hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
認知行動と精神神経疾患病態における大脳基底核神経回路機構とその破綻

さらに神経活動のイメージングにより精神神経疾患モデルマウスの神経回路特異的な活動性変化を同定し、精神・神経疾患の神経回路制御異常を明らかにすることを目的とした。本年度も引き続き、大脳基底核神経回路の直接路と間接路のそれぞれに特異的な可逆的神経伝達阻止法により、認知課題における大脳基底核神経回路の制御機構を解析した。マウスにおけるタッチスクリーン認知学習課題を開発し、認知学習において側坐核の間接路の神経伝達が重要であること、一方条件付け学習において条件付け関連行動は側坐核の直接路の神経伝達が重要であることを示した。また精神疾患モデルマウスの認知行動障害と関連する神経活動と分子の変化を解析し、精神疾患に特異的な神経回路異常を調べた。精神疾患モデルマウスの神経回路異常の解析から、場所学習行動に相関する海馬における報酬関連神経活動の消失という新たな神経回路病態を見いだした。場所学習行動中の海馬神経活動のイメージングのための装置を開発した。精神神経疾患モデルマウスの認知行動障害を解析することによって、精神神経疾患に特異的な大脳基底核神経回路異常を同定する。特にタッチスクリーン認知学習装置を用いた認知行動課題を設定する。さらに同定した特定神経回路の神経活動制御により、認知行動障害を是正できないか試みる。29年度が最終年度であるため、記入しない。
高減衰能を有するFeアルミナイド超弾性鋼板の創製

Fe_3Al単結晶では転位の可逆運動を基調として巨大な擬弾性が生じるものの、多結晶状態では十分な擬弾性が得られなかった。そこで本研究では、粒成長防止材を添加することによりその再結晶・粒成長プロセスを制御することで擬似単結晶化し、多結晶における擬弾性挙動を改善するとともに、同合金の制振特性について評価した。その結果、完全な擬似単結晶化は困難であったが、強度1ギガパスカル以上の制振材料の開発に成功した。DO_3型構造を有するFe_3Al単結晶では、マルテンサイト変態に因らず、転位の可逆運動を基調として巨大な擬弾性を発現する。しかしながら、多結晶状態では、結晶粒界が転位の運動を拘束し、十分な擬弾性が得られなかった。そこで本研究では、Fe_3Al多結晶の集合組織を制御することで擬似的に単結晶化し、擬弾性特性の改善を行うとともに、その巨大な応力-歪ヒステリシスを活かして高減衰能を有する制振鋼板の開発に資することを目的とした。Fe_3Al多結晶に対し、600°Cで80%まで温間圧延を行った後、800°Cで1時間の1次再結晶処理を施すと、bcc金属の場合と同様αならびにγ-fiberよりなる集合組織が得られた。しかしながら、3%歪負荷の場合で回復率が30%程度しか得られず、擬弾性特性の抜本的な改善には至らなかった。その原因は、結晶粒径が100μmと小さく、粒界による転位の拘束効果が強く現れたためである。そこで、AlNならびにMnSといったインヒビターを添加し、より高温(1100°C)で2次再結晶処理を施すことで、集合組織の先鋭化ならびに結晶粒径の増大を図った。その結果、cube粒を初めとする結晶粒が12mmまで粗大化し、回復率は60%近くまで増加した。しかしながら、異常粒成長する結晶粒の方位成分にばらつきがあり、集合組織の先鋭化は困難であった。したがって、今後は、2次再結晶処理の条件、インヒビターの種類・量を調整する必要がある。一方、動的粘弾性測定装置(DMA)で測定した内部摩擦の値は、多結晶であっても0.01を超え、Fe_3Alが制振材料として魅力的な素材であることが証明された。Fe_3AlならびにFe_3Gaでは、マルテンサイト変態に因らず転位の可逆運動を基調とする巨大な擬弾性(APB擬弾性)が発現する。本研究では、APB擬弾性発現時に応力-歪曲線に生じる巨大なヒステリシスを活かし、特にFe_3Alの制振材料としての開発を行っている。本年度は、まずFe_3AlならびにFe_3Ga単結晶を用いてその制振特性の発現機構について調査すると共に、集合組織制御ならびに第3元素添加によりFe_3Al多結晶の制振特性向上を図った。Fe_3Alの制振機構は歪振幅(ε)に強く依存し、ε≦10^<-4>程度で強磁性(磁壁移動)型、10^<-4>≦ε≦5×10^<-3>で転位型、ε≧5×10^<-3>でAPB擬弾性特有の制振挙動を示した。そこで、低εならびに高ε各領域での制振特性の改善を図った。まず、低εでは、3d遷移金属の添加が特性改善に有効なことを見出し、降伏応力1000MPaの超強力制振材料の開発に成功した。その強度、制振特性は、これまで達成されていなかった自動車起振源対策用制振材料としての要求を満足しているため、その実用化が期待される。一方、高εでは、圧延面//<111>(γファイバー)の方位成分に高配向した多結晶体について、APB擬弾性に由来する内部摩擦0.015の制振特性を達成すると共に、回復可能歪0.7%、最大応力1000MPaを実現した。なお、この性能は、1万回の交番応力を負荷しても維持される。さらに、集合組織の先鋭化を可能とする新たな圧延プロセスの開発も行い、先述したγファイバーへの配向度を高めることに成功した。単結晶状態で良好な超弾性を示すFe-Al合金多結晶の集合組織を制御することで、多結晶であっても十分な超弾性特性が得られるかについて検討した。その方策として、本年度はFe-Al合金の凝固時に発達する柱状晶の長手方向をTD方向とする特殊な圧延を実施し、集合組織のさらなる制御を図った(柱状晶直角圧延)。その結果、同圧延方法を用いると、圧延面が{001}面とならないため、試料全体が均一に変形し、再結晶後の集合組織が先鋭化した。しかしながら、この集合組織の先鋭化は、Fe-Al多結晶の超弾性特性にそれほど大きな影響を及ぼさなかった。一方、本課題の遂行中に発見した3d遷移金属添加Fe-Al系超強力制振材料について、さらに系統的に調査を行った。

その結果、自動車振動源対策の制振材料の指標である降伏応力≧1000GPa、制振係数≧20%をいずれも満足する合金組成の探索に成功した。また、この開発合金は、10^<-4>程度の低振幅の振動に対して極めて有効であることが確認された。これら最適組成の合金について、TEMにて組織を観察したところ、bcc不規則相とDO_3型規則相からなるナノ2相組織が発達しており、このことが同合金の高強度・高減衰能に繋がる。ちなみに、このナノ2相組織は高温安定相であるB2相からの相分離により形成される。また、同合金の制振係数は磁場下にて著しく低下するとともに、制振係数と磁歪との間によい相関があったことから、磁壁移動型の内部摩擦が同合金の高減衰能の主因である。さらに、延性改善のために熱間加工による組織制御を行ったが、同合金は極めて脆く、加工度を稼げないため結晶粒径や集合組織を制御するには至らなかった。
「もの」とイメージを介した文化伝播に関する研究-日本中世の文学・絵巻から-

