hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
Ph陽性急性リンパ性白血病のチロシンキナーゼ阻害剤抵抗機序の解析と克服

本研究においてはチロシンキナーゼ阻害剤(TKI)では治癒困難なフィラデルフィア染色体陽性急性リンパ球性白血病(Ph+ALL)の治療抵抗性機序の克服を目的とした。FRETの原理を応用して確立したBCR-ABLキナーゼ活性を可視化する技術を用いて、Ph+ALL細胞群に存在するTKI抵抗性を示す細胞集団を同定しTKI抵抗性細胞群において発現亢進している遺伝子を同定した。タンパク修飾系の一つであるSUMO化酵素の発現亢進が観察され、BCR-ABLがSUMO化修飾を受ける事を見いだした。更に、SUMO化阻害剤はPh+ALLの細胞死誘導を引き起こす事を確認した。Ph陽性白血病はチロシンキナーゼ阻害剤の有用性が確立した疾患である。慢性骨髄性白血病では長期的な効果が期待出来、一部の症例では薬剤を中止しても再発が認められない。一方、Ph陽性急性リンパ性白血病ではチロシンキナーゼ阻害剤の効果は短期間に限定され、高率に再発する。申請者らは、蛍光タンパクと蛍光共鳴エネルギー移動の原理を応用し、Ph陽性白血病の分子標的治療における高感度な薬剤感受性試験を開発した(Mizutani T, Kondo T et al. Clin. Cancer Res. 2010)。本研究ではFRETの技術を用い、Ph陽性急性リンパ性白血病ではチロシンキナーゼ阻害剤に抵抗性を示す細胞群が存在する事を見いだした。本研究ではFRETで同定されるチロシンキナーゼ阻害剤抵抗性に焦点を当てて、薬剤感受性細胞に混在している薬剤抵抗性細胞の遺伝子プロファイルを明らかにすることで、薬剤耐性に関与する分子を同定し、その機序を解明することで耐性克服への応用を目指す。現在までに、薬剤感受性細胞群と抵抗性細胞群の遺伝子発現の違いをマイクロアレイにてスクリーニングすることで、細胞内代謝、細胞内シグナルなどの分子を同定している。TKI抵抗性細胞群において、発現上昇を認めている細胞内タンパク修飾酵素システムを同定した。興味深いことに、本酵素は、in vitroの実験系でBCR-ABLと会合することが示され、BCR-ABLへの機能修飾を行う可能性が示唆された。本酵素には低分子化合物阻害剤が存在するため、この阻害剤をPh陽性細胞株に作用させた所、効率的に細胞死が誘導されることを確認している。本研究においてはチロシンキナーゼ阻害剤(TKI)を含む化学療法でも治癒困難なフィラデルフィア染色体陽性急性リンパ球性白血病(Ph+ALL)の治療抵抗性機序の解明を目的としている。これまでにFRETの原理を応用して、生細胞でのBCR-ABLのキナーゼ活性を可視化する技術を開発しているが、本手法を用いてPh+ALLにおけるTKI抵抗性細胞群を同定することが出来た。更に、TKI感受性細胞群と抵抗性細胞群における遺伝子発現の差異をマイクロアレイでスクリーニングしたところ、TKI抵抗性細胞群において多岐にわたる遺伝子の発現亢進が観察された。これらの遺伝子群の中でも、細胞内タンパク修飾系に着目し解析を進めている。本タンパク修飾系によってBCR-ABLの翻訳後修飾の有無を確認した所、BCR-ABLもタンパク修飾をうけることが確認された。本修飾系を担う一群の酵素についてBCR-ABLとの会合の有無をスクリーニングしたところ、in vitroでBCR-ABLに会合する酵素が同定されている。現在は、会合する酵素が、BCR-ABLの機能修飾を行うかどうかの解析を進めている。また、本修飾系の阻害剤を用いたところ、Ph+ALL由来細胞株に細胞死誘導を生じることを確認したが、Ph+ALL以外の細胞にも細胞死誘導を生じることが明らかとなり、現在は、TKIとの併用による相乗、相加効果の有無について検討を進めている。本研究においてはチロシンキナーゼ阻害剤(TKI)を含む化学療法でも治癒困難なフィラデルフィア染色体陽性急性リンパ球性白血病(PhALL)の治療抵抗性機序の解析を目的とした。これまでにFRETの原理を応用して確立した、BCR-ABLキナーゼ活性を可視化する技術を用いて、Ph+ALLにおけるTKI抵抗性細胞群を同定、分離することができた。更にTKI抵抗性細胞群と抵抗性細胞群における遺伝子発現の差異をマイクロアレイデスクリーニングし、TKI抵抗性細胞群において発現亢進している遺伝子を同定した。種々の遺伝子が同定されたが、その中で、細胞内タンパク翻訳後修飾に着目してみたところ、small ubiquitin modifier(SUMO)化の経路が発現亢進していることが示された。in vitroの解析において、BCR-ABLはSUMO化を受けていることも明らかとなった。SUMO化が白血病細胞増殖にどのような作用を及ぼすかにつき、SUMO化阻害剤であるギンコール酸、アナカルジン酸でPh+ALL由来細胞株を処理したところ、細胞増殖抑制、細胞死誘導が起きることが明らかとなった。これらのSUMO化阻害剤は、TKIとの併用において、協調的に作用することも判明した。

更に、SUMO化阻害剤はPh+ALLの細胞死誘導を引き起こす事を確認した。当初の計画では、生化学的解析によりタンパク修飾の分子機構を解析し、特異的阻害剤の検討と、モデルマウスによるin vivo実験での抗腫瘍効果を検討する予定であるが、生化学実験のアッセイ系の樹立に時間を要しており、in vivoモデル系での実験が具体化していない。血液内科学生化学実験での問題点は、BCR-ABLが約200KDaと分子量が大きく、タンパク修飾を検出することが、やや難しく、今後はBCR-ABLの欠失変異型を用いることや、細胞内での発現を免疫染色で細胞な局在がタンパク修飾で制御されるかどうかを検討していく予定である。マイクロアレイによるスクリーニングでは多数の遺伝子が変動しており、候補遺伝子の絞り込みに苦慮したが、現在、焦点を当てている分子については、これまでは当初の仮定通りの結果が得られてきている。予算は、ほぼ全額使用しているが、一部、小額が残っている。これは小額なために、必要な試薬を購入するには不十分であったため残金が生じた。今後、本酵素系が治療の標的となりうるかどうかを、単剤での効果、および、チロシンキナーゼ阻害剤と協調作用をするかどうかを検討する。また、細胞死を誘導する分子メカニズムの解明を進めていく。次年度研究費に併せて、研究目的に使用する。交付金の使用に関しては、概ね予定通りの支出であった。主たる経費は試薬、消耗品の購入に充てられたが、16,217円の額が端数として生じた。本金額では、必要試薬には不足する額であり、このために次年度使用額として生じた。次年度交付金と合わせて必要試薬の購入に充てる予定である。
ヴィクトリア朝文学における都市生活者の狂気:その社会的および心理的文脈の解明

