hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
mRNA核外輸送と細胞の高次機能発現

RNA転写の場である核とタンパク質翻訳の場である細胞質とが核膜により物理的に隔てられている真核細胞では、mRNAの核外輸送は遺伝子発現における必須の過程である。近年の研究から、核外輸送は、単に遺伝情報をコードしたmRNAをタンパク質翻訳の場である細胞質へ送達させるための機構として重要であるばかりでなく、核内における転写、スプライシングや3'-末端形成などのmRNAプロセシング、細胞質における翻訳などの各過程と機能的にカップリングすることにより、遺伝子発現調節機構やmRNAの品質管理機構の一段階としても重要な役割を果たしていることが明らかにされてきている。本年度は、実験計画に従い研究を遂行し、平成21年度研究において、抗TREX複合体抗体を用いた免疫沈降法により同定したいくつかのTREX複合体結合因子の遺伝子発現における役割の解析を進めた。その結果、ヒトTREX複合体は、標的遺伝子のmRNA転写終結および3'末端形成と核外輸送の過程を共役させ、遺伝子発現の効率を高めるために重要な役割を果たしていることを明らかにした。また、3'末端形成に必須であるmRNA前駆体切断の過程における役割を明らかにしつつある。今後、本申請研究によって新たに同定した種々のTREX複合体標的遺伝子の発現調節機構を解明していくとともに、前駆体切断の過程の分子機構の解明を試みる。さらに、これまでに同定した機能未解明のTREX複合体結合タンパク質因子群についての機能解析にも着手し、TREX複合体を介した遺伝子発現調節機構の全容の解明を試みる。転写の場である核と翻訳の場である細胞質とが核膜により物理的に隔てられている真核細胞では、mRNAの核外輸送は遺伝子発現における必須の過程である。近年の研究から、核外輸送は単に遺伝情報をコードしたmRNAをタンパク質翻訳の場である細胞質へ送達させるための機構として重要であるばかりでなく、核内における転写、スプライシングや3'-末端形成などのmRNAプロセシング、細胞質における翻訳などの各過程と機能的にカップリングすることにより、遺伝子発現調節機構やmRNAの品質管理機構の一段階としても重要な役割を果たしていることが明らかにされてきている。出芽酵母においてTREX複合体は、標的となるmRNAや複数のタンパク質因子との機能的・物理的な相互作用を介して、転写伸長や3'-末端形成など、mRNA生合成の複数の過程に関わり、それぞれの素過程を機能的に結びつける役割を果たしていることが明らかにされつつあるが、ヒトを含めた多細胞真核生物では、ごく限られた機能について解析がなされたに過ぎず、複合体構成因子個々の機能の詳細や支配下にある遺伝子についてなど、未解明の問題が数多く残されている。本年度は、実験計画に従い研究を遂行し、100種類以上のヒトTREX複合体の標的遺伝子候補を同定するとともに、免疫沈降法によりいくつかのTREX複合体結合因子を同定した。これらの知見に基づき、今後、標的遺伝子mRNAの発現過程におけるTREX複合体の役割を解析する。
小脳神経細胞特異的に発現誘導されるHsp70を制御する因子の同定と治療への応用

ポリグルタミン病は異常伸張したポリグルタミン鎖を含む蛋白質に起因する。神経細胞内に凝集体を形成し、選択的に神経細胞死が起きることが特徴である。本研究では選択的な神経細胞死の分子機構を解明することを目的とした。これまでに、変異型ハンチンチン(mhtt)に誘導される選択的神経細胞死のモデルを確立した。mhttの発現により大脳皮質神経細胞(CTX)では細胞死が亢進され、、小脳顆粒神経細胞(CBL)では抵抗性を示した(K.Tagawa,Journal of Neurochemistry)。DNAマイクロアレイ解析よりCBLでHsp70mRNAの発現が著しく増加していた。ウエスタンブロット解析よりHsp70蛋白質の増加も確認した。さらにHD患者の脳を抗Hsp70抗体で免疫染色したところ小脳顆粒細胞層に非常に強い染色が観察された。CBLでHsp70の発現を抑制すると細胞死が促進され、CTXでHsp70を過剰発現すると細胞死が抑制された。次に、このmhttによるHsp70発現誘導の分子機構について解析した。Hsp70はCCAAT因子を介してCBFにより誘導されp53により抑制されることが報告されている(S.N. Agoff, Science)。Hsp70はCBLでCBFにより誘導され、mhttにより誘導されたHsp70はp53で抑制された。さらにHsp70プロモーター/CATのCCAAT因子欠損系を構築した。Hsp70プロモーターはmhttにより活性化されるが、CCAAT因子の欠損系ではその活性の大部分を失った。以上の結果より、CBLにおいてはCBF/p53を介したHsp70の発現誘導系が働き、mhttによる神経細胞死に対する耐性を獲得していると考えられる。
リグニン生合成におけるペルオキシダーゼと4-クマル酸:CoAリガーゼの役割

1.ペルオキシダーゼ遺伝子の単離と解析これまでに報告されているペルオキシダーゼのアミノ酸配列を基にPCRを行い、ペルオキシダーゼ断片(389bp)を増幅した。これをプローブとして用い、ポプラカルスのcDNAライブラリーをスクリーニングした。その結果、得られたペルオキシダーゼクローンの一つは、ほぼ完全長で927bpのオープンリーディングフレームを含み、これまでに知られているポプラのアニオン性ペルオキシダーゼと高い相同性を有していた。本遺伝子はポプラカルスおよびポプラ木部の両方で発現が確認された。一方、ポプラカルスからペルオキシダーゼアイソザイムを精製し、それらのアミノ酸配列を検討した。2.アンチセンス4CLポプラの作製と選抜ポプラ4CL遺伝子(4CL1と4CL2)をカリフラワーモザイクウィルス35Sプロモーターおよびxylem特異的発現プロモーターの下流にアンチセンス方向に接続した4つのアンチセンスコンストラクトをアグロバクテリウム(LBA4404)を用いる形質転換系よりポプラに導入した。カナマイシンを含む選抜培地上で形質転換体を選抜し、最終的に形質転換体13個体を得た。これらの形質転換体の中で6個体は4CL活性がコントロールに対し約90%程度抑制されていた。これら4CL活性が抑制された個体を含む、全ての形質転換体のリグニン分析を行った結果、形質転換体のリグニン含有量やシリンギル/グアイアシル組成比に有意な差は認められず、リグニン生合成における4CLの制御的機能は小さいことが示唆された。1.ペルオキシダーゼ遺伝子の単離と解析これまでに知られているぺルオキシダーゼのアミノ酸配列を比較し、よく保存されている配列をもとに3種類のプライマーを設計した。次いで、ポプラカルスcDNAをテンプレートとしてPCRを行った。増幅されたDNA断片の内、389bpの断片をシークエンシングした結果、種々のペルオキシダーゼの塩基配列と高い相同性を有していた。この断片をペルオキシダーゼ遺伝子を選抜するプローブとして用い、ポプラカルスcDNAライブラリーをスクリーニングした結果、32個の陽性クローンを得た。まず、そのうち2クローンの塩基配列を決定した結果、互いに97.7%の相同性を示し、一つはほぼ完全長で927bpのオープンリーディングフレームを含んでいた。また、これまでに知られているポプラのアニオン性ペルオキシダーゼのアミノ酸配列と高い相同性を有していた。現在、他の陽性クローンのシークエンシングを進めている。2.アンチセンス4CLポプラの作製と選抜ポプラより単離された2つの4CL遺伝子(4CL1と4CL2)をカリフラワーモザイクウィルス35Sプロモーターおよびxylem特異的発現プロモーターの下流にアンチセンス方向に接続し、4つのアンチセンスコンストラクトを作製した。次いで、これらのアンチセンスコンストラクトをバイナリーベクターpBin19にサブクローニングした後、アグロバクテリウム(LBA4404)に導入した。リーフディスク法により目的遺伝子をポプラへ導入した後、カナマイシンを含む選抜培地上で形質転換体を選抜し、現在約80個体のputative形質転換ポプラを培養している。一方、形質転換体の2次選抜において、4CL活性を測定せず抗体を用いて酵素の発現量を調査する簡便な選抜方法を確立した。
実演芸術の需要の実態と構造に関する統計情報の収集と時系列分析

