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リウマチ滑膜のヘマトポルフィリン沈着形式とレ-ザ-照射の滑膜細胞破壊の研究

ヘマトポルフィリンは、癌細胞に特異的に、正常細胞に比較して、長時間大量に蓄積する。ラットのアジュバント関節炎を実験モデルとして、慢性滑膜へのヘマトポルフィリンの沈着の検討では、コントロ-ル群に比し、アジュバント注入後48時間で、24時間、72時間に比し、最大の蓄積を示した。ヘマトポルフィリン沈着はアルゴン・ダイレ-ザ-488nm,20mwの照射により、組織から発生する640nmの螢光強度により測定し、強度は螢光発生を認めたことによる。関節鏡施行時に採取した滑膜を組織培養し、培地内にヘマトポルフィリンを投与しても、培養滑膜細胞は増殖していくが、アルゴン・ダイレ-ザ-を照射すると、滑膜組織の増殖は停止し、一部細胞は死滅する。増殖を停止した滑膜組織は、一定期間後に増殖を開始するが、レ-ザ-照射前のように線維芽細胞、および樹枝状細胞が混在せず、増殖性の強い線維芽細胞のみが増殖し、滑膜組織全体の変化を示している。培養リウマチ滑膜が、ヘマトポルフィリンをとり込んだところで、アルゴン・ダイレ-ザ-を照射して、細胞のどの部分からレ-ザ-惹起の螢光が認められるか観察したが、細胞全体で螢光を発生しており、膜上が細胞質内かの判定は困難であった。細胞を洗浄、又は破壊による方法も試みたが、目的は達せられなかった。リウマチ滑膜は培養によりインタ-ロイキン2、および3でなく、インタ-ロイキン1を多量に放出するが、ヘマトポルフィリンとレ-ザ-の組合せで、インタ-ロイキン1の放出は著明低下する。炎症滑膜にとり込まれたヘマトポルフィリンは、アルゴン・ダイレ-ザ-の照射により、ス-パ-オキサイドを発生し、炎症細胞を破壊すると考えられるが、チトクロ-ムC還元法により測定したが、ス-パ-オキサイドの増加を認めた。実験的に作製したラットのアジュバント関節炎では、滑膜において腹腔内に投与した2mg/kgのヘマトポルフィリンが、正常滑膜に比較して多量に蓄積していた。ヘマトポルフィリンは正常滑膜にも少量蓄積するが、投与後24時間以内に速やかに代謝されたが、アジュバント関節炎滑膜には投与後48時間をピ-クとして、72時間以上も大量に滑膜に蓄積していた。ヘマトポルフィリンは、癌細胞に大量、長時間蓄積することが知られているが、false positive現象として炎症組織への蓄積が明らかになった。培養された滑膜のヘマトポルフィリンの取り込みは、リウマチ滑膜には非リウマチ滑膜に比較して大量に蓄積が認められた。培養中、ヘマトポルフィリンはアルゴンダイレ-ザ-照射ほどではないが、通常光によっても活性化され、滑膜細胞を破壊した。従って培養には通常光の遮光が必要となる。炎症組織に取り込まれたヘマトポルフィリンが細胞中のどの部分に分布するかを検討するために、リウマチ滑膜組織を培養し、培養液中にヘマトポルフィリンを加え、48時間培養後滑膜を破壊して遠心により細胞部分を分離して、各部分のアルゴンダイレ-ザ-照射による蛍光又は分離各部分のヘマトポルフィリンの化学的測定により、細胞各部分のヘマトポルフィリン蓄積分析を試みたが、遠心による細胞の細胞膜、細胞質の各部分の分離が行うことができず、炎症細胞のどの部分にヘマトポルフィリンが沈着するかは検討中である。慢性関節リウマチ患者の滑膜切除時に採取した滑膜を培養し、培養液中にヘマトポルフィリンを加えて培養すると、アジュバント関節炎滑膜同様に、ヘマトポルフィリンを大量に取り込む。

炎症滑膜にとり込まれたヘマトポルフィリンは、アルゴン・ダイレ-ザ-の照射により、ス-パ-オキサイドを発生し、炎症細胞を破壊すると考えられるが、チトクロ-ムC還元法により測定したが、ス-パ-オキサイドの増加を認めた。ヘマトポルフィリンは癌細胞に、特異的に、正常細胞に比較して長時間大量に蓄積する。ラットのアジュバント関節炎を実験モデルとして、慢性滑膜へのヘマトポルフィリンの沈着の検討では、コントロ-ル群に比し、アジュバント関節炎ではアジュバント注入後48時間で、24時間、72時間に比し、最大の蓄積を示した。ヘマトポルフィリン沈着はアルゴンダイレ-ザ-488mm,20mwの照射により組織から発生する640nmの螢光強度により測定し、強度な螢光発生を認めたことによる。関節鏡施行時に採取した滑膜を組織培養し、培地内にヘマトポルフィリンを投与しても、培養滑膜細胞は増殖していくが、アルゴン・ダイレ-ザ-を照射すると、滑膜組織の増殖は停止し、一部細胞は死滅する。増殖を停止した滑膜組織は、一定期間後に増殖を開始するが、レ-ザ-照射前のように線維芽細胞、および樹枝状細胞が混在せず、増殖性の強い線維芽細胞のみが増殖し、滑膜組織全体の変化を示している。培養リウマチ滑膜が、ヘマトポルフィリンをとり込んだところで、アルゴン・ダイレ-ザ-を照射して、細胞のどの部分からレ-ザ-惹起の螢光が認められるか観察したが、細胞全体で螢光を発生しており、膜上が細胞質内かの判定は因難であった。細胞を洗浄、又は破壞による方法も試みたが、目的は達せられなかった。リウマチ滑膜は培養によりインタ-ロイキン2,および3でなく、インタ-ロイキン1を多量に放出するが、ヘマトポルフィリンとレ-ザ-の組合せで、インタ-ロイキン1の放出は著明低下する。炎症滑膜にとり込まれたヘマトポルフィリンは、アルゴン・ダイレ-ザ-の照射により、ス-パ-オキサイドを発生し、炎症細胞を破壞すると考えられるが、チトクロ-ムC還元法により測定したが、ス-パ-オキサイドの増加を認めた。
相同組換えにおけるクロマチンでの相同鎖検索機構とその制御メカニズムの解明

