hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
カムチャッカ半島の地熱資源調査

さらに、ペトロパブロフスク・カムチャツキー周辺の地熱地域を訪問し、地表地質の予備調査、地熱水の流出と地下流動特性の研究状況について現場において活発な討論を行った。特にムトロフスキー地熱地帯では、現在地熱発電所の建設が進められており、開発会社の担当者を含めて現地討論を行った。ムトロフスキー地熱地帯は火山体上部に位置しており、地熱資源は豊富と推定されるが、貯留層構造等については未解明な点が多く、今後の研究を必要としている。本年度は、国際学術研究の初年度であり、双方の研究の状況を充分に理解し、さらにカムチャッカ半島での将来の調査研究の方向性について理解を深めた。本年度の成果をもとに、次年度以降の本格調査研究の計画立案を進めたい。ロシアカムチャッカ半島の地熱資源調査として、平成12年9月8日9月25日の18日間調査を行った。日本側参加者は、土屋他2名、ロシア側参加者は、キリューヒン博士他調査地域および調査内容により適宜調査協力者を得て調査を行った。研究交流:地熱探査研究ならびに貯留層評価方法について火山研究所においてセミナーを実施し、日本側、ロシア側の研究情報交換を行った。また、カムチャッカ州政府主催の天然ガス開発セミナーに参加し、カムチャッカ半島の天然ガス資源の賦存とその開発方法について討議した。モトノフスキー地熱地帯:ペトロパブロフスク・カムチャツキーをベースにし、日帰りの調査を繰り返した。モトノフスキー・ダッチニー地域の地表探査を行い、き裂構造、変質および岩石試料の採取を行った。本地域では、パイロットプラントの稼働が開始され、また実用プラントの建設工事が進められている。本地域は、モトノフスキー火山の中腹部に位置し、主たる貯留層岩石は安山岩流紋岩質の火山岩である。これらの貯留層岩石の地表露出部分には、冷却ともなう節理が発達し、節理の方向は、火山全体の断層構造と調和的な配向方向を示している。今後室内実験等により、節理の形成条件について検討する必要がある。パラムシュール島:千島(クリル)諸島の最北部に位置し、カムチャッカ半島の最も近い有人の島である。ペトロパブロフスク・カムチャツキーからは週に2便の大型ヘリコプターが運航されている。本島では、地熱探査用の坑井が採掘され、一部の坑井については温度のモニタリングが行われているが、本格的な調査までには至っていない。本島の地熱地域は、主として新第三紀火山砕屑岩類とこれを覆う第四紀火山岩からなっており、新第三紀火山砕屑岩類はいわゆるグリーンタフ変質を被っている。これらの地層の構造と変質の程度が熱源探査および地熱貯留層の把握に大きな指針となると考えられる。カムチャッカ半島には、南北に2列の大きな火山列があり、29個の活火山が分布している。活火山のほとんどは東側火山列に分布し、この火山列の南方延長は千島(クリル)諸島から知床半島に連なり、千島弧を形成している。カムチャッカ半島の地熱資源のほとんどは東側火山列に賦存している。Paratunsky, Maikinsky, Paushetsky, Mutnovsky等が代表的地熱地帯であり、このうちParatunsky, Maikinskyは州都のPetropavlovsk-Kamchatsky(P/K)近郊に位置し、現在は温泉、鮭養殖場、農業施設等に対する熱水利用が図られている。
変形性顎関節症実験モデル(羊)を用いての関節鏡視所見と病理組織所見との比較検討

目的:羊に変形性顎関節症を作製した後、微細径関節内視鏡(新興光器社製FV-3000,MS-611S:直径1.1mm)を用いて関節腔内を鏡視した後に羊を屠殺して顎関節部を摘出し病理組織標本を作製した後、その関節鏡所見を病理所見と比較して関節鏡所見の正診率を検討した。方法:対象は羊20顎関節とし、石丸・Gossの方法にて変形性顎関節症を作製し6ヵ月後に、全麻下にて関節鏡視を行った。関節鏡視は上関節腔に限り、下顎窩および関節結節部の所見を、(1)表面に平滑な線維性組織を認めるもの、(2)表面線維性組織がフィブリレーション状のもの、(3)骨の露出を認めるものの3段階に分類した。病理所見については(I)表面線維層が均一で平滑、(II)表面線維層が凹凸、(III)骨露出の3段階に分類した。両所見の比較には、それぞれの所見の最も進行した段階を選んだ。関節鏡所見および病理組織所見採取には観察者を変え、バイアスが入らないようにした。また、円板及び円板後部結合組織の穿孔についても両所見間で検討した。結果:両所見の一致を見たのは11関節(55%)であり、顎関節鏡によるoverdiagnosisは2関節(10%)、underdiagnosisは7関節(35%)であった。また関節鏡による穿孔の正診率は50%であった。考察:正診率の低い大きな理由は穿孔部及び骨露出部を覆う関節表面の線維組織のためと推察された。しかしながら、今後の関節鏡の進歩により、より明瞭な関節鏡所見が得られるならばその正診率は上昇すると思われた。目的:羊に石丸・Gossの方法(International Journal of Oral and Maxillofacial Surgery,Vol21,P239-242,1992.)にて変形性顎関節症を作製した後、微細関節鏡(新興光器社製FV-3000,MS-611S直径1.1mm)を用いて関節腔内を鏡視し、これら関節鏡所見と病理所見と比較することにより、関節鏡により変形性顎関節症をどの程度正確に診断することができるのかを検討した。方法:対象は羊20顎関節とし、変形性顎関節症を作製し6カ月後に全麻下にて関節鏡視を行った。関節鏡視は上関節腔とし、下顎窩および関節結節部の関節鏡所見を、(1)表面に平滑な線維性組織を認めるもの、(2)表面線維性組織がフィブリレーション状のもの、(3)骨の露出を認めるものの3段階に分類した。関節鏡視後に屠殺し、顎関節を一塊に摘出した後、矢状方向に切断し病理組織標本を作製した。病理所見については、(I)表面線維層が均一で平滑、(II)表面線維層が凹凸、(III)骨露出の3段階に分類した。さらに円板及び円板後部結合組織の穿孔についても両所見間で検討した。以上より変形性顎関節症に対する関節鏡視診査の有用性が得られている。現在は関節鏡所見と病理所見の最終確認を終え、論文作製中である。

