hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
濃度センサー機能を有した世界初のドラッグデリバリーシステムへの挑戦

濃度センサー機能を有した世界初のドラッグデリバリーシステムを開発するため,異なるリン酸化率のリン酸化プルラン(PPL)を合成して抗菌物質の担体として用いた。抗菌物質CPCのみでは高濃度でも洗浄後は十分な抗菌効果が得られなかったが,PPLとの複合体することにより,わずか100ppmの抗菌物質で優れた抗菌効果を発揮することが明らかとなった。PPLーCPC複合体はCPC濃度200ppmでも優れた抗菌効果を発現したが,300,400,500ppmでは抗菌効果を発現しなかった。以上の結果より,PPLは濃度センサー機能を有したドラッグデリバリーシステムの担体として有用であることが示唆された。低濃度時にのみ機能するドラッグデリバリーシステム(DDS)があれば,副作用の強い薬剤も効果的に使用でき,未来医療のブレークスルーとなることは間違いない。本研究では,多糖誘導体リン酸化プルランが薬剤の濃度変化に伴い会合状態を変えることを応用して,薬剤の濃度を検知して機能するインテリジェントDDSを創製することを目指した。まず,キャリアとなるリン酸化プルランについて,実用化を視野に入れて合成方法を見直した結果,塩化ホスホリルを用いることにより,これまでの加熱による合成法に比べて安定してリン酸化プルランを得られることが明らかとなった。この合成技術を応用して様々なリン酸化率のリン酸化プルランを合成し,抗菌剤CPCとの複合体の構造形成および薬剤徐放のメカニズムについて評価した。その結果,仕込み量を調整することでリン酸置換度DSが0.07,0.10,0.14のリン酸化プルランを合成することができた。また,リン酸化率の異なるいずれのリン酸化プルランにおいても,複合体の濃度が1000 ppmでは濁りを生じ,濃度を低くしていくに従い濁りも薄くなっていくが,さらに薄くなって100 ppmで再び濁りを生じることが明らかとなった。これは,CPCの臨界ミセル濃度が約300 ppmであることから,300 ppm以上ではCPCがミセルを形成してCPCをリン酸化プルランが内包しているミセル型の複合体を形成し,それ以下ではCPCがミセルを形成せず,リン酸化プルラン上に分散した形をとる非ミセル型の複合体を形成するためと考えられる。この複合体について100500ppmの溶液を調整して細菌実験により抗菌効果を評価した結果,300500ppmでは抗菌効果を発揮せず,低濃度の100,200ppmで抗菌効果を発揮していた。この知見は,低濃度時にのみ機能するインテリジェントDDSの開発につながると期待される。低濃度でのみ機能するドラッグデリバリーシステム(DDS)があれば,抗がん剤など副作用の強い薬剤も効果的に使用でき,未来医療のブレークスルーとなることは間違いない。しかし現在まで,薬物濃度を検知するDDSに関しては全く報告がない。本研究では,申請者が開発した多糖誘導体が薬物の濃度変化に伴いイオン結合から疎水性相互作用へと会合状態を変えることに着目し,会合体の構造変化により濃度を検知して機能する濃度センサー付インテリジェントDDSを創製することを目的とした。まず初年度である平成24年度は,多糖誘導体リン酸化プルランと塩化セチルピリジニウム(CPC)の複合体を実用化につなげることを目指し,当初の目標であった(1)会合状態の分子レベル解析,(2)抗がん剤への展開,(3)抗がん剤への展開に加え,(4)競合となるキャリアの探索を新たに行うこととし,特に(4)を重点的に行った。その結果,食品添加物として用いられている2種類のリン酸化多糖,同じく食品添加物であるリン酸化オリゴ糖,リン酸化プルランの原料であるプルラン,グルコース-6-リン酸など候補となり得る様々な材料とCPCとの複合体について評価した結果,いずれもリン酸化プルラン-CPC複合体ほど低濃度のCPCで抗菌効果を発現することはなかった。さらに候補となり得る材料を探索すべく,アパタイトに対して強固に接着することが報告されている10-methacryloyloxydecyl dihydrogen phosphate (MDP)ならびに類似構造を有するDecyl dihydrogen phosphate (DDP)をCPCのキャリアとして用いたところ,MDPではCPC0.3%で,またDDPでは0.2%で優れた抗菌効果を発現することが明らかとなったが,いずれもキャリアとしての機能はリン酸化プルランには及ばなかった。当初の目標であった(1)会合状態の分子レベル解析,(2)抗がん剤への展開,(3)抗がん剤への展開に加え,多糖誘導体リン酸化プルランと塩化セチルピリジニウム(CPC)の複合体を実用化につなげることを目指し,(4)競合となるキャリアの探索を新たに行った。特に(4)の結果,食品添加物として用いられている2種類のリン酸化多糖,同じく食品添加物であるリン酸化

オリゴ糖,リン酸化プルランの原料であるプルラン,グルコース-6-リン酸,さらに,アパタイトに対して強固に接着することが報告されているMDPならびに類似構造を有するDDPをCPCのキャリアとして用いたが,いずれもキャリアとしての機能はリン酸化プルランには及ばなかった。これはリン酸化プルランーCPC製剤を実用化につなげる上で不可欠な成果である。当初の目標である(1)会合状態の分子レベル解析,(2)抗がん剤への展開,(3)抗がん剤への展開に加え,多糖誘導体リン酸化プルランと塩化セチルピリジニウム(CPC)の複合体を実用化につなげるために必要な基礎的知見を集積する。予定よりも安く物品購入できたため残額が生じた。平成25年度は最終年度となるため,上記の目標を遂行する上で必要不可欠な実験の経費と,成果発表・資料収集・打ち合わせなどの旅費に充てる。
ステレオタイプ脅威の生起要因と低減方法の検討

