hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
中枢神経軸索終末部における単一シナプス小胞動態の可視化

ラットの大型中枢神経軸索終末部であるカリックス型シナプスを標本とし、全反射蛍光顕微鏡を用いて細胞膜直下におけるシナプス小胞の開口放出、およびそれ以前の動態を可視化することによって、シナプス小胞が開口放出される前の細胞膜近傍での振る舞いを直接測定することに成功した。また、開口放出からエンドサイトーシスにいたるまでの動態を小胞膜と小胞タンパク質の両面から同時測定した。本研究課題は、ラットやマウスの脳幹聴覚系カリックス型シナプスを主たる標本とし、シナプス小胞の開口放出およびその前段階における動態を、可視化によって明らかにすることを目的として遂行している。シナプス小胞をFM色素によって蛍光標識し、細胞膜直下のシナプス小胞のみを全反射蛍光顕微鏡を用いて可視化した。軸索終末部が大きく、イメージングの適用が容易なカリックス型シナプスを標本として実験を行った。シナプス小胞をFM色素によって蛍光標識し、細胞膜直下のシナプス小胞の動態を全反射蛍光顕微鏡によって観察することに成功した。シナプス前終末である軸索終末部において、シナプス小胞は伝達物質放出部位への動員(ドッキング)、伝達物質放出への分子的準備(プライミング)を経て開口放出に至る。全反射蛍光顕微鏡検鏡下では、開口放出は刺激に伴う蛍光の瞬時の消失として、ドッキングは輝点の出現として観察された。ドッキングが刺激に対してどのような時間経過で生じるのか、また、ドッキングされたもののうちどの程度のものが実際に開口放出可能な状態に準備されている(プライミングされている)のかについて、電気生理学的手法を組み合わせながら全反射蛍光顕微鏡を用いた高速、高解像度のイメージングを主な手段として測定した。実験の結果、輝点の消失として観察された開口放出は刺激中に集中して生じること、ドッキングされたシナプス小胞のうち一部のみがプライミングされており、開口放出可能な状態になっていることが分かった。また、即時放出可能なシナプス小胞が枯渇した後の比較的早い段階での再充填は、すでにドッキングされていたシナプス小胞がプライミングされることによってなされていることが分かった。当初の計画では研究計画初年度の今年度においてはカリックス型シナプスのシナプス小胞をFM色素で蛍光標識し、1)単一のシナプス小胞を全反射蛍光顕微鏡によって解像すること、2)その単一シナプス小胞の開口放出を可視化すること、の2点を目標としていた。しかし、実験の進展が予想よりも早く進んだため、当初2年目の研究計画として考えていたドッキングやプライミングの時間経過を調べる実験も行ってその結果を得ることができ、成果を学会発表、論文として発信することができた。全反射蛍光顕微鏡を用いることで、細胞膜直下でシナプス小胞がどのように接着し、分子的な準備状態を経て開口放出に至るかを直接可視化することを目指して研究を行った。ラットやマウスの脳幹聴覚系カリックス型シナプスを標本とし、FM色素によって蛍光標識した個々のシナプス小胞の開口放出とその直前の動態をライブイメージングによって捉えることに成功した。シナプス小胞が開口放出に至るまでには放出部位への動員、放出への分子的準備を経る必要があるが、これらがどのような時間経過で生じるのかについて電気生理学的手法を組み合わせながら測定した。実験の結果、細胞膜直下に係留されたシナプス小胞のうち一部のみが放出可能な状態にあることが明らかになり、即時放出可能なシナプス小胞が枯渇した後の素早い再充填は、すでに膜直下にあったシナプス小胞が分子的準備を経て放出可能な状態に遷移することによってなされていることが示唆された。また、同じくカリックス型シナプスにおいて開口放出された小胞タンパク質が小胞膜と共に回収される過程を可視化した。小胞タンパク質の一種であるシナプトタグミンをpH感受性色素によって蛍光標識することによって小胞内部にあるのか細胞膜表面に露出しているのかを識別し、電気生理学的手法によって測定した小胞膜の回収動態を比較した。実験の結果、シナプトタグミンの回収動態は刺激の強度に依存して変化することが分かった。さらに、開口放出関連タンパク質の一つであるMunc13-1を含むCa2+-CaM-Munc13-1経路を阻害すると、小胞膜の回収の時間経過に影響なくSyt2の回収の時間経過のみが遅くなることが分かり、小胞タンパク質を小胞膜と共に回収するための重要な分子経路を特定した。カリックス型シナプスにおける開口放出とその直前におけるシナプス小胞の動態を明らかにすることができたので、今後はより長い時間窓においてシナプス小胞がどのようにドッキング、プライミングされているのか、また、ドッキングからプライミングを経て開口放出されるまでにはどの程度の時間がかかるのかを調べる。また、Neher研究室(マックスプランク生物物理化学研究所)とBrose研究室(マックスプランク実験医学研究所)との共同研究によって、カリックス型シナプスにおいて開口放出された小胞タンパク質が細胞内に回収される過程の可視化に成功しつつあるので、そちらの動態についても調べる。

神経科学当初の予定では初年度にCMOSカメラを購入する予定であったが、次年度にほぼ同価格のまま性能を向上させた新型機種が出るとの業者からの連絡を受け、当初の購入計画を一年延期させることにしたため、次年度使用額が生じた。初年度に購入予定であったCMOSカメラを購入する予定である。
気液混在マイクロ・ナノ化学プロセスの開発

