hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
食餌誘発性心筋梗塞モデルマウスを用いた虚血性心筋症の発症予防と新規治療法の開発

年度当初は、本モデルの遺伝子の網羅的解析を含めた、虚血性心筋症のモデルマウスとしての病態および発症機序の推察とプロブコール投与実験の予定であった。しかし、近年、DPP4阻害薬の心血管系への作用が世界的に非常に注目され、臨床研究や基礎研究が盛んに行われつつある状況が加速されてきた(Scirica BM NEJM2013, Circulation2014. White WB NEJM2013. Ussher JR CircRes2014)。そこで本年度はDPP4阻害薬の実験を先行させた。虚血性心筋症にターゲットを絞ったDPP4阻害薬の研究はADAの発表でも注目され、2015年4月に開催される第79回日本循環器学会のシンポジウムにも採択されている。またプロブコールの投与研究についても十分な成果がでつつあり日本動脈硬化学会での公表を行ったところであり、さらに研究を進め第79回日本循環器学会に採択されている。当初の予定の虚血性心筋症のモデルマウスとしての病態および発症機序の推察については、生存曲線が虚血性心筋症による心不全死であることの確認のため、他の臓器での合併症、死亡マウスの心臓病理につき、探索を継続している。また、動脈硬化の評価については、大動脈のen faceの解析や冠動脈の解析もくわえつつあり、より詳細な病態の解明につながるものである。尚、心臓での発現遺伝子の網羅的解析は、先行したDPP4阻害薬の研究で予備的に解析を開始した状況である。以上、発現遺伝子の網羅的解析は遅れたが、DPP4阻害薬での研究の進展が予想以上であり、虚血性心筋症の新たな治療ストラテジーの開発という当初の目的を十分達成できつつあると考える。循環器内科学これまで成果が得られた、DPP4阻害薬の研究において、その生存率改善効果、心筋繊維化抑制効果のメカニズムをさらに解明する予定である。現在のところ、炎症抑制、血管内皮増生、心筋細胞死抑制、心筋エネルギー代謝のシフト等の面からの解析を進めている。これでより効率的なターゲットを見いだすとともに、そのターゲットに関連して制御可能な遺伝子群の有無を調べるため発現遺伝子の網羅的解析を進める。プロブコールにおいては、DPP4阻害薬と同じく心筋梗塞発症後の投与も行い、予防的投与との差異を検討する。DPP4阻害薬と同様に遺伝子の網羅的解析も行い、共通のターゲットを検索、心筋梗塞発症後の虚血性心筋症移行抑制に普遍的な治療ターゲットの有無を調べる。また、このマウスモデルが、虚血性心筋症に対する薬剤の治療評価やメカニズム解明に非常に有用であることが証明されたことから、臨床的または基礎的に治療効果が期待される他の薬剤が注目された場合、その投与実験を開始する。以上の研究を推進することにより、虚血性心筋症の新たな治療ストラテジーの開発という目標により近づけるものと考えられる。
高次高調波を利用した超精密形状計測法の開発

測れないものは作れない。測定技術はあらゆる科学技術の発展に不可欠である。超精密加工の分野では、近年飛躍的に高精度化が進み、1nmオーダーの精度でのものづくりが可能となってきている。こうした精密加工では、基本的に測定、評価された形状誤差データに基づき、加工が行われるため、計測精度が最終的な精度を決定する。これまで、干渉計、接触、非接触のプローブ方式など、様々な形状計測法が開発されてきている。近年、高次高調波と呼ばれる光源が基礎物理分野で利用されている。この光源は、コヒーレント、多波長、短波長の特徴を有している。その発生方法についても開発が進み、容易となってきている。そこで本研究では、高次高調波を用いた新規形状計測手法を提案している。波長30nm程度の波長をミラーに照射し、得られた集光プロファイルの強度から位相回復計算をすることで集光波面を求める。その集光波面から形状を逆算する。本研究目的を達成するため、平成29年度では、高次高調波による波面計測システムの構築と短波長のX線による波面計測の実証を行った。前者のシステムの構築では、現在の高次高調波の回転楕円ミラーによる集光システムに、集光強度分布計測のためのシステムを導入した。また、波長フィルターにより、単一波長を取り出すことも可能とした。後者では、放射光施設SPring-8において、波長4nmの軟X線を利用した位相回復による波面計測を行い回転楕円ミラーの形状を高精度に求めることに成功した。高次高調波の回転楕円ミラーによる集光システムにおいて、位相回復による波面計測システムをすでに構築し、SPring-8において位相回復計算による波面計測実験にも成功した。しかしながら、高次高調波の波面計測実験には至っていないため。2年間の計画の中で、高次高調波の集光波面計測システムを構築し、位相回復により短波長のX線の波面計測が可能となっている。今後、両者を組み合わせ、当初の研究目的である高次高調波による波面計測を行う。高次高調波は容易に波長を変えることができる。波長を変えて、同一形状の計測を行うと異なる位相誤差が算出され、それを比較することで計測精度を評価できる。今後、高次高調波の集光波面計測実験により、高次高調波による精密形状計測分野を開拓していく。本研究では、高次高調波による精密形状計測を目的としている。初年度において、形状計測のための物品購入を勧めたが、最終的な完成には至らなかった。高次高調施設は共用設備であり、他の研究者も多く利用するため、実験準備に遅延が生じた。今後、早期に形状計測システムを完成させ、研究を発展させる予定である。
加工食品の安全管理に対するアルゴリズム・サイエンスからのアプローチ