本研究は、クロマチン構造を形成したDNA上での相同組換え反応の解明を目指して、特に相同鎖検索機構の過程を中心に研究を推進している。ゲノムDNAの二重鎖切断損傷の修復や減数分裂期の遺伝的組換えにおいて、相同組換えは必須の機構である。RAD52は、ゲノムの損傷領域において単鎖DNAと複合体を形成する。本年度は、相同組換え反応に重要なRAD52と単鎖DNAとの複合体のX線結晶構造解析を行い、立体構造の解明に成功した。そして、RAD52と単鎖DNAとの複合体には、2種類のDNA結合様式が存在することを立体構造レベルで明らかにし、相同組換え反応の際の相同鎖検索機構の1つである、単鎖DNA間でのアニーリング反応のメカニズムのモデルを提唱した。また、RAD51およびDMC1による相同的対合反応の解析をさらに推し進めるために、遺伝学的解析が容易であり、かつ安定なタンパク質を精製することができる、シロイヌナズナのRAD51およびDMC1を精製し、それらの活性について、試験管内相同組換え系によって解析を行った。また、比較対象として、ヒトおよびイネのRAD51およびDMC1の精製も行い、シロイヌナズナのRAD51およびDMC1の相同組換え活性との比較研究を行った。その結果、シロイヌナズナのDMC1およびRAD51の相同的対合活性は、植物間で非常に近接しており、ヒトのRAD51およびDMC1とは、その活性の強度において異なっていることが明らかになった。これらのサンプルは、RAD51およびDMC1とヌクレオソームとの複合体の立体構造解析の試料として有用であり、現在行っている、RAD51-ヌクレオソーム複合体のクライオ電子顕微鏡解析に使用する予定である。また、ヒトRAD51-単鎖DNA-ヌクレオソーム複合体の調製方法の確立に成功し、現在、クライオ電子顕微鏡によって初期データの取得を開始している。本研究では、生化学的および構造生物学的手法を中心に、クロマチン上での相同組換え機構の解明を目指している。本年度は、相同組換えの中心の反応である相同的対合反応を担うRAD51およびDMC1に加えて、相同的対合反応を直接もしくは間接的に触媒するRAD52に着目して研究を進めた。そして、RAD52と単鎖DNAとの複合体のX線結晶構造解析による立体構造解析に成功し、2種類のDNA結合領域において単鎖DNAが結合した複合体の立体構造情報を得た。それらの解析を通して、相同組換え反応の際に起こる単鎖DNA間でのアニーリングの反応モデルを提案することができた。この成果は、当初の計画を大きく上回るものであった。また、RAD51およびDMC1による相同的対合反応の解析対象を、遺伝学的解析が容易なシロイヌナズナまで広げ、シロイヌナズナのRAD51およびDMC1を精製する系を確立した。これらの研究成果は、2報の学術論文として報告した。これらのことから、本年度の研究は当初の計画以上に進展したと言える。今後は、ヌクレオソーム上におけるRAD51およびRAD52による相同鎖検索機構を、立体構造レベルで明らかにするために、RAD51-単鎖DNA-ヌクレオソーム複合体およびRAD52-ヌクレオソーム複合体の立体構造解析を、クライオ電子顕微鏡解析を中心に推進する。それによって、これまでボトルネックとなっていた結晶化を回避し、立体構造情報が得られると考えられる。クライオ電子顕微鏡による解析は、東京大学に導入されたTitan Krios(300kV)およびTalos Arctica(200kV)の装置を中心に用いることで推進する。並行して、RAD51-単鎖DNA-ヌクレオソーム複合体およびRAD52-ヌクレオソーム複合体の結晶化についても、結晶化ロボットを用いた大規模スクリーニングを行なう。良質な単結晶が得られた場合は、大型放射光施設SPring-8またはPhoton Factoryにて回折実験を行い、データセットを取得する。そして、RAD51-単鎖DNA-ヌクレオソーム複合体およびRAD52-ヌクレオソーム複合体の立体構造を明らかにすることで、ヌクレオソーム上での相同鎖検索機構を明らかにする。本研究は、相同組換えの過程における、クロマチン構造上での相同鎖検索機構の解明を目的としている。相同組換えは、ゲノムDNAの二重鎖切断損傷の修復や減数分裂期の遺伝的組換えに必要な機構である。その際、RAD51およびDMC1は、損傷部位に形成された単鎖DNAと相同な二重鎖DNAの検索と相同的対合を触媒するが、クロマチン構造上における相同的対合反応の分子機構は明らかではない。本年度は、減数分裂期組換えにおけるSYCP3による相同的対合反応の制御に着目した。SYCP3は減数分裂期特異的な染色体構造であるシナプトネマ複合体の構成因子であり、減数分裂期組換えの推進に重要である。本研究では、リコンビナントタンパク質として精製したSYCP3を用いて、SYCP3がRAD51とDMC1の相同的対合反応活性に及ぼす影響について試験管内相同組換え系によって解析を行った。その結果、SYCP3は、DMC1依存的な相同的対合反応は阻害しないが、RAD51依存的な相同的対合反応を特異的に阻害することが明らかになった。また、二重鎖切断損傷の修復に必要となるクロマチンの基盤構造の解析に取り組んだ。

ゲノムDNAが凝縮したヘテロクロマチン上に生じた二重鎖切断領域では、ヘテロクロマチンタンパク質HP1が速やかに集積することで、相同組換え修復が促進されると考えられている。そこで、リンカーDNAで繋がった2つのヌクレオソームにHP1が結合した複合体のクライオ電子顕微鏡による立体構造解析を行った。その結果より、HP1が結合したヌクレオソーム複合体は、修復因子の集積が可能な構造であることを明らかにした。本研究は、クロマチン上での相同組換えの機構の解明を目的として、生化学的、構造生物学的観点から遂行している。本年度は、クロマチンでの相同鎖検索において、RAD51とDMC1の相同対合反応活性がSYCP3によって異なった制御を受けていることを生化学的解析により明らかにした。その成果を学術論文として報告した。また相同的対合反応で、RAD51と共同して機能するRAD52が、損傷領域に形成される1本鎖DNAに結合した複合体のX線結晶構造解析に成功し、2種類の結合様式を学術論文に報告した。これらの成果は、クロマチンでの相同組換えの分子機構の解明に大きく貢献している。近年、クライオ電子顕微鏡を用いた立体構造解析において、技術革新があり、近原子分解能の立体構造解析が可能になった。この技術は本研究の目的である、クロマチン上での相同組換えの機構を構造生物学的観点から解明するために、非常に有効であり、この技術をクロマチン構造に適用することが急務であった。そこで、本年度は、クライオ電子顕微鏡を用いた、ヌクレオソームとその相互作用因子の複合体の立体構造解析を行うためのサンプル調製法および測定法の開発についても行った。その結果複数例のクロマチン構造解析に成功し、その成果の一部を2報の学術論文にて報告した。以上の成果より、本年度の研究は当初の計画以上に進展したと言える。本研究は、クロマチン構造を形成したDNA上での相同組換え反応の解明を目指して、特に相同鎖検索機構の過程を中心に研究を推進している。ゲノムDNAの二重鎖切断損傷の修復や減数分裂期の遺伝的組換えにおいて、相同組換えは必須の機構である。RAD52は、ゲノムの損傷領域において単鎖DNAと複合体を形成する。本年度は、相同組換え反応に重要なRAD52と単鎖DNAとの複合体のX線結晶構造解析を行い、立体構造の解明に成功した。そして、RAD52と単鎖DNAとの複合体には、2種類のDNA結合様式が存在することを立体構造レベルで明らかにし、相同組換え反応の際の相同鎖検索機構の1つである、単鎖DNA間でのアニーリング反応のメカニズムのモデルを提唱した。また、RAD51およびDMC1による相同的対合反応の解析をさらに推し進めるために、遺伝学的解析が容易であり、かつ安定なタンパク質を精製することができる、シロイヌナズナのRAD51およびDMC1を精製し、それらの活性について、試験管内相同組換え系によって解析を行った。また、比較対象として、ヒトおよびイネのRAD51およびDMC1の精製も行い、シロイヌナズナのRAD51およびDMC1の相同組換え活性との比較研究を行った。その結果、シロイヌナズナのDMC1およびRAD51の相同的対合活性は、植物間で非常に近接しており、ヒトのRAD51およびDMC1とは、その活性の強度において異なっていることが明らかになった。これらのサンプルは、RAD51およびDMC1とヌクレオソームとの複合体の立体構造解析の試料として有用であり、現在行っている、RAD51-
Generic構造における超準的手法と、その安定性理論への応用の研究

