hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
卵巣癌発癌における腹腔マクロファージ由来サイトカインの影響

上皮細胞株に腹水上清(良性4例、卵巣癌I期3例、卵巣癌III、IV期12例)を加えて増殖能を検討したところ、卵巣癌III、IV期症例において増殖能が有意に高かった。腹水上清(良性4例、卵巣癌I期3例、卵巣癌III、IV期12例)中のサイトカインは、IL6とIL10が卵巣癌III,IV期で高い発現がみられたが、IL12,IL15,LIFでは有意な差はみられなかった。進行期卵巣癌患者の腹水中ではMφ数が増加しており、その中でも腫瘍増殖に関与するM2Mφの割合が高かった。以上より、M2 Mφが多く、割合が高い卵巣癌進行期患者の腹水中には、細胞増殖を促進する因子や腫瘍増殖に関与するサイトカインが発現していることが示唆された。【目的】女性の腹腔内には6.0-7.0×10^6のマクロファージ(Mφ)が存在するが、上皮性卵巣がんの腹水中でMφが増加し、腫瘍組織間にも浸潤、集簇することは既に知られている。Mφは腫瘍周囲の微小環境により、免疫抑制に働くM2Mφに分化し、浸潤・血管新生を促進することで腫瘍増殖に関わることが報告されているが、ヒトでの研究は殆どなされておらず、卵巣癌におけるMφの意義を解析する事が新たな臨床的展開の可能性を有しているものと考えられる。【方法】(1)卵巣癌症例およびコントロール群症例の腹水を採取し、腹水中のMφの数、ならびにそのMφの中に占めるM2Mφの割合について、(2)卵巣癌腹水がhOSEとヒト卵巣癌細胞株SKOV3の増殖を促進するかどうか、(3)卵巣癌患者の腹水中で増えているサイトカインをELISAにて測定、(4)増加しているサイトカインをM2Mφが産生しているか、(5)腹水中で増加しているサイトカインが細胞増殖に関わるかどうか、(6)卵巣癌腹水がヒト単球系細胞株THP-1の分化に与える影響について、それぞれ検討した。【成績】良性、卵巣癌症例から得られた腹水より、卵巣癌III、IV期(4例)では良性疾患(3例)や卵巣癌I期(1例)に比べて腹腔MφおよびM2Mφが増加していた。hOSEとSKOV3に腹水上清(良性4例、卵巣癌I期3例、卵巣癌III、IV期12例)を加えて増殖能を検討したところ、卵巣癌III, IV期症例の腹水で刺激した方が有意に細胞増殖を促進させた。腹水上清(良性4例、卵巣癌I期3例、卵巣癌III、IV期12例)中で増えているサイトカインについて検討したところ、IL6、IL10、GROαが卵巣癌III、IV期で高い発見がみられたが、IL8、IL12、IL15、LIF、MCP-1, M-CSF、TNFαでは差はみられなかった。増加しているIL6やIL10は、腹水中のMφの免疫組織化学にて、二重陽性像が確認され, Mφがこれらのサイトカインを産生することが示唆された。また、卵巣癌腹水中で増加しているIL6、IL10、GROでSKOV3を刺激すると、細胞増殖を促進された。M2Mφの指標としてIL10を用い、卵巣癌腹水がTHP-1の分化に与える影響をみたところ、進行期卵巣癌の腹水で刺激したTHP-1はM2Mφへの分化がみられた。【成績】進行期卵巣癌患者の腹水中ではMφは増加しており、腫瘍増殖に関与するM2Mφの数も同様に増えていた。卵巣癌進行期患者の腹水中には、細胞増殖を促進する因子が含まれており、実際に増加しているサイトカインはMφも産生しており、直接細胞増殖に関与することが分かった。また、卵巣癌腹水にはMφをM2Mφへ分化させる因子が含まれていることが示唆された。
バイオマス由来ガス燃料の超高効率HCCI燃焼に関する研究

バイオマス資源から生成され熱量が低く組成が時々刻々と変化する燃料を,従来のガスエンジンよりも高い効率が期待できるHCCI(HomogeneousChargeCompressionIgnition)エンジンに適用することを検討した。燃焼のリアルタイムな把握手法の検討,制御アルゴリズムの開発を行い,分オーダーでの燃料組成変動に対し,安定した高効率運転に成功した。バイオマスガスの主な成分であるH2,CO,CH4,CO2,N2を任意の割合で混合した燃料を対象に,実験および素反応数値計算によって着火時期,燃焼期間といった燃焼特性を調査した。燃焼期間,熱発生率が最大を示す時期およびノックが生じる最小のIMEPは,燃料中のH2とCO2の比と相関が強く,H2/CO2は,バイオマスガスをHCCIエンジンで利用する際の着火,燃焼の一つの指標として利用できることを明らかにした.また,炭化水素系燃料の場合には圧力履歴と強い相関を示し,反応過程にも関係するイオン電流の計測も同時に行った結果,燃料中にCH4が存在しない場合には,イオン電流を検出するはできないが,CH4が数%でも存在すればイオン電流は検出可能であり,CH4以外の燃料組成が変わっても,イオン電流は熱発生の開始時期およびピーク時期とイオン電流の検出開始時期,ピーク時期は相関が強いことが明らかになった。これは,イオン電流によってエンジン制御に必要な着火時期および燃焼期間のリアルタイムな把握が行える可能性を示唆している。一方,HCCI燃焼時にもエンジン内では濃度や温度は必ずしも均質でなく,反応状態が空間的に異なり,その影響も無視できないと考えられる。そこで,燃料の投入位置を変化させることで温度および濃度の不均質性を変化させた実験を行った。不均質性を強く与えることで,筒内ガス圧力の過剰な上昇および騒音を低減できることが確認された。また,その効果は燃料組成によって異なり,H2とCOの比と不燃成分の割合が高いほど大きいことが明らかになった。これは組成が変化するバイオマスガスを利用するにあたっては重要な知見である。バイオマスガスをHCCIエンジンで利用するにあたって,組成が変動することから常時燃焼状態を把握することが重要となる。前年までの成果から,熱発生率から同定される着火時期および燃焼期間は,燃料組成および吸気温度が変化した場合でもイオン電流から推測できることが示された。しかし,圧力履歴およびそこから算出される熱発生率履歴にわずかな振動が生じる程度の微弱なノックとなるような運転条件においてはイオン電流には振動が生じなかったこと,また予混合気の燃料濃度の不均質性は燃焼期間に影響するが,イオン電流に及ぼす影響については調査不十分であったことから,イオン電流をエンジン制御用のフィードバック信号として用いる場合にはこれらの影響も検討しておく必要がある。そこで,燃料の不均質性を変化させた場合,またノックの有無によってイオン電流と熱発生の相関がどのように変化するかを実験的に調査した。ノッキングの影響について,明確なノック発生時,圧力履歴,熱発生率履歴には高周波数の振動が発生するのに対し,イオン電流には高周波数の振動は生じないが,大きな2つのピークを示すことが分かった。1つ目のピークは正常燃焼時と同様に熱発生との相関によって生じるものであり,2つ目のピークはノック時の急激な温度上昇により,NOxが生成され,その際に発生するイオンを補足したものと考えられる。いずれの運転条件でも圧力,熱発生率の振動は,燃焼後半に生じており,イオン電流から着火時期および熱発生ピーク時期の予測は可能であった。不均質性を変化させた場合は,不均質性が強いほど熱発生の開始およびピーク時期は遅れる傾向にあるが,イオン電流の発生時期,ピーク時期も同様に遅れる傾向を示し,不均質性が変化しても,熱発生の開始,ピーク時期はイオン電流から予測できることが分かった。バイオマスガスをHCCIエンジンで利用するにあたって,組成が変動することから常時燃焼状態を把握すること,またその情報を元にした制御アルゴリズムの構築が必要である。前年度まで,燃焼時に発生するイオンは,均質予混合気の正常燃焼時の熱発生と非常に強い相関を持ち,さらに操作量として利用できる予混合気の不均質性が変化した場合でも熱発生と相関を持つことが確認されている。また異常燃焼時には,イオン電流も正常時とは明確に異なる挙動を示すことが明らかにされ,この手法をバイオマスHCCIの燃焼把握に利用することとした。一方,制御手法としては,熱効率を評価関数にイオン電流のピーク時期を制御することとし,予混合気の不均質性または都市ガス13Aとの混焼割合を,バイオマスガスの組成変動に対して操作するアルゴリズムおよび制御システムを構築し,その有効性を実機試験において検証した。具体的には,まず,様々な燃料組成を用いた場合でも,イオン電流値最大値時期をある一定のクランクアングル範囲内に収めることで,そのバイオマスガスの燃料組成で実現できる最大の効率を得ることができることを実験的に明らかにした。次に,バイオマスガスの燃料組成が,時間変化する条件において,燃料組成に応じて予混合気の不均質性を操作することで,制御なしの場合に生じたノックによる効率低下を防いで安定した運転に成功した。また,都市ガス混合割合を操作することで,バイオマスガスの燃料組成変化によって生じる燃焼位相の変化に伴う効率低下を引き起こすことなしに運転が可能となった。