199697年度にかけて実施した第3回「現代青年の芸術意識と芸術活動調査」より作成した単年度データファイルを用いて、学生の実演芸術の需要動向を社会・経済的要因がどのように規定しているかを分析した。さらに、同調査の第1回(1985年度)と第2回(1991年度)のデータファイルを用いて、時系列的な比較分析を行った。実演芸術の需要動向に影響をおよぼす社会・経済的要因として、本調査では、(1)生活時間、(2)経済的状況、(3)地域、(4)個人の文化資本または文化的環境(家族の影響や稽古事など)の4つの要因群についての質問項目を設定している。分析の結果から、(3)の地域的要因に関連して、鑑賞機会の豊富な東京圏を含む関東地域でのライブの鑑賞経験率がいずれの分野でも高く、近畿地域では大衆芸能の鑑賞経験率が高いこと、(3)の個大の文化資本に関連して、舞踊系、音楽系、華・茶道系の稽古事経験者が伝統演劇、現代演劇,オペラ・ミュージカル、舞踊・舞踏・バレエ、クラシック音楽の5分野で高い鑑賞経験率を示しており、家族の勧めなどにより個人が受けてきたプライベートな芸術教育が、これらの実演芸術分野に対する関心を高め、実演芸術の需要を喚起していることなどが明らかとなった。時系列的分析からは、第1回調査に比較して、第2回、第3回調査のライブの鑑賞経験率が全体として低下している結果が示された。有意標本による調査であるために単純な比較は難しく、サンプルの構造や設問の相違にも留紘して、集計結果を比較・解釈していく必要はあるが、小型・軽量で臨場感のある再生を可能にするデジタル技術を駆使した視聴覚メディアの出現・普及に加えて、1980年代後半のバブル経済と1990年代に入ってのその崩壊、そし,て現在に至るまでの景気の低迷といった経済環境の動きがこうしたライブの鑑賞経験率の推移にも影響を与えているのではないかと考えられる。
腎機能不全に伴う中枢神経系の薬物感受性亢進機構の解明とこれに基づく薬物療法適正化

腎機能不全に伴う中枢作用薬の作用増強メカニズムに関連し、腎不全時には、薬物の代謝消失を司る肝臓において薬物代謝酵素の発現量が減少すること、並びに、脳脊髄液の主要産生部位である脈絡叢において電解質輸送担体の発現量が変動することを明らかにした。従って、腎不全時には、中枢神経系への薬物移行量が上昇することに加え、脳中枢神経系の内部環境恒常性に乱れが生じることで、薬物作用が増強すると考えられる。腎機能が廃絶もしくは極端に低下した生理条件では、腎機能の喪失に起因する生体内環境の恒常性の乱れによって、薬物の血中濃度推移ならびに薬物に対する組織の感受性が大きく変動する。しかしこうした変化のメカニズムは現在まで十分に解明されてはおらず、現状では腎障害患者の病状に応じた薬物投与の個別設計が適切に実施できてはいない。そこで申請者は、重症腎不全時に薬物感受性、特に中枢神経作用薬物に対する脳神経系の感受性が亢進するメカニズムの解明を目的に、研究計画初年度である平成21年度は先ず、脳組織を取巻く脳脊髄液の電解質濃度に及ぼす腎不全の影響を実験動物を用いて検討した。脳脊髄液の生成は脳組織の脈絡叢と呼ばれる部分で行われていることから、脈絡叢における生体内の主要な電解質であるナトリウムおよびカリウムの輸送機能をインビボ実験系で検討した結果、腎不全に伴って、脈絡叢における血液から脳脊髄液への電解質輸送が低下することが見出された。こうした変化はナトリウムとカリウムの濃度比を変化させずに生じていたことから、更に検討を重ねた結果、腎不全に伴って脳脊髄液から血液方向への電解質輸送が亢進すること、この充進は脈絡叢上皮の脳脊髄液側に存在するNa-K-C1共輸送担体NKCC1の発現量が増加することに起因することが明らかとなった。従って、脈絡層の電解質輸送機構が変化することで脳脊髄液の電解質に関する恒常性が変動し、これが感受性の亢進につながるものと推察される。今後は腎障害時にNKCC1の発現が変動するメカニズムについて重点的に検討を加えるとともに、腎障害時には薬物の血中濃度も正常時とは異なる推移を示すことが知られていることから、こうした薬物血中濃度の変化を考慮しながら、腎障害時の薬理効果の変動機構を明らかにする予定である。腎臓機能が極端に低下した場合には、腎臓の恒常性維持機能が失われて生体内環境の乱れが生じる。こうした状況を反映し、腎障害患者においては、薬物の血中濃度推移や薬物に対する組織の感受性が大きく変動することが報告されているが、その変動メカニズムは未だ不明である。そこで申請者は、重症腎障害時に、特に中枢神経作用薬物に対する脳神経系の感受性が亢進するメカニズムの解明を目的に、研究計画初年度の平成21年度には、脳組織を取巻く脳脊髄液の電解質濃度に及ぼす腎障害の影響を実験動物において検討した。その結果、腎機能の低下に伴って脈絡叢における血液から脳脊髄液への電解質輸送が低下することを示し、その原因が脈絡叢上皮の脳脊髄液側におけるNa-K-C1共輸送担体NKCC1の発現亢進であることを明らかにした。平成22年度は、先に見出したこうした腎障害の影響の普遍性を検証する目的で、異なる誘発機序により惹起した実験的腎障害モデル動物を用いて比較検討を行った結果、腎障害時には薬物の肝代謝活性が変動することが普遍的に示され、更にその活性変動は用いる基質によって上昇する場合と低下する場合の2通りに分かれることが明らかとなった。次いで、代表的な肝臓の薬物代謝酵素であるCYP3Aサブファミリーを対象に、その発現量に対する腎障害の影響を精査したところ、CYP3A1の場合には発現量変化が認められなかったものの、CYP3A2においては発現量の低下が認められ、またCYP3A9の場合には発現の増加が示唆された.従って、腎障害時には肝臓の薬物代謝活性が変化することで薬物血中濃度が変動し、これが薬効変動の原因になっていることが推察された。また、脈絡叢のNKCC1に加えて肝臓の薬物代謝酵素にも発現変動が生じていることから、腎障害時には遺伝子発現制御に関わる因子が全身性に作用している可能性も示唆された。次年度は、こうした因子の同定を含め、遺伝子の発現変動メカニズムの解明を目指す。腎不全等の腎機能の著しい低下に伴って、薬物の組織における薬理効果に変化が生じることが知られている。しかしその詳細なメカニズムは未だ不明である。申請者は、研究計画初年度の平成21年度において、実験的に腎障害を惹起させた急性病態モデル動物を用いて腎機能低下時の薬物に対する脳神経系の感受性変化機構を検討し、その結果、腎機能の低下に伴って脈絡叢における血液から脳脊髄液への電解質輸送が低下すること、そしてその原因が脈絡叢上皮の脳脊髄液側におけるNa-K-Cl共輸送担体NKCC1の発現亢進であることを明らかにした。

