hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
低酸素免疫応答の解明と免疫システムを用いた集学的治療への展開

放射線(化学)療法下の低酸素免疫応答のメカニズムを解明し、食道癌及び直腸癌に関する新規補助療法を確立することを目的とした研究である。まず、マウス腫瘍樹立モデルにおける放射線(化学)療法の放射線・化学療法の治療下での低酸素状態の評価を行う。BALB/cマウスを宿主とし、大腸癌細胞株はCT26を用いる。皮下注を行い、樹立後に放射線照射を行い、これを評価している。放射線科学療法後に、PD-L1が発現することは、1Western blotting法、2免疫染色、及び3フローサイトメトリーにて、その発現のkineticsが明らかできた。また、腫瘍細胞由来の発現、免疫細胞(樹状細胞やMDSCによる)の発現を別に評価することに成功しており、この生理的な意義を検討次に、ヒト大腸癌組織異種移植マウスを用いた放射線(化学)療法治療モデルでの腫瘍の評価を行なっている。腫瘍内因性に発現する可能性の機序解明の可能性を探求すること及びヒト大腸癌細胞のPD-L1発現の検索のモデルとして、検討しているが、現在のところ、容易に確認できた大腸癌はない。次に、ヒト食道癌及び直腸癌術前治療患者の治療前(生検標本)、治療後(手術標本)の評価として、術前治療前生検標本及び術後切除標本を用いて、腫瘍側因子として、HIF1α、PD-L1、免疫因子として、CD8+T細胞、制御性T細胞(Treg)、腫瘍内MDSC、腫瘍関連マクロファージを検討している。まず、直腸癌であるが、上記の発現が誘導されていることが確認されている。また、食道癌でも同様の結果を得ている。消化器癌集学的治療として、放射線・化学療法を行うと低酸素環境に陥る。腫瘍組織は低酸素応答性誘導因子(HIF)を発現し、低酸素環境下での血管新生の促進や代謝活性の亢進により微小環境や細胞そのものの性質を変化させ、生存を維持する。元来、正常細胞が環境の変化に対応する転写調節機構を腫瘍組織が利用しているとも言えるが、同時に免疫細胞も環境の変化に対応する性質を持ち合わせ、これに対応する。この低酸素環境への応答メカニズムを詳細に解析し、放射線及び分子標的薬、さらには細胞に対する遺伝子調節技術や培養技術といったモダリティーを用いて腫瘍や免疫細胞を標的にした消化器癌の術前・術後治療を開発する研究である。免疫チェックポイント阻害剤、特にPD-1(Programmed cell death-1)やCTLA-4に関連した分子標的薬の抗腫瘍効果が注目を集めている。これらの機序が消化器癌における術前治療に効果が証明されている、食道癌、直腸癌に着目し、治療抵抗性を示す低酸素状況下での免疫細胞応答のメカニズムを明らかにすることで、効果的な免疫学的治療システムを構築し、介入し、新規周術期補助療法を確立することを目的として開始された研究である。免疫チェックポイント関連薬と低酸素状態における相乗効果や、効果的な腫瘍反応性CD8+T細胞の効率的な誘導方法の検討を行っている。さらに、これらの結果を元に、術前、術後の免疫補助療法の検討を行うことが、本研究の目的である。ヒト術前治療ー手術を介して得られたサンプルを用いて解析している。
Nーアセチル転移酵素の構造と機能に関する分子生物学的研究

(1)ヒト肝臓の多型性アリルアミンNーアセチル転移酵素(NAT)のcDNAをプロ-ブとしてNAT遺伝子の解析を行った。その結果NAT遺伝子には3種類あり、その組合せにより6種類の遺伝子型が存在することが判った。さらにイソニアチド負荷テストによりアセチル反応表現型との対応関係を調べたところ、3種のNAT遺伝子のうちの1種類は高いNAT活性に、2種類は低いNAT活性に対応することが明かになった。(2)ついでヒト剖検肝臓50例についてNAT遺伝子の解析、NAT活性の測定:NAT蛋白のイムノブロット、NATのmRNAのノ-ザンブロットを行った。その結果、NAT遺伝子1はmRNAも蛋白も多量に発現し、酵素活性も高いのに対し、遺伝子2ではmRNAは多量に発現しているのにNAT蛋白はほとんど検出できず、酵素活性は極めて低いことが判った。また遺伝子3はmRNAも蛋白も少なく、酵素活性も低いことが明らかとなった。さらに遺伝子NATをクロ-ニングし、その塩基配列を解析したところ、遺伝子2と3では点変異が起こっていることが判った。(3)肝臓のNATの多型性のモデル動物として用いられたウサギについても、NAT活性、NAT蛋白のイムノブロット、NATのmRNA量などの測定を行うとともに、遺伝子DNAのサザンブロット解析を行った。その結果、アセチル化反応遅延型のウサギでは多型性NATの遺伝子が全領域にわたって欠損していることが判った。(4)NATのアセチルCoA結合部位と考えられるアミノ酸配列に対応するオリゴヌクレオチドをプロ-ブとして、ラット松果体のcDNAライブラリ-をスクリ-ニングし、交叉反応を示す陽性クロ-ンを多数分離した。
爆発衝撃による材料の超高速破壊に関する研究

