hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
Gタンパク質共役受容体を標的とした機能性食品成分探索研究

7回膜貫通領域を持つGタンパク質共役受容体(GPCR)は、それぞれ固有の特異的リガンドを結合し、代謝調節に関与する事が知られている。胆汁酸を結合するGタンパク質共役受容体TGR5に結合する食品成分を探索する研究から、複数の植物由来成分の探索に成功した。さらに、複数のGPCRについて、アッセイ系の構築を試みた。ヒトゲノムに含まれるGタンパク質共役受容体(GPCR)の多くは、生理的リガンドが不明のオーファン受容体であり、GPCRが関与している生理現象の大部分が未解明の領域といえる。これまでリガンドが明らかにされている受容体は、中枢神経系、内分泌系、循環器、呼吸器、泌尿器、消化器、生殖器など多岐にわたる組織、臓器で機能している。従ってGPCR研究は多様な生理現象の調節機構を理解するための基礎研究としてだけでなく、それらを制御して健康を維持するという応用研究の面からも極めて重要である。このような受容体の中で、食品由来の分子を結合するものを標的と定め、新たなリガンド活性を有した食品成分を探索するアイディアのもとに研究を進めた。本年は小腸下部においてGLP-1発現を促進する働きのあるGPR119について解析を進めた。ヒト小腸様培養細胞であるCaco-2よりRNAを回収し、cDNAを作製し、GPR119のクローニングを行った。これを発現ベクターに組み込み、発現コンストラクトを完成させた。転写因子CREBの応答配列を5回繰り返したプロモーター領域を組み込んだレポーターコンストラクトを作成し、GPR119発現コンストラクトと同時にヒトHEK293細胞に遺伝子導入した。GPR119発現時にのみ、合成リガンドによりルシフェラーゼ活性の上昇が認められた。本アッセイ系を用い、すでに構築済みの食品成分ライブラリーから、活性成分の探索を進行させている。このような受容体の中で、食品由来の分子を結合するものを標的と定め、新たなリガンド活性を有した食品成分を探索するアイディアは斬新なものと言える。本年は胆汁酸受容体TGR5に焦点を絞り研究を進めた。TGR5はげっ歯類では主に褐色脂肪細胞、ヒトでは筋肉細胞に発現しており、各組織での熱産生を上昇させ、抗肥満活性を発揮することが証明されている。すでに評価系を構築し、複数のリガンド活性を有する食品成分の探索に成功している(特許出願済)。これらの化合物のうち、新たに見いだした柑橘成分化合物ノミリンに関して解析を進めた。本化合物は内因性リガンドである胆汁酸よりやや強いリガンド活性を有しており、マウスに高脂肪食と混ぜて投与すると、抗肥満効果が検証された。さらに、TGR5分子中のどのアミノ酸と水素結合し、機能を発揮するかについて、分子細胞生物学的な解析を進めている。独自に開発した評価系において、数百種類の植物由来精製成分の機能を評価し、その中から複数のリガンド活性化合物を見いだすことに成功している。さらに、そのうちの一つである柑橘成分ノミリンは、実験動物に投与した際に、強い血糖低下作用、顕著な抗肥満作用を発揮したことから、本評価系で陽性と評価された化合物には同様の効果が期待される。ノミリンとは別の成分である化合物についても活性を見いだし、これらはいずれも特許出願をすませてある。他のGタンパク質共役受容体に関しては、今後更なる評価系構築を試みて研究を進めつつある。胆汁酸受容体TGR5と複数の食品由来化合物の結合、その生理活性についてさらに解析を進める必要がある。とくに、すでに見いだしたリガンド成分は構造が著しく異なることから、受容体との結合様式は異なることが予想される。実際、その結合様式をコンピューターシュミレーションすると2つは異なるアミノ酸残基との結合を介して、機能を発揮していることが推定される。これらの推測に基づき、複数のアミノ酸を置換させたTGR5を発現させ、リガンドと受容体の結合様式の詳細を明らかにすることを予定している。(1) GPR120リガンド評価系の構築と食品成分探索ヒトGPR120 cDNAをクローニングし、発現ベクターに挿入し、HEK293細胞にSRE(serum response element)を含むレポーター遺伝子と共に発現させる。フラボノイド類を中心に低分子食品化合物約200種類を培地中にそれぞれ100 μM添加し、Luciferase活性を測定し、リガンド活性を評価する。n-3不飽和脂肪酸様リガンド活性を有する化合物に関して、添加濃度を減少させ、その有効濃度を検討する。(2)ナイアシン受容体HM74リガンド評価系の構築と食品成分探索ヒト

HM74 cDNAをクローニングし、発現ベクターに挿入し、HEK293細胞にCRE(cAMP response element)を含むレポーター遺伝子と共に発現させる。図1とほぼ同様の評価系であるが細胞内の応答系がGPR120と異なるため、別のレポーター遺伝子を用いる。フラボノイド類を中心に低分子食品化合物約200種類を培地中にそれぞれ100 μM程度添加し、Luciferase活性を測定し、リガンド活性を評価する。ナイアシン様リガンド活性を有する化合物に関して、添加濃度を減少させ、その有効濃度を検討する。
超音波断層像の動画フォーマットによる保存.データベース化に関する研究

超音波検査は顎口腔領域において広く用いられてきた。しかし、通常の超音波像は動画として観察されたものを2次元の静止画として表現するために、第三者による実態の把握には制限を受けざるを得ない。また動画を保存し,デジタル化するには膨大なデータ量が必要である。今回我々は各種形状ファントムを用い撮像した画像を動画としてコンピュータに取り込み、画像サイズ、圧縮法等を変えて画像変化の検討を行い、データベース構築に最も適した画像サイズおよび圧縮法を検討した。今回は多くのパーソナルコンピュータで再生できるCD-ROMを使用することを前提にし,動画の圧縮伸張技術には特別なハードウエアを併用せず,ソフトウェアのみで可能なものとした。その結果,画質は圧縮をかけないか,同じ圧縮法ならば低圧縮率の方が良好であった。圧縮は,なければそれに越したことはないが,CD-ROMのデータ転送速度はハードディスクのおよそ10分の1であり,最終的にはどうしても,CD-ROMに見合ったレベルにまでデータを削減しなければならなかった。特に処理能力の高くないマシンで再生すると,圧縮レベルを高くした方が,動きそのものはなめらかに見える事がわかった。さらにフルサイズ(680*480)表示ではなく,ハーフサイズ(320*240)あるいは(240*180)表示にし,フレーム数を30/秒から15/秒に下げる等のデータ軽減法を組み合わせる事によってデータ量を削減でき,しかも読影もある程度可能と考えられた。今後さらに患者の画像データを増やしていき,術式を段階的に動画で表示したり,部位を明確に理解させるため解剖図や解説図も添付された電子テキストを作成していきたい。
副甲状腺ホルモン分泌異常におけるCalcium sensing errorの検討

