hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
脳神経外科手術用止血剤の開発に向けた組織接着性ハイドロゲルの安全性評価研究

マウス、ラットで腹腔内の腹腔動脈、腹腔静脈、肝臓からの出血を、実験出血モデルとして確立しハイドロゲルの止血能、組織接着性、安全性を評価している。現在までの成果として、SDラット肝臓に生検用ポンチを使用した作成した出血モデルが、簡便性、再現性のある出血モデルとして優れているということがわかった。これらの実験結果は大阪市立大学工学部重点研究「バイオインターフェース先端マテリアルの創生」シンポジウムにおいて詳細に報告し、大阪市立大学医工連携のモデルとして展開している。関連論文:傍鞍部髄膜腫摘出術における穿通枝温存のための工夫.長久功、石橋謙一、大畑建治VIDEO JOURNAL of Japan Neurosurgery 201123号Analysis of Venous Drainagefrom Sylvian Veins in Clinoidal Meningiomas Nagata T, Ishibashi K, Ohata K World Neurosurgery 2011脳神経外科の手術においては、硬膜内出血部位の止血、硬膜欠損部位の補填、神経の接着剤として市販のフィブリン製剤が大量に使用されている。しかし、ヒトもしくは動物由来材料には感染症に対する懸念から医療現場では他の材料への置換えが切望されている。これまでにフィブリン製剤を代替する止血用接着剤、創傷被覆材料等として医療用組成物(コラーゲンなどの架橋構造体、合成高分子等)が種々検討されてきたが、これらの材料は局所的な炎症や細胞毒性を示し、また、生物適合性に乏しいものであった。また、食品添加物を原料とするデキストランとε-ポリ-L-リジン(以下、単にε-PLLとも称する)を原料とする、架橋型シッフ塩基形成に基づく接着剤が研究されているが、ゲル強度は市販止血剤であるフィブリン糊よりも劣り、止血剤としての強度不足が懸念される。強い接着剤を有するクエン酸を活性エステル化した誘導体とコラーゲン等のタンパクを接着成分とする組織接着剤も研究されているが、活性エステル化合物は化学的に不安定であり水溶液での長期保存が不可能である。従って臨床応用には適さない。そこで我々は、これらの問題を解決するために、生分解性・生体適合性を有する食品添加物や医薬品として使用実績のある天然高分子を使用することで安全性を確保し、さらに、ゲル強度の高いハイドロゲルを作成することによりハイドロゲル形成による組織接着効果を高める方法を確立した。本研究では&#61538;-1,3-グルカン(ダイソー社製、黒酵母産生物)由来のポリアルデヒドとε-PLL(放線菌産生物)を架橋剤により高分子量化したポリアミンからシッフ塩基結合形成による架橋反応によって形成するハイドロゲルを用い、高い安全性と機能性を有する脳神経外科手術用止血剤であることを前臨床試験で示し、臨床応用への一歩を確立することができた。脳神経外科1組織止血接着用ハイドロゲルの生成条件最適化:(達成点)ゲル化速度1秒以内を確認、かつ1000秒以内に6000Paのゲル化強度を有していることを確認した、これらは、手術時において動脈血圧に対しても十分な強度である。(問題点)実際に止血実験を施行すると、止血効果を規定する因子としてゲル強度だけでなくゲルの組織接着性も重要であることがわかった。
脾臓におけるPAF産生放出が肝障害発生及び血小板減少に与える影響についての検討

敗血症による多臓器不全の発症、特に肝不全の発症におけるPAFの関与について検討した。我々の開発した家兎胆管炎敗血症モデルを用いて、PAF拮抗剤を投与することにより臓器障害の改善が認められるかどうか、また、血液中及び臓器中のPAFの動態について検討した。この敗血症モデルにおいて、エンドトキシンの測定以外に、凝血学的パラメ-タ-として血小板数・白血球数・フィブリノ-ゲン・APTT・プロトロンビン時間を、肝臓機能のパラメ-タ-としてGPT・ビリルビンを、腎臓機能のパラメ-タ-としてBUN・クレアチニンをそれぞれ測定した。また、PAFの特異的拮抗剤としてE5880(1mg/kg、3mg/kg)を経静脈的に投与した(欧、1991)。E5880投与は血中エンドトキシンの増加に影響を与えなかったが、各パラメ-タ-の内、血小板・プロトロンビン時間・クレアチニン・ビリルビンを有意に改善した。また、PAFのバイオアッセイによる定量において、動物種による感度の違いを明らかにする目的で家兎・ウマ・ヒツジ・イヌ・ヒト・モルモット・ラットの洗浄血小板を用いて検索した結果、ウマの血小板が最も感度がよく(8x10^<ー12>M)、ヒツジ・家兎・モルモットの感度が(5x10^<ー11>M)であった(篠崎、1991)。採血の容易さから家兎を用いてPAF測定を行った。その結果、家兎血液からの測定は不可能であったが、肝臓・腎臓・肺・腎臓において測定可能であり、E5880投与による有意な低下は認められなかった。エンドトキシンによる多臓器不全の発症にPAFが強く関与することが示された。
糸球体線維化の再検討

