hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
血管攣縮の分子機構:平滑筋Ca感受性亢進に関与する細胞内情報伝達網の解明

これまでに、Rho-kinase、ZIP like kinase、Myotonic dystrophy protein kinaseがM130の燐酸化に関与することが知られているが、その生理学的意義については不明である。本年度は家兎脳底動脈のCa^<2+>感受性制御に関与する新しいprotein kinaseの探索を試みた。αトキシンで脱膜処理を施した家兎脳底動脈中膜標本を無Ca^<2+>・無ATP・1mMATPγSで5分間処理し、平滑筋蛋白質の不可逆性燐酸化を行った。次いで1mMATP・Ca^<2+>添加によって収縮を引き起こさせたところ、収縮力変化量はATP・Ca^<2+>量変化から期待される変化量よりも大きいことから、ATPγS前処理は収縮装置のCa^<2+>感受性を増強させていることが明らかとなった。このCa^<2+>感受性増強作用に対して、Y27632(Rho-kinase阻害薬)はATPγS処理前に投与すると部分阻害を示したが、ATPγS処理後の投与では全く阻害効果が無かった。このRho-kinase阻害剤無効の、Ca^<2+>非依存性・ミオシン軽鎖燐酸化/Ca^<2+>感受性増強作用を示すprotein kinaseはこれまでに報告のない新しい酵素であることがわかった。現在、このprotein kinaseの単離同定を試みている。炎症、出血、動脈硬化病変部ではprotease-actvated receptors (PARs)の発現亢進が知られている。PARsの1つにトロンビン受容体がある。トロンビンはフィブリノーゲンをフィブリンに転換する事によって血液凝固に関与する。一方、ヒトのクモ膜下出血ではしばしば脳動脈攣縮が起き、命取りとなることがよく知られている。クモ膜下出血の予備実験で次の結果を得た。正常家兎脳底動脈の摘出血管平滑筋標本はトロンビン添加によって、本来、わずかに緊張するのみである。ところが、クモ膜下に自家血を少量注入し、クモ膜下出血と同様の状態に曝すと、脳底動脈のトロンビン誘発性緊張は目毎に増大し、7-10日目に頂点に達する。すなわち、極微量のトロンビン添加でも、正常標本の30倍強度の持続的張力発生、いわゆる、強烈な血管攣縮が観察された。張力発生は局所平滑筋[Ca^<++>]iの著しい上昇を伴った。自家血をヘパリン化して注入した場合には、この現象は見られない。したがって、自家血の凝固によって生じた少量のトロンビンが血管に作用し、作用7-10日目を頂点にトロンビン自身に対する著しい緊張亢進状態を作り出していることになる。平滑筋のトロンビン受容体mRNAは、この緊張反応の増大に見合う量の増加を示した。この、「出血-トロンビン少量産生-平滑筋トロンビン受容体の過剰発現-トロンビン誘発の血管攣縮発現」という機序は、全く新しい攣縮の機序であり、重要な発見である。冠動脈攣縮モデル豚の強烈な攣縮局所血管にも微量の出血が見られることから、冠動脈攣縮においても、トロンビンの関与が強く示唆される。
超音波・胎児心拍・陣痛測定モニタによる在宅妊産婦モニタ-システムの研究

在宅妊婦の胎児モニタ-リングに、小型軽量化した信号採取部とテレメタ-送信部を患者側フロントエンドとし、受信およびデ-タ処理用の端末に家庭用TVゲ-ム機を利用し安全で経済的なシステムを開発した。患者側の端末は3MHz連続ドプラ-信号とし、子宮収縮用センサ-を組合せて、FM55ー710MHzでテレメ-タ送信し、77x57x21mmと小型軽量化し、ドプラ-出力2mW、電気出力を軽減し、リチウム電池1個で連続175時間の使用が可能である。患者がトランスデュ-サ-を装着し電源を入れれば、無拘束で安定した信号が連続的に得られた。デ-タ-受信及び処理部は、家庭用TVゲ-ムのカセット部にFM受信、複調、A/D変換、PROM化されたデ-タ-処理用ソフトがカセット化された一枚の基板に格納され、基板をゲ-ム機に挿入することで、TVゲ-ム機が胎児モニタ-リング装置となり、TV画面に胎児心拍曲線と子宮収縮曲線が表示される。装置の開発に際して、心拍計測の基本ソフトの開発のほかに、患者側端末の高性能化と低電力消費の実現、胎動その他のノイズ対策、トランスデュ-サ-装着の習熟性の軽減などにシステム化のための改良試作をかさねた。今後さらに、既存の医用診断ソフトのゲ-ム機用マシン語への変換が必要であるが、簡易なソフトによって実験室段階で、その臨床応用性が確認された。さらに、ホストとなる病院に簡易なパソコンを備えてデ-タ転送する時間軸圧縮による双方向通信も検討し、メモリ-の増設などによって、在宅で採取した信号を病院に転送し、診断結果を在宅のままで入手可能となった。これらのことから、家庭用TVゲ-ム機を用いた在宅モニタ-によるシステムが開発され、その臨床応用によって在宅患者に対する高度医療の実用化と時間的経済的負担が軽減可能になるなど多大な成果が得られた。1)双方向通信機能をもつ在宅妊婦モニタリングのシステム設計在宅妊婦を無拘束で胎児心拍計測と子宮収縮測定を行なうシステムを設計した。本システムはアナログ計測と前処理を行なうフロントエンドにA/D変換、メモリー、通信機能、プロッタを附加した簡素な端末と、その入出力を公共通信回線を介して結合する中央処理装置からなる。その特徴は現在の主流となっている患者側端末でデータ処理を行なう分散処理に対し、端末では原データを最小限の前処理を行ったのちに中央に転送する集中処理システムで端末で実時間で採録したデータを100150倍の高速伝送したのちに中央のCPUで集中的にバッチ処理する。その結果、処理効率と経済性を確保するとともに、在宅妊婦と多彩な情報交換が可能となった。初年度は全体のシステム設計を行なうとともに、臨床例の胎児ドプラ信号の転送を試みた。2)在宅妊婦のドプラ信号採録用端末の開発在宅妊婦の胎児ドプラ信号採取用の小型のテレメータ端末を開発した。この端末は85×45×20mmの小型の匡体にドプラフロントエンドとUHF送信部を収容したもので、低消費電力と他機器に対する安全性を実現した。3)転送ドプラ信号の狭帯域化中央のCPUで高度処理を前提として、胎児心拍計測の品位を劣化させることなく転送信号の狭帯域化の限界値が50Hz前後であることを明らかにした。4)時間軸圧縮機能をもつA/D、D/A変換用ハード及びソフトウエアの開発高速伝送を可能にするには10200倍の時間軸圧縮機能をもつ外付のハードと関連ソフトウエアを開発した。

