hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
DNA損傷による細胞周期抑制の新規メカニズム

SCF^<Fbxl12>はCul1、Rbx1、Skp1、Fbxl12からなるユビキチンリガーゼ複合体で、DNA損傷や細胞分化に関与することが示唆されている。本申請者は、SCF^<Fbxl12>がプロテアソーム活性化因子PA28γと複合体を形成し、相反する機能で増殖抑制因子p21の細胞内量を調節していること、またこの機構がUV刺激によって減弱することを明らかにした。さらにFbxl12のイントロン領域にプロモーター活性が存在し、UV刺激依存的にN末端を欠いたFbxl12を発現させることを新たに見出した。p21は細胞周期の抑制やDNA修復など多様な機能を持つことが知られたタンパク質で、mRNAやタンパク質での、発現、分解、安定化が厳密に制御されている。近年、細胞内でのp21量の制御異常が、癌を始めとする様々な疾患を引き起こすのではないかと考えられるようになってきた。しかしながら、その詳細な分子メカニズムについては明らかとなっていない。本研究では、ユビキチンリガーゼFbxl12ならびにプロテアソーム活性化因子PA28gammaがp21と結合して複合体を形成し、p21の安定化を正に制御すること、さらにUV照射によって、この複合体が乖離してp21が分解することを見出した。さらにFbxl12のイントロン領域にプロモーター活性を有する領域が存在し、UV刺激依存的にshort formのFbxl12の発現を上昇させることを見出した。以上の結果から。Fbxl12ならびにPA28gammaはUV照射依存的なp21発現量を制御するタンパク質であることが示唆された。紫外線照射による環境ストレスは、突然変異やゲノムの不安定性を誘発し、細胞の癌化を誘導する。一方、細胞はDNA損傷による癌化を抑制するため、細胞周期を停止させ、その間に損傷を受けたDNAを修復する機構を有することが知られている。通常、紫外線照射などでDNA損傷が起こると、ATMやATRといったセリン/スレオニンキナーゼが活性化してp53を安定化させ、CDK inhibitor p21を発現誘導する。それゆえp21は紫外線照射による増殖抑制の主要なメディエーターとして考えられている。その一方で、異なった条件下では、p21は紫外線照射によって分解誘導される系も報告されており、DNA損傷後のp21の発現量制御の詳細な分子メカニズムは未だ明らかとなっていない。本研究では、新規F-boxタンパク質Fbxl12が、p21をユビキチン非依存的に分解制御すること、また紫外線照射によってp21が蓄積する新しいメカニズムの可能性を見出した。課題1 SCFFbxl12によるp21分解機構の解析当初考えていた仮説とは多少異なるデータが得られたが、新しい可能性を検証し、p21の分解制御に関してこれまで知られていなかった新規メカニズムを見出すことに成功した。課題2 Fbxl12ΔFによるSCFFbxl12制御機構の解析Fbxl12ΔFによるSCFFbxl12の活性制御の解析に関しては、比較的順調に進展しているが、Fbxl12ΔFの発現制御の解析は当初考えていたより若干進展が遅い感がする。ただ、これは課題1の軌道修正に多少時間を費やしたためであり、総じて比較的順調に進んでいるのではないかと考えている。課題1に関しては、比較的しっかりしたデータが揃いつつあるので、本年度中に論文として発表していく(現在執筆中)。課題2は、Fbxl12ΔF発現制御の分子メカニズムを中心に解析し、本年度中には論文を投稿していきたいと考えている。主として分子生物学実験、細胞生物学実験の消耗品、試薬等に利用予定である。また論文校正ならびに出版費にも利用していく。また繰越金26万円相当は、抗体や試薬等、一般消耗試薬などに利用していく。
in situポア・ディメンジョン評価法によるATP放出アニオンチャネル種の確定

細胞は虚血や低浸透圧刺激などのストレスに対して、緊急アラーム信号としてATPを細胞外に放出し、そのATPを細胞外シグナルとして用いることが知られている。例えば、上皮細胞では低浸透圧刺激による細胞膨張時においてATP放出が見られ、そのATPは細胞外から容積調節能を高める役割を果していることが知られている。また、心筋細胞では心筋梗塞時や虚血・低酸素刺激時においてATP放出が見られ、その役割が注目されている。その細胞外ATP放出の非エキソサイトーシス性通路としてマキシアニオンチャネル、容積感受性外交整流性(VSOR)Cl^-チャネル及びCFTR Cl^-チャネルなどが挙げられてきた。本研究の目的は、これら3種のチャネルのポアのサイズが、実際にATPのサイズより大きいかどうかを調べることにある。種々の大きさを持った非電解質有機分子(ポリエチレングリコールなど)のポア内侵入によってシングルチャネルコンダクタンスが現象することを指標にしてポアサイズを測定した。その結果、マキシアニオンチャネルのポアサイズは約1.3nmであり、VSOR Cl^-チャネルのそれは0.63nmであり、CFTR Cl^-チャネルのそれは内側入口は約1nmで、外側入口は約0.6nmしかないことが判明した。ATP^<4->やMgATP^<2->の実効サイズは0.60.7nmであるので、VSORポア及びCFTRポア外側入口の大きさはATPサイズとほぼ等しく、それらが自由に大量にATPを透過させることは考えにくいことが判明した。一方、マキシアニオンチャネルのポアサイズはATPサイズよりもはるかに大きく、これが最もATPチャネルとして働くのに適したポアサイズを持つことが明らかになった。容積依存性・電圧依存性マキシアニオンチャネルはアニオン型ATPを透過させるATP放出チャネルであることを示すデータを私達は既に報告した。しかしその最終的な証明のためには、このチャネルのポアのディメンジョンにATPサイズの分子を透過させる条件が具わっていることを確認する必要がある。本研究では、C127乳腺由来細胞膜に単一チャネル記録法を適用して、次の2つの方法によって、ポアディメンジョンを評価した。1)細胞外液のCl^-を有機アニオンに置換して、そのサイズを次第に大きくしていくと、それに伴ってCl^-に比べての透過性が減少していくが、比較的大きな有機アニオンであるlactobionateに対しても透過性を残すことが明らかとなった。その結果、本マキシアニオンチャネルのポアの半径はlactobionateのカットオフ半径の0.487nmより大きいことが判明した。2)種々のサイズのポリエチレングリコール(PEG)を投与して、この非電解質がポア内に入りこめばCl^-コンダクタンスが減少するので、そのような効果を示すPEG分子のカットオフ半径から本チャネルポアの半径を推定したところ約1.3nmという値が得られた。この値は、ATP^<4->やMgATP^<2->の半径(約0.6nm)よりも相当大きいことが判明した。以上の結果から、アニオン型ATPを透過させる条件を具えていることが結論された。昨年度はマキシアニオンチャネルのポアサイズ測定を行ったので、本年度はcAMP依存性Cl^-チャネルCFTRと容積感受性外向整流性Cl^-チャネルVSORのボアサイズを、種々のサイズのポリエチレングリコール(PEG)のポア内分配によるコンダクタンス減によってモニターした。ヒト上皮Intestine407細胞のVSOR単一チャネル電流はPEG200-300(実効0.27-0.53nm)により抑制されるが、PEG400-4000(実効半径0.62-1.91nm)は殆んど又は全く無効であった。これらのデータからVSORチャネルポアの半径は0.63nmであると査定された。CFTR遺伝子を強制発現させたHEK293T細胞からCFTR単一チャネル電流を観察して同様の実験を行った。

