hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
退職移行期にある中高年層の社会的アイデンティティ再構築過程に関する研究

現在、団塊の世代を中心に大量の定年退職者が生まれつつある。本研究ではこれらの退職者たちがどのようにして退職後への移行という人生の転換点における危機-企業から家庭・地域ヘシフトするための「セカンド・モラトリアム」と名付けているが-を乗り越えようとしているのかを、滋賀県の企業に対するアンケート調査と、ボランティア・サークルを運営している人たちへのインタビューから明らかにしていった。平成18年度は、研究実施計画通り、滋賀県下の企業退職者に対する質問紙調査と聞き取り調査を行った。質問紙調査は、滋賀県下の大津市、草津市、守山市、彦根市の商工会議所に所属する定年知職制度のある企業の、現役勤労者と退職者を対象に実施した。滋賀銀行、三洋電機、キリンビールなどの大企業をはじめ中小企業を含めて46社の協力を得ることができた。質問紙の配布は平成18年10月12月の期間にわたっている。5500配布して3000名から回答があり、50%を超える高い回収率となった。その後データの打ち込みを行っている。退職者については完成したが、勤労者については次年度にまたがることとなった。なお、退職者については、調査した企業のいくつかから結果の問い合わせがあったため、分析の途上ではあるが、単純集計結果のみを簡単な冊子にまとめ送付した。現時点では、分析にまではいたらないが、企業規模別、業種別により退職後の生活に差が生じていると考えられる。次に、平成18年9月に守山市社会福祉協議会の協力を得て、守山市在住の企業退職者で現在ボランティア活動をされている13名の方に聞き取り調査を実施した。現在、テープ起こしはほぼ終えており次年度に詳細な分析を行う計画である。ただ、データ全体から次のような印象を感じている。ひとつは、インタビューに応じていただいた方々は非常にアクティブな退職生活を送っているように見えるが、退職直後から現在のようなライフスタイルを築くまでにそれなりの葛藤を抱えていたという点である。企業戦士としての自己から新たな自己に変わるまでに青年期のそれと同じような「モラトリアム」と呼べるような特別な時期を経られた方が半数くらいおられる。また、退職期のアイデンティティは会社勤めの頃のような単一な社会的役割が支配的であるというよりも、家庭、趣味、ボランティア、地域等々に多元的に分散している、したがって複数のチャンネルで社会とつながっていることもわかってきた。19年度は,昨年度に実施した調査データの分析が主な研究内容であったが,次第に,現代の定年退職者像が明らかになりつつある。1.質問紙調査...18年度実施した調査は,当初の見込みを超える回収率を達成した。そのため一部データの入力が間に合わず,本年度に持ち越すことになった。調査に協力をいただいた企業や商工会議所からの問い合わせが多くあり,中間報告書の作成を急ぎ,19年の秋には,要望先に配布した。また,一部商工会議所では報告講演もさせていただいた。あくまでも中間段階であるが,次のような諸点が明らかになった。(1)当初の予想と異なり,企業規模や業種の違いによる退職者の意識や行動の差は小さいか,ほとんど見られなかった。(2)退職後の経済的格差は見られるものの,これも意識や行動の差に直結していない。(3)予想に反して,商工会議所の所在地別に差が見られたが,その最も大きな規定要因は居住地域の違いに基づくものであった。(4)退職後の人間関係の中で配偶者との関係が重要である。(5)これまでの調査同様,健康に関わる要因では,精神的健康が最も意識や行動との相関が高い。2.聞き取り調査...昨年度実施した守山市のボランティアグループのデータ(テープ起こししたもの)をもとに,定年退職者の言説を分析しつつある。やはり,これまでの退職者とは異なる像が浮かび上がってきている。-例えば,現役時代に培った知識や技術はボランティア活動の中で常に役立つとは限らないが,現役時代に身につけた生活信条やエートスはほとんど変化させておなれない。ただし,多くの人が退職生活という新しい環境に馴染むために「空白」の時期を過ごしていおられる。いわば青年期に対応するモラトリアムが存在している。また,アンケート調査でも明らかなように,退職者たちは配偶者との関係に非常に気を遣っておられるのだが,その上で距離を置くことの大切さを述べる人もおられた。最終年度にあたる本年度は、18年度から19年度にかけて実施した、質問紙調査およびインタビュー調査のデータを分析することが主な研究内容であった。その詳細な内容は近々に観光される研究報告書にまとめているところである。なお、成果の一部は、要望のあった草津市商工会議所の講演で発表させていただいた。アンケートは、滋賀県下の企業を対象にしているが、滋賀県の地域的な特性が反映した結果になった。高度経済成長以降、県下には製造業を中心に大企業の事業所が急速に進出した。そこで働く従業員には2つのタイプがあり、当初は地元出身者が多かったが、やがて他府県からの移住者が増加した。

後者が、都市的ライフスタイルを持ち込み、新興住宅地の新住民となったのに対し、前者は、現役中も伝統的な地域社会との関係を持続している。このことが、定年後の行動や意識の違いとなって現れている。この差異は、企業規模間や業種間にみられる差異よりも大きかった。定年退職移行期が、ライフサイクルの大きな転換点であることは、アンケート調査からも読み取れるが、インタビュー調査のデータ調査ではこの点をさらに追求している。対象者は現在では安定した退職生活を送っているが、例外なく、移行期にはパーソナリティやアイデンティティのうえで危機的な時期を送ったと語っていた。結論として、危機を乗り越える支援として青年期同様に、セカンド・モラトリアムとも言うべき時間と場が必要なことが明らかとなった。
「好不調の波」を抑える：身体表現の揺らぎ発現メカニズムの解明

