hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ナノバブル発生技術を用いた脊髄液酸素化による対麻痺への新たな治療法の探求

前年度の結果において、神経学的症状の改善がみられていた。本年においては、実験数を増やすことにより統計学的に有意差を持って症状の改善がみられた。sarificeした症例から脊髄組織を採取し、病理学的な評価をしたところ、有意差をもって、神経伝達をつかさどる前角細胞の数が酸素化したnanobubbleを投与した群において有意に改善していた。神経学的症状の改善、前角細胞保持の改善のメカニズムをさらに追及するため、Microarray解析、qRT-PCRによる遺伝子学的解析を施行したところ、酸素化したnanobubble投与群において、有意差を持って、炎症細胞が抑制されていることが証明された。現時点においては、症状や前角細胞保持のメカニズムとして、酸素供給に伴う虚血の改善による炎症反応の抑制がみられていると考えられた。これらのデータを集計し、論文での報告や学会報告をさらに検討していく予定である。胸部大動脈瘤に対する治療の際の合併症である脊髄傷害は、一度発症すると有効な治療法は確立されていない。本研究では、まだ臨床応用のない微細な気泡(nanobubble)の持つ特異な性質を応用し高度に酸素化された人工髄液を作成、それを髄腔内に潅流することにより、低酸素状態を改善し神経学的予後の改善を試みる。Nanobubbleとは、液体中に発生する気泡のうち10μm以下の気泡である。この技術を用いて、我々は以前に人工髄液を過飽和酸素化し、腹部大動脈閉塞によるウサギ対麻痺モデルにおいて、虚血前に過飽和酸素化された人工髄液を髄腔に潅流しておくことで、虚血に対する脊髄保護効果を立証した。今回は、脊髄虚血を起こした脊髄に対して発症後に過飽和酸素化された人工髄液を髄腔内へ投与することにより虚血の改善とそれに伴う神経学的予後の改善が得られるのではと仮説を立て、それを検証することとした。全身麻酔下で、腹臥位にてL1L2の高さで切開をおき、カテーテルを脊髄腔内に挿入する。続いて仰臥位とし、ウサギの右大腿動脈から3Frバルーンカテーテルを挿入し15cm進めた腹部大動脈内で拡張させ、15分間血流を遮断し脊髄虚血モデルを作成する。遮断解除15分後より脊髄腔内への人工髄液灌流を開始する。投与時間は1時間とし、投与中は髄腔内圧をモニターしながら行う。その後鎮静をoffとしゲージへ戻す。48時間後に神経学的評価を行う。神経学的評価方法は、modified tarlov scoreを用いたスコアリングにて評価する。神経学的評価後、実験動物を犠牲死させ、脊髄を採取し、凍結固定ならびにホルマリン固定を行う。それらをH-E染色を行い、病理組織学的に前角細胞の数を比較検討する。また、凍結標本を用いてqRT-PCR、Microarrayを行いDNA変化も合わせて評価しメカニズムを解明する。まずは、ウサギを用いた脊髄血液低灌流による対麻痺モデルの作成を試みた。脊髄腔内へのカテーテル挿入方法としては、腹臥位にてL1L2の高さで切開をおき、髄腔内に18Gカニューラを穿刺しその後ポリウレタンカテーテルを脊髄腔内に挿入する。その後にウサギの右大腿動脈から3Fr Forgarty balloon catheterを挿入し15cm進めた腹部大動脈内でocclusionさせ、15分間血流を遮断し脊髄虚血モデルを作成した。手技、outcomeともに良好な結果を得ることができたため、同モデルを予定通り採用することとした。まずは、ナノバブル発生装置を用いた過飽和酸素化人工髄液を作成した。人工髄液にはアートセレブ(大塚製薬)を用いた。前回の研究と同様にpO2>750mmHgの過飽和酸素人工髄液を作成することに成功した。

いずれも順調な経過のため、続いて実際に対麻痺作成後に人工髄液を投与し適切な投与速度を検討した。注入圧をモニタリングしながら施行した。過去のデータを参考にし10ml/hrで投与開始したが、投与開始10分もたたないうちに髄腔内圧30mmHg以上と高い髄腔内圧となってしまうため、投与速度を5ml/hrへ減量し、適宜0.1mlほどドレナージ施行しながら行うことにより適切な髄腔内圧を保持することができたため、5ml/hrで投与する方針とした。以上の条件を用いて、Sham群5例、虚血群5例、非酸素化人工髄液投与群5例、酸素化人工髄液投与群5例と4群に分けて実験を施行することとした。実際に酸素化人工髄液投与群の実験を施行したところ、虚血群と比較して明らかに神経学的予後の改善が見られた。病理学的評価においても前角細胞も保持されていることが確認された。前年度の結果において、神経学的症状の改善がみられていた。本年においては、実験数を増やすことにより統計学的に有意差を持って症状の改善がみられた。sarificeした症例から脊髄組織を採取し、病理学的な評価をしたところ、有意差をもって、神経伝達をつかさどる前角細胞の数が酸素化したnanobubbleを投与した群において有意に改善していた。神経学的症状の改善、前角細胞保持の改善のメカニズムをさらに追及するため、Microarray解析、qRT-PCRによる遺伝子学的解析を施行したところ、酸素化したnanobubble投与群において、有意差を持って、炎症細胞が抑制されていることが証明された。現時点においては、症状や前角細胞保持のメカニズムとして、酸素供給に伴う虚血の改善による炎症反応の抑制がみられていると考えられた。これらのデータを集計し、論文での報告や学会報告をさらに検討していく予定である。現時点における数匹の実験結果においては明らかに神経学的予後の改善がみられていると思われる。実際脊髄虚血群のウサギは、自力座位の保持が困難であるのに対して、酸素化人工髄液投与群のウサギは、完全な改善とはいかないものの座位保持、hopが可能であった。これからさらに目標数までN数を増やし、統計学的有意差が出るほどのoutcomeが得られるか検証していく。
アメリカ前衛演劇における可塑的身体のリアリティ