その結果、CFTRチャネルポアの半径は、PEGを細胞内側から与えた場合には約1.0nmであるのに対して、細胞外側から与えた場合には約0.6nmであった。AMP-PNPを細胞内から与えておくと、細胞外側ポアは約0.75nmまで拡がったので、細胞内側におけるヌクレオチド結合によってポアサイズは一定程度拡大するものと推定された。以上から、VSORやCFTRのポアはアニオン型ATP(実効半径0.6-0.7nm)を全く通せないことはないが、マキシアニオンチャネルのポア(半径約13nm)に比べてその透過効率は極めて低いものと推定された。
肺移植後の拒絶反応に関する組織学的・免疫学的研究

本研究は肺移植後の拒絶反応に関する研究としてスタ-トしたが、初年度は移植後の生存期間延長の為に、雑種成犬を対象とする循環動態的な研究が主となった。その要旨は"IIistologic and hemodynamic investigation on canine lungallografts"としてJap.J.Surgery(vol.18,1988)に掲載した。小動物(ラット)ては拡大顕微鏡を使用したsinglelung transplantationを繰り返し、その成果については"ラット肺移植実験の手術手技"(福岡大学医学紀要vol.15,1988)に掲載した。2年目以降、本格的に拒絶反応の場を対象とする、組織学的・免疫学的研究に取り組んだ。これ迄肺における拒絶反応については、その発症を肺胞障害とする考えがあったが、我々の成犬を対象とする光顕・電顕的研究では拒絶反応は単核球浸潤による肺小血管の内皮細胞と血管基底膜の障害をスタ-トとする、との結論が確認された。この血管障害に関し、担当細胞の種類の同定の為、ラット移植肺で免疫染色を実施してみたが、移植肺生着例が期待した程得られず、結局不十分な結果となった。上記の研究より発生する形となったが、2年目以降double lungの移植及び肺葉移植を行い、single lung移植時と同様な循環動態・組織反応に関する検討を行なった。それらの成果についても、関係医学誌に掲載した。本年度は雑種成犬を対象とする肺移植(左肺単独)と,ラットを対象とした肺移植の2種の実験を主体に実施した.まず前者においては,雑種成犬20頭を利用して,通常の左肺単独移植を行ない,気管支吻合部周囲に有茎で腹腔内より持ちあげた大網を被覆した.移植手術後,経時的に内視鏡的観察を行ない,気管支吻合部の治癒過程を観察,〓殺あるいは剖検死の際の組織所見と対比した.大網移植の効果は吻合部治癒に有効な影響を及ぼす事が判明した.この結果については第10回日本気管支学会総会のワークショップ"肺移植実験における気管支鏡検査"においてその成果の一部を発表した.更に論文"Lung allograft withand withoutomentopexy"としてJapanese Jourmal of Surgeryに提出中である.移植時の組織所見,特に拒絶反応を電顕的に検討した論文"Ultrastructural study on acute rejection・・・"はJoumal of Thoracic and Cardiovascular Surgeonに掲載された(別紙).62年度後半は特殊な肺移植実験として,異所性肺葉移植実験を行なった.すなわち10頭の雑犬を対象にrecipient犬の肺はそのままの形でdonorの一部肺(肺葉)をrecipient胸腔内に移植する方法である.実験犬は全て1ヵ月内に死亡したがlimited lung transplantationとして評価されてよい実験と考えている.その成果は論文"An experimental trial for pulmonary lobe allotransplantation"としてThoraxに提出した.また62年末の肺・心肺移植研究会において発表した.ラットを対象として実施した肺移植は当初,麻酔事故等でかなり死亡したが, 62年後半より手術自体も成巧するケースが増えた.最長3ヵ月生存のラットが得られており,現在更に生存数を増している状態である.異種ラット間での肺移植が軌道にのれば拒絶反応部位の免疫組織学的検討を実施する(63年, 64年)予定である.なおラット肺移植実験については担当の筒井による論文"ラット肺移植実験の手術手技"が提出されている.今年度は本研究課題の2年目にあたり、以下の成果を得た。すなわち当初の計画である雑種成犬対象の片側肺移植あるいはラット片肺移植実験は、初年度においてほぼその目標を達成し得た。従って、今年度は更にそれらと類似した実験を推進させた。内容は1.両肺移植実験2.異所性肺葉移植実験3.気管移植実験等である。両肺移植実験は人工心肺を利用した同時両肺移植であり、わが国では具体的な研究成果は未だ出されていない。10頭の雑種成犬を対象として実施したが、移植手技の確立、移植直後の循環動態変化のチェックを目的とした。

雑種成犬を対象としたことより長期生存は困難であったが、有益な情報が得られ、その成果を昭和63年度の日本胸部外科学会総会において発表した。なお従来からのラット肺移植実験は手術手技の工夫、その成果を昭和63年度の日本呼吸器外科学会総会でビデオ供覧した。雑種成犬を対象とする肺葉移植実験はlimited lung transplantation、すなわちrecipientの両肺を既存の形のままとして新たに異所性にdonor肺葉を移植したものであり、移植肺の脱落によってもrecipient肺を救い得るmeritを狙ったものである。最長1ヶ月の生存犬しか得られなかったが、気管支移植部への血流を維持する事により生着の可能性が高くなる事実を知り得た。その成果については昭和63年度日本胸部外科学会総会および心肺移植研究会で発表した。気管移植実験は肺移植成功の鍵となる気管支吻合部の生着について、吻合部の拒絶反応、組織反応を観察するために雑種成犬を対象として実施したものである。12頭の成犬を対象として実施し、主に気管支鏡による観察を行ない、現在最長10ヵ月に達する生存犬を得ている。その成果については平成元年の日本呼吸器外科学会総会および日本気管支学会総会で発表する予定である。本年度の本研究では、昨年度に引き続き、犬・ラットの2種を研究対象として実験を行った。移植肺においては移植後、1週目頃より、細・小血管周囲・やや遅れて小気管支周囲に拒絶反応の主体的役割を担う単核球の浸潤がみられる。これら単核球の浸潤機序、ならびに役割について光顕的・電顕的・免疫組織学的解析を行なった結果、(1)当初focalな形で単核球浸潤がみられ、続いて血管内皮細胞の障害が生ずる。この内皮細胞障害には移植後早期において過酸化脂質(白血球)の関与も考えられる。(2)拒絶反応においては、血管基底膜障害より、肺脂系への破壊が進み水腫性変化を移行する。(3)浸潤単核球はcytotoxicCTリンパ球とmacrophageで構成されている。以上の結論等を得た。ラット肺移植では研究者辞退の為、予定した成功率が得られず、実験中途より犬移植肺研究を主体とするものにきりかえた。特に実験後半では、気管支吻部の拒絶反応に関して組織学的研究を詳しく行ったが、結論として、(1)実質肺組織にみられるfocalな単核球集蔟とは異なり、リンパ球浸潤はびまん性・散在性である。(2)実質肺組織に比して、拒絶反応に発現は一般に極めて弱い。(3)気管支吻合部生着の為には、十分な血行の確保が重要であり、大綱皮覆が有効である。以上の結論を得た。これらの研究成果については各種学会、或は、論文において発表した。
インフラマソームを標的とした低出力超音波パルスを用いた新規歯内治療の基盤構築

