hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
モノを通してみる現代ペルーにおける聖人信仰の形成と発展に関する人類学的研究

本研究は、近年宗教的なモノの商品化が著しいペルーにおける聖像の生産と流通ネットワークの実態について解明を行うものである。ペルーでは20世紀後半、地方から都市への人口移動とともに首都リマに聖像の生産市場が拡大すると同時に、リマに形成された聖具店街を中心に、聖像は各地に流布した。こうした消費拠点を介して、都市と地方の双方から往来する人びとの手によって広がる聖像の流通ネットワークは、現代の聖人信仰を支える重要なネットワークとなるものである。本年度は、ペルーにおける現在の聖像制作の実態と商品化プロセスの把握を目的に以下の調査を行った。(1)首都リマにある複数の工房および聖具店を訪問し、聖像の生産形態、デザイン、材質、工房や職人に関する調査研究を行った。その結果、現在の聖像生産の中心となるリマでは、ここ30年ほどで生産市場が拡大してきた点が明らかになった。この背景には農村部から都市部への人口流入が関わっており、地方出身者や大衆層による新たな生産市場が生み出されていることが判明した。(2)リマ市内の図書館および教会関係施設において、旧来の聖像制作に関する資料の収集を行った。(3)現代の聖像制作に関して比較検討を行うために、職人による伝統的な聖像制作が未だ主流であるクスコを訪問し調査研究を行った。聖像制作の実態を把握するために、クスコで年に一度開催される恒例の聖像販売市に参加し、この地域を中心に活動する聖像職人に関する調査を実施した。とくにクスコでは、国際的に名の知れた職人が制作する高品質・高価格なものを求める顧客も比較的多く、観光化や地域振興とも相まって特定の商品の価値が上昇する状況が観察され、国内でも制作の実態や市場の動向が二極化している現状が明らかになった。聖像制作の中核を担う二つの地域において現地調査を実施し、聖像制作に関する大方の情報・資料収集を終えた。本年度はペルーにおける聖像の流通ネットワークの解明を目的に以下の調査を実施した。(1)現在の聖像流通の一大拠点となっているリマの聖具店街の成り立ちについて明らかにするために、リマ市立図書館およびカトリカ大学附属リバ・アグエロ研究所の図書館において、1819世紀の旧市街地の様子や職業集団に関する歴史資料の収集と分析を行った。その結果、現在、聖具店が集中するワンカベリカ通りは地図のうえではかなり古い時代から存在している点が把握できたが、聖像の販売や制作を担っていた店や職人に関しては、19世紀半ば頃まで記録はなく、19世紀末から20世紀初頭に入り、ようやく聖像販売に携わっていた店に関する情報を数件確認できた。(2)上記をもとに、リマの聖具店街周辺で聞き取り調査を重ね、20世紀以降に存在した古い店や工房について情報収集した結果、この地域に最初に登場したとみられる工房を同定することができた。また当時は多くが露天商であったという事実も判明し、現在の聖具店街の形成過程を知るうえで重要な情報を得た。(3)リマの聖具店の各店舗を訪問し、店の成立時期や仕入先となる工房の情報を入手した。(4)聖具店を訪れる客にインタビューを行い、聖像購入の経緯およびその行先について聞き取り調査を行った。これらの情報から、工房や店舗の関係者以外に聖像の流通に関わる複数のアクターの存在を掴むことができた。このほか本年度は、本課題にかかる成果の一部を国立民族学博物館の共同研究会において発表した。今後は、これまでの調査結果をもとに、20世紀のペルーにおける聖像流通の発展と聖人信仰の展開との関連性について分析を行い、成果論文として発表を行う予定である。また次年度以降は、本研究をより発展させるべく、現代世界における宗教的なモノの流通をテーマにした共同研究を本格的に開始する予定にしている。今後は、聖像制作の変遷と商品化プロセスについてペルーのマクロな社会・経済動向等も視野により詳細な分析・検討を行う。また、引き続き現地調査を重ねることで、聖像の流通ネットワークおよびモノを通じた信仰形成のメカニズムの解明を目指す。28年度が最終年度であるため、記入しない。文化人類学28年度が最終年度であるため、記入しない。
化学ラベル化法を応用したタンパク質の超高解像度可視化解析

Aspリッチタグを用いたリアクティブタグ法の研究においては、昨年までに細胞表層に発現させたタグ導入タンパク質をラベル化し、金ナノ粒子修飾により電子顕微鏡により可視化が可能であることを明らかとした。本年度は、第二世代型の同手法が固定化された細胞サンプル上のタンパク質の電子顕微鏡イメージングにも応用できる事を証明した。さらに、プラスチック包埋細胞切片を用いた実験により、リアクティブタグ法によるラベル化が従来の抗体を用いた免疫電顕法よりも高い解像度でタンパク質を可視化できることを明らかした。これらの実験からリアクティブタグ法の有用性を明確にすることができた。また、マウス脳内に発現させたタグ導入タンパク質の対するラベル化応用検討を進めており、問題点を一つづつ改善している段階にある。ヒスタグ型リアクティブタグ法の研究においては、昨年度までにプローブ構造の最適化を、ほぼ終えた。本年度は、速度論解析によりCys-Hisタグ配列の最適化を行うと同時に、さらに詳細なプローブ構造の最適化を行うことで、最終的にラベル化効率の最適化されたプローブとヒスタグのペアを見出すことに成功した。本ペアは、細胞表層に発現させたCys-Hisタグ導入タンパク質の蛍光イメージングに応用することができた。現在、開発したプローブを共同研究先のオーストリアISTの重本研に送り、本ペアが金ナノ粒子ラベル化による電子顕微鏡イメージングに応用可能であるかについて検討中の段階にある。Aspリッチタグを用いたリアクティブタグ法の研究では、電子顕微鏡によるタンパク質可視化に応用する十分な成果が得られた。本成果は、現在、論文投稿中の段階にある。また、これまでに開発した第二世代型リアクティブタグ法よりも、高いラベル化効率と低い非特異反応性を示す第三世代型リアクティブタグ法を創出することにも成功した(論文投稿済み)。ヒスタグ型リアクティブタグ法の研究においても、プローブとタグ配列の詳細な最適化を行うことで、高いラベル化効率と低い非特異反応性を示す新たなペアを創出することができた(論文投稿済み)。現在、Aspリッチタグ型ならびにヒスタグ型リアクティブタグ法を用いたタンパク質の電子顕微鏡イメージング応用が、ほぼ確立された段階にある。今後は、これらの手法を脳組織に発現させたタンパク質へと応用するとともに、両ペアを組み合わせたタンパク質複合体の可視化の実現に注力して行きたいと考えている。Aspリッチタグを用いたリアクティブタグ法を用いた研究では、ELISAを用いたタグ配列の最適化を行うとともにラベル化選択性について生細胞を用いた評価を行った。その結果、これまで開発を行った第一世代、第二世代のリアクティブタグ法よりも今回開発した第三世代型のものが、高い反応性とラベル化選択性を併せ持つ最も優れたものであることを明らかとした。これにより、今後の電子顕微鏡イメージングへの応用には第三世代型のリアクティブタグ法を用いるべきであるとの明確な指針が得られた。電子顕微鏡イメージングについては、先行する第二世代型のリアクティブタグ法を用いた研究をオーストリアIST研究所の重本教授と共同して進めた。その結果、細胞表層上に発現させた膜タンパク質をビオチン/アビジン相互作用を介して金ナノ粒子でラベル化し電子顕微鏡で可視化できることを明らかとした。さらに、金ナノ粒子を直接修飾したプローブを用いた検討を行ったところ、細胞表層に発現させた受容体を金ナノ粒子で直接ラベル化が可能であり、電子顕微鏡で可視化できることが明らかとなった。ヒスタグを用いたリアクティブタグ法を用いた研究では、水を含まない完全有機溶媒系でのラベル化反応について検討を行った。現在までに、反応性の高いプローブの分子デザインについて最適化を終え、有機溶媒系の反応条件を種々検討している段階にある。また、Cysを含むヒスタグに対して反応するプローブについても開発に着手し、分子デザインの最適化を終了した段階にある。Aspリッチタグを用いたリアクティブタグ法を用いた研究において大きな進展が得られた。金ナノ粒子を直接修飾したプローブで蛋白質のラベル化が可能であることを明らかした事は大きな成果であると考えている。

