hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
廃棄物処分場のライフサイクルにおける鋼製遮水工の建設・維持補修技術に関する研究

本研究では,H-H継手内部の空洞空間に低水位環境を保持した場合,種々の条件をパラメトリックに変化させたときのH-H継手の有害物質の封じ込め性能ならびに浄化促進性能について評価を行った.本研究で得られた知見は以下のとおりである.1H-H継手内部の空洞空間に低水位環境を保持することで,鋼管矢板遮水壁を通過して海域へ流出する有害物質の発生を防ぐことができる.2遮水・浄化促進機能を有するH-H継手の有害物質の浄化促進性能は,処分場からの浸出水量の増大に伴って向上する.3・処分場内に存在する有害物質の封じ込めを達成するためには,底面遮水工の遮水性能を向上させることも重要である.本研究課題は新しい視点で廃棄物処分場のライフサイクルにおける環境信頼性を飛躍的に向上させる技術を提案・検討し,さらに廃棄物処分場の形質変更をも伴う跡地利用を促進することを目標としている。平成25年度は,2本の鋼管がH鋼で予め溶接された建材である「連結鋼管矢板」,ならびに連結鋼管矢板に係わる技術として開発した2つのH鋼および膨潤性止水材を用いた「H-H継手」によって構成される「H-H継手を施した連結鋼管矢板」を用いた鋼製遮水工の現場適用性および長期的耐久性を検討した。そこでは,H-H継手を施した連結鋼管矢板に関する室内力学的・水理学的試験に基づく既往の研究成果を発展させ,また,現場性能を検証するため,現場条件を限りなく模擬した室内大規模模擬打設・遮水性試験を実施した。計画した室内大規模模擬打設・遮水性試験では,既実施の室内試験等で得られたH-H継手を施した連結鋼管矢板の力学的・水理学的特性が,現場レベルにおいてどの程度まで発揮することができるかの検証を施工法も含めて加えた。一方,遮水処理材として研究代表者が開発に携わっている膨潤性止水材が接着・塗布されたH-H継手を施した連結鋼管矢板を用いた鋼製遮水工の長期的耐久性を実験的に明らかにした。具体的には,H-H継手を施した連結鋼管矢板の変形場(地震外力場)および劣化促進場における遮水性能および変形追随遮水性能を重力場・遠心場透水試験より評価した。それより,H-H継手を施した連結鋼管矢板の鋼製遮水工としての長期的な遮水・遮蔽性,耐震性,耐津波性,および各々の相関性に関する維持補修技術の提案・確立を目指した。本研究では,H-H継手内部の空洞空間に低水位環境を保持した場合,種々の条件をパラメトリックに変化させたときのH-H継手の有害物質の封じ込め性能ならびに浄化促進性能について評価を行った.本研究で得られた知見は以下のとおりである.1H-H継手内部の空洞空間に低水位環境を保持することで,鋼管矢板遮水壁を通過して海域へ流出する有害物質の発生を防ぐことができる.2遮水・浄化促進機能を有するH-H継手の有害物質の浄化促進性能は,処分場からの浸出水量の増大に伴って向上する.3・処分場内に存在する有害物質の封じ込めを達成するためには,底面遮水工の遮水性能を向上させることも重要である.近年、我が国では都市部の港湾域に大規模な海面廃棄物処分場の建設が増加している。廃棄物処分場は廃棄物に起因する有害物質の封じ込め機能が期待されており、既往の研究において長期的な評価から封じ込め機能を十分達成するという評価が得られている。しかしながら、海面廃棄物処分場は数十年にわたって供用されるにも関わらず、構成部材の劣化を考慮しないまま評価が行われていることから実現象と乖離している可能性がある。本研究では、海面廃棄物処分場において重要な役割を果たす遮水工に着目し、遮水工の劣化を考慮した有害物質の挙動に関して長期的評価を行った。遮水工の劣化を評価する際には、劣化メカニズムに依存することなく点検データから耐久性を評価する統計的劣化推定モデルの適用の検討を行った。また、点検データが存在しない場合においては劣化促進試験を行うことで、遮水工の劣化推定評価を行った。得られた遮水工の遮水性能に関する劣化曲線に基づき、海面廃棄物処分場における有害物質の漏出量に関する推定において3次元浸透・移流分散解析を行った。また、海面廃棄物処分場は沿岸部に位置するため処分場内外の水位差による影響を強く受けることから、解析条件による影響を定量的に示した。また、遮水工の劣化曲線には多くの不確実性が内包されていると考え、統計学的見地から確率密度分布を用いたリスク評価手法の提案を行った。具体的には、3次元浸透・移流分散解析によって得られた結果から海面廃棄物処分場における有害物質の漏出リスクの定量化を行った。上記の手法を採用することで、これまで不明瞭だった海面廃棄物処分場によって発生しうる環境リスクを定量的に示すことが可能となり、環境安定性を保持できる構造の選定や維持補修戦略に関する意思決定基準となりうる。本年度は,建設時から将来にわたって廃棄物処分場の環境安全性を持続ならびに保障するため,処分場内の水溶性有害物質の封じ込めに加え,水溶性有害物質の浄化促進をも期待できる鋼管矢板遮水壁を解析的に提案した.

具体的には,有害物質の封じ込めおよび浄化促進が求められる海面廃棄物処分場に対して,廃棄物埋立護岸の一つである鋼管矢板遮水壁の継手箇所に遮水・浄化促進技術を適用し,有害物質の封じ込めおよび浄化促進を図り,更なる環境安全性を追究した.本年度の成果として,鋼管矢板遮水壁の継手部材であるH-H継手に遮水・浄化促進技術を適用することで,処分場内の水溶性有害物質の封じ込め,ならびに浄化促進機能を有する鋼管矢板遮水壁の構築が可能であることを明らかにした.土木工学本研究課題の具体的な目的は以下のとおりであり,本年度は特に(2)を中心に当初の予定通り研究を遂行している。なお,本年度において(3)についても,着手の段階に入っている。(1)廃棄物処分場のライフサイクルにおける鋼製遮水工の環境性能評価(3)廃棄物処分場のライフサイクルにおける遮水・保有水浄化促進型の鋼製遮水工の提案本研究課題の具体的な目的は以下のとおりであり,本年度は特に(1)を中心に当初の予定通り研究を遂行している。なお,本年度において(2)および(3)についても,着手の段階に入っている。(1)廃棄物処分場のライフサイクルにおける鋼製遮水工の環境性能評価(3)廃棄物処分場のライフサイクルにおける遮水・保有水浄化促進型の鋼製遮水工の提案本研究課題の具体的な目的は以下のとおりであり,本年度の成果をより高度化させ,今後は(3)を重点的に進めていく予定である。(1)廃棄物処分場のライフサイクルにおける鋼製遮水工の環境性能評価(3)廃棄物処分場のライフサイクルにおける遮水・保有水浄化促進型の鋼製遮水工の提案本研究課題の具体的な目的は以下のとおりであり,本年度の成果をより高度化させ,今後は(2)および(3)を重点的に進めていく予定である。(1)廃棄物処分場のライフサイクルにおける鋼製遮水工の環境性能評価(3)廃棄物処分場のライフサイクルにおける遮水・保有水浄化促進型の鋼製遮水工の提案該当なし
異なる歩行スタイルによるノルディックウォーキングの運動強度とトレーニング効果

