hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
味覚情報伝達系におよぼす亜鉛欠乏の影響

味覚障害は亜鉛欠乏と密接に関連があることが知られている。しかしながら亜鉛欠乏により味覚障害が引き起こされる原因は明らかになっていない。味覚受容は、味物質が味覚受容体に結合することにより行われることから、味覚障害においては味覚受容体の数の減少が原因の一つである可能性があると考えられる。特定の遺伝子の転写を制御する転写因子は、その遺伝子の転写制御に関係するDNA配列に結合することにより転写の制御を行う。このような転写を制御する転写因子には多くの種類がある。その中には、転写因子中のDNA結合領域に亜鉛を配位することで特定の立体構造をとり、DNAに結合するものがある。このように転写因子には亜鉛がDNAの結合に必要な転写因子が多く存在する。そこで味覚障害においては亜鉛欠乏により、味覚受容体の転写を制御する転写因子が、転写制御に関係するDNA配列に結合できず、味覚受容体の転写量が減少し、その結果、味覚受容体の数が減少し味覚障害がひきおこされている可能性が推察される。本研究では、ヒトうま味・甘味受容体TIR3遺伝子の転写制御に関係するDNA配列であるプロモーター領域の検索をレポーターアッセイ法により行った。その結果、開始コドン上流0.2kbの領域中にプロモーター領域が含まれることが明らかになった。哺乳動物の味蕾には、I型、II型、III型と呼ばれる形態や機能の異なった細胞型が存在する。その中で、III型だけにシナプス小胞がみられ、求心性シナプスを形成することから、味覚受容に重要な役割をもつことが示唆されている、しかしながら、III型細胞のマーカーについては、セロトニンやPGP9.5などが知られているのみで、他型の細胞に比べると、マーカー物質については、あまり知られていない。本研究では、III型細胞がもつシナプス小胞に注目した。シナプス小胞放出関連蛋白質であるシナプトタグミン抗体による免疫組織化学により、シナプトタグミンがIII型細胞の同定に有効であることが明らかになった。またIII型細胞はセロトニンを含有することが知られているが、セロトニン前駆物質である5-HTPを脱炭酸してセロトニンを合成するアロマティクLアミノ酸脱炭酸酵素を細胞内にもつことが明らかになり、本酵素もIII型細胞の新しいマーカーとして用いることができることを示した。味覚障害の患者は、この10年間で3倍以上に増加し、全国で毎年14万人以上の患者が発生している。味覚障害の原因解明や予防法、治療法を開発することは、歯科医療の重要な役割の一つである。そのためには、味蕾の細胞生物学的特性や味覚情報伝達機構を理解することが重要である。味蕾内には数種の独立した細胞型が存在するが、その中でII型細胞は、T1Rs, T2Rsをはじめとした味覚受容体(甘味、苦味、うま味)と、これらに共役するG蛋白質・gustducinやPLC-β2をはじめとした細胞内味覚情報伝カスケード分子が発見されてきたが、シナプス小胞は存在せず、求心性シナプスも見られない。II型細胞が受容した味覚情報が、どのようにして味蕾内で伝達されているのか、現在のところ解決されていない大きな謎となっており、その解明が急がれる。近年Baulieuらの研究により、性ステロイドが細胞間情報伝達に重要な役割をもつことが示唆されている。性ステロイドは、先ずコレステロールを材料にチトクロームP450sccの作用により、プレグネノロンがつくられ、これが生体内に存在するすべてのステロイド生合成の第一段階である。我々はII型細胞が性ステロイドの合成酵素であるチトクロームP450コレステロール側鎖切断酵素(P450scc)、チトクロームP450aromatase(P450aroma)をはじめとしたステロイド合成酵素を含有すること、産生される性ステロイドがエストラジオールであることを発見した。このことは、更年期以降の女性に味覚障害が多く発症することを裏付けるものである。

特定の遺伝子の転写を制御する転写因子は、その遺伝子の転写制御に関係するDNA配列に結合することにより転写の制御を行う。このような転写を制御する転写因子には多くの種類がある。その中には、転写因子中のDNA結合領域に亜鉛を配位することで特定の立体構造をとり、DNAに結合するものがある。このように転写因子には亜鉛がDNAの結合に必要な転写因子が多く存在する。そこで味覚障害においては亜鉛欠乏により、味覚受容体の転写を制御する転写因子が、転写制御に関係するDNA配列に結合できず、味覚受容体の転写量が減少し、その結果、味覚受容体の数が減少し味覚障害がひきおこされている可能性が推察される。本研究では、ヒトうま味・甘味受容体T1R3遺伝子の転写制御に関係するDNA配列であるプロモーター領域の検索をレポーターアッセイ法により行った。その結果、開始コドン上流0.2kbの領域中にプロモーター領域が含まれることが明らかになった。
子宮内膜における幹細胞劣化による生物学的・機能的細胞老化誘導メカニズムの解明

1)受精卵の着床の場である子宮内膜においても、加齢による変化が何らかの影響をもたらしていると考えられる。今年度は若年マウスと老齢マウスの子宮を比較し、網羅的解析により老化のマーカーと成り得る遺伝子を抽出し、ヒト子宮内膜を用いて加齢により発現が変化する遺伝子を同定することを目的とした。5週齢、8週齢、60週齢を超える野生型マウスおよび早老症のモデルとされているklothoマウスから子宮を摘出し、total RNAを抽出しRNA-seqで網羅的に解析した。抽出した発現変動遺伝子について、検証実験として20歳代10例、40歳代10例のヒト子宮のサンプルを用いて、抽出した発現変動遺伝子の蛋白発現について組織免疫化学染色を用いて定量的に解析した。定量的解析にはImageJおよびそのプラグインIHC profilerのclour deconvolutionを用いて輝度値を比較した。マウス子宮から抽出したtotal RNAのRNA-seq解析により、代表的な発現変動遺伝子を4つ同定した。2)不妊治療における採卵時(増殖期)に採取したヒト子宮内膜細胞から分離した子宮内膜間質細胞を用いて、胚移植後に妊娠反応が陽性であった症例(妊娠群)と陰性であった症例(非妊娠群)において複数の細胞老化誘導のマーカー(SA-β-Gal染色,細胞周期解析,遺伝子発現,SASP因子)を解析し、妊娠群と非妊娠群の年齢を含めた患者背景は同等であったが、非妊娠群の子宮内膜間質細胞では妊娠群と比較して細胞老化が顕著に誘導されていることを明らかにした。さらに、組織幹細胞マーカーの遺伝子発現解析により非妊娠群の子宮内膜間質細胞では妊娠群と比較してABCG2およびALDH1の発現が低く、子宮内膜幹細胞の減少が示唆された。若年マウスと老齢マウスの子宮を比較し、網羅的解析により老化のマーカーと成り得る遺伝子を抽出し、マウス子宮から抽出したtotal RNAのRNA-seq解析により検証するという目標はほぼ達成された。当初の予定では、同定された遺伝子やそのsiRNAをレンチウイルスベクターに組み込み、子宮内膜の初代培養細胞に形質導入し、その生物学的特性の変化を解析する予定であったが、担当する研究協力者の大学院生が、出産し、産休に入ったため、レンチウイルスベクター作製の段階で止まっている。2019年4月に復帰したので、その続きを行なっていく。不妊症患者の子宮内膜を用いた研究に関しては、ほぼ今年度の目標を達成した。1)マウスやヒト臨床検体で同定された加齢に伴い発現が変化する遺伝子の機能解析:マウスで同定された4つの遺伝子についてヒト子宮を用いた組織免疫化学染色で検証実験を行う。また、同定された遺伝子やそのsiRNAをレンチウイルスベクターに組み込み、子宮内膜の初代培養細胞に形質導入し、その生物学的特性の変化を解析し、最も重要な遺伝子・pathwayを同定する。上記で同定された子宮内膜の老化に関与する遺伝子を発現するトランスジェニックマウスまたは欠損するノックアウトマウスを作製し、表現型(全身および子宮内膜の状態・妊娠率)を解析する。上記遺伝子改変マウスの子宮内膜初代培養細胞とマウス受精卵を共培養し受精卵の質に与える影響や着床現象をin vitroで解析する。2)不妊症の臨床検体を用いた解析:前年度同定された遺伝子・サイトカインの発現を臨床検体(子宮内膜・血液)を用いて解析し、最も着床率と関連のあるマーカーを同定する。ヒト絨毛細胞株を、同定された各種サイトカイン存在下で培養し、増殖能・浸潤能・遊走能を解析し、至適培養条件を検討し受精卵培養法の開発につなげる。