本研究は、ヴィクトリア朝の文学テクストを一次資料とし、そこで克明に描写されたイギリスの都市生活者に観察できる狂気の諸相に焦点を定め、人間が一定の社会的状況のもとで示す行動の法則性を突き止め、様々な社会的要因と個人の心理状態との相関関係を解明したものである。第1部の「ディケンズと狂気」では生まれか育ちかという単純な二者択一では記述できないディケンズの作品における狂気の概念を詳しく調査し、狂気の結果としての自殺(神の似姿を殺す大罪と見なされる自殺)および狂気に支配された時代精神や社会風潮が「抑圧の移譲」として黙認するイジメに関して分析した。第2部の「都市生活者の狂気」では、産業革命後に前近代的な帰属意識を喪失し、都市空間における孤立によってアイデンティティの危機に陥った後期ヴィクトリア朝のギッシングと彼が先輩作家として敬意を払って批評書まで書いたディケンズの作品を考察の対象にした。第3部の「狂気と罪悪感の投影物としての幽霊」では、これまで様々な解釈を許容してきたヘンリー・ジェイムズの『ねじの回転』とディケンズの『大いなる遺産』とを比較し、それぞれの主人公たちの心理状態と幽霊体験との相関関係を明らかにした。なお、このような観点に立って人間の心に潜む狂気を描いたヴィクトリア朝の小説家、メアリ・エリザベス・ブラッドンとJ・S・レ・ファニュによる罪悪感の投影物としての幽霊物語をそれぞれ翻訳し、報告書に収録した。1.本研究は、ヴィクトリア朝の文学テクスト(主としてディケンズ、ギャスケル、ギッシングの小説)において克明に描写されたイギリスの都市生活者に観察できる狂気の諸相に焦点を定め、人間が一定の社会的状況のもとで示す行動の法則性を突き止め、様々な社会的要因と個人の心理状態との相関関係を明らかにするものである。このことは、テクストの主観的・直感的な読みだけでは実証できないので、他のヴィクトリア朝作家たちの狂気に関する言説と比較する必要がある。従って、平成17年度はデータと統計によって傍証を固めるために、ウェブ上に設置したハイパー・コンコーダンス<http://victorian.lang.nagoya-u.ac.jp/concordance/>を充実させた。その結果、100名のヴィクトリア朝作家の作品における狂気の言説が検索可能となった。2.本年度はディケンズにおける狂気の問題を中心に分析した。彼が描く狂気については、真実と虚偽が区別をなくしている状況、つまり社会の矛盾と欠陥に起因するという環境決定論に偏っている批評が多いが、特定の個人には狂気の遺伝子があって、そのスイッチがオンになるかオフになるかは環境が左右するというのがディケンズの見解であることが判明した。3.今後の研究は、ディケンズの影響を受けたギッシングの作品において、社会問題に対する激しい葛藤に絶えず苦悩する都市生活者と、イギリス近代の文明社会が彼らに強いた疎外感の分析に展開するはずである。2007年のギッシング生誕150年記念に向けて研究代表者が編集している『ギッシングを通して見る後期ヴィクトリア朝の社会と文化』(英宝社)の第5章では「ギッシングと都市」を論じる予定だが、ギッシングの都市生活者の狂気を考察することで、様々なものから疎外されて自己が分裂し、全体性を見失ってしまってことが明かになるであろう。2.本年度は主としてディケンズの作品に見られる狂気、特に狂気に起因する自殺(犯罪としての自殺、入水自殺と投身自殺、罪意識による自殺、絶望による自殺)の問題をヴィクトリア朝の社会的および心理的文脈において分析し、ディケンズ・フェロウシップ日本支部の『年報』第29号に論文を載せた。

また、2007年のギッシング生誕150年記念に向けて研究代表者として編集し、日本学術振興会科学研究費補助金に申請した『ギッシングを通して見る後期ヴィクトリア朝の社会と文化』(渓水社)の第5章では「ギッシングと都市」を論じたが、そこではギッシングの都市生活者の狂気を考察することで、さまざまなものから疎外されて自己が分裂し、全体性を見失ってしまってことが明らかになった。3.最終年度の研究は、ディケンズが主宰する雑誌に投稿した同世代の女性作家で、主として新興産業都市マンチェスターを舞台とする小説を書いたギャスケルに焦点を定め、そうした産業都市における社会問題に対する激しい葛藤に絶えず苦悩する人々と、イギリス近代の文明社会が彼らに強いた疎外感を分析する予定である。また、『バーナビー・ラッジ』、『デイヴィッド・コパフィールド』、『荒涼館』の作品論によって、ディケンズと狂気のテーマに見られる一般的な原理を帰納的に導き出すことを考えている。研究代表者は社会学と心理学を中心に据えた隣接領域の方法論と研究成果を統合した学際的視座に立ち、イギリス近代の文明社会が人間に強いた疎外感の結果として生じる狂気について、文学テクスト(特にディケンズ、ギャスケル、ギッシングの小説)を通し、主として権力の背後に潜んだ狂気の社会的および心理的文脈の分析を行なった。平成19年度は、『ディケンズ鑑賞大事典』(南雲堂)の共編者として付録CD-ROM制作の責任者になると同時に、『大いなる遺産』の章では階級意識に目覚めた少年の愛に潜む狂気を自己欺瞞の側面から考察した。また、科研費の出版助成を受けて11月に上梓した編著『ギッシングを通して見る後期ヴィクトリア朝の社会と文化』の「都市」の章では、階級に関するギッシングの決定論的な見解を通して、疎外されて狂気に至る都市生活者の心理構造と様々な社会的要因との相関関係を明らかにした。そして、ディケンズ・フェロウシップ日本支部の学会誌『年報』(第30号)に掲載された「ディケンズの作品におけるイジメの問題」では、登場人物に観察できる狂気の諸相に焦点を定め、人間が一定の社会的状況のもとで示すイジメという行動の法則性を突き止めた。最終年度の科研報告書には、"Notions of Madness in the Works of Dickens"と"Madness and Ghosts: The Presentation of Childhood in The Turn of the Screw and Great Expectations"という2本の英語論文を新たに加えた。
レーザ流速計の改善開発に関する研究

本研究で開発された多点式レーザ流速計(LMSV)は従来型のレーザ・ドップラ流速計(LDV)の諸問題を取り除いた高精度で安価かつ取扱いの容易な装置であると言える。LDVは粒子の散乱する光の周波数(ドップラ周波数)が粒子、従って、これを運送する流体の速度に逆比例することを利用しており、その周波数を精度よく測定することを最大課題とするが、問題点として測定体積中に2個以上の粒子が共存すること(不確定性)を許さないこと、および光学系等によるノイズの除去が完全でなければならないことなどが上げられる。測定が不連続で統計的データ処理を必要とすること、変動の大きな流れに対して面倒な処理装置が必要なことなどはこれに起因しており、他の流速計に比して格段に高価である。LMSVはドップラ周波数を測定する代わりに、測定断面をスクリーン上に拡大投影し、スクリーンに設けたイメージセンサーによって断面を通過する粒子を追跡するもので、イメージセンサーは2個の主受光素子とその間に等間隔に配置した補助受光素子とからなり、受光素子のそれぞれは処理装置のゲート回路に繋がれていて最初に主受光素子を通過した粒子だけを追跡し、その経過時間を測定できるように構成されている。これによって、粒子濃度を高め連続測定が可能となったが、主受光素子の間隔は従来型に比して十分大きくとることができるから時間の測定は容易で精度も改善された。装置は光学的拡大部や受光素子だけの光電変換器を必要とする煩わしさはあるが、処理装置は簡単で極めて安価である。5μmの細線を張った回転円板を用いて行った較正の結果は、010m/sの範囲で完ぺきな作動をすることが確認された。現在、水素気泡(d=10μm)を用いた水路中での測定を実施中であるが、予備実験の結果は十分に満足すべきものである。
セレウス菌スフィンゴミエリナーゼの結晶解析にもとづく酵素活性分析