1960年代のアメリカ前衛演劇(ポストモダンダンス・パフォーマンスを含む)を資料の広汎な入手とその精読と分析、ならびに日本の小劇場演劇に対する現地調査とインタビューを行い、入手資料を分析した。2000年代日本の小劇場の演劇・パフォーマンスとの近似性を比較参照項として導入したことで、アメリカの60年代の前衛表現における身体の物質性・日常性・市民性が、新たな民主主義-演劇的主体の身体としての可能性をもつことをあきらかにしたほか、具体的な演劇実践に関わることで理論と実践の往還を試みた。本年度は、日米の演劇作品における身体のリアリティを措定するという研究目的を踏まえ、60年代のアメリカ前衛演劇における文献精読を集中して行ったほか、チェルフィッチュを初めとする東京を拠点に活動する劇団の発表する作品群および、それにかんする批評・国内外の記事・観客の反応をふまえ、諮問機関への非公開報告書として提出した。また、ジェンダー・コンシャスな制作をおこなう日本の劇団「指輪ホテル」とトリスタ・ボールドウィンによる日米共同制作作品『雌鹿』や、フェミニズム演劇の重要作品であるイヴ・エンスラーの『ヴァギナ・モノローグ』の日本公演に翻訳者として参加し、制作者との討論をもとに、日米の劇作家における言語と身体性への捉え方の差異についての新たな知見を得た。以上の活動の成果は、次年度に論文として発表する予定である。本年度の研究の具体的な成果としては、現在までにおける日本の小劇場演劇の状況を概観し『舞台芸術』誌に発表した。これは現在の小劇場演劇の取り組みが、インターネットなどの諸メディアといかに連関しているかを分析し、演劇をより広汎な社会的コンテクストに付置したものである。また年度後半には、現代のアメリカにおける言語と身体の状況を探るため、9.11において世界貿易センタービルから落下した人々の身体に焦点をあて、アメリカの現代文学やグラフィックノヴェルなど複数のジャンルを横断し、言語と身体の物質性が諸作品においてどのように表象されたのか、言語で表象された身体のもつリアリティの問題を考察し、『アメリカ研究』誌に発表した。本年度上半期は勤務校の都合により北京に滞在することになったため、Beijing Modern Dance Festivalを中心に中国政府により招聘された英米のダンス・カンパニーや、英米のポストモダンダンスを吸収し独自のものとして発展した中国のコンテンポラリー・ダンスと舞踊の現状を調査し、その結果、日米の前衛演劇・パフォーマンスにおける身体制御を相対化する枠組みを得ることができたことには大きな意義があった。下半期は日米の前衛演劇における身体のリアリティを措定するという研究目的を踏まえ、昨年度から継続している60年代のアメリカ前衛芸術にかんする文献精読・資料収集をコンテンポラリー・ダンスの文脈を中心に行なったほか、東京を拠点に活動するアーティストおよび制作者数名に対し、俳優の身体に対する意識について個別のインタビューを行なった。2007年より継続的に進化している長期プロジェクトである日米共同制作作品『DOE2.0』に翻訳者として関わりつつ、その創作のプロセスや異文化交渉を参与観察したほか、フェスティバル・トーキョーおよび国際舞台芸術ミーティングにて日米のカンパニーやフェスティヴァルディレクターと日本のパフォーマンスにおける身体運用の特徴を討議し、欧米の演劇研究者とは同内容についての研究会を行なった。本研究の成果の一部は、シェイクスピア『マクベス』におけるマクベス夫人にスポットをあて、女性身体と衣服とジェンダーの性役割の関係を問い直したミズノオト・カンパニーの作品『アンセックス・ミー・ヒア』でドラマトゥルグを担当したことを通して作品に反映されているが、活字および口頭における成果発表を現在準備中である。
運動視に関する大脳視覚野の構造と機能の研究

機能的磁気共鳴画像法(fMRI)を用いて、運動視に関連する大脳領野について調べた。まず、静止画が動いて見える錯視図形に対する運動関連応答測定により、運動視に関わる処理経路の関与が明らかになった。次に、マルチボクセル解析を用いて運動視関連領野を再定義する試みを行い、最終結果には至らないものの手法の将来性の評価など一定の成果を得た。また、高次運動視領野と自己運動感について今後の指針となる結果を得た。本研究では、ヒトの視覚運動情報処理の脳内機構を明らかにするため,心理物理学的実験及びfMRIによる脳機能画像化実験を行う.サルにおいてはMT/MST野が動き情報の処理中枢であると考えられ,ヒトでもおおまかには一致するが,細部は違う可能性が指摘されており,ヒトの脳における動き情報処理とその神経基盤について詳細に検討することが本研究の目的である機能的磁気共鳴画像法(fMRI)を用いて、運動視に関連する大脳領野について調べた。ヒト視覚野における運動視関連領野の応答を調べるfMRI実験を行った.今年度は,今後の研究の基盤となる予備的実験を中心に行い,後の指針となる重要な知見を得ることができた。まず,ロンドン大学のSmith教授の協力のもと,ヒトMT+野の構造を解明するのに不可欠な高解像度fMRIスキャンのテストを行ったが,画像のノイズやゆがみなど,検討すべき課題が多いことが明らかになった。そのため,次年度は多少解像度を落としても確実な機能画像が得られるような形で実験を進めるのがよいことがわかった.さらに,その結果を高精細な皮質地図上に提示するためのソフトウェアについてカーディフ大学のSingh教授と協議し,ソフトウェアの提供を受けるとともに今後の指針を得ることができた.また,得られた機能画像から機械学習によるパターン弁別解析を行うための方法の基礎を築くことができた.これはまだ改良を要するが,次年度から実用的なデータ収集に入る予定である.MT+野における動きと奥行きの情報表現を解明するためのfMRI順応実験は,予備的なデータ収集を終え,暫定的に意味のある結果を得たが,論文などで発表するためには視覚刺激条件などをさらに最適化する必要が明らかになった.最後に,関連する科研費プロジェクト(基盤A18203036)の成果を受け,静止画が動いて見える錯視による脳活動をfMRI順応法を用いて調べる実験を開始した.引き続き条件の最適化とデータ収集を進める予定である.以上,本年度は,本研究課題の達成へ向けた基礎となる知見を得ることに専念したため,成果をまとまった形で記述するには至らなかったのは確かであるが,次年度以降の進展のため有意義な情報を得ることができた.昨年度に引き続き、動く錯視に関するf MRI実験を行った。以前の研究では基本的なブロックデザインを用いて錯視図形と統制図形の比較を行ったためにVI野では違いが見いだせなかったが、本研究では順応法を用いた結果、VI野に始まる広範な視覚野での応答が明らかになった。昨年度の結果は2010年1月の日本視覚学会冬季大会で発表し、修正を経て次年度2010年5月のVision Sciences Societyで発表された。それらの議論を経て論文として投稿の準備を行っている。次に、動きと両眼立体視に関する実験をロンドン大学ロイヤルホロウェイ校のSmith教授との共同で継続したが、現在のところ有意義な結果には至っていない。fMRIスキャナ内での両眼立体視を実現する装置は調整が難しく、被験者に負担をかけるため、改良が必要であろう。引き続き検討を要する。また、A.Lingnau博士らと共同で行ってきた速度知覚に関する研究がJournal of Vision誌に掲載された。視覚野において時間周波数の表現から速度の表現への移行を検討したもので、当初の予想とは異なり、初期段階のVI野ですでに速度の表現ができるらしいことが報告されている。なお、計画に含めていたマルチボクセル解析について、従来利用してきたソフトウェアBrain Voyagerのアップデートにより簡便に利用できるようになったため、次年度へ向けて実験計画の策定を始めた。まず、昨年度までに行った動く錯視に関するfMRI実験の結果をまとめて論文として投稿した。審査により問題点が指摘されたため、統制実験を行い、再投稿のため準備中である。次に、昨年度に引き続いて運動視関連領野に関するfMRIマルチボクセル解析実験を行った。前年度までの結果は8月の欧州視覚学会(ECVP)にて発表、議論を行い、実験手続きを改良した。これまでの実験から、方向が反対の動きをデコードすることはきわめて難しいことがわかったが、それは他の研究者の見解とも一致している。反対方向の動きはきわめて密接したニューロンによる符号化が行われていることが示唆される。そのため、次に、回転と拡大という直交方向の動きの弁別を試みたところ、比較的よい結果が得られることがわかり、追加実験による研究のまとめについて検討中である。新しい結果については、本年8月に再度ECVPにて発表、議論を進める予定である。本研究開始からの懸案であった静止画が動いて見える

