hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
短い時間スケールにおける海洋難分解性溶存態有機物の生成と炭素sinkとしての意義

海洋植物プランクトンの光合成により生産される有機物のなかで、どの程度が溶存態有機物として細胞外に排出され、さらに排出された溶存態有機物のどの程度が難分解性溶存態有機物として保存されるのかを明らかにする目的で博多湾において炭素安定同位体(^<13>C)をトレーサーとして実験を行った。その結果、以下のことが明らかとなった。1)植物プランクトンの光合成により生産された有機物のなかで、24時間以内に溶存態有機物として細胞外に排出された割合は10%前後であった。2)一方、植物プランクトンの死後に生成される溶存態有機物量は30日60日程度で最大となった。これは、植物プランクトンの死後、細胞壁が壊れて原形質が溶存化する過程が溶存態有機物の主要な生成要因であることを示している。3)紫外線照射により分解されない溶存態有機物(難分解性有機物)の全溶存態有機物に対する割合は、実験開始直後は40%程度であったが、時間とともに増加する傾向を示した。4)このような難分解性溶存態有機物の13C同位体比も時間とともに増加する傾向が認められた。これは植物プランクトンに生産された「新鮮な」有機物も、数ヶ月の間に紫外線照射に対して安定性を持つ難分解性溶存態有機物に変化したことを示唆するものと思われる。1.博多湾における実験富栄養化し植物プランクトンの現存量が多く、溶存態有機物の生産量も高いと予想される博多湾における培養実験を1999年7月に実施した。実験では博多湾から採取した自然植物プランクトン群集にトレーサーとして^<13>C-NaHCO_3および各種栄養塩類を添加した後、12時間明中で培養した。その後、暗所に移し培養開始後一ヶ月を経過するまで、適時試料を採取した。採取した試料について、懸濁態有機物の濃度・^<13>C同位体比、溶存態有機物の濃度・^<13>C同位体比、溶存態炭水化物の単糖濃度・^<13>C同位体比を測定した。溶存態有機物については、難分解性有機物と易分解性有機物とを分画するために、紫外線照射を行った後に有機炭素の濃度と^<13>C同位体比とを測定した。2.相模湾における予備実験植物プランクトンの現存量が少なく、溶存態有機物の生産量が低いと予想される相模湾においては、次年度実施予定の本格的な実験に備え、予備的な情報を得るために、1999年10月に東京水産大学練習船「青鷹丸」の航海の際に実施した。溶存態有機物について、その濃度および^<13>C同位体比を測定する実験を、現在継続している。
児童・生徒の図形に対する豊かな直観を育成する指導法の研究

本研究では、児童・生徒の図形に対する豊かな直観を育成するための指導方法の改善について、その具体的な方向を明らかにするとともに、授業実践を通してその可能性を検討することを目的とする。具体的には、次のことを目的として行われた。(1)指導方法改善の視点を設定を具体的に設定すること。(2)(1)で設定した視点の有効性や可能性について中学校レベルの授業実践を通して検証すること。上述の目的を実現するべく研究を推進した結果、次のことが新たな知見として明らかにされた。まず、(1)に関しては次の3点を挙げることができる。(1)証明の構想や構成の指導では、アクションによるもの、口頭によるもの、形式的論理によるもののそれぞれを有効に活用した展開が大切であること。(2)G.ポリアが提唱している機能的手続き(暗示的接近と支持的接近)を導入することによって、証明の構成や構想などの創造的、生産的なアプローチを可能にしてくれること。(3)E.マッハによって提唱された思考実験のアイデアが図形の学習で有効であること。並行して、これらの原理・原則について、小・中学校における実証授業を重ねそれらの一般性を高めるための事例研究を収集することができた。ついで、(2)に関しては各種コンピュータ・ソフトやシミュレーション・ソフトの評価を実施したが、多くの場合図形の学習で有効であることが明らかになった。その際、児童・生徒による主体的な活動を促し、その過程で自己選択で活用できるようにすることが必要である。本研究は、小・中学校の算数・数学科における図形指導の改善にかかわるもので、平成4年度から3年計画で行おうとするものである。研究目的は、児童・生徒の図形に対する豊かな直観を育成するための指導方法の改善について、その具体的な方向を明らかにするとともに、授業実践を通してその可能性を検討することである。平成4年度はその第1年次に当たるので、研究の焦点を新しい算数・数学教育の動向及び先行研究の分析・検討において進めた。具体的には、次のようである。(1)新しい算数・数学教育の動向の分析・検討:我が国及び諸外国(主として米国、英国、仏国)における新しい算数・数学教育の動向を分析し、本研究課題直接かかわる「図形指導」及び「直観の育成」について、その内容と位置づけを中心に検討した。その結果いずれの国においても、数や量にかかわる内容についての指導に比べて、図形にかかわる内容についての指導には多くの課題をかかえていることが明らかになった。また、図形の指導を通して児童・生徒に豊かな直観を育成することについても関心が高まっていることが明らかにされた。(2)先行研究の分析・検討:先行研究については、理論的研究と実践的研究に分けて分析・検討を進めた。前者については、我が国及び諸外国の古典及び最新の成果を検討し、直観を促える幾かの視点をまとめることが、できた。後者については、過去十年程度の期間に行われた実践研究の中から研究課題にかかわる事例を抽出し、その成果と課題を整理した。これらの成果を踏まえて図形についての豊かな直観を育成する指導方法の原理的な仮説を設定し、授業実践を通して検証することは、第2、3年次の課題である。平成5年度はその第2年次に当たるので、第1年次の新しい算数・数学教育の動向及び先行研究についての分析・検討を踏まえて、具体的には、次の2つの視点で研究を推進した。まず第1に、具体的な操作や実験・実測などの具体的な活動を授業の過程でどのように位置づけたら児童・生徒に豊かな直観を育てたり働かせたりすることができるかについて明らかにする。

