hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ブドウさび病菌の系統分類と地理的分布

日本には2種のブドウさび病菌が分布し,ヤマブドウで2種が重複感染していた.分子系統解析の結果は熱帯アジアのブドウさび病菌が新分類群であることと地理的分布の異なる3菌群で構成されていることを示した.アメリカの2種のブドウさび病菌はメキシコ湾岸に沿った狭い地域を境に分布を違えていた.分子系統解析の結果,これら2種は近縁でツタ,アワブキおよびミヤマハハソに寄生するサビキンと同一のグループに含まれることが明らかとなった.いっぽう,東アジアおよび東南アジアのブドウさび病菌は近縁であるが,アメリカのブドウさび病菌とは系統的に遠く,東アジアに分布するツタさび病菌と直近の祖先を共有することを推定できた.1.これまでの研究成果と本研究での形態学的特徴と宿主に基づく同定によって,日本でのブドウさび病菌には2種あることを再確認し,そのうち1種は日本列島全域に分布するが、もう1種は西日本および中部地域と東北地域の高冷地・山地に分布が偏る傾向があることを明らかにした.2.熱帯アジアに分布するブドウさび病菌については,タイにおいてブドウ属植物さび病の発生生態を調査するとともに,これまでに収集・保存されている標本の同定を行い,タイではブドウ栽培地帯全域に広く分布することを明らかにした.また,熱帯アジアに分布するブドウさび病菌は形態的に温帯アジアに分布する2種のブドウさび病菌に類似するが,リボソームRNA遺伝子(5.8S rDNAを含む1TS領域およびD1/D2領域)に基づいた分子系統解析の結果から別種である可能性が高いことが判明した.いっぽう,王立森林局植物標本館に保管されている標本を精査することにより,アンペロキッスス属植物が熱帯アジアに分布するブドウさび病菌の野生宿主植物である可能性を見いだすとともに,温帯アジアに分布するアワブキ属植物とは異なる種が異種寄生の宿主となる可能性も見いだした.さらにこの研究の過程で,アフリカに分布するアンペロキッスス属植物に寄生するフラグミディエラ属サビキンの新種を見いだした.3.アメリカに分布するブドウさび病菌については,現地調査と新たに収集した約40点の標本を加えた多数の標本を形態学的特徴と宿主に基づいて同定することによって,アメリカに分布するブドウ属植物さび病菌2種の分類学的関係と地理的分布を明らかにした.1.熱帯アジアに分布するブドウさび病菌については、これまでのタイ、マレーシア、インドネシア、パプアニューギニアおよびオーストラリアからの標本に加え、タイでの広域調査と多くの収集標本をもとに形態および分子系統を精査した。その結果、熱帯アジアに分布するブドウさび病菌は温帯アジアに分布する2種のブドウさび病菌とは異なる新種であることを確認した。2.アジア全域でのブドウさび病菌の生活環研究を行う過程で、中間宿主であると推定できるアワブキ属植物5種に、既知の5種のPhakopsora属サビキンとは形態的特徴の異なる3種のAecidium型生育相を持つサビキンがあることを確認した。これらはさび胞子形態の特徴から、いずれもPhakopsora属サビキンのさび胞子世代であると推定した。接種試験の結果、このうちの一種はアワブキ属植物上に同種寄生性生活環をもつ新種のPhakopsora属サビキンであることを確認した。3.アフリカに分布するCissus属植物上に見出した新種はKuehneola属サビキンであることが判明し、またCayratia属植物に寄生する別のKuehneola属サビキンがあること新たに明らかにした。4.北アメリカ南部から南アメリカ北部に分布するブドウさび病菌が2種であること確認し、ブドウ属ブドウ亜属植物に寄生するサビキン種はメキシコ湾岸からフロリダ半島およびメキシコ・ベネズエラ。コロンビアに分布し、ブドウ属マスカディニア亜属植物に寄生するサビキン種はメキシコ湾岸から北部、ノースカロライナ州までに分布することを明らかにした。5.接種試験の結果、マスカディニア亜属植物に寄生するサビキン種はブドウ亜属植物にも感染し胞子形成することを確認した。いっぽう、ブドウ亜属植物に寄生するサビキン種がマスカディニア亜属植物に感染することは確認できなかった。1.北アメリカ南部に分布するブドウさび病菌2種について接種試験を行った結果,自然状態でブドウ亜属植物に病原性を持つ菌は,同亜属植物だけに病原性を示すことが明らかになった.本菌は,日本で普通に見られる野生種であるヤマブドウには病原性を示さなかったが,日本に分布するさび病菌に高度抵抗性を示すサンカクヅルには病原性を示した.また,日本での重要栽培ブドウであるデラウエアと巨峰が本菌の感染によって罹病することが明らかとなった.一方,マスカディニア亜属植物に病原性を持つ菌は,同亜属だけではなくブドウ亜属植物にも病原性を示し,やはりデラウエアと巨峰がこのさび病菌に罹病することが明らかになった.これらの接種試験の結果は,アメリカに分布する両さび病菌が日本に侵入することによってブドウ栽培・加工関係の分野に経済的損害がもたらされることが示唆された.2.日本に分布する2種のブドウさび病菌の地理的分布の調査研究と自然発生したさび病菌を用いた接種試験の結果,野生のヤマブドウでは2種の異なるさび病菌が同一植物体上で同時に感染している事例があることが新たに確認された.

