hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
微生物間相互作用を活用した医薬シーズ探索資源の高度化と休眠遺伝子活性化機構の解明

本研究では、微生物と他者との相互作用に注目し、両者を同一環境で培養する共培養法を用いる。他者による刺激により、微生物が、休眠している生合成遺伝子を活性化させることを期待し、1)新たな培養抽出ライブラリーの構築による二次代謝産物探索資源の高度化、2)共培養選択的に産生される新たな二次代謝産物の単離・構造決定、3)休眠遺伝子活性化機構の解析を進めることを計画している。本研究では、微生物間の相互作用を活用するため共培養により休眠している生合成遺伝子の活性化を行い、1)新たな培養抽出ライブラリーの構築による二次代謝産物探索資源の高度化、2)共培養選択的に産生される二次代謝産物の単離・構造決定、3)休眠遺伝子活性化機構の解析を進めることを計画している。本年度は、1)および2)に重点を置き、研究を行った。共培養には、独自に保有する、海綿などの底生海洋生物や様々な海洋環境由来の海沙から分離した2000株以上の海洋由来真菌株のうち、2014年から2016年に分離した真菌株を使用した。それら真菌株の単培養抽出物が抗菌活性および細胞増殖阻害活性を示さなかった真菌295株に関して、ミコール酸含有細菌Mycobacterium smegmatisとの共培養を行い、培養抽出物ライブラリーを構築した。得られた培養抽出物の抗菌活性と細胞増殖阻害活性を測定した結果、2株の培養抽出物に共培養条件選択的な細胞増殖阻害活性が見られた。そこで、2015年に海綿から分離した真菌Aspergillusniger 15F41-1-3株に着目したところ、生物活性以外の共培養選択的な変化として、橙色色素の産生やlinoleyl ergosterolの産生を確認した。そこで次に、細胞増殖阻害活性を指標に、A. niger 15F41-1-3株とM. smegmatisとの共培養抽出物を溶媒間分配、各種カラムクロマトグラフィーで精製を進めた。その結果、共培養条件選択的に産生される活性成分として環状ペプチドmalformin Cを単離・同定した。また、共培養選択的に産生される化合物として3種の化合物を単離した。さらに、本真菌株の二次代謝変化の機序について検討した結果、本真菌株のmalformin Cの産生には、生細菌と真菌の直接的な接触が重要であることが示唆された。当初、平成30年度の計画では、a)これまでの培養条件では生物活性を示さなかった真菌株をミコール酸含有細菌であるM. smegmatis存在下または非存在下で培養して、培養抽出物ライブラリーを作成し、共培養選択的に生物活性を有する二次代謝産物を産生する真菌株を選出すること、b)休眠遺伝子活性化機構の解明の検討(平成31年度まで)を行う予定であった。a)に関しては、培養抽出物ライブラリーの構築した後、生物活性を有する二次代謝産物を共培養特異的に産生する真菌2株を選択した。その内1株に関して、活性化合物や共培養選択的に産生される化合物の単離に至っている。b)に関しては休眠遺伝子活性化におけるM. smegmatisの役割について、直接的な接触の必要性、生存の有無の重要性、分泌される分子の重要性の3点について検討し、生細菌と真菌の直接的な接触が重要であることが示唆された。以上の結果から、研究課題は順調に進んでいたと考える。これまで、海洋由来真菌とミコール酸含有細菌による共培養により研究課題を遂行してきたが、平成30年度中に研究代表者の所属が変更したため、研究内容の変更を行うこととした。平成31年度(令和元年度)は、休眠している生合成遺伝子の活性化による新規二次代謝産物の取得を目指して、現所属研究室が独自に保有する2000株以上の日本国内より分離された放線菌等を活用した共培養を行うことで、高度化した新たな培養抽出物ライブラリーを構築する。また、培養抽出物のがんおよび感染症に関する生物活性評価、LC-MSによる網羅的二次代謝産物分析から、構築したライブラリーの有用性を実証し、さらに共培養選択的に産生される二次代謝産物の単離・構造決定を行っていく予定である。

それら真菌株の単培養抽出物が抗菌活性および細胞増殖阻害活性を示さなかった真菌295株に関して、ミコール酸含有細菌Mycobacterium smegmatisとの共培養を行い、培養抽出物ライブラリーを構築した。得られた培養抽出物の抗菌活性と細胞増殖阻害活性を測定した結果、2株の培養抽出物に共培養条件選択的な細胞増殖阻害活性が見られた。そこで、2015年に海綿から分離した真菌Aspergillusniger 15F41-1-3株に着目したところ、生物活性以外の共培養選択的な変化として、橙色色素の産生やlinoleyl ergosterolの産生を確認した。そこで次に、細胞増殖阻害活性を指標に、A. niger 15F41-1-3株とM. smegmatisとの共培養抽出物を溶媒間分配、各種カラムクロマトグラフィーで精製を進めた。その結果、共培養条件選択的に産生される活性成分として環状ペプチドmalformin Cを単離・同定した。また、共培養選択的に産生される化合物として3種の化合物を単離した。さらに、本真菌株の二次代謝変化の機序について検討した結果、本真菌株のmalformin Cの産生には、生細菌と真菌の直接的な接触が重要であることが示唆された。当初、平成30年度の計画では、a)これまでの培養条件では生物活性を示さなかった真菌株をミコール酸含有細菌であるM. smegmatis存在下または非存在下で培養して、培養抽出物ライブラリーを作成し、共培養選択的に生物活性を有する二次代謝産物を産生する真菌株を選出すること、b)休眠遺伝子活性化機構の解明の検討(平成31年度まで)を行う予定であった。a)に関しては、培養抽出物ライブラリーの構築した後、生物活性を有する二次代謝産物を共培養特異的に産生する真菌2株を選択した。その内1株に関して、活性化合物や共培養選択的に産生される化合物の単離に至っている。b)に関しては休眠遺伝子活性化におけるM. smegmatisの役割について、直接的な接触の必要性、生存の有無の重要性、分泌される分子の重要性の3点について検討し、生細菌と真菌の直接的な接触が重要であることが示唆された。以上の結果から、研究課題は順調に進んでいたと考える。これまで、海洋由来真菌とミコール酸含有細菌による共培養により研究課題を遂行してきたが、平成30年度中に研究代表者の所属が変更したため、研究内容の変更を行うこととした。平成31年度(令和元年度)は、休眠している生合成遺伝子の活性化による新規二次代謝産物の取得を目指して、現所属研究室が独自に保有する2000株以上の日本国内より分離された放線菌等を活用した共培養を行うことで、高度化した新たな培養抽出物ライブラリーを構築する。また、培養抽出物のがんおよび感染症に関する生物活性評価、LC-MSによる網羅的二次代謝産物分析から、構築したライブラリーの有用性を実証し、さらに共培養選択的に産生される二次代謝産物の単離・構造決定を行っていく予定である。
地震時および平常時の火災延焼モデルと被害軽減策に関する研究

