hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
機能向上を目指したマンションストック専有部分改修工事と管理規約・細則等の関連性

区分所有マンションの機能向上を図るための専有部分と共用部分とに関わる改修工事に関する実態把握、課題整理をおこなうとともに、改修工事に関連した管理規約・使用細則・施工細則等がマンション改修工事にもたらしている影響・効果について実態調査を行った。マンションの経年劣化状況や資産価値維持・向上に関する管理組合の考え方によって、マンション改修工事のルールそのものにも異なったニーズがあり、現状のルールについて多様なニーズや状況に応じた改定が重要であることを確認した。そのためには管理組合としてマンション改修工事に関する技術的対応や法的対応をサポートする専門家の役割がより重要となってくる。初年度に引き続いて、マンションの共用部分改修工事と専有部分改修工事に関する実態調査は順調に実施できた。また、マンション改修工事業団体とマンション管理業団体の調査協力を得て、マンションの経年別の専有部分改修工事に関するリフォームルールの設定状況、変更状況、今後のルール策定のニーズなどを具体的に整理作業を進めることができた。さらに、特定のマンション管理組合の了解を得て、専有部分改修工事に関するリフォームルールに基づいて提出されている工事申請書の分析を通じて専有部分工事履歴管理の重要性を確認した。この研究成果を日本建築学会大会や同学会・建築生産シンポジウム論文集に投稿を予定している。引き続き、その法的妥当性について専門の弁護士に確認する予定である。建築生産・建築経済平成27年度もマンション改修工事業団体との研究協力関係を継続する予定である。そのほか、平成26年度調査によって専有部分改修工事に関係したリフォームルールの実態把握がほぼ網羅できたので、リフォームルールのあるべき姿やルール設定の法的妥当性の確認を行う予定である。マンションの共用部分改修工事と専有部分改修工事に関する実態調査は順調に実施できた。1専有部分改修工事のリフォームルール、2共用部分改修工事に伴う専有部分の道連れ工事に関するルールの実態(中間とりまとめ)を整理できたので、その法的妥当性について専門の弁護士に確認する予定である。次年度は、本年度の研究成果を日本建築学会等で発表する予定である。消耗品用として予定していた予算に少額の残額が出たので、次年度分として使用する扱いとした。平成26年度もマンションリフォーム推進協議会との共同研究の実施を継続予定である。そのほか、マンション改修工事やマンション管理の専門業者団体との調査協力関係が構築できたので、継続調査を実施する予定である。次年度は、マンションの専有部分改修工事に取り組んでいる設計事務所・コンサルタント、および、施工者等の協力を得て、具体的な事例紹介を受けて、専有部分改修工事に伴う共用部分取り合い工事の実態、管理組合との承認を受けるプロセス・課題等の収集整理を行う。
新興国に見られる二次元混合交通の認知ネットワークに基づく特徴抽出

本研究は、新興国の渋滞緩和を目指し、二次元混合交通の特徴的な車列順を抽出することを目的とした。具体的には以下の項目に取り組んだ。【1,新興国交通のビデオデータ解析】車列順の特徴を抽出するにあたり、実交通中の車両の位置情報をビデオデータから抽出する作業を行った。具体的には、インドで撮影したビデオデータから、車両を選択し半自動で走行位置を追尾するソフトウェアを作成した上で、計およそ5000台(4時間)の走行軌跡データを取得した。視覚的重なりにより使用できないデータも存在するものの、様々な車種(自転車・バイク・オートリクシャー・乗用車・トラック・バス)を含む走行軌跡データの取得に成功し、所望の解析が可能となった。【2,二次元交通においてドライバーが認知する車両関連性の測定】一方車列順を定めるためには、ドライバーが他の車両をどのように認知しているかを定量化する必要がある。例えば、正面で同じような速度で走行する前走車は追従対象となり得、斜め前方を遅い速度で走行する前走車は追い抜きの対象となるだろう。本研究では、その認知の違いを各前走車の減速に対する挙動の違いであるとし、様々な位置に配置された前走車の減速に対する挙動を、ドライビングシミュレータを用いて測定した。結果、前走車の位置によって減速に対する反応の遅れと強度が様々に変化する事が明らかになり、現在そのモデル化を進めている。【3,一次元混合交通における各車種の運転特徴の解析】さらに、実験コースにおけるバイク・乗用車・トラックを用いた追従走行実験データを用いて、各車種の特徴的な運転挙動を抽出した。時系列データに対する決定木学習を用いることで、stop-and-goにおいて各車が任意のフェーズで見せる特徴の抽出が可能となった。2の結果と合わせることで、二次元混合交通で各車種を運転するドライバーの認知の違いを表現できる可能性がある。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。
神経系におけるグルタミン酸トランスポーターの機能的役割の解明

グルタミン酸トランスポーターは、脳内の主要な興奮性神経伝達物質であるグルタミン酸を細胞内に取り込むことにより、シナプス伝達を終結させ、神経細胞をグルタミン酸の興奮毒性から保護する役割を果たしていると考えられてきた。本研究は、グルタミン酸トランスポーターの神経系における機能的役割を明らかにすることを目的として、分子レベル、遺伝子レベル、組織個体レベルでの解析を行った。1.グルタミン酸トランスポーター分子の機能的性質の解析グルタミン酸トランスポーターEAAC1をXenopus卵母細胞に発現させ、一分子のグルタミン酸の輸送が、二つのNa^+の共輸送、一つのK^+、OHの対向輸送と共役することを明らかにした。この化学量論より、グルタミン酸トランスポーターは、正常な電解質環境下では、グルタミン酸を細胞外に対して細胞内に約10,000倍の濃度比で濃縮できることが示唆され、細胞外のグルタミン酸濃度を低値に保つ役割を担い得る機能的特性を有していることがクローニングされたグルタミン酸トランスポーターにおいて確認された。2.グルタミン酸トランスポーターの構造機能相関の解析グルタミン酸トランスポーターの基質結合部位同定の目的で、グルタミン酸トランスポーターのアイソフォーム間の薬物感受性の違いを利用したキメラ解析を行った。グルタミン酸トランスポーターGLT-1はグルタミン酸取り込み阻害薬ジヒドロカイニン酸(DHK)によってそのグルタミン酸取り込みが抑制されるが、他のアイソフォームEAAC1はDHKによって抑制されない。この両者のキメラcDNAをrecA^+の大腸菌を用いた相同組換により得た。キメラcDNAはXenopus卵母細胞に発現させ、DHKに対する感受性を検討した。膜貫通領域6から7にかけての領域を境にDHK感受性が大きく変化し、この領域内にDHK感受性の決定に与る構造が存在することが示唆された。さらに別の観点から基質結合部位同定の手掛かりを得るために、基質選択性の異なる新しいNa^+依存性中性アミノ酸トランスポーターASCT2のcDNAを単離した。キメラ解析から得られたDHK結合領域と、ASCT2とグルタミン酸トランスポーターの一次構造と機能的性質の比較から得られた基質結合部位に関する情報をもとに、部位特異的変異導入による解析が進行中である。3.グルタミン酸トランスポーターの発現の組織分布の解析ラット脳よりEAAC1cDNAを単離して、in situハイブリダイゼーション法による、ラット脳におるグルタミン酸トランスポーターEAAC1の詳細な発現の分布を検討した。EAAC1は中枢神経系においては、神経細胞得異的に発現し、グルタミン酸作動性神経細胞のみならず、他の神経細胞にも発現していることが明らかになり、EAAC1が神経伝達のみならず、神経細胞内の代謝にとっても重要な役割を果たしていることが示唆された。4.グルタミン酸トランスポーターのゲノミックDNAの解析マウスEMIBL3ゲノミックライブラリーから、EACC1 5'-末端プローブを用いて全長約15kbにわたるゲノニックDNAを単離した。DNAシークエンシング及びCATアッセイによる解析が進行中である。グルタミン酸トランスポーターのin vivoにおける機能的役割の解析EAAC1アンチセンスオリゴDNAの脳室内投与を行った。EAAC1アンチセンスDNAは、神経細胞脱落は生じなかったが、高率に痙攣を誘発し、平行して行ったグリア型トランスポーターGLT-1、GLASTのアンチセンスDNAが主に神経細胞死を起こし、痙攣誘発効果は弱かったのと対照的である。本研究は、従来から想定されてきたグルタミン酸トランスポーターの機能的役割に関して、分子生物学的手法を用いて実験的根拠を提供した。本研究の成果は、さらに構造機能相関及び遺伝子発現調節機構の解明へ向けた基礎的データとなり、病態の理解、特異的作用薬の開発へ向けた研究への出発点となることが期待される。