一旦学習したはずの運動,昨日まで絶好調だった運動のパフォーマンスが,いつのまにか不調に陥り,なかなか抜け出せない。ペアの競技でも,なぜか二人のパフォーマンスがうまく噛み合わなくなる。「好不調の波」と評される我々のパフォーマンスの揺らぎは,なぜ,どのように生じるのだろうか?どうすればこの揺らぎを阻止できるだろうか?本研究では,「解が冗長な状況下で生じる身体表現の変動」や「社会的相互作用による最適状態からの逸脱」が,この揺らぎに関与しているという仮説を実験的および理論的に証明する。そして,この好不調のゆらぎを阻止する手立てとして経頭蓋電気刺激法を適用し,最適パフォーマンス時の運動記憶の復活を試みた。当該年度は、個人課題の行動実験による「好不調の波」現象の確認を行った。実験では、被験者に左右の握力の合計を標的力(最大発揮力の20%程度)に可能な限り正確に合わせ続ける力調整課題(20秒間/ 1試技)を課し、この間どの程度左右の力配分を一定に維持されるかが評価された。先行研究にて確立された理論モデルに基づくならば、被験者は一定の力配分を維持することができず、この配分は時間とともにランダムウォーク上に変動するはずであった。結果は理論モデルにおける予測を支持するもので、標的力からの合計力のばらつきがほぼ一定なのに対して、力配分は時間とともに変動し、課題に関連しないばらつきはむしろ増大する傾向にあった。このことは、課題に直接関係しない身体表現の変動は必然的であること、このことが好不調の波の一因となりえることを示唆した。また、経頭蓋電気刺激法の刺激部位の同定に関連して、共同課題においてどの領域が個人間の力配分の揺らぎに影響を及ぼすかを検証した実験解析結果を精査し、右の側頭ー頭頂結合部(TPJ)にその座があることを同定した。この結果は国際学術雑誌NeuroImageに掲載された。H30年度の主な目的は、個人課題の行動実験による「好不調の波」現象の確認であったが、「研究概要の実績」で述べたように、理論モデルで予測された通りの振る舞いが実証できた。また、その間に今後の経頭蓋電気刺激法の実験に関する準備も行い、倫理申請を含む実験環境の整備を進めた。双方ともに当初の予定どおりの進捗状況であり、研究は順調に進行しているといえる。今後は経頭蓋電気刺激法の適用による身体表現ゆらぎの制御に関する実験を進めていく。H31年度は、当該年度で得られた行動実験の結果をもとに、両手を用いた個人課題に関する検証を行う。当初、経頭蓋電気刺激は直流電気刺激法(tDCS)の適用を考えていたが、その他に交流電気刺激法(tACS)等、異なる刺激法の適用も含めて検討していく。H31年度、個人課題における検証が終了した後は、この研究課題を共同課題に拡張し、個人&共同の両課題においてパフォーマンスにおける「好不調の波」の抑制・制御の可能性を検証してゆく。

H31年度は、当該年度で得られた行動実験の結果をもとに、両手を用いた個人課題に関する検証を行う。当初、経頭蓋電気刺激は直流電気刺激法(tDCS)の適用を考えていたが、その他に交流電気刺激法(tACS)等、異なる刺激法の適用も含めて検討していく。H31年度、個人課題における検証が終了した後は、この研究課題を共同課題に拡張し、個人&共同の両課題においてパフォーマンスにおける「好不調の波」の抑制・制御の可能性を検証してゆく。
においセンサを用いた呼気による頭頸部癌の非侵襲的診断法の開発

本研究の目的は,呼気に含まれる成分を解析することにより,頭頚部癌に特有なガス成分をガスクロマトグラフィーを用いて同定することである。正常人を用いた呼気成分の解析により,喫煙後や飲食後などの成分の判別は可能であった。しかし,同一被検者でも採取時間や採取方法の違いにより呼気成分構成比が異なり,今回測定に用いたセンサでは,癌患者に特有の成分を見いだすことは困難であることが予想された。本研究の目的は,人の呼気に含まれる成分を解析し,その中で頭頸部癌に特有なにおい成分あるいは呼気中成分を特定し,その成分をセンサを用いて感知することができないかという点について,実験的に検討を行うものである。平成23年度は,研究分担者の南戸は,独自に開発した10チャンネルの呼気成分分析装置を用いて,正常人の呼気分析を行った。その結果,喫煙後や飲食後など明らかににおいが違っていると思われる条件下での判別は可能であることがわかった。一方,研究代表者の三輪は,半導体ガスセンサを用いるセンサガスクロSGEA-P2(エフアイエス社製)を購入し,健常者での日内変動や採取法による変動を測定した。その結果,同一被検者でも,時間により成分構成比が異なり,また,サンプル採取法によっても異なる結果が生じることが判明した。しかし,決まった時間に決まった採取法で呼気の採取を行うことにより,再現性の高い結果を得ることができることも判明した。今回のセンサガスクロでの検知対象ガスはアセトン,アセトアルデヒド,エタノール,イソプレンであり,本機での測定は非常に簡便でかつ測定精度が高いことが判明した。今年度は対象数を増やすとともに,本来の目的である癌患者の呼気を用いての測定を行ったが,まだ癌患者に特有な呼気成分あるいはそのパターンを見出すには至っていない。その要因として,現時点での測定ガスの中に特異な物質が含まれていない可能性が考えられる。しかし,まだ対象症例数が少ないため,今後も継続して測定を行う予定である。がんを体臭で判定する,がん探知犬が存在する。われわれが日常,診療する頭頸部癌患者は,頭頸部すなわち気道に病変を有していることから,がんの何らかの成分が呼気として吐出されている可能性が高い。そこで,本研究の目的は,ヒトの呼気に含まれる成分を解析し,その中で頭頸部癌に特有なにおい成分あるいは呼気中成分を特定し,その成分をセンサを用いて感知することができないかという点について,実験的に検討を行うものである。平成23年度は,研究分担者の南戸は,独自に開発した呼気成分分析装置を用いて正常人の呼気分析を行った。その結果,喫煙後や,飲食後等明らかににおいが違っていると思われる条件下での判別は可能であることがわかった。一方,研究代表者の三輪は,半導体ガスセンサを用いるセンサガスクロSGEA-P2を用いて,健常者の日内変動や採取法による変動を測定した。その結果,同一被検者でも,時間により呼気成分構成比が異なり,また,サンプル採取法によっても異なる結果が生じることが判明した。しかし,本器で測定できるガス成分は,アセトアルデヒド,エタノール,イソプレン,アセトンの4種であり,結果は被検者の体調などによる変化がなく,癌の判定には不向きであることが判明した。さらに硫化水素,メチルメルカプタンなど,体臭に関連する可能性の高いガスに対する測定が必要であると思われた。おhン研究費で購入した半導体ガスセンサはこれらのガスに対する測定も可能であり,今後の検討課題としたい。本年度は,研究分担者の南戸は,独自に開発した10チャンネルの呼気成分分析装置を用いて,正常人の呼気分析を行った。今後は対象数を増やすとともに,本来の目的である癌患者の呼気を用いての測定を行うが,有意な差が出ない場合には,対象ガスセンサを変更することの検討も必要と思われる。目的とした癌患者に特有な呼気成分あるいはその構成パターンを見出すまで至っていなしため。

測定用のセンサはすでに使用可能となっており,その適正な測定条件も判明したため。研究推進に関する機材は揃っており,今後も対象症例を増やして研究を継続する予定である。今後は対象数を増やすとともに,本来の目的である癌患者の呼気を用いての測定を行うが,有意な差が出ない場合には,対象ガスセンサを変更することの検討も必要と思われる。研究継続のための備品は揃っており,対象を増やしての検討を行うとともに,その成果発表のための旅費として使用したい。対象ガスセンサの追加が必要である。また,研究打ち合わせ,成果報告などのための旅費を必要とする。
現代日本画の新岩絵具の変色原因の解明と色調回復方法確立のための基礎的研究

