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メルロ=ポンティの存在論構想における「芸術」の寄与

フランスの現象学者メルロ=ポンティの遺稿草稿(『眼と精神』の下書きやメモ類、およびゲシタルト派の芸術心理学者アルンハイムの読書メモ、『見えるものと見えないもの』関連の未刊草稿など)の調査を行った。また、晩年のメルロ=ポンティの他の芸術に関する考察に対して取っていたスタンスを、メルロ=ポンティ自身の前期の「セザンヌの懐疑」における考え方と比較・考察し、かつミシェル・アンリという哲学者の芸術論とを比較することなどを通して、メルロ=ポンティの後期存在論構想に対して、「芸術」が果たしている役割が根本的であることが確認された。21年度は、パリ国立図書館にて、メルロ=ポンティ遺稿のマイクロフィルム(BNFマイクロフィルム分類番号:R1997/120235)を閲覧し、特にタイプ草稿(完成直前稿と思われるもの)と原稿のテクストとの比較を試みた。いまだ、テクストの生成にまで達するものではないが、細かい修正の他、とりわけ、末尾の一文に大きな変更(厳密には削除)が生じていることが判明した。この削除の意味は、更に『眼と精神』全体の構想に基づいて判定するべき性質のものであるため、現段階で軽々に結論づけることはできないが、芸術の問題が存在論の問題のみならず、政治的な性質の問題との連繋において考えられていたこと(これまでのところでは、両者はあまり積極的に繋がるものとは考えられてはいなかった)を伺わせる。このことは、従来見落とされがちであったメルロ=ポンティの存在論構想において、芸術だけでなく、政治的なものの意味も共に提起しているという点で、新たな光を当てることを可能にしていると考えられる。もちろん、最終的にはその文言は削除されているため、削除されたことの意味も同時に考察されなければならない。さらにもう一点判明したことは、原稿メモの段階で、絵画の問題が、間人間的な関係の理念の問題かつ存在への関係の理念として捉えられ、あらゆる哲学のモデルであると考えられている点である。既に、晩年の講義でもこの視点は語られているが、『眼と精神』も同様の視点に立つものとして構想されていることが判明したことは、重要であると思われる。22年度は、昨年に引き続き、パリ国立図書館にて、メルロ=ポンティ遺稿のマイクロフィルム(BNFマイクロフィルム分類番号:R 1997/120235)を閲覧し、『眼と精神』の成立のプロセスを追った。まず、『眼と精神』がかなり短期間で書き上げられたこと(1960年5月9月初頃の間)が明確になった。しかし、メルロ=ポンティは、1955, 6年以来、直接には美学関連のテクストを著してはいない。そこで、この問題設定自体がいかにして浮上してきたのかという新たな問題が生じてきた。明確な資料が残っているものではないが、23年度に検討できればと考えている。次に、覚え書き・メモの部分の検討から、『眼と精神』の原稿を依頼したシャステルの影響を読み取ることが出来た。『眼と精神』本文にはシャステルへの言及はないものの、晩年のコレージュドフランスでの講義録の中には2箇所言及が確認できる。そのような意味で、シャステルのメルロ=ポンティへの思考への影響が確認できた。最後に、総合的に見て、この『眼と精神』草稿(マイクロフィルム)は論文執筆に関わるすべての草稿やメモを網羅したものではなかった、ということが結論できる。すべての草稿に日付がまったくないためその執筆時期等の確認は困難であり、また執筆の順についても確認の方法がない故、現在の草稿の順序が執筆の順序とは考えられないことが明確になった。その意味で、成立過程そのものを100%明確にすることは困難であるということが明確になった。本年度は、過去2年間の成果を承けて、総括的な研究を行うべく、パリ国立図書館にて、メルロ=ポンティ遺稿のマイクロフィルム(BNFマイクロフィルム分類番号:R 1997/120235)を閲覧、『眼と精神』草稿のみならず、本稿成立に影響を与えたものと考えられる、ルドルフ・アルンハイム(1904-2007)の主著"Art and Visual Perceptipn : A Psychology of the CreativeEye."(Berkeley and LosAngeles : University of California Press. 1954)のメルロ=ポンティによる読書メモ(BNFマイクロフィルム分類番号:MF12775)を中心に解読を行った。その成果を、「メルロ=ポンティのアルンハイム・メモについて」(『総合文化研究』第9巻、東京電機大学)としてまとめた。この結果として言えることは、アルンハイムのゲシタルト心理学者としての研究成果、およびその考察に関しての影響は、限定的であること、とりわけ、「現象」の解釈に関しては、やはりメルロ=ポンティ自身の立場とのズレとに気づかれる。

この点は、むしろ、メルロ=ポンティ自身の立場を鮮明にすることになり、有意であった。また、もう一つの課題として挙げていた他の哲学者との比較であるが、本年度はミシェル・アンリ(1922-2002)の哲学、とりわけ、アンリの芸術論"Voir l'invisible"におけるカンディンスキー論との比較を行い、ミシェル・アンリ哲学会第三回大会(2011年6月11日於立命館大学)において、「表現と直接性の隔たりアンリ・メルロ=ポンティ・カンディンスキー・シェーンベルク」と題した発表を行った(本発表は、2012年5月刊行予定の『ミシェル・アンリ研究』第二号に掲載決定)。ここでは、アンリの「内在」概念そのものの有意性と優位性を認めつつも、むしろ問題はその内在からの表現のレベル、すなわち<芸術作品が内在の表現である>とされるそのレベルに於いて、<いかにしてその表現が可能となるのか>という問いこそが、芸術作品成立の要であること、しかしアンリはそれを語り得てはいないのではないか、という疑問を、メルロ=ポンティの制度化の概念と<内なるものの外/外なるものの内>といった思考を手がかりとして考察することを目指した。それから、2012年3月には、実存思想協会(東京大学)にて開催されたシンポジウム「メルロ=ポンティ研究の今」においては、「両義性と可逆性」と題して、メルロ=ポンティの絵画論「セザンヌの懐疑」と『眼と精神』とを手がかりとして、メルロ=ポンティが伝統的な二者択一・二分法に対して、いかなる態度を取っているかについての報告を行った(この報告は、2012年9月刊行予定の『メルロ=ポンティ研究』第16号に掲載予定)。
小児の歯肉炎発症のメカニズムに関する研究(歯牙交換期のグラム陰性菌叢について)