膜貫通領域6から7にかけての領域を境にDHK感受性が大きく変化し、この領域内にDHK感受性の決定に与る構造が存在することが示唆された。さらに別の観点から基質結合部位同定の手掛かりを得るために、基質選択性の異なる新しいNa^+依存性中性アミノ酸トランスポーターASCT2のcDNAを単離した。キメラ解析から得られたDHK結合領域と、ASCT2とグルタミン酸トランスポーターの一次構造と機能的性質の比較から得られた基質結合部位に関する情報をもとに、部位特異的変異導入による解析が進行中である。3.グルタミン酸トランスポーターの発現の組織分布の解析ラット脳よりEAAC1cDNAを単離して、in situハイブリダイゼーション法による、ラット脳におるグルタミン酸トランスポーターEAAC1の詳細な発現の分布を検討した。EAAC1は中枢神経系においては、神経細胞得異的に発現し、グルタミン酸作動性神経細胞のみならず、他の神経細胞にも発現していることが明らかになり、EAAC1が神経伝達のみならず、神経細胞内の代謝にとっても重要な役割を果たしていることが示唆された。4.グルタミン酸トランスポーターのゲノミックDNAの解析マウスEMIBL3ゲノミックライブラリーから、EACC1 5'-末端プローブを用いて全長約15kbにわたるゲノニックDNAを単離した。DNAシークエンシング及びCATアッセイによる解析が進行中である。グルタミン酸トランスポーターのin vivoにおける機能的役割の解析EAAC1アンチセンスオリゴDNAの脳室内投与を行った。EAAC1アンチセンスDNAは、神経細胞脱落は生じなかったが、高率に痙攣を誘発し、平行して行ったグリア型トランスポーターGLT-1、GLASTのアンチセンスDNAが主に神経細胞死を起こし、痙攣誘発効果は弱かったのと対照的である。本研究は、従来から想定されてきたグルタミン酸トランスポーターの機能的役割に関して、分子生物学的手法を用いて実験的根拠を提供した。本研究の成果は、さらに構造機能相関及び遺伝子発現調節機構の解明へ向けた基礎的データとなり、病態の理解、特異的作用薬の開発へ向けた研究への出発点となることが期待される。
単離した中枢神経細胞を用いる神経毒性の簡便な評価法の開発

ラット脳から酵素処理により単離した小脳顆粒細胞に蛍光プローブであるフルオ-3とフローサイトメーターを適用して,生細胞から細胞内カルシウムイオン濃度を測定した。有機錫であるトリブチル錫,トリフェニル錫は100nM程度から用量依存性に細胞内カルシウムイオン濃度を上昇させた。しかしながら,トリメチル錫,トリエチル錫,ジフェニル錫,モノフェニル錫は1μM以下の濃度では細胞内カルシウムイオン濃度にはほとんど影響はなかった。トリブチル錫,トリフェニル錫の細胞内カルシウム濃度増加作用は細胞外液カルシウム濃度に強く依存していたが,細胞外カルシウム除去でも観察された。また,電位依存性カルシウムチャネル阻害薬の投与では細胞内カルシウム上昇作用は抑えることが出来なかった。さらに,マンガンイオン投与によっても細胞内カルシウムによる蛍光には影響がなかった。すなわち,これらの有機錫は神経細胞膜のカルシウム透過性を上昇させ,同時に細胞内小器官からのカルシウムの遊離させる事が考えられた。従来,トリエチル錫やトリメチル錫と較べて,トリブチル錫やトリフェニル錫は神経毒性が弱い事が考えられていたが,これらの実験から神経系に対しても影響がでる事が予想された。我々は,先にトリフェニル錫のイオンチャネルに対する影響から興奮毒性の可能性を示唆したが,この様な細胞内カルシウムに対する影響が加わることにより,さらなる興奮毒性が起こる事が考えられ,環境汚染物質としての有機錫に大きな危険性が存在する可能性が出てきた。しかし,同様な作用は神経細胞のみでなく,免疫系細胞である胸腺細胞でも観察された事から,この細胞内カルシウムイオン濃度に対する影響は神経毒性と考えるよりは細胞毒性に相当すると考えられた。A.電気生理学的研究ラット脳海馬CA1領域より酵素および機械的に急性単離した錐体細胞からナトリウム電流を他のイオン電流より単離して、トリフェニル錫のナトリウム電流増大作用について検討し、以下の結果を得た。(1)神経細胞より記録された活動電位はトリフェニル錫の存在下にプラトー相が著しく延長した。これらの細胞から記録されるイオン電流の不活性化過程は著しく遅延していた。外液ナトリウムを除くと、電流は記録されなかった。また、フグ毒により完全に抑制された。(2)電流の活性化過程、不活性化過程、いずれも遅延が観察された。しかし、不活性化過程への影響が著しかった。(3)電流ー電圧曲線には影響を与えなかった。(4)定常状態不活性化曲線はトリフェニル錫の存在下に左方に移動したが、有意では無かった。(5)再活性化曲線は左方に移動し、再活性化が速まっていることが考えられた。(6)不活性化過程を遅延させるサソリ毒の存在下では、トリフェニル錫の作用は観察されなかった。すなわち、トリフェニル錫はサソリ毒の作用点であるナトリウムチャネル内の毒結合部位に作用を及ぼし、ナトリウム電流を修飾するものと考えられた。B.光化学的研究マウスの胸腺細胞を用いて、光化学的に細胞内カルシウム濃度を測定し、トリフェニル錫の影響を観察した。(1)トリフェニル錫は低濃度から細胞内カルシウム濃度を用量依存性に増大させた。(2)細胞内カルシウムの増加は、外液カルシウムに強く依存していた。しかしながら、細胞内カルシウムにも依存する成分も観察された。(3)この作用は膜電位と関係なく、カルシウム拮抗薬でも抑制されなかった。(4)トリフェニル錫の力価はトリブチル錫より若干弱かった。これらの作用はナトリウム電流に作用する濃度以下で観察された。この作用が神経細胞でも観察されれば、その意義は大きい。ラット脳から酵素処理により単離した小脳顆粒細胞に蛍光プローブであるフルオ-3とフローサイトメーターを適用して、生細胞から細胞内カルシウムイオン濃度を測定した。有機錫であるトリブチル錫、トリフェニル錫は100nM程度から用量依存性に細胞内カルシウムイオン濃度を上昇させた。

