hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
新型インフルエンザに対する迅速診断法の開発

H5亜型のトリインフルエンザウイルス(AIV)を比較的高感度で検出する発光系免疫抗体法を作製した。この診断法はエジプトで2007-2009年に鳥類から分離された10株のH5N1ウイルスのうち9株に反応した。また、H5N1, H5N2, H5N3, H5N9亜型それぞれ1株には反応を認めたが、H5亜型以外のトリIV9亜型やヒトIVには反応せず、H5亜型特異的に反応し、検出感度も市販の診断キットの感度と同等で臨床応用可能な性能であった。H5亜型の新型インフルエンザが発生した場合、危機管理対策上、感染伝播阻止のため迅速にH5型を診断する必要がある。現在、ヒトインフルエンザの診断に用いられている迅速診断法はA型かB型かを鑑別する方法であり、新型か従来型かを現行の診断キットで鑑別することは不可能である。現在PCR法による診断に要する時間は、検査施設へ検体を搬入後、早くて半日(約6時間)を要し、ウイルス分離法では2-3日を要する。そこで、本研究では、より迅速に10分以内でH5亜型を特異的に、かつ高感度に型別診断することが可能な検出法を確立し、迅速な感染伝播防止対策を可能にすることを目的とする。平成21年度は、複数の抗H5亜型HAモノクローナル抗体を認識する抗体を用いて、サンドイッチ法による検出系を作製した。その中で最も感度良くH5N9型のトリインフルエンザウイルスに反応する抗体の組み合わせを特定できた。この検出系の感度は、現在ヒトインフルエンザに際して臨床に応用されている検出法の検出感度よりもさらに10倍感度の高い検出法であることが判明した。現在、数種のトリインフルエンザウイルスを用いてその反応性を検討している。平成21年度は、H5亜型のヘマグルチニン蛋白を認識する抗体を用いて、比較的高感度なイミュノクロマト法を作製した。平成22年度はこの診断法の特異性を検討した。その結果、この診断法ではヒトインフルエンザウイルス20株には反応せず、また、H5亜型以外のトリインフルエンザウイルスにも反応しなかった。H5亜型についてはH5N1,H5N2,H5N3,H5N9亜型それぞれ1株には反応を認めた。しかし例外として、H7N2亜型1株に反応を認めた。今後、実用化に向け、世界で現在流行するH5亜型の流行株への反応性を検討する計画である。H5亜型の鳥インフルエンザウイルスによる新型インフルエンザが発生した場合、危機管理対策上、感染伝播阻止のため迅速にH5型を診断する必要がある。現在PCR法による診断に要する時間は、検査施設へ検体を搬入後、早くて約4時間を要し、ウイルス分離法では2-3日を要する。平成23年度は、平成21年度に作製したH亜型のヘマグルチニン蛋白を特異的に認識するモノクローナル抗体を用いた比較的高感度なイミュノクロマト法をさらに改良し、検出感度を向上させた。さらに、エジプトで2007-2009年に鳥類から分離された10株のH5N1ウイルスに対する反応性を検討した。その結果、9株に反応したが、2009年に鶏から分離された1株には反応しなかった。反応しなかった株は4種の亜系統の内亜系統Cに属する株であった。H5N1ウイルスに感染した患者から高頻度に分離されるA,B亜系統の2株には反応した。
環境ファージ配列の大量解析による有毒アオコ防除技術の確立に向けた基盤研究

ファージを利用した水圏生態系維持技術開発のため、環境におけるアオコ構成種ミクロキスティス-ファージ感染系の多様性の解明を試みた。その結果、ミクロキスティス群集はファージ感受性の異なる複数タイプから構成され極めて多様なファージに感染を受けていること、その出現頻度は変動するもののその多様性は維持されること、また出現頻度が高まった集団では耐性獲得進化が起こるとともに、ファージも耐性克服により多様化すると推察された。当該研究機関では有毒アオコ原因ラン藻ミクロキスティスに感染する唯一のファージMa-LMMO1を保有している。本ファージの遺伝子情報を活用し、アオコ環境におけるファージゲノムならびにミクロキスティスゲノムのウイルス耐性遺伝子領域に存在する無数のファージ由来配列(スペーサー)を大量に解読して、環境におけるウイルス・ミクロミスティスの多様性を明らかにし、アオコ防除技術の確立に向けた基盤を構築することを目的としている。23年度の成果は下記のとおりである。1.アオコメタゲノム解析:メタゲノムデータ取得のための最適化京都府広沢池より抽出したウイルスゲノムをパイロシーケンス法に供し、ウイルスメタゲノムを得た。重複する配列を除去し、平均長が600bpを超える約6万のユニーク配列を得た。本メタゲノムの約150配列はミクロキスティスに含まれる約1000個のスペーサー配列を含んでいた。このうち18配列はそれぞれ複数のスペーサー相同配列を有しミクロキスティス感染性ウイルスに由来することが強く示唆された。本手法はミクロキスティスウイルスにとどまらず未同定環境ウイルス配列を同定するための強力なツールとなる。2.ファージ耐性獲得機構の解明:耐性機作の明確化分離したファージ耐性変異株では、ファージ感受性野生株で大量に発現する約90kDaのタンパク質が、ほぼ消失していた。そのN末端アミノ酸配列を決定し、NIES298株ドラフトゲノムより本タンパク質をコードずる機能未知の部分配列を得た。ファージは本タンパク質をターゲットにしている可能性が示唆され、ラン藻組換え系への応用が期待される。3.新規ファージの分離Ma-LMMO1タイプファージに由来する環境クローン配列を解読したところ、採取する場所あるいは年によって配列が異なり、本ファージの進化速度が高いことが示唆された。新規ファージの分離に向けた重要な基礎情報となる。アオコ環境におけるファージゲノムならびにミクロキスティスゲノムのウイルス耐性遺伝子領域に存在する無数のファージ由来配列(CRISPRスペーサー)を大量に解読して、環境におけるウイルス・ミクロミスティスの多様性を明らかにし、アオコ防除技術の確立に向けた基盤を構築することを目的としている。25年度の成果は下記のとおりである。1.アオコメタゲノム解析:昨年度まで京都市広沢池での観測から、本環境にはウイルス感染履歴の異なる複数の株が共存していることが明らかとなった。今年度の調査により、同一の感染履歴を示す株が異なる年度でも出現すること、また年間を通じて出現頻度を変化させていることを見出した。このことによりミクロキスティスの遺伝的多様性は、ファージ感染による頻度依存選択が働くことによって維持されていることを支持した。また、海洋において本種近縁ラン藻とそのファージの探索を試みたが、明確な溶菌画分は得られなかった。2.ファージ耐性獲得機構の解明:前年度までにファージ感受性野生株で大量に発現する約90kDaのタンパク質の遺伝子領域を10株の本種ゲノムと比較したところ、株間で大きく異なることを見出し本領域がファージ侵入の標的となり、そのため宿主は変異を蓄積していると推察された。3.新規ファージの分離:昨年度広沢池より新たなファージを分離することに成功した。プレート培養系での本株維持を可能にした。尾部形態並びにゲノム部分配列からシホウイルスであるものの既存株とは大きく異なることが明らかとなった。全ゲノム解読を試みたが、液体培養系で大量のファージ粒子が得られず本研究期間での解読には至らなかった。これらの成果は、国際ジャーナル4報に掲載された。24年度の成果は下記のとおりである。1.アオコメタゲノム解析:京都市広沢池より計94株のミクロキスティスを分離し、CRISPR配列の解析、ならびに種内多様性の指標である16S-23S rRNA内部介在配列に基づく系統解析を行った。その結果、本環境にはウイルス感染履歴の異なる複数の株が共存しており、過去の感染履歴が一致し、ある時点で異なる感染履歴を示す株も認められた。一方、尾部タンパク質配列の大量配列解析から、大きく5つの異なるMa-LMM01タイプファージが存在し、密度が多くなるとそれらの12塩基異なる配列が出現した。

