hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
Rab33による小胞輸送制御機構の解明

一般的に、Rabの膜輸送における役割を解明するためには、その下流の因子である特異的なエフェクター分子(活性化型のGTP-Rabに結合する分子)の同定とその機能解析が不可欠である。そこで本研究課題では、Rab33に特異的に結合するエフェクター分子の同定とその機能解析を通して、Rab33が制御する膜輸送過程(生命現象)の分子メカニズムの解明に取り組んで来た。これまでの研究で、活性化型固定化Rab33をbaitにしたスクリーニングにより、複数の新規Rab33結合蛋白質(Atg16L1/2,RUFY2/3など)の同定に成功している。このうちAtg16L1に関しては、Atg16L1の中央部分に存在するコイルドーコイル領域を介してRab33Bと結合すること(Autophagy,2011)、また、Rab33Bの不活性化因子(Rab33-GAP)としてOATL1を同定し、この分子がLC3/Atg8を介してオートファゴソーム上に局在することによりオートファゴソームの成熟過程を制御することを突き止めた(JCB,2011)。さらに、RUFY2/3に関しても、欠失変異体を用いた解析によりRab33結合サイトがコイルド-コイル領域であることを明らかにし、神経機能との関連性を初めて示唆した(CSF,2011)。
2次元画像処理による生体酸素情報のリアルタイム表示装置の開発と応用

1.酸素飽和度2次元画像計測システムの開発カラービデオ画像を直接解析することにより、酸素飽和度の2次元画像を得るシステムを開発した。各種濃度のヘモグロビン溶液の酸素飽和度を変化させ、3板式CCDカラーカメラ(DXC-930)で透過光を観察すると同時に従来の分光学的方法でヘモグロビン濃度と酸素飽和度の測定をおこなった。カラーカメラからのビデオ信号をRGBセパレート方式の画像取り込みボード(平成13年度購入)で画像処理用コンピュータ(平成13年度購入)に取り込み、赤・青・緑それぞれのフィルターに対するヘモグロビンの吸光係数を求めた。得られた吸光係数を用いてビデオ画像から酸素飽和度・ヘモグロビン濃度の2次元画像を得るプログラムをScionImageのマクロプログラムで作成した。2.開発システムの実証上記で開発した計測システムが実用になることを確認するために微小血管モデルを用いて実証実験をおこなった。血管モデルには酸素を透過する毛細管であるテフロン製の人工流路(内径25μm、外径100μm)を利用した。人工流路を倒立顕微鏡(IMT-2)の上に設置し、赤血球浮遊液を灌流した。人工流路の周りには低酸素圧の液を灌流し、流れる赤血球から酸素を拡散させた。赤血球の酸素飽和度は顕微分光法を応用した従来の酸素飽和度測定装置を用いて測定をおこなうとともに、今回開発した酸素飽和度2次元画像計測システムで測定をおこない、正確な測定ができていることを確認した。各種濃度のヘモグロビン溶液の酸素飽和度を変化させ、3板式CCDカラーカメラ(DXC-930)で透過光で観察すると同時に従来の分光学的方法でヘモグロビン濃度と酸素飽和度の測定をおこなった。得られた吸光係数を用いてビデオ画像から酸素飽和度・ヘモグロビン濃度の2次元画像を得るプログラムをScion Imageのマクロプログラムで作成した。得られた吸光係数を用いてビデオ画像から酸素飽和度・へモグロビン濃度の2次元画像を得るプログラムをScionImageのマクロプログラムで作成した。

血管モデルには酸素を透過する毛細管であるテフロン製の人工流路(内径25μm、外径100μm)を利用した。人工流路を倒立顕微鏡(IMT-2)の上に設置し、赤血球浮遊液を灌流した。人工流路の周りには低酸素圧の液を灌流し、流れる赤血球から酸素を拡散させた。赤血球の酸素飽和度は顕微分光法を応用した従来の酸素飽和度測定装置を用いて測定をおこなうとともに、今回開発した酸素飽和度2次元画像計測システムで測定をおこない、正確な測定ができていることを確認した。
遺伝性進行性ジストニアの発症に関わるビオプテリン生合成調節機構の研究

申請者は、GCH遺伝子の発現調節に関わる因子の探索を計画した。昨年、申請者らはGTPシクロヒドロラーゼI(GTP cyclohyroxylase I;GCH)遺伝子の発現制御領域を解析するために、トランスジェニックマウスを用いて、組織特異的発現調節領域の解析を行った。その結果、5'上流プロモーター領域の0.6kbでは脳のみで発現し、4.5kbでは脳、末梢ともに発現が検出されなかった。そこで申請者らは、本年度は4.5kbと0.6kbの間に脳での発現を調節する配列があると考え、その領域を特定するために、培養細胞を用いて転写活性を測定した。8.1、4.5、0.6kbのGCH5'プロモーター領域にルシフェラーゼ遺伝子を連結させた導入遺伝子を作製した。それらの遺伝子をライン化された培養細胞にトランスフェクションし、48時間培養した。その後細胞を回収し、ルシフェラーゼの発現量をルミノメーターにより測定した。その結果、神経系の細胞では4.5kbに対して0.6kbでは活性が高くなっていた。また上皮系の細胞では上昇は軽度であり、トランスジェニックマウスの解析結果を反映する結果となった。近年、末梢での発現を抑制し、神経での特異的な発現をさせる転写因子、NRSF(neural restrictive silencer bindingfactor)の存在が発見された。申請者らはその結合配列であるNRSと相同性の高い配列が4.5kbと0.6kbの間に存在することを検索し、その配列がNRSとして機能を持っているかを調べた。様々な長さのプロモーター領域とNRSFとの共発現や、NRS様配列に対する転写活性などの測定を行ったが、明らかな抑制機能は複数の細胞系列では観察されなかった。遺伝性進行性ジストニア(HPD)はテトラヒドロビオプテリンを生合成する酵素であるGTPシクロヒドロラーゼI(GCH)遺伝子の変異により発症する常染色体性劣性遺伝病である。しかしHPDは女性優位に発症し、また翻訳領域に変異が検出されない患者がいる。諸問題を解決する足掛かりとしてGCH遺伝子の発現制御機構について本研究を行った。ヒトGCH遺伝子の3種の長さの5'上流プロモーター領域にレポーター遺伝子であるクロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ(CAT)遺伝子を連結させ、マウスの受精卵に導入した。生まれたマウスの尾からゲノムDNAを抽出し、サザンブロット解析を行った。その結果、導入したそれぞれの遺伝子をもつトランスジェニックマウスが作成されていることが確認でき、それぞれ3系統ずつのファウンダーマウスを得ることができた。それらのトランスジェニックマウスについて、脳と末梢器官でのCATの発現をCATエンザイムノアッセイにより解析した。その結果、プロモーターの長さにより、脳でのみ、また脳と末梢器官(主に胸腺、脾臓、p小腸、肺)に発現をしていたマウスや、全身で発現が検出されなかったマウスが観察され、今回行った5'上流プロモーター領域内の組織特異的な発現制御調節領域を調べることができた。さらに強い発現を示していた胸腺などの組織において免疫組織化学染色を行い、内在のGCH陽性細胞と、レポーター遺伝子のCATの発現を比較検討している。
Fontan手術における血行動態の研究(心室の容量負荷の変化と心機能の関連について)