Aspリッチタグを用いたリアクティブタグ法の研究では、電子顕微鏡によるタンパク質可視化に応用する十分な成果が得られた。本成果は、現在、論文投稿中の段階にある。また、これまでに開発した第二世代型リアクティブタグ法よりも、高いラベル化効率と低い非特異反応性を示す第三世代型リアクティブタグ法を創出することにも成功した(論文投稿済み)。ヒスタグ型リアクティブタグ法の研究においても、プローブとタグ配列の詳細な最適化を行うことで、高いラベル化効率と低い非特異反応性を示す新たなペアを創出することができた(論文投稿済み)。オーストリアIST研究所の重本教授との連携をより密とし、電子顕微鏡イメージングへの応用研究をさらに加速して推進していく。ヒスタグを用いたリアクティブタグ法の開発についても加速して検討を進めることでラベル化法としての確立を急ぐ。現在、Aspリッチタグ型ならびにヒスタグ型リアクティブタグ法を用いたタンパク質の電子顕微鏡イメージング応用が、ほぼ確立された段階にある。今後は、これらの手法を脳組織に発現させたタンパク質へと応用するとともに、両ペアを組み合わせたタンパク質複合体の可視化の実現に注力して行きたいと考えている。
水溶液中における分子認識予測のための分子軌道計算モデルの確立と応用

本研究では、分子軌道計算により水溶液中における分子認識の熱力学を評価するための計算モデルを確立した。この計算モデルの確立により、(i)生体分子の溶液構造と分子認識過程に対する熱力学的パラメータの評価、そして、(ii)生体分子-水クラスターの水和構造と電子構造の解析において大きな進歩があった。生体分子の立体構造と機能を分子レベルで解析するために、計算化学的手法(分子動力学法やモンテカルロ法)が広く使われている。これらの計算では数百数千個の水分子を含んだ系を取扱うことができ、生体分子のみならずその周りに存在する水和水の挙動に関する知見が得られる。しかしながら、系の正確なエントロピーの計算は膨大な計算時間を必要とし、非常に困難とされている。水溶液中で起こる生体分子反応を自由エネルギーの観点から理解するためには、水和/脱水和に起因するエントロピー項を定量的に取り扱うことが不可欠である。本研究課題では、分子軌道計算により水溶液中における分子認識を精度よく予測できる計算モデルを確立し、特定の核酸塩基配列やアミノ酸配列を認識・結合する新規なプローブ分子の設計に応用することを目標としている。本年度は、1)小分子系の熱力学的に安定な水和構造の探索、2)低分子系の水和/脱水和自由エネルギーの算出、および3)分子間相互作用における排除体積効果の解析を行った。その結果、1)分子力学・分子動力学計算により得られる標的分子の水和クラスターのいくつかのアンサンブルを初期構造とし、これらを分子軌道計算により構造最適化した後、系全体の自由エネルギーを求める手法が計算モデルとして有用である、2)水分子1個あたりの水和エントロピー変化量は水和殻ごとに異なる傾向がある、そして、3)分子間相互作用におけるエントロピー変化量は振動項からの寄与が大きい、また、溶媒(水)分子を含まない系でエネルギー的に不安定な立体構造が、多数の溶媒分子を含む系では安定な構造になりうることを見出した。本年度の研究結果より、本研究課題で採用した計算モデルは水溶液系の分子間相互作用の解析に有効であることが示された。本研究課題では、溶質-溶媒(水分子)相互作用に起因するエントロピー項を定量的に取り扱う計算モデルを確立し、特定の核酸塩基配列やアミノ酸配列を認識・結合する新規なプローブ分子の設計に応用することを最終目的としている。平成21年度は、溶質分子の周りに水分子を配置する水和クラスターモデルを用いた量子化学的計算モデルを、より多くの原子を含む系に応用する予定であった。しかし、現在予備実験として進行中の新規蛍光プローブ分子の開発にあたって、1)蛍光プローブの耐光性、および、2)細胞内器官(ミトコンドリア)への特異的結合に関する実験上の問題を解決することが急務となった。そこで、当初計画を変更し、蛍光プローブの分子設計とその応用を今年度の主な研究課題として取り組むこととした。これらの結果を以下に要約する。1)一般に、有機色素を粘土鉱物に吸着させることにより、色素の分光学的性質を制御したり、その耐光性を高めることができると考えられている。そこで、粘土鉱物(合成サポナイト)共存下における蛍光色素の耐光性を調べた。その結果、粘土鉱物により光分解が促進される色素と促進されない色素があることが明らかとなった。光分解が促進されたローダミンBに関しては、さらに、プロトンNMRによりその光分解反応機構を明らかにし、光分解が促進される化学構造因子を見いだすとともに、耐光性にすぐれた蛍光プローブの設計指針に関する知見を得た。2)蛍光プローブの応用に関する実験的研究においては、最近開発された二光子吸収蛍光性フルオレン誘導体が、生細胞中のミトコンドリアの選択的染色剤として利用できるかどうかについて調べた。ゾウリムシおよびHela細胞を染色し、蛍光顕微鏡観察を行った結果、有機溶媒を使用することなく、フルオレン誘導体の水溶液により生細胞中のミトコンドリアを選択的に染色でき、また、ミトコンドリアの形が時間とともに変化するようすが見られた。さらに、フルオレン誘導体の蛍光退色や細胞毒性は極めて小さいことが明らかとなった。過去2年間の基礎研究により、溶質-溶媒(水分子)相互作用に起因するエントロピー項を定量的に取り扱うことが可能な分子軌道計算モデルを確立することができた。そこで今年度は本計算モデルをより多くの原子を含む系に適用し、1)オリゴペプチドの二次構造、2)核酸塩基対のスタッキング、3)核酸-色素および核酸塩基-アミノ酸相互作用に関する自由エネルギー解析を行った。また、生体分子を含む水和クラスターの電子構造や生体分子の周りに存在する水分子の配向(水和構造)についても検討した。その結果、1)においては、計算化学的に初めてアラニンとグリシンのヘリックス形成傾向の違いを説明できた。また、オリゴペプチド(ヘリックス構造)の周囲に存在する多くの水分子は、ペプチド自身の大きな双極子モーメントを相殺するように配向していることや、水素結合を通してペプチドと水分子との間で電荷移動がおこっていることが明らかとなった。

