hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ソマティック・エジュケ-ションの理論化モデルに関する研究

本研究は,ソマティクス(somatics)理論の実践への適用を明確にすると共に,その教育のあり方,すなわちソマティック・エジュケ-ション(somatic education)の理論化モデルを作成することによって,その専門性の教育と実践カリキュラムの開発について考慮することを目的とした。本研究の目的に従って,ソマティクス理論をボディ-マインド・センタ-リングを鍵概念とする,1)身体意識,2)動作意識,3)身体療法,4)運動療法の4つの枠組みから分析・検討し,その特徴を整理した。また,その実践への適用を明確にするため,特に身体療法と運動療法に焦点を合わせ,その実践的研究と指導の現状を調査し,臨床的技術と学術的研究との有機的な関わりについて検討した。これらの成果を踏まえて,ソマティック・エジュケ-ションの理論化モデルを,1)身体運動の特徴(nature),2)身体学の理論(theory),3)身体概念(concept),4)動作意識の観察(observation)と記述(description),5)カリキュラム・デザイン(designing)を枠組みとして詳細な分析を行ない,教育機関における実践的適用の可能性について検討した。さらに,その理論化モデルを基に,ソマティック・エジュケ-ションに関わる専門性の教育のあり方及び実践カリキュラムの開発を,特に理論と実践の統合化の視点から考察した。以上より,上記の理論化モデル試案は,人間の身体性と統合的経験としての身体運動をア-トとサイエンスの関われから捉え,「内側から捉えられる身体の科学」を追求することによって,体育学の基本的性格(identity)に関わる新たなパラダイムを再構成するための本格的な議論の土台を構築するものとして有効であろう。今後の課題として,ソマティクス理論を従来の「科学論」や「学問論」を越えて,教育の枠組みにおける「カリキュラム論」として展開し直すことによって,体育学におけるカリキュラム・モデルの開発とその標準化についての研究の必要性が指摘されるであろう。
確率共鳴現象における視覚特性の解明

前年度では,視覚系において,ある一定のコントラストをもった輝度ノイズによって縞刺激に対するコントラスト検出閾値(contrast detection threshold:CDT)の低下が起きるためには,視覚刺激が(1):一定の平均輝度(約4560cd/m^2)である,(2):過渡的成分を有する,といった条件を満さなければCDTの低下が起きないことを明らかにした。今年度では視覚刺激の平均輝度がどのようにしてCDTを低下させているのかを検討した。その結果,ノイズによるCDTの低下は,I:ノイズを与えられなかった視覚刺激に対するCDTが平均輝度の上昇によって低下するII:ノイズを与えられた場合では平均輝度の上昇によるCDTの低下が起きず一定の値を保つIII:その結果、相対的にノイズによってCDTが生じる,とう事を明らかにした。このことは、ノイズによって視覚系での情報処理が促進,または入力情報の強度が増強されると考えられてきたこれまでのモデルとは異なり、我々の視覚系におけるノイズとはシステムの出力を一定に保つために利用されている可能性を示唆する。また,CDTの低下に影響を与える平均輝度は,網膜に投射される物理的明るさなのか,それとも視覚系での処理された後の知覚される明るさを検討した。その結果、前者の物理的明るさによってノイズによるCDTの低下が生じることが明らかとなり、外部ノイズは網膜といった視覚情報処理では比較的速い段階で利用されている事が示唆される。視覚系において,ある一定のコントラストをもった輝度ノイズによって縞刺激に対するコントラスト検出閾値(contrast detection threshold: CDT)が低下するという報告がこれまでなされ(Blackwell,1998),その説明モデルとして確率共振現象(stochastic resonance : SR)が用いられてきたが,SRがその説明モデルとして妥当かどうかの検討はなされていない.そこで,SRのシミュレーションとヒトのCDTの変動が一致するかを検討することで,輝度ノイズがどの視覚情報処理過程にどの様に影響しているかを知ることが出来る.そのために視覚刺激の平均輝度,空間周波数,時間窓の形状,呈示時間,ノイズと刺激の空間周波数および時間的な同期を変数としてCDTを測定する実験を行った.その結果、特定の条件においては輝度ノイズによってCDTは輝度ノイズの無い場合のCDTよりも低下した.このような場合,CDTの低下はI:ノイズが含む空間周波数には依存しない,II:ノイズと刺激との時間的同期が必要,といったSRの特性で説明可能な部分と,輝度ノイズのコントラスト以外に視覚刺激が(1):一定の平均輝度(約4560cd/m^2)である,(2):過渡的成分を有する,といった条件を満さなければCDTの低下が起きないというSRでは説明できない部分が明らかになった.このことから視覚情報の過渡的成分の処理を担うmagno系の働きにノイズが影響していること,また,ノイズはCDTを低下させるというよりも平均輝度の上昇に伴うCDTの上昇を抑制する働きであることが示唆された.前年度では,視覚系において,ある一定のコントラストをもった輝度ノイズによって縞刺激に対するコントラスト検出閾値(contrast detection threshold:CDT)の低下が起きるためには,視覚刺激が(1):一定の平均輝度(約4560cd/m^2)である,(2):過渡的成分を有する,といった条件を満さなければCDTの低下が起きないことを明らかにした。
シュレディンガー発展方程式に向けた抽象論の建設

