hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
脳FDG-PETおよびMRIと機械学習を用いた高精度な認知症自動鑑別診断

認知症の診断や対策には、原因疾患の鑑別診断が不可欠である。本研究では、機械学習を用いてFDG-PETおよびMRIを入力とした認知症の鑑別を自動で行うシステムを構築した。FDG-PETの糖代謝低下とMRIにおける脳の萎縮を表す画像から特徴量を抽出し、サポートベクターマシンで学習する仕組みで、アルツハイマー型、前頭側頭型、レビー小体型の各原因疾患と健常群をそれぞれ自動で識別し、加えて疾患の重症度や進行度を表す客観的な指標を提示することで臨床の鑑別診断を支援する。本研究は、FDG-PETおよびMRIを用いた認知症自動鑑別診断支援の実現を目的とし、被験者の画像からアルツハイマー病(AD)、前頭側頭葉変性症(FTD)、びまん性Lewy小体病など認知症の原因疾患の鑑別を行い、疾患特異度と進行度を出力することで認知症の鑑別診断支援を行う仕組みの実現を目指している。平成27年度は、特徴量抽出及び機械学習アルゴリズムの検討、および学習モデルを用いた鑑別において得られる指標と認知機能との関係の調査を通じて、認知症診断支援の仕組みの構築を行った。1.特徴量抽出手法の検討本研究で良好な識別結果を得るためには特徴量抽出は重要な構成要素である。先行研究を参考に、(手法1)解剖学的に100程度の関心領域に分割する手法、(手法2)正常例と疾患例の統計的比較によって有意差を呈するボクセルから特徴量を抽出する手法、の二種を採用し性能を確かめた。疾患毎に特異的な特徴量の抽出が可能であるため、手法2のほうが有利であると予想されたが、実験の結果手法2より手法1の方が高性能であった。手法1は糖代謝の低下領域と比較的代謝が保たれている領域の双方の情報を学習に使用できることが理由の一つであると考えられる。2.機械学習アルゴリズムの検討と認知症診断支援の仕組みの構築機械学習アルゴリズムとして、2クラス分類であるサポートベクターマシン(SVM)を組み合わせで多クラス分類を実現する手法を採用した。SVMにおける各クラス間の超平面からの距離を画像から得られる評価指標と定義し、画像指標と同時期に測定したミニメンタルステート検査(MMSE)との相関を、ADと健常者(NL)の分類モデル、FTDとNLの分類モデルでそれぞれの対象のデータについて調べた。結果、ADとNLの分類モデルにおいて有意な相関が得られ、画像の特徴が病状の進行の指標として使用できる可能性が示唆された。本研究の目的である「FDG-PETおよびMRIを用いた認知症自動鑑別診断支援」について、本年度の研究によってFDG-PET画像を用いた画像指標の提案とその一次評価を行い、診断支援の原型となる枠組みが構築された。研究費応募時点の研究計画・方法におおむね一致した計画と方法で研究が進行している。本研究は、FDG-PETおよびMRIを用いた認知症自動鑑別診断支援の実現を目的とし、被験者の画像からアルツハイマー病(AD)、前頭側頭型変性症(FTD)、びまん性Lewy小体病など(DLB)、認知症の原因疾患の鑑別を行い、疾患特異度と進行度を出力することで認知症の鑑別診断支援を行う仕組みの実現を目指している。平成28年度は、前年度までの研究で構築したサポートベクターマシンを用いて健常群(NL)、AD、FTD、DLBの自動識別を行う仕組みの中で、これまで用いていたFDG-PET画像から抽出した糖代謝低下に関する特徴量に加え、T1強調MRIから得られる灰白質の萎縮に関する情報を用いた。MRIの解剖学的標準化を行う際、T1強調MRIを灰白質と白質画像に分離し、それらの画像を標準脳に合うように変形していく中で灰白質密度画像が生成され、脳萎縮の情報が得られる。これらの処理は従来から行われているMRIを用いたvoxel-based morphometryとも同等である。この灰白質の萎縮に関する情報を機械学習の学習データに加え、FDG-PETとMRIの両方を用いた自動識別を実現した。現在までの実験ではFDG-PETを用いた方がMRIを用いた場合より識別精度が高く、またFDG-PETとMRIの情報を連結して用いてもFTDが約4%向上したのみで、他のクラスの識別率の向上は見られていない。現状の実装ではMRIの特徴量抽出もFDG-PETと同様にAutomated Anatomical Labeling (AAL)法を用いているが、より高精度な識別のためにはこの特徴量抽出法と機械学習の方法について見直す必要があると考えられる。本研究の目的である「FDG-PETおよびMRIを用いた認知症自動鑑別診断支援」について、昨年度の研究によってFDG-PET画像を用いて診断支援の原型となる枠組みが構築され、今年度の研究でそれらがMR画像を併用した形に展開された。研究日応募時点の研究計画・方法におおむね一致した計画と方法で研究が進行している。

平成29年度は、前年度までの研究で構築した、サポートベクターマシンを用いて脳FDG-PETデータを健常群(NL)、AD、FTD、DLBの各群に自動識別を行う仕組み、およびMRIを用いた高精度な解剖学的標準化を用いた健常群との比較(SPM解析)などを認知症などを対象とした研究データに適用し、自施設の読影会等で実際に使用して使用経験を得た。これまでおおむね良好な結果を得ているが、臨床の診断や医師による読影結果と異なる結果が出る原因としては、脳の萎縮による影響およびMRIの計測歪みや解剖学的標準化の誤差などの影響などが多く挙げられた。また、新たに計測されたPET画像は、本研究で機械学習を行うのに使用したPET画像群を計測したPET専用機とは異なり、後に導入されたPET/CTでの計測が進められているため、機種間差等の影響も検討する必要がある。現在までの検討では、ROI平均値を特徴量としているため、機械学習による自動識別においては、機種間差の影響はボクセル値を用いるSPM解析よりも影響が少ない傾向を示しているが、その影響や補正法については引き続き検討する必要がある。また、最終年度として、これまでの研究成果を日本核医学会学術総会(2017年10月、横浜)および欧州核医学会(2017年10月、ウィーン)などで学術発表を行った。認知症の診断や対策には、原因疾患の鑑別診断が不可欠である。本研究では、機械学習を用いてFDG-PETおよびMRIを入力とした認知症の鑑別を自動で行うシステムを構築した。FDG-PETの糖代謝低下とMRIにおける脳の萎縮を表す画像から特徴量を抽出し、サポートベクターマシンで学習する仕組みで、アルツハイマー型、前頭側頭型、レビー小体型の各原因疾患と健常群をそれぞれ自動で識別し、加えて疾患の重症度や進行度を表す客観的な指標を提示することで臨床の鑑別診断を支援する。平成27年度の研究においては、FDG-PET画像のみを用いた鑑別を行っていたが、今後は、MRIのT1強調画像などを利用して脳の萎縮の情報なども用いて、鑑別などの精度の向上を目指す。そのためには、サポートベクターマシンにおける多重カーネル法の導入など、手法の改良なども必要となる。最終年度までに、実際の臨床データによる評価や多施設共同研究のデータへの適用など、実際の臨床現場で利用できるような仕組みとして実現したい。平成28年度の研究においては、FDG-PET画像に加えて、MRIのT1強調画像などを利用して脳の萎縮の情報を用いた機械学習を行い、鑑別などの精度の向上を目指した。今後は特徴量抽出、サポートベクターマシンのカーネルの選択等、実装レベルでの洗練、データのクリーニング等を行い、さらなる精度の向上を目指す。また、並行して最新の臨床データによる評価や、多施設共同研究のデータへの適用など、より汎用性を上げる方法についても取り組む予定である。医用画像解析研究応募時の計画で計上していた備品購入計画を組み替え、ディスクエンクロージャの購入を見送り既存のエンクロージャへの交換用ディスクの購入にとどめた。またラックマウント型サーバーの代わりにデスクトップ型パソコンを購入してPCクラスタシステムの増強を行った。次年度使用額はそれらの調整した差額である。別予算で行われる予定のホスト側のコンピュータの更新時期などと調整するために、研究応募時の計画で計上していた備品購入計画を変更し、ハードディスクエンクロージャの購入を平成29年度に先送りした。研究で使用するデータの運用・保存用の交換ディスクの購入が必要であり、それらに充当する予定である。
バイオマーカーと同位体による西アジアの家畜化・乳利用とヒトの食性の検証

