hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
リコンビナントマイクロプラスミンを用いた糖尿病黄斑浮腫の治療

糖尿病黄斑浮腫は糖尿病の罹患期間の持続により高頻度に発症し、視力低下の大きな原因になる。治療の一つの選択として硝子体手術を行い、後部硝子体剥離を作製することでかなりの改善もしくは病勢の維持が得られるが、手術による合併症もかなりみられることから、Enzymatic Vitreolysisの導入としてRecombinant microplasminを用い、化学的に後部硝子体剥離を作製することを試みた。リコンビナントマイクロプラスミン(rmpli)は、硝子体腔内に注入するとウサギ硝子体を網膜面から剥離すること、およびその眼内での安全性について、投与後90日間観察した。高濃度では一時、網膜電図(ERG)上でa波およびb波の減弱がみとめられたが、全例で90日までの間に、正常に復位していた。(IOVS46:3295-9,2005に発表)現在rmpliの臨床治験が海外で行われているため、我が国での使用はまだできない。従って本治療の選択肢の一つとして、自己血由来のプラスミンを用いる臨床応用を、かなりの症例数行うことが出来た(53症例)。プラスミノーゲンの作製にあたって、エンドトキシンフリーのキットの作製も成功し、これを用いて作製したプラスミンを使用し、良好な結果が得られた。(EJO15:787-94,2005に発表)糖尿病黄斑浮腫では、硝子体手術時の術中使用において後部硝子体剥離(PVD)が誘発され、手術を短時間で安全に行えた。また単独硝子体内投与(手術施行無し)でもPVDが発生し、浮腫の軽減、視力向上の良好な結果が得られた。自己血由来プラスミンとマイクロプラスミンは、同様にPVDを作製することから、今後リコンビナントマイクロプラスミンが臨床に用いられることになると、有望な治療の選択肢の一つとなるであろう。基礎実験として、家兎の硝子体腔中に1ml中microplasmin12.5μg及び25μgを含む溶液を注入し、硝子体剥離の有無を超音波Bモードで確認し、毒性の実験として電気生理学的(ERG)及び光学及び電子顕微鏡による観察を行った。観察期間は注入翌日から14日まで、また長期の毒性検査のため90日まで行った。結果:注入後前房及び前部硝子体腔中に軽度の細胞浸潤をみとめたが、数日で消失した。超音波B-モード検査では、12.5μg注入眼では完全後部硝子体剥離は全例におきなかったが、25μg注入眼では全例で完全後部硝子体剥離が完成した。光学顕微鏡検査では、網膜には異常は認められなかった。走査電子顕微鏡検査では12.5μg注入眼では硝子体線維が内境界膜上にみとめられる症例があったが、25μg注入眼では全例で残存する硝子体はなかった。ERG検査では一過性のa波及びb波の減弱がみとめられたが、1週間後には回復し、90日後では全く正常になっていた。以上から、リコンビナントマイクロプラスミンは後部硝子体剥離を作製するのに有用であり、多少の異物反応が眼内で起きるものの、安全に臨床応用即ち糖尿病黄斑症に対する後部硝子体剥離作製に用いられるものと思われた。

リコンビナントマイクロプラスミン(rmpli)は、硝子体腔内に注入するとウサギ硝子体を網膜面から剥離すること、およびその眼内での安全性について、投与後90日間観察した。高濃度では一時、網膜電図(ERG)上でa波およびb波の減弱がみとめられたが、全例で90日までの間に、正常に復位していた。(IOVS46:3295-9,2005に発表)昨年の実施計画の如く、現在rmpliの臨床治験が海外で行われているため、我が国での使用はまだできない。従って本治療の選択肢の一つとして、自己血由来のプラスミンを用いる臨床応用を、かなりの症例数行うことが出来た(53症例)。プラスミノーゲンの作製にあたって、エンドトキシンフリーのキットの作製も成功し、これを用いて作製したプラスミンを使用し、良好な結果が得られた。(EJO15:787-94,2005に発表)糖尿病黄斑浮腫では、硝子体手術時の術中使用において後部硝子体剥離(PVD)が誘発され、手術を短時間で安全に行えた。また単独硝子体内投与(手術施行無し)でもPVDが発生し、浮腫の軽減、視力向上の良好な結果が得られた。
チップ・パッケージレベルのノイズ抑制を目的とした磁性膜応用に関する研究