Bacillus cereus由来スフィンゴミエリナーゼ(Bc-SMase)は、溶血活性を有し、中性付近に至適pHを有する酵素(nSMase)であり、活性は、Mg^<2+>以外にCO^<2+>,Mn^<2+>などの2価の金属イオンに依存している。Staphylococcus aureus SMase(β-ベモリジン)やヒト、及び、ラットのnSMaseも、活性は、2価金属イオン依存性であること、アミノ酸配列の相同性の高く、これらは、nSMaseファミリーとして分類されている。従って、Bc-SMaseの二価金属イオンとの共結晶の三次元構造の決定し、金属イオンの役割と活性に重要なアミノ酸残基を明らかにすることは、病原因子としての解明と細胞内シグナル伝達機構に重要なSM代謝系の要となっているほ乳類nSMaseの機能と構造の研究に寄与すると考える。本研究において、Bc-SMaseとMg^<2+>、CO^<2+>、Ca^<2+>との共結晶解析に成功し、1)Bc-SMaseは、唯一の細長いクレフトが存在し、その中央部に2個(Ca^<2+>の場合、1個)、その端に1個の金属イオンが保持されていること、2)2個金属イオンが保持されている部位が、アミノ酸置換の結果を考慮すると、活性中心であること、端に存在する金属イオンの役割は不明であること、3)ほ乳類nSMaseには存在せず、酵素分子から突出している可動性のアームは、基質であるスフィンゴミエリンのホスフォリルコリンとの親和性が強く、基質との結合と膜への結合に重要であることが判明した。セレクス菌由来スフィンゴミエリナーゼ(SMase)は、スフィンゴミエリン(SM)をホスホリルコリンとセラミドに加水分解するCO^<2+>,Mg^<2+>などの2価の金属イオンを要求する酵素で、溶血活性を示す。まず、Co^<2+>、Mg^<2+>、そして、Ca^<2+>存在における酵素活性を比較すると、酵素活性は、Mg^<2+>>Co^<2+>>Ca^<2+>の順であった。カイネティク分析によると、二価金属イオンによる活性の相違は、基質との親和性によるのでなく反応速度に依存する事が判明した。次に、SMaseを大量精製後、酵素とCo^<2+>、Mg^<2+>、そして、Ca^<2+>とを共結晶化し、その三次元構造を約1.9オングストローム分解能で解析した。その結果、唯一のクレフトの中心部、活性中心と推察される領域は、同じファミリーに属するデオキシリボヌクレアーゼI(DNaseI)触媒領域と類似しているが、SMaseにはDNaseIと異なり、アーム状に飛び出した領域が存在した。活性部位と推察されるクレフトの中心部には、Co^<2+>の場合、2個の金屑イオンが保持されたが、Mg^<2+>とCa^<2+>場合のみが1個保持されていた。一方、1個のCo^<2+>及びMg^<2+>は、水分子とアミノ酸残基との結合様式は、全く同じで、金属イオンが占める空間も同じあるが、Ca^<2+>は、大きく異なっていた。これらの金属イオンに結合していると推察さるGlu-53及びAsp-295を置換すると、金属イオンも、酵素活性も消失した。クレフトの端に、いずれの金属イオンの場合も、1個同じ位置に、同じように結合していた。その役割は,不明である。アーム状に飛び出した領域のアミノ酸残基を置換すると、基質、さらに、膜に結合能を失うことが判明した。以上から、酵素の触媒部位と結合部位が明らかとなった。

Bacillus cereus由来スフィンゴミエリナーゼ(Bc-SMase)は,溶血活性を有し,中性付近に至適pHを有する酵素(nSMase)であり,活性は,Mg2+以外にCO2+,Mn2+などの2価の金属イオンに依存している。StaphylgcoccusaureusSMase(β-ヘモリジン)やヒト,及び,ラットのnSMaseも,活性は,2価金属イオン依存性であること,アミノ酸配列の相同性の高く,これらは,nSMaseファミリーとして分類されている。従って,Bc-SMaseの二価金属イオンとの共結晶の三次元構造の決定し,金属イオンの役割と活性に重要なアミノ酸残基を明らかにすることは,病原因子としての解明と細胞内シグナル伝達機構に重要なSM代謝系の要となっているほ乳類nSMaseの機能と構造の研究に寄与すると考える。本研究において,Bc-SMaseとMg2+,CO2+,Ca2+との共結晶解析に成功し,1)Bc-SMaseは,唯一の細長いクレフトが存在し,その中央部に2個(Ca2+の場合,1個),その端に1個の金属イオンが保持されていること,2)2個金属イオンが保持されている部位が,アミノ酸置換の結果を考慮すると,活性中心であること,端に存在する金属イオンの役割はふめいであること,3)ほ乳類nSMaseには存在せず,酵素分子から突出している可動性のアームは,基質であるスフィンゴミエリンのホスフォリルコリンとの親和性が強く,基質との結合と膜への結合に重要であることが判明した。
ゲノム情報を利用した5q31領域からの脳動脈瘤感受性遺伝子同定

【目的】脳動脈瘤の成因は現在不明であるが遺伝的要因が以前より指摘されている。我々は罹患同胞対連鎖解析により染色体5番7番14番に有意なlinkageを認め、その候補領域の染色体5q31に位置するFGF1について、SNPを利用してhaplotypeを構築し、患者対象間で関連解析を行うことで、この遺伝子と疾患との関係を評価した。【方法】脳動脈瘤罹患患者165例(平均年令59.8歳)対照192例(平均年令59.0歳)の血液サンプルより抽出したDNAを用いて、direct sequenceによりSNP searchおよびSNP typingを行った。患者対照間でSNP単独での頻度の検定、およびSNPを利用してArlequinにてhaplotypeを構築し、その頻度の検定を行った。【結果】FGF1遺伝子内に11ケ所SNPを確認できた。内7ケ所はpromotor領域に認め、4ケ所はintronに認めた。SNP単独では患者対照間で頻度に有意差は認められなかったが、同一intron内の2ケ所のSNPにて構築したhaplotypeの特定のhaplotype頻度にχ検定にて有意差が認められた。(患者(家族歴+)対照間P=0.004 ODD's ratio=4.85(CI=2.6216.18)、全患者対照間P=0.003 ODD's ratio=2.93(CI=2.016.12))【結論】FGF1が脳動脈瘤感受性遺伝子である可能性が示唆された。今後症例を増やし、機能解析等を追加して確認していく必要がある。
患者情報の共有化と情報プライバシー:情報化時代における看護の課題

