hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
カイコ生殖細胞BmN4を用いたin vitro piRNA生合成経路の再構成

piRNAは、生殖細胞特異的に発現する小分子RNAで、PIWIタンパク質と複合体を形成し遺伝子発現を抑制する。piRNAは、第一次と第二次経路で生成される。しかし、piRNA生成経路については、未だ不明な点が存在する。そこで、カイコ生殖細胞であるBmN4を用いて、piRNA生成経路の解明を試みた。PIWIタンパク質であるSiwiとBmVasaと結合していることが判った。さらに、第二次piRNA生成経路において、BmVasaタンパク質のタンパク質からRNAを解離する機能が重要であることを明らかにした。また、BmSpn-Eと呼ばれるタンパク質は、第一次生成経路で機能していることも判明した。piRNAは、生殖細胞を正常に保つために重要なトランスポゾン由来のRNAである。そのため、piRNAがどのような経路で生成されるのかを明らかにすることは、生殖細胞形成を解明するために重要である。カイコの生殖細胞由来である培養細胞BmN4を用いて解析を進めた。RNAi法を用いたpiRNA生合成経路のスクリーニングにより、ヘリカーゼドメインを有するBmVasaがカイコにおいてもpiRNA生合成経路に関与することが明らかになった。さらにBmVasaは、PIWIタンパク質であるSiwiと相互作用していることも明らかになった。しかしながら、もう一つのPIWIタンパク質であるBmAgo3とは相互作用はみられなかった。作製したBmVasa抗体を用いた免疫沈降実験により、この複合体にはトランスポゾン由来の長いセンス鎖RNAが含まれることが判明した。また、BmVasaノックダウン時に発現させたFlga-SiwiとFlag-BmAgo3へのloadingへの影響をみたところ、Flag-SiwiにloadされるpiRNAに影響は見られないが、Flag-BmAgo3にloadされるpiRNAが劇的に減少した。さらに、Siwi-piRNA複合体は、標的RNAを切断後、切断産物を解放せず保ったままであることを明らかにした。このSiwi-piRNA複合体にBmVasaを後から加えると切断産物が解放されることが判った。これらの結果からBmVasaは、第二次piRNA生合成経路でSiwiからBmAgo3へのpiRNAの受け渡しに機能していることが示唆された。piRNAは、生殖細胞特異的に発現し、PIWIタンパク質と複合体を形成することでトランスポゾンなどの遺伝子発現を抑制している。piRNAは、第一次と第二次と呼ばれる生成経路で増幅される。カイコでは、PIWIタンパク質としてSiwiとBmAgo3が発現しており、第一次経路で生成されたpiRNAはSiwiへloadされ、その後第二次経路でBmAgo3へpiRNAがloadされる。この第二次生成経路は、PIWIタンパク質の標的RNAを切断する活性が重要であることが判っている。しかし、詳細な生成経路については明らかになっていなかった。これまでに、私はPIWIタンパク質により切断されたpiRNA前駆体が切断後においてもPIWIタンパク質と結合したままであることを明らかにした。さらに、第二次生成経路において、DEAD-box RNAヘリカーゼタンパク質であるBmVasaがSiwiと複合体を形成し、BmVasaのRNAヘリカーゼ活性によりSiwiからのpiRNA前駆体を解離し、BmAgo3へpiRNA前駆体を受け渡す段階で機能していることを示唆する結果を得た。新たに最終年度に実施した研究から、BmAgo3により切断されたpiRNA前駆体の解離についてBmVasaは関与しないことを明らかにした。つまり、BmAgo3からのpiRNA前駆体の解離には別のRNAヘリカーゼタンパク質が関与していると示唆される。さらに、Siwiタンパク質は、BmSpn-E及びBmQinと複合体を形成していることを明らかにした。BmVasaが第二次生成経路で機能するのに対し、BmSpn-Eのヘリカーゼドメインが第一次生成経路で重要であることを示した。以上の結果を1つの論文としてまとめた。これまでの解析からカイコの第二次piRNA生合成経路において、BmVasaが機能していることが示唆される結果を得た。しかしながら、SiwiからBmAgo3へのpiRNAの受け渡しでVasaのヘリカーゼ活性が重要であるのかがまだ不明である。カイコpiRNA生合成経路の因子としてBmVasaを同定した。しかしながら、Vasaのヘリカーゼ活性が重要であるのかについてはまだ明らかになっていない。今後、Vasaのヘリカーゼ活性が重要であるのかを変異体を用いて解析を進めていく。また、piRNA生合成経路でどのような順序で複合体を形成し、piRNAを生成していくのかを解明していく。
ドイツ近・現代文学における<否定性>の契機とその働き