理論Tの存在閉モデルはTのモデルの中で特に解が豊富なモデルである。例えば、体の理論の存在閉モデルは代数的閉体であり、グラフの理論の存在閉モデルはランダムグラフである。しかし存在閉モデル全体は一般には初等的クラスになるとは限らない。初等的クラスになることが示されれば、モデル理論の多くの議論の枠組みに乗り、研究の発展がきたいできる。本研究では、ランダムグラフの理論と「全単射を持つ」という意味の理論の和を取った理論の存在閉モデル全体が初等的クラスになることを示した。関連研究として、(1)代数的閉体の理論と「自己同型を持つ」という意味の理論の和を取った理論の存在閉モデル全体は初等的クラスになる。(Chatzidakis,Hrushovskiなど)(2)ランダムグラフの理論と「自己同型を持つ」という意味の理論の和を取った理論の存在閉モデル全体は初等的クラスにならない。(Kikyo)がある。(1)によって得られる理論はACFAと呼ばれ、HrushovskiによるManin-Mumford予想の解決にも使われた重要な理論である。また、本研究では得られた理論(存在閉モデル全体を公理化するもの)が完全で、単純だが超単純ではないということを示した。任意の単純な理論において強タイプとLascar強タイプが等しいかどうかは未だ解決されていない大きな問題であるが、lowな理論の場合はそれらは等しいということがBuechlerによって示されている。従って、単純な理論とlowな理論の違いを知ることは重要であるが、本研究はその問題と以下のような関係性があると考えられる。以下の無限ソート構造を考える:n番目のソートは、本研究で全単射の変数がn変数の時に得られる理論のモデルである。この構造の理論は単純だがlowでないと予想される。(本研究によって超単純ではないことは既にわかっている。)1、超準的手法のgeneric構造の研究への応用Genericな構成法とは、E.Hrushovskiによって編み出された、有限構造の貼り合わせで無限構造を作る構成法である。Genericな構成法で作られた構造のことをgeneric構造と呼ぶ。超準解析とは、実数体の拡大になっていて、かつ無限小や無限大を具体的に元として含む体(実数体の超準モデル)を構成し、実数の中での解析をその超準モデルを介して行う分野である。私は以前から行ってきた、generic構造に超準的手法を応用する研究を、今年度、以下の2つの点で改良した。(1)有限閉包性をもつとは限らない場合のgeneric構造に対しても、超準的手法が応用できるようにした。(2)Generic構造における局所次元関数に対しても超準的な扱いができるようにした。これらの改良によって、generic構造において、次元関数を用いて定義する独立性と局所次元関数を用いて定義する独立性か同値であるというVerbovskiy-Yonedaの定理に、より簡潔な証明を与えた。法政大学の池田宏一郎氏と昨年度から行っていた共同研究で、quasi-substructureで閉じているクラスのgeneric構造についてはsuperstableなgeneric構造は存在しないといことを証明した。Elementary classにおいてB.Kimは以下の4条件が同値であることを示した:(1)forkingがlocal characterをみたす。(2)forkingがsymmetryをみたす。(3)forkingがtransitivityをみたす。(4)dividingと任意のMorley列によるdividingが同値になる。私は、Hrushovskiが定義したRobinson theoryのexistentially closed model全体のクラス(non-elementary classの例)においてKimの定理を証明した。(1)Genericな構成法とは、Ehud Hrushovskiによって編み出された、有限構造の貼り合わせで無限構造を作る構成法である。Genericな構成法は、安定性理論において、未解決問題に反例を与える目的に対して非常に有益な手法である。また近年、安定性理論を一般化した理論である、単純性理論においてもgeneric構造が重要な構造であることが、Frank Wagnerらによって確かめられてきた。(2)一方、単純性理論の一般論では、Anand Pillay, Itai Ben Yaacovらが、これまでelementary classで展開されてきた単純性理論を、non-elementary classでの単純性理論に一般化してきている。Elementary classにおいて、low simple classでは強タイプとLascar強タイプが一致することが知られていたが、今年度私は、Anand Pillayが提示したnon-elementary classにおいて、Itai Ben Yaacovの意味でthickなlow simple classにおいては、強タイプとLascar強タイプが一致することを証明した。Lowという条件を外して、simple classで強タイプとLascar強タイプが一致するかどうかは、elementary classの場合でさえ未だ解決されていない問題である。Pourmahdian-Wagnerによって提示されたnon-elementary classでの興味深いgeneric構造の例によって、non-elementary classの場合は、強タイプとLascar強タイプの間に面白い関係性があることが指摘されたが、本研究によってelementaryな場合とnon-elementaryな場合の強タイプとLascar強タイプの関係に、かなりの類似性があることがわかったと考えられる。