本研究は,ステレオタイプ脅威の生起要因を明らかにし,その問題の解決方法を探ることを目標とする,ステレオタイプ脅威とは,評価懸念が高まる状況下において,ネガティブなステレオタイプ(例"女性は男性に比べて数学が苦手である")が活性化し,それに一致して実際に課題成績が低下してしまうという現象である.本年度は大きく分けて,(1)数学ステレオタイプが自己認知・課題成績に及ぼす影響に関する研究,(2)システム正当化における相補的ステレオタイプ("男性は作動性/女性は共同性が高い")の役割についての研究を行った.研究1では,評価の存在を示す非言語シグナル(視線)が,女性の潜在的な数学アイデンティティの低下を引き起こすことを実験によって明らかにした.この結果はステレオタイプ脅威の効果とも一致し,当該領域に貢献する知見だと考えられる.加えて,以前実施した親子調査から,母親の潜在的ステレオタイプが,母親の評価を介して,女児の算数の自己評価や課題成績に影響を及ぼすことを明らかにした.非言語行動を中心としたコーディングの結果,母親からの侵入的サポートが評価伝達過程において重要な働きを担っている可能性が示唆された.以上から,ステレオタイプの影響過程における非言語シグナルの重要性が示唆された.研究2については,既婚男女630名を対象に調査を行い,システム正当化認知傾向が強いほど,相補的ステレオタイプに一致した自己ステレオタイプ化を引き起こし,家庭内での性役割分業を肯定することを明らかにした.これはステレオタイプの再生産過程を示す証拠だと考えられる,加えて実験研究を行い,相補的ステレオタイプへの接触によって女性の認知課題成績が低下することを明らかにした.これは相補的ステレオタイプがシステム正当化だけでなくステレオタイプ脅威と同様の効果を持つことを示しており,両過程の解明に貢献する知見だと考えられる.本研究は,ステレオタイプ脅威の生起要因を明らかにすることを目標とする.ステレオタイプ脅威とは,他者評価が懸念される状況下において,"女性は男性に比べて数学ができない"というネガティブなステレオタイプに一致して,実際に女性の数学成績が低下してしまうという現象である.本年度は,特にステレオタイプ脅威現象における他者からの非言語シグナル(例:視線,表情)の役割に注目して心理学実験を行うとともに,実際の母子間インタラクションに関するフィールド調査を行ってステレオタイプの伝達・維持過程を探った.まず,大学生を対象として,ステレオタイプ脅威のシグナルとして視線図形を用いた実験を行い,他者視線の存在によって,女性の数学に対する潜在的意識にどのような影響が見られるかを検討した.その結果,他者視線が存在する状況下では,ステレオタイプに一致して,数学に対するネガティブな自己認知が促進されることが明らかになった.これと並行して,小学校5年生のこどもとその母親60組を対象としたフィールド調査を実施し,算数課題場面の母子間インタラクションおよび母親の潜在的ステレオタイプが,こどもの算数に対する意識や課題成績にどのような影響を及ぼすかを検討した.その結果,母親の潜在的な数学ステレオタイプが強いほど,女児の算数に対する自信が低く,それがさらに算数成績に影響を及ぼすことが明らかとなった.今後,特に非言語シグナルの役割に注目して母子間インタラクションの様子を詳細に分析し,その影響過程を検討する予定である.以上,実験とフィールド調査の両面から検討を行うことで,ステレオタイプ脅威現象における他者からの非言語シグナルの効果を実証するとともに.実際の母子間におけるステレオタイプの伝達・維持の過程を明らかにすることができた,これはステレオタイプ脅威の解決に向けて意義ある知見を提供するものだと考えられる.本年度は,大きく分けて,(a)数学ジェンダーステレオタイプ("女性は数学が苦手である")が自己認知・課題成績に及ぼす影響に関する研究,および(b)システム正当化認知とジェンダーステレオタイプの関係についての研究の2つを行った.前者(a)については,大学生男女を対象とした実験研究を行い,非言語シグナル(視線)が,女性の数学に対する自信の低下(潜在的自己ステレオタイプ化)を引き起こすことを明らかにした,加えて,昨年度行った親子調査のデータをコーディング・分析し,母親の潜在的ステレオタイプがこどもの自己評価や課題成績に影響を及ぼしていることを明らかにした、親子間の感情インタラクションのコーディング結果から,母親の潜在的ステレオタイプが強いほど,親子インタラクション時の女児のネガティブ反応が多いことが明らかになった.これらの結果は,潜在的ステレオタイプが女性の数学に関する自己認知・課題成績に影響を及ぼしていること,および,その際に他者からの非言語シグナル(視線,表情など)が重要な役割を果たしていることを明らかにした点で重要な知見だと考えられる.加えて,潜在的ステレオタイプの伝達過程においても重要な示唆を与えるものである.後者(b)については,2060代の男女約1000名を対象にインターネット調査を行い,"男女の関係は相補的で公平である"というシステム正当化認知傾向が強い者ほど,伝統的性役割を支持し,非伝統的性役割の人物(e.g.,働く女性)に対する偏見を示すことを明らかにした,このことは,男女の相補性に注目することがステレオタイプの維持につながることを示した点で重要な知見である.本研究は,ステレオタイプ脅威の生起要因を明らかにし,その問題の解決方法を探ることを目標とする,ステレオタイプ脅威とは,評価懸念が高まる状況下において,ネガティブなステレオタイプ(例"女性は男性に比べて数学が苦手である")が活性化し,それに一致して実際に課題成績が低下してしまうという現象である.本年度は大きく分けて,(1)数学ステレオタイプが自己認知・課題成績に及ぼす影響に関する研究,(2)システム正当化における相補的ステレオタイプ("男性は作動性/女性は共同性が高い")の役割についての研究を行った.

研究1では,評価の存在を示す非言語シグナル(視線)が,女性の潜在的な数学アイデンティティの低下を引き起こすことを実験によって明らかにした.この結果はステレオタイプ脅威の効果とも一致し,当該領域に貢献する知見だと考えられる.加えて,以前実施した親子調査から,母親の潜在的ステレオタイプが,母親の評価を介して,女児の算数の自己評価や課題成績に影響を及ぼすことを明らかにした.非言語行動を中心としたコーディングの結果,母親からの侵入的サポートが評価伝達過程において重要な働きを担っている可能性が示唆された.以上から,ステレオタイプの影響過程における非言語シグナルの重要性が示唆された.研究2については,既婚男女630名を対象に調査を行い,システム正当化認知傾向が強いほど,相補的ステレオタイプに一致した自己ステレオタイプ化を引き起こし,家庭内での性役割分業を肯定することを明らかにした.これはステレオタイプの再生産過程を示す証拠だと考えられる,加えて実験研究を行い,相補的ステレオタイプへの接触によって女性の認知課題成績が低下することを明らかにした.これは相補的ステレオタイプがシステム正当化だけでなくステレオタイプ脅威と同様の効果を持つことを示しており,両過程の解明に貢献する知見だと考えられる.
中国新出土文献から見る「故事」の変遷と展開