AI2024、SS41、純銅の3種類の金属を対象に、爆発衝撃によるスポール破壊実験、差分法による破壊の数値シミュレーションおよびモーメンタムトラップによる破壊防止評価を行い、以下の結論を得た。(1)銅細線列をコンデンサーからの衝撃大電流で一斉爆発させる技術を利用した平面爆轟波発生法(爆薬:PETN)を適用し、50mm80mm角の供試体に鋸歯状の平面衝撃波を入射させ、供試体を回収できる実験システムを開発した。(2)PETNの厚さHを5mm15mmの範囲で変えて実験を行い、すべての材料で衝撃剥離破壊(スポール)を発生させることができた。また各材料に対して薬厚Hと剥離層厚さzの関係を把握することができた。これらのH-z関係は互いに逆比例する(薬厚が大きいほど剥離層が薄い)ことは共通であるが、その値は材料によって大きな相違が見られた。(3)時間依存累積損傷則を組み込んだ差分解析コードを構成し、試行錯誤で各材料の破壊常数値を設定しながら実験で得られた基本的な破壊特性を近似的にシミュレートすることができた。この結果、薬厚による破壊位置への影響が最も大きいAI2024はスポール破壊に対する応力保持時間効果が大きいことが分かった。(4)供試体に表層体(モーメンタムトラップ)を装着することで衝撃破壊防止効果があることをAI2024を用いた実験によって確認した。この結果、本実験では表層体の厚さ1mmと2mmの間に限界厚さが存在し、その厚さ以下では供試体に割れが発生することが分かった。また数値シミュレーションでも同様の結果を得た。爆発衝撃による材料の高速破壊としては、ほかに円筒状収束波や発散波が作用することで発生する場合がある。これらの衝撃波についても細線列爆発を利用して生成できることを確かめた。本年度は、まず予備的検討として材料を高速破壊させるための応力波発生方法について各種の実験を行った。本研究では爆薬の一斉面起爆技術を応用して材料中に応力波を発生させようとしており、高性能起爆装置の購入によって起爆の精度向上を図った。その結果、±200nsの時間精度で50mm-80mm角の面積に平面爆轟波を発生させることができることを確認した。また面起爆技術の応用として材料中に円筒状収束衝撃波を発生させることも試み、PMMA中に対称性の良い収束波を生成させた。ただし一次元の収束波を発生させるには広い面起爆が必要で、そのために高電圧のコンデンサーバンクが不可欠となり、物質研の実験設備を利用した。15EA02:これらの予備実験の後、アルミニウム(Al2020)を対象に、爆発衝撃による高速破壊実験を試みた。開発した実験方法では、50x50x20mmの供試体に5-20mmの薬厚のPETN爆薬を直接接触させて設置し、直径100μmmの平行銅細線・16本を衝撃電流で爆発させることで平面爆轟波を発生させ、供試体中に鋸波状の平面衝撃波を入射させる。この結果、自由表面で反射した衝撃波が引張り応力波となり、材料中に剥離破壊(スポール)を発生させることができた。供試体の回収は水中で行った。これらの実験の結果、薬厚とスポールの発生位置との関係が把握できた。また、実験と平行して爆轟から固体中の衝撃波伝播までを解析する一次元ラグランジ座標系の差分解析プログラムを作成した。この解析コードの開発では、購入した高速演算処理機が有効に利用された。

つぎに解析コードに種々の破壊則も組込みながら、各シミュレーション結果と実験結果との比較検討を行うことで時間依存破壊則の有効性が確認できた。来年度は引き続き材料を変えて平面波による破壊実験と数値解析を行ってゆく予定であり、また発散波・収束波による材料の破壊についても検討を進めたい。本年度は昨年度に引き続き、供試材料(寸法:50×50×20mm)を変えて平面爆轟波によるスポール破壊実験を行った。すなわちアルミ合金AL2024に比べ衝撃インピーダンスの大きな軟鋼SS41と純銅を対象として、爆薬PETNの厚さとスポール剥離層厚さの関係を実験的に求めた。純銅の実験ではAl2024に比べ剥離層が薄いことが分かった。また回収時の変形が大きく計測値のバラツキが著しかった。次にSS41の実験では、他の材料と同じく薬厚の増加とともに剥離層が薄くなる傾向は同じであったが層厚の低下割合は非常にわずかであった。またき裂の開口量が少なく、薬厚7.5mm未満ではスポール破壊は認められなかった。以上の実験結果に合致する各材料の破壊常数の設定を試みた。設定手順はAl2024の場合と同じく、時間依存型破壊則を組み込んだ差分解析コードで破壊常数を変えながら実験の数値シミュレーションを行うものである。この結果、数値シミュレーションが実験とほぼ類似の傾向を示す破壊常数を定めることができた。次に、スポール破壊防止手段として用いられているモーメンタムトラップ(MT)の効果を実験と数値シミュレーションによって確認することを試みた。すなわちAl2024供試体の自由表面に接して同一材料の表層体を設置し、単層の場合と同様の破壊実験を行った。表層体の厚さを1,2,5mmと変えて実験を行った結果、1mmの場合を除き、供試体のスポール発生を防止することを確かめた。また数値実験でも同様の結論を得た。衝撃波による材料の高速破壊として、固体に円筒状の収束波や発散波が作用する場合も考えられる。これらの衝撃波についても線爆を用いる生成方法を確立することができた。
Toll様受容体を分子標的としたSLEの新規治療法の開発

全身性エリテマトーデスは、自己抗体である抗DNA抗体の産生を特徴とする全身性自己免疫疾患である。その病因として、自己反応性B細胞の活性化、自己抗体産生が考えられている。Toll様受容体は、さまざまな病原体の菌体成分を認識する受容体で一部の受容体は、核酸成分を認識する。SLEの病因を解明する目的で、SLE患者末梢血リンパ球のTLR発現を検討した。その結果、SLE患者末梢血の、形質細胞様樹状細胞(PDC)においては、TLR9の発現は、変化がみられなかったがB細胞においては、健常人に比べ有意なTLR9の発現亢進がみられた。TLR9は、SLE患者の、抗DNA抗体から成る免疫複合体を認識し、B細胞、樹状細胞に活性化シグナルを送ることが明らかにされている。SLE患者、B細胞のTLR9発現の亢進は、SLE患者、流血中に増加している免疫複合体などの核酸成分の認識、B細胞のさらなる活性化を引き起こし、SLEの自己免疫発現の永続化に関与することが示唆された。全身性エリテマトーデス(SLE)患者の血清中には、抗ds-DNA抗体からなる免疫複合体(IC)が増加しておりこれらICが、臓器に沈着して、種々の病変を引きおこす。最近、これらICが、核配成分を認識するToll様受容体(TLR)のリガンドとなり、免疫担当細胞を刺激し、SLEの病因の一つである1型1FN、自己抗体産生を誘導することが知られている。そこで、SLE患者末梢血単核球のTLR発現を検討した。TLR2、TLR4は通常の細胞表面の染色で、TLR9は細胞膜を可溶化し、細胞質染色を行い検討した。対象はSLE患者15名、年令、性をマッチさせた健常人14名である。インフォームドコンセントが得られた全身性エリテマトーデス(SLE)患者の末梢血単核球および健常人の単核球を用いてToll様受容体(TLR)の発現を解析した。その結果、CD14陽性単球におけるTLR2およびTLR4の発現は、SLE症例において健常人に比べ低下していた。一方、CD14陽性単球におけるTLR9の細胞質の発現に関しては、SLE症例、健常人の間に有意の差はみられなかった。CD19陽性B細胞におけるTLR9の発現は、SLE患者において、健常人と比べ有意に亢進していた。以上の結果より、SLE患者末梢血単核球におけるTLR9発現には、異常がみられることが判った。TLR9は、SLE患者の、抗DNA抗体から成る免疫複合体を認識し、B細胞、樹状細胞に活性化シグナルを送ることか明らかにされている。
消化管病理検体に対するDNAチップを用いた遺伝子診断システムの確立と応用