本研究課題では,磁性薄膜で生じる伝導および誘導ノイズ抑制効果を利用し,チップおよびパッケージ間のインター/イントラデカップリング効果を最大とする設計指針を確立することを目的としている,本年度は,研究実施計画に基づいて,以下の2点についての研究を遂行した.1.磁性膜を回路上に配置することによる磁束分布の変化の明確化昨年度,ICチップ上に集積化したCoZrNb膜によるシールド効果は,1.1 GHzの強磁性共鳴周波数以下の周波数帯域では効果があったが,共鳴周波数以上の周波数帯域において負となる周波数帯が存在すること,その定量的な導出ができていない等,設計指針を考察するにあたり課題が存在していた.これに対し本年度は,シールド効果を磁性膜の外部空間も含めた磁気回路[室賀翔,電気学会全国大会,2-144,Mar.2012]を構築し,シールド効果の定量的な導出を行い,その妥当性をコプレーナ上に配置した250 nm厚のCoZrNb膜によるシールド効果の近傍磁界計測により実証した.これにより,磁性膜の寸法・材料特性および磁性膜に生じる反磁界を考慮することで,シールド効果を定量的に導出可能となった.更に,磁性膜によるチップ外部への誘導ノイズ減効果,すなわちチップレベルのインターデカップリングへの有用性を示した.2.イントラデカップリングの実証実験同一面内に2つのコイルを配置したICチップ上に300 nm厚のCoZrNb膜を体積し,コイル間の伝送特性を計測した結果,1.8 GHzにおいて18 dBの抑制効果が得られた.この結果より,磁性膜によるチップ内部への誘導ノイズ減効果,すなわちチップレベルのイントラデカップリングへの有用性を示した.更に,この結果は,1で述べた磁性膜の寸法・材料特性および磁性膜に生じる反磁界を考慮し,導出した解析結果と一致している.以上の結果より,磁性膜の寸法・材料特性および磁性膜に生じる反磁界を考慮し,1.で述べた磁気回路網を用いれば,インター/イントラデカップリング効果を最大とする膜設計が可能となることを示した.本研究課題では,磁性薄膜で生じる伝送ノイズ抑制効果および磁性薄膜の高透磁率に基づく高周波磁気シールド効果を利用したインター/イントラデカップリングの低減効果を最大とする設計指針を確立することを目指している.本年度は,研究実施計画に基づいて,以下の3点について研究を遂行した.1.磁性薄膜による電磁ノイズ抑制効果と寸法・配置との関係の検討および2.試作チップ上への薄膜電磁ノイズ抑制体の試作および電磁ノイズ抑制効果の評価ノイズ源回路搭載チップ上に膜厚0.21.0μmのCoZrNb薄膜を堆積させた際の磁気シールド効果を測定し,シールド効果の膜厚・透磁率依存性を考察した.本研究課題では,飽和磁化が高く,異方性磁界が低いアモルファスCo_<85>Zr_3Nb_<12>薄膜を用いた.この磁性膜をRFマグネトロンスパッタ装置を用いて60μm厚のポリイミド上に製膜し,ノイズ発生回路を搭載したチップ上に設置した.また,平行して有限要素法を用いた電磁界解析も行った.その結果,90%以上の抑制効果を得るための比透磁率と膜厚の積が,1,950μm必要であることを明らかにした.3.磁性/非磁性薄膜内における電流分布のシート抵抗依存性およびノイズ抑制効果の検討薄膜電磁ノイズ抑制体で生じる渦電流のシート抵抗依存性を定量的に考察するため,円盤の膜面垂直方向に磁界を印加したモデルにおける渦電流損失の計算を行った(S.Muroga et al.,電子情報通信学会論文誌C,Vol.J94-C, pp.39-44, 2011).微小円盤における渦電流のシート抵抗依存性を考察し,その微小円盤を,薄膜電磁ノイズ抑制体の膜長および膜幅方向に,多数並べたモデルを解析した,薄膜内の渦電流の経路は,微小円盤を薄膜の膜長および膜幅方向に多数並べることで適用したモデルを用いて,各微小円盤内で発生する渦電流を重ね合わせることにより説明することができることを示した.以上により,微小円盤モデルが薄膜電磁ノイズ抑制体の渦電流解析に極めて有用であることを明らかにした.本研究課題では,磁性薄膜で生じる伝導および誘導ノイズ抑制効果を利用し,チップおよびパッケージ間のインター/イントラデカップリング効果を最大とする設計指針を確立することを目的としている,本年度は,研究実施計画に基づいて,以下の2点についての研究を遂行した.1.磁性膜を回路上に配置することによる磁束分布の変化の明確化昨年度,ICチップ上に集積化したCoZrNb膜によるシールド効果は,1.1 GHzの強磁性共鳴周波数以下の周波数帯域では効果があったが,共鳴周波数以上の周波数帯域において負となる周波数帯が存在すること,その定量的な導出ができていない等,設計指針を考察するにあたり課題が存在していた.これに対し本年度は,シールド効果を磁性膜の外部空間も含めた磁気回路[室賀翔,電気学会全国大会,2-144,Mar.2012]を構築し,シールド効果の定量的な導出を行い,その妥当性をコプレーナ上に配置した250 nm厚のCoZrNb膜によるシールド効果の近傍磁界計測により実証した.これにより,磁性膜の寸法・材料特性および磁性膜に生じる反磁界を考慮することで,シールド効果を定量的に導出可能となった.更に,磁性膜によるチップ外部への誘導ノイズ減効果,すなわちチップレベルのインターデカップリングへの有用性を示した.

2.イントラデカップリングの実証実験同一面内に2つのコイルを配置したICチップ上に300 nm厚のCoZrNb膜を体積し,コイル間の伝送特性を計測した結果,1.8 GHzにおいて18 dBの抑制効果が得られた.この結果より,磁性膜によるチップ内部への誘導ノイズ減効果,すなわちチップレベルのイントラデカップリングへの有用性を示した.更に,この結果は,1で述べた磁性膜の寸法・材料特性および磁性膜に生じる反磁界を考慮し,導出した解析結果と一致している.以上の結果より,磁性膜の寸法・材料特性および磁性膜に生じる反磁界を考慮し,1.で述べた磁気回路網を用いれば,インター/イントラデカップリング効果を最大とする膜設計が可能となることを示した.
パプアニューギニアのマダン州で話される言語における時制と時間表現