若年マウスと老齢マウスの子宮を比較し、網羅的解析により老化のマーカーと成り得る遺伝子を抽出し、マウス子宮から抽出したtotal RNAのRNA-seq解析により検証するという目標はほぼ達成された。当初の予定では、同定された遺伝子やそのsiRNAをレンチウイルスベクターに組み込み、子宮内膜の初代培養細胞に形質導入し、その生物学的特性の変化を解析する予定であったが、担当する研究協力者の大学院生が、出産し、産休に入ったため、レンチウイルスベクター作製の段階で止まっている。2019年4月に復帰したので、その続きを行なっていく。不妊症患者の子宮内膜を用いた研究に関しては、ほぼ今年度の目標を達成した。1)マウスやヒト臨床検体で同定された加齢に伴い発現が変化する遺伝子の機能解析:マウスで同定された4つの遺伝子についてヒト子宮を用いた組織免疫化学染色で検証実験を行う。また、同定された遺伝子やそのsiRNAをレンチウイルスベクターに組み込み、子宮内膜の初代培養細胞に形質導入し、その生物学的特性の変化を解析し、最も重要な遺伝子・pathwayを同定する。上記で同定された子宮内膜の老化に関与する遺伝子を発現するトランスジェニックマウスまたは欠損するノックアウトマウスを作製し、表現型(全身および子宮内膜の状態・妊娠率)を解析する。上記遺伝子改変マウスの子宮内膜初代培養細胞とマウス受精卵を共培養し受精卵の質に与える影響や着床現象をin vitroで解析する。2)不妊症の臨床検体を用いた解析:前年度同定された遺伝子・サイトカインの発現を臨床検体(子宮内膜・血液)を用いて解析し、最も着床率と関連のあるマーカーを同定する。ヒト絨毛細胞株を、同定された各種サイトカイン存在下で培養し、増殖能・浸潤能・遊走能を解析し、至適培養条件を検討し受精卵培養法の開発につなげる。7現在の進捗状況で述べたように、研究協力者の大学院生が分娩・産休のため、2019年度に予定した実験の一部が施行できなかった。その経費の分を繰越金として2020年度に使用する。実験内容は、同定された遺伝子やそのsiRNAをレンチウイルスベクターに組み込み、子宮内膜の初代培養細胞に形質導入し、その生物学的特性の変化を解析し、最も重要な遺伝子・pathwayを同定する計画の部分である。
日本列島における先史・原史絵画の研究

弥生土器絵画は、弥生時代中期後半に近畿地方、特に奈良県唐古・鍵遺跡を中心にして東西に広がり、それらの絵画には画材の選択性・構図の共通性・表現様式の類似性という三つの特徴を指摘することができる。縄文土器絵画の類例資料は、近年増加しつつあるが、それらを弥生土器絵画と比較した場合、現時点では後者のような顕著な特徴を見い出すことはできない。ただし、以下の二点に留意する必要がある。まず第一点は、縄文時代中期に発達する土器表面への具象的表現。器面に蛇・半人半蛙・猪・山椒魚風の動物等を彫塑的に表現するという様式は、八ヶ岳山麓の縄文遺跡を中心として一定の分布範囲を有し、それらには弥生土器絵画とほぼ共通する画材の選択性・構図の共通性・表現様式の類似性等の特徴を指摘できる。しかも、弥生土器絵画が記号へと変化したように縄文土器絵画は単純な文様へと変化しているこのことは、社会がある一定の成熟度に到達した時点で起こりうる同一性を示唆しているものと思われる。第二点は、縄文時代晩期終末期に出現する絵画風または記号風の表現。現時点では近畿地方と東海地方西部地域の遺跡から出土する土器の中に僅かに認められるものであるが、弥生土器絵画・記号へ連続するものであるかどうか、今後の類例資料の増加を期待しつつ、検討対象として視野に入れておく必要がある。一方、古墳時代の絵画は中期の円筒埴輪に顕著に認められる。画材としては、鹿・馬?・船が多く、近畿地方を中心として関東地方へも伝幡している。しかも、それらの表現様式には弥生土器絵画に通じるものがある。前期の類例資料が乏しく、弥生土器絵画と円筒埴輪絵画との間には時間的空隙が存在するかのように見受けられるが、近年出土した兵庫県袴狭遺跡出土の木製品に描かれた絵画(古墳時代前期)等を勘案するならば、弥生時代中期以来キャンバスを替えながらも絵は連綿と描き続けられたと判断される。弥生土器絵画を代表する鹿の絵は、農耕祭祀との関わりで理解されているが、円筒埴輪は送葬用の器物であり、農耕祭祀とは直接結びつかない。したがって、弥生時代と古墳時代とでは、鹿を象徴とする観念に変化があったのか、または共通する別の観念に基づいて象徴されたものであるかについて再検討をする必要がある。見通しとしては、後者により高い蓋然性があるという前提のもとにその他の画材をも含めて総合的に検討していく必要があろう。以上のように、弥生土器絵画はそれのみを対象としてその意義付けを行うよりは、前後の時代の絵画等の類例をも含めて比較検討することによって、それらが内包するであろう象徴性についてより理解が深められるということが明らかになった。今後はその前提に基づいて、縄文弥生・古墳時代絵画が有する象徴性についてより理解を深め、各々の文化が内包する精神的側面を浮き彫りにしていきたい。