以上より、ファージとミクロキスティスの遺伝的多様性は、頻度依存選択が働くことによって維持され、宿主との軍拡競争型共進化により創出されることが明らかとなった。2.ファージ耐性獲得機構の解明:前年度までに明らかとしたファージ感受性野生株で大量に発現する約90kDaのタンパク質の遺伝子配列について、変異株と比較を行ったが、上流の転写調節領域を含め両者で完全に一致し、変異株においてパク質の転写制御における変異が起こっていることを示唆した。3.新規ファージの分離:広沢池より新たなファージを分離することに成功した。そのゲノムの一部配列を決定したところMa-LMM01タイプとは完全に異なり、データベースに登録されている他のファージとも大きく異なった。全ゲノム解読に向けた解析を進めている。これらの成果は、微生物部門の国際的トップジャーナル3報に掲載された。アオコ環境は極めて生物量が多いことから、初年度はウイルスを調整しメタゲノム配列を得るための検討実験を数多く行うことが必要と想定していた。しかしながら、我々が以前より分離ウイルス株の調整法に用いていた手法がほぼそのまま転用可能であったため、アオコ環境よりウイルスメタゲノムを得ることに成功した。さらに宿主ゲノム上のウイルス履歴配列を用いることで、新規なウイルス配列を見出すにいたった。また、ウイルス耐性メカニズムについても、その候補遺伝子を見出すことに成功したことから、計画以上の進展と判断するに至った。25年度が最終年度であるため、記入しない。初年度にメタゲノム配列データを得ることができたことにより、本年度は、ミクロキスティス株の分離株についてのウイルス感染履歴を多く解読するに至った。これにより、本感染系がウイルスーファージとの共進化を知るうえで極めて貴重なモデルとなりうることを示し、国際的にも高い評価を得た。さらに、新規ファージの分離に成功するとともにそのゲノム解読に向けたシーケンスを終えたことから、計画以上の進展と判断するに至った。計画した手法を用いて初年度から新規ウイルス配列を見出すことに成功したことから、予定通りウイルス感染履歴配列(スペーサー)配列の解読数を増やし、さらに多くのミクロキスティス感染性ウイルスに由来する配列探索を行う。今年度内には、宿主とウイルスの組み合わせの多様性の実態解明を目指す。また、ウイルス耐性への候補遺伝子を見出すことに成功したことから、予定を大きく前倒だおしし組換え体を用いた本遺伝子の機能解明を目指す。新規ファージの分離に成功したことから本年度はそのゲノム解読と新たな感染戦略の解明することを優先する。さらに、大量並列解析によって昨年度までに得た、CRISPRスペーサー配列とメタゲノムデータの解析を進め、宿主-ファージの組み合わせの多様性の実態解明を目指す。また、ファージ耐性に寄与する遺伝的変異を明らかにするためファージ耐性変異株のゲノム解読も試みる。
計算機幾何学による生体構造の三次元計量システムの開発と応用

病理学の研究で扱う臓器・組織・細胞などはいずれも空間を占める三次元的対象だが、構造の研究手段は実際は二次元断面像の観察に限られている。断面像から空間の数量的情報を推定するstereologyの方法も、生体解析の多くの局面で有効でない。そこで連続切片像を計算機に入力して三次元構造デ-タとし、三次元像を得ると同時にデ-タ間の演算によって必要な数量を得るシステムを開発した。以下の課題についてアルゴリスムを確立し、実用化の見通しを得た。1)粒体計量の計算機支援:細胞・細胞核・膵ランゲルハンス島など空間中に分散する「粒体」の個数・大きさの分布を得る。連続切片像を入力して空間中に長方体を重積した計測プロ-ブ(sampling brick)を設け、内部に含まれる粒体の計量を行なう。システムは肝細胞・肝癌細胞の核、糖尿病・非糖尿病膵のランゲルハンス島に応用し、病理学的にきわめて興味深い結果を得た。2)空間距離分布による三次元構築型の解析:三次元における構築型を数量化するのに有用なアルゴリスムを考案した。空間に設けた多数の無作為観測点から関心構造へのユ-クリッド距離を計算し、その分布を指標として構築型の差を把握する方法である。これを8症例の肝臓を用いて血管構築の解析に応用し、慢性肝炎などが肝硬変に移行するいわゆる肝組織改築について進行方向・進行度を数量的に記述することを可能にした。3)病態構造の位相幾何学的解析:病変には癌の組織構築など、位相的性質が基本的特徴となるものがある。かかる対象の解析用に、ネットワ-ク位相不変量(1次Betti数)の演算システムを開発した。また位相的性質を可視化するため、三次元構造のスケルトン化(細線化)を試み、近くアルゴリスムを樹立の予定である。生体組織の連続切片からの三次元再構成は、病理学・解剖学では重要な研究方法であり、近年は計算機による像構成が可能となったが、計算機に入力した構造デ-タの利用法としては三次元画像の抽出にとどまり、三次元生体計測など解析を目的とした利用は行われていない。三次元計測にはステレオロジ-の理論を用いて二次元断面像から行う方法もあるが、応用範囲は意外に狭い。そこで本研究では連続組織切片像を逐次構造デ-タとして入力し、計算機幾何学のアルゴリスムにより必要な三次元量の数値計算を行い、ステレオロジ-無効の生物学的課題に数値解を得ることを目的とした。平成2年度は計算機システムの設営を行い、連続切片からの画像デ-タの入力・三次元構造デ-タのファイリング用ソフトの準備を行った。次に、このシステム上に細胞・核・膵ラ氏島など、生体におけるいわゆる粒体の計測を行い、数・大きさの分布を解析するための方法論を完成した。これを細胞核(肝細胞・肝癌細胞)に応用して核体積分布の解析が可能であることを確かめた。また膵ラ氏島への応用とそのための試験的検討を行い、ほぼ実用に移し得るとの見通しを得ている。この面における成果は11.雑誌論文に揚げる報告として取り纏め、英国王立顕微協会の機関紙に投稿した。一方、空間における距離分布解析用のソフトウエアを作成すべく準備にとりかかっている。これは特定の組織構造、あるいは病変の空間中の分布、それと他の既存構造との空間的関係などを解析するための、きわめて応用範囲の広い数量化の方法を提供するもので、3年度の一目標である。以上の種々の可能性を、計算機幾何学の三次元的構造解析への応用と題して英文総説とし12.図書に記した論文に纏めた。

