hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
放射線治療中に生ずる高度増殖浸潤能クローンの封じ込め

マウス繊維芽肉腫細胞株QR s P細胞に10Gyの放射線照射を施行し、生存したコロニーから24株をクローニングした。これらに対しさらに10Gy照射したところコロニーの出現のしかたはまちまちであり、母集団の中には放射線高感受性のものもあれば抵抗性のものもあることが判明した。このうち最も抵抗性の株(10-1IRと命名)と最も高感受性の株10-5IRについて様々な角度から相違点を見つけ出した。まず親株との間でそれぞれc DNAアレイを行った。またIR群それぞれをC57BL/6マウスに細胞移植を行ったところ造腫瘍能には変わりがないことが判明した。この腫瘍から細胞株を再び作成し親株との間で2回目のc DNAアレイを施行した。この計4回のアレイデータから、それぞれ親株と似ているもの、異なるものを抽出し、さらにそれらの遺伝子群について10-1IRと10-5IRの間で異なる遺伝子を70個検出した。このなかには転写因子であるATF5が存在した。放射線照射をmimicするためp53を強制導入して親株と10-5IRの細胞死分画をフローサイトメーターみたところ、親株で7%、10-5IRで25%と明らかに10-5IR細胞においてp53によるアポトーシスが多く見られた。次にATF5を10-5IRに強制導入しコロニーアッセイによる10Gy照射後の生存コロニー数、フローサイトメーターによるアポトーシスの文画を調べたところいずれも、放射線に対する耐性を獲得した。次にATF5とp53を共導入しp53のレポーターアッセイをおこなったところp53の転写活性が有意に低下していることが観察された。以上の結果からATF5はなんらかの機構を介してp53に対し抑制的に働く遺伝子であることが判明した。同家移植可能なマウス線維肉腫細胞株QRsPに10Gyの照射を行ない、生残株6株をクローニングした。細胞増殖性の高い2株(それぞれ10-1、10-5と命名)に対して10Gyの照射を行なったところ感受性に優位差を認めた。算出されたsurviving fractionは親株;4.87×10^<-4>、10-1;5.52×10^<-4>、10-5;7.04×10^<-4>、であった。しかしこれらの細胞に造腫瘍性の差はなく、C57B6マウス背部に親株と同様の腫瘍塊を形成した。それぞれの株の接種によりin vivoで形成された細胞を組織培養して得られた細胞株(QRsP-V、10-1V、10-5V)でも同様の結果が得られたことから、観察された感受性の差は照射による一過性の変化ではないと考えられた。これらの細胞株にp53を発現するアデノウイルスを感染させたところ(m.o.i=20pfu/cell)感染により誘導されるアポトーシスは、3つの細胞株中10-5においてのみ顕著であり、照射に対する感受性の差はp53の下流で起こる細胞死に対する抵抗性の差であることが示唆された。いかなる遺伝子発現変化がこのような差に関連するかを明らかにするためDNAアレイによる解析を行なった。親株を対象とし10-1および10-5における遺伝子変化を網羅的に解析したところ、基本的な遺伝子発現プロフィールは10-1と10-5では類似していた。そこで、親株と10-1の間では変化が少なく(1.5倍以下)、かつ親株と10-5の間で大きな発現量の差が認められた遺伝子(0.5倍以下あるいは2倍以上)を抽出したところ100前後の候補遺伝子が検出された。

これらの遺伝子の中には数種類の転写因子も含まれており、現在この道伝子のクローニングまで終了した。マウス繊維芽肉腫細胞株QRsP細胞に10Gyの放射線照射を施行し、生存したコロニーから24株をクローニングした。これらに対しさらに10Gy照射したところコロニーの出現のしかたはまちまちであり、母集団の中には放射線高感受性のものもあれば抵抗性のものもあることが判明した。このうち最も抵抗性の株(10-1IRと命名)と最も高感受性の株10-5IRについて様々な角度から相違点を見つけ出した。まず親株との間でそれぞれcDNAアレイを行った。またIR群それぞれをC57BL/6マウスに細胞移植を行ったところ造腫瘍能には変わりがないことが判明した。この腫瘍から細胞株を再び作成し親株との間で2回目のcDNAアレイを施行した。この計4回のアレイデータから、それぞれ親株と似ているもの、異なるものを抽出し、さらにそれらの遺伝子群について10-1IRと10-5IRの間で異なる遺伝子を70個検出した。このなかには転写因子であるATF5が存在した。放射線照射をmimicするためp53を強制導入して親株と10-5IRの細胞死分画をフローサイトメーターみたところ、親株で7%、10-5IRで25%と明らかに10-5IR細胞においてp53によるアポトーシスが多く見られた。次にATF5を10-5IRに強制導入しコロニーアッセイによる10Gy照射後の生存コロニー数、フローサイトメーターによるアポトーシスの文画を調べたところいずれも、放射線に対する耐性を獲得した。次にATF5とp53を共導入しp53のレポーターアッセイをおこなったところp53の転写活性が有意に低下していることが観察された。以上の結果からATF5はなんらかの機構を介してp53に対し抑制的に働く遺伝子であることが判明した。
hsc70の転写調節

hsc70はhsp70遺伝子ファミリーのプロトタイプと考えられており、ストレス刺激以外に複雑な転写調節を受けている。ヒト白血病細胞U937では分化や血清飢餓によるG0停止により転写が30%に抑制される。hsc70の5′上流約400bpにある18bpの断片(18B)がこの抑制に関与していることをこれまで明らかにした。今年度は18Bの合成プローブを用いたゲルシフトアッセイにより転写因子の解析を行った。増殖中の細胞(Pr細胞)とG0細胞の両方に18Bと特異的に結合する因子が存在し、さらにG0細胞では移動度の小さい複数のバンドが余分に検出された。Pr細胞の核抽出液を調製し、DEAEセファセル、ヘパリンアガロースのカラムクロマトにより18B結合タンパクを部分精製した。両方とも0.5M KCIの濃度で溶出された。18Bの3量体をダイナビーズに結合させ、これを用いて結合タンパクを精製した。1M KCIで第1回目に溶出された分画には粗抽出液に含まれるバンドと移動度のより大きいバンドが検出され、2回目の溶出液には移動度が大きいほうのみのバンドが検出された。第一の溶出分画には103kD、71kD、62kD、55kDの4つのタンパクが、後者からは55kDを除く3つのタンパクが検出された。最も単純には4種のタンパク分子のうち55kDタンパクは高塩濃度で複合体からはずれやすく、18BDNAに直接ではなく、他のタンパクを介して間接的に結合していると解釈される。今後はG0細胞の調節因子の解析を行いPr細胞との比較を行う。一方HSC70とHSP70を区別できるモノクロン抗体を用いた測定によると、HSC70タンパクの合成速度はmRNA量に比例したが、HSC70タンパクの細胞あたりの含量は分化により約3倍に増加した。この結果Pr細胞ではHSC70の分解も速やかであることが示唆された。
末梢神経再生におけるサイトカインの発現と役割…特にHGF・BMP・FGFについて