以上のように、弥生土器絵画はそれのみを対象としてその意義付けを行うよりは、前後の時代の絵画等の類例をも含めて比較検討することによって、それらが内包するであろう象徴性についてより理解が深められるということが明らかになった。今後はその前提に基づいて、縄文弥生・古墳時代絵画が有する象徴性についてより理解を深め、各々の文化が内包する精神的側面を浮き彫りにしていきたい。
降雨にともなう微生物およびその遺伝子の移動に関する分子微生物生態学的研究

微生物はあらゆる環境に存在し,私たちを取り囲む大気中にも浮遊している.大気中に浮遊する微生物は風などの大気現象により受動的に,広範囲に拡散していくため,微生物を含めた様々な粒子が風に乗って国内に飛来してきていると考えられる.多量の微生物が移動している場合,これを検疫では対処できない微生物の越境問題として捉え,国内の生態系に与える影響を考えていく必要がある.そこで本研究では,大気現象による微生物の移動の現状を理解しそのリスクを評価するために,まず降雨とともに運ばれる微生物の現存量およびその生理活性(生死),群集構造を分子微生物生態学的手法を用いて明らかにすることを目的とした.本年度は前年度の検討結果をふまえて,雨水中の微生物の現存量を測定するとともに,その群集構造解析を行った.また,これらの結果をもとに,降雨にともなう微生物の移動量,降雨水中の微生物群集構造の変化の要因について考察した.以下に得られた結果をまとめた.1)雨水中には培養可能な真菌が細菌の10倍近く存在することがわかった.2)サンプリング期間を通して細菌の群集構造が大きく変化していたのに対し,真菌には常に存在する種が見られた.3)雨水中の細菌の群集構造は,真菌に比べて,地上の影響を大きく受けている可能性が考えられた.4)雨水中の細菌や真菌には,日和見感染症の原因菌や植物病原菌も含まれていた.5)本研究で決定した手法を用いて,雨水中の微生物量や属種の季節変化,地域変化を明らかにすることにより,降雨により移動する微生物の生態系への影響を考察できるものと考えられる.微生物はあらゆる環境に存在し,私たちを取り囲む大気中にも浮遊している.大気中に浮遊する微生物は風などの大気現象により受動的に,広範囲に拡散していくため,微生物を含めた様々な粒子が風に乗って国内に飛来してきていると考えられる.多量の微生物が移動している場合,これを検疫では対処できない微生物の越境問題として捉え,国内の生態系に与える影響を考えていく必要がある.そこで本研究では,大気現象による微生物の移動の現状を理解しそのリスクを評価するために,まず降雨とともに運ばれる微生物の現存量およびその生理活性(生死),群集構造を分子微生物生態学的手法を用いて明らかにすることを目的とする.本年度は降雨中の微生物を解析するための手法を検討した.さらに雨水中の細菌および真菌の現存量を測定するとともに,優占種の属種を明らかにした.以下に得られた結果をまとめた.1)細菌の迅速定量のために,マイクロ流体デバイスを用いた新規手法を作成した.2)雨水中の微生物の多くは今回用いた条件では培養困難であり,その定量および群集構造解析には,培養に依存しない手法が有効であった.3)雨水中に存在する微生物として,細菌より真菌のほうが多く存在した.4)落下してきた微生物には,人間に対して病原性を持つ細菌や,栽培作物に病害をもたらす真菌なども存在していた.5)今回決定した手法を用いて,雨水中の微生物量や属種の季節変化を明らかにすることにより,大気現象によって運ばれる微生物の生態系への影響を考察できると考えられる.微生物はあらゆる環境に存在し,私たちを取り囲む大気中にも浮遊している.大気中に浮遊する微生物は風などの大気現象により受動的に,広範囲に拡散していくため,微生物を含めた様々な粒子が風に乗って国内に飛来してきていると考えられる.多量の微生物が移動している場合,これを検疫では対処できない微生物の越境問題として捉え,国内の生態系に与える影響を考えていく必要がある.そこで本研究では,大気現象による微生物の移動の現状を理解しそのリスクを評価するために,まず降雨とともに運ばれる微生物の現存量およびその生理活性(生死),群集構造を分子微生物生態学的手法を用いて明らかにすることを目的とした.本年度は前年度の検討結果をふまえて,雨水中の微生物の現存量を測定するとともに,その群集構造解析を行った.また,これらの結果をもとに,降雨にともなう微生物の移動量,降雨水中の微生物群集構造の変化の要因について考察した.以下に得られた結果をまとめた.1)雨水中には培養可能な真菌が細菌の10倍近く存在することがわかった.2)サンプリング期間を通して細菌の群集構造が大きく変化していたのに対し,真菌には常に存在する種が見られた.3)雨水中の細菌の群集構造は,真菌に比べて,地上の影響を大きく受けている可能性が考えられた.4)雨水中の細菌や真菌には,日和見感染症の原因菌や植物病原菌も含まれていた.5)本研究で決定した手法を用いて,雨水中の微生物量や属種の季節変化,地域変化を明らかにすることにより,降雨により移動する微生物の生態系への影響を考察できるものと考えられる.
局在プラズモン増強励起と蛍光蛋白発現菌体を組み合わせた重金属分析マイクロデバイス

