践上における困難点について「子どもの学力差に対応」と「特別に支援を要する子の指導」の2項目に回答が集中したことが大きな特徴であった。また、今回から新しく設定した「転機をかかる言葉・思いに関する質問」結果からは、教育専門職者としての〈実践知〉が、困難な状況を打開していく上で機能する知であるとともに、新たな実践創造を支え・促していく上で機能する知として、解明していくことの重要性が明らかとなった。第3回目(10年間隔)にあたるインタビュー調査は、年齢・性の異なる11名の現職教師に対して実施したが、40歳代を迎えた中堅期教師たちが、従来のインタビュー調査では、様々な問題(障害や不登校、問題行動など)を抱える子どもとの格闘・交流の中で自らの教師としての発達を実感してきた経験(職業時間上の経験)を多く語っていたことに対して、今回は夫・妻ないしは自分自身のリストラ・病気等や、自らの子どものいじめ・不登校等の経験(家族時間上の経験)が多く語られ、中年期における問題が浮かび上がり、今後、職業時間上の経験だけでなく個人時間や家族時間上の経験も結び付けた教師の発達研究の重要性が明らかとなった。
3次元多様体とその写像類群の研究

向き付け可能な閉曲面上の向きを保つ同相写像のなす集合を考え、さらにそのイソトピーによる同値類のなす集合を考えると、そこには自然に群としての構造が入る。この群の事を写像類群と呼ぶ。この群は、リーマン面のモジュライ空間の基本群であることから、代数幾何学と深い関わりを持ち、また、Heegaard分解や、写像トーラスによる閉3次元多様体の構成を通じて、3次元多様体論とも深い関わりを持っている。本年度は、写像類群の表示に関する研究を行なった。写像類群が有限個のDehn twistによって生成されること(Lickorish)、有限表示できること(McCool)は約40年前から知られていた。実際の有限表示は、HatcherとThurstonにより単連結性の示されたcut system複体への写像類群の作用を調べることにより、1980年代にWajnrybにより求められた。さらに、近年になって、Wajnrybの表示を基にsymmetricな表示がGervaisによって求められた。しかしながら、cut systemの単連結性の証明にはギャップがあり、写像類群の表示を求める他の方法を開発する必要があった。一方、Harveyにより、complex of curveが導入された。それは、閉曲面上の単純閉曲線のイソトピー類を頂点とし、互いに交わらずアイソトピックでもない曲線に対応する頂点の集まりに対して複体を貼ることによって構成される複体である。この複体が単連結であることが示されており(Harer)、本年度は、その複体への写像類群の作用を調べることにより、閉曲面の種数に関して帰納的に写像類群のGervaisのsymmetricな表示をあらためて求めることが出来た。なお、この手法は、昨年度、3次元ハンドル体の写像類群の表示を求めるのに用いた方法と同様な方法であり、これより、3次元ハンドル体の写像類群の表示をより明快なものにすることも期待される。本年度は以下の2点について研究を行った.1. 3次元ハンドル体の写像類群の表示3次元ハンドル体内に固有に埋め込まれた本質的で非分離な2次元円盤のことをメリディアン円盤と呼ぶ.メリディアン円盤のイソトピー類を頂点とし,互いに交わらずホモトピックでないメリディアン円盤の族を単体とすることによって構成される単体的複体は可縮なものであり,ハンドル体の写像類群はその複体の上に単体的に作用していることが知られている.さらに,その部分複体で,非分離的なメリディアン円盤の族のみを単的とするものは種数が3以上の場合は単連結であることが示された.これらの複体の上へのハンドル体の写像類群の作用を調べ,また,曲面上の組み紐群の表示や組み紐群への写像類群の作用を詳細に調べることによって,3次元ハンドル体の写像類群の表示が得られた.2.向き付け可能な閉曲面をfillする2曲線の分類閉曲面上の2本のの単純閉曲線で,それらの補空間のすべての連結成分が2次元円盤となっているものをfillする2曲線という.閉曲面をfillする2曲線に沿ったDehn twistの合成としてあらわされる写像はほとんど全てが擬アノソフ同相写像であることが知られており,閉曲面上の写像の分類を行う上で,fillする2曲線の分類は重要な問題である.本年度は,修士課程の学生の富沢堅一氏とともに,filling dataという概念を導入しfillする2曲線の分類を試み,6交点以下の場合の分類を行い,さらに,両方の曲線が分離的である場合にfilling dataが特別な形をしていることを用いて12交点以下の場合の分類を行った.向き付け可能な閉曲面上の向きを保つ同相写像のなす集合を考え、さらにそのイソトピーによる同値類のなす集合を考えると、そこには自然に群としての構造が入る。
水平振動に対する要求性能レベルのわかりやすい表現に関する研究

