hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
加齢による肝疾患の病態制御の分子基盤の解明―特にＳＩＲＴ１の機能解析―

加齢が、肝疾患の遺伝子発現に密接に関連しており、臨床的に肝疾患の進展と予後および、特に発癌に関連していることが判明した。加齢関連分子が疾患の分子病態に密接に関連していることが予測される。本研究では、正常肝を解析することにより、重要な加齢責任分子を同定し、特に癌化の機序の解明に新しい見地を与え、発癌に関する新しい分子機構の解明に役立つばかりではなく、新たな遺伝子治療の標的の研究にも大きく寄与できていると考えている。加齢に伴う遺伝子としてSIRT1の関与をあらゆる角度から確認した。SIRT1の肝細胞癌に与える影響を検討するため、肝細胞癌細胞株であるSK-Hep1を用いた。SK-Hep1にSIRT1のShRNAベクターを導入し、安定発現株を作成した。SIRT1 ShRNAによりSIRT1遺伝子の発現は2030%にノックダウンされ、SIRT1タンパク質の発現も低下を認めた。これらを用いてSIRT1の細胞増殖に与える影響を調べたところ、SIRT1の抑制により、SK-Hep1の増殖が抑制されることが確認された。細胞増殖の原因を特定するために細胞周期の検討を行ったが、SIRT1の抑制と細胞周期の関連性は見いだされなかった。次に、SIRT1の抑制により抗癌剤の効果に影響がでるか検討を行った。5-FUとシスプラチンを用いて検討を行ったが、これらの抗癌剤の効果はSIRT1の抑制で変化は認められなかった。腫瘍特異的にアポトーシスを惹起するとされているTRAILを用いて検討を行ったところ、SIRT1の抑制によりTRAILの効果が増強されることがわかった。正常肝臓におけるSIRT1の効果を検討するために、肝臓特異的にSIRT1をノックダウンするモデルをマウスで作成することとした。肝細胞のみに発現するアルブミンプロモーターとCre遺伝子の融合遺伝子を導入したマウスと、SIRT1のExon4の両端にlox配列を導入したマウスを準備し、これらを交配することで肝臓特異的にSIRT1がノックアウトされる。作成前準備をおこなった。慢性肝疾患においては、例えば、C型肝炎は50歳代以降急速に線維化が進展することが知られているし、C型肝炎に対するインターフェロン治療は加齢に伴いその有効率は低下することが判明している。また、高齢になれば、肝細胞癌の発現率が上昇し高発癌状態であるとされている。また、生体肝移植においても30歳代のグラフトは高齢者のグラフトと比較し明らかに、生着率がよく良好な経過をとることが判明している。また、脂肪性肝炎においても加齢がすすむにしたがって重症度や合併症が増加することが知られている。このような臨床上のエビデンスからも加齢と肝疾患の密接な関連性が示唆されるが、その分子機構はあきらかになっていない。本年度は、生体肝移植ドナーの凍結肝臓組織を多数保存おり解析した。生体肝移植ドナーの肝臓は各種臨床検査において病気を保持しない人正常の肝臓のサンプルであると考えられる。また、20歳代から50歳代と若年者から中高年者まで分布しており。加齢による肝臓の分子基盤の変化を解析するために極めて適していると考えられる。我々は、このサンプルを用いDNAチップにて遺伝子発現を網羅的に解析して年代毎に発現が異なる分子を解析した。また、これらの分子発現の変化を包括的に解析し、その変化の上流にある分子の1つとしてSIRT1を同定した。さらなる、アップストリーム解析によりヒストン関連分子、特にアセチル化にかかわる機構が加齢とともにダイナミックに変動することを解明した。これまでの成果を踏まえて、Sirt1の加齢における役割を検討、解析した。また、メチル化DNAの解析を行い、その結果を統合し加齢に伴う遺伝子変化について包括的に解析した。その結果、GeneChipにて検出された28042個の遺伝子について、20歳代、50歳代のサンプル間で有意差検定を行った結果、292個の遺伝子に有意差を認めた。これらのうちFold Changeが1.5より大きい遺伝子23個を、Fold Changeが小さな遺伝子群と比較しupstream解析を行った。さらに、メチル化遺伝子の変化と合わせて、50個のキーノード遺伝子が検出された。p53、TRAF3、XIAP等のapoptosis関連遺伝子が認められた他に、SIRT1などのヒストン関連分子の重要性が示唆された。また、前年度から、継続して施行しているノックアウトマウスの作成については、順調に作成がすすむ、現在純系の系統作成をしている。一部のマウスに高脂肪食を与えて、脂肪肝の提訴や遺伝子変化や全身の臓器に与える影響について検討している。以上の研究結果から、今回検出された遺伝子のうちSIRT1についてはこれまでの報告とあわせて、老化関連疾患との密接な関係が示唆された。肝臓においてはSIRT1が糖新生、脂肪酸酸化に関わるとされている他、発癌との関連も推測される。今後はSIRT1

発現とIFNシグナルや脂質糖代謝など肝の加齢による変化、肝疾患との関連についてさらなる研究が必要と考えられる。消化器内科学老化に関する遺伝子の網羅的解析に関しての解析が遅れている。莫大な遺伝子の解析が必要であり方法論で行き詰まっている。しかし、その中でSIRT1遺伝子の重要性を確認している。SIRT1の機能解析に関しては様々な角度から確認中であり、成果が期待できる。ノックアウトマウスの作成に関しても遅れてはいるが順調にすすんでいる。加齢に伴い変化する遺伝子群の同定を網羅的、包括的にほぼ終了した。またそれらにかかわる分子の包括的解析もほぼ終了したため、次の研究ステージにすみやかに移行できると考えている。加齢によって変化する分子の同定最新のDNAメチル化アレイによりまず加齢に伴うDNAメチル化を網羅的に解析し、データベースなどにてその標的分子を探索する。さらに、最新のDNAアレイ解析により、遺伝子発現差のデータベースを構築して、DNAメチル化により発現に影響を受ける遺伝子群を同定する。その結果を解析し、加齢により変化する分子群、またシグナル経路などを明らかにする。また蛋白レベルの解析および修飾はプロテオミクス手法を用いて解析する。最終的に加齢をつかさどる責任分子を同定する。現在、マウスの交配を重ね、Cre遺伝子と、lox配列をホモ接合で持った系統を作成した。これらのマウスでは肝臓においてExon4が欠損したSIRT1を発現しており、SIRT1がノックダウンされていると考えられる。今後、これらのマウスを用いてSIRT1の肝臓における機能を検討していく予定である。主にSIRT1の機能解析を中心に研究をすすめていきたいと考えている。1.正常肝および各種肝疾患におけるサーチュインファミリーの発現(mRNAおよびタンパク)の解析。2.肝細胞におけるSIRT1の標的分子の検討。3.SIRT1の機能解析:肝細胞のサイトカインや酸化ストレスによる細胞死やDNA修復に対するSIRT1の機能を解析。また、SIRT1ノックアウトマウスを作成中であり、マウスモデルの確立を目標としている。研究費は主に研究消耗品(研究試薬、培養細胞消耗品等)に充当する。また国内学会発表に100千円計上する。
バクテリアルトランスロケーションにおける神経原性炎症の役割

