hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
位置及び立体制御ラジカル環化反応を基盤とする生理活性化合物の合成

1.アルケンに対するラジカル環化反応において,アルケン末端に硫黄原子やシアノ基を導入すると,環化反応がexo型でのみ効率良く進行することを見出した.また,これらの結果に対する機構的考察を行うと共に,本反応を(±)-イパルビジン及び(±)-フイゾスチグミンの重要中間体の合成に応用した.2.5-exo型ラジカル環化反応を用いる(3R^*,3aS^*,7aS^*)-3-アリールオクタヒドロインドール-2-オン類の立体選択的合成法を見出し,本反応を(±)-パンクラシンの形式合成に応用した.3.N-ビニル2-ヨードベンズアミドのラジカル環化反応の位置化学について検討し,6-endo環化体はアリールラジカルの5-exo環化と引き続くネオフィル転位を経て生成していることを明らかにした.4.N-(o-ブロモベンジル)エナミドのアリールラジカル環化反応について検討し,オレフィン上に置換基を持たない化合物のラジカル環化反応が6-endo環化体のみを与えるという初めての例を見出し,また,オレフィン末端に2つの硫黄原子を導入すると5-exo環化体のみが得られることも明らかにした.さらに,5-exo選択的アリールラジカル環化反応を抗ヘルペスウイルス活性物質マッピシンケトンのモデル化合物の合成に応用した.5.ハロゲン化合物のラジカル反応においてはクロロ原子よりもヨウ素原子を用いる方が良い結果を与えることが知られている.ところが,α-ハロアミドの5-endo型ラジカル環化反応においては,クロロ原子を用いると好収率で環化体を与えるが,ヨウ素原子を用いると環化体がほとんど得られない,という興味深い結果を与えた.6.酢酸マンガン(III)-酢酸銅(II)系を用いるα-メチルチオアミドの酸化的ラジカル環化反応を見出し,本反応をエリスリナン骨格の短工程合成法を応用した.1.アルケンに対するラジカル環化反応において,アルケン末端に硫黄原子やシアノ基を導入すると,環化反応がexo型でのみ効率良く進行することを見出した.また,これらの結果に対する機構的考察を行うと共に,本反応を(±)-イパルビジン及び(±)-フイゾスチグミンの重要中間体の合成に応用した.2.5-exo型ラジカル環化反応を用いる(3R^*,3aS^*,7aS^*)-3-アリールオクタヒドロインドール-2-オン類の立体選択的合成法を見出し,本反応を(±)-パンクラシンの形式合成に応用した.3.N-ビニル2-ヨードベンズアミドのラジカル環化反応の位置化学について検討し,6-endo環化体はアリールラジカルの5-exo環化と引き続くネオフィル転位を経て生成していることを明らかにした.4.N-(o-ブロモベンジル)エナミドのアリールラジカル環化反応について検討し,オレフィン上に置換基を持たない化合物のラジカル環化反応が6-endo環化体のみを与えるという初めての例を見出し,また,オレフィン末端に2つの硫黄原子を導入すると5-exo環化体のみが得られることも明らかにした.さらに,5-exo選択的アリールラジカル環化反応を抗ヘルペスウイルス活性物質マッピシンケトンのモデル化合物の合成に応用した.5.ハロゲン化合物のラジカル反応においてはクロロ原子よりもヨウ素原子を用いる方が良い結果を与えることが知られている.ところが,α-ハロアミドの5-endo型ラジカル環化反応においては,クロロ原子を用いると好収率で環化体を与えるが,ヨウ素原子を用いると環化体がほとんど得られない,という興味深い結果を与えた.6.酢酸マンガン(III)-酢酸銅(II)系を用いるα-メチルチオアミドの酸化的ラジカル環化反応を見出し,本反応をエリスリナン骨格の短工程合成法を応用した.1.ビニルスルフィドへの6-exo選択的ラジカル環化反応を明らかにし,本反応を(±)-イパルビジンの合成に応用した.2.立体選択的5-endoラジカル環化反応を見出し,(±)-パンクラシンの合成に応用した.3.アルケン末端にイオウ原子を導入することにより,メチレンシクロアルカンへの6-endo選択的アリールラジカル環化反応を5-exo選択環化反応に制御することができた.4.アルケン末端にイオウ原子を導入することによる効率的6-exoアリールラジカル環化反応を見出し,本反応を鎮痛作用物質(-)-アファノルフィンのモデル化合物の合成に応用した.5.N-ビニル-2-ヨードベンズアミドのアリールラジカル環化反応における位置化学を詳細に検討し,6-endo環化体の生成はアリールラジカルの5-exo環化とそれに引き続くネオフィル転位を経て進行していることを明らかにした.6.N-(2-ブロモベンジル)-N-ビニルアミドのアルケン末端にイオウ原子を導入することにより5-exo選択的アリールラジカル環化反応を達成させ,本反応を抗ヘルペスウイルス活性物質マッピシンケトンのモデル化合物の合成に応用した.7.α-チオアセトアミドを酢酸銅(II)存在下酢酸マンガン(III)で処理することによるα-チオカルバモイルメチルラジカルの新規発生法とその反応性を明らかにした.1.メチレンシクロアルカンに対するアリールラジカル環化反応の位置

化学を検討したところ,メチレン末端が置換基の場合にはendo環化成績体が優先的に得られ,メチレン末端に硫黄原子やシアノ基又はエステル基を導入するとexo環化成績体のみが得られることを見出した.続いて,これらの結果に対する機構的考察を行った.2.上記のexo選択的アリールラジカル環化反応を(±)-フィゾスチグミンの重要中間体の合成に応用した.3.N-(o-ブロモベンジル)エナミドのアリールラジカル環化反応について検討したところ,オレフィン上に置換基を持たない化合物のアリールラジカル環化反応が6-endo環化体のみを与えるという初めての例を見出した.また,オレフィン末端に2つの硫黄原子を導入すると,5-exo環化体のみが得られることも見出した.続いて,これらの結果に対する機構的考察を行った.4.上記の5-exo選択的アリールラジカル環化反応を,抗ヘルペスウイルス活性物質マッピシンケトンのモデル化合物の合成に応用した.5.一般に,ハロゲン化合物のラジカル反応においては,ハロゲン原子としてヨウ素原子を用いる方がクロロ原子を用いるより良い結果を与えることが知られている.ところが,α-ハロアミドの5-endo型ラジカル環化反応においては,ハロゲン原子としてクロロ原子を用いると好収率で環化体を与えるが,ヨウ素原子を用いると環化体がほとんど得られない,という驚くべき知見を得た.続いて,これらの結果について考察を行った.6.酢酸マンガン(III)-酢酸銅(II)系によるα-メチルチオアミドの酸化的ラジカル環化反応を用いるエリスリナン骨格の短工程合成法を開発した.
アミロイドβ誘発亜鉛イオン毒性の制御によるアルツハイマー病の新規防御戦略