なお,予混合気の不均質性による制御は,都市ガス13A混焼に比べて対応可能なバイオマスガスの組成変動幅が小さく,より大きな組成変動については都市ガス13Aの混焼割合を利用することが望ましいことが示された。24年度が最終年度であるため、記入しない。
唾液腺細胞内情報伝達系におけるプロテインホスファターゼ2Bの役割

プロテインキナーゼとプロテインホスファターゼ(PP)による蛋白質のりん酸化の調節が細胞内情報伝達機構において極めて重要な役割を果たしていることはよく知られている。近年、サイクロスポリンやFK506がPP2Bを特異的に阻害して薬理作用を発揮することが報告され、PP2Bの生理的役割がとくにCa^<2+>/カルモジュリンとの関連で注目を集めている。唾液腺をはじめ外分泌腺における刺激分泌連関において細胞内Ca^<2+>は重要な調節因子である。しかしながら、外分泌腺におけるPP2Bの生理的役割については不明である。そこで、本研究はラット耳下腺を用いてヒスタミン(H)による分泌刺激の情報伝達機構におけるPP2Bの役割をPP2Bの阻害剤であるトルフルオロペラジン(TFP)を用いて追求し、下記の成果を得た。耳下腺切片を10μMから1.5mMまでの濃度のTFPで前処理すると1mM Hによるアミラーゼ分泌(AM)がTFPの濃度に依存して著しく増強され、1.5mMTFPで最大の増強が認められた。1mMTFPで処理すると耳下腺組織のHに対するEC_<50>値は10分の1に低下し、H_2受容体の増量とH_2作動薬に対する親和性の増強が認められた。さらにH_2受容体に共役しているGTP結合蛋白質とくに促進性GTP結合蛋白質(Gs)のHによって誘導されるコレラ毒素によるADP-リボシル化能の増加は著しく増強され、c-AMP量も著しく増量された。しかし、Gsαの増量は認められず、TFP(0.011.5mM)はGsαの機能を増強することが明らかにされた。一方、抑制性GTP結合蛋白質(Gi)の百日咳毒素によるADP-リボシル化能は1mMTFPによる前処理の如何に拘わらずHによって全く影響を受けなかった。さらに2.0mM以上の濃度のTFPで耳下腺組織を前処理のPPに及ぼす影響を調べたところ、PP1及びPP2Aは5mM以下の濃度のTFPの前処理により全く影響を受けなかった。しかし、PP2Bは2mM以上の濃度のTFP前処理によるAM分泌の抑制と一致して活性が著しく低下した。以上の結果からPP2BはHなどの分泌刺激薬の分泌情報の伝達に何らかの関連があることが示唆された。
癌遺伝子rasによる高転移性獲得過程の分子生物学的解析

がん細胞の浸潤能に関係する因子としてメタロプロテア-ゼとTIMPに着目し、まずは報告された遺伝子配列に基づいて72kDa,92kDaIV型コラ-ゲナ-ゼ、ストロムライシン、TIMPのcDNAクロ-ンをPCR法で単離した。また、TIMP関連蛋白質の部分的アミノ酸配列を入手し、これを基に合成DNAプロ-ブを調整して新しいTIMP遺伝子のcDNAをクロ-ニングした。しかし、これは本年、L.Liottaらが報告したTIMPー2と同一であることが判明した。上記のcDNAをプロ-ブとして用いて、様々ながん遺伝子でトランスフォ-ムしたNIH3T3細胞の転移・浸潤能との関連を調べた。1、転移能は鶏卵法を用いて調べた。ヌ-ドマウスによる実験的転移能の解析で報告されている結果と一致して、ここでもrasトランスフォ-マントがもっとも強い転移能を示し、src,fos,ablもrasほどではないが明らかに造腫瘍性と転移能を増加させた。2、ノ-ザン法でメタロプロテア-ゼ、インヒビタ-の発現を調べると、親株のNIH3T3で既に72kDa,92kDaコラ-ゲナ-ゼ、ストロムライシンが発現しており、細胞の転移能との相関は認められなかった。TIMP,TIMPー2の発現量にもトランスフォ-メ-ションや転移能と相関した変化はなかった。3、前年度にrasトランスフォ-マントではAutocrine Motility Factorの産生が昂進していることを報告した。本年度の結果と合わせて考えると、ras遺伝子による高転移性のNIH3T3細胞では浸潤性の昂進は細胞外マトリックスの分解能の昂進よりもむしろ運動性の昂進によって引き起こされていると考えられる。
ヨーロッパ近代のエリート文化と民衆文化