本研究ではすでにこの2種のブドウさび病菌は野生のブドウ属の複数種と栽培品種に病原性を持つことを明らかにしているが,本年度の研究成果は,これまで栽培条件下で栽培ブドウにさび病を引き起こすさび病菌は1種のみであるという一般的認識を改めなければならないことを示した.これらさび病菌2種の同時感染の頻度と重複感染の地理的分布はブドウさび病の効果的防除に重要であるために,今後,分子情報を基にしたバーコーディング等で、栽培ブドウさび病にこれら2種がどのように関与しているのかということと、重複感染がどのような地理的な広がりを持っているのかを明らかにする計画である.1.アメリカに分布するブドウさび病菌2種の分子系統的研究がほぼ完了し,アジアに分布するブドウさび病菌及び近縁のアワブキ類のさび病菌を含めたサビキン群の系統関係の推定が可能になった.2.アメリカに分布するブドウさび病菌2種は宿主特異性で識別できるとされていたが,宿主特異性では識別できない可能性が明らかになった.3.平成27年度のアメリカ調査で,マスカディニア・ブドウのさび病菌冬胞子サンプルを採集できたために,接種試験での生活環解明の可能性が高まった.4.日本に分布するブドウさび病菌2種の同一植物での同時感染は予想されたが,それが自然状態では現実のことであり,さらに栽培条件下でも起こり得ることが明らかになった.本研究はアジアとアメリカ地域に広く発生するブドウさび病に異なる数種のさび病菌が関与していることを明らかにし,それらの地理的分布と系統関係を推定することを目的とした.研究の結果,日本には系統的に近縁な2種のさび病菌が分布していることが明らかになった.熱帯アジアのさび病菌は新分類群であることと地理的分布の異なる3菌群で構成されていることが示された.アメリカには2種のブドウさび病菌が分布することを再確認し,それらがメキシコ湾岸に沿った狭い地域を境に分布を違えていることを明らかにした.分子系統解析の結果,これら2種は近縁でツタとアワブキ属植物のさび病菌と同一のグループに含まれることが明らかとなった.東アジアおよび東南アジアのブドウさび病菌は近縁であるが,アメリカのブドウさび病菌は系統的に遠く,東アジアに分布するツタさび病菌と直近の祖先を共有することを推定できた.もう一つの目的は,ブドウ科植物さび病菌の宿主特異性・生活環特性と地理的分布を明らかにし,さび病菌の種分化と地理的分布変遷を推定することにあった.本研究によって,温帯アジアに分布する2種は異種寄生性生活環をもつが,精子・さび胞子世代宿主であるアワブキ属植物の種が異なることが明らかになった.それに対して,熱帯アジアおよびアメリカに分布するサビキンはアワブキ属植物に感染せず,精子・さび胞子世代の宿主は不明であった.いっぽう,さび病の伝染に重要な夏胞子世代については,分布域の異なるさび病菌も栽培ブドウに感染し発症させた.分子系統の解析結果と合わせて考察すると,ブドウ科植物さび病菌群は,東アジアでアワブキ属植物に病原性を持つ祖先さび病菌から分化し,ブドウ科植物と異種寄生することを通じて種分化したものと推定した.アメリカの2種のブドウさび病菌は東アジアのツタさび病菌と直近の共通祖先を持つことが推定できたが,具体的過程は不明である.日本には2種のブドウさび病菌が分布し,ヤマブドウで2種が重複感染していた.分子系統解析の結果は熱帯アジアのブドウさび病菌が新分類群であることと地理的分布の異なる3菌群で構成されていることを示した.アメリカの2種のブドウさび病菌はメキシコ湾岸に沿った狭い地域を境に分布を違えていた.
脊髄後索電位を用いた低酸素胎動抑制メカニズムの解明に関する研究

胎動は胎児の健康状態を示す指標として臨床的に広く用いられており、動物実験でも低酸素症により減少することが報告されている。しかしながら、胎動が低酸素症により抑制されるメカニズムについては未だ明らかにされていない。成人では低酸素による末梢化学受容体からの求心性インパルスは呼吸運動を刺激するが、胎児ではその求心性インパルスが脳幹レベルで抑制されることが知られている。胎児の運動に関しても、脊髄レベルで求心性刺激に対する抑制性の機序が働いている可能性がある。脊髄後索電位は末梢神経の刺激により誘発され、脊髄後角に存在する介在ニュウロンの興奮を反映する陰性および陽性波からなる電位であり、従来脊髄レベルでの抑制メカニズムを解明するために用いられてきた。我々はウサギ新生仔を用いて後索電位を記録し、低酸素刺激が脊髄機能に及ぼす影響を検討するとともに、脊髄を切断し上部中枢神経系からの下行性の調節メカニズムについても検討した。ハセロン麻酔下で椎弓を切除した後に電極を脊髄表面に留置し、坐骨神経に刺激を加え、後策電位を記録した。脊髄未切断ウサギにおいては、低酸素により陰性波の遅延時間は延長したが、陰性波の振幅、陽性波の遅延時間・振幅は変化しなかった。脊髄切断ウサギでは、低酸素による陰性波の遅延時間に対する影響は認められなかったが、陰性波の振幅は減少する傾向が認められた。また、陽性波は遅延時間、振幅ともに低酸素負荷により減少した。ウサギ新生仔においては、陰性波、陽性波ともにその振幅は脊髄未切断では変化せず、脊髄切断により減少することから、上部中枢神経系からの下行性信号が脊髄機能を代償性に維持している可能性が示された。本年度は、ニュージーランドウサギの新生仔を用いて、未処置ウサギにおける脊髄後索電位の低酸素負荷による変化、さらに上位脊髄を切断したウサギにおける脊髄後索電位の低酸素負荷による変化について検討した。ハロセン麻酔下で椎弓を切除した後に電極を脊髄表面に留置し、レベル1(反応がでる刺激閾値)、レベル2(レベル1の1.5倍)、レベル3(レベル1の2倍)の強度の刺激を坐骨神経に加え、後索電位を記録した。軽度・中等度の抵酸素負荷を加えた条件下で同様の記録を行った。さらに、頸髄のレベルで脊髄を切断した後に同様の実験を行った。未処置ウサギにおいては、レベル2刺激による陰性波の遅延時間は中等度の低酸素負荷により有意に延長し、レベル3刺激でも延長する傾向が認められた。陰性波の振幅は軽度・中等度の低酸素負荷のいずれにおいても、変化が認められなかった。陽性波に関しては、遅延時間・振幅のいずれも、低酸素負荷による変化は認められなかった。脊髄切断ウサギにおいては、陰性波の遅延時間は低酸素負荷により変化が認められなかった。レベル1刺激による陰性波の振幅は軽度低酸素負荷により有意に小さくなり、レベル2,3刺激でも、陰性波の振幅は低酸素負荷により小さくなる傾向を認めた。陽性波の振幅は低酸素負荷により減少する傾向を認め、レベル2刺激では軽度低酸素負荷で、レベル3刺激では中等度低酸素負荷により有意な減少が認められた。レベル2刺激による陽性波の遅延時間は中等度低酸素負荷により有意に減少し、レベル3刺激でも減少する傾向が認められた。本年度は昨年度と同様に、ニュージーランドウサギの新生仔を用いて、未処置ウサギにおける脊髄後索電位の低酸素負荷による変化、さらに上位脊髄を切断したウサギにおける脊髄後索電位の低酸素負荷による変化について検討した。軽度・中等度の低酸素負荷を加えた条件下で同様の記録を行った。