平常時と地震時の火災を対比し、地区特性と延焼危険および地震時火災の延焼速度式について分析し、さらに、火面周長の分析や全壊率を考慮した延焼速度(m/h)の時間的変化の分析および出火原因と延焼速度の関係の考察ならびに消防水利計画や所要消防力などの検討を行った。すなわち、従来においては平常時および地震時火災の延焼状況は、平均的な面積と時間の関係として把握しているが、本年度は、これを最大および最小の予測を行って、幅をもったゾーンとして捉え、延焼促進要因や抑制要因を考慮したモデルにするとともに、一般に使われる延焼速度(m/h)および火面周長としても表現し発展させた。また、今回の阪神・淡路大震災における水道管網の被害および通水の調査資料をもとに分析を行なった。すなわち、今回の震災では完全に断水したわけではなく、消火栓より消火用の水がでた個所も存在し、その放水能力を管網計算によって検討した。その結果、地域によっては地震後1時間程度は放水可能であった箇所も存在していたことが判明した。さらに、今回の阪神・淡路大震災における火災資料調査を行い、出火・延焼状況等を把握するとともに出火・延焼に関する要因などの検討を行なった。そして、平常時と地震時火災の延焼状況を総合的に表現する手法やモデルを検討するとともに、火災延焼速度式の開発・提案を行った。最後に、平常時および地震時火災の火災安全対策の検討として、火災予防、消火、救助活動のための方策などについて考察した。
慢性活動性EBウイルス感染症における病態解析とリンホカインによる治療の検討

慢性活動性EBウイルス感染症(CEBV)4症例と対象として健康人2例、伝染性単核球症患者1例よりその末梢血単核球培養または臍帯血単核球との混合培養を行ない、リンパ芽球細胞株を樹立した。培養細胞株よりDNAを分離し、制限酵素としてBamlllまたはEcoRIを用いて処理後電気泳動し、ニトロセルロース膜に転写、^<32>Pでラベルしたプローブと反応させオートラジオグラフィーを行なった。プローベにはEBNA-2AにpM-Bamll2,EBNA-2BにpJ-HKA-7を用い、コントロールとして2AにB95-8株、Raji細胞株、2BにJijoye細胞株を用いた。CEBVから樹立された4株、対象の3体は全て2A特異的プローベと強くハイブリダイズし、EB NA-2A型であることが明らかとなった。またCEBV4株のEBVは、EBNA-1をコードするBamIII-K領域、EBNA-2をコードするBamIII-H領域、EBNA-3をコードするBamIII-E領域に欠損は認められず、B95-8細胞株や既に報告されている欧米でのCEBV症例で見出されているEcoRI-C領域の欠損も解析した本邦のCEBV4症例では認められなかった。2.CEBVの男児例についてNK活性、LAK活性を指標にrecombinat IL-2(rIL-2)を抗ウイルス剤(Ara-A)と伴に用いて治療し、rIL-2の使用によりNK活性、LAK活性が増強ささること、臨床症状の長期寛解導入が可能であったことよりCEBVの治療にはrL-2と抗ウイルス剤の併用は有効である可能性が示唆された。
労働市場と労働組織の相互作用－近代鉱山企業における技術と情報と組織

(1)国際学会における報告・論文推敲3つの査読有り国際学会において報告を行い、それぞれで有意義なコメントを得た。報告によって、研究内容、そして論文を深めることができ、学術雑誌へ投稿している。(2)資料調査および分析九州大学に2度資料調査を行っい、資料目録にない興味深い資料を発見した。単純労務謝金により史料整理・分析要員を得た。個々の労働者で推薦採用の報酬にほとんど差はなく、雇用後の在籍期間によって改めて支払われるものがあることが判明した。(3)受賞2015年度に発表した『社会経済史学』、第81巻3号、127-149頁(査読あり雑誌論文)に対して、第7回社会経済史学会賞を受賞した。1.Society of Labor Economists 21st AnnualMeetingにおいて1900年代に操業された炭鉱企業の雇用契約書を用いた推薦採用の効果について議論した研究の発表を行った(査読あり、ポスター発表)。推薦採用については友人や親戚を通じた紹介によって雇用関係を締結すること、という認識は多くの研究者にあるが、従業員が紹介、保証して入職させることについてはあまり認識がないようで、発表をしたことによって、その他の部分でも論文を構成する上で、強調すべき点や整理すべき点が明確となった。理論的な予測の上で、雇用契約書をデータベース化して実証分析を行っている点については興味深い印象を持っていただけたようであった。2.前年度に発表した「過渡期炭鉱業の労働市場と労働組織ー筑豊麻生炭鉱における鉱夫の募集と管理ー」、『社会経済史学』、第81巻3号、127-149頁(査読あり雑誌論文)に対して、第7回社会経済史学会賞を受賞した。3.2016Asia Meeting of the Econometric Societyにおいて1と同様の研究について発表した(査読あり、口頭発表)。研究の手法や見せ方、データについて興味深いと感じてくださったようで、コメントを多くいただくことができた。その中で、注意すべき点や補足の必要な点もご教示いただき、有意義な学会報告となった。4.九州大学へ資料調査を行った。九州石炭礦業史資料目録に掲載されている史料についても、目録にないが資料館に所蔵されている史料についても、多く撮影することができた。企業内部の構図を推測可能となるような史料を発見するなど、今後の研究に大いに役立つものがあった。その他興味深い史料を多く撮影することができ有意義な資料調査となった。平成28年度は、2つの国際学会において研究発表を、国内の研究会においても数回の発表を行い、九州大学へ資料調査へも赴くことができたが、年度後半において任務先の授業準備が予想以上に比重の高いものとなり、論文の推敲や史料分析が当初の予定よりも遅れたと感じている。また、参加及び発表を検討していた国際学会に、日程の都合上参加できなくなったことも、このように回答した理由の一つである。1.九州大学附属図書館に資料調査九州大学が伊都キャンパスに移転するにあたり、「麻生家文書」の未整理資料を整理、そして、自らの研究対象に関連の深い資料の撮影を行った。研究対象としている炭鉱の、採炭高、入坑人員数、機械使用状況などを記録した日報が見つかり、撮影した。これまで、生産によるアウトプットと労働投入が同時に記録されている史料はほとんどなく、労働の成果を計ることが難しかったがこれによって可能となると思われる。また、同炭鉱における数ヶ月分の支払伝票や収入伝票の控えが見つかり、鉱業所の組織の全体像について示唆されるものと考えられ、希有な発見となると思われる。3.史料分析単純労務謝金によって、史料整理・分析要員を得た。具体的な作業としてひとつあげると、推薦採用の報酬(周旋料)をまとめた史料の分析を依頼した。周旋料にほとんど差はなく、雇用後の在籍期間によって改めて支払われるものがあるとわかった。周旋料について具体的に判明させたることができた初めての例ではないかと思う。4.研究成果の国際学術雑誌への投稿現時点で採択が決まっているものはないが、精力的に投稿を行っている。史料分析を進める。データベース化の待たれている鉱夫の勤怠を記録した史料は、比較的長期間にわたって記録されており、分析するだけでも研究史的に大いに意義のあることであり、長期間にわたる労働者個人のデータは、現時点で進めている研究、さらには今後の新たな研究の展開に大きく寄与するものであり、早急に進める。また、論文の推敲を進め、国際的な学術雑誌へ投稿する。また、研究計画書の通り、九州大学附属図書館付設記録資料館への資料調査は引き続き数回行う。前回の資料調査でも、目録にまとめられていないものはもちろんのこと、目録で確認できるものの中でも、タイトルだけでは想像ができないものもあり、今後も記録資料館に赴き、資料調査をする必要があると感じたからである。
全身麻酔薬による新しい心筋保護法の基礎的研究

