hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
時空間構造を持ったスキャン統計量の同時確率計算の実用化

時間的,空間的相関構造を持った確率変数の組からマルコフ性を抽出することによって,時空間スキャン統計量の多重性調整p値の高速計算法を確立した.また空間疫学の疾病集積クラスターの同定問題へ応用した.いくつかのデータ解析を通して手法の有効性を確認した.提案手法の考え方は,(i)空間情報,すなわち地理上の隣接関係を点と無向辺からなるグラフで記述し,(ii)そのコーダル化によってマルコフ性を抽出し,(iii)マルコフ構造を用いた階層的逐次数値積分を用いて多重性調整p値を計算する,というものである.また2016年10月29日(土)統計数理研究所にて研究集会『応用統計学のひろがり』を主催した.本研究は空間的相関構造を持った確率変数の組からマルコフ性を抽出することによって,時空間スキャン統計量の同時分布の高速計算法の確立を目的とする.特に空間疫学の疾病集積クラスターの同定問題で懸案となっている多重性調整p値と検出力の正確計算の実用化を最終的な目標としている.昨年までの研究で,スキャン統計量の空間情報から定義されるグラフのコーダル化によってマルコフ性を抽出し,得られたマルコフ性に基づく階層的逐次数値積分を用いて,多重性調整p値や検出力が原理的には計算できることを明らかした.またC言語によるプロトタイププログラムを作成した.しかしながらそのプログラムは実用的な速度ではないため,本年度は高速化のための検討を行った.最初に,現在得られているアルゴリズムの計算量の評価を行った.インシデント数の総数をN,コーダル化したグラフのi番目のクリークの頂点の数をc(i),i番目のクリークを親とする頂点の数をpa(i)とするとき,計算量はNのmax(c(i)+pa(i))乗に比例するものであった.実際に数値計算の結果によると,Nが100200の場合,max(c(i)+pa(i))が高々6の場合には計算可能であったが,それよりも大きい場合には不可能であった.それはこの計算量の考察とも合致する.そこでプログラムの高速化のために,以下のことを行った.(i)コーダルグラフにおいて,親クリークの指定は一意ではない.そのためなるべくpa(i)が大きくならないようなアルゴリズムを工夫した.(ii) c(i)は,スキャンウィンドウが与えられればそれにより決まる量である.そこで,逆にc(i)が大きくならないようなスキャンウィンドウの構成について考えた.サーキュラースキャンウィンドウを修正する形で,スキャン統計量の数が多くなってもc(i)が大きくならないようなスキャンウィンドウを構成した.本研究は,階層的相関構造からマルコフ性を抽出することにより,多数の時空間スキャン統計量の同時分布の高速計算法の確立を目的とする.それは特に空間疫学の疾病集積クラスター(ホットスポット)検出問題を念頭においたものであり,その分野で懸案となっている多重性調整p値と検出力の計算の実用化を最終的な目標とするものである.いままでの研究において,スキャン統計量の空間情報,すなわち地理上の隣接関係から定義されるグラフのコーダル化によってマルコフ性(ジャンクション木)を抽出し,そのマルコフ性に基づく階層的逐次数値積分を用いて,多重性調整p値や検出力が計算できることが明らかにしていた.その結果を踏まえて,本年度は以下のことを行った:(i)改良を加えて高速化したアルゴリズムに基づいてスキャン統計量の多重性調整p値計算のための汎用的なCプログラムを作成した.(ii) (i)のプログラムを用いて,東京都と神奈川県における平成23年の乳児死亡,新生児死亡数のデータ解析を行った.総インシデント数が200以下,最大ウインドウサイズが4以下ならば,現在のプログラムで実際的な時間で多重性調整p値を精度良く数値計算できることが分かった.本研究は,時間的,空間的相関構造を持った確率変数の組からマルコフ性を抽出することによって,時空間スキャン統計量の多重性調整p値の高速計算法の確立を目的としている.特に空間疫学の疾病集積クラスターの同定問題への応用を念頭に置いている.いままでの研究では,スキャン統計量の空間情報から定義される無向グラフのコーダル化によってマルコフ性を抽出し,得られたマルコフ性に基づく階層的逐次数値積分を用いて,多重性調整p値や検出力が計算可能であることを明らかした.またその考え方に基づいてCプログラムを作成し,さらにその高速化を試みた.本年度はその延長として以下のことがらを行った.(i)これまでの研究は,観測値がポアソンサンプリングに基づくことを仮定し,その条件付分布としての多項分布に基づく確率計算を想定していた.しかしながら本研究手法は,ガウス分布の条件付分布である縮退したガウス分布,ガンマ分布の条件付き分布であるディリクレ分布,2項分布の条件付き分布である多変数超幾何,負の2項分布の条件付き分布であるディリクレ多項分布でも有効であることを示した.(ii)いままでは計算量のオーダ評価のみを行っていたが,必要とされる記憶容量のオーダの評価も行った.(iv) Tango (2010)の山形県の胆嚢ガン件数データを再解析した.本研究は,時間的,空間的相関構造を持った確率変数の組からマルコフ性を抽出することによって,時空間スキャン統計量の多重性調整p値の高速計算法の確立を目的とする.