1.正常者および副甲状腺機能低下症、偽性副甲状腺機能低下症、副甲状腺機能亢進症術後において、citrateによる低Ca刺激およびCa gluconateによる高Ca刺激によって、PTH分泌は逆sigmoid曲線状の変動を示した。2.この曲線を解析した結果、副甲状腺細胞の細胞外Caに対する感受性の新たな指標として我々の提唱している基礎分泌と最大分泌の比は、細胞外Caの基礎れべると、逆sigmoid曲線状の関係を示した。3.この関係は、最大分泌能の高低やピタミンDの投与の有無には左右されることなく保たれていた。従って、この曲線は、細胞外CaとPTHの基礎分泌の基本的な関係を示すものと考えられる。4.基礎分泌と最大分泌の比と細胞外Caの基礎レベルとの逆sigmoid曲線状の関係は、原発性副甲状腺機能亢進症においても認められたが、その曲線は、上記の疾患において認められたものより右に変移していた。すなわち、より高い細胞外Caレベルにresetされていた。5.このような症例において、Ca sensing receptor遺伝子をPCR-SSCPおよびdirect sequencingにて解析したが、家族性低Ca尿性高Ca血症において報告されている第1エクソン、第3エクソンおよび第6エクソンの変異は認められなかった。細胞外Ca濃度を感知するレセプターは他にも存在するとの報告もあり、それらにおける変異の有無を検討していく必要があると思われる。
細胞オルガネラ形成における分子認識

1.ミトコンドリア蛋白質前駆体がミトコンドリア輸入されるのに必須な細胞質因子及び受容体の精製を行った。ミトコンドリアへの輸入シグナルとして機能するアミノ酸配列の構造要求性を詳細に検討した。前駆体蛋白質の延長ペプチドを切断するプロテア-ゼを精製した。2.数種のリソゾ-ム膜蛋白質の一次構造を決定し、それらの生合成、プロセシング、細胞内輸送について検討した。自己貧食胞の形機構について検討した。3.小胞体については、膜蛋白質分子が生合成の過程で小胞体膜を認識し、そこに組込まれる機構について検討した(cyt、b|-_<5-|>、cyt、Pー450)。4.ペルオキシソ-ム膜蛋白質(IMP70)の構造を決定し、ATP結合ドメインの存在と膜におけるトポロジ-を明らかにした。3ーケトアルシルーCoAチラオ-ゼのN末に村存在する延長ペプチドの局在化シグナルとしての機能を明らかにした。5.核蛋白質の核内移行を阻害する抗体(DDDED抗体)と反応し、かつ核蛋白質のもつ核局在化シグナルに親和性をもつものとして、分子量69Kの蛋白質を同定した。6.5'ーヌクレオチダ-ゼ(5'ーNT)は糖脂質(GPI)アンカ-型膜蛋白質であることが示唆されているので、ラット肝5'ーNTのCDNAをクローニングし蛋白質の一次構造を明らかにすることともに、精製酵素についてGPIアンカ-の存在を同定し、そのC末結合部位を決定した。7.高磁場勾配分画法と密度勾配遠心を併用して、ラット肝よりエンドゾ-ムの分画に成合した。またトランフェリンのエンドサイト-シスにおけるマイクロチュ-ブルの影響をノユダゾ-ルを用いて検討した。8.酵母遺伝子SAIの産物Sarlpの構造と機能について検討し、この産物がERーゴルジ間輸送に必須であることに証明した。また、SarlpのERーゴルジ輸送の機能には、GTPの結合とその水解が心須であることを明らかにした。1.リソゾ-ム膜に存在する分子量96Kの糖蛋白質のcDNAを分離蛋白の一次構造を決定した。LGP96のC末端には疎水性部分が存在し、この部分の構造はLGP107ときわめて高いホモロジ-を示したので、この部分に選別シグナルが存在する可能性が示唆された。2.ミトコンドリア蛋白質前駆体の延長ペプチドを化学合成し、そのペプチドを利用して、蛋白質前駆体を受容するミトコンドリア蛋白質の検索を行い、部分精製を行った。ミトコンドリア蛋白質前駆体のミトコンドリア移行にはサイトゾルに存在する蛋白因子が必要であるが、本因子をウサギ網状赤血球ライゼ-トよりほぼ均一に精製した。3.ペルオキシソ-ムのアシル-CoAキシダ-ゼの局在化シグナルはC末端の3個のアミノ酸(SKL)であることを確認した。ペルオキシソ-ムに局在するリピド輸送蛋白質の生合成について研究し、それらが遊離リボソ-ムで、14.5kDaの前駆体として合成されることを明らかにした。この前駆体はペルオキシソ-ムに取り込まれてから13kDaの成熟型に変換される。