しかし存在閉モデル全体は一般には初等的クラスになるとは限らない。初等的クラスになることが示されれば、モデル理論の多くの議論の枠組みに乗り、研究の発展がきたいできる。本研究では、ランダムグラフの理論と「全単射を持つ」という意味の理論の和を取った理論の存在閉モデル全体が初等的クラスになることを示した。関連研究として、(1)代数的閉体の理論と「自己同型を持つ」という意味の理論の和を取った理論の存在閉モデル全体は初等的クラスになる。(Chatzidakis,Hrushovskiなど)(2)ランダムグラフの理論と「自己同型を持つ」という意味の理論の和を取った理論の存在閉モデル全体は初等的クラスにならない。(Kikyo)がある。(1)によって得られる理論はACFAと呼ばれ、HrushovskiによるManin-Mumford予想の解決にも使われた重要な理論である。また、本研究では得られた理論(存在閉モデル全体を公理化するもの)が完全で、単純だが超単純ではないということを示した。任意の単純な理論において強タイプとLascar強タイプが等しいかどうかは未だ解決されていない大きな問題であるが、lowな理論の場合はそれらは等しいということがBuechlerによって示されている。従って、単純な理論とlowな理論の違いを知ることは重要であるが、本研究はその問題と以下のような関係性があると考えられる。以下の無限ソート構造を考える:n番目のソートは、本研究で全単射の変数がn変数の時に得られる理論のモデルである。この構造の理論は単純だがlowでないと予想される。(本研究によって超単純ではないことは既にわかっている。)
ベンダムスチン投与患者における皮膚障害の発現因子解明と予防法確立

ベンダムスチンは、これまでNHLの初回治療抵抗例や再発例に対する救援化学療法として用いられてきたが、2016年12月より初回化学療法としても使用可能となった。また、適応拡大に伴い、ベンダムスチンの使用頻度は益々増加している。一方で、ベンダムスチン投与患者では、悪心・嘔吐、静脈炎、皮膚障害等の副作用が高率に発現することが知られている。ベンダムスチンの皮膚障害に関しては、発現時期や発現因子に関する情報も国内外でほとんどないのが現状である。ベンダムスチンの副作用である皮膚障害がどのような患者でいつ頃起きるのか等を検証し、最終的にベンダムスチンによる皮膚障害発現予防法の確立を目指す。
翻案映画におけるシェイクスピア受容のインターテクスチュアリティ

サイレント時代からシェイクスピア作品は貴重な映画の材源となっていたが,戦後、大衆娯楽として映画産業が隆盛を迎えるにつれて娯楽ジャンル映画形式を活かしたシェイクスピア翻案映画が活性化した。本研究は、シェイクスピア受容のインターテクスチュアリティ研究の観点から,シェイクスピア受容批評の構築と検証を目指し、地域性や時代性を反映しながら、西部劇・ギャング映画・ミュージカル映画・時代劇等の娯楽ジャンル映画の枠組みの中でシェイクスピアがいかに古典としての力を保ちながら娯楽作品として国際的に翻案されてきたかを映画アーカイブ資料を利用して黒澤明映画と『テンペスト』受容事例のケーススタディから明らかにした。翻案映画におけるシェイクスピア受容のインターテクスチュアリティを解明するためには、映画誕生の時期にまで遡って調査することが必要であることが判明したので、サイレント映画におけるシェイクスピア受容と、戦後ジャンル映画(西部劇・ギャング映画)におけるシェイクスピア翻案の研究のために平成22年9月13日から22日まで渡英し、British Film Institute (London)とShakespeare Institute (Stratford-upon-Avon)においてアーカイブ資料の調査・分析を行った。成果としては初期シェイクスピア無声映画資料と初期娯楽ジャンル映画に属すシェイクスピア翻案映画資料を収集することができ、その成果の一部は、平成23年1月29日に九州シェイクスピア研究会第157回例会(於西南学院大学)において「サイレント映画とシェイクスピア『テンペスト』を中心に」という題目で研究発表を行った。平成23年7月プラハにおいて開催が予定されているシェイクスピア国際会議の『テンペスト』セミナーにおいて黒澤映画を代表とする日本的シェイクスピア翻案技法と蜷川幸雄のシェイクスピア演出を比較した"Ninagawa Tempest and the Japanese Tradition of Shakespearean Adaptation : Shakespeare in Sado Island"という題目の研究発表が受理されている。平成22年度にBritish Film Institute (London)とShakespear Institute (Stratford-upon-Avonで実施したシェイクスピア翻案映画とシェイクスピア受容に関する基礎研究を発展させつつ、インターテクスチュアリティ受容批評理論を実践的に応用し、娯楽ジャンル映画におけるシェイクスピア受容の解明に取り組んできた。特に19世紀以来の視覚的なシェイクスピア受容に着眼することによって、サイレント映画から初期娯楽ジャンル映画(西部劇・ギャング映画等)、さらには日本の明治時代におけるシェイクスピア受容から黒澤明のシェイクスピア映画『蜘蛛巣城』・『乱』を経て、現代における蜷川幸雄や野村萬斎の日本的なシェイクスピア上演(主として『テンペスト』を分析対象とした)へとつながるシェイクスピア翻案受容の伝統形成を指摘し、サイレント映画・戦後娯楽翻案映画・日本的シェイクスピァ翻案伝統に関するケーススタディによって、翻案映画・舞台演出におけるローカルな文化的・歴史的言説と演劇伝統の利用がグローバル化する世界におけるシェイクスピア作品の審美的価値と存在意義を高めていることを明らかにした。これまでのシェイクスピア翻案映画受容に関する事例研究・調査を活用しながら、事例研究とインターテクスチュアリティ受容批評理論の構築と検証を行い、米国フォルジャー・シェイクスピア・ライブラリー,ニューヨーク・パブリック・ライブラリー等で追加調査・資料収集(2014年2月)を実施して,地域性・時代性が原作に作用してユニークな翻案事例を生み出していることを明らかにした。研究成果は、第30回国際学会「心理学と芸術」(ポルト大学:2013年6月)において「『蜘蛛巣城』の戦後的インターテクスチュアリティに関する心理学的研究」という題目で研究発表を行い、日本人の戦後意識が心理的にどのように黒澤明のシェイクスピア翻案映画に作用しているかを明らかにした。第1回アジア・シェイクスピア・アソシエーション会議(国立台湾大学:2014年5月)においても日本的インターテクスチュアリティの観点からシェイクスピア劇ロマンス的要素の舞台表象を分析した研究発表が確定している。研究成果の社会還元としては,市民対象公開講座「翻案映画で楽しむシェイクスピア」(2013年9月90分4回)を実施した。以上のように翻案によるシェイクスピア受容に関する批評理念・方法論を実証的に構築・改善しながら,舞台公演事例とも比較したシェイクスピア翻案映画事例研究を実施し、地域や時代に根ざした言説や伝統や様式がインターテクスチュアリティとして作用してユニークなシェイクスピア翻案映画を生み出してきたことを明らかにした。本研究の三年目にあたり、これまでの研究成果をとりまとめて、論文化して公表し、関連学会で発表するとともに、アメリカ映画におけるシェイクスピア受容史研究資料の収集のためにフォルジャー・シェイクスピア・ライブラリ(米国ワシントンDC)を訪れて娯楽ジャンル映画におけるシェイクスピア受容に関する調査・資料収集を行った。発表論文としては、昨年度のシェイクスピア国際会議においてセミナーにて発表した日本における『テンペスト』受容に関する論文が評価され、本年度、ドイツ出版社Narr Verlagより英文学書REALシリーズの一冊として刊行予定の"Critical and Cultural Transformations: 'The Tempest', 1611 to the Present"において"'The Tempest' and Japanese Theatrical Traditions: Noh, Kabuki, and Bunraku"というタイトルで掲載されることが決まっている。学会研究発表に関しては、ベルギーのゲント大学における国際学会"Psychology and the Arts"に参加し(7月3日5日)、日本における『テンペスト』受容のインターテクスチュアリティについて発表した。