1雑種犬5匹に対し大腿動脈一静脈シャントを作成し8週間生存させ肥大型心筋モデルとした。対象として5匹の雑種犬を用いた。2脱血部位を右房、送血部位を主肺動脈とし、遠心ポンプにより体外循環を行った。主肺動脈を遮断することにより右心バイパスモデルを作った。3遠心ポンプによる流量を3段階から4段階に変化させ計測を行った。4心エコーブローベを2つ用い、1つは心臓に直接あてMモード短軸像を観察し1つは経食道よりパルスドップラー法により左室流入血流、左室流出血流の計測をおこなった。5 Mモード短軸像によりTeichholz法より計算した左室容積、および同時にトレースした左室圧によりP-Vループを描きEmaxを計算した。超音波画像上に圧曲線をInputすることにより6左室流入血流および左室流出血流からTeiらの提唱したDoppler Indexを計算した。7計測の後犬を解剖し左室心筋重量を測定した。8肥大型心筋モデルと対象群とでEmaxおよびDopplerindexに相関関係があるか検討を行った。雑種成犬を無作為に以下の2群に分け全身麻酔下に無菌的手術操作でA群:両側総頚動脈-内頚静脈間に内シャントを作成する。B群:疑似手術、すなわち血管の剥離のみ行い吻合はしない。の手術を数頭行った。実験犬は麻酔覚醒後、一部、感染症、両心不全と考えられる原因により、約その半数を術後早期に失った。術後早期を生存した残りの実験犬は3カ月間飼育した。3カ月後、実験犬を再び全身麻酔して、胸骨正中切開した。心室収縮および拡張機能の測定のため、コンダクタンスカテーテルを経大動脈的に左室に挿入し、また圧トランスジューサーカテーテルを左室および肺動脈に挿入した。また右房より脱血カヌラを肺動脈に送血カヌラを挿入してポンプで送血し、右房を毎分150回でペーシングした。これにより肺動脈血流が定常流で体動脈が拍動流であるFontan手術後の血行動態を疑似せしめた。ポンプ流量を毎分0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0,3.5,4.0L/M平方と変化させ、そのときのP-Vloopおよび肺動脈圧を測定した。心室の収縮および拡張機能はP-Vloopから最大エラスタンス値などを計算することにより求めた。しかし、コンダクタンスカテーテルによる、特に拡張期早期、すなわちいわゆる等容拡張期における心室容積の精度が、拡張機能曲線を算出するのに十分とはいえず、今後の課題として残っている。実験犬は安楽死させ、左室重量を測定した後、一部の心筋組織を採取して病理標本を作成した。雑種成犬を無作為に以下の2群に分け全身麻酔下に無菌的手術操作でA群:両側総頸動脈-内頸静脈間に内シャントを作成する。の手術を数頭行った。3か月後、実験犬を再び全身麻酔して、胸骨正中切開した。心室収縮および拡張機能の測定のため、心エコー短軸像をビデオテープに記録しながら圧トランスジューサーカテーテルを左室および肺動脈に挿入し、左室圧と短軸面積の同時記録を得た。ポンプ流量を毎分0.5, 1.0, 1.5, 2.0, 2.5, 3.0, 3.5, 4.0L/M平方と変化させた。また同時に肺動脈圧を測定した。心室の収縮および拡張機能は心エコー短軸面積より算出したP-Vloopから最大エラスタンス値などを計算することにより求めた。

しかし、コンダクタンスカテーテルによる、特に拡張期早期、すなわちいわゆる等容拡張期における心室容積の精度が、拡張機能曲線を算出するのに十分とはいえず、今後の課題として残っている。実験犬は安楽死させ、左室重量を測定した後、一部の心筋組織を採取して病理標本を作成した。9研究実績の概要9-1雑種犬5匹に対し大腿動脈-静脈シャントを作成し8週間生存させ肥大型心筋モデルとした。対象として5匹の雑種犬を用いた。9-2脱血部位を右房、送血部位を主肺動脈とし、遠心ポンプにより体外循環を行った。主肺動脈を遮断することにより右心バイパスモデルを作った。9-3遠心ポンプによる流量(1.2,1.4,1.6,1.8lit/min)を変え計測を行った。9-4心エコープローベを2つ用い、1つは心臓に直接あてMモード短軸像を観察し1つは経食道よりパルスドップラー法により左室流入血流、左室流出血流の計測をおこなった。9-5 Mモード短軸像によりTeichholz法より計算した左室容積、および同時にトレースした左室圧によりP-Vループを描きEmaxを計算した。9-6左室流入血流および左室流出血流からTeiらの提唱したDoppler Indexを計算した。9-7計測の後犬を解剖し左室心筋重量を測定した。9-8肥大型心筋モデルと対象群とでEmaxおよびDoppler Indexに相関関係があるか検討を行った。9-9当初、肥大型心筋モデルとして内頚動脈-静脈シャントを作製していたが2週間以上生存せず大腿動脈-静脈シャントに変更した。
ヒトリンパ球活性化関連分子、OX40の生物学的特性と発現誘導の解析

