hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
国立大学における入試の多様化とアドミッションセンターの機能拡充に関する総合的研究

関東以西の私立大学・短大分については,平成18年度に登録作業を実施する予定である。(イ)登録データのバックアップ方法の強化・平成16・17年度に蓄積したデータ(約110GB)のバックアップを確実に行うために,専用のパソコンを設定した。2.海外の大学,高校等に対する実地調査次の2カ国について,入学者選抜及び高大接続に関して注目すべき実践を行っている大学,高等学校及び関係機関への聞き取り調査を実施した。・アメリカ合衆国:カレッジ・ボード(ニューヨーク市),バルーチ・カレッジ・キャンパス・ハイスクール(ニューヨーク市),教育テスト事業団(ETS),ジョージワシントン大学(いずれもワシントンDC),スタンフォード大学(スタンフォード,CA),パロアルト・ハイスクール(パロアルト,CA)・カナダ:ブリティッシュ・コロンビア大学,ロード・ビング・ハイスクール(いずれもバンクーバー,BC),ブリティッシュ・コロンビア州教育省(ビクトリア,BC)1.入試関連情報データベース・システムの整備○入試関連情報のデータベース登録平成16年度に導入したデータベース・システム(Ridoc Document Server Pro V2)に,高等学校の学校要覧,AO入試実施大学等の大学要覧,関連する雑誌・新聞記事等の登録作業を継続して実施した(461件,1.5GB)。○登録データのバックアップ・システムの強化データベースのバックアップの確実性を高めるため,ネットワーク付加型のストレージ装置(RAID5仕様)を新たに導入・設定した。2.海外の大学,高校等に対する実地調査イギリス及びフィンランドについて,入学者選抜及び入試広報に関して注目すべき実践を行っている大学及び関係機関(後期中等教育機関を含む)に対し,訪問による聴き取り調査を実施した。イギリス【大学:2(カレッジ:3)グラマースクール:2】○オックスフォード大学(University of Oxford)・ベリオル・カレッジ(Balliol College)・サマビル・カレッジ(Somerville College)○ケンブリッジ大学(University of Cambridge)・フィッツウィリアム・カレッジ(Fitzwilliam College)○スロー・グラマースクール(Slough Grammar School)○ダートフォード・グラマースクール(Dartford Grammar School)フィンランド【教育行政機関:1大学:1後期中等教育機関:1】○ユバスキュラ大学(University of Jyvaskyla)
不攪乱試料採取と現場透水試験を組み合わせた礫質地盤の不均質性及び異方性の空間再現

1.研究目的:本研究の目的は,札幌扇状地にて不攪乱試料採取と現場透水試験を組み合わせた原位置試験を行うとともに,地球統計学に基づく数値シミュレーション手法を適用することで,礫質地盤内の不均質性と異方性を有する透水係数の空間分布の実態を明らかにすることである.2.研究方法:札幌扇状地の上流にて,特殊サンプラーを用いて礫質土の不攪乱試料を深度40mまで連続採取した.また深度11mまでピエゾメータ法とチューブ法を交互に繰り返す現場透水試験を行い,透水係数の鉛直分布を得た.既往研究を含む不均質性の情報に基づき,断面二次元領域で連続ガウスシミュレーションによりトレンドの有無,バリオグラムレンジの長短,異方性の有無の8ケース各1000パターンの透水係数分布(1m解像度)をモンテカルロ法により生成し,豊平川の伏没涵養帯周辺での水温移送過程を再現する分布を同定した.3.研究結果:(1)透水係数は不攪乱試料の低充填部と相関を有し,特定の水脈に依存することが分かった.粒度と充填度による礫質土の透水係数モデルは既往パラメータを修正することで適用可能であった.(2)透水試験結果が鉛直不均質場にて受ける影響を,軸対称断面二次元モデルによる感度解析から定量化し,線形回帰式で近似することで,試験結果から真の透水係数分布を導く補正式を導出した. (3)補正の結果,高透水層はより高く,難透水層はより低い透水性となり,試験結果に比べより強い不均質性が存在すると予想された.(4)透水係数の深度分布は,局所的(10^0mオーダー)には堆積過程を反映したサイクリックな構造が,巨視的(10^1mオーダー)には指数減衰トレンドが分布する可能性が示された.(5)不均質性のモデル化は,礫質土中の地下水流と物質移送の再現に有効であり,その際,深度トレンドや堆積構造の反映が重要であること,一方1mスケールでの異方性は比較的影響しないことなどが明らかとなった.1.研究目的:本研究の目的は,札幌扇状地にて不攪乱試料採取と現場透水試験を組み合わせた原位置試験を行うとともに,地球統計学に基づく数値シミュレーション手法を適用することで,礫質地盤内の不均質性と異方性を有する透水係数の空間分布の実態を明らかにすることである.2.研究方法:札幌扇状地の上流にて,特殊サンプラーを用いて礫質土の不攪乱試料を深度40mまで連続採取した.また深度11mまでピエゾメータ法とチューブ法を交互に繰り返す現場透水試験を行い,透水係数の鉛直分布を得た.既往研究を含む不均質性の情報に基づき,断面二次元領域で連続ガウスシミュレーションによりトレンドの有無,バリオグラムレンジの長短,異方性の有無の8ケース各1000パターンの透水係数分布(1m解像度)をモンテカルロ法により生成し,豊平川の伏没涵養帯周辺での水温移送過程を再現する分布を同定した.3.研究結果:(1)透水係数は不攪乱試料の低充填部と相関を有し,特定の水脈に依存することが分かった.粒度と充填度による礫質土の透水係数モデルは既往パラメータを修正することで適用可能であった.(2)透水試験結果が鉛直不均質場にて受ける影響を,軸対称断面二次元モデルによる感度解析から定量化し,線形回帰式で近似することで,試験結果から真の透水係数分布を導く補正式を導出した. (3)補正の結果,高透水層はより高く,難透水層はより低い透水性となり,試験結果に比べより強い不均質性が存在すると予想された.(4)透水係数の深度分布は,局所的(10^0mオーダー)には堆積過程を反映したサイクリックな構造が,巨視的(10^1mオーダー)には指数減衰トレンドが分布する可能性が示された.(5)不均質性のモデル化は,礫質土中の地下水流と物質移送の再現に有効であり,その際,深度トレンドや堆積構造の反映が重要であること,一方1mスケールでの異方性は比較的影響しないことなどが明らかとなった.
n-3系ドコサペンタエン酸の微生物生産とその利用技術の開発

