hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
人間の基本的回避方向に関する実験的研究

とくに、上方からの落下物に直面した際、女性は顔や頭を手で覆って守るという傾向が先行研究で指摘されているが、本研究でも、その傾向が出ていた。男女間の退避距離を調べると、男性の退避距離の方が大きかった。これは先行研究の結果と同じ結果となる。しかし先行研究に比べ、男女の距離はあまり差がなかった。本研究の男女間の臨場感を調べると、女性に比べ、男性の臨場感の水準は低かった。仮想空間における臨場感水準が高める事が、今後のVR実験の課題となるだろう。とっさの危険状況に直面したときにとる行動を退避行動というが、先の退避行動研究において、退避方向と現象的利き性との関係が検討されてきた。しかし、潜在的利き性と退避方向の関係を検討する研究は殆どなされていなかったが、昨年度の研究成果から、潜在的利き性によっても再分類する必要があることが確認された。しかし、昨年度の研究だけではデータ数が少なく、右利きを中心に検討していることから左利きについても検証していく必要があった。そこで今年度は、左利きのデータを可能な限り収集し、潜在的利き性が退避行動に影響を及ぼす可能性および潜在的利き性分類を行うことの意義を確認することを目的とし、実験を試みた。一方刺激提示装置だが、昨年度に引き続き、Virtual Reality(以降VR)を使用し、仮想環境内の統制された条件下で実験を行っている。今年度使用した空間は2つであり、その他手続きは昨年度の実験手続きと同じである。実験:被験者:都内R大学大学生及び大学院生57名(男性19名女性38名、19歳27歳、平均年齢21.47歳)実施時期:1997年7月11月結果及び考察:VRを使用して上方からの落下物(空間1)、前方からの衝突物(空間2)実験を行ってきたわけだが、現象的利き性による分類では両空間において有意な差が得られなかった。しかし、潜在的利き手による分類を行うと、両空間においてR-typeの退避傾向は、左方向の傾向が現象的利き性の分類に比べ明白となった。L-typeの行動傾向は両空間においてわずかに右方向に退避する傾向が見られたが明白な差は見られていない。L-typeの退避傾向が明白とはいえないものの、R-typeと退避方向の傾向が逆であり、5%水準で有意な結果が得られた。以上のことから、退避方向を調査する際、現象的利き性による分類だけではなく、潜在的利き性による再分類することの意義が確認されたと言えよう。
骨格筋におけるO-GlcNAc修飾の糖代謝に与える影響

蛋白翻訳後修飾の一つであるO-GlcNAc修飾と骨格筋のエネルギー代謝の関係を検討した。O-GlcNAc修飾は、ブドウ糖の代謝により生成されたFructose-6-phosphateの一部がヘキソサミン生合成経路に流入後の代謝産物であるUDP-GlcNAcを基質とし、O-GlcNAc transferase(OGT)によりserine/threonine残基に付加される修飾である。【結果】運動後の血糖はOgt-MKOで有意に低く、運動後のAMPK活性化を示すACCのリン酸化がOgt-MKOで亢進していた。AMPK活性化剤であるAICAR投与はOgt-MKOで強い低血糖を誘発した。Ogt-MKOは高脂肪食摂取下の体重増加の抑制、空腹時血糖低値および血清インスリン低値を示した。高脂肪食負荷後の糖負荷試験や高インスリングルコースクランプ法でインスリン感受性が亢進していた。本モデルでもAMPK蛋白発現が増加していた。また、12-13週齢の加齢状態でも体重増加が抑制されており、AMPK蛋白発現が増加していた。C2C12 Ogtノックダウンで糖取り込みが増加し、Cell Flux解析でブドウ糖酸化の亢進を確認した。Ogt-MKOおよびC2C12 OgtノックダウンともAMPK蛋白発現が増加していた。Ogt-MKOは高脂肪食摂取下で体重増加が抑制され、Euglycemic-clamp法でインスリン感受性の亢進を認めた。【結論】骨格筋におけるO-GlcNAc修飾の低下はAMPK蛋白発現の増加を伴う抗糖尿病抗肥満作用を示す。平成28年度の研究計画として以下の3点を挙げていた。1骨格筋特異的Ogtノックアウトマウス(OGT-MKO)の骨格筋ファイバータイプと糖代謝:MLC-CreマウスとOgt-Floxマウスの交配により骨格筋特異的Ogtノックアウトマウス(OGT-MKO)を作成し、明らかな体重差や耐糖能に差がない事を観察した。OGT-MKOでは血中インスリンは明らかに低値である事が観察されている。運動負荷を加えたところ、持続運動がコントロールマウスに比して短く、AMPK活性化が促進していることが明らかとなった。またAMPK活性化剤であるAICARの腹腔内注射によりOGT-MKOマウスは顕著な低血糖を来すことが観察された。インスリン注射後の骨格筋Aktリン酸化にか差がなかったことから、AMPKがOgt欠損により活性化していると考えられる。Euglycemic-clamp法によるインスリン感受性の検討(Dr. Cheol Soo Choi)と、代謝ケージによる呼吸商の測定については、現在マウスを韓国に搬送し結果を測定結果を待っているところである。2C2C12培養細胞を用いたOgt標的分子の同定:C2C12細胞にsiRNAでOgtをノックダウンさせたところ、AMPKが活性化する事が観察された。同時にSeaHorseフラックスアナライザーを用いて検討を試みたところ、ATP合成のuncouplingが亢進していることが観察され、何らかのミトコンドリア障害が想定されている。3加齢に伴う筋代謝変化におけるOgtの役割:加齢に伴うサルコペニアにおけるOgtの役割を検討するため平成28年度に野生群、MOGT-KO各20匹を作成し、通常食で1年間飼育したのちに、体組成の変化や筋肉量を評価する。近日中に骨格筋量への影響を観察できる予定である。これまでの検討はおおむね順調に経過していると考えられる。韓国への実験動物の搬送は既に完了しているが、先方の都合によりDATA取得が遅れている。O-GlcNAc修飾の骨格筋における役割を検討するために骨格筋特異的Ogtノックアウトマウス(Ogt-MKO)を用いて検討した。運動負荷を行うと、対照群に比してOgt-MKOは有意に運動後の血糖が低値であり、運動後にAMPKと基質であるACCのリン酸化が亢進していた。さらにAMPK活性化剤であるAICARの腹腔内投与によりOgt-MKOでは顕著な血糖低下を来した。Ogt-MKOでAMPK蛋白発現が増加しており、これがAMPK活性化の機序と考えられた。C2C12筋細胞においてOgtをsiRNAでノックダウンさせたところ、培養細胞においてもAMPK蛋白発現が増加しており、ブドウ糖取り込みも亢進している事が確認された。以上より、骨格筋においてO-GlcNAc修飾はブドウ糖取り込みの量を感知する栄養センサーとしての役割を担っており、その欠損はAMPKを介した代償性の糖取り込み増加を来すことが示唆された。韓国との国際共同研究で、12-13週齢のマウスを検討する必要があったため、やや遅れを呈していた。

