hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
新生児の脳発達に伴う脳回及び容積の測定と虚血性脳疾患での評価

本研究において、我々は、新生児脳MRIの3Dデータを用いて、AFSS(automated fuzzy logic based skull stripping)およびfuzzy active surface model(FASM)を応用し、脳領域を自動抽出する精度の高い方法を開発した。また、頭蓋除去についてはAFSSと別の方法を開発し、良好な結果を得た。これを用い、正常発達児での月令に伴う脳容積の増加を明らかにした。また新生児の標準化脳の作成も行った。今後、出生後令、修正令との関係、正常発達児、異常児との違いに応用する予定である。脳回、脳溝の自動抽出についてはthick rubber modelやparticle modelを開発したが、抽出能については、未だに十分な方法を開発できておらず、今後の課題である。小児の脳は成長とともに形態変化が著しいため、主観的に評価すると診断者間や診断者内で変動がみられる。そこで小児の脳を定量的に評価する方法が求められる。従来より被爆の少ないMRIで評価が行われているが小児の脳髄鞘過程では信号変化が複雑であり、成人に使用されている自動計測ソフトの使用は困難であり、今回、小児を対象とした脳の自動抽出法および自動脳領域分割法を開発する。小児脳診断支援ソフトの開発(脳領域抽出、脳回分割)を行った。脳領域抽出については全脳の形状や濃度特徴などの知識に基づくFASM(fuzzy rule-based active surface model)を用いて,脳全体を囲むような閉領域を求めることで全脳領域を抽出し、脳回分割はボリュームレンダリングにより立体表示された平面画像上に,操作者が脳回境界にあたる脳溝をおおまかにトレースする.入力された曲線にFACM(fuzzy rule-based active contour model)を適用することで,曲線を脳溝に沿うように変形し脳回境界を決定する.同処理により操作者の入力の手間の軽減,時間の短縮,さらには操作者間,操作者内変動を低減させることができた。また新生児から6歳程度の小児脳に対し、解析を行った。脳容量は年齢に正の相関を示すデータが得られた。小児脳は成長と伴に形態変化が著しいため、主観的に評価することから診断者間や診断者内で変動がみられる。そこで小児脳を定量的に評価する方法が求められる。従来から被曝がないMRIでその評価が行われている。しかし、小児脳は髄鞘過程では信号変化が複雑であり、広く成人に使用されている自動計測ソフトの使用は困難である。我々は小児を対象とした脳の自動抽出および自動脳領域分割を開発する。今回、昨年研究開発された小児脳診断支援ソフトの改善として、新生児脳の形状を考慮したソフト改善を行った。方法論としては、小児脳は成人脳に比較して個人差が大きいので、新生児脳を使用した基準脳を我々は作成し、精度の向上が可能となった。さらに精度を向上さすために頭蓋骨除去を行った複数の新生児から標準脳を作成した。脳表抽出法として、脳脊髄液、白質、灰白質を粒子の動きから小児脳表の抽出を試みたが、今後精度を上げるために遷移確率算出の再確認が必要である。23年度は、新生児脳の3D MRIデータをさらに蓄積した。3D MRIを用いた、新生児脳の脳回自動抽出法については、23年度は前年度までの検討で我々が提案した方法を、取得した対象新生児の代表データに応用したが、研究者が作成した真値と比較して、十分な感度、特異度を得られなかった。そこで、23年度は、新しく、node(小さいparticle)を用いて脳回を検出する方法を提案した。対象新生児脳に応用したところ、当初は真値との開きが大きかったが、我々が用いているfuzzy modelのparameterを様々に変化させることで、脳回の抽出が改善することがわかった。脳回抽出に最適なパラメーターの検討をすすめることで、新生児脳の脳回自動抽出が可能となると考える。また、1つのスライスの脳回抽出(全体としては180スライスの計算が必要)に24時間以上を要しており、実用的でなかったことから、23年度は計算項目を見直す事で現在1スライス6時間程度までに改善している。全スライスを6時間程度で計算出来る様改善をすすめる事は臨床応用に重要である。脳表検出法については、本年度は新しい抽出法を提案した。本法を代表的な症例に適応したところ、真値に比べ本法は感度、特異度ともに高く満足のいくものであった。臨床応用にむけて重要な進歩と考える。さらに本法を取得したデータに適応し、新生児脳の標準化法を試み、3例以上で標準化脳の作成が可能であることを明らかにした。さらに、本法で抽出した脳表から、脳の表面積と、体積を計算し、真値とくらべ良好な相関を得た。

このことは、正常発達児と発達遅延児の違いを標準脳からの違いで客観的にあきらかにすることを可能とすることにつながり、重要と考える。また、脳表抽出において、今まで手動で行っていた頭表の脂肪と頭蓋骨の抽出を自動化する方法についても検討した。結果頭表の脂肪と頭蓋骨の厚さは年齢、体重、頭蓋の大きさなど様々な要素により変化することがわかり、それぞれのパラメーターについて検討を行った。頭表の脂肪と頭蓋骨の自動抽出は、脳回自動抽出、脳表自動抽出どちらを客観的に行うにも必要な方法であり、重要である。
光合成による細胞膜プロトンポンプ活性制御のシグナル伝達と生理的役割の解明

