hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
国語教材を訓練集合とした機械学習による心情推定方式の研究

文章に表現されている感情を推定することは、文章の音声自動読み上げや感情教育など、さまざまなアプリケーションの基礎となる技術である。本研究では特に、物語文中の登場人物の発言に表現される感情を推定する研究に取り組んだ。感情ラベル間の依存関係、物語全体および個々の登場人物の感情の傾向や文脈情報を考慮することで、クラウドソーシングで得られたラベルから高い精度で感情を推定することが可能となった。さらに、異なる感情モデル間の互換性を実現するアルゴリズムの開発を行った。本年度も昨年度に引き続き物語文に対する感情ラベリングの研究を中心に行った。物語文中の登場人物の発言に感情ラベルを割り当てるために、インターネット上で不特定多数の作業者(ワーカー)に仕事を依頼できるクラウドソーシングサービスを利用している。感情ラベリングの問題は、正解が一意には決まらず、しかも複数の解の中でも人々が想起する感情の頻度が異なるため、分布推定の問題として定式化することが自然である。分布の推定は同じ文章を多数の人にラベリングしてもらうことができれば比較的容易であるが、その分コストが掛かる。少ないラベルから分布を推定するためには、ラベルの間の依存関係を考慮することが有効である。例えば、「怒り」と「悲しみ」は共起しやすいが、「怒り」と「喜び」は共起しにくい。ただし、ラベルの全ての組み合わせを考えると、推定しなければならない確率モデルのパラメータ数が大きくなり、データ数が少ない場合には精度の良い推定ができない。そこで、ラベルの間の条件付独立性をベイジアンネットワークで記述し、これを用いてラベルの同時分布を近似することで、少ないラベルから分布を推定する方式を開発した。また、登場人物の個々の発言に対する感情ラベルは一意には決められないものの、たとえば怒りっぽい人物や気の弱い人物など、同じ人物へのラベルは物語の中ではある程度の一貫性を持っている必要がある。このような登場人物の性格付けに関する一貫性を考慮した感情推定の研究も行っている。本年度は心情推定用テストコレクションの作成を中心に行った。題材としては青空文庫に公開されている著作権フリーの子供向けの小説を採用した。小説を台本形式に変換し、各登場人物の発話に当てはまる感情の種類を答えさせる設問を用意した。正解データを得るために、インターネット上で不特定多数の作業者(ワーカー)に仕事を依頼できるクラウドソーシングサービスを用いた。これにより、従来より短期間に安価に正解データを得ることが可能となった。感情推定の問題は基本的には、一つのデータに対して複数のラベルを付与できるマルチラベル問題として定式化できる。たとえば、一つの発話に「怒り」と「悲しみ」の両方のラベルが付与されることがあり得る。すなわち、正解は一つではなく複数となるが、これら複数のラベルの間にも、想起のされ易さにおいて差が存在する。そのため、正解は複数のラベル上の分布の形を取ると考えることが自然である。分布値を取る正解データを収集するには、例えば100人の人に同じデータについてラベリングをしてもらい頻度を数える等、大勢の人の意見を聞くことが有効であり、その意味でもクラウドソーシングを用いたアプローチは適切である。ただ、ラベリングを依頼する人の数が多くなれば、その分だけコストもかかるため、なるべく少ない人数のラベリング結果から、感情の分布を推定できることが望ましい。我々は、複数の感情の間には共起のしやすさが異なる点に着目した。例えば、「怒り」と「悲しみ」は共起しやすいが、「怒り」と「喜び」は共起しにくいといった現象がある。そこで、感情間の相関を考慮することで、比較的少ないラベルから正解を推定することができる方式を開発した。近年、「ヒューマンコンピュテーション」と呼ばれる、人間と計算機それぞれが得意な情報処理能力を組み合わせることで、効率よく精度の高い処理を実現するアプローチが人工知能分野で注目を集めつつある。物語文中の登場人物の個々の発言に表現される感情を推定することは、このようなアプローチが有効な問題の一つと考えられる。クラウドソーシングで得られた感情ラベルに対し、計算機による統計的品質制御を導入することで、高い精度で感情を推定することが可能となる。一方物語文中の感情は、それぞれ独立に生成されるのではなく、悲劇や喜劇といった物語全体の感情の傾向、登場人物の性格(たとえば、怒りっぽい人物や気の弱い人物)、ストーリー展開の中での文脈(たとえば、会話相手が喜んでいれば、その登場人物も喜んでいる可能性が高い)といった制約に支配される。感情ラベル推定のための従来の確率モデルに、このような感情の一貫性と文脈情報を考慮するための拡張を加えたモデルを提案した。この確率モデルを用いて感情ラベルを推定するアルゴリズムを開発し評価実験を行った結果、感情の一貫性と文脈情報を考慮することで、従来のモデルよりも高い精度で感情ラベルを推定できることを示した。また、現在の感情情報処理の研究では、中村の10基本感情モデルやEkmanの6基本感情モデルなど、様々な種類の感情モデルが用いられており、このことが、ある感情モデルで作成したデータが、他の感情モデルを前提としたシステムで使用することができないといった互換性の問題を生じている。このような感情モデル間の互換性の問題を解消するアルゴリズムの開発を行った。本研究では特に、物語文中の登場人物の個々の発言に表現される感情を推定する研究に取り組んだ。クラウドソーシングで得られた感情ラベルに対し、計算機による統計的品質制御を導入することで、高い精度で感情を推定することが可能となった。