OX40(CD134)は最初ラットT細胞活性化マーカーとして同定された分子で、tumor necrosis receptor(TNF)/nerve growthfactor receptor(NGF)ファミリーと相同性をもつことが判明した。OX40の機能はこれまでリンパ球を中心に議論されが我々は、認識があやふやであった一般組織の発現を分子レベルで解析し、さらに他のTNF/NGFファミリー、ことにCD30のデーターも検討しOX40の生物学的関わりを検討した。各細胞株のOX40のノーザンブッロトによる解析では、筋、肺、肝、神経、いずれの細胞株においても発現は見られなかった。リンパ球系細胞ではHUT102、MT-2などのHTLV-1感染細胞に発現した。TNF/NGFファミリーであるCD30ではHlV感染細胞においても発現をみているが、OX40ではHIV感染細胞では発現が見られなった。一方、HUVEC(血管内皮由来細胞)やTIG-2M(胎児筋由来)、TKS-1(カポジ肉腫白来)においてもOX46Lの発現をみた。TKS-1の発現はHHV-8の感染細胞や感染経路を考える上でも興味あることで、現在解析を進めている。ヒト胎児および成人組繊におけるOX40の発現は胎児においては心、胎盤、肺、脾に1.3kbのバンドとして認めている、この大きさのバンドはHUT102細胞でも同様な大きさであった、一方、心、骨格筋では2.4Kbにも認めこれらの組織でのvariant formを示唆された。心、骨格筋におけるOX40の存在は従来考えられてきたリンパ球活性化因子以外、これら組織での機能的役割を示唆された。(平成9年度)OX40(CD134)は活性化T細胞に発現する分子で、その遺伝子構造からTNF/NGFリセプターファミリーの一員であることが判明し、腫瘍増殖やリンパ球分化に関連しているされるが、その機能的役割はまだ殆どが不明である。我々は、本分子の機能を解析する一貫として、細胞内ドメインに対する特異抗体を作製し、免疫沈降、ウェスタンブロットに夜蛋白レベルの解析、CAT-OX40のキメラ蛋白の発現による細胞内ドメインのシグナル伝達の解析を試みた。ノーザンブロットによるmRNAの解析であはHUT-102、MT-2及び活性化リンパ球、胎盤、や正常の胎児心臓、肺臓、脾臓では1.3kbに認識された。また心臓、骨格筋では2.5kbにも確認された、これらをもとにして検索で、骨格筋では細胞内ドメインを保持するOX40のvariantの存在を見いだした。この分子の特性と疾患との関わりについて現在解析を進めている。ウェスタンブロットによる解析では、50kbに活性化リンパ球やHUT102、MT-2、骨格筋に認めたが、免疫組織化学による観察では正常組織では、正常リンパ節は軽度、心、筋の陽性は極めて弱かった。上皮系腫瘍の周囲にみられたリンパ球に発現しており、腫瘍浸潤との関わり示唆された。CAT-OX40の遺伝子のCOS-7のトランスフェクト実験から、TRAF1とTRAF2と会合し、さらに転写因子NFk-Bの活性も上昇していることも確認された。(平成10年度の予定)シグナル伝達系の中心に解析する。OX40(CD134)は最初ラットT細胞活性化マーカーとして同定された分子で、遺伝子構造の解析によりtumor necrosis receptor(TNF)/nervegrowthfactor receptor(NGF)ファミリーと相同性をもつことが判明した。OX40の機能についてリンパ球を中心についえ検討されたが、これまで認識があやふやであった一般組織の発現を分子レベルで解析し、OX40の生物学的関わりを検討をしてきた。

前年度では正常組織を中心に解析してきたが、本年度はさらに疾患を中心に解析した結果、成人心臓では発現が見られなかったにもかかわらず、心筋梗塞の傷害組織おいてその活性が認めた。心筋梗塞の診断的意味があるのではないかと考えられ現在検討中である。OX40のリガンド(OX40L)との関係では、TIG-2M(胎児筋由来)、TKS-1(カポジ肉腫由来)においてOX40Lの発現をみた、ことにTKS-1細胞ではOX40可溶性分子の添加により、IL-6、C-fos、C-junの活性が認めた。この現象は、HHV-8の感染細胞や感染経路を考える上でも興味あることで、現在解析を進めている。CD30分子シグナル伝達の解析とOX40のシグナル伝達の比較:OX40と同じTNF/NGFリセプターファミリーの一つであるCD30の細胞内領域のシグナル伝達を解析したところTRAF2、TRAF5が結合することが明らかになった、またこれらを介し、NF-kBを活性化することが明らかになった。OX40のシグナル伝達に関してCD30と類似性をしめし、TRAF2とTRAF5を介しNF-kBを活性化するととを示した。
連続最適化による混合整数計画問題の大域的解決と情報技術への応用

情報技術の開発や運用で現れる問題の多くは,混合整数計画問題として数理モデル化できる.ところが,離散変数の数は一般に膨大なため,問題の大域的な解決が図られることはまれで,凸計画問題への近似や精度保証のないヒューリスティクスが広く用いられている.本研究では,情報技術への様々な応用が期待できる混合整数計画を等価な連続最適化問題として再定式化し,その最適解を効率よく生成する大域的最適化アルゴリズムの開発を行った.情報技術の開発や運用で現れる問題の多くは,混合整数計画問題として数理モデル化できる.ところが,離散変数の数は一般に膨大なため,問題の大域的な解決が図られることはまれで,凸計画問題への近似や精度保証のないヒューリスティクスが広く用いられている.本研究では,情報技術への様々な応用が期待できる混合整数計画を等価な連続最適化問題として再定式化し,その最適解を効率よく生成する大域的最適化アルゴリズムの開発を行った.混合整数計画問題を等価な連続最適化問題に再定式化すると,凸多面体上での凹関数最小化問題に帰着する.この非凸最適化問題の大域的最適解を求めるアルゴリズムとして単体分枝限定法が1976年にHorstによって提案されている.実行可能集合を単体で分割し,分割単体上で凹目的関数の1次近似の最小化を繰り返すこのアルゴリズムは,ω分割とよばれる単体分割規則を用いた場合,経験的には計算効率が向上するものの,理論的な収束性は2000年にLocatelliとRaberが証明するまでは不明であった.本年度の研究では,主にω分割規則にもとづく単体分枝限定法の収束性証明に取り組みLocatelliとRaberとは異なる,より単純で拡張性のある証明を与えることに成功した.単体分枝限定法は,分割規則が非退化分割過程とよばれる条件を満たせば収束することが知られている.証明は,この条件を満足するように単体上での1次近似関数の最小化条件を若干修正することで実現した.この修正の結果,ω分割を一般化した分割規則でも単体分枝限定法の収束は保証され,アルゴリズムの実用性はさらに向上するものと思われる.それを確認するための計算機実験の実施に向けて現在,研究を継続している.また,情報技術への応用として統計的機械翻訳の句配列問題を整数計画問題として定式化した.これを連続化することにより,収束性の保証された単体分枝限定法の適用が可能となる.また,組込みシステムへの応用が期待されるロバスト制御問題に対し,マクスミニ最適化問題を繰り返し解く制御手法を考察した.この最適化問題は近似的に処理しているが,次年度以降,厳密な処理を行い,制御精度を高める予定である.混合整数計画問題と等価な非線形凹最小化問題の大域的最適解を求めるための単体分枝限定法において,ω分割とよばれる単体分割規則を用いた場合のアルゴリズムの理論的収束性の証明,分割後の単体の数が問題の次元に依存せず,常に2つとなる新たな分割規則,ω2分割の構築と収束性の証明,および2つの分割規則と通常の2分割との比較実験を行った.ω2分割は,ω分割の収束証明の過程で,より一般的な分割規則のもとでも収束の保証されることが明らかとなり,実用性も考慮して設計した分割規則である.理論的な収束性のある分割規則はこれまで2分割とω分割の2つしか知られていなかったが,新たに収束の保証される分割規則が明らかになっただけでなく,計算実験によって経験的にも既存の分割規則を凌駕する結果が得られたことは大きな成果である.現在,この成果を論文にまとめ,投稿の準備をしている.また,機械翻訳などへの応用が期待される非線形非凸最適化問題として,多目的線形最適化問題の有効解集合上で線形関数を最小化するための大域的最適化アルゴリズムの研究も行った.この問題は2つの凸多面体の差集合上での最適化問題となり,したがって既存の凸最適化アルゴリズムで大域的最適解の得られる保証はない.計算量の観点からはNP困難であることが予測されたが,これを理論的に証明すると同時に,有限回の反復で大域的最適解を生成するアルゴリズムを設計した.このほか,最適化問題を含むより一般的な問題として変分不等式問題を解くための切除平面法に関する研究,非線形凹最小化のニュージーランド電力市場への応用研究などを海外の研究者と共同で行い,それぞれ良好な研究成果が得られた.混合整数計画問題と等価な非線形凹最小化問題を大域的に解くための単体分枝限定法に関する研究に決着をっけることができた.具体的には,ω分割とよばれる既存の単体分割規則を用いるときのアルゴリズムの収束証明と,ω分割が問題の次元に等しい数の子問題を生成する弱点を排除するため,新たに提案したω2分割を用いる場合のアルゴリズムの収束証明を仕上げ,ワークステーション上での両者の比較実験の結果ととともに学術論文にまとめて専門誌に投稿した.同様のアイディアは錐分枝限定法とよばれる別タイプのアルゴリズムへも適用できることが予測ざれ,現在,詳細を調査・研究中であるまた,大域的最適化の画像処理技術への応用として分数和の最小化を効率よく行うアルゴリズムの研究を行い,良好な実験結果をえることができた.1つの被写体を複数のカメラで捉え,それらの画像から被写体の座標を明らかにする古典的な多視点