細胞膜H+-ATPaseは、H+の能動輸送を行う一次輸送体であり、様々な二次輸送体を介した物質輸送の駆動力を形成する、植物に必須の酵素である。H+-ATPaseの活性化にはC末端Thrのリン酸化が重要であることが知られており、シロイヌナズナのロゼット葉のH+-ATPaseのリン酸化レベルは光合成に依存して顕著に上昇することが明らかになっている。しかし、光合成が行われる葉緑体からH+-ATPaseが局在している細胞膜へのシグナル伝達機構は全く不明である。そこで、H+-ATPaseリン酸化のシグナル伝達因子を探索するため、リン酸化レベルを直接の指標としたスクリーニングを行い、暗所でリン酸化レベルが高い変異株、または光を照射してもリン酸化レベルが上昇しない変異株を単離した。約5000株をスクリーニングした結果、リン酸化レベルが暗所で高い株が8株、光照射下で低い株が12株得られた。このなかで、リン酸化レベルが暗所で高いD4-9株が最も顕著な表現型を示した。そこでD4-9株についてマッピングを進めたところ、SUC2遺伝子が原因遺伝子であることが明らかとなった。suc2変異体は成熟葉に糖が高蓄積することが知られており、今回得られた変異株でも同様であった。また、野生株のロゼット葉に糖を処理することでH+-ATPaseがリン酸化されることから、光合成によって作られた糖が光合成に依存したH+-ATPaseのリン酸化を仲介している可能性が考えられた。そこで、光に応答した糖蓄積のタイムコースを調べると、スクロースのタイムコースがH+-ATPaseリン酸化のタイムコースと一致していた。さらに、糖の合成が損なわれた変異株では光に応答したH+-ATPaseのリン酸化が抑制されており、糖が光合成に依存したH+-ATPaseのリン酸化を仲介していることが明らかになった。27年度が最終年度であるため、記入しない。(1)ドットプロット法によるH^+-ATPaseのリン酸化シグナル伝達の突然変異株のスクリーニングシロイヌナズナのロゼット葉のH^+-ATPaseのリン酸化レベルは暗所で低く、光照射下で光合成に依存して顕著に上昇することが明らかになっている。しかし、光合成が行われる葉緑体からH^+-ATPaseが局在している細胞膜へのシグナル伝達機構は全く不明である。そこで、H^+-ATPaseリン酸化のシグナル伝達因子を探索するため、リン酸化レベルを直接の指標としたスクリーニングを行った。一次スクリーニングでは、EMS処理したシロイヌナズナのM2世代のロゼット葉を用いてドットプロットを行い、暗所でリン酸化レベルが高い変異株、または光を照射してもリン酸化レベルが上昇しない変異株を単離した。得られた候補株について、H^+-ATPaseのリン酸化レベルをウエスタンブロッティングによって定量的に検出する二次スクリーニングを行った。現在までにそれぞれ約5000株ずつスクリーニングを行い、リン酸化レベルが暗所で高い株が8株、光照射下で低い株が12株得られた。現在、リン酸化レベルが高い株と低い株から1株ずつマッピングを行っており、それぞれの原因遺伝子の座乗染色体を明らかにしている。(2)細胞膜H^+-ATPaseが光合成によって制御される生理的な役割の解析シロイヌナズナの葉において、光合成に依存してH^+-ATPaseがリン酸化されることが明らかになったが、その生理学的役割は不明である。そこでまず、葉のどの組織・細胞のH^+-ATPaseが光合成に依存してリン酸化されているのかを明らかにするため、葉の横断切片を用いた免疫組織化学染色を行った。その結果、葉肉細胞の細胞膜で光に応答したH^+-ATPaseのリン酸化が検出された。さらに、葉肉細胞プロトプラストにおいても光合成に依存したH^+-ATPaseのリン酸化が確認され、この応答が葉肉細胞において細胞自律的に起こっていることを明らかにした。そこで、恒常的にH^+-ATPaseを活性化させるアミノ酸置換を導入したH^+-ATPaseを葉肉細胞で特異的に発現するプロモーター制御下で発現させる形質転換植物を作出した。現在、得られた形質転換植物の選抜を行い、ホモ化を進めている。細胞膜プロトンポンプ(H+-ATPase)は細胞外へプロトンを能動輸送する一次輸送体であり、植物に必須の酵素である。以前の研究から、H+-ATPaseの活性化には自身のC末端から2番目のスレオニン残基のリン酸化が重要であることが明らかになっている。これまでに、シロイヌナズナのロゼット葉のH+-ATPaseは光合成に依存してリン酸化されることを明らかにしたが、光合成からH+-ATPaseのリン酸化までのシグナル伝達は明らかでない。そこで、このシグナル伝達因子を解明するため、暗所においてすでにH+-ATPaseのリン酸化レベルが高い株や、光によるH+-ATPaseのリン酸化レベルの上昇が見られない株をドットブロットを用いてスクリーニングした。これまでに約5,000株のスクリーニングが終了しており、暗所でリン酸化レベルが高い株が8株、光照射下でリン酸化レベルが低い株が12株得られた。これらの変異株において顕著な表現型を示す株についてマッピングを行い原因遺伝子の探索を行ったところ、暗所でリン酸化レベルが高いD4-9変異株にアミノ酸置換を伴う一塩基置換が存在する遺伝子Xを見出した。

遺伝子Xを含むゲノム断片をD4-9変異株に導入したところ、暗所でのH+-ATPaseのリン酸化レベルは野生株と同等のレベルまで低下していた。さらに、遺伝子XにT-DNAが挿入されたノックアウトラインを解析したところ、D4-9変異株と同様に暗所で高いリン酸化レベルを示した。これらの結果から、遺伝子XがD4-9変異株の原因遺伝子であることが示された。遺伝子Xがコードするタンパク質の機能から、光合成に依存したH+-ATPaseのリン酸化は光合成で生産される糖が仲介している可能性が示唆された。光合成に依存したH+-ATPaseのリン酸化は比較的早い反応で、光照射開始後15分ですでにリン酸化が起こっている。そこで、光照射後の糖蓄積のタイムコースを調べたところ、H+-ATPaseのリン酸化と一致する結果が得られた。細胞膜H+-ATPaseは、H+の能動輸送を行う一次輸送体であり、様々な二次輸送体を介した物質輸送の駆動力を形成する、植物に必須の酵素である。H+-ATPaseの活性化にはC末端Thrのリン酸化が重要であることが知られており、シロイヌナズナのロゼット葉のH+-ATPaseのリン酸化レベルは光合成に依存して顕著に上昇することが明らかになっている。しかし、光合成が行われる葉緑体からH+-ATPaseが局在している細胞膜へのシグナル伝達機構は全く不明である。そこで、H+-ATPaseリン酸化のシグナル伝達因子を探索するため、リン酸化レベルを直接の指標としたスクリーニングを行い、暗所でリン酸化レベルが高い変異株、または光を照射してもリン酸化レベルが上昇しない変異株を単離した。約5000株をスクリーニングした結果、リン酸化レベルが暗所で高い株が8株、光照射下で低い株が12株得られた。このなかで、リン酸化レベルが暗所で高いD4-9株が最も顕著な表現型を示した。そこでD4-9株についてマッピングを進めたところ、SUC2遺伝子が原因遺伝子であることが明らかとなった。suc2変異体は成熟葉に糖が高蓄積することが知られており、今回得られた変異株でも同様であった。また、野生株のロゼット葉に糖を処理することでH+-ATPaseがリン酸化されることから、光合成によって作られた糖が光合成に依存したH+-ATPaseのリン酸化を仲介している可能性が考えられた。そこで、光に応答した糖蓄積のタイムコースを調べると、スクロースのタイムコースがH+-ATPaseリン酸化のタイムコースと一致していた。さらに、糖の合成が損なわれた変異株では光に応答したH+-ATPaseのリン酸化が抑制されており、糖が光合成に依存したH+-ATPaseのリン酸化を仲介していることが明らかになった。突然変異株のスクリーニングから、暗所においてH+-ATPaseのリン酸化レベルが高い変異株が単離され、その原因遺伝子の特定が完了した。この遺伝子がコードするタンパク質の性質から、光合成に依存したH+-ATPaseのリン酸化に糖が仲介している可能性が示唆されており、光合成によるH+-ATPaseリン酸化のシグナル伝達が解明されつつあることから、研究目的はおおむね順調に進展していると考えている。
軽度外傷性脳損傷後に生じる高次脳機能障害に対する多施設コホート研究

