hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
コンピュータを介したコミュニケーション論の再構築-ジェンダー分析の新たな展開-

その際に取り上げたのは、ラディカル・デモクラシーの論者ラクラウとムフの「主体」に関する議論である。「主体」を様々な「主体位置」と捉えるラクラウとムフは、その「主体位置」は、それが不安定で閉じることのない言説によって編成されるものであるがゆえに、完全に分離することはなく、「類比」や「相互浸透」を通じて重層的に決定されるものであるとし、重層的な決定の状況にある「自己」がもつ「意味の余剰」こそが、「抵抗」の可能性を生み出すと論じている。こうしたポストモダンの哲学、および、その倫理学の知見に基づいて、コンピュータを介したコミュニケーションが男女間のヒエラルキーから解放されたコミュニケーションの実現と現実世界のジェンダー構造の再編の可能性をもたらすことを示唆するジェンダー研究の理論的基盤を洗練させることを試みた。また、平成18年度は、現在の日本のコンピュータを介したコミュニケーションにおいて、男女間のヒエラルキーから解放されたコミュニケーションの可能性、および、現実世界の支配的配置の再構成の可能性が現れている局面を探求することも試みた。具体的には、REASというサイトを利用してインターネット上のアンケート調査を実施し、オンライン・ロールプレイイング・ゲームのプレイヤーに、インターネットにおけるジェンダー・スウィチングの経験の有無、および、その経験の現実の自己や生活への影響について尋ねた。3月中に100名を超える回答を得たため、分析を始めたところである。本研究者は、現在の日本のコンピュータを介したコミュニケーションにおいて、男女間のヒエラルキーから解放されたコミュニケーションの可能性、および、現実世界の支配的配置の再構成の可能性が現れている局面を探求することを目的として、平成18年12月-平成19年3月の期間、REAS(Realtime Evaluation Assistance System)を利用しインターネット上のアンケート調査を実施。MMORPGのプレイヤー105名に、インターネットにおけるジェンダー・スウィチングの経験の有無、および、その経験の現実の自己や生活への影響等について尋ねた。平成19年度は、この調査結果を手がかりに日本のインターネットにおける自己およびジェンダーの状況について考察を試みた。まず、自己のあり方について見てみると、ジェンダー・スウィチングの経験はないが、MMORPGで現実生活の自分とは異なる自分を経験できると答えた「男性」回答者に、「自己の多元化」に拠って立つ「新たな意味形成」の可能性が鋭敏に感じ取られ意識化されていることが見て取れた。一方、ジェンダー・スウッチングの経験について見てみると、現実のジェンダー秩序において不利な立場に置かれている「女性」の方に、現実とは異なるジェンダーでの経験に拠って立つ「新たな意味形成」に敏感で意識的な様子を見て取ることができた。これに対し、「男性」には、先のジェンダーが関わらない場合とは異なり,「新たな意味形成」に困難を感じている様子が認められた。
動脈硬化および大動脈瘤形成におけるインフラマソームの役割の解明

脂質異常や肥満、糖尿病、高血圧などの生活習慣病の病態基盤における慢性炎症反応の関与が注目されている。本研究では無菌性の炎症反応に関与するインフラマソームと呼ばれるシグナル分子複合体に着目し動脈硬化および大動脈瘤におけるインフラマソームの役割の解明を試みた。その結果動脈硬化形成および大動脈瘤の形成においてその炎症反応においてCaspase-1が重要な役割を持つことが明らかとなった。また腹部大動脈瘤の形成においてもNLRP3インフラマソームがその炎症惹起に重要であることが示された。今後より詳細なメカニズムを解析することによりインフラマソームが治療標的となり得ることが期待される。脂質異常、高血圧や肥満といった生活習慣病の基盤病態として慢性炎症反応が注目されている。しかし、これらの疾患ではどのようにしてその無菌的な炎症反応が惹起されるのかは不明である。そこで我々はインフラマソームと呼ばれる自然免疫経路に注目した。インフラマソームは細胞内の分子複合体でありCaspase-1を活性化する事で、IL-1βを成熟化させ炎症惹起を制御している。なかでもNLRP3インフラマソームは動脈硬化や痛風といった疾患における無菌性炎症の惹起に関与することが報告されている。そこでNLRP3インフラマソームが大動脈瘤の炎症に関与すると仮説を立て、その役割について検討した。ApoEノックアウトマウス(ApoE-KO)およびApoEとNLRP3インフラマソーム構成分子(NLRP3、ASC、Caspase-1)のいずれかと二重欠損したマウス(DKO)にアンジオテンシンII(AngII)を4週間持続投与し腹部大動脈瘤を誘導した。その結果ApoE-KO群に比べDKO群では大動脈瘤の形成率が有意に減少することが明らかとなった。また、病変部の外膜ではマクロファージが浸潤しCaspase-1が活性化していることが明らかとなった。さらに詳細な解析を行なったところ、AngIIによりマクロファージの酸化ストレスが亢進し、インフラマソームが活性化する事が明らかとなった。以上より大動脈瘤の発症・進展においてマクロファージのインフラマソームが重要な役割を持つ事が明らかとなった。今後さらに詳細なメカニズムを解明する事でインフラマソームが大動脈瘤の治療標的になり得ることが期待される。しかし、これらの病態では感染の関与はほとんどなく、その無菌性の炎症反応がどのようにして惹起されるのかは全くわかっていない。最近、新規の自然炎症経路であるインフラマソームと呼ばれるシグナル分子複合体が、痛風やアスベスト肺における無菌性の炎症を引き起こしていることが明らかとされた。本研究では、無菌的な慢性炎症である動脈硬化および大動脈瘤の形成におけるインフラマソームの役割、およびその治療標的としての有効性を明らかにし、インフラマソーム制御による新規の治療戦略の構築を目的として行なった。当該年度は疾患動物モデルにおけるインフラマソームの解明を行なった。まず動脈硬化モデルはApoe-KOマウスに通常食、Western Diet (Research Diets社)、Paigen Diet (Research Diets社)を3ヶ月給餌し作成した。動脈硬化を誘導したマウスから大動脈を採取し動脈硬化病変の評価を行った所、インフラマソームの構成分子の一つであるCaspase-1を欠損したマウスで動脈硬化の誘導が有意に抑制されることが判明した。また腹部大動脈瘤モデルはApoe-KOマウスに昇圧作用を持つ生理活性物質であるアンジオテンシンIIをALZETミニポンプで持続投与(1000ng/kg/min、4週間)して作成した。こちらについてもインフラマソームの構成分子を欠損したマウスで大動脈瘤の形成が有意に抑制されていた。これらのことから、動脈硬化および大動脈瘤形成においてインフラマソームが重要な役割を持つことが示唆された。しかし、これらの疾患ではどのようにしてその無菌的な炎症反応が惹起されるかは不明である。そこで我々はインフラマソームと呼ばれる自然免疫経路に着目した。インフラマソームは細胞内の分子の複合体でありcaspase-1を活性化することで強力な炎症性サイトカインであるIL-1βを成熟化させ炎症惹起を制御している。なかでもNLPR3インフラマソームは動脈硬化や痛風といった疾患における無菌性炎症の惹起に関与することが報告されている。そこでNLRP3インフラマソームが大動脈瘤に関与すると仮説を立て、その役割について検討した。ApoEノックアウトマウス(ApoE-KO)およびApoEとNLRP

