hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
製品の長期使用を促すことを目的とした複合材料の混練技術確立

本研究課題では,プラスチックの充填材であるフィラーに着目し,熱可塑性樹脂にフィラーを混練することで,その質感を変化させ,生活者に製品の長期利用を促すようなプラスチック材料を提案することを試みた.フィラーには,プラスチックとは異なる複数の天然材料や金属粉末等を用い,このことが質感変化にどのような影響を及ぼすのかについて検討した.その結果,まずフィラーを混錬することで質感の印象が大きく変化することが確認できた.そしてサンプルを研削することで,いずれのサンプルもマットな質感のある独特な印象へと変化した.また研削することでフィラーの特性が一層明確になるとともに,その印象が大きく変化するものがあることが確認できた.ついで使用に伴う摩耗が質感に及ぼす影響を明らかにする目的で,振とう機を用いた摩耗実験を行い,処理前後の印象評価結果を比較した.これにより,無機材料粉の質感変化と比較すると,和紙を混練したサンプルでは,より大きく質感が変化することが確認できた.得られた結果は以下のように要約できる.金属材料粉を混練したものは,表面処理により派手さ感が変化する.また和紙を混練したものは,研削や表面処理によって新品感や硬軟感が大きく変化する.さらなる長期使用により繊維が露出すれば,経時変化に伴う質感変化が大きくなることが期待できる.そして,無機材料粉を混練したものは,研削によって新品感や硬軟感が変化する.以上の結果から,従来のプラスチックは劣化や塗装の剥がれ等の経時変化によって質感が低下してしまうのに対して,フィラーを混練したプラスチックは,使用に伴う経時変化によって新たな質感へと変化することから,生活者に製品の長期利用を促す可能性が示唆された.平成30年度が最終年度であるため、記入しない。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。本研究では,プラスチックの充填剤であるフィラーに着目し,生活者に製品の長期使用を促すようなプラスチック材料を開発することを目的としている。そこで本年度は長期使用に伴って質感が向上するようなサンプルの作成を試みた。作成したサンプル群は,三つに大別できる。一つはシリコーン樹脂を母材としたものである。この樹脂には弾性があり,大きく変形させることができる。もう一つは,シリコーン樹脂のような弾性はないが,硬度の高い不飽和ポリエステル樹脂を母材としたものである。最後は,熱可塑性樹脂のポリプロピレンを母材としたサンプル群である。熱硬化性樹脂を用いた場合は,母材に金属やセラミックス,石材粉などを混入し撹拌した後に型に入れて硬化させた。これにより,いずれの熱可塑性樹脂に混入した場合でも,セラミックス系材料や石材をフィラーとした場合は濡れたような艶やかな外観へと変化していくことが確認できた。ついで,作成したサンプルの質感を被験者実験によって評価した。被験者実験は,視覚情報のほかに触覚的な情報を加えた場合とそうでない場合の2つの条件下で実施した。これにより視覚のみの場合と触覚情報を加えた場合では,その評価構造が異なることが定量的に把握できた。また,好ましさの評価と質感の評価結果との対応関係を検討したところ,被験者群を三つに大別することができた。このことは,熱硬化性樹脂にフィラーを混合させて質感評価を向上させる方法が,複数通りあることを示唆している。最後に,熱可塑性樹脂を母材として,フィラーの充填率を変化させたサンプルを作成した。そして外観の評価を行い,充填率と質感の対応関係を把握した。本研究課題は,充填剤であるフィラーに着目し,生活者に製品の長期使用を促すようなプラスチック材料を開発することを目的としている。今年度は樹脂とフィラーの組み合わせを中心に検討を実施した。まず均一に混練する技術を獲得するために,ポリエチレン,ポリプロピレン,ポリカーボネートの3種類の熱可塑性樹脂を用いて,これらと金属粉末とを混練した。これは混練後に均一に混練されているか否かが,視覚的に判断できるためである。また樹脂はペレット状のものと粉末状のものを用いた。試行錯誤の結果,均一に混練するための技術はほぼ獲得できた。これと同時に,均一に混練されない場合でも,それが無塗装プラスチックの特徴の一つとなる可能性が示唆された。ついで,フィラーの大きさを変化させた場合にどのような印象が得られるかを明らかにするために,金属粉や顔料を混練した樹脂に,混練できないような大きさの金属フィラーを加えた円盤状サンプルの制作を試みた。ついで,成型後のサンプルを研磨することによって,摩耗による質感の変化を確認した。これにより樹脂と混入するフィラーの表面処理と材質のいずれも,質感変化に大きな影響を及ぼすことが示唆された。フィラーを混練した樹脂は,その質感評価を行うために円盤状形状と卵型形状の2種類に成形した。円盤型形状は熱風乾燥器と金型を用いて作製し,一方の卵型形状のサンプルは,導入した手動式射出成形機によって作製した。最後に,作成したサンプルを対象とした被験者実験を実施し,その印象を明らかにした。本年度,挑戦的萌芽研究でも課題が採択されたことに伴って,導入を予定していた手動式射出成形機に,ペレットを作製する装置を加えることができた。その一方で,成形機の製造にはより多くの時間が必要となった。そのために納品が遅れ,ようやく3月上旬に成形機が設置された。

そのため本課題での卵型形状のサンプル作製に遅れが生じることとなった。ポリプロピレンと銅や鉄などの金属粉,珪藻土をはじめとするセラミックス粉,そして4種類の和紙繊維とを混練することを試みた.いずれの場合も,樹脂とフィラーの割合を,重量比で1:2,1:1,2:1の割合に変化させながら混練した.今回用いたフィラーでは,いずれについて均一に混練することができた.混練に必要なトルクに着目すると,特に和紙繊維を混入した場合は,和紙繊維の割合が高いほど,低いトルクで混練可能で,エネルギーが少なくて済むことが示唆された.一方で,並行して実施している手動の射出成形では,和紙繊維の割合が高いほど粘度が高くなり,成形に大きな力を必要とすることが示されている.和紙繊維を混練したポリプロピレンにおいては,加熱によって体積が増加することから,このこととも関係している可能性が示された.混練を終えたそれぞれのプラスチックは,例えば,金属粉を入れたものは特有の冷たさを有しまた重く,セラミックス粉を入れたものは光沢がなく乾燥した印象がし,和紙繊維を入れたものはその繊維を感じられるものとなり,フィラーを樹脂に混練することによる大きく質感が変化することが確認できた.またフィラーの割合が大きいほど,プラスチックとは異なる質感へと変化することが明らかになった.そして,それらは冷たい感じがするプラスチックであったり,セラミックスのようなプラスチック,あるいはさらに自然に近いプラスチックというようなフィラーと母材の中間に位置する質感を有しており,これまでに経験したことのない質感となることが確認できた.質感変化と同時に,フィラーの割合が高くなるほど,その強度が減少していくことが示唆された.混練しただけでは,強度を定量的に確認することができないので,次年度以降には試験片を制作して,その強度を測定する必要がある.母材となる樹脂をポロプロピレンのみに限定して,これに金属粉,セラミックス粉,和紙繊維などの複数種類のフィラーを混練することを試みたところ,いずれについても均一に混練することができた.またフィラーの特性を反映した明確な質感変化が確認できた.これまでの検討によって金属粉や無機材料粉,和紙繊維をフィラーとしてポリプロピレンに混練するための各種条件が把握できている.そこで今年度は,プラスチックの外観変化に加えて,フィラーが有する香りや手触りに注目して検討を行った.まず複数種類の材料をフィラーとしてポリプロピレンに混練した場合の外観の印象変化について検討した.色鉛筆やカラーホイル折り紙などといった複数種類の材料から成る製品を粉砕機によって粉砕しポリプロピレンに混練した.そして成形したサンプルを被験者に提示し,得られた発話をテキスト分析によって集計した.その結果,色鉛筆や和紙を混練したものは自然物のように見えるといった回答が多いことが判明した.以上の結果から,木粉や和紙繊維はテクスチャを造り出す役割を果たすことが確認できた.ついで,香りを付加する,あるいは手触りの印象を変化させることを目的として,木材や茶葉,香辛料,皮革などをフィラーとして熱可塑性樹脂や熱硬化性樹脂に混練することを試みた.木材や茶葉,皮革などをミルにより粉砕し,これらを混練試験機によってポリプロピレンと混練した.これらをフィラーとした場合は,粉体ほどではないものの和紙繊維よりは容易に混練できることが確認できた.
「追いかけ鬼」が及ぼす体力・運動能力の向上効果とその指導モデルの開発