本課題では、新石器時代に西アジアで発明された家畜飼養とミルク利用によりヒトの食性が変化したと仮説を設定し、人骨の同位体比分析とバイオマーカーによるミルク利用の検証を行った。人骨の同位体比分析では、ほとんどの遺跡におけるヒトの動物性タンパク質摂取率は新石器時代を通して一定であった。また乳幼児の離乳時期も新石器時代では変化が見られなかった一方で、銅石器時代集団では離乳の早期化が見られた。またアナトリア南東部の新石器時代遺跡の土器からはミルクの痕跡は見つかっていない。当初の仮説とは異なり、ミルク利用の本格化やそれに伴うヒトの食性の変化が起こったのは、銅石器時代であった可能性が示唆された。植物栽培・家畜化の起源地の1つである西アジアにおいて家畜導入前後のヒトの食物利用を検討するべく、西アジア新石器時代の人骨・動物骨・土器の分析を行った。【実験設備の構築】本研究の遂行にあたり、まず実験設備の構築を行った。東京大学総合研究博物館にアミノ酸窒素同位体分析のための前処理設備、および同位体分析装置を構築し、人骨・動物骨・植物のアミノ酸窒素同位体比測定の定期的な測定を開始した。また東京大学タンデム加速器研究施設の実験設備を利用し、土器脂肪酸の炭素同位体比分析のための前処理の体制を整えた。【考古資料の採取】従来の分析対象遺跡に加えて、本研究の対象となるトルコ新石器時代のアシュックルホユック遺跡、ハケミウセ遺跡の人骨・動物骨を採取し、一部の試料はすでに日本に持ち帰り分析を行った。また残りの一部は持ち出し許可を申請し、認可を待っている状態にある。またチャヨヌ遺跡、および旧石器時代遺跡のボンジュックル遺跡の人骨・動物骨について、資料提供の協議を行い手続きを進めている。ハケミウセ遺跡人骨から歯石資料を選定し、29年度の夏期調査において歯石を採取する予定である。【考古試料の分析】東京大学総合研究博物館において、新石器時代中期のアシュックルホユック遺跡、そして新石器時代後期のハケミウセ遺跡、サラット・ジャーミー・ヤヌ遺跡の人骨・動物骨を前処理し、同位体分析を行った。申請者がこれまでに同位体分析を行ってきた、新石器時代前期のテルカラメル遺跡、ハッサンケイフホユック遺跡、新石器時代中期および後期のテルエルケルク遺跡を合わせることで、レヴァント北部、アナトリア中央部、アナトリア南東部の3地域における、新石器時代人の食性を比較した結果、生業の変化に伴う食性の時代変化には地域・遺跡間差が大きいことが確認された。29年度は、乳利用に的を絞った分析を加えることで地域差の要因について検証する。【資料採取の遅れ】トルコ共和国において2016年7月15日に発生したクーデター未遂事件およびその余波の影響を受けて夏期発掘調査の中止や渡航の延期を余儀なくされたため、分析対象資料の持ち出しや資料提供者との協議に遅れがみられている。2017年3月にトルコのイスタンブール大学、およびハジェテッペ大学で資料の持ち出しと次の資料の申請、歯石資料のサンプリング方法などの検証を行い、半年遅れでサンプリング計画は進行している。【実験設備の構築】アミノ酸分析および土器脂肪酸分析用の実験設備の構築は順調に進行した。アミノ酸分析は既に定期的な測定を開始している。土器脂肪酸分析設備も2016年12月に構築されて条件検討の段階にあり、29年度から実資料の分析を開始する。歯石分析については試料採取の遅れの影響を受けているが、新石器時代の人骨資料の前に動物資料から採取した歯石を用いることで前処理、および分析条件の検討を先行して行っている。【分析結果】新規の資料採取の延期を受けて、既に日本に持ち込まれている人骨・動物骨で可能なコラーゲンの炭素・窒素同位体比分析、およびアミノ酸の窒素同位体比分析を中心に作業を進めた。28年度は人骨151個体、動物骨59個体からコラーゲンを抽出し、同位体比分析を行った。これにより西アジアの3地域で植物栽培、家畜導入の前後の新石器時代人の動物性タンパク質摂取率の時代変化・地域差の検討が可能となり、本研究の第一義となる家畜導入がヒトの食性と社会への影響の検証に必要な食性情報は確保されつつある。次に、第二の目標である乳製品の利用の検証であるが、まずサラット・ジャーミ・ヤヌ遺跡出土土器10点で脂肪酸炭素同位体比分析を行い、乳の煮炊きに使われた製品かを検討した。今後も継続して土器脂肪酸分析を進めて、人骨分析と合わせて西アジア新石器時代人の乳利用の起源を検証する。西アジアとその周辺地域おける家畜導入前後のヒトの食物利用を検討するべく、西アジア新石器時代、銅石器時代、青銅器時代の人骨・動物骨の分析を行い、その成果報告を行った。【考古試料の採取】昨年度にトルコにて採取し持ち出し申請を行った新石器時代のアシュックルホユック遺跡の人骨・動物骨、キルギス共和国のカイゼルブルク遺跡、タージェン遺跡の人骨・動物骨コラーゲンを受領した。【乳タンパク質検出手法の検討】金沢大学遺伝子研究施設のオービトラップ質量分析計において、現代人の歯石を用いて歯石試料の処理方法の検証と反芻動物の乳タンパク質検出を行った。【考古試料の分析】