さらに、頸髄のレベルで脊髄を切断した後に同様の実験を行った。未処置ウサギにおいては、レベル2刺激による陰性波の遅延時間は中等度の低酸素負荷により有意に延長し、レベル3刺激でも延長する傾向が認められた。陰性波の振幅は軽度・中等度の低酸素負荷のいずれにおいても、変化が認められなかった。陽性波に関しては、遅延時間・振幅のいずれも、低酸素負荷による変化は認められなかった。脊髄切断ウサギにおいては、陰性波の遅延時間は低酸素負荷により変化が認められなかった。レベル1刺激による陰性波の振幅は軽度低酸素負荷により有意に小さくなり、レベル2,3刺激でも、陰性波の振幅は低酸素負荷により小さくなる傾向を認めた。陽性波の振幅は低酸素負荷により減少する傾向を認め、レベル2刺激では軽度低酸素負荷で、レベル3刺激では中等度低酸素負荷により有意な減少が認められた。レベル2刺激による陽性波の遅延時間は中等度低酸素負荷により有意に減少し、レベル3刺激でも減少する傾向が認められた。胎児の運動は低酸素負荷により消失することが知られているが、その抑制メカニズムについては明らかにされていない。本研究は、脊髄後索電位を測定することにより、ウサギ新生仔における低酸素負荷時の脊髄機能を明らかにしようとするものである。ニュージーランドウサギ新生仔を用いて脊髄後索電位を測定し、低酸素負荷による変化を観察し、さらに上位脊髄の切断が脊髄後索電位に及ぼす影響について検討した。ハセロン麻酔下で椎弓を切除した後に電極を脊髄表面に留置し、レベル1(反応がでる刺激閾値)、レベル2(レベル1の1.5倍)、レベル3(レベル1の2倍)の強度の刺激を坐骨神経に加え、後策電位を記録した。軽度・中等度の低酸素負荷を加えた条件下で同様の記録を行った。さらに、頚髄のレベルで脊髄を切断した後に同様の実験を行った。陰性波の振幅、陽性波の遅延時間・振幅に関しては、変化が認められなかった。脊髄切断ウサギでは、低酸素による陰性波の遅延時間に対する影響は認められなかった。一方、陰性波の振幅は低酸素負荷により減少する傾向が認められた。また、陽性波の遅延時間はレベル2・3刺激において、低酸素負荷で有意に減少した。
ストレス性肥満を示すモデルマウスの性状

私達の作成/解析したNa,K-ATPaseα2サブユニット遺伝子欠損ヘテロマウスは、恐怖/不安に関連した行動に異常を示すと同時に生後3ヶ月以降に肥満を呈する。前年度までにヘテロマウスのメスは肥満になることが明確となったが、その原因として、脂肪細胞の分化や機能が変化したためではなく、神経系の異常によって肥満が起きている可能性が高いことを明らかにした。本年度はマウスの摂食量、基礎代謝を測定して、肥満の機序を明確にする実験及び観察を行った。(1)Na,K-ATPaseα2サブユニット遺伝子欠損マウスと野生型マウスの摂食量を比較した。12時間ずつの明暗サイクルに分けて、メスの摂食量を測定したところ、ヘテロマウスはこ野生型よりも、明期での摂食量が増加していた。体重に有意差が現れないオスにおいても、ヘテロマウスの摂食量は野生型よりも増加していた。(2)Na,K-ATPaseα2サブユニット遺伝子欠損ヘテロマウスと野生型との体温、酸素消費量、二酸化炭素産生量及び呼吸商を比較したところ、二酸化炭素消費量がヘテロマウスで増加していた他は、有意差が見られなかった。従って、基礎代謝量の変化によって肥満が生じたとは考えられなかった。(3)明期での摂食量を制御する摂食ペプチドの発現に差があるかどうかを検証するために、視床下部からmRNAを単離し、オレキシン、POMC、NPY、MCHのmRNA量をRT-PCRにて比較検討した。ヘテロマウスメスにおいて、オレキシンの量が低下していた他は、mRNAの発現量に差が見られなかった。これらの結果から、ヘテロマウスのメスは明期の摂食量が増加することによって肥満になることが明確となったが、その原因は現在のところ明確にできていない。昼夜のリズム制御の異常などがひとつの原因とも考えられるが、今後の検討が必要である。私達の作成/解析したNa, K-ATPaseα2サブユニット遺伝子欠損ヘテロマウスは、恐怖/不安に関連した行動に異常を示すと同時に生後3ヶ月以降に肥満を呈する。ストレスを感じた結果肥満になるのか、肥満そのものが別の原因であるのかを明確にする目的で、下記の実験及び観察を行った。(1)同腹のNa, K-ATPaseα2サブユニット遺伝子欠損マウスにつき、体重の増加を数カ月の間測定し、ヘテロマウスと野生型との違いを統計的に解析した。オスマウスでは、生後6-12ヶ月の間の体重増加がヘテロマウスで大きかったが野生型との差はわずかで有意差が見られなかった。これに対しメスマウスでは、生後6-12ヶ月の間の体重増加がヘテロマウスで有意に野生型より大きかった。(2)Na, K-ATPaseα2サブユニット遺伝子欠損ヘテロマウスと野生型のホームケージでの運動量には、全体としては変化がなかった。ヘテロマウスの昼間の運動量がやや多い傾向にあったが、有意差はなかった。(3)同遺伝子欠損ヌルマウス、ヘテロマウスと野生型マウスから、胚繊維芽細胞を分離し、インシュリンやデキサメサゾン処理により、脂肪細胞に分化させた。分化細胞の現れる時期や、最終的にどのくらいの細胞が脂肪細胞に分化するかといった点には差が見られなかった。また、インシュリン依存性グルコース取込みを測定したが、差がみられなかった。Rbイオンの取り込み能にも差がなかった。さらに、細胞内のNaイオン濃度を高めるためにmonensinを添加して測定したが、Rbイオン取り込みに差がなかった。これらの結果から、ヘテロマウスのメスは肥満になることが明確となったが、その原因として、脂肪細胞の分化や機能が変化したためではなく、神経系の異常によって肥満が起きている可能性が高いことが示唆された。今後、摂食量の変化や摂食ペプチドの発現量の変化などを測定し、肥満の機序を明確にする。

ヘテロマウスメスにおいて、オレキシンの量が低下していた他は、mRNAの発現量に差が見られなかった。これらの結果から、ヘテロマウスのメスは明期の摂食量が増加することによって肥満になることが明確となったが、その原因は現在のところ明確にできていない。昼夜のリズム制御の異常などがひとつの原因とも考えられるが、今後の検討が必要である。
p53遺伝子解析による種属とヒトの進化、分岐に関する研究

