hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
大学研究者のキャリア発達における危機と飛躍に及ぼすサポート資源の効果に関する研究

本研究の目的は、若手研究者がキャリア形成する上で、どのような危機(つらい・つまずき)を経験するのか、その経験後、どのようにして飛躍(モチベーション回復)するのかを社会心理学的に明らかにすることであった。大学院生を含む若手研究者の危機的経験とその実態を浮き彫りにするとともに、これらの危機に直面した後の飛躍に有効な指導・サポート源とそのあり方に関する示唆を得た。初年度(平成18年度)は、文系および理系の大学研究者(30歳代)を中心対象としてインタビューを実施した。これにより、合計22名分のデータを蓄積することができ、ほぼ実施計画どおりに進捗している。なお、インタビュー協力者の内訳は、文系17名(男性8名、女性7名、進路変更者男女各1名)、理系5名(すべて男性)である。現在、これらの蓄積データ(インタビュー内容)を文書化する作業および、それに基づく解析の準備を進めている。また、本テーマに密接に関連する内容で、以下に挙げるとおり学会での個人研究発表とワークショップでの発表を行った。(1)山浦一保2006社会人のアカデミック・キャリア発達に関する研究-社会人が大学院進学を決めるとき-日本社会心理学会第47回大会,pp.484-489.[東北大学,2006年9月18日](2)山浦一保2006大学院生の実態を統計データと面接調査から探る(3)坂田桐子2006女性の若手研究者のキャリア形成-研究の紹介と若干の私見-以上、日本心理学会第70回大会ワークショップ(WS073)「若手研究者のキャリア発達とその課題」企画者・司会者:田中堅一郎、話題提供者:山浦一保・坂田桐子・平野光俊、指定討論者:外島裕[九州大学,2006年11月4日](4)山浦一保2006大学生のかかわりのあり方は職業人生の始まりに何をもたらすか?-日常の対人関係で学びとることによる就職活動の効果-日本心理学会第70回大会ワークショップ(WS058)「青少年のキャリア意識形成と自己意識の発達促進に関する基礎研究」企画者・司会者:岡田努、話題提供者:榎本博明・岡田努・下村英雄・山浦一保[九州大学,2006年11月4日]平成19年度は、国内における理系の大学研究者(30歳代)を中心対象としてインタビューを実施し、データの蓄積を引き続き行った。その結果、十分な分析を行うために計画した当初の目標人数をほぼ満たすことができた。今年度実施したのは計17ケースである。そのインタビュー協力者の内訳は、文系3名(男性1名、女性2名)、理系14名(男性7名、女性7名)である。現在、前年度までの分と合わせて39名(残り1名は近日中に実施予定)のデータについて、分析を進め、調査票を具体化している。その一部は、平成20年度International Congress of Psychology(ICP)において成果報告を行う予定である。また、本テーマに密接に関連し示唆を得るために行った研究で、今年度行った学会発表等は以下に挙げるとおりである[ただし、大学研究者を対象にした調査ではないため、次ページには記していない]。(1)山浦一保2007組織における教育は人を自律させうるのか?-個人の成長プロセスと教育連鎖-日本心理学会第71回大会発表論文集,p.1232.[東洋大学,2007.9.18.9.20.](2)山浦一保2007大学生は過去経験の何を語るのか?-キャリア発達を促す心理的反応の観点から-日本心理学会第71回大会ワークショップ(WS054)「青少年のキャリア意識形成と自己意識の発達促進に関する基礎研究(2)実証データに基づく報告」企画者・司会者:岡田努、話題提供者:榎本博明・岡田努・下村英雄・山浦一保[東洋大学,2007.9.19.]本研究の目的は、若手研究者を対象に、キャリア発達上(1)どのような危機(躓き経験による落ち込み)を経験するのか、(2)この危機から飛躍(モチベーション回復)させるサポート資源は何か、そして(3)危機から飛躍に至る心理プロセスの解明を試みることであった。本年度はまず、インタビュー・データ全40名分について定性的分析を行った。その結果、若手研究者が直面する危機は、大きく「研究上の滞り」「対人的問題」「将来不安・進路の悩み」「経済的問題」「体調不良」に分類できた。このときの主なサポート資源には、対人的資源(指導教員や多様な交流、共同研究への参加)や経済的資源(外部資金獲得)があり、その際の学びもまた重要であった。この結果に基づき、対人的なサポート資源が、若手研究者の危機からの回復・飛躍に及ぼす影響とその心理プロセスについて検討した。分野と性別を考慮して、30歳代までの若手研究者を対象にweb調査を行った。

分析の結果、若手研究者が危機から飛躍するのは、対人的サポートによって自らの新しい可能性を発見し、研究者としてのアイデンティティを高め、社会に対する否定的な認識を抑制することができたときであった。これらの望ましい心理的反応を引き出しうるサポート源は、分野や性別によって異なった。特に、文系や女性の場合は家族からのサポートが、また理系や男性の場合は内部(指導教員、同じ研究室仲間)からのサポートがそれぞれ寄与することが明らかになった。ちなみに、文系や女性の場合は外部(国内外の研究者)からのサポートが、そして理系や男性の場合は家族からのサポートが、ポジティブに作用する側面をもつ一方で、社会に対する否定的な認識を促す側面も併せ持っことが示された。本年度の分析を通じて、大学院生を含む若手研究者の躓きに関わる実態を浮き彫りにするとともに、分野別や性別による指導・サポートのあり方に関する示唆を得ることができた。
センサ・フュージョンを用いた芝生内雑草検出方法の開発