各人がこの3年間に発表した個別研究の成果は次頁のごとくで、ここでは共通テーマとの関連性について述べたい。1〕尾野は近年出版した『バラ戦争の研究』(近代文芸社、1992年)を継承・発展させて、「イギリス絶対主義王制成立期の政治文化」を分担テーマとした。そして絶対主義の成立とされるテューダー朝が、自らの正統性を根拠づけるためリチャード3世「悪人」伝説を形成、かつアーサー王伝説を流布させた。それがイングランド中心部とウェールズという周縁的地域の双方の支配に多いに寄与したことが、中心論点である。2〕田村は「フリーメーソンを中心とする1819世紀ドイツの民衆」という分担研究で、既に文部省刊行助成による『18世紀ドイツ思想と「秘儀結社」』(多賀出版1994年)を出版。ついで、ゲーテの有名な教養小説「ヴェルヘルム・マイスター」2部作にみられる、「秘儀結社」理念の変化を考察。そして文人ゲーテの「秘儀結社」の理想像が、「工業化」の始動という時代背景の中で変化してゆくさまは、まさにエリート文化と民衆文化の接合の模索と言えよう。3〕垂水は「民衆文化と労働者文化」というテーマの下にストライキ研究を試み、20世紀初頭・中部ドイツを舞台とする事例研究を重ねつつある。完成した1911年褐炭鉱夫ストライキ論では、組合組織率が高く、一見極めて「近代的」な、この集団行動を支えたのはシャリバリ的な前工業化時代からの「民衆文化」だったことが、主要論点である。また1903年ザクセン・クリミチャウ繊維労働者のストライキを目下研究中で、ここでは事件の「神話化」を問題にするが、尾野の「伝説」論からの影響大である。4〕野村は「子供の権利条約」を採りあげ、伝統的なエリート文化の下方普及である学校制度と、難民をふくむ民衆の生活様態の矛盾の考察を中心に、「子ども文化」を問題にしつつある。本年は初年度に当たるため、各自が計画にそって次のような研究を行い、互いに報告しあった。共通の理論的深化が今後の課題である。1)垂水節子:「民衆文化としてのストライキ」というテーマのもとに、「1911年中部ドイツの褐炭鉱夫ストライキ」なるケーススタディを行い、ドイツ現代史研究会(93年11月京都)で報告、目下論文執筆中。中心論点は「耕地もち鉱夫」と「スト破りへの対応」にみられる、中部ドイツ独特の民衆文化の実態。2)尾野比左夫:イギリス近代国家におけるエリート文化の始まりとされる、テューダー朝ヘンリー7世時代について、本年は外交政策=国際関係を検討。そのなかで、大陸の先進文化(ルネサンス)を導入しつつ、官僚=エリート文化の基盤が形成されたことを論じた。論文「初期テューダー朝におけるイギリス国際係の特質-ヘンリー7世外交政策の特質-」(鳴教大紀要1994)を執筆、完成。3)田村一郎:「フリーメースンリィを中心とする1819世紀ドイツのエリート文化と民衆」なる分担テーマ研究の一環として、本年度は文部省「研究成果公開促進費」を得て、『18世紀ドイツ思想と「秘密結社」-自律」への不安(上)』の執筆に励み、すでに出版。ドイツ観念論ばかりでなく、レッシング、ヘルダーをふくむ18世紀ドイツ思想が、どのような形で、「フリーメースンリィ」らと係わったかを究明した。4)野村文男:教師の懲戒権についての事例研究の続行。

教育基本法、学校教育法等の実定法等上の理念、目的、構造から、教育上必要な懲戒と学校で行われている懲戒が、実定法上明示的に禁止されている体罰に当たることを確認。国家、教師、親、子供の法規範意識の相違を究明。まず、個別テーマについては、各々以下のような研究成果をえた。1〕尾野は「イギリス絶対主義成立期における北部支配の史的意義」(広島大学・西洋史学報22号、1995年3月)、「リチャード3世伝説を巡る一考察」(鳴教大紀要1995,3月)の論考を発表。2〕田村は「フリーメン-スリィ」研究の一環として、最重要関係文献の一つであるF.J.シュナイダーの翻訳に取り組んでいる。また、本年初め出版した『18世紀ドイツ思想と「秘儀結社」(上)』の続編執筆のため、現地での資料収集に当たった。3〕野村は「こどもの権利条約」というアクチュアルな問題を中心に、日本の教育制度の行政的・法制史的考察をすすめている。4〕垂水は「中部ドイツの鉱夫-1911年褐炭鉱ストライキ-」なる論文を完成し一学術誌に投稿した。さらに、次の事例研究「神話化されたストライキ-1903年クリミチャウ繊維労働者の蜂起-」に着手。以上のような個別研究を折りに触れ報告・討議しあい、共通テーマに向けての認識と理論化を深めつつある。例えば、尾野のリチャード3世伝説の分析を通じて17世紀イギリスの政治文化を解明してゆく視点と方法は、垂水の研究に関連する。つまり、上記のごとく一つのストライキの「神話化」の解明のため、その言説を分析することが、20世紀初頭のドイツの政治文化ないしエリート文化と民衆文化の関係の究明となる。また、田村のフリーメーソン研究から、野村は当時のドイツの教養市民層の民衆観と教育観、およびそれらの日本との比較研究に多くを得ている。垂水も19世紀前半のヨーロッパの民衆結社がフリーメーソン・モデルである点を自己の研究テーマにどう組み入れるか、模索しつつある。まず、個別テーマについては、各々以下のような研究実績をもった。1〕尾野は「リチャード3世の王位纂奪の特質」(鳴教大紀要1996,3月)を完成し、昨年の同王伝説との関連で王位纂奪の実態を明らかにした。2〕田村はこれまでの「フリィーメ-スンリィー」論をさらに進めて、ゲーテの有名な教養小説「ヴィルヘルム・マイスター」2部作の『徒弟時代』と『遍歴時代』にみられる「秘儀結社」理念の変化を歴史的背景との関連で捉えた。3〕垂水は昨年に引き続き1903/4年ザクセン・クリミチャウの繊維労働者ストライキを研究。繊維業に多い女性労働者の生活実態は「民衆文化」の一部であり、5カ月におよぶ大ストライキを組織した「労働者文化」のあり方、これを「言説」合戦たらしめたドイツ第二帝制の政治文化を考察。4〕野村は「こどもの権利条約」の考察を続行するなかで、難民の子どもや武力紛争下の子どもの保護といった、今日の国際的な問題にも視野を広めつつある。本年度は本共同研究の最終年に当たるため、以上のような個別研究の相互関連ずけ、つまり共通テーマとの係わりを明瞭にするために、討論を重ねた。その成果を全員が論文として完成するには至ってないにせよ、論点が非常に明瞭になったり、理論的に深化した面も多い。たとえば、田村のゲーテと「秘儀結社」論においては、「工業化」の始動という時代背景の中で、文人ゲーテの理念が変化しゆくさまは、まさにエリート文化と民衆文化の接点を明示している。また、尾野と垂水は「伝説」や「神話化」の考察を通じて、エリート層による民衆支配と、逆に民衆による支配層への文化攻勢を問題にした。
博物館標本の種子を用いた絶滅植物集団の復元と標本管理方法の開発