本研究では、アミロイドβ1-42(Aβ1-42)タンパク質を介した神経細胞内遊離Zn2+の増加は、タウタンパク質を過剰にリン酸化させ、進行性に神経を変性・脱落させてアルツハーマー病の要因となるとの斬新な仮説を実証する。そして、効率的、計画的に海馬メタロチオネイン(MT)合成やアドレナリンβ受容体活性化を誘導し、長期的に神経細胞内でAβ1-42から遊離するZn2+レベルを制御することが進行性神経変性の新規防御・治療戦略となることを実験動物で実証する。
航空監視システムにおける電波伝搬解析のための超高速広域計算アルゴリズムの開発

本研究の目的は、高速かつ広域の電磁界計算を可能とする計算アルゴリズムを開発し、それを民間航空分野で発生する種々の問題に応用することにある。本研究は、広域計算を得意とするレイトレーシング法(RTM)を応用したアルゴリズムを開発した。建物や航空機を面で離散化し、送信点から受信点までの電波の光線探索方法を簡単化することにより計算時間の短縮を図った。計算手法を三次元解析まで拡張し、航空機からの散乱波解析、空港内のマルチパス解析等へ応用し、得られた数値結果と実験結果を比較してその精度を確認した。計算時間については伝搬環境に依存するが、通常の解析手法と比べて7090%の計算時間を達成した。初年度にあたる平成25年度は、数値計算アルゴリズムの基本設計までを完了し、得られた数値結果と実験結果を比較することによって、提案手法の妥当性を検証した。本研究課題となる航空監視における電波伝搬解析のための数値計算アルゴリズムの開発では、レイトレーシング法を用いて2つの視点から研究を進めている。一つは、航空機の反射信号を利用した一次レーダ応用技術のため広域における航空機からの散乱電力推定アルゴリズムを開発することである。二つ目は、空港内を走行する航空機を監視するためのマルチラテレーション等で問題となっているマルチパス問題について数値解析ができるアルゴリズムの開発を進めることである。前者については、簡易な航空機モデルを作成し、通常では解析しないような50km×20kmの超広域における散乱電力の数値計算を行った。この計算モデルについては、平成25年に東京タワーから放射される電波を利用して航空機からの反射電力がどの程度であるかを測定し、数値計算結果と比較した。その結果、提案手法は概ね良好な結果を示すことを確認した。本結果については査読論文に投稿し、採択された。後者の空港内の伝搬解析については、三次元のアルゴリズムは未完成であるものの、二元問題についてはほぼ完成しており、開発したアルゴリズムを用いて空港内で問題となる建物からの反射について解析した。大規模空港での実験は行うことが出来なかったが、中規模空港で実施した他の研究テーマの実験結果を元に、受信電力について数値計算結果と比較した。両者の傾向は概ね同様であった。また、計算時間について商用の計算ソフトと比較することによって本提案手法の利点を確認した。比較の結果、通常の半分8割程度で計算できることがわかり、効率的なアルゴリズムとなりえることを確認した。ただし、詳細な精度検証は今後の課題とする。本研究の目的は、高速かつ広域で数値解析ができる電磁界解析アルゴリズムを開発し、それを航空分野に応用することにある。本研究では、電磁界解析手法の中でも広域の数値計算を得意とするレイトレーシング法(RTM)を採用している。二年目は、初年度に設計したプログラムの検証作業に重点を置いて研究を進めた。本研究では、2種類あるRTMの内、計算時間を必要とするが精度の良いイメージング法を採用している。この手法により、一次レーダへの応用を見据えて航空機からの散乱電力を広域で推定するアルゴリズムを開発した。また、空港内を走行する航空機の監視システムであるマルチラテレーション(MLAT)等で生じるマルチパス問題へ応用した。初年度までに、前者については三次元、後者については二次元の数値計算モデルを作成した。前者については実験結果とも概ね良く一致することから査読論文に投稿し初年度末に採録となっている。提案手法の特徴は、使用する周波数に対して精度を保証したモデルの面近似と送受信点間の電波の航跡、つまりレイ探索時間の簡単化にある。これにより通常の方法と比べて計算時間の短縮を図っている。通常、送受信間の経路上における反射点と回折点の算出に計算時間を要するが、提案手法ではレイ探索を最初に近似的に求めることによって計算時間を短縮する。この方法を利用すれば電磁界の解析だけでなく、空港内で直接波が届かないエリア等も算出することができるため、MLATの精度検証にも利用することが可能である。簡単な二次元モデルではあるが、本研究成果を応用して仙台空港内に展開したMLATの性能評価を実施した。ただし、初年度に開発したプログラムには同様の計算など余計な処理が複数あったことから、これらを簡略化した。また回折界の精度検証を行った。概ね検証作業は終了し、年度末から基本システムを拡張することで三次元解析の開発に取り組んでいる。本研究では、レイトレーシング法(RTM)を採用し、さらに計算手順を簡単化することで計算の高速化を図っている。最終年度はアルゴリズムの三次元への拡張と計器着陸システム(ILS)への応用を実施した。本研究は、2種類あるRTMの内、計算時間を必要とするが精度の良いイメージング法を採用した。この手法により、航空機からの散乱電力を広域で推定するアルゴリズムを開発した。また、空港内の航空機を監視するためのマルチラテレーションで発生するマルチパス問題へ応用した。二年目までに、前者については三次元、後者については二次元の数値計算モデルを作成した。また、後者についても実験システムの問題点を発見するに至った。提案手法の特徴は、使用する周波数を考慮して精度を保証した上でのモデルの面近似と送受信点間の電波のレイ(航跡)探索の簡単化にある。これらの処理によって、従来手順と比べて計算時間の短縮を図っている。

