hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
水素結合クラスターの振動暖和の直接観測のためのピコ秒赤外-紫外二重共鳴法の開発

発生した可視光をさらに二倍波に変換し、210nm 340nmの紫外ピコ秒パルス光を得た。紫外パルス出力エネルギーは50100μJであった。得られたピコ秒パルス光を、光学遅延回路を通して超音速分子線中の分子クラスターに照射し赤外励起、紫外光モニターのポンププローブ実験を行った。現在までのところ、ベンゼンのCH伸縮振動、およびフェノールとその水素結合クラスターのOH伸縮振動の観測と緩和の測定に成功し、それぞれの振動緩和速度を求めた。また、超音速分子線中のさまざまな芳香族分子(ナフトール、ベンゾニトリル、ピリドン、サリチル酸メチル、ベンジルアルコール)と水分子やアルコール分子との水素結合クラスターのOH伸縮振動の赤外-紫外二重共鳴振動分光を行い、量子力学計算を併用してクラスターの構造決定を行い、水素結合構造を明らかにした。
日英科学技術協力事業による新型中性子分光器の共同開発研究

本研究は、我が国の文部省高エネルギー加速器研究機構(KEK)と英国中央研究所審議会(CCLRC)間で締結されている日英科学技術協力事業を進めるものである。同事業は、日本と英国が協力して、CCLRC所属のラザフォードアップルトン研究所の大強度スポレーションパルス中性子源ISIS施設に単結晶専用高性能チョッパー型中性子分光器MAPSを建設し、中性子散乱による先端的物質科学研究を行うものである。日本側は主として、中性子検出器の開発及び設置を分担した。分光器の建設に関する予算は、特定領域研究(B)「大強度パルス中性子による局所スピン・原子構造とそのダイナミックスの研究」によりなされた。また、ISISにすでに設置されている中性子実験装置についても研究の進捗状況に応じて日本側研究者が利用できる体制にある。本研究は上記のMAPS分光器の建設および試験実験並び、その他の実験装置の利用のために日本側研究者を主に派遣するための予算であった。また、日英相互の意見交換を行うために英国より若干名の研究者を毎年我が国に招聘した。平成10年度12年度の三年間の実績は、我が国より52名の研究者を(短期(10日程度)50名、中期(3ヶ月程度)2名)派遣し、10名の被告研究者を招聘し、研究打ち合わせ会を行った。本国際学術研究は、日本と英国が協力して、英国ラザフォード・アップルトン研究所の大強度スポレーション・パルス中性子源施設ISISに単結晶用高性能チョッパー型分光器MAPSを建設し、中性子散乱による先端的物質科学研究を行うためのものである。日本側は主として中性子検出器の開発及び設置を担当する。分光器の建設は平成9年より3ヵ年掛けて行う。平成10年、11年度は分光器の建設を行い、平成12年度は分光器全体の調整を行う。この共同建設作業と並行して、すでにISISに設置されてある中性子分光器を用いた先端的共同研究を進めている。なお、本協力事業の協力協定は、平成8年12月23日に高エネルギー加速器研究機構(KEK)と英国中央研究所審議会(CCLRC)の間で締結した。平成10年度は、MAPS分光器の共同設置作業、中性子ビームによる遮蔽等に関する試験、及び、ISISに設置されている他の分光器を用いた、磁性体、非晶質、フラクタル、生体高分子、酸化物高温超伝導体等の静的および動的構造の解明のための実験研究を実施した。平成10年度内にラザフォード・アップルトン研究所で行われた実験課題数は23件であった。長期滞在者1名を含み、日本側から本協力研究に派遣した人員は24名におよんだ。また、研究打ち合わせのため英国より2名を招聘した。本国際学術研究は、日本と英国が協力して、英国ラザフォード・アップルトン研究所の大強度スポレーション・パルス中性子源施設ISISに単結晶用高性能チョッパー型分光器MAPSを建設し、中性子散乱による先端的物質科学研究を行なうためのものである。分光器の建設は平成9年より3カ年掛けて行なう。平成10年、11年度は分光器の建設を行ない、平成12年度は分光器全体の調整を行なう。この共同建設作業と並行して、既にISISに設置されている他の中性子分光器を用いた先端的共同研究を進めている。平成11年度は、MAPS分光器の共同設置作業、中性子ビームによる遮蔽等に関する試験、及び、ISISに設置されている他の分光器を用いた、磁性体、非晶質、フラクタル、生体高分子、酸化物高温超伝導体等の静的および動的構造の解明のための実験研究を実施した。平成11年度内にラザフォード・アップルトン研究所で行なわれた実験課題数は27件であった。長期滞在者1名を含め、日本側から本協力研究に派遣した人員は28名に及んだ。

同事業は、日本と英国が協力して、CCLRC所属のラザフォードアップルトン研究所の大強度スポレーションパルス中性子源ISIS施設に単結晶専用高性能チョッパー型中性子分光器MAPSを建設し、中性子散乱による先端的物質科学研究を行うものである。日本側は主として、中性子検出器の開発及び設置を分担した。分光器の建設に関する予算は、特定領域研究(B)「大強度パルス中性子による局所スピン・原子構造とそのダイナミックスの研究」によりなされた。また、ISISにすでに設置されている中性子実験装置についても研究の進捗状況に応じて日本側研究者が利用できる体制にある。本研究は上記のMAPS分光器の建設および試験実験並び、その他の実験装置の利用のために日本側研究者を主に派遣するための予算であった。また、日英相互の意見交換を行うために英国より若干名の研究者を我が国に招聘した。平成12年度の実績は、我が国より20名の研究者を(短期(10日程度)19名、中期(3ヶ月程度)1名)派遣し、3名の被告研究者を招聘し、研究打ち合わせ会を行った。
解剖学と情報学の連携で聴覚伝導路における音声情報のコーディングを解明する