ウサギを動物実験で多用されているKetamine/Xylazine全身麻酔をcontrol群とし、各種揮発性吸入麻酔薬が30分の冠動脈の結紮による虚血と180分の再灌流後の心筋壊死域の大きさに及ぼす影響を検討する。予備実験から虚血の前後に投与時期を変化させたものの5分間のsevoflurane投与では心筋壊死縮小効果は認められないことが示唆されたため、sevoflurane濃度1.5%を30分間投与することとした。isoflurane濃度は1.1%とした。Ketamine/Xylazine全身麻酔下においてischemia/reperfusionにより生じるhemodynamicsの変化、およびinfarct sizeを観察し、ischemic preconditioningを行う群と比較し、sevofluraneおよびisofluraneによるいわゆるpharmacological preconditioningの効果があるかを検討する。さらに、これらの効果がmito-KATPchannelのblockerである5-hydroxydecanoate(以下5HD)で抑制されるか否か、更にはIPによる心筋壊死縮小効果に麻酔薬による心筋保護効果がadditiveに作用するか否かを検討する。体重2.53.0kgのウサギ(New Zealand White)をKetamine/Xylazine麻酔下、左第4、5肋骨間で開胸し、心臓を露出後、左冠状動脈前下行枝を結紮し30分虚血させ、その後180分の再灌流(以下、虚血再灌流)を行う。(結果)Ketamine/Xylazine麻酔をcontrolにした場合、ischemic preconditioningを施行した場合とsevofluraneおよびisoflurane前投与した場合のhemodynamicsの変化、およびinfarct sizeを観察・比較した。その結果、ischemic preconditioningで見られる心筋梗塞域の縮小効果すなわちpharmacological preconditioningが認められた。そこで本研究ではmito-KATPchannelのblockerの5HDを前投与し、IPによる心筋梗塞域の縮小効果が抑制されるかをさらに検討した。その結果、infarct sizeはcontrol群と比較して有意に縮小し、5HDはIP群とsevoflurane群、isoflurane群のpharmacological preconditioningによる心筋梗塞域の縮小効果を抑制した。さらに、sevofluraneを前投与した上でIPを行い、心筋壊死縮小効果を観察し、心筋保護効果が相加的に作用するか検討したところ、sevofluraneにはIPによる心筋壊死縮小効果に相加的な作用は認められなかった。以上によりsevofluraneはmito-KATPchannelに作用して心筋虚血再灌流障害を増悪させることはなく、心筋に保護的に作用する可能性が示唆された。また、このsevofluraneによる心筋壊死縮小効果は、IPによる心筋保護効果に相加的には作用しないことが示唆された。

ウサギをKetamine/Xylazine全身麻酔下に開胸しIn vivo虚血再灌流モデルを作成する。虚血再灌流により生じる循環動態(hemodynamics)の変化、不整脈の発生頻度、種類および危険域(以下area at risk)、梗塞巣の大きさ(以下infarct size)を観察し、虚血によるpreconditoningを行う群とsevofluraneによるpreconditioningの群においてsevofluraneの曝露時間、濃度を変化させてsevofluraneの至適吸入条件を詳細に検討する。また、これらのデータをketamine, xylazine麻酔下のデータ(control群)と比較し、虚血およびsevofluraneによる心筋保護効果の効果比較検討する。まず、セボフルランの投与時期の違いによる、心筋虚血再灌流障害への影響について、infarct sizeを指標にして検討した。【方法】ウサギ(New Zealand White)にKetamine/Xylazine混合液(k/x)を筋注後、左側頚動脈および頚静脈にカテーテルを挿入、気管切開した。換気は、ベンチレータを用いroom airとO_2の混合ガスで行った。開胸後、左冠状動脈前下行枝(LAD)に結紮器を作成した。30分の虚血、180分の再灌流を行ったものをcontrol群(C群)とし、また、sevofluraneを投与する時期により、S1群(虚血5分前)、S2群(虚血直後)、S3群(虚血5分後)、S4群(再灌流5分前)、S5群(再灌流直後)、S6群(再灌流5分後)にそれぞれ分類した。sevofluraneの投与方法は、終末呼気濃度が0%から投与開始し5分後に3.9±0.07%(mean±SEM)となった時点で投与を中止した。全ての群において再灌流が終了後、area at riskを同定するためにLADを再結紮しevansblueを投与した。直ちに心臓を摘出し、凍結後、スライス切片を作製し、TTC溶液にて染色後、infarct size、area at risk、非虚血部位をそれぞれコンピュータに取り込み、infarct size/area at risk(I/R)を算出した。【結果および考察】Kersten^<1)>らウサギ心筋において、Isofluraneを15分間投与した後、30分の虚血と180分の再灌流を行うと心筋の梗塞層を縮小させることを報告した。
複雑非線形現象の統計理論の開発と応用