1.新出土文献の研究:以前より取り組んでいる北京大学蔵西漢竹書『周馴』の研究成果の中国語版が、中国の出土文献専門の研究機関「武漢大学簡帛研究中心」の学術雑誌『簡帛』の第18輯に掲載されることとなった。2.研究の整理・紹介:中村未来氏(福岡大学講師)、海老根量介氏(東京大学助教)とともに、2016年から2017年までに日本で発表された新出土文献研究の成果の概要をまとめ、『簡帛』第17輯に発表した。範囲は戦国時代から三国呉の「簡帛」に限り、戦国秦漢全般にわたる研究を草野が、楚簡・秦簡の研究を中村氏が、帛書・漢簡・呉簡・晋簡の研究を海老根氏が担当した。本事業によって、国外の研究者に日本の研究に関する情報を提供することができた。また、自らの研究にも大いに役立つものとなった。3.著書の刊行:単著『墨子』(角川ソフィア文庫、ビギナーズ・クラシックス中国の古典)が刊行された。本書は『墨子』の抄訳書であり、一般の読者に理解できるように配慮し、『墨子』を篇の順に訳していくのではなく、八つのテーマに分けて再構成した。また、「『墨子』に関わる新資料」の項目を設け、新出土文献の発見が中国古代思想史研究に与えた影響や、上博楚簡『鬼神之明』などの『墨子』に関わる新出の竹簡資料について解説を加えた。なお、2018年10月から2019年3月まで、産前産後の休暇取得に伴い、研究を一時中断、補助事業期間を2021年3月まで延長した。産前産後の休暇取得に伴い、研究を一時中断したため。今後も引き続き、新出土文献の「故事」に関わる文献を中心に検討を進める。2018年11月には清華簡の第八分冊が刊行され、その中に含まれている文献についても検討対象としたい。また、安徽大学蔵戦国竹簡『詩経』や「楚史」は本研究とも関連が深いため、公開後すぐに研究に着手したい。研究成果は、国内外の学術雑誌や学会・研究会等で随時発表する予定である。また、竹簡の保存先や研究機関に赴いて実見調査や学術交流を行い、研究の精度を高めていきたい。1.新出土文献の研究:本年度は、戦国時代の周の昭文公の共太子に対する訓戒書、北京大学蔵西漢竹書『周馴(訓)』の研究を中心に進めた。整理者は本篇を『漢書』芸文志・道家類の『周馴』十四章と見なしているが、すでに異なる見解も提示されている。そこで本篇の思想的傾向を明らかにするために、『周馴』に引用されている『詩』に注目し、検討を進めた。この成果は、2017年5月に国際学会において発表予定である。また、本年度は陳偉教授(武漢大学)による戦国竹簡の概説書『楚簡冊概論』を、湯浅邦弘教授(大阪大学)監訳のもと草野と曹方向氏(日本学術振興会外国人特別研究員)が抄訳し、『竹簡学入門ー楚簡冊を中心として』と題して出版した。本書は「楚簡の基礎知識」「発見と研究」「整理と解読」「出土文献の研究」の四章構成(草野は第一章第三章を担当)で、初学者のみならず専門家にも有益な情報を提供している。2.研究の整理・紹介:2016年7月にはワークショップを開催し、草野は日本の中国古代思想史研究において観念史アプローチで貢献した三氏(竹内照夫・加藤常賢・森三樹三郎)の業績内容を俯瞰し、その特色を論じた。その後、栗田直躬を加えて改訂した中国語版が『東亞觀念史集刊』に掲載予定である。また、中村未来氏(大阪大学招へい研究員)、海老根量介氏(学習院大学助教)と共に2015年に日本で発表された出土文献研究の成果を概述し、草野は戦国秦漢の総合的研究を担当した(『簡帛』第14輯に掲載予定)。さらに『漢字学研究』第4号の「古文字学研究文献提要」(2014年に日本で刊行された研究書の紹介)にて郭店楚簡の研究書を解説した。3.学術調査:2016年9月に上海博物館、2017年2月に安徽大学を訪問し、竹簡の実見調査および現地研究者との会談を行った。安徽大学の戦国竹簡には『詩経』、楚史、孔子語録等が含まれており、今後の公開が待たれる。本年度は当初予定通り、北京大学蔵西漢竹書『周馴』を中心に研究を進めた。また、翻訳事業、研究の整理・紹介、学術調査等を通じて、新出土文献の「故事」をどのように取り扱うべきかについて確認・再考することができた。その一方で、『周馴』は長篇であるため、本年度は『周馴』に引用されている『詩』の検討のみにとどまった。次年度は、本篇に引用されている『書』や関連する伝世文献・出土文献との比較を通して、『周馴』の思想的傾向を明らかにしていきたい。また、清華簡の伊尹故事についてはまだ検討が不十分であるため、引き続き研究を進めていきたい。1.新出土文献の研究:本年度は、北京大学蔵西漢竹書『周馴』を中心に研究を進めた。

『周馴』は、戦国時代の周の昭文公の共太子に対する教訓書であり、整理者は本篇を『漢書』芸文志・道家類の『周訓』と見なしているが、すでに異なる見解も示されている。そこで、『周馴』に引用されている伝世文献、特に『詩』の解釈を中心に取り上げ、本篇は道家よりも儒家の思想に近いことを明らかにした。また、『文物』2017年第9期に掲載された、黄徳寛氏による論文「安徽大学蔵戦国竹簡概述」の日本語翻訳事業に携わった。安徽大学の竹簡の中には『詩経』や「楚史」などが含まれているため、今後、本研究に与える影響は大きいと予想される。2.著書の刊行:共著『清華簡研究』が刊行され、以前に取り組んだ清華簡『祭公之顧命』の研究成果の修訂版「『祭公之顧命』考」を発表することができた。本書の中には、清華簡の第一分冊から第六分冊までの書誌情報と文献概要をまとめた「清華簡(壹)(陸)所収文献解題」も収録されている。また、共著『教養としての中国古典』が刊行され、本人は『戦国策』と『十八史略』の章を担当し、最新情報を交えながら一般読者向けに解説した。3.学会・講演会での発表:本年度は、安陽師範学院や武漢大学で開催された国際学会、漢字学研究会といった国内研究会等で研究成果を発表する機会を得、学術交流・情報交換を行うことができた。また、本人が所属する中国出土文献研究会主催の特別講演会において、「安徽大学蔵戦国竹簡について」と題して、昨年度行った安徽大学の竹簡実見調査の成果を発表した。さらに、同研究会主催の講演会「新出土文献による中国学の展開」に参加し、中国の新進気鋭の若手研究者との研究交流を行うことができた。これは、今後計画している若手研究者を中心とした国際学会開催への一つの足がかりともなった。1.新出土文献の研究:以前より取り組んでいる北京大学蔵西漢竹書『周馴』の研究成果の中国語版が、中国の出土文献専門の研究機関「武漢大学簡帛研究中心」の学術雑誌『簡帛』の第18輯に掲載されることとなった。2.研究の整理・紹介:中村未来氏(福岡大学講師)、海老根量介氏(東京大学助教)とともに、2016年から2017年までに日本で発表された新出土文献研究の成果の概要をまとめ、『簡帛』第17輯に発表した。範囲は戦国時代から三国呉の「簡帛」に限り、戦国秦漢全般にわたる研究を草野が、楚簡・秦簡の研究を中村氏が、帛書・漢簡・呉簡・晋簡の研究を海老根氏が担当した。本事業によって、国外の研究者に日本の研究に関する情報を提供することができた。また、自らの研究にも大いに役立つものとなった。3.著書の刊行:単著『墨子』(角川ソフィア文庫、ビギナーズ・クラシックス中国の古典)が刊行された。本書は『墨子』の抄訳書であり、一般の読者に理解できるように配慮し、『墨子』を篇の順に訳していくのではなく、八つのテーマに分けて再構成した。また、「『墨子』に関わる新資料」の項目を設け、新出土文献の発見が中国古代思想史研究に与えた影響や、上博楚簡『鬼神之明』などの『墨子』に関わる新出の竹簡資料について解説を加えた。なお、2018年10月から2019年3月まで、産前産後の休暇取得に伴い、研究を一時中断、補助事業期間を2021年3月まで延長した。産前産後の休暇取得に伴い、研究を一時中断したため。次年度も引き続き、新出土文献の「故事」に関わる文献を中心に研究を進める。2016年4月には清華簡の第六分冊が刊行され、そこには『鄭武夫人規孺子』『鄭文公問太伯』など春秋時代の鄭国に関わる故事が収録されていた。このような最新の資料についても研究対象としたい。研究成果は、研究誌や国内外の学会・研究会などで随時発表する予定である。また、竹簡の所蔵先や研究機関に赴いて実見調査・学術交流を行うことで、研究の精度を高めたいと考えている。今後も引き続き、新出土文献の「故事」に関わる文献を中心に検討を進める。2017年4月には清華簡の第七分冊が刊行され、2018年には第八分冊が刊行されると見られるため、その中に含まれている文献についても検討対象としたい。
シナプス活動を可視化して時空間特性に迫る

