hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ニュ-カッスル病ウイルス糖蛋白の三次元構造と機能の解明

1991年に九州でニワトリから分離されたニュ-カッスル病ウイルス(NDV)2株、同年に北海道で渡り鳥の集合湖沼の1つである宮島沼の水から分離されたNDV1株ならびにアラスカのカモおよびガンの糞便から分離されたNDV62株の抗原性と毒力を検討した。ニワトリ由来の2株および沼水由来の1株の抗原性はNDV標準株とほとんど同一であった。これら3株は何れも強毒で、驚くべきことに、沼水から得られたNDVが最も強い毒力を示した。アラスカの水會由来株は抗原性に基づいて3群に大別された。うち10株は強毒で、何れもワクチン株と異なる抗原性を示した。以上の成績は渡り鳥がNDVを維持、運搬、散布していること、さらにワクチン株と異なる抗原性のNCVが家會に導入され得ることを示唆している。粘膜感染病に対する免疫の強化法の確立に資するため、不活化NDVおよびこれにポツリヌス毒素あるいは百日咳菌線毛の血球凝集素を添加したワクチンを異なる経路でラットおよびニワトリに接種して、免疫賦与効果を比較した。鼻腔内あるいは腸管内にワクチンを接種した動物においても、呼吸器および腸管の両粘類にIgA抗体産生細胞の活性化が認められた。この成績はNDの経口ワクチンの有効性を示唆している。免疫原の構築およびキャリア-の検討ならびに感染防御試験を継続している。NDV糖蛋白の三次構造の解明のため、HNおよび下蛋白を精製し、可溶化する条件を確立した。精製HN標品をαーキモトリプシンで消化することによって、疎水性部分を欠く、分子量65Kの可溶性産物を得た。これにポリエチレングリコ-ルと高モル濃度の燐酸緩衝液を加え、hanging drop法で結晶化を試みた。2週間で微細な方式結晶が形成された。X線回析に供し得る結晶に成長させる条件を検討中である。
リソソーム内腔のイオン動態に着目した神経型Gaucher病の病態研究

Gaucher病の原因であるβ-glucocerebrosidaseの活性低下とパーキンソン病との関連性が注目されてきた。しかし、前者によるリソソーム内腔のイオン動態異常とパーキンソン病様症状の発症および進行過程を結びつける知見は存在しない。本研究は、Gaucher病で観察されるパーキンソン病様症状とリソソーム内腔のイオン動態の連関を明らかにすることを目的としている。本研究では、パーキンソン病様症状の発症および進行とリソソーム内腔のイオン環境との連関を明らかとし、リソソーム内腔のイオン環境を調節する因子が神経型Gaucher病の新たな治療ターゲットとなりうることを示す。
25(OH) vitamin Dによるlipid raft機能調節機構の検討

我々は本研究で25-hydroxyvitamin D[ 25(OH) D]が、1, 25-dihydroxy vitamin D[ 1, 25(OH)_2D]に変換されることなく、直接的生理作用を発揮することを明らかにした。その機序として、25(OH) DのビタミンD受容体(VDR)への直接作用だけではなく、25(OH) Dによるlipid raft機能調節が関与していることを示し、その治療応用への可能性を示した。我々は、25-hydroxyvitamin D (25(OH)D)の培養血管内皮細胞に対する作用を検討した。その結果、25(OH)D投与後10分以内にeNOSのSer 1177のリン酸化が上昇し、Thr 495のリン酸化が低下した。また、この変化は25(OH)D濃度依存的であった。同培養細胞にはビタミンDの活性化酵素(CYP27B1)や、不活性化酵素(CYP24)は発現しておらず、投与した25(OH)Dが1,25(OH)2Dに変換されることなく、直接的に作用した事が示唆された。eNOSのSer 1177のリン酸化とThr495の脱リン酸化は、ともにeNOSによるNO産生を促進する変化であり、25(OH)Dのnon-genomic作用により、eNOSの活性化が生じていることが示された。ショ糖密度勾配を用いて血管内皮細胞よりlipid raftを精製し、eNOSの分布を確認したところ、25(OH)D投与によりeNOSの分布様式に変化が生じる事も明らかとなった。以上のことから、25(OH)Dがlipid raftに作用してeNOSの活性を制御している可能性が示唆された。同様の変化が生体内においても生じるか否かについて、動物での検討を進めている。通常の動物に25(OH)Dを投与すると、腎CYP27B1により1,25(OH)2Dに変換され、得られた結果が25(OH)Dによるものか1,25(OH)2Dによるものか不明となるため、CYP27B1ノックアウトマウスを用いて1,25(OH)2D産生ができない状態で、さらなる検討を進めている。我々は、25-hydroxyvitamin D(25(OH)D)の培養血管内皮細胞に対する作用を検討した。同細胞に25(OH)Dを投与すると、10分以内にeNOSのSer1177のリン酸化が上昇し、Thr 495のリン酸化が低下した。同細胞にはビタミンDの活性化酵素(CYP27B1)や、不活性化酵素(CYP24)は発現しておらず、投与した25(OH)Dが1,25(OH)2Dに変換されることなく、直接的に作用した事が示唆された。eNOSのSer1177のリン酸化とThr495の脱リン酸化は、ともにeNOSによるNO産生を促進する変化であり、25(OH)DによりeNOSの活性化が生じていることが示された。ショ糖密度勾配を用いて血管内皮細胞よりlipidraftを精製し、eNOSの分布を確認したところ、25(OH)D投与によりeNOSの分布様式に変化が生じる事も明らかとなった。以上のことから、25(OH)Dが1ipidraftに作用してeNOSの活性を制御している可能性が示唆された。同様の変化が生体内においても生じるか否かについて、動物での検討を進めた。通常の動物に25(OH)Dを投与すると、腎CYP27B1により1,25(OH)2Dに変換され、得られた結果が25(OH)Dによるものか1,25(OH)2Dによるものか不明となるため、CYP27B1ノックアウトマウスを用いて1,25(OH)2D産生ができない条件下で検討し、培養細胞と同様の結果を得つつあった。また同ノックアウト動物を用い、25(OH)Dが腎臓レニン産生を直接抑制することを見いだし、25(OH)Dに直接的な多面的作用があることを明らかにした。
メタ言語能力が英語学習における動機づけ・学習方略・習熟度に与える影響について