・観測カオス時系列データから埋め込み次元と遅れ時間を推定する理論および方法を開発した。また、脈波データおよび脳波データに適用し、開発した方法の有効性を実証した.・ダイナミックノイズをもつ非線形自己回帰モデルから観測されるデータに基づいてスケルトンのリアプノフ指数を推定する方法を開発し、推定量の一致性を証明した.・正則化法によって推定されたロジスティックモデルを評価するための規準を導出し,その有効性を実データやシミュレーションによって実証した.また、ベイズ型予測分布モデルの評価規準を求め,モデル評価の観点からハイパーパラメータを推定する理論および方法を開発し、その有効性を実証した.・ブートストラップ法を用いるノンパラメトリックな方法について、幾つかの検定方法を開発した.また、複雑な標本抽出方式における非線形の推定値の標本誤差の推定には、ブートストラップ法が極めて有効であることを実証した.・多次元非線形データ解析を目的とする交交替条件付き期待値アルゴリズムを開発し、ソフトウエアを開発した.また、sliced回帰の理論を解明し、実用化のためのさまざまな技法を開発した。・定常時系列の枠組みで、バハドールスロープを始めとするいくつかの統計量の有効性を証明した.・時系列データのサブサンプリング法理論を開発した。また、予測の平均2乗誤差のクロス・バリデーション推定量の漸近正規性を示した.・超過ポアソン変動および超過二項変動をもつ母集団に対する非線形傾向性検定を開発し、超過変動をもつ複雑な非線形反応を高い検出力で検出することを検証した.・counter-matchingサンプリングの場合のMantel-Haenszel推定量を開発した.また、ペアワイズ条件付き推定関数を用いたMantel-Haenszel推定量の拡張を行った.・観測カオス時系列データから埋め込み次元と遅れ時間を推定する理論および方法を開発した。また、予測の平均2乗誤差のクロス・バリデーション推定量の漸近正規性を示した.・超過ポアソン変動および超過二項変動をもつ母集団に対する非線形傾向性検定を開発し、超過変動をもつ複雑な非線形反応を高い検出力で検出することを検証した.・counter-matchingサンプリングの場合のMantel-Haenszel推定量を開発した.また、ペアワイズ条件付き推定関数を用いたMantel-Haenszel推定量の拡張を行った.以下は、本研究で得られた多くの実績の中の主要な4点である。1.柳川は、非線形システムY_t=F(Y_<t-γ>,Y_<t-2γ>,・・・,Y_<t-dγ>)+ε_tを考察した。ここに、Fは未知、ε_tはダイナミックノイズである。まず、(Y_<t-γ>,Y_<t-2γ>,・・・,Y_<t-dγ>)、を用いてY_tをもっとも良く予測する最適なdとγは何か、という視点から埋め込み次元と遅れ時間の推定問題を定式化した。次に、推定した埋め込み次元の空間にデータの軌道を描きデータの非線形構造を視覚的にとらえる理論を開発し、カルカッタで開催された国際会議で発表した。2.くり返し測定から得られたデータの解析に、成長曲線モデルが適用されているが、個体の反応プロファイルが均一でなければ妥当性を失う。このため、それが保証されない複雑な医学データには適用できない。大瀧は、クラスター分析の手法で反応プロファイルを類別し、各クラスターにVonesh-Carter型の推定方程式を適用する新しい解析法を提案した。また、UCLAからLi教授を招きSliced Regressionについて、レビューを受け、非線形くり返し測定データの解析への適用に新たな着想を得た。3.一般化線形モデルにおいて、線形関係を関数関係で置き換えて非線形化し、その関数型をスプライン近似によってデータから推定することを考えた。このときスプライン関数の次元を上げたりノット数を増やすとモデルとデータの適合度は増加するが、関数の滑らかさは失われる。坂本・白旗は、尤度に基づく簡便交叉検証法を導入して両者のバランスをとる方法を提案した。また、小西は、情報量規準を導入してバランスをとる新しい理論を開発した。4.福地は、自己回帰モデルに基づく予測子の平均予測誤差をブートストラップ法で推定する新しい理諭を開発した。本年度の主要な実績を以下に述べる。1.時系列Z_t=(X_t,Y_t),t=

1,2,...,に基づいてX_<n+1>を予測する問題において、nestedの関係にある二つの非線型予測関数f_n,g_nがあるとき、予測誤差が小さい方の関数を用いて予測すれば良いが、予測誤差の推定をどう行うかが大問題である。福地は、sub-samplingを利用するブートストラップ法でこの推定法を開発し、その理論的根拠を与えた。2. Granger causalityは経済における線形時系列データの因果解析に頻繁に使用されている。大学院生大浜は柳川の指導の下でこのcausalityの概念を拡張するとともに、強定常非線型時系列データの因果解析理論と方法を開発した。3.一般化線形モデルは医薬データの統計解析に多用されている。小西は大学院生井元、藤岡と共同でこのモデルの線形部分を未知の非線型関数で置き換え、B-スプライン近似によってデータからこの関数を推定するという着想のもとに、情報量基準を適用してペナルティー項を評価する新しい解析法を切り開き、ロジスチックモデルに適用してその卓越性を実証的に示した。4.環境化学物質の無影響量決定問題は、リスク評価の中心的課題である。毒性反応の用量・反応関係は一般に非線型である。柳川と坂田は、minimum elevated riskという新しい概念を導入して、第2種のゴサを管理する、統計的検定による新しい無影響量決定方式を開発した。5、研究集会を2回開催し、新しい研究課題の立ち上げと研究の深化をねらって、非線型信号処理、モルフォロジー、ニューラルネット、ファジ非線型信号処理、ウェーブレッド画像信号処理、エイズ等の感染症モデル等の研究者と意欲的な研究交流を行うとともに、フランスから合計2人の権威を招待し研究のレビューを受た。本年度の主要な実績は以下の様である。1.カオス性をもつデータに対して非線形自己回帰モデルX_t=F(X_<t-τ>,...,X_t-(d-1)τ)+ε_tを適用し、Nadaraya-Watsonカーネル型ノンパラメトリック法でd,τ,Fを推定する方法を提案し、推定量の一致性を証明した。また、この推定値からスケルトンのLyapunov exponentを推定する方法を開発した。これらの結果は,国際会議で発表したが、まだ公刊されていない。2.2×K分割表に要約される離散多変量データの非線形反応に対する統計的検定法を開発した。第3相臨床試験データにおいて、対照群と治療群の有意差を検定するとき、従来の検定は線形性を想定しているため非線形反応の場合に有意差が検出できないという問題があったが、開発された検定法はその欠点を補うものである。3.一般化線形モデルをB-スプライン関数を導入して非線形化し、ペナルティー関数を組み込んだ上でデータに適合させるという着想の下で、情報量基準を適用し非線形データ解析のためのモデル化を行う解析法を、み込んだ上でデータに適合させるという着想の下で、情報量基準を適用し非線形データ解析のためのモデル化を行う解析法を、昨年度開発したが、この解析法をさらに発展させ改良した。
ケイ素の特性を利用した新しいラジカル反応による環状化合物合成法の開発