1.p53遺伝子を用いた人獣鑑別および種属鑑別法の開発:動物種属間でp53遺伝子のアミノ酸が共通して保存されている領域(IVとV)にプライマーを設定しPCR法で増幅後、PCR増幅産物に含まれる第7イントロンの大きさと塩基配列を明らかにした。霊長類内では、増幅産物の大きさの違いからは種属の特定が困難なものもあった。その他の哺乳動物種間おいては異なる大きさを有し、あるいは塩基配列においても異なる配列を示すことから動物種の特定が可能であった。今後、哺乳動物以外の動物種について検討を行うことにより、動物の分子系統進化と分岐について明らかになるものと思われる。2.p53遺伝子解析によるヒトと非ヒト霊長類の識別および進化、分岐:ヒトと非ヒト霊長類(15種類)のp53遺伝子第4、第5および第6エクソンの塩基配列の解析を行った。チンパンジーにおいて第5エクソンの81番目(G→A)と84番目(C→T)の2ヵ所に、ゴリラでは第5エクソンの10番目(G→A)と114番目(C→T)の2ヵ所に塩基置換があり、今まで困難であるとされていたヒトとチンパンジーおよびゴリラとの鑑別が可能であった。ヒトとサル類の塩基の相同性を比較したところ、ヒトと類人猿では平均は約98.8%、旧世界ザルでは平均約96.4%、新世界ザルでは平均約94.1%、原猿類では平均約86.2%の相同性を示した。平均距離法(UPGMA)で分子系統樹を作成して、霊長類16種類の系統関係を解析したところ、従来の形態学的分類とは矛盾しなかった。霊長類のp53遺伝子塩基配列の解明は、ヒトの進化や分岐の解明に有効であることが明らかになった。第7イントロンの大きさは、ヒト、ゴリラ、チンパンジー、ピグミーチンパンジー、ヒヒ、アカゲザルでは343bp、オランウータン328bp、フクロテナガザル、シロテナガザル、ニホンザル、リスザルでは342bp、キャプテン、ワタボシタマリンでは344bp、ギャラゴ330bp、ワオキツネザル308bp、ウシ329bp、ウマ341bp、シカ328bp、ヒツジ326bp、ブタ318bp、ネコ267bp、イヌ393bp、ラット311bp、マウス322bp、モルモット294bp、クジラ340bpであった。その他の動物種間おいては異なる大きさを有し、あるいは塩基配列においても異なる配列を示すことから動物種の特定が可能であった。2.ヒトと非ヒト霊長類の識別および進化、分岐:ヒトと非ヒト霊長類(15種類)のp53遺伝子第4、第5および第6エクソンの塩基配列の解析を行った。チンパンジーにおいて第5エクソンの81番目(G→A)と84番目(C→T)の2ヵ所に、ゴリラでは第5エクソンの10番目(G→A)と114番目(C→T)の2カ所に塩基置換があり、今まで困難であるとされていたヒトとチンパンジーおよびゴリラとの鑑別が可能であった。

ヒトとサル類の塩基の相同性を比較したところ、ヒトと類人猿では平均は約98.8%、旧世界ザルでは平均約96.4%、新世界ザルでは平均約94.1%、原猿類では平均約86.2%の相同性を示した。平均距離法(UPGMA)で分子系統樹を作成して、霊長類16種類の系統関係を解析したところ、従来の形態学的分類とは矛盾しなかった。霊長類のp53遺伝子塩基配列の解明は、ヒトの進化や分岐の解明に有効であることが明らかになった。1.p53遺伝子第7イントロンのDNA多型と民族特異性インフォームドコンセントを得て採取した日本人成人105名のp53遺伝子第7イントロンのDNA多型出現頻度について調べた。DNA多型があると報告されている第7イントロン5ヵ所の内、p53遺伝子14181番目とその20bp下流の14201番目である第7イントロンの72番目(C→T)と92番目(T→G)の塩基に多型が認められた。72番目でC/Tは92番目でT/Gであり、C/CはT/T、T/TはG/Gであった。この事から72番目と92番目は完全連鎖不平衡の状態にあり、ハプロタイプはC-T ; T-Gであった。その頻度はC-Tホモが57.14%、T-Gホモが7.62%、C-T/T-Gヘテロが35.24%であり、さらにこの頻度から計算した日本人のアリルの頻度はC-T:0.745、T-G:0.245であった。第7イントロン72番目の多型(C/T)をヨーロッパ人のアリル頻度とアジア人のアリル頻度を比較したところ明らかに有意差があり、民族特異性があることが明らかになった。2.p53遺伝子第7イントロンの進化・分岐ヒトと類人猿の第7イントロン塩基配列を比較したところ、チンパンジー、ピグミーチンパンジーにおいて2ヵ所、ゴリラにおいては3ヵ所に塩基置換が認められた。上記以外の類人猿においても10ヵ所以上の塩基置換や欠失が認められた。ヒトと類人猿の第7イントロンの相同性を比較したところ、ヒトとチンパンジー、ピグミーチンパンジーで99.4%、ゴリラで99.1%、オランウータンで91.8%、シロテナガザルで96.2%、フクロテナガザルで97.1%となり、ヒトと類人猿の平均相同性は約97.17%であった。ヒトに多型が認められる第7イントロンの72番目の塩基は6種類の類人猿すべてにおいてC/Cホモであり、また92番目はT/Tホモであった。この事からヒトでみつかったC→TおよびT→Gの塩基置換は、類人猿からヒトに進化、分岐した後に起こったものと考えられる。
生物社会における自律分散機構

自律的に生きる個体よりなる集団や社会、種というシステム全体の安定性に関するメカニズムの解明が本研究の目的である。今年度は、とりわけ魚類の群れと社会などについての検討を行った。魚群の維持機構を解明するためモデルによるシミュレ-ションを行った。その結果、群れの各個体が他のすべての個体から情報を得ていれば、固有速度に個体差がある場合でも群を形成できること、各個体が受ける情報量を小さくすると群の形は絶えず変化すること、また、群のまとまりは個体間誘引力よりも成群力によって左右されることなどが明らかにされた。魚類の繁殖システムについては、サンゴ礁に生息するダルマハゼの調査から、その婚姻システムの維持には、繁殖個体のサンゴ間移動や2個体の合意・協調に基づく性分化・性転換が重要な役割を果たすことが分かった。また、他の魚類の繁殖システムも検討したところ、雌の卵生産能力と雄の卵保護能力の程度が、パッチ状の生息場所を利用する魚類の婚姻システムと協調・対立関係を決める根本原理であると予想された。さらに、自律分散動物集団における利害対立解消の進化モデルに関する研究として、利他行動のコンフリクトとその妥協、シロアリにおけるワ-カ-の進化と種の安定性、最適グル-プサイズの理論、親の子への投資のゲ-ムモデルが検討された。生物集団の自律分散機構の解明への試みとして、群集、種、群れの3つのレベルでの検討が行われた。
腹部多発リンパ節転移を標的とした逆行性リンパ管内化学療法の開発