パプアニューギニアのマダン州で話されるニューギニア系言語とオーストロネシア系言語,さらにクレオールのトクピシンを調査対象として,記述文法をもとにした文献調査と,現地で聞き取りを実施するフィールドワークの調査両方を実施した.調査の結果,アメレ語では,1980年代に出版された記述文法書の記録とは異なる用法が観察された.時制形が衰退しており,現在であっても過去であってもひとつの形式しか使用しないことが判明した.ベル語では,時間表現に関してトクピシンの語彙が観察されるとともに,アメレ語とも共通部分が存在することが判明し,50年以上前の宣教師が書いたベル語の文法書とは,大きく異なっていることが判明した.今年度は夏にパプアニューギニアでのフィールドワークを実施し,アメレ語(ニューギニア系)の時間表現のデータを多く採集することができた.とりわけ,時間に関する語彙について多くデータを獲得した.加えて,アメレ語に隣接するオーストロネシア系のベル語の話者との接触に成功し,聞き取り調査を実施した.帰国後に,ベル語に関する先行研究を収集し,50年以上前に書かれた記述文法を手に入れることができた.ベル語に関しては次年度により多くのデータを収集する予定である.これまでの先行研究やアメレ語の記述文法の調査から,パプアニューギニアで話されるクレオール言語であるトクピシンのデータやその影響も考慮すべきであると感じた.そのため,トクピシンの時間表現データを再検討するとともに,言語接触の点から時間表現がどれくらいトクピシン他外部の言語から借用されるかについて注目し,再整理を実施した.文献調査においては,アメレ語を中心に,ベル語,ヤベム語,マナム語の記述文法を参照した.そうして時制・時間表現の記述の精緻化を実施した.研究発表においては,国内の研究会で紹介的なものから記述をまとめたものまで複数回発表し,国際学会ではフィールドワークで得られるデータと記述で得られるデータの相違について発表した.今年度は研究の総括と論文執筆を中心に活動した.夏期にパプアニューギニアでフィールドワークを実施し,アメレ語の時間表現,時制形について過去のデータをチェックし,さらに新たなデータや例を収集した.1980年代に出版されたアメレ語の記述文法書の記録とはかなり異なる用法が観察された.時間表現については,トクピシン経由で多くの英語語彙が使用されるようになった点が特徴的である.時制形については,記述文法ではとりわけ過去形の用法が,今日の過去,昨日の過去,離れた過去と豊富な形態的過去時制を有していると記されていた.しかし,調査の結果,時制形が衰退しており,現在であっても過去であってもひとつの形式しか使用しないことが判明した.この衰退に関しては,方言的相違なのか,言語変化によるものかを今後も慎重に観察する必要がある.加えて,アメレ語に隣接するオーストロネシア系のベル語の話者から,聞き取り調査を実施した.ベル語ではアメレ語の影響か,時制形の形態が存在することが確認できた.さらに,時間表現に関してはやはりトクピシンの語彙が観察されるとともに,アメレ語とも共通部分が存在することが判明した.これについても,50年以上前の宣教師が書いたベル語の文法書とは,大きく異なっているようであり,引き続き詳細な調査と文法記述が必要である.他方,研究計画で計画していたカルカル島や他のマダン州地域での現地語調査は,現地治安の悪化のため,断念せざるをえなかった.研究発表においては,社会言語科学会で一部の成果を発表し,さらに国際学会にひとつ採択されている.パプアニューギニアのマダン州で話されるニューギニア系言語とオーストロネシア系言語,さらにクレオールのトクピシンを調査対象として,記述文法をもとにした文献調査と,現地で聞き取りを実施するフィールドワークの調査両方を実施した.調査の結果,アメレ語では,1980年代に出版された記述文法書の記録とは異なる用法が観察された.時制形が衰退しており,現在であっても過去であってもひとつの形式しか使用しないことが判明した.ベル語では,時間表現に関してトクピシンの語彙が観察されるとともに,アメレ語とも共通部分が存在することが判明し,50年以上前の宣教師が書いたベル語の文法書とは,大きく異なっていることが判明した.今年度はパプアニューギニアの言語の中で,自身の中で一番調査が進んでいるアメレ語(ニューギニア系)とクレオール言語であるトクピシンのデータを中心に,時間表現のデータ収集を実施した.加えて,日本語,ハンガリー語等の他の言語との対照研究を試みた.その結果,パプアニューギニアの現地語の時間表現を文法記述するべき点を整理した.これまでの先行研究やアメレ語の記述文法の調査から,日本語とアメレ語の時制と時間表現を対照した.パプアニューギニアの言語の時間表現は,より複雑でより詳細な記述が必要なことが判明した.さらに対照する言語を増やし,英語,ハンガリー語の時間表現を観察した.同時期に,アマゾンのアモンダワ語には,「週」や「月」などの時間概念が存在しないという研究が出てきた.アメレ語のデータを参照したところ,アメレ語にも伝統的な時間概念と時計ベースの時間概念に差があることが判明した.特に,時計ベースの時間概念は,トクピシン等の接触言語から借用しており,この借用関係をあわせて調査・検討していく必要がある.時間表現の対照研究と並行して,パプアニューギニアのマダン州の言語の社会言語学的状況や記述文法の調査を実施した.

最後に,パプアニューギニアの4つの言語を取り上げた時間表現の対照研究を実施し,論文を国際学会にて発表した.取りあげたのはアメレ語(マダン州),ヤベム語(モロベ州),マナンブ語(セピック地方)とトクピシン(パプアニューギニア全域で話されるクレオール)である.4つの言語の時制と時間表現を記述文法ベースで調査し,対照した結果,オーストロネシア言語であるヤベム語やトクピシンが時制の形式が未発達で,時間表現が語彙的に実現される一方,ニューギニア系・パプア系のアメレ語,マナンブ語は時制の形式がより複雑で,時間表現が後置詞や格を伴って実現されるという結果を得た.本研究の主要なデータ元であるアメレ語のデータは大部分をそろえることができた.加えて,アメレ語に隣接するオーストロネシア系の言語であるベル語の調査に着手し,夏の調査で必要最小限のデータを収集することができた.ただし,家族の出産,育児で研究時間が取れなかったことと,パプアニューギニアの治安が悪化しており,フィールドへの移動や滞在においてトラブルが発生している状況である.調査対象の言語の記述文法を収集することはできたが,家庭の事情で研究する時間が制限され,予定していたフィールド調査へも行けなかった.そのため,目標となる成果を達成することができなかった.同時に,研究以外のエフォートが多くとらざるをえない状況であった.データ,機材の盗難や安全対策を考えつつ,現地でのデータ収集を実施する.治安状況によっては,現地での調査を縮小・中止することも考慮している.また,クレオール言語であるトクピシンの影響をどの程度見積もるかに注目することと,時制,時間表現に加えてアスペクトの用法まで調査事項を拡張する予定である.加えて,記述文法のデータに再検討を加え,インフォーマントに確認できるものは確認し,確認できないものについては類似例を収集するか,比較対照可能な形式で再整理する.何よりもまず,フィールドであるパプアニューギニアへ行き,長期的な現地調査への準備をする.同時に,記述文法では得られない現地語の話者の確保,必要最小限の時制,時間表現のデータを取る予定である.夏に2週間から3週間のパプアニューギニアでのフィールドワークを予定している.得られたデータを総括するためのデータベースの構築をすでに始めている.対照言語学,言語類型論の観点からパプアニューギニアの時間表現の特徴をモデル化し,国内外の研究会,学会で発表するとともに,総括の論文を執筆する予定である.得られたデータを総括するためのデータベースの構築を予定している.同時に,対照言語学,言語類型論の観点から,時制や時間表現の特徴をまとめ,どの点でパプアニューギニアの時間表現が特徴的であるのかを論文,国際学会で発表する予定である.
大規模運動介入研究における運動の効果に及ぼす遺伝子多型の探索