歯肉炎の原因となる病原性菌を検討するために,特定グラム陰性菌の同定を歯牙交換期の小児を対象として行った。特定グラム陰性菌はBacteroides属,Capnocytophaga属,Eikenella属,Fusobacterium属である。歯肉炎発症によりグラム陽性球菌の減少が示唆されていることからStreptococci属も同時に調査した。対象年齢は5才から7才であった。結果1.同じ歯肉炎群でも個体間で歯肉縁下試料中の歯周疾患関連細菌の比率および出現頻度は異なっていた。また個体によっては検出されない菌種が存在した。2.黒色色素産生Bacteroides属は歯肉炎群の永久歯75%,乳歯60%に認められたが,正常群においても永久歯38%,乳歯60%に認められた。3.Fusobacteriumは乳歯の健康群には認められなかった。永久歯においては歯肉炎群の方が高い頻度で認められた(63%)。4.Eikenella属は永久歯の歯肉炎群において高い頻度で認められた。5.Capnocytophaga属は歯肉炎の有無に関係なく存在していた。6.Streptococcus属は歯肉炎群では出現率が減少する傾向にあった。以上の結果より,歯牙交換期の歯肉縁下細菌叢は個体間で大きく異なりことが明らかとなり,また乳歯と永久歯においても菌叢は異なることが明らかになった。このことは歯周疾患関連細菌の歯肉炎原因菌に違いがあることを示唆しており,細菌の伝搬時期および定着様式が歯牙交換期の小児の個体間で異なることが示唆された。
自動車エンジン用電磁駆動バルブのためのリニアモータと制御系に関する研究

自動車エンジン用電磁駆動バルブ(ElectroMagnetic engine Valve:以下EMVと略記)のバルブ駆動用のリニアモータの設計・試作を行い、その推力特性を測定することでその性能を明らかにした。その結果からさらに性能を改善した新型リニアモータ構造を提案することができた。従来のEMV用のバルブ位置決め制御系の性能を改善する新たな制御系を提案することができた。さらに、EMVに対するエンジン環境下の外乱を明らかにし、バルブ位置決め制御系の外乱に対する性能を明らかにした。以上のことによってEMV実用化に関する多くの知見を得ることができた。自動車エンジン用電磁駆動バルブ用の新型リニアモータの試作を行った。その新型リニアモータは,バルブをより高速に開閉させるために従来のリニアモータより高推力化を実現するものであり,新たな構造を採用したリニアモータである。また,高速な応答を目的としているため,エンジン搭載のための決められたサイズの中で推力定数/可動子質量を最大化することを目的に設計している。その試作を行うにあたり,細部の再設計を行った。具体的には,コイルスペースの形状,可動子サイズの最適化などを行った結果,再設計前と比べ,推力定数/可動子質量を7%向上させることができた。その設計をもとに新型リニアモータの試作を行い,静推力特性を測定した。その結果,リニアモータのストローク端において一部相違があるものの,おおむね設計値と同様となることを確認した。一方,バルブの位置決め制御系として,可変切換超平面をもつスライディングモードサーボ制御系を用いていた。しかし,高速応答とオーバーシュート低減の点で高い制御性能が得られるものの,構造が複雑であり,また,設計パラメータの調整が困難であるという問題があった。そこで,従来の制御系と同等の制御性能を得られながら構造を簡素なものとした新たな制御系を提案し,バルブの駆動実験からその有効性を確認した。さらに,制御系のエンジン環境下での対外乱性能を評価するための第一歩として,エンジンの振と温度の計測を行った。研究目的は,自動車エンジン用電磁駆動バルブ用のための新型リニアモータの性能を検証すること,エンジン環境下の外乱を再現する実験装置を製作すること,制御系のエンジン環境下に想定される耐外乱性能を検証することである.○前年度にひきつづき,試作したバルブ駆動用の新型リニアモータの基本性能の検証を行った.具体的には動特性の測定を行った.さらにその新型リニアモータを用いた位置決め制御実験を行った.その結果,改善すべき点が有ることが分かった.そこで,構造を見直した新たなリニアモータを提案した.その新型リニアモータでは,永久磁石の搭載方法の変更を行った.新型リニアモータでは,リニアモータ設計の評価値として用いている推力定数/可動子質量を改善することができた.さらに,可動子位置に対して発生推力がほぼ変化しない推力特性とすることができ,制御性を改善することができた.○前年度のエンジンの振動の測定結果をもとに,コイル可動型リニアモータを駆動源として用いる振動再現装置を作成した.その振動再現装置を用いることでエンジンの振動(最大加速度)を概ね再現できることを確認した.○上記の振動再現装置にリニアモータを搭載し制御系の位置決め制御実験を行い,制御系の耐外乱性能を検証した.提案制御系を用いることで,外乱下においてもバルブを駆動できることを確認した.研究期間を通して,自動車エンジン用電磁駆動バルブを実用化する上での有用な知見を多く得ることができた.
腫瘍診断を目的とした核酸系シングルフォトンCT薬剤の開発

ニトロイミダゾール類は強い低酸素細胞親和性を有し、腫瘍への取り込みが期待されたが、その中枢毒性が強いために、腫瘍診断および治療薬剤としての応用性は限られていた。本研究では、毒性の軽減と腫瘍組織取り込みの効率化を図るため、ニトロイミダゾールを含む新規ヌクレオシドを合成し、そのシングルフォトンCT(SPECT)用薬剤としての有用性について検討した。目的ヌクレオシド合成には、まず、ニトロイミダゾールと糖部の立体選択的カップリング反応を実施する必要がある。このためには、塩基部の活性化、糖部分の1'位活性化およびOHの保護基の選択が必須である。ハロゲン化アラビノースの保護基として、ベンゾイル基を選び、シリル化されたニトロイミダゾールとカップリング反応を実施すると、反応は円滑に進行した。この場合、2'位のアシル基の隣接基効果により、アラビノースの1'位のハロゲンの配位にかかわらず、α-ヌクレオシドのみが生成した。核酸トランスポーターによる腫瘍への集積を考慮すると、β-ヌクレオシドの有効性が期待された。本研究では、α-リボシドから2'位のOHの配位を反転させ、C_<1'>-C_<2`>cisヌクレオシドに変換する方法により、β配位をもつニトロイミダゾールアラビノシドの立体選択的合成を確立し、新規アゾマイシンヌクレオシドを得ることができた。さらに糖部のヨード化について検討し、2級OHである2'位および1級OHである5'位の選択的ヨード化に成功した。新規アゾマイシンヌクレオシドは、X線構造解析により、絶対構造,糖部のコンフォメーションを含め、その構造の詳細が明らかにされた。^<125>I標識体について、その薬剤安定性と腫瘍組織取り込みを検討した結果、腫瘍への集積は良好な結果を示し、シングルフォトンCT用腫瘍診断薬剤としての有用性が示唆された。本研究では、毒性の軽減と腫瘍組織取り込みの効率化を図るため、ニトロイミダゾールを含むヌクレオシドを合成した。目的のヌクレオシド合成には、まず、ニトロイミダゾールと糖部の立体選択的カップリング反応を実施する必要がある。β-ヌクレオシドを得るためには、ニトロ基の活性を損なわずに脱保護できるメトキシベンジル基の導入が最も有望と考えられたが、ハロアラビノース生成過程の酸性条件下で、容易に脱離してしまい、ヌクレオシドはほとんど得られなかった。そこでC_<1'>-C_<2'>-transヌクレオシドすなわちα-リボシドから2'位のOHの配位を反転させ、C_<1'>-C_<2'>cisヌクレオシドに変換する方法を検討した。その結果、β配位をもつニトロイミダゾールアラビノシドの立体選択的合成を確立することができた。さらに、アラビノシドの2'位および5'位の選択的ヨード化に成功した。

