hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
水棲型嗅覚受容体巨大遺伝子クラスターを支配する発現制御領域の解析

本年度までに、先行研究から発現制御領域として着目していた配列について、マウストランスジェネシスによる種々のレポーターアッセイと情報学的解析を実施することにより、初めてClass I遺伝子の発現制御領域を同定した。作出したノックアウトマウスの解析から、JエレメントがClass I遺伝子のエンハンサーとして機能していることを見出し、一連の成果を発表することができた。また、Jエレメントの制御に関わることが予想された転写因子の嗅覚系特異的欠損マウスを作出し、その解析にも取り掛かっている。以上より、本年度においては当初の計画以上に進展していると判断される。一方で、Class I嗅覚受容体遺伝子クラスターは少なくとも数個のエンハンサーによって制御されていることが明らかとなったため、Class I嗅覚受容体遺伝子発現制御機構の全容解明に向けて、他のエンハンサー領域の同定が新たな課題となった。そこで、Jエレメント以外のClass I遺伝子エンハンサーについても候補を探索し、見出した配列についてはノックアウトマウスの作出と解析を進めているところである。マウスゲノム最大の遺伝子ファミリーを形成する嗅覚受容体は、系統学的に、魚類まで保存されたファミリーを含むClass I(水棲型)と、陸棲生物特異的なClass II(陸棲型)に分類される。Class II遺伝子がほぼすべての染色体上に散在しているのに対して、Class I遺伝子は約300万塩基対の単一の巨大遺伝子クラスターを形成する特徴的なファミリーである。嗅神経細胞における「1細胞1受容体」ルールから、Class I遺伝子クラスターを支配する共通の発現制御領域の存在が推定されているが、同定には至っていなかった。本研究課題では、発現制御領域を同定し、さらにその機能を明らかにすることで、他に類を見ない巨大遺伝子クラスターを形成するClass I嗅覚受容体遺伝子の発現制御機構を解明することを目的とする。昨年度までに、Class I遺伝子クラスターを制御する新たな嗅覚受容体遺伝子発現制御領域「Jエレメント」の同定に成功し、エンハンサーを介した嗅覚受容体遺伝子の発現制御モデルを提唱した。Jエレメントはこれまでに例のない長距離作用性エンハンサーであるため、本年度はその制御機構の解明を目指し、Jエレメントならびにその他推定制御因子の機能解析を実施した。嗅覚受容体遺伝子の網羅的遺伝子発現解析やトランスジェニックマウスを用いたレポーターアッセイにより、Jエレメント内の機能領域と他の制御因子を明らかにしつつある。関連学会において発表をおこなったが、論文投稿には至っていないため、研究課題の実施期間を翌年度まで延長することとした。本研究課題では(1)Class I嗅覚受容体発現制御領域の同定、(2)発現制御領域の機能解析、(3)転写因子によるClass I嗅覚受容体遺伝子発現への寄与、の3つの小課題を計画している。
近現代日本の医療費支払いシステムと医療供給システム―地域社会の視点から―

本研究においては、明治大正期については北海道地域、戦後期については名古屋地域において史料を収集・整理し、近現代日本の医療費支払いシステムと医療供給システムについて地域社会レベルにおける事例研究を進め、それぞれの研究成果について発表を進めつつある。また、近現代日本における医療の実態を明らかにするためには、事例をさらに多く積み重ねる必要があるため、次年度以降の科研費研究において新たな事例研究に取り組むこととする。本研究の目的は、近現代日本における医療の供給および受療の経済的実態を、可能な限り構造的に明らかにすることである。そのねらいは、「医療崩壊」が叫ばれる今日の医療問題に対して、歴史認識に裏打ちされた現状認識を提供することにあり、そのためには、医療供給と医療受療の拡大局面としての近現代日本の経験を解明する必要がある。その際、当該研究領域における先行研究が十分に発展していない現状を踏まえ、基礎的な事実を明らかにしつつそこから全体の構造を展望するという方法をとる。本年度は基礎的な文献史料の収集および地域史料の収集・分析を行った。本研究が主要なフィールドとして設定している北海道地域については、統計資料を中心に史料を収集し、地域の社会経済構造の分析を進めた。このことによって、既に収集済みの医療供給主体および医療需要主体の史料と併せ、明治大正期の医療の実態を分析する準備が整った。また、戦後の医療問題を検討するフィールドとして設定している名古屋地域については、1930年代から1960年代にかけての行政史料を収集し、当該地域の医療問題の政治行政面での展開を時系列で整理する作業が進展した。さらに、新たな史料を発掘して調査のフィールドを開拓すべく、新潟県魚沼地域および佐渡地域の史料収集を試みた。佐渡地域については文献史料の収集、魚沼地域については一次史料の収集ができ、かなりの成果があったため、今後の調査フィールドに組み入れていく。そこで、本年度も文献史料の収集および地域史料の収集・分析を行った。明治大正期の医療実態を解明するフィールドとして設定している北海道地域については、すでに収集整理を終えている基本史料の周辺を固めるため、地域の社会経済構造を明らかにする史料を収集するべく根室地域において史料調査を行った。戦後の医療問題を検討するフィールドとして設定している名古屋地域については、大都市における国民健康保険制度実施の前提となる社会経済構造と、市行政および市議会の政策動向について重点的に史料調査を実施した。またその研究成果を学会において口頭発表し、論文発表の準備を進めている。機器および資料の整備を含む研究環境の整備が一段落した。研究機器の整備により、デジタル形態で保有している史料の整理がほぼ終了し、分析作業が進捗した。また基礎的な文献及び史料の整備により、研究仮説の補強および部分的な実証が進展している。さらに旅費の使用により、新たな史料の収集および研究の中間発表(口頭)を行うことができた。25年度が最終年度であるため、記入しない。基礎的な文献や機器類の整備が一段落したことから、本年度よりも史料調査の回数を増加する。とりわけ基礎となる一次史料を補強する地域史料の収集が不可欠であり、短い日程でも調査出張を繰り返すこととする。一次資料の分析および地域社会経済構造の分析を進め、まとまった成果から研究発表していく。
キタゴヨウ集団におけるハイマツのミトコンドリアDNAの遺伝子浸透の解析