本研究の目的は、追いかけ鬼が及ぼす体力・運動能力の向上効果とその指導モデルの開発であり、一般的な鬼遊びに教授学的改変を加えた2教材を小学低学年を対象にして一定期間実施したところ、平衡性、巧緻性、敏捷性、瞬発力に向上効果が認められたため、両教材のモデルとしての妥当性が確認された。本研究の目的は、「追いかけ鬼」を一定期間実施することによる児童の体力・運動能力の向上効果を明らかにし、さらにその結果を参考にして、追いかけ鬼の指導モデルを開発することである。初年度(平成22年度)は、計画どおり、一般的な「ねことねずみ」の予備調査結果からルール等に教授学的改変を加えた「しっぽ取りねことねずみ」という教材を考案し、小学2年生(実験群32名、統制群30名)を対象に実施した。実施方法は、体力・運動能力テスト(バランス・力動的エネルギー・スピード・敏捷性・巧緻性等の6項目)-教材の実施(6日間:1日につき1人が追う3回・逃げる3回のパフォーマンス、しっぽの装着、安全地帯までの距離10m)-上記と同様の体力・運動能力テスト-質問紙調査の順であった。その結果、以下の知見を得た。1.教材実施前後の体力・運動能力テスト結果について、2群間の差の平均値の統計処理を行ったところ、全体(男女)、男子、女子では全身反応時間テストに1%、25m走に5%、男子ではケンパー跳びに5%の水準で有意な差が認められた。2.両群の教材実施前後のテスト結果については、実験群において、全体、男子では25m走に1%、女子では5%の水準で、また全体、男子、女子では、ケンパー跳び、3・5・7シャトル走、反復横とび、全身反応時間テストに1%水準で有意な差が認められた。3.これらの結果から、本教材は、6日間程度の実践でも力動的エネルギーとスピードに関わる因子及び敏捷性の向上に好ましい影響を及ぼしたといえる。また、質問紙調査の結果からもスリリングなゲームの楽しさや充実感が味わえたとの回答が多くみられたため、本教材は、学校園での鬼遊び教材として妥当であると結論できる。なお、本結果は論文としてまとめ、体育科教育に関する学会に投稿する予定である。23年度は、計画通り、具体的な追いかけ鬼として「宝運び鬼」をとりあげたが、予備調査の結果、一般的なルールだとできる者とそうでない者との間に大きな技能差が生じるため、授学的改変を加えた「修正たからじまゲーム」を考案した(1チーム5人構成、攻撃と守備の時間交代制、コートは11m×22m、守備チームは鬼ゾーン2カ所<1.5m×11m>のみ行動可、攻撃チームは腰に2本のしっぽをつけスタート地点から宝をコート後方の宝島へ運ぶ、攻撃側は時間内にしっぽを2本とも取られない限り何回でもスタート地点に戻り宝を運ぶこと可、勝敗は運んだ宝の数と獲得したしっぽの数の合計によるチーム対抗戦)。本教材を小学3年(実験群36名、統制群37名)を対象にして1日あたり20分間、6日間実施した処以下の知見を得た。1.実施前後の体力・運動能力テスト結果については、実験群において「ケンパー跳び」「反復横跳び」「全身反応時間テスト」において平均値に向上がみられ、また「ケンパー跳び」では全体及び男子に、「反復横跳び」では全体及び男子、女子において統計的に有意な差が認められた。2.本教材の特徴は一般的な宝運び鬼のルールとは異なり、宝を宝島へ運ぶというストーリー性の導入、運んだ宝の数と獲得したしっぽの数の合計をチームで競う対抗戦の導入、攻撃側の行動を保障するために防御側が行動できる空間上の制約ルールの導入であった。質問紙調査の結果、夢中になれる楽しさについて回答する児童が多かったことからも、学校や幼稚園では、未分化遊びの一般的な宝運び鬼ではなく、本教材のような教授学的改変教材を導入することが妥当である。本研究の目的は、追いかけ鬼を1どの程度の量と期間、実施するといかなる体力・運動能力に効果があるのかを明らかにすること2指導モデルを呈示することであった。本年度は、未分化な遊びだと児童の間に活躍できる者とそうでない者の差が生じることから、児童全員の参加の保障と興味関心の持続をねらいとして、場(空間)とルールに教授学的改変を加えた追いかけ鬼を策定・実施した。具体的な教材名、指導方法、期間、体力・運動能力の向上効果は以下のとおりである(対象者は小学低・中学年)。1.「しっぽ取りねことねずみ」1しっぽをつける(勝敗の明確化)2対戦相手を変える3取ったしっぽの数をチームで競い対抗戦とする(集団の凝集性)4実施回数は1人当たり6回(追う3回&逃げる3回)5安全地帯までの距離は10mが妥当(10mより長または短の場合ゲームの緊迫性が希薄化)