線維化組織で蓄積するI型コラーゲンは,通常2本のα1(I)鎖と1本のα2(I)鎖から成るheterotrimerである.申請者等は,高率に再現性よく糸球体硬化症の誘導が可能なマウスモデルで検討し,硬化糸球体ではα1(I)鎖mRNAが増加しα2(I)鎖mRNAが減少することを見出した.本申請の研究では,糸球体研究では活用されてこなかった質量分析法を用いてI型コラーゲンを解析し,糸球体硬化症ではα1(I)2α2(I) heterotrimerからα1(I)3 homotrimerへと変容するという仮説の検証を行う.従来見逃されていたこの概念の証明は,MMPで分解されないコラーゲンの蓄積を伴う糸球体硬化症が,糸球体外(腎尿細管間質)や他臓器の線維化と全く異なったメカニズムで発症することを示し,糸球体硬化症の根本的治療法の開発に繋がることが期待される.H30年度は,質量分析計を用いたI型コラーゲン測定系の構築を行った.I型コラーゲンα1鎖,α2鎖に特異的なペプチド(それぞれ,GAAGPPGATGFPGAAGR,EGPVGLPGIDGRPGPIGPAGPR)を同定し,定性的な検討が可能となった.定量的な検討を行うべく,これらのペプチドの合成を外部機関に依頼している.糸球体からのI型コラーゲン抽出に関しては,レーザーキャプチャー法による凍結切片からの糸球体の切り抜きも検討したが,当初の磁気ビーズを潅流させる方法が有効であることから,この方法にて採取した糸球体にペプシン溶解と塩析を行いI型コラーゲンを抽出することとした.糸球体からのI型コラーゲンの抽出系の構築に時間を要している.腎組織のうち糸球体が占めている体積は僅かであり,その糸球体に含まれているI型コラーゲンを効率に回収する為に実験系の調整を行った.ペプシン溶解・塩析・超遠心を用いた方法が有効であると期待される.正常・傷害糸球体より安定したI型コラーゲン抽出が可能となり,合成ペプチドを用いた質量分析によりα1鎖とα2鎖の定量検査が可能になると期待される.更に,α1鎖homotrimerより構成されるI型コラーゲンの硬化糸球体における蓄積を,低真空条件での走査型電子顕微鏡を用いて観察することを予定している.線維化組織で蓄積するI型コラーゲンは,通常2本のα1(I)鎖と1本のα2(I)鎖から成るheterotrimerである.申請者等は,高率に再現性よく糸球体硬化症の誘導が可能なマウスモデルで検討し,硬化糸球体ではα1(I)鎖mRNAが増加しα2(I)鎖mRNAが減少することを見出した.本申請の研究では,糸球体研究では活用されてこなかった質量分析法を用いてI型コラーゲンを解析し,糸球体硬化症ではα1(I)2α2(I) heterotrimerからα1(I)3 homotrimerへと変容するという仮説の検証を行う.従来見逃されていたこの概念の証明は,MMPで分解されないコラーゲンの蓄積を伴う糸球体硬化症が,糸球体外(腎尿細管間質)や他臓器の線維化と全く異なったメカニズムで発症することを示し,糸球体硬化症の根本的治療法の開発に繋がることが期待される.H29年度は,1質量分析計を用いたI型コラーゲン測定系の構築と2正常糸球体と傷害糸球体におけるα1とα2鎖の定量を行う予定であった.現在進行は遅れており,1においてα1,2鎖由来のペプチドを選定ののち,その合成ペプチドを入手し定量性について検討している.また,2において硬化糸球体を選択的に採取することを試みているが,当初予定していた磁気ビーズを潅流させる方法では,硬化の進行に伴い糸球体へのビーズの潅流が困難であった.そこで,凍結切片をトルイジンブルーにて染色ののちに,レーザーキャプチャー法にて切り抜くことを試みている.硬化糸球体の採取の段階で,当初磁気ビーズを潅流させる方法を用いたが,硬化の進行に伴い糸球体への潅流が困難であり選択的に採取することが出来なかった.現在,レーザーキャプチャー法による採取を試みている.線維化組織で蓄積するI型コラーゲンは,通常2本のα1(I)鎖と1本のα2(I)鎖から成るheterotrimerである.申請者等は,高率に再現性よく糸球体硬化症の誘導が可能なマウスモデルで検討し,硬化糸球体ではα1(I)鎖mRNAが増加しα2(I)鎖mRNAが減少することを見出した.本申請の研究では,糸球体研究では活用されてこなかった質量分析法を用いてI型コラーゲンを解析し,

糸球体硬化症ではα1(I)2α2(I) heterotrimerからα1(I)3 homotrimerへと変容するという仮説の検証を行う.従来見逃されていたこの概念の証明は,MMPで分解されないコラーゲンの蓄積を伴う糸球体硬化症が,糸球体外(腎尿細管間質)や他臓器の線維化と全く異なったメカニズムで発症することを示し,糸球体硬化症の根本的治療法の開発に繋がることが期待される.H30年度は,質量分析計を用いたI型コラーゲン測定系の構築を行った.I型コラーゲンα1鎖,α2鎖に特異的なペプチド(それぞれ,GAAGPPGATGFPGAAGR,EGPVGLPGIDGRPGPIGPAGPR)を同定し,定性的な検討が可能となった.定量的な検討を行うべく,これらのペプチドの合成を外部機関に依頼している.糸球体からのI型コラーゲン抽出に関しては,レーザーキャプチャー法による凍結切片からの糸球体の切り抜きも検討したが,当初の磁気ビーズを潅流させる方法が有効であることから,この方法にて採取した糸球体にペプシン溶解と塩析を行いI型コラーゲンを抽出することとした.糸球体からのI型コラーゲンの抽出系の構築に時間を要している.腎組織のうち糸球体が占めている体積は僅かであり,その糸球体に含まれているI型コラーゲンを効率に回収する為に実験系の調整を行った.ペプシン溶解・塩析・超遠心を用いた方法が有効であると期待される.上記の硬化糸球体の選択的採取に関する問題をレーザーキャプチャー法を用いて解決し,そこからI型コラーゲンを抽出し定量することを予定している.硬化糸球体ではα2鎖に比べて不均等にα1鎖が増加し,α1鎖/α2鎖比が増大すると予想している.正常・傷害糸球体より安定したI型コラーゲン抽出が可能となり,合成ペプチドを用いた質量分析によりα1鎖とα2鎖の定量検査が可能になると期待される.更に,α1鎖homotrimerより構成されるI型コラーゲンの硬化糸球体における蓄積を,低真空条件での走査型電子顕微鏡を用いて観察することを予定している.硬化糸球体の採取に難航し,本年度に予定していた実験計画が予定通り進行しなかった為.この硬化糸球体採取の問題を解決し,予定通り実験を進め予算を使用する予定である.質量分析によるI型コラーゲン測定系の構築に時間を要し,予定していた実験計画を進めることが出来なかった為.今後,ペプチドの合成等,研究費を要する研究を行う予定である.
ドライアイにおける膜型ムチンの発現制御についての検討