新規に開発した大規模スパインイメージング法を用いて、海馬ニューロンの樹状突起におけるシナプス入力の時空間パターンを観察することに成功した。興奮性ニューロンにおいては近傍のスパインが同時に活動していたことから、同期入力が樹状突起の局所に集約されていることが見いだされた。一方で、Parvalbumin陽性の抑制性ニューロンにおいては同期入力が分散型であることを見いだし、ニューロン種特異的なシナプス入力の空間制御が存在することを明らかにした。本研究では、ニューロンの樹状突起におけるシナプス活動の時空間特性の解明にあたった。新規に開発した大規模スパインイメージング法を用いることにより、同時に数百個ものスパインから個別に入力の時系列パターンを観察することに成功した。以下では、申請した研究計画に従ってその成果を述べる。1樹状突起上での個々のシナプス入力の分布イメージング結果から各スパインでの入力頻度を算出し、スパインの空間座標との関係を検討した。座標については、細胞体からの距離および方位(尖端側-基底側)を参照し3次元的に同定された。結果として、入力頻度はスパインの空間座標に関わらず樹状突起上に一様に分布していることを明らかにした。2同期シナプス入力の空間分布同期入力の空間分布については、これまで「クラスター型」と「分散型」の2つの仮説が提唱され議論が分かれていた。そこで本研究では、同時に活動したスパインの空間配置を解析した。その結果、8μm以内の近傍のスパインがより高い頻度で同期入力を受けていることを見出した。これは先の「クラスター型」を支持する結果であり、これまでの議論について明確な解答を得ることができた。本研究ではさらに、このクラスター入力の形成にはNMDA受容体の活性化が関与していることを明らかにした。この結果については、従来の局所可塑性モデルに基づいたクラスター入力の形成機構を提唱するに至っている。3ニューロン種間での時空間特性の違い同様の検討を抑制性ニューロンであるparvalbumin陽性細胞についても行った。驚くべきことに、それらのニューロンでは同期入力の空間特性は「分散型」であった。これよりシナプス入力の時空間特性はニューロン種特異的であることがわかった。以上の成果は、論文としてまとめられScience誌に掲載されることが決定している(2011年12月時点でin press。本研究の重要性が大いに評価されたものと考えている。
新規緑色糸状細菌の光合成電子伝達系と光合成の初期進化

近年、本研究代表者を含むグループで新規に自然界から単離した緑色糸状細菌Roseiflexus castenholziiは最古の光合成細菌の性質を残している可能性が高い。この細菌から、光合成遺伝子を単離し、塩基配列を決定した。決定した12の遺伝子は、3つのクラスターを形成して存在していた。これらの遺伝子配列は、これまで知られていた別の緑色糸状細菌と、紅色細菌の中間的な性質を示した。このことは、緑色糸状細菌Roseiflexus castenholziiの遺伝子構成が緑色糸状細菌と紅色細菌の共通祖先に近いことを示唆する。さらに、この細菌の光合成電子伝達系を、生化学的および分光学的に解析した。生細胞では、閃光照射によって光合成反応中心複合体に結合したチトクロムcの速い酸化と、それに引き続く再還元が100ミリ秒以内に観察された。この再還元の最適温度は、50度付近であった。この再還元の最適温度は、この細菌の生育における最適温度の50度とよく一致した。細菌細胞を破壊し調製された膜標品を用いた場合でも、閃光照射によって、チトクロムcの速い酸化と再還元が観察された。このことは、多くの紅色細菌の場合と異なり、膜結合性のチトクロムcへの電子供与タンパク質もまた、膜結合性であることを示唆した。銅を含むタンパク質であるオーラシアニンを分離調整し、光合成反応中心複合体標品に加えて、光合成電子伝達を測定すると、単離複合体標品の結合型チトクロムcの再還元が観察された。したがって、この細菌における、光合成反応中心複合体のチトクロムcへの直接の電子供与体は、オーラシアニンであると結論した。キノンの拮抗阻害剤であるHQNOを加えると、膜標品におけるチトクロムcの再還元が阻害された。以上の結果、この新規細菌の光合成電子伝達系には、オーラシアニンとキノール:オーラシアニン酸化還元酵素が含まれると考えられる。好熱性光合成細菌である緑色糸状細菌のグループは、16S-rDNAの系統解析によると光合成細菌の中で最も初期に分岐するため、光合成器官の初期進化を考える上で重要である。緑色糸状細菌の光合成電子伝達経路は、主としてChloroflexus属のChloroflexus aurantiacusを用いて研究されてきたが,その経路はほとんど解明されていない。本研究により,新属・新種の緑色糸状細菌として長野県の中房温泉から単離されたRoseiflexus cast enholziiを用いて緑色糸状細菌の電子伝達系の概要をあきらかにした。Roseiflexus属のひとつの特徴は、Chloroflexus属と異なりクロロソームを欠いている点で有り,そのことによりR.cast enholziiでは吸収変化の正確な測定が可能となった。生細胞に閃光を照射すると、光酸化した反応中心結合型チトクロムの数十ミリ秒での速い再還元が観察された。この再還元速度の温度依存性を調べたところ50°C付近で最も速く,この細菌の生理学的に適した条件下で最適化されていた。精製した反応中心に膜分画より得た銅タンパク質であるオーラシアニン画分を加えた再構成系で閃光照射実験を行うと、光酸化したチトクロムの再還元が認められ、電子伝達系へのオーラシアニンの関与が考えられた。また、膜標品に阻害剤HQNOを添加して閃光照射すると、チトクロムの再還元速度が低下したことから、膜におけるキノール・オーラシアニン酸化還元酵素の存在が示唆された。