当初の目的である抽象論の建設は達成されず,成果の中心として掲げられるものを得ることはできなかったが,その途上においていくつかの小成果を得ることができた.1つは,シュレディンガー発展方程式のある種の最適制御問題の可解性を明らかにした.また,リパルシブ・ハミルトニアンの研究に関して,ある種の散乱理論を部分的に拡充する結果を得た.これらの研究は基礎解析学に属するだけでなく,応用においても重要な土台となる.シュレディンガー発展方程式を含む多くの時間発展を伴う偏微分方程式は,発展方程式と総称され,コーシー条件と呼ばれる条件と組み合わせた,コーシー問題の形で考察されることがほとんどであり,それらの抽象化である抽象発展方程式も同様である.一方で既存のコーシー条件を含む一般コーシー条件と放物型発展方程式を組み合わせた一般コーシー問題の解析についてはいくつかの成果が既に知られており,年齢を考慮した人口変動モデルなどへの応用も考察されている.本年度はモデナ・レッジョ・エミリア大学のマラグッティ教授との共同研究を行い,双曲型発展方程式の一般コーシー問題に対する理論と,それを用いたある種の制御問題に関する結果を得ることができた.特に制御問題については既存の放物型発展方程式に対するもので課せられていた応用を制限する条件のいくつかが放物型特有のものであり,双曲型においては不要であることも明らかにすることができた.またそれら成果を国内外の複数の研究集会において報告し今後の研究に向けた知見を得ることができた.これらは汎用性の高い抽象論の構築にむけた重要な成果と言えだけでなく,その後の非線形偏微分方程式への展開も期待できるものである.平成27年度,研究代表者は複数の要因から海外での長期研究が可能となったため,海外研究者との共同研究を優先的に行った.そのため,次年度以降に予定していた非線形問題への応用や,当初予定していなかった制御問題に対する理論の展開などがあり,予定以上に研究の広がりを得ることができた.これらの点については当初の計画以上に進展したと言える.一方で当初予定していた非正規形双曲型発展方程式に対する抽象論の構築については,十分な成果を得たとは言えず,時間依存ユニタリー変換との関連についても新たな知見を得られていない.これらの点についてはやや遅れていると言える.以上の観点を総合的にかんがみて,本研究の現在までの進捗状況はおおむね順調に進展していると言える.シュレディンガー発展方程式を含む多くの時間発展を伴う偏微分方程式は,発展方程式と総称され,シュレディンガー発展方程式は特に双曲型発展方程式と呼ばれるものに分類される.また,双曲型発展方程式の抽象理論の応用例としてシュレディンガー発展方程式を研究する際,方程式を主要項とそれに付随する摂動項に分けて考察するのが常であるが,その区分をどのように扱うかは抽象理論の応用を考える際の肝要な部分となる.近年リパルシブ・ハミルトニアンと呼ばれる形の主要項に関する研究が散乱理論の研究に関連して活発になっており,それらの研究を踏まえる形で本年度はリパルシブ・ハミルトニアンとそれに付随可能な摂動項についての研究を行った.結果,これまで付随可能と見なされていなかったいくつかの特殊な摂動項についても1次元に限ってであるが線形シュレディンガー方程式の場合においては可能であることが判明した.またこれらの成果を日本国内および米国にて開催された国際的な研究集会において報告し,今後の研究に向けた知見を得ることができた.今回判明した摂動項のいくつかは既に知られていた結果であるが,それらを共通の方法で判別する手法の確立されたことで,リパルシブ・ハミルトニアンを含む一般のハミルトニアンにも適用可能となることが期待される.このことから今後,本研究から散乱理論の研究について摂動項の分類に関する新たな理論を供する可能性を示唆することができる.平成28年度,研究代表者はリパルシブ・ハミルトニアンに関する研究を中心に行い, 1次元に限るという条件下でいくつかの新たな知見を得ることができた.当初はこれを一般の次元に拡張することで応用例を準備することで,抽象理論の補強を考えたが,残念ながら一般次元への拡張は未達に終わった.また当初計画していた時間依存ユニタリー変換の抽象化を含めた双曲型発展方程式の抽象理論の構築においては時間依存ユニタリー変換の抽象化において断片的な結果を得ることはできているものの,双曲型発展方程式の抽象理論の構築には至っていない.以上の観点を総合的に鑑みて,本研究の現在までの進捗状況はやや遅れていると言える.シュレディンガー発展方程式を含む多くの時間発展を伴う偏微分方程式は,発展方程式と総称され,シュレディンガー発展方程式は特に双曲型発展方程式と呼ばれるものに分類される.本研究の目的は双曲型発展方程式の解析における俯瞰的視点の獲得のために,抽象理論の構築すること,また理論構築の1つとしてシュレディンガー発展方程式の解析に用いられる時間依存型ユニタリー変換の理論を抽象化することである.偏微分方程式の抽象理論の構築は,複数の種類の偏微分方程式に対する統一的な解析方法を提示する.

そのため個別の偏微分方程式の特異な性質を解析することはできない.しかし,それら個別の解析のための準備として必要とされる共通の性質の解析において有用である.特に時間依存型ユニタリー変換やその類似の技法はそれぞれの偏微分方程式で個別に利用されており,それらに対してある程度の統一的な視座を与えることは今後の偏微分方程式研究の効率化に寄与することが期待できる.双曲型発展方程式との類似点がある放物型発展方程式に関して,近年いくつかの抽象論が提唱されており,平成29年度はそれらの最新の成果について放物型発展方程式の研究者と意見交換を行い,対応する双曲型発展方程式の抽象論の構築の可能性を検討した.現状では成果と言えるものは得られていないが,これは今後の研究とする.時間依存型ユニタリー変換の抽象化については,それ単独での抽象化ではなく,基となる抽象理論自体にも新たな柔軟性を確保することで目的を達成できると予想されるが,これについても今後の研究とする.当初の目的である抽象論の建設は達成されず,成果の中心として掲げられるものを得ることはできなかったが,その途上においていくつかの小成果を得ることができた.1つは,シュレディンガー発展方程式のある種の最適制御問題の可解性を明らかにした.また,リパルシブ・ハミルトニアンの研究に関して,ある種の散乱理論を部分的に拡充する結果を得た.これらの研究は基礎解析学に属するだけでなく,応用においても重要な土台となる.当初の研究実施計画通り時間依存ユニタリー変換の抽象化と,双曲型発展方程式の抽象理論の構築を目指す.特に双曲型発展方程式の重要な応用例である線形シュレディンガー発展方程式の研究においては,所謂主要項と摂動項の区分をどのように統一的に扱うかが抽象論の肝要な部分となる.いくつかの具体的な主要項とそれに付随して決定される摂動項については古くから結果が知られていたが近年リパルシブ・ハミルトニアンと呼ばれる形の主要項に関する研究が活発になっており,それら具体例を踏まえることで抽象論への新たな知見を得ることができると期待している.本年度未達に終わった時間依存ユニタリー変換の抽象化と双曲型発展方程式の抽象理論の構築を目指す.数物系科学本研究について多くの研究者の興味を得ることができ,当初予定よりも講演の機会を多く得ることができた.また,それに関連し旅費が膨らむことが年度途中から予測できたため,物品費を調整した.差額については十分に誤差の範囲内であると考える.差額分については高額とは言えず,誤差の範囲であるからして,次年度のその他に計上する.
2〜3の歯槽骨移植材が骨芽細胞様細胞の初期石灰化に及ぼす影響に関する研究

