hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
専門職養成カリキュラムをめぐるステークホルダーの合意形成に関する実証的研究

本研究は、教育、医療、保健、法務分野の4領域の専門職を対象とした歴史・制度分析、国際比較ならびに国内調査から、専門職に必要な能力(専門職コンピテンシー)の保証に関する国際的な水準をリストアップするとともに、その養成カリキュラムをめぐるステークホルダーの認識ギャップと合意形成の一端を明らかにした。各職様々な認識の下で多様な養成プログラムが併存しているが、いずれのステークホルダーにおいても「態度」形成(特に「倫理」面)が最重要項目の一つとして認識されていること、専門職コンピテンシーは養成機関のカリキュラムだけでなく生涯にわたる専門職キャリア全体において定位されることなどが明らかになった。本研究の目的は、教育、医療、保健、法務分野の4領域をとりあげ、専門職に必要な能力(「専門職コンピテンシー」)の養成カリキュラムをめぐるステークホルダーの合意形成モデルを明らかにすることにある。研究計画としては、(1)国際比較研究:各種の先行研究・調査結果、政策資料などを踏まえ、海外におけるステークホルダー群から、各専門職に求められている具体的な専門職コンピテンシーのリストアップと比較検証を行う。(2)量的調査:各専門職コンピテンシーに関するステークホルダーの意識についてアンケート調査を実施し、その異同・偏差を明らかにする。(3)質的調査:ステークホルダーへのインタビュー調査と、個別大学におけるカリキュラム改革のケーススタディから、専門職コンピテンシーの実質化プロセスを集約し、モデル化と効果の検証を行うという、3つに大きく分けられる。上記3課題に関する計画初年度の研究実績としては、以下のとおりである。(1)米国専門分野別アクレディテーション団体の認証機関であるCHEA(Council for Higher Education Accreditation)などの資料から、50数領域にまたがる専門職コンピテンシーの基準やその設定手順について整理し、いくつかの事例研究を行った。これと並行して、次年度の本格的な訪問調査を想定して、各領域における認証評価機関のリストアップを進めた。(2)法曹・看護・社会福祉を対象として、それぞれの現場で必要とされる専門職コンピテンシーに関するアンケート調査を日弁連、看護系大学などの協力の下に行った(なお看護系についてはパネル調査を実施継続中)。(3)法曹・看護・社会福祉など諸領域の現場関係者、大学教員とのラポール形成を行うとともに、カリキュラム編成や養成の実態に関するインタビューを行った。研究計画としては、1国際比較研究:各種の先行研究・調査結果、政策資料などを踏まえ、海外におけるステークホルダー群から、各専門職に求められている具体的な専門職コンピテンシーのリストアップと比較検証を行う。2量的調査:各専門職コンピテンシーに関するステークホルダーの意識についてアンケート調査を実施し、その異同・偏差を明らかにする。3質的調査:ステークホルダーへのインタビュー調査と、個別大学におけるカリキュラム改革のケーススタディから、専門職コンピテンシーの実質化プロセスを集約し、モデル化と効果の検証を行うという、3つに大きく分けられる。上記3課題に関して、計画2年度目の研究実績としては、以下のとおりである。1米国については、教員、カイロプラクティック、英国については法曹、社会福祉士、栄養士などの各職種について、専門分野別のアクレディテーション団体ならびに個別大学などに訪問調査を行った。2保育士、看護士、薬剤師、管理栄養士、社会福祉士、臨床心理士を対象として、それぞれの養成機関で必要とされる専門職コンピテンシーに関するアンケート調査を配布した。3看護・社会福祉・中等教員など諸領域の現場関係者、大学教員とのラポール形成を行うとともに、カリキュラム編成や養成の実態に関するインタビューを行った。上記3課題に関して、計画3年度目の研究実績としては、以下のとおりである。1諸外国については教員、社会福祉士、栄養士などの各職種について、専門分野別のアクレディテーション団体、準政府的な資格認定機関などに訪問調査を行った。2保育士、看護士、薬剤師、管理栄養士、社会福祉士、臨床心理士の6職を対象として、それぞれの養成プロセスで必要とされる専門職コンピテンシーに関して、各養成機関に配布したアンケート調査の分析を進めた。またこれと並行して、同様のアンケート調査を全国の専門職団体ならびに現場施設に配布・回収した。3看護・社会福祉・中等教員など諸領域の現場関係者、大学教員などに対して、カリキュラム編成や養成の実態に関するインタビューを進めた。研究計画としては、国際比較研究、国内の量的・質的調査、歴史的・制度的考察に大きく分けられる。

これらの課題に関して、4年間の研究実績としては、以下のとおりである。まず、国際比較調査については法曹をはじめとする各職種について、英国・米国などの専門分野別のアクレディテーション団体、準政府的な資格認定機関などへの訪問調査を行った。また各種の調査結果・政策資料などを踏まえて、各専門職に求められている具体的な専門職コンピテンシーのリストアップと比較検証を行った。これを踏まえて国内調査では、専門職(養成)の現状と課題を歴史的・制度的な側面からトレースするとともに、各職ステークホルダーへのインタビュー調査と、個別大学におけるカリキュラム改革のケーススタディを進めた。これと並行して、保育士、看護士、薬剤師、管理栄養士、社会福祉士、臨床心理士の6職を対象として、それぞれの養成プロセスで必要とされる専門職コンピテンシーに関して、全国の養成機関、専門職団体、現場施設にアンケート調査を実施し、ステークホルダー間の比較分析を行った。以上の調査分析の結果、国内外ともに専門職性についての認識の多様性のなかで、各職様々な養成プログラムが並立しているものの、いずれのステークホルダーにおいても「態度」形成、特に「倫理」面の養成が最重要項目の一つとして認識されていることが明らかとなった。また専門職コンピテンシーは、養成機関入学から生涯にわたる学習機会まで、専門職のキャリア全体にわたる養成プロセスの中で定位されること、また養成システム(とくに実習と研修)と個人面(での成長)双方との関連が重要であることなどが示唆された。本研究は、教育、医療、保健、法務分野の4領域の専門職を対象とした歴史・制度分析、国際比較ならびに国内調査から、専門職に必要な能力(専門職コンピテンシー)の保証に関する国際的な水準をリストアップするとともに、その養成カリキュラムをめぐるステークホルダーの認識ギャップと合意形成の一端を明らかにした。各職様々な認識の下で多様な養成プログラムが併存しているが、いずれのステークホルダーにおいても「態度」形成(特に「倫理」面)が最重要項目の一つとして認識されていること、専門職コンピテンシーは養成機関のカリキュラムだけでなく生涯にわたる専門職キャリア全体において定位されることなどが明らかになった。本研究の3つの課題である、1国際比較、2量的調査、3質的調査それぞれにおいて、計画初年度から複数領域における量・質調査が順調に進み、また欧米諸国についての横断的な資料・データ分析と現地調査も行い、それぞれの課題に関して論考も発表することができた。27年度が最終年度であるため、記入しない。教育社会学、高等教育研究今年度は本研究の最終年度に当たっている。これまでに分担担当してきたサブグループごとの研究を集約しつつ、年度半ば以降、これまでに蓄積された知見をとりまとめ、最終報告書に総括する予定である。
HB-EGF複合体によるジャクスタクライン機構の解析

