hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
フェンシクリジンによる感覚入力制御機構の破状態の解析

PCPの投与前のPPIはcontrol群(生食投与群)で50.8±4.9%、PCPA投与群で78.9±3.1%でありPCPA投与により有意な増加が認められた。PCP投与によりcontrol群ではPPIは30.8±6.3%、PCP投与群では61.1±6.3%と両群ともに減少がみとめられ、PCPAの効果とPCPの効果に交互作用は認められなかった。以上の結果はPCPによるPPIの減弱作用はPCPのserotonin遊離作用のみでは説明できず、serotonin 2A受容体あるいはその他の受容体に対する刺激作用によることが示唆された。PCPにはσ受容体に対する高い親和性が報告されている。そこでPCPによるPPI減弱に対するσ受容体遮断薬であるMS-377の拮抗作用を検討した。PCPによるPPI減弱はPCP投与30分前にMS-377を腹腔内投与するとPCPによるPPI減弱は有意に拮抗され、そのED50値は0.5mg/kgであった。このことはPCPによるPPIの減弱にσ受容体が関与していることを示唆している。分裂病の病態モデルとされるラットのPPIの値は個体毎にほぼ一定であった。そこでこの個体差に注目し、PPI測定後に断頭し前頭前野、側坐核、線条体のDAおよび3,4-dihydroxyphenyl acetic acid(DOPAC)濃度を測定した所、PPIの値と側坐核のDAとDOPAC量に最も高い逆相関を認めた。さらにラットを低PPI群と高PPI群に分け、側坐核スライスからの刺激誘発性DA遊離に対するDA受容体作動薬の抑制作用を比較すると、apomorphine(APO)のDA遊離抑制作用が低PPI群で減弱していることを認めた。すなわち低PPI群では側坐核DA神経終末の自己受容体の機能低下があり、DA作動薬によるDA遊離の抑制が減弱した状態にあると思われる。PPIの減弱はN-methyl-d-aspartate受容体遮断薬(Phencyclidine,PCP)をラットに投与しても認められる。そこでPCP及びAPOにより減弱したPPIに対する各種抗精神病薬(spiperone,haloperidol,clozapine,chlorpromazine,pipamperone,seroquel,risperidone,olanzapine)の拮抗作用の力価を同一条件下で調べた。APOによるPPIの減弱に対する各薬物の拮抗作用の力価(ED50)はそれぞれのDAD2受容体親和性と正の相関を認め(P=0.0008)、PCPによるPPIの減弱に対する各薬物の拮抗作用の力価とそれぞれのserotonin2A受容体親和性との間に高い相関を認めた(P=0.0011)。すなわちAPOまたはPCPによる減弱はそれぞれDAD2受容体またはserotonin2A受容体の活性化を介して独立して生じることが示唆された。またσ-1受容体リガンドであるMS-377はPCPにより減弱したPPIを用量依存性に拮抗し、σ-1受容体リガンドの抗精神病薬としての可能性を示唆した。
NMDA受容体と各種神経伝達物質受容体との機能的相関性-神経細胞障害機序の解明の試み

本研究計画においては、NMDA受容体活性化に伴う神経細胞傷害機序と他の神経伝達物質受容体との相関性、およびCaの細胞傷害発現における機能的役割を解明する目的で行われ、以下の成果を得た。(1)初代培養神経細胞において、NMDA受容体刺激により、用量依存的な細胞傷害が生じることが認められた。この神経細胞傷害はNMDA受容体拮抗薬のMK-801により有意に抑制された。(2)GABA_A受容体作動薬であるmuscimol(Mus)の共存によりNMDA曝露後1時間における細胞傷害は有意に抑制され、この抑制効果はGABA_A受容体拮抗薬であるbicuculline(Bic)により消失した。一方、曝露後24時間の時点において認められる遅発性細胞壊死にはなんらの影響も示さなかった。(3)NMDA受容体刺激に伴う神経細胞傷害にはCaの細胞内への流入増加が原因である可能性が指摘されていることから、Mus共存下にNMDA受容体刺激によるCa流入の変化を検討したところ、MusによりNMDA誘発性Ca流入増加は促進され、しかもこのMusによる促進作用は電位依存性Caチャネル阻害薬によって抑制された。これらの結果から、NMDA受容体刺激による即時性および遅延性の細胞傷害発現におけるCaの病態生理学的役割は異なる可能性が示唆され、今後これらCaの病態生理学的役割の相違を検討することにより神経細胞傷害の原因が明らかにされる可能性があると考えられる。(4)株化細胞として神経学的研究に繁用されるNG108-15におけるNMDA受容体の存在の有無について、Ca流入およびNMDA受容体への放射性リガンドである[^3H]MK-801の細胞膜への結合の観点から検討したところ、この細胞にも明らかなNMDA受容体が存在していることが判明し、今後有用なNMDA受容体研究の実験モデルになりうることが明らかになった。神経細胞障害機序を解明する目的で、NMDA受容体を中心として、(1)他の神経伝達物質受容体との機能的相関性の検討、および(2)NMDA受容体を有する株化神経細胞の検索を行った。(1)神経化学的研究において繁用されるNG108-15細胞(NG細胞)を用い、NMDA受容体が存在するか否かについて、Caの細胞内流入と[3H]MK-801結合を測定することにより検討したところ、NG細胞ではNMDAによりCa流入が増大し、この増大はMK-801により用量依存的に阻害されること、および[3H]MK-801結合部位が存在することなどから、NG細胞には薬理学的特性を有するNMDA受容体が存在することが判明した。従って今後このNG細胞は、神経細胞障害機序を検討するために有用な実験系となりうることが示唆された。(2)NMDA受容体に対する他の神経伝達物質受容体の作用については、NMDA受容体を有していることが明らかにされている初代培養大脳皮質神経細胞を用いて、この神経細胞が保持しているムスカリン受容体、β-アドレナリン受容体およびGABA_A受容体との機能相関性を検討したところ、ムスカリンおよびβ-アドレナリン受容体は、NMDA受容体刺激により生じるCaの細胞内への流入に影響を与えないことが判明した。一方、GABA_A受容体をそのアゴニストで刺激した場合には、NMDA受容体刺激に伴うCaの細胞内流入を有意に増加させ、しかもこの増強効果はGABA_A受容体アンタゴニストであるビククリンによって抑制された。またこの増強効果はピクロトキシンでは影響をうけず、L型Caチャネル拮抗薬であるベラパミールにより有意に抑制された。これらの結果から、GABA_A受容体刺激はNMDAの存在下において、NMDA誘発性のCa流入を、L型Caチャネルの活性化を介して増強することが示唆される。