マクロファージにより分泌されるIL-1βは、根尖性歯周炎の炎症を憎悪させ病態形成に重要な因子である。本研究の目的はIL-1βの分泌を制御している細胞内タンパク複合体であるインフラマソームに対する低出力超音波パルス(Low intensity pulsed ultrasound:以下LIPUS)の抗炎症効果について明らかにすることである。昨年度、マウスマクロファージ様株化細胞J774.1にLPS、ATP刺激、LIPUS照射を行い、pro-IL-1β、インフラマソームの構成分子であるNLRP3、Caspase1の遺伝子発現をリアルタイムPCR法、タンパク発現をウエスタンブロット法にて解析を行った結果、pro-IL-1β、NLRP3、Caspase1ともにLIPUS照射群では有意な遺伝子発現およびタンパクの抑制がみられたことをふまえ、今年度はより詳細な抗炎症作用のメカニズムの解析を行った。今年度はまずLIPUS照射におけるIκ-Bへの影響をウエスタンブロット法にて解析を行った。LPSによるIκ-Bの分解はLPS添加後30分後には回復してきたことをふまえ、LPS刺激後30分でのIκ-Bの分解に対してLIPUSの影響を検討したところ、LIPUS照射はIκ-Bの分解には関与していないことが示唆された。次にLIPUS照射によるIL-1β産生の抑制がどのシグナル伝達経路で生じているものかをウエスタンブロット法にて解析を行った。J774.1をLPSで刺激するとp65のリン酸化が誘導さたがLIPUS照射を行うとリン酸化は抑制された。すなわち、NFκ-B経路の活性化を抑制していることが示唆された。次年度はこれらの知見をもとにLIPUSによる詳細な抗炎症作用のメカニズムをさらに解析していく予定である。初年度、今年度と研究計画であるインフラマソームに対するLIPUS照射による抗炎症作用の検討に関してマウスマクロファージ様株化細胞J774.1を用いて解析を行った。J774.1をLPSで刺激する際、LIPSU照射を同時に行ったところ、pro-IL-1β、NLRP3、Caspase1ともにLIPUS照射群では有意な遺伝子発現およびタンパクの抑制がみられたことをふまえ、NFκ-B経路の活性化の有無を検討したところ、LIPUS照射によりp65のリン酸化が優位に抑制されていた。この解析をもとにさらに詳細な抗炎症作用のメカニズムの解析を進めることにより次年度の継続課題とすることができる。従って、以上の結果から現在までの研究の達成度は概ね順調と言える。初年度および今年度の研究成果、すなわちインフラマソームに対するLIPUS照射による抗炎症作用に対してより詳細なシグナル伝達経路を明らかにしていくことが今後の研究目標となる。マクロファージにより分泌されるIL-1βは、根尖性歯周炎の炎症を憎悪させ、病態形成に重要な因子である。LIPUSは硬組織形成促進作用があることが知られているが、インフラマソームへの効果は知られていない。今年度はまずLIPUS照射における細胞毒性の実験を行った結果、マウスマクロファージ様株化細胞J774.1にLIPUS照射したところ明らかな細胞死は見られなかった。またJ774.1をLPSで刺激する際、LIPUS照射を同時に行いELISA法にて解析を行ったところ、IL-1βの分泌が有意に抑制された。さらにELISAの結果をふまえ、J774.1にLPS、ATP刺激、LIPUS照射を行い、pro-IL-1β、インフラマソームの構成分子であるNLRP3、Caspase1の遺伝子発現をリアルタイムPCR法にて解析を行った結果、pro-IL-1β、NLRP3、Caspase1ともにLIPUS照射群では有意な遺伝子発現の抑制がみられた。LIPUS照射によるpro-IL-1β、NLRP3、Caspase1の遺伝子発現が抑制されたことをふまえ、タンパク発現をウエスタンブロット法にて解析を行った結果、pro-IL-1β、NLRP3、Caspase1ともにLIPUS照射群でタンパク発現が優位に抑制された。次年度はこれらの知見をもとにLIPUSによるより詳細な抗炎症作用のメカニズムを解析していく予定である。初年度の研究計画であるインフラマソームに対するLIPUS照射による抗炎症作用の検討に関してマウスマクロファージ様株化細胞J774.1を用いて解析を行った。J774.1をLPSで刺激する際、LIPUS照射を同時に行ったところ、IL-1βの分泌が遺伝子レベルで有意に抑制された。またインフラマソームの構成分子であるNLRP3、Caspase1ともにLIPUS照射群では有意な遺伝子・タンパク発現の抑制がみられた。この解析をもとにLIPUS照射による抗炎症作用についてさらに詳細なメカニズムの解析を進めることにより次年度以降の継続課題とすることができる。