膜結合型細胞増殖因子HB-EGFは、CD9等の膜4回貫通型蛋白質、細胞接着因子であるインテグリンα3β1、細胞外マトリックス成分であるヘパラン硫酸プロテオグリカンと複合体を形成していること、複合体が細胞と細胞の接着部位に局在していることを、これまでの研究で見いだした。本研究では、HB-EGF復合体による細胞接着を介した細胞増殖制御機構を、複合体を形成する個々の因子の役割を分子レベルで解析すると同時に、複合体全体の生理的役割を明らかにすることを目的として研究を行い以下のような成果を得た。(1) CD9によるHB-EGFアップレギュレーション機構の解析:CD9はHB-EGFに結合して、その作用を増強するが、この増強に関係するHB-EGF並びにCD9の分子内領域を決定した。(論文準備中)(2)膜結合型HB-EGFによる増殖抑制:膜結合型HB-EGFと分泌型HB-EGFの作用機構の違いを、新たに開発したアッセイ法を用いて詳細に検討し、膜結合型HB-EGFはレポーター細胞の増殖を抑えアポトーシスを誘導すること、同様な実験条件で分泌型HB-EGFは全くアポトーシスを誘導せず増殖促進効果を示すことを示した。(論文準備中)。膜結合型と分泌型HB-EGFの両者の違いが何によって生じるのか、細胞内ではどの様なシグナルが伝えられているのかを現在さらに詳しく解析中である。(3)ジャクスタクラインにおけるCD9の役割解析:HB-EGFとインテグリンα31β1はCD9が仲介することによって複合体を形成していると考えられる。そこで複合体におけるCD9の役割を解析するために、CD9ノックアウトマウスを作成した。その結果、CD9(-/-)マウスは正常に生まれるが、生殖過程に重大な欠損が認められた。現在、HB-EGFやインテグリンとの関わりを含めて、詳細に解析中である。膜結合型細胞増殖因子HB-EGFは、膜4回貫通型蛋白質であるCD9並びにCD63とCD81、細胞接着因子であるインテグリンα3β1、細胞外マトリックス成分であるヘパラン硫酸プロテオグリカンと複合体を形成して細胞と細胞の接着部位に局在しており、その複合体は細胞接着を介した細胞増殖の制御に働いているものと推定される。本研究は、HB-EGF複合体による細胞接着を介した細胞増殖制御機構を、複合体を形成する個々の因子の役割を分子レベルで解析すると同時に、複合体全体の生理的役割を、培養細胞レベル、ニワトリ胚やマウス個体を用いて明らかにしようとするものである。平成9年4月から現在(平成10年1月)までに行った研究によって次のような結果を得た。(1)CD9はHB-EGFに結合して、その作用を増強するが、この増強に関係するHB-EGF並びにCD9の分子内領域を決定した。(2)膜結合型HB-EGFは、ある種の細胞にアポトーシスを誘導すること、このような作用は分泌型HB-EGFでは見られないこと、を見いだした。(3)ニワトリ胚の肢芽形成期に将来アポトーシスが起こる部分でHB-EGF並びにCD9の発現が認められた。(4)以上のことから、膜結合型HB-EGFは分泌型とは異なる機能を持って作用していること、その作用は細胞増殖の促進だけでなく抑制あるいはアボトーシスの誘導に働いていることが示唆された。今後は、これらの知見を更に発展させて、HB-EGFによる細胞接着を介した細胞増殖制御のメカニズムのより詳しい理解を目指す予定である。(論文準備中)。

膜結合型細胞増殖因子HB-EGFは、CD9等の膜4回貫通型蛋白質、細胞接着因子であるインテグリンα3β1、細胞外マトリックス成分であるヘバラン硫酸プロテオグリカンと複合体を形成していること、複合体が細胞と細胞の接着部位に局在していることを、これまでの研究で見いだした。本研究では、HB-EG日反合体による細胞接着を介した細胞増殖制御機溝を、複合体を形成する個々の因子の役割を分子レベルで解析すると同時に、複合体全体の生理的役割を明らかにすることを目的としている。今年度は、培養細胞やマウス個体を用いて検討し、以下のような成果を得た。1)膜結合型HB-EGFによる増殖抑制:膜結合型HB-EGFと分泌型HB-EGF作用機溝の違いを、新たに開発したアッセイ法を用いて詳細に検討した。その結果、膜結合型HB-EGFはレポーター細胞の増殖を抑えアポトーシスを誘導することが示された。分泌型HB-EGFは全くアポトーシスを誘導せず増殖促進効果を示した。この増殖川通りは、膜型と分泌型がEGFリセブターを競合した結果ではなく、何らかの積極的なアポトーシス誘導シグナルが膜結合型から伝えられていることが示唆された(論文準備中)。膜結合型と分泌型HB-EGFの両者の違いが何によって生じるのか、細胞内ではどの様なシグナルカゴ伝えられているのかを現在さらに詳しく解析中である。2)ジャクスタクラインにおけるCD9の役割解析:HB-EGFとインテグリンα3β1はCD9が仲介することによって複合体を形成していると考えられる。そこで複合体におけるCD9の役割を解析するために、CD9ノックアウトマウスを作成した。その結果、CD9(-/-)マウスは正常に生まれるが、生殖過程に重大な欠損が認められた。現在、HB-EGFやインテグリンとの関わりを含めて、詳細に解析中である。
西洋中世における特殊地形と王・隠者ネットワーク