本研究の目的は末梢神経の修復過程において一時的に発現するサイトカインを検索することにより、将来的により効率的な神経再生を人為的に制御する可能性を探るための第一段階として計画されたものであった。ターゲットとしたサイトカインはHGF,BMP,b-FGFであったが、切断されたラット坐骨神経において、その修復過程にのみ特異的に発現するのはHGFのみであった。これは免疫組織化学的(ABC法ペルオキシダーゼ染色)に蛋白レベルでも、in situ hybridization法によりm-RNAレベルでも確認され、それは損傷初期に同部に動員されてくる細胞により、産生されることがわかった。その細胞のcharacterizationのため、抗S-100抗体、抗neurofubril抗体を用いた結果、Schwann細胞ではない感触を得た。現在ほかの抗体により、そのcharacterを検索中である(この結果は現在投稿中である。acceptされれば、報告したい)。またBMPは神経損傷という刺激により初めて発現するものではなかったが、損傷前後において、その発現が変化することがわかり、現在それを追及中で、次年度の科学研究費補助金を申請中である。b-FGFについては手技上の問題か、抗体の問題か、発現の可能性は残されているが、有意な所見は得られていない。今後所見の得られているHGF,BMPに関しさらに追求を求め、現在全くといってよいほど解明されていない、末梢神経の修復帰転における制御系を明らかにしていきたいと考えている。
多重連結磁石による白色ビーム集光法の開拓

低エネルギー中性子は、物質透過能力、水素等の軽元素識別能力、同位体識別能力、磁気解析能力等の他に無い優れた特徴を持つ物質科学、生命科学における不可欠な構造解析プローブである。この中性子の利用性能をさらに高めるために、六極磁石を多重連結した白色ビームの磁気集光法を開拓し、J-PARCのパルス中性子小中角散乱装置に具体的に応用する環境を整えた。しかし、利用できる中性子ビームの輝度は、大強度中性子施設といえども放射光施設等に比べて絶対的に不足しており、このことが中性子の適用範囲に制限を与えている。中性子の幅広い分野での利用を可能とするためには、中性子ビームを高精度かつ高効率に制御する中性子光学技術が不可欠な要素となる。我々は六極磁場が中性子の高精度かつ高効率な制御に極めて有効であることを最近の研究から見出した。そこで、本研究課題では、複数の六極磁石を直列配置した多重連結磁石を構成し、これにより広い波長帯域の白色中性子ビームを高精度かつ高効率に集光する手法を世界に先駆けて開拓することを目的とする。そこで、平成20年度は、六極磁石間に挟む磁場接続コイルと中性子スピン反転器(70kHz程度の共鳴周波数を与えるRFコイルと2.5mT程度の定常磁場を発生するDCコイルから構成されるRFグラジエントスピン反転器)を開発し、日本原子力研究開発機構の研究用原子炉JRR-3のNOPビームラインにおいてディスクチョッパーを用いてパルス化した中性子ビームを用いた特性評価を行った。6A以上の長波長帯城での99%以上の中性子スピン反転効率の確認を行うことができた。また、これらの機器を用いて3重連結システムを構成し、パルス中性子との同期駆動を行いながら7.49.8Aの約2.5Aの波長幅の中性子の集光特性の評価を行うことができた。平成21年度は、前年度までに性能評価した六極磁石間に挟む磁場接続コイルと中性子スピン反転器のJ-PARCの大強度パルス中性子源への応用を目指して、中性子小中角散乱装置に搭載するための設計と性能評価を行った。装置のq分解能の向上に波長が約8Aの中性子の集光が有効であることを見積もり、二重連結磁石により7.88.2Aの中性子を前方約5.6mに置かれる小角検出器に集光できることを明らかにした。この結果、中性子小角散乱装置のq分解能の向上を従来の装置に比べて高効率に行える可能性が高まった。低エネルギ直中性子は、物質透過能力、水素等の軽元素識別能力、同位体識別能力、磁気解析能力等の他に無い優れた特徴を持つ物質科学、生命科学における不可欠な構造解析プローブである。平成22年度は、前年度までに六極磁石間に挟む磁場接続コイルと中性子スピン反転器をJ-PARCの大強度パルス中性子源の中性子小中角散乱装置に搭載するための性能評価を行ったが、J-PARCの大強度パルス中性子源(25Hz)から発生する中性子パルスの第1フレームの最長波長である約8Aの中性子を約5,6mに置かれる超小角散乱高分解能検出器(位置分解能=0.5mm)に集光することで、中性子小中角散乱装置のq分解能をパルス中性子源におけるピンホール型の装置としてはこれまでにない約0.0005(1/A)まで向上できることを確認し、中性子小中角散乱装置の光学系の設計、建設に反映させることができた。
実証的会計研究において用いられるデータおよび分析モデルに関する基礎的研究