4.核蛋白質の核内移行を阻害する抗体である抗Asp-Asp-Asp-Glu-Asp抗体の認識する抗原で、核局在化シグナルと特異的に結合する蛋白質が同定され、分子量70KDaであることが判明した。また上記合成ペプチドに対するモノクロ-ナル抗体のうち、核蛋白質の核内移行を阻害するものが得られ、その抗体が認識する抗原も同定された。5.ラット及びヒト5'-nucleotidaseから、それぞれC末端部分を分離精製し、その組成を分析した。その結果、典型的な糖脂質(GPI)アンカ-の成分が同定され、このGPIはcDNAから推定される一次構造のC末端から26番目のserineに結合していることが判明した。6.酵母ER-ゴルジ体間輸送にあずかる遺伝子SARIの産物蛋白質は分子量23Kであることを明らかにし、この蛋白質がER膜に局在化していることを明らかにした。1.リソゾ-ム膜に存在する酸性ホスファタ-ゼのCDNAを分離し、蛋白部分の一次構造を決定した。また、培養肝細胞を用いてこの酵素の生合成、プロセシング及び細胞内輸送について検討し、さらに本酵素が膜から遊離する機構を明らかにした。2.ミトコンドリア外膜に存在しミトコンドリア蛋白質前駆体の延長ペプチドを認識する受容体蛋白質のうち、52kDaと42kDaの蛋白質を精製した。ミトコンドリアより精製したプロセシングプロテア-ゼが前駆体蛋白質を認識して延長ペプチドを切断する反応を検討し、プロテア-ゼによって認識される延長ペプチド部分を明らかにした。3.3ーケトアシルCoAチオラ-ゼ(PT)はN末に延長ペプチドをもつ前駆として合成される。in vivo及びin vitro輸送実験より、PTの前駆体及びPTの延長ペプチドを含む領域をN末にもつ融合蛋白質はペルオキシソ-ムに輸送されるが、延長ペプチドを欠失すると輸送されなくなることを明らかにした。4.cyt.b_5の小胞体局在化シグナルを検討した。C末の約10残基を欠失させると細胞質に留まり、この部分を他の蛋白質に融合させると小胞体に局在したので、cyt.b_5の小胞体局在化シグナルはC末の約10残基に存在すると考えられる。KDELは小胞体蛋白質が小胞体に留まるシグナルの1つと考えられているが、このシグナルをもつプロテインジスルフィドイソメラ-ゼ(PDI)が、ラット膵外分泌細胞では、例外的に細胞膜まで輸送されることが見出された。5.形質膜に存在する糖脂質(GPI)アンカ-型蛋白質は,GPIの生合成が阻害されると、前駆体のまゝ細胞内に蓄積されるが、最終的にはC末が徐々に切断されて可溶性となり細胞外に分泌されることが判明した。6.培養肝細胞にアシアロ糖蛋白質を加え、そのエンドサイト-シスに対するスタウロスポリン(蛋白質リン酸化阻害剤)の効果を調べた。
扁桃核内嗅領海馬神経回路の側頭葉てんかんに対する抑制作用の研究

近年、海馬に隣接した、海馬への神経入力線維のほとんどが起始している内嗅領での神経細胞の変性が報告され、海馬とともに形成される神経回路が側頭葉てんかんの発現に重要な役割を演じていると考えられてきている。また、扁桃核との関連も発作の伝播や抑制において注目されている。現在まで我々はラットの海馬スライスにけいれん誘発物質を灌流しin vitroにおける海馬内の発作発現に関する電気生理学的検討を行い、さらにより生体に近い病態をin vitroで再現するため内嗅領を含み神経回路を保ったままの海馬拡大スライスを開発し、従来の海馬スライスにおける研究では明らかにできなかった内嗅領のてんかん原性と内嗅領から海馬へ入力された興奮の海馬内でのモジュレーションの解明を行ってきた。今回は正常ラットとてんかんモデルラットから、これらの海馬スライスを作製し、刺激もしくは誘発薬で出現するてんかん性電位に対する抗てんかん薬等の影響を検討しそのメカニズムの解明を行った。臨床で広く用いられているニューキノロン系抗菌薬のノルフロキサシンが海馬CA1部位で記録される誘発てんかん波を増強させ、鎮痛薬のフルルビプロフェンの併用でその作用が増強されることを示した。さらに、この増強作用に対する抗てんかん薬の効果には違いがあり、抑制効果はカルバマゼピン>フェノバルビタール>バルプロ酸であった。てんかんモデルラットから作製した海馬スライスの実験ではけいれん性を有する脳神経においてけいれん誘発性を有する薬物に対する感受性が高まっている可能性が示された。さらに扁桃核を含む海馬拡大スライスの作製を行い、扁桃核から海馬にいたる神経回路がたもたれていることを確認した。扁桃核を含む海馬拡大スライスは、今後てんかん発作における辺縁系の役割を解明するうえで有用であることが示された。側頭葉てんかんの病理所見は海馬の神経細胞脱落が特徴的で海馬硬化症として知られているが、近年、海馬に隣接した、海馬への神経入力線維のほとんどが起始している内嗅領での神経細胞の変性が報告され、海馬とともに形成される神経回路が側頭葉てんかんの発現に重要な役割を演じていると考えられてきている。我々はラットの内嗅領を含み神経回路を保ったままの海馬拡大切片を開発し、内嗅領のてんかん原性と内嗅領から海馬へ入力された興奮の海馬内でのモジュレーションの解明を行ってきた。しかし大脳辺縁系全体に及ぶ側頭葉てんかん発作のメカニズムを明らかにするためにはさらに拡大した神経回路を保った切片の開発が重要と考えられ、扁桃核、内嗅領、海馬を同一平面上に含む切片の作製を計画した。解剖学的特徴を捉えながらラット海馬内嗅領扁桃核領域を様々な角度から切り出し、また周囲脈管やくも膜の剥離方法を工夫し、脳を摘出後ビブラトームで切片を作成した。この切片をインターフェース型の潅流槽に載せ35度に保温しながら酸素化した人工髄液で潅流し、扁桃核の双極刺激を行った。同時に内嗅領皮質、海馬顆粒細胞層から電位記録を行い、刺激が海馬へ伝播するかどうかを各スライスで検討した。以上の実験により神経線維連絡が保たれ再現性のある安定した反応を得るために以下の手技を確立することができた。1.腹側の海馬内嗅領扁桃核が同一平面内に神経回路を保ちやすく、その切片の切り出し角度は大脳長軸とほぼ平行した水平断が至適であった。2.皮質の損傷を最小限に食い止めるため脳表面の脈管やくも膜は無理に剥離せず、また、切片切り出しには高周波のビブラトームが適当であった。