歯周領域で用いられる骨移植材の骨組織への直接作用を検討する目的で、1.コロニ-分離法によるマウス頭蓋冠から骨芽細胞様細胞を分離し、のちにこの細胞を介し、本細胞の移植材への親和性について検討した。2.さらにこれら移植材の親和性を良くする為に牛真皮由来アテロコラ-ゲンを移植材表面にコ-ティングし、1.と同様の実験を行った。以上のin vitroでの結果をin vivoで確認する目的で、3.ビ-グル犬に人工骨欠損窩洞を作製し、骨移植材移植後の組織内骨再生状態についてComputerーaided microanalyzer(CMA)を用い移植材周囲のCaおよびP元素濃度を測定し併せ検討した。その結果、1.in vitroの系における石灰化は培養21日目で、牛除タンパク焼成骨(TBC)ではその周囲に層状に認められたがハイドロキシアパタイト(HAP)ではほとんど認められなかった。2.in vitroの系においてTBCおよびHAPにアテロコラ-ゲンをコ-ティング(CーTBC,CーHAP)することにより、培養14日目ですでにCーTBC,CーHAP共にその周囲に層状に石灰化が認められた。しかしその後の石灰化部位はあまり拡大せず培養21日目ではTBC群とCーTBCおよびCーHAP群の3群はほぼ同程度の石灰化を認めた。3.さらにin vivoの系において非移植群とHAP,TBC,CーTBC群をそれぞれ作製した結果、非移植群にくらべ移植群では母床骨の再生が良好であった。またHSP群にくらべTBC,CーTBC群では移植材周用でCaおよびPの高濃度分布域が広範囲に認められ、移植後1ケ月から3ケ月にかけて経時的に拡大して行く傾向が認められた。今回のCMA分析によって得られた結果は、本研究と平行して行った隣接組織のヘマトキシリン・エオジン染色やアザン・マロリ-染色による観察結果と同様な結果が得られ、CMA分析の特徴であるCaおよびPの元素定量法によるin vivoにおける移植材周囲の骨再生の定量化が間接的に可能であることが示唆された。本研究は骨移植材の初期石灰化能の差異を検討する目的で、新たに骨芽細胞を分離しこれを用いて、近年注目されている骨移植材(Hydroxyapatite:HAP,β-Tricalcium phosphate:TCP)や牛除タンパク焼成骨(True Bone Ceramic:TBC)の生体適合性についてin vitroの系で評価、検討を行った。まず初めに骨芽細胞を胎生20日のMouse頭蓋冠よりColony分離法を用いて分離し、本細胞が骨芽細胞としての性状を持ち合わせているかを検討した。その結果、本細胞は(1)Bone-liver-kidney typeの高いAlkaline phosphatase活性を有し、(2)Alizarin red SならびにVon Kossa染色によってin vitroでの石灰化能を有している細胞であることが認められた。さらに、(3)走査型電子顕微鏡像によってExtracelluler matrixを活発に産生し、(4)Anti-mouse Type I,III monoclonal antibodyを用いる事によって、Type I,III collagenを産生することが認められた。この様な細胞を用いて各種骨移植材の生体適合性を検討した結果、(1)細胞のTBC,HAP及びTCP表面での付着は、いずれも培養開始後3日目で認められた。(2)経時的な骨移植材周囲の細胞密度の増加はTBCが最も大きかった。

また、培養21日目のSEM像から、細胞の骨移植材への付着はTBCでは45層に、また、HAPやTCPでは単層から2層で認められた。(3)石灰沈着形成は、TBCではその周囲に層状に、またTCPではその小片を中心に点状に認められた。以上の結果から骨芽細胞の骨移植材への付着やそこに付着する細胞数およびそこでの石灰沈着形成は骨移植材の性状によって差異のあることが示唆された。以上の結果をふまえ、我々は現在骨移植材周囲での骨芽細胞の産生するType I,III collagenの動態について上記抗体を用いて検討をおこなっており、さらにこの実験系を煮つめた上で平成2年度内に報告を行いたいと考えている(抗Collagen抗体は、九州大学歯学部第2解剖学教室栗栖浩二郎教授より供与)。前年度のin vitroでの研究成果に基づき、この結果をin vivoで確認する目的で、イヌを用いた骨移植材移植後の周囲歯槽骨再生状態を観察した。すなわち、雄ビ-グル犬の下顎骨に3壁性骨欠損を作製、ハイドロキシアパタイト(HAP)、牛除タンパク焼成骨(TBC)およびTBCにアテロコラ-ゲンをコティングしたCーTBCを移植し、1ケ月および3ケ月後の歯槽骨の再生状態をComputerーaided Micro Analyzer(CMA)を用いて組織内のCaおよびP濃度の分布状態から検討した。その結果、移植後1ケ月のCMA所見では、TBCおよびCーTBCの移植材周囲はHAPの周囲に比べ、CaおよびPの高濃度分布域が広範囲に認められ、移植後3ケ月では、その分布域の拡大が認められた。特にTBCではそのポア-内部にCaおよびPの高濃度分布域が認められた。しかし一方で、骨移植材表面に生体親和性の良いアテロコラ-ゲンをコ-ティングした効果は、移植後初期に認められたのみで長期間経過した結果からは、明確な有効性は認められなかった。本実験結果は、昨年度に報告したin vitroでの結果とほぼ同様な結果が得られ、このことからも、今回行なった様な骨移植材に対する一連の基礎的・臨床的検討がその親和性を確認するうえでたいへん重要なことが分かった。また、本研究において骨移植材を構成する成分や形態によって生体に対する組織親和性が異なることが明確となり、さらに骨移植材表面にコラ-ゲンをコ-ティングすることによって移植後早期の生体親和性が向上する可能性が示唆できたものと考える。
肝細胞の癌化に伴なう増殖抑制機構の異常に関する分子生物学的研究

硬変化した肝蔵では、肝細胞の壊死・再生が頻繁にくり返されており、そのため肝硬変は肝細胞癌発生の母地になるとされている。正常状態では、肝細胞の増殖はparacrineメカニズムにより分泌されるTGFーβを中心とした増殖抑制因子により制御されている。しかし、肝細胞の癌化に伴って、TGFーβなどに対する反応性を失ない、この増殖抑制機構から逸脱することにより自律的増殖能を獲得すると考えられる。本年度の研究において、私共はヒト肝癌由来細胞株(HeP G2,PLC/PRF/5,Mahlavu細胞)が多量のTGFーβmRNAを発現していることを明らかにした。また、これら細胞株は正常細胞が有している、潜在型のTGFーβを活性化する能力を欠いていることを見い出した。しかし、これらの細胞株はTGFーβに対するI,II,III型のレセプタ-をともに有しており、HepG2,PLC/PRF/5細胞は活性型TGFーβに反応して増殖が抑制されるが、Mahlavu細胞は活性型TGFーβに反応せず、レセプタ-以降の情報伝達機構に障害があると考えられた。さらに、このMahlavu細胞をホルボ-ル・エステルで処理すると活性型TGFーβにより増殖が抑制されることを見い出した。外科的に切除したヒト肝癌組織において、TGFーβmRNAが非癌部肝組織に比較して大量に発現していることを見い出した。また、ラジオ・レセプタ-・アッセイを用いて、組織中のTGFーβ蛋白量を測定すると、同様に癌組織においてTGFーβ蛋白量が増加していることが分った。さらに抗ヒトTGFーβ抗体を用いて、免疫組織化学的検討を行ない、肝癌細胞がTGFーβを有していることが観察され、肝癌細胞がTGFーβを産生していることが示唆された。
家事調停の実証的研究-調停手続の構造化に向けて