前年度では葉緑体DNAのモノヌクレオチドリピート領域をSSCP解析することで,キタゴヨウ種内の多型の検出を行った.この多型の塩基配列レベルでの変異パターンを調べるために,主要な4つのハプロタイプについてシーケンスを行った.その結果,実際にGリピートやAリピートといったモノヌクレオチドリピート領域の繰り返しの数に変異が生じていることが明らかとなった.キタゴヨウ集団の葉緑体DNAの遺伝的多様性は,ハイマツmtDNAの浸透の生じている集団と生じていない集団とでは差がほとんどなかった.集団間の分化の程度では,浸透集団ではGST=0.067,非浸透集団でGST=0.040であった.浸透集団間の方がGST値が大きいが,それでも0.1以下であり,大きな分化とは言えない.このことから,創始者効果といった大規模な遺伝的浮動が,mtDNAの浸透の原因になっているとは考えにくい.他の要因として,地史的な原因を考えてみた.本研究で特定されたmtDNAの遺伝子浸透の生じている地域は、東北南部に限られている.緯度ごとにハイマツが分布可能な面積を計算してみると,本州の中で,ちょうどこの地域のみ面積が小さい.最終氷期以降の気候変動の中で,縄文海進(約6千年前)のころには気候の温暖化によって山岳の垂直分布帯は,200-400m上昇したと考えられている.この時期,東北南部の規模の小さい山岳では,山頂効果によって遺存したハイマツをキタゴヨウが取り囲むような状況が生じ,結果として特に大規模に交雑が生じたのではないかと考えられる.形態的中間型の細胞質ゲイムのタイプは、東北南部ではmtDNAがハイマツ型・cpDNAがキタゴヨウ型という細胞質キメラが優占していた.しかし,東北北部の栗駒や八甲田では,両細胞質ともハイマツ型のものが多い.このような雑種の細胞質型の違いも,本州の中での山系の規模と関係するかもしれない.東北北部ではハイマツ集団の規模が大きいため,細胞質キメラがハイマツけの花粉を受けて,二次的に両細胞質ともハイマツ型になったと考えられる.東北の奥羽山脈の南部から中部にかけての地域においては,ハイマツとキタゴヨウの浸透性交雑の結果,キタゴヨウ集団におけるハイマツのミトコンドリアDNA(mtDNA)の細胞質捕獲が生じている.特に蔵王から栗駒山にかけての地域では,ほぼ完全なmtDNAの置換が生じていることを明らかにした(Senjo et al.1999).この細胞質捕獲に際して,キタゴヨウ集団に大きな遺伝的浮動が生じた可能性を検証するため,このmtDNAの捕獲の生じている3集団と,この地域以外の3集団の遺伝的多様性を,葉緑体DNAのモノヌクレオチドリピート領域の変異(cpDNA SSRs)を用いて定量化することを試みた.方法としては,Vendramin(1996)らの開発したプライマーセットを用いてPCRを行い,その多型をSSCP法で調べた.3種類のプライマーセットを用いた結果,6集団全体で14種類の葉緑体ハプロタイプを認識できた.一集団内のハプロタイプ数は27で,Haplotype Diversity(h)は0.5000.802となった.この2つの遺伝的多様性のパラメーターについては,捕獲の生じている集団とそれ以外で有意な差は検出できなかった.さらに,cpDNAのハプロタイプ頻度の集団間分化をReynolodsの遺伝的距離で定量化し,NJ法で樹形図にしてみた.その結果,捕獲の起こっていない石川,富山,秋田の集団が小さくまとまるのに対し,捕獲の起こっている宮城の3集団は枝長が大きく,分散することがわかった.この結果は,これら捕獲の起こっている集団に遺伝的浮動が働いて,ハプロタイプ頻度が変化したことを示唆していると考えられる.今後,核遺伝子のマーカーについても同様な解析を行う予定である.前年度では葉緑体DNAのモノヌクレオチドリピート領域をSSCP解析することで,キタゴヨウ種内の多型の検出を行った.この多型の塩基配列レベルでの変異パターンを調べるために,主要な4つのハプロタイプについてシーケンスを行った.その結果,実際にGリピートやAリピートといったモノヌクレオチドリピート領域の繰り返しの数に変異が生じていることが明らかとなった.キタゴヨウ集団の葉緑体DNAの遺伝的多様性は,ハイマツmtDNAの浸透の生じている集団と生じていない集団とでは差がほとんどなかった.集団間の分化の程度では,浸透集団ではGST=0.067,非浸透集団でGST=0.040であった.浸透集団間の方がGST値が大きいが,それでも0.1以下であり,大きな分化とは言えない.このことから,創始者効果といった大規模な遺伝的浮動が,mtDNAの浸透の原因になっているとは考えにくい.他の要因として,地史的な原因を考えてみた.本研究で特定されたmtDNAの遺伝子浸透の生じている地域は、東北南部に限られている.緯度ごとにハイマツが分布可能な面積を計算してみると,本州の中で,ちょうどこの地域のみ面積が小さい.最終氷期以降の気候変動の中で,縄文海進(約6千年前)のころには気候の温暖化によって山岳の垂直分布帯は,200-400m上昇したと考えられている.この時期,東北南部の規模の小さい山岳では,山頂効果によって遺存したハイマツをキタゴヨウが取り囲むような状況が生じ,結果として特に大規模に交雑が生じたのではないかと考えられる.

形態的中間型の細胞質ゲイムのタイプは、東北南部ではmtDNAがハイマツ型・cpDNAがキタゴヨウ型という細胞質キメラが優占していた.しかし,東北北部の栗駒や八甲田では,両細胞質ともハイマツ型のものが多い.このような雑種の細胞質型の違いも,本州の中での山系の規模と関係するかもしれない.東北北部ではハイマツ集団の規模が大きいため,細胞質キメラがハイマツけの花粉を受けて,二次的に両細胞質ともハイマツ型になったと考えられる.
環境行動研究による住空間デザイン方法

■研究会の概要研究会及びワーキングを開催し、各委員それぞれの立場から以下の項目に関して報告があり、討議を行った。1.環境行動デザイン研究、及びそこからみた都市居住環境の問題と課題2.環境及び環境行動(人間と環境の関係)の質・価値をとらえる概念と方法論3.住環境形成へ向けての具体的な方法論同時に、現在行われている様々な住空間デザイン方法との対比を通じて、これらの項目の取り組むべき問題(研究課題)について各委員の間で、議論・検討が重ねられた。■研究成果の概要以上の討議より、現在の住空間デザイン方法において、以下のような点が不十分であることが明らかになり、居住者個人個人にとって真に豊かな住空間・居住環境を作りあげていく上で、今後の重要な課題であることが認識された。・環境行動の視点からの生活環境の構造と質の解明・住環境に関する価値・情報を共有する方法論・住環境計画・設計における居住者・研究者・設計者のあり方・住環境を運営していく方法論さらに、重点領域研究応募の準備として、それぞれの項目についてどのような点が解明されるべきかの議論が繰り返され、具体的な問題群に整理された。また、これらの課題を解決し、住空間の質を向上させていくためには、これまでのような各専門分野個々からのアプローチではなく、人間と生活環境の関係に重点を置いた環境行動研究のパースペクティブを基礎とした、人文・社会科学など広範な分野の共同によるアプローチが必要であることが分かった。
心筋梗塞発症と密接に関連した遺伝性高脂血症家畜の開発

