hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
虚血性神経細胞死の予防および治療に関する基礎的研究

砂ネズミ一過性前脳虚血モデルを用いて、非致死的ストレスを複数回負荷することにより長期の虚血耐性が得られるか否かを検討した。まず、2分間の非致死的虚血をあらかじめ8回負荷し、2週間後、4週後でも虚血耐性が確認されうるか否かを検討した。その結果、2分間の虚血を2日あるいは4日おきに8回負荷した動物において、虚血後2週後に耐性獲得が認められた。複数回の非致死的虚血を与えておくとは、4週後においても、生存する神経細胞が存在した。また、虚血耐性の獲得に熱ショック蛋白、特にHSP70が関与している可能性について免疫組織化学的手法を用いて検討した。抗HSP70抗体を用いた免疫組織化学的検討では、2週後、4週後の海馬CAl錐体細胞層において、HSP70の発現は確認されなかった。一方、軽度低体温も虚血性神経細胞死の予防に有効であることが明らかになっている。砂ネズミ一過性前脳虚血モデルを用いて、インドメタシンの虚血保護効果を再検討した。まず、虚血中の体温を37.5±0.5°Cに維持したところ、インドメタシンの虚血保護効果は認められなかった。一方、インドメタシンにより、体温をコントロールしない動物では、虚血中体温が約2°C低下した。従って、インドメタシンの神経細胞保護効果は低体温を介している可能性が高いことがわかった。更に、体温と虚血性神経細胞死の関連を、アラキドン酸代謝の側面から検討したが、低体温の条件下では、体温をコントロールしない場合と比較して、虚血後のアラキドン酸の増加が抑えられることがわかり、神経細胞死のメカニズムにアラキドン酸カスケードが関与している可能性が示唆された。同様のモデルにおいて、NO合成酵素抑制薬であるN-ニトロ-L-アルギニンの虚血保護効果を検討したところ、100mg/kg複数回投与で、効果があることも明らかとなった。最近、短時間の脳虚血をあらかじめ動物にストレスとして与えておくと、2度目の虚血に対して神経細胞は耐性となることが明らかとなり、"虚血耐性現象"として知られるようになっている。この虚血耐性のメカニズムを明らかにすることができれば、虚血性細胞死を予防する治療法がみつかる可能性がある。しかしながら、一回の致死的虚血でこの虚血耐性を誘導できる期間はせいぜい1週間である。今回は、非致死的ストレスを複数回負荷すると、強いあるいは長期の虚血耐性が得られるか否かを砂ネズミ前脳虚血モデルで検討した。まず、2分間の非致死的虚血を、68回予め負荷し、2週間、1ヶ月後でも虚血耐性が確認されるかを検討した。その結果、虚血後2週後では、耐性獲得が認められるが、1ヶ月後では、動物の虚血に対する耐性能力は消失していることが明らかとなった。現在、複数回非致死的虚血の条件を変えて、さらにこの期間を延長できないか検討している。一方、軽度低体温も虚血性神経細胞死の予防に有効であることが、動物実験で明らかにされ、また実際の臨床上でも重症頭部外傷やくも膜下出血の患者に応用されている。われわれは、以前サイクロオキシゲナーゼの阻害薬であるインドメタシンが砂ネズミ一過性前脳虚血モデルにおいて、虚血性神経細胞死の予防に有効であることを明らかにしたが、そのメカニズムは不明であった。

今回、虚血中の体温を37.5±0.4°Cに維持したところ、インドメタシンの虚血保護効果は認められなかった。一方、インドメタシンにより、体温をコントロールしない動物では、虚血中体温が23°C低下した。従って、インドメタシンの神経細胞保護効果は低体温を介していることがわかった。現在は、低体温および高体温が虚血性神経細胞死にどのような影響をあたえるかについて、また、体温と虚血性神経細胞死の関連を、アラキドン酸代謝の側面から検討している。非致死的ストレスを複数回負荷すると、長期の虚血耐性が得られるか否かを砂ネズミ前脳虚血モデルで検討した。まず、2分間の非致死的虚血を8回予め負荷し、2週間後、1ヶ月後でも虚血耐性が確認されるか否かを検討した。その結果、2分間の虚血を2日あるいは4日おきに8回負荷した動物において、虚血後2週後に耐性獲得が認められた。1カ月後でも、一部の動物では虚血耐性が持続していることが明らかとなった。現在、複数回非致死的虚血の条件を変えて、さらにこの期間を延長できないか検討している。また、虚血耐性の獲得に熱ショック蛋白、特にHPS72が関与している可能性について免疫組織化学的手法を用いて検討している。一方、軽度低体温も虚血性神経細胞死の予防に有効であることが明らかになっている。砂ネズミ一過性前脳虚血モデルを用いて、インドメタシンの虚血保護効果を再検討した。まず、虚血中の体温を37.5±0.4°Cに維持したところ、インドメタシンの虚血保護効果は認められなかった。従って、インドメタシンの神経細胞保護効果は低体温を介している可能性が高いことがわかった。更に、体温と虚血性神経細胞死の関連を、アラキドン酸代謝の側面から検討したが、低体温の条件下では、体温をコントロールしない場合と比較して、虚血後のアラキドン酸の増加か抑えられることがわかり、神経細胞死のメカニズムにアラキドン酸カスケードが関与している可能性が示唆された。砂ネズミ一過性前脳虚血モデルを用いて、増強された虚血耐性と熱ショック蛋白(HSP70)との関連を免疫組織化学的に検討した。非致死的2分間虚血を2日おきに8回動物に負荷し、2週間後あるいは4週間後に4分間の致死的虚血を与え、この時点でHSP70が発現するか否かを検討した。結果は、2週後、4週後の海馬CA1錐体細胞層において、4分虚血直前でも、4分虚血2日後でも、HSP70の発現は確認されなかった。また、同じ前脳虚血モデルを用いて、虚血耐性の温度依存性を検討した。4分間致死的虚血時の脳温(側頭筋温)を、低温(36.0±0.5°C)、平常温(37.5±0.5°C)、高温(39.0±0.5°C)と3つに変化させ、獲得される虚血耐性に差があるか否かを検討した。その結果、海馬CA1錐体細胞層における、残存神経細胞数は、低温群>平常温群>高温群となった。現在、動物の数を増やし、さらに検討を行っている。砂ネズミ一過性前脳虚血モデルを用いて、インドメタシンの神経細胞保護効果は、低体温が関与していることを昨年度までの研究で示した。そこで、同じモデルを用いて、インドメタシン投与後にアラキドン酸がどのように変動するかを現在検討している。
新しい尿路病原性大腸菌病原遺伝子群の分布および機能解析