幾何問題だが,計算の複雑さは理論上NP困難であることが知られる難問である,しかし,カメラの台数が増えても問題の次元が3に固定されたままであることを利用し,分枝限定法をベースに既存のものよりも遥かに効率のよい厳密アルゴリズムを構築することに成功した.アルゴリズムの収束性も理論的に証明することができたので,現在,この成果を論文にまとめて専門誌に投稿する準備を行っているこのほか,錐最適化やロバスト制御に関しても当該年度内に良好な成果をえることができた
上皮間葉移行制御による水疱性角膜症に対する新規治療法の開発

角膜内皮細胞はTGFベータシグナルの活性化により、機能を喪失し、線維化関連のタンパク質を発現しEMTを生じることを明らかにした。さらに、TGFベータ受容体阻害剤を用いることで、角膜内皮細胞のEMTを阻害して機能を維持できることを見出した。角膜内皮障害は角膜の混濁を生じ重症の視力障害の原因となるが、角膜内皮障害時に角膜内皮細胞が上皮間葉移行(Epithelial-Mesenchymal Transition; EMT)により角膜内皮機能を喪失するという着想のもと研究を実施し、角膜内皮細胞のEMTを低分子薬剤により抑制すること可能であり、角膜内皮のEMTによる機能喪失を遮断できることを見出した。この知見は申請者らが進めている角膜内皮再生医療に応用可能であり現在First in manによる臨床研究の細胞培養の最終プロトコールに応用している。またさらにはEMT制御による角膜内皮障害治療という新規の分野の可能性を示し、創薬を視野に入れた開発を行う基盤的技術を開発した。角膜内皮障害は角膜の混濁を生じ重症の視力障害の原因となるが、現在唯一の治療法は角膜移植のみである。本研究においては、角膜内皮細胞の上皮間葉移行(Epithelial-Mesenchymal Transition; EMT)を低分子薬剤により抑制することにより、角膜内皮障害時の機能喪失を遮断する方法を樹立することを目的とする。角膜内皮機能喪失へのEMTの寄与を解明するために、培養角膜内皮細胞に対してTGFβによりEMTを誘導し、in vitroにおけるEMT関連分子の発現解析を行った。EMT誘導によりフィブロネクチンなどのECM産生が上昇することを確認した。また、EMT誘導時の角膜内皮の分子レベルの評価系を確立した。また、角膜内皮の細胞間接着関連分子であるZO-1、およびポンプ機能関連分子であるNa+K+ATPaseによる免疫染色およびウエスタンブロッティング法を行い、EMTによる角膜内皮機能喪失を確認にした。さらに、角膜内皮のEMT動物モデルの作成を行うために、ウサギに対してステンレスチップによる経角膜冷凍凝固を行った。また、我々が研究を行なっている角膜内皮再生医療において、生体外で培養した角膜内皮細胞を前房内投与にて移植した際に、EMTが誘導されることを確認した。このような生体内でのEMTは選択的Rhoキナーゼ阻害剤により抑制できることを見出した。このことは、角膜内皮再生医療の臨床応用化について不可欠な技術であり角膜内皮のEMT制御による治療法開発という研究課題に即した重要な研究実績と考える。我々が研究を行なっている角膜内皮再生医療において、生体外で培養した角膜内皮細胞を前房内投与にて移植した際に、EMTが誘導されることを確認した。動物モデルにおけるEMT制御は平成24年度の課題であり、前倒しで実施できた。また、生体内でのEMT制御は角膜内皮再生医療の臨床応用化について不可欠な重要な研究実績である。EMT抑制を行う候補薬剤の絞り込みおよび角膜内皮のEMT制御の動物モデルによる検討について、特に角膜内皮再生医療への応用という視点からも推進する。前年度に確立した培養角膜内皮細胞によるin vitroにおけるEMT評価系を用いて薬剤によるEMT抑制効果を評価する。また、生体内での効果についてもウサギモデルを用いて有用性の確認を行う。
工学系における固体表面間の接触熱抵抗のミクロ・マクロ現象に関する研究