以上の結果から、R.cast enholziiの光合成電子伝達経路において、キノール・オーラシアニン酸化還元酵素とオーラシアニンが電子伝達に関与していると結論した。電子伝達系の比較のために,紅色細菌の対応する電子伝達系についての研究も平行して進め,新知見を得た.近年、本研究代表者を含むグループで新規に自然界から単離した緑色糸状細菌Roseiflexus cantenholziiは最古の光合成細菌の性質を残している可能性が高い。この細菌から、光合成遺伝子を単離し、塩基配列を決定した。決定した12の遺伝子は、3つのクラスターを形成して存在していた。これらの遺伝子配列は、これまで知られていた別の緑色糸状細菌と、紅色細菌の中間的な性質を示した。このことは、緑色糸状細菌Roseiflexus cantenholziiの遺伝子構成が、緑色糸状細菌と紅色細菌の共通祖先に近いことを示唆する。さらに、この細菌の光合成電子伝達系を、生化学的および分光学的に解析した。生細胞では、閃光照射によって、光合成反応中心複合体に結合したチトクロムcの速い酸化と、それに引き続く再還元が100ミリ秒以内に観察された。この再還元の最適温度は、50度付近であった。この再還元の最適温度は、この細菌の生育における最適温度の50度とよく一致した。細菌細胞を破壊し調製された膜標品を用いた場合でも、閃光照射によって、チトクロムcの速い酸化と再還元が観察された。このことは、多くの紅色細菌の場合と異なり、膜結合性のチトクロムcへの電子供与タンパク質もまた、膜結合性であることを示唆した。銅を含むタンパク質であるオーラシアニンを分離調整し、光合成反応中心複合体標品に加えて、光合成電子伝達を測定すると、単離複合体標品の結合型チトクロムcの再還元が観察された。したがって、この細菌における、光合成反応中心複合体のチトクロムcへの直接の電子供与体は、オーラシアニンであると結論した。キノンの拮抗阻害剤であるHQNOを加えると、膜標品におけるチトクロムcの再還元が阻害された。以上の結果、この新規細菌の光合成電子伝達系には、オーラシアニンとキノール:オーラシアニン酸化還元酵素が含まれると考えられる。
減数分裂における制御機構

分裂酵母を材料に減数分裂を制御する分子機構を解析し、減数分裂のための遺伝子のmRNAにはそれらを栄養増殖時には細胞から選択的に取り除くための目印が埋め込まれていることを発見し、またそれらが減数分裂時には減数分裂マスター制御因子Mei2pによって安定化されるメカニズムを解明した。減数分裂は有性生殖を可能にする特異的な細胞周期の様式であり、生命の多様性を生み出す重要な過程である。真核微生物である分裂酵母における減数分裂の制御機構につき、主要な進展のあった3つの成果を記述する。1.減数分裂は、相同染色体を還元的に分配する第一分裂と、姉妹染色体を均等に分配する第二分裂からなる。第二分裂は従来体細胞分裂分裂に準じるとされていた。しかし、分裂酵母の第二分裂の進行には体細胞分裂に必要とされないmes1遺伝子が必須であり、第二分裂は体細胞分裂と等価ではない。mes1遺伝子産物(Mes1p)の果たす機能を解析したところ、Mes1pの有無によって、減数第一分裂後に残存するサイクリンBの量が異なっていた。サイクリンBはcdc2キナーゼの活性化因子であり、核分裂を進行させるのに不可欠の要素である。さらに、mes1変異株の多コピーサプレッサーとして単離された、後期促進複合体(APC)の活性化因子でタンパク質分解に関与するslp1とmes1との関係を解析しところ、Mes1pがSlp1pの働きを阻害する因子であることが証明された。これらを総合し、第一分裂後にMes1pがSlp1pに結合してその活性を抑え、サイクリンBの分解を部分的な段階に留め、第二分裂の開始に必要なサイクリンBを確保することを提唱した。2.減数分裂に特異的ないくつかのmRNAは、栄養増殖時には積極的に不安定化されているが、それらを安定化的に発現できるmmi1変異株を単離した。さらにmmi1変異株を利用して、このような制御下にあるmRNAを網羅的に同定した。3.生育に必須な分裂酵母第二のTORキナーゼTor2pにつき温度感受性変異株を作製した。この株は高温で有性生殖を開始する表現型を示し、Tor2pが普段は有性生殖開始に負に働く因子であることが明らかとなった。分裂酵母において、減数分裂特異的に機能を発揮するいくつかの遺伝子のmRNAは、体細胞分裂周期に転写されると極めて不安定で、速やかに細胞から除去される。こうした遺伝子は少なくとも10以上あると見積もられる。これらのmRNAは、我々がDSR(destabilizing region)と呼ぶ領域をもち、この領域が体細胞分裂周期においてmRNAを不安定にしている。DSRは、ORF中に存在する場合と、ORFと3'-UTRにまたがる形で存在する場合が知られている。そのようなmRNAを体細胞分裂周期において安定に保持する突然変異体の分離と解析から、減数分裂特異的mRNAの不安定化に必須の役割を果たす新規のRNA結合タンパク質Mmi1pが同定できた。Mmi1pはDSR RNAに直接結合する能力をもつ。Mmi1pを欠くと細胞は極端に生育が悪くなる。またMmi1pの機能低下に伴って細胞内には減数分裂特異的遺伝子の転写物が検出されるようになる。mmi1変異による生育阻害は、DSRをもつ遺伝子の一つで、減数分裂の進行に重要な転写因子をコードするmei4を欠失させるとかなりの程度回復した。したがって、Mmi1pは、体細胞分裂にとって有害な減数分裂遺伝子の発現の漏出を抑え込むことによって、栄養成長を可能にしていると考えられる。こうしたMmi1pの機能は、減数分裂開始時にはオフにならないと不都合が生じると考えられる。実際、分裂酵母における減数分裂のマスター制御因子であるMei2pが、Mmi1pに結合してその機能を抑え込むように働くことが明らかとなった。さらには、Mmi1pの機能を抑制して減数分裂特異的遺伝子の高発現を可能にすることこそが、Mei2pが減数分裂前期に核内に構築する点状構造の果たす役割であると考えられることが判明した。減数分裂特異的に発現が観察されるいくつかのmRNAには、体細胞周期においてそれらを積極的に不安定化する領域(DSR)が組み込まれており、YTHファミリーに属するRNA結合タンパク質Mmi1pに認識されて、転写された直後に細胞から取り除かれる。Mmi1pと相互作用する分子の検索を進めた結果、RNA分解酵素複合体のexosomeとMmi1pとの関連が示唆された。また、Mmi1pは分裂酵母の減数分裂マスター制御因子のMei2pと物理的に結合することを認めていたが、Mei2pと複合体をつくって減数第一分裂を促進するmeiRNAの欠損を、DSRの過剰発現が抑圧するという遺伝学的相互作用を見いだした。さらに、Mmi1pは栄養増殖時には核内に散在しているが、減数分裂時には一点に集結し、この点はMei2PがmeiRNAと結合して作る点状構造、いわゆるMei2ドットに重なることが判明した。