H14年度は,今までの患者情報プライバシー研究成果の一部を米国看護情報学の国際集会(SINI 2002)で発表し,日米の病棟看護における患者のプライバシーへの配慮に関する違いについて議論するとともに,参加者への質問紙調査を行った。59名の参加者から回答が得られ(回収率59%),日米間の以下の違いが明らかになった。患者がどのようにプライバシー上の問題を感じているかに関する看護師の認知と看護師自身が自分の問題としてプライバシー上の問題をどのようにとらえているかの質問した結果,1.ケア上必要となる「陰部の様子」は日米ともに最もプライバシー性が高い情報であったが,2.排泄の様子については米国看護師は日本ほど高いスコアを与えていなかった。3.同様の項目を比較すると,日本の看護師が,自身のプライバシーと患者のプライバシーを同程度に高いものとして回答し,さらに経済状態,勤務先等については,患者の方をより高く回答していたのに対し,米国看護師は,学歴以外の項目は全体に患者のプライバシー性をより低く回答していた。以上の結果は,プライバシーという概念が社会的により浸透している米国と比べて,我が国ではまだ,権利等として十分に発達しておらず,看護師が自身の問題と同じように患者のプライバシーを考えざるを得なかった可能性が示唆された。より高い質のケアを提供するためには,患者情報の共有は不可欠である。H12年度からの研究によって以上の結果の他,1.施設を超えた情報共有に際して,患者の事前了解の必要性という観点から看護師が過剰に慎重である可能性,2.介護保険の要介護度認定においては,排泄に関する情報の収集に抵抗を感じながらも,「世話を受ける」見返りに情報提供をせざるを得ない受給者の存在の可能性などが示され,今後,看護職が患者のプライバシーについてさらに理解し,実践に反映していくことの必要性が明らかになった。病棟看護婦が退院後の継続看護のために作成し,地域保健婦等に送る退院サマリーに着目して,患者からの事前同意の必要性および情報共有の範囲等をテーマとした事前調査から本研究はスタートした。平成12年度は,この成果を踏まえて,在宅ケアを受ける高齢者自身が抱くプライバシー概念の相対性に着目した検討・調査を行った。調査は,現時点ではまだ健康上の大きな問題がなく,介護保険の認定調査と同じ内容の調査を経験したことがある農村地区在住の高齢者を対象として行った。認定調査に含まれる項目の中から,主にADLに関する内容,疾病に関する内容,痴呆に関する内容,排泄上の問題に関する内容に絞って,これらの情報を保健婦,かかりつけの医師,ホームヘルパー,隣人,知人・友人など,自分以外のものに「知られる」ことへの抵抗感を面接調査した。29人の高齢者へのインタビューの結果,以下のことが明らかになった。1.健康に関する情報の内,ADLや疾病に関する情報では約25%が知られることに抵抗感があると答えたのに対して,痴呆や失禁に関する情報については約50%が抵抗感があると答えていた。2.知られる相手による抵抗感の違いについては,介護保険サービスにかかわる職種と隣人,友人・知人という一般人との間で違いが見られたが,介護保険サービスにかかわる職種の中では,保健婦,医師,ホームヘルパーおよび役場の事務担当者の間に特に差は見られなかった。3.知られることを受け入れる理由の一つに,「世話になる」という思いが大きく影響していた。このようにプライバシーに対する概念は,内容,相手,引き替える利益等によって相対的に変化するものであることが示された。平成13年度は,このプライバシーの概念をさらに深め,看護に役立つ知見を得るために調査,検討を進めていく。平成13年度は,以下の調査研究を行った。

1)患者情報の共有のための国際標準化の動向を調査するためにMedinfo2001(London)の国際看護ミニマムデータセット(i-NMDSプロジェクト)に関するワークショップ,および,国際看護実践分類(ICNP)のワークショップに参加した。そこで,NMDS構築においてデータ収集時の個人識別情報の秘匿化が課題の一つとなっていること,ICNPについては,欧米,韓国,台湾など世界20ヶ国以上で,すでに実用化に向けた検討に入っており,情報共有のための共通言語構築への取り組みに関するわが国の遅れ等が明らかになった。また,インタビュー調査の中から,薬局から病院への処方情報の問い合わせなど,施設間での患者情報の共有において,患者へのインフォームド・コンセントが制度化されている国があることなどが明らかになった。2)わが国の病棟看護師が患者のプライバシーをどのように捉え,患者に関する個人情報を看護師間でどのように共有しているかを調査するため,N県内のある病院で看護師179名を対象とする質問紙調査を行った(回収率79%)。その結果,看護に直接関係する患者情報については,看護師自身の個人情報と比較して患者の個人情報のプライバシー性を低く捉える一方で,学歴,勤務先等の社会性の強い情報については,むしろ患者情報のプライバシー性を高く捉えている傾向が明らかになった。さらに,患者情報の看護師間での共有については,看護データベースに一般的に記載される病名,年齢,住所のような情報は,病棟の全看護師によって共有し,治療,看護に必要だと考える情報については,そめ患者にかかわるチームで,そして,悩み事や打ち明け話のようなプライバシー性の高い情報については,共有する相手を限定する傾向があるなど,情報共有の実態と共有範囲の制限の理由の一端が明らかになった。H14年度は,今までの患者情報プライパシー研究成果の一部を米国看護情報学の国際集会(SINI2002)で発表し,日米の病棟看護における患者のプライバシーへの配慮に関する違いについて議論するとともに,参加者への質問紙調査を行った。59名の参加者から回答が得られ(回収率59%),日米間の以下の違いが明らかになった。患者がどのようにプライバシー上の問題を感じているかに関する看護師の認知と看護師自身が自分の問題としてプライバシー上の問題をどのようにとらえているかの質問した結果,1.ケア上必要となる「陰部の様子」は日米ともに最もプライバシー性が高い情報であったが,2.排泄の様子については米国看護師は日本ほど高いスコアを与えていなかった。3.同様の項目を比較すると,日本の看護師が,自身のプライバシーと患者のプライバシーを同程度に高いものとして回答し,さらに経済状態,勤務先等については,患者の方をより高く回答していたのに対し,米国看護師は,学歴以外の項目は全体に患者のプライバシー性をより低く回答していた。以上の結果は,プライバシーという概念が社会的により浸透している米国と比べて,我が国ではまだ,権利等として十分に発達しておらず,看護師が自身の問題と同じように患者のプライバシーを考えざるを得なかった可能性が示唆された。より高い質のケアを提供するためには,患者情報の共有は不可欠である。
外来がん化学療法を受ける患者家族の看護介入モデルの開発-対処過程に焦点をあてて