1.高脂血症家兎の選抜育種WHHL(Watanabe heritable hyperlipidemic)家兎の選抜育種を行った。生後2ヵ月目に採決し血清コレステロール値が400mg/dl以上の家兎をWHHLホモ接合体,400mg/dl未満をヘテロ接合体と判定した。3ヵ月齢ではホモ接合体の血清コレステロール値は7001050mg/dlを示し,ヘテロ接合体は300mg/dl以下であった。3ヵ月齢時に調べた血清トリグリセリド値はホモ接合体で2001000mg/dlの幅広い範囲に分布した。そこで、ホモ接合体のうちトリグリセリドが高い個体について選抜交配し、高トリグリセリド血症の遺伝形式を検討した。高コレステロール血症と高トリグリセリド血症を併せ持つ系を確立する目処がついた。トリグリセリドが低い素因についても系の確立を試みた。これらの純系動物について大動脈粥状硬化病変、冠動脈硬化病変、心筋壊死巣の広がりと程度について対比検討中である。すなわち、高コレステロール血症と高トリグリセリド血症のいずれが虚血性心疾患、特に心筋梗塞の発症に関与するかが明らかになるものと期待される。2.軟X線撮影装置の導入による冠動脈局在病変の検出と分布の解析本年度の設備として軟X線撮影装置を設備した。Ba-ゼラチン混合液やミクロフィルを冠動脈に注入することによって冠動脈の起始部から微細な血管に至るまでの冠動脈造影が可能となった。WHHLの冠動脈狭窄病変は冠動脈の起始部に好発した。1)WHHL家兎の脂質分析生後2ヵ月目に採血し、血清コレステロール値が400mg/dl以上の家兎をWHHLホモ接合体、400mg未満をヘテロ接合体と判定した。3ヵ月齢で再度採血し、血清コレステロール値を調べたところ、ホモ接合体7001050mg/dlの間に分布し、ヘテロ接合体はいずれも300mg/dl以下であり、最頻値100mg/dlであった。3ヵ月齢のトリグリセライドはホモ接合体は2001000mg/dlの幅広い範囲に分布し、ヘテロ接合体は200mg/dl以下で最頻値は100mg/dlであった。トリグリセライド値はコレステロールと異なる遺伝形式と考えられた。2)心筋梗塞発症と関連した遺伝性高脂血症家兎の開発WHHL家兎の脂質分析からトリグリセライド値が2001000mg/dlの間に幅広く分布することが明らかになったので、超高トリグリセライド値を恒常的に発現する群と200mg/dl前後の比較低値を発現する群を選抜育種中である心筋梗塞の発症にトリグリセライド値がどの程度影響を及ぼすかについて810ヵ月齢を対象に検索予定である。トリグリセライドと心筋梗塞の発症との関連から新しい系統の選抜指針をさらに特定する。生後2ケ月目に採血し血清コレステロール値が400mg/dl以上の家兎をWHHLホモ接合体,400mg/dl未満をヘテロ接合体と判定した。3ケ月齢ではホモ接合体の血清コレステロール値は7001050mg/dlを示し,ヘテロ接合体は300mg/dl以下であった。ホモ接合体のうちトリグリセリドが高い個体について選抜交配し,高トリグリセリド血症の遺伝形式を検討した。

すなわち、高コレステロール血症と高トリグリセリド血症のいずれが虚血性心疾患、特に心筋梗塞の発症に関与するかが明らかになるものと期待される。2.軟X線撮影装置の導入による冠動脈局在病変の検出と分布の解析本年度の設備として軟X線撮影装置を設備した。Ba-ゼラチンやミクロフィルを冠動脈に注入することによって冠動脈の起始部から微細な血管に至るまでの冠動脈造影が可能となった。
英語史におけるポライトネス・ストラテジーの変化と原因

平成30年度においては、話し手が聞き手に対する「約束表現」における調査を行った。研究方法としては、中英語期から後期近代英語期までの文献における「約束表現」を調査した。特に、発語内行為として「約束」の機能を果たしていると思われる動詞と1人称人称代名詞が結びついている表現を丁寧に拾い上げた。このアプローチは、歴史語用論における「通時的な機能ー形式の対応づけ」(Diachronic Function-to-Form Mapping)の手法である。中英語期においては、あまり「約束」の機能を果たしている表現が少なく、"Iplight you(thee)"のような表現がみられた。ポライトネスの観点からは、ポジティブ・ストラテジーにもネガティブ・ストラジーにも分類できないような例が多くみられた。初期近代英語期になると、"I promise you"の表現が次第に増加するという傾向がみられた。そのほかにも"I swear"や"Iwarrant you"のような様々な動詞がみられるようになった。後期近代英語期には、小説というジャンルも現れるため、さらに「約束」表現が増えていく様子が見られた。このような「約束」という機能を表す表現を使用する話し手と聞き手との社会的関係を親子、夫婦、恋人、兄弟、友人というような観点からみると、それぞれの場面において、相手との心的距離を離したり縮めたりするために「約束」表現もポライトネスの一環として用いられていることが明らかになった。本研究は、英語史におけるポライトネス・ストラテジーの変化を考察することであり、中英語期から後期近代英語期にかけて、各時代の人々がどのようなポライトネスに配慮した話し方をしているかを明らかにし、さらには通時的にどのように変化してきたかを分析するものである。平成27年度においては、初期近代英語期における「付加疑問文」に関する論文を執筆した。「付加疑問文」もポライトネス・ストラテジーの一つであり、話し手と聞き手との関係を知ることができた。また、平成27年度においては、中英語期から初期近代英語期における「依頼表現」のデータを収集した。中英語期では、法助動詞を用いたCould youやWould you please?といった表現はまだ発達していない。当時はPrayなどの動詞を用いて、I prayの表現形式が多く見られた。初期近代英語期においても、その傾向が見られるが、後期英語期になると次第に法助動詞が発達してきて、法助動詞を用いた表現が増加する。ポライトネスの観点から、Brown and Levinsonのポライトネス・ストラテジーに従い、ポジティブ・ストラテジーに相当するか、またはネガティブ・ストラジーに相当するかを分類した。特に演劇においては、話し手と聞き手との社会的な関係に着目して、親子間、夫婦間、恋人間、兄弟間、友人間、国王と家来、主人と召使、召使同士などに分類して特徴を明らかにした。先に提出した研究計画書に従って、まず平成27年度においては、英語史の文献に見られる「依頼表現」を拾い出し、どのようなポライトネス・ストラテジーが機能しているかを調査した。そのため、進捗状況としては、順調に進展していると思われる。本研究の全体構想は、英語史におけるポライトネス・ストラテジーの変化を考察することであり、中英語期から後期近代英語期にかけて、各時代の人々がどのようなポライトネスに配慮した話し方をしているかを明らかにし、さらには通時的にどのように変化してきたかを分析することである。また、英語史におけるポライトネス・ストラテジーの変化がいつごろどのようにして起こり、その原因は何かを探ることである。平成28年度においては、「敬意表現」を表す言語表現を、中英語期から後期近代英語期までの文献から収集した。具体的には、目下である話し手が目上である聞き手に対して、または、対等な相手に対して、どのような場面で、どのような敬語または丁寧表現を用いているかを調査した。初期近代英語期の劇作品においては、敬語というよりも、呼びかけ語に特徴があり、ファーストネームだけではなく、タイトルなどとともに使われている例が多く見られた。ポライトネスの観点からは、呼びかけ語に関しては、非常に丁寧であるが、伝達形式に関しては、ポジティブポライトネスを表しているような例も見られ、呼びかけ語は一種の役割語としての機能もあることが明らかになった。「敬意表現」といっても当時の敬意表現とはどのようなもので、現代英語とはどのように異なるのかということも非常に難しい問題なので、用例をなるべく幅広く収集した。先に提出した研究計画書にしたがって、平成28年度においては、中英語から後期近代英語にみられる「敬意表現」を拾い出し、どのようなポライトネス・ストラテジーが働いているかを考察した。そのため、現在までの進捗状況としては、おおむね順調に進展していると思われる。本研究は、英語史におけるポライトネス・ストラテジーの通時的な変化を考察することであり、中英語期から後期近代英語期にかけて、各時代の人々がどのようなポライトネスに配慮した話し方をしているかを明らかにして、さらには、いつごろからどのような変化が見られるかを考察することである。平成29年度においては、主に、「謝罪表現」を取り上げて、中英語期から初期近代英語期までの表現を収集して考察した。中英語でも多くみられたのが、Pardon me.やYou pardonme.のような2人称代名詞が主語となる表現であり、話し手が聞き手より力を持っている時や、話し手と聞き手とが対等な場合などに見られた。これは初期近代英語期においても同様であった。