中高齢者の健康づくり運動として、ポールを使用するノルディックウォーキング(Nordic walking: NW)が広く普及してきている。NWは、ポールを身体後方に突いて推進力として利用するDiagonal style(DAI)と、ポールを身体前方に突いて杖のように利用するDefensive style(DEF)の大きく2つの様式に分けられる。DAIは、体力増進のためのエクササイズとして、多くの先行研究でその有効性が示されているが、身体的な虚弱者に対しリハビリテーションの手法として実施されることの多いDEFに焦点を当てた研究報告は少ない。本研究は、DAIおよびDEF双方の運動効果を明らかにし、様々な体力レベルの人々に対して健康づくりの運動手法とするためのエビデンスを示すことを目的とした。本来の最終年度に当たる平成30年度は、研究代表者が2018年3月10日より2019年1月29日まで日本学術振興会の「国際的な活躍が期待できる研究者の育成事業(旧:頭脳循環を加速する戦略的国際研究ネットワーク推進プログラム)」の助成を受け、AustraliaのEdhith Cowan Universityに長期海外研修で出ていたため、最終年度に予定していた研究成果の一般市民へのフィードバックを目的としたセミナーなどの開催が出来ず、補助事業期間の来年度への延長申請を行った。しかしながら、この期間中に研究成果をまとめることが出来(受け入れ先機関のDennis R. Taaffe教授とも本研究課題について議論が出来、適切な助言をいただけた)、体力科学(67(6): 423-430, 2018)、ならびにPLOS ONE(13(11): e0208070, 2018)に論文を公表することが出来た。研究代表者である本研究課題の申請者が、平成30年3月11日から平成31年1月29日まで日本学術振興会の「国際的な活躍が期待できる研究者の育成事業(旧:頭脳循環を加速する戦略的国際研究ネットワーク推進プログラム)」の助成を受け、AustraliaのEdith Cowan Universityに長期海外研修に出ていたため、本研究課題の3年目に予定していた主な取り組み(研究成果を広く一般市民にフィードバックするための講演会や講習会の開催)が出来なかったことが、その理由である。しかしながら、この長期海外研修中の期間に、研究成果を論文として3本(体力科学、体育学研究、PLOS ONE)公表でき、前述した講演会や講習会の開催が出来なかったこと以外は、極めて順調に助成をしていただいた事に対して結果を出していると考えている。現在、一般市民を対象とした大学主催のNordic Walkingの講習会、鹿児島県の歴史資料館とコラボレートしたウォーキングイベントの開催などを計画・打合せ中である。上記の取り組みに際して、若干新たにNordic walkingと通常のwalkingの比較などのデータ取得を必要とする予定ではあるが、得られたデータはより一般市民へわかりやすく研究成果をフィードバックするために使用するとともに、研究成果としての公表にも取り組んでいく予定である。平成28年度は、地域在住の中高齢者12名を対象に、DIA、DEFの両歩行様式におけるNWをそれぞれ12分間ずつ行わせ、生理応答(VO2・エネルギー消費量・HR)、およびEMGによる上肢(上腕二頭筋・上腕三頭筋)・下肢(外側広筋・大腿二頭筋・前脛骨筋・腓腹筋内側頭)の筋活動水準、ポールを押す際に加わる力(ポーリング力)について検証した。結果、12分間の歩行距離はDIAのほうがDEFよりも有意に多かった。エネルギー消費量はDEFがDIAよりも有意に高かった。心拍予備量に対する運動強度は、両者間に有意差はみられなかった。筋活動水準は、上肢の上腕三頭筋のみ有意差が見られ、DIAがDEFよりも有意に高かった。ポーリング力はDIAがDEFよりも有意に高かった。DIAとDEFの、異なる歩行様式によるNWは、歩行距離、エネルギー消費量、上肢の一部の筋活動、ポーリング力において差異が認められたが、実際の運動効果において大きな差につながるほどではなかった。本研究は、「DAIおよびDEF双方の運動効果を明らかにし、様々な体力レベルの人々に対して健康づくりの運動手法とするためのエビデンスを示すこと」を目的としている。本年度は、地域在住の中高齢者を対象に、携帯型の呼気ガス分析器や筋電図測定装置を用いて、屋外における実際のNW運動時でのデータを取得した。その結果、実験室内で行われた先行研究と大きな差異は認められなかった。特にDEFに焦点を当てた研究報告は少なく、屋外で実際の運動時におけるデータで比較したのは本研究以外みあたらない。本研究により得られた知見は、少なくとも自立した生活を送っている地域在住の中高齢者に対して、DIAおよびDEFの運動効果には差がないことを示しており、中高齢者の健康づくりに対する運動処方のエビデンスとして、有意義な知見であるといえる。

