hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
強皮症硬化機序の解析とHGF遺伝子プラスミドを用いた遺伝子療法の開発

最終年度では、Smad3複合体が細胞核に接合することを競合阻害するSmad Decoy ODN(おとり型DNA:デコイ)をHVJ-liposomeに組み込んで強皮症モデルマウスに投与し、in vivoでその硬化抑制効果とメカニズムを検討した。またFibroblastを用いたin vitroの実験でSmad DecoyODNのコラーゲン代謝に与える影響などについても検討した。ブレオマイシン(BLM;日本化薬、10μg)あるいはPBS(正常コントロール)を7週令のメスのC3Hマウス背部に1日おきに4週間皮下注射した。ブレオマイシン投与群はさらに3群に分け、ブレオマイシン単独投与群と、ブレオマイシンに加HVJ-liposomeに組み込んだSmad DecoyODN投与群、ないしはScrambled DecoyODN投与群とした。ブレオマイシン単独投与群(右上344.1±30.7μm)ではPBSの正常コントロール群(左上;149.0±25.9μm)に比べ真皮厚が2倍に増加し、真皮全層にわたって真皮膠原線維の膨化、変性を認め正常組織に存在する脂肪層はみられなかった。これは以前にも報告している通り、人間の強皮症に非常に類似した皮膚硬化所見である。ブレオマイシンに加えSmad DecoyODN投与した群においては真皮厚が238.0±65.2μmと著明に減少し、膠原線維の膨化、変性の程度もわずかで脂肪層も保たれていた。一方、Scrambled Decoy ODN投与群(の真皮厚は289.4±52.8μmとブレオマイシン単独投与群と有意差は認めなかった。強皮症モデルマウス皮膚におけるヒトHGF遺伝子プラスミド投与による皮膚硬化に対する効果とサイトカイン、ケモカイン、蛋白分解酵素の動態の検討(1)HGF遺伝子プラスミド投与による皮膚硬化抑制の解析ブレオマイシン(BLM)をC3Hマウスに4週間、連日皮下注射し硬化を誘導した。その後、ヒトHGF cDNA (2.2Kb)をVector plasmidに挿入後、HJV-liposomeに組み込み10mcg/mouse筋肉内に2週間ごとに2回投与しPBSを筋肉内に投与した群と4週間後に比較検討した。BLM最終投与4週間後に、背部皮膚を切除し組織学的に検討する。一部の実験ではホルマリン固定した組織標本において、H&E染色以外にトルイジンブルー、ギムザ、コンゴレッド染色を各々施行し、硬化病変部における皮膚の厚さと結合織の変化を検討。また、皮膚ハイドロキシプロリン量をWoessnerの方法を用いて測定。その結果、HGF cDNA投与群では皮膚の厚さ結合織の効果さらに、human HGFがmRNA、蛋白レベルで発現しているかを明らかにするため皮膚、肺、筋肉、腎臓などの臓器の抽出液および血清よりRT-PCR法、ELISA法を用いて測定する。HGFの発現分布を検討するため、硬化が低下していた。ヒトHGF抗体を用いて免疫組織化学的に検討したところplasmid投与群では明らかに増強がみられた。さらに、皮膚におけるTGF-β1の発現レベルを測定するためELISA, RT-PCR法を用いてmRNA,蛋白レベルで定量比較したところHGF-plasmid投与群ではTGF-β1の発現レベルが低下していた。今後、肺線維症におけるHGF-plasmidの効果を検討する。(2)HGF遺伝子によるサイトカインの動態の検討HGF遺伝子プラスミドあるいはコントロールプラスミドを投与した強皮症マウスの皮膚をそれぞれ採取し、発現されているサイトカイン(TGF-β,PDGF, CTGF, IL-6, IL-4, IL-5, bNGFなど)をRT-PCR法と免疫組織法を用いて検討する。

HGF投与してそれぞれに皮膚におけるサイトカイン発現を検討し、主要な役割をはたすサイトカインを検出したところTGF-bは減少していた。HGF遺伝子プラスミドをHVJ-liposomeを用いて強皮症モデルマウスに有効であることを報告した。しかし実際にヒトに投与するときにはHVJ-liposomeなどのベクターは使用できない。そこで今回、naked HGFが強皮症モデルマウスで有効か検討した。ブレオマイシン(BLM)をC3Hマウスに4週間、連日皮下注射し硬化を誘導した。その後、ヒトHGF cDNA (2.2Kb)をVector plasmidに挿入したnaked DNAを10mcg/mouse筋肉内に2週間ごとに2回投与しPBSを筋肉内に投与した群と4週間後に比較検討した。BLM最終投与4週間後に、背部皮膚を切除し組織学的に検討した。一部の実験ではホルマリン固定した組織標本において、H&E染色以外にトルイジンブルー、ギムザ、コンゴレッド染色を各々施行し、硬化病変部における皮膚の厚さと結合織の変化を比較検討したところHGFのnaked plasmid投与群では明らかに真皮の厚さが減少していた。また、皮膚ハイドロキシプロリン量をWoessnerの方法を用いて測定して比較検討したがnaked HGF plasmid投与群では明らかに低下していた。さらに、human HGFがmRNA、蛋白レベルで発現しているかを明らかにするため皮膚、肺、筋肉、腎臓などの臓器の抽出液および血清よりRT-PCR法、ELISA法を用いて測定した。その結果liposomeで導入した群に比べHGF量は低下するもnaked plasmid投与群でもhuman HGFは定量できた。HGFの発現分布を検討するため、抗ヒトHGF抗体を用いて免疫組織化学的に検討したがnaked HGF plasmid投与群では真皮全体にHGFの発現が認められた。さらに、皮膚におけるTGF-β1の発現レベルを測定するためELISA, RT-PCR法を用いてmRNA、蛋白レベルで定量し比較検討したところnaked HGF plasmid投与群ではTGF-β1の発現レベルが抑制されていた以上のことよりnaked HGF plasmid投与によっても皮膚効果を改善することが明らかになった。この結果よりヒトヘのHGF-plasmid療法の可能性が示唆された。(1)HGF遺伝子によるケモカインの動態の検討HGF遺伝子プラスミドあるいはコントロールプラスミドを投与した強皮症マウスの皮膚を採取し、発現されているケモカイン(MlP-1a, RANTES, Eotaxinなど)をRT-PCR法と免疫組織法を用いて検討した。さらに、HGFを投与して、それぞれにおけるサイトカイン発現を検討し、主要な役割をはたすケモカインを検出する。また、同時にそれらの操作によって出現する局所浸潤細胞を検討し、主役を務める炎症細胞を決定する。(2)HGF遺伝子による蛋白分解酵素、蛋白分解酵素阻害剤の動態の検討HGF遺伝子プラスミドあるいはコントロールプラスミドを投与した強皮症マウスの皮膚を採取し、発現されている蛋白分解酵素(MMP-1, MMP-2, MMP-9, TlMP-1)をRT-PCR法と免疫組織法を用いて検討する。
公民権運動から半世紀、アフリカ系アメリカ文学のパラダイムの行方──世代間の対話