3インフラマソーム構成分子(NLRP3、ASC、Caspase-1)のいずれかと二重欠損したマウス(DKO)にアンジオテンシンII(AngII)を4週間持続投与し腹部大動脈瘤を誘導した。その結果ApoE-KO群に比べDKO群では大動脈瘤の形成率が有意に抑制されることが明らかとなった。また、病変部の外膜ではマクロファージが浸潤しCaspase-1が活性化していることが明らかとなった。さらに詳細な解析を行ったところ、AngIIによりマクロファージの酸化ストレスが亢進し、ミトコンドリア由来のROSの産生を介することでインフラマソームが活性化されることが明らかとなった。これらの結果からNLRP3インフラマソームを制御するとこが大動脈瘤形成の予防及び治療に結びつくことが期待される。炎症学動脈硬化モデルに関しては動物モデルによりインフラマソームの構成分子の欠損で動脈硬化の形成が有意に抑制され、マクロファージの浸潤が抑制されることを見いだした。また動脈硬化の形成で重要な血管の石灰化に関与するリン酸カルシウム結晶がインフラマソームを活性化することを見いだした。以上の内容は既に論文報告を行なっておりプロジェクトとしては終えている。一方大動脈瘤モデルに関しても、動物モデルや細胞レベルの検討でインフラマソームが大動脈瘤形成で重要な役割を持つことを見いだしているが、論文投稿した結果、追加実験を求められており現在遂行中である。現在動物モデルの作製および解析はほぼ終えている。また解析の結果、動脈硬化モデルではインフラマソームの構成分子を欠損すると病変形成の抑制と共にマクロファージの浸潤が抑制されること、IL-1βやIL-6、MCP-1といった炎症サイトカインが抑制されることを見いだしている。大動脈瘤モデルではインフラマソームの構成分子を欠損すると大動脈瘤の形成が抑制されること、その際に外膜側に浸潤するマクロファージが病変形成に重要な役割を持つことを見いだしている。追加実験で求められている、インフラマソーム構成分子欠損マウスの生食投与群の追加、骨髄移植モデルの追加、免疫組織化学染色の追加を現在遂行中である。これらを行なった後、すみやかに論文を修正し再投稿を行なう。当該年度では動物モデルを中心に解析を行い、すでに一定の結果を得ている。次年度は当初の予定通り培養細胞におけるインフラマソーム活性化機構の解析を行う予定である。具体的には野生型と各インフラマソーム構成分子を欠損したマウスの骨髄由来の血管平滑筋の初代培養細胞およびマウスのマクロファージ株化細胞であるJ774細胞にASCやcaspase-1のsiRNAによるノックダウンを行い、炎症性因子(ICAM-1、VCAM-1など)、サイトカイン(IL-1β、IL-18、IL-6、MCP-1など)の発現・産生やASC、Caspase-1の活性化を検討する。インフラマソーム活性化の刺激としては酸化LDL、アンジオテンシンII、炎症刺激(LPS、炎症性サイトカイン)を使用する。さらに、インフラマソーム活性化を阻害する薬剤、因子のスクリーニングを行い、疾患モデルにおける効果の検証の予備実験とする。
Nrf2による新しい酸化ストレス応答機構の解析

今年度は以下の成果を得た.1)親電子性物質・活性酸素種によるNrf2蛋白質蓄積の分子機構の解析Nrf2が親電子性物質により蓄積するメカニズムを腹腔マクロファージを用いて調べた。親電子性物質とプロテオソーム阻害剤にはNrf2蓄積に対する協調効果が認められなかったことより、新電子性物質は、プロテオソーム阻害剤と同じ経路でNrf2を蓄積することが示唆された。さらに、Nrf2の半減期が親電子性物質により延長することより、新電子性物質がNrf2を安定化することが明らかになった。Keaplとの相互作用に重要であるNeh2ドメインを用いたNeh2-GFP融合蛋白質の半減期は,GFP蛋白質やNeh5-GFP蛋白質に比較して著明に短縮していることより,Neh2ドメインが,Nrf2蛋白質の分解に寄与することが示唆された。2)Keapl遺伝子破壊実験によるKeaplの生体機能の解析Keapl遺伝子破壊マウスを作製して,肝臓におけるNrf2の蓄積を調べたところ,同因子が著明に蓄積していることが明らかになった.また,Nrf2の標的遺伝子である異物代謝系第2相の酵素群の発現が上昇していることも明らかになった.さらに,Keapl :: Nrf22重欠損マウスでは,これらの酵素の誘導が認められず,Keapl遺伝子欠損マウスの表現型は,Nrf2の過剰状態を反映していることが示された.以上により,Nrf2の活性は,Keaplにより負に制御されていることが個体レベルで証明された.1)親電子性物質、活性酸素種によるNrf2 DNA結合活性上昇の分子機構の解析Nrf2 DNA結合活性増加の分子機構を知るために、マウス腹腔マクロファージを用いて解析した。DEMで刺激後、活性化の様子を経時的に解析すると、Nrf2 DNA結合活性の上昇と核内Nrf2蛋白質量の増加との間に相関性が観察された。非刺激時には、Nrf2蛋白質が細胞質分画には検出されないことおよび核内Nrf2蛋白質量の増加および標的遺伝子の活性化は蛋白質合成阻害剤であるサイクロヘキシミドに感受性であることより、DEMによるNrf2活性化のメカニズムとして、細胞内Nrf2蛋白質の蓄積による核内Nrf2蛋白質の増加が考えられた。細胞内Nrf2蛋白質蓄積の原因の一つとして、Nrf2蛋白質分解の阻害が考えられた。様々な蛋白質分解酵素阻害剤を用いて調べたところ、Nrf2蛋白質量はプロテオソーム阻害剤により著明に上昇した。このことより非刺激状態では、Nrf2はプロテオソームにより分解されており、親電子性物質や酸化ストレスによる細胞内Nrf2蛋白質の増加は、プロテオソームによるNrf2蛋白質分解の阻害であることが強く示唆された。このようなNrf2蛋白質量の変化を担うNrf2蛋白質領域の同定を目的として、Nrf2 N末端蛋白質領域に大腸菌のLacZ蛋白質と核移行シグナルを融合した蛋白質を作製し解析した。この融合蛋白質は、小腸および腹腔マクロファージにおいて、親電子性物質刺激に反応して蛋白質量が増加した。このことにより、Nrf2蛋白質分解制御には、Nrf2 N末端領域が重要であることが明らかになった。2)Nrf2とKeap1の相互作用の解析Keap1との相互作用を欠失したNrf2点変異蛋白質を得るために、酵母のリバースツーハイブリッド法を用い、蛋白質間相互作用の減弱を指標にしてスクニーニングを行った。結果、4つの独立した点変異体の単離に成功した。得られたNrf2点変異蛋白質は野性型蛋白質と同等の転写活性化能を示したが、Keap1による抑制は著明に減弱していた。この点変異体はKeap1との相互作用が減弱していることが明らかになった。2)Keapl遺伝子破壊実験によるKeaplの生体機能の解析Keapl遺伝子破壊マウスを作製して,肝臓におけるNrf2の蓄積を調べたところ,同因子が著明に蓄積していることが明らかになった.また,Nrf2の標的遺伝子である異物代謝系第2相の酵素群の発現が上昇していることも明らかになった.さらに,Keapl :: Nrf22重欠損マウスでは,これらの酵素の誘導が認められず,Keapl遺伝子欠損マウスの表現型は,Nrf2の過剰状態を反映していることが示された.以上により,Nrf2の活性は,Keaplにより負に制御されていることが個体レベルで証明された.
カイコの細胞膜透過性に関する遺伝的制御機構とその遺伝子構造の解析