本研究は、紀元千年における隠者のネットワークの実態を、とくに山岳地帯や潟(ラグーン)、岩窟・洞窟などの特殊地形に着目しつつ、そうした場所に建造された聖堂とその守護聖人について実地に調査し、史資料を分析することで明らかにした。また、紀元千年という時間がもつ終末意識や死に備える心性を背景に、神聖ローマ帝国オットー朝皇帝オットー3世の関与を媒介として、大天使ミカエル崇敬が流布する様相を解明した。本研究計画は、1紀元千年期の隠者ネットワークの解明、2聖ミカエル崇敬の拡張過程の解明、2王の参籠についての解明、4改革派修道士=建築家の動向の解明、の4点を研究計画の柱としている。2年目にあたる平成25年度は、1、2、3に重点を置きつつ、とくにイタリア北東部(アルプス山圏)、クライン、イストリア、ケルンテン辺境伯領地域に関する研究を進めた。8月13日9月3日に行なった海外出張では、まずミュンヘン大学附属図書館を中心に、プロジェクトに関する史資料を収集し、その後、イタリア北東部(ボルツァーノ、ヴェローナ、マントヴァ)、クライン・イストリア辺境伯領該当地域(コーペル、クラニ)、ケルンテン辺境伯領該当地域(フィラッハ、クラーゲンフルト、ミルシュタット)での現地調査を行なった。紀元千年期の神聖ローマ帝国の東部辺境を構成したこれらの地域は、アドリア海を舞台とする物資・人の流通、アルプス山圏東部における峠道を行き来する物資・人の移動の結節点として、ビザンツの影響下に、固有の信仰実践を育んだ。今回の調査で得られた知見は、この圏域に存在した修道院・教会群が紀元千年期の隠者ネットワークならびに聖ミカエル崇敬と関係を持っていたこと、神聖ローマ皇帝の滞在が、イタリア半島における隠者の場合と同じく、ネットワークの形成・結節に大きな影響を及ぼしていたことである。これらの成果を踏まえ、研究年度の後半では、収集した文献と史資料の解析を進めつつ、次年度における研究成果の公表へ向けた準備を行なった。本研究計画は、紀元千年期の隠者ネットワークの解明、聖ミカエル崇敬の拡張過程の解明、王の参籠についての解明、改革派修道士=建築家の動向の解明、の4点を研究計画の柱としている。初年度にあたる平成24年度は、紀元千年期の隠者ネットワークの解明、聖ミカエル崇敬の拡張過程の解明、改革派修道士=建築家の動向の解明の3項目を研究活動の中心にすえ、さらにその相互の連関を解明することを課題とした。まずそのための基礎作業として、紀元千年期の隠者の活動、聖ミカエル崇敬の展開、紀元千年期におけるギリシア典礼に関する研究文献を収集し、その分析をもとに現地での調査計画を策定した。この調査計画に従い、夏期休業期間(8月)の3週間を使って現地調査を行なった。今回は、フランス(とくにノルマンディー地方)における改革派修道士=建築家の活動と地形・建造物の調査、関連史料の調査・収集を行なった。調査の結果、紀元千年期の改革派修道士の活動拠点であったブルゴーニュ地方を中継地として、アルプス南麓の北イタリア(オルタ・サンジュリオ)とノルマンディー地方(ノルマンディー公の統治領域)とが、フランチェジーナ街道(ブザンソンレマン湖大ベルナール峠アオスタ)を主なルートとして結ばれていたことが明らかとなった。今年度の研究を通じ、この改革派ネットワークのチャンネルと南イタリアからローマに及んだギリシア典礼のネットワークが、モンテ・ガルガーノの聖ミカエル崇敬に端を発するネットワークといかなる関係を結んでいたか、という点を解明することが、次年度以降の研究課題となることが確認された。本研究計画は、紀元千年期における特殊地形と隠者の関係を解明することを課題としており、とくに(1)紀元千年期の隠者ネットワークの解明、(2)聖ミカエル崇敬の拡張過程の解明、(3)王の参籠についての解明、(4)改革派修道士=建築家の動向の解明、の4点を研究計画の柱としている。紀元千年期の隠者ネットワークの総体を解明するために重要となるのは、神聖ローマ帝国西部地域からイングランドへのネットワークの拡張と接続の実態を把握することである。前年度までの研究成果から、神聖ローマ帝国とノルマンディー地方に存在した婚姻ネットワークと島上の山上修道院(モン・サン・ミシェル、特殊地形)および聖ミカエル崇敬の重要性が明らかとなった。3年目にあたる平成26年度は、(2)・(4)に重点を置いて研究を行ない、まず(2)については、初年度に調査を行なったモン・サン・ミシェル修道院と英仏海峡を挟んだ「対蹠地」にあたる、イギリス・コーンウォール地方のセント・マイケルズ・マウント修道院址を訪れ、実地調査を行なった。また、(4)については、紀元千年期の修道院改革の広域ネットワークのうち、大陸からカンタベリ大司教座に至る経路を画定していくフィールド調査と、それを裏付けるための史資料の調査・収集を、イングランド南部(ウィンチェスター)とフランス中部(フルリ、サン・ブノワ・シュル・ロワール)を中心に行なった。本調査では、イングランド南部とフランスを結ぶ改革派修道院のネットワークの存在が確認され、また王家の接続という点でも、オットー朝とイングランドのウェセックス王家との関係が、紀元千年期の重要な血縁関係=政治同盟をなしていたことも明らかとなった。本研究計画は、紀元千年期における特殊地形と隠者の関係を解明することを課題としており、とくに1紀元千年期の隠者ネットワークの解明、2聖ミカエル崇敬の拡張過程の解明、3王の参籠についての解明、4改革派修道士=建築家の動向の解明、の4点を研究計画の柱としている。

紀元千年期の隠者ネットワークの総体を解明するために重要となるのは、神聖ローマ帝国、イングランド、フランス、イタリアの修道院をつなぐ聖ミカエル崇敬ネットワークの実態を把握することである。過去3年間の研究成果から、神聖ローマ帝国とノルマンディー地方に存在した婚姻ネットワーク、島上の山岳修道院(モン・サン・ミシェル、モン・サン・ミシェル修道院と英仏海峡を挟んだ「対蹠地」にあたるコーンウォール地方のセント・マイケルズ・マウント修道院址など)という特殊地形を結ぶ聖ミカエル崇敬を通じた崇敬兄弟的関係、イングランド南部(ウィンチェスター)とフランス中部(フルリ、サン・ブノワ・シュル・ロワール)との人的交流・聖人崇敬の共有などが明らかとなっている。4年間の研究計画の最終年度にあたる平成27年度には、これまでの過去3年間の研究を経て残されている地域の調査を行なった。まずイタリアのアレッツォを拠点に、アレッツォ司教座教会、ペルージャ聖ミカエル聖堂において遺構調査を行ない、続いてピレネー山圏のペルピニャンを拠点に、サン・ミシェル・ド・キュクサ修道院等において、経路・立地調査・遺構調査・史料調査を行なった。さらに、フランスのミュールーズを拠点に、フランス中部の聖ミカエル崇敬の拠点ル・ピュイ内の大聖堂及び聖ミッシェル・アギレ教会の遺構調査・資料収集を行なった。最後にドイツ南部のミュンヘンを拠点に、バンベルクのミヒャエルスベルク修道院及びバイエルン州立図書館を訪問し、遺構調査ならびに史料調査を行なった。年度後半には、成果公表に向けた準備を進めた。本研究は、紀元千年における隠者のネットワークの実態を、とくに山岳地帯や潟(ラグーン)、岩窟・洞窟などの特殊地形に着目しつつ、そうした場所に建造された聖堂とその守護聖人について実地に調査し、史資料を分析することで明らかにした。また、紀元千年という時間がもつ終末意識や死に備える心性を背景に、神聖ローマ帝国オットー朝皇帝オットー3世の関与を媒介として、大天使ミカエル崇敬が流布する様相を解明した。紀元千年期の隠者ネットワークと特殊地形との関連に関する基幹研究地域のうち、アルプス山圏西部、アルプス山圏東部、ノルマンディ=イングランド南部に関する調査がほぼ完了した。関連する史資料の収集とともにその解析も順調に進み、論文での公表も間近である。過去2年間の研究成果との接合をはかりつつ、最終年度である次年度における研究課題の総括に向けて、研究は順調に進捗しているといえる。ヨーロッパ中世史研究開始当初に計画した実地踏査対象地域のうち、これまでの過去3年間の研究を経て残っているのは、ピレネー山圏の聖ミカエル崇敬の拠点群である。同圏域は紀元千年期のローマ教皇シルウェステル2世を通じて教皇座と深い関わりを持ち、またオットー3世と隠者ロムアルドゥスが参籠した場所という点で、隠者ネットワークの重要な結節点であったと考えられる。次年度は、この圏域、とりわけミカエル崇敬の拠点であるサン・ミシェル・ド・キュクサ修道院(フランス)とその一帯についての実地踏査(夏期)を中心に据えつつ、過去3年間の圏域研究との接合をはかりながら、4年間にわたる研究成果の最終的な取りまとめをはかる。
書換え可能LSI用シリコンコンパイラシステムの開発