特に空間疫学の疾病集積クラスターの同定問題への応用を念頭に置いている.いままでの研究では,スキャン統計量の空間情報から定義される無向グラフのコーダル化によってマルコフ性を抽出し,得られたマルコフ性に基づく階層的逐次数値積分を用いて,多重性調整p値や検出力が計算可能であることを明らかした.またその考え方に基づいてCプログラムを作成し,さらにその高速化を試みた.またポアソン分布以外のへ適用,計算量・記憶容量の評価,公開データ解析への適用を行った.本年度はその延長として以下のことがらを行った.ところで,疾病集積クラスターの同定問題と似た構造を持つ問題に,脳画像データ(fMRI画像データ等)におけるホットスポットの同定問題がある.その分野では,同定のための閾値の設定や,クラスターサイズの有意性検定の方法についての標準的方法が既に存在する.しかしながらその導出は,ロシア(ソ連)の数学者V. P. Noskoの一連の証明なし論文によるものであり,明らかではなかった.そこで本年度は,ヒューリステックな方法で,脳画像が滑らかなガウス確率場であると仮定したときのクラスターサイズの分布を導出した.予定通りテクニカルレポートを作成し,論文投稿を行っている.また当初想定していた応用分野である空間疫学とは別の応用分野である脳画像データ解析に着目し,その分野での基本的な問題の整理を行うと共に今までの研究成果の応用可能性について検討した.これらのことは計画当初は想定していなかった異分野の融合研究であり,今後の進展が期待できる.本研究では,空間的相関構造からマルコフ性を抽出することにより,多数の時空間スキャン統計量の同時分布の高速計算法を確立した.特に空間疫学の疾病集積クラスター検出問題を念頭におき,多重性調整p値の正確計算法を開発した.(i)基本的な考え方は,スキャン統計量の空間情報,すなわち地理上の隣接関係から定義されるグラフのコーダル化によってマルコフ性を抽出し,階層的逐次数値積分を用いて多重性調整p値を計算するものである.この考えに基づき,多重性調整p値計算のためのCプログラムのプロトタイプを作成した.(ii)計算量,記憶容量を評価した.インシデント数の総数をN,コーダル化したグラフのi番目のクリークの頂点の数をc(i),i番目のクリークを親とする頂点の数をpa(i)とするとき,計算量はNのmax(c(i)+pa(i))乗に比例するものであった.またpa(i)が大きくならないようなコーダルグラフ拡張アルゴリズムを工夫した.c(i)が大きくならないような新たなスキャンウィンドウを構成した.(iii)ポアソンサンプリングの条件付分布としての多項分布ばかりではなく,縮退ガウス分布,ディリクレ分布,2多変数超幾何,ディリクレ多項分布でも本手法は有効であることを確認した.(v) 2016年10月29日(土)統計数理研究所にて研究集会『応用統計学のひろがり』を開催した.時間的,空間的相関構造を持った確率変数の組からマルコフ性を抽出することによって,時空間スキャン統計量の多重性調整p値の高速計算法を確立した.また空間疫学の疾病集積クラスターの同定問題へ応用した.いくつかのデータ解析を通して手法の有効性を確認した.提案手法の考え方は,(i)空間情報,すなわち地理上の隣接関係を点と無向辺からなるグラフで記述し,(ii)
カザフスタンにおける現生人類北回り拡散ルートの解明に関する国際共同研究の基盤強化

アフリカで進化した現生人類がアジアに至るまでの拡散ルートは、アラビア半島から海岸部を伝って東南アジアに至る南回りルートと、中央アジアを経由してユーラシア北部を経由した北回りルートの2つが想定されている。このうち日本列島に大きな影響を及ぼした北回りルートの実態解明は先史考古学上の世界的な中心課題のひとつとなっており、そのカギを握るのが中央アジア西部の情報である。とくにユーラシア中央部で広大な範囲を占めるカザフスタンでは重要な遺跡の存在が予測されるものの組織的な調査が少なく実態が不明である。このため本研究課題では、カザフスタン共和国国立博物館及びカザフ国立大学と共同で、現生人類が中央アジアに到達して拡散した時期とみられる53万年前の遺跡を新規に発見して発掘調査を実施する。徹底した野外調査によりオリジナルな資料を新たに獲得することを目的としている。カザフスタンにおいて収蔵資料調査を予定していたが、本務と共同研究機関の日程の都合がつかず実施することができなかった。このため1月にカザフスタン2研究機関と協力機関である東大考古学研究室とともに、来年度から5か年にわたる具体的な野外調査計画について協議を行った。ユーラシア中央部で広大な範囲を占めるカザフスタンでは重要な遺跡の存在が予測されるものの組織的な調査が少なく実態が不明である。本研究課題では、カザフスタン共和国国立博物館及びカザフ国立大学と共同で、現生人類が中央アジアに到達して拡散した時期とみられる53万年前の遺跡を新規に発見して発掘調査を実施する。研究初年度である2018年度には、交付決定した冬以降は、季節的に野外調査が出来ないため、海外共同研究機関に赴いて収蔵資料調査を予定していた。しかし、本務と共同研究機関の日程の都合がつかず実施することができなかった。そのため、これまでに収集していたカザフスタン後期旧石器の図面類や共同研究者と共同執筆した論文等をまとめて、カザフスタンにおける後期旧石器文化の研究の総括的な研究報告書の作成を実施し、2018年度末に刊行することができた。2019年度からは、海外共同研究機関であるカザフスタン共和国国立博物館とアルーファラビ記念カザフ国立大学とともに、本格的な野外調査を実施する予定である。カザフスタン共和国国立博物館とは、カラタウ山地においてビリョックバスタウ・ブラック1遺跡の発掘調査を実施する。発掘調査は、現地にベースキャンプを設定して、労働者を雇用し、精密な発掘調査を実施する予定である。またカラタウン山地東麓の平原地帯において、後期旧石器時代の堆積層を持つ遺跡を探索し、新たな後期旧石器時代遺跡の存在を把握する。クズルタウ丘陵周辺の小河川跡に沿った旧河岸段丘沿いで後期旧石器時代の石器散布地を確認しているため、地点を選んで試掘調査を実施し、後期旧石器時代の石器包含層を把握することを目的とする。アルーファラビ記念カザフ国立大学とは、天山山脈北麓において新しい後期旧石器時代遺跡の発見を目的とした遺跡探索を実施する。アルマトイ州西部のカステック山脈北麓の小河川沿いの河岸段丘を主な踏査対象地とする予定である。

またカラタウン山地東麓の平原地帯において、後期旧石器時代の堆積層を持つ遺跡を探索し、新たな後期旧石器時代遺跡の存在を把握する。クズルタウ丘陵周辺の小河川跡に沿った旧河岸段丘沿いで後期旧石器時代の石器散布地を確認しているため、地点を選んで試掘調査を実施し、後期旧石器時代の石器包含層を把握することを目的とする。アルーファラビ記念カザフ国立大学とは、天山山脈北麓において新しい後期旧石器時代遺跡の発見を目的とした遺跡探索を実施する。アルマトイ州西部のカステック山脈北麓の小河川沿いの河岸段丘を主な踏査対象地とする予定である。交付決定以後に、研究計画では海外共同研究機関に赴いて資料調査を計画していたところ、本務と共同研究機関の日程の都合が合わず、実施することができなかったため。
失語症の機能回復ネットワークの解明

脳卒中後の失語症は、ヒト特有の症状であり、また社会参加を妨げる後遺症のひとつである。失語症の機能代償に伴う神経回路再編機構は、依然として不明な点が多い。そこで可塑性関連分子であるAMPA受容体に対する新規PETトレーサーを用いて、リハビリテーション前後でPET画像を撮影し、失語症の代償過程をシナプス機能分子レベルで捉え、代償脳領域の同定を試みる。さらに代償脳領域と他の脳領域との線維結合・機能的結合を、拡散テンソル画像と安静時機能的MRIを撮影することで探索し、失語症の機能回復ネットワーク形成過程を包括的に理解することを目指す。
時間分解ラマン散乱分光による擬1次元有機結晶の光誘起構造相転移の研究