本研究では,加工食品の製造や流通のプロセスを対象として,製品の安全管理に関わる三種類の最適化モデル,組合せ食品袋詰めモデル,繰り返し型二部的経路計画モデルおよび中間経由地点の物流量を考慮した輸送計画モデル,を構築した.これらの最適化モデルに対して,計算の困難性を解析するとともに,厳密解を求めるアルゴリズムや精度保証のある近似解を求めるアルゴリズムを設計した.本研究では,加工食品の製造や流通のプロセスを対象として,製品の安全管理に関わる三種類の最適化モデル,組合せ食品袋詰めモデル,繰り返し型二部的経路計画モデルおよび中間経由地点の物流量を考慮した輸送計画モデル,を構築した.これらの最適化モデルに対して,計算の困難性を解析するとともに,厳密解を求めるアルゴリズムや精度保証のある近似解を求めるアルゴリズムを設計した.本研究では,加工食品の製造システム及び供給連鎖ネットワークについて,数学モデルの構築とアルゴリズムの設計を行う.当該年度の実施項目は,パッキングを軸とした製造システム関係で4項目(1-1各種数学モデルの構築,1-2アルゴリズムの設計,1-3マテハンの検討,1-4実装及び実験的性能評価),供給連鎖ネットワーク関係で2項目(2-1ネットワークの調査,2-2数学モデルの構築)であった.製造システムについては,動的計画法を基礎とした厳密アルゴリズムの設計及び計算手間の評価を行い,標準タイプのシステムを含め,実装においても高速計算が可能な数学モデルを明らかにした.一方で,理論的な計算手間が疑似多項式的であっても,将来,システムの機械的な性能向上の程度によっては,実行時間の観点から実装が躊躇われるアルゴリズムとなる数学モデルも見つかった.ただし,後者については,標準タイプの操作を仮想的に逐次化することによって,解の質を大きく損なうことなく,高速な実行時間を維持できることが観察されている.供給連鎖ネットワークについては,輸送問題の一種として定式化できる数学モデルとサブシステムの一つとしての二部グラフを用いた数学モデルを示した.一部先行して得られたものもあるが,前者の数学モデルについては近似困難性(具体的には,多項式的な計算手間での定数近似困難)の成果を,また,後者の数学モデルについては,ある固定された条件下で定数近似が可能であるという成果を得た.本研究では,加工食品の安全性と顧客の安心感を確保するため,パッキングを軸とした製造システム及び供給連鎖ネットワークを対象として,数学モデルの構築とアルゴリズムの設計を行っている.パッキングの製造システムに関連する実施内容としては,国際論文誌における研究成果発表を行った.具体的には,正味量を適正に保ちながら,鮮度劣化を防ぐ等の二次的な評価規準を考慮した食品袋詰めの離散最適化モデルに対して,実機での使用に耐えうる計算時間での動作を目指した疑似多項式時間アルゴリズムを議論した.また,その中では,過去の研究では殆ど言及されていない極小性を有する食品組合せの求解法についても議論した.供給連鎖ネットワークに関連する実施内容としては,英文論文誌や国際会議における研究成果発表を行った.主要な成果としては,連続する流通情報のやり取りの一表現として二部グラフを用い,そのネットワーク上の離散最適化モデルに対して,計算の複雑さと精度保証を持つ近似アルゴリズムを議論した.なお,興味深いことに,この数学モデルはある組立システムで生じる最適化問題でもある.現時点では,後者のモデルとしてとらえる方が直接的な有用性を理解しやすいかもしれない.その他,まだ近似困難性(あるいは近似可能性)については議論を深めていく余地が残っているものの,保管施設のスケジューリングや配送システムの資源割当についても,ネットワーク・アルゴリズムの設計を行った.本研究では,加工食品の安全性と顧客の安心感を確保するため,パッキングを軸とした製造システム及び供給連鎖ネットワークを対象として,組合せ最適化モデルの構築とアルゴリズムの設計を行って来た.最終年度となった本年度の研究実績はつぎのようにまとめられる.第一に,二部グラフ列によって表現されたネットワーク最適化問題に対して,その定数倍近似可能性を証明した.後に,この精度保証は6から3に改良できることが分かった.これまで,このネットワーク最適化問題の供給連鎖ネットワークへの対応づけを明示して来なかったが,今後は積極的に行っていく.第二に,保管システムのスケジューリング問題に対して,これまでにネットワーク・アルゴリズムを適用したヒューリスティックを設計していたが,そのタイトなインスタンスを発見した.この問題には関連する膨大な数の文献があって,精度保証の観点からは提案手法が最良のものとは言えないが,最悪ケース解析によってシンプルなアルゴリズムの限界を理解することが出来た.第三に,袋詰めにおける食品の選択問題に対しては,誤差パラメータによって合計重量の最適値からのずれを制御する近似アルゴリズムを設計した.理論的な精度保証を導くだけでなく,計算実験によってもその高い近似性能を観察した.第一と第三の成果は査読つき論文誌に発表することが出来た.さらに,直接的な研究成果ではないが,生産システムの専門家を講師に招き,大学院生を中心の聴講者とするミニ研究集会を開催することも出来た.18世紀の小麦製粉プロセスや19世紀の畜肉解体プロセスなど,興味深い話題に触れることが出来た.加工食品のパッキングの製造システムに関連する研究では,将来期待されるシステムの機械的な性能向上を見越したレベルで,パッキングの高速計算可能なアルゴリズムの設計基盤を確立している.また,供給連鎖ネジトワークに関連する研究においても,現時点では原始的な数学モデルに対してのみながら,精度保証を持つ近似アルゴリズムの構築に成功している.24年度が最終年度であるため、記入しない。本研究課題は,計画通りおおむね順調に進展しているので,大幅に研究計画を変更することは予定していない.最終年度においても,パッキングに関連する数学モデルの拡張および多項式時間近似スキームの検討は,当初の計画の遂行に支障のない範囲で継続していきたい.

また,供給連鎖ネットワークに関連する数学モデルについては,理論解析のみならず,計算実験による分析も強化する方向に持っていく.なお,消費者に届く加工食品について,震災後,有害物質の含有量(あるいは含有率)に対する関心が非常に強まっている.本研究課題の開始時には予想しなかった状況ではあるが,計測機器側とアルゴリズム側の協調で改善可能となる事項を明示するよう心掛けたい.24年度が最終年度であるため、記入しない。
超多孔質磁性クライオゲルを用いた地下水砒素汚染への応用