本研究では、ミトコンドリアDNA(mtDNA)多型の一連のセットからなるミトコンドリアハプログループが、筋力・筋量に及ぼす影響を検討した。対象は、大規模運動介入研究の参加者で2385歳の480名であった。被検者の静脈血より総DNAを抽出し、蛍光ビーズによる多重解析システム(Luminex 100)を用いてmtDNAに点在する187カ所の多型を網羅的に解析した。この方法から得られた多型から対象者を大きくマクロハプログループNとマクロハプログループMに大別した。さらに、マクロハプログループNは、ハプログループF、B、A、N9a、N9bに分類し、マクロハプログループMは、ハプログループM7a、M7b、M*、G2、G1、D5、D4にmtDNAの多型の組み合わせから分類した。マクロハプログループNを有する群の脚伸展パワーは、マクロハプログループMを有する群と比較して有意に高値であった。一方、12種のハプログループ間の比較において、どの測定パラメータも有意の差を認めなかった。以上の成績から、ミトコンドリアマクロハプログループは、筋力と関連する可能性がある。ハプログループNを有する人は、ハプログループMを有する人よりヒスタミン刺激によるミトコンドリアおよび核のカルシウムレベルが高いことが培養細胞系を用いた検討で報告されている。これは細胞質のカルシウムダイナミクスの向上を意味する。カルシウムはグリコーゲン分解を調節する。筋収縮が引き起こされるとき、筋小胞体からカルシウムが放出されるが、そのカルシウムは、グリコーゲン分解に重要な酵素であるグリコーゲンホスフォリラーゼキナーゼを活性化する。これにmtDNA多型やミトコンドリアハプログループが関与しているとしたら非常に興味深い。本研究においては、生活習慣病に対する運動介入の効果に関与する遺伝子多型を明らかにすることを目的とする。すなわち、筋持久力(最大酸素摂取量)や筋力(脚伸展パワー・握力)に影響を与える核およびミトコンドリア遺伝子多型ならびにその多型の一連のセットであるミトコンドリアハプログループを解明することである。まず、被験者の末梢血から総DNAを抽出し、multiplex PCRによりDNAを増幅する。その後、Luminex法を用いてmtDNA多型を網羅的に解析した。申請者らは、既に蛍光ビーズを利用して149種類のmtDNA多型を網羅的に分析するシステムを福島市のG&Gサイエンス株式会社の協力を得て開発している。この方法は、PCR産物にそれぞれの塩基置換に特異的なオリゴヌクレオチドを結合させた100種類の蛍光ビーズとハイブリダイゼーションを行う。それぞれの蛍光ビーズは赤とオレンジの蛍光強度(各10段階、積算で100種類)によって鑑別される。特定の塩基置換が存在すると、ハイブリダイゼーション後の反応によりビーズは第3の蛍光(緑色)を発する。目立製Luminexシステムを用いることにより、100種類の塩基置換の有無を1つのチューブ内で一括して判定することができる。本年度は、大希望運動介入研究において、同意の得られた約400名に対して、149種のmtDNA多型の解析を終了した。ミトコンドリアDNA多型が最大酸素摂取量やその他の因子の運動の効果に及ぼす影響を検討することで個人の体質に応じた運動の指導が可能である。
高共役化合物の合成法確立と物性評価

主にペリ環状分解反応を鍵反応として用いて,π電子系の融合したポルフィリンオリゴマー,ビスチアポルフィリン,シクロ[n]ピロール,ピセン,[5]ヘリセン,bisBODIPY,及びナフト[2,3-f]イソインドールの合成を達成し,その電子状態を解析した。π電子系の融合したポルフィリンオリゴマーの二光子吸収特性は,そのπ電子数よりも共役の形状に大きく左右されることが判明した。また,近赤外にのみ強い吸収を持ち安定なbisBODIPY色素の開発に成功した。高共役化合物は、電界効果型トランジスタ、有機発光素子、有機太陽電池などの材料として大変興味が持たれている。申請者は、ペリ環状分解反応を最終段階で行うことにより高純度の高共役化合物を合成する方法を開発し、前駆体塗布法によるデバイス作成に成功した。申請者の方法の特徴は、最終段階の分解反応を無溶媒かつ100%の収率で行える場合は、前駆体が高共役π電子系化合物と等価のものとみなせることである。これまでの成果をさらに発展させるために、(1)目的物質にあった有機合成的に有用な前駆体の選定(2)π電子系のモルホロジー変化を伴う新たなπ電子系の創出(3)高共役化合物の電子状態と挙動の解析(4)高共役化合物の有機電子材料としての評価、を検討することとした。平成23年度は、具体的には以下の5つの課題について検討した。課題(1):種々の形式で連結したポルフィリンオリゴマーの電子遷移スペクトルと二光子吸収特性の検討課題(2):大環状電流効果の異なるチアポルフィリン二量体の合成とその物性の検討課題(3):BODIPY融合化合物誘導体の合成とその物性の検討課題(4):フェナントレン系縮合多環芳香族化合物の合成とその物性の検討課題(5):ベンゼン環を環上に組み込んだオリゴピロール色素およびベンゼン内部度環ヘキサフィリンの合成とその物性の検討当初の予定通り課題(1)(3)については合成を完了した。現在、(3)については論文を投稿中であり、(1)の化合物については二光子吸収特性の評価をDongho Kim教授(韓国Ybnsei大)に依頼している。(2)および(5)については種々の合成法を検討し、合成にめどが付いた。(4)については、平成23年度より始めたが、新たにグループに加わったスタッフの活躍により望外の進展でピセン型縮合環系芳香族の合成に成功した。昨年度までの検討で,予定通りポルフィリンオリゴマーの合成、近赤外領域に吸収を持つBODIPY二量体の合成およびチアポルフィリン二量体の合成は達成した。本年度は,以下の3つの課題について検討した。課題1:チアポルフィリン及びその二量体の物性:チアポルフィリン及びその二量体において,興味あるプロトン化挙動と個体構造との関係を見出した.この成果については学会発表を行った。現在6月の国際学会発表と論文発表にむけて準備している。課題2:種々の縮合多環芳香族化合物オリゴマーの合成とその物性の検討をおこなう.ペンタセン二量体の合成を報告した.この方法をアズレンに応用することにより,大きな極性を有した縮合芳香族炭化水素の合成に成功した.本方法を拡張して五員環や七員環を組み込んだナノグラフェン類やヘリセン類の合成を行っている.課題3:分解反応の前後で,総π電子数が芳香族(4n+2)πと反芳香族4nπとなる系として,ベンゼン環を組み込んだオリゴピロール色素の合成:昨年度までの検討でエチレン架橋前駆体の合成には成功していたが,この前駆体の変換はできなかった.このため,光変換可能なカルボニル架橋前駆体の合成を目指すとともに,カルボニル架橋体自身の物性についても検討した.N-置換ピロールのβ位でオキソビシクロ[2.2.1]ヘプタジエンと縮合したジピロールは,室温でも分解して比較的安定なアゾメチンイリド中間体を生成し,さらに酸素と反応して種々の生成物を与えることを見出した。現在,前駆体の前段階化合物までの合成は終えており,反応を検討中である.その他、種々の高共役化合物の合成を達成し,得られた高共役化合物は,小林長夫教授(東北大)と協力してMCDと理論解析により電子遷移による吸収と電子状態の関係を明らかにした.同様に,Dongho Kim教授(韓国Yonsei大)と協力して,二光子吸収特性も評価した.昨年度の検討で,予定通りポルフィリンオリゴマーの合成と近赤外領域に吸収を持つBODIPY二量体の合成は達成した.本年度は,以下の課題を検討した.課題1大環状電流効果の異なるチアポルフィリン二量体の合成と物性の検討