これについては近く刊行の予定である。平成2年度は、補助金により導入したシステム(Hewlett-Packard社ワ-クステ-ション)を用いて連続切片からの画像デ-タの入力・三次元構造デ-タのファイル作成のためのソフトェアを準備した。これを基礎として平成3年度は次の病理学的課題を対象として、連続切片から生体構造を解析するための計算機幾何学的アルゴリスムを確立し、実用化の見通しを得た。1.細胞・細胞核・膵ランゲルハンス島など、いわゆる「粒体」の計量システムを確立した。このシステムを2種の課題に応用してpilot studyを行った。第一は正常肝細胞・肝癌細胞の核を対象とした解析で、正常例では核DNA量のploidyに相当する規則的な周期性分布、肝癌ではaneuploidyに相当する非周期性分布が得られ、核の大きさがもつ生物学的意義が明らかになった。他方では糖尿病・非糖尿病膵のランゲルハンス島の計量を行い、糖尿病時の島の個数・大きさの分布などに重要な知見を得た。これらにより、今回設定したシステムの粒体計量における有効性は十分に示されている。この問題については現在、論文を投稿中である。2.組織の三次元構築型における特徴を、無作為観測点からの空間距離分布パタ-ンを利用して抽出するためのアルゴリスムを確立した。これを肝臓の血管構築とその正常からの偏りの解析に応用し、慢性肝炎から肝硬変にいたるいわゆる小葉改築過程の程度を数量表現することに成功した。この成果は第6回計量病理学国際ワ-クショップ(1992年9月、イタリア)の基調講演として発表した。論文は一篇は現在印刷中、さらに一篇を準備中である。3.生体構造、またはある種の病変では、三次元ネットワ-クとしての性格が形態上もっとも本質的な局面となっている場合があり、この様なものに対して位相幾何学的性質を抽出するためのアルゴリスムを確立した(1次Betti数の計量)。これに関連して、三次元構造の細線化を可能にする様な画像処理アルゴリスムの開発を試み、このプロジェクトは現在、東北学院大学工学部グル-プにより進捗中である。三次元細線化は画像処理として未解決の課題であり、完成すれば生体構造の骨格を解析する上で威力を発揮すると期待している。
イソプレノイド代謝研究におけるアーキアからの新展開

アーキアが生産するイソプレノイド化合物には、エーテル型膜脂質や糖キャリア脂質、膜内在性の電子伝達体などバクテリアやユーカリアの類縁化合物とは大きく異なった構造を含むものが多い。それらの生合成に関わる新奇酵素を単離し、また、イソプレノイド代謝関連酵素の特性評価や反応機構解析を行うことで、アーキアにおけるイソプレノイド代謝の理解を深めると共に同代謝経路の進化に関する知見を得ることができたアーキアが生産するイソプレノイド化合物には、エーテル型膜脂質や糖キャリア脂質、膜内在性の電子伝達体などバクテリアやユーカリアの類縁化合物とは大きく異なった構造を含むものが多い。それらの生合成に関わる新奇酵素を単離し、また、イソプレノイド代謝関連酵素の特性評価や反応機構解析を行うことで、アーキアにおけるイソプレノイド代謝の理解を深めると共に同代謝経路の進化に関する知見を得ることができたアーキアにおいてイソプレノイド代謝の出発点となる2つの化合物、イソペンテニル二リン酸とジメチルアリル二リン酸の間の異性化反応はタイプ2イソペンテニル二リン酸イソメラーゼによって触媒される。好熱好酸性アーキアSulfolobusshibatae由来の同酵素について、基質を結合した状態の立体構造解析に初めて成功した。さらにその構造をもとに部位特異的変異導入等の酵素学的な研究を進めることで、同酵素に結合したフラビンモノヌクレオチドが一般酸塩基として異性化反応の触媒に関わることを明らかにした。これまで一般的にはフラビン補酵素の機能は酸化還元反応の触媒と考えられてきたが、本発見によりこれまで知られていなかった一般酸塩基触媒としての機能を初めて証明することができた。同時に、フラビンが一般酸塩基として機能する際の分子機構についても新規性の高い提案を行っている。同酵素はアーキアだけでなく、黄色ブドウ球菌など一部の病原性バクテリアにおいても生育に必須であるため、今回明らかにざれた反応機構は将来の抗生剤開発に役立つことが期待される。また、アーキアのイソプレノイド膜脂質代謝において生合成中間体のゲラニルゲラニル基の二重結合を全て還元し、膜脂質のコア構造の形成に関わるゲラニルゲラニル基還元酵素についても、立体構造解析と酵素学的な研究を進めた。未発表のため詳細は記載できないが重要な知見が得られており、現在もそれらの発表に向けデータ収集を続行中である。アーキアのイソプレノイド代謝において、イソプレン鎖の連続的な伸長を触媒するプレニル二リン酸合成酵素の探索および機能改変を進めた。第1に、メタノフェナジンの生合成に関わるゲラニルファルネシル二リン酸合成酵素の遺伝子クローニングと特性評価を行った。メタノフェナジンはメタン生成アーキアMethanosarcinamazeiのメタン生成機構において膜内在性電子キャリアとして働く化合物であり、その生合成経路は全く解明されていなかった。我々は既知酵素との相同性をもとに目的酵素の候補遺伝子をM. mazeiゲノムから見出し、その異種発現系を大腸菌において構築した。組換え酵素を精製することでゲラニルファルネシル二リン酸合成酵素活性を確認し、さらに、同酵素が膜脂質生合成に関わるゲラニルゲラニル合成酵素の生成物を基質としてメタノフェナジンの前駆体を合成していることを明らかにした。また、他生物由来のプレニル二リン酸合成酵素との間の分子系統を解析した結果、アーキア膜脂質の生合成に関わる酵素ではなく、呼吸鎖キノンの生合成に関わる酵素と同酵素との類縁性を明らかにした。第2に、好熱性アーキアSulfolobus acidocaldariusにおいて膜脂質の生合成に関わるゲラニルゲラニル二リン酸合成酵素を用い、真核生物Saccharomyces cerevisiae由来の同酵素の生成物鎖長制御機構での重要性が過去に示されているG(Q/E)モチーフ周辺の構造が、同酵素にとっても同様に重要か否かを確認した。その結果、アーキア酵素においても同モチーフ周辺の配列が生成物鎖長に関わることを明らかにした。
髄意運動発現における大脳基底核の役割-神経生理学的研究-