蛍光蛋白や生物発光酵素を予め2つに分割して機能を消失させておき、これらを水銀イオン耐性大腸菌がもつ水銀制御蛋白によって再結合させる系を大腸菌の遺伝子組み換えにより構築した。これらの大腸菌や菌体から単離した蛋白をガラス表面に固定化して水銀イオンセンサ機能を実証したが、感度が低いことが判明した。感度向上のために優れた光アンテナ機能をもつ素材としてバラ花形の金・銀合金ナノコロイドを再現性よく大量合成することに成功し、これらを組み合わせてセンサを構築した。水銀イオン応答遺伝子と蛍光蛋白発現遺伝子を組み込んだ大腸菌を固定化し、水銀イオンセンサとして応用する研究を展開している。水銀イオンを含む培地で選別培養された水銀イオン耐性大腸菌は水銀イオンに応答する遺伝子merRをもつ。このmerRにより発現される水銀制御蛋白MerRによる蛍光蛋白発現系とプラズモン増強励起を組み合わせた水銀イオンの蛍光分析系を考え、実証研究を行った。MerRの水銀結合ドメインMBDを2つタンデムにつなぎ、両端に黄色蛍光蛋白のN,C末端をそれぞれ融合させ、蛋白をマイクロ流路に固定化するのためのstrep-tagを含むコンストラクトを作製した。この大腸菌をガラス製マイクロ流路に固定化し、プラズモン増強励起による蛍光測定を行うため、大腸菌と金コロイドの両者を安定に、しかも大量に固定化できる表面コート剤を各種検討した。大腸菌は正電荷をもつ表面に静電的に吸着される。また、金コロイドの表面は負に帯電しており、基板にアミノ基を修飾することが適当と思われる。しかし、従来よく用いられたポリリシンコーティングは疎水性で、菌体と金コロイドの定着率が悪く、親水性をもつアミノコートが望ましいことが明らかになった。そこで、種々のシランカップリング試薬を検討し、および強い親水性を持つ市販のMASコートおよびポリエチレンイミンが最適であることを見出した。これらコーティング剤では金コロイドが集合化したギャップモードが形成され、プラズモン増強励起に有利なうえに、菌体の生存率がポリリシンと比較して高いことが明らかになった。今年度の研究により、菌体を固定化したマイクロ流路の作製法が確立されたので、今後、水銀イオン応答についで検討を進める予定である。水銀イオン応答遺伝子と蛍光蛋白発現遺伝子または生物発光酵素発現遺伝子を組み込んだ大腸菌を固定化し、水銀イオンセンサとして応用する研究を展開している。このmerRにより発現される水銀制御蛋白MerRによる蛍光蛋白発現系とプラズモン増強励起を組み合わせた蛍光分析系および水銀制御蛋白MerRによるルシフェラーゼ発現系による生物発光分析系の2つの水銀イオン分析系を考え、それぞれの系について、生菌体を用いる系と単離蛋白固定化系の2つを平行して検討してきた。昨年度まではMerRの金属結合ドメインMBDを2つタンデムにつなぎ、両端に黄色蛍光蛋白サブユニットのN,C末端をそれぞれ融合させたコンストラクトで検討していたが水銀イオンに対して応答はするものの検出限界が低く、本年度新たにMBDの両端にルシフェラーゼのサブユニットをそれぞれ融合させた生物発光検出用コンストラクトを作成した。生物発光検出用コンストラクトを大腸菌に組み込んで大量発現させ、蛋白をアフィニティーカラムで精製して水銀イオン応答性を評価した。良好な応答を示すようコンストラクトを種々改変する過程は困難を極めたが、ようやく一定の応答を示す蛋白を単離することに成功した。しかし、水銀イオンが高濃度になると、ルシフェラーゼ自体が強い阻害を受けて失活し、生物発光強度が低下してしまうことが明らかになった。そこで、本年度は再度、蛍光検出系のコンストラクトの構造を洗練させてセンサーとしての応用を試みることとする。開発途上国では水銀による飲料水汚染が重大な問題となっており、その場で簡便に検査できるマイクロチップセンサの開発が急務となっている。水銀イオンを含む培地で培養された水銀イオン耐性大腸菌は水銀イオンに敏感に応答して水銀制御蛋白MerRを産生する。蛍光蛋白やルシフェラーゼを予め2つのサブユニットに分離して機能を消失させておき、これらをMerRによって再結合させる系を組めば水銀イオンによって蛍光・発光機能が発現するので、プラズモン増強を応用すれば高感度水銀センサになると期待される。そこで本研究では1)水銀イオン応答遺伝子と蛍光蛋白発現遺伝子または生物発光酵素発現遺伝子を組み込んだ大腸菌をプラズモン増強基板上に固定化する、2)遺伝子組換大腸菌から水銀イオン応用性蛋白質を単離し、これをプラズモン増強基板上に固定化する研究を展開した。今年度は新たなプラズモン増強媒体として、直径数十nmで花形の特異な形態によって可視領域全域に幅広い吸収帯を持ち青色を呈する金・銀合金のコロイドを合成し、これを親水性アミノ化ガラス基板に固定化して蛍光蛋白からの蛍光および生物発光を増強することを試みた。花形金および銀コロイドについては最近報告が相次いでおり、先鋭部分に強いプラズモン電場が形成されることから新規なプラズモン媒体として期待されている。

既報では金イオンからごく限られた条件でのみ合成可能であったのに対し、保護剤にポリビニルピロリドンを用いることと銀イオンを共存させることで再現性よく容易に合成できることを明らかにした。合成されたコロイドはICP分析とEPMAにより金銀合金であり、SEMによって直径80nm程度のバラ型であることが明らかになった。また、金コロイドや銀コロイドとは異なり、650nm付近に極大をもつブロードな紫外可視吸収スペクトルを示し、赤色蛍光蛋白の蛍光を数倍増強できることが明らかになった。
日仏中世末演劇における聖と俗の関係性の歴史的比較研究:「花」のテーマを中心に

日仏の中世末期とは、いずれにおいても、聖と俗の関係性がとりわけ強く人々の意識を捉えた時代であったが、当時の文学や演劇はその表出の一端を担っている。本研究の目的は、フランスと日本の中世末の聖俗をめぐる精神風土のありようを、アルヌール・グレバンの『受難の聖史劇』(15世紀中期初演)をはじめとするフランスの聖史劇と、世阿弥の一連の能楽論(『風姿花伝』『至花道』等)を対象として、とくに両者においてそれぞれに聖俗の観念に包括的に係わる根本的イメージとして提起されている「花」もモチーフに焦点を定め、双方の「花」の比較をとおし、相違と協応による相互対照の視点のもとに捉え直すことであった。その成果を総括すれば、これらフランスと日本の宗教家と能芸家の言説に現れた「花」は、まずは前者では「愛」を媒介とする聖と俗の交流の概念の表出であるとすれば、後者では「美」を軸とした俗から聖への超越性のイメージを担っており、この点において、各々のジャンルの根ざす文化的背景が起因の違いが認められるが、しかし視点を引いて、両者をそれぞれの内容に準じて、神の救済成就にみる予定調和の運行であれ、あるいは芸的求導行程であれ、いわば巨視的な時間の流れの中で眺めるならば、両者とも包括的には聖・俗の和合と調和の志向において照応しているのであり、聖と俗の間の遠大な循環運動に組み込まれた異次元空間の表象としての「花」というのが、協応点として確認された。本年度は、アルヌール・グレバンの『受難の聖史劇』と世阿弥の『風姿花伝』を対象として、両者においてそれぞれに聖俗の観念に包括的にかかわる根本的イメージとして提起されている「花」のモチーフの象徴体系を同定すると同時に、そうした観念の由来や意味を、相互対照的にそれぞれの演劇環境や文化的背景の中に考察した。その結果、以下のようなことが明らかになった。1.いずれもその「花」は、象徴領域が自然界から超自然へと跨がることによって、アンビヴァレントな価値を有することになっている。2.グレバンにおける「花」はキリストの受肉に収束する。予言成就の贖罪としてのこの「花」は、神から人間へ、至高天から俗世へと下降してくる。一方、世阿弥は、自然界に咲く俗世の花から超自然的かつ驚異的な「真の花」に向かう求道的なヴェクトルを追求したのであるが、そこに我々は、ある種の聖性への上昇という方向性をシンボライズする「花」をみることができる。両者の「花」はこのように逆行関係にある。3.こうした相違には、少なくとも、第一に当時の両国における芸術の美的趣味の違い(聖史劇は宗教的玄義を写実的に可視化するジャンルであるのに対し、<もののあわれ>や<幽玄>は内在化された美を探究する)、第二に作家個人の趣味の違い(聖職者グレバンは芸術に傾倒したが、遊芸者の世阿弥は禅宗に心酔していく)、そして第三には観客層の違い(聖史劇の観客は在俗信徒を中心とする広く一般大衆であったが、能の観客はおもに精神の陶冶を求める武士に限定された)が、大なり小なり関連しているといえる。本年度は、フランスの聖史劇における「花」の象徴性のあり方についての研究・考察に従事した。そして、関連する書籍等の資料を収集するとともに、アルヌール・グレバンの『受難の聖史劇』を中心に、その「花」のもつ意味を聖と俗の枠組みから分析し、かつその象徴性の歴史的背景についての探究を行なった。具体的には、1.まず聖史劇自体が、聖俗の関係性においてどのような布置をとっているか、2.聖史劇の「花」の象徴はいかなる聖俗関係のヴィジョンを可能にしているか、3.その「花」の象徴体系およびヴィジョンは歴史的、文化的にいかにして成立したのか、をテーマの柱とした。