.課題2フェナントレン系縮合多環芳香族化合物の合成と物性の検討:ジカルボニル架橋アセン化合物では光による一酸化炭素,オキソチオメタノ架橋では熱または光でアセンを生成することを報告した.最近,ピセンのナトリウムドープによる超伝導が報告され,フェナントレン系の縮合多環芳香族が注目を集めている.これらの化合物はアセン系化合物と比較して格段に安定であることが知られているが,溶解性の低さから有効な有機合成法はない.課題3:分解反応の前後で,総π電子数が芳香族(4n+2)πと反芳香族4nπとなる系として,ベンゼン環を環上に組み込んだオリゴピロール色素およびベンゼン内部度環ヘキサフィリンの合成.課題1については、合成を完成し,単結晶を得て詳細な物性の検討が行えた.この過程で興味あるチアポルフィリン類のプロトン化の挙動が明らかとなった。現在これについては詳しく検討している。課題2については,ジナフトピセンやアズレンを組み込んだ縮合多環芳香族化合物の合成に成功した.一般的な種々の縮合多環芳香族化合物合成法の確立に向けて検討を続けている.課題3については,カルボニル架橋前駆体の合成を引き続き行っている.得られた高共役化合物の一部については,小林長夫教授(東北大)と協力してMCDと理論解析により電子遷移による吸収と電子状態の関係を明らかにした.同様に,Dongho Kim教授(韓国Yonsei大)と協力して,二光子吸収特性を評価した.さらに,高共役化合物の応用を目指し,JSRおよび日本触媒と協力して近赤外特性を評価した.当初予定していた課題のうち(2)について、予定よりも進展が遅く目的物質の合成までに至らなかったものの、(5)については合成のめどが付いた。また、(4)については、新しいスタッフを得たこともあって取り掛かり当初から素晴らしい成果を得ることが出来きた。また、(3)については安定な選択的近赤外吸収色素の合成を達成し、特許を申請することができたことは、当初の計画以上の成果であった。25年度が最終年度であるため、記入しない。当初予定していた課題1については,合成を達成することができた.しかし,その吸収波長と強度は,当初の予想に反して長波長シフトも小さく強度もあまり大きくならなかった.これのX線結晶構造解析を行ったところ,興味深いことにプロトン化の位置が当初の予想と異なっていた.この原因については今後検討していく.課題2については合成できる縮合多環芳香族化合物のライブラリーが増えており,当初の予定以上に順調に進んでいる.課題3に関しては,前駆体合成に手間取っており,現在も継続中であるが,合成できるめどはついている.以上のことから,おおむね順調に進展していると判断した.今後は、初年度で達成できなかった課題(2)の遂行と課題(5)の完成を目指すと共に、課題(3)及び(4)を更に発展させる。これらの研究で得られた化合物群の基本的物性評価は、東北大学の小林長夫教授やYionsei大Dongho Kim教授と共同で検討し、応用物性については三菱化学、日本触媒やJSR等の企業と共同で検討し、積極的に成果の権利化と社会への還元をおこなう。予定通りポルフィリンオリゴマーの合成およびチアポルフィリン二量体の合成は達成した。本年度も引き続き,以下の3つの課題について検討する。課題1:チアポルフィリン及びその二量体の物性の検討課題
ICTを活用した日本語教員養成のための学習環境デザイン

本研究の目的は,情報通信技術(Information and Communication Technology以下ICT)を活用した日本語教員養成のための学習環境のデザインを提案することである.日本語教師をめざす学生が,海外で日本語を学ぶ学生に対してSkypeを通して指導するという実践を行った.デザイン実験アプローチに基づき,2010年から2012年度の3回に渡り実践を行い,参加学生が習得した実践的スキルとその習得プロセスを明らかにすることができた.その結果,ICTを活用した日本語教員養成のための学習環境をデザインする要件として(a)学習観の理解促進とそれに基づいた実践支援,(b)体験の何をどのように内省するかの指導,を提案することができた.本研究では,ICTを活用した日本語教員養成のための学習環境のデザインとその評価を行った.学生の実践的スキルの習得を目的とし,体験と内省の両側面を支援する学習環境を先行研究に基づいてデザインし,2011年度にデザインされた学習環境で実践を行い,事例を分析することで学習環境の要件を整理した.2012年度は,2011年度の実践の課題を整理し,先行研究をもとに実践の再デザインを行った.具体的には,2011年度の実践結果,日本語指導に対する学習観」の違いによって,体験と内省の学習モデルに違いがみられること,そして,「つまずきの要因の解釈」の違いによって体験と内省の学習モデルに違いがみられたことがわかった.以上の分析結果から得られた知見をもとに,2012年度では(a)学習観の理解促進とそれに基づいた実践支援,(b)体験の何をどのように内省するかの指導の2つの要件をデザインに埋め込み,実践を行った.再デザインされた学習環境おいて,前年度と同様に,京都外国語大学(京都外大)の日本語学科の学生と米国ホノルル市カピオラニ・コミュニティカレッジ(KCC)およびタイのピブンソンクラームラチャパット大学(PSRU)間で日本語を学習する学生との間で行われる日本語教育実践事例を分析した.分析段階では,京都外大の学生が実際の日本語教育で必要とされる実践的スキルを習得できたか,KCCの学生が日本人と日本語で会話を継続的に行うことで日本語活用力を向上させたか,という観点から学習環境を評価し,改善した.デザイン実験アプローチに基づき,デザイン-実施-評価-改善のプロセスを2年間継続して実施した結果をもとに,最終的に,ICTを活用した日本語教員養成のための学習環境デザインのガイドラインを書籍および論文にまとめ提示した.本研究の目的は,情報通信技術(Information and Communication Technology以下ICT)を活用した日本語教員養成のための学習環境のデザインを提案することである.日本語教師をめざす学生が,海外で日本語を学ぶ学生に対してSkypeを通して指導するという実践を行った.デザイン実験アプローチに基づき,2010年から2012年度の3回に渡り実践を行い,参加学生が習得した実践的スキルとその習得プロセスを明らかにすることができた.その結果,ICTを活用した日本語教員養成のための学習環境をデザインする要件として(a)学習観の理解促進とそれに基づいた実践支援,(b)体験の何をどのように内省するかの指導,を提案することができた.本研究の目的は,情報通信技術(Information and Communication Technology以下ICT)を活用した日本語教員養成のための学習環境のデザインとその評価である.今年度は,計画通り,京都外国語大学(京都外大)の日本語学科の学生と米国ホノルル市カピオラニ・コミュニティカレッジ(KCC)で日本語を学習する学生との間で行われる日本語教育実践を事例とし,ICTを活用した日本語教員養成のための学習環境をデザインし,実施した.京都外大の学生20名とKCCの学生20名が,9月から12月までの4ヶ月間,1対1のペアごとに日本語会話演習のための交流実践を行った.学生は活動の振り返りをSNS上に記録し,教員はそれをもとに必要に応じて支援を行った.研究成果として,本事例を「ピアインタラクションを通して習得される日米の学生の実践的スキル」に焦点をあてて分析し,中間報告として国内外の学会で発表した.現在,連携している日本語教員(日本およびハワイ)と支援方法について分析中である.ハワイとの実践に加えて,韓国の釜山外国語大学の学生とも遠隔による日本語教育のためのワークショップを実施した.KCCとの実践については,学生主体による長期的(4ヶ月)な実践であるが,韓国との実践については,筆者らが活動目的および方法を設定し,1日だけの実践であった.前者(ハワイ)については,京都外大の学生が交流の目的,指導方法(会話の進め方や会話の内容など)を自ら計画し,実施し,振り返り,再度計画をたてて実施するというプロセスを繰り返すが,後者(韓国)については,教員が計画,実施を行った.今後,ICTを活用した異なる2つの日本語会話演習の実践を比較し,学習環境について検討する.韓国との実践については,「フォリナー・トーク」および「学習環境デザイン」の観点から考察し,まとめた.今年度は,計画通り,ICTを活用した日本語教員養成のための日本語会話演習を実践した.先行研究に基づき,ICTを活用した遠隔での協働を促す学習環境をデザインし,京都外国語大学(京都外大)の日本語学科の学生と米国ホノルル市カピオラニ・コミュニティカレッジ(KCC)で日本語を学習する学生との間で実践を行った.本実践をもとにした研究は,一部を中間報告として国内外の学会で発表した.具体的には,本実践に参加した日本人学生および米国学生の学習成果についてである.現在,実践において見られた課題を分析している.この知見をもとに来年度の実践をデザインする.また,今年度の実践には,京都外大だけではなく,実践女子大学で日本語教育を専攻する院生4名が参加した.日本語教育を研究する院生に参入してもらうことにより,日本人同士の学び合いを促すことがねらいである.

