hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
プロポフォールによる完全静脈麻酔の血小板凝集と出血時間に及ぼ影響

研究分担者である平方は、プロポフォール研究の第一段階として、まず、吸入麻酔薬の血小板機能に及ぼす影響を検討した。その結果、吸入麻酔薬であるハロセンとセボフルランはサイクロオキシゲナーゼ活性を抑制することにより血小板凝集を抑制しているが、イソフルランにはこのような血小板機能に影響するような作用はないことを突き止め、米国麻酔学会誌であるAnesthesiology誌(85:1447-53、1996 87:1016-7,1997)に論文発表した。さらにセボフルランを臨床使用した場合でも実際にこのような血小板凝集抑制作用が血小板凝集計により確認されるがイソフルラン麻酔時にはこのような効果のないことをつきとめCan J Anaesth誌(44:1157-61,1997)に論文発表した。またプロポフォールについては、研究分担者である平方が、血小板凝集能に対して条件により抑制、増強両方の作用を有していることを確認した。さらにプロポフォールの血小板凝集抑制作用のメカニズムは吸入麻酔薬のそれと同様であること、即ちプロポフォールがサイクロオキシゲナーゼ活性を抑制することにより血小板凝集を抑制するのがそのメカニズムであることを突き止め、本年の日本麻酔学会年次総会で発表予定である。研究分担者である平方は、さらに、プロポフォールによる血小板凝集能の増強作用のメカニズムを検討した。その結果、プロポフォールが被刺激時の血小板イノシトール3リン酸量を増加することにより血小板凝集に対して増強作用を有することを確認した。以上をまとめて米国麻酔学会誌であるAnesthesiologyに論文発表すべく投稿を急いでいる。新しい静脈麻酔薬であるプロポフォールの血小板、血管平滑筋などに対する作用の報告は、これまで、報告者により食い違いが大きく、大変議論のあるところであった。そこで、我々は、プロポフォールの血小板に対する作用とその機序についての研究をおこなった。現在までにプロポフォールはADPによる血小板二次凝集に対し高濃度では抑制作用を示すが、低濃度では増強作用を示し、いずれの場合にも一次凝集にはほとんど影響しないこと、及び、アラキドン酸による血小板凝集は抑制するが、プロスタグランジンG_2(PGG_2)及びトロンボサキサンA_2(TXA_2)類似物質であるSTA_2による血小板凝集は増強することを解明した。さらに、プロポフォールはサイクロオキシゲナーゼ活性を直接抑制すること、及び、血小板TXA_2受容体の結合能には影響しないことも解明した。このことよりプロポフォールはサイクロオキシゲナーゼ活性を抑制することによりTXA_2合成を阻害して血小板凝集を抑制する作用とTXA_2受容体以降のなんらかの機序に作用して血小板凝集を増強する作用の両方を有することが示された。すなわち、プロポフォールは、実験条件による正反対の作用を示しうるものであり、ひいては、上記の報告者による大きな食い違いを統一的に説明しうるものと思われる。以上を本年のアメリカ麻酔学会年次総会において発表を予定している。さらに、各種刺激物質で刺激したときの血小板におけるTXA_2の安定分解産物であるTXB_2生成量をRIA法で測定することにより直接TXB_2生成量を検討する事を現在進めている。さらに、プロポフォールがTXA_2受容体以降のどのような作用機序によってSTA_2による血小板凝集増強作用をもたらすのかも併せて検討したい。研究分担者である平方は、プロフォール研究の第一段階として、まず吸入麻酔薬の血小板機能に及ぼす影響を検討した。

その結果、吸入麻酔薬であるハロセンとセボフルランはサイクロオキシゲナーゼ活性を抑制することにより血小板凝集を抑制しているが、イソフルランにはこのような血小板機能に影響するような作用はないことを突き止め、米国麻酔学会誌であるAnesthesiology誌(85:1447-53,1996 87:1016-7,1997)に論文発表した。さらにセボフルランを臨床使用した場合でも実際にこのような血小板凝集抑制作用が血小板凝集計により確認されるがイソフルラン麻酔時にはこのような効果のないことをつきとめCan J Anaesth誌(44:1157-61,1997)に論文発表した。またプロポフォールについては、研究分担者である平方が、血小板凝集能に対して条件により抑制、増強両方の作用を有していることを確認した。さらにプロポフォールの血小板凝集抑制作用のメカニズムは吸入麻酔薬のそれと同様であること、即ちプロポフォールがサイクロオキシゲナーゼ活性を抑制することにより血小板凝集を抑制するのがそのメカニズムであることを突き止め、本年の日本麻酔学会年次総会で発表予定である。研究分担者である平方は、さらに、プロポフォールによる血小板凝集能の増強作用のメカニズムを検討した。その結果、プロポフォールが被刺激時の血小板イノシトール3リン酸量を増加することにより血小板凝集に対して増強作用を有することを確認した。以上をまとめて米国麻酔学会誌であるAnesthesiologyに論文発表すべく投稿を急いでいる。
支援が必要な母親との援助関係づくりにむけた保健師の研修プログラムの開発と評価

保健師は母子保健事業等で最初の支援者として親子に出会い、支援の必要な親子を早期支援につなげる役割を担うが、そのプロセスにおいて母親との援助関係づくりの困難感や負担感が高まっている。そのため、支援が必要な母親に対する虐待予防を行う保健師を対象に、Banduraの社会的認知理論をもとに、母親との援助関係づくりに着目したプログラムを作成し、その評価検証を行う。
重症呼吸不全に対する一酸化窒素吸入療法の安全な臨床応用法の確立

メイプルソンA,D,Fシステム下で総ガス流量を10l/分、吸入一酸化窒素(NO)濃度を0,4,8,12,16,19ppm,酸素濃度を21,40,60,80,100%としたときの二酸化窒素(NO_2)濃度の変化を窒素酸化物測定装置(サーモエレクトロン,モデル42)で検討した。統計処理には一元分散分析とボンヘロニ補正t-testを用いた。NO_2濃度はどのシステムでも吸入NO濃度または酸素濃度が高いほど高かった。従って、NO_2濃度はNO濃度19ppmで酸素濃度100%で最も高く、A,D,FでのNO_2の最大値は0.20±0.03,0.15±0.03,0.17±0.02ppmであった。メイプルソンAでのNO_2はD,Fよりも高く維持された。10l/分の定常流を用いたIMVシステム(ゼクリスト,モデルIV-100B)でもNO_2の値は吸入NO濃度が19ppmで酸素濃度100%で最も高く,最大値は0.10±0.02ppmであった。サーボベンチレータ900Cの低圧送気路から低常流とNOを投与し、成人用呼吸回路の吸気側にソーダライムを用いた場合はソーダライム前後でNO_2濃度の低下が観察された。NO_2の値は吸入NO濃度が19ppmで酸素濃度100%で最も高く最大値は0.26±0.06ppmであった。重症呼吸不全14例に16ppm以下のNO吸入療法を施行した。14例中、間質性肺炎の2例と術後膿瘍のARDS1例を除いた11例にNO吸入により酸素化の改善と肺動脈圧の若干の低下傾向を認めた。動脈圧、心拍出量には影響を認めなかった。メトヘモグロビン血症は生じなかった。2ppm以下の微量のNO吸入でも酸素化は十分に改善した。しかし、NO吸入療法を施行した11例のうち救命できたのはわずか1例であった。NO吸入療法によると考えられる副作用は認めなかった。
薄肉円筒工作物切削加工時に生じる工作物変形型びびり振動の発生メカニズムと抑制対策