本研究の目的は、メタ言語能力と外国語(英語)学習における個人差変数との関連を検討することである。当該年度は出産・育児のため7月から1月まで研究中断しており、5ヶ月のみの研究実施となった。一昨年度・昨年度に実施したTime1・Time2・Time3・Time4のデータを統合し、分析を進めた。このデータとは、一昨年度4月・5月時(Time1、対象:中学1年生)、10月・11月時(Time2、対象:中学1年生)、昨年度4月・5月時(Time3、対象:中学2年生)、10月・11月時(Time4、対象:中学2年生)に実施した縦断調査で収集したものである。調査項目は、メタ言語能力テスト、および英語学習における学習意欲・動機づけ・学習方略・習熟度であった(Time1では習熟度はなし)。具体的には、各変数(学習方略、動機づけ、習熟度)に対するメタ言語能力(Time1)の影響を相関分析・回帰分析により明らかにするとともに、各変数の発達の相互作用を検討中である。なお、過去年度に実施した認知カウンセリングという手法を用いた質的調査のデータに関しても分析を進めている。インタヴュー・発話思考法と同様の方法で収集した発話データ・自由記述データをコーディング・カテゴリ化し、内容分析を中心に行っている。さらに、小学生の言語活動に関する著書(今年5月に出版予定)のプロジェクトに著者の一人として参加しており、現在は原稿執筆を終え、校正の段階に入っている。この原稿は、言語学の基礎的理論の教授が中学生の個人差変数に与える影響を明らかにすることを目的とする研究を元にしている。この研究では、通常、理論言語学は大学以上でしか扱われないが、言語学の教授は中学生の言語学習にとっても良い効果が得られるということが明らかになった。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。メタ言語能力と外国語(英語)学習における個人差変数との関連を検討することを目的として、中学一年生を対象に4月・5月にメタ言語能力テスト、および学習意欲・動機づけを測定する質問紙調査を実施した(Time1)。分析の結果、体系的な英語学習開始時においてはメタ言語能力と学習意欲・動機づけの間には明確な関連性がないということが明らかになった。参考としての2年生・3年生のデータにおいては、メタ言語能力と動機づけとの間には統計的に有意な相関がみられたことから、学習が進むにつれてメタ言語能力の影響が強くなってくる可能性あると考えられる。Time2以降、外国語学習に対するより明確なメタ言語能力の影響がみられることが示唆される。10月・11月にかけてTime2の調査として、Time1の調査項目に学習方略を加えてデータを収集した。また、修士論文の研究結果と上記のTime1の結果をもとに、メタ言語能力テストを開発した。先行研究における日本語メタ言語能力テストは信頼性・妥当性の検証が不十分なまま採用されているものがほとんどであった。しかし、本研究では信頼性・妥当性を実証的に検討しつつメタ言語能力テスト作成を試みており、その点で国内の今後のメタ言語能力研究に大きく貢献するものだと考えられる。さらに実践研究では、言語学の基礎的理論の教授が中学生の個人差変数に与える影響を明らかにした。メタ言語能力、および言語に対する態度のうちの言語学習に対する有効性の認知に関して事後測定時に統計的に有意な上昇がみとめられた。通常、理論言語学は大学以上でしか扱われないが、言語学の教授は中学生の言語学習にとっても良い効果が得られるということが明らかになった。今年度は、メタ言語能力と外国語学習における個人差変数との関連を検討する縦断研究を開始するとともに、メタ言語知識の教示がメタ言語能力を含む言語学習における個人差変数に与える影響について検討し、論文にまとめた。4月・5月にメタ言語能力テスト、および学習意欲・動機づけを測定する質問紙調査を実施し(Time1)、10月・11月にかけてTime2の調査として、Time1の調査項目に学習方略を加えてデータを収集した。習熟度に関しては、調査協力校3校が共通して受験している全国模試の結果を開示してもらい、データを収集する予定であったが、その手続きが当初の予定よりも遅れている。しかし、今月中にはデータが開示される予定であり、研究遂行上大きな問題にはなっていない。メタ言語能力と外国語(英語)学習における個人差変数との関連を検討することを目的として中学1年生を対象に4月・5月にメタ言語能力テスト、および英語学習における学習意欲・動機づけ・学習方略・習熟度を測定する調査を実施した。これは、昨年度4月・5月時(Time1)、10月・11月時(Time2)に行った縦断調査の一部であり、第三時点(Time3)の調査となる。なお、習熟度に関しては協力校からのデータの開示が遅れたため、最終的な結果はまだ出ていないが、現在、昨年度収集したデータを統合して分析の最中であり、Time1・Time2の結果から学習が進むにつれてメタ言語能力の影響が強くなってくる可能性が示唆されている。名目上、8月以降研究は中断中であるが、本研究の目的上、データの収集時期を大幅にずらすことは望ましくないため、11月中にTime4の調査を実施する予定である。また、一昨年度おこなった実践研究の結果をまとめたものを論文として発表した。この研究は言語学の基礎的理論の教授が中学生の個人差変数に与える影響を明らかにすることを目的としていた。

メタ言語能力に関してのみ事後測定時に統計的に有意な上昇が認められていたが、さらに詳細な結果を得るべく効果量の算出などより詳細な分析を行った。その結果、その効果は小さいものの、言語学習(国語・英語とも)に対する有効性の認知に対してもポジティブな効果があるということが明らかになった。今年度は、昨年度開始したメタ言語能力と外国語(英語)学習における個人差変数との関連を検討する縦断研究を継続して行った。4月・5月に中学二年生を対象にメタ言語能力テスト、および英語学習における学習意欲・動機づけ・学習方略・学習観を測定する調査を実施した。習熟度に関しては、調査協力校が共通して受験している全国模試の結果を開示してもらい、データを収集する予定である。その手続き前に研究中断期間に入ってしまったが、データの開示に関しては約束をとりつけてあるので、研究遂行上大きな問題にはなっていない。また、一昨年度実施したメタ言語知識の教示に関する実践研究についてまとめた論文がJALT Conference Proceedings(JALT 2015・Focus on the Learner)に採択・刊行された。さらに、昨年度参加したディスコースレベルのメタ言語能力に関連する研究プロジェクトの結果をまとめ、2つの国際会議(9th International Conference on the Theory and Application of Diagrams・The 31th International Congress of Psychology)で発表した。これは図表を用いることによって、自分が産出する言語表現の構造の意識化をはかれるということを示唆するものであった。このプロジェクトは、本研究の一部ではないものの、今後本研究で使用する質問紙の作成に重要な示唆を与えるものであった。本研究の目的は、メタ言語能力と外国語(英語)学習における個人差変数との関連を検討することである。当該年度は出産・育児のため12月まで研究中断しており、1月から3月まで3ヶ月のみの研究実施となった。調査協力校の都合により、年度をまたいでとったデータの照合・整理に滞っている部分があるものの、研究計画の変更が必要なほど大きな支障にはなっていない。このデータとは、一昨年度4月・5月時(Time1、対象:中学1年生)、10月・11月時(Time2、対象:中学1年生)、昨年度4月・5月時(Time3、対象:中学2年生)、10月・11月時(Time4、対象:中学2年生)に実施した縦断調査で収集したものである。調査項目は、メタ言語能力テスト、および英語学習における学習意欲・動機づけ・学習方略・習熟度であった(Time1では習熟度はなし)。また、過去年度に実施したメタ言語能力テスト開発に関する研究の結果をまとめたものを国際誌Universal Journal of Educational Researchに論文投稿中である。さらに、小学生の言語活動に関する著書(近年中に出版予定)のプロジェクトに著者の一人として参加しており、鋭意原稿執筆中である。この原稿は、言語学の基礎的理論の教授が中学生の個人差変数に与える影響を明らかにすることを目的とする研究を元にしている。
FT-ラマン合光法による電解重合プロセスのin-situ計測と材料解析