当研究課題では,これまでに行った水平振動に対する被験者実験やユーザー・工務店に対する意識調査の結果を整理し,知覚確率に基づいて居住性能評価の指標を提示し,それに基づいた揺れ性能レベルを,ユーザーによりわかりやすく,実感できる表現として説明するための資料を提案した。ユーザーに対するヒアリング・アンケート調査の結果や専門家に対するヒアリングで聞かれた意見をふまえ,揺れ性能の説明に用いる項目の種類や数,説明資料としてのプレゼンテーション方法などについて試行錯誤を繰り返して洗練した。すなわち,知覚閾および感覚評価における回答確率が,居住性能評価の対象となる加速度範囲でほぼ0100%に変動する項目を選択し,振動数ごとに各項目の回答確率を加速度最大値と対応させる。これによって揺れ性能レベルを段階的に評価し,ユーザーに身近な表現で示された性能レベルを専門家が設計指標としてくみ取れる資料を提示した。これらの結果は,日本建築学会から2004年5月に刊行された「建築物の振動に関する居住性能評価指針・同解説」に反映されている。また,2003年度には一般ユーザーを対象とした全国規模のアンケートを実施し,ユーザーの住宅性能に対する意識を明らかにするとともに,振動に関する性能をユーザーにとってより身近にするための課題を知ることができた。さらに,ユーザー調査の新しい方法として作成を進めているインターネットによるコンテンツも,日本女子大学生涯学習総合センターより順次公開している。本年度は,これまでに行った視覚刺激を考慮した水平振動感覚,被験者の意識や状況の違いが知覚閾に及ぼす影響に関する実験の結果を整理し直し,水平振動の物理量とユーザーの状況とを対応させて説明する資料を模索した。建物の固有一次振動数と応答加速度最大値で評価することを想定し,これらの水平振動の物理量と心理評価や知覚閾の累積確率との対応を軸として性能レベルの説明を試みた。その結果,心理評価などのユーザー側のばらつきをふまえて,揺れ性能レベルのグレードを説明することができた。ここでは,様々な条件における水平振動に対する心理評価や知覚閾を同じ座標軸で表し,ユーザーの状況を多角的に表現することからわかりやすさを追究するものである。これらの資料を基にして,心理評価と知覚閾とを対応させて揺れ性能レベルを説明することができ,建築学会の居住性能評価指針におけるH-1H-4の評価曲線を,ユーザーの状況と対応させて説明してみた。一方,水平振動に対する居住性能をユーザーにわかりやすく説明するために,設計の現場で性能説明として実際に行われているユーザーとのコミュニケーションや,居住者が水平振動に対する性能を説明する上で実感できる表現などに関して,並行して調査を進めている。現状では,ユーザーと専門家の間に有効なコミュニケーション手段がないため,両者の対話をすすめる資料の作成が急務である。ユーザーがより取り組みやすいインターネットを用いた方式によるアンケートなども検討しており,次年度以降の本調査実施へ向けて準備している。本年度は,昨年度から継続してユーザーにわかりやすく揺れ性能を説明する資料の模索を中心に研究を進めた。昨年度に纏めた設計指標となる振動数-加速度軸で表現された揺れ性能の評価レベルをふまえて実験データの条件を整理し,ばらつきを平滑化した評価曲線を提示した。さらに,この評価レベルをユーザーに近い表現で説明するため,揺れを感じる人の割合や心理・感覚の表現にあてはまる人の割合,すなわち感覚側のばらつきに基づいて,揺れ性能のグレードを説明することを試み,資料を作成してみた。昨年度までに蓄積した,揺れの感じ方に関する調査・実験データの解析を進める一方で,被験者実験やアンケート・ヒアリング調査などを通して,よりわかりやすい説明方法や表現方法の検討とこれまでの実験結果の検証を並行して行っている。現段階では,作成した資料を用いてユーザーと専門家にヒアリング調査を行ない,説明に用いる項目の種類や数,資料としてのプレゼンテーション方法などについて意見を集めている。その結果をふまえて,ユーザーによりわかりやすく説明された評価レベルを,専門家が設計指標としてくみ取れるような資料を作成したいと考えている。一方,揺れ性能だけでなく住宅性能全般を対象としたユーザーの意識調査や性能説明方法に関する検討,工務店やリフォーム関連企業などとユーザーとのコミュニケーションの現状調査を進めており,住宅性能全般における揺れ性能の位置づけをみた上で,次年度以降に結果を纏める予定である。

ユーザー調査の新しい方法として昨年度より作成を進めているインターネットによるアンケートのコンテンツもより数を増やし,近日中の公開に向けて最終準備に入っている。本年度は,当研究課題のまとめとして,知覚確率に基づいて提示した居住性能評価の指標をふまえ,ユーザーによりわかりやすく,実感できる表現として揺れ性能を説明するための資料を提案した。継続して実施したユーザーに対するヒアリング・アンケート調査の結果や専門家に対するヒアリングで聞かれた意見ををふまえ,揺れ性能の説明に用いる項目の種類や数,説明資料としてのプレゼンテーション方法などについて試行錯誤を繰り返して洗練した。すなわち,知覚閾および感覚評価における回答確率が,居住性能評価の対象となる加速度範囲でほぼ0100%に変動する項目を選択し,振動数ごとに各項目の回答確率を加速度最大値と対応させる。これによって揺れ性能レベルを段階的に評価し,ユーザーに身近な表現で示された性能レベルを専門家が設計指標としてくみ取れる資料を提示した。これらの結果は,日本建築学会から4月に刊行予定の「建築物の振動に関する居住性能評価指針・同解説」に反映されている。これらの揺れ性能を位置づける上で,本年度は一般ユーザーを対象とした全国規模のアンケートを行い,これまでに行った調査の結果に加えて,ユーザーの住宅性能に対する意識を明らかにすることができた。また,ユーザー調査の新しい方法として作成を進めているインターネットによるコンテンツも,順次公開を進めている。
単層カーボンナノチューブへの分子内包方法の確立と新規物性の発現