材料と実験方法対象)2000年2004年に札幌医科大学にて分離された尿路感染症由来大腸菌249株。対照)健常人糞便株50株(Kanamaruら:J Urol 170:2490,2003)。方法)病原因子はkpsMT, ompT, uspをPCR法にて検出し、χ^2検定にて統計解析を行った。結果1.kps, ompT, uspの分布:膀胱炎株(n=106)および腎孟腎炎株(n=32)における保有頻度はkps、ompT、uspそれぞれ74.5%、81.1%、66.0%および81.3%、84.4%、78.1%であり、膀胱炎株と腎孟腎炎株の間に差は認めなかった。一方、無症候性細菌尿由来株(n=103)においては、kps71.8%、ompT69.9%、usp61.2%と急性尿路感染症に比してやや低い傾向がみられたが、健常人糞便株との比較するとこれら3病原因子はいずれも有意に高い頻度で保有されていた。2.kps、ompT、uspの病原因子間の相関:尿路感染症由来249株においてのオッズ比はompT vs. usp、kps vs. usp、ompT vs. kpsでそれぞれ142.8、22.2、12.8と非常に高く、各遺伝子間で極めて強い相関を認めた。無症候性細菌尿株のみに限定すると、各オッズ比は186、34.4、12.7と更に高い値を示した。過去の報告からompT、kps、uspは染色体上では同一の病原遺伝子島上には存在しないことが判明しているので、これら3遺伝子は機能的な関連が深いことが示唆された。とくにompT vs. uspのオッズ比は過去の報告と比べても非常に高く、無症候性細菌尿の病態にこれらの遺伝子が深く関わっている可能性が示唆された。今後の展開現在、さらに京都大学より収集された無症候性細菌尿株を含む約400株についても解析中であり、他の病原因子との関連、薬剤感受性、臨床像に関してもさらに検討する予定である。大腸菌病原因子の機能解析をおこなうにあたり、本年度は尿路感染症の原因菌の分離、同定および研究協力患者の臨床情報のプロファイリングづくりを開始した。つぎに、尿路感染症で最も大腸菌の分離頻度が高い急性単純性膀胱炎において、通常施行されているempiric therapyが妥当であるかを検討するために、急性単純性膀胱炎症例から分離された大腸菌において、薬剤感受性の年次推移を調査した。【方法】1998年および2003年に札幌医大病院泌尿器科外来を受診した急性単純性膀胱炎症例から分離された大腸菌株を対象とした。薬剤感受性はMicroscan Walk Awayにより測定し、NCCLSの基準に準拠して判定した。【結果】1998年、2003年に対象とした大腸菌はそれぞれ35株、53株であった。それぞれの年での耐性株は、ABPC 8株(22.9%)、13株(24.5%)、PIPC 5株(14.3%)、9株(17.0%)、CCL 3株(8.6%)、5株(9.4%)、CTM 0株、1株(1.9%)、CMZ 0株、1株(1.9%)、GM 1株(2.9%)、2株(3.8%)、MINO 0株、4株(75%)、FOM 0株、1株(1.9%)、IPM 0株、0株、ST 2株(5.7%)、6株(11.3%)であった。フルオロキノロンは1998年OFLX、2003年LVFXで測定しているが、それぞれ1株(2.9%)、5株(9.4%)で耐性と判定された。【考察・結論】5年間で各種抗菌薬に対する耐性率は増加傾向にあった。急性単純性膀胱炎はフルオロキノロン系薬が第一選択薬として汎用されているが、フルオロキノロンに対して耐性と判断される大腸菌の頻度が増加していることが推測された。

2.kps、ompT、uspの病原因子間の相関:尿路感染症由来249株においてのオッズ比はompT vs. usp、kps vs. usp、ompT vs. kpsでそれぞれ142.8、22.2、12.8と非常に高く、各遺伝子間で極めて強い相関を認めた。無症候性細菌尿株のみに限定すると、各オッズ比は186、34.4、12.7と更に高い値を示した。過去の報告からompT、kps、uspは染色体上では同一の病原遺伝子島上には存在しないことが判明しているので、これら3遺伝子は機能的な関連が深いことが示唆された。とくにompT vs. uspのオッズ比は過去の報告と比べても非常に高く、無症候性細菌尿の病態にこれらの遺伝子が深く関わっている可能性が示唆された。今後の展開現在、さらに京都大学より収集された無症候性細菌尿株を含む約400株についても解析中であり、他の病原因子との関連、薬剤感受性、臨床像に関してもさらに検討する予定である。
スミスにおける共感と自己保存の原理の学史的再構成：経済学の進化心理学的基礎

本研究の成果は以下の4点である。1.アダム・スミスの『道徳感情論』と『国富論』とが直接理論的に関係するのは、『道徳感情論』の「正義論」と『国富論』第5編「国家の役割」特に「法の整備と教育、学術と芸術の振興」である。2.『道徳感情論』の「効用」論の眼目は、身体的効用と「公共の利益」とは「本来異なる」ことの明証である。3.『道徳感情論』加筆修正過程でのスミスの苦労は、「公平な観察者」の役割が「神」と無関係であることの説明であった。4.従来のスミス研究が見逃してきたが、彼は1768年からエジンバラ音楽協会の会員で、オペラやオラトリオにも造詣が深かく、純粋な器楽曲が「情動をかき立てる」理由に注目した。1.アダム・スミス『道徳感情論』の翻訳・刊行(2013年6月に講談社学術文庫)。とくに、従来「同感」と訳されることが多かったシンパシーの概念について、それは、心理学的に見えはするが、実際には人間本性がもつ「社会的動物の一員」としての本質的特徴であること、その意味で、スミスの「生物学的」な人間と社会の理解について、従来の内外の研究は不十分であったことを、巻末の訳者解説でも明確に指摘しておいた。2.翻訳・刊行の作業を通じて分かってきたことを、専門研究者だけでなく、むしろ一般読者への「社会還元」のため、雑誌『本』2013年7月号(講談社刊行)に「自己愛と思いやりと社会」と題した小論で、スミスにおける共感概念の基本的特徴を分かりやすく説明しておいた。3.現在、アダム・スミスと功利主義の関係について英文原稿を完成させるため、準備中である。2014年の夏、2回の学会発表を予定しているが、ヒュームとスミスの共感概念の違いだけでなく、そもそも「感覚器官と知覚作用」の理解の仕方が、両者の間で異なっていたことが明確になってきた。当初の予定では、エジンバラで調査した後、とくにNature概念を中心に学会発表する予定であったが、個人的な事情もあり、26年度にずれ込んでいる。4.テキスト『経済学史のエッセンシャルズ』第3章「アダム・スミス」で『道徳感情論』と『国富論』の関連性を明確化した。1.スミスの人間本性概念を内在的に理解していく上で、生物学的な人間の理解が根底を貫いているということを、初期の方法論や『道徳感情論』の説明をつうじて再構成し、それを、オーストラリア経済学史学会で報告し(Instinct as a Foundational Concept in Adam Smith's Social Theory: Biological Understanding of Human Nature in TMS and WN. The 2014 HETSA Conference, The University of Auckland, 11 -12 July.)、「次の機会に、もう少し先まで、話を聞きたい」という好意的な感想も少なくなかった。スミスはニュートン主義者に属するというのは「思い込み」であり、訂正を要するということだけは、理解してもらえたようである。3.上記の学会報告と内容的にはほとんど重なるが、我が国での研究成果を織り込み、日本語でより詳細に論じたのが、アダム・スミス『道徳感情論』における「効用」概念の重層構造ー「正義」との関連性を手がかりにー(『同志社商学』66巻5号2015年(平成27年)3月15日、1-27頁)である。1.アダム・スミスの「共感」の捉え方は、D.ヒュームのような物理学的・力学的なものではなく、動物行動学や進化心理学的なもので、いわば現代の「心の理論」に近いものであること、また、スミスの「効用」の理解は、身体的な「効用」と「装置の美や統一性」という機械的なものとを明確に区別したものであり、両者を連続したものとしてとらえると、個人の効用と社会の効用とを区別できず、「体系的統一性」を重視するシンプルな体系となってしまうという批判に裏打ちされたものであったことを、『道徳感情論』の大部を中心に再構成し、論文にまとめて発表した。2.D.ヒュームからの批判を受け、スミスは『道徳感情論』の第二版以降「共感」概念に関する脚注を追加するが、その間の事情をG.エリオットあての手紙と、それに添えらえていた「追加・補正」の原稿を精査し、第二版における第三章の追加と変更、さらに第6版での大幅な追加について、図式化しながら考察し、全体としては「変更というよりも、説明不足であった点を追加した」とみるべきであること、さらにNLSやエジンバラ大学図書館での調査によりわかってきたスミスの音楽観を追加し、論文で発表した。3.進化論的経済学の方法を明確にするため、ヴェブレンの『有閑階級の理論』に論文「経済学はなぜ進化論的科学でないのか」を訳出・増補追加したうえで、全体をさらに読みやすく手直しして、出版した。3.

