hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
課題解決型説明カリキュラムと評価法のユニバーサルデザイン化

本研究の目的を達成するために,次の二つの下位目標を設定した。目標I:課題解決型説明カリキュラムで育成される資質・能力の評価法を作成する。目標II:開発されたカリキュラムと評価法をユニバーサルデザイン化する。このうち,目標II「開発されたカリキュラムと評価法をユニバーサルデザイン化する」に関して平成30年度の研究実施計画を概ね達成できているため。次世代に持続・発展可能な社会を形成するために,資質・能力としての課題解決力の育成を意図するカリキュラム開発がOECD等で国際的に進展しており,育成された資質・能力を捉える評価法の開発が求められている。我が国でも,課題探究力を育むための優れたカリキュラム/指導と評価の開発が推進されており,これらを,できるだけ多くの国々で適用可能かつ資質・能力の育成に対し実効性の高いものとしてデザインすることが教育界での国際貢献となる。そこで,本研究では,中学校数学科の課題解決型説明カリキュラムで育成される資質・能力の評価法を開発し,カリキュラムと評価法をユニバーサルデザイン化する。本研究の目的を達成するために,次の二つの下位目標を設定する。このうち,本年度は,目標I「課題解決型説明カリキュラムで育成される資質・能力の評価法を作成する」に関して,前年度に作成した,課題探究型説明カリキュラムで育成される資質・能力の評価法の作成原理に基づいて,特に,教育学で育成・評価が重要な学術的課題とされている非認知的スキルに焦点をあて,中学校数学科の内容・活動の特性に応じた評価法を試作し,中学校の教員に対し実施し,その結果の統計的な分析に基づいて質問項目の選定・追加・改善等を実施した。目標I課題解決型説明カリキュラムで育成される資質・能力の評価法を作成する。目標II開発されたカリキュラムと評価法をユニバーサルデザイン化する。このうち,目標Iに関して平成29年度の研究実施計画を概ね達成できているため。このうち,本年度は,目標Iに関して,前年度に,課題解決型説明カリキュラムで育成される資質・能力の評価法の作成原理を定めたことを受けて,この原理に基づいて中学校数学科各4領域の特性に応じて評価法を作成する。
痛みなどの症状をオノマトペで表す人の特徴を利用した問診支援システムの開発

人は,微妙な心身の状態を,「頭がズキズキ痛い」といったオノマトペ(擬音語や擬態語の総称)を使って表現することが多い.本研究では,医療従事者へのアンケートをもとに35尺度を評価尺度として選定し,オノマトペ表現を構成する各音が評価尺度に与える影響を定量化し,オノマトペによって表される心身の状態を形態と音韻の両面から定量的に推定するシステム開発した.また,評価尺度を多言語化することで,海外の病院で日本人が自分の症状を日本語のオノマトペで入力すると,症状が評価尺度ごとに定量化して示され,外国語では伝えにくい微妙な症状を,外国人医師などに伝えられるシステムを開発した.本研究の目的は,日本人が痛みなどの症状を「ずきずき」「がんがん」といったオノマトペ(擬音語擬態語の総称)で表すという特徴を利用した問診支援システムの開発である.交付申請時に平成24年度までに実施予定だった以下の全てを順調に実施している.平成23年度中に実施したこと:文献調査により医療現場で有効な感性評価尺度候補を選定した.次に,1により収集した感性評価尺度候補のうち,実際に医療現場で有効なものを選定するため,医師や看護師などの医療従事者にアンケート調査を行った.調査結果を解析し,問診・診断支援ツールに採用する感性評価尺度を決定した.その後.被験者に,病気の様々な症状を表すために用いられるオノマトペを提示し,各オノマトペが表す症状を,選定された感性評価尺度ごとに評価してもらう被験者実験を行った.各オノマトペ表現を構成する各音と評価が新しく選定された感性評価尺度に与える影響を定量化し,オノマトペ全体が表す情報を予測評価できるようにした.平成24年度中に実施したこと:患者が痛みなどの症状を表すために用いたオノマトペ表現のもつ情報を,選定した感性評価尺度で定量化し,日本の医療現場での問診支援を行えるシステムを開発した.また,感性評価尺度を多言語化し、日本人が海外の病院を受診した際,日本人が自分の症状を日本語のオノマトペで入力すると,症状が評価尺度ごとに定量化して示され,「どのような痛みか」といった外国語では伝えにくい微妙な症状を,外国人医師などに伝えられるシステムを開発した.本研究課題の目的は,患者が痛みなどの症状を表すために用いた「ズキズキ」「キリキリ」といったオノマトペ(擬音語や擬態語の総称)が表す情報を,医療用に有効な評価尺度で定量化し,国内の医療現場での問診支援を行えるシステムを開発することである.さらに,海外の病院で日本人が自分の症状を日本語のオノマトペで入力すると,症状が評価尺度ごとに定量化して示され,「どのような痛みか」といった外国語では伝えにくい微妙な症状を,外国人医師などに伝えられるシステムを開発する.2324年度の研究では,国内外の問診を支援するシステムのプロトタイプを作成した.25年度の研究では,プロトタイプシステムにいて,医療現場で,医師・看護師を対象としたアンケートに基づく評価尺度の再選定,インターフェースの再設計などを含めたシステムの改良をおこない,より高精度に患者が用いたオノマトペ表現の特徴を定量的に分析し,その情報を問診に効果的に利用するためのシステムを開発を行った.患者が言語によって表す痛みを可視化することで,問診の円滑化が可能になった.さらに,オノマトペを構成する各音韻に基づいた分析をおこなうことで,新奇性のある表現,個人差から生じる微妙に異なった表現など全てに対応可能なシステムの開発に成功した.人は,微妙な心身の状態を,「頭がズキズキ痛い」といったオノマトペ(擬音語や擬態語の総称)を使って表現することが多い.本研究では,医療従事者へのアンケートをもとに35尺度を評価尺度として選定し,オノマトペ表現を構成する各音が評価尺度に与える影響を定量化し,オノマトペによって表される心身の状態を形態と音韻の両面から定量的に推定するシステム開発した.また,評価尺度を多言語化することで,海外の病院で日本人が自分の症状を日本語のオノマトペで入力すると,症状が評価尺度ごとに定量化して示され,外国語では伝えにくい微妙な症状を,外国人医師などに伝えられるシステムを開発した.本研究の目的は,国内外で患者が痛みなどの症状を表すために用いたオノマトペの情報を,医療現場で有効な評価尺度で定量化し,問診支援を行えるシステムを開発することである.平成23年度は,以下の手順により,国内の医療現場での問診支援を行うためのシステムのプロトタイプを作成した.1.医療現場で有効な感性評価尺度を選定した.認知科学・感性情報学・医学関係の文献調査により,問診支援ツールに有効な感性評価尺度候補を収集した.先行研究17文献より評価尺度候補が67個選定された.2.医療機関にアンケートを送付し,68個の評価尺度候補の中から,医療従事者に医療現場で重要な評価尺度を回答してもらった.最終的に医師・看護師計14名の回答が得られ,それを参考に35尺度を評価尺度として用いることとした.3.音韻特性と医療用尺度の印象評価値の関係についてのデータを採取するためのアンケート実験を行った.具体的には,痛みや症状を表すオノマトペと評価尺度を被験者に提示し,それぞれのオノマトペについて,評価尺度ごとに7段階で評価してもらった.