蛋白翻訳後修飾の一つであるO-GlcNAc修飾と骨格筋のエネルギー代謝の関係を検討した。O-GlcNAc修飾は、ブドウ糖の代謝により生成されたFructose-6-phosphateの一部がヘキソサミン生合成経路に流入後の代謝産物であるUDP-GlcNAcを基質とし、O-GlcNAc transferase(OGT)によりserine/threonine残基に付加される修飾である。【結果】運動後の血糖はOgt-MKOで有意に低く、運動後のAMPK活性化を示すACCのリン酸化がOgt-MKOで亢進していた。AMPK活性化剤であるAICAR投与はOgt-MKOで強い低血糖を誘発した。Ogt-MKOは高脂肪食摂取下の体重増加の抑制、空腹時血糖低値および血清インスリン低値を示した。高脂肪食負荷後の糖負荷試験や高インスリングルコースクランプ法でインスリン感受性が亢進していた。本モデルでもAMPK蛋白発現が増加していた。また、12-13週齢の加齢状態でも体重増加が抑制されており、AMPK蛋白発現が増加していた。C2C12 Ogtノックダウンで糖取り込みが増加し、Cell Flux解析でブドウ糖酸化の亢進を確認した。Ogt-MKOおよびC2C12 OgtノックダウンともAMPK蛋白発現が増加していた。Ogt-MKOは高脂肪食摂取下で体重増加が抑制され、Euglycemic-clamp法でインスリン感受性の亢進を認めた。【結論】骨格筋におけるO-GlcNAc修飾の低下はAMPK蛋白発現の増加を伴う抗糖尿病抗肥満作用を示す。来年度の目標である、iPS細胞を用いたOgtの筋文化における役割に関する検討は、準備段階にあったが、共同研究者今村武史准教授の人事異動により、一旦実験を中止していることもあり、来年度の研究が大きくずれ込む可能性がある。そこで、本研究としては、実験動物による検討と、C2C12培養細胞を用いた検討の部分で、2017年8月ごろに論文投稿を行う方針である。iPSの検討と、加齢による影響に関する部分については別論文としての成果発表を目標とすることとする。ヒトiPS細胞を用いたOgtノックダウンによるファイバータイプへの影響について検討予定である。ノックアウトマウスやC2C12培養細胞で得られた知見がヒトに外挿できるかを検討すため、ヒトiPS細胞で検証する。我々は既にiPS細胞を高率に骨格筋へ分化分化する事を確認してい。OgtをsiRNAでノックダウンした後に、骨格筋分化マーカー、ミトコンドリア量、AMPKタンパク量、代謝フラックスについて検討予定である。また、細胞を高血糖などの過栄養条件に暴露させて際のOgtの役割についても検証したいと考えている。
ヤコビ形式のレベルと指数を交換する持ち上げ写像の具体的構成

ヤコビ形式は、1変数楕円保型形式を多変数ジーゲル保型形式に持ち上げる際に"媒体"の役割を果たすため、整数論のみならず幾何学や表現論等の諸分野において益々重要な役割を果たす様になってきている.本研究では、平方因子を持たないレベルのヤコビ形式を(レベルと指数を入れ換えた)他のヤコビ形式に持ち上げる写像を次の2通りの手法で具体的に構成した.1.平方因子を持たないレベルのヤコビ形式に作用する様々な算術的作用素の跡公式の完全な記述を行い、それを基にヤコビ新形式からなる複数の(ヘッケ加群として同型な)空間を与えた.次にこれらの空間の間に存在する持ち上げ写像を、(半整数ウエイトの保型形式の様々な理論を駆使して)構成した.2.平方因子を持たないレベルの指標付きヤコビ形式をベクトル値保型形式に対応させ、その指標から誘導される表現の既約分解とそれ上で定義されるヴェイユ表現の既約分解をそれぞれ与えた,次にそれぞれの中から同型な既約成分を具体的に取り出し、その構造を用いてそれらの間に存在する持ち上げ写像を構成した.さらに、この2通りの手法で構成したそれぞれの持ち上げ写像の性質を詳細に分析した結果、これらは互いに異なる条件下でのみ与えられることが分かり、ヤコビ形式を表現論的立場で捉えた場合、指標付きヤコビ形式と主指標を持つヤコビ形式は大きく異なる構造を有していることも判明した.これらの構成写像を用いることで、多変数ジーゲル保型形式等、他の保型形式間に存在する様々な持ち上げ写像を具体的に構成することも可能となるため、本研究が(数論幾何や保型表現論を含んだ)多くの分野の研究進展に大きく寄与するものと思われる.なお、本研究で跡公式を求めていく際、類数が持つ幾つかの性質を調べることも出来たため、この成果を用いて高次冪レベルのヤコビ形式に作用するヘッケ作用素の跡公式の一部の項も記述出来た.ヤコビ形式は、1変数楕円保型形式を多変数ジーゲル保型形式に持ち上げる際に"媒体"の役割を果たすため、整数論のみならず幾何学や表現論等の諸分野において益々重要な役割を果たす様になってきている.本研究では、平方因子を持たないレベルのヤコビ形式を(レベルと指数を入れ換えた)他のヤコビ形式に持ち上げる写像を次の2通りの手法で具体的に構成した.1.平方因子を持たないレベルのヤコビ形式に作用する様々な算術的作用素の跡公式の完全な記述を行い、それを基にヤコビ新形式からなる複数の(ヘッケ加群として同型な)空間を与えた.次にこれらの空間の間に存在する持ち上げ写像を、(半整数ウエイトの保型形式の様々な理論を駆使して)構成した.2.平方因子を持たないレベルの指標付きヤコビ形式をベクトル値保型形式に対応させ、その指標から誘導される表現の既約分解とそれ上で定義されるヴェイユ表現の既約分解をそれぞれ与えた,次にそれぞれの中から同型な既約成分を具体的に取り出し、その構造を用いてそれらの間に存在する持ち上げ写像を構成した.さらに、この2通りの手法で構成したそれぞれの持ち上げ写像の性質を詳細に分析した結果、これらは互いに異なる条件下でのみ与えられることが分かり、ヤコビ形式を表現論的立場で捉えた場合、指標付きヤコビ形式と主指標を持つヤコビ形式は大きく異なる構造を有していることも判明した.これらの構成写像を用いることで、多変数ジーゲル保型形式等、他の保型形式間に存在する様々な持ち上げ写像を具体的に構成することも可能となるため、本研究が(数論幾何や保型表現論を含んだ)多くの分野の研究進展に大きく寄与するものと思われる.なお、本研究で跡公式を求めていく際、類数が持つ幾つかの性質を調べることも出来たため、この成果を用いて高次冪レベルのヤコビ形式に作用するヘッケ作用素の跡公式の一部の項も記述出来た.
神経活性物質受容体によるジグリセリド産生の制御機構