新岩絵具は鉛ガラスを主体し、戦後の日本画制作に多用されてきている顔料の一つである。その変色について以下の通り調査した。1.変色した日本画作品の調査新岩絵具を用いて描かれ、約20年経過した日本画の画面に、変色した部分が観察された。制作後、どの時点で変色が起こったのかは不明である。群青色あるいは緑色の部分の表面が黒銀灰色に変化していた。下地は朱である。これらの箇所をX線回折により分析したところ、変色部分には硫化鉛(PbS)が生成している可能性があることを確認した。硫黄が導入された原因としては、(1)外部からのガス等によるもの、(2)朱下地によるもの、(3)その他、が考えられる。調査結果を受けて、朱の下地と新岩絵具との相互作用を加熱した条件で調べたところ、黒っぽい変色がみられた。室温化でこれらの反応が起こるのか追跡する必要がある。2.現代日本画の現地調査制作された当時の色調を示す客観的な判断材料がなかったため、明らかな新岩絵具の変色を確認する事はできなかった。3.新岩絵具の変色・回復試験変色試験に用いた新岩絵具は最も粒子の細かい「白」で、色目は緑青・黄土・水浅黄・桃色・銀鼠の5色である。試料は主に絵具を和紙上に膠を用いて塗布した試料(礬水引きの有無、胡粉下地の有無の区別あり)を使用した。1)高湿度下、二酸化硫黄10ppm、20時間:色変化の傾向は、黄土・銀鼠は黄変、水浅黄などはやや白化するなど、絵具の色により異なっていた。生成した物質が異なるためか、着色剤の状態が変化したためとみられる。2)高湿度下、硫化水素10ppm、20時間試験に用いた5色いずれも褐色化した。鉛及びその他の金属元素が硫化したことが考えられれる。3)高湿度下、ホルムアルデヒド25ppm、20時間この条件ではほとんど変化がなかった。長期の試験が必要である。上記の3条件のうち、1)では、胡粉下地・礬水引きのある試料、2)では胡粉下地あり、礬水引きなしの試料の変色程度がやや少なかった。次に3)については、今回の条件下では変色がみられなかったが、長時間暴露による影響が懸念される。パネルに使用されることのある合板の接着剤からホルムアルデヒドが発生する恐れがあり、影響の確認が必要である。一方、二酸化硫黄で変色した試料の回復がオゾンにより可能かを調べたが、部分的に元の色に近づくものの、ムラができてしまい、完全な回復には至らなかった。下地は朱である。

1.新岩絵具の変色試験変色試験に用いた新岩絵具は最も粒子の細かい「白」で、色目は緑青・黄土・水浅黄・桃色・銀鼠の5色である。試料は、主に絵具を和紙上に膠を用いて塗布した試料(礬水引きの有無、胡粉下地の有無の区別あり)を使用した。1)高湿度下(>98%RH)、亜硫酸ガス(二酸化硫黄・SO_2)10ppmの環境下に20時間曝露した際に、絵具の著しい変色(明度L^*の減少、赤みa^*の増加、黄みb^*の増加)が観察された。この条件下での変色の程度は、礬水引きや胡粉下地の有無に関係しないという結果が得られた。この変色はおそらく硫化鉛等の硫化物の生成による変色と考えられるが、元素分析(ケイ光X線分析)のみでは追跡が困難である。結晶構造の変化の確認(X線回折分析)を次年度行う予定である。この条件より低濃度のSO_2の存在下で、礬水引きや胡粉下地の有無により変色程度が異なるかどうかについても今後試験を行い、製作技法と変色との関係を追跡する。2)乾燥条件下(25%RH)でのSO_2の影響は比較的小さかったが、赤みa^*の減少が見られた。3)他の大気汚染原因となるガス、例えば二酸化窒素による変色、及び紫外線による影響については現在調査中である。2.変色した日本画作品の調査石川県立美術館及び生駒市宝山寺等において、日本画画面の彩色層及び下地層の絵具の種類、変色・剥離などの劣化の状況、制作年代、画面の基底材の種類(木、紙など)や劣化状況について調査した。絵具の厚塗りによると思われる亀裂やヒビ等が観察され、変色と思われる部分も見受けられた。しかしながら、分析可能な剥落片を入手するに至っておらず、また、変色以前の状況がどのような色であったかが判るような部位(例えば額縁で隠れている所など)を観察し得る機会が無かった。そのため今年度は、実際の日本画画面での変色を定性的に調べるには至っていない。今後、所有者の了承を得て、調査の機会を求めていく予定である。1.変色した日本画作品の調査新岩絵具を用いて描かれ、約20年経過した日本画の画面に、変色した部分が観察された。制作後、どの時点で変色が起こったのかは不明である。これらの部分は比較的粒子の粗い新岩絵具で描かれ、群青色あるいは緑色の部分の表面が黒銀灰色に変化していた。下地は朱である。これらの箇所を制作者の許可を得てサンプリングし、X線回折により分析したところ、変色部分には硫化鉛(PbS)が生成している可能性があることを確認した。硫黄が導入された原因としては、(1)外部からのガス等によるもの、(2)他の画材によるものが考えられるが詳細は不明である。2.新岩絵具の変色・回復試験変色試験に用いた新岩絵具は最も粒子の細かい「白」で、色目は緑青・黄土・水浅黄・桃色・銀鼠の5色である。試料は主に絵具を和紙上に膠を用いて塗布した試料(礬水引の有無、胡粉下地の有無の区別あり)を使用した。前年度に引き続き、各種ガスによる変色の影響を調べた。1)高湿度下、二酸化硫黄10ppm、20時間:色変化の傾向は、黄土・銀鼠は黄変、水浅黄などはやや白化するなど、絵具の色により異なっていた。ガラス中の鉛は変化せず、絵具の着色剤の金属のみが変色した可能性が考えられる。2)高湿度下、硫化水素10ppm、20時間試験に用いた5色いずれも黒変した。鉛及びその他の金属元素が硫化したことが考えられる。3)高湿度下、ホルムアルデヒド25ppm、20時間ほとんど変化がなかった。上記の3条件のうち、1)、2)では、胡粉下地のある試料、及び礬水引きのない試料の変色が比較的軽微であった。次に3)については、今回の条件下では変色がみられなかったが、長時間暴露による影響が懸念される。
着床前期胚特異的な遺伝子のｉＰＳ作成における機能解析