ポリピロールを始とする導電性高分子薄膜の合成法として電解重合法が近年注目されている。材料の機能の向上を図る上では合成過程における分子種の構造変化を検討する必要があり、電解重合時の電極上の化学種の状態をin-situで解析することは極めて重要な課題である。この課題を解決する手段として、近赤外レーザーを励起光源とするFT-ラマン分光法を用い、電解重合プロセスのin-situ計測を可能とする測定系を構成した。電極上での重合反応過程を解析するには電極近傍に存在する極微量の化学種を検出することが必要となる。このことから、表面増強ラマン散乱(SERS)を利用した計測を行った。電極をSERS活性とするために、金、銀の電極を0.1MKCl水溶液中で酸化還元処理(ORC)することにより粗面電極とした。アニリンをモノマーとする電解重合でポリアニリンの生成をFT-SERSにより検討した。電位をパラメータとし、銀電極では、-0.3Vから+0.15V(vs.SCE)まで印加電圧を変化させてラマンスペクトルを測定した。従来のポリアニリンの合成は酸性溶液中で電位を+1.1V_<VA>.SCE程度に設定して行なわれている。このような条件下で白金電極上に合成したポリアニリンのスペクトルと比較すると、Nd:YAGレーザー照射条件下では+0.15Vとかなり低い電位で重合反応が進行することが分かった。このときレーザー光照射部位にのみ黒いスポットが観測された。このスポットの構造を赤外顕微鏡で測定した結果、ドープ状態のポリアニリンが生成していると同定できた。低い電位で重合が進行する原因として粗面電極の影響を検討した。電極として平滑な金板を用いた場合にも同様の結果が得られた。アニリンの電解重合は通常溶液を酸性(pH=12)として行なわれ、中性溶液では重合膜は生成しない。しかし、レーザー光照射下では中性(pH=6.7)溶液でもポリアニリンが生成することが分かった。
多剤耐性に寄与するP-糖タンパク質の発現の速さと量を規定する因子の同定

P-糖タンパク質(Pgp)の発現に差がある細胞を用いて、DNAマイクロアレイやタンパク質の網羅的解析を行い、がんの悪性化に関与しているNrf2及びKeap1について調べた。その結果、Pgpの発現が強いと、Keap1の発現は減少していた。Nrf2は、膜・オルガネラにおいてKeap1と同様に減少し、核では増加していた。一方、Pgpの発現が弱いと顕著にKeap1の発現が増加した。一般的にNrf2はKeap1と細胞質に共存しているが、K562細胞においては、Nrf2の細胞質での存在が確認されなかった。このことから、Pgpの発現にはKeap1-Nrf2制御系と新たな因子が存在する可能性が示唆された。ヒト由来骨髄性白血病細胞株であるK562細胞に抗がん剤であるDoxorubicin(DOX)を処置することで耐性細胞を作成したところ、薬物を処置する期間や濃度とは関係なく、P-糖タンパク質の発現は起きているという現象を見つけた。そこで、この現象を誘発する因子を同定するため、Pー糖タンパク質の発現量や期間に差があるK562細胞から、TOTALRNAを抽出し、セルイノベーターにDNAマイクロアレイ解析を依頼した。その結果、3種類の細胞で3000以上の遺伝子に発現の差が見られ、現在も解析中である。その中で、Pー糖タンパク質の発現量が多い細胞においてADPリボシル化因子に関係する遺伝子の発現が増加していた。そこで、ARF1とARF6の発現とこのタンパク質の活性化に関わるARF-GEP100をウエスタンブロットで解析したところ、P-糖タンパク質の発現量が多いときには、ARF6とARFーGEP100の発現の増加が見られ、Pー糖タンパク質の発現量が少ないとARF6とARFーGEP100の発現に変化は認められなかった。一方、ARF1の発現量に関しては、ARF6やARF-GEP100と違いP-糖タンパク質の発現量が多い細胞では変化が見られず、P-糖タンパク質の発現量が少ない細胞では、若干増加する傾向が見られた。このことから、ARF6やARF-GEP100がP-糖タンパク質の発現の安定化に関わっている可能性があるため、現在、ベクターを作成し、これらタンパク質をノックダウンさせ、P-糖タンパク質の発現量の変化や耐性への影響を検討中である。また、乳がん細胞株であるMCF-7や大腸がん細胞株であるHT-29を用いて耐性細胞を作成中で、同様の解析を行う予定である。P-糖タンパク質の速さや発現量を規定する因子を同定するため、P-糖タンパク質の発現量や期間に差があるK562細胞を可溶化し、タンパク質の網羅的解析(iTRAQ試薬とSWATH)を行った。その結果、ユビキチン関連酵素などが候補として上がってきた。最近、Keap1-Nrf2制御系は、生体の酸化ストレス防御機構において注目されている。Nrf2は、薬剤などの外来刺激によるストレスに対しても重要な防御因子であり、恒常的なNrf2の安定化は、がんの悪性化に関係していることが報告されている。このNrf2の機能を制御しているのがKeap1である。Keap1が、活性酸素種や毒物などのセンサーとして働くことから、P-糖タンパク質の発現においても深く関わっている可能性が考えられた。そこで、P-糖タンパク質の発現の違うK562細胞を用いてウエスタンブロットで検討しところ、P-糖タンパク質の発現量が多い細胞では、Keap1の発現の低下が認められた。これに対して、P-糖タンパク質の発現量が少ない細胞では、Keap1の発現量の低下が認められず、むしろ増加する傾向が確認された。そして、Doxorubicinを処置してもP-糖タンパク質の発現が認められない細胞においては、Keap1の発現量に変化は認められなかった。さらに、Keap1の分解は選択的オートファジーに必要なp62タンパク質が関与することが報告されている。そこで、p62タンパク質に対する抗体やリン酸化抗体を用いて解析したところ、変化は認められなかった。このことから、耐性細胞の発現には、Keap1-Nrf2制御系において新たなメカニズムが存在する可能性が示唆された。DNAマイクロアレイの解析に時間を要していること。また、網羅的プロテオミクスの解析するために、細胞の可溶化の条件検討に時間が必要だったこと。さらに、網羅的解析によって候補となる因子を絞り込めないかったことによる。そこで、P-糖タンパク質(P-gp)の発現の違うK562細胞を用いて、細胞成分分画を行い、Keap1とNrf2の発現を調べた。Keap1とNrf2は、細胞質画分に存在すると報告されているが、今回、K562細胞においては、Keap1は、細胞質と膜・オルガネラ画分に存在し、Nrf2は、膜・オルガネラ画分と核画分での存在が確認された。興味深いことに、P-gpの発現が強いと、Keap1の発現は減少していた。一方、Nrf2は、膜・オルガネラ画分においてKeap1と同様に減少し、核画分では増加していた。そして、P-gpの発現が弱いと細胞質画分において顕著にKeap1の発現が増加することが確認されたが、Nrf2は、ほとんど変化ないか、若干減少した。また、タンパク質の網羅的解析によりS26