大脳皮質の層構造形成のメカニズムについての研究はDab1などの条件付きノックアウトマウスの解析を利用して行っているが、その結果を情報学的研究へ還元し、その結果をさらに利用してモデル動物における表現型の解釈を行うという双方向性の研究を目指している。大脳皮質層構造の機能を考える上で、大脳皮質の構造を参考にして設計されているディープラーニングは非常に有用であるため、層構造を反映したネットワークモデルの検証プラットフォームとして転移学習による比較的困難な画像判別課題を正常組織に対するDab1ノックアウト大脳皮質を用いて設計する試みを行い、公開されている学習済みディープラーニングネットワークの一つであるGoogLeNetを利用した転移学習系によってこれらがある程度判別可能ではあるが学習に多数の試行を要し最終的に十分な精度は達成できないことを確認した。この成果は2019年3月27日開催の第124回日本解剖学会総会全国学術集会において研究代表者を筆頭発表者とする「Deep LearningによるDab1ノックアウトマウス大脳皮質の判別ー事前学習済みネットワークへの転移学習」として発表した。また聴覚における同ノックアウト動物および同一遺伝子の欠損が見られるreelerマウスでの解剖学的解析も続けられており、その成果は同学会において谷浦仁美他「reelerマウス脳の聴覚伝導路における髄鞘構築異常」として報告された。これらの研究により、大脳皮質層構造の特徴を模したニューロネットワークの設計およびパフォーマンスの検証が実現可能になり、当初の解剖学と情報学を結びつけるというアイデアに対して具体的な道筋をつけることができた。この研究はディープラーニングにおける普遍的な技術革新をもたらす可能性がある。この実験計画では分子生物学的技法を導入した解剖学的研究による精密な局所神経構造とシミュレーションによるモデル研究を結びつけ、情報学における新しい研究手法の確立をめざしており、中でも当初の計画では聴覚脳幹における解剖学的特徴の意義について情報学においてビームフォーミングとよばれる信号処理機構の使用によって聴覚情報の空間的分離を効率的に行っている可能性について着目していた。この計画においてはNeuroscience2016(7月)で発表などを行い解剖実験部分の報告及びモデル研究での協力者の確保に努めた。一方で申請書にも明記したように新教授の就任があり、当該年度はその実質的な1年目に当たったことから、研究・教育の両面において新体制の立ち上げに協力する必要があった。これは研究計画において記載した大脳皮質の神経発生的研究の導入および学生協力者の育成にもつながりうる。この方面においては遺伝子改変マウスを用いた大脳皮質形成過程を解析しうる実験系(層構造の乱れた大脳皮質を持つことで有名なReeler mouse及びそれと生物情報学的に関連する複数の自然発生及び遺伝子組換え条件下ノックアウトマウス)の再構築において貢献し、また鍍銀染色などの古典的手法を再評価することで局所神経構造の大域的特徴を評価比較しうる手法を確保するなどで研究に参加している。また神経解剖学の教育の改革を通して学生が研究活動に参加できる環境作りを行い、学内誌に学生主導での成果を発表するまでに至っている(生野泰彬,瀧公介ら;ヒト脳の中脳・橋断面における神経構造可視化のための簡便染色法,滋賀医大雑誌,30巻2017年)。大脳皮質の層構造は失われても生存を著しく阻害しないが、行動に非効率な変化が現れることから、学習の効率などを確保する上で関与している可能性が有り、ディープラーニングなどにおいて有用な知見をもたらしうる。申請書にも明記したように新教授の就任があり、当該年度はその1年目に当たったことから新研究室の立ち上げのために積極的に協力する必要が生じて、研究・教育の両面において多大な影響が有り結果として当初の計画に分配できるエフォートが確保できなかった。特に理論部分の進展については研究協力者の国外留学もあってほとんど進まなかったが、学会活動によって複数の新しい協力者を見つけることができたのがわずかな光明である。またウイルスを用いた実験研究においても予定を大幅に下回り、予算S執行を来年度に持ち越すことになった。一方で大脳皮質をターゲットにした講座の新しい研究課題が大脳皮質構造の乱れによる情報処理能力の低下というテーマをもたらし、鍍銀染色法などの古典的手法も用いて遺伝子改変マウスにおける大脳皮質や海馬における神経構造の混乱の可視化に成功しているので、これらを材料とした展開が可能になっている。以上の状況を総合的にみて、部分的には計画以上に進んでいる点もあることから、やや遅れているの区分とした。当実験計画では分子生物学的技法を導入した解剖学的研究による神経構造の解明とシミュレーションによるモデル研究を有機的に結びつけ、情報学における新しい研究手法の確立をめざしており、当初は聴覚系の脳幹上行伝導路におけるビームフォーミング処理の可能性について注目していた。しかし、申請書及び前回の実施状況報告書にも記載したように新教授の就任に伴う教育研究体制の大幅な切り替えがあり、研究においても大脳皮質層構造の発生からみた形態解析を中心にシフトがあった。具体的には正常な大脳皮質層構造の形成に不可欠なReelin情報伝達系において、その下流に位置するDab1およびSbno1についてconditional knock out個体を作成し、その形態解析を通して分子機序の解明を通した大脳皮質層構造の形態・機能形成の解明を目指しており、その中で古典的鍍銀染色による形態異常の可視化や、Diffusion Tensor法による神経連絡構造の可視化・比較において成功を収めた。これらは申請課題の発展的課題に挙げた形態数理的解析の対象として価値がある。このうちDab1に関する貢献の一部は新たに発表された学術論文の一部になった。

Blume M, Inoguchi F, Sugiyama T, Owada Y, Osumi N, Aimi Y, Taki K, Katsuyama Y. Dab1 contributes differently to the morphogenesis of the hippocampalsubdivisions. Development, Growth & Differentiation. 2017Oct;59(8):657-673またこれらの研究活動を通して、情報学・シミュレーション研究において強みを持つ学生協力者の確保にもつながった。一方で本年度は聴覚系においても、当初の実験計画において中心的なアイデアの元になった抑制性投射経路の特徴について論文発表の準備作業を再開しており、助成期間中の発表に向け順調な進捗があった。初年度は新研究室の立ち上げ作業のために本研究計画においては予算執行と成果の両面おいて遅れがあったが、本年度は研究の方針を申請内容の範囲内で変えつつも成果に結びつけることができているため、おおむね順調に進んでいるという自己判定とした。特に分子生物学的手法で大脳皮質構造を攪乱したマウスについては前述のように学術論文として発表されており、その乱れが神経回路のシステムに及ぼす影響については非常に興味深い物がある。他にもSbno1のconditional knockout個体を用いて形態学的解析の結果が学会レベルの発表に至っている。一方で聴覚系についても、当研究計画にとって重要な聴覚伝導路における抑制性投射について論文発表の目処が立っている。一方で理論部分の進展については現状では具体的な進展に乏しいが、形態学的発見の解釈において理論研究を併用することでその学術的価値を高めることを目指したい。この面でも協力者を得ることができ、Diffusion Tensor法などができるようになっているので、研究体制という面では進展があった。大脳皮質の層構造形成のメカニズムについての研究はDab1などの条件付きノックアウトマウスの解析を利用して行っているが、その結果を情報学的研究へ還元し、その結果をさらに利用してモデル動物における表現型の解釈を行うという双方向性の研究を目指している。大脳皮質層構造の機能を考える上で、大脳皮質の構造を参考にして設計されているディープラーニングは非常に有用であるため、層構造を反映したネットワークモデルの検証プラットフォームとして転移学習による比較的困難な画像判別課題を正常組織に対するDab1ノックアウト大脳皮質を用いて設計する試みを行い、公開されている学習済みディープラーニングネットワークの一つであるGoogLeNetを利用した転移学習系によってこれらがある程度判別可能ではあるが学習に多数の試行を要し最終的に十分な精度は達成できないことを確認した。
先端巨大症患者における肺癌発症に関する分子生物学的機序の解明