本研究では、軽度外傷性頭部外傷(MTBI)後に生じる高次脳機能障害に対し、世界で初めて多施設コホート研究を行った。急性期・慢性期の双方において、代表的な高次脳機能であるMMSEに比して、TMT-A、TMT-B、三宅式記銘力検査では異常所見を認めるケースが多かった。また、急性期頭部CTでは20%のみに異常所見を認めるのみで、CTでの異常所見の有無と高次脳機能に相関は認められなかった。本研究より、MTBI後の脳機能評価を行うためにはMMSEおよび頭部CTのみでは不十分な可能性が示唆され、他の高次脳機能検査やMRI撮影を行って行く必要があると考えられた。背景:軽度外傷性脳損傷(mild traumatic brain injury ; MTBI)の予後は従来良好であると考えられていたが、近年、その受傷後に「長期間遷延する高次脳機能障害(認知障害、記憶障害など)」が生じることが報告されている1。しかしながら現状では、多くの患者がフォローアップも無く未治療となっており、重大な問題となっている。方法:選択基準・研究方法:16歳以上の外傷性軽度脳損傷(救急外来到着時のGCS13点15点)の患者を対象とし、多施設前向き観察研究にて行う。高次脳機能評価:全例に受傷2日後及び3カ月後に、代表的かつ簡便な神経心理学的検査であるMMSE・trail-making test(A and B)・三宅式記銘力検査・言語流暢性検査を行い、高次脳機能・日常行動を評価する。結果:急性期・慢性期双方において、代表的な高次脳機能であるMMSEに比して、TMT-A、TMT-B、三宅式記銘力検査(無関係)では異常所見を認めるケースが多かった。MMSE、TMT-A、TMT-B、三宅式記銘力検査(無関係/無関係)、言語流暢性検査(カテゴリー)については、急性期と慢性期の検査結果に有意な相関を認めた。一方で、言語流暢性検査(文字)については、急性期と慢性期の検査結果に有意な相関は認められなかった。また、急性期の頭部CTにおいて、20%にしか異常所見を認めなかった。しかしながら、CTで明らかに異常を認めなかった患者のうち、4名にMRIを撮影したところ、3名に明らかな異常所見が認められ、MTBIにおけるCT検査の感度が高くないことが示唆された。考察:以上の結果より、MMSE/CTは感度が低く、MTBI後の評価を行うためには、MMSE/CTのみならず、TMT-A、TMT-B、三宅式記銘力検査、言語流暢性検査、MRIなどの検査を行って行く必要があると考えられた。今後も本研究を継続し、MTBI後に生じる高次脳機能障害の評価法開発に向けた基盤となるデータを収集・解析し、neuroimagingによる情報を解析しながら、急性期の頭部MRI所見と高次脳機能障害の関連性を検討し、その発生メカニズムの解析を行う予定である。
ラグランジュファイバー空間における局所トーラス作用の研究

前量子化束を持つ特異Lagrangeファイバー束について,Riemann-Roch数がBohr-Sommerfeldファイバーの個数と一致する現象がさまざまな事例で報告されている.この現象が起こるメカニズムを解明するため,Witten摂動に基づく指数の局所化の観点から研究を行い,以下の成果を得た.1開多様体上のDirac型作用素に対して指数を定式化する枠組みを与え,その指数に対して局所化定理を証明した.2その応用として,前量子化束を許容する特異Lagrangeファイバー束について,Riemann-Roch数が非特異Bohr-Sommerfeldファイバーの個数と特異ファイバーからの寄与で表せることを証明した.前量子化束を持つ特異Lagrangeファイバー束について,Riemann-Roch数がBohr-Sommerfeldファイバーの個数と一致する現象がさまざまな事例で報告されている.この現象が起こるメカニズムを解明するため,Witten摂動に基づく指数の局所化の観点から研究を行い,以下の成果を得た.1開多様体上のDirac型作用素に対して指数を定式化する枠組みを与え,その指数に対して局所化定理を証明した.2その応用として,前量子化束を許容する特異Lagrangeファイバー束について,Riemann-Roch数が非特異Bohr-Sommerfeldファイバーの個数と特異ファイバーからの寄与で表せることを証明した.当初の主な目的は,前量子化可能な局所トーリックLagrangeファイバー空間について, Riemann-Roch数とBohr-Sommerfeldファイバーの個数が一致する現象を,局所トーラス作用の観点から解明することであった.しかし,研究を進めるうちに,この現象はDirac型作用素の指数の局所化として捉えるのが自然であると考えるに至った.そこで,今年度,この観点から研究を進めた結果,局所トーリックLagrangeファイバー空間のみならず,全ての前量子化可能な特異Lagrangeファイバー空間に対して, Riemann-Roch数が非特異Bohr-Sommerfeldファイバーと特異ファイバーからの寄与で表せることが証明できた.特に,非特異Lagrangeファイバー空間については,上記の現象が起きるメカニズムを指数の局所化の観点から解明することが出来た.また,ファイバー空間の全空間が曲面の場合に,楕円型特異ファイバーからの寄与を直接計算した.一方,この結果は,特異ファイバーの近傍での局所化の精度が不十分であるため,トーリック多様体上の運動量写像など,特異ファイバーが連続的に現れる場合に,既知の結果を再現できない.この点を改善することが来年度の課題である.上記の局所化の証明では, Lagrangeファイバー空間のファイバーに沿ったdeRham作用素の族を用いてDirac型作用素を摂動する.この摂動は強力な手段ではあるが,人工的であるため,幾何学的な意味が明確でない.そこで,今年度は,この点について,幾つかの具体例を考察した,その結果,この摂動はファイバー方向の計量を小さくするRiemann計量の変形と関係があることが徐々に明らかになってきた.来年度は, Riemann-Roch数とBohr-Sommerfeldファイバーの個数が一致する現象について,この計量の変形に関する断熱極限を用いた幾何学的なアプローチも試みたい.前量子化束を許容する特異Lagrangeファイバー束について,Riemann-Roch数とBohr-Sommerfeldファイバーの個数が一致する現象がさまざまな例で,主に双方を別々に計算し比べることにより,観察されている.本研究の目的は,この現象が起こるメカニズムをDirac型作用素の指数の局所化の観点から解明することであった.これについて,前年度はWitten摂動のアイディアを用いて,Riemann-Roch数が非特異Bohr-Sommerfeldファイバーの個数と特異ファイバーからの寄与で表せることを証明した.特に,非特異Lagrangeファイバー束については,上記の現象が起こるメカニズムをDirac型作用素の指数の局所化の観点から解明することができた.しかし,特異ファイバーがある場合,得られた結果は実際の現象と比べると,特異ファイバーの近傍での局所化の精度が不十分であった。そこで,今年度はこの点を改善すべく研究を行い,以下の結果を得た.1.開多様体上のDirac型作用素の指数の定式化とその性質.閉多様体上のDirac型作用素はFredholmであるため,指数が定義でき,様々な状況下でその局所化定理が知られている.しかし,開多様体上のDirac型作用素は一般にはFredholmではない.これについて,開多様体が無限遠であるacyclicityを満たすトーラスファイバー束の族を許容する場合,その上のDirac型作用素に対して指数を定式化し,連続変形不変性,切除性,積公式などの性質を持つことを証明した.2. 4次元局所トーリックLagrangeファイバー束への応用.結果1の応用として,前年度得られた結果について,特異ファイバーの近傍での局所化の精度を向上させることができた.特に,前量子化束を許容する4次元局所トーリックLagrangeファイバー束について,Riemann-Roch数が特異,非特異両方のBohr-Sommerfeldファイバーの個数と一致することを証明した.Dirac型作用素の指数のWitten摂動による局所化は,この現象のメカニズム解明への非常に良い手法と思われるが,今回の研究では,メカニズムの完全な解明には至らなかった。この研究をさらに進め,上記の現象やGuillemin-Sternberg予想などを,Dirac型作用素の指数の局所化という現象を通じて,統一的に理解することが今後の課題である.
表面波ウェーブレット解析によるコーティング層の機械的特性評価システムの開発