近年の環境問題の深刻化に伴い,ゴルフ場における除草の機械化・自動化が強く望まれている.この実現に向けて,本研究では,最初に静岡県富士山麓のゴルフ場にて現地調査を行った.その結果,特に問題となっていたのが,グリーン上のスズメノカタビラであり,パッティングに影響を与える.この駆除の自動化を考えるとき,最も困難なのは雑草の検出である.そこで本研究では以下のセンサを試作した.(1)色(葉緑体含有量)の差より検出:LED/葉緑体吸収波長の干渉フィルタ/フォトダイオードを用いた微妙な色の差を検出するセンサを試作した.好条件時は雑草を検出可能であったが,応答は季節により逆転し,夏季は芝,冬季は雑草の方が緑が濃くなるため,春季,秋季の検出は困難であった.(2)水分量の差より検出:マイクロ波を照射し,その反射強度が水分の含有量差に影響されることを利用したセンサを試作した.このセンサも,夏季は芝,冬季は雑草の方が水分量が多く,中間期の検出が困難なこと,天候や時刻により反射強度が変化し,特に雨の影響が大きいことなどが判った.(3)手触りの差による検出:雑草は手で触ってみると芝よりも硬い感じがする.これを検出するため,ウレタンゴムにひずみゲージを張り付け,これで表面を撫でるタイプのセンサを試作した.このセンサの場合はデータを平滑化する必要があるので分解能は悪くなるが,季節や天候,時間などの影響が最も少なく,常に雑草の方が芝よりも硬い.以上のセンサは,いずれも,植物の生理状態,地面の状態などに起因する誤認識を単体で防ぐことはできない.そこで,センサ・フュージョン手法を開発する第一段階として,フォトダイオードセンサと,手触りの差によるセンサの2つの出力をもとに,ファジイ推論により雑草を認識することを試みた.その結果,現時点ではまだ不完全ではあるが,単独のセンサ使用時よりも,誤認識を減らすことができた.近年の環境問題の深刻化に伴い,ゴルフ場における除草の機械化・自動化が強く望まれている.この実現に向けて,本研究では,最初に静岡県富士山麓のゴルフ場にて現地調査を行った.その結果,特に問題となっていたのが,グリーン上のスズメノカタビラであり,パッティングに影響を与える.この駆除の自動化を考えるとき,最も困難なのは雑草の検出である.そこで本研究では以下のセンサを試作した.(1)色(葉緑体含有量)の差より検出:LED/葉緑体吸収波長の干渉フィルタ/フォトダイオードを用いた微妙な色の差を検出するセンサを試作した.好条件時は雑草を検出可能であったが,応答は季節により逆転し,夏季は芝,冬季は雑草の方が緑が濃くなるため,春季,秋季の検出は困難であった.(2)水分量の差より検出:マイクロ波を照射し,その反射強度が水分の含有量差に影響されることを利用したセンサを試作した.このセンサも,夏季は芝,冬季は雑草の方が水分量が多く,中間期の検出が困難なこと,天候や時刻により反射強度が変化し,特に雨の影響が大きいことなどが判った.(3)手触りの差による検出:雑草は手で触ってみると芝よりも硬い感じがする.これを検出するため,ウレタンゴムにひずみゲージを張り付け,これで表面を撫でるタイプのセンサを試作した.このセンサの場合はデータを平滑化する必要があるので分解能は悪くなるが,季節や天候,時間などの影響が最も少なく,常に雑草の方が芝よりも硬い.以上のセンサは,いずれも,植物の生理状態,地面の状態などに起因する誤認識を単体で防ぐことはできない.そこで,センサ・フュージョン手法を開発する第一段階として,フォトダイオードセンサと,手触りの差によるセンサの2つの出力をもとに,ファジイ推論により雑草を認識することを試みた.その結果,現時点ではまだ不完全ではあるが,単独のセンサ使用時よりも,誤認識を減らすことができた.
蛋白質ジスルフィド結合の創生に関わる細胞マシーナリの構造生物化学

ジスルフィド結合の形成・開裂は、タンパク質の高次構造形成およびミスフォールドタンパク質の分解除去において極めて重要な酸化還元反応である。本研究代表者は、大腸菌およびヒト細胞の小胞体におけるタンパク質ジスルフィド結合において中心的役割を担う膜酸化酵素DsbBとフラビン酵素Ero1αの構造生化学的研究を主たる研究テーマとして進め、それらの結晶構造解析に成功した。この成果に加え、ミスフォールドタンパク質の分解除去に関わるジスルフィド結合還元酵素ERdj5全長の結晶構造解析にも成功し、同酵素が促進する一連の小胞体関連分解経路の分子機構を解明するに至った。二つのシステイン残基間で形成されるジスルフィド結合は、蛋白質の高次構造形成のみならず機能発現制御に大きく寄与しており、細胞品質管理に深く関与する。本研究課題では、細胞における蛋白質ジスルフィド結合形成システムの構造生物学的研究を展開し、その機能発現メカニズムを分子構造レベルで解明する。特に大腸菌におけるDsbB-DsbAシステム、およびヒト細胞の小胞体に存在するEro1-PDIシステムを対象とし、両システムの機能発現メカニズムに関する知見を照合することにより、細胞内でのジスルフィド結合形成に関する普遍的原理を見いだし、一つの独創的学問分野を確立させる。本研究の主目的は、大腸菌において蛋白質ジスルフィド結合を創生する膜酸化酵素DsbBの作用機序を生化学・構造生物学的アプローチにより分子レベルで完全解明することである。本研究者は2006年にDsbBとそのパートナー蛋白であるDsbAとの複合体の結晶構造解析に成功し(Inaba, et. Al.,Cell,2006)、その構造情報を基に、新たな研究を展開している。中でも平成19年度は、DsbBが有する膜と水平方向の両親媒性αヘリックスの機能的役割を解明するため、in vivoおよびin vitro両方において系統的な変異解析を行った。その結果、膜水平ヘリックスと膜間の結合が、DsbAからDsbBへの一方向の電子移動反応において重要な役割を担っていることを解明し、DsbBによるDsbA再酸化反応を駆動するためのCysteine Relocaton Modelを提唱するに至った。本研究成果については、すでに論文原稿を仕上げつつあり、近日中に論文投稿する予定である。さらに、DsbB-DsbA反応中間複合体に加え、DsbB単独での構造情報を得るため、モノクローナル抗体Fabフラグメントを利用したDsbBの結晶化を試みた。DsbBを特異的に認識するモノクローナル抗体の系統的なスクリーニングを終え、FabフラグメントとDsbBとの共結晶化を開始している。すでにDsbBとFabフラグメントとの共結晶が再現性よく得られており、SPring8の放射光を利用した回折実験の結果、4.5Å分解能のデータセットを収集することに成功した。今後サンプル調整条件・結晶化条件を最適化し、更なる分解能の向上を目指すとともに、DsbB単独での構造解析を一日も早く成就させる。小胞体は分泌蛋白質や膜タンパク質の合成の場であり、そこには蛋白質の高次構造形成反応を促進し、かつ不良品の蛋白質が過剰に蓄積しないよう厳正にコントロールするシステムが存在する。特にジスルフィド結合の形成・異性化・開裂は、正しい高次構造を促す上でも、いったんミスフォールドした蛋白質を修復または除去する上でも極めて重要な反応である。平成21年度、我々は、ヒト細胞の小胞体において補酵素であるFAD分子と共役してジスルフィド結合を創りだす酵素Erolの結晶構造を2.3A分解能で決定することに成功した。これにより、ErolがFAD分子と共役してジスルフィド結合を創りだす化学スキームおよびErolがパートナー蛋白質であるPDIを特異的かつ効率よく再酸化する分子機構の詳細が明らかとなった。さらに我々は、酸化的な環境である小胞体においてミスフォールド蛋白質の誤ったジスルフィド結合を特異的に還元し、ミスフォールド的に還元し、ミスフォールド蛋白質の分解を促進する酵素ERdj5全長の結晶構造解析にも成功した。これと並行して進めた機能解析の結果と合わせ、ERdj5がパートナー蛋白質であるEDEMと協同して蛋白質分解を促進する作用機序を分子構造レベルで解明した。以上の仕事により、高等生物細胞の小胞体における蛋白質品質管理の仕組みに関する理解が大きく深まった。現在、これら二つの構造解析の仕事について論文投稿中である。特にジスルフィド結合の形成・異性化・開裂は、正しい高次構造を促す上でも、いったんミスフォールドした蛋白質を修復または除表する上でも極めて重要な反応である。