熱工学の系にある実在表面は,実験室の清浄な光学鏡面とは著しく異なり,・表面にはミクロなあらさがあり,その表面はなんらかの被膜で覆われているのがふつうである.このような実在表面での現象が,熱工学の系において重要になる局面が2つある.1つは固体表面間の接触熱抵抗であり,他の1つがふく射伝熱物性・ふく射応用計測である.本研究では,その課題のために次の4つの研究を行った:第1に,接触熱抵抗を外部からその場診断するための手法を検討した.接触面の微視形状はその印加圧力と結晶組織の変形に応じて経時変化するため,その接触状態の同定法の開発が重要になるが,本研究では,そのための手法として超音波探傷法の応用を考え,金属・金属接触面における超音波反射とその面をよぎる熱通過に関するマクロ実験を実施した.第2に,接触熱抵抗のミクロ機構を解明する際にその最小の考察の要素となる,有限サイズの接触点での熱エネルギーの流れを分子動力学計算で明らかにすることを試みた.表面部の影響が顕著になる有限サイズの原子のマイクロチャネルでは,熱流は一様に流れるのではなく,おもに中心部を流れることを定量的に明らかにした.第3に,実環境下にある表面の熱ふく射特性を調べる手法として,高速スペクトル法を確立すべく努めた.可視赤外の波長域の反射・放射のスペクトルを1台の分光装置で繰り返し測定できるようにして,実在表面の環境下でふく射特性のふるまいを系統的に明らかにするとともに,その技術を金属表面の温度・性状診断に応用するためのアルゴリズムを開発しつつある.加えて,第4に,実在表面のふく射性質をふく射伝熱評価とふく射応用計測に生かすことを目的として,金属のあらい表面におけるふく射反射の角度特性とその伝熱パラメータ表現に関する研究を行った.団体表面間の接触熱抵抗は,熱工学のもっとも重要な課題のひとつである.実在表面はあらい微視形状をもち2つの表面は点接触する.接触点は力学的に圧縮され変形する.そのため,接触点を通る熱の流れは,均質な連続体中におけるものとは異なる.研究代表者は,この接触熱抵抗について,分子動力学モデリングを試みてきた.この研究は,実在の工学系にある固体が原子の集合体としてどのようにモデル化できるかに係るものであるが,まず,この点を固体表面間の接触熱抵抗の固体力学的な要因に注目して研究した.接触熱抵抗の物理を扱うMD研究では,原子系の圧縮が重要である.また,その問題において境界条件に現れる圧力を制御することの原子系の圧縮が重要である.さらに,熱運動は,MDのオーダの単結晶系にも協力現象としての起こるすべり変形の素因となるものであり重要である.そこで,非等方的に加圧されて弾性変形・塑性変形する接触点のMDモデルを提案し,固体表面間の接触熱抵抗の系統的な研究のために,その原子系の挙動を調べた.つぎに,有限サイズの原子系における熱の流れに注目した.接触点を1012個の原子からなる柱状のAr原子の系としてモデル化し,その上下部がステップ状に加熱・冷却される際の温度分布と熱エネルギーの流れあるいは熱力学状態量の過渡挙動を計算した,さらに,有限の微小サイズの原子系の熱物性値(質量密度・定圧比熱容量・熱伝導率・熱拡散率)の推算を試みた.今後には,有限系における力学的変形と熱伝導の関係を検討しなければならない.熱工学の系にある実在表面は,実験室の清浄な光学鏡面とは著しく異なり,・表面にはミクロなあらさがあり,その表面はなんらかの被膜で覆われているのがふつうである.このような実在表面での現象が,熱工学の系において重要になる局面が2つある.1つは固体表面間の接触熱抵抗であり,他の1つがふく射伝熱物性・ふく射応用計測である.本研究では,その課題のために次の4つの研究を行った:第1に,接触熱抵抗を外部からその場診断するための手法を検討した.接触面の微視形状はその印加圧力と結晶組織の変形に応じて経時変化するため,その接触状態の同定法の開発が重要になるが,本研究では,そのための手法として超音波探傷法の応用を考え,金属・金属接触面における超音波反射とその面をよぎる熱通過に関するマクロ実験を実施した.第2に,接触熱抵抗のミクロ機構を解明する際にその最小の考察の要素となる,有限サイズの接触点での熱エネルギーの流れを分子動力学計算で明らかにすることを試みた.表面部の影響が顕著になる有限サイズの原子のマイクロチャネルでは,熱流は一様に流れるのではなく,おもに中心部を流れることを定量的に明らかにした.第3に,実環境下にある表面の熱ふく射特性を調べる手法として,高速スペクトル法を確立すべく努めた.可視赤外の波長域の反射・放射のスペクトルを1台の分光装置で繰り返し測定できるようにして,実在表面の環境下でふく射特性のふるまいを系統的に明らかにするとともに,その技術を金属表面の温度・性状診断に応用するためのアルゴリズムを開発しつつある.加えて,第4に,実在表面のふく射性質をふく射伝熱評価とふく射応用計測に生かすことを目的として,金属のあらい表面におけるふく射反射の角度特性とその伝熱パラメータ表現に関する研究を行った.
コンピュータ急性骨髄性白血病モデルによる再発動態解析と標的治療開発の基盤創成

研究者らは3次元コンピュータシミュレーションモデルを用いて「急性骨髄性白血病モデル」を構築し、さらに治療シミュレーションを加えた「急性骨髄性白血病治療モデル」を構築した。このモデルでは白血病幹細胞が少数ながら生き延びつつやがて「消滅する完全治癒型」と「再増殖する再発型」が再現されている。再発か治癒かの分岐点には白血病幹細胞の局在とその周囲の骨髄環境が密接に関連していることが推測されている。本研究ではこのモデルを用いて、白血病幹細胞細胞の動態(振る舞い)を追跡し、分岐点における白血病幹細胞の局在とその周囲の骨髄環境を可視化して、再発の機序を明らかにする。
レーザーテクスチュアリング法による自己複合化組織の創製

最大出力100Wクラスのファイバーレーザ発振器とレンズ、ミラーを組み合わせて焦点位置での最小径が3μm程度の集光能力を有するレーザ局所加熱システムを設計・製作し、それによるA2024-T3アルミニウム合金板への局所組織制御を試み、レーザ局所熱処理を施すことで同一素材でありながらあたかも複合材料であるかのような力学的異方性を有する素材を創出することに世界で初めて成功した。本研究は、任意の局所領域を加熱する機能を有するファイバーレーザー局所加熱システムを用いて時効硬化性金属材料板に軟化領域を任意の大きさと配列で創り出し、特異な力学特性を付与する材料組織制御技術の開拓の端緒を開こうとするものである。素材の任意の位置・領域にレーザー光を照射してその領域のみ未照射領域とは異なる組織状態を創り出し、これら照射領域パターンによりあたかも衣服め織柄のような固体空間を得るという考えをここでは「レーザーテクスチュアリング」と呼ぶ。本研究では、レーザーテクスチュアリングの考え方を熱処理型合金板の組織制御に適用し、時効硬化した素材板にレーザー局所加熱処理を施して軟質領域を所定の配列でパターニングして力学特性に特異性を持たせた新素材を創り出せることを実証する。本年度は、熱処理型合金の薄板に対してファイバーレーザー局所加熱システムを用いていくつかの照射位置パターンに従った加熱処理を施し、機械的性質の異なる領域の混在が照射位置パターンに応じた特有の力学特性を素材に付与できることを実証するための基礎実験を実施した。得られた成果は次の通りである。供試材としてA2024-T3アルミニウム合金板を採用し、これに対するレーザー局所加熱実験を実施した。まず同材料の熱処理特性を電気炉加熱実験により調べた。その結果、500°C加熱において数秒間で硬さが半分程度まで減少する事実を確認した。すなわち、レーザー局所加熱において加熱領域の温度が500°C以上になっていればその領域のみの硬さを変化させることが実現できることが実証された。レーザー局所加熱システムについては、プログラムに従って加熱位置を移動させる制御システムを構築し、所定の加熱処理ができることを確認した。供試材としてA2024-T3アルミニウム合金板(1mm厚)を採用し、機械研磨法により試料表面を所定の性状に調整してレーザ照射実験に供した。レーザ照射は数種類の出力(ビーム強度)を適宜選択し、最大10秒間までの範囲で照射時間を変化させた。照射部の組織は試料断面ならびに表面を観察対象とし、照射後に機械研磨ならびに化学腐食処理により組織を調整して光学顕微鏡法ならびにSEM-EBSD法で観察・解析した。力学特性評価として曲げ試験法を採用し、試験時のストロークと荷重を記録して最大曲げ荷重により異方性を評価した。照射部の熱影響領域は加工組織中に出現する再結晶領域の大きさにより推算したが、試料表面で直径約300μm程度の範囲で、深さ方向には最大深さで200μm程度の湾曲した半球領域であることを実験的に確認した。この結果を踏まえて、縞状にビームをスキャンする際の縞間隔を設定し、幅5mm、長さ10mmの範囲で数本の縞状のパターンでレーザ照射を施した。なお、連続照射時には熱伝導問題により溶融現象が生ずるため、スポット照射位置をずらしながら擬似的に線上の照射結果と同等の組織を得るようにした。縞状パターンによるレーザ熱処理材を室温曲げ試験に供したところ、曲げ方向が縞方向に平行な場合は垂直な場合に比べて最大30%程度最大曲げ荷重が大きいという結果を得た。すなわち、レーザ局所加熱により素材の析出物が再固溶される領域が周期的に縞状に生成されることが原因となり、単一素材に曲げ強度の異方性が発現することが実証された。
健康度の科学的評価に関する予防医学的研究