東京大学総合研究博物館において、トルコのアシュックルホユック遺跡、イキズテペ遺跡、シリアのテルカラメル遺跡、テルエルケルク遺跡、キルギス共和国のカイゼルブルク遺跡、タージェン遺跡の人骨・動物骨においてコラーゲンの炭素・窒素同位体比分析と解析を行い食性復元と離乳習慣の復元を行った。【成果報告】本研究によりハッサンケイフ遺跡の狩猟採集民は、埋葬された家屋によって異なる食習慣を持っていたことが明らかとなった。この結果を『Journal of Archaeological Science』に投稿し、2017年5月に出版された。また本研究によりテルエルケルク遺跡では、主に食べた家畜の種類が個人や世帯により異なっていた可能性が示された。また狩猟採集民に対して、初期農耕民の食肉消費は低下していた。この結果を『Journal of Archaeological Science: Reports』に投稿し、2018年1月に出版された。これらの結果を基にアミノ酸窒素同位体比分析に基づく先史時代集団の食性復元に関する総説を『季刊考古学』に投稿し、2018年4月に出版された。本課題では、新石器時代に西アジアで発明された家畜飼養とミルク利用によりヒトの食性が変化したと仮説を設定し、人骨の同位体比分析とバイオマーカーによるミルク利用の検証を行った。人骨の同位体比分析では、ほとんどの遺跡におけるヒトの動物性タンパク質摂取率は新石器時代を通して一定であった。また乳幼児の離乳時期も新石器時代では変化が見られなかった一方で、銅石器時代集団では離乳の早期化が見られた。またアナトリア南東部の新石器時代遺跡の土器からはミルクの痕跡は見つかっていない。当初の仮説とは異なり、ミルク利用の本格化やそれに伴うヒトの食性の変化が起こったのは、銅石器時代であった可能性が示唆された。【人骨の同位体比分析】既に7遺跡の人骨・動物骨からコラーゲンを抽出し、炭素・窒素安定同位体比を測定しているが、アミノ酸の窒素同意多比分析はさらに別の前処理と分析が必要であるため、測定された試料は90試料ほどである。29年度は、それらのコラーゲン試料のアミノ酸分析を継続して進め、ヒトの食性データを増やす。【食性データによるヒトの食物利用の時代差・地域差の検討】これまで得られた人骨・動物骨の炭素・窒素同位体比分析、アミノ酸窒素同位体比分析のデータを使い、家畜導入がヒトの食性と社会に与えた影響を議論する。具体的には、動物性食物の消費、水産資源の消費、乳幼児の離乳時期と離乳食について、植物栽培・家畜導入の前後で時代を区分し、その時代変化を地域ごとに検証する。【土器脂肪酸分析】土器脂肪酸分析については設備を構築し分析を開始した段階にある。本研究では乳利用に的を絞り、人骨の同位体比分析を行った遺跡資料で土器から脂肪酸を抽出し、その同位体比を測定することでその土器が何の食資源の煮炊きに使われたのかを推定し、人骨の同位体比と合わせた検証を行う。【歯石のタンパク質分析】現在は西アジア新石器時代遺跡人骨の歯石を日本に持ち帰ってこれていないため、西アジアの動物骨や中国や日本などの他の地域の人骨歯石資料を用いて、歯石タンパク質分析による乳利用の条件検討を進め、資料を採取次第に西アジアにおける乳利用の検討を開始するスケジュールで準備を進める。【考古試料の採取】歯石サンプルおよび土器資料について、人骨資料提供者を通じて資料採取を進める。29年度の前半期においてハケミウセ遺跡人骨付着の歯石資料をサンプリング予定である。
がんと概日リズムの関連に着目した新規薬剤標的の探索

概日リズムは、日々の睡眠サイクルを含む一日約24時間の生体の恒常性を制御している生物の基本的な機構である。近年の大規模疫学研究によると、シフトワーク従事者(看護師、パイロット)は、がん罹患率が有意に上昇することが報告された。また、正常な概日リズムが保てないPeriod2欠損マウスは癌になりやすいことが報告されている。このことは、がんと概日リズムの密接な関連性を示唆しているが、その分子機構は不明な点が多い。本研究課題では、がん抑制遺伝子Rbが概日リズム遺伝子を阻害する機構を解明し、がん抑制遺伝子Rbと概日リズムの新たな関連を明らかにすることを目的とする。これまでに、Rbの概日リズム遺伝子に対する影響を検討し、Rbがヘムを介して概日リズムを制御する可能性を示唆する結果を得ている。ヘムはO2、CO、NO等とも結合し、レドックスセンサーとして知られており、代謝経路を制御する因子として重要である。また、概日リズムとヘム経路は相互制御機構が存在する(KaasikらNature 2004)。しかし、未だどの因子がヘムのヘムタンパク質への結合を制御しているかは同定されていない。そこで、Rbによるヘム制御機構の重要性の検討を行った。その結果、Rbによるヘム制御機構が細胞の代謝経路に非常に重要であるとの結果を得た。この結果は、Rbによるヘム制御経路を標的として、がん及びリズム障害を伴う疾患への新規薬剤となる可能性を示唆しており、非常に重要である。本研究課題では、がん抑制遺伝子Rbが概日リズム遺伝子PER2のヘム結合を阻害する機構を解明し、がん抑制遺伝子Rbと概日リズムの新たな関連を明らかにすることを目的とする。これまでに、Rbの概日リズム遺伝子に対する影響を検討し、Rbがヘム制御を介して概日リズムを制御する可能性を示唆する結果を得ている。肝臓特異的Rb欠損マウス(Albumin-Cre; Rbflox/floxマウス)を用いて、Rbの概日リズムコア遺伝子発現量への影響及び、PER2のヘム結合量の測定を行った。また、Rb欠損マウスでの概日リズム複合体のCry1プロモーター結合量をクロマチン免疫沈降法により解析を行った。どちらの手法においてもRbが概日リズムの制御とヘム結合に関係していることを示唆する結果を得た。当初の計画通りに進展している。平成30年度は、Rbによるヘム制御が概日リズムのみならず他のこれまで報告されているRb制御機構(細胞周期、細胞分化等)に対してどのように影響があるかを検討する。
近接場顕微分光法による窒化物半導体発光素子の効率ドループ機構の解明