ドイツ現代文学は、言語に対する先鋭化した批判意識から始まる。とりわけホーフマンスタール、ムージル、カフカの文学は、既存の言語が原理的機能不全に陥っていることを確信しながら、言語の否定性を原理的契機として立ち上がっていく。本研究は、ドイツ近・現代文学の各時期の代表的もしくは特徴的な作品を手掛かりとして、それぞれの作品において<否定性>という契機の所在を突き止め、そのあり方と働きを明らかにした。本研究は、否定性(Negativitat)を文学が成立する原理的契機として捉え、この観点から、ドイツ近・現代文学の各時期の代表的もしくは特徴的な作品を手掛かりとして、それぞれの作品において〈否定性〉という契機の所在を突き止め、そのあり方と働きを明らかにしようとするものである。その際、(1)「否定性」を文学そのものの原理的問題として捉えながらドイツ近・現代文学を全体的かつ個別的に考察し、(2)神学的・哲学的思想と文学的思想を意識的に関係づけると同時に、認識の否定性と言語の否定性を連動している問題として検討し、(3)この理論的側面と実際的側面とを相互規定的もしくは相互修正的な関係において捉え、(4)「否定性」のあり方と働きの連関を「我々の問題」として叙述することを目指す。本年度は本研究の初年度にあたり、研究課題についての本質的理解を確認するとともに研究課題にかかわる基本的な問題点の共有をはかるために、研究分担者全員参加システムによる二度の研究会を開いた。研究会においては、主として、(1)<否定性>の概念をめぐる総論的な研究報告、(2)本研究の準備段階で明確になってきた三系列の研究を継承発展させる研究報告をおこない、かつ議論を重ねた。(第一回研究会:9月6日-10日、研究テーマ解題、および研究報告九本;第二回研究会:2月10日-12日、研究報告七本と特別講演一本;いずれも九州大学院人文科学研究院において。)また、本研究の問題意識をより広範囲な研究者たちと共有しあうとともに、本研究の最初の成果の一端を提示するために、本年度の日本独文学会秋季研究発表会(10月14日-15日、九州産業大学)において、本研究課題に基づくシンポジウム「ドイツ近代文学における<否定性>の契機とその働き」をおこない(浅井・小黒・田野の三名に、研究協力者である田口・安徳を加えた、計五名による)、高い評価を受けた。以上の活動により、本研究の研究組織をひとつの有機的活動性をもつチームへと強化かつ深化させることができ、これに加えてさらに、本研究を原理論的な視点を具えたひとつの研究モデルとして、全国的な広がりをもつ研究者たちの問題地平のなかに位置づけることができた。なお、本科研費により、上述したような研究会をもつことができたうえに、本研究のより効果的な進展に不可欠である電子機の設備、およびさまざまな書籍・視聴覚資料etc.をかなりの程度に充実させることができた。本年度は本研究の二年目にあたり、当初の研究計画に基づき、問題点の更なる展開を目指して、研究分担者全員参加システムによる二度の研究会を開いた。研究会においては、主として、(1)総論的考察の深化を図る研究報告(「否定性」の概念を、ひき続き、神学的/哲学的/美学的領域それぞれにおける問題史的観点から、できるだけ文学との関連性へと収斂させつつ検討する)、(2)予備研究および初年度の研究成果の更なる発展的継承を図る各論的研究報告(ドイツ文学・思想における「否定性」の働きを、通時的視点から捉える)、(3)理論的考察を叙述へともたらす研究報告(上記(1)、(2)で捉えられた〈文学における「否定性」の問題〉を「我々の問題」として理論的に構築/叙述する)を行い、かつ議論を重ねた。(第三回研究会:9月15日-17日、研究報告7本と特別講演〔下記参照〕1本;第四回研究会:研究報告8本;いずれも九州大学大学院人文科学研究院において。)上記(2)に関しては、本年度はとくに近代前半のドイツ文学に重点を置いたが、この観点から、9月の第三回研究会では、日本でのゲーテ研究の第一人者である柴田翔・東大名誉教授を招いて、「ゲーテにおける〈否定性〉と〈肯定性〉」について講演討論していただくとともに、9月16日17日の丸二日間にわたって各研究報告の検討にも加わっていただき、実りのある活発な議論ができた。また、初年度の日本独文学会秋季研究発表会でおこなった、本研究課題に基づくシンポジウム「ドイツ近代文学における〈否定性〉の契機とその働き」の発表論考を、加筆/改稿したかたちで「日本独文学会研究叢書」の一冊として刊行し、高い評価を得た。なお、本科研費により、上述したような研究会をもつことができた上に、本研究のより効果的な進展に不可欠である機器/設備、およびさまざまな書籍/視聴覚資料をかなりの程度に充実させることができた。

平成20年度は、当初の研究計画に基づき、かつ初年度および第二年度の研究成果を踏まえつつ、問題点の更なる展開を目指して、これまでと同様に研究分担者・協力者全員が参加するかたちで、二度の研究会を開いた。研究会においては、主として、(1)総論的考察の深化を図る研究報告(「否定性」の概念を、神学的/哲学的/美学的領域それぞれにおける問題史的観点から、できるだけ文学との関連性へと収斂させつつ検討するもの)、(2)予備研究を含むこれまでの研究成果の更なる発展的継承を図る各論的研究報告(ドイツ文学・思想における「否定性」の働きを通時的視点から捉えるもの)、(3)理論的考察を叙述へともたらす研究報告(上記(1)、(2)で捉えられた〈文学における「否定性」の問題〉を「我々の問題」として構築・叙述する枠組みについて考察するもの)を行い、議論を重ねた。(第五回研究会:9月13日-15日、研究報告7本と特別講演〔昨年度に引き続き、柴田翔氏による「ゲーテ文学における〈否定性〉と〈肯定性〉」についての講演〕;第六回研究会:2月21日-23日、研究報告8本〔うち3本はドイツ/オーストリア人研究者による〕;研究会はいずれも九州大学大学院人文科学研究院において開催。)なお、本科研究費により、上述の研究会をもつことができたのみならず、本研究のより効果的な進展に不可欠である機器/設備、およびさまざまな書籍/視聴覚資料etc.をかなりの程度に充実させることができた。(現時点での研究上の反省点:「否定性」と「否定」の概念的な区別がまだ甘いこと、および、「否定性」の捉え方が各研究者によって微妙に異なること〔あえて二元化するのではなく、この多様性を生産的な方向へ展開できないか〕。)平成21年度は、当初の研究計画に基づき、9月19日から21日までの間に九州大学文学で行った第七回科研研究会にて、これまでの研究成果を踏まえた総括を行った。発表担当者と発表題目は以下のとおりである。(1)小川さくえ(連携研究者):インゲボルク・バッハマンにおける「語る主体」とジェンダー(2)小黒康正(研究代表者):「水の女」の黙示録-バッハマン『ウンディーネ行く』を中心に(3)恒吉法海(連携研究者):薄明とジャン・パウル(4)安徳万貴子(研究協力者):ホーフマンスタールのオペラ『影のない女』を統べる声なきものの声(5)武田利勝(研究協力者):狩猟者の悦楽、あるいは自己喪失-ホガースとヴィンケルマンにおける彫像観察について(6)岡本和子(連携研究者):ベンヤミンと子供の本(7)時田郁子(研究協力者):ムージル文学における群衆(8)小黒康正(研究代表者):本研究の総括以上の研究発表に基づく合同討議では、(1)「否定性」の概念を神学・哲学・現代思想における問題から文学の問題へと還元し[上記(1)、(2)、(5)、(6)]、(2)ドイツ文学における「否定性」の働きを通時的視点から総括し直し[上記(3)、(4)、(7)]、(3)その上で「否定性の詩学」の為の理論的基盤の構築を図った[上記(8)]。反省点は、「否定性」の捉え方、並びに「否定性」と「否定」の区別が各研究者によって微妙に異なり、統一的な概念構築に至らなかったことである。しかし、「否定性」をあえて一元化しなかったが故に、逆に、「否定性の詩学」の多様性を生産的に明らかにすることができ、文学研究における新たな観点を提示できるに至った。
幼若時脳障害を受けたラットの成長後の生理機能に対する環境温度の効果