第2に、コンピュータのシミュレーション機能を生かして児童・生徒の図形に対する感覚を育て、旺盛な思考実験をさせることを通して児童・生徒に豊かな直観を育てることができることを明らかにする。研究の要点を更に具体的にまとめると次のようである。(1)実験授業を繰り返し、年度の前半では、具体的な操作や実験・実測などの具体的な活動としてどのような活動がふさわしいか、それらをどのような場面で用いるとよいかについての研究に重点を置き指導方法の開発を進めた。(2)年度後半は、コンピュータのシミュレーション機能を生かした実験授業を中心に進め、それを活用することが比較的有効な場面を明らかにするとともに、シミュレーション・ソフトの評価及び作成のポイントを整理した。算数・数学科で取り上げる内容の中で「図形」にかかわる内容は、「数と計算」(算数科)及び「数と式」(数学科)の内容に次いで多く、重要な内容である。これからの教育では、その質の充実が強く要請されており、算数・数学科の指導においても、論理的な思考に優れ、豊かな直観を働かせることのできる児童・生徒の育成を図る方向で現行学習指導要領が作成されている。本研究では、児童・生徒の図形に対する豊かな直観を育成するための指導方法の改善について、その具体的な方向を明らかにするとともに、授業実践を通してその可能性を検討することを目的とする。具体的には、まず第1に、具体的な操作や実験・実測などの具体的な活動を授業の過程でどのように位置づけたら、児童・生徒に豊かな直観を育てたり働かせたりすることができるかについて明らかにすることである。第2に、コンピュータのシュミレーション機能を生かして児童・生徒の図形に対する感覚を育て、旺盛な思考実験を行わせることを通してかれらに豊かな直観を育てることができることを明らかにすることである。平成6年度は、過去2年間の研究を踏まえて、次のような計画に基づいて研究を推進し、一定の成果を挙げることができた。すなわち、これまでの研究を基に、「図形」の指導方法の原理・原則を「豊かな直観を育成する」観点から、具体的な操作や実験・実測などの具体的な活動を生かすこと及びシミュレーション・ソフトによる思考実験の有効性に焦点を当てて基本的な視点を明らかにすることができた。さらに、並行して、これらの原理・原則について、小・中学校における実証授業を重ねそれらの一般性を高めるための事例研究を収集することができた。
脳塞栓急性期に発生する大血管血流動態異常の病態解明

平成15年度科学研究費補助金の交付内定後、268例の(ラクナ梗塞を除く)急性脳梗塞症例に対し経食道造影超音波法が施行され、超音波造影剤レボビストの経静脈的投与により、大動脈弓部の血流動態が視覚的に評価された。70例(26%)において、(拡張末期から収縮早期にかけて血管内を占めるような)巨大な逆行性渦血流が確認された。渦血流が確認された70例中49例(70%)は、心原性/アテローム血栓性脳梗塞が否定されcryptogenic subtypeと診断された。高度渦血流群は渦血流を認めない群に比べ、弓部の内中膜複合体(IMT)とstiffness parameter β、血中の総コレステロール値とLDLコレステロール値が有意に上昇していた(IMT 3.6±1.0 vs. 2.0±0.6mm;β13.4±4.4 vs. 9.3±2.0;TC 192±40 vs. 163±37mg/dl;LDLc 128±31 vs. 94±32mg/dl,P<0.05)。さらに可動性プラークを有する6例は、全例において高度渦血流の合併が確認された。高度渦血流を認めた70例中、同意の得られた33例に対してワーファリン投与(INR2.0-3.0)が開始された。発症3週間後のフォローアップ時に29例(88%)において渦血流の消失が確認された。大動脈弓部に一過性に発生する高度渦血流の存在は、塞栓源の特定が困難な脳梗塞症例における独立した発症規定要因である可能性が始めて示唆された。造影時の大動脈弓部内腔(プラーク近傍)における超音波後方散乱信号値の周期性変動量は、高度渦血流群が渦血流のない群に比し有意に高値であった(22.5±2.2 vs. 15.4±1.7dB,p<0.001)。我々が発見した渦血流(大動脈弓部血流動態異常)は、超音波後方散乱信号指標を用いて定量評価も可能であることが明らかになった。我々は、予備的検討において、大動脈弓部に一過性に発生する高度渦血流の存在が、これまで原因不明といわれてきた脳塞栓症の独立した発症規定要因である可能性をつきとめた。平成15年度科学研究費補助金の交付内定後、157例の急性脳塞栓症例に対して、経食道造影超音波法が実施された。我々は、経静脈投与にて肺毛細血管床を容易に通過し動脈系・左心系の染影を可能にした超音波造影剤レボビストを用いて、大動脈の血流動態を視覚的に評価した。すると、cryptogenic strokeと病型診断された36例中20例(56%)において、拡張末期から収縮早期にかけほぼ血管内を占めるような巨大な逆行性渦血流が確認された。この現象はcardioembolic strokeの34%、atherothrombotic strokeの44%、健常コントロール群の8%にしか認められなかった。さらに我々は、高度渦血流を認めた69例中同意の得られた32例に対しワーファリン投与(INR2.0-3.0)を開始し、発症3週間後のフォローアップ時に28例(88%)の高度渦血流の消失を確認した。高度渦血流群は渦血流のない群に比べ、大動脈弓部の血管径や内中膜複合体厚が有意に亢進していた。と同時に、慢性期に渦血流が消失する例はそうでない例に比べ(慢性期の)全血粘調度や血漿中のフィブリンモノマーが低い傾向にあった。大動脈弓部に(脳梗塞急性期に)発生する高度渦血流は、大血管の硬さや後負荷といった生理的因子だけでなく、血液粘度や凝固線溶機能の影響もうけ、両者が複雑に作用しあった結果生じるものであることが推測された。造影時の大動脈弓部内腔(プラーク近傍)における超音波後方散乱信号値の周期性変動量は、高度渦血流群が軽度渦血流群に比し有意に高値であった(22.5±2.2vs.15.4±1.7dB,p<0.001)。我々が発見した渦血流(大動脈弓部血流動態異常)は、超音波後方散乱信号指標を用いて定量評価も可能であることが始めて明らかになった。以上の結果は2003年9月に行なわれた日本心臓病学会(東京)と11月に行なわれたAmerican Heart Association(Orland)において口答発表された。

高度渦血流群は渦血流を認めない群に比べ、弓部の内中膜複合体(IMT)とstiffness parameter β、血中の総コレステロール値とLDLコレステロール値が有意に上昇していた(IMT 3.6±1.0 vs. 2.0±0.6mm;β13.4±4.4 vs. 9.3±2.0;TC 192±40 vs. 163±37mg/dl;LDLc 128±31 vs. 94±32mg/dl,P<0.05)。さらに可動性プラークを有する6例は、全例において高度渦血流の合併が確認された。高度渦血流を認めた70例中、同意の得られた33例に対してワーファリン投与(INR2.0-3.0)が開始された。発症3週間後のフォローアップ時に29例(88%)において渦血流の消失が確認された。大動脈弓部に一過性に発生する高度渦血流の存在は、塞栓源の特定が困難な脳梗塞症例における独立した発症規定要因である可能性が始めて示唆された。造影時の大動脈弓部内腔(プラーク近傍)における超音波後方散乱信号値の周期性変動量は、高度渦血流群が渦血流のない群に比し有意に高値であった(22.5±2.2 vs. 15.4±1.7dB,p<0.001)。我々が発見した渦血流(大動脈弓部血流動態異常)は、超音波後方散乱信号指標を用いて定量評価も可能であることが明らかになった。
α1-酸性糖蛋白質によるTLR4・マクロファージ制御を基盤とした腎疾患治療戦略