『道徳感情論』加筆修正過程でのスミスの苦労は、「公平な観察者」の役割が「神」と無関係であることの説明であった。4.従来のスミス研究が見逃してきたが、彼は1768年からエジンバラ音楽協会の会員で、オペラやオラトリオにも造詣が深かく、純粋な器楽曲が「情動をかき立てる」理由に注目した。さまざまな学内事情があって、初年度に時間と労力を空費したが、今年度も、まだ完全には片付いておらず、なかなか遅れを取り戻すまでに至らなかった。とはいえ、海外の学会報告をもう少し重ねていけば、最終年度には、何とか一応の目処が立つくらいには来ているような気がする。ただ、欧米の学会は、基本的に6月か7月に開催されるから、授業を休んで行かざるをえず、後の補講が大変で、疲れなどを考えると、思うようには海外の研究者と意見交換できないので、次年度は、そのあたりを少し工夫してみようと思っている。経済学史・思想史最終的には、日本語と英語で、それぞれ「研究書」を出版する目処を立てるのが目標であったが、それは少し「無理」な感じがするので、今年はまず、1『道徳感情論』と『国富論』でスミスが何を、どこから、誰に向かって主張したかを、学生でも分かるようにわかりやすく解説するとともに、現代の豊かさと自由の意味を問い直すような「スミス入門書」を執筆する。2ヒュームとスミスの「共感」の理解、「功利主義の理解」のそれぞれが、どう重なり、どう違うのか、これを英文論文にして発表する。3『道徳感情論』がいかなる意味と内容をもって、『国富論』の基礎になっているのか、これを日本語論文としてまとめ、専門学会誌に発表する。申請時のエフォート率を達成できなかったことが最大の理由だが、それには2つの理由があった。1つは、同居の義母を冬に自宅で看取ったため、外国出張ができず、疲れもたまり、仕事への集中が落ちたことである。二つめの理由は、研究科主任として、予想外の校務が押し寄せてきたため、時間とエネルギーを取られたことであった。春になり、上記2つの不測の事態は終わったから、研究の遅れは次年度以降取り戻せるであろう。イギリスに出張し、スミスやダーウィン関係資料を調査する予定であったが、体調および家庭の事情もあって、次年度に延期したこと、および、もう一本予定していた論文の英文校閲費が、原稿ができなかったため、留保したこと。1.ヒュームがスミスの「共感」理論に対して放った批判の意味を、ヒューム自身の共感概念を正確に再構成したうえで、『道徳感情論』第二版以降におけるアダム・スミスによる「反論」の意味を明確化すること。2.ニュートン流の実験と経験にもとづき統一的な理論体系の構築を目指し、人間行動の原理としては効用を、社会原理としては慣習のもつ意義を重視しつづけたヒュームに対し、生物学的な集団的行動の意義を重視し、個人の自愛心と他人への思いやり、この2つの特徴を「本能」と捉えた上で、「共感」によって社会が成立しうることを論証した点にスミスの特長があることを、原典に即して再構成し、論文にして発表する。3.スミスのキリスト教批判が、無神論者ヒュームとどのような関係を持っていたかを解明すること。イギリスの経済学史学会に出席するとともに、エジンバラ、グラスゴー、ロンドンで資料の調査を行う。1.25年度に予定していたイギリスでの資料調査、英語論文校閲費、学会発表などが、諸般の事情で延期せざるをえなかったため、26年度に可能なかぎりすることにした。主要なものは、以下の通り。1.オーストラリア経済学史学会での学会発表のための海外出張旅費2.ISUS13回大会での学会発表のための国内出張旅費3.英語論文校閲費4.図書購入費
ロシア語の語彙力増加法 －動詞接頭辞の意味学習を通じて－