また平成22年度は、薬理効果の変動と密接に関係する薬物の血中濃度推移と腎機能低下の関係を精査した結果、腎不全時に肝臓の主要な薬物代謝酵素であるCYP3Aサブファミリーの発現量が変動することを示した。これにより、腎不全時にはこうした発現変動によって薬物の血中濃度推移が変化し、よって薬効変動が引き起こされることが強く示唆された。これらの知見を受けて平成23年度は、腎臓の機能不全が位置的に離れた脈絡叢や肝臓において輸送担体や代謝酵素の発現変動を引き起こすメカニズムの解明を試みた。急性腎障害には炎症性サイトカインの誘導が伴うことから、この炎症性因子の関与について、カラゲニン誘発炎症病態モデルを用い、正常腎機能条件で評価した結果、脈絡叢における輸送担体の発現量並びに肝臓における薬物代謝酵素の発現量が共に変動することが認められた。従って腎障害時には、それに伴って血液中に放出される炎症性サイトカインが全身性に作用して、それぞれの組織の遺伝子発現調節に影響を与えることが明らかとなり、そしてこれによる遺伝子の発現調節機構の変動が腎機能低下に伴う薬効変動のひとつの要因であることが示唆された。
コーパスに基づいたコロケーション習得のためのｅラーニング教材の開発と実践研究

まず、コーパスを利用して共起する名詞と動詞を抽出できるプログラムを開発し、名詞と動詞のコロケーションデータの収集と分析を行った。その結果をこれまで開発して来たコロケーション習得のためのパソコン用e-learning教材に反映させ、旧日本語能力試験1級名詞の追加に加え、新たに2級、3級、4級名詞について問題作成を行った。これにより、中級から上級レベルの幅広い学習者が利用できる教材となった。また、新たにタブレット端末でもこれらのコロケーションが学習できるようプログラムの構築を行った。試行と学習履歴の分析を行い、その結果を反映して教材を完成させた。1.前年度改良したコロケーション抽出プログラムを利用し、新しく公開された「現代日本語書き言葉均衡コーパス」(2011)に基づいたコロケーションデータを収集し直し、分析の後、動詞の再選定を行った。2.コロケーション習得のためのWeb教材「コロケーション彗星」を、日本語学習者と日本人学生の協働学習のために利用することを目的とし、新たに「意見交換」機能を搭載した。この意見交換機能とは、留学生、日本人学生、教員がトピックを登録し、各々が当該トピックについて意見を交換するものである。登録されたすべての意見は誰でも閲覧可能で、コメントを書き込めるようになっている。システムの検証を行った後、上級クラスの学習者を対象にブレンディッドラーニングとして試行を実施した。その結果、教員だけでなく学習者側からもトピックの提示があり、限られた時間内で行われる授業では十分述べることができなかった意見の投稿や、ほかの学習者の意見についてのコメントなど、活発な意見交換が行われた。3.モバイル端末で本Web教材を利用できるよう、システムの構築と検証を行った。モバイル端末用に練習問題の種類を絞りゲーム感覚で学習ができるようにし、前年度に拡充した新たなトピックとコロケーションも学習できるようにした。当初計画していたのは携帯端末用アプリケーションの開発であったが、学習履歴が取得できるようサーバに接続して使用する形態での教材開発を行った。大分大学と山口大学の留学生にモバイル端末を貸与するなどして試行を実施し、学習者からのフィードバックや学習履歴データの分析を行った。その結果、問題の解答方法や履歴の取得方法などに問題点が見つかり、システムの修正を行った。また、練習問題について、問題文を短くするなどの修正が必要であることが分かったため、修正を行った。4.これらの研究成果について学会発表を行った。1.コロケーション抽出プログラムを利用し、日本語能力試験3級と4級の名詞とコロケーションを抽出し、問題作成と例文作成を行うと同時に、1、2級の問題もさらに充実させ、教材の拡充を図った。また、従来グループ別に出題していたWeb教材の出題方式に多様性を持たせるため、すべての問題をランダムに出題するコースを新たに追加し、学習者のニーズに合わせた学習ができるようにした。2.本システムの管理者以外の大学の学習者なども自由に教材を利用できるように、携帯端末用アプリケーションとして新たにシステムを開発する予定にしていたが、予算が不足することが判明した。そこで、これまで管理者が学習者情報を入力して使用を許可していたログイン方式について、IDとパスワードを自動発行する方式に変更し、学習者自らが登録し学習を開始できるシステムとした。このことにより、一般の学習者も広く本システムを使用することが可能となった。3.試行の結果、教員が学習者の学習状況を把握しにくいという問題点が浮かび上がった。そこで、学習履歴抽出画面を追加し、該当年度・クラスの学習履歴を抽出できるようにした。さらに、クラス全員のポイント一覧と学習進度状況を学習履歴に追加し、教員がクラス内の学習者の学習状況を把握できるようにした。その結果、本教材を授業の一環として利用しやすくなった。4.学習者の意見を反映し、データベースに問題文の訳を追加し、学習者が誤答した際に訳が表示されるようにした。また、学習結果表示が分かりにくいという指摘を受け、結果表示画面の修正を行った。その他バグの修正など、問題点の発見と修正を引き続き行った。5.再度試行を行い、学習効果の検証を行い、研究成果についてまとめ学会発表を行った。また、『最新ICTを利用した私の外国語授業』(2014)に、本研究で開発したWeb教材とモバイル端末用教材についての論文が採択された。日本語学習者向けのコロケーション習得のためのe-learning教材「コロケーション彗星」のデータを拡充するために、まず、新たなコロケーションの選定を行った。中級レベルの学習者のために2級名詞を選定し、その名詞と共起する動詞のデータ収集を行った。実際の言語使用に基づいたコロケーションを選定するために利用したコーパスは、本年度12月に国研によって新しく公開された現代日本語書き言葉均衡コーパス(BCCWJ)である。本コーパスからデータを収集するために、コロケーション抽出プログラムをDVD版に対応するために改良し、精度を高めた。また、語の頻度数などの統計処理を行うカウントプログラムも新しく開発した。