先端肥大症(acromegaly)患者には複数臓器に悪性腫瘍が発症する頻度が高い.これまで肺に多発性の肺癌を発症した先端肥大症の症例を経験し報告してきた.これらの症例では手術前の下垂体腫瘍,あるいは術後の残存腫瘍からの成長ホルモン(GH)の作用で,肝臓や間葉系細胞によるinsulin-like growth factor 1 (IGF-1)の産生が亢進し,この結果血中IGF-1が持続的に高値を示すのみならず,肺癌細胞においてIGF-1受容体(IGF-1R)が強発現していることを見出した2007年1月から2009年2月の26ヶ月に虎の門病院間脳下垂体外科にて下垂体腫瘍切除術を受けた20歳以上の成人先端肥大症患者255例のうち,胸部CTを撮影しえた5例に関して解析した.結節影を呈した症例は1例,肺野の限局性すりガラス陰影(GGO)は2例に認められ,うち1例は右肺の単発GGO,もう1例は左右肺に合計3個のGGOが確認できた.すなわち画像上細気管支肺胞上皮癌(BAC)や異型性腺腫様過形成(AAH)を疑わせる所見を有する患者は40%にのぼった.いずれも径が10 mmに満たないため,現在経過観察中であり,摘出組織を用いたISHによるIGF-1およびIGF-1受容体発現,腫瘍組織と近傍の正常組織におけるcDNA microarray解析などの検討は未施行である.また,新たに68歳の先端肥大症Hardy手術既往の肺癌患者を経験した.この症例では,右肺内に同時多発性の2つの肺腺癌(上葉S^3 :高分化乳頭腺癌,下葉S^7 :中等度分化混合型亜型癌)を発症し,胸腔胸下切除術+術後補助化学療法,左側の肺癌推定病変への放射線療法を施行した先端肥大症(acromegaly)患者には複数臓器に悪性腫瘍が発症する頻度が高い.これまで肺に多発性の肺癌を発症した先端肥大症の症例を経験し報告してきた.これらの症例では手術前の下垂体腫瘍,あるいは術後の残存腫瘍からの成長ホルモン(GH)の作用で,肝臓や間葉系細胞によるinsulin-like growth factor 1 (IGF-1)の産生が亢進し,この結果血中IGF-1が持続的に高値を示すのみならず,肺癌細胞においてIGF-1受容体(IGF-1R)が強発現していることを見出した2007年1月から2009年2月の26ヶ月に虎の門病院間脳下垂体外科にて下垂体腫瘍切除術を受けた20歳以上の成人先端肥大症患者255例のうち,胸部CTを撮影しえた5例に関して解析した.結節影を呈した症例は1例,肺野の限局性すりガラス陰影(GGO)は2例に認められ,うち1例は右肺の単発GGO,もう1例は左右肺に合計3個のGGOが確認できた.すなわち画像上細気管支肺胞上皮癌(BAC)や異型性腺腫様過形成(AAH)を疑わせる所見を有する患者は40%にのぼった.いずれも径が10 mmに満たないため,現在経過観察中であり,摘出組織を用いたISHによるIGF-1およびIGF-1受容体発現,腫瘍組織と近傍の正常組織におけるcDNA microarray解析などの検討は未施行である.また,新たに68歳の先端肥大症Hardy手術既往の肺癌患者を経験した.この症例では,右肺内に同時多発性の2つの肺腺癌(上葉S^3 :高分化乳頭腺癌,下葉S^7 :中等度分化混合型亜型癌)を発症し,胸腔胸下切除術+術後補助化学療法,左側の肺癌推定病変への放射線療法を施行した先端肥大症(acromegaly)患者には,下部消化管をはじめとする複数の臓器に悪性腫瘍が発症する.これまで,われわれは肺に多発性の肺癌を発症した先端肥大症の症例を複数例経験し報告した.これらの症例ではHardy手術後の残存下垂体腫瘍からの成長ホルモン(GH)の作用で,肝臓や間葉系細胞によるsomatomedin(insulin-like growth factor 1,IGF-1)の産生が亢進し,このため血中IGF-1が持続的に高値を示すのみならず,肺癌細胞においてIGF-1受容体(IGF-1R)が強発現していることを見出した.すなわち,[IGF-1]-[IGF-1R]系は強力な細胞分化増殖因子であり,IGF-1Rを発現する肺内の腫瘍細胞の増殖が起こること,さらにIGF-1自体がIGF-1Rの発現をupregulateし得ることが推定される.これらの仮説を検証するため,虎の門病院内分泌センター/間脳下垂体外科で診療を受ける20歳以上の成人先端肥大症患者の肺癌合併頻度を胸部CTスキャンを用いて検討し,肺癌合併例では,血中のIGF-1,下垂体手術時の腫瘍内のIGF-1産生状況,摘出した肺癌組織中のIGF-1R発現などを解析し,IGF-1およびIGF-1Rの病的発現亢進