1.体液中のカロチノイド結合タンパク質(CBP)の物理化学的性質とその生理機能の解析(分担藤井博・土井良宏)白血系統の幼虫体液中に黄血系統の体液に存在するcarotinoid binding protein(CBP)と電気泳動の移動度と同じ位置にタンパク質の存在が認められ、さらにそれはCBPに対する抗血清と反応するタンパク質であることが明らかになった。そこで白血系統の体液からCBP様のタンパク質(CBPL)の分離精製を行い、CBPとCBPL物理化学的性質を比較検討した。CBPとCBPLは共に糖と脂質を含む分子量600kDaの糖脂質複合タンパク質であった。両者は共に223kda(H鎖)と76kda(L鎖)の2つのサブユニットからなっていた。両者のアミノ酸組成はきわめてよく似ており、アスパラギン酸とロイシンが多く、メチオニン、シスチンおよびチロシンが著しく少なかった。両者の脂質成分はジグリセリド、コレステロ-ルの単純脂質成分は同じであったが、CBPLにはカロチノイドが存在しなかった。2.カロチノイド結合タンパクのmRNAの同定と分離法の確立(分担河口豊・藤井博)抗体を用いたウエスタ-ンブロット法によりCBPは中腸組織、卵巣、卵に存在することが明らかとなった。CBPは中腸組織で合成されていることがin vitroおよびin vivoのタンパク質合成実験から明らかとなったので、中腸組繊よりRNAを抽出し,poly A RNAを分離し、これを用いてcDNAを作成し、λg11ファジ-に組み込みcDNAライブラリ-を作成した。このライブラリ-よりCBP抗体を用いて1つのクロ-ンを分離した。現在塩基配列を決めるべく実験を進めている。1.体液中のカロチノイド結合タンパク質の構造と機能の解析:体液からカロチノイド結合タンパク質(CBP)の分離精製法はすでに確立しているがより簡単に分離する方法を確立した。精製CBPは脂質と糖を含む分子量600KDの糖脂質蛋白質であった。CBPは223KDのH鎖と76KDのL鎖の各々1つのサブユニットからなること、phopholipidとcholesterol,di(tri)glyceride,carotinoidの脂質成分を含むことを明らかにした。抗CBP抗体をnativeCBP,H鎖およびL鎖と反応させたところ、nativeCBPおよびH鎖とは強く反応したが、L鎖とは弱く反応した。しかしながら、HおよびL鎖に反応する抗体が得られたことは今後の研究を展開する上で大きな成果であった。今後CBPの構造をより詳細に調べると共に機能を解析する予定である。2.カロチノイド結合タンパク質のmRNAの同定法と分離法:抗CBP抗体を用いてCBPの産生部位を調べたところ、中腸組織で合成されている可能性が示唆された。そこでinvivoでCBP合成を調べたところ、中腸組織で合成されることが明らかとなった。次に中腸組織からCBPmRNAの分離を試みた。5令3日目幼虫の中腸組織からRNAをSDS-phenol法で抽出し、oligodTカラムでpolyARNAを分離した。このpolyARNAを無細胞蛋白質翻訳系で蛋白合成を行い、CBP合成をSDS-PAGE,オートラジオグラフで調べた結果、CBPのH鎖の位置に極めて薄いがバンドが認められた。しかしながらL鎖にはバンドが認められなかった。これは抗体とL鎖との反応が弱いために、合成されていても検出出来なかったものと考えられる。L鎖を検出するためには特異な抗体が必要であるので、現在L鎖並びにH鎖に対する力価の高い抗体を作成中である。またpolyARNAにCBPmRNAが存在したことから、このmRNAの精製分離を行い、cDNAを作る予定である。