1.1-アリロキシ-1-フェニルシラシクロブタンをジブロモメチルリチウムで処理すると,環拡大した1-アリロキシ-2-ブロモ-1-フェニルシラシクロペンタンが得られる。この化合物をトリエチルボラン共存下に,トリブチルスズヒドリドで処理するとラジカル環化反応が収率よく進行する。生成した2-オキサ-1-シラビシクロ〔3.3.0〕オクタンは容易に1,3,6-トリオールに導くことができる。2.安息香酸エチルやギ酸イソプロピルに第三級ブチルジメチルシリルジブロモメチルリチウムを作用させるとカルボニル基への付加に続いてシリル基が炭素原子から酸素原子上へと1,3転位することを見いだした。第三級ブチルジメチルシリルジブロモメチルリチウムの代りにアリルジメチルあるいはビニルジメチルジブロモメチルリチウムを用いると、それぞれ対応するアリルシロキシ基ならびにビニルシロキシ基をもつ混合アセタールを合成することができる。こうして得られたβ,β-ジブロモ混合アセタールをトリエチルボラン共存下にトリブチルスズヒドリドで処理すると,アリルシロキシ基をもつアセタールからは2-オキサ-1-シラシクロヘプタンが選択的に得られ,一方ビニルシロキシ基をもつ基質からは5員環化合物2-オキサ-1-シラシクロペンタンが選択的に得られることが明らかとなった。3.α-ヨードアシルシランにトリエチルボランを作用させるとラジカル的にエノラートを発生させることができる。得られるホウ素のエノラートにカルボニル化合物を作用させると立体選択的にアルドール付加体を得ることができた。なお出発原料デあるα-ヨードアシルシランは1-クロロ-1-トリアルキルシリル-1-アルケンをエポキシ化したものを,ヨウ化ナトリウムで処理することによって収率よく得ることができた。ケイ素がα位のラジカルを安定化することを利用した位置選択的ならびに立体選択的なラジカル環化反応について研究を行い次の2つの成果を得た。1.1-アリロキシ-2-ブロモ-1-フェニルシラシクロペンタンを触媒量のトリエチルボラン存在下にトリブチルスズヒドリドで処理すると、ラジカル環化が起こり2-オキサ-1-シラビシクロ〔3.3.0コオクタンが収率よく生成することを見いだした。対応する2-ヨード体を基質としトリエチルボランで処理するとヨウ素原子が転位したラジカル環化体が生成する。このものをトリブチルスズヒドリドで還元すると先に2-ブロモ体から得たものと一致した。得られたビシクロ体にフッ化カリウム存在下過酸化水素を作用させ炭素-ケイ素結合を酸化的に切断するとトリオールに変換することができる。さらに2-ヨードシラシクロペンタンがアセチレンの三重結合に対してラジカル付加し対応するヨードアルケンを与えることも明らかとなった。2.(アリルジメチルシリル)ジブロモメチルシランとLDAから調製したアリルジメチルシリルジブロモメチルリチウムにアルデヒドを作用させた後、ヨウ化メチルおよびHMPAを加えるとシリル基の1,3-転位を伴いシリルエーテルが収率よく得られる。このシリルエーテルのベンゼン溶液(0.017M)に触媒量のトリエチルボラン共存下トリブチルスズヒドリドを作用させると7-エンド環化が進行し7員環シリルエーテルが選択的にしかも収率よく得られることを見いだした。環化の際にトリブチルスズヒドリドの代りに(Me_3Si)_3SiHを用いると高立体選択的に7員環シリルエーテルが生成する。交付申請書に記載の計画に従い研究を行い次の成果を得た。

1.α-ヨードアシルシランにトリエチルボランを作用させるとラジカル的にエノラートを発生させることができる。こうして得られるホウ酸のエノラートを用いて立体選択的なアルドール反応を行うことができた。なお出発原料であるα-ヨードアシルシランは、1-クロロ-1-トリアルキルシリル-1-アルケンをエポキシ化したものをヨウ化ナトリウムで処理することによって収率よく得ることができた。2.安息香酸エチルやギ酸イソプロピルに第三級ブチルジメチルシリルジブロモメチルリチウムを作用させるとカルボニル基への付加に続いてシリル基が炭素原子から酸素原子上へと1,3-転位することを見いだした。第三級ブチルジメチルシリルジブロモメチルリチウムの代わりにアリルジメチルあるいはビニルジメチルジブロモメチルシリウムを用いると、それぞれ対応するアリルシロキシ基ならびにビニルシロキシ基をもつ混合アセタールを合成することができる。こうして得られたβ,β-ジブロモ混合アセタールをトリエチルボラン共存下トリブチルスズヒドリドで処理すると、アリルシロキシ基をもつアセタールからは2-オキサ-1-シラシクロヘプタンが選択的に得られ、一方ビニルシロキシ基をもつ基質からは5員環化合物2-オキサ-1-シラシクロペンタンが選択的に得られることが明らかとなった。3.1-アリロキシ-1-フェニルシラシクロブタンをジブロモメチルリチウムで処理すると環拡大した1-アリロキシ-2-ブロモ-1-フェニルシラシクロペンタンが得られる。この化合物をトリエチルボラン共存下にトリブチルスズヒドリドで処理するとラジカル環化反応が収率よく進行する。生成した2-オキサ-1-シラビシクロ[3.3.0]オクタンは容易に1,3,6-トリオールに導くことができる。
アカサビザトウムシ種複合体における環状重複をともなう色斑と核型の著しい地理的分化