錯視の研究は,学術誌投稿において厳しい評価が続き,当初予定より若干時間がかかったものの,これまでに行ってきた追加実験を総合して最終的にNeuroImage誌に掲載された.特に,今年度は東京大学・村上研究室の協力を得て眼球運動の精密測定を行い,fMRI実験における成果を補強できたことで研究を完遂することができた.また,大脳運動視中枢に関するマルチボクセル解析の研究を当初予定より早めて前年度より行ってきたが,V5(MT+)野をサーチライト法によって同定するという成果を得て,国際学会において発表した.解析の安定性など方法論的な問題点も明らかになり,まだ論文発表には至っていないが,さらに実験研究を継続し,成果を結実させたい.次に,Smith教授(英国ロンドン大学)の協力のもと,大域的オプティカルフローパタンによる自己運動感覚の誘発に関する脳活動の同定実験を行った.大域的運動処理の端緒とみられるV5,V6野では自己運動と関連すると思われる応答は見られなかったが,さらに頭頂,前頭にかけて存在し,前庭感覚との統合が示唆される高次運動関連領野における応答が示され,国際学会での発表を企画中である.さらに補強データを得て論文発表につなげたい.最後に,Scott-Samuel博士(英国ブリストル大学)の協力を得て運動視と明るさ知覚が連動する新しい錯視に関する心理物理学的実験研究を開始した.成果の一部は国際学会で発表する予定であるが,引き続き実験を行い,理論面での展開も含めて発展させていきたい.(670字)
中世文学における「敗者」像の生成と表現

2年間にわたる調査・研究・討議の結果、中世文学における「敗者」像の生成と表現、その歴史的事実と文学への階梯、「敗者」像の変容と享受について、多くの知見と成果を得ることができた。今回の研究では多くの文献を収集・調査したが、中でも特に注目すべきものは、2つのこれまで未紹介の新出資料である。すなわち、西蓮書状5点(これは原本は既に所在不明であるが、写真などが東京大学史料編纂所にあることが判明した)、及び曲舞(くせまい)「隠岐院」(隠岐での調査において発見されたもの)である。これらの翻刻・紹介・位置づけについては、研究成果報告書(冊子体)に掲載の論文で行ったが、いづれも「敗者」の歴史と文学を考える上で、極めて重要な資料である。このほか、滅亡した敗者を中心に諸行無常を語る『平家物語』が巨大な存在となるに至るまで、そこにはどのような離陸の過程があったのかを、主として和歌史の方向から探った論、『平家物語』が形成される直前の時代に生きた「敗者」の帝王後鳥羽院が、時代の公的な歴史認識を示すところの勅撰集の中で、どのように享受・変容していくかを考察した論、また長門本『平家物語』の和歌の摂取を含めて、享受史の側から『平家物語』を捉えた論など、別紙のような多くの成果が結実するに至った。また、併せて、戦乱に敗れた者たちを含めた人々の「隠遁」という視点からも考えようと試みた。こうした諸論から、「敗者」を文学の中心に据えていくまでの文化と歴史的意識の変遷を、さまざまな側面からあぶり出すことができたと思う。本年度は勅撰集を中心とする和歌資料、及び『平家物語』に関連する資料・文献・研究文献を収集し、問題とすべきことを整理し、時代史を俯瞰するための土台を整備した。特に、後堀河・四条の時代、後嵯峨院の時代、伏見院から南北朝、という、『平家物語』が生成される過程のエポック的な時代-これらはそのまま勅撰集が編纂され歌壇が活況を呈した時代と重なる-、この3つの時代を和歌と軍記文学の双方から広く捉え直すことを意図した。和歌文学関係に関しては、本年度は『新古今和歌集』『新勅撰和歌集』、及び承久の乱関係、後鳥羽院関係、後嵯峨院関係、伏見院関係の資料の収集に努めた。また、軍記文学関係では、『平家物語』の諸本、特に延慶本、長門本を中心に収集調査した。また、双方が深く関わる『明月記』については、双方からの検討課題として重視した。印刷物以外の写本・文書類は、国文学研究資料館・宮内庁書陵部・東大史料編纂所・国立歴史民俗博物館、その他の地方の文庫・図書館などで、マイクロフィルム・紙焼写真・複写による収集を行った。分担は、和歌とその周辺資料を田渕、『平家物語』とその周辺資料を櫻井が担当した。これらの資料の整理、及び論文作成のために、田渕・桜井ともにパソコンを用いて、資料・文献の整理・論文作成にあたり、かつ京都・大阪などへ調査へ赴き、複写資料によって解析を進めた。また、平行して、それらの解読・分析・意見交換を行い、更に不足のものを収集することに努めた。来年度はこうした調査をもとに「敗者」像を文学の中心に据えていくまでの文化と意識の変遷を具体的に考察する。平成12年度は、二年間にわたる調査・研究のとりまとめを行うべく、文献調査の結果を整理し、そこから得られた知見・結果を検討して更に調査を重ね、ジャンルの垣根を越えながら討議し、考究した。

歴史的には、後堀河・四条の時代、後嵯峨院の時代、伏見院から南北朝、という、『平家物語』が生成される過程のエポック的な時代-これらはそのまま勅撰集が編纂され歌壇が活況を呈した時代と重なる-、この3つの時代を和歌と軍記文学の双方から広く捉え直すことを意図すると共に、文献調査の成果として、未紹介の資料を積極的に発掘し、紹介・解説することに努めた。また戦乱・政争などに敗れた者たちの「隠遁」という視点からも考えようと試みた。和歌文学関係に関しては、新古今時代から後嵯峨院時代にかけての和歌資料、及び承久の乱前後の諸史料、後鳥羽院関係の資料の収集に努めた。また軍記文学関係では、『平家物語』の諸本、特に延慶本、長門本を中心に収集調査した。印刷物以外の写本・文書類は、国文学研究資料館・宮内庁書陵部・東大史料編纂所、その他で、マイクロフィルム・紙焼写真・複写による収集を行った。分担は、和歌とその周辺資料を田渕、『平家物語』とその周辺資料を櫻井が担当した。かつ隠岐などへ実地調査へ赴き、資料の調査にあたった。これらの資料の整理、及び論文作成のために、田渕・櫻井ともにパソコンを用いて、資料・文献の整理・論文作成にあたり、複写資料によって解析を進め、また平行して、それらの解読・分析・意見交換を行い、敗者の文学とその表現、文化史的歴史的背景について、いくつかの視点から集約することに努めた。こうした調査・検討・討議・論究の結果は、別記のような、いくつかの論文、翻刻と解説、研究書の一部に結実した。
ゴルジ体再構成におけるＶＣＩＰ１３５の機能の解明