絶滅危惧植物を中心に117種555標本の標本種子の発芽試験と胚の酵素活性を調査したところ、73種(62%)、235標本(42%)において生存が確認された。生存が確認された最も古い標本種子は87年前のヒメヒゴタイであった。12種類の標本作製方法と種子の生存の関係について検討した結果、40°C以下で乾燥処理を施すと高い生存率を示すことが明らかになった。発芽実生を得ることができたスズサイコについて、4つの標本由来の実生集団と採集元の野生集団の遺伝的多様性を比較した。実生集団の遺伝的多様性は著しく低かったが、野生集団から失われた対立遺伝子が確認された。●標本種子が発芽可能な種のリストアップ:前年度からの継続調査として、大阪市立自然史博物館の植物標本庫から合計80種263標本の種子を得て発芽試験を行い、18種33標本において発芽が確認された。テトラゾリウム染色試験で生存と判断されたものを含めると生存種子は合計50種104標本であった。●標本のコンディションによる発芽率の違い:様々な年代の標本が収蔵されている4種(カワツルモ、コガマ、ホシクサ、ミヤコグサ)の標本から種子を回収して発芽実験を実施した。ホシクサにおいてのみ時間経過と生存率に対数関数的な関係がみられ、他の種では経過年数に加えて標本作製方法が生存率に影響を与えている可能性が示唆された。ホシクサ、カンガレイ、タコノアシ、ヒメノハギ、イヌハギ、スズサイコ、キクモの7種について12種類の方法で標本を作製・管理した後、種子の生存率を調査した。発芽試験の結果、全ての種において高温条件で乾燥処理を施したものは著しく他の条件よりも発芽率・生存率が低下した。●野生集団と復元集団の遺伝的組成の比較:スズサイコについて、標本種子から復元した集団と野生集団の遺伝的組成や多様性をマイクロサテライトマーカー9遺伝子座を用いて予備的に比較した。標本由来の集団は野生集団に比べて、対立遺伝子数が有意に少なかったものの、ヘテロ接合度の観察値に差はなく、野生集団に見られない固有対立遺伝子も確認された。●栽培と生品展示:大阪市立自然史博物館の実験圃場および、ビオトープにおいて、発芽に成功させた植物からミズキンバイなど数種選抜し、試験栽培を開始した。●結果のまとめ:日本陸水学会甲信越支部会(平成24年12月)、日本生態学会(平成25年3月)および日本植物分類学会(平成25年3月)において研究成果を発表した。また、平成24年5月に大阪市立自然史博物館において市民向けの普及講演を行った。●標本種子が発芽可能な種のリストアップ:前年度からの継続調査として、大阪市立自然史博物館の植物標本庫から合計117種555標本の種子を得て発芽試験を行い、23種54標本において発芽が確認された。テトラゾリウム染色試験で生存と判断されたものを含めると生存種子は合計73種235標本であった。●野生集団と復元集団の遺伝的組成の比較:スズサイコについて4標本由来の実生集団32個体と野生集団131個体の遺伝的多様性をマイクロサテライトマーカーを用いて比較した。標本種子自体の遺伝的多様性は非常に低いが、標本種子にのみ見られる固有アリルがみられたことから、これらを再導入した場合に遺伝的多様性を増加させられる可能性が明らかになった。●最適な標本作製方法、管理方法の開発:2012年度標本を作成した7種に加えて、埋土種子の寿命が明らかになっているハコベ、ナズナ、ビロードモウズイカ、メマツヨイグサ、キンエノコロ、アカメガシワの6種について12種類(乾燥処理3条件×保存温度2条件×保存時の酸素条件2条件)の方法で標本を作成し、発芽実験を実施した。13種のうち7種において80°Cの乾燥処理を施すと他の乾燥処理を施すよりも生存率が低い傾向がみられた。保存温度と酸素条件についてはそれぞれ1種と2種のみが生存率に影響を受けていた。●栽培と生品展示:2012年度からの活動に加えて、大阪市立自然史博物館において企画展「植物標本のタネは地域の自然を救う!?」時を越えて発芽する植物標本のタネ(2014年3月15日5月31日)を企画し、市民に成果を公表した。●結果のまとめ:日本陸水学会甲信越支部会(平成25年12月)、日本植物分類学会(平成26年3月)において研究成果を発表した。また標本種子や博物館標本のステークホルダーに関する論文をまとめた。●標本調査および対象種の絞込み:

土地開発などにより、都市部において個体群の減少が著しく、土壌シードバンクからの復元が困難と考えられる、水生植物・湿生植物40種に絞って調査を進めた。大阪市立自然史博物館の標本庫(OSA)に収蔵されている標本群を調査し、利用に適した標本をリストアップし、標本から種子を収集した。●発芽実験:初年度となった2011年度は最近採集されたもので、最も状態の良い標本に絞って種子を収集し、発芽実験を行った。発芽試験における酸素条件はこれまでの研究論文を参考にして選択し、温度条件は段階温度法(Washitani,1987)に従って設定し実験を行った。また、発芽しなかった種子は胚を取出し、テトラゾリウム染色を行い、赤色化の染色の有無によって胚の酵素活性を確認した。●栽培実験:発芽させることができたものについては、室内の人工気象器および自然史博物館の実験圃場において実験的に栽培を進めた。●結果のまとめ:発芽試験の結果、40種のうち12種(30%)で発芽を確認した。実験に用いた107標本のうち16標本で確認され、もっとも古いものでは10年前のカワツルモの標本から発芽が確認された。また発芽がみられなくてもテトラゾリウム染色による呈色反応は11種15標本において確認された。呈色反応が確認された標本のうち、もっとも古いものは50年前のカワツルモの標本であった。上記の実験結果から標本種子は絶滅集団の復元に用いることができることが明らかになった。この発芽実験のスクリーニング結果を日本植物分類学会(平成24年3月)において発表した。志賀隆,2012.博物館標本の種子は生きている?:標本種子を用いた絶滅集団復元の試み.日本植物分類学会第11回大会,大阪.本研究では(1)どの種が標本の種子から発芽させることが可能なのかを明らかにする、(2)どのような状態の標本ならば利用可能なのかを明らかにする、(3)復元された集団に含まれる遺伝的多様性の程度を比較する、(4)博物館標本から植物保全を行う一連のフレームワークの提案、の4つを大きな目的としている。当該年度までの2年間の研究で、それぞれ4項目において順調に成果が出すことができた。(1)に関しては80種を調査し、50種で標本の種子が確認された。(2)については経年変化と標本作製方法が標本種子の寿命に大きな影響を与えることを明らかにするとともに、最適な標本作製方法を明らかにするために試験的に標本を作成した。(3)に関してはスズサイコについて標本種子由来の集団と野生集団の遺伝的多様性について試験的に比較した。(4)については試験栽培を開始した。上記のことから、本研究の達成度について「おおむね順調に進展している」と自己評価した。標本種子のスクリーニング作業は50種を予定していたが、40種行うことができ、そのうち12種から発芽を確認することができた。またテトラゾリウム試験による呈色反応が確認されたものを含めると20種の標本が生存していることを確認でき、博物館標本の種子は絶滅集団の復元に用いることができることを明らかにできた。本年度は以下の項目について研究を進める。●生存種子の発芽方法の検討:テトラゾリウム染色で胚が生存していることがわかっているにも関わらず、発芽できなかった標本種子については、ジベレリン酸添加などのホルモン処理を行うなどして発芽可能かを確認する。●野生集団と復元集団の遺伝的組成の比較:スズサイコについて35標本由来の実生集団と野生集団の遺伝的多様性をマイクロサテライトマーカーを用いて比較する。●最適な標本作製方法、管理方法の開発:昨年度
中枢神経機能におけるプロスタグランジンE受容体の役割