n-3系高度不飽和脂肪酸としては,プロスタグランジン3群の直接の前駆体であるエイコサペンタエン酸(EPA,C20:5n-3)及び脳神経系での極めて重要な働きが知られてきたドコサヘキサエン酸(DHA,C22:6n-3)が注目されている。しかし,その中間体であるドコサペンタエン酸(DPA,C22:5n-3)は,最近になって冠状動脈硬化抑制因子としてEPAの1020倍の活性を持つことが報告されたものの,その重要性は十分に認知されておらず,また,脂質素材としての供給源が極めて限られており市場化されていない。本研究では,n-3DPAの微生物による生産技術の開発を目的とした。まず,日本近海などから高度不飽和脂肪酸生産微生物を探索し,DPA生産性について検討した。その中で,n-3DPAを1-3%含む海洋性微生物Thraustochytrium sp.KK17-3株について,培養条件の検討と脂質生産特性の解析を行い,その有用性を認めた。これら海洋性微生物における高度不飽和脂肪酸の生合成酵素及びその遺伝子を高度利用するために,未解明である生合成機構の解析を行った。その結果,真核生物としては全く新規な経路の存在が考えられ,最終産物であるDHAが生合成されるまでの中間体はn-3DPAではなく,n-6DPAであることが示唆された。しかし,実際に菌体内に存在するEPAやn-3DPAの生合成には,真核型の脂肪酸不飽和化経路が重要であると考え,Δ12及びΔ6不飽和化酵素遺伝子の単離を試み,部分断片の取得に成功した。未だ知られていないn-3系ドコサペンタエン酸[DPA(n-3)]を大量に産生する微生物の探索は、ドコサヘキサエン酸(DHA)産生微生物のスクリーニング方法を基本として、松花粉による釣り餌法による海洋性菌の探索を瀬戸内海海域及び西表島のマングローブ林の海水を採取し行った。約1000株の単離菌から、EPA、DHAなど高度不飽和脂肪酸を多量に産生する糸状曹を15株得た。この中には、DHAを50%以上と極めて高いDHA生産菌、また、DPA(n-6)を15%以上産生する株は得られたが、DPA(n-3)の生産菌としては含量5%未満の菌株しか得られなかった。引き続き、スクリーニング方法の検討を行い、探索を続行する。DHA生産微生物におけるDHA生合成経路での代謝中間体として、DPA(n-3)が前駆脂肪酸と位置付けられるとの既知の哺乳類での代謝経路の知見の下に、DHA生産菌であるShizochyt-rium sp. SR21株を用いて、DPA(n-3)を蓄積する不飽和化酵素阻害剤の探索を200種に及ぶ化学物質について行った。その結果、ω-3不飽和酵素阻害剤(ヨウ素化合物)及び炭素鎖18から20への鎖長延長酵素を阻害する水銀化合物を新規に見出した。ω-3不飽和酵素阻害剤による阻害実験の結果、SR21におけるDHA生合成経路の前駆脂肪酸がDPA(n-3)ではなく、DPA(n-6)であることが見出され、本微生物におけるDHA生合成経路が哺乳類におけるそれとは全く異なる経路を取っていることを明らかにした。従って、DPA(n-3)がDHA合成の中間体ではなく、EPAの鎖長延長から生合成されていることが示唆され、鎖長延長酵素遺伝子の取得による高生産技術の開発の方向が示された。また、高度不飽和脂肪酸の生合成の鍵となるΔ6-不飽和化酵素遺伝子のラットからの単離を行い、酵母(S. cerevisiae)においての発現に成功した。

さらに、アトピー性皮膚炎モデルマウスを用いて、その血漿脂質の分析を行った結果、発症に従ってDHAが蓄積されていることを認めた。本年度までに主として海水域から単離した高度不飽和脂肪酸(PUFA)生産微生物31種は、いずれも昨年度同様ドコサヘキサエン酸(DHA,C22:6n-3)、n-6系ドコサペンタエン酸(DPA(n-6),C22:5,n-6)を産生するものであり、n-3系ドコサペンタエン酸(DPA(n-3),C22:5n-3)を多量(全脂肪酸の10%以上)に蓄積する菌を得ることは出来なかった。単離されたPUFA産生菌は18S ribosomal RNA塩基配列に基づく菌学的分類などから、Labyrinthura類のTraustochytriumあるいはSchizochytrium属菌であることを見いだした。昨年度、哺乳類の高度脂肪酸の代謝経路とは異なり、DHA生産徴生物における代謝中間体としてDPA(n-3)が前駆脂肪酸ではないことがw-3不飽和化酵素阻害剤としてヨウ素化合物を見いだした結果から明らかとなった。従って、DHA高生産菌であるSchizochytrium limacinum SR21株を用いて、本菌におけるDHA生合成経路の解明を生合成系阻害物質の検索により試みた。その結果、水銀含有化合物の添加により炭素数22のDHA、DPA及びわずかに蓄積していた炭素数20の不飽和脂肪酸の顕著な生産抑制が認められた。in vitroでの脂肪酸鎖長活性の測定系を確立し、水銀含有化合物であるエチルメルクリルチオサリチル酸ナトリウム(チメロサール)がC18及びC20飽和脂肪酸に特異的な延長活性を持つ鎖長延長酵素を阻害していることを明らかにした。この事実から、DHA生合成経路として少なくともC18:0からC20:0を経由してC22:0に至る鎖長延長と、C22:0からC22:6(DHA)に至る不飽和化経路が存在することが推察された。アトピー性皮膚炎モデルマウスであるNC/Ngaマウスを用いてDHAの投与実験を行った結果、DHA投与がコントロールと比べて有意にIgE抗体価の上昇並びにアトピー性皮膚炎症状の発症を抑制しているしていることを明らかにした。n-3系高度不飽和脂肪酸としては,プロスタグランジン3群の直接の前駆体であるエイコサペンタエン酸(EPA,C20:5n-3)及び脳神経系での極めて重要な働きが知られてきたドコサヘキサエン酸(DHA,C22:6n-3)が注目されている。しかし,その中間体であるドコサペンタエン酸(DPA,C22:5n-3)は,最近になって冠状動脈硬化抑制因子としてEPAの1020倍の活性を持つことが報告されたものの,その重要性は十分に認知されておらず,また,脂質素材としての供給源が極めて限られており市場化されていない。本研究では,n-3 DPAの微生物による生産技術の開発を目的とした。まず,日本近海などから高度不飽和脂肪酸生産微生物を探索し,DPA生産性について検討した。その中で,n-3 DPAを1-3%含む海洋性微生物Thraustochytrium sp.KK17-3株について,培養条件の検討と脂質生産特性の解析を行い,その有用性を認めた。これら海洋性微生物における高度不飽和脂肪酸の生合成酵素及びその遺伝子を高度利用するために,未解明である生合成機構の解析を行った。その結果,真核生物としては全く新規な経路の存在が考えられ,最終産物であるDHAが生合成されるまでの中間体はn-3 DPAではなく,n-6 DPAであることが示唆された。しかし,実際に菌体内に存在するEPAやn-3 DPAの生合成には,真核型の脂肪酸不飽和化経路が重要であると考え,△12及び△6不飽和化酵素遺伝子の単離を試み,部分断片の取得に成功した。
新生児・乳児開心術における安全な無輸血人工心肺システムの開発