アカサビザトウムシGagrellula ferruginea(クモガタ綱ザトウムシ目)では,これまでに2カ所(長野県北アルプス周辺と香川県讃岐山地)で環状重複とみられる現象が生じている。これら両地域で染色体や色斑の調査を進め,両地域でのその様相の詳細を追跡した。北アルプスの同所的集団では相互に数も核型も大きく異なる。両者の交配前生殖隔離機構が不完全で,繁殖干渉により同所的になれない可能性が高い。讃岐山地では同所的集団は竜王山山頂付近のごく狭い範囲に限定されており,周辺はすべて2n=12の集団で固められていることがわかった。環状重複(circular overlap)は地理的に少しずつ分化したある生物種の一連の集団がその両末端で再び分布域を重ねたときに生殖隔離を達成していて,別種としてふるまう現象で,種分化が地理的な形質分化の積み重ねで生じることを例証するものとして注目される。しかし,その実例は珍しく,また染色体数の分化がこれに関わるケースは知られていない。最近の調査で四国北部および本州中部地方の2カ所において染色体数または色斑で環状重複の現象を示すことが示唆されたアカサビザトウムシ(クモガタ綱ザトウムシ目)について,さらに核型と色斑の地理的分化を調査し,この現象がどのような過程や条件で発達するのかを探るのが,本研究の目的である。2010年度は,このうち,長野県西部の環状重複を確認するため,染色体数分化のデータが空白の岐阜県から滋賀県にかけての地域での本種の染色体数分化を中心に調査した。その結果,滋賀県では琵琶湖の西側では2n=16であるが,東側では2n=12で,琵琶湖の南側にはこれらの移行域があることがわかった。また,滋賀県東部一帯が2n=12であるにもかかわず,その東では再び増加するようで。岐阜県では西部の関市板取川渓谷で2n=15/16,白川村の天王峠など3カ所で2n=14,飛騨市二十八滝で2n=12,高山市秋神温泉で2n=10と東に向かって徐々に減少していることがわかった。長野県西南部には2n=10/12の多型集団があるので,これにつながっていると思われる。北アルプスの岐阜県側にあると予想した2n=1418の移行域は今回は確認できなかった。2011年度は,長野県西部にみられるアカサビザトウムシ関東型と北陸型の環状重複を確認するため,松本市から大町市にいたる北アルプス山麓沿いで分布と染色体数の調査をおこなった。残念ながら,両者の同所的生息地として新たに確認できたのは梓川沿いの1カ所(鷺沢)のみであった。北陸型では大町市から松本市梓川までの狭い地域で染色体数が集団内多型をともないながら2n=10-18まで大きく変化することがわかった。同所的集団では北陸型が2n=12,関東型が2n=16であるが,核型は2回の動原体融合・解離では説明できないほど大きく異なっていることがわかった。いっぽう,この北陸型と近畿地方北部の近畿型との染色体数変異の地理的パターンの把握のため,滋賀県,三重県,岐阜県で染色体調査をおこなった。新たに調査した三重県中部の布引山地で染色体数が2n=12から18まで急激にかつ複雑に入り組んで変異することがわかった。遺伝子交流を保ちながら地理的に分化した一連の集団が一周し,その両末端で交雑なしに分布を重ねる現象を環状重複(circular overlap)という。北極を周回して分布するセグロカモメなどで報告されているが,実例はきわめて少ない。本州以南の日本各地に広く分布するアカサビザトウムシGagrellula ferruginea(クモガタ綱ザトウムシ目)では,これまでに2カ所(長野県北アルプス周辺と香川県讃岐山地)で環状重複とみられる現象が生じている。今年度は両地域で分布の重複の幅や染色体数の地理的分化をより詳細に追跡した。北アルプス:北アルプス山腹の一部の集団で同所的となる北陸型と関東型の分布と染色体を約15地点で調べた。

糸魚川市では両者の分布はマクロには重複するが,内部では相互排他的で,同所的集団は見つからなかった。北陸型と関東型は色斑・染色体数ともに大きく異なるが(この地域内で関東型は小谷村では2n=18,大町市松本市周辺では2n=16,北陸型は2n=10-18と変異するが,同所的集団では相互に数も核型も大きく異なる),両者の交配前生殖隔離機構が不完全で,繁殖干渉により同所的になれない可能性が高い。讃岐山地:2n=12と2n=20の集団の同所性が確認されている竜王山山頂の周辺で,両核型の分布の重複の範囲と相対頻度を調査した。この周辺では同所的集団は竜王山山頂付近のごく狭い範囲に限定されており,周辺はすべて2n=12の集団で固められていることがわかった。ここでも繁殖干渉により同所性が安定的ではないことを示唆する。また,並行して調査したサトウナミザトウムシNelima satoiでは,兵庫県円山川以東から福井県にかけての広範囲で染色体数が2n=18/19/20の多型状態を示すこと,円山川と京都府由良川の間ではB染色体も染色体数の変異に関わっていることがわかった。染色体数の地理的分化パターンの把握はまだ十分ではないが,これは今回調査対象とした地域で染色体数が予想以上に大きく複雑に変異することがわかったためである。24年度が最終年度であるため、記入しない。上述のように,アカサビザトウムシの本州の近畿地方から長野県にいたる地域での染色体数の変化は予想以上に大きいので全貌の把握のためにはさらに数年間の調査期間が必要と思われる。今後の継続調査につなげるため,最終年度では,当初予定した,長野県と香川県の2カ所の周辺での染色体数調査を優先し,さらに時間のゆるす範囲で,これまで調査の不十分な地域(奈良県,福井県など)でも予備的な染色体数把握をおこなう。
介護施設における看取りケア教育手法の開発およびケアの質評価に向けたプロトコル作成