平成22年度、我々は、ヒト細胞の小胞体において補酵素であるFAD分子と共役してジスルフィド結合を創りだす酵素Ero1の結晶構造を2.3A分解能で決定することに成功した。さらに構造情報に基づき系統的な生化学解析を行うことにより、Ero1が周りのレドックス環境をセンスし自身の酸化活性を制御する機構およびEro1がパートナー蛋白質であるPDIを特異的かつ効率よく再酸化する仕組みを分子レベルで明らかにした。さらに我々は、小胞体においてミスフォールド蛋白質の誤ったジスルフィド結合を選択的に還元し、ミスフォールド蛋白質の分解を促進する酵素ERdj5全長の結晶構造解析にも成功した。これと並行して進めた機能解析の結果と合わせ、ERdj5がパートナー蛋白質であるEDEMおよびBiPと協同して蛋白質分解を促進する作用機序を分子構造レベルで解明した。以上の仕事により、高等生物細胞の小胞体における蛋白質品質管理の仕組みに関する理解が大きく深まった。Ero1αに関する研究成果はEMBO Journal誌とJ.Biol.Chem誌に、ERdj5に関する研究成果はMolecular Cell誌にそれぞれ掲載した。特筆すべきことに、ERdj5に関する研究成果Molecular Cell誌の表紙を飾った。
分泌性RNAによる認知症の早期診断法の開発

認知症の患者は現在国内で約500万人と推計され、深刻な社会問題となっている。認知症の60%を占めるADには、早期であれば分子標的薬も有効と考えられているが、現在のところ有効な早期診断法は存在しない。このような背景の中、本研究においては、miRNAの発現変動を、健常者と比較AD特異的エクソソームのマーカー単離を行い、アミロイドの沈着前の早期診断を目指した。その結果、特に顕著にAD患者血清中に上昇するmiRNAとして、miR-1234,miR-1238,miR-1280、miR-1471またAD患者血清中で減少するmiRNAとしてmiR-22を同定した。認知症患者は現在国内で462万人と推計され、深刻な社会問題となっている。認知症はその原因から(1)血管性、(2)アルツハイマー型:AD、(3)レビー小体型:DLB、(4)前頭側頭型:FTLDに分類されているが個々に神経に沈着する物質も違い治療戦略も異なることから、正確な分類が必須である。また60%を占めるADには、早期であれば分子標的薬も有効と考えられているが、有効な早期診断法は存在しない。このような背景の中、応募者は血清中に存在する数種のmiRNAによって、ADの血清診断の可能性を見出した。具体的には、これまでの応募者の結果から、アミロイドが沈着するAD患者の血清中のmiRNAプロファイルと、α-シヌクレインが沈着するDLBはmiRNAのプロファイルが異なる可能性が示された。この事実はエクソソームのプロファイルにも差がある可能性も示唆する。従って、本研究から、神経細胞における分泌小胞、miRNAを介した変性機構が明らかになる可能性がある。また、神経変性の初期変化を捉えることは、認知症以外の神経変性疾患の診断応用につながる可能性を持っている。平成27年度は、miRNAの発現変動を大規模な範囲で健常者と比較し、AD特異的エクソソームのマーカー単離を目指した。また、今後の臨床応用を考慮し、検体の採取の標準化や(年齢によって異なるmiRNA内部標準マーカーを同定する検討も行った。研究計画に沿って順調に推移している。認知症患者は現在国内で462万人と推計され、深刻な社会問題となっているが、申請者は血清中に存在する数種のmiRNAによって、ADの血清診断の可能性を見出した。具体的にはこれまでの申請者の結果から、アミロイドが沈着するAD患者の血清中のmiRNAプロファイルと、α-シヌクレインが沈着するDLBはmiRNAのプロファイルが異なる可能性が示された。一方、今年度は、miRNA検査の臨床応用を目指して以下の項目の検討を行った。(1)検体採取・保存法の相違がmiRNA検出量に及ぼす影響:検体の採血・保存方法は各施設によって異なることが予想される。血漿・血清検体の採取方法や保存方法の違いが与える影響について検討した。検体の分離方法や保存条件により生じる結果のばらつきや個人差によるばらつきを補正するために、一般的に、外来性因子としてC.elegans由来のmiRNA(cel-miR-39)を混入した後にRNAを抽出し、qPCRの結果をcel-miR-39の検出量によって補正する方法が用いられている。しかし、補正因子も保存中に分解する可能性がある。そこで、ボランティアの血漿と血清にcel-miR-39を加えて、検体の個体差や保存条件、分離方法によるcel-miR-39の安定性に及ぼす影響について検討を行った。その結果、同一個体由来であっても血漿と血清ではcel-miR-39の検出値に差が認められた。さらに、14日間4°Cで保存することにより、全ての検体でcel-miR-39の減少が認められた。(2)内部標準miRNAの検討:近年、外部標準物質としてcel-miR-39による補正方法は広く用いられている。しかし、(1)の結果でも示されたように外部標準物質として加えたcel-miR-39は、4°C、14日間の保存によって分解される。そこで、本研究項目にいては、同一検体内において補正因子となり得るmiRNAの検索を行った。その結果、miR-8059及びmiR-6131が内部標準miRNAの候補として考えられた。平成28年度は、(1)年齢によって異なるmiRNA内部標準マーカーを同定する、(2)AD特異的な、血清及び唾液中の分泌型miRNAを同定する、(3)AD特異的なエクソソームのマーカーを同定する、

(4)上記マーカー分子を微量検体から検出可能なシステムの開発を行うまた、最近、オランダのWurdingerのグループから、血小板中に存在するがん由来のRNA(Tumor-educated blood platelets,TEPs)が報告された。彼らは、がん患者の血小板中にRNAが存在することを見いだし、そのRNAが、がん由来の配列をもっている事を発見した。今年度は、さらに、認知症において、血小板中のRNAの解析を加えていく。分子病理学実験の条件検討に時間を要したため。条件検討後、実験を進める。
共感性の分子調節機構

