hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
大規模レセプトデータベースによる重症インフルエンザ発症要因に関する臨床疫学研究

本研究は(1)インフルエンザウイルスに関連する死亡と入院の状況を国ベースで調べ、(2)毎年のインフルエンザウイルスの流行状況とその年のワクチンの株と使用量、個人の抗インフルエンザ薬の使用状況からそれらのインフルエンザウイルス関連の死亡と入院への寄与を明らかにし、さらに(3)外来での予防的な抗生剤の使用がインフルエンザウイルス感染症に関連する入院を減らしているかを検討することを目的としている。本研究の1番目の目的である、インフルエンザ罹患に伴う重症化率の研究論文を英文誌に投稿し、現在審査を受けている。当初は重症化アウトカムとして死亡を含めることにしていたが、レセプトデータでは死亡を正確に把握できないことが判明し、重症化として(a)急性呼吸困難(b)肺炎(c)急性呼吸窮迫症候群(ARDS) (d)熱性けいれん(e)脳症・脳炎を扱い、インフルエンザ罹患の中でのそれらの入院率を算出した。レセプトデータではしばしば、治療を行う目的で実際の病名とは異なる「レセプト診断名」が付けられる。この研究では、そのバイアスを回避する目的で、レセプトデータに含まれている検査に用いる材料、本当にその疾患である場合に行われる特異的な治療により、インフルエンザ罹患に伴う重症化として本研究で取り扱っている(a)急性呼吸困難と(e)脳症・脳炎を把握することに努めた。レセプトデータの入手に時間を要したこともあり、本研究の2番目、3番目の目的である抗インフルエンザ薬の使用と重症化、抗生剤の使用と重症化についての研究の進捗は遅れている。解析に必要なデータとそのための資料は入手した。分析を続け、それらの結果も併せて研究論文として発表したいと考えている。日本人がインフルエンザウイルスに感染した際にの重症化率を計算し、本来ウイルスに効果が無い抗生剤、抗インフルエンザ薬が重症化の予防に役立っているかを検討する目的で本研究を行った。日本人インフルエンザ患者の1.0%が入院し、男性に呼吸器系合併症と熱性けいれんが多いことが示された。0-5才児は肺炎リスクが高く、脳炎/脳症は、乳幼児で多いという訳ではなく、子どもでその合併率と年齢に関連はみられなかった。厚生労働省の審査分科会で承認されれば、本年度11月からレセプトデータと先に収集したインフルエンザワクチン株とそれらの使用状況のデータを合わせて、本研究課題のパート(1)・(2)の解析を行い、発表と公開する。続けて課題のパート(3)である、外来での抗生剤の使用がインフルエンザウイルス感染症に関連した入院を実際に予防しているかの解析を進め、次年度での発表を目指す。解析モデルの開発はおおむね順調に進んでいる。データからインフルエンザウイルス感染による入院と死亡を抽出し、これらモデルを適用して解析し、本年度内に発表と公開を行う。糖尿病の疫学研究計画では、私企業よりレセプトデータを取得する事を予定していた。同様の、より日本人を代表するレセプトデータを厚生労働省から取得できる見込みとなったので、国に申請する事に変更した。レセプトデータを借り受ける契約を平成29年度に行うことになったため、平成28年度の予算は持ち越しとなった。本研究から派生する研究の件数が増加する見込みである。
糖尿病性動脈硬化は歯髄石灰化の誘発因子となるか?