効率ドループの主要因を解明するために、近接場光学顕微鏡を用いたPL測定と時間分解(TR)PL測定を行った。青色発光InGaNでは、キャリア密度が増加すると、キャリアが局在中心からオーバーフローするが、非輻射中心周囲にポテンシャル障壁が形成されているため、非輻射再結合するキャリアが増えないことが分かった。一方、緑色発光InGaNでは、キャリア密度が増加すると、キャリアが強発光領域から貫通転位に起因した非輻射中心が多数分布するIn組成の高い弱発光領域へ拡散するようになり、非輻射再結合するキャリアの割合が増えることが判明した。これらの結果より、貫通転位密度とキャリア寿命の増加が緑色発光InGaNにおける効率ドループの主要なメカニズムであることが明らかになった。本研究では,発光の内部量子効率に主眼を置き,InGaN量子井戸のキャリアダイナミクスを,近接場顕微分光測定によってナノスケールで可視化し,InGaN発光デバイスにおいて効率ドループを引き起こす物理現象を解明することである.本年度の主な成果を以下にまとめる.マクロ発光測定の結果から,青色LEDでは内部量子効率が効率ドループ現象に寄与しないこと,緑色LEDでは内部量子効率が強く関与することが示唆された.そこで,この積分発光強度の飽和現象とキャリアダイナミクスの関わりを明らかにするために,近接場発光測定,時間分解近接場発光測定を行った.これまで,ナノスケールのキャリアダイナミクスの可視化には,局所励起・局所集光法と局所励起・マクロ集光法を同一場所に行う,マルチモード法を用いてきた.しかし,この方法では,励起場所以外にキャリアがないため,キャリアの面内拡散が促進されてしまい,実デバイスの動作時とはキャリアダイナミクスが異なる恐れがある.そこで,本研究の特色として,マクロ励起・局所集光法とマクロ励起下のマルチモード法を行うことにより,デバイスの動作状況に近い状態でのキャリアダイナミクスの可視化に取り組んだ.その結果,青色発光InGaN SQWでは,励起パワー密度の増加によって,キャリアが局在準位から非局在準位へオーバーフローするが,ポテンシャル障壁により,キャリアが非発光中心に捕獲されにくいことが分かった,一方,緑色発光InGaN SQWでは,ポテンシャル障壁は存在するものの,高In組成領域における貫通転位密度の増加により非発光中心への捕獲確率が高くなっていた.そのため,励起パワー密度が高くなると,キャリアが発光強度の強い領域から,貫通転位に起因した非発光中心が存在する高In組成領域へ拡散し,非発光再結合するキャリアの割合が増えることが判明した.今年度は,まず,緑色や長波長領域で高効率発光が期待される半極性{20-21}GaN基板上緑色発光InGaN量子井戸(QW)の基礎光物性を近接場顕微発光測定よって評価した.この試料において,発光強度分布の最大値と最小値の比が4,また,発光ピーク波長分布が5nmであった.これらの値は,従来報告されている(0001)QWに比べ数分の1程度の小さな値であり,{20-21}QWの面内発光特性が非常に均一であることを示している.さらに,マルチモード近接場発光測定からキャリアの面内拡散長を見積もったところ,{20-21}面内の[10-14]方向に70nm,直交する[-12-10]方向に50nm程度であった.これらの値は,(0001)QWにおける拡散長の数百nmに比べて非常に短い.これは,内部電界の強度の大小関係に従って,{20-21}QWの発光寿命が(0001)QWよりも短いことを直接的に反映している.また,{20-21}QWの表面には,数nmの凹凸構造が観察された.稜線が[-12-10]に沿った特徴的な形状をしており,結晶学的な異方性に起因したものと考えられる.また,表面モフォロジに関連して発光波長分布も見られ,表面に現れる結晶面によりInの取り込まれ量が異なるためと考えている.次に,共焦点顕微発光マッピング測定と過渡レンズ測定を同一領域で行い,(0001)サファイア基板上青色および緑色発光InGaN QWにおける効率ドループへのオージェ再結合の関与を調べた.これらの試料において,励起光強度の増加によって発光強度が飽和傾向になる領域は,過渡レンズ測定によって観測されるキャリア密度も飽和傾向を示していた.また,キャリアの飽和傾向がより顕著に観測された.

この結果は,効率ドループへのオージェ再結合の関与を否定しており,発光領域から非発光領域へのキャリアの流出が主要因であることを示唆している.青色LEDでは,効率ドループ現象へ内部量子効率の関与がないこと,緑色LEDでは,内部量子効率のドループが効率ドループ現象に関わっていることを明らかにした点,また,内部量子効率ドループのメカニズムとして,キャリア数の増加により,局在準位から非局在準位へのキャリアのオーバーフローとキャリアの面内拡散の促進により,キャリアの非発光中心への捕獲確率が増加していること解明した点で順調に進んでいると判断している.24年度が最終年度であるため、記入しない。これまでは,実デバイスに用いられているC面InGaN量子井戸構造の評価を重点的に進めてきた.次年度では,C面InGaN量子井戸では高効率発光の実現が困難な,緑色領域やより長波長領域において高効率発光の実現が期待される,反極性面InGaN量子井戸構造の評価に注力していく.また,近接場過渡レンズ法を用いることで,効率ドループ現象を引き起こす要因の一つと挙げられているオージェ再結合過程のキャリアダイナミクスへの関与の有無および可視化に取り組んでいく.24年度が最終年度であるため、記入しない。
染色体複製起点の同定とその制御機構の解明

マウスのナイーブT細胞からIL-4/IL-13を発現するヘルパーT細胞タイプ2および、これらを発現しないヘルパーT細胞タイプ1に誘導する系を用いて、2種類のヘルパーT細胞におけるIL-4/IL-13遺伝子領域の複製起点の同定を、新生鎖DNAの量を定量する競合的PCR法を用いて行った結果、両細胞でIL-13遺伝子付近に複製起点活性が検出された。また、従来の新生鎖DNAの精製方法を改良し、この領域についてより詳細なマッピングを行ったところ、複製起点候補領域がIL-13遺伝子の第4エクソン内に存在することが明らかになった。未分化ES細胞についても同様の競合的PCRを行ったところ、ヘルパーT細胞と同じIL-13遺伝子領域に複製起点活性がみられた。以上の結果は、細胞の分化段階や遺伝子発現の状態に関係なく、このIL-13遺伝子領域に存在している複製起点は活性化している事を示唆している。また、ゲノムDNA全体に対する複製起点マッピングの方法として、DNA micro arrayによる解析は非常に有用だと考えちれるが、そのためにはDNA micro arrayに対するhybridizationのプローブとして使用可能な新生鎖DNAの精製方法の確立が必要だった。これまでの結果から、硫化セシウム密度勾配遠心法とショ糖濃度勾配遠心法の2種類の超遠心法を用いて精製した新生鎖DNAは、ゲノム全体に対する複製起点探索のためのDNA microarrayhybridizationに用いるプローブとして充分に使用可能な品質であると考えている。今後は、得られた新生鎖DNAを偏り無く増幅することによって量的にも充分なものを確保するための方法を開発する予定である。
エンドトキシンショックにおけるマクロファージ遊走阻止因子の発現機構と機能の解明