それぞれの考察からえた新たな知見は以下の如くである。1.聖史劇は、従来の演劇史研究では、純聖的な典礼劇と比べて世俗的な要素に満ちているという理由から、いわば典礼劇の堕落版とみなされてきたのであるが、しかしその世俗性とは、地上で受肉受難したキリストに対し、同じ人間として共感を寄せる信徒の視点から出ているものであり、聖的見地からみて、否定的なものではないと考えられる。2.キリストと聖母マリアに結びつけられた「花」は、聖俗の包括的なイメージを象徴すると同時に、聖を志向する聖的理想主義を旨とするものであるが、その両義的体系はあくまで俗を基盤としたもので、そこに、肉をもってこそ、すなわち死を経てこそ天国の生に到達しうるというパラドクシカルなイメージの表象が認められる。3.聖史劇の「花」の成立に影響を及ぼした背景としては、花の短命性を語ったりその開花を神に結びつけた新約や旧約の言葉、花を性愛の象徴として歌った中世やルネサンスの詩、さらに、宗教的倫理の象徴としての花を究明した騎士道物語群、或いは神秘的受胎や救済を巡る聖母譚、そして天地を問わず花を散らした中世来の絵画などがある。本年度の計画は、第一に、世阿弥の作品全体の中で「花」の象徴がどのような布置をとっているかを調べた上で、『風姿花伝』と『花鏡』を中心とする能芸論における「花」のもつ意味を超脱や俗世との関係で再度詳細に捉え直すことであり、第二には、上記の結果と、過年度にグレバンの『受難の聖史劇』の「花」について行なった同様の作業からすでに得られている結果とを突き合わせて、両者の「花」の間に見られる相違点を取り出しつつ、日仏の両文化における聖・俗の関係性の特質を明らかにし、同時に、両者の間の協応点を探ることで、文化の違いを超えた聖性・俗性のありようの考察を行なうことであった。以上の成果を総括すれば、これらフランスと日本の宗教家と能芸家の言説に現れた「花」は、まずは前者では「愛」を媒介とする聖と俗の交流の概念の表出であるとすれば、後者では「美」を軸とした俗から聖への超越性のイメージを担っており、この点において、各々のジャンルの根ざす文化的背景が起因の違いが認められるが、しかし視点を引いて、両者をそれぞれの内容に準じて、神の救済成就にみる予定調和の運行であれ、あるいは芸的求道行程であれ、いわば巨視的な時間の流れの中で眺めるならば、両者とも包括的には聖・俗の和合と調和の志向において照応しているのであり、聖と俗の問の遠大な循環運動に組み込まれた異次元空間の表象としての「花」というのが、協応点として確認された。
英語発音練習支援システムの開発

既に英語の母音11音素の発音を自習するための支援システムを構築している.このシステムを改良すると共に,このシステムに英語独特の音を中心に有声子音13音素(半母音を含む),無声摩擦音(無声破擦音を含む)6音素の練習支援部を組み込むための検討を行った.一つは子音それぞれに適した特徴抽出条件の検討である.発音練習支援システムではすべての子音を同一の条件で分析する必要はなく,発音の良し悪しに直接関係するその音独特の特徴を強調すればよいと考えるからである.個々の子音の特徴抽出条件と共に,相対評価をするために,個々の子音に対して,調音点の近い,または,日本人が間違いやすい子音群の中で評定を行うことを検討して,個々の子音に対して,適した特徴抽出条件を明らかにした.もう一つは評定に使う音節中の子音部検出法の情報についてである.子音発音練習支援システムでは有声子音については音の始めが無音で後続音が母音の/e/の音節,無声摩擦音では,音の始めが無音で,後続音が母音/i:/の音節を用いることにしているが,音節のフレームの最大パワーを基準にした個々の子音の始めのフレームのパワー分布を調べて明らかにした.この分布を基にして,評定に用いる子音部のセグメントを検出するためである.これらの検討を基に,システムの子音部の基礎を構築した.設計方針は母音部と同様である.精度やアドバイスの内容等,まだ問題も多い.これらは今後の課題である.既に英語の母音11音素の発音を自習するための支援システムを構築している.このシステムを改良すると共に,このシステムに英語独特の音を中心に有声子音13音素(半母音を含む),無声摩擦音(無声破擦音を含む)6音素の練習支援部を組み込むための検討を行った.一つは子音それぞれに適した特徴抽出条件の検討である.発音練習支援システムではすべての子音を同一の条件で分析する必要はなく,発音の良し悪しに直接関係するその音独特の特徴を強調すればよいと考えるからである.個々の子音の特徴抽出条件と共に,相対評価をするために,個々の子音に対して,調音点の近い,または,日本人が間違いやすい子音群の中で評定を行うことを検討して,個々の子音に対して,適した特徴抽出条件を明らかにした.もう一つは評定に使う音節中の子音部検出法の情報についてである.子音発音練習支援システムでは有声子音については音の始めが無音で後続音が母音の/e/の音節,無声摩擦音では,音の始めが無音で,後続音が母音/i:/の音節を用いることにしているが,音節のフレームの最大パワーを基準にした個々の子音の始めのフレームのパワー分布を調べて明らかにした.この分布を基にして,評定に用いる子音部のセグメントを検出するためである.これらの検討を基に,システムの子音部の基礎を構築した.設計方針は母音部と同様である.精度やアドバイスの内容等,まだ問題も多い.これらは今後の課題である.
鳥類松果体細胞における光受容および計時機構の解析