ゴルジ体形成必須因子として機能するVCIP135脱ユビキチン酵素と複合体を形成する新規タンパク質WACを同定し、その機能解析をおこなった。WACは、VCIP135の脱ユビキチン活性を活性化し、ゴルジ体再構成におけるp97/p47膜融合経路において必須因子として機能する一方、p97/p37膜融合経路では機能しない事を明らかにした。また、小胞体形成においてはWACが機能していない事を見出した。これらの結果は、WAC/VCIP135/ユビキチンを介した分子機構が、細胞分裂期のゴルジ体再構成に特異的に働いている事を強く示すものである。ゴルジ体は細胞分裂期に入ると、扁平膜積層構造が断片化、小胞化し、細胞分裂の終了とともに娘細胞で新たに扁平膜積層構造が再構成されることが知られている。細胞分裂期においてゴルジ体が小胞化するためには、膜融合が阻害される機構が存在すると考えられた。今年度において、細胞分裂期におけるゴルジ体膜融合を阻害するための新たな機構を発見した。今回、オルガネラ形成の必須因子であるVCIP135が細胞分裂期特異的にリン酸化を受けていることを見出した。種々のキナーゼの阻害剤や、VCIP135の様々なリン酸化サイトの点変異体などを用いて検討した結果、VCIP135をリン酸化するキナーゼがcdc2キナーゼであることを明らかにし、そのリン酸化サイトがスレオニン760、セリン767であることを明らかにした。in vitroにおいて、VCIP135がcdc2キナーゼによりリン酸化されると、VCIP135のp97に対する結合能が顕著に阻害される事を見出した。VCIP135の疑似リン酸化変異体(T760E,S767E)も、p97との結合を示さなかった。さらに、間期及び分裂期の細胞から免疫沈降法によりin vivoにおけるVCIP135とp97の結合を検討し、分裂期においてVCIP135とp97の結合が顕著に減少していることを明らかにした。また、試験管内ゴルジ体再構成実験系を用いてVCIP135の疑似リン酸化変異体(T760E,S767E)の活性を検討した結果、この変異はゴルジ体再構成を顕著に阻害した。これらの結果から、細胞分裂期に入るとVCIP135がcdc2キナーゼによりリン酸化を受けp97との結合が阻害され、その結果、p97による膜融合が阻害されていると考えられる。細胞分裂期におけるゴルジ体膜融合を阻害するための機構の一つであると考えられる。これまでに本研究では、新規脱ユビキチン酵素複合体を形成するVCIP135結合タンパク質、WAC(p87)を同定し、WACがゴルジ体に局在し、ゴルジ体形成必須因子として機能する事を明らかにした。さらに、WACが細胞分裂期のゴルジ体再構成特異的に、p97/p47膜融合経路におけるVCIP135の脱ユビキチン活性を活性化する事で機能している事を強く示唆する結果を得た。細胞分裂期におけるWAC、VCIP135およびユビキチンが、ゴルジ体再構成の分子機構に重要な役割を果たしている事が明らかであり、ゴルジ体膜上のWACの機能の解明がそれらに重要な知見を与えるものと考えられる。しかしながら、WAC分子内に膜貫通領域は存在せず、また膜局在修飾モチーフも無いと思われることから、WACをゴルジ体に繋ぎ止めている結合タンパク質の存在が予想された。このゴルジ体膜上のWACレセプター分子もゴルジ体再構成に重要な役割を果たしている可能性が高いと考えられる。そこで、まずyeast two hybrid法を用いて、WAC結合タンパク質の同定を試みた。その結果、いくつかのWAC結合タンパク質の同定に成功し、そのなかからゴルジ体に局在を示すタンパク質、p130を見出した。in vitroにおいて、WACとp130が直接結合する事を生化学的に確認し、また、抗WAC抗体を用いた免疫沈降により、in vivoにおいてWACおよびp130がゴルジ体膜上において複合体を形成している事を確認した。新規VCIP135結合タンパク質、WACを同定し、その機能解析をおこなった。まずWACに対する抗体を作製し、抗WAC抗体によるウエスタンブロットを行ったところ、WACは分子量約87KDaのタンパク質であり、調べた全ての組織において発現していることを確認した。また、間接蛍光抗体法による免疫染色を用いて、WACの細胞内局在を検討したところ、主にゴルジ体に局在している事が明らかとなった。

GSTプルダウン法を用いて、WACの生化学的性質を検討したところ、WACはVCIP135と直接結合を示し、VCIP135の結合タンパク質であるp97ATPaseとは直接結合は示さなかった。また、p97存在下において、WAC-VCIP135間の結合が顕著に増大する事を見出した。一方、WAC存在下において、VCIP135-p97間の結合に変化は見られなかった。このことは、VCIP135がp97と結合することにより、WACに対する結合能を増大させる事を示しており、WAC-VCIP135-p97の三者で機能している事を示唆するものである。そこで、WAC-VCIP135-p97の三者が複合体を形成しているか確認するために、ゴルジ体膜の可溶性画分から、抗WAC抗体を用いて免疫沈降法をおこなった。ウエスタンブロットを用いて、WACの免疫沈降産物中にVCIP135、およびp97が存在している事を確認した。以上の結果は、WACがVCIP135およびp97とゴルジ体膜上で複合体を形成し、WAC-VCIP135-p97が三者で機能している可能性を強く示唆するものである。VCIP135の新たな活性制御機構の発見に成功した。研究計画に記載している計画の1)新規VCIP135結合タンパク質、WACの機能解析、について、予定通りに機能解析を進めた。研究計画の通りに、2)ゴルジ体再構成におけるVCIP135のターゲットとなる基質の同定、を進めたい。また、WACのゴルジ体における結合タンパク質の探索も併せて行いたい。生化学実験用試薬、分子生物学実験用試薬・培地類、プラスチック器具類、質量分析外部依頼費を計上する。
性染色体にコードされたヒストン脱メチル化酵素によるライディッヒ細胞の分化制御

哺乳類の性はY染色体上のオス決定遺伝子SRYの有無により決定される。そのため、SRY遺伝子の導入により、XX(メス)個体に精巣形成を誘導することが可能である。しかしながら、XX精巣は男性ホルモン産生能が低下することから、オス決定遺伝子以外の性染色体上の遺伝子が精巣の機能に重要な役割を担うと考えられる。男性ホルモンの産生は精巣のライディッヒ細胞が担う。本研究では、XYとXXライディッヒ細胞を比較検討する。特に、性染色体にコードされるヒストン脱メチル化遺伝子に着目し、これらの遺伝子がエピジェネティック制御を通じ、ライディッヒ細胞のオス化・分化に寄与するメカニズムを明らかにする。
ヒトT細胞の分化・成熟・活性化機序の解析