2)においては、2つの核酸塩基対が一層分の水分子を含む程度の距離からπ-πスタッキングを形成する距離へ接近する際、低振動数を示す振動モードの振動数がより低下する(すなわち、エントロピー変化量が正となる)ことにより、系の自由エネルギーを低下させることが明らかとなった。よって、本計算モデルにより二分子会合に伴う排除体積効果に起因するエントロピー変化量を定量的に解析できることが分かった。3)においては、大量の計算資源を必要とする上、エンタルピー変化量を過大評価する傾向があるものの、従来の実験的知見と一致する結果を得ることができた。さらに、昨年度開発した、新規なミトコンドリアイメージング用水溶性蛍光プローブ(フルオレン誘導体)の二光子吸収特性を評価したところ、水溶液中でも従来の蛍光プローブよりも二光子吸収効率が大きく、二光子励起蛍光プローブとして優れた特性を有することが分かった。
古代日韓交流の考古学的研究―墓制の比較研究―

本研究は、日本列島における初期水稲農耕社会の定着から律令国家形成にいたるまでの長い古代国家形成過程のなかで、東アジア・特に朝鮮半島の諸社会が及ぼした影響を、おもに墳墓関係の資料を中心に取り上げつつ検討を加えようとするものである。研究期間中は、(1)日本と韓国での研究会や研究打ち合わせによる意見と情報の交換、(2)関連資料の収集整理、(3)関連遺跡の発掘・整理・分析等を中心に活動を行った。研究会や打ち合わせは適宜行ったが、各年度とも韓国に渡り、関連遺跡・遺物の観察、韓国研究者との意見・情報交換を行うとともに平成13年度には韓国から研究者を招聘し公開の研究会を実施した。第1回(12月14日)は圓光大学校の崔完奎教授「韓国西海岸一帯の周溝墓と墳丘墓」と、和田「弥生墳丘墓の再検討」、第2回(平成14年1月26日)は釜山大学校博物館の李在賢研究員「韓国嶺南地域木来槨墓の構造と葬制」と、日本の弥生木槨集成図を中心とした討議であった。収集した資料は国内では弥生墳丘墓と木槨・石槨関係資料が中心で、それにあわせて朝鮮半島の木棺・木槨・周溝墓等の資料を収集した。また、発掘調査を行った遺跡は京都府向日市五塚原古墳(平成12・13年度。和田・高担当)で、兵庫県中町東山古墳群(平成11年度・菱田担当)の発掘・整理経費の一部にも割り当てられた。それぞれの時点での研究成果は研究分担者各自の論考として発表してきたが(裏頁参照)、研究成果報告書には、以上の成果とともに、各自の新たな論考を準備している。本研究は、日本列島における初期水稲農耕社会の定着から律令国家形成にいたるまでの長い古代国家形成過程のなかで、東アジア、特に朝鮮半島の諸社会が及ぼした影響を、おもに墳墓関係の資料を中心に取り上げつつ、検討を加えようとするものである。そのため本年度は、日本での関連資料の収集と整理および情報交換、ならびに韓国での現地踏査・資料収集・研究者との交流とレビューに重点をおきつつ、各自がそれぞれのテーマで、研究史の検討を中心に作業を行った。(1)国内での関連遺跡の踏査は各自が適宜行った。(2)資料収集は弥生前期の方形周溝墓・木棺墓、弥生後期から古墳前期の木槨・竪穴式石槨、古墳中期の特殊な竪穴式石槨、古墳後期の初期横穴式石室、奈良・平安時代の木槨等を行った。(3)菱田は1999年7月21日から9月2日にかけて兵庫県多可郡中町東山古墳群(古墳後期・横穴式石室)の発掘調査を実施した。(4)韓国での遺跡踏査・資料収集・研究者との交流とレビューに関しては、和田・菱田・吉井が1999年8月29日から9月4日にかけて釜山市立博物館、東亜大学校、国立金海博物館、全南大学校、国立光州博物館、国立全州博物館、円光大学校、国立扶余博物館、国立公州博物館、公州大学校、忠南大学校等を訪問、高橋は2000年2月23日から27日にかけて国立慶州博物館、嶺南大学校、嶺南文化財研究院、慶北大学校等を訪問し、それぞれの機関の研究者と交流し、各地の遺跡・遺物についてレビューを受けた。本研究は、日本列島における初期水稲農耕社会の定着から、律令国家形成にいたるまでの長い古代国家形成過程の中で、東アジア、特に朝鮮半島の諸社会が及ぼした影響を、おもに墳墓関係の資料を中心に取り上げつつ、検討を加えようとするものである。2年目にあたる今年度は、昨年に引き続き、

