hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
19世紀末イギリスの体操場と体操の競技化に関する研究-イギリススポーツとドイツ系体操論を中心にして-

イギリススポーツとドイツ系体操とのかかわりという点では、19世紀末のイギリスでは、体操が国民的な文化であったというよりもむしろ1つのスポーツ種目となりつつあった事情が存在していた。イギリスにおいて体操競技統括団体としてのAmateur Gymnastic Associationは、1890年に設立され、1896年にAGA Championshipが創始されている。体操の競技会の開催及びその競技運営・競技採点方式は、この時期に確立されたとみられる。同年、AGAは、フェンシングを包含してAmateur Gymnastic and Fencing Associationとなっている。体操を含んだ走跳投などの多種目実施のドイツ系体操の内容論をめぐる論議がイギリススポーツ事情を絡めて展開されている。また、体操場や体操クラブの設置拡充、体操教師会の設立、体操講習会の開催あるいは体操教師資格付与事業などは、ドイツの事情とも一致をみている。しかしながら、イギリス体操史の本質的な理解のためには、イギリスへのドイツ系体操移入の事情を理解する必要が生じてきた。その点で研究の関心が1820年代後半にまで遡ることとなった。ゲームム-ツ及びクリアスの体操書の英訳の検討、フェルカ-らの体操家の体操内容論の把握もこの研究の中で試みている。
高密度窒素原子を用いた金属材料の表面窒化プロセスの実験的解明

金属材料のプラズマ窒化処理における諸問題(長い処理時間,硬く脆い化合物層の形成等)を解明するために,材料との反応性の高いN原子を効率よく生成することが可能な「電子ビーム励起プラズマ(EBEP)」源を用いて,N_2の解離度をパラメータとした窒化プロセスに関する実験的研究を行った。昨年度までに,生成される電子ビーム電流値及びその制御領域の拡大のため,電子銃部の構造の改良を行うとともに,実際に鉄鋼試料の処理を行い,従来法と同じ処理時間において従来法よりも高い表面硬さを得ること,即ち窒化処理の高効率化に成功している。そこで本年度は,本装置を用いた高速窒化処理における窒素原子の振る舞いをより詳細に調べる最初の段階として,処理条件下における窒素原子密度の定量計測法の開発研究を行った。ここで,その基礎となる技術として,窒化処理への実用化を視野にいれ,より簡便でプラズマに影響を与えない「発光分光法」を用いた。窒化処理条件下における発光分光測定の結果、従来のプラズマ源では検出が困難とされていた,可視領域(300550nm)における励起窒素原子の4本の発光スペクトルを複数同時に検出することに成功した。通常,発光分光法より得られる発光強度は相対値であるため,その励起種の絶対密度を見積もるためには,その強度を絶対値へ校正する方法を考案する必要がある。そこで本研究では,同可視光領域にて検出される窒素イオンの遷移N_2^+(B,2→X,2)が,放射を通してのみ起こることに着目し,それを生成する電子ビームのエネルギーを制御することにより,対応する生成断面積から絶対強度を見積もる校正方法を考案し,検出された励起窒素原子の絶対密度を求めることに成功した。この方法は,窒素原子の発光を観測するだけで即座にその絶対密度を知ることができるため,窒化処理中の窒素原子密度を保証するモニタリング法として,幅広い窒化プロセスへの適用が期待される。金属材料のプラズマ窒化処理において問題となっている,10数時間におよぶ長い処理時間や硬いが脆い化合物層が形成される問題を解明するために,材料との反応性の高いN原子を従来のプラズマ源より非常に効率よく解離させることが可能である「電子ビーム励起プラズマ(EBEP)」源を用いて,N原子密度(N_2の解離度)をパラメータとした窒化プロセスに関する実験的研究を行った。電子衝突による解離過程において生成されるN原子は電子ビーム電流値に比例するため,はじめにその制御領域を拡大することを目的として現有の小型EBEP源の高出力化を行った。具体的には,電子ビーム加速領域を3分割して並列に設置し,さらに加速電極としての多孔電極の開孔率を増大することにより,電子ビームの引き出し効率をこれまでの2割程度から最大6割まで向上させることに成功した。これにより生成される電子ビーム電流値の大幅な増大とその制御領域の拡大が達成された。つぎに,プラズマ中で試料表面全体を一定の設定温度で均一に保持可能なヒーター付き基板ホルダーを製作し,改良した小型EBEP源を用いて窒化鋼SCM435の窒化実験を行った。その結果,従来法と同じ処理時間において従来法よりも高い表面硬さを得ること,即ち窒化処理の高効率化に成功した。また,処理ガスの条件としてN_2に対するArの混合比を変えて実験を行った結果,Ar混合比が16%の時,拡散層は浅いものの材料表面に化合物層が生成されない処理に成功した。しかし,それ以上の混合比では化合物層が形成されることがわかった。このときのプラズマ中のN_2の解離度を四重極質量分析計を用いて見積もった結果,解離度はAr混合比が16%のとき10%程度で,Ar混合比の増加とともに増大し最大20%に達することが確認された。以上の結果は,化合物層が形成されないためのN原子密度の上限が存在することを示唆している。

そこで本研究では,同可視光領域にて検出される窒素イオンの遷移N_2^+(B,2→X,2)が,放射を通してのみ起こることに着目し,それを生成する電子ビームのエネルギーを制御することにより,対応する生成断面積から絶対強度を見積もる校正方法を考案し,検出された励起窒素原子の絶対密度を求めることに成功した。この方法は,窒素原子の発光を観測するだけで即座にその絶対密度を知ることができるため,窒化処理中の窒素原子密度を保証するモニタリング法として,幅広い窒化プロセスへの適用が期待される。
イネの胚乳発生にみられる生殖的隔離機構の解明