本研究は,日本における実証的会計研究で用いられるデータの特性を明らかにすることを目的とするものであり,財務データベースの収録の方法などの実証的会計研究における前提となる事項について検討した.その結果をもとに,経営者の利益調整の手法を分析し,経営者は様々な利益調整の手法を組み合わせ適用しているものの,それは首尾一貫するものではないことが明らかとなった.本研究は,日本における実証的会計研究で用いられるデータの特性を明らかにすることを目的とするものであり,財務データベースの収録の方法などの実証的会計研究における前提となる事項について検討した.その結果をもとに,経営者の利益調整の手法を分析し,経営者は様々な利益調整の手法を組み合わせ適用しているものの,それは首尾一貫するものではないことが明らかとなった.本研究は,日本における実証的会計研究で用いられるデータの特性を明らかにすることを通じて,会計研究のさらなる展開と国際的な発信能力を高めることを目的としている.本研究は,「実証的会計研究のための実証研究」として位置付けられ,わが国の実証的会計研究の頑健性・信頼性の改善を図ることを意図している.平成21年度は,研究期間(2年)の1年目にあたり,関連研究のサーベイおよび資料収集を中心に進めた.まず,実証研究において用いられる財務データとして,日本では,日経メディアマーケティング社のNEEDS-CD ROM企業財務データが広く用いられている.そこで具体的にこのデータと企業が公表する財務諸表等の数値の関連性について,Compustat(グローバル版)のデータと比較して検討した.その結果,NEEDS-CD ROM企業財務データが独自の修正を施していることが明らかとなった.その上で,こうした企業財務データを実証分析において用いる際に,いかなる問題が生じるのかについて,利益調整の定量化指標の算定を題材として検討している.さらに,本研究では,業種分類が実証分析に及ぼす影響について考察している.日本の実証研究で一般的に適用可能な業種分類(日経業種分類、東証業種分類、GICSコードによる分類)の信頼性とその選択が実証研究に及ぼす影響を議論の俎上にあげている.これまでの分析で,日本企業においては,日経ないし東証業種分類を適用する方がより信頼性が高いことが示唆されているが,それらを組み合わせてより信頼性の高い分類基準が構築できないかについて検討している(分析は継続中である).以上の分析結果について平成22年度に成果をまとめていく予定である.本研究は日本における実証的会計研究で用いられるデータの特性を明らかにすることを通じて実証結果の信頼性を高め,日本企業を対象とした実証的会計研究のさらなる展開と国際的な発信能力を高めることを目的するものである.本年度においては,実証的会計研究で中心的なテーマとなっている利益調整(earnings management)の調査を進めた.海外の研究の議論をふまえ,より広範な企業活動を通じた実体的調整とともに会計的調整を対象として,利益調整の手法に関する比較分析を実施した.まず,販売活動,調達(生産)活動,資産(固定資産・有価証券等)の売却,裁量的費用,減価償却・引当金の計上に関する利益調整を推定するモデルを提示し,その上で,1990年から2009年までの日本の上場企業を対象として,いかなる利益調整がどの程度実施されているのか,そして,時点間で変化しているのかについて検証した.分析の結果,企業は多様な手法を組み合わせて利益調整を実施しており,それは,実体的調整,会計的調整に及んでいること,各手法について,平均的には,利益の削減,増加について首尾一貫したパターンはなく,時点間によって異なることから,経済状況,会計制度等の影響を受けている可能性があることが見出された.一方,各項目の異常部分を推定するモデルの精緻化を図ること,利益調整に関する個別尺度を積み重ねて集約的指標を作成する方法の構築,各手法の関係パターンの考察(あるいは発見)が課題であることも明らかとなった.
物質間の自発的量子もつれ生成へ向けた幾何学的量子光学の創成

本研究の目的は、特に縮退した二準位に着目し、これを論理量子として幾何学的量子操作を行う幾何学的量子光学と呼ぶ学問領域を開拓することである。物質量子の例として固体中の電子スピンと核スピンを用い、光波からラジオ波に渡る超広帯域電磁場のコヒーレントな励起で核スピン間の自発的な量子もつれの生成に挑戦する。自発的もつれ光子対生成に縮退系を用いるのは常識であるが、物質間のもつれ生成に縮退系を用いるという概念はなく、新概念の創成につながる。極めて遠方の単一スピンと量子もつれを形成する縮退量子の特性を生かし、超高感度量子センサーの可能性も探る。また本研究のねらいは、超広帯域のコヒーレントな電磁波を用いた物質の様々な自由度のコヒーレント励起により、通常は不可能な縮退した論理量子を幾何学的に制御することである。光子と物質の様々な量子の幾何学的な量子状態を、物質に内在する量子もつれの力とデジタルコヒーレント制御技術の協力で一括して自由自在に制御することを目標とする。提案時当初の研究計画・方法に従い、平成28年度は計画通りに縮退した幾何学的量子構造の構築と直交偏光アップコンバージョン法の構築を行い、平成29年度も計画通りに光波およびマイクロ波による電子スピン縮退論理キュービットの幾何学的量子操作を行った。最終年度となる平成30年度は、光子を媒介とした複数核スピン間の自発的量子もつれ生成を行う予定であったが、本実験で必須条件となるダイヤモンドNV中心の歪み量の低減に予想以上に時間を要し、実験計画に大幅の遅延が発生した。今後、歪み量増大の原因を速やかに究明し、延長期間内に最終目標である光子を媒介とした複数核スピン間の自発的量子もつれ生成を行う予定である。提案書に示した当初の年度毎の達成目標は以下のように設定した。1.15桁に渡る超広帯域のコヒーレントな電磁波の波形・位相・周波数・偏光を自在に制御する技術の開発を行い、2.さらにこの技術を用いた電子スピンあるいは核スピンのアダプティブなデジタルコヒーレント量子操作を行う。3.最終的には、超広帯域コヒーレント光を媒介とした物質スピン間の自発的な量子もつれの形成に挑戦する。上記1および2について完了している。特に、本研究課題を支える主要技術である幾何学的量子操作(ホロノミック量子操作)について、マイクロ波および光波を用いる両手法についてそれぞれ任意偏光による万能なホロノミック量子操作の手法を独自に開発、実験により実証し、Nature Communications、Nature Photonics、Optics Lettersに掲載した。さらに、電子スピンと核スピンのマイクロ波偏光によるホロノミック量子もつれ操作を行い、ホロノミック量子の万能性(universality)を示すとともに、ノイズ耐性のある万能量子コンピュータの開発に貢献した意義は大きい。本研究では縮退した二準位に着目し、これを論理量子として幾何学的量子操作を行う幾何学的量子光学と呼ぶ学問領域を開拓することを目的とした。物質系としてダイヤモンド中のドーパンドである単一窒素原子の色中心(NV中心)を用いた。磁場を完全に排除することで縮退したスピン部分系を論理的量子として用い、超広帯域のコヒーレントな電磁波で幾何学的量子制御するための準備として、本年度は下記の研究項目の実施を行った。1縮退した幾何学的量子構造の構築に成功幾何学的量子操作を行うには、磁場を完全に排除して物質系に縮退した幾何学的構造を形成することが必要となる。ダイヤモンド中のNV中心に捕獲された電子の軌道、スピンならびにNVを構成する窒素の核子スピンにおいて、完全に縮退した幾何学的量子を構築することに成功した。2直交偏光アップコンバージョン法の構築に成功幾何学的量子操作を行うには、波形・位相・周波数・偏光が制御されたコヒーレントな光波、マイクロ波、ラジオ波が必要である。デジタル波形によるマイクロ波基準周波数(LO)のIQ変調でアップコンバージョンされた任意波形のマイクロ波を生成し、さらにマイクロ波による光波基準周波数(LO)のIQ変調でアップコンバージョンされたで任意波形の光波を生成することに成功した。これにより、電子軌道、電子スピン、核スピンという15桁に渡る周波数域に渡る物質量子のコヒーレント多重共鳴を可能とした。さらに、IQ変調部を偏光サニャック干渉系に挿入することで偏光に応じたダブルパスとし、偏光の制御も可能とした。当初本年度に計画した1縮退した幾何学的量子構造の構築、2直交偏光アップコンバージョン法の構築に成功しただけでなく、次年度に計画した3幾何学的量子操作の予備実験にも成功した。幾何学的量子操作の予備実験に成功上述のアップコンバージョン法により生成した、波形・位相・周波数・偏光が制御されたコヒーレントな光波、マイクロ波、ラジオ波を用い、縮退した幾何学的量子構造にある電子スピン、核スピンの幾何学的量子操作の予備実験に成功した。本研究では特に縮退した二準位に着目し、これを論理量子として幾何学的量子操作を行う幾何学的量子光学と呼ぶ学問領域を開拓することを目的とした。