本研究は、公民権運動後、エスニック・リバイバルと多文化主義の下で1980年代までに構築されたアフリカ系アメリカ文学・文化の枠組みが、アフリカ系の集団内部で拡大した格差や多様性、合衆国内の文化戦争、グローバル化と消費文化の浸透等を背景に、80年代末90年代に内外から揺さぶられる状況を、新たな文学・文化、ひいては共同体の構築を模索する動きとして、主に二つの観点から分析してきた。第一は、1970年以来アフリカ系アメリカ文学・文化を牽引するトニ・モリスンの文学と時代の相関関係の検証である。マニュスクリプト調査の成果も踏まえ、8090年代のモリスン中期の展開を分析し、ポスト公民権運動時代の急激な変化と新世代の出現に民族のアイデンティティの危機を見た作家が、奴隷制以来のアフリカ系の歴史・文化の再発見/再構築を通じて、民族の過去と未来を接続する文学世界の創造を模索した過程を跡づけた。第二は、公民権法制定後の時代に育ったポストソウル世代とモリスン世代の間の、民族文化とアイデンティティの枠組みをめぐる破壊力と創造力に満ちた対話関係の検証である。研究に当り、トマス・アレン・ハリス氏、ダンジー・セナ氏、ダフニ・ブルックス氏ら多くのポストソウル世代のアーチストや研究者から貴重な証言を得た。成果には、平成27年度に共訳書1本、ポストソウルのアーチスト2名の招聘・講演会開催、同28年度にカリフォルニア大学での招待講演1本と共著書1本、同29年度に日本アメリカ文学会東京支部での招待研究発表1本、最終年の同30年度は、モリスンが『タール・ベイビー』(1981)で描いたポスト公民権運動時代の黒人女性像がいかに若い世代に修正されていくかを論じた黒人研究学会での研究発表1本と学術論文1本がある。今後は、同じ問題意識の下でさらにモリスンのマニュスクリプト調査を進め、研究の射程を21世紀にまで拡げたい。計画に必要な修正を加えつつ、以下の通り研究を進めた。1Toni Morrison文学の背景ーMorrison文学が成熟期を迎える1980年代から90年代に作家が深く関わった多文化主義運動と文化戦争についての文献を収集した。また、2016年3月にMorrisonがハーバード大学で行った講演会に参加し、作家自身によるParadise(1997)執筆前後の問題意識についての議論を聞く機会を得た。3ポストソウル研究ー2015年6月、映画監督Thomas Allen Harris氏を招聘し、ドキュメンタリー映画Through a Lens Darkly: Black Photographers and the Emergence of a People (2014)の上映と講演会を企画・開催した。同映画の日本語字幕版制作では監修を務めた。同氏と黒人表象とアイデンティティをめぐる問題について意見交換をするとともに、黒人研究の会の会誌編集長として来日講演原稿の編集に携わり、『黒人研究』第85号に収録した。2016年3月には、アメリカ大使館の助成金と科研費により作家Danzy Senna氏を招聘し、同大使館主催の講演会と科研費による研究会を企画・実行した。研究会には、木内徹氏、森あおい氏、平沼公子氏(聖徳大学)柴崎小百合氏(城西国際大学)、小泉泉氏(フェリス女学院大学)他が参加し、人種、歴史、身体、アイデンティティをめぐる活発な議論が行われた。計画に一部変更が生じたものの、総合的にはおおむね順調に進展している。成果は以下の通りである。研究テーマの二本柱であるToniMorrison文学の背景とポストソウルと呼ばれる世代の文化表現について、いずれも必要な文献資料の収集を進めることができた。Morrison文学の背景の研究においては、2015年10月に出版した研究書の翻訳を通して、Morrison作品とその批評の再確認をすることができた。共訳者である木内徹氏、森あおい氏とMorrison文学をめぐり率直な議論を交わせたことも大変有益であった。また、2016年3月にMorrisonがハーバード大学で行った講演を聞く機会を得、本研究が関心を寄せる1990年代当時の問題意識について作家自身の議論を聞くことがかなったのは、本研究において貴重であった。一方、ポストソウル研究では、予想を上回る成果を得た。当初2015年度は1名の研究者もしくはアーチストを招聘する予定であったが、映画監督Thomas Allen Harris氏と作家Danzy Senna氏の2名を招聘する機会を得た。彼らの思想や創作活動とその背景について直接に話を聞き議論を交わせたことは、計り知れない収穫であった。他方、やむをえず計画が変更となったのは次の2点である。一つは、2015年度と2016年度に分けて行う予定だったポストソウル関連のゲスト招聘が2015年度に集中することになった結果、文献を通じた198090年年代の社会・文化・政治状況についての基礎研究に遅れが出ることとなった。2つ目は、国外出張の目的をMorrisonのハーバードでの講演出席へと変更したため、計画していた多文化主義運動と大学カリキュラムにおけるエスニック・スタディーズの歴史的展開についての現地調査は延期せざるをえなかった。これらの遅れや変更について、2016年度に可能な限り修正したい。1.カリフォルニア大学アーバイン校での講演