通常、送受信間の経路上における反射および回折点の算出にはかなりの計算時間を要するが、提案手法はレイ探索を最初に近似的に求めることによって計算時間を大幅に短縮する。最終年度は基本アルゴリズムを空港面の解析に対応するために三次元問題に拡張し、特にILSの一つであるローカライザー(LOC)の解析に応用した。空港内で発生するマルチパスを計算して、実際の飛行データと比較したところ概ね同様の誤差が生じることが分かった。これにより三次元に拡張したアルゴリズムも一定の制度を保っていることが確認できた。また計算時間については、やや増大したものの商用ソフトの計算時間の最大78割程度となり、計算の高速化を達成した。本研究の目的は、高速かつ広域の電磁界計算を可能とする計算アルゴリズムを開発し、それを民間航空分野で発生する種々の問題に応用することにある。本研究は、広域計算を得意とするレイトレーシング法(RTM)を応用したアルゴリズムを開発した。建物や航空機を面で離散化し、送信点から受信点までの電波の光線探索方法を簡単化することにより計算時間の短縮を図った。計算手法を三次元解析まで拡張し、航空機からの散乱波解析、空港内のマルチパス解析等へ応用し、得られた数値結果と実験結果を比較してその精度を確認した。計算時間については伝搬環境に依存するが、通常の解析手法と比べて7090%の計算時間を達成した。初年度に基本となるアルゴリズムを開発し、二年目は開発したアルゴリズムの精度検証を行いながら改良を進めた。初年度に問題となっていたプログラムのエラーについては概ね解消されており、これまでの二次元問題については商用ソフトと比較することで計算時間の短縮率を大まかに調査した。完全に一致したモデルではなかったが最大で半分程度まで計算時間の短縮ができていることを確認した。また、課題となっていた三次元問題への拡張についても年度末より着手することができ、現在レイ探索までの部分が概ね完成しているところである。初年度までに開発した部分については航空分野における様々な電磁界解析に応用した。まずは50km四方に及ぶ航空機散乱電力を数値解析し、航空路上を飛行する航空機モデルからの散乱電力の統計をとることによって、受信機感度と航空機検出率の検証を行った。このような観点からの議論はこれまでになく、本研究の特色を活かしたものであると考えている。次に、実際の空港モデルの一部を作成し、空港面の電波伝搬環境を数値解析した。空港内の一部地域で発生する航空機の検出率低下の原因が、周囲の構造物からのマルチパスによるものであることが受信電力や遅延スプレッドから明らかとなった。また、提案手法に基づいて作成したレイ探索の基本原理から、到来時間差を用いるマルチラテレーション(MLAT)で利用される測位精度劣化指数について検証した。直接波を利用して測位するMLATでは回折波等は誤差の原因となる。この事象について、当研究所が仙台空港に展開している実験システムの結果と比較することで、誤差原因が建物遮蔽等による原因であることが分かった。
長期間放置されていた棚田の復元にともなう生物多様性の変化

金沢大学角間キャンパス「里山ゾーン」内の25年にわたり放棄されていた棚田跡において,すでに2002年から2007年まで,棚田の復元を段階的に実施しながら,生物多様性の変化を見るために,動植物の種類相,種ごとの個体数,開花植物と訪花昆虫の関係等を,春から秋まで総合的にモニタリングしてきた.また,キャンパス周辺,珠洲市,能美市等の棚田,水田でも比較調査をおこなった.主成果は以下である.1.上述の棚田復元地の水田内において,昆虫類,クモ類を中心として,2004年は17目4993個体、2005年は13目2508個体、2006年は12目2171個体が採集され,捕食者ギルドの個体数・割合は3年間で有意に増加した。クモ類は合計75種が確認され優占目であり,2004年は10科38種875個体、2005年は10科42種1078個体、2006年は11科38種700個体が採集された.クモ類の種組成は20042006年まで年ごとに異なっており(DCA解析),水田の広分布種が移入しつつあった.2.上述の里山ゾーンにおいて無脊椎動物の多様性と群集構造の変化を,特に地表歩行性甲虫類(コウチュウ目:ゴミムシ科)に注目して調査した.棚田復元地のほかに,コナラ林,モウソウチク林,スギ林,等を調査地としてえらび,落とし穴トラップを用いて,月1回採集を繰り返した.また,飛翔性飛翔性の昆虫類を中心とした節足動物相の個体数と多様性に及ぼす環境の異質性(植生,地形等)と保全活動の影響を調査するために,IBOY式ウィンドウ・トラップを用いて,上下2層において月1回採集した.3.上記2から,ゴミムシ類や飛翔性昆虫類の解析の結果,(1)生息環境による種類構成の差が明瞭に検出された.(2)再生作業により種類構成,個体数にはっきりした差が生じた.(3)棚田の再生活動は,ゴミムシ類や飛翔性昆虫類の種類構成に大きな変化をもたらした.金沢大学角間キャンパス「里山ゾーン」内の25年にわたり放棄されていた棚田跡において,すでに2002年から2007年まで,棚田の復元を段階的に実施しながら,生物多様性の変化を見るために,動植物の種類相,種ごとの個体数,開花植物と訪花昆虫の関係等を,春から秋まで総合的にモニタリングしてきた.また,キャンパス周辺,珠洲市,能美市等の棚田,水田でも比較調査をおこなった.主成果は以下である.1.上述の棚田復元地の水田内において,昆虫類,クモ類を中心として,2004年は17目4993個体、2005年は13目2508個体、2006年は12目2171個体が採集され,捕食者ギルドの個体数・割合は3年間で有意に増加した。クモ類は合計75種が確認され優占目であり,2004年は10科38種875個体、2005年は10科42種1078個体、2006年は11科38種700個体が採集された.クモ類の種組成は20042006年まで年ごとに異なっており(DCA解析),水田の広分布種が移入しつつあった.2.上述の里山ゾーンにおいて無脊椎動物の多様性と群集構造の変化を,特に地表歩行性甲虫類(コウチュウ目:ゴミムシ科)に注目して調査した.棚田復元地のほかに,コナラ林,モウソウチク林,スギ林,等を調査地としてえらび,落とし穴トラップを用いて,月1回採集を繰り返した.また,飛翔性飛翔性の昆虫類を中心とした節足動物相の個体数と多様性に及ぼす環境の異質性(植生,地形等)と保全活動の影響を調査するために,IBOY式ウィンドウ・トラップを用いて,上下2層において月1回採集した.3.上記2から,ゴミムシ類や飛翔性昆虫類の解析の結果,(1)生息環境による種類構成の差が明瞭に検出された.(2)再生作業により種類構成,個体数にはっきりした差が生じた.(3)棚田の再生活動は,ゴミムシ類や飛翔性昆虫類の種類構成に大きな変化をもたらした.金沢大学角間キャンパス「里山ゾーン」内の25年にわたり放棄されていた棚田跡において、すでに2002年から2005年まで、復元を段階的に実施しながら、動植物の種類相、種ごとの個体数、開花植物と訪花昆虫の関係等を、春から秋まで総合的にモニタリングしてきた、本研究課題では2006年度内にさらに棚田の復元と保全作業をを進めながら生物多様性の変化を記録した。また、キャンパス周辺、珠洲市、能美市等の棚田、水田でも比較調査をおこなった。主成果は以下である。1.上述の里山ゾーンにおいて脊椎動物の多様性と群集構造の変化を、特に地表歩行性甲虫類(コウチュウ目:ゴミムシ科)に注目して調査した。棚田復元地のほかに、コナラ林、モウソウチク林、スギ林、等を調査地としてえらび、落とし穴トラップを用いて、月1回採集を繰り返した。ゴミムシ類を対象とした解析の結果、(1)生息環境による種類構成の差が明瞭に検出された。(2)再生作業により種類構成、個体数にはっきりした差が生じた。