1.ヒト胸腺、臍帯血および末梢血T細胞のin vitroにおけるスーパー抗原応答性を解析し、次の結果を得た。(1)胸腺内でシングルポジティブCD4T細胞に分化したT細胞が胸腺内でさらにCD1a^+からCD1a^-に分化し、スーパー抗原応答性を獲得する、(2)胸腺内から末梢へ移行する直前のT細胞および移行直後のT細胞はスーパー抗原刺激により、アナジー(不応答)になりやすい、(3)末梢血中のCD38^+T細胞はサイトカインの産生に制限がある。これらの結果からT細胞は末梢血移行後も成熟・分化することが明らかとなった。2.胸腺細胞で免疫したラット脾細胞から、単クローン抗体の作製を試み、6クローンのハイブリドーマを得た。その中で、3クローンは既知の抗原CD11a、CD7、CD45を認識するものであったが、他の3クローンについては未知の可能性もあり、現在解析を継続中である。3.胸腺内の最終分化段階にあるヒトT細胞がスーパー抗原不応答性になる時の細胞内変化の解析を行った。胸腺細胞由来の芽球化T細胞内のLckとCD45間の相互作用が欠落することがこの細胞が不応答であることに強く係わることが示唆された。4.我々がヒト末梢血T細胞の変動から、細菌性スーパー抗原(TSST-1)が病因と考えられる新生児TSS様発疹症(NTED)を発見した。その後の解析で(1)NTED患児のT細胞の変動はTSS患者と異なり、TSST-1応答性T細胞の増加は一過性で数日中に健常児よりも低下する、(2)増加中のTSST-1応答性T細胞はin vitroでのTSST-1刺激に不応答(anergy)になっている、(3)原因菌であるメチシリン耐性黄色ブドウ球菌(MRSA)のある新生児でも母親由来と考えられる抗TSST-1抗体(IgGクラス)があると発症は抑制されるなどが明らかになった。本年度は胸腺の成熟型T細胞の免疫応答性を末梢血あるいは臍帯血のT細胞と比較することで、胸腺を離れてからのT細胞が末梢血に移行してから抗原に依存しない分化・成熟の段階があることをまず明らかにした。1.スーパー抗原(TSST-1)を抗原としてヒト胸腺T細胞の免疫応答性(細胞増殖性やサイトカイン産生性)について解析し、成熟型の胸腺T細胞(CD1a^-CD4シングルポジティブT細胞)が末梢血T細胞や臍帯血T細胞に比較し、未熟であること(強いアナジー感受性を示すこと)を明らかにした。2.ヒト胸腺および末梢血T細胞のスーパー抗原反応時の細胞内変化を解析し、細胞内シグナルに係わる分子の動向に違いを発見した。現在、その結果の確認と詳細を解析中である。3.ヒト胸腺細胞でラットを免疫し、ハイブリドーマを作成中である。T細胞表面のマーカー等を用いて機能的な各分化段階の識別を可能なれば、我々の最大の目的である細菌感染症の治療に結びつけることができると考えている。4.我々の研究で細菌性スーパー抗原(TSST-1)が病因と考えられる新生児の疾患(新生児TSS様発疹症:NTED)が発見された。現在、詳細を解析中である。

これまでに、スーパー抗原(TSST-1)を抗原とした免疫応答性の検討を行い、成熟型の胸腺T細胞が末梢血T細胞や臍帯血T細胞に比較し、機能的に未熟な応答性を示すデータを得、報告した。平成11年度は引き続き、細胞レベルでT細胞の機能解析を中心に行った。(1)ヒト胸腺T細胞の機能面での解析ヒト胸腺T細胞のサイトカイン産生能についてヒト末梢血T細胞の反応と比較検討し、産生されるサイトカインが異なること、また、胸腺細胞のステージによっても異なることが明らかになりつつある。詳細の検討を継続中である。(2)ヒトT細胞の表面マーカーの解析特にT細胞の活性化マーカー、HLA-DR,CD25,CD38を中心に解析を継続し、また、新規の胸腺細胞に反応する単クローン抗体の作成を行い、現在その抗原の解析を行っている。(3)分化段階の違うT細胞のスーパー抗原応答時の細胞内変化の解析ヒトT細胞のTSST-1応答時の細胞内シグナルについての報告を投稿中で、さらに研究を継続している。(4)マウス胸腺内CD4^+T細胞のサイトカイン産生がヒトと異なることを見いだし、解析を継続している。(5)我々の研究で細菌性スーパー抗原(TSST-1)が病因と考えられる新生児の疾患(新生児TSS様発疹症;NTED)が発見された。現在、詳細の解析を継続中である。1.これまでに、ヒト胸腺、臍帯血および末梢血T細胞のin vitroにおけるスーパー抗原応答性を解析し、次の結果を得た。(1)胸腺内でシングルポジティブCD4T細胞に分化したT細胞が胸腺内でさらにCD1a^+からCD1a^-に分化し、スーパー抗原応答性を獲得する、(2)胸腺内から末梢へ移行する直前のT細胞および移行直後のT細胞はスーパー抗原刺激により、アナジー(不応答)になりやすい、(3)末梢血中のCD38^+T細胞はサイトカインの産生に制限がある。これらの結果からT細胞は末梢血移行後も成熟・分化することが明らかとなった。2.胸腺細胞で免疫したラット脾細胞から、単クローン抗体の作製を試み、6クローンのハイブリドーマを得た。その中で、3クローンは既知の抗原CD11a、CD7、CD45を認識するものであったが、他の3クローンについては未知の可能性もあり、現在解析を継続中である。3.胸腺内の最終分化段階にあるヒトT細胞がスーパー抗原不応答性になる時の細胞内変化の解析を行った。胸腺細胞由来の芽球化T細胞内のLckとCD45間の相互作用が欠落することがこの細胞が不応答であることに強く係わることが示唆された。4.我々がヒト末梢血T細胞の変動から、細菌性スーパー抗原(TSST-1)が病因と考えられる新生児TSS様発疹症(NTED)を発見した。その後の解析で(1)NTED患児のT細胞の変動はTSS患者と異なり、TSST-1応答性T細胞の増加は一過性で数日中に健常児よりも低下する、(2)増加中のTSST-1応答性T細胞はin vitroでのTSST-1刺激に不応答(anergy)になっている、(3)原因菌であるメチシリン耐性黄色ブドウ球菌(MRSA)のある新生児でも母親由来と考えられる抗TSST-1抗体(IgGクラス)があると発症は抑制されるなどが明らかになった。
内皮系超低増殖細胞によるライ菌の長期体外培養法の樹立