神経細胞傷害機序を解明する目的で、NMDA受容体の活性による神経細胞傷害を、lactic dehydrogenase(LDH)活性の細胞外への漏出を測定することにより調べ、併せてGABA_A受容体活性化がこの神経細胞傷害にいかなる影響を与えるのかを、Caイオンの細胞内流入の観点から検討を加えた。(1)NMDAを15分間神経細胞に曝露したのち、1時間および24時間後のLDH活性の細胞外漏出を検討したところ、いづれの場合にも用量依存性のLDH活性の細胞外漏出の増加が認められた。これらの増加は、NMDA受容体の特異的拮抗薬であるMK-801により有意に抑制された。(2)GABA_A受容体の特異的作動薬であるmuscimol(Mus)は、NMDA曝露1時間後にみられるLDH活性の漏出を用量依存性に抑制し、GABA_A受容体拮抗薬であるbicuculline(Bic)は、この抑制作用を有意に低下させた。(3)NMDA曝露24時間後に観察されたLDH活性の漏出の増加は、NMDA1時間曝露の場合とは異なり、Musによってなんらの影響をも受けなかった。(4)ついで、NMDA受容体の活性化により細胞化へのCa流入が生じることが知られていること、およびこのCa流入が神経細胞傷害に関係している可能性が従来より報告されていることから、NMDA受容体活性化に伴うCaの細胞内流入の増加に対して、GABA_A受容体活性化がいかなる変化を与えるのかを検討した。(5)NMDAは用量依存的なCa流入増大をもたらした。Musの共存によりこの増加はさらに促進され、またこの促進作用はBicにより用量依存的抑制を受けた。MusによるNMDA誘発性Ca流入の増大はGABA_A受容体に共軛するC1チャネル阻害剤であるピクロトキシニンおよびTBPSによっても影響されず、Caチャネル阻害薬によって抑制された。(6)以上の結果より、NMDA受容体活性化によって生じる細胞傷害発現機序におけるCaの役割は、その急性傷害および遅発性傷害では異なる可能性が示唆される。
注意欠陥・多動障害児の大脳半球間伝達機能

〈目的〉乳幼児の視覚機能の発達についてはこれまでにも様々な形で研究がなされているが(M.J.Greenwald.1983など),いずれも両眼での視覚機能を対象としたものであり、単眼視の場合の乳児の反応についての研究は未だ試みられていない。そこで本研究は,正常な乳幼児について以下の3点を知るために実験を行ない、その視覚機能についての検討を行なうことを目的とする。(1)単眼で対象物を見る際の顔の動き(2)単眼による追視の可否(3)単眼時にリ-チングを行なう際の手の左右差の有無〈対象・方法〉胎児期より実験当日まで専門的な異常が指摘されていない生後213カ月の正常乳幼児99名(男59名、女40名)を対象とした。一人の対象児に対して、(1)両眼で行なう場合(2)右目で行なう場合(3)左目で行なう場合、という3つの条件の下で上記3点について観察を行なう。〈結果〉顔の動き方:単眼での条件下で35カ月児に、開いている目と同方向に顔を向ける反応が見られた。これは右目の場合も左目の場合も同様な反応を示す。追視:両眼視から単眼視になると追視達成率が下がる。リ-チング:単眼視の条件下での方がリ-チングに出にくい。出される手の左右は、両眼・単眼に影響されない。
国会と立法についての比較憲法的・規範的研究

日本ではここ20年来、立法過程や立法のあり方が変化している。本研究では、同様の変化が見られるフランスとの比較を通じて、制度的要因(日本では政党システムの変容や両院間のねじれ、フランスでは修正の氾濫など)や社会構造の変容が、その背景にあることを明らかにしている。そして、制度の運用の見直し(シャトル・システム等)だけでなく、法律の一般性の意義の確認、新たな統治の正統性の模索などが重要な意味をもつことを、指摘している。ここ10年ほど、日本の国会を取り巻く環境が大きく変化しており、それに伴い議員立法や基本法の増加、「ねじれ」のもとでの国会内部の合意形成手続の問題、政治主導のもとでの政策形成をめぐる問題など、従来の憲法学の理論では十分に対応できない課題が生じている。研究は、国会の最も重要な機能である立法に焦点を合わせ、共通の問題を抱えるフランスを中心とした比較憲法的・比較制度的視点からの分析によって、国会と立法が直面する諸課題に向き合うための理論的基礎を解明することを目的としている。初年度である21年度は、基礎的な資料の収集と分析、それにもとづく試論の形成・発表などを行った。10月の日本公法学会では、「議員立法と閣法」と題する報告を行い、日本の立法過程の問題点と近時の変化について憲法学の視点から検討を加えた。「立法の質」の確保が大きな問題となっている近時のフランス憲法学の理論状況についても分析を進め、試論の構築に努めた。また、国会による行政統制のあり方や中央・地方間の規範制定権の分有の問題などについても分析を行っている(後者については、2009年12月に成城大学で開催された国際シンポジウムで報告を行った)。さらに、2010年3月には、フランス・リール大学で行われた第9回日仏公法セミナーに参加し、日本における憲法学と政治学の関係についての報告を行った。セミナーでは、フランスの憲法研究者との意見交換を通じ、政治学とは異なる視角から「政治」を主題化しようとする近時のフランス憲法学の新たな理論動向に触れることができた。本研究の方法論的基礎とも関わる視点を得ることができ、大変有益であった。本研究は、国会の最も重要な機能である立法に焦点を合わせ、共通の問題を抱えるフランスを中心とした比較憲法的・比較制度的視点からの分析によって、国会と立法が直面する諸課題に向き合うための理論的基礎を解明することを目的としている。2年目である22年度は、初年度の研究をふまえ、試論的な論文執筆に取りかかるとともに、国内外の研究会やシンポジウム等に参加し、実務家や内外の研究者と意見交換を行うことを予定していた。後述のように、立法・国会の役割について、3件の論文を公刊した。このうち「『議員立法』と閣法」は、21年度の公法学会における報告を活字化したものであり、日本における立法をめぐる近時の環境や規範構造の変化をふまえ、議員立法の再定位を試みたものである。「『饒舌な立法』と『一般意思』-フランスにおける立法と政治」は、上記の論文と対をなすもので、近時のフランスにおける立法をめぐる問題状況を、日本の問題状況を意識しつつ論じたものである。「立憲的統制と安保体制-外交・軍事と国会」では、外交・軍事をめぐる議会の役割の限界と可能性を、やはり日仏比較という視座の中で論じた。10月には、日仏会館における国際シンポジウムに参加し、「政治の優位と政官関係-官僚制と政治的法としての憲法」と題する報告を行った。国会をめぐる与件の変化をふまえつつ、官僚統制においても立法機能が重要な身を有していることを論じ、日仏の政治学者・行政学者と議論を行った。2011年1月には、来日していたフランスにおける議会法研究の第一者であるAlmel Le Divellec教授(パリ第二大学)と意見交換を行うことができた。また、同教授と共に参議院・国会図書館を訪問し、国会議員・議会実務家を交えた貴重な意見交換の機会をもつことができた。最終年度である平成23年度においては、これまで2ヵ年の研究をふまえ、必要な視点を補足・整理しつつ、研究課題全体に関わる試論の構築につとめ、2本の論文を公刊した。「自治体の立法権をめぐる『国家の型』の理論」は、近時の日本における立法権の分権をめぐる議論を素材に、フランス憲法学の知見によりつつ、国と地方という異なるレベルでの立法権の並存の可能性と限界を、原理的な視点から論じたものである。従来よりも広い視座から、立法をめぐる問題を論じる、補足的な意味合いをもつ論文である。「よりよき立法(mieux legiferer)-フランスにおける社会・経済の変容と統治の正統性-」は、EUとフランスを素材に、政治・社会の変動のなかで立法と統治に新たな正統性が求められるようになっていることを、立法過程と理論双方から、論じてみた。本研究課題を集成するものであると同時に、今後の研究への橋渡しの役割をも持つ論文である。

