hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
オーエスキー病ウイルスの神経病原性と再活性化の分子機構-発生工学手法による解析-

1.本研究は、オーエスキー病ウイルスの増殖に必須の転写調節因子である前初期蛋白IE180がマウス個体に与える作用と神経病原性発現における役割を調べる目的で、IE180遺伝子を導入したトランスジェニック(Tg)マウスを作製した。確立した5系統のオーエスキー病ウイルスIE180発現Tgマウスの内、3系統のマウスにおいて、歩行中のよろめき、横転、全身の震えが観察され、対照マウスに比べ有意な運動協調性の低下が認められた。また、症状の認められたマウスの小脳は、対照マウスの小脳と比較し明らかに小さく、その病理組織学的解析においては、小脳の層構築が不規則で、一部分子層ならびに顆粒層の欠如が観察された。免疫組織化学的解析から、プルキンエ細胞の配列は不規則で、プルキンエ細胞から伸びる樹状突起の2次、3次突起の形成が極めて粗であった。また、プルキンエ細胞層から表層へ伸びるGFAP陽性線維が認められなかった。また、運動障害の認められない1系統のマウスに網膜形成異常が認められた。以上の結果から、IE180の発現が小脳および眼の形成に影響を与えることが示唆された。2.オーエスキー病ウイルス非存在化での潜伏感染関連転写産物プロモーター(LAP)の組織特異性を調べる目的で、LAPで駆動するレポーター遺伝子(CAT)導入トランスジェニックマウスを作製した。LAPからの転写をRT-PCRを用いて解析したの結果、三叉神経を含む12の組織すべてにおいてCAT mRNAが検出された。次にCAT発現量を比較するために各組織抽出液中のCAT量をCAT-ELISAを用いて測定した。その結果、三叉神経においてCATが最も強く発現していることが確認された。また、CAT mRNAの発現をin situ hybrizization法を用いて解析したところ、三叉神経節でCAT mRNAが発現していることが確認できた。再活性化を誘導する刺激(UV,免疫抑制剤)を、このトランスジェニックマウスに与えた時の、CAT発現量の変化をCAT-ELISAを用いて測定したが、再活性化誘導刺激によるCAT発現量の変化は認められなかった。以上のことから、LAPは、ウイルス蛋白非存在下でマウスの全身で遺伝子を発現させることができること、および三叉神経節では高い活性を示す可能性があることが示唆された。以上の結果から、IE180の発現が小脳の発達に影響を与えることが示唆された。2.オーエスキー病ウイルスは三叉神経節に潜伏感染し、潜伏感染期には、LATと呼ばれる潜伏感染関連転写産物だけが、潜伏部位である三叉神経節で検出される。本研究は、オーエスキー病ウイルス非存在化でのLATプロモーター(LAP)の組織特異性を調べる目的で、LAPで駆動するレポーター遺伝子(CAT)導入トランスジェニックマウスを作製した。CATの発現が確認された他の3系統のTgマウスにおいても、三叉神経でのCAT発現量は、大脳皮質、小脳、臭球、海馬に比べ23倍高い値を示した。以上のことから、LAPは、ウイルス蛋白非存在下でマウスの全身で遺伝子を発現させることができること、及び三叉神経では高い活性を示す可能性があることが示唆された。

また、運動障害の認められない1系統のマウスに網膜形成異常が認められた。以上の結果から、IE180の発現が小脳および眼の形成に影響を与えることが示唆された。2.オーエスキー病ウイルス非存在化での潜伏感染関連転写産物プロモーター(LAP)の組織特異性を調べる目的で、LAPで駆動するレポーター遺伝子(CAT)導入トランスジェニックマウスを作製した。LAPからの転写をRT-PCRを用いて解析したの結果、三叉神経を含む12の組織すべてにおいてCAT mRNAが検出された。次にCAT発現量を比較するために各組織抽出液中のCAT量をCAT-ELISAを用いて測定した。その結果、三叉神経においてCATが最も強く発現していることが確認された。また、CAT mRNAの発現をin situ hybrizization法を用いて解析したところ、三叉神経節でCAT mRNAが発現していることが確認できた。再活性化を誘導する刺激(UV,免疫抑制剤)を、このトランスジェニックマウスに与えた時の、CAT発現量の変化をCAT-ELISAを用いて測定したが、再活性化誘導刺激によるCAT発現量の変化は認められなかった。以上のことから、LAPは、ウイルス蛋白非存在下でマウスの全身で遺伝子を発現させることができること、および三叉神経節では高い活性を示す可能性があることが示唆された。
アポトーシス誘導による骨軟部腫瘍治療 : ICE遺伝子とチロジンキナーゼの観点より

Fas抗原は広範囲の細胞に分布している膜表面抗原であり、TNF-αスーパーファミリーに属し、アポトーシスを誘導する分子である。近年、腫瘍細胞でのFasを介したアポトーシスの研究が盛んである。また、ある種の細胞分化誘導療法の過程でもアポトーシス現象がみられている。本研究ではin vivo,in vitroの系で骨軟部腫瘍におけるFas抗原の存在を確認するとともにアポトーシスの作用機序について検討した。またビタミンD、Kによる骨肉腫分化誘導過程に伴うアポトーシス発現を検討した。さらに骨代謝に関係する諸薬剤を投与してアポトーシス誘導性を研究した。実験として骨肉腫細胞株14株と骨巨細胞腫4株、軟骨肉腫1株を用いた。外科切除標本の検索では、TUNEL法で陽性細胞を多数に認め、電顕ではapoptotic bodyを認め、DNA ladderを示した。腫瘍組織中では実際にアポトーシスの現象が起きていることが証明された。培養骨肉腫の9株と骨巨細胞腫4株でFas抗原が検出できた。可溶性Fasの存在も確認できた。蛋白合成阻害剤cyclohexamideの添加で形態、生化学的にアポトーシスを導入することができた。Cyclohexamideがアポトーシス関連細胞内情報伝達機構を促進している可能性があるのではないかと考えた。ビタミンの分化誘導はp21発現に伴って出現し、その後のp21消退に続いてアポトーシスが誘導された。ビスフォスフォネート製剤は破骨細胞腫にアポトーシスを誘導した。生体内で腫瘍はアポトーシスを起こしており、その機序を高める方法が実際にあることが証明できた。治療への応用性が期待できるものと考える。"Programmed cell death"はアポトーシスの過程によって起り、Fas抗原は細胞の膜表面に広く分布されている膜表面抗原でTNF-αのスパーファミリーに属し広い範囲の細胞にプログラム細胞死であるアポトーシスを誘導する事が出来る分子である。近年、ある種の腫瘍細胞でFas抗原を介したアポトーシスを誘導する事が出来るとの報告がありそのメカニズムが急速に解明されようとしている。そこで本研究では悪性骨軟部腫瘍に於てin vivo,in vitroのFas抗原の存在を確認しするとともにアポトーシスを誘導しその作用機序について検討した。腫瘍細胞にFas抗原が存在するならその増殖に於てFas抗原を介したアポトーシスに何らかの機序を介して抵抗していることが考えられる。本研究では悪性骨軟部腫瘍の増殖過程においてFas抗原を介したアポトーシスへの抵抗の機序を解明しその機序を除外することによってアポトーシスの誘導が可能になるとの推論に立脚している。実験として骨肉腫細胞株14株と骨巨細胞腫4株を用いた。また4例ずつの外科切除標本の検索では、TUNEL法で陽性細胞を多数に認め、電顕ではapoptotic bodyを認め、DNA ladderを示した。これらから腫瘍組織中では実際にアポトーシスの現象が起きていることが証明された。一方、培養骨肉腫の9株と骨巨細胞腫4株でFas抗原が検出できた。そこで抗Fas抗体を添加してアポトーシスの導入を図ったが、成功しなかった。可溶性Fasが存在することが判明したが、この量は微量であった。蛋白合成阻害剤cyclohexamideの添加で形態、生化学的にアポトーシスを導入できたことを証明できた。Cyclohexamideがアポトーシス関連細胞内情報伝達機構を促進している可能性があるのではないかと考えている。