なお,被験者数は120名で,20名×6グループに振り分け, 1個のオノマトペに対して20人分のデータが取れる計算で行った.4.各オノマトペ表現を構成する各音と評価が新しく選定された感性評価尺度に与える影響を定量化し,オノマトペ全体が表す情報を予測評価できるようにした.高い精度で予測できることが確認された.このアルゴリズムにより,形態と音韻の両面から症状を定量的に推定し出力するシステムのプロトタイプを作成した.当初の研究計画では,システムの開発は平成24年度から実施する予定であったが、すでに平成23年度にシステムのプロトタイプの作成を行った.その点では当初の計画以上に進展していると言える.しかし,研究成果の発表には至っておらず,その点を差し引いて自己評価し,「おおむね順調に進展している」とした.研究最終年度である平成25年度は,以下のことを行う.平成24年度までに作成した問診支援システムのアルゴリズムを精緻化し,システムのインタフェース画面もより見やすいものに改良する.その後,研究室内でシステムを改良し,日本国内用問診・診断支援システムを,実際に医師に使用してもらい,問題点や要望などのフィードバックを受けて,システムの改善を行う.また,平成24年度に作成した海外用問診支援システムで出力される感性評価結果を,実際に外国人医師に提示し,どのような症状か理解可能かどうかなど確認する.必要に応じて,システムの改善などを行う.フィードバックを受けて,システムの改善を行う.最終的に,タッチパネル上に実装するなど実際の使用場面を想定したものにする.さらに,症状を可視化することによる,当初想定した以外の効果について検討を行い,今後の応用の可能性を探る.研究成果の公表を積極的に行いたい.また,医療現場での有効性を確認するための調査を行う.並行して,国外での問診を支援するツールの開発も進める.今年度使用可能である約327万円の使用計画は以下のとおりである.1.医療現場でのシステムのヒアリングなど調査費:100万円2.システムを改善するための実験謝金など:20万円3.タッチパネルなどへの実装費:200万円4.システムの今後の応用についての資料調査費:7万円平成24年度は、平成23年度に当初の研究計画より早めに実装することができたシステム(患者が痛みなどの症状を表すために用いたオノマトペ表現のもつ情報を,選定した感性評価尺度で定量化し,日本の医療現場での問診支援を行えるシステム)の課題を確認し、その解決に努める。同時に、論文発表を目指す.さらに、感性評価尺度を英語および可能であればできるだけ多くの言語に多言語化し、日本人が海外の病院を受診した際,日本人が自分の症状を日本語のオノマトペで入力すると,症状が評価尺度ごとに定量化して示され,「どのような痛みか」といった外国語では伝えにくい微妙な症状を,外国人医師などに伝えられるシステムの開発も行う.
第1次大戦前におけるイギリス植民地「開発」政策の研究

本研究は,第一次大戦に先立つ時期のイギリス植民地政策を検討し,現代の低開発国援助政策の歴史的起源を解明しようとするものである.1895年,チェンバレンは植民地相就任とともに「未開発所領」開発政策を開始した.このために彼が推進した立法が「植民地借款法」(1899)と「植民地証券法」(1900)である.即ち,彼は国家予算からの補助金とロンドン・シティの資金を植民地に誘導することにより鉄道,道路,港湾設備などのインフラストラクチュアを整備し,また商業・金融機関の植民地進出を促すことにより,「未開発領」の開発と経済的自立を実現しようとした.但し,開発は鉱山,プランテーション農業などの第一次産品生産の発展を中心とするものであり,「工業化」ではない.こうして大戦前の時期にイギリス植民地は「一次産品輸出経済」に再編され,当時の世界経済(「多角的貿易構造」)において「周辺」と位置づけられることになる.しかし,チェンバレン政策は必ずしも成功と評価し得ない.第一に,正統的経済政策(特に,緊縮=均衡財政)に固執する大蔵省は,植民地が本国財政への依存を強め,また,シティ資金の借入れが債務不履をひきおこすことを懸念し,チェンバレンの開発政策に反対した.第二に,植民地省官僚自身が植民地の開発が現地社会の変動をひきおこし,政治的・社会的混乱を導くとの理由から開発政策策に消極的姿勢を示した.こうした状況を大きく変えたのは,第一次大戦下におけるイギリス植民地の位置と役割の変化である.本研究は,第一次大戦に先立つ時期のイギリス植民地政策を検討し,現代の低開発国援助政策の歴史的起源を解明しようとするものである.1895年,チェンバレンは植民地相就任とともに「未開発所領」開発政策を開始した.このために彼が推進した立法が「植民地借款法」(1899)と「植民地証券法」(1900)である.即ち,彼は国家予算からの補助金とロンドン・シティの資金を植民地に誘導することにより鉄道,道路,港湾設備などのインフラストラクチュアを整備し,また商業・金融機関の植民地進出を促すことにより,「未開発領」の開発と経済的自立を実現しようとした.但し,開発は鉱山,プランテーション農業などの第一次産品生産の発展を中心とするものであり,「工業化」ではない.こうして大戦前の時期にイギリス植民地は「一次産品輸出経済」に再編され,当時の世界経済(「多角的貿易構造」)において「周辺」と位置づけられることになる.しかし,チェンバレン政策は必ずしも成功と評価し得ない.第一に,正統的経済政策(特に,緊縮=均衡財政)に固執する大蔵省は,植民地が本国財政への依存を強め,また,シティ資金の借入れが債務不履をひきおこすことを懸念し,チェンバレンの開発政策に反対した.第二に,植民地省官僚自身が植民地の開発が現地社会の変動をひきおこし,政治的・社会的混乱を導くとの理由から開発政策策に消極的姿勢を示した.こうした状況を大きく変えたのは,第一次大戦下におけるイギリス植民地の位置と役割の変化である.