マイクロ・ナノ化学プロセスは、化学操作の集積化の観点から注目を集めている。流路幅が、数百ナノメートルから数百マイクロメートルにおける気液混在流体は、マイクロ・ナノ化学プロセスの中で、気液抽出や蒸留などのプロセスに利用できる重要な流れである。この気液混相流の制御因子を明らかにし、またナノ構造を利用した相変化制御を考案することで、マイクロ・ナノ化学チップの中で蒸留操作を実現した。本研究では、「毛管現象capillarity」をキーワードに、マイクロ空間とナノ空間の流体挙動・相転移現象を明らかにし、気液混在系マイクロ化学プロセス開発の基盤を構築することを目的とする。気液マイクロ多相流挙動の定量的解析では、ガラス製マイクロチップを光リングラフィー湿式エッチング法にて作製し、気液二相流が安定に生成できる条件を実験的に解析した。その結果、溶媒の接触角・粘度および流路径から圧力バランスモデルを導いた。このモデルには、流路作製時に制御可能な流路径が含まれており、気液混在プロセスにおける設計指針を確認したといえる。この設計指針をもとに大気中のアンモニアを水中に分配するマイクロチップを作製し、アンモニア分析チップが実現可能であることを確認した。ナノ構造を利用した毛管凝縮現象の解析では、電子線リングラフィーとプラズマエッチングを利用したナノ加工法にて、毛管長が300nm程度のナノピラー構造を作製し、毛管凝縮現象を観察した。純水をナノピラー近傍のマイクロ流路内に流し、流路全体を100度Cとして飽和水蒸気をナノピラー内に導入した。この実験では、実験開始数分後からナノピラー内で凝縮現象が観察された。Kelvinの式に基づくサイズ効果までは実証できていないが、毛管凝縮現象に基づく蒸留操作が原理的に可能であることを示す結果であると考えられる。同様に水-エタノール混合溶媒でも同様の結果が得られた。溶液体積と組成を調べた結果から、蒸留率4%が達成されていることが示唆され、ナノ・マイクロ化学チップ内で初めて蒸留を達成した。気液混在系マイクロ化学プロセスの発展にとって重要な操作が実現したといえる。本年度は、マイクロ流路内を並行して流れる二相(気液および液液)間に働く毛管力を定量的に評価するための物理モデルを実験的に検証した。二相間には粘度差が存在するため、モデルでは、並行して流れる二相に、それぞれ別々の圧力損失を考え、平行二相流の上流と下流では二相間に異なる圧力差が存在すると考える。この圧力差を二相界面の変形によって生じるラプラス圧が補償する。このとき、二流体間と壁面の三相接触線がとりうる接触角は、前進接触角から後退接触角までであるとした。様々な表面張力と接触角をもつ溶媒について実験を行い、モデルが広い範囲で適用可能であることを確かめた。気液混在マイクロ化学プロセスを設計する上で重要な知見が得られたといえる。ナノピラー内での毛管凝縮現象の解析では、異なる大きさと空隙サイズをもつナノピラーを一枚のチップに集積化したチップ作製に取り組んだ。また、蒸気圧を正確に制御することを目的に、チップ外で飽和蒸気をつくり、キャピラリーを介して蒸気を導入するシステムを組み上げた。このシステムでは、飽和蒸気を導入し、ナノピラーで蒸気が凝縮しはじめる温度を正確に計測できるため、毛管凝縮現象の平行論を議論するのに適したシステムであるといえる。一方、このシステムでは蒸気発生部から凝縮部までの距離が離れており、凝縮が始まった後も、凝縮液の成長がゆっくりとしか進まないという現象を観測した。蒸気発生部と凝縮部が離れていると、凝縮速度がキャピラリー内の流速に支配されるためと考えた。そこで速度論解析のためには、蒸気発生部と凝縮部が十分接近している必要があると考え、液体流路とナノピラー部(凝縮部)が数mm程度に接近したチップを作製した。この距離では、観測する凝縮現象の時間スケールに対して、気相中溶媒分子の拡散時間は無視できるほど小さいと考えられる。このチップを用いて、毛管凝縮現象を観測に成功した。凝縮率評価方法の確立などに課題は残っているが、本研究の目的の1つである、毛管凝縮現象の速度論解析につながる重要な成果であるといえる。本年度は、ナノピラー内での毛管凝縮現象の速度を定量的に評価する方法を検討し、毛管凝縮現象のサイズ依存効果を検討した。ナノピラーとして、毛管半径が245nm(群1)、273nm(群2)、340nm(群3)、405nm(群4)を作製した。それぞれピラー高さは、250nmでピラー間隔と・ピラー断面積は、150ミクロン角のピラー作製領域中のナノ空間体積が約620fLとなるように調整した。この気体で満たされたナノ空間が、液体で満たされた割合を定量的に評価する方法を様々検討した。その結果、照明光を落射方向から斜入射し、凝縮前後での顕微鏡画像をCCDで記録し、その輝度変化から相転移により液体が満たされた割合を計測することにはじめて成功した。

この観察方法を用いて、水をナノピラー近傍のマイクロチャネルに導入した後の様子を約15分間記録した。100°Cにおいて実験したところ、水導入後100秒から230秒の誘導時間の後、凝縮が始まる現象がみられた。凝縮が始まってから全体が液体で満たされるまでの凝縮速度は、3から11fL/sであった。25°Cで実験したところ、誘導時間は、凝縮速度は10秒から70秒であり、凝縮速度は、11から74fL/sであった。誘導時間はナノ空間のサイズが大きくなるほど、ながくなった。このことは、凝縮核形成と成長により、液体がピラー間にブリッジを形成する時間に対応すると考えられる。また、液体凝縮速度はサイズが大きくなるほど遅くなった。サイズが小さいほど毛管凝縮効果による過飽和度が高くなることと、よい一致を示していると考えられる。100nm程度の大きさの空間で、相転移現象の速度論を定量的に確かめた研究はこれまでになく、基礎化学的にも重要な結果と言える。実用面においても、ナノ・マイクロ化学プロセスにおける相転移制御の指針が得られたことが本研究の大きな成果と言える。
データ駆動型アプローチによる教育向け適応制御システムの一設計

【研究目的】:過去の情報を用いて制御を行う、データ駆動型制御は、非線形なシステムに対しても制御が行える点で注目されている手法の一つであるが、その仕組みについては未だ不明な点が多い。本研究では原理を実験を通して理解するための一案として、簡易な制御系を試作し、検証を試みた。試作過程や得られた結果から、教育用教材として活用するための課題について考察した。【研究方法】:装置の試作に先立ち、計算機上でシミュレーションを行った。非線形システムのモデルを一例に挙げ、PID制御およびON/OFF制御にて、ある目標に設定した場合の追従性を観測した。制御パラメータが多いPIDの方が2値のみを取り扱うON/OFF制御に比べ、評価が優れるのは明らかであるが、本研究では、装置を試作していく中で部品特性や回路設計について知識を深めることも目的としていたため、今回は設計が容易なON/OFF制御で試作することとした。アルミ板を加熱し、所望の温度にするための簡易な実験装置を試作し検証した。出力を得るたびにマイコンのメモリ内に蓄え、以降の制御に利用していく形式とした。【研究成果及び考察】:検証の結果、開始から約1520分においては概ね誤差5°C以内の応答が得られた。この時間帯においては、データが得られるたびに過去の情報と比較して出力を予測し、目標値に近づける機能が働いたと考えられる。以降は内部データが飽和した影響か、スイッチングがなされず、温度は自然降下した。この点は装置面、プログラム面双方で再考が必要である。試作過程及び上記の検証から、火傷や感電防止のための安全対策や、部品特性を入念に吟味することの必要性が今後の課題として挙げられる。さらに教育用機材として扱うためにはプログラミング環境や操作方法もわかりやすいものでなくてはならない。今後も検証を重ね、装置設計のプロセスについても学んでいく。
グルタミン酸による内耳に対するexcitotoxicityとその予防に関する研究