ニトロイミダゾール類は強い低酸素細胞親和性を有し、腫瘍への取り込みが期待されたが、その中枢毒性が強いために、腫瘍診断および治療薬剤としての応用性は限られていた。本研究では、毒性の軽減と腫瘍組織取り込みの効率化を図るため、ニトロイミダゾールを含む新規ヌクレオシドを合成し、そのシングルフォトンCT用薬剤としての有用性について検討することとした。本研究の結果、α-リボシドから2'位のOHの配位を反転させ、C_1,-C_2,cisヌクレオシドに変換する方法により、β配位をもつニトロイミダゾールアラビノシドの立体選択的合成を確立し、新規アゾマイシンヌクレオシドを得ることができた。さらに糖部のヨード化について検討し、2級OHである2'位および1級OHである5'位の選択的ヨード化に成功した。新規アゾマイシンヌクレオシドは、X線構造解析により、絶対構造,糖部のコンフォメーションを含め、その構造の詳細が明らかにされた。さらに、高選択的、高収率で放射性ヨードを導入し、新規薬剤β-ヨードアゾマイシンアラビノシドβ-IAZAを合成することができた。^<125>I標識体について、その薬剤安定性と腫瘍組織取り込みを検討した。その結果、モデル動物では腫瘍への集積は良好な結果を示した。また、さらに、MTTアッセイおよび生体内分布の測定も行い、放射線増感効果に対する検討も実施した。以上の結果、2'-及び5'-ヨード標識体のシングルフォトンCT用腫瘍診断薬剤としての有用性が示唆された。
非天然型プレニル化芳香族化合物合成系の構築とその利用

Streptomyces niveusのnovobiocin生合成遺伝子クラスター中にコードされているNovQの基質特異性を解析するため、大腸菌での発現系を構築した。NovQはこれまでの研究で、DMAPPをプレニル基供与体、4-hydroxyphenyl pyruvate (4-HPP)をプレニル基受容体として、二価金属イオン非存在下で、dimethylallyl化された4-HPPを生成することが報告されている。しかしながら、4-HPPの構造アナログであるtyrosineやhydroxyphenyl lactate、hydroxybenzoateとは反応しないことが明らかにされており、それ以上の基質特異性については調べられていない。発現ベクターpHIS8にnovQ遺伝子を導入したプラスミドを構築し、大腸菌BL21(DE3)株で発現させて組換えタンパク質を取得した。次に、精製した組換えタンパク質NovQを炭素数5のジメチルアリル2リン酸存在下、フラボノイドとしてはナリンゲニン、ダイゼイン、ゲニステイン、クリシン、ガランギン、イソサクラネチン、フェニルプロパノイドとしてはp-クマル酸とカフェ酸、ポリケチドとしてはオリベトール、レスベラトロール、フラビオリンを使用し、反応を行った。その結果、予想に反して、NovQはナリンゲニン、ダイゼイン、ゲニステインと反応すること、さらには、p-クマル酸と反応して、ドゥルパニンを生成することが判明した。また、レスベラトロールとも反応し、そのプレニル化の位置は、これまでのプレニル化反応とは異なることが判明した。2.NphBを用いた反応機構の解明NphBを用いた詳細な酵素学的パラメーターの解析からは、この反応が逐次定序反応で進行することを明らかにした。さらには、結晶構造データを基に、GPPが第一基質であること、GPPから生じるゲラニルカチオンが芳香族基質上の電子と作用することでC-C結合が形成されることを提唱した。本研究課題では、プレニル基転移酵素を大量発現させた大腸菌の形質転換体を用いた微生物変換を基本的な原理として、ジメチルアリル化芳香族化合物やゲラニル化芳香族化合物の合成系構築を目的としている。平成18年度は、ジメチルアリル基転移酵素、Sco7190を発現させた組換え大腸菌を用いて、微生物変換によりナリンゲニンのジメチルアリル化化合物を得ることができた。これにより酵素精製をすることなく、簡便にプレニル化化合物を合成できる系を確立することができた。加えて、大腸菌で高発現させた組換えタンパク質Fur7(フラキノシン生合成酵素の一つであるゲラニル基転移酵素)を用いてフラビオリンとGPPを反応させた場合、2種類の反応産物が得られたので構造解析を行つた。一つはNphB(ナフテルピン生合成酵素の一つであるゲラニル基転移酵素)と同じく一級のカルボカチオンが生成し反応したと考えられるが、もう一方は3級のカルボカチオンが生成し反応したと考えられる構造であった。このような酵素活性をリバースプレニル基転移活性と呼び、これまでにカビ由来の酵素で報告されているが、プレニル基転移活性と両方の活性を有する酵素はFur7が始めての例である。CL190株のメバロン酸経路遺伝子クラスター下流に、脂肪酸生合成の初期段階の反応を触媒する酵素であるKASIIIと相同性を有するORF-nを見出した。解析の結果、本ORFは、真核生物の酵素に関して報告されているようにアセチルCoAの2分子からアセトアセチルCoAを生成するのではなく、アセチルCoAとマロニルCoAからアセトアセチルCoAを生成する新規酵素、アセトアセチルCoAシンターゼであることが判明した。一方、Streptomycessp.CL190株からPCRを利用してクローニングしたアセトアセチルCoAチオラーゼホモローグはアセトアセチルCoAの合成活性を示さなかった。以上のことから、放線菌のメバロン酸経路は真核生物のそれとは初期段階が異なることが明らかになった。

2.NphBを用いた反応機構の解明NphBを用いた詳細な酵素学的パラメーターの解析からは、この反応が逐次定序反応で進行することを明らかにした。さらには、結晶構造データを基に、GPPが第一基質であること、GPPから生じるゲラニルカチオンが芳香族基質上の電子と作用することでC-C結合が形成されることを提唱した。
脊髄内C線維終末に発現する温度センサー機能と病態時変化の解明