げっ歯類では、視線と匂いを社会シグナルとして情動が伝染。この時、双方のストレス内分子が機能する必要となった。脳内ではACCからPAGが情動伝染を司ること、また痛み受容チャネルのTRPV1が関与する可能性を見出した。次に、幼少期母子間の阻害で、情動伝染の機能が低下した。母子間において、帯状回オキシトシン神経系が活性化し、この幼少期帯状回オキシトシンを阻害すると、社会認知や親和性が低下することを見出した。最期に、ヒトイヌの視線を用いた交流は両者のオキシトシンを分泌すること、飼育期間が長く、飼い主を長く見る犬は、飼い主からの情動が伝染し、飼い主と再開したイヌはオキシトシンを介した情動的な涙を流た。1)情動伝染神経回路と分子の同定:これまでヒトで情動伝染に関わるとされている脳部位(前頭前野、帯状回、島皮質)に加え、他者の痛みを観察したマウスでのすくみ行動に関わる脳部位(扁桃体、中脳灰白質、視床下部、嗅内皮質)における神経細胞活性マーカのc-fosの発現を網羅的に解析した。その結果、前帯状皮質と扁桃体の中心核においてすくみ行動との相関が得られた。またすくみ行動中枢である中脳灰白質でもすくみ行動との有意な相関を得た。これらの結果から、マウスにおいてもヒトと同様に前帯状皮質が情動伝染に関与すること、さらにその下流に位置する扁桃体中心核と中脳灰白質を経由することが示された。2)発達期オキシトシンの情動伝染機能に及ぼす影響の解析:母子分離した早期離乳モデルマウスを用い、共感性の発達変化を調べた。Langford(Science, 2006)に従い、腹痛情動伝染を実施した。その結果、早期離乳マウスでは痛み行動の伝染が減弱し、さらに他者の存在による社会的緩衝作用が起こりにくいことが明らかとなった。3)オキシトシンの共感性に果たす役割の系統発生的役割の解明:オキシトシンが共感性に果たす役割の系統発生的役割について、ヒト-イヌ間の身体性同期化と情動伝染をモデルに解析した。イヌにおけるリアルタイムの情動評価系の確立を目指し、電極の作成、Wavelet方式の解析を実施した(駒井班と連携)。その結果、イヌでもイベントに応じた情動を定量することの成功した。またイヌの運動性同調の実験を実施し、オキシトシンが関わる飼い主に対するアタッチメント行動と飼い主との同調性の関連を調べた。その結果、アタッチメントが高いイヌは飼い主とも行動同調が起きやすいことがわかった。オキシトシンの効果は、共感性の発動における個体間の関係性に作用する可能性を見出した。1)情動伝染神経回路と分子の同定:平成26年度は、情動伝染に関わる社会因子同定を目指した。電撃ショックを受けたケージメートを観察すると、観察個体でもすくみ行動を発現するようになった。この際、微細行動解析を実施したところ、すくみ行動がすくみ行動と同調して発現しないこと、個体間の空気流を制限すると情動伝染が減弱すること、から視覚的に情動伝染する可能性が低いことを見出した(駒井班、渡辺班と連携)。さらに視覚情報と聴覚情報を同時提示してもすくみ行動が発現しないことから、嗅覚を介した情動伝染の存在が強く示唆された。2)発達期オキシトシンの情動伝染機能に及ぼす影響の解析:母子間がオキシトシン分泌に及ぼす影響と、オキシトシンの作用する脳部位の同定を目指した。仔マウス帯状回におけるオキシトシン分泌は母親マウスとの接触頻度と高い相関性を示し、母親からうける皮膚接触が重要であることを見出した。さらにこの時期、帯状回と扁桃体中心核では成獣に比べて高いオキシトシン受容体を発現することを見出した。これらの結果は情動伝染時の脳内活性化部位と一致した。また発達期に帯状回でオキシトシン作用が障害されたマウスでは社会的探索行動の減少、養育行動の減弱が見出された。3)オキシトシンの共感性に果たす役割の系統発生的役割の解明:ヒトとイヌの絆の関係性がオキシトシンに依存するかを調べた。その結果、オキシトシンと視線を主としたアタッチメント行動とのポジティブ・ループによって促進されるものであることが明らかとなった。このポジティブ・ループはオオカミとでは認められなかったことから、進化の過程でイヌが特異的に獲得したものであることも明らかとなった。このようなヒトとイヌの異種間における生理学的な絆形成の存在は、イヌの優れた社会的能力や共感性を示すものである。本成果はScience誌に掲載され、表紙にも採用された。

本研究の目的は,フットショックを用いた野生種マウス(MSM)における情動伝染様式の解析である.本年度は,前年度の共同研究(No.2014-A84)から得られた結果をふまえ,iPad mini 4を用いた動画再生実験を行った.実験用系統であるC57BL/6J(B6)雄マウスに,0.99mAのフットショックを12回与えた様子を撮影し,その動画をiPadで再生できるよう設定した.動画再生時間は計13分間で,B6を実験箱に入れてから7分間(以下,preと記す),フットショックを12回受けている4分間,その直後の刺激のない2分間という内訳である.実験日には,B6雄マウスにフットショックを5回与え,その際に排尿した尿を採取した.同時に別室では,MSM雄マウスに前述した動画を呈示した.動画呈示時に,別室で採取したB6の尿を共呈示する群と,コントロールとして蒸留水を共呈示する群という2条件を設け,MSMの1分間におけるすくみ行動(freezing)発現率を比較した.その結果,preにおける1分間当たりの平均すくみ行動発現率を1としたとき,尿呈示群は平均で3.83のfreezing増加がみられたが,蒸留水呈示群では1.75に留まった.このことから,フットショックを受けた異系統マウスの尿呈示により,MSMにおける情動伝染の受容反応は増強されることが明らかとなった.また,本研究の目的である情動伝染様式の解析という点においては,情動伝染のシグナルとして嗅覚情報が重要であることも示唆された.同じ実験系を用いたC57BL/6の恐怖情動伝染モデルでは、他者の痛みを受容したマウスの前帯状皮質における神経活性の上昇が認められた。この活性指標とすくみ行動は正の相関を示した。また情動行動に関係すると言われている扁桃体では相関が認められず、すくみ行動の中枢であるPAGでは相関が認められた。本課題の目的は共感性を司る分子調節機構の解明である。分子が外的に働く機能をMSMを用いたユニークな系で明らかにしつつある。また脳内では帯状回が関与することを明らかにしてきた。業績には記載できなかったが、共感性を高めることが知られているオキシトシンが、ヒトとイヌの絆形成を担っていることをScience紙に発表し、社会的関係性を高めることで、オキシトシンが共感性を促進している可能性を、異種間でも示した。これらは特筆に値する。本研究の目的は,フットショックを用いた野生種マウス(MSM)における情動伝染様式の解析である.昨年度は尿によって、情動伝染が起こることを見出したが、それに加えて、視覚情報の効果を調べた。ショックを受けているマウスの動画を再生すると、観察個体でもフリージングが起こった。しかし、動画をモザイク化した場合、その効果が消失し、マウスが動画を手がかりに恐怖を感じていることが明らかとなった。情動伝染のシグナルとして嗅覚情報と視覚情報が重要であることが示唆された.同じ実験系を用いたC57BL/6の恐怖情動伝染モデルでは、他者の痛みを受容したマウスの前帯状皮質からすくみ行動の中枢であるPAGへの投射回路があることを実証した。現在、その回路が情動伝染に果たす機能的役割を調査中である。最後に、ヒトと犬という他種間での情動伝染を調べた。行動解析の結果からは、ストレス条件時に飼い主に生じた何らかの変化はイヌをひきつけるものであった。心拍変動解析は、条件間で比較した場合に飼い主・イヌともに違いが認められず、また微細な時系列で解析をしてもペア毎に結果が異なり、一貫した傾向は観察されなかった。しかしながら、ストレス条件下においてのみイヌー飼い主の心拍変動の相関係数と年齢や飼育期間との間に有意な正の相関が見られたことから、飼い主が何らかの情動変化を示す場合には情動伝染が成立する可能性が示唆された。また、その成立のためにはイヌの年齢や飼育期間といった諸因子が影響を及ぼしていることが考えられた。今回、実験中にイヌが飼い主を注視する時間といった諸因子との間には統計的に有意な相関を見出すことはできなかったが、傾向はみられたためこれらの諸因子も情動伝染に影響を及ぼしているのかもしれない。
粒子法シミュレーションを用いた肺の呼吸性移動の研究