(3)小型で飛翔力のある種は、再生作業のある湿地で多くなり、大型で飛翔しない種は、再生作業のない湿地に見られた。(4)棚田の再生活動は、ゴミムシ類の種類構成に大きな変化をもたらした。2.上述の棚田復元地の水田内において、昆虫類、クモ類を中心として、2004年は17目4993個体、2005年は13目2508個体、2006年は12目2171個体が採集され、捕食者ギルドの個体数・割合は3年間で有意に増加した。クモ類は合計75種が確認され優占目であり、2004年は10科38種875個体、2005年は10科42種1078個体、2006年は11科38種700個体が採集された。クモ類の種組成は20042006年まで年ごとに異なっており(DCA解析)、水田の広分布種が移入しつつあった。金沢大学角間キャンパス「里山ゾーン」内の25年にわたり放棄されていた棚田跡において,すでに2002年から2007年まで,復元を段階的に実施しながら,動植物の種類相,種ごとの個体数,開花植物と訪花昆虫の関係等を,春から秋まで総合的にモニタリングしてきた。本研究課題では2007年度内にさらに棚田の復元と保全作業をを進めながら生物多様性の変化を記録した。また,キャンパス周辺,珠洲市,能美市等の棚田,水田でも比較調査をおこなった。主成果は以下である。1.上述の里山ゾーンにおいて脊椎動物の多様性と群集構造の変化を,特に地表歩行性甲虫類(コウチュウ目:ゴミムシ科)に注目して調査した。棚田復元地のほかに,コナラ林,モウソウチク林,スギ林,等を調査地としてえらび,落とし穴トラップを用いて,月1回採集を繰り返した。ゴミムシ類を対象とした解析の結果,(1)生息環境による種類構成の差が明瞭に検出された。(2)再生作業により種類構成,個体数にはっきりした差が生じた。(3)小型で飛翔力のある種は,再生作業のある湿地で多くなり,大型で飛翔しない種は,再生作業のない湿地に見られた。(4)棚田の再生活動は,ゴミムシ類の種類構成に大きな変化をもたらした。2.上述の棚田復元地の水田内において,昆虫類,クモ類を中心として,2004年は17目4993個体,2005年は13目2508個体,2006年は12目2171個体が採集され,捕食者ギルドの個体数・割合は3年間で有意に増加した。クモ類は合計75種が確認され優占目であり,2004年は10科38種875個体,2005年は10科42種1078個体,2006年は11科38種700個体が採集された。クモ類の種組成は20042006年まで年ごとに異なっており(DCA解析),水田の広分布種が移入しつつあった。
加齢に伴うアスコルビン酸レベル低下機構と加齢性機能変化の関連性解明とその制御

正常ヒト線維芽細胞OUMS-36の細胞老化に伴うアスコルビン酸(AsA)取込み量の変化および老若細胞間での細胞内酸化ストレスレベルの違いとAsA投与による影響について検討し,AsA取込み能が老化細胞でおよそ2倍高いことを見出した。また,OUMS-36のメインアイソフォームはSVCT2であることを明らかにし,その発現レベルが老若細胞間で大差なかったことから,AsA取込み能の変化はSVCT発現量の変化とは異なる要因であることを明らかにした。次に,無刺激および酸化ストレス条件下における老若細胞間での細胞内酸化ストレスレベルとAsA投与による影響を検証した。その結果,無刺激条件においては,若い細胞の方が細胞内O2・-レベルが高いのに対し,老化細胞では,ペルオキシドおよび過酸化水素などが増加していることを明らかにした。一方,酸化ストレス誘導剤t-BuOOH曝露条件では細胞内O2・-量は老若細胞間で大差なかったが,細胞内ペルオキシドおよび過酸化水素などのレベルは増加し,特に老化細胞で顕著に増大していた。また,老化依存的な細胞内活性酸素の増加に対するAsA投与の影響を検討したところ,AsA投与は両条件下において,濃度依存的に,特に老化細胞の細胞内酸化ストレスを顕著に低下させた。これらの結果より,ヒト線維芽細胞OUMS-36では,細胞老化に伴ってペルオキシドや過酸化水素などの細胞内酸化ストレスが増大しており,その増加に対する細胞応答の1つとしてAsA取り込みが増大している可能性が示された。また,老化細胞において増加した細胞内酸化ストレスに対してAsA投与が有効であったことから,加齢に伴いAsA摂取の重要性が増していることが示唆された。今後,更に解析を進めていくことで,高齢者における適正なAsA摂取量を設定するための基礎的かつ有効なエビデンスが集積されると思われる。

ビタミンC (VC;アスコルビン酸(AsA))は、その多彩な生理機能以外にも水相における活性酸素を捕捉する"迅速性"において優れた抗酸化物質として知られており、様々な酸化ストレス関連疾患における防御成分として重要な役割を果たしている。また、AsAは組織・細胞内に高濃度蓄積されることが知られており、この高濃度蓄積がAsAの様々な生理機能の発揮において重要な因子であると考えられている。しかしながら、その一方で、老化に伴う体内VCレベルの低下が報告されており、AsA輸送能や蓄積性の変化と加齢や酸化ストレス関連疾患との間には何らかの関連性があると推測される。そこで、細胞老化に伴う細胞老化に伴う酸化ストレス応答性およびVC要求性の変化を検証するために以下の研究を実施した。1)正常ヒト胎児由来の線維芽細胞OUMS-36の老化細胞の取得のその評価を行った。2)老若細胞間での細胞内酸化ストレスレベルの違いとAsA投与による影響について検討した。3)老若細胞間でのAsA取り込みの相違と細胞内への輸送を司る輸送担体SVCT(sodium-dependent vitamin C transporter)1および2の発現の違いについて検証した。現在までの達成度は50%と自己評価する。その理由として、申請書において目的として記述した、1)加齢に伴う細胞内AsA量の変化とAsA特異的輸送タンパク質の発現変化の解析、2)AsAが重要な役割を果たしている生理機能(細胞内酸化ストレスレベル、抗酸化作用、コラーゲン合成、色素沈着)と加齢との関連性解明とその制御という2つの目的に対して、正常ヒト胎児由来の線維芽細胞OUMS-36においては、概ね一通り検討が終了しており、加齢に伴う変化について一つの仮説に到達できたと判断しており、達成度は高いと考えている。しかしながら、これまでの研究で老化細胞の方が細胞内AsAレベルが高いといった予想外ではあるが興味深い結果が新たに得られており、この点がまだ解明できていないこと、他の細胞での加齢に伴う変化などが不明である点は今後の検討すべき課題と考えている。これまでの研究成果をふまえて、今後の研究では以下の点に絞って進めていく。1)これまでの研究で明らかとなった正常ヒト胎児由来の線維芽細胞OUMS-36における加齢に伴う細胞内AsAレベルの上昇の原因を究明するために、老若細胞間で発現している遺伝子レベルの違いについて検証を行う。また、酸化ストレスに対する老若細胞の抵抗性を比較し、その相違の原因についても検証する。2)他の細胞での検討により、これまでに分かっている事象が普遍的なものなのか、それとも、特定細胞における変化なのかどうかを検証する。3)通常の培養による細胞老化の誘導だけでなく、薬剤等による細胞老化誘導モデルを用いた解析についても検討する。研究成果は適宜、学会発表を行うと共に、論文等により積極的に国内外への情報発信を行っていく。次年度においては、上記推進方策に基づき、細胞培養関連試薬、生化学用分析試薬、成果発表用経費に充てる予定である。備品については初年度に計画通り、ケミルミ装置購入しており、新たな備品を購入する予定はない。
mRNAプロセッシングによる相同組換修復維持機構の解明と卵巣癌治療への応用