6実施期間は1週間以上行うことが妥当7体力・運動能力については、25m走、3・5・7シャトル走、全身反応時間テストに遊び前後に統計的に有意な差が認められたことから、瞬発力、敏捷性、巧緻性の向上が期待できる。2.「改良たからじまゲーム」15人対5人の対抗戦211×22mのコートに鬼ゾーンを2ヶ所設定(1.5×11m/鬼2人・3人)3鬼は鬼ゾーンでしか行動できない4冒険チームは2本のしっぽを腰につけ鬼ゾーンでしっぽをとられることなく30秒以内に宝(紅白玉)をゴールの宝島に運ぶ5冒険チームはしっぽを2本取られなければスタート地点へ戻り何回でも宝を運ぶことができる6勝敗は各チーム2回の冒険で運んだ宝の数の合計で決する7実施期間は1日当たり20分間程度1週間以上行うことが妥当8体力・運動能力については、ケンパー跳び、反復横跳びに遊び前後に統計的に有意な差が認められたことから敏捷性、巧緻性、平衡性の向上が期待できる。1.計画通り22年度は二人組鬼の中の「修正ネコとネズミ」、23年度は宝取り鬼及びボール運び鬼の中の「修正宝運び鬼」を考案・実施し、両者が児童の体力・運動能力の向上に好ましい影響を及ぼしたことが明らかとなった。2.「指導モデル試案」は作成済みであり、24年度ではその妥当性の検証を行った後に指導モデルを確定する。24年度が最終年度であるため、記入しない。1.「指導モデル試案」をこれまでと同様の方法で実施・測定し、検証する。2.各教材の目的、ルール、コート(場)、方法、1授業あたりの実施時間、1単元あたりの実施期間について検討を加え、「指導モデル」を確定する。3.「指導モデル」では、小学校教諭や幼稚園教諭がわかりやすく、見やすく、指導しやすいように、写真、図、教具の作り方も加えたパンフレット状の「指導書」版を作成する予定である。
胆汁酸およびアルコールが食道扁平上皮発癌に及ぼす影響

アルコールは食道扁平上皮癌の高リスク因子だが、発癌プロセスは十分に解明されていない。今回、我々は食道内に逆流した胆汁酸がアルコールの浸透作用により食道扁平上皮の基底層細胞まで浸透し、DNA損傷を引き起こし発癌するという仮説を立てた。本研究では食道正常上皮に対するアルコールおよび胆汁酸の暴露が扁平上皮癌の発生に及ぼす影響を、Organotypic培養・オルガノイドなど3次元培養を用いて立体的な細胞生物学的変化について検証し、食道扁平上皮癌の高リスク患者に対する硫酸コレステロールの予防的治療応用を探索する。
小学生を対象とした性犯罪防止教育プログラムの作成

本研究では、子どもを性犯罪から守るための方策のうち、子どもに対して教育的な介入をする方法に焦点を当てて研究を行った。今回の研究においては犯罪行動の特性、犯罪者の特性、犯罪場所の特性、犯罪についての一般の人のステレオタイプ認知、保護者の要望などを調査し、それに基づいたエビデンス-ベースドな方法で教育プログラムを作成した。また、エビデンスに基づいた防犯教育プログラムを作成するための具体的な手順と枠組みを示した。子供に対する性犯罪防止プログラムを作成するにあたって,本年は子供に対する性犯罪者についての国外の研究について網羅的なサーベイを行った。とくに重点的に検討したのは,性犯罪者の手口の問題である。アメリカの性犯罪者の手口と本邦における性犯罪者の手口を文献および警察資料の分析から洗い出し,以下の3つのタイプに分類した。1仲良し型A(孤立した子供に長期的に接近するもの),2仲良し型B(言語的に巧みに子供を誘い出すもの),3連れ去り型(強引に車などに乗せたり,凶器を使って子供を連れ去るもの)。次に,これらの手口について従来の防犯手法,たとえば,防犯ベルや「知らないおじさんについて行かない」という教育が効果があるのかについて検討した。その結果,従来の防犯手法では,これらの犯罪に対して十分な防衛ができないことがわかった。たとえば,防犯ベルに関しては仲良し型に関しては「だまして連れ出す」以上,ならすタイミングがつかめないし,また「連れ去り型」の現実の手口では防犯ベルを物理的に鳴らすことはできないということがわかった。次に,子供に効果的な防犯手法を教育するための前提として「犯罪についてどの程度のことを子供に教えるべきか」という間題がある。とくに子供が巻き込まれる犯罪は性犯罪が多いためにこの範囲は性教育とも絡んでくる問題である。そとで,板橋区のPTA対してアンケート調査を行った,その結果,健全な性教査を行うことが基本として必要であるが,性犯罪については具体的にどのような人が犯人で,どのような手口で犯罪が行われ,どのようなことをされるのか,について小学校高学年生には教えるべきであるという結果が得られた。これらの結果をふまえて,具体的な小学生向けの性犯罪防止プログラムのカリキュラム作成を次年度以降,行っていくつもりである。小学校高学年向けの性犯罪防犯教育プログラムを作成するに当たって、次のような方向からの研究を行った。1,犯人の行動に関する研究子ども(特に小学校高学年)に対する性犯罪者の行動パターンについての従来の研究を網羅的に収集し、整理した。その結果をもとにして、子ども(主に小学校高学年児を対象)に対する性犯罪の行動のカテゴライゼーションを行った。本研究で示したカテゴリーは以下の通りである。露出犯タイプ、・福祉犯罪勧誘タイプ、・非行タイプ、・強制わいせつタイプ、・ストレンジャーレイプタイプ、・交際相手によるレイプ、・交通機関内での痴漢、・性的虐待タイプなどをあげ、それぞれの行動パターンと対処パターンを明らかにした。本研究では、,主に強制わいせつタイプとストレンジャーレイプタイプを対象にすることにした。ただし当初想定していなかった非行タイプと交際相手によるレイプが数としては相当数みられる可能性があるため、来年度の研究ではこれらのタイプについても取り扱う事が必要であることがわかった。昨年度の研究成果から、コンピューター性犯罪への対処の必要性が浮かんできたが、この問題に関しては上記のカテゴリー化に統合された。この研究成果を元にして、犯人の行動にマッチしたエビデンスベースドな防犯プログラムを作成した。2,子どもの防犯行動に関する研究本研究が従来の防犯教育の問題点を是正するという意味を持つため、その前提として現在行われている子どもに対する防犯教育に関する書籍や資料を網羅的に収集し、その傾向をつかんだ。その結果、従来の防犯教育には矛盾した指示や犯人の行動にマッチしていないルールが多数存在することがわかった。この点についての資料を作成した。本研究は、子どもを対象とした性犯罪から、子ども守るための手法のうち、子どもに対して介入する方法について検討することを目的とするものであった。具体的には、子ども自身の防犯スキルを向上させるための、教育プログラムを作成する。本年度は研究の総括、具体的な防犯プログラムの作成、及びその評価に関する研究を行った。第1に子どもに対する性犯罪者の行動パターンについての国内外の研究や警察データの分析よりその犯行パターンを把握した。とくに常識と異なっている知識についての情報を整理した(犯人の属性、犯行時間など)。第2にこれらの情報を示した上で、子どもに対してどのようなタイプの防犯教育が必要なのかについて、小学生、中学生の子供を持つ親に対してアンケート調査を行い、分析を行った。因子分析の結果、性犯罪についての知識一般、インターネットの性情報、加害者についての知識、ハラスメントに関する因子が抽出され、これらの因子と調査協力者の属性の関連について分析を行った。また、教育プログラムに組み入れるコンテンツと、そのバランスについて考察した。第3に、従来の子ども向け防犯図書のコンテンツを系統的に分析し、その問題点について明らかにした。とくに、エビデンスの存在しない項目、大人との信頼関係を崩す可能性のある項目を系統的に抽出した。