本年度は、光波およびマイクロ波による電子スピン縮退論理キュービットの幾何学的量子操作を行った。電子スピン縮退論理キュービットを光学励起状態の|A2>準位を補助準位として光波により幾何学操作を行った。まずは、|A2>準位に共鳴する光波を約100ns照射することで、その偏光に直交した量子状態に初期化した。次に、任意の偏光をもつ自然放出寿命(約10ns)以下の光波の2πパルスを照射することで幾何学的量子操作を行った。この際、光波の偏光で回転軸を設定し、前半と後半のπパルスの位相差で回転角を決める任意軸かつ任意角の単一量子回転を可能とした。さらに、光波の任意の偏光で射影読み出しを行うことも可能である。また、同様の操作をマイクロ波でも偏光自由度を利用して可能とした。この場合には、スピン基底状態の|0>準位を補助準位として利用した。|0>準位への初期化は532nmのグリーンレーザで可能とした。任意の偏光をもつマイクロ波のπパルスを照射することで、電子スピンの縮退論理キュービットを任意の量子状態に初期化した。次に、任意の偏光をもつマイクロ波の2πパルスを照射することで幾何学的量子操作を行った。この際、マイクロ波の偏光で回転軸を設定し、前半と後半のπパルスの位相差で回転角を決める任意軸かつ任意角の単一量子回転を可能とした。マイクロ波の任意の偏光で射影読み出しを行うことも光波と同様に可能とした。さらに、電子スピンだけでなく、核スピンもラジオ波共鳴によって幾何学操作を行った。この場合にも、ラジオ波の偏光自由度を用いた。本年度目標とした光波およびマイクロ波による電子スピン縮退論理キュービットの幾何学的量子操作に留まらず、電子スピンと核スピンのマイクロ波偏光によるホロノミック量子もつれ操作を行い、ホロノミック量子の万能性(universality)を示すことに成功した。本研究の目的は、特に縮退した二準位に着目し、これを論理量子として幾何学的量子操作を行う幾何学的量子光学と呼ぶ学問領域を開拓することである。物質量子の例として固体中の電子スピンと核スピンを用い、光波からラジオ波に渡る超広帯域電磁場のコヒーレントな励起で核スピン間の自発的な量子もつれの生成に挑戦する。自発的もつれ光子対生成に縮退系を用いるのは常識であるが、物質間のもつれ生成に縮退系を用いるという概念はなく、新概念の創成につながる。極めて遠方の単一スピンと量子もつれを形成する縮退量子の特性を生かし、超高感度量子センサーの可能性も探る。また本研究のねらいは、超広帯域のコヒーレントな電磁波を用いた物質の様々な自由度のコヒーレント励起により、通常は不可能な縮退した論理量子を幾何学的に制御することである。光子と物質の様々な量子の幾何学的な量子状態を、物質に内在する量子もつれの力とデジタルコヒーレント制御技術の協力で一括して自由自在に制御することを目標とする。提案時当初の研究計画・方法に従い、平成28年度は計画通りに縮退した幾何学的量子構造の構築と直交偏光アップコンバージョン法の構築を行い、平成29年度も計画通りに光波およびマイクロ波による電子スピン縮退論理キュービットの幾何学的量子操作を行った。
遷延性意識障害患者における「好みの音刺激」に対する副交感神経活動への影響

本研究は、遷延性意識障害患者等の長期臥床を強いられる患者に対し、リラックスできる時間もたらすために、副交感神経活動の賦活化を導くケアとしての「好みの音刺激」について検討することを目的に実施している。研究の第一段階として、指標となる自律神経活動の中でも副交感神経活動の各研究分野における活用実態を検討した。その上で「好みの音刺激」による副交感神経活動の変化と情動反応を明らかにするための介入研究を実施した。その結果、情動反応としては好みの音刺激が楽しさや心地よさをもたらすと言えたが、副交感神経活動の有意な変化は認められていない。今後さらに詳細なデータ解析を行う予定である。研究1副交感神経活動の文献検討の実施当該分野および関連領域における副交感神経活動の意味を明らかにすることを目的に、当該領域および関連領域(医学、心理学、社会学等)における副交感神経活動について論じている文献(原著論文)の過去10年分(20032013年)について、国内文献の検索を行い検討中である。当研究施設の図書館において、医中誌Web Ver.5を用い、「副交感神経活動」をキーワードとして検索し、原著論文、対象をヒトとして絞込み検索を行った。その結果、220件が抽出された。その中から、副交感神経活動の指標として心拍変動を用いている文献を選択し、178件を対象とした。各文献を研究者2名で分担し、「研究目的」「心拍変動の測定・解析方法」「分析方法」「結果・考察」「その他併用している測定指標」の項目にわけ、分類を行っている。概観として、副交感神経活動をリラックス等の心理的に安寧な状態の指標として使用している文献の他、自律神経活動の変化から疾患の診断治療、薬剤の効果等の検証する文献に分類できる傾向にあるのではないかと考えられた。詳細な分類については、現在も検討中である。また、研究代表者が前年度に取り組んでいた「健常者における音刺激の自律神経活動への影響の検討」の分析結果を平成25年9月に開催された「日本看護技術学会第12回学術集会」にて報告した。好みの音刺激とその他の自律神経を変化させると言われていた音(音楽)刺激では、自律神経の変化に差はみられないという結論であった。しかし、心理的な指標として用いたVASでは、好きな音が他に比べて「楽しい」や「心地よい」気持ちが有意に高くなっていた。研究1の副交感神経活動の文献検討の結果を日本看護技術学会第13回学術集会にて発表した。内容は、以下の通りである。看護学および関連領域における心拍変動解析による副交感神経活動の活用の実態を明らかにすることを目的に文献検討を行った。データべースソフト医学中央雑誌Ver.5において、キーワードに「副交感神経活動」を入力し検索し、副交感神経活動を心拍変動解析から反映している文献152件を分析の対象とした。その結果、様々な研究分野(医学系の研究から工学系など)で使用されており、看護学系の研究は33%を占めていた。その中で、様々な看護介入、特に感覚刺激の評価に多く用いられ、一定の結果が得られていた。このことから、感覚刺激への介入の指標として有用であると考えられた。さらに、健常者を対象とした基礎研究も多く、症状や疾患を有した対象への応用も可能であると考えられ、今後も対象の反応を捉える指標として様々な分野での活用が可能と考えられた。しかし、今回の文献検討は、国内のみの文献であり、測定指標の選択として限界がある。今後、国外での看護系で使用されている副交感神経の指標を検討するために、国外の看護系論文の文献検討を行うことと、自律神経活動の専門家と協力して、適した指標の選択をしていく必要がある。研究2の入院患者における音刺激の副交感神経活動への影響の検討について、研究計画書を作成中である。文献検討の結果から、自律神経活動を測定する機器や併用する測定指標の選択について検討中であること、入院患者の中でもベッド上安静を強いられている方を対象と考えているが、研究デザインの倫理的側面や介入内容について検討を重ねている。次年度早々に倫理委員会に計画書を提出し、実施する予定である。本研究の目的は、患者の情動変化を、自律神経活動を含む生体反応から客観的に捉えることにより、自ら意志表示が困難な患者を含む長期臥床患者のQOL向上につながる新しい看護ケアの方法を開拓することである。平成27年度は、長期臥床患者でも意思疎通が可能な患者を対象に、本人の嗜好する音楽刺激と情動・自律神経活動の変化を検討するための研究を計画した。長期臥床に状態にある入院患者を対象に、ベッド上、仰臥位の状態で心電図R-R間隔と呼吸運動および音楽の連続的記録を行う。記録中、本人が普段、嗜好する音楽等を含む様々な音(種々のジャンルの音楽、人の声、無意味音など)を聴いてもらい、心拍変動の高頻度成分(HF)または低頻度成分(LF)が優位となる音刺激を探索する。記録終了後、各音刺激に対して発現した感情と、HF(副交感神経活動)またはLF(交感神経活動)成分の変化との関係について検討する。さらに、R-R間隔のPoincare plots(Lorenz plots)を行い、音刺激に対して特徴的なパターンが出現するか否かを検討することとした。