本研究は、日本の中世の物語絵画、とりわけ多様な知識や情報を共有し伝達する媒体であった絵巻の描写を手がかりに、身分と階層を跨る絵巻制作者と享受者の重層的な世界観を明らかにしようとするものである。本研究では、中世の人々の日常生活、労働、信仰、行事、儀礼、合戦の他、異国や異域、神仏化現の舞台となる「場」(型)を抽出・収集し、そこに描かれた建築や環境、多様な「もの」に、身分差や階層差、ジェンダーの差異がどのように描き分けられ、関連付けられているかを具体的に検証し、物語絵画、とりわけ絵巻という媒体の歴史的特性を明らかにした。(1)中世の絵巻作品に絞り,さまざまな「もの」によって構成される日常生活の場や,行事・儀礼の場などに関するの「イメージの型」を抽出し、建築・景観、着衣と身体、道具類等の図像・表現の特徴を記入するエクセルファイルの作成に取り組んだ。各自担当の作品を決め、画像データの取り込みと整理を行い、絵と詞書のファイルシートに記入して、内容とファイル、フォーマットに関する検討を目的とした研究会を5回開催した。作成したファイルは「星光寺縁起絵巻」「豊明絵巻」「藤の衣絵巻」「芦引絵」「掃墨物語絵巻」「当麻曼茶羅縁起絵」「春日権現験記絵巻」「男衾三郎絵巻」「法然上人伝絵」など。(2)絵巻に描かれた「イメージの型」の成立と伝播に関する検討を課題として、図版入手が困難な作品を中心に、絵巻・冊子絵の作品調査を実施した。具体的には「遊行上人縁起絵巻」(大分県永福寺・東京国立博物館)、「天稚彦草子絵巻」「平家物語絵扇面画帖」(ベルリン国立東洋美術館)、「十二類歌合絵巻」「酒飯論絵巻」「和州多武峰増加上人行状記絵巻」「しぐれ」「玉藻の前」「落窪物語」「熊野の本地」「聖徳太子伝」「平治物語絵巻」(チェスター・ビィーティー図書館)、「北野天神縁起絵巻(弘安本)「業兼本三十六歌仙絵断簡(源順)」「土蜘蛛草紙絵巻」(東京国立博物館)「是害坊絵巻」(泉屋博古館)など。以上の精査と作成ファイルの検討を経て、主題や制作工房の相違を超えて「参詣」「奇瑞」「霊験」「対面」「宴」といったイメージの型を構成する要素やその組み合わせの共通性や差異を考察するための資料的基盤を整えっっある。また検討の結果を踏まえ、各自が学会発表、研究論文を執筆した.平成20年に計画していた北米各所に所蔵される絵巻、物語を主題とする屏風絵調査は、先方との日程調整の結果、平成22年1月11日(月)から16日(土)までの滞在期間に実施した。調査対象とする作品は、主として二つのテーマに絞った。すなわち本研究が重要な課題とする(1)合戦を主題とする絵画(2)異界の描写を含む絵画である。今回の調査は、上記の目的に沿って研究代表者、および連携研究者、研究協力者が協力して携わり、異なる視点からの知見を得た。12日は終日、メトロポリタン美術館にて資料熟覧調査(「北野天神縁起絵巻」(五巻)および「保元・平治物語図屏風」の描写の細部と場面構成を精査)した。また、前日および最終日の15日には、同館のMasako WATANABE氏(Senior Research Assoiate)、Snead Kehoe(Assistant Curator)との作品および資料に関する意見交換をおこなった。13日(水)には、ジョン・C・ウェーバー氏コレクションの資料熟覧調査「時代不同歌合絵巻」(二巻)「源氏物語歌合絵巻」の細部表現の特徴を精査した。14日(木)は、M&Jバークコレクションの資料調査(「春日宮曼荼羅」、「北野天神縁起絵巻」(一巻)の細部表現の精査)。GRATIA(SANDY)WILLIAMS氏(M & J BURKE FOUNDATION Curator)同席のもと調査を実施、意見交換等をおこなった。以上の調査研究は、本科研費助成研究の成果報告書『「もの」とイメージを介した文化伝播に関する研究-日本中世の文学・絵巻から-』における分析に生かされ、物語絵画に描かれた場の型、もの、人物の描写を手がかりとした絵巻の分析に大きな成果をもたらした。先行研究が提示する知見については調査の事前準備として周到な検証を重ねたが、現地調査を経て細部表現についての考察が著しく深まった。撮影した画像データの整理・分析も進展した。本年度は研究のまとめの年にあたるため、初年度より取り組んできた「絵巻画面分析表」の作成に力を注いだ。

その意図は、.絵巻作品の中に「詞」が語り出すプロット(あらすじ)を越えて設定される「場」に着目し、またそれらの「場」を構成する一定の要素(「もの」)を含む「型」を抽出して、データベースを作成することにあった。ほぼ隔月で検討材料となるデータと図像を持ち寄り、検討を重ねて、十八作品に及ぶ試作的な<表>を、研究成果報告書に提示、その表に連動して考察を深め論考を執筆した。提示した「絵巻画面分析表」の特徴は、<場の型>を基準として、絵巻画面を分節する点にある。<場の型>とは、人の行為によって立ち上がるイメージの型を指している。それは各論考において具体的に指摘されるように、必ずしもひとつの場がひとつの型に対応するのではなく、画中の出来事は画中人物の視点に応じて、もしくは物語の語り手や鑑賞者の立場から見て複数の型に対応する場合がある。描かれた「もの」と「場」の関係を、この「型」という視点を導入して探究してきた。言い換えるならば、中世絵巻に描かれた多様な「場」を「型」として捉え、共時・通時的な関係性を明らかにすることを目指し、一定の成果を上げた。また本年度は、研究をまとめる上で不可欠な熟覧・調査を実施した。金刀比羅宮「なよ竹物語絵巻」、甲子園学院美術資料館・久米アートミュージアム「下燃物語絵巻」である。研究成果報告書、および参加者各自のこの期間の業績に、本年度を含む三年間の助成期間における熟覧・調査の成果を大いに生かすことができた。
グレリンによる手術侵襲軽減のメカニズムの解明と臨床応用へ向けた投与法の最適化