プロテオソームが、耐性細胞において変化していることが確認されたため、プロテオソーム阻害剤であるMG-132を処置して、これらタンパク質の発現の変化を調べた。その結果、細胞質画分におけるKeap1の発現には、大きな変化はなかったが、膜・オルガネラ画分において、Keap1の減少は抑えられていた。一方、Nrf2は、膜・オルガネラ画分において、MG-132処置により全体的にその発現が減少していた。また、Nrf2は核画分において、MG-132処置によって大きな変化は見られなかった。さらに、p62の変動を調べたところ、細胞質画分では変化が見られなかったが、膜・オルガネラ画分において、MG-132処置により、P-gpの発現が強い細胞で増加していた。このことから、P-gpの発現には、Keap1-Nrf2制御系における新たな因子が存在する可能性が示唆された。P-糖タンパク質(Pgp)の発現に差がある細胞を用いて、DNAマイクロアレイやタンパク質の網羅的解析を行い、がんの悪性化に関与しているNrf2及びKeap1について調べた。その結果、Pgpの発現が強いと、Keap1の発現は減少していた。Nrf2は、膜・オルガネラにおいてKeap1と同様に減少し、核では増加していた。一方、Pgpの発現が弱いと顕著にKeap1の発現が増加した。一般的にNrf2はKeap1と細胞質に共存しているが、K562細胞においては、Nrf2の細胞質での存在が確認されなかった。このことから、Pgpの発現にはKeap1-Nrf2制御系と新たな因子が存在する可能性が示唆された。DNAマイクロアレイの解析には、時間が必要だと思っていたが、思いのほか時間を要していること。そして、候補となる遺伝子をなかなか絞り込めないのが現状である。実績にも記載したが、ARF-GEP100については、タンパク質レベルでは増加が認められているが、DNAマイクロアレイの解析では該当する遺伝子として上がってこなかったなど、P-糖タンパク質の発現の速さや量を規定する因子の同定が思いのほか進んでいない。さらに、iTRAQ標識試薬を用いたプロテオーム解析が行えなかった。Keap1-Nrf2制御系の関与が認められたことから、P-糖タンパク質の発現の違う耐性細胞を用いて、網羅的メタボロミクス解析を行い、P-糖タンパク質の発現に特徴的な代謝経路を明らかにする。さらに、網羅的プロテオミクス解析、DNAマイクロアレイや網羅的メタボロミクス解析から更なるP-糖タンパク質の発現等に関わる因子を絞り込み、生化学的手法や分子生物学的手法、あるいは免疫学的手法を使いP-糖タンパク質の発現の速さと量を規定する因子を同定する。そして、P-糖タンパク質の発現の速さや量に関わる因子の働きをin vivoで検証する。生化学、タンパク質の機能解析P-糖タンパク質の発現量や期間がことなる細胞について、iTRAQ標識試薬を用いたプロテオーム解析を行う。さらに、DNAマイクロアレイ解析やプロテオーム解析で得たデータから、P-糖タンパク質の発現量や速さに関わるターゲット因子を絞り込む。そして、ターゲット因子を耐性の獲得していないK562細胞やNalm-6細胞、さらには、乳癌細胞などのがん細胞にその遺伝子を過剰発現させ、P-糖タンパク質の発現に、どのような影響を与えるかをWestern blottingで解析を行う。
アルツハイマー病における伝達機構障害

昨年度の研究成果のうち、化学的神経回路網の解析では、大脳皮質や海馬においてアセチルコリン入力線維のpostsynaptic targetとしてコレシストキニンをはじめとする神経ペプチド作動性ニューロン群が明らかとなった(遠山)。また、海馬内部の回路網についてはその重要な構成要素である錐体細胞の立体構築についてトレーサー細胞内注入法により、詳細な検討が加えられた(石塚)。一方、アセチルコリン線維の起始細胞には、アルツハイマー病遺伝子との関連で注目を受けているスーバーオキシドジスムターゼが豊富に存在していることを初めて明らかにした(高木)。受容体・細胞内代謝の研究ではムスカリン性アセチルコリン(M)受容体の機能の多様性を分子レベルで明らかにした(東田)。また、M1受容体は膜リン脂質(P1)代謝に連関し、その受容体刺激によるP1代謝活性が老化にともなって低下することを示唆した(野村)。またプロテインキナーゼCの各サブタイプの脳内(海馬等を中心に)での局在を免疫組織化学法により解析し、機能との関連を検討した(田中)。アルツハイマー病脳とアセチルコリン動態の研究においては、本病で血清アセチルコリンエステレースのうちG4アイソザイムが減少することを明らかにした(中村)。モデル動物の開発・改良に関しては、神経成長因子(NGF)にジフテリアトキシンを結合したものを、大脳皮質や海馬に注入することにより、投射性アセチルコリンニューロンを選択的に破壊し、記憶学習能力を低下させることに成功した(塩坂)。このモデル動物は従来の方法(イボテン酸や電気刺激によるマイネルト核破壊や選択性コリン神経毒注入)により作製されたモデルに比較し、より限局して特異的に投射性アセチルコリンニューロンに障害を与えることが出来るので、今後治療面での応用が期待される。
フェッファーマンのプログラムと非可換幾何学