目的:羊に変形性顎関節症を作製した後、微細径関節内視鏡(新興光器社製FV-3000.MS-611S:直径1.1mm)を用いて関節腔内を鏡視した後に羊を屠殺して顎関節部を摘出し病理組織標本を作製した後、その関節鏡所見を病理所見と比較して関節鏡所見の正診律を検討した。方法:対象は羊20顎関節とし、石丸・Gossの方法にて変形性顎関節症を作製し6カ月後に全麻下にて関節鏡視を行った。関節鏡視は上関節腔に限り、下顎窩および関節結節部の所見を、(1)表面に平滑な線維性組織を認めるもの、(2)表面線維性組織がフィブリレーション状のもの、(3)骨の露出を認めるものの3段階に分類した。病理所見については、(I)表面線維層が均一で平滑、(II)表面線維層が凹凸、(III)骨露出の3段階に分類した。両所見の比較には、それぞれの所見の最も進行した段階を選んだ。関節鏡所見および病理組織所見採取には観察者を変え、バイアスが入らないようにした。また、円板及び円板後部結合組織の穿孔についても両所見間で検討した。結果:両所見の一致を見たのはII関節(55%)であり、顎関節鏡によるoverdiagnosisは2関節(10%)、underdiagnosisは7関節(35%)であった。また関節鏡による穿孔の正診率は50%であった。考察:正診率の低い大きな理由は穿孔部及び骨露出部を覆う関節表面の線維組織のためと推察された。しかしながら、今後の関節鏡の進歩により、より明瞭な関節鏡所見が得られるならばその正診率は上昇すると思われた。
看護学実習において学生が経験した「患者中心」の看護と教員の学生理解に関する研究

看護学士教育における看護実践能力の育成のために、技術教育のみでなく、看護の本質を理解し、患者に関心をもってかかわりながら、学生自身の見方や考え方を「患者中心」へとシフトしていく臨床での学習経験は重要である。本研究の目的は、看護学実習(以下、実習)において看護系大学学生が「患者中心」の看護をどのように経験し、学んでいるのかを学生及び実習指導教員(以下、教員)の視点から明らかにすることである。研究の第一段階として、2018年度より2年計画で、実習における学生の患者理解について概観するための文献検討を行っている。2018年度は、基礎看護学実習に限定せず、広く患者を受け持つ実習に関して、我が国において看護系大学が増加した過去20年間を中心に、学生、教員それぞれの立場から捉えられた患者理解や看護実践を通した学びに焦点をあて、「看護(nursing)」「実習(practicum)」「学生(student)」「患者中心(patient-centered)」「教員(instructor)」「実習教育(practicum, instruction)」「経験(experience)」「学び(learning)」等をキーワーズに、会議録を除いた国内外の文献データベース及び看護系雑誌による検索を行った。文献収集の過程で、引用文献から二次的に得られた文献も、検索対象に含めた。データベースによる国内和文献及び英文献の検索、及び看護系雑誌の関連文献より、各要旨から研究テーマに沿って文献を絞り込み、研究論文(和文)、研究論文(英文)、学生手記(和文)、学生手記(英文)に分類した。抽出した文献について、研究目的に沿って文献の精読、文献リストの作成を進めているところである。研究の第一段階として、2018年度より2年計画で、実習における学生の患者理解について概観するための文献検討を行っているが、研究者の健康上の理由のため、3ヶ月程遅れて研究を開始した。2018年度は、基礎看護学実習に限定せず、広く患者を受け持つ実習に関して、我が国において看護系大学が増加した過去20年間を中心に、学生、教員それぞれの立場から捉えられた患者理解や看護実践を通した学びに焦点をあて、「看護(nursing)」「実習(practicum)」「学生(student)」「患者中心(patient-centered)」「教員(instructor)」「実習教育(practicum, instruction)」「経験(experience)」「学び(learning)」等をキーワーズに、会議録を除いた国内外の文献データベース(医学中央雑誌、CINAHL Plus with Full text)及び看護系雑誌による検索を行った。文献収集の過程で、引用文献から二次的に得られた文献も検索対象に含めた。その結果、データベースより、国内和文献は340件、英文献は122件検索され、看護系雑誌関連文献を含め、各要旨から研究テーマに沿って文献を絞り込み、これまでに研究論文(和文)145件、研究論文(英文)69件、学生手記(和文)159件、学生手記(英文)16件を抽出した。抽出した文献について、研究目的に沿って文献を精読し、実習での学生の患者理解及び「患者中心」の看護についての学生の学びの観点から、文献リストの作成を進めているところである。研究第一段階の2年目となる2019年度は、必要時文献の追加収集及び精選を行いながら、研究目的に即して整理した文献リストの内容をもとに、年次推移、研究デザイン、研究方法、実習科目や履修学年、受け持ち患者の状態や状況、実習での学生の患者理解及び「患者中心」の看護についての学生の学びの観点から、分析を行う。分析の際には、学生の学びの内容と学生の変化、それらの契機や転機となったことは何か、学びが困難な状況はなかったか、学生・教員それぞれの立場による特徴はあるかを検討する。2019年度後半には、結果を研究成果として発表できるよう論文作成の準備を行う。なお、2020年度より第二段階として実習をフィールドとした調査を予定しているため、文献検討の知見をふまえて研究計画を立案していく予定である。

抽出した文献について、研究目的に沿って文献の精読、文献リストの作成を進めているところである。研究の第一段階として、2018年度より2年計画で、実習における学生の患者理解について概観するための文献検討を行っているが、研究者の健康上の理由のため、3ヶ月程遅れて研究を開始した。2018年度は、基礎看護学実習に限定せず、広く患者を受け持つ実習に関して、我が国において看護系大学が増加した過去20年間を中心に、学生、教員それぞれの立場から捉えられた患者理解や看護実践を通した学びに焦点をあて、「看護(nursing)」「実習(practicum)」「学生(student)」「患者中心(patient-centered)」「教員(instructor)」「実習教育(practicum, instruction)」「経験(experience)」「学び(learning)」等をキーワーズに、会議録を除いた国内外の文献データベース(医学中央雑誌、CINAHL Plus with Full text)及び看護系雑誌による検索を行った。文献収集の過程で、引用文献から二次的に得られた文献も検索対象に含めた。その結果、データベースより、国内和文献は340件、英文献は122件検索され、看護系雑誌関連文献を含め、各要旨から研究テーマに沿って文献を絞り込み、これまでに研究論文(和文)145件、研究論文(英文)69件、学生手記(和文)159件、学生手記(英文)16件を抽出した。抽出した文献について、研究目的に沿って文献を精読し、実習での学生の患者理解及び「患者中心」の看護についての学生の学びの観点から、文献リストの作成を進めているところである。研究第一段階の2年目となる2019年度は、必要時文献の追加収集及び精選を行いながら、研究目的に即して整理した文献リストの内容をもとに、年次推移、研究デザイン、研究方法、実習科目や履修学年、受け持ち患者の状態や状況、実習での学生の患者理解及び「患者中心」の看護についての学生の学びの観点から、分析を行う。分析の際には、学生の学びの内容と学生の変化、それらの契機や転機となったことは何か、学びが困難な状況はなかったか、学生・教員それぞれの立場による特徴はあるかを検討する。2019年度後半には、結果を研究成果として発表できるよう論文作成の準備を行う。なお、2020年度より第二段階として実習をフィールドとした調査を予定しているため、文献検討の知見をふまえて研究計画を立案していく予定である。2018年度前半、研究者の健康上の理由により研究開始が遅れた関係で、研究補助アルバイトの採用期間が当初予定よりも短く、人件費予算が低く抑えられたことが一因と考えられた。2019年度においては、早めに人件費を活用し、研究補助アルバイトを採用して文献研究を円滑に進められるように計画していく。
生体蛍光検出装置を用いた遺伝子発現の画像化システムの開発