3月3日に"Of Futurity, Then, and Now: A Re-Reading of Toni Morrison's Tar Baby"と題し、同校のアフリカ系アメリカ研究と東アジア言語・文学の教員と大学院生を対象に、1日本で1980年代からモリスンを中心にアフリカ系アメリカ文学を研究に携わってきた環境と問題意識、2注目度の低い四作目の小説Tar Babyと「文化的孤児」と評された女性主人公の再評価、について講演した。その中で、モリスン文学がポスト公民権運動時代にアフリカ系アメリカ人の新旧世代間を橋渡しする役割を果たしたことを指摘するとともに、アフリカ系アメリカ研究を通して異なる時代や社会における人間の抑圧や疎外の体験を橋渡しする批評の枠組みを構築することの今日的重要性を指摘した。複数の専門分野の現地の研究者と対話したことは意義深かった。2.共著『新たなるトニ・モリスンーその小説世界を拓く』(金星堂、2017年3月31日)の出版「第四章時間の遠近法とポスト公民権運動時代の神話ー『タール・ベイビー』再読」(57-75頁)において、従来注目されてこなかったトニ・モリスンの第四作『タール・ベイビー』(1981)は、作家がポスト公民権運動時代にアフリカ系アメリカ人が直面している文化的危機をの状況を精査し、自らが取り組む文学的主題を思索する場であったと位置づけ、その後の四半世紀にわたるモリスン文学の展開を予示する重要な作品として再評価した。さらに、『タール・ベイビー』と『パラダイス』(1997)の間に歴史表象の枠組みの転換が見られることを論証し、多文化主義運動から文化戦争へ向かう80年代からノーベル賞を経て2000年代に至るモリスン文学のを形成過程を分析して、今日的視点から『タール・ベイビー』の新たな読みを提示した。青山学院大学より一年間の在外研究を与えられ、9月からイェール大学に客員研究員として滞在中である。それに伴い予想を超える機会に恵まれ、よい意味で計画を逸脱した部分はあるものの、研究は概ね順調に進展している。Morrison文学の198090年代の展開とポスト公民権運動時代との関わりを考察する作業を継続中である。7月にはニューヨークで「編集者としてのモリスン」をテーマとするトニ・モリスン学会に参加し、内外の研究者と70年代以降のアフリカ系アメリカ文学にモリスンが果たした役割を多角的に議論した。9月以降、プリンストン大学図書館のトニ・モリスン・ペーパーズとニューヨーク市立図書館のベルグ・コレクションを閲覧し、第四作Tar Baby(1981)とそれに続く三作品Beloved (1987)、Jazz (1992)、Paradise(1997)との関係を検証中である。ここまでの成果は、3月3日にカリフォルニア大学アーバイン校で行った講演と共著『新たなるトニ・モリスンーその小説世界を拓く』(金星堂、3月31日)で発表した。2ポストソウル研究10月のデンバーでのASA大会やイェール大学での見聞を通じ、ポストソウル世代にとどまらずオバマ後の時代を生きる世代までを射程に入れたより長いスパンで、アフリカ系アメリカ研究分野の議論をしていくための視座を得た。聴講した現代アートおよびポピュラー音楽の授業からは、モリスン研究を文学分野での議論のみならずジャンルを横断した文化状況とアーチストの時代への応答というより広い文脈で考える多くのヒントを得て、今後の研究課題が明確になった。
新規降圧性ペプチドホルモン、サリューシンによる心筋収縮抑制作用

顕著な降圧活性を有する新規生理活性ペプチド、サリューシンの作用機序を明らかにするため、in vivoラットならびに摘出灌流心モデルを用いて心機能に及ぼす作用を検討した。(1)サリューシンのin vivo効果:サリューシン-βは用量依存性に一過性で急激に平均血圧(MAP)と心拍数(HR)を減少させたが、これらと並行して大動脈血流量(AF)も減少を示した。サリューシン-α投与後、MAP、HR、AFはいずれも低下したが、その効果はサリューシン-βの1/10倍以下であった。サリューシン-β投与後、著明なMAPとHRの低下にもかかわらず全身血管抵抗の有意な変化を認めなかった。サリューシン-βによる急峻なMAPとHRの低下はatropine前投与によってほぼ完全に阻害されたが、propranololによっては影響されなかった。以上から、サリューシン-βは心収縮能だけでなく拡張能も低下させ、その作用機序として副交感神経系の関与が示唆された。(2)摘出心におけるサリューシン-βの効果:摘出心workingモデルにおいては、サリューシン-β添加後、AFおよびMAPは低下したが、HRの明らかな減少は認められなかった。サリューシン-βにより、心拍出量、およびAFは経時的に低下し、dp/dt_<max>も減少した。従って一回拍出量、および一回拍出仕事量も減少した。しかしこの間、冠血流量は有意な変化を示さなかった。従って、摘出心ではサリューシン-βが直接心筋に対して作用し、陰性変力作用を持つことが示された。さらに、摘出心non-working(Langendorf)モデルにおいても、サリューシン-β灌流後、冠血流量の低下は認められなかった。以上からサリューシン-βの作用は冠血流の低下を介して作用する可能性は否定的であった。
吊り天井システムの地震時の損傷発生機構とその被害軽減方法に関する研究

平成30年度は昨年度に引き続き、「隙間なし天井システムにおける損傷発生機構を明らかにすること(課題A)」について重点的に実験等を実施した。具体的には以下のとおりである。1.熊本地震で被害が確認されたグリッド・システム天井の最小構成ユニットから成る試験体を用いた振動台実験を行い、地震被害として確認されている天井パネルの落下現象を従来とは異なるメカニズムで発生することを明らかにした。2.吊りボルトのような極めて細長い部材によって吊り下げられた天井システムが地震力のような動的水平外乱を受けた場合に、昨年度まで実施してきた鉛直外乱を受ける時同様に、吊り材に発生する非線形挙動により吊り材に大きな張力が生じること、およびこの張力により下地材に損傷が発生し天井面の落下が誘発されることを実験的に明らかにした。なお、この現象が質量マトリクスなどを改善した数値解析法を用いて高精度で再現できることを確認した。3.地震時を含めた被害を軽減するために、設置初期段階からの経年的な力学的特性の劣化を評価するための指標の選出およびその定量的に評価するための分析方法を提案し、その妥当性を実験的に確認した。特に、経年劣化によって落下被害が発生すると考えられている天井ボードについて、浸漬試験により含水率とボードのビス頭抜け強度および剛性の関係を実験的検討により明らかにした。さらに、打音試験を客観的に診断する方法として超低周波音対応騒音計を用いて含水率上昇による材料的劣化に伴い低下する固有振動数を計測する方法の妥当性を示した。本研究課題に使用していた工学院大所有の振動台の改修設置工事が予定よりも長引き、振動台実験が十分に実施できなかった。その代りに、昨年度同様、被害軽減に向けた経年劣化に関する研究を時間をかけて検討することができたことから、概ね順調と判断している。研究課題の大きな柱の一つである数値解析法の整備に重点を充て、これまで実験的検討で得られてきた結果の再現性を含めて検討する。世界標準仕様を検討するために、海外の非構造要素研究者と連絡を密にし情報交換を行っていく。特に、非構造要素耐震性能に関する国際グループSPONSEによるworkshopに積極的に参加するようにする。本研究では、現在落下原因が特定できていない隙間なし天井システムにおける損傷発生機構を数値解析的・実験的検討により明らかにすること(課題A)、天井懐に存在する設備機器の天井システムに及ぼす影響や天井自体の規模効果を定量的に把握すること(課題B)、さらに、これらを踏まえて、勾配を有する天井やシステム天井などを含めた吊り天井システムの落下現象に対する包絡的損傷条件を提示するとともに、これまで曖昧であった「吊り」天井と言う言葉を規模効果を含めて工学的に再定義すること(課題C)を目的としている。各課題ごとに平成28年度実績を記す。課題Aについては、マシュー方程式に代表される細長い棒の動的不安定問題が吊り天井システムにおける吊りボルトと錘から成るシステムにおいても発生することを鉛直方向加振実験により検証するとともに、当研究グループが所有する解析プログラムによって実験結果を高精度で再現できることを確認した。すなわち、吊りボルトのような下端に錘を有する極めて細長い棒に上下方向のみの動的外乱が作用した場合でも大きな横振動が発生することを明らかにした。課題Bについては、天井システムと設備機器の相互作用を明らかにすることを目的として、材長ならいに端部境界条件が異なる吊りボルトを試験体として、これに設備機器を模擬した錘を衝突させる簡易な動的試験結果を通して、設備機器と吊りボルト間の衝突時の反発係数を導出した。3つ目の課題「吊り天井の再定義」については、本課題が包絡的な検討課題であるために平成28年度は実施していない。本研究課題に取り組む以前に予備的に行った数値解析などによる予想が大きく間違っていなかったために実験などの手戻りが少なかったため概ね順調に進展している。ただし、天井システムのユニット試験体による動的実験は振動台の制御系が不調のために行うことができなかった。平成29年度は、本研究で挙げている「隙間なし天井システムにおける損傷発生機構を明らかにすること(課題A)」について重点的に実験等を実施した。昨年度に引き続き吊り天井システムにおける吊りボルトを抽出した動的実験を実施した。平成29年度の実験の特徴は、試験体の吊りボルト下端に設置する質点を単なる錘ではなく、鋼製下地在来工法天井の実際の仕様を想定した天井面とした点である。この試験体に鉛直方向加振を実施し、昨年と同様に動的不安定現象が発生し、その結果として接合金物の脱落ならびに天井面が落下する挙動が発生することを確認した。このことは本研究課題の課題Aに対するひとつの解が見出されたことを意味する。さらに、鋼製下地在来工法天井を対象としてこれを構成するすべての構成要素から成る試験体に様々な複合力を作用させたときの損傷過程を実験にて確認した。ただし、得られた実験結果を数値解析モデルを適用し再現を試みたが、傾向としては捉えられているものの精度として芳しいものではなかった。熊本地震で被害が確認された米国に代表されるグリッド・システム天井に着目し、その下地材、特に接合部要素の静的加力実験ならびにこれに対応する数値解析を実施した。一方で、天井システム加振実験が振動台改修作業未完了のために実施できなかったために、その代りとして健全性評価を目的とした実験を実施した。