本研究は、コーパス言語学と認知言語学的なアプローチを用いた、ロシア語の語彙力増加を目的とした動詞接頭辞の意味の記述整備を課題としている。これまでの研究で、ロシア語は派生接辞の学習によって効率的に語彙力を伸ばし得ることを数量的に確認した。また、コーパス内で極めて高頻度に用いられている動詞接頭辞も選定している。本研究は最も生起頻度の高い接頭辞の一つであるpo-とza-を分析対象とし、コーパスのデータを判断材料として実際に出会う頻度の高い(学習価値の高い)意味を選定する。次に、該当の接頭辞の放射状カテゴリーを作成する。この意味の記述整備は接頭辞の効率的な意味学習の基盤となる。本研究は、ロシア語の動詞接頭辞を用いた効率的な語彙学習法を検討している。具体的に言うと、接頭辞po-とza-の意味記述を分析の対象としている(これらの動詞接頭辞は数多くの派生語に含まれているため、学習価値が高いと言える。つまり、両接頭辞の知識は、語彙力を効率的に伸ばし得ると考える)。2018年度は、主に動詞接頭辞po-の分析を進めていった。まず、自ら作成した自作100万語コーパスから、当接頭辞の付いた派生動詞をすべて抽出した。そして、前後の文脈を確認できる形式でexcelデータに保存した。このデータ内で確認される派生動詞の当接頭辞の意味を、前後の文脈を頼りに判別していく。上記分析の必要性は以下の通りである:po-は複数の意味を持っており、そのすべてを覚えることは学習者にとって負担が大きい。より効率的な語彙学習法を検討するのであれば、付加されている際の意味まで確認する必要がある。つまり、po-がどの意味で派生動詞に頻繁に付加されているのかを数量的に確認する。これまでの研究において、接頭辞po-の意味分類は言及されてきた。ただし、いくつかある意味のうち、どの意味が頻繁に用いられているかを調べた応用言語学的な研究は存在しない。現在、後述の意味分類の枠組みを用いて、po-の意味毎の生起頻度を確認中である。本研究における応用言語学的・認知言語学的な分析は、これまでの研究では行われてこなかった。この点において本研究は価値があると考える。2018年度は、まず自作の100万語コーパスから、po-とza-という接頭辞付きの派生動詞が生起している例をすべて抽出した(excel形式で保存)。そして、本研究では両接頭辞が付いた派生動詞の全数を調査する予定であり、現在、実際の言語使用においてどの意味がより高頻度に用いられているかを確認中である。意味の分析は曖昧になる場合が多い。そのため、可能な限り意味を形式に還元して分析を進めることとした。例えば、次のような意味分類の構造を設定した:1.の意味で接頭辞が付加される場合は、その派生動詞は他の完了体動詞と共に並列で用いられる。または、複数の詳解事典における体のペアの記述も参考にする。3.の意味で付加された派生動詞はvやnaなどの行き先を表す前置詞句を伴う。このような意味分類の枠組みを作成し、現在、意味毎の生起頻度を計測中である。なお、za-は意味の数が多く、また、先行研究の数が少ないため、現在、意味分類の枠組みを検討中である。以下の通りに研究を進める予定である:まず、動詞接頭辞po-の意味毎の生起頻度を、前述の分類の枠組み(4つの意味)を用いて確認する(ただし、現実的には分類不能な「その他」といった枠組みも使用する)。そして、実際の言語使用において頻繁に用いられているpo-の意味(学習価値の高い意味)を選定する。それにより、より効率的な当接頭辞の意味学習の記述を整備する。同様に、動詞接頭辞za-にもpo-と同じ分析を行う:まず、アカデミー文法などの先行研究を参考にし、意味分類に必要な枠組みを作成する。その上で、生起頻度の高い当接頭辞の意味を確認し、学習価値の高い意味を選定する。そして、認知言語学の観点から放射状カテゴリーを作成し、両接頭辞の意味記述を整備する。その際、プロトタイプの意味から、他の意味がメタファー、メトニミー、イメージスキーマ変換によって拡張していく図を示す。

2018年度は、主に動詞接頭辞po-の分析を進めていった。まず、自ら作成した自作100万語コーパスから、当接頭辞の付いた派生動詞をすべて抽出した。そして、前後の文脈を確認できる形式でexcelデータに保存した。このデータ内で確認される派生動詞の当接頭辞の意味を、前後の文脈を頼りに判別していく。上記分析の必要性は以下の通りである:po-は複数の意味を持っており、そのすべてを覚えることは学習者にとって負担が大きい。より効率的な語彙学習法を検討するのであれば、付加されている際の意味まで確認する必要がある。つまり、po-がどの意味で派生動詞に頻繁に付加されているのかを数量的に確認する。これまでの研究において、接頭辞po-の意味分類は言及されてきた。ただし、いくつかある意味のうち、どの意味が頻繁に用いられているかを調べた応用言語学的な研究は存在しない。現在、後述の意味分類の枠組みを用いて、po-の意味毎の生起頻度を確認中である。本研究における応用言語学的・認知言語学的な分析は、これまでの研究では行われてこなかった。この点において本研究は価値があると考える。2018年度は、まず自作の100万語コーパスから、po-とza-という接頭辞付きの派生動詞が生起している例をすべて抽出した(excel形式で保存)。そして、本研究では両接頭辞が付いた派生動詞の全数を調査する予定であり、現在、実際の言語使用においてどの意味がより高頻度に用いられているかを確認中である。意味の分析は曖昧になる場合が多い。そのため、可能な限り意味を形式に還元して分析を進めることとした。例えば、次のような意味分類の構造を設定した:1.の意味で接頭辞が付加される場合は、その派生動詞は他の完了体動詞と共に並列で用いられる。または、複数の詳解事典における体のペアの記述も参考にする。3.の意味で付加された派生動詞はvやnaなどの行き先を表す前置詞句を伴う。このような意味分類の枠組みを作成し、現在、意味毎の生起頻度を計測中である。なお、za-は意味の数が多く、また、先行研究の数が少ないため、現在、意味分類の枠組みを検討中である。以下の通りに研究を進める予定である:まず、動詞接頭辞po-の意味毎の生起頻度を、前述の分類の枠組み(4つの意味)を用いて確認する(ただし、現実的には分類不能な「その他」といった枠組みも使用する)。そして、実際の言語使用において頻繁に用いられているpo-の意味(学習価値の高い意味)を選定する。それにより、より効率的な当接頭辞の意味学習の記述を整備する。同様に、動詞接頭辞za-にもpo-と同じ分析を行う:まず、アカデミー文法などの先行研究を参考にし、意味分類に必要な枠組みを作成する。その上で、生起頻度の高い当接頭辞の意味を確認し、学習価値の高い意味を選定する。そして、認知言語学の観点から放射状カテゴリーを作成し、両接頭辞の意味記述を整備する。その際、プロトタイプの意味から、他の意味がメタファー、メトニミー、イメージスキーマ変換によって拡張していく図を示す。
ヒト脳血管内皮細胞を用いたタイト結合動的評価によるウイルス関連脳症病態解明