本研究では、内耳の神経伝達物質であるグルタミン酸による内耳障害の可能性、内耳虚血によるグルタミン酸遊離の程度、内耳虚血による聴力の推移と組織像、グルタミン酸アンタゴニストによる内耳障害の防御効果、について検討した。1.モルモットの鼓室階外リンパ腔にグルタミン酸あるいはアゴニストであるAMPAを投与し蝸電図および組織像を検討した。その結果、これらの投与によりCAP閾値は著明に上昇し,グルタミン酸が内耳障害をおこすことを確認した。組織学的には内有毛細胞とシナプスを形成する一次求心神経の樹状突起の変化が顕著であった。2.スナネズミの椎骨動脈血流を遮断することにより5分間の内耳虚血を負荷し、経時的に外リンパ中のグルタミン酸濃度を測定した。その結果、はじめは鼓室階、遅れて前庭階の外リンパ中グルタミン酸濃度が上昇し、最大で約30倍に達した。3.内耳虚血動物のABRを経時的に記録すると、虚血直後は無反応となるが徐々に回復し、3日目には域値は正常となった。しかし5日目以後、半数の動物でABR閾値は再び上昇し15dB以上の難聴をきたした。組織学的には内有毛細胞とその求心性シナプスに膨化・変性など高度の変化がみられたが、これらは遅発性神経細胞死による障害メカニズムによると考えられた。4.グルタミン酸のアンタゴニストであるDNQXをあらかじめ投与しておくと、内耳虚血を負荷しても、内有毛細胞や求心性シナプスには変化がおこらず、遅発性神経障害は生じなかった。以上の結果から、急性難聴の原因の一つと考えられる一過性虚血による内耳障害メカニズムにグルタミン酸のexcltotoxicityが関与すると結論した。また虚血負荷前に、あらかじめグルタミン酸アンタゴニストを前投与しておくと、内有毛細胞やその求心性シナプスに変化は生じず、内耳障害が防御できる可能性が示された。内耳虚血は突発性難聴の原因の一つと考えられるが、これによる障害のメカニズムについては不明な点が多い。本研究では一過性内耳虚血による聴覚障害においてグルタミン酸がどのような役割を果たすかを明らかにする目的で実験を行った。実験動物には先天的に後交通枝が欠損したスナネズミを用い、両側の椎骨動脈を5分間遮断して内耳虚血を作成し、虚血前後における外リンパ中のグルタミン酸濃度を経時的に測定した。その結果、虚血前の状態で鼓室階が0.35±0.22pmol/μl,前庭階が0.42±0.32pmol/μlであったが、虚血直後よりグルタミン酸濃度は著明に上昇し、鼓室階では血流再開2.5分後に11.72pmol/μl(n=12)となり、その後は徐々に減少した。前庭階では濃度上昇は緩徐であり、血流再開20分後に最高値8.49pmol/μl(n=6)を記録したが、45分後には鼓室階と同程度となった。また同じ条件で蝸電図を測定すると、蝸牛血流遮断によりCAPは消失、血流再開とともに回復したものの、60分後の測定では13dBの閾値上昇を残した(n=6)。

さらに長期の観察では、2日目に閾値は完全に虚血前に回復したが、7目以降は悪化する例が6例中3例でみられ遅発性の障害が生じた。透過電子顕微鏡による検討では、虚血負荷後の形態変化は外有毛細胞よりも内有毛細胞とそのシナプス間隙において顕著であり、空胞変性などがみられた。動物にあらかじめグルタミン酸拮抗剤であるDNQXを投与しておくと、このような虚血による形態的変化は生じなかった。本研究では、内耳の神経伝達物質であるグルタミン酸による内耳障害の可能性、内耳虚血によるグルタミン酸遊離の程度、内耳虚血による聴力の推移と組織像、グルタミン酸アンタゴニストによる内耳障害の防御効果、について検討した。1.モルモットの鼓室階外リンパ腔にグルタミン酸あるいはアゴニストであるAMPAを投与し蝸電図および組織像を検討した。その結果、これらの投与によりCAP閾値は著明に上昇し、グルタミン酸が内耳障害をおこすことを確認した。組織学的には内有毛細胞とシナプスを形成する一次求心神経の樹状突起の変化が顕著であった。2.スナネズミの椎骨動脈血流を遮断することにより5分間の内耳虚血を負荷し、経時的に外リンパ中のグルタミン酸濃度を測定した。その結果、はじめは鼓室階、遅れて前庭階の外リンパ中グルタミン酸濃度が上昇し、最大で約30倍に達した。3.内耳虚血動物のABRを経時的に記録すると、虚血直後は無反応となるが徐々に回復し、3日目には域値は正常となった。しかし5日目以後、半数の動物でABR閾値は再び上昇し15dB以上の難聴をきたした。組織学的には内有毛細胞とその求心性シナプスに膨化・変性など高度の変化がみられたが、これらは遅発性神経細胞死による障害メカニズムによると考えられた。4.グルタミン酸のアンタゴニストであるDNQXをあらかじめ投与しておくと、内耳虚血を負荷しても、内有毛細胞や求心性シナプスには変化がおこらず、遅発性神経障害は生じなかった。以上の結果から、急性難聴の原因の一つと考えられる一過性虚血による内耳障害メカニズムにグルタミン酸のexcltotoxIcityが関与すると結論した。また虚血負荷前に、あらかじめグルタミン酸アンタゴニストを前投与しておくと、内有毛細胞やその求心性シナプスに変化は生じず、内耳障害が防御できる可能性が示された。
再構成可能アーキテクチャを活用したLSIシステム設計方法論