EP3受容体サブタイプの神経細胞における新規の機能4つのサブタイプの中で、EP3受容体は中枢において最も発現量が高くかつ幅広く分布しているサブタイプである。神経細胞におけるEP3受容体の機能を調べるため、PC12細胞にEP3受容体を発現させて細胞の形態日対する作用を調べた。EP3受容体は、PC12細胞でGiを介してアデニル酸シクラーゼの活性を抑制したが、細胞内Ca^<2+>の動員は起こさなかった。一方、EP3受容体を発現したPC12細胞をNGFで分化させた後、EP3アゴニストは神経突起の退縮と成長円錐の消失を引き起こした。この作用は、百日咳毒素(PT)では遮断されなかったので、GiやGoを介した作用ではない。一方、ボツリヌス毒素C3酵素処理により完全に阻害されることから、その作用は低分子量G蛋白質Rhoを介していることがわかった。更に、Cキナーゼを活性化するフォルボールエステル、TPAも同様にRhoを介して神経突起の退縮と成長円錐の消失を引き起こした。細胞をTPAで長時間前処理し、Cキナーゼをダウンレギュレーションさせると、TPAによる神経突起の退縮と成長円錐の消失は完全に阻害されたが、EP3受容体による作用は全く影響を受けなかった。これらのことから、Rhoを介した神経突起の退縮と成長円錐の消失には2つの経路があり、1つはCキナーゼを介する経路で、もう1つはCキナーゼを介さない経路である。EP3受容体はGiを介してアデニル酸シクラーゼの活性を抑制する一方で、PT非感受性のG蛋白質を介してCキナーゼ活性化とは異なる経路でRhoを活性化して、神経細胞の形態を制御している。現在、後者の全く新しい情報伝達系路に関与する三量体型G蛋白は不明であるが、最近G12、G13がRho活性化するという報告があり、これらのG蛋白も含めてその同定を行っている。
ＭＤ分子による免疫応答制御機構

血中にも存在する生体内脂質、およびその脂質受容体により誘導されるシグナルが、免疫活性化にとっても重要な機能をしていることを見出した。またトル様受容体(Toll-like receptor, TLR)類似分子、RP105に会合する分泌タンパクMD-1が血清内にも存在することを、作製したELISAアッセイで確認した。さらにMD-1が前述の脂質応答を制御することで過剰な免疫反応を制御している可能性を見出した。当研究課題での研究計画は以下の通りである。(1.脂質代謝・運搬に対するMD-1の役割2.エンドトキシンショックにおけるMD-1の重要性3.MD-1と自己免疫疾患との関連4.脂質会合分子MD分子群の機能解析5.脂質会合機能とTLR応答および抗体産生機能との関与)本年度はこのうち主に計画1、3、5に関して中心に行った。1.MD-1はMD-2と同様に脂質が入り込むポケットをもっており、電気泳動にて様々なリン脂質が入ることがわかった。MD-1のポケットにはもともとリン脂質がはいっており、元来RP105/MD-1が2つくっついたダイマーとなって存在していることが構造解析の論文報告で明らかにされている。RP105はTLR4とよく似た構造であるが細胞内ドメインをもたないため、シグナルを伝えるためのトランスデューサーを検索したところ、ある脂質レセプターがRP105/MD-1に会合していることがわかった。機能的な関係をさらに検索中である。3.自己免疫疾患モデルマウスとMD-1ノックアウトマウスとをかけあわせたマウスをふやして、MD-1の存在が自己免疫疾患発症に与える影響を検討したところ、ワイルドタイプマウスをかけあわせた群に比べ増強し、リン脂質に対する抗体価も上昇した。以前の当教室での報告では、自己免疫疾患モデルマウスとMD-1が会合しているRP105ノックアウトマウスとを掛け合わせた群ではワイルドタイプマウスをかけあわせた群に比べむしろ改善を見ていたという、対照的な結果であった。このような対照的な結果の理由・メカニズムについて、1.の結果もあわせてさらに検討を進めていく。5.数種類の脂質レセプターノックアウトマウスを入手することができた。TLR応答への影響について現在解析中である。当研究課題での研究計画は以下のとおりである。1.脂質代謝・運搬に対するMD-1の役割2.エンドトキシンショックにおけるMD-1の重要性3.MD-1と自己免疫疾患との関連4.脂質会合分子MD分子群の機能解析5脂質会合機能とTLR応答および抗体産生機能との関与本年度はこのうち主に1.の発展としてリゾリン脂質受容体を介する反応と免疫応答に関して結果を得た。MD-1がリゾリン脂質とも結合することを見出したことや、リゾリン脂質受容体抑制剤の中でB細胞に影響するものがあることなどから、リゾリン脂質受容体のコンディショナルノックアウトマウスを入手し解析を行った。このマウスではワイルドタイプに比べB細胞の活性化や増殖反応が低下していた。ノックアウトマウス由来のB細胞では成熟B細胞が減少し未熟B細胞が増加しており、B細胞の分化成熟にも差を認めた。また脂質受容体阻害剤でもB細胞受容体を介する活性化が抑制された。さらにそれぞれの抗体を用いた免疫沈降により、この脂質受容体とB細胞受容体とが会合していることを見出した。以上より脂質受容体を介するシグナルはB細胞受容体を介する増殖・活性化・成熟に重要であることが今回判明した(2013年免疫学会にて発表)。また昨年2.の計画の発展として、自己免疫疾患モデルマウスとMD-1欠失マウスを掛け合わせたマウスでは、ワイルドタイプ掛け合わせ群にくらべリンパ腫大・脾腫等の症状の差を認めた。このことからMD-1がリゾリン脂質と結合することや、前述の脂質受容体によるB細胞応答制御と、リンパ腫増大とが関係あるかどうか、さらに検討を進めていく(研究期間延長申請済み)。本年度は以下の研究計画各項目に則して行った。(1.脂質代謝・運搬に対するMD-1の役割2.エンドトキシンショックにおけるMD-1の重要性3.MD-1と自己免疫疾患との関連4.脂質会合分子MD分子群の機能解析5.脂質会合機能とTLR応答および抗体産生機能との関与)各項目に関する実績概要は以下のとおりである。1.作製しえた数種類の抗MD-1モノクローナル抗体を用いて、血清中の濃度を測るためのELISAシステムを構築した。このことにより感染時、発症時のMD-1の血中濃度を測定することができるようになった。血中の脂質濃度に関しては、作製した抗MD-1抗体を用いて脂質のMS解析などを共同研究により進めている。2.RP105/MD-1複合体と肥満との関与も最近報告されていることから、エンドトキシンショックに関しては体重差・個体差なども複雑に関与してくるため、慎重に検討を進めている。