5)臨床データ採録による狭帯域伝送と胎児心拍計測に上記システムの試作が完成したので臨床データにつき各種の前処理回路、テレメーター特性について検討したのち、ドプラ信号の狭帯域転送を試みた。現行の自己相関演算による胎児心拍数計を前提として50Hz以下のバンド巾で良好な記録が得られ、システムの基本が確立した。在宅用胎児モニタ-を従来のパソコンに代えて家庭用テレビゲ-ム機に簡素な1/0モジュ-ルを附加したものに変更しコストダウンと操作の単純化に成功した。テレメ-タ方式の在宅用胎児ドプラ信号は細かい手直しに止め、無線周波数70-900MHzのFM/FM方式二重変調で送信した。サンプリングレ-ト8msec、TV画面上で心電、ドプラ信号の表示が可能な無線テレメ-タを採用し、母体と胎児の電気安全性を本質的に維持した。無線の実用到達距離は約10mで、送信機を低電力化しリチウケ電池使用で連続動作時間は約40時間とした。TV画面での表示はサンプリングレ-ト8msec、表示時間幅約2秒、振幅分解能127(7ビット)、TVの音声チャンネルにサブキャリヤ音を出力させTV画面上にドプラ原信号を描出させた。胎児ドプラ信号は、診断に必要な情報がすべて読取り可能で、装置内部では表示波形よりはるかに高い16ビットで実用波形が得られるので安定した心拍測定が可能となった。本装置の実用性はサブシステムのソフトウェア開発に左右され、すでにハ-ドウェア機能の実証試験用ソフトの開発が終了した。附加ソフトとして、画面フリ-ズ,スタ-ト、エンベロ-プ、処理瞬時心拍数の実時間計互、心拍数図の内部蓄積と必要時点での呼出し表示などを開発し、臨床応用の実用化試験が確立された。本装置開発のネックとなったのは、いわゆるファミコンの雑音電波放射障害であり、無線テレメ-タの到達距離は、この特性によって規定されるのが現状である。また、ゲ-ム機特有の内部構造とプロトコ-ルの特殊性があるため、目的のソフトウェアコ-ディングには特殊な知識が要求され、しかも、研究者には無縁なゲ-ムソフトなどとして存在していて、ソフト開発には大きな困難があった。しかし、これらの制約はあるものの、安価な妊婦と胎児の在宅ケアシステムの開発に成功し、大きな利用価値があることが確認された。また、基本的にこのシステムは、ソフトの多くを在宅老人共モニタシステムと共通なので、今後の開発費を最小限にすることできる。さらに、最適な通信モデムを附加し、小型のパソコンなどを利用した簡易な端末へのデ-タ転送が可能となった。これによって、高度処理を中央のシステムに移管し、定期的、または必要時にセンタ-と双方向通信を行なう安価な在宅胎児管理システムが実現し、臨床的にも社会医学的にも大きな利用価値をもつことが明らかとなった。在宅妊婦の胎児モニタ-リングに、小型軽量化した信号採取部とテレメタ-送信部を患者側フロントエンドとし、受信およびデ-タ処理用の端末に家庭用TVゲ-ム機を利用し安全で経済的なシステムを開発した。患者側の端末は3MHz連続ドプラ-信号とし、子宮収縮用センサ-を組合せて、FM55ー710MHzでテレメ-タ送信し、77x57x21mmと小型軽量化し、ドプラ-出力2mW、電気出力を軽減し、リチウム電池1個で連続175時間の使用が可能である。患者がトランスデュ-サ-を装着し電源を入れれば、無拘束で安定した信号が連続的に得られた。
生体内酸化ストレス指標(8-OH-dG)生成量に影響する因子の分子疫学的研究

本研究は、分子疫学のデザインを用いて人間の生体内で生成される8-OH-dGのレベルに影響を及ぼす因子の探索を行なうことを目的としている。本研究では標的指標の抽出に、HPLC-ECD(High Pressure Liquid Chromatography coupled with Electro-Chemical Detection)を用いるため、その精度について十分な吟味・確認が必要とされる。これまで、HPLC-ECDの調整を行ないながら、平行して当該テーマに関連する資料による予備的測定・分析を行い、その妥当性と信頼性について検討を行ってきた。まず、脳虚血状態におけるIndomethacinの抗酸化作用を検討するため、Gerbilの海馬における8-OH-dGレベルを測定したところ、Pre-Ischemic時にIndomethacinを注入した群の測定値は、Ischemia群およびSham群に比べて有意に低く、その抗酸化作用を示唆していた。また、この分析においては、Back-Groundの数値も低く、妥当な測定結果であると考えられた。同じく、分析精度およびDNA抽出の新しい技法開発に関係する研究テーマとして、異なるDoseのγ線(2060Gy)を照射したヒトの肺がん細胞(A549)から、末梢白血球中DNAにおける8-OH-dGMPレベルをそれぞれ測定した。その結果、γ線のDoseと8-OH-dGMP生成量のレベルは極めてLinearな関連性を示しており、なおかつBack-Groundも低くなっていたことから、ここで適用された測定方法は妥当性と信頼性の高い技法であることが示された。以上の結果については、学術論文としてまとめ、2003年度に報告を行なった。また、これらの主要なデータについては日本癌学会などで報告を行なっている。現在は、ヒト抹消血中および尿中の8-OH-dGMPの測定と関連要因の抽出・分析を鋭意進行中である。本年度においては、HPLC-ECDの調整を行ないながらも、平行して当該テーマに関連する資料による予備的測定・分析を行い、その妥当性と信頼性について検討を行ってきた。同じく、分析精度およびDNA抽出の新しい技法に関係するテーマとして、異なるDoseのγ線(2060Gy)を照射したヒトの肺がん細胞(A549)から、末梢白血球中DNAにおける8-OH-dGMPレベルをそれぞれ測定した。その結果、γ線のDoseと8-OH-dGMPレベルは極めてLinearな関連性を示しており、なおかつBack-Groundも低くなっていた。以上の予備的分析の結果を報告した一方で、本研究テーマにおける資料収集なども進めながら、運動および生活習慣の間隔尺度および順序尺度によるデータ収集・分析と、同一対象者の血中および尿中8-OH-dGの資料分析を進めている。
移植研究などに使用するラットの標準化のための共同研究