中高齢者の健康づくり運動として、ポールを使用するノルディックウォーキング(Nordic walking: NW)が広く普及してきている。NWは、ポールを身体後方に突いて推進力として利用するDiagonal style(DAI)と、ポールを身体前方に突いて杖のように利用するDefensive style(DEF)の大きく2つの様式に分けられる。DAIは、体力増進のためのエクササイズとして、多くの先行研究でその有効性が示されているが、身体的な虚弱者に対しリハビリテーションの手法として実施されることの多いDEFに焦点を当てた研究報告は少ない。本研究は、DAIおよびDEF双方の運動効果を明らかにし、様々な体力レベルの人々に対して健康づくりの運動手法とするためのエビデンスを示すことを目的とした。平成29年度は、地域在住の過去に運動経験の無い高齢女性25名に対し、異なる歩行スタイルでのNWを週に2回の頻度で9週間の期間で介入し、その効果について機能的体力を主たる指標として調査した。その結果、両歩行スタイルとも機能的体力では、上肢・下肢の筋力、上肢・下肢の柔軟性、動的バランス能力、持久力などの項目で改善を示し、多くの項目で同様の結果であった。しかしながら、下肢筋力についてはDEFで、動的バランス能力についてはDIAでの改善がより大きく、歩行様式による相違もみられた。しかしながら、これらの結果には対象者の体力水準やNWの習熟度の違いも影響する可能性があり、今後のさらなる研究の必要性も示唆された。なお、本研究結果は、体育学研究に原著論文として受理された(in press)。本研究は、「DIAおよびDEF双方におけるNWの運動効果を明らかにし、様々な体力レベルの人々に対して健康づくりの運動手法とするためのエビデンスを示すこと」を目的としている。平成29年度は、地域在住の高齢者を対象に9週間の異なる歩行スタイルによるNWを介入し、その運動効果の違いについて調査した。昨年度の研究結果と同様に、両者の歩行スタイルの運動介入による機能的体力の改善は、多くの項目で同様の結果を示した。DIAとDEFによるNWの運動介入を行い、その結果を報告した先行研究は未だ見当たらず、本研究結果はNWの運動指導を行う人々にとって有意義な知見であると言える。また、本研究結果は原著論文として体育学研究に受理された(in press)。
川崎病の包括的研究・急性期病態と自然免疫の関連

定量PCR,マイクロアレイ解析により、自然免疫系が川崎病急性期の病態に深く関与していることが判明した。さらに、HCAECsを用いたin vitroの実験により、自然免疫系受容体のligandであるNOD1 ligandによりICAM-1の発現や、IL-8の産生が促進されることがわかった。【結果】a. ICAM-1の発現crude LPSによる刺激ではday1で最も高値でその後減少傾向を示した。NOD1 ligand、MDP、PGN K12による刺激では、day3でピークを示した。b.サイトカイン産生crudeLPSによる刺激ではday35でIL-8産生が高値を示した。PGNK12、MDP、Zymosan、NOD1 ligand刺激では、IL-8産生のピークはday5であった(Figure 5B)。IL-6産生は、crude LPS刺激によってのみ認められ、他の4種類のサイトカイン産生は認められなかった【結果】a.ICAM-1の発現crude LPSによる刺激ではday1で最も高値でその後減少傾向を示した。IL-6産生は、crude LPS刺激によってのみ認められ、他の4種類のサイトカイン産生は認められなかった。
PC計測システムを用いた物理実験の授業プランの標準化のための実践的研究

理科の授業では、生徒の科学的概念形成のために、実験や観察を通した学習が不可欠である。本校の物理科では、デジタルセンサを用いたPC計測システムを導入し、ほぼ全領域で実験や観察を取り入れた授業を行い、教材開発と授業展開の研究を行ってきた。この授業の特徴は「データ測定とグラフ化が瞬時にでき、授業者のねらい通りの展開が可能である」「従来できなかった実験が授業内にできる」などである。本研究では、このスタイルの授業を本校以外の高校で実践し、授業プランの標準化と評価を行った。実践協力校は4校(国立1校、公立2校、私立1校)で、授業内容は「電界と電位」「力積と運動量」「運動の法則」「電池の起電力と内部抵抗」であった。実際に授業実践できたのは3校で、うち1校は生徒実験を行った。授業後の教員アンケートでは「このスタイルの授業を他の分野でもやりたい」など、3校とも良い評価の回答が多かった。また生徒アンケートは、大阪の公立高校で用いられている授業評価アンケートを使用し、3校に本校を加えた4校のデータを集計した。その結果、PC計測システムを用いた授業は、どの質問項目においても高い数値(6.0ポイント前後)を示していた。例えば「興味関心の高まり;6.0ポイント」「知識技能の獲得;63ポイント」であり、1つの高校のこの2項目の全授業の平均が3.9ポイントであることから考えると、今回実践した授業の評価はかなり高いと言える。PC計測システムを用いた授業は、生徒を授業に集中させ、興味関心を高め、内容理解を助けることのできる授業であり、高校物理の授業改善につながる授業スタイルであると考えられる。このスタイルの授業が、生徒の誤概念を修正し、正しい科学的概念の形成に与える効果についての検証は今後の課題であると考えている。
心筋組織幹細胞におけるSTAT3/Pim-1シグナルの解析と創薬標的の探索