消化管の病理検体に対するDNAチップを用いた癌の個性についての遺伝子診断システムを確立するために、次のことを行った。1.消化管癌の鑑別診断、個性診断用DNAチップの作成に関する基礎的検討手術的に切除された胃の高分化腺癌と低分化腺癌(スキルス癌)からRNAを抽出し、既知の癌関連遺伝子のcDNAマイクロアレイを用いて、遺伝子発現の組織型による相違を比較検討した。高分化腺癌では、integrin-beta4、cadherin、細胞周期調節因子、MAPKなどが、スキルス癌では、種々の増殖因子、MMP-2、MMP-3などのプロテアーゼが高発現していた。癌における発現異常には、CpGメチル化の関与が重要であった。さらに、多種の発現レベルの異なる遺伝子が検出されたが、胃癌における意義は現在不明である。これらについては、前癌性病変、早期癌、進行癌、転移癌での発現を比較し、また予後との相関を検討する必要がある。2.遺伝子多型(SNP)と癌病態(発癌感受性、薬剤感受性など)に関する検討E-cadherinの転写調節領域にはC/Aの一塩基変異多型rSNPがあり、A型はC型に比較して転写活性が弱いことが知られている。胃癌患者70例および健常対照者47例について、PCR-SSCPによりこのrSNPを検索したところ、胃癌患者には転写活性の高いgenotype(C/C型)が少ない傾向があった。さらに、胃癌患者の中でも、スキルス癌患者は、C/C型が19%、C/A型が81%、A/A型が0%と、有意にC/C型の割合が低かった。従って、E-cadherinのrSNPは、スキルス型胃癌の発生を予知する遺伝子マーカーである可能性がある。さらに検索を進め、それの基づいた消化管癌の診断用ミニチップを作成し、分子病理診断システムに導入することにより、新しい癌の予防・診断・治療が展開できる。
マルチエージェント系における情報量と制御性能の関係解明

本研究の目的は,マルチエージェント系を含む通信が中心的な役割を果たす制御糸を対象に,通信路を介して伝達される情報や,制御対象の動特性を表すモデルに不確実性がある場合を想定し,これらの不確実性がシステムの挙動に及ぼす影響を理論的に解析することである.昨年度までに,システムの安定化(または合意)を達成するために必要/十分な通信ビット数と通信障害の発生確率の限界を導出し,これらの安定化限界が不確実性によってどう変動するかを明らかにした.本年度の主な成果は以下の2点となる.(1)昨年度に構築したシステムモデルを,より一般的な枠組みに拡張し現実的な問題設定に近づけた.具体的には,制御対象のモデルについて,これまで既知としていたアクチュエータ側のパラメータにも不確かさがある場合を扱えるようになった,さらに,通信される情報の不確実性についても,ある期間に集中的に通信障害が発生する場合を表現できるように障害の発生モデルを一般化した.(2)システムの安定性に加え,収束速度についても解析を行った. Markov Jump Linear Systemsの結果を基に,状態の収束速度が,ある行列のスペクトル半径で評価できることを示した.これにより,安定化限界を満たしている場合にっいても,不確実性が収束速度をどの程度悪化させるかを評価することができるようになった.(抄録なし)本研究の目的は,複数のエージェントが局所的な通信を行いながら,全体としてある目的を達成するシステムであるマルチエージェント系において,通信路を介して伝達される情報や,エージェントの動特性を表すモデルに不確実性がある場合を想定し,これらの不確実性がシステムの挙動に及ぼす影響を理論的に解析することである.本年度は単一の通信路と一組の制御対象・制御器から成るネットワーク化制御系を対象として,「情報伝達の不確実性とモデルの不確かさに関して,システムの安定化を達成するためにはどの程度の確実性が必要か?」という問題に対する基礎理論の確立を目的とした.まず,制御対象と制御器間の情報伝達の不確実性と,制御対象の不確かさのモデル化を行った.とくに情報伝達の不確実性については,(1)デジタル信号の通信を想定して,観測した制御対象の状態が量子化された後に制御器に送信される.また,(2)輻輳や遅延などにより確率的に通信パケットがロスすると仮定した.つぎに,上記のシステムについて安定化を達成するための条件を求めた.得られた結果から,制御対象のモデルに不確かさがある場合には,既存の研究結果から示唆されるよりも陽に高い通信品質(不確実性の低い通信路)が求められることがわかった.また,通信資源をより効率的に使用する新たな量子化の手法を提案した.本研究の目的は,マルチエージェント系を含む通信が中心的な役割を果たす制御糸を対象に,通信路を介して伝達される情報や,制御対象の動特性を表すモデルに不確実性がある場合を想定し,これらの不確実性がシステムの挙動に及ぼす影響を理論的に解析することである.昨年度までに,システムの安定化(または合意)を達成するために必要/十分な通信ビット数と通信障害の発生確率の限界を導出し,これらの安定化限界が不確実性によってどう変動するかを明らかにした.本年度の主な成果は以下の2点となる.(1)昨年度に構築したシステムモデルを,より一般的な枠組みに拡張し現実的な問題設定に近づけた.具体的には,制御対象のモデルについて,これまで既知としていたアクチュエータ側のパラメータにも不確かさがある場合を扱えるようになった,さらに,通信される情報の不確実性についても,ある期間に集中的に通信障害が発生する場合を表現できるように障害の発生モデルを一般化した.(2)システムの安定性に加え,収束速度についても解析を行った. Markov Jump Linear Systemsの結果を基に,状態の収束速度が,ある行列のスペクトル半径で評価できることを示した.これにより,安定化限界を満たしている場合にっいても,不確実性が収束速度をどの程度悪化させるかを評価することができるようになった.当初の予定通り,通信路が単一なネットワーク化制御系について理論的な解析を中心に行った.また,得られた結果の妥当性を数値シミュレーションで確認した.研究成果を査読付きの国際学会で発表したほか,学術論文誌に投稿し,掲載が決定している.今後は,本年度得られた結果を大規模なシステムを対象とした理論へ発展させ,マルチエージェント系を含めたネットワーク化制御系について,情報量と制御性能の関係を明らかにする.その際,本年度に確立したモデルをもとに解析を行うが,現状のモデルは大規模システムの特徴に合致しない点があるためこれを改善する.(抄録なし)
生体膜中におけるαヘリックスの相互認識-膜蛋白質構築原理の研究