平成27年度2月の所属大学研究倫理審査委員会から承認を受け、3月に研究フィールドとなる所属大学附属病院臨床研究委員会の承認を受けている。現在、機器の最終確認とプレテストを実施しており、データ収集の準備を行っているところである。今年度前半までには、データを収集し、分析を行っていく予定である。当該研究は、昨年度までに研究計画が終了する予定であったが、終了していない状況である。その理由として、研究2の研究計画書作成にあたり、対象者の条件と介入方法についての決定に困難を要したことが挙げられる。研究2については、研究計画ができたため、データ収集をしていく予定であるが、研究2を踏まえて研究3を実施していく予定であるため、研究2のデータ収集を踏まえて、研究3にも着手していく予定である。本研究の目的は、患者の情動変化を、自律神経活動を含む生体反応から客観的に捉えることにより、自ら意志表示が困難な患者を含む長期臥床患者のQOL向上につながる新しい看護ケアの方法を開拓することである。平成28年度は、長期臥床患者でも意思疎通が可能な患者を対象に、本人の嗜好する音楽刺激と情動・自律神経活動の変化を検討するための研究を計画しデータ収集を行った。しかしながら、フィールドとした病棟では、意識レベルが清明で長期臥床に状態にある患者がほとんど居ず、データ収集が困難であった。そこで、対象の拡大を行い、意識レベルが清明でなくても家族の同が得られた方も対象とした。一方で、入院患者と同年代で健康な高齢者を対象に同様の設定で研究計画しデータ収集を行っている。データの収集方法は、ベッド上仰臥位の状態で心電図R-R間隔と呼吸運動および音楽の連続的記録を行う。記録中、本人が普段、嗜好する音楽等を含む様々な音(種々のジャンルの音楽、人の声、無意味音など)を聴いてもらい、心拍変動の高頻度成分(HF)または低頻度成分(LF)が優位となる音刺激を探索している。記録終了後、各音刺激に対して発現した感情と、HF(副交感神経活動)またはLF(交感神経活動)成分の変化との関係について検討する。さらに、R-R間隔のPoincare plots(Lorenz plots)を行い、音刺激に対して特徴的なパターンが出現するか否かを検討することとし、現在データ収集と分析を行っている。本研究は、遷延性意識障害患者等の長期臥床を強いられる患者に対し、リラックスできる時間もたらすために、副交感神経活動の賦活化を導くケアとしての「好みの音刺激」について検討することを目的に実施している。研究の第一段階として、指標となる自律神経活動の中でも副交感神経活動の各研究分野における活用実態を検討した。その上で「好みの音刺激」による副交感神経活動の変化と情動反応を明らかにするための介入研究を実施した。その結果、情動反応としては好みの音刺激が楽しさや心地よさをもたらすと言えたが、副交感神経活動の有意な変化は認められていない。今後さらに詳細なデータ解析を行う予定である。当該研究の進捗状況としては、平成26年3月には、研究2について実施している予定であったが、実施できていない状況である。その理由として、研究2の研究計画書作成において、機器の選択、併用する指標、対象者の条件と介入条件についてのデザインに困難を要していることが挙げられる。研究代表者は次年度から、医学系研究科にて研究を進めていくこととなり、自律神経活動に精通した指導者のスーパーバイズを受けることができた。
肺癌治療におけるＥＧＦＲ－ＴＫＩ耐性克服にむけた代謝経路を標的とする治療法の開発