LPS腹腔内投与マウスモデルではIL-6濃度は著しく高濃度であることから,PAMPモデルであるLPSモデルはグレリン作用機序の対象ではなく,DAMPモデルがグレリン抗炎症効果のターゲットと考えられた.ヒト研究においては,食道癌術後グレリン持続投与,高齢者胃癌胃全摘患者グレリン投与のランダム化比較試験を開始でき,本結果からグレリン投与方法の最適化が行われる.また活性型グレリン濃度とコリンエステラーゼ値が逆相関し,肝機能と肥満がグレリン値に影響することが判明した.1.敗血症・過大侵襲モデルにおけるグレリン投与法の比較については、CLPラット作成がなかなかうまくいかず,場合により作成を企業への委託を検討しているが、予算的に厳しくラボでの作成を引き続き検討する.しかしながら,グレリン持続投与に関する研究として,すでに食道癌術後グレリン持続投与の臨床治験(PMDA対面助言終了.2016年11月ごろ開始予定)が計画されており,このなかで時速投与における指摘濃度のValidationが行われる予定である(プラセボVS 0.25mg/kg/H VS 0.50mg/kg/H).PK/PD解析,炎症性マーカー測定についても施行する予定である.また,並行して,グレリン持続投与と食前静注投与の違いに関する研究として,同じくHumanにて,食道癌化学療法時におけるグレリン投与方法の違いによるランダム化試験を計画している.2.胃全摘症例におけるグレリン投与の検討については、現在症例集積を継続中である。3.グレリン不活性化メカニズムの解明について、食道癌手術患者の中心静脈および左胃静脈より採血し、それぞれのアシルグレリン値を測定したところ、両者の間には有意差を認めなかった。このことから、グレリンは肝臓ではなく、末梢血中で不活性化される可能性が示唆された。また、肝不全患者は健常人と比較し、有意に活性化グレリン値が高値であった(25.9 : 9.8fmol/ml)。そこで我々は、これまでに報告のあったグレリン代謝に関連する因子の中から、肝臓で生成された後に末梢血中を循環し、肝不全患者で低値となるコリンエステラーゼに着目し測定を行った.実際、肝移植前後で肝機能の回復と共に経時的にコリンエステラーゼは上昇するのに対し、活性型グレリン値はそれとは逆相関して低下することを確認した。研究(1)敗血症・過大侵襲モデルにおけるグレリン投与法の比較→2研究(2)胃全摘症例におけるグレリン投与の検討と薬物動態の解明→3研究(3)グレリン不活性化メカニズムの解明→1研究(1)については、敗血症モデルであるCLPラットの作成中である。モデルが確立次第、炎症性サイトカインの定量や形態学的な肺組織の炎症程度、および生存期間など、抗炎症効果に関するグレリンの持続投与と間欠的投与の比較を行う予定である。一方,Humanレベルでのデータ収集は開始される予定であり,動物実験を超えたレベルでの研究進捗があることから,上記達成度とした.研究(2)については、他の臨床試験やda Vinci Surgical Systemを用いたロボット手術の導入などにより、適格症例が不足しているが、今後も症例集積を継続し、論文報告を予定している。研究(3)については、肝不全患者と健常人を比較することで、コリンエステラーゼという不活性化酵素を同定することができた。さらには実際に胃静脈におけるグレリン濃度が測定できたことは非常に大きく,中心静脈と左胃静脈でグレリン値に差がなかったことから,肝だけではなく全身でのグレリン代謝が重要であることが示された.今後,代謝に影響するコリンエステラーゼに焦点を絞り,In vitroでのAssayを行う予定である.本結果によっては,阻害剤投与によりグレリン濃度を上昇させる可能性が存在し,Vivoデータがそろったころから,上記進捗状況と判定した.1.敗血症・過大侵襲モデルにおけるグレリン投与法の比較についてはLPS腹腔内投与マウスモデルを検討している.実際,マウスにLPSを腹腔内投与した時,投与後4時間で各臓器におけるIL-6mRNA,多くの臓器で発現上昇が確認され,肺や脾臓でも高かった.このモデルに対するグレリン投与により,どの臓器でのIL-6発現が抑制されるかの検討により,グレリン投与法の違いによる臨床効果検討の解析につながる可能性があり,同実験を次年度も継続予定である.また,グレリン持続投与に関する研究として,すでに食道癌術後グレリン持続投与の臨床治験についてPMDA対面助言は終了し,治験届の受理,院内倫理委員会通過も終了した.当該年度において治験が開始され,このなかで時速投与における指摘濃度のValidationが行われる予定である(プラセボVS 0.25mg/kg/H VS 0.50mg/kg/H).PK/PD解析,炎症性マーカー測定についても施行する予定である.また,並行して,グレリン持続投与と食前静注投与の違いに関する研究として,同じくHumanにて,食道癌化学療法時におけるグレリン投与方法の違いによるランダム化試験を計画している.2.胃全摘症例におけるグレリン投与の検討については、高齢者胃癌患者を対象とし,グレリン持続投与期間5日間,間欠投与期間を5日間もうけるランダム化比較試験を計画した.グレリン持続投与とグレリン間欠投与における臨床効果の差を検討できるようなデザインを組んでいる.3.グレリン不活性化メカニズムの解明について、肝不全患者は健常人と比較し、有意に活性化グレリン値が高値であることを証明してきた。

さらに肝不全患者で低値となるコリンエステラーゼに着目し肝移植前後で肝機能の回復と共に経時的にコリンエステラーゼは上昇するのに対し、活性型グレリン値はそれとは逆相関して低下することを確認した。今後,グレリン代謝に関わる医薬品,漢方などの使用に関する研究計画を検討する.研究(1)については、敗血症モデルであるCLPラットの作成からLPS腹腔内投与モデルの作成に変更し,今後の研究推進が期待される。モデルが確立次第、炎症性サイトカインの定量や形態学的な肺組織の炎症程度、および生存期間など、抗炎症効果に関するグレリンの持続投与と間欠的投与の比較を行う予定である。一方,Humanレベルでのデータ収集は,治験開始とともに進んでおり,昨年度と同様に動物実験を超えたレベルでの研究進捗があると判断する.研究(2)については、他の臨床試験やda Vinci Surgical Systemを用いたロボット手術の導入などにより、適格症例が不足しているが、プロトコル作成,倫理委員会申請後で承認待ちの状況であり,今後も症例集積を継続し、論文報告を予定している。研究(3)については、今後,代謝に影響するコリンエステラーゼに焦点を絞り,In vitroでのAssayにくわえ,漢方薬などの投与によりグレリン代謝変化の検討を行う予定である.本結果によっては,阻害剤投与によりグレリン濃度を上昇させる可能性が存在し,Vivoデータがそろったころから,上記進捗状況と判定した.1.敗血症・過大侵襲モデルとして,LPS腹腔内投与マウスモデルの検討を行った.実際,マウスにLPSを腹腔内投与した時,投与後4時間で各臓器におけるIL-6mRNA,多くの臓器で発現上昇が確認され,肺や脾臓でも高かった.しかしながら,このモデルに対するグレリン投与では血中IL-6抑制には至らなかった.LPS投与モデルにおけるIL-6濃度は,ヒトーマウス換算において,われわれがヒトにおいてグレリン投与に関する研究を行った際のIL-6濃度よりも著しく高濃度であり,モデルとしてふさわしくない可能性が示唆された.そのため,再度侵襲学の観点から,PAMP/DAMPの概念に着目し,LPSモデルは前者であることから,DAMPモデル作成が適当であることが判明した.また,グレリン持続投与に関する研究として,すでに食道癌術後グレリン持続投与の臨床治験が開始され,このなかで時速投与における指摘濃度のValidationが行われる(プラセボVS 0.25mg/kg/H VS 0.50mg/kg/H). PK/PD解析,炎症性マーカー測定についても問題なく検体集積がなされている.2.胃全摘症例におけるグレリン投与の検討については、高齢者胃癌患者を対象とし,グレリン持続投与期間5日間,間欠投与期間を5日間もうけるランダム化比較試験を開始した.現在,2例の症例登録がなされており,今後も症例集積を重ねる.3.グレリン不活性化メカニズムの解明について、肝不全患者は健常人と比較し、有意に活性化グレリン値が高値であることを証明してきた。また,肝不全患者ではコリンエステラーゼ低値,高グレリン血症であるのに対し、逆に肥満患者(特に高度肥満患者)では,コリンエステラーゼ異常高値症例が存在することがわかり,グレリン濃度とコリンエステラーゼ値とのFeedback関係が判明した.グレリン代謝に関わる医薬品,漢方などの使用につながると思われる.
細胞極性蛋白質複合体による白血球の遊走方向決定機構