心臓は再生能が低い組織と考えられてきたが、心筋組織に幹細胞が存在することが知られるようになり、その生物学的機能に注目が集まっている。我々はこれまで、IL-6ファミリーサイトカインが、STAT3/Pim-1シグナルを介して、心筋組織幹細胞を血管内皮細胞に分化誘導し組織修復に寄与する可能性を提唱してきた。本研究では、同ファミリーに属するIL-27が、心筋梗塞や心筋炎モデルにおいて傷害慢性期に発現増強すること、IL-27がSTAT3/Pim-1シグナルを介して心筋組織幹細胞を血管内皮細胞に分化誘導することを見出した。併せて、Pim-1の下流にあるPim-1キナーゼの基質となる分子を同定した。これまでに、IL-6ファミリーサイトカインが、心筋組織幹細胞の血管内皮細胞への分化誘導し、心筋組織の恒常性維持に寄与することを明らかにしてきた。本研究では、組織幹細胞を標的として、心筋組織内の血管形成を誘導することにより、心筋組織の修復・再生を促すという治療戦略を確立することを目的とする。この目的を達成するために、心筋組織幹細胞の内皮細胞分化誘導に必要であるPim-1の下流シグナルや、心筋組織幹細胞の内皮細胞への分化を誘導する因子の同定を行い、心筋組織幹細胞の内皮細胞への分化に関して、詳細なシグナル伝達機構を明らかにし、組織幹細胞を用いた血管再生治療の創薬標的を同定する。まず、心筋組織幹細胞の内皮細胞分化誘導過程におけるPim-1の下流シグナルを明らかにするために、心筋組織幹細胞におけるPim-1の標的因子(基質)の同定を試みた。具体的には、成体マウス心臓由来細胞より磁気細胞分離装置を用いて調製したSca-1陽性心筋組織幹細胞において、野生型Pim-1発現アデノウイルスベクターによるPim-1遺伝子導入後にリン酸化される分子の探索を行うことにした。平成25年度は、野生型Pim-1のクローニングを行い、クローニングした野生型Pim-1発現アデノウイルスベクターの作製に成功した。また、心筋組織幹細胞の内皮細胞への分化を誘導する新たな因子の同定を行うために、心筋組織幹細胞においてSTAT3シグナルを活性化するサイトカインや成長因子の探索を行った。その結果、IL-6ファミリーサイトカインのひとつであるIL-27が、心筋組織幹細胞においてSTAT3シグナルを活性化することが明らかとなった。研究代表者は、これまで、心筋組織幹細胞がIL-6ファミリーサイトカインにより血管内皮細胞に分化誘導されることを報告してきた。本研究では、平成26年度、心筋組織幹細胞の細胞運命を制御を担う新たなサイトカインとして、IL-27を同定した。IL-27はこれまで循環器領域では、あまり注目されることがないサイトカインであったが、研究代表者は、IL-27が、マウス急性心筋梗塞モデルや実験的自己免疫性心筋炎モデルにおいて、心臓で発現誘導されることを見出した。IL-27はIL-6ファミリーサイトカインと同様に心筋組織幹細胞においてSTAT3シグナルを活性化し、Pim-1を誘導することによって、心筋組織幹細胞を血管内皮細胞に分化誘導した。IL-27は、これまで免疫制御サイトカインとして研究がなされてきたが、本研究成果はIL-27が心筋組織再生に関与する可能性を示唆するものであり、IL-27が組織炎症と再生をリンクさせるサイトカインであると期待され興味深い。また、上記の研究と並行して、心筋組織幹細胞におけるPim-1キナーゼの基質の検討をおこなってきた。Pim-1キナーゼのリン酸化モチーフに着目し、リン酸化モチーフペプチド特異的な抗体をもちいた検討から、SDS-PAGE上、約50kDa、100kDaの基質が存在することを見出している。心筋細胞は生直後に増殖能を失うため、心臓は再生能力が低い臓器と考えられてきた。しかしながら、近年、心筋組織内にさまざまな組織幹細胞が存在することが報告され、その細胞機能に注目が集まっている。我々は、これまで、心筋組織幹細胞のひとつであるSca-1陽性細胞が、IL-6ファミリーサイトカインの刺激により血管内皮細胞に分化すること、また、その過程にタンパクリン酸化酵素であるPim-1が発現誘導されること重要であることを報告してきた。我々は、Pim-1が発現誘導されるメカニズムとしてシグナル伝達分子STAT3の重要性を既に明らかにしてきたが、Pim-1の発現がどのようにして心筋組織幹細胞を血管内皮細胞に分化誘導するかに関しては不明であり、本研究では、STAT3/Pim-1シグナルの機能解析を行った。具体的には、Pim-1がセリン・スレオニンキナーゼであることから、その基質となる分子の同定を試みるという戦略を立てた。まず、Pim-1を発現するアデノウイルスベクターを用いて心筋組織幹細胞にPim-1遺伝子を導入し、リン酸化されるタンパク質を探索した。その結果、Pim-1によってリン酸化される可能性が示唆されるタンパク質が複数見つかったが、そのうちの一つの分子を同定し得た。今後、当該分子が、Pim-1を介した、心筋組織幹細胞から血管内皮細胞への分化に関与しているかどうかを検討する予定である。我々はこれまで、IL-6ファミリーサイトカインが、STAT3/Pim-

1シグナルを介して、心筋組織幹細胞を血管内皮細胞に分化誘導し組織修復に寄与する可能性を提唱してきた。本研究では、同ファミリーに属するIL-27が、心筋梗塞や心筋炎モデルにおいて傷害慢性期に発現増強すること、IL-27がSTAT3/Pim-1シグナルを介して心筋組織幹細胞を血管内皮細胞に分化誘導することを見出した。併せて、Pim-1の下流にあるPim-1キナーゼの基質となる分子を同定した。心筋組織幹細胞の細胞運命を制御する新たなサイトカインとしてIL-27を同定し得た点で、研究は一定の成果を得ているものと判断する。また、今回、Pim-1キナーゼの基質のモチーフに着目し、リン酸化モチーフペプチドに対する抗体で候補基質のおおよその分子量を把握できた。「今後の研究の推進方策等」に記載するように、このことは、PhosTagカラムとプロテオミクス技術を組み合わせることでPim-1キナーゼの下流分子を同定することが期待させる。循環薬理学1IL-27が心筋組織幹細胞を血管内皮細胞へ分化誘導することを見出した。今後は、心筋組織幹細胞において、IL-27受容体をノックダウンし、梗塞後心筋組織に移植することにより、分化誘導が抑制されるかどうかを検討する。2Pim-1キナーゼの基質を同定するために、以下の実験を行う;まず、心筋組織幹細胞にPim-1アデノウイルスベクターを感染させ、細胞抽出液を調整する。調整した細胞抽出液をPhosTagカラムで精製しニトロセルロース膜にブロットする。リン酸化基質モチーフペプチド抗体を用いて分子量に目安をつけ、その部分を切り出してプロテオミクス解析を行う。心筋組織幹細胞におけるPim-1の基質の同定に関しては、Pim-1発現アデノウイルスベクターの構築に時間を要したため、やや遅れている。一方で、心筋組織幹細胞の内皮細胞への分化を誘導する新たな因子の同定に関しては、IL-27を候補分子として見出した。今後は、作製したPim-1発現アデノウイルスベクターを用いてPim-1遺伝子を導入した心筋組織幹細胞においてリン酸化される分子の探索を行い、Pim-1の標的分子を明らかにする。さらに、Pim-1の標的因子として同定した分子に関して、siRNAや特異的な阻害剤、及び、ドミナントネガティブ型(抑制型)アデノウイルスベクターを用いてその発現あるいは活性を抑制した場合に、心筋組織幹細胞の内皮細胞への分化効率が低下するかどうかをin vitroで検討し、Pim-1基質の分子の内皮細胞分化への関与を明らかにする。また、心筋組織幹細胞においてSTAT3の活性化を誘導することが明らかとなったIL-27サイトカインシグナルに関しては、心筋細胞分化や細胞増殖への影響を解析し、IL-27サイトカインシグナルの心筋組織幹細胞に対する作用を解明する。
振動粒子の凝集促進作用を援用したサブミクロン粒子の電気集塵法