本研究ではin vivo,in vitroの系で骨軟部腫瘍におけるFas抗原の存在を確認するとともにアポトーシスの作用機序について検討した。またビタミンD.Kによる骨肉腫分化誘導過程に伴うアポトーシス発現を検討した。さらに骨代謝に関係する諸薬剤を投与してアポトーシス誘導性を研究した。実験として骨肉腫細胞株14株と骨巨細胞腫4株、軟骨肉腫1株を用いた。外科切除標本の検索では、TUNEL法で陽性細胞を多数に認め、電顕ではapoptotic bodyを認め、DNA ladderを示した。腫瘍組織中では実際にアポトーシスの現象が起きていることが証明された。培養骨肉腫の9株と骨巨細胞腫4株でFas抗原が検出できた。可溶性Fasの存在も確認できた。蛋白合成阻害剤cyclohexamideの添加で形態、生化学的にアポトーシスを導入することができた。Cyclohexamideがアポトーシス関連細胞内情報伝達機構を促進している可能性があるのではないかと考えた。ビタミンの分化誘導はp21発現に伴って出現し、その後のp21消退に続いてアポトーシスが誘導された。ビスフォスフォネート製剤は破骨細胞腫にアポトーシスを誘導した。生体内で腫瘍はアポトーシスを起こしており、その機序を高める方法が実際にあることが証明できた。治療への応用性が期待できるものと考える。
世界（再）創造の欲望ー「長い１８世紀」における出版文化と蒐集のポリティクス

本研究は、「長い十八世紀」における出版文化・蒐集文化についての研究を、博物誌、政治史、国際関係や植民地支配(ポストコロニアル研究)などの観点から研究した。その結果、出版行為と蒐集行為は相互に密接に関連していることを確認した。具体的には、(1)アンソロジー、カタログ、雑誌などの形態の発展における蒐集文化の影響(2)「驚異の部屋」から博物館への変容、および残存する個人の蒐集行為における出版文化の影響、等である。また、それぞれの文化が同時代の(国際)政治・経済の文脈と結びついていることを明らかにした。平成25年度は、前年度の作業にひきつづき、理論的深化および資料蒐集を行った。46月は、平成24年度の成果に基づき、各自で理論的深化および資料に基づく発表の準備を行った。また、研究を進めるにあたり不足する資料についてピックアップをして、理論的基盤に関するメールでの議論と今後の方向性の再検討補足資料の選定を行った。次いで、811月では、メール等で、46月期の資料蒐集およびその整理の成果を相互に確認した。その際、今後の理論的検討の課題および夏期休暇中の資料蒐集の選択を確認した。海外旅費が割り当てられている分担研究者は、夏期休暇などを利用して、国外でデータ蒐集を行った。また、各自、蒐集した資料の整理を行った。その後、123月成果の確認のためのメール等で成果を確認し、とりわけ、理論面に関する意見交換をメール等を通じて行った。最終的に、本年度の成果をもとに、理論的課題および資料の不足等、次年度の課題を整理を行った。本研究は、「長い18世紀」における出版文化と蒐集文化が交錯する状況を、学際的視座から考察することを目的としている。この時期、出版文化の隆盛にともない、国内外を問わず、あらゆる情報を渉猟・蒐集し、書籍の形で世界を再創造しようとする欲望が顕在化したが、それは世界全体の再創造の場合もあれば、限定された分野での世界再創造、あるいは、新世界の創造の場合もあった。本研究では、この二つの文化の交わりを考察する。H24年度は、以下の3点から研究を実施した。1.本研究に関する理論的整備と資料蒐集計画:各研究者がこの出版文化と蒐集文化について理論的検討を開始し、必要な資料についての整理を開始した。具体的には、17世紀の文学とその周辺に関する出版文化(詩の出版、アンソロジーなど)、文学以外の蒐集文化等(キャビネット・オブ・キュリオシティなど)について、それぞれの接点を考察している。2.1.の成果確認の研究会の開催,資料蒐集およびその整理:今年度は主にメールでの情報交換によって行い、問題意識の共通化などを図り、出版という形の蒐集文化、蒐集というかたちの出版文化に関して、一定の共通理解に達した(共通資料の収集の面では、必要なものが多岐にわたるため、当初計画より遅れている)。3.成果の確認のための研究会の開催、次年度の課題確認:3月に研究会を開催し、各自の発表と質疑応答を行い、理論的基盤の整理および各話題の共通点などについての認識を共有した。外部講師の招聘にいたらなかった点が若干計画より遅れているが、しかしながら、その点も踏まえ、H25年度の課題等について、整理を行った。本年度は研究の最終年度にあたり、これまでの研究成果(出版文化と蒐集文化が交錯する状況の学際的視座から考察およびその理論的基盤の整序)をもとに以下の作業を行った。各研究者の作業により、文学テクストに留まらず、政治、宗教、経済、美術、歴史、法律などの学際的な観点から、幅広い範囲のテクストの検討を行い、二つの文化が交錯する状況を探り、カタログ出版、書籍というメディア、百科事典、旅行記などの分野においても、新たな知見を得ることができた。また、長い18世紀という期間において、出版という文化の進展にともなう蒐集文化の受容とそれに伴う変容についての検討も行った。具体的には、日記(文学)の検討による蒐集文化とその気質の形成・変化、国外からのさまざまな商品の流入とそれに対する文学テクストの受容(肯定的・否定的評価)、18世紀のジェンダーの問題の前景化と印刷文化の関係性(印刷物としてのジェンダーの表面化)などである。定期的に集まっての研究会を実施することはできなかったが、学会等の場、および、メール等を利用することで、それぞれの具体的な研究成果についての報告を随時することで、この分野での新たな可能性についての意見交換等を行い、次の発展的な研究テーマの設定(長い18世紀における出版文化と蒐集文化の遭遇とその相乗効果に関する学際的研究)を行うことができた。また、研究の過程での資料整理などで大学院生に対する研究方法の教育なども同時に行った。英文学昨年度は日程の調整がつかず、研究会の開催ができなかった。