膜タンパク質の膜内ドメインは通常α-ヘリックスが数本集まってバンドルを作ることによって形成されている.これらのα-ヘリックスはループ部分によってつながっており、その為にα-ヘリックスは受動的に会合して構造形成が起こっていると考えられやすいが、われわれはリン脂質膜中でのα-ヘリックス間の相互認識こそが膜タンパク質構造形成の要因であると考え、バクテリオロドプシン発色団の構造形成が1本のポリペプチド鎖からでなく、構成するα-ヘリックスを単独で与えても起こるかどうかを調べることによって、一般の膜タンパク質構造の構築原理を明らかにしようとこの実験を行った.膜内でのペプチドの会合を調べる一般的な方法はないが、バクテリオロドプシンではヘリックスの会合がネイティヴタンパク質と同様正確に起こったときにのみレチナ-ルとの発色団が極めて特徴ある吸収を示し、構造が出来たかどうかを鋭敏に検出できるからである.バクテリオロドプシンは7本のα-ヘリックスA、B、・・Gを構成要素として持つが、A、BもしくはF、Gをそれぞれ単独のものとして与え、残りの部分、すなわちA、Bに対しては(C-G)、F、Gに対しては(A-E)という3成分系からの再構成をレチナ-ル存在下で行ったとき、収率1020%でネイティヴなバクテリオロドプシン発色団が再構成されることが明らかになった.すなわちつながっていないヘリックス同志が相互認識の結果、つながった場合と同じ本来の正しい構造を与え得ることが示された.このことは膜タンパク質の構造形成に際して、膜内α-ヘリックス間の相互認識がわれわれの最初の予測通り、第一原因として重要であることを示すものである.膜タンパク質の膜内ドメインは通常α-ヘリックスが数本集まってバンドルを作ることによって形成されている.これらのα-ヘリックスはループ部分によってつながっており、その為にα-ヘリックスは受動的に会合して構造形成が起こっていると考えられやすいが、われわれはリン脂質膜中でのα-ヘリックス間の相互認識こそが膜タンパク質構造形成の要因であると考え、バクテリオロドプシン発色団の構造形成が1本のポリペプチド鎖からでなく、構成するα-ヘリックスを単独で与えても起こるかどうかを調べることによって、一般の膜タンパク質構造の構築原理を明らかにしようとこの実験を行った.膜内でのペプチドの会合を調べる一般的な方法はないが、バクテリオロドプシンではヘリックスの会合がネイティヴタンパク質と同様正確に起こったときにのみレチナ-ルとの発色団が極めて特徴ある吸収を示し、構造が出来たかどうかを鋭敏に検出できるからである.バクテリオロドプシンは7本のα-ヘリックスA、B、・・Gを構成要素として持つが、A、BもしくはF、Gをそれぞれ単独のものとして与え、残りの部分、すなわちA、Bに対しては(C-G)、F、Gに対しては(A-E)という3成分系からの再構成をレチナ-ル存在下で行ったとき、収率1020%でネイティヴなバクテリオロドプシン発色団が再構成されることが明らかになった.すなわちつながっていないヘリックス同志が相互認識の結果、つながった場合と同じ本来の正しい構造を与え得ることが示された.このことは膜タンパク質の構造形成に際して、膜内α-ヘリックス間の相互認識がわれわれの最初の予測通り、第一原因として重要であることを示すものである.バクテリオロドプシンは好塩菌の外膜に紫膜の形で存在する膜蛋白質であって、光エネルギーを吸収してプロトンポンプとして働く.この蛋白質のポリペプチド鎖は膜内を貫通する7本のアルファヘリクス(A、B、・・、G)と、それらをつなぐループの部分からなっている.7本のアルファヘリックスはある特有な形で会合し、これらでできる特異的な空間にレチナ-ルが包み込まれていて、バクテリオロドプシン独特の吸収を示す.蛋白質三次構造は二次構造間の特異的な相互作用の結果生ずるが、最も単純かつ規則的な二次構造であるアルファヘリックス同士の会合様式を明らかにすることは蛋白質三次構造形成の原理を推察するのに最も有効であると考え、バクテリオロドプシンの7本アルファヘリックスの会合体形成をそのモデルとして実験を行った.天然バクテリオロドプシン同様の構造ができればレチナ-ルを取り込み、バクテリオロドプシンと同一の吸収スペクトルを示すはずで、このことを目安として構造形成を評価することができる.本年度はバクテリオドロプシン紫膜を単離精製し、キモトリプシンまたはV-8プロテアーゼ処理によってヘリックスCG部分(72番残基から248番まで)と、ヘリックスAE部分(1番残基から166番まで)の2種の部分ポリペプチドを得た.一方、固相法によってヘリックスA、B、F、Gに相当する4種のペプチド(それぞれ25、25、38、36残基)を化学合成し、それぞれを精製後、ペプチドA、BとヘリックスCG、およびヘリックスAEとペプチドF、Gとからの再構成実験を試みた.550nmにおける特有のレチナ-ル吸収の測定から、いずれの場合も1020%の収率でバクテリオロドプシンの構造ができていることが明らかになった.

このことから、ヘリックスA、B、F、Gが他のヘリックスと会合するためにはそれらをつなぐループ部分は必要ないことが明らかになった.すなわちこの蛋白質は1本のポリペプチド鎖である必要はなく、ばらばらのヘリックスからでも構造ができる.平成7年度の予備的研究において、バクテリオロドプシンの構造形成においてバクテリオロドプシンがリン脂質膜中につくる7本のα-ヘリックス(A、B、・・・G)の中、ヘリックスA、B、F、Gはそれぞれ独立したものとして与えてもバクテリオロドプシンの構造形成が起こることを示唆する結果が得られたが、平成8年度の研究においてはその結果を確定するとともに、再構成率の増加と、バクテリオロドプシンの生理的機能、すなわち光駆動プロトンポンプ機能を直接検証することを目指した.再構成率の最適化の中、再構成時間に関しては単独α-ヘリックスからの再構成率は、バクテリオオプシンとレチナ-ル、もしくは大きなバクテリオオプシン断片(キモトリプシン消化で得られるものなど)の場合とは異なり、再構成には50時間以上を要することが判明した.再構成率に及ぼす脂質組成の検討の結果、CHAPS濃度は高いほど、またペプチド成分はペプチド-DMPC比が小さいほど再構成率が高いことが判ったが、従って最適化は実用とは相反することを示しており、現在得られた値、1020%を大幅にあげることは難しいと思われる.プロトンポンプ機能についても変化量が小さいために通常のガラス電極での測定は極めて困難で、色素の利用は色素とペプチドとの相互作用のためにうまくいかなかった.α-ヘリックス内残基置換の試みの一環としてレチナ-ルが結合するリシン216を両隣のアラニンもしくはバリンと入れ替えた変異ヘリックスGでは現在未だ再構成に成功していない.しかしいずれにしても膜タンパク質の膜内ドメインの構造はα-ヘリックス間の相互認識で形成されるというわれわれの考えは立証されたと思われる。
離散レベルをもつ量子系のダイナミックスと光子系の直接数値シミュレーション