粒子法固体解析手法を用いて、肺の呼吸性移動のシミュレーション技術を開発した。具体的には、胸郭の運動モデル、横隔膜の運動モデル、肺モデルを作成し、これらを組み合わせた。計算結果は医用画像と比較してその妥当性確認を行った。おおむねよい一致が見られた。しかしながら、肺外面と胸郭内面のすべりが再現できていないという問題が残った。粒子法による生体力学シミュレーションとしては、他に三半規管内のリンパ液の流動解析および嚥下と誤嚥の解析も行った。粒子法の計算精度の向上のため、高次精度粒子法空間離散化スキーム、これを対流項に用いる任意ラグランジュ-オイラー法、ポリゴンを用いた壁境界条件の研究も行った。粒子法固体解析手法を用いて、肺の呼吸性移動のシミュレーション技術の開発を行った。具体的には以下の4点について研究を実施した。(1)胸郭の運動モデルの開発:肋骨の弾性変形を考慮した呼吸による胸郭の運動モデルを開発した。(2)横隔膜の運動モデルの開発:横隔膜は医用画像にすべてが映っていないため、そうした部分に対して標準モデルを変形することで作成する技術を開発した。これにより、通常の胸部の医用画像からでも横隔膜全体を生成することが可能になり、呼吸による横隔膜の運動を与えることができるようになった。(3)肺モデルの作成:肺は線形弾性体とし、上記の胸郭および横隔膜の運動モデルを境界条件として組み込み、肺の呼吸による変形を解析できるようにした。(4)医用画像との比較による肺モデルの妥当性確認:上記の肺モデルによる呼吸のシミュレーションを行い、肺の各部の移動量を計算値と測定値で比較した。おおよその一致が得られ、特に横隔膜近傍では体長方向の移動量が大きくなることが再現できた。しかし、背面付近で測定値は大きな移動量を示すが、計算値ではそうならず、あまり一致しなかった。その原因は、実際の生体では肺表面と胸郭内面との間にすべりがあるためであることがわかった。肺表面と胸郭内面の境界条件を改良し、医用画像に基づいた肺形状を作成し、呼吸性肺変形のシミュレーションをおこなった。計算結果は医用画像と比較することで、肺内部の各点の変位について定量的な比較を行った。肺以外の器官は、固定あるいは自由な境界条件としてシミュレーションに組み込んだ。肺は自ら運動することはできず、胸郭と横隔膜の運動に追随して受動的に運動する。特に胸郭の運動のモデルの高度化を実施した。肋骨の運動は胸椎との接触部を軸として回転運動する。これまでは医用画像にもとづて強制運動させていたが、これを肋間筋の収縮による力を導入し、運動モデルを改良した。肋間筋は各肋骨の間にあり、協調して肋骨の運動を支配している。まずは、最低限の数の肋間筋をモデル化して、その収縮により肋骨が回転運動できるようにした。実際に本改良によっても胸郭の運動を再現でき、胸郭の運動を筋肉の収縮の結果として模擬できるようになった。本改良によって、肺の運動モデルを実際のメカニズムにさらに近づけることができた。また、肺の呼吸運動以外の生体シミュレーションとして、三半規管内のリンパ液の流動現象や、口腔や咽頭の運動による嚥下にも適用した。肺がんの放射線治療時における腫瘍の呼吸性移動をシミュレーションするために、肺形状を医用画像より得て、呼吸運動を横隔膜と胸郭の運動によって行う粒子法シミュレーション技術の開発を行っている。この当初の研究目的はほぼ達成され、シミュレーション結果は医用画像と定量的な比較を行うことができた。特に、横隔膜と胸郭の運動は、筋肉の運動の結果として得られるようにすることで、より原理的なメカニズムに基づいてシミュレーションができるようになった。平成26年度に引き続き、肺モデルの改良を行った。具体的には以下の2点の研究を実施した。(a)肺表面と胸郭内面および横隔膜とが互いに滑りあうような境界条件を導入した。(b)4次元コンピュータ断層撮影(4DCT)データを活用したデータ同化手法を用いて、シミュレーションの精度向上を試みた。改良された肺モデルの妥当性確認を行った。医用画像と定量的に比較することで、計算精度が向上した。さらに発展的な研究として、粒子法の定式化について検討し、最小二乗法を適用することで粒子法において任意の高次精度の離散化スキームが構築できることを示した。また、時間積分スキームについて、高粘性流体に対する高精度スキームの開発を行った。当初の計画に沿って研究を実施した。一部、データ同化手法の導入についてはあまり好ましい精度向上の結果が得られなかった。一方、発展的な研究として、最小二乗法に基づいた定式化による高精度化を新たに試み、よい結果を得ることができた。これらを総合すれば、おおむね順調に研究は進展したと評価できる。これまでの粒子法による肺の呼吸性移動および生体力学に関するシミュレーションのとりまとめを行うとともに、高精度粒子法スキームの研究、および、壁境界条件の高度化の研究を行った。高精度粒子法スキームの研究では、最小二乗法をMPS(Moving Particle Semi-implicit)法の枠組みで記述することで、任意の空間次数の精度を有する粒子法を開発した。さらに、差分法で近年注目されているコンパクトスキームをも包含する定式化を行った。メッシュレス法におけるコンパクトスキームは世界的に最先端である。