昨年度、マウスマクロファージ様株化細胞J774.1にLPS、ATP刺激、LIPUS照射を行い、pro-IL-1β、インフラマソームの構成分子であるNLRP3、Caspase1の遺伝子発現をリアルタイムPCR法、タンパク発現をウエスタンブロット法にて解析を行った結果、pro-IL-1β、NLRP3、Caspase1ともにLIPUS照射群では有意な遺伝子発現およびタンパクの抑制がみられたことをふまえ、今年度はより詳細な抗炎症作用のメカニズムの解析を行った。今年度はまずLIPUS照射におけるIκ-Bへの影響をウエスタンブロット法にて解析を行った。LPSによるIκ-Bの分解はLPS添加後30分後には回復してきたことをふまえ、LPS刺激後30分でのIκ-Bの分解に対してLIPUSの影響を検討したところ、LIPUS照射はIκ-Bの分解には関与していないことが示唆された。次にLIPUS照射によるIL-1β産生の抑制がどのシグナル伝達経路で生じているものかをウエスタンブロット法にて解析を行った。J774.1をLPSで刺激するとp65のリン酸化が誘導さたがLIPUS照射を行うとリン酸化は抑制された。すなわち、NFκ-B経路の活性化を抑制していることが示唆された。次年度はこれらの知見をもとにLIPUSによる詳細な抗炎症作用のメカニズムをさらに解析していく予定である。初年度、今年度と研究計画であるインフラマソームに対するLIPUS照射による抗炎症作用の検討に関してマウスマクロファージ様株化細胞J774.1を用いて解析を行った。J774.1をLPSで刺激する際、LIPSU照射を同時に行ったところ、pro-IL-1β、NLRP3、Caspase1ともにLIPUS照射群では有意な遺伝子発現およびタンパクの抑制がみられたことをふまえ、NFκ-B経路の活性化の有無を検討したところ、LIPUS照射によりp65のリン酸化が優位に抑制されていた。この解析をもとにさらに詳細な抗炎症作用のメカニズムの解析を進めることにより次年度の継続課題とすることができる。従って、以上の結果から現在までの研究の達成度は概ね順調と言える。初年度の研究成果、すなわちインフラマソームに対するLIPUS照射による抗炎症作用に対して、その詳細なシグナリング伝達経路を明らかにしていくことが今後の研究の目標となる。初年度および今年度の研究成果、すなわちインフラマソームに対するLIPUS照射による抗炎症作用に対してより詳細なシグナル伝達経路を明らかにしていくことが今後の研究目標となる。(理由)次年度使用額は、今年度の研究を効率的に推進したことに伴い発生した未使用額である。(使用理由)平成29年度請求額とあわせ、平成30年度の研究遂行に使用する予定である。(使用理由)平成30年度請求額と合わせて、平成31年度の研究遂行に使用する予定である。
視覚刺激の3次元空間配置が視覚誘導性自己運動知覚に及ぼす効果の実験心理学的検討

視覚刺激による自己運動知覚(ベクション)に及ぼす視覚刺激の3次元的布置の効果を心理実験を用いて検討し、(1)視覚刺激の奥行き知覚に変動がない条件においても、視野中心部に呈示された視覚刺激は、同一の面積をもつ周辺刺激と同等の強度を持つベクションを誘導可能であること、(2)静止背景によるベクション抑制には視野の周辺部が、静止前面によるベクション促進には視野の中心部がより大きな影響を持つこと、などを明らかとした。本研究は、視覚誘導性自己運動知覚(ベクション)に及ぼす視覚刺激の3次元空間内での配置の効果を分析することにより、環境への行動的適応に必要不可欠な自己身体の空間的定位が、どのような知覚情報処理プロセスにより実現されていちのかを実験心理学的手法を用いて解明することを目指すものである。本年度は、研究計画の初年度として、内外の研究動向を精査し、研究計画を再調整したうえで、実験環境の整備を行った。さらに、視覚刺激の空問特性のうち、これまでその自己運動知覚に及ぼす影響が組織的には検討されて来なかった、視覚刺激の剛体性の効果を心理実験を用いて検討し、1)等速運動を行なう広視野視覚刺激に重畳された付加的視覚刺激振動が視覚刺激の剛体性感を向上させ、より強い自己身体運動を誘導すること、2)付加振動の同期性や斉一性を低減させることにより、視覚刺激の剛体性感が低減することにより、それに量的に比例する形で自己運動強度が低下することを見出した。これらの結果は、視覚刺激の2次元/3次元的配置という物理的な空間特性と同様に、その剛体性感という知覚的特性が、自己運動知覚の生起に大きな影響を及ぼしうることを示唆するものである。今後は、剛体性など視覚刺激の多様な空間特性の効果を引き続き検討し、それらの要因が3次元空間内での運動刺激の配置の効果とどのような関係にあるのかを明らかとすることにより、視覚情報に基づく自己運動知覚に関する心理学モデルの構築を目指す。本研究計画は、視覚誘導性自己運動知覚(ベクション)に及ぼす視覚刺激の3次元空間内での配置の効果を分析することにより、環境への行動的適応に必要不可欠な自己身体の空間的定位が、どのような知覚情報処理プロセスにより実現されているのかを解明することを目指す。本年度は、単に視覚刺激の呈示領域を操作するのみでなく、近年自己運動知覚の強力な促進要因であることが明らかとされているジター運動(ノイズ様のランダム運動)の関与が、刺激呈示の3次元的布置によりどのように変化するのかを検討した。12名の観察者が参加した心理実験の結果、視野の中心部にジター運動を呈示した場合に、視野周辺部にそれを付加した場合よりも、より強力な自己運動知覚が誘導されることが明らかとなった。この結果は、刺激提示の大きさ(面積)が均一であれば運動刺激呈示の離心度はベクション誘導に影響を及ぼしえないとした前年度の研究結果と対比をなしており、加速度運動を含むジター運動刺激によるベクション増強が、通常の(等速運動成分のみで構成されている)視覚刺激によるベクション誘発とは異なるメカニズムによることが示唆される。次年度は、研究計画の最終年度として、ベクションに及ぼす視覚刺激の3次元空間内での配置の効果に関するこれまでの心理実験の結果を取りまとめ、その効果を定量的に表現可能な心理学的モデルの構築を目指す。これにより、ベクションに大きな影響を及ぼすと考えられる視覚刺激の3次元空間内布置の問題に関し、統合的に検討を進める理論的枠組みを構築することが可能となる。本研究は、視覚誘導性自己運動知覚(ベクション)に及ぼす視覚刺激の3次元空間内での配置の効果を分析することにより、環境への行動的適応に必要不可欠な自己身体の空間的定位が、どのような知覚情報処理プロセスにより実現されているのかを実験心理学的手法を用いて解明することを目指すものである。本年度は、研究計画の最終年度として、自己身体運動に関わる心理実験を継続し、得られた結果に基づき、自己身体運動知覚に及ぼす視覚情報の効果を総合的に考察した。本年度得られた主な知見を以下にまとめる。1)視覚刺激(オプティカルフロー)が鼻側網膜に投影された遠心運動成分を持つが場合に、ベクションがより強くなる。この結果は、自己運動知覚に皮質下経路に媒介された視覚情報処理が関与していることを示唆する。2)刺激属性(輝度および色度)の斉一な変動が、視覚刺激による自己運動知覚誘導を強力に抑制する。このことは、単に視覚刺激の空間配置(空間特性)のみならず、その画像特性もが自己運動知覚に大きな影響を及ぼしうることを示している。3)ベクションにおけるジター優位性(単純運動ではなく、複雑な加速度を有する視覚刺激がより強いベクションを引き起こす)に及ぼす網膜離心度の効果を検討し、ジター優位性がジター付加面積に依存して強化されること、視野中心部の効果が高いことなどを確認した。この結果により、ジター運動の効果は、周辺視野優位であると考えられてきたベクションにおける刺激呈示領域依存性とは異なる傾向を示すことが理解できた。
子宮内膜における着床現象の解明