ウイルス関連急性脳症(VAE)の病態は、高サイトカイン血症により血液脳関門(BBB)が障害される非炎症性の脳浮腫である。今回、我々は脳血管内皮細胞と周皮細胞の3次元的共培養によるin vitroBBBモデルにてin vitro VAEモデルを作成し、炎症性サイトカインTNF-αによる脳血管内皮細胞障害の動的変化を以下の方法で評価した。1ヒト脳血管内皮細胞と周皮細胞をトランスウェル膜の上部と下部にそれぞれ培養し、cellZscopeを用いてTERを経時的に測定した。TERがプラトーになったことを確認後、段階希釈したTNF-αを添加してin vitro VAEモデルを作成し、TERを継続して測定した。2同様のトランスウェルシステムを用いて分子量の異なるフルオレセインナトリウム(分子量376 Da)またはFITC標識デキストラン(分子量3-5 kDa、70 kDa、250 kDa)を添加し物質の細胞透過を蛍光マイクロプレートリーダーにより評価した。3TNF-α添加後の血管透過性変化に伴うclaudin-5とZO-1の局在変化を蛍光免疫染色により、またclaudin-5の蛋白発現変化をウェスタンブロット法によって観察した。結果は以下の通りであった。1TER値は、TNF-α添加後に減少し、最小値に達した後、徐々に回復したが、回復までの時間は、TNF-α濃度に依存した。2溶質透過試験では、TNF-α添加後にすべての分子量の物質の透過性が亢進したが、その程度は分子量とTNF-α濃度に依存し、経時的に回復の傾向を認めた。3claudin-5の局在は、TNF-α添加後に変化し、TNF-α濃度依存的に回復した。一方、ZO-1の局在には変化がみられなかった。claudin-5の発現は、TNF-α添加24時間後にTNF-α濃度依存的に減少した。昨年度、ヒト脳血管内皮細胞不死化細胞株(HCMEC/D3)を用いて検討したが安定した系の確立は困難であったので、本年度は脳血管内皮細胞と周皮細胞を用いた血液脳関門モデルを用い、TNF-αを添加することによりin vitroのVAEモデルを検討し確立した。当初の計画は、安定的なVAEを用いて、各種薬剤のin vitro VAEモデルに対する影響を評価する予定であったが、系の確立に時間を要したため、薬剤調整等の準備段階でとどまり、計画より遅れている状況である。我々が作製したin vitroVAEモデルは、VAEの病態解明だけではなく、血管透過性に焦点をあてた特異的治療法開発に有用であると考える。今後は、この評価系を用いて、各種薬剤のin vitro VAEモデルに対する影響を評価する予定である。薬剤として、急性脳症のリスク要因である解熱剤(ジクロフェナク、メフェナム酸)、アポトーシスを抑制するシクロスポリン、ステロイド剤などの免疫抑制剤、抗サイトカイン抗体、タイト結合の形成を促進させ血管透過性を改善させうる薬剤(cAMP、エストロゲン)などを用いて検討を行う。本研究は、脳血管内皮細胞による検討が必要であり、より再現性のある実験が可能なヒト脳血管内皮細胞不死化細胞株(HCMEC/D3)を用いた。細胞は、CELLutions Biosystems Inc.のCLU512を購入し、培地は、PromoCellのEndothelial Cell Growth Medium MV2 kitを用いて、安定して培養できることを確認した。1型コラーゲンをコーティングしたトランスウェル膜上にHCMEC/D3を単層培養し、コンフルエントに達した後にCellZscope(CellSeed社)を用いて経内皮電気抵抗値(TER)を測定した。TERが上昇し、プラトーになった段階で、培養液中に炎症性サイトカインであるTNF-αを濃度100ng/mL、10ng/mL、1ng/mL、0.1ng/mLで添加した。TNF-α濃度依存的にTERが減少するのを確認し、in vitro血管内皮細胞障害モデルを作成した。さらにTER測定に使用した同じトランスウェルシステムを用いて、FITC標識デキストランによる溶質透過性試験を行った。分子量10kDa、70kDaのFITC標識デキストランを使用したが、TNF-α添加による血管透過性の亢進は認めなかった。また、タイト結合を構成するClaudin-5,Occludin,ZO-1について免疫染色を行い、タイト結合の局在変化を検討した。TNF-α添加によるタイト結合の蛋白発現や局在変化は認めなかった。HCMEC/D3にTNF-αを添加すると、イオンレベルの透過性の変化は認めたが、分子量が10kDa以上のトレーサーの透過性には変化を来さず、タイト結合蛋白の局在変化は認めなかった。脳血管内皮細胞では、TNF-αは、タイト結合におけるイオンレベルの透過性に影響を及ぼす可能性がある。

TERがプラトーになったことを確認後、段階希釈したTNF-αを添加してin vitro VAEモデルを作成し、TERを継続して測定した。2同様のトランスウェルシステムを用いて分子量の異なるフルオレセインナトリウム(分子量376 Da)またはFITC標識デキストラン(分子量3-5 kDa、70 kDa、250 kDa)を添加し物質の細胞透過を蛍光マイクロプレートリーダーにより評価した。3TNF-α添加後の血管透過性変化に伴うclaudin-5とZO-1の局在変化を蛍光免疫染色により、またclaudin-5の蛋白発現変化をウェスタンブロット法によって観察した。結果は以下の通りであった。1TER値は、TNF-α添加後に減少し、最小値に達した後、徐々に回復したが、回復までの時間は、TNF-α濃度に依存した。2溶質透過試験では、TNF-α添加後にすべての分子量の物質の透過性が亢進したが、その程度は分子量とTNF-α濃度に依存し、経時的に回復の傾向を認めた。3claudin-5の局在は、TNF-α添加後に変化し、TNF-α濃度依存的に回復した。一方、ZO-1の局在には変化がみられなかった。claudin-5の発現は、TNF-α添加24時間後にTNF-α濃度依存的に減少した。昨年度、ヒト脳血管内皮細胞不死化細胞株(HCMEC/D3)を用いて検討したが安定した系の確立は困難であったので、本年度は脳血管内皮細胞と周皮細胞を用いた血液脳関門モデルを用い、TNF-αを添加することによりin vitroのVAEモデルを検討し確立した。当初の計画は、安定的なVAEを用いて、各種薬剤のin vitro VAEモデルに対する影響を評価する予定であったが、系の確立に時間を要したため、薬剤調整等の準備段階でとどまり、計画より遅れている状況である。今後は、安定したin vitro血管内皮障害モデルを構築し、薬剤として、ステロイド剤などの免疫抑制剤、抗サイトカイン抗体、またはタイト結合の形成を促進させ血管透過性を改善させうる薬剤(cyclic AMP、フォスフォジエステラーゼ阻害剤、エストロゲン)、予後悪化因子である解熱消炎鎮痛剤(シクロオキシゲナーゼ阻害剤)などについて血管内皮細胞障害モデルに対する影響を検討する。我々が作製したin vitroVAEモデルは、VAEの病態解明だけではなく、血管透過性に焦点をあてた特異的治療法開発に有用であると考える。今後は、この評価系を用いて、各種薬剤のin vitro VAEモデルに対する影響を評価する予定である。薬剤として、急性脳症のリスク要因である解熱剤(ジクロフェナク、メフェナム酸)、アポトーシスを抑制するシクロスポリン、ステロイド剤などの免疫抑制剤、抗サイトカイン抗体、タイト結合の形成を促進させ血管透過性を改善させうる薬剤(cAMP、エストロゲン)などを用いて検討を行う。消耗品は計画的に購入し研究を進めてきたが、974円が未執行となってしまった。少額であるので、次年度の消耗品購入に充てて計画的に研究を進める。研究計画に従い、消耗品を購入したが、少額の残金が発生した。次年度も研究計画に従い研究を実施する。
都市域における地下水流動の実態把握のためのマルチトレーサー手法の開発

