hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
好古家ネットワークの形成と近代博物館創設に関する学際的研究

1「物産会」研究プロジェクトでは、分担研究者の三浦泰之を中心に国文学研究資料館(東京都立川市)所蔵・杉浦梅潭関係資料、富士山かぐや姫ミュージアム(静岡県富士市)所蔵・鈴木香峰関係資料、草雲美術館(栃木県足利市)所蔵・田崎草雲関係資料、静嘉堂所蔵・松浦武四郎旧蔵古物コレクション関係の史料調査を実施した。21)好古家蒐集古物資料の調査研究プロジェクトでは、静嘉堂・松浦武四郎記念館における松浦武四郎関連古物の資料化を実施し、松浦武四郎記念館資料についてはデジタルトレースまで完成した。分担研究者の長谷洋一を中心に静嘉堂松浦武四郎コレクションのうち下駄仏など、木彫品の来歴についての調査研究を行った。2)好古家ネットワーク研究プロジェクトの推進では、柏木貨一郎(1841-1898)に関して悉皆的調査研究を実施した。3シーボルト父子蒐集古物調査研究プロジェクトでは、P.F.v.シーボルト蒐集の日本考古資料についてライデン国立民族学博物館、シーボルトハウスにおける調査は、既に先行研究で平成29(2017)年に実施しており、整理作業を本科研で行い、成果として『好古家ネットワークの形成と近代博物館創設に関する学際的研究Iーライデン国立民族学博物館収蔵Philipp Franz Balthasar von Siebold蒐集資料調査報告ー2018』として刊行した。(PDFは、本科研ホームページ(http://hcra.sakura.ne.jp/hvsiebold/)で公開している。また、本年度、諸情報から資料化の許諾を得ることが出来た大英博物館に変更し、H.v.シーボルトが収集した縄文時代から古墳時代に至る日本の考古遺物を撮影・実測等の調査を実施し、現在整理作業を進めている。1「物産会」研究プロジェクトは、引き続き文献の悉皆調査を実施し、近代以降の「博物館」の前身として、「モノ」を展覧する場として近世後期の「物産会」の実態について個別のデータを集積している。具体的には石水博物館所蔵資料(山本亡羊・榕室主催「読書室物産会」他)、国立国会図書館所蔵資料(「尾張名古屋物産会」他)、富士市立博物館の鈴木香峰資料である。松浦武四郎と好古家とのネットワーク研究についても新たな史料を蓄積しつつある。21)好古家蒐集古物資料の調査研究プロジェクトにおける静嘉堂収蔵資料については、未整理資料の70%の整理が終了している段階であり、松浦武四郎記念館における関連古物の資料化は全体の90%についてデジタルトレースまで終了している。仏像類の調査に関しては概ね予定通りの進捗状況である。当初予定していた飛騨の漢学者二木長嘯蒐集古物の調査は、諸般の事情から見送る可能性もある。2)好古家ネットワーク研究プロジェクトでは『幕末維新期好古家一覧表』を製作しており、柏木貨一郎に関しては論文執筆の前段階となっている。3シーボルト父子蒐集古物調査研究プロジェクトでは、前年度行った現地調査の報告として本科研で整理作業を敢行し、『好古家ネットワークの形成と近代博物館創設に関する学際的研究Iーライデン国立民族学博物館収蔵Philipp Franz Balthasar von Siebold蒐集資料調査報告ー2018』として刊行した。加えて研究計画当初未知件であった大英博物館資料の調査に着手でき、Hv.シーボルトが収集した縄文時代から古墳時代に至る日本の考古遺物の資料化を実施することが適い、これまでにない研究成果を公表出来ることが期待できる。
マウス眼優位可塑性に関与するOtx2蛋白質の作用機構の解析

これまでの研究により、視覚経験に依存してOtx2蛋白質が視覚野のParvalbumin(PV)陽性細胞に局在すること、またOtx2蛋白質を早期に視覚野へ導入すると、PV陽性細胞において機能分子の発現が促進し、臨界期が早期に誘導されることを明らかにしてきた。一方で、Otx2蛋白質が欠如した視覚野において臨界期が誘導されるか否かは不明であった。そこで今年度は、Otx2変異マウス(Tian et al., 2002)と、CaMKIIプロモーター制御下でCreを発現するマウス(Minichiello et al., 1999)を掛け合わせ、Otx2コンディショナルノックアウトマウスを作成した。このマウスでは生後多くの脳細胞においてOtx2遺伝子が欠損するが、PV陽性細胞では正常なまま保たれる。すなわち、Ots2蛋白質が細胞外からPV陽性細胞に取り込まれるのであれば、このマウスにおいて視覚野のOtx2蛋白質は欠如することが期待される。予測どおり、コンディショナルマウスにおいてOtx2蛋白質はPV陽性細胞に検出されないことから、視覚経路上の組織に発現したOtx2蛋白質が視覚野のPV陽性細胞に取り込まれることが示唆された。さらに、臨界期に顕著に見られる眼優位可塑性の有無をin vivo単一細胞記録法を用いて解析した。その結果、Otx2蛋白質が視覚野のPV陽性細胞へ局在することが、臨界期の眼優位可塑性に必要であることが明らかになった。これらの結果は、Otx2に対する阻害抗体やsiRNAを視覚野に投与した後に解析した結果と一致する。一連の研究により、細胞非自律的なOtx2蛋白質が視覚野のPV陽性細胞の発達と眼優位可塑性の誘導に必要であることが明らかになった。
野菜の細胞壁の煮熟による微細構造変化

野菜の煮熟による軟化が主として細胞壁の構造変化によることを、エポキシ樹脂超薄切片の電子顕微鏡観察から明らかにしてきたが、今回はさらに研究法を発展させて、人工像をつくる可能性のある化学固定操作を行うことなく細胞壁構成成分の相互関係を観察できる急速凍結・ディ-プエッチング・レプリカ法により生、及び煮熟後の細胞壁を観察した。1.ニンジン皮層部柔組織の細胞壁は、走行方向の異なる層板状構造をしたセルロ-スミクロフィブリルの間に微細な顆粒や繊維からなるマトリックス成分の詰まった第一次壁であり、細胞壁間は顆粒や繊維成分の豊富な中層部で結着されていた。34個の細胞間に形成される細胞間隙の部分は中層部と連続していた。2.30分間煮熟した細胞壁の第一次壁では、セルロ-ス繊維間に存在していたマトリックス成分がほとんど消失して隙間を生じ、軟化の様相を呈した。中層部で第一次壁間の分離が顕著であるが、中層と細胞間隙には煮熟により崩壊しない網目構造が残存した。3.第一次壁成分の化学的溶解性に着目し、30分間煮熟したニンジン柔細胞壁をさらに30mMヘキサメタリン酸ナトリウムで20°C8時間処理したもの、及びさらに4MーKOHで20°C13時間処理したものを観察した結果、煮熟30分でほとんでのマトリックス成分が溶出していることがわかった。4.生のニンジン柔細胞壁にポリガラクツロナ-ゼ処理を施した結果は、第一次壁のセルロ-ス繊維間が広がり、煮熟した細胞壁と似た様相を呈した。しかし、細胞間隙部には煮熟後と同様の網状構造が残存し、これは非ペクチン質成分である可能性が示唆された。この構造が野菜の煮崩れを防止していると考えられる。
散布薬剤が果樹葉の光合成、蒸散及び葉肉組織に及ぼす影響