BRCA1のBRCT領域は遺伝性乳がん卵巣がん症候群の発がんリスク関連する変異が集積するだけでなく、PARP阻害剤に対する感受性を示す変異の集積も報告されている。申請者は野生型BRCTと遺伝性乳がん卵巣がん患者に認められる変異BRCTのGST fusion plasmidを作成し、GST pull down法にて新規DNA損傷修復候補因子が遺伝性乳がん卵巣がん患者における変異体BRCT領域との結合が失われていることを示した。また新規DNA修復因子の候補であるメディエーター複合体のDNA損傷修復経路への直接的寄与を示すためにLaser microirradiation法を用いて検証を行った。本研究では、新規因子として同定されたメディエーター因子のうち、第一段階の検証としてMED1及びMED12に着目して研究を行なった。MED1に関してはBRCA1のBRCT領域に結合することを示し、BRCA1が制御する転写活性やDNA損傷における相同組換修復経路に寄与することを明らかにした。また、MED1のDNA損傷時の動態観察を行い、DNA損傷時に損傷部にMED1が集積することを示した。本研究成果に関しては、日本産科婦人科学会、日本癌学会、米国癌学会(AACR)等複数の学会にて発表を行い、日本産科婦人科学会にて学会奨励賞の受賞を受け、現在論文投稿準備中である。MED12に関しては子宮平滑筋腫や平滑筋肉腫で高頻度で変異が報告されているが、発癌に関する詳細な機序はこれまでのところ報告は少ない。本研究では、MED12がBRCA1と複合体を形成すること、またMED12の機能失活がDNA二本鎖切断につながることを示し、現在機能失活下でDNA損傷が誘導される機序を複製ストレスに着目して解明中である。本研究の成果の一部は本年度の日本癌学会で発表予定である。メディエーター複合体とゲノム安定性維持に関する報告はこれまで無く、本研究は20以上の複合体の2つの因子に着目した研究であるが極めて新規性が高く、説得性の高いデータを出している。その他の因子においてもDNA損傷修復、相同組換修復に関連する機序を一部明らかにしつつあり、今後はこうした因子のさらなる解明、DNA損傷修復に関するさらなる詳細な機序解明が期待される。MED1、MED12を含めたメディエーター複合体はRNA polymerase IIと連動して転写制御を行う転写共役因子であるが、比較的高頻度に各種のがんで変異が生じていることが報告されているが、ゲノム安定性機構、DNA損傷修復機構に着目して解明している報告は少ない。本研究で着目している二つの因子に関してはBRCA1と転写複合体を形成しており、BRCA1のRNA polymerase IIとの関連におけるゲノム安定性維持機構に寄与していると想定している。BRCA1/2は近年mRNA転写の副産物であるDNA:RNA hybrid, R-loopの積極的処理によりDNAを複製ストレスによる二本鎖切断誘導から守る機序が、新規の機能として報告されている。本研究ではMED1及びMED12のノックダウン下ではR-loopが誘導されるというデータを得ており、今後BRCA1と協調してR-loop処理を行う機序を明らかにすることを一つの目標とする。本研究では、BRCA1/2やRAD51等の既知の相同組換修復因子以外にも、直接的ないし間接的寄与で相同組換修復経路に寄与する因子を同定することを一つの目標にしており、こうした因子の失活による相同組換修復異常もPARP阻害剤の標的になりうることを明らかにしようとしている。具体的には、卵巣癌の細胞株において、本因子をsiRNAにてノックダウンすることによりPARP阻害剤への感受性が増強することを薬剤感受性実験で示すことを目標とする。MED12は子宮平滑筋肉腫において高頻度で変異があることが報告されており、MED12変異性平滑筋肉腫を細胞株で樹立、またPDXモデル樹立、細胞のバイオロジー解明、プラチナ製剤・PARP阻害剤等の薬剤感受性との関連を明らかにしていく。

メディエーター複合体とゲノム安定性維持に関する報告はこれまで無く、本研究は20以上の複合体の2つの因子に着目した研究であるが極めて新規性が高く、説得性の高いデータを出している。その他の因子においてもDNA損傷修復、相同組換修復に関連する機序を一部明らかにしつつあり、今後はこうした因子のさらなる解明、DNA損傷修復に関するさらなる詳細な機序解明が期待される。MED1、MED12を含めたメディエーター複合体はRNA polymerase IIと連動して転写制御を行う転写共役因子であるが、比較的高頻度に各種のがんで変異が生じていることが報告されているが、ゲノム安定性機構、DNA損傷修復機構に着目して解明している報告は少ない。本研究で着目している二つの因子に関してはBRCA1と転写複合体を形成しており、BRCA1のRNA polymerase IIとの関連におけるゲノム安定性維持機構に寄与していると想定している。BRCA1/2は近年mRNA転写の副産物であるDNA:RNA hybrid, R-loopの積極的処理によりDNAを複製ストレスによる二本鎖切断誘導から守る機序が、新規の機能として報告されている。本研究ではMED1及びMED12のノックダウン下ではR-loopが誘導されるというデータを得ており、今後BRCA1と協調してR-loop処理を行う機序を明らかにすることを一つの目標とする。本研究では、BRCA1/2やRAD51等の既知の相同組換修復因子以外にも、直接的ないし間接的寄与で相同組換修復経路に寄与する因子を同定することを一つの目標にしており、こうした因子の失活による相同組換修復異常もPARP阻害剤の標的になりうることを明らかにしようとしている。具体的には、卵巣癌の細胞株において、本因子をsiRNAにてノックダウンすることによりPARP阻害剤への感受性が増強することを薬剤感受性実験で示すことを目標とする。MED12は子宮平滑筋肉腫において高頻度で変異があることが報告されており、MED12変異性平滑筋肉腫を細胞株で樹立、またPDXモデル樹立、細胞のバイオロジー解明、プラチナ製剤・PARP阻害剤等の薬剤感受性との関連を明らかにしていく。次年度使用額として計上されているものに関しては、主に実験の消耗品に使用予定である。これまでの実験の継続として、siRNA(MED1及びMED12)試薬、抗体(MED1及びMED12)試薬、siRNAやプラスミドのトランスフェクション試薬等に使用する予定である。また、本研究は既述2因子以外の転写因子及びスプライシング因子の解析も予定しており、siRNA及び抗体試薬も購入予定である。これらの他に、細胞培養の培地、血清、抗生剤も消耗品として購入する予定である。
造血幹細胞の静止期(Go期)を修飾する造血因子-インターロイキン6,G-CSF