そのため、相互の意見交換が十分だとはいえないため、やや遅れていると判断した。また、新たな資料の購入についても、若干、遅れている。しかし、各自の研究については、それぞれ予定通り進んでいる。上記のように、計画全体としては、各研究者の研究の進展および研究会開催による議論などを経て、「長い18世紀」における出版文化と蒐集文化が交錯する状況を、学際的視座から考察するという目的を達成できている。遅れているのは、多岐に亘る資料について、限られた予算範囲での選定作業と購入、実際の配架という点と、外部講師招聘による、よりいっそうの学際的視座からの研究の深化であるが、来年度にそれを補う計画を立てており、おおむね順調に進展していると判断した。本年度は、最終年度にあたり、本研究のまとめのための整理および発表準備を行う。まず、各自で理論的深化および各自の研究の予備総括を行いつつ、補足すべき資料等の選定を行う。また、これまで蒐集した資料のデータベース化などの整頓を行う。次いで、8月11月に、研究会を開催して、昨年度の成果と最終的な総括のための意見交換を行う。その後、データベースについても相互に意見を交換する。最終的には、12月3月本研究のまとめの研究会の開催、今後の研究の展開の協議を行う。そのために、総括を行って議論をしつつ、外部研究者等の意見を聴取し、研究の成果およびデータベースの公開等のための作業を開始する。H25年度については、具体的には、以下の3点から行う予定である。1.理論的深化および資料蒐集:(1)H24年度の成果に基づき、各自で理論的深化および資料に基づく発表の準備(2)研究を進めるにあたり不足する資料についてピックアップ(3)理論的基盤に関するメールでの議論と今後の方向性の再検討補足資料の選定(4)出版文化・蒐集文化に関連する書籍の配置2.上記の成果確認の研究会の開催、資料蒐集およびその整理(1)研究会の開催および討議(2)研究会で、今後の理論的検討の課題および夏期休暇中の資料蒐集の選択を確認(3)夏期休暇などを利用して、国内外で電子資料等のデータ蒐集(4)大学院生等を活用し、蒐集した資料の整理を行い、データの共有化3.成果の確認のための研究会の開催、次年度の課題確認(1)研究目的に関する研究会などでの発表の準備を行う(2)理論面に関する意見交換をメール等を通じて行う(3)(1)の成果について、研究会を開催(外部講師も招聘し、意見を聴取)(4)研究会の議論に基づき、理論的課題および資料の不足等、次年度の課題を整理H26年は以上の成果に基づいた予備総括および研究会の開催および国内外での成果発表を行う。昨年度は研究会を開催予定であったが、各分担者が多忙のため開催できなかったため、次年度使用額が生じた。また、新規資料についても、必要なものの選定が決まらず、購入ができなかったため、次年度使用額が生じた。本年度については、早い時期に、昨年開催できなった研究会を開催し、その際、新規資料についても確認も行い、購入を行う予定である。主な使用計画は、資料の購入60万円(主に研究拠点である東北学院大学に配架)、国内外での資料収集(旅費)60万円、研究会旅費20万円(年に2回程度開催)、研究補助、謝礼等20万円(資料の整理等)である。
共生細菌ボルバキアによる性染色体の伝達阻害・機能補完・非宿主の発生阻害の機構解明

メスヘテロ型の生物において細胞質因子は、性染色体(W染色体)と利害を共にしていることから密接な相互作用が予想される。本研究課題は、節足動物の細胞内共生細菌であるボルバキアが、宿主キタキチョウの性染色体の伝達や機能に与える影響について、その分子メカニズムの解明を目指すものである。本研究の遂行により、細胞内共生細菌が真核生物の生殖システムに対して、どこまで深く作用しているのかについての具体的な新規知見が得られるとともに、チョウ目昆虫全体の性決定に対する包括的理解が期待できる。また、この知見と理解を基盤として、ボルバキアによる生殖制御を介した新たな害虫管理技術確立への発展が期待できる。
ナノディグリー旋光計の開発と旋光分析への応用

光ヘテロダイン法を用いた旋光計の開発及び計測感度の理論的な考察を行った。従来の旋光計は、牛乳などのような光学的多重散乱体の旋光度を測定する事が出来なかった。しかし我々の開発した光ヘテロダイン法を用いた干渉計測による旋光度の計測は、多重散乱体中を直進した弾道光のみを選択的に検出し、結果として、多重散乱体溶液の旋光度を測定することが出来る。本研究では、旋光度計測における感度についても研究した。従来の光強度を検出する旋光計は、信号光強度が弱い場合(200mW以下)、光検出器の熱雑音が検出限界を決める大きな要因になる。しかしながら、ヘテロダイン法を用いた電場計測では信号光強度の強弱にかかわらず常に量子限界感度が得られる事が判った。更に、局部発振光の振幅雑音を抑圧するため、差動検出法を導入し、理論限界感度に近い値を得た。したがって、我々の開発した旋光計は、光の強度が200mW以下の場合最も高感度な旋光計である。更に、測定計の安定性を向上させるため、半導体レーザーの周波数安定化のためのレーザー周波数変調法の新しい方法を開発した。我々は、圧電素子により振動させた鏡からの反射光が周波数変調されていることに注目しや。超音波加湿器に用いられていた圧電素子を用い、607kHzで周波数変調を行った。理論的な解析を行った結果、従来からあるどの様な周波数変調法よりも残留振幅変調成分が小さい事が判った。反射光を用いた旋光計測への発展性を考え、原子気体からの反射光の動的な振る舞いを理論的に解明した。
柔軟付属物をもつ人工衛星のロバスト姿勢制御に関する研究