フェムト秒時間分解反射分光法を用いて、赤外領域の電荷移動遷移を波長可変的に励起し、イオン性相から中性相への相転移発生効率と相転移動力学の励起波長依存性の研究を行った。その結果、電荷移動遷移領域における光子エネルギーの増加に伴って増大する相転移効率は、励起直後1ps以内に形成される前駆体としての1次元励起子ストリングスのサイズの光子エネルギー依存性に起因するものであることが判明した。2)TCDU結晶の光誘起重合過程における1次元鎖形成過程の機構の解明光誘起重合は、3重項励起子凝縮による2量体ジラジカルの生成がトリガーとなって発生する。ラマン散乱分光法を用い、2量体ジラジカル生成後の重合相形成過程におけるC骨格の結合様式変化を追跡した。その結果、A相およびB相への選択的重合過程は、ジカルベン状態で分岐する事が明らかとなった。この分岐は、モノマー結晶の分子配列と密接に関係している。3)ポリジアセチレン結晶およびナノ結晶(DCH)における励起子緩和過程の研究A、B相のポリジアセチレンおよびDCHナノ結晶(結晶サイズ100nm)のフェムト秒分光による研究の結果、数ピコ秒の励起子の消滅後、35ps後に固有な緩和励起状態が生成する。その寿命は、ナノ結晶においては、A、B相単結晶における類似の中間状態の寿命よりもはるかに短い。本研究は、時間分解ラマン散乱分光壊とフェムト時間分解分光法を用いて、擬1次元有機結晶における光誘起構造相転移の微視的機構を解明する事を目的とする。本年度は、超高感度ピコ秒時間分解ラマン散乱測定システムの作成と調整を行うとともに、擬1次元電荷移動有機錯体結晶であるtetrathiafulvalene-p-chloranil(以下TTF-CAと略す)およびポリジアセチレン結晶5,7-dodecadiyne-1,12-diol bis[phenylcarbamate](以下TCDUと略す)を対象とした、フェムト秒時間分解反射分光による構造相転移動力学の研究を精力的に展開した。得られた成果を以下に記す。フェムト秒時間分解反射分光の手法を用いて、電荷移動遷移励起(励起波長800nm)におけるイオン性相から中性相への相転移発生の動力学を時間分解的に研究するとともに、励起後数ピコ秒の前駆体生成過程に後続して発生する中性分子クラスターの増殖過程に対する温度依存性の研究を行った。その結果、前駆体発生過程においては顕著な温度依存性がないが、中性分子クラスターの増殖過程、および中性相秩序形成過程には、強い温度依存性があり事を明らかにした。2)TCDU結晶における光誘起重合初期過程の解明光でのみ擬1次元π電子系秩序形成が発生する典型例としてのTCDU結晶を用い、重合初期過程の機構を解明した。光で生成した3重項励起子の凝縮によって2量体ジラジカルが発生し、それがトリガーとなって重合が進展することを明らかにした。3)ジアセチレンTCDU結晶におけるフェムト秒時間分解反射分光の研究ジアセチレン分子の配向の相違によって、A、B両相へ選択的に重合したA、B相ポリジアセチレンをフェムト秒レーザーパルスで励起し、量相における励起状態のダイナミクスの相違の有無を明らかにした。その結果、次のことが明らかになった。(1)量相とも、光励起によってCの擬1次元鎖の結合の弱化が起こり、その結果、コヒーレントフォノン発生が生ずること、(2)励起後基底状態への回復時間は温度上昇とともに短くなること、(3)励起状態の生成によって長寿命の中間状態が形成されるが、その形成には、励起後数10psの時間を要し、中間状態は、マイクロ秒の寿命で消滅すること。

その結果、光子エネルギーの増加に伴って増加する相転移効率は、励起直後1ps以内に形成される前駆体としての1次元励起子ストリングスのサイズの増加に起因するものであることが判明した。2)TCDU結晶の光誘起重合過程における1次元鎖形成過程の機構の解明光誘起重合は、3重項励起子凝縮による2量体ジラジカルの生成がトリガーとなって発生する。今年度は、ラマン散乱分光法を用い、2量体ジラジカル生成後の重合相形成過程におけるC骨格の結合様式変化を追跡した。その結果、A相およびB相への選択的重合過程は、ジカルベン状態で分岐する事が明らかとなった。この分岐は、モノマー結晶の分子配列と密接に関係している。3)ポリジアセチレンナノ結晶(DCH)における励起子緩和過程の研究特殊な手法で創製された、DCHナノ結晶(結晶サイズ100nm)のフェムト秒反射分光による研究の結果、数ピコ秒の励起子の消滅後、35ps後に固有な励起状態が生成し、その状態は数100psの寿命で消滅することが見出された。この寿命は、通常の単結晶における類似の中間状態の寿命よりもはるかに短い。
曲面の組合せ論によるブラウアーグラフ代数の導来圏の研究