我々は、脳腫瘍の遺伝子治療を成功させるために非常に重要である生体内での遺伝子の発現とその分布を正確に把握するための方法として、生体蛍光検出装置を用いた生体内での外来遺伝子発現の画像化システムの開発を行っている。まず、ルシフェラーゼ遺伝子をウイルスベクターを用いて細胞に導入発現し、生体蛍光検出装置を用いて、in vivoで遺伝子発現の画像化システムの構築を目的として研究を行った、またその他、脳腫瘍に対する分子生物学的研究を幅広く行った。ルシフェラーゼ遺伝子を恒常的に発現する腫瘍細胞を作成し、その生体内での状態を、生体蛍光検出装置で画像化した。さらに、治療遺伝子(薬剤感受性遺伝子)を持ったウイルスベクターを投与し、その治療効果を検討し、有効性が認められた。さらに治療遺伝子(薬剤感受性遺伝子・Cytochrome p450)とルシフェラーゼ遺伝子ぼ両方を持つアデノウイルスベクターを作製し。これにより、生体内での遺伝子発現の画像化を検討している。また、ES細胞から作成した神経幹細胞にルシフェラーゼ遺伝子を挿入し、その細胞をラット脳内、脳腫瘍モデルに注入し神経幹細胞の分布状態を検討し、その遊走性を明らかとした。その他の脳腫瘍に対する分子生物学的研究を行った。グリオーマ細胞に対す蛋白治療として、p53 proteinを用いて直接細胞内に導入する方法の有効性を明らかにし、また新しいヒトのグリオーマ抗原(RFX4)を同定し、その免疫反応を検討した。これらは論文として発表した。今回我々は、生体内での遺伝子の発現とその分布を正確に把握するための方法として、生体蛍光検出装置を用いた生体内での外来遺伝子発現の画像化システムの開発を行っている。ルシフェラーゼ遺伝子をウイルスベクターを用いて細胞に導入発現し、生体蛍光検出装置を用いて、in vivoで遺伝子発現の画像化システムの開発を目的としている。現在、ルシフェラーゼ遺伝子を恒常的に発現する腫瘍細胞を作成し、その生体内での状態を、生体蛍光検出装置で画像化した。さらに、治療遺伝子(薬剤感受性遺伝子)を持ったウイルスベクターを投与し、その治療効果を検討している。さらに治療遺伝子(薬剤感受性遺伝子・Cytochrome p450)とルシフェラーゼ遺伝子ぼ両方を持つアデノウイルスベクターを作製を行っている。これにより、生体内での遺伝子発現の画像化を試みている。また、作製したアデノウイルスベクターを用いて種々の脳腫瘍培養細胞での遺伝子発現の状態をX-Gal染色、免疫染色で詳細に検討する予定である。今後は、脳腫瘍モデル、あるいは皮下腫瘍における遺伝子発現の状態を生体蛍光検出装置で検出可能かどうか検討し、さらに、その遺伝子発現状態とCytochrome p450遺伝子・cyclophosphamideの薬剤感受性遺伝子治療の効果を比較検討し、脳腫瘍における遺伝子発現の画像化システムの開発と効果的な薬剤感受性遺伝子治療の改良を目指している。また、ルシフェラーゼにより代謝される薬剤を投与することにより、PETによる画像化も検討している。
画像解析を応用した放牧草地の生態系環境評価