Zscan4は24時間の活性化を行うだけで、iPSの作成効率が改善し、Zscan4を用いたiPS作製早期の遺伝子プロファイリングにより、Zscan4が、iPS細胞作製早期に着床前期特異的遺伝子プログラムを活性化することができる初めてのリプログラミング因子であることがわかった。すなわち、1短期間の誘導でiPS作製効率を上げること。2核型の維持に働くこと。3着床前期特異的遺伝子プログラムを活性化することなどからiPS細胞作製において、Zscan4を用いることで、着床前期胚の発達や核移植に近い初期化条件を作り、作製効率を上げるのみならず、qualityの高いiPSの作製が可能となったと考えている。ES細胞は、もともと胚盤胞の内部細胞塊(ICM)に由来する細胞であり、4倍体の胚盤胞にこのES細胞を注入することで、完全にES細胞由来の胎児を得ることが可能である。培養期間が長くなり、継代が進むにつれ、このpotencyは低下することが分かっている。そこで、Zscan4を間欠的に発現を上げ、Zscan4の発現頻度を上げた。そのES細胞を胚盤胞に注入したときに高寄与率のキメラマウスが非常に高率で得られた。しかも30継代しても、高寄与率のキメラマウスが40%以上であることがわかった。さらに厳しいテストとして、4倍体の胚盤胞に1個のES細胞を注入したところ、5%で生存した胎児を得ることができた。4倍体の胚盤胞に1個のES細胞を注入した場合に、通常胎児が得られるのは0.5%程度であることから考えても、驚異的な数字である。ES細胞では前述のように、Zscan4+とZscan4-の状態を繰り返しているが、この頻度を上げることで「若返り」の頻度が上がり、長期間potencyを維持できることが解った。1MEF-ZERTにMKOSを導入したところ、Tmx+はTmx-に比較し、iPS作製効率は1.52倍であった。これらのiPSは、3胚葉に分化し、tetraploid complementation testにて胎児が得られた。4MEF-KOS-ZERTにおいて、Dox+の条件下でTmx+とTmx-の遺伝子発現プロファイルを比較すると、iPS作製効率の大きな差にも関わらず、発現の差は、1日目で28遺伝子、3日目に162遺伝子、6日目に237遺伝子だけであった。重複を除いた231遺伝子がZscan4の活性化によって発現が上昇している遺伝子であったが、そのうち27遺伝子が着床前期胚、14遺伝子が卵細胞、37遺伝子が卵巣、精巣に特異的であった。これらの遺伝子群は、Mycを加えたMKOSによるiPS作製早期においても活性化されていなかった。申請書提出時にはベクターのconstructonが全て行われていたため、非常にスムーズに研究に移ることができたため。マウスについてはある程度証明することができため、ヒトのiPS細胞につき検討を進めていく。Mouseでの結果に基づき、humanのfibroblastを用いたiPS作成にhuman Zscan4(hZscan4)を用いる。予備的なデータとして、hZscan4をMEFに導入したところiPSの作成効率を上げることを既に確認している。そこで、まずhZscan4がヒトのfibroblastに導入してiPSの作成効率が促進されるかどうかにつき検討する。また、得られたiPSに関しては、PCR、免疫染色法によりnanog, Tra1-60などの多能性幹細胞マーカーの発現を確認する。さらに、このiPSが三胚葉に分化することを免疫染色法で確認する。さらに多能性を確認する上で、得られたiPSをSCID mouseの皮下もしくは腹腔内に注入し、奇形腫を形成し三胚葉に分化するかどうか検討する。特にhuman iPSは、mouseに比較して核型が非常に崩れやすいことが分かっている。。そこで、hZscan4もマウスのZscan4と同様に核型の維持に働くかどうかについても比較検討する。
地球・惑星外圏発光の特性X線を多波長同時観測する反射鏡の開発研究

地球・惑星外圏プラズマの光学観測には、構成要素に対応する複数の輝線を同時に効率よく観測できる広視野の明るい光学系が必要である。本研究では、主要な構成要素である炭素イオンと酸素イオンの特性X線に対して同時に高い反射率を有する二重多層膜鏡の設計・試作を実施し、光学特性を取得、さらに真空デシケーター内で保管し経年変化を調査した。多層膜間の界面拡散は測定されず、反射率と膜構造は安定していることが判明した。地球・惑星外圏プラズマ観測には、大局的な分布を測る光学観測、粒子エネルギーを測定する直接粒子観測、太陽風プラズマ観測等、系統的な同時観測が不可欠である。その一角を担うプラズマ光学観測には広視野の明るい光学系が必要となる。さらに観測対象となる惑星外圏・電離圏で発光している軟X線はその場に存在するプラズマの1keV以下の低エネルギー特性X線であり、存在する複数の輝線を同時に効率よく観測するよう特化する必要がある。X線撮像器開発では、検出器でエネルギー分解し分光撮像観測を行う必要があるが、本研究では鍵となる光学素子である直入射型多層膜反射鏡の開発に主眼をおき、惑星超高層大気の主要な構成要素である酸素・炭素イオンの特性X線を観測対象とした。多層膜材質の光学定数の文献値を用いて観測対象となる炭素イオンと酸素イオンの特性X線に対して同時に高反射率を有する多層膜の膜厚や層数の設計を行った。その結果として、50層のSc/Cr多層膜と100層のW/B_4C多層膜を重ねる二重多層膜が有効であることが判明した。国内外の研究者・メーカー技術者と議論を行ったところ、希少な金属材料のため、製膜条件チューニングを含め製作メーカーに依頼し二重多層膜試作を行った。X線構造解析により二重多層膜が設計どおり成膜されていることを確認した。この結果を第11回惑星圏研究会にて報告し、収録に掲載された。地球・惑星外圏プラズマ観測には、大局的な分布を測る光学観測、粒子のエネルギー・数密度を測定する直接粒子観測、境界条件である太陽風プラズマの観測等、系統的な同時観測が不可欠である。その一角を担うプラズマ光学観測には広視野の明るい光学系が有効である。さらに観測対象となる地球・惑星の外圏・電離圏で発光している軟X線はその場に存在するプラズマの1keV以下の低エネルギー特性X線であり、存在する複数の輝線を同時に効率よく観測する必要がある。X線撮像器開発では、検出器でエネルギー分解し分光撮像観測を行う手法が採用される。本研究では撮像機器の鍵となる光学素子である直入射型多層膜反射鏡の開発に主眼をおく。昨年度、地球・惑星超高層プラズマの主要な構成要素である炭素イオンと酸素イオンの特性X線に対して同時に高い反射率を有する二重多層膜鏡を設計、試作を実施した。反射率測定とX線構造解析により二重多層膜が設計どおり成膜されており、想定どおりの性能を有していることを確認した。今年度は、デシケーター内で1年間保管し経時変化を調査した。二重多層膜の反射率を定期測定を実施するとともに、1年間保管後X線構造解析を実施し、二重多層膜層構造の経年変化を測定した。測定結果は、当初危惧していた多層膜間の界面拡散は観測されず、反射率と膜面構造は安定している存在することが判明した。この結果を平成23年度の日本地球惑星科学連合2011年大会で報告する予定である。
９～１４世紀初頭のイスラーム社会における医学観