太陽電池パネルのような柔軟体をもつ人工衛星モデルに対して、ロバスト制御手法(H∞制御、LTR法、周波数依存評価関数を用いるLQR法)を用いて制御系を設計し、その特徴や制御性能を計算機シミュレーションと実験により調べた。研究は次の手順で行った。1.有限要素法により、実験に用いる人工衛星モデルのシステムパラメータを同定した。2.同定結果をもとに姿勢制御系を設計し、その特徴や制御効果について調べた。特にH∞制御については、設計されたコントローラが過度に保守的になりやすいという問題点に注目し、ロバスト安定性を保ちしかも制御効果が高いコントローラの設計法を提案した。その結果の一部は、Asia-Pacific Vibration Conf.93および計測自動制御学会の講演会において発表した。3.ディジタルコンピュータを用いてロバスト姿勢制御系を構成し、実験により制御効果を確認した。実験では、実際の大型人工衛星に採用されている姿勢制御方式と同じように、リアクションホイールによるゼロモーメンタム方式の姿勢制御系を構成した。この時、リアクションホイール駆動用モータの動特性と姿勢制御系との連成についても検討し、ロバスト制御手法を大型人工衛星の姿勢制御系の設計に適用する場合には、より一層のコントローラの低次元化が要求されることが要求されることがわかった。
カチオン-アニオン会合体の関与するポリタングステン酸イオンの生成初期過程

本研究はポリ酸イオン生成およびその結晶成長に与える対カチオンの影響を解明することを目的とし、主にその単結晶X線構造解析を通して対カチオンとポリ酸イオンとの相互作用を解明するものである。本年度の研究ではまず、ポリ酸イオンとして過酸化物配位子を持つポリタングステン酸およびモリブデン酸アニオン、対カチオンとしてテトラブチルアンモニウムカチオンを選び、それらの間の相互作用を単結晶X線構造解析により追従した。その結果、結晶中ではテトラブチルアンモニウムカチオンはカチオン同士でカラム構造を形成し、一方過酸化ポリ酸イオンもアニオン同士でカムラ構造を形成し、一見カチオン-アニオン相互作用は存在しないかのように見える。しかし、結晶中での水素結合の様式を詳細に検討した結果、テトラブチルアンモニウムカチオンの窒素原子とポリ酸の架橋酸素原子のとあいだに多くの水素結合が見られ、それがこの結晶中でのカラム構造を安定化させていることが明らかとなった。この結果は日本化学会欧文誌に投稿予定である。次に対カチオンを3価の希土類カチオンにかえ、ポリ酸イオンとの相互作用を検討した。まず、水溶液系における3価のサマリウムイオンとモリブデン酸との複合体を単結晶X線構造解析した結果、モリブデン酸の8量体がサマリウムカチオンによって架橋され、一次元の無限鎖を形成していることが明らかとなった。この結果はActa Crystallographica誌に発表済みである。さらに、有機溶媒系における3価のランタンとモリブデン酸との複合体の解析の結果、ランタン1原子あたりモリブデンの8量体が2つ会合したものと、逆にモリブデンの8量体1つに対しランタンが2原子会合した2種類の錯体が存在することが明らかとなった。この結果は本年8月に米国シアトルで開催される国際結晶学会において報告する予定である。
ファインセラミックスの研削温度測定

ファインセラミックスをダイヤモンド砥石で研削加工するとき,研削点では1000°Cを越える高温になると考えられている。ところが、セラミックスは絶縁体であるため、熱電対を用いる方法では測定できない。本研究は著者がこれまでに研究開発した光ファイバを用いた赤外線輻射温度測定法によって研削時のセラミックス内の温度分布及び研削点における砥粒切れ刃温度を測定することを目的として行なわれた。得られた成果をまとめると次のようになる。InAs、InSbなど5種類の光電変換素子を用いて温度計を製作し、それぞれの温度計の持つ特長を調べた。また、石英光ファイバのほかにフッ化物光ファイバのような新しい材質でできた光ファイバを用いて改善を試み、温度計の測定下限温度を約250°C下げることができた。また、赤外線を受ける光ファイバの受光面の研摩方法についても詳細に検討を加えている。これらの研究結果をもとに温度計に改良を加え、ファインセラミックスの研削温度を測定することに成功した。Si_3N_4を研削しているが、研削点におけるダイヤモンド砥粒の切れ刃温度は1200°C以上の高温に達していた。Si_3N_4内部の温度分布も測定しようとしたが、材料の熱伝導率が悪いため、表面近傍における温度勾配が急となり、表面下40μmで約500°Cに達していることが確認されるにとどまった。ファインセラミックスは高硬度であるため加工が極めて困難であり、ダイヤモンド砥石を用いて研削加工を行うのが唯一の加工法である。ところが、加工中、研削点では1000°Cを越える高温になると推定され、ダイヤモンド砥粒の寿命を縮めるだけでなく、加工材料中に大きな熱応力を発生しクラックを生じる原因になる。ところが、セラミックスは絶縁体であるためこれまでの熱電対法では研削温度の測定ができず、この方面の研究は全く行われていない。本研究は著者がこれまでに研究開発した光ファイバを用いた赤外線輻射温度測定法によって、研削時のセラミックス内の温度分布を測定し、熱応力の影響を定量的に解析することにより、セラミックス材料の強度に対する信頼性を高めることを目的として行われた。本年度の研究は研削温度を測定するための装置を製作することに主眼を置いて行った。その結果、低温度測定が可能な光ファイバを用いた新しい赤外線輻射温度計を製作することに成功した。特に、温度計の周波数特性には十分な注意を払い、かつ感度を高める工夫をしている。また、石英に代わる新しいフッ化物光ファイバを入手することができるようになり、そのファイバの伝送損失や受光角を調べて改良を加え、本研究の目的に使用できるファイバを準備できるところまでに到達した。一方、加工材料であるファインセラミックスにはファイバを挿入するための小穴をあける必要があるが、焼結前にφ0.6mmの穴をあけることでこの問題を解決しており、すでにその試料を入手している。そこで来年度は、本年度用意した温度計,光ファイバ,セラミックス材料を用いて研削温度を測定することにしている。また、熱的モデルを考案し、加工物内の温度分布を尊出すると共に、熱応力についても解析し、加工物内のクラック発生についても検討する。ファインセラミックスをダイヤモンド砥石で加工するとき,研削点では, 1000°Cを越える高温に達すると推定される.この温度はダイヤモンド砥粒の寿命を縮めるだけでなく,加工材料中に大きな熱応力を発生し,クラックを生じる原因にもなる.クラックは材料の強度を著しく弱め,その信頼性を低下させてしまう.ところが,セラミックスは絶縁体であるためこれまでの熱電対法では研削温度が測定できず,この方面の研究は全くといってよいほど行われていない.