鳥類の松果体にはメラトニン合成機構に加えて、それ自体に光受容機構および時計機構が存在し、互いにリンクしてメラトニンのリズムを駆動する。近年、アデニレートサイクラーゼの活性化ホルモン、PACAPがラット松果体に存在し、メラトニン合成を促進すること、また、視交差上核の時計機構あるいは光同調機構にも関与していることが相次いで報告された。一方、鳥類では未だPACAPとメラトニン合成機構、時計機構あるいは光同調機構の関係については明らかにされていない。そこで、今回、ヒヨコ松果体におけるメラトニン合成機構、時計機構および光同調機構に対するPACAPの作用、また、松果体におけるPACAPの存在の有無について検討した。まず、メラトニン合成系への関与を調べるため、ヒヨコ松果体の培養細胞に種々の濃度のPACAPを添加したところ、投与量依存的にメラトニン分泌の促進が認められた。次に、PACAPはVIPファミリーの一つであり、VIPはメラトニン合成を促進することから、VIPとの関係について検討した。その結果、メラトニン分泌促進効果はVIPよりも強いこと、さらにPACAPの効果は高濃度のVIPレセプターアンタゴニストによってもほとんど抑制されないことが判明した。次に時計機構への関与を検討するため、恒常暗、あるいは恒常明下で培養した松果体細胞に、種々の時刻にPACAPの6時間パルスを与えて、位相変位の有無を調べた。しかし、PACAPパルスでは位相変位は起こらなかった。さらに光同調機構への関与を検討するため、恒常暗下で光パルスによる位相前進が確認された時刻に,光パルスとPACAPを同時に投与したが、光の位相変位作用に対しては影響しなかった。最後に、松果体でのPACAPの有無について免疫組織化学的に検討したところ、ラット松果体では松果体以外から、軸索輸送で持ち込まれたと思われるPACAPの存在が確認されたが、ヒヨコ松果体においては、明確に確認することはできなかった。以上のことから、ヒヨコ松果体にはPACAPに特異的なレセプターであるPAC1レセプターが存在し、PACAPは主にこれを介してメラトニン合成に作用すること、また、PACAPはラットと異なり、ヒヨコ松果体の時計機構および光同調機構には作用しないことが示唆された。生物は地球の自転や公転が作り出す環境の周期的変化に適応すべく自己体内に計時機構(生物時計)を具備したと思われる。鳥類ではこの計時機構は松果体に局在していることがすでに知られているが、松果体の時計のリズムがどのようにして行動や体温などのリズムに反映されているのかは、未だ謎である。本研究目的は、この時計と生理機能のリンクの仕組みを明らかにすること、加えて、松果体から分泌されるメラトニンはどのような機構で合成が制御されているのかの一端を明らかにすることにある。著者は、これまでの研究において、鳥の松果体には時計機構、光受容機構、およびメラトニン分泌機構が一個一個の細胞に存在し、お互いにリンクしていることをすでに示した。このことから考えれば、時計のリズムはメラトニンを介して生理機能のリズムを駆動している可能性が高い。そこでメラトニンをスズメやウズラに単一投与し、体温や行動におよぼす効果を検討したところ、投与直後から、急激な体温低下と行動抑制が認められた。この事実と、夜間にメラトニンの旺盛な分泌が起こることを併せて推測すれば、夜間、これらの鳥類は内因性メラトニンにより体温低下、行動抑制、睡眠が誘起されているものと考えられ、夜に昼行性鳥類が動けなくなることを良く説明できるように思われる。次に、ラットの松果体においてメラトニン合成を促進することが最近報告されているpituitary adenylate cyclase activating polypeptide(PACAP)のヒヨコ松果体細胞におけるメラトニン合成への関与の有無を検討した。その結果、PACAPは量依存的にメラトニン合成を促進し、その作用はvasoactive intestinal polypeptide(VIP)のレセプター拮抗剤で阻止されなかった。またPACAPに特異的なレセプターmRNAの発現をRT-PCR法で確認した。以上の結果は、ヒヨコ松果体細胞膜上にはPACAPに特異的なレセプターが存在し、メラトニン合成系はこのPACAP系によって一部制御されていることを示唆するものである。

次に時計機構への関与を検討するため、恒常暗、あるいは恒常明下で培養した松果体細胞に、種々の時刻にPACAPの6時間パルスを与えて、位相変位の有無を調べた。しかし、PACAPパルスでは位相変位は起こらなかった。さらに光同調機構への関与を検討するため、恒常暗下で光パルスによる位相前進が確認された時刻に,光パルスとPACAPを同時に投与したが、光の位相変位作用に対しては影響しなかった。最後に、松果体でのPACAPの有無について免疫組織化学的に検討したところ、ラット松果体では松果体以外から、軸索輸送で持ち込まれたと思われるPACAPの存在が確認されたが、ヒヨコ松果体においては、明確に確認することはできなかった。以上のことから、ヒヨコ松果体にはPACAPに特異的なレセプターであるPAC1レセプターが存在し、PACAPは主にこれを介してメラトニン合成に作用すること、また、PACAPはラットと異なり、ヒヨコ松果体の時計機構および光同調機構には作用しないことが示唆された。
金属蒸気レーザ・フィルターを使った新しい気温計測ライダー

気象要素の一つである気温の遠隔連続観測は、未だ安定した手法が実現していないのが現状である。本研究では、金属蒸気レーザ等取扱いが容易な光源と安定した狭帯域特性が得られる金属原子フィルタを使った新しい高スペクトル分解能方式の気温計測ライダーの開発を行った。受信部にはカリウム原子ファラデーフィルタを用いることを提案した。室内実験ならびに屋外の上空200mの気温計測実験を行い、温度計の値と良く一致することを確認した。本システムは地表から対流圏全域にわたる気温の鉛直分布を測定するための小型で無人観測が可能なライダーへの拡張が可能であり、気象学、環境学、防災工学などへの大きな寄与が期待される。気象要素の一つである気温鉛直プロファイルのライダー観測は、風や水蒸気に比べて未だ安定した観測が実現していないのが現状である。本研究では、金属蒸気レーザ等取扱いが容易な光源と安定した狭帯域特性が得られる金属蒸気フィルタを使った新しい高スペクトル分解能方式の気温計測ライダーの開発を行っている。本システムは地表から対流圏全域にわたる気温の鉛直分布を測定するための小型で無人観測が可能なライダーであり、気象学、環境学、防災工学などへの大きな寄与が期待される。当該年度は主に光源として金属蒸気レーザの開発を行った。原子としてはカリウム、ルビジウム及びセシウムを候補とした。はじめにシミュレーションにより最適な金属蒸気セルの設計を行った。セルの長さ、温度、バッファーガスの種類等を先行研究の文献等を参考に確定し、特注セル並びにレーザ共振器用ミラーを発注し、基本的な特性を測定した。励起光源としては半導体レーザ並びにアレキサンドライトレーザを用いる。また、受信部の金属蒸気フィルタの開発にも着手した。シミュレーションにより最適な透過特性を得るための、金属蒸気セルの設計を行った。方式は、背景光の大きな昼間の観測にも有利であることからファラデーフィルタ方式を検討した。特に、ファラデーフィルタでは磁場の安定度が温度測定精度に大きく影響を与えることが明らかになったので、その対応法を検討した。得られた成果の一部を学会等で発表した。本研究では、金属蒸気レーザ等取扱いが容易な光源と安定した狭帯域特性が得られる金属蒸気フィルタを使った新しい高スペクトル分解能(HSRL)方式の気温計測ライダーの開発を行った。HSRL用の狭帯域フィルタとして、従来の原子・分子吸収フィルタの代わりにカリウム原子(K)異常分散ファラデーフィルタ(FF)を用いることを提案し、これにより強いミー散乱成分を抑えつつ狭い帯域幅を得る事が可能になり、日中における背景光を大幅に除去し昼間の観測が可能となることを示した。さらに、フィルタにかける磁場の安定度が気温測定誤差に与える影響について検討し、磁場の変動の影響が少ないフィルタの組み合わせを提案し、この組み合わせにより高度06Kmの気温を誤差1K以内で測定可能であることを示した。次に気温観測ライダーの実用化に向けて、室内実験を行った。実験は気温を一定に保ったBOX内に、Kの共鳴波長770nmに同調した狭帯域CWレーザを照射し、レンズで集光した散乱光を異なる磁場に設定したK-FFで透過光強度を測定した。得られた透過光強度比の気温依存性を理論値と比較した結果、良く一致していることが確認出来た。さらに半導体アンプ(TSOA)を用いた高出力光源を開発し、屋外の上空200mの気温計測実験を行い、屋上設置の温度計と良く一致することが確認出来た。送信部の開発については、部品調達に時間がかかったためやや遅れているが、その間に受信部の開発を先行して進めたため、全体としては概ね順調に進展している。レーザー計測やや遅れている送信部の開発を進めるとともに、送信部については波長安定化DBRレーザとパルス半導体アンプ方式の採用も平行して検討する。受信部については磁場の安定度の影響対策に注力する。当面必要な物品が揃ったので、残額を翌年度に繰り越した。次年度購入する物品の費用として利用する。
脂質栄養状態を制御する分泌性ホスホリパーゼA2の新しいパラダイム