本研究では,「どのような仕組みでびびり振動が発生するのか」「びびり振動の発生に,工作物,工具,切削条件は,どのような影響を与えるのか」「どのような対策をとれば,びびり振動の発生を抑制できるのか」を明らかにする。まず,背分力→並進変位,並進変位→主分力,主分力→背分力の静特性から,一巡伝達関数の静的ゲインを算出する。次に,工作物の減衰と固有振動数差からゲイン増幅率を求める。静的ゲインとゲイン増幅率の積である一巡伝達関数のゲインが,位相交点周波数で1より大きいときに,びびり振動が発生する。この一巡伝達関数のゲインを低下させる工作物,工具,切削条件を求め,びびり振動抑制対策を作成する。
疲労困憊後に余力は残っているか

一定の大きさの筋力発揮が困難になった(疲労困憊)直後の筋力発揮について調査し、疲労困憊が起こる原因を検討する。具体的な検討内容は以下の4点である。1疲労困憊直後のわずかな休息がその後の最大筋力にどう影響するか。2疲労困憊を引き起こす筋力発揮の運動強度を変えると疲労困憊直後の筋力はどのように変わるか。3疲労困憊直後に行う筋力発揮の運動強度によってその筋力はどう変わるか。4疲労困憊直後に行う筋力発揮の速度は筋力にどう影響するか。
酵母をモデルとした高等動物細胞における増殖制御機構の解析

本研究では、高等動物細胞における細胞増殖制御機構を明らかにする目的で、酵母をモデル系として、プロテインキナーゼC(PKC)による細胞増殖制御機構について解析を行ない以下の成果を得た。まず、酵母のPKC(PKC1)により制御されるシグナル伝達系を明らかにする目的で、PKC1を介したシグナル伝達系に働く因子を遺伝学的に同定した。その結果、BCK1、MKK1、MKK2、MPK1の4つの遺伝子を分離し、BCK1はMAPキナーゼキナーゼキナーゼ(MAPKKK)を、MKK1/MKK2はMAPKKを、MPK1はMAPKをコードし、PKC1-BCK1-MKK1/MKK2-MPK1のカスケードにより、シグナルが伝達されることが明らかになった。従って、酵母のPKC1は、MAPキナーゼの活性化を介して細胞増殖を制御している。次に、動物細胞においてMAPキナーゼカスケードに関与する因子を同定する目的で、酵母のPKC1-MAPキナーゼカスケードに関与するヒト遺伝子の分離を行なった。T細胞由来のJurkat細胞から作製したcDNAライブラリーを酵母のpkc1及びbck1温度感受性変異株に導入し、高温での増殖を回復させる遺伝子としてヒトMSP1とMSB1をそれぞれ分離した。MSP1はnPKCをコードし、SRαプロモーターによりNIH3T3細胞において強制発現させると、軟寒天培地でコロニーを形成した。一方、MSB1は酵母のmpk1温度感受性変異株の増殖も回復させることから、MPK1の下流で作用することが明らかになり、またその塩基配列から転写に関与していると考えられる。
英国にみる高齢者施設の機能を有する歴史的建築物の保存・活用に関する萌芽研究

本研究は我が国の高齢者福祉施設を効率的に整備する手法を考究するための萌芽的研究として,歴史的建築物における芸術的価値の保存と高齢者介護施設としての活用について明らかにすることを目的とし調査を実施した。研究対象は,歴史的建築物が高齢者介護施設として活用されている先駆的な事例として,英国のスコットランド地方に立地する住宅建築のケアンドゥ(Cairndhu,1872年)を取り上げた。平成18年度においては,以下の調査を実施した。1.夏季住環境調査高齢者施設の住環境要素の内,特に居住者の健康に深く関係する温熱環境の測定を実施した。ケアンドゥにおける実測は,オーナーの意向(施設のプロパガンダに関する憂慮)により協力が得られなかったため,研究対象と同じ建築家W.Lieperにより同地域・同時期に建築された2棟の住居を発掘し,これらに対する夏季実測を行った。本研究の目的を考慮し,2棟の内,1棟は高齢者が居住する住居とし,データの収集を実施した。2.保存実態調査前年度の調査結果,建築家・ウィリアム・リーパーによる住宅建築がヘレンズバラ地域に多く現存することを発見し,その歴史的建築物の分布について実際に建築物の存在を確認しながら地図上に布置する作業を行った。また,本研究対象としたケアンドゥの1999年・2001年当時の改修計画の平面図の一部を発見した。3.他の西欧地域の歴史的建築物の保存・活用実態の視察研究のまとめの段階において,英国以外の地域における歴史的建築物の保存・活用の実態を把握し将来的な研究の発展に資する知見を得るために,ドイツ(ミュンヘン)とデンマーク(コペンハーゲン)にて視察を行った。その結果,市庁舎やホテル,百貨店,美術館などに利用されながら歴史的建造物が現代生活の中で利用されていることが明らかとなった。なお,本研究による研究成果の一部は,学術的論文として投稿・掲載を行った。平成17年度においては,事前調査と冬季調査のため英国・スコットランドに2度赴き,以下の研究内容を実施した。1.活用実態調査歴史的建築物の高齢者施設としての活用状況を把握するために,研究対象であるケアンドゥが立地する英国のヘレンズバラにて調査を行った。高齢者施設として現在も活用されている歴史的建築物のため,調査は主に施設の概要とインテリアの保存状況などに関するヒアリングを,建築物の現オーナー,マクドナルド氏に対して実施した。さらに,建築物の状況をあらわす効果的な資料として,デジタルカメラによる設備・インテリアの記録を行った。2.オリジナル資料収集ケアンドゥの歴史的なオリジナル資料の収集を行った。現在までの保存・活用の経緯を明らかにするために,ヘレンズバラ図書館の司書,デービス氏の協力を得て,ケアンドゥの改修に関わる設計資料の調査を実施し,オリジナルの設計図書を発見・収集した。また,研究対象を含む英国における歴史的建築物の保存・活用を行っているヒストリック・スコットランド,およびRCAHMS(Royal Commission on the Ancient and Historical Monuments of Scotland)での調査を実施し,資料の収集を行った。さらに,ミッチェル・ライブラリー,グラスゴー大学図書館において本研究の関連資料の収集を実施した。3.冬季住環境調査高齢者施設の住環境要素の内,特に居住者の健康に深く関係する温熱環境の測定を実施した。ケアンドゥにおける実測は,オーナーの意向(施設のプロパガンダに関する憂慮)により協力が得られなかったため,研究対象と同じ建築家W.Lieperにより同地域・同時期に建築された2棟の住居を発掘し,これらに対する冬季実測を行った。
日独の建築規制比較による景観価値を適正評価した公共的価値向上のための方策