状態が肺癌発症に及ぼす影響を解析する前向き試験を開始した.成人先端肥大症患者の入院時に胸部CTを撮影し,肺内に何らかの異常影が指摘された場合は,さらに高解像度CTスキャン(HRCT)を施行する.肺癌(とくに細気管支肺胞上皮癌,BAC)や異型性腺腫様過形成(AAH)を示唆する肺野の限局性GGOや,肺癌を疑わせる結節などの病変が見出された場合に,患者の臨床的背景,肺癌の鑑別診断に必要な諸検査,血中のIGF-1濃度測定,胸部CT所見の綿密な解析を行い,肺原発のBAC,AAH,あるいは通常の肺癌の存在が強く疑われる場合,開胸術あるいは胸腔鏡下手術(VATS)による外科的治療の適応を厳密に検討し,治療に関する説明および同意を得て手術的治療を行ない,さらに摘出組織を用いたIGF-1受容体発現(免疫組織学的検査,ISH),腫瘍組織と近傍の正常組織におけるcDNA microarray解析を行なう.現在症例を集積し研究を継続中である.これまで報告した症例に加え,新たに68歳の先端肥大症Hardy手術既往患者で,右肺内に同時多発性の2つの肺腺癌(上葉S3:高分化乳頭腺癌,下葉S7:中等度分化混合型亜型癌)を発症し,胸腔胸下切除術+術後補助化学療法を施行した症例を新たに報告した.先端肥大症(acromegaly)患者には下部消化管をはじめとする複数の臓器に悪性腫瘍が発症する頻度が高い.これまで,われわれは肺に多発性の肺癌を発症した先端肥大症の症例を経験し報告してきた.これらの症例では手術前の下垂体腫瘍,あるいは術後の残存腫瘍からの成長ホルモン(GH)の作用で,肝臓や間葉系細胞によるsomatomedin(insulin-like growth facor 1,IGF-1)の産生が亢進し,この結果血中IGF-1が持続的に高値を示すのみならず,肺癌細胞においてIGF-1受容体(IGF-1R)が強発現していることを見出した.すなわち,強力な細胞分化増殖をもたらす[IGF-1]-[IGF-1R]系を介して,IGF-1Rを発現する腫瘍細胞の増殖が起こることが推定される.これらを背景に,研究期間中に虎の門病院内分泌センター/間脳下垂体外科で診療を受ける20歳以上の成人先端肥大症患者の肺癌合併頻度を,胸部CTスキャン[必要に応じて高解像度CT(HRCT)を]を用いて検討し,肺癌(とくに細気管支肺胞上皮癌,BAC)や異型性腺腫様過形成(AAH)を示唆する肺野の限局性GGO,肺癌を疑わせる結節などの病変合併の有無を検討した.2007年1月から2009年2月の26ヶ月に当院の間脳下垂体外科にて下垂体腫瘍切除術を受けた先端肥大症患者は255例にのぼる.しかしながら,これらの症例のうち,胸部CTを撮影しえたのわずか5例であった.この5例中,結節影を呈した症例は1例,肺野の限局性GGOは2例に認められ,うち1例は右肺の単発GGO,もう1例は左右肺に合計3個のGGOが確認できた.すなわち画像上BACあるいはAAHを疑わせる所見を有する患者は40%にのぼった.いずれも径が10mmに満たないため,現在経過観察中であり,摘出組織を用いたISHによるIGF-1およびIGF-1受容体発現,腫瘍組織と近傍の正常組織におけるcDNA microarray解析などの検討は未施行である.最後に,これまで報告した肺癌合併の先端肥大症症例に加え,新たに68歳の先端肥大症Hardy手術既往患者を経験した.この症例では,右肺内に同時多発性の2つの肺腺癌(上葉S3:高分化乳頭腺癌,下葉S7:中等度分化混合型亜型癌)を発症し,胸腔胸下切除術+術後補助化学療法,左側の肺癌推定病変への放射線療法を施行し,小康を得ている.
中枢神経再生阻害におけるp75受容体の役割の解明

中枢神経において損傷を受けた神経軸索が再生できない要因の1つとして、神経線維を取り巻くオリゴデンドロサイトがMAG、Nogo、OMgpといった軸索伸長阻害因子を発現し、軸索の伸長を阻害していることが考えられている。軸索伸長途上にある神経細胞内では、Rho-GDI(Rho-guaninenucleotide dissociation inhibitor)が低分子量GタンパクであるRhoAと結合し、その活性化を阻害している。しかし上記の軸索伸長阻害因子がNogo受容体と結合すると、共受容体であるp75受容体とRho-GDIの結合が神経細胞内において促される。これによりRhoAはRho-GDIとの結合から解放され、細胞内のRho-GEFにより活性化される。活性化されたRhoAは細胞骨格制御因子に作用し軸索伸長を阻害する。このことからp75受容体は、中枢神経損傷後の回復を目指すにあたって重要な標的分子の一つと考えられる。しかし、p75受容体欠損動物において中枢神経損傷後に軸索は再生・伸長せず、機能回復は野生型と比べ改善しないことが報告された。この結果はp75受容体が軸索伸長を促進する神経栄養因子(NGF,BDNFなど)の受容体でもあることを反映していると考えられる。したがって、p75受容体が生体内でも軸索再生阻害に関与しているか否かは、p75受容体欠損動物を用いては知ることが出来なかった。そこで本研究では、『p75受容体がもつ軸索再生阻害経路としての機能のみを遮断すれば、中枢神経の軸索再生は促される』と仮説を立て、p75受容体の細胞内結合部位をめぐりRho-GDIと競合する薬剤:Pep5を用い、視神経損傷モデル動物にPep5を処置し、その後の神経再生・機能回復を観察した。その結果、Pep5処置により視神経軸索再生が観察され、本研究の仮説が立証された。さらに申請者は、軸索反発因子として知られるephrin-B3が、上述のp75受容体を介した機序により軸索伸長を阻害することを見出した。申請者はephrinB3を安定発現する細胞株を構築し、その上に大脳皮質由来の神経細胞を共培養すると、神経突起の伸長が抑制されることを再現し、さらにこの作用がPep5処置により打ち消されること、ならびにsiRNAを用いた実験により、神経細胞に発現するp75受容体とEphA4受容体がephrinB3による突起伸長抑制に必要であることを見出した。p75受容体、EphA4受容体、ephrinB3の関係については共沈実験およびELISA法により、ephrinB3がEphA4受容体を介してp75受容体と結合することを見出した。これらの研究成果は、ephrinB3の新たな作用機序を明らかにするとともに、生体内でのp75受容体による軸索再生阻害機序の全貌を明らかにするものである。研究計画書に記載した実験内容をすべて滞りなく遂行し、仮説を立証した。p75受容体は、中枢神経の再生を阻害する機構の中心的役割を担うとされており、そのメカニズムについてはin vitroでの実験系において、詳細な研究が行われている。にもかかわらずin vivoでの系においては、中枢神経再生阻害へのp75受容体の関与を証明した報告は未だなされていない。本研究ではp75受容体のもつ機能のうち軸索伸長阻害経路のみを遮断するPep5を中枢神経損傷モデル動物に適用することで、p75受容体の生体内における軸索伸長阻害への関与を検証した。また、軸索伸長阻害因子としての作用をもつことが新たに報告されたephrin-B3が、p75受容体を介してその作用を発揮するか否かについての検証を行った。(1)脊髄損傷後におけるp75受容体の軸索再生阻害における役割の解明成獣ラットに脊髄半切断術を施し、下肢の運動を支配する運動神経線維(皮質脊髄路を含む)を切断した後、浸透圧ポンプにより脊髄硬膜下にTAT-Pep5を常時投与した。コントロール群にはTAT配列にコントロール配列を付加したペプチド(TAT-Control)を投与した。術後10週間にわたり各群の運動機能回復をBBB(Basso-Beattie-Bresnahan)scoringによる目視評価で比較した。結果...Pep5投与による脊髄損傷後の機能回復促進は観察されなかった。(2)ephrin-B3-p75受容体経路による軸索伸長阻害機構の解明本研究においてephrin-B3の有する軸索伸長阻害作用がPep5処置ならびにp75受容体の発現ノックダウンにより打ち消される事を見出した。またELISA法および免疫沈降法によりephrin-B3はp75受容体とは直接結合はせずEphA4を介してp75受容体と結合する事を見出し、EphA4の発現ノックダウンによってもephrin-B3の軸索伸長阻害作用が消失する事を示した。