粗粒度再構成可能アーキテクチャを用いて設計制約に応じたソフトエラー耐性を柔軟に実現するための手法として,最も一般的なものの一つに選択的三重化がある.本研究では,与えられた回路面積等の制約のもとでソフトエラー耐性が最大となる選択的三重化の適用箇所を,短時間で効率良く探索する手法を提案した.一般に,アーキテクチャ上に実装されるアプリケーション回路はデータフローグラフ(DFG)として表現される.グラフ中の頂点は,実行する命令等の様々な観点から特徴づけることができ,その違いは脆弱性にも大きな影響を及ぼすと考えられる.そこで本手法においては,それらの特徴を数値化し,それぞれに対する重みとの積の総和を各頂点の脆弱性としてモデル化し,その値の大小関係に基づいて三重化適用の優先順位を決定する.提案するモデル中の重みを求めるために,まずサンプルとなる回路に対して故障挿入シミュレーションを行い,DFG中の頂点の脆弱性の序列を求める.次に,回路中の各頂点の脆弱性が,頂点の特徴と重みを変数とする連立一次方程式で表現されることから,求めた順序を可能な限り再現できる重みを,一般化逆行列を用いて求める.エッジ検出等の回路に本手法を適用することで求めた脆弱性と回路面積のトレードオフカーブは,シミュレーションにより求めたカーブに十分近いものであった.また本手法で求めた重みにより,異なる入力ベクトルや新しい回路に対しても同様の結果が得られた.このことは本手法が広く一般的に有用であることを示す.本手法における処理時間の内訳は,重みを求めるのに9.87秒,与えられた回路の三重化順序を求めるのに1秒以下であった.これに対し,全ての選択的三重化の適用パターンに対して故障挿入シミュレーションを網羅的に行った場合,今回対象とした回路の中で最小規模のものに対しても55620.0秒かかり,提案手法は処理時間の点で特に優れているといえる.FPGAに代表される再構成可能アーキテクチャは,LSIシステムの信頼性低下やNREコストの高騰といった問題を解決し得るものと期待されている.特に粗粒度のアーキテクチャは,細粒度のものに比べて構成情報量が少なく,アプリケーションの実装効率や,ソフトエラーの発生率の点で優れているため,本研究で目標とするプラットフォームの中核をなすものと考えられる.しかし,信頼性を考慮した粗粒度再構成可能アーキテクチャの設計例は数少ないため,広大な設計空間の探索を要する。そこで,効率の良い探索のために,故障挿入スクリプトの自動生成や,選択的三重化を適用した上での自動配置配線が可能な,粗粒度アーキテクチャ向けの信頼性評価環境を構築した.構築した環境を用いて,配線資源量の異なる複数のアーキテクチャに対して,viterbi decoder等のアプリケーションをマッピングし,選択的三重化を適用する箇所を変えた際の,回路面積と信頼性のトレードオフを評価した.viterbi decoderにおいては,回路面積や信頼性の制約に関わらず,配線資源量が最も豊富なアーキテクチャが最適であることがわかった.これに対して,FIR Filterにおいては,回路面積が強く制約される場合においては配線資源量が豊富なアーキテクチャが適しており,高い信頼性が要求され回路面積におけるオーバヘッドが許容される場合には,配線資源量が中程度のアーキテクチャが適していることがわかった.これらの評価の結果から,ターゲットとするアプリケーションや,面積や信頼性の制約に応じて,最適な配線構造が異なるなど,信頼性と配線柔軟性の関係が一意ではないことが,定量的に明らかになった.粗粒度再構成可能アーキテクチャを用いて設計制約に応じたソフトエラー耐性を柔軟に実現するための手法として,最も一般的なものの一つに選択的三重化がある.本研究では,与えられた回路面積等の制約のもとでソフトエラー耐性が最大となる選択的三重化の適用箇所を,短時間で効率良く探索する手法を提案した.本手法においてはまず,三重化を適用する領域を段階的に変化させながら評価と探索を行う.適用する領域を変化させる際には,信頼性のモデル化に基づく評価関数を用いることで,評価値の改善が見込まれるものに対してのみ配置配線と脆弱性評価を行う.そして評価値が改善されなかったものに関しては評価を打ち切る.ランダムに生成したデータフローグラフに対して,提案手法を用いて面積コストと脆弱性のトレードオフカーブの探索を行った結果,提案手法により探索点数を平均で9.9%から21.6%に抑えることが可能であり,その際の脆弱性におけるオーバーヘッドは平均で9.3%から20.8%であることがわかった.前述の脆弱性の評価は,構成情報メモリに故障を挿入した状態でのシミュレーションを行い,その故障が回路の出力に与える影響に基づいて行った.この評価においては故障パターンが膨大な数になるため,一つの三重化の適用パターンに対しての評価にも時間がかかる.そこで,前述の探索手法を更に効率化するために,GPUを用いてこの故障挿入シミュレーションを並列化し高速化を行った.本手法は評価対象となるアーキテクチャの回路規模にあわせて,小規模なものには単一の,大規模なものにはこれを分割した複数のカーネルを用いてシミュレーションをGPUに実装する.評価を行った結果,シミュレーションの実装に単一のカーネルを用いる手法においては,最大で68倍の高速化を達成した.これに対して複数カーネルを用いる手法においては,平均で14.6倍の高速化を達成し,これは評価対象の回路規模に関わらずほぼ一定の値であった.粗粒度再構成可能アーキテクチャを用いて設計制約に応じたソフトエラー耐性を柔軟に実現するための手法として,最も一般的なものの一つに選択的三重化がある.

本研究では,与えられた回路面積等の制約のもとでソフトエラー耐性が最大となる選択的三重化の適用箇所を,短時間で効率良く探索する手法を提案した.一般に,アーキテクチャ上に実装されるアプリケーション回路はデータフローグラフ(DFG)として表現される.グラフ中の頂点は,実行する命令等の様々な観点から特徴づけることができ,その違いは脆弱性にも大きな影響を及ぼすと考えられる.そこで本手法においては,それらの特徴を数値化し,それぞれに対する重みとの積の総和を各頂点の脆弱性としてモデル化し,その値の大小関係に基づいて三重化適用の優先順位を決定する.提案するモデル中の重みを求めるために,まずサンプルとなる回路に対して故障挿入シミュレーションを行い,DFG中の頂点の脆弱性の序列を求める.次に,回路中の各頂点の脆弱性が,頂点の特徴と重みを変数とする連立一次方程式で表現されることから,求めた順序を可能な限り再現できる重みを,一般化逆行列を用いて求める.エッジ検出等の回路に本手法を適用することで求めた脆弱性と回路面積のトレードオフカーブは,シミュレーションにより求めたカーブに十分近いものであった.また本手法で求めた重みにより,異なる入力ベクトルや新しい回路に対しても同様の結果が得られた.このことは本手法が広く一般的に有用であることを示す.本手法における処理時間の内訳は,重みを求めるのに9.87秒,与えられた回路の三重化順序を求めるのに1秒以下であった.これに対し,全ての選択的三重化の適用パターンに対して故障挿入シミュレーションを網羅的に行った場合,今回対象とした回路の中で最小規模のものに対しても55620.0秒かかり,提案手法は処理時間の点で特に優れているといえる.研究実績の概要で述べた,面積制約等に応じた最適な選択的三重化の適用箇所の探索の効率化と,信頼性評価のためのシミュレーションの高速化は,本年度の研究実施計画に挙げていたものであり,これらに関する手法を提案し,国内および国際学会で発表することができた.特にシミュレーションの高速化に関しては,GPUを用いることで,関連する研究の中でも有数の高速化を達成できた.今後は,前年度に構築した信頼性評価環境や,今年度に提案した選択的三重化の適用領域の効率的探索手法等を拡張することで,再構成可能アーキテクチャとプロセッサが協調動作するLSIシステムにおける,信頼性を考慮した設計方法論の確立を目指す.特に,このようなシステムにおける信頼性を考慮したアプリケーション開発環境は,前例もなく斬新なテーマであるため,この環境の構築を中心に進めていく.
福山型先天性筋ジストロフィーの重症化因子の探索と治療への応用