ある種の神経活性物質がその細胞膜受容体に結合すると、細胞膜イノシトールリン脂質がホスホリパーゼCによって速やかに加水分解を受けて、ジグリセリド(DG)が産生され、産生されたジグリセリドはCキナーゼを活性化する。最近、宇井やGompertsは、細胞膜受容体からホスホリパーゼC反応に至る細胞膜トランスダクション過程にGTP結合性蛋白質(Gi蛋白質)が関与していることを、肥満細胞や多核白血球を用いた細胞レベルの実験で示した。そこで、私共は、本特定研究において、HL-60細胞をジブチリルサイクリックAMPで多核白血球様細胞に分化させた細胞をモデル細胞として、細胞膜レベルで外界シグナルによってホスホリパーゼC反応が引き起こされる実験系をまず確立することを試みた。そして、この無細胞実験系を用いて、走化性因子であるfMLPの受容体によるホスホリパーゼC反応の制御機構にGTP結合性蛋白質が関与していることを実証することに成功した。すなわち、単離した細胞膜にfMLPを作用させると、用量依存的にホスホリパーゼC反応が促進された。fMLPによるこの反応の促進効果は微量のGTP(1-10μM)と【Ca^(2+)】(0.1-2μM)に依存しており、これらの非存在下では認められなかった。細胞膜をNADの存在下に百日咳毒素(IAP)で処理すると、fMLP依存性のホスホリパーゼC反応は抑制された。しかし、この抑制は牛脳やラット脳から部分精製したGi蛋白質を加えることによって解除された。一方、細胞膜を放射性NADを用いてIAPで処理すると、分子量4万前後の蛋白質がADPリボシル化された。これらの実験結果から、多核白血球様に分化したHL-60細胞では、fMLP受容体と共役したイノシトールリン脂質のホスホリパーゼCによる加水分解反応にGi蛋白質が関与していることが明確になった。
不連結簡約群に対するSpringer対応と指標層

当初の研究計画は,不連結簡約代数群のSpringer対応と指標層の研究であった.このテーマに関しては,次ページに記載した結果が得られ,その拡張をめざして研究を進め,ある程度のめどがたった.しかし,この分野で,既に先行する研究があることが分り,我々のねらいとしていた結果は,そこに含まれることが分った.そこで,後半は少しテーマを変えて,有限体上の対称空間の理論,特に簡約群,Gに対し,G(〓_<q^2>)/G(〓_q)について調べた.Gの中心が連結な場合,一般的な結果が知られていたが,Gの中心が不連結な場合は,まだ知られていなかった.我々は,そのようなGの典型的な例であるSL_nの場合にG(〓_<q^2>)/G(〓_q)の置換表現に表われる.G(〓_<q^2>)の既約指標の重複度を決定することが出来た.この結果は,Shintani descentの理論,更にはG(〓_<q^n>)/G(〓_q)への拡張など興味深い問題に発展する可能性を持っている.当初の研究計画は,不連結簡約代数群のSpringer対応と指標層の研究であった.このテーマに関しては,次ページに記載した結果が得られ,その拡張をめざして研究を進め,ある程度のめどがたった.しかし,この分野で,既に先行する研究があることが分り,我々のねらいとしていた結果は,そこに含まれることが分った.そこで,後半は少しテーマを変えて,有限体上の対称空間の理論,特に簡約群,Gに対し,G(〓_<q^2>)/G(〓_q)について調べた.Gの中心が連結な場合,一般的な結果が知られていたが,Gの中心が不連結な場合は,まだ知られていなかった.我々は,そのようなGの典型的な例であるSL_nの場合にG(〓_<q^2>)/G(〓_q)の置換表現に表われる.G(〓_<q^2>)の既約指標の重複度を決定することが出来た.この結果は,Shintani descentの理論,更にはG(〓_<q^n>)/G(〓_q)への拡張など興味深い問題に発展する可能性を持っている.
脳低温療法の有効性-プロテオーム解析を用いた脳損傷と脳保護効果の検討

心肺停止蘇生後患者の6ケ月後の神経学的予後をGlasgow outcome scaleを用いて予後良好群(GR) 5例、予後不良群(PR)7例の2群に分類した。髄液採取は蘇生後48時間目に、コントロール群(CTL)9例の髄液は腰椎麻酔手術時に採取した。脳脊髄液の蛋白質同定はナノフロー液体クロマトグラフィー・ハイブリッド型タンデム質量分析システムによる分析、及びMASCOTソフトウェアを用い行った。3群各1例の試料から合計107種類の主要脳脊髄液蛋白質が同定され、Gene Ontology Databaseによるその細胞局在は58%が細胞外に、32%が細胞質及び細胞内小器官に分類された。CTL 49種類、GR 45種類、PR 80種類の蛋白サブセットが同定された。Albumin, transferrin, apolipoprotein Eなどの23種類は3群で共通に検出され、87%が細胞外局在であった。一方、63種類の蛋白質はいずれかの群のみで検出され、中でもPRのみで同定された40種類の蛋白質は、22種類、55%が細胞内局在をもつ蛋白質であった。PRに特異的な蛋白質40種類の生理的役割は、炎症や細胞代謝に関連するものが多く、ついでシグナル伝達、物質輸送、構造にかかわる蛋白質であった。脳局在の高いPR特異的蛋白質はcarnosinase I、aldolase C、secretogranin IIIなどの代謝に関連する蛋白や脳損傷マーカーであるenolase 2などがあり、細胞内蛋白の割合が高かった。既知蛋白質についてはwestern blot解析によりPR特異性を示した。合成ペプチドに対する抗体を作成した新規マーカー蛋白のWestern blotによる半定量的解析では、CTL O/9、GR 1/5であったのに対し、PR 6/7が陽性であり、PRに強く発現を認め、神経学的予後を予測するマーカー候補となりうると考えられた。(2)脳脊髄液のタンパク質解析:脳脊髄液を還元・アルキル化後、直接トリプシン消化して得られたペプチド混合物、およびSDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動で分離した各ゲルバンドのトリプシン消化物についてLC/MS分析と配列データベース検索を行いタンパク質を同定した。3群各1例の患者由来試料から合計116種類の主要脳脊髄液タンパク質が95%以上の信頼性を持って同定された。(3)マーカー候補の選別:Gene Ontology Databaseなどの生物情報(機能・局在・生理的役割など)に基づき脳脊髄液の主要タンパク質カタログを作成した。アルブミンなどを含む30種類は三者に共通して見られ、それらの多くは既知の分泌タンパク質であった。一方、予後不良患者に特異的に検出された40種類のタンパク質の大半は典型的な細胞内局在タンパク質であり、神経特異的エノラーゼを含むいくつかの既知タンパク質についてはウエスタンブロッティングにより予後不良患者特異性を確認した。(4)新規マーカー:本研究で見出した新規マーカー候補について特異抗体を作成し、3群計21例についてのウエスタンブロッティングにより神経学的予後と発現量の強い相関を明らかにした。
きのこ類腐敗病の発生生態に関する研究