1.目的大脳基底核は随意運動の神経過程に関与すると考えられているが、その神経機序は明らかではない。サルのオペラント条件づけを用いた被殻のニューロン活動を調べる実験から、現在までに次の事実が明らかである。被殻には、(1)持続的な自発放電をし、運動開始のための手がかり刺激に応答するが、刺激によって運動反応が誘発されない時には応答も消失する【I】型細胞、(2)自発放電は少いが運動に同期して相動的な活動をする【II】型細胞とがある。本研究では【II】型細胞が運動と無条件に関連して活動するのか、または【I】型細胞のように特定の行動条件に限って活動するのかを明らかにすることを目的とした。2.方法(1)サルのオペラント条件づけ:日本ザルを訓練して感覚刺激によって(光ランプと音)、腕と口の反復運動を行わせた。(2)ユニット記録:ガラス被覆のエルジロイ電極を大脳を通して被殻に刺入し、単一ニューロンの活動を記録した。3.結果と考察ユニット記録後その部位で微小電気刺激を行い、記録された細胞がどの体部位を代表する部位にあったかを確認した。72個の【II】型細胞を腕の領域より、58個の【II】型細胞を顔と口の領域より記録した。これら130個の【II】型細胞の65%の細胞は感覚刺激で誘発される腕や口の反復運動に先行して1回だけ相動的な活動をしたが、反復運動中には活動しなかった。一方、残りの35%の細胞は反復運動に1対1対応で活動した。反復運動に先行して1回だけ活動する細胞は運動の方向、速度や力などのパラメータの制御に関与するとは考えられず、特定の感覚刺激と対応して学習された運動をいわば条件反射のように自動的に行うことに関与する可能性が新しく示唆された。反復運動に1対1対応で活動する細胞は筋活動より遅れて現われたので、Delongらの主張と一致して運動指令の随伴発射を受けて運動をモニタするのに役立つのかも知れない。
超臨界流体を利用した放射性金属・カーボンナノコンポジット材料の創製

本研究では、放射性核種を長期安定に保管廃棄できる新しい手法の構築を目指し、カーボンナノチューブ(CNT)内に核種を内包・固定化したナノコンポジット材料を作製しうる超臨界水熱合成法の研究開発を行った。ウランやランタノイド等の金属元素とCNTを含む水溶液に対して超臨界水熱処理を行い、反応前後の各金属元素の濃度を解析した結果、金属酸化物がCNT上に吸着したナノ粒子として回収できることを見出した。また、固体試料はプレス成型することでペレット化できることを実証した。新しい廃棄物保管手法の基盤技術を構築したと言える。本研究では、放射性金属核種を長期安定に保持できる新しい手法の構築を目指し、カーボンナノチューブ(CNT)内に金属核種を内包・固定化したナノコンポジット材料を作成しうる超臨界水熱合成法の研究開発を行うものである。本年度は、単酸化物ナノ粒子の合成と、これら単酸化物とCNTとのナノ材料合成、および合成した化合物のキャラクタリゼーションを実施した。具体的には、ウランや3価ランタノイド元素を含む硝酸水溶液を、バッチ式水熱合成システムを用いて超臨界水熱処理を行って、イオン濃度、酸濃度、反応時間・圧力、保持時間等に対する依存性を調べた。反応後、急速に減圧・冷却することで得た沈殿物をSEM, XRD等で計測し、粒子の形状,粒径,組成を解析して、粒子生成条件を検討した。その結果、Ce(III-IV), Pr(III-IV), Tb(III-IV)のように、価数の変化を起こすことのできる金属イオンは、超臨界水熱処理によって酸化物ナノ粒子として沈殿し、それぞれCeO2蛍石型立方晶、PrO2角型結晶、TbO2針状結晶となることを見出した。一方、500°C程度では価数変化を起こさないNd(III)やSm(III)のような金属イオンでは、酸化物ナノ粒子化しないことを見出した。また、超臨界処理後の溶液中の亜硝酸及び硝酸濃度を定量した結果、価数変化を誘起する酸化・還元剤は、硝酸水溶液の高温処理により生成する亜硝酸であることが分かった。放射性廃棄物を長期安定的に保管・管理する技術の確立は緊縛の課題である。本研究では、核種を一時的に保管・取出できる新しい技術の構築を目指し、カーボンナノチューブ(CNT)内に金属核種を内包・固定化したナノコンポジット材料を作成するための超臨界水熱合成法の構築を目指すものである。本年度には、硝酸ウラニル水溶液に対するバッチ式超臨界水熱合成試験を実施し、得られた生成物の特性をXRDにより調べた。その結果、超臨界水処理によって、UO2(OH)2、UO3、U3O8等のウラン酸化物が生成するが、それらの生成率は硝酸濃度や反応条件(温度・圧力・時間)によって変化することが分かった。また、これら生成物のSEMを実施したところ、低い硝酸濃度・短い反応時間では有意な結晶生成は観測できないが、硝酸濃度と反応時間の増加に伴って、プレート状・棒状あるいはフィルム状の均一な結晶が生成していることが分かった。反応条件の変化に応じて、これら結晶の量・形状も変化した。さらに、超臨界条件下での硝酸水溶液のUVスペクトル測定を行い、200°C以上から硝酸のピークは消滅して、HNO2やNO2に帰属できるピークが出現することを見出した。これらの結果から、硝酸ウラニルの超臨界水処理においては、単純な加水分解反応や酸化反応だけでなく、水の解離に伴って生じる水素によってU(VI)からU(V)やU(IV)への還元反応が進行していることが明らかとなった。超臨界水熱合成試験の結果、ウランやランタノイドの酸化物化の条件を解明すると共に、その反応機構を明らかにすることに成功した。本年度は、粒子化可能な希土類元素(Ce, Pr, Tb)を含む複合酸化物の超臨界水熱合成試験を、様々な条件下(温度、圧力、反応時間等)で実施し、得られた粉末粒子の組成及び形状をXRD及びSEMを用いて解析した。0.1Mの硝酸Ce(III)と硝酸Pr(III)を混合した二成分試料では、500°C、40MPa、5分の反応条件において、Ce(IV)とPr(IV)への価数変化が引き起こされ、立方晶CeO2と板状結晶PrO2が複合した(Ce,Pr)O2±x酸化物粒子へ転換することが分かった。また、硝酸濃度が増加するにつれて、得られる粒子が球状へ変化した。同様の現象は、Ce/Pr/Tb三成分試料でも見られており、立方晶CeO2,板状結晶PrO2に針状結晶TbO2が加わった(Ce,Pr,Tb)O2±x酸化物粒子が、硝酸濃度の増加に伴って筒状へ変化した。しかし、硝酸濃度が高くなり過ぎると、反応セルからNiが溶出してしまうため、反応セルの材質改善など、Ni溶出を抑制する対策が必須であることが分かった。また、硝酸溶液を用いた多層CNTの表面改質状態について検討した。CNTを含む硝酸溶液を140°Cで3時間還流させ、ろ過・洗浄後、350°Cで焼成させた。