本研究では,東京都・埼玉県境部(武蔵野台地荒川低地)において,地下水流動方向に沿って複数地点の複数深度から地下水試料を採取し,各指標(溶存イオン,環境同位体,年代指標,PPCPs,人工甘味料)の性状を把握する。各指標の性状を相互に比較し,また当該地域の地下水流動機構とあわせて検証することにより,各指標のトレーサーとしての特性や相関性を把握し,課題を検討する。
箱庭療法の国際比較における基礎研究

1.前年度に収集した各国からの箱庭療法に関する資料をもとに、さらに討論を重ね各国の研究者から情報を収集してきた。また1988年8月にはロンドンで開催された第七回国際箱庭療法学会に河合、山中が参加したのを機に、再度、スイス、ドイツ、イタリア、アメリカ、韓国、オーストリアなどの研究者と直接に意見交換を行ない、箱庭療法実践上の文化比較の問題が討議された。2.前年度の質間紙調査を続行し、上記の成果と総合してみた結果、以下のような知見が得られた。(1)、箱庭療法の適用年令は、基本的に言語化能力の低い児童が中心ではあるが、広く3才70才くらいまでの実践例が認められ、年令の幅は広く、その性格類型として感情、直観タイプの者が多いと考られる。(2)、箱庭療法に合わない、もしくは行うべきでないクライエントとして、自我機能の弱いボーダーラインや分烈病の患者があげられ、また、治療者ー患者関係の特徴によって治療者が言語化をし知性化してしまいやすい状況に入りやすい時、箱庭療法が新たな展開をもたらすきっかけとなることが多いことが確認された。(3)、箱庭作品をみる視点として、(a)全体的印象(b)全体的な配置(c)置かれたものの象徴的意義(d)系列的に作品の流れをとらえる(e)作品のテーマ、という5点に分けてみることができる。(4)各国の研究者は共通して、箱庭療法実践中に作品についてのライエントとあまり言語化して話しすぎないようにしている。(5)一方で、アメリカやスイスの研究者には一回の作品に関する象徴解釈に重点が置かれすぎており、日本の研究者は作品の流れに焦点をあて一回一回の作品に解釈を行なわない、という違いがみられた。(6)心理療法では修業が大きな問題であり、その経験の差によって、初心者ほど文差が影響されやすく、熟練する程、文化差がなくなっていくという現象が箱庭療法施行においてもみられた。1.日本国内だけでなく,スイス,ドイツ,イタリア,アメリカ,韓国,オーストリアなど世界各国から箱庭療法に関する資料や文献を収集してきている.また国際箱庭療法学会が10月に日本で開催されたのを機に,各国の学会員と積極的に意見の交換がなされた.そしてこの国際学会において,特に箱庭療法の妥当性とその国際比較について討議された.2.これらの成果をもとに,予備調査として貭問紙を作成し,国際箱庭療法学会員と日本箱庭療法学会員に実施した.その結果,以下のような知見が得られた. (1).箱庭療法が特に有効なクライエントとしては,一般に子供が考えられるが,大人でも感情・直観タイプの人や,内的イメージの豊かな人が考えられる.(2)箱庭療法を避けた方がよいクライエントとして,自我が弱く現実感の乏しい分裂病やボーダーラインの患者を,挙げる回答者が多かった. (3).診断に役立つかどうかは意見が分かれた. (4)箱庭についてどの程度クライエントと話しあうかについては,ほとんどの回答者が,面接中は必要最少限にしか話しあわないと答えた. (5).心理療法における箱庭療法の位置付けとして,回答者の意見をまとめると,セラピストとクライエントの関係が大切であり,箱庭療法だけが浮き上がったものになってはいけないという点が確認された.そして夢分析や絵画療法と同様,心理療法において無意識を知り,自己治癒や自己実現のための有効な手段であると考えられる.(6).国際比較については,個人の特殊性とともに,文化の影響がどの程度作用しているのか意見がわかれた.そして各国ともセラピストの技量が向上するにつれ,箱庭療法のプロセスでは文化的差異がなくなってきたのではないかという意見が多くだされた.日本の特色としては,単純で直接的表現を示すものが素材として選ばれる傾向があるのではという指摘がなされた.1.前年度に収集した各国からの箱庭療法に関する資料をもとに、さらに討論を重ね各国の研究者から情報を収集してきた。

(5)一方で、アメリカやスイスの研究者には一回の作品に関する象徴解釈に重点が置かれすぎており、日本の研究者は作品の流れに焦点をあて一回一回の作品に解釈を行なわない、という違いがみられた。(6)心理療法では修業が大きな問題であり、その経験の差によって、初心者ほど文差が影響されやすく、熟練する程、文化差がなくなっていくという現象が箱庭療法施行においてもみられた。
側坐核機能と意思決定の障害-ドパミントーン操作動物を用いた実験的検討-