本研究は、非小細胞肺癌治療におけるEGFRチロシンキナーゼ阻害薬(EGFR-TKI)耐性の克服を目指し、代謝経路を標的とした新規治療法の開発を目的としている。特に、第3世代のEGFR-TKIであるオシメルチニブ耐性の克服を主目的とした。EGFR活性化変異を有する肺腺癌細胞株HCC827細胞株を親株として、オシメルチニブ耐性細胞株(EOSR)を作成し本研究に用いた。メタボローム解析の結果、EOSR細胞株では、解糖系の顕著な活性化が観察された。そこで、解糖系阻害剤である2-デオキシ-D-グルコースとオシメルチニブの併用を検討した結果、EOSR細胞株のオシメルチニブ感受性の回復が認められた。本年度末承認された第3世代EGFR-TKIオシメルチニブは、肺腺癌治療の新たな治療選択肢として注目されている。この薬剤は、T790M二次的遺伝子変異に起因する第1、第2世代のEGFR-TKI治療への耐性を示す症例に対し、良好な治療効果(奏効率61%、PFS中央値9.6ヵ月)を示す。また、EGFR変異陽性非小細胞肺癌症例に対する1次治療としての使用も検討されており、第1、第2世代のEGFR-TKIよりも高い有効性(奏効率77%、PFS中央値19か月以上)が示されている。そこで、EGFR-TKI耐性の克服を目指し代謝経路を標的とした新規治療法を開発するうえで、1次治療としてEGFR変異陽性非小細胞肺癌症例に対しオシメルチニブを使用した際に生じることが予想される耐性の機序の検討およびその克服にむけた治療法の開発が今後必要になると判断し、基礎検討を行うためのオシメルチニブ耐性細胞株の作成を行った。EGFR-TKI感受性を示すHCC827細胞株を、オシメルチニブに段階的に濃度を上げながら長期間暴露し耐性細胞株を樹立した(HCC827OSR)。HCC827OSRは、オシメルチニブだけでなく第1世代EGFR-TKIのエルロチニブおよび第2世代のアファチニブに対しても耐性を示した。また、HCC827細胞株をエルロチニブへ長期暴露することにより樹立したエルロチニブ耐性細胞株(HCC827ER)も、HCC827OSR細胞株と同様に3種類のEGFR-TKI対し耐性を示した。両細胞株は、EGFR-TKIへの感受性は同等であるが、細胞の形態、増殖速度に違いが認められ、暴露した薬剤の違いが生物学的特性に影響を与えている可能性が示唆された。肺腺癌治療における第3世代EGFR-TKIオシメルチニブの臨床開発が大きく進展し、本年度中に承認される可能性が高まったことから、オシメルチニブへの耐性の機序について、代謝という観点からの検討と、その結果に基づく代謝経路を標的とした治療法の開発を本研究課題の主軸として進めることにした。そこで、基礎検討に用いるオシメルチニブ耐性細胞株の樹立を始めたが、暴露濃度を短期間に上げることができず、想定以上に時間を要した。これは、オシメルチニブの増殖抑制作用が第1、第2世代のEGFR-TKIよりも強いことが影響したと考えられる。また、樹立したオシメルチニブ耐性細胞株について、CE-MS(キャピラリー電気泳動質量分析法)によるメタボローム解析を行い、代謝依存性の解明を行う予定であった。しかし、経年劣化による故障のため、残念ながらCE-MSを稼働させることができず、本年度中にとりかかることができなかった。次年度、メタボローム解析機器の更新を行い、より網羅的な代謝物質の検出が可能となるので、両細胞株の代謝依存性の検討を行うことで標的とする代謝経路を選定し、そしてその代謝経路の特異的阻害による増殖抑制効果について検討を進める。次年度は、オシメルチニブに耐性を示すHCC827OSRおよびHCC827ER細胞株の生物学的特性を、親株であるHCC827細胞株をコントロールとしたマルチオミクス解析により明らかにする。それにより、治療標的になる可能性がある代謝経路、そしてその代謝経路に関連する遺伝子を同定する。メタボローム解析による両細胞株の代謝依存性の解明(耐性化に伴い亢進した代謝経路の同定)に加えて、その原因となる塩基配列レベル、転写レベルでの変化を、次世代シーケンサーを用いた全エキソンシーケンシングおよびDNAマイクロアレーを用いた全遺伝子発現解析により明らかにする。

次に、耐性化に伴い亢進した代謝経路を標的とする薬剤の評価をMTTアッセイまたはコロニー形成試験により行い、耐性細胞株特異的な増殖抑制効果を示す代謝阻害薬、またはEGFR-TKIと併用処理することにより耐性細胞株のEGFR-TKIへの感受性を回復させる代謝阻害薬を選択する。そして、その観察された増殖抑制効果が、選択した薬剤の標的代謝反応に対する作用による結果であるか評価を行う。オシメルチニブ耐性細胞の樹立に時間を要したため、分子生物学的検討および臨床検体を用いた検討は次年度以降に行う研究計画に変更した。そのため、次年度の研究費の配分を増やす変更を行った。また、CE-MSの故障により、メタボローム解析は次年度に行うことになったので、メタボローム解析用の消耗品費を繰り越した。オミクス解析(メタボローム解析、全エキソンシーケンシング、DNAマイクロアレー解析)および分子生物学的検討に必要な試薬、機器類の購入に使用すると共に、臨床検体を用いた研究に必要な抗体など免疫染色に必要な試薬類の購入を行う。また、成果発表、情報収集を目的とした学会参加のための旅費に使用する。
導電性高分子強誘電性液晶の作製と電子光物性および新機能性発現の研究

従来、剛直な主鎖構造のため液晶性があまり期待されず詳しく調べられなかった導電性高分子の液晶性とメソゲン基を導入した導電性高分子液晶さらにこれらと低分子強誘電性液晶との複合体を作製しその構造と誘電特性等を調べた。poly(2,5-dinonyloxy-p-phenylenevunylene)(NO-PPV)は463Kで軟化を始めるが、偏光顕微鏡観察によりネマチック相であることが明らかになった。この場合、主鎖型のネマチック液晶であると考えられる。キャスティング法で作製したフィルムと液晶相で配向したフィルムの吸収スペクトルから推定した禁止帯幅は前者が2.2eV、後者が2.08eVであることが明らかとなったが、液晶相をとることによって主鎖の乱れが減少し、実効共役長が長くなったものと解釈される。スメクチック液晶相を呈するPPCH803AおよびPMHBDPMと通常の側鎖置換型導電性高分子であるPoly(3-alkylthiophene)(PAT)およびPoly(9,9-dialkylfiuorene)(PDAF)の複合体の誘電率はIMCIEPDDPBの強誘電性液晶相を示す温度域で大きな値となり、自発分極もかなり大きな値が得られた。スメクチック液晶相を示すPPCH803A等と低分子強誘電性液晶1BCIEPOPB等を混合複合化した場合は均一な複合体が得られた。IBCIEPOPB濃度の高い場合に強誘電相が形成され大きな誘電率が観測された。
ナノ狭窄構造薄膜のコヒーレントマイクロ波発振に関する研究