しかしながら、トリメチル錫、トリエチル錫、ジフェニル錫、モノフェニル錫は1μM以下の濃度では細胞内カルシウムイオン濃度にはほとんど影響はなかった。トリブチル錫、トリフェニル錫の細胞内カルシウム濃度増加作用は細胞外液カルシウム濃度に強く依存していたが、細胞外カルシウム除去でも観察された。また、電位依存性カルシウムチャネル阻害薬の投与では細胞内カルシウム上昇作用は抑えることが出来なかった。さらに、マンガンイオン投与によっても細胞内カルシウムによる蛍光には影響がなかった。すなわち、これらの有機錫は神経細胞膜のカルシウム透過性を上昇させ、同時に細胞内小器官からのカルシウムの遊離させる事が考えられた。従来、トリエチル錫やトリメチル錫と較べて、トリブチル錫やトリフェニル錫は神経毒性が弱い事が考えられていたが、これらの実験から神経系に対しても影響でる事が予想された。我々は、先にトリフェニル錫のイオンチャネルに対する影響から興奮毒性の可能性を示唆したが、この様な細胞内カルシウムに対する影響が加わることにより、さらなる興奮毒性が起こる事が考えられ、環境汚染物質としての有機錫に大きな危検性が存在する可能性が出てきた。しかし、同様な作用は神経細胞のみでなく、免疫系細胞である胸腺細胞でも観察された事から、この細胞内カルシウムイオン濃度に対する影響は神経毒性と考えるよりは細胞毒性に相当すると考えられた。
多因子疾患の遺伝解析系としてのマウスSMXARI系統群の基盤整備と応用

マウスリコンビナント近交系(RI系統)群は異なる2種類の近交系間の雑種第2代を起源として育成された複数の近交系のセットであり、各系統の任意の染色体領域が両親系統のどちに由来しているかを示すSDP(strain distribution pattern)を作成し各系統の表現型と比較することで、対象とする表現型を支配する遺伝子の染色体マッピングを効率的に行うことが可能である。RI系統群は多因子形質の遺伝解析に極めて有効であることから、マウスを用いて遺伝解析を行う際の重要なインフラ(infrastructure)として認識されている。本研究では国内で唯一個体として系統維持されているSMXA RI系統群をより有用なインフラとして整備するため、詳細なSDPを作成することと、この成果を応用して糖代謝異常の原因遺伝子の染色体マッピングを行いその原因遺伝子を同定することを目的とした。新たに150個以上のマイクロサテライト(Mit)マーカーによるSDPを追加した。この結果SDPを構成するMitマーカーの総数は400以上に達し、マーカー間の平均距離は約4.0cMとなった。SMXARI系統群に糖負荷試験を行い耐糖能を調査した。両親系統(SM/J,A/J)の耐糖能は正常であるにもかかわらず、SMXA RI系統群のなかには耐糖能障害を示す系統が存在していた。この表現型データと上記のSDPを用いてQTL(quantitative trait loci)解析を行ったところ、マウスChr.2,18にはA/J系統由来の、Chr.10にはSM/J系統由来の耐糖能障害に関与する遺伝子の存在が推定された。現状では高密度にSDPが作成されている領域と約20cMにわたってSDPが作成できていない領域が混在している。そこで今後は、SDPが充実していない領域をターゲットとしてSDPの更なる質的向上を図る必要がある。両親系統(SM/J,A/J)の耐糖能は正常であるにもかかわらず、SMXARI系統群のなかに耐糖能障害や高インスリン血症を示す系統が存在することは、正常な系統にも糖代謝異常に関与する遺伝子が存在し、それらの組み合わせによっては糖代謝異常を発症することを示している。この事実はヒトのNIDDMなど多因子疾患の遺伝的要因を解析する上で極めて興味深く、それら疾患の遺伝的解析にRI系統は有用であると考えられる。
青年期の発達障害児地域育児支援：乳幼児期からのピア・グループサポートの追跡研究

乳幼児期から青年期に至るまでの発達障害児の地域育児支援(保護者によるピア・グループサポート)実践への追跡的参加と対話記録の分析を通して、特に青年期の子育ての課題と支援のニーズを明らかにし、地域生活に根ざす持続的ピア・グループサポートが子どもと保護者にどう貢献するかを検討する。共生社会の実現という観点から、発達障害児の子育てにおける保護者主体の持続的な相互支援の意義と支援者(ピア・スタッフと専門家スタッフ)の役割を考察する。
脊椎動物におけるnebulinスーパーファミリーの生理機能の進化