1.高度希釈体外循環の安全限界と中枢神経に対する影響に関する検討を体重2-3kgの家兎を用い小型人工心肺による体外循環モデルを作成し、体外循環中に近赤外線モニターによる脳の酸化・還元ヘモグロビン及び酸化チトクロームCの測定を行うとともに、hippocampus CA1領域の組織学的に評価し、体外循環中の潅流星、血液希釈、血液ガスの効果を検討した(20例)。安雄したモデル作成に時間を要したため、現時点で断定的結論をくだすにはデータが不十分であるが、酸化・還元ヘモグロビン及びチトクロームCの変化から見て、Hb3.0g/dlが安全限界と思われた。組細学的検討は進行中である。2.臨床的検討:(1)乳児用超低充填量回路(充填量350ml)を用いて、乳児開心術症例において、近赤外線分光器による脳内酸化ヘモグロビン、チトクロームC解析による脳代謝の状態と、S-100 prooteinの動態を検討した(15例)。Hb 3.5 mg/dlを下回る症例(1例)で一過性の痙攣とS-100 proteinの上昇を認めた。(2)高度血液希釈体外循環が血液凝固機能に及ぼす影響を臨床例において検討した結果、高度血液希釈を伴う無輸血体外循環でThrombin-Antithrombin complex,D-dimerの上昇(凝固系の活性化)が見られ、Antithrombin III(ATIII)の濃度低下のためヘパリンの効果が不十分で、術後に血液凝固障害がおこり出血憎加の原因となり得る可能性が示唆された。高度血液希釈を伴う体外循環中は、ATIIIに依存しない抗凝固療法を併用する方が安全と思われた。(3)生体適合性を高める目的で体外循環回路のヘパリン被覆のについては有用性が多数報告されているが、我々はヘパリンを用いない方法として、HydroxycthylmcthacrylatcとStyrcncのブロック共重合体によって回路内面をミクロドメイン構造に加工した体外循環回路を用いその生体適合性について検討した。結果、血液凝固系の活性化においては差を認めなかったが、血小板数ではミクロドメイン加工によって温存される傾向が認められた。また、ミクロドメイン)加工によって回路充填夜中のブラジキニンの活性化が抑制された。ミクロドメイン構造に加工した体外循環回路は、血液接触系の活性化抑抑を期待できる方法として有用であると思われた。1.開心術中の輸血合併症の認識から乳児・複雑心奇形まで無輸血開心術の適応が拡大されているが、無輸血治療の完結には術後出血のコントロールが重要である。高度血液希釈体外循環が血液凝固機能に及ぼす影響を臨床例において検討した結果、高度血液希釈を伴う無輸血体外循環でThrombinAntithrombn complex,D-dimerの上昇(凝固系の活性化)が見られ、Antithrombin III(ATIII)の濃度低下のためヘパリンの効果が不十分である可能性が示唆された。その結果、体外循環が長時間に及ぶ場合、術後に血液凝固障害がおこり出血増加の原因となり得る。

高度血液希釈を伴う体外循環中は、ATIIIに依存しない抗凝固療法を併用する方が安全と思われた。2.近年、体外循環(以下CPB)時、ヘパリン被覆回路の生体適合性については多くの検討が行われ、その有用性が多数報告されている。我々はヘパリン被覆をせず、HEMA(hydroxyethylmethacrylate)とStyreneのブロック共璽合体によって回路内面をミクロドメイン構造に加工した体外循環回路を用いその生体適合性について検討した。結果、血液凝固系の活性化においては差を認めなかったが、血小板数ではミクロドメイン加工によって温存される傾向が認められた。また、ミクロドメイン加工によってrecirculation後の回路充填夜中のブラジキニンの活性化が抑制された。ミクロドメイン構造に加工した体外循環回路は、血液接触系の活性化抑制を期待できる方法として有用であると思われた。1.高度希釈体外循環の安全限界と中枢神経に対する影響に関する検討を体重2-3kgの家兎を用い小型人工心肺による体外循環モデルを作成し、体外循環中に近赤外線モニターによる脳の酸化・還元ヘモグロビン及び酸化チトクロームCの測定を行うとともに、慢性期の機能回復とhippocampus CA1領域の組織学的に評価し、体外循環中の潅流量、血液希釈、血液ガスの効果を検討した(20例)。安定したモデル作成に時間を要したため、現時点で断定的結論をくだすにはデータが不十分であるが、酸化・還元ヘモグロビン及び酸化チトクロームCの変化から見て、Hb3.0g・dlが安全限界と思われた。組織学的検討は進行中である。2.臨床的検討:乳児用超低充填量回路(充填量350ml)を用いて、乳児開心術症例において、近赤外線分光器による脳内酸化ヘモグロビン、チトクロームC解析による脳代謝の状態と、S-100 proteinの動態を検討した(15例)。Hb3.5mg/dlを下回る症例(1例)で一過性の痙攣とS-100 proteinの上昇を認めた。
前立腺癌高線量率組織内照射期間中における経時変化が尿道・直腸線量に及ぼす影響

【研究目的】前立腺癌の放射線療法には3次元外部照射・強度変調放射線治療・高線量率組織内照射・密封小線源永久挿入療法・粒子線治療があり,中でもイリジウム192高線量率組織内照射は,前立腺に対し大量かつ安全に放射線を投与できる方法として有用であり,その治療効果も高いことが知られている.一方,リスク臓器(尿道,直腸など)に隣接するため放射線療法で起こりうる副作用には排尿障害・直腸障害・性機能障害がその可能性として挙げられる.本研究では,排尿障害と直腸障害の指標となる尿道線量および直腸線量が,現在行われている高線量率組織内照射期間中にどの程度変動するか調査し,発生した副作用との関係性を明らかにすることで,前立腺癌に対する高線量率組織内照射の安全性と有用性をより高め,臨床利用することを最終的な目的とする.【研究方法】高線量率組織内照射を複数日にわたって施行した際,刺入されているアプリケーターの移動や刺入に伴う前立腺の浮腫性変化が生じると考えられている.これまでの研究でアプリケーターの尾側への偏位により前立腺尖部側の尿道線量が増加することを報告してきた.今回は,外照射に対し高線量率組織内照射を先行した群,後行した群でアプリケーターの偏位の程度に違いがあるかどうか,治療計画時及び照射直前に撮影したCT画像から3Dワークステーションを使用して検討した.また,評価基準(骨構造,前立腺内石灰化)の違いによる影響も検討した.【研究成果】アプリケーターの尾側への偏位評価では,後行群でわずかに増加傾向を示した.断面内での偏位評価では,先行群でばらつきの大きい結果を示した.外部放射線治療のタイミングがおよぼす影響も否定できないが,今回の検討では有意差はなかった.評価基準の違いによる検討では,石灰化基準を真値とした場合,骨構造を基準とすると平均3.1mm,最大10.2mmアプリケーターの尾側への偏位を過小評価する傾向が見られた.【研究目的】前立腺癌の放射線療法には3次元外部照射・強度変調放射線治療・高線量率組織内照射・密封小線源永久挿入療法・粒子線治療があり,中でもイリジウム192高線量率組織内照射は,前立腺に対し大量かつ安全に放射線を投与できる方法として有用であり,その治療効果も高いことが知られている.一方,リスク臓器(尿道,直腸など)に隣接するため放射線療法で起こりうる副作用には排尿障害・直腸障害・性機能障害がその可能性として挙げられる.本研究では,排尿障害と直腸障害の指標となる尿道線量および直腸線量が,現在行われている高線量率組織内照射期間中にどの程度変動するか調査し,発生した副作用との関係性を明らかにすることで,前立腺癌に対する高線量率組織内照射の安全性と有用性をより高め,臨床利用することを最終的な目的とする.【研究方法】高線量率組織内照射を複数日にわたって施行した際,刺入されているアプリケーターの移動や刺入に伴う前立腺の浮腫性変化が生じると考えられている.これまでの研究でアプリケーターの尾側への偏位により前立腺尖部側の尿道線量が増加することを報告してきた.今回は,外照射に対し高線量率組織内照射を先行した群,後行した群でアプリケーターの偏位の程度に違いがあるかどうか,治療計画時及び照射直前に撮影したCT画像から3Dワークステーションを使用して検討した.また,評価基準(骨構造,前立腺内石灰化)の違いによる影響も検討した.【研究成果】アプリケーターの尾側への偏位評価では,後行群でわずかに増加傾向を示した.断面内での偏位評価では,先行群でばらつきの大きい結果を示した.外部放射線治療のタイミングがおよぼす影響も否定できないが,今回の検討では有意差はなかった.評価基準の違いによる検討では,石灰化基準を真値とした場合,骨構造を基準とすると平均3.1mm,最大10.2mmアプリケーターの尾側への偏位を過小評価する傾向が見られた.
転写伸長／ユビキチンリガーゼ（Ｅ３）因子Ｅｌｏｎｇｉｎの生体内生理機能の解明