(1)日本と韓国での情報交換、(2)関連資料の収集・整理、および(3)関連遺跡の発掘・整理・分析等を中心に活動した。(1)では、研究分担者間では、研究会のほかにも日常的に接触を保ち、研究内容の検討・調整や情報交換を行うとともに、韓国の釜山大学校で行われた嶺南考古学会・九州考古学会合同研究会に参加し、韓国の研究者との交流・情報交換等を行った。(2)では、国内の関連資料を収集するとともに、朝鮮半島の資料では、無文土器時代の墳墓資料を中心に集成を継続している。(3)では、京都府向日市五塚原古墳の墳丘調査(立命館大学担当)と、兵庫県中町東山古墳群の整理・報告書作成(京都府立大学担当)等を実施した。なお、関係者は関連時期の遺構・遺物についての研究活動を行い、「研究発表」に記載のような図書、論文を公表している。本研究は、日本列島における初期水稲農耕社会の定着から律令国家形成にいたるまでの長い古代国家形成過程のなかで、東アジア、特に朝鮮半島の諸社会が及ぼした影響を、おもに墳墓関係の資料を中心に取り上げつつ、検討を加えようとするものである。3年目にあたる今年は、昨年に引き続き、(1)日本と韓国での情報交換、(2)関連資料の収集・整理、(3)関連遺跡の発掘・整理・分析等を中心に行ったが、それぞれ、この間の作業のまとめにはいった。(1)では、研究分担者間で日常的に接触し情報を交換する一方、韓国から研究者を招聘し、公開の研究会を2回実施した、第1回(12月14日)は圓光大学校の崔完奎教授「韓国西海岸一帯の周溝墓と墳丘墓」と和田「弥生墳丘墓の再検討」、第2回(1月26日)は釜山大学校博物館の李在賢研究員「韓国嶺南地域木榔墓の構造と葬制」と日本の木槨集成図を中心に討論した。(2)では、国内の関係資料を収集するとともに、朝鮮半島の関連資料の収集(木棺、木槨、周溝墓など中心)を継続した。(3)では、京都府向日市五塚原古墳の墳丘調査(第2次・立命館大学担当、8月1日9月日)を実施し、墳丘規模、段築、葺石等に関して一定の成果を上げ、現在は報告書を準備中である。また、研究分担者は関連時期の遺構・遺物についてそれぞれ独自にも研究活動を行っており、「研究発表」に記載のような成果を上げている。
磁気圏境界層MHD不安定の研究

磁気圏境界層でのプラズマ輸送問題を扱うのに、粒子効果も含めてself consistentな場の発展方程式を解き、その中での粒子のダイナミックスを考えることが必要である。ここでは、MHDスケール現象をイオン粒子効果を採り入れながらシミュレーションできるハイブリッド・コードをもちいて、磁気圏境界でのケルビン・ヘルムホルツ不安定による粒子輸送を考えた。MHD方程式から期待されるのは、磁気圏境界では、ある面を境にして太陽風的なプラズマ・磁場と磁気圏的なプラズマ・磁場に、不連続的にわかれている、ということである。ところが、実際に観測してみると磁場が変化する磁気圏境界の内側(地球側)に、太陽風プラズマと磁気圏プラズマの混合層が発見される。そこで、境界層で成長するケルビン・ヘルムホルツ(KH)不安定の渦による新しい混合過程で二つのプラズマが混ぜられているのではないか、と考える。KH不安定は流体的不安定であり、流体近似で扱う限りプラズマ混合は起こらないが、そのMHDスケールの渦流に粒子効果が重ね合わされたときには混合が発生するのでは、と考えるのである。事実、シミュレーションをしてみると、一様な初期条件からスタートした場合、かなり速い混合がおきることはわかっている。今回の研究では、初期条件の磁場強度分布が非一様な場合には混合効率が下がること、また、その機構は電流層にともなう静電場によるものであること、をつきとめた。理論的研究の一方で、Geotail衛星データの解析も進めた。その結果、混合層とその外側領域との間には大きな磁場強度の差はなく、また、混合層で大振幅の低周波波動が受かっていることから、混合メカニズムとしてKH混合過程は再有力候補の一つであるといえる。その反面、データには顕著にみられた、3次元的磁気圏・電離圏結合効果をどのようにして理論に取り込んでいくか、あるいは、それによって現モデルが大きく書き換えられるか、が次の課題として残された。
植物ホルモンと細胞周期制御をむすぶ分子機構

本年度は、G2/M期特異的転写を指令する転写因子である3リピート型Myb(3R-Myb)のシロイヌナズナ遺伝子ノックアウト株の解析の過程で、新たにオーキシン信号伝達やオーキシン極性輸送に関連した表現型を発見した。シロイヌナズナには5個の3R-Mybをコードする遺伝子があり、それらは構造からA-type、B-type、C-typeの3つに分類できる。2つあるA-type 3R-Myb遺伝子の二重破壊株では、胚発生の初期に胚柄と胚の区別が不明瞭になり、胚全体が胚柄様の分裂パターンを示す。この表現型は胚の頂端基部軸に沿った極性を形成に不全があることを意味している。また、この変異体はサイトキネシスにも欠損を示す。胚の極性形成の異常は、不完全なサイトキネシスの結果、娘細胞との間の区画化が不完全となり、極性形成に関わる物質(例えばオーキシン)の濃度勾配を形成できなかったためであると解釈できる。一方、C-type 3R-Myb遺伝子二つを破壊した株では、サイトキネシスには欠損を示さないが、胚の極性の異常を示したことから、胚の極性の異常とサイトキネシスの異常とは遺伝学的に分離可能であり、それぞれが3R-Mybの欠失による独立の表現型であると考えられる。胚の極性形成の異常はオーキシン信号伝達因子(ARFやIAA)やオーキシン排出キャリア(pin)の欠失により特徴的に生じる表現型であるので、3R-Mybの転写制御の標的遺伝子が何らかの形でオーキシンと関連していると考えられる。遺伝子破壊株と野生型シロイヌナズナの間で網羅的に遺伝子発現を比較することにより、3R-Mybの標的遺伝子を同定できれば、3R-Mybがどのように初期胚の極性形成に関わっているかを明らかにできると考えられる。本研究では以下の二つの発見に基づき、細胞周期G2/M進行の制御機構とオーキシンの増殖促進作用との関連を探るものである。(1)G2/M期に特異的に発現が起こる遺伝子のプロモーター領域にはMSAエレメントと名付けた周期依存的転写に必要十分なシス配列が存在することを明らかにしているが、このようなG2/M期遺伝子の多くにMSAエレメントに加え、オーキシン応答性転写に関わるシスエレントAuxREが存在することがわかった。(2)プロモーター領域に繰り返しMSAエレメントを持つ遺伝子を検索したところ、AuxREに結合する転写因子ARF(auxin response factor)やIAAなどオーキシン応答的転写に関わる因子が同定された。これらの発見はオーキシンシグナル伝達と、細胞周期G2/M期制御との間の関連を示唆している。本研究は2年計画の課題であるため、本年度の進行分を以下に示す。プロモーター領域にMSAエレメントが認められたARF遺伝子の転写開始点を決定したところ、MSAエレメントは予想通り、転写開始点の近傍に存在していることがわかった。このARF(ARF9)のプロモーター領域はタバコ培養細胞BY2に導入するとG2/M期に活性の上昇が見られたため、この遺伝子は実際にMSAエレメントによるG2/M期転写制御を受けていることが明らかになった。またシロイヌナズナに存在するARF9によく似た二つのARF遺伝子に関しても同様のことが明らかになった。また細胞周期中の転写産物量の変動を網羅解析するための準備を行った。一方、G2/M期遺伝子のプロモーター領域に存在するAuxREの働きは、AuxRE配列への変異の導入や優勢型IAAタンパク質の発現によりプロモーター活性がどのように影響されるか調べることにより明らかにする予定である。今年度はプラスミド構築等の準備を行った。これらは次年度の解析に使用する予定である。