バクテリアルトランスロケーション(Bacterial translocation:BT)は腸管より細菌や毒素が進入することにより生じる病態であり、通常では生じないが重症の患者に生じやすく、ひとたび生じると致命的となる。今回我々はリポポリサッカライド(lipopolysaccharide:LPS)を用いて腸管よりの進入形態につき調査を行ったところ、LPSは腸管粘膜のある特定の細胞から進入していることが明かとなった。また腸管の刺激(炎症、拡張)により吸収が促進されている可能性が考えられた。今後この現象につきひき続き調査を行う方針としている。消化管粘膜のバリアーを通過し、細菌やエンドトキシンが生体内に移行する現象はBacterial Translocation(BT)と呼ばれている。アフェレーシス療法や、選択的腸管内除菌法、腸粘膜の移植を防ぐための侵襲後早期の経腸栄養などが行われているが、今もなお完全に防ぐことが難しい病態であり、ひとたび生じると、治療困難であり、在院日数を増加させ、死亡率をも上昇させている。本研究代表者は、BTは発症機序が多岐(腸管の機械的拡張、高サイトカイン血症、腸管自体の炎症、腸粘膜の萎縮等)に渡っているため、病態の理解が難しく、治療を困難にしていると考えている。そこで、それぞれの病態におけるBTの病態を観察するために、まず動物モデルの作成を試みることとした。マウスにおいて、腸管内にLPS(lipopolysaccaride)を注入し、3時間後に心臓から採血した血液中のLPS濃度を測定した。興味深いことに、LPSを注入するだけで腸炎が誘発され、腸管の炎症が顕著になるほど血液中のLPS濃度が上昇した。これは、腸管内のLPS濃度が上昇するだけでBTが生じる可能性があることを示唆し、さらにはBTの発症にはその局所の炎症が関与している可能性が高い。そこで、神経原性炎症(neurogenic inflammation)を抑制する内臓知覚神経上のバニロイド受容体型カチオンチャネル1型(TPRV-1)レセプターの拮抗薬を投与したところ、腸炎の程度が抑制されただけでなく、血液中のLPS濃度も低下し、実験的BTが抑制されることが明かとなった。今後もこのモデルを使用し、腸管の機械的拡張時や、腸炎等の腸管自体の炎症時、高サイトカイン血症時といった様々な病態におけるBTの変化や、TPRV-1拮抗薬の効果につき検討を行い、BTの病態の理解、治療法の確立にむけての努力を継続したいと考えている。本研究代表者は、BTは発症機序が多岐(腸管の機械的拡張、高サイトカイン血症、腸管自体の炎症、腸粘膜の萎縮等)に渡っているため、病態の理解が難しく、治療を困難にしていると考え、それぞれの病態におけるBTの病態を観察するために、動物モデルの作成を行った。平成20年度に、マウスの腸管内にLPS(lipopolysaccaride)を注入し、3時間後に心臓から採血した血液中のLPS濃度を測定したところ、腸炎が誘発され、腸管の炎症が顕著になるほど血液中のLPS濃度が上昇した。そこで神経原性炎症(neurogenic inflammation)を抑制する内臓知覚神経上のバニロイド受容体型カチオンチャネル1型(TPRV-1)レセプターの拮抗薬を投与したところ、腸炎の程度が抑制されただけでなく、血液中のLPS濃度も低下し、実験的BTが抑制されることが明かとなった。そこで、腸管上皮のどの部分からBTが生じているかをFITCにてラベルされたLPSを腸管内に投与し、共焦点レーザー顕微鏡にて観察したところ、腸管上皮の特定の細胞が蛍光を発しており、その細胞よりBTが生じている可能性が高いと考えられた。今後この上皮細胞の性質を調査し、BTの生じる病態生理に付き、引き続き調査を行っていくつもりである。消化管粘膜のバリアーを通過し、細菌やエンドトキシンが生体内に移行する現象はBacterial Translocation (BT)と呼ばれている。アフェレーシス療法や、選択的腸管内除菌法、腸粘膜の萎縮を防ぐための侵襲後早期の経腸栄養などが行われているが、今もなお完全に防ぐことが難しい病態であり、在院日数を増加や死亡率の原因となっている。

平成22年度には、マウスの腸管内にLPS (lipopolysaccaride)を注入し、1時間後に門脈から採血した血液中のLPS濃度を測定したところ、腸炎が誘発され、腸管の炎症が顕著になるほど血液中のLPS濃度が上昇した。また、実験的腸閉塞モデルマウスにて同様の実験を行ったところ、門脈血液中のLPS濃度は上昇していた。このことから、炎症によるBTと腸閉塞によるBTは相乗作用を持つことが示唆された。そこで、腸管上皮のどの部分からBTが生じているかをFITCにてラベルされたLPSを腸管内に投与し、共焦点レーザー顕微鏡にて観察したところ、腸管上皮の特定の細胞が蛍光を発しており、その細胞よりBTが生じている可能性が高いと考えられた。実験的腸閉塞モデルマウスにても共焦点レーザー顕微鏡による観察にて同様の所見が得られた。このことから、腸閉塞時(腸管内圧上昇時)に促進されるBTは、特定の細胞による調節にて行われている可能性が示唆された。これらの結果を今後の研究に役立てたいと考えている。
動物プランクトンの内分泌系に関する分子生物学的研究

