hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
解析関数の乗法演算と合成演算の代数構造と位相構造の研究

本研究課題では、単位円板上の解析関数空間の上に作用する合成作用素や掛け算作用素の研究を中心に、その周辺問題も含めて研究していた。研究代表者は、この研究テーマの周辺状況を調べるうちに、単位円板上の作用素論の離散モデルとして、グラフの特別な場合であるツリーに注目し、その上の作用素の研究を行う必要性があることに気づいた。特にツリーのグラフとしての構造を反映する代表的な関数空間として、リプシッツ空間がある。このリプシッツ空間では、その2つの頂点の間の誘導距離が、2つの頂点間の辺の個数に一致するという顕著な性質がある。平成30年度は、このリプシッツ空間上の種々の作用素の研究を主に行った。(1)研究代表者は、ツリーの上のリプシッツ空間に作用する荷重付き合成作用素の、下からの有界性に関連する単射性半径を決定した。また、全射性半径も決定した。これらの結果の系として、荷重付き合成作用素の下からの有界性の特徴付けも得られている。(該当する論文を投稿中)(2)研究代表者は、ツリーの上のリプシッツ空間に作用する積分作用素の有界性及びコンパクト性について特徴付けた。また、この結果の一般化として、二つの異なる荷重付きリプシッツ空間の間に作用する場合の積分作用素まで拡張することが出来た。(現在、論文の準備中)(3)研究代表者は、ツリーの上のリプシッツ空間の荷重付き合成作用素が全射等距離写像になる場合を特徴付けた。この結果を基にして、リプシッツ空間の一般の全射等距離写像の満たす必要条件を得た。(現在、論文の準備中)本研究課題では、単位円板上の解析関数空間において、合成作用素や掛け算作用素の作用素論的性質を作用素のシンボルの関数論的性質で特徴付けるというという問題設定に加えて、シンボルの関数に対する代数的な演算が作用素の性質にどの様に影響するかという問題も併せて研究している。Bergman空間においては、φ・Ψをシンボルとする合成作用素C_(φ・Ψ)のコンパクト性は、角微分についての条件で特徴付けることが出来た。Bloch空間上では、状況が複雑であり、いくつかの場合に分けて、C_(φ・Ψ)がコンパクトになる場合とならない場合を双曲微分を用いた条件で分類した。また、little Bloch空間においては、C_(φ・Ψ)が有界になる場合も自明ではない。このため、C_(φ・Ψ)が有界性とコンパクト性について研究し結果を得ている。(日本工業大学・大野修一准教授との共同研究、現在該当する論文を投稿中)また、メビウス変換の合成積を二項演算(以下ではメビウス・ジャイロ積と呼ぶ)とすることで、単位円板上にジャイロ群の構造が入ることが知られている。これに関連し、二次の正値可逆行列の全体におけるジャイロ群の代数構造について、茨城大学・岡裕和氏と茨城大学・阿部敏一氏と共同研究が始まった。ジャイロ群は結合法則を満たさないので、二次の正値可逆行列の全体における結合子((a+b)+c)-(a+(b+c))の計算(便宜的にジャイロ演算を「+」で表した)を行い、結合子が単位行列になる場合を調べ、結果を得た。従来の研究テーマである解析関数空間上の合成作用素に加えて、ジャイロ群の共同研究も始まり、どちらも十分な結果を得ているため、順調に進展していると考える。本研究課題では、単位円板上の解析関数空間の上に作用する合成作用素や掛け算作用素の研究を中心に、その周辺問題も含めて研究している。(1)日本工業大学・大野修一准教授との共同研究として、little Bloch空間上において、シンボルが積で表わされる場合の合成作用素の性質が、有界正則関数空間の極大イデアル空間のGleason部分における挙動で分類されることが分かった。特にシンボルが、ある正則自己写像のべき乗で表わされる場合の有界性とコンパクト性について特徴付けた。(現在、該当する論文を投稿中)(2)研究代表者は、単位円板の離散モデルとして、グラフの特別な場合であるツリーに注目し、ツリー上のリプシッツ空間に作用する2つの合成作用素の差の有界性及びコンパクト性について特徴付けた。また、ツリー上のリプシッツ空間に作用する荷重付き合成作用素の有界性及びコンパクト性について特徴付けた。特にグラフ上の荷重付き合成作用素の研究は、現在まで他に研究の例がなく、新しい種類の結果を出したと言える。また、この荷重付き合成作用素は、等距離作用素にならないことも示した。(現在、該当する2つの論文を投稿中)(3)日本工業大学・大野修一准教授との共同研究として、合成作用素や掛け算作用素との関連が深い積分作用素についての研究を始めた。これは、定義域をBergman空間とし、値域をBMOAを含む解析関数空間の族として、この場合の積分作用素の有界性とコンパクト性について特徴付けることが出来た。(現在、投稿準備中)従来の研究テーマである解析関数空間上の合成作用素の研究に加え、グラフ上の合成作用素の研究や、積分作用素の研究も始まり、いずれも十分な結果を得ているため、順調に進展していると考える。

研究代表者は、この研究テーマの周辺状況を調べるうちに、単位円板上の作用素論の離散モデルとして、グラフの特別な場合であるツリーに注目し、その上の作用素の研究を行う必要性があることに気づいた。特にツリーのグラフとしての構造を反映する代表的な関数空間として、リプシッツ空間がある。このリプシッツ空間では、その2つの頂点の間の誘導距離が、2つの頂点間の辺の個数に一致するという顕著な性質がある。平成30年度は、このリプシッツ空間上の種々の作用素の研究を主に行った。(1)研究代表者は、ツリーの上のリプシッツ空間に作用する荷重付き合成作用素の、下からの有界性に関連する単射性半径を決定した。また、全射性半径も決定した。これらの結果の系として、荷重付き合成作用素の下からの有界性の特徴付けも得られている。(該当する論文を投稿中)(2)研究代表者は、ツリーの上のリプシッツ空間に作用する積分作用素の有界性及びコンパクト性について特徴付けた。また、この結果の一般化として、二つの異なる荷重付きリプシッツ空間の間に作用する場合の積分作用素まで拡張することが出来た。(現在、論文の準備中)(3)研究代表者は、ツリーの上のリプシッツ空間の荷重付き合成作用素が全射等距離写像になる場合を特徴付けた。この結果を基にして、リプシッツ空間の一般の全射等距離写像の満たす必要条件を得た。(現在、論文の準備中)今後は、解析関数空間上の作用素の研究と、二次の正値可逆行列の全体の成すジャイロ群の代数構造の研究の両面から研究課題を進めていく。グラフ上の合成作用素の研究については、研究分担者の防衛大学・瀬戸道生准教授と再生核Hilbert空間の理論の応用を視野に研究する。積分作用素については、Bergman空間からVMOAタイプの空間に作用する場合についても研究を進める。物品が予定より安く購入できたことと、研究分担者のうち1名が異動した都合で出張が予定より減ったため。(理由)海外を含むいくつかの出張予定が日程調整の結果、次年度に行うことになったため。(使用計画)平成30年度実施分として支払請求した分と合わせて、当初の計画通りに使用する。平成29年度実施分として支払請求した分と合わせて、当初の計画通りに使用する。
マイクロマシンによる自立型糖尿病強化インスリン療法システムの研究