日本では、人口減少を見据えて今から公共的価値の向上のため私的財産に影響した減価部分を補填していく仕組みをつくる必要性がある。一方、ドイツのミュンヘンや同じバイエルン州に位置するニュルンベルクやローテンブルクでも建物の形状や緑化など住民に義務づけると同時に資産価値が上昇し続けている。ドイツの建設法典で、町の条例や計画策定の際に住民意見の担保が条例で位置づけられていることから規制を含む条例は民意の現れともいえる。本研究ではそのような背景・考え方に立ち、厳しい建築条例のあるドイツの調査を通し、建物の形状、緑など景観価値を含めた適正に地価を評価することで公共的価値向上の方策を検討・提言するものである。
ポジトロンCTによるミトコンドリア脳筋症のエネルギー代謝異常に関する研究

【対象】遺伝子診断の確定したMELAS2例、MERRF2例を正常人5例と比較した。【方法】ポジトロンCTを用いて、局所脳血流、酸素代謝、血液量、局所脳糖代謝の測定、^<11>C標識炭酸ガスの吸入による脳pHの測定、^<15>O標識水静注法による安静時および負荷時(5%炭酸ガス吸入時、過呼吸時)血流測定を行った。計測はPETカメラ(HEADTOME-IV)で行い、データは当施設のコンピュータシステム(CONVEX-INDY-Mac)で解析した。脳の各部位に関心領域を設定し、局所の循環代謝諸量について、ミトコンドリア脳筋症群を正常群と比較検討した。【結果および考察】脳血流は両疾患ともほぼ保たれていたが、酸素代謝率、酸素摂取率は著明に低下しており、両者ともミトコンドリアの機能異常により酸素の利用障害があることを反映していると考えられた。一方ブドウ糖代謝はMELASでは正常ないしやや亢進しているのに対してMERRFでは低下しており、両疾患で大きな違いを認めた。脳pHはMELASの症例では低下しており、脳全体としてアシドーシスになっていることが示された。両者のエネルギー代謝異常の違いは臨床症状の違いに対応していると考えられた。特にMELASにおいて酸素の利用障害と解糖系の亢進によるアシドーシスが認められたことはstroke episodeが血管障害ではなくエネルギー代謝の崩壊による組織障害である可能性を示唆している。
細胞内への機能分子輸送システムと輸送素子の開発

生きた細胞内へ機能性たんぱく質を高い効率で送りこむ輸送システムを開発することにより遺伝病に対する酵素置換療法と免疫系のマクロファージによる抗原提示能を高めて抗体生産の効率を上げる目的で次の研究をした.まず,それ自体毒性も抗原性もない血清糖たんぱく質α_2-マクログロブリン(α_2M)に酵素や抗原たんぱく質を結合する条件を設定し, α_2M-分子に対し-分子の外来たんぱく質をプロテアーゼの作用を利用して結合する事に成功した.ついでこの複合体を培養細胞に与えると細胞は効率よく複合体をとりこむ.このとりこみが,目標通りα_2Mに対する特異的リセプターを介したエンドサイトーシスによるものであることを示した.こりこまれたたんぱく質や酵素は細胞内でゆっくりリソソームに運ばれてゆくが,これがリソソーム酵素である場合はリソソーム内で酵素活性を発現することができるので,リソソーム酵素欠損症の遺伝病に対する療法として開発できる可能性がある.細胞が抗原提示能を持ってマクロファージである場合は, α_2Mにウィルス抗原たんぱくを結合させて与えることにより,マクロファージへのとりこみ,抗原提示,ヘルパーTセルの活性化等を経て最終的にBセルによると考えられる抗体の産生が上昇することがわかった.現在この方法を利用して効率的なワクチンの製造を行なうプロジェクトを組んで準備中であるが,今後次のような点に注意して研究を有意義なものとしてゆく方針である.まず,効果のあがる抗原の種類をふやすこと,次に, α_2Mにそのものでなくとも, α_2Mのリセプター結合部位を抗原に結合するだけでよいかどうかを確かめる.ついで,リセプター結合部位を人工的に大量に生産する.このようにして使いやすい高効率ワクチン生産体系を作り上げてゆく.生きた細胞内へ機能性たんぱく質を高い効率で送りこむ輸送システムを開発することにより遺伝病に対する酵素置換療法と免疫系のマクロファージによる抗原提示能を高めて抗体生産の効率を上げる目的で次の研究をした.まず,それ自体毒性も抗原性もない血清糖たんぱく質α_2-マクログロブリン(α_2M)に酵素や抗原たんぱく質を結合する条件を設定し, α_2M-分子に対し-分子の外来たんぱく質をプロテアーゼの作用を利用して結合する事に成功した.ついでこの複合体を培養細胞に与えると細胞は効率よく複合体をとりこむ.このとりこみが,目標通りα_2Mに対する特異的リセプターを介したエンドサイトーシスによるものであることを示した.こりこまれたたんぱく質や酵素は細胞内でゆっくりリソソームに運ばれてゆくが,これがリソソーム酵素である場合はリソソーム内で酵素活性を発現することができるので,リソソーム酵素欠損症の遺伝病に対する療法として開発できる可能性がある.細胞が抗原提示能を持ってマクロファージである場合は, α_2Mにウィルス抗原たんぱくを結合させて与えることにより,マクロファージへのとりこみ,抗原提示,ヘルパーTセルの活性化等を経て最終的にBセルによると考えられる抗体の産生が上昇することがわかった.現在この方法を利用して効率的なワクチンの製造を行なうプロジェクトを組んで準備中であるが,今後次のような点に注意して研究を有意義なものとしてゆく方針である.まず,効果のあがる抗原の種類をふやすこと,次に, α_2Mにそのものでなくとも, α_2Mのリセプター結合部位を抗原に結合するだけでよいかどうかを確かめる.ついで,リセプター結合部位を人工的に大量に生産する.このようにして使いやすい高効率ワクチン生産体系を作り上げてゆく.
交差耐性を利用した全く新しい手術後の残存腫瘍増殖のコントロール法の研究