脳外科領域や救急医学領域で注目されている脳低温療法は、脳血管障害や頭部外傷などの脳受傷直後の急性期に体温を低く維持し、回復後の脳障害を軽減するものである。脳低温療法は新生児の分娩時低酸素脳症による脳障害に対する治療法としても注目されているが不明な点が多い。本研究は低酸素低灌流障害の発症メカニズムを動物モデルを用い生理学的手法など用いて解明しようとする。・聴性脳幹反応:生後7日目のWistar新生仔ラットをハロセン麻酔の上、顕微鏡下に左総頚動脈を露出結紮し、8%酸素、環境温35°Cのチャンパーに1時間収容した。ついで酸素20%の湯浴に浮かせたチャンパーに入れ、直腸温37°Cあるいは30°Cになるように環境温度を調節した。脳障害の程度は聴性脳幹反応により評価した。小型イヤホンをラット両耳に挿入し、85dBあるいは90d8のパルス音を与え、誘発脳波を測定した。脳障害ラットでは特にIIIVのピーク高の減少、ピーク間時間幅の延長がみられ、脳障害の指標に用いることができた。・組織学的実験:低酸素低灌流負荷を与え、続いて環境温を調節したラット新生仔を深麻酔下に全脳を摘出し、海馬と大脳半球のスライス標本を作製した。体温を通常温で維持した群で障害側の脳重量の減少の他、免疫組織化学法によりCaspase-3の発現の増加を認めた。・光計測法による脳活動の記録:負荷ラットの脳を摘出後、海馬を含む脳スライスを作成し、人工脳脊髄液で灌流した。電位感受性色素で染色の後、電気刺激を加えることにより、脳内の刺激伝導経路とその断絶を光計測法で測定できた。2年間の検討により、低酸素低灌流新生仔脳障害モデルの確立と聴性脳幹反応による評価系を確立できた。本障害の成立にアポトーシスが関与し、それを評価できる測定系を確立できた。今日、脳低温療法が臨床医学の場で注目されている。脳受傷直後の急性期に体温を低く維持し、回復後の脳障害を軽減するものである。本療法は最近では新生児の分娩時低酸素脳症による脳障害に対する治療法としても注目されている。新生児のdeveloping brainの低酸素低灌流障害に対する脳低温療法の機序・効果を厳密に見直し、動物実験にて主な脳内関連部位の解明、機能回復の程度の解明、メカニズムの解明をしようとして、本年度は以下の検討を実施した。・モデル動物の作成生後7日目のWistar新生仔ラットをハロセン麻酔の上、顕微鏡下に左総頚動脈を露出し結紮し、8%酸素、環境温35°Cのチャンパーに1時間収容した。ついで自律性行動性体温調節を抑制するために、低濃度ハロセンを合む酸素20%のチャンパーに入れ、チャンパーを湯浴に浮かせて、直腸温37°Cあるいは30°Cになるように環境温度を調節した。温度負荷終了後、6週間以上の飼育が可能であった。・行動実験の基礎的検討Staircase test:長さ20cm幅10cm高さ14cmのプラットホームを作成し、その側に階段をつけた。ラットを階段上に収容できるが、階段上のペレットは同じ側の前肢でのみ取得できるようにした。階段上にペレット餌を1ヶずつおき、ラットが前肢の可動範囲でのみペレット餌を摂れる実験装置を作成した。聴性脳幹反応:音響刺激装置(直径0.5cm長さ1cm小型スピーカー)をラット両耳に挿入する。

左右スピーカーからパルス音を呈示し、誘発脳波を測定する実験系の作成に着手した。・組織学的実験ラットを深麻酔下に全脳を摘出し、左右半球に脳を正中で切断し重量を測定する系を確立し、大脳皮質、海馬のスライス標本に対する免疫組織学的検討を試みている。脳外科領域や救急医学領域で注目されている脳低温療法は、脳血管障害や頭部外傷などの脳受傷直後の急性期に体温を低く維持し、回復後の脳障害を軽減するものである。脳低温療法は新生児の分娩時低酸素脳症による脳障害に対する治療法としても注目されているが不明な点が多い。本研究は低酸素低灌流障害の発症メカニズムを動物モデルを用い生理学的手法など用いて解明しようとする。本年度は、昨年度の検討結果に基づき、さらに以下の検討を実施した。・聴性脳幹反応:生後7日目のWistar新生仔ラットをハロセン麻酔の上、顕微鏡下に左総頚動脈を露出結紮し、8%酸素、環境温350°Cのチャンバーに1時間収容した。ついで酸素20%の湯浴に浮かせたチャンバーに入れ、直腸温37°Cあるいは30°Cになるように環境温度を調節した。脳障害の程度は聴性脳幹反応により評価した。小型イヤホンをラット両耳に挿入し、85dBあるいは90dBのパルス音を与え、誘発脳波を測定した。脳障害ラットでは特にIIIVのピーク高の減少、ピーク間時間幅の延長がみられ、脳障害の指標に用いることができた。・組織学的実験:低酸素低灌流負荷を与え、続いて環境温を調節したラット新生仔を深麻酔下に全脳を摘出し、海馬と大脳半球のスライス標本を作製した。体温を通常温で維持した群で障害側の脳重量の減少の他、免疫組織化学法によりCaspase-3の発現の増加を認めた。・光計測法による脳活動の記録:負荷ラットの脳を摘出後、海馬を含む脳スライスを作成し、人工脳脊髄液で灌流した。電位感受性色素で染色の後、電気刺激を加えることにより、脳内の刺激伝導経路とその断絶を光計測法で測定できた。2年間の検討により、低酸素低灌流新生仔脳障害モデルの確立と聴性脳幹反応による評価系を確立できた。本障害の成立にアポトーシスが関与し、それを評価できる測定系を確立できた。
射影多様体のCastelnuovo-Mumford量についての研究