日本語を教えるという「体験」を,どのように「内省」させるかについても今後の研究課題としたい.今年度はハワイとの実践に加えて,今年度は韓国の釜山外国語大学の学生とも日本語会話演習(1日)を実施し,その知見を研究論文としてまとめることができた.今年度は,連携先のKCCの担当教員を日本に招聘し,今年度の取り組みをもとに「支援の方法」について議論し,研究知見としてまとめる予定である.本研究には,京都外大,実践女子大学,KCCの日本語教員が支援者として参加している,実践に参加した学生だけではなく,実践をした教員にインタビューを行い,日本側および米国側,学部生および院生がどのような課題に直面したかについて明らかにする・加えて,本研究を連携者である日本語教員の一人がタイで発表したことをきっかけに,タイの日本語教員からも本実践を行いたいという提案があったことから,対象地域を拡大して実践することを検討する.【旅費】連携先(ハワイのカピオラニコミュニティカレッジ)の教員の招聘:ICTを活用した日本語教員養成のための学習環境のデザインについて議論するため,KCCの日本語教員を招聘する.【物品費】(1)遠隔交流のための機材の補充:ノートパソコン,ipadなど学生が交流のために必要な機材を補充する.(2)文献:研究に関する書籍や論文を購入する.【人件費・謝金】本実践に参加した学生数名に,来年度はファシリテータとして参加してもらうため,研究補助として人件費を支払う.
哺乳類DNAシトシンメチル基転移酵素の活性制御機構に関する研究

高等真核細胞では、DNAシトシンメチル化はヘテロクロマチン領域に多く見られる。しかし、ゲノムのメチル化パターン形成機構は未だ明らかにされていない。クロマチンの構造変化や、ヘテロクロマチン形成時におけるメチル化パターン形成の過程を明らかにするためには、経時変化の観察や関与する蛋白質の機能分析に適した生化学的解析が有用である。そこで私は、アフリカツメガエル卵抽出液を用いたテロメアクロマチンの再構成を試みた。テロメアヘテロクロマチンの形成には、テロメア繰り返し配列DNAと、その配列に特異的に結合するTRF1およびTRF2蛋白質が特に重要であると考えられている。アフリカツメガエル卵抽出液中において、テロメア繰り返し配列を末端に持つ線状DNAは、線状のまま安定に維持されることが、既に報告されている。しかし、その末端保護作用は、極めて微量のDNAに対してのみ有効であると考えられていた。今回、卵抽出液において、細胞周期進行の時期に着目して、末端保護作用に関して再考を行った。その結果、一部のDNAについては末端の融合が観察されるが、末端を保護する生理活性は、高濃度のDNA存在下においても有効であることが分かった。この観察から、卵抽出液中にテロメア配列を末端に持つ低分子量DNAを多量に混合し、形成されるテロメアDNA蛋白質複合体の構造解析が可能であると予想した。そこで、一方の末端がテロメア配列である線状プラスミドの、他方の末端をビオチン化し卵抽出液と混合した。再構成されたテロメアDNA蛋白質複合体は、ストレプトアビジンを固相化したビーズにより単離した。回収された蛋白質に関して、質量分析計を用いて同定を試みたところ、これまでにテロメアへの局在が知られていなかったDNA修復因子や転写因子が検出された。現在、これらの因子について、機能解析を行っている。ゲノムDNAのメチル化修飾パターンの形成機構を解明する為に、本年度は基質の構造に関して研究を進めた。これまでのDNAシトシンメチル基転移酵素の酵素学的研究には、基質に精製されたDNAが用いられてきた。しかし近年、クロマチン構造やコアヒストン修飾とシトシンメチル化修飾に関連が見られることが遺伝学的に示されるようになった。そこで私は、再構成クロマチンを用いて解析を行った。アフリカツメガエルの未受精卵を用い、クロマチンを再構成する系は既に確立している。しかし、DNAメチル化と関連が深いヘテロクロマチンのような、さらなる高次構造体を再構成することについては、未だ確立した系はない。そこで、染色体末端テロメアに局在するヘテログロマチンをモデルとして用いることにした。テロメア繰り返し配列を末端に持つDNAを卵抽出液に加えた場合、通常の二本鎖切断末端とは異なり、DNA損傷チェックポイントの活性化が見られなかった。この結果は、加えたDNAの末端にテロメア複合体が形成されたことを示唆している。また、通常の二本鎖切断末端を持つDNAを卵抽出液中に加えた場合、DNA修復反応が起こるため、放射性標識ヌクレオチドがDNAに取り込まれる。しかし、テロメアを持つDNAの場合には、効率的な標識ヌクレオチドの取り込みが観察されなかった。このことは、テロメア配列を持つ外来DNAの末端は、チェックポイント機構による認識を免れ、さらに修復機構にも認識されない構造体を形成しているものと考えられる。以上の結果より、テロメア機能の一部を備え持った高次クロマチンを再構成することができたと思われる。今後は、ヘテロクロマチンとしての転写抑制能の検定を行い、最終的にはDNAメチル化修飾の挙動を観察する予定である。
加齢的運動器変性に及ぼす運動療法の効果-老化促進マウスを用いた基礎的研究-