本研究は外来がん化学療法が患者家族に及す影響と対処過程を明らかにし、それに基づき、外来化学療法を受ける患者家族の対処を支援する看護介入モデルを検討した1.外来化学療法を受ける消化器がん患者(19名)とその家族(19名)を対象とした面接調査による質的データ分析から外来化学療法を受ける患者家族の対処として9カテゴリーと30サブカテゴリーが見出されそれらの関係から対処の構造を見出すことができた。2.外来化学療法を受ける消化器がん患者家族(15組)対象の自記式質問紙(既存項目に1に基づく区重くを加えて作成、1点から5点の5段階尺度)調査の結果、治療を続けるための対処行動(19項目)では患者は9項目、家族は7項目が平均3.0以上、その他の患者家族の対処行動(50項目)では患者は25項目、家族は22項目が平均値3.0以上であり、外来化学療法を受ける患者と家族(特定の個人)および患者家族(集団)が用いる対処行動の多くが明らかとなった。3.上記の知見に基づいて外来がん化学療法を受ける看護介入モデル試案を作成した。本研究の知見に基づいて外来がん化学療法を受ける患者家族の対処を把握する質問紙の開発が可能である。また明らかになった患者家族の対処の構造に基づいたアセスメントによって外来がん化学療法を受ける患者と家族(個人)および患者家族(集団)の対処の把握が容易となり、夫々のニードに応じた看護支援が可能になると考えられる。本研究は外来がん化学療法が患者家族に及ぼす影響と対処過程を明らかにし、それに基づき、外来がん化学療法を受ける患者家族の対処を支援する看護介入モデルを検討することを目的としている。本年度は、神戸大学病院の外来でがん化学療法を継続的に受ける患者とその家族を対象に、1.外来がん化学療法が患者家族に及ぼす影響と対処過程および看護ニードとケアの現実・期待に関する面接調査及び参加観察2.心理的ストレス尺度、ソーシャルサポート尺度、QOL評価表等を用いた質問紙調査を計画していた。しかし、大学病院の平成16年度内の外来化学療法室の開設と運用開始という環境の変化の影響を勘案し、外来における研究計画の実施を延期した。本年度は、事前準備として、外来化学療法室開設後に外来化学療法の開始を予定している婦人科、泌尿器科の病棟に入院している患者で、がん化学療法(プラチナ系製剤による)を3回以上受けた女性患者5名(3865歳)、男性患者5名(3165歳)を対象に、1.がん化学療法が患者の食事に及ぼす影響と対処過程および看護ニードとケアの現実・期待に関する面接調査、を行った。その結果、以下の点が明らかとなった。1.制吐剤の効果は明らかであるが、なお消化器症状の食事への影響は大きい。2.患者は食事を「生きる上で重要」ととらえ食事摂取の努力・工夫をしている。3.食事に関する対処過程には段階があり前の経験や情報が次の対処に活かされている。4.女性が男性より食事への対処に積極的である。5.差し入れなど家族の支援を得られているが支援内容は男女間に違いがある。6.適切な化学療法食に関する要望が強く存在する。以上から、がん化学療法を受ける患者家族の食事に関する対処を支援する看護の必要性が示唆され、外来化学療法を受ける患者家族の食事に関する対処過程を明らかにするための基礎資料を得ることができた。本研究は外来がん化学療法が患者家族に及す影響と対処過程を明らかにし、それに基づき、外来化学療法を受ける患者家族の対処を支援する看護介入モデルを検討することを目的としている。本年度は婦人科病棟に入院し術後がん化学療法(TJ療法:Taxol+CBDCA)を受けた成人女性患者22名(4278歳)を対象に、1.がん化学療法を受ける患者の消化器症状出現時の食事に関する対処および看護ニードとケアの現実・期待に関する面接調査2.がん化学療法を受ける患者の家族によるサポートに関する面接調査を行なった。その結果。以下の点が明らかとなった。

1.食事に関する対処は、1)食べられるものを探す、2)食べることによる症状増悪を避ける、3)無理して食べる4)病院食を加工したり変更して食べる、5)他の食品で補う、などに分類された。2.がん化学療法を受ける患者の家族によるサポートは、1)差し入れてくれる2)家事をしてくれる3)身の回りのことをしてくれる4)一緒に食事をしてくれる5)気分転換に連れだしてくれる6)通院の送り迎えをしてくれる7)聞いてくれ分ってくれる9)傍にいてくれる10)自分を必要としてくれる、に分類された。また、本年度は外来化学療法室でがん化学療法(GEM療法他)を継続的に受ける消化器がん(膵臓がん・胆嚢がん・胆管がん他)の患者10名(男性7、女性3名)とその家族10名(妻7名、夫2名、娘1名)を対象に、3.外来がん化学療法が患者家族に及す影響と対処過程および看護ニードとケアの現実・期待に関する面接調査および参加観察を行なった。3については、現在、データ収集を継続しており、質的データの分析も途中段階であるが、外来化学療法を受ける患者家族の対処について、1)平常な暮らしの維持2)通院治療継続のための協力3)治療効果への期待と不安のコントロール4)患者の体調の変化に合わせた調整5)共に過ごすための調整6)家族間の情報の共有化7)家族間相互の気づかい8)患者と他の家族員へのケアのバランスの調整、などのカテゴリーが見いだされている。本研究は外来がん化学療法が患者家族に及す影響と対処過程を明らかにし、それに基づき、外来化学療法を受ける患者家族の対処を支援する看護介入モデルを検討することを目的としている。本年度は、以下の調査を実施した。1.昨年度から引き続いて、外来化学療法室でがん化学療法(GEM療法他)を継続的に受ける消化器がん(膵臓がん・胆曩がん・胆管がん他)の患者と家族を対象に、患者家族の対処過程および看護ニードとケアの現実・期待に関する面接調査および参加観察を行なった。その結果、患者20名(男性12名、女性8名)とその家族19名(妻11名、夫3名、娘3名、息子の嫁1名、姉1名)の質的データ収集ができた。修正版グラウンデッドセオリー・アプローチによる分析途中であるが、患者家族の対処として「平常な暮らしを維持する」「通院治療継続に協力する」「治療効果を期待する」「不安をコントロールする」「患者の体調の変化にあわせて支援する」「共に過ごす時間をつくる」「家族のスケジュールを調整する」「家族間で情報を共有する」「家族員相互に気づかう」「患者の世話と他の家族の世話を調整する」「家族・友人の支援を受ける」の10カテゴリーと17サブカテゴリーが見出された。2.外来で補助化学療法(5FUアイソボリン)を受ける大腸がん術後患者6名(男性4名、女性2名)を対象に、ストレスと対処に関する面接調査を実施した。
言語と利他性の霊長類的基盤