射影空間内において有限個の斉次多項式の零点として定義された射影多様体の定義イデアルの次数、極小自由分解の複雑さを表す重要な不変量として、Castelnuovo-Mumford量がある。Castelnuovo-Mumford量の上限を射影多様体の次数、余次元などで記述する問題はこの分野の重要なテーマであり、いくつかの上限が知られている。本研究において、射影曲線のCastelnuovo-Mumford量がCastelnuovo型の上限、次の上限を満たすときに、最小次数の射影曲面もしくは正規Del Pezzo曲面の因子となることを示した。射影多様体のCastelnuovo-Mumford量について研究を進めました。この不変量は射影多様体の定義イデアルの生成元の次数や極小自由分解を制御する量です。正標数の代数閉体上での射影曲線の超平面切断についてのCastelnuovo-Mumford量の上限を満たす場合は、次数が大きい場合は有理正規曲線に含まれるという問題について以前に得られた結果を改良しました。古典的Castelnuovoの方法を用いたもので、この結果は論文にまとめました。さらに、Castelnuovo-Mumford量が上限となる場合の次に大きい値を取る射影曲線の超平面切断は、次数が余次元に比べて十分大きいという条件下では、その点集合は楕円正規曲線に含まれるという結果も得ました。この方向を膨らませて、射影曲線がCastelnuovo-Mumford量の上限の次のカテゴリーにあるときにDel Pezzo曲面に含まれるのではないかと予想しています。即ち、Castelnuovo-Mumford量と射影多様体のデルタ種数の間に何らかの関係があるのではないかということです。これらも含めた近年のCastelnuovo-Mumford量についての結果を中央大学での代数曲線の国際研究集会において講演しました。さらに、研究分担者全員とその他関連の研究者を含めて、「Castelnuovo-Mumford量をその周辺の話題」についての研究集会を琉球大学にて行いました。トーリックイデアルやStanley-Reisnerイデアルの極小自由分解とCastelnuovo-Mumford量についても研究や、重みつき射影空間における射影多様体のCastelnuovo-Mumford量についての研究を進める準備ができたと思います。射影多様体のCastelnuovo-Mumford量についての研究を引き続き進めました。射影曲線の種数の上限を曲線の次数・余次元で表すCastelnuovo型の不等式を用いて、Castelnuovo-Mumford量の上限を研究する問題に取り組んでいます。前年度、投稿して論文の結果に基づいた内容をMax Planck研究所およびライプチヒ大学で開催された国際研究集会で発表し、関連の研究者とその問題について議論しました。この結果は、Castelnuovo-Mumford量の上限を満たす曲線は有理線織曲面の因子となり、次の上限を満たす曲線はdel Pezzo曲面上の因子となる、ということです。射影曲線の場合は、Castelnuovo-Mumford量とCastelnuovo型の式の近さは、デルタ種数による射影多様体の分類に、0と1の場合にはある種の対応があることを示しています。この結果の類似として高次元の射影多様体で、座標環がCohen-MacaulayもしくはBuchsbaumである場合には、上限を満たす場合は、多様体が有理線織多様体の因子となり、次の上限を満たす場合はdel Pezzo多様体の因子となる結果が得られました。Huneke-UlrichのSocle補題が一つの鍵になっています。できるだけ、基礎体の標数に依らない形での拡張が望ましいのすが、一区切りをつけるために、論文を準備中です。また、研究分担者を中心に2月に佐賀大学で研究会を開きました。15名ほどの参加があり、代数的観点からの射影多様体やその極小自由分解についての話題についての講演について議論しました。特に、「有理曲線がCastelnuovo-Mumford量の上限に近いときの有理曲線の定義式」、「トーリック多様体の3次元、4次元の場合の定義方程式」については、研究の余地があり、来年度の研究課題の一つだと位置づけています。本研究の目的は射影多様体のCastelnuovo-Mumford量のCastelnuovo型の上限についての問題を進めていくことにありました。一般次元のBuchsbaum多様体の上限については、等号の場合は、最小次数の多様体の因子に対応することが知られていましたが、今年度の研究において、等号の次の上限の場合は、最小次数の多様体に加えて、次の次数の多様体、つまり、Del Pezzo多様体の因子に対応するという結果について、標数の関わり方についても道筋がつき、きちんとした証明を得ました。この結果は、2009年2月の九大での研究集会で結果を報告し、現在、論文を作成中です。

射影曲線の場合のCastelnuovo-Mumford量のCastelnuovo型の分類についても、Si-Jong Kwak氏(KAIST,韓国)および野間氏(横浜国大)とは、佐賀大学および韓国で、寺井氏も含めて研究打ち合わせなどを行いました。一般の射影曲線の場合は、その不変量の度合いに応じて、高い次元の有理線織多様体にはいることがわかるため、この方向からアプローチすることは今後の課題となりました。また、一般次元の射影多様体のCastelnuovo-Mumford量とSecant Lineとの関連性の問題も野間氏などと議論しました。2008年11月には可換環論シンポジウムを国民宿舎虹の松原(唐津)で主催し、3名の外国人招待講演者を含めて約70名の可換環論およびその周辺分野の研究者が参加しました。Irena Swanson(Reed College, USA)とも議論する良い機会になりました。
石鏃を中心とする押圧剥離系列石器群の石材別広域編年の整備

石鏃は列島全域に広く分布している縄文時代の代表的な石器である。しかし、これまで石鏃についての型式学的研究はあまり行われていなかった。そこで、本研究では石鏃にも特徴的な型式が存在していることを明らかにし、関東・甲信地域において10型式の型式設定を行った。そして、石鏃型式は土器型式とは分布域が異なる場合があることや、威信財として扱われたり、集団の象徴としての意味をもっていることを解明した。本研究の主たる目的である関東・甲信地方の押圧剥離系列の石器群の広域編年整備に関する資料調査のうち、今年度計画していた群馬県・栃木県・茨城県の資料調査を行った。特に、これまで報告書未刊行で詳細の分からなかった群馬県の早期及び後・晩期の主要な遺跡出土の石鏃についての調査を行った。石鏃に多彩な石材が用いられている群馬県は、本研究の目的である広域編年の基軸となる地域であるため、重点的に資料調査を行い、多くの特徴的な石鏃の存在を確認することができた。この調査では、石器担当の研究協力者グループによる実測、土器担当の研究協力者による時期認定、在地石材担当の研究協力者によるプレパラート作成、黒曜石担当の研究協力者による蛍光X線分析を連携しつつ併行して行ったことにより、石鏃に関しての多くの詳細な実測図と帰属時期・石材属性についてのデータを蓄積することができた。これらの特徴的な石鏃に対しては、技術形態学的視点から形状・技術・石材についての属性を検討し、広域編年の基本単位となる型式の認定を行った。今年度の調査成果として、早期中葉段階の「柳久保型」、後期後葉晩期前葉の「安通型」・「押手型」、晩期前葉の「茅野型」・「谷地型」といった型式を認定することができた。また、群馬県の前期中期の遺跡及び栃木県・茨城県地域の遺跡については、既刊の報告書をもとに資料調査を行い、縄文時代早期晩期にかけての各時期の主要遺跡について、時期が明確な石鏃についての実測図の収集を行った。そして、群馬県域での実地調査の成果を踏まえて、類似した明確な特徴を有する石鏃の存在の有無について確認作業を行った。その結果、両県地域においては、群馬県域で認められたような特徴的な石鏃が少なく、異なる地域性を有していることが明かとなった。当該年度は4年計画の2年度目に当たる。当初年度に未実施の研究調査を行うとともに、2年目に予定されていた研究調査を実施した。まず、1年目に未実施の栃木・茨城県域での石鏃の様相について、巡見調査を実施した。その結果、栃木県において早期前葉の特徴的な局部磨製石鏃について、仮宿型として型式設定が可能であることを確認した。また、中期末葉後期前葉の関東地方における初源的な有茎鏃について、桧の木型として型式設定が可能であることを確認した。今年度の調査対象の南関東地域では、神奈川県では草創期の出現期石鏃について実見調査を行い、すでに型式設定済みの花見山型を確認した。また、東京都下布田遺跡の晩期の石鏃について実見調査を実施し、晩期中葉のいわゆる飛行機鏃については、下布田型として型式設定が可能であることを確認した。また、これまで調査が実施されていなかった群馬県烏川流域の石材調査を実施して、石材サンプルを採集し、プレパラートを作成した。そして、継続的に実施している各地の遺跡出土の石鏃の実測・トレース作業を行った。また、石鏃関連文献をもとにした基礎資料の収集についても群馬・栃木地域はほぼ完了し、埼玉地域についても作業が進展した。これまでの研究成果については、論文としての誌上発表(千葉県中峠遺跡の石器群について・出現期の石鏃について・群馬県安通型石鏃の研究)、学会での口頭発表(群馬県域の石鏃型式について・出現期の石鏃について)を行い、研究成果を公開した。また、黒曜石の蛍光X線分析は、群馬県内の青柳宿上遺跡・西新井遺跡・塩川砂井戸遺跡について実施し、成果を調査報告書により公表した。また、中間検討会を1月に実施し、これまでの研究成果の報告と、今後の研究課題についての検討を行った。そして、研究成果も蓄積されてきたので、研究成果を公開するためのホームページを作成の準備作業も実施した。当該年度は4年計画の3年度目に当たり、前年度未実施の調査を行うとともに、3年度目に予定されていた調査を実施した。まず、前年度の追加調査を行った千葉県及び埼玉県の石鏃について、巡見調査を行い石鏃を実測した。その結果、千葉県では中期後葉に飯積原山型が、埼玉県では晩期前葉に後谷型が存在することを確認した。また、群馬県では中期後葉に吾妻川流域に林中原型が存在することを確認した。栃木県を中心とする早期前葉の堀込型(旧仮宿型)についても、千葉県まで分布が及んでいることが確認され、その概要は中間報告会で報告した。今年度調査対象の山梨県・長野県については、文献調査と巡見調査を実施した。その結果、鍬形鏃の帰属時期が早期押型文段階後葉に相当することを確認した。黒曜石原