書換え可能LSI(FPGA)用シリコンコンパイラのアイデアを申請したのは平成元年である。その当時は、限られた研究者のみがFPGAの研究を行っていた。しかし、現在では、FPGAは世界中の多数の研究者・技術者の注目を集めるようになった。実際、LSI設計に関する大きな国際会議では、FPGAに関する特別セッションが設けれ、また、FPGAに関する国際会議も新設され年に二回開催されるようになった。FPGA技術の急激な進歩によって、最初の研究計画も手直しが必要となった。平成元年に申請書に書いたものと類似のシステムが最近アメリカやヨーロッパで開発されたため、研究主力を単なるシステム開発ではなく、システム中で最も重要な論理合成のアルゴリズム開発に集中した。その結果、重要な理論的成果が得られた。1.従来法に比べ格段に能率のよい論理合成法(一般化関数分解法)を開発した。従来法では、実現すべき機能をAND、OR、NOT等の多段論理回路を設計し、それをFPGA回路に変換していた。そのため、余分な設計時間がかかり、多数の素子を必要とする欠点があった。今回開発した一般化関数分解法では、設計仕様をBDD(Binary DecisionDiagram)と呼ばれるグラフに変換し、それを直接FPGA回路に変換するため、従来法に比べ設計時間が短く素子数も大幅に少なくてよい。また、配線も規則的になるため、全体として、高性能なLSIが開発できるようになった。2.FPGA向きの論理合成法として、EXORゲートを用いた論理合成法を開発した。EXORゲートを用いると、ANDやORゲートのみを用いた場合に比べ、ゲート数や接続線数を減らせるため、FPGAの論理合成に適していることを明らかにした。多段論理合成のためのデ-タ構造及び基本的操作の一部を定式化しC言語でコ-ディングを開始した。今年になって同様のアイデアがアメリカとヨ-ロッパの大学で公表された。ただし,論理設計に関しては申請者の方法が能率があり,実際に多数の回路を設計して性能の比較を行えば,興味深い。今年度新たに得られた成果は,下記のとおりである。1.現在のLZAの開発システムでは,論理設計よりも配線問題に計算時間がかかる。しかし,これは高性能アルゴリズム及び高性能ワ-クステ-ションを用いることにより解決できる。2.LCAの設計では,論理領域よりも配線領域が少ないため,配置配線を十分考慮して論理合成を行う必要がある。この欠点を改良した新しいア-キテクチャ-のLCAが数ケ月後に発売される予定である。そのため,開発システムも新しいLCAの設計ができるように,機能を強化するよう検討中である。3.LCAの場合,EXORのコストもORのコストも同じため,ANDーOR回路で設計するよりも,ANDーEXORで設計する方が能率がよい。今年度新たに得られた成果は以下の通りである.1.書換え可能LSIの第一のア-キテクチャは,5入力のセル(ROM)を格子状に配列したものである.このア-キテクチャに適した合成法として,関数分解を利用する方法を考案した.また,その方法を用いれば,従来の手法に比べ必要なセル数を大幅に削減できる事を示した.2.関数分解を計算機上で能率よく行う方法として,BDD(Binary Decision Diagram)を用いた方法を考案した.また,C言語を用いて,プログラムを開発し,種々の関数を設計し,従来の方法よりも必要なメモリ数や計算時間が大幅に削減できることを明かかにした.3.書換え可能LSIの第一のア-キテクチャを実現する方法として,AND-EXOR論理回路による方法を開発した.AND-EXOR回路では,AND-OR回路よりも積項数や接続線数が少なくてよい事を実証した.4.書換え可能LSIの第二のア-キテクチャは,2入力のマルチプレクサセルを格子状に配列したものである.

このア-キテクチャに適した合成法として,BDDを用いた方法を考案した.また,その方法を用いて,種々の関数を設計した.書換え可能LSI(FPGA)用シリコンコンパイラのアイデアを申請したのは平成元年である.その当時は,限られた研究者のみがFPGAの研究を行っていた.しかし,現在では,FPGAは世界中の多数の研究者・技術者の注目を集めるようになった.実際,LSI設計に関する大きな国際会議では,FPGAに関する特別セッションが設けれ,また,FPGAに関する国際会議も新設され年に二回開催されるようになった.FPGA技術の急激な進歩によって,最初の研究計画も手直しが必要となった.平成元年に申請書に書いたものと類似のシステムが最近アメリカやヨーロッパで開発されたため,研究主力を単なるシステム開発ではなく,システム中で最も重要な論理合成のアルゴリズム開発に集中した.その結果,重要な理論的成果が得られた.1.従来法に比べ格段に能率のよい論理合成法(一般化関数分解法)を開発した.従来法では,実現すべき機能をAND,OR,NOT等の多段論理回路を設計し,それをFPGA回路に変換していた.そのため,余分な設計時間がかかり,多数の素子を必要とする欠点があった.今回開発した一般化関数分解法では,設計仕様をBDD(Binary DecisionDiagram)と呼ばれるグラフに変換し,それを直接FPGA回路に変換するため,従来法に比べ設計時間が短く素子数も大幅に少なくてよい.また,配線も規則的になるため,全体として,高性能なLSIが開発できるようになった.2.FPGA向きの論理合成法として,EXORゲートを用いた論理合成法を開発した.EXORゲートを用いると,ANDやORゲートのみを用いた場合に比べ、ゲート数や接続線数を減らせるため,FPGAの論理合成に適していることを明らかにした.
難治組織肺癌である肺多形癌の病態解明・治療開発を目指した分子病理学的研究