本研究では、老化促進マウス(SAM)を用いて脊髄前角細胞の加齢変化と長期的な運動が及ぼす影響を検討した。オートファジーの関与を調べるため、封入体形成因子であるp62とオートファジー実行因子であるBeclin1の発現について検討した。実験動物にはSAMの12週齢(若齢群)、58週齢(老齢群)、50週齢時よりトレッドミル運動(13 m/min,週6日間, 1日2回,各20分間)を8週間継続して行なった群(老齢運動群)を用いた。脊髄前角細胞数は老齢群で若齢群と運動群よりも有意に減少していた。脊髄前角細胞におけるp62の発現を検討した結果、p62陽性細胞数とp62発現量は3群間に有意差が認められなかった。脊髄前角細胞におけるBeclin1の発現を検討した結果、Beclin1陽性細胞数は、老齢群で若齢群と老齢運動群よりも有意に減少していた。また、Beclin1発現量については、老齢運動群のBeclin1発現量が他の2群に比較して有意に増加していた。老齢群の脊髄前角細胞数は若齢群と老齢運動群に比べて減少していたが、p62陽性細胞数と発現量に有意差は認められなかった。老齢運動群についてはBeclin1陽性細胞数が減少しておらず、発現量は増加していたため、運動により脊髄前角細胞のオートファジー活性が高まることが示唆された。本研究結果から考えると、オートファジーによって変性タンパク質の蓄積を選択的に分解できなくなることが、加齢による脊髄前角細胞の脱落を招くと考えられ、長期的な運動によりオートファジーの機能を高めることが、脊髄前角細胞の脱落を抑制すると推測される。老化促進マウス(SAM)を50週齢まで飼育し、無作為に1日20分のトレッドミル上の走行を2回行うSAM58週齢運動群、トレッドミル上の走行を行わないSAM58週齢群の2群に分け、8週後(58週齢)に屠殺した。また、対照として12週齢の老化促進マウス(SAM12週齢群)と58週齢のICRマウス(ICR58週齢群)を用いた。1.脊髄の観察腰髄膨大部を摘出し、凍結固定し、凍結切片を作製した。HE染色、Nissl染色、KB染色を行い、前角細胞の数と形態、神経線維の変性を観察し、老化と運動が脊髄神経組織に及ぼす影響を組織学的に検証した。オートファジー関連蛋白であるBeclinと神経の変性に関与していると報告されているnNOSについて免疫染色を行い観察した。その結果、SAM58週齢群の腰髄部において、加齢に伴う神経変性と前角細胞の有意な減少を認めた。また、Beclin陽性細胞は有意に減少し、抗nNOS抗体陽性細胞は有意に増加していた。SAMでは、老化に伴い腰髄部の神経は変性していた。オートファジーの減少とNOの増加が老化に伴う神経変性に関与することが示唆された。2.関節の観察膝関節を摘出し、凍結固定し、凍結切片を作成した。トルイジンブルー染色と抗TNF-α染色を行い、軟骨細胞の変性とTNF-αの発現を観察した。その結果、SAM58週齢群ではSAM58週齢運動群とICR58週齢群と比較して軟骨層の厚さと軟骨細胞面積が有意に減少していた。SAM58週齢運動群ではSAM58週齢群に比べTNF-α発現細胞が有意に減少していた。SAMでは、老化により軟骨細胞および軟骨基質の変性が生じていた。適度な運動によるメカニカルストレスは軟骨変性に対して健常な刺激として作用し、TNF-αの発現を抑制する可能性が示唆された。

本研究の目的は、トレッドミル運動が脊髄前角細胞の加齢変化に及ぼす影響と、そのメカニズムについて明らかにすることである。実験動物には老化促進マウス(SAM)の12週齢を12匹(若齢群)、58週齢を16匹(老齢群)、50週齢時よりトレッドミル運動を8週間継続して行なった58週齢を15匹(老齢運動群)用意した。屠殺後、組織を取り出し形態学的・免疫組織学的観察、生化学的観察を行い、以下の知見を得た。脊髄前角細胞数は、若齢群、老齢運動群に対して老齢群が有意に減少していた。このことから、老化促進マウスの脊髄前角細胞数は老化により減少し、長期間のトレッドミル運動を行なうことにより、その加齢変化が抑制されることが示唆された。脊髄前角細胞におけるp62陽性細胞数とp62発現量(Western blotting)は、3群間に有意差が認められなかった。また、Beclin1陽性細胞数については老齢群が有意に減少しており、Beclin1発現量(Western blotting)については老齢運動群が有意に増加していた。これらのことから、老化した脊髄前角細胞における細胞内タンパク質の代謝を保つためには、高いオートファジー活性が必要となるが、オートファジーの機能する細胞数は加齢により減少することが示唆された。さらに、長期的な運動を行なうことは、高いオートファジー活性を保った神経細胞の減少を抑制することが示唆された。正常マウスに比べ、老化の進行が速く、平均寿命が約40%低下している老化促進マウス(SAM)を使用し、壮・老年期の運動が身体にどのような影響を与えるのか、検討した。老化促進マウスは、50週齢で筋萎縮などの老化現象が出現するとの報告から、50週齢の時点を老化現象出現時期と設定し、老化初期50W齢群,老化58W齢群,老化初期からトレッドミル運動を8週間行った運動群の3群間の比較・検討を行った。運動群は、トレッドミル運動を13m/minの速度で1日20分間、1週間に6日間、連続8週間行った。活動量の比較では、50W齢群>運動群>58W齢群で有意に活動量が大きくなり、老化に伴い活動量の低下が起こり、運動介入を行うことで活動量の低下を抑制できる可能性が示唆された。また、下大静脈から採血し、採血した血液を遠心分離し、血清を採取した。酵素免疫測定法(ELISA法)により血中のHigh Mobility Box group-1 (HMGB1), Tumor Necrosis Factor (TNF-α)、Interleukin-1a (IL-1β),-6(IL-6),-10(IL-10)を検出した。HMGB1血中濃度は、58W齢群が他2群と比較し有意に高い数値を示した。TNF-α、IL-6、IL-10血中濃度は3群間に有意な差はみられなかった。IL-1βは運動群が58W齢群に比べ有意に高い値を示した。このことより、血中HMGB1濃度が上がると炎症や組織のバリアー障害を起こし細胞死を誘発する可能性があるため、運動介入によりこれらを抑制する可能性が示唆された。今後、サイトカインなどとの関連を調べていきたい。
脳切片標本による大脳皮質視覚野の可塑性シナプスの研究