最近の研究から、ある種の動物プランクトンには高等動物と同様の内分泌系が存在することが示唆されている。したがって、環境ホルモンは動物プランクトンの生殖機能に影響を及ぼしている可能性があり、その評価法の確立は急務である。本研究は、シオミズツボワムシをモデルとして、未だ全容が明らかでない動物プランクトンの内分泌系に関する基礎的な知見を得ることを目的とした。本年度もシオミズツボワムシBrachionus plicatilis石川株を対象に大量培養を行った。本株ワムシは単為生殖で増殖することでクローン化された個体が得られ、遺伝子解析には好都合である。また、仔虫の産出率も高く、内分泌系の研究にも有用である。上記のように培養したシオミズツボワムシから全RNAを調製し、市販のキットを用い1st strand DNAを合成した。次に長崎大学の萩原博士らのグループがシオミズツボワムシのEST解析で得たgamma-aminobutyric acid(GABA)受容体関連タンパク質(GABARAP)の一部領域をコードしていると想定されるDNA配列を参照してプライマーを設計し、上記のようにして合成した1st strand DNAを鋳型に目的遺伝子の増幅を行った。その結果、GABARAP1およびGABARAP2をコードする2種類の遺伝子を得ることができた。さらにその内部配列を参照にプライマーを設計し、市販の3'-および5'-RACEキットを用いて目的遺伝子の全長を決定してアミノ酸配列を演繹したところ、両受容体のアミノ酸同一率は53%であった。次に、GABARAP1およびGABARAP2のそれぞれ、合成ペプチドおよび組換えDNA発現タンパク質を抗原としてウサギ抗血清を作製した。この抗体を用いてワムシ個体中の組織分布を調べたところ、GABARAP1およびGABARAP2はいずれも中枢神経および末梢神経に広範囲に分布することが明らかになった。以上の結果は、GABARAP1およびGABARAP2がGABA受容体の細胞内輸送に重要な働きを果たしているのみでなく、その他の代謝機構にも重要であることを示唆するものである。本年度はシオミズツボワムシBrachionus plicatilis石川株を対象に大量培養を行った。また、仔虫の産出率も高く、ビゲロジェニンが関係する卵成熟の研究にも有用である。陰イオン交換クロマトグラフィー、ヒドロキシアパタイトクロマトグラフィーなどの方法でシオミズツボワムシから調製した低イオン強度緩衝液の抽出液を分画し、電気泳動分析に付したところ、204kDaのビテロジェニン候補成分がみられた。そこで本成分をN末端アミノ酸分析に付し、この配列をもとにPCRに用いるprimerを合成した。別途、シオミズツボワムシから調製したfirst strand cDNAを鋳型にPCRを行い得られた増幅DNA断片の塩基配列を分析して相同性検索を行ったところ、本DNA増幅断片はミオシン重鎖の1部領域をコードすることが明らかになった。一方、ミジンコ類Daphnia magnaのビテロジェニンに特異的な抗体を他機関から供与してもらい、先の、抽出液につき電気泳動に付してイムノブロッティング分析を行ったが、抗原抗体反応を示すタンパク質バンドは観察されなかった。したがって、本年度はシオミズツボワムシからビテロジェニンのcDNAをクローニングすることはできなかった。現在、両性生殖を行うシオミズツボワムシの雄および雌を大量培養してmRNAを調製し、subtraction法を適用して実験を継続している。次に、GABARAP

1およびGABARAP2のそれぞれ、合成ペプチドおよび組換えDNA発現タンパク質を抗原としてウサギ抗血清を作製した。この抗体を用いてワムシ個体中の組織分布を調べたところ、GABARAP1およびGABARAP2はいずれも中枢神経および末梢神経に広範囲に分布することが明らかになった。以上の結果は、GABARAP1およびGABARAP2がGABA受容体の細胞内輸送に重要な働きを果たしているのみでなく、その他の代謝機構にも重要であることを示唆するものである。
四肢形態形成におけるFGF10の役割の解明

四肢の形態形成のメカニズムを解明する目的で,肢形態形成に重要である線維芽細胞増殖因子(FGF10)に着目して研究を行ってきた。FGF10は,ニワトリ胚側腹部より過剰肢を誘導し,予定胚芽形成領域に発現していることから,肢形成のトリガー因子であると考えられていた。さらに昨年,FGF10機能喪失(KO)マウスでは四肢が全くできないことから,FGF10が内在性の四肢形成因子として実際に作用していることが証明された。本年度は、四肢形態形成におけるFGF10の役割をさらに解明するために,FGF10 KOマウス胚を用いてFGF10の標的遺伝子をRepresentative Difference Analysis(RDA)法により単離し,FGF10のシグナルカスケードを明らかにすることを試みた。胎齢14日のKO胚(ホモ接合体)と野生型胚よりmRNAを抽出,cDNAを合成し,それぞれドライバー,テスターcDNAとしてRDA法を行った。野生型にのみ発現しFGF10 KOマウスには発現しないDNA断片について,現在シークエンス解析中である。現在までのところ65クローンについて解析した結果,シグナル伝達関係の遺伝子が27,細胞周期に関与する遺伝子が19,諸酵素遺伝子が6,膜タンパク質遺伝子が4,既知の塩基配列とホモロジーのない遺伝子が9クローン単離された。また,FGF10 KOマウスの表現型の詳細な解析を行い,FGF10が四肢の形成だけでなく,肺,唾液腺,膵臓,腎臓,毛,歯,下垂体など様々な器官の形態形成に必要であることを明らかにした。四肢の形態形成のメカニズムを解明する目的で,肢形態形成に重要である線維芽細胞増殖因子(FGF10)に着目して研究を行ってきた.本年度は,FGF10機能喪失(KO)マウスを解析し(Nature Geneticsに発表),四肢形態形成におけるFGF10の役割を明らかにした.FGF10 KOマウスには四肢が全くなく,重度のサリドマイド奇形様の表現型(先天性四肢切断症)を呈することから,FGF10が内在性の四肢形成因子として実際に作用していることが証明された.また,本KOマウスでは四肢原基である肢芽は形成されるが,肢芽のシグナルセンターである後部極性化域(ZPA)と外胚葉性頂堤(AER)が全く形成されない.従って,FGF10は,ZPA因子のソニックヘッジホッグやAER因子のFGF8などより上位の四肢形成因子であることが明らかとなった.さらに興味深いことに,FGF10遺伝子が欠損すると肺が形成されないことがわかった.FGF10遺伝子は,肢芽,肺芽,耳胞,皮膚構造物である毛や羽毛の原基など,魚類が地上にあがる際に劇的な進化を遂げたであろうと考えられる様々な器官原基に発現する.少なくとも四肢と肺の形成において,FGF10が最上位の形態形成因子としての機能を担っていることが証明されたことを契機に,FGF10の脊椎動物の形態進化における役割についての解析を現在進めている.FGF10の下位シグナルカスケードについてはRDA(Representational Difference Analysis)法とdifferential display法の両方法により研究が進行中である.四肢の形態形成のメカニズムを解明する目的で,肢形態形成に重要である線維芽細胞増殖因子(FGF10)に着目して研究を行ってきた。
児童の「自己教育力」の形成に関する実証的比較評価研究

この研究では、新しい教育実践方式(開発した諸個別学習モデル中の学習パッケ-ジによる自由進度学習)と伝統的なそれ(いわゆる一斉指導方式)との「自己教育力」の形成に及ぼす教育効果の違いを比較研究することが目的とされた。そして、この目的のために、以下の諸調査を実施した。1知的学力調査の実施(1)調査対象校:自由進度学習実践校3校(4、5、6学年児童、延960人)。一斉指導実践校12校(4、5、6学年児童、延1625人)。(2)対象教科は算数とし、調査問題を作成し、平成2年1月3月に実施。2価値態度学力調査の実施(1)調査対象校:上記知的学力調査対象校と同じ。(2)内容として「自己教育力態度調査」アンケ-ト、及び「出来事調査」アンケ-トを作成し、平成2年1月3月に実施(但し、「出来事調査」は個別校の5年生には実施しない)。3この研究の一環として、新教科「生活」に関する研究資料の収集に努め(平成元年102年1月)、この結果、生活科研究推進校(文部省指定、全国51校)のうち、45校分の資料を収集することができた。現在、上記1、2に関する調査資料を順調に回収中であり、4月以降その結果の整理・分析に取り組み、その研究成果を報告書にまとめることにしている。他方、収集した生活科関連資料については、現在、その整理・分析作業を精力的に行っており、その成果は公表する予定である。
１型糖尿病の病態解明と発症・進展予知への応用