これによりRhoAはRho-GDIとの結合から解放され、細胞内のRho-GEFにより活性化される。活性化されたRhoAは細胞骨格制御因子に作用し軸索伸長を阻害する。このことからp75受容体は、中枢神経損傷後の回復を目指すにあたって重要な標的分子の一つと考えられる。しかし、p75受容体欠損動物において中枢神経損傷後に軸索は再生・伸長せず、機能回復は野生型と比べ改善しないことが報告された。この結果はp75受容体が軸索伸長を促進する神経栄養因子(NGF,BDNFなど)の受容体でもあることを反映していると考えられる。したがって、p75受容体が生体内でも軸索再生阻害に関与しているか否かは、p75受容体欠損動物を用いては知ることが出来なかった。そこで本研究では、『p75受容体がもつ軸索再生阻害経路としての機能のみを遮断すれば、中枢神経の軸索再生は促される』と仮説を立て、p75受容体の細胞内結合部位をめぐりRho-GDIと競合する薬剤:Pep5を用い、視神経損傷モデル動物にPep5を処置し、その後の神経再生・機能回復を観察した。その結果、Pep5処置により視神経軸索再生が観察され、本研究の仮説が立証された。さらに申請者は、軸索反発因子として知られるephrin-B3が、上述のp75受容体を介した機序により軸索伸長を阻害することを見出した。申請者はephrinB3を安定発現する細胞株を構築し、その上に大脳皮質由来の神経細胞を共培養すると、神経突起の伸長が抑制されることを再現し、さらにこの作用がPep5処置により打ち消されること、ならびにsiRNAを用いた実験により、神経細胞に発現するp75受容体とEphA4受容体がephrinB3による突起伸長抑制に必要であることを見出した。p75受容体、EphA4受容体、ephrinB3の関係については共沈実験およびELISA法により、ephrinB3がEphA4受容体を介してp75受容体と結合することを見出した。これらの研究成果は、ephrinB3の新たな作用機序を明らかにするとともに、生体内でのp75受容体による軸索再生阻害機序の全貌を明らかにするものである。当初2年間での研究課題として立案したが、初年度でほぼ遂行することが出来た。研究計画書に記載した実験内容をすべて滞りなく遂行し、仮説を立証した。脊髄損傷モデル大脳皮質運動野より順行性神経トレーサーを注入し、切断した皮質脊髄路を標識することでPep5投与による組織的レベルでの神経軸索再生を評価する。また、視神経挫滅モデルにおいても同様の検討を行い、Pep5処置による視神経軸索の再生を評価する。
ニュートリノ振動におけるCPの破れとLeptogenesisに関する研究

1.ニュートリノ工場とニュートリノ振勧におけるCPの破れについて研究した。次世代のニュートリノ振動実験の最有力候補であるニュートリノ工場において、Lepton SectorにおけるCPの破れがどのように見えるかについて講論した。特に物質効果との関連を詳しく調べた。まず、ニュートリノ工場では、ニュートリノ振動における物質効果を通じて、地球内部における物質の密度の変化が測れることも示した。また、我々の仕事以前にはCPの破れとされていた信号が、実はUnitary性を用いて間接的に得られたものに過ぎないことを示した。次に、CPの信号が、直接的に見えるために必要な条件を議論して、これまでの常識と異なっていることを示した。その上で、Tの破れをみるような実験をミュー粒子の偏極を使って行う可能性について調べた。2.Lopsided構造を持つ質量行列を導く一群の模型における観測可能量について調べた。Super Kamiokandeで得られた大気ニュートリノにおけるLarge mixingを導くような一群の模型は、それが(A)SU(5)統一理論に埋め込むことができ、(B)小さなニュートリノ質量がSeasaw気候を通して出てくる限り、Lopsided構造を持つFrogatt-Nielsen U(1)chargeの言葉でそれらを分類することができる。模型をこのように分類した上で、それぞれの分類毎に、将来のレプトン稀崩壊の実験においてどの程度の信号が見えるかを調べた。3.レプトンの混合を出すための荷電レプトンとニュートリノの質量行列のパターンを調べた。現在の実験から要求されているようなレプトン混合を出すためにはどのような質量行列のパターンがありうるかを網羅的に調べた.1.ニュートリノ工場とニュートリノ振動におけるCPの破れについて研究した。次世代のニュートリノ振動実験の最有力候補であるニュートリノ工場において、Lepton SectorにおけるCPの破れがどのように見えるかについて議論した。まず、我々の仕事以前にはCPの破れとされていた信号が、実はUnitary性を用いて間接的に得られたものに過ぎないことを示した。また、この研究の副産物として、将来のニュートリノ振動実験で、地球内部における物質の密度の変化が測れることも示した。Super Kamiokandeで得られた大気ニュートリノにおけるLarge Mixingを導くような一群の模型は、それが(A)SU(5)統一理論に埋め込むことができ、(B)小さなニュートリノ質量がSeasaw気候を通して出てくる限り、Lopsided構造を持つFrogatt-Nielsen U(1)chargeの言葉でそれらを分類することができる。模型をこのように分類した上で、それぞれの分類毎に、(a)Solar neutrinoの混合の様子、(b)残る混合角U_<e3>の大きさ、(c)CPの破れの度合い、(d)2β0ν崩壊が見えそうか、について調べ、それぞれの分類毎に特徴があることを見た。さらに、SUGRA typeのSUSY breakingを持つ場合μ→eγ等のLepton Flavorを破る過程に対するBranching ratioがどうなるかを計算し、すでに一群の模型の半数が現在の実験の制限を満たしていないことを示し、また、残りのものについては近い将来に予定されている実験で見えそうであることを示した。現在の実験から要求されているようなレプトン混合を出すためにはどのような質量行列のパターンがありうるかを網羅的に調べた.
森林土壌－植物間の資源移動における土壌動物の機能解明