Alfa1-酸性糖蛋白質(AGP)は急性相反応物質として知られており、近年、我々はAGPの抗炎症作用を新たに見出してきた。本研究では、アドリアマイシン腎症マウスに対するAGPの腎保護効果を検討した。その結果、AGPの投与は、蛋白尿を減少させ、腎組織障害を改善した。その際、腎臓におけるTNF-alfaとマクロファージマーカーF4/80の発現量が減少した。また、マクロファージにAGPを添加したところIL-10の増加とiNOS発現減少が観察された。同時にCD163の発現も増大した。AGPはマクロファージに起因する炎症反応の沈静化を介して腎保護効果を発揮することを初めて見出した。H28年度は、炎症と蛋白尿を呈するアドリアマイシン腎症(AN)マウスに対するα1-酸性糖蛋白質(AGP)の治療効果と腎障害抑制機序について検討し、以下の知見を得た。1)ANマウスに対するAGPの治療効果を検討した。アドリアマイシン投与直後より、AGP 5 mgを5日間連続腹腔内投与し、3週間後の尿蛋白と腎組織障害を評価した。その際、腎臓におけるTNF-αとマクロファージ(Mφ)マーカーであるF4/80の発現量が減少していた。2)AGPによる腎障害抑制機序の解明を目的として、アドリアマイシン投与1週間後における外因性AGPの腎臓内局在を免疫染色にて確認した。その結果、投与したAGPの一部は腎糸球体に集積していた。この時、AGPの投与はANマウス腎臓において、M2型MφマーカーであるCD163 mRNA発現を有意に上昇させた。3)Mφの極性に及ぼすAGPの効果について、PMA刺激ヒト単球様THP-1細胞を用いて評価した。その結果、興味深いことにAGPの添加濃度依存的にIL-10とCD163 (M2マーカー)の発現上昇が観察され、iNOS (M1マーカー)発現は減少していた。以上の結果から、外因的なAGPの投与は糸球体バリア機能の保持による尿蛋白の抑制効果に加え、Mφに起因する炎症抑制効果の2つの作用により腎保護効果を有することが示唆された。本研究成果は、炎症と糸球体バリア機能を標的とした新たなCKD治療薬開発に向けての有用な基礎的情報なると思われる。研究代表者と分担者は熊本地震での被災のために研究スタートが遅れてしまった中でも、概ね目標に向けての研究を展開し、着実に成果を上げてきたと思われる。また代表者と分担者、連携協力者は有機的連携を実践し、相互の協力体制が築かれており、概ね順調に進展していると判断される。H29年度は、前年度に確認したAGPによる腎保護効果について、腎線維症モデルに対する効果並びにAGP誘導剤によるAGPを介した腎保護効果を検討した。加えて、前年度に引き続きAGPノックアウトマウスの作成を行った。1)片側尿管結紮によるマウス腎線維症モデルに対してAGPを予防的投与したところ、腎線維化の抑制が観察された。その際、腎組織中IL6、IL1beta等の炎症性サイトカインの抑制とCD163の産生亢進が観察された。2)THP1細胞をPMAで分化後、AGPを添加したところIL6、IL1betaの抑制とCD163の産生亢進が認められ、AGPによる腎線維化抑制効果にはマクロファージの可塑性が関与している可能性が示唆された。3)AGPを誘導する活性型ビタミンD3を投与したところ、血清中AGPの上昇が観察されるとともに、腎線維化の抑制作用が観察された。4)HepG2細胞並びにTHP1細胞にビタミンD3を添加したところ、AGPの発現上昇が確認できた。すなわち、ビタミンD3は肝細胞と単球またはマクロファージにおいてAGPを誘導することが確認できた。5)ビタミンD3の腎線維化抑制効果におけるAGPの寄与を検証するため、AGPノックアウトマウスの作成を行った。その結果、H30年3月にAGPノックアウトマウスの作成に成功した。ノックアウトマウスと用いた検討を次年度以降加えることで、腎線維症におけるAGPの寄与について検証する予定である。以上の検討より、腎線維症に対してAGPまたはAGP誘導剤が有効である可能性が示唆された。H28年度は震災の影響で、震災直後は研究活動が大きく出遅れたものの、現在は研究環境は概ね回復している。ただし、現在、薬学部動物舎の感染クリーンアップのために、やや動物実験が遅れる可能性が予想される。今後、代表者と分担者の有機的連携により研究展開を進める予定である。医療薬学
ウシ精子の鞭毛機能の評価基準の見直しを目的とした3次元ローテーション運動の解析

目的は,ウシの繁殖成績を回復させるための精子検査の評価基準の見直しである。現行の評価基準は「前進運動が良好な精子の運動様式である」という学説に基づいている。しかし私たちは,ウシ精子の前進運動に3次元ローテーションを伴う運動(R+)とローテーションしない2次元平面運動(R-)が存在し,鞭毛シグナル伝達分子の活性が低い精子は(R+)を,活性が高い精子は(R-)を示すことを報告した。この事実は検査の評価基準の見直しが必要であることを示唆している。しかし見直しに際して3次元ローテーションの詳細な知見が必要である。本研究ではウシ精子の3次元ローテーションの発生機構と役割を解明し,その現象の利用を検討する。
中世イタリアの宗教画における周縁と境界：画像と観者を結ぶ媒介機能に着目して

本研究は、13世紀末から14世紀前半にかけてのイタリア、とりわけ中部のトスカーナ地方で活躍した画家たちによる宗教画に、従来とは異なる角度から光をあてることを目的とする。すなわち、画面の周縁部や境界という、これまであまり重視されてこなかった領域に配置されたモチーフの表現と組み合わせを分析することで、それらが当時、絵を間近から仰ぎ見て拝んでいた聖職者や信者たちの視覚や触覚にどのような影響を及ぼしていたのかを考察したい。
柔らかな情報処理による構造材料信頼性評価システム自動構築の研究