1型糖尿病の新規自己抗体であるZnT8抗体の臨床的意義を検討する目的で、6つのZnT8/ZnT3キメラcDNAを作成しZnT8抗体の認識部位を検討した。その結果、1型糖尿病の発症年齢と関連するZnT8のC末端10残基で形成する3次元エピトープを同定した。また、ZnT8抗体と1型糖尿病の病型、罹病期間との関連を調べ、ZnT8抗体は急性発症1型糖尿病および小児発症1型糖尿病に高率に検出される一方、成人発症1型糖尿病ではZnT8に対する液性免疫反応が長期間残存することが明らかになった。さらに、新規ZnT8抗体測定法(ELISA法)の臨床的評価も行った。1. ZnT8抗体におけるaa325と1型糖尿病のフェノタイプ:(1)昨年度に作成したZnT8/ZnT3キメラcDNAを用いて、RBA法により1型糖尿病発症時のZnT8抗体エピトープを検討した。(2)使用した1型糖尿病の検体は、急性発症型(81例)、緩徐発症型(30例)、劇症型(85例)の発症時に得られた血清である。(3)58%の急性発症1型糖尿病患者および20%の緩徐発症1型糖尿病においてZnT8抗体が検出されたが、劇症1型糖尿病患者には検出されず、劇症1型糖尿病のマーカーとしては有用でないことが明らかとなった。(4)ZnT8の325番目のアミノ酸をArg/TrpからGlnへ変更したところ、10歳以上発症例の59%で反応が消失したが、10歳未満発症例においては33%と有意に低かった。(5)1型糖尿病の発症年齢によりZnT8に対する液性免疫反応が異なることが明らかになった。2.ZnT8抗体3次元エピトープの解析:(1)昨年度ZnT8のC末端aa360-369(10残基)とaa325が立体エピトープを形成していることが明らかになったため、ZnT3 268-357/ZnT8 358-369のキメラ蛋白のaa325をZnT3のアミノ酸からZnT8のアミノ酸(R/W)にsite-directedmutagenesisにより置換した。(2)新たに作成したZnT3 268-357/ZnT8 358-369 (325R)またはZnT3 268-357/ZnT8 358-369 (325W)を用いて1型糖尿病患者血清との反応を検討したが、いずれの血清も反応を示さなかった。(3)以上からZnT8のC末端aa360-369(10残基)とaa325が形成する3次元エピトープには周囲のアミノ酸も関与し、ZnT8抗体エピトープがaa325だけに依存しているのではないことが明らかとなった。1. ZnT8抗体と1型糖尿病の病型、罹病期間との関連:(1)昨年度までに確立したZnT8抗体のradioligand binding assayおよび1型糖尿病発症時からの保存血清を用いてZnT8抗体の陽性率を罹病期間ごとに検討した。(2)使用した1型糖尿病の検体は、急性発症1型糖尿病214例より得られた血清である。(3)これらの検体におけるZnT8抗体の陽性率を小児発症(≦15歳、108例)、成人発症(>15歳、106例)に分けて検討した。(4)その結果、小児発症の陽性率は発症時66.7%、罹病期間0-3年32.3%、4年以上15.4%と罹病期間とともに速やかに低下し、4年以上の陽性率はIA-2抗体に比べ有意に低かった。一方、成人発症例では36.8%、38.2%、21.1%と遷延化していた。(5)成人発症1型糖尿病ではZnT8に対する液性免疫反応が長期間残存することが明らかになった。2.新規ZnT8新規抗体測定法の評価:(1)英国のRSR社によりZnT8抗体の新規ELISA法が開発されたのをきっかけに、一般臨床におけるZnT8抗体測定を目的として、我々のradioligand binding assay(RBA)と比較検討した。(2)使用した検体は、1型糖尿病患者114例(急性発症60例、緩徐発症42例、劇症12例)およびIASP2012(Islet Autoantibody Standardization Program)における急性発症1型糖尿病50検体である。(3)ELISA-ZnT8抗体の陽性率は、急性発症71%、緩徐発症29%、劇症0%でありRBA-ZnT8抗体とほぼ同様の結果であった。ELISA-ZnT8抗体陽性を規定する独立因子は、20歳以下発症(OR 15.91、P<0.0002)、急性発症(OR 3.38、P<0.019)、IA-2抗体陽性(OR 3.75、P<0.014)であった。(4)両抗体測定法の一致率は、96.5%(κ統計量0.928)と非常に良好であった。

1型糖尿病の新規自己抗体であるZnT8抗体の臨床的意義を検討する目的で、6つのZnT8/ZnT3キメラcDNAを作成しZnT8抗体の認識部位を検討した。その結果、1型糖尿病の発症年齢と関連するZnT8のC末端10残基で形成する3次元エピトープを同定した。また、ZnT8抗体と1型糖尿病の病型、罹病期間との関連を調べ、ZnT8抗体は急性発症1型糖尿病および小児発症1型糖尿病に高率に検出される一方、成人発症1型糖尿病ではZnT8に対する液性免疫反応が長期間残存することが明らかになった。さらに、新規ZnT8抗体測定法(ELISA法)の臨床的評価も行った。1. ZnT8/ZnT3キメラ蛋白の作成とZnT8抗体エピトープの解析:(1)1型糖尿病患者の自己抗体がZnT8の立体構造を認識する場合、ペプチドライブラリーではエピトープが同定できない可能性があるため、立体構造を保持するためにZnT8とZnT3とのキメラ蛋白を作成し、1型糖尿病発症時のZnT8抗体エピトープを検討した。(2)ZnT8とZnT3の細胞内領域をコードするcDNAを用いて6つのZnT8/ZnT3キメラcDNAを作成しexpression vectorへ挿入しradioligand binding assayによりepitope解析をおこなった。(3)ZnT8のC末端aa360-369(10残基)をZnT3の相同部分に置換したところ、約40%の1型糖尿病患者でaa325との反応が消失した。(4)しかし、ZnT8のC末端aa358-369を有するキメラ蛋白にはすべての血清が反応せず、このエピトープは3次元構造を認識していることが分かった。(5)3次元エピトープを有する患者の頻度は急性発症1型糖尿病で高く、1型糖尿病の発症年齢が有意に低かった。2. ZnT8抗体のアイソタイプ解析システムの構築:(1)Th1またはTh2免疫現象を反映しているZnT8抗体の免疫グロブリン・アイソタイプを、抗免疫グロブリン・アイソタイプ抗体を固定化したセファロースビーズとradioligand binding assayにより解析した。(2)1型糖尿病患者のZnT8抗体は、IgG1優位であることが明らかとなった。ZnT8のファージディスプレイライブラリーの作製が遅れおり、平成24年度中に完了できなかったため。ZnT8/ZnT3のキメラ蛋白によるZnT8抗体エピトープ解析法を確立し、病型別の相違について明らかにし、初年度の目的を達成したが、ZnT8のファージディスプレイライブラリーの作製はまだ進行中であり、平成23年度中に完了できなかったため。早急にZnT8のファージディスプレイライブラリーの作製を進める。そして調整されたファージライブラリーによりZnT8抗体陽性の急性発症1型糖尿病および緩徐発症1型糖尿病患者のプール血清を用いて、抗体に結合性のあるファージをクローニングし、得られたZnT8 cDNAとradioligand binding assay(RBA法)を用いてZnT8抗体エピトープ解析システムを構築する。急性発症1型糖尿病および緩徐発症1型糖尿病患者血清が結合したファージより得られたZnT8抗体エピトープのcDNAを用いて、経時的に保存されている緩徐発症1型糖尿病血清にてZnT8抗体エピトープをRBA法により解析する。ZnT8のファージディスプレイライブラリーの作製を進め、調整されたファージライブラリーによりZnT8抗体陽性緩徐発症1型糖尿病患者のプール血清を用いて、抗体に結合性のあるファージをクローニングし(パニング)、得られたZnT8 cDNAとradioligand binding assayを用いてZnT8抗体エピトープ解析システムを構築する。得られたZnT8抗体エピトープのcDNAを用いて、経時的に保存されている緩徐発症1型糖尿病血清にてZnT8抗体エピトープをradioligand binding assayにより解析する。次年度の研究費のほとんどは、アイソトープや自己抗体測定に使用する試薬などの消耗品費としての使用を予定している。
直接PCR法による窒素固定藍藻の迅速かつ簡便な検出と評価