3.潅流層内で細胞外電位を記録するためには、300-500uの厚さの切片が適当であった。側頭葉てんかんの病理所見は海馬の神経細胞脱落が特徴的で海馬硬化症として知られているが、近年、海馬に隣接した、海馬への神経入力線維のほとんどが起始している内嗅領での神経細胞の変性が報告され、海馬とともに形成される神経回路が側頭葉てんかんの発現に重要な役割を演じていると考えられてきている。また、扁桃核との関連も発作の伝播や抑制において注目されている。大脳辺縁系全体に及ぶ側頭葉てんかん発作のメカニズムを明らかにするために拡大した神経回路を保った切片の開発が重要と考えられ、扁桃核、内嗅領、海馬を同一平面上に含む切片の作製を計画した。本年度は解剖学的特徴を捉えながらラット海馬内嗅領扁桃核領域を様々な角度から切り出し、神経回路を保ち安定した電気生理学的反応が得られる扁桃核内嗅領海馬切片作製法を確立することを計画した。この切片を使用して、けいれん誘発物質であり、かつ、けいれん抑制に働くGABA介在神経をも賦活するアミノピリジンを切片上に潅流投与して、切片上の扁桃核、内嗅領、海馬、各部位からの細胞外電位を記録し、誘発される発作波を検討した。研究成果と問題点を挙げる。1.腹側の海馬内嗅領扁桃核が同一平面内に神経回路を保ちやすいが個体差が著しい。その切片の切り出しのおおよその角度が大脳長軸とほぼ平行したものから15度頭頂方向のものに良好な反応が得られた。また、切片の厚さは500umm以上必要であったが、あまり厚く切ると反応が鈍くなる。2.わずかな皮質の損傷でも影響を受けるため、切片切り出し時には高周波のビブラトームが必要であったが、断頭時の脳摘出手技も迅速かつ繊細に行なわなければならず熟練を要した。3.アミノピリジンにより誘発される発作波に対して、扁桃核の刺激が抑制的に働いていた。しかし個体差があり、刺激方法に検討の余地があるが、扁桃核の抑制的な機能の可能性が示唆された。大脳辺縁系全体に及ぶ側頭葉てんかん発作のメカニズムを明らかにするために拡大した神経回路を保った切片の開発が重要と考えられ、扁桃核、内嗅領、海馬を同一平面上に含む切片の作製を行なってきた。本年度はピロカルピン腹腔内投与により作成した辺縁系てんかんモデルラットから、この切片を使用してけいれん性を有する脳神経に対してけいれん誘発性薬物であるニューキノロン系抗菌薬が与える影響を検討した。けいれん閾値と仮定したけいれん誘発物質である4-アミノピリジン(4-AP)による切片上のCA2刺激によって出現するCA1でのpopulation spike(PS)の用量反応曲線がニューキノロン系抗菌薬の存在下において低濃度側にシフトし、てんかんモデルラットにおいても4-APの用量反応曲線は正常ラットのそれより低濃度側にシフトした。したがって、けいれん性を有する脳神経はけいれん誘発性薬物に対して感受性が高い可能性が示された。抗てんかん薬の抑制効果を電気生理学的に検討するため同様に切片を使用してニューキノロン系抗菌薬と、やはりけいれん誘発薬物であるNSAID sの併用により十分増強させたPSに抗けいれん薬を灌流した結果、カルバマゼピンとフェノバルビタールナトリウムにでは1st Spikeは54.1±6.9%、74.4±5.5%にそれぞれ抑制された。また、2nd Spikeは44.6±12.6%、76.2±6.8%にそれぞれ抑制された。
神経変性疾患の細胞モデルを用いた、発症機序と予防法についての研究

パーキンソン病の原因遺伝子産物であるα-シヌクレイン、パーキンによる細胞死の機序の解明、および新しい治療法の手がかりを得ることを目的として研究を進めている。細胞モデルを用いて、細胞死、ユビキチン化、ミトコンドリア機能、細胞内シグナル伝達の解析を計画した。以下のように、現在までに細胞死・ユビキチン化の観察、細胞内シグナル伝達の解析において有意な結果を得ることができた。既に野生型とA53T変異型α-シヌクレインのPC12誘導性細胞モデルを作成している。免疫染色にて、変異α-シヌクレインを発現させた細胞では、α-シヌクレイン陽性の凝集体を認め、その凝集体がユビキチン化されていることを確認した。さらに、細胞死をTrypanblueexclusion assayおよびDAPI nuclear stainingによって確認し、変異α-シヌクレインが野生型蛋白と比較して有意に細胞死を増加させ、それがアポトーシスであることを観察した。また、この細胞死は変異α-シヌクレインの発現量に依存していた。細胞内シグナル伝達の解析において、nuclear-factor kappaB(NF-kappaB)との関連を解析するためNF-kappaB阻害剤を用い、変異α-シヌクレインにより誘発される細胞死が減少することを見いだした。これらの結果は、NF-kappaB pathwayが、変異α-シヌクレインにより誘発される細胞死において重要な役割を担っているとともに、細胞死を抑制するための重要な標的となりうることを示唆している。今後、さらに変異α-シヌクレイン、またパーキンによる細胞死の機序を解析するとともに、治療法の手がかりを得るため、細胞死抑制の方法についての検討を行っていく。
フラストレート系におけるトポロジカルな励起

スピンアイスにおける素励起が、磁気モノポールに類似した現象(専門用語では、3次元系におけるfractionalize可能なソリトン型励起)として理解可能であろうという理論的な考え方が注目されている。このモノポール励起は、新しい集団励起現象であり、また観測し難いこともあって、新しいアイデアに基づく実験が可能と考えられる。研究計画のひとつは、カゴメアイスDy2Ti207[111]磁場下での気液相転移の臨界点(Tc=0.36K,Hc=0.93T)近傍において多数生成されていると考えられている磁気モノポールを、AC磁場を用いて動かすことにより、AC磁化率として観測することであった。この実験は、大震災後の自主節電のためスタートが半年遅れてしまったが、2012年3月に行った実験では、予想に沿った形の非常に興味深い実験データが得られた。現在進行中の解析等も含めて論文にまとめる予定である。いくつか計画した中性子散乱実験は、原研(東海村)の研究用原子炉が地震のダメージ等により、現在も稼働できない状況であるため、実験できない状況になってしまっている。早期の再稼働を期待したい。この中性子散乱実験の代わりに、Tb2Ti2O7の研究に乗り出した。この系は、量子スピンアイス状態ではなかろうか?と推測されている系である。量子効果が働くスピンアイスでは、磁気モノポールが、Dy2Ti2O7のような古典的系に比較して良く動くことが期待できることが、この研究の基本的なアイデアである。Tb2Ti2O7の基底状態の実験研究は、再現性が得られないため難問と考えられていたが、Tb2+xTi2-xO7+yのxを微小量コントロールすることにより、スピン液体状態と長距離秩序状態の間をtuning可能であることが分かった。tuning可能であれば、今後大きな発展が期待できる。スピンアイスDy2Ti2O7における素励起が、磁気モノポールに類似した現象、もしくは3次元系におけるfractionalize可能なソリトン型励起、として理解可能であろうという理論的な考え方が注目されている。この考え方によると、Dy2Ti2O7の[111]磁場下におけるカゴメアイス状態に現れる気液型相転移の臨界点の性質を明らかにすることは、重要と考えられる。そこで臨界発散を調べるために、磁化測定、中性子散乱実験を行った。しかし予想に反して、明確な臨界発散は観測されないことが分かった。揺らぎが遅くなって、発散が抑制されることに原因があると考えられるため、研究の方向性を修正している。スピンアイスDy2Ti2O7においては、線欠陥型の励起に起因するKasteleyn転移があることが、理論的に指摘されている。この予想を実験的に研究するために磁化測定、比熱測定、MCシミュレーションを用いて研究を行ない、その結果、理論上のシナリオに沿った形で実験データが解釈可能であることが分かった。これを発展させるために、中性子散乱実験に用いる大きな単結晶作成を装置の整備から行った。現状では、細い単結晶は比較的簡単に育成可能であるが、大きな単結晶の育成には成功しなかった。問題点の解決方法は予想できているので、来年度に期待したい。量子スピンアイスではなかろうかと理論的に予想されていたTb2Ti2O7の基底状態を、粉末サンプルを用いて中性子非弾性散乱法により調べた。その結果、確かに量子揺らぎが非常に強い系であるという興味深い結果を得た。今後、量子スピンアイス状態やトポロジカル励起の研究への発展を期待している。
根の成長を最適化する根冠組織の特異的機能とその時空間統御