離散レベル系の量子系の例として原子系のハミルトニアンをスピン系表した系が光子の相互作用する場合の量子力学的な運動に関する直接的な数値シミュレーションの方法を開発しJC模型、およびそれを拡張した模型の性質を調べた。特に、従来の密度行列の方法と等価な確率的なシュレディンガー方程式によるシミュレーションの方法を導入し、光子の緩和や原子系の励起の様子をよりリアルに観測できる方法を開発した。それらの方法でいろいろな励起の機構のもとでの光子系のスクイージング様子を調べ、JC模型ではポアソン型の光子数分布の傾向が強いことを見出した。さらに、原子系が複数個の原子からなる場合、原子系の励起がコヒーレントに行われる場合とそうでない場合の違いなども調べた。また、量子的動揺が大きな系での低温における性質を調べるため一次元量子スピン系の研究に関する量子モンテカルロ法の方法を開発した。特に、相互作用に競合のある場合に問題となる負符号問題に対する実際的な解決法としての転送行列モンテカルロ法を開発し低温でのゆらぎの在り方を研究した。また、系の素励起の運動を明らかにするため系の低エネルギーの分散関係を量子モンテカルロ法で求める方法を開発し、一次元S=1反強磁性ハイゼンベルク模型に適用しこの系の特有な励起パターンの運動形態を調べた。さらに、素励起間の相互作用の影響も明らかにした。熱的なゆらぎが存在しないような低温での緩和メカニズムについて幾つかの提案をし、それらの機構の中でどのような緩和が起こるか実際に数値シミュレーションを行ないそれらの性質を明らかにした。特に、外場をゆっくり変えることで系を断熱的に変える場合、系が準安定性を持つとき緩和はトンネル現象が必要になるにもかかわらず従来知られているランダウ・チェナ-型の緩和率で整理できることを発見した。また、準安定な状態にある系での緩和現象における光子系との相互作用の重要性も指摘した。特に、真空ラビ分裂により原子系だけでは準安定な系が量子ゆらぎをもち、基底状態にある光子系との相互作用で量子核形成を引き起こすことを見出した。
フリーラジカルによる神経細胞死と神経細胞保護

強力な内在性dopamine (DA)の遊離促進剤であるmethamphetamine (MA)の投与によってDA neuronが障害される.遊離されたDAの自動酸化によってできるhydroxyl radical (・OH)がその原因の一つと考えられているが,ヒトParkinson病においても本来生理的な存在であるDAから形成される・OHが病因的に重要と見られている.本研究では,線条体内のDA遊離によって始まる生体内での・OH形成過程の解明と,DA neuron保護に有用な薬剤を見いだすことを目的に,MA投与によるC57black mouseのparkinsonismモデル脳を用いて実験を行った.MA投与1時間後に線条体内で発生した・OH量はsalicylic acid (SA)を用いて捕捉定量・(OHとSAの反応生成物をHPLCで測定)し,DA neuronの変性の程度はMA投与後72時間目の線条体のDA含有量ないしチシロン水酸化酵素活性を指標として,投与薬剤による・OH産生抑制(または捕捉量)とDAneuron保護の検討を行った.その結果,deprenylないしclorgyline (MAO, monoamine oxidaseBないしA阻害剤)によるDAの酸化阻害,deferoxamine (鉄キレート剤), amfoneric acid (DA teansporter阻害剤)により・OHの産生が抑制され, MAOによるDA酸化,DAの再取り込み機構,鉄イオンによる触媒が,DA遊離に続く生体内・OH産生に関与することが明らかとなった.また,上記薬剤および・OH消去剤(dimethylsulfoxideおよびbromocriptine)のDA neuronに対する保護作用が明らかとなった.類似の作用機序がある薬剤のParkinnsonn病治療への応用が考えられる.強力な内在性dopamine (DA)の遊離促進剤であるmethamphetamine (MA)の投与によってDA neuronが障害される.遊離されたDAの自動酸化によってできるhydroxyl radical (・OH)がその原因の一つと考えられているが,ヒトParkinson病においても本来生理的な存在であるDAから形成される・OHが病因的に重要と見られている.本研究では,線条体内のDA遊離によって始まる生体内での・OH形成過程の解明と,DA neuron保護に有用な薬剤を見いだすことを目的に,MA投与によるC57black mouseのparkinsonismモデル脳を用いて実験を行った.MA投与1時間後に線条体内で発生した・OH量はsalicylic acid (SA)を用いて捕捉定量・(OHとSAの反応生成物をHPLCで測定)し,DA neuronの変性の程度はMA投与後72時間目の線条体のDA含有量ないしチシロン水酸化酵素活性を指標として,投与薬剤による・OH産生抑制(または捕捉量)とDAneuron保護の検討を行った.その結果,deprenylないしclorgyline (MAO, monoamine oxidaseBないしA阻害剤)によるDAの酸化阻害,deferoxamine (鉄キレート剤), amfoneric acid (DA teansporter阻害剤)により・OHの産生が抑制され, MAOによるDA酸化,DAの再取り込み機構,鉄イオンによる触媒が,DA遊離に続く生体内・OH産生に関与することが明らかとなった.また,上記薬剤および・OH消去剤(dimethylsulfoxideおよびbromocriptine)のDA neuronに対する保護作用が明らかとなった.類似の作用機序がある薬剤のParkinnsonn病治療への応用が考えられる.
新規なホウ素種/亜鉛交換反応を用いる環境調和型不斉スピロ環構築法の開発