今年度は、子宮内膜上皮細胞において精子による刺激がどんな影響を及ぼすかについて検討した。精子や精液中にはacrosinやprostasinなどのprotease activated receptor (PAR)-2を活性化するセリンプロテアーゼが含まれている。子宮内膜ではPAR-1、2の存在が確認されており特に、PAR-2は着床期周辺に発現が増強することが報告されている。今回は、R&D社製のMAP kinaseアレイキットを用いて検討を行った。in vitroで培養した子宮内膜上皮細胞に精子をふりかけて刺激したところ、種々のMAP kinaseのリン酸化が増強された。また、このリン酸化の増強はPAR-1のantagonistでは抑制されず、PAR-2のantagonistで抑制された。このことから、子宮内膜上皮細胞において、精子はPAR-2を介してシグナル伝達の活性化を引き起こしている可能性が示唆された。ただし、この実験だけでは精子中のどの成分がPAR-2を活性化しているか不明である。今後の検討課題と思われる。今回の研究は2010年7月に開催された第28回日本受精着床学会において世界体外受精会議記念賞候補演題となり口演で発表させていただいた(未受賞)。
アタキシア・テランジェクタシアを用いたヒト放射線感受性遺伝子の単離と解析

放射線高感受性を特徴とするヒト遺伝病のAT(アタキシタ・テランジェクタシア)を用い、ヒト放射線感受性遺伝子を単離することを目的として研究をおこない以下の成果を得た。1.AT遺伝子の座位するヒト染色体11q23領域に欠失をもつと同時に放射線抵抗性を消失した細胞2859/4-1を用い、このヒト11q23欠失染色体をもつマウス細胞株を微小核融合法で作成した。ヒトAlu配列をプライマーにしたIRS-PCR法で欠失領域を解析し、AT遺伝子に近接する2種のDNAマーカーを単離した。11q23領域に切断点をもつX/11転座染色体を用いて、ヒト11q23微小断片をもつ放射線ハイブリドを作成した。クローンRH12/1はAT細胞の放射線高感受性を相補するが他の2クローン(MH12/1,MH12/3)は相補せず、両者の差異領域に遺伝子が存在するという作業仮説を設定して解析をすすめた。11q23領域内のDNAマーカーを用いて3クローンのヒト断片を解析した。RH12/1に固有のマーカーはなく、AT遺伝子にもっとも近接するとされるD11S384をも欠いていた。遺伝子がD11S384よりテロメア側DRD2D11S351領域内にあるという新しい可能性を示唆する。RH12/1から作成したコスミドライブラリーから256個のヒト由来のクローンを分離し、21個の11番染色体由来クローンを同定したが、この中にはAT遺伝子を含むものはなかった。一方RH12/1からのIRS-PCR産物のなかから単離したプラスミドpBM8.9は11番染色体上のRH12/1に固有の領域内にあり、AT遺伝子にきわめて近接する可能性が高い。このマーカーをもとにAT遺伝子を探索してゆきたい。放射線の生物作用のメカニズムを解析するため、放射線高感受性を特徴とするヒト劣性遺伝病のアタキシア・テランジェクタシア(AT)を用い、その原因遺伝子の単離を目的とした本研究計画の初年度である本年度は、染色体11q23領域内のAT遺伝子座位近傍の解析と、この領域からのDNAマーカーの分離とクローン化を試み、以下の成果が得られた。1.AT患者由来の永代細胞株AT2KYSVを受容細胞とした染色体移入実験から、AT遺伝子座位を染色体11q23領域に同定した。この実験の過程で、AT座位を含む11q23領域に染色体微小欠失をもつAT細胞クローン2859/4-1を得た。2859/4-1からマウスA9細胞への微小核融合を行い、欠失染色体を単一に保有する1クローンA9(2859/4/1/2)-1を得た。2.マウス細胞内でのヒト染色体のDNAを調べるためAlu配列をプライマーとしたPCRによる解析を行った。AluプライマーのTC65と517を用い、ヒト第11番染色体の種々の領域を含むヒト/マウス雑種細胞および今回作成したA9(2859/4/1/2)-1のDNA間で比較した。PCR産物相互のサザン解析から、A9(2859/4/1/2)-1で消失したPCR産物が複数個確認された。これらはプラスミドベクターpUCBM20にクローン化し、AT遺伝子座位近傍を解析するためのDNAマーカーとして用いる予定である。

3.ヒト/マウス雑種細胞ックローンA9(3552)-2に高線量X線(30120Gy)を照射後マウス細胞と融合し、AT遺伝子座位近傍の微小染色体断片をもつ放射線ハイブリドを作成した。AT遺伝子座位近傍からのゲノムライブラリー作成の出発材料とする予定である。放射線高感受性を特徴とするヒト劣性遺伝病のアタキシア・テランジェクタシア(AT)はヒト細胞にたいする放射線の作用機構を解析するための有用なモデル系である。放射線感受性に関係するこのATの原因遺伝子の単離を目的とした本研究の第2年度である今年度は、ヒト染色体11q23領域の解析とここからのDNAの分離を試み、以下の成果が得られた1.AT細胞への染色体移入実験からAT遺伝子の座位はヒト染色体11q23領域にマップされた。AT遺伝子座近傍に転座点をもつ11/X転座染色体と放射線による染色体の断片化を用いて、この遺伝子座位を含む微小な染色体断片をもつ放射線ハイブリドを作成した。2.得られた放射線ハイブリドについて、ヒト特異的反復配列をプライマーとしたPCR法によって染色体の細片化のみられたクローンを選別し、その染色体領域を調べた。5クローンの染色体断片は11/X転座点から11S14411S385間に亙るものであり、うち1クローン(RH12/1)がAT細胞の放射線高感受性を相補した。3.ATの原因遺伝子を含むヒト染色体断片をもつクローンRH12/1からコスミドのゲノム・ライブラリーを作成した。作成したライブラリーから、ヒト特異的反復配列をプローブに用いてヒト由来のコスミドクローンを選択した。得られたクローン間相互の位置関係とこれらの放射線感受性の相補能について解析中である。放射線高感受性を特徴とするヒト遺伝病のAT(アタキシア・テランジェクタシア)を用い、ヒト放射線感受性遺伝子を単離することを目的として研究をおこない以下の成果を得た。1.ATの原因遺伝子が座位するヒト染色体11q23領域に切断点をもつX/11転座染色体を用いて、11q23領域の微小ヒト断片をもつ放射線ハイブリドを作成した。クローンRH12/1はAT細胞の放射線高感受性を相補するが他の2クローン(MH12/1,MH12/3)は相補せず、両者の差異領域に遺伝子が存在するという作業仮説を設定して以後の解析をすすめた。2.11q23領域内のDNAマーカーの存否を調べたところ、3クローンとも調べた11マーカー中D11S144とD11S351の2マーカーのみを保持しており、RH12/1に固有の既知のマーカーはなかった。これは11番染色体上のRH12/1に固有の領域がきわめて微小であることを示す。注目されるのは、リンケージ解析からAT遺伝子にもっとも接近するとされるD11S384をも欠いていることであり、遺伝子がD11384よりテロメア側DRD2D11S351領域内にあるという新しい可能性を示唆する。3.RH12/1からsCos1をベクターに用いてコスミドライブラリーを作成した。50万個のクローンから256個のヒト由来のクローンを分離し、21個の11番染色体由来クローンを同定したが、この中にはAT遺伝子を含むものはなかった。一方RH12/1からのIRS-PCR産物のなかから単離したプラスミドpBM8.9は11番染色体上のRH12/1に固有の領域内にあり、AT遺伝子にきわめて近接する可能性が高い。このマーカーをもとにAT遺伝子を探索してゆきたい。
看護師の役割機能に焦点を当てた療養病床における専門職連携実践のあり様に関する研究