本研究は、言語と利他性こそが人間の子育てや教育や社会といった本性の理解に不可欠だという視点から、1人間にとって最も近縁なチンパンジー属2種(チンパンジーとボノボ)とその外群としてのオランウータン、さらにその外群としての他の霊長類や哺乳類を研究対象に、2野外研究と実験研究を組み合わせ、3社会的伝播や生涯発達に焦点をあてることで、人間の本性の進化的起源を明らかにすることを目的とした。チンパンジーの野外研究はギニアのボッソウの1群7個体、実験研究は霊長類研究所の1群12個体と京大熊本サンクチュアリの58個体が主な対象だ。ボノボの野外研究はコンゴの1群27個体、実験研究は熊本サンクチュアリに導入した1群6個体が対象だ。チンパンジー特有の超短期記憶の研究から派生して、かれら2個体が協力して数列を完成できることを示した。またチンパンジーには困難といわれる循環的関係の理解について検討し、じゃんけんの規則を学習できることもわかった。アイトラッカーによる視線検出課題で他者の心の理解を実証した。シンボルの形成、感覚間一致、共感性の基礎にある同期行動、遅延時間のある自己認知の研究をおこない、毛髪からのストレス関連ホルモンの抽出に成功した。チンパンジー親子3個体のトリオゲノムの解読に成功し、父親由来の変異の方が多く受け継がれることを実証した。今後の比較認知ゲノム科学への展望が開けたといえる。野生ボノボに関するまとめをオックフォード大学出版局から上梓した。母子だけの社会をつくるオランウータンをボルネオのダナムバレイで研究し3歳に発達の分岐点があることがわかった。テナガザルの利き手の論文がまとまった。ポルトガルの野生ウマの研究が軌道に乗り、ドローンを利用した空撮で野生ウマの集団が重層構造をもつことの手掛かりを得た。飼育下のウマが人に要求する行動も解析でき、「ウマ学」に向けた一歩を踏み出した。実験室での認知研究、野外での観察研究の順に述べる。認知研究では、チンパンジー2個体が左右に並んで1台のタッチパネルを共有し、連携して数列を構成する課題を習得できることを実証した。またじゃんけんのような循環型の論理を理解できることもわかった。いずれもきわめて新しい発見である。視線検出の研究からチンパンジーも他者の心を理解することが明晰に実証されSCIENCE誌で公表しその結果をさらに補強した。時間知覚という新たな側面の研究も進んだ。また認知機能の身体的基盤として、毛髪からストレスホルモンを検出することに成功し、ゲノム解析も進んでチンパンジー親子トリオの全ゲノム解析という世界初の試みが論文公表された。アキラーアイーアユムという親子トリオの塩基配列の違いが明らかになった。そこで次世代を作って祖父母ー父母ー子どもという3世代に向けた群れを展望して、比較認知科学大型ケージを利用した群れ単位の認知研究に着手した。ウマについては、視覚・触覚的信号を用いてヒトの注意をひいて助けを求め、ヒトの知識状態に応じて要求行動を柔軟に変えることがわかった。野生チンパンジーについてはギニアで、無人航空機ドローンを利用した空撮映像を用いた生息域の環境調査をおこない、野外研究でドローンが有効な研究機器となることを実証した。40余年間の観察蓄積のあるボッソウの群れで採食行動に関する論文がまとまった。チンパンジー・ボノボについて協力行動(食物分配や道渡り協力行動)の種間比較を継続し、野生・飼育下のボノボ研究を一書にまとめて出版した。オランウータンの観察としてダナムバレイにおける子どもの行動発達について調べた結果から3歳に発達の節目をみつけ、母子密着で子育て期間が長い親子の実態を解明した。野生ウマの研究から最初の論文が公表され「ウマ学」に向けた一歩になった。認知研究では、まずチンパンジーの1個体場面で、言語的コミュニケーションの基盤となる認知機能の解明に向けて、数字の記憶、言語と知覚のストループ干渉、感覚間一致、視覚的注意、遅延時間のある自己認識、情動の理解、対象操作や道具使用にみられる行為の文法、リズム同調など、未解明の認知課題をおこなう。2個体場面で共感の基礎にある行動の同期現象を探り、さらには比較認知科学実験大型ケージ施設を活用して親子や仲間の役割を探る。野外研究では、石器などの道具使用、食物分配などに着目するとともに、その生涯発達や加齢変化をみる。またボノボでは新しい調査地の開拓を継続する。「チンパンジーとボノボ」、「野外と実験室」の2X2の研究計画での比較研究を基盤に、このパン属2種にオランウータンを「外からの目」として加え、さらに人間の哺乳類的起源を探る研究対象として、ウマも野外(ポルトガルのアルガ山)と国内飼育施設で研究する体制を確立する。またチンパンジーの約30年間の野外研究で得たビデオ資料について、経年変化を追跡するアーカイブ化の作業を進める。そのためにAIを利用した大規模データの自動顔識別手法を開発中である。これによって野外における道具使用の世代間伝播や社会交渉とその発達変化を実証的に解析する。なお研究分担者の役割分担は、松沢と足立と林は霊長類研究所の担当で、平田と山本と森村は熊本サンクチュアリの担当である。足立と平田が主として実験研究を担当し、松沢と林と山本と森村が野外研究を担当する。ウマは松沢・平田・山本で分担する。

特定教員2名を雇用してウマや鳥類までを含めた比較認知科学研究を推進し、研究員・実験支援者を雇用し、研究の一部は外国人共同研究者(オックスフォード大学のドラ・ビロほか)と共同しておこなう。人間を特徴づける認知機能の特性を知るうえで、それらが「どのように進化してきたか」という理解が必要不可欠である。本研究は、言語と利他性こそが人間の子育てや教育や社会といった本性の理解に不可欠だという視点から、1人間にとって最も近縁なチンパンジー属2種(チンパンジーとボノボ)とその外群としてのオランウータン、さらにその外群としてのウマやイヌを研究対象に、2野外研究と実験研究を組み合わせ、3知識や技術や価値とその社会的伝播や生涯発達に焦点をあてることで、人間の本性の進化的起源を明らかにすることを目的とした。チンパンジーの野外研究はギニアのボッソウの1群7個体、実験研究は霊長類研究所の1群13個体と京大熊本サンクチュアリの58個体が主な対象だ。ボノボの野外研究はコンゴの1群27個体、実験研究は熊本サンクチュアリに導入した1群6個体が対象だ。これに、母子だけで暮らす社会を営むオランウータンを外群とし、ボルネオのダナムバレイの野生群、マレー半島のオランウータン島で研究をおこなった。ポルトガルの野生ウマの研究が軌道に乗った。新しい研究手法の開発として、ドローンを利用した空撮で野生チンパンジーや野生ウマの研究を始めた。実験研究のトピックスは、研究代表者らが世界に先駆けて発見したチンパンジー特有の超短期記憶の研究、アイトラッカーによる視線検出、色の命名課題にみるシンボルの形成、チンパンジーには困難といわれる循環的関係の理解、感覚間一致、共感性の基礎にある同期行動などである。個体レベルでの認知機能の研究を基盤に、比較認知科学大型ケージを活用した集団場面での行動の解析を手がけた。野外研究では、チンパンジー、ボノボ、オランウータン、キンシコウ、野生ウマを対象として、毛づくろいや近接関係など社会交渉の解析を通じて社会的知性の研究を推進した。観察研究、実験研究の順に述べる。野生と飼育下のチンパンジーの観察については、認知発達の基盤となる母子関係について、認知課題・行動観察から得られた知見をまとめた。野生チンパンジーについてはギニアで、無人航空機ドローンによる空撮映像を用いた棲息域調査をおこなっている。チンパンジー・ボノボについて野生における協力行動(食物分配・道渡り協力行動)の種間比較観察も継続中である。野生のオランウータンの観察としてダナムバレイにおける子どもの行動発達について調べた結果を論文にまとめた。オランウータンは母子密着で、他の大型類人猿に比べて子育て期間が長いという事実が例証された。実験研究として、飼育下のボノボ、チンパンジー、オランウータンを対象に「誤信念」理解をテストする研究をおこなった。この課題では、他者が現実とは異なる状態を信じているとき、その他者の頭の中にだけ存在する「信念」を理解することが問われる。ストーリー動画を見ている時の他者の行動を予測するときの目の動きを、アイトラッカーを用いて記録した。その結果、類人猿が他者の行動を正しく予測することがわかった。成果はサイエンス誌に掲載され、2016年の10大論文に選ばれた。
Ａｌ／Ｆｅ界面でのＡｌ液相中反応制御を用いた高品位Ａｌ／Ｆｅ接合の可能性