産地遺跡の広原遺跡群出土の鍬形鏃については実測を行い、報告書へ掲載した。長野県の晩期中葉のいわゆる飛行機鏃については、黒曜石製の御社宮司型として型式設定できることを確認した。こうした巡見調査と併行して文献調査を行い、石鏃データベースを構築した。当プロジェクトのホームページを27年10月に開設した。ここでは石鏃データベースのほか、既発表の石鏃関係論文等を掲載して、研究成果を公開した。そして、28年1月には研究協力者に集まってもらい第2回中間検討会を開催し、これまでの研究活動報告を行い、成果と問題点について検討した。そして、今後の研究活動方針について再確認し、最終報告の取りまとめと執筆分担等を決定した。これと併行して黒曜石蛍光X線分析も実施し、東京都下布田遺跡(後・晩期)、和田百草遺跡(中期中葉)についての分析を行った。当プロジェクトの成果を、論文として執筆し、「茅野型石鏃の研究」、「安通型石鏃の研究」として雑誌で公表した。文献調査、巡見調査とも順調に実施しており、型式設定可能な石鏃型式も着実に増加し、研究成果も上がってきている。今年度調査対象の長野県では既知の草創期の長脚鏃(曽根型)、早期の鍬形鏃(樋沢型)について、帰属時期を絞り込むことができた。また、群馬県から長野県にかけて分布する林中原型を新たに確認することができた。前年度対象地域であった南関東地域では、千葉県の飯積原山型、埼玉県の後谷型、東京都の下布田型といった型式とその帰属時期について確認することができた。これまで構築作業を進めていたホームページも出来上がり、研究成果を公開することができるようになった。その後も石鏃データベースについては、逐次データを追加して充実をはかっている。また、石鏃の石材として用いられる黒曜石の蛍光X線分析は東京都の時期が絞り込める資料について実施して、時期ごとの原産地データの充実をはかった。群馬県の石鏃型式である安通型と茅野型については、論文を執筆して雑誌に発表した。また、飛行機鏃(下布田型・御社宮司型)については、下布田遺跡の報告書と下諏訪の黒曜石シンポジウム資料集に研究成果の一部を発表し、型式設定の準備を整えることができた。本年度は本科研事業の最終年度であるので、補足調査と成果をまとめるための作業を中心に活動を行った。研究の進捗状況は、当初予定していたとおりであり、一定の成果を得ることができた。これまでの調査が不十分な石鏃について、補足調査を行いった。また、研究代表者と研究協力者が分担して研究成果をとりまとめ、最終検討会を行った。そして、その結果により一部修正を行い、最終的な研究成果報告書を作成した。報告書は印刷製本して研究者・研究機関等へ配布するとともに、ホームページにおいて公開した。本研究においては、草創期から晩期に至るまでの石鏃型式についての研究を行った。特に早期と晩期には多くの石鏃型式を設定することができた。最終報告書において型式設定あるいはその前段階まで到達した石鏃型式は以下のとおりである。草創期中葉の石鏃出現期の群馬地域の内湾三角形鏃、草創期中葉の長野地域を中心とする曽根型長脚鏃、早期前葉の東関東地域の堀込型、早期中葉の群馬地域の柳久保型、中期中葉の千葉地域の(仮称)東長山野型、中期末後期前葉の東関東地域の桧の木型、晩期前葉の群馬地域の安通型・茅野型、晩期前葉の埼玉南部を中心とする後谷型、晩期中葉の西関東地域の下布田型、晩期中葉の甲信地域の御社宮司型といった型式である。本研究により、時空的な単位である石鏃型式が設定可能であり、広域編年を整備することができることを明らかにすることができた。また、石鏃型式が土器型式と同じ分布を示す場合と、土器型式とは異なる分布を示す場合があることも明らかにすることができた。
語学と文学の「接点」から「共有」への深化:18世紀に辿る小説の言語を媒介として