これらのプログラムを利用し収集したデータをもとに、コロケーションの使い分けに関して分析を行うとともに、例文、練習問題の作成を行った。次に、本e-learning教材を日本語学習者と日本人学生の協働学習に利用するために、以下の新たな機能を追加することを検討した。1.「意見交換」タブの追加。2.「意見交換」では、トピックを登録しそれに対するコメントを投稿可能とする。3.トピックは学習者、日本人学生も登録可能とする。4.投稿文を読んで140字以内でコメントを書き込める。5.画像の投稿も可能とする。以上の追加機能について、実際のシステムの構築は予算残高不足から次年度に持ち越すことになった。本e-learning教材を携帯端末でも利用できるようにするために、画面構成、提示のしかた、練習問題の種類等について検討を重ねた。新たな形式の問題、音声を取り入れた練習等を追加し、携帯端末用教材を作成することにした。数社のアプリ開発業者との打合せを経て見積りを取り、発注を行った。3月中に完成する予定であったが、業者より開発期間延長の申し入れがあり、納品は次年度に持ち越されることになった。1.前年度に選定した新しいトピックとコロケーションを搭載したことで、教材の拡充を図ることができ、この点については計画通りに進展している。しかし、モバイル端末教材に搭載する練習問題の修正が新たに必要となったため、より広範囲の語彙についてコロケーションデータを収集し教材を拡充すること、また解説画面を充実させることについては達成が遅れている。そのため、引き続き次年度にこれらについて実施する予定である。2.日本語学習者と日本人学生の共同学習のための新たな機能の追加と検証を行うことができ、前年度の遅れは取り戻せた。3.モバイル端末用のシステム構築については、前年度発注していた業者から、別の開発者に開発を委託することとなったため、完成が当初の計画に比べかなり遅れることとなった。しかしながら、今年度中に試行を実施することができ、システムの問題点も見つかり、修正も行うことができた。試行期間が短かったことから、引き続き試行を行い、システムの検証を行う必要がある。4.今年度作成したモバイル端末用教材をさらに発展させ、サーバに接続しなくても広く使用が可能になるアプリケーションとして新たにシステムを開発することにしたため、達成が次年度に持ち越されることになった。このため、現在の達成度は当初の計画よりやや遅れることとなった。研究の目的として挙げた以下の4点について、達成度の評価を行う。1.e-learning教材「コロケーション彗星」の拡充については、新たなトピック5つとコロケーションを約400組選定した。また、例文と練習問題の作成は次年度の予定であったが、既に作成を行っている。よって、目標を達成していると評価できる。
ソーシャルスキルズトレーニングを用いた看護学生のコミュニケーション教育の有用性

本研究は看護学生が患者とのコミュニケーションを学ぶために、SST(Social Skills Training以下、SSTと略記する)の技法を用いたコミュニケーション教育を行い、その有用性を明らかにすることを目的とした。初年度は、SSTのリーダー研修と看護師、看護学生を対象としたSSTの文献検討からコミュニケーション教育計画を立案した。次年度は、看護学生へSSTの技法を用いたコミュニケーション教育を実施し、グループインタビューからその効果を調査した。最終年度には、グループインタビューと質問紙から、話題提供者とグループメンバーの役割の違いによるSSTの技法を用いたコミュニケーション教育の効果が明らかになった。本研究の目的は、看護学生が患者とのコミュニケーションを学ぶために、ソーシャルスキルズトレーニング(Social Skills Training以下、SSTと略記する)を用いたコミュニケーション教育を行い、グループインタビューから、その有用性を明らかにすることとした。本研究の遂行にあたり、平成21年度は主に研究実施に向けた準備を行った。はじめ、看護学生、看護師を対象としたSSTに関する動向を明らかにするために、これまでに発表された国内における看護学生、看護師を対象としたSSTに関する文献検討を行った。その結果、看護学生、看護師を対象としたSSTの運営状況やSSTの実施によって得られる効果等について、その傾向が明らかになった。これらは、次年度以降、学会等で発表をしていく予定である。次に、SSTの運営方法についてより詳細な情報を得るため、SST研修会等に参加した。SST研修会等で収集した情報や看護学生を対象としたSSTに関する文献等から、SSTの運営方法を検討し、看護学生を対象としたSST運営計画を作成した。また、看護学生を対象としたSSTに関する文献等をもとに、本研究における課題を明確にし、グループインタビューの実施方法・インタビュー内容を検討し、インタビュー計画を作成した。これらのSST運営計画、インタビュー計画は、研究計画書にまとめ、倫理委員会の審査を受け、研究実施の承認を得た。次年度は研究計画にもとづき、研究対象者にSSTへの参加協力を得て、研究データの収集を行う予定である。本研究の遂行にあたり、平成22年度は看護学生を対象にSSTを実施し、データ収集を行った。SSTの実施は、計18名の看護学生を対象に3つのグループに分けて1回ずつ行った。データ収集はSST終了後、グループインタビューを行った。インタビューは逐語録にまとめ、質的に分析した。その結果、SSTに参加しての効果とSSTのプログラム内容等との関連が把握でき、SST運営の検討課題が明らかになった。これらの結果から、看護のコミュニケーション教育へのSSTの活用が示唆された。この成果は次年度以降、発表していく予定である。その他、今年度は国内における看護学生、看護師を対象としたSSTに関する文献検討で明らかになったSSTの運営状況やその効果等について学会発表を行った。また、看護学生を対象としたSSTの運営に当たり、看護におけるコミュニケーションについて教育内容・方法の整理が必要であるため、看護のテキストと看護のコミュニケーションスキル尺度から、看護におけるコミュニケーションスキルの分類を試みた。その結果、看護のコミュニケーションスキルの理論と技術的側面が示され、看護に特徴的なコミュニケーションスキルが明らかになった。この成果については学会にて発表を行った。本研究の目的は、看護学生が患者とのコミュニケーションを学ぶために、ソーシャルスキルズトレーニング(Social Skills Training以下、SSTと略記する)の技法を用いたコミュニケーション教育を行い、その有用性を明らかにすることである。SSTは対人関係の技能を高める目的で、ロールプレイやフィードバック、モデリングなどの技法を組み合わせて練習が進められる。看護学生は実習において患者とのコミュニケーションを難しいと感じることが多い。看護学生が患者とのコミュニケーションを難しいと感じた場面を取り上げ、SSTの技法を用いて練習していく方法は、看護学生のコミュニケーション能力の向上に役立つと考える。今年度は、SSTの技法を用いたコミュニケーション教育での話題提供者とグループメンバーの役割の違いによる効果の捉え方を比較することを目的に行った。SSTの技法を用いたコミュニケーション教育の実施は、看護学生を対象に3つのグループに分けて1回ずつ行った。データ収集は、SSTの技法を用いたコミュニケーション教育の実施後、グループインタビューと昨年度の調査で得た結果をもとに作成した質問紙を用いて行った。その結果、話題提供者とグループメンバーが捉える効果を明らかにすることができた。これらの結果から、看護学生のコミュニケーション教育へのSSTの活用を検討することができた。その他に、今年度は昨年度の調査で明らかになったSSTの技法を用いたコミュニケーション教育の効果について学会発表を行った。
癌化にともなう遺伝子欠失の解析とその機序の解明-ヒト染色体脆弱部位ゲノム構造解析と癌細胞における大規模遺伝子変異の検討-