本研究では、アジア諸国で深刻な社会問題になっている砒素で汚染された地下水に適用することを目的として、マグネタイト/クライオゲルハイブリッド吸着材を開発し、砒素の除去システムを構築する。マグネタイト/クライオゲルハイブリッド吸着材を氷点下で調製しマクロ孔をもつ多孔体を得た。ポリアクリルアミドゲルはモノリス型にアルギン酸は球状体に形状加工し、バッチ法により砒素の吸着特性を評価した。また、モノリス型ハイブリッド吸着材を用いてカラム法により砒素の除去法を確立した。ポリアクリルアミドクライオゲル(PAAm)を支持体としたモノリス型および球状クライオゲルを種々の条件で合成し、物性評価を行った。モノリス型PAAmの細孔は合成温度に依存することが示され、温度の低下に伴って細孔径が減少することがわかった。モノマー濃度が増加すると膨潤率および膜厚は増加したが細孔径は減少することが示された。迅速なカラム吸着を行うためには低い膨潤率で、細孔分布がマクロ孔で占められているものが適していると考えられるため、合成条件をモノマー濃度10%,合成温度を-12°Cとした。次に磁性体の分散性を高めるために非イオン性界面活性剤共存下で合成を行った。界面活性剤なしの条件よりも小さな粒子が生成し6-10 nmの結晶性のナノ粒子(MAGT)が得られた。MAGTを用いて砒素吸着実験を行ったところ、その吸着量はMAGの約70%であった。これはMAGTの比表面積がMAGの1/3であり吸着サイトが減少したことに起因すると考えられる。MAGおよびMAGTを用いて得られた磁性PAAmはほぼ同等の物性を示した。高い砒素吸着量を示したMAGを分散担持したPAAm(MCG)を用いてAs(III)吸着の平衡到達時間を測定した。MAG/MCG=0.9(g/g)の時、MCGによる平衡到達時間はMAGとほぼ一致し、6時間で平衡に達した。カラム実験では空間速度SV=2.2 h-1ではすぐに破過したが、SV=0.52 h-1ではバッチ法で求めた飽和吸着量とほぼ、同等のAs(III)を吸着することができた。次に脱着剤に水酸化ナトリウム水溶液を用いて脱着実験を行ったところ、1M水酸化ナトリウム水溶液を用いるとAs(III)は約50倍に濃縮され、カラムに吸着されたAs(III)の約60%が脱着された。したがって、本研究で得られた磁性クライオゲルはAs(III)の吸着除去に有効であることが示された。本研究では毒性の高い無機砒素をターゲットとして地下水あるいは河川水から高速かつ高効率に除去できる高性能な砒素除去材の開発を行うことを目的としている。今年度は昨年度に引き続きポリアクリルアミドゲル(PAAm)の支持体にマグネタイトナノ粒子を高分散させたモノリス型クライオゲル(MCG)を合成し、As(V)の吸着特性をバッチ法およびカラム法により明らかにした。As(V)の吸着速度はマグネタイトナノ粒子を用いたときよりも遅かったことから、支持体であるPAAmの影響を受けることが明らかとなった。カラム法によるAs(V)の吸着特性を評価し、1 M水酸化ナトリウム水溶液を用いることによってMCGの再生が可能であることを明らかにした。模擬砒素汚染水を用いてMCGの吸着挙動を検討し、As(III)に対して選択的な吸着が示されたため、実用化が期待される。次にアルギン酸やセルロースなどの生体高分子を支持体としてマグネタイトナノ粒子を分散担持させた球状クライオゲル(MCGB)を調製した。アルギン酸のゲル化は一般にカルシウムイオンが用いられるが、本研究では鉄イオンを用いることにより高い砒素特性が示され、鉄イオンも砒素の吸着に関与することが示唆された。ジメチルアセトアミド/塩化リチウムを溶媒としてセルロースを溶解しセルロース濃度を2,5,10 wt%のそれぞれの濃度でMCGBを調製した。10 wt%が強度の最も高いビーズが得られたが、その形状は球状を保てず一部崩壊がみられた。これらの結果は、溶解時にセルロースが一部分解されたことを示唆した。今後セルロースを分解しない溶解条件と高濃度のセルロース溶液を調製可能な良溶媒の検討が必要である。アルギン酸MCGBを用いた模擬砒素汚染水からの吸着特性を詳細に検討した。アルギン酸MCGBは高い砒素除去特性を示したことから、MCGとともに実証試験を今後検討する予定である。本研究では毒性の高い無機砒素をターゲットとして水圏中特に地下水中から高速かつ高効率に除去できる高性能な砒素除去材の開発を行うことを目的としている。今年度はモノリス型ポリアクリルアミドクライオゲルの合成を行った。

モノマーのアクリルアミド水溶液に架橋剤としてN, N'-メチレンビス(アクリルアミド)を加えた反応溶液を円筒状容器に加え氷浴下で合成した。水洗後、凍結乾燥してポリアクリルアミドクライオゲル(AAゲル)を得た。得られたAAゲルをSEM観察および水銀圧入法により物性を評価した。得られたAAゲルは5-150μmのマクロ孔を持つ網目構造を示し、その平均細孔径は30μmであった。0.8m2/gの比表面積であることがわかった。氷点下温度で合成を行うことにより、溶媒である水が氷となるため、その周りでゲル化が起こったと考えられる。これを母材として、マグネタイトナノ粒子の分散化を行った。(Fe(II)+Fe(III))のエタノール溶液に含浸してエタノールを蒸発留去し、アルカリ溶液中に加えて振とう後、水洗し凍結乾燥した(MAGAA1)。SEM/EDXにより、得られたMAGAA1の細孔壁はマグネタイトでコーティングされていることが確認された。また母材であるAAゲルの細孔径が一部崩壊していることが確認された。金属イオン濃度を低くすると細孔の崩壊は抑制された。次にAAゲルの反応溶液中にマグネタイトナノ粒子を超音波を用いて分散させて、マグネタイト含有クライオゲルを合成した(MAGAA2)。反応初期段階で高い分散性を保っていたが、得られたMAGAA2は低い分散性を示した。反応中における超音波の照射あるいはマグネタイトナノ粒子を界面活性剤で被覆することにより分散性の低下を抑制できた。得られたモノリス型磁性クライオゲルは比表面積は低いがマクロ孔を多く有し、高い空隙率をもつ超多孔体であることが示された。本年度は、主に本研究で調製した磁性クライオゲルを用いて砒素汚染水を用いた吸着特性を評価した。1.モノリス型磁性ポリアクリルアミドクライオゲルを用いた汚染水からの砒素吸着バングラデシュの地下水の化学成分を分析し、調製したモデル汚染水を用いて、マグネタイトナノ粒子を分散させたモノリス型ポリアクリルアミドクライオゲルによる砒素の吸着特性を評価した。環境基準値を下回る砒素濃度の処理水を得ることができた。2.コバルトフェライトおよびマンガンフェライトによる砒素除去特性の解明バングラデシュの地下水pHは78であるため、等電位点がこのpH領域以上であることが望ましい。そこで、マグネタイトよりも等電位点が高い磁性体のコバルトフェライトおよびマンガンフェライトを調製し、砒素の吸着挙動を調べた。As(III)の吸着はマグネタイトと同等であることが明らかとなった。弱酸性領域でフェライトからコバルトイオンあるいはマンガンイオンの溶出が確認されたが、中性より高いpH領域では溶出しなかったことから、マグネタイト同様に利用可能であることが示された。分離分析化学本研究では毒性の高い無機砒素をターゲットとして地下水あるいは河川水から高速かつ高効率に除去できる高性能な砒素除去材の開発を行うことを目的としている。今年度の目的は砒素除去に適したクライオゲルを合成して砒素除去フィルターを開発するための基礎的データを収集することである。昨年度に引き続きモノリス型クライオゲル(PAAm)および砒素の吸着材となる磁性体を分散担持された磁性クライオゲルの合成を行い、砒素の吸着特性を評価した。目的に合致した砒素除去フィルターを開発するために細孔径と膨潤率に着目して支持体であるPAAmの最適な合成条件を見出し、再現性を確かめた。マグネタイトを分散担持して得られた磁性PAAmはバッチ法において速い吸着速度が示された。
三重鎖DNAに特異的に結合するヒト由来のタンパク質の生物学的役割