一方物語文中の感情は、それぞれ独立に生成されるのではなく、悲劇や喜劇といった物語全体の感情の傾向、登場人物の性格、ストーリー展開の中での文脈といった制約に支配される。感情ラベル推定のための従来の確率モデルに、このような感情の一貫性と文脈情報を考慮するための拡張を加えたモデルを提案した。この確率モデルを用いて感情ラベルを推定するアルゴリズムを開発し評価実験を行った結果、感情の一貫性と文脈情報を考慮することで、従来のモデルよりも高い精度で感情ラベルを推定できることを示した。また、現在の感情情報処理の研究では、中村の10基本感情モデルやEkmanの6基本感情モデルなど、様々な種類の感情モデルが用いられており、このことが、ある感情モデルで作成したデータが、他の感情モデルを前提としたシステムで使用することができないといった互換性の問題を生じている。このような感情モデル間の互換性の問題を解消するアルゴリズムの開発を行った。最終年度は主に、前年度までの研究成果のとりまとめと対外的な発表を行った。物語文中における感情の一貫性と文脈情報を考慮した確率モデルを提案し感情ラベル推定を行った研究を、電子図書館分野の主要な国際会議であるJCDL2015で発表した。また、異なる感情モデル間の互換性の問題を解消する研究を、人工知能分野の主要な国際会議であるIJCAI2015で発表した。文章に表現されている感情を推定することは、文章の音声自動読み上げや感情教育など、さまざまなアプリケーションの基礎となる技術である。本研究では特に、物語文中の登場人物の発言に表現される感情を推定する研究に取り組んだ。感情ラベル間の依存関係、物語全体および個々の登場人物の感情の傾向や文脈情報を考慮することで、クラウドソーシングで得られたラベルから高い精度で感情を推定することが可能となった。さらに、異なる感情モデル間の互換性を実現するアルゴリズムの開発を行った。人工知能本研究の提案技術は、物語文の感情を込めた自動読み上げなど、様々な応用システムの基盤となるものであるが、その際に、異なった感情モデル間の互換性の問題は非常に重要となる。様々な感情モデルの組み合わせで評価実験を行い、アルゴリズムの改善に繋げていきたい。感情ラベリングをマルチラベル上の分布推定の問題として定式化し、ラベル間の依存関係を考慮して推定するアルゴリズムを提案した論文が国際論文誌に採録が決定するなど、順調に研究成果を挙げていると考えている。また、物語を通しての感情ラベルの一貫性を考慮する問題など、物語文の感情推定という問題における、新しく興味深い研究課題も見えてきている。従来は研究者自身がテキストに感情ラベルを付与することで正解データを準備する必要があり、これが機械学習を用いた感情推定の研究におけるボトルネックとなっていた。最近日本でも急速に普及しつつあるクラウドソーシングサービスを用いることで、短期間に大量のテキストに感情ラベルを付与できるようになった。
インタ-ロイキン3レセプタ-cDNAを用いたサイトカインレセプタ-の解析

マウスILー3レセプタ-分子Aicー2Aとその類似膜蛋白質Aicー2Bの機能を明らかにすることを目的に、Aicー2A分子及びAicー2B分子に特異的なハムスタ-のモノクロ-ナル抗体を作製した。遺伝子組換えの技術を用いて、可溶性のAicー2AとAicー2B分子を調製し、アルメニアンハムスタ-に免疫した。そして、Aicー2Aに特異的モノクロ-ナル抗体HAとAicー2Bに特異的モノクロ-ナル抗体HBを得た。HAはILー3の高親和能レセプタ-に対する結合を抑制し、ILー3依存性増殖も抑制した。Aicー2A分子が機能的高親和能ILー3レセプタ-の構成成分であることが示された。HBはGMーCSF及びILー5の高親和能レセプタ-への結合を阻害した。Aicー2BがGMーCFS及びILー5の高親和能レセプタ-に共通な構成成分であることが明らかになった。また、HBがILー3の高親和能結合も一部抑制したことから、ILー3レセプタ-にはAicー2Aを構成成分とするものと、Aicー2Bを構成成分とする二種類の存在することが示唆された。次に免疫沈降実験を行って、ILー3レセプタ-とGMーCSFレセプタ-複合体の構造を解析した。HA及びHBは細胞表層から分子量120K(Aic2A)・63K・50K、及びMr130K(Aic2B)・75k・50Kの蛋白質複合体をそれぞれ免疫沈降した。放射能標識リガンドとの化学的架橋実験からMr120K・63K及びMr130K・75Kの分子がそれぞれILー3及びGMーCSFを結合する蛋白質である事は既に示唆されている。50Kの蛋白質はILー3及びGMーCSFレセプタ-複合体ではまだ報告されていない第三の構成成分である可能性が強く、興味深い。
衝撃的負荷を受けるゴム強化樹脂の破壊のメカニズムに関する研究

ゴム成分と含有率が異なる3種類のゴム強化アクリル樹脂およびアクリル樹脂単体について,モードI破壊挙動の負荷速度依存性に関する研究を行った。負荷速度が110^3mm/minの範囲での試験には油圧サーボ式試験機を用い,l2m/s(0.6×10^51.2×10^5mm/min)での試験には,計装化落錘衝撃試験機と光ファイバとレーザ光を応用して作製した自家製の高速変位計測装置からなる衝撃試験システムを用いた。また,き裂周辺で形成されたダメージゾーンを含む部分を切り出し,切断と研磨により厚さ約150μm程度の薄片を作製し,偏光顕微鏡を用いて透過光下で観察した。得られた結果は以下の通りである。1.衝撃試験において,ピエゾエレクトリックロードセルを用いた荷重測定,高速変位計測装置を用いた荷重点変位の直接計測の結果,高精度での衝撃破壊じん性の測定が可能となった。2.角荷速度が110^3mm/minの範囲では,ゴム強化アクリル樹脂の破壊じん性はほとんど負荷速度依存性を示さなかった。一方,アクリル樹脂単体の破壊じん性は負荷速度の増加とともに増加する傾向を示した。3.ゴム強化アクリル樹脂の衝撃破壊じん性は低速での破壊じん性に比べ著しい低下を示した。一方,アクリル樹脂単体の衝撃破壊じん性は低速での破壊じん性と比べても変化は見られなかった。4.偏光顕微鏡観察の結果,ダメージゾーンの規模は負荷速度の増加とともに減少した。ゴム強化アクリル樹脂の高じん化は,き裂先端近傍でのダメージゾーン形成による付加的なエネルギ散逸の結果として生じるものである。従って,ダメージゾーンの規模が減少すると散逸エネルギ量も減少し破壊じん性も低下することが考えられる。低速域でもダメージゾーンの規模は減少したが生成に必要とされるエネルギ量は負荷速度の増加とともに増大するため,破壊じん性の顕著な変化は見られなかったものと思われる。平成10年度の研究実績は,1.スプリントホプキンソン棒法(SHB法)を応用した衝撃曲げ試験機(以下SHB試験機と略する)の作製,2.SHB試験機に対する予備試験としてアクリル樹脂の動的破壊じん性の測定,に大別される.1.高圧空気を利用して材料に衝撃的負荷を加えるSHB法を応用した衝撃曲げ試験機を作製した.空気圧を調整することで負荷速度を変えることができ,最高20m/s程度までの衝撃負荷を加えることが可能である.2.開発したSHB試験機を用いてアクリル樹脂の動的破壊じん性(動的臨界応力拡大係数K_<Id>)の測定を行った.通常,K_<Id>の評価に対しては,静的評価において使用する臨界荷重と試験片形状の関数として表される簡便式の適用は難しく,有限要素法(FEM)等の数値解析的手法を用いて動的効果を考慮した解析が必要となる.本研究では,試験機負荷部に粘弾性緩衝材(シリコンゴム)を用いることで,立ち上がりの緩やかな負荷を意図的に試験片に加え,衝撃負荷下ながら静的簡便式の適用が可能な応力状態を実現することを試みた.衝撃試験から得られた荷重点変位-時間関係を入力データとして動的FEM解析を行った結果,立ち上がりの緩やかな衝撃負荷を受ける試験片の応力状態は,同じ大きさの静的変位を加えた場合の試験片の応力状態とほぼ一致しており,本研究における静的簡便式の適用の妥当性を示す結果が得られた.得られたK_<Id>は静的破壊じん性K_<Ic>に比較して約9%の上昇を示した.平成11年度は平成10年度に得られた知見を基に,ゴム成分およびゴム粒子の含有率が異なる3種類のゴム強化アクリル樹脂の動的破壊じん性を異なる負荷速度で測定し,動的破壊じん性に及ぼす負荷速度の影響について調べる予定である.ゴム成分と含有率が異なる3種類のゴム強化アクリル樹脂およびアクリル樹脂単体について,モードI破壊挙動の負荷速度依存性に関する研究を行った。