近年,SPM(suspended particulate matter)の弊害が注目されるようになった。この研究ではSPMの中で最も弊害が大きいサブミクロン域の微粒子を,通常の集塵機でも容易に捕集できる直径数μmの粒子に静電的に凝集させることにより,微粒子の捕集効率を向上しようとするものである。捕集核となる粒子を強く帯電しておくと,付近の微粒子は静電気力を受ける。静電気力には分極力も含まれ,これにより無帯電あるいは同極性に帯電した粒子同士にも強い引力が作用する。しかしこの作用を有効に引き出すためには2粒子を十分に接近させる必要がある。この目的に,捕集核粒子を強く振動させたり,あるいは適当な周波数の音波を作用させることにより,捕集核の周りに音響流を発生させ,微粒子を捕集核の周りに運搬させる。まず,流体力学的な考察により,振動粒子の周りに誘導される流れを特異摂動法によって解析し,粒子径に比較して振幅が大きい場合にも破綻しない摂動解を見つけた。また電気力学的な計算で高次の分極力の正確な計算法を明らかにして,捕集核の周りの微粒子の運動を精密に追跡する計算を行った。この計算を捕集核粒子が振動の半周期で微粒子を捕捉できる体積(凝集体積)の見積に応用し,既存のモデルの不備を補った。その結果,粒子振動で発生する音響流が凝集速度に与える効果が非常に大きいこと,粒子の荷電が凝集速度の促進に大きな効果があることなどを明らかにした。実験的には凝集速度定数を単一の捕集核粒子の成長速度から実測する装置を製作し,多数の測定を行った。凝集速度定数の実測値は全体的に理論値よりも数倍大きい。これは現実の凝集空間には気流の乱れが存在し,その流れの振動軸に直交する成分が凝集に寄与した結果と考えられる。中には2×10^<-3>cm^3s^<-1>を超えるものも観測され,この値は音波凝集で予測される値の数十倍にも及び,この凝集法が予測以上の効果を発揮するものと期待できる。交付申請書に記載した実施計画は達成できたと考える.実験計画の項目ごとに説明する.1、凝集速度定数に及ぼす流体力学的効果の解析:振動する捕集核粒子(あるいは振動流中の粒子)の周りに発生する音響流が遠方の微粒子を捕集核付近に運搬し,捕集核と微粒子の静電的相互作用による凝集を促進する.従来,振動振幅が捕集核半径より大きな場合の音響流は解析されていなかったが,この研究では大振幅の場合が必要になるため振動流Oseen近似による新しい解を見出した.この解の妥当性の確認実験を計画している.2、凝集速度定数に及ぼす静電気力の効果の評価:分極力を無視した場合の計算がFuchsによってなされているが,振動する捕集核と微粒子の衝突断面積を計算する目的には高次の分極力も考慮する必要があり,これをRe-expansion法と呼ばれる新しい手法で解析した.

捕集核と微粒子が接近すると高次の分極力の寄与が顕著になり,衝突断面積は分極力を考慮しないときの数倍に及ぶ場合のあることが予測された.3、凝集実験:新規に購入した機器にコンピューター制御を施し,実験装置を整備した.多くの予備実験を実施した結果,いくつかの問題点が明らかになり対策を講じた.その主なものは,(1)サブミクロン粒子の濃度の安定化-サブミクロン粒子の帯電による付着損失が濃度を不安定化することがわかり,高周波バリア放電による除電器を装置に組み込んで解決した.(2)サブミクロン粒子の残留電気量の測定-サブミクロン粒子の電気量は凝集速度に強く影響するので捕集核の粒径増加と電気量変化から求める計画であったが,波形記憶装置の位相特性が変動するため必要な精度が出せない.当面,位相校正を頻繁に行って出来る限りの信頼性を確保することにした.現在までの予備実験により大きな問題点はすべて洗い出せたのでこれから本実験に入る.近年,SPM(suspended particulate matter)の弊害が注目されるようになった。この研究ではSPMの中で最も弊害が大きいサブミクロン域の微粒子を,通常の集塵機でも容易に捕集できる直径数μmの粒子に静電的に凝集させることにより,微粒子の捕集効率を向上しようとするものである。捕集核となる粒子を強く帯電しておくと,付近の微粒子は静電気力を受ける。静電気力には分極力も含まれ,これにより無帯電あるいは同極性に帯電した粒子同士にも強い引力が作用する。しかしこの作用を有効に引き出すためには2粒子を十分に接近させる必要がある。この目的に,捕集核粒子を強く振動させたり,あるいは適当な周波数の音波を作用させることにより,捕集核の周りに音響流を発生させ,微粒子を捕集核の周りに運搬させる。まず,流体力学的な考察により,振動粒子の周りに誘導される流れを特異摂動法によって解析し,粒子径に比較して振幅が大きい場合にも破綻しない摂動解を見つけた。また電気力学的な計算で高次の分極力の正確な計算法を明らかにして,捕集核の周りの微粒子の運動を精密に追跡する計算を行った。この計算を捕集核粒子が振動の半周期で微粒子を捕捉できる体積(凝集体積)の見積に応用し,既存のモデルの不備を補った。その結果,粒子振動で発生する音響流が凝集速度に与える効果が非常に大きいこと,粒子の荷電が凝集速度の促進に大きな効果があることなどを明らかにした。実験的には凝集速度定数を単一の捕集核粒子の成長速度から実測する装置を製作し,多数の測定を行った。凝集速度定数の実測値は全体的に理論値よりも数倍大きい。これは現実の凝集空間には気流の乱れが存在し,その流れの振動軸に直交する成分が凝集に寄与した結果と考えられる。中には2X10^<・3>cm^3s^<-1>を超えるものも観測され,この値は音波凝集で予測される値の数十倍にも及び,この凝集法が予測以上の効果を発揮するものと期待できる。
観光情報の蓄積と共有方法の確立を通した案内ガイドの育成手法に関する研究

案内ガイドの育成において、ガイド自身が当該地域の観光情報を知る事は重要である。主要な観光地はガイド自身が熟知して案内業務に従事しているものの、季節や観光客の属性(性別や年代、国籍)によって観光客が指向する訪問先は変化するし、時間の経過とともに変化する事も多い。このように、常に変化し続ける観光客の訪問先を把握することが、ガイドの重要なスキルであるが、個人の属性や経験年数によるばらつきが認められる。そこで、情報の共有と教育システムの確立を本研究では目指した。くわえて、外国人観光客に対する公共交通の情報提供のあり方について、よりわかりやすい表現方法を目指している。情報の共有方法として、LINEを使った日報の作成と既読状況の把握、案内ガイドに対するアンケートを実施した。この結果を集計し、分析している状況である。案内ガイドの教育システムについては研究着手前より実施し、その変化を追跡している。これまで蓄積された訪問先データをもとに、案内ガイドの研修に使用したところ、多くの質問に答えることができたが、対応の仕方や検索スキルの向上については経験年数を積んでいるガイドと一定期間同行する必要がある。観光客からの質問に答えられない場合の案内ガイドに対するフォローは引き続き検討していく。また、外国人観光客に対する駅やバス停に掲示されている情報のわかりやすさについては、京都市内の交通事業者と定期的にワークショップを開催しており、引き続き効果の測定を行っていく。
ダイズの耐湿性に関与する根形質の網羅的評価とゲノムワイド・アソシエーション解析