本研究は,平成17年度から平成19年度にわたる3年間に,18世紀から19世紀,さらには20世紀へと至るイギリス小説の展開を,語学と文学の専門家がそれぞれの観点から分析を試みたものである。専門を異にする研究者でも共同に研究ができると考え,かたや言語学に立脚し,かたや文芸批評の見方により,相互に歩み寄りながら読みの手探りをすることを目的に行ったものである。読みの「接点」の確認とこれに基づく対話から,その奥行きを「共有」へと深化させることは充分可能であると確認できたことは,この共同研究の成果の一つである。その端的な例は,私たちが平成18年度に取り組んだ「(試論)Emmaの一節の文体的分析」であった。18世紀の小説言語と19世紀以降,特にヴィクトリア朝の小説言語を結ぶ結節点をなすJane Austenのテキストには,英語の多様な表現技法が,18世紀の小説家を通じて,さらにはそれ以前の伝統に培われて生きていることが確認できた。彼女は,人間の見かけと実態の落差を眺めて楽しむコメディの精神を体現しているが,この感受性が比類なきアイロニーとユーモアを湛えた英語を磨きあげる武器となっている。彼女の英語の特徴であるぼかしは,豊かな陰影を宿すのに貢献している。ぼかしの技法は,語り手と登場人物の間を自在に移動する視点の微妙な移ろいと相まって,作家の真骨頂であるアイロニカルユーモアを醸し出す秘訣である。Austenの場合,技と,感受性ないしは想像力はそっと補いあっていることが見て取れる。そこに私たちは,言語学的アプローチと文学的アプローチの両方の見方が,作品言語の理解を深めるのに重要な意味あいをもつ可能性をみた。本研究でほの見えてきた隣接する専門領域の「接点」から「共有」への深化は,今後文学テキストのさらに多様な見方を掘り下げることによって,より着実に進展していくものと考える。平成17年度は、「語学と文学の「接点」から「共有」への深化:18世紀に辿る小説の言語を媒介として」を研究課題とする新規の科学研究費の交付を受けた初年度である。研究代表者の脇本は、18世紀の喜劇であるGoldsmithのShe Stoops to Conquer(1773)とSheridanのThe Rivals(1775)を資料に、主に「誓言(oath)」について、性別・階級など社会的要因から生じる言語の差を指摘しながら、論文の形にまとめていった。また、今回の研究課題を具体的に検討するための第一歩として、Emma(1815)の第二章冒頭部の一節を取り上げ、研究分担者の福永と共に、片や語学的観点から、片や文学的観点からの分析を行うことで、18世紀から19世紀への文学の橋渡しの役を担ったJane Austenの文体を吟味・考察した。尚、この論文の刊行は、来年度(平成18年度)初めの見込みである。同じ作家の限られたテキストを共通基盤として、その言語を英語学と文学の眼で比較考量してみてわかったことは、言語という生成発展している生き物をダイナミックに捉える文献学的な見方と作品世界に表現された価値の鑑賞は、不可分一体のものであり、お互いが相手の方法と見方を取り入れることにより、生きた言葉の流動性と奥行について感受性を磨きあうことができるということであった。異なるアプローチが相照らしあうことを、先に述べた二つの論文で確認できた。この成果を元に、今後18世紀から19世紀に至る英語の展開を手探りしていくつもりである。

平成18年度は、「語学と文学の「接点」から「共有」への深化:18世紀に辿る小説の言語を媒介として」を研究課題とする科学研究費の交付を受けた次年度である。研究代表者の脇本と研究分担者の福永は、上記の研究課題を具体的に検討するために、Emma(1815)の第二章冒頭部の一節を取り上げ、片や語学的観点から、片や文学的観点からの分析を行い、18世紀から19世紀への文学の橋渡しの役を担ったJane Austenの文体を吟味・考察した。また、脇本は、4月に広島大学で行われたコーパス学会のシンポジウムで口頭発表をし、それを「コーパスを利用した文学テクストの分析-Joseph Andrewsにおける発話の表出を中心として-」という論文の形にまとめた(2007年春に刊行の予定)。その他にも、18世紀の代表的な小説二作を取り上げ、主に語彙の分析を行っている。福永は、George Eliotの作品のテキストに、19世紀ヨーロッパの歴史的論争たる聖書批評が反映している相を人間観と語彙の両面に亘って検証した。これにより、科学と宗教の対話が文芸の世界にも浸透し、聖書の語彙が科学のイメージ・暗喩により新たな意味合いを帯びるに至ったことを論証した。平成19年度は,「語学と文学の「接点」から「共有」への深化:18世紀に辿る小説の言語を媒介として」を研究課題とする科学研究費の交付を受けた最終年度である。平成18年度には,脇本と福永は同一の文学テキストを英語文献学と文学の視点を用いて学際的な共同研究を行ったが,19年度には,脇本は18世紀の代表的作家であるSamuel Richarsonの作品における「悪態語」を中心に研究を行った。各作品に見られる特徴的な悪態語を明らかにすると共に,Oxford English DictionaryやWrightの方言辞典,Partridgeの俗語辞書を用い,それぞれの語句の意味変遷を,歴史的発達の過程から辿っていった。福永は,平成19年度には,この共同研究から得た成果を生かして,18世紀古典主義を代表するゴールドスミスのThe Vicar of Wakefield,19世紀後半を代表するジョージ・エリオットのMiddlemarch,20世紀初頭のモダニズムを代表するヴァージニア・ウルフの短編小説"The Mark on the Wall"の文体を分析した。これによって,田園イングランドのが都市化と産業化によって変容を迫られたこと,ロマンティシズムと科学的世界観がきびすを接して広がり,詩人,小説家,批評家の心の風景が一変したこと,さらに,ダーウィニズムの感化で地球的時間の視野で人間を捉えなおす見方が国民精神に浸透して,論争を巻き起こしたことをテキストの言語事実から跡付けた。
ソフトウェア無線用フィルタバンクアナログ―ディジタル信号処理デバイスの開発