材料の表面を高強度化あるいは高機能化するために,めっき,熱処理,PVD,CVD,溶射などの多様なコーティング技術が利用されている.目的に適った強度や機能を有するコーティングを施し,有効に使用するためには,コーティング層の材料特性,密着性,剥離,摩耗などの評価や検出が必要である.そこで,表面波探触子とウェーブレット解析を併用することにより表面波の分散特性を計測する技術を発展させ,超音波によるコーティング層の非破壊評価の実用化を図ることを目的として研究を行った.具体的には,比較的広帯域の表面波を送受信可能な接触型探触子を開発するとともに,ウェーブレット解析による分散特性の算定などの演算処理をできる限り自動化することによって,実用に適するシステムの構築を試みた.すなわち,分散性波動の波形解析に対してウェーブレット変換を適用することによって弾性波パルスの到達時刻を周波数毎に求める方法について,その精度を向上させる方法について検討するとともに,そのソフトウェアーの整備を行った.さらに,薄板材ならびにコーティング材の弾性定数を同定し,本手法が,十分な有用性,実用性を有していることを明らかにしている.本研究では,表面波探触子とウェーブレット解析を併用することにより表面波の分散特性を正確かつ簡便に計測する技術を発展させ,超音波によるコーティング層の非破壊評価の実用化を図ることを目的とする.具体的には,これまでに開発した表面波探触子の改良を進めるとともに,ウェーブレット解析による分散特性の算定などの演算処理をできる限り自動化することによって,実用に適するシステムの構築を試みる.本年度は,広帯域の超音波を送受信するための表面波探触子の設計・製作,ウェーブレット変換により表面波の速度を算定するソフトウェアの製作,実験による探触子の性能および評価法の妥当性についての検討を行った.今後は,上記の結果を基に,探触子の効率・感度などの性能向上を図るとともに,ソフトウェアの改善を行うことが課題である.材料の表面を高強度化あるいは高機能化するために,めっき,熱処理,PVD,CVD,溶射などの多様なコーティング技術が利用されている.目的に適った強度や機能を有するコーティングを施し,有効に使用するためには,コーティング層の材料特性,密着性,剥離,摩耗などの評価や検出が必要である.そこで,表面波探触子とウェーブレット解析を併用することにより表面波の分散特性を計測する技術を発展させ,超音波によるコーティング層の非破壊評価の実用化を図ることを目的として研究を行った.具体的には,比較的広帯域の表面波を送受信可能な接触型探触子を開発するとともに,ウェーブレット解析による分散特性の算定などの演算処理をできる限り自動化することによって,実用に適するシステムの構築を試みた.すなわち,分散性波動の波形解析に対してウェーブレット変換を適用することによって弾性波パルスの到達時刻を周波数毎に求める方法について,その精度を向上させる方法について検討するとともに,そのソフトウェアーの整備を行った.さらに,薄板材ならびにコーティング材の弾性定数を同定し,本手法が,十分な有用性,実用性を有していることを明らかにしている.材料の表面を高強度化あるいは高機能化するために,めっき,熱処理,PVD,CVD,溶射などの多様なコーティング技術が利用されている.目的に適った強度や機能を有するコーティングを施し,有効に使用するためには,コーティング層の材料特性,密着性,剥離,摩耗などの評価や検出が必要である.そこで,本研究では,表面波探触子とウェーブレット解析を併用することにより表面波の分散特性を正確かつ簡便に計測する技術を発展させ,超音波によるコーティング層の非破壊評価の実用化を図ることを目的とする.具体的には,これまでに開発した表面波探触子の改良を進めるとともに,ウェーブレット解析による分散特性の算定などの演算処理をできる限り自動化することによって,実用に適するシステムの構築を試みた.すなわち,分散性波動の波形解析に対してウェーブレット変換を適用することによって弾性波パルスの到達時刻を周波数毎に求める方法について,その精度を向上させる方法について検討するとともに,そのソフトウェアーの整備を行った.さらに,コーティング材の非破壊評価への適用可能性について検討するために,比較的広帯域のLamb波を送受信するために開発した接触型探触子を用いた実験を行い,弾性定数を同定した.その結果,本手法は,十分な有用性を有していることを明らかにした.
極短パルスを用いた偏光異方性測定による励起分子の内部転換ダイナミクスの研究