実験1目的:LPSを用いてエンドトキシン耐性(ET)を誘導できることを確認する。毒性の少ない合成のLPS receptor agonistを用いても耐性を誘導しうるか調べる。方法:RatにLPSまたは合成LPS receptor agonist(以下SLA)を前投与し、2回目に致死量のLPSを投与した際の致死率を検討する。結果:LPSによる前処置をした群は,対照群において全例が死亡する量のLPSを投与した場合,70%が生存した.SLAにて前処置をした群では,90%が生存した.結論:ETが再現した。また、SLAによってもLPSに対する致死率の改善が得られた。実験2目的:癌細胞の増殖促進に対する手術侵襲の影響を評価できるモデルを作成する。方法:マウスにmelanoma細胞を接種し、以下の手術を施行し、術後に腫瘍容積を測定した。A:単開腹B:肝切除C:腹膜炎モデルD:胃切開縫合E:腸管用手的刺激モデル結果:42日目における腫瘍容積はA:2032mm^3B:2321mm^3C:2045mm^3D:6140mm^3E:6650mm^3となった。A群と比較してDにおいて有意に増大する傾向がみられた。結論:胃切開縫合モデルにおいて手術侵襲により腫瘍増大が促進することが確認された。実験3目的:ETを誘導した上で手術侵襲を加えると、術後の腫瘍増殖にどのような影響を与えるかを調べる。本試験方法:マウスにmelanomaを接種し、手術(A:単開腹,B:胃切開縫合C:LPS前投与+胃切開縫合)を施行する。3.術後60日間にわたって腫瘍サイズを測定する。4.手術後の血中IL-6レベルを測定する。結果:60日目における腫瘍容積はB群と比較してC群において統計学的に有意に腫瘍増大が抑制される傾向がみられた。また、B群と比較してC群においてIL-6の術後6時間値は有意に低値を示した。結論:ET誘導により手術侵襲を軽減することで、IL-6の産生を抑制し、腫瘍増大を抑制しうることが示唆された。b)腫瘍のモデルの作成:6週齢のC57BL/6マウスの背部に1×10^6の皮膚MalignantMelanoma Cell Line (JCRB0202[B16melanoma])をマウスの背部へ皮下注し,皮膚におけるMelanoma腫瘍の増殖をその最大径,最短径,高さの測定によって評価した.この担癌マウスモデルにおける腫瘍促進速度を3週目から1週おきに8週目まで記録し,Growth Curveを作成して、コントロールとしてのモデル作成を行った。c)マウスの手術侵襲モデルの作成:6週齢のC57BL/6マウスに対して腹部正中全切開にて開腹を行い,腸管のManipulationを全腸管に対して行い,侵襲モデルを作成した.d)侵襲の評価:侵襲モデルにおける血清中の炎症性サイトカインの動態を評価した.炎症性サイトカインは上部小腸・肝臓においてIL-6, TNF-alpha, IL-1 betaのmRNA発現を確認し、門脈中の同炎症性サイトカインの上昇が確認できた.

皮膚における炎症性サイトカイン発現には差がなかったが、循環血液中のサイトカインの上昇を認めたため、侵襲の差が充分腫瘍発育に影響を与える原因となりうると考えた.b)腫瘍のモデルの作成:6週齢のC57BL/6マウスの背部に1×10^6の皮膚MalignantMelanoma Cell Line (JCRB0202[B16melanoma])をマウスの背部へ皮下注し,皮膚におけるMelanoma腫瘍の増殖をその最大径,最短径,高さの測定によって評価したが、腫瘍増殖に個体差が大きく、フットパッドへの腫瘍移植を行うことで、再評価を行っている.c)マウスの手術侵襲モデルの作成:6週齢のC57BL/6マウスに対して腹部正中全切開にて開腹を行い,腸管のManipulationを全腸管に対して行い,侵襲モデルを作成したが、種々の侵襲の評価が必要であることから、肝切除モデル、回盲部穿孔モデルなども侵襲モデルに加えた。また、種差の影響も考え、ブタにおける腸管のManipulationモデルを作製し、侵襲がManipulationによるもとであることを確認した。d)侵襲の評価:侵襲モデルにおける血清中の炎症性サイトカインの動態を評価した.炎症性サイトカインは上部小腸・肝臓においてIL-6,TNF-alpha, IL-1 betaのmRNA発現を確認し、門脈中の同炎症性サイトカインの上昇が確認できた.1.マウスの腫瘍モデル:腫瘍増殖モデルの安定が本研究にとって肝要な課題であった。フットパッドモデルでは安定した結果が得られず、再度腫瘍細胞濃度などを調整して背部皮下注射によりmelanoma細胞を生着させるモデルを構築することに成功した。2.手術侵襲モデル:様々な外科侵襲を想定して、モデルを作成し、これらを評価のうえ、侵襲として利用した。manipulationモデル、胃切開モデル、肝切除モデル、回盲部穿孔モデルを用いて手術侵襲による腫瘍増大を観察したところ、manipulaticmモデル、胃切開モデルによって経時的に増大することが観察された。また、manipulationモデル、胃切開モデルにおいて術後サイトカイン(IL-6)値がshamより上昇することも確認した。4.本試験:[方法]mouse(雄性C57BL/6J 910w)にLPSまたは生食を24時間毎に2回、腹腔内投与する。2回目投与の48時間後にmouseの背部にmelanoma細胞を接種し、手術(A : Sham(単開腹),B:胃切開縫合C : LPS前投与+胃切開縫合D : manipulationE : LPS前投与+manipulation各群N=10)を施行した。術後60日間にわたって腫瘍サイズを測定する。[結果]B群と比較してC群において有意に腫瘍増大が抑制される傾向がみられた。D群と比較してE群において腫瘍増大が抑制される傾向がみられた。(有意差なし)またLPSの前投与により術後IL-6の上昇を抑制することも確認した。[結論]ETは手術侵襲を軽減することで腫瘍増大を抑制しうることが示唆された。
豚の脚弱症対策と骨の力学的特性に関する研究

研究成果報告書は、昭和63年度、平成元年度および2年度に実施された骨の力学的特性に関する実験を主として取りまとめた。その内容は以下の通りである。1.豚の関節軟骨ー海面骨複合系の力学性に関する一知見:体重別の健常豚および脚弱豚の関節軟骨ー海面骨複合系に対して鋼製円筒圧子により押込み試験を行い、極限強さ、見掛け弾性係数、押込みエネルギ-など力学性についての基本的知見が得られた。2.家畜骨強度の計測:不断給飼により飼育した豚の大腿骨骨幹より、一定サイズの円柱状試験片を成形し、平板圧縮試験による骨強度の計測を行い、また、大腿骨骨頭より試料を採取し、関節軟骨ー海綿骨複合系に対して押込み試験を行なった。その結果、1)生体重99.6105.0kg、日齢157205日の豚の大腿骨骨幹の圧縮強さは134.3219.4N/mm^2の値を示した。2)骨幹の粒子密度は平均1.79g/cm^3、灰分は平均53.5%であった。3)体重82113kg、日齢145205日の供試豚の関筋軟骨ー海綿骨複合系に対する押込み極限強さは2040N/mm^2、見掛け弾性係数は41161N/mm^2、押込みエネルギは1.43.2N・mの値を示した。4)関節軟骨一海綿骨複合系の力学的特性値相互には本試験の範囲では正の相関(押込み極限強さとこわさ:r=0.872、同極限強さと見掛け弾性係数:r=0.779、同極限強さと押込みエネルギ:r=0.542)が認められた。3.家畜骨強度の計測(その2):標準飼料の不断給餌により飼育した豚の大腿骨骨幹より、ほぼ一定サイズの円柱状試験片を成形し、三点曲げ試験による骨強度の計測を行った。その結果、曲げ破壊荷重は58.8195.5N、曲げ強さは157.6260.8N/mm^2、縦弾性係数は843016647N/mm^2の値が得られた。本研究は、脚弱の主原因とされる骨軟骨症に罹患した脚弱豚および健常豚より採取した骨の極限強さ、変形量、見かけ弾性係数、静的粘弾性パタメータ等の力学的特性を、バイオメカニクス的観点から明らかにすると共に、生体の大腿骨あるいは上腕骨間接構成体のマクロ的な動的粘弾性パラメータ等の計測を試みることにより、前記特性と比較検討を行い、従来飼養施設の現場において、生体での診断が困難であった骨軟骨症の早期発見の可能性を見出し、かつ施設構造環境の改善策を検討することを目的としている。本年度は、研究の第1段階としての間接軟骨・海綿骨複合系に対して行った押し込み試験について以下の結果を得た。体重別豚、脚弱豚および繁殖豚の25頭について、その大腿骨と上腕骨を入手し、-7°C前後で凍結保存し供試した。試験に際しては、大腿骨遠位端内側顆より骨頭を切除すると共に、密閉したポリ袋内で常温解凍し試験片とした。