平成4度の研究活動の成果は以下の2点にまとめられる。(1)加藤,名取および野村はピッツバーグ大学を訪問してGill班員らが育成したラットの凍結保存ならびに微生物学的清浄化についての打合せ会議を行った。前年度から実中研に輸送されたラット系統については逐次胚の凍結を開始している。概ね良好な成績で胚の凍結は進められているが,BN系統における成績が繰り返し行った実験でも悪いことが明らかになった。マウスにおいてもDBA/2系統などでこのような傾向が見られているので興味深い結果である。(2)外国人班員のT.Gill3(ピッツバーグ大学)およびH.W.Kunz(ピッツバーグ大学)が本研究で招聘され,1993年1月16日から22日まで東京と川崎を訪問した。訪日期間中,本研究組織の班会議,遺伝的モニタリング技術に関するワークショップ,ラット国際命名規約委員会の設立準備会議,凍結保存打合せ会議等が開催された。班会議は,特に我が国の研究者への本研究班の趣旨の啓蒙を行うために全国の大学等から参加者を集って行われた。会議では,Gill班員が実験動物におけるラットの位置づけを生物学的な特徴を示しながら解説した。Kunz班員は,ラットの主要組織適合抗原遺伝子群について特に免疫系への関与について解説し,今後免疫抑制剤の開発が重要であることを示した。これを受けて,玉置班員はラットを用いた移植実験系の確立と一部の免疫抑制剤の評価実験を紹介してその系の有用性を示した。野村班員は,国際実験動物学会議(ICLAS)の立場で実験動物学全体の動きを国際的な観点で解説すると共に将来へ向けての分析を行った。その他,糖尿病研究におけるラットのモデル動物の有用性やトランスジェニック高血圧ラットなどについても発表が行われ,活発な議論が行われた。ラットでは同じ系統名で異なる遺伝子型を持つ系統が存在することが明らかになっている。このことは,移植研究などにラット系統を使用する場合に混乱をもたらす可能性を意味している。一部の研究者は,ラットを使った移植実験の再現性を疑問視するほどである。こうした状態を整理するために本研究の班員であるDr.T.Gill III(ピッツバ-グ大学)と野村達次(実験動物中央研究所)が議長を務めて1992年1月12日から18日までの7日間,アメリカカリフォルニア州ア-ヴィンにある米国科学アカデミ-ベックマンセンタ-で国際ワ-クショップを開催した。日本をはじめ,アメリカ,ドイツ,イギリス,イタリア,スウェ-デンから34名の参加者を得て現状の問題点とその解決に向けての今後の課題が討議された。実中研にICLAS命名規約常設委員会が設置されることで承認が得られ,今後指導的役割を持つことで全員の了解が得られた。ラット移植研究に関して中心的役割を持っているアメリカのピッツバ-グ大学のRT1コンジェニック系統の微生物学的清浄化(SPF化)を進めており,今年度は25系統を実中研へ導入して遺伝的モニタリングを実施し,維持,生産に入っている。上記のアメリカでの会議に先立ち,今後のSPF化の進め方について打合せ会議を開催した。一方,名取班員が系統育成を行っている6系統のRT1コンジェニック系統のSPF化も開始した。実中研でRT1検査の素実を計るために,ピッツバ-グ大学から3種類のRT1抗血清を分与してもらった。その結果,ほとんどの系統のRT1検査が可能になった。ラットの胚凍結保存についてはその基礎的研究を開始し,一部の系統について実用化へ向けて凍結保存を実施した。
カルシウムフロライド・カ-バイド系フラックスによる太陽電池用シリコンの還元脱燐

これまでの金属シリコンからの脱リンに関する報告は、電子ビーム溶解、真空処理など、何れもリンの蒸気圧が比較的高い事を利用して真空脱カスを試みたものが多いが、これらの手法はスケールアップによる反応の疎外が予想されるなど、検討すべき課題が多い。一方、フラックスのよる清浄化処理においては比較的精練温度が高いこと、系の酸素分圧が低いことなどから、還元精練による脱リンの可能性がある。申請研究は、酸化物糸フラックスと溶融シリコン合金間のリンの分配に関する平衡論的研究により溶融シリコンからのリンの還元除去反応の進行が確認された、との実験事実を踏まえて、より還元反応の進行を促進する条件として高塩基度フラックス、すなわち、カルシウムフロライド・カ-バイド系フラックスによる脱リン挙動を調査することを目的とした。カルシウム-シリコン合金と酸化物系あるいはフロライト系フラックスを黒鉛坩堝内で溶解し、合金とフラックスの反応後、目的とする系のフラックスとシリコン合金とを平衡させる実験を試みたが、黒鉛坩堝との反応が著しく実験温度でフラックスや合金が固化する現象が認められた。フッ化物を多く含有するフラックスに対しては酸化物系坩堝の耐蝕性が疑問視されることは従来より知られているところであり、黒鉛坩堝が最適と判断していたが、実験手法上の問題点としての坩堝材の選択は解決に至らなかった。また、申請研究では発展的課題として、粗金属シリコンを出発材料とした同系フラックスによる還元脱リンとそれに引き続く酸素添加によるカルシウム除去の試験をるつぼスケールで実施することを目的とした実験を予定していたが、上述の理由により実施が困難と判断された。
SAGE法を用いた統合失調症の成因遺伝子の探求

NMDA受容体拮抗薬であるフェンサイクリジン(PCP)は、ともに統合失調症様の精神症状をひきおこす乱用薬物である。この変化を包括的に把握し、統合失調症様の精神症状に関与する遺伝子を絞り込む目的で、本研究では、serial analysis of gene expression (SAGE)法を用いて、生理食塩水(1ml/kg)およびPCP(10mg/kg)を腹腔内投与した1時間後のラット大脳皮質由来のcDNAライブラリーを解析した。その結果、2つのcDNAライブラリーから解析されたtagの総数は約5万ずつ(合計約10万)で、tagの種類は約18000種類ずつであった。2群間の比較から、216種類のPCP反応性tag(うち、120種類が発現増加、96種類が減少)を同定した。その中で、優位に発現増加が認められたtransthyretin (TTR)遺伝子多型について関連研究を行った。対象は日本人の統合失調症患者70名(男性33名、女性37名、平均年齢64.5±9.2歳)と健常者101名(男性23名、女性78名、平均年齢37.4±15.0歳)で、TTR遺伝子のpromoter領域(5'-UTRより約1.5k上流まで)および4つのすべてのexon領域の計5領域をdirect sequence法で解析した。TTRは、約40%が血中のレチノール結合タンパクと結合してビタミンAの輸送をし、約1%が血中の甲状腺ホルモン脳内に輸送する働きをもつ肝臓や脳の脈絡叢で合成されるタンパク質といわれているが、今回の研究では残念ながら統合失調症とTTR遺伝子の関連は認められなかった。今後は、さらに本研究で病態への関与を示唆された候補遺伝子の中から成因遺伝子を絞り込みたい。統合失調症モデル動物の作成として、ウィスター型雄性ラットに1-10mg/kgのフェンサイクリジンを単回投与し、投与後1時間目に断頭後、大脳皮質を取り出し、そこからmRNAを抽出した。抽出したmRNAより合成した2本鎖cDNAから、種々の分子生物学的手法を用いて10塩基対の短い断片(タグ)を分離し、それらを繋げて長い分子にした後、オートシーケンサーを用いて塩基配列を決定し、結果をSAGE専用ソフトで解析した。Serial analysisof gene expression(SAGE)法を用いて、PCP(10mg/kg)投与ラットの大脳皮質で優位に発現増加が認められたtransthyretin(TTR)遺伝子多型について、日本人の統合失調症患者70名(男性33名、女性37名、平均年齢64.5±9.2歳)と健常者101名(男性23名、女性78名、平均年齢37.4±15.0歳)を対象にした関連研究を行った。TTR遺伝子のpromoter領域(5'-UTRより約1.5k上流まで)および4つのすべてのexon領域の計5領域を解析対象領域とした。また、多型解析方法はdirect sequence法で、各群2サンプル以上でRFLPまたは裏側からのdirect sequence法で解析結果の再確認を行った。TTRは、約40%が血中のレチノール結合タンパクと結合してビタミンAの輸送をし、約1%が血中の甲状腺ホルモン脳内に輸送する働きをもつ肝臓や脳の脈絡叢で合成されるタンパク質といわれている。またTTR遺伝子は18q12.1の染色体領域に存在し、遺伝子領域内のミスセンス変異は家族性アミロイドポリニューロパチー(val30met)や老人性全身アミロイドーシス(val122ile)などの原因となることが知られている。