肥満、インスリン抵抗性などのメタボリックシンドロームは脂質代謝異常や慢性炎症に起因する。我々は肥満マウスのマイクロアレイ解析により、二種の分泌性ホスホリパーゼA_2 (sPLA_2-V, IIE)が脂肪細胞に著しく発現誘導されることを見出した。sPLA_2-Vは脂質運搬に関わるリポタンパク質(LDL)中のホスファチジルコリンを分解して高脂血症を改善し、さらにTh2優位の免疫応答を促進して脂肪組織の炎症を抑制することで、メタボリックシンドロームに対して防御的に作用した。本研究は、過栄養により脂肪細胞に誘導され、全身の代謝状態を制御する「metabolic sPLA_2s」を発見した初めての成果である。我々は肥満マウスのマイクロアレイ解析により、二種の分泌性ホスホリパーゼA2 (sPLA2-V, IIE)が脂肪細胞に著しく発現誘導されることを見出した。高脂肪食(HFD)負荷したsPLA2-V欠損マウスでは肥満、インスリン抵抗性、脂肪肝、高脂血症が増悪し、一方脂肪組織特異的sPLA2-V過剰発現マウスでは脂肪の蓄積が抑制された。sPLA2-Vは脂質運搬に関わるリポタンパク質(LDL)中のホスファチジルコリンを分解して高脂血症を改善し、さらにTh2優位の免疫応答を促進して脂肪組織の炎症を抑制することで、メタボリックシンドロームに対して防御的に作用することがわかった。これに対し、HFD負荷sPLA2-IIE欠損マウスでは内臓脂肪の蓄積、脂肪肝、高脂血症が抑制された。sPLA2-IIEはリポタンパク質の微量リン脂質(ホスファチジルエタノールアミン,ホスファチジルセリン)を選択的に分解することによりその性質を変化させ、組織への脂肪蓄積を促進するものと考えられた。以上より、sPLA2-VとsPLA2-IIEは過栄養により脂肪細胞に誘導され、全身の代謝状態を制御する「metabolic sPLA2」であることが明らかとなった。ヒト脂肪組織のsPLA2-Vの発現とBMIおよび血漿LDLレベルが逆相関を示すことから、sPLA2-Vはメタボリックシンドロームの新しい診断マーカーとして期待される。1.培養細胞を用いた各sPLA2発現誘導メカニズムの解析培養脂肪細胞としてマウス前脂肪細胞株3T3-L1を用い、常法に従い脂肪細胞に分化させ、飽和または不飽和脂肪酸の添加、脂肪組織より採取した間質細胞との共培養を行ったがsPLA2-Vの発現は誘導されなかった。しかしながら小胞体ストレスを誘導するタプシガルジンを添加するとsPLA2-Vの発現が誘導された。2.各sPLA2遺伝子改変マウスにおけるメタボリックシンドロームの病態生理学的解析・sPLA2-III :視床下部において蛍光二重染色によるsPLA2-IIIの発現を調べた結果POMCニューロンおよびNPYニューロンに共局在していた。また高脂肪食負荷したPla2g3欠損マウスの視床下部を定量的PCRにより摂食関連遺伝子の発現を調べた結果Pla2g3欠損マウスではリポタンパクリパーゼの発現が有意に増加していた。神経特異的にLplを欠損したマウスでは過食・肥満をきたすがPla2g3欠損マウスはLplの発現が上昇することで摂餌量が抑制されるものと考えられる。・sPLA2-V :高脂肪食負荷したPla2g5欠損マウスは、肥満、脂肪肝、高脂血症、インスリン抵抗性の増悪が認められた。Pla2g5欠損マウスでは血漿中のLDLが顕著に増加していた。一方、脂肪組織特異的Pla2g5トランスジェニックマウスはPla2g5欠損マウスとは逆に体重が軽く、血漿中のLDL, HDLが低下していた。以上のことよりsPLA2-Vは過栄養により脂肪細胞に誘導される「metabolic sPLA2」であり、脂質過多のリポタンパク質に作用してこれを正常化することで、肥満やインスリン抵抗性に対して防御的に機能するものと考えられる。本研究は、脂肪過栄養により誘導されるsPLA2の新しい一群「metabolic sPLA2」に着目し、メタボッリクシンドロームの成因におけるsPLA2の新しい機能とその作用機序を解明することを目的として研究を実施している。従来、sPLA2の機能としては炎症との関連が大きく注目されていた。一方で、sPLA2はリポ蛋白質のリン脂質を分解し、病理学的に本反応の過度の進行が動脈硬化に関わることが提唱されていたが、この反応が生体に存在する生理学的本質はわかっていなかった。