本年度は昨年度末に引き続き、イブン・スィーナー(11世紀)の『医学典範』に対するクトゥブッディーン・シーラーズィー(14世紀)による注釈の分析を重点的に行った。その中で、シーラーズィーの注釈の一部に同著者の医療倫理書『医学と医者が必要であることの証明』の冒頭と同じ記述が存在することが判明した。彼がギリシア的医学書に対する注釈書の中頃で医学を擁護しているという事情と、その議論がギリシア哲学的な学問論とイスラームの伝統の双方に基づいたものであることから、医学を取り巻く状況がこの時代には変わっていたと考えられる。信仰と科学の対立は複雑であり、改めてこの領域の研究への注目を集めるであろう。シーラーズィーの注釈の冒頭部分からは、1314世紀にも医学の哲学的定義が盛んに議論されていたことが判明した。そこでは彼以前の『医学典範』注釈者の議論が数多く引用されている。その中でも神学者ファフルッディーン・ラーズィー(13世紀)が提起した問題点が中心的に扱われており、ラーズィーの議論は『医学典範』の注釈伝統において大きな位置を占めている。このことは、従来の見解とは異なり、注釈においても医学研究が盛んに行われていたことを示している。注釈者間の影響関係の指摘は、今後の『医学典範』受容史研究に大きく貢献するであろう。またこれらと平行して、イスラーム社会における医者の扱いを調査した。ルハーウィー(9世紀)による医療倫理書『医者の作法』やイブン・アビー・ウサイビア(13世紀)による医者の人名録には医者の収入に関する具体的な逸話が多数記録されているが、10世紀以降の医療倫理書にはこのような話が語られることはない。9世紀の医者にとって収入が特に重要であり、このことには医者という職業の特殊な事情が関わっていると考えられる。この指摘は、イスラームでの医学の発展を解明する上で大きな意義があるだろう。本年度は当初の計画通り、イブン・スィーナーの『医学典範』に対するクトゥブッディーン・シーラーズィーの注釈の分析を行うことができた。前年度までに十分な量の写本資料は入手しており、この注釈に関係する著作の写本も図書館を通じて入手することができたためである。シーラーズィーの医療倫理書が『医学典範』注釈からの再編集であること、ギリシア的医学書の中でイスラームの伝統的議論が展開されていることが明らかとなったことから、1314世紀における医学の状況について改めて検討すべきであると言えよう。この成果は論文化して『科学史研究』誌上で発表した。『医学典範』注釈の分析については、冒頭部分を精査することで、イブン・スィーナー以降の医学者たちによる医学の研究状況が分かってきた。1314世紀にも、従来言われていたように注釈の執筆が為されるだけで医学が停滞していたのではなく、批判的な医学研究が盛んに行われていたことが明らかとなった。その中でも神学や哲学の伝統で重要なファフルッディーン・ラーズィーが医学分野でも重要な人物であることは、イブン・スィーナー以降の医学史研究にとって注目すべき事実であり、この指摘には思想史上の大きな意義がある。これらは2018年10月の日本オリエント学会において発表し、論文として2019年3月に『オリエント』誌に投稿し、審査待ちである。ルハーウィーやイブン・アビー・ウサイビアによる医者の収入に関する多くの逸話について2018年11月に開催されたイスラーム初期史研究会にて発表した際に、具体的な金額を含む収入の情報は医者以外の職業では極めて稀であると指摘を受けた。これらの逸話からは医者の特殊な状況を明らかにすることができるだろう。この問題は、さらに分析を進める予定である。本年度の研究は研究計画の通りに進んでおり、イスラーム思想史および医学史に重要な情報を提供できている。本年度までに本研究に必要な写本資料については収集できたため、資料の分析を集中して行っていく。ただし、分析の過程で不足している写本資料があれば、可能な範囲で図書館を通じて必要な文献を入手する。なお、当初の研究計画では海外の学会において発表をする予定であったが、健康上の理由により渡航は断念し、その代わりに欧文で研究成果を発表する予定である。次年度は受入教員の小林春夫氏の協力を仰ぎ、哲学者・神学者による医学理解という観点からの哲学・神学文献の分析に重点を移す。ガザーリー以降、科学の分野で活躍した人物は神学者としても著名であるため、神学文献も視野に入れる必要がある。それらの文献のうち学問分類や医学の価値を扱う部分に焦点を絞り、哲学者や神学者による医学の位置づけを明らかにする。ただし、研究対象の時代は哲学と医学が密接に関係しており、医学文献の中にも哲学の要素が語られているため、医学文献も同様に検討していかねばならない。したがって、前年度から分析してきた複数の『医学典範』注釈を含め、医学書の分析も継続する。これらの作業を通じて、医学者や哲学者・神学者による医学の定義や医学の評価を明らかにし、医学観がどのような変遷を辿ったかを描く。一方、昨年度までの分析で明らかになった、医者の伝記における収入という問題についても調査を進めていく。この問題を解明することで、本研究が対象とする時代における医者の社会的状況を探る手がかりを得られるであろう。これについては、論文化して『科学史研究』欧文誌へ投稿する。これまでの調査結果から914世紀における医学観の変遷の全体像を描き出し、ガザーリーによる哲学批判のイスラーム医学への影響力について評価する。

最終年度の成果は日本オリエント学会年次大会で発表すると共に、年度末に同『オリエント』欧文誌へ投稿する。初年度はまず医療倫理書の記述を分析することから、イスラーム世界において医学の重要性の主張や医者の規定の実態を明らかにすることを目指した。具体的にはルハーウィー(9世紀)『医者の作法』、サーイド・ブン・ハサン(11世紀)『医学への欲求の喚起』、クトゥブッディーン・シーラーズィー(1314世紀)『医学と医者が必要であることの証明』の内容の比較分析を行った。その結果、医学の重要性に関する議論は、最初期は純粋にギリシア哲学的だが、次第にイスラームの信仰との調和が視野に入り、最終的にギリシア哲学的議論とイスラームの伝統の双方が重視されるようになったことが明らかになった。このことはギリシア的学問への神学・法学の圧力を思い起こさせる一方で、遅い時代にギリシア哲学的な学問論の展開が不可能であったわけではないことを示している。ガザーリー(1111年没)による哲学批判以後のギリシア的学問の状況を正しく評価する上で、この分析結果は大きな意義をもつ。その後シーラーズィーの医学観を重点的に検討するため、彼の『イブン・スィーナー「医学典範」注釈』の写本の読解を始めた。その序文にはシーラーズィーの簡潔な自伝が記録されているが、その記述によれば、当時『医学典範』を十分に教えることができる人物がおらず、流布していた複数の注釈も大半は不十分であり、この難解な書物を理解するには相当の知識が要求されていたという。このことは、シーラーズィーの時代に医学教育の水準が決して高くなかった可能性を示唆しているが、それと同時に(著者を含めて)志の高い医者が存在していたことを意味する。これは前述の点とともに、ガザーリー以後の時代に医学研究が衰退したわけではないことの重要な証拠と言えるだろう。初年度の研究計画はクトゥブッディーン・シーラーズィー『医学と医者が必要であることの証明』を中心に写本資料を収集することを主要な課題としていたが、健康上の理由により渡航を断念した。しかし、調査を進めていく中で、前述の著作は校訂版が出版されていることが判明し、これを入手することができた。また、他の研究者の厚意により、いくつかの写本を入手することもできたため、計画の変更は本研究を進める上での大きな障害とはなっていない。他の出版物についても一通り入手することができている。そのため、想定していたより早い段階で実際の文献分析にとりかかることができた。初年度に行う予定であった医療倫理書の調査については、計画していた通りの文献を分析することができた。その分析結果を論文としてまとめるには至っていないが、その概観を学会発表という形で他の研究者に向けて提示した。また、本研究における重要な文献(前述のシーラーズィーによる著作)の一部の翻訳とその紹介を公表した。医療倫理書の分析を早期に行えたことから、年度後半には計画を少し前倒しして、次年度に予定していた医学書の分析に着手した。イスラーム世界で重要な医療倫理書にはまだ検討を終えていないものも数点あるが、これらを利用した研究はいくらか存在している。それに対し、本研究計画の下限である1314世紀のシーラーズィーは研究が乏しい。
競技者のからだ作りにおける適正な朝食摂取の有用性