11月2日4日は漢陽女子大学(韓国、ソウル)における日本演劇学会ソウル集会「演劇の未来日本と韓国」に参加し、韓国人・日本人九州大学大学院芸術工学研究院修士学生各一名とともに日本と韓国におけるシェイクスピア受容に関する地域性について共同研究発表を行った。研究成果の社会還元としては、九州大学大学院芸術工学院が毎年開催している市民対象公開講座として9月10月木曜日19:0020:30にシェイクスピア翻案映画受容研究の成果を取り入れた「映画で楽しむシェイクスピア」(全5回)を実施した。第9回シェイクスピア国際会議(チェコ共和国プラハ)と『テンペスト』四百年記念国際学会(ポルトガル共和国ポルト)という二つの国際学会において研究成果を発表し、その研究内容が認められて、学術書として公刊予定の論文集に両論文ともに掲載されることが決定している。25年度が最終年度であるため、記入しない。上記のように、研究成果が著名なドイツ出版社の英文学書シリーズREAL(Research in English and American Literature)の一冊に収録されることが決定し、25年度内に公刊される。24年度内に国際学会研究発表を二件、関連海外研究機関での調査・資料収集を行い、海外の研究者との交流を深めることにより、地域性を重視したローカルなシェイクスピア受容のプロセスに関して国際的理解をより深めるとともに、日本におけるシェイクスピア受容のインターテクスチュアリティに関する研究成果を国際的に発信することができた。フォルジャー・シェイクスピア・ライブラリにおいてはシェイクスピア翻案映画に関する貴重な一次資料を入手することができた。さらに能・狂言・歌舞伎・文楽という日本の伝統芸能が日本における『テンペスト』受容に及ぼした影響に関して具体的な事例研究を行い、研究成果として発表・論文化することができた。研究成果の社会還元に関しても、上記のように公開講座「映画で楽しむシェイクスピア」を実施し、受講者アンケート集計結果によると好評であった。
異方性材料の波動解析と非破壊評価への適用に関する研究

異方弾性体における弾性波動の散乱・伝播特性は,弾性波速度の方向依存性によって等方弾性体における特性とはかなり異なったものとなる.よって,異方性材料に対する超音波非破壊評価法の定量化・高精度化を進めるには異方性を考慮した弾性波動の散乱,伝播解析を行なうことが必須である.本研究は,異方性が波動伝播や散乱現象に及ぼす影響を数値的に明らかにして,超音波実験と比較するとともに,その結果を異方性を持つ厚い鋼板の超音波欠陥評価に適用したものである.得られた主な結果は以下の通りである.1.体積を持つ欠陥を含む無限弾性体に対する波動解析プログラムを開発した.手法は選点法を用いた境界要素法である.空洞による平面入射波の散乱問題を,入射波の種類,入射方向,材料定数などを様々に変化させて解析し,空洞周辺の散乱波の挙動を可視化ソフトウェアを用いて表示させて異方性の影響を明らかにした.2.異方弾性体内におけるき裂による弾性波動の散乱解析のための境界要素法による解析コードを開発した.ガラーキン法を用いて境界積分方程式を正則化することにより高次基本解に含まれる特異性をlogオーダーにまで弱めて数値的な安定を図った.3.欠陥を模擬した空洞を持つ厚板鋼による超音波実験を行った.その結果,斜角探触子を用いた超音波探傷では入射角度が大きくなるほど異方性の影響が大きくなり,探傷精度が低下することが確かめられた.特に,板裏面で一回反射させて欠陥に超音波を入射する一回反射法では,超音波の伝播距離が長くなり異方性の影響が大きいことがわかった.4.超音波実験をシミュレーションするため,入射パターン,空洞周辺での散乱過程,散乱波の放射現象までを含めた数値解析を行い,実験結果と比較した結果,両者はよい一致が得られた.異方弾性体における弾性波動の散乱・伝播特性は,弾性波速度の方向依存性によって等方弾性体における特性とはかなり異なったものとなる.よって,異方性材料に対する超音波非破壊評価法の定量化・高精度化を進めるには異方性を考慮した弾性波動の散乱,伝播解析を行なうことが必須である.本研究は,異方性が波動伝播や散乱現象に及ぼす影響を数値的に明らかにして,超音波実験と比較するとともに,その結果を異方性を持つ厚い鋼板の超音波欠陥評価に適用したものである.得られた主な結果は以下の通りである.1.体積を持つ欠陥を含む無限弾性体に対する波動解析プログラムを開発した.手法は選点法を用いた境界要素法である.空洞による平面入射波の散乱問題を,入射波の種類,入射方向,材料定数などを様々に変化させて解析し,空洞周辺の散乱波の挙動を可視化ソフトウェアを用いて表示させて異方性の影響を明らかにした.2.異方弾性体内におけるき裂による弾性波動の散乱解析のための境界要素法による解析コードを開発した.ガラーキン法を用いて境界積分方程式を正則化することにより高次基本解に含まれる特異性をlogオーダーにまで弱めて数値的な安定を図った.3.欠陥を模擬した空洞を持つ厚板鋼による超音波実験を行った.その結果,斜角探触子を用いた超音波探傷では入射角度が大きくなるほど異方性の影響が大きくなり,探傷精度が低下することが確かめられた.特に,板裏面で一回反射させて欠陥に超音波を入射する一回反射法では,超音波の伝播距離が長くなり異方性の影響が大きいことがわかった.4.超音波実験をシミュレーションするため,入射パターン,空洞周辺での散乱過程,散乱波の放射現象までを含めた数値解析を行い,実験結果と比較した結果,両者はよい一致が得られた.平成9年度は異方弾性体における波動解析プログラムコードの開発を中心として以下のような成果を得ることができた.1.体積を持つ欠陥を含む無限弾性体に対する波動解析プログラムを開発した.手法は選点法を用いた境界要素法である.空洞による平面波の散乱問題を解析した結果,異方弾性体特有の散乱パターンが得られた.次年度に行う予定だった波動の可視化の一部については本年度に前倒しして実施した.2.き裂を含む無限弾性体に対する境界要素解析プログラムを開発した.手法はガラーキン法によって正則化された境界積分方程式法である.これによって,比較的低次の形状関数を用いた場合でも異方弾性体におけるき裂先端での応力拡大係数を精度良く求められるようになった.3.水浸超音波法によって異方性材料における波動伝播に関する基礎実験を行った.伝搬方向の違いによる波動到達時間の差異など,異方性材料での波動特性の解明のための基礎データを収集した.なお,半無限異方弾性体における解析コードの開発については本年度中に完成させることができなかったので,次年度へ持ち越すこととした.次年度以降,異方性パラメータを様々に変化させて解析データを収集し,超音波非破壊評価における異方性の影響を検討するとともに,実験との対応をとる予定である.平成10年度は,境界要素法を用いた異方弾性体の波動解析をベースとして,波動伝播の可視化,散乱波形のデータベース化,ならびに,超音波実験による異方性の評価を行ない,以下の知見を得た.1.波動伝播の可視化においては,異方弾性体の内部点における変位応答を境界要素法により計算し,解析結果を可視化ソフトウエアを用いて表示させることにより異方弾性体中における波動散乱,伝播状況を明らかにした.その結果,等方性とは全く異なる散乱現象を再現することができた.