現在国内の糖尿病患者は、約1000万人ともいわれ循環器疾患の大きな原因を占め、人工透析患者の30%や網膜症による失明の原因となり社会的負担が著しく増大している。しかし厳密な血糖管理で進行を抑制できるが、低血糖発作の危険にさらされてしまう。持続的に血糖値をモニターすれば安全であるが、実用的デバイスは存在していない。我々は生体内の化学量を積極的に動力源に利用し機械的運動する、糖尿病治療用アクチュエータを研究してきている。この原理を微細加工技術を用いたマイクロアクチュエータの開発をしてきた。これまでにシリコンプロセスを応用したバルブシステムを考案してきたが、さらに光造形法によるバルブ機構を設計した。光造形法は、予め3次元CAD等により設計されたデータに基づいて、上方からレーザ光を液状感光硬化性樹脂にXY面走査し、水平断面形状に樹脂を硬化させそれを積層させる。この方法は半導体技術との融合が簡単であり、電子デバイスとの融合も容易である。本研究の成果(A)グルコース水溶液200mg/dlの濃度変化で可動膜の変位は20分間に5μmの変位を起こし、高濃度ほど変位量は大きく、また変位する速度も速いことが分かった。この性質は、糖尿用の治療時に高血糖時ほどインスリンの注入量を多く、さらに短時間に注入できることを意味し、インスリン療法に適した性質を持った浸透圧バルブとなりうることを示唆している。(B)ブドウ糖溶液濃度変化によるバルブの流量は低濃度ほど少なく、高濃度ほど大い非線形性である。(C)約10mm^3の立方体の大きさでインスリンの量としては十分な量を注入できることが分かり、臨床的にも効果的に働き、十分に機能することを示すことが出来た。現在国内の糖尿病患者は、約600万人と言われており増加の一途をたどっている。糖尿病は、引き起こされる合併症がその予後を左右し、糖尿病性網膜症で失明したり、発症後約10年で25%に糖尿病性腎不全に合併し、人工透析患者の30%を占め莫大な医療費を費やしている。しかし不治の病の糖尿病も厳密な血糖管理で、その進行を妨ぐことができるが、これには低血糖発作の危険を避け得ない。そこで本研究は血糖管理のデバイスとして、半透膜を利用したアクチュエータを提案した。これは半透膜を介し高血糖と接触すると水の移動が起こり体積変化が起こる。すなわち血糖の化学量をインスリンを放出させるための機械的運動に直接変える微小浸透圧駆動バルブを半導体プロセスでの構成とマイクロ化を目標とする。本研究の成果(A)シリコン基板の異方性エッチングで流路を含むバルブ本体を構成し、ダイアフラム可動バルブをシリコーンゴムで、フォトリソグラフィでレジストを展開するようにスピンコートし、同時にシリコン基板を接着した。すなわち半導体プロセスだけを用いバルブ(バルブ部サイズ5mmX5mm)を構成した。これにより半導体技術を流用でき、更なるマイクロ化も可能である。また低コスト、大量生産、感染の防止になる使い捨ても可能なだけでなく、電子回路とのハイブリッド化も可能である。(B)エネルギーの供給を要せず外部の血糖値の変化で、ダイアフラムバルブの機械的運動を可能にした。その結果ダイアフラム膜の変位はインスリンを注入するには注射針以上の十分な流路確保できることをレーザ変位計を用い実験的に確認した。またグルコース濃度の上昇に対し流路は線形的に拡大することが分かった。(C)血糖値の上昇でインスリンが放出され、その結果血糖値が低下すれば駆動を停止する制御系も要しないインテリジェントな自律的システムが可能であることをシュミレーションで確認した。
cAMPシグナルカスケードによる光環境応答の分子機構

改変デトマー培地で培養したAnabaena cylindricaの細胞を遠心により集め、常法に従って抽出したgenomicDNAを用い、クローニングベクターとしてpBR322を利用し、independent clone(1x10^4)、平均insert長9.3kbのライブラリを作製した。このライブラリを用い遺伝子導入したE.coliのMK1010株(アデニル酸シクラーゼ欠損株)の形質転換体より、一個のcya^-のマルトース発酵を相補する形質転換体を得た。この形質転換体より回収したプラスミドクローンpAC1を導入したcya^-のE.coliは多量のcAMPを含んでいることがわかった。pAC1の制限酵素切断断片地図と、それぞれの切断断片をcya^-のE.coliに導入したときのマルトース発酵能の検索から、マルトース発酵能を回復させる領域1.8kbを同定し、塩基配列の決定を行った。この領域には1,506bp、502アミノ酸残基からなるタンパク質をコードするオープンリーディングフレームが見い出された。このオープンリーディングフレームのアミノ酸配列のC末端側は、根粒菌(Rhizobium meliloti)、ラットのタイプIII型、ショウジョウバエのアデニル酸シクラーゼ、ウニ、ラット、マウス、ヒトのグアニル酸シクラーゼの触媒領域と相同性があることがわかった。また、構成アミノ酸から予想される疎水性の度合いについて検討した結果、この酵素には膜を貫通する領域があることが推定された。A.cylindricaのアデニル酸シクラーゼには、タンパク質のN末端および中央付近に疎水性アミノ酸からなる配列が2箇所存在しており、1次構造上から膜タンパク質であることが示された。この酵素は、中央で膜を1回貫通した、いわゆる受容体型の膜タンパク質であることが予測された。ラン藻のアデニル酸シクラーゼが、原核生物よりは、真核生物型に近い構造を示すことから、ラン藻にも真核生物に類似したcAMP依存性信号応答機構が存在する可能性が示された。
エキスパート・フレンドリーな損傷・強度評価システム