試験片を万能材料試験機の基部に置かれた試作押し込み試験装置の支持台上に静置し、上方よりφ4×50mmの鋼製円筒圧子を用いて10mm/minの速度で押込み試験を行った。試験は押込みが進行し、記録紙上の荷重-変位曲線において押込み試験装置の支持台の影響が認められるまで行った。押込み試験の結果、1)生体重20210kg、週齢890週の豚関節軟骨-海綿骨複合糸の円筒圧子の押込みに対する極限強さは2.03.5kg/mm^2の値を示した。2)見掛けの強性係数は4.325.9kg/mm^2の値を示し、週齢・体重の増加とともに、増加する傾向を示した。3)関節軟骨の破壊後、海綿骨に対し5mmの押込みを行うのに要するエネルギは0.090.7gkg・mの値を示し、週齢に対しては供試豚の成長曲線と同様な増加傾向を示した。以上の押込み試験とともに、次年度以降に利用する超音波を利用した家畜骨関節の動的粘弾性測定装置の仕様設計を行ない、また養豚現場における豚の歩行特性の観測を行った。本年度は、標準飼料の不断給飼により飼育した豚の大腿骨骨幹より、ほぼ一定サイズの円柱状試験片を成形し、平板圧縮試験による骨強度の計測を行い、また、骨軟骨症の好発部位である大腿骨骨頭より試料を採取し、関節軟骨-海綿骨複合系に対して押込み試験を行った。1.骨幹試験片に対する平板圧縮試験結果(1)平板圧縮試験において、骨幹試験片はぜい性材料としての挙動を示し、破壊の際に塑性流動を生じなかった。(2)生体重99.6105.0kg、日齢157205日の豚の大腿骨骨幹の圧縮強さは134.3219.4N/mm^2の値を示した。(3)骨幹の粒子密度は平均1.79g/cm^3、灰分は平均53.5%であった。(4)本平板圧縮計測法によれば、従来の原型の試験片を用いた検討に比べ飼料成分の骨強度に対する影響を十分精度良く把握することが可能である。2.関節軟骨-海綿骨複合系に対する押込み試験結果(1)体重82113kg、日齢145205日の供試豚の関節軟骨-海綿骨複合系に対する押込み極限強さは2040N/mm^2、見掛け弾性係数は41161N/mm^2、押込みエネルギ-は1.43.2N・mの値を示した。(2)関節軟骨-海綿骨複合系の力学的特性値相互には本試験の範囲では正の相関(押込み極限強さとこわさ:r=0.872、同極限強さと見掛け弾性係数:r=0.779、同極限強さと押込みエネルギ-:r=0.542)が認められた。(3)試料の軟X線学的病変判定結果と本試験により得られた力学的特性値との比較から、病変の進行により、一時、力学的特性値は大きくなり、ついで病変の更なる進行により力学的特性値は小さくなるという一定の傾向が認められた。最終年度にあたる平成2年度においては、標準飼料の不断給餌により飼育した豚の大腿骨骨幹より、ほぼ一定サイズの円柱状試験片を成形し、三点曲げ試験による骨強度の計測を行った。また、過去2年間の試験デ-タと本年度の研究結果を総合的に取りまとめ、研究成果報告書の作成を行った。1.骨幹試験片を供試した三点曲げ試験標準飼料を不断給餌したLWH種およびLWD種の生後57カ月(体重150210kg)までの豚13頭を供試し、左大腿骨より骨幹を切断・採取した。これを1カ月間水浸した後、骨髄を取り除き水洗し気乾した試料より、直径が3mm前後、また15mmの支点間距離がとれるように曲げ試験用の円柱状試験片を成形加工した。試験片を万能材料試験機の試験テ-ブルに置いたメタルベ-ス上に静置し、上方より曲げロッドにより1.25mm/minの速度で試験片が破壊するまで荷重を加えた。成形した骨幹試験片に対する曲げ試験の結果、それぞれ、(1)曲げ破壊荷重は58.8195.5N、(2)曲げ強さは157.6260.8N/mm^2、(3)縦弾性係数は843016647N/mm^2の値が得られた。(2)研究成果報告書の作成研究成果報告書は、昭和63年度、平成元年度および2年度に実施された骨の力学的特性に関する実験を主として取りまとめた。その内容は以下のように、(1)豚大腿骨骨頭の力学的特性に関する一知見ー円筒圧子による押込み試験結果、(2)家畜骨強度の計測ー
アトピー性皮膚炎における自己免疫寛容の破綻に関する研究

アトピー性皮膚炎患者の約8割において、末梢血好塩基球は汗の中の何らかの成分に反応してヒスタミンを遊離することが明らかとなっている。しかし患者のリンパ球が汗の成分に対していかなる反応を示すのかについての情報はない。本研究により、アトピー性皮膚炎患者の末梢血好塩基球からヒスタミン遊離を惹起する活性を指標に部分精製した汗抗原を用いて、アトピー性皮膚炎患者リンパ球の増殖反応とサイトカイン産生能について検討した。ヘパリン採血した静脈血から比重遠心法で末梢血単核球(PBMC)を分離し、AutoMACS磁気分離シ:ステムによりCD4陽性細胞を分離し、さらにCD25陽性画分と陰性画分に分画した。それぞれの細胞群に関して増殖反応と刺激因子存在下の培養での培養液中のサイトカイン(interleukin-4(IL-4)とinterferon-γ(IFN-γ))の産生量を測定した.健常人8名、アトピー性皮膚炎患者12名について検討した。刺激因子の陰性対照を緩衝液として陽性対照を抗CD-3抗体とした。PBMCの増殖反応ではダニ抗原、汗抗原刺激のいずれでもアトピー性皮膚炎群で高い傾向が見られたが統計学的有意差は見られなかった。PBMCのIL-4産生はダニ抗原、汗抗原いずれにおいてもアトピー性皮膚炎群で有意差をもって高い産生能が確認された。IFN-γ産生能では汗抗原刺激でむしろ健常人に有意に高い産生が見られた。抑制性T細胞のリンパ球の抑制作用を除去する目的で、PBMCからCD4+CD25+画分を除いたうえで同様の反応を見たところ、やはり増殖反応は有意差なく、IL-4の産生においてアトピー性皮膚炎群で有意な高値がみられた。これらのことより、アトピー性皮膚炎患者においては汗抗原刺激によってTh2タイプのサイトカイン産生が生じ、汗抗原特異的IgE産生につながるものと考えられた。ヒトの汗の中には、アトピー性皮膚炎患者の約8割にI型アレルギーを惹起する抗原が存在することが明らかとなっている。その抗原はアトピー性皮膚炎患者の末梢血好塩基球からヒスタミンを遊離させる活性として認識できる。カラムクロマトグラフィーによりヒト汗の中から部分精製がなされており、その部分精製汗抗原に対するアトピー性皮膚炎患者および健常者のリンパ球の反応性について検討した。中等症以上のアトピー性皮膚炎患者9名、アトピー性皮膚炎だけでなくアレルギー性鼻炎・結膜炎の合併のない健常人6名を対象とした。まず末梢血単核球に汗抗原を反応させ、BrdUの取り込み法による増殖反応を確認したところ、アトピー性皮膚炎群および健常人群のいずれにも差はなかった。末梢血単核球にダニ抗原、未精製汗、部分精製汗抗原のそれぞれを反応させ、反応上清中のIL-4およびIFN-γをELISA法で測定した。ダニ抗原に対してはアトピー性皮膚炎患者9名中全員で、健常人6名中4名でIL-4の産生がみられた。汗に対しては未精製、部分精製にかかわらずアトピー性皮膚炎9名中8名でIL-4の産生がみられたが、健常人ではIL-4の産生はみられなかった。IFN-γについては健常人1名においてダニ抗原および汗抗原に反応して高い産生がみられたが、その他ではアトピー性皮膚炎群、健常人群いずれも産生がみられなかった。以上より、アトピー性皮膚炎患者においては汗抗原に対してTh2タイプのサイトカインであるIL-4を産生しやすく、汗抗原に対する持続的暴露が高IgE血症を引き起こす一つの誘因である可能性が示唆された。