側坐核のドパミントーンを遮断すると考えられる高用量のドパミン部分作動薬は,慢性ストレスや慢性的な抗うつ薬によって亢進した興奮性シナプス伝達を正常化する可能性が示唆された。また,側坐核のドパミントーン依存的な「意欲」やグルタミン酸トーン依存的な「意思決定の柔軟性」の個体差を反映する新たな行動指標の確立に成功した。これらは,意思決定及びその異常において側坐核が果たしている未知の役割とその分子機序を理解する上で重要な知見である。本研究の当初目的は「側坐核内の細胞外ドパミン濃度(=ドパミントーン)が背側線条体依存性の意思決定のモードを制御する」という仮説を提案し,ラットの側坐核特異的にドパミントーンをin vivo操作してこの仮説を検証することであった。しかし最近,ドパミン依存性の側坐核機能における大きな個体差が報告され,遺伝的多様性を保持するoutbredの実験動物に一律にドパミントーン操作を加えることの妥当性に疑問が付された。そこで以下のように目的を修正した:側坐核ドパミントーン依存性の意欲や柔軟な意思決定を反映する行動指標を確立し,将来的にドパミントーンの上昇あるいは下降操作を施すべき個体群を特定する。人工甘味料を報酬としたProgressive ratioスケジュールのレバー押しをラットに訓練し,反応率の高い群(=高意欲,H)と低い群(L)の混在を確認した。さらに,この2群間には急性ストレス直後の血清コルチコステロン濃度の上昇率(H < L)と慢性ストレス負荷後の平常時コルチコステロン濃度(H > L)において有意差を認めた。側坐核を含む中脳辺縁ドパミン系がストレス感受性の投射回路であることから,この2群は側坐核ドパミントーンの高低を反映すると考えられた。また,H群は訓練を繰り返したときに一貫して反応率が高い個体(HH群)と,徐々に反応率を減少させる個体(HL群)に分けられた。HL群は費用便益比に応じて行動を変容させた(=意思決定が柔軟)と考えられ,この2群は前頭前野から側坐核へのグルタミン酸投射系の機能的差異を反映すると考えられた。本研究の成果は,側坐核特異的にドパミン(あるいはグルタミン酸)トーンを操作する実験系において,これら3群を分離した上で実験操作の影響を評価することの重要性を指摘したのみならず,ストレス関連性の精神疾患の前臨床研究におけるこの3群分離法の有用性を示唆した。本研究は,側坐核内の細胞外ドパミン濃度(=ドパミントーン)が線条体背内側部と背外側部の機能的バランスを制御し,意志決定のモードの切り替えを行う,という仮説を提案し、この仮説を,動物の側坐核特異的にドパミントーンをin vivo操作して検証することを目指している。初年度は、ドパミン部分作動薬であるアリピプラゾールを慢性投与することで、側坐核のドパミントーンの操作を試みた。まず、5mg/kgという、比較的高用量のアリピプラゾールを、動物にとって予測不能な慢性ストレスを3週間連続で負荷したラット(=大うつ病モデル)に、ストレス負荷終了後より、3週間連続投与し、対照群、SSRI投与群と側坐核のシナプス機能についてウエスタンブロット法を用いて解析した。この高用量のアリピプラゾールは、ヒトでは統合失調症や双極性感情障害の急性期に用いられる用量に相当し、ドパミントーンを遮断する方向で作用すると期待される。実験の結果、慢性ストレス負荷後の側坐核では、興奮性シナプスのシグナル伝達に欠かせないNMDA型グルタミン酸受容体の足場タンパク質であるPSD-95が膜分画で増加していたが、この増加はSSRIで更に増強される傾向を示した(ただし、個体差が大きく、顕著に増加する群と、そうでない群に分かれた)。一方、高用量のアリピプラゾールは慢性ストレス負荷で増加したPSD-95を正常化する方向に作用した。以上の結果は、高用量のアリピプラゾールが側坐核において、慢性ストレス負荷やSSRIによって誘発される過剰な興奮性シナプス伝達を正常化する可能性を示唆した。初年度には一般に大うつ病の臨床治療に用いられる低容量のアリピプラゾール(この場合、高用量の場合とは反対に、ドパミントーンを増強すると予想される)による実験も行う予定であったが、残念ながら動物実験に予定以上の時間を要し、果たせなかった。同実験は次年度に施行予定である。低容量のアリピプラゾールについても初年度と同様の実験を行う他、SSRIと低容量アリピプラゾールを併用した場合(=ヒト大うつ病臨床における増強療法に相当)についても同様の検討を行う。また、上記実験にて行動実験も行い、ドパミン依存性の行動(移動活動量や報酬関連学習)あるいは意思決定(習慣化の促進など)がどのような影響を受けるかについても詳細な検討を行う。以上の実験によって、側坐核興奮性シナプス伝達系において、大うつ病治療の標的となりうるドパミン依存性の意思決定に関わる重要分子の特定を目指す。
住宅ストックの有効活用に向けた中古住宅市場の活性化策と適正価格評価手法の開発

本研究は、本格的な少子高齢化社会、人口・世帯減少社会の到来を目前に控えたわが国の現状を踏まえ、量的充足から質的充足へ、そして住宅ストック重視、市場重視等の政策転換が求められている中で、中古住宅市場の活性化によるストックの有効活用、柔軟な居住地選択機会の提供による住み替えを促進するために、中古住宅の価格を適正に評価できる地理的加重回帰モデルを構築し、地区別中古住宅価格の構成要因を明らかにした上、今後の中古住宅市場の活性化へとつながる適正価格評価の仕組みを示した。本研究は、本格的な少子高齢化社会、人口・世帯減少社会の到来を目前に控えたわが国の現状を踏まえ、量的充足から質的充足へ、そして住宅ストック重視、市場重視等の政策転換が求められている中で、中古住宅市場の活性化によるストックの有効活用、柔軟な居住地選択機会の提供による住み替えを促進するために、中古住宅の価格を適正に評価できる地理的加重回帰モデルを構築し、地区別中古住宅価格の構成要因を明らかにした上、今後の中古住宅市場の活性化へとつながる適正価格評価の仕組み及びそれに関わる政策提言を行うことを目的としている。本年度は計画の通り、主に地区別の価格形成要因とその分布状況の分析を行った。分析結果に普遍性を持たせるために、本年度は対象都市として大都市の大阪、そして地方中核都市の福岡市の2都市を設定し、それぞれの空間データを統一しながら、分析に必要な基礎データを整備した。また、分析の際に地理的加重回帰モデルの要点は、重み行列の作成にカーネル関数利用することであった。つまり、立地環境の影響に関する重み関数の設定は線形関数でも可能であるが、地域間の滑らかな影響変化を捉えるためにカーネル関数などを利用し、また、局所的な宅価格形成要因の決定係数を推定し、それぞれの有意性の検定を行う。まず住宅属性(面積、築年数、設備(システムキッチン、床暖房など)等)の関数の有効性を検証し、次いで立地環境の影響分布を明らかにした。本年度は昨年度に続き、主に地区別の価格形成要因とその分布状況の分析を行った。分析の際に地理的加重回帰モデルの要点は、重み行列の作成にカーネル関数利用することであった。つまり、立地環境の影響に関する重み関数の設定は線形関数でも可能であるが、地域間の滑らかな影響変化を捉えるためにカーネル関数などを利用し、また、局所的な住宅価格形成要因の決定係数を推定し、住宅属性(面積、築年数、設備(システムキッチン、床暖房など)等)の関数の有効性を検証した。解析成果を踏まえながら、今後我が国においては、住宅のストックが量的に充足し、環境問題や資源・エネルギー問題がますます深刻化し、これまでの「住宅を作っては壊す」社会から、「いいものを作って、長く大切に使う」社会へ移行し、住宅ストックの質を高めるとともに、適切に維持管理されたストックが市場を通じて循環利用される環境の整備が必要であり、今後住宅性能・居住環境・住宅面積等の居住水準に基づき、居住ニーズと住宅ストックのミスマッチの解消による循環型住宅市場の形成が重要であることを指摘した。上述の目的を達成するために、本研究では空間的自己相関の概念に基づいて、地理的加重回帰モデルを導出し、住宅情報タウンズ及び都市計画基礎調査のデータを用いて、モデルのパラメータの算出し、その妥当性を検証した上で、中古住宅価格決定関数の推定を行う。次いで、地区別の価格形成要因を定量的に明らかにし、中古住宅市場の選好傾向、潜在的な需要構造を解明し、中古住宅流通市場の活性化方策を検討する。本年度は3ヵ年計画の初年度であり、主に中古住宅に関するデータベースの作成を行った。具体的には住宅情報タウンズより住宅価格、面積、築年数、設備などの情報、そして都市計画基礎調査より立地条件に関するデータをそれぞれ取得し、GIS(地理情報システム)上でデータベースを作成し、加工した。