きのこ類に発生する細菌病の原因菌と、その発生生態について検討した。その結果の概要は以下のとおりである。1.大分県のほだ木栽培シイタケ腐敗症は1990年から多発傾向にあり、その被害も激しくなった。腐敗症の病原は2種の細菌、Pseudomonas tolaasiiによる黒腐細菌病、及びErwinia sp.による腐敗病である。両者は大分県のシイタケ栽培地に普遍的に存在し、被害を与えていることが再確認された。2.きのこ類腐敗症の生態的防除法の確立のため、まず、病原の診断技術の向上を検討したP. tolaasiiの選択培地、T-PAFに栽培施設消毒剤のミクロトールDを添加すると、生態系生存微生物の生育を制御し、検出効率が向上することを確認した。しかし、従来有していたWhite line形成能を失活した。P. tolaasiiの毒素生産遺伝子の塩基配列から作成したプローブは特異的にP. tolaasiiと反応、精度の高い、迅速な診断技術として利用できることを明らかにした。3.シイタケの栽培環境から主として黒腐細菌病の病原、P. tolaasiiの検出を試みた。(1)P. tolaasiiはかさ木、伏せ込み地土壌、ほだ場土壌等から検出された。(2)ほだ木に寄生しているきのこ(害菌)の腐敗症状株、取り残した腐敗子実体からP. tolaasiiが検出でき、広く栽培環境に生息することが判明した。(3)きのこ類の栽培を行っていない地域から採集した野生きのこ8種の腐敗症状からP. tolaasiiが検出され、野生きのこの腐敗に栽培きのこの病原細菌が関与していると推定した。(4)きのこを加害する昆虫の内、ガガンボダマシ、キノコバエの1種(未同定)からP. tolaasiiが検出され、昆虫がP. tolaasiiの伝搬に重要な役割を果たしているものと推定した。大分県は日本有数のシイタケ栽培地であるが、近年細菌性の腐敗病が多発生し問題となっている。この腐敗原因菌については著者らが明らかにしてきたがその発生生態に関してはほとんど検討されていない。そこで、シイタケ子実体腐敗原因菌のシイタケ栽培環境からの検出を試みた。その結果の概要は以下の通りである。1.シイタケ栽培環境に生息する昆虫の病原細菌保菌:原木を加害するハラアカコブカミキリおよび子実体を加害するハエ類の病原細菌汚染について調査した。その結果、3地点から採取したハラアカコブカミキリの蛹、幼虫、成虫からシイタケ腐敗原因菌の1種Erwinia sp.が検出された。Erwinia sp.はハラアカコブカミキリが食害した原木組織周辺部からも検出でき、食害によってハラアカカミキリの体に付着あるいはアラアカカミキリから原木組織に病原菌が伝搬するものと思われた。また、子実体腐敗症の発生している3ケ所のほだ場から採取したハエ類のうち、2カ所のほだ場から採取したハエ類からPseudomonas tolaasiiが検出された。P. tolaasiiは主としてガガンボダマシから検出され、その他からは検出できなかった。2.野生きのこからの検出:野生きのこ59個体について検出を試みた結果、P. tolaasiiは2個体から、Erwinia sp.は15個体から検出された。3.土壌からの検出:ほだ場土壌9点について検出を試みた結果、P. tolaasiiは1地点から、Erwinia sp.は3地点から検出された。

4.かさ木からの検出:かさ木からはErwinia sp.のみが10地点のうち3地点から検出された。シイタケ腐敗病の感染経路を解明するため、シイタケほだ木の伏せ込み場及びほだ場に生息する昆虫から原因菌の分離を行った。ハラアカコブカミキリ幼虫からの分離では改変D3培地上に黄色集落のErwinia sp.が高率に分離された。分離菌の一菌株を発生直後の幼子実体に有傷接種したところ、成長を停止しやがて腐敗させた。しかし、子実体の菌傘と菌柄に同様の方法で接種した場合や幼子実体に噴霧接種した場合は、子実体の生長停止は認められず、菌柄の一部が褐変する程度であった。他の分離菌では組織の褐変が僅かに認められる程度であった。また、成虫からもErwinia sp.が分離されたが分離頻度は幼虫に比較して低かった。ほだ木食害害虫のナガゴマフカミキリからは原因菌は検出されず、ユミアシダマシからはErwinia sp.が検出された。キマワリからは、Pseudomonas tolaasiiとErwinia sp.の両方が分離された。ほだ場で腐敗の進んだシイタケから採集したハエ類の成虫のうち、ナカモンミナミキノコバエからはErwinia sp.が高頻度に検出され、分離菌はシイタケ子実体の生育阻止・腐敗能を有していた。シマバエ科の一種からはErwinia sp.は検出されなかった。P.tolaasiiはいずれのハエ類からも検出されなかった。シイタケ栽培地周辺に自生する野生キノコ(カワラタケ・カイガラタケ・シロホウライタケ・ゴムタケ)を採取し、原因菌の存在を調査した。その結果、カワラタケとカイガラタケからはP.tolaasiiおよびErwinia sp.が高頻度で分離された。これらは年間を通してほだ木に常在しており、両原因菌の伝染源であることが示唆された。各種野生きのこからPseudomonas tolaasiiの検出を試みた。用いた33種39試料の野生きのこのうち、6種7試料からP.tolaasiiが検出された。昨年度はシイタケほだ木栽培場の周辺に発生する野生きのこからP.tolaasiiが検出されているが、今年度はきのこ栽培地帯ではない場所で採集したものを用いている。よって、今回検出されたP.tolaasiiは、もともと野生きのこを宿主とするものであると考えられる。これらの菌がきのこ栽培にどのように影響を及ぼすかについては、今後の検討が必要である。施設栽培で生産されるきのこからのP.tolaasiiの検出は、全国各地のきのこ栽培施設の汚染状況を調査する目的で行った。全国各地7県の試料を用いたが、いずれも1gあたり高濃度でP.tolaasiiに汚染されていた。P.tolaasiiの感染では腐敗しないマイタケを選んで、P.tolaasiiの増殖と生存について検討を行った。その結果、マイタケ子実体上でもP.tolaasiiが少なくとも72時間は安定して生存できることを確認した。一方、きのこ類に病原性を持たないP.syringaeで同様の試験を行った場合は、時間経過とともに菌数が減少していくことから、腐敗しないきのこ類も感染源になりうることが示唆された。P.tolaasiiの簡易検定法開発するために、White Line形成細菌(Pseudomonas sp.; WLRO)の安定した保存方法を検討した。
IL-17による乳癌微小環境形成と転移促進作用の機序解明