改質後のCNTのIRスペクトル測定及び塩基性水溶液にて滴定を行った結果、表面官能基はカルボニル基及びヒドロキシル基に変化していることが示唆された。また、TEM観察より、改質後のCNTは壁面構造が破壊されていることを確認した。以上より、硝酸水溶液中のCNT及び金属イオンを同時に超臨界処理することで、金属イオン固定化CNTが合成できると考えられる。カーボンナノチューブを含む水溶液の超臨界水熱合成において、最適な反応条件を決定することに時間を要したため。本研究では、放射性核種を長期安定に保管廃棄できる新しい手法の構築を目指し、カーボンナノチューブ(CNT)内に核種を内包・固定化したナノコンポジット材料を作製しうる超臨界水熱合成法の研究開発を行うものである。本年度は、東電福島原発事故廃棄物の処理処分も鑑み、様々な金属元素(セシウム、ストロンチウム、ランタノイド類、ウラン)を対象として、これら金属元素とCNTを含む硝酸水溶液の超臨界水熱合成試験を実施した。1100mMの濃度に調整した硝酸セシウム(Cs)、硝酸ストロンチウム(Sr)、硝酸セリウム(Ce)、硝酸プラセオジウム(Pr)、硝酸テルビウム(Tb)、硝酸ウラニル(UO2)の水溶液と、規定量のCNTとを超臨界セルに導入し、400°C、30MPaで30分間超臨界処理を行った後、回収した液体及び固体試料をそれぞれ分析した。回収した水溶液中に含まれる各金属元素の濃度をICP質量分析装置で測定することで、CNTに吸着した各金属元素の濃度を算出すると共に、吸着挙動を解析した。その結果、いずれの元素においても、CNTに対してFreundlich型の吸着挙動を示すことが分かった。また、回収した固体試料はTEM観察やXRD分析を行って、CNT及び金属酸化物の構造を調べた。その結果、超臨界水処理によってCNT表面がC=O, OH, N-Oのような官能基に改質あるいは表面が構造破壊を起こしていること、また、金属イオンは酸化物に転換されていることが確認できた。さらに、回収した固体試料はプレス成型することでペレット化できることを実証した。以上より、CNTに金属元素を固定化したナノコンポジット材料作製のための超臨界水熱合成法の基盤技術開発に成功したと言える。本研究では、放射性核種を長期安定に保管廃棄できる新しい手法の構築を目指し、カーボンナノチューブ(CNT)内に核種を内包・固定化したナノコンポジット材料を作製しうる超臨界水熱合成法の研究開発を行った。ウランやランタノイド等の金属元素とCNTを含む水溶液に対して超臨界水熱処理を行い、反応前後の各金属元素の濃度を解析した結果、金属酸化物がCNT上に吸着したナノ粒子として回収できることを見出した。また、固体試料はプレス成型することでペレット化できることを実証した。新しい廃棄物保管手法の基盤技術を構築したと言える。超臨界水熱処理試験は順調に進行しており、単酸化物合成においては、すでに興味ある成果が得られている。これら単酸化物とCNTとのコンポジット化条件がシビアであることが分かってきた。超臨界水熱合成試験の結果、ウランやランタノイドの酸化物化の条件を解明することができた。これら金属酸化物とCNTとのナノコンポジット化について集中的に検討を進める。反応条件の最適化ができたことから、今後は、CNTと金属イオンを含む条件で合成を実施し、目的を達成する。分析化学、放射化学、マイクロ化学超臨界水熱処理によって、簡便に単酸化物をCNTに内包あるいは固定化させる必要がある。よって、反応条件の最適化と反応機構の解明を集中的に進める。
神経成長円錐のアクチン再編を伴う小胞輸送機構

神経回路形成または再生時において、軸策を先導する成長円錐は運動性に優れた構造を形成する。成長円錐の最前線(先導端)では連続的なアクチン細胞骨格の再編と形質膜の回収が頻繁に生じるが、両者の関係性は明らかになっていなかった。我々は超解像顕微鏡(3D-SIM)を用いた成長円錐の解析で、F-アクチン束化によるフィロポディア形成に伴って小胞膜タンパク質シナプトフィジン(Syp)陽性の小胞が先導端で生じることを発見した。先導端のSyp小胞はBARドメインタンパク質のエンドフィリンA3、ダイナミン1依存性、クラスリン非依存性のエンドサイトーシスで生じ、脂質ラフトの回収に関係することを明らかにした。成長円錐の先導端は伸長する軸索の最前線で、膜上に存在する多様な受容体-リガンド相互作用で神経成長やシナプス形成、神経再生が決定付けられる。申請者は小胞蛋白質シナプトフィジン(SYP)のGFPライブイメージングで、成長円錐の先導端近傍にSYPが多数の点状に集積する様子を観察した。この先導端のSYP集積はダイナミンと共局在したことから、エンドサイトーシスによる小胞形成が先導端で生じると考えられる。これらの小胞のほとんどはクラスリンとは共局在せず、一方でBARタンパク質のエンドフィリンと共局在することを明らかにした。この結果は、成長円錐の先導端でクラスリンが介在しない、エンドフィリン介在性のエンドサイトーシスが生じることを示唆する。先導端はF-アクチンに富む部位であることから、エンドサイトーシスとF-アクチンの関係を2色蛍光ライブイメージングで調べた。フィロポディアのごく近傍でエンドフィリン、およびSYPの集積が生じることを明らかにした。先導端へのエンドフィリンの集積は1)アクチン重合阻害、2)アクチン束化因子ファシンの発現抑制、のいずれでも顕著に消失した。これは先導端のエンドフィリン介在性エンドサイトーシスがフィロポディア形成に伴って生じる可能性を強く示唆する。成長円錐におけるエンドサイトーシスの空間分布を明らかにするため、エンドフィリンおよびクラスリンの分布を全反射照明蛍光(TIRF)像で比較した。クラスリンは成長円錐の基底部に分布がみられたのに対し、エンドフィリンは基底部にほとんど分布していなかった。超解像顕微鏡による3次元蛍光像の結果と合わせると、クラスリンが成長円錐の基底部に多く分布しているのに対し、エンドフィリンはアクチン束に沿って成長円錐の表面側(非接着面)の膜直下に集積することが分かった。成長円錐の先導端で生じるSYP集積がエンドサイトーシスによるものであることをダイナミン、エンドフィリンとの共局在を示すことで証明した。クラスリン介在性エンドサイトーシスではみられない、フィロポディアとの関係性を初めて明らかにした。成長円錐の先導端は伸長する軸索の最前線で、膜上で生じる多様な受容体ーリガンドの相互作用によって神経成長・再生、シナプス形成が決定付けられる。本課題研究では、超解像顕微鏡(構造化照明法、SIM)を用いて、成長円錐の先端部でF-アクチンの伸長および束化によるフィロポディアの形成が生じるとき、その近くでシナプトフィジン(Syp)陽性の小胞が生成することを明らかにした。生じたSyp小胞はアクチン-ミオシン相互作用で生じるアクチン逆行性流動に依存して、成長円錐の中心部に向かって移動した。先導端でSyp小胞が生じる際、クラスリンの集積は見られず、代わりにエンドフィリンおよびダイナミンが共局在した。先導端のSyp小胞がクラスリン介在性エンドサイトーシス(CME)ではなく、エンドフィリン介在性エンドサイトーシス(EME)で生じることを阻害剤とRNAi実験で明らかにした。3D-SIMで成長円錐におけるF-アクチンの空間分布を調べた結果、先導端では基底部近くに配置し、中心部に近くなるほど高い位置に配置していた。すなわち成長円錐の周辺領域でF-アクチンが山の稜線を描くように配置しており、主要なF-アクチンが成長円錐の基底面ではなく、表面に沿って分布していることが示唆された。同じ手法でクラスリンは成長円錐中心領域の基底部に多く分布したのに対して、エンドフィリンは周辺領域でF-アクチンと共局在することが分かった。これらの結果は、成長円錐でCME、EMEが空間的に区別できるエンドサイトーシス経路として存在することを強く示している。Syp小胞は成長円錐膜のコレステロールを選択的に取り込み、成長円錐で高発現の膜蛋白質であるGpm6aの取り込みにも寄与することを明らかにした。先導端で生じるEMEによって脂質ラフトが関与する神経成長・極性形成のシグナルが制御されている可能性が考えられる。1)成長円錐のF-アクチンとエンドサイトーシスの関係を超解像で初めて明確に示した。2)先導端のエンドフィリン介在性エンドサイトーシスがアクチン束形成と同時に生じることを明らかにした。3)先導端で生じるSyp小胞が形質膜の脂質ラフト取込みに寄与する可能性を示唆した。成長円錐の先端は伸長する軸索の最前線であり、神経成長・再生、シナプス形成を決定付ける最も重要な領域である。我々は成長円錐で1)アクチン束化因子ファシンが介在するF-アクチン束化、2)BARタンパク質のエンドフィリン、3)ダイナミンの3つの因子に依存したエンドサイトーシスによってシナプトフィジン陽性の小胞が先導端から生じることを明らかにした。