これらの前提をもとにして、小学校6年生向けの防犯教育プログラムと、小学校の子供を持つ親向けの防犯教育プログラムを作成した。さらにこのプログラムをインターネットを通じてダウンロード可能なようなプログラムを作成した。
椎間板変性に対する脊索性髄核の役割

脊索細胞を含む脊索性髄核は椎間板組織の恒常性を保つ為に重要な役割を担い、脊索細胞が髄核から消失すること、すなわち脊索性髄核から線維軟骨性髄核への移行が細胞外基質代謝に影響を及ぼすと仮定し研究を行ったとろ、脊索性髄核はTGF-β1とTIMP-3を発現することによって椎間板の恒常性維持に寄与している可能性が示された。また、脊索性髄核の終末期にはTGFβなどのサイトカインの低下にともなうADAMTS4/TIMP-3比の不均衡が基質代謝に変化を及ぼし線維軟骨性髄核に移行する可能性が示された。椎間板変性のメカニズムには不明な点が多いが、人では脊索性髄核から線維軟骨性髄核に移行する10歳代から椎間板変性が生じることが判明している。われわれは脊索性髄核が椎間板変性に対して抑制的に働く機能を有している可能性が高いと考え、その機能について家兎椎間板を用いて、脊索性髄核の役割を組織学的、分子生物学的手法を用いて検討してきた。それらの基礎的データをもとに、臨床的データの解析を行い椎間板変性に関連する因子の同定を行う。4週齢および160週齢の家兎を使用し、経年的組織学的変化の半定量的評価を行った。また脊索細胞の有無、比率を検討した。TIMP-3の免疫染色およびTIMP-3,ADAMTS4,5,TGF-β1の発現をRT-PCRを用いて評価した。またTGF-β1およびIL-1β刺激培養下でのTIMP-3およびADAMTS4の発現をRT-PCRで評価した。4週齢の家兎椎間板はヒトでは胎児から2歳に相当し、160週齢の家兎は11歳から16歳に相当した。160週齢の髄核では細胞数の減少が認められ、髄核における脊索細胞の比率は66%であった。TIMP-3免疫染色では、4週齢の髄核および線維輪細胞の両方でTIMP-3が陽性であったが、160週齢ではTIMP-3の染色を認めなかった。4週齢のTGF-β1、TIMP-1,2,3,mRNAの発現は髄核において線維輪よりも有意に強く発現していた。TGF-β1とTIMP-3mRNAは4週齢と比較して160週齢において有意に低値を示したが、ADAMTS4のmRNAの発現は4週および160週齢で明らかな差を認めなかった。ADAMTS5のmRNAは両群とも検出されないかった。TIMP-3のmRNAの発現はTGF-β1添加により容量依存的に増加したが、IL-1βの影響は受けなかった。一方、ADAMTS4のmRNAの発現はTGF-β1添加の影響を受けなかったが、IL-1β添加によって増加した。以上の結果より、家兎椎間板組織においても加齢によりヒトとほぼ同様な組織学的変化が生じ、160週齢の家兎椎間板組織には脊索細胞が残存するものの、その数は著明に減少し、脊索性髄核から線維軟骨性髄核への移行時期と考えられた。脊索性髄核にけるTIMP-3の発現は160週齢において4週齢と比較して有意に少なく、その一因としてTGF-β1の発現低下が考えられた。脊索性髄核から線維軟骨性髄核の移行期には、ADAMTS4の発現上昇が生じる以前にTGF-β1の低下に伴うTIMP-3の減少が生じ、ADAMTS4/TIMP-3比の不均衡が生じる可能性がある。したがって脊索性髄核はTGF-β1とTIMP-3を発現することによって椎間板の恒常性維持に寄与している可能性があることが示唆された。細胞分化、粘液変性、クレフト形成、顆粒状変化の有無について検討を行ったところ、4週令の椎間板組織は人間と比較して細胞分化(0-1ヵ月)、粘液変性(胎児)、クレフト形成(1ヵ月から2歳)、顆粒状変化(0-1ヵ月)に相当した。一方160週令の家兎は、細胞分化(11-20歳)、粘液変性(11-16歳)、クレフト形成(21-30歳)、顆粒状変化(11-16歳)に相当すると結論つけた。また脊索細胞の有無、比率を検討したところ4週令のウサギでは7検体中全例で脊索細胞を認めたのに対して、160週令では7検体中4検体で脊索細胞が認められたが、その割合は減少し、髄核における脊索細胞の比率は66%であった。昨年までのTIMP3ADAMTS

4, TGF結果を併せて考えると、家兎椎間板組織においても加齢によりヒトとほぼ同様な組織学的変化が生じ、160週齢の家兎椎間板組織には脊索細胞が残存するものの、その数は著明に減少し、脊索性髄核から線維軟骨性髄核への移行時期と考えられた。脊索性髄核にけるTIMP-3の発現は160週齢において4週齢と比較して有意に少なく、その-因としてTGF-β1の発現低下が考えられた。脊索性髄核から線維軟骨性髄核の移行期には、ADAMTS4の発現上昇が生じる以前にTGF-β1の低下に伴うTIMP-3の減少が生じ、ADAMTS4/TIMP-3比の不均衡が生じる可能性がある。したがって脊索性髄核はTGF-β1とTIMP-3を発現することによって椎間板の恒常性維持に寄与している可能性が示唆された。家兎椎間板組織には脊索細胞が残存するものの、その数は経年的に著明に減少し、脊索性髄核から線維軟骨性髄核への移行が考えられた。。索性髄核から線維軟骨性髄核の移行期には、ADAMTS4の発現上昇が生じる以前にTGF-β1の低下に伴うTIMP-3の減少が生じ、ADAMTS4/TIMP-3比の不均衡が生じる可能性がある。したがって脊索性髄核はTGF-β1とTIMP-3を発現することにより椎間板の恒常性維持に寄与している可能性が示唆された。これらの所見をもとに人椎間板組織の変性所見の画想的検討を検討を開始した。手術症例の長期的な問題点として術後の椎間板変性が挙げられるがそのメカニズムは不明な点が多い。本年度はまず画像的な椎間板変性の特徴を検出することを目的に、手術症例の長期経過における椎間板変性の特徴を検討した。腰椎変性すべり症61例を対象とし術前および術後5年時の単純X線を用いて、上位隣接椎間(L3/4)の変性を評価した。術前単純X線でL3/4高位で、L1/2またはL2/3と比較し椎間板高が20%以上減少した例、前後屈ですべりを認めた例、正面像で5°以上の楔状変形を認めた例は、術前から椎間板変性が存在すると判断し、対象から除外した。椎間板変性は、1)術前比20%以上の椎間板高減少、2)正面像で3°以上の椎間楔状化進行、3)3mm以上のすべり発生、で定義し評価した。変性発生例の平均年齢は54歳で、未発生例の55歳と比較して有意差を認めなかったが、女性(42例中10例;23.8%)は男性(19例中2例;10.5%)と比較してASDの発生率が高い傾向を認めた。ALIFおよびPLIF群でASDの発生率に有意差はなかったが、ALIF群では椎間楔状化が多く、PLIF群では椎間板高減少が多かった。ALIF群の椎間楔状化は手術侵入側と反対側の右側へL4椎体が傾斜し、L3/4椎間が代償するように楔状化していた。本年度は人椎間板変性所見の画像的検討を継続し、手術例の長期経過における椎間板変性の特徴を検討した。L4変性すべり症で5年以上経過観察可能であった72例を対象とし、術前、術後5年時の単純X線を用いて、上位隣接椎間(L3/4)の画像上の隣接椎間病変(ASL)を評価した。ASLは3mm以上のすべり進行または術前比20%以上の椎間板高減少と定義した。72例中14例(19%)にASLが発生した。ASL、あり群は、平均56歳、性別(男0例,女14例)、術式(ALIF7例,PLIF7例)、椎弓傾斜角119±4゚、術前の椎間板変性(あり8例,なし6例)、固定椎間前湾角15±7゚、固定椎間高差2.2±3.1mmであった。ASLあり群はなし群と比較し女性(p<0.01)および術前の椎間板変性あり(p<0.001)が有意に高かった。過去にASLに関与すると報告されている項目のなかで、L4変性すべり症固定術後のASL発生に最も影響を及ぼす因子は、術式や手術手技に関連した因子ではなく、術前から存在する椎間板変性と性差が関与していた。
高効率メカノケミカルプロセスによる高密着性DLC皮膜の迅速創製