精神的ならびに身体的健康度の科学的評価方法の開発を目的として、複数の製造業事業所の男女従業員の協力を得て、健診受診時に、(1)質問紙による精神的健康度(全般的精神健康度(GHQによる)、自覚的ストレス量、日常いらだち事の量、生活満足度など)、(2)身体的健康度(健康診査における多目的健康測定)、(3)血液リンパ球のNK細胞活性、(4)血清中の総IgE値、(5)リンパ球染色体変異量、(6)白血球DNAの活性酸素による損傷量、(7)1日尿中の変異原活性、(8)ALDH2およびADH2遺伝子型、の測定および相互の関連性の検討を行なった。各対象者について、森本の提唱している喫煙、飲酒、ストレス等の生活習慣8項目を加算することにより、生活習慣指数を算出した。この生活習慣と測定した諸健康度指標との関連を検討し、以下のような知見を得た。(1)NK細胞活性が生活習慣指数のみならず、ストレス度ともよく相関していること、(2)1日尿中の変異原活性が包括的生活習慣指数、および生活習慣の中でも喫煙習慣とよく相関していること、(3)東洋人の飲酒行動を決定する遺伝的因子として重要とされているALDH2多型により、アルコール感受性が3つの群に分けられること、およびこの感受性に対応して飲酒行動に伴う染色体変異量に大きな差異のみられること、(4)白血球DNAの活性酸素による損傷を、無酸素的に抽出したDNAサンプルにて測定することにより精度を向上させ、この指標が集団における疫学的調査に応用可能であること、(5)近年様々な健康事象との関連が注目されているGSTM1の遺伝子多型について、信頼性の高い検出法を確立し、分析疫学的調査への応用を試みたこと、等である。精神的ならびに身体的健康度の科学的評価方法の開発を目的として、複数の製造業事業所の男女従業員の協力を得て、健診受診時に、(1)質問紙による精神的健康度(全般的精神健康度(GHQによる)、自覚的ストレス量、日常いらだち事の量、生活満足度など)、(2)身体的健康度(健康診査における多目的健康測定)、(3)血液リンパ球のNK細胞活性、(4)血清中の総IgE値、(5)リンパ球染色体変異量、(6)白血球DNAの活性酸素による損傷量、(7)1日尿中の変異原活性、(8)ALDH2およびADH2遺伝子型、の測定および相互の関連性の検討を行いつつある。まず各対象者について、森本の提唱している喫煙、飲酒、ストレス等の生活習慣8項目を加算することにより、生活習慣指数を算出した。この生活習慣と測定した諸健康度指標との関連を検討した。本年度は、(1)リンパ球染色体変異量が生活習慣指数とよく相関していること、(2)全般的精神健康度が生活習慣指数とよく相関していること、(3)血清中総IgE値が、喫煙・飲酒等の悪い生活習慣により増加する一方、他の生活習慣項目では逆に減少すること、などが明らかになった。また、東洋人の飲酒行動を決定する遺伝的因子として重要とされているALDH2多型により、アルコール感受性が3つの群に分けられることと、これに対応して飲酒量も3つの群に分けられることを実証的に明らかにした。その他の様々な健康度指標に関しても現在精力的に解析を行っているところである。

精神的ならびに身体的健康度の科学的評価方法の開発を目的として、複数の製造業事業所の男女従業員の協力を得て、健康受診時に、(1)質問紙による精神的健康度(全般的精神健康度(GHQ)による)、自覚的ストレス量、日常いらだち事の量、生活満足度など)、(2)身体的健康度(健康診査における多目的健康測定)、(3)血液リンパ球のNK細胞活性、(4)血清中の総IgE値、(5)リンパ球染色体変異量、(6)白血球DNAの活性酸素による損傷量、(7)1日尿中の変異原活性、(8)ALDH2および4DH2遺伝子型、の測定および相互の関連性の検討を行ないつつある。まず各対象者について、森本の提唱している喫煙、飲酒、ストレス等の生活習慣8項目を加算することにより、生活習慣指数を算出した。この生活習慣と測定した諸健康度指標との関連を検討した。本年度は、(1)NK細胞活性が生活習慣指数とよく相関していること、(2)1日尿中の変異原活性が諸生活習慣とよく相関していること、(3)東洋人の飲酒行動を決定する遺伝子因子として重要とされているALDH2多型により、アルコール感受性が3つの群に分けられることと、これに対応して飲酒量も3つの群に分けられること、(4)白血球DNAの活性酸素による損傷が集団レベルで測定可能であることを実証的に明らかにした。その他の様々な健康度指標に関しても現在解析を行っているところである。精神的ならびに身体的健康度の科学的評価方法の開発を目的として、複数の製造業事業所の男女従業員の協力を得て、健診受診時に、(1)質問紙による精神的健康度(全般的精神健康度(GHQによる)、自覚的ストレス量、日常いらだち事の量、生活満足度など、)(2)身体的健康度(健康診査における多目的健康測定)、(3)血液リンパ球のNK細胞活性、(4)血清中の総IgE値、(5)リンパ球染色体変異量、(6)白血球DNAの活性酸素による損傷量、(7)1日尿中の変異原活性、(8)ALDH2およびADH2遺伝子型、の測定および相互の関連性の検討を行ないつつある。本年度は、(1)NK細胞活性が生活習慣指数のみならず、ストレス度ともよく相関していること、(2)1日尿中の変異原活性が包括的生活習慣指数、および生活習慣の中でも喫煙習慣とよく相関していること、(3)東洋人の飲酒行動を決定する遺伝的因子として重要とされているALDH2多型により、アルコール感受性が3つの群に分けられることと、これに対応して飲酒量も3つの群に分けられること、(4)白血球DNAの活性酵素による損傷が集団レベルで測定可能であること、そしてこの指標が集団における疫学的調査に応用可能であること、等を実証的に明らかにした。さらに近年様々な健康事象との関連が注目されているGSTM1の遺伝子多型についても、信頼性の高い検出法を確立し、分析疫学的調査への応用を試みている。
Al合金系めっきで表面処理した高張力鋼の水素脆化とその抑制