また、相手に配慮するときは、pardon meの前にI pray youのような表現を付加して、I pray you pardonme.のような表現も見られた。また、I am sorry.の表現は通時的に見ると、次第に増加する傾向が見られた。歴史的にみると、You pardon me.のような2人称主語からI am sorry.のような1人称主語へと変化していく過程があり、ポライトネスの観点から「謝罪表現」を見ていくと興味深い傾向が見られた。先に提出した研究計画書にしたがって、平成29年度においては、中英語期から初期近代英語期にみられる「謝罪表現」を収集し、どのようなポライトネス・ストラテジーが働いているかを考察した。そのため、現在までの進捗状況としては、おおむね順調に進展していると思われる。平成30年度においては、話し手が聞き手に対する「約束表現」における調査を行った。研究方法としては、中英語期から後期近代英語期までの文献における「約束表現」を調査した。特に、発語内行為として「約束」の機能を果たしていると思われる動詞と1人称人称代名詞が結びついている表現を丁寧に拾い上げた。このアプローチは、歴史語用論における「通時的な機能ー形式の対応づけ」(Diachronic Function-to-Form Mapping)の手法である。中英語期においては、あまり「約束」の機能を果たしている表現が少なく、"Iplight you(thee)"のような表現がみられた。ポライトネスの観点からは、ポジティブ・ストラテジーにもネガティブ・ストラジーにも分類できないような例が多くみられた。初期近代英語期になると、"I promise you"の表現が次第に増加するという傾向がみられた。そのほかにも"I swear"や"Iwarrant you"のような様々な動詞がみられるようになった。後期近代英語期には、小説というジャンルも現れるため、さらに「約束」表現が増えていく様子が見られた。このような「約束」という機能を表す表現を使用する話し手と聞き手との社会的関係を親子、夫婦、恋人、兄弟、友人というような観点からみると、それぞれの場面において、相手との心的距離を離したり縮めたりするために「約束」表現もポライトネスの一環として用いられていることが明らかになった。今後については、交付申請書の通りに、英語史におけるポライトネス・ストラテジーについての調査を行っていくつもりである。研究計画の変更や研究を遂行する上での課題等は特にない。今後については、交付申請書の通りに、英語史におけるポライトネス・ストラテジーについての調査を引き続き行っていくつもりである。購入を考えていた図書が絶版のため購入できなかったため。
気管支喘息感受性遺伝子の探索

喘息の気道炎症や気道過敏性において重要な役割が推測される分子群の中で、初年度にはinducible Nitric Oxide Synthase(iNOS)、Regulated upon activation, normal T-cell expressed and secreted(RANTES)、さらにはMuscarinic receptor M1、M2(CHRM1、2)の遺伝子の意義を検討した。iNOS遺伝子及びRANTES遺伝子のそれぞれのプロモーター領域に存在する多型は、転写効率の多寡に遺伝的な影響を与えることが知られている。また我々は機能的意義は未だ不明だがCHRM1とCHRM2遺伝子のコード領域にそれぞれ一塩基置換による遺伝子変異を発見した。約300名の喘息患者と約300名の健常人の検討から、iNOSプロモーター領域の機能的変異はアトピーの有無に、RANTES及びCHRM1、CHRM2の変異は気管支喘息の発症や気道過敏性の亢進に寄与していることを発見した。これらの一連の結果は2001年5月アメリカ胸部疾患学会、2001年11月日本アレルギー学会総会と2002年3月アメリカアレルギー学会(AAAAI)で学会発表すると同時に誌上発表した(J Allergy Clin Immunol2001:108(5):810-4.)。次年度も引き続き喘息の気道炎症や気道過敏性において重要な役割が推測される分子群の遺伝子多型が喘息やアレルギーの発症や病態に与える影響を検討した。特にRANTES、さらにはMacrophage migration inhibitory factor(MIF)の遺伝子の意義を検討した。RANTES遺伝子及びMIF遺伝子のプロモーター領域に存在する多型は、転写効率の多寡に遺伝的な影響を与えることがin vitroの検討で知られている。またこれらの多型はこれまでにアトピー性皮膚炎、サルコイドーシス、リウマチ性関節症などの種々の免疫炎症性疾患の発症や病態に影響を与えていることが既に報告されている。我々は約300名の喘息患者と約300名の健常人の検討から、RANTESプロモーター領域の機能的変異は気管支喘息、なかでも40歳以上からの喘息の発症に、MIF遺伝子の変異は抗原特異的なIgE応答の有無に寄与していることを発見した。これらの一連の結果は2002年3月アメリカアレルギー学会(AAAAI)、2002年11月日本アレルギー学会総会などで学会発表すると同時に誌上発表した(Am J Respir Crit Care Med 2002;166(5):686-90)。
抗癌剤耐性トランスポーターABCB1の薬剤排出メカニズムの解明