機械振動加速されたボールの繰り返し衝突によってメカノケミカル効果を高効率に発現させる新規プロセス(ボールインパクト法)を開発し, DLC皮膜の形成を試みた。またプロセス条件最適化のために,離散要素法に基づくシミュレーションモデルの開発を行った。実験装置の運転負荷上の制限により,行った実験範囲ではDLC合成を確認できなかったが,計算により,振動振幅と周波数を大きくすることで最大接触応力を3倍以上に増やす条件を導くことができた。本研究では,通常プラズマCVD(chemical vapor deposition)法など高エネルギー・高コストプロセスによって作られるDLC(diamond like carbon)皮膜を,加速されたボールの衝突によって常温・常圧条件下で誘起される瞬間的な高温・高圧反応場(メカノケミカル効果)を利用して迅速に形成することを目的とする。そのために鉛直方向に高速振動加速したボールによって繰り返しインパクト処理を行う新規のメカノケミカル法(ボールインパクト法)を提案し,密着性の高いDLC皮膜の創製を目指すと共に,数値シミュレーションによってプロセス条件の最適化を図っている。本年度はまず,ボールインパクト法の数値シミュレーションモデルを完成させた。離散要素法に基づき,振動チャンバー内のボールに働く全ての力を解くことで,ボール間およびボール-壁間衝突を含むボール群の挙動をシミュレートすることができた。チャンバー内壁に対する衝突時の接触応力の大きさに着目しし,パラメータであるボール充填率および径の与える影響を定量的に予測した結果,ボールインパクトを大きくするためには,1mm程度の小さなボールを数%入れる条件が最も合理的であることを導き出した。この結果に従い,チャンバー内をメタンガス雰囲気としてボールインパクト処理を行ったが,今回の実験条件の範囲ではDLCの生成を確認することができなかった。主原因として実験装置にかかる運転負荷上の制限(最大加振力3000N以下)が挙げられ,装置構造を見直す必要性を指摘した。なおシミュレーション条件には制限がないため,特に振動振幅を大きくとることで,到達する最大接触応力を数倍に増やすことが可能であることを示した。
脱メチル化酵素LSD1をターゲットとした新規分子標的治療薬の開発と応用

本年度は昨年までに施行した免疫組織学的検討に追加し、術後経過が5年を超えた2013年度の50例の肝細胞癌手術検体を用いてさらに免疫組織学的検討を行った。1次抗体はこれまで同様abcam社のAnti-KDM1/LSD1 antibody-ChIP grade (rabbit polyclonal, Cat#ab17721)を使用した。染色強度と割合のscoringに関してもこれまで同様に決定し、当科で作成している肝細胞癌databaseと突合し、肝細胞癌におけるLSD1の関与を臨床的に検討した。LSD1の高発現群では、5年全生存率・無再発生存率両者において、低発現群と比較して著明に予後不良であった。さらに多変量解析において、LSD1高発現は5年全生存率・無再発生存率において独立した予後不良因子であった。これらの結果より、肝細胞癌におけるLSD1の臨床的寄与を証明することができた。LSD1はこれまでの検討より、細胞周期におけるG1-S期の移行に関与し、クロマチン構造の変化(Open/Close)に影響していることが判明している。今後LSD1阻害剤(例:SP2509(Cayman Chemical company)など)を用いて、より臨床実装に近い機能解析を進めていく予定である。具体的には肝細胞癌細胞株やマウスを用いた肝細胞癌モデルを構築し、LSD1阻害剤の抗腫瘍効果を確認していく。またこれらの結果については、学会発表および論文発表として公表し、世に知らしめていく予定である。2000年1月2011年12月に当科で施行した331例の肝細胞癌症例を対象として、抗LSD1抗体を用いて免疫組織学的検討を行った。染色強度と割合のscoringに関しては既報を参考に決定した。決定したスコアを当科で作成・保有しているdatabaseと突合して検討し、詳細な統計学的解析を行った。これによってLSD1の発現量と関わる因子を同定した。当科で作成しているdatabaseは患者因子・背景肝因子・腫瘍因子ならびに手術時のdata・追加治療・予後調査を厳密に行ってきたので、これらを用いて解析を行うことができた。さらに詳細な統計学的検討を続けている。これによりLSD1の臨床的寄与を検討することができ、LSD1阻害剤を使用する際の、最も適切な使用条件(術前neo-adjuvant療法として、あるいは術後補助療法として、また再発high risk群への使用など)を検討することができると考えている。LSD1の免疫組織学的検討・統計学的解析を行うことができ、ほぼ研究計画通りに進んでいると考えている。<免疫組織学的検討>本年度は昨年までに施行した免疫組織学的検討に追加し、術後経過が5年を超えた、2012年度までの62例の肝細胞癌手術検体を用いて免疫組織学的検討を行った。染色強度と割合のscoringに関してもこれまで同様に決定し、当科で作成しているdatabaseと突合して検討し、統計ソフトとしてJMP ver.12を用いて多変量解析を行い、LSD1の発現量と関わる因子を同定した。当科で作成しているdatabaseは患者因子・背景肝因子・腫瘍因子ならびに手術時のdata・追加治療・予後調査を包含しており、多岐にわたる解析を施行しえた。今回肝細胞癌におけるLSD1の臨床的寄与を検討することができた。LSD1阻害剤を使用する際の、最も適切な使用条件(術前neo-adjuvant化学療法として、あるいは術後補助化学療法として、また再発high risk群への使用など)を検討することができると考えられる。LSD1の臨床病理学的解析を行うことができ、一定の結果を示すことができたため、順調に進展していると考えられる。