2.散乱波形のデータベース化では,散乱源となる欠陥種別,入射波の種類,入射方向などを様々に変化させて,後方散乱波の位相,振幅を計算して,その取りまとめを行なった.今まで,異方性材における超音波の解析では入射波動の伝播についての研究は多く行なわれているが,散乱現象については解明されていなかった.本計算結果は,散乱特性を考慮した超音波パルスエコー法の定量化のための基礎データを提供するものと考えられる.3.超音波実験では,異方性を持つ鋼板に対して様々な方向から超音波を入射し,計測された波速から鋼板の弾性定数を決定することができた.その結果,用いた鋼板はほぼ5%の弾性定数の偏差を持つ横等方弾性体であることが分かった.ただし,今年度,欠陥を含んだ供試体による超音波実験までは実施することができなかった.これについては次年度において実施し,解析結果と比較検討を行なう.異方性材料に対する高精度な非破壊評価法を確立するために異方性を考慮した波動解析が不可欠であるが,本研究は,一般的異方弾性体に対する基本解を用いた動的境界要素法プログラムを開発し、異方性が波動伝播に及ぼす影響を数値的に明らかにして,超音波実験と比較するとともに,その結果を異法性を持つ厚い鋼板の超音波欠陥評価に適用したものである.平成11年度に得られた主な結果は以下の通りである.1.異方弾性体内におけるき裂による弾性波動の散乱解析のための境界要素法による解析コードを開発した.基本解にはラドン変換によって得られた積分表現された解を用い,ガラーキン法を用いて境界積分方程式を正則化することにより高次基本解に含まれる特異性をlogオーダーにまで弱めて数値的な安定を図った.2.欠陥を模擬した空洞を持つ厚板鋼による超音波実験を行った.その結果,斜角探触子を用いた超音波探傷では異方性の影響によって入射角度が大きくなるほど探傷精度が低下することが確かめられた.特に板裏面で一回反射させて欠陥に超音波を入射する一回反射法では,超音波の伝播距離が長くなり異方性の影響が大きいことがわかった.3.超音波実験をシミュレーションするため,入射パターン,空洞周辺での散乱過程,散乱波の放射現象までを含めた数値解析を行い,実験結果と比較した結果,両者はよい一致が得られた.これまで欠陥による散乱,放射の現象まで含めた解析は世界的にも行われておらず,本研究は異方性材料に対する超音波非破壊評価の定量化の基礎をなすものであると考えられる.
通時的中国語基礎語彙データベースの構築と語彙教育に関する研究

本研究は日本の北京語教育が本格的に始まった明治以降の教科書を対象とした学習語彙の基礎的研究期間として、中国語教材の調査を行い、並行して当時の教科書を対象とした基本語彙研究の手法の構築を目指した。書誌調査としては日本、中国、アメリカなどで当時の教材を多く所蔵する機関で蔵書調査を行い、必要に応じて目録を作成した。同時にオンラインデータベースとして「中国語教材データベース」の構築を進めた。次に語彙研究として、主要な教材の語彙索引作成を進め、語彙索引を作成するためのツールの開発も行った。今後『官話指南』等、日本の中国語教育史に影響を与えた教材の索引を完成させ順次発表していく。25年度は本研究の期間を通じて構築、運用中である『中国語教材データべース』(http://www.chlang.org/book.php)について、データの拡充やバグの修正を行うと共に、新たな機能として「文献相互参照機能」を実装した。これにより、データベース上で特定の教材と別の教材を関連付けることが可能となった。さらに完成した『中国語教材データベース』については、7月に琉球大学、9月に天津外国語大学で開催された歴史的な中国語教材をテーマして扱った学会やシンポジウムにおいて、本研究の取り組みと合わせて紹介した。今後データの拡充とシステム的な調整を加え続け、より使いやすいデータベースにしていく予定である。これと並行して、海外や日本国内の中国語教材の実情を把握するために、8月にアメリカのハーバード大学燕京図書館、翌3月に早稲田大学、東京大学等で中国語教材の調査を重点的に実施した。また古書店を通じて購入した中国語教材のうち、すでに著作権が切れてパブリックドメインとなっているものについて試験的にスキャン作業を行った。またサンプル調査の目的で一部の教材に対して語彙リストの抽出作業を実施するなどをした。この一連の調査で得られた情報については、26年度には『中国語教材データベース』や紙面を通じて公開できるよう検討している。本研究は中国語教育における基礎語彙の通時的な扱いについて明らかにすることを目標としているが、本年度は研究の準備段階として、歴史的にどういった教材があるのかを明らかにするために1870年以降の日本・中国・欧米で刊行された中国語を学習するための教科書や辞書など中国語教材全般に対する調査を行った。中国語教材を網羅的に調査するために多くの中国語教材を所蔵していると考えられる国内のいくつかの図書館や博物館についてその所蔵状況の調査を実施した。特に関西大学の東西学術研究所が所蔵している関連書籍については、戦前期の中国語教材が多く収集されているにもかかわらず、これまで目録が公開されたことがなく、その実態が不明であったこともあり、重点的に調査を行い、「関西大学東西学術研究所所蔵の中国語教材目録(1868-1950)」にまとめた。結果多くのこれまで発表された中国語教材の目録にはない教材を発見することができた。中国語教材を調査し目録を作成するのは、上述の理由以外に今後日本と外国(主に中国・ヨーロッパ・アメリカ)における中国語教育の全体像を明らかにし、中国語に対する認識、立場の違いをより明確にすることができると考えるためである。今後も並行してこの種の調査を進め1870年以降の中国語教材の全体像を明らかにしていく。また当時の中国語教材の全体像を明らかにするために、中国語教材に関する書籍広告についての調査も行っており、データを集積している。以上のことから当初の研究目標を達成したと考えている。次に収集したデータを基礎資料として、インターネット上に公開することを念頭に置いた中国語教材のデータベースのシステム設計を行った。その設計をもとにプログラムの開発を行い、完成したデータベースを「中国語教材データベース」として公開した。データの登録作業については上述の調査結果を反映しており、現在も進行中である。研究期間全体を通じて、中国語教材と語彙のデータベースの構築を進め、そのことを通じて戦前の中国語教材の実態や基礎語彙研究の基礎研究を進めている。今年度も引き続き中国語教材の収集並びに研究を進行した。開発中の中国語教材DBの構築では最終的な調整を行い、特定の単語がどういった地域や年代に分布しているのかを把握することができるLangLinkという機能を設計し、その結果を集計しグラフ化する機能を実装した。また研究代表者が関係する他のプロジェクトで語彙索引の作成ツールを共同開発し公開した。このツールは基礎語彙研究には欠かせないもので、『華語ピン字妙法』や『語言自邇集』など数種類の教材のテキストをディジタル化した上で、このツールを利用して全語彙索引を作成した。これらのDBや研究内容については7月に開催した外国語教育ワークショップや11月に開催された日本中国語学会で報告した。調査としては、10月に実施した中国での調査を通じて、『官話指南』のフランス語訳版のひとつに中国人による書き込みがあったことが判明した。これは明治期に日本人が執筆した中国語教材が他言語に展開し、さらにその教材が中国人の外国語学習教材として利用されている具体的な状況を裏付ける結果となった。