本研究は多様化したnebulinスーパーファミリーの脊椎動物における生理的な役割を明らかにするために、脊椎動物で出現したlasp-1・lasp-2・nebuletteの生化学的な性質を明らかにしつつ、細胞・組織・個体における機能を筋肉と神経を中心に調べた。その結果、鳥類や哺乳類で報告されていたlasp-1とlasp.2の組織分布の違いが魚類でも確認され、初期胚における発現時期も異なることも示された、また、哺乳類と鳥類ではlasp-1とlasp-2の神経細胞内での局在に共通点と相違点があることが明らかとなった。特にlasp-2のdeletionconstructやsiRNAを用いた実験から、lasp-2が神経細胞の形態や運動を制御していることが示された。さらに、哺乳類と鳥類のグリア細胞の膜輸送・細胞接着・細胞突起の形成にlasp-2が関与していることも明らかとなった。GFP融合タンパク質の導入や免疫染色からlasp-2の機能は哺乳類と鳥類では共通であることも推定された。本研究は多様化したnebulinスーパーファミリーの脊椎動物における生理的な役割を明らかにすることを目的として、22年度は(A.laspファミリーの組織発現と組織内局在)(B.laspファミリーの生化学的な性質)について解析を進めた。その結果、ゼブラフィッシュ胚におけるlasp-1は胚全体に母性mRNAとして分布し、epiboly期にhatching glandになる部位に発現が見られ、体節形成期には脳と目で発現が強いことが観察された。Lasp-2の母性mRNAは検出されず、原腸陥入期に神経組織に発現が見られ、体節形成期には脳と目で発現が見られるなど、違いのあることが明らかになった。ニワトリ培養神経細胞の免疫染色では両者ともフィロポディアではアクチン束に沿ったドット状の局在を示したが、T-zoneにおける局在に差が見られる可能性が示された。また、グリア細胞における局在についても解析を進めている。また、両者ともアクチン結合の親和性に差は見られず、トロポミオシンとの競合も無いことが共沈実験で確認されたことから、アクチン以外の結合タンパク質の違いについて解析中である。並行して様々な無脊椎動物lasp遺伝子と脊椎動物のlasp-1遺伝子、lasp-2/nebulette遺伝子のexon-intron構造に保存性が見られることも明らかにした(2010年12月学会発表)本研究は多様化したnebulinスーパーファミリーの脊椎動物における生理的な役割を明らかにすることを目的として、23年度は(C.laspファミリーの細胞における機能)の解析を進めた。その結果、ニワトリ培養神経細胞にニワトリlasp-2に対するsiRNAやニワトリlasp-2のdeletion constructを導入すると成長円錐の形態や運動に異常が見られることが画像解析から明らかとなった。さらに、ニワトリ大脳由来のグリア細胞であるアストロサイトでは細胞と基質の接着部でlasp-2とzyxinが共局在することや、lasp-2の一部は細胞内の膜輸送と思われる構造に存在しアクチンフィラメントと思われる構造の上を運動していることが示された(2011年細胞生物学会・2011年動物学会で申請者および申請者が指導する学生が発表)。さらにヒトlasp-1・lasp-2に対する抗体とGFP融合タンパク質ベクターを作成し、ラット海馬の神経細胞やラットグリア細胞でもニワトリと同様の局在を示すことを確認した。本研究は多様化したnebulinスーパーファミリーの脊椎動物における生理的な役割を明らかにすることを目的として、24年度は引き続き(C.laspファミリーの細胞における機能)を進めた。23年度までにニワトリ感覚神経細胞におけるlasp-2の発現抑制や過剰発現による成長円錐の形態や軸索の伸長速度の変化が起きることが確認されていたが、24年度はより詳細な画像解析をすることで、成長円錐のフィロポディアにおけるアクチン系細胞骨格の変化が運動性の変化に影響していることが推測された。また、ニワトリ感覚神経細胞におけるlasp-1はlasp-2に類似した成長円錐上のフィロポディア上のドット状の構造に観察された他、成長円錐の辺縁部にlasp-2より強く集積する傾向が見られ、両者の機能に共通点と相違点があることが推測された。23年度に作成したヒトlasp-2に対する抗体による免疫染色やGFP-ヒトlasp-2の導入により、ラット海馬由来の神経細胞の成長円錐でもlasp-2がニワトリ感覚

神経細胞と同様の局在を示すことが確認された。さらに、神経ネットワークの形成に重要な役割を果たすスパインにもlasp-2が局在することが示された。ニワトリ大脳由来およびラット由来のアストロサイトの免疫染色およびGFP-lasp-2の導入によりlasp-2は細胞基質間接着、膜輸送、および神経細胞や血管との接着に関与するperipheral astrocyte processの形成、と複数の機能を持つことが示唆された。また、これらの機能にはアクチン結合ドメインが必須であることがdeletion constructで確認された(2012年細胞生物学会・2012年動物学会で申請者および申請者が指導する学生が発表)。データは順調に出ており、学会発表も続けているが、論文投稿に至っていない。24年度が最終年度であるため、記入しない。神経細胞における機能解析は当初の予定通り進め、計画には記述していなかったグリア細胞における解析も進める。近年の研究から神経細胞の機能の制御にはグリア細胞が大きな役割と果たしており、グリア細胞が神経細胞に接触して制御するためにはグリア細胞の細胞骨格が機能していると考えられる。グリア細胞が進化の段階でどのような機能を担っていくのか、その過程にnebulin superfamilyの多様性がどのように関わっているのか明らかにしたい。
iPS細胞由来網膜色素上皮細胞の移植用デバイスの開発