ABCB1は癌細胞に過剰発現するトランスポーターである。ABCB1は抗癌剤を細胞内から細胞外へ排出することで、多剤耐性の一因となっているが、その輸送に関するメカニズムは明らかになっていない。本研究は、ABCB1の基質結合部位の4つのアミノ酸(F728/F978/Y310/Y953)に注目し、そのアミノ酸の変異がトランスポート機能に与える影響について解析することを目的としている。初年度は、4つのアミノ酸の変異をbacMam baclovirus transductionsystemを用いてHela細胞に発現させ、トランスポート機能をFlow cytometryを用いて解析した。その結果、4つ全ての変異を持った場合(以下SM mutantと示す)で検討に用いた10種の蛍光基質のトランスポート機能を抑制することが判明した。また、2つのフェニルアラニンの変異(F728/F978;以下FF mutantと示す)の場合でも同等の結果が得られた。以上のことから、4つのアミノ酸全ての変異、少なくとも2つのフェニルアラニンの変異がABCB1のトランスポーター機能に影響をもたらすことが明らかとなった。今後はSM、FF mutantの2種の変異に注目して実験を行う方針とした。これら2種の変異がATPase活性に与える影響を調べるため、ATPアーゼアッセイを行い、また、これらの変異とABCB1の基質がどのように作用するかをABCB1の放射活性を持つ基質であるIAAPを用いてIAAP結合アッセイを行う予定である。さらに、4つのアミノ酸とABCB1の基質である薬物との相互関係を明らかにするため、in silico解析も行う予定である。初年度はFlow cytometryを用いたトランスポート解析を主に行った。その結果、4つのアミノ酸全ての変異、少なくとも2つのフェニルアラニンの変異がABCB1のトランスポーター機能に影響をもたらすことが明らかとなった。今後は主にSMとFF mutantという2つの変異に注目して実験していくため、効率的に研究を進めていくことが可能と考えられる。今後はSM、FF mutantの2種の変異に注目して実験を進める。SM、FFの変異がATPase活性に与える影響を調べるため、ATPアーゼアッセイを行い、また、これらの変異とABCB1の基質がどのように作用するかをABCB1の放射活性を持つ基質であるIAAPを用いてIAAP結合アッセイを行う予定である。その後、論文作成を進めていく予定である。
クロイツフエルト・ヤコブ病発症因子の解明

亜急性海綿状脳症(以下SSEと略す)の発症機序を明らかにする手段の一つとして、発症動物脳における発症因子の細胞内局在性を検索してきた。昨年度の本特定研究において発症因子がミクロソーム画分に高濃度に存在することを示唆するデータを得たが、本年度は、その後の研究結果を報告するとともに、我々の研究室においてヒトのクロイツフェルト・ヤコブ病(以下CJDと略す)をマウスへ伝播することに成功したので報告する。1)SSEマウス脳の庶糖密度勾配遠心法により調製した5つの顆粒画分と可溶画分のうち、ミクロソーム画分は最も高い感染能を示した。発症因子数の細胞内分布をタンパク質量を基礎として換算すると、ミクロソームにおける発症因子数を1000とした場合の相対分布は神経終末とミエリンが400、ミトコンドリアと核が40であった。これらの係数に潜伏期間と発症率のfactorを考慮すると、発症因子がミクロソーム画分に局在することが明らかとなった。次にミクロソーム画分の組織化学及び電顕的検索を行った。ミクロソームをDylon染色した結果、アミロイド陽性物質が散見されたが、ネガティブ・ステンによる電顕検索ではSAF様の桿状構造は見出されなかった。以上の結果からミクロソーム画分が示す感染性と桿状構造との間に直接的な関係は証明されなかった。2)臨床的にCTDと診断された2例の患者脳のホモジネートをマウス脳内に接種し、1例は433日目、他の1例は856日の潜状期間で伝播させることに成功した。最初の1例は更にマウスへ継代接種し、178日目でSSEが発症することを確認した。いずれのマウスも組織学的に脳の海綿状態を確認している。
衝撃波管による流体の相変化現象の分子熱流体力学的研究

本研究は,気液界面で過飽和状態にある蒸気の相変化(凝縮)現象,とくに,相変化速度,相変化のメカニズム,凝縮係数とその温度・密度依存性,等を分子レベルで解明することを目的としてなされたものである.強い会合性のために相変化に影響を与えると予想されるメタノール蒸気および酢酸蒸気に対して,衝撃波管による実験,気体力学の理論解析,分子動力学シミュレーションを行い,以下のことを明らかにした.1.酢酸蒸気は強い会合性のために常温においても二量体を形成し,実験データの整理および凝縮係数の決定に必要な諸熱物性値は化学平衡論に基づいて求めなければならない.また,メタノール蒸気はほぼ単量体として扱える.2.メタノールおよび酢酸のいずれの蒸気においても,凝縮係数は気液界面での蒸気の温度および密度に強く依存している.すなわち,凝縮係数は温度が高いほど大きく,密度が高いほど小さくなる.全体に,凝縮係数は酢酸蒸気の場合の方がメタノール蒸気の場合よりも大きい.3.メタノールの相変化の時空相関現象は,凝縮分子により液体分子の蒸発が影響を受け,凝縮後5ps程度以下の時間範囲では蒸発の割合が低く,約10ps経過後最も高くなり,その後時間の経過とともに減少する.また,空間的には凝縮位置から離れるにしたがい蒸発分子に対する凝縮分子の影響が弱くなる.以上の結果は,今後,相変化のメカニズムをモデル化する際にきわめて有用な知見を提供するものである.液体の蒸発・凝縮は理学,工学の広い分野における基礎プロセスの一つであるが,その分子論的メカニズムは今日に至るまでほとんど解明されていなかった.その理由とでぃて,蒸発・凝縮速度を正確に測定できる適切な実験方法および分子レベルで扱える理論的方法がなかったことを挙げることができる.本研究者らはこれまでに蒸発・凝縮とくに蒸気の凝縮係数を研究するために衝撃波を用いた新たな方法を開発し,この方法に気体力学解析による理論的根拠を与えるとともに,実際にメタノール蒸気の凝縮係数を測定した.本研究は本研究者らによるこれまでの研究成果を踏まえて,メタノール蒸気の凝縮係数の熱的非平衡度依存性を明らかにすることを目的としてなされたものである.以上の目的を達成するために,衝撃波管を用いてメタノール蒸気の凝縮係数を広範囲な熱的非平衡条件の下で測定して以下のことを明らかにした.1.凝縮係数は気液界面における蒸気の温度と液体の温度との比の増加とともに大きくなる.2.凝縮係数は気液界面における蒸気の数密度と液面温度での飽和蒸気の数密度の比の増加とともに小さくなる.また,これら凝縮係数の熱的非平衡度依存性は分子動力学法による蒸発・凝縮のシミュニレーションによっても確認された.この依存性は,単純液体(アルゴンなど)よりも会合性液体(メタノール,水など)の方が顕著であることがわかった.本研究は,気液界面で過飽和状態にある蒸気の相変化(凝縮)現象,とくに,相変化速度,相変化のメカニズム,凝縮係数とその温度・密度依存性,等を分子レベルで解明することを目的としてなされたものである.強い会合性のために相変化に影響を与えると予想されるメタノール蒸気および酢酸蒸気に対して,衝撃波管による実験,気体力学の理論解析,分子動力学シミュレーションを行い,以下のことを明らかにした.1.酢酸蒸気は強い会合性のために常温においても二量体を形成し,実験データの整理および凝縮係数の決定に必要な諸熱物性値は化学平衡論に基づいて求めなければならない.また,メタノール蒸気はほぼ単量体として扱える.2.メタノールおよび酢酸のいずれの蒸気においても,凝縮係数は気液界面での蒸気の温度および密度に強く依存している.すなわち,凝縮係数は温度が高いほど大きく,密度が高いほど小さくなる.全体に,凝縮係数は酢酸蒸気の場合の方がメタノール蒸気の場合よりも大きい.3.メタノールの相変化の時空相関現象は,凝縮分子により液体分子の蒸発が影響を受け,凝縮後5ps程度以下の時間範囲では蒸発の割合が低く,約10ps経過後最も高くなり,その後時間の経過とともに減少する.また,空間的には凝縮位置から離れるにしたがい蒸発分子に対する凝縮分子の影響が弱くなる.以上の結果は,今後,相変化のメカニズムをモデル化する際にきわめて有用な知見を提供するものである.
リーマン空間と部分多様体の大域的幾何学