本課題研究は、極短パルス光源を製作し、それを使った時間分解吸収分光により光励起直後の極めて短い時間内におこる分子ダイナミクスを解明することを目的に、二年度にわたって取り組んだ。二年目にあたる平成12年度には、研究計画にそって、まず極短パルス光源の改良をおこなった。現有するチタンサファイア再生増幅器出力で二台の光パラメトリック増幅器を同時に励起し、それぞれから独立に波長可変な可視10fsパルスを発生させることに成功した。このうちの一方の出力を非線形結晶を使って第二高調波に変換することにより、紫外ポンプ、可視プローブの時間分解吸収分光測定が可能となった。この測定の時間分解能は約40fsである。この高い時間分解能およびポンプ光・プローブ光の独立波長可変性により、この分光装置の適用範囲が格段に広がったといえる。次いで、この分光装置を駆使して、トランススチルベン(ヘプタン溶液)を紫外(320nm)ポンプ光で励起した場合に観測されるS_n←S_1吸収の時間変化をプローブ波長640nmおよび590nmで測定した。この結果、どちらの波長においても光励起直後から約1ピコ秒にわたって、S_1状態での振動コヒーレンスを反映すると考えられる振動成分(ビート信号)を観測することができた。この成分のフーリエ解析から得られた振動スペクトルは波数200cm^<-1>に強いピークを示したが、これはS_1状態での面内変角振動(ν_<25>)に対応している。この振動モードの特異的に強い寄与について考察をした結果、ビート信号の強度はS_1←S_0およびS_n←S_1の両方の遷移でのFrank-Condon因子によって決まることがわかった。このことにもとづき、Frank-Condon因子についての情報を含む他の分光データ(S_1-S_0蛍光励起スペクトルやS_1状態過渡ラマンスペクトル)を参考にしてビート信号強度を見積もった結果、観測されたビート信号強度を定量的に説明することができた。これらの結果はすでに欧文誌に発表した。本課題研究は、極短光パルスを発生させ、それを使った時間分解吸収分光により光励起直後の極めて短い時間内におこる分子ダイナミクスを解明することを目的に、二年度にわたって取り組んでいる。初年度にあたる平成11年度は、研究計画にそって、まず極短パルスを発生させる光パラメトリック増幅器を製作した。この増幅器では、サファイア中で発生させたフェムト秒白色シード光を非線形結晶中での非平行位相整合過程を利用して増幅し、非常に広帯域な増幅光をえている。プリズム対をもちいてこの増幅光の位相分散を高次項まで補償することにより、最終的に500-750nmで波長可変な時間幅10フェムト秒、パルスエネルギ-10μJという極短パルスを発生させることができた。次いで、この10フェムト秒パルスを用いて、近紫外(320nm)ポンプ・可視(640nm)プローブ時間分解吸収測定を試み、35フェムト秒というこれまでになく高い時間分解能を達成することができた。この高い時間分解能を駆使して、トランススチルベン(ヘプタン溶液)のS_n←S_1吸収の時間変化を測定した。この結果、光励起後1ピコ秒以内に、S_1状態での振動コヒーレンスを反映すると考えられる振動成分を観測することができた。この成分のフーリエ解析から得られた振動スペクトルは波数200cm^<-1>に強いピークを示したが、これはS_1状態での面内変角振動(ν_<25>)に対応することがわかった。報告されている蛍光励起スペクトルや過渡ラマンスペクトルとの比較から、振動コヒーレンス信号の強度はS_n←S_1のみならずS_1←S_0遷移でのFrank-Condon因子によって決まることが明らかとなった。現在、これらの結果をまとめた論文を投稿準備中である。

この振動モードの特異的に強い寄与について考察をした結果、ビート信号の強度はS_1←S_0およびS_n←S_1の両方の遷移でのFrank-Condon因子によって決まることがわかった。このことにもとづき、Frank-Condon因子についての情報を含む他の分光データ(S_1-S_0蛍光励起スペクトルやS_1状態過渡ラマンスペクトル)を参考にしてビート信号強度を見積もった結果、観測されたビート信号強度を定量的に説明することができた。これらの結果はすでに欧文誌に発表した。
直腸がん手術患者の排便状態アセスメントシートの作成と排便障害改善の看護介入

本研究の目的は、直腸がん術後の排便障害を改善し、QOLの向上を目指して、排便状態を評価するアセスメントシートを作成し、排便障害対策としての看護介入を提案することである。直腸がん術後の外来受診患者を対象に、排便障害とセルフケアの実態を調査した。さらに、抽出された7項目の排便障害状況を調査し、アセスメントシートを完成させた。内容は、[1日の排便回数][排便の連続][便の出方][落ち着くまでの時間][便失禁][肛門部痛][夜間の排便][便の性状]を、問題ない・中程度障害・高度障害で評価する。また、排便障害に対する看護介入は、[排便習慣][食生活][骨盤底筋運動]に集約したパンフレットを作成した。平成24年度は昨年度収集したデータから排便障害の改善策を検討するため、さらに分析を深めた。対象者は直腸がんのためISR、LARを施行後5年以内であり、研究の趣旨に同意し調査の協力が得れた外来受診患者88名であった。質的分析で抽出された排便障害7項目、セルフケア状況11項目について、術式別に比較した。排便障害の[排便回数]では、<毎日排便回数が多く10回以上>がISRが2名(5.9%)、LARが7名(13.0%)でLARの方が多く、<排便回数が少ない日と多い費が交互>はISRが7名(20.6%)、LARが0名であり、ISRは排便パターンにばらつきが多くみられた。[便漏れ]は、<いつも漏れる>がISRが17名(50.0%)、LARが1名(1.9%)であり、ISRの割合が多く、[肛門部痛]も<ある>がISRが10名(29.4%)、LARが7名(13.0%)であり、ISRの割合が多かった。排便障害の認識では、[排便回数]ではISRが<排便のない日あるいは少ない日と多い日が交互>が多く、LARが<下剤を内服しないと便が出ない>が多いことが特徴的であった。術式別のセルフケアでは、[オムツやパットをあてる]は、LARに比べISRに多く、薬物以外のセルフケアである[排便をコントロールする]もISRに多く、便失禁に対処するためにセルフケアを実施していた。またISRは、[食べるのを控える][食事量をコントロールする]など、食事の内容や量を控えている人が多かった。平成23年度は外来通院中のLAR、ISRの患者88名のデータから質的分析で抽出された排便障害項目7項目で排便状態アセスメントシート案を作成し、平成24年度は外来通院中のLAR、ISRの患者91名のデータから統計的分析を行い排便状態アセスメントシートを作成した。さらに、アセスメントシートを用いて研究協力看護師2名に外来通院中のLAR、ISRの患者7名、入院中の患者2名の排便状態を評価してもらった。協力看護師からの意見、研究者間での意見交換を重ね、排便状態アセスメントシートを完成させた。完成したアセスメントシートの内容は、「1日の排便回数」「排便の連続」「便の出方」「落ち着くまでの時間」「便失禁」「肛門部痛」「夜間の排便」「便の性状」の8項目を「問題ない」「中程度の障害」「高度障害」を白、黄、赤に色分けして、評価が一目でわかるように工夫した。その他、気になることについて記載できるようにし、入院中、外来通院中に継続して記録できるように作成した。また、排便障害対策としての看護介入は、平成23年度のデータで得られたセルフケアの11項目について、平成24年度にアンケート調査を行い、「排便習慣」「食生活」「骨盤底筋運動」に集約してパンフレットを作成した。アセスメントシートで「高度障害」の項目をを中心に介入を行い、排便障害対策を提案した。本研究の目的は、直腸がん肛門温存手術後の術式別(ISR:intersphincteric resection、LAR:low anterior resection )の排便障害状況・セルフケア状況の実態を明らかにし、排便状態を評価するアセスメントシートを作成すること。排便障害対策として看護介入を検討し提案することである。平成23年度は、直腸がん肛門温存手術後のISR、LARの排便障害状況、セルフケア状況の実態を明らかにし、アセスメントシートと看護介入を検討することを目的としている。