従って,ダメージゾーンの規模が減少すると散逸エネルギ量も減少し破壊じん性も低下することが考えられる。低速域でもダメージゾーンの規模は減少したが生成に必要とされるエネルギ量は負荷速度の増加とともに増大するため,破壊じん性の顕著な変化は見られなかったものと思われる。
若年性パーキンソンニズム(AR-JP)の原因遺伝子産物パーキン蛋白質の機能解析及び遺伝子変異解析

常染色体劣性若年性パーキンソニズム(AR-JP)はパーキン遺伝子変異に伴うことが我々の研究グループにより明らかにされている.変異はパーキン遺伝子多岐に渡っており,世界中にその変異を持つ若年性パーキンソン病が存在することが分かった.しかしながら,その機能については何も分かっていなかったが,やはり我々の研究グループによりパーキンがUbcH7と反応するユビキチンリガーゼであることが明らかにされた.ユビキチンシステムはubiquitin activating enzyme(E1),ubiquitin conjugating enzyme(E2),そしてubiquitin ligase(E3)より構成されている.このシステムは細胞周期や受精など様々な現象に関わっており,神経細胞死においてもこの系が働いていることは重要な新しい知見である.AR-JPではubiquitinの付加反応が起こらず細胞にとって細胞毒性を示す基質が蓄積することで細胞死がおこると考えられる.実際患者で認められた変異型は全てE3活性を持っていなかった.現在yeast two hybrid系を用いて14クローンの基質候補を単離できており,詳細な解析を行っている.レビー小体はパーキンソン病の病理学的マーカーであり,ubiquitin陽性であることが分かっている.その細胞内封入体が存在しないAR-JPの原因遺伝子産物がE3であったことは他の神経変性疾患での病態解明の上で重要な情報となるであろう.常染色体劣性若年性パーキンソニズム(AR-JP)はパーキン遺伝子変異に伴うことが我々の研究グループにより明らかにされている.変異はパーキン遺伝子多岐に渡っており,世界中にその変異を持つ若年性パーキンソン病が存在することが分かった.しかしながら,その機能については何も分かっていなかったが,やはり我々の研究グループによりパーキンがUbcH7と反応するユビキチンリガーゼであることが明らかにされた.ユビキチンシステムはubiquitin activating enzyme(E1),ubiquitin conjugating enzyme(E2),そしてubiquitin ligase(E3)より構成されている.このシステムは細胞周期や受精など様々な現象に関わっており,神経細胞死においてもこの系が働いていることは重要な新しい知見である.AR-JPではubiquitinの付加反応が起こらず細胞にとって細胞毒性を示す基質が蓄積することで細胞死がおこると考えられる.実際患者で認められた変異型は全てE3活性を持っていなかった.現在yeast two hybrid系を用いて14クローンの基質候補を単離できており,詳細な解析を行っている.レビー小体はパーキンソン病の病理学的マーカーであり,ubiquitin陽性であることが分かっている.その細胞内封入体が存在しないAR-JPの原因遺伝子産物がE3であったことは他の神経変性疾患での病態解明の上で重要な情報となるであろう.
英語化における半周辺の再生産と権力構造－高等教育のマレーシア・モデルの伝播

マレーシアで創造されたトランスナショナルな高等教育モデルは、英語化の進展の仕方やそこに内包する権力構造を象徴的に示す現象である。英語化の過程の半周辺に位置づけられるマレーシアの文化的仲介者が創造した制度は、周辺(ベトナム、インドネシア等)さらには中心(英国等の西洋英語圏)においても模倣され、拡大再生産された。英語化のプロセスを説明する上で、周辺(多くは途上国)と中心の接合は分析の要であり、その鍵となるのが、半周辺が編み出した仲介的制度である。本研究では、同制度の伝播およびそれに伴って生じるナショナルおよびグローバルな社会的文脈における権力構造を考察した。本研究は、英語化の過程の半周辺に位置づけられるマレーシアの文化的仲介者が創造した制度の国際的伝播およびそれに伴って生じるナショナル社会、グローバル社会の権力構造を考察するものである。平成23年度は、4つの課題を中心に調査、分析を進めた。第1に、英語化をめぐる権力構造の理論構築を行うために、グローバル資本主義、世界システム論、グローバル言語、ナショナリズムに関する文献調査を徹底的に行った。それを基に仮説を構築するに際して、イギリスをベースとする社会学者、政治学者、言語学者と議論を行い、批判的フィードバックを受けた。第2に、英語化の中心諸国における高等教育のマレーシア・モデルの模倣の考察を行った。マレーシアの民間の高等教育機関と積極的に関係を推進しているイースト・ロンドン大学等において海外戦略に関する聞き取りを行った。第3に、英語化の周辺諸国における高等教育のマレーシア・モデルの伝播・技術移転の考察を行うために、マレーシアの民間の高等教育機関の海外市場担当者を対象に具体的な活動内容や問題点に関して聞き取りを行った。第4に、英語化市場における文化的仲介者と接合的制度の考察を行った。具体的には、アジアや中近東諸国を訪問して活動するマレーシア人仲介者への聞き取りを通して、英語圏留学に結びつける制度に関して分析した。以上の調査研究を通して、英語を媒介とした高等教育のマレーシア・モデルの国際伝播が英語化をめぐるグローバル社会の中心・半周辺・中心の権力関係を固定化させたり流動化させる諸様相を理解する上で貴重な発見と示唆を得ることができた。研究成果は、口頭発表2件で発表した。本研究は、英語化の半周辺に位置づけられるマレーシアにおいて創造された民間の高等教育モデルの国際的伝播、およびそれに伴って生じるナショナル社会およびグローバル社会の権力構造を考察するものである。平成25年度は、4つの課題を中心に調査、分析を進めた。第1に、英語化の周辺諸国における高等教育のマレーシア・モデルの伝播の考察を行った。前年度からの継続である。具体的には、ベトナムの高等教育における同モデル採用に伴う社会経済的利点と制約に関して、ハノイにおいて教育訓練省および国家大学の首脳陣に聞き取りを行った。また、インドネシアにおける民間の大学へのモデル移転に伴う社会経済的利点と制約に関して、ジャカルタにおいて文部省と民間の大学の担当者に聞き取りを行った。第2に、ポストコロニアル社会における英語化に関して比較の視点を引き出すために、香港において小規模な調査を行った。第3に、前年度に引き続いて、ナショナリズム、グローバル資本主義、世界システム、グローバル英語などに関する資料収集、現地視察および研究者との意見交換を行った。第4に、英語化をめぐる権力構造の理論構築を進めた。理論の妥当性に関して、主にマレーシアの現場の視点から批判的チェックを受けた。平成25年度は、研究成果を公表する上で、単著の執筆に専念して書き上げた。そのため、年度中の研究発表(雑誌論文、学会発表)は行わなかった。単著は4月末時点で初校を終え、9月に刊行予定である。本研究は、英語化の過程の半周辺に位置づけられるマレーシアにおいて創造された民間の高等教育モデルの国際的伝播、およびそれに伴って生じるナショナル社会およびグローバル社会の権力構造を考察するものである。平成24年度は、4つの課題を中心に調査、分析を進めた。具体的には、マレーシアの主な民間の高等教育機関の経営陣および海外担当者を対象に技術移転に関する聞き取りを行った。加えて、中国蘇州にある国際学院におけるマレーシア・モデルの伝播に関して首脳陣に聞き取りをクアラルンプールで行った。第2に、英語化市場における文化的仲介者と接合的制度の考察を行った。第3に、英語圏の半周辺に位置するマルタにおいて、日本を含めた多くの国・地域から留学生を集めている英語教育産業の調査を行った。同じく英語圏の半周辺に位置するマレーシアなどの事例と比較検討する上で有意義な情報と知見を得た。第4に、英語化をめぐる権力構造の理論構築を行うために、ナショナリズム、グローバル資本主義、世界システム論、グローバル英語等に関する資料収集、現地視察および研究者との意見交換、打ち合わせを行った。平成24年度は、研究成果を公表する上で、単著の執筆に専念した。単著は1年以内に刊行予定である。平成26年度は、4つの課題を中心に調査、分析を進めた。第1に、マレーシアの高等教育におけるグローバル化の推進者とナショナリストとの対立の構図を理解するため、大学における意思決定プロセスに詳しいインフォーマントに聞き取りを行った。