昨年度、超低増殖細胞(SLG細胞)の培養条件の設定温度として、34°Cと報告した。しかし、ライ菌の組織内最適増殖温度条件が3027°Cとされていることから、さらにライ菌の温度条件にあったSLG細胞の最適培養温度条件を検討した。SLG細胞は28°Cにすると、細胞増殖はほぼ停止状態になった。細胞数の倍加時間は5000時間を超えた。細胞は一部ヒトデ型に変形するが、剥離や細胞融解を起こすことはなかった。この28°Cはライ菌組織内最適増殖温度条件の3027°Cの範囲内であり、ライ菌、SLG細胞双方にとって最適条件と考えられる。今年度の研究予定であった、SLG細胞内ライ菌の増菌を確認するための経時的SLG細胞内菌数、Shepard法による菌数とATP値は正確な値が計測できなかった。理由はライ球を障害せず単菌にして各細胞に均一に感染させられなかったためで、菌数を測定することができなかった。Shepard法による分離菌数やATPの測定は出来ているが、分離中の菌のロスが多く、安定したデータとはならなかった。ライ菌の分離手技向上は今後の課題として残された。上記の方法に代えて生菌として増殖している確証を得るために、ライ菌特異的16S rRNA primier P2,P3を用いたcomparative RT-PCRによるRNAの比較定量を行った。この結果、4ヶ月の培養期間中にRNAが約8倍に増加した。この結果からライ菌のSLG細胞内での増殖倍加時間は約14日前後と推察された。分離菌のマウスフットパッドへの接種実験は菌数的に十分採取できなかったことから、まだ明らかな足底の腫脹は見られていない。上記の最適培養温度28°Cが設定されたことで、分離菌のSLG細胞への継代感染には成功しており、2回の継代で現在、感染実験の最長は8ヶ月に達し、さらに培養は継続されている。我々は以下の方法でライ菌寄生媒体となる超低増殖細胞の樹立に成功した。(1)SCIDマウス皮下可植性ヒト血管肉腫WB-SCIDより非酵素処理にて細胞を採取した。(2)採取細胞をヒト血管肉腫細胞用培地であるDMEM+10%FCS+マウス血管肉腫細胞株ISOS-1)培養上清50%添加で37°Cにて初代培養した。(3)1週間後、0.25%Trypsin-EDTAで10分処理し、剥離細胞を除去し培養皿に残存した細胞のみを培養継続した。(4)培養約2ヵ月後、細胞はTypsin-EDTA20分処理+ピペッティングにて剥離可能となり、継代培養し、同時に凍結保存した。継代培養された細胞はISOS-1培養上清無添加では5日以内に死滅し、50%添加条件でのdoubling timeは約70時間で、コンフルエントに近づくと死滅することなく増殖は徐々に低下しdoubling timeは1000時間以上となった。20%添加条件にすると細胞密度は半減し、増殖率はさらに低下した。20%添加条件でライ菌の好培養温度とされる34°Cでも培養が可能であった。細胞の性状はマウス系内皮マーカー(マウスCD31、GSA-1)陽性で、染色体数は77前後、すべてマウス型である。またヒト/マウス両classI抗原を同時発現する。性状は長さ約100-250mmの紐状細胞である。電顕所見では細胞小器官にきわめて富んでいる。基本的には単層増殖する。ライ菌の感染実験については、34°C・CO_25%の条件下でハンセン病研究センターより分与されたThai53株ライ菌を混合感染させたところ、抗酸菌染色により細胞内に多数のライ菌が取り込まれていることが確認され、また、電顕によっても細胞質内に菌体要素を認めた。ライ菌感染した超低増殖細胞は5ヶ月経過してなお生存中である。

上記の方法に代えて生菌として増殖している確証を得るために、ライ菌特異的16S rRNA primier P2,P3を用いたcomparative RT-PCRによるRNAの比較定量を行った。この結果、4ヶ月の培養期間中にRNAが約8倍に増加した。この結果からライ菌のSLG細胞内での増殖倍加時間は約14日前後と推察された。分離菌のマウスフットパッドへの接種実験は菌数的に十分採取できなかったことから、まだ明らかな足底の腫脹は見られていない。上記の最適培養温度28°Cが設定されたことで、分離菌のSLG細胞への継代感染には成功しており、2回の継代で現在、感染実験の最長は8ヶ月に達し、さらに培養は継続されている。
シットスキー選手のスポーツ傷害予防と競技力向上のためのバイオメカニクス的研究

下肢や体幹に障がいのあるシットスキー選手の特徴として,上肢,特に肩関節に慢性的なスポーツ傷害が多いことが報告されており,これにはシットスキー選手のポーリング動作が影響している可能性がある.しかし,これまでにシットスキー選手のポーリング動作を分析した研究はいくつかあるが,スポーツ傷害との関連に着目した研究はない.本研究では,肩関節・肩甲骨の精度の高い運動学的分析などのバイオメカニクス的手法によってシットスキー選手のスポーツ傷害のリスクとなりうる因子を明らかにする.本研究によって,シットスキー選手のスポーツ傷害予防のみならず,競技力向上のための効果的なトレーニング方法の提案が可能となる.下肢や体幹に障がいのあるシットスキー選手の特徴として,上肢,特に肩関節に慢性的なスポーツ傷害が多いことが報告されており,これにはシットスキー選手のポーリング動作が影響している可能性がある.しかし,これまでにシットスキー選手のポーリング動作を分析した研究はいくつかあるが,スポーツ傷害との関連に着目した研究はない.本研究では,肩関節・肩甲骨の精度の高い運動学的分析などのバイオメカニクス的手法によってシットスキー選手のスポーツ傷害のリスクとなりうる因子を明らかにする.本研究によって,シットスキー選手のスポーツ傷害予防のみならず,競技力向上のための効果的なトレーニング方法の提案が可能となる.
難治性のバイオフィルム感染症に対する多機能性EDTA系根管洗浄剤の開発

有機質と無機質の両方が除去可能な根管洗浄液が未だ存在しないことから、安全性が高く、簡便で強力な根管清掃効果を有する根管洗浄液の開発が急務になっている。そこで、EDTA溶液をベースとしてNaClO溶液と同程度の酸緩衝能に調整した強塩基性水溶液を用いて、申請者らがすでに確立したヒト抜去歯根管モデルを用いた根管象牙質評価法と口腔内細菌を用いた細菌学的評価法により、難治性のバイオフィルム感染症に対する多機能性EDTA系根管洗浄剤の有効性を評価すること。
癌細胞におけるホルモン療法及びアポトーシス耐性獲得とイオンチャネル活性・発現制御