【研究目的】本研究の最終目的は、癌化に伴う遺伝子欠失の機序に関与するゲノム一次構造の特徴、特に欠失に共通する配列構造を明らかにすることである。初めに、ヒトの染色体で最も不安定な領域の一つである染色体3番3p14.2領域(FHIT/FRA3B領域)に存在するFHIT遺伝子のゲノム構造を大規ヘシークエンスし、次いで様々な癌腫におけるその染色体の変化を遺伝子配列のレベルで明らかにしたい。更に一般に癌抑制遺伝子として知られるp53、APCの発癌過程におけるゲノム配列上の変化、特に遺伝子の欠失(loss of heterozygosity)を引き起こすゲノム構造上に共通する配列の特徴を明らかにすること。【結果と意義】(1)我々あるいは公的データベース(ゲノム・プロジェクト)の進展によりFHIT/FRA3B領域のシークエンスは1Mb以上に拡大された。(2)消化器癌におけるFHIT/FRA3B領域のゲノム構造を62例の外科切除大腸癌で検索した。大腸癌に関してはFHIT遺伝子中のdinucleotide markerとFHIT上流、下流にある3個のSTSマーカーによる欠失検索とmRNAの発現異常、また抗FHIT抗体による免疫組織学的検索を併せて行った。その結果、臨床外科切除大腸癌において、3個のSTSマーカーの少なくとも一つに変化(LOHあるいはhomozygous deletion)が認められる症例は43例(70%)と極めて高率に認められた。またmRNAレベルでFHIT発現異常(発現低下、発現消失あるいは異常mRNAの発現)は18例(30%)であった。更に免疫組織学的にFHIT蛋白発現の低下していた症例は31例(50%)に認められた。更にFHIT蛋白の発現異常とmRNAの発現異常には有意な相関が認められ(p<0.05)更にFHIT蛋白の発現異常がゲノムの変異と強い相関(p=0.016)で関係していることが明らかになった。
微小重力下における固液界面の濡れ特性に関する研究(宇宙における固液界面の動的挙動)

本研究は、複合材料や接合体の製造,半導体のハンダ付け,新素材のろう付け等を行う際に,重要な材料学的因子である,異種材料間の固液界面の濡れ挙動,特に流動する液体を想定した動的濡れ挙動を実験的・理論的に明らかにし,得られた結果を材料設計の分野に役立てることを目的として行われた。また近未来に行われる宇宙環境下すなわち微小重力・高真空状態における材料作製時の固液界面の濡れ挙動,特に微小重力の影響を調べた。研究は,まず従来から行われてきた地上での濡れ挙動評価法の調査を行い,本研究目的に適合した幾つかの方法を選択・実行した。個々の結果の精度・再現性,相互の相関性及び宇宙実験としての妥当性の検討を行った後,航空機を用いた微小重力下での実験結果と地上実験とを比較して重力の影響を考察した。また次の段階で行う溶融金属と固体材料(金属、セラミックス等)との濡れ性評価技術の開発の予備試験として,メニスコグラフ法による低融点金属の濡れ性評価に及ぼす材料学的因子及び実験環境の影響についても調査検討を行った。本研究で行った実験方法は,地上実験では押出液滴法,リキッド・ブリッジ法,メニスコグラフ法,傾斜平板法,微小重力環境下においては,押出液滴法,リキッド・ブリッジ法で行った。供試材は,液体として精製水,グリセリン,ヒマシ油,シリコンオイル,及び低融点金属(Uメタル),固体として,ガラス,アクリル,テフロン,金属(Ni等)及びセラミックス(Si3N4等)を用いた。この結果静的濡れ挙動は,地上では実験条件を正確に合わせることにより、評価法によらずほぼ一定であること。動的挙動は履歴により変化し、評価法の実験条件により異なること.重力により濡れ挙動すなわち接触角が変化することなどが明らかになった。本研究は,新素材の複合材料を製作する上で重要な因子である,異種材料間での動的な漏れ挙動を実験的,理論的に解析するとともに,得られた結果を材料設計の分野に役立てることを目的として行なわれている。実験初年度である平成元年度の研究においては,地上実験での基本的な漏れ挙動評価法および実験結果の解析法を確立することを主眼として三種類の実験を行い,以下の成果を得た。(1)押出液滴法:動的な漏れ性及び漏れの履歴を評価するために,考案された独自の方法で液滴の成長,収縮過程を観察した。その結果,静的・動的な接触角の相違,固・液材料の組合せによる接触角の変化,界面張力を評価することができた。(2)メニスコグラフ法:従来より行われている装置に改良を加え,動的漏れ性を評価した。従来の解析方法ではあまり考慮されていない因子,例えば液体のキャピラリ-数,粘性,漏れ速度に対する知見を得た。(3)傾斜平板法:漏れ速度を評価するために行われた方法であり,毛細管を用いた従来の漏れ速度および接触角評価法に比較して,簡単な方法で精度よく漏れ挙動を評価することができた。以上の実験を行うにあたり,ビデオカメラを用いた画像解析装置を製作し,漏れの進行状況を調べた。これらの装置および測定方法の健全性は,水と固体(アクリル,ガラス)との接触角,表面張力の測定結果から確認できた。本年度で,地上における実験方法および基本的なデ-タができたので,平成2年度において,微小重力下におけるデ-タを収集して重力による漏れ挙動の変化を測定することが充分可能になった。