以上の観察を総合して、減数分裂の際にはMei2ドットがMmi1pを引きつけてMmi1pを減数分裂特異的遺伝子のmRNAから隔離するために、これらのmRNAが安定に働くことができるようになるというモデルを提唱した。Mei2ドットができなくて減数分裂の進行が停止するmeiRNA欠失変異株において、Mmi1pの活性を低下させると減数分裂が回復することが実証でき、このモデルの妥当性が支持された。DSRの過剰発現はMmi1pをトラップして、結果的に減数分裂特異的mRNAを安定化したと考えられる。今年度の研究により、永年その減数分裂制御における重要性が指摘されながら分子機能が特定できなかったMei2pにつき、少なくともその役割の一部が解明された。減数分裂開始のシグナルとなる栄養源飢餓の認識において重要な働きをもつと推定されるTORキナーゼについて解析を進めた。分裂酵母に2種類存在するTORキナーゼのうち、Tor1pについては、経路の下流でGad8キナーゼを介して有性生殖に必須の役割を果たすことを先に示した。いっぽう、生育に必須と記載されていた第二のTORキナーゼTor2pにつき、温度感受性変異株を作製したところ、それらは制限温度で栄養条件を無視して有性生殖に入る表現型を示すことが判明した。今回マイクロアレイ解析によってTor2pに発現が支配されている遺伝子を網羅的に解析したところ、Tor2pの活性が低下すると細胞はちょうど窒素源飢餓に遭遇したのと同じような遺伝子発現プロファイルを示すことが明らかとなった。すなわち、アミノ酸の取り込みに働く遺伝子や、有性生殖の開始に必要とされる遺伝子の発現が広範に誘導された。さらに、分裂酵母におけるTOR複合体構成因子の同定を進めて、複合体1(TORC1)と複合体2(TORC2)のサブユニット構成を解明した。TORC1には、Tor2pに加えてraptorホモログMip1pやWat1pが含まれ、TORC2には、Tor1pに加えてrictorホモログSte20pやWat1pが含まれていた。分裂酵母TORC1は細胞の増殖を促進する方向に働く点で動物細胞や出芽酵母のTORC1と近い機能を果たすと考えられたが、分裂酵母TORC2は細胞内のアクチンの編成を制御する働きをもつようには見えず、他生物のTORC2とは果たす機能が異なるように思われた。分裂酵母では減数分裂特異的なmRNA群が栄養増殖期に積極的に細胞内から除去される現象が存在し、Mmilタンパク質がこの選択的除去に中心的な役割を果たすことを先に示した。MmilによるmRNAの選択的除去機構の解析を進めた結果、エキソソームと呼ばれるリボヌクレアーゼ複合体のmRNA分解への関与が明らかとなった。エキソソームのサブユニットであるRrp6やDis3の変異体では、栄養増殖期においても減数分裂特異的mRNA群の蓄積が確認された。また、Mmilと相互作用する因子を酵母ツーハイブリッドスクリーニングで探索した結果、mRNAのポリA付加複合体の構成因子が複数単離された。それらのうちPlalやRna15について変異体を作製したところ、エキソソームの変異体の場合と同様に、Mmilにより除去されるはずのmRNAの発現上昇がみられた。また、エキソソーム変異体で蓄積するmRNAでは、3'端のポリA鎖が通常よりも伸長していることが観察され、この異常なポリA付加はポリA付加酵素であるPlalに依存していることがわかった。
マルテンサイト晶のバリアント配向性とテイラー則に從う変態ひずみ系に及ぼす外力効果

一軸応力と磁場は方向性を持った外力であるが,温度と静水圧は等方向的な外力である。それらの外力によりマルテンサイト変態を誘発できるが,生成するマルテンサイト晶のバリアント配向性は外力が方向性を持ったものであるか等方的なものであるかによって大きく異なる.すなわち,一軸応力あるいは磁場を付加したときには,付加方向に平行な晶癖面を持つバリアントが選択的に生成するが,温度を低下させたり静水圧を付加したときはその選択性がなくなる.また,このバリアント配向性および塑性変形時のテイラー則によって,マルテンサイト晶内の格子不変変形の系も外力の影響を受けるはずである.マルテンサイト晶のバリアント配向性と格子不変変形の系に及ぼす,そのような外力効果を明らかにすることが本研究の最終目的であるが,昨年度は非等温マルテンサイト変態するFe-Ni合金をH_s点以上の温度で一軸応力あるいは磁場を印加して,熱誘起,応力誘起および磁場誘起マルテンサイト変態を起させ,マルテンサイト晶の配向性および内部の格子不変変形を光学顕微鏡,走査型電子顕微鏡および透過型電子顕微鏡により観察した.予想通り,バリアントの配向性およびそれに応じた内部の格子不変変形にも配向性が認められたが,それら配向性の定量化までには至らなかった.本年度は配向性を定量化すると共に,配向牲に関して新しい成果を得るべく,昨年の実験を数多く重ねることにした.その結果,一軸応力付加の場合には,外力付加方向に平行なバリアントだけでなく,シュミッド・ボアスの法則に従った外力付加方向と45°の角度をなす晶癖面に沿うバリアントも観察された.一軸応力と磁場は方向性を持った外力であるが,温度と静水圧は等方向的な外力である。それらの外力によりマルテンサイト変態を誘発できるが,生成するマルテンサイト晶のバリアント配向性は外力が方向性を持ったものであるか等方的なものであるかによって大きく異なる.すなわち,一軸応力あるいは磁場を付加したときには,付加方向に平行な晶癖面を持つバリアントが選択的に生成するが,温度を低下させたり静水圧を付加したときはその選択性がなくなる.また,このバリアント配向性および塑性変形時のテイラー則によって,マルテンサイト晶内の格子不変変形の系も外力の影響を受けるはずである.マルテンサイト晶のバリアント配向性と格子不変変形の系に及ぼす,そのような外力効果を明らかにすることが本研究の最終目的であるが,昨年度は非等温マルテンサイト変態するFe-Ni合金をH_s点以上の温度で一軸応力あるいは磁場を印加して,熱誘起,応力誘起および磁場誘起マルテンサイト変態を起させ,マルテンサイト晶の配向性および内部の格子不変変形を光学顕微鏡,走査型電子顕微鏡および透過型電子顕微鏡により観察した.予想通り,バリアントの配向性およびそれに応じた内部の格子不変変形にも配向性が認められたが,それら配向性の定量化までには至らなかった.本年度は配向性を定量化すると共に,配向牲に関して新しい成果を得るべく,昨年の実験を数多く重ねることにした.その結果,一軸応力付加の場合には,外力付加方向に平行なバリアントだけでなく,シュミッド・ボアスの法則に従った外力付加方向と45°の角度をなす晶癖面に沿うバリアントも観察された.一軸応力と磁場印加は方向性を持った外力であるのに対し,温度低下と静水圧印加は等方的な外力である.それらの外力を負荷してマルテンサイト変態が起きるとき,生成するマルテンサイト晶のバリアント配向性は方向性を持った外力であるか,等方的な外力であるかによって大きく異なるはずである.すなわち,一軸応力あるいは磁場を印加したときは印加方向に平行なバリアントが選択的に生成し,温度低下と静水圧を印加したときにはその選択性は無くなる.このバリアントの配向性および塑性変形時のテイラー則によって,マルテンサイト晶内の格子不変変形も外力の影響を受けるはずである.マルテンサイト晶のバリアント配向性と格子不変変形の系に及ぼすそのような外力効果を明らかにすることが本研究の最終目的であるが,本年度は非等温マルテンサイト変態するFe-Ni合金を試料とし,それをMs点以下の温度へ冷却したり,Ms点以上の温度で一軸応力あるいは磁場を印加して,それぞれ熱誘起,応力誘起および磁場誘起マルテンサイト変態を起こさせ,マルテンサイト晶のバリアント配向性および内部の格子不変変形をそれぞれ光学顕微鏡あるいは走査型電子顕微鏡および透過型電子顕微鏡によって観察した.その結果,熱誘起マルテンサイト晶のバリアントには選択性が無いのに対し,応力誘起および磁場誘起のマルテンサイト晶のそれは外力印加方向に平行に選択的に生成していた.これらは予測された結果であるが,同一試料について確認することができた.マルテンサイト晶内部の格子不変変形にもバリアント配向性に応じた違いが観察されたが,どのように違うかを断定できるまでには至っていない.次年度にはより多くの実験を重ねることによって明確にする予定である.