自家脂肪由来幹細胞による放射線潰瘍の治療と予防および再照射への試み

放射線皮膚障害の動物モデルであるラット下肢虚血肢およびマウス下肢リンパ浮腫モデルに、脂肪由来幹細胞を移植すると、それぞれ虚血および浮腫の改善を認めるが、脂肪由来幹細胞単独投与でなく、血行が豊富な皮弁あるいはリンパ節移植を併用すると、さらなる改善効果を認めた。放射線皮膚障害部位への脂肪由来幹細胞の単独投与でも効果があるが、同時に血行が豊富な組織移植を行うと、より高い治療効果が期待され、重度の局所放射線障害への治療に応用できると考える。SDラットの脂肪組織より間葉系幹細胞を分離し、培養増殖を行った。増殖した細胞の一部を脂肪細胞へ分化誘導し、特殊染色にて、脂肪細胞への分化を確認した。同様にEGFPラットからの脂肪由来幹細胞の抽出および増殖も行った。次に、放射線障害動物モデル作成を試みた。SDラットの背部に30Gyから50Gy放射線を照射したが、当初、早期に死亡したり、潰瘍の形成が照射線量が同じでもばらつきがあったので、麻酔方法の変更、照射時の皮膚の固定方法の工夫などを行い、今年度の後半には、安定した放射線障害動物モデルが作成できるようになってきた。本研究は脂肪由来幹細胞投与による放射線照射による皮膚軟部組織損傷の治癒過程で幹細胞がどのような役割を果たしているか解明することを試みたものである。我々はラットの下肢に放射線を照射してリンパ浮腫モデルを作成して、同モデルに脂肪由来幹細胞を投与してリンパ管の再生およびリンパ浮腫の改善を確認している。さらなるリンパ浮腫の改善を目指して我々は下肢リンパ浮腫モデルに血行があるリンパ節を移植して脂肪由来幹細胞を投与したところ著しいリンパ浮腫の改善と、再生したリンパ管と移植したリンパ節の吻合も確認した。このことは放射線照射による皮膚軟部組織損傷の治療は脂肪由来幹細胞の単独投与だけでなく血行がある組織移植の併用がさらに有効であることを示唆している。また、我々はラットの下肢虚血肢のモデルに放射線を照射すると下肢壊死となるモデル作成していた。このモデルに脂肪由来幹細胞を投与すると下肢が救肢されるが、さらに放射線を照射した下肢に血行がある皮弁を付加すると、脂肪由来幹細胞だけ投与した群や皮弁の付加だけを行った群に比べて、下肢の血流の増加、新生血管の増加および照射した下肢の足底に作成した皮膚欠損創の治癒期間の短縮を認めた。このことは、放射線照射による皮膚軟部組織損傷の治療には脂肪由来幹細胞の投与は十分に治療効果は望めるが、現在行われている血行が豊富な皮弁や筋弁移植を併用することで、それぞれ単独で使用するより、さらなる治療効果が期待できることを示唆している。この虚血+放射線照射モデルにラベルした脂肪由来幹細胞単独投与群と皮弁付加併用群を比較すると幹細胞単独投与群の方が明らかに多く投与した幹細胞が新生血管に認めた。放射線照射した組織に脂肪由来幹細胞単独投与と血行のある組織移植を併用したものでは幹細胞のふるまいが違い、周囲の環境により緻密な制御されていることが示唆され、さらなる検討が必要である。脂肪由来幹細胞の抽出、増殖および分化能の確認は出来ている。放射線障害動物のモデル(ラット)は当初ばらつきがあったが、今年度後半には概ね安定したモデルを作成できるようになってきた。創傷治癒学放射線障害ラットを作成し、すでに抽出および増殖している脂肪由来幹細胞を投与して効果を検証する。その中の数匹のラットは再度放射線照射を行い、幹細胞投与により放射線の再照射が可能か評価を行う。平行して、EGFPラットより抽出、増殖した脂肪由来幹細胞を同様に放射線障害ラットに投与して、脂肪由来幹細胞の動態を検証する。当初、放射線障害動物のモデル作成が困難であったために、予定の動物数が計画より少なかったことにより、次年度使用額が生じた。今年度予定だった動物を次年度に購入し実験し、解析する予定である。
高精度マイクロ壁面センサならびに先端的評価システムの開発

進展が望まれるマイクロ流体分野における高性能壁面マイクロセン、サならびにマイクロセンサの静・動特性を正確に評価可能なマイクロセンシング風洞により構成される先端的評価システムを開発することが本研究プロジェクトの目的である。まず、マイクロデバイス周りの流れに対し、低流速の空気流の設定が可能なマイクロセンシング風洞において平成13年度にマイクロ画像処理流速計(PIV)システムを構築し、マイクロデバイス基盤周りの流れに重点を置き、特に、デバイスやセンサの電圧出力端子に相当するボンディングワイヤとピンなどの影響を含めた流れ場の計測を実施し、センサならびに基盤周りの微細流動構造を明らかにすることが可能となった。その際、マイクロPIVシステムにおいてヤグレーザ光学系の微小移動を迅速、かつ正確に実施するため、マイクロコンピュータによる制御を可能とする精密ステージを含む高精度トラバースシステムを設計、製作し、計測の自動システムを構築している。次に、従来のマイクロ壁面センサのヒーター部を取り除き、センサ部のサイズを小型化し、温度センサの自己発熱による熱対流の原理を利用したセンサ形状を新たに提案した。基盤上の温度センサの配置、薄膜に設けられたスリットの配置など、感度ならびに応答性を向上させる要因を詳しく検討し、平成13年度までに完成した熱伝導問題を含む二次元熱流動場の数値計算コードを用いて、数値解析を実施し、センサ特性を満足するセンサ配置の最適化がなされたので、新型センサの設計・試作に取り組んだ。以上により、マイクロ壁面センサの熱流動に関する設計法、ならびにセンサの精度に影響を及ぼす基盤を含めた自動計測システムを完成させ、設計から精度評価に至るまでの一貫した先端的評価システムを構築し、このようなシステムを用いることにより、高性能マイクロ壁面センサの開発期間と開発費用の低減化を達成した。マイクロセンサの静特性を検討する場合、センサと流れ場は二次元定常問題として、簡単化された解析により求め、三次元効果は検定で補正する方法が従来用いられている。そのためセンサ周りの三次元流動機構、ならびに熱伝導と対流熱伝達を考慮した検討は非常に少ない。その理由は、センサ周りの熱流動場を直接計測するセンサが存在しないためである。このような問題に解決の糸口を見出すことを目的として、平成12年度、マイクロセンサが設置されたマイクロセンシング風洞内にノズルを装着し、風洞の光学アクセスの精度を向上するための高品位ガラスを取り付け、風洞を整備した。次に、ダブルパルスヤグレザーを光源とするPIV(粒子画像流速計)システムにおいて、長焦点ズームレンズ(購入設備備品)をデジタルカメラに装着し、マイクロPIVシステムを構築した。そして、直径3mmの円柱ならびに1mmx3mmの角柱周りの二次元流れ場における拡大画像を撮影し、データレコーダ(購入設備備品)に記録し、濃度相関法により速度ベクトルを求め、マイクロPIVシステムの精度を検証した。