眼表面に発現する膜型ムチンには、MUC1, MUC4, MUC16があるが、これらは眼表面のバリア機能に関連している。膜型ムチンの発現が減少すると、眼表面のバリア機能が低下し、臨床的には角膜上皮障害を呈する。我々は、ヒト角結膜培養上皮細胞において、0.1%ローズベンガル液を用いたムチン関連のバリア機能を評価するモデルを確立し、様々な薬剤による影響を検討した。その結果、点眼薬に多く含まれる塩化ベンザルコニウム(BAC)が、濃度依存的に結膜上皮のムチン発現を低下させ、バリア機能を低下させていることが明らかになった。また、BAC含有および非含有の緑内障点眼を用いた検討では、BAC含有点眼の方が非含有点眼にくらべて有意にムチンによるバリア機能が低下していた。さらに、様々なコンタクトレンズ保存液について検討したところ、ホウ酸を含む保存液が有意に角膜上皮のムチン発現を抑制することが明らかになった。今回の研究の成果は、臨床的に治療に苦慮する薬剤毒性角膜症の病態解明の糸口になると思われ、さらに今後の副作用の少ない点眼薬の開発のヒントになると考えられる。【研究内容】眼表面における膜型ムチンの発現およびその機能を調べるために、ヒト不死化角膜および結膜上皮細胞をもちいたin virtoの実験を行った。まず、膜型ムチンの眼表面におけるバリア機能を調べるため、コンタクトレンズ保存液中に含まれる成分が眼表面ムチンの発現にどのような影響を及ぼすかを検討した。SV40ヒト不死化角膜上皮細胞をもちいた研究では、ホウ酸を含んだコンタクトレンズ保存液、およびホウ酸そのものが角膜上皮に発現する膜型ムチン(MUC1,MUC4,MUC16)の発現を抑制した。さらにコンタクトレンズ保存液における消毒成分として含まれるPHMBでも膜型ムチンの発現は抑制されることが明らかになった。また別の実験で、ホウ酸は角膜上皮細胞に発現するtight junctionに障害をあたえることが明らかになっており、角膜上皮に緑膿菌を接着させる実験では、ホウ酸を添加して培養した角膜上皮細胞に、緑膿菌が接着しやすいことが明らかになっている。以上のことから、ホウ酸は、角膜上皮細胞において、ムチンとtight junctionの両面からバリア機能を阻害し、感染を起こしやすい原因となっていると推察される。【意義および重要性】コンタクトレンズユーザーは我が国に1000万人以上いると言われており、最近では不適切なコンタクトレンズの保存方法から角膜感染症を生じる症例が増加している。このコンタクトレンズ関連角膜感染症は、今後も増加し続けるとおもわれ、その原因と考えられるコンタクトレンズやその保存液と角結膜上皮におけるムチンの関係を調べることは、感染防御の面からも重要であると考える。【研究内容】眼表面における膜型ムチンの発現およびそのバリア機能を調べるために、培養ヒト結膜上皮細胞をもちいて実験を行った。特に、点眼液に含まれる防腐剤である塩化ベンザルコニウムによる眼表面ムチンへの影響とバリア機能の変化を調べるため、塩化ベンザルコニウムを添加した培養液にて、1分間暴露させた。塩化ベンザルコニウムが添加された培養細胞では、対照群と比較して濃度依存的に膜型ムチン(MUC16)の遺伝子発現が低下した。また、0.1%ロースベンガル試験にてバリア機能評価を行ったところ、塩化ベンザルコニウムに1分間暴露させた培養細胞では、バリア機能が低下していた。一方、WST-1をもちいた細胞障害を検討した実験では、細胞障害はあまり生じていなかった。つまり、結膜細胞において、1分間の塩化ベンザルコニウム暴露で細胞障害は少ないにもかかわらず、膜型ムチン発現およびバリア機能は有意に低下していたことがあきらかになった。さらに興味深いことに、1分間塩化ベンザルコニウムの暴露後、通常の培養液にもどすと7時間で膜型ムチンの発現およびローズベンガル試験でのバリア機能は元通りに回復していた。【意義および重要性】現在、点眼液の60%以上に塩化ベンザルコニウムが防腐剤として使用されている。臨床的には、点眼毒性による角膜上皮症が散見され、塩化ベンザルコニウムが関与していると思われる症例に遭遇する。

ムチンは眼表面のバリア機能を担っており、塩化ベンザルコニウムとムチン発現の関連を研究することは、薬剤毒性角膜上皮症の病態の解明と治療へのヒントに非常に役立つと考えられ、今後も研究を続けていきたいと考える。「研究の具体的内容」:(1)培養細胞を用いたムチンのバリア機能評価の実験系の確立:重層化させて膜型ムチンが発現しているHCjEcellの培養液に1%ローズベンガルを加えて細胞への浸透を観察し、ローズベンガルの細胞への浸透度を顕微鏡写真のローズベンガルの赤色の濃度をデンシトメトリーで定量を行って、バリア機能の判定を行えることが明らかになった。(2)上記の実験系にて、コンタクトレンズ保存液、点眼薬の防腐剤におけるHCjEcellの細胞障害の有無、膜型ムチン(MUC16)発現、ローズベンガル染色試験を行い、上皮のバリア機能への影響を調べたところ、コンタクトレンズ保存液では、ホウ酸を含むものが有意に細胞上の膜型ムチンであるMUC16の発現が阻害され、バリア機能の指標であるタイトジャンクションも阻害されていた。また、点眼薬の防腐剤に多く含まれる塩化ベンザルコニウムを培養液中に添加して1分間反応したところ、濃度依存的に膜型ムチンの発現が阻害され、ローズベンガル試験で細胞のバリア機能が障害されていた。同様に、緑内障点眼を用いて塩化ベンザルコニウムを含むものと含まないものを培養液中に添加したところ、塩化ベンザルコニウムを含む緑内障点眼において、有意に型ムチンの発現が阻害され、ローズベンガル試験で細胞のバリア機能が障害されたことが明らかになった。「研究の意義」:眼表面において膜型ムチンはバリア機能に関係しており、日常よく使われるコンタクトレンズ保存液や点眼薬に含まれる成分によって影響を受けることが明らかになった。「研究の重要性」:本研究によって膜型ムチンの眼表面での役割が明らかにされるとともに、将来、眼表面にとって安全である薬剤の開発にたいする有用な情報が得られたと考える。
アデノウイルスE1Aタンパクによる転写因子活性の調節機構の解析

無細胞転写反応およびDNA-タンパク結合実験を行い、アデノウイルス12型(Ad12)E1A遺伝子の転写制御機構に関して以下の知見が得られた。1.E1A遺伝子の5'上流域には異なる核因子が結合する2つの領域が存在する。それぞれの領域に結合する因子は互いに他方の因子のDNAへの結合を阻害する。2.一方の結合領域(a領域)への因子の結合により、E1A遺伝子の2つの転写単位のうち一方のみが促進される。3.a領域への結合因子は、アデノウイルスゲノムDNAの複製因子であるNF-Iと同様のDNA結合活性を示す。さらに、HeLa細胞より精製したNF-Iはa領域結合因子の持つ転写促進活性を代用する。4.Ad12E1Aタンパクを産生する細胞の核抽出液中には、Ad12E1A遺伝子の転写促進活性、a領域への結合活性とも認められない。以上の実験結果から、NF-I様因子がAd12E1A遺伝子の2つの転写単位のうちの一方のみを特異的に促進することが明らかとなった。従ってAd12ゲノムDNAの複製とE1A遺伝子転写の両反応がNF-Iにより制御されると考えられる。これは腫瘍原性の無いAd2やAd5には見られない制御機構である。また、Ad12E1Aタンパクの作用によりNF-IのDNA結合活性が失われることが示唆された。これらのことは、Ad12E1AタンパクがNF-Iを介してウイルスの増殖を制御するという可能性を与える。今後は、実際にAd12E1AタンパクがNF-Iの活性を調節するかどうか、そしてNF-I活性の変動がウイルス増殖に影響を与えるかどうかを追求する必要がある。この研究を通して、アデノウイルスによるトランスフォーメーションおよび腫瘍形成機構解明のための新しい視点が提供されるものと期待される。
細胞外EGF様反復構造を有する7回膜貫通型ヒト受容体EMR1に関する研究:抗体作成と発現細胞の同定、結合分子とシグナルの検討、並びにリガンドの探索