遺伝子破壊株と野生型シロイヌナズナの間で網羅的に遺伝子発現を比較することにより、3R-Mybの標的遺伝子を同定できれば、3R-Mybがどのように初期胚の極性形成に関わっているかを明らかにできると考えられる。
植物プランクトンの遷移に関与する化学物質の検索・同定

珪藻Skeltonema costatumを試験生物とし、迅速かつ少量で増殖抑制活性が測定できる試験法を確立することにより、原因化学物質の追求が可能となった。この方法を指標に、有明海等で赤潮を形成する大型珪藻Rhizosolenia setigeraの培養液に認められた活性物質の構造解析を実施した。培養液250LからXAD2を使って固相抽出した各分を2段階の逆相クロマトグラフィーで精製し、複数認められた活性成分のうち1成分5.5mgを単離した。MS及び各種NMRスペクトルを解析し、分子量266、分子式C_<16>H_<26>O_3の(6Z,9Z,11E)-13-hydroxyhexadecatrienoic acidと決定した。この物質は先にChattonalla溶藻成分として同定した脂肪酸16:3(n-4)の水酸化物であり、酸化によって生成すると推測される。さらに他の活性成分も類似構造である可能性が高い。本化合物は6.3μg/mLの濃度でS.costatumの増殖を抑制し、起源と推定される遊離脂肪酸の5倍高い活性を示した。市販の飽和・不飽和脂肪酸およびその水酸化物について珪藻増殖抑制活性を比較したところ、炭素数が増え不飽和度が高くなるほど活性は強くなる傾向があった。さらに水酸化物はその酸化前駆体の脂肪酸と比較して3500倍という非常に強い活性を示した。なお、関連化合物を含め、LC/MSによる高感度分析条件を設定し、これらの化合物の生成機構、環境における機能評価への道を拓いた。1)赤潮生物の珪藻増殖抑制物質の検索他種間の作用物質の検索する目的で、香川県赤潮研究所から譲渡された赤潮形成藻8種について、抽出物及び培養濾液の他種に対する影響を調査した。多くの藻類がラフィド藻Chattonella antiquaを溶藻する活性を示したが、特に渦鞭毛藻Heterocapsa cirularisquamaが高い活性を示した。本種を大量培養し、C. antiqua溶藻活性を指標に各種クロマトグラフィーを用いて活性成分を精製して単離した。遅効性、速効性の活性発現速度の異なる2群の物質を生産しており、前者4成分、後者4成分を0.34.0mg単離した。NMR, MSスペクトルデータの解析から、成分1-4は脂肪酸の異なるガラクトシルモノアシルグリセロール、成分5-8は脂肪酸の異なるスルホキノボシルモノアシルグリセロールと決定した。また、得られた成分は構成脂肪酸の8倍以上の溶藻活性を示した。本種は一般種では増殖阻害がおこるpH9付近で至適増殖を示し、培養中に自ら培地pHを上昇させることが明らかにされている。大量培養を行い、培養液中に放出される有機塩基物質の検索を行い10数種の物質を同定したが、いづれも極微量であり、pHの上昇を説明するものではなかった。他渦鞭毛藻と比べて急速に培地中の硝酸イオンを消費することが明らかになり、これが原因であると推定した。1)微細藻の他生物増殖抑制物質の検索他種間の作用物質の検索する目的で、赤潮形成珪藻8種の培養藻体抽出物及び培養濾液について培養藻及びアルテミアに対する影響を調査した。多くの種が活性を示したが、特にRhizoxoleniasetigeraがラフィド藻Chattonella antiqua及び珪藻Skeltonema costatumに対して高い活性を示した。また、珪藻Pseudo-nitzschia pungensがアルテミアに対する経口毒性を示した。80LのR.setigera培養藻体からC antiqua溶藻活性を指標に逆相分配系のカラムクロマトグラフィーで精製を行い、710ppmで活性を示す4成分を単離した。NMR,Msの解析から、いずれも遊離脂肪酸のDHA,EPA,(6Z,9Z,12Z)-hexadecatrienoic acid, palmitoleic acidと判明した。含量と活性から推定して天然で問題を起こすとは考えにくいが、類縁脂肪酸について調べたところ1/10以下の活性しか示さず、今回単離された脂肪酸が顕著に強い活性を示すという興味有る結果が得られた。珪藻S.costatumに対する増殖抑制を短時間で測定するシステムを開発し、A.catenellaの培養路液が有為に珪藻の増殖を抑制することを発見した。多数の化学物質が関与することが推定され、その内、脂溶性の1成分を単離した。現在、機器分析により構造を解析中である。

本化合物は6.3μg/mLの濃度でS.costatumの増殖を抑制し、起源と推定される遊離脂肪酸の5倍高い活性を示した。市販の飽和・不飽和脂肪酸およびその水酸化物について珪藻増殖抑制活性を比較したところ、炭素数が増え不飽和度が高くなるほど活性は強くなる傾向があった。さらに水酸化物はその酸化前駆体の脂肪酸と比較して3500倍という非常に強い活性を示した。なお、関連化合物を含め、LC/MSによる高感度分析条件を設定し、これらの化合物の生成機構、環境における機能評価への道を拓いた。
気泡塔型紫外線リアクターによる揮発性有機塩素化合物汚染ガスの分解処理