さらに、低レイノルズ数領域におけるマイクロセンサの静特性を検討するため、壁面マイクロセンサの検定実験を実施した。その際、研究分担者の上運天ならびに長田は、センサの増幅回路の提案と高流速ならびに低流速用センサを製作・提供し、マイクロデバイスのヒーターならびにセンサの最適位置の検討を行った。研究分担者の山本は、2次元熱伝導問題を含む熱流動場の数値解析スキームを開発し、さらに三次元熱流動場の数値計算手法に発展させる準備をした。併せて、熱源周りの境界条件に検討を加え、対流熱伝達二次元問題に関する数値計算手法を実験結果により検証し、計算手法の改善に努め、平成13年度に本格化する数値計算法の基本システムを構築した。既設のマイクロセンシング風洞を整備し、平成12年度に構築したマイクロPIV(粒子画像流束計)システムを1mm角のマイクロセンサ基盤周りの流れに適用した。正対配置とひし形配置にした場合の基部に生じる渦を計測し、詳細な渦内の速度ベクトルを得た。

特に、基盤の前縁、後縁剥離に着目して、センサ周りの微細渦構造を明らかにし、流体工学上、基盤配置の重要を確認した。さらに、上記風洞において、マイクロセンサの電圧出力端子に相当するボンディングピン位置の影響を実験的に検証するため、マイクロセンサ出力に及ぼす流れの角度特性を調べ、ピン位置下流に対応する角度でセンサ出力が局所的に低下し、ピン位置の角度特性を明らかにした。併せて、上記風洞に音響スピーカによる周期的壁面ジェットを与え、下流でのセンサ応答試験を実施した。5kHzまで応答可能な熱線流速計とマイクロセンサの出力特性を比較し、1KHzまでは流れの周期的擾乱に十分応答することが判明した。次に、設備備品費で購入したスーパーパーソナルコンピュータを用いて、センサ基盤と薄膜の熱伝導問題を含むキャビティ形状の熱流動場を考え、ナビエストークス方程式の数値計算を実施した。特に、対流熱伝達2次元問題に関する数値計算手法を実験結果より検証し、計算手法の改善に努めた。即ち、代表長さがマイクロ化することに基づく流れの希薄効果を考慮するため、薄膜に設けられたスリットを通過する流れにスリップ条件を課し、キャビティ内部の熱流動を詳細に調べ、センサの応答性を向上させる要因を検討した。平成14年度に予定されている高応答壁面センサの試作に向けた準備として、以上の結果をもとにヒーター、センサなどの基盤上の最適配置を検討した。高応答壁面センサを開発するため、従来のマイクロセンサのヒーター部を取り除き、センサ部のサイズを小型化し、温度センサの自己発熱による熱対流の原理を利用したセンサ形状を新たに提案した。基盤上の温度センサの配置、薄膜に設けられたスリットの配置など、感度ならびに応答性を向上させる要因を詳しく検討し、平成13年度までに完成した数値計算コードを用いて、熱伝導問題を含む二次元熱流動場の数値解析を実施した。その結果、センサ特性を満足するセンサ配置の最適化がなされたので、新型センサの設計試作に取り組んだ。センサ周りの流れに対し、マイクロセンシング風洞において平成13年度に構築したマイクロPIVシステムを適用した。基盤周りの流れに重点を置き、特に、センサの電圧出力端子に相当するボンディングワイヤとピンの影響に着目し、センサならびに基盤周りの微細流動構造を明らかにした。その際、マイクロPIVシステムのヤグレーザ光学系の微小移動を迅速、かつ正確に実施するため、マイクロコンピュータによる制御を可能とする精密ステージを含む高精度トラバースシステムを設計、製作し、計測の自動システムを構築した。マイクロPIVシステムから得られた実験結果により数値計算手法を検証し、実験と計算結果の精度を向上させ、実験流体力学と数値流体力学の統合的解析システムの構築を試み、マイクロEFDとCFDのハイブリッド利用技術を確立した。マイクロ壁面センサの熱
「自決権」を通じたロシアの国家戦略：その法的基盤と言説

ソ連解体後のロシアは、周辺の旧ソ連諸国に集住するロシア語系住民の庇護および保護を「同胞支援」の名のもとで、国策の次元にまで高めてきた。とりわけソ連解体後、ウクライナ領であったクリミア州はロシア語系住民が多く居住し、1954年以前は当地がロシア領であったという事実を追い風に、当地の住民がロシアとの再統合を望んでいるという「自決権」の言説をもとに2014年にロシアへの編入に乗り出した。西側諸国からは「国際法違反」が指摘されるクリミア併合について、ロシア国内の言説は正反対で、むしろ国際法と民主的手続きに乗っ取ったものという認識のギャップが深刻であることに注意を向ける必要がある。本研究の目的は、近時ロシアが、クリミア等の近隣の旧ソ連諸国において生じている分離・独立問題に関与する際、いかなる国内法的、国際法的な根拠をとっているのかを総合的に分析し、法的側面からロシアの国家戦略を解明することである。本年度の研究実施計画は、クリミア問題をはじめとする分離・独立問題の背景を、ソ連時代にまでさかのぼって検証すると同時に、ソ連解体後のそれらの諸地域にロシアが関与する際に、いかなる形で「自決権」を標榜しているのかを分析することである。本年度の研究実施計画については、さしあたり2014年のロシアによるクリミア編入の経緯に分析に主眼が置かれ、いくつかの研究成果の公表を通じて、おおむね当初の目的を達することができた。すなわち、年度内に刊行したロシア法に関する著書ではクリミア問題の歴史的背景に関する解説のみならず、ロシアによるクリミア編入にいたるまでの直近のウクライナ政変の分析、そしてソ連解体後から現代にいたるまでのウクライナにおけるクリミアの法的地位の変動について旧ソ連法、ロシア法、ウクライナ法を通じて明らかにした。また研究総会での研究報告では、ロシアによる「自決権」のイデオロギーを通じた旧ソ連諸国の分離独立問題への関与の仕方を分析し、特に旧ソ連諸国における民族的少数者や「ロシア語住民」の保護の口実が「自決権」や国際人権法の援用と連動していることを明らかにした。さらにまた市民講座における講演において、以上の計画内容を平易に解説する機会を得た。おおむね順調に進展していると判断した理由は、平成27年度内に出版した著書において、同年度の研究実施計画の課題分析を平易に解説した章を盛り込むことができたこと(渋谷謙次郎『法を通してみたロシア国家』ウェッジ、2015年、第4章「ウクライナ政変をクリミア問題)、また同年6月の研究総会報告において、本研究課題のキーワードである「自決権」の視点からクリミア問題等におけるロシアの国家的関与についての研究報告をなしえたこと(渋谷謙次郎「クリミア問題と自決権のイデオロギー」、社会体制と法研究会総会、2015年6月5日、東京大学)、また市民講座において、以上の研究成果を一般向けに講演する機会があったことである(渋谷謙次郎「ロシア:クリミア問題をめぐって」、2015年11月10日、ひょうご講座「2010年代のグローバル政治・経済の混迷をめぐって」、公益財団法人ひょうご震災記念21世紀研究機構学術交流センター、神戸市中央区)。