AR (Androgen receptor)が発現しているヒト前立腺癌組織サンプルとヒト前立腺癌細胞株LNCaPにおいて、KCa2.2が高発現していることを明らかにした。KCa2.2阻害薬UCL1684やKCa2.2のノックダウンにより、LNCaPの細胞増殖は抑制された。また、KCa2.2はARを介した細胞増殖に機能的に関与する可能性がある。さらに、KCa2.2はARの下流に位置し、ARによる転写調節を受けることを明らかにした。加えて、短期間の去勢環境では、KCa2.2の遺伝子発現、タンパク発現共に減少した。対して、比較的長期間の去勢環境では、KCa2.2 mRNAの発現が増加を明らかにした。前立腺癌進行に対する創薬標的となり得るCa2+活性化K+チャネルサブタイプを同定し、機能的役割を検討することでその病態的意義を明らかにし、イオンチャネル作用薬の前立腺癌治療における有用性を実証するため、以下の実験を行った。1リアルタイムPCR解析により、各種Ca2+活性化K+チャネルサブタイプの発現量を解析した。これにより、正常前立腺細胞株や、アンドロゲン非依存性ヒト前立腺癌細胞株PC-3と比較し、アンドロゲン依存性ヒト前立腺癌細胞株LNCaPにおいて、KCa2.2 mRNAが高発現していることを明らかにした。また、KCa2.2 mRNAは、ヒト正常前立腺組織と比較してヒト前立腺癌患者由来組織において高発現していた。2RNA干渉法によりアンドロゲン受容体(androgen receptor, AR)によるKCa2.2転写調節を検討した。LNCaPにおいて、KCa2.2ノックダウンではAR mRNAは影響を受けなかったが、ARノックダウンによりKCa2.2 mRNA発現が有意に低下した。また、去勢環境条件での培養により、LNCaPにおけるAR mRNA発現が上昇し、それに伴いKCa2.2 mRNA発現が有意に増加した。以上の結果より、LNCaPにおいて、KCa2.2が細胞内Ca2+シグナル調節に関与しており、ARの転写調節を受けた。去勢抵抗性の獲得や維持にKCa2.2機能亢進が寄与する可能性があり、Ca2+活性化K+チャネルKCa2.2の新規前立腺癌治療標的としての有用性が示唆された。前立腺癌のイオンチャネル発現・活性調節による「去勢抵抗性獲得」メカニズムを解明するため、リアルタイムPCR解析、Western blot解析により、AR (Androgen receptor)が発現しているヒト前立腺癌細胞株LNCaPとVCaPにおいて、KCa2.2が高発現していることを明らかにした。ヒト前立腺癌組織サンプルにおいても、正常前立腺サンプルと比較し、KCa2.2 mRNAは高かった。一方、ARが発現していないヒト前立腺癌細胞株PC-3やDU145では、KCa2.2の発現はほとんど認められなかった。さらに、LNCaPにおいて、KCa2.2の阻害薬UCL1684やKCa2.2のノックダウンにより、LNCaPの細胞増殖が抑制された。一方、PC-3やDU145では、UCL1684やKCa2.2ノックダウンにより、細胞増殖は抑制されなかった。加えて、Ca2+イメージング解析により、LNCaPにおいてUCL1684投与でSOCE(store-operated Ca2+ entry)が有意に抑制された。以上の結果より、KCa2.2はARを介した細胞増殖に機能的に関与している可能性がある。さらに、LNCaPにおいて、KCa2.2ノックダウンではAR mRNAはほとんど影響を受けなかったが、ARノックダウンによりKCa2.2 mRNA発現は有意に低下した。よって、KCa2.2はARの下流に位置し、ARによる転写調節を受けることが明らかになった。加えて、アンドロゲン除去血清を用いた培地に切り替えた短期間(2日間)の去勢環境で、KCa2.2の遺伝子発現、タンパク発現共に減少した。これに対し、上記の培地で4回継代した比較的長期間(14日間)の去勢環境では、KCa2.2 mRNAの発現が増加した。本研究により、KCa2.2が長期去勢における去勢抵抗性獲得に関与する可能性を明らかにした。アンドロゲン依存性ヒト前立腺癌細胞株LNCaPやVCaP、アンドロゲン非依存性ヒト前立腺癌細胞株PC-3やDU145、22Rv1、ホルモン療法抵抗性前立腺癌細胞株(PCai1, LNCaP AI-5, LNCaP AI-8)など、多種の前立腺癌細胞株の安定した培養に時間を要した。さらに、創薬標的となり得るCa2+活性化K+チャネルサブタイプの同定のために、これら細胞株を使用したリアルタイムPCR解析においても、多種あるイオンチャネルの中からターゲットイオンチャネルを同定するのに苦慮した。

また、当初、ラット前立腺癌モデル由来細胞株PCai1に発現しているターゲットイオンチャネルの去勢環境下での発現変化を明らかにした上で、そのイオンチャネルをノックダウンしたPCai1をマウスに移植することを計画していた。しかしながら、去勢環境でPCai1を継代しても、ターゲットイオンチャネルの変化は認められなかったため、PCai1を用いた動物実験は中止とした。この代替実験として同様に去勢抵抗性を獲得しているヒト由来の前立腺癌細胞LNCaP AI8 CSを用い、発現しているターゲットイオンチャネルの阻害薬投与やノックダウンを行うことで、ターゲットイオンチャネルの機能的変化の解明を行う。加えて、本研究では当初、名古屋市立大学病院より前立腺癌患者の針生検(または摘出組織)を譲受することを予定していた。しかしながら、本研究の立ち上げ初年度であったため基礎研究結果が十分ではなく、協力研究者である名古屋市立大学大学院腎・泌尿器科学分野佐々木昌一准教授との詳細な協議の結果、IRB(治験審査委員会)の承認が得られないとの判断がなされた。そのため、最終的には予定施設からのヒト前立腺癌患者由来組織サンプルを譲受することが出来なかった。この結果を受けて、ヒト前立腺癌患者由来組織サンプルは、OriGen社からmRNAを購入することで代用することとした。医歯薬学現在、それぞれの細胞株の環境条件が定まり、安定した継代培養が可能になっている。さらに、ターゲットイオンチャネルの同定についても終了した段階である。本研究計画調書の提出時には、研究立ち上げの初年度であったため、可能性のある実験を広く設定していた。今後、遅れを取り戻すため、実験計画を下記のように見直す。2本実験開始時に予定していたPCai1のマウス移植実験は上述の理由(「11.現在までの達成度」参照)にて行わないが、その代替実験として、本実験に関わる動物種を全てヒトもしくはヒト由来に統一させ、同様に去勢抵抗性を獲得しているヒト由来の前立腺癌細胞LNCaP AI8 CSを用い、ターゲットイオンチャネルの機能的変化の解明を続行する。ヒト前立腺癌のmRNAをOriGene社より購入予定であったが、希望条件(黄色人種、腫瘍占有率:75%以上、Bioanalyzer Ratio(25S/18S):1.4以上)で、腫瘍ステージII期、III期、IV期(それぞれ3例以上)のサンプルが商品として販売されていない。2015年6月までを目処に、希望条件のヒト前立腺癌mRNAを購入する。この期日までに希望条件を満たしたヒト前立腺癌mRNAが購入出来ない場合には、条件を腫瘍占有率70%以上、Bioanalyzer Ratio(25S/18S) 1.0以上の設定に下げて購入検討をする。それでも購入が出来ない場合には、ヒト前立腺癌患者由来組織データによる裏図けを少しでも補えるよう、培養細胞の実験データを追加する。具体的には、去勢環境で培養したLNCaP AI8 CSを用いた実験を考えているが、この継代培養に必要なチャコール処理した血清が追加で必要になる。現状保持している量では不足するため、ヒト前立腺癌mRNAの購入予算をチャコール処理済の血清購入に充てる。
タイタ語のコーパスに関する文化人類学的研究