なお試論ではあるが、本研究を通じ解明をめざした課題に対する、基本的な方向性が提示されている。このほか、立法過程、さらにはより広く政治過程における審議や決定にどこまで規範的な統制が及びうるのか、といった点についても考察を行っている。刊行スケジュールの遅れから、年度内の刊行はかなわなかったが、そうした成果の一部をふまえ、法科大学院用のテキストに、共同執筆者として参加し、「国会・内閣・財政」の章を執筆した。執筆活動以外では、研究代表者がこれまで専門としてきた選挙制度や国会制度のあり方をめぐり、国会実務関係者から意見を求められる機会が複数あった。これまでの研究成果をふまえ意見を述べる一方で、意見交換を通じ、様々な貴重な知見を得ることもできた。
共感性の神経回路基盤の解明

共感性の神経回路基盤の解明を目指し,一連の共感行動に関連した神経活動を同定する目的で,行動を小さなピースに分解し,同行動ピースと関連する神経活動の同定を試みた.「共感行動」と一般に言われる一連の行動を小さなモーションに分解するために,コンピュータビジョンを用いた動物の特徴量抽出を自動的,客観的に行うことを試み,得られた数値データを統計学的にカテゴリー分けを行った.共感行動の中でも最もプリミティブである「情動伝染」を手はじめに分割を試みた際には,本研究課題により開発したシステムにより発信個体と受信個体のそれぞれの行動が影響し合う様が観察できた.更により多様な行動が含まれるオープンフィールドにおいて見られる,行動の解析を行うことで行動解析の一般化を試みた.特徴量としてピクセル・ベースのCHLACを用い,オープンフィールド内における動物行動の分類を行ったが,この際,共感性などの社会行動が診断基準の一つとされる自閉症のモデル動物と行動比較を行うことで,健常行動の理解につなげることを試みた.まずは通常ビデオカメラで得られるだけの情報を収集し,これを認知カテゴリ(歩行,餌を食べる,グルーミング等)として分類することから始めた.実際にはビデオレートで撮影したビデオデータをCHLACで解析を行ったので,3フレーム(約10 ms)を一単位として行動解析を行い,これを二次カテゴリーにクラス分けすることで行った.こうすることにより一度小さな「手を動かす」などのモーションに分解し,その集合としての認知行動という行動のありようが可視化できるようになった.深度センサーの導入も試みたが,マウスやラットといった四足動物の行動理解には,一般的なカメラを用いた特徴量抽出に於いても比較的多くの情報が得られることが明らかとなったため,今回は一般カメラを用いて行うこととした.平成29年度が最終年度であるため、記入しない。平成29年度が最終年度であるため、記入しない。共感性の神経回路基盤の解明を目指し、一連の共感行動に関連した神経活動を同定する目的で、行動を小さなピースに分解し、同行動ピースと関連する神経活動の同定を試みている。まず初めに「共感行動」という一連の行動を小さなモーションに分割するために、コンピュータビジョンを用いて動物の特徴量を自動的、且つ客観的に同定し、これを統計学的にカテゴリー化した。共感行動の中でも最もプリミティブであると考えられる緊急回避行動を手始めに分割を試みた。ラットを用いて、回避行動中の活動をビデオカメラで捉え、混合因子分析法により行動解析を行った。このことは一連の「行動」が多くの未知のモーションを含み、今回の行動解析により今後の神経活動との関連を検討するために非常に有用であることが示唆される。現在までのところ、コンピュータビジョンを用いた特徴量抽出およびカテゴリー化に成功しつつあるため、それぞれのモーションの遷移確率等を誘導し利用することにより、以後起こりうる行動と、脳活動との関連を検討する。共感性の神経回路基板の解明を目指し、一連の共感行動に関連した神経活動を同定する目的で、行動を小さなピースに分解し、同行動ピースと関連する神経活動の同定を試みている。まず初めに「共感行動」という一連の行動を小さなモーションに分解するために、コンピュータビジョンを用いて動物の特徴量を自動的、且つ客観的に同定し、これを統計学的にカテゴリー化した。共感行動の中でも最もプリミティブであると考えられる「情動伝染」を手始めに分割を試みた。マウスを用いて、情動伝染活動中の活動をビデオカメラで捉え、多く平面で活動するマウスの活動をトラッキングにより同定し、重心の移動、体長(体幹の伸縮)、首の向きを主な特徴量として数値化を行った。これをノンパラメトリックベイズ法によりモデルを推定することにより、事前定義されていない行動を検出することが可能であることが明らかとなった。このことは「共感行動」という多くの未知のモーションが含まれる一連の行動を分解することに有効であり、今後の神経活動との関連を検討するために非常に有効であることが示唆される。ネズミは四足動物であるので、比較的平面上での活動が多く、情報からの撮影で多くの情報を得ることができた。しかし、この先トリやイヌ、サルやヒトの行動を同様に評価することを考えると、やはり3次元空間の中で特徴量抽出する手法を検討せざるを得ない。違う種間で共通の「共感行動」について議論をする必要が有るためである。そこで、3次元空間の中で動物行動の特徴量を抽出し、これをカテゴリー化するためにCHLAC法を用いた特徴量抽出を試み、その後注目すべき部分に絞っていくという一連の解析の流れを検討した。本学動物飼育施設が空調工事のために閉鎖されており、利用ができなかったこと、教授の退職により研究室の引っ越しや改装により手が止められたことにより若干の遅れを持って進んでいる。現在までのところ、CHLAC法を用いた特徴量抽出の再実装に成功しつつある。ネズミのみならず最終の目標の一つであるヒトの行動解析にも適応するためにヒトでの脳活動計測、視線計測の準備を進めている。光遺伝学に用いるウイルスベクタに関しては感染効率の上昇に務めた。共感性の神経回路基板の解明を目指し,一連の共感行動に関連した神経活動を同定する目的で,行動を小さなピースに分解し,同行動ピースと関連する神経活動の同定を試みている.