単層カーボンナノチューブへの分子内包方法装置を作製し、パラニトロアニリン分子を単層カーボンナノチューブへ内包した。単層カーボンナノチューブヘパラニトロアニリン分子が内包されたことを透過型電子顕微鏡およびラマン分光法により観察した。フラーレンC_<60>が単層カーボンナノチューブへ内包された時、フラーレンC_<60>は単層カーボンナノチューブ中へ隙間なく充填される。パラニトロアニリンおよびフラーレンC_<60>を内包した単層カーボンナノチューブ中にはフラーレンC_<60>間に隙間があることが透過型電子顕微鏡観察により分かった。パラニトロアニリンの分子量は小さいため、フラーレンC_<60>に比べてコントラストがつきにくい。よって、フラーレンC_<60>間にパラニトロアニリンが内包されていると透過型電子顕微鏡観察により推測した。パラニトロアニリンおよびフラーレンC_<60>を内包した単層カーボンナノチューブのラマンスペクトには、フラーレンC_<60>及びパラニトロアニリン由来のピークが見られた。よって、透過型電子顕微鏡測定およびラマン分光測定より、単層カーボンナノチューブにパラニトロアニリンおよびフラーレンC_<60>が内包されたと結論づけた。単層カーボンナノチューブは、その直径が約1nmの円筒状の物質である。一方、パラニトロアニリンは1nmの半分以下の大きさである。単層カーボンナノチューブへ内包する分子の大きさがその直径に較べて十分小さい時、分子は単層カーボンナノチューブへ内包されやすいと同時に、単層カーボンナノチューブ外部へ出て行きやすいことを意味する。小さな分子を単層カーボンナノチューブ内部のみに留めておくことができたということは、これまで単層カーボンナノチューブ内部に留めておきにくいと考えられていた分子をも内包することができる可能性を示唆している。さらに、単層カーボンナノチューブ内部の完全な真空状態を利用した分子同士の純粋な相互作用の観察等、基礎研究にも大きく貢献すると考える。(抄録なし)単層カーボンナノチューブへの分子内包方法装置を設計および作製し、パラニトロアニリン分子の単層カーボンナノチューブへの内包を試みた。単層カーボンナノチューブへパラニトロアニリン分子が内包されたことを透過型電子顕微鏡およびラマン分光測定により観察した。透過型電子顕微鏡測定では、得られた白黒の像のコントラストから試料の構造決定を行った。ラマン分光法による測定では、試料が単層カーボンナノチューブとパラニトロアニリンの二分子からなることを確認した。以上、これら二つの測定結果からパラニトロアニリン分子が単層カーボンナノチューブへ内包されたと判断した。単層カーボンナノチューブは炭素原子のみから成る円筒状の物質であり、その直径は約1nmである。一方、パラニトロアニリン分子は直径の半分以下の大きさである。単層カーボンナノチューブへ内包する分子の大きさがその直径に較べて十分小さい時、分子は単層カーボンナノチューブへ内包されやすいと同時に、一度内包された分子が単層カーボンナノチューブ外部へ出て行きやすいことも意味する。そのような小さな分子を単層カーボンナノチューブ内部のみに留めておくことができたということは、これまで単層カーボンナノチューブ内部に留めておきにくいと考えられていた分子も内包することができる可能性を示唆し、応用研究の幅が大きく広がると考える。また、単層カーボンナノチューブ内部の完全な真空状態を利用し、分子同士の純粋な相互作用の観察を通じて基礎研究にも大きく貢献することができると考える。

実験条件が与える試料への影響が予想していた以上に大きく、実験条件の最適化に時間がかかっているため。分子内法における温度管理が特に重要な実験条件であることが分かった。また、実験装置の他実験室への移動も研究の進捗の遅れに繋がっている。分子内包実験における条件の最適化を行い、分子内包単層カーボンナノチューブを作製する。さらに、近接場ラマン分光測定および密度汎関数法による計算を行い、内包分子と単層カーボンナノチューブの相互作用を調査する。(抄録なし)
三畳紀古・中世放散虫からみた海域環境の変遷