本研究は,画像解析を応用した放牧草地センシングシステムの構築を目指したものである。放牧草地を適切に管理するに当たっては,イネ科牧草とマメ科牧草の比率,雑草繁茂の状態,裸地・枯死地の分布など様々な空間情報を把握する必要がある。しかし,放牧草地は広大であるため,こうした情報を高精度に得るのは困難である。そこで本研究では,カメラを装備した車両を走行させて放牧草地内の画像を収集し,画像解析を応用したデータ処理により草地内の状況を推定した。本研究では,画像解析(RGBカラー画像およびハイパースペクトル画像)を利用した放牧草地のセンシングシステム構築を目指している。平成22年度の研究において,以下の成果を得た。【携行型画像撮影システムの開発】放牧草地内において画像サンプルを収集するため,人手で容易に運搬できる小型軽量な携行型画像撮影システムを開発した。特に,ハイパースペクトル画像は,一度にラインエリアの情報しか取得できない。そのため,対象物を面として捕らえるためには,撮影位置を移動させながら撮影しなければならない。そこで,本撮影システムでは,三脚に電動雲台を取り付け,電動雲台の回転運動により撮影位置を移動させた。【小スケール画像の取得】北海道大学生物研究農場内の放牧草地内に小スケール(0.5m×0.5m)の実験区を設け,イネ科牧草,マメ科牧草,雑草,採食行動による可食地および不食地を対象に,それぞれの画像(RGBカラー画像およびハイパースペクトル画像)を取得した。【推定モデルの作成】取得したRGBカラー画像およびハイパースペクトル画像から,草種識別モデル(イネ科牧草,マメ科牧草および雑草)および可食地・不食地識別モデルの作成を試みた。RGBカラー画像解析では,形状や模様(テクスチャ)などの空間情報を利用してモデルを作成した。一方,ハイパースペクトル画像解析は,波長情報と空間情報を組み合わせてモデルを作成した。それぞれ作成されたモデルによる精度の検証・評価を行い,モデルの有効性を検討した。【車両走行型撮影システムの検討と試験】携行型撮影システムでは,草地内の小スケールの情報しか取得できない。そのため,草地全面の画像情報を取得するために,車両走行型撮影システムを開発した。このシステムでは,トラクタなどの農用車両にカメラを搭載して撮影することで,トラクタの走行により撮影位置を移動させ草地全面の画像情報を取得できる。本研究では,画像解析(RGBカラー画像およびハイパースペクトル画像)を利用した放牧草地のセンシングシステム構築を目指した。このセンシングシステムの構築により,植生,生育量および成分の放牧草地における不均一性などの放牧草地生態系環境情報のセンシングが可能となる。【小スケール画像の取得】複数年度の画像を取得するために,前年度と同様に携行型撮影システムを用いて,イネ科牧草,マメ科牧草,雑草,採食行動による可食地および不食地の画像を取得した。【フィールドスケール画像の取得】前年度に試作した車両走行型撮影システムにより,放牧草地全面の画像を取得した。【推定モデルの改良】前年度に作成したモデルの精度の検証を行い,有効性を検討した。また複数年度のデータによる検討から,さらに汎用性の高い推定モデルに改良した。なお,このとき解析において使用する画像は,携行型撮影システムによって取得した画像である。【圃場マッピングシステムの開発】作成した推定モデルから,圃場全体の草種構成の分布および可食地・不食地の分布を示すフィールドマップを作成した。ここでは,作成したそれぞれのモデルと車両走行型撮影システムにより取得した画像を用いて,放牧草地の圃場マップを作成した。また,囲場マップに位置情報も加えて,定量的かつ視覚的に圃場の不均一性を示すマップを作成した。これらのマップの作成には,膨大な画像情報を使用するため,効率的な処理アルゴリズムを開発した。放牧草地では,季節変動に伴う草量の変動,広大な面積規模による草地管理の難しさなどから,経年化に伴う草地の荒廃が問題に挙げられる。本研究で構築したセンシングシステムにより,放牧草地の植生変動(イネ科・マメ科牧草,雑草,枯死,裸地など)を把握することが可能となったので,これらを持続的な放牧草地管理のための有用な情報として活用することが期待できる。
レジオネラ含有バキュオール(LCV)へリクルートされる宿主GTPaseの研究

細胞内寄生性細菌は、宿主細胞内機能を利用し自己増殖を可能とするニッチを形成する。たとえば、レジオネラはER・ゴルジ間トラフィックを様々なエフェクタータンパク質を駆使してハイジャックする。この過程で多くの細菌由来のタンパク質(エフェクタータンパク質)がレジオネラ含有膜胞(LCV)に局在し、メンブレントラフィックにおいて中心的な役割をはたすRab1やARF1などの低分子量Gタンパク質を、LCVにリクルートし利用していることが知られている。近年のRab1に関わる多数の研究は、レジオネラが多数のエフェクタータンパク質を動員し、様々な分子機構によりRab1の活性を巧みに制御していることを明らかにした。その一方で、ARFIの活性調節に関わるエフェクタータンパク質としては、GEF活性をもつRalFのみが知られているにとどまり、LCV上での一時的なARF1活性化の制御機構、さらには活性化されたARF1のレジオネラ感染における役割も明らかにされていない。本年度は、昨年度までに構築したARFIと相互作用するタンパク質をBiFC法により検出する系を利用して、ARF1と相互作用するレジオネラエフェクタータンパク質の探索を行った。全エフェクタータンパク質の過半数をカバーするエフェクタータンパク質Gatewayライブラリを構築し、これをBiFC用ベクターへ導入したものを利用したスクリーニングにより、RalF以外に複数のARF1結合エフェクタータンパク質を得た。今後、これらの相互作用の別の方法により確認した上で、その生理的意義について研究を発展させていく予定である。交付申請書に記載の研究計画をおおむね達成できた。その一方で、ARF1の活性調節に関わるエフェクタータンパク質としては、GEF活性をもつRalFのみが知られているにとどまり、LCV上での一時的なARF1活性化の制御機構、さらには活性化されたARF1のレジオネラ感染における役割も明らかにされていない。研究分担者はこれまでに、ショウジョウバエの培養細胞においてARF1の宿主側GEFであるGBF1をノックダウンすると、レジオネラの増殖阻害が起こることを見いだしている。本年度は、レジオネラの哺乳類宿主細胞内増殖におけるGBF1の役割をノックダウンにより解析したが、ショウジョウバエの場合とは異なり有意な増殖阻害を検出できなかった。一方で、ARF1およびRalFと結合する細菌・宿主タンパク質を探索する系として、一過的にトランスフェクトした哺乳類細胞中におけるARF1-RalF,ARF1-GBF1の相互作用をBiFC法により検出する系を確立することができた。本年度実績によりBiFC法を確立できたが、BiFC法と相補的なアプローチとしての免疫共沈殿法等の活用も取り入れ、相互作用タンパク質の同定を更に展開していく予定である。
IgM/A受容体欠損マウスにおける精子形成異常の解析