まず初めに「共感行動」という一連の行動を小さなモーションに分解するために,コンピュータビジョンを用いて動物の特徴量を自動的,且つ客観的に同定し,これを統計学的にカテゴリー化した.共感行動の中でも最もプリミティブであると考えられる「情動伝染」を手始めに分割を試みていたが,オープンフィールドといったより基本的な行動課題を課している間の行動の解析を試み始めた.手法はこれまでと同様であるが,平場である「オープンフィールド」に観察対象の動物を入れ,CVにより特徴量を抽出し,統計的にカテゴリー化を行った.観察条件,映像撮影条件などを詳細に決め,研究班内での共同研究を進めることで,様々な動物種への展開を試みている.トラッキングによる特徴量抽出は特許を取得済みであるが,これらの手法を今一度活用することによって空間的情報の把握も併せて行うことも試みている.今後の種間比較を視野に入れ,深度センサの導入を目指し必要な機材選定を行い,有効な特徴量とカテゴリーのあり方の検討を行ってきている.また,モデル動物として幾つかの神経疾患モデル動物を入手し,これらの動物における行動解析を行い,健常動物との比較から異常の在り方,正常動物の行動様式の理解を進める予定である.共感性の神経回路基盤の解明を目指し,一連の共感行動に関連した神経活動を同定する目的で,行動を小さなピースに分解し,同行動ピースと関連する神経活動の同定を試みている.神経計測に辺り,まず出口である行動の客観的分割を着実に進めていること,これと併せて光遺伝学で利用するウイルスベクタ等の分子ツールの確立を進めていること,計測デバイスの開発を共同研究により進めている.これらのことから概ね順調に進展していると考えられる.共感性の神経回路基盤の解明を目指し,一連の共感行動に関連した神経活動を同定する目的で,行動を小さなピースに分解し,同行動ピースと関連する神経活動の同定を試みている.初めに「共感行動」と一般に言われる一連の行動を小さなモーションに分解するために,コンピュータビジョンを用いた動物の特徴量抽出を自動的,客観的に行うことを試み,得られた数値データを統計学的にカテゴリー分けを行った.共感行動の中でも最もプリミティブである「情動伝染」を手はじめに分割を試みていたが,より多様な行動が含まれるオープンフィールドにおいて見られる,行動の解析を行うことで行動解析の一般化を行った.特徴量としてピクセル・ベースのCHLACを用い,オープンフィールド内における動物行動の分類を行ったが,この際,自閉症モデル動物との比較を行うことで,健常行動の理解につなげることを試みた.まずは通常ビデオカメラで得られるだけの情報を収集し,これを認知カテゴリ(歩行,餌を食べる,グルーミング等)として分類することから始めた.実際にはビデオレートで撮影したビデオデータをCHLACで解析を行ったので,10 msを一単位として行動解析を行い,これを二次カテゴリーにクラス分けすることで行った.こうすることにより一度小さな「手を動かす」などのモーションに分解し,その集合としての認知行動という行動のありようが可視化できるようになった.
子宮体癌幹細胞及び子宮内膜幹細胞の同定と新規分子標的治療の開発

ヒト月経血(月経1日目2日目)より回収した子宮内膜細胞におけるSP(side population)細胞の存在比率をフローサイトメトリーで検討したところ、およそ2%前後のSP細胞が存在していることが明らかとなった。またSP細胞と非SP細胞を用いてコロニーフォーメーションアッセイを行ったところ、SP細胞では効率よくコロニーを形成した。以上の結果よりヒト月経血より回収したSP細胞は自己複製能の高い細胞集団であることが明らかとなった。IL-1R(interleukin-1 receptor)、SDF-1の発現を免疫染色により検討したところ、SP細胞集団においてIL-1R、CXCR4を発現する細胞がわずかに認められた。組織幹細胞の同定に使用されるHoechst33342の取り込みの低い分画の細胞(side population cells、以下SP細胞)をフローサイトメトリー法により分離する方法を用いて、正常子宮内膜細胞株hEMでのSP細胞分画の分離を試みた。しかしSP細胞の存在割合は概ね1%以下と非常に少ないことが明らかとなった。次にhEMより多くのSP細胞を回収するための至適培養条件を見いだすために、基礎培地DMEMに加える血清、各種増殖因子の条件検討を行った。血清濃度を1%とし、それぞれ最終濃度10ng/mlとなるようにbFGF、TGFβ、TGFα、EGFを添加した培地を調製し、hEMを6日間培養した後にフローサイトメトリー法でSP細胞の割合を検討した。bFGF、TGFβ、TGFαを添加した細胞ではSP細胞の存在比率は0.010.05%であったが、EGFを添加した細胞ではSP細胞の存在比率は4.3%であった。現在までのところEGFを添加した際にSP細胞の割合が増加する理由は不明であるが、少なくともhEMのSP細胞を効率よく回収するには、EGFを添加した培地を用いる方がよいことが明らかとなった。このようにして回収したSP細胞に、Ras/ER経路に関わる遺伝子群(活性型K-Ras、HER2など)を導入し、SP細胞の存在比率に影響を及ぼすかどうかの検討を試みたが、hEMそのものの遺伝子導入効率が非常に悪いため、その効果を確認することは出来なかった。一方でヒト月経血(月経1日目2日目)より回収した子宮内膜細胞を5日間培養した後、hEMと同様の方法を用いてSP細胞の存在比率を検討したところ、およそ2%前後のSP細胞が存在していることが明らかとなった。このようにして回収したSP細胞と非SP細胞を用いてコロニーフォーメーションアッセイを行ったところ、非SP細胞では20日間培養後もほとんどコロニー形成を認めなかったが、SP細胞では効率よくコロニーを形成した。以上の結果よりヒト月経血より回収したSP細胞は非SP細胞と比べて自己複製能の高い細胞集団であることが明らかとなった。ヒト月経血(月経1日目2日目)より回収した子宮内膜細胞を5日間培養した後、hEMと同様の方法を用いてSP細胞の存在比率を検討したところ、およそ2%前後のSP細胞が存在していることが明らかとなった。さらに高効率でSP細胞を回収可能な培養条件の検討を進めたが、現状では2%前後の回収率に止まっており以後の遺伝子導入実験を開始するには至っていない。今後本研究を推進するための課題として、SP細胞維持に関わる因子や至適なマーカー分子の同定が、きわめて重要であり、その探索を進めているところである。以前の研究でhEMのSP細胞/non-SP細胞のマイクロアレイ解析で両者の遺伝子発現プロファイルを検討したところ、SP細胞においてIL-1R(interleukin-1 receptor)、SDF-1の発現が高いことが明らかになった。われわれはこれらの発現が上昇している分子がSP細胞内に存在する子宮内膜幹細胞のマーカーとなる可能性があると考えた。そこでhEMのSP細胞におけるIL-1R、SDF-1のレセプターであるCXCR4の発現を確認するために免疫染色を行い検討した。SP細胞においてIL-1R、CXCR4を発現する細胞はわずかに認められるが、non-SP細胞においては認められなかった。上記のSP細胞の回収率から考えてSP細胞内にIL-1R、CXCR4を発現する細胞がわずかにしか存在しないというのは妥当と思われるが、これらの分子を発現する細胞が本当に多分化能を有するのかということが今後の課題である。
人間環境の批評についての理論構築――居住者・観光者の環境美学――