福山型先天性筋ジストロフィー(FCMD)は重度の筋ジストロフィーに脳の形成異常や眼奇形を伴う本邦特有の小児の希少難病でいまだ治療法がない。患者はほぼ一生歩行を獲得せず、重度の知的障害を合併する。一方この挿入変異ホモ型の患者には、わずかに歩行が可能な例や、会話が可能な軽症例が存在し、その表現型は患者間で大きな差があるがその理由は未解明である。本研究の目的はこの表現型の差を引き起こす因子を解明・同定し、新規治療法を開発することである。疾患特異的iPS細胞などの細胞系を用い、スプライシング活性や糖鎖・糖転移活性を検討する。本年度はフクチン遺伝子の配列決定のため、ロングリードの配列同定が可能な次世代シークエンサーであるナノポアをもちいて患者及び両親(保因者)の挿入変異配列の配列を検討した。結果、いまだエラー率や挿入配列内の繰り返し配列の解読に難渋したため、個人間での配列の差と臨床症状の相関についての検討までにはいたらなかった。しかし、この技術をもちいて、今後はRNAの配列を決定し、発現での表現型の差も検討を予定している。また患者フクチン遺伝子をエピジェネティックに調節する因子の有無を、メチル化解析やヒストン修飾の検討より探索することを予定し予備検討を行っている。重症化因子では、αDG活性の差がかかわっていることをつきとめたため、今後はαDG活性に関わる因子について、さらに検討を予定している。福山型先天性筋ジストロフィー(FCMD)は重度の筋ジストロフィーに脳の形成異常や眼奇形を伴う本邦特有の小児の希少難病である。また患者フクチン遺伝子をエピジェネティックに調節する因子の有無を、メチル化解析やヒストン修飾の検討より探索する。これらと運動機能評価やバイオマーカー等の客観的指標との相関を検討し、重症化に関与する病態解明を目指す。本年度は複数の患者における挿入変異の配列及びハプロタイプを検討した。結果は重症度と配列・ハプロタイプの相関はみられなかった。スプライシング活性に関しては、軽症において正常フクチンの発現が高い傾向があり、正常フクチンの活性が病状に関与している可能性が示唆された。この結果は、軽症型においてαジストログリカンの糖鎖活性が高いこととも相関した。糖転移活性については、より良いアッセイ系の構築を検討中である。本研究より挿入変異の配列とスプライシング活性は関連が薄く、スプライシング活性については挿入変異配列以外の要因が関与している可能性が示唆され、来年度においてその詳細を検討する予定である。結果は重症度と配列・ハプロタイプの相関がないことや、スプライシング活性に関しては、軽症において正常フクチンの発現が高い傾向があり、正常フクチンの活性が病状に関与している可能性が示唆された、など本年度に必要な研究を終了できた。糖転移活性については、より良い解析方法を検討中であるが、それ以外に関してはおおむね順調に実験が進み、来年度の研究につながる結果が出た。来年度は計画通り、エピジェネティックな影響やバイオマーカーと臨床症状との相関をみて、治療法につながる因子を同定する予定である。

現時点では、まだ重症化に関わる因子の同定は未解決であるが、プロモーター領域の検討などについて詳細に検討することで、新たな治療標的が同定される可能性がある。また、同定が不明な場合は、他の糖転移酵素との関連や、結合蛋白などに関しても視野を広めて広く重症化因子の同定を行ってゆきたい。物品費用が当初計画よりやや安価で終了した。次年度に抗体などの消耗品として使用する予定である。
出産・子育て期の女性の就業キャリアと転職の経済的ペナルティに関する研究

女性の就業やキャリアに関して、前年度の成果を継続的に発展させるとともに、出産を経た再就職の経済的ペナルティに関する分析をおこなった。女性の就業キャリアに関しては、出産を経た最初の再就職に関して、前職と同じ職種か・異なる職種かと、正規雇用か非正規雇用かの観点から4つのパターンに分類した。すなわち、「前職と同じ職種で、正規雇用」「前職と同じ職種で、非正規雇用」「前職と異なる職種で、正規雇用」「前職と異なる職種で、非正規雇用」の4つである。これら4つのパターンの生起が、どのような要因と関連しているかを検討した。分析の結果、出産後再就職までの中断期間が長くなると、「前職と同じ職種で、正規雇用」で再就職する確率が低くなり、「前職と異なる職種で、非正規雇用」で再就職する確率が高くなること、前職が専門職である場合には、「前職と同じ職種で、正規雇用/非正規雇用」で再就職する確率が高くなること、1980年代生まれは、1960年代生まれに比べて、「前職と同じ職種で、正規雇用」および「前職と異なる職種で、非正規雇用」で再就職する確率が、ともに高くなっていることが明らかになった。出産を経た再就職の経済的ペナルティに関しては、出産した女性を対象に、時間当たり賃金について、就業継続者と再就職者の比較をおこなった。分析の結果、就業継続者と比べて再就職者の時間当たり賃金は、再就職後の経過年数の中で差が縮まってはいくものの、再就職後10年以降においてもなお、低い水準にとどまっていることが明らかになった。就業継続者と再就職者の賃金の差が、どのような要因によって条件づけられるかについては、さらに検討していく必要がある。女性の就業キャリアの分析に関して、前年度からの成果をふまえて、継続的なデータ分析をおこなうことができた。転職の経済的ペナルティについては、出産後の再就職の経済的ペナルティに関する分析課題を設定し、データ分析を進めることができたため。出産後の再就職の経済的ペナルティに関して、日本の女性についてのデータ分析を進めるとともに、国際比較研究をおこない、研究を総括する。出産・子育て期の女性の就業キャリアを検討するにあたり、女性の就業キャリアに関する近年の国内外における研究動向、またそこでとられている分析手法を検討するとともに、データ分析に着手した。女性の就業キャリアに関する先行研究によると、幼い子どもをもつことが労働市場における有利な移動を阻害することを指摘するものが多い。しかしその不利の度合いは、個人の保有する人的資本や労働市場での経験によって異なることに加え、社会の制度的編成の差異やその変動の度合いによっても異なることが指摘されている。すなわち、出産・子育て期の女性の就業キャリアを検討するにあたっては、特定の社会の労働市場や社会政策のコンテクストをふまえた分析が必要であると同時に、それを国際比較などによって異なる制度的編成の社会と比較しながら理解することが必要であることが明らかになった。また、日本の1960年代から80年代生まれの女性を対象として、出産前の就業形態と出産後の就業状況との関連を、出生コーホートごとに分析したところ、若いコーホートほど出産直後に就業している割合が高く、その増加の多くは、非正規雇用者の増加であることが明らかになった。こうした出産直後の時期の非正規雇用者の増加は、同じく出産前後の女性の就業率が大きく低下する韓国では見られていない。以上のような研究成果を研究論文として発表し、国内外の研究者らと意見を交わし、さらなる研究の展開についての示唆を得た。女性の就業キャリアの分析に関して、先行研究を検討するとともに、その多くが2010年代に入ってから出産・子育て期をむかえた1980年代生まれも含めた分析をおこなうことができた。また、就業キャリアのさらなる分析の準備と、転職の経済的ペナルティに関する先行研究についても検討する準備ができているため。前年度に引き続き、1990年代以降の日本の労働市場と社会政策の動向が、出産・子育て期の女性の就業キャリアにどのような影響を及ぼしてきたかを明らかにすべく、データ分析をおこなった。1990年代から2010年代初めの、子どもをもつ女性の就業率の変化を末子年齢別にみると、1990年代から2000年代初めにかけて、末子15ー17歳の女性の就業率にはそれほど大きな変化が見られない一方で、末子0ー2歳の女性の就業率は顕著に増加する傾向が見られた。ここからは、1990年代から2000年代にかけて、出産した女性がより早いタイミングで労働市場に戻っていることが示唆された。ただし、1990年代以降の経済不況のもとでの非正規雇用者の増加や賃金の伸び悩み、一方で少子化を背景とした育児休業制度をはじめとした子育て支援策の展開といった動向は、出産・子育て期の女性に一様に影響を及ぼすものではない。そこで本研究では、出産後の女性の仕事への戻り方のパターンに注目し、データ分析をおこなった。その結果、以下のことが明らかになった。1)1960年代生まれに比べて、1970・80年代生まれの女性は、出産後早いタイミングで仕事に戻っていること、2)出産後の女性は非正規雇用者として仕事に戻るケースが多いが、正規雇用者として仕事に戻るケースも一定程度あること、3)仕事へ戻るタイミングに注目すると、正規雇用者と非正規雇用者として戻る場合には大きな差異があり、正規雇用者として戻る場合には出産後34年以内に戻るケースが大半でそれを過ぎると正規雇用者として戻るケースは、ほどんど見られない一方で、非正規雇用者として戻るケースは、出産後10年をすぎても見られること。