競技者が良好なコンディションを維持しながらからだ作りを行うことは競技力向上にとって極めて重要である。競技者はエネルギー及び栄養素を食事から不足なく摂取する必要があるが、近年では朝食を欠食する者が多いという問題点がある。競技者が朝食を欠食すれば、コンディショニングやからだ作りにとってはマイナスの影響を及ぼすことは明らかであるものの、朝食摂取のからだ作りへの影響について競技者を対象に実施した食事介入研究はこれまでに認められない。そこで本研究では、エナジー・アベイラビリティーを調整し、13C呼吸試験法を用いてたんぱく代謝の観点から競技者の朝食摂取の有用性について明らかにすることを目的とする。
ＰＴＨｒＰでなくＰＴＨを大量発現する後腹膜腫瘍に内在する異所性ホルモン産生機構

後腹膜腫瘍に高Ca血症を伴う一例の、腫瘍のPTH大量発現をRT-PCRおよび免疫組織法で確認した。PTH遺伝子配列に異常はなかったが、幾つかのPTH遺伝子転写因子群の発現量が変動していた。RNA-seqで、コピー数増減が、PTHがある11番染色体に集中し、さらにATRX遺伝子や転写共役遺伝子med1、USP24が発現消失しており、またCYP24A1mRNAの発現量が著増していた。まずCYP24A1蛋白が大過剰に発現され、その発現細胞内において活性化ビタミンD濃度が激減し、PTH mRNAの産生が著明に増強され、さらに腫瘍化刺激が重なって、異所性のPTH発現腫瘍形成が起こったと考えられた。後腹膜原発の悪性組織球腫症例に見られた著明な高Ca血症は、PTHrPでなくPTHの腫瘍からの大量発現によるものであることをRT-PCRおよび免疫組織学法により確認した。しかし、本症例のPTH遺伝子上流約800塩基対、全エキソン、下流約800塩基対までの遺伝子配列には変異は認められなかった。さらに、癌センターの市川仁博士が、10数例の悪性組織球腫症例のみを対象にマイクロアレイ法で遺伝子発現解析結果を報告していることを知り、そのうちの4例と我々の症例との間でデータマイニングを行った。4つのサンプル(そのうち1例がやはり後腹膜原発であった)のデータを抽出し、比較検討した結果、ビタミンD代謝酵素(CYP24A1、CYP27B1)、腫瘍抑制遺伝子で副甲状腺腺腫でその発現低下が知られていたHIC1、さらにPTH遺伝子上流配列に結合してその遺伝子発現を促進するのに必要な転写因子群(AUF1、SP3、NFYB、p300、PCAFなど)のmRNAの発現量が我々の症例のみにおいて、著明に変動していた。予想通り、対象に用いた4例の悪性組織球腫症例は、いずれもPTH mRNAがほとんど発現していなかった。この結果は。我々が併行して行なった個別のRT-PCRのデータといずれもほぼ一致した。これらのことから、ここに述べた10種近くの遺伝子が異所性PTH遺伝子発現の原因に強く関わることが示唆された。現在、東大先端研の油谷浩幸教授とともに次世代シークエンス法を用いて本症例のRNA-seqを行い、その解析を進めている。また、これらの結果から候補遺伝子をしぼりこみ、本症例を用いて、それらの蛋白の発現を免疫組織化学によって検討していく予定である。本研究では、我々が遭遇した、後腹膜発生PTH産生かつPTHrP非産生の線維性悪性組織球腫(MFH)の症例の摘出腫瘍を用いて、厳格な組織特異的発現をする遺伝子として名高いPTH遺伝子が、その唯一の発現部位の副甲状腺細胞から逸脱して発生するに至った、異所性PTH産生成因を詳細に検討することを主目的とした。これまでの検討から1)腫瘍からは正常者副甲状腺からと匹敵する量のPTHmRNAが発現されていた。2)免疫組織化学的検査から、腫瘍標本からの十分な量のPTH蛋白の発現を確認した。3)副甲状腺発生に関わる転写因子群のうち、HoxA3のmRNAおよびタンパク量がやはり副甲状腺組織と同等レベルに高発現していた。4)副甲状腺細胞特異的発現に必要十分とされるPTH遺伝子上流5.5kbpの全塩基配列決定では、本症例にSNP以外の遺伝子変異や欠失はなかった。またメチル化の腫瘍特異的変化もなかった。5)奇妙なことに、3回におよぶ異なる時期での患者血中からのPTHrP濃度はすべて感度以下であったにもかかわらず、本腫瘍のPTHrPmRNAは、数種の異なるプライマーを用いたいずれのRT-PCR検索によっても、コントロールのPTHrP発現腫瘍と同レベルに発現していた。この発現の乖離の機序が新たな検討課題となった。6)他施設から報告されている4種のMFHのマイクロアレイ情報を本症例のcDNAマイクロアレイと比較検討した。これらのコントロール症例と比して本腫瘍では50種以上の遺伝子発現が10倍以上亢進していた。この中でも、我々と同じく後腹膜原発ではあるがPTHを発現していないMFHのマイクロアレイの登録データを中心とした詳細な比較検討を現在施行中である。本症例において以下のことを見いだした。1)コピー数の増減のある30数個の部位のうち、40%にも上る15部位が、PTH遺伝子がある11番染色体に集中していた。神経内分泌膵島腫瘍で高頻度に欠損が見られるクロマチン構造改変蛋白ATRXがフレームシフト変異を起こし、その発現が消失していた(症例は男性でATRXはX染色体にある)。