アトピー性皮膚炎患者の約8割は汗によってI型アレルギー反応を呈する。それは自己の汗による皮内テストで陽性を示すこと、末梢血好塩基球が汗に反応してヒスタミンを遊離することなどで確認できる。それらの反応は健常人にはほとんど見られず、アトピー性皮膚炎患者に特異的である。アトピー性皮膚炎患者が汗に対して即時型反応を示すことは、患者が汗に感作されて汗に対する抗原特異的IgEを産生していることを示しているが、リンパ球の反応性については明らかとなっていない。昨年までの研究で末梢血単核球に対して抗CD3抗体、ダニ抗原、精製汗抗原を反応させると、アトピー性皮膚炎患者群ではTh2サイトカインの一つであるIL-4を産生し、健常人群ではIL-4の産生は見られないことが明らかとなっていた。また、末梢血単核球からautoMACSを用いてまずネガティブセレクションでCD4^+細胞を回収し、さらにautoMACSでCD25のポジティブセレクションによってCD4^+CD25^-細胞とCD4^+CD25^+細胞を分画採取する。それらとは別に末梢血単核球をマイトマイシン処理し、CD4^+細胞と共生培養し、精製汗抗原の他、陽性コントロールとしての抗CD-3抗体、あるいはダニ抗原を加えて細胞増殖反応、およびIFNγ、IL-4の産生能をELISA法で測定した。CD4^+CD25^-細胞画分での各因子による細胞増殖反応とサイトカイン産生能を、抑制性T細胞としてのCD4^+CD25^+細胞画分を添加した場合と比較する。本年度までに健常人8名、アトピー性皮膚炎患者12名まで被験者を増やして測定した。その結果アトピー性皮膚炎群ではCD4陽性CD25陰性の細胞は抗CD3抗体、ダニ抗原、精製汗抗原刺激でIL-4の産生し、IFNγは産生しなかった。健常人群では抗CD3抗体、ダニ抗原、精製汗抗原でIL-4の産生は見られず、1名のみでIFNγの産生の高値が確認された。
組織学習を創出する多様な雇用形態のマネジメント

本研究では、さまざまな企業の組織学習のタイプや水準を明らかにするとともに、その成立を可能にしている要因を探った。その結果、雇用形態や職務の違いよりも、そうした違いを乗り越えて、組織メンバーに一種の自己効力感や当事者意識を持つことを許されたと感じさせるような仕組みづくりに成功するときに、各組織が期待するような組織学習が成立すること、その状態が広いほど高次な組織学習が可能になる傾向が見いだせた。本研究は、近年ますます多様な職種、働き方をしている人々で構成されるようになっている組織において、組織としてのシナジー効果を引き出しながら、どのように目標とする組織学習プロセスを実現するのか、そのメカニズムの端緒を掴むことを目的としている。そのため、まず組織学習論、人的資源管理論を始めとする、本研究関心の関連分野の先行研究の整理を行うとともに、現実のメカニズムを理解するために、インタビュー等に基づく詳細な事例分析を行うことにした。より具体的には、1年目は主として文献レビューを、2年目、3年目は主に事例分析を進めた。また、4年目は、それら文献調査および複数の事例分析をもとに、さらなる追加調査を進めながら総合的に考察を深め、理論の一般化に努める計画である。1年目である平成20年度は、主として組織学習論に関して、文献・資料研究および事例についての知識を深めるための事例研究会を開催した。具体的には、まず、毎年続々と発表されている組織学習研究の組織観を改めて整理し、今後の展望を探るため、主に2003年から2008年までの論文を対象に、文献レビューをおこなった。その結果、研究対象と定める組織の境界が従来に比べ拡大し、かつ、学習主体としての組織メンバーの存在感がわずかながら高まっている傾向が見出せた。なお、この結果は、2009年度(5月)の経営学史学会で報告予定である。次に、2回(12月と2月)実施した事例研究会では、正規従業員と非正規従業員が混在して働くケースを2つ取り上げ、組織学習プロセスの知識獲得フェーズや解釈フェーズにおいて、学習サイクルが途中で断絶せず、有効に働くときには、どのような組織状況や条件が見出せるかについて検討した。その際には、組織学習の視点だけでなく、他の経営学の視点からの知見も得るために、研究テーマの異なる研究者を研究会に招き、専門的な知識のご提供をいただいた。その結果、さらに掘り下げて検討すべき点が明らかになったり、ある程度リサーチ・クエスションやリサーチ・デザインの見直しが必要になりそうであることが確認された。また、こうした過程で、正規従業員のみの事例ではあるが、非常に興味深い事例に遭遇することができ、その事例分析も行った。それは、2009年6月の『一橋ビジネスレビュー』に掲載予定である。平成21年度は、まず、自治体職員約500名を対象にした質問表調査を実施し、これまで注目していた知識獲得フェーズだけでなく、組織学習プロセスの中でも特に「組織」の学習たらしめている知識共有・移転フェーズについて分析・考察を行った。その結果、組織の中で優れた成果を上げている職員、もしくは一皮むけた体験をしている職員でも、部下や後進の意識的な育成や仕事を任せることを通じての育成を行うなど、意識的に知識移転を行っている割合はごくごく低いことが明らかになった。こうした質問表調査による量的分析の一方で、ケーススタディによる質的分析・考察についても並行して研究を行った。具体的には昨年度に引き続いて行った出版社での知識の創造や取り出しについてのヒアリング調査、農業ビジネスにおける職員の学習意欲を引き出す工夫についてのヒアリング調査、また、社会福祉法人の高次学習が発生していくプロセスについての調査などを進めた。従来は、大手の企業組織を研究対象としていたが、今年度はそれ以外の組織(自治体、中規模企業組織、社会福祉法人、病院などを指す)を対象として、多様な業種における多様な働き方の考察・検討を行った。この一連の作業を通じて、改めて組織のライフサイクルにおける適切な組織学習プロセスの多様性が認識できるとともに、大企業組織では多くの要素に埋もれてみえにくくなった重要な論点や組織学習の重要要因を顕在化することができたのではないかと考えている。上記の質問表調査の結果、およびケーススタディの一部は現在、論文として執筆作業を進めており、来年度中の研究代表者の所属学会のジャーナルへの投稿を予定している。また、その準備段階として、外部の講演会・研究会などによる報告依頼がある際に、その時点までの研究成果を積極的に発表している。そこでの参加者の方々からいただいたご意見やご質問をもとに、考察.推敲を深める取り組みを行っているのが現在の状況である。3年目である平成22年度は、引き続き、組織学習現象に関する事例を蓄積するとともに、それらを理論と結び付ける作業を行った。理論だけでは現実から乖離しやすかったり、現実を忠実に捉えていなかったりという問題点がある。また、事例のみでは一般化することが難しいため、その双方の長所を結び付け、そうした作業を複数、積み重ねることによって、有意義なグランドデザインを描くことを目指した。