体内に微生物が侵入すると、白血球の一種である好中球が、微生物の侵入部位(あるいは炎症部位)へ素早く遊走して貪食・殺菌を行う。この細胞の遊走過程を「ケモタキシス(走化性)」と呼ぶ。正しくケモタキシスするためには「方向の決定」と「運動性の亢進」が必要であるが、「遊走方向」を制御する機構については不明な点が多い。本研究では、好中球の遊走方向の制御に関わる蛋白質を見出し、その作用機構について解明した。好中球は、私たちの体を循環する白血球のおよそ60%を占める細胞であり、その機能は、体内に侵入した細菌や真菌などの微生物を、貪食して殺菌することである。その機能を発揮するためには、ケモタキシス(chemotaxis;走化性)により微生物の侵入部位へ素早く到達することが必要不可欠であり、この過程は生体防御ひいては人間の生存にとって不可欠な現象である。ケモタキシスを誘導する走化性因子の受容体は、すべて7回膜貫通型で、その全てが3量体G蛋白質のGiと特異的に共役する。細胞が正しくケモタキシスするためには「方向の決定」と「運動性の亢進」が必要であるが、「遊走方向」を制御するメカニズムについては、ほとんど分かっていない。本研究の目的は、Giの役割に着目し、好中球の遊走方向を決定するための分子機構を解明することである。本年度は、走化性因子依存的に遊離したGiの下流で機能する蛋白質キナーゼを見出した。このキナーゼは、ケモタキシスの際、走化性因子依存的に好中球の前方にリクルートされることが分かった。このキナーゼの働きを阻害した好中球は、走化性因子の濃度勾配下でランダムに遊走し、「遊走方向」の異常が観察された。一方で、遊走速度は全く損なわれていなかったことから、このキナーゼの働きを阻害しても「運動性の亢進」には影響が無いことが分かった。このことは、好中球のケモタキシスの際に、Giの下流で「遊走方向」を特異的に制御するためのシグナル伝達経路があることを示唆する。その機能を発揮するためには、ケモタキシス(chemotakis:走化性)により微生物の侵入部位へ素早く到達することが必要不可欠であり、この過程は生体防御ひいては人間の生存にとって不可欠な現象である。これまでの解析により、走化性因子依存的に遊離したGiの下流で機能する蛋白質キナーゼを見出した。上記の結果から、好中球のケモタキシスの際に、Giの下流で「遊走方向」を特異的に制御するためのシグナル伝達経路があることが示唆された。本年度は、このキナーゼが前方に集積するのに必要なアダプター蛋白質を見出し、そのノックアウトマウスを作製した。このノックアウトマウス由来の好中球は、キナーゼの前方への集積が起こらず、細胞質に均一に局在した。さらに、遊走時に細胞極性が維持されず、「遊走方向」に異常をきたすこと等を明らかにした。
カルシウムイオン駆動収縮性蛋白質の結晶融解仮説の検証のためのｃＤＮＡ作製

ツリガネムシの採集が不可能な期間には,赤血球のCa2+依存膜変形,特に,収縮の研究を始めた。牛赤血球においては,顕著な収縮や変形は観察されなかった。しかし,より原始的なジェノパスの赤血球を用いたところ,Ca2+添加によって顕著な赤血球収縮が起きることを発見した。1)琵琶湖湖畔の巨大ズーサム二ウムを持つツリガネムシ種の採集は本年度の雨季の分の採集を含めて、ほぼ終局を迎える状況になった(ただし、スパコネクチン蛋白質の抽出・精製は、一回の試験のみの量であるので慎重を要する)。2)試験的なテストを含めてのカルケシウムを用いる研究は、大麦若葉を餌として用いると、大量培養・大量採集が可能であることが分かったが、この原生動物の種をみつけることにはまだ成功していない。東京を含む関東一円の下水処理場では、絶望的である。曝気槽や沈殿槽が屋内に在って、藻類を含む植物の生長が困難であるからである。また、流出壁が銅版でできているうえに、毎日のように壁を洗浄するから、カルケシウムが固着生長しない。本年中には、大雨の後に発生するので、大量培養用の種を見つけたい。3)カルケシウムの大量培養を成功させたい。各地で採集されるツリガネムシを含む原生動物の種の同定のためのRNA遺伝子解析のために、純粋エタノール漬けツリガネムシ採集を始めた。ツリガネムシを中心とした生物多様性の研究テーマである。4)デスクワークによるツリガネムシ収縮機構の研究はかなり進んでいる。毎年のように、原生動物学会と生体運動総合研究班会議で発表している。非平衡の物理の湯川記念ホールにおける研究会でも、原生動物および周辺物理現象の研究発表を毎年続けている。その一部は、誰か若い人が興味を持って研究に参加することを期待しての研究アイデアの発表である。言わば、白鳥の歌のつもりである。5)ツリガネムシと同じCa2+収縮性の微細繊維は真核多細胞動物にもあるはずである。そこで、牛の血液の赤血球のCa2+依存性形状変化の研究を所属する朝日研院生の石川君が初めてくれることになった。まだ、研究条件の探索中である。1)琵琶湖での枝分かれ巨大ツリガネムシ採集;`09ー'12年の間は、枝分かれ巨大ツリガネムシ(Zoothamnium arbuscula strain Lake Biwa)の採集は、全く、不可能であったが、'13年の初夏と初秋の時期には、かなりの量を採集することができた。この種が付着するカナダ藻が大量に発生したことと、他種のながれ藻が湖畔を覆い尽くすことがなかったからである。一日当たり約250-200個体採集できた。10年間近く採集してきた試料を用いて、ようやく、スパズミンおよびスパコネネクチンの精製とそれらのcDNA決定の段取りが可能となった。08年と11年のことであるが,長年貯蔵していたグリセリン処理カルケシウムが3ビンも盗まれてしまった。汚らしい漬物入れのビンと勘違いして、捨ててしまったのだろう。隣の研究室の大学院生だと推定されるが、どう仕様もない。これらの事件によって、本課題研究は3年も遅れることになってしまった。2)ツリガネムシ類のssRNA遺伝子決定のための試料集め;琵琶湖産の巨大ツリガネムシと北志賀高原アワラ湿原の緑ツリガネムシとApocarchesium sp.を採集して、純エタノール漬けにした。これらのssRNA遺伝子決定のためである。3)赤血球のCa2+励起収縮の可能性;1)の研究が滞ってしまったので、代わりに、赤血球のCa2+の細胞内流入に伴う膜収縮の可能性を検討した。用いたのは、ウシの赤血球である。自然重力下における赤血球群の沈降状態を赤血球層のパッキングによって調べるというものである。結果は、約5μMー10μMのCa2+の細胞内流入の有る層がややパッキングが強固であるというものであった。4)紙とエンピツで出来る実験計画・実験予想・理論的研究;実験研究が途と凝ってしまったので、主として理論的・予想的研究も行ってきた。現在までの達成度の項でも述べた理由により、申請した研究テーマの進捗は大幅に遅れてしまった。さらに、保存していたカルケシウムのグリセリンモデルが隣りの研究者によって廃棄されてしまったらしい。そこで、大至急大量培養の段取りをしなければならない。そのために、恒温インキュベーターを二台急遽購入することにした。さらに幸いに、琵琶湖で1年前まで採集した巨大ツリガネムシは、かろうじてそのスパコネクチン精製・分析に使えそうな量がある。日本医科大学に保管していた分析用超遠心機を早大理工学部に移管し、スパズミンとスパコネクチンとの相互作用の研究に使う手筈を整えた。また、日本医科大学の消耗品類と自動SDSページ装置などを貰い受けた。