本研究ではソフトウェア無線用低IF方式受信機において,DCオフセット並びにイメージ周波数信号による希望信号への干渉を抑圧するため,複素係数フィルタバンクを用いる受信方式を提案した.提案する方式はA/D変換器の変換速度及び解像度に対する要求を緩和し,広帯域通信システムに対応する.本年度は複素フィルタバンクのアナログ部の係数誤差を適応信号処理によって補償する方式を提案し解析した.解析の結果以下のことが判明した.-A/D変換器の解像度が6ビット以上あればイメージ周波数信号による干渉を提案方式により除去することが可能である.-提案方式は必要とする信号対干渉比を約10dB改善する.理論検討と同時に実験により提案方式の有効性を確認した.実験においては3次の複素アナログフィルタを用いた.無線LANを想定しOFDM信号を送受信した.OFDM信号は干渉信号と希望信号を同時に送信し,また隣接する2チャンネルに配置した.干渉信号電力と希望信号電力の比を変えながら提案するアルゴリズムの特性を評価した.干渉信号に対応したフィルタの出力と,希望信号に対応したフィルタの出力の相関をとることにより,Weiner解を求め,Weinerフィルタを構成した.このWeinerフィルタを用いて希望信号に干渉する信号をキャンセルした.このような信号処理をA/D変換器およびFPGAボードを用いて構成した.そして提案方式が有効に機能することを確認した.以上のようにシミュレーションおよび実験によりA/D変換器の解像度への要求を約1/10に削減することができることを示した.本研究ではソフトウェア無線用低IF方式受信機において,DCオフセット並びにイメージ周波数信号を抑圧するため,複素係数フィルタバンクを用いる受信方式を提案した.提案する方式はA/D変換器の変換速度及び解像度に対する要求を緩和し,広帯域通信システムに対応する.本研究では複素係数フィルタバンクのアナログ部の係数誤差をディジタル信号処理によって補償する方式の特性を理論的に解析した.解析の結果以下のことが判明した.-アナログフィルタの係数誤差をディジタル側で推定し,補償しなければ通信品質は改善しない.-ディジタル側の推定がほぼ完全であれば干渉電力対信号電力が60dBあっても干渉信号を抑圧することができる.理論検討と同時に実験により提案方式の有効性を確認した.実験においては1次のローパスフィルタ(LPF)とハイパスフィルタ(HPF)をアナログ回路で構成し,DCオフセット成分を入力した.そしてLPF側の出力信号からHPF側の出力信号を推定し,実際の信号と比較した.これにより提案方式の干渉信号再生精度を検討した.検討の結果-アナログ連続フィルタをアナログ離散フィルタとして近似することが可能である.-提案するアナログーディジタル信号処理アルゴリズムはA/D変換部の必要解像度を約5ビット引き下げることができる.ことが判明した.今後リアルタイムに処理を行うシステムを構築する予定である.本研究ではソフトウェア無線用低IF方式受信機において,DCオフセット並びにイメージ周波数信号による希望信号への干渉を抑圧するため,複素係数フィルタバンクを用いる受信方式を提案した.提案する方式はA/D変換器の変換速度及び解像度に対する要求を緩和し,広帯域通信システムに対応する.本年度は複素フィルタバンクのアナログ部の係数誤差を適応信号処理によって補償する方式を提案し解析した.解析の結果以下のことが判明した.-A/D変換器の解像度が6ビット以上あればイメージ周波数信号による干渉を提案方式により除去することが可能である.-提案方式は必要とする信号対干渉比を約10dB改善する.理論検討と同時に実験により提案方式の有効性を確認した.実験においては3次の複素アナログフィルタを用いた.無線LANを想定しOFDM信号を送受信した.OFDM信号は干渉信号と希望信号を同時に送信し,また隣接する2チャンネルに配置した.干渉信号電力と希望信号電力の比を変えながら提案するアルゴリズムの特性を評価した.干渉信号に対応したフィルタの出力と,希望信号に対応したフィルタの出力の相関をとることにより,Weiner解を求め,Weinerフィルタを構成した.このWeinerフィルタを用いて希望信号に干渉する信号をキャンセルした.このような信号処理をA/D変換器およびFPGAボードを用いて構成した.そして提案方式が有効に機能することを確認した.以上のようにシミュレーションおよび実験によりA/D変換器の解像度への要求を約1/10に削減することができることを示した.
分子スペクトル線観測に基づく銀河系中心巨大星団の探査

銀河系中心の銀経-1.2度領域には高温・高密度なガスが集中しており、それらが5つの球殼状に分布していることがわかっている。これら球殼構造は各々膨張しており、その膨張のエネルギーは数回から十数回にものぼる超新星爆発によってもたらされるエネルギーに匹敵する。これだけの超新星爆発を発生させるにはそれだけの数の重い星が必要であり、そこに銀河系内で最も重い星団が必要である。しかしながら、現状ではそのような星団は検出されておらず、この天体の形成過程は分かっていない。本研究ではこの銀経-1.2度領域についてより詳細な観測研究を行い、その形成過程を明らかにすることを目指す。
ダイレクトコンバージョンOFDM受信機におけるキャリア同期ずれ補正に関する研究

低コストのダイレクトコンバージョン受信機(DCR)では、RF帯信号から直接ベースバンド信号に変換することにより、I/Q不均衡問題が発生する。本研究は、DCR方式OFDMとMIMO-OFDM受信機実現に大きな障害となっていたCFOとI/Q不均衡問題を研究対象とし、実用化可能なデジタル信号処理の補正手法を開発しました。さらに、現存のOFDM通信システム規格でのパイロット信号に対処し得る補正法も提案しました。近年、ダイレクトコンバージョン受信機(DCR)は、低コストの通信端末機製造において非常に注目を受けている。しかしながら、DCRではRF帯信号から直接ベースバンド信号に変換することにより、直流オフセット(DCO)およびI/Q不均衡問題が新たに発生する。本研究は、低コストDCR方式OFDMとMIMO集OFDM受信機実現に大きな障害となっていたCFOとI/Q不均衡問題を研究対象とし、実用化可能なデジタル信号処理の補正手法を開発する。平成20年度には、OFDMシステムにおけるCFOとI/Q不均衡に対処できる最適なパイロット信号およびこのパイロットに基づいた補正法を提案しました。また、現存のOFDM通信システム規格でのパイロット信号に対処し得る補正法も提案しました。従来法は、CFO推定は非線形最小2乗問題であり、解析解は存在しないため、計算は非常に複雑である。また、I/Q不均衡の補正係数はCFO推定値に依存し、正確な推定を得るため、タイミング同期は不可欠である。これらの問題点の主原因は、CFO推定とI/Q不均衡補正を別問題として解決している。本研究では、両者を同一問題として捉え、CFOとI/Q不均衡補正係数を同時に推定できるアルゴリズムを提案しました。提案手法は,パイロットの周期性を利用し、線形最小2乗アルゴリズムを解くことにより、CFOおよびI/Q不均衡補正係数をすべて解析的に求めるものであり、計算負荷が大幅に軽減できる特徴を有する。また、パイロットは周期性を持っており、タイミング同期ずれがあっても周期性の変わりがないため、提案方法はタイミング同期誤差に対して頑丈であることも確認できました。さらに、周期性パイロットとチャネル推定パイロットを併用することで、802.11aWLAN標準に対応した補正法の開発も成功しました。平成21年度には、CFOとI/Q不均衡が存在するときのMIMO-OFDM受信信号のべースバンド数学表現式を導きました。計算上のメリットを有する周期性パイロット信号を提案しました。時不変MIMOチャネルを通り、共通のCFOと受信アンテナ毎に違うI/Q不均衡の影響を受けたパイロット信号を分析する。分析の結果により、二つ補正構造とそれぞれの補正法を検討しました。一つは受信アンテナ毎に補正を行う、補正した信号を従来通り合成する方法である。もう一つは、受信アンテナ毎に周波数選択性I/Q不均衡のみを補正し、残りCFOと周波数非選択性I/Q不均衡を含む信号を、合成過程にて補正する方法である。前年度の研究成果を踏まえ、この二つアプローチに対して、理想的な補正と合成が行われたときの、CFO、I/Q不均衡補正係数、更には合成係数が満たすべき関係式を導き出し、補正パラメータを求めました。一方、時変MIMOチャネルの場合、CFOとI/Q不均衡が存在するときのMIMO-OFDM受信信号のべースバンド数学表現式も導きました。そこで、CFOを等価チャネルの状態方程式に吸収し、カルマンファイタを用いてチャネルの変化をトラッキングする方法を提案しました。提案法は、CFO、I/Q不均衡の補正をチャネル等化の一部とみなす、さらに、サイクリックプレフィックスの位相回転を起因としたキャリア間干渉を判定帰還フィルタリングにて除去しました。サブキャリアごとでの補正ができ、計算量が非常に少ない時変MIMO-OFDMシステムのCFOとIQ不均衡補正法を開発しました。
シロイヌナズナＳＣＦＣＦＫ１ユビキチンリガーゼが細胞成長に果たす役割の解明