一軸応力と磁場は方向性を持った外力であるが,温度と静水圧は等方向的な外力である.それらの外力によりマルテンサイト変態を誘発できるが,生成するマルテンサイト晶のバリアント配向性は外力が方向性を持ったものであるか等方的なものであるかによって大きく異なる.すなわち,一軸応力あるいは磁場を付加したときには,付加方向に平行な晶癖面を持つバリアントが選択的に生成するが,温度を低下させたり静水圧を付加したときはその選択性がなくなる.また,このバリアント配向性および塑性変形時のテイラー則によって,マルテンサイト晶内の格子不変変形の系も外力の影響を受けるはずである.マルテンサイト晶のバリアント配向性と格子不変変形の系に及ぼす,そのような外力効果を明らかにすることが本研究の最終目的であるが,昨年度は非等温マルテンサイト変態するFe-Ni合金をM_s点以上の温度で一軸応力あるいは磁場を印加して,熱誘起,応力誘起および磁場誘起マルテンサイト変態を起させ,マルテンサイト晶の配向性および内部の格子不変変形を光学顕微鏡,走査型電子顕微鏡および透過型電子顕微鏡により観察した.予想通り,バリアントの配向性およびそれに応じた内部の格子不変変形にも配向性が認められたが,それら配向性の定量化までには至らなかった.本年度は配向性を定量化すると共に,配向性に関して新しい成果を得るべく,昨年の実験を数多く重ねることにした.その結果,一軸応力付加の場合には,外力付加方向に平行なバリアントだけでなく,シュミッド・ボアスの法則に従った外力付加方向と45°の角度をなす晶癖面に沿うバリアントも観察された.
糖修飾による血液脳関門透過性改善法の開発

モデルペプチドとして、中枢性の鎮痛活性を有するロイシンエンケファリン(アミノ酸残基数5個、LE)を選択し、糖を結合させる方法として研究者の所属する研究室において汎用されているシッフ塩基を中間体として利用する方法を用いた。この方法は合成に時間がかかる(約1か月)が、目的物質以外の生成物が少なく、精製が容易にできるという点で優れた方法である。結合させる糖は、ペプチドとの結合後おいても末端にグルコース構造を維持できるセロビオースを選択した。この構造を持つ糖修飾体は未修飾体に比べ消化管透過性の改善が観察された化合物である。合成後、精製した糖修飾LEを^<125>Iで放射標識化し、in situ brain perfusion法を用いて、血液脳関門透過性が改善されているかどうか検討した。糖修飾LEの血液脳関門透過性は未修飾LEの透過性に対して約6割に減少しており、これは、糖修飾により水溶性が増加したためであると考察できた。また、グルコース輸送担体に対する認識性を獲得できたかどうか検討するために、グルコースを同時存在させてその血液脳関門透過性が変化するかどうかの検討も行ったが、その変化は観測できなかった。このことから、グルコース輸送担体に対する認識特性は獲得できていないことが明らかとなった。グルコース輸送担体に対する認識特性を獲得できなかった理由として、ペプチド鎖が長いためであることが考えられたために、アミノ酸残基数を3個にしたtyrosyl-glycyl-glycine(YGG)を用いて同様の検討を行った。その結果、糖修飾YGGは血液脳関門透過は観察されず、また、未修飾YGGの透過性よりも劣ることが明かにされた。このことから、アミノ酸残基数の問題よりも結合させる糖の構造、もしくはペプチドとの結合部位、結合様式が、血液脳関門透過性を決定する因子としてより重要であることが示唆され、小腸と同様の修飾方法では血液脳関門透過性を改善できない可能性が示唆された。
集団間の分布が著しく異なる色素形成関連遺伝子多型の個人識別への応用

個人識別は法医学鑑定上最も重要な項目の一つであり、通常、繰り返し配列多型(STR)が用いられている。しかしながら、個人の帰属集団の推定することは困難であり、異なった方法の開発が必要である。本研究では集団問の遺伝子頻度が異なる色素形成遺伝子多型の頻度を解析し、さらに東アジアおよび日本人に特異的遺伝子を新たに検索調査した。これらの知見に基づいて、識別同定の方法を開発した。ヒトの皮膚などで生じているメラニン色素の合成量は紫外線量や緯度と相関関係があり、そのため、個人の帰属・祖先集団といった個人の情報の推定に有効であると考えられる。一方、同じ集団内の人々の個人識別は昨今の反復(STR)多型を利用した方法の開発で比較的容易に判別できるが、帰属・祖先集団といった地域性についての情報を得ることは困難である。本研究では、国際的なデータベースから色素関連遺伝子の多型を検索して、集団の分化度の指標である固定指数(F_<ST>)の高いものを抽出した。SLC45A2(MATP)遺伝子はヨーロッパ人に特異的な対立遺伝子(SNP)があり、西ヨーロッパの北部から北アフリカにかけての約20集団を調べたところ、北ではほぼ100%の頻度であるが、北アフリカでは50%の頻度を示し、北から南に向かって頻度が下がる地理的勾配が存在することを発見した。CFI遺伝子ではアジア人特異的遺伝子と日本人特異的遺伝子が見つかった。アジア人特異的遺伝子は南から北に向かって頻度の減少が見られた。この変異の近傍のSTR多型はいずれの集団でも多様性が高く、加えて、アジア人特異的な対立遺伝子が多数存在する稀有なSTR多型であった。このような遺伝子を多数同時に分析し、クラスター分析することにより、目的の個人の帰属・祖先集団の推定が可能なことがわかった。さらに、遺伝子調査するとともに、多数のSNPやSTR多型を同時に判定する方法を開発する。国際化されつつある現在、目撃情報がない事件の犯罪加害者や災害などの被害者の身元情報として、当該の人々の祖先集団や帰属集団を推定することは法医鑑識において重要な研究項目である。本研究においては集団間の差異の著しいメラニン色素合成に関連する遺伝子に着目して上記の情報を得、あわせて、他の有効な単一塩基多型(SNP)や繰り返し多型(STR)を開発することが目的でめる。昨年、研究目的に合致したアジア人特異的なマーカーをみつけてきたが、今回、そのCFI遺伝子のSTRをアジアの諸集団で調べたところ、南中国で高い頻度を示し、北に向かって頻度が減少する地理的勾配が存在し、日本人では約10%の頻度で観察された。HERC1遺伝子ではアジア人集団では90%で、比較的均一な分布を示すのに対して、アフリカ人、ヨーロッパ人集団では、10%というきわめて頻度差の大きいマーカーを報告した。ABCC4、FBN1、CEP152、ZNF804B、GALNT11などもアジア人特異的な分布を示すことを明らかにした。FBN1は東北アジアかち頻度の地理的勾配がみられ、一方、ZNF804BはHERC1と同様に比較的均一な分布を示した。これらのアジア人集団特異的対立遺伝子を少なくとも一つもつ確率は日本人では95%以上であり、われわれが以前に報告したOCA2などのマーカーとあわせると、99.99%に達した。GALNT11には日本人特異的対立遺伝子も観察され、日本人であることを証明できる確率を高めることができた。日本国内に世界の各地からいろいろの集団の人々が居住しており、犯罪にまきこまれるケースがしばしば見受けられる。加害者あるいは被害者であれ、通常の個人識別では繰り返し配列多型(STR)を組み合わせて個人の同定を行っている。しかしながら、これらの情報は個人の民族、集団などの出自を語ってはくれない。ある特定地域に限局して分布する一塩基多型(SNP)を組み合わせることが、精度の高い判定法を確立するのに、必須である。今回、この目的ために、チベット人、オロチョン人、エヴェンキ人などのサンプルを入手し、20数集団の集団分析をおこなった。眼皮膚白皮症II型(OCA2)遺伝子上の二つの多型(p.A481Tとp.H615R)のうち、481Tはオロチョン人において、また、615Rは中国の長沙の漢民族において頻度がもっとも高く、それぞれ、北から南、南から北の地理的勾配が観察され、これらは東アジア特異的遺伝子として有用であった。日本人であることを証明するには、日本人に特異的な対立遺伝子が多数必要とされるが、先に報告したGALNT11のほかに、RPS6KA2、PLA2G12A、C1S、KCNJ16、MFGE8、FBXW11などの遺伝子上に見出され、さらに詳細に検討することにより多数の日本人特異的遺伝子が存在することが示唆された。また、集団間の分布が異なる色素形成