本研究の目的は、人間環境の批評をより十全に説明する理論を構築することにある。この目的は1基礎研究、2個別研究、3事例分析の3つのステップを経て達成される。本年度は主に、12に関わる研究を進めた。【1について】:基礎研究に関しては、2018年3月に博士の学位を授与された博士論文を大幅に加筆・修正しつつ進めている。特に、美的経験、美的判断、美的性質、そして批評といった各概念の布置を丹念に検討し、本研究のオリジナルな議論を明晰に提示するための準備を進めている。この成果に関して、平成30年度中に公にできなかったが、現在準備中の博士論文を元にした書物に反映させるほか、学術論文としても平成31年度の前半に2本投稿する目処が立っている。【2について】:2の個別研究に関して、私は観光者と居住者という2つの立場に注目し、各々の立場に固有の美的経験およびそこから生起する美的判断が規範性を持つための条件を探っている。この研究方針そのものが英米系環境美学においては一定の新規性を有するものであるため、この方針の妥当性を検討する意味も含め、2018年7月にアアルト大学(フィンランド)にて開催された国際美学会中間大会において研究発表を行い、フィードバックを得ることができた。またこの学会での基調講演の内容とそれについての私見を含む報告文を、『フィルカル』Vol.3 No.2にて執筆した。続いて、特に観光者の美的経験・美的判断に関して、観光学の文献をサーベイしながら美学に立ち返り続けることで研究を進めた。この成果に関しては、2019年4月に開催される応用哲学会第11回年次大会において研究発表をしたのち、さらに内容を充実・洗練させて2019年7月に開催される国際美学会において発表する(査読を経て採択済み)。今年度は、まず1の基礎研究に目処をつけて2019年度に続く予定であった。しかし実際には、2の個別研究を進めつつ基礎研究を洗練させるほうがより生産的かつ独創的な理論を構築できるのではないかと考え、元の計画よりも先に2の研究に着手することとなった。そのため、1の研究に関する成果の公開が遅れている。しかし結果として、1と2の研究を同時並行的に進めることは、研究の進展を大幅に助けている。それゆえ、遅れの発生は認められない。とはいえ、全体の達成量としては、当初の予定以上の進展をしているとは言い難いだろう。2018年度に培われた研究成果を学術論文として発表することで、2019年度は1と2の研究を完成へと導き、2020年度の3の事例分析へと進んでいきたい。2019年度は、13の研究に関してそれぞれ次のような計画の元進めていく。1基礎研究:基礎研究に当たる研究、すなわち環境における美的経験で我々の諸感覚と活動の果たす役割に関しては、昨年度までの研究成果をまとめ、雑誌『美学』への投稿を目指す。2個別研究:観光者による環境批評に関しては、すでにその素地が出来上がっているため、これを発展させ最終的には7月に開催される国際美学会にて研究発表を行う。この原稿を元に、英語での論文化を計画している。居住者による環境批評に関しては、居住環境に対して感じる「親しみ(familiarity)」が美的性質であるかどうかという論点に焦点を絞り、親しみという美的概念の構造を描き出すことを目指す。この成果は、10月に開催される美学会での研究発表を行い、年度内には論文化を目指す。3事例分析:2020年度の研究を円滑に推進するため、2019年度のうちに開催される地域芸術祭に訪れ研究調査を行う。具体的には、あいちトリエンナーレ、瀬戸内国際芸術祭、岡山芸術交流、Reborn-Art Festivalなどを対象とすることを検討している。実地での調査に限らず、地域芸術祭をめぐる言説や批評に関しても渉猟する。

続いて、特に観光者の美的経験・美的判断に関して、観光学の文献をサーベイしながら美学に立ち返り続けることで研究を進めた。この成果に関しては、2019年4月に開催される応用哲学会第11回年次大会において研究発表をしたのち、さらに内容を充実・洗練させて2019年7月に開催される国際美学会において発表する(査読を経て採択済み)。今年度は、まず1の基礎研究に目処をつけて2019年度に続く予定であった。しかし実際には、2の個別研究を進めつつ基礎研究を洗練させるほうがより生産的かつ独創的な理論を構築できるのではないかと考え、元の計画よりも先に2の研究に着手することとなった。そのため、1の研究に関する成果の公開が遅れている。しかし結果として、1と2の研究を同時並行的に進めることは、研究の進展を大幅に助けている。それゆえ、遅れの発生は認められない。とはいえ、全体の達成量としては、当初の予定以上の進展をしているとは言い難いだろう。2018年度に培われた研究成果を学術論文として発表することで、2019年度は1と2の研究を完成へと導き、2020年度の3の事例分析へと進んでいきたい。2019年度は、13の研究に関してそれぞれ次のような計画の元進めていく。1基礎研究:基礎研究に当たる研究、すなわち環境における美的経験で我々の諸感覚と活動の果たす役割に関しては、昨年度までの研究成果をまとめ、雑誌『美学』への投稿を目指す。2個別研究:観光者による環境批評に関しては、すでにその素地が出来上がっているため、これを発展させ最終的には7月に開催される国際美学会にて研究発表を行う。この原稿を元に、英語での論文化を計画している。居住者による環境批評に関しては、居住環境に対して感じる「親しみ(familiarity)」が美的性質であるかどうかという論点に焦点を絞り、親しみという美的概念の構造を描き出すことを目指す。この成果は、10月に開催される美学会での研究発表を行い、年度内には論文化を目指す。3事例分析:2020年度の研究を円滑に推進するため、2019年度のうちに開催される地域芸術祭に訪れ研究調査を行う。具体的には、あいちトリエンナーレ、瀬戸内国際芸術祭、岡山芸術交流、Reborn-Art Festivalなどを対象とすることを検討している。実地での調査に限らず、地域芸術祭をめぐる言説や批評に関しても渉猟する。
教育・保育・福祉関係者が使える発達性協調運動障害評価と日常生活介入の開発と普及