IL-17は、癌周辺の炎症と血管増生を誘導することで癌細胞の増殖を促進する反面、細胞傷害性T細胞の活性化を介して腫瘍抑制的にも作用する。一方、癌の転移におけるIL-17の役割は殆ど明らかになっていない。癌の転移は「浸潤能の獲得」「浸潤」「血管内流入」「血中での生存」「血管外流出」「遠隔組織での増殖」のステップからなる。申請者はマウス乳癌自然転移株4T1をIL-17欠損マウス乳腺内に同所移植したところ、著明に肺転移が抑制されることを見いだした。そこで、本研究ではIL-17が転移のどの相に影響するか調べるために、4T1細胞を野生型およびIL-17欠損マウスにそれぞれ静脈内移入した。その結果、両群で生存に差を認めなかった。このことより、IL-17の肺転移促進作用は転移形成の早期(血管内流入まで)に何らかの作用を及ぼすと考えられた。次に、転移形成の早期段階での腫瘍環境について調べるために、担癌14日目および21日目に腫瘍組織を摘出し、コラゲナーゼ処理にて単細胞に分離し、フローサイトメトリーを用いて腫瘍浸潤細胞を解析した。その,結果14日目の時点で野生型とIL-17欠損マウスではCD11b+Ly6C+単球とCD11b+F4/80+マクロファージの比率が異なり、IL-17欠損マウスではF4/80マクロファージへの分化が遅れることが示唆された。21日目では両群ともF4/80+マクロファージが大部分を占めていた。また、腫瘍局所に浸潤するリンパ球を解析したところ、14日目の時点で1L-17欠損マウスにおいて明らかにFoxp3+制御性T細胞の浸潤が減少していた。同時に、所属リンパ節と脾臓細胞を解析したが、腫瘍局所と同様の結果が得られた。申請者は腫瘍浸潤マクロファージに着目し、このマクロファージの表面マーカーを解析した。その結果、IL-17欠損マウス腫瘍に浸潤するマクロファージは野生型に比べてCD206(mannose receptor)の発現が低く、class II発現が高く、よりM2マクロファージの性質を帯びていることが示唆された。これらの結果から、IL-17は腫瘍局所において、M2マクロファージへの分化を促進することで転移を促進する機序が示唆された(第71回日本癌学会学術総会ポスター発表)。
メタロセン型異種混合金属クラスターの創製

本研究では、異種混合金属クラスターに対する新しい分子設計指針として「異種混合金属メタロセン型クラスター錯体」を新しく創出し、均一系異種金属クラスターの化学の発展に貢献することを目指して研究を遂行した。その結果、白金もしくはパラジウムを用いて単核中間体を発生させ、ここに別の金属を添加して混合金属Pd_2PtおよびPdPt_2サンドイッチ錯体を合成することに成功した。混合金属サンドイッチ錯体の同定は^<31>P NMRを用いておこなった。異なる金属元素が直接結合して生じる異種混合金属クラスターは、同一種類の金属元素から構成されるクラスターとは異なる触媒反応活性や物性を示すことが期待され、異種金属クラスターの合成研究が数多く行われてきた。しかし、均一系で特徴ある機能を示す異種混合金属クラスターはほとんど報告されていない。一般に、異種混合金属クラスターは金属の解離を伴うフラグメンテーションを起こしやすい問題がある。また、異種金属が等価な配位環境下にないことがほとんどであり、実際に反応活性点となるのはどちらか一方の金属種のみでもう一方の金属はスペクテーターとして働く場合がほとんどである。本研究では、これらの問題を克服する新しい分子設計指針として「異種混合金属メタロセン型クラスター錯体」を新しく創出し、均一系異種金属クラスターの化学の発展に貢献することを目指して研究を遂行した。シクロヘプタトリエニルおよびシクロヘプタトリエン3核錯体において、パラジウムと白金を1:2、2:1で組み込む反応の実現を目指して研究をおこなった。白金のみを用いた系において、3核錯体の形成機構を検討し、単核中間体が反応初期に定量的に生成することを既に見出している。この結果をもとにして、白金もしくはパラジウムを用いて単核中間体を発生させ、ここに別の金属を添加して混合金属Pd2PtおよびPdPt2サンドイッチ錯体を合成することに成功した。混合金属サンドイッチ錯体の同定は、31P NMRを用いておこなった。すなわち、生成した錯体にPPh3を添加してトリスホスフィン錯体に変換し、31P NMRのシグナルパターンを解析することによって、パラジウムと白金がどの組成で取り込まれているかを判別した。「メタロセン型クラスター錯体」は、2枚の不飽和炭化水素配位子の間に金属シートを組み入れたサンドイッチ型有機金属クラスターであり、本研究者が2006年に初めて合成に成功している。メタロセン型クラスター錯体の発見は、「安定で有用なサンドイッチ化合物=単核メタロセン錯体」という従来の概念を打ち破り、2次元金属シートを持つサンドイッチ化合物が安定に存在することを初めて実証するものである。これまでに合成してきたメタロセン型クラスター錯体は、同一の金属(PdあるいはPt)により構成された金属シートを持っている。一方、もし、2種類以上の金属種が混合したメタロセン型異種金属クラスター錯体を選択的に構築することができれば、フラグメンテーションに対して安定で、かつ異なる金属種がどちらも反応点になり得る異種金属クラスターを構築することができると期待される。平成23年度では、PdPt2組成およびPd2Pt組成を持つ3角形状3核サンドイッチ化合物の合成を目指した検討をおこなった。PdPt2組成を持つ異種金属混合シートサンドイッチ錯体については、Pd2(dba)3とPt2(dba)3をトロピリウム塩と混合することによって選択的に合成できることを明らかにした。一方、Pd2Pt組成を持つ異種金属混合シートサンドイッチ錯体については、同様の方法では選択的に合成することが難しいことが判明した。そこで、別の手法を探索した結果、シクロヘプタトリエン間にPd2Ptシートを形成させ、次いで塩基触媒下で酸化的に脱水素化することでPd2Ptシートをトロピリウム間に構築できることを明らかにした。本研究では、異種金属混合シートを持つサンドイッチ化合物を初めて合成することを目指した研究である。当初の研究計画では、平成23年度にPdとPtが混合した3核シートサンドイッチ錯体の合成を検討し、可能であればPd2Pt組成とPdPt2組成の構造を選択的につくりわけることを目標としていた。この目標は平成23年度中にほぼ達成できており、Pd2PtおよびPdPt2サンドイッチ化合物を選択的に合成できることを明らかにしている。今後は、平成23年度までにおこなってきた異種混合3核シートサンドイッチ化合物について、その合成と基本的性質について細部をつめ、論文投稿段階に進めることを目指していく。また、これまでに得た反応機構の知見に基づいて、異種金属混合4核シートサンドイッチ化合物の合成に挑戦する。当初の計画通り、主に消耗品と国内旅費に充当する。
サル側頭連合野ニューロンにおける時間コーディングの解析と研究