我々は三重鎖DNA結合タンパク質を通して三重鎖DNAの生物学的役割について調べているが、本年度は我々の開発したMg^<2+>依存三重鎖アフィニティ・キャプチャー法を用いて結合タンパク質の作用する相手側のDNAを精製し、クローニングを行なった。この方法はMg^<2+>の存在下でビオチン化したオリゴヌクレオチドとゲノムDNAとの間で三重鎖を形成させ三重鎖形成能を有するDNAのみをストレプトアビジン・マグネティックビーズを用いて濃縮する方法で非常に効率良く精製が行なえるという利点を持つ。この方法を用い、ヒトのゲノムDNAよりポリ(dA)・ポリ(dT)、ポリ(dG-dA)・ポリ(dC-dT)及びポリ(dG)・ポリ(dC)配列を含むDNA断片をクローニングし、解析を行なった。前年度までにポリ(dA)・ポリ(dT)配列の解析結果を報告したが、本年度はポリ(dG-dA)・ポリ(dC-dT)配列について次の様な解析を行なった。(1)ゲノムDNA中での不安定性を調べるため個体間の多型を調べた。(2)世代間で安定に遺伝されることを見た。(3)いくつかのがん組織を調べ、正常細胞との間の変異を確認した。これらのことからポリ(dG-dA)・ポリ(dC-dT)配列はヒトのゲノム中において個体間で多型を示すほど不安定であることが解かり、多型マーカーとしても有用であることが示唆された。これらの結果はまとめて現在論文を投稿中(印刷中)である。また、ポリ(dG)・ポリ(dC)配列についてもクローニングを終え、解析を行なっている。高等動物ゲノムに高頻度に現われるポリプリン・ポリピリミジン配列のひとつのポリアデニン・ポリチミン配列はマグネシウムイオンの存在下において他のポリチミン鎖と三重鎖を形成することがしられており、生物学的意義が問われている。我々はこの疑問に答えるためヒトゲノムよりまずポリアデニン・ポリチミン配列の精製を試みた。その際我々は通常のDNAハイブリダイゼーションによる方法を採らず、三重鎖形成能によるDNAのスクリーニングの方法を新たに開発した。具体的には三番目の鎖となる34ヌクレオチドのポリチミン配列をビオチンで標識し、三重鎖形成反応後、三重鎖を形成したDNAのみアビジンをコートしたマグネティックビーズに吸着させ精製を行った。また用いるDNAにアダプターを結合し、PCRを用いて増幅する事によりこの操作を繰り返し使えるようにした。そしてこの課程を45回繰り返すことによりヒトゲノムから三重鎖形成配列を約10^6倍に濃縮し、それを用いてライブラリーを作製した。その中のクローンの塩基配列を解析することにより全クローンの約80%がポリアデニン・ポリチミンの配列を有し、確かにこの方法により三重鎖形成能のあるDNA配列が濃縮されることが解った。またそのポリアデニン・ポリチミン配列の長さは15bp35bpであった。またいくつかは既知のレトロポゾンや反復配列のポリ(A)鎖であるが、未知の配列もいくつか得られ、これがどの様な配列の一部か現在解析を行っている。我々は三重鎖DNAの生物学的意義を調べる目的で、三重鎖DNAに特異的に結合するタンパク質が結合する相手側のDNAに注目した。このようなDNA配列はポリプリン・ポリピリミジン配列と呼ばれ高等動物ゲノムに数多く存在するが、効果的なクローニングの方法はなかった。そこで、我々は、三重鎖形成能を利用して配列を濃縮し、クローニングする方法を考案した。

この方法はビオチンラベルしたオリゴヌクレオチドをマグネシウムイオンの存在下でDNAと混ぜ、三重鎖形成を行い、三重鎖DNAのみをストレプトアビジンマグネティックビーズを用いて精製する方法で、この方法を用いて我々はオリゴヌクレオチドの配列を変える事によりポリ(dA)・ポリ(dT)・ポリ(dG-dA)、ポリ(dC-dT)及びポリ(dG)・ポリ(dC)タイプの三重鎖形成配列を精製しクローン化を行った。このうち、ポリ(dA)・ポリ(dT)を含むDNA配列についてさらに解析したところ得られたクローンの約60%がヒトのAluファミリーの一部である事が解った。他のクローンは未知の配列であり、ゲノム中のコピー数は数コピー以下であった。また、この様な配列にはDNAの多型が起こりやすい事が知られているが、調べたクローンでは確かに個体間で差が見られた。従って、この配列を含む部分において組み換え反応などの活性が高いと考えられるため、他のクローンについても同様に検討を行なっている。我々は三重鎖DNAに特異的に結合するタンパク質をヒト由来細胞より精製した。このタンパク質の生体内で果たす役割について知見を得るため次の段階としてこれの基質となるDNA配列をヒトのゲノムDNAより濃縮、精製する方法(Mg^<2+>依存三重鎖アフィニティ・キャプチャー法)を開発し、実際にゲノムDNAより三重鎖DNA形成配列をクローニングした。この方法はMg^<2+>の存在によって三重鎖を形成し、特定の二重鎖DNAを精製する方法である。まず第一段階として、最も研究が進んでいるポリ(dT)・ポリ(dA)・ポリ(dT)三重鎖を構成するポリ(dT)・ポリ(dA)配列を含むDNA断片を濃縮、クローニングし、これを報告した。また、このクローニングの際に見られたポリ(dT)・ポリ(dA)配列を持つプラスミドの大腸菌内での不安定性についても三重鎖形成による可能性について調べ別に報告した。さらに、次の段階として、ポリ(dG-dA)・ポリ(dG-dA)・ポリ(dC-dT)三重鎖を形成するポリ(dG-dA)・ポリ(dC-dT)配列のクローニングを同様に行なった。得られたいくつかの配列についてヒト個体間での多型を調べたところ非常に顕著な多型を示し、ゲノムDNA上でこのような配列が比較的不安定であることが確認された。また、直腸がんなどではこのような配列が不安定であることが知られているが、いくつかのがん組織を調べたところ、大腸がんにおいて正常組織と異なる長さを示す例が見つかった。現在、これらの知見をまとめた論文を投稿(in press)している。
加齢黄斑変性のサブタイプにおける歯周病の関与