ATRX遺伝子以外にエキソーム解析でフレームシフトによる蛋白発現欠落の候補遺伝子を25個にまで絞り、その中にはmed1などの転写共役遺伝子や、USP24などのユビキチン関連遺伝子なども含まれていた。2)PTH以外の遺伝子を副甲状腺細胞で発現させるための必要十分領域がPTH遺伝子上流5500塩基対にあるが、ここには遺伝子組み換え、変異、メチル化変化はなかった。このDNA配列に結合して、転写促進もしくは抑制するタンパク遺伝子の発現量変化を幾つかの転写因子で確認した。3)活性化ビタミンD濃度の上昇が起こるとその過剰を防ぐために、種々の組織からCYP24A1の発現が強力に誘導される。興味あることに、我々の症例組織(MFH)でのCYP24A1mRNAの発現量はPA(副甲状腺腫瘍)の10万倍以上に達していた。我々の仮説は、まず何らかの原因でCYP24A1が大過剰発現され、その発現細胞内に活性化ビタミンD濃度の著明な低下が起こることによって、PTHの産生刺激が激増するとともに、さらに何らかの腫瘍化刺激が重なった結果、その組織が腫瘍化した結果CYP24A1の大量発現が腫瘍化に関連するというものである。4)さらに、4例のPTH非発現MFHのアレイ結果との間でsubtractionを行い、副甲状腺腫と正常副甲状腺との間で発現に有意差があるものを抜粋して、最終的にはPTHの過剰発現に伴う二次的な変化を共通に受けるであろう遺伝子群を除外するところまでを完了した。またPTH遺伝子転写開始部近傍にいくつかのeRNAとも考えられるnon-coding RNAの発現を確認した。内分泌学これまでの結果を第一報として現在作成中である。次世代シークエンスの結果によっては第二報以後も充実したものになることを強く期待している。進行は予定通り順調であると考えている。今の段階で、これまでのデータをまだ英文刊行出来ていないことが「おおむね」という表現にとどまる原因になった。これまでの研究結果から、我々の腫瘍の発生成因が、既知の異所性ホルモン発生機構によるものではなく新たなメカニズムに基づくものである可能性が想定されるようになった。そして、2012-2013年時点で利用可能なテクノロジーを用いて、腫瘍成因の同定に迫る我々のアプローチは順調に進行しており、その中でもマイクロアレイを完了させたことは順調な経過と言える。しかし、マイクロアレイの詳細かつ効率的な解析は今後の大きな課題であることも痛感している。その一方で、次世代シークエンシング検索の2013年中の完了についての共同研究の目安もつき、全体の経過としてはまずまず満足できると考える。現在解析を進めている次世代シークエンス法によってRNA-Seqを行って得られた情報と、すでに検討をほぼ終えたマイクロアレイの結果とを比較検討することで、非常に興味深い新たな知見が得られると考えている。副甲状腺細胞のみという組織特異的発現が非常に厳格なために、真の意味で異所性にPTHを発現する腫瘍例が極めて少なく、その発現制御機構が未だに不明の点が多いPTH遺伝子の転写調節についての詳細を明らかにできるのではと期待している。施行済みのマイクロアレイ解読の完成が急務であると考える。さらに東大先端医学研究所の油谷研究室とのジョイントが決定し、本症例のエキソーム解析およびRNAseqが進められることは本研究の推進にとって非常に心強いと考えている。さらに副甲状腺特異的発現に中心的な役割を持つ転写因子の同定を、上記の研究成果とプロテオーム解析を通じて試みていく予定である。
戦後中国の対日政策--「積み上げ」戦略における「浸透」と「友好」

本年度は大学院における研究を総括すると同時に、今後の研究活動に向けて布石を打った。まず総括であるが、研究代表者は博士論文「『戦後日中民間人道外交』の史的考察--1950年代を中心として」を完成させ、2006年3月、博士号(政治学)を取得した。同論文は、戦後初期に国交不在であった日中両国の民間団体を交渉主体として、「人道」という建前の下で解決が目指された「人道問題」(当時、日中両国政府は新中国成立後まで残された、(1)在華邦人問題、(2)在華日本人「戦犯」問題、(3)在日華僑問題、(4)中国人俘虜殉難者遺骨問題などの「戦後処理」問題を「人道問題」と表現した)をめぐる日中民間外交の具体的な展開を検討したものである。かかる日中民間外交の展開に関する分析を通じて研究代表者は、当時国家が処理し得なかった「戦後処理」問題を、かかる民間交渉を通じて日中両国がいかにして処理したのかを明らかにすると同時に、これらの「人道問題」解決過程の全体像を理解するために「戦後日中民間人道外交」という新たな分析枠組みを提示している。当時、中国政府は冷戦外交の文脈において対日外交の戦略目標として日米離間、あるいは日本「中立化」を目指していたが、いわゆる「戦後日中民間人道外交」については、中国共産党の伝統といわれる「革命的人道主義」に源泉を持つとされ、肯定的に評価されてきた。だが、中国政府主導の「戦後日中民間人道外交」における対日「浸透」という外交戦略的な側面を膨大な日本側公文書に依拠して描き出した同論文は、戦後初期中国の対日外交の源泉を考察する上で不可欠な事例研究になると考えられ、加えて、現在、日本各地で提起されている中国残留日本人の早期帰国実施義務をめぐる日本政府の責任問題を議論するための学術的基礎を提供するものとなる。なお、今後への布石としては、2005年12月に中国外交部档案(公文書)調査を実施した。1950年代前半時期の関係文書を獲得することができ、さらに研究を展開させる基礎を整えた。研究従事者は博士課程在学中であり、本年度の研究活動は学位論文執筆を中心に展開した。まず史料調査・収集について。計画では中華人民共和国外交部档案館(北京)での戦後日中関係関連史料の獲得を予定していたが、照会の結果、史料整理の遅延が判明したため、これを変更して中華民国国史館(台北)での史料調査・収集を実施した(2004年9月22日10月2日)。本調査により第二次大戦終結直後の在華邦人送還に関する国民政府史料、1950年代の国民政府外交部の対日関係史料を獲得し、学位論文第1章関係部分「在華邦人問題の形成過程」を完成させた。同研究では第二次大戦後の米国の東アジア政策と在華邦人引揚、国民政府の日本人技術者留用政策との関連を解明した。また、島根県立大学(2004年12月11日)及び北海道大学(2005年1月30日)において「戦後米国のアジア政策と台湾における日本人技術者留用問題」など、関連する報告を行なった。つぎに個別の研究成果について。計画では主要研究対象である戦後日中民間人道外交-1950年代の日中民間における「人道問題」解決交渉-以外に、同時期の日中経済外交にも考察対象を広げるとしていた。そのため、同分野を扱った王偉彬『中国と日本の外交政策』(ミネルヴァ書房、2004年)の書評を発表。また、「日中民間人道外交における中国人遺骨送還問題」、「中共党史の展開と胡喬木」〔共著〕を発表した。特に前者は学位論文を構成する論稿であり、外務省外交史料館所蔵史料に依拠し、戦時中の中国人強制連行問題に源流を持つ中国人殉難者遺骨送還問題が戦後日中民間外交の文脈においてどのように扱われ、解決されたのかを明らかにした。だが、中国政府主導の「戦後日中民間人道外交」における対日「浸透」という

外交戦略的な側面を膨大な日本側公文書に依拠して描き出した同論文は、戦後初期中国の対日外交の源泉を考察する上で不可欠な事例研究になると考えられ、加えて、現在、日本各地で提起されている中国残留日本人の早期帰国実施義務をめぐる日本政府の責任問題を議論するための学術的基礎を提供するものとなる。なお、今後への布石としては、2005年12月に中国外交部档案(公文書)調査を実施した。1950年代前半時期の関係文書を獲得することができ、さらに研究を展開させる基礎を整えた。
顎関節疾患に対するANKHを標的遺伝子とした遺伝子治療法の開発