現在、川越産の巨大ツリガネムシの分離スパズモネームのαへリックスジャイレーションテンソルを測定中である。G-HAUPスペクトロスコピー(偏向分散測定)を使う。さらに、少量の試料のみで研究できるsmall subunit RNA geneの解析による巨大ツリガネムシの亜種変異を分析することをこの雨期に始める(埼玉県川越産、琵琶湖産、さらに岐阜県木曽川の河川敷内の池産)。以上述べたように、研究計画は、ほぼ一年半おくれてしまった。しかし、申請テーマではないが、重要な他の研究テーマ・少量の保存試料で達成できる研究テーマを優先的に実施することにしたのである。その一つは、5月中旬から実施するAFM装置を用いるスパズモネーム細繊維束の微細構造分析である。豊橋科学技術大学准教授に就任した永井萌土博士との共同研究である。英文論文の執筆余裕はないので、まだゼロ論文数。1)本申請の採択以前には、約1リットルのグリセリン処理カルケシウムが保存してあるはずであったが、となりの研究室の院生が無断で廃棄してしまったと推定される。そのために、本申請書に直接に係る研究テーマの推進は、大はばに遅れる(約2年分)こことなってしまった。時間つなぎのために、間接的だが重要な研究テーマにスイッチせざるをえなかった。したがって、本研究に直接かかわる研究の達成度は30%と推定される。間接的な実験研究テーマとデスクワーク的なテーマをあわせると、約50%といったところであろう。合計での研究達成度は、80%とみる。本研究の申請が採択される以前の東関東大震災の日(3・11)に、浅井博自身が大震災的病気の通知を杏林大学血液内科教授から受けた。そこで、他のある病院に入院し、緊急治療をおけることになった。約1ヶ月間入院し、その後3ヶ月間毎週通院した。経過は良好。翌年の現在、4月から年一回ごとの1ヶ月間週1回の通院が必要。そこで、琵琶湖での巨大ツリガネムシの採集は不可能となった。したがって、理論生物物理学的研究と実験研究の準備を行っていた。英語論文執筆の余裕はまだない。学会発表と依頼講演のみ。1)少量のツリガネムシでも出来る研究テーマを積極的に推進する方向に研究方策を多少変更する。すなわち、ランタニド金属(3価の陽イオン)を含む種々の金属イオンによる研究を巨大ズーサム二ウムについて行う予定である。孤立型ツリガネムシでは分析できなかったことが巨大型ツリガネムシのズーサム二ウムで分析可能であるからである。巨大ズーサム二ウムのCa2+結合たんぱく質のスパズミンは、AとBの2種類のスパズミンのみで構成されているし、2ヶ所のみのCa2+結合部位を持っているので、スパズミンからスパコネクチンへのエネルギー伝達の機構解析が可能である。このようなたんぱく質間またはタンパク質内のエネルギー転移の研究は、前代未聞のものである。2)大量入手・大量の抽出と精製が可能な牛赤血球膜からスパズモネーム様のCa2+駆動収縮性繊維の探索を行う。3)勿論、申請の研究テーマは研究条件がととのえば、優先的に実行する。朝日研の大学院生を指導・動員して、ツリガネムシの一種であるカルケシウムの大量培養を始める。三菱科学財団に申請した研究テーマも行う。分析用超遠心機を預けてあった日本医科大学新丸子分校から早大理工学部に移転して、スパズミンとスパコネクチンとの相互作用研究に供する。
売場効率向上のための知的マーケティング意思決定支援システム

本研究で明らかにしたことは、以下の機能の実現であり、これらの機能をもつ「売場効率向上のための知的マーケティング意思決定支援システム」を構築した。1.売場での知的人物計数赤外線センサと人工知能技術を用いて知的人物計数システムを構築した。知的人物計数システムの機能は、次の2つである。(1)人物計数赤外線センサと推論技術を用いた知的人物計数システムを開発した。これは従来のビデオカメラによる画像処理では不可能であった薄暗い店舗内での人物計数ならびに人物の移動方向の把握を可能としたものである。(2)人物識別赤外線エリアスキャナセンサと人工知能技術を用いて知的人物属性識別システムを開発した。これは2組のエリアスキャナ間を通過する人物の形状を検出し、形状データをもとに男女識別をするものである。一人通過の条件のもとで約80%の男女識別精度を達成した。また同じく赤外線エリアスキャナセンサを用いた別手法の人物属性識別システムも開発した。これはセンサにより通行人の身長・歩速・歩幅を検知することで、予め多数の通行人歩行データから作成しておいたベイジアンネットワークの条件確率モデルを利用して男女識別を行うものである。実験では一人通過時に約85%の精度を達成した。2.マルチエージェントによる店舗内人流シミュレーション複数の顧客をマルチエージェントで表して、顧客の店舗内行動、特に顧客の動線を解析できるシミュレータを開発した。様々なフロアレイアウトや売場配置のもとでの顧客の動線や売場前通過率の変化を解析することが可能なため、実店舗での実験が困難である売場配置決定問題のマーケティング意思決定支援ツールとして利用できる。平成17年度は「売場効率向上のための知的マーケティング意思決定支援システム」の以下の2つの機能の実現のために、研究室内での試作システムを構築して研究基盤を築いた。1.売場での知的人物計数赤外線センサと人工知能技術を用いて知的人物計数システムの実現を目指したものである。本年度は、知的人物計数システムの機能を、(1)人物計数と(2)人物識別に分けて試作システムの開発を進めた。(1)では、研究室内に仮想の売場を設け、2組のエリアスキャナを設置した。実験では、被験者にいろいろなケースでの出入りを試させて、通行データを収集するとともにそれぞれのケースでの計数精度の検証を行った。簡易な設備では計数できないパターンもいくつか存在したため、これらのパターンをすべて洗い上げて推論などの人工知能技術を適用した結果、ほぼ100%の計数精度を実現した。(2)では、試作システムに2組のエリアスキャナセンサを用いて、通過する人物の形状を検出し、それをもとに男女識別を試みた。形状データは非常に情報量が少ないために、データマイニング技術により補完した結果、約90%の男女識別精度を達成した。今後は、歩幅や歩速などの情報も用いることで更なる精度の向上を目指す予定である。2.マルチエージェントによる店舗内人流シミュレーションマルチエージェント技術を用いて顧客の店舗内行動、特に顧客の動線を解析するマーケティングツールの実現を目指したものである。本年度は、スーパーマーケットの店舗内売場を回遊する顧客の基本的な動作を再現できる試作シミュレータを完成させた。今後は、実験対象とする現実のスーパーマーケットの売場や商品配置をモデル化して開発し、実店舗での人流を現地調査することで、シミュレーションの妥当性の検証を行う予定である。