ダイズミニコアコレクションを対象に,好気および嫌気条件が根系質に及ぼす影響ならびに嫌気耐性を評価した.その結果,好気区に対して嫌気区では,根長増加量,根表面積増加量,根体積増加量,地下部乾物重は有意に減少し,平均根直径,地上部乾物重は有意に増加した.主成分分析の結果から,植物体の大きさ(大/小)および嫌気耐性(高/抵)に基づいてミニコアコレクションを4つのグループに分類したところ,それぞれのグループと原産地の間に関連が認められた.また,土耕栽培湛水条件下における根形質は,上記の結果を反映することが明らかであった.本年度は,ダイズミニコアコレクションを供試し,水耕栽培下における好気条件および嫌気条件が根系質に及ぼす影響と嫌気耐性の系統間差を評価した.生物資源研究所より配布されたダイズミニコアコレクション158系統およびその他ダイズ5系統の計163系統を供試した.播種後6日目のダイズ幼苗に対して,嫌気区では溶存酸素濃度1.0 mgL-1以下に調整した0.1%寒天溶液を用いて嫌気処理を施し,好気区では蒸留水に大気をバブリングし,7日間の水耕栽培を行った.処理開始時および終了時に根形質を測定し,処理期間中における各形質の変化量を算出した.また,根形質の調査後,地上部および地下部乾物重を測定した.実験はグロースチャンバー(140 μmol m-2 s-1, 14 hrlight/10 hrdark, 23°C)内で,3-6反復行った.この結果から二元配置分散分析および主成分分析によって嫌気耐性を評価した.その結果、好気区に対して嫌気区では,根長増加量,根表面積増加量,根体積増加量,地下部乾物重は有意に減少し,平均根直径,地上部乾物重は有意に増加した.また,地上部乾物重を除く全ての形質で交互作用(系統×処理)が認められた.主成分分析の結果,第一主成分は植物体の大きさを示し,第二主成分は嫌気耐性を示した.主成分得点により,植物体の大きさ(大/小)および嫌気耐性(高/抵)に基づいてミニコアコレクションを4つのグループに分類したところ,それぞれのグループと原産地の間に関連が認められた.提供されたダイズ・ミニコアコレクション158系統のすべてについて嫌気耐性の評価を終え,グループ化するとともに,原産国別に特徴付けることが出来た嫌気処理による根の伸長抑制程度が異なる6系統を対象に,細胞間隙の形成率,嫌気代謝関連酵素活性,嫌気耐性候補遺伝子の発現量を比較した.その結果.嫌気条件下における細胞間隙率は,嫌気感受性系統と比較して嫌気耐性系統で高い傾向が認められた.嫌気条件下でアルコール発酵を促進するADH活性は,嫌気耐性系統では有意に低かった.一方,アルコール発酵の代替経路を促進するとの報告があるAlaATの活性は,嫌気耐性系統では低く維持される傾向があるものの,ADH活性ほど顕著な差は認められなかった.アルコール発酵におけるピルビン酸脱炭酸酵素に必須な補因子の生合成に関与するとの報告があるTHI1の発現量は,1系統を除く嫌気感受性系統はほぼ変化しないのに対し,嫌気耐性系統は全て抑制された.これらの結果から,嫌気条件下における根系の発達には細胞間隙の形成による通気能の獲得,あるいはADHやAlaATが関与しない代謝経路が関係している可能性が示唆された.期間全体を通して,ダイズミニコアコレクションを対象に,好気および嫌気条件が根系質に及ぼす影響ならびに嫌気耐性を評価した.その結果,好気区に対して嫌気区では,根長増加量,根表面積増加量,根体積増加量,地下部乾物重は有意に減少し,平均根直径,地上部乾物重は有意に増加した.また,地上部乾物重を除く全ての形質で交互作用(系統×処理)が認められた.主成分分析の結果から,植物体の大きさ(大/小)および嫌気耐性(高/抵)に基づいてミニコアコレクションを4つのグループに分類したところ,それぞれのグループと原産地の間に関連が認められた.また,嫌気耐性と細胞間隙の形成率,嫌気代謝関連酵素活性および嫌気耐性候補遺伝子の発現量の間に密接な関係が認められた.これらデータの蓄積により,SNPs情報の公開後にはゲノムワイド・アソシエーション解析の実施が可能となった.ダイズミニコアコレクションを対象に,好気および嫌気条件が根系質に及ぼす影響ならびに嫌気耐性を評価した.その結果,好気区に対して嫌気区では,根長増加量,根表面積増加量,根体積増加量,地下部乾物重は有意に減少し,平均根直径,地上部乾物重は有意に増加した.主成分分析の結果から,植物体の大きさ(大/小)および嫌気耐性(高/抵)に基づいてミニコアコレクションを4つのグループに分類したところ,それぞれのグループと原産地の間に関連が認められた.また,土耕栽培湛水条件下における根形質は,上記の結果を反映することが明らかであった.本年度の結果をもとに,今後公開される予定のSNP情報によって,アソシエーション解析を実施する.作物学当初人件費を計上していたが,年度末(2月)まで雇用実績が無かったため.本年度当初より実験補助員を雇用予定.
蝸牛におけるグルタメイトおよびグルタメイトレセプターの局在と意義