1超局所解析とフェッアーマンのプログラム(1)ラプラシアンの冪を主要部とする共形不変微分作用素はGJMS作用素とよばれ,最近の共形幾何の重要な研究対象である.GJMS作用素のグリーン核に現れる対数型特異性は局所共形不変量を与える;この不変量の具体的な計算を行った.(2)GJMS作用素の一般化としてラプラシアンの複素冪を主要部とする共形不変擬微分作用素を構成した;これにはアンビエント計量をもちいる.(3)上記二つの結果から,次元nが6以上のコンパクト・リーマン多様体が球面と共形同値になるのは階数n/2-2のGJMS作用素のグリーン核の対数項が消えるときであることを示した.(4)Colin Guillarmou氏(ENS研究員)と共同で,漸近的複素双曲空間のレゾルベントと散乱行列が負の整数点で有限重複度の特異性をもつことを示すことを目標とする研究を開始した.これが成功すれば複素双曲空間の凸ココンパクト商のセルバーグ・ゼータ関数の跡公式への応用が期待できる.2ハイゼンベルグ解析と接触多様体の局所指数定理オハイオ州立大学滞在中にこの課題についての新しい着想を得た.これは接触同型によって不変な指数公式およびCR同型によって不変な指数公式へのハイゼンベルク解析と非可換解析(サイクリック・コホモロジーとホップ代数など)の応用方法を示唆するものである.3非可換幾何における高次の指数公式CMサイクルの構成におけるregularityと呼ばれる重要な仮定を取り除くことを試みた.1超局所解析とフェッアーマンのプログラム(1)ラプラシアンの冪を主要部とする共形不変微分作用素はGJMS作用素とよばれ,最近の共形幾何の重要な研究対象である.GJMS作用素のグリーン核に現れる対数型特異性は局所共形不変量を与える;この不変量の具体的な計算を行った.(2)GJMS作用素の一般化としてラプラシアンの複素冪を主要部とする共形不変擬微分作用素を構成した;これにはアンビエント計量をもちいる.(3)上記二つの結果から,次元nが6以上のコンパクト・リーマン多様体が球面と共形同値になるのは階数n/2-2のGJMS作用素のグリーン核の対数項が消えるときであることを示した.(4)Colin Guillarmou氏(ENS研究員)と共同で,漸近的複素双曲空間のレゾルベントと散乱行列が負の整数点で有限重複度の特異性をもつことを示すことを目標とする研究を開始した.これが成功すれば複素双曲空間の凸ココンパクト商のセルバーグ・ゼータ関数の跡公式への応用が期待できる.2ハイゼンベルグ解析と接触多様体の局所指数定理オハイオ州立大学滞在中にこの課題についての新しい着想を得た.これは接触同型によって不変な指数公式およびCR同型によって不変な指数公式へのハイゼンベルク解析と非可換解析(サイクリック・コホモロジーとホップ代数など)の応用方法を示唆するものである.3非可換幾何における高次の指数公式CMサイクルの構成におけるregularityと呼ばれる重要な仮定を取り除くことを試みた.
ヒト卵膜におけるprolactinの電解質代謝に及ぼす影響

1.ヒトprolactin(PRL)cDNAを含むプラスミドのpBR322を大腸菌X1776を培養させることによって増やした。つまりBacto-typtoneとBacto-yeast extractにて培養液をつくり、同時にplateも用意した。small scaleでX1776を一晩培養した後、plateに塗り、コロニーを選びだし、更に大量に培養した。増殖したX1776からプラスミドを回収、精製した。結果として、4tubeからそれぞれtotal 374μg,329μg,420μg,328μgのpBR322を得た。2.上記の如く得られたプラスミドからPRLcDNAを増幅して得るためPCRを行った。条件はpolymerase72°C1分間、annealing55°C,1分間、denature94°C,1分間で30cycle行った。PRLcDNAは単一のバンドとして電気泳動上確認された。3.RNAは正期産の卵膜より羊膜、絨毛膜、脱落膜を分離しGIT/CsClによる変性と超遠心法(100000rpm,12時間)によって抽出した。これらのRNAと上記のPRLcDNAのDNAprobe(α-p^<32>)によってNorthern analysisを行った。絨毛にのみ約1.1kbの位置にバンドを認め、絨毛にPRLのmRNAが発現していることが確認された。4.今後、同様の方法を用いて、PRL recepterの発現も観察し、培養細胞を用いて、PRLならびにPRL receptorの発現調節を検討したあと、Na-K ATPase活性の変化を追跡する予定である。
白血球-内皮相互反応の麻酔による外科治療低侵襲化

緑色蛍光蛋白遺伝子導入ラットにおいて麻酔下に肺微小循環を蛍光顕微鏡下に観察、肺循環の毛細血管における白血球の通過を可視化した。これを高感度蛍光観察用CCDにて記録、PCにて解析し、白血球の毛細血管通過時間および毛細血管における集積、細静脈における白血球動態を評価するモデルを確立した。このラットにエンドトキシンを静注し、肺循環においては、細静脈に白血球の集積がおこる体循環とは異なり、肺循環においては毛細血管に白血球が毛細血管に集積することを、標識による修飾の加わらない状態での白血球の動態をリアルタイムで観察することにより、証明した。この研究の成果の一部は日本外科学会総会サージカル・フォーラムにて発表した。このモデルにおいて白血球のcGMP濃度を、NOのドナーであるSNAP等を用い、cAMP濃度はcAMP合成を促進するプロスタグランディンI2及びcAMP分解を抑制するphosphodiesterase type4阻害薬を用い、増加させ白血球の集積への影響を評価した。また、肺循環の定量的評価を行う目的でMRIを用い実験を行った。FAIR法は造影剤を使用することなく血流を評価できるMRIの撮像法であり,これを肺循環の評価に用いた。体位変換により、肺内の血流分布が変化する事を示す事ができた。腹臥位では、仰臥位に比し肺循環の不均等が減少することを定量的に示した。これは急性肺障害の患者の体位を腹臥位にすると酸素化が改善する理由の一つと考えられた。この研究の成果の一部は平成18年日本外科学会総会サージカル・フォーラムにて発表しました。現在このモデルにおいて白血球のcGMP濃度を、NOのドナーであるSNAP等を用い、cAMP濃度はcAMP合成を促進するプロスタグランディンI_2及びcAMP分解を抑制するphosphodiesterase type4阻害薬を用い、増加させ白血球の集積への影響を評価中である。緑色蛍光蛋白遺伝子導入ラットにおいて麻酔下に肺微小循環を蛍光顕微鏡下に観察,肺循環の毛細血管における白血球の通過を可視化した。これを高感度蛍光観察用CCDにて記録,PCにて解析し,白血球の毛細血管通過時間および毛細血管における集積,細静脈における白血球動態を評価するモデルを確立した。このラットにエンドトキシンを静注し,肺循環においては,細静脈に白血球の集積がおこる体循環とは異なり,肺循環においては毛細血管に白血球が毛細血管に集積することを,標識による修飾の加わらない状態での白血球の動態をリアルタイムで観察することにより,証明した。この研究の成果の一蔀は平成20年サイトカインストーム研究会2008にて発表しました。現在このモデルにおいて白血球のcGMP濃度を,NOのドナーであるSNAP等を用い,cAMP度はcAMP合成を促進するプロスタグランディンI_2及びcAMP分解を抑制するphosphodiesterase type4阻害薬を用い,増加させ白血球の集積への影響を評価中である。