1.リンゴ、ナシ、モモ及びブドウに対して通常の防除暦に従って薬剤散布を行い、葉の純光合成速度(Pn)、蒸散速度(Tr)及び気孔拡散伝導度(Gs)の消長を調べた。その結果、Pn、Tr及びGs共に、薬剤散布直後には低下し、1日後にはかなり回復するという経過を繰返した。2.供試薬剤のうち最も顕著な抑制作用を示したのはビ-ナイン(主成分SADH)で、正常に回復するには約10日を要した。そして、その抑制は高濃度液ほど、また若齢葉ほど顕著であった。3.リンゴの収穫前落果防止の目的で散布するオ-キシン剤は、Pn、Tr及びGsに対する抑制は軽微で、散布後1日目にほとんど正常に回復した。4.殺虫剤スミチオンの粉剤、水和剤及ぴ乳剤をナシに散布して、Pn、Tr及びGsに及ぼす影響を比較したところ、乳剤の抑制作用が最も著しく、粉剤の影響が最も小かった。5.浸透性の強い展着剤に温州ミカンの葉を浸漬した後、徒手切片を作成して、落射蛍光顕微鏡で観察したところ、浸漬直後には気孔周辺に浸漬1日後には海綿状組織及び柵状組織に、自己蛍光を発生する細胞が認められた。このことから、たとえ肉眼的な薬害症状が認められない場合でも、細胞が何らかの生理的障害を受ていることが推察された。6.各種薬液に葉を浸漬した後に、走査型電子顕微鏡を用いて、気孔の開度を調べたところ、各薬液共に、浸漬直後には気孔の開度を低下させ、高濃度液ほど閉鎖作用が著しかった。ただし、ボルド-液に浸漬した場合には、開閉機能が失なわれて開いたままの気孔が散見された。果樹の病害虫防除暦に記載されている主要農薬10種類及び生長調節剤3種類をリンゴ、ナシ及びブドウに散布して、光合成及び蒸散速度に対する影響を調べた。供試薬剤のうち最も強い影響が認められたのは、ブドウ「巨峰」の結実増進に用いられるビ-ナインで、通常の200倍液の散布直後に、光合成及び蒸散速度は対照区の約1/3に低下した。散布の2日後から徐々に回復し、5日後にはほぼ正常に回復した。散布濃度が高いほど抑制の程度及びその持続期間が長かった。ビ-ナインは、リンゴ及びナシに対しても光合成及び蒸散を抑制する作用を示したが、ブドウほど顕著ではなかった。農業散布による光合成及び蒸散の抑制は、葉齢が若いほど顕著な傾向がうかがえたが、平成元年は初夏に降雨が多く、若齢葉に対する試験回数が少なかったので、次年度にさらに追試する必要があると思われる。薬剤の形態による影響の相違を、殺虫剤のスミチオンを用いて試験したところ、粉剤が水和剤及び乳剤に比べて影響が少ない傾向が認められたが、この点も、より若齢葉についてさらに追試する必要があると思われる。農薬散布による光合成及び蒸散の抑制は、主として気孔が閉鎖することによって起きるもので、光合成速度と気孔拡散伝導度との間にはきわめて高い正の相関が認められた。ビ-ナイン散布後24時間ごとに葉の横断切片を作成して葉肉組織の変化を調べたところ、高濃度液散布の場合には、海綿状組織にカロ-ス形成によると思われる蛍光反応が認められたが、通常濃度液散布の場合には、特別な組織学的変化は認められなかった。

1.前年度の試験結果から,SADH(ビ-ナイン)が葉の純光合成速度(Pn),蒸散速度(Tr)及び気孔拡散伝導度(Gs)を抑制する効果がかなり強いことが判明したので,ビ-ナインと同様にジベレリンの生合成阻害作用を有するといわれている殺菌剤,サプロ-ル水和剤,バイレトンAN水和剤,ルビゲン水和剤及びトリフミン水和剤を,リンゴ及びナシの葉に散布してPn,Tr及びGsに及ぼす影響を調べた。その結果,各薬剤とも,散布直後からPn,Tr及びGsを抑制し,とくにGsに対する抑制効果が大きかった。抑制の持続期間はほぼ23日間で,ビ-ナインに比べると短かかった。2.リンゴの収穫前落果防止のために散布する合成オ-キシン剤(商品名ストッポ-ル及びマデック)も,葉のPn,Tr及びGsを抑制する作用を示した。しかし,抑制程度及び持続期間は,ビ-ナインに比べると小さかった。3.ナシの葉を各種展着剤に浸漬した後,落射蛍光顕微鏡(RFM)で観察したところ,気孔部に自己蛍光を発するものが多数認められ,浸透性が強いと思われる展着剤ほど顕著であった。しかし,浸漬の1日後には,蛍光はまったく認められなかった。この傾向は,展着剤散布直後のPn,Tr及びGsの低下傾向とよく一致していた。4.ナシの葉に4ー12式ボルド-液を散布したところ,肉眼的に薬害は認められなかったが,夜間でも開口したままの気孔が散見された。開口気孔からは,とくに多量の散布薬剤が浸透することがRMFで観察され,薬害の誘発に結びつくのではないかと懸念された。ただし,4ー12式ボルド-液の散布によるPn,Tr及びGsへの影響は軽微であった。
COを含むファンデルワールス分子の高速掃引赤外半導体レーザー分光

高速掃引赤外半導体レーザー装置を製作し、COを含む弱く結合したファンデルワールス錯体分子の赤外吸収スペクトルの研究を行った。高速掃引分光法は短時間で再現性のあるスペクトルを測定でき、本装置では分子線の温度が良く冷却されているので、これまで報告例の少なかった弱い結合力のファンデルワールス錯体分子を検出できることが分かった。ネオンガスに希釈し背圧約5気圧のもとで実験を行った結果、HCCH...COや報告例の無いN_2...COとN_2O...CO分子をCOの伸縮振動モード(2143cm^<-1>近辺)で赤外吸収スペクトルを測定でき分子定数を決めることができた。また、Ne...COの低い振動モードを含むホットバンドも測定できた。HCCH...COの測定結果は直線型構造を支持しており、これまでの赤外スペクトルやマイクロ波スペクトルの結果と一致していた。N_2O...CO分子はT型構造を取っていることが分かった。N_2...CO分子ではQ枝とR枝は測定されたがP枝の振動回転線は測定されず、弱い結合力に付随して錯体分子の中でそれぞれの分子が回転し始め、通常の赤外スペクトルと異なった強度のスペクトルを与えることを見出した。またCO...COの場合、分子運動および分子構造の多様性のために測定されたスペクトルの解析を困難にしていることも分かった。
高等植物の減数分裂における染色体構造の解析