これは接合金物の一部を人的に外した天井面の固有振動数を計測する実験であり、これにより天井面の損傷具合と固有振動数には相関があることを定量的に示すとともに、超低周波音対応騒音計によって固有振動数が測定可能であることを示した。本研究課題に取り組む以前に予備的に行った数値解析などによる予想が大きく間違っていなかったために実験などの手戻りが少なかったため概ね順調に進展していると考えている。ただし、これまで構築してきた天井用鋼製下地材の数値解析モデルのさらなる精度向上の必要性が確認されたために今後改善していく必要がある。また、昨年度に引き続き今年度も天井システムのユニット試験体による動的実験は振動台の制御系の改修完了が3月となってしまっために行うことができなかった。そのために、非構造要素の健全性を評価するための手法について予備的な実験を実施し、上記の遅れを別の角度から補うことができたと考えている。平成30年度は昨年度に引き続き、「隙間なし天井システムにおける損傷発生機構を明らかにすること(課題A)」について重点的に実験等を実施した。具体的には以下のとおりである。1.熊本地震で被害が確認されたグリッド・システム天井の最小構成ユニットから成る試験体を用いた振動台実験を行い、地震被害として確認されている天井パネルの落下現象を従来とは異なるメカニズムで発生することを明らかにした。2.吊りボルトのような極めて細長い部材によって吊り下げられた天井システムが地震力のような動的水平外乱を受けた場合に、昨年度まで実施してきた鉛直外乱を受ける時同様に、吊り材に発生する非線形挙動により吊り材に大きな張力が生じること、およびこの張力により下地材に損傷が発生し天井面の落下が誘発されることを実験的に明らかにした。なお、この現象が質量マトリクスなどを改善した数値解析法を用いて高精度で再現できることを確認した。3.地震時を含めた被害を軽減するために、設置初期段階からの経年的な力学的特性の劣化を評価するための指標の選出およびその定量的に評価するための分析方法を提案し、その妥当性を実験的に確認した。特に、経年劣化によって落下被害が発生すると考えられている天井ボードについて、浸漬試験により含水率とボードのビス頭抜け強度および剛性の関係を実験的検討により明らかにした。さらに、打音試験を客観的に診断する方法として超低周波音対応騒音計を用いて含水率上昇による材料的劣化に伴い低下する固有振動数を計測する方法の妥当性を示した。本研究課題に使用していた工学院大所有の振動台の改修設置工事が予定よりも長引き、振動台実験が十分に実施できなかった。その代りに、昨年度同様、被害軽減に向けた経年劣化に関する研究を時間をかけて検討することができたことから、概ね順調と判断している。課題A「隙間なし天井システムの耐震性能」については、まず、今年度行うことができなかった天井システムのユニット動的実験は振動台のオーバーホールが平成29年度にはなされる予定なので、オーバーホールが完了次第行うこととする。鋼製下地在来工法
細胞内還元環境に応答する高分子ミセル型遺伝子キャリアの構築と機能評価

本研究は、生体内投与による遺伝子導入の成功に向け、新たな遺伝子キャリアシステムの開発を目標とした。まず、キャリアのベースとして高分子ミセルを用いた。これは、DNAを内包するカチオン性高分子(ポリリシン,PLys)コアの周囲を、生体適合性の高いポリエチレングリコール鎖(PEG)が覆うため、生体内での異物認識機を回避することが可能となる。このミセルの内核にジスルフィド結合の架橋を導入した。ジスルフィド結合は還元環境である細胞内においては開裂するため、血液中では架橋によりミセル型キャリアは安定化されるが、標的細胞内に取り込まれると速やかに架橋は開裂し、治療用遺伝子は放出されることが期待される。実際に、静脈を介して、架橋ミセル型キャリアをマウスに投与したところ、DNAのみや架橋なしのミセル型キャリアからは遺伝子発現が見られなかったが、高密度で架橋を導入したキャリアからは遺伝子発現が確認された^<1)>。そして、さらに高い遺伝子導入を得るために、DNAを内包するカチオン性高分子構造の最適化を図った。すなわち、エステル-アミド交換反応を介して種々のカチオン構造をスクリーニングしたところ、ジエチレントリアミン(DET)構造を有する構造は、培養細胞に対し低毒性かつ高遺伝子発現能を示すことが発見された^<2)>。このDET構造は、DNAとのアフィニティが高くないため、局所投与による生体への遺伝子導入においては効果的な遺伝子発現が得られたが、静脈投与においては効果が見られなかった。そこで、DETのアフィニティを改善するために、DNAと高いアフィニティを示すLysとハイブリッドしたポリカチオンの合成を試みた。一つは、PEG-b-PDET-b-PLysのトリブロックコポリマー構造である^<3)>。もう一方は、PEG-b-P(DETr-Lys)のランダムポリカチオン構造である。これらのポリマーからなるミセル型キヤリアを調製し、その機能を評価したところ、ともに高い安定性と培養細胞への遺伝子導入能を有することが確認された。今後は、これらの系のin vivo遺伝子導入をも含めた詳細な検討を行う予定である。
肺移植後早期グラフト機能不全の発症における炎症性メディエーターの変動と診断的価値