これは従来のビデオカメラによる画像処理では不可能であった薄暗い店舗内での人物計数ならびに人物の移動方向の把握を可能としたものである。(2)人物識別赤外線エリアスキャナセンサと人工知能技術を用いて知的人物属性識別システムを開発した。これは2組のエリアスキャナ間を通過する人物の形状を検出し、形状データをもとに男女識別をするものである。一人通過の条件のもとで約80%の男女識別精度を達成した。また同じく赤外線エリアスキャナセンサを用いた別手法の人物属性識別システムも開発した。これはセンサにより通行人の身長・歩速・歩幅を検知することで、予め多数の通行人歩行データから作成しておいたベイジアンネットワークの条件確率モデルを利用して男女識別を行うものである。実験では一人通過時に約85%の精度を達成した。2.マルチエージェントによる店舗内人流シミュレーション複数の顧客をマルチエージェントで表して、顧客の店舗内行動、特に顧客の動線を解析できるシミュレータを開発した。様々なフロアレイアウトや売場配置のもとでの顧客の動線や売場前通過率の変化を解析することが可能なため、実店舗での実験が困難である売場配置決定問題のマーケティング意思決定支援ツールとして利用できる。
骨髄由来血管内皮前駆細胞より分泌される血管平滑筋細胞の増殖・遊走性促進因子の解析

血管内皮前駆細胞より分泌され、血管平滑筋細胞の増殖と遊走性を促進する未知の因子の探索を行った。目的の因子は、可溶性である事、またタンパク質の大きさは約44kDaであることがわかった。しかし、粘度が非常に高く、現在、同定までに至っていない。EPCsにより分泌されるSMCsの増殖・遊走性促進因子の決定を行った。比較はラット大動脈由来血管内皮細胞の培養上清(aorta endothelial cel1-conditioned medium ; AoEC-CM)とする。平成20年度にはHPLCを使用したクロマトグラフィーによって蛋白を精製し、マススペクトル解析により蛋白を同定する事を予定していた。まず最初に、目的蛋白の精製のため、EPCを2×10(7)cellsを培養し、その培養上清を回収し、HPLCにより分離を行った。しかし、この培養上清は予想に反して非常に粘性が高く、HPLCのカラムに引っかかってしまい、分離が非常に困難であった。粘度を下げるために、培養上清の希釈を検討したが、うまくはいっていない。現在、HPLCによる分離の検討と、粘度を低下させるためのEPC培養条件の検討を行っている。比較はラット大動脈由来血管内皮細胞の培養上清(aorta endothelial cell-conditioned medium ; AoEC-CM)とする。まず最初に、目的蛋白の精製のため、EPCを2X10(7)cellsを培養し、その培養上清を回収し、HPLCにより分離を行った。組換え蛋白をSMCs培地に添加し、細胞増殖・遊走性促進を確認する。購入した組換え蛋白で活性を確認出来なかった場合、蛋白の同定が間違っていたと考え、クロマトグラフィーからやり直した。ただし、自分で合成したHis-tag融合組換え蛋白の場合は、蛋白の活性が消失している可能性が考えられる事から、大腸菌ではなく哺乳類細胞で発現させて作製する。His-tagを付加していないcDNAをEPCsで発現させ、その培養上清の効果を調べる。中和抗体とEPCs-CMの混合液をSMCs培地に添加し、細胞増殖・遊走性促進が抑制されるかを確認した。抑制効果が観察されなかった場合は、抗体とEPCs-CMを3時間ほどゆっくり攪伴して目的タンパクを抗体に結合させた後、protein Gと結合させて抗体を除去し、SMCs培地に添加して抑制効果が見られるか確認した。骨髄単核球や末梢血幹細胞による細胞移植療法が、多くの大学において臨床試験が実施されており一定の成果を上げている。しかし、これらの細胞は未分化であり、また血管の種となる血管内皮前駆細胞(endothelial progenitor cells ; EPCs)の含有率が0.001-1%と非常に低く、純化したEPCsのみを移植に用いる方が安全かつ効率的であると思われる。しかし、EPCsは未知な点が多く残されており、安全かつ効率的なEPCs細胞移植療法を確立するためには、その作用機序を早急に解明する必要がある。研究代表者はこれまでの研究において、EPCsが分泌する因子によって血管平滑筋細胞(smooth muscle cells ; SMCs)の増殖・遊走性が促進される事を発見した。そこで、EPCsによる血管新生促進メカニズムを解明するために、EPCs由来血管平滑筋細胞活性化因子の同定とその解析を行った。第一に、EPCsにより分泌されるSMCsの増殖・遊走性促進因子の決定を行った。粘度を下げるために、培養上清の希釈を検討したが、分離することが出来なかった。
Arbuscular菌根菌共糸における共生特異的リン酸代謝に関する研究

Arbuscular菌根共生系における菌根菌から宿主植物へのリン酸移行のメカニズムを解明する目的で、共生特異的に発現する酸性およびアルカリ性ホスファターゼの性質について検討を行った。(1)N末端アミノ酸配列の決定:精製された酵素標品よりN末端アミノ酸配列15残基を決定した。さらに、この配列を基にタンパク質データベース上で相同なものを検討したところ、他の植物の酸性ホスファターゼのN末端配列と相同性が高かった。このことはISPaseが宿主植物由来であることを強く示唆していた。(2)活性発現部位の推定:菌根における酸性ホスファターゼ活性部位を組織化学的方法により調べたところ、主に菌根菌組織の周辺部や植物根の細胞壁部分で高い活性が認められたことから、ISPaseは分泌型の酵素であることが予想された。また、ISPaseが根の分泌液中から検出されたことも仮説を支持していた。2.アルカリ性ホスファターゼ(1)粗酵素液調製法:共生状態の菌根菌組織に特異的に発現するアルカリ性ホスファターゼの機能を推定するために、宿主根をセルラーゼなどで消化後、菌根菌組織を顕微鏡下で摘出し、そこから得られる可溶性および不溶性画分におけるホスファターゼ活性を測定する方法を確立した。(2)特異的阻害剤と基質特異性:本酵素の活性はベリリウムにより特異的に阻害された。また、このことを利用して基質特異性や動力学定数などを求めたところ、糖リン酸に対する基質特異性が高いことが明らかになった。
独立空隙型軽量骨材を用いた高強度コンクリートにおける繊維補強効果に関する研究