減数分裂前期には相同染色体の対合と高頻度の遺伝的組換えがおこる。この対合はシナプトネマ構造(SC)によって安定に維持され、SC形成が減数分裂における遺伝的組換えの前提条件となる。本研究では多量のSCが含まれるユリ花粉団細胞を実験材料として、高等植物のSCを構成する蛋白質成分の特定とそれらの機能を解明することを目的としている。このために、ユリ花粉母細胞のSCを分離するための条件設定と単離したSC標品に対するモノクロ-ン抗体の作製を試み、現在までに以下の結果が得られている。1.SC形成の完了した太糸期の花粉母細胞から核を単離し、これをDNア-ゼIIで処理した後、遊離してきたSCをナイコデンツの密度勾配遠心により精製した。得られたSCは約10μmの長さに断片化したものであり、ラテラルエレメントは保存されていたがセントラルエレメントの微細構造は消失していた。精製したSC標品中には、残存するヒストン以外に約60200kDaの分子量を有する10種類程度の酸性蛋白質が含まれていた。2、SCを構成する蛋白質を特定するために上記のSC標品を抗原として抗SCモノクロ-ン抗体の作製をおこなった。ハイブリド-マのスクリ-ニングは免疫組織化学的方法を用いておこない、現在までにユリのSCを認識する抗体(SCーD3G12)が得られている。この抗体はユリSCのラテラルエレメントを認識することが金コロイドを用いた免疫電顕観察により明らかになった。今後は抗原蛋白質の検索と減数分裂周期における抗原の挙動及び機能を解析する予定である。
脳機能イメージングおよび視線計測を用いた摂食障害治療法開発への挑戦

本研究は摂食障害の原因となる「身体像の歪み(自分自身の体に対する不適切な認識)」の効果的な軽減方法の確立を目指したものである。この身体像の歪みには視覚情報処理異常が関わる「知覚の歪み」と情動処理異常が関わる「認知の歪み」の二種類が存在し、それぞれに関わる神経メカニズムは異なると示唆されている。従って、それぞれに対して効果的な介入法も異なると考えられることから、これを健常者を対象として検討する。さらに、介入前後にMRIと視線計測装置によって脳活動・視線パターンを測定することで、二種類の歪みの軽減には異なる心理・神経メカニズムが関わることを明らかにする。
膀胱癌におけるAxlをターゲットとした新規治療戦略の確立

今回、我々はreceptor tyrosine kinaseの一種であるAxlの発現と予後との関連、抗癌剤耐性機序に及ぼす影響を検討し、さらにAxlの制御が期待できるmulti kinase阻害剤であるCabozantinibに着目し、これを用いた膀胱癌はじめ泌尿器科癌に対する新規治療戦略を新たな発想のもと確立したい。現在の所、膀胱癌に対しAxlを直接ターゲットとした治療戦略は存在しない。まずは当教室で作成された臨床データベース及び未染のプレパラートを用いて、膀胱癌におけるAxlの発現と腫瘍の進展・予後との関連につき臨床的・組織学的検討を施行中である。加えて、現在泌尿器科癌の中で腎癌にCabosantinibが適応となっているが、その作用機序としてのAxlに関しても詳細を明らかにしたいと考え研究中である。これまでに、まずはAxlの発現を見るための免疫染色を確立するため、その手技を獲得した。さらに、AxlおよびそのリガンドであるGas-6で、未染のプレパラートを用いて免疫染色を行い、癌の悪性度や病理組織像によりその発現の違いがあるのか、また、初発の膀胱癌とBCGや膀胱内抗癌剤注入後ではその発現に違いが生じるのか、またAxl発現有無による予後との相関について等を含めた研究を継続中である。評価、解析はまだおこなっておらず、結論は2019年度に持ち越しているが、いずれにせよ膀胱癌はじめ泌尿器科癌でのAxlの発現とそれによる予後の関連等につき、一定の結論を出す予定である。膀胱癌検体の未染スライドの作成に時間がかかっており、最初はすでに未染スライドのあった腎癌で研究手技を確立したため。上記に記載した通り、まずはAxlの発現を見るための免疫染色を確立するため、その手技を獲得した。未使用額の発生は効率的な物品調達を行った結果である。引き続き来年度も消耗品等、研究に必要な物品購入に充てさせていただきたいと思います。
エピジエネティクス調節機構を応用した新しい癌治療の開発

1.ヒストンアセチル化亢進時におけるBmf蛋白誘導の重要性ヒストンアセチル化後(HDAC阻害剤FK228またはCBHA添加後。さらに、ヒストンアセチル化酵素CBPまたはP300の遺伝子導入後の過剰発現後)、アポトーシス誘導能をもつBH3-only蛋白であるBimやBmfが誘導されたことから、各々のmRNAをターゲットとするsiRNAによってノックダウンさせ、それがHDAC阻害剤自身によるアポトーシス誘導能に極めて重要であることを証明した(Cell Death Diff 2006;Int J Radiat Oncol 2006)。2.JNK活性化とDNA傷害との関連性動物各種低分子化合物の活性酸素レベル上昇能を網羅的に調べた結果、methoxy-E2が強い活性酸素誘導作用を有し、この前処置によって放射線照射後のDNA障害が増加すること、さらにヌードマウスを用い、生体内においても治療効果を発揮しうることを明らかにした(Chnical Cancer Res 2006)。このことから、酸化ストレス誘導物質は、放射線治療効果の促進剤として、実用化の可能性が示された。3.ヒストンアセチル化亢進が及ぼすDNA傷害への感受性亢進作用ヒストンアセチル化過剰によりアポトーシスが惹起されることを明らかにしているが、その機序は不明な点が多かった。アセチル化亢進によって、放射線照射後のDNA傷害が増強していることを証明した。(Apoptosis 2006)このことは、ヒストンアセチル化によって放射線感受性を変えられることを示唆している。1.ウエスタンブロットによるアポトーシス関連分子発現の網羅的解析ヒストンの過剰アセチル化によって、誘導される蛋白質の同定とそれによって生じる様々な生物学的現象との関連性を調べた。すなわち、HDAC阻害剤FK228またはCBHA添加後にアポトーシス誘導能をもつBH3-only蛋白であるBimやBmfが誘導され、それがHDAC阻害剤自身によるアポトーシス誘導能に極めて重要であること、さらに放射線照射後のアポトーシスへの増強効果にも関わることを証明した(Cell Death Diff 2006 ; Int J Radiat Oncol in press)。2.新規低分子化合物によるアポトーシス誘導各種低分子化合物の活性酸素レベル上昇能を網羅的に調べた結果、複数の有望な活性酸素誘導分子を同定した。このうちの一つの化合物は生体内にも存在しうるものであり、この前処置によって放射線照射後のDNA障害が増加すること、さらにヌードマウスを用いた生体内においても治療効果を発揮しうることを明らかにした(投稿中)。3.アポトーシスに関わるシグナル伝達の解析申請者らは、ヒストンアセチル化過剰により放射線照射後のアポトーシスが増強されることを既に明らかにしているが、その機序は不明な点が多かった。そこで、本研究において、機序解析を詳細に行った結果、アセチル化亢進により放射線照射後のDNA障害が増強することを明らかにした。これにより放射線増強効果《アポトーシス誘導》が発揮されるものと思われた(Apoptosis, in press)。上記したBmf蛋白との関連性を含めて、今後、さらなる放射線増強効果を目指して、こうした様々な現象がどのように機能するのかを詳細に解明して行く必要性がある。1.siRNAを用いたノックダウンによる効果ヒストンアセチル化後(HDAC阻害剤FK228またはCBHA添加後。さらに、ヒストンアセチル化酵素CBPまたはp300の遺伝子導入後の過剰発現後)、アポトーシス誘導能をもつBH3-only蛋白であるBimやBmfが誘導されたことから、各々のmRNAをターゲットとするsiRNAによってノックダウンさせ、それがHDAC阻害剤自身によるアポトーシス誘導能に極めて重要であることを証明した(Cell Death Diff 2006;Int J Radiat Oncol 2006)。2.動物実験による検証各種低分子化合物の活性酸素レベル上昇能を網羅的に調べた結果、methoxy-E2が強い活性酸素誘導作用を有し、この前処置によって放射線照射後のDNA障害が増加すること、さらにヌードマウスを用い、生体内においても治療効果を発揮しうることを明らかにした(Clinical Cancer Res 2006)。