本研究は西南日本のジュラ紀付加体を構成する下部-中部三畳系堆積物を主対象とし,それに含まれる放散虫化石群集を解析し,岩相・層相変化との関連を検討して,当時のパンサラッサの海域環境の変遷を復元することを目的としている.1995年度-1996年度を通して,美濃帯の下部-中部三畳系連続層序断面の詳細な野外調査を行い,岩相記載・岩石試料の採集・放散虫化石摘出処理・化石検鏡・及び一部の岩石薄片の作成と検鏡を行つた.また、美濃帯のペルム紀新世およびジュラ紀古・中世放散虫化石群集,秩父帯ペルム紀群集,北海道の白亜紀群集等の比較検討も行った.その結果,以下の成果を得た.検討層序断面において,下部三畳系上部統の放散虫化石を産出する層準は,大略的に灰色珪質粘土岩で代表され,黒色泥岩薄層とドロストーン団塊を含むという一般傾向を持つ.一部の層序断面では赤色泥岩(層厚数十cm)を伴う.放散虫化石群集の構成は,種数が少なく非常に多様性が低い.上位の中部亜畳系の層準は,層状チャートで代表され,下位の珪質粘土岩から漸移する.一般的に赤色を呈するが,灰色・黒色を呈する層準を挟む.放散虫化石群集は,上位に向かって種数が増加し多様性が高くなる.一方,上部ペルム系層状チャートはある程度多様性の高い放散虫化石群集を含む.これらの結果から三畳紀古世当時,灰色珪質泥岩・黒色泥岩はパンサラッサ海の低緯度域に広範囲に広がった貧酸素海洋底で堆積したと想定される.しかし,一部に赤色泥岩が挟まれることから当時の堆積環境は多様であったと考えられる.また,下位の珪質粘土岩から上位の層状チャートへの岩相変化は、放散虫群集の多様化と密接に関係しているといえる.本研究は西南日本のジュラ紀付加体の一部を構成する下部-中部三畳系堆積物を研究対象とし,それに含まれる放散虫化石群集を解析し,岩相・層相変化と放散虫化石群集の変化の関連を検討して,当時の海域環境の変遷を復元することを目的としている.この目的に対して1995年度には美濃帯の下部-中部三畳系連続層序断面の詳細な野外調査を行い,岩相記載・岩石試料の採集・放散虫化石摘出処理・化石検鏡・及び一部の岩石薄片の作成と検鏡を行った.その結果,以下の成果を得た.1.検討層序断面において,下部三畳系上部統の放散虫化石を産出する層準は,大略的に灰色珪質粘土岩で代表され,黒色泥岩薄層とドロストーン団塊を含むという一般傾向を持つ.一部の層序断面では赤色泥岩(層厚数十cm)を伴うことも見い出された.放散虫化石群集の構成は,種数が少なく非常に多様性が低い.2.中部三畳系の層準は,層状チャートで代表され,下位の珪質粘土岩から漸移する.一般的に赤色を呈するが,灰色・黒色を呈する層準を挟む.放散虫化石群集は,上位に向かって種数が増加し多様性が高くなる.三畳紀古世当時,灰色珪質泥岩・黒色泥岩は広範囲に広がった貧酸素海洋底で堆積したと想定されるが,一部に赤色泥岩が挟まれることから当時の堆積環境の多様性が明らかになった.また,下位の珪質粘土岩から上位の層状チャートへの岩相変化は,放散虫群集の多様化と密接な関係があることが明らかとなった.本研究は西南日本のジュラ紀付加体を構成する下部-中部三畳系堆積物を主対象とし,それに含まれる放散虫化石群集を解析し,岩相・層相変化との関連を検討して,当時のパンサラッサの海域環境の変遷を復元することを目的としている.1995年度-1996年度を通して,美濃帯の下部-中部三畳系連続層序断面の詳細な野外調査を行い,岩相記載・岩石試料の採集・放散虫化石摘出処理・化石検鏡・及び一部の岩石薄片の作成と検鏡を行つた.また、美濃帯のペルム紀新世およびジュラ紀古・中世放散虫化石群集,秩父帯ペルム紀群集,北海道の白亜紀群集等の比較検討も行った.その結果,以下の成果を得た.検討層序断面において,下部三畳系上部統の放散虫化石を産出する層準は,大略的に灰色珪質粘土岩で代表され,黒色泥岩薄層とドロストーン団塊を含むという一般傾向を持つ.一部の層序断面では赤色泥岩(層厚数十cm)を伴う.放散虫化石群集の構成は,種数が少なく非常に多様性が低い.上位の中部亜畳系の層準は,層状チャートで代表され,下位の珪質粘土岩から漸移する.一般的に赤色を呈するが,灰色・黒色を呈する層準を挟む.放散虫化石群集は,上位に向かって種数が増加し多様性が高くなる.一方,上部ペルム系層状チャートはある程度多様性の高い放散虫化石群集を含む.これらの結果から三畳紀古世当時,灰色珪質泥岩・黒色泥岩はパンサラッサ海の低緯度域に広範囲に広がった貧酸素海洋底で堆積したと想定される.しかし,一部に赤色泥岩が挟まれることから当時の堆積環境は多様であったと考えられる.また,下位の珪質粘土岩から上位の層状チャートへの岩相変化は、放散虫群集の多様化と密接に関係しているといえる.

本研究は西南日本のジュラ紀付加体を構成する下部-中部三畳系堆積物を主対象とし,それに含まれる放散虫化石群集を解析し,岩相・層相変化との関連を検討して,当時のパンサラッサの海域環境の変遷を復元することを目的としている.1995年度-1996年度を通して,美濃帯の下部-中部三畳系連続層序断面の詳細な野外調査を行い,岩相記載・岩石試料の採集・放散虫化石摘出処理・化石検鏡・及び一部の岩石薄片の作成と検鏡を行った.また,美濃帯のペルム紀新世およびジュラ紀古・中世放散虫化石群集,秩父帯ペルム紀群集,北海道の白亜紀群集等の比較検討も行った.その結果,以下の成果を得た.検討層序断面において,下部三畳系上部統の放散虫化石を産出する層準は,大略的に灰色珪質粘土岩で代表され,黒色泥岩薄層とドロストーン団塊を含むという一般傾向を持つ.一部の層序断面では赤色泥岩(層厚数十cm)を伴う.放散虫化石群集の構成は,種数が少なく非常に多様性が低い.上位の中部三畳系の層準は,層状チャートで代表され,下位の珪質粘土岩から漸移する.一般的に赤色を呈するが,灰色・黒色を呈する層準を挟む.放散虫化石群集は,上位に向かって種数が増加し多様性が高くなる.一方,上部ペルム系層状チャートはある程度多様性の高い放散虫化石群集を含む.これらの結果から三畳紀古世当時,灰色珪質泥岩・黒色泥岩はパンサラッサ海の低緯度域に広範囲に広がった貧酸素海洋底で堆積したと想定される.しかし,一部に赤色泥岩が挟まれることから当時の堆積環境は多様であったと考えられる.また,下位の珪質粘土岩から上位の層状チャートへの岩相変化は,放散虫群集の多様化と密接に関係しているといえる.
選択的エストロゲン受容体の血管新生ＶＥＧＦ系と閉経後糖尿病性微小循環異常との関係