1.カロチノイド結合タンパク質mRNAの分離とcDNAの作成:これまでのRNAの抽出法に変えてCsーFTAを用いて、中腸からRNAの抽出を行い、このRNAのタンパク質合成能をrabbit reticulocyte lysateを用いたcell-freeタンパク質合成系で調べた結果、これまでのフェノ-ル抽出法の場合に比べて数倍の合成能を示した。このことはCsTFAで抽出されたmRNAはフェノ-ル法の場合に比べてよりnativeな状態で抽出されたことを示唆している。そこでこのCsTFA法で抽出したRNAよりoligo-dTカラムを用いてpoly-A-mRNAを分離し、このmRNAに対して相補的なcDNAを合成し、これをλgtllに組み込みcDNAライブラリ-を作成した。現在抗CBP抗体を用いてCBP遺伝子(cDNA)のクロ-ニングを行っている。2.カロチノイドの細胞膜透過機構の解析:(1)中腸皮膜および絹糸腺細胞におけるCBPに親和性を示すタンパク質の探索のためにCBPーSepharoseaffinity columnを作成し、中腸細胞および絹糸腺細胞の磨砕液をカラムにかけて親和性タンパク質の検策を行っているが、今のところCBP親和性蛋白質の検出に成功していない。この原因としてはCBP親和性タンパク質が細胞膜および細胞質内に極く微量にしか存在しないために検出できないのか、あるいは細胞内プロテア-ゼが分離中のタンパク質に影響(分解)を与えるためなどが考えられるが、これらの点に関しては現在検討中である。(2)絹糸腺細胞膜中のCBPレセプタ-の探索を行った。まず蛍光物質で絹糸腺細胞表面膜上のタンパク質を標識し、標識タンパク質を電気泳動で調べた結果、主要成分として23、微量成分として数成分を検出することが出来た。そこでこれらのタンパク質の内どの成分がCBPに親和性を示すものかを現在調べている。1.カロテノイドの細胞透過機構の解析:黄血系統(<Y+>___ー)の5齢幼虫の体液より精製したcarotenoid binding protein(CBP))をウサギに注射して作成した抗CBP血清をproteinーAカラムにかけて、抗CBPIgGを分離精製した。このCBPIgGをBrCNで活性化したSepharoseー4Bと結合させた。このようにしてCBPー抗体結合アフィニティカラムを作成した。このカラムに<Y+>___ー系統の5齢3日幼虫の中腸組織を磨砕し、その105,000xgの遠心分離した上清をかけた、中腸皮膜細胞中のCBPに親和性を示すタンパク質の分離を試みた。その結果CBPに親和性を示すタンパク質を検出することが出来なかった。カロテノイド透過機構の一つとして細胞膜にCBPの受容体が存在する可能性が考えられるので、中部絹糸腺における細胞膜上のの受容体の存在を+__ー^cとC__ー系統の中部絹糸腺とを用いて調べた。蛍光試薬であるFITCを用いて細胞膜の表層タンパク質を蛍光ラベルし,タンパク質をSDSーPAGEで分析した。その結果蛍光ラベルされた数成分のタンパク質が検出された。しかしながら+__ー^cとC__ー系統のタンパク質には差異が認められなかった。
前近代東アジアの外交と異文化接触－日明関係を軸とした比較史的考察－

古代日本の遣唐使に比べて、日本の伝統文化の形成期にあたる室町時代の遣明使に関する研究は少なく、まだ基礎的な部分もおぼろげなままである。そこで本研究課題において、おもに遣明使の中国での活動に重点を置きながら、歴史学的な基礎研究を行った。具体的には、遣明使となった僧侶の残した入明記を精読し、中国でのフィールドワークと突き合わせ、他国・他地域から中国への朝貢使節との比較も視野に入れながら、遣明使の歴史的特性を明らかにすることに一定程度成功した。本研究は史料研究(講読)と現地調査(フィールドワーク)の両輪から成っている。以下に、今年度に行なった調査研究の概要を説明する。前者=史料講読については、『策彦和尚初渡集』下巻の翻刻に向けての講読を、現地調査該当箇所を中心に漸次読み進めている。具体的には、年に2回、集中的に(2泊3日)東京に集まり、担当箇所をあらかじめ決めて輪読会を行ない、文字や読みを確定している。現在、その結果をもとにテキストデータを作成・整理中である。今年度の既読箇所は、『初渡集』下巻、嘉靖18年(1539)10月7日同19年1月11日(11/2-12/6をのぞく)までとなった。非常に良いペースで進んでいる。後者=現地調査については、遣明使節の上京経路である京杭大運河沿いを中心に実施している。今年度は、2010年8月23日9月1日にかけて、過去の共同研究におけるフィールドワークでもなお到達することができなかった、長江の北側を中心に調査を行なった。踏査地域は揚州・准安・〓州・徐州におよび、江蘇省北部の主要な関係史跡をおさえることができた。当該地域の入明記の記述は概して簡略であり、また意味がとりにくい個所も多く講読にやや困難をきたしていたが、本調査によって、入明記の記述の舌足らずな点を補い、理解することができた。なお当該地域は開発が進行中であり、史跡の開発・整備、移転などが行われている最中のところも多く、この時期に調査が実施できたのは貴重であった。第一に、本研究がもっとも重点をおいている『策彦和尚初渡集』下巻の翻刻・講読作業は、22年度に引き続き年に2回、集中的に東京に集まって講読を行ない、本年度においては嘉靖19年(1540)1月12日5月9日条までを読み切った。これで22年度と併せて全体の半分程度を読了したことになる。会で作成した凡例に沿って文字や読みを確定し、テキストデータを揃えることが、徐々にではあるが確実にできており、今後の公開に弾みがついたといえる。第二に、当初予定していた、外交比較研究に関する全体的会合は、時間的・金額的制約から、ほとんど行なうことができなかったが、比較外交儀礼の観点から、研究分担者や研究協力者が検討をすすめ、メーリング・リスト(Email)などを通じて議論を深めている。日明関係のみならず、明と朝鮮、朝鮮と日本とのあいだで行なわれた儀礼の比較の結果が、近く、研究協力者の米谷均氏の論稿によって明らかにされる予定である。第三に、本年度の現地調査は、日本遣明使の北京上京ルートのうち、山東省の運河沿いの諸都市を重点的に行なった。参加者のほとんどが山東省に足を踏み入れたことすらなく、史料を読んでいても地理がつかめず、読解に支障をきたしていたエリアである。2011年8月23日から31日にかけて行なった調査では、徳州・臨清・聊城・済寧などの諸都市をまわり、辛うじて残っている古黄河や駅跡と推定される場所などを確認し、読解上意味不明だった部分を相当程度補うことができた。また発掘したばかりの古運河遺構である?上南旺遺蹟を訪れ、運河及び周辺施設についての認識を深めることができたのは大きな収穫であった。第一に、本研究がもっとも重点をおいてきた『策彦和尚初渡集』下巻の翻刻・講読作業については、予定通り、本研究課題期間中に終了することができた。具体的には、毎年2回、集中的に東京に集まって講読を行い、講読メンバーで作成した凡例に沿って文字や読みを確定し、基礎的な注釈を施したテキストを作成したものである。今後の課題としては、残る「下之下」巻、および『策彦和尚再渡集』について同様な作業をいかに続けるか、またこれまでに作成・確定したテキストの公開をいかに行うかなどが挙げられる。後者については印刷公刊・Web公開など、さまざまな具体化の方向を検討していきたい。