文化人類学的視点からタイタ語のコーパスの動的側面を明らかにすることが本研究の目的である。そのために、次の4種類の言語データを音声言語による発話記録として収録した。すなわち、a)タイタ語の基礎語彙2000、b)タイタ語の文法、c)拙著収録「体験された呪術」(原文はタイタ語)、d)小学生用タイタ語の教科書である。発話記録のデジタル化をおこなえたことは、彼らの思考体系を反映させた記録方法の中に、言語を記録する意味があると考えられることから、危機言語の記録方法の一形態を提示できたと考えられる。ケニア東南部の山地農耕民タイタ人の世界に関する文化人類学的研究の一環として、デジタルメディアを介した発話記録の収集とその分析を通して、文化人類学的視点からタイタ語のコーパスの動的側面を明らかにすることが本研究の目的である。これは、これまでおこなってきたタイタ語の語彙や文法などの文字化され、記述された言語データに関する研究の次の段階として位置づけられるものである。平成19年度においては、10月から科研費による研究がスタートしたことにより、タイタ語の2000の基礎語彙に関する研究に先立ち、文法構造に関する研究で採録した語彙及び各例文を、音声言語の形で収録することを中心に進めた。文法に関する事項については、表記法・名詞・形容詞・数詞・代名詞・動詞・副詞・前置詞・接続詞・関係詞の順で収録した。これらの収録は、現地調査協力者とともにおこなった。I2007年10月12月:タイタ語の文法構造に関する研究II2007年12月2008年1月:ケニアでの調査研究現地調査協力者とともに文法構造に関する収録をおこなった。III2008年1月2月:文法構造を収録可能な形に再整理(タイタ語のみ)IV2008年3月:ケニアでの調査研究現地調査協力者とともに文法構造に関する収録をおこなった。本研究は、タイタ語の発話記録に関する研究をおこない、デジタルメディアを用いて記録に残すことにより、危機言語としてのタイタ語のコーパスの全体像を明らかにしようとするものである。平成19年度からの継続研究として、タイタ語の発話記録を収録した。平成20年度では、前半で、基礎語彙と例文に関する収録をおこなった。後半で、拙著(坂本、2001)でとりあげた「体験された呪術」(原文はタイタ語)を音声言語の形で収録した。これらに関しては、ネイティヴスピーカーのチェックを受けるために、夏と春に短期間現地に赴き、対面調査を通じてデータの充実に努めた。I2008年4月7月:タイタ語の語彙に関する研究、既収録語彙の整理、例文の妥当性の点検II2008年8月9月:ケニアでの調査研究、資料収集現地調査協力者とともに基礎語彙と例文に関する収録をおこなった。III2008年10月2009年2月:収録内容の整理(英語、スワヒリ語、タイタ語)IV2009年3月:ケニアでの調査研究、資料収集現地調査協力者とともに「語り」に関する収録をおこなった。次回調査の実施項目の確認。語彙の収録に時間を要してしまったが、これでネイティヴスピーカーによる基礎語彙の発音に関して記録を取ることができた。以上により、前年度実施した文法に関する収録に加え、基礎語彙に関する収録が完了した。今後は、「語り」の部分の収録を中心に進めていくこととする。平成20年度の継続研究として、既に採録が終わっている語彙、文法、文字化された資料との対応関係に齟齬が生じないように再チェックを行い、その結果をタイタ人の調査協力者とともに最終的な検討をおこなった。また、儀礼と世界観をテーマとした「語り」をタイタ語による発話記録として収録をおこなったが、タイタ語のシナリオを書いてそれに即して発話記録を採録するという段階までには至らなかった。そこで、ケニア国独立以前に小学校で使用されていたタイタ語のテキストを入手し、音声言語による発話記録として収録するとともに、スワヒリ語による対照訳を付した。ケニアでの調査研究は、現地調査協力者の最終チェックを受けることを目的とするため、当初の予定を半年延期し現地の状況に照らして2010年3月におこなった。

以上、平成13年度18年度にかけて科学研究費補助金によりおこなってきた語彙と文法構造に関する研究に、新たに3ヵ年にわたる研究を継続しておこなうことにより、タイタ語のコーパスの全体を視野に入れて研究することができた。特に、発話記録のデジタル化をおこなえたことは、彼らの思考体系を反映させた記録方法の中に、言語を記録する意味があると考えられることから、危機言語の記録方法としての一つの可能性を提示できたのではないかと考えられる。
複素モンジュ・アンペール作用素のルロン数と剰余測度

ルロン数と剰余測度は多重劣調和関数の得意点における重要な指標であり、これらを近年発展中の複素モンジュ・アンペール作用素の解析を結びつけて研究した。当初の目標は、ルロン数が0になる点における剰余測度の解であり、Wiklundはこれが0になるという予想(massless conjecture)に取り組み、一定の成果を得た。これを論文にして投稿したが、レフェリーから大幅な注文がつき、改稿中である。一方、複素モンジュ・アンペール作用素の解析は1987年のJ.-P.Demaillyの仕事によって新たな方向づけがなされ、主要な問題がU.Cegrellによって解決された。これをふまえて大沢は相対モンジュ・アンペール測度の掃散によって定まる境界測度の解析を提案し、Wildundにより若干の成果が得られたのだが、その後Cegrellも我々とは独立にこの研究を行っていたことが判明した。現在これに関してはCegrellとWiklundの共同研究が進行中である。さらにこの研究によって複素モンジュ・アンペール測度に対する理解が深まったことにより、大沢のL^2拡張理論にも新しい進展があり、モンジュ・アンペール測度と比較可能な測度族の導入によって孤立特異点をもつ超曲面上のL^2正則関数についての最良の拡張定理が得られた。この新しい拡張定理に用いられた測度族は、ポテンシャル論においても興味深い研究対象になりうるのではないかと期待している。Xをスタイン多様体、ψをX上の多重劣調和関数とするとき、Xの近似列B_rCCB_<r+1>CC・・・CXに対し測度μ_<ψ,r>=1_<X-Br>(dd^Cψ)^h-(dd^Cmax(ψ,r))^nの極限を掃散モンジュアンペール測度という。XがC^n内の滑らかな有界擬凸領域であり、ψがXの多重複素グリーン関数ならば、掃散モンジュアンペール測度の台は強擬凸境界点に集中する(Demailly '87)。この現象は等角マルチンゲールを用いて確率論的解釈をすることが可能であると考えられている。Wiklundはこのような動機から、より一般の状況で掃散モンジュアンペール測度の台について研究し、Cegrellの極限定理とGuanの平滑化補題を用いることにより次を示した。(以下では掃散モンジュアンペール測度は多重複素グリーン関数に対するものとする。)定理1、X_1,X_2を放物型スタイン多様体、Ω_1CX_1,Ω_2CX_2を超凸領域とすると、X_1xX_2内の領域Ω=Ω_1xΩ_2に対する掃散モンジュアンペール測度の台は∂Ω_1x∂Ω_2にふくまれる。定理2、PをC^n内の有界な解析的多面体領域とすると、Pの掃散モンジュアンペール測度の台は∂PのLevi平坦部分と共通部分をもたない。この結果をプレプリントにまとめ、投稿準備中である。ちなみにGuanの平滑化補題とは、2つの多重劣調和関数u,vおよび実関数|x|の凸C^2近似xに対してx(u-v)+u+vが多重劣調和であるというものである。