こうした出産後の仕事への戻り方のパターンに関して、どのような要因が関連しているか、さらなる検討の必要性が示唆された。女性の就業キャリアの分析に関して、先行研究の検討をふまえて、前年度から継続的なデータ分析をおこなうことができた。また、就業キャリアのさらなる分析のための課題設定をおこない、転職の経済的ペナルティに関する先行研究の検討にも着手できたため。女性の就業やキャリアに関して、前年度の成果を継続的に発展させるとともに、出産を経た再就職の経済的ペナルティに関する分析をおこなった。女性の就業キャリアに関しては、出産を経た最初の再就職に関して、前職と同じ職種か・異なる職種かと、正規雇用か非正規雇用かの観点から4つのパターンに分類した。すなわち、「前職と同じ職種で、正規雇用」「前職と同じ職種で、非正規雇用」「前職と異なる職種で、正規雇用」「前職と異なる職種で、非正規雇用」の4つである。これら4つのパターンの生起が、どのような要因と関連しているかを検討した。分析の結果、出産後再就職までの中断期間が長くなると、「前職と同じ職種で、正規雇用」で再就職する確率が低くなり、「前職と異なる職種で、非正規雇用」で再就職する確率が高くなること、前職が専門職である場合には、「前職と同じ職種で、正規雇用/非正規雇用」で再就職する確率が高くなること、1980年代生まれは、1960年代生まれに比べて、「前職と同じ職種で、正規雇用」および「前職と異なる職種で、非正規雇用」で再就職する確率が、ともに高くなっていることが明らかになった。出産を経た再就職の経済的ペナルティに関しては、出産した女性を対象に、時間当たり賃金について、就業継続者と再就職者の比較をおこなった。分析の結果、就業継続者と比べて再就職者の時間当たり賃金は、再就職後の経過年数の中で差が縮まってはいくものの、再就職後10年以降においてもなお、低い水準にとどまっていることが明らかになった。就業継続者と再就職者の賃金の差が、どのような要因によって条件づけられるかについては、さらに検討していく必要がある。女性の就業キャリアの分析に関して、前年度からの成果をふまえて、継続的なデータ分析をおこなうことができた。転職の経済的ペナルティについては、出産後の再就職の経済的ペナルティに関する分析課題を設定し、データ分析を進めることができたため。出産・育児期の女性の就業キャリアに関して、さらなる分析を進める。また、転職の経済的ペナルティに関する先行研究についても検討し、データ分析に着手する。また、転職の経済的ペナルティに関するデータ分析をおこなう。出産後の再就職の経済的ペナルティに関して、日本の女性についてのデータ分析を進めるとともに、国際比較研究をおこない、研究を総括する。統計ソフトの更新を、次年度におこなうこととしたため。また、当初海外で出版された書籍をもちいて先行研究の検討を予定していたが、その多くを学術論文をもちいておこなったため。当初海外で出版された書籍をもちいて先行研究の検討を予定していたが、その多くを学術論文をもちいておこなったこと、また、国内学会のうち1件が近接地で開催されたこと、英文校閲に関する費用が発生しなかったこと等による。
インターネットを用いた図形の動的探究を支援する学習環境とコンテンツの開発

1990年代以降,作図ツールを利用した動的な探究は,主としてスタンドアロンのソフトの利用形態で行われてきた。また,授業の形態としては,課題分割型グループ別探究が主として行われてきた。それらは図形の動的探究学習の可能性を示すとともに,より多くの学校で実現可能にするためには,多様なニーズに合った学習環境・コンテンツをシームレスに提供することの必要性を求めるものであった。本研究では,作図ツールGC/Javaを部品とし,サーバ側の様々なソフトと組み合わせることによって,GC_BBS, Pukiwiki with Gc, Gcで5択問題など,図形の動的探究を支援する複数の学習環境を構築した。従来からあるGC/Winやこれらの学習環境を使い分けることによって,(1)解説,(2)問題提示・議論,(3)課題分割型グループ別探究,(4)グループ別/個別探究,(5)コラボレーション,(6)スキル学習,(7)個別学習の学習形態に対処できるようになった。そして,それぞれに対応した基本的なコンテンツ例および,組織的に開発するための基本ツールを開発した。これらの基盤を元にして,組織的なコンテンツ開発と授業実践の蓄積が次の課題となった。さらに,教材選択の視点や授業のノウハウをまとめ,教師を支援するためのリソースとして提供することの必要性等も明らかになった。本研究は、作図ツールGeometric Constructorに関する研究成果を元にして,図形の動的探究を支援するための学習環境とコンテンツ開発を目指している。研究室中心の開発にとどまらず,実際の教育現場で通用するもの,新指導要領やそれを基礎とした教科書に対応するものを目指している。同時に,新世紀型の教育では,標準的なカリキュラムのみでなく,多様なニーズや学習環境にシームレスに対応できる体制が不可欠と考えている。本研究で対象としているのは,(1)解説,(2)問題提示・議論,(3)課題分割型グループ別探究,(4)グループ別/個別探究,(5)スキル学習,(6)コラボレーション,(7)個別学習の7つであるが,(3)に関しては,これまで多くの実践事例の蓄積がある。(1)(2)に関しては,新指導要領に対応する標準的なコンテンツを開発した。そして,それらに関する研究授業・検討会を実施した。研究協議会を伴う研究授業を名古屋(5授業)・奈良・静岡・有田(2授業)・川崎(予定)で行った。また,各地で研究協力者自身による研究授業を行い,授業のビデオを収集・配布・検討を行った。さらに,小牧市立小牧中学校において,6名の教諭を中心として,どのような授業が展開可能かを一般の先生方に発表する会を企画し,100名ほどの参加者を得た。その成果を元にして,より多くの学校での利用可能性を高めるための方策を検討した。また,それ以外に関しては,システム・コンテンツの試作を行い,次年度における研究のための基礎を固めた。
膜輸送系を標的とする光線力学的治療の効果増強剤の新薬シーズ開発