造血幹細胞は細胞周期上静止期(Go期)に属するが、インターロイキン6(IL-6)、顆粒球コロニー刺激因子(G-CSF)、IL-1はIL-3と共同で働き、これらの細胞を活発な細胞周期に移行させる活性を有することを報告した。これらの相乗因子は造血幹細胞の初期分化過程にも作用し、未分化な多能性を長く維持することも報告してきた。造血幹細胞の有する重要なもう1つの機能、自己再生能を修飾する造血因子の同定を試みたが、IL-3が支持する自己再生確率0.589に対して、IL-6,G-CSF,IL-1は影響を及ぼさず、IL-4、TGF-beta,Leukemia inhibitory factor (LIF)は共存することで、かえって自己再生能を低下させた。造血支持能を有する骨髄ストロマ細胞由来の因子、IL-11,Stem cell factor (SCF)などを更に検討し、自己再生能を増加させる因子の同定とその応用を試みる予定である。造血幹細胞の生存・維持に関与する造血因子の検討では、マウス幹細胞は無因子では生存しないこと、IL-3、G-CSFは生存に必須でありIL-6は機能しないことが明らかになった。純化幹細胞を用いて更に詳細に検討する予定である。細胞分裂過程を映画で連続的にとらえるシステムを導入し、造血細胞由来のコロニー形成過程を記録した。1個の造血幼若細胞が分裂してできた2個の細胞(Paired daughter cells)が次にどのようなタイミングで分裂していくかを観察したが、ヒト赤血球系、好酸球系、マウス白血球系のいずれでもペア-細胞の細胞倍加時間は不一致で、細胞増殖がランダムな過程であることが明かになった。細胞運動能、細胞間相互作用や、白血病細胞の挙動など解析中である。1.自己再生能の検討:5-フルオロウラシル(5-FU)150mg/kg投与したマウス細胞を、インタ-ロイキン3(IL-3)と相乗因子(IL-6,G-CSFIL-1)存在下に培養し、形成した未分化なBlast cellコロニ-を釣り上げ再培養し、できた2次コロニ-の種類、頻度を求め、2次Blast cellコロニ-の出現率から造血幹細胞の有する自己再生能を計算した。相乗因子とIL-3の共存条件で、Blast cellコロニ-のReplating Efficiencyや、2次Multipotentialコロニ-(GEMM)頻度等は増加し、幹細胞の初期分化にこれら相乗因子は一定の影響を及ぼすことが分かった。但し自己再生能は、IL-3で0.5955,IL-3+IL-6で0.5858,IL-3+G-CSFで0.5758,IL-3+IL-1で0.5931と大差がなく修飾はされなかった。IL-3,IL-3+G-CSFの2群につき1個の造血幹細胞が最終的に何個の2次Blastcellコロニ-(自己再生能を有する幹細胞の指標)を生み出したかを検討したところ、IL-3は0.90個、IL-3+G-CSFは1.93個となり、G-CSFの添加で約2倍に増えることが分かり、in vivoの系で幹細胞を増やし得ることが示唆された。2.老化と幹細胞:10週令と12ヵ月令のマウスを対象に造血幹細胞の頻度を検討したところ、老化個体で骨髄では約3/4、臓では約1/2に減少していることが示された。かつ培養後期に形成する幹細胞由来のBlast cellコロニ-数がかえって増加していた。

5-FU処理マウス細胞を用いたBlast cellコロニ-形成の過程を検討したところ、老化個体では遅延し、細胞の分裂周期(Doubling Time)も平均して延長していた。但し形成したBlast cellコロニ-の再培養による2次コロニ-の検討では大差なく、初期分化過程では変化のないことが予想された。造血幹細胞は細胞周期上静止期(Go期)に属するが、インタ-ロイキン6(ILー6)、顆粒球コロニ-刺激因子(GーCSF)、ILー1はILー3と共同で働き、これらの細胞を活発な細胞周期に移行させる活性を有することを報告した。これらの相乗因子は造血幹細胞の初期分化過程にも作用し、未分化な多能性を長く維持する機能を有することも報告してきた。造血幹細胞の有する重要なもう1つの機能、自己再生能を修飾する造血因子をこの間検討したが、ILー6,GーCSF,ILー1はILー3が支持する自己再生確率0.589に殆ど影響を及ぼさなかった。ILー4、TGFーbeta,Leukemia inhibitory factor(LIF)は共存することで、かえって自己再生能を低下させたが、実験ごとにバラツキが多く、一定したデ-タが得られていない。自己再生確率を高める造血因子が得られば、造血幹細胞を増幅することができ、臨床の場で用いれば、骨髄移植療法に大きな進歩をもたらすであろう。造血幹細胞の支持機能を有する骨髄ストロマ細胞由来の因子、ILー11、Stem cell factor(SCF)やストロマ細胞との共培養系を検討し、目的因子の発現に取り組みたい。造血幹細胞の生存・維持に関与する造血因子の検討も合わせて試みた。ILー3、GーCSFにその機能が認められたが、完全ではなく、他の機能因子との総合作用と考えられた。細胞分裂過程を映画で連続的にとらえるシステムを導入し、造血細胞由来のコロニ-形成過程を観察できるようになった。細胞種類によって細胞分裂態度、運動能、細胞倍加時間、細胞間相互作用が随分と異なっていた。現在解析を行なっているが、純化した造血幹細胞と造血因子を用いて、細胞周期の解析に応用できる系と考えられ今後も取り組む予定である。
東南アジアに多い若年性心臓突然死-その実態を調査する