細胞外EGF様反復構造を有する7回膜貫通型ヒト受容体EMR1は、一般的な化学性走化因子の受容体とは異なる特異な構造を有する。本研究においては、この受容体に対するモノクローナル抗体を作成し、ヒト血球における発現分布を明らかにする。また、リガンド分子もしくは抗受容体抗体を用いて、会合分子の存在やシグナル伝達機構を探求する事を目指した。昨年より継続して可溶性組換えヒトEMR1分子の構築及び発現を検討してきた。これは免疫原として使用する為、及び直接細胞へ作用させて細胞膜表面上のリガンド分子の解析に用いる為の二点の理由からである。ヒト免疫グロブリン遺伝子と融合させた発現カセットを構築するにあたり、近年その存在が知られる様になったGPSドメインが未知の蛋白分解酵素の攻撃を受け、その結果生成した融合蛋白質が分解される事が判明した為、その部位を除去した可溶性組換えヒトEMR1発現カセットを構築し、アフリカミドリザル由来のCOS1及びCOS7細胞へ導入したが、遺伝子が導入され蛋白質を発現している細胞は容易に速やかな細胞死を起こし、一過性発現で組み替え蛋白質を十分量得ることは困難であった。そこでCOS細胞以外での蛋白産生系を検討し、可溶性蛋白質産生に適した細胞としてハムスター由来のCHO細胞及びBalb/cマウス由来のBalb/3T3細胞を選択した。Balb/3T3細胞については、SV40ウイルス断片を含む当該発現ベクターとの組み合わせを考慮して予めSV40ゲノムにて形質転換させ、SV40LargeT抗原を高発現する細胞をも樹立した。この細胞へ導入したSV40複製起点を含むプラスミドはCOS細胞と同等以上の複製効率を示した。これらの細胞を用い、更に蛋白質発現ベクターとしてヒトEF-1alphaプロモーターを用いた発現系を併せて使用することで融合蛋白質の産生性を改善する事が出来た。細胞外EGF様反復構造を有する7回膜貫通型ヒト受容体EMR1は、走化性因子の受容体とは異なる特異な構造を有する。本研究においては、この受容体に対する抗体を作成して、ヒト血球における発現分布を明らかにする。また、リガンドもしくは受容体抗体を用いて、会合分子やシグナル伝達機構を探求する。本年度はEMR1分子に対するモノクローナル抗体の作製を試みたが、下記の理由で抗EMR1抗体産生性ハイブリドーマの樹立が遅れている。当初、マウスに直接ヒト単球細胞株HonoMac6をアジュバントとしてPolyA:PolyUと共に免疫を施したが、期待した抗体価の上昇は認められず、逆に腹水の貯留を認め、それ以上の追加免疫は困難であった。アジュバントとして用いたPolyA:PolyUは核酸成分から成る物質であり、生細胞を免疫原とする際に良く用いられる。今回の免疫原はマクロファージであるので、それを直接PolyA:PolyUが活性化してしまった為、前述の症状を呈したと考えられた。そこで直接細胞を免疫しなくても済む手法を検討した。免疫原となるタンパク質を組換え蛋白として発現させて用いる手法を試みた。EMR1分子は細胞外に約600アミノ酸残基をもつ7回膜貫通蛋白質であるので、抗体の標的となる細胞外ドメインをコードするcDNAをPCR法で単離し、標識タグとしてヒトの免疫グロブリン遺伝子と融合させ、発現カセットを構築した。これを動物細胞にて発現させてみたところ、予想とは異なる分子量の蛋白が得られた。これは後になってGPSドメインと呼ばれる特異的に蛋白分解酵素の攻撃を受けうる部位が存在する為であったことが判明した。現在コンセンサスとして知られているGPS配列を除去した可溶化EMR1分子を作製し、免疫原として使用し、研究を進めている。
ＣＬＰＴＭ１が関わる新しい小胞体品質管理分子機構と疾患