本研究は,複合材料や接合体の製造,半導体のハンダ付け,新素材のろう付け等を行う際に,重要な材料科学的因子である,異種材料間の固液界面の濡れ挙動,特に流動する液体を想定した動的濡れ挙動を実験的・理論的に明らかにし,得られた結果を材料設計の分野に役立てることを目的として行われた.また近未来に行われる宇宙環境下すなわち微小重力・高真空状態における材料作製時の固液界面の濡れ挙動,特に微小重力の影響を調べた.研究は,まず従来から行われてきた地上での濡れ挙動評価法の調査を行い,本研究目的に適合した幾つかの方法を選択・実行した.個々の結果の精度・再現性,相互の相関性及び宇宙実験としての妥当性の検討を行った後,航空機を用いた微小重力下での実験結果と地上実験とを比較して重力の影響を考察した.また次の段階で行う溶融金属と固体材料(金属、セラミックス等)との濡れ性評価技術の開発の予備試験として,メニスコグラフ法による低融点金属の濡れ性評価に及ぼす材料学的因子及び実験環境の影響についても調査検討を行った.本研究で行った実験方法は,地上実験では押出液滴法,リキッド・ブリッジ法,メニスコグラフ法,傾斜平板法,微小重力環境下においては,押出液滴法,リキッド・ブリッジ法で行った.供試材は,液体として精製水,グリセリン,ヒマシ油,シリコンオイル,及び低融点金属(Uメタル),固体として,ガラス,アクリル,テフロン,金属(Ni等)及びセラミックス(Si3N4等)を用いた.この結果静的濡れ挙動は,地上では実験条件を正確に合わせることにより,評価法によらずほぼ一定であること,動的挙動は履歴により変化し、評価法の実験条件により異なること.重力により濡れ挙動すなわち接触角が変化することなどが明らかになった.
MAP kinase特異的阻害剤スクリーニング系の確立

MAP kinase特異的阻害剤スクリーニング系の確立に関する研究を行い、以下の結果を得た。酵素現としては、細胞内シグナル伝達機能解析に用いられるPC12細胞を用い、それより増殖因子で刺激し、MAP kinaseを始めとする細胞内シグナル伝達物質が活性化された状態にあるcell lysate及び、増殖因子で処理していないcell lysateの2種類を調製した。次に基質としては、MAP kinaseの良い基質となるMBP(Myerin Basic protein)を、活性型アフィニティー担体リガンド固定化用ゲルに固定化したものを用いた。さらにリン酸化反応を、上記のcell lysate、MBP-アフィニティー担体ゲル複合体、[g-^<32>P]ATP及び、阻害剤を含んだ形で96穴マルチウェルプレート上で行った。反応終了後、96穴マルチウェルプレート用セルハーベスターを用いて、リン酸化されたMBP-アフィニティー担体ゲル複合体のみをガラスフィルター上にトラップし、そのリン酸化放射活性を96マルチウェルプレート用シンチレーションカウンターを用いて測定した。そして、活性化されたcell lysateによるMBPのリン酸化量から、活性化されていないcell lysateによるリン酸化量を減算した値をMAP kinase活性とした。上記の方法を採用することによって、MAP kinase特異的阻害剤検出系の概略を構築することに成功した。今後、既知のkinase阻害剤を用いることにより、本スクリーニング系の検証を行う予定である。
欧州エコミュージアムにみる世代継承性と現代的課題への対応