エンドトキシン(LPS)投与によるエンドトキシンショックによる致死率が抗MIF抗体により改善することを報告し、敗血症の病態おけるMIFの重要性を明らかにした。そのメカニズムとして、LPSが標的細胞を攻撃し、TNF-a.IL-1,IL-6、IL-8などの炎症性サイトカインの産生を促進すると考えられた。これまでの筆者らの培養細胞を用いたLPS刺激時のMIFの発現の解析から、血管内皮細胞においてもMIF mRNAレベルの発現の上昇があり、また培養液中に大量のMIFの放出が認められることから、エンドトキシンショック時には下垂体に限らずほとんどの組織からMIFが血中に放出されるものと考えられる。ラットを用いたARDSモデル実験においても、気道上皮細胞と肺胞マクロファージの胞体が抗MIF抗体で陽性に染色された。特に気道上皮細胞はLPS投与24時間後に染色性が増強した。MIFmRNAは未処理の肺ですでに発現しており、LPS投与後は経時的に発現が増強した。LPS投与前に、ラット腹腔に抗MIF抗体で投与すると、肺組織への好中球の浸潤や肺浮腫が著名に抑制された。このことからMIFはエンドトキシン肺損傷時における炎症性サイトカインとして機能していることを示唆するものである。一方、ラット角膜を用いMIFが組織損傷の治癒に重要な機能を果たしていることを明らかにした。特に注目されるのは、皮膚や角膜では増殖の盛んな基底膜細胞に特異的にMIFが認められることから、本タンパク質が細胞増殖機能を持ち合わせているものと考えられる。これまで、MIF anti-sense RNAを導入した癌細胞の増殖が著明に抑制されることを確認しており、癌細胞の増殖に関わる新たな細胞増殖因子としても注目される。グルタチオン(GSH)を固定化したアフィニティゲルにマクロファージ遊走阻止因子(MIF)様の一次構造を持つタンパク質が結合することがNature誌(1992年)に発表され、グルタチオントランスフェラーゼなどGSHを基質とする酵素系の生体防御機構とマクロファージによる細胞性の防御機構の関連性が指摘された。それまで我々は炎症、癌、免疫など様々な分野におけるGSHの機能に関する研究を続けてきたが、この論文の発表を受けてMIFの研究に着手し、これまでヒトMIFを高純度に精製し、初めてその結晶化に成功しその高次構造を明らかにした(Nature Struct.Biol)。MIFは、本来リンパ球から放出されたサイトカインであり、マクロファージを炎症部位に集める免疫機能を持つと考えられてきた。しかし、我々はMIFがリンパ球以外の組織、例えば脳、腎臓、角膜、皮膚上皮、骨芽細胞などでも産生さることを初めて報告した。これまでの本研究グループによるエンドトキシン刺激時のMIFの発現機構に関する解析から、ヒト白血病細胞(HL-60)や血管内皮細胞がLPS刺激によりMIFのmRNAレベルの発現が増強され、細胞外に大量に放出すること、角膜の損傷にMIFが関与すること、マクロファージの貧食能にMIFがaurocrine,paracrineに作用するのど結果を発表するなど国内外でのMIF研究をリ-ドしている。解毒系酵素であるグルタチオントランスフェラーゼ(GST)の構造と機能の相関に関する研究で、ペプチドマッピング法によりその酵素活性中心部位を同定し、核磁気共鳴法(NMR)や部位特異的アミノ酸置換法により触媒のメカニズムを中心に研究を行ってきた。興味深いことに、解毒をつかさどるGSTと免疫系防御機構に関わるマクロファージ遊走阻止因子(MIF)に極めて相同性の高いアミノ酸配列が存在することが明らかとなり、MIFの構造と機能の相関に関する研究に着手した。リコンビナントMIFを用いタンパク質結晶構造解析に成功し、その高次構造を明らかにした。

これまでMIFはサイトカインとして機能すると考えられていたが、この構造解析の結果をもとに異性化酵素として機能することも明らかにした。また、MIFは免疫担当細胞のみならずに脳、腎臓、血管などあらゆる臓器で発現し細胞の機能維持に不可欠な分子であることや、エンドトキシン刺激による急性呼吸窮迫症候群(ARDS)病態モデルラットを用い、MIFがARDSで増悪因子として機能することなどを明らかにした。さらに、MIFは癌細胞の増殖を促し、成長因子としても機能することが明らかにした。最近、MIFと同様な酵素活性を有するヒトD-dopachrometautomerase遺伝子のクローニングに成功し、そのタンパク質高次構造がMIFと極めて類似していること、またMIFと同様にアミノ末端のプロリン残基が酵素活性中心として機能するユニークなタンパク質であることなどを明らかにした。さらに、MIF-related protein(MRP)や転写因子OmpRをクローニングし、これらリコンビナントタンパク質を用いてX線結晶構造解析より高次構造を明らかにし、タンパク質とカルシウムイオンあるいはRNAとの相互作用についても報告した。
北海道における戦後国語教科書の実態に関する調査研究

1「成立の背景と種類」-戦後初期の教科書事情がまだ混乱していたころ、北海道では、「北海道の実情を反映した教科書」の出現を待望する教師たちの悲願があった。というのも、北海道はその地域性から全国を対象にした教科書では季節の推移や行事などにおいて大きく異なる部分があったからである。こうした要求から生み出されたのが、北海道読本編集委員会編著「北海道読本」(昭和23年)であった。「北海道読本」は、昭和23年度を初版に、以後一年こどに改訂を加え、昭和27年度まで五版を重ねた。その代表的なものは、小学校版(小1小6、各上下2巻、計12巻)であった。が、一部には、中学校版(昭和25年度に中1と中2、いずれも上巻のみ)や、地方版(昭和25年度に石狩版小学校用、同年度に北見版も?)の編纂も試みられた。2 [目的と内容]-「北海道読本」は、北海道を知らせることを第一義とした。北海道の自然・生活・産業を中心にして、アイヌの歴史と生活にも触れ、これらを説明文・童話・詩・伝記・紀行文の表現形式で記述した。3 [活用法]-「北海道読本」は当初、郷土読本として、次いで社会科・国語科の生活単元の資料集として、そして国語科の副読本として定着していった。固定・検定教科書を補完するものとして、積極的に活用された。4 [反響]-学習者からは「絵があってきれい」「厚くしていっぱいお話を」、教師からは「国定よりも子供をひきつける」「積極的に活用」という声ともに、「高くて買えない」「国定で精一杯」という声もあった。5[終焉]-昭27年度版が刊行されたころ、検定国語教科書に北海道版を実現させる方策が検討され始めた。それが現実になって、「北海道読本」の役割は終わった。こうして「北海道読本」はわずか3060ページの小冊子ではあったが、北海道の実態を反映した副読本として、北海道の国語教育に大きな役割を果たした。
ネコノメソウ属イワボタン群の分類学的、系統地理学的研究