脊髄スライス標本を用いた研究から、熱受容体であるTRPV1はC線維の末梢のみならず中枢側にも発現しており、何らかの役割をはたしているものと考えられた。そこで、C線維の多く終末している膠様質細胞からin vivoパッチクランプ記録行い、末梢に加えた熱に応答するか否かを調べた。その結果、いずれの細胞も熱刺激には応答せず、中枢側に発現するTRPV1の意義は不明であった。そこで、慢性炎症モデルラット脊髄スライス標本を用いて同様に膠様質細胞から記録を行い、脊髄への直接熱刺激に対して如何なる温度感受性を示すかを正常ラットのそれと比較検討した。正常ラット脊髄スライスでは脊髄灌流Krebs液の温度を43oC以上にすると自発性EPSCの頻度の増大と緩徐な内向き電流が記録された。しかし、42oC以下の温度では何ら作用を示さなかった。次に慢性炎症ラット脊髄スライス標本から記録を行い、温度を変化させると、38oCから自発性EPSCの増大と緩徐な内向き電流が観察された。これらの結果は、慢性炎症モデルではTRPV1受容体が感作を起こし、より低い温度でも活性化されることが示唆された。末梢皮膚に加えられた侵害性の熱および冷刺激は、それぞれTRPV1およびTRPA1受容体によって受容され、脊髄後角に運ばれていると考えられる。今までの研究からこれら脊髄後角にはこばれていると考えられている。今までの研究からこれらの受容体は末梢のみならず中枢側にも発現しており、その機能については全く不明であった。昨年の研究ではそれぞれの受容体作動薬によってグルタミン酸の放出が増大することを明らかにしてきた。しかしながら、それらの作動薬が中枢側に存在することはなく、また、侵害性の温度閾に脊髄が達することはないと考えられる事から、脊髄内に発現している受容体の機能的役割にっいては全く不明であった。一方、末梢の炎症によってプロスタグランディンやブラジキニン、ATPなどの炎症関連物質が放出され、それらによってTRPV1受容体が感作をうけ、本来刺激温度ではない36度C付近でもTRPV1が活性化されることが明らかにされている。また、炎症時にはCOX2が脊髄後角に発現することが報告されており、これらの物質によって中枢側に発現したTRPV1受容体の感作が惹起される可能性が考えらた。そこで、慢性炎症モデルラットから脊髄スライスに後根を付した標本を作製し、脊髄スライス灌流液の温度を36度Cから上昇させたときにいかなる応答が観察されるかを調べた。その結果、正常ラットでは温度変化によっては自発性EPSCになんら変化は観察されなかったが、炎症ラット脊髄では温度を上昇させるに従い自発性EPSCの頻度が増大した。また、後根誘起のシナプス応答も増大傾向を示した。今後、正常ラットの脊髄から記録を行いプロスタグランディンやブラジキニン存在下に温度を変化させたときの自発性EPSCの変化を明らかにしていく。
ゼブラフィッシュのストライプパターン形成の分子機構

川上は、ゼブラフィッシュにおいては成魚のストライプパターン形成異常変異Hagoromoの原因遺伝子であり、マウスにおいては指形成異常変異Dactylaplasiaの原因遺伝子であるhagoromo遺伝子(Dactylin遺伝子)の産物の機能解析を.行った。すなわち、マウスDactylin遺伝子産物の生化学的解析を行い、特異的なターゲット蛋白質をユビキチン化し、蛋白質分解経路へ導く働きをするSCFユビキチンリガーゼの構成成分であることを明らかにした。近藤は、ゼブラフィッシュストライプパターン形成を制御する普遍原理の研究をさらに発展させた。縦じまと横じまをもつ近縁な熱帯魚種間でのパターン変化を説明する新しい理論を考案し、簡単なパラメーターの変化でパターンが変化しうることを証明した。これは、熱帯魚の体表面のストライプパターンが、「反応拡散システム」で作られるという近藤の従来からの仮説を強く裏付けるものである。1、新しい色素パターン変異分離のため、ゼブラフィッシュ挿入変異生成法の開発を行った。Tol2因子プラスミドDNAと試験管内で作成した転移酵素mRNAをゼブラフィッシュ受精卵に微量注入し、Tol2が転移反応によって始原生殖細胞の染色体に組み込まれ、次世代に伝えられることを示した。2、ゼブラフィッシュストライプパターン形成異常変異hagoromoの解析を行った。新規F-box/WD40リピート蛋白質をコードする遺伝子中へのプロウィルス挿入がhagoromo変異の原因であることを明らかにした。hagoromo遺伝子のマウスorthologは、マウス指形成異常変異Dactylaplasiaの原因遺伝子であった。3、ゼブラフィッシュの皮膚を走査および透過電子顕微鏡で観察し、皮膚の層構造、それぞれの層に存在する細胞の同定を行った。皮膚は3層からなり、薄い表皮層、コラーゲンと繊維芽細胞からなる真皮層、色素細胞層に分かれる。3種類の色素細胞は、通常真皮と筋肉細胞の間にある色素細胞層にのみ存在し、まだ形態からは同定できない細胞も数種存在していることが明らかになった。4、ゼブラフィッシュ黒色素胞が位置情報を持つかどうかを調べるため、キメラを使った実験を行った。これにより、黒色素胞がパターン形成そのものには関与しておらず、ほかの細胞の作った位置情報に依存して分化することにより、目に見える模様を作っていることが明らかとなった。5、パターンを作り出す位置情報が、皮膚のどの部分にあるのかを調べるため、黒色素胞の移植を行った。鱗に散在する樹状の小黒色素胞を皮膚に移植したところ、色素細胞層に存在するような大きな黒色素胞に分化することがわかった。移植する場所をストライプ間の隙間にするとこの現象は見られないことから、黒色素胞が正常な位置情報に反応していることがわかる。川上は、ゼブラフイッシュにおいては成魚のストライプパターン形成異常変異Hagoromoの原因遺伝子であり、マウスにおいては指形成異常変異Dactylaplasiaの原因遺伝子であるhagoromo遺伝子(Dactylin遺伝子)の産物の機能解析を行った。すなわちマウスDactylih遺伝子産物の生化学的解析を行い、特異的なターゲット蛋自質をユビキチン化し、蛋自質分解経路へ導く勧きをするSCFユビキチンリガーゼの構成成分であることを明らかにした。縦じまと横じまをもつ近縁な熱帯魚種間でパターン変化を説明する新しい理論を考案し、簡単なパラメーターの変化でパターンが変化しうることを証明した。
アジア社会のグラスルーツの構造と変動に関する比較研究-日本とインドネシアの比較-