3年間に28症例の肺移植(脳死肺移植20例、生体肺葉移植8例)を実施し、全例救命できた。外科手技と麻酔・術後管理の向上により、重篤な肺移植後早期グラフト機能不全は発生しなかった。血中の炎症性メディエーターの中でインターロイキン6と好中球エラスターゼは人工心肺中に増加したが、術後は一定の傾向を示さなかった。インターロイキン1,6,8,およびTNF-αは麻酔中と術後のいずれも一定の傾向を示さなかった。研究目的早期グラフト機能不全は肺移植後数日間以内に高頻度で発生し、重篤な呼吸不全を呈する合併症である。我々は肺移植後に早期グラフト機能不全が発生した症例を数多く経験しており、他の臓器移植に比べて死亡率が高い肺移植の救命率を少しでも高めるためには再灌流傷害を含めた早期グラフト機能不全の原因を解明し有効な治療法を見つけ出さなければならない。早期グラフト機能不全の病態解明と鑑別診断を目的として、術中および術後5日間経時的に炎症性メディエーターと呼吸循環系パラメーターを測定し、炎症性メディエーターの診断的価値および重症度との相関を分析する。研究計画・方法両側生体部分肺移植患者10名に対し、観血的動脈圧をモニターしながら高用量フェンタニルとベクロミウムを用いた全身麻酔を施行する。麻酔導入後、右内頚静脈より持続心拍量測定が可能な肺動脈カテーテルを挿入し、肺動脈圧、右心房圧、楔入圧、心拍量の測定を開始する。食道に経食道心臓超音波装置を挿入し、心室の運動性、心室径、弁逆流、圧差などを測定する。麻酔導入後,再灌流直前,再灌流直後,麻酔終了後,術後6, 12, 24, 36, 48, 72, 96, 120時間後の12点において血中インターロイキンIL-1,IL-6,IL-8,IL-10,IL-12,TNF-α,好中球エラスターゼ,血小板活性化因子PAF,CRP、フィブリノーゲンを測定する。今年度は平成22年10月に内定をうけ、下記の分担にて臨床研究を行った。五藤恵次(研究の総括、麻酔および集中治療担当)大藤剛宏(肺移植手術実施)溝渕知司(呼吸循環系・炎症性パラメーターの測定)早期グラフト機能不全は肺移植後数日間以内に高頻度で発生し、重篤な呼吸不全を呈する合併症である。本研究の着想に至った経緯は、我々は肺移植後に早期グラフト機能不全が発生した症例を数多く経験し、他の臓器移植に比べて死亡率が高い肺移植の救命率を少しでも高めるためには再灌流傷害を含めた早期グラフト機能不全の原因を解明し有効な治療法を見つけ出さなければならないと強く感じたがらである。肺移植患者に対し、観血的動脈圧をモニターしながら高用量フェンタニルとベクロミウムを用いた全身麻酔を施行する。ドナーに対しては、移植肺の摘出直前にヘパリン300単位/Kgとメチルプレドニゾロン10mg/Kgを静脈内投与しておく。移植肺の再灌流直前よりメチルプレドニゾロン30mg/Kgを静脈内投与しNOの吸入(15ppm)を開始する。麻酔導入後,再灌流直前,再灌流直後,麻酔終了後,術後6,12,24,36,48,72,96,120時間後の12点において血中インターロイキンIL-1,IL-6,IL-8,IL-10,IL-12,TNF-α,好中球エラスターゼ,血小板活性化因子PAF,CRP,フィブリノーゲンを測定する。同時に,観血的動脈圧,肺動脈圧,動脈血液ガス分析,心拍出量,左右の肺静脈血液ガス分析,経食道的心臓超音波検査,胸部レントゲン撮影を施行し,PGDの重症度を判定する。コントロール群として人工心肺を使用する冠動脈バイパス手術患者5名に対し同様の測定を実施する。NO吸入装置、血液ガス分析装置、心拍出量測定装置、経食道心臓超音波装置などは,現有の設備を使用する。各種インターロイキン、好中球エラスターゼ、血小板活性化因子は測定キットを購入し測定を行う。フィブリノーゲンは院内中央検査部にて測定する。臨床研究を行うにあたり平成23年度の各研究者の相互関係を下記に示す。五藤恵次(研究の総括、麻酔および集中治療担当)

大藤剛宏(肺移植手術実施)溝渕知司(呼吸循環系・炎症性パラメーターの測定)早期グラフト機能不全は肺移植後数日間以内に高頻度で発生し、重篤な呼吸不全を呈する合併症である。本研究の着想に至った経緯は、我々は1998年の本邦初の肺移植を実施して以来、移植後に早期グラフト機能不全が発生した症例を数多く経験し、他の臓器移植に比べて死亡率が高い肺移植の救命率を少しでも高めるためには再灌流傷害を含めた早期グラフト機能不全の原因を解明し有効な治療法を見つけ出さなければならないと強く感じたからである。早期グラフト機能不全の病態解明と鑑別診断を目的として、術中および術後5日間経時的に炎症性メディエーターと呼吸循環系パラメーターを測定し、炎症性メディエーターの診断的価値および重症度との相関を分析することを研究目的とした。対照は生体肺移植患者とし、観血的動脈圧をモニターしながら高用量フェンタニルとベクロミウムを用いた全身麻酔を施行する。各種の測定は、右内頚静脈より持続心拍量測定が可能な肺動脈カテーテルを挿入し、肺動脈圧、右心房圧、楔入圧、心拍量の測定を開始する。経食道心臓超音波装置を挿入し、心機能などを測定する。移植肺の再灌流直前よりメチルプレドニゾロン30mg/Kgを静脈内投与しNOの吸入(15ppm)を開始する。麻酔導入後,再灌流直前,再灌流直後,麻酔終了後,術後6, 12, 24, 36, 48, 72, 96,120時間後の12点において血中インターロイキンIL-1,IL-6,IL-8,IL-10,IL-12, TNF-α,好中球エラスターゼ,血小板活性化因子PAF,CRP,フィブリノーゲンを測定する。同時に,観血的動脈圧,肺動脈圧,動脈血液ガス分析,心拍出量,左右の肺静脈血液ガス分析,経食道的心臓超音波検査,胸部レントゲン撮影を施行し,PGDの重症度を判定する。生体肺移植数が予想よりも少なかったため。24年度が最終年度であるため、記入しない。引き続き研究を推敲していく予定である。
ジョン・ディーが１７世紀英国のアンティクエリアニズムに及ぼした影響の基礎的研究