本研究は著者がこれまでに研究開発した"光ファイバを用いた赤外線輻射温度測定計"によって,研削時のセラミックス内の温度分布を測定し,熱応力の影響を定量的に解析することによりセラミックス材料の強度に対する信頼性を高めることを目的として行っている.本年度は,前年度に製作した"フッ化物光ファイバを用いた赤外線輻射温度計"の性能をチェックすることから始め, 150°C以上の温度を精度よく測定できることを確認した.しかし,フッ化物光ファイバの強度は石英ファイバに比べて著しく低く,このため平面研削中の加工物の温度を測定しようとするとき破損してしまう恐れがあり,現在この点の改良を行っている.なお,石英ファイバを用いてSi3N4中の研削温度を測定してみたが,表面下5μmで500600°Cに達している結果が得られた.一方,解析に関しては,これまでの測定結果をもとに熱モデルを考案し,加工物内の温度分布,及びそのとき発生する熱応力などについて検討中である.来年度は,フッ化物光ファイバを用いてセラミックス内の研削温度分布を測定し,この結果をこれまで検討してきた熱モデルに適用することにより,セラミックス内に発生する熱応力を求めると共に,クラックの発生,その生長などについても検討し,本研究の総まとめを行うことにしている.ファインセラミックスは高硬度であるため加工が極めて困難であり、ダイヤモンド砥石を用いて研削加工を行うのが唯一の加工法である。ところが、セラミックスは絶縁体であるため、これまで金属加工において用いられてきた熱電対法では研削温度の測定ができず、この温度を測定した例はない、本研究は著者がこれまで研究開発してきた光フィイバを用いた赤外線輻射温度計によって、研削温度を測定する目的で行ってきた。本年度は本研究の最後の年であり、これまでに得られた実験結果、解析結果を整理し、不足しているデータを補いながら検討を加えた。得られた結果をまとめると次のようになる。SiCはSi_3N_4に比べて熱伝導率が大きく、加工物内の温度分布を測定しやすいと考えていた。しかし、研削抵抗が小さいため、研削点ではそれほど高温にならず、結果的には加工物内の温度を測定できなかった。これに対し、Si_3N_4は研削抵抗が大きく、研削温度が高温になるため、加工物表面層の温度を測定することができた。熱伝導率が悪いため、温度勾配が急となり、研削表面下40μmで約500°Cであった。一方、研削点におけるダイヤモンド砥粒の切れ刃温度は1200°C以上の高温に達しており、加工表面の切くず生成領域ではこれに近い温度に達しているものと推定できる。
骨粗鬆症に伴う大腿骨頸部骨折を予防するための診断システムの開発

1.骨粗鬆化速度の解析及び動物を使っての実測骨粗鬆化速度に最も強く影響を与えるのは骨梁構造である。任意断面における骨体積密度変化は、A(t)=A(o)exp(Ract・Ktr:t)で表わせた。ただし、A(o)は時間t=0における密度,Ractは破骨造骨細胞の相対的活性差、Ktrは骨梁構造特性を示すパラメータで、骨梁単位断面を占める骨周囲長の比である。家免大腿骨の両パラメータを計測したところ、Ractは32週命において負に転じ、Ktrは骨頭中心部のPlateは状構造が最も小さく、次に層板状,綱目状骨梁の順に大きくなる。従って、体積密度の減少速度は、Ktrの大きい順に大きくなる。大腿骨頸部骨折を起こしたヒト大腿骨摘出骨頭および、屍体骨(骨粗鬆症が見られない)各5例のKtr及び体積密度を画像解析によって計測したところ、Ktrは家象よりも更に変動が大きく、また、体積密度の減少率、(正常例の平均値-骨粗鬆症例の平均値)/正常例平均値,もそれに伴って変動した。上記の解析結果の妥当性を確かめることが出来たが、本解析は計算を簡略化するためにRact,Ktrは定数としている。従ってこれらの値を用いるならば、近未来の予測しか出来ず、その精度には限界があることは否定できない。Ktrも本来は骨梁体積密度そのものに依存するためにその解析解は非常に複雑にならざるを得ない実用上は、数年ごとに各パラメータを測定しながら補正し、骨折発生に至るまでの期間を予測することで充分と思われる。2.骨折時期の予測に関する基礎的研究ラット頸骨にくり返し力学刺激を加え、Micro-damgeの蓄積量と骨折予寿命の関係を実測した。Turn-overの遅い老命化ラットではその蓄積速度が早く、また修復に要する時間も遅くなる傾向が伺えた。また過度の力学刺激は骨のリモデリング活性を高めることも確かめられた。今後、海綿骨の骨梁に加えられる負荷と同活性能の関係を明らかにする必要がある。
細胞内マグネシウム恒常性維持におけるTRPM7チャネルの役割