2018年1月から12月の1年間に、松本歯科大学病院眼科に通院中の抗血管内皮増殖因子阻害薬の硝子体内注射の治療を行っている加齢黄斑変性の患者157人(男性118人、女性39人)をサブタイプに分類した。診療録、カラー眼底写真、光干渉断層計、フルオレスセインおよびインドシアニングリーン蛍光眼底造影検査の所見をもとに滲出型加齢黄斑変性をサブタイプに分類した。典型的加齢黄斑変性80人(51 %)、ポリープ状脈絡膜血管症66人(42 %)、網膜内血管腫状増殖8人(5 %)に分類できた。並行して、加齢黄斑変性の患者および対照群として白内障患者の歯周病検査を行った。加齢黄斑変性患者の平均年齢は75.3歳で、対照群の72.1歳と統計的有意差はなかった。総歯数は加齢黄斑変性患者において23.3本、対照群において21.5本で統計的有意差はなかった。歯周病の評価の1指標となる平均probing depth (PD)は加齢黄斑変性患者で2.28 mm、対照群で2.3 mmで有意差がなかった。平均PD値で有意差が出なかったため、前歯と奥歯に分けて、評価した。前歯では加齢黄斑変性1.95 mm、対照群で2.04 mm、奥歯で加齢黄斑変性2.51 mm、対照群で2.79 mmで有意差がなかった。代表値として、最深部の長さを検討した。こちらも前歯では加齢黄斑変性3.25 mm、対照群で4.20 mm、奥歯で加齢黄斑変性4.33 mm、対照群で5.78 mmで両群間において差がなかった。以上の検討を進める一方、加齢黄斑変性に関する論文が多いRetina誌の定期購読を継続し、情報収集をした。また、加齢黄斑変性に関する海外の最新の情報を得るために、欧州網膜会議に出席した。松本歯科大学病院眼科に通院する加齢黄斑変性の患者を診療録、カラー眼底写真、光干渉断層計、フルオレスセインおよびインドシアニングリーン蛍光眼底造影検査の所見よりドルーゼンのみの前駆病変、滲出型加齢黄斑変性、萎縮型加齢黄斑変性の診断をすすめている。滲出型加齢黄斑変性157人を典型加齢黄斑変性51%、ポリープ状脈絡膜血管症42%、網膜内血管腫状増殖5%のサブタイプに分類できた。一方、歯周病の診断は2割程度にとどまっている。最大の理由は大学のある塩尻市内の患者は1割程度で患者の住所が遠い(病院から30km50km)ため、頻回通院が大変である。眼科診察では診断のため、外来診察において、視力検査、眼圧検査、眼底写真、光干渉断層撮影の上、暗所での細隙灯検査と眼底検査が必要となる。さらに抗血管内皮増殖因子阻害薬の硝子体内治療時は術前・術中・術後処置も必要となる。眼科外来での滞在時間が多く、同日の歯周病診察が負担となっている。また、高齢者が多く、視力障害が主な症状であり、院内および通院時の移動に伴う転倒等の危険を考えると歯周病診断を同一日に行うには患者負担が多くなる。実際、研究の説明をしても同意されない症例に時々直面する。また、歯周病だけの診察に別の日に来院することは遠方からの通院が多いため、同意されない場合もあり、研究対象者数が増えてこない。また、加齢黄斑変性のサブタイプ分類と関連する遺伝子多型に関する解析は進んでいない。こちらは軽微ながら採血という侵襲を伴うため、歯周病診察が進行しない間はより、同意を得ることが難しい状況にある。本研究においては眼科外来患者における滲出型加齢黄斑変性を典型加齢黄斑変性、ポリープ状脈絡膜血管症、網膜内血管腫状増殖のサブタイプへの分類は進んでいる。最終年度は滲出型加齢黄斑変性のほか、ドルーゼンのみの前駆病変および萎縮型加齢黄斑変性の診断を追加する。これは診療録、カラー眼底写真、光干渉断層計、フルオレスセインおよびインドシアニングリーン蛍光眼底造影検査の所見があるので、継続的に診断を行うことは遂行可能である。最終年度においてはより精力的に患者の歯周病診察へ地道な説明を継続的に行うことに尽きる。加齢黄斑変性診断に必要な視力検査、眼底写真、光干渉断層撮影、蛍光眼底造影検査、医師による診察の途中に本研究の必要性および具体的な方法を示した案内を行い、歯周病検査への理解を求める。または眼科の検査(たとえば視力検査後に散瞳剤の点眼を行い、30分程経過してから眼底写真、光干渉断層計による撮影、医師による診察が行う)の合間に歯周病科に移動して歯周病診察を受けてもらうという対策がある。または眼科外来に本研究の目的・協力依頼を書いたポスターを掲示して、診察を待つ間に、啓蒙する対策がある。

もちろん、本研究においては松本歯科大学の「学術研究倫理指針」を尊重し、「松本歯科大学研究等倫理審査委員会」での承認を得ているが、被験者の募集に関しては、研究へ参加することは個人の自由意志であり、強制されるものでないこと、同意しなくても不利益は生じないこと、いったん同意した場合もいつでも同意を撤回できること、その場合は採取した研究用血液、結果は破棄されて、研究に使用されないこと、データは個人情報であり、厳重に管理され、個人識別情報(氏名、生年月日、患者ID等)とは分離し、施錠された部屋のキャビネットに厳重に保管されることなどを十分説明した上で、推進する。血管内皮増殖因子阻害薬の眼内(硝子体内)注射により、加齢黄斑変性の一部においては視力の維持、高度の視力低下の回避が可能となった。しかし、この治療は高額かつ複数回投与が必要であり、超高齢化社会を迎えた今日の日本では、保険システムおよび財政破綻の可能性さえある。従って、疾患の発症前のアプローチで発症を抑えることは、各患者のみならず、医療費削減にも極めて有効な対策である。本研究では加齢および動脈硬化という共通項を有する歯周病と加齢黄斑変性との関連を研究する。平成29年度において、松本歯科大学病院眼科に通院する加齢黄斑変性の患者を診療録、カラー眼底写真、光干渉断層計、フルオレスセインおよびインドシアニングリーン蛍光眼底造影検査の所見よりドルーゼンのみの前駆病変、滲出型加齢黄斑変性、萎縮型加齢黄斑変性の診断を行った。さらに滲出型加齢黄斑変性は典型加齢黄斑変性、ポリープ状脈絡膜血管症、網膜内血管腫状増殖のサブタイプに分類した。一部の加齢黄斑変性の患者においては現在歯すべてについて6点法による歯周組織検査を実施し3mm以上のクリニカルアタッチメントレベル(CAL)が1部位でも認められた被験者を歯周病と診断し、平均probing depth (PD)、平均CAL、Bleeding on probing (BOP)率から歯周病の程度を評価した。加齢黄斑変性に関する論文が多いRetina誌の定期購読を始め、情報収集の手段とした。また、加齢黄斑変性に関する最新の情報を得るために、欧州網膜会議に出席した。松本歯科大学病院眼科に通院する加齢黄斑変性の患者を診療録、カラー眼底写真、光干渉断層計、フルオレスセインおよびインドシアニングリーン蛍光眼底造影検査の所見よりドルーゼンのみの前駆病変、滲出型加齢黄斑変性、萎縮型加齢黄斑変性の診断は行っている。また、滲出型加齢黄斑変性を典型加齢黄斑変性、ポリープ状脈絡膜血管症、網膜内血管腫状増殖のサブタイプへも分類している。しかし、加齢黄斑変性患者に対する歯周病診断が進んでいない。最大の理由は加齢黄斑変性の患者の年齢が高く、歯周病診断に必要な十分な歯数を有さない患者が多いことである。眼科診療時、普通に会話をしていても歯周病の診察の説明時点で、「入れ歯」であることが発覚することが多い。また、大学のある塩尻市内の患者は1割程度で患者の住所が遠い(病院から30km50km)ため、通院が大変である。元々、地元の眼科医療機関からの紹介であり、診断と治療のために無理して遠方にある眼科の診療に来院される。眼科診察では診断のため、視力検査、眼底写真、光干渉断層撮影、蛍光眼底造影検査、診察が行われる。治療が必要な場合は散さらに瞳、血圧測定、滅菌、抗血管内皮増殖因子阻害剤の硝子体内注射と眼科外来での滞在時間が多く、同日の歯周病診察は負担となっている。さらに、高齢者かつ治療後は片眼帯となり、移動に伴う転倒等の危険を考えると歯周病診断を同一日に行うには患者負担が多くなる。実際、研究の説明をしても同意されない症例に時々直面する。また、歯周病だけの診察に別の日に来院することは遠方からの通院が多いため、同意されない場合もあり、研究対象者数が増えていない。2018年1月から12月の1年間に、松本歯科大学病院眼科に通院中の抗血管内皮増殖因子阻害薬の硝子体内注射の治療を行っている加齢黄斑変性の患者157人(男性118人、女性39人)をサブタイプに分類した。診療録、カラー眼底写真、光干渉断層計、フルオレスセインおよびインドシアニングリーン蛍光眼底造影検査の所見をもとに滲出型加齢黄斑変性をサブタイプに分類した。
即興的な芸術表現活動における他者との踊り合いを通した相互学習プロセスの検討