閉経後の女性における糖尿病性心不全の背景には、心組織内の微小循環異常がある。この病態に対する選択的エストロゲン受容体(ER)の役割を解析する目的にて、1型糖尿病モデル(ストレプトゾトシン投与)を、ERアルファ-ノックアウト(ERαKO)、ERβKOの2系統に誘導し、心機能、心組織におけるVEGF(血管内皮増殖因子)関連分子の発現等を野生型との比較において検討した。KO群では心機能低下、VEGF発現低下がみられ、特にERαKO群では有意であった。閉経後の糖尿病性心不全の病態にはエストロゲン減少・枯渇状態が関連しており、特にα受容体が優位に関与している可能性が示唆された。雌マウスの野生型(WT)、エストロゲンα受容体ノックアウトマウス(ERαKO)およびエストロゲンβ受容体ノックアウトマウス(ERβKO)を飼育、繁殖させた。8週齢の時点でストレプトゾトシン(STZ,150 mg/kg,ip/日) 2回投与し、以下の6群を作成。その5週間後、ペントバルビタール麻酔下で心臓超音波検査(UCG)、血圧測定を行い、安楽死後に直ちに血液(血清・血漿)を採取し、臓器(心臓、腎臓、脳)を摘出した。1.野生型(WT, n=25) 2.ストレプトゾトシン(STZ)投与マウス(WT+STZ, n=23)3.エストロゲンα受容体ノックアウトマウス(ERαKO, n=22)4. ERαKO+STZ投与マウス(ERαKO+STZ, n=22)5.エストロゲンβ受容体ノックアウトマウス(ERβKO, n=22)6. ERβKO+STZ投与マウス(ERβKO+STZ, n=22)結果:(1)体重と血糖値: STZ投与群のマウスの体重は何れも減少したが、特にERαKO群で高度であった。STZ投与による高血糖の程度もKOマウス群の方が高度であった。(2)心臓超音波検査:野生型マウスでの比較としては、非糖尿病群と比べ、糖尿病心では心機能低下(拡張・収縮不全)がみられた。ノックアウトマウス群では、ERαKO、ERβKO両者ともに心機能低下(軽度)を認めた。糖尿病群における心機能低下の増悪はERαKOでは明らかであったが、ERβKOでは認められなかった。(3)心臓組織VEGF発現レベル:野生型マウス群とKOマウス群の両群において、高血糖発症群では、組織VEGF発現レベルは低下を認めた。KOマウス群の低下は野生型よりも高度な低下を示した。ERβKO群におけるSTZ投与においては、組織VEGF低下の増悪は有意ではなかったが、ERαKOマウス群においては、STZ投与群における心組織VEGFは、一層の低下を示した。研究3年目最終年度(H27年度)では、平成26年度に作成を開始した2型糖尿病マウスモデルを用いて、VEGF系とエストロゲン受容体系との関係の解析を計画した。ただし、残念ながらエストロゲンα受容体の系の継続が3年目途中で困難となったため、解析に十分数を確保できず、このたびの研究期間内では、選択的エストロゲンβ受容体ノックアウトマウス系での解析を行った。通常脂肪食(12%脂肪、28%タンパク、60%炭水化物;A04,Villemoisson sur Orge, France)と高脂肪食(72%脂肪:コーン油、ラード、28%タンパク、1%未満炭水化物)の2群を作成して以下の比較を行った。(1)体重変化:高脂肪食群は通常脂肪食群よりも有意な体重増加を示した。(2)血糖値:高脂肪食群と通常群の2群に有意差を認めなかった。(3)心臓組織でのVEGF(血管内皮増殖因子)発現:通常食群(n=5, 52±8pg/mg)と高脂肪食群(n=5, 62±12pg/mg)であり、高脂肪食群ではVEGF発現は多い傾向がみられたが有意差は認めなかった。(4)心臓組織でのリン酸化Akt発現とリン酸化eNOS発現:通常食と高脂肪食群の2群において、リン酸化Akt発現とリン酸化eNOS発現は同程度であった。以上より、心臓でのVEGF血管新生系のシグナル伝達系においては、雌エストロゲンβ受容体系では、通常食でも高脂肪食でも有意な変化は認められなかった。エストロゲンα受容体ノックアウトマウスの系の継続は平成28年4月現在、再度、試みている。残念ながら今回の3年計画では間に合わなかったが、平成28年度中には回復・継続して、対象個体数を確保する予定である。循環器病学病理学途中である。以下のデータを解析中。

即ち、心臓組織の可溶性VEGF受容体(sVEGFR1およびsVEGFR2)発現レベルを測定中。野生群に比べて高血糖群では、心組織のsVEGFR1発現は高いレベルの印象である。この亢進はERαKOマウス群において高度な印象である。心組織のsVEGFR2発現も同様で、ERαKOマウス群において高度な傾向である。即ち、2種類の可溶性受容体(sVEGFR1,sVEGFR2)は、VEGF発現の低下とは逆に、亢進を示し、かつそのレベルにおいてはERβKOよりもERαKOにおいて、高度な傾向が認められている。以上の程度(高度や相関の状態など)を統計的に解析中である。心組織の血管新生系であるVEGFシグナル伝達系における組織リン酸化レベル(peNOS)を解析する。リン酸化eNOSは、eNOSの活性化状態をあらわすと考えられるが、そもそもeNOSは、VEGFシグナル伝達系の下流に存在する重要な分子と考えられる。高血糖マウスの心組織における、リン酸化eNOS(peNOS)濃度を測定する。このpeNOS濃度は、ERαKOとERβKOで違いがあるか否かを解析する。ERαKO及びERβKOの両群を対象として、非糖尿病群とSTZ投与群でのpeNOS発現の相違を調べる。KOされている選択的エストロゲン受容体の違いによって、糖尿病環境における、peNOS発現の相違があるか否かを解析する。初年度はストレプトゾトシン誘発性1型糖尿病モデルの解析を開始したが、2年次以降では、高脂肪食誘発性の1型糖尿病モデルの作成、解析を、同様に行いたい。即ち、普通食モデルとの比較において、心機能、心組織発現VEGF及び受容体の発現とそのバランス、eNOS発現等を、ERαKO及びERβKOの2群を対象として比較する予定である。研究の進捗状況はほぼ計画通りで達成度もおおむね順調である。ただし、一部の実験動物群において、平成25年度計画における最終段階である臓器検体処理と生化学的測定に数か月レベルでの遅れが生じた。即ち、前項、H25年度の研究実施計画にあるごとく、遺伝子欠損マウスの準備、糖尿病の誘発、手術処置、心機能評価等までは順調であるが、一部の実験群においては最終段階である生化学的指標の測定に至らなかった。一部の最終段階ではあるが、一部であるため準備・実施等は非効率であり、研究費としては大きい部分を占める。この最終段階における消耗品購入・人件費支払執行等が次年度にずれ込んだため、次年度使用額が生じました。1.生化学的測定検査試薬:ELISAキット(インシュリン、hsCRP,VEGF,VEGF受容体等)、一般生化学的測定試薬(血糖、HDL,LDL等)の購入、RNA測定試薬、文具等として642,036円。2.以上の測定作業担当研究補助者への人件費(内訳:5人x2か月)・1月30千円として300,000円。以上の1と2の合計として942,036円。
がんー間質間相互作用検出技術を用いた腫瘍微小環境形成メカニズムの解明