平成30年度が最終年度であるため、記入しない。
高次元値分布論の研究

私の研究目的は、複素平面から複素多様体への正則写像の性質を解明することである。このような正則写像を研究する際には、Nevanlinna理論や小林双曲多様体論が有効である。Nevanlinna理論では、正則写像から定まる個数関数、特性関数、接近関数という3つの関数を定義して、それらの大小関係を調べることで正則写像の漸近的な挙動を調べる。簡単に説明すると、特性関数は写像の像の大きさを測り、接近関数は写像の像と因子との距離を測り、個数関数は写像による点の逆像の個数を数えている。個数関数の特性関数による下からの評価はNevanlinna第二主要定理と呼ばれており、Nevanlinna理論では最も重要な不等式である。私は一般次元射影空間の特別な超曲面に対する第二主要定理と、一次元射影空間の直積に対する第二主要定理を示した。また小林双曲多様体とは多様体に定まる小林擬距離が距離になるものとして定義される。小林双曲多様体の重要な性質は、複素平面から小林双曲多様体への任意の正則写像は定数写像になるということであり値分布論では重要な性質である。私は代数的トーラスから代数的な因子を除いた集合があるトーリック多様体に小林双曲的に埋め込まれる条件を十分条件を、トーリック幾何的に与えた。筆者の研究内容は、ネヴァンリンナ理論といって、正則写像の値分布に関するものである。研究成果として、1年のうちに2本論文を書くことができ、現在投稿中である。論文の詳しい内容を述べる。1本目の論文は、高次元射影空間とその中の特別な超曲面に対する、ネヴァンリンナの第2主要定理を証明したものである。これは筆者がもともと研究目的として考えていた、一般の超曲面に対する第2主要定理への大きな前進を与えた。論文中では有理型接続という幾何的な概念が鍵となった。より詳しく記述すると、実際に論文中で使われたのは、J.P.Demanly氏によって考えられた、有理型接続よりも一般的な概念である。この概念をネヴァンリンナ理論に組み込んだことも、この論文の大きな意義であると考えている。2本目の論文は、やはり有理型接続を用いてネヴァンリンナの第2主要定理を示したものである。具体的には、リーマン球面の直積に対する正則曲線の分布を調べたものである。ネヴァンリンナ理論の研究の大きな課題として、調べる対象の空間を具体的なものに限定して第2主要定理が示されないかどうかというものがある。うまくいった対象の例として、高次元射影空間の超平面に対する第2主要定理、準アーベル多様体に対する第2主要定理などである。しかしこのように望まれる第2主要定理が得られた場合は、大変に少ない。この2本目の論文はリーマン球面の直積という具体的な対象において、第2主要定理がうまく示された数少ない例としてあげてもいいのではないかと思われる。以上のように、交付申請書に記載した研究目的の一部は達成された。他にもトーリック多様体の値分布論の研究をしている。この研究で、小林双曲性埋め込みという概念と、トーリック多様体は相性の良いものであることが明らかになってきた。まとまり次第、論文の形にするつもりである。
無人ヘリコプタをプラットフォームとした農地空間の情報化に関する日米共同研究の企画

近年,超高解像度衛星画像が実用化し,食糧生産のためのセンシングデバイスとしての期待も大きい.しかし衛星画像は,曇天,雨天時は有効でない,画像データを手元にするまで時差がある,画像分解能が低いなど生産技術に適用するには課題が多い.一方車載センサも画像取得の高度が低すぎて,画像データが膨大になる,潅水状態やぬかるみなどで車両を圃場に入れることができない場合が多い.特に,稲作で生育情報がほしい梅雨時期は,衛星ベース,地上ベースとも問題を抱えている.本研究は,日本に適したリモートセンシングのプラットフォームとして無人ヘリコプタに着目し,ヘリコプタベースのリモートセンシングシステムの開発を目指している.しかし,無人ヘリコプタの操縦は免許を必要とし,安定して飛行させることは容易でない.このような背景から,ヘリコプタベースシステムの場合,高度な制御系の開発が重要課題であるため,マサチューセッツ工科大学(MIT)航空宇宙学科との共同研究を企画した.『ヘリコプタによる農地情報の効率的な収集』と『タイムリーなリモートセンシング』の両立を目標設定した場合に,どのようなトータルシステム設計が必要で,その中の要素課題はなにか,今年度は研究調査に主眼をおいた。2003年10月にMIT航空宇宙工学科Feron助教授を招聘して,共同研究の企画会議を開いた。産業界からは産業用無人ヘリコプタを製造販売しているヤマハ発動機,ヤンマー農機に参加頂いた。次年度以降の共同研究テーマとして自動着陸機能,ローカルエリアの高精度測位技術の開発を設定することになった。併せて,農業機械学会主催の元,10月17日にセミナー「安全で安心な社会に貢献する産業用無人ヘリコプタ」を80名程度の参加者の元で科学技術振興事業団研究成果活用プラザ北海道において開催した。
日本におけるスペインインフルエンザ(1918-1920年)の疫学的解析

インフルエンザでは突然別の亜型が出現して流行することがあり、これをインフルエンザパンデミックという。過去100年間に発生した3回のパンデミックのうち最も被害が大きかったのは我々の研究で41万3000人(95%信頼区間76,717-480,357)の超過死亡がみられた1918年から1920年に起こったスペインインフルエンザである。中国大陸に駐留していた関東軍では1918年から1920年の致死率(死亡者数を感染者数で除したもの)でみるとそれぞれ1000人あたり5.0、7.8、7.2人であり、流行時期が後になるほど高い数字であった。またパンデミック(H1N1)2009の発生を受けて、流行像がより近いと示唆された1957年のアジアインフルエンザあるいは1968年の香港インフルエンザの時期に発行された新聞記事を用いてデータベースを作成した。アジアインフルエンザでは学校閉鎖および流行状況に対する報道姿勢が今回と似ていること、新聞の報道数では初期の動向と非常に相関が高いが、12月以降のインフルエンザシーズンでは動向と必ずしも一致しないことが明らかとなった。研究についてまとめると、スペインインフルエンザでは大きなMortality impactがみられたが、過去に検討された病理像は現在のウイルス性肺炎と矛盾しないものであつたが、細菌性肺炎の関与も強く疑われた。また流行初期よりも後期において致命率が上昇していたことも明らかとなった。1918年以外のパンデミックも含めてもやはり公衆衛生上において重要な課題であったことと考えられた。インフルエンザは突然別の亜型である新型インフルエンザが出現してそれまで流行していた亜型に取って代わることがあり、これをインフルエンザパンデミックという。過去100年間に発生した3回のパンデミックは、1918年から1920年に起こったスペインインフルエンザ、1957-58年に発生したアジアインフルエンザと1968-69年に発生した香港インフルエンザがある。このうち最も深刻な被害をもたらしたのはスペインインフルエンザであり、日本でも40万人近くの死者を出したとされているがいくつかの地域で報告されておらず不明であったために、当時の人口動態統計を利用してSerfling法によるインフルエンザ関連死における超過死亡数を算出したところ41万3000人(95%信頼区間76,717-480,357)であった。さらに東北大学図書館に現存する関連する資料を「流行性感冒」、「パンデミー」などのキーワードから検索を行い、データベースを作成した。特にスペインインフルエンザ流行時のシベリアに出征した兵士における病理学的検討および当時の病理学的な検討の総説においても所見として病期により違いがあるとしており非常に臨床経過の早いものは出血性気管支肺炎、発病後7日ないし14日を経過したものでは融合性カタル性肺炎が、20日経過したものでは化膿性気管支肺炎および間質性気管支肺炎が観察されたと報告している。2つの剖検群(8例と34例)での死亡経過をみても明らかな偏りは見られないことから、その肺炎像は多彩であったことが示唆される。本データベースは来年度に公開に向けて整理を引き続き行う予定である。また公衆衛生対応の比較としてアジアインフルエンザ時における小学校および中学校閉鎖の効果を死亡数に対する影響により検討を行ったが明らかな効果は見られなかった。学校閉鎖の有効性は疫学モデルなどで指摘されているが、その開始時期については更なる検討が必要であると考えられた。
印刷用トナー粒子の吸入が人体に及ぼす影響に関する疫学的研究