本研究の目的は、ユビキチン化や糖鎖認識に非依存性という特徴をもつ、アニオン交換輸送体AE1変異体の小胞体関連分解(ERAD)におけるCLPTM1の役割を解明することである。AE1変異体を発現させたHEK細胞における解析から、CLPTM1がERに分布し、KIAA0090、p97/VCP、Derlins、calnexin等と相互作用することを明らかした。CLPTM1は、R664X AE1と特異的に結合するものの、その存否はR664X AE1のプロテアソーム分解に影響しなかった。一方で、KIA0090とp97/VCPは、やはりR664X AE1と結合し、そのプロテアソーム分解を促進した。2.前年度研究から、CLPTM1は、R664X AE1の小胞体関連分解過程で直接に分解に寄与するのではなく、これをERに止める作用をもつことが示唆された。そこで、これを検証し、また同時に他のER分子の作用を検討すべく、CLPTM1、KIAA0090等の組換え蛋白質をHEK細胞に発現させ、同時に導入したR664X AE1の分解に及ぼす影響を解析し、遺憾の結果を得た。1)CLPTM1-mycの過剰発現はR664X AE1の発現量に明らかな影響はみられなかった(対照の約90%)が、KIAA0090-mycを同時に発現させるとR664X AE1含量の著しい低下(同45%)がみられ、これはプロテアソームの抑制により阻害された。2)これらの細胞では、CLPTM1-myc、KIAA0090-mycの免疫沈降反応でR664X AE1の共沈が認められ、かつその共沈産物量はKIAA0090のほうが相対的に多かった。3)p97/VCPの過剰発現はR664X AE1含量の顕著な減少は生じなかったが、その機能不全変異体K524Mの存在下で、R664X AE1含量は約2倍に増加した。即ち、そのプロテアソーム系分解にはp97/VCPが必須であることが示された。これらの知見から、CLPTM1はR664X AE1のER品質管理に関わるものの、そのERから細胞質への輸送とプロテアソーム分解には、むしろp97/VCPとKIAA0090が関与することが示唆された。R664X AE1、あるいはΔF508-CFTRとCLPTM1を培養細胞に一過性共発現させ、プロテアソーム阻害剤の存在・非存在下、あるいはsiRNA法で内因性CLPTM1の発現を抑制した条件下で、これらタンパク質の含量、相互作用、細胞内局在を検討した。その結果、ERにおいて、CLPTM1がR664X AE1と特異的に結合する一方、CFTRとは結合しないことを明らかにした。しかし、R664X AE1のプロテアソームによる分解には、CLPTM1の存否による明瞭な影響が認められず、ERにおけるR664X AE1のCLPTM1との結合とプロテアソーム分解とは直接にはリンクしないことが示された。したがって、CLPTM1のR664X AE1のERADにおける役割は、ERシャペロンとして、これをERに止めることにあることが推定された。一方で、興味深いことに、CLPTM1と同時に見出したKIA0090が、やはりR664X AE1と結合し、さらにそのプロテアソーム分解を促進することが明らかになった。1)CLPTM1がR664X AE1のERシャペロンとして機能することを明確に示し、そのERADにおける役割の実証という平成24年度本研究の主たる目的は達成し得た。2)一方、CLPTM1とR664X AE1のプロテアソーム分解との関係については、予想と異なる結果を明確に示し得た。さらに、本年度の実験結果から、R664X AE1のERADに関して、KIAA0090という新たな構造、機能ともに未知のタンパク質が関与することが示され、その分子機構解明への手掛かりを得ることができた以上の理由から、計画は当初計画以上に進展していると考える。1)上記、ならびに申請者らの従来知見から、CLPTM1-R664X AE1間結合は、ERにおける複数のシャペロンタンパク質群により形成される複合体を形成する要素と考えられる。そこで、当初の平成25年度計画に従い、これら複合体を構成するタンパク質群を、アフィニティー精製/プルダウン法とLC-MS/MSにより解明する。

2)新しく実証されたKIAA0090の、R664X AE1のERADにおける促進作用がいかにして生じるのかを明らかにする手段を検討し、それを試行する。該当なし
ウリノキ科塩基アンコリンを中心とする各種酸化レベル体の合成

ウリノキ科塩基ankorine(1)の類似体として, 2位側鎖の酸化レベルが異るalancine(II),8-hydroxyprotoemetine(III),2-エチル体(IV)を次のようにして合成した.1.出発原料として必要なcincholoipon ethyl ester〔(+)-V〕は,市販品として入手容易なキナ塩基cinchonineから,既知の7段階変換によって通算収率50%で製造することができた.2.(+)-Vは,本研究代表者らがウリノキ科lenjoquinolijidine型塩基のキラル合成のために開発した合成戦略「cincholoiponの合成的組込み法」に従って, 10段階の化学変換を経て3環性アミノ酸エステル(-)-VIを与えた.3.上記の(-)-VIをアルカリ性で加水分解し,次に水素化分解(Pd-C/H_2)を行ったところ, IIが高収率で得られた.また, (-)-VIを水素化分解(Pd-C/H_2)した後にi-Bu_2AlH還元すればIIIが得られ,これを更にWolff-Kishner還元にかけることによってIVを高収率で合成することができた.4.I-IVの類似別途合成経路として, (+)-Vにラクタム構造を構築するためにRuO_4酸化経路を確立した.5.このようにして得たalancine(II)は,意外なことにSchiff教授らが天然から単離したサンプルとは一致しなかった.しかし,合成品を塩酸塩に導いたところ,この塩酸塩は同教授らが遊離塩基であるとしていた天然品と一致した.このことから,同教授らがalancineの遊離塩基として報告していた各種データは間違いで,実際には塩酸塩についてのものであったことが判明した.更に,天然からは遊離塩基の形では未だ単離されていないalancine(II)そのもの及び未発見のIII,IVの各種データは,上記の合成品について充分に取揃えることができた.ウリノキ科塩基ankorine(1)の類似体として, 2位側鎖の酸化レベルが異るalancine(II),8-hydroxyprotoemetine(III),2-エチル体(IV)を次のようにして合成した.1.出発原料として必要なcincholoipon ethyl ester〔(+)-V〕は,市販品として入手容易なキナ塩基cinchonineから,既知の7段階変換によって通算収率50%で製造することができた.2.(+)-Vは,本研究代表者らがウリノキ科lenjoquinolijidine型塩基のキラル合成のために開発した合成戦略「cincholoiponの合成的組込み法」に従って, 10段階の化学変換を経て3環性アミノ酸エステル(-)-VIを与えた.3.上記の(-)-VIをアルカリ性で加水分解し,次に水素化分解(Pd-C/H_2)を行ったところ, IIが高収率で得られた.また, (-)-VIを水素化分解(Pd-C/H_2)した後にi-Bu_2AlH還元すればIIIが得られ,これを更にWolff-Kishner還元にかけることによってIVを高収率で合成することができた.4.I-IVの類似別途合成経路として, (+)-Vにラクタム構造を構築するためにRuO_4酸化経路を確立した.5.このようにして得たalancine(II)は,意外なことにSchiff教授らが天然から単離したサンプルとは一致しなかった.しかし,合成品を塩酸塩に導いたところ,この塩酸塩は同教授らが遊離塩基であるとしていた天然品と一致した.このことから,同教授らがalancineの遊離塩基として報告していた各種データは間違いで,実際には塩酸塩についてのものであったことが判明した.更に,天然からは遊離塩基の形では未だ単離されていないalancine(II)そのもの及び未発見のIII,IVの各種データは,上記の合成品について充分に取揃えることができた.ウリノキ科塩基ankorineの側鎖アルコール部における最高酸化レベル体は、同科塩基alancineであるが、本年度の研究ではこの塩基を次のようにして合成することができた。1.出発原料として必要なethyl cincholoiponateは、市販品として入手可能なキナ塩基cinchonineを既知の7段階変換経路によって、通算収率が50%で製造することができた。2.上記のようにして得たethyl cincholoiponateの1位Nに2-benzyloxy-3,4-dimethoxyphenacyl基を導入、Na【BH_4】還元によって得たpiperidinoethanol体を酢酸第二水銀で酸化して6-piperidone体を得た。次に、この6-piperidone体を水素化分解し、更にアルカリ性加水分解によってcis-lactamacid体を得た。このcis体を180°Cに加熱してtrans体に異性化させ、エステル化、フェーノール性水酸基のベンジル化、Bischler-Napieralski閉環、接触還元の諸段階を経て3環性アミノ酸エステル体を得た。このエステル体をアルカリ性で加水分解し、次にPd-C/H2による水素化分解によって、目的とした(-)-alancineを高収率で合成することができた。3.このようにして得た(-)-alancineは、意外なことに、米国Schiff教授らが天然から単離したサンプルとは一致しなかった。しかし、この合成サンプルを塩酸塩に導いたところ、この塩酸塩は同教授らが遊離塩基であるとしていた天然品と一致した。