5-アミノレブリン酸(ALA)は従来の光線力学的治療で用いられてきたポルフィリン関連化合物とは異なり、がん細胞内でプロトポルフィリンIXに変換され、光感受性物質として活性化し、殺細胞効果を発揮する。本研究ではALAとの同時処理により細胞内PpIX量を増加させてPDT効果を増強する低分子化合物TX-816の誘導体開発を実施し、TX-816のアルキルベンゼン型誘導体が有用なリード化合物になることを見出した。5-アミノレブリン酸(以下ALA)は従来の光線力学的治療(PDT)で用いられるポルフィリン関連化合物とは異なり、がん細胞内でヘム生合成系酵素群によりプロトポルフィリン(PpIX)に代謝されて光感受性物質として活性化され、殺細胞効果を発揮する。最近、申請者らはALAとの同時処理により細胞内PpIX量を増加させてPDT効果を増強する低分子化合物TX-816を見出した。本研究では、TX-816をリード化合物とし、多様ながん腫の診断や治療に広く応用可能なALA-PDT効果増強剤の新薬シーズを開発することを目的とする。誘導体展開のための基礎研究として、TX-816の分解産物で、効果増強の活性本体であるDCSAの類縁化合物として、ジクロロベンズアルデヒド、クロロサリチルアルデヒドなどのベンズアルデヒド類や、ジクロロサリチル酸、クロロヒドロキシベンズアミドなど、アルデヒド基がカルボキシル基やアミド基に置換された化合物を用いて効果増強における構造活性相関を検討したところ、アルデヒド基を有するものに増強作用が認められた。一方、アルデヒド基がカルボキシル基、アミド基に置換されたでは活性がないことからアルデヒド基がALA-PDTの効果増強発現に重要であることが明らかになってきた。これらの知見を基に、今年度はベンジルオキシベンズアルデヒドやメトキシベンズアルデヒド、分解によりベンズアルデヒドを生成するシッフ塩基など、7つの化合物のALA-PDT効果増強作用を検討した。その結果、TX-816やDCSAに匹敵する増強作用を有するシッフ塩基(HMB)を新たに見出すことができた。このHMBはDCSAと同様にMKN-45のALA-PDT獲得耐性株のPDT感受性を回復させることも確認できた。興味深いことにHMBはTX-816よりも安定性が高いと考えられ、より有用なリード化合物となることが期待される。申請者らはALAとの同時処理により細胞内PpIX量を増加させてPDT効果を増強する低分子化合物TX-816を見出した。本年度はTX-816の炭素-窒素二重結合を還元した還元的アミノ化誘導体を合成し、加水分解を受けない誘導体には増強活性がないことを確認した。また、平成26年度ではTX-816の効果増強の活性本体であるDCSAの類縁化合物を用いて構造活性相関を検討した結果、TX-816やDCSAに匹敵する増強作用を有するメトキシベンズアルデヒドとブチルアニリンが結合したシッフ塩基(HMB)を見出した。そこで本年度ではこのHMBの構造をヒントにTX-816のクロロニトロベンゼン部分をブチルベンゼンに置換した誘導体、さらにアルキル鎖長を変えた誘導体を合成し効果増強活性を評価した。その結果、ペンチル基およびヘキシル基を導入した誘導体がより強いALA-PDT効果増強作用を示すことが明らかになった。疎水性置換基を導入することで膜透過性を高めた誘導体の分子設計が可能であることが示された。本年度は平成26年度に新たに見出された化合物を基に分子設計したTX-816の誘導体の活性評価を中心に研究を展開し、活性の向上につながる有用な知見が得られた。今年度は平成26年度に見出したHMBのブチル基(C=4)に変わり、長さが違うアルキル基(C=2,C=3,C=5,C=6)を導入した誘導体を新たに合成し、ALA-PDT増強作用や細胞内PpIX蓄積量、溶液中での安定性についてTX-816およびその4-アルキルアニリン誘導体(C=2からC=6)との比較検討を行った。その結果、PDT増強作用については新たに合成したHMB誘導体でもペンチル基およびヘキシル基を導入した誘導体がより強い増強作用を示し、それらの効果はTX-816の誘導体にほぼ匹敵するものであった。

また、細胞内PpIX蓄積量においても同様の結果が得られた。一方、溶液中での安定性を解析した結果、HMB誘導体よりもTX-816の誘導体の方がより安定であることが明らかになった。以上の結果から、TX-816の4-アルキルアニリン導入型誘導体はがん細胞内で活性化される有用なリード化合物となることが明らかになり、プロドラッグ型ALA-PDT効果増強剤としてさらなる発展が期待される。5-アミノレブリン酸(ALA)は従来の光線力学的治療で用いられてきたポルフィリン関連化合物とは異なり、がん細胞内でプロトポルフィリンIXに変換され、光感受性物質として活性化し、殺細胞効果を発揮する。本研究ではALAとの同時処理により細胞内PpIX量を増加させてPDT効果を増強する低分子化合物TX-816の誘導体開発を実施し、TX-816のアルキルベンゼン型誘導体が有用なリード化合物になることを見出した。本年度の研究では、TX-816に匹敵する効果増強作用を有する新たなシッフ化合物を見出すことができた。この化合物はTX-816よりも安定に細胞内に取り込まれることが期待され、有望なリード化合物となる可能性がある。また、TX-816のシッフ塩基の窒素原子を炭素原子に変えて切断しない化合物としては、スチルベン誘導体であるレスベラトロールの効果増強作用の評価を行い活性がないことを確認した。スチルベン誘導体の効果増強作用に関しては今後さらに検討する予定である。平成28年度もアルキル基導入型の誘導体の分子設計および活性評価をさらに進展させるとともに、in vivoにおけるALA-PDT効果増強作用の検討を行う。分子腫瘍学本年度の研究で見出したシッフ塩基、HMBの溶液中での安定性および細胞内PpIXの蓄積に対する影響を詳細に検討するとともに、誘導体の分子設計および活性評価を実施する。
ナチズム期におけるハイデルベルク大学との学術交流の実態研究