TRPM7チャネルは哺乳類の全身の細胞に遍在し、Mgイオンの透過性が比較的高く、細胞内Mgイオン濃度の低下により活性化されることから、生理的なMgイオンチャネルの候補となっている。本研究では、生体内でTRPM7が細胞内Mgイオン濃度の調節にどのように関わっているかを検討した。ラット心筋細胞由来の培養細胞株であるH9c2細胞を用いて、RNA干渉法によりTRPM7の発現を抑制した。TRPM7のshRNA(small hairpin RNA)と共に導入の指標として蛍光蛋白質(GFP)遺伝子をリポフェクション法で細胞内へ導入した。48時間培養の結果、遺伝子導入効率は約50%、TRPM7遺伝子発現は非標的遺伝子のshRNAを組み込んだ細胞(コントロール)と比べて約40%に抑制されていた。遺伝子導入72時間後の細胞に蛍光Mg指示薬(mag-fura-2)を負荷し、細胞内遊離Mgイオン濃度を測定した。TRPM7遺伝子発現を抑制した細胞の細胞内Mgイオン濃度は維持されていた。次に、細胞外液のMgイオンを高濃度(92 mM)にして、細胞内へのMgイオン流入を増やしてみると、TRPM7遺伝子発現が抑制された細胞ではコントロールと比べて細胞内Mgイオン濃度上昇が抑制された。一方、細胞内からのMgイオンの汲み出しは、細胞内外のNaイオン濃度勾配を利用したNa-Mg交換輸送が働いていることが知られている。TRPM7遺伝子発現抑制はNa-Mg交換輸送活性には影響しなかった。実験の結果から、生体の心筋細胞でTRPM7の減少はMg恒常性維持に影響しないが、Mg流入経路の一つとしてTRPM7が働いていることが示唆された。マグネシウムイオン(Mg2+)は細胞内で300以上の反応の補酵素として働き、代謝やDNA合成でも重要な役割を担う。心筋細胞内のMg2+濃度調節系の破綻は心不全や不整脈の病態とも関わる。このため、細胞内Mg2+濃度の恒常性は維持されているが、その調節機構は解明されていない。本研究ではラット心室筋細胞の生理的なMg2+チャネルを同定するため、Mg2+輸送体分子として報告されている蛋白の発現を抑制し、Mg2+輸送能の変化を観察した。Mg2+輸送体分子の発現抑制にはRNA干渉法を用いた。まず、Mg2+輸送体としての性質を持つTRPM7とSLC41A1の二つの分子に着目した。これらの遺伝子のshRNA(small hairpin RNA)と共に蛍光蛋白質(GFP)遺伝子を導入した組換えアデノウイルス(rAdV)を作成した。細胞にアデノウイルスが感染し配列が読まれると、GFPが発現するので遺伝子導入の標識となる。ラット心臓線維芽細胞において、rAdVを感染させた細胞から得られたmRNAをリアルタイムPCRで確認したところ、mRNA発現がTRPM7shRNAで40%程度、SLC41A1shRNAで20%程度に抑制されていた。成獣ラット心室筋細胞を初代培養し、rAdVを感染させ、48時間後に細胞のMg2+輸送能を観察した。標的分子蛋白の発現には関係ない配列からなるnon-targetingshRNAを導入した細胞では、心筋細胞を単離した直後の細胞から得られたMg2+輸送能が再現された。しかしながら、標的分子の遺伝子発現を抑制した細胞においてもMg2+輸送能の明らかな低下を認めなかった。3種類の組換えアデノウイルスを作成し、生体投与の前に初代培養細胞への遺伝子サイレンシングを試みた。成獣ラット心室筋の初代培養細胞にTRPM7shRNA、SLC41A1shRNAを導入し、48時間後にMg2+輸送能を観察したが、有意な変化を認めなかった。蛋白発現抑制には48時間以上必要である可能性が示唆された。哺乳類細胞でTRPM7が生理的にMg2+チャネルとして働いているのか調べるために、ラット心室筋細胞を急性単離し標本として用いた。細胞内遊離Mg2+濃度([Mg2+]i)を蛍光Mg2+指示薬(furaptra)で測定した。細胞外液を高K+低Mg2+溶液に変え[Mg2+]iを一旦下げると、生理的な溶液の灌流により[Mg2+]iの回復過程が観察できる。[Mg2+]iの上昇過程は指数関数で近似できたため、流入開始時の微分値を細胞内へのMg2+流入速度として解析した。心室筋細胞におけるMg2+流入速度と、TRPM7チャネル活性化の性質を比較した。TRPM7電流はナルトリベンにより特異的に活性化されることから、細胞内へのMg2+流入速度に対するナルトリベンの効果を検討した。ナルトリベンは容量依存性にMg2+流入速度を加速させ、50%効果濃度(EC50)はTRPM7に対する効果に類似した。複数の非特異的阻害薬の効果も類似したことを加味して、薬理学的解析からはTRPM7が生理的なMg2+流入経路として矛盾しないことを明らかにした。次にRNA干渉法を用いて、TRPM7の発現を抑制した。TRPM7のshRNA(small hairpin RNA)と共に蛍光蛋白質(GFP)遺伝子を導入した組換えアデノウイルス(rAdV)を作成し、GFPの発現を遺伝子導入の標識とした。ラット心臓線維芽細胞において、rAdVを感染させた細胞から得られたmRNAをリアルタイムPCRで確認したところ、mRNA発現が30%程度に抑制された。

ラットの心臓への直接投与を試みたが、感染効率が低かったため、成獣ラット心室筋の初代培養細胞を用いて、rAdVを感染72時間後にGFP陽性の細胞からTRPM7電流とMg2+流入速度を測定している。成獣ラット心室筋初代培養細胞のTRPM7蛋白ノックダウン効率の検討には、ウエスタンブロット法による発現量の低下を示したいが、生来の発現量が多くないため困難である。TRPM7電流の低下を確認し、蛋白発現量の低下を示したいが、個体差が大きく、有意性を確認するためには多くのデータを必要とするため予定よりも時間が掛かっている。心室筋細胞の生理的なMgイオンチャネルの同定を目指して、候補分子であるTRPM7の発現を抑制した細胞のMgイオン輸送能の測定を試みた。分子の発現抑制にはRNA干渉法を用いた。TRPM7のshRNA(small hairpin RNA)と共に導入の指標として蛍光蛋白質(GFP)遺伝子を持つ組換えアデノウイルス(rAdV)を作製し、成獣ラット心室筋の初代培養細胞に感染させた。72時間培養した後、TRPM7分子蛋白発現の抑制を確認するために、ホールセルパッチクランプ法によりTRPM7電流を測定した。非標的遺伝子のshRNAを組み込んだ細胞に比べてTRPM7電流の有意な低下を認めなかった。内在性TRPM7蛋白の発現が少ないこともあり、ウエスタンブロット法や免疫組織化学法による蛋白発現の抑制を確認できなかった。標本を再検討し、蛋白発現抑制が容易な細胞増殖能の高い株化細胞の使用を計画している。平行してラット心室筋の急性単離細胞を用いて細胞内Mg濃度調節分子の薬理学的な解析を進めた。TRPM7はナルトリベンによって活性化され、NS8593によって抑制される。細胞を生理的な細胞外液で灌流中にナルトリベンを投与しても細胞内遊離Mgイオン濃度は上昇しないが、ナルトリベン投与と同時に細胞外Naイオンを除去するとMg濃度は上昇し、Naイオンの再添加で元に戻った。つまり、TRPM7の活性化によってMgイオンは流入するが、過剰なMgイオンはNa-Mg交換輸送によって汲み出されると考えられる。一方でNS8593は細胞外Naの有無に関係なく、わずかではあるが有意に細胞内Mg濃度を減少させた。細胞内Mg濃度が定常状態の時はNaに依存しないMgイオンの汲み出しが行われることを示唆する。この結果よりTRPM7によるMg流入が細胞内Mg恒常性維持に関与している可能性が示唆された。より生理的な細胞を標本にするため、成獣ラット心室筋初代培養細胞を用いたが、増殖能がなく培養日数も限られるため、内在性蛋白質の発現をRNA干渉法で抑制することが難しかった。TRPM7チャネルは哺乳類の全身の細胞に遍在し、Mgイオンの透過性が比較的高く、細胞内Mgイオン濃度の低下により活性化されることから、生理的なMgイオンチャネルの候補となっている。本研究では、生体内でTRPM7が細胞内Mgイオン濃度の調節にどのように関わっているかを検討した。ラット心筋細胞由来の培養細胞株であるH9c2細胞を用いて、RNA干渉法によりTRPM7の発現を抑制した。TRPM7のshRNA(small hairpin RNA)と共に導入の指標として蛍光蛋白質(GFP)遺伝子をリポフェクション法で細胞内へ導入した。
拡散過程とレヴィ過程およびその変型過程に関する極限定理とその応用