当院において1996年から2011年までに切除された肉腫様成分を含む肺癌手術例24例のうちデータ不備1例を除いた23例(多形癌20例、巨細胞癌3例)を対象とし、臨床像と予後の検討を行った(第58回日本肺癌学会総会)。観察期間の中央値は122ヶ月で、5年無再発生存割合は56%。再発は8例認めたが、7例は術後1年以内の再発で、再発後生存期間中央値は3ヶ月であった。一方、5年無再発生存を6例(26%)に認め、過去の報告同様、術後早期再発を来たし再発後予後も不良な集団がある一方で、長期無再発生存例が存在することが示唆された。次いで、各症例のホルマリン固定パラフィン包埋(FFPE)切片より、肉腫様(sarcomatoid [S])成分、非肉腫様(non-sarcomatoid [NS])成分、非腫瘍(normal [N])部に分けlaser micro dissectionによりDN A抽出を行った。しかしながら、laser micro dissectionは、DNA回収効率が非常に悪く、特にNS成分から十分量のDNAを抽出が困難であった。そのため、悪性度を規定するS成分のみ、macro dissectionによってDNA抽出を行った。しかし、抽出後のquality checkにて、DNAの断片化が著しく、シークエンスが困難であることが判明した。2010年までの症例が、20%ホルマリンで固定されていたことが要因と考えられた。そこで、10%ホルマリンでの固定に変更された2011年以降の症例から13例を抽出し直し、解析することとした。これら13例から各成分のDNAをmicro dissectionにより抽出し、現在、NS、N成分をコントロールとしたS成分の遺伝子異常のならびにメチル化アレイを用いたDNAメチル化異常のprofilingを行っている。本研究の目的は、肺癌の中でも特に悪性度が高い肺多形癌(pleomorphic carcinoma)を対象とし、高悪性度の元凶と考えられる紡錘形細胞/巨細胞成分の出現に関与する分子病理学的因子を明らかにすることで、新規治療開発への道筋をつけることである。本年度、研究代表者が所属機関異動となったため、新規所属機関での対象症例を新たに抽出する必要が生じた。新規所属機関での対象症例数は、申請時所属機関の対象症例数よりも少ないことが予想されたため、新研究計画では、対象を、肺多形癌を含めた肺肉腫様癌(多形癌、紡錘細胞癌、巨細胞癌、癌肉腫、肺芽腫)全般に広げることとした。その結果、1996年から2014年の間に新規所属機関で切除された原発性肺癌1808例中、肺肉腫様癌が23例(1.3%)抽出され、これを新研究計画の対象とすることとし、臨床病理学的背景を明らかにした。対象症例の手術時年齢中央値は65歳(範囲: 39-79)。男性13例(57%)で、喫煙歴を18例(78%)に認めた。組織型は多形癌20例(87%)、巨細胞癌3例(13%)であり、腫瘍径中央値は5.7cm (範囲: 1.5-15)と大型の腫瘍が主体であった。病理病期はIB / IIA / IIB / IIIA / IIIB / IV期がそれぞれ4 / 4 / 5 / 7 / 1 / 2例。術後観察期間の中央値は122ヶ月(範囲: 1-249)で、5年無再発生存割合は56%。再発は8例(35%)に認めたが、そのうち7例は術後1年以内の再発(胸膜播種4例、多臓器転移2例、脳転移1例)で、再発後生存期間中央値は3ヶ月(範囲: 1-14)と極めて短期間であった。一方、5年無再発生存を6例(26%)に認め、うち4例は病理病期IIA期以上の進行病期であった。以上より、肺肉腫様癌の切除例には、早期再発を来たし再発後予後も不良な集団がある一方で,比較的予後良好な一群も存在することが示唆された。研究代表者が所属施設異動となり、新規所属機関にて新たな研究計画を作成する必要が生じたため。当院において切除された24症例の肉腫様成分を含む肺癌手術症例(多形癌21例、巨細胞癌3例)を対象とし、臨床データを収集した(臨床検討dataは2017日本肺癌学会で発表)。そして、DNA抽出のため、各症例のホルマリン固定パラフィン包埋(FFPE)切片を確認し肉腫様成分(sarcomatoid [S]成分)、非肉腫様成分(non-sarcomatoid [NS]成分)、非腫瘍部(normal [N]成分)に分けてマーキングを行った。DNA抽出は、当初の計画に従い、S成分、NS成分、N成分に分けてlaser microdissecionにて行うこととした。Dissectionを容易に行うため、FFPEブロックをmembrane slide上に再度薄切し、Carl Zeiss PALM Micro Beam IVを用いてlaser micro dissectionを施行した。QIAGEN GeneRead DNA FFPE Kitを用いてdissection検体からDNAを抽出し、Qubit dsDNA HS AssayにてDNAの定量を行った。

しかしながら、laser micro dissectionは、時間を多く要したにも関わらずDNAの回収効率が非常に悪く数検体で探索的に行った結果は、NS成分、N成分からはシークエンスを行うに足る十分なDNA量を抽出することができないことが判明した。そのため、laser micro dissectionによるS, NS, N成分別のDNA抽出を断念することとし、肉腫様成分の悪性度を規定する成分であるS成分のみからのDNA抽出をmacro dissectionによって行う方針とした。全24症例のS成分からmacro dissectionによってDNAの抽出し、シークエンス解析を行うに十分なDNA量が得られたことを確認した。FFPE切片からのDNA抽出の条件設定に時間を要したため。当院において1996年から2011年までに切除された肉腫様成分を含む肺癌手術例24例のうちデータ不備1例を除いた23例(多形癌20例、巨細胞癌3例)を対象とし、臨床像と予後の検討を行った(第58回日本肺癌学会総会)。観察期間の中央値は122ヶ月で、5年無再発生存割合は56%。再発は8例認めたが、7例は術後1年以内の再発で、再発後生存期間中央値は3ヶ月であった。一方、5年無再発生存を6例(26%)に認め、過去の報告同様、術後早期再発を来たし再発後予後も不良な集団がある一方で、長期無再発生存例が存在することが示唆された。次いで、各症例のホルマリン固定パラフィン包埋(FFPE)切片より、肉腫様(sarcomatoid [S])成分、非肉腫様(non-sarcomatoid [NS])成分、非腫瘍(normal [N])部に分けlaser micro dissectionによりDN A抽出を行った。しかしながら、laser micro dissectionは、DNA回収効率が非常に悪く、特にNS成分から十分量のDNAを抽出が困難であった。そのため、悪性度を規定するS成分のみ、macro dissectionによってDNA抽出を行った。しかし、抽出後のquality checkにて、DNAの断片化が著しく、シークエンスが困難であることが判明した。2010年までの症例が、20%ホルマリンで固定されていたことが要因と考えられた。そこで、10%ホルマリンでの固定に変更された2011年以降の症例から13例を抽出し直し、解析することとした。これら13例から各成分のDNAをmicro dissectionにより抽出し、現在、NS、N成分をコントロールとしたS成分の遺伝子異常のならびにメチル化アレイを用いたDNAメチル化異常のprofilingを行っている。新規所属機関において、1996年から2014年の間に切除された肺肉腫様癌23例(原発性肺癌1808例中1.3%)の検討の結果、多形癌を主体とした肺肉腫様癌には、術後早期再発を来たし再発後予後も不良な集団がある一方で,比較的予後良好な一群も存在することが示唆された。今後は、当初の計画に基づき、肉腫様肺癌を構成する紡錘形細胞/巨細胞成分と非小細胞癌成分の分子病理学的相違を検討することに加え、今回明らかとなった、予後不良群と予後良好群の分子病理学的相違にも着目して、肉腫様肺癌の悪性度を規定する因子の同定を進めて行く方針である。具体的には、紡錘形細胞/巨細胞成分および非小細胞癌成分ならびに非癌部分からゲノムDNAを抽出し、ターゲットシークエンスにて紡錘形細胞/巨細胞成分に特異的な遺伝子異常ならびに、予後不良群と予後良好群での遺伝子異常の相違を明らかにする。また、免疫チェックポイント関連蛋白(腫瘍細胞でのPD-L1, PD-L2発現、腫瘍胞巣内でのCD8+Treg)
エリザベス朝演劇文化の誕生に作用した大学才人と英国国教会の接触に関する動態的研究