最近、低吸水性の独立空隙型軽量骨材が開発され、軽量骨材コンクリートの施工性や耐久性を向上できるようになった。さらに、この軽量骨材は骨材強度も高いため、高性能減水剤や微粉材料と組み合わせることで従来よりも軽量で高強度なコンクリートの製造が可能になっている。しかし、このコンクリートの実用化においては、(1)骨材を低吸水率にして高性能化を図るほど自己収縮が増大すること、(2)圧縮強度にくらべて引張強度の増加割合が小さく、脆性的な破壊挙動を示すことなどが問題となる。このため、本研究では、独立空隙型軽量骨材を用いたコンクリートの自己収縮特性ならびに破壊特性を改善する目的で、緻密化されたペースト母材に対する合成短繊維の補強効果について検討した。コンクリート要素レベルの検討では、(1)合成繊維を1.5%以上混入することで自己収縮が低減できるものの、水結合材比が30%以下になるとほとんど収縮低減効果が認められないこと、(2)自己収縮の低減には合成繊維の形状などの幾何学的性質の関与が大きく、逆に破壊エネルギーの向上には合成繊維の引張強度や弾性係数などの力学的性質の関与が大きいこと、(3)合成繊維が混入されたペースト母材の自己体積変化を収縮低減剤や早強型膨張材などの混和材料よって制御した場合、収縮低減量にともなって破壊力学特性が向上することなどが明らかになった。また、コンクリート部材レベルの検討では、(1)独立空隙型軽量骨材コンクリートを用いたRCはりのせん断耐力は普通コンクリートを用いた場合の60%程度となるものの、合成繊維の混入によって普通コンクリートを用いた場合の1.4倍程度まで向上できること、(2)自己収縮がRCはりの曲げ耐力に与える影響は小さいものの、せん断耐力に与える影響は無視できず、体積変化の制御によってはりのせん断特性を大幅に改善できることなどが明らかになった。
腎疾患増悪過程における有機イオントランスポータの発現変動機構に関する研究

これまでの研究において、薬物トランスポータ発現量と腎薬物排泄能との相関関係から外れる患者が存在した。この理由について、トランスポータの活性制御機構が想定される。本年度は腎尿細管側底膜において有機イオンや薬物の輸送に深く関与している、有機アニオントランスポータの活性調節機構について検討した。これまで尿細管側底膜のアニオン輸送にはCl-が活性調節因子として働くことが示されていた。一方、血中のCl-濃度は腎疾患時に変動することがある。そこでCl-のhOAT1及びhOAT3輸送活性に及ぼす影響について検討した。hOAT1及びhOAT3は多様な基質認識特性を示すが、本研究においていずれの基質においてもCl-濃度依存的に活性が上昇した。更に詳細に検討するため速度論的解析を行ったところ、hOAT1では最大輸送速度が変化しているのに対して、hOAT3では基質への親和性が変動していることが示された。次にCl-の細胞内及び細胞外濃度を変化させて検討した。細胞内及び細胞外Cl-の濃度を平衡状態にした場合と細胞外Cl-濃度のみを変動させた場合のいずれにおいてもCl-による輸送活性の制御に違いは認められなかった。これらの結果よりCl-はhOAT1やhOAT3によって輸送されるのではなく、活性調節因子として働くことが示唆された。更にhOAT1やhOAT3は細胞内のαケトグルタル酸と細胞外基質との交換輸送体であると考えられている。そこでCl-濃度による細胞内αケトグルタル酸濃度について検討した。しかし、細胞外Cl-濃度を変化させても細胞内αケトグルタル酸濃度に変化は認められず、Cl-による活性変動には細胞内αケトグルタル酸は関与しないことが示唆された。本研究成果は生体内での有機アニオントランスポータの活性変動機構を解明するための重要な基礎情報である。本年度は、さらに腎疾患時の発現量について詳細なデータを収集するため、腎疾患患者におけるトランスポータ発現量についてデータを収集した。その結果最終的に京都大学医学部附属病院における腎疾患患者37名についてトランスポータ発現量のデータを収集した。またこれまで、有機アニオントランスポータ発現量とアニオン性薬物の腎排泄能との相関のみについて解析を行ったが、本年度からは、さらに有機カチオントランスポータとカチオン性基質の腎排泄速度についても検討した。尚、本研究は京都大学医学部・医学研究科医の倫理委員会の承認を得て実施された。京都大学医学部附属病院腎臓内科において、確定診断のため腎生体検査が行われた37名の患者を対象とした。これらの患者は24時間蓄尿検査を実施されており、余剰の血液並びに尿酸検体を用いてNMN腎排泄速度について検討した。その結果、患者間で約20倍の差が認められた。さらに、臨床上もっとも汎用されるクレアチニンクリアランスとの相関について検討したところ、'有意な相関は認められるものの、相関係数は0.60と高くなく尿細管分泌を受ける薬物の腎排泄速度の予測にはクレアチニンクリアランスでは不十分であることが示唆された。2.有機カチオントランスポータ発現量とNMN排泄速度との相関腎疾患患者における有機カチオントランスポータ発現量について検討したところhOCT2が最も高い発現量を示した。また、NMN排泄速度との相関について検討したところ、いずれのトランスポータ発現量とも有意な相関は認められなかった。これは、尿中に排泄されるNMNの約50%は糸球体濾過の影響を受けることに起因すると考えられた。従って、糸球体濾過速度を推定式より算出し補正を行ったところ、hOCT2発現量との間に相関が認められた。以上より、カチオン性薬物の腎排泄速度が有機カチオントランスポータの発現量に影響を受けることが示唆された。
抗ウイルス免疫応答における新規細胞間接触依存シグナル伝達経路の解析