Elongin A(EloA)はRNAポリメラーゼIIに対する伸長促進機能とユビキチンリガーゼ(E3)機能とを併せ持つが、両機能の生体内における重要性は不明であった。本研究では、EloAホモ欠失型のマウス胎仔およびES細胞では複数の脳神経節と後根神経節を含む感覚神経系の形成ならびにニューロンへの分化が著明に損なわれていることを見出した。さらに、EloAの2つの機能を選択的に欠損させた変異体を用いた同欠失ES細胞への救済実験により、E3機能ではなく伸長促進機能がニューロンへの分化ならびにNeurogenin1、2等の転写制御因子遺伝子のレチノイン酸による発現誘導に重要であることを明らかにした。1.クロマチン免疫沈降(ChIP)解析に利用可能な抗Elongin A抗体の作製神経分化にはたらくElongin Aの直接的な標的遺伝子を探索するため、ChIP-sequence解析に利用可能な抗Elongin Aポリクローナル抗体の作製を試みた。マウスElongin A配列内の6種類のペプチドを合成後、ウサギに免疫して抗血清を得た。これらをMEP HyperCelカラムを用いて精製(アルブミン除去のために25 mMオクタン酸ナトリウムによる洗浄のステップを加えた)した後、免疫細胞染色、Western blotならびに免疫沈降(IP)等により特異性の検証を行った。その結果、うち2種類の抗体が実施した全ての検定において良好な成績を示し、ChIP-sequence解析に利用できる可能性が示唆されている。2. RNA-sequence解析を用いたElongin A標的候補遺伝子の同定Elongin A-/-型とElongin A+/+型のマウス胚様体を用いてレチノイン酸刺激前と刺激後48時間、96時間でRNA-sequence解析を実施し、Elongin Aに依存して発現が有意に増加する遺伝子を複数同定することに成功した。それらの中には、Neurogenin1、Sox familyならびにHomeobox遺伝子群に加えて、これまで神経分化との関連が明らかにされていないnon-coding RNAの遺伝子も含まれていることが明らかとなっている。胚様体でのレチノイン酸(RA)による発現誘導にEloAを必要とすることが確認されたNeurogenin1、Neurogenin2、Hoxa7等について、RA添加、非添加時の遺伝子上各部位におけるRNAポリメラーゼII(Pol II)の分布を調べた。その結果、EloA-/-型の胚様体ではRA添加の有無に関わらず何れの遺伝子上にもPol IIがほとんど検出されなかったが、EloA+/+型の胚様体においては、RA添加によりプロモーターならびにコーディング領域に結合したPol II(totalならびにSer5リン酸化型)の量が著増することが判明した。以上から、EloAはいくつかの遺伝子においてはPol IIのプロモーターへのリクルートメント促進あるいは転写開始複合体の安定性維持にも寄与していることが示唆された。2. EloA-/-マウス胎仔の神経系発生・分化異常の病理・病態学的解析EloA+/+型と-/-型胎仔間で細胞増殖性とアポトーシスについて比較検討したが、何れの脳神経節においても有意な差は認められなかった。次いで、E9.5E10.5の胎仔を用いてホールマウントin situハイブリダイゼーションにより各種転写制御因子の発現について検討した結果、神経堤細胞のマーカーであるSox10の発現がEloA-/-胎仔の脳神経節と後根神経節において、また、感覚神経系の分化に必要なNeurogenin1ならびにNeuroD1の発現が第V神経節等で著明に低下していることが判明した。一方、プラコード細胞のマーカーであるPax8や交感神経系の分化に必要なMash1の発現には有意な変化が認められなかった。以上より、EloAは神経堤細胞から感覚神経への分化の制御に重要な役割を果たしていることが示唆された。2. EloA-/-マウス胎仔の神経系発生・分化異常の病理・病態学的解析: EloA+/+型と-/-型胎仔(E9.5E10.5)間で比較解析した結果、神経堤細胞のマーカーであるSox10の発現がEloA-/-胎仔の脳神経節と後根神経節において、また、感覚神経系の分化に必要なNeurogenin1ならびにNeuroD1の発現が第V神経節等で著明に低下していることが判明し、EloAが神経堤細胞から感覚神経への分化の制御に重要であることが示唆された。3. RNA-sequence解析によるEloA標的候補遺伝子の探索: EloA-/-型と+/+型胚様体を用いた解析の結果、神経分化や胚発生に働くことが知られている複数のlong non-coding RNAの発現がEloA-/-型で有意に低下していることが判明した。4. ChIP解析に有用な抗EloA抗体の作製: EloA

配列内のペプチドをエピトープとする6種類の抗体を作製して、クロマチン分画からのEloAとPol IIの共免疫沈降の可否について検討した結果、内2種類の抗体が高効率で共沈可能であることが判明した。医歯薬学クロマチン免疫沈降(ChIP)解析に有用である可能性のある抗Elongin A抗体を2種作製できた。また、レチノイン酸刺激前後でElongin A-/-型とElongin A+/+型のマウス胚様体間でRNA-sequence解析を実施し、Elongin Aに依存して発現が有意に増加する遺伝子を複数同定することができた。さらには、一部の成果をJ. Biol. Chem.誌に発表することができたため。目標としていた(1)クロマチン免疫沈降(ChIP)によるElongin Aの標的遺伝子の解析と(2)Elongin A-/-マウス胎仔の神経系発生・分化異常の病理・病態学的解析をほぼ計画通りに実施し、Cell Reports誌に発表することができたため。ChIP-sequence解析を海外共同研究者のJoan Conaway博士が在籍する米国Stowers研究所のシークエンス部門の協力を得て実施する。RNA-sequence、ChIP-sequence等の解析に必要な遺伝子工学用試薬、細胞培養試薬、プラスティック器具ならびに抗体の購入やDNA合成、マウス飼育費等に充てる。
ヨーガg調息訓練が呼吸循環状態および体力に及ぼす効果に関する研究