今回の結果では残念ながら統合失調症とTTR遺伝子の関連は認められなかったものの、6つの新規SNP、2つの新規マイクロサテライト多型、および1つの新規9bp欠失を発見することができた。
自由視点画像の生成のための、シーン構造に依存しない光線内挿法とその理論構築

多視点画像から自由視点画像を生成する際に対象シーンの奥行を推定しない方法を開発した。本手法は、多視点画像にフィルタを施すアプローチをとっている。このフィルタをシーンに依存することなく導出することに成功した。ただし、次の2点を仮定している:(1)奥行が2層である。(2)カメラの配置が円形である。(1)を仮定した場合は、それぞれに生じる対応点ずれを一種のぼけ作用としてとらえて、画像復元手法を適用し、繰り返し法の有限回における解として自由視点画像を生成した。(2)を仮定した場合は、対応点ずれを3次元の点広がり関数としてとらえて、逆フィルタ法を適用した。本手法は、コンピューターにて合成した画像に対して有効に動作することを確かめた。また、最適なカメラ配置やノイズ耐性についても調べた。その結果、カメラは奇数台がよく、ノイズ耐性はカメラ台数が多いほど向上することがわかった。また、ある台数以上で理論的には逆フィルタが安定にかつ一意に決定されることを示した。多視点カメラを円周に配置し,台数を増やすことによって,その円内の自由視点画像をより安定かつ高精度に生成できる手法を開発した,シーン構造が平面であると仮定し,それに基づいて既存の光線内挿を用いて自由視点画像の候補画像を生成するが,この処理を平面の奥行を変えながら行う.これにより生成した複数枚の候補画像を一つの3次元画像と見なし,それに適切な3次元フィルタを施すことによって,自由視点画像を生成する.本年度は,フィルタがシーン構造に依存しないこの3次元フィルタの理論的な導出を3次元周波数領域で行った.このフィルタが安定に機能するための条件として,カメラ台数とその配置が重要であることを明らかにした.さらに,2次元でも同様の効果を得ることのできる手法も開発した.多視点画像から直接所望の画像を生成するためのフィルタの導出も行った.両手法は,シミュレーションおよび実写画像による実験で評価し,おおむね良好な結果を得ることができた.実験では,一台のカメラを回転しながら多視点画像を取得する装置を作成した.また,仮想的に焦点ぼけ効果を付与できる手法へと拡張することに成功した,これまでの手法では,カメラ台数が少ない場合やカメラの配置が疎な場合は,付与した焦点ぼけにゴースト状の劣化が生じるため,シーン構造が必要であったが,本手法では,わずかに残った周波数成分を適切に復元させることによって,構造に依存することなく,劣化を大幅に抑制することができることがわかった.既存の実写の多視点データに適用し,その有効性を示すことができた.多視点画像から自由視点画像を生成する際に対象シーンの奥行を推定しない方法を開発した。
高度界面制御有機・無機複合構造による量子物性の発現と応用

高度に制御された有機無機ヘテロ界面を実現し,電界による電荷注入や界面相互作用における多体効果による新奇量子現象の発現を最終目標として今年度は以下の研究を行なった.また,最終年度としての総括もおこなった.金属-有機物界面の電荷注入過程と電荷極性の相関;同一試料に対して薄膜成長中のFET測定,電子分光による薄膜評価が行なえるシステムを改良し,FETにおけるキャリアの極性と電子状態の変化を詳細に追跡した.その結果,電荷極性は金属のフェルミ準位と有機半導体のHOMO-LUMOギャップの相対位置関係により決まり,有効チャネル伝導度は界面のエネルギー障壁に対して指数関数的に変化することを初めて実験的に実証した.有機薄膜表面形態と電気伝導現象の相関;先年度に開発した,同一試料に対してFET測定とAFMによる薄膜形態測定が可能な装置を用いて,ペンタセン薄膜の形態安定性と伝導度の相関を詳細に追究した.その結果,形態変化を齎す分子移動は界面第1-2層目の境界から生起することが明らかになった.薄膜の安定化を図るためには第2層の結晶系の制御が重要であることは当該分野での大きな指針となる.ベンゼンの重合によるナノグラフェンの合成とエッジ状態,磁気秩序;ベンゼンの重合によるナノグラフェンについて,STM観察によりエッジの構造について詳細に探究した結果,本手法により作製されたナノグラフェンの端は70%以上の確率でジグザグ端であることが判明した.STM像のバイアス依存性から,ジグザグ端にはフェルミ面近傍に状態を持つことが明らかとなり,従前の分光学的な結果と整合した.また,高分解能電子エネルギー損失分光から,ジグザグ端には水素原子が1あるいは2個吸着した状態があることがわかった.これらの結果および磁気光学カー効果の結果について理論的な検討をおこなった.高度に制御された有機無機ヘテロ界面を実現し,電界による電荷注入,界面相互作用における多体効果による新奇量子現象の発現を実現するため,実験グループは成長過程の制御,ゲート絶縁膜の探索に,また理論グループは金属/絶縁体界面電子状態と有機薄膜における強磁性に重点を置いた研究をおこなった.主な成果は以下のとおりである.(1)薄膜成長;原子間力顕微鏡探針を利用してあらかじめ描画したナノ構造上および傾斜基板上に存在するステップへのペンタセン,フラレンの薄膜成長過程を解明し,ナノスケールで位置を制御して有機薄膜を成長する手法を確立した.Cu、Agなどのfcc金属およびKBrなどのアルカリハライド基板上へのオリゴチオフェン分子の成長過程を電子線回折,X線吸収端微細構造(NEXAFS)を駆使して解明した.(2)ゲート絶縁膜;単結晶有機薄膜の成長を目指し,単結晶ゲート絶縁膜の作製条件の探索をおこない,Ag単結晶基板上へLiF薄膜の成長と絶縁特性,Si基板上へのCaF_2薄膜の成長と絶縁特性を解明し,絶縁膜への適用可能性を検証した.また,従来多用されているSiO_2,Al_2O_3に代わる高誘電性絶縁膜として陽極酸化法により作製したTa_2O_5膜を用いて有機薄膜電界効果トランジスタ(FET)を作製し,絶縁膜としての有用性を実証した.(3)有機薄膜の光重合;MoS_2、基板上へのC_<60>薄膜成長時に532nm, CWレーザー照射し,ラマン分光によってC_<60>の重合を確認した.超薄膜FET構造に電界を印加しながら光電子分光を測定すると,重合したC_<60>薄膜のスペクトルに近付き,電界+紫外光照射による高効率の重合が生起することを見い出した.(4)有機薄膜FET特性;予め用意した電極構造を持つ基板上にペンタセン,C_<60>,VOPcの薄膜成長をおこない,真空中でFET特性の評価をおこなった.ガス吸着による特性の変化を受けやすい有機薄膜の電気物性の精確な評価が可能になった.また,薄膜成長中の有機薄膜の電気特性のin-situ, real-timeの特性評価装置を製作した.(5)界面特性;元素選択性分析手法であるNEXAFS方を利用して,絶縁体/金属界面に特有な電子状態(MIGS)を制御された界面において初めて見い出した.このMIGS状態について第一原理計算によって調べた結果,半導体特有の現象と思われていたMIGSの存在が,ギャップの大きな絶縁体と金属の界面でも生ずること,MIGSの波動関数の性格などを明らかにした.MIGSは励起子機構による界面超伝導などの興味深い多体現象につながることも期待され,理論的考察を開始した.(6)有機強磁性理論;新奇な有機物強磁性発現の可能性を5員環高分子(ポリアミノ・トリアゾール)について第一原理計算により探索し,電荷移動や化学ドーピングによる電子密度の制御による遍歴強磁性の発現を実証した.高度に制御された有機無機ヘテロ界面を実現し,電界による電荷注入,界面相互作用における多体効果による新奇量子現象を発現させるため,実験グループは有機薄膜成長制御と有機無機ヘテロ界面における電荷注入過程に,理論グループは金属/絶縁体界面電子状態と有機薄膜における強磁性に重点を置いた研究をおこなった.高度な薄膜成長制御;フラレンとフェロセンのハイブリッド分子のエピタキシャル成長過程を追究し,膜厚による構造転移を見いだした.オリゴ