1)配管の延性不安定破壊に対する評価システムの開発;従来の弾塑性破壊力学的取扱いは、偏微分を含む余りにもソフィスティケイテッドで物理的意味が不明確であったが、本研究においては荷重変形曲線をべースとし、これに欠陥寸法とJ積分をパラメータにした曲線群を重畳し、容易に安定・不安定条件を評価し得るシステムを開発した。さらに本システムに熱応力負荷時の強度評価システムを付加し、熱衝撃時に構造系の安全度がどのように推移するのかを容易に読み取れるシステムを開発した。2)対話的機能を有するエキスパートシステムの開発;疲労データの検索、信頼性評価、画像処理などの独立したプログラムモジュールを統合化してエキスパートシステムを構築するための問題点を検討した。ここではMSDOSのチャイルドプロセス機能の利用によって複数モジュールの統合化を達成した。3)疲労強度特性評価エキスパートシステムの開発;まず、材料学会より提供され幅広く普及している疲労強度データをパソコン上の汎用データべース上に乗せるためのシステム開発を行った。次に2)項の原理に基づき、エキスパートシステムとしてのメインプログラムをFORTRANで記述し、これにチャイルドプロセスとしてのデータべースを結合したところ、よりエキスパートフレンドリーなシステムとすることができた。4)エキスパートフレンドリーな信頼性評価システムの開発;最後に信頼性評価プログラムを独立モジュールとして追加し統合的なエキスパートフレンドリーシステムの構築を試みた。荷重側の統計的性質を与え、疲労強度データはデータべースシステムより検索し、強度の統計処理を行った上で信頼性評価を行う。逆に所定の信頼度を満足する為の荷重側、強度側のばらつきの範囲をグラフィック画面で読取可能となった。1)新評価アルゴリズムの開発;エキスパートフレンドリーなシステムを構築するため,新たな評価アルゴリズムを開発した.本アルゴリズムは入力データ,評価方法,推論過程および結論に互って,各分野のエキスパートとの対話によって彼らを助けながら,その知識および洞察を有機的に活用するものである.マイクロコンピュータの対語,画像,通信の機能を活用した評価方式の開発を完了した.2)プログラミング環境の整備;主としてMSーDOS上のFORTRAN,PrologおよびC言語によるソフトウェア開発の環境を整え,また研究室で開発済みの有限要素法,疲労強度解折用ソフトの移植を完了した.汎用のデータベースとしてはdBASEIIIを採用し,これに材料学会提供の疲労強度解折システム結合し,システムの骨格とした.3)原子炉圧力容器加圧熱衝撃に対する評価システム;熱応力解析,中性子照射脆化,応力拡大係数解析,破壊力学的破壊基準などに関する開発済みのソフトウェアを移植し,これにエキスパート・フレンドリーな特性を付加したシステムを試作した.特に,最終評価において各分野のエキスパートの討議を反映した総合評価を行うためのアルゴリズムを開発した.4)圧力容器などの確率論的破壊力学評価に対するシステムの開発;潜在欠陥寸法,破壊靭性,亀裂准展則などの不確定性を考慮した疲労・脆性破壊の確率論的評価のシステムを試作した.特に,入力データの作成支援システムに重点を置くこととし,また入力データに対するエキスパート意見をシミェレーション中間結果のエキスパートへのフィードバックを経た後に再評価・修正してリアリスティックな入力に収束させる対話型アルゴリズム,すなわちシステムとの対話によるエキスパート支援とその知見活用の機能を目指したアルゴリズムを組込んだ.1)配管の延性不安定破壊に対する評価システムの開発;従来の弾塑性破壊力学的取扱いは、偏微分を含む余りにもソフィスティケイテッドで物理的意味の不明確な評価法となっていたが、本質的に同じことが荷重一変形線図を欠陥寸法とJ積分をパラメータにした曲線群により、容易に安定・不安定条件その他の特性を表現できる。規制および一般公衆など専門家以外の安全性・信頼性アクセプタンスに有効な評価結果表示法を開発した。2)破面画像処理による事故解析支援システムの開発;コンピュータ画像処理による立体視と特徴抽出によって破面解析の労力を軽減するシステムを組込み、事故原因の解析をするエキスパートを支援する方式を開発した。3)エキスパート意見への客観性付与方途の開発;

権威あるデータベースが存在しない時、エキスパート意見はリアリステックなものであっても、その評価結果の権威についての疑問が残る。このため上記1)のアルゴリズムの一般化を行った。すなわちあい昧性のある入力と評価結果との結びつきが明確な評価結果表示法を用い、結果を利用する者が直接かつ容易に入力の影響度および安全裕度を確認できるようにした。4)応用範囲の汎用化;上記の開発したシステムを統合し、一般の化学プラントの健全性・安全性の評価を行うことのできるシステムに拡張した。このために、想定される各種破壊・損傷モード,特に高温強度,腐食などを包含し、その中から重要なモードをエキスパートの知見を反映して選定するアルゴリズムを採用した。特に原子力関連とは異なって、プラントおよび機器固有のデータベースの完備は期待出来ないから、本システムの応用対象として適切であるものと考えられる。
新規グリコシル化を活用する認識機能糖鎖高分子の合成