トナー粉じんの吸入がヒトの呼吸器影響を引き起こす可能性を示唆する症例報告がいくつかなされているが、この仮説を検証した疫学的研究は見あたらない。本研究の目的は、日常の作業でトナー粉じんを取り扱う職業コホートにおいて、肺の線維化に関わるいくつかの生物学的指標とトナー粉じん曝露との間の関連性を、断面的に評価することである。全1032名の調査対象にについて2回の繰り返し調査を行った(初年度690名、次年度792名)。これらの対象者に対して、主観的呼吸器症状、肺機能、血液・尿中バイオマーカー、および胸部レントゲン検査の調査を行った。さらに曝露履歴に加えて、トナー粉塵の作業環境と個人曝露量も調べた。これらの生物学的アウトカムと曝露指標の関連性を断面的に評価した。20年以上トナーを取り扱っている作業者では呼吸器症状と軽度の胸部X線変化が増加する傾向を示したが、トナー粉じん曝露と生物学的所見の間には一貫した関連性は認められなかった。また調査時点のトナー粒子への曝露は、権威機関から勧告されている許容限界値以下に良好に制御されていた。以上のことからわれわれは、粉体のトナーが現在の良く制御された作業環境下で注意深く取り扱われるならば、トナー粉じん曝露に関連付けられる呼吸器障害が生じる可能性は少ないと結論した。しかしトナー粉じん吸入の生物学的影響に関する疫学的証拠は、とくに縦断的なデザインによって、さらに積み重ねられる必要がある。予備調査で把握済みの職域コホート約800名を対象に野外調査を実施した。調査実施に先立って、書面および面談にて研究目的等の説明と協力依頼を行い、書面で同意を得た。調査項目は以下のとおりである。(1)標準化質問表による呼吸器症状・生活習慣等の面接調査(2)肺機能測定(フライシュ型流速形を用いたスパイロメータによるスパイロメトリー、最大努力性呼出曲線)(3)胸部レントゲン直接撮影(じん肺健康診断に準拠)(4)血清・尿中バイオマーカー測定(血清サイトカイン【IL4、IL6、IL8、IFNγ】、スーパーオキシドディスムターゼ、尿中8-ハイドロキシデオキシグアノシン、ハイドロキシプロリン、など)(5)作業環境測定(総粉じん、吸入性粉じん、等)及びトナー粉じんの個人曝露量測定(作業環境測定標準に準拠)(6)業務歴調査3種類の業務区分、すなわちトナー製造、研究開発、複写機メンテナンス、を通して、全体的な作業環境、呼吸保護具の使用など、労働衛生管理のレベルは良好であった。これに対応して、胸部X線写真上2型以上の有所見者は認められなかったが、ごく軽度の肺野の線維化を疑わせる所見が数%に認められ、対象群に比して取扱者にやや頻度が高い傾向を認めた。しかし肺機能、呼吸器症状では、トナー取り扱いの有無に対応する有意な差は認められなかった。実際の個人曝露量に大きく影響する作業要因など個人差を含めて、今後詳細な分析を行なう予定である。なお、血液・尿中のバイオマーカーの測定は、次年度の検体と合わせて同時に行う、また肺内粉じん蓄積量のマーカーである肺磁界測定を次年度に実施できるように、携帯式測定器等を準備した。昨年度に引き続き、トナー取り扱い作業者の健康調査と、曝露調査を継続実施した。調査対象は、昨年度の調査対象である約700名(コントロール含む)に加えて、年齢の不均衡を補正するために若干の追加を行い、総計約800名を対象とした、調査実施の際の問診時に、各対象者毎に本研究に関する説明を行い、書面によるインフォームドコンセントを得て調査を実施した。調査の項目は下記の通りである。1.医学検査(1)問診・質間票調査:業務歴、曝露歴、既往歴、現病歴、呼吸器症状、その他(標準化質問票を用いた面接・問診)。(2)胸部レントゲン直接撮影。(3)肺機能検査:最大努力性呼出、フローボリウム曲線検査。

(4)血液・尿検査:血清サイトカイン量(IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IFN-γ)、酸化ストレス関連マーカー(8-OHdG、SOD)、および一般臨床検査項目(肝機能、腎機能、脂質等)。2.環境測定(1)作業環境測定(各単位作業所毎に実施)。(2)個人曝露量測定(単位作業毎に、対象者のおよそ1/10を抽出して実施)。また本年度は昨年開発した携帯型肺磁界測定器を用いた測定を試みたが、一般的な一成分系トナーの磁化強度が予想を下回り(溶接ヒュームの13%程度)、このままでは曝露量からみて、現場での測定上の感度がやや不足するため、装置のさらなる改良を行った。2年間の結果を総合すると、トナー粉じん曝露が肺の線維化病変形成リスクを増大させることを示す一貫した結果は得られなかった。しかし一部の慢性症状や機能検査項目では曝露指標による有意な差が認められる区分があり、縦断的手法を用いて検討を継続していく必要性が示唆された。
その場X線回折によるシリコン基板上へテロエピタキシャル成長の観測と制御