土壌動物は地上の植物生態系と地下の土壌生態系をつなぐ物質循環の要であり、腐食連鎖を駆動するキーストーン種が存在する。本研究では、森林生態系の土壌と植物間の資源移動に土壌動物がどのように関与するのかを明らかにするため、土壌動物群集の中でバイオマスが大きい優占種を対象として、1.土壌動物によって土壌有機物の貯留量と深度分布が変化するか、2.土壌動物が形成した土壌構造物の形態は野外環境下において維持されるか、3.植物の初期生長と根の伸長に対する土壌動物由来の土壌構造物および排泄物の影響解明、について取り組んだ。本研究では、森林生態系の土壌と植物間の資源移動における土壌動物の機能を明らかにするため、1.土壌動物による土壌有機物貯留量の長期的変化の追跡、2.土壌動物が形成した土壌構造物の土壌栄養塩貯留様式の解明、3.植物の初期生長と根の伸長に対する土壌動物由来の土壌構造物の影響解明、に取り組んでいる。本年度は、腐食連鎖のキーストーン種であると予想されるキシャヤスデ幼虫を対象として土壌動物由来の土壌構造物(脱皮室)と植物根の分布を冷温帯のミズナラが優占する林分において調査した。土壌の深度別に土壌動物由来の土壌構造物と植物根の量、幼虫の生息密度を測定し、それぞれの分布パターンを明らかにした。脱皮室の崩れやすさは湿式団粒分析によって評価した。さらに、秋以降に成虫を採取し、成虫の落葉消費に伴う土壌有機物貯留量の変化を測定するための室内実験を実施している。植物根の伸長と土壌動物由来の土壌構造物の相互関係を明らかにするため、土壌深度別に土壌動物由来の土壌構造物と植物根の分布パターンについて野外観測を実施し、研究はおおむね順調に進展している。土壌-植物間の資源移動の要となる土壌動物が土壌有機物の分解・貯留および土壌栄養塩動態に及ぼす影響については一定の見解が得られておらず、検証されていない事象が未だに多い。本研究では、森林生態系の土壌-植物間の資源移動における土壌動物の機能解明を目的としている。今年度は、腐食連鎖のキーストーン種であると予想されるキシャヤスデ成虫が土壌リン動態に及ぼす影響を野外観測と操作実験に基づき評価した。野外土壌におけるリン含有量の季節変化、キシャヤスデの生息状況を明らかにするため、6回の野外調査を実施した。土壌条件によってキシャヤスデ成虫の影響が異なるかを明らかにするため、2つのタイプの落葉と土壌を用いて成虫の生息密度を操作した室内実験を行った。この操作実験からキシャヤスデ成虫は、落葉と土壌のタイプによって餌資源利用様式を変化させ、落葉堆積層の消失、土壌リン動態に及ぼす影響が異なることが明らかとなった。野外調査、室内操作実験を実施し、成果を学会において発表した。研究は順調に進展している。長期的な栄養塩供給に対する土壌動物の寄与を明らかにするため、野外環境下における土壌構造物の残存割合と化学特性を土壌深度別に追跡する。土壌動物由来の土壌構造物から植物への資源移動プロセスを明らかにするため、動物由来の土壌構造物(脱皮室、排泄物)の量を操作した土壌を野外林床に埋設し、植物根の侵入量を測定する。植物地上部の生産に対する土壌動物由来の構造物の影響は、光、温度、水分環境を制御した室内実験によって明らかにする予定である。(1)土壌動物由来の土壌構造物における栄養塩類動態、(2)土壌動物の死骸を介した栄養塩供給プロセス、について追加の分析を行う。備品の見積額に差額が生じ、物品費全体の支出を当初計画より抑制できた。操作実験土壌において得られた成果をもとに追加の分析を実施する。次年度の助成金とあわせて分析に必要な目的の試薬、物品等を購入予定である。
認知症高齢者への社会的支援に関する瑞日韓比較研究-国家戦略・制度・実践-

認知症高齢者に対する社会的支援は先進国共通の政策課題である。本研究では、スウェーデン、韓国、日本の3か国に焦点を当て、(1)各国政府が展開している認知症に対する国家戦略を明らかにした。加えて、(2)各国が提供している認知症高齢者に対するケアサービスの概要と限界を具体的に明らかにしている。また、(3)各国で実践されている認知症高齢者に対する非薬物療法の現状と課題についても明らかにしている。特に、非薬物療法の実践に関しては、スヌーズレン(snoezelen)という療法が、スウェーデン、韓国、日本においてどのように活用されているかを論じている。2014年度に実施した3か国の認知症高齢者への社会的支援に関する研究実績は以下の通りである。まずスウェーデンに関しては、社会保健庁(socialstyrelsen)を訪問し、2010年に発表された認知症高齢者に対する国家戦略および介護の付いた特別住宅における職員配置に関する新法について、担当者にインタビュー調査を行った。加えて同庁から「監督機能」を分離独立させた社会サービス医療監督庁(IVO)を訪問し、認知症高齢者ケアに密接に関連するサーラ法(Lex Sarah)のコミューン別データを入手した。研究課題のもう一つの大きな柱である成年後見制度に関しては、スウェーデン北部のウーメオコミューン、ルーレオコミューンの成年後見監督機関を訪問し、ゴードマン、フォルバルタレという2種類の成年後見人の役割と数的データに関して情報の提供を受けた。次に韓国に関しては、保健福祉部(世宗市)の政策責任者に対して認知症高齢者ケアに関する国家戦略に関するインタビュー調査を実施する計画であったが、アポイントメントを取ることができなかった。次善の策として、国立認知症管理センターを訪問し、副所長の精神科医に韓国における認知症高齢者に対する社会的支援についてインタビュー調査を実施することができた。第3に、日本については、厚生労働省老健局に出向いて、認知症高齢者に対する国家戦略である新オレンジプランについて詳しいインタビュー調査を行う予定であったが、同戦略に関しては全てインターネットで情報公開しているとの理由から、アポイントメントを取ることができなかった。韓国および日本に関して直接のインタビュー調査をできなかった点は、2015年度の追加課題として位置づけ、計画を実施することとしたい。2015年度に実施した3か国の認知症高齢者への社会的支援に関する研究実績は以下の通りである。まず、スウェーデンに関しては、コミューンによる認知症高齢者へのフォーマルな支援を調査するために、過疎地にあるエステルシュンド・コミューンの介護の付いた特別住宅3か所を訪問し、認知症入居者のケアの現状と問題点について調査を行った。2か所は、コミューンが運営している介護の付いた特別住宅であり、1か所は大手民間会社が委託を受けて運営している。スウェーデン認知症協会を訪問し、会長にインタビュー調査を行った。在宅で生活している認知症高齢者が認知症協会で展開している様々なプログラムに参加する現状を詳しく聞くことができた。韓国に関しては、国立認知症研究センターおよび認知症協会を訪問した。同センターでは、センター長にインタビュー調査を実施した。相談業務に特に力を入れており、24時間体制で認知症高齢者を介護する在宅介護者や認知症を患っている当事者からの相談を受け付けている。ただ、認知症高齢者への非薬物療法に関しては情報をセンターが集約することまではしていない。ソウル市の各保健所では、認知症高齢者への非薬物療法としてスヌーズレンが実施されているところが多いが、同市として情報の集約を行っていないようなので、今後、聞き取り調査を行うという課題が明らかになった。認知症協会においては、会長にインタビュー調査を実施した。協会では、認知症に関する研修活動に力を入れている。日本に関しては、認知症高齢者のグループホームの介護職員に対して、インタビュー調査を実施した。グループホームという小規模ケアの長所とともに、抱える問題点が明らかになった。どの国でも同じような問題を抱えているのであるが、施設ケアの中で、利用者の体調が急変した時に、誰がどのように緊急時対応すべきかという点で課題が山積していることが明らかになった。スウェーデン、韓国、日本の3か国における認知症高齢者に対するフォーマルケアとインフォーマルケアのケアミックス、すなわち社会的支援に関して、研究計画通りに概ね進めている本研究の課題は、『認知症高齢者への社会的支援に関する瑞日韓比較』である。国家戦略、制度、実践という3つのフェーズから複眼的にアプローチするのが研究の特色である。平成28年度は、過去2か年に遂行してきた研究調査の知見を3か国について整理しまとめることに主眼が置かれた。研究調査の知見の中で、まずスウェーデンの認知症高齢者に対する社会的支援についてまつめると以下のようになる。1認知症高齢者というカテゴリーが、高齢者介護という実践の場では、あまり強調されていないことが判明した。つまり、認知症は、数ある要介護状況の一つであって、それ以上ではないという現場の認識である。スウェーデンに見られる認知症高齢者に対する実践現場での接し方が、他の北欧諸国でも見られるのかは、不明である。2国家レベルでは、認知症高齢者の患者を登録しフォローアップするSveDemというレジスターシステムが開発され運用されていることが分かった。2008年からスタートしているが、2011年スタートのBPSDレジスター同様、登録情報のカバー割合で課題を残している。スウェーデンでは、現在高齢者関係で、Senior alert、SveDem、BPSD、Palliative registretの5種類のレジスターシステムが稼働しており、重層的な国家支援システムが構築されている。5つと登録のインセンティブを強化する必要がある。