加齢黄斑変性に対してヒトiPS細胞由来網膜色素上皮細胞シートの移植が臨床応用された。一方で病変部が約3.0mm径であることから、3.0×3.0mmの移植片を移植することが望ましいが、現在の手術器具では1.3×3.0mmの移植片の移植が限界である。そこで、現在の強膜創の長さ(1.5mm)から3.0×3.0mmの移植片を移植可能な手術器具の開発を行った。作製した移植器具は、カニューラの吸引口を眼球内への挿入方向から見て横側に設置し、また内部を渦巻き状に加工することで3.0×3.0mmの移植片を収納可能な設計にした。これにより、強膜創よりも大きな細胞シートを移植することが可能となった。iPS細胞樹立の報告以降、再生医療の分野においてiPS細胞を用いた基礎研究と臨床応用への動きが様々な分野で加速している。眼科分野においては、2014年度にもヒトiPS細胞から作製した網膜色素上皮細胞(Retinal Pigment Epithelium:RPE)を細胞シートとして移植する臨床試験が開始される予定である。ヒトiPS細胞由来RPEシート移植の際に行われる硝子体手術は、眼球内に手術器具を挿入するための創口を作製するが、1970年代の開発された当初は術中・術後合併症の頻度が非常に高く、一旦合併症を引き起こすと失明に至ることが多かったため、対象は一部の重症な疾患に限られていた。この合併症の頻度が高い理由の一つに手術器具の大きさがある。手術器具が大きくなることで創口が大きくなり、眼球を一定に保つことが困難となるため様々な合併症が引き起こされた。しかし手術器具の大きさ(口径)も年々小型化しており、開発当初は1.5mmあった口径は、80年代に入ると0.9mm、現在は0.5mmまでなっている。この手術器具の小型化に伴い手術の安全性が高まり、現在では個人医院で日帰り手術として行えるほど広く普及しており、創口の大きさの重要性を示している。一方で、臨床試験の対象疾患である加齢黄斑変性症は、病変部である黄斑部が約3mmの範囲であるため、病変部を覆う事が出来る3.0mm×3.0mmの細胞シートを移植することが理想である。しかし現在、我々が作製した臨床試験で用いられる予定の手術器具では、1.3×3.0mmの細胞シートの移植が限界であり、また手術手技の観点から複数の細胞シートを移植することは非常に困難である。そこで上記の点を克服するため、『小切開で3.0×3.0mmの細胞シートを移植可能な手術器具』を開発することが本研究の目的である。本研究の目的は、3.0×3.0mmのヒトiPS細胞由来網膜色素上皮細胞シートを小切開(1.5mm)の創口から眼球内に移植可能な手術器具を開発する事である。本研究の研究計画は、「ヒトiPS細胞由来網膜色素上皮細胞シートの作製」と「移植器具の開発」で構成されている。ヒトiPS細胞由来網膜色素上皮細胞シートの作製に関しては、神戸理化学研究所のiPS細胞由来網膜色素上皮シート作製方法に準じて作製し、網膜色素上皮特有の形態や網膜色素上皮特有遺伝子の発現や網膜色素上皮の機能(PEDFやVEGFの分泌)を確認することで十分な機能を持つ細胞シートを作製できていることを確認している。一方で、移植器具の開発に関しては、カニューラの吸引口を眼球内への挿入方向からみて横側に設置し、また内部を渦巻き状に加工する事で、3.0×3.0mmの細胞シートを収納可能なカニューラを計画した。これまでにリアクトシステム社の協力の下、渦巻き状の金属の作製、側面への金属と注射針の取り付けに成功し、細胞シートの吸引と排出が可能であることまで確認している。しかし細胞シートを、開発した移植器具内に収納し模擬眼への挿入を行うと、細胞シートが移植器具に接着し排出不能となる。これは、移植器具の内腔が1mm径であるため金属の接合部分の接着不全があり、挿入の際に培地が漏れてることが原因である。このため臨床応用を目標とした場合に、十分な器具が開発が作製できたとは言い難い状況である。細胞シートを移植器具内に収納し模擬眼への挿入を行うと、細胞シートが移植器具に接着し排出不能となる。これは、移植器具の内腔が1mm径であるため金属の接合部分の接着不全があり、挿入の際に培地が漏れてることが原因であると考えている。このため、臨床応用を目標とした場合に十分な器具が開発が作製できたとは言い難い状況であるため、現在共同研究の企業と接着不全を改善するべく作製方法を模索している。加齢黄斑変性に対するヒトiPS細胞由来網膜色素上皮細胞シートの移植が臨床応用され、その後の経過が良好であったことから、今後さらに細胞シートの移植が施行されることが予想される。一方で、加齢黄斑変性は病変部が約3.0mm径であることから、3.0×3.0mmの細胞シートを移植することが望ましいが、現在の手術器具では1.3×3.0mmの細胞シートの移植が限界である。これは、現在の手術器具が手術器具の幅と同じ長さの強膜創を必要とするからである。強膜創が大きくなると、手術中の眼球内圧を一定に保つことが困難となり、様々な合併症が引き起こされる。

そこで、現在の強膜創の長さ(1.5mm)から3.0×3.0mmの細胞シートを移植可能な手術器具の開発を行った。作製した移植器具は、カニューラの吸引口を眼球内への挿入方向から見て横側に設置し、また内部を渦巻き状に加工することで3.0×3.0mmの細胞シートを収納可能な設計にした。カニューラの作製方法は、1.5mmの円形金属を2つ作製し、1つの円形金属の中央部分に0.5mmの孔を作製後、孔に22Gの注射針を取り付けた。次に渦巻き状の円柱の金属を作製し、その両側面に先ほどの円形金属を取り付けた。最後に、注射針に1mmの医療用シリンジを装着させることで、1mmシリンジを用いてカニューラの側面に作製した吸引・排出口から液体や細胞シートを吸引・排出することができた。この作製した移植器具により、強膜創よりも大きな細胞シートを移植することが可能となった。加齢黄斑変性に対してヒトiPS細胞由来網膜色素上皮細胞シートの移植が臨床応用された。一方で病変部が約3.0mm径であることから、3.0×3.0mmの移植片を移植することが望ましいが、現在の手術器具では1.3×3.0mmの移植片の移植が限界である。そこで、現在の強膜創の長さ(1.5mm)から3.0×3.0mmの移植片を移植可能な手術器具の開発を行った。作製した移植器具は、カニューラの吸引口を眼球内への挿入方向から見て横側に設置し、また内部を渦巻き状に加工することで3.0×3.0mmの移植片を収納可能な設計にした。これにより、強膜創よりも大きな細胞シートを移植することが可能となった。平成26年度の研究計画は、『移植器具の開発』と『ヒトiPS-RPE細胞シートの作製』で構成されいる。移植器具の開発に関しては、リアクトシステム社の協力のもと、当初計画したカニューラを作製し、作製したカニューラが液体の吸引と排出が可能であることを確認できているため、おおむね順調に進展していると判断した。細胞シートの作製に関しては、iPS-RPE細胞シートの作製まで成功し、作製したiPS-RPEが生体のRPEと同等の機能を有することを確認できているため、おおむね順調に進展していると判断した。移植器具の金属の接着不全を改善するべく作製方法を共同研究の企業と模索している。眼科分野平成27年度の研究計画は、『移植器具の開発』で構成されいる。研究項目として、iPSC-RPEシートの移植動作:培養液中でiPSC-RPEシートを吸引・排出し、円滑な移植動作が可能か確認する。iPSC-RPEシートへの負荷:培養液中で吸引・排出した後、iPSC-RPEシートの生細胞率と培養皿への接着能を確認する。iPSC-RPEシートのウサギ網膜下移植:移植中と直後の移植片の評価(1.損傷の有無、2.表側・裏側、3.移植位置)、合併症の有無、組織学的評価を行う。平成25年度の研究計画は、『移植器具の開発』と『ヒトiPS細胞由来RPEシートの作製』で構成されている。『移植器具の開発』は、リアクトシステム社の協力の下、当初計画したカニューラを作製することに成功している。細胞シートを移植器具内に収納し模擬眼への挿入を行うと、細胞シートが移植器具に接着し排出不能となる。これは、移植器具の内腔が1mm径であるため金属の接合部分の接着不全があり、挿入の際に培地が漏れてることが原因であると考えている。このため、臨床応用を目標とした場合に十分な器具が開発が作製できたとは言い難い状況であるため、現在共同研究の企業と接着不全を改善するべく作製方法を模索している。
メソアメリカに於ける古代都市の発展に関する研究