これらの研究成果の内容や、その公表・公開方法から、本研究課題の進捗状況については、おおむね順調に進展していると判断した。本研究の全体構想である、クリミア等の近隣の旧ソ連諸国内で生じている分離・独立問題に関与する際、いかなる国内法的・国際法的な根拠をとっているのかについての総合的に分析に関して、まず研究実施計画のうち、本年度は、計画の中間段階にあたる、ロシアがそれらの係争地に影響力を行使して独立国家として承認したり、クリミアのようにロシアへの編入を正当化したりする際の国内法的および国際法的な論拠の解明に比重を置いた分析を関連資料の収集を通じて行った。その結果、ロシアは、単にソ連自体由来の民族自決権の発想の延長上で、それらの係争地に影響力を行使しているのみならず、クリミア編入時のロシア側のスタンスおよび説明にみられたように、国際法で認められた人民の自決権や民族的少数者の人権などを根拠に、主として旧ソ連各地に散らばるロシア語系住民の庇護者的な役割を果たしており、またそのために、かねてから旧ソ連地域のロシア語系住民の支援に関するロシア国内法の整備を行ったり、ロシア議会が度重なる決議などをしていることがわかった。これらを通して、ロシア現体制(プーチン体制)の大きな変化がない限り、今後も旧ソ連諸国に対するロシア流の「人権外交」、「自決権外交」が繰り広げられることが予想できる。ただし、その際にもロシアは国内的にはチェチェンの自決権を武力で封じ込めてきたなど、自決権に関しては対外的、対内的にダブルスタンダードがみられることを考慮に入れる必要もある。研究実施計画のうち、ロシアが旧ソ連諸国(とりわけウクライナ、モルドヴァ、グルジアなど)の係争地に影響力を行使して、分離独立を掲げている地域を独立国家として承認したり、クリミアのようにロシアへの編入を正当化したりする際の国内法的および国際法的な論拠の解明に比重を置いた分析については、本年度を行った資料収集等ともとに、研究会で成果を報告をした。その成果を現在、論文集の原稿執筆において反映させており、また研究計画の第三段階にあたる、係争諸地域の「自決権」が地域的・経済的「自立」というよりも、ロシアのような大国の支配と影響力拡大に結びついていくメカニズムの解明に関する予備的な原稿を別途作成しているため、本研究課題の進捗状況について、おおむね順調に進展していると思案し得る。最終年度には、主として2014年のロシアによるクリミア編入に際しての、国際法的論拠および国内法的な手続きに関する分析を行った。

すなわち、クリミア編入は、当地の多数派を占めるロシア語系住民のウクライナからの独立とロシアへの再統合を希求する、国際法で認められた「人民の自決権」の正当な行使であり、その際、クリミアの州民投票を実施して圧倒的多数がロシアとの再統合を望んだという論拠である。またロシア国内法の手続きとしては、クリミアが共和国の資格でロシア連邦に加入するための、新連邦構成主体加入の手続法に乗っ取ったというものである。総じて、ソ連解体後のロシアは、周辺の旧ソ連諸国に集住するロシア語系住民の庇護および保護を「同胞支援」の名のもとで、国策の次元にまで高めてきた。とりわけソ連解体後、ウクライナ領であったクリミア州はロシア語系住民が多く居住し、1954年以前は当地がロシア領であったという事実を追い風に、当地の住民がロシアとの再統合を望んでいるという「自決権」の言説をもとに2014年にロシアへの編入に乗り出した。西側諸国からは「国際法違反」が指摘されるクリミア併合について、ロシア国内の言説は正反対で、むしろ国際法と民主的手続きに乗っ取ったものという認識のギャップが深刻であることに注意を向ける必要がある。このようにして、ロシアは、周辺の旧ソ連諸国に対する一定の影響力を維持する際、国家戦略の一部として「自決権」外交とも呼ぶべきものを採用し、今後も、同様な手段を取り続けるものと予想できる。ソ連解体後のロシアは、周辺の旧ソ連諸国に集住するロシア語系住民の庇護および保護を「同胞支援」の名のもとで、国策の次元にまで高めてきた。本年度の研究成果に立脚したうえで、今後は、旧ソ連諸国における分離・独立問題に対するロシアの国家的関与の基盤となるロシアの国内法の立法過程やその適用についての実証的かつ精緻な分析を、議会の議事録、専門誌を通じて行う。また、コソボのセルビアからの独立等、西側諸国が承認した「人民の自決権」に対するロシアの当時のスタンスの経緯が、ロシアの「自決権」外交にどのような影響を与えているのかについて、国際法および国際関係の観点から明らかにし、本研究課題の更なる深化をはかる。今後は、さらなる資料収集とその分析を通じて、2014年3月のロシアによるクリミア編入が、着々と準備されていたものではないにせよ、少なくとも、クリミアにおける住民投票→独立→ロシア連邦への加入という「手続」が、制度や法的言説としては周到に準備されていたものであることを検証する。またクリミア編入をめぐる国際法に対するっロシアのアプローチをみることで、ロシアの国家戦略における法的言説の特徴を明らかにする。
化学シフトイメージングによる心筋内高エネルギーリン酸代謝の定量的研究

1.目的chemical shift imaging(CSI)による心筋内高エネルギーリン酸定量について検討した.2.方法1.5T装置で,表面コイル(送信8インチ,受信5インチ径)を用い,一次元(sagittal方向のスライス選択パルスで左室部分を選択しcoronal方向に16の位相エンコード)および三次元(一方向にスライス選択,他の二方向に16の位相エンコード)のリンCSIを行った.3.一次元CSIの結果運動負荷タリウム-201心筋シンチグラフィーで左室前壁に再分布がある狭心症群(n=29),再分布のない梗塞群(n=12)および健常対照群(n=11)についてみると,左室前壁phosphocreatine含量は対照群12.14±4.25[SD]>狭心症群7.64±3.00>梗塞群3.94±2.21μmol/g湿重量で三群間に有意差(p<0.05)を認めた.ATP含量は対照群7.72±2.97,狭心症群6.35±3.17,梗塞群4.35±1.52で対照群と梗塞群の間に有意差(p<0.05)を認めた.4.三次元CSIの結果axial方向にスライス選択し他の二方向に位相エンコードする方法を既知濃度の無機リン酸溶液を満たしたファントムについて実施した.