第2に、もうひとつのポストコロニアル社会における英語化を比較事例として考察することを通して命題の妥当性を高めるため、香港において大学の研究者およびビジネス・エリートを対象に聞き取りを行った。第3に、英語化の周辺諸国における高等教育モデルの考察を行った。具体的には、フランス語圏の中で英語プログラムを提供しているモナコ国際大学の事例の調査を行った。加えて、比較の視点から、ニース・ソフィア=アンティポリス大学のトランスナショナルなプログラムに関する聞き取りを行った。。第4に、英語化をめぐる権力構造の理論構築を進めるために、ナショナリズム、グローバル資本主義、世界システム、グローバル英語などに関する資料収集を続行すると同時に、現地の研究者からフィードバックおよび批判的チェックを受けた。研究成果は、単著『英語化するアジアートランスナショナルな高等教育モデルとその波及』(名古屋大学出版会、2014年)として出版した。マレーシアで創造されたトランスナショナルな高等教育モデルは、英語化の進展の仕方やそこに内包する権力構造を象徴的に示す現象である。英語化の過程の半周辺に位置づけられるマレーシアの文化的仲介者が創造した制度は、周辺(ベトナム、インドネシア等)さらには中心(英国等の西洋英語圏)においても模倣され、拡大再生産された。英語化のプロセスを説明する上で、周辺(多くは途上国)と中心の接合は分析の要であり、その鍵となるのが、半周辺が編み出した仲介的制度である。本研究では、同制度の伝播およびそれに伴って生じるナショナルおよびグローバルな社会的文脈における権力構造を考察した。27年度が最終年度であるため、記入しない。社会学調査対象側の状況の変化のために、インドネシア調査を先送りする必要が生じたが、代替の調査でカバーすることができた。英語化における半周辺の再生産と権力構造に関する理論構築を行う上でベースになる経験的調査を順調に進めることができた。具体的な調査方法、調査地・時期等の変更はあるが、全体の研究目的の達成に問題はない。たとえば、調査対象側の状況の変化などのために、フランスとイギリスにおける調査を取りやめ、先送りする必要が生じたが、マレーシアにおいて、これらの国の事情に詳しい担当者や研究者に聞き取りを行うことで代替の調査を行い補完することができた。研究成果の発表に関しては、平成25年度は、単著の執筆に集中した。そのため、年度中の研究発表(雑誌論文、学会発表)は行わなかった。単著は本年9月に刊行予定である。英語化における半周辺の再生産と権力構造に関する理論構築を行う上でベースになる経験的調査を順調に進めている。たとえば、調査対象側の状況の変化のために、中国調査を取りやめたが、調査対象者のマレーシア訪問時に聞き取りを行うことができた。
コーヒーの日常的な消費が動脈硬化と認知機能に及ぼす影響～20年の疫学的縦断研究～

申請者のグループは、1958年より世界7カ国共同研究の一環として、福岡県久留米市田主丸町にて経年的に一般住民検診を行っている。1999年に40歳以上、約2,000人の住民を対象に大規模な栄養調査を含めた住民検診を実施し、コーヒーの消費量を詳細に調査した。2017年4月に出産したため、産前および産後休暇・育児休業が終了後2017年9月より研究を再開した。同年は主にベースライン時のデータの整理を行うとともに、ベースラインデータの解析を行った。2018年5月より同年12月まで約8か月間にわたり、田主丸研究地区の大規模住民検診を行った。検診受診者は計1368名で問診、栄養調査、血圧測定、身体測定、血液・尿検査、心電図、心エコー図検査、頸動脈エコー図検査、認知症検査を施行した。検査結果は検診者に結果についての健康指導をコメントして送付した。2018年に行った検診結果はすべてデータベース化し、現在集積、解析している。本研究ではコーヒーの日常的な消費が頚動脈の硬化に対して抑制的に働き、認知症の発症を抑制するとの仮説をたて、1999年時のデータをベースラインとし、今回集積できた頚動脈エコー検査やMMSEのデータにおいて、頚動脈エコー検査での頚動脈の内膜中膜複合体厚(IMT)、プラークの有無を用いて、コーヒーの日常的な摂取が動脈硬化に与える直接的な影響について検討するとともにMMSEを用いた認知機能評価により認知機能に与える経年的な変化を評価している段階である。2018年5月より約8ヶ月間、当初の計画通り住民検診を施行し、計1368名の検診データを得た。現在得られた結果を集積し、解析段階である。概ね順調に施行している。得られたデータを集積し、統計ソフトで解析する。得られた結果は国内外の学会並びに論文発表を予定している。申請者のグループは、1958年より世界7カ国共同研究の一環として、福岡県久留米市田主丸町のにて経年的に一般住民検診を行っている。また、2018年5月より開始となる大規模な田主丸住民検診の準備を中心となって遂行した。2018年5月より約半年間にわたり同地区で大規模な田主丸住民検診を実施する。準備内容として事前に対象となる住民への検診簿の配布や検診場所との打合せ、倫理委員会などへの提出を行った。さらに入力データのデータベース化に取り組み、検査結果を速やかに検診対象者へ還元する方法を構築した。平成29年度4月に出産をし産後休暇・育児休業が終了後平成29年9月より研究を再開した。現在は平成30年5月よりおこなう大規模な田主丸住民検診の準備を中心となって遂行している。同時進行で本研究の予後調査を行うとともに、過去の報告の論文作成、また順次解析、結果の考察を進めているところである。今後平成30年5月11月まで大規模検診を行う予定であり、データの蓄積に努力する。