これは構造化照明法による超解像顕微鏡(SIM)を使った神経芽細胞種NG108-15細胞の蛍光ライブイメージングにより得られた結果で、先導端から生じたシナプトフィジン陽性の小胞はアクチン逆行性流動に依存して成長円錐の中心部に向かって移動した。マウス大脳皮質神経の初代培養細胞でも、成長円錐のF-アクチンが束化している先導端近傍でシナプトフィジンの集積がみられた。RNAiによるエンドフィリンの発現抑制により、初代培養神経細胞における軸索の長さが有意に減少した。このとき成長円錐の面積、およびF-アクチン量は大幅に減少していたが、微小管、接着分子のパキシリンには影響がみられなかった。これらの結果はエンドフィリン介在性エンドサイトーシスが軸索伸長過程に必要であり、F-アクチン生成とエンドフィリン介在性エンドサイトーシスの間に正のフィードバック機構が存在することを示唆する。神経回路形成または再生時において、軸策を先導する成長円錐は運動性に優れた構造を形成する。成長円錐の最前線(先導端)では連続的なアクチン細胞骨格の再編と形質膜の回収が頻繁に生じるが、両者の関係性は明らかになっていなかった。我々は超解像顕微鏡(3D-SIM)を用いた成長円錐の解析で、F-アクチン束化によるフィロポディア形成に伴って小胞膜タンパク質シナプトフィジン(Syp)陽性の小胞が先導端で生じることを発見した。先導端のSyp小胞はBARドメインタンパク質のエンドフィリンA3、ダイナミン1依存性、クラスリン非依存性のエンドサイトーシスで生じ、脂質ラフトの回収に関係することを明らかにした。本課題が着目している先導端のエンドサイトーシスで取り込まれる膜タンパク質、脂質を既に数種類同定している。それらの確証性を検証するとともに、成長円錐機能に関連した分子群との関係性を明らかにする。1)先導端のエンドフィリン介在性エンドサイトーシスと神経成長シグナルの関係を明らかにする。2)3D-SIMによる成長円錐内部構造の同定を進め、立体的で精密な構造-機能関係の解明を進める。神経生化学
豊臣政権下毛利氏領国の研究

本研究は、地域の視座から豊臣政権下の大名毛利氏の権力構造や領国の実態、そしてその史的展開の解明をめざしたものであり、以下の研究成果が得られた。まず、戦国・豊臣期における毛利氏の厳島支配の史的展開を、厳島「役人」や厳島町衆の動向に焦点をあてて検討し、文禄年間における毛利氏の領国支配の再編・強化の実態を明らかにしたほか、国指定重要文化財である厳島神社五重塔の現地調査を実施して初重柱銘の再検討により、塔再建の歴史的背景の解明と建立時期の推定を試み、その上で建立推定年の持つ意味について考察した。次に、中近世移行期の貨幣研究に関する蓄積が乏しいことに鑑み、当該期の毛利氏領国における貨幣の問題に本格的に取り組み、戦国期大内氏支配下の基準額「清料」の存在形態と実際の銭貨通用の実態を大名権力と在地勢力の対抗関係のなかで明らかにするとともに、この基準額「清料」が権力編成の基本原理である石高のなかに次第に包摂されていく過程を探ることで、銭貨の観点から石高制の成立について展望した。また、当該期の銭貨および金銀貨の貨幣流通と諸権力の対応の史的展開について、大内氏および毛利氏領国の事例を中心に、東アジア的規模で展開する国際交流、とりわけ貿易構造の変容を視野に置きながら考察した。さらに、毛利氏領国における南京銭や鍛(ちゃん)の流通・通用について分析することにより、中近世移行期の銭貨流通の史的展開と中央政権の銭貨統一に向けての諸政策について展望した。これら成果については逐次学術論文として発表した。なお、研究成果報告書は、豊臣政権が第一次朝鮮侵略戦争(文禄の役)時に、軍勢発進基地の肥前名護屋と京都・大坂とを結ぶ長距離通信輸送制度として開設した次夫・次馬・次飛脚・次船制について、関係史料を広範に蒐集して、この制度の開設目的と実際の運用状況、そして毛利・小早川氏ら地域大名らに与えた影響をまとめたものである。これまで史料調査の際、原文書や少量の史料群の写真撮影に使用してきた通常のカメラに加え、今回新たにマイクロカメラを撮影機材として導入し,近世萩藩によって編纂された冊子形態の膨大な史料群の写真撮影が可能になった。今後、史料収集に大いに活用していく予定である。今年度行なった出張調査としては、主に山口県文書館を訪ね、戦国期および豊臣期関係の史料の写真撮影、影写本・謄写本・写真帳の閲覧等の方法で史料収集を行なった。特に、当館で新たに公開され始めた「遠用物」の閲覧・撮影は、今後の研究方向を探る上で大きな収穫であった。また、収集した史料については、研究専用にノートパソコンを導入し、データベースソフトを活用して地域別および編年別の整理に着手した。今年度に進めた研究内容としては、1991年に「毛利氏領国における基準銭と流通銭」を論文発表したのちに、アジア史および考古学の分野で新たな成果が積み上げられてきた中世貨幣の問題を、日本史(文献史学)の立場から改めて取り上げ、戦国・豊臣期における貨幣通用の実態とそれに対する公権力の対応を、当該期の東アジアの社会変動を視野に入れながら考察し、大名権力の分散状態から統一政権が誕生するという権力の集中過程で、金銀も含めた貨幣の流通形態の変容と、それが公権力の領国支配や権力編成にいかなる意味をもったのか整理した。そして、撰銭状況の発生から貫高制を経て石高制が成立するまでの過程を、特に貨幣基準額の成立と公権力の権力編成の観点から明らかにした。