牛乳の中に含まれているシアリルラクトースと呼ばれるオリゴ糖を牛乳から単離精製した。シアリルラクトースとp-ビニルベンゾイルクロリドとから、反応効率の高いβ-N-グリコシル化を駆使してスチレン誘導体を合成し、そのラジカル重合を行って糖鎖高分子を高収量で得た。このシアリルラクトース結合ポリスチレンがインフルエンザウイルスと強く結合することを、静岡県立大学薬学部の鈴木康夫教授との共同研究で明らかにした。シアリルラクトースのオリゴ糖そのものでは、このような機能を発現しない。したがって、シアリルラクトース高密度で高分子に結合しているために、いわゆるクラスター効果あるいは多価(multi-valency)効果が発現して、インフルエンザウイルスの表層にあるヘマグルチニンタンパク質のシアル酸結合部位に強く取り込まれたものと考えた。次に、大腸菌の表層にあるコロミン酸と呼ばれる多糖の加水分解により調製されたシアリル二糖を原料として用いた。シアリル二糖とp-ビニルベンジルアミンをBOPあるいはHOBtの略称で呼ばれるペプチド縮合剤の存在で反応させて、シアリル二糖結合スチレンを調製し、その単独重合およびアクリルアミドとの共重合を行った。シアリル二糖には二種類のカルボキシル基があるので、どちらが反応してアミドを形成したのかを、酵素シアリダーゼを活用して調べた。その結果、シアリル二糖の還元性末端にあるカルボキシル基がアミドを形成することが明らかとなった。このような二種類の貴重なオリゴ糖を用いて、ほとんど一段階でポリペプチドに結合されることを試みた。まず、シアリルラクトースの還元性末端にアミノ基を導入して、ペプチド縮合剤の存在下にポリグルタミン酸との反応を行って、シアリルラクトース結合ポリグルタミン酸を調製した。このものとインフルエンザウイルスとの結合を調べたところ、上記のポリスチレン誘導体に比べると弱い機能を示したにすぎなかった。また、シアリル二糖とポリリシンとの反応を同様に行って、シアリル二糖の還元性末端のカルボキシル基が反応した生成物を調製した。シアリルラクトースおよびシアリル二糖は、天然の糖タンパク質や糖脂質のオリゴ糖鎖のなかに含まれる貴重な糖鎖であり、特有の重要な機能を発現している。本研究で合成した人工複合糖質高分子は、これらの天然糖鎖の生体機能と関連づけて解析するための、重要なモデル物質となると考えている。糖鎖および高分子の両方の特性を活用して、糖鎖を高密度に配向・配列させて、糖鎖のもつ特有の動的精密構造認識の促進を図るとともに、低分子物質とは異なった生物機能の発現を目指す。そのために構造が規制された「糖鎖高分子」や「枝分かれ高分子」を設計し、超分子構造に基づく生物認識機能を探究する。N-アセチルラクトサミン、N-アセチルアロラクトサミン、およびガラクトシルラクトースにN-グリコシル化反応の手法を適用させた。オリゴ糖のヒドロキシル基を保護することなく、one-potの簡単な方法で立体規則性の糖質ビニル化合物を合成できたことになる。

オリゴ糖の還元性末端がp-ビニルベンズアミドとβ-アノマー型でN-グリコシド結合していることを^1H-NMRおよび^<13>C-NMRにより確認した。糖鎖高分子のレクチンに対する認識作用を明らかにすることは、生命を細胞レベルで考察する上で重要な知見をもたらすとともに、細胞機能を生体の内外で利用する基礎的な情報を与えることを期待できる。本研究で得た糖鎖高分子も含め、数種類の人工複合糖質高分子について、(a)ゲル内二重拡散法、(b)赤血球凝集阻害試験、(c)酵素結合レクチン測定、(d)蛍光分光分析を行うことでレクチンとの相互作用を検討した。その結果、低分子物質とは異なった特有の動的精密構造認識を発現することが分かった。このように、糖質および高分子の両方の特性を活用することで、新しい生理・薬理活性物質や生体機能材料を創出することが可能である。本研究で得た人工複合糖質高分子は、細胞表面のレクチンを解析するための糖鎖プローブ材料として、また、細胞培養基質材料としても非常に有用なものと期待している。牛乳の中に含まれているシアリルラクトースと呼ばれるオリゴ糖を牛乳から単離精製した。シアリルラクトースとp-ビニルベンゾイルクロリドとから、反応効率の高いβ-N-グリコシル化を駆使してスチレン誘導体を合成し、そのラジカル重合を行って糖鎖高分子を高収量で得た。このシアリルラクトース結合ポリスチレンがインフルエンザウイルスと強く結合することを、静岡県立大学薬学部の鈴木康夫教授との共同研究で明らかにした。シアリルラクトースのオリゴ糖そのものでは、このような機能を発現しない。したがって、シアリルラクトース高密度で高分子に結合しているために、いわゆるクラスター効果あるいは多価(multi-valency)効果が発現して、インフルエンザウイルスの表層にあるヘマグルチニンタンパク質のシアル酸結合部位に強く取り込まれたものと考えた。次に、大腸菌の表層にあるコロミン酸と呼ばれる多糖の加水分解により調製されたシアリル二糖を原料として用いた。シアリル二糖とp-ビニルベンジルアミンをBOPあるいはHOBtの略称で呼ばれるペプチド縮合剤の存在で反応させて、シアリル二糖結合スチレンを調製し、その単独重合およびアクリルアミドとの共重合を行った。シアリル二糖には二種類のカルボキシル基があるので、どちらが反応してアミドを形成したのかを、酵素シアリダーゼを活用して調べた。その結果、シアリル二糖の還元性末端にあるカルボキシル基がアミドを形成することが明らかとなった。このような二種類の貴重なオリゴ糖を用いて、ほとんど一段階でポリペプチドに結合されることを試みた。まず、シアリルラクトースの還元性末端にアミノ基を導入して、ペプチド縮合剤の存在下にポリグルタミン酸との反応を行って、シアリルラクトース結合ポリグルタミン酸を調製した。このものとインフルエンザウイルスとの結合を調べたところ、上記のポリスチレン誘導体に比べると弱い機能を示したにすぎなかった。また、シアリル二糖とポリリシンとの反応を同様に行って、シアリル二糖の還元性末端のカルボキシル基が反応した生成物を調製した。シアリルラクトースおよびシアリル二糖は、天然の糖タンパク質や糖脂質のオリゴ糖鎖のなかに含まれる貴重な糖鎖であり、特有の重要な機能を発現している。
量子固体中に捕捉された分子の核スピン異性体間の変換ダイナミクスの解明