30週齢以降に糖尿病の発症が確認され,30週齢では糖尿病ラットの歯髄内に粒状の石灰化物,歯根部の象牙前質の肥厚が認められたが,動脈硬化巣は確認できなかった。OPNは発現していたが石灰化物周囲に特異的ではなく,正常対照ラットとの著明な差はなかった。40週齢では,10週間のコレステロール食投与において血中総コレステロール及びLDLコレステロールの有意な上昇が確認され,脂肪肝も認められた。また糖尿病ラット(標準食群およびコレステロール食群)の歯髄内に粒状の石灰化物が著明に見られ,歯根部の象牙前質の肥厚も増加した。OPNは石灰化物周囲に特異的ではなかったが,歯根部で著しい発現が認められた。ただし標準食群とコレステロール食群の間での歯髄内変化に大差は認められず,また共に胸部大動脈と歯髄内血管に動脈硬化巣は確認できなかった。一般的にラットは動脈硬化抵抗性であるが,今回2型糖尿病自然発症ラットにおいても胸部大動脈や歯髄内血管に動脈硬化巣は確認できなかった。今回,高血糖状態における歯髄内石灰化物の形成と歯髄細胞のOPN産生との関連性,歯髄内血管変化と血管内皮細胞のOPN産生との関連性を,有意差をもって示すことはできなかった。しかし,糖尿病では歯根部の象牙前質の肥厚,その付近のOPN産生が増加していたことより,歯根部歯髄細胞においては高血糖状態がOPN産生を促し象牙前質の形成が進んだ結果,歯根部歯髄が狭小になる可能性が示された。歯髄内のVEGFは,正常対照ラットと糖尿病ラット共に強く発現し著明な差はなかった。糖尿病患者の歯周組織ではVEGFの発現が増強するとの報告があり,また健常歯髄でもVEGFが発現し不可逆性歯髄炎ではその発現が増強するとの報告がある。しかし糖尿病の歯髄での報告はなく,今回の糖尿病の歯髄におけるVRGF発現が,歯周組織や網膜などとは異なるという新しい知見が得られた。(796字)2型糖尿病を自然発症するOLETFラットと正常対照としてLETOラットを用い,OLETFラット群,OLETFラット・コレステロール食群,LETOラット群およびLETOラット・コレステロール食群の4群に分けた。30週齢および40週齢に被験ラットの体重測定,血糖値の測定および心臓採血を行った後,顎骨および胸部大動脈を採取し,10%中性緩衝ホルマリン液にて浸漬固定した。採取した血液は血清分離し,総コレステロール,HDLコレステロール,LDLコレステロール,トリグリセリドおよび遊離脂肪酸を測定した。ラット顎骨はX線画像計測システムMIF-100(日立メディコ社)を用いて臼歯部のCT画像を撮影した後,4週間脱灰し,通法に従いパラフィン切片を作製した。また,非脱灰の胸部大動脈を同様にパラフィン切片を作製した。組織切片はヘマトキシリン・エオジン(HE)染色を行い,また抗オステオポンチン(OPN)抗体による免疫染色も行った。30週齢のラット空腹時血糖値を調べた結果,OLETFラットに糖尿病の発症が確認された。30週齢では正常対照群に比較してOLETFラットの歯髄中に石灰化物の存在が認められ,歯根部の象牙前質の肥厚も認められた。一方,OPNの発現では正常対照群との問に著明な差は認められなかった。40週齢においては,両コレステロール食群に脂肪肝が認められ,特にOLETFラット・コレステロール食群では血中総コレステロールおよびLDLコレステロールの著明な上昇が認められた。40週齢OLETFラットでも歯髄中に石灰化物の存在が認められ,歯根部の象牙前質の肥厚も増加していた。さらに40週齢OLETFラットでは歯根部において著しいOPNの発現が認められた。以上より,2型糖尿病ラットにおいて歯髄中の石灰化物形成と歯根部の象牙前質の肥厚が亢進することが本実験から明らかとなった。

しかし,糖尿病では歯根部の象牙前質の肥厚,その付近のOPN産生が増加していたことより,歯根部歯髄細胞においては高血糖状態がOPN産生を促し象牙前質の形成が進んだ結果,歯根部歯髄が狭小になる可能性が示された。歯髄内のVEGFは,正常対照ラットと糖尿病ラット共に強く発現し著明な差はなかった。糖尿病患者の歯周組織ではVEGFの発現が増強するとの報告があり,また健常歯髄でもVEGFが発現し不可逆性歯髄炎ではその発現が増強するとの報告がある。しかし糖尿病の歯髄での報告はなく,今回の糖尿病の歯髄におけるVRGF発現が,歯周組織や網膜などとは異なるという新しい知見が得られた。(796字)
遺伝子診断に内在する倫理的・法的・社会的諸問題に関する日米比較