さらに、高精度粒子法スキームを対流項に適用し、風上化を施すことで、任意ラグランジュ-オイラー(ALE)の計算を行う方法を開発した。このALE粒子法を用いると、これまでの粒子法では不得意とされてきた定常問題において、計算点を固定することで高精度の計算ができるようになった。壁境界条件では、壁粒子を配置することが従来より行われてきたが、壁をポリゴンで扱うことで計算時間と計算容量を大幅に低減することができる。従来の原田らのポリゴン壁境界条件を改良することで精度の向上を実現した。具体的には、角や隅を原田らの方法では曲率で近似していたが、これを角や隅としてそのまま扱えるように改良した。これにより、様々な3次元形状の壁境界近傍での流体の挙動が滑らかになった。また、ポリゴンで壁を表現する場合、流体粒子を壁から離すように移動することで壁から外に流体が出ることを防いでいる。これは位置ベースの境界条件を適用していると考えることができる。従来の壁境界条件は力ベースであり、壁粒子の圧力を計算してその圧力により流体粒子は壁から反発させていた。しかしながら、位置ベースの計算を行うことでも等価な圧力を得られることを示した。すなわち、位置ベースの壁境界条件でも物理的に適切な計算ができることを示した。粒子法固体解析手法を用いて、肺の呼吸性移動のシミュレーション技術を開発した。具体的には、胸郭の運動モデル、横隔膜の運動モデル、肺モデルを作成し、これらを組み合わせた。計算結果は医用画像と比較してその妥当性確認を行った。おおむねよい一致が見られた。しかしながら、肺外面と胸郭内面のすべりが再現できていないという問題が残った。粒子法による生体力学シミュレーションとしては、他に三半規管内のリンパ液の流動解析および嚥下と誤嚥の解析も行った。粒子法の計算精度の向上のため、高次精度粒子法空間離散化スキーム、これを対流項に用いる任意ラグランジュ-オイラー法、ポリゴンを用いた壁境界条件の研究も行った。平成25年度の当初の研究計画である、(1)胸郭の運動モデルの開発、(2)横隔膜の運動モデルの開発、(3)肺モデルの作成、(4)医用画像との比較による肺モデルの妥当性確認について、すべて予定通りに実施した。粒子法はメッシュ生成が不要なシミュレーション手法であるため、複雑な3次元形状を容易に扱うことができるだけでなく、大変形に対してもメッシュが破綻することなく計算を進めることができる。また、形状の不整合に対しても耐性があり、ノイズが多く含まれることが多い医用画像に基づいたシミュレーションに適している。しかしながら、従来の有限要素法と比較して計算精度は悪く、今後の改良が必要である。これまでの研究で、粒子法を肺の呼吸性移動に適用し、医用画像に基づいた生体の大変形をシミュレーションできることを示し、実際的な例題において粒子法の有用性を実証した。今後は、粒子法における高次精度の離散化スキームの開発など、計算精度の向上に関する研究に発展させていく予定である。計算の高精度化に関して、測定結果反映させながらシミュレーションを行うというデータ同化の手法を、これまでは導入する方針であった。しかしながら、あまりよい結果が得られなかったことと、医療の現場では使いにくいという点から、方針転換したい。
選択的リチウム吸着剤のリチウム同位体分離特性

三種の選択的リチウム吸着剤,すなわち,LiMn_2O_4を前駆物質としそれからリチウムを抽出することにより得られる吸着剤(MnO_2(Li)),Mg_2MnO_4を前駆物質としそれからマグネシウムを抽出することにより得られる吸着剤(HMnO(2Mg)),およびLiSbO_3を前駆物質としそれからリチウムを抽出することにより得られる吸着剤(アンチモン酸;HSbO_3),につき,それらを合成し,それらのリチウム同位体選択性を調べる研究を行った。いずれの吸着剤も^6Liを選択的に取り込み^6Li選択性であった。MnO_2(Li)では、MnO_2(Li)の示すリチウム同位体効果が前駆物質の合成条件およびそこからのリチウム抽出条件と相関していることが見いだされた。すなわち,同位体効果は前駆物質からのリチウム抽出時のマンガン溶出率と弱い負の相関性を示し,前駆物質合成時のLi/Mn比と負の相関性を示した(Li/Mn比が0.50.8の範囲)。得られたリチウム同位体に関する分離係数の最大値は25°Cにおいて1.014であった。HMnO(2Mg)では,リチウム同位体効果は前駆物質からのマグネシウム抽出率と強く相関しており,抽出率が上がると小さくなってしまうことが見いだされた。マグネシウムの抽出法をさらに検討する必要があろう。HSbO_3では,MnO_2(Li)やHMnO(2Mg)よりもさらに大きなリチウム同位体効果が観測されたが(25°Cにおける最大値1.025),リチウムの脱着が難しく,今後の検討課題である。本研究により,いずれの吸着剤も,イオン交換法によるリチウム同位体分離の研究において,現在最もよく使用されたいる有機のイオン交換体に比べ,数倍大きなリチウム同位体効果を示すことが明かとなったが,それらを優れたリチウム同位体分離剤とするためにはまだまだ解決すべき点も多く,今後も研究を継続していく必要がある。LiMn_2O_4あるいはMg_2MnO_4を前駆物質とし、それらからLiあるいはMgを抽出することにより得られる2種の選択的Li吸着剤(それぞれMnO_2(Li)、HMnO(2Mg)と略記)に関し、合成条件、Li選択吸着性とLi同位体効果の関連を研究した。以下に各々の吸着剤につき、得られた結果をまとめる。MnO_2(Li):Li抽出剤に(NH_4)_2S_2O_8を用いるとMnの溶解率を1%以内に抑えながら、高いLi抽出率を達成できる。最適調製条件は、固液比10gdm^<-3>、抽出回数2回、抽出温度90°C、抽出時間1h,(NH_4)_2S_2O_8濃度0.5Mである。調製されたMnO_2(Li)のイオン選択性は、調製条件にあまり依存せず、Liに対し特異的に大きい(分配系数値として4000cm^3/g以上)。Li吸着量は4.55.7meq/gと吸着剤の調製条件により若干異なり、調製時のMn溶解率と緩やかな正の相関性を示す。また、正の温度依存性を示す。Li同位体分離係数については、Mn溶解率と緩やかな負の相関性を示し、25°Cにおいて最大で1.014である。また、温度に対しては負の依存性を示す。