栽培イネ(Oryza sativa)と野生イネ(O. longistaminata)の種間交雑を行った場合に、胚乳発生で見られる生殖的隔離の分子機構を明らかにすることを目的としている。これまでの研究から、倍数性を操作して種間交雑を行うことで、雑種胚乳が正常に発生し、生殖的隔離を打破できることを明らかにしている。そこで、隔離のある組合せと、打破される組合せから得られた雑種胚乳におけるトランスクリプトームの比較、特に胚乳に特徴的なインプリント遺伝子に着目した解析を行い、胚乳における生殖的隔離の分子機構の推定を行った。隔離のある組合せでは、本来は片方の対立遺伝子からのみ発現するインプリント遺伝子が、両方の対立遺伝子から発現していた。一方、打破される組合せでは、片方の対立遺伝子からのみ発現するインプリント遺伝子が多く見られた。更に、通常の遺伝子であっても、隔離のある組合せでは、片方の対立遺伝子からのみ発現していたのに対し、打破される組合せでは、両方の対立遺伝子から発現していた。インプリント遺伝子は、エピジェネティックに制御される遺伝子であることから、生殖的隔離のある組合せでは、両親の対立遺伝子特異的なエピジェネティックな制御機構の乱れが引き起こされていると想定される。加えて、栽培イネと野生イネ、それぞれの種においてインプリント遺伝子を網羅的に同定し、比較したところ、2つの種は近縁な種であるにも関わらず、インプリント遺伝子の保存性は極めて低いことを明らかにした。これらの結果から、エピゲノムの進化速度は、ゲノムよりも早いことが示唆された。2つの種間では、エピジェネティックな制御機構(エピゲノム)に大きな差異が存在することが示唆され、そのエピゲノムの種間差によってインプリント遺伝子を含む遺伝子の制御が乱れ、胚乳発生の生殖的隔離を引き起こす原因になっている可能性が想定される。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。本研究は、栽培イネ(Oryza sativa)と野生イネ(O. longistaminata)の種間交雑を行った場合に、胚乳発生でみられる生殖的隔離の分子機構を明らかにすることを目的とし、以下の2つの実験を実施している。1種間雑種後代における分離集団を用いた遺伝分析から、胚乳の生殖的隔離に関わる染色体領域の同定を行った。本研究で扱う栽培イネと野生イネは、胚救済によりF1雑種個体が得られ、その後代種子においても一定の割合で胚乳発生の異常が生じる。そのため、分離集団の遺伝子型情報から、生殖的隔離に関連する領域を分離比の歪みとして検出可能である。本年度は、種間雑種後代のF2分離集団を用いた解析を実施した。F2集団270個体を材料にRADーseq解析により、網羅的に遺伝子型を判定し、分離比が有意に歪む21個の領域を見出した。2栽培イネと野生イネの種間交雑で見られる生殖的隔離は、母親である栽培イネの倍数性を上昇させることで、生殖的隔離が緩和され正常な胚乳が形成される。そこで、種間交雑で得られた異常な胚乳と正常な胚乳の間のトランスクリプトームの比較を行う。本年度は、トランスクリプトーム解析のための試料のサンプリングを完了した。また、種間交雑から得られた胚乳の解析の前段階として、栽培イネの初期胚乳におけるRNA-seq解析を実施し、イネ胚乳のde novoリファレンスデータを作成した。ここで得られた基盤情報を基に、次年度以降、雑種胚乳の解析を進める。遺伝学的な解析から、生殖的隔離との関与が想定される領域を同定することができた。また、雑種胚乳におけるトランスクリプトーム解析のための試料サンプリングを完了すると共に、解析の基盤となるイネ胚乳のde novoリファレンスデータを構築しており、次年度の解析を即座に開始できる。栽培イネと野生イネの種間交雑を行った場合に,生殖的隔離として胚乳発生の異常が見られる.本研究は,イネの胚乳で見られる生殖的隔離の分子機構を明らかにするため,1種間雑種後代の分離集団を用いた遺伝学的アプローチによる原因遺伝子の同定,および2正常に発生する雑種胚乳と発生異常が生じる雑種胚乳のトランスクリプトーム解析を比較する.特に,胚乳で特徴的なインプリント遺伝子に着目した解析を実施する.実験1:前年度までに,生殖的隔離に関与する染色体領域を同定した.今年度は,最も効果の大きい第4染色体上に見られる候補領域を対象に,分離集団に栽培イネを戻し交雑し,原因遺伝子が座乗する候補領域の絞り込みを試みたが,栽培イネと野生イネの組み替え個体を得ることはできなかった.この領域は,ヘテロクロマチン領域であることが報告されており,組換えが抑制されている可能性が推察され,戻し交雑によるこれ異常の絞り込みは困難であると考えられる.実験2:昨年度までに作成したイネ胚乳のde novoリファレンスデータに基づき,栽培イネにおけるインプリント遺伝子の同定を行った.また,実験に用いた野生イネは自家不和合性をもち,他殖による種子形成率も極めて低いことから,野生イネの胚乳における解析は計画していなかった.しかし,自家和合性系統を見出すことができたため,野生イネの胚乳でもRNA-seq解析を実施し,de novoリファレンスデータを作成すると共に,インプリント遺伝子の同定を試みた.

その結果,栽培イネおよび野生イネにおいて,多くのインプリント遺伝子を同定することができ,更には,それぞれで同定されたインプリント遺伝子を比較することで,両種に保存されたインプリント遺伝子を見出すことができた..実験1の遺伝学的解析では,戻し交雑による候補領域の絞り込みを試みたが,領域内に組み換え個体を得ることはできなかった.一方,トランスクリプトーム解析では,栽培イネのインプリント遺伝子を同定できただけでなく,当初の計画にはなかった野生イネのインプリント遺伝子を同定することができ,両種で保存されているインプリント遺伝子と,一方の種に特異的な遺伝子を見出すことができた.これらの情報は,種間交雑で得られる雑種胚乳の解析を行う上で非常に有効な情報であると考えられる.栽培イネ(Oryza sativa)と野生イネ(O. longistaminata)の種間交雑を行った場合に、胚乳発生で見られる生殖的隔離の分子機構を明らかにすることを目的としている。これまでの研究から、倍数性を操作して種間交雑を行うことで、雑種胚乳が正常に発生し、生殖的隔離を打破できることを明らかにしている。そこで、隔離のある組合せと、打破される組合せから得られた雑種胚乳におけるトランスクリプトームの比較、特に胚乳に特徴的なインプリント遺伝子に着目した解析を行い、胚乳における生殖的隔離の分子機構の推定を行った。隔離のある組合せでは、本来は片方の対立遺伝子からのみ発現するインプリント遺伝子が、両方の対立遺伝子から発現していた。一方、打破される組合せでは、片方の対立遺伝子からのみ発現するインプリント遺伝子が多く見られた。更に、通常の遺伝子であっても、隔離のある組合せでは、片方の対立遺伝子からのみ発現していたのに対し、打破される組合せでは、両方の対立遺伝子から発現していた。インプリント遺伝子は、エピジェネティックに制御される遺伝子であることから、生殖的隔離のある組合せでは、両親の対立遺伝子特異的なエピジェネティックな制御機構の乱れが引き起こされていると想定される。加えて、栽培イネと野生イネ、それぞれの種においてインプリント遺伝子を網羅的に同定し、比較したところ、2つの種は近縁な種であるにも関わらず、インプリント遺伝子の保存性は極めて低いことを明らかにした。これらの結果から、エピゲノムの進化速度は、ゲノムよりも早いことが示唆された。2つの種間では、エピジェネティックな制御機構(エピゲノム)に大きな差異が存在することが示唆され、そのエピゲノムの種間差によってインプリント遺伝子を含む遺伝子の制御が乱れ、胚乳発生の生殖的隔離を引き起こす原因になっている可能性が想定される。遺伝学的解析では、F1雑種個体に栽培イネおよび野生イネを戻し交雑した分離集団を作出し、RAD-seq解析による遺伝子型判定を実施し、先行しているF2集団を含む全ての分離集団の間で重複して分離比が歪む領域を明らかにする.本年度サンプリングを完了したRNAサンプルのRNA-seq解析を実施し、種間交雑で得られた異常な胚乳と正常な胚乳の間のトランスクリプトームの比較を行い、胚乳発生を引き起こすメカニズムを推定する。当初の予定では遺伝学的解析から,生殖的隔離に関わる遺伝子領域を絞り込む予定であったが,戻し交雑によって領域の絞り込みが困難であると考えられるため,今後はこれまでに同定した候補領域と実験2で行うトランスクリプトーム解析で得られるデータと照らし合わせることで,生殖的隔離の原因
可変斜面を動歩行する2脚および4脚ロボットの研究開発