得られたデータを集積し、統計ソフトで解析する。得られた結果は国内外の学会並びに論文発表を予定している。平成29年度4月に出産をし産後休暇・育児休業が終了後平成29年9月より研究を再開したこと、また現在は平成30年5月よりおこなう大規模な田主丸住民検診の準備を中心となって遂行しているため、研究費を使用しなかった。同時進行で本研究の予後調査を行うとともに、過去の報告の論文作成、また順次解析、結果の考察を進めているところである。平成29年度4月に出産し、産前及び産後休暇・育児休業が終了後平成29年9月より研究を再開したことより平成29年度は研究費を使用しなかった。平成30年度は当初の計画通りに田主丸地区での大規模住民検診を行い、検診に関する諸費用を必要とした。今後平成31年度は検診にて得たデータの解析を予定している。データの解析にはパソコンおよびその周辺機器は必須である。さらに、今後は研究成果を発表するにあたり論文投稿料、学会・研究会参加旅費等は、必要不可欠であると考える。
銅触媒による第三級ハロゲン化アルキルを基質として用いる交差カップリング反応

(1)アルケンに対する分子内ハロアミノ化反応は、ハロゲンを有する含窒素環化合物が得られるため近年盛んに研究されている。しかしながらアルケンの代わりにアレンやアルキンを基質とした例はほとんど報告されていない。そこで1,10-フェナントロリンを配位子とする銀触媒を用いて、N-クロロスクシンイミドを塩素化剤とする官能基許容性に優れたアレンの分子内クロロアミノ化反応を達成した。また本反応により得られる生成物はクロスカップリングや酸化反応により種々のピロリンやピロール誘導体へと容易に変換することが可能である。(2)アルカリ金属は豊富に存在するため安価であり、また毒性が低いため有用である。しかしながらアルカリ金属をルイス酸として用いる反応はこれまであまり研究されていない。そこでアルカリ金属であるリチウムのルイス酸性に関する研究を行なった。その結果、リチウム塩のルイス酸性が対アニオンにより大きく変化することが分かった。ヘキサフルオロリン酸リチウム存在下、1-アリールー2,3-ブタジエン-1-オール誘導体をヘキサン中加熱撹拝すると、アルコール部位の活性化を経てナザロフ型環化が進行することを見いだした。なお本反応は臭化リチウムやトリフルオロメタンスルホン酸リチウムなどを用いた場合ほとんど進行しない。生成物であるベンゾフルベンは材料化学や配位子の前駆体として重要な化合物である。また他のヘキサフルオロリン酸塩を用いても本反応はほとんど進行しなかった。またこの反応においてリチウム塩の代わりに銅塩を触媒として用いてトルエン中反応させると、アレン部位のプロトンが選択的に引き抜かれることにより共役エンインが立体選択的に生成することも見いだした。本手法は共役ジエンインやエンジインの立体選択的合成にも利用することが可能である。ソフトなルイス酸である銀触媒の研究からはじまり、これまであまり効果的には利用されていなかったアルカリ金属のルイス酸としての有用性を示すことができた。また同じ基質を用いてルイス酸により異なる生成物作り分けが可能であることも報告できた。α-アレノールをリチウム塩と反応させることによりベンゾフルベンを、銅触媒を作用させることにより共役エンインをそれぞれ合成した。今後はこのアレンの末端プロトンの引き抜きを利用したこの反応形式を更に発展させていきたい。具体的には基質のアルコール部位の位置をずらす、つまりβ-アレノールを用いて銅触媒と反応させることによりシクロブロパン環の合成を目指す。通常熱的に不安定なアリル銅種がカルベン配位子により安定化されるという知見をもとに、カルベン配位子を有する銅錯体によるホモアリルアルコールのレトロアリル化およびそれを利用したカルボニル化合物のアリル化反応を見出した。本触媒系ではこれまで適用できなかった第二級ホモアリルアルコールも基質として用いることができる点で有用である。さらに本反応はホモアリルアルコールのγ付加体からα付加体への異性化反応にも応用することができる。次に上述した知見をもとにホモアレニルアルコールのレトロアレニル化を利用したイミンの選択的アレニル化について検討した。アレニル金属種とプロパルギル金属種は通常平衡状態にある。そのためカルボニル化合物との反応では二種類の生成物、つまりホモプロパルギルアルコールとアレニックアルコールが生成してしまうという問題がある。特筆すべきことに本触媒系では高い選択性でイミンがアレニル化された生成物が得られた。なお未精製の生成物をエタノール/水混合溶媒中加熱することにより3-ピロリンが高収率で得られた。3-ピロリンは天然物に見られる構造であり、酸化剤により容易に酸化されピロールへと変換できる。これらの結果をもとにホモプロパルギルアルコールのレトロプロパルギル化を利用したイミンの選択的プロパルギル化についても検討を行なった。その結果プロパルギル位に置換基を有するホモプロパルギルアルコールを用いると、イミンが選択的にプロパルギル化された生成物のみがほぼ定量的に得られた。カルベン配位子を有する銅触媒存在下、ホモアリルアルコールを基質として用いることにより、これまでほとんど例の無いsp^3炭素間の結合の切断に成功した。このレトロアリル化反応により生じたアリル銅種はイミンやアルデヒドといった求電子剤で捕捉可能である。同様の手法を用いることにより、アレノールやホモプロパルギルアルコールの炭素間の結合の切断も見いだした。生じたアレニル銅またはプロパルギル銅は求電子剤としてイミンを用いることにより位置選択的に反応させることができた。一般にアレニル金属とプロパルギル金属は平衡にあるため、求電子剤との反応においては位置異性体が混じってしまうという欠点があったが、本反応ではカルベン配位子のかさ高さのために非常に高い位置選択性が達成された。またルイス酸として銀触媒を用いる反応についても検討を行なった。その結果、1,10-フェナントロリンを有するカチオン性銀触媒存在下、α-アミノアレンとN-クロロスクシンイミドを反応させると分子内クロロアミノ反応が進行し、有機合成上非常に有用なビニルクロライド部位を有する3-ピロリンが得られることを見いだした。本反応の生成物は酸化反応やクロスカップリングなどにより種々の3-ピロリンやピロールへと容易に変換が可能である。