具体的には肝細胞癌細胞株やマウスを用いた肝細胞癌モデルを構築し、LSD1阻害剤の抗腫瘍効果を確認していく。またこれらの結果については、学会発表および論文発表として公表し、世に知らしめていく予定である。研究計画通り、臨床データから導き出された結果を基に、細胞実験を含めた基礎実験を進めていく予定である。
緑膿菌の抗菌薬抵抗性に対する新規化合物の作用機序の解明

緑膿菌クオラムセンシングのシグナル分子オートインデューサーのアナログである新規化合物AIA-1が、緑膿菌の抗菌薬抵抗性を減少させること、その作用機序の一つとして、rpoS遺伝子の発現を抑制することを見出した。そこで本研究では、rpoS遺伝子の制御機構を明らかにすることを目的とした。rpoS遺伝子の制御機構を明らかにするため、rpoSプロモーターの下流に発光遺伝子を組み込んだ株を作製した。その株を親株とし、トランスポゾン挿入株を作製し発光強度の測定を行った結果、親株に比べ発光強度が著しく減少した株が得られた。これらの株を用いてトランスポゾン挿入部位を同定した結果、1株はladS遺伝子、もう1株はgacS遺伝子という二成分制御系に関連する遺伝子にトランスポゾンが挿入されていることが分かった。このことから、rpoS遺伝子の発現に二成分制御系が関与している可能性が示唆された。また、AIA-1以外の新規化合物15種のうち、抗菌薬との併用により効果が得られた化合物1種において作用機序を検討した結果、AIA-1同様rpoS遺伝子の発現を抑制していることが明らかとなった。以上の結果から、新規化合物2種は二成分制御系機構を介してrpoS遺伝子に作用し、抗菌薬抵抗性を減少させている可能性が示唆された。緑膿菌以外の細菌に対する併用効果の検討では、カルバペネマーゼ産生遺伝子を有する肺炎桿菌を用いて微量液体希釈法による感受性試験を行った結果、最小発育阻止濃度(Minimum Inhibitory Concentration: MIC)が減少することが確認された。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。そこで本研究では、rpoS遺伝子の制御機構を明らかにすること、及びその他の作用機序を解明することを目的とする。加えて、緑膿菌以外の細菌に対する効果を検討する。まず一つ目に、rpoS遺伝子の制御機構を明らかにするため、rpoSプロモーターの下流に発光遺伝子を組み込んだ株を作製した。その株を親株とし、トランスポゾン挿入株を作製し発光強度の測定を行った結果、親株に比べ発光強度が著しく減少した株が5株得られ、これらの株はrpoS遺伝子の発現が抑制されていると考えられた。その他の作用機序の解明については、平成29年度において候補として検討した遺伝子では差が見られなかったため、候補を追加し検討する。緑膿菌以外の細菌に対する併用効果の検討では、カルバペネム系抗菌薬耐性腸内細菌科細菌(Carbapenem-resistant Enterobacteriaceae: CRE)を用いた微量液体希釈法による感受性試験において最小発育阻止濃度(Minimum Inhibitory Concentration: MIC)が減少することが確認された。このことから、AIA-1はCRE感染症に対し有効である可能性が示唆された。その他の検討項目として、AIA-1以外の新規化合物15種類を用いて抗菌薬との併用効果を検討した結果、1種の化合物がAIA-1と同様の効果を有することが見出された。この化合物の作用機序がAIA-1と同じであるか検討する必要がある。rpoS遺伝子制御機構の解明において、トランスポゾンライブラリを作製し発光強度が減少した株を見出したが、トランスポゾン挿入部位の決定には至っていないため、早急に決定する必要がある。また、rpoS遺伝子以外のターゲット遺伝子の探索においては、候補とした遺伝子の欠損株における殺菌試験では、野生株との差が見られなかったため、更なる候補遺伝子の追加が必要である。現在得られているトランスポゾン挿入株において、トランスポゾンの挿入部位を決定し、欠損株の作製を行う。

またRNA-seqなどの結果から候補となる遺伝子を決定し欠損株を作製し殺菌試験を行う。CREに対する検討においては、菌種及び株数を増やし薬剤感受性試験を行う。新たに併用効果が見出された1種の化合物においては、AIA-1の作用機序解明方法に準じた実験を行い、作用機序を明らかにする。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。
ミトコンドリアDNA多型による混合斑痕試料からの個人識別方法の確立

顕微鏡下にてトランスファーした1個の細胞から、直接ミトコンドリアDNAのHV1およびHV2を増幅させ,シーケンスにより配列を決定したところ、対象者本人のDNA型が検出された。また、1個の細胞からDNAを抽出し、PCR増幅を行ったところ、ミトコンドリアDNAの目的の範囲が増幅され、対象者本人のDNA型を検出した。DNAによる法医学的検査における個人識別には主に常染色体およびY染色体のSTR多型検査ならびにmtDNA多型検査が用いられている。しかし、犯罪現場等に遺留された血痕や唾液・精液斑についてDNA鑑定を行う場合、一個人に由来する試料なのかあるいは複数人に由来する試料なのか、DNA鑑定の結果からは判断が困難な場合がある。そこで、斑痕試料から1個の細胞を採取し、斑痕試料からのDNA鑑定における精度を向上させるための方法を確立する。1アプリケーターチップの一部をElution Buffer(1ml)に浸すことで細胞を浮遊させ,溶液をシャーレ中に分注し,倒立型リサーチ顕微鏡CKX41N-31PHP (OLYMPUS),CellTram vario (eppendorf),TransferMan NK2 (eppendorf)を用いて細胞1個を採取した。採取した細胞をTks GflexTM DNA Polymerase (TaKaRa)を用いて直接ミトコンドリアDNAのHV1およびHV2を増幅させ,シーケンスにより配列を決定したところ対象者本人のDNA型を検出した。2斑痕試料からトランスファーした1個の細胞からミトコンドリアDNAおよび核DNAを抽出し,1個の細胞からの検査が可能であるか試みた。トランスファー細胞からQIAamp DNA mini kit (QIAGEN)を用いてDNAを抽出し、PCR増幅を行ったところ、目的の範囲が増幅され、対象者本人のミトコンドリアDNA型を検出した。今回の方法により、トランスファーした1個の細胞からのミトコンドリアDNA型の検出、および抽出によるDNA型の検査が可能であることが確認され、これからの個人識別にとって応用価値が極めて高いことが明らかとなった。犯罪現場等に遺留された血痕や唾液・精液斑についてDNA鑑定を行う場合、一個人に由来する試料なのかあるいは複数人に由来する試料なのか、DNA鑑定の結果からは判断できない。DNA型を構成する数種類の変異が検出されたに過ぎないのである。人権擁護の観点からも決して冤罪を看過してはならず、確度の高い鑑定法が求められる所以である。斑痕試料から細胞を確実に採取しDNA鑑定を行うことができれば、問題は解決するものと思われる。そこで、混合斑痕試料から細胞を浮遊させ、顕微鏡下で細胞(mtDNA)を確実に採取し、斑痕試料からのDNA鑑定の精度向上を図り、かつマイクロマニピュレーションテクニックを用いた方法論を確立する。今年度は被験者複数人から唾液を採取し、まずは単独の試料からの採取を試み、装置の技術を取得し、1細胞からのmtDNAの増幅および塩基配列の検査工程を構築する。次いで2名の唾液で混合唾液を作製し、顕微鏡下で細胞(mtDNA)を複数個トランスファーさせ、mtDNAの型判定を行う。その混合唾液で斑痕試料を作製し、試薬に浸透させ浮遊させた細胞を複数個トランスファーさせ、mtDNAの型判定を行う。さらに、被験者3名以上の唾液で混合斑痕を作製して同様の検討を行い、混合斑痕からのDNA鑑定による個人識別を確立することを目標として行ってきた。浮遊させた細胞(mtDNA)を顕微鏡下で浮遊細胞をトランスファーする方法は習得できたが、1細胞からmtDNAを増幅する事が難しく、精製方法やPCR条件等、様々な条件下で適切な方法を検討している。当初の目的のうちトランスファー装置による細胞の採取は習得出来たが、採取した1つの細胞からmtDNAを増幅する過程が難しく、混合試料からの識別には至っていない。23年度に引き続き、1つの細胞からのミトコンドリアDNAの増幅を試み、さらに混合試料からの識別を可能にする。ミトコンドリアDNAの検査に必要な試薬やキットの購入に使用する予定である。また、研究成果の発表を行う。次年度への繰り越しとなった7525円について、顕微鏡およびトランスファー装置購入に際し、予定金額より購入金額が抑えられたために発生したものであり、次年度における試薬やキットの購入に使用予定である。
凖フロベニウス分裂多様体に関する研究