このことから、酸化ストレス誘導物質は、放射線治療効果の促進剤として、実用化の可能性が示された。3.パートナーの同定申請者らは、ヒストンアセチル化過剰によりアポトーシスが惹起されることを明らかにしているが、その機序は不明な点が多かった。本研究において、アセチル化亢進後に生じるBimやBmfの発現亢進の機序解析の結果、JNK活性化のみならず、これらの蛋白に特異的に結合するたんぱく質の変化を見出した。アセチル化に伴う分子会合の変化は、BAXとKu70との間で既に知られているが、それとは異なる現象であり、この意義に注目している。現在、このパートナー分子の生物学的意義について詳細な解析を加えて発表する予定である。
コンピュータ不安検査と情緒的リテラシー形成のための教材の開発研究-不安感の発達的な変化と不安低減教育の方略-

本研究は,次の3点を目標として行われた.(1)コンピュータに対する不安感を他のハイテク機器に対する不安感と比較することにより,コンピュータに対する抵抗感の内容を明かにする.(2)小川ら(小川,1991;小川・浅川,1991)が作成したコンピュータ不安尺度(CAS)を用いて2つの小学校を対象に調査を行い,小学生における情緒的リテラシーの差を検討すると同時に,大学生や中学生との比較によって情緒的な反応の差を検討する.(3)コンピュータ使用時における大学生のストレス場面とストレス反応について質問紙を作成し,ストレス反応の頻度と強さの構造を検討する.研究の結果から,次のことが示された.(1)調査結果を因子分析した結果,不安感/抵抗感などが一体となった否定的感情の因子が抽出され,この因子で比較すると旅行代理店などのチケット予約システムや自動改札といった社会的なサービスを受けるための機器ほどコンピュータは否定的にとらえられていない.その反面,社会システムほど身近ではない.コンピュータはいまだ未知の存在であり,知識や技能がないと使えない機械であると考えられていることが示された.(2)小学校を対象にした調査結果を中学校や大学の結果と比較した結果,不安得点は大学生よりは中学生,中学生よりは小学生のほうが低いことが示された.(3)ストレス場面としてデータ等の情報の喪失が重要視されていること.その反面情報の保存についてストレスを感じていない(気にしていない)ことが示された.本研究は,次の3点を目標として行われた.(1)コンピュータに対する不安感を他のハイテク機器に対する不安感と比較することにより,コンピュータに対する抵抗感の内容を明かにする.(2)小川ら(小川,1991;小川・浅川,1991)が作成したコンピュータ不安尺度(CAS)を用いて2つの小学校を対象に調査を行い,小学生における情緒的リテラシーの差を検討すると同時に,大学生や中学生との比較によって情緒的な反応の差を検討する.(3)コンピュータ使用時における大学生のストレス場面とストレス反応について質問紙を作成し,ストレス反応の頻度と強さの構造を検討する.研究の結果から,次のことが示された.(1)調査結果を因子分析した結果,不安感/抵抗感などが一体となった否定的感情の因子が抽出され,この因子で比較すると旅行代理店などのチケット予約システムや自動改札といった社会的なサービスを受けるための機器ほどコンピュータは否定的にとらえられていない.その反面,社会システムほど身近ではない.コンピュータはいまだ未知の存在であり,知識や技能がないと使えない機械であると考えられていることが示された.(2)小学校を対象にした調査結果を中学校や大学の結果と比較した結果,不安得点は大学生よりは中学生,中学生よりは小学生のほうが低いことが示された.(3)ストレス場面としてデータ等の情報の喪失が重要視されていること.その反面情報の保存についてストレスを感じていない(気にしていない)ことが示された.
レファレンス・サ-ビスの質的評価基準策定のためのレファレンス・プロセスの研究

本研究の目的は、参考質問を起点として展開されるレファレンス・サ-ビスの実態調査を行うことによって、(1)サ-ビス記録の標準化を図り、(2)その質的基準を確立し、(3)レファレンス・サ-ビスを評価するための指標を明かにし、大学図書館におけるレファレンス・サ-ビスの改善に資することである。この目的を達成するため、まず、質問紙調査と面接調査を実施して、大学図書館におけるレファレンス・サ-ビスの実態を把握し、その課題と問題点を整理することを試みた。質問紙調査は、全国の大学図書館(中央館約500館)のレファレンス・サ-ビス担当者を対象とした全数調査を行った。参考質問の記録の形式と内容、記録デ-タの利用と評価方法、参考図書のコレクションの選書方法等、参考質問の記録と参考図書コレクションの構築に関して、十分な量のデ-タを収集、分析することができ、その結果、わが国の大学図書館におけるレファレンス・サ-ビスの実態を統計的に把握することができた。面接調査は、レファレンス・サ-ビスを活発に実施している大学図書館、特微的なサ-ビスを実施している図書館を10館余り抽出し、そのレファレンス担当職員に対して行った。実際の質問応答、問題解決のプロセス、参考図書コレクションの選書プロセス等に関する具体的で詳細なデ-タを入手、分析することができ、その結果、わが国の大学図書館におけるレファレンス・サ-ビスの特性を質的に解明し、その課題と問題点を整理することができた。以上のような実態調査の分析結果を踏まえて、わが国の大学図書館におけるレファレンス・サ-ビスを改善するための方策を検討し、サ-ビス記録の標準化の方法とサ-ビスの質的な評価の指標に関する提言をまとめた。
閾値関数系の解析と神経回路網への応用