本研究は、ジョン・ディーJohn Dee (1527-1609)が、ジョン・オーブリJohn Aubrey (1626-97)やイライアス・アシュモールElias Ashmole (1617-92)などに代表される17世紀英国のアンティクエリアニズム(antiquarianism)に及ぼした影響を解明することを目的とする。本年度については、前年度に行ったトマス・フラーThomas Fuller (1608-61)研究の補足をおこなうと共に、ジョン・オーブリの研究に着手した。ディーの天使召喚作業記録の手稿調査までおこなったフラーは、イギリス国教会の高名な聖職者であるのみならず、『ブリテン教会史』Church-History of Britain (1655)などの著者でもあった。したがって、異端の恐れがあるディーやその協力者エドワード・ケリーEdward Kelley (1555-98?)への強い関心、肯定的評価を、フラーが『イングランド名士録』The Historyof the Worthies of England (1662)において公然と表明できた背景については、さらなる研究が必要とされる。オーブリが主著のひとつ『名士小伝』Brief Livesを執筆したのは占星術研究のデータ収集のためであった事実は、ケイト・ベネットKate Bennettによって編集された初の完全版(2015)によりいっそう明瞭となり、かつまた、アシュモールが『英国の化学の劇場』Theatrum Chemicum Britannicum(1652)で採用した形式に多くを負うことも判明した。さらに、オーブリのディーへの強い関心が占星術、錬金術と関連するだけでなく、言語研究にも関わっている可能性も見出せる。この点についてはできるだけ考究を進めたい。昨年度に生じた若干の遅れを取り戻して、本年度はジョン・オーブリについての研究作業を進めることができた。本年度に引き続き、ジョン・オーブリについての研究作業を継続する予定で、可能であればイライアス・アシュモールの研究に着手したい。本年度については、オーブリ、アシュモールより上の世代に属する聖職者、文人トマス・フラーThomas Fuller (1608-61)についての研究を主として進めた。フラーの死後に刊行された『イングランド名士録』The History of the Worthies of England(1662)は、地誌と人物伝が混淆した形式をとっているが、英国伝記文学の歴史の観点からは、オーブリの『名士小伝』Brief Livesに先行する重要な著作である。そして、同書において、ジョン・ディー及びエドワード・ケリーの双方が偏見なしに取りあげられているのは注目に価する。のみならず、ジョン・ウィーヴァーJohn Weever(1576-1632)の『古代墳墓論』Ancient Funeral Monuments(1631)、アシュモールの『英国の化学の劇場』Theatrum Chemicum Britannicum(1652)などを情報源としつつ、フラーは天使召喚作業を詳細に記録したディーの手稿(トマス・コットンThomas Cottonの所蔵分)の調査までおこない、それに基づいて評価を下している。この事実は、如何にフラーがディーとケリーの事蹟に強い関心を抱いていたかを証明するものといえよう。なお、フラーがディーとケリーについての箇所を執筆した時期は、メリック・カソーボンMeric Casaubonが1659年にディーの手稿記録を公刊するより以前なのは確実である。トマス・フラーに関する研究作業、特に資料収集が予想以上に時間を要したので、ジョン・オーブリやイライアス・アシュモールについての研究作業の進捗状況がはかばかしくないため。

昨年度に生じた若干の遅れを取り戻して、本年度はジョン・オーブリについての研究作業を進めることができた。トマス・フラーに関する研究作業をいったん中断して、ジョン・オーブリ、イライアス・アシュモールについての研究作業のほうに注力する予定である。本年度に引き続き、ジョン・オーブリについての研究作業を継続する予定で、可能であればイライアス・アシュモールの研究に着手したい。
先住民族の視点から見たオーストラリア多文化主義:社会学的実証研究と理論的再検討

本研究では、これまで主に「移民」に焦点を当てて研究されてきたオーストラリア多文化主義を「先住民族」という観点から再考した。具体的には、先住民族の存在や主張をオーストラリア多文化主義の理論・実践のなかでどのように位置づけることができるのかを社会学的実証調査および他国の事例との比較分析によって明らかにし、先住民族の存在や主張にじゅうぶんに配慮した多文化主義のあり方を理論的に検討した。それによりオーストラリア多文化主義研究の理論的・実証的水準を向上させるとともに、日本における「多文化共生」のあり方を考察する際の示唆を得ることもめざした。本研究では、これまで主に「移民」に焦点を当てて研究されてきたオーストラリア多文化主義を「先住民族」という観点から再考する。具体的には、先住民族の存在や主張をオーストラリア多文化主義の理論・実践のなかでどのように位置づけることができるのかを社会学的実証調査および他国の事例との比較分析によって明らかにし、先住民族の存在や主張にじゅうぶんに配慮した多文化主義のあり方を理論的に検討していく。それによりオーストラリア多文化主義研究の理論的・実証的水準を向上させるとともに、日本における「多文化共生」のあり方を考察する際の示唆を得ることもめざす。平成22年度には以下のような研究を実施した。まず4月から7月にかけて、上記研究テーマに関する先行業績の検討と分析枠組みの策定を行った。そして8月4日から23日にかけてオーストラリアにて現地調査を実施した。まずシドニーで現地在住研究者等との意見交換を行い、その後バサーストで先住民族が多数在籍する公立高校2か所を訪問しインタビュー調査を行った。キャンベラの国立図書館で資料収集を行い、ダーウィンにおいては州立図書館や博物館等で資料収集を行ったほか、現地における先住民族芸術の状況を視察した。その後9月から2月にかけて調査によって得られた資料やデータを分析し、一部を論文や著作として執筆した。3月3日から22日にかけて2回目のオーストラリア現地調査を行った。シドニーで資料収集および現地在住研究者等との意見交換を行い、アリススプリングスでは現地視察と公立図書館等での資料収集を行った。キャンベラでは現地研究者との意見交換および国立図書館・国立博物館等での資料収集を行った。以上のような調査結果をもとに、下記のような研究成果を発表・刊行することができた。平成23年度においては、前年度に収集したデータの整理・分析を進めて研究の理論枠組みの構築を目指すとともに、それをより確固たるものにするべく2回の現地調査を実施した。11年8月の調査では、先住民族のルーツをもつ法律学者であるラリッサ・ベーレント博士、先住民族政策の第一人者であるジョン・アルトマン博士、北部準州で先住民族に対するソーシャルワークに従事する林靖典氏とエマ・マーフィー氏などに聞き取りを行い、貴重な知見を得ることができた。また12年3月の調査では林氏にフォローアップの聞き取りを行ったほか、環境問題の観点から先住民族への支援を行っているジャスティン・タフィー氏への聞き取りを行った。また両方の調査を通じて、オーストラリア国立図書館や北部準州立図書館などで資料収集を行い、成果を得た。また日本の先住民族運動に関する調査も行い、アイヌ民族と沖縄の2名の活動家に聞き取りを行ったほか、先住民族支援国連NGO「市民外交センター」のメンバーとの意見交換を行った。こうした研究の成果を学術論文や著書のかたちでまとめることもできた。こうした業績は平成24年度には公刊予定である。平成24年度は、これまでの研究成果を再検討し、先住民族の視点に配慮した多文化主義の理論構築を試みた。まず、昨年度までに収集した資料・データの分析を行うとともに、日本とオーストラリアの先住民族問題の比較のために、日本のアイヌ民族や琉球・沖縄の先住民族運動指導者3名への聞き取り調査を実施した。そして8月にはオーストラリアのパースとシドニー、キャンベラ、メルボルンにおいて、移民・先住民族支援の当事者への聞き取りおよび文書資料収集を実施した。こうした調査の結果、従来は移住者と受け入れ社会の関係を主な考察の焦点としてきた多文化主義研究に先住民族問題に関する視点を導入する重要性を再確認し、先住民族・移住者・マジョリティ国民の関係性を分析する理論的枠組みを試論的に導き出すことができた。こうした成果は、6月のオーストラリア学会全国研究大会個別研究報告にて口頭発表された。