本研究においては、まず家庭裁判所の家事調停記録、特に家事調停委員の手控えを含む非公式記録を中心に、事件の諸要素を含む記録を閲覧・騰写した。調査対象事件は、1昨年に家庭裁判所に調停申立がなされ、昨年度末までに調停手続きが終了した事件である。そのなかの全ての事件ではなく、遺産分割に関する事件、および実質的に見て離婚に関する事件の2種類を選び出した。後者は協議離婚のトラブルなども含めると、家事調停事件のなかの極めて大きな割合を占めており、当初、騰写する事件は全体の6割程度という見込みであたが、最終的には8割近い割合になった。また、当初は全事件のなかからサンプルをランダムに選択する予定であったが、裁判所における記録が必ずしも事件受理月日毎に整理されて保存されているわけではなかったので、該当事件の全てを騰写する方針に切り替えた。なお、事件記録の性質上、当事者のプライブァシ-保護に十分に配慮するため、騰写に当たっては、調査者が当事者の氏名、住所、関連地名、雇用先名等々、固有名詞のほとんどをテープで隠してから騰写を行うというやり方を採用した。以上のような調査手続きの変更のために、調査が大幅に遅れてしまった。これまでに、昨年12月末までに終了した事件の全ての騰写を終え、コーディングの準備も終え、現在、統計分析のためのデータベース作成のため、パーソナルコンピューターに入力中である。予定を大幅に遅れてしまったが、4月には基本統計の分析を行い、数量的分析は5月頃に終了する見込みである。なお、データベース作成の作業と平行して、個々の事件記録を読み、調停事件の展開の筋を読み説く定性的な分析も進めている。これも、ケース総数が大幅に増えたため、まだ作業が半ばである。
高齢視野狭窄患者の自動車運転能力の評価と運転支援

視野狭窄患者の自動車運転能力を評価するために、アイトラッキング搭載ドライビングシミュレータを施行した。これは、ドライビングシミュレータ(HONDAセイフティーナビ)装置に、据え置き型眼球運動計測装置(Tobii Pro X2-30)を設置したものである。ドライビングシミュレータは、一般乗用車のフロントガラスからの眺めをプロジェクターで投射し、速度一定で、ハンドル操作はなく、側方からの車の飛び出しなど全15場面での事故の有無を記録した。Tobii Pro X2-30を用いて、左右からの飛び出しと信号を確認できる範囲でキャリブレーションを行い、視線の動きを記録した。検査中は、赤い点を表示することにより、視線の動きを追えているかを確認した。また、検査後は、視線の動きをあわせてたリプレイ画面に、視野欠損部を重ねることにより、事故を起こした場面では、対象物hazard(信号や左右からの飛び出し)を見ていないために事故が起きたことを確認した。今後は、1.6度以内に0.1秒以上とどまっているものを固視点と定義し、ブレーキをふんだ直前に固視していた部位を同定し、それが対象物hazardとどれくらい離れていたかを計算することにより、事故回避に必要な視野部位を同定し、同定された視野部位のうち、事故を起こした群と事故を起こさなかった群とを視野感度を比較・検討することにより、事故回避に必要な視野感度を求めるプログラムを作成した。アイトラッキングを搭載したドライビングシミュレータの開発を行い、視野狭窄患者に実施し、自動車運転に必要な視野感度基準を明らかにするための患者データベースを作成した。眼球運動計測装置と同期したDSの結果を解析することにより、自動車運転に必要な視野感度基準を明らかにしていく。視野障害度および認知機能障害度に合わせた運転支援(信号の事前通知、自動ブレーキ等)を行い、その効果を判定する。信号や左右の飛び出しの情報を事前に与えることによる、視線の変化についても検討していく。また、高齢緑内障患者への効果的な運転訓練方法を考案し、評価する予定である。倫理委員会申請が遅れたため、研究を実施した患者数が少ないため。
腹腔内異物周囲に形成される肉芽組織を用いた自己血管再生法の開発

動脈硬化や動脈瘤に対して今日、膨大な数の血行再建術が行われている。血行再建には静脈グラフトや人工血管が使用されるが、再建術後の吻合部や中間部の閉塞によりバイパス機能が廃絶することも日常的である。近年、生体内には多分化能を持つ幹細胞が存在し、神経や心筋細胞へも分化が可能であることが明かとなった。平滑筋細胞に関しても肉芽組織内に増生する筋線維芽細胞myofibroblastは組織内で平滑筋に分化することが知られている。しかしながら内皮細胞と平滑筋が円筒状に構成された立体的な血管の再生は従来不可能であった。もし自己の幹細胞から内皮細胞と平滑筋細胞が再生され、一定の長さを持つ血管が再生されるならば、拒絶反応のない理想的なグラフトが得られる。本研究では腹腔内にプラスティック等の棒状異物を挿入し、異物周囲に肉芽組織と抗血栓機能をもつ上皮細胞の増生を促す。異物を除去し、筒状構造物の内側と外側を翻転することにより内皮様上皮に裏打ちされ管腔構造をもつ再生血管を作成することができる。本計画では肉芽の増生に適した異物の種類と長さ、癒着防止の条件、さらに上皮細胞による被覆に適した条件を検討する。次に、肉芽組織内の筋線維芽細胞の平滑筋細胞への分化を、我々が開発したミオシンアイソフォームと転写因子BTEB2を指標にして検討する。本年度は、ラットとウサギの腹腔内にプラスチックまたはシリコン等の異物を植え込み、異物の外壁に肉芽組織様の細胞層の形成を促す。肉芽組織の形成されるための条件、すなわち異物の種類、長さ、腹腔内への留置期間を経時的に検討した。次は、異物周囲に形成される筋線維芽細胞がどの程度平滑筋細胞に分化しうるかを、平滑筋特異的分化マーカーであるSM1とSM2ミオシンの発現により、また脱分化平滑筋のマーカーであるSMembミオシシとその転写因子BTEB2により検討する。また筋線維芽細胞の構造を電子顕微鏡で解析する。さらにα受容体刺激による収縮能を解析する。最終的には、再生血管をラットまたはウサギの頚動脈や大動脈に吻合し、in vivoで血管として機能するがを明らかにする。
18世紀上方・江戸における出版と都市文化の関連性-西川祐信を中心として-