我々はI型IFN産生をGFPの蛍光によってモニタリングできるマウスを利用しI型IFN発現の顕微鏡下において経時的に追跡する研究を行う途上において、樹状細胞が細胞間接触依存的にI型IFNを産生する新規のシグナル伝達経路が存在することを示した。本研究においては細胞間接触による相互作用を実現するシグナル伝達機構とそれを媒介する分子機構を同定し、同定された分子による抗ウイルス応答の誘導法の探索を行うことを目的とし、(1)野生型細胞と種々の遺伝子欠損細胞を混合し、細胞間接触シグナル伝達によるIFN誘導に必要な遺伝子を同定する。(2)種々の遺伝子の欠損細胞とIFN受容体欠損細胞を混合し、細胞間接触シグナル伝達を引き起こすために必須の分子を同定する。(3)野生型細胞と混合したIFN受容体欠損細胞を経時的にソーティングによって回収し、トランスクリプトーム解析を行うことで細胞間接触シグナル伝達により引き起こされる応答を特徴づける。特に、必須の転写因子等を同定する、の3つの実験を主に行った。結果として次のようないシグナル伝達の存在が示された。すなわち、ウイルスは樹状細胞に感染するとRLR-IPS-1依存シグナル伝達を活性化し、IFNを発現するのみならず、IRF3, IRF7依存的に細胞間接触シグナル伝達を司るリガンド分子を発現する。一方、リガンド分子はその受容体を通じて隣接する細胞の細胞間接触シグナル伝達経路およびその下流に位置するStat1を活性化し、IFN産生を誘導する。このStat1活性化にはリン酸化酵素Sykの関与が示唆される。本研究は細胞間接触による相互作用を実現するシグナル伝達機構とそれを媒介する分子機構を同定し、同定された分子による抗ウイルス応答の誘導法の探索を行うことを目的としている。上記現象は野生型樹状細胞とI型IFN受容体(IFNR)欠損樹状細胞を混合して観測するが、IFNR欠損細胞の代わりにRIG-I-like receptor (RLR)のアダプター分子であるIPS-1欠損細胞を用いたところIFNの産生は見られなかった。これはRLRによるウイルス認識機構が必須であることを示している。また、野生型樹状細胞のかわりに種々のシグナル伝達分子欠損細胞を用いることで、細胞間接触シグナル伝達経路に必須の分子を同定することができた。さらに、当該シグナル伝達経路によって誘導される遺伝子発現を調べるために、混合培養した野生型樹状細胞とIFNR欠損樹状細胞をソーティングしRNA-seqに供し、網羅的な遺伝子発現時系列データを取得した。当初予定していたように当該細胞間接触依存シグナル伝達に必須の因子やその下流遺伝子発現の特徴づけを行うことができた。取得したデータを用い細胞間接触依存シグナル伝達経路を司る分子機構を同定する。また、当該シグナル伝達経路がin vivoにおいて果たす役割をIfna6gfpマウスを使用して調べる。マウス飼育に関わる費用において差額が生じた
その他の広汎性発達障害の疾病分類学的及び診断学的研究

I:小児自閉症評定尺度東京版(CARS-TV)総得点を,PDD430人とPDD非合併精神遅滞(MR)75人の間と,PDD4群(自閉性障害AD,小児期崩壊性障害CDD,アスペルガー障害ASD, PDDNOS)間で比較した.総得点は有意に,PDDでMRより高く,ADとCDDでPDDNOSとASDより高く,PDDNOSでASDより高く,そのカットオフは,PDD/MRは25.5/26,AD/PDDNOSは30/30.5であった.II:自閉性スペクトル指数日本版(AQ-J)得点は,信頼性が良好で,高機能PDD男子青年15人で男子対照群49人より有意に高く,その高機能PDDカットオフは26点であった.III:高機能AA53人を小児自閉症(CA)21人とCARS-TVでIQとCARS-TV総得点を統制し比較すると,前者は有意に対人関係と全般的印象で異常性が軽く,不安反応が強かった.IV:出生時頭囲は,AA143人,CA95人,一般乳児の3群間で有意差なく,AAとCAとも女児で男児より有意に大きかった.V:各22人の高機能PDDNOSと注意欠陥多動性障害をWISC-IIIで比較すると,前者は有意に,言語性IQ,言語理解,単語,理解が不良で,積み木模様,記号,処理速度が優れていた.VI:小児行動質問表改訂版(CBQ-R)が4-6歳時と24-36ヵ月後に施行された,AD19人,PDDNOS59人,PDD非合併精神遅滞24人を比較し,IQとCBQ-R得点に診断・時間の交互作用のないことと,3群でIQ上昇とCBQ-R得点減少を認めた.VII:平均20歳時で,AA41人はCA83人より,有意に自閉度が軽く高機能PDDの比率が高かった.I:小児自閉症評定尺度東京版(CARS-TV)総得点を,PDD430人とPDD非合併精神遅滞(MR)75人の間と,PDD4群(自閉性障害AD,小児期崩壊性障害CDD,アスペルガー障害ASD, PDDNOS)間で比較した.総得点は有意に,PDDでMRより高く,ADとCDDでPDDNOSとASDより高く,PDDNOSでASDより高く,そのカットオフは,PDD/MRは25.5/26,AD/PDDNOSは30/30.5であった.II:自閉性スペクトル指数日本版(AQ-J)得点は,信頼性が良好で,高機能PDD男子青年15人で男子対照群49人より有意に高く,その高機能PDDカットオフは26点であった.III:高機能AA53人を小児自閉症(CA)21人とCARS-TVでIQとCARS-TV総得点を統制し比較すると,前者は有意に対人関係と全般的印象で異常性が軽く,不安反応が強かった.IV:出生時頭囲は,AA143人,CA95人,一般乳児の3群間で有意差なく,AAとCAとも女児で男児より有意に大きかった.V:各22人の高機能PDDNOSと注意欠陥多動性障害をWISC-IIIで比較すると,前者は有意に,言語性IQ,言語理解,単語,理解が不良で,積み木模様,記号,処理速度が優れていた.VI:小児行動質問表改訂版(CBQ-R)が4-6歳時と24-36ヵ月後に施行された,AD19人,PDDNOS59人,PDD非合併精神遅滞24人を比較し,IQとCBQ-R得点に診断・時間の交互作用のないことと,3群でIQ上昇とCBQ-R得点減少を認めた.VII:平均20歳時で,AA41人はCA83人より,有意に自閉度が軽く高機能PDDの比率が高かった.ICD-10の非定型自閉症(atypical autism : AA)児87人(平均月齢=55.0, SD=13.7;男75,女12)と小児自閉症(childhood autism : CA)児33人(平均月齢=57.9, SD=15.0;男26,女7)(月齢に有意差なし)で、早期発達、全訂版田中ビネー知能検査IQ、小児自閉症評定尺度東京版(CARS-TV)総得点と15項目得点、けいれん発作などを比較した。両群で、性比、出生時体重、歩行開始月齢、初語月齢に有意差はなかった。測定されたIQは、AA群63人(M=58.1, SD=16.6)でCA群16人(M=41.4, SD=13.2)より有意に高く(t(77)=3.75, P<0.001)、IQ未測定例は臨床的に遅滞水準が判定され、全例が、IQ70以上、軽度遅滞(70>IQ≧50)、中度遅滞(50>IQ≧35)および重度遅滞(35>IQ)に分類されたが、AA群がCA群よりも有意に遅滞が軽かった(U-test, p<0.001)。CARS-TV総得点は、AA群87人(M=29.2, SD=2.7)でCA群33人(M=31.9, SD=2.8)より有意に低かった(t(118)=4.93, p<0.001)。