計算力学シミュレーションと階層形ニューラルネットワークに基づく超音波非破壊評価システムにおいて、評価システムの各種パラメータを「柔らかな情報処理」により自動決定するとともに、システム全体をメッセージパッシングに基づく並列処理に対応させてシステムの高速化・高精度化を図ることにより、並列処理環境上に高精度な構造材料信頼性評価システムを自動構築する基本システムの開発を行った。まず、標準的なメッセージパッシングライブラリであるPVMを用いた動的問題の並列有限要素解析システムを開発し、固体内超音波伝播現象のシミュレータとして最適化を行った。これを、並列処理環境としてイーサネットで結ばれた複数のワークステーションに実装し、高速に解析できることを確認した。ニューラルネットワークについても、PVMを用いた並列ニューラルネットワークシミュレータを開発し、実際に上記並列処理環境に実装し処理速度の大幅な向上を確認した。最適なシステムパラメータの自動決定に関しては、固体内超音波伝播の並列シミュレータによる解析結果をもとに、並列ニューラルネットワークシミュレータと遺伝的アルゴリズムを組み合わせて、超音波観測点を欠陥同定に最適な位置に設定するシステムを構築した。さらに、こうした個々のシステムやシミュレータをHTML言語とCGIスクリプトにより総括することにより、WWWで広く用いられているWEBブラウザをユーザーインターフェースとし、ネットワークワイドでユーザーによる対話的な操作が可能な統合環境を構築した。
走査型電気化学ナノ顕微鏡の開発と局部界面反応発現機構・速度論の解明

新型電気化学測定技術を用いて、実用材料と環境の界面で起きるヘテロ反応の反応機構や速度論を検討した。LIGAによる微小プローブ電極の開発に成功したものの、同プローブのレーザー顕微鏡観察位置への調整が困難を極め、走査型電気化学ナノ顕微鏡(SECN)の構築には至らなかった。しかしながら、同軸二重構造微小電極のプローブ電極への適用により、走査型電気化学顕微鏡像の検出感度および面分解能を向上させることができた。同法、さらに微小電気化学セルを酸性硫酸塩環境中の多結晶体純鉄の腐食挙動その場観察に適用した結果、腐食速度が異方性を示すこと、その異方性が水素発生反応の活性に依存すること、不働態の安定性に素地面方位が影響すること等を明らかにした。1SECM用ナノプローブの作製光学ガラス上にLIGAにより白金細線パターンを真空蒸着し、絶縁被覆した構造を有するナノプローブを作製した。ポテンショスタットを用いて作製した電極特性を電気化学的に評価し、結果をLIGA加工にフィードバックさせた。さらに、電極部位をカーボンとするナノプローブの作製方法を検討し、電極代表長さサブマイクロメートルの微小リング電極および微小ダブルリング電極の開発に成功した。2高面分解能SECNシステムの開発1において開発したナノプローブをXYZ精密ステージに搭載し、試料表面近傍を走査、制御できるシステムを開発した。ナノプローブ電極および試料電極の電気化学情報をレーザー光学系による位置情報に組み合わせた高面分解能SECNシステムの仕様を決定した。3下地金属の結晶組織および組成解析硫酸水溶液中、多結晶鉄の溶解速度の面方位依存性を、モデル試料(焼鈍材)を用いて検討した。110<111<001面の順に腐食速度が大きいこと、鉄の溶解反応は対となる水素発生反応のカソード支配を受けることを見出した。本研究の目的は、実用材料界面構造ゆらぎのin situ解析を目指した超高分解能走査型電気化学ナノ顕微鏡(SECN)を開発と「材料下地金属組織および組成の不均一性を要因とする金属溶解反応および不働態皮膜形成反応の不均一性発現機構および局部反応速度分布の定量」への適用である。今年度、以下の事項について検討、研究成果を得た。1)前年度に引き続き、LIGA技術による電極代表長さ1μm以下のプローブ微小電極の作製と走査型レーザー変位計への組み込みによるSECNシステムの構築を試みた。電極代表長さ0.2μm程度のSECN用白金プローブ作製に成功したものの、電気化学測定への再現性ある取り付けに難航しており、SECNシステムの完成には至っていない。2)炭化水素熱分解法により同軸二重構造微小炭素化物電極を新規に開発した。本電極と多チャンネルポテンショスタットの動作により走査型電気化学顕微鏡(SECM)プローブに新しくシールド機能を付加した。白金/エポキシ樹脂境界モデル試料上のレドックスメディエータを用いたSG/TCモード測定において、検出感度と面分解能をそれぞれ45%ならびに5%程度、向上させることができた。3)2)にて開発したSECMを用いて、硫酸系水溶液中、多結晶鉄電極の鉄溶解反応速度に関する金属組織依存性を調査した。低指数面のうち001面の溶解速度が多結晶面に比べて低く、これが昨年度の調査結果(鉄単結晶電極の腐食速度は、低指数面のうち001面で最大)と逆転することを示した。不均一腐食反応の反応機構に関する各結晶粒面上の吸着反応物の寄与について考察した。実用材料界面構造ゆらぎのin situ解析として「材料下地金属組織の不均一性(ヘテロ)を要因とする金属溶解反応および不働態皮膜形成反応のヘテロ発現機構および局部反応速度分布の定量」を図り、以下の研究成果を得た。1)過去2年間に引き続き、LIGA技術による電極代表長さ1μm以下のプローブ微小電極の作製と走査型レーザー変位計への組み込みによる超高分解能走査型電気化学ナノ顕微鏡(SECN)システムの構築を試みた。電極代表長さ約200nmのSECN用白金プローブの作製に成功したものの、レーザー変位計ヘッドに取り付ける際の精度と位置決め再現性の確保に難航し、電極代表長さ相当の面分解能を有するSECNシステムの完成には至らなかった。2)長焦点落射照明型偏光顕微鏡の観察視野内に試料サイズ80μmΦ程度の微小電気化学セルを配置することにより、任意の材料試料表面局部の微小電気化学測定を可能とした。

硫酸水溶液環境中の純鉄の動電位アノード分極に本法を適用し、微小な電極試料に流れる電流応答を解析した結果、不働態皮膜の安定性が下地結晶粒の面方位に強く依存すること、さらに結晶粒界が不働態皮膜の不安定化と安定化の両方に影響することを検証した。3)消光型偏光反射解析法とCCDカメラを組み合わせて、溶液中に浸漬した材料表面で反射する偏光状態を観察する偏光反射解析顕微鏡を作製した。硫酸水溶液環境中、チタンをアノード分極した際に下地結晶面方位に依存して酸化皮膜が成長する過程、さらに溶液中に添加した臭化物イオンの攻撃により酸化皮膜が局部的に劣化し孔食が発生する過程を、6fpsの時間分解能で可視化することに成功した。
甘草毛状根でのチトクロームP-450遺伝子の導入によるグリチルリチン酸の生産