Zn系めっきにより表面処理した高張力鋼板が犠牲防食作用によって大気腐食環境で水素脆化するのに対して, Al系合金めっき高張力鋼板では水素脆化感受性が大幅に低下した。その理由として,犠牲防食状態での電位がZn系では. 1. 0Vであるのに対して, Al合金系では約. 0. 7Vで鋼材上での水素発生反応を大幅に抑制するためであることが分かった。また,鋼材への水素の侵入量は鋼材の金属組織に依存し,鋼材中での水素の拡散係数が小さいマルテンサイトの場合には乾湿腐食サイクルの繰返し数の増加で侵入量が増加する。H21年度の研究では,高張力鋼に使用されるマルテンサイトを含む金属組織の鋼材について,水素侵入に関与する水素発生反応機構と鋼中の水素の拡散挙動について検討するとともに,昇温脱離分析装置(TDS)によって水素吸収量と金属組織との関係を調べた。マルテンサイト,フェライト等の金属組織は,水素発生反応機構,その律速段階および交換電流密度にはほとんど影響を与えないが,マルテンサイトは鋼材中の水素の拡散速度を大幅に減少させる。また,マルテンサイトに含まれる多量の転位が鋼材に吸収された水素のトラップサイトとして働き,水素の吸収量は増加する。微酸性の溶液中でカソード反応により水素を発生させ,鋼材に侵入・透過する水素を裏側の面で電気化学的に検出するDevanathan法により,水素発生量と水素透過速度との関係を調べたところ,カソード分極電位が卑になり,水素発生電流が増加するほど水素の鋼材への侵入効率は低下し,200から300mVの電位低下で侵入効率は約1/10になることが確認された。これは水素が吸収される前段階の吸着水素濃度の電位依存性によるもので,理論的な解析からは,侵入側の電極表面直下の水素濃度および水素透過電流がカソード側のTafel勾配と逆符号で2倍の傾きで増加することが示され,実験的にも確認された。高張力鋼の表面処理と水素脆化の関係を明らかにするために,1400MPa級の高張力鋼板を引張試験片として,定電流カソード分極によって水素を発生させながら低ひずみ速度引張(SSRT)試験をおこなった。その結果,カソード分極による水素の発生とともに鋼中へ水素が侵入し,引張試験の破断伸びが空気中での試験および分極しない場合に比べて大幅に減少し,水素脆化することが確認された。一方,亜鉛系めっきによる表面処理では,亜鉛による犠牲防食電位が-1.0V(vsSSE)付近にあって,防食される鋼材表面で水素発生反応が起こる。そのため,定電位でのカソード分極電位を-1.0Vにした場合のSSRT試験では破断伸びの大幅な減少が起こったが,分極電位を-0.7Vおよび-0.6Vにした場合には破断伸びは空気中とほぼ同じで,脆化は見られなかった。1400MPa級の高張力鋼に溶融亜鉛めっきを施すことは困難であることから,電気めっきにより亜鉛を2.7μmめっきした高張力鋼について,0.5MNaCI水溶液中でSSRT試験を行った。めっき後に十分な時間をおけば,電気めっきにより侵入した水素の影響はなくなること,亜鉛めっき層に下地鋼板に達する傷を付け,犠牲防食状態でSSRT試験を行った場合には-1.0Vで分極した場合と同様に破断伸びが大幅に減少し,水素脆化が起こることが確認された。さらに,大気腐食を模擬した環境として,0.5MNaCl水溶液の液滴を傷部にのせ,液滴が完全に乾燥しない相対湿度に保持してSSRT試験を行ったところ,亜鉛めっきをしていない高張力鋼では破断伸びの顕著な低下は見られなかったが,亜鉛めっきした高張力鋼では破断伸びが減少し,水素脆化感受性が確認された。前年度までの研究によって,水素脆化に絡む鋼材への水素侵入機構を解明し,亜鉛めっきのように犠牲防食電位が-1.0V付近でかなり低い場合には犠牲防食に伴う鋼材表面での水素発生反応によって鋼材に水素が侵入し,高張力鋼が水素脆化することを明らかにした。今年度は,Al合金系めっきによって犠牲防食電位と水素侵入量がどのように変化するか,および水素脆化が抑制できるか否かについて検討した。Al-Mg-Si合金の溶湯に厚さ10.7mmの炭素鋼板を浸漬・急冷することによって,1050μmのAl合金溶融めっきを施した試料について,0.5M NaCl溶液中で犠牲防食電位を測定するとともに,めっき層に傷を付け犠牲防食状態での水素侵入量をDevanathan法によって測定し,Znめっき鋼板の場合と比較した。その結果,Al合金系めっきの犠牲防食電位は-0.75V-0.65

V前後であり,鋼材の腐食は起こらず十分な犠牲防食特性を持つことが確認された。さらに,乾湿繰返し腐食試験での腐食状態における水素侵入量はZnめっき鋼板の約1/10となることがわかった。高張力鋼にAl合金系の溶融めっきを試みたが,めっきの前処理で鋼材の酸化が起こり,高張力鋼への溶融めっきについては成功していない。真空同時蒸着によってAl-Mg-Si合金を1400MPa級の高張力鋼にめっきし,0.5M NaCl水溶液中および同液の液膜に覆われ大気腐食を模擬する状態での低ひずみ速度引張(SSRT)試験を行った。SRRTによる破断ひずみは空気中でのそれに比べてやや小さくなったものの,前年度のZnめっき高張力鋼板の場合に比べて水素脆化の感受性が大きく改善されることが確認された。
皮膚疾患を非侵襲に感知するための誘電体検出器の研究開発