標準物質は表面コイルの中央におき,縦緩和による飽和因子を算出して信号強度を補正し,リン酸溶液の濃度を算出したところ実際の濃度に極めて近い値が得られた.coronal方向にスライス選択し他の二方向に位相エンコードする方法では標準物質を表面コイルの感度領域内に置くことが困難であった.いずれもヒトで行う場合1voxel内の心筋重量測定に困難を認めた.三次元CSIは信号の由来部位と各部位での化学シフトの違いを示すのに有用であった.5.結語心筋内リン化合物定量には,現段階では三次元CSIより一次元CSIの方が適していると考えられる.スライス選択を加えた一次元CSIで求めた心筋内ATP含量が虚血性心疾患における心筋viabilityの指標になる可能性がある.1.目的chemical shift imaging(CSI)による心筋内高エネルギーリン酸定量について検討した.2.方法1.5T装置で,表面コイル(送信8インチ,受信5インチ径)を用い,一次元(sagittal方向のスライス選択パルスで左室部分を選択しcoronal方向に16の位相エンコード)および三次元(一方向にスライス選択,他の二方向に16の位相エンコード)のリンCSIを行った.3.一次元CSIの結果運動負荷タリウム-201心筋シンチグラフィーで左室前壁に再分布がある狭心症群(n=29),再分布のない梗塞群(n=12)および健常対照群(n=11)についてみると,左室前壁phosphocreatine含量は対照群12.14±4.25[SD]>狭心症群7.64±3.00>梗塞群3.94±2.21μmol/g湿重量で三群間に有意差(p<0.05)を認めた.ATP含量は対照群7.72±2.97,狭心症群6.35±3.17,梗塞群4.35±1.52で対照群と梗塞群の間に有意差(p<0.05)を認めた.4.三次元CSIの結果axial方向にスライス選択し他の二方向に位相エンコードする方法を既知濃度の無機リン酸溶液を満たしたファントムについて実施した.標準物質は表面コイルの中央におき,縦緩和による飽和因子を算出して信号強度を補正し,リン酸溶液の濃度を算出したところ実際の濃度に極めて近い値が得られた.coronal方向にスライス選択し他の二方向に位相エンコードする方法では標準物質を表面コイルの感度領域内に置くことが困難であった.いずれもヒトで行う場合1voxel内の心筋重量測定に困難を認めた.三次元CSIは信号の由来部位と各部位での化学シフトの違いを示すのに有用であった.5.結語心筋内リン化合物定量には,現段階では三次元CSIより一次元CSIの方が適していると考えられる.スライス選択を加えた一次元CSIで求めた心筋内ATP含量が虚血性心疾患における心筋viabilityの指標になる可能性がある.1.目的運動負荷タリウム-201心筋シンチグラフィーで左室前壁に再分布を認める狭心症群(n=29),再分布を認めない梗塞群(n=12)および健常対照群(n=11)について,一次元chemical shift imaging(1D CSI)によるヒト心筋内高エネルギーリン酸定量を試み,この方法がそれらを鑑別できるかどうかについて検討した。2.方法装置はSIGNA1.5Tで,5.75M hexamethylphosphoric triamide(HMPT)0.5mlを表面コイル(送信8インチ,受信5インチ径)の中心に置き,sagittal方向のスライス選択パルスで左室部分(6-8cm)を選択して,FOV32cmでcoronal方向に16のphase ensoding(各ステップ32回加算平均)を行う領域選択加味P-311DCSIを実施した。励起パルス強度と検出感度は一定とし,心電図同期で収縮期に,パルス繰り返し時間は2xRRで信号を収集した。

HMPTと健常者心筋の縦緩和時間,パルス繰り返し時間およびファントム実験で求めたHMPT部分と心筋部分でのフリップ角から縦緩和による飽和因子を算出してピーク面積を補正し,ATP(βリン酸基)については心腔内血液からのシグナルの混入についての補正も行った。心筋容積はスピン・エコー像から測定し,比重を1.05として心筋重量を推定した。3.結果左室前壁phosphocreatine含量は対照群12.14±4.25[SD]>狭心症群7.64±3.00>梗塞群3.94±2.21μmoles/g湿重量で三群間に有意差(p<0.05)を認めた。ATP含量は対照群7.72±2.97,狭心症群6.35±3.17,梗塞群4.35±1.52で対照群と梗塞群の間に有意差(p<0.05)を認めた。4.結語以上より,p-31 1D-CSI法による心筋内高エネルギーリン酸含量の定量は可能で,左室前壁内ATP含量の定量により心筋viabilityの判定ができる可能性が示唆された。2.方法装置はSIGNA 1.5Tで,表面コイル(送信8インチ,受信5インチ径)を用い,傾斜磁場で一方向にスライス選択(スライス厚2.5cm)し,FOV40cmで,他の二方向にそれぞれ16の位相エンコードを行う三次元リンCSI(1 voxelは2.5x2.5x2.5立方cm)を次の2つの方法で試みた.(1)第1法:axial方向スライス選択,他の二方向に位相エンコード.外部標準物質の5.72M hexamethylphosphoric triamide(HMPT)はその2mlを表面コイルの中心に置いた.(2)第2法:coronal方向スライス選択,他の二方向に位相エンコード.この場合,HMPTは被検者の左側胸部にあたる部位に置いた.いずれも検査時間短縮のためreduced k-space samplingを行った.3.結果(1)第1法を,長さ32cm・幅25cm・高さ10cmの容器に147mMのリン酸溶液を満たしたファントムについて実施した.HMPTの縦緩和時間(T1)は11.5秒でその部位のフリップ角は145度,147mMリン酸溶液のT1は11.0秒で表面コイルから5cm(ヒトの左室前壁部位に相当)でのフリップ角は75度であった.それらより縦緩和による飽和因子を算出して信号強度を補正し,リン酸溶液の濃度を算出したところ139mMと実際の濃度に近く,この方法による定量可能性が示唆された.しかしこれをヒト心筋に応用したときの問題は,1 voxel内の心筋重量推定が大変困難なことであった.(2)第2法を上記と同じファントムおよび健常成人について行ったところ,いずれの場合もHMPTの良好な信号がとれず,この方法では標準物質を表面コイルの感度領域内に置くことが困難であった.(3)三次元CSIは信号の由来部位と各部位での化学シフトの違いを示すのに有用であった.4.結語心筋内リン化合物定量には,現段階では三次元CSIより一次元CSIの方が適していると考えられる.