本研究を遂行するためには、glycyrrhizin生合成の最終段階で関与すると推定されるチトクロームP-450遺伝子を単離し,これをA.rhizogenesを介して甘草属植物に導入するため,第一に,各種甘草でのA.rhizogenesを介した外来遺伝子導入条件と導入遺伝子の検出条件を検討した。これと平行して,第二に,チトクロームP-450遺伝子単離のための諸条件を検討した。6種の甘草属植物を無菌的に播種して得られた芽生えあるいは幼植物体より得た葉,茎などを材料として用い,これに3株のA.rhizogenesを直接接種法により塗布感染処理した。生じた不定根を切り取り,Claforanを含むMurashige & Skoog寒天培地で除菌処理した後opineの存在を調べた。以上のようにして,6種の甘草より27株の毛状根の誘導に成功した。次に約40週水耕栽培しglycyrrhizinが検出されたGlycyrrhiza uralensisの根よりRNAを抽出した。このRNAを用いてRT-PCR法により逆転写反応を行い。得られたcDNAをtemplateとしてsense側のprimerをこれまで植物から単離されたP-450遺伝子の保存領域を含むCおよびDドメインよりdesignし,antisense側はprimerM13M4を用いてPCRを行った。PCR product中,500bp付近に数本のバンドが検出された。これらのバンドからDNAを回収しTAcloning kitを用いてpCRTMIIベクターに組み込んだ。インサートの確認はM13forwardprimerおよびM13reverse primerを用いて,コロニーPCRを行うことにより確認した。500bp付近にインサートを持つことが確認されたコロニーから,アルカリ-SDS法を用いてプラスミドを抽出し,dideoxy法によりインサートの塩基配列を決定した。これまでに計33クローンのシークエンスを行ったが,現在までのところ,P-450遺伝子の判定基準となるヘム結合中心であるシステインのコドンをもつクローンは得られていない。現在,水耕栽培でglycyrrhizinの生成が確認されているG.uralensisとglycyrrhizinが生成されないことが知られているG.echinataの双方から抽出したtotalRNAからcDNAを調製しsubtractive hybridization法によりP-450遺伝子を単離することを試みている。本研究を遂行するためには,第一段階としてグリチルリチン酸の生成に関与していると推定されるP-450遺伝子の単離が必須である。Glycyrrhiza uralensis芽生えより得た水耕栽培物のグリチルリチン酸含有量に関する予試験の結果,グリチルリチン酸含量は栽培開始後30週から50週目の間に0.2%前後から0.8%前後と急激に増大することが明らかになった。そこで,95年5月に開始した水耕栽培植物の,28, 32, 36週目の根を材料とし定法に従ってtotal RNAの抽出を試みた。それぞれの材料はRNA抽出の4週間前に,低温ストレスを与えるため,室内から屋外に移動した。

その結果,21.34g, 20.05g, 47.70gの根より,(1)384, (2)1020, (3)11000μgのtotal RNAが抽出された。このRNAを用いてRT-PCR法により,P-450遺伝子の単離を試みた。それぞれのtotal RNAをoligo (dT)_<20>-M4 primerを用いて42°C30min.逆転写反応を行った。こうしてえられたcDNAをtemplateとしてPCRを行った。PCRにおけるsense側のprimerをこれまで植物から単離されたP-450遺伝子の保存領域を含むCおよびDドメインよりdesignした。一方,antisense側はprimer M13M4を用いた。定法によりPCRを行うと(2),(3)由来のcDNAをtemplateとしたPCR product中,500bp付近に数本のバンドが検出された。現在,これらのバンドからDNAを回収しTA cloning kitを用いて増幅とシーケンスを行っている。シーケンスによりP-450遺伝子と確認したのち,このインサートをprobeとしてcDNAライブラリーより完全長のクローンを検索する。こうした得られたP-450遺伝子のcDNAを組織特異的発現の制御を受けないことが知られているカリフラワーモザイクウイルス35Sプロモーターに連結したプラスミドをE. Coliで構築し,これを接合伝達によりAgrobacteriumに導入する。このAgrobacteriumを用いて直接接種法により,G. uralensisをはじめ他の甘草属植物の無菌芽生えに感染処理する。次いで,できるだけ多くの不定根株を得,除菌処理後に形質転換による毛状根であることの確認と同時に培養物の抽出物についてグリチルリチン酸の有無を検索する。本研究を遂行するためには、glycyrrhizin生合成の最終段階で関与すると推定されるチトクロームP-450遺伝子を単離し,これをA.rhizogenesを介して甘草属植物に導入するため,第一に,各種甘草でのA.rhizogenesを介した外来遺伝子導入条件と導入遺伝子の検出条件を検討した。これと平行して,第二に,チトクロームP-450遺伝子単離のための諸条件を検討した。6種の甘草属植物を無菌的に播種して得られた芽生えあるいは幼植物体より得た葉,茎などを材料として用い,これに3株のA.rhizogenesを直接接種法により塗布感染処理した。生じた不定根を切り取り,Claforanを含むMurashige&Skoog寒天培地で除菌処理した後opineの存在を調べた。以上のようにして,6種の甘草より27株の毛状根の誘導に成功した。次に約40週水耕栽培しglycyrrhizinが検出されたGlycyrrhiza uralensisの根よりRNAを抽出した。
室内空気中エタノール濃度からみた「受動飲酒」の実態とその対策に関する研究