本研究は、Webサイト設計手法の一つであるペルソナ手法を応用して、看取りケアの質評価を可能にするプロトコル作成を含んだ介護保険施設における看取りケア教育の手法の開発が目的であった。結果として、本研究期間を通して1事例の映像教材を制作・配信した。本映像教材は、一人の高齢者が介護保険施設に入所して穏やかに生活する日々から最終的に臨死期を迎えるまでの経過を追ったケアと遺族へのグリーフケアまで幅広い内容を含む多職種対象の教材である。個別学習と施設職員の集団学習が可能であり、看取りの未体験者のシミュレーション学習にも利用できる。今後の看取りケア教育への貢献と発展が期待できる。本年度は、本研究の初年度にあたり、あたらためて高齢者のエンド・オブ・ライフケアに関する最新の情報の収集および看取りケア教育の実践的トレーニングに重点を置いた活動を行った。具体的には、American Association of Colleges of Nursingが行ったエンド・オブ・ライフケアにおける看護教育内容とCity of Hope(カリフォルニア州の医療施設)が行った研究をもとに作成されたELNEC-G(End-of-Life Nursing Education Consortium-Geriatric)の教育プログラムを受講し、実践トレーニングの習得に努めた。エンド・オブ・ライフケア教育あるいは緩和ケア教育は、日本の看護教育カリキュラムにおいて必須科目としての規定がなく、教育体制は十分であるとは言い難い。看護教育の先進国であるアメリカにおいても同様の状況がある。そのためELNECは、エンド・オブ・ライフケアに携わる看護職に必要とされる知識を学習するためのプログラムとして開発され、ELNEC-Gは、その高齢者版として、エンド・オブ・ライフケアにおいて高齢者特有の状況を加味した教育プログラムに構成されている。これを受講することで、高齢者の老衰という死の状況だけでなく、高齢者のがん終末期の緩和ケア方針について知識が深まるとともに、看取りケア教育のプロトコル作成あるいは、教育の場づくり、教育の段階分け、教育プログラム運営方法などのノウハウについて知識を深めることができた。また、2013年6月23日(日)27日(木)に韓国ソウルで行われたThe 20th IAGG World Congress of Gerontology and Geriatrics(第20回国際老年学会議)に参加し、これまでの研究成果を報告するとともに近年の諸外国ならびに日本国内のエンド・オブ・ライフケア研究の現況について情報を収集した。その他、他の研究機関に所属するエンド・オブ・ライフケア研究者らとの定期的な研究会へ参加、研究協力を通して、本研究への準備を進行した。今年度の達成課題1はペルソナ映像作製であった。6月に映像作製業者を選択し、本研究で必要とする映像の作製を依頼した。業者内で検討するとの回答を待つが返答がなく、数回の依頼内容確認を営業担当者と行ったが、最終的に12月末に作製が困難であるとの回答を受けた。その後、本業者から別の会社を紹介されたが、本年度の6月に参加した施設における終末期ケア研修後の評価結果を10月頃に検討した際に、映像教育方法そのものに期待される教育効果への懸念が生じていたため、依頼そのものに見直しを検討している段階である。達成課題2は、教育実施フィールドとして在宅看護領域への拡大であった。訪問看護ステーションにおけるインタビュー調査を行い関係構築ができ、今後のフィールド拡大については達成できた。達成課題3と4については、達成課題1の進行の遅れを受けて未達成となった。以上、本研究における本年度の達成課題の実績を記載した。今年度の達成課題1:ペルソナ作成について、映像制作業者の確保を行い現在、作成に向けて詳細を調整している。平成28年度8月を目標に完成させ、10月以降に使用開始を計画している。達成課題2:こちらは平成26年度に在宅看護フィールドの確保を達成している。達成課題3と4:こちらは、達成課題1が完了していないため、未達成のまま進行している。今年度の研究達成状況として、他に平成26年度に在宅終末期ケアにおける看護師のケア満足状況と終末期患者の身体状況との関連を分析してまとめおり、これを学会において報告した(平成27年10月19-22日開催のIAGG;The 10th international association of gerontology and geriatrics-Asia/Oceania2015Congress)。本学会では、本報告により日本の在宅終末期ケアの状況は、近隣アジアの国よりもIT化の面で遅れている現状、終末期の痛みをとるということへの看護職の感度が低いことなどが把握でき、教育内容への新たな課題を得た。また、本研究への関連として終末期ケアに取り組む訪問看護職の連携の取り方を視点に分析を試みた。データは他の研究で行われた調査で得たものを利用した。分析結果を本年度の6月開催の日本老年社会科学学会において報告し、終末期ケア教育においてどのような多職種連携を行うことがどのようなチーム医療やチーム活動に影響を生みだしているのかについて意見交換を行い、多職種連携における他の学術領域の人々の見解を知ることで今後の本研究の発展に活用できた。平成27年度の9月から大学を異動した。異動に伴い、その前後の数カ月において大学間での資金の移行手続きに伴い研究費の利用の制限があったことおよび、新しい大学での教育体制整備への時間が必要であったことから研究に取り組む時間が十分に確保できす遅延していた分の進行を促進することができなかった。しかし、研究者の希望する映像作成に協力できる映像制作会社を探す作業は継続していた。

予算に見合う業者探しに時間がかかることを改善するため、作業の効率化を優先させることにし、映像制作会社の探索と業者打ち合わせを業務委託することに計画を変更した。業務委託できる会社を見つけて現在は、映像制作会社が見つかり、原稿を出すなどの制作に向けた具体的調整に着した段階である。本研究は、Webサイト設計手法の一つであるペルソナ手法を応用して、看取りケアの質評価を可能にするプロトコル作成を含んだ介護保険施設における看取りケア教育の手法の開発が目的であった。平成25年度から開始し、一年の延長期間を受けて平成28年度に映像教材を制作した。さらに、この教材を広く介護保険施設で働く職員が利用できるようにWeb配信システムを構築した。ただし、利用者への教育の質を適正に保つ目的および教材の質評価を行う目的から映像の利用は、教育資材の使い方や使ったことの効果などを測定する仕組みの中で配信することになっている。計画では、ペルソナ作成から教材開発を行い、介護保険施設での現任教育の実践と改善の繰り返しからいくつかの典型的な看取りケアの事例を場面ごとに制作・配信する予定であった。しかし、看取りケアの質を豊かにする目的からリアリティのあるペルソナ作成は欠かせないと判断したこと、映像制作に掛かる事前の費用試算がそれに見合ったもので無かったことが影響し、いくつかの映像制作会社と交渉が成立せずに研究期間は延長し、資金確保の点からも予算の繰り越しを要した。研究代表者の研究機関変更に伴う資金の利用期間制限も一部、進行の遅れに影響した。結果として、本研究期間を通して制作・配信が完了したのは1事例の映像教材となった。事例数は、少なくなったが本事例は、一人の高齢者が施設に入所し生活する日々から、生命危機を迎えた場面、回復した場面、最期には臨終を迎える場面、臨終を迎えた後に家族と職員が関わる場面など、本人への看取りケアから家族のグリーフケアまで幅広い場面を取り入れ、各場面の学習ができるように工夫されている。また、多職種連携が上手くいくことにより看取りケアの質が確保されるため、多職種が同時にも個別にも学習できるように問いかけの工夫がある点で、今後の看取りケア教育への貢献と発展が期待できる。結果として、本研究期間を通して1事例の映像教材を制作・配信した。本映像教材は、一人の高齢者が介護保険施設に入所して穏やかに生活する日々から最終的に臨死期を迎えるまでの経過を追ったケアと遺族へのグリーフケアまで幅広い内容を含む多職種対象の教材である。個別学習と施設職員の集団学習が可能であり、看取りの未体験者のシミュレーション学習にも利用できる。今後の看取りケア教育への貢献と発展が期待できる。
腎機能低下時のネダプラチン投与による骨髄抑制発現解析と至適投与量設定

研究目的:ネダプラチンは腎排泄型の薬剤であることから、腎機能低下時にはAUCが上昇し、骨髄抑制の発現頻度上昇や重篤化が起こることが想定される。しかしネダプラチンの腎機能低下時における明確な減量・中止基準は無く、臨床現場では腎機能低下患者においても減量されることなく投与されるケースが散見される。本研究は、腎機能低下患者におけるネダプラチンの骨髄抑制発現頻度を調査し、減量水準を設定するためのデータを収集、解析することを目的として行った。研究方法: 2013年9月から2017年8月までに、京都大学医学部附属病院産科婦人科においてネダプラチン/イリノテカンの併用によるがん化学療法を受けた子宮頸癌患者における副作用発現頻度を電子カルテより情報を収集し、調査・解析を行った。症例をCockcroft-Gault式より算出したクレアチニンクリアランスを基に腎機能を層別化し、各群における骨髄抑制発現頻度を調査した。研究結果:現時点で約100症例の子宮頸癌患者を対象とした調査をレトロスペクティブに行い、40症例のデータ収集、解析を終了している。治療開始時において推定クレアチニンクリアランス(以下、推定Ccr)が30mL/min未満の患者においては推定Ccrが60mL/min以上の患者と比較して、血小板減少の発現頻度が有意に高い結果が得られた。なお、レトロスペクティブな調査は現在も継続して実施している。今後は、医の倫理委員会からの承認を得て、患者におけるネダプラチン血中濃度測定を開始し、腎機能低下時におけるネダプラチンの血中濃度の変動について検討を行い、さらに各群における骨髄抑制発現頻度を合わせて考察することで、ネダプラチンの腎機能低下時における減量・中止基準について提言することを目指す。
線毛発生における機能分子の解明とその特性についての研究