対象者は直腸がんのためISR、LARを施行後5年以内であり、研究の趣旨に同意し調査の協力が得られた外来受診患者とした。方法は、半構造化面接で、排便障害の実態、セルフケア状況などについて収集した。分析は、排便障害とセルフケアの実態については、質的分析を行った。さらに、抽出された排便障害の項目ごとにデータを見直し、ISR、LARの術式別にχ2検定で比較した。セルフケアは、具体的セルフケア内容については術式別に量的比較を行い、セルフケア数についてはχ2検定で比較した。結果、対象者は88名(62.2±9.3歳)、ISRが33名、LARが55名であった。排便障害は、[排便回数が多い][排便回数が定まらない][薬の内服で排便がある][夜間の排便が多い][便失禁][肛門部痛]などの7つにまとめられ、[排便回数が定まらない][夜間の排便が多い][便失禁]はISRの割合が有意に高かった。排便障害に対するセルフケアは、[肛門部を洗浄する][オムツやパットをあてる][食事量をコントロールする][排便をコントロールする]などの11にまとめられた。看護介入として、排便のコントロール、肛門部の局所ケア、食事の内容や摂取方法をチェックリストで詳細に把握することが必要であると考えられた。平成24年度は、研究目的の排便状態を評価するアセスメントシートを作成し、排便障害を改善するための看護介入を検討するために、平成23年度に収集したデータの分析をさらに深め、その成果を国内、国外の学会で発表した。アセスメントシート作成のための分析は深められたが、統計的分析を行うために、作成したアセスメントシートを50名に実施する予定であったが、冬季間は豪雪のため、研究者が調査協力病院へ調査に行けないことがあった。そのため、量的データの収集を現在も行っており、当初予定であった看護介入は、まだ実施できていない状況である。平成23年度は、直腸がん肛門温存手術後の術式別(ISR、LAR)の排便障害状況、セルフケア状況の実態を明らかにし、アセスメントシートと看護介入を検討することを目的としている。当初の計画では対象者を50名としていたが、データ収集を進めるうちに、ISRの排便障害が高いこと、ISRもLARも術後2年以内の排便障害が高いことから、ISRの対象者数を出来るだけ収集し、術後2年以上のLARの対象者もできるだけ収集したことから、88名を収集することができた。さらに、分析も88名について行い、おおむね順調に進展している。平成25年度は、作成した排便状態アセスメントシートを外来受診患者30名に実施し、統計的分析を行い、アセスメントシートを完成させる。さらに、直腸がん術後の入院患者10名、外来通院患者10名に対し、協力看護師が排便状態アセスメントシートを用いて排便状況を評価し、看護介入を実施してもらう。さらにアセスメントシート、看護介入の精度をあげるため検討を重ねる。排便状態を評価するアセスメントシートを作成し、排便障害対策として看護介入を提案するという研究目的を達成する。平成24年度は、平成23年度に作成した排便状態アセスメントシートを同意が得られた外来受診患者50名に実施し、統計的分析を行いアセスメントシートとして完成させる。また、排便障害対策として看護で解決可能な看護介入を検討することを目的としている。今年8月までに、現在実施している排便障害の実態を質的分析、量的分析の結果から、類似尺度との比較検討、文献学的検討を重ね排便状態を評価するアセスメントシートを作成する。さらにセルフケア状況の分析結果も踏まえて、排便障害を改善するための看護介入の検討を行う。
ディーゼル排気ガス中のNOxとパーティキュレートの同時除去触媒の開発

ディーゼル排気ガス中のNOxとパーティキュレートを同時に除去するために、炭素とNOの反応の本質、およびそれに対する触媒の作用機構の理解の上に立った設計が必要である。今年度はモデル化合物として種々の炭素を用いたNO還元反応の研究炭素表面に存在する含窒素化合物のNO還元反応における役割を明らかにするために、同位体を用いた過渡応答実験を行った。まず、4種の炭素試料をNO/O_2流通下、昇温しながらNOの転化率を検討した。どの炭素に対しても炭素によるNOの還元がはじまる温度と炭素燃焼によるO_2の消費がはじまる温度が一致していたが、これはO_2による炭素のガス化反応が炭素とNOとの反応を促進していることと深く関係している。また、試料を^<14>N^<16>OとO_2の混合ガスと600°Cで反応させ、炭素表面に含^<14>N化合物を生成させた後、^<14>^<16>Oだけを^<15>N^<18>Oに切り替え、反応生成物を質量分析計とガスクロマトグラフで定量した。切り替え後に^<14>N^<15>Nが主に生成したことから、N_2の生成は気相中の^<15>N^<18>Oと炭素表面の含^<14>N化合物の反応によるものと結論できた。Cu触媒を担持した褐炭とNOあるいはNO/O_2混合ガスとの等温反応を行った結果、O_2の共存はとくにCu触媒共存下でのNO還元を促進した。Cu触媒が炭素とO_2の反応を促進し、炭素上に多くの活性点を生成することを通じてNOの還元反応を促進していることが明らかとなった。
川崎病の冠動脈病変と酸化ストレス