チオフェン分子のAg,Cu(110)基板上への成長過程を迫究し,特異な擬一次元構造を見いだした.またステップバンチさせたSi基板を酸化することにより,ステップが整列したSiO_2絶縁膜の作製条件を探索し,成長制御したペンタセン薄膜のFET特性を探索した.電界による電荷注入分布の解明;絶縁膜を介してゲート電極から注入された電荷分布は,無機半導体においても理論的推測の域をでていなかったが,われわれは薄膜成長時に電界効果電気伝導特性を測定する装置を開発し,これを有機半導体に適用することにより電界効果トランジスタ(FET)おいて重要な蓄積層,空乏層に関する情報を得た.また,ケルビンファース顕微鏡(KFM)を用いて,FET断面の電位分布の観察をおこない,ゲート電圧による電荷注入の実空間観察に手かかりを得ている.新奇構造を持つ有機薄膜FET特性;電極作製,有機薄膜成長,電気特性測定,が全で超高真空中で行えるシステムを作製し,雰囲気敏感な有機FET特性を解明した.ベンゼン吸着によるFET特性の変化は,フラレンにおいては電子供与効果に加えてドメイン境界の不連続性を解消する効果の存在を見いだした.ヘテロ界面特性;昨年度イオン結晶/金属界面において見い出した特有な電子状態(MIGS)を,飽和炭化水素/金属界面においても実験的に見いだし,理論的には詳細な第一原理計算を開始した.分光学的手法において観測した界面MIGS状態を,走査トンネル顕微鏡による詳細な観察から初めて実空間像として捉えることに成功した.一方,実験グループが成長に成功した極性面(MgO/Ag(111))について第一原理計算をおこなった結果,極性界面の局所状態密度は基板の格子定数と密接に関連し、格子定数の調整によって界面での金属絶縁体転移や磁性が考えられることを提案した有機強磁性理論;昨年度第一原理計算により探索した新奇な有機物強磁性発現の可能性を持つ5員環高分子(ポリアミノ・トリアゾール)について,3次元結晶化させてアニオンにより化学ドーピングする可能性についても考察電荷移動や化学ドーピングによる電子密度の制御による遍歴強磁性の発現を実証した.高度に制御された有機無機ヘテロ界面を実現し,電界による電荷注入や界面相互作用における多体効果による新奇量子現象の発現を最終目標として今年度は以下の研究を行なった.高度な薄膜成長制御;陽極酸化により描画したパタン化シリコン基板上へのペンタセン位置制御薄膜成長法を確立した.ステップバンチさせて周期的テラスを持つシリコン酸化膜基板上に成長させたジアセチレン誘導体の重合膜において基板の構造を反映した異方性成長を見出した.レーザー照射下におけるAlq_3薄膜において光偏光への分子軸優先配向を確認した.電界による電荷注入分布の解明;有機薄膜成長中にFET電極構造を用いたインピーダンス測定から,その膜厚依存性,ゲート電圧依存性,周波数依存性を見出した.分布定数回路モデルを用いた解析により,これらの現象の定量的理解が可能となった.ケルビンフォース顕微鏡(KFM)によるFET断面の電位分布について有限要素法解析した結果,薄膜内グレイン境界への負電荷蓄積の可能性を示した.In situ FET特性評価システムの作製;同一試料に対して薄膜成長中のFET測定,電子分光による薄膜評価が行なえるシステムを作製し,閾値膜厚を正確に評価した.また,成膜有機試料を大気に曝すことなくAFM測定できるシステムを構築し,1層以下のペンタセン薄膜の形態を評価した.
遺伝子診断用核酸分子集合体に関する研究