シリコン基板上の熱反応堆積法により鉄シリサイドが成長する初期過程をその場X線回折で初めて観測した。450°C成長では初期に高温相α-FeSi2のナノ結晶の成長が見られるが、β-FeSi2(100)面の成長に伴いα相は消滅した。500°C以上ではα-FeSi2は消滅しなかった。450°Cでβ-FeSi2単相を成長した後、900°Cまでのアニールによりβ相[100]軸がSi[001]軸方向に整列する過程を観測した。本年度は、Si上のGeドットがSiに埋め込まれる過程のX線その場観測に必要なSi用蒸着セルを購入した。しかし、ビームタイムに間に合わなかったため、反射高速電子回折で成長を確認した。SPring8では次年度と研究対象を入れ替え、β-FeSi2薄膜の成長過程を観測した。Si上のβ相薄膜は直接遷移型半導体であるが、α-FeSi2は金属であり発光素子、太陽電池などへの応用には適さない。Si上でのFeの熱反応堆積法では、α相が混在しやすいため、α相出現の原因を解明し抑制することが重要である。成長実験により、(1)Si(001)基板温度500°C以上ではα相(111)面の成長が顕著であり、一旦ある程度大きなα相結晶が形成されてしまうとβ単相を得ることはできない、(2)450°C成長では初期にα相の成長が見られるが、β相(100)面の成長に伴いα相は消滅する、(3)450°Cでβ単相を得た後では、900°Cまでアニールしても再びα相が現れることはない、(4)450°C未満では薄膜の結晶性が良くないことを確認した。そこで最適温度450°Cでのα相の成長消滅過程をX線回折で詳細測定した。それによると、β相が出現するまではα相が成長するが、β相成長に伴ってα相は消滅する。消滅過程でのα相からの散乱ピーク幅とピーク強度のX線入射角依存性とを計算と比較することによって、消滅過程でもα相の個々の結晶粒子サイズ(数nm)は減少しておらず、α相の粒子密度が減少していくことが分かった。すなわち、ほぼ粒子単位でα相からβ相への構造転移が起きることでα相が消滅してく。バルクでは950°C以上の高温で安定化するα相が、薄膜成長初期に現れる理由は、粒子サイズが小さい場合はバルクよりも低温でα相が安定になり、粒子サイズ増加と供に成長温度でもβ相が安定になるため、α相からβ相への転移が起きるためと考えられる。(1)昨年度購入したSi用電子ビーム蒸着セルからSiを安定して蒸着できるように、本年度はグラファイトるつぼを購入した。Si(111)上にGe、Siを蒸着し2次元成長期間での7×7から5×5への表面構造の変化、その後のGe島形成過程を観測した。(2)基板による全反射を取り入れた歪曲波ボルン近似(DWBA)を使用して散漫散乱のX線強度計算を行うために計算機を購入した。まず、Stepanovらの方法による擬似格子整合した多層薄膜からの動力学的回折強度計算のプログラムを作成した。これにより計算された反射・透過波を基本波としてDWBAにより、面内格子緩和した島からの散漫散乱強度計算を行う。(3)Si(001)上でのFeの熱反応堆積法によるβ-FeSi2薄膜の成長過程をX線回折で観測し、金属であり発光素子、太陽電池などへの応用には適さないα-FeSi2を含まない、半導体β単相膜が450°Cで得られることを昨年度見出した。このβ単相膜をX線回折で調べると、結晶軸がわずかにずれた2領域に分裂しているように見える。7つの回折点について系統的に測定した結果、この分裂は面内方向のtwist回転ではなく、基板面垂直軸が傾いて生じていること、この垂直軸の傾斜は少なくとも45度ごとの8方位に向かって生じていることを見出した。さらに900°Cまでのアニールで、回折点の分裂は無くなりβ薄膜の方位がそろうことを観測した。バルクでβからαへの転移温度は950°Cである。450°Cの低温成長でSi基板とβ島の界面に形成されていた転位が、アニールによって解消されたと考えられる。これらの結果より、450°C成長とその後の900°Cアニールにより、エピタキシャル成長したβ単相薄膜が得られることがわかった。これは連続膜でなく、平均高さ14nm、幅20nmの島からなり、量子ドットまたはMBE薄膜のテンプレートとして利用できる。Si(111)上にFeを蒸着し半導体β-FeSi2の成長をSPring8-BL13XUにて、その場X線回折で観測した。

Si(111)上ではSi(001)上と異なり、成長初期に金属相であるα-FeSi2の形成は観測されなかった。従ってSi(111)上ではより広い温度範囲でβ-FeSi2が単相で形成された。β-FeSi2(110)または(101)面がSi(111)上に成長した。斜方晶β-FeSi2の単位格子は立方晶CaF2構造の単位格子4個分がヤーン・テラー歪で安定化したもので、β-FeSi2(110)と(101)面は基になるCaF2構造の(111)面に相当する。このためSi(111)上でβ-FeSi2が形成されやすいと考えられる。X線回折では主にβ-FeSi2の040と004反射を測定し、β-FeSi2の膜厚増加に伴う回折ピーク幅の減少と格子定数変化の過程を観察した。β-FeSi2の単相薄膜成長は、Si(111)基板のほうがSi(001)基板より容易であることを確認できた。さらに、Geドット自己形成過程をX線回折で実時間測定した。Si基板上にGe濡れ層とドットが成長した場合について、歪分布を有限要素法で計算した。ドットの頂上付近ではほぼGe本来の格子定数まで歪が緩和する。等歪面は基板面にほぼ平行になっており、ほぼ一定の高さ付近に分布している。ドットが基板表面に疎に分布している場合、全反射臨界角以下で入射したX線を用いると、ドット内のX線強度分布は入射波と濡れ層/基板表面で全反射された波とのつくる定在波の強度分布で近似できる。入射波と全反射波が基板表面の真空側に作る定在波強度の視射角α依存性が基板表面からの高さによって変化することを利用して、ドット内の等格子間隔面高さ分布を追跡するため、X線入射角依存性の測定を行った。結果は定在波の効果で説明できることを確認した。
細胞膜上でのADAM28活性調節機構の解析