日本の固有種であるイワボタンの仲間Chrysosplenium macrostemon s. l.は本州の太平洋側、四国、九州に広く分布し、5つの変種、イワボタンvar. macrostemon、ニッコウネコノメvar. shiobarense、ヨゴレネコノメvar. atrandrum、キシュウネコノメvar. callicitrapa、サツマネコノメvar. viridescensが知られている。しかし、これら種内分類群の実態は十分には把握されていない。本研究は、多くの集団を対象としたこれら形態学的・細胞学的解析、さらにDNAによる分子系統学的解析を通じてイワボタンの仲間の分類学的再検討を行うことを目的としたものである。まず、イワボタンの仲間の単系統性を検証するため、イワボタン列Ser, Macrostemon内の5種43集団(イワボタンの仲間23集団、イワネコノメ6集団、ホクリクネコノメ5集団、ヒダボタン4集団、ボタンネコノメソウ5集団)について核DNAの5.8SrDNAを含んだITS領域の分子系統学的解析を行った結果、イワボタンの仲間は単系統群であり、イワネコノメソウがその姉妹群にあたることが示唆された。次に、イワネコノメソウを外群としてイワボタンの仲間51集団について核DNAのETS領域塩基配列による系統解析を行った。その結果、27種類のETS塩基配列タイプが認識され、それらの系統解析ではまず熊本県五木村周辺の集団が分岐し、その他の集団は一つのクレードを形成するという新知見が得られた。後者のクレード内では集団間のサブクレードはいくつか認められるものの、全体として多分岐となり明確な系統関係把握には至らなかった。このクレード内に認められたETS塩基配列タイプの一つ(タイプ4)は、広く九州、四国西部、紀伊半島、丹沢山系など22集団に共通に認められたが、これらの集団の花形態、種子表面構造などは大変多様であり、遺伝的分化と形態的分化は必ずしも対応していないことが示唆された。また、染色体数はこれまでに調べられた43集団ですべて2n=22の2倍体であり、イワボタンの仲間では倍数性は認められないと考えられる。今後ITS領域も含めた分子系統学的解析をイワボタン内で進め系統樹の解像度を高めるとともに、花・種子などの形態学的特徴をより多くの集団で進める必要がある。日本の固有種であるイワボタンの仲間Chrysosplenium macrostemon s.1.は本州の太平洋側、四国、九州に広く分布し、5つの変種、すなわちイワボタンvar.macrostemon、ニッコウネコノメvar.shiobarense、ヨゴレネコノメvar.atrandrum、キシュウネコノメvar.callicitrapa、サツマネコノメvar.viridescensが知られている。しかし、これら種内分類群の実体は十分には把握されていない。この原因は主に、乾燥標本では失われてしまう生きた状態での形質(特に花形態)や種子表面構造などの変異の解析が十分に行われていないためと考えられる。本研究は、多くの集団を対象としたこれら形態学的解析、さらにDNAによる分子系統学的解析を通じてイワボタンの仲間の分類学的再検討を行うことを目的としたものである。

本年度は西日本の特に九州南部、紀伊半島、京都市を中心に現地調査・資料収集を試み、これらの地域で約25箇所50集団のサンプリングを行った。九州南部、紀伊半島におけるサンプリング時期は6月以降であったため、花期は既に過ぎており花形態の観察まできなかったが、各集団でDNA材料とともに多くの果実(種子)の液侵標本を作製することができた。種子表面のSEM観察の結果、突起の長さやその形状に過去の報告にはなかった多くの変異があることが分かった。ネコノメソウ属では種子表面構造は重要な形質であるので、イワボタン群におけるこの様々な種子形態の変異は重要な分類の指標形質であることが予想される。この種子形態と対応した花形態の観察は、現在栽培されている植物および今春のフィールド調査によって行われる予定である。また、本年度の調査の過程で、イワボタン群にごく近縁な新種と考えられる2種が、京都市および三重県で見いだされた。今年度さらに詳しく調査し、公表する予定である。日本の固有種であるイワボタンの仲間Chrysosplenium macrostemonは本州の太平洋側、四国、九州に広く分布し、5つの変種、すなわちイワボタンvar. macrostemon、ニッコウネコノメvar. shiobarense、ヨゴレネコノメvar. atrandrum、キシュウネコノメvar. callicitrapa、サツマネコノメvar. viridescensが知られている。しかし、これら種内分類群の実態は十分には把握されていない。本研究は、多くの集団を対象としたこれら形態学的解析、さらにDNAによる分子系統学的解析を通じてイワボタンの仲間の分類学的再検討を行うことを目的としたものである。本年度は主に九州南部、四国、九州を中心に、昨年度採集できなかった花のサンプリングを実施した。また、イワボタン列(Ser, Macrostemon)におけるイワボタンの仲間の系統学的位置を把握するため、この列内の5種43集団(イワボタンの仲間23集団、イワネコノメ6集団、ホクリクネコノメ5集団、ヒダボタン4集団、ボタンネコノメソウ5集団)と外群としてチシマネコノメソウ、コガネネコノメソウ、ムカゴネコノメソウを用いた分子系統学的解析を行った。核DNAの5.8SrDNAを含んだITS領域のシークエンス解析によって構築された系統樹では、3つのクレード、すなわち日本海側に比較的偏った分布をしている3種(ホクリクネコノメ、ボタンネコノメソウ、ヒダボタン)(クレード1)、イワネコノメ(クレード2)、イワボタンの仲間(クレード3)が認められ、さらにクレード2とクレード3は61%のブートストラップ確率で単系統となった。すなわち、この解析によればイワボタンの仲間はイワネコノメに最も近縁であることが推定される。今回の解析ではイワボタンの仲間内では多くは多分岐となり集団間の系統関係は不明瞭であったが、今後、イワボタンの仲間内の集団数をさらに増やしイワネコノメを外群として解析することで、よりよい解像度が得られると期待される。また他の核遺伝子領域(ETSなど)も解析する予定である。昨年度
微小球共振器をプローブとした走査型CRDS顕微システムによる極微細構造の分光診断