大学才人の劇作家たちが1580年代から1590年代にかけて生成・発展させた演劇文化および散文文化の状況を、歴史的・政治的・宗教的コンテクストにおいて調査分析し、エリザベス朝後期における演劇文化ならびに散文文化と英国国教会との関係を、取り分け動態的諸相に注目しながら実証的に記述した。今回のプロジェクトでは特に、大学才人の中でも英国国教会体制との繋がりが緊密だと考えられる3人の劇作家ーロバート・グリーン、クリストファー・マーロウ、ジョン・リリーに焦点を絞り、彼等の劇作の有りように影響を与えた政治・宗教的側面の特質とその限界を具体的に明らかにした。平成24年度では、エリザベス朝における宗教・政治関係の研究書、およびアングリカン・チャーチ体制と演劇文化に関する文献・資料を収集し、あわせて1Christopher Marloweに関する学会発表を1件、2エリザベス朝散文に関する研究論文と学会発表をそれぞれ1件ずつ、3Shakespeare劇と社会階級に関する学会発表を1件行った。1では、「銃・疫病・資本ーMarlowe作品現存原稿から照射したThe Massacre at Parisー」を第11回エリザベス朝研究会で発表した。サン・バルテルミの虐殺というフランスの宗教戦争を扱ったMarloweの戯曲に残されたマニュスクリプトの構成上の意義を論じ、該当戯曲における政治宗教的意味と経済的コンテクストの重要性を明らかにした。2では、「写実性と教訓性の干渉ーdescriptionとprescriptionをめぐって」を、日本英文学会第84回大会シンポジア第一部門「エリザベス朝散文とその後ー18世紀小説への展開」で発表し、その内容に加筆修正したものを「エリザベス朝散文とその後(1)ーペスト表象を中心にー」として『文藝言語研究文藝篇』第62巻に掲載した。Thomas LodgeとThomas Dekkerのペスト表象を写実性の観点から分析し、それらの記述に作用した政治や宗教また医学の規範的な言説の影響力を指摘し、18世紀小説との関連を論じた。3では、「社会的弱者としての病人ー感染症罹患者の階層化とTimon of Athensへの一つの視座ー」を「シェイクスピア劇における社会的弱者」第5回研究会で発表した。感染症の罹患が共同体の階層化を生成することを指摘し、その知見を該当戯曲の分析に応用し、疫学的見地からあぶり出される意味の重要性を指摘した。平成25年度では、エリザベス朝における宗教・政治関係の研究書、およびアングリカン・チャーチ体制と演劇文化に関する文献・資料を収集し、あわせて1Christopher Marloweに関する研究論文を1件、2Shakespeare劇と社会階級に関する研究論文を1件、それぞれ執筆した。1では、「銃・疫病・資本ーMarlowe作品現存原稿から照射したThe Massacre at Parisー」を『文藝言語研究文藝篇』第64巻に掲載した。サン=バルテルミの虐殺というフランス宗教戦争上の1エピソードを扱ったMarloweの戯曲に残されたマニュスクリプトの、戯曲本体上での構成的意義を議論し、それが該当戯曲における政治宗教的意味(プロテスタンティズムの他者化による政治宗教的対立の鮮明化)と経済的コンテクスト(ヨーロッパ大陸におけるフランスの地政学的意味)を指示している点で、重要であることを明らかにした。2では、「エリザベス朝演劇における社会的弱者としての病人ー感染症罹患者の階層化とTimon of Athensへの一つの視座ー」を『文藝言語研究文藝篇』第65巻に掲載した。皮膚疾患を伴う感染症の罹患が共同体における階層化を生成することを、古代文明や西洋古典の事例を踏まえながら指摘し、その知見を該当戯曲の分析に応用し、贈与や金融といった経済的意味の検証に偏りがちなTimon of Athensに関して、疫学的見地から照射されうる意味の存在の重要性を指摘した。また、上記実績とは別に、John Lylyの初期喜劇に関する調査を開始した。散文ロマンスで成功を収めたLylyが、1580年代前半に演劇創作に着手した動機として、宮廷廷臣の知己を梃子にしたキャリア構築の戦略が存在することを解明する予定である。平成23年度では、エリザベス朝における宗教・政治関係の研究書、及びアングリカン・チャーチ体制と演劇文化に関する文献・資料を収集し、あわせて、(1)Robert Greeneに関する研究論文の執筆を行うと共に、(2)Greeneおよびエリザベス朝散文に関する学会発表を2件行った。(1)では、「聖書劇の可能性ーA Looking Glass forLondon and Englandの場合ー」を、Seijo English Monographs No.43 (成城大学大学院文学研究科、2012年3月), pp. 153-68に掲載した。聖史劇の創作上演が困難な時期に、何故本劇の創作が可能であったのかを、David and Bethsabeの分析とも関連させながら検証し、結論として鑑文学というフレームや無敵艦隊来襲時の政治的環境の重要性を指摘した。