そこで1,10-フェナントロリンを配位子とする銀触媒を用いて、N-クロロスクシンイミドを塩素化剤とする官能基許容性に優れたアレンの分子内クロロアミノ化反応を達成した。また本反応により得られる生成物はクロスカップリングや酸化反応により種々のピロリンやピロール誘導体へと容易に変換することが可能である。(2)アルカリ金属は豊富に存在するため安価であり、また毒性が低いため有用である。しかしながらアルカリ金属をルイス酸として用いる反応はこれまであまり研究されていない。そこでアルカリ金属であるリチウムのルイス酸性に関する研究を行なった。その結果、リチウム塩のルイス酸性が対アニオンにより大きく変化することが分かった。ヘキサフルオロリン酸リチウム存在下、1-アリールー2,3-ブタジエン-1-オール誘導体をヘキサン中加熱撹拝すると、アルコール部位の活性化を経てナザロフ型環化が進行することを見いだした。なお本反応は臭化リチウムやトリフルオロメタンスルホン酸リチウムなどを用いた場合ほとんど進行しない。生成物であるベンゾフルベンは材料化学や配位子の前駆体として重要な化合物である。また他のヘキサフルオロリン酸塩を用いても本反応はほとんど進行しなかった。またこの反応においてリチウム塩の代わりに銅塩を触媒として用いてトルエン中反応させると、アレン部位のプロトンが選択的に引き抜かれることにより共役エンインが立体選択的に生成することも見いだした。本手法は共役ジエンインやエンジインの立体選択的合成にも利用することが可能である。ソフトなルイス酸である銀触媒の研究からはじまり、これまであまり効果的には利用されていなかったアルカリ金属のルイス酸としての有用性を示すことができた。また同じ基質を用いてルイス酸により異なる生成物作り分けが可能であることも報告できた。α-アレノールをリチウム塩と反応させることによりベンゾフルベンを、銅触媒を作用させることにより共役エンインをそれぞれ合成した。今後はこのアレンの末端プロトンの引き抜きを利用したこの反応形式を更に発展させていきたい。具体的には基質のアルコール部位の位置をずらす、つまりβ-アレノールを用いて銅触媒と反応させることによりシクロブロパン環の合成を目指す。
動脈硬化症を中心とした心血管系における遺伝子治療法の開発

アデノウイルスによる心血管系における遺伝子導入および遺伝子治療の技術確立のために共同研究が行われた。研究代表者のグループでは、in vivo,in vitroモデルの確立と循環器疾患に関与する重要な遺伝子の構造、機能、発現制御の検討が行われた。ラットなどの心筋細胞、ヒト由来を含む内皮細胞、平滑筋細胞の初代培養系が遺伝子導入のターゲット細胞として確立された。in vivoモデルとしては、冠動脈結紮による心筋虚血、心筋梗塞モデル、マウス心移植モデル、ウイルス性心筋炎モデル、心筋症モデル、心不全モデルが確立された。そしてこれらの病態モデルがヒト疾患モデルとして十分有用であることが証明された。重要な遺伝子としてサイトカイン、増殖因子、イオンチャネル、転写調節因子の種々の病態における発現調節、機能解析がおこなわれた。これには、サイトカインの各種心疾患での発現調節とそのmodulationによる病態に対する影響の証明、種々の増殖因子による血管新生に対する影響、イオンチャネル異常による不整脈発症機序の解明、転写調節因子と心肥大の関係などが明らかにされた。海外の研究協力者により平行してアデノウイルスの作成、培養系、モデル動物系においての遺伝子導入についての検討が行われた。これには、プラスミノーゲンアクティベータ-遺伝子の導入による凝固系の調節、エンドセリン前駆体導入による高血圧症の発症、NO合成酵素の導入による肺血管収縮の影響などが検討された。また、ポリリジン修飾ウイルスによる各種心血管系培養細胞への遺伝子導入が検討されレポーター遺伝子が良好に導入されることが確認された。このベクターは、ウイルスが不活化されているためbiohazardとしての安全性が高いと予想されること、導入遺伝子のサイズの制限を受けないことなどが利点として考えられるため引き続きモデル動物への遺伝子導入とその有用性の検討が行われる予定である。また、研究代表者側で検討された種々の遺伝子およびその突然変異体などのアデノウイルス組み換え体などを共同研究者と作成し、モデル動物へ導入することでその病態生理の解明が進むと考えられる。今回の共同研究により、心血管系においていかなる遺伝子が重要な役割を果たしているか、そしてアデノウイルスベクターを用いた遺伝子導入が非常に強力な病態生理解明の糸口となることがすでに種々の系で確認された。また、これらの過程で海外共同研究者との密接な討議、研究成果の交換により、最新の情報を交換でき、また将来の研究発展の基盤となり成果の多い共同研究となった。平成8年度は、アデノウイルスを用いた遺伝子導入法が循環器系にどのように適用可能かを、種々の初代培養細胞を対象に検討を加えた。その第一は、レポーター遺伝子としてβガラクトシダーゼ遺伝子を組み込んだ5型アデノウイルスを用いた。初代培養細胞に血管内皮細胞、新生児ラットからの心筋細胞、アダルトラットからの心筋細胞いずれにおいても、アデノウイルス感染後、翌日より非常に良好なβガラクトシダーゼ活性を検出することが出来た。従来のアデノウイルスベクターは、組み換え体の作成、クローニング、組み込む遺伝子のサイズに煩雑さや制限があったため、これらの欠点を改良したベクターの開発が望まれていた。これに関しても、共同研究者のDr.Gerard R.D.らとの共同研究により、ポリリジン修飾アデノウイルスの有用性を検討した。