本研究の目的は、即興的な芸術表現であるブレイクダンスが営まれる場面において、共演者との間で生じる協働活動の様相について検討を行い、その活動がもたらす変化や変化が生じる過程を実証的に解明することであった。そのため、(1)熟達者2名による協働活動場面、(2)熟達者と初心者2名による協働活動場面、(3)熟達者3名による協働活動場面、(4)表現活動の分析のための手法と観点、に関する検討を行った。結果として、他者の表現を取り入れ発展させ新しい表現を生成する・やり取りの中から新しい表現パタンを生成する、といった相互作用を活発に行い、多様な側面に影響を与え合いながら互いの表現が展開していく様相が示された。今年度は当初計画にもとづき、表現者(ダンサー)2名による協同活動場面を対象として取り上げ、そこで生じるダンサーの変化を検討した。また、予備研究(フィールドワーク、予備実験)の結果、ダンサーの変化を捉える上で必要とされた、表現活動の指標に関する検討も行った。まず、協同活動場面を対象とした研究では、熟達したダンサーによって行われた協同活動場面を対象に,予備研究の結果得られた手法(映像記録による身体運動測定と内省報告による認知過程の測定)を用いて検討を行った。この研究は既に予定していた人数のダンサーに対して実施済みであり、平成26年度に国内学会において研究発表を行った。また、現在は下記の表現活動の指標に関する検討により得られた観点を踏まえ、データの追加・更なる詳細な分析を行っている状態である。表現活動の指標に関する検討では、具体的には、「協同活動場面に臨むまでにダンサーが積み上げてきた技術」と「ダンサーのパフォーマンスの全体的な傾向」を捉える指標が必要とされたため検討を行った。1点目については、表現者の練習場面や実際の協同活動場面を対象とした縦断的なフィールドワークを実施し、上記した手法により検討を行った。2点目については、実際の協同活動場面や実験室実験で測定したダンスパフォーマンスの記録映像、モーションキャプチャーシステムによる身体運動のデータ等を用いて、パフォーマンスの傾向を数理的な観点に基づいて分類する手法を開発した。これらの研究は平成26年度に国内学会における研究発表、論文出版等を行っており、平成27年度においても引き続き国内学会、国際学会等で発表予定である。なお、上記した研究計画の修正、表現活動の指標に関する検討が必要とされたため、協同活動場面における初心者を対象とした研究計画に関しては、平成27年度に実施することとした。本年度では、1)熟達者を対象とした2名で行われる協同活動場面の検討、2)熟達者と初心者の2名で行われる協同活動場面の検討、3)熟達者を対象とした3名で行われる協同活動場面の検討、4)表現活動の指標に関する検討、を行った。まず1については平成26年度の計画を継続し、データの追加・分析を行った上で、知見を関連学会で発表している。また、2については、熟達者と初心者の2名による協同活動場面を対象として取り上げ、そこで生じた表現活動の変化について、平成26年度の予備研究、そして1の研究の結果得られた手法(映像記録による身体運動測定)を用いて検討を行った。3については、ダンス領域で「サイファー」と呼ばれる複数名間での協同活動場面を対象にした研究デザインを設定し、複数名間で生じる表現方法の変化について検討した。この研究については、相互に与える影響の複雑さや、表現者が積み上げてきた技術等を事前に把握する必要性から、予備研究や研究デザインの修正を行い、現在もデータの追加・更なる分析を行っている。なお2、3に関しては、知見を整理・統合し、平成28年度に国内の関連学会において発表する予定である。さらに4については、平成26年度に実施した研究を継続し、「表現者が協同活動場面までに積み上げてきた技術」と「表現者のパフォーマンスの全体的な傾向」を捉える指標を開発・検討した。これは、縦断的なフィールドワークや、実験室実験で測定したパフォーマンスの記録映像、モーションキャプチャーシステムによる身体運動のデータ等を用いて、パフォーマンスの傾向・詳細を抽出する手法であり、国内の関連学会において研究発表を実施した。なお、上記した研究デザインの修正、予備研究の実施が必要とされたため、3の3名で行われる表現活動場面の検討については、平成28年度に継続してデータの追加・分析を実施する予定である。研究の進捗状況としては、当初の予定よりもやや遅れて進行している状態である。表現者2名による協同活動場面(熟達者2名による協同活動、初心者と熟達者による協同活動)を対象とした研究については、特に熟達者2名に関する研究について、当初予定していた人数以上を対象とした検討を行うことが出来た。さらに研究デザインや表現活動を捉える指標に関しても、国内学会や研究会を通して議論を活発に行い、予定していたよりも精緻化・構造化された研究デザイン・指標を用いて検討を行うことが出来ている。特に開発した表現活動を捉える指標は、表現者の実際の活動について、練習場面を含めた長期的な観点から捉えたものであり、練習場面、協同活動場面両者を含めた表現活動に関する検討全般に渡って適用可能と考えられる。この研究は、当初予備的な研究として位置づけていたものの、学会発表といった規模の大きな研究へと発展させることが出来た。また、熟達者3名による協同活動場面を対象とした研究については、先述したように研究デザインの修正、予備研究の実施が必要とされたため、現在継続して計画を実施している状態である。引き続きデータの追加・分析を行い、国内の関連学会等でその成果を発表する予定である。

まず本年度では、熟達者3名による協同活動場面の検討(研究1)と表現活動の指標に関する更なる検討(研究2)、の2点を実施した。そして、昨年度までに実施済みの研究で得られた知見と併せることで、即興的な芸術表現活動において他者との間でどのような相互作用・学習過程が生じるのか、その現象やその現象を捉えるための観点について総合的な考察を行った。まず1については、平成27年度の計画を継続し、データの追加と分析を行い、関連する知見を学会・研究会で発表している。特にこの研究に関しては、現象を捉えるための観点・装置が必要とされるため、データの追加・分析と並行して上記の点についても検討し、データ測定のための有用な観点を抽出することが出来た。結果として、3名による協同活動場面に加え、4名以上の複数名による協同活動場面にも適用可能と考えられる手法・知見を得ることが出来た。次に2については、研究1のデータ測定と縦断的なフィールドワークを実施する中で、表現活動の概要と表現活動の中で生じる相互作用を捉えるための指標・観点を抽出した。これらはパフォーマンスの記録映像やモーションキャプチャーシステムによる身体運動データ等を用いて、表現活動の傾向や相互作用の詳細を抽出する手法であり、国内の関連学会・研究会において発表を行った。最後に上記の知見と昨年度までに実施した研究の知見(熟達者2名による協同活動場面、熟達者と初心者による協同活動場面)とを併せ、即興的な芸術表現活動において他者との間で生じる相互作用・学習過程について体系的な整理・検討を行った。本研究の目的は、即興的な芸術表現であるブレイクダンスが営まれる場面において、共演者との間で生じる協働活動の様相について検討を行い、その活動がもたらす変化や変化が生じる過程を実証的に解明することであった。そのため、(1)熟達者2名による協働活動場面、(2)熟達者と初心者2名による協働活動場面、(3)熟達者3名による協働活動場面、(4)表現活動の分析のための手法と観点、に関する検討を行った。結果として、他者の表現を取り入れ発展させ新しい表現を生成する・やり取りの中から新しい表現パタンを生成する、といった相互作用を活発に行い、多様な側面に影響を与え合いながら互いの表現が展開していく様相が示された。研究の進捗状況としては、概ね当初の計画通りに進行している状態である。ダンサー2名による協同活動場面を対象とした研究については、当初予定していた人数以上の熟達したダンサーを対象として検討を行うことが出来た。また国内学会や研究会を通して研究手法に関する議論も活発に行い、当初予定していた手法よりも精緻化された手法を用いて検討することが出来ている。今後はこの手法に基づいたデータの追加と分析、論文執筆等を進め、国内学会・国際学会等で、その成果を継続して発表していく予定である。さらに、協同活動場面を対象とした研究に伴って、表現活動の指標に関する研究も実施することが出来た。この研究は、熟達したダンサーの実践を長期的な観点から捉えたものであり、知見として提示された表現活動の指標は、協同活動場面を対象とした研究を含め、ダンサーの表現活動に関する検討全般に渡って適用可能であると考えられる。
学校教育におけるジェンダーバイアスに関する研究