広汎に多発リンパ節転移をきたし、根治切除不能な消化器癌に対し、頸胸部から胸管内にカテーテルを挿入、そこから逆行性に抗癌剤を持続注入し、広汎な腹部リンパ節転移巣に高濃度の薬剤を選択的に投与することで、高い抗腫瘍効果と毒性の軽減をはかる「逆行性リンパ管内化学療法」という新規治療戦略の可能性を探ることを目的とした。方法として、まず、麻酔下に大動物のブタの胃壁内および腹部リンパ節に青色色素(パテントブルー)を注入しリンパ管系を容易に視認できるようにした後、開胸し、胸管を同定することを試みた。その結果、腹腔リンパ本管は横隔膜を通過した後、枝分かれして大動脈周囲を上行し、気管分岐部から頭側で再び集合し集合リンパ管を形成することが解った。そこで、頸胸部の気管左方で胸管をテーピングし、カニュレーションをする動物モデルを作成し、水溶性抗癌剤であるシスプラチン、脂溶性抗癌剤パクリタキセルを胸管チューブより投与、薬物を投与しその動態を検討することにした。今後はこのモデルを用いて、血液および種々の臓器における抗癌剤の濃度を胸管内投与後24時間まで経時的に測定することで、全身投与との薬物動態の違いを明らかにする。さらに、免疫不全ブタを用いて腹部リンパ節に腫瘍を注入、転移癌を作成した後、同様の方法で抗癌剤を胸管内に留置したカテーテルより投与しその組織学的効果を経静脈的に投与した群をコントロール群として比較し、その治療効果についても検討する予定である。計4頭のブタを使用し、麻酔下に開腹し、腸間膜リンパ節内にパテントブルーを注入し、開胸後ブタの胸管を確認し、テーピングした後に胸管にPICCカテーテルのカニュレーションを行い、造影剤を用いてリンパ管造影を施行することで、胸管の走行を確認することに成功した。さらに、パクリタキセル5mg/mlを胸管内に注入し、1、4時間後に血液および腹部リンパ節を含めたできた臓器を採取、凍結した。このサンプルを用いて、LC-MS方法でパクリタキセルの濃度を測定することができた。以上から、実験系を確立するという初年度の目標はクリアできた。初年度に確立したブタ実験システムと薬物濃度測定法を用いて、パクリタキセルを胸管チューブより投与し、ブタの腹腔内リンパ節における抗癌剤濃度を経時的変化を、同量の抗癌剤を経静脈的に投与した群をコントロール群として比較検討する。同時に、血清中、腹水中の薬剤濃度とともに、リンパ節以外の臓器、脳・肺・心臓・胃・肝臓・脾臓・腎臓・小腸・大腸についても抗癌剤濃度を測定し、胸管内抗癌剤投与後の薬物動態に関する詳細な結果を得る。また、シスプラチンを用いて同様の検討を行い、抗癌剤の水溶性・脂溶性の違いによる薬剤分布に違いついても合わせて検討する。また、免疫不全ブタリンパ節転移モデルを用い、パクリタキセルの胸管内投与が転移リンパ節に与える組織学的奏効を検討する予定である。

初年度に確立したブタ実験システムと薬物濃度測定法を用いて、パクリタキセルを胸管チューブより投与し、ブタの腹腔内リンパ節における抗癌剤濃度を経時的変化を、同量の抗癌剤を経静脈的に投与した群をコントロール群として比較検討する。同時に、血清中、腹水中の薬剤濃度とともに、リンパ節以外の臓器、脳・肺・心臓・胃・肝臓・脾臓・腎臓・小腸・大腸についても抗癌剤濃度を測定し、胸管内抗癌剤投与後の薬物動態に関する詳細な結果を得る。また、シスプラチンを用いて同様の検討を行い、抗癌剤の水溶性・脂溶性の違いによる薬剤分布に違いついても合わせて検討する。また、免疫不全ブタリンパ節転移モデルを用い、パクリタキセルの胸管内投与が転移リンパ節に与える組織学的奏効を検討する予定である。本研究に使用する動物(ブタ)および手術に要する物品は高価で、一回の実験につき約3050万円程度のコストがかかる。このため、初年度は、実験系を確立する目的にて、他の目的(鏡視下手術の練習用)で既に使用したブタをより安価で供給してもい、予定より少ない物品費で初期の目的を達成することができた。そこで、次年度にあらかじめ予定していた実験回数を3回程度増やして、より精度の高いデータを得ることを意図して繰越し使用とした。
アジア新興市場における共生型の異文化マネジメントモデルの探求

異文化相互作用を規定する3つのキー概念、すなわちコンテクスト(Context)、距離(Distance)、埋め込み(Embeddedness)から成る「CDEスキーマ」から異文化マネジメントの共生型モデルの理論化を試みた。具体的には、第一に異文化マネジメントの先行研究をHofstedeからGLOBEに至るまで整理した。第二には、1)ヤマト・ホールディングスの宅急便(TA-Q-BIN)の海外展開、2)台湾出自の頂新国際集団の中国市場展開、3)電通アジアのナレッジマネジメント・スキームについてフィールド・ワークを行い、CDEスキーマに基づく異文化マネジメント理論の初期仮説を構築した。本研究課題の目的は、アジア市場でメタナショナル展開する下記の3つの企業事例に肉薄することで、サービスビジネスの国際化は「コンテクスト」「距離」「埋め込み」の複合的メカニズム(CDEスキーマ)の影響を強く受けることを検証する点にある。1)DNAカレッジ:電通アジアがASEAN現地スタッフをDENTSU WAYに「内部埋め込み」するために2006年に起ち上げた社内カレッジの事例研究。電通本社関係者と電通アジア現地スタッフに数回の聞き取り調査を行い、暗黙知移転のカギは関係者間の脱コンテクスト化と再コンテクスト化にあることを確認。成果の一部は国際ビジネス研究学会で発表済み。2)康師傅:台湾出自の「康師傅」が中国市場で日本企業と共生関係を成功裏に構築する際の異文化マネジメントに関する事例研究。3年前から同社の全面的協力を得て定点観測的に実態調査を実施しており、成果の一部はAsia Academy of Managementで発表済み。3)TaQbin:ヤマト運輸が上海、シンガポールに進出した2011年から同社の全面的協力を得て定点観測的に進めている事例研究。TaQbinは日本独特の高品質サービスかつ純粋役務であるため、本研究課題を直接的に実証しうる最重要プロジェクト。25年度は、シンガポールとマレーシアの現地法人経営陣ならびにTaQbinの競争力源泉であるSDI(Sales Driver Instructor)への聞き取り調査を複数回実施。25年度はケース1本の執筆に留まっているが、今後は過去3年半の調査結果に基づき学会発表、ケース、論文ならびに書籍の執筆を加速していく。なお上記3社の事例研究は今年度中に発刊される『異文化マネジメントの理論知と実践知』(太田編著、同文舘)に収録される。26年度は、研究代表者(太田)がサバティカルでIMD(3月末から6月末)ならびにCambridge Judge Business School(7月初めから9月末)に滞在した機会を活用し、海外研究者との本研究課題に関するコラボレーションを推し進めた。IMDではサプライチェーン・マネジメントを専門とするProf. Carlos Cordonと、ヤマト運輸の宅急便(海外ではTA-Q-BIN)のアジアリージョナル戦略ならびに羽田クロノゲート、厚木ゲートウエイ、沖縄国際物流ハブをリンクさせるバリューネットワーキング構想に関する分析を進めた。その成果として、本年2月にProf. Cordonが来日し、ヤマト運輸本社で共同インタビューを実施し、現在、IMD・早稲田共同ケースとして執筆中(8月完成予定)である。Judge Business Schoolでは、組織論を専門とするProf. Jonathan Trevorと、TA-Q-BINのコアコンピタンスであるセールズドライバー(SD)を上海、シンガポール、香港、マレーシア市場で育成する際の国際知識移転、その結果として生じる組織効果に関する共同研究を進めた。これについては、日本型サービスビジネスの国際知識移転と組織効果に関する、日本目のIMD・早稲田共同執筆ケースとして27年度中に完成予定である。前述のとおり、IMDならびにJudge Business Schoolでの共同研究が予想以上に進捗したことが大きな理由である。とりわけ、本研究課題の中核的企業事例であるヤマト運輸のTA-Q-BINのアジア展開に関するIMD・早稲田の共同ケースの執筆が、複数実現しつつあることは画期的である。研究代表者(太田)がスイスならびにイギリスに3月から9月末にかけて滞在することで、本研究課題の国際的インプットは大きく前進したが、他方において、国内での研究活動、そしてアジア新興市場でのフィールドリサーチの進捗が若干スローダウンしたことは否めない。この点は学会発表、論文執筆、著書執筆といった具体的なアウトプットが十分でないことに表れている。しかしながら、【今後の研究の推進方策等】で述べるとおり、26年度の貴重なインプットが著書、論文、ケースといった27年度のアウトプットに直結する形で蓄積されていることを考えれば、実質的にマイナス点にならないと考えている。国際経営26年度に蓄積されたインプットは現在、1)太田正孝編著『異文化マネジメント理論と実践(仮題)』同文舘出版社(27年12月出版予定)、2)太田正孝監訳『異文化リーダーシップ文化を超えるCEO効果(仮題)』中央経済社(27年9月出版予定)、3)ヤマト運輸に関するIMD・早稲田共同ケース2本(「TA-Q-BINのアジア進出」「SDの国際知識移転と組織効果」)などのアウトプットとして27年度中の完成を目指して執筆中である。