海洋には数多くの微細藻類が存在し、その中からの有用物質生産株のスクリーニングが盛んに行われている。本研究では、特にその中でも窒素固定能を有する海洋藍藻の迅速な検出を行うことにより効率的なスクリーニングを検討した。藍藻の窒素固定はニトロゲナーゼにより行われるが、条件によっては水素を発生することも可能である。本研究の特徴としては、サンプル中に存在するターゲット藻体を直接PCR法を用いて遺伝子レベルでキャラクタライズすることによって検出する点である。ニトロゲナーゼのサブユニットである鉄タンパクをコードするnifH遺伝子を検出のマ-カとし、相補性の高いところでプライマーをデザインした。次に窒素固定藍藻を用いて、DNAを抽出することなく細胞への直接PCRを行う際の最適条件の検討を行った結果、抽出DNAを用いるときよりは低いannealing温度55°Cで良好なnifH遺伝子の増幅が確認された。また、用いる細胞数も数個単位で検出可能であることが示された。モデル実験で得られた最適条件を利用し、実海水を用いて海洋窒素固定藍藻のスクリーニングを行った。多くのサンプル中、直接PCR法でnifH遺伝子の増幅が確認されたものにおいて数種の糸状性窒素固定海洋藍藻が分離された。それらの水素生成能を調べたところ、0.49μmolH_2/mg dry wt/hと高い生成速度が示された。また、温泉源付近より得たサンプル中からも同様な方法により窒素固定藍藻が分離された。このようにサンプル中に存在する微生物を遺伝子レベルで迅速に評価することにより、多くのサンプルを一次スクリーニングにかけることが可能になり、今までにかかっていた分離操作をより簡便にかつ迅速確実に行うことが可能になった。本法はターゲット遺伝子のシークエンスさえ明らかであれば、どのような微生物にも用いることが可能であると考えられる。
C4光合成回路に関与するリンゴ酸輸送体の同定と機能特性の解析

本研究は,NADP-マリックエンザイム型C_4植物の葉肉細胞と維管束鞘細胞の葉縁体内包膜においてC_4光合成中間代謝産物であるリンゴ酸の輸送を行っている膜タンパク質を同定し,その機能特性を比較することを目的としている.本年度の研究により,以下のような成果が得られた.(1)リンゴ酸輸送体の候補となる3種のトウモロコシcDNAがコードする膜タンパク質を酵母で発現させ,リポソームヘの再構成を用いて輸送特性の解析を行った.その結果,これらのタンパク質は2-オキソグルタル酸/リンゴ酸輸送体あるいはジカルボン酸輸送体と推定されるような基質特異性を持つ輸送能を示した.また,オキサロ酢酸も効率よく輸送した.これらの遺伝子は,細胞特異的に光応答性の発現誘導を示すことから,C_4光合成回路に関与している可能性が高いと推察された.(2)シロイヌナズナからも上記のトウモロコシリンゴ酸輸送体のホモログ遺伝子を同定している.再構成系を用いた組み換えタンパク質の取り込み活性測定により,これらのシロイヌナズナ膜タンパク質がトウモロコシと同様に,オキサロ酢酸に対して高い親和性をもつことを見出した.そのKm値は,単離葉緑体でのオキサロ酢酸取り込み時のKm値に近いものであった.したがって,2-オキソグルタル酸/リンゴ酸輸送体およびジカルボン酸輸送体がオキサロ酢酸輸送体としても機能しうると結論付けた.(3)上記のリンゴ酸輸送体の生理機能を明らかにするため,シロイヌナズナタグラインのスクリーニングを行った.その結果,各リンゴ酸輸送体遺伝子の破壊株をそれぞれ複数種単離することができ,現在その表現型を解析中である.本研究はC_4光合成細胞である葉肉細胞と維管束鞘細胞の葉緑体内包膜においてC_4光合成中間代謝産物であるリンゴ酸の輸送を行っている膜タンパク質を同定し,その機能特性を比較することを目的としている.既にトウモロコシ葉より,両光合成細胞で各々特異的に発現しているリンゴ酸輸送体のcDNA候補を単離しているが,シロイヌナズナにおいても一次構造の良く似た膜タンパク質をコードしている遺伝子を見出した.シロイヌナズナ葉より,その遺伝子に相当するcDNAを単離し,酵母内で発現させ,リポソームへの再構成系を用いて輸送特性を解析したところ,高いリンゴ酸輸送活性を示した.しかしながら,基質特異性は既報の2-オキソグルタル酸/リンゴ酸輸送体とは異なっており,むしろジカルボン酸輸送体に近い特異性をもっていたことから,今回同定したシロイヌナズナ遺伝子がジカルボン酸輸送体をコードしているのではないかと推定している.トウモロコシのcDNAについても同様の解析を進めており,機能特性の差異が見出されれば,両光合成細胞内での生理機能について考察できるものと考えている.また,これらの膜タンパク質の部分ポリペプチドを大腸菌で発現させ,特異抗体を作製中である.得られる特異抗体を用いて,発現の細胞特異性・組織特異性,細胞の分化過程での誘導性についてウエスタン解析ならびに免疫電顕を行う予定である.本研究は,NADP-マリックエンザイム型C_4植物の葉肉細胞と維管束鞘細胞の葉縁体内包膜においてC_4光合成中間代謝産物であるリンゴ酸の輸送を行っている膜タンパク質を同定し,その機能特性を比較することを目的としている.本年度の研究により,以下のような成果が得られた.(1)リンゴ酸輸送体の候補となる3種のトウモロコシcDNAがコードする膜タンパク質を酵母で発現させ,リポソームヘの再構成を用いて輸送特性の解析を行った.その結果,これらのタンパク質は2-オキソグルタル酸/リンゴ酸輸送体あるいはジカルボン酸輸送体と推定されるような基質特異性を持つ輸送能を示した.また,オキサロ酢酸も効率よく輸送した.これらの遺伝子は,細胞特異的に光応答性の発現誘導を示すことから,C_4光合成回路に関与している可能性が高いと推察された.(2)シロイヌナズナからも上記のトウモロコシリンゴ酸輸送体のホモログ遺伝子を同定している.再構成系を用いた組み換えタンパク質の取り込み活性測定により,これらのシロイヌナズナ膜タンパク質がトウモロコシと同様に,オキサロ酢酸に対して高い親和性をもつことを見出した.そのKm値は,単離葉緑体でのオキサロ酢酸取り込み時のKm値に近いものであった.したがって,2-オキソグルタル酸/リンゴ酸輸送体およびジカルボン酸輸送体がオキサロ酢酸輸送体としても機能しうると結論付けた.(3)上記のリンゴ酸輸送体の生理機能を明らかにするため,シロイヌナズナタグラインのスクリーニングを行った.その結果,各リンゴ酸輸送体遺伝子の破壊株をそれぞれ複数種単離することができ,現在その表現型を解析中である.
腫瘍マーカーSCCAを標的とした癌免疫療法の研究