具体的には、これまで報告書レベルでまとめていた一次調査と二次調査の結果を、組織学習の理論的なフレームワークから位置付けると、どのように解釈・分析しうるのかを論文という形で執筆した。その結果、そのうちの1つ、社会福祉法人を調査対象にした、組織アンラーニングという観点からまとめた論文が、実務家との共著という形であるが、組織学会の学会誌である『組織科学』に採択され、2011年3月刊行のものに掲載されるに至った。これは、組織学会でのCall for Paper企画「経営組織の分厚い記述」に応募したものであるが、応募総数38件のうち採択されたのは6件のみで、そのうちの1つに選ばれたということは、平成22年度のほぼ全期間を採択に向けた作業のために費やしたという点で、非常に労力と時間はかかったが、非常に満足できる結果となったと考えている。なお、社会福祉法人の事例以外にも、このような理論化を進めている事例は、現在のところ、他に5件5業種ある。さらに、年度末に実施予定であった専修大学への訪問により、知見の一般化に関する助言や相談を受けることも2011年6月に可能になった。また追加的に、静岡の企業の調査も着手したところである。来年度は最終年度であるため、これらすべての集大成を目指し、形ある成果を出していきたい。最終年度である本年は、引き続き、静岡県、三重県、岐阜県、愛知県などの企業を数社訪問し、ヒアリング調査を行い、それぞれの企業でどのように組織学習が生じているのか、その際、その企業が選択している多様な人材、多様な雇用形態がどのように関係しうるのか、整理を進めた。具体的には、それぞれの企業のヒアリング調査の後、比較的詳細なケースを作り、それぞれの企業の組織学習の種類とその成立を可能にしている要因を探った。その結果、雇用形態の違い、職務の違いよりも、一種の自己効力感のような感情や従業員が当事者意識を持つことが許された(「許容された当事者化」)と感じられるような仕掛けを作ることに成功し、従業員の巻き込みに成功したとき、各社の目指すような組織学習が生じていたことが認められた。今回収集した対象企業の多くが、主にトップが意図的に組織学習を実現させようと旗を振っていた。初期はリーダーを中心に小さく始め、次第により多くの従業員を巻き込んでいくというパターンをとる傾向があったが、リーダーたちさえぶれなければ、巻き込みに至るまでの葛藤が大きいほど、あるいは組織的な制約が大きいほど、成果としての組織学習がより高次になる傾向が見られた。なお、上述したように今回調査の場合、雇用形態や職務の違いの影響はあまり明確にすることはできなかった。ただし、意図した組織学習を実現させた企業はたとえば正規従業員でもパート労働者でも同様の扱いをしているなど、両者を区別した待遇をとらず、同じ組織メンバーとして信頼感の醸成を図ることが多かったことから、多様性マネジメントが組織学習に無関係ということではないと理解している。今後の課題としたい。一方で、質的調査の分析・考察を裏付けたいと量的調査(質問票調査)も年度の終わりのほうに実施した。その結果は、まだ現在分析中である。可能な限り早く分析を終えて、ヒアリング協力企業などに報告書を提出するとともに、論文あるいは著書という形で公刊したい。
植物エストロゲンの心不全病態に対する性差別的防御機構の解明

【目標】生薬剤併用量の機械は増加しているため、その適正使用は、現代医学に通じる手法を用いて、裕子ウエイや有害性の根拠を明確にする必要がある。本研究では、(1)女性の閉経後に増加する心疾患発症に対する予防的応用の可能性を検討するため、これまで構築した病態モデル系の発症要因を検討した。(2)併用実践を目的として、消化管CYP3A4を介した薬物間相互作用の評価をヒト結腸癌由来培養細胞(Caco-2細胞)を用い、1α、25-dihydrixyvitamin D3(1α,25-(OH)2-D3)で処置することにより、従来の透過評価系にCYP3A4代謝能を加えた評価モデルを構築した。(3)CYP3A4だけでなくP-glycoprotein(P-gp)が発現しており。両者の基質特異性は類似していることから、本Caco-2細胞モデルを応用し、女性の服薬頻度の高い伝統薬や食品由来成分(植物エストロゲン類)のCYP3A4およびP-gpへの影響を総括的に解析した。【成果1】心筋細胞の配列構造は、心臓機能の維持に必須である。ストレッチ刺激により形成された配列構造には、Rac1活性が重要であることを示唆した。一方、doxorubicin誘発心筋細胞毒性は、Nucear factor-activated T call 5(NFAT5)蛋白の低下と関連することを明らかにした。【成果2】Caco-2細胞を用い、CYP3A4の発現および活性上昇が報告されていた1α、25-(OH)2-D3処置により、総括的解析モデルを構築した。従来法での、(1)ヒト組織由来株化細胞ではCYP3A4などの薬物代謝酵素活性が低く活性評価しない、(2)ラット由来材料は種差があり、典型的なヒトCYP3A4薬剤誘導剤のRifampicin(RFP)に反応しない。(3)酵素反応実験では経口剤でかつ長期間作用を評価できないなどの限界を克服した。すなわち、1α、25-(OH)2-D3惹起性CYP3A4誘導Caco-2細胞は、CYP3A4をmRNA・蛋白・活性レベルで測定でき、総括的解析が可能であった。これらの反応性は、1α、25-(OH)2-D3除去後96時間以内も安定しており、RFP処置による誘導反応も認められ、CYP3A4は活性、蛋白発現。mRNA発現の各レベルで再現できた。【成果3】植物リグナン類のヒト腸内細菌最終代謝物であるEnterolactone, Enterodiol(110μM)は、1α、25-(OH)2-D3惹起性CYP3A4誘導Caco-2細胞のCYP3A4のmRNA及び活性に影響しなかった。また、P-gp活性に対しても同様であった。一方、サプリメント市場で汎用されるクルクマ属生薬エキス(ウコン、ハルウコン、ガジュツ)は、CYP3A4蛋白分解を促進することにより、消化管CYP3A4活性を抑制する可能性があるが、本阻害作用に対するクルクミン(ウコン、ハルウコンの主要成分)の関与は低いことが示唆された。クルクマ属生薬エキス/クルクミンが異なる作用で、消化管P-gp介在分泌輸送を変化させることを明らかにし、併用薬物動態への影響を示唆した。生薬製剤は代替療法に使用されることから、適正使用のためには原材料生薬と主要成分での作用が異なる事への十分は注意が必要であることを喚起した。【目標】本研究は、疫学的研究で心疾患への有効性が示唆されているリグナン由来植物エストロゲン(女性ホルモン様作用物質)を用い、心血管系疾患予防効果の科学的評価を目指した。特に生命予後の悪い心不全はあらゆる心臓病の終末像であることから、多様な心不全前駆病態モデルを用いたスクリーニングによる有効性の検討を行うため、複数の評価系構築と改良を行った。一方、経口摂取された植物リグナン類は消化管内に常在する腸内フローラで代謝後、腸管を経て血中に移行することから、生薬成分の体内動態を視野にいれた代謝物の作製を行った。【成果1】ラット新生児心臓から、2種の心臓由来培養細胞(心筋、線維芽様細胞)を調製した。病態モデルとして、従来の液性因子(Angiotensin II:AII)誘発心筋肥大や線維芽様細胞増殖、心筋アポトーシスに加え、新たに心筋細胞配列構造の破綻モデルを作製した。心筋の配列構造は介在板と呼ばれる特殊な心筋の細胞間構造を維持し、興奮-収縮機能の維持に必須である。本モデルは心臓環境要因であるストレッチ刺激を心筋細胞に負荷し配列細胞を作製したもので、配列構造が維持された心筋細胞では細胞長軸先端部にN-CadherinとConnexin(Cx)43とが局在し、介在板構造をとる事を示唆した。これらの異常が心不全の発症・悪化の原因として注目されており、本モデルは配列・極性ならびにCx43局在メカニズムの検討を可能にした。【成果3】心筋細胞の拍動能を機能評価指標とした。生理的培養条件下、ENL10^<-6>Mによる形態異常や拍動停止は添加72h以内では認められず、良好な拍動状態を維持した。線維芽様細胞をENL10^<-6>M処置することでAII(10^<-9>M)誘発による細胞増殖に抵抗性が認められた。【目標】