特に、『異文化マネジメント理論と実践(仮題)』は第一部(理論編)と第二部(実務編)とに分かれるが、理論編は本研究課題の中心テーマでもあるCDEスキーマのレンズから纏められており、異文化マネジメントの著書としては画期的なものである。また実践編では、本研究課題でフィールドリサーチの対象となったヤマト運輸のTA-Q-BIN、電通アジアのDNAカレッジ、康師傳の中国市場戦略を含む、貴重かつ豊富なケースに基づいて考察されている。これら確定しているアウトプットを踏まえて、次年度以降の科研費プロジェクトを獲得するために、太田はTA-Q-BINのアジア新興市場における国際知識移転に関する、より詳細な論文を執筆するためのフィールドリサーチを上海、香港、シンガポール、マレーシアで推し進め、池上は豊田通商のグローバル知識移転戦略に関する更なるフィールドリサーチを推し進める。こうした印刷物に加えて、内外の学会において研究成果を積極的に発表するとともに、日本企業でのエグゼクティブ・プログラムにフィードバックすることも展開していく。研究代表者(太田)と研究分担者(池上)は、以前から同様のアプローチで研究していたため、初年度の2つのタスク、1異文化マネジメントの理論的系譜の整理、2フィールドリサーチの実施はスムーズに進めることができた。また本研究課題申請時にはまったく予測しなかったが、前者の派生物として異文化マネジメント理論に関する最大の研究グループGLOBEの近刊書“Strategic Leadership Across Cultures"の日本語版監訳を太田が務めることになった。本書は本研究課題の理論的向上のみならず、我が国の異文化マネジメント研究の進展にも貢献しうる。フィールドリサーチ実施は周到に準備をしたうえで、8月に池上がマレーシア・ヤマトのプレ調査、26年に入って2月に池上が頂新国際集団傘下の最大企業である「康師傅」の柯幕僚長(最高執行責任者に相当)へのインタビューを上海で実施。最後に太田が3月にシンガポールに2週間弱滞在して、シンガポール国立大の研究仲間とも連携しながら、ヤマト運輸のTaQbin事業の実態と課題についてインタビューを実施した。また本テーマに深く関わる公開フォーラム(「日本企業とアジアリージョナル戦略」」)を10月に早稲田大学で開催し、康師傅の柯幕僚長、ヤマト運輸の木川社長に加えて日産自動車の小枝名誉会長を招聘し、本研究課題の2年目以降に向けた知識共有の基盤づくりを行った(『産研フォーラムNo.39』として刊行済み)。最後に、日本型サービスに共通の「おもてなし」と欧米型サービスの基盤でもあるHospitalityとの違いは何か、おもてなし型サービスは海外移転可能かについて、1月に日本マーケティング協会と共催でセミナーを開催した。
実験動物モデルによる肝包虫症の初期治療の研究

1.プラジカンテルを用いた多包虫症治療実験。チャイニーズハムスターの腹腔に多包虫の原頭節を接種し、プラジカンテルを1頭当り2.34mgを23日に1回皮下に注射し原頭節の接種後60日に剖検して多包虫を切り出し、その重量を測定して対照群と比較した。治療群と対照群における多包虫重量に、統計的に有意な差はなく、プラジカンテルには多包虫症に対する治療効果は認められなかった。2.X線照射による多包虫症治療実験。胚層と角皮層からなる、感染後20日の無原頭節多包虫に、5,000、15,000、25,000、35,000、45,000、55,000RのX線照射を行い、チャイニーズハムスターの腹腔に移植して、その後の多包虫の発育を調べた。移植後113日に剖検すると、35,000Rまでの照射量では、X線の影響は顕著でなかった。45,000R以上を照射された多包虫の発育は明かに阻害され、萎縮、変性していた。電顕像でも胚層のtegment,tegment cell regian,innermost areaが崩壊しており、多包虫の増殖能力が失われたことを示している。3.温熱処理による多包虫症治療実験。胚層と角皮層からなる、感染後14日の無原頭節多包虫を44,46,48°Cのincubatorに120分入れておき、コットンラットに移植してその後の多包虫の発育を調べた。93日後に剖検すると、44°C処理では原頭節を持つ正常な多包虫となったが、46,48°C処理では発育しなかった。電顕的には、46°C以上の温度に曝露された多包虫は、胚層細胞の核のクロマチンが異常に凝縮していた。この温度では実際の治療に用いるには高過ぎるが、他の方法と併用すれば実用の可能性がある。4.単包虫の分離と継代。オーストラリア産の牛から単包虫を分離し継代することに成功した。これによって多包虫のみならず単包虫の治療実験も可能となった。5.日本人の多包虫症例の文献的検索。これまでに報告された国内の症例を文献的に検索し、治療の実態と予後の関係を検討した。
化学反応理論ー理論計算によるアプロ-チ

本総合研究(B)は、平成4年度に発足する重点領域研究「化学反応理論ー理論によるアプロ-チ」を円滑に始動するため、実行グル-プ会議や研究会を開催し、研究計画の具体案を作成することを目的としている。この主旨の基づき、以下の活動を実行した。1.第1回研究会平成3年8月31日9月1日、分子科学研究所に於て第1回研究会を開催した。本会合は総括班と4つの計画研究班の研究方針とその実施案を討議した。研究代表者:諸熊奎治より重点領域研究「化学反応理論ー理論計算によるアプロ-チ」の研究方針が説明され、引続き計画班代表者による各研究班の研究方針の説明があった。同時に、「分子系の多電子理論」、「化学反応の電子理論」、「分子集合体の化学反応理論」、及び「化学反応の動力学理論」の4分野に関連する主要な研究者16名(計画班代表者を除く)の研究発表及び討論が行われた。この後、総括班予定者の会議が開かれ研究会の成果が取りまとめられた。2.第2回研究会平成3年10月8日10月9日、分子科学研究所に於て、第2回研究会を開催した。この会合は「化学反応理論ー理論計算によるアプロ-チ」の公開研究会であり、総括班予定者と重点領域研究の4分野に関連した研究者20名ほどで行われた。若手研究者を含めて、近年の理論化学の成果が討論された。また総括予定者の会議も開かれ、これまでの成果を踏まえて、重点領域研究を最も効果的に実施するための方針が議論された。
食道扁平上皮癌における慢性炎症シグナルを標的とした新規治療法の開発