植物の根の先端にはキャップ型の形状を持つ根冠組織がはまっている。根冠は目立たない組織であるが、根端部に存在する分裂組織の物理的保護や、重力方向の感受、代謝産物の分泌や細胞剥離を通じた土壌微生物と相互作用を通じ、根のみならず植物全体の成長や生産性を左右する重要な役割を担っている。しかし根冠がこれらの独特の機能を発揮するために働く遺伝子や、その統御メカニズムはほとんど分かっていない。本研究課題では、これまでの研究で培った根冠分化に関する科学的知見や変異体などの生物リソースに、独自の顕微鏡ライブイメージング技術を融合させ、根の成長を最適化する根冠機能の発現機構を遺伝子レベルで明らかにする。
顎堤ならびに義歯の形態的因子が総義歯の安定性に及ぼす影響

【目的】総義歯の安定性に影響する無歯顎堤や義歯の形態の診断法として、非接触型形状測定装置を用いたシステムを試作し、その臨床応用の可能性などを検討することにあった。【試作システム】非接触型の形状測定装置としてスポット径140230μmの半導体レーザー変位計を用い、これからの出力とX-Yテーブルからの位置情報を、A/Dボードを通してパソコンに取り込むシステムとした。【実験方法】1)形状測定装置の操作性と再現性:義歯床(床部分と人工歯部分)、石膏模型、およびシリコーン印象材で作製した疑似粘膜面を測定し、従来の接触型との比較を行った。2)実験義歯とその安定性の条件:臼歯部人工歯の頬舌的な排列位置を、歯槽頂を基準にこれより2mm頬側および2mm口蓋側を設定し、1名の総義歯装着者が使用中の義歯を複製後、その臼歯部を可撤式として実験を行った。3)義歯の安定性の指標としての義歯床下の気圧の動態を、我々が開発したシステムにより生ニンジン咀嚼下で測定した。【結果と考察】1)今回試作した非接触型では、載物台の移動にマニュアル操作を伴うが、一定領域内の計測に要する時間は従来の接触型に比較して短縮され、CRTへの表示結果もほぼ満足のいくものであった。2)平衡側における気圧の低下量は、臼歯部人工歯の排列位置が頬側2mm>歯槽頂>口蓋側2mmの順となり、これはテコ・バランスの観点からその順に義歯の安定性が悪いことを示しているが、試作システムにより顎堤と人工歯との関係を知ることができた。【今後の展望】今回作製した非接触型測定装置は計測範囲がやや狭いため、義歯や無歯顎石膏模型の全体を1度のスキャンでは測定できなかった。現在、各部分の計測データをもとに義歯全体の形状を構築する方法について検討中であり、計測データの構築が可能になり次第、義歯床の安定性に対する義歯床辺縁形態とポストダム形態の効果についても検討を行う予定である。
ゲノム解析に基づく抗血小板薬内服時の上部消化管粘膜傷害予防法の確立

LDAに関連した胃粘膜傷害を引き起こしうる薬理遺伝学的な因子を検索した。Low dose aspirin (LDA)内服患者、非内服患者を対象に、4種類の薬物代謝関連遺伝子の遺伝子多型を測定し、H. pylori感染と薬剤の内服歴を考慮して、消化管粘膜傷害のリスク予測を行った。LDA内服中のSLCO1B1 (rs4149056)TT型の症例は、LDA内服者のCアレル保持者と比較して消化性潰瘍のリスクが約3.2倍も高いことが明らかとなった。今回の研究により、SLCO1B1 (rs4149056)の遺伝子多型を測定が、LDA内服時の消化管粘膜傷害の予測マーカーとなる可能性が示された。健常ボランティアにアスピリンに加えてクロピドグレルを内服した際の胃粘膜傷害とさらにPPI内服による予防効果に間セル検討に関しては、Clinical Gastroneterology& Hepatology誌に掲載された(Clin Gastroenterol Hepatol. 2012Aug;10(8):879-885。そこで明らかになったことは、クロピドグレルの活性化代謝を担うCYP2C19遺伝子多型は胃粘膜傷害との関連は無く、従って、クロピトグレル自体には粘膜傷害を惹起させる作用はすくないということである。しかし、ひとたび粘膜傷害が起こるとクロピドグレルは出血は助長しやすい。もう一点明らかとなったことは、H. pylori感染の関与である。H. pylori感染は胃酸を抑制し、アスピリンの粘膜傷害に防御的に働くという報告もあるが、やはりH. pylori感染による炎症を有する粘膜では低用量アスピリンによる粘膜症が重篤化しやすいことが明らかとなった。予防薬としてのPPIであるが、その効果はこれまで報告してきたとおりでCYP2C19遺伝子多型の影響をうけるが、特にrapid metabolizerでH. pylori陰性の場合にその粘膜傷害がPoor metabolizer (PM)やintermediatemetabolizer (IM)と比較して予防効果が低下することが明らかとなった。現在は、粘膜傷害の個体間格差に関わる遺伝子多型に関して検討しており、候補遺伝子のリストはできており、現在解析の測定系の確立と症例の集積中である。UGT1A6, CYP2C9, COX-1, COX-2,等の解析を予定している低用量アスピリン(LDA)内服時の粘膜障害に関わる要因を遺伝子多型を中心に検討した。当院を受診し上部消化管内視鏡を行った患者のうち同意が得られた209名を対象に、患者DNAから、LDAの動態との関与が報告されている遺伝子SLCO1B1(rs4149056)、UGT1A6(rs2070959、rs1105879)の遺伝子多型を解析し、他の薬物の内服状況、H. pylori感染の有無をふまえて解析を行った。対象とした209名の各遺伝子多型のアレル頻度は日本人のHap-Mapデータ(Hap-Map JPT)と同様であった。LDAの内服の有無と消化性潰瘍の有無を各遺伝子多型別に検討したところ、LDA(+)/消化性潰瘍(+)、LDA(+)/消化性潰瘍(-)、LDA(-)/消化性潰瘍(+)の各群において、UGT1A6のrs2070959とrs1105879の各SNP間で明らかな差を認めなかったが、LDA(+)/消化性潰瘍(+)のSLCO1B1 (rs4149056)TT型は、LDA(+)/消化性潰瘍(-)と比較し、多い傾向を認めた(p=0.06)。次に、LDA内服者88名に対し、上述と同様に消化性潰瘍に対する因子を検討した。すると、SLCO1B1 (rs4149056) TT型はCアレル保持者と比較し、3倍以上も消化性潰瘍のリスクが高いことが明らかとなった。さらにこれらをH. pylori感染と胃酸分泌抑制薬内服の有無別に検討したところ、Cアレル保持者と比較し、TT型かつ胃酸分泌抑制薬内服がない場合は、よりリスクが上昇する傾向を認めた。LDAの消化性潰瘍リスクに関して、薬理遺伝学の検討とH. pylori感染、胃酸分泌抑制薬と合わせて検討した。高齢化社会に伴いLDAが頻用されている中で、リスクをより正確に予測し、適切に治療を施す個別化医療への一助となったと思われる。