本研究では、江戸中期に活躍した西川祐信(16711750)に着目し、18世紀上方出版文化から江戸の都市文化へと続く知の連環を考察した。(1)国内外の所蔵機関で祐信作品の調査を行い、「西川祐信総合作品データベース」を公開した。(2)月1回「西川祐信雛形本研究会」を開催し、文学史、美術史、染織史などの研究者約10名で『正徳雛形』の翻刻・語釈を行っている。(3)祐信作品に繋がるものとして上方を中心に出版された絵入百科事典に着目し、「近世期絵入百科事典データベース」を構築・公開した。2017年7月に「国際シンポジウム絵とことばの350年」を国際日本文化研究センターで開催。本研究は、江戸中期に京都を拠点として活躍した浮世絵師である西川祐信(16711750)に着目し、18世紀上方出版文化から江戸の都市文化へと続く知の連環を明らかにすることを目的としている。具体的には、(1)祐信全作品目録の作成(2)未翻刻資料の調査・翻刻(3)多分野の研究者による共同研究会。上記の研究を踏まえ、祐信を核とした文化の展開と交流の実態解明を計画している。(1)祐信全作品目録の作成。平成26年度は、作品目録作成のためアメリカ・メトロポリタン美術館、コロンビア大学、NY公共図書館、ホノルル美術館での絵本調査を行った。この調査により40点の書誌情報を収集することができた。これまでの調査によって214点の絵本の情報が蓄積されており、これを基に次年度以降データベースの構築作業へと進む。(2)未翻刻資料の調査・翻刻(3)多分野の研究者による共同研究会。報告者は平成2324年にかけて西川祐信に関する共同研究を行った(科研費若手研究[B])。そこでは、文学史、美術史、服飾史から研究を行ってきたが、特に着物と文学という関連性は新しい視点となった。本研究では、この点に着目し、祐信が制作した着物の雛形本(模様の見本帳)が、文学作品から受けた影響を指摘し、服飾と文学、出版文化と風俗の関係性を明らかにする。報告者と染織研究者の加茂瑞穂氏(立命館大学)を中心として「西川祐信雛形本研究会」を立ち上げ、祐信の雛形本『正徳雛形』に記載された各雛形を分析し、模様の典拠となった文学、演劇との関連性を考察している。研究会は月1回の開催で、約8名のメンバーで研究発表を行っている。本研究では、江戸中期に京都を拠点として活躍した浮世絵師である西川祐信(16711750)に着目し、18世紀上方出版文化から江戸の都市文化へと続く知の連環を考察する。具体的に1西川祐信全作品目録の作成、2未翻刻資料の調査・翻刻、3多分野の研究者による共同研究会の実施。これらの研究を踏まえ、祐信を書くとした文化の展開と交流の実態解明を計画している。1祐信全作品目録の作成。データベースの公開。平成27年度は、作品目録作成のためアメリカ・ホノルル美術館での絵本・雛形本調査を行った。この調査により30点の書誌情報を収集することができた。これまでの調査によって作成した目録を基にデータベースを構築、「西川祐信作品総合データベース」として公開をスタートした(http://sukenobu.net/)。西川祐信が制作に関わった作品(肉筆・版画・版本)の所在情報、書誌情報を検索できるようにしたものである。本サイトでは、西川祐信の研究文献目録や、2013年に科研費若手研究(B)の成果として刊行した論文集『西川祐信を読む』のPDFを公開している。2未翻刻資料の調査・翻刻、3共同研究会。平成26年度に引き続き、西川祐信の雛形本研究会を月1回開催している。研究会メンバーは約10名。染織、文学、美術など様々な研究者をメンバーとして雛形本に記載された雛形図の翻刻・語釈を行い、文様の典拠や技法の考察などを行っている。祐信の絵本調査を継続的に進めることができている。平成26年度中に公開予定だったデータベースについて、27年度に公開をスタートさせることができた。また、資料翻刻・共同研究会も順調に進んでいる。『正徳雛形』全ての翻刻・語釈の完了までには数年を要するが、その後に出版物として公開する準備もすすめている。具体的に1.西川祐信全作品目録の作成、2.未翻刻資料の調査・翻刻、3.多分野の研究者による共同研究会の実施、4.1718世紀の上方における絵入百科事典のデータベース作成。本データベースは祐信の作品に大きな影響を与えた『訓蒙図彙』をはじめとして、1718世紀にかけて上方で刊行された絵入百科事典を翻刻し、挿絵・言葉を検索出来るものである。これらの研究を踏まえ、祐信を核とした文化の展開と交流の実態解明を計画している。平成28年度は、目録作成のため平成29年3月にアメリカ・ホノルル美術館での絵本調査、平成29年2月に千總ギャラリーでの雛形本調査を行った。この調査により、53点の書誌情報を収集した。

平成29年度にはその情報を「西川祐信総合作品データベース」において公開する。また、2.未翻刻資料の調査・翻刻、3.共同研究会として平成26年度から引き続いて月1回の西川祐信雛形本研究会を開催している。研究会では、雛形本の翻刻、語釈を行い、文様や技法の考察を行っている。4.絵入百科事典のデータベースについては、『訓蒙図彙』、『百人女郎品定』など4点の資料を翻刻し、約2000件のメタデータを入力した。本データベースの構築にあたって、国際シンポジウムで発表を行い、それを基に論文を執筆した。論文は平成29年度に刊行予定である。西川祐信の絵本・雛形本の調査を継続的に進めることができている。また、資料翻刻・共同研究会も月1回のペースで定期的に開催しており、順調に進んでいる。祐信を含めた18世紀の上方における書物の連関性を明らかにするために、平成28年度より「絵入百科事典データベース」の構築に着手したが、データ入力、設計の作業も進んでおり、平成29年度には公開することが可能である。本研究では、江戸中期に京都を拠点として活躍した浮世絵師である西川祐信(16711750)に着目し、18世紀上方出版文化から江戸の都市文化へと続く知の連環を考察することを目的に、主に下記の研究を進めた。(1)祐信全作品目録の作成大英博物館、大英図書館、ホノルル美術館、メトロポリタン美術館、国立国会図書館など国内外の所蔵機関での調査を行い、またデータベースなどで公開されている情報も収集した。それを基に「西川祐信総合作品データベース」(http://sukenobu.net/)を公開し、情報の発信・共有を行った。本サイトでは、前回の科研費若手研究(B)で刊行した論文集『西川祐信を読む』の全頁PDFも公開した。(2)未翻刻資料の調査・翻刻月1回「西川祐信雛形本研究会」を開催し、文学史、美術史、染織史などの研究者約10名で『正徳雛形』の翻刻・語釈を行った。また、諸本調査も行った。(3)関連データベース公開と国際シンポジウム開催上方の啓蒙主義的書物の潮流を明らかにするため「絵入百科事典データベース」(http://dbserver.nichibun.ac.jp/EHJ/index.html)を構築・公開した。また、雛形本研究会での研究を核にして「国際シンポジウム絵とことばの350年」を国際日本文化研究センターで開催した。本研究で作成した目録は完成版ではなく今後も調査・増補を行っていくが、一部からでも目録を公開することで祐信研究の基盤整備を進めることができた。また、雛形本研究会では「着物」「出版」「文学」「風俗」などの切り口から『正徳雛形』を読み解いており、時代やジャンルを限らず多様な研究者が参加することで多角的に京都の出版と都市文化の関連性を考察した。本研究会は引き続き継続し、最終的に出版とデータベースの公開を行う。本研究では、江戸中期に活躍した西川祐信(16711750)に着目し、18世紀上方出版文化から江戸の都市文化へと続く知の連環を考察した。(1)国内外の所蔵機関で祐信作品の調査を行い、「西川祐信総合作品データベース」を公開した。(2)月1回「西川祐信雛形本研究会」を開催し、文学史、美術史、染織史などの研究者約10名で『正徳雛形』の翻刻・語釈を行っている。(3)祐信作品に繋がるものとして上方を中心に出版された絵入百科事典に着目し、「近世期絵入百科事典データベース」を構築・公開した。2017年7月に「国際シンポジウム絵とことばの350年」を国際日本文化研究センターで開催。
NMR緩和分散法によるiPS細胞誘導因子Oct3/4の揺らぎの検出