動物の歩行には静歩行と動歩行があるが,静歩行は静的に安定な状態を維持しながら脚を移動させる歩行で容易に実現できる.一方,動歩行は,静的に不安定な状態が存在する歩行で,動歩行ロボットの本格的な研究は1970年代に始まった.それまでの研究は,静歩行ロボットに関するものが中心で,動歩行という言葉は研究代表者の江村が用いたのが最初かと思う.江村は,足の裏面の曲率半径よりも重心の高さの方が高く,制御なしでは転倒してしまう竹馬型2脚ロボットを1972年に試作した.この竹馬型ロボットを用い,ロボットの姿勢を動物の半規管と同じ構造の姿勢センサで検出し,ロボットの股関節に与えるモーメントを制御しながら平地を安定に歩行させることに成功し,この研究成果を発表したときに動歩行という言葉を用いたのである.動歩行を用いて安定な歩行を実現するには,制御上の多くの問題を解決せねばならない.当研究室では,14自由度の人型2脚ロボットと12自由度の4脚ロボットを試作し,水平面については,安定な歩行が実現できるころまで研究が進んでいる.しかし,起伏の多い荒れ地を想定した可変傾斜面上での動歩行についてはこれからである.それ故,2個のモータで傾斜角が直交2軸の回りに時々刻々可変できる可変傾斜面型のベルトコンベヤの試作を行い,この可変傾斜面型ベルトコンベヤ上で,2脚・4脚ロボットの安定な動歩行を実現するには,どのような制御上の工夫が必要かを調べるのが本研究の主な目的となる.平成11年度は,可変傾斜型ベルトコンベヤ上での動歩行を可能とするために,既存の2脚ロボットと4脚ロボットの足首部の改造,ならびに関節角を直接エンコーダで検出するための改造等を行った.可変傾斜面上での動歩行を実現するには,現在実験に使用している2脚ロボット,4脚ロボットとも,足首部の強度やモータトルクが不足するため,十分な強度を有する足首部を新たに設計製作するとともに,モータ出力の増大を図るための造を行った.平成12年度は,足底と床面との摩擦力不足により,2脚ロボットが歩行中に進行方向が変化することを避けるため,腕を製作して取り付けた.また,実際に歩行実験を行い進行方向の修正に腕が有効に機能することを確認した.さらに,改造した脚ロボットを可変傾斜面上で歩かせる実験を行い,安定な歩行を行わせることに成功した.これは,優れた成果である.動物の歩行には静歩行と動歩行があるが,静歩行は静的に安定な状態を維持しながら脚を移動させる歩行で容易に実現できる.一方,動歩行は,静的に不安定な状態が存在する歩行で,動歩行ロボットの本格的な研究は1970年代に始まった.それまでの研究は,静歩行ロボットに関するものが中心で,動歩行という言葉は研究代表者の江村が用いたのが最初かと思う.江村は,足の裏面の曲率半径よりも重心の高さの方が高く,制御なしでは転倒してしまう竹馬型2脚ロボットを1972年に試作した.この竹馬型ロボットを用い,ロボットの姿勢を動物の半規管と同じ構造の姿勢センサで検出し,ロボットの股関節に与えるモーメントを制御しながら平地を安定に歩行させることに成功し,この研究成果を発表したときに動歩行という言葉を用いたのである.動歩行を用いて安定な歩行を実現するには,制御上の多くの問題を解決せねばならない.当研究室では,14自由度の人型2脚ロボットと12自由度の4脚ロボットを試作し,水平面については,安定な歩行が実現できるころまで研究が進んでいる.しかし,起伏の多い荒れ地を想定した可変傾斜面上での動歩行についてはこれからである.それ故,2個のモータで傾斜角が直交2軸の回りに時々刻々可変できる可変傾斜面型のベルトコンベヤの試作を行い,この可変傾斜面型ベルトコンベヤ上で,2脚・4脚ロボットの安定な動歩行を実現するには,どのような制御上の工夫が必要かを調べるのが本研究の主な目的となる.平成11年度は,可変傾斜型ベルトコンベヤ上での動歩行を可能とするために,既存の2脚ロボットと4脚ロボットの足首部の改造,ならびに関節角を直接エンコーダで検出するための改造等を行った.可変傾斜面上での動歩行を実現するには,現在実験に使用している2脚ロボット,4脚ロボットとも,足首部の強度やモータトルクが不足するため,十分な強度を有する足首部を新たに設計製作するとともに,モータ出力の増大を図るための造を行った.平成12年度は,足底と床面との摩擦力不足により,2脚ロボットが歩行中に進行方向が変化することを避けるため,腕を製作して取り付けた.また,実際に歩行実験を行い進行方向の修正に腕が有効に機能することを確認した.さらに,改造した脚ロボットを可変傾斜面上で歩かせる実験を行い,安定な歩行を行わせることに成功した.これは,優れた成果である.動物の歩行には静歩行と動歩行があるが,静歩行は静的に安定な状態を維持しながら脚を移動させる歩行で容易に実現できる.一方,動歩行は,静的に不安定な状態が存在する歩行で,動歩行ロボットの本格的な研究は1970年代に始まった.それまでの研究は,静歩行ロボットに関するものが中心で,動歩行という言葉は研究代表者の江村が用いたのが最初かと思う.江村は,足の裏面の曲率半径よりも重心の高さの方が高く,制御なしでは転倒してしまう竹馬型2脚ロボットを1972年に試作した.