揮発性有機塩素化合物(CVOC)は脱油脂やドライクリーニングなど幅広い分野で使われている。これまで、使用後のCVOCを適切に処理してこなかったため、CVOCが土壌や地下水中に混入してしまい、世界的な環境問題の一つとなっている。CVOCガスを直接、光触媒反応によって酸化分解すると、多くの有害な副生成物が生成し、完全に無害化することはできない。一方、地下水についても光触媒反応を利用してCVOCの分解が試みられているが、地下水中に含まれているミネラル分がヒドロキシラジカルのスカベンジャーとして作用するため、効率が上がらない。そこで、申請者は、CVOCガスを脱イオン水へ移動させ、UVランプを備えた気泡塔型紫外線リアクター内で過酸化水素の助けを借りて分解する手法を提案した。この手法における最大のメリットは、リアクター内のCVOCがUVランプからの光子や、気液界面ならびにバルク液相でのヒドロキシラジカルと反応できるため、高速かつ副生成物の少ない分解処理が可能になる点である。前年度までの研究により、水中に含まれるCVOCの濃度に応じた最適な過酸化水素添加量が存在することが示された。本年度は、UVランプのエネルギーコストと過酸化水素の消費コストのバランスを考えたコスト計算法を構築した。これによって、水中に含まれるCVOCの濃度が与えられると、コストを最小限に抑えることのできる過酸化水素の濃度ならびにUVランプの必要エネルギー量が計算でき、最適なリアクター設計を行うことが可能である。一方、気泡塔型リアクターを設計する上でガスの容量係数を求めることは必要不可欠である。しかしながら、ガスの混合状態が不確定であるため、容量係数を正確に求めることは難しいとされてきた。本研究では、過酸化水素の分解によって酸素が生じることを利用し、そのマスバランスから簡便に容量係数を求める新たな手法を構築した。これまで,使用後のCVOCを適切に処理してこなかったため,CVOCが土壌や地下水中に混入してしまい,世界的な環境問題の一つとなっている。CVOCガスを直接,光触媒反応によって酸化分解すると,多くの有害な副生成物が生成し,完全に無害化することはできない。一方,地下水についても光触媒反応を利用してCVOCの分解が試みられているが,地下水中に含まれているミネラル分がヒドロキシラジカルのスカベンジャーとして作用するため,効率が上がらない。そこで,申請者は,CVOCガスを脱イオン水へ移動させ,UVランプを備えた気泡塔型紫外線リアクター内で分解する手法を提案した。この手法における最大のメリットは,リアクター内のCVOCがUVランプからの光子や,気液界面ならびにバルク液相でのヒドロキシラジカルと反応できるため,高速かつ副生成物の少ない分解処理が可能になる点である。本研究では,上記リアクター内における物質移動およびCVOCガス分解の速度論的解析を行い,装置設計や操作条件の最適化を行った。本年度は各種センサーを備えた気泡塔型紫外線リアクターの作製を行い,次に空隙率分布の影響を確認するために,UVランプの近傍に局所的に気泡が集中するような多孔質板,およびUVランプの周りに均一に気泡が生成するようなリングタイプの散気板を用いて実験を行った。その結果,まず,UVランプ近傍の空隙率の分布を特殊な導電率プローブを用いてオンラインでモニタリングすることに成功した。また,空隙率の分布が反射・散乱などの効果により光の吸収に影響を与えることを明らかにした。
複素双曲空間に作用するPU(l,n,c)の離散部分群の研究

1、複素双曲空間に作用するユニタリ群PU(1,2 ; C)のHeisenbergtranslationを持つ部分群の離散性についてBasmajianとMinerはstable basinという概念を導入して論じた(Inv.Math.131,85-136(1998))。一方、Parkerは、メビウス変換群において有名な清水の補題の一般化を行なった(Math.Z.225,485-505(1997))。両者の間の関連を明らかにすることが問題となった。PU(1,2;C)の元のdistortionに関する性質等を導きそれらを用いてまずBasmajian-Minerのstable basinに関する結果を拡張した。この結果を使いBasmajian-Minerの離散性が判定できる領域をより大きくすることにより彼等の定理を拡張した。次にこの結果が上記のParkerの定理から導きうることを証明した。1、複素双曲空間に作用するユニタリ群PU(1,2 ; C)のHeisenberg translationを持つ部分群の離散性についてBasmajianとMinerはstable basinという概念を導入して論じた(Inv.Math.131,85-136(1998))。1.離散群の研究において2つの元により生成される群の離散性の判定は重要である。複素双曲空間に作用するPU(I,2;C)においてHeisenberg translationを含む部分群が離散的かどうかの判定についてParkerは、メビウス変換群における清水の補題の一般化としてisometric sphereの半径とisometric sphereの中心のHeisenberg translationによって動かされる距離との関係を用いて論じた。一方、BasmajianとMinerは、Stable Basinという概念を導入し離散性を議論した。神谷は、まずBasmajian、MinerによるStable Basin Theuremを拡張し、Parkerの定理を用いることによりBasmajian、Minerの結果が導きうることを示した。2.Goldmanの定義したPU(I,n;C)の元fのisometic sphereの概念をSiegel領域の任意の境界点yに対するgeneralized isometric spherely(f)に拡張しその性質を議論した。Gをyおよびαにおけるstability subgraupがideutityのみよりなるPU(I,n;C)の離散部分群とする。このときGの元のgeneralized isometric spheresの外部の交わり、すなわち∩f∈G-lidyExtIy(f)(これをPy(G)とおく)は、Gの基本領域となり、Dirichlet領域Dz(G)はz→yのときこのPy(G)に収束することを示した。1、複素双曲空間に作用するユニタリ群PU(1,2;C)のHeisenberg translationを持つ部分群の離散性についてBasmajianとMinerはstable basinという概念を導入して論じた(Inv.Math.131,85-136(1998))。
SGAモデルマウスを用いた生活習慣病発症予測マーカーの開発

SGA児は、在胎週数に比して出生体重が小さい児で、そのほとんどは低出生体重児となる。低出生体重児は、成人期にメタボリック症候群、さらに高脂血症、糖尿病、高血圧などの生活習慣病を発症するリスクが高いことが明らかになっている。SGA・低出生体重児は、子宮内で低栄養に曝露されその環境に適合するための体質変化が生じその後の生活習慣病の発症に関連するため、子宮内からの発症が実際のヒト臨床に近い。本研究の目的は、子宮内虚血により発症するSGA・低出生体重モデルマウスが将来的に生活習慣病(糖・脂質代謝異常)を発症するかどうかを明らかにし、生活習慣病の病態解明のためのモデルマウスを開発することである。
消費者信用法制の新段階の検証―法規制の態様・存在形式・内容の総合的検討の試み―