今後は、収集した史料の分析を進めるとともに、惣国検地の問題も含めて、地域の視座から豊臣政権下の毛利氏権力や領国の実態、そしてその史的展開について解明して行く予定である。今年度の出張調査は、東京大学史料編纂所・大阪城天守閣・山口県文書館等で実施し、戦国期および豊臣期関係文書の写真撮影、影写本・謄写本・写真帳の閲覧等の方法で史料蒐集を重ねた。特に,東京大学史料編纂所では、写真帳で『大日本古文書』の活字史料の校合を丹念に行なったほか、可能な限り写真複製により史料の広範な蒐集に努めた。また、山口県文書館では、「遠用物」をはじめとする未紹介史料を数多く閲覧した。こうして蒐集した史料は、昨年同様にパソコンのデータベースソフトを活用して、地域別・編年別の整理を進めほか、多くの県史・市町村誌類の活字史料をアルバイトの協力を得て複写し、家別・編年別の整理を行なった。また、研究史の整理のために、多くの関係論文を文献複写の形で図書館を通じて広く取り寄せ、その蓄積を図った。今年度に行なった研究内容としては、まずは昨年に引き続き、中世貨幣の問題を取り上げ、出張調査の過程で入手した史料を利用し、戦国期の大内氏支配下の筑前・豊前両国を主な対象地域として、基準額「清料」の存在形態と実際の銭貨通用の実態を大名権力と在地勢力の対抗関係のなかで明らかにするともに、この基準額「清料」が権力編成の基本原理である石高のなかに包摂されていく過程を探ることによって、銭貨の観点から石高制の成立について検討した。また、戦国期から豊臣期にかけての毛利氏の厳島支配についての研究に本格的に着手し、まずは毛利氏時代における厳島「役人」に焦点をあてて、彼らの出自や役割、そしてその歴史的意義について具体的に明らかにした。これらについては、近日中に学術論文として発表の予定である。今年度の出張調査は、東京大学史料編纂所・山口県文書館のほか広島県宮島町で実施し、戦国期および豊臣期関係文書の写真撮影、影写本・謄写本・写真帳の閲覧等の方法で史料蒐集を重ねたほか、宮島の町並みや五重塔内の調査を行った。特に、東京大学史料編纂所では多くの影写本や謄写本類を閲覧し、史料の広範な蒐集に努めた。また、山口県文書館でも、「遠用物」など未紹介史料の閲覧・写真撮影を実施した。そして蒐集した史料は、昨年同様、パソコンのデータベースソフトを活用して、地域別・編年別の整理を進めほか、多くの史料集の活字史料をアルバイトの協力を得て複写し、家別・編年別の整理を行った。また、研究史の整理のため、多くの関係論文を文献複写請求の形で図書館を通じて広く取り寄せ、その蓄積に努めた。今年度に行った研究内容としては、一つは昨年に引き続き、中世貨幣の問題を取り上げ、出張調査の過程で入手した史料を利用し、戦国・豊臣期の貨幣(銭貨・銀)流通と東アジア貿易について検討した。また、これも昨年に引き続き戦国期から豊臣期にかけての毛利氏の厳島支配についての研究を進め、厳島町衆の動向を探るとともに、厳島神社五重塔初重の調査を実施し、柱銘の再検討を行い塔建立の年代推定とその意味について明らかにした。これらについては、すべて近日中に学術論文として発表の予定である。今年度の出張調査は、山口県文書館で二度にわたって実施し、戦国・豊臣期関係文書の写真撮影や影写本・謄写本・写真帳の閲覧による史料蒐集をおこない、これまでと同様、パソコンのデータベースソフトを利用して、地域別・編年別の整理を進めた。特に、新たに購入したデジタルカメラによって蒐集した文書および花押の画像データは、今後大いに活用したい。
小胞体分子シャペロン誘導を介した糖尿病腎症の抗線維化治療

細胞内外のタンパク質の恒常性を司るメカニズム「小胞体(ER)ストレス応答」は、多様な疾患の治療標的として注目を浴びている。代表者は、今まで不明のままであった肥満がいかなる機序でERストレスとインスリン抵抗性を引き起こすのかを明らかにしている(Diabetes 2013)。今回、糖尿病腎症の進行過程で認められる腎臓の線維化において、ERストレス応答の関与に着目し研究を行った。代表者らは6週齢雄CD1マウスにストレプトゾトシン(200 mg/Kg)を単回投与し1型糖尿病(T1D)腎線維化モデルマウスを確立した。このモデルでは糖尿病誘導6ヶ月で糸球体硬化、尿細管間質の線維化が生じ、そのような腎間質の線維化は内皮間葉分化転換(EndMT)と関連していることを見出している。このT1D腎線維化モデルマウスでは、腎間質の血管内皮においてX-box binding protein 1 (XBP-1)の発現が低下していることを見出した。また近年、腎臓における様々な生理学的、病理学的応答系へのmicroRNA (miR)の関与が明らかとなってきており、前述のT1D腎線維化モデルマウスの腎臓におけるmiR microarray解析および定量的miR PCRを施行した。その結果、miR-214の発現が有意に亢進していた。miR-214はXBP-1の3'UTRと相互作用することが報告されている。以上の結果より、XBP-1の発現低下が、内皮細胞機能不全を起こし、EndMTを介して腎線維化を促進する可能性が示され、miRを含めたERストレスの制御が糖尿病腎の線維化治療の標的となることが期待される。
神経幹細胞の増殖制御に関わる遺伝子群の同定