βーアミドアリルボロン酸エステルとイミド誘導体によるアザスピロラクトン化反応の不斉反応への展開を検討した。イミド原料とアリルボロン酸エステルの反応に対する直接的な不斉アザスピロラクトン化は極めて低い選択性にとどまったため、断念した。一方、同反応の中間体のヒドロキシラクタムを単離し、これに対し、臭化マグネシウムとキラルアミノフェノール誘導体を共に触媒量添加したところ、中程度の不斉誘導が実現できた。さらに、得られた環化体に対してマイケル付加して生じるジアステレオマーを分離することで光学純度を低下させることなく誘導体を得、この化合物を単結晶とし、X線構造解析を行うことで、本反応生成物のスピロ炭素上の絶対立体配置がS配置であることを明らかとした。また、前述のヒドロキシラクタム中間体の利用範囲拡大のため、窒素原子上に種々の置換基を導入したフタルイミド誘導体とβーアミドアリルボロン酸エステルを用いたアミドアリル化反応を行った。その結果、いずれの基質を用いた場合においても中程度の収率にてヒドロキシラクタムが得られることが分かった。さらに、得られた生成物を酸性条件下にて環化することでN,O-スピロ環状構造をもつ新規なアザスピロ化合物を高収率にて得た。一方、同ヒドロキシラクタムの側鎖アミド基上をBoc基で保護し、さらに塩基性条件下にて環化することでN,N-スピロ環構造をもつアザスピロ化合物を高収率にて得た。これにより、同一のヒドロキシラクタム中間体から3種類のスピロラクタム、またはスピロラクトンを合成する手法を確立した。β-アミドアリルボロン酸エステルとイミド誘導体を基質とする不斉反応検討では、臭化亜鉛、炭酸カリウム、クラウンエーテル共存下、(S)-BINOLや光学活性なアミノフェノールを配位子として用いても、生成物のエナンチオマー過剰率は極めて低かったため、直接的な不斉アザスピロラクトン化を断念した。次に、ヒドロキシラクタム中間体からの不斉反応を試みることとし検討を行った。種々の添加剤の調査の結果、臭化マグネシウムと新たに合成した光学活性なアミノフェノールを添加することで収率とエナンチオマー過剰率が向上し、目的性生物が92%, 56% eeにて生成することが明らかとなった。合成したアザスピロ-γ-ラクトンの絶対立体配置は、まず再結晶を行うことで光学的に純粋な化合物を得、4-クロロベンゼンチオールをMichael付加して生じるジアステレオマーを分離した。得られた化合物の光学純度は99% eeであり、これをクロロホルム溶液から単結晶を晶出させ、X線構造解析により分析することで、そのスピロ炭素上はS配置をもつことが明らかとなった。他方、上述のヒドロキシラクタム中間体に対し、酸性添加剤を加えて加熱処理したところ、ラクタム環が新たに形成された化合物を与えた。本反応の効率は酸触媒のpKaに強く依存し、安息香酸誘導体が最も良い結果を与えた。これに対し、同中間対をBoc化し、次いで炭酸カリウムとクラウンエーテル共存下アルコール溶媒中で反応を試みたところ、高収率でラクタム環が形成することが明らかとなった。これらの結果より、亜鉛触媒共存下、β-アミドアリルボロン酸エステルとイミド誘導体から得られるヒドロキシラクタムは3種類のスピロラクタム、またはスピロラクトンの共通中間体として利用できることが示された。以上のことから、当該研究は概ね順調に進展したものと判断される。現状において合成したスピロ化合物のうち、エナンチオ選択的合成に成功したものは1種類であるうえ、中程度の選択性にとどまっている。次年度はより有効な不斉反応場を構築する配位子構造を探索し、更なる選択性の向上を目指す。また、残る2種類の化合物の不斉合成にも挑戦する。アミド修飾されたアリルボロン酸エステルの合成を検討した。従来のアリルすず合成の手法に倣って調製した活性種をボロン酸とした後、ネオペンチルグリコールとピナコールによりボロン酸エステル誘導体とすることで、安定に単離することに成功した。特にネオペンチルグリコールから得られる誘導体は結晶性の極めてよい固体であり、長期保存に耐えうる化合物であることが明らかとなった。さらに、その結晶をX線構造解析により解析することで構造を再確認するとともに、ホウ素原子とアミド部位の相互作用がその安定性に寄与している可能性を明らかとした。これらを用いた反応検討においては、ピナコール誘導体に比べネオペンチルグリコール誘導体が優位な反応性を示すことが明らかとなった。さらにイサチンとの反応において、添加剤を加えない場合はほとんど反応が進行しなかったのに対し、塩基性条件や亜鉛試薬を添加すると劇的に反応性が向上することが明らかとなった。また、亜鉛試薬を添加する系において、キラルアミノフェノール試薬を添加することで、極めて高い立体選択性にてアリルアルコール体を生成することを明らかとした。この反応は広範なイサチン基質に適用可能であり、従来のアリルすず試薬を使用するスピロオキシインドール合成法の代替として利用可能であった。加えて、上記のアミドアリルボロン酸エステルの更なるスピロ環合成への利用を目指し、イミドとのアザスピロラクトン化へと適用した。この反応においても亜鉛種の添加は反応の成否に直結しており、アミドアリルボロン酸エステルによるカルボニル化合物への求核付加反応が亜鉛種により活性化されることを明らかとすることが出来た。