第二に、当初予定していた、外交比較研究に関するワークショップ等は、時間的・金額的制約から、それのみで開催することが叶わなかったが、比較外交儀礼の観点から、研究分担者や研究協力者が検討をすすめ、それによっていくつかの研究成果を得られた(研究成果欄参照)。また不十分ながら、Email等で日常的に情報交換や議論を進めてきた。なお、次の第三項に掲げる遼東地域での現地調査は、比較史的検討の闕を埋める意味を持つ。第三に、本年度の現地調査は、2013年8月24日から9月1日、遼東半島方面で実施した。おもに、朝鮮から中国北京への朝貢使節(燕行使)の辿った陸路につき、基点となる地域・都市を辿っていく内容である。同時にこれは、過去3か年度に行なった日本の遣明使節の入朝ルート(揚州から北京を調査)との比較を企図したものと位置づけられる。具体的には、瀋陽・遼陽・丹東・大連等のほか、鴨緑江河口等も巡検し、明清時代・李朝時代の関連史蹟を辿り、その地勢や距離感等の把握に成功したものと思う。江南の浙江から、運河沿いに北上する遣明使のルートと異なり、乾燥した陸路を延々と辿る朝鮮燕行使の旅はさらに負担の大きいものであったことが推察される。第一に、本研究がもっとも重点をおいている『策彦和尚初渡集』下巻の翻刻・講読作業は、22・23年度に引き続き年に2回、集中的に東京に集まって講読を行ない、本年度までに嘉靖20年(1541)8月23日条までを読み切った。これは全体の4分の3程度にあたり、残る一年で確実に読み切る目途がついた。会で作成した凡例に沿って文字や読みを確定し、テキストデータを揃えることも、着実に積み重ねられており、大変順調に進捗していると言える。第二に、当初予定していた、外交比較研究に関する全体的会合は、主として金額的制約から行なうことができなかったが、比較外交儀礼の観点から、検討をすすめ、メーリング・リスト(Email)などを通じて議論を深めている。その成果は本年度、各種著作物として刊行された(研究成果欄参照)。第三に、本年度の現地調査は、日本遣明使の北京上京ルートのうち、山東省から河北省そして北京までの最終行程の諸都市を重点的に行なった。北京・天津を除く地域は、参加者のほとんどが未踏の地域であり、史料を読んでいても地理がつかめず、読解に支障をきたしていたエリアである。2012年7月31日から8月8日にかけて行なった調査では、徳州滄州天津間に点在する鎮レベルの町を順番に巡り、各地に辛うじて残っている古運河や、駅館の痕跡の記憶を確認し、また北京市・天津市の関連史跡をまわって、読解上意味不明だった部分を相当程度補うことができた。なお9月以降、日中関係は急激に悪化したが、本調査はそれ以前に行なうことができ、相応の成果を挙げることができたのは幸運であった。外交比較研究についてはやや遅れがみられるが、基本史料である入明記の翻刻などは順調に進展しており、また現地調査もおおむね予定通りに進められ、成果を上げつつある。また、本研究課題の成果として、『遣明船入門』(仮題)という編著の刊行計画も平行して立ち上がっており、研究成果の社会への還元も近く果たせる見込みである。25年度が最終年度であるため、記入しない。また、本研究課題の成果として、『遣明船入門』(仮題)という編著の刊行計画も平行して進行中であり、研究成果の社会への還元も果たせる見込みである。当初の計画通りに研究(翻刻・講読作業;フィールドワーク;研究報告会など)を実施していきたい。
消化器癌における形質発現の研究

1.十二指腸腫瘍の粘液抗原の形質発現25例の十二指腸癌のpS2,HGM, SIMA, CD10,MUC2の発現では、de novo癌由来(9例)、腺腫由来(12例)で小腸型のSIMAがそれぞれ6/9,8/12、ブルンナー腺由来(4例)で胃型のHGMが4/4の高頻度の傾向を示した。2.大腸腫瘍の粘液抗原の形質発現(1)通常の腺腫並びにsm癌において胃型の形質発現は低く、SIMAは腺腫と比較し癌での発現率が統計的に有意に高かった。(2)臨床病理学的には各種粘液抗原の中でSIMAのみがsm浸潤実測値、静脈侵襲等の生物学的悪生度に相関していた。(3)正常粘膜から化生変化で発生したHPまたは鋸歯状腺腫(SA)は、胃型の形質を獲得し、癌化により腸型の形質に分化していた。3.膵腫瘍における粘液抗原の形質発現(1)過形成病変、IPMA, IPMCにおける粘液抗原の発現;胃型の形質発現(pS2,HGM, MUC5AC, MUC6)は、過形成、腺腫、さらに腺癌で有意な発現があり、小腸マーカーSIMAは癌で特異的な発現を示した。(2)浸潤膵管癌における粘液抗原の発現;浸潤膵管癌では、MUC1,SIMAの腫瘍間質陽性率は、37.0%,26.1%を示しMUC1/SIMAの間質発現を訴す症例が、両者とも陰性の症例に比較して有意に予後不良だった。4.胆管の過形成病変、dysplasia、腺癌における粘液抗原の発現過形成病変では、pS2,MUC5AC, MUC6,SIMAがわずかに発現し、dysplasiaでは、発現はなかった。腺癌では、pS2,HGM, MUC5AC, SIMAは、それぞれ65.2%,65.2%,86.4%,65.2%認められ、有意な発現を示した。臨床病理学的にHGMの発現がある症例は、血管浸潤の頻度、深達度が有意に高かった。1.大腸の腺腫(隆起型(I型)、平坦型(II型))、sm癌(隆起型(I型)、平坦型(II型))における粘抗原(pS2,HGM, MUC5AC, MUC6,MUC2,SIMA)の発現に関する検討(1)(腺腫、sm癌)においてpS2の発現頻度は、I型では(3/22,7/33)、II型では(0/10,1/18)、HGMは、I型で(9/22,9/33)、II型で(1/10,1/18)、MUC5ACは、I型で(2/22,7/33)、II型では(0/10,1/18)で胃型の粘液の発現は低い。MUC6は腺腫、sm癌とも発現は認められない。(2)MUC2は、I型で(16/22,22/33)、II型では(7/10,9/18)、SIMAは、I型で(6/22,30/33)、II型では(0/10,10/18)を示した。