この点については2015年度刊行予定の『官話指南の研究』(仮題)に成果として盛り込む予定である。また12月には国内有数の中国語教材のコレクションが日本大学(福島)の鱒澤研究室にあることを知り、氏の蔵書を調査させていただいた。結果として日本の戦前の中国語教育史、教材などに関する書籍が数千冊あり、過去数年間に収集、調査してきたものを凌駕する分量・内容であった。後日、氏の退職に伴い研究代表者が所属するアジア文化研究センターに寄贈いただくことになった。2015年2月より全図書の受け入れを行い、2015年度中の完成予定で目録を作成している。http://www.chlang.orgで公開している項目のうち、「中国語教材データベース」と「語彙データベース」の一部が本科研の成果を公開しているデータベースである。中国語教育1870年代から戦後期にいたるまでの、日本、中国、アメリカで刊行された主要な中国語教材の目録作成とデータベース化を1つ目の研究目的に設定していたが、このうち、データベースのシステム面について、当初設計した通りに問題なく動作しており、当初予定していた以上の成果を得られている。このことから「計画より順調に進んでいる」と言える。教材調査によるメタ情報獲得及び目録の作成については、日本で刊行された書籍については概ね順調に進んでいると言える一方、中国とアメリカについてはまだまだ完全に調査しきったとは言い難いが、実地調査などを通じて少しずつではあるが着実に進展している。2つめの教材のメタ情報の収集と分析、主要な教材の語彙リスト作成による基本語彙のデータベースの構築についてはサンプル的な調査を実施した。この部分については、26年度の課題と密接につながる部分が多いので作業途上ではあるが、以上の点からおおむね順調に進んでいると自己評価した。研究の準備段階として1870年代以降の日本・中国・欧米で刊行された中国語教科書や辞書などを中心に中国語教材の調査及び基礎的な目録の作成を行うという点については、伝統的に中国語教材を多く収集する図書館、博物館等の目録調査や実地調査を行い、日本国内における中国語教材の調査を中心に概ね達成できているが、調査を進めるほどこれまで未知だった教材が明らかになり、今後も継続して作業を進めていく必要があると感じた。特に関西大学図書館や個人文庫、東西学術研究所の蔵書には戦前の中国語教材が多く収集されており、重点的に調査を実施した。東西学術研究所の調査結果はこれまで目録が作成されたことがなかったこともあり、2013年「関西大学東西学術研究所所蔵の中国語教材目録(1868-1950)」『東西学術研究所紀要46輯』にまとめた。同時に収集した中国語教材の目録データからインターネット上で閲覧できるデータベース(以下DB)を利用するためのシステムの設計を行い、その基幹となるプログラムの開発を委託し、インターネット上にその試作版となる「中国語教材データベース」を公開した。
ゾル-ゲル法によるゲル細孔内プロトン移動反応

ケイ素を主とし遷移金属(M=Co,Mo,Mn,Zn,Cr,Ni)を含むゾル-ゲル反応により、アントロンをゲル中にカプセル化し、ゾルゲル過程における蛍光スペクトル変化、蛍光に現れるフォトクロミズム的挙動に及ぼす遷移金属の影響を調べた。さらに、作成したゲル(M=Co,Mo,Mn)のEXASFとゲル中の9-アントロールの蛍光寿命(Si-Al系も含む)を行い検討した。EXAFSの測定からゲル中に2種以上の金属が含まれる場合、Siに対する第2の金属はゲルネットワーク中に均一に分散していることが分かった。480nm付近の蛍光は2種類の成分で解析できた。短寿命成分は水素結合種からの、長寿命成分は錯体種型の発光であり、ゲルにAlやCoの金属が微量含まれると錯体種の量が急激に増加することが分かった。蛍光強度の増加は1次で進行し、Alよりも遷移金属の方が著しく効率が高く、Co>Cu>Mo>Alの順序であった。ゲル中における光誘起プロトン移動はSi : Al=90:10,Si : M =10000:1付近が最も効率が良く、光誘起プロトン移動はAlではゲル中のBronsted酸のプロトンが関与し、遷移金属中では金属に配位した状態から生じると解釈できた。
ロドコッカス・エクイ病原性遺伝子群の水平伝播-病原細菌の適応戦略とその起源-