SNOM顕微鏡システムはその近接場の形成方法の違いから数種類に分類されるが、高分解能と試料の多様性を両立させることは難しい。しかし、我々が開発した共振球を介した微小突起を有する共振球プローブでは、上の2つの条件を両立させることが可能である。研究課題に沿ったプローブとして,極微小突起を有する微小共振球プローブの試作を行なった.一連の実験結果より,共振球以外からの散乱光を取り除く必要が生じたため、直径100μm程度の共振球は,シングルモードファイバの先端を炭酸ガスレーザーによる溶融,伸延して作製したスポーク付のガラス球とした.このスポーク部をガラス基板に接着し,共振球を基板表面に接触,保持した.これにより、基板と共振球との接着部からの散乱光を抑えることが出来た。また、この共振球表面への極微小突起の製作は,i線露光用のフォトレジストを球表面に塗布し,HeCdレーザーの集光スポットを用いて感光させることにより実現した.露光スポットサイズ,露光時間の制御により,1μm程度の微小突起を再現性良く作製できた。この突起からの散乱光が、照明用のTi:サファイアレーザーの波長をスキャンし,共振球内に光共振状態を作り出すことで観察されたことで,SNOM用プローブとしての動作が期待できた.共振球に共振が起こっているときだけ極微小突起からの散乱光が観測できるので,キャビティーリングダウン(CRDS)分光プローブとしての動作も十分期待できる.そこで,試作プローブの動作テストとして,市販のCDの表面に多数存在するピット(高さ100nm,幅500800nm,長さ8703180nm)の観察を行なった.その結果,ピット列が観察され,試作プローブの有効性が示せた.また,プローブの極微小突起周りをモデル化し,三次元境界要素法による電磁場伝搬解析をおこなった結果,微小突起からの散乱光強度が,試料を近接させることにより急激に増加する様子がシミュレートできた.このシミュレーション結果は,定性的に実験事実とも良く対応した.さらに,微小突起の形状,材質が,散乱光強度(プローブの共振状態)に非常に強く影響を及ぼすことがわかり,CRDS分光法の実現性が高まった.今後は,試料材質によりもっとも共振状態が影響を受けるようなプローブの最適設計を行ないながら,CRDSに用いた際の過渡現象をFDTD法などにより解析することで,目的とするプローブを開発し,CRDS顕微システムとして完成させる.本研究は、走査型近接場光学顕微鏡(Scanning Near-field Optical Microscope;以下SNOMと略記する)に特有の応用分野を開拓する意味で、新型の分析システムの提案を行ない、その実証を試みている。具体的には、物質との近接効果が顕著に現れる可能性がある、μmオーダの微小球の共振状態に注目し、この微小球により試料表面の各微小領域でキャビティーリングダウン分光法(Cavity Ring Down Spectrosocpy:CRDS→研究課題中の略称はこの分光法を指す)を行ないながら走査型顕微法を実行するシステムの創成と実証と行なう。本年度は、研究開始に当たり、物質との近接効果が顕著に現れる可能性がある、μmオーダの微小球の共振状態に注目し、この微小球により試料表面の各微小領域でCRDSを行ないながら走査型顕微法を実行するシステムの製作を開始し、一部の性能評価を行なった。・光源部:リトロー配置の回折格子との間で外部共振器を構成する半導体レーザーを準備し、発振線幅(5MHz)、出力安定性、波長スキャン性能などを評価し、システムに組み込むのに十分な性能であることが分かった。・プローブ部:(a)の出力光を0.85μm用PANDAファイバで伝送し、非球面レンズによりコリメートして、微小球を照明する光学系を製作した。レーザー波長を変化させることにより、微小球の共振状態を確認し、維持することが出来た。・CRDS部微小球の共振状態の変化を、この球からの散乱光強度の変化により検出するため、PMT+アンプからなる高感度光検出系を製作し、パソコンにより信号処理する系を構築した。プローブ部の初期テストとして、50μmのポリスチレン球に1.5μmのアクリル突起を付着させたプローブを製作し、レーザー波長を固定(=試料が近接しない状態で共振状態を発生する波長)して、アクリル突起からの散乱光強度にフィードバックをかけ、通常のSNOMとしての試料走査を試みた。その結果、金属蒸着面のμmオーダの微細構造が観察でき、CRDSシステム構築の可能性が示せた。次年度以降は、CRDSシステムの完成と評価を目指す。

また、この共振球表面への極微小突起の製作は,i線露光用のフォトレジストを球表面に塗布し,HeCdレーザーの集光スポットを用いて感光させることにより実現した.露光スポットサイズ,露光時間の制御により,1μm程度の微小突起を再現性良く作製できた。この突起からの散乱光が、照明用のTi:サファイアレーザーの波長をスキャンし,共振球内に光共振状態を作り出すことで観察されたことで,SNOM用プローブとしての動作が期待できた.共振球に共振が起こっているときだけ極微小突起からの散乱光が観測できるので,キャビティーリングダウン(CRDS)分光プローブとしての動作も十分期待できる.そこで,試作プローブの動作テストとして,市販のCDの表面に多数存在するピット(高さ100nm,幅500800nm,長さ8703180nm)の観察を行なった.その結果,ピット列が観察され,試作プローブの有効性が示せた.また,プローブの極微小突起周りをモデル化し,三次元境界要素法による電磁場伝搬解析をおこなった結果,微小突起からの散乱光強度が,試料を近接させることにより急激に増加する様子がシミュレートできた.このシミュレーション結果は,定性的に実験事実とも良く対応した.さらに,微小突起の形状,材質が,散乱光強度(プローブの共振状態)に非常に強く影響を及ぼすことがわかり,CRDS分光法の実現性が高まった.今後は,試料材質によりもっとも共振状態が影響を受けるようなプローブの最適設計を行ないながら,CRDSに用いた際の過渡現象をFDTD法などにより解析することで,目的とするプローブを開発し,CRDS顕微システムとして完成させる.
ナラティヴ・アプローチによる看護師のキャリア形成支援実践者育成プログラムの開発