多くの癌の発生・進展には慢性炎症が寄与しており、大腸癌では炎症で誘導されたIL-6ファミリーサイトカインが共通の受容体gp130を介して、従来から知られている炎症シグナル情報伝達経路であるJAK-STAT3シグナルに加えて、新規炎症シグナルSrc-YAP経路を活性化して癌の進展に寄与していることが明らかにされた。食道を含む扁平上皮癌ではSrc-YAP経路の役割はこれまで十分に検討されておらず、食道扁平上皮癌におけるSrc-YAP経路とJAK-STAT3経路の役割を明らかにし、慢性炎症を標的とした新規治療法の提唱を目指す。
ポストモダンにおける芸術と写真

写真の非芸術的側面と従来みなされてきた細部の再現からなる触覚的質が、視覚をモデルとするモダンの美的ヒエラルキーと知を揺るがし、日常的なものや無意味なもの、アブジェクトなものや非焦点性を芸術の世界に組み入れ、芸術のポストモダン的状況を作り出すと共に、アパレイタスとしてのその特性は自我やリアリティーの消失に対応している。他方、芸術と写真とのこの近接は写真の非芸術的な起源への問を再び呼び起こしている。ポストモダンとも呼ばれる現代における芸術の規範の転倒と変容の様はめまぐるしい。本研究課題は、こうした芸術におけるポストモダン的現象において、写真という媒体がどのような役割を果たしたかを、写真の本質規定を模索しつつ、明らかにしようとするものである。20年度の5名の共同研究は以下のように行われた。山口和子(研究代表者):出口は写真を介したグロテスクなイメージの流布と写真の特性との関係を、ブラッサイ、ベルメール、メープルソープらの性的表現に認められる構成的共通性と相違を分析するとともに、近代的な〈視(Sehen)〉とポストモダン的な〈視〉の相違が遠近法的視と、触覚的無焦点的視の相違に求め、現代の種々の哲学的知覚論を考察した。西村清和:写真と絵画という異なったメディアにおける「美的」な質のちがいについて、ゲルハルト・リヒターなどのアーティストの作品を例に分析し、戦争や事故や処刑といったテーマを写真や絵画が扱う際の「美的なもの」と「倫理的なもの」との関係を考察した。長野順子:フランスのシュルレアリスム期の女性アーティスト、クロード・カオンのセルフ・ポートレートを中心とした写真活動を詳しく調査し、シンディ・シャーマンらの現代の女性アーティストの表現との相違を検討した。川田都樹子:ジョン・ラスキンの「無垢な目innocent eye」にまつわるポストモダンの論者らの言説にある見落としの分析を介して、現代美術批評における写真の位置づけの問題点を考察した。前川修:戦後アメリカにおける写真と芸術との関係を写真史的文脈から考察し、そのポストモダン的な表現をアラン・セクーラを介して検討するとともに、デジタル写真登場以降の写真論、つまり、ミッチェルからロビンス、ウィリスを経てマノヴィッチにいたるまでの言説を概観する作業を行った。山口和子:本年度の計画予定通り、写真というメディアの特徴として触覚性をどの程度いいうるかどうかを、主要に初期写真論を介して検証する共に、触覚の心理学的規定、アフォーダンス理論、現代の哲学メルロ・ボンティ、ドゥルーズ、デリダ、またドイツのべーム、ベルティングらの像理論における触覚の位置づけ等を考察し、ポストモダンとも呼ばれる現代において、触覚が、近代の遠近法的な視に変わる知のパラダイムとなりつつある基本的な傾向を考察した.川田都樹子:本年度アメリカニューヨークに一年間滞在し、アメリカにおけるポストモダンへの移行期における写真の役割を具体的な資料を解して再確認するとともに、それを踏まえ、抽象表現主義の画家とみなされているサイ・トオンブリーの写真における「脱視覚化」、「脱モダニズム」について考察した。長野順子:シュールレアリズム期のアーティストであるクロード・カオンのセルフ・ポートレートやコラージュ、および1980年代以降のシンディ・シャーマン、ナン・ゴールディンらの写真作品を再検討しながら、それらに顕著な「おぞましさ」や「吐き気」という感覚について、そうした負の美的感受性の伝統的な位置づけ、および現代アートのおけるそれらの戦略的インパクトのポストモダン的意味を考察した.前川修:アラン・セクーラ、シャーカフスキーの写真論を、ポストモダン的文脈の中で再検討すると共に、セクーラと同じ70年代に活動を始めた杉元博司の写真とその言説を整理し、ボス.トモダン的現代における写真のありようを考察した.西村清和:ドイツの画家ゲルハルト・リヒターにおける絵画と写真との関係を検討しつつ、とくにその「アトランタス」における醜の契機の写真的特性を考察した。ポストモダンともよばれる現代における芸術の多様な拡大は、既成の芸術学・美学や美術史の方法論をも脅かすがごとき状況を呈している。本共同研究は、写真映像の特性と、芸術におけるこのようなポストモダン現象との関係を考察する事を目標としているが、最終年度にあたる今年度は、過去2年間の研究を踏まえ、次のような研究を展開した。山口は、現代のアートシーンにおける芸術概念の拡大と映像との関係を、主要にブラッサイ、メープルソープの映像の特徴の分析を介して明らかにした。西村は、現代のアートシーンにおける醜の美学の新たな基礎付けを、特にアブジェクト、ディスターベーションのカテゴリーに属する作品の分析を介して行った。長野は、シュルレアリズム期の特異な存在であったユダヤ系フランス人クロード・カーアンのセルフ・ポートレート写真、フォト・モンタージュと文章テクストとの組み合わせについて考察し、現代アーティスト、シンディ・シャーマンの試みとの比較を行い、自我概念の変容を分析した。川田は、現代におけるポストモダン的な傾向を示す画家、サイ・トゥオンブリにおける写真と絵画の関係の考察を介して、モダニズム絵画の「視覚」中心主義がいかに克服されたかを明らかにした。

前川は、セクーラのアーカイブ論を介して、従来の写真論が陥っているディレンマに別の視点を開くとともに、デジタルとアナログ写真における文脈と写真言語との相違を考察した。以上の考察を介して、写真映像の特性と現代のアートシーンへのその影響関係に明確な輪郭が与えられたと考えられる。また、現代アートと写真の関係への、美学、美術史学、ジェンダー論、映像論の多面的な視点からのアプローチはこれまでにはなされてはい。なお、本共同研究の成果は科研共同研究成果報告論文集『ポストモダンにおける芸術と写真』(23年3月31日発行)に上梓されている。
鶏卵アレルギーの免疫寛容誘導