癌の発症・進展には炎症細胞や血管細胞、線維芽細胞などにより形成される腫瘍間質が重要な役割を果たしている。本研究では、複数細胞により構成される腫瘍組織内の細胞間相互作用を解析する手法(がんー間質インタラクトーム)により膵臓癌移植モデルを解析し、癌細胞から間質への新規シグナル経路としてWNTシグナル経路を同定した。さらに、WNTシグナル経路の活性化はマクロファージの炎症応答を抑制すること、その抑制メカニズムは、NFκBシグナル経路の抑制を介していることを見出した。以上のことから、がん細胞由来WNTシグナルによる免疫細胞活性化制御機構が、癌組織における免疫寛容を誘導している可能性が示唆された。これら腫瘍間質構成細胞は癌細胞によって積極的に構築され、癌の進展を促進させることが知られており、新たな治療標的として注目されている。我々は、これまで包括的かつ定量的に評価することの難しかった複数細胞により構成される腫瘍組織内の細胞間相互作用を解析する手法を開発している(がんー間質インタラクトーム)。この手法を用いて、がん-間質間相互作用データの蓄積を目的として、膵臓癌細胞株を用いたXenograftモデルを作成し、データの蓄積を行うとともに得られたデータを用いて新たな相互作用の探索を行った。その結果、癌細胞から間質へのシグナル経路としてWNTシグナル経路を同定した。間質細胞におけるWNTシグナルは、線維芽細胞のTGFbによる活性化を促進することが知られているが腫瘍免疫における意義については良くわかっていなかった。そこで、炎症におけるその意義を検討する為にマクロファージ様細胞株であるRAW264.7細胞を用いin vitroにおける検討を行った。その結果、WNTシグナル経路の活性化はLPSによるマクロファージの炎症応答を抑制することが明らかとなった。さらにその抑制メカニズムは、炎症応答における中心的な転写因子NF-κBの核移行の抑制を介していることを見出した。現在、がん細胞由来WNTシグナルによる免疫細胞活性化制御機構が、癌組織における免疫寛容を誘導しているとの仮説を構築し解析を行っている。炎症細胞や血管細胞、線維芽細胞などにより形成される腫瘍間質はがん細胞によって積極的に構築され、腫瘍の増殖や進展にとって重要な役割を果たしていることが知られている。本研究ではこれら複数細胞により形成される腫瘍組織における癌と間質間の相互作用を我々が開発した包括的かつ定量的に解析する手法(がんー間質インタラクトーム)を用いて解析することで新たな治療標的候補の探索を行った。その結果、膵がんのゼノグラフトモデルにおいて新規の癌細胞から間質へのシグナル経路としてWNTシグナル経路(WNT7BおよびWNT10A)を同定した。これまで間質細胞におけるWNTシグナル経路は繊維芽細胞の活性化や組織線維化において重要な役割を担っていることが示唆されていた。しかしながら、腫瘍免疫におけるWNTシグナルの意義について不明であった。そこで、マクロファージ炎症応答におけるWNTシグナルの役割を検討したところWNTシグナルの活性化はLPS刺激によるマクロファージの炎症性活性化を抑制することが明らかとなった。さらに、その分子機構を探索するためにWNTシグナル下流の転写因子であるb-Cateninの転写活性の関与についてその阻害剤を用いて検討を行ったところb-Cateninの転写活性とは関係なく炎症応答抑制があることが見出された。一方、炎症応答における中心的転写因子であるNFkbの活性化について検討を行ったところ、LPS刺激に伴うNFkbの核移行がWNT経路の活性化によって抑制されることも明らかとなった。膵癌細胞株ゼノグラフトモデルを用いた癌-間質相互作用の網羅的解析法を用いることで新たな癌から間質への相互作用としてWNTシグナルを同定することができた。間質におけるWNTシグナルの役割を明らかにする目的で炎症のエフェクター細胞であるマクロファージの細胞株RAW264.7細胞を用いて検討を行ったところLPSによる炎症応答を抑制することが明らかとなった。また、膵癌細胞株以外に胃癌細胞株のゼノグラフトモデルのデータ取得も順調に進んでおり、胃癌においても新たな相互作用候補を同定することが可能と考えられる。分子生物学前年度に得られたマクロファージ様細胞株RAW264.7で得られた結果についてマウスの腹腔より得られる腹腔マクロファージを用いて検証を行う。検証により同様の結果が得られた際には、その分子メカニズムを明らかにする為にCanonical WNTシグナルの下流において重要なbeta-Cateninによる転写制御の関与についてその阻害剤を用いて検討を行う予定である。また、WNTシグナル活性化によるLPS下流でのNFKb活性化抑制がどのようにして引き起こされているのかその作用点を明らかにするためにLPSの受容体であるTLR4シグナル経路の各構成因子の活性化状態などに着目し、検証を行う。