この竹馬型ロボットを用い,ロボットの姿勢を動物の半規管と同じ構造の姿勢センサで検出し,ロボットの股関節に与えるモーメントを制御しながら平地を安定に歩行させることに成功し,この研究成果を発表したときに動歩行という言葉を用いたのである.動歩行を用いて安定な歩行を実現するには,制御上の多くの問題を解決せねばならない.当研究室では,14自由度の人型2脚ロボットと12自由度の4脚ロボットを試作し,水平面については,安定な歩行が実現できるころまで研究が進んでいる.しかし,起伏の多い荒れ地を想定した可変傾斜面上での動歩行についてはこれからである.それ故,2個のモータで傾斜角が直交2軸の回りに時々刻々可変できる可変傾斜面型のベルトコンベヤの試作を行い,この可変傾斜面型ベルトコンベヤ上で,2脚・4脚ロボットの安定な動歩行を実現するには,どのような制御上の工夫が必要かを調べるのが本研究の主な目的となる.平成11年度は,可変傾斜型ベルトコンベヤ上での動歩行を可能とするために,既存の2脚ロボットと4脚口ボットの足首部の改造,ならびに関節角を直接エンコーダで検出するための改造等を行った.可変傾斜面上での動歩行を実現するには,現在実験に使用している2脚ロボット,4脚ロボットとも,足首部の強度やモータトルクが不足するため,十分な強度を有する足首部を新たに設計製作するとともに,モータ出力の増大を図るための改造を行った.改造した脚ロボットを可変傾斜面上で歩かせる実験を行い,歩行速度の面で多少改善の余地はあるが,安定な歩行を行わせることに成功した.これは,優れた成果である.現在,歩行速度の向上に向けた研究を行っている.動物の歩行には静歩行と動歩行があるが,静歩行は静的に安定な状態を維持しながら脚を移動させる歩行で容易に実現できる.一方,動歩行は,静的に不安定な状態が存在する歩行で,動歩行ロボットの本格的な研究は1970年代に始まった.それまでの研究は,静歩行ロボットに関するものが中心で,動歩行という言葉は研究代表者の江村が用いたのが最初かと思う.江村は,足の裏面の曲率半径よりも重心の高さの方が高く,制御なしでは転倒してしまう竹馬型2脚ロボットを1972年に試作した.この竹馬型ロボットを用い,ロボットの姿勢を動物の半規管と同じ構造の姿勢センサで検出し,ロボットの股関節に与えるモーメントを制御しながら平地を安定に歩行させることに成功し,この研究成果を発表したときに動歩行という言葉を用いたのである.動歩行を用いて安定な歩行を実現するには,制御上の多くの問題を解決せねばならない.当研究室では,14自由度の人型2脚ロボットと12自由度の4脚ロボットを試作し,水平面については,安定な歩行が実現できるころまで研究が進んでいる.しかし,起伏の多い荒れ地を想定した可変傾斜面上での動歩行についてはこれからである.それ故,2個のモータで傾斜角が直交2軸の回りに時々刻々可変できる可変傾斜面型のベルトコンベヤの試作を行い,この可変傾斜面型ベルトコンベヤ上で,2脚・4脚ロボットの安定な動歩行を実現するには,どのような制御上の工夫が必要かを調べるのが本研究の主な目的となる.平成12年度は,前年度に足首部の改造と関節角を直接エンコーダで検出するための改造を行った2脚ロボットと4脚ロボット,および傾斜角を任意に設定可能なベルトコンベヤーを用いた動歩行実験を行った.また,足底と床面との摩擦力不足により,2脚ロボットが歩行中に進行方向が変化することを避けるため,腕を製作して取り付けた.また,実際に歩行実験を行い進行方向の修正に腕が有効に機能することを確認した.さらに,改造した脚ロボットを可変傾斜面上で歩かせる実験を行い,安定な歩行を行わせることに成功した.
微分体の整数論的性質

本研究を進めるに当り、代表者は各分担者間の連絡を密にし、各分担者はそれぞれの専問の立場から本研究の進展をはかって代表者に協力した。また、他の研究機関にぞくする研究者との間の研究連絡、打合せ、情報交換を重視し、各研究者は積極的に研究集会等に出席し、研究連絡等を行い、本研究の推進に努めた。その実施は、国吉4回、菅野3回、岩田2回で、各自の研究上有意義であった。本研究機関は新設間もないということもあり、図書の蓄積の不十分な点もあるので、本研究に関する基本的な文献の整備にも重きをおいた。本研究において、微分体の整数論的性質の1つとして、微分付値が、具体的な微分拡大体に延長される例を考察した。とくに、局所的なものとして、通常の形式的巾級数体の微分を、それを含む一般形式的巾級数体に、その自然な付値が微分付値になるように延長した例を考察し、応用として、形式的巾級数体上の2階線形微分方程式のピカール・ヴェシオ拡大について、微分付値の延長の例が得られた。また、菅野はフーリェ級数の總和法と関数近似に関する研究を継続し、同時に、離散値フーリェ級数の研究を行った。岩田はスペクトル解析を応用した世代重複モデルにおける景気循環の研究を行った。今野は多変量線形模型における共分散行列のように母数空間が行列構造をもつ場合についての同時推定問題を扱い、よりよい推定量を提案した。以上のように、微分体の整数論的性質の研究は、微分付値の延長の例がいくつか得られ、上り一般的な発展への基礎が得られたと見ることが出来よう。
胚中心での新規なシグナル分子群発現調節によるＢ細胞選択の解析