正標数の代数閉体上定義された代数多様体には、frobenius射と呼ばれる自己射が存在する。frobenius分裂多様体とは、このfrobenius射が構造層に誘導する射が分裂するような代数多様体である。frobenius分裂多様体はKodairaの消滅定理の成立など良い性質を持つ。準frobenius分裂多様体とは、frobenius分裂多様体の拡張概念であり、frobenius分裂多様体同様、良い性質を持つ。本研究ではこの準frobenius分裂多様体としてどのようなものがあるかを明らかにする。
ヒト心臓内幹細胞の増殖・分化誘導因子の発見と心筋分化初期プライミング因子の探索

ヒト心筋生検組織より単離した心筋分化可能な多能性間葉系幹細胞(CSC)より得たcDNAのサブトラクションスクリーニング法とディファレンシャルスクリーニング法を組み合わせる事によって、「初期プライミング因子」群の候補になりえる6因子同定した。そのなかでも、比較的新規とされる骨形成タンパク質(BMP)結合タンパク質であるcrossveinless-2(Cv2)1こ注目し解析を進めた。心臓発生過程では初期胚の側方に位置する心臓発生領域において、間葉系細胞が周囲の内胚葉/外胚葉から分泌される細胞増殖因子(BMP等)の刺激により転写因子活性を生じ、多くの遺伝子の段階的で複雑な働きが開始されることにより心筋細胞が分化するとされる。従ってBMP結合タンパク質は間違いなく重要な役割を果たしていると考えられる。Cv2についてH21年度に得られた研究成果として、(1)発生過程において2相性に発現し、BMP結合タンパク質でBMP情報伝達系の阻害物質であるNogginと同様に、Cv2がBMP情報伝達系の抑制作用を持つことを明らかにした。(2)内因性Cv2の役割を検討するために、RNAiの手法を用いて心筋細胞分化発生初期のCv2の発現を抑制したところ、幹細胞の心筋細胞への分化が著しく阻害された。(3)遺伝子レベルの検討では、当該幹細胞は心臓中胚葉に分化するよりもむしろ内胚葉に分化していた。(4)さらにCv2蛋白を外的に添加することで分化過程がほぼリバースされる事が明らかになった。以上の事より心筋細胞分化プロセスにおいて初期中胚葉誘導期にはBMP感受性の重要な過程が存在し、初期プライミング因子群の一つであるCv2はこの過程において心臓中胚葉への道標的な役割を果たしていることが想定される。これらの解析は、心筋再生医学のネックとも言えるセルソース(再生治療用細胞資源)の問題を解決する糸口を得る突破口になる可能性があると考えている。私達はヒト心筋生検組織より心筋分化可能な多能性間葉系幹細胞(CSC)の単離・増幅に成功した。この幹細胞の心筋分化効率は1-2%と低く、増殖能も遅く、世界中が心筋分化誘導・増殖促進因子を探索している。申請者らが心筋より単離成功した新規の心筋分化・増殖誘導因子(Cv2, MuRC)を中心に、初期心筋分化プライミング因子群の解析を実施した。(Cv2)cDNAサブトラクションスクリーニング法とディファレンシャルスクリーニング法を組み合わせる事によって、「初期プライミング因子」群の候補になりえる6因子同定した。そのなかでも、比較的新規とされる骨形成タンパク質(BMP)結合タンパク質であるcrossveinless-2(Cv2)に注目し解析を進めている。(MuRC)心臓Z-disk特異的に発現するmuscle-restricted coiled-coil rotein (MuRC)の解析による心筋分化誘導メカニズム解明心筋細胞のサルコメアの両端に位置するZ-discは、心筋の伸展を感知し、肥大や生存のためのシグナルを伝達し、心不全発症に重要な役割を担っている。申請者らは、成人心臓に発現している遺伝子の網羅的な探索を行い、心臓、骨格筋、血管平滑筋にのみ発現している筋細胞特異的新規遺伝子MuRCの単離に成功した。MuRCはactininの局在と一致して心筋Z-discに存在した。Tg-MuRCは著明な心筋細胞肥大と心電図上PR間隔の延長を認め、完全房室ブロックや心房細動を呈した。