本研究では、中高年者における深くてゆっくりした呼吸や、身体動作を繰り返して行なうヨーガg訓練が換気機能、心臓機能および有酸素的身体作業能力にどのような影響をもたらすかを明らかにするためヨ-ガ訓練者5名と健康な成人男子5名を被検者とした。各被検者に対し普通に呼吸を行なわせた時と意識的にゆっくりした呼吸を行なわせた結果、ヨ-ガ訓練者は毎分13回の呼吸が可能であり、その時の呼気終末炭酸ガス分圧は約50mmHgと高いことなる。身体はかなり酸性化(アミドーシス)に傾いていることが推測された。しかし、脳波からみたゆっくりした呼吸の効果は明らかにすることはできなかった。一方、自転車エルゴメーターを用い漸増負荷法による最大酸素摂取量を測定した結果、ヨ-ガ訓練者の体重当りの最大酸素摂取量は、一般人のそれと比べ高い傾向が認められた。これらの結果は、日常生活においてヨ-ガ訓練を行なうことにより呼吸の化学調節および身体作業能力は影響されることを示唆するものであると考えられた。
異空間における制御構造の再解釈に基づく制御理論の構築

本研究では,研究代表者らが提案した最小射影法と局所同次制御に対し,制御システムが定義された空間とは異なる空間において制御構造の再解釈を行うことによる理論展開を行った.その結果,新たな制御手法として多層最小射影法,無限層最小射影法,特異点配置法,探索制御法,局所同次適応制御則を開発することに成功した.また,最小射影法に対し二輪車両型移動ロボット,局所同次制御に対しロボットアームを使った実機実験により有効性を確認することに成功した.本研究では,研究代表者らが提案した最小射影法と局所同次制御に対し,制御システムが定義された空間とは異なる空間において制御構造の再解釈を行うことによる理論展開を行った.その結果,新たな制御手法として多層最小射影法,無限層最小射影法,特異点配置法,探索制御法,局所同次適応制御則を開発することに成功した.また,最小射影法に対し二輪車両型移動ロボット,局所同次制御に対しロボットアームを使った実機実験により有効性を確認することに成功した.本研究の目的は,安定化フィードバック制御則を設計することが難しい制御対象に対する制御手法として申請者らが提案している「最小射影法」「局所同次性を保証する制御則設計法」を拡張し,新たな非線形制御理論基盤を構築することである.最小射影法は,制御系が定義された空間とは異なる空間上で制御問題を再解釈することにより問題を簡単化する手法である.従来の最小射影法は,単一の異空間を利用していたため,異空間の設計が難しく,限られた制御対象にしか適用できなかった.そこで,本年度は多数の異空間を利用する多層最小射影法を提案した.さらに,最小射影法は,強制御Lyapunov関数,厳密な制御Lyapunov関数の設計にも利用可能であることを明らかにした.最小射影法によって設計した関数は,通常局所半凹制御Lyapunov関数になるが,これまで局所半凹制御Lyapunov関数を利用した制御則の設計は不十分なものしかなかった,そこで,局所半凹関数はかならず滑らかな関数の最小をとることによって構成されているという点に着目した新しい制御則を提案した.さらに,最小射影法によって設計された局所半凹制御Lyapunov関数は一般的な局所半凹制御Lyapunov関数と比較して制御則設計に優れた関数となっていることを明らかにした.局所同次性は,一般的に固定した座標系において定義されており,座標変換に対する不変性は議論されてこなかった.そこで,本年度は,もっとも都合の良い固定座標系において設計した局所同次制御則は,任意の座標系に対して収束速度を保証することを明らかにした.これにより,同次系と一般的な非線形系で異なっていた収束速度の定義を統一することができた.本研究の目的は,安定化フィードバック制御則を設計することが難しい制御対象に対する制御手法として申請者らが提案している「最小射影法」「局所同次性を保証する制御則設計法」を拡張し,新たな非線形制御理論基盤を構築することである.最小射影法は,制御系が定義された空間とは異なる空間上で制御問題を再解釈することにより問題を簡単化する手法である.昨年度までに,有限個の異空間を利用する多層最小射影法を提案した.本年度はこの結果をさらに発展させ,無限個の異空間を利用することのできる無限層最小射影法を提案するとともに,「最小射影」による特異点消去現象について詳しく解析を行い,特異点消去・特異点配置と最小射影法を組み合わせた新たな制御Lyapunov関数設計法を開発した.さらに,最小射影法は情報理論的探索と相性が良いことを発見し,リアルタイムA*と最小射影法の融合による,探索制御法を提案することができた.局所同次性を保証する制御則はこれまで実験による有効性が確認できていなかった.本年度はロボットアームを用いた実験により,局所同次性によって理論的に規定される収束速度の違いを実験結果から確認することに成功した.また,同次近似を持たないような制御システムに対して,同次システムを近似とは異なるリファレンスシステムとしてとらえ直すことによって,収束速度を保証する制御則を開発することができた.従来局所同次制御と適応制御の融合はこれまでに行われてこなかったが,本年度は特定の条件下における局所同次適応制御を提案した.
抗接着分子抗体と核抗原の同時投与によるトレランスの導入とループス腎炎の発症予防

LAF-1やICAM-1などの接着分子に対する抗体を心移植時に同時に投与することによって、移植を永続させ得るとの報告がある。すなわち、抗接着分子抗体を用いることにより抗原特異的にトレランスを導入させることが可能となった。この方法によるトレランスの導入は移植免疫のみならず、異種蛋白に対する通常の液性抗体反応においても認められる。今回の目的はこの方法を応用して自己免疫疾患における自己抗体の産生を抑制し臓器障害の発生を予防することである。すなわち、SLE自然発症マウスの生後比較的早い時期に、臓器障害性が高く免疫原として重要なクロマチンを積極的に免疫すると同時に抗接着分子抗体を投与することによって、SLEにおいて自己抗体の産生が抑制されるかどうかを検討した。モデル動物として、lprマウスとNZB/NZWF1マウスを用いた。生後1カ月齢のlprマウスに抗接着分子抗体を投与しても抗体産生量あるいは糸球体腎炎の程度に影響を与えなかった。そこで、生後より早期である2週令のlprマウスと2週令のNZB/NZWF1を対象として実験を行った。これらの場合においても、残念ながら、抗接着分子抗体の投与は自己抗体の産生量や臓器障害に対して保護的な効果を示さなかった。SLEと異なり膵ラ氏島炎という臓器特異的な自己免疫疾患を自然に発症するNODマウスでは今回、ここで行った方法により疾患の発症が予防されたとの報告がある。臓器特異的自己免疫疾患とSLEのような全身性自己免疫疾患では、自己抗体の産生や臓器障害の機序に違いがあることが考えられた。
定ひずみ速度圧密試験に対する有限変形圧密理論の適用性に関する研究