これまで、T細胞でしか発現していないと考えられていたシグナル伝達分子であるCD3eが胚中心B細胞の一部の集団で発現していることを見出した。この集団は胚中心B細胞の中でも激しく増殖している細胞であり、CD3eは、これらの細胞のアポトーシスに関与していることが明らかとなった。これらの結果は、これまで知られていなかったシグナル伝達分子が胚中心B細胞の正の選択・負の選択に重要な役割を果たしていることを強く示唆している。また、ある種の自己免疫疾患モデルマウスで当該細胞集団が増加していることも明らかとなった。B細胞欠損マウスに野生型およびCD3eノックアウトマウス由来のB細胞を移植後に免疫する方法、また、これらのマウスの骨髄細胞を移植する方法により、正常B細胞を持つマウスとCD3eを欠失したB細胞を持つマウスを作出し、それらのマウスにおける免疫応答を検討したところ、正常B細胞を持つマウスに比べてCD3eを欠失したB細胞を持つマウスにおいては、高い免疫応答が認められた。この結果は、前年度までに得られた予備検討の成果が正しいものであることを示している。加えて、本研究年度においては、前年度に作成したRamos B細胞株由来のCD3e陽性細胞を用いて、CD3eの発現とアポトーシスにどのような関係があるのか検討をしたところ、CD3eを介するシグナルがBimによるアポトーシスの制御に関与していることを示唆するデータが得られた。また、CD3eのプロモーター領域についてもクローニングを行いレポーター系を作成した。現在、当該レポーター遺伝子を用いてB細胞における制御様式を解析中である。これまでT細胞でのみ発現していると考えられていたCD3eが胚中心B細胞のサブセットにおいて発現していることを明らかにした。当該細胞集団を詳細に検討したところ、激しく増殖している細胞集団が特徴的にCD3eを発現していることが明らかとなった。しかし、この細胞集団が脾臓B細胞に占める割合は極めて低く、詳細な生化学的な解析は困難であることがわかった。そこで、これらの細胞で発現しているCD3eの生理学的な役割を明らかにするために、胚中心B細胞のモデル細胞として広く使われているRamos細胞からCD3eを発現しているサブラインを樹立することを試みた。その結果、元々のRamos細胞では極めて低レベルの発現しか認められないCD3eが、mRNAレベルのみならず、FACSでも検出可能なサブラインCD3+Ramos細胞を樹立することに成功した。CD3+Ramos細胞と野生型のRamos細胞との比較により、B細胞が発現するCD3eの役割について種々の解析を行ったところ、CD3eがこれらの細胞のアポトーシスを促進していることを示唆する結果が得られた。また、この現象がT細胞受容体のシグナル伝達において重要な役割を果たしていることが広く知られているlckを介するシグナルに依存していることも明らかとなった。加えて、当該細胞株においては、抗原受容体の細胞膜上の発現に必須であることが知られているCD79bの発現が著しく低下していることも明らかとなった。これらの結果は、胚中心B細胞の分化・成熟に従来は予想されていなかった分子群が関与していることを強く示唆しており重要な成果であると考えられる。本研究年度においては、胚中心B細胞において従来T細胞でしか発現していないと言われていたシグナル分子群が発現しているということをFACSレベルで明らかにした。加えて、胚中心由来のバーキットリンホーマと言われているRamosB細胞株においても、同様の分子群を発現している株を単離することに成功した。当該細胞株を用いて解析を行った結果、上記のシグナル分子群が細胞の生存を介して、胚中心における細胞選択に深く関わっていることを示唆するデータが得られた。一方、in vivoにおいて、これらの分子が免疫応答に重要な役割を果たしているのか否かを明らかにするために、細胞移植後の免疫応答を検討した。その結果、T細胞関連シグナル分子群を発現していないB細胞で再構成したマウスにおいては、T細胞依存性応答が正常マウスと異なることが明かとなった。これらのことは、上に述べたような胚中心B細胞における、T細胞関連シグナル分子の発現が、生理学的な意味をなさないbystanderな発現ではなく、積極的に胚中心B細胞の選択に関与していることを強く示唆している。加えて、これらのシグナル分子を発現した細胞が、どのような運命を辿るかを明らかにするためにGFPマークした実験においては、GFP陽性の細胞のうち一定の割合がアポトーシスに陥っているということが明かとなったことから、やはり、これらのシグナル分子が胚中心の選択に関与していることが示唆される結果が得られた。申請書においては、本年度においては主にプロモーター解析を行うこととなっており、実際に解析を進めていることから順調に進んでいると考えられる。また、CD3eコンディショナルノックアウトマウスについても、作成が順調に進んでいることから、概ね順調に進展していると考えられる。

研究計画書においては、今年度においては、FACS解析によってどのようなシグナル分子が発現しているのか、全体像を明らかにすることを重要な目的としていた。実際に、多色FACS解析により胚中心B細胞におけるT細胞関連シグナル分子の発現プロフィールを明らかにできたことから順調に推移していると考えられる。また、in vitroでの解析を行うために、細胞株の樹立にも成功しており、骨髄キメラマウスを用いる実験系も確立できたことから、この点についても順調に進展していると考えられる。加えて、次年度以降により詳細な検討を行うために、コンディショナルノックアウトの作製も実施しており相同組換えを行ったES細胞が得られたことから、こちらも順調に解析が進んでいると考えられる。作成したコンディショナルノックアウトマウスについて解析を進めるとともに、CD3eノックアウトマウスにおいて、これまで知られていなかったB細胞の機能異常について解析を進める前年度にin vitro、in vivoの移植実験で行ったことを明らかにするために、コンディショナルノックアウトマウスの作製を進め、移植の系以外でも同様の表現型が得られることを明らかにする。また、一部、コントロールが不十分であることが判明した移植マウスにおける免疫実験も新たなマウスを導入することにより、確実なデータとする。主に、マウスの解析に重点的に研究費を充てる。主に、マウスの作製と新規系統の導入、また、それらのマウスの解析に重点的に研究費を充てる。
シナプス形成・制御分子の解析

神経軸索の伸長とシナプス形成は神経回路網形成の最も重要な過程であり、我々はこの発生過程の現象とシナプスの可塑的変化の間に共通のメカニズムがあるものと考えている。本研究においては、軸索伸長促進蛋白因子の解析、シナプス形成過程の解析、シナプス長期増強解析系の開発を目的とし、これら相互の関係解析のための第一段階の研究とする。生化学的精製やモノクローナル抗体を用いた解析から明らかにした数種の因子候補蛋白質の一つをクローニングし、一次構造を明らかにした。この蛋白質は既知の蛋白質とは相同性の無い新規物質である。我々はこの因子をNPF(Neurite Promoting Factor)と命名した。クローン化した組換え蛋白を大腸菌で発現させたところ、初代培養系を用いたアッセイ系で活性が得られた。in situハイブリダイゼーションの結果は大脳全域に亘る発現を示した。cDNAの組換えにより調製した欠損NPF作製と発現による解析は、神経突起伸長活性を担う部位がC末端に近い部位にあることを明らかにした。一方、我々は、すでに培養ニワトリ胚大脳細胞において電気生理学的に機能するシナプス形成がE. E. Days(胚令+培養日数)依存的に起こり、このシナプス形成過程においては、E. E. Days15から17にかけてシナプス部位の成熟が起こることを明らかにしている。この過程のメカニズムを探るために、この成熟の活動依存性を調べた。シナプス伝導と伝達の2種類の活動の影響を区別して考えるために、同時期にTTXとCNQXの効果を検討した。その結果、両阻害剤ともにevoked EPSCの大きさの増大を有意に抑制したが、CNQXの方がその度合いが大きかった。しかし、miniature EPSCの大きさは両者間に差が認められなかった。このことは、両者の活動が異なる発生過程に関与していることを示している。
学習障害の読解の問題を予防するための指導法の効果に関する研究