固体パラ水素結晶中における分子の原子核スピン異性体間の変換過程を解明するために、その振動回転遷移の強度に対する時間変化を観測した。パラ水素中に含まれるオルト水素濃度が高い(1000ppm)場合には捕捉された分子内での緩和でなく、不純物として存在するオルト水素の四重極子相互作用を介した変換過程が支配的となることが明らかになった。気相中では核スピン異性体間の緩和は殆んど起こらない。しかし、固体水素中のメタン分子では不純物のオルト水素濃度[ο-H_2]に依存してJ=1(I=1)からJ=0(I=2)への緩和速度が変化することが知られている。本研究ではパラ水素結晶中における分子の核スピン異性体間の状態緩和を振動遷移および回転遷移の測定することで、分子の原子核スピン異性体間の変換ダイナミクスを解明することを目的とした。メタンのν_3バンドをフーリエ変換赤外分光器でモニターしながら結晶を作成したところ、約10ppmの濃度に調整されたサンプルをクライオスタット内で2Kに冷却した基板に20分程度吹き付けるのが最適条件と分かった。[ο-H2]を変化させることによって、観測されたメタン分子の振動回転遷移から異性体間の緩和時間の違いを測定した。その結果、[ο-H,]に比例して緩和速度が速まることを明らかにした。また、メタンの重水素化物についても同条件で結晶を作ることが可能であった。回転遷移の測定では、クライオスクット内におけるマイクロ波の緩衝効果によるノイズが大きいために、回転遷移を観測することはできなかった。緩衝効果の影響に依存しない観測法として、マイクロ波吸収に伴う結晶の温度変化を観測する光熱変換検出を試みた。市販の熱電対10uV/Kでは感度が低いために、検出器としてインジウムInの薄膜を用いた超伝導センサーを開発し、10mV/Kの感度を得た。気相中では核スピン異性体間の緩和が殆ど起こらない。しかし、固体パラ水素結晶中のメタン分子は不純物として僅かに存在するオルト水素の濃度[o-H_2]に依存してJ=1(I=1)からJ=0(I=2)への緩和速度が変化することが知られている。本研究ではパラ水素結晶中における分子の核スピン異性体間の状態緩和を振動遷移および回転遷移を測定することで、分子の原子核スピン異性体間の変換ダイナミクスを解明することを目的とした。メタン分子CH_4(T_d)の同位体種CH_2D_2(C_<2v>)に対して結晶を作成したところ、対称性の違いによりv_3およびv_4振動モードの三重縮重が解け、それぞれ3つの振動回転遷移が観測された。CH_2D_2における核スピン異性体間の緩和過程の[o-H_2]依存性を観測した。[o-H_2]が1000ppm程度の高濃度領域におけるスピン異性体間の緩和速度はCH_4と比べてほぼ同じであった。低濃度の依存性については結晶製作過程で低濃度のo-H_2を作ることができなかったため、緩和速度の依存性を確認することができなかった。高温領域ではメタン分子のエネルギー準位構造に依存しないことから、結晶中に含まれるo-H_2との四重極-四重極相互作用による核スピン変換過程の可能性が示唆された。
膝蓋腱の神経終末に関する実験的研究

成熟家兎30羽を使用し、右膝の膝蓋腱中央1/3を骨付きで切除した。左膝は処理を加えずにコントロール群とした。術後3カ月、6カ月、9カ月後に、各群10羽ずつ屠殺し部分切除後の膝蓋腱を一塊として摘出し、tensilonを用いた引っ張り強度を各5羽ずつ測定し、患健側比を求めた。更に、残りの各5羽に対しては、同様の摘出膝蓋腱を凍結後、40μmの連続切片を作製し、抗PGP(Protein Gene Product)抗体にて免疫組織化学的染色を行った。その後DAB反応にて発色させ光顕観察を行い、強度同様、患健側比による定量的検討を行った。現在までのところ、tensilonによる引っ張り強度は、患健側比で3カ月60.7%、6カ月66.7%、9カ月69.7%と経時的にわずかながらの増大傾向を示していた。PGP陽性線維は、一般的に膝蓋腱において各骨(膝蓋骨・脛骨)付着部近傍及び表面近くに多く分布しており、経時的には、3カ月60.2%、6カ月66.0%、9カ月74.1%(患健側比)と引っ張り強度同様に定量的増加が認められた。前十字靱帯再建においては従来の力学的機能再建のみならず、近年は神経知覚学的機能再建をも考慮する必要があると考えられている。一方、採取される膝蓋腱が膝の伸展機構の一部である事を考えると、再建使用目的にて採取された膝蓋腱の残存部分においても各機能の代償が必要であると推測される。今回の研究の結果、術後経時的に各機能(力学的、神経学的)の増大が認められた。
RSVサブグループに関するウイルス学的ならびに病学的研究

有効なRespiratory syncytialvirus (RSV)のワクチン株の選定のためには長期に渡るRSV流行株の調査が不可欠である.今回,RSV感染児よりのウイルス分離を行い,得られたウイルス株のサブグループをモノクローナル抗体を用いて決定した.札幌市では1980年から1992年までの12シ-ズンで186株,小樽市では1987年から1992年までの5シ-ズンで115株のRSV株が分離された.札幌市におけるRSVサブグループはA株が112株(60.2%),B株が74株(39.8%)とA株が優位であった.また,各シ-ズン毎の優位流行株はA株からB株,B株からA株に交替していく傾向が明かであった.小樽市の5シ-ズンの検討では,115株中,A株が48株(41.7%),B株が67株(58.3%)とB株が優位であった.優位流行株の交替も認められた.性別,年齢と感染RSVサブグループとの間には特に有意な関係を認めなかった.臨床診断はMufsonらの診断基準に基づいて決定したが,臨床診断とRSVサブグループとの間にも特に有意な関係を認めることはできなかった.A,B株感染のいずれかの場合も,急性期の鼻汁中には抗RSV活性は検出されないが,回復期には全例に両株に対する抗体活性が検出された.その反応は,感染サブグループに対するものが他株に対してより高く,そのことはA,B両株の場合とも統計学的に有意であり,株特異的な局所免疫反応を確認できた.この株特異的な反応の主体はG蛋白に対するものであった.母体由来と考えられる急性期の血清中のIgG抗体は,抗F抗体反応が主であり,その高さと,児の回復期の鼻汁中の抗F IgA抗体との間には有意な逆相関の関係が認められた.この事は母体由来抗体が,ウイルス蛋白特異的に,児の局所IgA抗体反応反応を抑制する事を示しており,興味深い所見である.このことはまたワクチンの開発,治療としてのrグロブリン製剤の使用にあたり示唆に富む所見と考えられた.有効なRespiratory syncytialvirus (RSV)のワクチン株の選定のためには長期に渡るRSV流行株の調査が不可欠である.今回,RSV感染児よりのウイルス分離を行い,得られたウイルス株のサブグループをモノクローナル抗体を用いて決定した.札幌市では1980年から1992年までの12シ-ズンで186株,小樽市では1987年から1992年までの5シ-ズンで115株のRSV株が分離された.札幌市におけるRSVサブグループはA株が112株(60.2%),B株が74株(39.8%)とA株が優位であった.また,各シ-ズン毎の優位流行株はA株からB株,B株からA株に交替していく傾向が明かであった.小樽市の5シ-ズンの検討では,115株中,A株が48株(41.7%),B株が67株(58.3%)とB株が優位であった.優位流行株の交替も認められた.性別,年齢と感染RSVサブグループとの間には特に有意な関係を認めなかった.臨床診断はMufsonらの診断基準に基づいて決定したが,臨床診断とRSVサブグループとの間にも特に有意な関係を認めることはできなかった.A,B株感染のいずれかの場合も,急性期の鼻汁中には抗RSV活性は検出されないが,回復期には全例に両株に対する抗体活性が検出された.その反応は,感染サブグループに対するものが他株に対してより高く,そのことはA,B両株の場合とも統計学的に有意であり,株特異的な局所免疫反応を確認できた.この株特異的な反応の主体はG蛋白に対するものであった.母体由来と考えられる急性期の血清中のIgG抗体は,抗F抗体反応が主であり,その高さと,児の回復期の鼻汁中の抗F IgA抗体との間には有意な逆相関の関係が認められた.この事は母体由来抗体が,ウイルス蛋白特異的に,児の局所IgA抗体反応反応を抑制する事を示しており,興味深い所見である.このことはまたワクチンの開発,治療としてのrグロブリン製剤の使用にあたり示唆に富む所見と考えられた.Respiratory syncytialvirus(RSV)感染児よりのRSV分離を試みた。分離は当研究室で継代培養されているHEp-2細胞を用いた組織培養法によって行った。患児より鼻汁を採取し,遠心分離の後上清をセミマイクロプレート上のHEp-2細胞に接種し,経時的に観察した。RSVに特微的とされる合胞体形成を伴う細胞変性効果(cytopathic effect;CPE)が現れたものを分離陽性とし,培養液を-80°Cに保存した。また経時的に鼻汁を採取し保存した。平成4年度分を合わせると,現在まで,札幌市では180株あまり,小樽市でも110株あまりのRSV株を分離保存することができた。分離株のサブグループをRSV A,B株にそれぞれ特異的,およびA,B両株に反応する単クローン性抗体を用いた酵素抗体法により決定した。保存分離株を96穴のマイクロプレート上に培養されたHEp-2細胞に接種し,CPEを認めた後アセトン固定したものを抗原固相として直接用いた。