本研究では,飽和粘性土の定ひずみ速度圧密試験時の挙動を有限変形理論に基づいた数値解析手法を通して把握するとともに,これまでに提案されている結果の整理法の適用性について検討した.主たる結論は次のようである.1.微小変形を仮定して有限要素解析数値シミュレーションを行い,その結果を微小変形を仮定しない場合と比較すると,微小変形を設けることによって土の定ひずみ速度圧密試験時の挙動を見誤らせる可能性がある.従って,微小変形を仮定して得られた定ひずみ速度圧密の理論解は,確かに,同試験を実用的なものにはしているが,結果の解釈には十分注意が必要である.2.著者の提案した整理法は,定ひずみ速度圧密の理論解さえ与えられれば,有限変形・微小変形を問わず,定ひずみ速度圧密度試験結果から試料の構成関係を推定できる.その方法を微小変形圧密理論解に適用して試料の構成関係を推定し,同じく微小変形理論に基礎を置くWissaらの整理法から推定した構成関係と比較した.提案整理法で構成関係を推定すると現行の地盤工学会基準で推奨された速度より10倍以上大きな速度で試験をしても構成関係を推定できる.ただし,推定された構成関係が真のものである保証はない.3.定ひずみ速度圧密試験に対する有限変形圧密理論解がZnidarcicらによって与えられている.その解に,提案する結果の整理法を適用して試料の構成関係を推定する試みも行った.しかし,理論解を得るために設けられた支配方程式の線形化の仮定の影響のため,推定された構成関係は真の構成関係とは異なったものになる.本研究では,飽和粘性土の定ひずみ速度圧密試験時の挙動を有限変形理論に基づいた数値解析手法を通して把握するとともに,これまでに提案されている結果の整理法の適用性について検討した.主たる結論は次のようである.1.微小変形を仮定して有限要素解析数値シミュレーションを行い,その結果を微小変形を仮定しない場合と比較すると,微小変形を設けることによって土の定ひずみ速度圧密試験時の挙動を見誤らせる可能性がある.従って,微小変形を仮定して得られた定ひずみ速度圧密の理論解は,確かに,同試験を実用的なものにはしているが,結果の解釈には十分注意が必要である.2.著者の提案した整理法は,定ひずみ速度圧密の理論解さえ与えられれば,有限変形・微小変形を問わず,定ひずみ速度圧密度試験結果から試料の構成関係を推定できる.その方法を微小変形圧密理論解に適用して試料の構成関係を推定し,同じく微小変形理論に基礎を置くWissaらの整理法から推定した構成関係と比較した.提案整理法で構成関係を推定すると現行の地盤工学会基準で推奨された速度より10倍以上大きな速度で試験をしても構成関係を推定できる.ただし,推定された構成関係が真のものである保証はない.3.定ひずみ速度圧密試験に対する有限変形圧密理論解がZnidarcicらによって与えられている.その解に,提案する結果の整理法を適用して試料の構成関係を推定する試みも行った.しかし,理論解を得るために設けられた支配方程式の線形化の仮定の影響のため,推定された構成関係は真の構成関係とは異なったものになる.研究の目的は(1)定ひずみ速度圧密試験(CRS試験)結果に対する有限変形理論の適用性を検討することとと(2)土の持つ本質的な時間依存性を定ひずみ速度圧密試験を通して明らかにすることである.目的(1)のために,微小変形の仮定を設けた場合と設けない場合に対して有限要素解析によってCRS試験をシミュレーションし,結果を比較した.シミュレーションのために,実際の土の挙動をできるだけ忠実に表現できるように従来の研究結果を参考に定めたモデルと,慣用の理論または結果の解析法において仮定されている性質を備えたモデルを設定した.シミュレーションの結果,どのモデルに対しても,有限変形解析によるシミュレーション結果は微小変形解析による結果と異なることがわかった.実際の土が微小変形の枠内で変形しないので,微小変形の仮定を設けると全く非現実的な土の挙動を前提にしたことになってしまうことを示している.特に,微小変形理論に基礎を置く慣用の解析法で仮定されている「定常状態」は,例え同じ性質のモデルを設定しても,有限変形解析では実現しないことがわかった.目的(2)のために,繰り返し後圧密した粘性土試料に対して段階載荷試験とCRS試験を実施した.試料の真の時間依存的性質は,段階載荷圧密試験においては二次圧縮特性によって,CRS試験においてはひずみ速度依存的挙動によって表されると考えた.現在,これらの時間依存性の指標を関連付けるに足る十分なデータが得られておらず,実験および考察を引き続き行っている.本研究では,飽和粘性土の定ひずみ速度圧密試験時の挙動を有限変形理論に基づいた数値解析手法を通して把握するとともに,これまでに提案されている結果の整理法の適用性について検討した.主たる結論は次のようである.1.微小変形を仮定して有限要素解析数値シミュレーションを行い,その結果を微小変形を仮定しない場合と比較すると,微小変形の仮定を設けることによって土の定ひずみ速度圧密試験時の挙動を見誤らせる可能性がある.従って,微小変形を仮定して得られた定ひずみ速度圧密の理論解は,確かに,同試験を実用的なものにはしているが,結果の解釈には十分注意が必要である.2.著者の提案した整理法は,定ひずみ速度圧密の理論解さえ与えられれば,有限変形・微小変形を問わず,定ひずみ速度圧密試験結果から試料の構成関係を推定できる.

その方法を微小変形圧密理論解に適用して試料の構成関係を推定し,同じく微小変形理論に基礎を置くWissaらの整理法から推定した構成関係と比較した.提案整理法で構成関係を推定すると現行の地盤工学会基準で推奨された速度より10倍以上大きな速度で試験をしても構成関係を推定できる.ただし,推定された構成関係が真のものである保証はない.3.定ひずみ速度圧密試験に対する有限変形圧密理論解がZnidarcicらによって与えられている.その解に,提案する結果の整理法を適用して試料の構成関係を推定する試みも行った.しかし,理論解を得るために設けられた支配方程式の線形化の仮定の影響のため,推定された構成関係は真の構成関係とは異なったものになる.
肺における線維化の指標としてのプリオン蛋白の発現とその臨床応用