日本の町内会とインドネシアのRT/RWに関する一連のフィールドサーベイから得た知見(findings)は以下の通りである。(2)町内会およびRT/RWについていえば、それらは「上から」の制度的文脈のなかにある。(3)ジャカルタ特別州(DKI Jakarta)の多くのRT/RWは基本的には、行政によって動員された組織であるが、それらは部分的にある種のセイフティ・ネットとして機能している。(4)日本の町内会は衰退過程にあり、行政の末端組織もしくは「なじみ集団」(親睦集団)として生きながらえている。(5)日本ではコミュニティ全体は分化する傾向にあるが、インドネシア・とくにジャカルタ特別州ではますます凝集力を高めている。本年度の研究実績は以下の通りである。(1)交付決定後,日本側とインドネシア側で連絡を取り合い,研究計画の確認と初年度のスケデュールの作成および調整をおこなった。(2)平成11年の8月上旬から9月上旬にかけて日本側のメンバー(吉原,高城,永井およびラファエラが参加。長谷部は病気のため不参加)がジャカルタに出かけ,インドネシア側のメンバーと共同研究のためのテーマおよび枠組の設定,さらにフィールドの選定等について研究会をもち,共同研究について合意に達した。(3)上記期間において,メンテンアタスでポスヤンドゥ,RT/RWおよび独立記念日行事についてのヒヤリングサーベイをおこなった。併せて,国立図書館,公文書館,インドネシア大学中央図書館,インドネシア政府統計局等で関連資料の収集につとめた。(4)主に吉原,ラファェラがジェトロ,アジア経済研究所,国立国会図書館,京都大学東南アジアセンター等で関連文献資料の収集を行い,また関連研究者から意見を聴取した。(5)上記(3)・(4)で得られた文献資料の整理をおこない,その成果をファイル化した。(6)平成12年の3月中旬にインドネシア側のメンバ-が来仙し,初年度の研究成果を報告確認するとともに,次年度のラフなスケデューリングをおこなった。なおこの際,日本側メンバーのサポ-トを得て,インドネシア側のメンバーが中心となって仙台の地域社会についての予備調査をおこない,その成果を共有した。1.昨年度の調査研究の集約をおこない,日本側とインドネシア側の双方で知見を共有し,課題の析出につとめた。そしてその成果をファイリングした。2.平成12年8月に日本側メンバー(吉原,高城,長谷部,永井およびラファエラ)がジャカルタにでかけ,複数事例対象地でインドネシア側メンバー(Medelina,Heru,GumilarおよびIsmanto)と共同して地域住民組織,地域福祉,地域医療に関するフィールドサーベイを実施した。そして,CSISおよびインドネシア大学で,その第一次集約のための研究会を開催した。3.昨年度に続いて,国立図書館,公文書館,インドネシア大学,インドネシア政府統計局,CSIS図書館,シティホール資料室等で地域統計資料およびコミュニティ関連資料の収集につとめた。4.昨年度に続いて,吉原とラファエラがジェトロ・アジア経済研究所,京都大学東南アジア研究センター,国立民族学博物館,国立国会図書館等で上記関連資料の収集をおこなった。5.上記3.,4.で得られた資料を整理するとともに,その成果をファイリングし,メンバーが共同で利用できるようにした。6.平成13年2月上旬にインドネシア側メンバー(Medelina,Heru,GumilarおよびIsmanto)が来仙し,日本側メンバーと共同して地域住民組織,NPO等についての現地調査を実施するとともに,その成果の共有につとめた。併せて,研究会を開催し,次年度の調査研究の課題とスケデュールについて議論した。7.なお,インドネシア側メンバーは,帰国時に国立国会図書館でインドネシアおよび日本のグラスルーツに関する資料を収集した。日本の仙台市および盛岡市、DKIジャカルタのメンテアタスおよびチキニ等の定点観察であきらかになったグラスルーツの構造は、まずその中核組織である町内会およびRT/RWに関していえば、いずれも「上から」の位置づけが目立っている。そして組織的にトップヘヴィの状況であるのも似ている。しかし、ジャカルタの場合、RT/RWを機軸にして(RT/RWと)その他諸組織・団体が重層的に交錯するなかで、上からの動員組織としての性格を色濃くとどめながらも、過渡的に人びとのセイフッティネットとして機能している。他方、日本の場合、町内会の衰退はいなめず、全体として行政補完組織もしくは「なじみ集団」としてかろうじて存続しているようにみえる。日本の場合、明らかにかつて町内会がになっていた機能のかなりの部分を、ボランタリー・アソシエーションとかNPOが取って替わるようになっている。実際、RT・RWが地域のイッシューをうまく取り込んで組織の活性化をはかっているのにたいして、町内会の場合、イッシューに対処できず、組織的衰退をまねいている。

たしかに、コミュニティ全体でみると、日本でもインドネシアでも諸組織・団体の分節化と多層化がすすんでいるが、それが後者ではコミュニティの統合へと作用しているのにたいして、前者の場合、コミュニティの分化に向かっているように見える。もっともこうしたそう反する傾向も、日本の側で一部町内会で「テーマコミュニティ化」する動きがみられること、またインドネシア側でRT/RWじたいの活動がパターン化し、「上から」のテコ入れに馴化する傾向がみられること等からして、決して固定的にとらえるべきではない。
チロシン脱リン酸化酵素群によるMAPキナーゼの直接抑制機構

MAPキナーゼ(MAPK)は、細胞外からの刺激で活性化され、ほ乳動物では、ERK、JNK/SAPK、p38の三つの異なったMAPKカスケードが知られている。これらのカスケードは、細胞の分化や増殖、ストレス応答や細胞死などのシグナル伝達過程で重要な役割を果たし、がんとも密接に関連すると考えられる。チロシンだけに特異的な脱リン酸化酵素(狭義のPTP)やdual-specificity脱リン酸化酵素のMKPは、MAPKに結合しこれを脱リン酸化/抑制する。その、ほ乳動物における生理的意義を明らかにするため本年度は、以下の解析を行った。1)MAPK脱リン酸化酵素群の多様性の検討Tリンパ球でPTP、MKP合わせて8種のMAPK脱リン酸化酵素が発現していた。これらは、MAPK特異性、細胞内局在、抗原受容体刺激後の誘導様式に多様性を認めた。2)PTPのERKによるリン酸化とその意義LC-PTPのThr66、Ser93がERKによってリン酸化されること、リン酸化部位をAlaに置換した変異型LC-PTPでERKへの抑制作用が弱まることを明かにした。LC-PTPがERKによるリン酸化で制御される可能性を示した。3)sem型MAPKノックインマウスの作成。脱リン酸化酵素群と結合せず、抑制に抵抗性のsem型p38MAPKをノックインしたマウスを作成した。このマウスは、p38の抑制系が働かない状態となり、事実p38の活性化亢進を認めている。今後、MAPK抑制機構の生理的意義の解析に使用する。
テキスト間の関係を考慮した複数テキスト要約に関する研究