本年度は国内における研究会を2回実施し、海外調査を1回実施した。1回目の国内研究会では、本プロジェクトにおける代表者の問題意識をより明確化するための報告を代表者から行った。そこでの意見交換により、本計画の総論・基礎理論部分の課題は重要であり各論で予定されたトピックにとどめない検討を行うべきこと、また、消費者信用などの各論部分のトピックの検討を進めるにあたって総論の問題を意識すべきことについての了解が得られた。総論的・基礎理論的トピックとは、1消費者法の価値基準論、2行動経済学の位置づけと法学における活用のあり方、3法の存在形式論・法実現主体論、4私法の手段化を踏まえた公法との関係、5事前評価・事後評価という問題である。また、行動経済学の消費者法への影響がEUでは著しいため、EU海外調査を本年度実施することで一致した。11月に行われた海外調査では、ベルギー・カトリックルーヴァン大学教授Anne-Lise Sibonyとイギリス・ウォーリック大学教授Christian Twigg-Flesnerにインタビューを行い、EU消費者法の目的や行動経済学の利用について有益な情報を得るとともに、本プロジェクトとの継続的学術交流を約束され、かつSibony教授の注目すべき業績について完全翻訳の許諾を得た。翻訳とインタビューの成果は2019年度中に公表を予定している。第2回目の国内研究会では、本研究の総論および各論(消費者信用中心)部分にかかわる各自の研究について、企画報告を行い、方向性について全員の了解を得た。各自の報告を代表者が企画化することにより、学術雑誌への連載という形で、成果の公表とプロジェクト外の研究者との意見交換を進めようと考えた。すでに、企画案の提示により学術雑誌からは連載の承諾を得ている。なお、代表者および分担研究者による関連する論稿の公表も随時行われている。国内研究会において有益な意見交換・議論ができた成果として、2018年度は当初の研究計画よりも早いペースで研究を進展できたものと考える。まず、2018年度に、代表者の発案に対する分担研究者の精力的な協力の下、海外調査を実施することができ、EUの消費者法プロジェクトにおいて国際的に著名な2名の研究者の継続的学術協力を得られることとなり、EUの消費者立法と行動経済学との関係など、本プロジェクトにとって有益な示唆を得ることができた。本調査からの発展として国際シンポが2019年度に予定されている。また、代表者の発案に対し、分担研究者がペーパーベースで企画案を出し討論するという形式をとったことにより、研究成果の公表に向けてのロードマップを1年目の段階で具体化および詳細化することができた。1年目の段階で、学術雑誌の編集委員会に企画案を審査いただき、この段階で、連載の許諾を得ることができているのは、研究のかなり順調な進捗を示しているものと考える。1年目の段階で、研究成果の公表に向けてのロードマップを具体化・詳細化できたため、研究の水準を高めるべく、研究会での討論を経たうえでの、成果の公表というプロセスを実施していく。具体的には、2年目の後半から3年目の前半にわたる形で、研究会での討論を経た各研究者の研究を学術雑誌に公表し、外部研究者・実務家・行政官との意見交換や評価を得る段階に入っていく予定である。本研究は、学術的および理論的に水準の高い研究成果を目指すとともに、消費者立法という実務の側面にフィードバックすることを目的としているので、研究者のみならず、実務家・行政官らと意見交換するという段階を実現したいと考えている。また、初年度に継続的学術協力を得られることとなった海外の研究者と国際シンポを開催することによって、シンポにおける意見交換も予定している。

国内研究会において有益な意見交換・議論ができた成果として、2018年度は当初の研究計画よりも早いペースで研究を進展できたものと考える。まず、2018年度に、代表者の発案に対する分担研究者の精力的な協力の下、海外調査を実施することができ、EUの消費者法プロジェクトにおいて国際的に著名な2名の研究者の継続的学術協力を得られることとなり、EUの消費者立法と行動経済学との関係など、本プロジェクトにとって有益な示唆を得ることができた。本調査からの発展として国際シンポが2019年度に予定されている。また、代表者の発案に対し、分担研究者がペーパーベースで企画案を出し討論するという形式をとったことにより、研究成果の公表に向けてのロードマップを1年目の段階で具体化および詳細化することができた。1年目の段階で、学術雑誌の編集委員会に企画案を審査いただき、この段階で、連載の許諾を得ることができているのは、研究のかなり順調な進捗を示しているものと考える。1年目の段階で、研究成果の公表に向けてのロードマップを具体化・詳細化できたため、研究の水準を高めるべく、研究会での討論を経たうえでの、成果の公表というプロセスを実施していく。具体的には、2年目の後半から3年目の前半にわたる形で、研究会での討論を経た各研究者の研究を学術雑誌に公表し、外部研究者・実務家・行政官との意見交換や評価を得る段階に入っていく予定である。本研究は、学術的および理論的に水準の高い研究成果を目指すとともに、消費者立法という実務の側面にフィードバックすることを目的としているので、研究者のみならず、実務家・行政官らと意見交換するという段階を実現したいと考えている。また、初年度に継続的学術協力を得られることとなった海外の研究者と国際シンポを開催することによって、シンポにおける意見交換も予定している。
イネ白葉枯病菌の病原性関連遺伝子群hrpにおける糖依存的な新規発現制御機構の解明