N-置換メタクリルアミドに対し、ジアニオンを経由するホウ素化反応を行い、さらにホウ素化された中間体をネオペンチルグリコールとピナコールでボロン酸エステルとした。これにより2352%で純粋なアミドアリルボロン酸エステルを得た。得られた一連の生成物は大気中室温下で安定な固体であり、ネオペンチルグリコールから誘導される化合物は単結晶を与えた。これをX線構造解析により分析したところ、カルボニル基の酸素原子とホウ素原子が近接していることが明らかとなった。合成したアミドアリルボロン酸エステルをイサチンと作用させたところ、トルエン溶媒中添加剤を加えない場合は極めて低い収率であったのに対し、触媒量のジエチル亜鉛を添加すると、劇的に反応性が向上し、97%の付加体を与えた。続く不斉触媒反応の検討では、キラルジオールを添加した場合、生成物のエナンチオマー過剰率に偏りはみられなかった。他方、L-バリンより誘導したアミノフェノールを用いると飛躍的な反応効率の向上が確認され、クロロホルム溶媒中にて-30°C下でも3時間で反応が完結した。この反応で得られた生成物のエナンチオマー過剰率は89% eeであり、極めて高いエナンチオ選択性で反応が進行していた。また、アミノフェノール上のアミド窒素原子上の置換基を2,4,6-トリメチルベンジル基へと変換したところ、エナンチオ選択性が向上し、92% eeの目的物を収率95%で与えた。さらにラセミ合成ではあるものの、イミドとの反応においてアザスピロ-γ-ラクトンを与えることも確認しており、この反応系でも亜鉛添加剤が有効であることを明らかとした。これらの結果は、亜鉛種がアミドアリルボロン酸エステルを利用する反応において良好な触媒として機能していることを示しており、今後の反応開発において極めて重要な成果である。このことから、当該研究は概ね順調に進展したものと判断される。βーアミドアリルボロン酸エステルとイミド誘導体によるアザスピロラクトン化反応の不斉反応への展開を検討した。イミド原料とアリルボロン酸エステルの反応に対する直接的な不斉アザスピロラクトン化は極めて低い選択性にとどまったため、断念した。一方、同反応の中間体のヒドロキシラクタムを単離し、これに対し、臭化マグネシウムとキラルアミノフェノール誘導体を共に触媒量添加したところ、中程度の不斉誘導が実現できた。さらに、得られた環化体に対してマイケル付加して生じるジアステレオマーを分離することで光学純度を低下させることなく誘導体を得、この化合物を単結晶とし、X線構造解析を行うことで、本反応生成物のスピロ炭素上の絶対立体配置がS配置であることを明らかとした。また、前述のヒドロキシラクタム中間体の利用範囲拡大のため、窒素原子上に種々の置換基を導入したフタルイミド誘導体とβーアミドアリルボロン酸エステルを用いたアミドアリル化反応を行った。その結果、いずれの基質を用いた場合においても中程度の収率にてヒドロキシラクタムが得られることが分かった。さらに、得られた生成物を酸性条件下にて環化することでN,O-スピロ環状構造をもつ新規なアザスピロ化合物を高収率にて得た。一方、同ヒドロキシラクタムの側鎖アミド基上をBoc基で保護し、さらに塩基性条件下にて環化することでN,N-スピロ環構造をもつアザスピロ化合物を高収率にて得た。
第一次世界大戦から1930年代までのロシアにおける身体――労働・医療・モラル

第一次世界大戦からロシア革命を経てスターリン体制の成立にいたる20世紀ロシア史の社会変動を、身体の経験から検討する。当該期の社会変動は、人間生活の基本的な単位である身体において、個々人に直接に関わる形で受け止められた。本研究は身体の経験(身体はどう観念され、どう扱われたか)という視座から、日常性のレベルの変動と、国家・社会全体に関わるレベルの変動とを統合的に把握する。同時に、当該期における社会変動の巨大さにもかかわらず、旧来の政治・社会構造の諸要素が持続し、再生産されたことについても、身体の経験という視座から統合的に理解する。具体的には、労働・医療・モラルという三つの分野に焦点を当てる。
内部特異点フリーなシザース・ペア・ダブルジンバルCMGの開発と駆動制御法の研究

宇宙機の大型化・高速姿勢変更による多点観測要求の高まりから,大トルク出力装置であるコントロールモーメントジャイロ(CMG)を姿勢制御装置として使用する必要性が高まっている.CMGには特異点が存在し,これを解消するために多数の研究されてきている.しかし,重量の増加,複雑な特異点回避制御則を必要とするなど依然として課題が多い.本研究では,CMGユニット数が少なく,特異点問題・トルク発生反応速度の遅さを機構的に同時解消できる新形態として,シザース・ペア・ダブルジンバルCMG(SPDGCMG)を提案,ジンバル駆動法を考案し,従来形態によるトルク発生性能を超えることを理論的かつ実験的に検証する.宇宙機の大型化・高速姿勢変更による多点観測要求の高まりから,大トルク出力装置であるコントロールモーメントジャイロ(CMG)を姿勢制御装置として使用する必要性が高まっている.CMGには特異点が存在し,これを解消するために多数の研究されてきている.しかし,重量の増加,複雑な特異点回避制御則を必要とするなど依然として課題が多い.本研究では,CMGユニット数が少なく,特異点問題・トルク発生反応速度の遅さを機構的に同時解消できる新形態として,シザース・ペア・ダブルジンバルCMG(SPDGCMG)を提案,ジンバル駆動法を考案し,従来形態によるトルク発生性能を超えることを理論的かつ実験的に検証する.
表情識別インタフェースによる自閉症児の共感性の定量的検討