宮崎神楽の研究

(1) 350ほどもある宮崎の神楽のうち、データベース化されたのはただ一つと言っても過言ではなかったこれまでの状況に対し、主要3系統5つのデータベースが提供できる準備が整った。(2)そのデータベースに付された字幕解説により、初心者でも神楽の舞の意味を容易に掴めるようになった。「研究実施計画」に則り、今年度は宮崎神楽の代表たる高千穗神楽と、そ孔と対極的な形態を示す、日南・潮嶽神楽のデータ採取と、これまで撮り貯めたデジタルビデオテープをパソコンに取り込み、DVDデータベース化するための基礎編集作業、及びその試作品の作成等を平行して行った。「研究の目的」に示したとおり、従来もその幾つかのビデオテープは既に世に出ているが、頭出しがしにくいため、例えばこの舞のこの部分が見たいといったことが容易にできず、データベースとしての利用価値も、教材として使用する価値も低いからである。本研究を開始する以前から、将来的にはそうしたものを作成することも視野に入れ、最初からデジタルビデオで撮影はしてきたが、やはり技術の進歩はすばらしく、直接ハードディスクにデジタル信号で撮影した方が、何倍も鮮明な画像・音声を得られた。また、これも「研究の目的」に書いたが、宮崎の神楽は一つが30番近くもあり、14,5時間を要するので、これまでのテープ方式ではどうしても交換のロスタイムが生まれたが、それもハードディスクだと一気に撮影できたため、格段に資料価値は上がったと言える。しかし、完壁を期すには取り直しの必要が多々生じ、かなり絞ってもまだファイルの容量が大きく、BDも視野に入れねばならない可能性が生じた。また、画像編集ソフトの進歩もすばらしく、最初に曲目一覧のDVDメニューを作り、解説テロップがついた必要な箇所へとそこからジャンプすることも可能であった。ただし、その編集作業に慣れるのに若干の時間を要したため、今年度は試用版しか作成できなかったが、来年度以降には、これまでにない革新的なデータベースを構築し、最終的には資料として提供することが可能となるという自信は得られた。昨年度に引き続き、撮影済みの高千穂神楽、日南・潮嶽神楽の編集を行い、それと並行して今年度は椎葉神楽の資料集め・撮影を行った。潮嶽神楽については、昨年、悪天候のため撮影できなかった部分(福種下ろしの神事)も補完した。これにて高千穂・潮嶽、両神楽の映像資料は完壁に近い形となり、雇用した学生の力により編集もおおよそ終了した。来年度その映像データに文字解説を加え、DVDまたはブルーレイ・ディスクに焼き付け、データベース化する準備はほぼ整ったと言える。当初の研究計画から明示しているように、類同のものはかつて紀伊國屋書店で販売されたことはあったが、三十近くある椎葉神楽のうちのたった一つに対してのものであったし、高千穂・日南と言った、宮崎を代表する他の神楽まで及んだものではなかった。また、現在は絶版となっているため手に入れることはできない。本資料も現時点では萌芽的なもので、宮崎の神楽の全てを網羅したものではないが、代表的なものを横断的に捉えることができるはずであり、研究する上では非常に貴重と言うことができよう。因みに椎葉神楽については、椎葉民俗芸能博物館に立体映像による簡単なデータベースが存在することが本年度の調査で分かったが、各神楽数秒程度のものであるし、解説もないので、その舞の意味等を熟知した専門家以外の役に立つとは言いがたい。今年度最後にホームページ作成ソフトも購入し、次年度は本研究の成果をホームページにもアップして、広く利用の便を図ることまで視野に入れて活動していきたい。研究計画に則り、今年度はこれまで集めたデータの編集を中心に行った。しかし、若干の計画の遅れが生じたため、椎葉神楽の中の尾前神楽の撮影も並行して行った。これにより椎葉神楽は、もとから持っていた栂尾、昨年度撮影した向山日当と合わせて、3つのデータが揃ったことになる。椎葉神楽は、現在では不定期にしか行われず、データ採集は先ず不可能な地域を合わせて全部で26であるから、総数としてはまだまだ少ないけれども、代表的なものは網羅できたと言える。昨年度も述べたように、これまで研究データとして発表されたものは、椎葉の場合は栂尾神楽しかなく、しかもそれは現在絶版で手に入らないのであるから、これだけでも本研究の意義は十分にあると思う。しかしながら、11でも述べるように、その成果を発表する準備が、残念ながら遅れていると言わざるを得ない。基礎となるデータの編集は、予算配分を当初の計画と組み替え、学生バイトを増やしたため、に何とか終了したが、それを提示するだけでは、専門家なら何とか理解できるが、広く一般の人がそれぞれの神楽の意味を読み取ることは不可能なものにしかなり得ない。それゆえ映像に解説文を載せることを当初から計画していたが、その部分が、主として研究者の多忙により、まだ完成していない。したがって今後の計画としては、その部分を一刻も早く完成したい。既にホームページ作成ソフトは購入済みであるので、来年度から予算がなくなっても、成果発表は十分に可能である。
臍帯血由来培養破骨細胞に及ぼすエストロゲンの直接作用について

本研究では,臍帯血単核細胞から効率的に破骨細胞を分化・誘導させる培養条件について検討すること,E2(Estradiol)が破骨細胞の分化・誘導に及ぼす影響について検討すること,および培養破骨細胞のTNFα産生能とエストロゲン受容体遺伝子(ER)多型との関連について検討することを目的とした.1)臍帯血単核細胞から効率的に破骨細胞を分化・誘導する培養条件の検討10%牛胎児血清(FBS),20%馬血清(HS),2%BSA添加培養液に,M-CSF, IL-4,活性型Vitamin D(VD),破骨細胞分化因子(ODF)を添加して臍帯血単核細胞を培養し,破骨細胞が分化・誘導される条件について検討した.形態学的手法による判定(多核で細胞質内の酒石酸抵抗性酸性phosphatase活性陽性細胞の出現頻度)では,FBS+M-CSF+VD, HS+M-CSF+IL-4,BSA+M-CSF+VD)の組み合わせで高率に破骨細胞が誘導された.生化学的手法による判定(calcitonin添加時のcAMP産生能)では,H S+M-CSF+VD, BSA+M-CSF+IL-4の組み合わせが好条件だった.骨吸収能による判定(BioCoat Osteologic slide上の吸収窩の面積比)では,HS+M-CSF+VDが好条件だった.2)E2が破骨細胞の分化・誘導に及ぼす影響についての検討血清中のE2の影響を排除するためBSA+M-CSF+IL-4培地を用い,cAMP産生を指標として破骨細胞への分化・誘導に対するE2添加の影響を調べた結果,明らかなcAMP産生の変化は認められなかった.3)培養破骨細胞のTNFα産生能とER多型との関連についての検討BSA+M-CSF+IL-4培地を用いE2+/-の条件下で破骨細胞を分化・誘導させた.LPS刺激後,E2(-)のTNFα産生に対するE2(+)の産生を比率で算出して臍帯血ゲノムDNAのER遺伝子多型との関連について検討した結果,その産生比はPP型:0.596±0.06,Pp型:1.06±0.06,pp型:1.44±0.12であり,培養破骨細胞のE2(+)時のTNFα産生能はER多型によって異なる可能性が示された.