本研究では幼児を対象に、聞き取り指導に語彙指導を組み合わせた指導法を考案し、単に語彙指導のみを行った場合との効果の違いを比較した。その結果、言語発達に問題のある幼児を対象とした研究1では、聞き取り指導の有効性が確認された。しかし、健常幼児を対象とした研究2では、語彙指導と比較した際、その効果に大きな差は認められなかった。研究1:聞き取りと語彙の両方を合わせた指導プログラムを作成し、言語発達に問題のある幼児に実施し、その効果を検証した。対象児は年長児6名(男5名、女1名)であり、全員知的な遅れはないにもかかわらず(動作性IQは85以上)、PVTやITPA言葉の類推、WPPSIのVIQで測定される言語能力に問題が見られた。指導プログラムの作成においては、幼児用のお話を制作し、その中に話し言葉及び書き言葉の双方で役立つと考えられた語彙を、一つのお話につき約5つ組み入れた。指導は1お話の読み聞かせ、2内容に関する質問、3語彙指導、4お話の読み聞かせ、5内容に関する質問、6内容に関する語りである。指導は週に1回、1か月間(計4回)、グループ指導を行った。その結果、聞き取り及び語彙課題の両方で伸びが見られた。研究2:健常幼児を対象に、聞き取りと語彙の両方を合わせた指導プログラム(聞き取り指導)と、語彙指導のみのプログラムを実施し、その効果を検証した。対象児はD園の年長児18名、E園の年長児25名である。研究1と異なり、多くの対象児に見てもらうことを考慮し、全指導の内容をビデオ形式とした。聞き取り指導の内容は、対象児に模倣させたりお話の内容を語らせる部分以外は研究1と同様である。語彙指導では、毎回約5単語ずつ取り上げ、一つの単語につき3例ずつ絵カードを呈示し、絵の名称を言わせたり、何をしているところか動作を答えさせたりした。その後、その語彙に合う動作を子ども達にも実際にするよう促した。両園で週に23回、約2か月間、計15本のお話のビデオを対象児に見せてもらった。その結果、両指導の効果に大きな違いは見られなかった。この理由として、聞き取り指導でも語彙指導を取り入れたものの、研究1及び研究2の語彙指導と異なり、対象児に反復させたり動作をさせたりといったことが無かった点が挙げられる。1.目的:本研究では学童期の読解の問題を予防するため、読解と処理過程が似ており、相関も強い聞き取り能力に着目し、聞き取りに語彙指導を組み合わせた指導法を考案し、その効果を検証した。2.方法(1)対象児:42名の年長児(5歳7ケ月6歳6ケ月、平均:6歳0ケ月、男児27名、女児15名)(2)スクリーニング課題: PVT(絵画語彙発達検査)とITPAの「言葉の類推」を実施した。先行研究より、両検査とも標準値からマイナス1.25SD以下の場合、言語の問題があると仮定した。その結果、6名が該当した。(3)指導教材:まず、先行研究を元に、名詞38語、動詞211語を指導語彙として選択した。次に、これらの言葉を含むようにして、子供用のお話(2500文字程度)を作成した。その後、作成したお話を内容ごとに区切り、各内容に合う絵を作成した。(4)指導:週1回、1ヶ月間、23名でのグループ指導を行った。指導内容は、お話を読み聞かせ、その中に出てくる語彙を内容と関連付けながら指導した。(5)評価:聞き取り課題(計12問)と語彙課題(計20問)を指導前と指導後に行った。3.結果:聞き取り課題においては、全体の平均正答率は事前が18.1%(標準誤差5.0)、事後が59.7%であった(標準誤差5.4)。語彙課題においては、全体の平均正答率は事前が50%(標準誤差4.7)、事後が62.5%であった(標準誤差3.1)。4.考察:聞き取り課題では全員に40ポイント以上の伸びが見られたことから、本研究で用いた教材や語彙を使った指導方法が聞き取りの向上に有効であったことが伺われた。しかし、伸びの度合いには個人差が見られ、各対象児の言語の問題の重症度によって左右されることが示された。達成度を「遅れている」と判断した一番の理由は、目的とした3つの指導形態の比較が出来なかったためである。今回研究のオリジナルとして掲げていた聞き取りと語彙を組み合わせた指導は行えたものの、語彙指導のみ、また全く指導しなかった場合の検討まで行うことができなかった。これは指導教材を作成するのに多くの時間を割いてしまったことが原因である。その結果、スクリーニングの期間及び指導期間を短縮せざるを得なくなり、他の指導形態の実施が難しくなってしまった。また、第2点目の理由として、今回対象としたLDリスク児の数も当初予定していた数の七分の一にとどまった点も挙げられる。

上記にも述べたように、指導教材の作成に時間を多く割いてしまい、各園への依頼の時期が大幅にずれてしまった。結果、3園のみに依頼をかけるにとどまり、うち1園は予定していた計画より開始時期が大幅にずれてしまったため、未実施になってしまい、残り1園はスクリーニングの段階までは順調にいっていたが、指導の段階で園側の事情により研究を中断せざるを得なくなってしまった。これは園側とスケジュールや内容について、細かな点まで話しを詰めておかなかったことが原因と考えられた。また、第3点目の理由として、指導期間の短縮が挙げられる。当初の目的として、各指導を2ヶ月ずつ行うことを予定していたが、1ヶ月の指導期間しか取ることができなかった。かつ、指導回数も研究計画の段階では、毎日行うこととしていたが、家庭の指導から園における指導に変更したため、園の状況も考慮した結果、月4回の指導にとどまった。以上のことから、当初掲げていた研究目的を遂行するには、「比較のための他の指導形態の欠如」「統計解析に耐えうる対象児の数の欠如」及び「指導回数の欠如」が挙げられ、達成状況を「(4)遅れている」とした次第である。1.スクリーニング(平成25年9月平成25年10月):研究協力の得られた埼玉県内の保育園及び幼稚園の年長児約300名を対象に、スクリーニングを行う。スクリーニングは、当初の計画では、個人の研究課題を使用することとしていたが、評価点の算出や対象児の言語年齢を正確に把握するため、PVTやITPAなど標準化されたテストを使用することとする【変更1】。2.評価(平成25年11月平成25年12月):1のスクリーニングで得点の低かった幼児の知的能力や言語能力を調べる。併せて多動やこだわりといった行動上の問題も調べる。その結果、行動上の問題はなく、動作性IQも高い(85以上)にもかかわらず、言語性IQや言語課題での成績が低い者をLDリスク児として特定する。3.指導(1)指導プログラムの作成(平成25年5月平成25年8月):当初予定していた家庭での指導は保護者の状況に左右される可能性が高いため、家庭ではなく園での一斉指導とする。指導内容をDVDに納め、DVDに登場する人物が子どもに問いかけたりして指導を進めるようにし、保育者の指示などが指導効果に影響を与えないように配慮する【変更2】。(2)指導方法:当初予定していた同一グループに2つの指導方法を行い、その効果を比較するためには、難易度の同じ語彙を用いることが前提となる。しかし、日本では子どもが使用する語彙を難易度別に分類したものはないため、対象児を2グループに分け、同一の語彙を使って、「聞き取り&語彙」指導のグループ及び「語彙指導」のグループの小学一年生段階における読解テストの点数を比較する【変更3】。(3)指導期間(平成26年1月平成26年3月):(1)の変更に伴い、指導は3ヶ月間、週3回の指導とする。1回の指導時間は30分とする【変更4】。1.スクリーニングと評価:各園を訪問する際の旅費(ガソリン代等)に使用する。また各園で検査を実施してくれる協力者にも謝金を支払う。2.指導プログラムの作成:(1)各お話に合う絵を作成してくれる協力者に謝金を支払う。また、絵の具や紙類の購入に充てる。(2)指導プログラムのDVDに登場してくれる人に謝金を支払う。また、それを撮影してくれる人にも謝金を支払う。その他、書籍や文献複写、郵送代等に使用するものとする。
新しいマイクロイメージング技術EFICを用いたヒト胚子発生過程の三次元画像解析