本研究では、これまで全く注目されてこなかった、ドイツ・ハイデルベルク大学との学術交流の実態と性格について、主にナチズム期に焦点を当てて解明する。それに際しては、まずは主として現地の大学公文書館にほぼ未認知の状態で保存される当時日本人留学生たちの資料を網羅的に収集・調査することで、学術交流の規模と傾向を実証的に解明する。また、留学生の思想体験とその理論展開を、彼らの著作や日記等を用いて分析することにより、学術交流の日本への実態的影響を思想史的にも解明する。これにより、従来知られていなかった戦時期日本の学知・思想形成とその変貌過程ならびに性格の新たな側面を国際的視野の中で精密に明らかにする。
否定神学化する哲学―マリオン、レヴィナス、デリダの宗教哲学

20世紀末のフランス哲学において、神概念はなおも重要な位置を占めており、これはとくに「現れないものの現象学」と呼ばれる思想家たち、J-L・マリオン、E・レヴィナス、J・デリダらに顕著であるが、彼らの神の言説の形式には否定神学との類似性が認められる。まず、これらの点がもっとも顕著な思想であるマリオンの宗教哲学の研究結果を、学術誌『哲學研究』に論文として公表した。また神や差異や異他性といったものの人間の概念的思考に対する絶対的超出を主張することの発端には、現象学における「現れないもの」への注目が絡んでいる。これには、レヴィナスの現象学受容と批判が参考になるため、彼の初期の現象学研究における現象学への評価受容点と限界指摘点とを明らかにし、論文として学会誌『現象学年報』に公表した。他方で、まだ公表するには至らなかったが、三者の微妙な相違も、「否定神学的」ということをめぐって明らかになるように思われる。マリオンでは神の不在という否定性は、神の慈愛から人間に与えられた自由であり人間の自己判断の奨励として意味付けられている。レヴィナスでも神の不在という否定性は、倫理的責任の喚起という人間同志の連帯性ということへとつなげて意味付けられている。デリダでは直接に神について語られることは少なく、脱構築による基準不在という否定性をいかに意味付けるかという問題になるが、既成の正しさ(droit適法性)には汲み尽くされない理念的な正しさ(justice正義)を希求させるべく、基準の果てなき再検討可能性流動性として一時的な基準不在という否定性を意味付けられている。三者のうちでもっとも否定「神学的」なマリオンと「否定」神学的なデリダとの間に論争があったのもこれゆえのものと考えられる。(デリダの論文「Comment ne pas parler」(1986)マリオンの論文「Au nom ou comment le taire」(1997))。この件でデリダの思想に関連して、不足する資料があり研究の進捗に支障をきたしていたため、海外旅費を用いて、フランスにて資料の入手を行なった。1.20世紀末のフランス哲学において、神観念はなお重要な位置を占めており、これはとくに「現れないものの現象学」と呼ばれる思想家たち、ジャン-リュック・マリオン、エマニュエル・レヴィナス、ジャック・デリダに顕著であるが、彼らの神についての言説の形式には否定神学との類似性が認められる。まずこれらの点が最も顕著であるのはジャン-リュック・マリオンの思想であるため、彼の哲学における偶像崇拝批判論を中心に各テクストを検討分折を行なった成果を、裏面記載のように発表・公表に向けての研究活動を行なった(このために国内旅費を活用した)。マリオンの思想から明らかになったことは、哲学の否定神学化の要因には、神や差異や異他性の概念的思考に対する絶対的超出を強調するということがあり、その帰結として否定神学的な言説様式への接近(修辞化)と神の不在というニヒリズムの危険に由来する倫理への指向とが認められるということである。これを本研究では現代哲学の修辞化と倫理化と名称化し、レヴィナス、デリダにも共通に見られることを指摘した。2.また神や差異や異他性といったものの人間の概念的思考に対する絶対的超出を主張することの発端には、現象学における「現れないもの」への注目が契機となっており、こうした点を明らかにするためにエマニュエル・レヴィナスの初期現象学研究と主著形成と関連の分祈検討を行ない、裏面記載のように発表・公表に向けての活動を行なった。(デリダの論文「Comment ne pas parler」(1986)

マリオンの論文「Au nom ou comment le taire」(1997))。この件でデリダの思想に関連して、不足する資料があり研究の進捗に支障をきたしていたため、海外旅費を用いて、フランスにて資料の入手を行なった。
セントロメアタンパク質ZW10の細胞周期制御機構およびがん細胞における変異の解析

染色体が安定に次世代細胞へと受け継がれていくことは、生物にとって最も基本的な性質である。染色体分配機構に狂いが生じると、染色体の異数化、がん化など生物に対して重大な悪影響が生じる。染色体の不安定性に関する基礎知見はがんの生物学的特性を理解する上で重要である。我々はがん化と染色体不安定性の関係を理解するために、新規セントロメアタンパク質ZW10の機能解析を行っている。ZW10はショウジョウバエで染色体不安定性を引き起こす変異体の原因遺伝子として単離され、M期にセントロメアに局在することが知られている。また、変異体の姉妹染色分体は微小管の重合阻害剤であるコルセミドの処理により分離してしまうことから、チェックポイントタンパク質の可能性も示唆されている。しかしながら、ショウジョウバエの変異体は蛹で致死となるため、詳細な細胞遺伝学的な研究は遅れている。本年度の研究において、テトラサイクリン(TET)の遺伝子発現制御システムを応用してZW10の条件的ノックアウトDT40細胞株を作成した。作成した条件的ノックアウト株は3アリルから成るすべての野生型のZW10遺伝子座を薬剤耐性遺伝子が置換され、TETで発現が制御されるプロモーターの下流につないだZW10cDNA遺伝子のみを保持している。従って、TETの添加によりZW10の発現を条件的にコントロールできる。本株にTETを加えてZW10の発現を抑え、なおかつ微小管の重合阻害剤であるコルセミドを添加すると細胞周期が進行した。この結果はZW10が紡錘体のチェックポイントタンパク質であることを強く示唆している。現在、ノックアウト株における染色体の不安定性とZW10とMadやBubファミリータンパク質との関係について解析している。