本研究は「受動飲酒」が実際に起こりうるかを確かめ、「受動飲酒」の有害性を検討するコホート研究の足掛かりとすることを目指している。平成29年度にて、ガスクロマトグラフ・タンデム型質量分析装置にタンデムカラム及び固相マイクロ抽出法を用いた、高感度且つより微量な毛髪からFAEEを検出できる測定方法を確立した。平成30年度において、確立した測定方法を用いて、参加者から得た毛髪(新生児毛髪)中のFAEE濃度の測定を実施した。最終的に32組の参加者に協力を得ることができた。参加者特性は、男児56.4%、単胎87.5%、経腟分娩56.4%、低出生体重児18.8%、早産15.6%、平均在胎週数38.0週、平均出生体重2930.0 g、平均出生身長47.6 cm、平均出生頭囲32.6 cmであった。親の飲酒に関する質問紙票調査の結果、出産時の母親の飲酒割合は6.2%、父親の飲酒割合は50.0%、飲酒していた父親のうち新生児と同じ空間で飲酒していた割合は86.7%であった。FAEE濃度測定の結果、FAEE分画のうち、Ethyl Myristate、Ethyl Palmitate、Ethyl Stearateの濃度はすべての検体で分析可能であった。しかしながら、Ethyl Oleateは32検体中25検体が検出限界(0.005 ng/mg)以下であった。Ethyl Myristate、Ethyl Palmitate、Ethyl Stearate及びEthyl Oleate、各々の平均濃度は、0.025ng/mg、1.154 ng/mg、0.032ng/mg及び0.189 ng/mg(7検体平均)であった。新生児の毛髪中FAEEはほぼすべて同居する親の飲酒により室内空気中に揮発されたものと仮定できる。今後、親の飲酒と新生児毛髪中のFAEEの関連を解析し、「受動飲酒」の存在を確かめていく。平成29年度は研究遂行上、おおむね順調に進展した。平成29年度では、より微量な毛髪からFAEEを検出するため、ガスクロマトグラフ・タンデム型質量分析装置による測定法を確立した。平成30年度の目標であった、「一般集団における参加者から得た毛髪中FAEE濃度を測定すること」を協力いただいた32組終えており、目標はおおむね達成できたと考える。現在、参加者の毛髪(新生児の母親)を追加収集しており、今後、それらの毛髪中FAEEの測定を実施していく。さらに、質問紙票の解析を進めていく。これらの結果は、国内外の学会発表及び学術雑誌に投稿することで、社会・国民に発信していく予定である。平成31年度において、平成30年度末日までに収集した参加者の毛髪中のFAEE濃度の測定を実施していく。参加者のリクルートと同時に、質問紙票を用いて、飲酒時期、飲酒量、酒種類等を詳細に把握したため、これらの解析も進めていく。また、可能であれば、毛髪提供者宅の室内空気中の揮発性有機化合物をカーボンモレキュラシーブ充填の捕集管を用いて捕集する。一連の作業を行い、測定結果と質問紙票によるエタノール濃度または捕集管にて捕集したエタノール濃度の相関関係を検証し、「受動飲酒」の実態を明らかにしていく。そうすることで、「受動飲酒」の有害性を検討するコホート研究の足掛かりとすることを目指す。研究成果は、国内外の学会発表及び学術雑誌に投稿することで、社会・国民に発信していく予定である。先の研究において、毛髪中のFatty Acid Ethyl Esters (FAEE)が飲酒量に関連があることを示し、正確な飲酒量の把握を可能にした。一連の研究において、飲酒歴のない者の毛髪中にFAEEが検出され、受動喫煙ならぬ「受動飲酒」の存在を疑った。近年、受動喫煙の有害性は様々な研究により明らかとなっているが、「受動飲酒」はその存在自体明らかでない。そこで、まず「受動飲酒」が実際に起こりうるのかを確かめ、さらに、一般集団を対象とした全国規模の疫学研究を実施する。「受動飲酒」を明らかにすることで、「受動飲酒」の有害性を検討するコホート研究の足掛かりとすることを目指している。今年度において、毛髪中FAEEと室内空気中エタノールの相関関係を確認することを目標とした。しかし、室内空気中のエタノールを採取するため、3つの捕集管を検討したが、検知管など一般のボランティアが扱うには難しいものが多く、適切に採取することができなかった。さらに、採取したエタノールが純粋にボランティア宅の室内空気中のものを反映しているか疑念が残り、毛髪中FAEEと室内空気中エタノールの相関関係を確認するまでには至らなかった。今年度は学会などに積極的に参加し、他の研究者に本研究の進展に関する意見を聞くこと、また研究の協力のお願いに尽力した。その結果、鳥取大学医学部周産期・小児医学分野の今本彩先生の研究班に、来年度以降、協力頂くこととなった。来年度、10組程度の新生児とその親の毛髪の採取、さらに親の飲酒量について質問する予定である。新生児は室内空気中以外のエタノールには曝露をされていない状態にあり、新生児の毛髪中FAEEはほぼ全て同居する親の飲酒により室内空気中に揮発されたものと仮定できる。来年度は、採取した毛髪と質問紙票から、毛髪中FAEEと室内空気中エタノールの相関関係を確認することを目指す。

理由として、平成27年度の達成目標であった、「毛髪中FAEEと室内空気中エタノールの相関関係を確認すること」まで至らなかったためである。室内空気中のエタノールを採取するため、3つの捕集管を検討したが、検知管など一般のボランティアが扱うには難しいものが多く、適切にエタノールを採取することができなかった。さらに、今年度検討した一般成人ボランティアにおける毛髪中FAEEは、純粋にボランティア宅の室内空気中エタノール濃度を反映しているか否かに疑問が残った。解決策として、室内空気中以外のエタノールには曝露をされていないと仮定できる新生児の毛髪を採取し、質問紙票から把握した親の飲酒量との相関関係を見ることにした。そうすることで、毛髪中FAEEと室内空気中エタノールの相関関係を確認する予定である。順調に進むことで、平成28年度に予定している検討課題まで追い付くことが可能と考えている。先の研究において、毛髪中のFatty Acid Ethyl Esters (FAEE)が飲酒量に関連があることを示し、正確な飲酒量の把握を可能にした。一連の研究において、飲酒歴のない者の毛髪中にFAEEが検出され、受動喫煙ならぬ「受動飲酒」の存在を疑った。近年、受動喫煙の有害性は様々な研究により明らかとなっているが、「受動飲酒」はその存在自体明らかでない。そこで、まず「受動飲酒」が実際に起こりうるのかを確かめ、さらに、一般集団を対象とした全国規模の疫学研究を実施する。「受動飲酒」を明らかにすることで、「受動飲酒」の有害性を検討するコホート研究の足掛かりとすることを目指している。平成28年度において、一般集団において「受動飲酒」の有害性を検討する疫学研究を実施するために参加者をリクルートすることを目的とした。平成27年度の報告にて、平成28年度において、10組程度の新生児とその親の毛髪の採取、さらに親の飲酒量について質問する予定とした。参加者のリクルートは順調に進んでおり、報告時現在、10組以上の参加者にご協力頂いている。新生児は室内空気中以外のエタノールには曝露をされていない状態にあり、新生児の毛髪中FAEEはほぼ全て同居する親の飲酒により室内空気中に揮発されたものと仮定できる。今後の方針として、平成29年度の早い時期に、採取した毛髪と質問紙票から、毛髪中FAEEと室内空気中エタノールの相関関係を確認することを目指す。平成27年度の進捗状況はやや遅れ気味であったが、平成28年度は研究遂行上、大きな問題もなくおおむね順調に進展した。平成28年度の目標であった、「一般集団において疫学研究を実施するために参加者をリクルートすること」を目標人数までおおむね達成できた。報告現在も、着実に参加者のリクルートを実施しており、平成29年度中には我々が先の研究で確立した方法により毛髪中のFAEEを測定できるものと推測する。平成27年度の報告時に予定していた、新生児の毛髪中FAEEと、質問紙票から把握した親の飲酒量との相関関係も平成29年度中に検討できる見込みである。先の研究において、毛髪中のFatty Acid Ethyl Esters(FAEE)が飲酒量に関連があることを示し、正確な飲酒量の把握を可能にした。近年、受動喫煙の有害性は知られているが、「受動飲酒」はその存在自体明らかでない。
議論マイニングのための議論に基づくベイズ的生成モデル