基礎的研究として、健常ボランティアにアスピリンに加えてクロピドグレルを内服した際の胃粘膜傷害を検討し、クロピドグレルの活性化代謝を担うCYP2C19遺伝子多型との関連を中心に検討した。アスピリン100mgとクロピドグレル75mg一週間内服後の胃粘膜傷害は個体間格差をみとめた。クロピドグレルの抗血小板作用はCYP2X19遺伝子多型に依存するため、粘膜傷害とCYP2C19遺伝子多型に関連があるかを検討したが、有意な相関は認めなかった。また、アスピリンによる抗血小板作用とも相関が認めなかった。予防方法としてPPIが用いられるが、PPIの効果はCYP2C19遺伝子多型に異存する。そして、アスピリンとクロピドグレル併用時のPPIの予防効果はCYP2C19遺伝子多型に依存した。以上の結果はClin Gastroneterol Hetaptolに掲載予定である。今後さらに、粘膜傷害の個体間格差に関わる遺伝子多型に関して検討を続ける予定である。臨床的な検討に対しては、アスピリンやクロピドグレル内服中の患者より同意を得た後に採血をおこないDNAの抽出をしており、ゲノム解析に向けてのサンプルの蓄積を進めている。予防法に関する遺伝子多型については報告済みである。病態の個体差に関わる遺伝子多型については現在検討中であり、引き続き研究を進めていく。問題点としては、caseの症例の集積がやや不足しており、現在、週集につとめている。基礎的研究を一つ終えた時点で一定の成果をあげることができている。すなわち、臨床研究は症例の蓄積に時間がかかるため、同時にボランテイアでの検討をすすめ、そこでアスピリンやクロピドグレルによる粘膜傷害が形成させる様子を観察することができた。さらに24時間胃内pHモニタリングで胃酸分泌をモニターしたため、胃酸との関連も検討することができた。CYP2C19遺伝子多型はクロピドグレルの効果に影響するため、クロピドグレルによる粘膜傷害にCYP2C19多型は関与することが予測されたが、結果的には関連がないこととなった。ただし、胃酸分泌やH. pylori感染は有意な影響因子であることが判明し、さらに予防法で用いるPPIの効果がCYP2C19遺伝子多型に影響することが判明したため、予防にはPPIでかつその用量はCYP2C19多型で決定すべきと言う結論がえられ、予防方法の個別化療法にたいしての重要な結果を得ることができた。以上は、Clinican Gastroenterology and Hepatology誌に掲載予定となっている。臨床研究における症例の蓄積は時間がかかるため、臨床でのデータに関してはすこし時間が必要であると考えている。測定すべき遺伝子多型についてはすでに候補をあげているが、さらに最新の情報をもとに追加を検討している。最終的な結果はまだ出ていないが、それまでの過程として、基礎研究での一定の成果がでたこと、そして論文をひとつ完成させたこと、さらに臨床研究の症例も蓄積が始まっているという点で、進展はあるいみ順調であると評価できると考えている。粘膜傷害の個体差にかかわる遺伝子多型について引き続き検討をすすめていく。単独の多型では難しい可能性もあり、スコア化するなどして、即ち、遺伝子多型の数と重みでのスコアを設定し、リスク評価ができるかを検討できればと考えている。予防法の遺伝子多型が確定したため、それに基づく前向き試験を検討したいと考えている。即ちCYP2C19遺伝子多型に応じてPPIの用量を調整する群と、これまでどおりの標準用量を投与する群を設定することにより、この遺伝子多型に基づく粘膜傷害抑制がより効果的に抑制できるかですある。基礎的検討として、データの詳細な解析を予定している。
静粛環境創生のための固体音に起因する騒音のハイブリッド制御の基盤的研究