本研究では,複数のジャンルのテキストで構成されるテキスト集合にも対処可能な複数テキスト要約技術の開発を行なう.一般に複数テキストを対象にした自動要約では,要約対象のテキスト集合の収集が要約の前段階として必要であり,その際,ジャンルの異なるテキストがテキスト集合中に混在する可能性がある.また,どのようなジャンルのテキスト集合を要約対象とするかで,要約の手法が異なる可能性がある.そこで本研究では,世の中に存在するテキストのジャンルとして主要と考えられるWebページ,科学論文,新聞記事の3つのジャンルを対象とし,(1)テキストのジャンルを特定する技術,(2)ジャンルごとのテキスト集合を要約する複数テキスト要約技術,(3)ジャンルごとのテキスト集合の要約をまとめ,複数のジャンルのテキスト集合から要約を作成する技術の3つに構成素を分解し,これらの開発を行ない,複数のジャンルのテキストで構成されるテキスト集合にも対処可能な複数テキスト要約技術を実現する.文書横断文間関係タグ付コーパスを構築し,異なるテキスト中の文間関係を解析する技術,テキスト中の単語,表現が肯定的/否定的な記述をもたらすものであるかどうかを判定する技術,また,システムの出力する要約テキストを自動的に評価する技術を計算機上に実現した.そして,それらの有効性を評価した.本研究では,複数のジャンルのテキストで構成されるテキスト集合にも対処可能な複数テキスト要約技術の開発を行なう.一般に複数テキストを対象にした自動要約では,要約対象のテキスト集合の収集が要約の前段階として必要であり,その際,ジャンルの異なるテキストがテキスト集合中に混在する可能性がある.また,どのようなジャンルのテキスト集合を要約対象とするかで,要約の手法が異なる可能性がある.そこで本研究では,世の中に存在するテキストのジャンルとして主要と考えられるWebページ,科学論文,新聞記事の3つのジャンルを対象とし,(1)テキストのジャンルを特定する技術,(2)ジャンルごとのテキスト集合を要約する複数テキスト要約技術,(3)ジャンルごとのテキスト集合の要約をまとめ,複数のジャンルのテキスト集合から要約を作成する技術の3つに構成素を分解し,これらの開発を行ない,複数のジャンルのテキストで構成されるテキスト集合にも対処可能な複数テキスト要約技術を実現する.文書横断文間関係タグ付コーパスを構築し,異なるテキスト中の文間関係を解析する技術,テキスト中の単語,表現が肯定的/否定的な記述をもたらすものであるかどうかを判定する技術,また,システムの出力する要約テキストを自動的に評価する技術を計算機上に実現した.そして,それらの有効性を評価した.本研究では,多様なテキスト集合に対処可能な複数テキスト要約技術の開発を行なう.一般に複数テキストを対象にした自動要約では,要約対象のテキスト集合の収集が要約の前段階としてテキスト検索システム等で行なわれるが,その際,性質(ジャンル,事実を述べているのか/意見を述べているのか等)の異なるテキストがテキスト集合中に混在する可能性がある.また,テキスト集合中のテキスト間の関係も様々である(たとえば,特定の事件に関する一連の報道なのか,同じ種類の複数の事件に関する報道を集めたものなのか,等).したがって,要約対象のテキスト集合中のテキストの性質,テキスト間の関係を同定し,それを元にした要約手法を開発する必要がある.そこで本研究では,要約システムを,(1)テキスト集合中のテキストの性質(ジャンル,事実を述べているのか/意見を述べているのか等)を特定する技術,(2)(1)の情報を考慮して,テキスト集合中のテキスト間の関係を特定する技術,(3)(1),(2)の情報を元に,テキスト集合から要約を作成する技術の3つの構成素に分解し,これらの開発を行ない,多様なテキスト集合に対処可能な複数テキスト要約技術を実現する.16年度では,(1)を開発するとともに,(2),(3)を開発するための基礎的な分析,検討を行なった.1)テキスト中の各文が事実を記述する文なのか/意見を述べる文なのかを自動判別する技術を開発した.この情報は,テキストのジャンル特定(たとえば,報道記事なのか社説なのか,日記かどうか等)および,テキストからの重要文抽出の際に利用される.2)テキスト集合中のテキスト間の関係を特定する技術,異なるテキスト中の文間の関係を解析する技術に関する分析,検討を行なった.2)(3)の要素技術として,(i)テキスト集合中のテキストのジャンル,テキスト間の関係を元に,要約テキストの構造を決定する枠組および,(ii)異なるテキスト中の文間の関係を考慮して,テキストから重要文を抽出する技術に関する分析,検討を行なった.本研究では,WWW上の検索エンジンの出力結果のような,多様なテキスト集合を対象とし,(1)テキスト集合中のテキストの性質(ジャンル,事実を述べているのか/意見を述べているのか等)を特定する技術,(2)(1)の情報を考慮して,テキスト集合中のテキスト間の関係を特定する技術,(3)(1),(2)の情報を元に,テキスト集合から要約を作成する技術の3つの構成素に要約システムを分解し,これらの開発を行なう.17年度では,テキスト集合中のテキスト間の関係を特定する技術,異なるテキスト中の文間の関係を解析する技術を開発した.テキスト構造解析の場合と同様,テキスト集合の構造解析においても,テキスト中のさまざまな情報が利用可能である.そこで,テキスト集合の構造を正しく解析するのにどのような情報が有用かを分析,検討した.そのため,定義したテキスト間,文間の関係の体系を元に,コーパス中のテキスト間,文間に関係を人手でタグ付けしたタグ付コーパスを作成した.

「テキスト中の文間の関係を解析することで,テキストの構造を得る技術(頑健なテキスト構造解析技術)」を開発しており,「テキスト集合中のテキスト間の関係を解析し,テキスト集合の構造を得る技術」および,「異なるテキスト中の文間の関係を解析する技術」は,それを拡張する形で実現した.具体的には,異なるテキスト中の文間において,「同等」,「推移」の関係が成り立つ2文を精度良く同定する技術を開発した.本研究では,複数のジャンルのテキストで構成されるテキスト集合にも対処可能な複数テキスト要約技術の開発を行なう.一般に複数テキストを対象にした自動要約では,要約対象のテキスト集合の収集が要約の前段階として必要であり,その際,ジャンルの異なるテキストがテキスト集合中に混在する可能性がある.また,どのようなジャンルのテキスト集合を要約対象とするかで,要約の手法が異なる可能性がある.そこで本研究では,世の中に存在するテキストのジャンルとして主要と考えられるWebページ,科学論文,新聞記事の3つのジャンルを対象とし,(1)テキストのジャンルを特定する技術,(2)ジャンルごとのテキスト集合を要約する複数テキスト要約技術,(3)ジャンルごとのテキスト集合の要約をまとめ,複数のジャンルのテキスト集合から要約を作成する技術の3つに構成素を分解し,これらの開発を行ない,複数のジャンルのテキストで構成されるテキスト集合にも対処可能な複数テキスト要約技術を実現する.文書横断文間関係タグ付コーパスを構築し,異なるテキスト中の文間関係を解析する技術,テキスト中の単語,表現が肯定的/否定的な記述をもたらすものであるかどうかを判定する技術,また,システムの出力する要約テキストを自動的に評価する技術を計算機上に実現した.そして,それらの有効性を評価した.
GTP結合蛋白質DRGファミリーとその結合蛋白質の生理機能解明