アルミニウムと鉄の接合における界面反応制御を目指し、接合界面での金属間化合物の形成に及ぼす合金元素の影響とそのメカニズムに関する基礎知見を得ることを目的とした。金属間化合物形成に及ぼすCu, Ni, Tiの影響を調べた結果、生成する金属間化合物の種類や構成相に及ぼす合金元素の影響は小さいものの、Tiは反応層厚さを低下させることが示された。Tiによる反応層厚さ減少機構について検討し、アルミニウムと鉄の接合界面での高度な界面反応制御の一助となる知見を得た。AlとFeの接合では、界面にAl-Fe系金属間化合物が生成するため、高い信頼性を有する継手を得ることは難しい。AlとFeの接合を信頼性の高い汎用技術として普及させるための1つの方策として、Al/Fe界面でのAl-Fe系金属間化合物以外の安定反応層の形成が挙げられる。Al-Fe系金属間化合物以外の安定反応層は亜鉛めっき中にAl-Fe系金属間化合物よりも熱的な安定な化合物を作る合金元素を亜鉛めっき中に添加することにより得られる可能性が示唆されていることから、本研究では、Al/Fe界面での反応層形成に及ぼす亜鉛めっき中合金元素の影響を調べ、「ZnによるAl溶融」と「Al液相中での反応制御」によりAl/Fe界面にAl-Fe2元系金属間化合物以外の安定反応層を得るための基礎学理を究明することを目的としている。平成24年度は亜鉛めっきの溶融により形成するAl液相中においてアルミニウムと親和力の高い合金元素としてNiとCuを選定して、これらを含む亜鉛めっき鋼板を作製後、アルミニウム合金と亜鉛めっき鋼板の異材摩擦攪拌点接合を行い、界面組織に及ぼすNiとCuの影響を調べた。平成25年度はTiの影響について系統的に調べ、下記の成果を得た。Tiを含む亜鉛を鋼板上に亜鉛めっきすることが技術的に難しいため、溶融Al/Fe界面での反応層形成に及ぼす亜鉛めっき中Tiの影響を、アルミニウム合金と亜鉛めっき鋼板の接合界面現象を疑似的に再現する実験により系統的に調べた。すなわち、亜鉛と合金元素を含む溶融Al中にFeを浸漬し、反応層形成に及ぼすTiの影響について調べた。Tiを添加することによりAl/Fe界面に形成される金属間化合物の厚さは減少し、Ti量が1%のときに最も薄くなることが示されたが、金属間化合物はFe2Al5およびFeAl3であり、Tiの添加に伴う反応層の組成・構造変化は見られなかった。Ti添加に伴う金属間化合物層厚さの減少は一度形成された金属間化合物層の再溶融に起因することが示唆された。AlとFeの接合を信頼性の高い汎用技術として普及させる1つの方策として、Al/Fe界面でのAl-Fe系金属間化合物以外の安定反応層を形成が挙げられる。本研究では、Alと亜鉛めっき鋼板の接合において生じる「ZnによるAl溶融」と「Al液相中での反応」によりAl/Fe界面にAl-Fe2元系金属間化合物以外の安定反応層を得るための基礎学理を得ることを目的に、Al/Fe界面での反応層形成に及ぼす亜鉛めっき中合金元素の影響を調べている。H24年度は亜鉛めっき(Zn)の溶融により形成するAl液相中においてアルミニウムと親和力の高い合金元素として、Ni, Cu, Ti, Mgを選定し、これらを含む亜鉛めっき鋼板を作製することを試みたが、技術的な課題によりNiとCuを含むもののみを得ることができた。アルミニウム合金と亜鉛めっき鋼板の異材接合を摩擦攪拌点接合により実施し、引張試験と組織観察に供した。合金元素を含まない場合も含め、接合界面にはAl-Fe系金属間化合物であるFeAl2.8が生成したが、亜鉛めっきへのCuとNiの添加によりFe4Al13の生成も認められた。接合界面のショルダ外縁部ではAl-Zn固溶体の存在が見られるが、Cu添加亜鉛めっきの場合には、粗大なAl2Cuの生成が観察された。引張せん断強度はNi添加によりほとんど変化しなかったが、Cu添加により著しく低下することが示された。その理由としては、種々の合金元素を含む亜鉛めっき鋼板の作製が難しいことによる。すなわち、アルミニウムと親和力の高い合金元素を含む亜鉛を鋼板にめっきする技術が確立されていないため、Al/Fe界面での反応層形成に及ぼす亜鉛めっき中合金元素の影響を系統的に調べるのが技術的に困難であり、これまでNiとCuの影響しか調べられていない。得られた継手の力学試験と組織解析は順調に実施して、これらに関するノウハウを取得することができ、種々の合金元素を含む亜鉛めっき鋼板の作製以外の部分に関しては計画どおり達成されている。種々の合金元素を含む亜鉛めっきを鋼板にめっきするのが技術的に難しいため、種々の合金元素を含む亜鉛合金を作製し、鋼板上に蒸着するなどして対応する予定である。

本研究の主たる目的は、溶融Al/Fe界面での反応層形成に及ぼす亜鉛めっき中合金元素の影響を系統的・学術的に究明することであるため、アルミニウム合金と亜鉛めっき鋼板の接合界面における現象を疑似的に再現する実験にも取り組む予定である。すなわち、亜鉛と合金元素を含む溶融Al中にFeを浸漬し、反応層形成に及ぼす合金元素の影響に関する基礎知見を得ようと考えている。鋼板への亜鉛めっきするための外注費、鉄鋼への亜鉛合金の蒸着、接合試験および亜鉛と合金元素を含む溶融AlへのFeの浸漬試験、その後の界面組織解析を行うための消耗品費、得られた成果を溶接学会(9月@岡山)にて発表するための旅費、学生の実験補助謝金として利用予定である。
サクラ類てんぐ巣病菌は本当にサクラ樹体内で植物ホルモンを生産しているのか？