本研究では,静粛環境の創生に不可欠な実用的で信頼性の高いハイブリッド固体音騒音制御法の確立を目的として,アクティブ方式とパッシブ方式の得意分野を組み合わせたハイブリッド遮音壁の制御法の基礎研究を進めてきた。前年度は遮音壁を想定した平板構造物の多モード振動制御法について研究を行い,Journal of Sound and Vibrationや日本機械学会講演会などでその成果を発表してきた.今年度は平板構造物を通して放射される騒音の制御法について研究を行い,Journal of the Acoustical Society of America,第二回世界構造制御会議,精密工学会誌,International Journal of the Japan Society for Precision Engineeringなどにその研究成果を発表した.この一連の研究成果の概要は,アクティブ方式をパッシブでは困難な低周波振動・騒音の制御に当て,パッシブ方式をアクティブでは難しい高周波振動・騒音の抑制に当てて,広い周波数帯域に渡って良好な遮音性能を持つ遮音平板を実現したものである.本研究では,1次モードから9次モードまでの多数の振動モードがアクティブ方式で制御され,それ以上のモードは動吸振器で抑制されている.今までに,このような多数の共振周波数を制御した事例は皆無であったが,本研究では,スピルオーバと呼ばれる不安定振動を起こすことなく,しかも簡素な制御システムを用いて所用の広い周波数帯域を振動・騒音制御の目的を達せすることができた.なお,これに引き続き180cm^*90cmの実物大の大型遮音壁を製作しこれを振動制御すると共に,2つの反響室の遮音壁として用いて一方の部屋で騒音を発生させ,他方の部屋で放射音を測定することによって,遮音特性を定量的に評価する研究を行った.その成果については1999年7月にデンマークで開催される第6回世界騒音振動会議で発表の予定である.本研究では,静粛環境の創生に不可欠な実用的で信頼性の高いハイブリッド固体音騒音制御法の確立を目的として,アクティブ方式とパッシブ方式の得意分野を組み合わせたハイブリッド遮音壁の制御法の基礎研究を進めてきた。前年度は遮音壁を想定した平板構造物の多モード振動制御法について研究を行い,Journal of Sound and Vibrationや日本機械学会講演会などでその成果を発表してきた.今年度は平板構造物を通して放射される騒音の制御法について研究を行い,Journal of the Acoustical Society of America,第二回世界構造制御会議,精密工学会誌,International Journal of the Japan Society for Precision Engineeringなどにその研究成果を発表した.この一連の研究成果の概要は,アクティブ方式をパッシブでは困難な低周波振動・騒音の制御に当て,パッシブ方式をアクティブでは難しい高周波振動・騒音の抑制に当てて,広い周波数帯域に渡って良好な遮音性能を持つ遮音平板を実現したものである.本研究では,1次モードから9次モードまでの多数の振動モードがアクティブ方式で制御され,それ以上のモードは動吸振器で抑制されている.今までに,このような多数の共振周波数を制御した事例は皆無であったが,本研究では,スピルオーバと呼ばれる不安定振動を起こすことなく,しかも簡素な制御システムを用いて所用の広い周波数帯域を振動・騒音制御の目的を達せすることができた.なお,これに引き続き180cm^*90cmの実物大の大型遮音壁を製作しこれを振動制御すると共に,2つの反響室の遮音壁として用いて一方の部屋で騒音を発生させ,他方の部屋で放射音を測定することによって,遮音特性を定量的に評価する研究を行った.その成果については1999年7月にデンマークで開催される第6回世界騒音振動会議で発表の予定である.静粛環境の創生に不可欠な実用的で信頼性の高いハイブリッド固体音騒音制御法の確立のための基盤研究を行った。本研究の特徴は,アクティブ方式とパッシブ方式の得意分野を分担させる点にある。アクティブ方式はパッシブでは困難な低周波振動の制御に当たった。パッシブ方式はアクティブでは難しい高周波振動騒音の抑制に当てた。通常は制御のために低次元化モデル作成と言う手法が採られるわけだが,そのことによって無視された共振周波数でスピルオーバと呼ばれる発振現象が起こる。平板構造物では,特にこの問題が起こりやすいために,本研究では,そのようなスピルオーバを起こすこと無く,しかも簡素な制御システムを用いて希望の周波数範囲まで所用の共振周波数を振動制御する必要がある。そこで,本研究では,研究代表者が提案する不可制御・不可観測性を用いた低次元物理モデル作成法に基づく9質点モデルを作成し,そのモデルを用いてフィルタ包含順最適制御に基づく制御系設計を行い,遮音板の10次モードまでの振動制御実験を行った。更に高次モードはアクティブ制御では困難であるので,多重動吸振器によるパッシブ制御を高次モードの振動制御にも適用し,11次モード以上の制振を行った。その結果,初年度の研究としたはアクティブ方式とパッシブ方式を融合した固体音の良好な制御効果が得られた。次年度はこの方式による遮音性能の評価を行いたい。前年度は遮音壁を想定した平板構造物の多モード振動制御法について研究を行い,Journa1 of Sound and Vibrationや日本機械学会講演会などでその成果を発表してきた.今年度は平板構造物を通して放射される騒音の制御法について研究を行い,Journal of the Acoustical Society of America,第二回世界構造制御会議,精密工学会誌,International Journal of the Japan Society for Precision Engineeringなどにその研究成果を発表した.

この一連の研究成果の概要は,アクティブ方式をパッシブでは困難な低周波振動・騒音の制御に当て,パッシブ方式をアクティブでは難しい高周波振動・騒音の抑制に当てて,広い周波数帯域に渡って良好な遮音性能を持つ遮音平板を実現したものである.本研究では,1次モードから9次モードまでの多数の振動モードがアクティブ方式で制御され,それ以上のモードは動吸振器で抑制されている.今までに,このような多数の共振周波数を制御した事例は皆無であったが,本研究では,スピルオーバと呼ばれる不安定振動を起こすことなく,しかも簡素な制御システムを用いて所用の広い周波数帯域を振動・騒音制御の目的を達せすることができた.なお,これに引き続き180cm^*90cmの実物大の大型遮音壁を製作しこれを振動制御すると共に,2つの反響室の遮音壁として用いて一方の部屋で騒音を発生させ,他方の部屋で放射音を測定することによって,遮音特性を定量的に評価する研究を行った.その成果については1999年7月にデンマークで開催される第6回世界騒音振動会議で発表の予定である.
レ-ザの生物学的効果に関する基礎的研究 特に硬組織誘導能について

レ-ザが骨組織形成細胞である骨芽細胞の増殖と分化とを促して骨質を形成することを明らかにする目的で以下の実験を行った。すなわち、我々が開発したレ-ザ・マイクロビ-ムを組込んだ細胞工学用顕微鏡を用いて、株化骨芽細胞MC3T3ーEIを対象として、ヘリウムネオンレ-ザとアルゴンイオンレ-ザとをそれぞれ各種条件で連続培養中の細胞群に照射し、培養骨芽細胞の増殖と分化について、それぞれの指標として蛋白質量とアルカリ性フォスファタ-ゼ活性とを測定し、あわせて、被照射細胞の超微細構造的な変化を透過型電子顕微鏡で観察した。当該年度中に得られた研究実績の概要は以下の通りである。いずれのレ-ザも1日1回1分間の1回照射では、蛋白質量とアルカリ性フォスファタ-ゼ活性とはともに変動せず、超微細構造学的にも細胞に変化を認めなかった。また、1日1回15分間の1回照射では、蛋白質量とアルカリ性フォスファタ-ゼ活性とはともに変動しなかったが超微細構造学的にはミトコンドリアの膨化等の細胞内小器官の変性を認めた。これらの結果を踏まえて、以後のレ-ザ照射は1日1回15分間よりも照射エネルギ-の累積量が少ない条件で行った。試行錯誤の末、1日1回5分間の5回照射(5日間照射)すると、いずれのレ-ザにおいても、蛋白質量が僅かながら増加し、細胞の増殖が促される傾向を示したが、アルカリ性フォスファタ-ゼ活性には変動を認めなかった。超微細構造学的には変化を認めず、細胞の変性を示唆する所見も明らかではなかった。現在までのところ、レ-ザ照射が骨芽細胞であるMC3T3ーEI細胞の増殖を促進する細胞生物学的な効果をもつことを示唆する所見を得ているが、骨基質を形成するような分化を促進する効果については、これを支持する結果を得ていない。照射条件を検討するとともに半導体レ-ザについても検討を加えるべく実験を継続中である。
立位での足底特定部位への電気刺激による体性感覚誘発電位に及ぼす注意の影響