肝臓において、類洞壁星細胞が活性化し線維化を生じるに伴って細胞質型のプリオン蛋白(PrPc)を発現することをヒントとし、肺の線維化におけるプリオン蛋白の発現について基礎研究および臨床研究を行なった。基礎研究として肺組織におけるプリオン蛋白産生細胞の解析を、肺線維症モデルを作成し免疫組織化学的手法を用いて行なった。正常肺では細気管支に多く分布し小顆粒を有するクララ細胞の細胞質にPrPcの発現が認められたが、核と顆粒には発現は認められなかった。ブレオマイシンの細気管支投与によって作成した線維化肺では、終末細気管支の周囲の線維化巣において細気管支が増殖し、増殖細気管支はPrPc陽性のクララ細胞に覆われていた。また、PrPc陽性細胞は、肺胞管の上皮と肺胞の再生した上皮にも存在していた。また、線維化巣にはα-smooth muscle actin陽性の筋線維芽細胞が多数存在していたが、PrPc陽性細胞とはその分布は異なっていた。これらの所見より、肺胞が障害を受けた際、クララ細胞が増殖し終末細気管支から腺房に遊走し、肺の幹細胞として増殖し損傷を修復する可能性と、肝と肺の筋線維芽細胞のheterogeneityの可能性を示唆している。臨床研究は、当病院において原発性肺癌症例で放射線療法と化学療法を施行した後、外科的治療を行なった摘出標本を用いて、プリオン蛋白発現を指標とした至適放射線量と範囲および術式の再評価を行なうことを目指した。摘出した標本においては、免疫組織化学的手法およびPCR法を用い検討じたが、放射線療法終了後約68週経過し線維化が完成した為か、明らかなプリオン蛋白陽性細胞の増殖は認めなかった。今後はプリオン蛋白の発現が最も顕著と思われる時期、すなわち放射線療法の影響が強く存在し、明らかに線維化が完成する以前の肺組織を対象として、再度検討する予定である。肝臓において、類洞壁星細胞が活性化し線維化を生じるに伴ってプリオン蛋白を発現することをヒントとし、肺の線維化におけるプリオン蛋白の発現について基礎研究および臨床研究を現在行なっている。正常肺では細気管支に広く分布するClara Cellにプリオン蛋白の発現が認められた。次にブレオマイシンにて作成した肺線維症モデルでは、終末細気管支の周囲に、新たな細気管支と線維組織の増殖とを認めた。この新たに増殖した細気管支と線維化組織内の再生肺胞上皮にClara Cell用のプリオン蛋白陽性を認めた。これらはClara Cellが万能細胞として増殖し、障害を受けた肺組織の上皮組織修復の役割を担っていることを示唆している。臨床研究は、当病院において原発性肺癌症例で放射線療法と化学療法を施行した後、外科的治療を行なった摘出標本を用いて、プリオン蛋白発現を指標とした至適放射線量と範囲および術式の再評価を行なうことを目指している。現在までの摘出した標本においては、放射線療法終了後約68週経過し線維化が完成した為か、明らかなプリオン蛋白陽性細胞の増殖は認めていない。したがってプリオン蛋白の発現が最も顕著と思われる時期、すなわち放射線療法の影響が強く存在し、明らかに線維化が完成する以前の肺組織を対象として、免疫組織化学的手法およびPCR法を用い検討する予定である。これには放射線療法終了後に経気管支鏡下肺生検を行なわなければならず、院内での倫理委員会の認可および患者本人の同意が必要であり、現在準備を行なっている。

肝臓において、類洞壁星細胞が活性化し線維化を生じるに伴って細胞質型のプリオン蛋白(PrPc)を発現することをヒントとし、肺の線維化におけるプリオン蛋白の発現について基礎研究および臨床研究を行なった。基礎研究として肺組織におけるプリオン蛋白産生細胞の解析を、肺線維症モデルを作成し免疫組織化学的手法を用いて行なった。正常肺では細気管支に多く分布し小顆粒を有するクララ細胞の細胞質にPrPcの発現が認められたが、核と顆粒には発現は認められなかった。ブレオマイシンの細気管支投与によって作成した線維化肺では、終末細気管支の周囲の線維化巣において細気管支が増殖し、増殖細気管支はPrPc陽性のクララ細胞に覆われていた。また、PrPc陽性細胞は、肺胞管の上皮と肺胞の再生した上皮にも存在していた。また、線維化巣にはα-smooth muscle actin陽性の筋線維芽細胞が多数存在していたが、PrPc陽性細胞とはその分布は異なっていた。これらの所見より、肺胞が障害を受けた際、クララ細胞が増殖し終末細気管支から腺房に遊走し、肺の幹細胞として増殖し損傷を修復する可能性と、肝と肺の筋線維芽細胞のheterogeneityの可能性を示唆している。臨床研究は、当病院において原発性肺癌症例で放射線療法と化学療法を施行した後、外科的治療を行なった摘出標本を用いて、プリオン蛋白発現を指標とした至適放射線量と範囲および術式の再評価を行なうことを目指した。摘出した標本においては、免疫組織化学的手法およびPCR法を用い検討したが、放射線療法終了後約68週経過し線維化が完成した為か、明らかなプリオン蛋白陽性細胞の増殖は認めなかった。今後はプリオン蛋白の発現が最も顕著と思われる時期、すなわち放射線療法の影響が強く存在し、明らかに線維化が完成する以前の肺組織を対象として、再度検討する予定である。
多センサを用いた振動インテンシティの直接計測手法の研究

1)1次元の簡単な振動系に4つのセンサ(振動ピックアップ)を配置して,曲げ波の振動インテンシティを計測し,振動エネルギ-の伝搬方向と大きさの測定を行った.この測定に際しては大量のデ-タのクロススペクトルを求める必要があるため,デ-タ蓄積用にハ-ドディスク装置を購入した.2)1次元の振動系の曲げ振動を解析的に求め,その結果を元に,曲げ波の振動インテンシティを解析的に求めた.これによって,エネルギ-の伝達に際しての,近傍場と遠方場の寄与率を明らかにした.その結果以下の2項目が明らかとなった.・近傍場と遠方場の影響を正確に見積もることが正確な測定に欠かせない要件であること・近傍場と遠方場に位相差がある場合には,近傍場の影響が極めて大きくなること3)計測に用いる多センサの利得差,位相差,位置の誤差,取り付けインピ-ダンス等による測定誤差を実験的に評価し,コンピュ-タシミュレ-ションによる結果と比較した.4)振動インテンシティの実測結果,解析解,それに,センサに誤差がある場合の測定誤差の影響について比較検討した.その結果,誤差を実用的な値である2dB以下に抑えるためには,4つのセンサの位相差,感度差,位置誤差を従来法である2センサ法より厳重に管理する必要があるものの,近傍場の影響がある場では,2センサ法に比較して,はるかに良い精度で計測が可能であることが明らかになった.1)1次元の簡単な振動系に4つのセンサ(振動ピックアップ)を配置して,曲げ波の振動インテンシティを計測し,振動エネルギ-の伝搬方向と大きさの測定を行った.この測定に際しては大量のデ-タのクロススペクトルを求める必要があるため,デ-タ蓄積用にハ-ドディスク装置を購入した.2)1次元の振動系の曲げ振動を解析的に求め,その結果を元に,曲げ波の振動インテンシティを解析的に求めた.これによって,エネルギ-の伝達に際しての,近傍場と遠方場の寄与率を明らかにした.その結果以下の2項目が明らかとなった.・近傍場と遠方場の影響を正確に見積もることが正確な測定に欠かせない要件であること・近傍場と遠方場に位相差がある場合には,近傍場の影響が極めて大きくなること3)計測に用いる多センサの利得差,位相差,位置の誤差,取り付けインピ-ダンス等による測定誤差を実験的に評価し,コンピュ-タシミュレ-ションによる結果と比較した.4)振動インテンシティの実測結果,解析解,それに,センサに誤差がある場合の測定誤差の影響について比較検討した.その結果,誤差を実用的な値である2dB以下に抑えるためには,4つのセンサの位相差,感度差,位置誤差を従来法である2センサ法より厳重に管理する必要があるものの,近傍場の影響がある場では,2センサ法に比較して,はるかに良い精度で計測が可能であることが明らかになった.
オメガ-3不飽和脂肪酸摂取による脈絡膜新生血管の抑制