京都大学・先天異常標本解析センターに所蔵されるヒト胚子を用いて、これまで行われていなかった三次元形態学的な観察を、新しいイメージング技術(EFIC)を用いて行った。EFIC法のヒト胚子への応用にあたり、撮像プロトコールを完成させ、さらに実験動物への応用も可能となった。得られた画像については三次元可視化および定量的な観察を行った。また、データおよび画像については、Webによる公開を予定している。本研究の目的は、発生学において時々刻々変化する胎児の形態解析を、EFIC法という極めて解像度の高い三次元立体画像を描出することのできる新しい方法を用いて行うものである。本年度の実績は以下の通りである。1. EFICシステムはマイクロトーム、蛍光顕微鏡、デジタルカメラ、画像解析ソフトウェア、コンピューターシステムを統合したものであるが、安定した撮像システムは完成されていない。そのため、次年度以降の研究を円滑に進めるために、まずシステムを完成させた。スライスにより露出した標本断面の蛍光像を、GFPフィルターを装着した蛍光顕微鏡および高解像度CCDカメラによって捕捉するが、この際の自家蛍光を最も効率よく捕捉するためのパラメータの設定(撮像条件)を決定した。2.標本作製過程でのアルコールによる脱水時間が長くなると自家蛍光が消失する傾向にあり、脱水時間が短いとEFICに用いる特殊なwaxのサンプルへの浸入が不十分となる。この時間の調整をサンプルの胎齢ごとに厳密に行い、標準プロトコールを作成した。発生学領域への広範な応用を期待し、(1)マウス胚(2)ニワトリ胚(3)オタマジャクシ(4)メダカ成魚・稚魚など、実験動物として汎用される動物種についての標準プロトコールを確立した。3.ヒト胚子の形態解析をするにあたり、EFIC法での観察が有用な表面正常内部異常胚のスクリーニングを開始した。前年度までに撮像の終了しているカーネギー発生段階1323の1240例のMRIデータを用いたスクリーニングを開始した。三次元表面再構成像を作成し、表面データを観察したうえで、断面データの作成を開始している。今後は、より高解像度のデータを取得できる撮像プロトコールの改良を進める予定である。1.EFICシステムはマイクロトーム、蛍光顕微鏡、デジタルカメラ、画像解析ソフトウェア、コンピューターシステムを統合したものであるが、昨年度完成したシステムの改良を行った。現在のパラフィンを用いるシステムから、高温の過程を省略できるレジン包埋の系を用いた撮像法を試み、明瞭な画像を得ることに成功した。2.ヒト胚子の形態解析をするにあたり、EFIC法での観察が有用な表面正常内部異常胚のスクリーニングを開始した。まず、中枢神経系について脳神経管の二次元・三次元構造について解析した。脳神経管を前脳、中脳、菱脳に区分しその長さや体積について詳細に検討した。カーネギー発生段階16から23の間で側脳室の体積は大きく増加し、特に発生段階20から23の間が著明であることが初めて明らかとなった。以上により、胚子期の脳神経管の発生を正確に定量化することができた。また、腹腔内最大の器官である肝臓についても、形態の変化について三次元的に詳細に観察を行った。その結果、周辺器官との関係および容積の変化について新たな知見を得た。これらのデータは、妊娠初期の胎児診断における重要な基礎的データとなり、他では得ることのできない重要なものである。本研究の目的は、発生学において時々刻々変化する胎児の形態解析を、これまでに撮像した核磁気共鳴法(MR)画像データおよびEFIC法という極めて解像度の高い三次元立体画像を描出することのできる新しい方法を用いて行うものである。1.EFICシステムを用いて、カーネギー発生段階1323の胚子については撮像を完了し、解析へと進んでいる。2.ヒト胚子の形態解析をするにあたり、EFIC法での観察が有用な表面正常内部異常胚のスクリーニングをこれまでに撮像したMRデータ1200例を用いて行った。昨年行った中枢神経系のスクリーニングに続き、腹部内臓のスクリーニングを行った。まず、腹腔内最大の器官である肝臓について、形態の時系列的変化を三次元的に詳細に観察を行った。肝臓の体積が指数関数的に増加すること、肝臓の成長する空間的方向性がカーネギー発生段階1417、1719、1923でその特徴を変えること、などが明らかとなった。また、外形正常とされる胚標本から、容積の異常が検出され、高解像度撮影に供する候補とした。3.これまでに得られた所見について、論文発表を行った他、書籍を刊行し公表することができた。
微小管依存性の脊椎動物背側決定機構の解明