今日の様々な問題はオンラインフォーラム,ブログ,ソーシャルネットワーキングサービス,Q&Aサイト,カスタマーレビューサイトなどで議論されている.その結果.それらの問題は議論というかたちをもってウェブに存在している.議論マイニングはこれらの構造化されていないデータから議論の構造を特定することを目的とする野心的な研究領域である.最も難しい問題は論証(意見)間の攻撃関係や支持関係を特定することであるとされる.議論マイニングに対する支配的な方法は機械学習を伴う自然言語処理である.しかしその難問がその方法で十分に解決されると考えるのは今のところ過度に楽観的である.本研究課題では数理論理学を背景に持つ数理議論学と機械学習を合わせてこの問題に挑戦する.本年度は,議論に関する知識表現である議論フレームワークを構築する方法を研究した.このために抽象的議論を特徴付ける確率的生成モデルを与えその妥当性を示した.議論フレームワークが観測される状況での議論帰結の事後分布を分析し,それが抽象的議論の意味論的帰結と整合することを証明した.また,議論帰結が観測される状況での議論フレームワークの事後分布の性質を分析し,期待される結果が得られることを証明した.議論帰結が観測されるときの議論フレームワークの事後分布を近似するギブスサンプリングアルゴリズムを実装し,厳密推論と比較して計算量が改善されることを実証した.研究の内容自体は着実に進んでいるものの,計画していた難関国際会議に複数の論文が通らなかった.より丁寧な説明を論文中に展開するために論文の作成にかける時間をさらに増やす.難関国際会議へ投稿する論文と難関論文誌へ投稿する論文の作成を並行させて作業を効率化させる.今日の様々な問題はオンラインフォーラム,ブログ,ソーシャルネットワーキングサービス,Q&Aサイト,カスタマーレビューサイトなどで議論されている.その結果.それらの問題は議論というかたちをもってウェブに存在している.議論マイニングはこれらの構造化されていないデータから議論の構造を特定することを目的とする野心的な研究領域である.最も難しい問題は論証(意見)間の攻撃関係や支持関係を特定することであるとされる.議論マイニングに対する支配的な方法は機械学習を伴う自然言語処理である.しかしその難問がその方法で十分に解決されると考えるのは今のところ過度に楽観的である.本研究課題では数理論理学を背景に持つ数理議論学と機械学習を合わせてこの問題に挑戦する.本年度は,議論に関する知識表現である議論フレームワークを構築する方法を研究した.このために抽象的議論を特徴付ける確率的生成モデルを与えその妥当性を示した.議論フレームワークが観測される状況での議論帰結の事後分布を分析し,それが抽象的議論の意味論的帰結と整合することを証明した.また,議論帰結が観測される状況での議論フレームワークの事後分布の性質を分析し,期待される結果が得られることを証明した.議論帰結が観測されるときの議論フレームワークの事後分布を近似するギブスサンプリングアルゴリズムを実装し,厳密推論と比較して計算量が改善されることを実証した.研究の内容自体は着実に進んでいるものの,計画していた難関国際会議に複数の論文が通らなかった.より丁寧な説明を論文中に展開するために論文の作成にかける時間をさらに増やす.難関国際会議へ投稿する論文と難関論文誌へ投稿する論文の作成を並行させて作業を効率化させる.今年度に実施した作業の一部が別の研究課題の作業と重複した.その別の研究課題により近い作業であったためそちらの予算の使用を優先した.
マスト細胞と好酸球除去による新規喘息治療法の開発

GATA1およびGATA2の両因子は好酸球とマスト細胞の分化に重要なタンパク質である。本研究ではGATA因子欠損による好酸球とマスト細胞の減少が、気管支喘息等のアレルギー疾患に対してどの程度の耐性を与えるかを明らかし、新しい治療標的としての意義を確立する。さらに新規GATA因子阻害剤およびsiRNAによるGATA因子機能阻害が、好酸球とマスト細胞を削減もしくは機能抑制し、気管支喘息への治療効果を発揮するか検証する。
口腔腫瘍細胞を用いてフェノール関連化合物の抗炎症作用とアポトーシス誘導を探る