本研究では,{1,-1}^n上の自己双対な正の閾値関数に関するminimal weightの生成法を提案する.自己双対関数は適当な標準化によって,すべての重みが正整数でその和が奇数となるように出来る.そのようなweighは無数にあるが,その中で,ある意味でminimalなweightを定めることは理論的に橋,また効率的な閾値素子を設計する上でも重要である.そのような最適なweightは,L.T.Fisher等によるMBS(minimal boundary set)関数のような特別な場合を除いては知られていない.本研究では,nー1次元のminimal weihtからn次元のminimal weightを生成する方法を提唱する.通常,minimal weightは各重みの和を最小にするものとして定義されるが,この要請は線形計画法によるminimal weght生成法と密接に関連している.ここでは,より厳しい要請ーベクトルとしてminimalの条件をおく.この場合,minimal weightの一意性が保証される.本研究では,奇数次元ですべての重みが1であるweight(初期normal weghtとよぶ)から出発してnormal手続きと呼ばれる方法に従ってより次元の高いweight(normal weightとよぶ)を帰納的に生成していく.この手続きは線形計画法等よる方法より極めて簡単な手続である.この手続きで得られるnormal weightはすべてminimal weightであることが示される.さらに,この手続きで得られるweightはすべて異なり,生成法として効率がよいことも示される.n≧6では,normal手続きによりすべてのminimal weightが生成される.n=7では,103個のnormal weightが得られる.この方法で得られないminimal weghtが11個あり,それらは,normal手続きを少し変更することにより,n=6のnormal weightから得られることがわかった.現在,normal weightのクラスの特徴付けを行っている.本研究では,{1,-1}^n上の自己双対な正の閾値関数に関するminimal weightの生成法を提案する.自己双対関数は適当な標準化によって,すべての重みが正整数でその和が奇数となるように出来る.そのようなweighは無数にあるが,その中で,ある意味でminimalなweightを定めることは理論的に橋,また効率的な閾値素子を設計する上でも重要である.そのような最適なweightは,L.T.Fisher等によるMBS(minimal boundary set)関数のような特別な場合を除いては知られていない.本研究では,nー1次元のminimal weihtからn次元のminimal weightを生成する方法を提唱する.通常,minimal weightは各重みの和を最小にするものとして定義されるが,この要請は線形計画法によるminimal weght生成法と密接に関連している.ここでは,より厳しい要請ーベクトルとしてminimalの条件をおく.この場合,minimal weightの一意性が保証される.本研究では,奇数次元ですべての重みが1であるweight(初期normal weghtとよぶ)から出発してnormal手続きと呼ばれる方法に従ってより次元の高いweight(normal weightとよぶ)を帰納的に生成していく.この手続きは線形計画法等よる方法より極めて簡単な手続である.この手続きで得られるnormal weightはすべてminimal weightであることが示される.さらに,この手続きで得られるweightはすべて異なり,生成法として効率がよいことも示される.n≧6では,normal手続きによりすべてのminimal weightが生成される.n=7では,103個のnormal weightが得られる.この方法で得られないminimal weghtが11個あり,それらは,normal手続きを少し変更することにより,n=6のnormal weightから得られることがわかった.現在,normal weightのクラスの特徴付けを行っている.
ターボ符号を用いた超高密度記録のためのディジタル信号処理方式の研究

二十一世紀初頭の高度情報社会分野では,現行よりも一段と進化したハードディスクや光ディスクなどの様々なディジタルストレージ装置が,マルチメディア情報蓄積のための記録メディアとして最も期待されている.このため,ハードディスク装置においては,現時点でディジタル記録媒体の面記録密度が年率100%という急速な勢いで高密度化が求められ,一平方インチ当たり約百ギガビットを超える記録密度を達成している.本研究では,今後の超高密度ディジタル磁気記録方式を実現するために,このディジタル磁気記録のための信号処理技術に着目し,性能の良い情報伝送を実現するためのパーシャルレスポンス方式と呼ばれるディジタル信号処理方式の検討を更に進めた.そして,磁気記録・再生チャネルの持つ特性に適するようにデータ系列を加工して変換する記録符号化と呼ばれる符号化方式を組み合わせることで,さらに性能の良い優れた情報伝送を実現することを検討した.この結果,記録符号化方式として近年様々な通信分野で着目されているターボ符号化方式を採用し,従来よりも性能の良い高次パーシャルレスポンス方式を組み合わせることで,今後の目標となる記録密度の領域において数dBのSN比改善が得られることが判明している.この結果は,次世代の記録方式の一候補となる単一装置内に複数ディスクを装備するマルチトラック方式を用いたハードディスクシステムにも当てはまることも,様々な計算機シミュレーションや実験結果によって裏付けられている.併せて,本研究を通して,誤り訂正方式と本研究方式との有効な組み合せを見出す問題やマルチトラック方式実現に向けての課題も同時に幾つか判明している.1.ターボ符号とトレリス符号を用いたPR方式の検討本研究の狙いと目標は,通信の各分野で次世代の有望な信号処理方式の一つとなっているターボ符号や低密度パリティ検査符号を始めとする符号化方式と事後確率に基づく系列推定を行う繰り返し復号法を組合わせたパーシャルレスポンス(PR)方式を構成し,これらの各符号化PR方式の誤り率特性を解析することにある.本年度においては,まず中間の目標として,ターボ符号化と事後確率に基づく系列推定を行う繰り返し復号法を組合わせたターボ符号化PR方式と系列間の最小自由ユークリッド距離を大きくするトレリス符号化PR方式を構成し,シミュレーションによって両者のビット誤り率特性を比較検討し,両者の特性の違いを明かとする.2.研究経過・中間成果符号化率19/20トレリス符号,38/40ターボ符号とE^2PR4ML方式を組み合わせた各方式の開発を行い,従来の16/17MTR(3;11)符号にPR(5,9,1,-7,-6,-2)方式を組み合わせた方式の誤り率特性を求め,比較検討する.ただし,規格化線密度K=3.0,ナイキスト波形のロールオフ率β=0.5,符号間干渉量と等化器の帯域幅を調整するためのパラメータηを読み出し点SN比においてビット誤り率(BER)を最適とするη_<opt>とする.その結果,トレリス符号は16/17MTR符号に対して,BER=10^-5程度で1.8dB程度のSN比改善が得られた.また,トレリス符号の誤り率特性は,5回の繰り返し復号を行ったターボ符号に対してBER=10^<-4>程度までは優位にあることが明かとなった.また,ターボ符号の軟出力を利用した繰り返し復号では,等化器出力系列から得られる軟出力を含める場合は,さらにSN比改善が得られることが明らかとなった.二十一世紀初頭の高度情報社会分野では,現行よりも一段と進化したハードディスクや光ディスクなどの様々なディジタルストレージ装置が,マルチメディア情報蓄積のための記録メディアとして最も期待されている.このため,ハードディスク装置においては,現時点でディジタル記録媒体の面記録密度が年率100%という急速な勢いで高密度化が求められ,一平方インチ当たり約百ギガビットを超える記録密度を達成している.本研究では,今後の超高密度ディジタル磁気記録方式を実現するために,このディジタル磁気記録のための信号処理技術に着目し,性能の良い情報伝送を実現するためのパーシャルレスポンス方式と呼ばれるディジタル信号処理方式の検討を更に進めた.そして,磁気記録・再生チャネルの持つ特性に適するようにデータ系列を加工して変換する記録符号化と呼ばれる符号化方式を組み合わせることで,さらに性能の良い優れた情報伝送を実現することを検討した.この結果,記録符号化方式として近年様々な通信分野で着目されているターボ符号化方式を採用し,従来よりも性能の良い高次パーシャルレスポンス方式を組み合わせることで,今後の目標となる記録密度の領域において数dBのSN比改善が得られることが判明している.この結果は,次世代の記録方式の一候補となる単一装置内に複数ディスクを装備するマルチトラック方式を用いたハードディスクシステムにも当てはまることも,様々な計算機シミュレーションや実験結果によって裏付けられている.併せて,本研究を通して,誤り訂正方式と本研究方式との有効な組み合せを見出す問題やマルチトラック方式実現に向けての課題も同時に幾つか判明している.
ホログラフィー等分配則と非加法的エントロピーに基づく革新的宇宙論モデルの構築