一次抗体としては前述の単クローン性抗体を,二次抗体としては酵素標識抗マウスIgG抗体を用いた。その結果,札幌市におけるウイルス分離は多くは入院治療を必要とした症例よりなされたものであるが,A株が111株,B株が74株とA株が優位であった。一方,小樽市の一般開業医院にて分離された115株のうちでは,A株が48株,B株が67株とB株が優位を占めた。小樽市でのRSV分離症例は,外来治療が可能な軽症例であり,これらの結果よりRSV感染重症例にはA株が,軽症例にはB株が多いと考えられた。A,B株内の亜型の存在を明らかにするために更に検索を続行している。Respiratory syncytialvirus(RSV)感染児よりのRSV分離を試み,札幌市では180株あまり,小樽市でも110株あまりのRSV株を分離保存することができた。分離株のサブグループをRSV A,B株にそれぞれ特異的,およびA,B両株に反応する単クローン性抗体を用いた酵素抗体法により決定した。A株が111株,B株が74株とA株が優位であった。これらの分離株の中の,サブグループ内の亜型の存在を明らかにするため,分離ウイルスと多くの単クローン性抗体との反応性を検討し,B株が,3種類に分けられることを確認できた。また,A株の中にも,数個の変異ウイルスを確認することができた。急性期の鼻汁よりウイルスを分離できず,酵素抗体法によりウイルス抗原を検出することで診断できたRSVの再感染と考えられる4例を確認した。これら症例の臨床症状と,初感染の児の臨床症状との間に明かな相違はなかった。サブグループ特異的な局所免疫反応を探る目的で鼻汁中の抗RSV-IgA,抗RSV-IgG抗体を測定するTissue cultureELISA法を開発した。抗原固相作製にはRSV Long株(A株),61-48株(B株)を用いた。それにより,30名余りのA,B株感染児の鼻汁中の抗体活性を測定したが,A,B株感染のいずれの場合も,急性期の鼻汁中には抗RSV活性は検出されないが,回復期には全例に両株に対する抗RSV IgA,IgG活性が検出された。その反応は,感染サブグループに対するものが他株に対してより高く,そのことはA,B両株の場合とも統計学的に有意であり,株特異的な局所免疫反応を確認できた。平成4,5年度の研究で札幌市および小樽市におけるRespiratory syncycalvirus(RSV)感染児よりの分離ウイルスのサブグループの決定を終了した.また,亜型の存在の検討,臨床症状,診断との関係についての検討も終了した.更にそのデータを踏まえ,サブグループ特異的な免疫反応が,感染局所に出現してくることを確認できた.続いて,今年度は,RSVの中和エピトープを有するエンベロープ蛋白であるFusion protein(F),Large glycoprotein(G)に対する抗体反応が感染局所にどのように出現してくるか,また,その抗体反応に,既存の母体由来抗体がどのように関与してくるかについて検討した.サブグループA,B株間には特にGの抗原性に大きな変異が認められていることから,このような検討には同一のサブグループに感染した対象を用いる必要があり,よってこれまでの研究でなされたRSV感染のサブグループ決定が不可欠である.今回はA株感染児のみを対象とした.鼻汁,血清中のIgA,IgG抗体はTissue culture ELISA法により測定したが,抗原ウイルスとしてはRSV A2株のF,Gを表現しているVaccinia-RSV recombinantを用いた.
平家物語八坂系諸本の総合的研究