本研究では、療養病床での多職種連携実践において、看護師が発揮している役割機能とその特徴を明らかにするために、療養病床で働く看護師と他職種者にグループインタビューと多職種連携実践力調査を行った。その結果、看護師は多職種チームの中で、情報を統合し患者の目標の到達に向けて他多職種者に働きかけ、患者の療養生活が円滑に進むよう活動する役割機能を発揮していた。連携実践力の調査結果では、看護師集団は他職種者集団と比較して実践力の自己評価が低く、連携実践の発想をもつ者の割合が低かった。管理職者では、他職種者と同程度の評価であった。これには、看護師集団が看護チームとして働いている現状が影響していると考えられた。本研究では、療養病床での多職種連携実践において、看護師が発揮している役割機能、チームメンバーが期待する役割機能を明らかにすることを目指して、療養病床で働く看護師と同チームで働く他多職種者(医師、介護福祉士、理学療法士、作業療法士、栄養士、医療ソーシャルワーカー等)にフォーカスグループインタビューと自記式調査票による多職種連携実践力調査を行った。フォーカスグループインタビューによる調査から、療養病床において看護師が多職種チームの中で、患者中心の立場を貫き、患者に関する情報を統合し、患者の目標の到達に向けて他職種者に働きかけ、かつ、家族との中継役を担い、日々の患者の生活および他職種者の実践が円滑に進められるように活動する役割機能をもつことが示唆され、患者の療養生活を支援する上で重要な役割を担うことが明らかになった。しかし、多職種連携実践力の調査結果では、看護師スタッフ集団は他職種者と比較して実践力の評価が低く、多職種チームで連携した実践の発想をもつ者の割合が低いことが明らかになった。管理職者では、他職種者と同等の評価であった。これは、看護師集団が看護チームとして働いているために、一看護スタッフとしては他職種者との関わりが必要のない現状が影響していると考えられる。今後の展開として、看護師集団の特徴を鑑み、看護師集団のリーダーを担う者を対象に他職種者との連携実践力を培う教育を促進すること、スタッフ看護師を対象に、看護師チームとして患者に関わりながら他職種者をも含めたケアとして日々の実践を考えられるシステムを構築することが療養病床における多職種協働ケアの実践、ひいてはケアの質の向上に向けて有効であると考える。当初計画では、本年度に高齢者専門病院の療養病床における調査票を用いた量的調査とグループインタビューによる質的調査を実施する予定であった。しかし、調査項目を精錬する段階で、考慮すべき概念(Team Climate)を発見し、検討に時間を要したために、調査予定を繰り下げ、本年度は調査票の再構成に取り組んだ。本研究においては、多職種で連携したチームにおける実践力の測定を試み、職種による特徴の差異を量るため、チームの状況を測定することが必要不可欠であると判断した。本年度は、このTeam Climateに関する文献精査、翻訳に取り組み、調査票への組み入れの検討を中心に行った。Team Climateとは、革新性の高い組織を創るために必要な要素を組織における目標設定、参加的環境、革新性の保持、方向性の設定、相互作用の程度の5因子に整理されたものであり、その評価尺度が開発されている。Team Climateの概念は、英国研究者らによって開発されたものであるが、欧州各国で活用され、信頼性が確認されている他、病院や訪問看護師集団といった保健医療にかかわる組織の調査においても活用された実績がある。現在、このTeam Climateの調査項目を取り込んだ調査票がほぼ完成し、研究実施について倫理審査委員会の承認を得ている。当初計画より実施時期が遅延しているため、計画より時間的に逼迫することとなっているが、研究目的を遂行するために、データ収集方法について再検討し、調査対象の範囲を狭め、研究協力者を募る準備をした。また、高齢者医療の先進国であるスウェーデンにて、個人主義を貫きシステム化された連携のあり様、看護職者の役割機能を視察した。ケア、看護という営み、またそのシステム化においては、文化が反映されており、日本独自の連携実践のあり様を明らかにする重要性を確認した。本年度は、調査を実施する予定であったが、文献検討の段階で調査に組み入れるべきと判断する新たな概念を発見し、その精査、調査票の精錬のために時間を要した。そのため当初計画よりもやや遅れている。しかし、研究目的を達成するためには、必要不可欠な過程である。当初計画で平成24年度に実施予定であった高齢者専門病院の療養病床における調査と平成25年度に実施予定である総合病院の療養病床における調査を同時に実施する。計画では、全国の療養病床から選定する予定であったが、研究者から地理的に近い施設に狭めて研究協力施設を募り、研究の遂行を可能とする。

手順は、当初計画と変更なく、調査票による量的調査とインタビューによる質的調査の方法論的トライアンギュレーションを用いて多面的に分析を進める。平成24年度は、当初計画で調査を実施する予定であったが、調査票の精錬が必要と判断し、調査実施を繰り下げた。そのために、次年度への繰越金が発生した。平成25年度は、調査票を用いた調査のための費用(郵送費、印刷費、データ入力、謝礼)やインタビュー調査のための費用(研究者交通費、逐語録作成、謝礼)等に研究費を活用し、研究を遂行する予定である。
ウェーブレット解析による耕うんづめの耕うん抵抗変動現象の解析

周波数解析には,簡便ではあるが最も完成度が高いフーリエ解析の使用が一般的である。しかし,ここで研究対象とする耕うん時における耕うんづめの変動現象は被切削土壌表面に形成される亀裂と関係をもち,耕うんづめの変動と亀裂形成の場所の相関をも解析対象とする。このため,単なる周波数解析のみばかりでなく振動が発生した場所(時間位置)の推定も必要とされ,周波数解析ツールであるフーリエ解析では不十分である。耕うんづめの耕うん抵抗変動の解析にウェーブレット解析を導入することによって,変動の周波数と変動が発生した場所(時間)の推定が同時に可能になった。ここでは,耕うん時の耕うんづめの変動に16,22,27,34Hzの個別の周波数値が求められ,耕うん作用である大きな波形上に重なり合った変動波形(変動成分)の発生場所(時間位置)が,切削開始時からそれぞれ0.02s,0.04s,0.07s,0.1s後であることが計算された。これにより,被切削土壌表面上の亀裂形成の可視化により亀裂形成位置と耕うんづめの変動位置(時間)の関係を求め,未耕地土壌表面の亀裂形成の要因の探求が今後展開される。また,フーリエ解析における周波数解析では基本周波数に依存した解析精度であったが,ウェーブレット解析には基本周波数に対応する概念がなく,コンピュータの性能とプログラミング方法によってより高精度な周波数の計算が可能となることがわかった。さらに,ウェーブレット解析にはウィンドウ関数を用いる必要性はなく,不連続データについてもアナライジングウェーブレットでダイレクトに解析可能であることなどその拡張性の広さが認識された。
新奇π電子系オリゴマー類の合成法の開発とそれらの機能に関する研究