本研究の目的は,標準的な宇宙論モデルを超えた革新的モデルとして,「非加法的エントロピーとホログラフィー等分配則に基づく宇宙論モデル」を構築し,熱・統計力学的な視点から,加速膨張宇宙のメカニズムの解明に資することである。具体的には,以下の項目を達成することを本研究の主な目的とする。(1)非加法的エントロピーをホログラフィー等分配則に適用した宇宙論モデルを構築し,一様等方宇宙の重力方程式(加速度方程式とフリードマン方程式)を定式化する。(2)熱力学第二法則を用いて,加速度方程式の駆動項の大きさの評価を試みる。2018年度(平成30年度)は,事象の地平のエントロピーを一般化エントロピーと仮定して検討を実施した。具体的には,(1)の検討について,非加法的エントロピーに限定せずに,一般化エントロピーをホログラフィー等分配則に適用し,宇宙論モデルの構築を試みた。本手法により,重力方程式(加速度方程式とフリードマン方程式)を拡張した形で定式化することができた。特に,加速度方程式の駆動項(いわゆる宇宙項)は、一般化エントロピーに関係する項として定式化されることが明らかになった。もちろん,一般化エントロピーを非加法的エントロピーに変更することも可能である。したがって,当初予定の(1)を拡張した成果が得られた。さらに,次年度以降に行う予定であった(2)の熱力学的検討も簡易的に試みた。その結果,密度パラメーター等の微調整が必要な標準的な宇宙論モデルとは異なり,本モデルでは,駆動項の大きさが熱力学的に制限されることが示された。本年度は,一般化エントロピーをホログラフィー等分配則に適用し,宇宙論モデルを構築した。その結果,事象の地平のエントロピーを非加法的エントロピーに限定せずに,より一般化した形で加速度方程式を定式化することができた。また,次年度以降で行う予定であった熱力学的検討も簡易的に試み,本モデルの加速度方程式の駆動項(いわゆる宇宙項)の大きさが熱力学的に制限されることを示した。本年度の研究成果は,学会発表2回,および国際的な学術論文1編として発表した。本年度に定式化した宇宙論モデルをベースに,背景膨張或いは揺らぎなどに関する視点から,本モデルの特性の解析を進めていく予定である。
癌形質の発現機構

癌化に伴う足場非依存性増殖能の獲得機構と染色体異常の発生機構を探るために、EGFとTGFーβによって可逆的に癌化が誘導されるNRK繊維芽細胞の変異株を用いた細胞内発癌シグナル伝達経路の分子遺伝学的解析とヒト細胞のG2期細胞周期制御遺伝子の単離解析を進めている。これまでの成果として、細胞内発癌シグナル伝達経路に関しては、少なくともNRK細胞では、EGFとPDGFによって共有されるシグナル伝達経路が、発癌シグナルの主要な伝達経路であること、増殖誘導シグナルと発癌シグナルは同一ではないこと、erbB,fms,fes,mos,ras,fos,polyoma mTの作用点が、src,raf,adenoElAの作用点の上流にあることが、更に生化学的解析からも強く示唆された。一方、足場非依存性増殖能と細胞周期との関連を検討した結果、足場非依存性増殖能とEGFとTGFーβによって足場非依存性にG1からS期に細胞が進行できる能力とに強い相関があることが見出された。従って、足場非依存性増殖能の本態が、細胞が足場非依存性に細胞周期のG1からS期に進行できる能力の獲得にあると解釈された。他方、染色体異常の発生機能を探めるために、細胞周期のG2期の周節因子遺伝子のクロ-ニングを進めたところ、分裂酵母のcdc25遺伝子に対応するヒト遺伝子の単離に成功し、更に、この遺伝子の発現がある種の癌細胞で著名に昂進している事実を突き止めた。分裂酵母では、cdc25遺伝子の発現昂進によって染色体異常が誘導されることから、少なくとも一部の癌細胞で見られる染色体異常が同様の機構によって発生している可能性が明らかとなった。
自己組織化有機ナノシートを用いる有機スーパーキャパシタ開発に関する研究

ペプチドナノシートを分子集合体で調製するため、ポリサルコシンと(Leu-Aib)の繰り返しを6回有する疎水性ヘリックスペプチドとのブロック共重合体を3種類合成した。ヘリックス部がD体(SDM)とL体(SLM)、およびL体にD-pi-A官能基を結合したペプチド(SOLDA)である。DOLDA/SLM/SDM(30/20/50)の混合物をエタノール10%水溶液中にインジェクションし、50°Cで1時間加熱することで、5ミクロン程度のサイズのナノシートを調製できることが明らかとなった。ナノシートは平面性が高く、D体とL体とのステレオコンプレクス形成が分子集合体の疎水性部構築のドライビングフォースとなっていると考えられる。このナノシートを金基板に置き、対極に水銀を用いてキャパシタ測定を行ったが、アマルガム生成のため定量的な値を得ることができなかった。そこで、カーボン電極を用い、ポリ乳酸の厚さ100nm以下の薄膜を隔ててナノシートを置き、水銀電極を用いてキャパシタ測定を行ったところ、再現性のあるデータの取れることが明らかとなった。さらに、KFMを用いたナノシートの表面電位測定を行ったところ、ナノシートからポリサルコシン部位を光照射切断することにより、D-pi-A部位に基づくと考えられる表面電位形成を確認することができた。これらの結果から、分子レベルでの超薄膜化によるキャパシタの増大、さらには、D-pi-A化合物のシート表面への導入による擬電気二重層による表面電位形成、などを確認でき、スーパーキャパシタ調製への道筋を示すことができた。
半導体量子ドット格子における量子相関に関する研究