3.自己免疫疾患モデルマウスとMD-1KOマウスとをかけあわせたマウスをふやして、MD-1の存在が自己免疫疾患発症に与える影響を検討中である。リン脂質に対する抗体価に関してMD-1KOマウスを掛け合わせた群とワイルドマウスをかけあわせた群とで差が見いだされ、現在そのメカニズムを検討中である。4.MD-1/MD-2ダブルKOマウスを作製したが、in vitroのレベルでは両者欠失により初めて見えるフェノタイプは見つからなかった。現在in vivo解析を進めている。5.に関してはヒトMD-1抗体作製のための免疫源は樹立できたので、さらに抗体作成を進めていく。当研究課題での研究計画は以下の通りである。(1.脂質代謝・運搬に対するMD-1の役割2.エンドトキシンショックにおけるMD-1の重要性3.MD-1と自己免疫疾患との関連4.脂質会合分子MD分子群の機能解析5.脂質会合機能とTLR応答および抗体産生機能との関与)本年度は前年度の引き続き(延長申請)で1.の発展に関してさらに解析を進めた。これまでの結果でMD-1がリゾリン脂質のひとつ、スフィンゴシン1リン酸(S1P)とも結合することがわかったことからS1PとMD-1とのかかわりを調べるため、S1P受容体のノックアウトマウスを用いて検討したところ、S1P1が欠失したマウスのB細胞ではRP105抗体刺激、CD40刺激、IgM抗体刺激などによるB細胞の活性化や増殖反応が減弱していることがわかった。またこのB細胞ではIgMhiIgDhiのmature B細胞が減少し、IgMhiIgDloのimmature B細胞が増加していたことから、S1P/S1P1はB細胞の成熟分化にも関与することがわかった。なおワイルドタイプのB細胞においてもS1P1アンタゴニストやスフィンゴシンキナーゼインヒビターでS1P機能を阻害するとB細胞活性化が抑制されるという結果を得た。このことから、B細胞分化への影響が関与しなくても、S1P/S1P1はB細胞活性化において重要であることがわかった。さらになぜS1P/S1P1はB細胞活性化において重要であるのかを検討するため、B細胞受容体(BCR)やS1P1受容体に対する抗体を用いて免疫沈降を行った。その結果、BCR(B細胞受容体)とS1P1とは会合していることが判明し、S1P/S1P1シグナルがBCRシグナルを強めるように機能している可能性が考えられた。またいっぽうで、われわれはMD-1欠失マウスをSLEモデルマウスにかけあわせたマウスではB細胞リンパ腫になりやすい傾向を見出している。このことから、MD-1によるリンパ腫発症制御のメカニズムに関して、S1P/S1P1およびBCRへのMD-1の作用を中心にさらに検討を進めてゆく予定である。免疫学これまではRP105分子のシグナルトランスデューサーを検索する目的で、その会合分子を免疫沈降法などで検索してくるという蛋白レベルの解析にとどまっていた。
湾曲π共役面を持つ新規金属埋め込み型ナノチューブの構築

自由回転ができない剛直な骨格を持つベルト状分子は、高度に規定された内部空間を持つことから、選択的なゲスト認識が可能なホスト分子となるため有用な化合物群である。本研究は、金属含有湾曲π共役ベルト状分子(メタロナノベルト)の構築ならびにこれらを用いた機能開拓を行うことを目的として研究を行った。まず、屈曲型配位子としてテトラアミノトリプチセンLを用い、金属イオンとの自己集合によりメタロナノベルトの効率的な構築を試みた。その結果、アセトニトリル中でLとPd(II)イオンを錯形成させると、三核、四核、五核のメタロナノベルトの混合物が得られることが各種スペクトルにより明らかとなった。また、この混合物から得られた結晶の構造解析により、四核メタロナノベルトの結晶構造を明らかにし、目的のベルト状構造の形成を確認できた。さらに、テンプレートを用いた単一サイズのメタロナノベルト錯体の形成を目指し、ピラーアレーン誘導体存在下、同条件で錯形成を行った。その結果、トリエチレングリコール(TEO)鎖を導入したピラー[5]アレーン誘導体(T-P5)存在下同条件で錯形成を行ったところ、T-P5が一分子包接された四核および五核のメタロナノベルトの形成が確認された。同じ側鎖を持つ環サイズのより大きなピラー[6]アレーン誘導体(T-P6)をテンプレートとして用いた場合は、T-P6が一分子包接された五核メタロナノベルトが選択的に形成した。さらに、イオン性のメタロナノベルトとT-P6との溶解性の差を利用することで、五核メタロナノベルトの単離に成功した。さらに、この五核メタロナノベルトと種々のピラーアレーン誘導体との相互作用を調べたところ、分子認識能とテンプレート効果には相関があり、五核メタロナノベルトはT-P6をT-P5に対して20倍強く認識することも明らかにした。本研究は、酸化還元応答性を兼ね備えた金属含有湾曲π共役ベルト状分子とその集積体の構築ならびにこれらを用いた機能開拓を行うことを目的としている。平成29年度は、屈曲型配位子としてテトラアミノトリプチセンLを用い、金属イオンとの自己集合によりベルト状構造の効率的な構築を試みた。その結果、アセトニトリル中でテトラアミノトリプチセンLとPd(II)イオンを錯形成させると、三核、四核、五核のベルト状金属錯体の混合物が得られることが各種スペクトルにより明らかとなった。また、この混合物から得られた結晶の構造解析により、四核ベルト状金属錯体の結晶構造を明らかにし、目的のベルト状構造の形成を確認することができた。さらに、テンプレートを用いた選択的な単一サイズのベルト状金属錯体の形成を目指し、ピラーアレーン誘導体存在下、同条件で錯形成を行った。その結果、トリエチレングリコール(TEO)鎖を導入したピラー[5]アレーン誘導体(T-P5)存在下同条件で錯形成を行ったところ、T-P5が一分子包接された四核および五核のベルト状金属錯体の形成が確認された。同じ側鎖を持つ環サイズのより大きなピラー[6]アレーン誘導体(T-P6)をテンプレートとして用いた場合は、T-P6が一分子包接された五核のベルト状金属錯体が選択的に形成することが見出された。一方、側鎖としてモノエチレングリコール鎖を導入したピラー[6]アレーン誘導体(M-P6)はベルト状金属錯体と相互作用せず、テンプレート効果を示さなかった。このことから、ピラー[6]アレーンの分子サイズが適合することに加え、TEO鎖とアミノ基との水素結合が五核ベルト状金属錯体の選択的形成に重要であることが明らかとなった。さらに、イオン性のベルト状金属錯体とT-P6との溶解性の差を利用することで、五核ベルト状金属錯体の単離に成功した。金属配位結合を駆動力とした自己集合は高収率で環状分子を得る上で非常に有用な手法である。これまでに報告されている自己集合型金属環状錯体は、単座配位子を構成要素とする例が多く、金属イオンと配位子間の自由回転が可能な部位を持つものがほとんどであった。一方、本研究で目的とするような、自己集合を利用した自由回転ができないベルト状分子を構築した例は少ない。平成29年度における研究では、キレート型の金属錯体によって剛直な屈曲型配位子を連結するという手法を用いることで、金属配位結合を駆動力としたベルト状金属錯体の効率的な構築を達成した。また、単純に配位子と金属イオンを混合するだけでは、環サイズが異なる環状錯体の混合物が得られたため、テンプレートを用いた単一構造の形成を検討した。当初は、電子不足な金属錯体と電子豊富なジアルコキシベンゼンが相互作用すると期待し、ピラー[n]アレーン誘導体をテンプレートとして利用した。しかし、様々なテンプレートを用いた検討の結果、ピラー[n]アレーンの主骨格であるジアルコキシベンゼンではなく、側鎖であるトリエチレングリコール鎖が金属錯体と相互作用していることがわかった。これは、今後この金属錯体を用いてテンプレート自己集合を行う上で、重要な知見であると考えらえる。すなわち、トリエチレングリコール鎖を持つ様々なサイズの分子をテンプレートとして用いることで、今回得られた五核ベルト状金属錯体のみならず、様々な環サイズのベルト状金属錯体が得られると期待される。