現在中枢神経系において、NMDA receptor ζ1は全ての神経系に存在し異なるεsubunitsとの組み合わせにより、異なった機能を担っていると考えられている。今回我々はgene target法によりNMDA receptor ε1 subunitとε4 subunitを欠失させた2種類のジーンノックアウトマウスを用いる機会を得たので聴覚系にて検討を行った。初めに聴覚脳幹部にその各々のsubunitの局在をnon radioisotope in situ hybridization法にて確認した。コントロールであるWild型のマウスではε1mRNA,ε4mRNA共に蝸牛神経核及び上オリーブ核に発現を観察した。蝸牛の光学顕微鏡による観察では,Wild型マウスとε1及びε4ノックアウトマウスのコルチ器に構造的差は認められなかった。次にジーンノックアウトマウスとWild型のマウスの聴覚閾値をAuditory Brainstem Response(ABR)を用いて比較検討することにより聴覚系におけるNMDA receptor subunits ε1、ε4の機能の検討を行った。まず針電極によりABRの測定を行い、閾値の検討を行った。次に、音響負荷を行いその後に再度ABRの測定を行い、閾値の変動を検討した。ε1ノックアウトマウスにおいて、ABRの閾値はコントロールであるWild型と差を認めず、音響負荷後に閾値の上昇を認めた。ε4ノックアウトマウスはABRの閾値の上昇を認め、音響負荷では閾値の変動を認めなかった。ε1のノックアウトにより聴覚路におけるシナプスの可塑性が傷害され、音響負荷後に閾値の上昇を認めたと推察された。ε4のノックアウトにより、聴覚路の形成期になんらかの障害がおこり、ABR閾値の上昇を認めたのではないかと考えられた。ラット蝸牛の内、外有毛細胞においてアスパラテイトの存在を免疫組織化学的に証明した。今後、アスパラテイト同様に興奮性アミノ酸として知られているグルタメイトの局在をも観察したい。また組織化学的証明以外にウェスタンブロット法を用いてもラット蝸牛内にアスパラテイトおよびグルタメイトが存在することをも証明し、有毛細胞-蝸牛神経のneurotransmitterであることを明らかにしたい。グルタメイトレセプターの内、NMDA型レセプターを先天的に欠くNMDAノックアウトマウスを用い、ABR検査を施行しワイルドマウスとの比較を行なった。その結果、ワイルド、ミュータントとも閾値に変化はなっかたが、音響負荷によりNMDAノックアウトマウスは一過性閾値上昇の変化を観察することができた。今回使用したマウスはε1およびε4の両者を欠くダブルノックアウトマウスであったが、ε1またはε4のどちらかを欠くシングルノックアウトマウスを用いて検査することによりどちらかが聴力の可塑性に関与しているかを明らかにしていきたい。またNMDAノックアウトマウスのグルタメイトレセプター(NMDA型、非NMDA型)の分布を免疫組織化学的ならびにin situ hybridyzation法を用いて証明していく予定である。初めに聴覚脳幹部にその各々のsubunitの局在をnon radiosotope in situ hybridization法にて確認した。コントロールであるwild型のマウスではε1mRNA,ε4mRNA共に蝸牛神経核及び上オリーブ核に発現を観察した。

次にジーンノックアウトマウスとWild型のマウスの聴覚閾値をAuditory Brainstem Response(ABR)を用いて比較検討することにより聴覚系におけるNMDA reseptor subunits ε1、ε4の機能の検討を行った。まず針電極によりABRの測定を行い、閾値の検討を行った。次に、音響負荷を行いその後に再度ABRの測定を行い、閾値の変動を検討した。ε1ノックアウトマウスにおいて、ABRの閾値はコントロールであるWild型と差を認めず、音響負荷後に閾値の上昇を認めた。ε4ノックアウトマウスはABRの閾値の上昇を認め、音響負荷では閾値の変動を認めなかった。ε1のノックアウトにより聴覚路におけるシナプスの可塑性が傷害され、音響負荷後に閾値の上昇を認めたと推察された。ε4のノックアウトにより、聴覚路の形成期になんらかの障害がおこり、ABR閾値の上昇を認めたのではないかと考えられた。
皮膚表面の模様(指紋を含む)が形づくられる機序とその意義

(1)正常の形:詳細に観察すると皮膚にはほぼ平行な凹凸である指紋や、身体の表面を縦横に交差する溝が作り出す多角形(皮野と皮溝)、そして老化に伴うシワなど多彩な模様が規則的に存在している。(2)病的な形:病的状態では(既存の模様を破壊して)さらに多彩な形、たとえば赤い点が散在する麻疹(ハシカ)、環状に拡大するタムシ、地図状のジンマシン、塊状皮膚癌、さらにはシミのように不規則な黒色腫(メラノーマ)などが展開される。(3)研究成果:以上の背景から、虫食状に拡大する皮膚癌、基底細胞癌の形と、本来の皮膚の形との関係を検討して、この癌が周囲に向かって増殖する多彩な形のモデルを作成し、実際の病理組織と比較検討して、この皮膚癌は転移よりは周囲の結合組織の栄養状態と要求度によって形が決定されていることを示した。(4)展開:皮膚に表現される異常な形を理解するということは、これらが形づくられる機序を解明することでもあり、ひいては、ヒトの形態発現過程における外表の役割、さらには老化による修飾の意義が説明できると考えている。(1)測定条件の設定生きた状態における皮膚内部構造の測定法として超音波断層法が存在する。しかし分解能が低いためμmレベルでの測定は不可能であり、目的とする表皮下面(真皮結合組織との境界面)を観察できない。そこで本研究では低コレーレンス光干渉装置(Optical Coherence Tomography)に着目し、本装置により皮膚が測定できるか否かを試験した。その結果、重層扁平上皮からなる表皮と真皮結合組織では光減衰率が大きく異なること、その変化点から両者の境界面を特定できることが判明した。また得られた値が正しいことを皮膚の組織標本により確認した。そこで表面と一対一に対応した表皮の三次元構造の再構築が可能となった。これにより正常な皮膚においては表面の細かい皺は表皮と真皮接合部に反映されることが判明したため第一報として投稿準備中である。(2)臨床への応用皮膚疾患では表皮の性状が臨床診断に重要な意味を持つうえ、たとえばステロイド長期投与による皮膚萎縮は表皮の厚さと下面の凹凸の消失をもたらすなど、疾患の状態を確認するためにも重要な情報である。そこでアトピー性皮膚炎と膠原病を対象に測定し、前者では表皮の肥厚が確認され、後者では罹病期間に比例して菲薄化することが確認された。これについては統計学的な処理を行なうために患者数を増やしつつある。(1)正常の形:皮膚を詳細に観察すると、ほぼ平行な凹凸である指紋や、身体の表面を縦横に交差する溝が作り出す多角形(皮野と皮溝)、そして老化に伴うシワなど多彩な模様が規則的に存在しています。(2)病的な形:病的状態では(その上またはそれを破壊して)さらに多彩な形、たとえば赤い点が散在する麻疹(ハシカ)、環状に拡大するタムシ、地図状のジンマシン、塊状皮膚癌、さらにはシミのように不規則な黒色腫(メラノーマ)などが展開されます。(3)研究成果:以上の背景から、虫食状に拡大する皮膚癌、基底細胞癌の形と、本来の皮膚の形との関係を検討して、この癌が周囲に向かって増殖する多彩な形のモデルを作成し、実際の病理組織と比較検討して、この皮膚癌は転移よりは周囲の結合組織の栄養状態と要求度によって形が決定されていることを示しました。(4)展開:皮膚に表現される異常な形を理解するということは、これらが形づくられる機序を解明することでもあり、ひいては、ヒトの形態発現過程における外表の役割、さらには老化による修飾の意義が説明できると考えています。
水疱症病変部の化学伝達物質の同定ならびにその好中球機能への作用