さらに2012年7月刊行の多文化主義研究に関する単著『共に生きる』や、2013年2月に刊行された先住民族研究に関する編著書『市民の外交』などにも反映された。詳細は、様式C-7-1の業績一覧を参照されたい。ただしこうした本研究の成果はあくまでも試論的な域に留まっており、本格的な実証研究や理論的精緻化は今後の課題として残されている。そこで本研究の成果をさらに発展させるために、2014年度からは新たに基盤研究Cの研究を開始することになった。当初予定していた遠隔地の先住民族コミュニティでの聞き取り調査は、現地コミュニティに入ることの手続き的困難さから実現できなかった。しかし先住民族知識人・支援団体への闘き取りは順調に進み、また先住民族政策に関する文献資料は予定よりも大量に集めることができた。研究成果の公表についても、来年度における研究論文や編著書、単著書の公刊の目途をつけることができた。24年度が最終年度であるため、記入しない。上述のとおり、遠隔地の先住民族コミュニティでのフィールドワークは技術的・手続き的に困難であることが判明したため、政策分析におよび理論化に研究の比重を移すことを計画している。平成24年度中に研究成果として編著書および単著を刊行することを目標としたい。
高齢者立脚型アウトカム評価を用いた歯科医療の位置付けの確立

I.目的高齢者の義歯治療を評価するために本研究では,年齢,性別,義歯使用年数と顎堤の吸収状態をマッチングさせ,インプラントオーバーデンチャー装着者と全部床義歯装着者の治療効果を,チェアサイドでの機能評価表を用いて明らかにすることを目的に研究を行った.II.方法被験者は下顎無歯顎インプラントオーバーデンチャー装着者10名(IOD群)と下顎全部床義歯装着者35名とした.まず,IOD群と下顎全部床義歯装着者35名を各種機能評価表((1)義歯評価表,(2)咀嚼機能評価表,(3)満足度評価表)を用いて比較検討を行った.次に,両群間で年齢,性別,現義歯使用年数,顎堤吸収の状態をマッチング因子としてマッチングテストを行い比較した.全部床義歯装着者35人の内訳は,平均年齢71.7歳,男性15名,女性20名,義歯使用年数38.1ヶ月,顎堤スコア36.6点であった.IOD群の内訳は,平均年齢60.8歳,男性3名,女性7名,現義歯の平均使用年数27.0ヶ月,顎堤スコア20.0点であった.マッチング因子の適合率は,4項目平均で70.1%であった.また,両群の各機能評価のスコアを比較した結果,満足度評価において有意差は認められなかった。各機能評価のスコアを比較すると,CD群((1)義歯評価:67.3,(2)咀嚼機能評価:38.5,(3)満足度評価:54.7)に対してIOD群((1)義歯評価:93.9,(2)咀嚼機能評価:77.0,(3)満足度評価:80.8)はすべての機能評価で有意に高い値を示した(P<0.05).本研究において,全部床義歯とインプラントオーバーデンチャーの治療効果の判定に,顎堤状態を加味したマッチングテストの有用性が示唆された.また,全部床義歯と比較して,インプラントオーバーデンチャーの治療効果が高いことが明らかとなった.I.目的高齢者の義歯治療を評価するために本研究では,年齢,性別,義歯使用年数と顎堤の吸収状態をマッチングさせ,インプラントオーバーデンチャー装着者と全部床義歯装着者の治療効果を,チェアサイドでの機能評価表を用いて明らかにすることを目的に研究を行った.II.方法被験者は下顎無歯顎インプラントオーバーデンチャー装着者10名(IOD群)と下顎全部床義歯装着者35名とした.まず,IOD群と下顎全部床義歯装着者35名を各種機能評価表((1)義歯評価表,(2)咀嚼機能評価表,(3)満足度評価表)を用いて比較検討を行った.次に,両群間で年齢,性別,現義歯使用年数,顎堤吸収の状態をマッチング因子としてマッチングテストを行い比較した.全部床義歯装着者35人の内訳は,平均年齢71.7歳,男性15名,女性20名,義歯使用年数38.1ヶ月,顎堤スコア36.6点であった.IOD群の内訳は,平均年齢60.8歳,男性3名,女性7名,現義歯の平均使用年数27.0ヶ月,顎堤スコア20.0点であった.マッチング因子の適合率は,4項目平均で70.1%であった.また,両群の各機能評価のスコアを比較した結果,満足度評価において有意差は認められなかった。各機能評価のスコアを比較すると,CD群((1)義歯評価:67.3,(2)咀嚼機能評価:38.5,(3)満足度評価:54.7)に対してIOD群((1)義歯評価:93.9,(2)咀嚼機能評価:77.0,(3)満足度評価:80.8)はすべての機能評価で有意に高い値を示した(P<0.05).本研究において,全部床義歯とインプラントオーバーデンチャーの治療効果の判定に,顎堤状態を加味したマッチングテストの有用性が示唆された.また,全部床義歯と比較して,インプラントオーバーデンチャーの治療効果が高いことが明らかとなった.1.目的歯科医療の分野においてエビデンスの必要性は浸透してきており、科学的根拠に基づいた明確な医療行為の提供が望まれている。しかし、いまだそれを確立するための研究報告は見られない。そこで、高齢者を対象とした歯科治療の満足度の自己評価(高齢者立脚型アウトカム)を集計すると共に、包括的に健康関連QOLの向上との総合的な関連性の解明を行うことを目的とした。2.方法同意の得られた高齢者(65歳以上の有病者と70歳以上の方)を対象にQOLの評価を行った。被験者には、本研究の意義、方法などを十分に説明の上、同意の得られた場合にのみ実施した。初診時の術前評価としてSF-36 ver1.2(包括的健康関連QOL尺度)を用いた。さらに、それぞれの対象者が持っている全身の合併症を調査し、それぞれの疾患別に存在するQOLの評価法(各種疾患特異的QOL尺度)を用いて同時に評価を行った。3.結果と考察SF-36の結果は8つの尺度(身体機能、心の健康、身体的日常役割機能、精神的日常役割機能、体の痛み、全身的健康感、活力、社会生活機能)で数値化される。