本研究はガン、AIDSなどの難治性疾患の高感度、高精度診断を目的とし、それに用いる核酸分子集合体の分子設計ならびにその構築、さらにそれらを用いた診断法の確立に関するものである。これらの目的のために本研究では対象遺伝子配列に完全に適合する遺伝子配列を持った短鎖DNAをプロ-ブとして用い、対象遺伝子の有無を判定するDNAプロ-ブ法を採用した。研究は具体的に2方法によって実施した。第1の方法は蛍光剤で修飾した核酸分子集合体(蛍光ラベルDNAプロ-ブ)を分子設計し、蛍光偏光解消法により遺伝子中の対象核酸塩基配列の有無を判定する方法である。本法では対象遺伝子を含む検体溶液にフルオレセインラベルDNAプロ-ブを添加し、30分後に蛍光偏光解消スペクトルを得る操作のみで対象遺伝子の有無が判定ができた。第2の方法は電子スピンで修飾した核酸(スピンラベルDNAプロ-ブ)を分子設計し、ESRのスペクトル変化から判定する方法である。本法では対象遺伝子を含む検体溶液にニトロキシド系スピンラベルDNAプロ-ブを添加し、30分後にESRスペクトルを得る操作のみで判定できた。初年度では対象遺伝子として化学合成した単鎖核酸を用いて方法論の確立を主として行い、次年度では分子量238万のファ-ジDNAを対象とし、その一部塩基配列を欠落させた変異体(遺伝子組換え技術により作製)を比較として実験を行った。その結果、本研究で開発したラベルDNAプロ-ブは高感度(0.1μM)で短時間(1時間以内)に巨大DNAを検出できることが明らかになった。本研究で基礎的方法論を確立した液相DNAプロ-ブ法は新しい概念のDNAプロ-ブ法であり、今後より精密な核酸分子集合体の設計・構築を行うことで従来より困難とされてきた病気診断、特にAIDS、ATLのようなウイルス性疾患の発症前診断に威力を発揮するものと考えられる。遺伝子診断に用いる彼酸分子集合体の構築とその応用を目的とし以下に示す結果を得ている。1.ラベルDNAプロ-ブの合成とその修飾法の開発核酸分子集合体として多機能を有するオリゴヌクレオチド及びその修飾体を選びそれらの化学合成法、精製法を確立した。(1)10ー20量体のオリゴヌクレオチドを自動合成機によって合成した後、高性能逆相クロマトグラフィによる高純度精製法を確立した。(2)蛍光ラベル(フルオレセイン)をオリゴヌクレオチドのリン酸結合部位に導入する方法及びその精製法を確立した。(3)電子スピンをオリゴヌクレオチドのリン酸結合部位に高収率で導入する方法とその精製法を確立した。2.ラベルDNAプロ-ブを用いた遺伝子検出法の基礎概念の確立ラベルDNAプロ-ブを用いて溶液中に存在する対象遺伝子を検出するために必要な、溶液中でのラベル剤の運動性の変化と2重鎖形成との基本的関係を明らかにした。(1)蛍光ラベルDNAプロ-ブが溶液中で対象遺伝子と2重鎖を形成するとその運動性が変化するが、その変化は蛍光偏光解消の変化としてモニタ-できることを明らかにした。(2)電子スピンラベルDNAプロ-ブが溶液中で対象遺伝子と2重鎖を形成するとその運動性が変化し、ESRスペクトルの変化としてモニタ-できることを明らかにした。(3)両ラベルDNAプロ-ブを用いた結果は溶液中でB/F分離なく対象遺伝子を検出できたことを示しており、新しい遺伝子診断法の開発の可能性が強く示唆された。本研究は難治性疾患の遺伝子診断に物する基礎的方法論の確立に関するものである。

初年度において蛍光剤(フルオレセイン)で修飾した核酸分子集合体(蛍光ラベルDNAプロ-ブ)、電子スピン(2、2、6、6ーテトラメチルピペリジンーNーオキシル)で修飾した核酸分子集合体(スピンラベルDNAプロ-ブ)の分子設計ならびに合成、精製法ならびに同定法を確定した。さらに今年度にかけて、それらDNAプロ-ブと相補的な単鎖核酸(530量体)との相互作用を検討した結果、蛍光偏光解消による蛍光異方性の増加ならびにESRスペクトルの線幅に大きな変化がみられた。これは2重鎖形成がそれらDNAプロ-ブによってモニタ-できること、言い換えれば、溶液中で分光法を用いるのみで対象遺伝子の存在が容易にモニタ-できることを示している。これらの結果を踏まえ、今年度は天然の巨大DNA(数千塩基以上)を検出することを試みた。対象遺伝子としては分子量238万のM13ファ-ジDNAを選び、比較対照DNAとして、その一部塩基配列を欠落させたM13ファ-ジDNA変異体を遺伝子組換え技術により作製した。ラベルDNAプロ-ブをそれぞれのDNAと共存させた場合、対象ファ-ジDNAの系でのみスペクトルに大きな変化が見られた。これは初年度の結果から2重鎖形成による変化と考えられ、溶液中でM13ファ-ジDNAが選択的に検出できたことを示している。本研究でラベルDNAプロ-ブを用いて基礎的分析法を確立した液相遺伝子診断法は、今後、検出感度の上昇やラベル剤の改良によって充分実用に足る遺伝子診断法になるものと考えられる。
結核菌低分子量分泌タンパクT細胞エピトープの同定と抗結核ワクチンへの応用

本研究では、CFP11(Rv2433c)、CFP17(Rv1827)、TB18.5(Rv0164)の3種の結核菌の低分子量分泌タンパク抗原のマウスおよびヒトの優勢(ドミナント)T細胞エピトープの同定を試みた。純系マウスおよびヒトHLAトランスジェニックマウスに、各タンパク抗原をコードするプラスミドDNAを免疫後、脾細胞のインターフェロン-γ(ガンマ)の産生を指標にしてT細胞エピトープ領域を決定した。本研究で得られた結果は、結核菌感染におけるT細胞応答の解析、ワクチン開発にとって有益である。1)単一分子のDNAワクチン用プラスミドの構築T細胞エピトープ同定のために、個々の低分子量分泌タンパク分子のDNAワクチンを構築した。結核菌H37Rvゲノム遺伝子からPCR法により、上記低分子量分泌タンパク各遺伝子を単離した。その塩基配列を確認後、DNAワクチンを構築した。2)抗原ペプチドライブラリーの作製これらの低分子量分泌タンパク分子の全長を網羅する20merのペプチドからなるペプチドライブラリーを作製した。さらにコンピューターアルゴリズムを用いて、優勢(ドミナント)T細胞エピトープを予測した。T細胞エピトープの予測には、SYFPEITHI、BIMAS等を用いた。3) DNAワクチンの純系マウスへの投与上記プラスミドを金粒子にコートし、マウス皮膚に遺伝子銃(BIO-RAD社製)を使って接種した。4) DNAワクチンの効果判定マウスにDNAワクチン投与後、免疫終了12週間後IFN-γELISA等のアッセイにより免疫効果の判定を行なっている。結核菌由来低分子量分泌タンパクは主要なT細胞抗原である。ESAT6とCFP10タンパクは、ツベルクリン反応に代わる結核の特異的診断薬として最近広く使用されるようになった。平成21年度はCFP11(Rv2433c),CFP17(Rv1827),TB18.5(Rv0164)の各低分子量分泌タンパクについて以下の研究を行った。その成果を学会で発表し、また論文を投稿した。またヒトHLA-DR4トランスジェニック(Tg)マウスにも各DNAを接種を開始した。2)DNAワクチンの効果判定マウスにDNAワクチン投与後、免疫終了12週間後脾細胞を調製し、各タンパクのペプチドライブラリーを用いてIFN-γの産生を指標にしてT細胞エピトープを含むペプチド領域を明らかにした。さらにコンピューターアルゴリズムの結果を参考にして最小T細胞エピトープを限定した。また免疫ヒトHLA-DR4 Tgマウスに関しても同様の解析を開始した。3)成果の発表CFP11,CFP11,TB18.5タンパクのマウスT細胞エピトープの解析結果について日本免疫学会、日本細菌学会、およびDNAワクチン2010国際学会で発表し、また論文を作成しVaccine誌に投稿した。EsAT6とCFP10タンパクは、ツベルクリン反応に代わる結核の特異的診断薬として最近広く使用されるようになった。平成22年度はCFP11(Rv2433c), CFP17(Rv1827), TB18.5(Rv0164)の各低分子量分泌タンパクについて以下の研究を行った。1) DNAワクチンの効果判定純系マウス(BALB/cおよびC57BL/6)皮膚に遺伝子銃(BIO-RAD社製)を使ってCFP11, CFP11, TB18.5 DNAワクチン投与後、免疫終了12週間後脾細胞を調製し、各タンパクのペプチドライブラリーを用いてIFN-γの産生を指標にしてT細胞エピトープを含むペプチド領域を明らかにした。さらに、免疫ヒトHLA-DR4Tgマウスに関しても同様の解析をおこない、ヒトHLA-DR拘束性T細胞エピトープを同定しつつある。その成果は、今後発表の予定である。2)成果の発表CFP11, CFP11, TB18.5タンパクのマウスT細胞エピトープの解析結果について日本免疫学会、日本細菌学会、およびDNAワクチン2010国際学会で発表し、また論文を作成しVaccine誌に発表した。
基礎疾患(糖尿病)を持つ心臓の低潅流障害と再潅流障害に対する薬物の作用とその機序