研究代表者糸川銚は,Mをn次元リッチ曲率非負の完備非コンパクトリーマン多様体とするとき,もし,Mの体積増大度が1次より大であるか,又はその直径増大度が有界ならは,H(M;Z)={0}であるか,あるいはMの有限被覆空間は実直線をスプリットする,というR.Kobayashi氏との共同結果のアナウンスメントを発表した.詳細は現在執筆中である.また,L.Coghlan氏との共同研究である,リーマン多様体の極小超曲面の単射半径と安定性半径の評価は,応用としてCorletteの極小超曲面の有限性定理の簡単な最証明と共に,Kyushu J.Math.に掲載が決定された.K.Shiohama氏との共同研究では既に得られていた,リッチ曲率正の完備非コンパクト多様体上の完備極小超曲面の像の非有界性定理の証明より幾何学的測度論の利用を省くことに成功し,次の結果への拡張を得た.すなわち,正断面曲率の完備非コンパクト多様体上では,任意の余次元の完備極小多様体の像は非有界である.研究分担者西原賢は,無条件シャウダー基底を持つフレッシェ空間のラインハート領域における擬凸性と多項式展開可能な関数の存在領域であることの同値性を示し,発表した.また,T.Honda,M.Miyagi,M.Yoshidaとの共同研究では,C上の局所凸空間からC上の完備局所凸空間への写像は,weak typeの多項式写像ならば,有界集合上一様連続であることの証明に成功した.研究代表者糸川銚は,Mをn次元リッチ曲率非負の完備非コンパクトリーマン多様体とするとき,もし,Mの体積増大度が1次より大であるか,又はその直径増大度が有界ならは,H(M;Z)={0}であるか,あるいはMの有限被覆空間は実直線をスプリットする,というR.Kobayashi氏との共同結果のアナウンスメントを発表した.詳細は現在執筆中である.また,L.Coghlan氏との共同研究である,リーマン多様体の極小超曲面の単射半径と安定性半径の評価は,応用としてCorletteの極小超曲面の有限性定理の簡単な最証明と共に,Kyushu J.Math.に掲載が決定された.K.Shiohama氏との共同研究では既に得られていた,リッチ曲率正の完備非コンパクト多様体上の完備極小超曲面の像の非有界性定理の証明より幾何学的測度論の利用を省くことに成功し,次の結果への拡張を得た.すなわち,正断面曲率の完備非コンパクト多様体上では,任意の余次元の完備極小多様体の像は非有界である.研究分担者西原賢は,無条件シャウダー基底を持つフレッシェ空間のラインハート領域における擬凸性と多項式展開可能な関数の存在領域であることの同値性を示し,発表した.また,T.Honda,M.Miyagi,M.Yoshidaとの共同研究では,C上の局所凸空間からC上の完備局所凸空間への写像は,weak typeの多項式写像ならば,有界集合上一様連続であることの証明に成功した.
cMyc-LAT1 axisを基盤とした胸腺上皮性悪性腫瘍治療戦略の確立

胸腺癌における、癌細胞特異的発現を示すアミノ酸トランスポーターLAT1の発現ならびにその制御に関わる因子を明らかにすることを目的にして、胸腺癌由来培養細胞Ty82を用いた検討を行った。Ty82にLAT1は発現していた。LAT1の特異的阻害約であるJPH203にてTy82の発育は阻害された。JPH203は濃度依存的にTy82におけるS6 kinaseを脱リン酸化し、eukaryotic initiation factor or 4E-binding protein 1をリン酸化した。JPH203は、mTORの不活化を通してTy82の増殖を抑制した。ヒト検体でもLAT1の発現を胸腺癌に認めた。(1)胸腺上皮悪性腫瘍の病理組織切片を用いた癌遺伝子cMycおよび中性アミノ酸トランスポーターLAT1遺伝子発現の解析:期間1年目は、LAT1の胸腺上皮細胞への発現を解析する病理検体の収集と、遺伝子発現と予後の検討を行なえるデータベース作成を行なった.2年目である今年度は、腫瘍細胞での遺伝子発現と病理学的悪性度、予後に関して研究中である。(2)胸腺上皮悪性腫瘍由来培養細胞を用いたL型アミノ酸輸送特性の解析:マウス胸腺種EL4細胞を入手し、代表的中性アミノ酸であるL-ロイシンの放射線標識体を用いたトレーサー実験を行ない、マウス胸腺腫細胞EL4への取り込み確認を行なった。(3)胸腺上皮悪性腫瘍由来培養細胞を用いたcMycおよびLAT1発現の解析:マウス胸腺腫細胞EL4からmRNAを抽出し、cDNAを合成して、cMyc、LAT1を初めとしたアイソフォームLAT1-4とシャペロンタンパク質4F2hcのリアルタイムPCR機器を用いた遺伝子発現解析を実行中である.(4)cMycおよびLAT1 siRNAによる腫瘍細胞増殖抑制効果の検討:癌遺伝子cMycおよび癌細胞におけるメインの必須アミノ酸トランスポーターであるLAT1のタンパク質発現を、それぞれの特異的siRNAのリポフェクション法による遺伝子導入で減少させ、増殖抑制が生じることをマウス胸腺腫細胞EL4を用いてin vitroで実証実験中である.胸腺癌における、癌細胞特異的発現を示す中性アミノ酸トランスポーターLAT1の発現の有無、ならびにその発現制御に関わる癌遺伝子cMycの関連性(cMyc-LAT1 axis)を明らかとすることを目的として、胸腺癌由来培養細胞Ty82を用いた検討を行った.LAT1の特異的阻害薬であるJPH203は、胸腺癌細胞に対する抗腫瘍効果を持つことが示唆された.一方、胸腺腫にはLAT1の発現を認めなかった。分担者による基礎研究は概ね順調に進行している。今年度は、ヒト標本を用いた検討を行っていく。医学胸部外科学呼吸器外科学今年度は、ヒト標本検体を用い、LAT1の発現と、臨床腫瘍学的悪性度との関連を明らかにする。臨床検体を用いた検討の開始が次年度開始となるため、次年度繰越金が発生した。臨床検体を用いた検討ならびに、データ発表に関する諸費用により使用する予定である。
Toll様受容体遺伝子多型によるH.pylori応答性単球動態と胃粘膜疾患関連性