発達障害児において,心理社会的問題に加えて身体運動面の障害が,日常生活を送っていくための大きな障壁になっている.有効なアプローチは,日常生活場面で子ども達の援助を行う教育・保育・福祉関係者が,各子どもの難しさを評価し,各子どもに合わせた有効な日常生活でのアプローチを工夫して実施することである.本研究の目的は,教育・保育・福祉関係者が使用できる協調運動障害のある子ども達の評価表を作成し,その評価を基にした日常生活の中で実施できる有効なアプローチを開発して普及させることである.発達障害児において,心理社会的問題に加えて身体運動面の障害が,日常生活を送っていくための大きな障壁になっている.有効なアプローチは,日常生活場面で子ども達の援助を行う教育・保育・福祉関係者が,各子どもの難しさを評価し,各子どもに合わせた有効な日常生活でのアプローチを工夫して実施することである.本研究の目的は,教育・保育・福祉関係者が使用できる協調運動障害のある子ども達の評価表を作成し,その評価を基にした日常生活の中で実施できる有効なアプローチを開発して普及させることである.
ＡｍｏｔとＬａｔｓの双方向制御によるＨｉｐｐｏ経路活性化機構の解明

Hippo経路は多細胞システムの構築と調和おいて重要な役割を担っている細胞シグナル経路であるが、マウス着床前胚におけるHippo経路制御機構についてはまだ不明な点が多い。本研究では、細胞接着関連分子であるAngiomotin (Amot)とHippo経路の中心的キナーゼであるLatsとの相互作用に注目して解析を行った。AmotはLatsによるリン酸化コンセンサス配列を持ち、この配列が実際にLatsによるリン酸化を受けることを明らかにした。リン酸化Amotはアドヘレンスジャンクションに局在し、Latsと相互作用することでHippo経路を活性化することを明らかにした。個体の発生において組織・器官が正しく形成されるには細胞間のコミュニケーションが重要である。Hippo経路は細胞間コミュニケーションを制御する中心的なシグナル経路であるが、その活性化機構には未だに不明な点が多い。私は、細胞接着関連分子であるAngiomotin (Amot)がHippo経路の中心的キナーゼであるLatsと相互作用することを見いだしており、両者が互いの活性をコントロールするという仮説を提唱している。本研究は細胞接着によるHippo経路活性化機構の解明を目的として、マウス着床前胚のAmotおよびLatsによるHippo経路による細胞分化制御について明らかにする。H25年度は、Hippo経路の中心的キナーゼであるLatsの着床前胚における局在と活性化状態についての解析を進めた。Lats1の局在は市販の抗体を用いた免疫染色、Lats2の局在はHAタグを付加したLats2を着床前胚に発現させ、HAタグの免疫染色によってタンパク局在を解析した。いずれの方法でも、接着結合での局在に加え、着床前胚の外側に位置する極性細胞の頂端側での局在が顕著に検出された。接着結合にはAmotタンパクも局在することから、細胞接着情報が接着結合で接着分子からAmot, Latsへと伝達されるという仮説が支持された。一方、着床前胚の細胞極性はAmotを頂端に引きつけると同時に接着結合から排除することでHippoシグナルを抑制するが、Latsも頂端に顕著に局在していた。本結果はAmotに加えLatsの局在も細胞極性によって制御されており、これが細胞極性によるHippoシグナル抑制の分子基盤であることを明らかにするものである。Hippoシグナルは栄養外胚葉分化に関与する転写活性化因子Yapの働きを抑制する。そのため、Hippoシグナルが弱い外側細胞ではYapが働いて栄養外胚葉へと分化するのに対し、Hippoシグナルの強い内側細胞では栄養外胚葉への分化が起こらず、多能性を維持した内部細胞塊が形成される。この内外でのHippoシグナルレベルの違いは外側細胞が持つ細胞極性がHippoシグナルを抑制することで形成される。これまでHippoシグナルと細胞極性による細胞分化の解析は胚盤胞を用いて行ってきたが、細胞分化は8細胞期から16細胞期へと進行する頃に始まる。従って、Hippo経路による細胞分化制御の全容を解明する上で8-16細胞期におけるHippo経路の制御機構を明らかにすることが重要であり、本年度は8-16細胞期に焦点を当てて解析を行った。8-16細胞期のHippo経路も胚盤胞期と同様に細胞極性による抑制を受けるかを調べるために極性破壊を行った。16細胞期でも胚盤胞と同様に極性破壊によるHippo活性化が起こったが、Yapの機能阻害は胚盤胞期と比べ弱かった。また、胚盤胞期では極性破壊に伴い外側細胞頂端側にみられる微絨毛が消失したが、16細胞期では極性破壊をしても微絨毛は残った。微絨毛は主にF-アクチンからなる構造であるが、F-アクチンはHippoシグナル抑制に関与することが示唆されている。従って、極性破壊によるYap機能阻害の胚盤胞期と16細胞期における違いは微絨毛の有無の違いによるものであると示唆された。微絨毛にはHippo経路活性化に関わるAngiomotin(Amot)の局在も見られるがF-アクチンと結合したAmotはHippo経路を活性化できないと考えられる。昨年度の研究で明らかにされたようにHippo経路の中心的キナーゼであるLatsも微絨毛と同様に頂端側に局在しているが、微絨毛を構成するF-アクチンはAmotとLatsの相互作用に干渉することでAmotによるLatsの活性化を阻害しているのかもしれない。Hippo経路は多細胞システムの構築と調和おいて重要な役割を担っている細胞シグナル経路である。私は、Hippo経路が着床前胚の細胞分化を制御していることを明らかにしてきたが、着床前胚におけるHippo経路制御機構についてはまだ不明な点が多い。本研究は、細胞接着関連分子であるAngiomotin (Amot)とHippo経路の中心的キナーゼであるLatsとの相互作用に注目し、16細胞期のマウス胚においてAmot-LatsによるHippoシグナル活性化が細胞極性や微絨毛によって抑制的な制御を受けていることを明らかにした。また、16細胞期胚の形成において、細胞極性が細胞分裂軸の方向性を制御することで細胞配置の確立に関与していることを明らかにした。H26年度までの研究は、分化初期段階におけるHippo経路の制御に焦点を当てて解析を行った。