大脳皮質連合野のニューロンが視覚弁別・記憶課題遂行中に、刺激条件の違いや、弁別、記憶、行動選択などの行動条件に対応して、スパイク発生の時間的系列をどのように変化させるかを研究することを目的とし、今年度は、動画(12種類の左右対称な図形の右回転および左回転)および静止画を用いた3つの学習課題を2頭のサルで訓練した。課題1(注視課題)では、サルが画面中央を注視しているときに画像を呈示した。課題2(動きの方向の弁別課題)では、注視中に動画を1秒間呈示した後、記憶期間を経て再び画像を呈示した。呈示した画像の動きの方向がその試行の始めに呈示した画像の動きの方向と逆のときサルがレバ-から手を離すと正解とした。課題3(形の弁別課題)では、課題2と同様に画像を呈示し、試行の最初の画像と違う形が呈示されたときレバ-を離せば正解とした。これらの学習課題遂行中に、側頭連合野から動きと形の両方に選択性を示すニューロン(FM neuron)を記録した。形の選択性指数(FI=Nd/(N-1) : Ndは、あるニューロンが最大応答を示した形と識別可能な他の形の数、Nはテストした刺激の数)は、FM neuron(中央値=0.72)が形のみを扱うニューロン(F neuron ;中央値=0.42)よりも、高い値を示した。また画像呈示から反応開始までの遅れ時間も、FM neuron(中央値=130ms)がF neuron(中央値=110ms)よりも長かった。さらに、1本の電極から記録した複数ニューロンを波形識別装置で分離して相互相関を調べた結果、約57%で相関が見られ、その内の3分の2で非対称性の相関を示した。この出現頻度は、前頭連合野と比較して高率であった。また、多点記録の目的で、2つの電極を独立に駆動するマニピュレータを開発し、現在データを取得中である。
準安定電子励起状態にある分子の広領域近赤外レ-ザ-分光

本研究では近年開発された半導体レ-ザ-を用いて、近赤外領域の広い範囲に渡る高分解能高感度分光系を製作し、レ-ザ-分光の研究領域を今まで未開拓であった近赤外領域へ拡張した。具体的には気相分子の励起電子状態間の遷移を観測することによって、以下の研究を行なった。○分子の準安定電子励起状態の分光0.8μm領域にあるCO分子の三重項準安定状態からの電子遷移^3Δー^3Πを検出し、その高分解能スペクトルを解析することによって^3Δ状態の複雑な摂動を解明した。解析の結果得られた電子状態の固有関数を用いてこの状態の特異的な電子遷移強度、Δ状態のA型二重項分裂、gー因子等を説明した。○二原子分子の解離ダイナミクスN_2分子のリドベルグ電子の励起状態の振動励起準位において、回転量子数に依存する吸収線幅の増大を観測した。解離過鍋における電子、振動、回転の効果を明確にするためより高い振動状態の検出を検みた結果、線幅の増大は回転量子数の二乗に比例し、また振動励起によって著しく促進されることを見い出した。○反応緩和過程の追跡パルス放電と時間分解分光法の特色を生かし、N_2分子の準安定状態の振動緩和や反応過程を研究した。吸収線の過渡吸収スペクトルは分子種を分類する上で非常に有用な情報を与えることがわかった。○サイドバンド二重共鳴分光半導体レ-ザ-の注入電流にRF信号を重畳することで発生させたサイドバンド光と基本光を同時に分子の遷移に共鳴させる新しい光ー光二重共鳴の実験手法を開発した。この方法でAr原子のゼ-マン分裂したレベルを観光したところサブドップラ-の分解能の共鳴信号が得られ、寿命を正確に決定することができた。1.半導体レ-ザ-分光システムの制作レ-ザ-分光の研究領域を近赤外領域へ拡張するため、光通信用に開発されている分布帰還型(DFB)半導体レ-ザ-素子を用い、近赤外領域(1.3及、1.5μm)の高分解能分光系を制作した。このレ-ザ-を広い領域を一度に掃引するためには、電流を一定にして温度制御方式としたほうが有利となるので、制御系の応答関数をふまえたコンピュ-タ-による能動制御方式を試みた。2.時間分解測定系の製作研究対象である準安定分子を高い濃度で生成する手段としてパルス放電法を用いた。これは有限の寿命をもつ短寿命分子種の検出に対して有利な時間分解法を用いるためである。パルス放電で生成した短寿命種の過渡吸収波形をトランジェントメモリ-を用いてサンプリングし、パ-ソナルコンピュ-タ-に高速転送する。その後、実時間の積算処理あるいはゲ-ト処理を施すことによって時間軸あるいは周波数軸のスペクトルを得た。3.新しい周波数の較正法の開発近赤外領域での周波数の絶対較正に新しい手法を開発した。即ち、半導体レ-ザ-素子自身の非線形効果によって生じる可視領域の第二高調波でヨウ素分子の標準吸収線を基本光と同時に測定することで基本光の周波数を決定した。この方法の開発により従来、近赤外分光の欠点であった周波数較正の問題点を解決することができた。(論文投稿中)4.分光学上の研究成果まず、初めに水とアセチレン分子の重音バンドを測定し、この装置の分解能と検出感度を見極めた。その後、目的である準安定励起電子状態の検出を試みた。

最初は窒素分子のリドベルグ準安定電子状態を測定し、リドベルグ電子に起因するスピン微細構造や、回転量子数依存性のある前期解離過程を見出した(論文投稿中)。次に、一酸化炭素分子の高励起電子状態のスペクトル観測したところ、純粋な単一電子状態としては解釈できず、複数の電子状態との混合状態であることがわかった。また、パルス放電と時間分解分光法の特徴を生かした励起状態の寿命による分類はスペクトルの帰属に非常に有力な手法であることを示した。本研究では近年開発された半導体レ-ザ-を用いて、近赤外領域の広い範囲に渡る高分解能高感度分光系を製作し、レ-ザ-分光の研究領域を今まで未開拓であった近赤外領域へ拡張した。具体的には気相分子の励起電子状態間の遷移を観測することによって、以下の研究を行なった。○分子の準安定電子励起状態の分光0.8μm領域にあるCO分子の三重項準安定状態からの電子遷移^3Δー^3Πを検出し、その高分解能スペクトルを解析することによって^3Δ状態の複雑な摂動を解明した。解析の結果得られた電子状態の固有関数を用いてこの状態の特異的な電子遷移強度、Δ状態のΛ型二重項分裂、gー因子等を説明した。○二原子分子の解離ダイナミクスN_2分子のリドベルグ電子励起状態の振動励起準位において、回転量子数に依存する吸収線幅の増大を観測した。解離過程における電子、振動、回転の効果を明確にするためより高い振動状態の検出を試みた結果、線幅の増大は回転量子数の二乗に比例し、また振動励起によって著しく促進されることを見い出した。○反応緩和過程の追跡パルス放電と時間分解分光法の特色を生かし、N_2分子の準安定状態の振動緩和や反応過程を研究した。吸収線の過渡吸収スペクトルは分子種を分類する上で非常に有用な情報を与えることがわかった。○サイドバンド二重共鳴分光半導体レ-ザ-の注入電流にRF信号を重畳することで発生させたサイドバンド光と基本光を同時に分子の遷移に共鳴させる新しい光ー光二重共鳴の実験手法を開発した。この方法でAr原子のゼ-マン分裂したレベルを観測したところサブドップラ-の分解能の共鳴信号が得られ、寿命を正確に決定することができた。
エラスチン再生による生体軟組織の伸展性向上と健康長寿医療への展開