また、がん-間質間相互作用データの収集については、胃がん細胞株などのゼノグラフトモデルについて収集を続けることと並行して、新たな相互作用の探索も行う。さらに、VEGF⇒FLT1シグナル経路の腫瘍随伴線維芽細胞における意義については、その分子メカニズムを明らかにする為にVEGFAをTGFbetaによる線維芽細胞活性化系に添加することでその作用の検討とVEGFAにより制御される標的遺伝子の同定を行うことで腫瘍随伴線維芽細胞の腫瘍間質における機能とその分子メカニズムの解明を目指す。購入した試薬が当初の予定より安く購入できたため。前年度の予定通り分子生物学用試薬及び細胞培養用試薬の購入に合わせて使用する予定である。
消化管癌の分子分類別にみた超保存領域T-UCRの生物学的意義と臨床応用

消化管癌は近年、包括的ゲノム解析に基づく分子分類が提唱され、個別化医療の発展に大きく寄与している。一方で、生物種を超えて相同配列を示すT-UCRの中に抗癌剤耐性に関わるものが存在することが明らかとなり、抗癌剤抵抗性を制御する重要な分子であることが想定されるが、現在のところ癌における解析は十分ではない。本研究では、消化管癌の各々のmolecular subtype別のT-UCRの特徴を明らかにし、癌幹細胞マーカーを含めた制御機構や、腫瘍内局在や組織型別・臓器別相違を明らかにすることで、治療抵抗性を示す消化管癌の進展転移の解明や治療や予後予測、鑑別診断マーカーなどの臨床応用を目指す。
内在性レトロエレメントLINE-1のDNA損傷誘導性選択的転移による発がん機構

1DNA損傷誘導時のLINE-1新規挿入部位の網羅的解析。DNA損傷で誘導されるLINE-1タンパクの分布パターンから、LINE-1新規挿入部位として、p53の標的となるがん抑制遺伝子群の割合の増加が期待される。現在次世代シーケンサー出力データについて解析を進めている。これによって、DNA損傷誘導性のLINE-1転移の細胞がん化促進への積極的な寄与を明らかにしたい。2LINE-1転移を介したがん遺伝子誘導性細胞老化の解除。X線によるDNA損傷誘導では、アポトーシス、一過的細胞周期停止、および細胞老化など多様な細胞応答が誘導されるため、LINE-1挿入部位と細胞表現型の関連付けを行うのは複雑度が高く困難である。従って、LINE-1選択的挿入の発がん過程への関与を明らかにするために、ドキシサイクリン(Dox)誘導性Rasによって細胞老化を誘導する。LINE-1転移のブラストサイジン(Bsd)レポーターを導入した後、Dox添加により細胞老化を誘導し、BsdとDoxの共処理を継続して行った。その結果、10万細胞に1個程度の頻度でDox添加条件下においてもRasを発現しつつ、細胞増殖を開始する細胞群を得ることに成功した。このような細胞集団よりゲノムDNAを抽出し、nrLAM-PCRを用いて、次世代シーケンサーによりLINE-1新規挿入部位を同定した。現在、同定されたLINE-1新規挿入部位とRas誘導性の細胞老化との関連性について解析を進めている。所属機関の異動にともなう、研究環境のセットアップ、および予算執行の滞りにより、若干の遅れを生じた。一方で、新たな解析機器の導入により、今後の研究の加速が期待できる。Rasによる細胞老化がLINE-1転移により解除された細胞において、LINE-1転移により壊された遺伝子を、発現ベクターにより相補を行い、細胞老化状態が再誘導されることを確認することで、LINE-1挿入の直接的な細胞老化解除への寄与を裏付ける。あるいは上記標的遺伝子をsiRNAにより発現を抑制し、細胞老化の誘導が阻害されるかを明らかにする。上記の過程においては、細胞老化の解除に寄与する遺伝子が無作為に抽出されるため、未知のがん抑制遺伝子群の同定も期待される。また、LINE-1転移反応過程で誘導されるDNA二重鎖切断部位を網羅的に解析し、LINE-1転移過程での損傷遺伝子群を探索し、LINE-1の発がん過程への寄与を明らかにする。所属機関の異動により、2018年12月より2か月以上の間、研究費を使用できない期間が生じたため、次年度使用額が生じた。次年度使用額は少額であるため、次年度の交付金と合わせて消耗品などに充当し、執行する。
Maf遺伝子導入による転移能の変化