本研究では、看護師のキャリア形成支援者を育成するためのプログラムを開発する。したがって次の2点を目的とする。1.ナラティヴ・アプローチによる看護師のキャリア形成支援実践者育成の具体的な内容と指針を明らかにする2.ナラティヴ・アプローチによる看護師のキャリア形成支援実践者育成プログラムの成果と限界を明らかにするここでいう看護師のキャリア形成とは、“私の看護実践"に意味が生まれそれを重視することと、“私らしい看護実践像"の言語化により肯定的自己意識(Self-Esteem)をもって未来を志向することである。これらの目的を達成するために、本研究の前段階の研究にあたる「ナラティヴ・アプローチによる中堅看護師のキャリア形成プログラムの開発」(平成2426年度基盤研究(C),研究代表者:紙野)で得た成果をもとに作成された本プログラムの運用を開始した。本研究への参加に同意を得た医療施設に勤務する看護師を対象に1年間のプログラムを実施中である。平成30年度は、プログラムの実施を終了し、プログラムの公表と応用可能性の検証に取り組む予定であったが、現在プログラムを試用しているところである。やや遅れている状況ではあるが、研究者間およびフィールド代表者との綿密な打ち合わせを重ねることで、確実に遂行できている。研究計画に沿って平成30年度から引き続き、第2段階【フィールドにおけるプログラムの実施と分析】を行い、第3段階【プログラムの公表と応用可能性の検証】に着手する。第3段階【プログラムの公表と応用可能性の検証】では、研究成果の公表に向けて準備を行う。本研究は、看護師のキャリア形成支援者を育成するためのプログラムを開発する介入研究であり、次の2点を目的とする。1.ナラティヴ・アプローチによる看護師のキャリア形成支援実践者育成の具体的な内容と指針を明らかにする。2.ナラティヴ・アプローチによる看護師のキャリア形成支援実践者育成プログラムの成果と限界を明らかにする。これらの目的を達成するために、平成27年度は研究計画の第1段階【キャリア形成支援実践者育成プログラムの枠組みの検討】に取り組み、開発準備を行った。本研究の前段階の研究にあたる「ナラティヴ・アプローチによる中堅看護師のキャリア形成プログラムの開発」(平成24年27年度基盤研究(C),研究代表者紙野雪香)で得た成果をもとに、本プログラムの枠組みを作成した。内容は、<ステップ1>ナラティヴに関する理論的背景を知る、<ステップ2>“私の実践"とナラティヴ・アプローチの接点について考える、<ステップ3>“私の実践"を活写すことへの挑戦、<ステップ4>“私の実践"を伝えるということ、のプログラムを受講した後、各臨床現場でプログラムを実践する際にはスーパーバイズ体制をとれるようなプログラムとする。これらの目的を達成するために、平成27年度は第1段階【キャリア形成支援実践者育成プログラムの枠組みの検討】、平成2829年度前半は第2段階【フィールドにおけるプログラムの実施と分析】、平成29年度後半30年度前半は第3段階【プログラムの公表と応用可能性の検証】、平成30年度後半は第4段階【プログラムの内容および指針についてまとめる】の手順を踏む。現在までに、第1段階【キャリア形成支援実践者育成プログラムの枠組みの検討】までを終えて、フィールドの検討を始めている。平成28年度は、計画通りに第2段階【フィールドにおけるプログラムの実施と分析】に着手していく。以上のことから、おおむね順調に進展しているといえる。1.ナラティヴ・アプローチによる看護師のキャリア形成支援実践者育成の具体的な内容と指針を明らかにする2.ナラティヴ・アプローチによる看護師のキャリア形成支援実践者育成プログラムの成果と限界を明らかにするここでいう看護師のキャリア形成とは、“私の看護実践"に意味が生まれそれを重視することと、“私らしい看護実践像"の言語化により肯定的自己意識(Self Esteem)をもって未来を志向することであるこれらの目的を達成するために、平成28年度は開発準備の段階として、昨年度作成したプログラム案の試用および研究フィールドに入る準備を行った。本研究は、看護師のキャリア形成支援実践者育成プログラムの具体的内容とその指針を作成することを目的とした看護教育実践研究である。その目的を達成するために、以下の研究手順を踏む。平成27年度は、第1段階とし研究代表者が取り組んできたこれまでの研究の成果をもとに、キャリア形成支援実践者育成プログラムの枠組みを検討し作成する。平成28年度と29年度は、第2段階であるプログラムの実施と分析を行い、第3段階として関連学会や公開シンポジウムで成果を発表し、得られた示唆を参考にプログラムの修正を加える。平成30年度には、第4段階として、成果をまとめ臨床で活用できるパンフレット形式の報告書を作成する。平成28年度は、プログラム(案)の試用と研究フィールドに入る準備を行ったが、プログラムの実施には至っていない。そのことからやや遅れてはいる状況ではあるが、研究者間およびフィールド代表者との活発な打ち合わせを行うことができ次年度にむけて確実な基盤を作成できている。

1.ナラティヴ・アプローチによる看護師のキャリア形成支援実践者育成の具体的な内容と指針を明らかにする2.ナラティヴ・アプローチによる看護師のキャリア形成支援実践者育成プログラムの成果と限界を明らかにするここでいう看護師のキャリア形成とは、“私の看護実践"に意味が生まれそれを重視することと、“私らしい看護実践像"の言語化により肯定的自己意識(Self Esteem)をもって未来を志向することである。これらの目的を達成するために、平成29年度は、本研究の前段階の研究にあたる「ナラティヴ・アプローチによる中堅看護師のキャリア形成プログラムの開発」(平成2426年度基盤研究(C),研究代表者:紙野)で得た成果をもとに、本プログラム(案)を作成し、プログラム(案)実施の際に活用する配布資料を作成した。またプログラムを試用するためのフィールドの準備を整えた。平成29年度は、プログラム(案)の実施に取り組む予定であったが、そこには着手できていない。そのことからやや遅れている状況ではあるが、研究者間およびフィールド代表者との活発な打ち合わせを重ねることでき、プログラム(案)およびプログラム(案)実施の際に活用する配布資料を作成し、次年度にむけて確実に進捗している。本研究では、看護師のキャリア形成支援者を育成するためのプログラムを開発する。したがって次の2点を目的とする。1.ナラティヴ・アプローチによる看護師のキャリア形成支援実践者育成の具体的な内容と指針を明らかにする2.ナラティヴ・アプローチによる看護師のキャリア形成支援実践者育成プログラムの成果と限界を明らかにするここでいう看護師のキャリア形成とは、“私の看護実践"に意味が生まれそれを重視することと、“私らしい看護実践像"の言語化により肯定的自己意識(Self-Esteem)をもって未来を志向することである。これらの目的を達成するために、本研究の前段階の研究にあたる「ナラティヴ・アプローチによる中堅看護師のキャリア形成プログラムの開発」(平成2426年度基盤研究(C),研究代表者:紙野)で得た成果をもとに作成された本プログラムの運用を開始した。本研究への参加に同意を得た医療施設に勤務する看護師を対象に1年間のプログラムを実施中である。平成30年度は、プログラムの実施を終了し、プログラムの公表と応用可能性の検証に取り組む予定であったが、現在プログラムを試用しているところである。やや遅れている状況ではあるが、研究者間およびフィールド代表者との綿密な打ち合わせを重ねることで、確実に遂行できている。平成28年度は研究計画に沿って、第2段階【フィールドにおけるプログラムの実施と分析】に取り組む。平成27年度にキャリア形成支援実践者育成プログラムの枠組みは作成しており、その内容に基づいて行う。プログラムの実施と分析は、研究分担者と連携研究者とともに学際的協力によって遂行する。