エラスチンが組織の伸展性や柔軟性を支配している構成要素であるにもかかわらず,エラスチン成分に着目したバイオメカニクス的研究は,国内,国外ともにこれまでに殆ど実施されていない.本研究では,損傷した皮膚損傷の修復を促進させる有効成分の探索を行うための基礎データを得ることを最終目標として,ヘアレスマウスの背部皮膚に紫外線を照射した後,エラスチン成分を塗布した皮膚組織に対し力学的試験を実施した.その結果,エラスチンの塗布によって,紫外線照射による皮膚の硬化を抑制する可能性があることが示唆された.今後,皮膚の成分変化などの生化学的もしくは組織形態学的分析を実施する必要があるものと考えられた.ハマチ並びにマグロから摘出した動脈球を原材料としてエラスチンを精製し,それらに対してアミノ酸分析を行った結果,アルファエラスチンとベータエラスチンの2種類の成分を抽出可能であることが示された.また,精製したエラスチンを用いてヘアレスマウス背部皮膚への塗布実験を行った.紫外線によって軽度または重度の損傷を生じさせた皮膚組織に魚類由来エラスチン成分を塗布することで,皮膚の力学的,組織形態学的または分子生物学的特性にどのような変化が生じるのかについて検討した.その結果,紫外線照射によって軽度損傷を発生させた皮膚では,コラーゲンおよびエラスチンの合成を抑制する因子の発現が増加するとともに,皮膚の力学的伸展性が低下していたが,エラスチン成分を塗布することで,光老化によって低下した皮膚の伸展性が正常皮膚レベルに近づく傾向がみられた.また,紫外線照射により,表皮が肥厚し,皮膚表面の形状も粗くなったが,エラスチン成分を塗布することで,表皮の肥厚が抑制され,皮膚の表面形状も滑らかになった.一方,紫外線照射で重度損傷を生じさせた皮膚は,エラスチン成分を塗布することで,組織の引張強度が増加した.さらに,個体の生存が維持させた状態で実施した吸引負荷試験でも,皮膚への紫外線照射で生じた伸展性低下が,エラスチン塗布によって抑制されることを示すデータが得られた.加えて,紫外線を照射した皮膚では,細胞増殖因子の発現が亢進されるとともに,表皮が厚くなり,表皮凹凸が増加する傾向を経時的な観察によって確認した.また,エラスチンを塗布した皮膚では,細胞増殖因子の発現が抑制され,表皮が薄くなり,皮膚の表面形状も滑らかになることが明らかになった.これまでにハマチ動脈球を用いた予備的な実験を繰り返しながら,マグロ動脈球からのエラスチン成分の抽出方法を確立した.さらに,精製したエラスチンを対象としたアミノ酸分析を行うことで,エラスチンにみられる特徴的なアミノ酸配列が確認されており,実験に使用する魚類由来エラスチン材料は,確実に供給される状況にある.一方,精製したエラスチンを用いて,ヘアレスマウス背部皮膚に対する塗布実験を行っており,紫外線照射によって生じる皮膚伸展性の低下が,エラスチン塗布によって抑制される傾向にあることが明らかになっている.また,力学的な試験だけではなく,組織形態学的ならびに分子生物学的な検討も行っており,皮膚の表面形状や表皮厚さの変化からも,紫外線照射よる皮膚への悪影響を軽減する作用がエラスチンにあることが示唆されている.このように,魚類由来エラスチンという独自の材料が高純度で精製できる状況にあり,さらに精製したエラスチンを使用した皮膚への塗布実験も行っていることから,研究はほぼ順調に進展しているものと判断される.皮膚には,表層から深層にかけて,表皮,真皮,皮下組織の3つ形態が存在する.この中でも真皮は,皮膚の力学的特性と深く関係していると考えられている.真皮を構成する成分は,線維性基質とその産生細胞に大別され,基質の大部分はコラーゲン線維とエラスチン線維で構成されている.エラスチンはゴムのように伸縮する性質を有する線維であり,主にコラーゲンを支える働きをしている.このエラスチンの性質が,皮膚の柔軟性や弾性を維持しハリを皮膚に与えていると推察されている.エラスチンとコラーゲンの構造が変化することにより,皮膚にシワやたるみなどが発生する.特に,皮膚が紫外線に曝されるとコラーゲン線維やエラスチン線維が変性して硬くなり,弾力が失われてしまう.このように,皮膚組織に存在するエラスチン成分は,加齢による生物学的老化と紫外線曝露による光老化の相互作用に起因して減少することが一般的に知られている.本研究では,紫外線照射による皮膚損傷の修復を促進させる有効成分の探索を行うためのデータを取得することを最終目標とする.その初期段階として,紫外線を照射した後に魚類由来エラスチン成分含有溶液を塗布したヘアレスマウス背部皮膚の変形挙動を実験的に評価し,正常組織との相違を定量化した.自作した装置を用いて陰圧負荷試験を行った結果,紫外線照射で損傷した皮膚に対してエラスチン成分を塗布することで,紫外線照射によって剛性が高くなる傾向にある皮膚の伸展性が向上し,粘弾性回復が短時間に現れることが明らかになった.本実験では,紫外線に暴露された皮膚組織内のエラスチンに変性が生じたものと推察され,このエラスチンの変性が外部から供給されたエラスチンによって抑制される可能性が示唆された.今後は,どの程度のエラスチン成分が損傷した皮膚組織に浸透するのかを明らかにする必要があるものと考えられた.クロマグロ由来動脈球よりエラスチン成分を精製した.細断した動脈球を脱脂脱水した後,アルカリ処理を施すことによって不溶性エラスチンを得た.