iPS細胞誘導因子の1つである転写因子Oct3/4のDNA認識機構を分子の動きの面から解明するべく、本年度は、遊離状態とDNA(utf1)結合状態のOct3/4がどのような運動性を示すのか明らかにすることを目的として研究を進めた。特に、Oct3/4に2つあるDNA結合ドメインのうちホメオドメインの解析を集中的に進めた。まずは遊離状態とDNA結合状態のNMRシグナルの帰属を従来法で完了した。この帰属の情報と、水素結合を直接観測する実験から、ホメオドメインのC末端はDNA結合に伴いヘリックスが長くなることが分かった。続いて緩和分散測定を行なったが、残念ながら、当初、期待していた緩和分散(揺らぎ)は観測されなかった。このことは、蛋白質の揺らぎのタイムスケールが、緩和分散で観測できる揺らぎのタイムスケールとマッチしなかったためと予想した。そこで、違う観点から揺らぎを観測するということで、水とアミドプロトンとの交換速度を決定するCLEANEX-PM測定を行なった。非常に興味深いことに、DNA滴定を行いながら、CLEANEX-PMを測定すると、滴定の途中でホメオドメインが、より柔軟になることが分かった。同じくDNA滴定実験から、化学シフト変化を追跡した結果、単純な2状態交換モデル(遊離←→結合)では理解出来ない化学シフト変化が観測された。これらの結果から、ホメオドメインのDNA結合の過程には、より構造が柔軟な中間状態があることが強く示唆された。iPS細胞誘導因子の1つである転写因子Oct3/4のDNA認識機構を分子の動きの面から解明するべく、本年度は、遊離状態のOct3/4が元々どのような運動性を示すのか明らかにすることを目的として研究を進めた。まずは大腸菌発現系を用いて、NMR測定用に安定同位体標識したOct3/4の大量発現系の構築を試みた。まずはHisタグをOct3/4のDNA結合ドメインのN末端に付加し培養条件の検討を行った。しかし、どのような培養条件でもOct3/4は封入体でしか発現してこなかったため、精製においては8M尿素でOct3/4の封入体を可溶化し、Ni-NTAカラムで精製を行った。この場合、Ni-NTA上で尿素濃度を下げてリフォールディングを行うとNi-NTA樹脂に吸着してしまい、Oct3/4が全く得られなかったため、8M尿素を含むバッファーでNi-NTAからの溶出を行ったところ、不純物をほとんど含まないOct3/4を大量に得ることができた。ただし、透析により尿素を除くと、全てのOct3/4が沈殿した。これはおそらくOct3/4に2つあるDNA結合ドメインの等電点が大きく異なるためと考えられる。そこで、バッファーのpHを変えたり、蛋白質の可溶化に定評のあるアルギニンを添加してみたりした。この結果、アルギニンが可溶化には有効で、アルギニンを含むバッファーでNMRシグナルも観測できるようになり始めた。現在は、2つのDNA結合ドメインの等電点が異なる問題に関して、バッファーの検討を行っていると同時に、それぞれのDNA結合ドメインを切り出したもののクローニングも開始した。
レジスチンによる免疫機構の変化を介した糖尿病発症メカニズムの解明と発症予知

糖尿病の既往の無い29症例のうち、血中レジスチン高値群13例、低値群16例から単球を単離し、DNA Array及びパスウエイネットワーク解析を施行した。その結果、血中レジスチンにて影響を受ける免疫、炎症関連遺伝子ネットワークを明らかにした。この内の複数の遺伝子は既に糖尿病、動脈硬化との関連が報告されている因子であった。更に、別の70症例においてこれらの因子の発現量を遺伝子、タンパクレベルで解析し、血中レジスチン値との相関関係を確認した。レジスチン過剰発現単球細胞の遺伝子発現解析でも同様の結果であった。レジスチンは免疫、炎症応答を介して、糖尿病や動脈硬化の発症に関与していると考えられる。ボランティア24症例のうち、血中レジスチンレベルが高い群12例をExperimental (case)とし、低い群12例をBaseline (control)とし、末梢血からmiRNAを抽出し、miRNA arrayを施行した。さらに昨年度施行したAffymetrix Gene Chip Human U-133 Plus 2 Arrayから得られたデータと統合することで、変化を認めたmiRNAが実際にそのtarget遺伝子の発現に影響を与えているか、バイオインフォマティクスを用いた遺伝子ネットワーク解析を行った。さらに、パスウエイ解析を行い、単一遺伝子の変動だけではなく、これらに影響を受ける遺伝子群として解析した。その結果、複数の免疫、炎症に関連する遺伝子が、血中レジスチン値と関連性がある可能性が高いことを発見した。更に、28名のヒト単球RNAを用いたqRTPCRにても確認した。興味深いことに、この内の2個の遺伝子は既に、糖尿病発症との関連が報告されている遺伝子であった。また、これらの遺伝子群の発現量と血中レジスチン値が相関することを見出した。次に、血中レジスチンレベルがこれらの遺伝子の発現と関係するメカニズムを明らかにするために、レンチウイルスを用いて、レジスチン過剰発現THP-1細胞を作成しin vitroの系を作成した。このレジスチン過剰発現細胞では、コントロールに比較し、レジスチンmRNAレベルは約8000倍に増加していた。この細胞を用いて、qRTPCRやフローサイトメトリーによる解析を行った。その結果、炎症性マクロファージであるM1マクロファージのマーカーの高値を認めた。糖尿病の既往の無いボランティア29症例のうち、血中レジスチンレベルが高い群13例をcase、低い群16例をcontrolとした。これらからCD14抗体を用いたMACS systemにより単球を単離し、total RNAを抽出した。これを用いてHuman DNA Arrayを施行し、さらに、パスウエイ解析を行い、単一遺伝子の変動だけではなく、これらで影響を受ける遺伝子群を解析した。更に、これらの遺伝子群の発現量を先の29症例とは別の、70名の単球total RNAを用いたQRTPCRで確認した。その結果、血中レジスチンにて影響を受ける遺伝子を複数明らかにした。また、これらの遺伝子群のmRNAレベルと血中レジスチン値の相関関係についても確認した。興味深いことに、この内の3個の遺伝子は既に、1型糖尿病発症との関連が報告されている遺伝子であった。さらに、複数の糖尿病、インスリン抵抗性や動脈硬化に関連が強い因子とレジスチンの関連を認めた。そこで、先とは別の集団250名にて、ELISA法を用いて、これらの因子の血中タンパクレベルを測定し、これらのタンパク群の血中レベルと血中レジスチン値の相関関係を確認した。次に、血中レジスチンレベルがこれらの遺伝子の発現と関係するメカニズムを明らかにするために、ヒト末梢血単球、レジスチン過剰発現THP-1細胞の遺伝子発現解析を行った。血中レジスチンが高い群の単球、およびレジスチン過剰発現細胞では、M2マクロファージの表面マーカー、及び、血中M2マクロファージ関連サイトカインの低下を認め、M1/M2比の増加を認めた。更に、糖尿病やインスリン抵抗性への関与が証明されている炎症性マクロファージであるM1マクロファージから分泌されるCC及びCXC chemokine ligand 2種の高値を遺伝子および血中タンパクレベルで認めた。これらのタンパクによる、Th1の活性化による免疫応答は、糖尿病やインスリン抵抗性、全身の炎症を惹起していると結論づけた。ボランティア24症例のうち、レジスチンレベルが高い群12例をExperimental (case)とし、低い群12例をBaseline (control)とし、それぞれの末梢血からLymphoprepTubeを用いて単核球を分離した後、CD14ビーズを用いたMACSシステムによりさらに単球に分離しRNAを抽出した。RT-PCRによりcDNAとした後、血中レジスチンレベルにより影響を受ける遺伝子群を同定するためにAffymetrix Gene Chip Human U-133 Plus 2 Arrayと定量的RT-PCRにより解析した。