本研究の目的は、ロス・ナランホス遺跡考古学調査を中心に、メキシコ合衆国チアパス州からグァテマラ共和国、エル・サルバドル共和国にかけての太平洋岸とその周辺地域に於いて、メソアメリカの古代都市への発展過程を解明することである。ロス・ナランホス遺跡では、2,3,6号建造物の発掘調査を行い、当該遺跡での都市への発展過程を研究した。同時に、地形測量も実施した。チャルチュアパ遺跡タスマル地区では発掘修復された建造物を測量すると共に地形測量を実施した。この地区最大の建造物であるB1-1建造物や球戯場(B1-3,4)の発掘調査から都市としての発展過程を調査研究した。また、タスマル地区を含むチャルチュアパ遺跡全体の都市の発展を今までの発掘資料から再検討した。コパン遺跡においては、都市としての発展を示す資料を収集した。トナラ地域で行った考古学調査からメソアメリカ古代都市への発展過程に関する考古学資料を収集した。また、中米地域で年代決定のための鍵層となるイロパンゴ火山灰の年代を測定するために、火山灰の分布を調査し、火山灰に埋もれた埋没林で試料を収集した。ロス・ナランホス遺跡では建造物の時期的変遷から古代都市への発展を明らかにした。タスマル遺跡では、建築構造から古代都市の発展を明らかにした。コパン遺跡では古典期における都市の発展を明らかにした。トナラ地区遺跡群では、先古典期から後古典期に至る都市への発展過程を明らかにした。各遺跡の古代都市への発展を示すことが出来たが、メソアメリカ古代都市への発展に共通する規則性を解明することは出来なかった。今後の課題として、メソアメリカの古代都市を時間的空間的に様々な事例を比較研究し、メソアメリカ文明における古代都市の特質を明らかにする必要がある。また、都市を経済的な面から支えた集落群と都市の関係も明らかにし、メソアメリカ文明の実態を解明することも今後の課題となる。メソアメリカにおける都市発展過程に関する研究調査を行うために、測量調査を行った。この測量調査は、ホンジュラス、ロス・ナランホ遺跡とエル・サルバドル、タスマル遺跡において、都市遺跡内における主要建造物群の位置を把握するために行った。また、基本的な年代観を得るために、試掘調査を行った。ロス・ナランホス遺跡においては、2007年までの調査許可とは別に、ホンジュラス人類学歴史学研究所と2005年調査の契約を交わした。2004年7-10月に測量を行った。また、2005年3月末に試掘を行う。一方、タスマル遺跡では、国立芸術文化審議会と今後3年間の調査研究に対する許可を得、契約書に署名した。2004年7-10月には、チャルチュアパ遺跡タスマル地区の建造物群の測量調査を行った。その結果、中心となるピラミッドの下層に、東西南北に、列柱を持つ建造物がある可能性があることが判明した。また、そのピラミッドの北西にメソアメリカ文化において重要な意味を持つ球戯場がある可能性も明らかに出来た。2005年2-3月の調査においては、このピラミッドが載る基壇の中にあると推定される東の基壇を確認するための調査を行った。また、球戯場(平行する2基の長方形の建造物からなる)と推定される建造物では、建造物の存在を確認する試掘を行った。今年度の主な研究業績としては、タスマル遺跡において、建造物の変遷が床の重なりによって、数時期に渡ってあった事が明らかになった。

また、球戯場では平行してあったと考えられる建造物の一部を確認した。これらの調査から、都市遺跡内における建造物群の建築過程から、メソアメリカにおける都市発展史が調査できることが確認できた。ロス・ナランホス遺跡では、試掘調査を開始し、今後の本格的発掘調査の足がかりを得たメソアメリカにおける都市発展過程に関する発掘を実施した。ホンジュラス、ロス・ナランホ遺跡とエル・サルバドル、タスマル遺跡において、都市遺跡内における主要建造物群のメソアメリカ史における位置を把握するために行った。ロス・ナランホス遺跡においては、2005年の調査許可とは別に、ホンジュラス人類学歴史学研究所と2006年調査の契約を交わした。2005年8,9月と2006年2,3月に考古学調査を行った。発掘では最も古いと考えられる6号建造物を調査し、編年的研究を行うための基礎的な遺物を得る事が出来た。また、2,3号建造物では建造物の一部である石壁を検出することが出来た。また、建造物と関連して、都市の発展過程を探るための手がかりとなる遺物を得ることが出来た。一方、タスマル遺跡では、発掘によって、仮説の検証を行った。測量調査による仮説では、中心となるピラミッドの下層に、東西南北に、列柱を持つ建造物がある可能性が考えられる。現在、みられる姿では北と西に建造物があるが、発掘では東と南に試掘坑を入れた。その結果、仮説を実証するまでには至らなかったが、東と南の建造物の存在の可能性は窺えた。また、そのピラミッドの北西にある球戯場でも発掘を行い、タスマル遺跡における都市発展過程を調査した。今年度の主な研究業績としては、タスマル遺跡において、建造物の変遷が床の重なりと建造物の建築構造によって、数時期あった事が明らかになった。ロス・ナランホス遺跡では、建造物の建築構造と遺物から、都市発展に関する基礎的な資料が得ることが出来た。これらの調査から、都市遺跡内における建造物群の時期的変遷から、メソアメリカにおける都市発展史に関するデータが蓄積できた。メソアメリカにおける都市発展過程に関する考古学調査を実施した。ホンジュラス、ロス・ナランホ遺跡とエル・サルバドル、タスマル遺跡において、都市遺跡内における主要建造物群のメソアメリカ建築史における位置を把握するために行った。ロス・ナランホス遺跡においては、ホンジュラス人類学歴史学研究所と2006年調査の契約を交わした。2006年8,9月に発掘調査を行った。発掘では2,3号建造物の間にある窪地で、主要グループの建設活動の開始時期を確認することが出来た。試掘坑を数箇所に設けて、主要グループの居住時期の最も早い時期を調査した。測量調査による仮説では、中心となるピラミッドの下層に、東西南北に、列柱を持っ建造物がある可能性が考えられる。発掘では北側に試掘坑を入れた。その結果、北側での建造物が複雑な発展段階を経ていた可能性が窺えた。西側では、仮説と関連する主神殿にぴたると考えられる階段部分や西側建造物の古い時期の建造物が検出された。
心房細動における左房壁細動の定量評価:二次元スペックルトラッキング法による解析