1.大脳皮質視覚野細胞の視覚反応性は幼生期の視覚体験によリ不可逆的に修飾される。脳切片標本を用いた電場電位の解析により、この可塑性の基礎と考えられるシナプス伝達の長期増強が感受性期の仔ネコの大脳皮質視覚野に起こることをすでに明らかにしている。本研究では、細胞内記録により視覚野での長期増強の神経機構を解析した。2.灌流液に1μMのBicucullineを加えてGABA抑制を部分的に抑制すると、長期増強の発現に要する高頻度(2Hz)の条件刺激の時間が1時間から15分に短縮できることが分かり細胞内記録による解析が可能となった。3.白質の試験刺激(O.lHz)によってIIーIII層細胞に速い興奮性シナプス後電位(f EPSP)とそれに続く時間経過の遅いEPSP(s EPSP)がひきおこされた。条件刺激後、f EPSPとs EPSPの両者に長期増強が発現した。f EPSPの傾斜はコントロールの1.6倍となり、s EPSPの振幅は約3倍となった。f EPSPとs EPSPの長期増強は単独でもおこったので独立の現象と考えられる。4.f EPSPはnonーNMDA型のsEPSPはNMDA型のグルタミン酸リセプターによって伝えられていた。5.海馬で示されている様に、f EPSPの長期増強の発現にNMDAリセプターが関与しているかを調べた。s EPSPを完全にブロックするのに十分なAPV(100μM)存在下でもAPV無しのコントロールと全く同様な時間経過で同じ大きさの長期増強がほぼ同じ頻度で発現した。従って、f EPSPの長期増強はNMDAリセプターの関与なしに発現すると結論される。6.長期増強がシナプス前と後のどちらで起きているか調べる目的で量子解析を試みたが、spike-triggered averaging法によってシナプス結合のあるニューロン対を見いです確率が低いことと、そのニューロン対の維持が困難なため成功しなかった。脳切片標本を用いたこれまでの研究で,大脳皮質視覚野細胞の反応性が視覚体験により可塑的に変化する感受性期には,白質と電気的な条件繁樹(2Hz, 30分)すると視覚野内のシナプス伝達に長期増強が生じることを見い出している.本年度は,このシナプス伝達の長期増強の神経機構を明らかにする目的で,仔ネコの視覚野切片標本を用い皮質細胞より細胞内記録し,条件刺激中とその後のシナプス電位の変化を解析した.長期増強を引き起こすためには,条件刺激を30分以上与えなければならないため,細胞内記録により解析することは困難である.しかし, .潅漑液にビキュキュリンを加え抑制を少し抑えると,短時間(515分)の条件刺激で長期増強が発現することが分かり,解析が可能となった.白質刺激により皮質細胞に誘発される興奮性シナプス後電位(EPSP)はNMDAリセプターに依存しない時間経過の速いEPSPとNMDAリセプター依存性の遅いEPSPからなっていた.条件刺激後,早いEPSPの振幅が増大したので,長期増強が興奮性シナプスで起こることが明らかになった.また,遅いEPSPは低頻度(<0.2Hz)の白質の試験刺激中にはほとんど見られないが, 2Hzの条件刺激中には振幅が約20mVと非常に大きくなった.

これは,海馬での長期増強の場合と同様にNMDAリセプリーグ視覚野の長期増強にも関与していることを示唆している.さらにユニタリーンナプス電位レベルでの解析を行なうためにスパイク・トリガー・アベレイジング法を用いて,コニタリーンナプス電位を検出することに成功した.このように短時間で長期増強が引き起こせ,またコニタリーンナプス電位が検出できるようになったので,今後量子解析により長期増強の機構を調べることが可能となった.1、大脳皮質視覚野細胞の視覚反応性の可塑的変化の基礎と考えられるシナプス伝達の長期増強を仔ネコの視覚野脳切片標本を用いて解析した。62年度の研究により灌流液に1μMのBicucullineを加えGABA抑制を部分的に抑制すると、長期増強の発現に必要な高頻度(2Hz)の条件刺激を従来の1時間から15分に短縮できることが分かった。63年度の研究ではこの条件下で細胞内記録による解析を行い、海馬で示されているようにNMDAリセプターが長期増強の発現に関与しているか検討した。2、白質の試験刺激(0.1Hz)に対してIIーIII層細胞に速い興奮性シナプス後電位(fEPSP)とそれに続く時間経過の遅いEPSP(sEPSP)がひきおこされた。条件刺激後、fEPS.PとsEPSPの両者に長期増強が発現した。fEPSPの立ち上がりの最大傾斜はコントロールの1.6倍となり、sEPSPの振幅は約3倍となった。13個の細胞のうち7個は両者に長期増強が起こったが、1個でfEPSPだけに、3個でsEPSPにだけ起こった。従って、fEPSPとsEPSPの長期増強は独立の現象と考えられる。3、fEPSPはnonーNMDA型のsEPSPはNMDA型のグルタミン酸リセプターによって伝達されていた。4、sEPSPを完全にブロックするのに十分なAPV(100μM)存在下でもAPV無しのコントロールと全く同様な時間経過で同じ大きさ(1.5倍)の長期増強がほぼ同じ頻度(7/11)で発現した。従って、fEPSPの長期増強はNMDAリセプターの活性とは無関係に発現すると結論される。5、長期増強がシナプス前と後のどちらで起きているか調べる目的で量子解析をを試みたが、Spikeーtriggered averaging法によってシナプス結合のあるニューロン対を見いだす確率が低いことと、そのニューロン対を解析するのに十分な時間維持することが困難なため成功しなかった。