真核生物で高度に保存され、癌細胞の増殖機構に関与すると考えられるDRG1とDRG2からなるGTP結合蛋白質DRG(developmentary regulated GTP-binding protein)ファミリーの機能解明のために、昨年度までにそれぞれ特異的に結合するDFRP1とDFRP2からなるDFRP(DRG family regulatory protein)ファミリーを同定した。Xenopusの発現解析により、初期胚での増殖機構に関わることが強く示唆されたが、出芽酵母でのノックアウト解析では通常の増殖に関与しないことが示された。そこで、特殊な条件が機能の露呈に必要なのではないかという仮説を提示した。Dfrp2のN末端はアミノ酸飢餓ストレスに適応するための生体制御システムGeneral aminoacid control(GAAC)において必須となるeIF2αkinase Gcn2のGIドメインと相同性が高い。Gcn2はGIドメインによってGAACに必須なGcn1への結合・活性化を行う。本研究ではDfrp2がGIドメインを介してGcn1に結合しlGcn2の活性化を競合阻害することを見出した。さらに、非常に強いアミノ酸飢餓ストレスを模倣する強い活性化型Gcn2変異体存在下ではDfrp2のGcn2抑制機能が細胞の増殖に有利に働くことが示唆された。さらにDrg2をDfrp2と共発現させると、Dfrp2の発現が上昇し、Dfrp2によるGcn2の抑制活性が高まることが明らかとなり、Drg2が複合体の中でDfrp2の活性を制御する調節ユニットであることが示唆された。以上、本研究は癌増殖細胞の高い蛋白生産環壌で起こりうる強いアミノ酸飢餓ストレスを抑制し、増殖へ有利に働く高次メカニズムの解明に重要な貢献をなすと考えられる。当研究室ではGTP結合蛋白質ファミリーであるDRG1とDRG2が、RNAに結合し、何らかの作用を及ぼし、細胞の生育・細胞運動・形態変化に重要となる因子であることを提唱してきた。我々は以前に、結合タンパク質の探索・同定を行い、過剰発現系の解析からDFRP1とDFRP2がそれぞれDRG1とDRG2に特異的に相互作用し、DRGタンパク質の分解を抑制することにより安定化を誘起するのではないかというモデルを提唱してきた。そこで、このモデルを生理的条件下で証明する実験を試みた。DFRP1とDFRP2のノックアウト細胞あるいは誘導性ノックダウン細胞を作製し、DRG1およびDRG2のタンパク質の発現解析を行ったところ、DFRP1が消失した細胞ではDRG1のみ、DFRP2が消失した細胞ではDRG2のみ、特異的に発現が減少する結果が得られた。このことから、DFRP1とDFRP2のDRGファミリーの発現の正制御がin vivoの条件で明らかとなった。これまで、DRG1とDRG2がそのアミノ酸配列の相同性の高さから、ほぼ同じ機能を持つと考えられてきた。しかし、上記結果に加え、進化的分岐、発現パターンの不一致性といった我々のデータを考え合わせると、2つの因子は異なる機能を持っていることが強く示唆された。今後はこのDRG1-DFRP1とDRG2-DFRP2の2つの細胞内システムがどのようなRNA種・RNA配列に結合するか、分画・SELEX等の解析を行い明らかにしてゆく方針である。真核生物で高度に保存されたDRG1(developmentary regulated GTP-binding protein 1)とDRG2はGTPase superfamilyに属する。Xenopusでは発生時の増殖細胞においてmRNAの高発現が見られ、細胞増殖の新たな制御機構に関わる可能性があった。我々は以前にDRG1とDRG2にそれぞれ特異的に結合するタンパク質正制御因子、DFRP1(DRG family regulatory protein 1)とDFRP2を同定し、DRG1とDRG2が異なる機能を有していることが示唆されたが、生理機能解明に到ってなかった。これら4因子は出芽酵母orthologのノックアウト解析により栄養に富む生育条件では必須ではないことが分かっていたが、結合因子の網羅的解析から翻訳因子への相互作用が強く示唆されていた。そこで、特殊な環境下での翻訳制御システムに関与する可能性が考えられた。我々はDFRP2に存在するRWD domainに着目した。General aminoacid control (GAAC)はアミノ酸飢餓ストレスに対応する生体制御システムで、アミノ酸欠落tRNAがeIF2a kinaseであるGCN2に結合し、活性化することで転写因子GCN4が特殊な翻訳を受け、その結果アミノ酸合成酵素の転写が導かれる巧みな制御機構であるが、GCN2がRWDドメインをもち、DFRP2がこの経路に与える活性の存在が示唆された。出芽酵母を用い、DFRP2を過剰発現させると、ヒスチジン合成酵素阻害剤3-ATにsensitiveであったこと、およびGCN1と作用点をもつことを点変異体(E→K)や(Y→P)で証明し、DFRP2が特殊翻訳制御機能を有している可能性が示唆された。Dfrp2のN末端はアミノ酸飢餓ストレスに適応するための生体制御システムGeneral amino

acid control(GAAC)において必須となるeIF2αkinase Gcn2のGIドメインと相同性が高い。Gcn2はGIドメインによってGAACに必須なGcn1への結合・活性化を行う。本研究ではDfrp2がGIドメインを介してGcn1に結合しlGcn2の活性化を競合阻害することを見出した。さらに、非常に強いアミノ酸飢餓ストレスを模倣する強い活性化型Gcn2変異体存在下ではDfrp2のGcn2抑制機能が細胞の増殖に有利に働くことが示唆された。さらにDrg2をDfrp2と共発現させると、Dfrp2の発現が上昇し、Dfrp2によるGcn2の抑制活性が高まることが明らかとなり、Drg2が複合体の中でDfrp2の活性を制御する調節ユニットであることが示唆された。以上、本研究は癌増殖細胞の高い蛋白生産環壌で起こりうる強いアミノ酸飢餓ストレスを抑制し、増殖へ有利に働く高次メカニズムの解明に重要な貢献をなすと考えられる。
糖鎖結合を利用したリガンドおよびホルモンのビオチン化と非放射性受容体定量法の確立