この数値を付属のスコアリングプログラムに入力することで対象者の性別、年齢を考慮した日本国民における偏差値を算出することが可能となる。今回、QOLの変化の推移として8尺度のそれぞれの変化率、8尺度の国民標準値に対する変化率を算出し、記録を行った。I.目的高齢者の義歯治療を評価するために本研究では,年齢,性別,義歯使用年数と顎堤の吸収状態をマッチングさせ,インプラントオーバーデンチャー装着者と全部床義歯装着者の治療効果を,チェアサイドでの機能評価表を用いて明らかにすることを目的に研究を行った.II.方法被験者は下顎無歯顎インプラントオーバーデンチャー装着者10名(IOD群)と下顎全部床義歯装着者35名とした.まず,IOD群と下顎全部床義歯装着者35名を各種機能評価表((1)義歯評価表,(2)咀嚼機能評価表,(3)満足度評価表)を用いて比較検討を行った.次に,両群間で年齢,性別,現義歯使用年数,顎堤吸収の状態をマッチング因子としてマッチングテストを行い比較した.全部床義歯装着者35人の内訳は,平均年齢71.7歳,男性15名,女性20名,義歯使用年数38.1ヶ月,顎堤スコア36.6点であった.IOD群の内訳は,平均年齢60.8歳,男性3名,女性7名,現義歯の平均使用年数27.0ヶ月,顎堤スコア20.0点であった.マッチング因子の適合率は,4項目平均で70.1%であった.また,両群の各機能評価のスコアを比較した結果,満足度評価において有意差は認められなかった。各機能評価のスコアを比較すると,CD群((1)義歯評価:67.3,(2)咀嚼機能評価:38.5,(3)満足度評価:54.7)に対してIOD群((1)義歯評価:93.9,(2)咀嚼機能評価:77.0,(3)満足度評価:80.8)はすべての機能評価で有意に高い値を示した(P<0.05).本研究において,全部床義歯とインプラントオーバーデンチャーの治療効果の判定に,顎堤状態を加味したマッチングテストの有用性が示唆された.また,全部床義歯と比較して,インプラントオーバーデンチャーの治療効果が高いことが明らかとなった.
血管腫の増殖制御における血管新生制御因子としてのインターフェロン療法の意義

sEnd.1, eEnd.1, eEnd.2,の3種類の細胞を5x10^7ケ、生後1日目、6週齢の雌129Svマウスの左大腿後方皮下に注入し、腫瘍の出現、大きさ、増大速度を観察し、検討した。生後1日目マウスでは、注入後急速に腫瘍の増大がみられ、全例で注入後3日以内に腫瘍死した。6週齢マウスでは、eEnd.1は4匹全例で7日以内に腫瘍が出現し、3匹で30日以上生存した一方、sEnd.1、eEnd.2細胞では、20日以内に全例が死亡した。そこでeEnd.1細胞を本実験に使用することとした。2.6週齢雌の129Svマウスを、対照群、INF α投与群、INF β投与群の3群にわけ、投与群では、eEnd.1細胞注入時に、背部にINF αまたはINF βを5000単位皮下注し、1日目、4日目、14日目、21日目の腫瘍径を測定し、21日目に屠殺し、血管腫を切除し、mRNAをフェノール/クロロホルム法にて抽出し、bFGFのDNAプロープ(bFGF(Pr-1))を用いてノザンブロッティングを行っている。現在のところ、9匹に処理を行い、腫瘍は1-4日目に出現し急速に増大し、14日目から21日目の間は腫瘍径はほぼ一定している。INF投与群では腫瘍の初期の増大が押えられる症例もあるが、対照群にても固体差が大きいため、各群の数を増やす必要があると考えている。
がん細胞接着システムの制御機構

がん細胞の接着と運動の機構に関し、以下のような成果を得た。1.カドヘリンの細胞質領域が、この分子の機能にとって必須の役割を果たしていること、また、この領域に細胞質内タンパク質が結合することを見出した。2.接着帯の細胞幕裏打ち構造について分子的解析を行い、5つの成分(400kd、82kd、70kd、55kd、50kdタンパク質)について、抗体を作成しその細胞内分布を明らかにした。この中、82kdのものはアクチンと結合し、ラディキシンと名付けられた。3.微小管関連タンパク質タウの全長を含むcDNAをクローニングし、これを用いてマタウが神経突起の基本となる微小管の重合と束形成に関与していることを明らかにした。また、モーター分子キネシンの分子構造をモノクローナル抗体による修飾により解明した。4.中間径フィラメントのリン酸化による脱重合の機構を探り、ヘッドドメインのリン酸化が重要であることを示した。5.黒色腫において、転移能と逆相関して発現するA^Xアクチンに対するcDNAをクローニングし、その全構造を決定した。次に、A^XcDNAを細胞に導入することにより、この分子が運動能および転移能を低下させることを明らかにした。また、v-fosがん遺伝子をsrcで形質転換した3Y1細胞に導入すると、肺への転移が増大し、運動性が有意に増強されていることを明らかにした。6.TPAに対して形態的応答をしないTR4細胞は、がん遺伝子導入により高転移性を示し、また、39kd膜結合タンパク質が欠失していることを明らかにした。7.フィブロネクチンmRNA前駆体の可変的スプライシングが、がん化に伴い胎児性の変化をすることを明にした。8.虹彩上皮に存在しレンズ再生の過程で一過性に消失する分子量70kd糖タンパク質は、分化形質の安定化を司るものであることを示唆した。