これまでに強磁性ナノコンタクト磁気抵抗(NCMR)素子(強磁性層にFe_<50>Co_<50>、スペーサー層にAlO_xNOL(Nano-Oxide-Layer)を用いたスピンバルブ素子)についてスピントルク励起型マイクロ波発振を測定した結果を報告した。測定試料の膜構成はunderlayer/lrMn15nm/COFe3.3nm/Ru0.9nm/Fe_<50>Co_<50>2.5nm/Al-NOL/Fe_<50>Co_<50>2.5nm/Cappinglayerであり、素子サイズは0.4×04μm^2、MR比は45%、面積抵抗(RA)は0.71.6Ωμm^2である。その結果、磁壁の閉じ込め方によってマイクロ波発振の周波数が異なることが示され、さらにフリー層の磁化方向がリファレンス層の磁化方向と完全に反平行であるときには発振が観測しにくいといった本系独特の特徴ある実験結果が得られた。また、18GHzを超える高いQ値=2300(f/△f:△f=8MHz)のシャープな発振を観察している。この結果は狭窄磁壁とそれに接したフリー層強磁性体を考慮したスピントルク発振シミュレーションの発振周波数とほぼ一致する。さらに、磁化反平行状態を0deg.と定義して印加磁場を膜面内方向で回転させ、ネットワークアナライザを用いたナノ狭窄構造薄膜のスピントルク強磁性共鳴(ST-FMR)による直流電圧スペクトルを測定した。ST-FMRスペクトルと発振スペクトルはともに9GHz付近で共鳴および発振を示した。ST-FMRスペクトルではフリー層磁化の共鳴と考えられる周波数以外に複数の共鳴ピークを示した。一方、発振スペクトルは線幅の狭い単一のスペクトルのみである。この両者の差異を周波数の磁場変化のキッテル式を用いたフィッティング解析から強磁性ナノコンタクトに幾何学的に閉じ込められた磁壁のスピントルク振動に基づいて考察を行った。これまでに強磁性ナノコンタクト磁気抵抗(NCMR)素子についてスピントルクによるマイクロ波発振を測定した結果を報告した。その結果、フリー層の磁化方向がリファレンス層の磁化方向と完全に反平行であるときには発振が観測しにくいといった本系独特の特徴ある実験結果が得られた。そこで本年度はフリー層とリファレンス層の磁化方向を180゚から変化させることを目的に、膜面内において印加磁場の方向を変化させてNCMR素子のマイクロ波発振特性の測定を行った。測定試料の膜構成はunderlayer/PtMn 15nm/CoFe 3.3nm/Ru 0.9nm/Fe_<50>Co_<50> 2.5nm/Al-NOL/Fe_<50>Co_<50> 2.5nm/Cappinglayerであり、素子サイズは0.3×0.3μm^20.6×0.6μm^2である。MR比は49%、面積抵抗(RA)は0.61.4Ωμm^2である。外部磁場は膜面水平に印加し、印加方向を膜面内において回転させ、フリー層の磁化容易軸に対して所定の角度方向に磁場を印加した状態でマイクロ波を測定した。印加磁場方向はフリー層の磁化がリファレンス磁化と反平行になる方向を+方向とし、反平行を0゚と定義した。電流方向は素子のフリー層からリファレンス層へ流れる方向を+方向とした。電流方向+において発振強度は20゚のとき最大を示した。最大で10倍以上の発振強度となり、半値幅は極小を示した。また、発振周波数は印加磁場の角度が大きくなるほど周波数が減少する傾向が見られた。この結果は松下、今村らによる狭窄磁壁に関するスピントルク発振のシミュレーションの結果と定性的に一致しており、狭窄された磁壁に起因した発振であることが示唆された。

ST-FMRスペクトルと発振スペクトルはともに9GHz付近で共鳴および発振を示した。ST-FMRスペクトルではフリー層磁化の共鳴と考えられる周波数以外に複数の共鳴ピークを示した。一方、発振スペクトルは線幅の狭い単一のスペクトルのみである。この両者の差異を周波数の磁場変化のキッテル式を用いたフィッティング解析から強磁性ナノコンタクトに幾何学的に閉じ込められた磁壁のスピントルク振動に基づいて考察を行った。
腎微小循環におけるRhoキナーゼの役割およびその分子機構の検討

昨年度の研究にて腎輸入細動脈の自動調節能である筋原性収縮反応と、尿細管糸球体フィードバック反応をin vivoにおいてCCDカメラを用いて可視化することに成功し、その機序について検討したが、本年度は細胞伸展装置を用いて筋原性収縮反応をin vitro実験系で再現することを試みた。背景,目的血管自動調節能である筋原性収縮反応(MYO)は、伸展刺激に対して収縮を示す反応である.我々はMYOのin vitro実験系を確立し、AMPキナーゼ、Rhoキナーゼの関与につき検討した。さらに、肥満モデルであるZucker fatty ratにおける腎輸入細動脈MYOの減弱を以前に報告したが、これに対するAMPキナーゼが関与について検討を加えた。方法結果考察MYOは伸展刺激後10秒という非常に急速な反応であり、その反応にAMPキナーゼ、Rhoキナーゼが関与していることが示唆された。さらに、AMPキナーゼ活性化薬は糖尿病初期のhyperfiltrationを改善する可能性が考えられた。以上よりAFF圧収縮反応においてRho-kinaseはMYO、TGF共に関与しておりTGFに関しては一部nNOSを介した反応であることがin vivoにて確認された。RPP上昇に対する腎間質adenosine濃度の上昇を除き、これらの反応はWKYに比しSHRにおいて増強しておりSHRにおけるMYO, TGFの増強、Rho kinase, nNOSの発現亢進がin vivoにて示唆された。
六世鶴澤寛治の芸の伝承に関わる分析的研究

本研究は、明治期に始まり今日まで文楽の舞台に継承されている「彦六系」の芸について、その伝承を支えた文楽三味線奏者・故六世鶴澤寛治(重要無形文化財=人間国宝)の残した芸談『鶴澤寛治の芸道生活と意見』(文部省委託・朝日放送製作/昭和43年1月)の全内容を分析し、「彦六系」の芸の伝承の実態を明らかにする事を目的に行ったものである。鶴澤寛治の実子であり文楽三味線の弟子である八世竹澤団六師(重要無形文化財=人間国宝)とともにこれらの記録テープを聞き、内容の正確な理解に努めた(竹澤団六師も鶴澤寛治と同じく「彦六系」の芸の伝承者である)。その結果、以下の点が明らかとなった。1.六世鶴澤寛治の芸を形成するに至った師匠について指導を受けた「彦六系」の三味線奏者(1)初世豊澤松太郎(2)三世豊澤団平(3)初世鶴澤道八指導を受けた「文楽系」の三味線奏者(1)六世豊澤廣助(2)二世鶴澤寛治郎(3)六世鶴澤友次郎指導を受けた大夫(1)三世竹本大隅太夫(「彦六系」)(2)三世竹本越路太夫(「文楽系」)2.六世鶴澤寛治が継承する「彦六系」の芸の伝承曲について「堀川猿廻しの段」「寺子屋の段」「山科閑居の段」「沼津の段」「岡崎の段」「宿屋の段」「澤市内の段」「新口村の段」「熊谷陣屋の段」「阿古屋琴責の段」「志渡寺の段」等3.六世鶴澤寛治が相三味線を勤めた大夫について(1)三世竹本津太夫(2)七世竹本源太夫(3)五世竹本錣太夫(4)七世豊竹駒太夫(5)四世竹本津大夫平成10年度は六世鶴澤寛治の残した音源資料「鶴澤寛治の芸道生活と意見」を収集(ダビング)し、収録された内容の一部を文字に起こした。その原稿について、八世竹澤團六師とともに音源を聴きながら分析・検討を進めている。その際に、竹澤團六師に文楽三味線の専門的立場からの貴重な助言・指導を頂いた事は、音源資料の内容をより正確に理解するための助けとなった。この音源資料は時間的に長大であり、かつ内容も非常に専門的で高度なため、分析・検討の作業にも多大の時間を要する。平成11年度は、引き続き残った部分を文字に起こし、竹澤團六師の協力を得て分析・検討作業を続行する。音源資料の内容を裏付けるために、義太夫節関係文献として大正期に発行された雑誌「新演芸」及び昭和期(戦後)に発行された雑誌『幕間』記載の関連記事を収集し、内容の照合作業を進めている。また、東京国立文化財研究所蔵「安原コレクション」の中にある、鶴澤団治郎・六世竹澤團六・三世鶴澤寛治郎(=六世鶴澤寛治)の演奏を収集(ダビング)し、併せて竹澤團六師とともに内容を検討している。これまで研究を遂行した結果、六世鶴澤寛治の芸歴を正しく把握する必要性を痛感した。そのため、鶴澤寛治の文楽公演における詳細な「床年譜」の作成が是非とも必要である。また「安原コレクション」以外の寛治の演奏記録を収集し検討することも重要。これらは本研究を進める上で必要不可欠な作業であり、平成11年度に残された大きな課題である。1.六世鶴澤寛治の芸を形成するに至った師匠について指導を受けた「彦六系」の三味線奏者(1)初世豊澤松太郎(2)三世豊澤団平(3)初世鶴澤道八指導を受けた「文楽系」の三味線奏者(1)六世豊澤廣助(2)二世鶴澤寛治郎(3)六世鶴澤友次郎指導を受けた大夫(1)三世竹本大隅太夫(「彦六系」)(2)三世竹本越路太夫(「文楽系」)2.六世鶴澤寛治が継承する「彦六系」の芸の伝承曲について「堀川猿廻しの段」「寺子屋の段」「山科閑居の段」「沼津の段」「岡崎の段」「宿屋の段」「澤市内の段」「新口村の段」「熊谷陣屋の段」「阿古屋琴責の段」「志渡寺の段」等3.六