本研究は、サクラ樹体内におけるサクラ類てんぐ巣病菌Taphrina wiesneriの植物ホルモン生産を遺伝子発現レベルの計測により検出し、菌由来の植物ホルモンがてんぐ巣病徴を起こすという仮説を証明することを目的としている。サクラ類てんぐ巣病菌は植物の成長ホルモンであるオーキシンを培養条件下で生産するため、それがサクラの異常な多分枝に代表される病徴の発現に寄与していると推測されてきた。近年のゲノム解析によって、本菌が数種の植物ホルモン生産関連遺伝子を持つことが明らかになった。本研究ではこれら菌の遺伝子の発現に注目し、サクラ組織中の本菌由来の植物ホルモン生産をサクラ由来の植物ホルモン生産とは区別して捉え、菌の病徴発現への寄与を遺伝子レベルで明らかにしようと試みた。サクラ類てんぐ巣病の病徴におけるT. wiesneriの植物ホルモン生産関連遺伝子の発現を明らかにするため、てんぐ巣病徴の明らかな枝、病徴のある個体の外見上健全な枝、及び病徴のない外見上健全な個体の枝について、定期的なサンプリングを行った。サンプリング対象木として、東京都八王子市と京都市に植栽された`染井吉野'、`十月桜'及び`越の彼岸'のサクラ各栽培品種を用いた。当初計画の最終年度に当たる2017年度に冷凍庫の故障のためサンプルの一部が失われ、課題を継続してサンプル採取を続行し、解析中である。本研究の目的は、サクラ類てんぐ巣病菌の寄主サクラ樹体内における植物ホルモン生産を、遺伝子発現レベルの計測により検出し、菌由来の植物ホルモンがてんぐ巣病徴を起こすという仮説を証明することである。最新のゲノム解析によって、本菌が数種の植物ホルモンの生産関連遺伝子を持つことが明らかになった。本研究ではこれら菌の遺伝子の発現に注目し、サクラ組織中の本菌由来の植物ホルモン生産をサクラ由来の植物ホルモン生産とは区別して捉え、菌の病徴発現への寄与を遺伝子レベルで明らかにする。今年度は「サクラ組織におけるサクラ類てんぐ巣病菌の植物ホルモン生産関連遺伝子の発現レベルを計測する」という基本的な実験系を確立するために、核酸データベース上のサクラてんぐ巣病菌の情報から植物ホルモン生産に関連する酵素の遺伝子を検索し、リアルタイムPCRを用いて遺伝子発現を検出するためのプローブを作成した。加えて、菌体を培養し、サクラ類てんぐ巣病罹病木の病徴発現した部位および同じサクラ個体の病徴発現していない部位から組織サンプルを採取した。これらを用いて培養菌体及び植物体上の菌の植物ホルモン生産関連遺伝子の発現を検出する予定である。リアルタイムPCR機の購入が遅れたため、研究計画が大幅に遅れた(安価な購入予定機が昨年度末に生産終了し販売も終了したため、予算内で購入できる代替機の選定と購入までに時間がかかった)。本研究の目的は、サクラ類てんぐ巣病菌の寄主であるサクラ樹体内における植物ホルモン生産を、遺伝子発現レベルの計測により検出し、菌由来の植物ホルモンがてんぐ巣病徴を起こすという仮説を証明することである。近年のゲノム解析によって、本菌が数種の植物ホルモンの生産関連遺伝子を持つことが明らかになった。核酸データベース上のサクラ類てんぐ巣病菌の情報から植物ホルモン生産に関連する酵素の遺伝子を検索し、リアルタイムPCRを用いて遺伝子発現を検出するためのプローブを作成した。これを用いて培養菌体及び植物体上の菌の植物ホルモン生産関連遺伝子の発現を検出できるようになった。`染井吉野'及び`染井吉野'以外のサクラ類てんぐ巣病の病徴における菌の植物ホルモン生産関連遺伝子の発現を明らかにするため、病徴の明らかな枝、病徴のある個体の外見上健全な枝、及び病徴のない外見上健全な個体の枝について、定期的なサンプリングを行った。サンプルの解析により、各枝の菌の植物ホルモン生産関連遺伝子の活性を比較し、季節的な変化を追うことが可能になった。`染井吉野'および`染井吉野'以外のサクラてんぐ巣病の病徴の明らかな枝、病徴のある個体の外見上健全な枝、及び病徴のない外見上健全な個体の枝のサンプリングを行い、菌の植物ホルモン生産関連遺伝子の発現を明らかにするための解析が可能となった。本研究の目的は、サクラ類てんぐ巣病の寄主であるサクラ樹体内における植物ホルモン生産を、遺伝子発現レベルの計測により検出し、菌由来の植物ホルモンがてんぐ巣病徴を起こすという仮説を証明することである。

本研究ではこれら菌の遺伝子の発現に注目し、サクラ組織中の本菌由来の植物ホルモン生産をサクラ由来の植物ホルモン生産とは区別して捉え、菌の病徴発現への寄与を遺伝子レベルで明らかにする。サクラ類てんぐ巣病の病徴における菌の植物ホルモン生産関連遺伝子の発現を明らかにするため、`染井吉野'・`十月桜'及び`越の彼岸'の病徴の明らかな枝、病徴のある個体の外見上健全な枝、及び病徴のない外見上健全な個体の枝について、定期的なサンプリングを行った。冷凍庫の故障のためサンプルの一部が失われたが、課題を継続してサンプル採取と解析を続行した。`染井吉野'及び`染井吉野'以外のサクラのてんぐ巣病の病徴の明らかな枝、病徴のある個体の外見上健全な枝、及び病徴のない外見上健全な個体の枝について、定期的なサンプリングを行った。冷凍庫の故障のため当年度に採取したサンプルのほとんどが解析前に失われたが、課題を継続してサンプル採取と解析を続行している。本研究は、サクラ樹体内におけるサクラ類てんぐ巣病菌Taphrina wiesneriの植物ホルモン生産を遺伝子発現レベルの計測により検出し、菌由来の植物ホルモンがてんぐ巣病徴を起こすという仮説を証明することを目的としている。サクラ類てんぐ巣病菌は植物の成長ホルモンであるオーキシンを培養条件下で生産するため、それがサクラの異常な多分枝に代表される病徴の発現に寄与していると推測されてきた。近年のゲノム解析によって、本菌が数種の植物ホルモン生産関連遺伝子を持つことが明らかになった。本研究ではこれら菌の遺伝子の発現に注目し、サクラ組織中の本菌由来の植物ホルモン生産をサクラ由来の植物ホルモン生産とは区別して捉え、菌の病徴発現への寄与を遺伝子レベルで明らかにしようと試みた。サクラ類てんぐ巣病の病徴におけるT. wiesneriの植物ホルモン生産関連遺伝子の発現を明らかにするため、てんぐ巣病徴の明らかな枝、病徴のある個体の外見上健全な枝、及び病徴のない外見上健全な個体の枝について、定期的なサンプリングを行った。サンプリング対象木として、東京都八王子市と京都市に植栽された`染井吉野'、`十月桜'及び`越の彼岸'のサクラ各栽培品種を用いた。当初計画の最終年度に当たる2017年度に冷凍庫の故障のためサンプルの一部が失われ、課題を継続してサンプル採取を続行し、解析中である。サクラ類てんぐ巣病菌の植物ホルモン生産関連遺伝子が、日本各地および`染井吉野'を含む多種のサクラてんぐ巣病の病徴で一般的に発現しているか明らかにする。菌の植物ホルモン生産関連遺伝子の発現の季節変動を調査し、菌とサクラのフェノロジーへの関与を解明する。てんぐ巣病に罹病したサクラの種・栽培品種について、本菌の植物ホルモン生産関連遺伝子の発現を調査する。その知見を元に、本菌の植物ホルモン生産関連遺伝子の発現レベルとサクラ病徴の発現の相関、および本菌の植物ホルモン生産関連遺伝子の発現と菌とサクラのフェノロジーの対応について検討し、研究結果のとりまとめを行う。その知見を元に、本菌の植物