SIMAは腺腫と比較し癌での発現率が統計的に有意に高い。(3)臨床病理学的には各種粘液抗原の中でSIMAのみがsm浸潤実測値、静脈侵襲等の生物学的悪生度に相関していた。(4)粘液形質発現でみた,I型、II型腫瘍では、腺腫のみ、腺腫とsm癌に共通、sm癌のみの3つの発現パターンあり粘液の形質発現の点からもI型、II型はそれぞれ特徴的な組織発生を示していた。2.十二指腸腫瘍の粘液抗原の発現における検討(2)組織発生学的には、de novo発生並びに十二指腸腺腫の癌化には小腸型、Brunner腺由来には胃型の形質発現の傾向が見られた。1.膵の過形成病変、膵管内乳頭腫瘍(IPMA,IPMC)、浸潤膵管癌における粘液抗原の発現に関する検討1)過形成病変、IPMA,IPMCにおける粘液抗原の発現膵管上皮の過形成では、粘液抗原pS2,HGM,MUC5AC,MUC6,SIMA,MUC2,MUC1の発現は、それぞれ32.4%,26.5%,38.2%,35.3%,5.7%,0%,並びに11.8%を示した。IPMAでは、それらの粘液抗原は、それぞれ84.4%,84.4%,31.3%,15.6%,6.3%並びに12.5%で、IPMCでは、それぞれ81.3%,75.0%,81.3%,25.0%,50.0%,25.0%,並びに31.3%を示した。胃型の形質発現(pS2,HGM,MUC5AC,MUC6)は、過形成、腺腫、さらに腺癌で有意な発現があり、小腸マーカーSIMAは癌で特異的な発現を示した。2)浸潤膵管癌における粘液抗原の発現浸潤膵管癌では、粘液抗原MUC5AC,SIMA,MUC2,MUC1は、それぞれ73.9%,45.7%,4.3%,100%の発現が認められた。またMUC1,MUC5AC,SIMAの腫瘍間質での陽性率は、それぞれ37.0%,60.9%並びに、26.1%を示し癌間質に大部分認められた。臨床病理学的には、MUC1またはSIMAの間質発現を示す症例が、両者とも陰性の症例に比較して有意に予後不良だった。2.胆管の過形成病変、dysplasia,腺癌における粘液抗原の発現過形成病変では、HGM,MUC2の発現は認められなったが、pS2,MUC5AC,MUC6,SIMAがわずかに発現していた。Dysplasiaでは、発現はすべてなく、腺癌においてpS2、HGM、MUC5AC,SIMAでそれぞれ65.2%,65.2%,86.4%,65.2%認められ、有意な発現を示した。臨床病理学的にHGMの発現がある症例は、血管浸潤、深達度が有意に高かった。
生物多様性・生態系に配慮した商品についての消費購買意識調査

本研究では,生物多様性・生態系に配慮した商品について消費購買意識調査を行うことで,消費者の生物多様性に対する意識を定量的に把握することを目的とする.具体的には,生物多様性・生態系に配慮した商品を例として台所用洗剤を取り上げ,消費者に対してアンケートを行い,購買意識についてコンジョイント分析を行った.本調査におけるアンケートはインターネットを通じて行い,消費者は配慮型商品を評価しているなどのいくつかの知見を得た.本研究では,生物多様性・生態系に配慮した商品について消費購買意識調査を行うことで,消費者の生物多様性に対する意識を定量的に把握し,また,生物多様性を維持しながら持続可能な成長を続けていくために必要な施策について検討することを目的している.具体的には,生物多様性・生態系に配慮した商品を例として消費者に対してアンケートを行い,消費者の配慮型商品に対する購買意識についてコンジョイント分析を行った.このアンケートでは,台所用洗剤を生物多様性・生態系に配慮した商品の例として採りあげた.洗剤の洗浄性能や手肌への影響,除菌効果,そして生物多様性・生態系配慮型製品であるかどうかを属性とし,プロファイルを設計した.生物多様性・生態系配慮型製品であるかどうかという属性は,洗剤の売上の1%を環境保護団体を通じ,“緑の回廊"の保全に活用しているという具体例を提示した.“緑の回廊"とは,植物系洗剤の原料となるパームオイルをとるために分断されてしまった森と森をつなぐことを目的に土地を取得し,そこに住む野生動植物の移動経路を確保するというものであり,それについても説明文を設けて被験者に説明を行った.以上のようなアンケートはインターネットを通じて行った.分析結果についてはいくつかの知見を得たが,詳細については現在とりまとめているところである.急ぎ取りまとめ,論文として投稿したいと考えている.なお,本年度は,上記のような生物多様性・生態系配慮型製品以外のものを対象とし,いくつかのアンケート調査も行った.これらは調査対象が全く異なるものの,類似の評価手段・手法を用いていることから,得られた知見は本研究を行うために非常に有用であった.よって,これらの研究も成果の一部として挙げている.本研究では,生物多様性・生態系に配慮した商品について消費購買意識調査を行うことで,消費者の生物多様性に対する意識を定量的に把握することを目的とする.具体的には,生物多様性・生態系に配慮した商品を例として台所用洗剤を取り上げ,消費者に対してアンケートを行い,購買意識についてコンジョイント分析を行った.本調査におけるアンケートはインターネットを通じて行い,消費者は配慮型商品を評価しているなどのいくつかの知見を得た.企業における従来の生物多様性に対する取り組みは,植林など社会貢献的なものが多く,今後,(1)直接影響の削減,(2)間接影響の削減(3)土地水域の管理・保全といった点がますます求められている.しかしながら,企業がこのような取り組みを行っても,消費者がこの取り組みを理解し,支えていかなければ持続可能な成長は達成できない.そこで本研究では,生物多様性・生態系に配慮した商品について消費購買意識調査を行うことで,消費者の生物多様性に対する意識を定量的に把握し,また,生物多様性を維持しながら持続可能な成長を続けていくために必要な施策について検討することを目的とする.具体的には,生物多様性・生態系に配慮した商品を具体例として消費者に対してアンケートを行い,消費者の配慮商品に対する購買意識についてコンジョイント分析を行うものとする.今年度の計画においては,既存研究の整理や先進事例調査を行うことを予定していた.既存研究においては,前述のような生物多様性・生態系に配慮した商品について定量的に実証分析を行った研究は存在しないものの,本研究に適用可能な分析手法についてはいくつかの研究が存在する.例えば,環境配慮型商品の市場調査をコンジョイント分析によって行った研究や,消費者の生物多様性・生態系への配慮を定量的に把握している研究が存在する.今年度は,これらの研究について取りまとめ,本研究に適用するための課題を検討した.さらに今年度の計画では,先進事例を調べることが予定されていた.現時点における具体的な事例としては,サラヤ株式会社のヤシノミ洗剤を候補としている.このヤシノミ洗剤は,その売上の1%がボルネオ保全トラストを通じてキナバタンガン川の「緑の回廊」の保全に活用されている.このような生物多様性保全のための取り組みに対して,消費者がどの程度,商品を評価しているのか定量的に分析できればと検討中である.やや遅れている理由として,当初計画していた生物多様性・生態系に配慮した商品を開発している企業へのヒアリング等の情報収集が延期されたことが挙げられる.企業とのスケジュールが合わず,次年度に延期された.この点については,できる限り早く対応する予定である.本年度は,まずは遅れている企業へのヒアリングを進める.また,当初の計画であった,アンケート設計およびプレ調査,本調査および調査結果の解析と社会への発信についても同時に進めていく予定である.アンケート設計およびプレ調査では,コンジョイント分析を行うために,生物多様性・生態系に配慮した商品を参考に,いくつかの配慮方法を属性として抽出し,プロファイルを作成する.そしてアンケート本調査に先立ち,プレテストを行う予定である.本調査および調査結果の解析と社会への発信では,プレテストの結果を基に,アンケートに問題がないかを吟味し,必要に応じて修正を加える.本調査は,インターネットによるアンケート調査によって実施し,そこから得られたデータを統計的に分析する.さらに,その分析結果を学会で報告し,企業に発信していくことを予定している.