上皮性癌の腫瘍マーカーとして知られている扁平上皮癌抗原(SCCA)を標的とした癌ペプチドワクチン療法を確立するために、日本人の6割が発現するHLA-A24分子と日本人の4割が発現するHLA-A2分子陽性癌患者に対する癌ワクチン療法に応用できるSCCA由来ペプチドの同定を試みた。その結果、HLA-A24分子陽性癌患者に利用できるSCCAペプチドを2個同定でき、上皮性癌患者に対するSCCAを標的とした癌ワクチン療法の可能性が示唆された。上皮性癌の腫瘍マーカーとして知られているセルピンファミリーに属する扇平上皮癌抗原(SCCA)を標的とした癌ペプチドワクチン療法を確立するために、日本人の6割が発現するHLA-A24分子に提示され、癌細胞反応性細胞傷害性Tリンパ球(CTL)を誘導できるSCCA由来ペプチドの同定に取り組んだ。その結果、1、食道癌、肺癌、子宮頭癌、頭頚部癌などの上皮性癌細胞株でのSCCA mRNAの発現をリアルタイムPCR法で検討することにより、大部分の扇平上皮性癌細胞株でのSCCA mRNAの発現が確認出来た。一方、腺癌細胞株での発現の頻度は低かった。2.種々の癌組織でのSCCA蛋白の発現を免疫組織染色で検討したところ、大部分の扇平上皮性癌組織に発現していることが確認されたが、一部の正常上皮にも発現していた。3、HLA-A24分子への結合モチーフに基づいてSCCA蛋白由来抗原ペプチドを準備し、HLA-A24分子陽性の癌患者の末梢血リンパ球をSCCA抗原ペプチドで繰り返し刺激して、ペプチド特異的CTLを誘導できるかを検討したところ、SCCA 112-120とSCCA 215-224ペプチドを用いた場合には、SCCAペプチド反応性CTLを誘導できることが判明した。4、SCCA 112-120 SCCA215-224ペプチドで誘導したSCCAペプチド反応性CTLは、HLA-A24陽性でSCCA蛋白を発現している上皮性癌細胞に対して、HLAクラスI拘束性に細胞傷害活性を示すことを明らかにした。上皮性癌の腫瘍マーカーとして知られているセルピンファミリーに属する扁平上皮癌抗原(SCCA)を標的とした癌ペプチドワクチン療法を確立するために、日本人の4割が発現するHLA-A2分子に提示され、癌細胞反応性細胞傷害性Tリンパ球(CTL)を誘導できるSCCA由来ペプチドの同定に取り組んだ。1)HLA-A2分子への結合モチーフに基づいてSCCA蛋白由来の合成ペプチドを複数個準備し、HLA-A2分子の発現を確認した癌患者の末梢血リンパ球をSCCA抗原ペプチドを用いて繰り返し刺激し、SCCAペプチド特異的CTLの誘導の有無をIFN-gamma ELISA法で検討した。その結果、有用な候補ペプチドを絞り込めた。さらに、これらのSCCA候補ペプチドで誘導したCTLが、HLA-A2陽性SCAA陽性扁平上皮癌に対して細胞傷害活性を示すか検討したところ、必ずしも特異的な細胞傷害活性を示さなかった。CTLの細胞株化やクローニングが必要と考えられた。また、2)多種類の上皮性癌細胞株(扁平上皮癌と腺癌)でのSCCA蛋白の発現をWestern blot法で検討した。その結果、SCCA蛋白の発現は、扁平上皮癌では大部分の細胞株に認められたが、腺癌での発現は稀であったことから、腺癌に対しては、SCCAを標的とした癌ペプチドワクチンは適応しづらいことを明らかにした。上皮性癌の腫瘍マーカーとして知られている扁平上皮癌抗原(SCCA)を標的とした癌ペプチドワクチン療法を確立するために、治療に利用できるSCCA由来癌抗原ペプチドの同定に取り組んだ。昨年度までに、日本人の約6割が発現するHLA-A24分子陽性癌患者に利用できるSCCAペプチドを同定したので、今年度は、日本人の約4割が発現するHLA-A2分子陽性癌患者に利用できるSCCAペプチドの同定を試みた。HLA-A2分子への結合モチーフに基づいてSCCA蛋白由来の合成ペプチドを複数個準備し、HLA-A2分子陽性癌患者の末梢血リンパ球をこれらの抗原ペプチドを用いて繰り返し刺激し、SCCAペプチド特異的細胞傷害性Tリンパ球の誘導の有無をサイトカインの産生量で検討した。その結果、候補ペプチドを絞り込めた。さらに、これらのSCCA候補ペプチドで誘導した細胞傷害性Tリンパ球が、HLA-A2陽性でSCAAを発現した扁平上皮癌に対して細胞傷害活性を示すか検討したところ、必ずしも特異的な細胞傷害活性を示さなかった。また、多種類の上皮性癌細胞株(扁平上皮癌と腺癌)でのSCCA蛋白の発現をWes tern blot法で検討した。その結果、SCCA蛋白の発現は、扁平上皮癌では大部分の細胞株に認められたが、腺癌での発現は稀であったことから、腺癌に対しては、SCCAを標的とした癌ペプチドワクチンは適応にならないことが明らかとなった。
日本の多国籍銀行:その特質と世界的影響