1.Boyden chamberを使っての化学発光の測定から、好中球走化性因子は酸素代謝をおこしながら遊走するもの(FMLP、C5aなど)とこれとは無関係に遊走させるもの(モノサイト由来の因子、IL-3など)の2種類に分けられることを明らかにした。2.濃疱性疾患の1つである乾癖の皮疹鱗屑抽出液中に好中球の活性酸素産生する因子のあることを明らかにした。3.大疱症・類大疱症、熱傷の水疱内容をフラクションに分けて検討したところ乾癖鱗屑同様cytochrome C markerに一致するchemctactic peptideに高い化学発光が認められた。しかしこれらの発光量と水疱内C5aレベルは相関しなかった。このことから、このフラクションにはC5a以外の因子の存在が示唆された。3.1例の角層下膿疱症の濃疱内容においては今迄見つかったchemotacticpeptideないしはLTB_4とは異なる別の因子が存在することを明らかにした。4.水疱症の解析症例がいまだ少なくて、結論は出せないものの、水疱症においても乾癖と同様分子量12,00018,000のchemctacticpeptideが病態に重要な因子として作用する可能性が示唆された。このフラクションにはC5aが含まれることは間違いないことであり、病変形成の上でC5aが重要な役を演じているものと思われるが、さらにこれ以外の因子の関与も考えられる。IL-6などをはじめとするいくつかのサイトカインは分子量的にはこのフラクションに入るものであり、これらのサイトカインの役割が今後のポイントになるものと思われる。1既存の走化因子を用いて新らしい好中球化学走化性試験法を確立した.すなわちModified Boyden chamberを作製し,それをそのまま化学発光測定機でchemotaxisに際して生ずる活性酸素を測定した.今迄好中球が遊走する際には酸素代謝が起こらないと考えられていたが,実際にはスーパー・オキサイドがこの過程で産正されることを世界ではじめて明らかにした.2水疱内容の解析は天疱瘡,中毒性表皮壊死症,熱像について行なった.天疱瘡ではCSaが存在し,好中球を刺激しうること,熱傷水疱中にも多量のCSaの存在することがわかった.一方中毒性表皮壊死症の水疱内容には好中球の酸素代謝をひき起すメディエーターのないことが示唆されたが,これは水疱採取時に加えるEDTAの影響による可能性が考えられる.今後EDTAを加えないもので検討が必要である.3乾癬の鱗屑による好中球の反応をコントロール実験として行なった.その結果,鱗屑抽出液の中で分子量1万2千のchemotactic・peptideの画分に強い酸素代謝誘導が認められた.一方,ビタミンB12マーカー近辺の低分子画分には好中球の酸素代謝を抑制する因子のあることが明らかとなった.また,掌蹠膿疱症,膿疱性乾癬の鱗屑中には乾癬にみられるような抑制物質が存在しない可能性が示唆された.膿疱発生機序の解明の糸口になるかもしれない.4ここ2-3年水疱症,特に免疫の関与するものが減少傾向にあり,実験材料を得るのが困難となってきているが,症例を待って解析を継続してゆく予定である.また併せて平行して膿疱性疾患の解析を行ってゆきたい.多くの走化性因子は好中球の遊走に対して作用する時の至適濃度をこえる非生理的濃度ではじめて直接細胞に働いてrespiratory burst(RB)をひきおこす。そのため細胞が遊走する時にはRBは起りえないと長い間考えられてきた。細胞の遊走を測定する方法にBoyden chamber法があるが、このシステムを改良してそのまま化学発光を測定してみた。FMLPなどの因子を2つの部屋の下室に、細胞とルシゲニンを上室に入れて化学発光を測定した。その結果、従来の走化能テストと同様生理的濃度で発光がみられた。これはSODで抑制されることから、この系におけるスーパーオキサイドの産生が示唆された。この結果は従来の説をくつがえす新知見であると同時に、本研究の遂行上有力な手段となる。1例の天庖瘡について検討したところ、水疱内容の【C5_a】を含むfractionにおいて高い反応がみられた。ラジノイムノアッセイによる【C5_a】量は17.2ng/mlであり、通常人皮膚suctionblisterの9.68より有意に高く、本疱においても【C5_a】が何らかの役をしているものと推測される。以上の仕事の過程において隅然の副産物として、上述の系を用いて好中球のadherenceが調べられることがわかった。細胞を分離してすぐに上室に入れ、走化因子なしの状態で化学発光を測定すると、きわめて高い反応が得られた。用いたガラス管およびfilterをシリコン化する処理の検討から、この化学発光か細胞がfilterに接着する時に産生されるものであることが判明した。しかも、plasmaの存在下でも反応のみられることから、この反応はin vivoで好中球が血管内皮に接着する時のRBに近い反応である可能性が強く示唆され、新しいadherence testとしての有用性も充分期待できる。

2.濃疱性疾患の1つである乾癖の皮疹鱗屑抽出液中に好中球の活性酸素産生する因子のあることを明らかにした。3.大疱症・類大疱症、熱傷の水疱内容をフラクションに分けて検討したところ乾癖鱗屑同様cytochrome C markerに一致するchemctactic peptideに高い化学発光が認められた。しかしこれらの発光量と水疱内C5aレベルは相関しなかった。このことから、このフラクションにはC5a以外の因子の存在が示唆された。3.1例の角層下膿疱症の濃疱内容においては今迄見つかったchemotacticpeptideないしはLTB_4とは異なる別の因子が存在することを明らかにした。4.水疱症の解析症例がいまだ少なくて、結論は出せないものの、水疱症においても乾癖と同様分子量12,00018,000のchemctacticpeptideが病態に重要な因子として作用する可能性が示唆された。このフラクションにはC5aが含まれることは間違いないことであり、病変形成の上でC5aが重要な役を演じているものと思われるが、さらにこれ以外の因子の関与も考えられる。IL-6などをはじめとするいくつかのサイトカインは分子量的にはこのフラクションに入るものであり、これらのサイトカインの役割が今後のポイントになるものと思われる。