白葉枯病菌の最重要病原性関連遺伝子群の1つであるhrp遺伝子群の発現はキシロース存在下で誘導されることが知られていたが、その機構については不明であった。本研究では、転写抑制因子XylRがキシロース存在下におけるhrp遺伝子群の発現制御因子であるHrpXの高蓄積とそれに伴うhrp遺伝子群の高発現を誘導することを見出した。さらにXylRはキシロース代謝関連遺伝子群の負の制御因子として機能することも明らかにした。XylRは制御する遺伝子の上流に存在する配列(シス因子)に結合することでその下流の遺伝子の転写を抑制するが、キシロース存在下ではシス因子から解離することで、その遺伝子の転写を可能にする。以上のことから、XylRはイネ葉内において、キシロースを細菌増殖のための栄養として利用すると同時に、病原力遺伝子群hrpの発現誘導因子としても利用していることがわかった。一方、転写抑制因子であるXylRのHrpXの蓄積抑制に関しては、XylRが直接制御する因子、およびそれに制御されるタンパク質分解酵素と予想される因子の、少なくとも2つの因子が介在することを予想した。本年度は、キシロース代謝に関わるキシロースイソメラーゼおよびキシルロキナーゼ(それぞれキシロース→キシルロース→キシルロース5リン酸を触媒する)の欠損がhrp遺伝子群の発現に影響しないことを明らかにした。これは、キシロース代謝経路はhrp遺伝子群の発現に関与しないこと、およびXylRがキシロース自体を認識し、ターゲット遺伝子の制御を行うことを示している。また、XylRの結合するシス因子をもつ6つの遺伝子について、それらすべてについて欠損株を作出したが、いずれもhrp遺伝子群の発現は確認できておらず、XylRに制御され、HrpXの蓄積制御に関わる因子の同定には至っていない。その同定と機構解明については現在も取り組んでいる。イネ白葉枯病菌の病原性には、hrp遺伝子群の感染特異的な発現とその産物によるIII型タンパク質分泌装置の構築、およびそれを介した機能性タンパク質群の植物細胞内への分泌が必須である。申請者は既に、キシロース存在下、あるいは負の転写制御因子であるXylRの欠損条件下でHrpXの蓄積増加とそれに伴うhrp遺伝子群の発現増加が見られることを見出してきた。本結果は、HrpXの分解制御に関わる未知プロテアーゼ(A)、およびXylRにその発現を負に制御され、未知プロテアーゼの発現(あるいは活性)抑制に関わる未知因子(B)の存在を示唆している。このような背景をもと、本細菌におけるhrp発現制御ネットワーク、さらには感染過程における「糖」の重要性、とくに糖依存的なHrpXの量的制御機構の解明を目的として開始した本申請課題において、これまでに以下の知見を得た。(1) XylRはhrp遺伝子群の発現のほか、キシロース代謝に関わる遺伝子群の負の制御因子として機能する。(2) XylRは、被制御遺伝子上流のモチーフ配列に結合し、その遺伝子の発現を抑制する。またキシロースの代謝産物であるキシルロース存在下ではXylRのモチーフ配列からの解離により、その下流の遺伝子発現が誘導される。(3)ゲノム解析の結果、本細菌にはXylR結合モチーフを上流にもつ遺伝子が6つ存在し、それらはすべてXylRにより発現制御されることを明らかにした。これらの中には、XylRにより直接制御され、HrpXの量的制御に関わる上記未知因子(B)が含まれると予想される。(4)トランスクリプトーム解析の結果、XylR存在下で発現誘導され、その産物が細胞質内に局在すると予想されるプロテアーゼ遺伝子が8つ存在することを明らかにした。これらの中には、HrpXの分解(蓄積抑制)に関わる上記未知プロテアーゼ(A)が含まれることも予想される。(1)申請時に計画していたXylR(申請書にはSalRと表記。その機能および既報の研究によりXylRと改名)の機能解析の結果、被制御遺伝子上流領域への結合、およびそのモチーフ配列とDNAからの解離に関わるリガンドの同定を行うことができた。また、XylRがhrpの発現制御だけでなく、キシロース代謝に関わる遺伝子群の発現制御に関わることを明らかにすることができた。(2) XylR制御下にあり、HrpXの量的制御に関わると予想されるプロテアーゼについて、その同定には未だ至っていないが、トランスクリプトーム解析の結果、その候補として8つのプロテアーゼ遺伝子を見出すことができた。(3) XylRに直接制御され、未知プロテアーゼの発現あるいはその活性を抑制することが予想される未知因子について、ゲノム情報からのモチーフ検索、およびトランスクリプトーム解析の結果、その候補を6つ見出すことができた。また、並行して行ったトランスポゾンタギング法では、約2500株の変異体の解析により、hrpの発現制御に関わる遺伝子候補を15個得た。これらについてはXylR制御下には無いことが明らかとなったが、白葉枯病菌のhrp遺伝子群の発現制御に関わる新規因子として今後併せて解析を進める予定である。イネ白葉枯病菌の病原性には、hrp遺伝子群の感染特異的な発現とその産物により構築されるIII型分泌装置を介した機能性タンパク質群の植物細胞内への分泌が必須である。hrp遺伝子群の発現はキシロース存在下で誘導され、また、本遺伝子群は制御因子HrpXにより活性化されることがわかっているが、我々はこれまでにキシロース代謝に関連する遺伝子群の発現を負に制御する転写抑制因子

XylRが、HrpXの蓄積抑制(HrpXの分解)に関わること、そして、キシロース存在下ではXylRの不活化により、キシロース代謝関連遺伝子群の発現とともにHrpXの蓄積、およびそれに伴うhrp遺伝子群の発現を導くことを明らかにしており、本年度はこの結果をまとめ、論文として発表した。また、XylR欠損株のイネに対する病原性について調べたところ、野生株と顕著な差は認められなかった。キシロース(およびその重合体のキシラン)はイネの細胞壁の主成分であることが報告されている。したがって、十分量のキシロースの存在のため、本来イネ葉内ではXylRは不活化されており、そのためXylRの有無にかかわらず十分なhrp発現が生じうるためと考えられた。一方、キシロースの代謝産物がhrp遺伝子発現に関与している可能性も考えられたが、キシロース代謝に関わる遺伝子を破壊した変異株でのhrp遺伝子の発現は野生株と同様であり、hrp遺伝子群の発現制御にキシロース代謝系は関与しないことが明らかとなった。キシロース依存的なhrp発現制御に関わる新規因子を同定するためにトランスポゾンタギング法を実施したところ、新たなhrp制御因子としてXOO0590を得た。本タンパク質は本課題の主目的であるHrpXのキシロース依存的な蓄積増加に関わる因子とは異なり、もう一つのhrp制御因子であるHrpGの発現を制御する新規転写制御因子であることがわかった。本年度は、XylRによるHrpXの蓄積抑制を介在する因子の同定を中心に実施した。その結果、これまでにXylRが直接制御する遺伝子(群)が少なくとも6つ存在することを明らかにすることができたが、それらのうち、hrp遺伝子の発現に直接関与する因子の同定に未だ至っていない。白葉枯病菌の最重要病原性関連遺伝子群の1つであるhrp遺伝子群の発現はキシロース存在下で誘導されることが知られていたが、その機構については不明であった。本研究では、転写抑制因子XylRがキシロース存在下におけるhrp遺伝子群の発現制御因子であるHrpXの高蓄積とそれに伴うhrp遺伝子群の高発現を誘導することを見出した。さらにXylRはキシロース代謝関連遺伝子群の負の制御因子として機能することも明らかにした。XylRは制御する遺伝子の上流に存在する配列(シス因子)に結合することでその下流の遺伝子の転写を抑制するが、キシロース存在下ではシス因子から解離することで、その遺伝子の転写を可能にする。以上のことから、XylRはイネ葉内において、キシロースを細菌増殖のための栄養として利用すると同時に、病原力遺伝子群hrpの発現誘導因子としても利用していることがわかった。一方、転写抑制因子であるXylRのHrpXの蓄積抑制に関しては、XylRが直接制御する因子、およびそれに制御されるタンパク質分解酵素と予想される因子の、少なくとも2つの因子が介在することを予想した。本年度は、キシロース代謝に関わるキシロースイソメラーゼおよびキシルロキナーゼ(それぞれキシロース→キシルロース→キシルロース5リン酸を触媒する)の欠損がhrp遺伝子群の発現に影響しないことを明らかにした。これは、キシロース代謝経路はhrp遺伝子群の発現に関与しないこと、およびXylRがキシロース自体を認識し、ターゲット遺伝子の制御を行うことを示している。