歯科用薬物として古くから使用されているフェノール化合物は抗菌作用、抗炎症作用があることが知られている。また最近、カレーの香料であるcurcumin、クローバー油のeugenol、緑茶のcatechinなどの植物フェノールの抗酸化作用も注目を集めている。この知見は植物フェノールなどのnatural productsが著明な抗炎症作用や白板症などの前癌病変の発癌予防作用を有している可能性を示唆した。そこで私は昨年度の研究で、米糠フェノールであるferulic acidとその二量体bis-ferulic acid、異性体isoferulic acidを使用して細菌リボ多糖体(LPS)刺激で誘導され、炎症や発癌に密接に関連していると考えられているcyclooxygenase-2(COX-2)の調節作用について検討した。その結果、これらのフェノール化合物のLPS誘導性COX-2発現の調節作用はその構造特異性に基づく、いわゆるフェノール作用に起因している可能性を示唆した。しかし、その詳細なメカニズムの解明には構造-遺伝子転写制御に関するさらなる検討が必要と考えられた。ゆえに、今年度の研究で合成メトキシフェノール化合物であるbutylated hydroxyanisole(BHA)とその二量体であるbis-BHAを使用してCOX-2発現の調節作用について検討した。刺激物は、歯周病原細菌の菌体表面に有する線毛を使用して歯周病の薬物療法の可能性についても併せて考察した。BHA(東京化成社)、bis-BHA(単量体から合成)を使用した。Porphyromonas gingivalis線毛は菌体洗浄後、陰イオンカラムクロマトグラフィにて精製した。COX-2発現はNorthern blot法で検討した。転写因子活性化はAP-1結合配列をLuciferase遺伝子に結合させたプラスミドを試験細胞にトランスフェクションしてその活性度を測定するルシフェラーゼレポーターアッセイで検討した。線毛刺激COX-2発現は二量体であるbis-BHAで著明に抑制された。しかし単量体では抑制されなかった。この抑制作用は転写因子AP-1やNF-κBの活性化抑制に起因していた。また、bis-BHAは中等度のフェノール性OH基解離エンタルピー(BDE)を持っていた。今年度の研究結果から、フェノール関連化合物の抗炎症作用はその構造特異性に基づく、いわゆるフェノール作用に起因している可能性が判明し、またその薬理作用が実際の歯科臨床の炎症性疾患においても有用であることの知見を得た。フェノール化合物は歯科用薬剤として歯科臨床に日常使用されている。フェノール化合物は抗酸化作用、抗炎症作用が知られており、これらの作用・メカニズムを明らかにするためフェノール化合物(フェノール、m-クレゾール、チモール、フェルラ酸、カフェイン酸、クマリン酸)、フェノール化合物の脱水素重合体(DHP-カフェイン酸、DHP-パラクマリン酸)のマクロファージ様細胞(RAW264.7細胞)に対する細胞障害性を検討した。また、これらの化合物がリポ多糖(LPS)で刺激されたRAW264.7細胞による一酸化窒素(NO)産生を抑制するか否かも検討した。その結果、細胞障害性はカフェイン酸>DHP-カフェイン酸>DHP-パラクマリン酸>フェルラ酸、クマリン酸>フェノール>m-クレゾール、チモールの順となりカフェイン酸が最も細胞障害性が強く、m-クレゾール、チモールが最も弱かった。次にLPS刺激RAW264.7細胞におけるNO産生を抑制する活性は、m-クレゾール<チモール<フェノール<クマリン酸<フェルラ酸<DHP-パラクマリン酸>DHP-カフェイン酸>カフェイン酸の順に強くなった。さらにフェノール、m-クレゾール、チモールについてはLPS誘導性iNOS遺伝子発現を抑制するか否かについて検討したところLPS誘導iNOS発現についてフェノール、m-クレゾール、チモールの添加でほとんど抑制しなかった。LPS(+)でCC_<50>/EC_<50>(SI値)をみると、この中でもフェノール化合物の脱水素重合体は細胞障害性を与えない濃度でLPS誘導性NO産生を強く抑制した。しかし、フェノール化合物の抗炎症作用のメカニズムについては十分に知られていない。ゆえに、私は昨年度の研究で、フェノール化合物(phenol、m-cresol、thymol)のマクロファージに対する作用について検討し、これらの化合物がそれ自身高濃度では細胞障害性を有するものの、顕著なROSやNOラジカルの補足活性を認めることを発見した。この結果はフェノール化合物が局所の抗炎症薬として十分機能する可能性を示唆した。最近、カレーの香料であるcurcumin、クローバー油のeugenol、緑茶のcatechinなどの植物フェノールの抗酸化作用が注目を集めている。そこで、私は今年度の研究で、米糠フェノールであるferulic acidとその二量体bis-ferulic acid、異性体isoferulic acidを使用して炎症や発癌に密接に関連していると考えられているcyclooxygenase-2の調節作用、樹木成分の一つであるligninの抗酸化作用、抗炎症作用について検討した。Ferulic acid、isoferulic acid(東京化成社)、bis-ferulic acid(単量体から合成)、lignin(松傘より精製)を使用した。LPSはEscherichia coli0-111B4由来(LBL社)を使用した。

抗酸化作用はDPPHラジカル補足により測定した。LPS刺激COX-2発現は二量体であるbis-ferulic acidと高濃度であるがisoferulic acidで顕著に抑制された。しかしferulic acidでは抑制されなかった。構造-COX-2抑制活性の関係を検討したところ中等度のフェノール性OH基解離エンタルピー(BDE)を持つ化合物にこの抑制作用が顕著に認められることが判明した。一方、ligninは腫瘍細胞特異的な細胞障害性を示したが、抗ウイルス作用に関連したマクロファージの活性化作用をも併せ持っていた。今年度の研究結果は、フェノール関連化合物の抗炎症作用がその構造特異性に基づく、いわゆるフェノール作用に起因している可能性を示唆した。しかし、その詳細なメカニズムの解明には構造-遺伝子転写制御に関するさらなる検討が必要と考える。歯科用薬物として古くから使用されているフェノール化合物は抗菌作用、抗炎症作用があることが知られている。また最近、カレーの香料であるcurcumin、クローバー油のeugenol、緑茶のcatechinなどの植物フェノールの抗酸化作用も注目を集めている。この知見は植物フェノールなどのnatural productsが著明な抗炎症作用や白板症などの前癌病変の発癌予防作用を有している可能性を示唆した。そこで私は昨年度の研究で、米糠フェノールであるferulic acidとその二量体bis-ferulic acid、異性体isoferulic acidを使用して細菌リボ多糖体(LPS)刺激で誘導され、炎症や発癌に密接に関連していると考えられているcyclooxygenase-2(COX-2)の調節作用について検討した。その結果、これらのフェノール化合物のLPS誘導性COX-2発現の調節作用はその構造特異性に基づく、いわゆるフェノール作用に起因している可能性を示唆した。しかし、その詳細なメカニズムの解明には構造-遺伝子転写制御に関するさらなる検討が必要と考えられた。ゆえに、今年度の研究で合成メトキシフェノール化合物であるbutylated hydroxyanisole(BHA)とその二量体であるbis-BHAを使用してCOX-2発現の調節作用について検討した。刺激物は、歯周病原細菌の菌体表面に有する線毛を使用して歯周病の薬物療法の可能性についても併せて考察した。BHA(東京化成社)、bis-BHA(単量体から合成)を使用した。Porphyromonas gingivalis線毛は菌体洗浄後、陰イオンカラムクロマトグラフィにて精製した。COX-2発現はNorthern blot法で検討した。転写因子活性化はAP-