長い空洞を有する包接ホスト分子及び拡張π電子系としての興味が持たれる分子量一定のナノチューブ類の合成法の確立を目的として、1.構成単位としてのピロメッリト酸ジイミド基盤マクロサイクル類の効率的合成法の開発、2.連結基(エチニル基、臭素)を導入したマクロサイクル類の合成法の開発、3.連結基(特にエチニル基)で置換されたマクロサイクル類の連結反応条件の最適化を、マイクロフロー法を利用して行った。○チューブ状分子の合成と特異な包接挙動の解明分子量一定で直径約1.5-2nmの空洞を持つチューブ分子の合成ルートとして、分子内に2個の環化部位と2個の連結部位を持つ基本骨格の左右の部位を環化してマクロサイクル(構成単位)を合成し、次に、構成単位の上下の連結部位を共有結合で段階的に連結して構築する方法を検討した。まず、酸無水物とアミンとの環化反応条件を種々検討したが、中-高希釈条件でピロメリット酸ジイミドを2個および3個含むマクロサイクルでそれぞれ10-15%,7-8%程度であり、更なる収率の向上が必要である。この反応はアミック酸生成と引き続いての脱水反応の二段階反応であり、最初の反応は室温でも進行するので、マイクロフロー反応器を用いる合成を行うことにし、現在、装置の組み立てと反応条件検討を行っている。また、光反応の前駆体である[3_3](1,3,5)シクロファン類の合成にはTosMIC環化法を用いており、この環化法もマイクロフロー反応に適していると判断されるので、高希釈条件の代わりにマイクロフロー反応を用いる環化反応を検討している。この研究の主題である「空間的反応集積化」に関する成果は未だ得られていないが、研究を遂行する過程で幾つかの反応においてマイクロフロー反応装置を用いる合成反応が有効であると確信したので、現在、環化反応、光反応、薗頭反応、酸化的アセチレン二量化反応等にこの方法を用いる予定で準備を進めており、まず、光化学反応と環化反応から始めている。A01及びA02班員との共同研究を積極的に進め、より高いレベルの研究成果を得る予定である。○チューブ状分子の構成単位となるピロメリット酸ジイミド基盤マクロサイクル類は、ピロメリット酸無水物とアミンとの脱水縮合を希釈条件で行い、その後生成したアミック酸を無水酢酸で脱水縮合することにより合成される。今年度はこの反応をマイクロリアクターを用いたフロー反応で行い、反応溶媒、温度、濃度について詳細に調べた。ピロメリット酸無水物とアミンのTHF溶液を反応用セル中で混合して50°Cで1分間反応させ、その後、生成したアミック酸を脱水してから分離を行うと、バッチ反応と同程度の収率で目的のマクロサイクルが得られた。未だ収率の改善が必要であるが、フロー反応では副生成物が少なく、また、マクロサイクルの環サイズは使用する溶媒の種類により選択的に合成できることが明らかになった。今後は、フロー反応を環化反応、光反応、金属触媒を用いるクロスカップリング反応等にも適用する予定である。○ピロメリット酸ジイミドを3個含むマクロサイクルは、空孔内にアニリン四量体を包接した興味ある超分子構造体を生成する。一方、このマクロサイクルはN,N-ジメチルアニリンによりゲル化し、このゲルを遠心分離機で分離してからN,N-ジメチルアニリンを真空中で除くと、多孔質ナノファイバーが得られた。これは、マクロサイクルが自己集合により積層してチューブ構造を形成し、更にこれらのチューブ構造がバンドル化してファイバーが形成されると考えられる。この多孔質ナノファイバーはケモセンサーとしての応用や、酸素に比較的安定なラジカルアニオン種が生成するので、有機導電体としての応用を調べている。○ピロメリット酸ジイミド基盤マクロサイクル類を連結するためには、イミドのベンゼン環にハロゲン等の置換基を導入する必要がある。長年、臭素を置換したマクロサイクルの合成を検討して来たが、脱水環化反応では目的物の収率が低く量的に得ることが困難であった。最近、環化反応にアセチレンの二量化反応であるGlaser反応が、Pd触媒存在下、有機酸化剤を用いることにより円滑に進行して目的の臭素置換マクロサイクルを収率良く生成することを見出した。○π電子不足の空孔を持つピロメリット酸ジイミド基盤[3+3]マクロサイクルは、N,N-ジメチルアニリンによりゲル化して多孔質ナノファイバーを形成する事を昨年度報告した。この多孔質ナノファイバーを構成しているピロメリット酸ジイミドはπ電子受容体であり、段階的に還元されてラジカルアニオン、ジアニオン種へ変換すると予想される。実際に、多孔質ナノファイバーにヒドラジン蒸気を曝すとナノファイバーのラジカルアニオン種が生成する事がESRスペクトルにより確認された。また、金電極間に自己集積により形成したナノファイバーにヒドラジン蒸気を曝した後、電極間に電圧をかけると電圧に比例して電流が流れる事が分かり、自己集積型多孔質ナノファイバーのラジカルアニオン種が電気伝導体となる事が確認された。