偶然性に左右されて変化する確率過程の中でも最も基本的なクラスである拡散過程とレヴィ過程は,確率論の中心的な研究対象として詳しく調べられてきた.しかしながら,これらの過程は単純すぎて現実問題に現れる複雑な確率過程と大きな隔たりがある.本研究は,拡散過程とレヴィ過程の一部の構造を保ちながら一般化した変型過程を研究し,その極限的性質の理論的究明と新しい現象の発見を目指す.偶然性に左右されて変化する確率過程の中でも最も基本的なクラスである拡散過程とレヴィ過程は,確率論の中心的な研究対象として詳しく調べられてきた.しかしながら,これらの過程は単純すぎて現実問題に現れる複雑な確率過程と大きな隔たりがある.本研究は,拡散過程とレヴィ過程の一部の構造を保ちながら一般化した変型過程を研究し,その極限的性質の理論的究明と新しい現象の発見を目指す.
F特異点論を用いた正標数の線形系の一般元の研究

判定イデアルはF特異点論において重要な役割を担うイデアルである.一口に判定イデアルと言っても,有限判定イデアルと巨大判定イデアルの2種類がある.Hochster-Hunekeは2つの判定イデアルは一致すると予想したが,30年以上たった今も未解決である.この予想は,1990年後半にはAberbach-MacCrimmon,原伸生,Karen Smithらによって,Q-Gorenstein多様体の場合に正しいことが知られていた.研究代表者は,彼らの結果を数値的Q-Gorenstein多様体の場合に拡張した.Kollarは1980年代中頃に,標数0の非特異射影多様体上の半豊富な直線束に対する単射性定理を証明した.このKollarの単射性定理は小平の消滅定理の拡張と見なされるものであり,正標数では一般には成り立たない.一方Mehta-Ramanathanは,Cohen-Macaulay大域的F分裂多様体上では,正標数でも小平の消滅定理が成り立つことを証明している.そこで研究代表者と權業善範は,Kollarの単射性定理がCohen-Macaulay大域的F分裂多様体上で成り立つかどうか調べた.そしてCohen-Macaulay大域的F分裂多様体の特別なクラスである,大域的F正則多様体上ではKollarの単射性定理が成り立つことを証明した.藤野修はKollarの単射性定理がトーリック射影多様体上で成り立つことを証明したが,トーリック多様体は大域的F正則多様体であるため,代表者達の結果は藤野の結果の一般化になっている.また研究分担者である中村は,田中公と橋詰健太との共同研究において,標数7以上の3次元対数的標準対に対する極小モデルプログラムの存在を証明した.本研究課題は,正標数の線形系の一般元の性質をF特異点論を用いて調べることを目的としている.F特異点論において重要な役割を果たす判定イデアルは一般にはBertiniの定理を満たさないことが,最近Bydlon氏によって示された.Bertiniの定理は一般元の性質を調べる上で基本的かつ重要なものである.このBydlon氏の結果を受けて判定イデアルそのものの研究に立ち返ることにし,その結果判定イデアルに関する重要な予想の部分的な結果を得た.また大域的F正則多様体上の豊富なCartier因子がなす線形系の一般元の性質を調べるために,大域的F正則多様体上でどのようなコホモロジーの消滅定理が成り立つか調べたところ,大域的F正則多様体上でKollarの単射性定理が成り立つことを証明することに成功した.このように当初の計画とは異なるが,着実に研究成果は得られており,進捗状況はおおむね順調と言えるだろう.大域的F正則多様体上の消滅定理についてある程度知見が得られたので,今年度はこの研究をさらに推し進める.標数が多様体の次元より大きいとき,非特異大域的F正則多様体は標数0に持ち上がるため,秋月-中野の消滅定理が成り立つ.標数が小さい場合にも非特異大域的F正則多様体上で秋月-中野の消滅定理が成り立つか調べる.また一般元の研究としては,正標数のジェネリックリンクについて研究する.Ma-Page-Rebecca R.G.-Taylor-Zhangは,イデアルが完全交叉の場合にジェネリックリンクのF純閾値について調べた.この結果をイデアルが完全交叉でない場合に拡張することを考える.正標数ではBertiniの定理が成り立たないことがネックになるが,ジェットスキームの理論を駆使することでこの困難を克服したい.判定イデアルはF特異点論において重要な役割を担うイデアルである.一口に判定イデアルと言っても,有限判定イデアルと巨大判定イデアルの2種類がある.Hochster-Hunekeは2つの判定イデアルは一致すると予想したが,30年以上たった今も未解決である.この予想は,1990年後半にはAberbach-MacCrimmon,原伸生,Karen Smithらによって,Q-Gorenstein多様体の場合に正しいことが知られていた.研究代表者は,彼らの結果を数値的Q-Gorenstein多様体の場合に拡張した.Kollarは1980年代中頃に,標数0の非特異射影多様体上の半豊富な直線束に対する単射性定理を証明した.このKollarの単射性定理は小平の消滅定理の拡張と見なされるものであり,正標数では一般には成り立たない.一方Mehta-Ramanathanは,Cohen-Macaulay大域的F分裂多様体上では,正標数でも小平の消滅定理が成り立つことを証明している.そこで研究代表者と權業善範は,Kollarの単射性定理がCohen-Macaulay大域的F分裂多様体上で成り立つかどうか調べた.そしてCohen-Macaulay大域的F分裂多様体の特別なクラスである,大域的F正則多様体上ではKollarの単射性定理が成り立つことを証明した.藤野修はKollarの単射性定理がトーリック射影多様体上で成り立つことを証明したが,トーリック多様体は大域的F正則多様体であるため,代表者達の結果は藤野の結果の一般化になっている.