1,食物アレルギー発症機序の解明ソバの主要アレルゲンである24kDaのソバタンパク質のIgEエピトープを解明した。トマト果肉アレルゲンとスギ花粉との間に交叉反応性があることを証明した。2,低アレルゲン化卵白の開発低アレルゲン化された加熱脱オポムコイド卵白を2週間から1ヵ月経口摂取してもアトピー性皮膚炎の悪化などの有害事象がみられず、比較的長期に投与しても安全であることを示した。3,鶏卵アレルギーにおけるアウトグローの機序の解明鶏卵アレルギーのアウトグローにはTh2/Th1サイトカイン比がTh1優位に正常化することが関与していると唆された。4,鶏卵アレルギーの寛解誘導療法の開発加熱脱オボムコイド卵白含有クッキーの連日摂取によって、鶏卵白経口負荷試験が陰性化する率は約50%であった。卵白特異的抗体の中では1gG4抗体の有意な上昇が陰性化群で観察された。以上から、本治療によって誘導される寛解には、特異的IgG4が関与していることが示唆された。陰性化の背景因子としては連日投与前に行った経口負荷試験が陽性となる最終抗原量が陰性化群で有意に高値であったことから、寛解に近づいている患者の方が陰性化しやすいことが示唆された。非陰性化群でも連日摂取後に負荷試験点数が有意に低下(改善)したことから、陰性化は達成できなくても寛解に近づけられることが推測され、これらの症例でもさらに摂取期間を延長することによって寛解達成が期待された。鶏卵アレルギーは乳幼児期に好発し、加齢とともに寛解、すなわち、アウトグローしていく。本研究の目的は、鶏卵アレルギー患者を対象として、アウトグローの機序をサトカイン産生の観点から検討することである。鶏卵アレルギー児の末梢血単核細胞を比重遠心法にて分離、採取した。培養には96穴プラスチックプレートを用いた。最終細胞数を1×10^6個/mlとなるように調整し10%非働化胎児牛血清加RPMI 1640培養液に浮遊した。Ovomucoidを最終濃度として0.1・1000μg/mlの濃度で添加し、37°C、5%、CO2培養器内で7日間培養した。培養終了後、上清を回収した。上清中のIL-4,IFN-γを高感度Immunoassay-kitを用いて測定した。鶏卵アレルギー児に凍結乾燥卵白抗原経口負荷試験の結果で、患児を非寛解群8例(年令7.5±2.8歳)と寛解群4例(年令12±1.6歳)とに分けた。食物アレルギーがない4例(年令11±5.9歳)を対照とした。鶏卵アレルギー非寛解群は、ovomucoid刺激によって非刺激時と比べると上清中IL-4は有意に上昇したが、寛解群では有意な上昇を認めなかった。一方、INF-γは寛解群でovomucoid刺激によって有意な上昇をみたが、非寛解群ではみられなかった。以上から、鶏卵アレルギーのアウトグローにはTh1サイトカインであるINF-γ産生の回復が関与している可能性が示唆された。経口負荷試験用卵白抗原として(1)凍結乾燥卵白(8g=鶏卵白1個相当)、(2)加熱卵白を含むクッキー(クッキー1枚で鶏卵約1/4個相当の90°C、60分間、加熱処理を施した卵白を含む)4枚、(3)加熱脱オボムコイド卵白を含むクッキー(卵白含有量は加熱卵白と同様)4枚、(4)プラセボは卵白を含まないクッキー4枚を用いた。寛解導入用抗原としては加熱脱オボムコイド卵白クッキー4枚を用い、14日間あるいは28日間連日経口摂取してもらった。

終了後、再度、投与前と同じ抗原で負荷試験を実施し、陰性化するか否かを検討した。凍結乾燥卵白(男:女=7:6、年齢4.5±2.7歳)あるいは加熱卵白(男:女=4:5、年齢4.0±1.6歳)経口負荷試験陽性でしかも加熱脱オボムコイド卵白による経口負荷試験が陰性の鶏卵アレルギー患児22人。加熱脱オポムコイド卵白連日摂取後の経口負荷試験の結果は、凍結乾燥卵白陽性群は13例中8例(61.5%)、加熱卵白陽性群は9例中5例(55.6%)で陰性化した。全症例で検討すると、22例中13例(59、1%)で陰性化した。連日摂取前後で測定した種々のパラメーターをみると、血中サイトカイン(IL-4、IL-5、IFN-γ、TGF-β)、血清総IgE値、特異的IgE抗体価(卵白、オボムコイド、ヤケヒョウヒダニ、牛乳、小麦)は有意な変動を示さなかった。卵白特異的IgA、IgGも有意な変化はなかった。一方、卵白特異的IgG4は陰性化しなかった群だけが、連日摂取後、有意に上昇した。以上から、加熱脱オボムコイド卵白の連日経口摂取は鶏卵アレルギーの寛解を導入できる可能性があり、その機序には卵白特異的IgG4が関与していることが推測された。加熱脱オボムコイド卵白連日摂取(1日鶏卵1個相当、2週間から4週間)後の経口負荷試験の結果は、凍結乾燥卵白陽性群は23例中12例(52.1%)、加熱卵白陽性群は9例中5例(55.6%)で陰性化した。全症例で検討すると、32例中(男:女=17:15、年齢4.5±2.8歳)17例(53、1%)で陰性化したことになる。しかも、負荷試験点数でみると非陰性化群でも有意に(p=0.045)低下(改善)していた。連日摂取前後で測定した種々のパラメーターをみると、血清総IgE値、特異的IgE抗体価(卵白、オボムコイド、ヤケヒョウヒダニ、牛乳、小麦)は有意な変動を示さなかった。卵白特異的IgA、IgGも有意な変化はみられなかった。一方、卵白特異的IgG4は非陰性化群(p>0.05)では変動はみられなかったが、陰性化群だけが、連日摂取後、有意に(p=0.044)上昇した。陰性化群と非陰性化群と間で背景因子を検討した結果、(1)年齢では差がみられなかった、(2)連日摂取前の経口負荷試験の症状点数には差がなかった、(3)負荷試験が陽性となる最終抗原量が陰性化群は非陰性化群と比べると有意に高値(P=0.041)であった、(4)2週間で陰性化しなかった1例に2週間、4週間で陰性化しなかった2例に8週間追加摂取した結果、陰性化した。陰性化の背景因子としては連日投与前に行った経口負荷試験が陽性となる最終抗原量が陰性化群で有意に高値であったことから、寛解に近づいている患者の方が陰性化しやすいことが示唆された。2週間あるいは4週間では陰性化できなかった症例でも、摂取期間を延長することによって寛解誘導が可能であることが示唆された。