心房細動(AF)にみられる左房壁の振動を定量化することを目的とし、48名のAF症例に経胸壁エコーから左房壁のlongitudinalストレインを解析した。左房壁振動のストレインは全心周期を通じて波打つような曲線として認められ、最大振動ストレインを視覚的に求めた。最大振動ストレインの平均は2. 8±1. 3%(range 0. 9-7. 1%)であった。平均最大振動ストレインは左心耳血流速度波形と独立して関連した。結論:二次元スペックルトラッキング法はAF症例の左房壁振動の定量評価に有用であることが示唆された。目的1:心房細動における左房壁細動ストレイン(STR)と左心耳内血流速度波形との比較:慢性心房細動13例を対象にして、GE社製Vivid 7を用いて経胸壁心エコーにより心尖部四腔断面を描出し左房壁運動の動画を記録した。解析装置は同社製EchoPac PCを用いた。左房壁全体にスペックルトラッキング法のROIをおき、左房円周方向のLongitudinal STRを求めた。左房壁細動は100-200msecの時間間隔でSTRの低下・増加を不規則に繰り返す波打つようなSTR波形を呈した。この時間間隔は左心耳内血流速度波形の周期に類似していることから左房壁の細動を反映していると判断した。左房壁細動STRの中で最大値を示すものをその症例の最大細動STRとした。経食道心エコー法を行い、左心耳内血流速度を計測した。最大細動STRの値は0.6-6.3%の範囲であり、左心耳血流速度の値は7-70cm/secの値であった。両者はY=0.63X+0.76、r=0.770、p<0.01の正相関を示した。目的2:左心房壁細動STRの心拍毎の変動の評価:慢性心房細動の9例を対象にして、目的1と同様の方法で心尖部4腔断面の動画像を連続10心拍記録し、1心拍の中の最大細動STRを解析した。最大細動STRの10心拍の平均値を基準値とし、これに対する各心拍の絶対値の誤差を求め、全症例で平均した(n=90)。10心拍の平均は3.0±1.8%(0-7.9%)であり、各心拍の誤差の平均は0.0±1.0%であった。以上より細動STR値は心拍ごとに最大で2%変動する可能性が示唆された。結論:左房壁最大細動STRは、左心耳血流速度を反映する可能性が高いが、心拍間変動も若干ある。解析にあたってはなるべく多くの断面から最大細動STRを求めて平均値を求める必要がある。本研究の課題における左房壁細動は左房壁のoscillationと記載されているので、今後は振動ということばに変更したい。本年度の交付申請書に沿って左房の振動ストレインと収縮末期最大ストレインの2つの指標を解析したが、2つの指標の意義は全く異なるので、それぞれの指標単独でデータまとめたい。以下が今年度の研究結果であり、2011年5月の日本超音波医学会と同年6月のAmerican Society of Echocardiography Scientific Sessionsで発表予定である。【目的】二次元スペックルトラッキング法により心房細動(AF)にみられる左房壁の振動を定量化し、それに関連する因子を見出すことを目的とした。【方法】対象は48例のAF症例であった。心エコー検査と経食道エコー検査を行った。心尖部四腔及び二腔断層エコーの動画像において描出される左房壁にトラッキングのROIをおき、Longitudinalストレインを解析した。左房の6セグメントから収縮末期をピークとするストレイン曲線が得られた。左房壁振動のストレインは全心周期を通じて約100-200 msecの間隔で波打つような曲線として認められ、1心周期で最大の振動ストレインを計測した。左心耳血流速度波形、左房容量、左室拡張末期径、左室駆出率、拡張早期の左室流入血流速度(E)とその減速時間、拡張早期僧帽弁輪運動速度(E')及びE/E'を求め、最大振動ストレインとの相関を検討した。全ての指標は3-10心拍の平均値で求めた。【結果】平均最大振動ストレインの平均は2.8±1.3%(range 0.9-7.1%)であった。

平均最大振動ストレインは左心耳血流速度波形(r=0.61,p<0.0001)との間に有意な正相関を、最小左房容量(r=-0.52,p<0.001)、左室拡張末期径(r=-0.31,p<0.05)及びE/E'(r=-0.31,p<0.05)との間に有意な負相関を認めた。ステップワイズ重回帰分析により左心耳血流速度波形が平均最大振動ストレインと関連する独立した因子として採択された。【結論】二次元スペックルトラッキング法はAF症例の左房壁振動の定量評価に有用であり、平均最大振動ストレインは左心耳血流速度波形と関連することが示唆された。平成21年度と22年度において、二次元スペックルトラッキング法により心房細動における左房壁細動を平均最大振動ストレインとして計測が可能であるデータを得た。そして左心房平均最大振動ストレインは経食道心エコー法により得られる左心耳血流速度波形(r=0.61,p<0.0001)との間に有意な正相関を、最小左房容量(r=-0.52,p<0.001)、左室拡張末期径(r=-0.31,p<0.05)及び左心房圧の非観血的な指標であるE/E'(r=-0.31,p<0.05)との間に有意な負相関が得られ、その中で左心耳血流速度波形と独立して関連することを見いだした。平成23年度は左心房の平均最大振動ストレインの計測に再現性があることを示すためにIntraobserver variability studyとIntrerobserver variability studyを行った。その結果、その計測法には検者間の誤差は小さく、再現性を持って得られるデータが得られた。そして、これらの研究成果の発表を下記に示すように3つの日本国内、アメリカ、ヨーロッパの超音波医学に関する学会で発表し、討論する機会を得た。研究者の意見は概ね好意的であり、興味を示す研究者が多数存在した。その後、論文にまとめるべく、最新の左心房のスペックルトラッキングに関する論文を調べ、類似の研究業績がないことを確認した。現在、英語論文として執筆中であり、なるべく早期に仕上げて、投稿したいと考えている。
都市広場の類型化に関する形態学的研究

当研究課題は、平成2年度から4年度までの3年間の継続研究として設定されたものであるが、研究継続の期間としては第一期として10年間を考えている。そして、第一期の中での3年間は、研究の基礎づくりと、ヨーロッパを中心とした海外都市広場調査の第1ステップの開始と考えていた。研究の基礎づくりとしては、パソコンによる形態の把握手法の開発をはじめとする形態学的研究手法の設定を第一として、それに多変量解析の手法の適用を加えて、都市広場を対象として研究するための手法開発を行うことを課題としてきて、この3年間で、初期の目的は達成できたと考えている。海外都市広場調査の遂行として、この3年間で3回の海外調査を企画し、実施してきた。その意味でヨーロッパを中心とする海外調査の第1ステップを踏めたと評価できるであろう。海外都市広場調査の第1回には東欧4ヵ国とイタリア、ドイツで行い、第2回には、東欧3ヵ国とトルコ、ギリシャ、イタリアで行い、第3回にはトルコとギリシャで行った。東欧を中心にその延長でバルカンのトルコギリシャをまた、アジア側のトルコおよびイタリアと、いずれも東欧からの延長で3回の調査が行われ、一つの連続した調査地域として第1ステップ調査の意味付けがなされている。当研究の成果を箇条書きにすると以下のようになる。1。東欧を中心とする都市広場の類型を把握できた2。広場の形態に対して、コンピューターの自動図化手法の適用を行った。3。広場の形態を判断するカテゴリーを設定して数量化III類を適用した。4。多変量解析の結果、広場の主要概念を抽出し、パターン化が出来た。以上の結果から次のテーマとして、「都市のセンター概念に関する形態学的研究」を導入することが出来た。1。3。4。当研究課題は、平成2年度に3年間の継続研究として開始されたが、今年度の課題は、研究の基礎づくりである、形態的把握の方法の基礎となるパソコンの図形処理システムのハ-ドとソフトを用意することが第1の課題であった。その意味では、第1の課題は、前半期に解消された。つまり。図形処理システムとしてのシステム一式は用意できたし。イメ-ジスキャナからの読み取りを出発点に、道路空間から、自動的に広場に対応する膨らみの空間を抜き出してゆくシステムを作ることが出来た。今期の第2の課題は、夏期に海外調査を遂行することであった。これも予定通り9月に25日間の東欧都市広場調査を行うことが出来た。7カ国55都市の調査資料を採集し、現在そのまとめをしている段階である。55都市の都市広場図面を資料として作成し、それを囲む建物のフアサ-ドの図面化を併せて行い、図面のなかなか手に入らない東欧についての資料整理を基礎的研究として行った。現在その資料化を行った図面をパソコンに入力して、自動図化による広場抽出を行っている。東欧の特色ある広場形態の抽出が出来ることを目標としている。また、平成3年度に第2回の都市広場調査を考えており、第1回の調査の反省を踏まえて、企画をする予定である。研究成果のまとめとして以下の項目を挙げることが出来る。1.形態的の把握の基本となる読み取り装置の用意と、図形の自動処理システムの作り上げが出来た。2.東欧都市広場の図面採集を7カ国55都市について行うことが出来た。3.東欧関係の文献資料を現地で購入し用意することが出来た。4.図形の自動処理に東欧関係の広場図面を適用させ、第1段階の分析を行うことが出来た。当研究課題は、平成2年度に3年間の継続研究として開始されたが、今年度の課題は、研究の展開を図る段階である。パソコンの図形処理システム作成の上に立って、その応用手法を検討する段階であった。その意味では、図形処理のシステムを基礎に、多くの対象を得て、それに適用を図ることができた。