魚類・両生類の背側軸決定は一細胞期に起こる。背側決定因子が微小管依存性に予定背側に運搬され、Wntシグナルを活性化することが最初のステップであると考えられてきた。GFP-TubulinおよびEB1-GFP発現するトランスジェニックゼブラフィッシュを用いた解析から、一細胞期胚の植物極に一方向性の微小管が形成されること、微小管は予定背側方向にプラス端を向けて伸長しながら移動すること、微小管依存性に小胞が背側に運搬されることを見出した。さらに、背側決定に必要な分子であるSyntabulinが、Grip2aおよびWntlessと会合し、微小管依存性のWnt小胞の運搬に関与する可能性が示唆された。魚類・両生類の背腹軸形成は、受精後早期に開始する。一細胞期胚の植物極に微小管が形成され、植物極に存在する背側決定因子が微小管に沿って輸送され、胚盤細胞に取り込まれると、Wntシグナルが活性化する。これにより、背側特異的遺伝子が発現し、背側組織の誘導が始まる。本研究はゼブラフィッシュを用いて研究を行った。(1)受精を引き金に形成される植物極微小管のイメージング:GFP-Tublin、EB1-GFPを発現するゼブラフィッシュ受精卵を用いて植物極微小管の形成過程を観察し、微小管はプラス側を予定背側領域に向けて伸長していること、微小管自身も背側領域に向かって移動していることを見出した。さらに、微小管に沿って小胞構造が背側に移動することを明らかにした。(2)微小管形成を制御するメカニズムの解明:これまで受精によってCa2+ウェーブが動物局から植物極に起こることがメダカ胚で知られていた。Ca2+シグナルを阻害するthapsigarginを処理した受精卵では微小管が形成されないことから、Ca2+シグナルが微小管形成に関与していることが考えられた。これに関連して、Ca2+/calmodulin-dependent protein kingase 2g1のmRNAが卵植物極に局在していることを見出した。(3)微小管依存性の背側決定因子の輸送機構の解明:背側決定因子はWnt8aと考えられているが、Wnt8a輸送に関与する候補分子として、背側組織の欠損を示す母性遺伝子効果変異体tokkaebiとhecateの責任遺伝子産物SyntabulinとGrip2aが予想された。生化学的実験からSyntabulinとGrip2aが会合すること、Syntabulinは微小管に結合しGrip2aを微小管上に招集することを見出した。また、ライブイメージングおよび免疫組織学的解析から、SyntabulinとGrip2aの複合体が、微小管上でWnt8aを含む小胞構造を輸送している可能性が示唆された。魚類・両生類の背側軸形成は、受精直後一細胞期に開始すると考えられている。受精後早期、胚の植物極に微小管が形成される。その後、植物極に存在する背側決定因子が微小管上で輸送され、胚盤細胞に取り込まれWntシグナルを活性化する。これにより背側特異的遺伝子が発現し背側オーガナイザーが形成され背側組織が誘導される。本研究では、ゼブラフィッシュ一細胞期胚における背腹軸形成機構の解析を行った。微小管の構成要素であるalpha Tubulinまたは微小管プラス端結合タンパク質EB1と蛍光タンパク質との融合タンパク質(GFP-Tubulin, EB1-GFP)を卵で発現するトランスジェニックフィッシュを作製し観察を行った。その結果、受精後約20分後に胚植物極に一方向性の微小管が形成され、受精後30分後頃に減少・消失することを見いだした。植物極微小管の形成には、受精を引き金に活性化されるCaシグナルが必要であること、微小管は予定背側方向のプラス端を向けて伸張していることを見いだした。さらに微小管依存性に、小胞構造が背側方向に運搬されることを見いだした。微小管上をプラス端側に移動するモータータンパク質Kinesin Iに会合し、背側決定に必要な分子として同定されたSyntabulinは、卵植物極に局在することが報告されていた。本研究では、Syntabulin-GFPを用いてSyntabulinの移動のライブイメージングを行い、Syntabulinは小胞構造を取り囲んでおり、植物極微小管依存性の小胞構造の運搬に関与する可能性を示唆するデータを得た。さらに、Syntabulinは、アダプター分子Grip2aおよびWntを含む小胞の運搬に関わるWntlessと会合することを見いだした。これらの結果はSyntabulinが、微小管依存性にWnt小胞を運搬することに関与する可能性を示唆した。ゼブラフィッシュ一細胞期胚の植物極に形成される微小管形成のイメージングを行った。

当初は、in vitroの微小管形成システムを構築し観察する予定であったが、より生理学的なin vivoでの観察を行った、その結果、詳細な微小管形成過程を観察することに成功した。微小管形成を制御するメカニズムに関して、微小管制御分子の探索を行った。候補分子としてCa依存性プロテインキナーゼCamk2g1を同定した。Camk2g1のmRNAは卵植物極に発現していることから、次年度の機能解析の結果につながるものと思われる。微小管依存性の背側決定因子の輸送機構に関しては、微小管上をKinesin Iと会合する分子Syntabulinと、Wntの輸送に関与するWntlessおよびアダプター分子Grip2aの会合を検出することが出来た。さらに、これらの分子の細胞・胚での共局在を観察することに成功した。卵母細胞インジェクション法によりSyntabulin-GFPを一細胞期胚で発現させ、Syntabulinタンパク質が小胞構造と一緒に移動する様子を観察出来た。以上を考慮すると、研究はおおむね順調に進展していると言える。微小管形成を制御するメカニズムに関しては、同定したCamk2g1の機能解析を中心に行う。微小管依存性の背側決定因子の輸送に関しては、Syntabulinと会合することが見いだされたGrip2aおよびWntlessのライブイメージングを行う。また、Syntabulin-Wntless-Grip2a複合体のWnt輸送における役割を解明する。微小管形成を制御するメカニズムの解明:Camk2g1を阻害するペプチドAIP2が報告されており、これを母性プロモーターを用いて発現させCamk2g1の機能を阻害し、微小管形成および背側形成における役割を解析する。微小管依存性の背側決定因子の輸送のメカニズムの解明:Grip2aおよびWntless、また背側決定因子の候補であるWnt8aと蛍光タンパク質との融合タンパク質(Grip2a-mCherry, mCherry-Wntless, mCherry-Wnt8a)を卵母細胞インジェクション法またはトランスジェニックフィッシュを作製することで、一細胞期胚で発現させ、これら分子の移動をライブイメージングで観察する。Syntabulin, Grip2aに関しては、その変異体では背側決定に異常を見いだすことが知られている。本研究では、WntlessおよびWnt8aの母性遺伝子効果変異体の作製を行い、Wntless, Wnt8aの背側決定における役割を解明する。
身体の変容をめぐる技術哲学的考察

技術が新しい行為の形を生み出し、社会のあり方を大きく変える現代において、技術の具体的なあり方に即しながら、それが人間・社会にもたらす意味を吟味する視点が求められている。本研究では(1)自己と身体の変容、社会的コミュニケーションにおける身体の地位の変容など、技術が身体にもたらす変容を考察するための新しい技術哲学的視点を提示すること、(2)その視点をもとに、医療ケア、人工空間・環境など、具体的な場面に即して影響を考察し社会的提言を行うこと、(3)これらを通じて、技術と身体概念を結びつける新たな視座を獲得して、教材を開発することを目的とする。