HMnO(2Hg):MnO_2(Li)の場合と同様、Mg抽出剤として(NH_4)_2S_2O_3が有効である。Mn溶解率を1%以下に抑えながら、Mg抽出率を95%以上にすることができる。HMnO(2Mg)の特性は、調製時のMg抽出率に強く依存し、特に抽出率50%を境として大きく変化する。Li選択性、Li吸着量ともMg抽出率の増加に伴って増大するが、Li同位体分離係数は小さくなる。25°CにおけるLiの分配係数、Li吸着量、Li同位体分離係数の最大値はそれぞれ150000cm^3/g、2.26meq/g、1.016である。MnO_2(Li)、HMnO(2Mg)とも、市販のイオン交換体に比べ10倍程度大きな分離係数値を示し、Li同位体分離剤としての基本特性を有していることが明らかである。しかしそれらが優れた同位体分離剤となるためには、優れたカラム充填剤である必要があり、今後検討する必要がある。昨年度に引き続きLiMn_2O_4を前駆物質とする吸着剤(MnO_2(Li))及び本年度新たに始めたLiSbO_3よりLi^+をH^+とイオン交換することにより得られる単斜晶アンチモン酸(HSbO_3)につき、それらのキャラクタリゼーション並びにリチウム同位体選択性を調べた。MnO_2(Li):本年度は前駆物質を合成する際のLi/Mn量比(=0.4,0.5,0.7,0.8)並びに焼成温度(=400,600,850°C)が調製されたMnO_2(Li)の示すリチウム同位体選択性に及ぼす効果について検討した。その結果、どの温度でも一般にLi/Mn比が大きくなるとリチウム同位体効果が小さくなることがわかり、同位体効果とMnO_2(Li)の結晶格子の歪との相関が示唆された(歪が大きくなると同位体効果が小さくなる)。これは、吸着剤の示すイオン選択性からも支持される。また、Li/Mn比一定の場合、実験条件の範囲内で、同位体効果は前駆物質の焼成温度にあまり依存しないこと、すなわち、吸着剤の結晶性の高低にはあまり依存しないことがわっかた。リチウム同位体分離係数は25°Cにおいて、最大1.0092であり、昨年度報告した最大値1.014(本年度のものとは調製条件が異なる)は得られなかった。なお、いずれの条件で調製されたMnO_2(Li)もアルカリ金属、アルカリ土類金属の中でリチウムに対して高い選択性を示した。HSbO_3:五塩化アンチモンと水酸化リチウムから合成したアンチモン酸リチウムよりリチウムを抽出することにより単斜晶HSbO_3を調製した。イオン選択性としてはMnO_2(Li)以上に高いリチウム選択性を示した。分離係数は各種含リチウム水溶液に対して25°Cで1.020-1.025、90°Cで1.011-1.015であり、マンガン酸化物系吸着剤よりかなり大きく、この点では、有望なリチウム同位体分離剤の候補であるといえる。しかし、リチウムの脱着が難しく、今後の更なる検討が必要である。
実験と計算を融合した核酸酵素の進化工学

遺伝子情報を担うDNAやRNAといった核酸は、タンパク質酵素のように化学反応を触媒する機能も持ち、物質生産や遺伝子治療などに応用が期待されている。本研究の主な目的は、これらの核酸酵素を実験室内で人工的に進化させ、より活性の高い配列を発見することである。さらに、この人工進化の過程に、機械学習などコンピューターによる計算を取り入れ、従来の実験室進化を凌駕する手法を開発することを目指す。
DNAマイクロアレイ法によるダイオキシン発生毒性機構の検討

1)ツメガエルの約4万クローンのcDNAについてマクロアレイを行った。2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p- dioxin(TCDD)は受精後27時間胚で1クローンの増加、5クローンの減少、7日胚で41クローンの増加、12日胚で14クローンの増加、42クローンの減少を起こした。しかし、cytochrome P450 1A(CYP1A6,7)を除いて、ノーザンブロット法で増減が一致したクローンを見つけることができなかった。2)ノーザンブロット法により、Ah受容体は受精後初日から既に弱いが発現し、7日で顕著な増加がみられた。AHRの発現はTCDD暴露で影響されなかったが、CYP1A6,7の他、CYP1Bでは顕著な誘導が受精後2日からTCDD濃度依存性に観察された。この他、Arntやグルタチオン転移酵素の発現はTCDDに影響されなかった。3)以上の結果から、初期発生においてTCDDであきらかな誘導を受けるCYP1AについてTCDD感受性の高いゼブラフィッシュで役割を検討した。モルフォリノアンチセンスオリゴヌクレオチド(AHR2-MO)を用いて、ゼブラフィッシュで報告される二種のAh受容体の一つ(AHR2)の翻訳を阻止したところ、体幹の血流遅延・浮腫、下顎の成長阻害および中脳背側部の局所循環障害とアポトーシスなどこれまで知られている主なTCDD毒性が顕著に阻害された。AHR2-MOは毒性とともに、CYP1A誘導を阻害したので、CYP1Aに対するモルフォリノアンチセンスオリゴヌクレオチド(CYP1A-MO)を処置したところ、上述のTCDDによる毒性が抑制された。4)最近、TCDDがヒト由来培養肝細胞で、炎症や各病態で誘導されるプロスタグランジン合成酵素であるシクロオキシゲナーゼ2(COX2)が誘導されることが報告された。COX2阻害剤は同時暴露した場合TCDDによる中脳静脈の血流遅延とアポトーシスを顕著に回復させた。COX2に対するモルフォリノアンチセンスオリゴ処置は低濃度TCDDによる血流遅延とアポトーシスをほぼ完全に消失させた。4850hpf胚の頚動脈と思われる部分にCOX2 mRNAの強い発現が観察できた。TCDD処置はCOX2発現に全く影響しなかった。5)我々はこれまで、ソニックヘッジホッグ(shh)が下顎にも発現し、TCDD暴露により顕著に減少した。AHR2-MOはTCDDによるshh発現の低下と下顎の低形成を阻止した。TCDDは下顎原基のptc1と2の発現には影響を与えなかった。発生生物学的背景が充実しており、かつ解析力の高いゼブラフイッシュとアフリカツメガエルを用いて、ダイオキシンの発生毒性における分子機序を検討した。