32010年に、認知症ケア国家戦略ガイドラインが公表された、現在はバージョンアップした戦略が公開されている。日本については、新オレンジプランが進行中であるが、スウェーデンの認知症国家戦略のように、多くのアクションプランを10段階の優先順位をつけて具体的に示すべきである。韓国については、認知症国家戦略は計画されてないが、国立認知症センターで、24時間の認知症介護者からの相談を受け付け効果を上げている。認知症高齢者に対する社会的支援は先進国共通の政策課題である。本研究では、スウェーデン、韓国、日本の3か国に焦点を当て、(1)各国政府が展開している認知症に対する国家戦略を明らかにした。加えて、(2)各国が提供している認知症高齢者に対するケアサービスの概要と限界を具体的に明らかにしている。また、(3)各国で実践されている認知症高齢者に対する非薬物療法の現状と課題についても明らかにしている。特に、非薬物療法の実践に関しては、スヌーズレン(snoezelen)という療法が、スウェーデン、韓国、日本においてどのように活用されているかを論じている。スウェーデンに関しては、当初の研究計画を超えて、様々な政府機関およびコミューンから、認知症高齢者に対する国家戦略および認知症高齢者ケアの質に直接関連する介護の付いた特別住宅における職員配置の立法について多くの情報を、直接のインタビュー調査から得ることができた。スウェーデンに関しては、順調に進展していると言える。ただし、韓国と日本に関しては、当初予定したインタビュー調査の対象者にメイン会することができなかったので、2015年度(場合によっては2016年度)の課題として残ることになった。しかしながら、韓国に関しては、国立認知症管理センターの副所長にインタビュー調査をすることができたことは、当初の研究計画を超えた研究成果であり、結果的には、研究として進めることができたと言える。日本に関しては、引き続き交渉を続け、新オレンジプランの進捗状況および、各自治体における「初期集中支援チーム」の整備状況など、インターネットに公開されていないデータなどを得たいと考える。スウェーデン、韓国、日本の3か国に関して、認知症高齢者への社会的支援、すなわちフォーマルケアとインフォーマルケアのダイナミックなケアミックスを実証的に研究している。が、それぞれの国における認知症高齢者の介護に関する仕組みと現状、情報公開状況が異なるために、研究の進捗状況としては概ね順調に進めてきてはいるものの、共通の比較分析軸に基づいて有機的な比較が可能なところまで達しているかどうかという点については、やや課題が残る。今後は、有機的な比較分析が可能な軸の措定を強く意識しながら、当初の研究計画通り研究を進めていくつもりである。高齢者福祉論2015年度の研究推進方策は、以下の通りである。
19世紀アメリカ小説における動物表象の科学史・文化史的研究