Fcα/μR遺伝子欠損マウス由来生殖細胞はWBB6F1-W/W^Vマウス精巣内への移植後に精子への分化が認められたためFcα/μR遺伝子欠損マウスにおける精子形成異常は生殖細胞自身ではなく、精巣細胞側の異常であると考えられた。また、BALB/cマウスES細胞を用いて作製したFcα/μR遺伝子欠損マウスにおいては正常の精子形成が認められたため、精子形成におけるFcα/μR遺伝子の関与はマウスの遺伝背景によって異なると考えられた。目的IgAおよびIgMに対するFc受容体であるFcα/μRの遺伝子欠損マウス(Fcα/μ-/-マウス)において精子形成異常の結果、雄性不妊が認められたことから、Fcα/μが精子分化に関与していると考えられた。本研究ではFcα/μ-/-マウスにおける精子細胞分化異常のメカニズムを明らかにすることを目的とする。結果透過型電子顕微鏡Transmission-type Electron Microscope(TEM)を用いて、精巣における精子細胞の分化について観察を行った。野生型マウス精巣内には精原細胞Spermatogonia、精母細胞spematocytes、球状round及び伸長精子細胞elongated spermatidが認められたが、Fcα/μ-/-マウスの精巣内では球状精子細胞は異常な形態を示し、伸長精子細胞は確認されなかった。さらに走査型電子顕微鏡Scan-type Electron Microscope(SEM)を用いて、成熟精子の観察を行ったところ、野生型マウス由来の成熟精子は三目月状の形態をしていた。一方Fcα/μ-/-マウス由来の成熟精子は数が激減しており、存在した精子についても頭部が屈曲したり、凝集したような異常形態を呈していた。精巣体細胞におけるFac/uR遺伝子の発現を検討する目的で、精巣体細胞が存在するものの生殖細脚が存在しないWBBF1一W/Wvの精巣からmRNAを抽出し、RT-PCRを行った。その結果、WBBF1-W/Wvマウスの精巣においてもFcα/μ遺伝子の発現が確認されたことから、Fcα/μ遺伝子はマウス精巣体細胞にも発現していることが示唆された。以上の結果からマウス生殖細胞または精巣体綱胞に発現するFcα/μが精子形成に関与していることが示唆された。目的IgAおよびIgMに対するFc受容体であるFcα/μRの遺伝子欠損マウス(Fcα/μR-/-マウス)において精子形成異常の結果、雄性不妊が認められたことから、Fcα/μRが精子分化に関与していると考えられた。本研究ではFcα/μR-/-マウスにおける精子細胞分化異常のメカニズムを明らかにすることを目的とする。結果H20年度の研究からFcα/μR遺伝子はマウス生殖細胞および精巣体細胞に発現することが明らかとなった。そこでFcα/μR-/-マウスの精巣由来生殖幹細胞の精子形成能を検討するため、c-kitの変異によって精子形成不全を呈するWBB6F1-W/W^Vマウスの精巣内へFcα/μR-/-マウスまたは野生型マウス由来精巣細胞を移植し、3ヵ月後に精巣を摘出、HE染色による組織学的な解析を行った。Fcα/μR-/-マウス由来精巣細胞を移植した精巣では野生型マウス由来精巣細胞を移植した精巣と同様に、正常に精子が分化し、精細管内腔において尾部の伸長した成熟精子が確認された。透過型電子顕微鏡(TEM)を用いた解析においても、両精巣細胞から成熟した精子に明らかな相違は認められなかった。よってFcα/μR-/-マウスにおける精子形成異常は生殖細胞自身の異常ではなく、精巣体細胞の異常である可能性が示唆された。IgAおよびIgMに対するFc受容体であるFcα/μR遺伝子欠損マウスにおいて精子形成異常の結果、雄牲不妊が認められたことから、Fcα/μRが精子分化に関与していると考えられた。本研究はFcα/μR遺伝子欠損マウスにおける精子細胞分化異常のメカニズムを明らかにすることを目的とする。本年度は129マウス由来胚性幹細胞とB6マウスとの交配から得られたFcα/μR遺伝子欠損マウスで認められた雄性不妊がマウス系統に関わらず認められるのか否かを検討する目的で、新たにBALB/cマウス由来胚性幹細胞を用いたFcα/μR遺伝子欠損マウス(BALB/c由来Fcα/μR遺伝子欠損マウス)を作製して検討を行った。BALB/c由来Fcα/μR遺伝子欠損雄マウスは雌マウスとの交配によって正常に産仔が得られた。精巣および精巣上体の組織標本をHE染色したところ、BALB/c由来Fcα/μR遺伝子欠損マウスの精巣では、野生型マウスの精巣と同様に精子形成が正常に進行しており、尾部の伸長した成熟精子が精細管内腔に確認された。

また、BALB/c由来Fcα/μR遺伝子欠損マウスの精巣上体には成熟精子の貯留が確認され、野生型マウスとの間に明らかな差は認められなかった。よってFcα/μR遺伝子欠損マウスにおいて認められる精子形成異常はマウスの遺伝背景に強く影響されると考えられた。
ロボットを用いた組込みシステム学習支援環境における教材開発システムの研究

本研究は,ロボットなどの制御教材を扱う組込みシステム学習支援環境において,可視化を中心とした教材開発および配信のシステムに関する研究である。本研究の目的は,高校生・大学生を対象とした組込みシステムの学習支援環境において不足している教材の開発,管理を支援する環境およびその上で動作する教材の開発を行うことである。研究の成果としては,ロボットなどの組込みシステムで用いられるAndroidを対象として,管理が容易なブラウザベースの可視化環境を構築したこと,および動作を把握するためのロギング環境を構築したこと,配信のためのクラウド管理機構の構築を行った。教材としてはスケジューリングに関するコードおよびセットの提供,さらにゲームによる動作概念の理解支援を行った。本研究の目的は,高校生・大学生を対象として,組込み・制御システムの概念,実装の学習を支援する教育環境における,教授者による容易なカスタマイズや運用が可能な機構,およびそのためのユーザインタフェース(UI)についての研究である,特に,ロボットや可視化を用いた教育環境において,多忙な教員・教授者が,各自で容易に授業の進度に合わせた組込みシステム学習教材を開発するための機構およびUIの構築法について,開発および評価を通して明らかにしていく.平成22年度は,まずこれまでに開発したツールの実践評価を行った.具体的には,工業高校において本システムを実際に用いて,学習支援環境の評価実験を行い,有効性を明らかにした.これらの評価で明らかになった,教材提供の容易な環境を構築するために,可視化環境をブラウザ上で動作可能にした.具体的には,従来のJavaベースの環境から,HTML+Javascriptベースの環境に移行した.教材の管理や拡張を容易にするために,jQueryをベースとしたプラグインとして実装を行った.可視化環境としては,プロセスを対象としてプロセスの状態遷移や内部状態を可視化する教材を作成した.さらに,対象OSとして組込みシステムで用いられつつあるAndroidをターゲットに加え,Androidのプロセスの可視化環境を構築した.また,組込みシステムでのハードウェアモニタリングを可能にするために,KVM仮想マシンベースのロギング環境を実現した.教室においてWebベースの可視化教材を利用可能にするためにクラウドベースの環境構築を行った.システムモニタリングなどの管理機構を構築し,クラウド上での教材提供を容易にする環境を構築した.本研究の目的は,高校生・大学生を対象として,組込み・制御システムの概念,実装の学習を支援する教育環境における,教授者による容易なカスタマイズや運用が可能な機構,およびそのためのユーザインタフェース(UI)についての研究である.特に,ロボットや可視化を用いた教育環境において,多忙な教員・教授者が,各自で容易に授業の進度に合わせた組込みシステム学習教材を開発するための機構およびUIの構築法について,開発および評価を通して明らかにしていく.平成23年度は,前年度までの予備実験の結果を元に,プロトタイプシステムの開発,評価,およびUIについてのフィードバック,さらに教室内のクラウドシステムについて試作を行うことを目的としている。本年度の成果としては,組込みシステム,特にOSについて,その動作をWeb環境で可視化を行うツールのプラットフォームを開発した.これは,Javascriptで開発し,ブラウザ上で動作する環境である.これによって,学習支援教材をインストールすることなく,学習者が利用することが可能になった.また,組込みシステムの基盤として用いられているAndroidを対象として,ロボットなどを制御するマルチタスク環境で重要となるタスクのスケジューリングを低負荷で取得する機構を実装した.これについては,ロギングを支援するサーバを同時に実装し,ログデータの管理を容易にした.さらに.これらの提供基盤としてクラウド環境を構築し,その動作状況をモニタリングする環境を開発した.これによって,実行の監視を教授者や管理者が容易に行うことが可能になった.また,学習教材の一環として,ゲームをベースとした教材を試作し,学習者が興味を失わずに,組込みシステムの動作を理解できるようにした.本研究の目的は,高校生・大学生を対象として,組込み・制御システムの概念,実装の学習を支援する教育環境における,教授者による容易なカスタマイズや運用が可能な機構,およびそのためのユーザインタフェース(UI)についての研究である.特に,ロボットなどのデバイスや可視化を用いた教育環境において,多忙な教員・教授者が,各自で容易に授業の進度に合わせた組込みシステム学習教材を開発するための機構およびUIの構築法について,開発および評価を通して明らかにしていくものである。本年度は最終年限であることから、これまでの研究成果を元にシステムとして取りまとめた。本成果は大きく分けて次の3点である。(1)組込みシステムで用いられているAndroidOSや組込みOSを対象としてOSの動作を可視化する環境の構築。(2)教材配信に必要となるクラウド環境について容易に管理、利用が可能になる環境の構築、(3)ゲーミフィケーションを取り入れたブラウザベースのシステム学習環境の構築、の3点である。(1)についてはAndroidのプロセスについて組込みOSボードから動作情報を、動作への影響を減らして取得する環境を構築した。また多くの学習者のログを管理するサーバ環境を構築した。