オメガ-3多価不飽和脂肪酸の一つであるエイコサペンタエン酸(EPA)摂取は脈絡膜における炎症抑制を介して加齢黄斑変性(AMD)の本態である脈絡膜血管新生(CNV)を抑制することが示された。またCNVの抑制は眼局所のみならず全身の炎症レベルの低下による可能性が示唆された。現在米国ではEPAのAMD発症に対する介入試験が行われている。本研究はその生物学的根拠となりうるものである。【目的】近年ω-3多価不飽和脂肪酸(PUFA)の摂取が加齢黄斑変性の発症を抑制するとの疫学調査が報告されている。今回我々は、エイコサペンタエン酸(EPA)の摂取が実験的脈絡膜血管新生(CNV)に及ぼす影響を検討した。【方法】6週齢のC57BL/6マウスを魚粉抜き飼料、EPA混餌飼料、またはリノール酸混餌飼料で4週間飼育した後、レーザー光凝固によりCNVを誘導した。光凝固後7日目にCNV体積を評価し、また脈絡膜でのICAM-1、MCP-1、VEGF、IL-6の発現をRT-PCR法、ELISA法で検討した。さらに血清中のCRP、IL-6濃度を測定した。また、培養血管内皮細胞でのTNF-α刺激時のICAM-1、MCP-1、培養マクロファージでのLPS刺激時のVEGF、IL-6の発現につき、EPA投与の効果をRT-PCR法、ELISA法で検討した。【結果】魚粉抜き飼料群に比し、EPA混餌群でCNV体積は有意に減少したが、リノール酸混餌群では有意差は見られなかった。EPA混餌群では脈絡膜における上記分子の発現が有意に抑制された。さらに血清CRP、IL-6とも有意に低値を示した。培養細胞における上記分子の発現もEPA投与により有意に抑制された。【結論】EPA摂取は脈絡膜における炎症抑制を介してCNVを抑制することが示された。【目的】近年ω-3多価不飽和脂肪酸(PUEA)の摂取が加齢黄斑変性(AMD)の発症を抑制するとの疫学調査が報告されている。光凝固後7日目にCNV体積を評価し、また脈絡膜での炎症関連分子の発現をRT-PCR法、ELISA法で検討した。また、培養血管内皮細胞で炎症関連分子の発現につき、EPA投与の効果をRT-PCR法、ELISA法で検討した。【結果】魚粉抜き飼料群に比し、EPA混餌群でCNV体積は有意に減少したが、リノール酸混餌群では有意差はなかった。培養細胞における上記分子の発現もEPA.投与により有意に抑制された。
消化器癌に発現するチロシンホスファターゼSAP-1の基礎的研究並びにその臨床応用

従来より、チロシンキナーゼや、それにより活性化されるRasをはじめとする細胞内情報伝達系の異常が、発癌過程に重要な役割を果たしていることが示唆されている。一方、最近になり、リン酸化チロシン基を特異的に脱リン酸化するチロシンホスファターゼ(PTPase)がチロシンキナーゼ系を介した生理的応答や発癌過程に重要な調節的役割を果たしていることが明かにされつつある。私達は、ヒト胃癌細胞KATO-IIIに発現するPTPaseを検索した結果、新規のPTPase、SAP-1を同定、遺伝子クローニングした。SAP-1は、細胞外ドメインとして、糖鎖に富むフィブロネクチン様構造を有している。興味深いことに、SAP-1は、正常大腸粘膜には、ほとんど認めなかったが、多くの大腸癌細胞株に過剰発現を認めている。そこで、本研究においては、SAP-1のさらなる生理機能の探究、及びSAP-1の消化器癌における診断、治療上の臨床応用を目指している。(1)SAP-1を培養細胞に過剰発現した際には、細胞増殖の抑制が認められた。さらに、PTPase活性を喪失した変異型SAP-1とEGF受容体の結合が観察されたことから、SAP-1は、EGFを介したシグナル伝達経路に影響を及ぼす可能性が示唆され、現在これをさらに解析中である。(2)SAP-1遺伝子5上流域1.7Kbをクローニングし解析した。幾つかの転写因子結合配列を見い出したが、大腸癌において特有の異常を現在までは検出していない。(3)SAP-1のモノクローナル抗体の作成に成功した。これを用い、またポリクローナル抗体を用いた免疫組織染色を大腸腺腫、大腸癌組織において行った結果、約40%の大腸癌症例においてSAP-1の過剰発現を観察した。一方、大腸腺腫においては、SAP-1の過剰発現は認められず、K-ras、p53遺伝子の変異の比較検討から、SAP-1の過剰発現は大腸癌の多段階発癌過程の後期に生じるのではないかと結論した。現在、このモノクローナル抗体をもちいた測定系により、大腸癌、膵癌患者血中のSAP-1測定を行いつつある。私達は、最近、ヒト胃癌細胞より、全く新しいタイプの受容体型PTPase,SAP-1の遺伝子クローニングに成功した。SAP-1は、正常大腸粘膜には、ほとんど認めなかったが、多くの大腸癌細胞株に過剰発現を認めている。そこで、本研究においては、SAP-1の生理機能の解明、大腸腺腫及び大腸癌組織におけるSAP-1の発現を検討、SAP-1の特異モノクローナル抗体の作成により患者血中のSAP-1活性を検索等を計画した。SAP-1 cDNAをトランスフェクション用ベクターに組み込み、NIH3T3細胞にトランスフェクションし、細胞のトランスフォーメーションの有無を検討した。しかしながら、SAP-1 cDNA単独のトランスフェクションによっては、明らかな細胞のトランスフォーメーションは観察されなかった。現在、さらに活性化ras、p53遺伝子等、大腸癌の発癌に関与していると考えられている遺伝子群とSAP-1遺伝子とを組み合わせて、細胞の形質転換への影響を観察中である。内視鏡検査や、手術時に得られた大腸腺腫及び大腸癌組織におけるSAP-1の発現を、免疫組織化学的に抗SAP-1モノクローナル抗体を用いて検討した。46例の大腸癌組織中20例にSAP-1の高発現を観察した。14例の大腸腺腫中では、2例のみに、SAP-1の高発現を観察し、この2例とも腺腫内癌を伴った症例であった。さらに、SAP-1モノクローナル抗体を作成し、現在患者血中SAP-1活性を測定する系を確立中である。