(1)根小毛は、線毛を伸長した基底小体の付属構造であり、線毛発生に特異的に出現するfibros granuleから形成される。根小毛の205/215蛋白質を認識する抗体(R67,R155ほか)を作製して、根小毛の形態を免疫組織化学的に解明した。作製した抗体とヒトHeLa細胞のcDNAライブラリー及びヒト肺cDNAライブラリーを利用して、抗体の認識する蛋白質をコードしているcDNAのスクリーニングを行って、陽性クローンをDNAシークエンスした。(3)顎下腺における孤立線毛形成、及び中心子と根小毛の関係について、形態学的に解析した。孤立線毛は、筋上皮細胞において2.8%に観察された。根小毛は、孤立線毛の形成とは無関係に、中心子に恒常的に付随していた。特に中心子が細胞先端部に位置する、線条部の上皮細胞において、著明に発達していた。これらの結果は、rootletは中心子の付属構造として常に存在しており、中心子の位置の決定に関与していることを示唆する。(4)幼若マウス卵巣を用いて、卵胞発育に対する男性ホルモン、及び女性ホルモンの効果を、in vitroの培養系を用いて検討した。男性ホルモン(dehydroepiandrosterone)には、卵胞発育と細胞増殖効果があった。(1)線毛を伸長した基底小体には、striated rootlet,basal foot,transitional fiberなどの付属構造が付随している。Striated rootletの205/215kDaの蛋白を認識する6個のラットモノクロナル抗体を作製して、その局在について免疫組織化学的に様々な組織を用いて検討した。ヒト卵管分泌細胞の孤立線毛に付随するrootletは、分枝、ループ状、星型等の多様な形態を示した。Rootletの長さは3.83nmで、閉経後は3.53nmに有意に短くなった(P=0.038)。作製したモノクロナル抗体とヒト肺cDNAライブラリーを用いて、抗体の認識する蛋白質をコードしているcDNAのスクリーニングを行って44個の陽性クローンを獲得し、現在DNAシークエンスについて解析している。(2)線毛と孤立線毛の付属構造におけるgamma-tubulinの局在について免疫組織化学的に解析した。基底小体の側方から伸びでているbasal footにgamma-tubulinが局在していることをはじめて超微形態レベルで証明した。(3)孤立線毛を伸長した基底小体と、それと対をなす中心子との間に、striated connectorを見出し、電顕、免疫電顕的に解析した。Striated connectorの横紋の周期は54nmで、striated rootletと比較して15nm短かったが、免疫電顕により、両者が共通の蛋白分子から構成されていることを明らかにした。(4)線毛の形成に関わらず、中心子にrootletが付随していることを組織化学的に証明した。細胞周期のG2/M期において、中心子が移動する際のrootletの形態変化について解析した。(1)根小毛striated rootletは、線毛を伸長した基底小体の付属構造であり、線毛発生に特異的に出現するfibrous granuleから形成される。根小毛の構成蛋白質から、striated rootletの構成分子、さらには線毛発生における機能因子を解明することを目的として本研究を行った。根小毛を認識する抗体(R67,R155)とヒトHeLa細胞のcDNAライブラリーを利用して、抗体の認識する蛋白質をコードしているcDNAのスクリーニングを行って、5個の陽性クローンを獲得し、DNAシークエンスについて解析した。(2)一対の中心子は、intercentriolar linkによって結合している。孤立線毛を伸長した基底小体とそれとペアの中心子とを連絡する横紋構造を発見し、striated connectorと命名した。この構造について電顕的免疫組織化学的に解析し、striated rootletとstriatedconnectorは、共通の蛋白分子から構成されていることを明らかにした。孤立線毛は、筋上皮細胞において2-8%に観察された。

特に中心子が細胞先端部に位置する、線条部の上皮細胞において、著明に発達していた。これらの結果は、rootletは中心子の付属構造として常に存在しており、中心子の位置の決定に関与していることを示唆する。(4)幼若マウス卵巣を用いて、卵胞発育に対する男性ホルモン、及び女性ホルモンの効果を、in vitroの培養系を用いて検討した。男性ホルモン(dehydroepiandrosterone)には、卵胞発育と細胞増殖効果があったが、女性ホルモンにはなかった。
本態性高血圧の原因遺伝子に関する研究

本研究の最終目的は、本態性高血圧の原因遺伝子を単離同定することである。今回、本態性高血圧の発症の候補遺伝子として、レニン-アンジオテンシン系の重要な基質であるアシジオテンシノ-ジェン遺伝子、アンジオテンシンIIの受容体であるタイプ1受容体とタイプ2受容体遺伝子などについてcase-control studyで検討を行った。1)アンジオテンシノ-ジェン遺伝子(AGT):AGTの-18に位置する多型が、AGCE1に結合する転写因子の結合性に影響を及ぼし、AGTの発現量などを変え、最終的に高血圧の発症に関わっているものと推測した。以前から、235番目のアミノ酸多型(Met/Thr)が高血圧発症に関連していると報告されていた。しかし、今回の結果より、235の(Met/Thr)多型はいわゆる遺伝子マーカーであり、血圧調節には遺伝子多型は-18のC/T多型が関与している可能性が高いことが分かった。将来、この多型は高血圧の発症前診断に利用できると考える。2)アンジオテンシンIIタイプ1受容体(AT2R1):AT2R1とAT2R2は、高血圧発症に関与していないが、AT2R1のC対立遺伝子は、健常人の左室の重量に影響を与えている可能性があった。3)Methylenetetrahydrofolate reductase(MTHFR)遺伝子:MTHFRの遺伝子変異で酵素活性が低下し、血清のホモシステイン値が上昇すると、虚血性心疾患や脳血管障害の発症頻度が高くなることが報告されている。今回の結果では、Val/Val型のホモ接合体は脳血管障害の頻度は上昇していなかった。これは、Val/Val型のホモ接合体では、血栓の危険性は高まるが、血圧が低下するため、効果が相殺されることにより、脳血栓の頻度は上昇しないことになったと考えられる。