健康な青壮年が夜間就寝中に突然死する原因不明の病態であるポックリ病症候群は、日本や東南アジアに多く、タイでは、Lai-Taiと呼ばれてきた。我々の現地での実態調査によって、タイ全土では、年間12001800人程度がLai-Taiで死亡していると推計された。Lai-Tai事例について、不整脈突然死をきたすBrugada症候群等に関係するSC5NA遺伝子解析をしたところ、72%の事例で、何らかのアミノ酸置換を伴う変異がみられ、その中には、Lai-Taiにのみみられるものもあった。これらについては、今後機能解析を行う予定である。また、ミャンマーの訪問調査では、類似の病態があるとの情報を得た。ポックリ病症候群(Pokkuri Death Syndrome: PDS)は、健康な青年が、夜間就寝中に突然、短時間で死亡する原因不明の疾患である。冠動脈疾患による突然死例(Coronary Artery Disease: CAD)にみられる動脈硬化所見はほとんどなく、心肥大や明らかな器質的疾患もみられない。PDSは東南アジア地域で多発することが知られており、タイでは、Lai-Tai (L-T)として知られている。本研究は、その原因を、実態調査を通して、地域間比較をすることにより、明らかにするものである。これまで、日本の事例において、Brugada症候群の原因遺伝子の一つであるSCN5A遺伝子の変異をいくつかみとめているが、今回は、タイのL-T事例につき、まずは、日本のPDS例で多くみられたSCN5Aの変異部位について遺伝子解析を行った。その結果、exon 12において、心房細動と関連のある変異(H558R)が、L-T群(48例)で27.1%、CAD群(44例)で36.4%、Control(C)群(43例)で23.3%にみられた。日本の場合と比較してタイの事例で多い傾向にあるが、C群でも多く、現時点では明確な意義づけはできていない。このほか、exon 28において、これまで未報告の変異をタイの事例でも見出しているも、有意な結果は得られていない。タイ以外の国の実態調査としては、ミャンマーのヤンゴン第1医科大学と共同研究体制を構築した。このほか、ポックリ病の原因物質のひとつと考えられる、レムナントリポ蛋白(RLP)の生化学的性状の解析を進めることにより、脂質代謝の中心的役割を果たす酵素でRLPの生成に関与するリポ蛋白リパーゼ(LPL)が、循環血液中でレムナントリポ蛋白(RLP)と結合した代謝中間体、「RLP-LPL複合体」として存在していることを明らかにした。タイ国の事例については、新年度、予算使用可能となりしだい、一気にシークエンス解析を行う準備ができており、本年度は大きく進展していく予定である。一方、ミャンマーにおける実態調査については、先方との交渉等に時間を要したが、今後は、円滑に進めていくことができるものと思われる。L-Tの頻度を知るため、タイChulalongkorn大学の剖検記録を、Chutivongse医師と数年にわたり調べたところ、年間、L-Tは2030例程度であることが明らかとなった。同大学の担当地域の人口が約110万人であることから、単純に見積もると、タイ国全体で、毎年12001800人がL-Tで死亡していると推定された。また、本研究では、これまで日本の事例において、突然の致死性不整脈で死亡する場合のあることが知られているBrugada症候群の原因遺伝子の一つであるSCN5A遺伝性の変異をいくつかみとめているが、タイの事例における解析を本年度さらに進めた。昨年度は、Exon12(H558R)という心房細動に関係する変異が、タイのL-T例、CAD例、コントロール(C)事例のいずれにおいても、全体的に多い傾向にあったが、本年、新たに、QT延長症候群およびBrugada症候群に関係する変異であるExon20(R1193Q)を有する例が見いだされ、CAD例、コントロール例と比較して頻度が高い傾向にあった。現在、解析途上であるが、本年度中に全例の塩基配列決定を終了の予定である。くわえて脂質や炎症マーカー等の分析を行い、解析中であるが、現段階で日本と同様の傾向はみつかっていない。このほか、ミャンマーを訪問し、L-Tと同様の症例がミャンマーでもみられるとの情報を得た。東南アジアでは、きっちりとした解剖体制をとっている地域が少なく、信頼性の高い診断を行っているタイ国チュラロンコン大学との共同研究で得られるデータ、試料の解析を中心に研究を進めてきた。タイ国の事例の塩基配列決定については、新年度に終了できる見込みであるが、現在、タイ国以外の周辺諸国の実態調査が遅れている。詳しいデータをもっている地域を探すと交渉が進まない傾向にあるので、おおまかな傾向についての情報収集を集めることにとどめ、できるだけ多くの地域を訪問することが重要と思われる。ポックリ病症候群(Pokkuri Death Syndrome: PDS)は、一見、健康な青年が、夜間就寝中に突然死亡する原因不明の疾患である。冠動脈疾患による突然死例(Coronary Artery Disease死亡群:以下CAD)でみられる動脈硬化所見はほとんどなく、心肥大や明らかな器質的疾患もみられない。PDSは東南アジア地域で多発しており、タイではLai-Tai(以下L-T)として知られている。タイのL-T事例において、不整脈による突然死の原因となるBrugada症候群やLongQT症候群の原因遺伝子のひとつであるSCN5A遺伝子解析を進めた。

その結果、タイ事例において、16種のアミノ酸置換を伴う遺伝子変異がみつかり、そのうち11種類は、日本ではみられないものであった。Exon20(R1192Q)、Exon28(P1732L)はタイで多くみられたが、L-T群、CAD、コントロール群(C)の間で有意な差はみられなかった。一方、心房細動に関係する変異、Exon12(R558H)は、タイおよび日本の事例で比較的多くみられたが、これも、L-TとCAD、Cとで有意な差はみられなかった。16種のアミノ酸変異の殆どは未報告の変異であり、この遺伝子権威であるR. Brugada博士と連繋して機能的な意義について検討の予定である。なお、Exon解析では、アミノ酸置換を遺伝子変異が、一つもみられない事例が約40%あった。このようなことから、全ゲノム解析を進める必要性があり、共同研究者であるChulalogkorn大学と交渉を重ねた結果、倫理委員会からその許可を得るに至った。また、Lai-Tai事例の発生現場の視察を行ったが、劣悪な住環境である場合が多く、また、水道設備等も不十分であるなどから、血液中のイオン解析も進める予定となり、これについても、その許可を得るに至った。健康な青壮年が夜間就寝中に突然死する原因不明の病態であるポックリ病症候群は、日本や東南アジアに多く、タイでは、Lai-Taiと呼ばれてきた。我々の現地での実態調査によって、タイ全土では、年間12001800人程度がLai-Taiで死亡していると推計された。Lai-Tai事例について、不整脈突然死をきたすBrugada症候群等に関係するSC5NA遺伝子解析をしたところ、72%の事例で、何らかのアミノ酸置換を伴う変異がみられ、その中には、Lai-Taiにのみみられるものもあった。これらについては、今後機能解析を行う予定である。また、ミャンマーの訪問調査では、類似の病態があるとの情報を得た。引き続き、タイの事例についての実態調査と資料収集を継続するとともに、遺伝子解析を行う。気温の高いタイの事例の中には、高体温や脱水の影響を受けているものが存在する可能性があり、事例の経過の詳しい検討と、新たな診断マーカーの検討を行いたい。ミャンマーのほか、タイの近隣諸国についても、共同研究体制を構築し、まずは、統計的な調査を進めていく。東南アジア諸国におていは、解剖体制が整っていない国もあり、そのような点についても情報を集めていく。脂質についても、新しいマーカーの検討を同時に進めて行く予定である。引き続き、タイの事例についての実態調査と試料収集を継続するとともに、SCN5A遺伝子解析をさらに進める。実態調査については、新年度中に論文として報告の予定である。また、明らかとなった遺伝子変異については、スペインのBrugada教授と連絡をとり、その機能的意義を明らかにする。脂質分析については、環境温度が高いことから、死後変化の影響を強く受けている可能性があり、さらに検討する予定である。また、比較的安定な物質であるCRPやアディポネクチンについても測定しているが、これらの解析をさらに進める予定である。現時点での実態調査や脂質分析の結果からは、日本におけるポックリ病とは異なる病態のものが含まれている可能性が示唆される。
LEDを用いた光音響法による胎児等の血中酸素飽和度測定とその有効性