ユビキチン化によるタンパクの分解制御(ubiquitin proteosome sysmtem,. UPS)は真核生物の翻訳後修飾のひとつとして非常に重要である。UPSのひとつであるCOP9は植物においては光応答、細胞周期を始めとする多様な過程を制御するが、その具体的なメカニズムは分かっていない。共同研究者のFranciosini博士らは先行研究からCOP9の下流で機能するF-boxタンパクCFK1がシロイヌナズナの胚軸の細胞成長を制御することを見いだしていた。CFK1はSCF複合体の一部としてSkp1, Cullinとともにユビキチンリガーゼとして機能することが分かっているため、本研究ではCFK1によってユビキチン化される基質タンパク質の同定を試み、COP9-CFK1を軸としたシグナル経路が細胞成長を制御する分子機構の解明を目指した。またCFK1やそのホモログCFK2が葉や根などの他の器官においても同様の機能を果たすかどうかを検証した。CFK1遺伝子とCFK2遺伝子はゲノム上で隣接しているために、かけあわせによる二重変異体の作成はうまくいかなかったが、CRISPR/Cas9を用いたゲノム編集により複数のcfk1 cfk2二重変異体を作出することができた。予想に反して、このcfk1 cfk2二重変異体は野生型に較べて成長がよく、胚軸、根、子葉、種子等、これまでに調べたすべての器官の成長が促進されていた。またこの器官成長の促進はひとつひとつの細胞の成長促進によることも分かった。マススペクトロメトリを用いた解析からはCFK1に結合する基質タンパク質の候補を同定することに成功し、その機能解析に着手することができた。28年度が最終年度であるため、記入しない。ユビキチン化によるタンパクの分解制御(ubiquitin proteosome sysmtem, UPS)は真核生物の翻訳後修飾のひとつとして非常に重要である。私達はこれまでにCOP9の下流で機能するF-boxタンパク(CFK1)がシロイヌナズナの胚軸の細胞成長を制御することを見いだし、CFK1がSCF複合体の一部としてSkp1, Cullinとともにユビキチンリガーゼとして機能することを示した。本研究では、CFK1によってユビキチン化される基質タンパク質の同定を試み、COP9-CFK1を軸としたシグナル経路が細胞成長を制御する分子機構を明らかにすることを目的としている。さらにCFK1が植物の普遍的な細胞成長を制御するかどうかを明らかにするため、葉や根などの他の器官においても同様の機能を果たすかどうかを検証する。今年度はこれまでに既に作成しているCFKのシロイヌナズナ過剰発現体、機能欠損体の解析を行った。特にこれらの変異体において、細胞成長との関連が指摘されている核内倍加周期に異常があるかどうかをフローサイトメトリ、顕微蛍光測光等によって検証した。これまでのところ、CFK1変異体の胚軸の核相には野生型と比べて明確な差が検出されておらず、CFK1が核相に依存せず細胞成長を制御するという仮説を立てている。またCFK1と98%のアミノ酸相同性を示すCFK2の変異体、及びcfk1 cfk22重変異体の作成を進めた。さらに植物体内でCFK1, CFK2が発現する部位を明らかにするため、それぞれの遺伝子のレポーターライン(pCFK:CFK-YFP)の解析を進めた。今年度はCFK1と98%のアミノ酸相同性を示すCFK2の変異体、及びcfk1 cfk22重変異体の作成を進めた。この二つの遺伝子はゲノム上で近傍にあるため、CRISPR-Cas9によって単独、2重変異体の作成を行い、これまでに5系統以上の2重変異体の作出に成功した。現在T2世代の植物を用いて両遺伝子の発現量を確認するとともに、表現型観察を進めている。cfk1単一変異体の表現型が弱いため、これまで胚軸以外の表現型を解析するのが難しかったが、安定した2重変異体の作出に成功し、植物体全体の表現型観察が可能になったため。またCFK1, CFK2の発現が環境条件によって変化することも見いだすことができた。

UPSのひとつであるCOP9は植物においては光応答、細胞周期を始めとする多様な過程を制御するが、その具体的なメカニズムは分かっていない。共同研究者のFranciosini博士らは先行研究からCOP9の下流で機能するF-boxタンパクCFK1がシロイヌナズナの胚軸の細胞成長を制御することを見いだしていた。CFK1はSCF複合体の一部としてSkp1, Cullinとともにユビキチンリガーゼとして機能することが分かっているため、本研究ではCFK1によってユビキチン化される基質タンパク質の同定を試み、COP9-CFK1を軸としたシグナル経路が細胞成長を制御する分子機構の解明を目指した。またCFK1やそのホモログCFK2が葉や根などの他の器官においても同様の機能を果たすかどうかを検証した。CFK1遺伝子とCFK2遺伝子はゲノム上で隣接しているために、かけあわせによる二重変異体の作成はうまくいかなかったが、CRISPR/Cas9を用いたゲノム編集により複数のcfk1 cfk2二重変異体を作出することができた。予想に反して、このcfk1 cfk2二重変異体は野生型に較べて成長がよく、胚軸、根、子葉、種子等、これまでに調べたすべての器官の成長が促進されていた。またこの器官成長の促進はひとつひとつの細胞の成長促進によることも分かった。マススペクトロメトリを用いた解析からはCFK1に結合する基質タンパク質の候補を同定することに成功し、その機能解析に着手することができた。今年度の解析からCFK1, CFK2が光受容シグナリングや概日リズム制御に関与することが見え始めており、基質タンパク質の絞りこみを進める事ができているため。現在進めている光や温度等の環境ストレス下での表現型解析をまとめ、10月までに論文投稿する。28年度が最終年度であるため、記入しない。平成27年度にはCFK1、CFK2によってユビキチン化を受ける基質タンパク質の同定を進める。