多くの対象に適用をすると同時にその結果をどの様に表現してゆくかを検討することが出来た。今期の第2の課題は、夏期に海外調査を遂行することであった。これも予定通り8月に28日間の東欧都市広場調査を行うことが出来た。これは、平成2年度で出来なかった国を中心として、東欧を全体的に概観できるように行程を組んだ。また、東欧から、トルコ、ギリシャ、イタリアを調査地に加え、多彩な調査を行うことが出来た。7カ国35都市の調査資料を採集し、現在そのまとめをしている段階である。35都市の74に及ぶ都市広場図面を資料として作成し、それを囲む建物のファサ-ドの図面化を併せて行い、図面のなかなか手に入らない東欧についての資料整理を基礎的研究として行った。また、平成4年度に第3回の都市広場調査を考えており、第1,2回の調査の反省を踏まえて、企画をする予定である。研究成果のまとめとして以下の項目を挙げることが出来る。1.形態的の把握のシステムの表現手法を作り上げた。2.東欧都市広場の図面採集を7カ国35都市74都市広場調査について行うことが出来た。3.東欧関係の文献資料を現地で購入し用意することが出来た。4.広場の自動図化から発展して、都市道路網全体の分析に展開を図ることが出来た。当研究課題は、平成2年度に3年間の継続研究として開始されたが、今年度の課題は、研究の展開充実を図る段階である。パソコンの図形処理システム作成と併せて、その応用手法として適用を図ってゆく段階であった。その意味では、図形処理のシステムを基礎に、多くの対象を得て、それに適用を図ることができた。とくに今年度は、多変量解析手法を都市広場の類型化に適用した点が特色と言える今期の第2の課題は、夏期に海外調査を遂行することであった。これも予定通り8月に28日間のトルコ・ギリシャの都市広場調査を行うことが出来た。これは、平成3年度で訪れたイスタンブールを起点としてアジア側トルコとギリシャの島についての行程を組んだ。2回目の調査に比べて調査国は2カ国と少ないが、一つ一つの都市に於ける調査を充実して行った結果である。結果として21都市の調査資料を採集し、現在そのまとめをしている段階である。今回の調査の課題は、トルコのイスラム都市空間の特徴を把握することと、ギリシャの島の空間の特色を併せて把握してゆくことであった。1.多変量解析(数量化III類)の適用によって、都市広場の類型化を行った2.ギリシャ・トルコの都市広場の図面採集を2カ国21都市25都市広場調査について行うことが出来た。3.トルコ・ギリシャ関係の文献資料を現地で購入し用意することが出来た。
Ca依存性ミトコンドリア膜アスパラギン酸・グルタミン酸輸送体の神経ネットワーク形成における役割

平成14年度に引き続いて、aralar-KOマウスについての以下の解析を行い、それぞれの結果を得た。1)aralar-KOマウスは胎児期の診断では常染色体劣性の遺伝形式にしたがった個体数が検出されるが、生後死亡し、比率が減少することが判明した。死亡の時期は脳でのaralar遺伝子発現の経過と一致する。2)筋力および神経の統合機能を、それぞれwire hanging testとbartestで検討した。対照の野生型マウスが成長にしたがって急速に能力を獲得し、テスト成績が上昇するのに対して、nullマウスでは生後10日前後からの筋力および神経統合機能の成長が観察されず、低い値に留まった。3)組織学的検索を行い、脳神経系で神経細胞の数や配置には異常を認めなかったが、ミエリン染色において、nullマウスにはミエリン線維の著しい減少が認められた。4)脳、および坐骨神経から脂質を抽出し、薄層クロマトグラフィーでの解析を行った。脳からの脂質分析ではcholesterolやphosphatidylcholineなどのスポットには差異がないが、galatocerebrosideのスポットが著しい減少を示した。しかし坐骨神経からの脂質分析では差異を示すスポットは存在しなかった。5)脂質成分の定量を行い、定量的にgalactocerebroside含量の低下を確認した。6)脳内アミノ酸の定量を行っているaspartateの低下にとどまらず、serine、glutamateなど多くのアミノ酸の低下を見出している。7)Myelin中の脂質合成に重要な役割を演ずると考えられているN-acetylaspartateの含量が低下していることを見出した。11月に研究を開始してから、これまでに以下の解析を行い、それぞれの結果を得た。1)挿入変異法により作成したSlc25a12遺伝子ノックアウト(aralar-KO)マウスの遺伝子型を検出するために、PCRを用いたDNA診断法を確立した。Preliminaryなデータでは、null(-/-)マウスの生存率は低く、その多くは、出生前に死亡するか出生直後に死亡するものと考えられる。2)Northern blotおよびWestern blot analysisを行った結果、aralar mRNAと蛋白の発現は、nullマウスでは、本来存在すべきbrain, skeletal muscle, heartならびにkidneyなどすべての組織で検出されず、heterozygoteではwild typeの約50%に低下していた。4)3週のnullマウスでは血漿中のlactate/pyruvate比が上昇していた。5)Nullマウスは34週で死亡するので、AGCの機能から効果が期待される物質の投与を行った。これまでにasparagine, glucose, skim milkを試用したが、いずれも治療としての効果がなかった。6)Nullマウスの対光反射を検討したが、光に対し、瞳孔は縮小しなかった。以上、aralar-KOマウスで見られたいくつかの異常を記載し、今後の詳細な研究の準備を行っている。