また、このテンプレートはベルト状金属錯体との溶解性の差を利用することで容易に除けるため、テンプレートはあくまでも単一サイズの環状錯体を得るために用いられ、続くベルト状金属錯体の機能探索を行う上で阻害しないことも得られた重要な知見である。以上のことから、研究はおおむね順調に進展したと判断できる。自由回転ができない剛直な骨格を持つベルト状分子は、高度に規定された内部空間を持つことから、選択的なゲスト認識が可能なホスト分子となるため有用な化合物群である。本研究は、金属含有湾曲π共役ベルト状分子(メタロナノベルト)の構築ならびにこれらを用いた機能開拓を行うことを目的として研究を行った。まず、屈曲型配位子としてテトラアミノトリプチセンLを用い、金属イオンとの自己集合によりメタロナノベルトの効率的な構築を試みた。その結果、アセトニトリル中でLとPd(II)イオンを錯形成させると、三核、四核、五核のメタロナノベルトの混合物が得られることが各種スペクトルにより明らかとなった。また、この混合物から得られた結晶の構造解析により、四核メタロナノベルトの結晶構造を明らかにし、目的のベルト状構造の形成を確認できた。さらに、テンプレートを用いた単一サイズのメタロナノベルト錯体の形成を目指し、ピラーアレーン誘導体存在下、同条件で錯形成を行った。その結果、トリエチレングリコール(TEO)鎖を導入したピラー[5]アレーン誘導体(T-P5)存在下同条件で錯形成を行ったところ、T-P5が一分子包接された四核および五核のメタロナノベルトの形成が確認された。同じ側鎖を持つ環サイズのより大きなピラー[6]アレーン誘導体(T-P6)をテンプレートとして用いた場合は、T-P6が一分子包接された五核メタロナノベルトが選択的に形成した。さらに、イオン性のメタロナノベルトとT-P6との溶解性の差を利用することで、五核メタロナノベルトの単離に成功した。さらに、この五核メタロナノベルトと種々のピラーアレーン誘導体との相互作用を調べたところ、分子認識能とテンプレート効果には相関があり、五核メタロナノベルトはT-P6をT-P5に対して20倍強く認識することも明らかにした。これまでの研究により、五核ベルト状金属錯体の効率的な合成に成功している。平成30年度は、この単離した五核ベルト状金属錯体の性質をさらに詳細に調べる。まずは、自己集合により形成したこのベルト状金属錯体の各種溶媒中における安定性を評価する。一般的に、金属配位結合を駆動力として形成される自己集合型環状錯体では、配位子交換が速い場合、混合物の中からテンプレートを用いて単一の構造を形成しても、テンプレートを除くと再び熱力学的に安定な平衡混合物に変化してしまう可能性が高い。一方、本研究で合成した五核ベルト状金属錯体はキレート型の金属錯体により連結されているため、配位子交換が比較的遅く、サイズ変換に対して安定であることが期待されるため、それについて検討する。また、得られたベルト状分子は、芳香環および金属錯体の壁で囲まれた高度に規定された1.5 nm程度の内部空間を持ち、様々な分子を包接可能と期待されるため、種々のゲストに対する認識能を調べる。まずはテンプレートとして用いたピラー[n]アレーン誘導体との相互作用を検討する。さらにお椀型分子であるカリックス[n]アレーン誘導体や、フラーレン誘導体などに対する認識能を調べる。官能基を導入した他の屈曲型配位子を用いた五核ベルト状金属錯体の合成も行い、本手法の一般性についても検討する。
免疫組織化学及び微細構造からみた筋無力症候群の神経伝達障害機序の解明

コハク酸シベンゾリンは、Vaughan Williamsらの分類でクラスI型の作用を示し、活動電位の持続時間の延長及び高濃度において内向きCa2+電流の抑制作用を示す。本剤は、未変化体として尿中に5562%が排泄され、腎機能低下の患者において、筋無力症状や低血糖を来すことが知られている。また、LEMSは電位依存性カルシウムチャンネルに対する抗体(抗VGCC抗体)により、神経筋伝達障害が生じる。そこで、コハク酸シベンゾリンの運動終板の変化とLEMSの運動終板の微細構造の変化を検討した。対象及び方法:コハク酸シベンゾリンによる筋無力症状を呈した76歳女性。Harvey Marslandtestで16%のWaning、テンシロンテスト陽性を示した。左上腕二頭筋から神経筋接合部の筋生検、また、抗VGCC抗体陽性のLEMS 5名からの筋生検がなされた。シベンゾリンによる筋無力症およびLEMSの運動終板でペルオキシダーゼでラベルしたバンガロトキシンの染色性は保たれ、アセチルコリン受容体の減少及び補体の沈着はなかった。微細構造の変化では、神経終末のサイズがシベンゾリンによる筋無力症症候群とLEMSで大きくなっていた。結論:カルシウムの流入が抑制されることにより、一次シナプス間隙へのアセチルコリンの分泌が抑制され、代償的に神経終末の肥大が惹起されると推測される。今年度は、DOK-7をコードする遺伝子に変異を加えた、DOK-7欠損マウス、コントロールマウス、DOK-7過剰発現マウスの運動終板の微細構造を観察した。DOK-7欠損マウスにおいても、DOK-7過剰マウスともに運動終板の襞の形成が不十分であった。DOK-7が欠損しても、過剰であっても、後シナプスの形成に影響を及ぼし、かつ、神経終末にも影響を及ぼしうる。コハク酸シベンゾリンは、Vaughan Williamsらの分類でクラスI型の作用を示し,活動電位の持続時間の延長及び高濃度において内向きCa2+電流の抑制作用を示す。本剤は未変化体として尿中に5562%が排泄され、腎機能低下の患者において、筋無力症状や低血糖を来すことが知られている。また、LEMSは電位依存性カルシウムチャネルに対する抗体(抗VGCC抗体)により、神経筋伝達障害が生じる。Harvey Marslandtestで16%のwaning、テンシロンテスト陽性を示した。微細構造の変化では、神経終末のサイズがシベンゾリンによる筋無力症候群とLEMSで大きくなっていた。