このことから、同教授らがalancineの遊離塩基として報告していた各種のデータは間違いで、実際には塩酸塩についてのものであったことが判明した。更に、天然からは遊離塩基の形としては未だ単離されていない(-)-alancineそのものの各種データは、上記の合成品について充分に取揃えることができた。
20世紀政治思想の形成におけるルカーチの美学と革命論の連関に関する思想史的研究

本研究は、第一次世界大戦勃発前後からスターリン体制確立までの期間におけるG・ルカーチの美学と政治思想に関する研究を通して、20世紀政治思想の形成の特質を解明しようとするものである。本年度では、昨年度に投稿していた論文が審査を経て掲載されることが決定したのをうけ、査読委員のコメントも参照しながら、論文を完成させた。その結果、20世紀政治思想の形成における「文化戦争」から「文化革命」への思想史的展開が明らかとなった。この成果は、論文「「文化戦争」から「文化革命」へ-第一次世界大戦期ルカーチにおける西欧・ドイツ・ロシアの連関」にまとめられ、『年報政治学2006-I』(木鐸社、2006年)にて発表された。次に、20世紀政治思想の形成の歴史社会学的背景を明らかにすべく、E.ホブズボームの「20世紀」論とN.エリアスの「文明化」論を総合的に分析した。その結果、ヨーロッパにおける世紀の分水嶺は、1、工業化にともなう社会の水平化・平準化、2、そうした社会構造の変容を土台として生じた「全体戦争」(二つの世界戦争)と「世界革命」(ロシアに端を発したヨーロッパ各地での革命)に見出されることが明らかとなった。ここから、20世紀はヨーロッパ文明の崩壊によって幕を開けたと結論づけられる。この成果は、共著『悪と正義の政治理論』(太田義器・谷澤正嗣編、ナカニシヤ出版、2007年予定)の第3章「二十世紀における文明と悪」としてまとめられ、出版が予定されている。以上の成果を踏まえ、今後はルカーチと1、Th.マンとの関係、2、O.シュペングラーの文明論としての「西欧の没落」観との比較検討が研究課題となる。本研究の目的は、第一次世界大戦勃発前後からスターリン体制確立までの期間におけるG・ルカーチの美学と政治思想に関する研究を通して、20世紀政治思想の形成の特質を解明することである。本年度ではとくに、かれの思想に対する第一次大戦勃発の影響を主たるテーマにして研究を行なってきた。そのなかで得られた重要な論点として次の2点を挙げることができる。1、ルカーチのドストエフスキー論の政治思想的意義。2、第一次大戦勃発に対するTh・マンおよびジンメルの肯定的態度とルカーチの批判的態度との差異。1、ルカーチのいわゆる「ドストエフスキー・ノート」は死後発見された断片的なメモ書きの類いであり、研究もドイツを中心に近年ようやく進展しつつある状況である。しかし、これがもつ無視しえない政治思想的意義は、(1)ロシア革命でのテロリズムの倫理への関心、(2)「ドイツ対ロシア」という認識枠組み、これらが明瞭に認められるという点にある。(1)は、それまで美学者もしくは芸術批評家として知られていたかれがロシア革命を契機に政治へと関心をシフトさせたことを示しており、また(2)は、後述するように当時のドイツ知識人の多くが共有していた「西欧対ドイツ」の図式に対して距離をとる際の認識的基礎になったと考えられる。2、ルカーチの第一次大戦に対する態度は、勃発直後(1915年)に執筆され死後発見された草稿「ドイツ知識人階級と戦争」に表明されている。このテクストでかれは、マンとジンメルの主張を分析しながら、ドイツ知識人の戦争熱に批判を加えている。かれらに共通するのは、西欧(とりわけ英国とフランス)の文明と資本主義によって汚されたドイツ文化を復興させるものとして戦争をとらえる点である。それに対してルカーチは、第一次大戦は西欧文明における「即物化」の延長でしかないとし、それを克服するものとしてロシア革命に期待する。本年度ではとくに、N・エリアスの「文明化」論を基本的枠組みとし、第一次大戦期ジンメルの文化哲学および戦争論とルカーチの思想との関係について研究を行なった。大戦期ドイツ知識人における「西欧文明」対「ドイツ文化」という図式は、政治経済的に無力な教養市民層の避難所にして自己意識の源泉である「文化」概念を基盤にしている。19世紀末の急激な大衆化はそうした文化エリートたちにとって文化の危機を意味し、その中で戦争勃発は文化復興の好機と捉えられ(「文化戦争」論)、同時に、屈折した自己意識が敵国の「文明」へと投影される(「文明批判」論)。ジンメルは、「文化」を「文明」と対立的に捉えず、文化的「疎外」は文化に内在的・本質的なものだという「文化の悲劇」を主張する。しかし、大戦勃発とともに彼もまた文化的疎外・悲劇の克服としての「文化戦争」を唱道し、文化概念を国民化する。これに対してルカーチは、ロシア革命およびドストエフスキー研究に依拠して、戦争はあくまで「西欧」的であり、ドイツ文化もそこに含まれるがゆえに西欧文明の危機を克服しえないと主張し、西欧と異なる全く新しいものとして「ロシア」を捉える。こうして、ロシア革命において「国際的」文化が出現したという「文化革命」の構想が成立する。以上の成果は論文「「文化戦争」から「文化革命」へ-第一次世界大戦期ルカーチにおける西欧・ドイツ・ロシアの連関」(投稿中)にまとめられ、また第10回政治哲学研究会(於:岐阜)で研究報告が予定されている。