なお、研究対象都市は、大都市の代表として大阪市、地方中核都市の代表として福岡市をそれぞれ取り上げて、GIS上で中古住宅に関するデータベースを作成した後、統計分析により両都市の中古住宅の価格分布及び立地特徴を明らかにした。本研究は3ヵ年の計画である。本年度は第2年目であり、おおむね当初計画の通り、研究対象都市の中古住宅データベースをGIS上で作成し、また立地的影響の有無を検証するために、住宅の立地条件及びその特徴分析を行ったことによって、本研究の目的を達成するための最も基礎かつ重要な作業を完了した。また地区別の価格形成要因とその分布状況の分析を行ったことで、今後の研究計画の遂行に大いに役に立った。さらに最新の研究成果を学会などで発表した。本年度は初年度であり、おおむね当初計画の通り、研究対象都市の中古住宅データベースをGIS上で作成し、また立地的影響の有無を検証するために、住宅の立地条件及びその特徴分析を行ったことによって、本研究の目的を達成するための最も基礎かつ重要な作業を完了したことで、今後の研究計画の遂行に大いに役に立った。本研究課題の今後の推進方策は当初予定の通り、第3年度には中古住宅市場の選好傾向と活性化策の提示を行う。具体的には、住宅に限らず、一般的に需要の高い地域は価格も高くなる傾向はあることに加えて、中古住宅は、地区のイメージや周辺住宅の価格に大きく影響されており、供給側と需要側とのミスマッチの発生は否めない。ここで、地理的加重回帰モデルの推計で得られたパラメータを元に、全変数を備えた物件が各地区に存在すると仮定し、各地区固有の値を挿入することによって、中古住宅の需要構造、選好傾向など、つまり地区ごとの潜在的な需要構造を明らかにする。また、現段階で想定できる展開としては、本研究の成果をもって、各分野の専門家と協議・検討し、今後わが国の住宅政策の決定への提言を目指す。また、民間関連企業との意見交換を実施しながら、中古住宅価格の評価基準を共有し、流通の促進を図る施策を提示する。本研究課題の今後の推進方策は当初予定の通り、第2、3年度には具体的に以下の作業を行う予定である。第2年度:地区別の価格形成要因とその分布状況の分析地理的加重回帰モデルの要点は、重み行列の作成にカーネル関数利用することである。つまり、立地環境の影響に関する重み関数の設定は線形関数でも可能であるが、地域間の滑らかな影響変化を捉えるためにカーネル関数などを利用することが妥当であると考えている。また、局所的な宅価格形成要因の決定係数を推定し、それぞれの有意性の検定を行う。まず住宅属性(面積、築年数、設備(システムキッチン、床暖房など)等)の関数の有効性を検証し、次いで立地環境の影響分布を明らかにする。さらに、地区ごとの影響要因を分析し、立地要因と属性要因は、どのように価格に影響し、重視されているかを明らかにする。さらに欧米中古住宅の市場及び活用方法について調査を行う。第3年度:中古住宅市場の選好傾向と活性化策の提示住宅に限らず、一般的に需要の高い地域は価格も高くなる傾向はあることに加えて、中古住宅は、地区のイメージや周辺住宅の価格に大きく影響されており、供給側と需要側とのミスマッチの発生は否めない。
新規フォトクロミッククロスリンク剤の開発とタンパク質機能制御への展開

(1)タンパク質の構造解析に用いられる"クロスリンク剤"に着目し、スペーサー部にアセチレンユニットや光異性化分子(スピロピラン)を導入した新規ペプチドクロスリンク剤を開発した。これらクロスリンク剤とペプチド鎖に存在するLysの側鎖アミノ基を反応させることで、架橋ペプチドとした。アセチレンユニットを含むクロスリンク剤で架橋されたペプチドは、もとのペプチドに比べ、四倍強のα-ヘリックス含有率を示した(5°Cにおいて)。またこの架橋ペプチドのα-ヘリックス構造は、架橋されていない元のペプチドのものに比べ熱に対して安定性を示した。(2)ペプチド鎖の二次構造を光で制御するために、スペーサー部位に光異性化分子であるスピロピランを導入したクロスリンク剤を開発した。スピロピランとは、紫外光照射によりメロシアニン構造へと開環異性化するフォトクロミック分子の代表例である。スピロピランが有するこの大きな構造変化を利用することにより、ペプチド二次構造を光によって制御できるのではないかと考えた。スピロピラン骨格を含むクロスリンク剤とカルボキシル・アミノ両末端にLysを有するペプチド鎖を反応させることにより、架橋ペプチド鎖を得た。この架橋ペプチド鎖内のスピロピラン骨格(環状スピロピラン)は、架橋前のスピロピラン分子(非環状スピロピラン)とは異なる光学特性を示した。非環状スピロピランは紫外光を照射することにより、メロシアニン構造へと異性化するが、環状スピロピランは暗所においてはメロシアニン構造が安定で、光照射によりスピロピランへと異性化する逆フォトクロミック特性を示した。フォトクロミック(光異性化)色素を導入したクロスリンク剤を開発する前に,次のような予備実験を行った.種々の長さ・堅さを有するクロスリンク剤ライブラリーの構築をした.アルキル鎖,オキセチレン鎖,さらにはベンゼンやアセチレン骨格を含むものである.ターゲットとするアミノ酸残基は,リジン(Lys)を選択した.二つのLys残基間の距離を考え,ポリペプチド鎖を設計し,固相合成を行った.ポリペプチド鎖とクロスリンク剤の反応性は,高速液体クロマトグラフィー(HPLC)により解析した.また架橋構造を形成することにより,ペプチド鎖の二次構造に与える影響に関しては,円二色性スペクトル(CD)を用いて解析を行った.反応性において,アセチレン骨格を含むクロスリンク剤がLys残基間の距離に依存性があることが明らかとなった.クロスリンク剤の骨格の中にある程度の堅さを導入することで,残基間の距離特異的な架橋が可能であるかもしれないことを示唆する結果である.つまり,スピロピラン構造をペプチド鎖に導入する場合において,クロスリンク剤とポリペプチド鎖の双方の設計を綿密に行う必要がある.二次構造に与える影響は,室温におけるCD測定においてクロスリンク剤の種類による顕著な差は認められなかった.スピロピラン骨格を含むクロスリンク剤の合成に成功した.今後,このフォトクロミッククロスリンク剤とポリペプチド鎖との反応を行い,詳細に検討していく予定である.(1)タンパク質の構造解析に用いられる"クロスリンク剤"に着目し、スペーサー部にアセチレンユニットや光異性化分子(スピロピラン)を導入した新規ペプチドクロスリンク剤を開発した。