その後,シュウ酸分解を行うことによって,不溶性エラスチンの中に含まれる可溶性のベータエラスチンを精製した.ヘアレスマウスを実験に用い,正常皮膚のデータを得るためのマウスをControl群として,残りのマウスの背部皮膚に紫外線を照射した.紫外線照射のみ施したマウスをUV群,無水エタノールとポリプロピレングリコールを混合した液をプラセボ溶媒としそれを塗布したマウスをUV+placebo群,プラセボ溶媒にベータエラスチンを1%含有した溶液を塗布したマウスをUV+ベータ群とした.1日1回,紫外線照射後に0.1mlの溶液を皮膚に塗布した.紫外線照射後も皮膚の力学的特性を評価するために,陰圧負荷試験を実施した.陰圧負荷試験装置は,プローブ型赤外線距離センサや圧力計などを用いて自作した.この装置によって,マウスが生存する状態において,皮膚の変形挙動を計測することが可能である.得られたデータから,最大圧力とその際に生じる皮膚の変形から剛性を算出した.また,圧力を開放した後に現れる粘弾性回復の挙動を近似式で表し,粘弾性回復時定数を求めた.吸引負荷試験から得られた皮膚剛性は,UV群でControl群よりも高値であったが,UV+ベータ群の値はControl群と同程度であった.粘弾性回復時定数は,低値であるほど皮膚の変形回復が早いことを示しており,UV+ベータ群で低値となる傾向がみられた.これらから,紫外線照射で損傷した皮膚に対してエラスチン成分を塗布したことで,皮膚の伸展性が高くなり,粘弾性回復が短時間に現れることが明らかになった.皮膚は身体の最外層を覆っている臓器である.体表面から表皮,真皮,皮下組織の三層構造となっており,外力などの刺激から身体を保護する機械的防御や発汗による体温調節などの生理的に重要な機能を担っている.特に真皮は,細胞外マトリックスとそれを産生する細胞によって構成されており,皮膚全体の硬さや弾性などの力学的機能の大部分を担っている.真皮を構成する細胞外マトリックスの代表として,コラーゲンとエラスチンが挙げられる.コラーゲンは皮膚の剛性を主に支配し,皮膚の弾性や伸展性はエラスチンと強く関連すると考えられている.これらの成分は,紫外線曝露などによって生じる光老化に起因して変化することが知られている.その結果,皮膚の弾性や伸展性が変化していくと同時に,皺やたるみが出現する.本研究では,損傷した皮膚損傷の修復を促進させる有効成分の探索を行うための基礎データを得ることを最終目標として,ヘアレスマウスの背部皮膚に高強度紫外線を一定期間にわたって照射した後,紫外線の照射を停止してからの治癒期間において,エラスチン成分を塗布した皮膚組織に対し力学的試験を実施した.力学試験として,吸引負荷試験を行っており,吸引圧力と皮膚変形量の関係から組織の弾性係数を算出した.これらの結果より,損傷治癒過程にある皮膚の力学的特性に及ぼすエラスチン成分の影響について検討した.今回新たに実施したデータ解析手法によって,皮膚の材料特性である弾性係数を求めることができ,紫外線照射およびエラスチン塗布が皮膚の伸展性に及ぼす影響を定量的に評価することが可能であった.紫外線照射によって損傷したヘアレスマウスの背部皮膚の治癒過程において,エラスチン含有ワセリンを塗布した皮膚の弾性係数は,紫外線照射のみを施した群と比較して低値を示し,エラスチン成分が紫外線照射による皮膚の硬化を抑制する可能性があることが考えられた.
肺がんの予防要因を明らかにするためのコホート内症例対照研究

1)イソフラボン摂取量と肺がんとの関連について前向きコホート研究デザインにて検討し、未喫煙者でのみ肺がんリスクの低下が示唆された。2)女性においてコホート内症例対照研究デザインにて検討したところ、血漿イソフラボン類濃度による肺がんリスクの低下がしめされた。摂取量、血中濃度という異なる測定方法で一致してイソフラボンによる肺がんリスクの低下を示す関連性がみられ、イソフラボンが肺がんの予防要因である可能性がしめされた。血液中のイソフラボン類(ゲニステイン、ダイゼイン、イコール)と肺がんとの関連をコホート内症例対照研究デザインにより検討することが本研究の目的である。平成20年度は、症例・対照の選択および血漿中イソフラボン類の測定を行った。症例・対照については、1990年と1993年からすでに開始されているコホート研究(JPHC Study)の対象者である40歳以上70歳未満(調査開始時年齢)の住民約14万人のうち、質問票に回答し血液サンプルが得られた者のなかから選択した。症例は追跡期間中の肺がん罹患例とし、対照は、年齢・居住地・喫煙状況・採血年月日・採血時間・空腹時間を症例にマッチングして選択した。つぎに、選択した症例・対照について研究開始時に採取され凍結保存されている血液サンプルを用い、血漿中イソフラボン濃度の測定を行った。平成21年度は、測定した血漿中イソフラボン濃度と肺がん罹患との関連を検討する予定である。血漿中イソフラボン濃度と肺がん罹患との関連を報告した前向き研究は世界でもまだ報告されていないため、本研究により肺がんの予防要因についての新たな知見が得られることが期待される。また、JPHC Studyの対象者全体について質問票から推定されるイソフラボン摂取量と肺がんとの関連についても検討する予定である。さらには、質問票からのイソフラボン摂取量と血漿中イソフラボン濃度の比較を行い、イソフラボンの吸収や代謝の影響について考察する。血漿イソフラボン類(ゲニステイン、ダイゼイン、グリシテイン、イコール)濃度と肺がんリスクとの関連について、コホート内症例対照研究デザインにて検討をおこなった。本検討とあわせてコホート全体の対象者で質問票から推定されるイソフラボン摂取量と肺がんとの関連についても解析をおこなったが、男性、女性とも未喫煙者でのみイソフラボン摂取による肺がんリスクの低下が示唆されたため、血漿イソフラボン類濃度の検討については未喫煙者が大部分をしめる女性に焦点をおいた。症例・対照については、1990年と1993年からすでに開始されているコホート研究(JPHC Study)の対象者である40歳以上70歳未満(調査開始時年齢)の住民約14万人のうち、質問票に回答し血液サンプルが得られた女性のなかから選択した。症例は追跡期間中の肺がん罹患例とし、対照は、年齢・居住地・喫煙状況・採血時期・採血時刻・空腹時間を症例にマッチングして選択した。つぎに、症例126名(未喫煙者117名、93%)・対照252名について研究開始時に採取され凍結保存されている血液サンプルを用い血漿イソフラボン類濃度を測定し(血漿ゲニステイン濃度中央値:症例72.0ng/ml、対照72.4ng/ml)、肺がんとの関連について解析をおこなった。検討した血漿イソフラボン類のうちゲニステインと肺がんリスクとの間に負の関連を認めた。本研究ではイソフラボン摂取量、血中イソフラボン濃度という異なる測定方法で一致してイソフラボンによる肺がんリスクの低下を示唆する関連性がみられた。これらの結果はイソフラボンが肺がんの予防要因である可能性を支持するものであった。