2018年度は、検出器に試料を挿入する従来法による測定と解析を中心とし、並行して誘電体検出器の研究開発を行った。従来法では、測定対象が限られる。取り分け、バイオメディカル試料の測定は限定的になる。MMは皮膚に発生する皮膚ガンで、悪性度が非常に高いガンである。そこで、新たに試作した誘電体検出器でMMを調べてみた。今回、新たな誘電体検出器として、悪性黒色腫(MM)などの皮膚疾患を非侵襲に表面検出できる検出器の開発に取り組んだ。特に、MMのメラニンラジカルの濃度10E16程度を検出できるよう様々な工夫をした誘電体検出器を試作した。測定用試料は、また、Xバンド用の誘電体誘電体検出器(サイズ約34 mm×34 mm×73 mm)を試作してもらった。検出器は、検出信号を最大にするべく内部の高い充填率で設計された。検出器のQ値は、以前に報告された580(無負荷)の値とした。誘電体検出器によって生成されるマイクロ波の磁場が検出器の検出面の近くに分布し、マイクロ波がよりサンプル深く浸透するようデザインした。はじめに、従来法による測定を行った。スペクトル解析からMMにはエウメラニンのラジカルとフェオメラニンラジカルがあることが分かった。一方、コントロールとして母斑を測定したところ、エウメラニンのラジカルが観測された。フェオメラニンラジカルがコントロールでは観測されないことから、フェオメラニンラジカルはMMに特有のラジカルであることが示唆された。この詳細は新たな年度に検討する予定である。よって、MMに内在するラジカル種を非侵襲に検出し解析することができた。皮膚計測と画像関連の研究での主な理由は、以下の通りである。(1)研究計画を達成する模擬やバイオメディカル試料の画像化を行うことができた。(2)メラノーマのスペクトル解析から、エウメラニンのラジカルとフェオメラニンのラジカルがあることが新たに分かった。(3) 2018年度に得られた新たな結果は、皮膚科学関連の国際的なジャーナルに投稿中である。以上のことから、順調の進展と判断した。電子スピン共鳴(ESR)による皮膚の応用計測と誘電体検出器を用いた試料の画像化でおおよその目標は達成する予定であるが、さらに、いろいろな試料のイメージング測定を行い実験と解析精度の向上を目指す。今後の研究方針としては、(1)イメージング(画像)の測定精度の向上を図る。(2)データの画像化の技術と画像の解像度を上げるよう試みる。また、これまでの結果を踏まえ、より多くの試料を測定しESRイメージングの応用範囲を高め広めるよう検討する。
日韓山岳宗教の比較研究―その聖地観・神観念・宗教的実践をめぐって―

本研究課題では、北部九州の英彦山・朝鮮半島南部の智異山という日韓を代表する山岳宗教聖地の調査研究を通して、聖地観・神観念・宗教的実践の比較考察を行った。具体的には、1日韓山岳聖地の現地調査に基づく聖地構成要素(窟・泉・岩・塔・寺院・廟・祠など)の把握、2日韓山岳宗教に関する文献・図像資料に基づく山岳宗教の歴史的変遷の考察、3日韓山岳周辺地域における現地調査による山岳宗教の民俗的意義の考察、である。この比較研究によって、日韓双方の山岳宗教の歴史、およびその実態を相対的に思考する視座を得ることができたと考える。本研究課題は、北部九州の英彦山・朝鮮半島南部の智異山という日本・韓国を代表する山岳宗教聖地の調査研究を通して、次の3点を明らかにすることを目的としている。1現地調査に基づく日韓山岳聖地の構成要素の把握、2日韓山岳宗教に関する文献・図像資料調査に基づく山岳宗教の歴史的変遷の解明、3日韓山岳周辺地域の現地調査による山岳宗教の民俗的意義の解明。上記の課題を達成するため、初年度である本年は、北部九州の英彦山(福岡県田川郡添田町)の聖地構成・神観念・宗教的実践に関する調査研究を集中的に実施した。具体的には、まず山岳宗教および修験道に関する基本的な図書・資料を収集し、今後3年間の研究遂行のために必要な研究環境を整備した。また、英彦山神宮・添田町を始め、本研究に関連する研究者・研究機関との間に研究協力・情報交換を行える関係を築いた。11月には英彦山の現地調査を実施し、神社関係者への聞き取り調査、山内聖地の踏査を実施するとともに、アルバイト学生を雇用して英彦山神宮所蔵文書の調査・撮影を実施した。さらに3月には御田祭の調査を実施するとともに、山麓地域の氏子の方々への聞き取り調査、および英彦山神宮所蔵文書の補充調査・撮影を実施した。また年間を通して、収集資料の分析を行った。以上のように、本年度は英彦山修験道の事例を中心として調査・研究を行い、次年度以降調査を実施する韓国智異山の山岳宗教との比較研究の基礎を築いた。本研究課題は、北部九州の英彦山・朝鮮半島南部の智異山における山岳宗教聖地の調査研究を通して、日韓山岳聖地の構成要素を把握するとともに、日韓双方の山岳宗教の歴史的変遷を解明し、それぞれの山岳宗教が地域社会にどのような民俗的意義を有しているのかを明らかにしようとするものである。上記の課題を達成するため、2年目となる本年は、朝鮮半島南部の智異山の聖地構成・神観念・宗教的実践に関する文献調査・現地調査を集中的に実施する予定であった。ところが、韓国におけるMERSの流行を受け、年度前半期に予定していた山内聖地の調査を中止せざるを得なくなり、当初予定していた調査を十分に実施することができなかった。本年度実施した韓国調査は、智異山南西部の寺院・宗教施設の現地踏査および宗教者への聞き取り調査が中心となり、山内聖地の踏査については次年度に持ち越すことになった。ただ、国立順天大学校智異山圏文化研究院・国立慶尚大学校慶南文化研究院において、韓国の智異山研究の最前線の研究者と情報交換を行うとともに、貴重な資料を得ることができたのは、本研究を推進していく上で大変有益であった。韓国での調査が実施できなかった本年度前半期には、英彦山山内聖地の現地調査を実施した。特に英彦山信仰の特色ともいえる窟の信仰に注目し、その歴史的変容と現代における宗教実践について詳しく調査を行った。また、本年度は研究公表に力を入れた年でもあった。8月に国際歴史科学大会(ICHS)、9月に日本山岳修験学会、11月に東アジア山岳文化研究会と、3学会において口頭発表を行った。また1本の論文を紀要に報告するとともに、現在投稿中の論文もある。先述のとおり、年度前半期の韓国におけるMERSの流行は当初予期していない出来事であったが、韓国の研究者・研究機関の協力を得ることにより、智異山南西部の山岳寺院(七佛寺・双渓寺・燕谷寺・南嶽祠址・泉隠寺・華厳寺・大源寺等)を踏査するとともに、寺院関係者や民間宗教者への聞き取り調査を実施し、短期間ながらも効率的な調査を実施することができた。また、智異山に関する貴重な資料の数々も入手し、その分析を進めることもできた。なお、本年度延期となった智異山における山内聖地の現地踏査については、計画を後倒しし、平成28年度前半に実施する予定である。また、韓国での現地調査が実施できなかった期間、英彦山の現地調査に入ることができ、昨年度の補充調査を行うことができた。特に7月に行われた玉屋神社例祭においては、山内第一の聖地ともいえる玉屋窟の調査が許され、その詳細を知ることができた。また、本年より本研究課題の研究成果を公表し始めたが、国際学会2件(いずれも招待)、国内学会1件と、3件の発表を行うことができた。また論文も2本(投稿中を含む)執筆した。このように、本研究課題のアウトプット面に関していえば、当初の計画以上の進展といえる。上記のことから、本年度の進捗状況は「おおむね順調に進展している」とするのが妥当であると評価する。