川崎病の冠動脈病変と酸化ストレスの関連性については不明な点が多い。今回酸化ストレスに感受性を示すNrf2遺伝子欠損(KO)マウスに対してLCWEを腹腔内投与し冠動脈炎を誘発しワイルドタイプ(WT)と比較した。予想に反してNrf2KOマウスの冠動脈炎と血清の炎症性サイトカインはともに有意な抑制をみた。Nrf2KOマウスの末梢血中マクロファージは超急性期に強く誘導される一方で亜急性期は脾臓におけるアポトーシスが著明に亢進していた。つまりNrf2遺伝子は抗酸化ストレス作用による抗炎症作用と脾臓におけるアポトーシスの抑制による炎症の遷延化という2つの側面を持つという新たな発見があった。本研究での最大の目的は、川崎病の冠動脈病変の形成への酸化ストレスの関与について死菌化した乳酸菌抽出物であるLactobacillus caseicell wall extract(以下LCWE)誘導性の川崎病類似冠動脈炎モデルマウスを用いて明らかにすることである。まず我々は前年度から酸化ストレスに対する感受性が高い(脆弱性を示す)NrF2遺伝子欠損(NrF2KO)マウスを作製するべく継代繁殖を繰り返し行い、6週令雄のNrF2KOマウスを計10匹得る事ができた。6週令の雄のWild type (WT、C57BL/6N)マウスをコントロールとし、各々のマウスにLCWEを300μg腹腔内投与して、2週間後(各n=5)と4週間後(各n=5)に安楽死し組織学的に冠動脈周囲の炎症の程度を比較検討をした。NrF2は抗酸化遺伝子の制御配列上に存在するARE配列に結合しそれらの転写を誘導することから、NrF遺伝子欠損マウスは、肝臓、肺、脳組織や毒性を引き起こすことが知られており、同様に本モデルにおいても酸化ストレス障害の惹起から冠動脈炎の悪化を示すことが予想された。しかしこの予想と反して、NrF2KOマウスは、WTマウスと比較して有意に冠動脈炎が抑制された事が明らかとなった。さらにBDTM Cytometric Bead arrayシステム(CBA)を用いて行った血清サイトカイン解析結果でも、NrF2KO+LCはWT+LCと比較してTNF-α、IL-1β、MCP-1などの炎症性サイトカインの有意な抑制をみた。来年度以降は、この結果を裏付けるメカニズムの解明を探究する予定である。酸化ストレスは循環器領域において動脈硬化や心筋梗塞の増悪因子として知られている。川崎病の冠動脈病変と酸化ストレスの関連性については不明である。酸化ストレスに高い感受性を有するNrf2ノックアウト(KO)マウスに対して乳酸菌の抽出物であるLactobacillus casei cell wall extract(LCWE)を腹腔内投与することで冠動脈炎を誘発しNrf2遺伝子が川崎病の冠動脈病変に与える影響を検討した。6-8週令の雄のNRF2KOマウス(n=10)とWild type(n=10)マウスにLCWEを腹腔内投与し冠動脈炎を誘発し両群での炎症の程度を比較した。Nrf2の標的遺伝子であるHo-1、NQO-1mRNA値は、Nrf2KOマウスでは有意に抑制されていた。予想に反して、冠動脈炎の重症度スコアはNrf2KOマウスでWTマウスと比較して2週後(WT:7.0±0.8vs Nrf2:4.0±1.0 p=0.015)、4週後(WT:7.0±1.1 vs Nrf2:3.7±0.7、p=0.012)共に有意な抑制をみた。さらに血清TNF-α、IL-1β、IL-6、MCP-1などの炎症性サイトカインは、Nrf2KOマウスで有意な抑制をみた。Nrf2KOマウスの末梢血中マクロファージは超急性期に一過性の強い誘導を認めたが、亜急性期には脾臓におけるTUNNEL陽性細胞(アポトーシス)が著明に亢進していた。つまりNrf2遺伝子欠損は、酸化ストレス促進により急性期の炎症を増強する一方で、脾臓におけるアポトーシス誘導を促し冠動脈炎を鎮静化するという2つの側面を持つという新たな発見があった。本研究での最大の目的は、川崎病の冠動脈病変の形成における酸化ストレスの関与をマウスを使って明らかにすることでありこの研究を通じて川崎病の冠動脈病変の新たな治療戦略が見いだされるが期待される。まず酸化ストレスに対する感受性が高い、NrF2遺伝子欠損(NrF2KO)マウスを作製する事から開始した。

Nrf2KOマウスは存在しておらず、ヘテロ(+/-)の雄とwild typeの雌を交配させる事から開始し、継代繁殖を計3回行う事で雄のNrF2KOとwild typeマウスをそれぞれ10匹ずつ得ることが出来た。継代繁殖には半年程度の時間を要すると予想していたが、ヘテロ(+/-)同士の交配では通常のマウスと比較して交配開始から妊娠までの時間を要した為、目的のマウスを得るまでに予想以上の時間が掛かった。今後は得られたNrF2KOマウスに対してLCWEの腹腔内注射を行い、両群での冠動脈病変の程度に差があるかを組織学的に比較検討する予定である。また血清を用いて各種サイトカインの定量的な評価も行い組織(冠動脈炎)との関連性があるかを検討する。さらに来年度は酸化ストレスの対して抵抗性を持つKeap1ノックダウンマウスも繁殖、継代も並行して行い、同様にLCWEの投与による影響についても検討していく予定である。研究実施計画と照らし合わせるとほぼ予定通りに進んでおり実験結果は来年度以降に報告する。前年度NrF2KOマウスの継代繁殖に予定より長い時間を費やしたが、今年度は概ね順調な進展であったと考えます。NrF2KOマウスを得るため、繁殖、継代にある程度時間を要したが概ね順調であると判断します。さらに冠動脈切片を用いた免疫染色でのマクロファージ(F4/80)の浸潤の程度を評価していく予定である。またNrF2系とは相反するkeap1ノックダウンマウス(酸化ストレスに対して抵抗性を示す)を用いてこれを裏付ける結果を得るべく継代繁殖を現在行っている。4週齢の雄のマウスを以下の4群に分ける。(1)Nrf2(keap1)ノックアウトマウス+LCWE腹腔内注射<n=10>(2)Nrf2(keap1)ノックアウトマウス+PBS腹腔内注射<n=10>(3)ワイルドタイプマウス+ LCWE腹腔内注射<n=10>(4)ワイルドタイプマウス+ PBS腹腔内注射<n=10>LCWEはいずれも0.5mg/匹使用過去の実験から炎症が最も強く出る腹腔内注射4週後にマウスをsacrificeし各群間での比較を行う。一回の交配で得られるマウスの数に限りがあり数回に分けて同様の実験を繰り返す。組織染色:上記で得られた上部心臓から凍結切片を作製しH&E染色、免疫染色(CD169、CD3)を行い浸潤した細胞の定量化、解析を行う。Realtime PCR:また同部位からRNAを抽出し(RNeasy Mini kit・Qiagen, Valencia,CA)ABI prism 7700 sequence detection system(ABI)を使用したRealtimePCR法(Taqman)でMMP-2、MMP-9、MCP-1、IL-6、TNF-αの定量的評価を行う。Bio-Plexサスペションアレイシステム:さらにマウスの心臓から直接採血を行い(約1ml)、遠心により血清のみを-20°にて凍結保存する。約70μlと極少量で、20種類以上のマウスのサイトカイン測定を行う事が可能である。IL-6、TNFα、IFNγといった川崎病との関連性が過去にも証明されているものから、MCP-1、MIP、VCAMなどはマクロファージ、血管内皮細胞に絡んだ炎症性サイトカインの測定も可能であり非常に興味深く川崎病の冠動脈病変の病因解明につながる可能性も示唆される。昨年度残金が生じ理由はマウスの繁殖に時間を要したため上記の前半部分の実験が行えなかった為で次年度使用予定となります。1.各種抗体;免疫染色用のマクロファージに対してはF4/80、リンパ球に対するCD-3染色
「いのち」観念にあらわれた日本人の宗教性の実証的研究