我々は、ビオチン化したサイトカインとストレプトアビジン標識蛍光色素を利用したフローサイトメトリー法によるG-CSFF受容体,erythropoietin受容体およびmplの非放射性受容体定量法を確立した。また、マルチカラーフローサイトメトリー法により不均一な細胞群においても細胞表面形質別に微量のサイトカン受容体を定量的に解析することも可能となった。そこで今回、急性白血病細胞における細胞表面のmpl発現量、フローサイトメトリーによる非放射性受容体定量法のホルモン受容体測定への応用の可能性について検討した。急性白血病症例より得られた白血病細胞の表面mpl数を測定した。その特性からFAB-M7に多いと思われたmplはMOからM7まで広範に発現していることが判明した。またALLにおいてもその発現を認める症例が存在することが判明した。3H-tymidine incorporationを施行したところ、これらの細胞の一部では増殖能を有していた。しかし、検体ごとのvariationはかなりあり、そのvariationの原因を特定することはできなかった。表面抗原との相関関係も認められなかった。ホルモン受容体解析への発展応用として、recombinant human TSHとTSH受容体発現細胞株を用いてTSH受容体の発現解析の可能性を検討した。前述のサイトカンと同様ビオチン化を試みたが、十分なビオチン化が得られず、更にビオチン化効率を改善する必要があると考えられた。また、蛍光色素によるTSHの直接標識を試みたが、蛍光標識TSHのTSH受容体への特異的結合による蛍光強度の増強は不十分であった。これよりフローサイトメーターでの定量的測定解析には、更にビオチン化あるいは蛍光色素の標識効率の増強をはかり検出感度の増高が不可欠であると考えられた。造血因子やホルモン受容体の量的解析方法は、従来はアイソトープを使用使用した方法のみであり、大量の細胞を要することに加え、均一の細胞群でしか測定できないことより臨床材料での検討はほとんど不可能であった。最近我々は、蛍光色素を利用したフローサイトメトリーでのG-CSF,エリスロポエチン受容体およびc-mplの測定解析法を開発した。そして、マルチカラーフローサイトメトリー法により、不均一な細胞群においても、細胞表面形質別に微量の造血因子受容体を定量的に解析できることを証明した。そこで、今年度は、このフローサイトメトリーによるnon-isotopic ligand binding assay法の、他の造血因子やホルモン受容体測定への応用の可能性について検討した。ホルモン受容体解析として、上記造血因子と同様に糖鎖を有する甲状腺刺激ホルモン(TSH)の受容体について検討を開始した。TSH受容体の検出は、G-CSF受容体等の造血因子受容体解析法と同様に、ビオチン標識したTSHをTSH受容体と結合させ、更に蛍光色素結合ストレプトアビジンと反応後フローサイトメーターにて細胞の蛍光強度を測定し解析するnon-isotopic ligand binding assay法とした。そこで、細胞表面の微量のTSH受容体検出を可能にするため、生物活性を保持したTSHのより効率的なビオチン化について検討中である。また、TSH受容体発現細胞としてTSH依存性に増殖する甲状腺由来培養細胞株を用い、フローサイトメトリーでのTSH受容体の定量的発現解析について検討中である。マルチカラーフローサイトメトリー法による、G-CSF,エリスロポエチン受容体およびc-mplの造血因子受容体の定量的解析方法を応用し、ホルモン受容体のフローサイトメトリー法による定量的検出の可能性について検討した。今年度は、ホルモン受容体解析として、上記造血因子と同様に糖鎖を有する甲状腺刺激ホルモン(TSH)の受容体について検討した。

まず遺伝子組換え型ヒトTSH(rhTSH)をビオチン標識し、このビオチン標識rhTSHをTSH受容体発現細胞と反応させ、その後、蛍光色素結合ストレプトアビジン(streptavidin-PE/Cy5)と反応させる。フローサイトメーターにて蛍光強度を測定し、未標識rhTSHを反応させたコントロールサンプルとの蛍光強度の差より、Kormogorov-Smirnov testのD値を利用してTSH受容体発現量を定量的に解析する。TSH受容体発現細胞としては、TSH依存性に増殖する甲状腺由来培養細胞株を用いて検討中であるが、発現量が微量で、heterogeneousな細胞集団である臨床検体における測定を可能とするために、より高感度で、安定した測定系の確立が必要と考えられ、さらに検討を進める必要があると考えられた。ビオチン標識したthrombopoietinおよびストレプトアビジン標識蛍光色素を用いて,フローサイトメトリー法によるthrombopoietin受容体(mp1)の定量法を確立し,急性白血病症例より得られた白血病細胞の表面mpl数を測定した。その特性からFAB-M7に多いと思われたmplはMOからM7まで広範に発現していることが判明した。またALLにおいてもその発現を認める症例が存在することが判明した。^3H-tymidine incorporationを施行したところ,これらの細胞の一部では増殖能を有していた。しかし,検体ごとのvariationはかなりあり,そのVariationの原因を特定することはできなかった。表面抗原との相関関係も認められなかった。Mp1などのサイトカイン受容体のフローサイトメトリーによる定量的測定解析法をホルモン受容体に応用発展させることを目的とし,mp1と同様糖鎖を有するホルモンである甲状腺刺激ホルモン(TSH)を使用したTSH受容体の検出法について検討した。TSH受容体発現細胞としては,ラット正常甲状腺由来細胞株FRTL-5細胞およびヒト正常甲状腺由来細胞株Nthy-ori 3-1細胞を使用した。Recombinant human TSH用い,前述のサイトカンと同様ビオチン化を試みたが,十分なビォチン化が得られず,更にビオチン化効率を改善する必要があると考えられた。また,蛍光色素によるTSHの直接標識を試みたが,蛍光標識TSHのTSH受容体への特異的結合による蛍光強度の増強は不十分であった。これより,TSHのフローサイトメーターでの定量的測定解析には,更にビオチシ化あるいは蛍光色素の標識効率の増強をはかり,検出感度を増高することが不可欠であると考えられた。
微分方程式の研究

複素解析的な,階数1のPoincar'e条件を満足しない不確定型特異点をもつ2連立常微分方程式を考えた。形式変換(形式解)の意味づけを,不動点法で行うとき,ある関数族を定義しなければならない。その関数族に属する個々の関数の特異点の近くで行動が,よい性質をもつことが不動点法を適用できるための鍵である。その性質を明確に表現するのがStablrdomainsの存在である。本研究では,次の2種類の簡約化方程式を調べた:(1)における,いわゆる固有値は(1,-1),(2)のは(1,0),両者ともPoincar'e条件を満足しない.Stable domainsを決定するさいの本質的な部分はそれのX-領域内の任意の点X_0と特異点0を結ぶ道(積分路)で,都合のよい性質をもっているものを探すことである。そのために本研究では,パーソナルコンピューター(EPSON VN 513ET)を用いて,X_0を出発する幾種類かの道の上で(1),(2)の解の近似値を調べ,それらの結果から解析的に,Stable domainsを決定した。Stable domainsが構成されたことにより,簡約化方程式(1),(2)を導く形式変換の意味づけができる。本研究はいずれ公表の予定である。