細胞極性を実験的に破壊し、16細胞期で解析したところ、初期胚盤胞と同様に外側細胞でのHippo経路の活性化がみられたものの、栄養外胚葉の内部細胞塊への分化転換は限定的だった。また、胚盤胞期では極性破壊に伴い外側細胞の頂端側に存在する微絨毛が消失したが、16細胞期では極性破壊をしても微絨毛は残存した。微絨毛を構成しているF-アクチンがAmotによるLatsの活性化を阻害していると思われる。最終年度は16細胞期胚の細胞極性による細胞配置の制御に焦点を当てて解析を行った。頂端側の極性制御因子を阻害すると内側に配置される細胞数が減少することが分かった。内側細胞は非対称分裂によって生じることが知られているが、頂端側の極性制御因子を阻害すると非対称分裂が阻害され、その結果内側の細胞数が減少することが明らかとなった。16細胞期の細胞配置は32細胞期でのHippo経路による位置依存的な細胞分化の礎となるものであり、本研究は細胞極性が着床前胚の細胞分化の初期から重要な役割を担っていることを明らかにした。Hippo経路は多細胞システムの構築と調和おいて重要な役割を担っている細胞シグナル経路であるが、マウス着床前胚におけるHippo経路制御機構についてはまだ不明な点が多い。本研究では、細胞接着関連分子であるAngiomotin (Amot)とHippo経路の中心的キナーゼであるLatsとの相互作用に注目して解析を行った。AmotはLatsによるリン酸化コンセンサス配列を持ち、この配列が実際にLatsによるリン酸化を受けることを明らかにした。リン酸化Amotはアドヘレンスジャンクションに局在し、Latsと相互作用することでHippo経路を活性化することを明らかにした。本年度は、16細胞期における細胞極性によるHippo経路および細胞分化制御に焦点を当てて解析を行った。16細胞期はそれまで均質だった各割球が栄養外胚葉と内部細胞塊分化へと分化を始める段階であり、この段階でのHippo経路制御は胚盤胞期のように完全に細胞極性依存的ではなく、微絨毛のF-アクチンによる細胞極性非依存的な制御を受けていることを明らかにした。F-アクチンによるAmot-Lats相互作用への干渉は着床前胚の細胞分化制御に限らずHippo経路が関与する細胞増殖・細胞死の制御および細胞癌化の解明にもつながるものであり、ほ乳類胚を用いた個体レベルの解析としては最も扱いが容易である本実験系のメリットを生かして成果を挙げることができた。発生生物学16細胞期のHippo経路制御機構がこれまで研究対象としていた胚盤胞期と異なる制御を受けていることが明らかになったので、H27年度は引き続き16細胞期を中心とした解析を行う。16細胞期において細胞極性を制御するPar-aPKCシステムの各構成因子の機能阻害を行い、Hippo経路と細胞分化への影響を解析し、16細胞期における細胞極性依存的および非依存的制御についてより詳細に検討する。本年度は予定通り、Latsの局在と活性化状態の解析を主に行った。固定胚を用いた解析で当初に想定していた以上の研究の進展があった一方、Lats活性のライブイメージングのためのツールとして作製したFRETプローブは機能せず、今後の課題として残されている。したがって、総合的にはおおむね順調に進展しているといえる。H26年度は東京医科歯科大学実験動物センターに異動して1年目であったため、これまで未経験であったセンター業務の習熟にほとんどの時間を費やすこととなった。
韓国における八景と九曲による景観創出構造の研究

「八景」に関しては、李朝18世紀詩画帖『関東十境』の詩歌分析と現地調査を中心にして学会発表(1)および査読論文投稿中(1)がある。「九曲」に関しては、詩歌資料と現地調査分析を中心にした事例研究の学会発表(1)と歴史的資料文献の分析による学会発表(1)がある。「八景」と「九曲」に関しては、視点場という共通した枠組みから論じた学会発表予定(1)がある。本研究の目的は韓国における伝統的な景観構成システムである「八景」と「九曲」の構造を主として李朝時代の詩歌や絵画などの文献資料と対象地の現地調査をとおして現象学的に分析することであるが、18年度は前者「八景」である韓国東海岸の「関東八景」と楼亭建築との緊密な関係分析に重点を置いた。その成果の一端は「<関東八景>と楼亭の欄干」と題して、日本建築学会大会の建築史・意匠部門で発表した。ソウル大学奎章閣所蔵の詩画帖「関東十境」に含まれる66首のおよそ1/4にあたる詩文に登場する建築的な部位としての「欄干」に着目し、その現われ方、捉え方を分析した。得られた主な知見は、1・欄干が楼亭を代表的(提喩的)に表わすこと、すなわち楼亭の場所的な性格を集約的に現わす建築的部位であること。2・欄干は人が「倚る」ものであると同時に周囲の自然(海、陽、風光、音など)が「倚る」ものとして身体性豊かに捉えられていること。3・関東八景の各場所が必ず楼亭をもつのは、上述のように欄干の身体性によって周囲自然と交流しようとする意図があること、などであった。この小論は、李朝期山水画における楼亭欄干へ人びとが「倚る」姿勢の分析考察を加えてひとつの纏まった論考(審査論文)にする予定である。八景に関する調査は、現地調査としては関東八景以外にも研究計画のとおり三亀亭八景(慶尚北道安東)や檗渓八景(檗渓九曲も並存。京畿道楊平郡)でおこない、八景に関する書籍や文献資料の収集分析につとめた。九曲に関しては、現地調査としては研究計画のとおり華陽九曲(忠清北道)、仙遊九曲(慶尚北道)および新たに双龍九曲(慶尚北道)でおこなった。関連の文献資料収集は、主として韓国国会図書館でおこなった。九曲に関する小論は「韓国の九曲に関する一考察」と題して、19年度には日本建築学会大会(九州)で発表の予定である。本研究の目的は、韓国における伝統的景観構成システムである「八景」と「九曲」の構造を現地調査と李朝時代の文献資料をとおして現象学的に分析することにある。19年度は「九曲」の分析に重点をおいた。その成果の一端は「韓国の九曲に関する一考察」と題し日本建築学会大会の建築史・意匠部門で発表した。1、「九曲」は、渓流に沿って9つの景勝地を設定し、遊覧するものであるが、日本では存在せず、韓国独自の儒教文化を背景に展開したものであることを踏まえ、まず具体的な輪郭を描出した。2、九曲の構成意図・構成原理に関して、韓国の多くの研究者が主張する「修養の階梯」説(儒学的な「道」の根源を探り求めて各曲を階梯的に進み行くという構成説)を紹介した。3、「修養の階梯」説に対する批判検討を、『畏斎集』(丁泰鎮)に載る漢詩「仙遊九曲」の分析を通して行なった。検討の結果として九曲構成の基本的構造は、根源を最終の曲に設定して根源を最終の曲に設定して階梯を漸次遡り行く動性と、各曲のその場に根源を求める動性が両義的にはたらいていることが指摘できたのである。次に大きな歴史的視野から九曲の構造を分析する必要に迫られ、歴史上に屹立する二大儒学者(李退渓・李栗谷)の九曲に関する文献から分析を試みた。この論考は「韓国の九曲-師へ遡行する風景」と題して既に投稿済みであり、20年度日本建築学会大会(広島9月)で発表の予定である。日本にも中国にもない韓国独自の伝統的景観構成としての「九曲」の構造を明らかにする研究は、韓国でもはじまったばかりであり、韓国固有の伝統的な景観文化を明らかにするとともに、現代の景観構成に対しても新たな示唆を与えうると考えられる。本研究の目的は、韓国の伝統的景観構成システムである「八景」および「九曲」の構造を現地調査と文献資料をとおして分析することにある。本年度は、「九曲」構造の独自性の分析と「八景」・「九曲」に関する視点場の分析に重点をおいた。成果の一端は「韓国の九曲一師へ遡行する風景」と題し、日本建築学会大会(2008年9月広島大学)の建築史・意匠部門で発表。