C-1300神経芽腫にリポフェクチン法を用いてMaf遺伝子を導入し、A/Jマウスに静注移植、転移実験を行った。転移臓器別のアッセイ法としては、肝ではliver colony法で検討した。Maf遺伝子導入法を確立し、transfection効率を一定とした。静注移植後、肝転移を定量的に得ることができた。Maf遺伝子導入群では転移抑制が見られた。次に、Small Maf memberであるMafKをT-cell系で過剰発現するtransgenic mouseを開発した。このtransgenic mouseの寿命は短く、T-cell系の減少、IL-2、IL-4のmRNAレベルの低下を検討した。小Maf群は、胎生中期以降の神経系細胞で広く発現する転写因子で、特にneural crestの発達分化に関与することが示唆されている。また、MafK遺伝子導入によるマウス赤白血球(MEL)細胞の赤白血球分化を報告した。今回、神経芽腫細胞へのMafK遺伝子導入による形質転換を、細胞形態・蛋白合成能・転移能の変化を検討する事により明らかにした。すなわち、細胞分化と悪性度の相関を観察した。神経芽腫は、その転移部位・形式により、予後が大きく左右される。すなわち、乳児神経芽腫が肝に転移し予後良好である一方、年長児は骨・リンパ節に転移し予後不良である。この興味深い年齢・転移臓器に伴う予後変化は現在、研究の中心となっている。本研究では、神経系分化転写因子を導入し、Maf転写遺伝子が関わる分化度を変化させ、その転移標的臓器である肝での転移能を検討した。C-1300神経芽腫にリポフェクチン法用いてMaf遺伝子を導入し、A/Jマウスに静注移植、転移実験を行った。転移臓器別のアッセイ法としては、肝ではliver colony法、で検討した。liver colony法は肝表面に結節として現れる転移観察するものである。本年度は神経芽腫細胞へのMaf遺伝子導入に着手、方法としては確立したが、transfection効率は7-9%と低く繰り返し実験で平均7.6%であった。10^5cells移植により対象群では平均186個の肝転移出現であったが、Maf遺伝子導入群では125個と転移抑制が認められた。Liver colony法は肝表面に結節として現れる転移を観察するものである。本年度は神経芽腫細胞へのMaf遺伝子導入に着手、方法としては確立したが、transfection効率は7-9%と低く、繰り返し実験で平均7.6%であった。10^5cells移植により対象群では平均186個の肝転移出現であったが、Maf遺伝子導入群では125個と転移抑制が見られた。次に、Samll Maf memberであるMafKをT-cell系で過剰発現するtransgenic mouseを開発した。このtransgenic mouseの寿命は短く、T-cell系の減少、Pneumocystis carinii発症を認めた。更に、IL-2、IL-4のmRNAレベルの低下を呈した。
骨粗鬆症に及ぼすヘパラン硫酸の役割の解明

ヘパラン硫酸合成酵素異常を有する遺伝性多発性外骨腫症患者の骨粗鬆症スクリーニングを行った結果、健常成人よりも骨減少傾向を示していることが明らかとなった。血液生化学的検査では活性化ビタミンD値の軽度高値を認めが、その他骨代謝に関係する数値には明らかな異常は認めなかった。採取、抽出したゲノムDNAの解析結果では遺伝子異常の部位および型は様々であった。骨量減少と遺伝子異常との間には明らかな関連性は認められなかった。本研究は遺伝性多発性外骨腫症患者について、骨粗鬆症の頻度、病態を明らかにすること、採取した骨髄間質細胞の骨分化能と骨形成能を解析すること、ゲノムDNAを解析し、得られた結果を総合して、遺伝子変異と骨粗鬆症の相関関係を明らかにすることを目的としている。平成23年度は、遺伝性多発性外骨腫症患者の骨粗鬆症スクリーニングおよびゲノムDNAの採取を計画した。現在までに10例を超える患者の骨量測定、血液生化学的検査による骨粗鬆症スクリーニング及び末梢血白血球からのゲノムDNAの抽出が終了している。これまでの解析の結果、二重エネルギーX線吸収測定法(dual-energy X-ray absoptiometry)による骨量測定では、腰椎および大腿骨頚部双方において健常成人よりも骨減少傾向を示していることが明らかとなった。血液生化学的検査では活性化ビタミンD値が軽度高値を認めているが、その他のカルシウム代謝に関連するCa、P、副甲状腺ホルモン(PTH)-C末端および、骨形成マーカーである骨型アルカリフォスファターゼ値、オステオカルシン、骨吸収マーカーであるNTX(I型コラーゲン架橋N-テロペプチド)の値には明らかな異常は認めていない。ゲノムDNAの抽出は末梢血白血球より液相分離法にてWizard Genomic DNA Purification Kit (Promega)を用いて行っており、現在ゲノムDNAライブラリーの構築を進めているところである。本研究は遺伝性多発性外骨腫症患者について、骨粗鬆症の頻度、病態を明らかにすること、ゲノムDNAを解析し、得られた結果を総合して、遺伝子変異と骨粗鬆症の相関関係を明らかにすることを目的としている。平成24年度までに18例の患者の骨量測定、血液生化学的検査による骨粗鬆症スクリーニング及び末梢血白血球からのゲノムDNAの抽出が終了している。ゲノムDNAの抽出は末梢血白血球より液相分離法にてWizard Genomic DNA Purification Kit(Promega)を用いて行い解析を行った。現在までの解析の結果、遺伝子異常とその型によらず骨量の減少が生じていることが明らかとなった。遺伝性多発性外骨腫症は稀な疾患であるが、岐阜大学病院整形外科で開設している専門外来には全国から患者が受診している。徐々にサンプルは集まってきており、現在のさらにサンプル収集をすすめている。24年度が最終年度であるため、記入しない。患者の集約はすすんできているので、今後もサンプル採取を継続するとともに、骨粗鬆症スクリーニングの結果解析およびゲノムDNAの解析をすすめ、遺伝子変異とその型が骨量測定、血液生化学検査、骨形成能の解析結果とどのような相関関係にあるかを詳細に検討する。これによりヒトにおけるヘパラン硫酸合成酵素異常が骨粗鬆症発生にどのように関わっているかを明らかにする予定である。