土壌細菌であるロドコッカス・エクイは病原性を病原性プラスミドの存在に規定されている。この病原性プラスミドはヘテロな病原性関連遺伝子群が水平伝播によってロドコッカスの潜在プラスミドに移行し、その結果、病原性機能を獲得したものと推察されている。本研究では強毒株に存在する16種類の病原性プラスミド、中等度毒力株に存在する33種類の病原性プラスミドのPAI領域付近の塩基配列と比較検討し、その派生の過程で病原性と多様性を獲得したことを明らかにした。ロドコッカス・エクイ中等度毒力株は、豚及び野生イノシシから分離され、保有する病原性プラスミド上には毒力関連20KDa抗原蛋白(VapB)がコードされている。病原性プラスミドは、プロトタイプとなる潜在性プラスミドに異なる系統の菌からPathogenicity island (PAI)が水平伝播した後、DNAの挿入、欠失、突然変異により多型性が生じたと考えられているが、その成立過程はよくわかっていない。これまでに制限酵素切断像から、プラスミド型は32種類に分類されてきたが、今回ブラジルの豚及び野生イノシシから、未知のバンドパターンを示す病原性プラスミドが確認された。新型病原性プラスミドは8型病原性プラスミドと類似した制限酵素切断像を示したため、両者のプラスミド地図を作成すると共に、PAI内外20箇所のシークエンスを行い、全塩基配列が解明されている1型プラスミド(pREA3)を含めた32種類のプラスミド型と比較検討した。両者の類似点は、(1) EcoRI断片Fのサイズが同一(2) R6/4, R4/8Ecoサイトが制限酵素で認識されない(3) EcoT22 I断片c領域に4,000bp以上の断片が挿入(4) No,16, 81319, 534領域にかけてPCRによる増幅が困難の4点であり、一番の相違点は、8型においてvapJ, Kをコードする3, 349bpの欠損がみられたことであった。この領域を8型に戻すと2型と類似のプラスミド地図が得られることから、2型が両者の共通祖先である可能性が示唆された。またシークエンス結果から、新型におけるPAI内の領域は1型と近縁な塩基配列が確認され、一方PAI外の領域では半数の領域で8型と近縁な塩基配列が確認された。過去の研究において、1型の塩基配列と類似性の低い8型はプロトタイプに近縁とされているため、新型病原性プラスミドは、分化の進んだ1型とプロトタイプの両者の特徴を兼ね備えていることが分かった。ロドコッカス・エクイ強毒株病原性プラスミドは、制限酵素EcoR I及びHind IIIの切断像の違いから16種類に型別され、(1)85kbI,II,III,IV型(2)90kbII,V型(3)87kbI,III型(4)90kb I,III,IV型(5)87kbII a,IIb,IIc,IId型(6)52kb型に分類される。この中でグループ(4)と(5)に属する病原性プラスミドは日本に分布している。本研究では北海道日高地方の仔馬分離強毒株JRA09-12株の病原性プラスミド型が、既知の16種のプラスミド型と異なっていたため詳細に解析した。このプラスミドのEcoR I切断像は87kb IIa型と90kbIV型の2つに共通点があった。詳細に分析すると点変異や欠損を伴うEcoR Iサイトの消失、新しいEcoR Iサイトの形成など87kb II a型との類似点が多く認められた。一方、断片(7)領域ではPAI境界部分において非常に大きな挿入があり、他の90kb型同様にEcoR Iサイトを含む約14,000bpの挿入があると考えられた。以上の成績から新型病原性プラスミドを90kbVI型と命名し、プラスミドサイズが90kbであるにも拘らずその変異部位は87kb II a型に非常に類似していることから、病原性プラスミドの多型性獲得過程での共通祖先プラスミドの存在の可能性が推測された。次に、17種類の強毒株病原性プラスミドの簡易型別法についてPCR法を用いて検討した。これまでの17種類の研究成果から変異部位はほぼ同定されており遺伝子の欠損・挿入が見られる領域を標的としてPCRを実施し、型別のフローチャート図を作成した。PAI境界の遺伝子群におけるPCRでは増幅産物のサイズから(1)85kb型,52kb型,90kbII型(2)87kbI,IIa,IIb,IId,III型,90kbIV型(3)90kbI,III,IV型,87kbIIc型に分けられ、90kbV型では増幅されなかった。

0RF490RF50の欠損から85kbII型、断片(9)の挿入から90kbII型が判別できた。87kbIIad型間では変異や欠損の違いから個々を区別できた。しかし85kb I,III,IV型、87kbIとIII型はEcoR Iサイトの点変異での相違であり、PCRでのプラスミド型別は出来なかった。今回、新たに病原性プラスミド型が加わり、我が国では87kbIIad型,90kbIVI型と10種類の存在が明らかとなった。ロドコッカス・エクイ強毒株病原性プラスミドは、制限酵素EcoR I及びHind IIIの切断像の違いから16種類に型別され、(1)85kbI,II,III,IV型(2)90kb II,V型(3)87kbI,III型(4)90kb I,III,IV型(5)87kb IIa, IIb,IIc,IId型(6)52kb型に分類される。この中でグループ(4)と(5)に属する病原性プラスミドは日本に分布している。平成23年度の研究では、岩手県馬飼養環塊土壌由来株<52-4>と、オーストラリアの病馬由来株、更に北海道の病馬の肺由来株<2-2,2-3,2-6,2-9>などの病原性プラスミド型について、平成22年度に本研究で報告したPCRを利用したプラスミド型別法を新たに取り入れ、既知の17種のプラスミド型と比較し、その正確性と有用性を確認するとともに、それらの株の解析を実施した。北海道の病馬の肺病変由来株<H2>から、これまで北海道では見られなかった90kb IV型を初めて検出した。岩手県馬飼養環境土壌由来菌株<52-4>の病原性プラスミドのEcoR I切断像は87kb IIa型に類似していたが、87kb IIa型の1本の断片に欠損が生じ、87kb IIa型と比べて、サイズが小さくなっていた。そこで、この菌株を新型とし、87kb IIeと命名した。これにより、強毒株は全部で18種類となった。次にオーストラリアの馬由来の14菌株を解析したところ、EcoR I切断像は全て、85kb I型を示したが、Hind IIIとEcoT22 Iでは14株中6株で85kb I型と異なる2種類の切断像を示した。そこで、PCRやサザンプロット法を利用して更に解析を進めたところ、その一つは潜在性プラスミドの切断像の可能性が強く、他5株は新型と考えられ、詳細に検討している。北海道の馬由来株についてもEcoR I切断像が既知の87kb IIa型より1本多く、現在詳細な検討を行っている。強毒株の病原性プラスミドの多型性が日本及びオーストラリアの病馬由来で認められ、これらは疫学調査の有効な指標となるであろう。