本研究は、第一次世界大戦勃発前後からスターリン体制確立までの期間におけるG・ルカーチの美学と政治思想に関する研究を通して、20世紀政治思想の形成の特質を解明しようとするものである。本年度では、昨年度に投稿していた論文が審査を経て掲載されることが決定したのをうけ、査読委員のコメントも参照しながら、論文を完成させた。その結果、20世紀政治思想の形成における「文化戦争」から「文化革命」への思想史的展開が明らかとなった。この成果は、論文「「文化戦争」から「文化革命」へ-第一次世界大戦期ルカーチにおける西欧・ドイツ・ロシアの連関」にまとめられ、『年報政治学2006-I』(木鐸社、2006年)にて発表された。次に、20世紀政治思想の形成の歴史社会学的背景を明らかにすべく、E.ホブズボームの「20世紀」論とN.エリアスの「文明化」論を総合的に分析した。その結果、ヨーロッパにおける世紀の分水嶺は、1、工業化にともなう社会の水平化・平準化、2、そうした社会構造の変容を土台として生じた「全体戦争」(二つの世界戦争)と「世界革命」(ロシアに端を発したヨーロッパ各地での革命)に見出されることが明らかとなった。ここから、20世紀はヨーロッパ文明の崩壊によって幕を開けたと結論づけられる。この成果は、共著『悪と正義の政治理論』(太田義器・谷澤正嗣編、ナカニシヤ出版、2007年予定)の第3章「二十世紀における文明と悪」としてまとめられ、出版が予定されている。以上の成果を踏まえ、今後はルカーチと1、Th.マンとの関係、2、O.シュペングラーの文明論としての「西欧の没落」観との比較検討が研究課題となる。
鉱物の星雲ガス中での蒸発および凝縮実験装置の試作

太陽系形成の過程においては,原始太陽系星雲の冷却に伴って高温ガスから珪酸塩を主とする鉱物粒子の凝縮がおこり,これらの粒子の集積によって地球をはじめとする固体惑星や隕石が生成されたと考えられている.高温での凝縮作用や蒸発作用といった固相-気相反応は,このような星雲における物質の化学的・鉱物学的な分化過程に大きな役割を果していると考えられる.しかしながら,このような反応に関する実験的な研究は,とくに凝縮作用に関して,ほとんどおこなわれてこなかった.本研究では,上記のような未開発の実験分野を開拓するという精神のもとに,原始太陽系星雲に近い条件での鉱物の蒸発・凝縮作用を実験的におこなうための装置を試作し,これに成功した.第一年度は真空蒸発凝縮炉(アユミ工業製:EC300)を製作し,その性能のチェックをおこなった.本装置の最大の特徴は,試料室が大きく多量の試料(数百mg以上)を取り扱えるところにある.当初,この大容量の試料室を加熱するためのヒーター部に事故が発生した.第二年度は,このヒーター部の改良をおこなうとともに,蒸発凝縮実験をおこない,いくつかの成果を挙げることができる.実験は,単純かつ天然を代表するMg_2SiO_4-H_2系を用いておこない,凝縮のおこる実験条件を明らかにした.本装置では多量の試料を取り扱えることから,生成条件の良くわかった凝縮物の評価(相の同定,微細組織の観察,化学分析など)が正確かつ容易におこなえるようになった.今回の実験では,凝縮は基本的に温度に依存し,またVLS機構によるフォルステライト・ウィスカーの凝縮もおこることが明らかにされた.さらに,多量の試料を取り扱えるため,微量元素や同位体組成の分析も容易になる.今後,本装置を用いて実験を進めていくことにより,原始太陽系での凝縮作用の解明に大きな貢献がなされるものと確信される.太陽系形成の過程においては,原始太陽系星雲の冷却に伴って高温ガスから珪酸塩を主とする鉱物粒子の凝縮がおこり,これらの粒子の集積によって地球をはじめとする固体惑星や隕石が生成されたと考えられている.高温での凝縮作用や蒸発作用といった固相-気相反応は,このような星雲における物質の化学的・鉱物学的な分化過程に大きな役割を果していると考えられる.しかしながら,このような反応に関する実験的な研究は,とくに凝縮作用に関して,ほとんどおこなわれてこなかった.本研究では,上記のような未開発の実験分野を開拓するという精神のもとに,原始太陽系星雲に近い条件での鉱物の蒸発・凝縮作用を実験的におこなうための装置を試作し,これに成功した.第一年度は真空蒸発凝縮炉(アユミ工業製:EC300)を製作し,その性能のチェックをおこなった.本装置の最大の特徴は,試料室が大きく多量の試料(数百mg以上)を取り扱えるところにある.当初,この大容量の試料室を加熱するためのヒーター部に事故が発生した.第二年度は,このヒーター部の改良をおこなうとともに,蒸発凝縮実験をおこない,いくつかの成果を挙げることができる.実験は,単純かつ天然を代表するMg_2SiO_4-H_2系を用いておこない,凝縮のおこる実験条件を明らかにした.本装置では多量の試料を取り扱えることから,生成条件の良くわかった凝縮物の評価(相の同定,微細組織の観察,化学分析など)が正確かつ容易におこなえるようになった.今回の実験では,凝縮は基本的に温度に依存し,またVLS機構によるフォルステライト・ウィスカーの凝縮もおこることが明らかにされた.さらに,多量の試料を取り扱えるため,微量元素や同位体組成の分析も容易になる.今後,本装置を用いて実験を進めていくことにより,原始太陽系での凝縮作用の解明に大きな貢献がなされるものと確信される.太陽系創世期における高温星雲ガス中での鉱物の凝縮作用や蒸発作用は、惑星の化学組成やそれに続く惑星の分化に大きな影響を与えたと考えられている。本研究ではこのような鉱物の凝縮・蒸発作用の実験的研究を行うための装置の開発を目的とした。太陽系星雲ガスは比較的低圧で水素を主成分とすると考えられているために、水素ガスを導入しつつ真空に近い条件を保持できるようにした真空蒸発凝縮炉を試作した。抵抗加熱によって試料の蒸発をおこない、蒸発によって生成されたガスを様々な温度で凝縮させ、その凝縮物を回収できるように炉の設計をおこなった。蒸発部と凝縮部の温度較正等のテスト実験をおこない、この真空蒸発凝縮炉の性能をチェックした。蒸発部は1800°C以上の温度に加熱でき、問題とする物質(珪酸塩,酸化物,等)の蒸発実験に十分な温度が得られることが確認された。また、凝縮部の温度を1800°Cの高温から1000°C以下の低温まで大きな範囲で変化させて実験ができることを確認した。しかしながら、初期故障のために、実験パラメーターを色々と変えた本格的な実験をおこなうまでにはまだ至っていない。一方、宇宙組成に近い単純な系(MgO-Si【O_2】系)での予備実験では、蒸発残査を回収することができたので、これについての解析をおこなっている。また、微細な凝縮物(数μm以下)については電子顕微鏡による研究をおこない、急速な凝縮作用においても、熱力学的に安定なMgSi【O_3】相(プロトエンスタタイト)が気相成長することが明かとなった。今後の研究計画としては、初期故障についての炉の改良をおこない、上述した単純系の他に複雑な系についても蒸発・凝縮実験をおこないたい。
視覚障害者の空間認知における地域音環境の役割解明に関する実験的研究