本研究の目的は動物介在療法を自閉症スペクトラム障害児(ASD児)に実施すると問題行動の減少やコミュニケーション行動の促進がなぜ起こるかについて最近、我々が動物介在療法やロボット介在療法中に発見し報告した「最初は笑顔とアイコンタクトの同期は起こらないASD児が、笑顔量が増加すると笑顔と相手の目を見る行動が徐々に同期する」ことに着目し、ASD児の未発達は共感的行動(アイコンタクト)が動物介在療法により促進されるかを検討し、同時に動物の目を見つめる際に愛情ホルモン、オキシトシンの分泌がASD児で増加されるかを検討することである。この目的を達成するため、2018年度は以下の研究実施計画を実施した。研究に参加したASD児は近郊の特別支援学校や自閉症児の親御さんのサークルから10名(男子9名女子1名、年齢は6歳17歳)を得た。これら10名の研究参加者に個別でセラピードッグと触れ合うドッグセッションを30分40分実施した。各参加者は2018年11月初旬から1か月に1回のインターバルでドッグセッションに各自合計78回参加した。笑顔生起頻度等については装着型表情推定インタフェースを用いて1)ドッグセラピー前の安静時、2)ドッグセラピー実施中、3)ドッグセラピー後、のそれぞれの状況で定量的に測定した。同時に愛情ホルモンオキシトシン濃度を各ASD児の尿サンプルから検定するため、1)ドッグセッション実施日に自宅を出る前の尿、2)ドッグセッションを体験した直後の尿を5mlチューブに採取し、ドライアイスで急速冷凍し、現在、これらの尿試料を用いてオキシトシン濃度を測定中である。また、笑顔とアイコンタクトの同期についての解析は今後、1)ダートフィッシュ解析ソフトによる行動ビデオ解析と2)装着型表情推定インタフェースによる笑顔量解析を行い、両データをつき合わせて解析を進める予定である。参加児童(ASD児)と親御さんの大変協力的なご参加のおかげでドッグセラピーそのものの実施と表情識別インタフェースによる笑顔測定、それから尿サンプル採取、ビデオによる笑顔や社会的行動の録画は大変円滑に実施できた。ただ、当初、2018年12月から尿サンプルの生化学的検定によりオキシトシン濃度を測定する予定であったが、残念ながら、尿を濃縮する装置がパイロットスタデイでの運転直後に壊れたため、新規に装置を購入する事態となり、その予算獲得などの為に装置の導入が2019年4月上旬となり、オキシトシンの解析が大幅に遅れた。そのため、2019年日本神経科学学会(新潟)での発表に間に合わせることができなかったことは残念である。ただ、現在、解析はスタートしたので、5月下旬には大よその解析結果が出ると判断している。笑顔や犬との触れ合い行動などの行動解析はもともと、2019年の春以降に解析をスタートする計画であったので、この点については遅れは出ていない。故に、オキシトシン解析が測定機器の故障によりやや遅れてはいるが、自閉症児のドッグセラピー研究そのもののデータは研究計画通りのASD児10名から順調に得られているので、特に研究計画上、問題はないと判断している。ただ、ASD児のドッグセッション参加は順調であるものの、コントロール群(普通児)の実施はセラピードッグが名古屋から横浜の日体大キャンパスに月に1回のペースで出張してくる関係上、自閉症児用のセッションと同時並行で普通児用のセッションを実施することが物理的に無理であった。そのため、犬にとって暑さの厳しい6月8月の研究実施を避け、2019年の10月初めから、コントロール群用の測定を始める予定である。そのため、研究結果の全体像を把握できるのは、ASD児のデータとコントロールのデータが出そろう2020年2月ぐらいになる予定である。2019年5月18日・19日の第8回ドッグセッションを実施すると、ASD児に対する研究データはつつがなくすべて採取できたことになる。5月半ばから9月中旬までは、主としてデータ解析を精力的に実施する。それと並行して、ASD児のデータと比較検討するために普通児の被験者を10名確保し、10月からの本実験の準備をする予定である。普通児10名はすでに確保してあるので、7月の夏休みに入る前に、普通児10名の保護者に研究の説明会を行い、研究参加の同意書を頂く作業を行う予定である。普通児に対するドッグセッション(犬と遊ぶセッション)は10月初旬から各参加児童に対して合計3回行う予定である(1カ月に1回のインターバル)。病気あるいは学校の行事などで、予定日に参加できない児童が数名出てくることを予想して、予備セッションを12月下旬に1回、2020年1月に1回用意し、10名すべての参加児童に対して3回のドッグセッションへの参加およびデータの採取を試みる予定である。オキシトシン解析装置も新しくなったので、データの解析は2020年1月から開始したとしても2月には完了する予定であるので、あとは、行動データをダートフィッシュ解析ソフトで解析する作業と表情識別インタフェースにより笑顔の定量的測定を実施し、笑顔とアイコンタクトのズレが自閉症児でどの程度、セッションの回を重ねるにしたがって、改善されてくるかを解析し、同時に、1)犬と児童が見つめあう頻度とオキシトシン濃度の関係、2)笑顔量の変化とオキシトシン濃度の変化の関係などを定量的に解析する予定である。

本研究の目的は動物介在療法を自閉症スペクトラム障害児(ASD児)に実施すると問題行動の減少やコミュニケーション行動の促進がなぜ起こるかについて最近、我々が動物介在療法やロボット介在療法中に発見し報告した「最初は笑顔とアイコンタクトの同期は起こらないASD児が、笑顔量が増加すると笑顔と相手の目を見る行動が徐々に同期する」ことに着目し、ASD児の未発達は共感的行動(アイコンタクト)が動物介在療法により促進されるかを検討し、同時に動物の目を見つめる際に愛情ホルモン、オキシトシンの分泌がASD児で増加されるかを検討することである。この目的を達成するため、2018年度は以下の研究実施計画を実施した。研究に参加したASD児は近郊の特別支援学校や自閉症児の親御さんのサークルから10名(男子9名女子1名、年齢は6歳17歳)を得た。これら10名の研究参加者に個別でセラピードッグと触れ合うドッグセッションを30分40分実施した。各参加者は2018年11月初旬から1か月に1回のインターバルでドッグセッションに各自合計78回参加した。笑顔生起頻度等については装着型表情推定インタフェースを用いて1)ドッグセラピー前の安静時、2)ドッグセラピー実施中、3)ドッグセラピー後、のそれぞれの状況で定量的に測定した。同時に愛情ホルモンオキシトシン濃度を各ASD児の尿サンプルから検定するため、1)ドッグセッション実施日に自宅を出る前の尿、2)ドッグセッションを体験した直後の尿を5mlチューブに採取し、ドライアイスで急速冷凍し、現在、これらの尿試料を用いてオキシトシン濃度を測定中である。また、笑顔とアイコンタクトの同期についての解析は今後、1)ダートフィッシュ解析ソフトによる行動ビデオ解析と2)装着型表情推定インタフェースによる笑顔量解析を行い、両データをつき合わせて解析を進める予定である。参加児童(ASD児)と親御さんの大変協力的なご参加のおかげでドッグセラピーそのものの実施と表情識別インタフェースによる笑顔測定、それから尿サンプル採取、ビデオによる笑顔や社会的行動の録画は大変円滑に実施できた。ただ、当初、2018年12月から尿サンプルの生化学的検定によりオキシトシン濃度を測定する予定であったが、残念ながら、尿を濃縮する装置がパイロットスタデイでの運転直後に壊れたため、新規に装置を購入する事態となり、その予算獲得などの為に装置の導入が2019年4月上旬となり、オキシトシンの解析が大幅に遅れた。そのため、2019年日本神経科学学会(新潟)での発表に間に合わせることができなかったことは残念である。ただ、現在、解析はスタートしたので、5月下旬には大よその解析結果が出ると判断している。笑顔や犬との触れ合い行動などの行動解析はもともと、2019年の春以降に解析をスタートする計画であったので、この点については遅れは出ていない。故に、オキシトシン解析が測定機器の故障によりやや遅れてはいるが、自閉症児のドッグセラピー研究そのもののデータは研究計画通りのASD児10名から順調に得られているので、特に研究計画上、問題はないと判断している。ただ、ASD児のドッグセッション参加は順調であるものの、コントロール群(普通児)の実施はセラピードッグが名古屋から横浜の日体大キャンパスに月に1回のペースで出張してくる関係上、自閉症児用のセッションと同時並行で普通児用のセッションを実施することが物理的に無理であった。そのため、犬にとって暑さの厳しい6月8月の研究実施を避け、2019年の10月初めから、コントロール群用の測定を始める予定である。