エコミュージアムは、1971年に命名されてから一世代を上回る40年を経て、様々な変容をとげてきている。とくにヨーロッパでは、この間に活発であった時期もあればその後衰退した地域もあり、次の世代への継続性が課題となっている。長期間を経たエコミュージアムでは、歴史的遺産の継承だけではなく、教育的視点を持ちつつ常に現代的課題に対処し、社会的包摂の考え方やその基盤には住民活動による一貫性などが重要な意味を持っていることなどがわかった。本研究では、世界的に初期に形成されたエコミュージアム活動において、いかに世代継承が成されてきたかを明らかにし、また経年変化の中でどのように現代的課題に対応してきたのかを把握しようとするものである。本年度は次年度以降の海外調査をすすめるため、海外動向のための基本的な文献資料の収集と、国内事例についての海外研究協力者による評価を通じて、現代的課題の抽出を試み、海外現地調査のための基盤を固めた。1.研究者メンバーによる研究会を開催し、研究計画の詳細検討、エコミュージアム国際比較のための課題の洗い出し、ワークショップの準備・運営の企画をおこなった。2.国内でのワークショップを開催し、海外からの協力研究者(スペインから訪問、フランスから招聘)と共に、各地の国内事例、隼人町(鹿児島県)、三浦半島(神奈川県)のエコミュージアムについて、現地調査と意見交換を行った。また、海外からの報告により、エコミュージアム成立期の事情と現代までの変容について討論し、その後のシンポジウムにおいて国内の各事例についての評価を試みた。3.国内版チェックリスト作成の準備作業として、海外で作成されたエコミュージアム活動評価チェックリストを訳して、その適用について考察した。4.その他、資料収集と予備調査として、日本エコミュージアム研究会大会(東北)に参加し、国際博物館会議ICOM大会(上海)に参加し、MINOM新博物館学運動の集会にも出席し討論に参加、海外関連研究者と情報交換し資料収集を行った。本年度は、基礎研究として文献、資料収集をおこなう他、A)フランス国内の現地調査(世代継承性と現代的ニーズへの対応に関する実態把握と評価)B)研究者間の討論(経年変化の評価と活動の持続性のための条件をテーマに討論)C)評価指標等、資料の国内への適用を計画したが、ほぼ予定通りに研究を進めた。A)フランス国内エコミュージアムの現状と経緯の調査を実施した。いくつかの長期経過したエコミュゼの、これまでの変化(自治体の形態や運営体制などの社会的背景の変化を含む)や現在の実態についての現地調査を行い、その現代的な役割に関してフランスにおける協力研究者(ユグ・ドヴァリーン、アレクサンドル・ドラルジュ、アラン・ジューベール)らとの議論をおこなった。さらに関連する欧州内のエコミュージアムの動向についても資料収集を継続的におこない、現代社会における各事例に対する多面的評価を試みた。B)国内で開催されたエコミュージアム研究会全国大会(長野県阿智村で実施)や研究例会などの研究会議等に参加し、現地調査を実施することに加え、情報交換と資料収集を行った。C)国内のエコミュージアム評価指標についての整理をおこなった。このほか、海外の最新動向について、D)資料などをもとに研究計画の詳細検討、エコミュージアム国際比較のための課題の洗い出しをおこない、適宜、外部研究協力者や海外からの研究協力者(仏、西、英、スウェーデン、ブラジル)と情報交換をおこなった。エコミュージアムはその名前が誕生してから40年あまりが経った。この実践と理念の変容と現代的な意義を見いだすために、本研究では、長い経験をもつ欧州のエコミュージアムにおける動向を調査した。本年度は、3年間の研究の最終年度として、これまでの議論のまとめをおこなうと共に、実地調査もおこなった。まず、文献や資料を収集し、近年の動向を確認し、国内外の研究者との情報交換を実施し、日本国内におけるエコミュージアムの事例の動向についても、研究会等によりその実情を把握した。今年度中には、7月にブラジル、アマゾニアでもエコミュージアムとコミュニティミュージアムの国際会議が開かれたが、その資料を収集し内容を把握するとともに、さらに、9月には大規模な国際会議としてポルトガルのセイシャルで開催されたecomuseums2012国際会議に出席をし、日本の実情と課題を報告するとともに、当該地域におけるセイシャル市のエコミュージアムの実態調査をおこない、また会議での研究交流や討論、情報交換や資料収集などを集約的におこなった。これに加えてさらに、近年きわめて急速に発展しているエコミュージアムの先進国として注目されているイタリアにおいて、そのピエモンテ州の3カ所のエコミュージアムの実態を把握すべく現地調査をおこない、典型的なタイプの異なるエコミュージアムの運営、実態についての調査をおこなった。これらから、3年間のまとめとして議論をおこない研究報告を作成した。国内外の情報を取得し、今年度の成果として、これまで日本に紹介されてきたフランスにおける主要なエコミュゼ(エコミュージアム)の変遷と動向について現地調査をおこなうことによって、様々な知見を得ることができた。24年度が最終年度であるため、記入しない。

最終年度には、近年ヨーロッパでめざましいエコミュージアムの展開をみせているイタリアにおける実状から、現代的課題を把握することとなるが、キーパーソンの勤務先変更により、計画していたよりもやや情報が少なくなっている。このことの克服も含めて、昨年企画されて実現するエコミュージアム国際学術会議が2012年9月にポルトガルで開催されることとなり、その場での情報交換、収集に努めることとした。これらの総合的な考察のまとめを残された期間に遂行し、研究を完了する予定でいる。24年度が最終年度であるため、記入しない。
パーオキソ-ポリタングストランタニド錯体の触媒機能と希土類元素の化学作用

(1)10-タングストランタニド錯体(LnW10036n-;LnW10)にH202を加えるとパーオキソ錯体が生成することをin situ分光法で明らかにした。H202-CeW10反応系について特にそのユニークな推定モデルを提案した。この錯体は極めて可逆的に振舞うことよりアルコールの酸化触媒反応に適用した。1-hexanolや2-Octanolでは低い収率(5-30%)となったが、benzyl-alcoholやbolneolからは極めて高い収率(85-95%)で対応するaldehidesが得られた。このことよりH202-CeW10は穏和で安定な酸化触媒となることを結論した。(2)La,Ce,Pr,Nd,Sm,Eu,Gd,Dy,Ho,Er,およびYbを含む一連のLnW10を合成し、ICP,UV-vis,FT-IR,FT-Raman,183W-NMRにより同定、評価した。Ln-O-Wラマン伸縮バンドはLn(III)のイオン半径およびf^nの理論的磁気モーメント(νtheor)と良い相関性を示した。Ln(III)に直接配位した(WO6)_5ユニットの183W-NMR化学シフトはfnの高いエネルギーの分光学項のspin-軌道相互作用による混合と結合効果を二次摂動による計算で求めた“Golding constant"(Sz)と良い相関関係を示した。このLnW10シリーズの2-Octanolに対する酸化活性はまたLn-O-W伸縮バンドに近似的に対応するようにみえる。現在これらの相関関係の物理的意味について、特にLnの化学作用の観点から、検討している所である。
ラット海馬スライスにおける脳虚血に対する低体温および全身麻酔薬の保護効果