本研究の代表者である田村らは、過去の研究により、視覚障害者の外出歩行には、彼らが二次元的メンタルマップを持ちながら歩行する事が有効的である事、二次元的メンタルマップの形成を補助する環境づくりや視覚障害者への訓練が重要である事を報告している。これを受け平成10年度においては、視覚障害者の二次元的メンタルマップの形成に有利な音環境のあり方を探るべく、視覚障害者の聴覚情報による空間認知の特性について探った。無響室で街中の音環境を再現し、被験者(視覚障害者、晴眼者各5名)にどのような空間であるかを想像してもらった。結果より、道路構成の認知には交通音が大きく寄与している事、その場所のイメージと大きく隔たりのある音(住宅地の大きな車の音等)の存在が空間把握を困難な物にする事などが確認された。平成11年度には、視覚障害者の外出歩行の訓練プログラム、とりわけ外出に消極的な視覚障害者が外出意欲を持ち、かつ地域を二次元的に把握していく事を目的としたプログラム(オリエンテーリング)を提案し、その評価実験を行った。携帯型触地図を用いて主体的に歩行する事が、視覚障害者の二次元的メンタルマップの構成に対し有効な訓練となりうる事が確認された。一方でレクリエーション性が十分に得られず、歩行に不慣れな参加者には恐怖感、不安感などの心理的負担が報告された。平成12年度には、外出に消極的な視覚障害者が外出意欲を持ち、かつ地域を二次元的に把握していく事を目的とし、携帯型蝕地図を用いて観光地散策を行い、レクリエーションの面からの視覚障害者の外出歩行支援、訓練を試みた。参加者全員から携帯型触地図の有効性(地域の二次元的イメージが持ちやすい、地図を使って他の人と行き先を相談できる等)が報告された。また、触地図に載せきれない情報(商店の名前等)をどう提供していくかが今後の課題として指摘された。視覚障害者が街中の様々な音環境において、様々に混在する音の中でどのような聴覚情報に注意を払っているのか、騒音の中に埋もれた聴覚情報をどれだけ弁別できるか、また意識にとまった聴覚情報から周辺環境をどのようにイメージしているかを把握すべく実験を行った。一回目は1998年4月から5月にかけて、視覚障害者5名と晴眼者5名を被験者として、現場でモノラール録音し無響室の中でスピーカ再生音(30種)を呈示する実験であった。二回目は1998年11月から12月にかけて、視覚障害者5名と晴眼者5名を被験者として、ダミーヘッドを用いてバイノーラル録音しヘッドフォン再生(20種)する実験であった。聴覚情報による空間認知では、やはりレベルの大きな車の音が多大な影響を与えていたが、一方で場所のイメージによって道路の認知状況が異なる場合もあった。これらのことから、聴覚情報によって空間を認知しやすいまちづくりを考える場合には、1つの音だけでなく、すべての音を総合的に計画していくことが必要である。視覚障害者が自由に街中を単独で歩行することができるようになるためには、設備の整備なども有効であるが、視覚障害者が空間を正確に認知できるような都市環境造りも重要である。本研究は視覚障害者自身が街中を歩行する際に利用している多数の情報の中でも特に聴覚情報に着目し、この視点から都市空間と音環境の関連を考察し都市空間の在り方を模索するものである。本年度は、外出歩行に対する恐怖心が強く、歩行経験が浅い視覚障害者に対し、視覚障害者単独歩行オリエンテーリングという歩行支援プログラムを作成することを目的として研究を行なった。

市街地に歩行ルートを設定し、先ず、歩行経験の豊かな視覚障害者5名を対象に、単独歩行によるオリエンテーリングを試みた。健常者のオリエンテーリングと同様に事前に地図、但しルートの大枠を示す触地図を呈示し、ルート上のチェックポイントを探索しながら目的地にたどり着く。この実験により、問題点を整理した。次に、経験の浅い障害者5名を対象に、同じルートの一部を3回歩行してもらった。これらのプログラム評価実験を、レクリエーション性、環境把握のための聴覚情報利用の促し、2次元的市街地把握の促し、聴覚・嗅覚情報利用への積極性向上の視点から検討した。経験の浅い視覚障害者は未知のルートを歩くこと自体に恐怖を覚えることから、レクリエーション性、楽しみを付加するには安全性を十分に確保しておく必要のあること、聴覚情報の利用はランドマーク的利用が有効であること、触地図と実際空間の比較を歩行によって確かめることが2次元的市街地はあくに役立つこと、単独歩行が周りの情報知覚の上達に有効であることが指摘された。これらの観点から、適切なルート設定と運用により、視覚障害者の歩行能力向上支援として視覚障害者単独歩行によるオリエンテーリングが有効であり、今後展開が期待されることを示した。視覚障害者の歩行は、地域内の自分の位置と目的地の位置関係を把握するオリエンテーションと、一つの場所から他の場所へ安全かつ能率的に移動するモビリティーとを組み合わせたものとして成り立っている。しかし、モビリティーに不自由を感じていない視覚障害者でも、周辺環境の認知に困難を伴うことに起因してオリエンテーションが得意でないために未知の場所を歩行することや、自分で歩行経路を選びながら歩行することに困難を感じていることが多い。特に外出歩行に不慣れな視覚障害者や高齢になってからの失明者は、屋外を歩行する際、危険回避に多大な意識を集中しなくてはならないため、周辺環境を把握するまでに至らず屋外歩行に対して消極的になりがちである。そこでこのような環境の把握ができないため、外出に消極的になりがちな視覚障害者に対して、オリエンテーション能力を向上させる支援が必要であると思われる。12年度は前年度に試みた視覚障害者オリエンテーリング実験の反省の上、より主体的歩行を促すため、携帯型触地図を利用した観光地探索実験を行い、二次元的空間把握を促すための携帯型触地図利用が歩行に与える影響を観察し、わかりやすく利用しやすい触地図を検討した。視覚障害者は触地図を用いることで、歩行地域の全体像、現在地と目的地の位置関係を把握することができ、未知の場所に対しての不安がなく、事前に目的地や歩行経路を自由に選択することができた。また触地図を携帯型にしたことで、歩行中に目的地・歩行経路を変更するといった柔軟な歩行が可能となった。触地図を介して目的地や歩行経路を確認しながら相談したり、口で説明してもわかりにくい場合でも触地図を用いて人に説明するなど、触地図が視覚障害者同士、視覚障害者と晴眼者の情報交換に役立っていた。また触地図がメンタルマップを作成するのに補助的な役割を果たし、二次元的把握を促すことに有効である。