これまで半導体を用いた二次元電子系においては量子ホール効果、分数量子ホール効果をはじめとした様々な電子物性や量子相関が明らかにされてきた。しかしながらさらに次元性の低い一次元、ゼロ次元電子系では電子物性研究の進展やデバイス応用の研究が著しく遅れている。この原因は平坦な二次元構造では原子スケールの構造精度がほぼ完全に達成されているのに対し、一次元・ゼロ次元構造ではそれが極めて不完全であることによる。本計画ではこれまで半導体ナノ構造の製造技術として開発を進めてきたMEE技術を進化・最適化することにより、おもにIII-V族化合物半導体を用いて、構造精度の極めて高い量子細線構造、量子ドット網構造などの製作技術を確立し、それらの構造を用いた新しい現象の探索を行った。III-V族化合物半導体の特性を生かすにはヘテロ接合が不可欠である。このため低次元構造の製作技術に関してはAlGaAs/GaAsをはじめ、InAs/GaAs、InGaAs/GaAsなどの諸材料を用いて行った。量子細線、量子ドット等の製作では、サイズと配列の不均一性・不規則性を排除するため、これまでの自己形成型の手法はとらず、電子線露光をベースに選択エピタキシャル成長の方法をとった。ナノ構造を設計どおりに実現するには横方向成長を阻止する必要があったが、MEE法を最適化することによりこれを実現した。その結果極めて均質性の高い一次元量子細線、ゼロ次元量子ドットの製作に成功すると共に、これらを用いた二次元格子配列構造の製作技術が確立できた。AlGaAs/GaAsを用いた量子ドット格子は、二次元フォトニック結晶として有効に機能することが明らかになった。さらに量子ドット-量子細線ネットワークの製作にも成功し、所期の性能を得た。一方InAs/GaAs量子ドット構造ではヒロックの発生に直面したが、結晶学的な解析によりその原因を究明し、この系においても構造精度の高い低次元構造の実現を可能にした。【研究概要】GaAsに、濃度、位置ともに極めて高い精度で制御できる収束イオン注入技術を用いてInを注入し、熱処理したところ、注入領域に微小な結晶が再成長することを発見した。このことから、イオン注入によってドット列を自由に形成することが可能であり、応用性の高い半導体量子ドット形成技術に発展できるものと期待できる。【実験概要】固体ソースMBE法を用いてGaAs(111)A基板上に膜厚500nmのInAsを成長させた。このInAs層をエッチングによリ100μm幅のラインアンドスペース状に除去し、InAs表面とGaAs表面が交互に現れる構造にした。イオン注入はInをビーム径100nm、加速電圧30kVとし、InAs/GaAsストライプを直角によぎるように、直線状及び10μm間隔のドット状に行った。熱処理は基板のAsの脱離を防止するためInAs基板を密着させ、600°Cで1分間行った。Inイオンを注入したあと、熱処理したGaAs表面に、注入線に沿って結晶方位のそろったピラミッド状の微結晶が出現した。この微結晶のサイズは、高さが約300nmであった。この高さはGaAs表面からは200nmほど高くなっており、微結晶の周囲では一定領域にわたってGaAsの厚さが減少している。このことから、熱処理時にイオン注入領域に周囲の原子が移動し、微結晶が再成長していることがわかる。これに対し、InAs領域にInを注入した場合には、熱処理温度やドーズ量を変化させても、微結晶は出現しなかった。

このことから、微結晶形成の原因の一つとして、GaAs中にInを注入したことによる局所的な歪みが考えられる。今後、AlGaAs/GaAsヘテロ構造のGaAs層の厚さを変化させることにより、周囲からの原子の移動を制限し、微結晶のサイズを制御することを検討する。本年度は、選択成長による量子細線の作成に関する研究に加え、GaAs中に等電子不純物である窒素をδドーピングした試料の詳細な光学特性を、外部場を印加することで調べた。今回、MEE法を用いた選択成長により、サブミクロン量子細線の作製に成功した。この量子細線の周囲に400nm幅のサブミクロンマスクを施すことにより、SiO2マスク上に供給されるGa原子の拡散による成長層への寄与が小さくなり、量子細線と電極との接続部分における膜厚の不均一性が改善された。また、SiO2マスク幅をGa原子の拡散長に近づけることで、完全なる選択性を得ることができ、成長速度の改善がされた。また、従来困難であったAlGaAs選択成長が可能となった。量子細線のPL発光強度の二次元パターンを観察したところ、成長層での発光はマスク下の基板からの発光に比べ極めて強く、均質であることが確認され、良質な量子細線構造が形成できたことが分かる。今後、基板面、量子細線方向、量子細線の幅、成長条件等を最適化するとともに光導波路としての特性調べる。さらに低次元の電気伝導特性も検討する。また、ゲート電極で制御することにより、バリスティック伝導および1次元伝導特性の観測が期待され、低消費電力FETへの応用も考えられる。次に、窒素をδドーピングしたGaAsの光学特性に関しては、GaAs中に分布した2nm以下の原子間距離を持つ窒素原子対に束縛された励起子の発光を電界と磁場を印加して詳細に調べた。その結果、励起子の生成過程は、定常的なトンネル現象によって支えられており、その遷移プロセスは、N原子対に束縛された励起子の束縛エネルギーに比べて、非常に小さい外部場により制御できることが明らかになった。【微細構造におけるファセットの応用】トップダウンとボトムアップを組み合わせることによって微細構造の位置制御は改善されるが個々のドットや細線の形状の制御性は保障されない。この問題を解決するため我々は三次元成長に伴って現れるファセットを積極的に応用することとした。MBEやMOVPEでは{111}B面および{110}がファセットを形成するが、MEEでは{111}Bファセットが消失し、{110}ファセットのみが顕著に現れることを明らかにし、MEE法を用いることにより、{110}ファセットによって囲まれた微細構造の製作が可能になった。【ナノスケールチャネル構造】高速・低消費電力のバリスティックデバイスの実現をめざしナノスケールチャネル構造を作製した。半導体におけるバリスティック伝導距離はきわめて短く、一般に実用的なバリスティック長は低温でしか得られない。しかしInGaAsでは、バリスティック長は室温においても数100nmに達する。したがってそのようなチャネルを無損傷で実現できれば室温で動作するバリスティックデバイスも可能となる。成長開始時から{111}Bファセットと垂直{
妊娠高血圧症候群の病態における分子標的因子の解析と新たな治療法の開発