また研究分担者である中村は,田中公と橋詰健太との共同研究において,標数7以上の3次元対数的標準対に対する極小モデルプログラムの存在を証明した.本研究課題は,正標数の線形系の一般元の性質をF特異点論を用いて調べることを目的としている.F特異点論において重要な役割を果たす判定イデアルは一般にはBertiniの定理を満たさないことが,最近Bydlon氏によって示された.Bertiniの定理は一般元の性質を調べる上で基本的かつ重要なものである.このBydlon氏の結果を受けて判定イデアルそのものの研究に立ち返ることにし,その結果判定イデアルに関する重要な予想の部分的な結果を得た.また大域的F正則多様体上の豊富なCartier因子がなす線形系の一般元の性質を調べるために,大域的F正則多様体上でどのようなコホモロジーの消滅定理が成り立つか調べたところ,大域的F正則多様体上でKollarの単射性定理が成り立つことを証明することに成功した.このように当初の計画とは異なるが,着実に研究成果は得られており,進捗状況はおおむね順調と言えるだろう.大域的F正則多様体上の消滅定理についてある程度知見が得られたので,今年度はこの研究をさらに推し進める.標数が多様体の次元より大きいとき,非特異大域的F正則多様体は標数0に持ち上がるため,秋月-中野の消滅定理が成り立つ.標数が小さい場合にも非特異大域的F正則多様体上で秋月-中野の消滅定理が成り立つか調べる.また一般元の研究としては,正標数のジェネリックリンクについて研究する.Ma-Page-Rebecca R.G.-Taylor-Zhangは,イデアルが完全交叉の場合にジェネリックリンクのF純閾値について調べた.この結果をイデアルが完全交叉でない場合に拡張することを考える.正標数ではBertiniの定理が成り立たないことがネックになるが,ジェットスキームの理論を駆使することでこの困難を克服したい.
シリコン・マイクロストリップ検出器の放射線損傷の研究

シリコン・マイクロストリップ検出器の表面損傷については、イオン化効果によりシリコンとSiO_2の境界面に正電荷が蓄積することがマイクロディスチャージに大きく影響していることが解り、マイクロディスチャージを抑制する構造の検出器を実現した。その要決は1)読み出しストリップの幅をインプラントストリップより狭くすることと、2)インプラントの深さを深くすることにある。バルク損傷に関しては、バルクの型転換それに続いておこる全空乏化電圧の上昇、放射線損傷を受けた検出器のストリップ間の電気的分離の状況、電荷収集効率を測定した。シリコン・マイクロストリップ検出器でこれらを総合的に検討したのは初めてである。この研究でシリコン・マイクロストリップ検出器の放射線損傷の基本的な研究は終わった。放射線損傷に強い検出器を製作するには第一にマイクロディスチャージを抑制すること、第二に全空乏化電圧の上昇を遅らせること、および第三に高いバイアス電圧に耐えられる構造にすることが有効である。このことを放射線照射実験、レーザーテスト、ビームテストを通じて確認した。また、この3点に留意して製造したシリコン・マイクロストリップ検出器は1Mrad程度の放射線を照射した後も使用に耐えうることも実証した。この成果は、米国フェルミ研究所に我々が共同研究として建設するバ-テックス検出器SVXIIに取り入れられる。欧州原子核研究所のATLAS検出器の飛跡検出器SCTにも生かされるであろう。最近、衝突型加速器における高エネルギー物理学実験用の検出器ではシリコン・マイクロストリップ検出器を多数使用する。加速器のビーム強度が飛躍的に上がりそれにともなって検出器の放射線損傷が大きな問題となってきた。特に半導体検出器は放射線損傷の影響が大きい。半導体検出器の放射線損傷にはバルクの損傷と表面損傷があり、前者はかなり研究が進んでいるものの表面損傷に関しては我々がその重要性を指摘するまで研究されていなかった。表面損傷を研究するために、両面読みだしAC結合のシリコン・マイクロストリップ検出器に^<60>Coのガンマ線を照射して主にイオン化効果を起こさせた。荷電粒子を照射するとシリコン結晶の損傷が大きく、また大線量ではバルクの半導体型の反転が起こる。イオン化効果を研究するにはガンマ線照射が有利である。ガンマ線照射実験は広島大学工学部の照射設備で3回行った。検出器のノイズが急激に増大する現象を吸収線量別にまた温度をコントロールして詳しく観測した。また、検出器の半導体としての基本特性(暗電流、空乏化電圧)も測定した。次に、高エネルギー物理学研究所において陽子シンクロトロンで得られるパイ粒子線を用いて、イオン化効果による表面損傷を持つ検出器のビームテストを1回行った。分解能、S/N比、検出効率を放射線損傷のないものと比較する為のデータをとった。現在これらのデータの解析途中であるので最終結果ではないが、読み出し電極及びマイクロストリップの形状を強電場をシリコンバルクから絶縁体へ追い出すようなものにするとノイズの発生を抑えられることがわかった。この後これを確認し最適な形状を求めている為の検討を行う必要がある。ビームテストでは放射線損傷のある検出器において分解能、S/N比の低下が認められた。

また、この3点に留意して製造したシリコン・マイクロストリップ検出器は1Mrad程度の放射線を照射した後も使用に耐えうることも実証した。この成果は、米国フエルミ研究所に我々が共同研究として建設するパーテックス検出器SVXIIに取り入れられる。欧州原子核研究所のATLAS検出器の飛跡検出器SCTにも生かされるであろう。
C型肝炎ウイルス非構造タンパクNS5Aが転写制御する遺伝子の特定

1:野生型(448アミノ酸)とアミノ末端欠失型(318アミノ酸)NS5A遺伝子(H株由来)をサイトメガロウイルスプロモーター制御下にタンパク発現可能な哺乳類発現プラスミドベクターにサブクローニングし、リポゾームを用いたヒト肝細胞癌由来培養細胞(HepG2細胞)への一過性トランスフェクションにて野生型ならびにアミノ末端欠失型NS5Aタンパクの発現をウエスタンブロット法にて確認した。野生型とアミノ末端欠失型NS5Aのカルボキシル末端にはFLAGタンパクを添加したため、タンパクの発現は抗FLAG抗体を用いたウエスタンブロット法にて確認可能であった。2:一方、カバーグラス上で培養したHepG2細胞に同様の方法で、上記のプラスミドベクターをトランスフェクションし、一次抗体として抗FLAG抗体を用いて、蛍光抗体法でNS5Aタンパク発現を検討した。タンパク発現は蛍光顕微鏡下に観察可能であった。興味あることに、野生型NS5Aタンパクが細胞質内に発現するのに対して、アミノ末端欠失型NS5Aタンパクは核に蛍光シグナルがみられた。以上より、NS5Aタンパクのアミノ末端を欠失させることにより、このタンパクが核に移行することが示唆された。3:上記1で行ったHepG2細胞への一過性トランスフェクション法に引き続いて、ネオマイシン(G418)500μg/mlで選択をかけ、クローニングリングを用いて、HepG2単細胞株を拾い上げた。個々の細胞株を培養し、NS5Aタンパクの発現をウエスタンブロット法にスクリーニングしたところ、野生型とアミノ末端欠失型NS5Aタンパクを発現する安定HepG2細胞株が得られた。また、テトラサイクリン-オフ系によるNS5A発現細胞株の樹立を現在行っている。