今回の研究を通して、立位時に足底部(中足骨骨頭部)に電気刺激をして体性感覚誘発電位を測定した際に、刺激に対して注意を向けると誘発波形に影響が現れることが確認できた。次に、その影響は、N80成分の振幅に現れることが確認できた。そして、前傾姿勢を保持し、中足骨骨頭部に注意を向けるトレーニングをすると、安静立位位置に近い位置で立位を保持したときに注意の影響が現れることが確認できた。このトレーニング法は、立位位置を知覚するトレーニング法に発展させることができると考える。立位位置の知覚には、足底圧情報が重要であると考えられる。それゆえ、立位位置を知覚する状況では、脳内における足底からの体性情報処理の様相が特異的に変わる可能性が推察される。今年度の研究は、立位における足底への電気刺激時に選択的注意課題を課すことによって誘発電位の振幅が増大するという仮説を証明するために実施された。被験者は20から46歳の健常成人8名で、実験についての説明を受け、同意して参加した。電気刺激装置(ユニークメディカル、NS-101)を用いて右側中足骨骨頭部に1Hzで持続時間0.2msの矩形波による2種類の電気刺激(非標的刺激(確率60%、感覚閾値の1.8倍)と標的刺激(確率40%、非標的刺激の強度との違いが知覚できる最小の強度))が加えられた。電気刺激よる体性感覚誘発電位は脳波アンプ(NEC 6R12)で増幅され、A/D変換器を介してコンピューターに入力された。刺激条件は、1)刺激のみ(コントロール)、2)標的刺激の回数を心の中で数える(数唱課題)、3)標的刺激に対して右手のIII、IV、及びV指を速やかに屈曲する(反応課題)-の3つである。これらの条件は座位と立位とで課され、合計6つの条件をランダムな順番で遂行した。各条件とも1セット60回の刺激を90秒間の休憩を挟んで5から7回繰り返し、合計120から150回の加算波形を得た。分析は非標的刺激時の波形について、刺激後200msまで行った。座位および立位姿勢ともP30の振幅が、コントロールに比べて反応課題で増大する傾向が認められ、その傾向は立位において著しかった。このことから、下肢においても手指への電気刺激と同様に刺激部位に注意を向けることによって、刺激対側の一次知覚野近傍から出現すると考えられている刺激後30ms以降の波形の振幅が増大することが明らかとなった。今年度の研究は,立位における足底への電気刺激時に立位姿勢の前傾度を変えた場合,および選択的注意課題によって誘発電位の振幅が増大するという仮説を証明するために実施された。被験者は20から47歳の健常成人7名で,実験についての説明を受け,同意して参加した。電気刺激装置を用いて右側中足骨骨頭部に1Hzで持続時間0.2msの矩形波による2種類の電気刺激(非標的刺激(確率60%,感覚閾値の1.8倍)と標的刺激(確率40%,非標的刺激の強度との違いが知覚できる最小の強度))が加えられた。立位条件は,1)安静立位位置,2)40%FL,3)50%FL,4)60%FL,および5)70%FLで,それぞれの条件で,刺激のみ課題,および注意課題の2つを課した。注意課題は,標的刺激に対して右手のIII,IV,及びV指を速やかに屈曲する。合計10の条件をランダムな順番で遂行した。各条件とも1セット60回の刺激を90秒間の休憩を挟んで5から7回繰り返し,合計150から200回の加算波形を得た。分析は非標的刺激時の波形について,刺激後200msまで行った。誘発電位の振幅は,いずれの立位位置ともに刺激のみ課題より注意課題の方が大きかった。40%FLから60%FLにかけて電位の振幅が大きくなった。70%FLの振幅は個人差が認められた。注意,および前傾により誘発電位が大きくなることが示された。但し,70%FLについては,骨格形状等の個人差が影響している可能性が考えられる。昨年度の研究で、前後方向における立位位置を50%FL、60%FL、および70%FLとし、右側第一中足骨骨頭部に電気刺激をし、体性感覚誘発電位を導出した。その結果、50%FL位置で、刺激部位に注意を向けた条件において注意を向けない条件と比べて、N80成分の振幅のみが有意に大きかった。しかし、70%FL位置では、注意の有無による振幅への有意な影響は認められなかった。

そこで、今年度は、70%FLの位置での足底圧情報に対する選択的注意能力を高めることを目的に、70%FLの位置で立位保持トレーニングを足底圧に注目させながら、1日あたり1分間を5回、5日間実施した。そして、このトレーニング前後での右側第一中足骨骨頭部への電気刺激に対する体性感覚誘発電位における注意の影響について検討した。対象は、20歳から25歳の大学生19名で、彼らをトレーニング群10名と対照群9名に分けた。トレーニング群は5日間のトレーニングの前後に体性感覚誘発電位を測定し、対照群は1回目の測定の後、6日後に再度測定を行った。測定時の立位位置は、50%FL、および70%FLとした。電気刺激は、オドボール刺激とし、感覚閾値の1.2倍の強度と、この強度との違いが知覚できる強度の2種類の強度をランダムな順番で与えた。被験者には弱い刺激(標的刺激;刺激確率40%)に対して指の屈曲をすることで反応させ、強い刺激(非標的刺激;刺激確率60%)には反応させなかった。体性感覚誘発電位は、非標的刺激時の誘発された波形のうち、指の屈曲(誤反応)をしなかったときの波形を加算平均することにより求め、トレーニング群と対照群とで比較する。この結果については、現在分析中である。