生薬剤併用量の機械は増加しているため、その適正使用は、現代医学に通じる手法を用いて、裕子ウエイや有害性の根拠を明確にする必要がある。本研究では、(1)女性の閉経後に増加する心疾患発症に対する予防的応用の可能性を検討するため、これまで構築した病態モデル系の発症要因を検討した。(2)併用実践を目的として、消化管CYP3A4を介した薬物間相互作用の評価をヒト結腸癌由来培養細胞(Caco-2細胞)を用い、1α、25-dihydrixyvitamin D3(1α,25-(OH)2-D3)で処置することにより、従来の透過評価系にCYP3A4代謝能を加えた評価モデルを構築した。(3)CYP3A4だけでなくP-glycoprotein(P-gp)が発現しており。両者の基質特異性は類似していることから、本Caco-2細胞モデルを応用し、女性の服薬頻度の高い伝統薬や食品由来成分(植物エストロゲン類)のCYP3A4およびP-gpへの影響を総括的に解析した。【成果1】心筋細胞の配列構造は、心臓機能の維持に必須である。ストレッチ刺激により形成された配列構造には、Rac1活性が重要であることを示唆した。一方、doxorubicin誘発心筋細胞毒性は、Nucear factor-activated T call 5(NFAT5)蛋白の低下と関連することを明らかにした。【成果2】Caco-2細胞を用い、CYP3A4の発現および活性上昇が報告されていた1α、25-(OH)2-D3処置により、総括的解析モデルを構築した。従来法での、(1)ヒト組織由来株化細胞ではCYP3A4などの薬物代謝酵素活性が低く活性評価しない、(2)ラット由来材料は種差があり、典型的なヒトCYP3A4薬剤誘導剤のRifampicin(RFP)に反応しない。(3)酵素反応実験では経口剤でかつ長期間作用を評価できないなどの限界を克服した。すなわち、1α、25-(OH)2-D3惹起性CYP3A4誘導Caco-2細胞は、CYP3A4をmRNA・蛋白・活性レベルで測定でき、総括的解析が可能であった。これらの反応性は、1α、25-(OH)2-D3除去後96時間以内も安定しており、RFP処置による誘導反応も認められ、CYP3A4は活性、蛋白発現。mRNA発現の各レベルで再現できた。【成果3】植物リグナン類のヒト腸内細菌最終代謝物であるEnterolactone, Enterodiol(110μM)は、1α、25-(OH)2-D3惹起性CYP3A4誘導Caco-2細胞のCYP3A4のmRNA及び活性に影響しなかった。また、P-gp活性に対しても同様であった。一方、サプリメント市場で汎用されるクルクマ属生薬エキス(ウコン、ハルウコン、ガジュツ)は、CYP3A4蛋白分解を促進することにより、消化管CYP3A4活性を抑制する可能性があるが、本阻害作用に対するクルクミン(ウコン、ハルウコンの主要成分)の関与は低いことが示唆された。クルクマ属生薬エキス/クルクミンが異なる作用で、消化管P-gp介在分泌輸送を変化させることを明らかにし、併用薬物動態への影響を示唆した。生薬製剤は代替療法に使用されることから、適正使用のためには原材料生薬と主要成分での作用が異なる事への十分は注意が必要であることを喚起した。
超高速集積化光回路に関する基礎研究

光波の潜在的な超高速性と超広帯域性とを活用するための光変調と光復調の高速化に関して、光波系以外の信号伝送および処理に電気信号を用いる限り、従来の方法ではその高速性に限界がある。ここでは、光変調器および光復調器を組み合わせて、それ以上の高い周波数で高速光変調と光復調を行い、かつ副搬送波を用いて信号伝送路を多重化する方法を提案し、基礎的な解析と実験を実施した。1.光変調現在の実用周波数における光変調は半導体レーザーによって行える。それより高い周波数の変調は、電気光学効果結晶を用いた外部光変調器によって行う。さらに高い周波数の変調は、光変調器の縦続接続によって可能である。このように、変調周波数の高さに応じて適当な様式の変調方式を採用し、それぞれについて幾つかの副搬送波を割り当てて、信号伝送路を多重化する。2.光復調フォト・ダイオードを用いる通常の直接光検波では、最も低い周波数のベースバンドの信号しか復調できない。それより高い周波数の副搬送波に乗っている信号は、今回提案した副搬送波ヘテロダイン方式によって低い周波数に変換して復調する。しかし、回路構成を適当に選ばなければ、それぞれの副搬送波に乗っている信号を分離できない。3.多重化システムまず、2重副搬送波の分離復調について、光分岐と2個のフォト・ダイオードおよび局部信号を用いる方法を提案した。また、フォト・ダイオードに光信号を印加する前に光変調器に通すと、さらに高い周波数の副搬送波の復調も行える。ベースバンド帯を空けておくと、比較的簡単な拡張で多重化復調が可能となる。