このラットにエンドトキシンを静注し、肺循環においては、細静脈に白血球の集積がおこる体循環とは異なり、肺循環においては毛細血管に白血球が毛細血管に集積することを、標識による修飾の加わらない状態での白血球の動態をリアルタイムで観察することにより、証明した。この研究の成果の一部は平成18年日本外科学会総会サージカル・フォーラムにて発表した。このモデルにおいて白血球のcGMP濃度を、NOのドナーであるSNAP等を用い、cAMP濃度はcAMP合成を促進するプロスタグランディンI2及びcAMP分解を抑制するphosphodiesterase type4阻害薬を用い、増加させ白血球の集積への影響を評価した。
細胞内構造の操作を目的とした大捕捉力を持つ高分解能光ピンセット顕微鏡の開発と応用

光ピンセット顕微鏡を開発し、その応用とし以下の成果を得た。シダ原始体を遠心処理し、核外に飛び出した核小体の修復機構を光ピンセット操作を使って調べた。10ピコニュートン以上の力で核小体を補足している間の核小体とそれを包む核膜の動きを観察したところ、核小体の修復に関して核小体につながる染色糸の張力と核膜の張力が各々独立に関与していることを明らかにすることができた。シダ原始体内の核小体を捕捉操作する研究では、光ピンセットによって加えた変位から、染色糸及び核膜の力学的性質を調べることができた。光ピンセット操作をよりダイナミックな細胞運動に適用する対象として正常ヒト好中球を選び、その遊走メカニズムを探る研究を行った。細胞内小器官を光トラップし、一定方向に周期的変位すなわち接動を与えた時のその追随のふるまいの振幅と位相遅れから細胞質の粘性及び弾性を定量することに成功した。細胞内の部位による差異の有無を調べたところ、仮足進展部では体部、尾部に比べて粘性は1/6、弾性は1/20という結果を得た。これは仮足進展部の細胞質はより液体に近いこと、細胞内圧により細胞質が押し出されて仮足が形成されることを示唆する。レーザーピンセット法の発展として、可視レーザー光、同時に顕微鏡に導入し光切断に用いた。培養後根神経節の培養細胞を顕微鏡で脱膜して微小管を取り出し、その状態で光切断すると脱重合反応が起こることを確かめた。この脱重合の速度から微小管には3種の安定化パターンがあること、その安定化状態が局所的に変化していることを見い出した。細胞内構造の力学的性質の計測、特にダイナミックに動く細胞の運動の解析に光ピンセットが極めて有効なことを示すことができた。1.光ピンセット用波長可変レーザー(Ti:SapphireレーザーおよびCr:LiSAFレーザー)の開発新しいレーザーの波長可変技術として音響光学素子(AOTF)を利用し、数ミリ秒の時間分解で任意の波長に同調することができる電子制御Ti:Sapphireレーザーを開発した。また、現有のクリプトンレーザーによりCr:LiSAF結晶を励起、レーザー発振させてその出力特性を測定し、波長850nmで約100mWの出力を確認した。2.光ピンセット顕微鏡の開発光ピンセット用の光源である近赤外レーザー光について透過率の良い光学系と、輝度の高い観察光を得るための照明光学系を採用して微分干渉顕微鏡の改良を行った。これにより20mW程度のレーザー出力で水溶液中のラテックスビーズ(直径0.8μm以下)を容易に捕捉可能であることを確認し、従来のNd:YAGレーザー光(1.06μm)に比べて捕捉パワーが小さくてすむことがわかった。まず照明光学系の改良により、ビデオコントラスト増強法と組み合わせて細胞内の微小顆粒(直径0.1μm以下)や細胞骨格フィラメントを高分解で可視化できることを確認した。さらに、レーザー光を顕微鏡視野内で任意に操作するために、コンピュータ制御のガルバノスキャナミラーを採用し、これを経由してレーザー光を顕微鏡に導入した。3.細胞内構造の基礎研究開発したNd:YAGレーザーを光源とする光ピンセット顕微鏡を用いた応用研究として、シダ原始体内の核小体の捕捉を試みた。シダ原始体を遠心処理し、核外に飛び出した核小体の修復機構を光ピンセットにより調べた。約10ピコニュートンの力で核小体を捕捉している間の核小体とそれを包む核膜の動きを観察したところ、核小体の修復に関して核小体につながる染色糸の張力と核膜の張力が各々独立に関与していることを明らかにすることができた。