実験糖尿病ラットの摘出心臓を用い、ノルエピネフリン(NE)付加低流量潅流時の左心室収縮弛緩機能不全と局所心筋エネルギー代謝異常の関係を調べ、各種薬物の効果を検討し、非糖尿病心臓との相違を明らかにした。1.低潅流下のNEは、β受容体を介する心筋Ca^<2+>含有量増加を伴い低潅流障害を悪化させた。心筋エネルギー代謝異常は左心室内膜下層心筋において著しく、左心室拡張期ステフネス(Stiffness)の増加と共に、糖尿病心臓において顕著であった。2.両心臓において、このステフネスの増加は、内層心筋のATP減少および乳酸増加とよく相関していた。しかし、糖尿病心臓の方が内層心筋のATP減少の影響を受けやく、ステフネスの増加しやすさを、心筋細胞内総ATPの減少量で、単純に非糖尿病心臓と比較できないことを示した。3.糖尿病心臓のグリコーゲン含有量は、糖尿病期間に依存して増加した。この高濃度のグリコーゲンはステフネス増加の発現を遅らせるが、長時間の低潅流による障害は糖尿病期間に依存して悪化した。4.NE付加低潅流下のex vivoインシュリンは、内層心筋の水分含有量増加と共にエネルギー代謝異常を一部改善し、ステフネスの増加を抑制した。この有益な効果は、非糖尿病心臓より糖尿病心臓で顕著であるが、高血糖下では、乳酸レベルの上昇と共に効果は減弱し、産生乳酸濃度に依存することが示唆された。5.Ex vivoピルビン酸は、糖尿病心臓のNE付加低潅流時のステフネス増加の発現を遅らせ、有益な効果をもたらした。ピルビン酸脱水素酵素活性化剤ジクロロ酢酸は、単独でもピルビン酸との併用でも効果を示さなかった。6.糖尿病治療薬グリブライドは,K^+チャネル阻害によりNE付加低潅流時のステフネス増加の発現を促進させた。7.他の生理活性物質の作用や局所心筋血流分布の変動についても検討中である。なお、糖尿病6週間の摘出大動脈の電位依存性収縮は減弱していたが、アドレナリン受容体を介する反応は同程度であった。実験糖尿病ラットの摘出潅流心臓を用い、ノルエピネフリンを伴う低流量潅流時の左心室収縮弛緩機能不全と局所心筋エネルギー代謝異常の関係を調ベ、非糖尿病心臓と比較検討した。「得られた知見」1)ノルエピネフリンを伴う低潅流により、心筋エネルギー代謝上、左心室内膜側心筋層の方が障害され易い。2)左心室弛緩機能および内層心筋エネルギー代謝は、糖尿病心臓の方が障害され易い。3)左心室拡張期Stiffnessの増加は、内層心筋のATP減少および乳酸増加とよく相関しているが、糖尿病心臓の方が、心筋内層のATP減少の影響を受け易い。4)糖尿病心臓のStiffnessの増加し易さは、心筋細胞内総ATPの減少量および乳酸蓄積量で、単純に非糖尿病心臓と比較出来ない。5)著者らのこの実験系における糖尿病心臓のStiffnessの増加はインシュリンで阻止できた。よって、ノルエピネフリンを伴う流量減少時の、糖尿病心臓のStiffnessの増加し易さには、解糖系よりのATP産生が少ない事が重要な意味を持つのではないかと推察される。「今後の展望」1)ノルエピネフリンを伴う低潅流障害における、糖尿病心臓のグリコーゲン高濃度含有の意義を明らかにする。2)左心室内膜下と外膜下の局所心筋潅流量を測定し、弛緩機能、Ca含有量および局所心筋エネルギー代謝との関係を明らかにする。3)心臓や血管の低潅流障害に対して改善または悪化させる種々の生理活性物質(薬物)の効果を調ベ、その作用機序を解明する。

5.Ex vivoピルビン酸は、糖尿病心臓のNE付加低潅流時のステフネス増加の発現を遅らせ、有益な効果をもたらした。ピルビン酸脱水素酵素活性化剤ジクロロ酢酸は、単独でもピルビン酸との併用でも効果を示さなかった。6.糖尿病治療薬グリブライドは,K^+チャネル阻害によりNE付加低潅流時のステフネス増加の発現を促進させた。7.他の生理活性物質の作用や局所心筋血流分布の変動についても検討中である。なお、糖尿病6週間の摘出大動脈の電位依存性収縮は減弱していたが、アドレナリン受容体を介する反応は同程度であった。1.実験糖尿病ラツトの摘出心臓を用い、ノルエピネフリン(NE)付加低流量灌流時の左心室収縮弛緩機能不全と局所心筋エネルギー代謝異常に対するグリコーゲンと各種薬物の効果を検討し、非糖尿病心臓と比較した。(1)糖尿病心臓のグリコーゲン含有量は、糖尿病期間に依存して増加した。この高濃度のグリコーゲンは、NE付加低流量灌流時に使用され、左心室拡張期ステフネス(Stiffness)増加の発現を遅らせる事に関与していると推察された。即ち、短時間の低灌流障害に対し防止的効果を及ぼすものと思われる。しかしながら、長時間の低灌流による障害は、糖尿病期間に依存して悪化する事がわかった。低灌流60分後には、左心室ステフネスの増加に相関した内膜下層心筋ATP含有量の減少がみられた。(2)NE付加低灌流下のex vivoインシュリンは、内層心筋の水分含有量増加と共に心筋エネルギー代謝異常を一部改善し、ステフネスの増加を抑制した。この有益な効果は、非糖尿病心臓より糖尿病心臓で顕著であるが、高血糖下では、乳酸レベルの上昇と共に効果は減弱し、産生される乳酸濃度に依存することが示唆された。(3)Ex vivoピルビン酸は、糖尿病心臓のNE付加低灌流時のステフネス増加の発現を遅らせ、有益な効果をもたらした。ピルビン酸脱水酵素活性化剤ジクロロ酢酸は、単独でもピルビン酸との併用でも効果は示さなかった。(4)糖尿病治療薬グリブライドは、K^+チヤネル阻害によりNE付加低灌流時のステフネス増加の発現を促進させた。2.糖尿病(6週間)ラツト摘出大動脈の電位依存性収縮は、非糖尿病のに比し減弱していたが、アドレナリン受容体を介する反応は同程度であった。3.低流量灌流時の糖尿病心臓に対する各種生理活性物質の作用と局所心筋血流分布の変動についても検討中である。
前近代日本史料の比較文化史的観点による国際的翻訳基準の研究