この修飾ウイルスは、外来プラスミドを細胞内に導入させることが可能であったが、ポリリジン修飾の効率及び遺伝し導入効率に変動が大きいため、さらにより簡便なベクターを開発中である。現在、これらと同等の遺伝子導入効率を得られる非修飾coniugatedアデノウイルスが、まだpreliminaryであるが開発されている。また、循環器系においては、心筋炎、心筋症において、サイトカインの関与が重要であることが次第に判明してきた。これらのファクターをmodulateすることで心筋症、心筋炎、心機能などを改善、治療できる可能性が開けてきた。これらの基礎的、臨床的研究が進んでいる。(別掲論文集参照)アデノウイルスによる心血管系における遺伝子導入および遺伝子治療の技術確立のために共同研究が行われた。研究代表者のグループでは、in vivo,in vitroモデルの確立と循環器疾患に関与する重要な遺伝子の構造、機能、発現制御の検討が行われた。ラットなどの心筋細胞、ヒト由来を含む内皮細胞、平滑筋細胞の初代培養系が遺伝子導入のターゲット細胞として確立された。in vivoモデルとしては、冠動脈結紮による心筋虚血、心筋梗塞モデル、マウス心移植モデル、ウイルス性心筋炎モデル、心筋症モデル、心不全モデルが確立された。そしてこれらの病態モデルがヒト疾患モデルとして十分有用であることが証明された。重要な遺伝子としてサイトカイン、増殖因子、イオンチャネル、転写調節因子の種々の病態における発現調節、機能解析がおこなわれた。これには、サイトカインの各種心疾患での発現調節とそのmodulationによる病態に対する影響の証明、種々の増殖因子による血管新生に対する影響、イオンチャネル異常による不整脈発症機序の解明、転写調節因子と心肥大の関係などが明らかにされた。海外の研究協力者により平行してアデノウイルスの作成、培養系、モデル動物系においての遺伝子導入についての検討が行われた。これには、プラスミノーゲンアクティベータ-遺伝子の導入による凝固系の調節、エンドセリン前駆体導入による高血圧症の発症、NO合成酵素の導入による肺血管収縮の影響などが検討された。また、ポリリジン修飾ウイルスによる各種心血管系培養細胞への遺伝子導入が検討されレポーター遺伝子が良好に導入されることが確認された。このベクターは、ウイルスが不活化されているためbiohazardとしての安全性が高いと予想されること、導入遺伝子のサイズの制限を受けないことなどが利点として考えられるため引き続きモデル動物への遺伝子導入とその有用性の検討が行われる予定である。また、研究代表者側で検討された種々の遺伝子およびその突然変異体などのアデノウイルス組み換え体などを共同研究者と作成し、モデル動物へ導入することでその病態生理の解明が進むと考えられる。
形式代数スタックの研究とモジュライの問題の応用

代数スタック(ここで代数スタックとは,Artinスタックを意味する)を研究する際,しばしば古典的なスキームや代数空間の幾何学を使いたいことがある.そのような橋渡しをするものとして代数スタックの疎モジュライという概念がある.大雑把にいってスタックの代数空間による近似である,私は,一般の代数スタック(Artinスタック)上の点に対しても安定性の概念を導入した.そして,安定点たちは開部分スタックをなし,その開部分スタックには疎モジュライが存在することを示した.また,被約代数スキーム$X$に簡約群$G$が作用している状況で商スタック$[X/G]$に私の導入した安定性を適用するとそれはMumfordの安定性を含むことを示した.私はある条件下でArtinスタックの局所構造定理を示した.スタック上の点に対して,その点の安定化群(自己同型群)が線形簡約群$G$ならばその点の形式近傍は形式スキームへの$G$による作用の商で書けることを示した.(より一般の$G$に対しても示した).この結果は,応用が多い.これを使うと例えば,任意の分離的Deligne-Mumfordスタックやtame Artinスタックは,ブローアップすること.によって商スタック$[W/G]$の形に改変できることが示せる私は17年度中に主に次の二つのテーマに研究を行った.(1)リジッド解析空間の変形理論.(2)トロイダル幾何学の代数スタックによる新しい手法導入と応用.双方特に今のところ関連があるとは思われないテーマなので,以下にそれぞれ別に17年度中にあった進展を述べる.(1)について.昨年度の研究に引き続き,次の問題を考察した.それは,リジッド解析空間の変形をコホモロジーにより,理解することである.昨年度までは,これはイリュージーによる環付トポスの変形理論からすぐ理解できると思っていたが,出来ないことがわかった.一般にリジッド解析空間の層は,非アルキメテス的解析関数を含むため普通のケーラー微分の層は大きすぎるのである.そこでリジッド解析空間のための余接複体の理論を作る必要がでてくる.私はそのような理論を形式スキームの理論を使って作ることで解決した.(2)について.トロイダル特異点をもつ(つまりエタール位想で局所的にはトーリック多様体がもつ特異性)代数多様体に対し,それをあたかもスムースな幾何学をするような方法を発見した.私は,トロイダル特異点を持つ代数多様体に対し組織的に非常に自然なスタックを構成しもとの多様体と関係づける理論を得た.トロイダル特異点をもつ代数多様体Xが与えられると,対数的幾何の言葉でかける圏が現れ,その圏がXを粗ラジュライとしてもつスムースなスタックになっていることを発見し示した.またそのスタックはスタックの圏の中で極小特異点解消になっていることを示した.つまり,X上の幾何学で特徴付けられる.その他,様々なよい性質を満たしていることを示した.トロイダル特異点を持つ代数多様体の中で特にトーリック多様体多様体の場合が興味深い.私はこの場合にそのトロイダルスタック上のカルティエ因子,ピカール群をファンの言葉で与えた.二次元のトーリック多様体から得られるトロイダルスタックのチャウ環の研究し,それは常に滑らかなトーリック多様体のように振舞うことが発見された.そのほか,トロイダルスタックの理論の応用として代数曲面の特異点解消への応用があることを見出した.トーリックスタック(標数零)の(Kresch-Edidin-Grahamの意味での)整係数Chow環がファンのStanley-Reisner環と同型であることを示した.この結果の注目すべき点は私の視点から見て以下のように説明される.まず,従来のトーリック多様体では有理係数でしかChow環とStanley-Reisner環の同型はない.トーリック多様体やそれに似た多様体のChow群(環やその同変版など)は多くの人によって研究されてきたがどれも非特異ファンの枠組みを超えてStanley-Reiner環との対応をつけたものがない.というのも非特異でないファンからえられるStanley-Reisner環は次元より大きい次数の項でさえも非自明でありスキームや代数空間のような幾何学の枠組みではとらえきれない現象が組み合わせ論の現れていたのである.私が示した同型はStanley-Reisner環が示していた現象がトーリックスタックの幾何学でとらえられること,代数スタックの現象に対応することを示す.何年も前から定義されていた組み合わせ的な環にそのような幾何学的背景があることが私には面白かった.また次を示した(標数零).滑らかなDeligne-Mumfordスタックで粗モジュライがスキームであるようなものが与えられたとする.このときそれがスプリットトーラスを稠密開集合として含みさらにトーラス作用をもつことの必要十分条件はスタッキーファンと呼ばれる組み合わせ対象から得られるトーリックスタックと同型であることである.さらにそのようなもののなす2-圏はスタッキーファンと1-圏と同値である.またトーリックスタックの2-圏(あるいはスタッキーファンの圏)は非特異トーリック多様体の圏(あるいは非特異ファン)を忠実充満圏として含み非常に自然な拡張を与えている.これは,われわれのトーリックスタックの理論において基本定理である.代数スタック(ここで代数スタックとは,Artinスタックを意味する)を研究する際,しばしば古典的なスキームや代数空間の幾何学を使いたいことがある.そのような橋渡しをするものとして代数スタックの疎モジュライという概念がある.