さらに、MuRC-Tgは心筋間質の著明な線維化と拡張した左心室径および低下した心駆出率も示した。MuRcはZ-disk存在蛋白であるため、まずMuRc-Tgで発症した心筋肥大誘導と心房細動の原因遺伝子の同定や心不全という表現型解析のため、MuRC-Tg群とNT-g群の左房と左室のそれぞれからmRNAを回収し、マイクロアレイにて遺伝子群を網羅的に検索する。MuRCはZ-Diskに存在するので、yeast-two hybrid法にて結合蛋白も同定する。ヒト心筋生検組織より単離した心筋分化可能な多能性間葉系幹細胞(CSC)より得たcDNAのサブトラクションスクリーニング法とディファレンシャルスクリーニング法を組み合わせる事によって、「初期プライミング因子」群の候補になりえる6因子同定した。そのなかでも、比較的新規とされる骨形成タンパク質(BMP)結合タンパク質であるcrossveinless-2(Cv2)に注目し解析を進めた。心臓発生過程では初期胚の側方に位置する心臓発生領域において、間葉系細胞が周囲の内胚葉/外胚葉から分泌される細胞増殖因子(BMP等)の刺激により転写因子活性を生じ、多くの遺伝子の段階的で複雑な働きが開始されることにより心筋細胞が分化するとされる。従ってBMP結合タンパク質は間違いなく重要な役割を果たしていると考えられる。Cv2についてH21年度に得られた研究成果として、(1)発生過程において2相性に発現し、BMP結合タンパク質でBMP情報伝達系の阻害物質であるNogginと同様に、Cv2がBMP情報伝達系の抑制作用を持つことを明らかにした。(2)内因性Cv2の役割を検討するために、RNAiの手法を用いて心筋細胞分化発生初期のCv2の発現を抑制したところ、幹細胞の心筋細胞への分化が著しく阻害された。(3)遺伝子レベルの検討では、当該幹細胞は心臓中胚葉に分化するよりもむしろ内胚葉に分化していた。(4)さらにCv2蛋白を外的に添加することで分化過程がほぼリバースされる事が明らかになった。以上の事より心筋細胞分化プロセスにおいて初期中胚葉誘導期にはBMP感受性の重要な過程が存在し、初期プライミング因子群の一つであるCv2はこの過程において心臓中胚葉への道標的な役割を果たしていることが想定される。これらの解析は、心筋再生医学のネックとも言えるセルソース(再生治療用細胞資源)の問題を解決する糸口を得る突破口になる可能性があると考えている。
悪性髄膜腫における細胞内エネルギー代謝障害の解析

1悪性髄膜腫細胞株を用いて糖代謝経路を評価する。機能既知化合物のうち、代謝シフトを抑制する化合物を同定する。2PGK1の過剰発現細胞株、CRISPR-dCas9システムを用いた発現抑制株を用いて、代謝シフトの機序の評価を行う。3RIKENより購入した悪性髄膜腫細胞株であるHKBMM細胞を免疫不全マウスの脳へ移植し動物モデルの樹立を行う。4本研究で有力な薬剤候補が発見された場合、時間的猶予があれば作成した動物モデルを用いて薬剤効果を判定する。作成した動物モデルに対し、尾静脈内投与、腹腔内投与、経口投与などにより薬剤を投与し、その効果判定を生存時間解析および腫瘍の計測をもって行う。
「欧州安全保障協力機構における紛争予防措置の研究:1975年〜1955年」-紛争予防における規範とパワー-

本研究の目的は2つである。まず第一に、欧州安全保障協力機構(OSCE)の紛争予防メカニズムの歴史的発展過程を明らかにすると同時に、実際の紛争予防活動を分析することである。第二に、本研究の理論的視点は、現在アメリカの国際政治学界を中心に行われているコンストラクティヴィズムの実証可能性について分析することである。平成10年度には、本研究を一橋大学法学研究科に学位申請論文として提出して、専門家の講評を受けた。こうした専門家の講評から得た知見を可能な限り研究成果に取り入れるため、OSCEに関する図書やその他OSCEの活動している地域の政治的問題を分析した図書・論文を幅広く入手した。こうした活動から、以下の点を新たな知見として得ることができた。まずOSCEの活動は、きわめて広範囲で包括的であり、軍事力の行使を主体としたアプローチだけでは果たしえない機能をCISの対象国の民主化と安定に向けて果たしている。第二に、コンストラクティヴィズムが重視する規範は、新しい国際環境に直面したアクターが、議論を正統化する際に重要な意義を有している点も指摘した。したがって従来とは異なる国際環境の下で、多様な問題に直面しなければならない冷戦後の国際関係を分析する上で、コンストラクティヴィズムの枠組みは一定の有効性を有すると考えられる。今後とも、学術図書・論文として国内外で発表できるように努めたいと考えている。まず第一に、欧州安全保障協力機構(OSCE)の紛争の平和的処理手段と信頼醸成措置の歴史的発展過程を明らかにすると同時に、実際の紛争調停活動を分析することである。第二に、本研究の理論的視角は、現在、アメリカの国際政治学会を中心に行われているコンストラクティヴィズムをめぐる理論的論争に貢献することである。平成9年度には、主にOSCEに関する図書、その他関連する国際政治理論研究の国内外の最新研究図書及び論文を幅広く購入すると同時に、研究に必要な機材も購入してデータ処理に役立てた。また平成9年5月には、「日本国際政治学会」(於筑波大学、部会報告)で学会報告を行い、会員の講評を受けた。まずOSCEにおける紛争の平和的解決手段と信頼醸成措置の発展と紛争調停の実際という冷戦終焉後の新しい安全保障問題において、アクターの持つ規範が重要であり、また一定の条件の下で、規範は、パワーや利益が説明できない現象を説明することが可能であるという点を明らかにすることができた。さらに本研究では、紛争予防メカニズムの発展過程の歴史的検討と実際の紛争調停活動の事例に分けて論じた。紛争調停活動の事例としては、バルト諸国、ウクライナ、グルジア、マケドニア、モルドヴァでのOSCEの活動を分析したが、こうした新興独立国のアイデンティティーの形成に規範は重要な影響を与えている点が明らかとなった。
顎の発育誘導を行い術後の瘻孔発生率の低下を目指した唇顎口蓋裂補綴の臨床的研究

唇顎口蓋裂患者における構音障害の発現の割合は裂型が重度になるにしたがって多くなり、裂型が軽度であるほど、すなわち、正常な顎形態に近いほど少なくなる。正常な構音の発達は一部の音を除いて3歳でほぼ完成する。また手術の術式や手技などにもよるが裂型が重度であるほど口唇および口蓋閉鎖術後に残存する瘻孔が多く発生し、唇顎口蓋裂患者の正常な構音機能の発育を障害している。そのため口唇および口蓋閉鎖手術前の早期の顎矯正の意義は大きい。ホッツ床は短期間での顎矯正力は十分ではないためレジン床を硬口蓋にピンで留める方法を応用したLatham装置が開発されたが顎に対する侵襲が大きい。そのため当科では顎矯正が必要と考えられた症例では顎に対する侵襲の少ないnasoalveolar modeling plate(NAM)を用いている。NAMは近年開発され(Cuttingら1998、Graysonら1999)レジンの口蓋床と口蓋前提部から顎裂部の外鼻に続くワイヤーを主体としたnasal stentからなり、テープで頬部に固定する。本邦でも使用され始めている(佐藤2005)が、その有効性は十分検討されていない。今回われわれはこれまで用いてきたホッツ床よりNAMに変更することにより、口唇閉鎖手術前までに十分な顎誘導を行うことを可能とした。まだ症例数は少ないもののNAMをより早期、すなわち生後間もないころより使用するほど顎誘導が容易に行えることを確認している。NAMを使用した患児とホッツ床を使用した患児の顎形態を乳歯列の完成し構音訓練を開始する4,5歳時で比較することで瘻孔残存への顎誘導の効果や鼻咽腔閉鎖不全などの構音障害に対する顎誘導の効果を検討することが可能となる。今後さらに症例数を増やして行く予定である。