また、ログを学習者が容易に把握できるように、ログの可視化ツールキットおよびツールを構築した。これはブラウザベースで動作することで教室内でのセットアップの手間を低減することを可能にした。また、組込みOSのメモリ管理についても可視化環境の開発を行った。(2)については教材配信をスケーラブルに可能とするクラウドサーバ群を容易に管理できる環境を構築した。(3)についてはOSのスケジューリングを学習者が楽しみながら構築できるように、ブラウザベースのゲームとして開発した。これらを通して教材開発システムおよび教材の利用が可能になった。当初の計画目標については,ほぼ達成できた.クラウド環境については,プライベートクラウドおよびモニタリング機構を構築したが,運用までは至らなかった.Web上で動作するUIについては再検討および再実装を行った.24年度が最終年度であるため、記入しない。24年度が最終年度であり,取りまとめと評価を行う.また各種教材および基盤について,対外発表を中心に行なっていく.テーマであるロボット教材については,今年度は実装,評価は行わなかったが,次年度はロボット教材への搭載および評価対象として取り組み,テーマに対する評価を行なっていく予定である.24年度が最終年度であるため、記入しない。
ガスハイドレート生成阻害剤の作用機構に関する研究

本研究では、天然ガス輸送効率化を目指し、結晶成長学的視点から動的ハイドレート生成阻害剤(KHI)の効果を評価することを目的としている。天然ガスの輸送配管内でのハイドレート生成に起因する事故防止のためには、生成を阻害する作用をもつKHIを添加することが有効な対策である。しかし、従来の方法ではその評価に長時間実験を必要とし、阻害効果指標には統一されたものがなかった。これらの問題解決のため、申請者は、KHIについて簡易な性能評価手法を提案する。本研究では、この評価手法により、効果指標の世界標準化を実現する。また、未解明であるKHIの作用機構を解明することで、新規KHI開発の飛躍的加速を達成する。
遷移金属クラスター錯体の示す特異性の解明と触媒機能開発