1.光ピンセット用波長可変レーザー(Ti:SapphireレーザーおよびCr:LiSAFレーザー)の開発高能率、低損傷型光ピンセット用レーザーとして、光LDレーザー励起CW-LiSAFレーザーシステムを製作した。これは2台のLiSAFレーザー発振器からのレーザービームを1つのビームに合成することにより、大捕捉力光ピンセットに必要な高出力化をはかるものである。このシステムの最大の特長は2台のレーザーのビームプロファイルを制御することにより、効率よくTEM11型の中空ビーム出力を取り出せることであり、これによって、大捕捉力をもち、細胞に対する損傷が低い光ピンセット用ビームが得られた。2.細胞内構造の基礎研究従来のNd:YAGEーザーを光ピンセット用レーザービームに用いて、細胞構造の研究を進めた。シダ原始体内の核小体を捕捉する研究では、光ピンセットによって加えられた変位から、核小体につながる染色糸及び核膜の力学的性質を調べることができた。また、新しい測定対象として正常ヒト好中球を用い、その遊走メカニズムを探る目的で、光トラップによる細胞質の粘性及び弾性を定量した。測定部位を仮足進展部、体部、尾部の3種に分け、それぞれの部位による差異の有無を検討した。その結果仮足進展部では体部、尾部に比べて粘性は1/6、弾性は1/20というもので、これは仮足進展部の細胞質はより液体に近いことを示し、細胞内圧により細胞質が押し出されて仮足が形成されることを示唆する。宿主の組織に炎症が生じると、白血球は、毛細管近傍の小静脈で捕捉され、ローリングした後、接着、血管外遊走を行い炎症部位に到達する。細胞遊走する際には、白血球は大きく動的な変形を受ける。この時、細胞骨格は、細胞内で不均等に重合、脱重合され、それに従い、細胞質の粘性と弾性も動的に変化するはずである。細胞遊走のメカニズムを解明するため、正常人の遊走中の好中球において細胞質の粘性、弾性を仮足進展部、体部、尾部でそれぞれ測定し、その部位による差異の有無を検討した。好中球の細胞質内には直径0.5mm以下の顆粒が多数存在する。これらの細胞内顆粒を光トラツプにより捕捉して、正弦波で強制振動を加える。光トラップの振幅、顆粒の振幅、顆粒がトラップから遅れる位相差より強制振動させている顆粒周辺の細胞質の弾性係数および粘性を分離測定した。遊走中の好中球の細胞質粘弾性は、細胞内の部位によって異なり、仮足進展部では、体部、尾部に較べて弾性係数は1/20、粘性は1/6といずれも著明に低下していた。体部、尾部では粘性、弾性ともに有意の差は認めなかった。時定数は、体部、尾部では、それぞれ0.3秒、0.5秒に対して、仮足進展部では1.7秒と延長していた。粘性、弾性の絶対値、時定数ともに、仮足進展部の細胞質はより液体であることを示しており、細胞内圧により細胞質が押し出されて仮足が形成されることが示唆された。
入眠予兆信号の計測原理の数理的解明

入眠予兆信号とは、人間が眠りに入る少し手前で観察される前兆信号のことで、本研究では、これまで行なってきた入眠予兆現象の研究内容を掘り下げて学理に繋げるための研究を行った。本研究は、センサーの精度に関係する、設計条件、使用条件、外乱要因の把握による設計方法の提案を目的とする部分と、カオス解析、ウェーブレット解析、ケプストラム解析の3つの手法による入眠予兆信号の抽出方法と発生時期の相互比較、および、入眠予兆現象の原理と測定原理を表すことが可能な数学モデルの提案の3つのパートによって構成される。平成20年度は、エアパックセンサーの精度に関する検討、平成21年度は、解析手法間の相関に関する検討、平成22年度は、測定原理を表すことが可能な数学モデルの検討と入眠予兆現象捕捉のための新たな手法の提案を行った。平成22年度の研究成果は、以下の通りである。本研究では、脈波の揺らぎから入眠予兆信号を取得している。ドライバーの邪魔にならない場所で非侵襲で脈波の情報を取得するために、運転席シートの背部に取り付けた空気圧の変化を利用したセンサーを使用している。本年度は、測定原理を明らかにする目的で、脈波伝達経路を表現することのできる伝達関数を求めことに成功した。心臓の拍動が背部大動脈血管伝わる仕組みについて解析可能な動脈網モデルによる脈波伝播シミュレーションを行い、血管内の圧力が筋肉、皮膚、衣服を経由してセンサーに到達するまでの経路について解明することができた。また、昨年度の研究で見つけた新たな処理方法である、「ヒトの眠気をスリープスコアという点数で表現する」方法を被験者数を増やして実施し、成果を論文発表した。入眠予兆信号とは、人間が眠りに入る少し手前で観察される前兆信号のことで、本研究では、これまで行ってきた入眠予兆現象の研究内容を掘り下げて学理に繋げるための研究を行う。具体的には、(1)シートに装着した非侵襲センサーの測定精度に関係した、(i)設計条件、(ii)使用条件、(iii)外乱要因の把握による設計・装着方法の提案、(2)カオス解析、ウェーブレット解析、ケプストラム解析の3つの手法による入眠予兆信号の抽出方法と入眠予兆信号発生時期の相互比較検討、(3)入眠予兆現象の原理と測定原理を表すことが可能な数学モデルの提案の3つの事項に付いて研究を実施する。入眠予兆信号の定量的取得が可能になると、作業環境下での睡眠研究のツールとして貢献でき、特に、厳しい環境の下で長時間運転に従事しているトラックやバスドライバーの身体環境管理に役立つことが予想される。平成20年度は、エアパックセンサーの原理と脈波の測定精度に関する検討を行った。具体的には、ドライバーが居眠りに入る前兆信号を非侵略襲的手法で獲得することを目的として、運転席の背面部に取り付けた空気層と内布層から構成されるエアパックセンサーを適当な位置に取り付けることで、運転中のドライバーの脈波が計測できることを示した。まず、計測の原理を説明するために数学モデルの誘導を行い、次に、体動、呼吸、脈波が入り交じった信号から心拍の揺らぎ情報を取り出すための手法について検討し、指尖容積脈波から得られた情報との比較を行った。研究の結果、エアパック着座センサーはローパスフィルターを構成しており、カットオフ周波数(約10[Hz])以下の振動数においては,出力振幅はほぼ一定で位相も振動数に対してなだらかに推移することが分かった。また、エアパック着座センサーからの波形は、元波形で扱うようりも、微分演算を施した方が特緒を抽出しやすいことが明らかになった。入眠予兆信号とは、人間が眠りに入る少し手前で観察される前兆信号のことで、本研究では、(1)シートに装着した非侵襲センサーの測定精度に関係した、(i)設計条件、(ii)使用条件、(iii)外乱要因の把握による設計・装着方法の提案、(2)カオス解析、ウェーブレッド解析、ケプストラム解析の3つの手法による入眠予兆信号の抽出方法と入眠予兆信号発生時期の相互比較検討、(3)入眠予兆現象の原理と測定原理を表すことが可能な数学モデルの提案の3つの事項に付いて研究を実施する。エアパックセンサーの精度に関する検討を平成20年度に実施し、平成21年度は、解析手法間の相関に関する検討を行った。平成21年度の研究では、カオス解析、ウェーブレッド解析、ケプストラム解析の3つの手法による入眠予兆信号の抽出方法と入眠予兆信号発生時期の相互比較検討を行う予定であったが、これに加えて、被験者の眠気の感応評価の指標としてスリープスコアを提案し、このスコアを用いた入眠予兆の可能性を示すことに成功した。具体的には、20代の10名の被験者に対して、入眠実験を行い、長周期のトレンドの変化を追うカオス解析、低周波数成分の比率から自律神経の働きを見つけるウェーブレット解析、周波数スペクトルの包絡線の特徴から入眠予兆信号の出現を見つけるケプストラム解析、スリープスコアによる方法を適用して結果の比較を行った。