古典のなかで、もっとも多様なテクストを伝える『平家物語』。その諸本のうち、もともと琵琶法師の語りがかかわったと思われるのが、語り系の諸本である。大きく一方系と八坂系とに分かれるが、とくに後者の八坂系については研究成果もとぼしい。今回の共同研究においては、その後者について、従来の五分類説に従いつつ、可能なかぎりの再調査による分類の確認と補足を行なった。その作業のなかで、未紹介の本に出会うことも多く、その際に分類の基準そのものの再検討に迫られることがしばしばであった。かくて分類のための基準としてのマニュアルの作成が中心的な課題となった。今回の3年間にわたる調査の結果、今後新しい資料にめぐりあった際の、分類判定のための基準は、ほぼ完全なものが完成したと言ってよいだろう。調査の結果を今後の研究に活かすために、可能なかぎり完璧な書誌データの集積をも行いえたものと思う。時間と労力の都合で、今回は五類のうち、これまで八坂系の主流を形成するとされた第一類と第二類の調査に重点をおかざるをえなかったけれども、その過程で他系統や、八坂系内部で、複数系統にわたる相互の間での混態やとりあわせの多いことも明らかになった。今後、こうした現象の意味を考察しなければならないし、ひいては〈八坂〉系なるものの意味、琵琶法師の語りの関与のありかたをも再考する必要のあることが明らかになった。別に提出する研究報告集にその成果と見通しを各担当者が報告している。付記される研究史展望も、このような課題から、今後の研究のための有効な整理を施してある。昨年7月12日に第1回の会合を開いて方針を確定して以来、都合5回の打ち合せ会を開き、その都度経過を報告し、方針を見なおしながら最善の調査方法を探って作業を進めて来た。この間、まず国書総目録によりつつ、その補正を行なって、いわゆる八坂系と思われる諸本の所在を確認し、既成の成果をも参照しつつ書誌カードによる書誌調査データーベースの作成を行い、今後の作業の基本とすべき本文のを定め、撮影もしくは複写を行なった。調査の対象になったのは、盛岡市中央公民館・米沢市立図書館・彰考館・大前神社・筑波大学・内閣文庫・国文研究資料館・國学院大学・大東急記念文庫・静嘉堂文庫・学習院大学・尊経閣文庫・東洋文庫・国会図書館・慶応大学、東京大学・東京芸術大学・中京大学・京都府立総合資料館・大谷大学・京都大学・天理図書館・広島大学・山口県立図書館の24箇所、重点的に入手した本文は13点にのぼる。基礎的本文については、所蔵者の許しをえて、複数複写をとった。調査の過程で、山下の言う第1類本のうちの中院本について、従来、せいぜい2種の版の存在しか知られなかったのが、実はかなりの数にのぼる異版のあることが明らかになるなど、予期しなかった文化史的事実が明らかになりつつある。なお、この間、会合の度に各巻ごとに担当を決めて、諸テクストの異同を調査・報告し来年度の具体的な作業を進める上での見通しをも立てている。一方、研究史を踏まえつつ、八坂系と判定するためのマニュアルの作成にも着手している。基礎的な作業として進めつつあるこれらの成果は、今後未発見の資料の調査にも有力な手がかりになるであろう。山下が、昔、個人の力で数年をかけて行なった作業が、共同研究により短時日の間に広く、しかも精密に進みつつあることに今昔の感を催す。昨年度に引き続き研究会を継続、この3月、新潟大学で第12回目を開催の予定である。この間、鈴木が毎回の記録を「八坂系平家物語研究会会報」として発行し、現在21号を数える。作業の進捗状況を展望しつつ成果を確認し、あわせて今後の作業を立案するうえで有意義な場を提供している。

関連諸本の調査としては、昨年度、ほぼおえているのであるが、さらに今年度は高橋貞一氏宅・東京都立中央図書館・諏訪市立図書館・大阪天満宮に追加の調査を行い、とくに東京都立中央図書館本については、これが第一類A種の三条西家本に近いことが発見された。これまでの研究の不備を補う成果である。また昨年度から引き続いて八坂系諸本の本文異同を巻単位で行なってきたが、第一類のA種とB種の関係については、漢字の用字法などから考えて、これまでの山下の二分類、成立論に再検討の必要のあることが、ほぼ確実になりつつある。また従来五類に分類されてきた八坂系諸本の各種の本文の成り立ち方を考えた場合、いわゆる八坂系とか八坂流とかいった概念の実態そのものを再検討する必要に迫られる。いずれも、この二年間の調査研究で気付いた重要な課題である。また研究会では基礎的な作業の一環として、八坂系諸本に関する従来の成果について学習会を行なってきた。いわゆる第四類本の分類の在り方を検討し、百二十句本の位置付け、その語りの問題などである。一方、中院本の調査と、その諸本判定のためのマニュアルの作成、活字刊本の見直しも精力的に継続し、ほぼ完成に近付きつつある。最終年度にあたり、三条西家本を中心とした、各巻の諸本異同状況の検討を続行し、完了した。その結果、諸本の巻ごとの分類を判定するめどを獲得し、さらに今後新出の異本にめぐりあった際に備えて、合議の上、その分類判別のためのマニュアルの作成を実行し、これを完成した。別紙『研究成果報告書』の中核を、このマニュアルが占めることになった。『研究成果報告書』の内容は、共同研究の目的と経緯、資料編、レポート編から成るが、それらに目的・経過・今後の課題について各研究員が詳細に述べている。『平家物語』の語り本の編集基盤・状況などを考察する上に重要な課題を提起したものと確信する。個人研究では望めない成果をあげえた共同研究の実力を痛感させる場であった。
マウスAPOBEC３のプロテアーゼ抑制機構解明による新規抗レトロウイルス薬開発