三年間の研究によって、日本人の生命観とその宗教性の様相を包括的に解明することができた。まず第一に、日本人の生命観の底部に、神道的な来世観と、浄土仏教的な来世観が、特に色濃く反映されていることが明らかになった。これらの傾向は、古代の万葉集にもあらわれているし、時代を下った近代の小説群、たとえば志賀直哉の「暗夜行路」などにも反映されている。それだけではなく、我々が本研究の一部として行なった「生命観アンケート」への回答の中にもそれらの影響が見られるのである。第二に、我々は現代日本の生命倫理の社会問題となったいわゆる「脳死臓器移植問題」に関する言説群を分析し、その中に、上で述べたような伝統的な生命観と、それに対抗する科学的な生命観とを、同時に発見した。つまり、現代日本人の生命観は、伝統的なものと現代的なものとのモザイクであり、一元論に把握することはできず、むしろそれら二つのあいだに引き裂かれていることが明らかになった。第三に、我々は、大正時代の思潮を包括的にとらえるためのコンセプトとして「大正生命主義」の解明を行なった。このことばは、分担者のひとりである鈴木の造語であるが、大正時代の文化を、「生命」というアスペクトから統一的に把握すめのキーワードとして、徐々に受容されはじめている。我々は、大正生命主義と、10年代の生命主義との連続性についても議論を行なった。以上の研究成果は、我々3名の、数冊の著書および多数の論文の中でに詳しく展開された。平成4年度は、主に近代文学史・文化史にあらわれた生命文献の解読を行ない、そこに見られる宗教性について考察を加えた。たとえば、1910年代に顕著になってきたいわゆる「大正生命主義」の文献群を調査し、永井潜の生命論や、佐藤春夫の風流論、そして坪内逍遥の文章などの中に、ホーリスティックな生命観・自然観が共通して存在していることをつきとめ、そこには自己と宇宙の相即的悟りに似た、独特の宗教観が潜在していることを解明した。この背後には、伝統的な日本思想の水脈のほかに、当時のヨーロッパ思潮からの強い影響があったことがうかがわれる。このように、日本人の生命観の形成に関しては、いわゆる伝統的な背景のみではなく、ヨーロッパ等から輸入されたアイデアも強く影響している。この点の発見は、4年度の大きな収獲のひとつである。また、1910年代に日本文化史でおきた「生命論」の隆盛と同じ現象が、戦後の1970年代以降に反復されており、この2度にわたる生命主義の波をどのように分析すればよいかという課題が浮上してきた。この点に関しては、次年度の研究テーマとしてさらに追求したい。現代日本人の生命観のアンケート調査は、約200枚の回答を獲得し、現在それらを整理中である。特に、若い世代からの回答にすぐれたものが多く、今後の分析に期待がかかる。また次年度の調査として、筑波大学で行なわれる海外の生命観・自然観の調査と連けいして、日本と海外の生命観の比較調査を計画しており、今年度の日本での調査結果が、そこに生かされるはずである。【.encircled1.】山折、鈴木、森岡による文献学的研究、山折、森岡は宗教・医学関連を担当。森岡は、「脳の人工臓器化と脳死身体の実験利用等を素材にして、今後の先端医療を考える」(『医療と宗教を考える』No.86、1993年、全30ページ)、「目にふれないところで進む先端テクノロジー」、ブレインズ事務局編『アテネの学堂』、(ジャストシステム、1993年、109 116)を発表、共同研究『「ささえあい」の人間学』(法臓館、1994年、全30ページ)を編著としてまとめた。鈴木は、文学を中心として思想全般を担当。

昨年にひきつづき、20世紀前半の日本における生命主義の思潮傾向を分析し、分析視角の明確化と文献の収集、ならびに共同研究を進め、成果を『大正生命主義と現代』(1994年5月予定)としてまとめつつある。【.encircled2.】継続的に行っているアンケート調査をひきつづき行い、サンプルを増し、実証的データとして蓄積する一方、データベース形成を進めている。柏岡が、これを社会学見地から、森岡が文化人類学ならびに図像学的見地から解析をすすめている。本年度は、研究代表者、分担者が、それぞれのスタンスから「いのち」観念にあらわれた日本人の宗教性についての総括的研究を行ない、著書・論文として発表した。山折哲雄は、著書『お迎えのとき-日本人の死生観』の中で、日本人の死生観にあらわれた宗教性について、「断食死」と「安楽死」、日本仏教と「病気」などを素材にしながら、包括的に議論した。鈴木貞美は、著書『日本の「文学」を考える』の中で、「純文学」「大衆文学」「私小説」などの既成概念を再検討するなかで、それらを横断してあらわれてくる日本文学の生命観を、文字史の位相から解明した。森岡正博は、著書『生命観を問いなおす』の中で、1980年代の日本を席巻した「80年代生命主義」の思想史的位置付けを行ない、そこに内在するロマン主義の姿を析出した。また、生命観についてのアンケート調査の整理を行ない、日本人の生命観に秘められた「いのちの弁証法」についての仮説を提示した。
子宮頸癌の多段階発癌機構におけるHPV感染以降の遺伝子発現プロファイルの検討

子宮頸癌の発癌機構についての研究は、1983年にzurHausenがヒト乳頭腫ウイルス(Human Papillomavirus, HPV)の関与を発表して以来、その事実は、特に扁平上皮癌では疑う点はもはやないまでに、in vitro、in vivo共に証明されてきた。ただし、in vitroにおいては、HPVのE6、E7遺伝子の導入によって、子宮頸部上皮細胞をはじめとする初代細胞に不死化が獲得されるものの、ヌードマウスへの造腫瘍能は見られない。実際にも子宮頸部上皮異形成のみならず正常子宮頸部にもHPVが検出される。そのため、HPV感染のみでは発癌には到らず、さらなるコファクターが必要と推測されている。実験系ではHa-Ras、K-Ras、v-fosなどの既知癌遺伝子の導入で造腫瘍能は獲得されるが、臨床検体ではその発現は普遍的には認められず、実際の発癌システムを必ずしも反映しないと考えられる。そこで私達は、子宮頸癌発癌への関与が疫学的に証明されている、喫煙に注目し、たばこの煙の濃縮物を用いて、HPV18型DNA導入による子宮頸部上皮不死化細胞に造腫瘍能を獲得させることに成功している。この一連の実験系は実際の発癌に近い形のモデルで、各細胞株間の遺伝子発現プロファイルを比較して、発癌の責任遺伝子(群)を明らかにする事を最終目的とし、今年度はその候補遺伝子の絞込みまでを行う事を目標としている。DNAマイクロアレイによる解析には、不死化細胞株と、その悪性形質転換株のRNAを用いることにより、遺伝子発現プロファイルの検討を行なった。候補となる発現較差がある遺伝子は、10倍を超えるものにかぎると16種類あり、その中でもいくつかの遺伝子は他癌腫では発癌過程に有意に関与するものも含まれており、今後それらの遺伝子発現の再確認を行う予定である。確認できた遺伝子については集中的に子宮頸癌の多段階機構でHPV感染以降に果たす役割を検証していくことになる。詳細については投稿準備中である。子宮頸癌の発癌機構についての研究は、1983年にzurHausenかヒト乳頭腫ウイルス(Human Papillomavirus, HPV)の関与を発表して以来、その事実は、特に扁平上皮癌では疑う点はもはやないまでに、in vitro、in vivo共に証明されてきた。現時点では、DNAマイクロアレイによる解析には、不死化細胞株と、その悪性形質転換株のRNAを用いることにより、遺伝子発現プロファイルの検討を行う予定で、現在解析委託をする業者との交渉中である。解析結果が判明次第、候補遺伝子について、検討を行う予定である。不死化細胞株の発育が遅く、各種解析に入るのにやや時間を要している状態で、DNAマイクロアレイ終了後には速やかに、次の段階移行する。