1.細胞動態評価系の構築研究代表者らが既に構築したデジタルタイムラプス蛍光顕微鏡にCCDカメラを接続したシステムに、新規に開発した「培養細胞の層に細胞欠損領域を作製する器具」(特願2001-328556)を応用し、細胞損傷後の細胞遊走過程を5次元デジタル画像解析系にて経時的に連続撮像し解析することを可能とした。また、画像処理には、粒子解析及び濃淡解析ソフトを応用した。2.TLR4遺伝子突然変異C3H/HeJマウスでの検討TLR4遺伝子の点突然変異があるC3H/HeJマウス及びその対象群のC3H/HeNマウスに、H.pylori菌液(シドニー株)、H.pylori由来LPSを経口投与し胃粘膜傷害を検討した。粘膜内好中球浸潤の指標であるミエロペルオキシダーゼ活性、脂質過酸化反応の指標としてのチオバルビツール酸反応物質量を測定した。H.pylori菌液接種による感染群では、TLR4が正常に機能しないC3H/HeJマウスにおいて、C3H/HeNに比較すると、胃粘膜内の、より著明な好中球浸潤(MPO活性の増加)と酸化ストレス(TBA反応物質量の増加)が惹起されたことから、TLR4がマウスのH.pylori感染に対して防御的に働く可能性が示唆された。なお、H.pylori由来LPS単独の経口投与では、マウス胃粘膜に有意な変化は招来しなかった。本研究は、慶應義塾大学医学部倫理委員会の承認(受付番号13-93;2002年4月2日付)を得て実施された。インフォームド・コンセントを得られたH.pylori陽性の慢性胃炎患者のうち、定期的な上部消化管内視鏡検査をうけている患者を対象として、採血した血液10mlからDNAを抽出し、遺伝子多型解析に供した。TLR4遺伝子多型については、最近報告された日本人のSNP(single nucleotide polymorphism)のJSNPデータベースに収載されたSNPとTLR4ゲノム配列とを比較し、候補SNP部位を12ヶ所、選定した。これらの候補SNP部位を増幅するPCRプライマーを設計し正常群の患者のゲノムDNA等濃度混合物を直接シーケンシング法により解析し、ヘテロ接合率の高いSNPをプロモーター部位に1ヶ所GenBankTLR4ゲノム配列AF177765の第2209番目の核酸配列がAからGへの置換、イントロン2ヶ所に1ヶ所SNPGenBankTLR4ゲノム配列AF177765の第11771番目の核酸配列がGからTへの置換を同定した。それぞれのSNPについて熱変性高速液体クロマトグラフィー法によりタイピングを行った。2つのSNPのタイピング結果から、両者がきわめて強い連鎖不平衡にあることが示された。2209Aアレルおよび2209Gアレルの頻度はそれぞれ71%と29%であった。2209Aホモ接合体は47%、2209A/Gヘテロ接合体47%、2209Gホモ接合体は5%で、両アレルの間にHardy-Weinberg平衡が成立していた。慢性胃炎患者群38名をCorpus predominant gastritis(14例)とAntrum predominant gastritis(24例)の2群にわけ、TLR4多型との関連を検討した。結果として、胃炎の進展のtopographyで分類した2群間では,TLR4遺伝子多型に有意差を認めなかった(p=0.52)。TLR4

遺伝子多型については、最近報告された日本人のSNP(single nucleotide polymorphism)のJSNPデータベースに収載されたSNPとTLR4ゲノム配列とを比較し、候補SNP部位を12ヶ所、選定した。これらの候補SNP部位を増幅するPCRプライマーを設計し正常群の患者のゲノムDNA等濃度混合物を直接シーケンシング法により解析し、ヘテロ接合率の高いSNPをプロモーター部位に1ヶ所GenBankTLR4ゲノム配列AF177765の第2209番目の核酸配列がAからGへの置換、イントロン2ヶ所に1ヶ所SNPGenBankTLR4ゲノム配列AF177765の第11771番目の核酸配列がGからTへの置換を同定した。それぞれのSNPについて熱変性高速液体クロマトグラフィー法によりタイピングを行った。2つのSNPのタイピング結果から、両者がきわめて強い連鎖不平衡にあることが示された。2209Aアレルおよび2209Gアレルの頻度はそれぞれ71%と29%であった。2209Aホモ接合体は47%、2209A/Gヘテロ接合体47%、2209Gホモ接合体は5%で、両アレルの間にHardy-Weinberg平衡が成立していた。慢性胃炎患者群38名をCorpus predominant gastritis(14例)とAntrum predominant gastritis(24例)の2群にわけ、TLR4多型との関連を検討した。結果として、胃炎の進展のtopographyで分類した2群間では,TLR4遺伝子多型に有意差を認めなかった(p=0.52)。本研究開始後、間もなく、SmirnovaらによりヒトTLR4遺伝子の多型に関する包括的な報告(Genetics 158 : 1657-1664,2001)が行われた。白人において稀な遺伝子多型(Q188R,C246S,D299G,N329S,T399I,F443L,E474K,Q510H,W593X,K694R,R763H,Q834K)が報告された。しかし、現時点で、白人以外でのヒトTLR4遺伝子の多型に関する検討はいまだない。本年度は、これらの多型を同時にスクリーニングする熱変性高速液体クロマトグラフィー法(以下DHPLC)(特願:平11-357701)にもとづくアッセイ法を開発した。つまり、この領域のヒトゲノムドラフト配列(GenBank配列番号NT017568)を解析し、それぞれの遺伝子多型をはさむPCRプライマーを設計し、DHPLC解析のための指摘条件を決定した。また、他の研究グループにより、胃粘膜腺窩上皮細胞がH.pylori感染に際してTLR4を発現し、さらにmitogen oxidase1の発現を誘導するという報告(J Med Invest 48:190-7,2001)がなされ、TLR4がヒトのH.pylori感染防御に重要な役割を果たすという本研究課題の作業仮説の正当性が裏付けられた。次年度は、患者群と対照群における各多型の頻度を網羅的に検討する計画である。2.細胞動態評価系の構築研究代表者らが構築したデジタルタイムラプス蛍光顕微鏡に冷却型CCDカメラを接続したシステムに、新規に開発した「培養細胞の層に細胞欠損領域を作製する器具」(特願:2001-328556)を応用し、細胞損傷後の細胞遊走過程を、5次元デジタル顕微鏡撮像システムで、経時的に透過光像、標識蛍光像をそれぞれ連続して撮像し、画像解析することが可能となった。
解離の多次元アセスメントと心理援助法の開発