分子標的治療薬開発を目指して、完全ヒト型抗ADAM28特異抗体を開発した。本抗体は、IC50=37.5 nMと低濃度でADAM28活性を阻害し、5種類のNSCLC細胞株におけるIGF-I誘導性細胞増殖抑制とVWF誘導性アポトーシス亢進を示した。マウスを用いた早期肺癌転移モデルにおいては、癌細胞の増殖・転移を抑制するとともに生存期間を延長した。進行期肺癌転移モデルでは、既知の抗癌剤や抗VEGF抗体よりも有意に増殖・転移を抑制し、生存期間を延長した。本抗体をマウスあるいはカニクイザルに過剰投与しても有害事象は認められなかった。本抗体はNSCLC患者の新規治療薬候補として期待される。本研究では、ヒト正常組織におけるADAM28の発現を調べるとともに細胞に対するADAM28の生物学的機能を解析した。剖検で得られたヒト正常組織におけるADAM28の発現を2種類の特異抗体を用いて免疫組織化学染色により検討した。その結果、ADAM28は精巣上体、気管支、胃などの各組織において上皮細胞で発現しており、脾臓やリンパ節においては一部の血管内皮細胞が陽性を示すもののリンパ球は陰性であった。これら組織におけるADAM28の発現レベルは肺癌組織より6倍以下の低レベルであることがELISA法で示された。ADAM28の細胞に対する機能を調べるために、酵母two-hybrid法によりヒト肺組織cDNAライブラリーをスクリーニングし、ADAM28結合候補分子としてC1qを同定した。ADAM28とC1qの各タンパク質を用いてbinding assayと免疫沈降を行い、両分子の特異的結合が示された。一方、C1qはADAM28では分解されなかった。次いで、正常気管支上皮細胞(BEAS-2BとNHBE)を用いてC1qの作用を検討したところ、BEAS-2B細胞ではp38とcaspase-3の活性化を通してアポトーシスが誘導され、NHBE細胞ではLC3-IIの蓄積とオートファゴソームの増加によりオートファジーを伴った細胞死が出現した。C1q誘導性細胞死やそれに関わる細胞内シグナル分子の活性化は、C1qレセプターに対する抗体の前処理で抑制され、C1qの細胞障害作用はC1qレセプターを介することが明らかとなった。また、細胞への添加前にC1qをADAM28と複合体にした場合にはC1q誘導性細胞死は阻害され、ADAM28をsiRNAでノックダウンするとC1q誘導性細胞死の亢進が認められた。以上の結果から、ADAM28は精巣上体や気管支などの正常組織において上皮細胞で発現されることが実証され、ADAM28はC1qとの結合で気管支上皮細胞におけるC1q誘導性細胞死の回避を介して、気管支上皮細胞の生存維持に関与している可能性が示唆された。本研究では、正常組織におけるADMA28の組織発現と分子作用機構を解明することができた。これらのデータは、ADAM28を標的とした治療薬開発に基礎的データを供与し、将来的に完全ヒト型抗体を用いた臨床治験へ進めるために必須な情報を与えることが期待されることから、予定どおりに研究は進捗できている。Human combinatorial antibody libraryからADAM28に反応する抗体(211-14)を獲得し、本抗体はADAM28のinsulin-like growth factor binding protein -3分解活性を阻害し、ADAM28高発現ヒト肺腺癌細胞株(PC-9)のIGF-I誘導性細胞増殖とvon Willebrand factor誘導性アポトーシスを濃度依存的に抑制した。次に、LuciferaseとVenus融合遺伝子を導入したPC-9 ffLuc-cp156を作製し、マウス尾静脈内注入による肺転移モデルで本抗体の作用を検討した。PC-9 ffLuc-cp156細胞尾静脈内注入翌日から腹腔内へ211-14抗体を投与した結果、肺転移は有意に抑制され、生存率の著しい改善とともに10匹中3匹では腫瘍の完全消失がみられた。また、PC-9 ffLuc-cp156細胞尾静脈内注入3週後に抗体治療を開始した実験では、全身転移の有意な遅延がみられ、50%生存率が1.4倍延長した。本抗体と肺癌に対する既存の抗体医薬(Bevacizumab)と抗癌剤(Docetaxel)との効果を比較検討したところ、本抗体+Docetaxel投与群では、Bevacizumab+Docetaxel投与群より有意なマウス生存率の延長を認めた。さらに、本抗体の副作用を検討するために、マウスADAM28と反応する抗体を正常マウスに多量投与したところ、10匹中1匹で精巣上体導管の拡張・破壊が見られたが、全身臓器の病理学的異常や血液・血清学的異常は認められなかった。本研究で行う細胞膜上でのADAM28活性調節機構の解析は、ADAM28の癌細胞膜上での作用機序の理解のみでなく、ADAM遺伝子ファミリー分子全体の活性調節研究に貢献する可能性がある。また、ADAM28分子を標的とした完全ヒト型抗体の詳細な検討は、将来的に本抗体を用いた臨床治験を進めるために必須の情報を与えることが期待されるためおおむね順調に進展していると考えられる。本研究では、ADAM分子の中でも癌細胞増殖・浸潤・転移への関与が注目されているADAM28にターゲットを絞り、ヒト癌細胞膜上におけるADAM28の活性調節機構と癌細胞浸潤の分子機構の解明を目指して研究を遂行した。

Human combinatorial antibody libraryからADAM28に反応する抗体(211-14)を獲得し、本抗体はADAM28のinsulin-like growth factor binding protein -3分解活性を阻害し、ADAM28高発現ヒト肺腺癌細胞株(PC-9)のIGF-I誘導性細胞増殖とvon Willebrand factor誘導性アポトーシスを濃度依存的に抑制した。次に、LuciferaseとVenus融合遺伝子を導入したPC-9 ffLuc-cp156を作製し、マウス尾静脈内注入による肺転移モデルで本抗体の作用を検討した。PC-9 ffLuc-cp156細胞尾静脈内注入翌日から腹腔内へ211-14抗体を投与した結果、肺転移は有意に抑制され、生存率の著しい改善とともに10匹中3匹では腫瘍の完全消失がみられた。また、PC-9 ffLuc-cp156細胞尾静脈内注入3週後に抗体治療を開始した実験では、全身転移の有意な遅延がみられ、50%生存率が1.4倍延長した。進行期肺癌転移モデルでは、既知の抗癌剤や抗VEGF抗体よりも有意に増殖・転移を抑制し、生存期間を延長した。また、本抗体をマウスあるいはカニクイザルに過剰投与しても有害事象は認められなかった。本抗体は非小細胞肺癌患者の新規治療薬候補として期待される。分子標的治療薬開発を目指して、完全ヒト型抗ADAM28特異抗体を開発した。本抗体は、IC50=37.5 nMと低濃度でADAM28活性を阻害し、5種類のNSCLC細胞株におけるIGF-I誘導性細胞増殖抑制とVWF誘導性アポトーシス亢進を示した。マウスを用いた早期肺癌転移モデルにおいては、癌細胞の増殖・転移を抑制するとともに生存期間を延長した。本抗体をマウスあるいはカニクイザルに過剰投与しても有害事象は認められなかった。本抗体はNSCLC患者の新規治療薬候補として期待される。今後は、我々が開発したヒト型ADMA28抗体による副作用の検討と既存の分子標的薬との比較や併用投与などの検討を推進したいと考えている。免疫組織化学染色の結果、我々が開発した211-14抗体は分泌型ADAM28に特異的に反応し、211-12抗体は分泌型および膜型ADAM28共通領域の3次構造を認識することを明らかにしている。そこで、今後は、分泌型ADAM28と膜型ADAM28を癌細胞に過剰発現させ、細胞膜分画よりヒト型ADAM28抗体を用いてADAM28結合分子の免疫沈降を行う。対照としてコントロールIgGで同様に免疫沈降し、免疫沈降物をSDS-PAGEで展開し、ヒト型抗ADAM28抗体で検出された結合タンパク質をLC-MS/MS法により同定する。さらに、同定した分子とADAM28との相互作用をリコンビナントタンパク質を用いて証明し、結合ドメインの決定とともに相互作用による潜在型ADAM28の活性化や活性型ADAM28の活性変化を詳細に検討する。実験病理学、生化学本研究課題はいずれも我々の研究施設で行い、現有研究設備で実施可能である。従って、設備備品の購入は必要ではなく、各実験に用いる試薬、細胞培養液、抗体、プラスチック器具などの消耗品とマウスの管理飼育費が必要である。上記試薬やマウス管理飼育費を申請する。
哺乳動物卵における細胞骨格再配置の意義とこれに関わるシグナル伝達経路の解明