昨年に引き続き、歴史用語の翻訳基準の研究・設定、及びそれらの電子情報化が、当該年度における中心的な研究活動であった。1.前近代日本史用語・歴史語彙の翻訳基準の研究中世史だけではなく、近世史の歴史用語も対照とし、参照する既存研究書を増やし、項目・インデックス数の拡充に努めた。結果として、グロッサリーには現在までに英文32冊分、約20,000の項目が入力された。これらについて、翻訳・ローマ字化などの基準を定め、それに沿って修正を行っている。また、これまでに入力したグロッサリー/インデックスの著者・出版社宛に利用許可願いを出し、許可が降りたものから順に一般公開していく準備を始めた。2.日本前近代史料の国際情報化の研究(1)毎年行われる国際研究集会において、グロッサリー・ワークショップを開き、参加した欧米の研究者各人がより主体的にプロジェクトに関わるところとなった。(2)昨年の4月にワシントンD.C.で開かれた全米アジア研究学会でのプロジェクトについての報告文を作成した。今年も3月末にニューヨークで開かれるCouncil of East Asian Librariesの集会に参加し、プロジェクトの報告を行う。また学会発表の他にも、欧米の諸研究機関の日本研究者と意見交換して、世界各国で進行中の類似プロジェクトの進行状況や、それに纏わるさまざまな問題点、あるいは我々のプロジェクトに対する具体的なニーズを確認できた。(3)グロッサリーのデータベースが実際にどのような形で史料編纂所のデータベースの国際的な有効利用に貢献できるものにするかを検討してきた。その結果、「日本史用語応答型翻訳支援システム」を開発し、現在公開に向けて準備中である。今後の日本研究の国際化に大いに役立つものであることと確信する。副研究として挙げた中世後期のキリシタン書の翻訳・理解については、引き続き日本仏教の<悪>や<魔>の概念との比較研究を中心に史料の収集に従事し、研究会での口頭発表や論文執筆も行った。
インバウンド観光における観光土産のリピート購買促進のためのブランド認知の研究

インバウンド観光で観光土産として購買された商品が帰国後にリピート購買されれば、観光土産の消費拡大がはかられ観光産業の経済的安定やさらなる発展が期待できる。リピート購買が発生する要因に消費者のブランド認知があげられる。本研究は、食品の観光土産を購買する訪日中国人旅行者(買い手)と観光土産を受け取った中国国内の消費者(受け手)を対象に、ブランド認知、消費者関与、訪日経験、消費者属性等についての調査を実施し、ブランド認知のメカニズムを考慮したモデルで分析し、ブランド認知の特徴ごとに分類されたブランドグループに対しリピート購買促進のためのマーケティング・アプローチの方法を提案するものである。
モヤモヤ病およびその治療に関する研究

1.小児モヤモヤ病患者に於ける症候の分析をおこなった。又、国外の患者との比較も行った。2.小児モヤモヤ病の診断について脳波、脳血流からの検討を行った。3.小児モヤモヤ病の疾患分類はいまだに合理的なものが無い。そこで、脳の乏血の程度とその速度とを加味した新しい分類法を提唱した。5.EDASを施行前後の脳血管撮影所見の分析検討を行った。6.短時間Xenon吸入法による脳血流測定法を確立し、小児の実用的な脳血流の測定が可能となった。この方法を用いて小児モヤモヤ病患者のEDASの術前・術後の脳血流を検討した。7.EDASの術中・術後における合併症に就いての検討、およびこれに対する対策の検討が詳細にわたって行われた。8.EDASによる間接吻合のメカニズムを家兎による実験により解析し、術後まず見られる運動機能の改善を放射線解剖学的に裏付けた。9.モヤモヤ病に関する内外の文献のデータ・ベースを作成した。10.東医歯大付属病院脳神外科及びその関連病院の脳外科に来院したモヤモヤ病患者、総計91症例について、症例毎に150項目以上の詳細なデータ・ベースをRB5000を用いて完成した。11.EDAS手術時に浅側頭動脈の細分枝を採取して血管平滑筋細胞の培養を行い、対照培養平滑筋とモヤモヤ病患者の血管平滑筋との間に細胞倍加時間、血小板由来成長因子に対する反応性などの生物学的特徴に相違が在ることを確認した。又この培養細胞系を持っているのは、我々の所だけである。昭和61年度の科学研究費補助金交付の内定が通達されたのが、昭和61年10月15日であり、したがって、設備の購入等はあまり研究内容に反映されていないのが現状である。最近のモヤモヤ病に対する研究成果をまとめると以下の様である。1.EDASおよびその他の間接的外頸動脈/内頸動脈動脈吻合術は成人モヤモヤ病でも有効である。2.EDASはモヤモヤ病以外の小児の慢性脳乏血疾患にも症例、手術時期を選べば有効である。3.EDASは脳全体の血流量はさほど増加させないが、血流の分布をかなり、変化させる。特に頭皮動脈を移植した部位の直下では極めて血流が良好であることが明らかとなった。従って、左側ではSTAの前枝も用いてEDASを行えば、知能の改善が期待できる。4.3.とは別にEDAS術後の患者は短期の経過観察では知能の改善が明らかで無いが、長期に観察していると次第に知能の改善も見られることが明らかとなった。5.EDASの術中・術後における合併症に就いての検討、およびこれに対する対策の検討が詳細に亙って行われた。Xenon-enhanced CTにおける短時間Xenon吸入法による脳血流測定法が確立され、小児の実用的な脳血流の測定が可能となった。7.脳血管撮影像の解剖学的検討により、STAの頭頂枝がが極めて脳の運動領野に近接してあることが証明され、EDASを行うとまず運動機能が改善されることが裏付けられた。最近のモヤモヤ病に対する研究成果の一部を述べると以下の様である.1.EDAS(研究代表者が開発した新しいモヤモヤ病の手術法, encephaloーduroーarterioーsynangiosis)はTIA型のモヤモヤ病に対して極めて有効であるが,梗塞型のモヤモヤ病に対しては,その効果が制限される.2.EDASを行なうに当たって, 6歳から15歳の患者に於いては,脳乏性の合併症は見られないので,安心して手術を行なうことが出来る.