遷移金属クラスター触媒の研究開発として塩素架橋複核イリジウム錯体の合成と含窒素複素環の不斉水素化反応を開発した。複素芳香環の不斉水素化反応は、キラルな環状アミンを一段階で合成できるため非常に魅力的な反応である。近年、キノリンをはじめとした含窒素複素芳香環の不斉水素化反応の研究が盛んになされている。われわれは、独自に開発した塩素架橋イリジウム二核錯体がを用いることにより、不斉水素化が困難とされてきたピリジン環やイソキノリン環などの不斉水素化反応に、基質の塩酸塩を用いることにより成功した。さらに、特異な反応機構の解明に成功した。光学活性2座ホスフィン配位子を持ちハロゲン架橋を有する2核イリジウム錯体は、入手が容易なイリジウム錯体合成前駆体に過剰量のHX水溶液を加えることにより高収率で合成できるばかりでなく、イリジウムの酸化状態が3価であるため空気や湿気に対して安定で、実験操作として取り扱いやすく、水素化反応条件において容易に優れた不斉水素化触媒となる。これらのイリジウム錯体は、2-位に置換基を有するキノリン類の不斉水素化反応において高い触媒活性を示し、基質とハロゲン化水素酸との塩を形成させることによってより高いエナンチオ選択性を示すことや基質によって最適なハロゲンが異なるという興味深い結果を得た。さらに、2-位に種々の置換基を有するキノキサリン類を基質とした触媒的不斉水素化反応の開発を行い、軸性不斉2座ホスフィン配位子であるDIFLUORPHOSと塩素が結合した2核イリジウム錯体を水素化触媒として用いた場合に最も高い反応性とエナンチオ選択性を示すことを見いだした。さらに、基質である複素環化合物の直接水素化反応の反応機構の解明を目指して反応中間体の合成単離を行いいくつかの中間体の構造をX線構造解析により解明した。また、溶液中に存在する平衡にある中間体をスペクトル測定により同定した。その結果、本触媒系ではアミンを添加することにより水素化触媒活性とエナンチオ選択性が大幅に向上することや反応中間体のイリジウム-ヒドリド種の動的挙動を解明できた。複核遷移金属錯体による触媒反応として、ハロゲン架橋二核イリジウム錯体を触媒として用いることにより、含窒素芳香環化合物の不斉水素化反応が極めて効率よく進行することを見出した。本触媒反応では、反応の進行につれて触媒機能(反応活性、不斉選択性)が大幅に向上することを新たに発見し、反応メカニズムに関する研究から触媒反応生成物であるアミンがイリジウム錯体中心と相互作用することにより高反応性化学種を生成することを明らかにした。また、反応中間体や触媒反応中から単離される失活種についても、それぞれ錯体を単離し、単結晶X線構造解析により、その構造を明らかにすることに成功した。このような不斉水素化反応における生成物と触媒金属中心の相互作用の重要性を明らかにした研究はこれまでになく、本知見を元にしてさらに高活性な触媒の開発に向けた研究を進めている。さらに、前周期遷移金属アルキル錯体によるσ結合メタセシス反応を利用した炭素-水素結合活性化に着目し、カップリング反応への展開に関して研究を進めており、本年度はさらなる基質適用範囲の拡大を目的として含窒素複素環化合物以外の基質活性化に関する研究を進めた。その結果、通常は活性化されることのない内部アルキン類のプロパルギル位炭素-水素結合活性化が希土類金属錯体を用いて進行することを見出した。このような炭素-水素結合活性化反応は後周期遷移金属では見出されておらず、希土類金属特有の反応性を明らかにすることができ、触媒反応への応用に向けた研究へ展開している。本研究では、第1遷移金属や前周期遷移金属などの非貴金属からなる複核金属錯体を精密合成し、貴金属触媒や単核金属触媒では実現できない触媒機能の開発を目的としている。アミドは高い化学的安定性を有することからその変換は非常に困難であり、加水分解や加アルコール分解では厳しい反応条件が必須であった。スカンジウムトリフラートとボロン酸エステルを組み合わせた触媒系により、種々の1級アミドに適用可能であり対応するエステルが高収率で得られた。さらに、本触媒系はアセチルアニリン誘導体の脱アセチル化にも適用することができる。次に、アルコキシドもしくはアミド配位子によって架橋されたアルミニウム二核錯体とカルバゾールを反応させたところ、アルコキシ架橋二核錯体はCーH結合切断に活性を示さなかったのに対し、アミド架橋二核錯体はC(sp2)ーH結合が活性化され非対称な二核錯体が生成することを見いだした。得られた錯体のX線結晶構造解析から、これらの反応性の違いは、中心のAl2X2骨格が柔軟であり、基質のCーH結合とAlーC(メチル)結合との接近に十分な立体環境を形成できるかどうかに起因することを明らかにした。

さらに、イミド配位子によって架橋されたチタン複核錯体と内部アルキンを反応させたところ、イミド配位子のオルト位の炭素ー水素結合活性化が進行し、さらに内部アルキンが挿入することで分子内に2つのメタラサイクルを有する錯体が得られた。また、内部アルキンを配位子として有するタンタルの単核金属種の複核化反応の検討を行った。アルキン存在下で複核タンタル錯体の還元反応を行ったところ、6員環形成反応と二つの金属間へのアルキンの配位が進行した新たな複核タンタルメタラサイクル錯体が得られることを見出した。多核金属クラスター分子としてカルボキシレート架橋に加え、ハロゲン架橋やヘテロ元素架橋による前周期遷移金属を中心とした多様なクラスター分子のライブラリー構築を進めてきた。その結果、亜鉛と希土類金属、という組み合わせからは二酸化炭素とオキシランの交互共重合反応の触媒が得られることを見いだした。また、6族金属二核クラスター分子はラジカル反応による有機ハロゲン化物の分子変換の触媒反応に優れた触媒となることを明らかにした。また、イミド架橋チタン二核錯体においては、二核構造を形成した場合にのみイミド配位子上の芳香環の炭素ー水素結合活性化が進行することが分かった。さらに、ハロゲン架橋タンタル二核錯体においては、アルキンの環化三量化による芳香環構造の構築反応における反応中間体の単離に成功し、クラスター化を利用した中間体の安定化効果による反応機構解明が有力な手段となりうることを見出した。さらに、典型元素アルキル錯体を用いた反応開発を進めた結果、ジアルキルマグネシウムと含窒素2座配位子の反応により生成する二核マグネシウムアルキル錯体が、炭化水素の異性化反応の触媒として作用することを明らかにした。本反応は、原料となる炭化水素の炭素ー水素結合活性化を鍵段階として進行しており、容易に解離ー会合を繰り返す広い配位座を有するマグネシウム錯体を用いることで、高い反応温度においても安定でありながらも反応活性を維持する触媒の開発に成功した。この成果は、マグネシウム錯体を触媒とした初めての炭化水素の異性化反応であり、典型元素アルキル錯体を触媒としても炭素ー水素結合活性化を経た有機分子変換が可能であることを示す非常に革新的な研究成果である。キノキサリンの不斉水素化においてアニリン誘導体を添加すると、生成物の収率・鏡像体過剰率が向上することをすでに見いだしているが、本系において脂肪族アミンを添加すると反応がまったく進行しないという結果を得た。この結果から、イソキノリン類やピリジン類の不斉水素化が困難な原因の一つとして考えられていた生成する環状アミンの触媒毒としての作用を明らかとすることができた。この結果から、環状アミンのイリジウムへの配位を阻害することにより、触媒の失活を抑え効率的に反応が進行させることができると考え、環状アミンの配位を阻害する手法として、基質である複素芳香環化合物とブレンステッド酸との塩を形成することにより解決することができた。すなわち、イソキノリン塩酸塩を基質として用いた場合、水素化生成物は系中に存在するブレンステッド酸と塩を形成し、イリジウムに配位することができなくなる。また、基質の塩を形成することで基質の芳香族性を崩し、反応性の向上が見込める。そこで3ーフェニルイソキノリン塩酸塩を用いて検討を行ったところ、予想通り、高い転化率、エナンチオ選択性で反応が進行した。
新規な分子インプリンティング法を用いた反応触媒高分子の開発