この研究はこれら下等脊椎動物においてもほとんど不明であるダイオキシン毒性の分子機序を明らかにし、ヒトを含めた高等ほ乳類における毒性機序解明への手がかりをつかむことを目的としている。1)ツメガエルの約4万クローンのcDNAについてマクロアレイを行った。2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin(TCDD)は受精後27時間胚で1クローンの増加、5クローンの減少、7日胚で41クローンの増加、12日胚で14クローンの増加、42クローンの減少を起こした。しかし、cytochrome P450 1A (CYP1A6,7)を除いて、ノーザンブロット法で増減が一致したクローンを見つけることができなかった。2)ダイオキシン受容体である一種類のAh受容体をツメガエルにおいて初めてクローニングした。全長が3150bp、推定アミノ酸配列が834AAであり、他の脊椎動物と61-76%の相同性を示した。3)ノーザンブロット法により、Ah受容体は受精後初日から既に弱いが発現し、7日で顕著な増加がみられた。AHRの発現はTCDD暴露で影響されなかったが、CYP1A6,7の他、CYP1Bでは顕著な誘導が受精後2日からTCDD濃度依存性に観察された。この他、AhR nuclear translocatorやグルタチオン転移酵素の発現はTCDDに影響されなかった。4)上述の結果から、初期発生においてTCDDであきらかな誘導を受けるCYP1AについてTCDD感受性の高いゼブラフィッシュで役割を検討した。ゼブラフィッシュ胚において我々がこれまで報告しているように、TCDDは体幹の血流遅延・浮腫、下顎の成長阻害および中脳背側部の局所循環障害とアポトーシスを起こした。モルフォリノアンチセンスオリゴヌクレオチド(AHR2-MO)を用いて、ゼブラフィッシュで報告される二種のAh受容体の一つ(AHR2)の翻訳を阻止したところ、これらすべてのTCDD毒性が顕著に阻害された。これまでの成績より、発生初期のダイオキシン毒性にAh受容体が関与することをマウス以外の動物で初めて観察した。またTCDDをはじめとしたダイオキシン処置によりCYP1Aが顕著に誘導されることがよく知られていたが、毒性との関係は不明であった。本成績はAh受容体活性化から毒性発現の間にCYP1Aの誘導が介在することを示す初めての分子生物学的証拠である。初年度において、ダイオキシンの中でも最も急性毒性の強い2,3,7,8-tetrachlorodibenzo -p-dioxin (TCDD)処置されたアフリカツメガエル胚で発現変化が観察された約90の遺伝子についてノーザンブロット法を行ったところ、同様の顕著な変化が確認できたのはチトクロームP450 1A (CYP1A)だけが残った。この結果をふまえて、今年度は以下の研究を展開した。1)TCDD毒性におけるCYP1Aの関与とその機構:AHR-MO、CYP1A-MOを用いて、それぞれの特異的蛋白転写を阻害し、その影響を観察した。ゼブラフィッシュではAHRがこれまで二種類報告されているが、このうちAHR2-MOはこれまでゼブラフィッシュ胚で報告されている全てのTCDD毒性(浮腫、血流障害、赤血球の成熟、下顎の低形成、中脳背側部のアポトーシス)に対して阻害効果を示した。
周産期喪失後の父親がサポートグループに参加する経験：教材化の試みと看護者の反応

本研究は、周産期喪失後の父親が悲嘆過程を辿る中で、サポートグループ(以下、SG)に参加する経験を明らかにすることを目的とし、父親への支援の一助となることを目指して開始した。周産期喪失後の両親は、周産期喪失やケア等の情報を求めてインターネットを利用するため、研究結果はインターネット(以下、ネット)にまとめることとした。共に子どもを亡くした当事者である母親、家族、社会一般の人々もアクセスできるようにすることで、父親の体験への理解を深めると共に、ケアを提供する看護者に対しては支援のヒントも得られることを目指している。前年度は、1)文献検討により、大半の父親は妻を支えることを第一に考えること、自身の悲しみや辛さを表出することが困難なこと、一方で自身の体験や思いを共有する必要性を感じる父親もいること、父親に対するケアに戸惑いを抱く看護者もいることが明らかとなった。2)SGへの継続的な参加により、父親の体験を知る機会になったと共に、研究協力者となる父親に出会うためにフィールド開拓の検討の必要性を感じた。今年度も継続的にSGに参加することで更なる父親の体験への理解を深めた。母親の中には、夫との違いに気づいた後、自分と違って悲しみを吐露する場が無いことやその時間すら持てないこと、男性はどのように悲しみに向き合うのか、誰のケアを受けるのか等に思いを巡らせている母親もおり、父親の悲しみに寄り添おうとする様子も見られた。加えて、SGで活動を行う看護学・心理学の専門家、当事者スタッフとの意見交換を重ね、本研究について意見を求めた。以上の活動を通して、インタビューで得られた父親の声や先行研究等により体験をまとめることに加えて、父親に評価してもらうという方向性への示唆を得た。これにより、インタビューガイドの作成に加え、ネットのコンテンツ項目、評価に関する質問内容の作成に取り組み、現在修正中である。予定していた1年未満の育児休業期間を延長することになったこと、専門家との意見交換に時間を費やした結果、研究計画より遅れを生じる結果となった。インタビューガイドの作成、パイロットスタディの実施、インタビューの開始を予定していたが、インタビューガイドの修正に加え、ネットのコンテンツ項目、評価に関する質問内容の作成が必要であり、パイロットスタディの実施、インタビューの開始には至らなかった。早急にインタビューガイドの修正と、コンテンツ項目、評価に関する質問内容の修正を行い、パイロットスタディ、父親へのインタビューを実施する。インタビューの実施と並行して分析を行い、インタビュー結果を踏まえてコンテンツ項目を修正していく。本研究は、1)周産期喪失により子どもを亡くした父親がサポートグループに参加する経験を明らかにすること、2)周産期喪失のケアに関わる看護者に向けて父親の経験に関する情報提供を行い、その反応を探索することを目的に行う。これにより、周囲の人々(家族、社会の人)が子どもを亡くした父親の体験について深く理解すること、および父親に対する看護者の支援のあり方を検討することを目指している。本年度の進捗状況は以下である。1)文献検討を行った結果、父親は妻の喪失感が理解できなかったり、妻との心理的距離を感じたりする場合があり、妻の反応を確認しながら妻を支える方法を模索していた。また、父親は自身の悲しみを他者には話さず、悲しみを紛らわすように冷静でいることに努める傾向にある一方で、子どもの喪失体験や思いを共有することの必要性を感じている父親もいた。周産期喪失のケアに関わる看護者は、父親の悲しみに目を向けているが、父親と関わる機会が少なく、また父親の反応によってはどのように声をかけてよいのかわからずにいた。以上より、本研究により子どもを亡くした父親がサポートグループに参加する経験を明らかにすること、それにより父親の喪失体験を深く理解し、看護者による支援につなげていくことは意義のあるものであることを改めて確認した。2)研究フィールドの検討に関しては、研究協力の依頼を検討していたサポートグループは、現時点で研究協力者の条件(子どもを亡くして1年以上が経過している方、サポートグループの代表者が選定した方、自由意志に基づき研究協力が得られた方)を満たす研究協力者に出会うことが難しいことが考えられた。次年度は、周産期喪失のネットワークを介して研究協力者となる父親に出会う機会を得ていくとともに、新たな研究フィールドの開拓についても検討していく必要がある。本年度計画よりも進行が遅れている理由は、研究者が育児休業中(1年未満)であるためである。