次年度使用額は,当初計画していた生物多様性・生態系に配慮した商品を開発している企業へのヒアリング等の情報収集を次年度に延期することによって生じたものであり,延期した情報収集に必要な経費として平成24年度請求額とあわせて使用する予定である.また,本年度には前述のようにアンケート設計およびプレ調査,本調査および調査結果の解析と社会への発信を予定している。これらの進捗に合わせて,研究費を順次利用していく予定である.
新規生理活性ペプチドNURPが担う新しい生体制御機構の解明

ペプチドホルモンや神経ペプチドに代表される生理活性ペプチドは、細胞間の情報伝達を担う主要な分子の1つであり、生体の制御及び恒常性維持において重要な役割を果たしている。したがって、新しい生理活性ペプチドを同定してその機能を明らかにできれば、未だ知られていない生体制御機構を明らかにすることができる。現在でも、「新たな生体制御機構の解明」という学術的問いに対して、新規生理活性ペプチドの探索が盛んに行われている。これまでに発見されている多くの生理活性ペプチドは、それ自身の有する活性を指標とした精製によって同定されているが、近年では多様な方法を駆使して生理活性ペプチドが発見されるようになっている。特に、多くの生理活性ペプチドが、翻訳後修飾の過程において前駆体タンパク質の塩基性アミノ酸対部位で限定切断を受けて産生されることが明らかになってからは、タンパク質のアミノ酸配列上に存在する塩基性アミノ酸のクラスターを目印として新規生理活性ペプチドが発見されるようになった。最近、神経ペプチドであるneuromedin U(NMU)の前駆体タンパク質の配列解析により、この前駆体から産生されるもう1つの新しい生理活性ペプチドとしてNMU precursor-related peptide(NURP)を同定し、脳室内投与実験によりプロラクチン分泌促進活性などを明らかにした。しかしながら、受容体を含めた作用機序が全く不明であるため、NURPによる生体制御機構は未だ完全には明らかになっていない。そこで、NURPの受容体の探索を実施している。ラットへ脳室内投与したNURPは、プロラクチン分泌を抑制的に制御している視床下部からのドーパミンの分泌を抑制することにより、下垂体からのプロラクチン分泌を促進すると考えられる。その一方で、同じ前駆体タンパク質から産生されるNMUは、脳室内投与するとドーパミン分泌を促進することによりプロラクチン分泌を抑制した。このように、NURPはプロラクチン分泌制御においてNMUと真逆の作用を示すことから、NURPはNMUのアンタゴニストとしてNMU受容体に作用している可能性が考えられた。そこで、CHO細胞で安定発現させたNMU受容体に対して、FLIPRを用いたcalcium mobilization assayにてNURPの活性評価を実施したところ、アンタゴニスト活性は観察されなかった。また、NURPはNMU受容体に対してアゴニストとしても機能しないことから、本ペプチドはNMU受容体とは異なる受容体を介して機能していることが示された。c-fosタンパク質の免疫組織化学染色により、NURPの脳室内投与によって活性化される脳内領域を検討したところ、ある特定の領域でc-fosタンパク質の発現量の増加が認められた。また、ラジオアイソトープ標識したNURPを用いて脳スライス切片への結合実験を試みたところ、NURP脳室内投与後にc-fosタンパク質の発現誘導が認められたのと同じ領域でNURPの特異的な結合が観察された。これらの結果は、NURPが結合することにより特定の領域の神経細胞が活性化していることを示唆しており、この領域における受容体分子の存在が示唆された。NURP受容体の分子レベルでの同定を試みる。受容体発現細胞の検索にはCellKeyシステム(モレキュラーデバイス社)を用いる。このシステムは、リガンド添加前後の細胞形態変化をリアルタイムで検出することにより、一度のアッセイでGタンパク質共役型受容体やチロシンキナーゼ型受容体など様々な受容体の活性化を同時に測定でき、尚且つ活性検出パターンによりシグナル伝達経路の推測が可能である。また、多検体処理により受容体を発現している培養細胞株を効率よく検索できる。NURPの産生組織や同一前駆体から産生されるNMUの受容体の分布から考えると、主として神経系や免疫系、下垂体の培養細胞をNURP受容体の探索に供する。NURPへの反応性が高いために受容体が発現していると考えられる培養細胞や受容体分子が存在すると推定された特定脳領域を出発材料として、NURP受容体分子の同定を試みる。また、NURPの生理的役割を理解するために、新たな機能も検討する。

その一方で、同じ前駆体タンパク質から産生されるNMUは、脳室内投与するとドーパミン分泌を促進することによりプロラクチン分泌を抑制した。このように、NURPはプロラクチン分泌制御においてNMUと真逆の作用を示すことから、NURPはNMUのアンタゴニストとしてNMU受容体に作用している可能性が考えられた。そこで、CHO細胞で安定発現させたNMU受容体に対して、FLIPRを用いたcalcium mobilization assayにてNURPの活性評価を実施したところ、アンタゴニスト活性は観察されなかった。また、NURPはNMU受容体に対してアゴニストとしても機能しないことから、本ペプチドはNMU受容体とは異なる受容体を介して機能していることが示された。c-fosタンパク質の免疫組織化学染色により、NURPの脳室内投与によって活性化される脳内領域を検討したところ、ある特定の領域でc-fosタンパク質の発現量の増加が認められた。また、ラジオアイソトープ標識したNURPを用いて脳スライス切片への結合実験を試みたところ、NURP脳室内投与後にc-fosタンパク質の発現誘導が認められたのと同じ領域でNURPの特異的な結合が観察された。これらの結果は、NURPが結合することにより特定の領域の神経細胞が活性化していることを示唆しており、この領域における受容体分子の存在が示唆された。NURP受容体の分子レベルでの同定を試みる。受容体発現細胞の検索にはCellKeyシステム(モレキュラーデバイス社)を用いる。このシステムは、リガンド添加前後の細胞形態変化をリアルタイムで検出することにより、一度のアッセイでGタンパク質共役型受容体やチロシンキナーゼ型受容体など様々な受容体の活性化を同時に測定でき、尚且つ活性検出パターンによりシグナル伝達経路の推測が可能である。また、多検体処理により受容体を発現している培養細胞株を効率よく検索できる。NURPの産生組織や同一前駆体から産生されるNMUの受容体の分布から考えると、主として神経系や免疫系、下垂体の培養細胞をNURP受容体の探索に供する。NURPへの反応性が高いために受容体が発現していると考えられる培養細胞や受容体分子が存在すると推定された特定脳領域を出発材料として、NURP受容体分子の同定を試みる。また、NURPの生理的役割を理解するために、新たな機能も検討する。次年度に使用する予定の研究費は、主に物品費として計画していたが使用しなかったものである。物品費については必要最小限の消耗品の購入に充てたため、次年度使用額が生じた。翌年度は物品費として使用する予定である。本研究計画では、国立循環器病研究センターの保有する共同研究機器ならびに、国立循環器病研究センター研究所生化学部の機器を中心に使用するため、研究を遂行するための物品費(消耗品)を中心として研究費の使用を計画している。
進行非小細胞肺癌患者に対するエルロチニブの有効性や副作用に影響を与える因子の探索