大雑把にいってスタックの代数空間による近似である,私は,一般の代数スタック(Artinスタック)上の点に対しても安定性の概念を導入した.そして,安定点たちは開部分スタックをなし,その開部分スタックには疎モジュライが存在することを示した.また,被約代数スキーム$X$に簡約群$G$が作用している状況で商スタック$[X/G]$に私の導入した安定性を適用するとそれはMumfordの安定性を含むことを示した.私はある条件下でArtinスタックの局所構造定理を示した.スタック上の点に対して,その点の安定化群(自己同型群)が線形簡約群$G$ならばその点の形式近傍は形式スキームへの$G$による作用の商で書けることを示した.(より一般の$G$に対しても示した).この結果は,応用が多い.これを使うと例えば,任意の分離的Deligne-Mumfordスタックやtame Artinスタックは,ブローアップすること.によって商スタック$[W/G]$の形に改変できることが示せる
脳神経系腫瘍発生に関与する癌抑制遺伝子の機能とその異常の解析

脳神経系に発生する腫瘍は、悪性は勿論のこと、良性腫瘍でも発生部位によっては患者の生命を脅かす事が時にあり、治療の最も困難な疾病の一つと言える。本研究は脳神経系腫瘍形成の要因となる各種癌抑制遺伝子の変化と、それによって生じる生物学的特性を明らかにし、遺伝子異常と疾患の表現型との関連を明確にすることを目的とした。更に、それらの遺伝子産物が関与する細胞内シグナルについて解析を行った。本年度の成果を要約すると:1.グリオーマにおける10番染色体長腕の異常をマイクロサテライトマーカーを用いて解析し、GradeIII及びIVの悪性グリオーマにおいて高頻度に欠失している部位はD10S192とD10S566にはさまれる11.8cRの領域であることを見いだした。2.上記高頻度欠失両域内にショウジョウバエ神経分化関連遺伝子neuralizedのヒト相同遺伝子が存在することを見いだし、その全長cDNAのクローニング(h-neuと命名)を行った。h-neuはヒト正常脳では発現が見られるが、悪性グリオーマ組織ならびに細胞株では発現の消失あるいは変異が認められた。3.ショウジョウバエ腫瘍抑制遺伝子wartsの相同遺伝子(h-warts)のクローニングを行い、この遺伝子が悪性グリオーマや乳癌に置いて高頻度に欠失している6q25上のマーカーに近接して存在することを見いだした。4.NF2遺伝子産物であるmerlinが細胞内でポリ(ADPリボース)ポリメラーゼ(PARP)ならびにKu85と結合することを見いだした。更に、それらの遺伝子産物が関与する細胞内シグチルについて解析を行った。本年度の成果を要約すると:1.悪性脳腫瘍であるグリオーマにおける10番染色体の異常をマイクロサテライトマーカーを用いて解析した。46例の悪性グリオーマ組織を調べたところ、悪性度の増加に応じて長腕の欠失率の増加及び欠失範囲の拡大があることを認めた。また、Grade III及びIVの悪性グリオーマにおいて高頻度に欠失している部位はD10S566(q25)付近であることを見いだした。現在、このマーカー付近を含むYACクローンからcosmid contigを作製し、グリオーマ関連癌抑制遺伝子の候補遺伝子を検索中である。2.NF1遺伝子産物であるneurofibrominは細胞内でセリン/スレオニン基のリン酸化を受けているが、このリン酸化の一部はA-キナーゼによって行われていることを示した。この結果から、neurofibrominがRASとA-キナーゼの二つのシグナル系の間に存在する分子である可能性が考えられる。3.我々は以前、GST融合蛋白を用いてmerlinに結合する細胞内蛋白5つを同定したが、今回内在性merlinも細胞内でその中の一つである85Kdの蛋白(p85)と結合することを確認した。現在、p85蛋白の精製ならびにペプチド配列の決定を行っており、この蛋白の構造を明らかにすることが、merlinに関連する細胞内シグナルを解く鍵になると考えている。本研究では脳神経系腫瘍形成の要因となる各種癌抑制遺伝子の変化と、それによって生じる生物学的特性を明らかにし、遺伝子異常と疾患の表現型との関連を明確にすることを目的とした。本年度の成果を要約すると:1.グリオーマにおける10番染色体の異常をマイクロサテイラトマーカーを用いて解析し、Grade III及びIVの悪性グリオーマにおいて高頻度に欠失している部位はD10S540とD10S566を含む領域であることを見いだした。また、この領域に存在するcDNAの単離を行った。2.NF2遺伝子産物であるmerlinが細胞内でポリ(ADPリボース)ポリメラーゼ(PARP)と結合することを見いだした。その結合にはmerlinのアミノ端側半分が必須であることを確認した。また、merlinはPARPのADPリボシレーション活性を上昇させることが分かった。3.ショウジョウバエ神経系腫瘍抑制遺伝子Dlgの新たなヒト相同遺伝子(NE-dlgと命名)を同定し、その特性解析を行った。NE-dlgは神経細胞、膵臓ランゲルハンス島細胞、筋細胞、食道上皮細胞など終末分化した細胞に発現しており、基底細胞、培養腫瘍細胞株など分裂能の旺盛な細胞には発現が認められなかった。また、NE-dlg蛋白はhdlg1蛋白同様、APC蛋白と細胞内で会合することが分かった。本年度の成果を要約すると:

1.グリオーマにおける10番染色体長腕の異常をマイクロサテライトマーカーを用いて解析し、GradeIII及びIVの悪性グリオーマにおいて高頻度に欠失している部位はD10S192とD10S566にはさまれる11.8cRの領域であることを見いだした。2.上記高頻度欠失両域内にショウジョウバエ神経分化関連遺伝子neuralizedのヒト相同遺伝子が存在することを見いだし、その全長cDNAのクローニング(h-neuと命名)を行った。h-neuはヒト正常脳では発現が見られるが、悪性グリオーマ組織ならびに細胞株では発現の消失あるいは変異が認められた。3.ショウジョウバエ腫瘍抑制遺伝子wartsの相同遺伝子(h-warts)のクローニングを行い、この遺伝子が悪性グリオーマや乳癌に置いて高頻度に欠失している6q25上のマーカーに近接して存在することを見いだした。4.NF2遺伝子産物であるmerlinが細胞内でポリ(ADPリボース)ポリメラーゼ(PARP)ならびにKu85と結合することを見いだした。