入眠予兆信号とは、人間が眠りに入る少し手前で観察される前兆信号のことで、本研究では、これまで行なってきた入眠予兆現象の研究内容を掘り下げて学理に繋げるための研究を行った。本研究は、センサーの精度に関係する、設計条件、使用条件、外乱要因の把握による設計方法の提案を目的とする部分と、カオス解析、ウェーブレット解析、ケプストラム解析の3つの手法による入眠予兆信号の抽出方法と発生時期の相互比較、および、入眠予兆現象の原理と測定原理を表すことが可能な数学モデルの提案の3つのパートによって構成される。平成20年度は、エアパックセンサーの精度に関する検討、平成21年度は、解析手法間の相関に関する検討、平成22年度は、測定原理を表すことが可能な数学モデルの検討と入眠予兆現象捕捉のための新たな手法の提案を行った。平成22年度の研究成果は、以下の通りである。本研究では、脈波の揺らぎから入眠予兆信号を取得している。ドライバーの邪魔にならない場所で非侵襲で脈波の情報を取得するために、運転席シートの背部に取り付けた空気圧の変化を利用したセンサーを使用している。本年度は、測定原理を明らかにする目的で、脈波伝達経路を表現することのできる伝達関数を求めことに成功した。心臓の拍動が背部大動脈血管伝わる仕組みについて解析可能な動脈網モデルによる脈波伝播シミュレーションを行い、血管内の圧力が筋肉、皮膚、衣服を経由してセンサーに到達するまでの経路について解明することができた。また、昨年度の研究で見つけた新たな処理方法である、「ヒトの眠気をスリープスコアという点数で表現する」方法を被験者数を増やして実施し、成果を論文発表した。
マージの機構によるオブジェクト指向言語の型システムの研究

本研究の目的は、学位論文およびそれに続く理論的な研究で行なってきたマージの機能を持つ計算を拡張することにより、型つきのオブジェクト指向言語の基礎として用いることの可能な計算体系を構築することであった。このシステムで基礎となる、マージ式を用いた総称関数の定義方法に関して、2つの簡約規則を提唱してきた。一つは、基本型のマージ式は右辺を優先させるというもの、もう一つは、基本型のマージ結果がconflictを生じる時には、エラー値を返すというものであった。前者の体系が正規化性を持たないことは以前から知られていたが、そのモデルはできていなかった。本年度の研究の1つの成果として、ファンクタ・カテゴリにおいて領域理論を展開することにより、この体系のモデルを作成したことがある。この結果は、現在投稿中である。後者の体系に関しては、それによって作られる総称関数が、圏論におけるLAX変換に対応していることを発見した。また、それが実際のプログラミングにおいても自然な概念であることを裏づける例を見い出した。計算の性質として、正規化性は持たないが、Unresolved Termが存在しないといういい性質を証明した。また、前者の体系に対するモデルの手法に変更を加えることにより、モデルを作成できることも示した。この結果も、現在投稿中である。今後、この結果を拡張し、LAX limitのプログラミングにおける役割を考え、それに基づいたパラダイムを考えたい。また、オブジェクト指向の他の特徴もこのシステムに追加していきたい。
ラット結腸間間置小腸におけるMNNG発癌に関する研究

小腸癌の発生は極めて少ないが、その臓器特異性を解明する目的で、wistar系雄性ラットを用いて、回腸を遠位結腸間に間置したモデルにMNNGを注腸投与し、回腸及び結腸の粘膜上皮細胞動態の解析及び粘膜内キサンチンオキシダーゼ活性の測定を行った。癌腫発生率は生食群0%、MNNG注腸群では20週群54.5%、30週群35.0%、40週群は52.6%であった。MNNG群における間置回腸と遠位大腸の部位別の40週後の腫瘍発生率を見ると、遠位結腸の68.4%に比して、間置回腸では、5.3%と有意に低率であった。また、癌腫発生率をみても間置回腸は5.3%と遠位大腸の52.6%に比し有意に低率であった。上皮の細胞動態の解析はIdu及びBrdUを用いたDouble labeling法によって行った。MNNG投与群では間置回腸に置けるG-zone ratio及びlabeling Indexは回腸に比し、有意な増加がみられ、また腸粘膜上皮細胞の腺窩よりの脱落時間(Mig)の有意な短縮もみられた。間置回腸と遠位大腸の比較では細胞増殖に関するLabeling Index、S-phase transit time、potential doubling time及びG-zone ratioに差は見られなかった。しかし、粘膜上皮細胞の脱落時間をみると、遠位大腸の91.4±21.1時間に対し、間置回腸では40.6±8.2時間と極めて速い傾向が認められた。また、腸粘膜内キサンチンオキシダーゼ活性を測定すると、間置回腸ではその活性が4.28±0.75nmol/蛋白mg/分と遠位結腸に比して有意に高値を示した。以上より小腸粘膜上皮は増殖能が低いとともにその更新性が速く、もしこの腺窩細胞のDNAに障害が生じても、次々と新生してくる正常上皮細胞に押し上げられ腸内腔に脱落することが推察された。また小腸粘膜内ではキサンチンオキシダーゼを産生源とする活性酸素が多く、障害を受けた細胞がこの活性酸素により殺細胞効果をうけている可能性も考えられ、小腸粘膜にはいくつかの発癌防御作用の存在が示唆された。臨床的に小腸癌の発生は他の消化器癌の較べ極めて少ない。発癌に関する小腸の臓器特異性を解明するために、ラットを用い回腸を遠位結腸間に間置したモデルを作りMNNGを注腸投与した後、術後10週目、20週目、30週目、40週目と経時的に屠殺し間置回腸と遠位結腸のMNNGによる腫瘍誘発性を比較検討し、さらにIrdu,BrduによるTime sequential double labeling methodを用い免疫組織学的染色を行い粘膜上皮細胞の細胞動態を解析した。有効動物数は対照群として生食注腸40週群が16匹、MNNG注腸群は60匹でその内訳は、10週群10匹、20週群11匹、30週群20匹、40週群19匹であった。腫瘍発生率は生食注腸群0%、MNNG