本年は、日本に優生学が導入、支持され、遺伝学へ変遷した歴史的考察を行ない以下の考察を行なった。1.福沢諭吉に始まる優生学は、明治維新という社会改革の喚起されているものの、以降の思想家のほとんどは生物学あるいは進化学という学問を出発点とする。2.諸外国と同様に日本において、ダーウィンの進化論は優生学の根拠づけに大きな役割を果たし、とくに宗教的背景が希薄な日本においては、文明思想として積極的に受け入れられた。3.ドイツあるいはアメリカ合衆国で優生攻策が本格化するのは第一次大戦後であるのに対し、日本では第二次大戦後である。日本の優生学の発展は、戦争で多くの命が失われた結果、優良な生命を回復させ、国の復興や成長をめざすという社会的背景が大きな役割を果たしている。4.日本の優生学で特徴的であるのは、皇室崇拝を詠う日本独特のナショナリズムである。5.日本において「優生」という言葉は、タブー視されたものではなく、公然と極最近まで使用されていた。6.日本に導入された進化学は、獲得形質の遺伝の解釈によって、「生まれ」と「育ち」のいずれを重視するのかという点で変化している。とくに獲得形質の遺伝を認めないヴァイスマン説に傾倒するにつれて、「不適者」への消極的優生学に結びつく傾向がある。7.2002年に施行された「健康増進法」では、健康を保持することが国民の責務となった。この健康の概念は、今後遺伝子レベルで解釈される可能性もある。国家による健康の義務づけは、個々人の内なる優生思想を助長する可能性がある。遺伝子診断に基づく治療の概念が論点とされたKatskee v. Blue Cross/Blue Shield of Nebraskaにおいて、ネブラスカ州最高裁判所は、乳癌-卵巣癌症候群と診断された原告の状態は「illness」に該当し、予防的臓器切除を治療と認定した。遺伝的知見の増大は、従来の疾病概念を拡大する可能性もしくは否定的価値を付与する可能性がある。2.遺伝医療における医師の警告義務遺伝性疾患のリスクのある人々への医師の警告義務が論点となったPate v. Threlkelにおいて、フロリダ州最高裁判所は、医師の警告義務は、患者に警告することにより果たされるであろうと判決した。他方、Safer v. Packにおいて、ニュージャージー州控訴裁判所は、医師には遺伝性疾患のリスクを持つ血縁者に警告する義務があると判決した。法的見地から、医師の警告義務の及ぶ範囲と守秘義務の例外としての正当化要件を明確にする必要がある。3.遺伝情報に基づく米国の健康保険に関する差別の実情と連邦法・州法の対応米国で報告された健康保険の加入に関する差別の事例とその連邦と州の対応について検討した。連邦法を補充する州法には、遺伝の概念定義の不一致、確定診断のための診断の取扱いに関する不一致、および家族歴へのアクセスや家族の保護に関する不一致等がある。今後、多因子疾患への遺伝子の関与が解明されることを前提とし、遺伝情報に基づく差別的な取扱いを規制することと、逆選択による保険料の引き上げや保険市場の不安定化による無保険者の増加との均衡を図る政策が必要である。なお、本論文は、平成14年度受託研究「バイオ事業化に伴う生命倫理問題等に関する研究」(代表蔵田伸雄)報告書に掲載予定である。1.遺伝医療における医療倫理モデルを検討した。遺伝技術の応用について、個人に対する遺伝子検査など個人の利益のためになされるもの(医科もしくは臨床遺伝学)と遺伝子スクリーニングなど集団全体の遺伝状態を識別し、予防・改善を図るためのもの(公衆保健遺伝学)に分け、その目的と実践の相違を検討した。その結果、基本的に前者に対しては、個人の自律と意思決定を尊重した基本権モデルが適用され得るが、社会に対しては「連帯」概念を尊重した公衆保健モデルが適用され得る。さらに、社会では「連帯」概念によって、他方家族では「相互依存」概念によって、個人の利益が限定される場合あるいは個人の利益よりも集団の利益が優先される場合がある。公衆衛生モデルについては、その功利主義的で結果主義的な結論を導きやすい欠点があるが、それを最大限回避するために平等な機会を保証するなど、個人に対する社会的不利益を回避するシステムが重要である。2.英米独を中心とする優生学の歴史を回顧し、現代遺伝学につながり得る問題の射程について検討した。優生学の起源と発展について、英米独を代表とする主流派優生学と改革派優生学および多様な優生学についてまとめ、さらに進化学と優生学、遺伝学の関係性について考察した。多くの優生学に共通することは、第一に、その背景に「退化」や「逆選択」につながるおそれがあったことである。これは当時の進化学をはじめとする科学的知見に大いに影響され、優生学はその必要に迫られた問題を解決するための方策として用いられた。第二に、人間の行動の特性について「遺伝」という概念が持ち込まれたことであり、現代に通じるものがある。遺伝学という科学が人類にとって大きな恩恵をもたらすであろう近未来は、優生学の歴史にみられたように、人間に遺伝的な「不適者」という烙印づけをする可能性を秘めた時代として認識することが重要である。