本研究はsPLA2-Vの新しい機能、すなわちリポ蛋白質代謝を介して脂質栄養状態を制御するという新たな概念を提唱するものでありメタボッリクシンドロームの成因におけるsPLA2の新しい機能とその作用機序の一端を解明することができた。本研究では、sPLA2-III, V, IIEを対象に、遺伝子改変マウスを駆使してメタボリックシンドロームの表現型を精査し、各アイソザイムの新しい病態生理学的機能を解明する。この研究成果を礎に、これらmetabolic sPLA2を標的としたメタボリックシンドロームの新規治療薬の開発とその臨床応用のための理論基盤の構築を推進する。1.sPLA2-IIE遺伝子改変マウスにおけるメタボリックシンドロームの病態生理学的解析sPLA2-IIE欠損マウスに高脂肪食負荷を施し、(1)脂肪組織、肝臓、筋肉などの組織学的評価、(2)CT解析による脂肪蓄積量の測定、(3)血清生化学検査値(アディポカイン、インスリン、血糖値、肝機能マーカー)の分析、(4)インスリン感受性及び耐糖能の評価、(5)血漿リポタンパク質の脂質プロファイリング、(6)脂肪組織の炎症マーカーの発現プロファイリング、(7)脂肪組織における脂質メディエーターのプロファイリングの解析を行う。2.ヒトへの応用マウスでの解析結果がヒトにも適用できるかを確かめるために、ヒトのメタボリックシンドローム患者組織における当該sPLA2アイソザイムの発現を免疫組織染色ならびに定量的PCRにより調べる。さらにヒトsPLA2アイソザイムの高感度検出ELISA法を確立し、各アイソザイムの発現量と病態の進行度との相関性を検討する。本解析はサンプル入手がネックとなるので、臨床内科医との相談のもと、倫理委員会の審査承認を経てから実施する。論文を投稿する予定であったが間に合わなかったため次年度使用額が生じた。次年度の研究費の使用計画としては、国内学会出張費、投稿論文の英文校正費と論文投稿費および印刷費として使用する。残りの経費を消耗品に充てる。試薬消耗品として遺伝子関連試薬[遺伝子工学用酵素、PCRプライマー、免疫化学関連試薬、染色用試薬]、細胞培養試薬など、器具消耗品として細胞培養フラスコ、遠心チューブ、マイクロプレート、また高脂肪食。さらに遺伝子改変マウスの管理維持費として使用する。
爪母細胞の増殖、分化に及ぼす爪母周辺線維芽細胞、各種増殖因子の影響

ヒト爪母直下の線維芽細胞のヒト爪母細胞の形態、増殖に及ぼす影響を観察する目的で、cell culture insert法を用いて、ヒト爪母細胞とヒト爪母直下の線維芽細胞をco-cultureした。同時に爪母細胞と他の部位の皮膚線維芽細胞、表皮細胞と爪母直下の線維芽細胞、表皮細胞と他の部位の線維芽細胞もco-cultureし比較した。また爪母細胞、表皮細胞をそれぞれ線維芽細胞を培養してないcell culture insertとともに培養しコントロールとした。方法としてはまず爪母細胞、表皮細胞をそれぞれ培養シャーレ内に植え込みKGM培地で培養し、線維芽細胞は培養シャーレ内のcell culture insert上に植え込みEagle′s MEM培地で24時間培養した。その後、爪母細胞、表皮細胞を植え込んだシャーレ内の培地を除去し、線維芽細胞を植え込んだcell culture insertを入れ、MCDB-153を培地として培養した。培養の結果、爪母細胞と爪母直下の線維芽細胞のco-cultureではコントロールよりは爪母細胞の増殖が促進されたが、他のco-cultureとはほとんど差がなかった。このことより、爪母直下の線維芽細胞は爪母細胞の増殖に関して、外毛根鞘細胞に対する毛乳頭細胞のような特異的な働きはしていないと考えられた。今後は培地内のカルシウム濃度と爪母細胞におけるハードケラチンの発現に関して、抗毛ケラチンモノクローナル抗体を用いて調べることにより、爪母細胞の分化とハードケラチンの関係を研究し、さらにサイトカインや各種増殖因子の影響も調べたい。
アジアにおける国際裁判管轄法制の形成・適用・発展の比較法的研究

本研究は、日韓における新しい国際裁判管轄法制の立法化の動きを受けて、日韓の国際裁判管轄に関するルールの形成・適用・発展を比較法的観点から分析することによって、アジアにおける国際裁判管轄法制の調和の可能性や方向性を模索するものである。韓国では現在、国際裁判管轄規定を新たに盛り込んだ改正国際私法案が国会に提出されており、近いうちに成立の見込みにある。日本では、2011年民訴訟法改正により明文化された財産法関連の国際裁判管轄規定(民事訴訟法第3条の2以下)に加え、2018年「人事訴訟法等の一部を改正する法律」が成立し、人事訴訟及び家事事件に関する国際裁判管轄規定も明文化されるようになった。これまで日韓の間では国際裁判管轄に関するルールについて議論が多くなされてきたが、それらの議論の結果が今回の両国の立法にどのような形で反映されているかを分析することは、本研究において重要な課題となる。そこで本年度はまず、日本と韓国の新しい国際裁判管轄法制について、両国の間の議論が今回の立法に如何に影響したかという点に注目しつつ、比較法的な観点から検討を行った。韓国の新しい国際裁判管轄法制の成立と関連して、立法の背景や経緯、特徴について、日本法との比較から検討を行い、韓国の新法制の比較法的意義を探ってみた。その研究成果を、国際私法学会・国際私法フォーラムで「韓国の新しい国際裁判管轄法制の特徴と比較法的意義」という題で報告した。また、日本の新しい国際裁判管轄に関する規定について、比較法的な観点から考察を行った。最後に、日韓での国際裁判管轄法制の発展過程において、法規範の形成・適用・発展の過程で見られる国際的な統合と地域的な分散化の側面が如何に現れてきたかを、韓国が今回明文規定として新たに導入した「国際的訴訟競合」や「管轄の不行使」に関する規定等を中心に検討を行った。本年度の研究目標通りに、特に問題なく順調に進んでいる。今後の研究の方向性は、本年度に行われた日韓の国際裁判管轄法制に関する比較法的研究を踏まえて、法規範の国際的な統合と地域的な分散化が、ルールの形成・適用・発展の過程でどのように現れているかを、日韓での国際裁判管轄法制の発展過程を素材に理論的かつ実証的に分析するとともに、日韓でみられる営為が他のアジア諸国には如何に波及し、影響し合うかを考察し、アジア地域における国際裁判管轄法制の調和の可能性や方向性を探ることである。次年度は、これまで行ってきた日韓の国際裁判管轄法制に関する比較法的研究を法規範の形成・適用・発展の過程に注目しつつより深めると同時に、他のアジアの国々(例えば、中国とASEAN)にも目を向けて、それらの国々における国際裁判管轄に関するルールの形成過程に注目していく予定である。また、ハーグ国際私法会議の判決プロジェクト(外国判決の承認執行に関する条約作成)の推移と影響も併せて検討していく予定である。これらの研究の成果は、今後、論文や書籍、学会(日本、韓国、ドイツ)での報告を通じて発信していく予定である。

次年度は、これまで行ってきた日韓の国際裁判管轄法制に関する比較法的研究を法規範の形成・適用・発展の過程に注目しつつより深めると同時に、他のアジアの国々(例えば、中国とASEAN)にも目を向けて、それらの国々における国際裁判管轄に関するルールの形成過程に注目していく予定である。また、ハーグ国際私法会議の判決プロジェクト(外国判決の承認執行に関する条約作成)の推移と影響も併せて検討していく予定である。これらの研究の成果は、今後、論文や書籍、学会(日本、韓国、ドイツ)での報告を通じて発信していく予定である。当該助成金が生じた理由は、予定していた物品の購入や一部の旅費を大学の個人研究費で支払ったからである。当該助成金は翌年度分として請求する。使用計画は、2019年度ドイツで開かれるJournal of Private International Law Conference 2019で研究報告が予定されているが、その際の旅費等に充てたいと思う。