学校教育におけるジェンダー・バイアスに関し、中学生の理科という教科の学習を取り上げ、興味や関心、態度のジェンダー差の有無、その背景要因を明らかにすることを目的とした実証的研究を行った。理科と自然・科学への関心や態度に関する質問紙調査を、初年度は中学1年生に、2年度は2年生となったほぼ同一の対象に実施した。中2調査は、中1調査と同質問と新質問で構成した。調査対象は中1調査が全国各地の公立中学校9校961名、中2調査は同様の8校869名である。中1調査は、学校特性差を見るため東京都と近県の国公立・私立中学計22校でも実施した。第3年度には、調査校の教員インタビュー調査を行った。データ分析の軸は、男女差、理科の好き嫌いによる違い、中1から中2への変化、理科のおもしろさの変化のしかたによる違い、成績の自己評価ランクによる違い、学校特性(入試の有無、共学と女子校)による違いなどである。主な結果は次のとおりである。(1)科学的現象への関心は、内容により女子が高いもの、男子が高いものがある。(2)理科への関心は、女子は生物的内容、男子は物理的内容で高く、学習内容の理解度は数学的センスを要する単元ほど女子が低い。(3)理科の好き嫌いや学ぶ意味のとらえ方の男女差は中1から中2にかけて拡大し、とくに女子は理科嫌いの傾向が強まる。(4)理科に対する態度や信念の男女差は、全般的には中1から中2にかけて減少傾向にあるが、女子の方が理科に対し否定的な学習態度を示す。(5)理科の実験時の中心的役割は男子、準備・片づけや記録担当は女子が多い。(6)得意・苦手な科目は、英語を除きジェンダー化しており、また理科の得意・苦手は男子のほうが全般的な成績の自己評価との関係が強い。(7)女子校の生徒は実験や理科に積極的だが、意識としては理科は男子の教科とする傾向が強い。本研究は、学校教育におけるジェンダー・バイアスの問題の中でも、とくに「理科」という教科を取り上げ、興味や関心、態度のジェンダー差の有無、およびその背景要因を明らかにすることを目的とする。平成11年度においては、中学生の理科および自然・科学への関心や態度に関する調査を実施した。調査対象は、全国各地の公立中学校9校に通う中学1年生961名(女子437名、男子470名、不明54名)。調査方法は、学校を通して実施した学級単位での集団自記式質問紙調査である。調査時期は、1999年67月である。結果の概要(一部)は、以下の通りである。1自然や科学への関心(詳しく知りたいと思うこと)について、日常生活と関連づけた具体的な事象16項目を示してたずねた。その結果、男女とも「CDの音が聞こえる仕組み」「星の一生」「ダイオキシンの毒性」に関心が多く寄せられていた。男女を比較して、女子の回答が多かったのは、「星の一生」「ジェットコースターで人が落ちないのはなぜか」などであり、一方女子よりも男子の回答が多かったのは、「石や岩のでき方」「ダイオキシンの属性」であった。2「理科」という教科の4領域を構成する「物理」「化学」「生物」「地学」の代表的な学習内容を挙げ、それぞれについて関心の度合いをたずねた。各領域に対応する学習内容としては、「電気や磁石の働き(物理)」「氷・水・水蒸気の変化(化学)」「動物や植物の成長のしかた(生物)」「天気の変化(地学)」を挙げた。

その結果、男子よりも女子の方が関心を持っているのは「動物や植物の成長のしかた(生物)」であり、女子よりも男子の方が関心を持っているのは「電気や磁石の働き(物理)」であった。以上の結果から、具体的な科学的事象のレベルでは、男女それぞれに多様な領域に関心を示しているにもかかわらず、理科という教科への関心には、男女差がきわめて顕著であることが示された。本研究は、学校教育におけるジェンダー・バイアスの問題の中でも、とくに理科という教科を取り上げ、興味や関心、態度のジェンダー差の有無、およびその背景要因を明らかにすることを目的としている。2000(平成12)年度は、昨年度の調査に引き続いて、同じ調査校を対象とし中学2年に進級した生徒に質問紙調査を実施した。調査対象は、全国各地の公立中学校8校に通う中学2年生869名(女子408名、男子443名、不明18名)。調査方法は、学校を通して実施した学級単位での集団自記式質問紙調査、調査時期は、2000年6月7月である。結果の概要(一部)は、下記の通りである。1理科の好き嫌いや学ぶ意味のとらえ方の男女差は、中1から中2にかけて拡大している。とくに女子の方が理科嫌いの傾向を強めている。2理科の実験時にとる役割には、中心になるのは男子、準備・片づけや記録の担当は女子と、性別による偏りがみられた。3理科への関心と学習内容の理解度について、(1)女子は生物的内容、男子は物理的内容に関心が高い、(2)関心の高い単元ほど理解度も高い、(3)数学的センスを要する難しい単元ほど女子の理解が低い、という結果が得られた。4理科に対する態度や信念の男女差は、全般的には中1から中2にかけて減少傾向にあるものの、女子の方が理科に対して否定的な学習態度を示しており、また、男子の方が教員からの期待を感じている。5理科に関して、男子の方が親から期待されていると受け止めており、家庭内の性別しつけについては、女子の方が強く感じている。6得意・苦手な科目は、英語を除き、ジェンダー化している。男子では理科の好き嫌いと得意・苦手との関係は強いが、女子では理科好きでも苦手だという者が少なくなかった。理科と他教科や全般的な学業成績との関係は、男女で異なる構造を持つと推察された。本研究の目的は、学校教育におけるジェンダー・バイアスに関し、とくに理科をとりあげ、興味や態度のジェンダー差の有無と背景要因を明らかにすることである。前年度までに、全国各地の公立中学校で中1(9校)と、その追跡で中2(8校)に対し、集団自記式質問紙調査を実施した。また、中1調査は、学校特性による違いを見るため、東京都と周辺の国公立・私立中学計22校(2校は全国調査と重複)でも実施した。2001(平成13)年度は、中2調査の二次分析、学校特性による違いの分析、調査校の教員インタビュー調査を行なった。結果の概要(一部)は下記のとおりである。1.中2調査の二次分析理科のおもしろさの変化を軸に見ると、以前からおもしろい>中学からおもしろい>中学からつまらない>前からつまらない、の順に理科好きが多いが、中学からつまらなくなるのは実験への参加の減少が関係しており、中学からおもしろいという女子は計算を必要とする学習内容の理解度が高い。成績の自己評価を軸に見ると、女子は下位者で「理科離れ」がとくに強く、上位者は自然や科学に本質的な興味を示している。理科の得意・苦手や態度は、男子のほうが成績ランクとの関係が強い。
アレフ1上の組合せ的命題の独立性と強制法理論