分娩時の胎児well-beingの評価方法として、胎児心拍数モニタリングが半世紀にわたり用いられ、胎児心拍数変化により胎児酸素化・胎児酸血症を推定している。しかし、この方法は、母の帝王切開率を増加させたが、出生児の神経学的予後は改善しなかった。これは、胎児脳の虚血を直接評価する方法が無いことが一因である。この問題は、子宮内胎児の血中酸素飽和度の測定により解決されるが、現行の方法では困難である。我々は、超音波断層法用プローブと近赤外光を発振するLEDおよび光音響法の解析部より構成される機器を開発し、非侵襲的に子宮内胎児・胎盤の酸素飽和度の測定を原理的に可能とした。本研究では、同機器の有効性と安全性を、in vitro/in vivo両方で評価した後、臨床的な有用性を探索することを目的としている。本年度は、まず基礎実験として、本機器の近赤外光LEDから照射された光が、細胞障害を発生させないかを、様々な波長の光を用いて検討中である。胎内環境を模倣するために、胎盤組織の検討のために絨毛や、胎児の皮膚・神経細胞の培養細胞(不死化細胞、初代培養細胞)に本機器の光を照射し、細胞の細胞毒性マーカーを生化学的に測定して安全性を評価している。具体的には、培養細胞では電子顕微鏡観察による形態評価や、カスパーゼやシトクロムcの検出、アネキシンV/PI染色による細胞死の評価を行っているが、明らかな障害は認められていない。また、同時により深達度の深い光を照射できるように機器も改良中である。分娩中の胎児・胎盤の酸素飽和度を正確に測定するためには、想定よりも更に深い光の深達度が必要であることが判明したため、現在、機器を改良中である。そのため、in vitro/in vivoの実験系で使用する光の条件を固定できておらず、やや進捗状況が遅れている。機器の改良を進めるとともに、本機器の近赤外光LEDから照射された光が、細胞障害を発生させないか、培養細胞での評価を継続、また、ラットでも安全性を検討する。ラットの大血管に留置した微小酸素電極により局所の酸素濃度を測定し、同時に本機器でも同部位を測定し、比較検討する。また、新生仔低酸素虚血性脳症モデルである新生児ラットモデルを用い、脳血管や脳実質の酸素飽和度の経時的変化を、本機器で正確に計測できるか評価する。以上より、本機器の安全性・有効性を検証する。安全性を確認後、ヒトへの臨床応用として、分娩時の胎児・胎盤評価も検証する予定である。機器の改良が必要なため、それに伴う基礎実験の進行も遅れている。そのため、次年度に今年度に想定していた実験を実施予定である。
京都大工頭中井家文書の建築指図(社寺・城郭・茶室)に関する研究調査

本年度は最終年度にあたるので研究のまとめを行った。初年度に作成した仮目録にしたがって番号順に調書を取り,写真撮影を行った。保存用として,モノクロ写真(4×5,6×9,35ミリ)とカラー写真(4×5ポジ,6×9ポジ,35ミリ・ネガ)を撮り,その他に部分撮影(カラー35ミリ・ネガ)を行った。中井家では明治時代の当主が指図の整理を行ったようで,包紙に朱の番号が付されていた。そこでこの番号を手がかりにしてまとめたところ,第1号から第181号までほとんど欠けることなく残存していた。また、番号が付されていない番外の指図86点が,新たに確認できた。最終的には,指図・絵図を合わせて総計269件,504点が確認できた。成果として、指図名称,員数,寸法,縮尺率,制作者名,作図分類,着彩の有無,破損状況を一覧表にまとめた。指図の建築別分類は,城郭,禁裏,寺院,神社,数寄屋,役屋敷などで,他に町割図や地図,あるいは土木構築物の絵図などがある。これらはいずれも江戸時代の中井役所の職能に対応したものである。指図の種類は,平面図が大半を占め,少数ながら建地割図や詳細図もあった。また数寄屋はすべて起絵図であった。指図の技法は,篦書きの方角グリッドの上に,古いものでは色紙に描いた平面図を貼り付けたいわゆる貼絵図形式,新しいものは書絵図形式になっている。珍しいところでは,烏瞰図的に描かれた境内絵図があった。最古のものは,現在のところ慶長年間の名古屋城指図で、そのほか寛永年間の指図も一定数ある。しかし大半は17世紀末から18世紀前半の作成になるものである。この中井家指図をもとに,京都の武家屋敷の役屋敷を取り上げて分析を行った。その結果,京都所司代屋敷,二条在番屋敷,禁裏付・仙洞付・女院付屋敷・京都町奉行屋敷・代官屋敷・火消屋敷・京都守護職屋敷の指図をもとにして,建築構成・主屋の空間構成等について若干の知見を得ることができた。本年度は初年度でもあり,中井家に保管されている建築指図の現状を把握するため,東京の中井家を訪れて簡単な破損状況のチェックを行い,併せて仮目録の作成を行った。そこでこの番号を手がかりにしてまとめたところ,第1号から第181号までほとんど欠けることなく残存していることが判明した。また,番号が付されていない番外の指図が,新たに86点確認できた。最終的には,指図や絵図を合わせて約580点にのぼった。つぎに、番号順に採寸と破損確認の調書を取り,写真撮影を行った。