哺乳動物卵母細胞の成熟過程における細胞骨格の機能について検討した。ミトコンドリアの再配置に関わる微小管とマイクロフィラメントの役割が間期とM期で異なることを解明した。モータータンパク質であるミオシンとキネシンの卵成熟中の動態を明らかにした。さらに,中間径線維ケラチン,ビメンチンおよびネスチンの動態も示した。そして,細胞周期因子であるcdc2ならびにMAPキナーゼキナーゼ阻害,あるいはRhoキナーゼ阻害の影響を明らかにした。平成21年度の研究結果は以下のとおりである。1.哺乳動物卵におけるモータータンパク質キネシンの機能的役割ブタ卵母細胞の成熟過程におけるキネシンの分布変化を検討したところ,微小管の分布変化に同調し,MI期およびMII期において紡錘体が存在する領域に集中する卵の割合が増え,細胞質内のキネシンの濃度勾配が観察された。また,KIF5AはGV内において高密度に分布しており,mRNAの輸送に関与しているものと推察された。2.哺乳動物卵におけるミオシン軽鎖キナーゼの機能的役割ブタ卵母細胞の成熟培地にミオシン軽鎖キナーゼ阻害剤を添加して,その影響を検討したところ,ミオシン軽鎖キナーゼ阻害の影響はGV-MI期には認められないが,MI-MII期のうちのAI-TI期の卵母細胞成熟の進行に影響すること,MI-MII期のマイクロフィラメント重合/脱重合に影響していること,さらに第一極体放出に影響していることが明らかとなった。これに対し,GVBDおよび紡錘体の卵母細胞表層への移動や回転には影響しないことが明らかとなった。3.ハムスター卵母細胞並びに初期胚におけるケラチンの分布卵母細胞の成熟過程における中間径フィラメント,ケラチンの分布について検討した。その結果,未成熟な卵母細胞では集塊状の非繊維性ケラチンが細胞質の表層域に分布していたが,成熟後の卵母細胞では繊維性のケラチンが細胞質全域に分配された。初期胚では,ケラチンは胚細胞緊密化(コンパクション)が開始する8細胞期に割球の接着面に集中し始め,コンパクション時には割球接着面に高密度に分布していた。平成22年度の研究結果は以下のとおりである。1.ハムスター卵の成熟に伴う中間径フィラメント-ケラチンの分布変化卵母細胞の成熟過程における中間径フィラメント,ケラチンの分布について検討した。その結果,未成熟な卵母細胞では集塊状の非繊維性ケラチンが細胞質の表層域に分布していたが,第2減数分裂(MII)期の卵母細胞では繊維性のケラチンが細胞質全域に分配されると共に,表層域に極太のケラチン繊維の形成が開始していた。2.ブタ卵の成熟に伴う中間径フィラメント-ケラチンの分布変化ブタ卵では,卵核胞(GV)期では非繊維状のケラチン・シグナルが卵細胞質全体に分布して認められるが,第1減数分裂中期(MI期)及び第2減数分裂中期(MII期)に進行するに従って,ケラチンは繊維化し,かつ明瞭なメッシュ構造を形成していた。このケラチンの分布変化は排卵卵子の物理的な強度を補強する細胞骨格の変化を示すもので有り,家畜卵では初めて観察された所見である。3.ブタ卵におけるモータータンパク質-ミオシンの分布変GV期では細胞膜付近にほぼ均一に存在していたミオシンが,MI期からMII期にかけて局在が変化し特定の部位の細胞膜付近に厚い層を形成して,ここを中心として三日月状の分布を示した。この中心部位におけるミオシンの厚さと囲卵腔の大きさの相関が高いので,ミオシンの集中することが囲卵腔を形成する要因と考えられた。細胞膜直下にはマイクロフィラメントが分布するので,ブタ卵母細胞においてもマイクロフィラメントとミオシンとの相互作用により,細胞質に収縮性の変化が生じ,囲卵腔を形成するものと推察された。平成23年度の研究結果は以下のとおりである。1.ブタ卵における中間径線維ビメンチンの分布変化免疫抗体法によるビメンチンシグナルは,卵核胞(GV)期卵では大部分の卵(73.3%,n=52)で微細な粒子状として細胞質全体が均一に分布しており,卵核胞内にも認められた。第一減数分裂中期(MI)ではほとんどの卵で細胞質全域に亘って網目構造が形成されていた。第二減数分裂中期(MII)では表層の網目構造が不明瞭となり,ビメンチンが細胞膜直下約10μmの層状に集中していた(89.1%,n=76)。2.ブタ卵における中間径線維ネスチンの分布変化ブタ卵母細胞におけるネスチンがGV期(n=48)から出現し始め,ネスチンの特異的な構造がMI期(n=42)に出現し,MII期(n=65)にかけて分布が拡大した。3.ウエスタンブロット法によりハムスター卵におけるケラチンの同定と濃度変化を明らかにした。4.細胞骨格の維持に対するRhoキナーゼ阻害の影響・マイクロフィラメント形成への影響:Rhoキナーゼ阻害した卵母細胞のマイクロフィラメントの染色性が低下した。

また,第1極体の放出が抑制され,卵丘細胞の膨化も阻害された。・微小管形成への影響:Rhoキナーゼ阻害剤で処理した卵母細胞において紡錘体の形成には影響は全く認められなかった。・中間径線維形成への影響:中間径線維のうちネスチンについてRhoキナーゼ阻害処理を施したが,ネスチンの分布には影響が認められなかった。