EVT浸潤において、生理活性物質であるリゾリン脂質LPA、S1Pの受容体サブタイプの発現パターンを明らかにした。また、受容体サブタイプにより浸潤や遊走に促進的および抑制的に作用すること、シグナル伝達系やMMP-9の発現変化を介していることが判明した。受容体発現パターンには、細胞密度の関与を示唆する結果を得た。S1P2拮抗薬投与によるEVT浸潤促進作用が確認されたが、動物実験では有意な変化を認めなかった。一方S1P1,3拮抗薬投与により胎盤低形成、胎児発育不全のモデルを作成することができた。以上より、リゾリン脂質の受容体拮抗薬や作動薬が、胎盤低形成や胎児発育不全の新規治療への可能性が示唆された。1.絨毛膜外絨毛細胞(EVT)において、S1Pの浸潤、遊走に関与する受容体サブタイプを同定するために、各受容体サブタイプに特異的な拮抗薬を投与し検討したところ、S1P2受容体は浸潤、遊走を抑制すること、S1P3受容体は浸潤、遊走を促進する傾向を認めた。EVT細胞株は、HTR-8/SVNeoに追加し、Hch-Epc細胞も使用して、再現性を確認したが、再現が確認された。さらにsiRNAを遺伝子導入し検討した結果も、同様であった。以上より、EVTにはS1P2,3が発現しているが、S1P2は浸潤を抑制し、S1P3は浸潤を促進する作用があることが証明された。さらにEVTにはSPHK1およびABCC1が発現していることが明らかとなり、内因性のS1Pが作用している可能性が示唆された。またS1P2,S1P3のいずれかが発現優位となるかについては、細胞密度によって変化することが確認された。以上より、初期胎盤形成の段階で、脱落膜に着床後形成されるcytotrophoblastの細胞塊であるcell columnではS1P2が発現優位であり、intermediate EVTではS1P3が発現優位となっている可能性が示唆された。また、S1P2受容体拮抗薬はEVT浸潤を促進するので、胎盤形成に作用する可能性が示唆された。2.妊娠高血圧症候群症例と週数を合致させた正常妊娠症例で胎盤におけるSPHK1, ATXの発現を検討したが、発現には優位な変化は認めなかった。3.羊膜におけるS1P受容体の発現を確認し、陣痛後は陣痛前に比べSPHK1の発現が亢進し、S1Pによりcox-2の発現が促進することを確認した。これによりS1Pが妊娠末期に陣痛発来に関与していることが示唆された。1.絨毛膜外絨毛細胞株HTR-8/SVneo、HchEpc1b、Swan細胞を用いてS1P1ー3の受容体をノックダウンしたところ、HTR-8/SVneo細胞では再現性が得られず、それ以外の2種の細胞においてMMP-2の発現には有意な変化を認めなかったが、S1P2受容体のノックダウンにより約3倍MMP-9の発現亢進を認めた(P<0.05)2.HchEpc1b、Swan細胞を用いて、細胞密度によりS1P受容体サブタイプの発現パターンが変化するかについて検討したところ、細胞密度が高い培養条件ではS1P1、3受容体発現が低下し、S1P2受容体発現は亢進していた。このことから、妊娠初期の胎盤形成において、cell columnのように細胞密度が高い状態ではS1P2受容体発現が亢進し、MMP-9の発現が低下して遊走能が低く、細胞密度が低い状態では、絨毛膜外絨毛細胞として遊走能が高く、S1P2受容体の発現が低下している可能性が示唆された。3.2の結果を踏まえ、妊娠初期摘出子宮標本において、S1P受容体サブタイプの発現パターンを検討したところ、S1P1、3受容体発現は絨毛外絨毛細胞に発現を認めたが、S1P2受容体の発現は認められなかった。4.S1P2受容体拮抗薬をE7、E9、E11に投与し、E14に胎仔、胎盤の重量には有意な変化は認められなかった。5.羊膜における初代培養において、S1Pを添加したところ、ECE-1の発現は有意に亢進し、NEPの発現は有意に抑制し、結果として平滑筋収縮作用を有するET-1の発現の有意な亢進を認めた。したがって、S1PはET-1と協調的に陣痛発来に作用している可能性が示唆された。妊娠高血圧症候群は、全妊婦の3-4%の発生頻度であり、WHOの推計によると、年間10万人の妊婦がこの疾患で死亡している。

現在、確立された治療法はなく、妊娠終結が第一選択となり、母体の救命のために未熟児分娩を選択するという苦渋の決断を迫られている。近年、新生児医療の進歩により児の生命予後は向上したものの、疾患の特徴でもある胎盤低形成による子宮内胎児発育遅延をしばしば合併し、児の神経学的後遺障害は依然として問題となっている。従って、本疾患の原因究明およびその治療法の確立は重要課題と考えられる。これまで病態に関する報告は多岐にわたってきたが、近年、妊娠初期の母体脱落膜へのEVT浸潤障害による胎盤形成不全説を支持する報告が国内・国外で相次いでいる。本研究では、新規生理活性物質であるリゾリン脂質、スフィンゴシン1リン酸(S1P)およびリゾホスファチジン酸(LPA)の相互作用によるEVT浸潤調節機構を分子生物学的に解明すること、また、これらの受容体拮抗薬がEVT浸潤不全を改善しうるかを検討する。今年度は.患者からのインフォームドコンセントを得て集積した妊娠初期子宮筋ー脱落膜ー胎盤組織でLPAの受容体の各サブタイプおよびAutotaxinの発現パターンについて、検討した。初代培養EVT細胞およびEVT細胞株HTR-8/SVneoにおいてLPAがchemoattractantとして遊走能、浸潤能を促進した。増殖能には影響を認めなかった。またS1Pによる浸潤抑制を軽度改善する効果を認めた。これらの結果を第19回日本胎盤学会で報告したところ、学会賞である相馬賞受賞するという成果を得た。LPAの胎盤形成への関与の仕組みへの実験はやや遅れているが、S1Pの形成への関与を明らかにすることに関してはかなり進展した。EVT細胞株も2種類で同様の結果を得ることができた。また、羊膜におけるS1Pの役割も明らかにすることができたのは非常に発展したと考えている。初代培養EVT細胞への遺伝子導入が困難であったので、EVT細胞株HTR-8/SVneoへの遺伝子導入に切り替えたが、今のところ導入効率が悪く条件を検討中である。それ以外は計画通りにほぼ進行しており、翌年度の計画も一部前倒しに施行している部分もあるので、全体的にはほぼ計画通りの進行と考えている。S1P受容体サブタイプであるS1P2受容体拮抗薬のEVT浸潤不全の改善できるかを証明する。具体的には臨床検体でS1Pの産生細胞の同定と、S1P2、3のサブタイプの発現の分布、発現を比較検討していく。今年度はSPHKでは差が認められなかったが、受容体サブタイプでは発現に差が生じる可能性が期待できる。さらに、これまでの結果は細胞株を用いたものであり、臨床応用にむけて、初代培養細胞におけるS1P2受容体拮抗薬投与による浸潤促進作用の条件を検討していく。遺伝子導入が条件設定の変更によってもsiRNAで成功しないときには、レンチウイルス感染によるshRNAの導入も考慮していく。今年度も国際学会に参加し、最新の知見を得るとともに、同じ研究分野の研究者と交流し情報を得る。1.S1P産生細胞をinvivoで証明する。臨床検体での免疫組織染色、初代培養でのELISAを行う。2.臨床検体(妊娠高血圧症候群とコントロール)でS1P受容体の発現の変化を検討していく。3.初代培養細胞におけるS1P2受容体拮抗薬の浸潤促進作用を検討する。4.以上の結果を国内外の学会で発表後、論文作成する。平成23年度分予定の遺伝子ノックダウン実験を継続しつつ、今年度の計画は以下に示す。