シチジンデアミナーゼAPOBEC3は、デアミナーゼ活性に依存せずにレトロウイルス複製を阻害できる。しかし、デアミナーゼ非依存性複製阻害機構の実体は明らかでなかった。我々はマウスAPOBEC3がウイルスプロテアーゼによる構造タンパク質プロセシングと粒子成熟を強く阻害すること、APOBEC3存在下では成熟ウイルス粒子の出芽が抑制されることを発見した。マウスAPOBEC3によるウイルスプロテアーゼ活性阻害の分子機構について、今年度は以下の各点を解明することが出来た:1)マウスAPOBEC3は、マウスレトロウイルスのプロテアーゼ活性を定量的に阻害するだけでなく、Gag-Pol前駆体タンパク質からのプロテアーゼ切り出しを阻害する。2)マウス胎仔線維芽細胞で生理的に発現する量のマウスAPOBEC3が、Gag-Pol前駆体からのプロテアーゼ切り出しを阻害出来る。3)ウイルスプロテアーゼ活性の阻害にはデアミナーゼ活性中心は必要でない。4)Gag-Pol前駆体からのプロテアーゼ切り出し阻害活性は、APOBEC3のC-末端側半分により担われる。5)プルダウンアッセイによる解析の結果、マウスAPOBEC3はウイルスプロテアーゼの65番から105番のアミノ酸残基の範囲に直接結合すると考えられる。今年度はこれらの成果を論文にまとめ、学術雑誌に投稿した。また、平成30年10月8日から12日にかけて、淡路夢舞台国際会議場で第30回記念のThe International Workshop on Retroviral Pathogenesis主催し、その中でAPOBEC3及び関連の細胞内ウイルス抵抗性因子に関する特別セッションを設けて、本研究の成果を発表すると共に、世界各国の研究者と討論を行った。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。マウスAPOBEC3は同種由来レトロウイルスに対する生理的抵抗因子であり、系統間の遺伝子多型が宿主の感染抵抗性を決定する。我々はマウスAPOBEC3によるレトロウイルス複製阻害がデアミナーゼ活性に依存しないことを示したが、デアミナーゼ非依存性複製抑制機構の全貌は明らかでない。本研究は、マウスAPOBEC3がHIV-1のGag-Pro-Pol前駆体からのプロテアーゼ切り出しを阻害するとの我々の観察を基礎に、APOBEC3部分断片や変異体のプロテアーゼ切り出し阻害効果を比較解析して、HIV-1 Gag-Pro-Pol前駆体とマウスAPOBEC3との相互作用部位をアミノ酸残基レベルまで同定し、もって新規抗レトロウイル薬開発のシーズとすることを目標としている。平成28年度は、新たな抗HIVプロテアーゼ抗体を調製し、これによりウェスタンブロット上でGag-Pro-Pol前駆体からのプロテアーゼ切り出しの各段階を検出可能とした。また、マウスAPOBEC3のN-末端及びC-末端ドメインを単独で発現させ、HIV発現ベクターの系、または試験管内転写翻訳系でGag-Pro-Pol前駆体のプロセシングに対する影響を比較解析した。その結果、マウスAPOBEC3の全長またはC-末端側ドメインの存在下で、HIV Gag-Pro-Pol前駆体からの成熟プロテアーゼ切り出しが抑制されること、プロセシングの各段階中、マウスAPOBEC3の存在下ではp6とプロテアーゼから成る前駆体の段階で切断阻害が起こることが明らかとなった。さらに、標識APOBEC3によるプルダウンアッセイを実施した結果、マウスAPOBEC3は、既報のHIV RT及びインテグラーゼのみで無く、プロテアーゼ部分にも直接結合することが明らかとなった。本年度の研究により、HIV粒子中の成熟プロテアーゼの多寡のみでなく、試験管内転写翻訳系におけるGag-Pro-Pol前駆体の自己プロセシング系を用いて、HIVプロテアーゼ切り出しに対するマウスAPOBEC3の影響を定量評価できるようになった。また、標識APOBEC3を用いたプルダウン系も確立した。その結果、マウスAPOBEC3がHIVプロテアーゼと直接結合すること、またHIVのGag-Pro-Pol前駆体からのプロテアーゼ切り出し過程を途中で制限し、特定の前駆体が蓄積することを明らかにできたのは、大きな成果であると評価する。また、マウスAPOBEC3の部分断片を発現することで、HIVプロテアーゼの切り出し阻害に有効なのは、C-末端側のドメインであることも明らかとなった。この成果により、今後マウスAPOBEC3分子C-末端側ドメイン中に、HIVプロテアーゼ切り出し阻害に有効な最少構造部位を絞り込むことが可能となる。レトロウイルスGag-PolまたはGag-Pro-Pol前駆体からの各機能性タンパク質切り出し順序は正確には知られていない。今回我々の見出したマウスAPOBEC3存在下でのp6-プロテアーゼ前駆体蓄積は、生理的な阻害因子を用いることで、前駆体プロセシング過程の中間産物を明確に検出できることを示しており、レトロウイルス複製の生理過程について、これまで解析手段が無かった新たな前駆体プロセシング機構を明らかにする機会を与えるものと言える。研究計画は順調に進んでおり、当初予定の研究期間内に目的が達成できると期待される。

本研究は、マウスAPOBEC3がHIV-1のGag-Pol前駆体からのプロテアーゼ切り出しを阻害するとの我々の観察を基礎に、APOBEC3部分断片や変異体のプロテアーゼ切り出し阻害効果を比較解析して、HIV-1 Gag-Pol前駆体とマウスAPOBEC3との相互作用部位を同定し、もって新規抗レトロウイル薬開発のシーズとすることを目標としている。平成29年度は、マウスAPOBEC3とHIV-1およびマウスレトロウイルスプロテアーゼとの相互作用部位を絞り込むことを目的に、マウスAPOBEC3のN-末端側Z2ドメインのみ、およびC-末端側Z3ドメインのみを発現するプラスミドを構築した。一方、マウスレトロウイルスプロテアーゼのC-末端側欠失変異体も複数作成し、これらの相互作用をプルダウン法により解析した。その結果、HIV-1およびマウスレトロウイルスGag-Pol前駆体からのプロテアーゼ切り出しは、何れもマウスAPOBEC3のC-末端側ドメインのみの存在下で阻害されること、マウスAPOBEC3とマウスレトロウイルスプロテアーゼの結合は、プロテアーゼ分子のN-末端側から105残基までが存在する場合はこれが正常に起こり、N-末端側から85残基までを発現させた場合には見られなくなることが明らかとなった。また、デアミナーゼ活性の無いN-末端側Z2ドメインE73Aアミノ酸置換体は、野生型同様にウイルス粒子に取り込まれ、Gag-Pol前駆体からのプロテアーゼ切り出し活性も保たれることが示された。マウスAPOBEC3とレトロウイルスプロテアーゼとの相互作用部位を明らかにする目的に向かって、各分子の部分断片発現による結合部位絞り込みが計画通り進んでいる。当初はHIV-1のプロテアーゼ切り出し阻害とマウスレトロウイルスのプロテアーゼ切り出し阻害で、それぞれに有効なAPOBEC3のドメインが異なるものと考えていたが、今年度の研究で両者が何れもC-末端側Z3ドメインにより阻害されることが明らかとなった。これにより、HIV-1のプロテアーゼ切り出し阻害に有効なAPOBEC3側の構造要件を、マウスレトロウイルスプロテアーゼを相互作用の相手として解析していくことが有用であるとの根拠を得た。マウスレトロウイルスプロテアーゼの部分断片発現による相互作用部位絞り込みも順調に進み、少なくとも一次構造上は、85番目から105番目のアミノ酸残基が重要であると示された。デアミナーゼ活性の無いN-末端側Z2ドメイン活性中心変異体でもプロテアーゼ切り出し阻害が起こることから、APOBEC3によるプロテアーゼ切り出し阻害が、デアミナーゼ非依存性複製抑制機構の少なくとも一端を担うことも明らかに出来た。シチジンデアミナーゼAPOBEC3は、デアミナーゼ活性に依存せずにレトロウイルス複製を阻害できる。しかし、デアミナーゼ非依存性複製阻害機構の実体は明らかでなかった。我々はマウスAPOBEC3がウイルスプロテアーゼによる構造タンパク質プロセシングと粒子成熟を強く阻害すること、APOBEC3存在下では成熟ウイルス粒子の出芽が抑制されることを発見した。マウスAPOBEC