19世紀のアメリカ人作家メルヴィル、エマソンを中心にして、その自然観を考察するため、作品の動物表象に着目し研究を行った。その結果、当時発達した自然科学の影響を受けた多様な生物への関心がまし、また植民化活動の活発化から派生した東洋の文化・思想の流入した結果、動物と人間の融合する自然観、世界観が作品に反映されていることが確認できた。これらは今日の動物の権利、エコロジー的思考へと向かう流れを形成していると思われる。本年度の研究においてエマソン、メルヴィルを中心に、19世紀アメリカ作家の自然観に科学史及び文化史的影響がどのようにあらわれているかについて研究を行った。5月に行われた米国ALAでの学会発表において、エマソンが東西文化交渉から受けた影響とそれが還流して日本の明治の文学者に影響を与えた点、また、エマソンの記した"Japan"という言葉の背後にある物質文化、書物を通した鎖国時代の「日本」の影響について指摘できた。ここから、エマソンの詩を例にとり,自然史、文化史の影響関係をまとめ、さらにハンティントンライブラリー,ゲッティミュージアムなどで収集した資料をもとに「Ralph Waldo Emersonの“Rhodora"再読-ナチュラル・ヒストリーと東洋」として紀要に発表した。また、メルヴィルの自然観について、前年度のガラパゴスへの調査旅行をもとに、当時の科学史との関係をまとめ、『英語青年』に「ダーウィンを読むメルヴィル」として発表し,メルヴィルが進化論者ダーウィンに興味をもち批判的に受容していたことを指摘した。19世紀という科学が発展する時期において、科学に対してエマソンにおいては進歩的に、メルヴィルにおいては批判的に捉えながらもその進展に深い興味を持っていることが指摘出来たと考える。また、文化史的にも、旅行を通した交流や、その土台となる西欧諸国の海外進出、物質文化による文化交渉の影響が、思想を先取りする形で動物表象にあらわれ、自然観や人間観を変化させていったことについて、さらに研究が必要であることが確認できたと考える。本年度は、メルヴィルを中心に東西文化交流という観点で動物表象について考察した。特に絵画を通した影響、物質文化の影響という点に留意し、メルヴィルが聖地巡礼を行い、中近東、地中海沿岸諸国を旅した経験をもとに制作した長編詩『クラレル』という作品の読解を行なった。19世紀に米国からみて東洋熱ともいえる異国への関心が指摘されるが、これを動物表象の観点で見る時、単なる関心におわらない東洋理解が進んだことと捉えられ、これを作品で跡づけられたのが成果である。『クラレル』という作品はメルヴィル自身の聖地巡礼をかねた旅での東洋理解と、絵画や旅行記を通した影響のもとに書かれた当時の巡礼者の物語である。エルサレムという東西の文化、宗教が交錯する地で、作品の着想を得て、ここを舞台にした際、動物たちの描写に東西交流の様がうまく描き出されている。中近東という場での文化と宗教の対立を19世紀作家がどのように捉えたかを、動物と人間の関係の描き方から再構築できたと考える。動物と人間が一体になった生活をしている様を描く、その自然描写は、西洋的な役畜としての動物という人間中心的な見方にはない、動物と人間が融合する東洋的自然観を作家が発見している点として指摘した。これは、異なる思想を理解する以前に、その自然観の違いを人間と動物の関係を通じて理解するという異文化受容の一端であり、それをもとに宗教、制度の違いを超えた人間理解へとつながる契機となると考えられる。これらを資料調査で跡づけ、その成果の一部を日本英文学会全国大会シンポジウムにおいて発表し、その要旨を日本英文学会発行の『プロシーディングズ』に発表した。さらにこれを発展させ、メルヴィル国際学会(於エルサレム)で、発表した。その後口頭発表をもとに資料を整理し、論文発表の準備が本年度においてできた。本年は研究年度最終年にあたり、今までに行なった動物表象に関する文献・図版、東西文化交流の研究書、作家の日記の調査を整理し論文製作を重点にし、またこれまでの研究から派生的に生じた研究会への招聘(アメリカンルネサンスと大西洋)、学会発表(PAMLA学会、日本ソロー学会)を通じて、視野がひろがり、課題自体の広がりが確認できた年であった。まず、動物表象に関しては、19世紀に政治風刺が動物表象を多用していたこと、それを可能にするアメリカでの動物のイメージの固定化、また動物の見方が文化圏の交流により多様化することを作家メルヴィルが的確に捉えていたことが確認できた。メルヴィルに関しては1昨年のエルサレム国際学会での発表をまとめる形で論文にし、投稿した。また、科学言説と文化交流により多様な動物への関心がひろまった点に関して、研究報告の形でまとめた。さらに派生的に広がった問題として、研究会での発表(メルヴィルの戦争表象一戦闘心を動物にたとえる様など)、学会発表(ハワイという島を通して考える文化交流の捉え方、エマソン、ソローの自然観)を通して、19世紀のアメリカが持つ東西、南北の結節点的役割が指摘できた。

とりわけ、メルヴィルという作家の作品を研究することで、アメリカの内にいながらその文化、社会を客観視できる視点からみたアメリカ像を明らかにできた。これに関し論集の論文の一つとして発表し、また、2011年5月九州アメリカ文学会のシンポジウム講師として、その成果が周知できた。動物表象に注目して文学作品をみると文化史と科学史の影響を受けた動物描写、自然描写の変化が確認でき、その成果として論文を発表し、動物を通してみるアメリカ文化の複合性という新たな視点が指摘できた。
移植肝の監視における新しい急性炎症反応性蛋白の臨床的意義に関する研究

我々は肝アルギナーゼが肝細胞障害に伴って血中に逸脱することを報告してきた。最近の研究において,この肝アルギナーゼとmyeloid-related protein(MRP)8とMRP14の二つのサブユニットから構成されるMRP8/14が特異的に結合することを明らかにした。そこで,MRP8/14の臨床的意義を明らかにするため,まずMRP8/14を白血球から精製し,本結合蛋白に特異的なモノクローナル抗体を作製し,さらにMRP8/14に対するELISAをも開発した。そこで,本ELISAを肝移植患者及び生体小腸移植患者の血清に応用し,新しい急性炎症マーカーとしての有用性について検討した。その結果,肝移植患者および小腸移植例の死亡例において,MRP8/14はアルギナーゼ,CRP,AST,ALTなどの上昇に比べて07日ほど早く血中に出現する傾向のあることを初めて明らかにした。とくに,MRP8/14はCRPよりも早く血中に上昇する傾向が確認されたことは新しい急性炎症マーカーとしての意義を意味するものである。さらに,MRP8/14の著しい上昇と一致して強い拒絶反応が確認されたことは,非常に注目に値する結果であった。このように,MRP8/14の変動が拒絶反応に伴う急性炎症を事前に予想する上で臨床的に有用であることを明らかにした。移植医療において,MRP8/14がAST,ALT,及び炎症マーカーであるCRPよりも早く血中に出現する傾向が示されたことは,CRPに代わる急性炎症マーカーとして十分期待できるものであった。ヒト肝アルギナーゼ結合蛋白を白血球から精製し,N末端残基からのアミノ酸配列を解析したところ,myeloid relatedproteins(MRPs)と同一蛋白であった。MRPsはMRP8とMRP14の二種類から構成され穎粒球内にそれぞれ単独で細胞内に発現するが,拒絶反応を含む急性炎症の際には,これらのサブユニットが会合したMRP8/14が極めて早期に,かつ大量に生成し,生体防御に重要な役割を果たしている。このMRP8/14がカルシウム存在下においてアルギナーゼと特異的に結合し,分単位でMRP8/14・アルギナーゼ複合体を形成することを初めて発見した。従って,アルギナーゼとMRP8/14の変動を比較検討することはMRP8/14の生理学的意義の解明にとって重要な鍵となる。そこで,アルギナーゼおよぴMRP8/14に特異的なモノクローナル抗体を作製し,ELISAの構築を試みた。まず,アルギナーゼに対するELISAを構築し,報告した。次に,MRP8/14に対するELISAを開発し,これらの方法を肝移植患者及び生体小腸移植患者の血清に応用し,新しい早期炎症マーカーとしての有用性について検討した。なお,本法は数時間以内に1ng/ml以下のMRP8/14を特異的に測定できる優れた方法であった(現在,Clin Chemに投稿中)。肝移植患者の死亡例において,MRP8/14とアルギナーゼは共に著しく変動し,またアルギナーゼ,AST, ALTなどの上昇に比べて07日ほど早く血中に出現する傾向を示すことを見い出した。また小腸移植例(死亡例)において,とくに末期にMRP8/14は著しく上昇したが,アルギナーゼはほとんど上昇しなかった。このように,アルギナーゼとの併行測定は拒絶反応の起源を判別する上で臨床的に有用であることが明かとなった。移植医療において,MRP8/14がAST, ALT,及び炎症マーカーであるCRPよりも早く血中に出現する傾向が示されたことは拒絶反応を含む炎症反応の早期シグナルとしての可能性を示す重要な手掛かりになると考えられた。アルギナーゼ・MRP8/14の移植患者への臨床応用に関する報告は初めてである。