李朝時代に屹立する二大儒学者(李退渓・李栗谷)の九曲に関する文献から分析を試みた。以下がその概要。韓国の多くの研究者は、九曲(詩歌)を「出水詩」(叙景詩)と「道造詩」(精神的な修養の階梯性を表現した詩)の二分的理解から出発するが、これらの論者が見逃している重要な点は、何よりも韓半島の九曲が、景観・風景のなかに「師」(李朝の儒者にとって師は、まずもって朱熹であり、また自らが属する道統の祖である大儒者李退渓・李栗谷などであるが)の思想・生き方の全体を志向する点である。この点こそが中国朱熹による「武夷九曲」と韓半島の九曲を隔てているものである。韓国の今日の論者は朱熹による「武夷九曲」と自らの国の九曲をあまりにも連続的に捉えているが、中国朱熹による「武夷九曲歌」は、決して「師へ遡ろうとする風景」ではない。上のような観点・前提からはじめて韓国における九曲の独自な構造を考察できることを論じた。日本にも中国にもない韓国独自の伝統的景観構成としての「九曲」に関して、成立事情とその構造を明らかにする研究は、韓国でもはじまったばかりであり、韓国固有の伝統的な景観文化を明らかにするとともに、現代の景観構成に対しても新たな示唆を与えうると考えられる。視点場という観点から、包括的に「八景」・「九曲」を考察した論考として、「景と曲における視点場」と題して既に投稿済みであり、21年度日本建築学会大会(東北学院大学8月)で発表の予定である。
気流阻止法を用いた,発声時の声門下圧および声門の効率の評価に関する研究

気流阻止法を用いて、正常者における発声時の呼気圧,呼気流率と声の強さの関係を検討した。対象は成人男子30名、女子36名であった。発声条件は、声の高さとして、各人の話声位、および5度高い地声とした。声の高さはピアノの音で与えた。声の強さは、中等度,弱い声,強い声の3種類とし、各人の主観的判断にまかせて発声させた。測定は、各発声時の声の基本振動数(Hz),声の強さ(dB SPL),呼気流率(ml/sec),呼気圧(mm【H_2】O)の4種の値の同時測定である。結果は以下の通り。1)声の強さは流量計開口部から20cmの距離で6090dB SPLの範囲に分布し、話声位、5度高い声の間に差はなかった。2)呼気圧は、上記の声の強さの範囲で男女共に水柱20mm150mmの範囲に分布し、話声位、5度高い声の間に差はなかった。声の強さの増加と共に呼気圧は上昇した。3)呼気流率は、男女共に毎秒70350ml/Secの間に分布し、声の高さによる差はなかった。また声の強さを増しても、呼気流率は必ずしも増加しなかった。4)声の強さと呼気圧,声の強さと呼気流率,それぞれの比を計算すると、この値は、声の強さと共に一定の増加を示していた。すなわち、呼気圧,呼気流率共に、声門における呼気-音源の変換の効率が、声の強さと共に変化することが示された。このような効率と強さの関係を考慮して、病的症例の検査結果の評価を行なうべきである。5)呼気圧と声門下圧との関係は、呼気流率が少ない時はその差が無視されるが、呼気流率が増加した場合は、適当な補正により、呼気圧から声門下圧を推定することが可能である。結果は以下の通り。
12-リポキシゲナーゼの病態生理機能に関する基礎的研究

アラキドン酸の12位に酸素を添加する12-リポキシゲナーゼは,血管平滑筋の遊走,腫瘍細胞の転移,神経情報伝達,アルドステロン分泌などに関与していることが示されている。これまでヒト血小板およびラット松果体の12-リポキシゲナーゼのcDNAをクローニングし,そのアミノ酸配列から12-リポキシゲナーゼには『血小板型』および『白血球型』の2種類のアイソフォームが存在することを明らかにした。今回この酵素の病態生理機能を明らかにする目的で,酵素のcDNAの発現と精製,抗体の作製とそれを用いた酵素の組織分布に関する基礎的研究を行った。ラットの12-リポキシゲナーゼcDNAを制限酵素で切断し,tacプロモーターを持つ6個のヒスチジン配列の下流に組み込んで発現ベクターを構築した。この発現ベクターで大腸菌を形質転換し,IPTGの添加によって酵素の発現を誘導した。この大腸菌で発現された12-リポキシゲナーゼのアミノ末端には6個のヒスチジンが付加されているので,ニッケルなどの金属イオンをキレートする性質をもっている。この性質を利用して,ニッケル-テトラ酢酸(NTA)アガロースを用いたアフィニティークロマトグラフィーで,12-リポキシゲナーゼ蛋白を均一に精製することができた。精製した酵素蛋白を抗原としてウサギを免疫してポリクローン抗体を調整した。この抗体を用いた免疫組織化学によって,肺胞マクロファージ,膵臓ランゲルハンス島細胞,副腎皮質,一部の神経節細胞に酵素が存在していることが明らかになった。