世鶴澤寛治が相三味線を勤めた大夫について(1)三世竹本津太夫(2)七世竹本源太夫(3)五世竹本錣太夫(4)七世豊竹駒太夫(5)四世竹本津大夫平成11年度は六世鶴澤寛治の残した音源資料「鶴澤寛治の芸道生活と意見」に収録された内容を全て文字に起こし、その原稿について、平成10年度に引き続き八世竹澤團六師とともに音源を聴きながら分析・検討を進めた。この作業の中での竹澤團六師の談話は、新たな芸談としてデジタルビデオテープに記録した(この内容を詳細に検討するのは今後の課題である)。竹澤團六師の文楽三味線の専門的立場からの貴重な助言・指導を頂いた事が、音源資料の非常に専門的で高度な内容をより的確に把握するための大きな助けとなった。また、音源資料の内容を裏付けるために、義太夫節関係文献として大正期に発行された雑誌『新演芸』及び昭和期(戦後)に発行された雑誌『幕間』記載の関連記事を収集し、内容の照合作業を行った。さらに六世鶴澤寛治の芸歴を正しく把握するために、鶴澤寛治の文楽公演における「床年譜」を整理した。本研究で得た知見は、8歳で文楽三味線を習いはじめて86歳で亡くなるまでの長きにわたり、芸道を追究した鶴澤寛治が自ら「彦六系」の芸の伝承過程を語った全内容を明らかにした点である。尚、今後の研究の展開としては、「彦六系」の芸の伝承に対する「文楽系」の伝承を正しく理解し(文楽の大夫・三味線奏者から聞書する)、「近現代における義太夫節の劇場様式および個人様式」に関する音楽学と文学・演劇学の研究者による共同研究を行っていく計画である(科研費申請中)。
サイクリンGによるG2/M期制御

本研究では、p53下流で機能するサイクリンG蛋白の機能を明らかにした。細胞をDOX及びCDDPで処理すると、p53、p21、サイクリンG蛋白の発現が誘導され、G2/M期停止を生ずる。一方ヒストン脱アセチル化拮抗剤であるNaBで処理すると、p53及びp21発現誘導を介してG1期停止を生ずる。このため、DOX存在下サイクリンGnに相補的アンチセンスオリゴDNAを投与すると細胞のG2/M期集積は回避され、G1期に集積した。さらにDOXにより誘導されたサブG1領域の細胞集積も回避された。このため、G2/M期集積及びアポトーシス誘導へのサイクリンG2の関与が示唆された。サイクリンGを高発現する再構成細胞を樹立した。サイクリン高発現細胞はコントロール細胞と同様にDOX或いはCDDPに反応し、G2/M期に集積した。しかしDOX或いはCDDP非存在下ではコントロール細胞と同様の細胞周期分布を示した。サイクリンG高発現細胞は低血清刺激や細胞飽和に反応し、顕著なアポトーシスによる細胞死に至った。高発現細胞ではGc1-2やBcl-XL発現に変化を認めなかったが、Baxの高発現を認めた。BAX高発現は翻訳レベルで誘導されていた。これらの成果は今後サイクリンG発現を誘導する分子標的療法の有効性を示唆した。このため、サイクリンGはp53依存性アポトーシスの誘導に関与すると示唆された。
大環状化合物の新機能開発と応用

昭和62年7月20日23日,広島市厚生年金会館において「第12回大環状化合物の化学に関する国際シンポジウム」が,本研究代表者木村栄一を組織委員長として開催された.本研究では,その国際集会に臨んで,我国の機能性大環状化合物(クラウンエーテル,イオノフォア,大環状ポリアミン,クリプタンド等)化学に携わる第一線の薬学,化学者を結集し,有機合成,錯体化学,分析化学,電気化学,触媒化学,医薬学等,全ての分野研究について情報交換し,それぞれの研究テーマを進展させると共に,一同が広島国際会議において最新の研究成果を発表,そして世界の一流研究者と情報交換・討論および啓蒙を行った.各班員の研究成果は, "Current Topics in Macrocyclic Chemistry in Japan"という題名をもつ単行本(英文)の形で発表した.この本は,我国の関連研究者はもとより,世界中の研究者に送付され日本進展ぶりを紹介した.世界の大環状化合物化学研究の飛躍的発展に貢献し,もって新時代の化学素材を世に供することとなった.昭和62年7月20日23日,広島市厚生年金会館において「第12回大環状化合物の化学に関する国際シンポジウム」が,本研究代表者木村栄一を組織委員長として開催された.本研究では,その国際集会に臨んで,我国の機能性大環状化合物(クラウンエーテル,イオノフォア,大環状ポリアミン,クリプタンド等)化学に携わる第一線の薬学,化学者を結集し,有機合成,錯体化学,分析化学,電気化学,触媒化学,医薬学等,全ての分野研究について情報交換し,それぞれの研究テーマを進展させると共に,一同が広島国際会議において最新の研究成果を発表,そして世界の一流研究者と情報交換・討論および啓蒙を行った.各班員の研究成果は, "Current Topics in Macrocyclic Chemistry in Japan"という題名をもつ単行本(英文)の形で発表した.この本は,我国の関連研究者はもとより,世界中の研究者に送付され日本進展ぶりを紹介した.世界の大環状化合物化学研究の飛躍的発展に貢献し,もって新時代の化学素材を世に供することとなった.