DOK-7欠損マウスにおいても、DOK-7過剰マウスともに運動終板の襞の形成が不十分であった。DOK-7が欠損しても、過剰で合っても、後シナプスの形成に影響を及ぼし、かつ、神経終末にも影響を及ぼしうる。遅れた理由の一つに、電子顕微鏡の冷却装置の故障により、2ヶ月ほど、装置が運用できなかったことにある。現在、修理済みで利用可能。抗LRP4抗体陽性MGに関しては、運動終板を切り出すのに、時間がかかっているが、鋭意努力して、数多くの運動終板の写真を得ていく。また、コハク酸シベンゾリン中毒に関しては、症例の蓄積は望めないので、動物実験で対応しているが、満足できるモデルが巧くできてないので、薬剤の投与量の検討、方法を検討し、動物実験を再施行中である。重症筋無力症、抗MuSK抗体陽性MG,LEMSは、6例から20例の症例の蓄積があり抗LRP4、コハク酸シベンゾリン中毒による筋無力症候群に関しては1例のみ運動終板が保存されている。頻度の少ない疾患ではあるので、1例であっても、現在持っている抗AChR抗体陽性MGの症例を数多く分析し、これらの1症例との比較が分析出来るよう研究を勧めたい。また、コハク酸シベンゾリン中毒に関しては、症例の蓄積は望めないので、上述したような動物実験で対応したい。モデルが巧くできないので、薬剤の投与量の検討など、動物実験では再施行中である。抗LRP抗体MGに関しては、運動終板の写真撮影を行い数を増やしていく。電子顕微鏡の故障による実験計画および、動物実験の遅れにより、当初予定していた消耗品の使用量が少なくなったことが主な理由である。動物実験の再施行、運動終板の写真撮影の数を増やすことにより、実験動物代、撮影用フィルム、印画紙等の消耗品に使用する予定である。
磁場を横切る粒子加速と電界発生によるプラズマ構造形成

I.電子ビーム・プラズマ系におけるプラズマ構造形成の数値解析を更に進めて次の事が明らかにされた。(1)非線形静電波による磁場を横切るプラズマ電子加速と加熱を表す輸送方程式及び乱流プラズマ波動による異常拡散を組み入れた電磁流体方程式の数値解析を3次元のモデリングを用いて行なった。即ち、プラズマ電子ドリフト速度、電界、電子温度、電子密度の3次元プロフィルの時間変化の解析により異常拡散の効果が詳細に明らかにされた。(2)一般化されたオームの法則に基づきドリフト速度とプラズマ電子の圧力勾配で発生電界が決定される。静電波のランダウ減衰によってプラズマ電子がx軸方向に加速され、このドリフトのダイナモ効果によりy軸方向の電界が発生する。この電界がつくるx及びz軸方向の電界はポアッソン方程式により与えられる。更に、x軸方向電界はE×Bドリフトによってy軸方向のプラズマ電子ドリフトを生じさせる。これらのドリフトが電子ビーム・プラズマ系の中心部に電子ホール状の加熱領域(ラーマー半径程度)が生ずる事を16年度において既に明らかにした(J.Plasma Fusion Res. SERIES, Vol.6, 253-255(2004))。(3)中心部からのプラズマ電子の輸送によりプラズマ崩壊に至るが、空間的に成長した静電波動の乱流プラズマ波動拡散によりプラズマ電子は中心部に向かって拡散し、プラズマ電子加速と競合する。2つの機構を組入れたた数値解析により、中心部の電子密度減少は飽和し、更に電子ホール状の加熱領域が消滅する事が明らかにされた。結果は実験結果と定性的定量的に一致する。(4)この数値解析の方法を用いて核融合プラズマ中の輸送障壁形成の機構の解析が可能である事が分かり、その数値解析遂行の準備も完成した。II.磁化プラズマ中の異常波のコンプトン散乱により磁場方向の高エネルギー電子ビーム加速(【less than or similar】1GeV)が起こる事を明らかにした(J.Plasma Phys. Vol.3, Part3, pp.331-357(2004))。I.電子ビーム・プラズマ系におけるプラズマ構造形成の数値解析により次の事が明らかにされた。即ち、プラズマ電子ドリフト速度、電界、電子温度、電子密度の3次元プロフィルの時間変化が詳細に明らかにされた。これらのドリフトが電子ビーム・プラズマ系の中心部に電子ホール状の加熱領域(ラーマー半径程度)を生じさせる事を明らかにした。(3)中心部からのプラズマ電子の輸送によりプラズマ崩壊に至るが、空間的に成長した静電波動の乱流拡散によりプラズマ電子は中心部に向かって拡散し、プラズマ電子加速と競合する。2つの機構を組入れた数値解析により、中心部の電子密度減少は飽和しプラズマ崩壊に至らない事が示された。

結果は実験結果と定性的定量的に一致した。(4)この領域の先で電子ホールと電子加熱が静電波のコヒーレンスの消滅等により無くなる。このプロセスの数値解析を現在遂行中である。I.電子ビーム・プラズマ系におけるプラズマ構造形成の数値解析を更に進めて次の事が明らかにされた。(1)非線形静電波による磁場を横切るプラズマ電子加速と加熱を表す輸送方程式及び乱流プラズマ波動による異常拡散を組み入れた電磁流体方程式の数値解析を3次元のモデリングを用いて行なった。即ち、プラズマ電子ドリフト速度、電界、電子温度、電子密度の3次元プロフィルの時間変化の解析により異常拡散の効果が詳細に明らかにされた。(2)一般化されたオームの法則に基づきドリフト速度とプラズマ電子の圧力勾配で発生電界が決定される。静電波のランダウ減衰によってプラズマ電子がx軸方向に加速され、このドリフトのダイナモ効果によりy軸方向の電界が発生する。この電界がつくるx及びz軸方向の電界はポアッソン方式により与えられる。更に、x軸方向電界はE×Bドリフトによってy軸方向のプラズマ電子ドリフトを生じさせる。これらのドリフトが電子ビーム・プラズマ系の中心部に電子ホール状の加熱領域(ラーマー半径程度)を生じさせる事を16年度において既に明らかにした(J.Plasma Fusion Res.SERIES, Vol.6,253-255(2004))。(3)中心部からプラズマ電子の輸送によりプラズマ崩壊に至るが、空間的に成長した静電波動の乱流プラズマ波動拡散によりプラズマ電子は中心部に向かって拡散し、プラズマ電子加速と競合する。2つの機構を組入れたた数値解析により、中心部の電子密度減少は飽和し、更に電子ホール状の加熱領域が消滅する事が明らかにされた。結果は実験結果と定性的定量的に一致する。(4)この数値解析の方法を用いて核融合プラズマ中の輸送障壁形成の機構の解析が可能である事が分かり、その数値解析遂行の準備も完成した。II.磁化プラズマ中の異常波のコンプトン散乱により磁場方向の高エネルギー電子ビーム加速(【less than or similar】1GeV)が起こる事を明らかにした(J.Plasma Phys.Vol.3,Part3,pp.331-357(2004))。