Id2は、細胞分化と増殖の制御に深く関わるbHLH型転写因子の機能抑制因子の1つであり、その遺伝子欠損マウスはT細胞の分化障害や乳腺上皮細胞の増殖障害、嗅球の狭小化などを始めとする多彩な病態を呈する。この中で嗅球の狭小化は神経幹細胞の増殖障害に起因するものである。本研究の目的は、Id2遺伝子欠損マウスにみられる神経幹細胞の増殖障害という病態を活用し、神経幹細胞における遺伝子発現の網羅的解析により神経幹細胞の増殖制御に関与する遺伝子群を同定することにある。まず、Id2遺伝子欠損マウスを用いて、免疫組織法による脳の組織学的解析を行い、神経幹細胞の細胞増殖能、およびアポトーシスの状態を詳細に調べたところ、BrdU免疫染色にて、傍側脳室領域における増殖細胞数はId2欠損マウスでは対照マウスに比べ、20%減少していた。次に、neurosphere法で得た細胞塊から採取したmRNAを用い、Id2に関連する遺伝子群について、遺伝子スクリーニングを行ったが、明らかなmRNA量の変化は認めなかった。また、Real time RT-PCRにて細胞周期関連因子などの発現を解析したところ、Id2欠損マウスでは対照マウスと比較してCDKインヒビターp21の約10倍の発現増加を認め、これがId2欠損マウスにおける細胞増殖低下の要因と考えられた。さらに同じくneurosphere法を用いてin vitroでの神経幹細胞の分化能の解析を行ったところ、P1 (post natal day 1) Id2欠損マウスでは対照マウスと比べて、アストロサイト、およびニューロンへの分化する細胞の割合が高い傾向があったが、分化能に異常は認めなかった。
アーノルド・ベネットとその周辺ーリアリズム小説における現実と表象の批判的再検討ー

郷里のイングランド中部地方を舞台に市井の人びとの日常と心理を克明に写し取った「リアリズム作家」として長らく文学史の周縁に置かれてきたアーノルド・ベネット(1867-1931)と、その晦渋さゆえにつねに精緻な読解の対象とされるヴァージニア・ウルフ(1882-1941)、ジェイムズ・ジョイス(1882-1941)、T. S.エリオット(1888-1965)ら「モダニズム作家」との同時代性に注目し、ジャーナリズムと学術研究というふたつの領域間の交渉を跡づけることで、リアリズムからモダニズムへという単線的な発展史の見直しをおこないました。日本英文学会関東支部第8回大会(平成25年11月2日、於日本女子大学)において、英米文学部門シンポジウム「workと20世紀転換期の英米文学」の司会兼講師として「アーノルド・ベネットとclerical work」と題した発表をおこなった。本発表では、ベネットの長編小説5作と文芸コラム、各種労働組合の機関誌や文芸誌の言説に注目し、20世紀転換期の新しい識字層をターゲットとした連載小説のフォーマットについて考察すると同時に、ホワイトカラー労働者に要求される技能がリアリズム小説においてロマンスの媒介として、またプロットを駆動する契機として機能するさまを分析した。いずれも、従来研究が比較的手薄であった、リアリズム文学が描きその文学の受容者でもあった下層中産階級のひとびとの経験を、史資料の実証研究と文学テクスト分析を総合するアプローチによって再構築することで、学際的な広がりに貢献し得たものと考える。日本英文学会第86回大会において、第4部門シンポジウム「ミドルブラウという名の挑発」の司会兼講師として、「『文学趣味』、自己改善、ミドルブラウ」と題した研究発表をおこなった。また、本研究発表の原稿に大幅に加筆した論考「リアリズムとモダニズムー英文学の単線的発展史を脱文脈化するー」を一橋大学社会学研究科紀要『一橋社会科学』第7巻別冊「特集:「脱/文脈化を思考する」に寄稿し、20世紀転換期におけるリアリズムとモダニズムの相互作用に焦点を合わせ、ジャーナリズムと学術研究という2つの領域間の交渉を跡づけた。Edwardian Culture Network主催の会議"Arnold Bennett and his Circle"では、"Arnold Bennett and the RisingGeneration in Imperial Japan"と題した研究発表をおこなった。本発表は、著作の流通と受容のされ方に関する実証研究とテクスト分析とを総合するアプローチによって、学際的研究の広がりに貢献し得たものと自負する。本会議は、9つの研究発表と2つのディスカッション・セッションで構成され、発表者とフロアの参加者との間で活発な議論と意見交換をおこなうことができた。平成26年8月25日よりKeele大学客員研究フェローとして、附属図書館での資料収集に加え、ほぼ隔週で開催される所属研究科のEnglish Studies Seminarsに参加し、Keele大学外から招かれた研究発表者とも意見交換をおこなう機会を得た。また平成26年10月11日のArnold Bennett Society年次会合において評議委員に選出され、協会の活動の企画運営に積極的に関わることで、ベネットの生地を拠点にベネット研究の振興に務めている。平成26年度におこなった学会発表および論文執筆を通じて、リアリズム文学の新たな可能性を示し得たことに加え、渡英後の学会活動や、研究者や一般読者との意見交換などを通じ、貴重な視点と新たな知見が得られたため。とくに、Open Universityや学外講座の講師や受講者にインタビューさせていただいたことや、Sheffield Hallam University附属図書館の特別コレクション"Readership and LiteraryCulture 1900-1950"を、運営を担っているErica Brown博士の案内で閲覧させていただき、博士の蔵書分析プロジェクトを見学させていただいたことなどは、在外研究の機会を得て可能になったことであり、文学テクストの生産・流通と受容の過程、リアリズム文学における現実と表象の関係を再検討するという本研究目的におおいに資するものであった。英文学平成27年度8月末までは、引き続きイギリスKeele大学客員研究フェローとして、イギリスを拠点とする研究者との情報・意見交換をおこなうほか、Keele大学附属図書館、Potteries博物館、大英図書館が所蔵する史資料の収集と精査を通じて、ベネットの周辺で活動していた、今日ではほとんど研究の対象とされない作家らの言説を掘り起こしたい。また、平成27年6月6日にはArnold Bennett Society第12回年次大会において研究発表"Bennett and the Contemporary Japanese Reader"をおこない、その発表原稿に加筆・訂正したものを紀要(『言語文化』)に投稿する。客員研究フェローの任期終了後は、3年間の研究実績を論文にまとめる準備をおこないたい(中央大学人文科学研究所研究叢書として、2017年3月の刊行を目指し、論集の編集を企画中)。

平成25年度におこなった日本英文学会関東支部での学会発表および論文執筆を通じ、史資料の実証研究と文学テクスト分析を総合するアプローチによって、リアリズム文学が、社会の地殻変動の要請するスタイルであることを示せた。「リアリズムとモダニズムー英文学の単線的発展史を脱文脈化するー」http://hdl.handle.net/10086/27127平成26年8月末より1年間、イギリスKeele大学への客員研究フェローとしての受け入れが決定したため、平成25年度に実施予定であったイギリス国内の機関が所蔵する史資料の収集については先送りし、平成26年度の渡英後、地の利を生かして集中的におこなうこととしたい。同時にイギリスを拠点とする研究者との情報・意見交換をより積極的におこないたい。平成26年度8月末より1年間、勤務校よりサバティカルを得てイギリスKeele大学客員研究フェローとして研究に従事することが決定したため、平成25年度に予定していたイギリス国内の機関に所蔵されている史資料の収集を、地の利を生かして平成26年度に集中しておこなうこととし、旅費を支出しなかったため。Keele大学にて研究を継続し、イギリスを拠点とする研究者との情報・意見交換をおこなうため、おもに旅費として使用したい。