(2)では、「prescriptiveからdescriptiveへ:初期近代散文の記述の変遷」を第1回エリザベス朝散文研究会で、「聖書劇における旧約聖書の利用についてーA Looking Glass for London and Englandを中心に」を第7回エリザベス朝研究会において発表した。前者では、Thomas LodgeとThomas Dekkerのペスト表象を写実性の観点から分析し、それらの記述に作用した政治や宗教また医学などの規範的な言説の影響力を明らかにした。後者では、「ヨナ書」や「サムエル記」などの旧約聖書がいかに戯曲の創作に取り込まれているのかという観点から、商業演劇興行と政治宗教との折り合いの付けられ方を報告し、この両者の関係が個別対応的なものであったことを示した。本研究課題の目的は、1580年代・90年代のイングランドにおいて、演劇文化が立ち上げられる様相を、国教会の作用を念頭に置きながら実証的に再構成し、記述することであり、取り分け平成24年度の目的は、Christopher Marloweの政治宗教劇The Massacre at Parisを分析対象として、Marloweにおける演劇と宗教の接触の様態を明らかにすることであった。また、エリザベス朝散文の分析を継続し、18世紀小説への展開を視野に入れながら、写実性と規範性の関係を調査することであった。これらの件に関し、研究論文を1編執筆し、学会発表を2件行うことができた。よって「おおむね順調に進展している」と評価する。本研究課題の目的は、1580年代・90年代のイングランドにおいて、演劇文化が立ち上げられる様相を、国教会の作用を念頭に置きながら実証的に再構成し、記述することであり、取り分け平成23年度の目的は、Robert Greeneの聖書劇A Looking Glass for London and England (1594)を、大学才人とプロテスタント的反演劇主義の観点から考察することであった。この件に関し、研究論文を1編執筆し、また研究発表を1件行うことができた。よって、「おおむね順調に進展している」と評価する。本研究課題の目的は、1580年代・90年代のイングランドにおいて、演劇文化が立ち上げられる様相を、国教会の作用を念頭に置きながら実証的に再構成し、記述することであり、平成25年度の個別の目的は、John Lylyの政治的・宗教的振る舞いの分析を中心に据えながら、Lylyの複数の宮廷喜劇を取り上げ、大学才人と宮廷政治文化のインターフェイスを時系列的に明らかにすると共に、3年間の成果を集大成する研究論文を作成することである。本研究課題の目的は、1580年代・90年代のイングランドにおいて、演劇文化が立ち上げられる様相を、国教会の作用を念頭に置きながら実証的に再構成し、記述することであり、平成24年度の個別の目的は、Christopher Marloweの宗教劇The Tragical History of Doctor Faustusと政治劇The Massacre at Parisを分析対象として、大学才人と近代的懐疑主義思想との関係を考慮に入れながら、Marloweにおける演劇と宗教の接触の様態を明らかにすることである。
葉細胞の分化に伴うプラスチド転写・翻訳系の発現制御プログラム

1、virescent遺伝子のクローニングすでに表現型マーカーとして知られている11のvirescent遺伝子(Vl-Vl1)のうち、突然変異株の表現型解析が進んでいるVlV3の3つについて、その変異に対するRFLPマッピングを開始した。vlv3突然変異株はいずれもJaponicaバックグラウンドのため、代表的なIndica系統であるKasarath系統と交雑して第一代雑種Flを作り、さらにこれを自殖して約6000個体からなるF2世代集団を得た。得られたF2世代集団よりvirescent表現型を示すホモ個体を、v1、v2、v3それぞれから選抜した。現在、各個体からDNAを抽出し、プールドサンプリング法を併用してサザンブロット解析によるRFLPマッピングを行っている。2、イネにおける核コードの葉緑体局在RNAポリメラーゼ遺伝子の解析Arabidopsis rpoZ遺伝子、及び他の植物種においてミトコンドリア局在性のT3/T7型RNAポリメラーゼをコードすると推定されている遺伝子の塩基配列情報を基に、これらの遺伝子間で相同性の高い領域からdegenerate primerを作製した。このprimerを用いてイネのゲノムDNAからPCR反応を行ったところ、いくつかのDNA断片が増幅された現在、それらのDNA断片の塩基配列を調べているところである。
戦後日本における教育実践の展開過程に関する総合的調査研究

本研究は、三つの研究課題-(1)「日本社会の基本問題」と教育実践・教育理論との関わり、(2)日本生活教育連盟の「社会科三プラン」の内容と特質、(3)「日教組教育課程改革試案」と総合学習構想の内容と特質)-を設定し、以上の三課題に取り組む日本各地の教育実践の展開過程について七地域((1)上越地域、(2)山形地域、(3)奥丹後地域、(4)愛知三河地域、(5)兵庫但馬地域、(6)北海道地域、(7)熊本地域)を事例地として設定しその調査研究を実施した。以上の三研究課題に取り組む七地域の教育実践過程の総合的調査研究の成果を、第1集第6集の資料集として作成し、さらにそれらを踏まえた実践事例の考察を加えた論文集として第7集を作成した。本研究は、戦後における実践者(教師)たちの教育的営為を追跡し記録することを中心課題としつつ、このような課題をベースとして、戦後教育史における実践と理論のダイナミックな関連と相互浸透の過程にまで研究の幅ないし視野を広げることによって、戦後教育実践史における実践と、戦後教育学や教育理論との関わりについて検討をすすめて、戦後教育史における実践と理論とのダイナミックな関連と相互浸透の過程を分析し検討することをその研究目的として設定している。第1年度においては、戦後教育実践史研究の課題と方法を探るため、1950年代の雑誌「教育史研究」の検討や、同時期の「教育科学論争」の成果と課題を探りつつ今日的課題と方法を一定程度明かにした。また併せて戦後教育実践史における個別課題として京都府奥丹後地域の戦後郷土教育運動と教育実践の発掘と整理、日本生活教育連盟における1960年代前半の「社会科三プラン」(上越プラン、香川プラン、東京プラン)に関する資料収集と聴き取り調査、及び山形地域の生活綴り方運動と教育実践に関する資料収集等を一定程度進めることができた。具体的な成果としては日本教育学会において戦後教育実践史研究の課題と方法に関する報告とともに、京都府奥丹後地域の戦後教育運動と教育実践に関する教育雑誌である「郷土と教育」「生活と教育」「地いきと子ども」の内容目録と、運動・実践における中心的教師である渋谷忠男の年譜と、それに関する全体的特徴について報告した。併せて『渋谷忠雄教育実践資料集(第1集)』という冊子も刊行した。本年度は第1に研究三課題((1)「日本社会の基本問題」生成と教育実践・教育理論の相互環琉過程、(2)社会科三プラン(「上越教師の会」「東京サークル」「香川社会科サークル」)の生成と展開過程、(3)「日教組教育課程改革試案」と総合学習構想)の研究をまとめ、第2に四地域(上越地域、山形地域、奥丹後地域、愛知三河地域)に加え、北海道地域、但馬地域、熊本地域にも視野を広げて予備的調査を開始し、さらに第3に以上の調査・資料収集をふまえて複数学会での報告とともに、本研究グループの主催による「戦後教育実践史研究会」においてそれまでの調査・研究の報告・学習会も行ってきた。以上のような課題とその調査・研究によって、第1に東京サークルと香川社会科サークル等をささえた教師と研究者の組織(「全国青年教師連絡協議会」=全青協)の存在とその活動実態が明らかになり、第2に山形地域と但馬地域の生活綴方教育運動の共通点・相違点が一定程度明確になってきた。第3に東京サークルの高木浩朗氏の実践が戦後初期「新教育」及び愛知三河地域の社会科初志の会とも関わりを有することが明らかになり、第4に全青協の熊本地域の実践の実態とともに、それらと「総合学習」との関連も一定程度明確になってきた。このような成果によって、本研究における三課題と地域実践との相互関連、及びその担い手である教師と研究者の実相も明確になり、したがって戦後教育実践史における教師と研究者の相互関連と、その実践的特質が浮き彫りにしつつあるところに今年度の研究的意義がある。本年度は第1に研究三課題((1)「日本社会の基本問題」生成と教育実践・教育理論の相互環流過程、(2)社会科三プラン(「上越教師の会」「東京サークル」「香川社会科サークル」)の生成と展開過程、(3)「日教組教育課程改革試案」と総合学習構想)の研究をまとめ、第2に四地域(上越地域、山形地域、奥丹後地域、愛知三河地域)に加え、北海道地域、兵庫但馬地域、熊本地域にも視野を広げて調査を行い、さらに第3に以上の調査・資料収集をふまえて複数学会での報告とともに、以上の調査・研究のまとめをすすめた。本年度の調査・研究のまとめは以下のとおりである。