1.基質分子の非共有結合的認識を目的とした,分子認識のための官能基の共有結合的な導入法開発に関する検討:昨年度実施した手法はジアミンの認識を前提としていたがHPLCによるジアミン類の分離には問題が多いことがわかり,多種類の基質のアッセイが容易ではなかった.そこで次にアミノ基をポリマーに固着し,カルボン酸を認識すべく検討を行ったが,生成したアミドの加水分解が困難を極めた.現在は容易に生成,分解できるイミンを用いてアルデヒドの刷り込みを検討中である.2.反応触媒としての利用に関する検討:昨年来行ってきた,「2位に置換基を有するマロン酸誘導体」を鋳型に用いた加水分解触媒ポリマーの調製では,p-ビニルベンジルアミンとの縮合によりジアミドに変換した後に重合するという当初の計画は,上記の知見からテンプレートの加水分解が困難であると判明したので,変更を余儀なくされた.そこで,イミンを経由するインプリント法に切り替えるべくテンプレートを合成中である.一方,ポリマーの配座変化を利用した活性調節機能を有する鋳型触媒を開発すべく,既存の手法に従ってリン酸エステル型の鋳型を幾つか合成中である.これらのうちの一つについては従来の方法に従って加水分解能の評価を終えたところであり,次の研究へ進むための準備段階にある.3.その他:上記の実験に必要なジカルボン酸のアミド化は,スチリル基の重合を起こさないような温和な条件下に行う必要があり,従来のアミド化剤はいずれもうまく機能しなかった.このような背景のもとに,この目的を達成すべく研究代表者らが新たに開発を行ったトリアジン型化合物は,予想以上に優れた縮合能を示すことが分かり,論文発表することができた.現在は更に詳細な検討を実施中である.1.基質分子の非共有結合的認識を目的とした,分子認識のための官能基の共有結合的な導入法開発に関する検討:まず,キシレンジアミンとp-ビニル安息香酸とのアミド縮合を行い,これを鋳型として重合を行った.加水分解によりジアミンを切り離した後のポリマーを用いて,炭素鎖及び芳香環への結合位置を変えた各種ジアミンの結合活性を評価し,鋳型と基質との構造的相関を検討した.その結果,当初の予想より炭素鎖の一つ短いパラ置換のアミンが最も強く結合することが明らかとなった.次にフェニレン二酢酸とp-ビニルベンジルアミンのアミド縮合体を用いてジカルボン酸についても同様の検討を実施中であるが,まだ最終的な結論には至っていない.2.反応触媒としての利用に関する検討:上記の知見をもとに加水分解を触媒するポリマーの調製を目指して2位に置換基を有するマロン酸誘導体の合成を検討した.研究の初期段階である現時点では,加水分解の進行しやすいp-ニトロフェニルエステルが基質として適当であると考え,マロン酸の2位にアリールメチル基とアルキル基を導入し,ついでp-ビニルベンジルアミンとの縮合によりジアミドに変換するという手順で合成を行ってきた.現在は,この最終段階まで来ており,今後,これを鋳型に用いてポリマーの調製を行う.さらに,調製したポリマーを用いて研究計画書に記述したような,酵素様活性を評価するための検討を順次実施する.3.その他:上記の実験に必要なジアミド類は溶解性等の観点から従来のアミド化剤がうまく機能しないため,その合成に予想以上の時間を要した.しかしながらその際,本来の目的から外れるが,この問題を解決する目的で水系等の極性溶媒中でDCCよりうまく機能する新規な脱水縮合剤の開発に成功した.1.基質分子の非共有結合的認識を目的とした,分子認識のための官能基の共有結合的な導入法開発に関する検討:昨年度実施した手法はジアミンの認識を前提としていたがHPLCによるジアミン類の分離には問題が多いことがわかり,多種類の基質のアッセイが容易ではなかった.そこで次にアミノ基をポリマーに固着し,カルボン酸を認識すべく検討を行ったが,生成したアミドの加水分解が困難を極めた.現在は容易に生成,分解できるイミンを用いてアルデヒドの刷り込みを検討中である.2.反応触媒としての利用に関する検討:昨年来行ってきた,「2位に置換基を有するマロン酸誘導体」を鋳型に用いた加水分解触媒ポリマーの調製では,p-ビニルベンジルアミンとの縮合によりジアミドに変換した後に重合するという当初の計画は,上記の知見からテンプレートの加水分解が困難であると判明したので,変更を余儀なくされた.そこで,イミンを経由するインプリント法に切り替えるべくテンプレートを合成中である.一方,ポリマーの配座変化を利用した活性調節機能を有する鋳型触媒を開発すべく,既存の手法に従ってリン酸エステル型の鋳型を幾つか合成中である.これらのうちの一つについては従来の方法に従って加水分解能の評価を終えたところであり,次の研究へ進むための準備段階にある.3.その他:上記の実験に必要なジカルボン酸のアミド化は,スチリル基の重合を起こさないような温和な条件下に行う必要があり,従来のアミド化剤はいずれもうまく機能しなかった.このような背景のもとに,この目的を達成すべく研究代表者らが新たに開発を行ったトリアジン型化合物は,予想以上に優れた縮合能を示すことが分かり,論文発表することができた.現在は更に詳細な検討を実施中である.
細胞増殖関連遺伝子の転写制御蛋白質の機能構造

私達はすでにCRE結合蛋白質CREーBP1のcDNAクロ-ニングに成功していたので、今年度はこのcDNAを用いてCREーBP1の機能ドメインを解析した。一連の欠失変異、点変異をcDNAに導入し、これらの変異体を培養動物細胞内で発現させ、その転写活性化能を解析した。その結果、CREーBP1はCREを介して転写を活性化する能力を持つこと、N末端付近のメタルフィンガ-構造を含む領域が転写活性化ドメインであることが明かとなった。従来酸性アミノ酸クラスタ-などの複数の転写活性ドメインが同定されているが、メタルフィンガ-構造を含むものは初めて例である。またアデノウイルスのE1Aによる転写活性化をCREーBP1が仲介することを明らかにし、この際CREーBP1のN末端付近のメタルフィンガ-構造が必要であることを示した。また私達はすでにHIVエンハンサ-結合蛋白質HIVーEP1のcDNAクロ-ニングに成功していたので、今年度はHIVーEP1のcDNAをプロ-ブとして2つの関連遺伝子HIVーEP2と3のcDNAをクロ-ニングできた。HIVーEP2の構造を解析した結果、メタルファンガ-構造を持つDNA結合ドメイン、酸性アミノ酸クラスタ-、Ser/Thrに富む領域の3つの部分においてHIVーEP1と2が高い相同性を示し、これらの領域の重要性が示唆された。一方転写制御因子として機能する核内がん遺伝子産物MybとDNAとの相互作用を明らかにするため、MybのDNA結合ドメインの構造をNMRを用いて解析した。その結果、DNAと直接結合する部分はヘリックス・タ-ン・ヘリックスと類似の構造であり、周期的に位置するトリプトファン残基は蛋白質内部の疎水性コアの形成に関与していることが明かとなった。