レジスチンレベルが高い群(case)については3 array、低い群(control)については、4 arrayを施行した。Experimental群とBaseline群間で変動している遺伝子を特定するために、二群間の統計検定を実施した。Experiment群3サンプルとBaseline群4サンプルの組み合わせで作成される12通りの発現比を算出し、発現上昇(Log2 ratio>0.585)、発現低下(Log2 ratio<-0.585)を満たすものを血中レジスチンにより影響を受ける遺伝子として同定した。次に、SAM p-value<0.05でかつLog2 Ratio0.585>, <-0.585の発現変動がみられた遺伝子がどのような遺伝子機能群にみられたのかをフィッシャーの正確確率検定を用い検定した。更に、バイオインフォマティクスを用いた遺伝子ネットワーク解析、パスウエイ解析を行うことにより、単一遺伝子の変動だけではなく、これらで影響を受ける遺伝子群として解析した。その結果、複数の免疫に関連する遺伝子が、血中レジスチン値と関連性がある可能性が高いことを発見した。目標数以上のサンプルを収集し、DNA array、miRNA arrayを施行、さらに統計解析、バイオインフォマティクスを用いた遺伝子ネットワーク解析、パスウエイ解析を行うことにより、レジスチンにより影響を受ける候補遺伝子の絞り込みを行うことができた。また、分子メカニズムを明らかにするために、レンチウイルスを用いて、レジスチンの過剰発現THP-1細胞を作成し、臨床サンプルだけではなく、in vitroの系での解明が行える状況になった。ほぼ目標数のサンプルを収集し、DNA arrayを施行、さらに統計解析、バイオインフォマティクスを用いた遺伝子ネットワーク解析、パスウエイ解析を行うことにより、レジスチンにより影響を受ける候補遺伝子の絞り込みを行うことができた。24年度に作成したレジスチンの過剰発現THP-1細胞により、vitroだけではなく、in vitroの系での解明が行える状況になった。これらの細胞あるいは、培養上清中の遺伝子、タンパクの解析を行う。DNA array, miRNA arrayの結果から予測される標的タンパクについては、プロテオ医学センターにて、質量分析装置を用いたタンパク質定量を行う。この絶対定量プロテオミクスの解析基盤となる内部標準安定同位体標識タンパク質は、世界に先駆けて当大学が開発した無細胞タンパク質合成系によりゲノムワイドに合成し、プロテオーム解析に直接使用することができる。24年度の研究結果から、レジスチンはマクロファージとT cellとのinteractionに関係する可能性がでてきた。そこで、レジスチン過剰発現THP-1細胞(monocyte/macrophage)とT cellをtwo chamberを用いて共培養し、T cellにおける影響を、FACS、DNA array、miRNA array、qRT-PCRなどで解析する。
口腔扁平上皮癌の発生機構の分子病理学的研究

当初の研究計画・方法に基づいて項目別に記載する。1.ヒトパピローマウイルスについては口腔粘膜に生じた扁平上皮癌、白板症、上皮増殖などの病変から生材料を生検や手術時に採取し、DNAを抽出して、主にSouthern blottingによって解析を行った。プローブは従来のHPV13,16,18,32型などに加えて、国立予防衛生研究所松倉俊彦博士の協力を得て、氏が開発したHPV58型を用いて多く症例で検索した。これらの結果は本年度歯科基礎医学会で発表したが、現在症例は100例を越える多数例について解析を行っている。2.TGF-βに関する研究は主として、TGF-βのレセプターの構造解析について行った。TGF-βレセプターはセリン・スレオニン型であるが、キナーゼドメインと膜貫通部との間に特異的構造があることが明らかになり、この部が細胞機能発現の為の二次メッセージを二元的にコントロールしていることが明らかになった。これらの結果は本年度の口腔病学会で発表しており、またJournal of Biochemistryにも原著報告した。3.コラーゲン、ラミニンなどの細胞外基質の作用については、唾液腺多形性腺腫を研究対象として解析した。コラーゲンについてタイプ1,2,4,6,9型に対する抗体を用いて検索し、また1,2,9型についてはin situ hybridization法を用いて行った。その結果は本年度の歯科基礎学会で発表したが、唾液腺多形性腺腫にについての結果は口腔病理学会雑誌に原著報告した。なお本研究については本学難治疾患研究所の堀久枝博士の協力を得た。
食塩過剰に伴う高血圧の病態と視床下部由来の内因性ジギタリス様物質