本研究では,臍帯血単核細胞から効率的に破骨細胞を分化・誘導させる培養条件について検討すること,E2(Estradiol)が破骨細胞の分化・誘導に及ぼす影響について検討すること,および培養破骨細胞のTNFα産生能とエストロゲン受容体遺伝子(ER)多型との関連について検討することを目的とした.1)臍帯血単核細胞から効率的に破骨細胞を分化・誘導する培養条件の検討10%牛胎児血清(FBS),20%馬血清(HS),2%BSA添加培養液に,M-CSF, IL-4,活性型Vitamin D(VD),破骨細胞分化因子(ODF)を添加して臍帯血単核細胞を培養し,破骨細胞が分化・誘導される条件について検討した.形態学的手法による判定(多核で細胞質内の酒石酸抵抗性酸性phosphatase活性陽性細胞の出現頻度)では,FBS+M-CSF+VD, HS+M-CSF+IL-4,BSA+M-CSF+VD)の組み合わせで高率に破骨細胞が誘導された.生化学的手法による判定(calcitonin添加時のcAMP産生能)では,H S+M-CSF+VD, BSA+M-CSF+IL-4の組み合わせが好条件だった.骨吸収能による判定(BioCoat Osteologic slide上の吸収窩の面積比)では,HS+M-CSF+VDが好条件だった.2)E2が破骨細胞の分化・誘導に及ぼす影響についての検討血清中のE2の影響を排除するためBSA+M-CSF+IL-4培地を用い,cAMP産生を指標として破骨細胞への分化・誘導に対するE2添加の影響を調べた結果,明らかなcAMP産生の変化は認められなかった.3)培養破骨細胞のTNFα産生能とER多型との関連についての検討BSA+M-CSF+IL-4培地を用いE2+/-の条件下で破骨細胞を分化・誘導させた.LPS刺激後,E2(-)のTNFα産生に対するE2(+)の産生を比率で算出して臍帯血ゲノムDNAのER遺伝子多型との関連について検討した結果,その産生比はPP型:0.596±0.06,Pp型:1.06±0.06,pp型:1.44±0.12であり,培養破骨細胞のE2(+)時のTNFα産生能はER多型によって異なる可能性が示された.平成12年度は,臍帯血幹細胞から効率的に破骨細胞を分化・誘導する培養条件の検討を行った.また,現在汎用されている骨吸収活性の測定法に替わる簡便な測定法の確立を試みた.1)臍帯血幹細胞から効率的に破骨細胞を分化・誘導する培養条件の検討

臍帯血より分離したリンパ球を,10%牛胎児血清,20%馬血清,2%BSA添加培養液に様々な生理活性物質(M-CSF,IL-4,活性型Vitamin D;VD,ODF;破骨細胞分化因子)を添加培養し,効率的に破骨細胞が分化・誘導される条件を検討した.形態学的手法による判定(多核で細胞質内の酒石酸抵抗性酸性phosphatase活性陽性細胞の出現頻度を調べる)で分化・誘導が高率だったのは,10%牛胎児血清添加培養液.VD+M-CSF,IL-4+M-CSF,ODF+M-CSF,20%馬血清添加培養液.IL-4+M-CSF,VD+M-CSF,2%BSA添加培養液.VD+M-CSF,IL-4+M-CSFの組み合わせであった.生化学的手法による判定(calcitonin添加時に産生されるcAMPを測定して,細胞表面のcalcitonin receptor発現の量を調べる)で分化・誘導が高率だったのは,10%牛胎児血清添加培養液.VD+M-CSF,IL-4+M-CSF,20%馬血清添加培養液.IL-4+M-CSF,VD+M-CSF,2%BSA添加培養液.IL-4+M-CSFの組み合わせであった.2)簡便な骨吸収活性測定法の確立の検討骨吸収活性の指標として,誘導された破骨細胞に牛骨パウダーを添加培養し,培養液中に産生される骨基質たんぱく代謝物(deoxypiridinoline,I型collagen telopeptide)濃度をELISAにて測定したが,いずれも検出感度以下であった.顕微鏡下では,破骨細胞が骨パウダーに付着しているのが観察されることから,誘導された破骨細胞は骨吸収活性を有しているもののELISAに用いた抗体(抗ヒト特異的)が,牛の骨基質たんぱく代謝物を認識できなかったため測定できなかったと考えられた.来年度は,新しく発売された骨吸収活性測定用培養チャンバーを使って骨吸収活性測定法の確立を行う予定である.平成13年度は,破骨細胞の機能(骨吸収能)の点から高効率的に破骨細胞を分化・誘導させる培養条件についての検討,E2(Estradiol)が破骨細胞の分化・誘導に及ぼす影響についての検討,およびE2存在・非存在下で培養した破骨細胞をLPSで刺激した時の培養液中TNFα濃度を測定し,その産生能とエストロゲン受容体(ER)多型との関連についての検討を行った.1)臍帯血単核細胞から高効率的に破骨細胞を分化・誘導する培養条件の検討10%牛胎児血清(FBS),20%馬血清(HS),2%BSA添加培養液に,M-CSF,IL-4,活性型VitaminD(VD),破骨細胞分化因子(ODF)を添加して臍帯血より分離した単核細胞を培養し,機能(骨吸収能)の点から高効率的に破骨細胞が分化・誘導される条件について検討した.BioCoat Osteologicslide上で破骨細胞を分化・誘導させ,吸収窩の面積比を出して骨吸収能を比較した結果,骨吸収能が高かったのは,HS+VD+M-CSF, FBS+VD+M-CSFの組み合わせであった.2)E2が破骨細胞の分化・誘導に及ぼす影響についての検討血清中のE2の影響を排除するためBSA+IL-4+M-CSF培地を用い,cAMP産生を指標として破骨細胞への分化・誘導に対するE2添加の影響を調べた結果,E2添加・非添加による明らかなcAMP産生の変化は認められなかった.3)培養破骨細胞のTNFα産生能とER多型との関連についての検討BSA+IL-4+M-CSF培地を用いE2+/-の条件下で破骨細胞を分化・誘導させた.LPS刺激後,E2(+)のTNFα産生に対するE2(-)の産生を比率で算出してER多型との関連について検討した結果,その産生比はPP型: 1.68±0.29, Pp型:1.05±0.08, pp型: 0.72±0.06であり,培養破骨細胞のE2(-)時のTNFα産生能はER多型によって異なる可能性が示された.