目的:臨床的に全身麻酔薬および低体温の脳保護作用が示唆されているが,そのメカニズムは明らかでない.当該研究では,ラット脳スライス標本(in vitro)を用い,実験的脳虚血に対する全身麻酔薬および低体温の効果を電気生理学的に検討した.方法:ウィスター系雄性ラット(100-200g)を麻酔後断頭して海馬を摘出し,海馬スライス標本(400μm)を作成した.スライスは実験用チャンバー内のliquid/gas interface上に置き,人工脳脊髄液(pH=7.4)および95%O_2/5%CO_2混合ガスを還流した(37°C).CA1錐体細胞領域にガラス管微小電極を刺入し,field potentialを記録した.95%O_2/5%CO_2を95%N_2/5%CO_2に置換して180秒間のanoxiaを負荷することによりanoxic depolarization (AD)を誘発した.ADは,NMDAおよびnon-NMDAレセプタやGABAレセプタを薬理学的に遮断しても発生することから,シナプス伝達を介さない反応であると考えられる.結果:静脈麻酔薬thiopental(0.2-0.5mM)の適用により,ADの発生率は著明に抑制されたが,propofolおよび揮発性麻酔薬はAD抑制作用を示さなかった.また低体温(22°C)は,thiopentalによるAD抑制効果を促進する傾向を示した.結論:Thiopentalと低体温は,anoxiaによるADの発生を著明に抑制することにより,脳保護作用を来す可能性が示唆された.このAD抑制作用はシナプス伝達を介さないことから,神経細胞体(soma)に対する直接作用作用である可能性が示唆された.当該研究において,in vitro中枢神経標本の実験的脳虚血モデルにおいてthiopentalと低体温による脳保護作用が証明されたことは意義深い.目的:臨床的に全身麻酔薬および低体温の脳保護作用が示唆されているが,そのメカニズムは明らかでない.当該研究では,ラット脳スライス標本(in vitro)を用い,実験的脳虚血に対する全身麻酔薬および低体温の効果を電気生理学的に検討した.方法:ウィスター系雄性ラット(100-200g)を麻酔後断頭して海馬を摘出し,海馬スライス標本(400μm)を作成した.スライスは実験用チャンバー内のliquid/gas interface上に置き,人工脳脊髄液(pH=7.4)および95%O_2/5%CO_2混合ガスを還流した(37°C).CA1錐体細胞領域にガラス管微小電極を刺入し,field potentialを記録した.95%O_2/5%CO_2を95%N_2/5%CO_2に置換して180秒間のanoxiaを負荷することによりanoxic depolarization (AD)を誘発した.ADは,NMDAおよびnon-NMDAレセプタやGABAレセプタを薬理学的に遮断しても発生することから,シナプス伝達を介さない反応であると考えられる.結果:静脈麻酔薬thiopental(0.2-0.5mM)の適用により,ADの発生率は著明に抑制されたが,propofolおよび揮発性麻酔薬はAD抑制作用を示さなかった.また低体温(22°C)は,thiopentalによるAD抑制効果を促進する傾向を示した.結論:Thiopentalと低体温は,anoxiaによるADの発生を著明に抑制することにより,脳保護作用を来す可能性が示唆された.このAD抑制作用はシナプス伝達を介さないことから,神経細胞体(soma)に対する直接作用作用である可能性が示唆された.当該研究において,in vitro中枢神経標本の実験的脳虚血モデルにおいてthiopentalと低体温による脳保護作用が証明されたことは意義深い.目的:臨床的に,低酸素脳症に対する全身麻酔薬の保護効果が示唆されているが,その作用機序は明らかでない.海馬の電気生理学的性質に及ぼす実験的脳虚血の作用について,脳スライス標本を用いた検討を行った.方法:ウィスター系雄性ラット(100-200g)を麻酔後断頭して海馬を摘出し,海馬スライス(400μm)を作成した.スライスは脳チェンバー内のliquid/gasinterface上に置き(37°C),人工脳脊髄液(ACSF)および95%O_2/5%CO_2混合ガスを灌流した(pH=7.4).Schaffercollateralfiberに刺激電極を置き,CA1領域にガラス管微小電極を刺入した.微小電極用増幅器を用いてCA1錐体細胞の集合電位(PS)を記録した(0.1Hz)二連刺激(40ms)によりPSの促通反応(PPF)を誘発し,低酸素の影響を検討した.95%O_2/5%CO_2と95%N_2/5%CO_2を混合することによりCO_2濃度を一定に保ったまま低酸素負荷(hypoxic hypoxia)した.結果:180秒間の低酸素(10%O_2)曝露によりPSの振幅は抑制され,PPFは著明に増大した.これはPS1の抑制がPS2の抑制よりも強いことによった.上記の低酸素負荷による影響は,酸素濃度を95%に戻すことにより回復傾向を示したが,PPFの増大効果は持続した.考察:低酸素負荷中・後に認められたPPFの増大は,(a)NMDAレセプタなどの促進性シナプス伝達の亢進,あるいは(b)GABA

レセプタなどの抑制性シナプス伝達の抑制によると考えられる.今後の展望:すでに我々は同じ標本を用いて,促進性および抑制性シナプス伝達に及ぼす全身麻酔薬の効果を明らかにしており,我々のデータをもとに脳虚血に対する全身麻酔薬の保護作用を明らかにしてゆく計画である.目的:臨床的に,低酸素脳症に対する全身麻酔薬の保護効果が示唆されているが,その作用機序は明らかにする目的で脳スライス標本を用いた検討を行った.方法:ウィスター系雄性ラット(100-200g)を麻酔後断頭して海馬を摘出し,海馬スライス(400 μm)を作成した.スライスは脳チェンバー内のliquid/gasinterface上に置き(37°C),人工脳脊髄液(ACSF)および95%O_2/5%CO_2混合ガスを灌流した(pH=7.4).Schaffer collateral fiberに刺激電極を置き,CAl領域にガラス管微小電極を刺入した.微小電極用増幅器を用いてCAl錐体細胞の集合電位(PS)を記録した(0.1 Hz).二連刺激(40 ms)によりPSの促通反応(PPF)を誘発し,低酸素の影響を検討した.95%O_2/5%CO_2と95%N_2/5%CO_2を混合することによりCO_2濃度を一定に保ったまま低酸素負荷(hypoxic hypoxia)した.またthiopental(0.2mM)を低酸素負荷以前に投与し,全身麻酔薬の保護効果を検討した.結果:180秒間の低酸素(10%O_2)曝露によりPSの振幅は抑制され,PPFは著明に増大した.上記の低酸素負荷による影響は,酸素濃度を95%に戻すことにより回復傾向を示したが,PPFの増大効果は持続した.一方,thiopental投与群では低酸素負荷中・後のPPFの増大が抑制された.考察:低酸素負荷中・後に認められたPPFの増大は,(a)NMDAレセプタなどの促進性シナプス伝達の亢進,あるいは(b)GABAレセプタなどの抑制性シナプス伝達の抑制によると考えられるが,thiopentalはこれを抑制する.今後の展望:他の全身麻酔薬,低体温の効果などを検討し,脳保護作用のメカニズムを明らかにする.・目的:臨床的に,低酸素性脳症に対する全身麻酔薬の保護作用が示唆されているが,そのメカニズムを明らかにする目的でラット脳スライス標本を用いた電気生理学的検討を行った.・方法:ウィスター系雄性ラット(100-200g)を麻酔後断頭して海馬を摘出し,海馬スライス標本(400μm)を作成した.スライスは実験用チャンバー内のliquid/gas interface上に置き,人工脳脊髄液(pH=7.4)および95%O_2/5%CO_2混合ガスを還流した(37°C).シャーファー側枝に刺激電極を置き,CAl領域にガラス管微小電極を刺入し,錐体細胞の興奮性シナプス後電位(EPSP)および集合電位(PS)を記録した.95%0_2/5%CO_2を95%N_2/5%CO_2に置換することにより,180秒間のanoxic anoxiaを負荷した.・結語:Thiopentalは,anoxiaによるSDの発生を著明に抑制することにより,脳保護作用を来す可能性が示唆された.揮発性麻酔薬にはSD抑制作用は認められなかった.ThiopentalによるSD抑制作用はシナプスを介さないメカニズムであると考えられた.●目的:臨床的に,低酸素性脳症に対する全身麻酔薬および低体温の保護作用が示唆されているが,そのメカニズムを明らかにする目的でラット脳スライス標本を用いた電気生理学的検討を行った.