研究1では、大学生386名を対象に日常的解離尺度改訂版項目からなる質問紙調査を行った。結果、「没入・没頭」「健忘による情動対処」「非現実感」「うわの空」「疎隔感」の5因子49項目の改訂版尺度が作成され、ある程度の妥当性が確認された。研究2では、患者群150名に対して研究1の改訂版尺度を実施した。結果、精神的健康度の予測指標として非現実感、うわの空、疎隔感が有効な可能性が示された。研究3では、心的外傷体験が不明確な解離性障害4事例の心理検査について検討した。分析の結果、ロールシャッハ・テストと改訂版尺度による解離傾向は一致せず、解離に対する心理尺度と投映法の表現形は異なる可能性が示唆された。本研究の目的は、「解離の多次元アセスメントと心理援助法の開発」である。筆者が開発した「多次元解離質問紙(仮)」を利用し、これまでより広範囲な対象者(青年成人)、様々な病的解離(解離性健忘、解離性遁走、解離性同一性障害etc)と心理援助法(力動的、認知療法etc)へ調査を広げ、効果的な心理査定・援助法を開発する。平成24年度は平成23年度に引き続き、精神科外来・病棟を対象にデータを収集を継続したところ、平成25.3.31現在、10代60代までの計150人のデータが収集された。これらのデータについて申請内訳の人件費を用い、入力作業を行った。器質性の障害を有する患者を除外した結果、121名(男性36,女性85,平均33.67歳、SD13.69)となった。更に、121名の患者をDSM-IV-TRによる診断分類に従って群分けした結果、不安障害群48名(男性9名、女性39名、平均25.52歳)、気分障害群53名(男性20名、女性33名、平均38.91歳)、精神病群20名(男性7名、女性13名、平均28.90歳)となった。更に、各群において統計解析を行ったところ、1解離性体験尺度は精神病群、不安障害群が気分障害群より有意に高い、2改訂日常的解離尺度合計については不安障害群が気分障害群より高い、3改訂日常的解離尺度5因子に関しては、非現実感、うわの空が気分障害群より不安障害群が高い、という結果が得られた。今後の課題として、各群の診断分類・人数の統制が残された。本研究では、「解離の多次元アセスメントと心理援助法の開発」を研究目的とする。筆者が開発した日常的解離尺度を改訂し、これまでより広範囲な対象者と心理援助法の選択(力動的心理療法、認知行動療法etc)へと調査範囲を広げ、解離に対するエビデンスに基づいた心理査定・援助法を開発する。最終年度である平成25年度は、青年期大学生群386名のデータを用い、統計解析を行った。分析の結果、平成23年度に作成した日常的解離尺度改訂版の安定した5因子構造、再検査信頼性、基準関連妥当性が確認された。次に患者群のデータ収集については、最終年度も継続して調査を行った。結果、190名(平成26年3月31日現在)のデータを得ることができた。150名までの統計解析結果は既に平成24年度で報告しているが、最終的な統計解析結果について次年度以降学会発表・論文化をしていく予定である。更に、最終年度はこれまでデータ収集を行ってきた心的外傷体験が不明確な解離性障害成人患者3名に、思春期事例1名を追加し、心理検査結果の共通点・相違点を検討することができた。しかし、ロールシャッハ・テストの解離傾向と改訂版尺度の高さは必ずしも一致しない、という結果となった。この結果は、改訂版尺度の問題によるものか、投映法で表出される解離傾向と心理尺度上の解離傾向が必ずしも一致しない可能性の両者が残されている。従って、今後も事例累積を行い、詳細な検討が必要である。

平成23年度は申請内訳の図書費、消耗品費を用いて、(1)解離性障害患者の治療効果を文献検証、(2)多次元解離質問紙の基準関連妥当性検証に必要な患者データを収集した。第1に、国内外の解離性障害患者の心理援助に関する文献を収集したところ、学派に特化した心理援助法(精神分析的心理療法、認知行動療法etc)が多く集められた。援助する地域・機関によってはそれらの技法が適用できない場合も多く、その場合に可能となる援助法、もしくは既存の援助法の応用可能性を検討することが重要であることが示された。第2に、多次元解離質問紙の基準関連妥当性の検証については、村上(2006)が提唱する「一定の項目群を基準群と統制群に実施し、回答パタンが二つの群で異なる、弁別力の優れた項目を統計的に抽出して尺度化する手続き」に従った。解離は広範囲な精神科疾患に伴う心理機制であるため、統制群としては解離性障害患者群のみに限定せず、幅広い精神科疾患患者を対象とした。精神科外来・病棟を対象に、データを収集したところ、H24.3.31現在、10代60代までの計119人のデータが収集されている。患者群の大量データはこれまでの国内の研究では非常に少なく、非常に貴重なデータが収集されたと考えられる。研究目的である解離の査定・援助研究については、これまでの解離に関する量的、質的、事例研究に関して文献レビューを行い、学会企画にによる共著書の中で記載した。また、解離への心理査定、心理援助については、国内学会において解離を有する事例発表、シンポジウムの企画・発表を行った。また統制群(精神科患者群)も計150名のデータに達した。以上から、現在までの達成度は順調に進展していると思われる。第1の研究目的である解離の心理援助法については、文献収集だけにとどまらず、国内の学会にて研究代表者による解離を有する事例への実践例を提示し、汎用性の高い援助法を考案することの重要性が示された。第2の研究目的である、解離の査定面においては国際学会にて代表者作成による既存の解離尺度の問題点を整理した。国内の学会においては基準群(大学生健常群)の統計解析に基づき、「多次元解離質問紙(仮)」の妥当な因子数・因子内容について議論された。また統制群(精神科患者群)も計119名のデータに達した。解離の心理査定については、心理尺度を用いて対照群(青年健常群)、統制群(精神科患者群)の統計解析を更に進める。またロールシャッハテストによる解離の質的分析も進める。更に今年度の課題として挙げられた群の統制に関しては、各障害群で分析する際に多数のデータが必要である。従って次年度は最終年度にあたるが、統制群のデータ追加を継続して行う。解離の心理援助については、研究代表者の実践例についてより細かな事例検討を行い、汎用性の高い援助法を探ることを試みたい。解離の査定面については、基準群(大学生健常群)の統計解析を更に進める。更に統制群(精神科患者群)についてはデータ全体に認知症、てんかんなどの器質性の障害も含まれるため、より分析可能なデータを得るため、次年度以降も統制群のデータ追加を行っていく。次年度の研究費については平成23、24年度に引き続き、基準群、統制群の数量データの入力に関する謝金、統計解析に関する物品購入費、解離の様々な援助法を把握するための文献収集費、国内外での学会発表を行う際の旅費として支出することを計画している。次年度の研究費については、平成23年度に引き続き、基準群、統制群の数量データの入力・統計解析に関する謝金、解離の様々な援助法を把握するための文献収集費、国内外での学会発表費として利用することを計画している。