非小細胞肺癌患者を対象として、上皮成長因子受容体阻害剤(EGFR-TKI)であるエルロチニブの毒性に影響を与える薬理遺伝子多型や薬物動態を検討した。薬理遺伝子多型は、ABCG2、ABCB1、ABCC2、CYP3A4、CYP3A5、CYP1A1、CYP1A2の遺伝子多型解析を行い、薬物動態解析は、トラフ値、Cmax、AUCなどを解析した。遺伝子多型や薬物動態と毒性とに有意差を認めなかったが、間質性肺炎で死亡した1例では、ABCG2C>Aのhomozygousを有し、最も高いAUCを呈していた。また、肝機能障害を起こした症例では、起こさない症例よりCmaxが高い傾向があった。非小細胞肺癌に対する上皮成長因子受容体阻害剤(EGFR-TKI)の効果予測因子として、がん組織におけるEGFR遺伝子変異が報告されているが、EGFR遺伝子変異を認める症例でもEGFR-TKIが奏効しない症例が存在する。また、間質性肺炎や肝機能障害を起こす症例があるが、個体差がありその機序も分っていない。宿主側の薬剤感受性を規定する因子として、抗癌剤の代謝に関与する薬物代謝酵素やトランスポーターなどの遺伝子多型により、抗癌剤の血中濃度や癌組織への移行に個体差が生じることにより、感受性や副作用に関与すると考えられ、erlotinibの薬剤感受性規定因子、副作用に関与する因子をCYP3A4、CYP1A1、ABCG2、ABCB1などの遺伝子多型解析、CYP3Aのフェノタイピング解析、薬物動態解析により解明することを目的として本研究を施行中である。非小細胞肺癌に対する上皮成長因子受容体阻害剤(EGFR-TKI)であるerlotinibの毒性の間質性肺炎、肝機能障害、皮疹、下痢などの予測因子は分っていない。また、erlotinibの薬物動態には個体差があることが報告されている。抗がん剤の代謝に関与する薬物代謝酵素やトランスポーターなどの遺伝子多型により、抗がん剤の血中濃度に個体差が生じ、毒性の発現に関与すると考えられ、erlotinibの薬剤感受性規定因子、副作用に関与する因子をABCG2、ABCB1、ABCC2、CYP3A4、CYP3A5、CYP1A1、CYP1A2の遺伝子多型解析、薬物動態解析により解明することを目的として本研究を施行した。遺伝子多型や薬物動態と毒性との間に有意差を認めるものはなかったが、間質性肺炎で死亡した1例では、ABCG2C>Aのhomozygousを有し、検討した症例の中で最も高いAUCを呈していた。非小細胞肺癌に対する上皮成長因子受容体阻害剤(epidermal growth factor receptor-tyrosine kinase inhibitor: EGFR-TKI)の効果予測因子として、がん組織におけるEGFR遺伝子変異が報告されている。しかしながら、EGFR遺伝子変異を認める症例でもEGFR-TKIが奏効しない症例が存在し、逆に野生型EGFRを発現する患者においても感受性を有する患者が頻度は低いながら存在するが、その機序は分かっていない。宿主側の薬剤感受性を規定する因子として、抗癌剤の代謝に関与する薬物代謝酵素やトランスポーターなどの遺伝子多型により、抗癌剤の血中濃度や癌組織への移行に個体差が生じることにより、感受性や副作用に関与すると考えられ、EGFR遺伝子変異以外のerlotinibの薬剤感受性規定因子、副作用に関与する因子をerlotinibの臨床薬理学的特性、すなわちCYP3A4、CYP1A1、ABCG2、ABCB1などの遺伝子多型解析、CYP3Aのフェノタイピング解析、EGFR-TKI結合蛋白質解析、薬物動態解析により解明することを目的として、本研究を施行中である。本研究は、患者検体を用いるトランスレーショナルリサーチであり、平成23年度は、erlotinibによる治療を受ける20歳以上の切除不能進行非小細胞肺癌患者で、本研究への選択基準を満たす症例を対象とし、文書による同意を得て症例を集積した。登録された症例では、CYP3A4、CYP1A1、ABCG2、ABCB1などの遺伝子多型解析、erlotinib薬物動態解析、患者血漿結合蛋白質の探索・同定のため、プロトコールに基づき採血を施行した。本年度の目標登録症例数は15例であったが、23例より同意を得て本研究に登録した。得られた血液検体は、埼玉医科大学腫瘍内科へ送付され、研究分担者の佐々木康綱、藤田健一の下で、CYP3A4、CYP1A1、ABCG2、ABCB1などの遺伝子多型を解析中である。

現在施行中の遺伝子多型解析や薬物動態解析を終了させ、臨床情報との関連を解析し、erlotinibの抗腫瘍効果や薬物有害反応との関連について評価する。症例集積は概ね順調であり、平成24年度は、予定通りさらに15症例の集積を行う予定である。また、平成23年度はerlotinibの薬物動態解析や患者血漿結合蛋白質の探索・同定は施行していないが、これらも解析予定である。また、遺伝子情報や薬物動態解析と臨床情報との関連を解析し、erlotinibの抗腫瘍効果や薬物有害反応との関連について評価する。平成25年度は、解析を終了し、学会発表や論文発表に重点を置いて研究を完成させる予定である。平成23年度は、症例集積を主体として行い、erlotinibの薬物動態解析や患者血漿結合蛋白質の探索・同定を施行していないため、研究費は残ったが、平成24年度は本年度分と併せて、CYP3A4、CYP1A1、ABCG2、ABCB1などの遺伝子多型解析、erlotinib薬物動態解析、患者血漿結合蛋白質の探索・同定のために使用する。