2.諸外国と同様に日本において、ダーウィンの進化論は優生学の根拠づけに大きな役割を果たし、とくに宗教的背景が希薄な日本においては、文明思想として積極的に受け入れられた。3.ドイツあるいはアメリカ合衆国で優生攻策が本格化するのは第一次大戦後であるのに対し、日本では第二次大戦後である。日本の優生学の発展は、戦争で多くの命が失われた結果、優良な生命を回復させ、国の復興や成長をめざすという社会的背景が大きな役割を果たしている。4.日本の優生学で特徴的であるのは、皇室崇拝を詠う日本独特のナショナリズムである。5.日本において「優生」という言葉は、タブー視されたものではなく、公然と極最近まで使用されていた。6.日本に導入された進化学は、獲得形質の遺伝の解釈によって、「生まれ」と「育ち」のいずれを重視するのかという点で変化している。とくに獲得形質の遺伝を認めないヴァイスマン説に傾倒するにつれて、「不適者」への消極的優生学に結びつく傾向がある。7.2002年に施行された「健康増進法」では、健康を保持することが国民の責務となった。この健康の概念は、今後遺伝子レベルで解釈される可能性もある。国家による健康の義務づけは、個々人の内なる優生思想を助長する可能性がある。
MRI用マグネットのための新酸化物超伝導体線材の開発

MRIの超伝導マグネット用の線材としては高い超伝導転位温度T_cをもった物質が望まれている。我々は,その線材の候補となる物質として酸化物超伝導体が適切であると考え,現在までに報告されている物質を越える優れた超伝導特性を備えた新しい酸化物超伝導体の合成に関する基礎研究を行ってきた。初年度であるH14年度には,ホールのドーピング等の処理無しで高いT_cを示すRu系の酸化物超伝導体群に着目し,この物質群と同じRu-Oブロック層をもつ新物質を探索した。その結果,Ru-Sr-Ln(Ce)-Cu-O系(Ln=Sm, Eu, Gd)で超伝導を示すRu系1232相の合成に世界で初めて成功し論文とした。この物質は,RuO層に由来する強磁性をも示す。この物質の場合,Lnのイオン半径が小さくなるにつれて結晶の格子定数も小さくなるが,T_cはそれに反して増大し,LnをGdとした場合に最大となることが明らかとなった。H15年度は,この格子定数とT_cとの相関に着目し,Ru-Sr-Gd(Ce)-Cu-O系1232相のRuをイオン半径の大きなNbで置換する実験を行った。その結果,置換量の増加とともに格子定数が増大し,逆にT_cは低下するという事実を発見し論文とした。さらにこのRu-Sr-Gd(Ce)-Cu-O系の1232相でGdを同じ価数でイオン半径がGdより小さなDy, Hoと大きなSmで部分置換した試料をそれぞれ作製しT_cの変化を調べた。その結果,予想通りGdよりイオン半径が小さなDy, Hoを部分置換した試料のT_cは増大しするという実験事実を得た。これは,超伝導CuO_2面を含むペロフスカイトブロックと例えば螢石型ブロックとが積層するとき,それらの間の整合性に由来するストレスが,その物質のT_cの高低を左右する要因の一つであることを示唆する重要な発見であり,現在論文の作成中である。またBi-Sr-La-Cu-O系ではSr^<2+>とLa3^+のイオン半径がほぼ等しいために2212相は作製できないとされていたが,BiをPbで置換することにより同相の合成に初めて成功し,論文とした。これは,構成元素のイオン半径の制御で意図する相の作製が可能となるという重要な発見である。酸化物高温超伝導体では,キャリア供給層として電荷溜の役割を果たすブロッキングユニットが非常に重要な役割を果たす。現在のところ発見されている高温超伝導体の同ユニットは,Bi, Tl, Pb, Hgで構成されているものが主である。超伝導転位温度T_cが更新されていない現状では,さらに高いT_cをもった物質の合成を目指すために,新たな元素で構成されたブロッキングユニットを発見することが重要であると考えられる。