本年度の第一の成果は、国際銀行業務に固有な特質、とりわけユ-ロ金融市場との関連を考察した論文が公刊されたことである(裏面の発表書名を参照)。さらに本年度は、日本の銀行が多国籍化するに至った背景として、「金融の国際化」と総称される現象を多面的に検討することにした。この現象は(1)金融機関(銀行)、(2)金融市場,(3)通貨という三つの次元の国際化に区分されるが、三者の関連を高度成長期以来の歴史の中で、また国際比較を含めて、研究を進めることができた。さしあたり解明できた点は以下の通りである。邦銀の世界的なシェア拡大は、外国市場において外貨(ドル)建の取引に依存して実現した。すなわち、日本の場合は(2)、(3)の国際化が立ち遅れているが故に、(1)の急展開が生じるという関係がみられる。(2)に関しては、1980年代の一連の自由化措置によって加速されたが、日本市場では非居住者間の取引に以然として限界がある。それは、高度成長期から根強い閉鎖的な取引慣行も一因ではあるが、より基本的には、円が十分に国際化していない点に帰着する。(3)について、国際通貨としての比較優位は一面では金融市場の整備が条件になる((2)が(3)を規定する)が、ドイツマルクとの対比では、貿易取引における円の地位の低さが目立つ。貿易品目、相手国など実物的な関係が、通貨の国際化、ひいては金融市場の開放性にも影響すると考えられる。以上のような論点は、デ-タ面での裏付けや論理的整合性に不十分な点があり、残念ながらまだ公表する段階には至っていない。なかでも「市場の国際化」に関して、外国の制度、慣行をさらに調査士、日本市場の特徴をより一層明確にすることが必要であると考えている。3年計画の研究なので、本年度は準備段階に主眼を置き、分析の枠組み作り、歴史的概観を行うことを予定していた。基本的な統計の収集・整理も不可欠な作業であった。しかし幸いにも予定よりも研究の進展があり、昨年中に研究成果の一部を裏面記載のようにまとめるこができた。1.「邦銀の国際業務」は、基本統計を幅広く検討しつつ、業務の急成長を促した要因を制度的前提、企業行動様式などに関連させて論じた。なかでも、資料が公表されていない国際業務の利潤率を推計し、低収益性が業務拡大を可能にする動力になっていることを、実証的に解明した。この論文は、本研究の出発点になる。2.「国際銀行業務における競争・規制・不安定性」(石見・伊藤共編書所収)は、国際業務をより広く世界的な資金仲介レヴェルで分析した。したがって邦銀にかぎらず先進国の銀行がユーロ市場において展開する競争のあり方、国際金融不安との関連、また金融不安を解消するのにいかなる方策があるか、等を論じた。この問題は、本研究を広い視野から捉え返すのに有効な試金石となる。しかし、問題が複雑なだけに、今後とも理論、実証の両面で残された宿題は多い。3.「円の国際化」(小野・西村共編著所収)は、教科書の一部を分担執筆したものである。その意味では研究成果をやや性格を異たするが、国際通貨の条件、銀行と他の金融機関との関連など基礎知識を整理したことになり、準備作業の一つに数えることができる。2にふれたように、初年度の作業で残された論点は数多いが、なかでも重要な課題は、邦銀が仲介する世界的な資金フローを国際金融システムの安定性に関わらせて究明することである。
心臓移植時ドナー心臓超長時間保存を目指す一酸化炭素を利用した新たな保存法の確立

当初順調に進むと考えられていた腹部へのラット異所性心移植モデルの成功率が著明に悪化し、研究の進行が遅れてしまっている。ドナーラットからの心臓の摘出自体は大きな問題なく施行できているが、ドナー心のレシピエント腹部への植込みの際、特にドナー心の肺動脈とレシピエントの腹部下大静脈との吻合がうまくいかずに大出血をきたしたり、あるいは吻合終了後もドナー心の拍動がみられないような場合がほとんどで解析が不可能な状態になってしまっている。そのため(一酸化炭素付加)人工ガス運搬体を加えた心臓保護液・臓器保存液を用いた移植まで到達しておらず、成功率を上げるために手技を向上させたり、試行錯誤している最中である。具体的にはレシピエントラットのサイズをもう少し大きくする(200g→250g以上)、ドナー心の植込みの際は一人ではなく助手を付けて吻合の時間を短縮させる、吻合の際の糸をより細いものに変える、などである。またドナー心を腹部に植え込むのではなく、レシピエント頸部皮下においてレシピエントの頸動脈・頸静脈にそれぞれドナー心の大動脈・肺動脈を吻合する方法も報告されており(Heron I. Acta Pathol Microbiol Scand A 1971)、現在そちらの方法による移植法にも着手し始めた。特にcuff methodと呼ばれるcuffを用いた吻合法が成功率が高いという報告もあり、技術を確立しラット異所性心移植モデルを安定して作成できるように取り組んでいるところである。ドナーラットからの心臓の摘出自体は大きな問題なく施行できているが、ドナー心の腹部への植込みの際、特にドナー心の肺動脈とレシピエントの腹部下大静脈との吻合がうまくいかずに大出血をきたしたり、あるいはドナー心の拍動がみられないようになってしまっている。そのため人工ガス運搬体を加えた心臓保護液・臓器保存液を用いた移植まで到達しておらず、成功率を上げるために手技を向上させたり、試行錯誤している最中である。ラットの心移植モデルについては腹部・頸部ともに引き続き継続して行い、成功率を高めるように努力する。特に頸部皮下への移植については手術を開始した直後であり、今後の成績が改善するように細かな工夫を追加していきたいと考えている。また同時に、ドナー心をレシピエントに植え込む前の心臓の経時的変化を組織学的に評価することも行う予定にしている。具体的には心筋保護液・臓器保存液中に(一酸化炭素付加)人工ガス運搬体を加えない場合(コントロール)と加えた場合(どの程度の量を加える(どの程度の濃度にする)のがふさわしいかも検討する)で、摘出直後・摘出1・2時間後で心筋組織構造に違いが出てくるかを組織学的に解析を行う。本研究については、供給量の限られている人工ガス運搬体をできる限り節約するために、ラットではなくマウスを用いて行うことを考えている。ラット心移植モデルの成功率が向上し安定してきた際には、当初の予定通り移植したドナー心を摘出し解析を行う。