これまでにプロモーター領域およびエクソン2,8およびエクソン-イントロン境界部近傍のイントロン10にポリモルフィズムを発見していたが、近年、そのプロモーター領域のポリモルフィズムが、ある種の関節疾患と関連するという報告がなされた(FlorenceW.L.,et. al.,2003)ため、我々の収集した約80検体についても同部のポリモルフィズムの解析を行った。以下、上記論文の表記にしたがってポリモルフィズム座位を記載するとANK-ORおよびANK-TRとなり、それぞれ5'非翻訳領域のTCGCCCCGおよびCCGの繰り返し数のポリモルフィズムである。顎関節疾患患者の群内比較を行った結果、clikingを主訴とするもの16ケース、intermittent lockを主訴とするもの13ケース、closed lockを主訴とするもの36ケースというのが主要なカテゴリーであることが判明した。その他に筋症状を主訴とするいわゆるI型ケースと顎関節強直症ケースとが若干例含まれていた。各診断は、初診時になされたものを用いた。顎関節疾患患者群の群内比較(病院を受診した者の中での比較)をおこなうことによって病院を受診することによる社会的要因による交絡因子が一部除かれることが期待できる。また、顎関節疾患の主要な疑問点には、"関節円板の転位はなぜ起こるのか"と並んで、"clicking症状はclosed lockへと進行するのか"というものがあるが、顎関節疾患患者群の群内比較をおこなうことにより、cliking、intermittent lock、closed lockケースのなかに何らかのポリモルフィズムの集積があり、またそれに順序があるかという検討が可能になった。また、顎関節疾患餌者群と非患者群においてポリモルフィズムを比較検討するケースコントロール研究を行うことによりさらなる比較検討をすることにより、ANKHのプロモータ領域の遺伝子多型と顎関節症との関連を明らかにすることを目標に現在研究を行っているところである。本研究において、マウスank遺伝子と相同なヒト遺伝子であるANKH遺伝子を関節内障発症に関わる候補遺伝子の一つとして、顎関節内障患者に対するANKHの遺伝子多型を解析した。方法:本学附属病院を受診し、十分なインフォームドコンセントを行った後、同意を得られた関節内障click 16例、closed lock 39例、計55例の患者を対象とした。ANK調節領域をgenomic PCRにて増幅し、ダイレクトシークエンスによりANKHの調節領域内に存在する遺伝子多型ANK-TR(GGCの7-8回の繰り返し配列)、ANK-OR(TCGCCCCGの1-2回の繰り返し配列)に関して遺伝子多型解析を行った。一月齢、二月齢、三月齢、四月齢、五月齢、六月齢における変異のホモ接合体および野生型の各雌雄個体につき、顎関節および後肢指関節のヘマトキシリン-エオジン染色標本を作製し形態変化を観察した。後肢指関節における関節の破壊像は、六月齢ホモ接合体においては極めて著名に認められたに対し、野生型と比較して関節円板の菲薄化と顎関節滑膜への軽度の炎症反応が認められた。これらの事より、顎関節の病態の進行は他の関節に比べ緩慢であるが、関節炎が惹起されることが明らかとなった。本研究においマウスank遺伝子と相同なヒト遺伝子であるANKH遺伝子を関節内障発症に関わる候補遺伝子の一つとして、顎関節内障患者に対するANKHの遺伝子多型を解析した。

ANK調節領域をgenomic PCRにて増幅し、ダイレクトシークエンスによりANKHの調節領域内に存在する遺伝子多型ANK-TR(GGCの7-8回の繰り返し配列)、ANK-OR(TCGCCCCGの1-2回の繰り返し配列)に関して遺伝子多型解析を行った。
オーファン受容体を介して分泌されるペプチド、蛋白質の解析と生理機能の解明

G蛋白結合受容体(GPCR)はアゴニストによる活性化により、エンドサイトーシス過程を経て、受容体蛋白の細胞表面から細胞内部への再配分を起こすことが知られている。本研究では、リガンド刺激によるGPCRの細胞内移行が、薬理学的な評価に利用可能かについて検討を行った。ハイスループット顕微鏡により、GFP標識したGPCRが発現している細胞の蛍光イメージを取得し、画像処理することで、リガンド刺激によるGPCRの細胞内移行を量的に評価した。受容体に対して特異的な種々のアゴニスト、アンタゴニストの受容体の細胞内移行に対する作用強度を評価したところ、従来報告されている受容体結合実験の結果と非常に良く一致した。この細胞レベルの蛍光イメージングシステムは、上記化合物刺激による受容体の細胞内移行だけではなく、水素イオンを検知する受容体であるTDAG8および遊離脂肪酸を検知する受容体であるGPR120の細胞内移行の検出に適用可能であり、受容体細胞内移行の計測は、受容体の薬理学的解析や、オーファン受容体のリガンド探索に有効な方法である事が明らかになった。このリガンド探索法により、我々は腸に高レベルで発現しているGPR120が遊離脂肪酸(FFAs)の受容体であることを見出した。さらに、マウス消化管内への脂肪酸投与により血中にGLP-1が分泌される事を明らかにした。同刺激により、消化管ペプチドホルモンであるコレシストキニン(CCK)血中濃度が上昇した。マウス腸内分泌細胞であるSTC-1細胞をモデルとし、FFAによりCCK分泌が促進される機構を検討した。長鎖遊離脂肪酸刺激によりSTC-1細胞のCCK分泌が促進されたが、このCKK分泌促進は細胞外のCa^<2+>を除いたときと、L型Caチャネル阻害剤により抑制された。さらに、長鎖遊離脂肪酸により誘導されたCCK分泌は、GPR120特異的にshRNAのトランスフェクションにより抑制された。これらの結果により、長鎖遊離脂肪酸がGPR120のCa^<2+>シグナル伝達を介してCCK分泌を引き起こしていることが示唆された。オーファン受容体のリガンド探索研究としては、リガンド探索の報告が未だに無い受容体5種類について、独自の細胞内局在変化の検出系によるリガンド探索を行った。各受容体をGFPとの融合蛋白質としてTREx-293細胞誘導発現可能な系を確立した。これらの細胞について、各種化合物添加時のGFP蛍光の細胞内局在変化を定量化することによりスクリーニングを行った。その結果、GTO2について添加により細胞表面上の受容体が細胞内へ移行するインターナリゼーションを惹起するリガンド候補化合物群を見いだし、現在、他の情報伝達系の解析等を含めて詳細な確認の実験を行っている段階である。またこのGTO2の発現する血球系の細胞株を、公共データベースに登録されたマイクロアレイデータの検索から予測し、RT-PCRで確認した。シグナル伝達と生理機能についての検討をするため、siRNAの発現ベクターを用いた抑制実験系、GTO2大量発現系、および、抗GTO2抗体の作成を行い生理機能解析のために必要な完了した。脂肪酸がリガンドであることを既に見いだしているGPR120をモデルに、この受容体を介した刺激によりGLP-1を分泌をするSTC-1細胞を用いて分泌ペプチド・蛋白質の回収とプロファイルの解析を行った。培養上清を濃縮後、二次元電気泳動・銀染色を行うことにより蛋白質の同定を行った。