一昨年から継続して行っているMiami UniversityのPaul B. Larsonとの共同研究を発展させた。本年度に、2度、直接合う機会を作り、議論を深めた。特に、一般のccc forcingのジェネリックを、Pmax-iterationで構成していく方法を発見した。これを用いて、いくつかの未解決問題を、Pmax variationsを用いて解決を図ることが今後の課題である。Larson-TodorocevicがKatetovの問題を解決するために、[ω_1]^2上の分割に対する性質、rectengle refining propertyを導入し、それに関するMartin's Axiom MAより弱い公理、κ_2(rec)を導入した。上記の研究がなされる以前に、Todorcevicは、MAとcccな分割に関する命題の同等性や、MA_<N_1>の弱い断片たちに関する研究を行っている。
野菜類の水銀吸収阻害効果を利用した養殖クロマグロ水銀レベルの低減化

養殖魚の水銀レベルを低下させるため,いくつかの手段を講じた。水銀排出を促進するシステインを餌に混入させた場合,0.1%の混入率があれば,0%の場合と比較して有意に水銀の蓄積量が少なくなった。また,マダイの腸管を使い,水銀の吸収を抑える物質を野菜汁から探したところ,25種類の野菜のうち10種類に水銀吸収を抑える効果があり,その物質は分子量3000以上の水溶性食物繊維である可能性が示唆された。また,システインを配合飼料に混入させて飼育実験を行ったところ,0.1%から10%添加区において有意な水銀蓄積の抑制が認められたが,0.01%および0.05%では有意差は見られなかったマダイ活魚の腸管を用い,野菜圧搾液(ダイコン,レンコン,サトイモ,カブ,ゴボウ,トウモロコシ,アボカド,ゴーヤ,シシトウ,サンチェ,ニラ,ネギ,トウミョウ,コマツナ,チンゲンサイ,フキ,レタス,ニンニク,ニンニクの芽,レッドオニオン,ミズナ,オオバ,ワサビ,ミョウガ)によるメチル水銀吸収阻害効果を検討した。その結果,対照実験の吸収率(77.2%)に対して有意な吸収阻害効果が認められたのは,ワサビ(57.8%),コマツナ(62.9%),サンチェ(54.4%),ゴーヤ(53.1%),ミズナ(46.7%),トウモロコシ(43.6%),オオバ(43.4%),アボカド(41.8%),ゴボウ(39.3%),シシトウ(39.3%)であった。これらの野菜を含めて分類ごとに分けると,果菜類は実験に用いた4種中すべて,香辛野菜類も3種類中2種で有意な吸収阻害効果が見られた。しかし葉茎菜類では,13種類の野菜を用いたのにも関らず、3種でしか有意な効果が見られなかった。次に,吸収阻害効果の認められた野菜圧搾液について,分画分子量3000の言外ろ過膜を用いて分画し,分子量3000以上と以下の2つの画分について同様の実験を行ったところ,シシトウ,ゴボウ,ミズナ,サンチェ,オオバにおいて高分子側に吸収阻害効果が認められた。一方,ワサビ,コマツナにおいては分画後に両画分ともに効果が消失した。おそらく,分画膜に阻害効果を有する物質がトラップされたものと思われる。また,オオバにおいては高分子側で吸収促進が認められており,新たな機能性を有する物質の存在がうかがわれた。養殖魚の水銀レベルを低下させるための野菜類のスクリーニングを,Caco-2細胞による腸管モデルを用いて実施した。野菜をすりおろしたのち,遠心分離によって得られた上清液10%(v/v),1ppmメチル水銀を含む培地をトランスウェルキットの上部に添加し,24時間以内にキット下部へ通過するメチル水銀の割合を吸収率として測定した。使用した野菜はレタス,キャベツ,タマネギ,ホウレンソウ,アスパラガス,ニンニク,ショウガ,ニンジン,ジャガイモ,トマトの10種類であった。その結果,野菜汁を用いない対照区に対して,いずれの野菜・時間とも対照区よりも高い吸収率を示し,水銀吸収阻害効果は認められなかった。この原因のひとつの可能性として,野菜汁の濃度が高すぎたため細胞の活性に悪影響を及ぼし,腸管細胞層のバリヤ機能が低下してメチル水銀が拡散に近い状態でキット下部へと通過したことが考えられた。ただし,電子顕微鏡による形態観察を行った限りではタイトジャンクションを含めて形態に異常は認められていないため,細胞自体の透過性が向上したとも考えられる。水銀の排出促進を目的として,水銀の排出促進効果をもつといわれるシステインを用い,飼料中のシステイン濃度と水銀蓄積の関連について調べた。【方法】市販のグッピー(オス,体重約0.3g)30尾を30cm水槽(15L)に収容し,水温25°Cにて4週間まで飼育した。飼料におけるシステイン含有量は0.01から10%まで設定し,メチル水銀濃度はいずれも1ppmとした。給餌量は魚体重の1%量/日とした。魚体水銀測定サンプルは週に1度,また底面にたまる排泄物は2日に1度回収して1週間分をまとめ,それぞれサンプリングした。試料は60%硝酸により分解し,冷蒸気原子吸光法により総水銀量を測定した。【結果】飼育期間中に有意な体重の変動は認められなかった。魚体の水銀濃度はシステインを含まない対照区では飼育4週目までに開始時濃度の約2倍にまで上昇した。一方,システイン添加区の場合,1%および10%添加区では4週目において対照区の約3分の2の水銀濃度となり,有意差が現れた。さらにシステイン濃度の低い0.1%および0.5%添加区でもやはり4週目において対照区の約3分の2に濃度上昇が抑えられたが,0.01%および0.05%では対照区との間に有意差は見られなかった。この結果より,この給餌条件下ではシステイン濃度0.1%であれば有意な水銀濃度上昇の抑制が可能であると思われた。この結果から,システインをより多く含む野菜類や水産廃棄物の選定が次の段階における課題となった。【目的】水銀吸収阻害効果のある野菜汁について,将来的な量産化を考慮し,凍結による阻害効果への影響を明らかにする。【方法】有意な水銀吸収阻害効果を認めたシシトウ,ゴボウ,オオバを材料とした。