この多孔質ナノファイバーの更なる機能開発を行っている。○ピロメリット酸ジイミド基盤マクロサイクルの合成法として、ピロメリット酸無水物と2,5-ジアルコキシ-1,4-ビス(アミノメチル)ベンゼンとの二段階脱水縮合反応を、マイクロフロー合成法によるアミック酸合成、引き続いてのバッチ法によるアミック酸脱水縮合反応を用いて行った所、従来のバッチ法による合成法よりもはるかに高い収率、環サイズ選択性でマクロサイクルが得られる事が分かった。特に、アミック酸脱水縮合反応の際に、DABCO等の第3級アミンを共存させると、マクロサイクルの収率と環サイズ選択性が大きく向上する事が明らかになった。○ジメチルアミノエチル基等の電子供与性側鎖を有する芳香族ジイミド類では、光照射によるアミンからジイミドへの分子内光電子移動反応が起こり、着色した電荷分離状態になる。この電荷分離状態は、暗室では中性のジイミドに戻り、元の色に戻る。このように、分子内光電子移動反応に基づくフォトクロミズム現象を見出し、フォトクロミズム現象と結晶構造との相関関係を精査した。新しい包接ホスト分子及び拡張π電子系としての興味が持たれる分子量一定のナノチューブ類の合成法を開発する目的で、構成単位としてのピロメリット酸ジイミド基盤[3+3]マクロサイクル類、及びマクロサイクル間を連結するユニットとしての臭素及びアセチレンが置換したマクロサイクル類の合成法を開発した。連結反応の基礎実験として、Glaser反応条件下でのoligomerizationに特化したフローリアクターを作製し、1,4-ジエチニルベンゼンのGlaser反応を行った所、5量体や分子量分布の小さな生成物が得られバッチ反応とは異なるフロー反応独特の特徴が観測された。現在、本フロー反応を利用して、エチニル置換マクロサイクル類のGlaser反応によるチューブ状化合物の合成を検討している。また、合成したピロメリット酸ジイミド基盤[3+3]マクロサイクル類は電子不足の空孔を持つために、電子の豊富なゲスト分子(トルエン、p-キシレン、アニリン類、[2.2.2]パラシクロファン)を電荷移動相互作用により包接する事、N,N-ジメチルアニリンの場合にはマクロサイクルが自己集合してチューブ状構造を形成し、このチューブ状構造が更にバンドル化して多孔質ナノファイバーを形成する事を見出した。また、芳香族ジイミドの化学に関連して、電子供与基が置換したナフタレンビスイミドが光励起着色現象及び結晶の屈曲現象を示す事を発見し、それらの理由について解明した。電子受容性を有するピロメリット酸ジイミド基盤マクロサイクル類は電子受容性の空孔を持つので、電子供与性ゲスト分子の選択的包接が観測される他、ピロメリット酸ジイミドのラジカルアニオン種の生成に基づく物性についても興味が持たれる。本研究では、1.基盤となるマクロサイクルの収率の向上, 2.連結部位となるエチニル置換大環状化合物の合成法の開発、3.エチニル置換マクロサイクル類のGlaser反応による連結反応、について研究するとともに、合成したマクロサイクル類の電子スペクトル及び酸化還元挙動について調べた。また、芳香族ジイミドの化学に関連して、電子のドナー性側鎖を有するナフタレンジイミドの光電子移動反応に基づくフォトクロミズム現象及び結晶の屈曲現象を見出し、それらの現象が起こる理由について調べた。
脂肪の味覚受容機構の解明

1.脂肪を味覚受容する可能性に関する研究本研究では、脂肪が味覚受容される可能性について検討することを目的としている。しかし、脂肪を摂取する際には味覚、嗅覚、物性、代謝後の影響のいずれもが作用しているため、ラットが味覚で得た情報のみに基づいて脂肪を選択する系を確立し、さらにその系を用いて脂肪が味覚受容されるか検討を行った。(1)味覚情報の評価系の確立増粘多糖類であるキサンタンガムを溶媒として用いることで物性による影響を排除し、摂取時間を5分間にすることで代謝後の影響を排除し、硫酸亜鉛溶液を鼻腔に流して嗅粘膜を剥離させることで嗅覚による影響を排除した。一般に行われる二瓶選択実験法を基に上記の方法を併せ、またラットが5分間で試料を摂取するための訓練、嗅覚が確実に喪失していることを評価するために特定の臭いに対して忌避するための条件付けも併せて行うことにより、味覚情報の評価系を確立した。(2)長鎖脂肪酸、トリグリセリドに対する選択性上記の評価系を用いて食品に含まれる代表的な長鎖脂肪酸であるオレイン酸、またトリグリセリドとしてトリオレインに対する選択性を調べた。ラットは0.2%以下の濃度のオレイン酸、トリオレインを選択しなかったが、0.5%以上の濃度のオレイン酸、トリオレインを選択した。この結果は、脂肪は味覚受容されることを強く示唆するものである。1.脂肪を味覚受容する可能性に関する研究本研究では、行動・神経・細胞レベルで様々な脂肪に対する応答を測定することにより脂肪が味覚受容される可能性について検討し、さらに脂肪の味覚受容機構を解明することを目的としている。しかし、脂肪を摂取する際には味覚、嗅覚、物性、代謝後の影響のいずれもが作用しており、行動レベルにおいてはこれまではそれらの総合的な評価しか得ることができなかった。そこで本研究では、まずラットが味覚で得た情報のみに基づいて脂肪を選択する系を確立し、さらにその系を用いて脂肪が味覚受容されるか検討を行った。(1)味覚情報の評価系の確立味覚情報を評価するためには嗅覚、物性、代謝後の影響を排除した系を確立することが必要である。そこで、脂肪を懸濁する溶媒に増粘多糖類であるキサンタンガムを用いることで物性による影響を排除し、摂取時間を5分間にすることで代謝後の影響を排除し、硫酸亜鉛溶液を鼻腔に流して嗅粘膜を剥離させることで嗅覚による影響を排除した。一般に行われる二瓶選択実験を基に上記の方法を併せ、またラットが5分間で試料を摂取するための訓練、嗅覚が確実に喪失していることを評価するために特定の臭いに対して忌避するための条件付けも併せて行うことにより、味覚情報の評価系を確立した。(2)オレイン酸に対する選択性上記の評価系を用いて食品に含まれる代表的な脂肪酸であるオレイン酸に対する選択性を調べた。ラットは0.2%以下の濃度のオレイン酸を選択しなかったが、0.5%以上の濃度のオレイン酸を選択した。
安定線から遠く離れた短寿命不安定核の製造と研究

本研究は平成3年9月初めに仙台で開催予定の「質量分離装置とその応用技術に関する第12回国際会議」に対する準備として行なわれたものであり、本国際会議の中心テ-マに的をしぼり、行なわれたものである。まずはじめに、本研究のための研究内容の詳細を定めると同時に、本国際会議の細織方針を審議するため、本研究の分担者の内から国際会議の組織委員を含む少数名(14名)より成る検討会を平成2年11月30日に仙台にて開催した。上記に基づき、分担者各自において研究を進め、その成果を持ち寄つて、「安定線から遠く離れた短寿命不安定核の製造と研究」と題する研究会を平成3年3月18、1日に仙台にて開催した。研究会参加者数は約50名、30余の研究発表会が行なわれた。予算上の制約のため当初計画の70名の参加者数には達しなかったが、第1第4のプレナリ-セッションに恒って熱心な発表と討議が行なわれた。第1セッションでは不安定核の予想される諸性質につき、主として理論的な考察が行なわれた。第2セッションでは、安定線から遠く離れたエキゾチックな短寿命不安定核を製造するために不可欠な(広議の)「オンライン質量分離装置」の日本における現状が報告され、また日本における質量分離の初期の歴史も紹介された。第3セッションではオンライン質量分離に関係する測定装置について(レ-ザ-核分光ほか)について、また最後の第4セッションでは上記にもれた装置その他について報告・討論された。この研究会は装置の現状報告(将来計画も含む)、ポイントとなる核物理の現状と目標にも配慮したものであり、大変ユニ-クな試みであり、大きな成果が得られたものと思われる。以上のように、本番の国際会議に似た形式の研究会を行うことが出来、この分野に大きな刺激を与えたとともにここに国際会議に対する(研究面での)準備が完全にととのったと云える。