関連遺伝子(ASIP、MATP、MC1R、MLPH、OCA2、SLC24A4、SLC24A5、SLC45A2、TYRP1など)や既知の集団特異的遺伝子(FY、HBなど)を組み合わせて多重増幅することにより、高い確率でもって、主要3集団の識別が可能となった。
地域基盤型医療に貢献する歯科医療人養成のための多職種連携教育プログラムの構築

本研究では、歯科における多職種連携医療教育の現状をふまえ、多職種連携医療における歯科専門職の役割とその認識、協働上の問題点と解決法を検討し、多職種連携医療を実践する基本的能力を明らかにする。これらをもとに、多職種と連携をとり、患者中心の地域基盤型医療に貢献することのできる歯科医療人を養成するための多職種連携教育プログラムを構築し、実践、検証して、効果の高い教育手法を確立する。
抗リン脂質抗体症候群と全身性エリテマトーデスの疾患感受性遺伝子に関する研究

抗リン脂質抗体症候群(APS)や全身性エリテマトーデス(SLE)の遺伝的背景を明らかにすることを目的とし、APS約140名、SLE約500名、健常人コントロール400名からゲノムDNAを抽出し同時に患者データベースを作成した。TNFAIP3の遺伝子多型の解析では、日本人のSLEにおいても関連が明らかとなった。また、理化学研究所や名古屋市立大学で行なわれた日本人集団におけるSLEやAPSのゲノムワイドなSNP解析に協力し、検体の収集ならびに臨床情報の収集を行った。1.ゲノムDNAの抽出ならびにデータベースの作成:抗リン脂質抗体症候群(APS)、全身性エリテマトーデス(SLE)の患者から同意を得て、ゲノムDNA、血清、血漿サンプルの収集を行い、これまでAPS約100名、SLE約400名の検体を収集した。同時に臨床データの収集を行い、将来の層別化解析に向け患者データベースを作成中である。性別、年齢のマッチした健常人コントロールについても同様にDNAサンプルを収集しこれまで約400名のDNAサンプルの収集を行った。2.候補遺伝子のSNP解析:これまで欧米人で報告されてきたSLEの疾患感受性遺伝子について、日本人SLEやAPS患者で関連を検討した。例えばSTAT4の遺伝子多型は当初白人集団でSLEや関節リウマチと関連することが報告された。本研究ではSTAT4遺伝子多型はSLEのみならずAPSとも関連し、さらに原発性APSで強い関連があることが明らかとなった。3.ゲノムワイドなSNP解析:疾患感受性候補遺伝子のSNP解析と並行して、理化学研究所で行なわれるSLEゲノムワイドなSNP解析と協力し、検体の収集ならびに臨床情報の収集を行った。4.各種自己抗体などの臨床検査:患者血漿、血清サンプルを用い、従来から頻用されている各種自己抗体の測定や凝固機能検査、各種疾患標識マーカー、疾患活動性マーカーなどに加え、独自に測定系を確立した新しい自己抗体(ホスファチジルセリン依存性抗プロトロンビン抗体など)を測定し、各遺伝子多型との関連を検討中である。1.ゲノムDNAの抽出ならびにデータベータベースの作成:抗リン脂質抗体症候群(APS)、全身性エリテマトーデス(SLE)の患者から同意を得て、ゲノムDNA、血清、血漿サンプルの収集を行い、これまでAPS約120名、SLE約500名の検体を収集した。性別、年齢のマッチした健常人コントロールについても同様にDNAサンプルを収集しこれまで約500名のDNAサンプルの収集を行った。例えばTNFAIP3の遺伝子多型は当初白人集団でSLEと関連することが報告されたが、日本人のSLEとも関連が明らかとなった。3.ゲノムワイドなSNP解析:疾患感受性候補遺伝子のSNP解析と並行して、理化学研究所や名古屋市立大学で行なわれるSLEやAPSのゲノムワイドなSNP解析と協力し、検体の収集ならびに臨床情報の収集を行った。抗リン脂質抗体症候群(APS)や全身性エリテマトーデス(SLE)の発症や様々な臨床症状と関連する遺伝的背景を遺伝子多型、特に一塩基多型(single nucleotide polymorphism, SNP)を用いて明らかにすることを目的とし、これまでの基礎的および臨床的研究に基づきAPSやSLEの発症に重要と考えられる免疫関連、血栓症関連の遺伝子解析に加えて、近年の欧米を中心としたゲノムワイドな関連解析で新たに明らかとなった疾患関連候補遺伝子につき、日本人患者集団における関連を解析した。さらには日本人におけるAPSおよびSLEの疾患感受性遺伝子を明らかにする目的に日本人APSならびにSLEのゲノム解析を他施設と協力して行った。加えて、SLEやAPSの臨床症状や検査成績による層別解析を行い、臨床症状や検査成績との関連についても検討した。具体的には、以下のとおりである。(1)ゲノムDNAの抽出を行い、APS約140名、SLE約500名の検体を収集した。同時に臨床データの収集を行い、層別化解析のための患者データベースを作成した。健常人コントロールについても同様にDNAサンプルを収集し約500名のDNAサンプルを収集した。(2)これまで欧米人で報告されてきたSLEの疾患感受性遺伝子について、日本人SLEで関連を検討した。