第2集-戦後社会科教育実践史資料集(業平小学校教育実践関係資料・愛知三河地域教育実践関係資料・日本生活教育連盟三プラン関係資料)第3集-山下国幸初期社会科教育実践資料集第4集-全国青年教師連絡協議会関係資料集第5集-山形県及び兵庫県但馬の生活綴方教育運動調査記録第6集-戦後総合学習関係資料集-「教育課程改革試案」における総合学習を中心に第7集-論文集
異種移植の糖鎖抗原の改変

1)ノックアウトマウスの作成α1,3GTを3つのloxPではさんだDNAをもつマウスに、Creをもつマウスを交配させたが、3箇所あるloxPのうち肝心なloxPが飛ばず、失敗に終わった。現在、2つのloxPだけでα1,3GTのexson9をはさむ簡単な構築のタッゲテイングベクターを作り直している。2)GnT-IIIマウス・ブタの作成糖転位酵素GnT-IIIをβ-actin promot er pCXに挿入し、マウスおよびブタに発現させた。トランスジェニックマウス組織でのGnT-III発現は、全般的にみられたが、特に膵臓でおおかった。トランスジェニックブタではGnT-III発現は全般的にみられた。次に各組織での抗原性の変化を調べた。トランスジェニックマウスの場合腎臓では変化を認めなかったが、心、肝、肺、膵では抗原性の低下を認めた。また、ブタでは野生型で皮膚、脳での抗原性が低く、トランスジェニックブタでのこれらの臓器の変化はに乏しかった。しかし、トランスジェニックブタのその他の臓器でははっきりした抗原性の低下を認めた。さらに、トランスジェニックブタから血管内皮を培養し検討した。GnT-IIIブタの血管内皮は、野生型のブタからの血管内皮に比べて、40-60%抗原性が下がり、ヒトNK細胞に対する感受性も落ちていた。また、ヒト血清による細胞傷害を40-50%抑制し得た。最後にこのトランスジェニックブタの心臓を異所性にサルに移植した。野生型ブタをのサルに移植した場合、rejection timeは25分と165分であった。一方、トランスジェニックブタの心臓を移植した場合、高titerの自然抗体をもつサルのでは153分であったが、ふつうのサルに移植した場合240分後も大きな変化なく拍動していた。作成し得たトランスジェニックブタの有用性が確認された。1.ターゲッティングベクターを作製した。ターゲッティングベクターは、α1-3GTの機能ドメインであるエクソン9を、loxPではさむ形にし、3'側にさらに、グリーンプロテイン(GFP)とneomysine耐性遺伝子を置きさらにその3'側にloxPを置いた。この3'側を短腕(約2kbp)とし、5'側にチミジンカイネース(tk)のDNAを置き長腕(約5kbp)とした。2.哺乳類型CreのcDNAを製造した。バクテリオファージP1由来のCre蛋白は34merのloxP配列を認識して組み換えを起こすが、この蛋白のもちいているコドンは哺乳類の細胞には適さないため、翻訳が十分におこなわれず、遺伝子導入した際に多くの細胞での蛋白の発現量が少なく、Cre-loxP systemによる臓器特異的α1-3galactosyltransderase Knockoutの障害となることが予想された。このため、各アミノ酸のコドンが哺乳類の細胞で利用頻度の高いコドン配列を選び、PCRを用いてそのcDNAを合成した。CD59遺伝子をloxPではさみ、そのあとEgfpが続く構築のpCXN-YK1(pCX-olxP-CD59-loxP-EGFP)を持つCHO細胞のlineを作成した(#29#30)。

つぎに、これにpCXN(beta actin promoter)とpMC1(thymidine kinase promoter)のそれぞれに、野生型のCreと平成11年度に各アミノ酸のコドンが哺乳類の細胞で利用頻度の高いコドン配列を選び合成した哺乳類型Creは比較的弱いpromoterのpMC1を使った場合、かつ導入遺伝子量が少ないときに、野生型のCreに比し有意に高い組み換え率を示した。1)ノックアウトマウスの作成α1,3GTを3つのloxPではさんだDNAをもつマウスに、Creをもつマウスを交配させたが、3箇所あるloxPのうち肝心なloxPが飛ばず、失敗に終わった。現在、2つのloxPだけでα1,3GTのexson9をはさむ簡単な構築のタッゲテイングベクターを作り直している。2)GnT-IIIマウス・ブタの作成糖転位酵素GnT-IIIをβ-actin promoter pCXに挿入し、マウスおよびブタに発現させた。トランスジェニックマウス組織でのGnT-III発現は、全般的にみられたが、特に膵臓でおおかった。トランスジェニックプタではGnT-IIIは全般的にみられた。次に各組織での抗原性の変化を調べた。トランスジェニックマウスの場合腎臓では変化を認めなかったが、心、肝、肺、膵では抗原性の低下を認めた。また、ブタでは野生型で皮膚、脳での抗原性が低く、トランスジェニックブタでのこれらの臓器の変化はに乏しかった。しかし、トランスジェニックブタのその他の臓器でははっきりした抗原性の低下を認めた。さらに、トランスジェニックブタから血管内皮を培養し検討した。GnT-IIIブタの血管内皮は、野生型のブタからの血管内皮に比べて、40-60%抗原性が下がり、ヒトNK細胞に対する感受性も落ちていた。また、ヒト血清による細胞傷害を40-50%抑制し得た。最後にこのニトランスジェニックブタの心臓を異所性にサルに移植した。野生型ブタをのサルに移植した場合、rejection timeは25分と165分であった。一方、トランスジェニックブタの心臓を移植した場合、高titerの自然抗体をもつサルのでは153分であったが、ふつうのサルに移植した場合240分後も大きな変化なく拍動していた。作成し得たトランスジェニックブタの有用性が確認された。