ドナーラットからの心臓の摘出自体は大きな問題なく施行できているが、ドナー心の腹部への植込みの際、特にドナー心の肺動脈とレシピエントの腹部下大静脈との吻合がうまくいかずに大出血をきたしたり、あるいはドナー心の拍動がみられないようになってしまっている。そのため人工ガス運搬体を加えた心臓保護液・臓器保存液を用いた移植まで到達しておらず、成功率を上げるために手技を向上させたり、試行錯誤している最中である。具体的にはレシピエントラットのサイズをもう少し大きくする(200g→250g以上)、ドナー心の植込みの際は一人ではなく助手を付けて吻合の時間を短縮させる、吻合の際の糸をより細いものに変える、などである。またドナー心を腹部に植え込むのではなく、レシピエント頸部皮下においてレシピエントの頸動脈・頸静脈にそれぞれドナー心の大動脈・肺動脈を吻合する方法も報告されており(Heron I. Acta Pathol Microbiol Scand A 1971)、現在そちらの方法による移植法にも着手し始めた。特にcuff methodと呼ばれるcuffを用いた吻合法が成功率が高いという報告もあり、技術を確立しラット異所性心移植モデルを安定して作成できるように取り組んでいるところである。ラットの心移植モデルについては腹部・頸部ともに引き続き継続して行い、成功率を高めるように努力する。特に頸部皮下への移植については手術を開始した直後であり、今後の成績が改善するように細かな工夫を追加していきたいと考えている。また同時に、ドナー心をレシピエントに植え込む前の心臓の経時的変化を組織学的に評価することも行う予定にしている。具体的には心筋保護液・臓器保存液中に(一酸化炭素付加)人工ガス運搬体を加えない場合(コントロール)と加えた場合(どの程度の量を加える(どの程度の濃度にする)のがふさわしいかも検討する)で、摘出直後・摘出1・2時間後で心筋組織構造に違いが出てくるかを組織学的に解析を行う。本研究については、供給量の限られている人工ガス運搬体をできる限り節約するために、ラットではなくマウスを用いて行うことを考えている。ラット心移植モデルの成功率が向上し安定してきた際には、当初の予定通り移植したドナー心を摘出し解析を行う。研究分担者の大塚が東京慈恵医大へと異動になり、それに伴い分担金の使用が本年度生じなかったためである。本分担金は翌年度分と合わせ試薬購入や人工ガス運搬体の準備・供給のために必要な資金として使用する予定となっている。
アラブ・イスラーム世界におけるマルクス主義の展開―運動・哲学・歴史像をめぐって

従来、現代中東の社会運動をめぐる研究では、専らいわゆる「イスラーム主義」運動のみが脚光を浴びる傾向があったが、本研究では中東におけるマルクス主義の問題に着目し、その展開過程の特質を、運動、思想、歴史的・社会的背景という角度から分析した。研究の結果、中東のマルクス主義はこの地域の置かれた社会的・経済的現実と対峙し、地域に根ざした「知」の伝統(アラブ・イスラーム哲学の蓄積等)とも対話・格闘しながら発展してきたものであり、欧米からの単なる「移植」の産物ではないことが明らかになった。また、中東の社会・政治のあり方に関する従来の固定的・静態的イメージの見直しを行なうことができた。アラブ・イスラーム世界におけるマルクス主義の展開過程に関し、計画通り、「運動」「社会的経済的背景」「哲学・思想」「歴史像」の4つのテーマを中心に資料収集、現地調査、資料分析と意見交換のための研究会・勉強会を行ない、成果を挙げることができた。初年度の2013年度は、各研究分担者により、エジプト・カイロにおける政治・社会思想をめぐる現地調査(2014年3月)、同国地方社会における教育と知のあり方に関する調査(同3月)、ウズベキスタンにおけるイスラーム思想関係の調査および資料収集(同3月)が行なわれ、トルコで開催された国際学会出席(2013年11月)、英国ケンブリッジおよび中国蘭州における研究打ち合わせ(2014年3月)も実施された。研究協力者によるエジプト・イランの社会思想・運動をめぐる文献収集および分析も順調に進展した。計5回の研究会(2013年6月1日、8月3日、11月30日、12月15日、2014年2月22日)参加を通じて研究分担者・協力者ほぼ全員が一堂に会して意見交換・基本的テクストをめぐる理解の共有を行なう機会を持つと共に、うち2回は外部からの講師を招聘して、イスラーム以前のアラビア半島における言語文化状況(6月1日)、マルクス主義研究の根幹であるマルクス草稿分析(12月15日)をめぐる勉強会を開催し、本研究テーマに多様な切り口から接近するための貴重な手がかりを得ることができた。これらの成果を踏まえ、各研究分担者・協力者による論文・著作発表、学会参加や研究報告等も活発に行なわれている。アラブ・イスラーム世界におけるマルクス主義の展開過程に関し、計画通り「運動」「社会的経済的背景」「哲学・思想」「歴史像」の4つのテーマを中心に、資料収集、現地調査、資料分析と意見交換のための研究会・勉強会を行ない、成果を挙げることができた。2014年度は各研究分担者により、エジプト・カイロにおける調査・資料収集、同国地方都市における社会調査(2014年8月9月)、中国のムスリム居住地域における調査(2015年2月)、スリランカにおけるイスラムと他宗教共同体の比較調査(2015年3月)、英国における調査・資料収集が行なわれた。また、世界中東学会連合(WOCMES)大会(2014年8月アンカラ)において研究代表者によるLinking the Middle East with World Historyと題するパネルを組織し、その他のパネルでも当研究プロジェクトのテーマと関連する報告を研究分担者が行なうなど、研究の国際化や国際的発信の取り組みにも着手した。計4回の研究会(2014年7月15日、11月29日、12月2日、2015年3月14日)開催を通じて研究分担者・研究協力者ほぼ全員が一堂に会して意見交換・基本テクストをめぐる理解の共有を行なう機会を持つことができ、うち1回(哲学班主催:「イスラームとマルクス主義をめぐる理論上の諸問題」)では「中国におけるイスラームとマルクス主義」をめぐり中国人研究者とのパネル討論により、当研究プロジェクトのテーマに関し、現代的な意義に富む意見交換、新たな視座の模索を行なうことができた。これらの成果を踏まえ、各研究分担者・協力者による論文・著作発表、学会参加や毛急報告等も活発に行なわれている。アラブ・イスラーム世界におけるマルクス主義の展開過程に関し、計画通り「運動」、「社会的・経済的背景」「哲学・思想」「歴史像」の4つのテーマを中心に、資料収集、現地調査、資料分析と意見交換のための研究会・勉強会を行ない、成果をあげることができた。2015年度は計3回の全体研究会(2015年7月11日、10月17日、12月19日)開催を通じて研究分担者・研究協力者が一堂に会して意見交換・共通のテクストをめぐる意見交換を行なう機会を持ち、また「社会・経済」班は中国社会科学院西南アジア研究部門からの訪日団との研究会(12月22日.エネルギー経済研究所との共催)により中国の中東研究者との意見交換も実施した。各研究分担者により、エジプト・カイロでの資料収集(2016年2月)、同じくカイロにおける調査・研究発表(2016年3月)が行なわれ、資料収集にとどまらず中東現地の研究者・機関との研究交流が深められた。さらに2015年12月には、プロジェクト・メンバー全体による中国(上海・蘭州)への調査旅行を行ない(組織者:「哲学班」代表:愛知大学鈴木規教授)、復旦大学(12月24日27日)、蘭州大学(12月27日29日)でのワークショップ参加や現地でのフィールド調査によって、中国におけるイスラームとマルクス主義の関係やイスラームのあり方に関して貴重な知見を得ることができた。資史料収集および現地調査や、研究会・勉強会が、計画通り進展している。