ウアバイン様物質(OLF)は、生体内では濃度が極めて低いためにその高感度測定法の開発が待たれており、我々は高感度ELISA法の開発にまずとりかかり、増感法の応用によりpg/mlオーダーの高感度測定を実現した。HPLCにて生体試料を分析したところ、血漿と組織にはウアバインとほぼ同じ性質の物質が存在することを明らかにし、これを特異的に測定するための前処理法を確立した。これを応用すると、DOCA-食塩高血圧モデルでOLFの尿中排泄量が増大しており、視床下部のOLFが存在することを免疫組織化学で明らかにした。さらに、6-OHDAで脳内のカテコラミン作動神経を破壊すると視床下部-下垂体系のみならず血中濃度も減少することから、視床下部が血液中のOLFの産生部位であることが示唆された臨床的な検討では、定期的な適度の運動が降圧をもたらすが、その際にジゴキシン様物質が減少することが報告されているのでこの点を検討した。その結果、3ヶ月の自転車エルゴメーターによる運動習慣により血圧は有意に下降し、血中OLI濃度も有意に低下した。このことから、運動はEDLFの産生を低下させることが示された。食塩との関連から考察すると、運動時には発汗するために食塩を喪失することも一原因と考えられる。OLIは血中では蛋白と結合しており、強酸性で初めて解離する。そこで、ウアバイン結合蛋白についての解析を行った。種々の精製過程を経て得た蛋白の構造を解析すると、免疫グロブリンに告示したアミノ酸配列を示すことを明らかにした。この点についてはさらに詳細に検討し論文として発表の予定である。ウアバインに対する特異的で抗体価の高いモノクロ-ナル抗体を作成した。これを用いてウアバインの生体内での局在を明らかにする目的で免疫組織化学的手法を用いた。ウアバインは水溶性であることからその固定法などで苦労したが、結局、ラットの視床下部では室傍核の細胞体にウアバイン様免疫活性物質が密に存在することを明らかにした。また、視索上核の細胞体にも粗ながら免疫活性物質を認めた。しかし、以前に報告したポリクロ-ナル抗体で明らかにした所見とはやや異なって、神経線維は良好に染色できなかった。また、副腎では皮質ではなくその髄質に密にウアバイン様免疫活性物質の存在を確認し、吸収試験にも成功した。以上のように、他の研究者とは異なり、私の結果ではウアバイン様物質は視床下部-副腎髄質の神経由来組織のみに存在することを明らかにした。すなわち、一種の神経伝達物質として機能している可能性が示唆された。また、このウアバイン抗体を用いて放射免疫測定法(RIA)の開発を試みたがB/F分離が困難なため断念し、ポリクロ-ナル抗体を用いてRIAを開発した。用いた抗体の特異性はモノクロ-ナル抗体と同じもので、ナトリウムポンプ抑制活性部位をエピト-プとするものである。その結果、DOCA-食塩高血圧ラットではウアバイン様免疫活性物質の尿中排泄量は有意に多く、組織内濃度では視床下部-下垂体系と副腎で高濃度を示し、対照に用いた正塩食飼育ラット群と有意差を示した。従って、食塩負荷高血圧モデル動物ではウアバイン様免疫活性物質の産生が亢進していることが示された。昨年度に完成させた高感度ELISAを用いて血清、尿、組織などを対象にして特異的ウアバイン様免疫活性物質(OLF)濃度を測定した。まず、それぞれの組織、尿、血液から粗抽出した分画をHPLCで細分画して、測定している対象がウアバイン様構造体(HPLCでの溶出位置から)に類似するものであることを確認した。以前にジゴキシン様免疫活性として測定したものと大差がない成績が得られた。

すなわち、OLF濃度は下垂体、視床下部、副腎の順で、その他の組織と比較して大量に含まれており、DOCA-食塩負荷高血圧モデルラットではOLFの尿中排泄量が有意に増大していた。OLF一日尿中排泄量と血圧値は有意の正相関関係を認めた。視床下部と下垂体で濃度が高いことから中枢神経系が産生部位と想定し、抗ウアバインモノクローナル抗体を用いて視床下部での免疫組織化学的染色を行うと、室傍核と視索上核の細胞体にOLFを検出した。そこで、次にOLFの産生と放出機構を検討するために室傍核に密に分布するノルアドレナリン作動性神経の役割を、選択的神経毒である6-OHDAを脳室内に投与して検討した。その結果、投与24時間後では血中、視床下部中、下垂体中OLF濃度はいずれも著名に減少した。しかし、投与1週間後では明らかな回復傾向を認めた。このことから、OLFは視床下部より、ノルアドレナリン作動神経から刺激を受けて産生と放出を行っていることが示唆された。現在は、次年度に目標としているOLFの構造解析に向けて基礎検討中である。
科学的な見方・考え方を育む生活科授業づくりに関する研究

本研究は,義務教育小中9年間を見据え,中学年から始まる理科に焦点化し,生活科の学習がどうあるべきかを探っていこうというものである。子どもの気付きの質をどのように高めていくことが,「科学的な見方・考え方」を育むことにつながっていくのか,その知見を得ることを目的とする。本研究では,「身の回りの自然と直接関わる体験や試行錯誤しながらものを作る活動を充実させ,絵や言葉で表現し交流する場を多く設けることで,気付きの質が高まり,生活的概念の発達が促されるのではないか。」との授業仮説を設定した。検証にあたっては,体験・活動の充実と表現・交流の場の設定への手立てとして,「活動実現型学習過程」による授業構成を行い,児童の気付きの質の高まりを見取る手段として,「気付きの構造表」を用いることとした。研究単元「つくってあそぼう」の教材化にあたっては,(1)児童の興味・関心・意欲を喚起するものであること,(2)活動の目的が明確であること,(3)試行錯誤が可能であること,(4)科学的な見方・考え方につながる内容が包含されていること,の4つの条件を満たすよう心掛けた。本研究によって明らかになったことは,(1)もの作り活動では,振り返りとしての全体での話し合いだけでなく,もの作りの最中にも,気付きの質が高まっていくこと,(2)気付きの質の高まりを見取る際,「気付きの構造表」は有効であるが,これだけでは十分とは言えず,さらに多面的・総合的に判断する必要があること,の2つである。(1)については,製作中の子ども同士が自然な関わり合いをもつことができるよう,場づくりを行った。言葉によるコミュニケーションだけでなく,見合うことによる情報交換も可能となり,友達と自分の作品を比べたり,予想したりしながら製作活動を行う様子が見られた。(2)については,当初,「気付きの構造表」の第1層「個々の子どもの発言のレベル」を,「内容的な記述」「情意的な記述」の2つに分類し,さらに「内容的な記述」を「分析的」「観察的」「感覚的」の3段階に,「情意的な記述」を「観察的・分析的」「感覚的」の2段階に整理して見取りを行う予定であった。しかし,「内容的な記述」は,このままでは,不十分であったため,最終的には4段階に修正した。「気付きの構造表」は,子どもの気付きの質の高まりを見取る際,大変有効ではあるが,多面的・総合的に判断するために,子どもの作品,もの作りの様子,発言やつぶやきなどを,どのように見取っていけばよいか,さらに検討していく必要があるであろう。