本研究では手始めに高温まで雰囲気制御が可能な雰囲気調整炉を作製した後,上記の目的を達成すべく実験を開始した。まず,最近発見された高いT_cを示すRu系の高温超伝導体群に着目し,その物質群と同じRuで構成されるブロッキングユニットをもつ,未発見の物質の探索を行った。その結果,世界で初めて,1232構造をもつRu系の層状銅酸化物の合成に成功した。さらに,構成元素を精密に組成調整した結果,15K以下の温度で超伝導に由来すると考えられる抵抗の減少と,反磁性を観測した。これらの事実からRu系1232相はT_cが15K程度の超伝導体であると考えられ,そうであるとすると,結晶構造中に最多のフルオライト層数を含む酸化物超伝導体となる。さらに,1222相の低T_cの要因が単位胞にある上下CuO_2層中のCuイオンの"ずれ"にあり,この"ずれ"が解消される1232相ではT_cが上昇するという予想があったが,この1232相のT_cの方が1222相に比べ低いという予想とは逆の実験結果を得た。これらの実験事実は,酸化物超伝導体の結晶構造とT_cとの相関という観点において,新たな知見を提供することになるものと考えられる。さらに最近,Mo, Nbで構成されるブロッキングユニットを持った1232相の合成に成功した。またBi-Sr-La-Cu-O系のブロッキングユニットのBi_2O_2を構成するBiをPbで部分置換することによって,超伝導を示す2212相の合成にも初めて成功した。現在,新しい酸化物超伝導体を合成するために有用となるさらに多種のブロッキングユニットの発見に努めている。MRIの超伝導マグネット用の線材としては高い超伝導転位温度T_cをもった物質が望まれている。我々は,その線材の候補として酸化物超伝導体が適切であると考え,既知の物質を越える特性を備えた新しい酸化物超伝導体の合成に関する基礎研究を行ってきた。初年度であるH14年度には,ホールのドーピング等の処理無しで高いT_cを示すRu系の酸化物超伝導体群に着目し,この物質群と同じRu-Oブロック層をもつ新物質を探索した。その結果,Ru-Sr-Ln(Ce)-Cu-O系(Ln=Sm,Eu,Gd)で超伝導を示すRu系1232相の合成に世界で初めて成功し論文とした。この物質は,RuO層に由来する強磁性も示す。興味深いことに,この物質のT_cは結晶の格子定数が小さくなるほど増大しGdの場合に最大となる。H15年度は,この格子定数とT_cとの相関に着目し,Ru-Sr-Gd(Ce)-Cu-O系1232相のRuをイオン半径の大きなNbで置換する実験を行った。その結果,置換量の増加とともに格子定数が増大し,逆にT_cは低下するという事実を発見し論文とした。さらにこのRu-Sr-Gd(Ce)-Cu-O系の1232相でGdを同じ価数でイオン半径がGdより小さなDy,Hoと大きなSmで部分置換した試料をそれぞれ作製しT_cの変化を調べた。その結果,予想通りGdよりイオン半径が小さなDy,Hoを部分置換した試料のT_cは増大しするという実験事実を得た。これは,超伝導CuO_2面を含むペロフスカイトブロックと例えば螢石型ブロックとが積層するとき,それらの間の整合性に由来するストレスが,その物質のT_cの高低を左右する要因の一つであることを示唆する重要なものであり,現在論文の作成中である。またBi-Sr-La-Cu-O系でBiをPbで置換することにより2212相の合成に初めて成功した。この結果は,構成元素のイオン半径の制御で意図する相の作製が可能となるという重要な発見であり,論文とした。
同種造血細胞移植後の移植片対宿主病の新規バイオマーカーと国際的評価法の研究

H30年度は以下の2つの課題に取り組んだ。これらの研究成果は同種造血細胞移植後移植片対宿主病(GVHD)の病態解明とより優れたGVHDの新規治療標的の開発につながるものと考えられる。1.GVHDの新規バイオマーカーの確立:(1)海外研究室と協力し、硬化型GVHDに関連する候補蛋白質を検証するコホートでの解析を実施し、新規蛋白が見つかった。結果を海外の共同研究者と議論しながら論文化を進めている。(3)海外研究室と協力し、硬移植後閉塞性細気管支炎に関連する候補蛋白質を検証するコホートでの解析を実施した。(4)日本人GVHDコホートの検体収集を行い、検体解析の準備を進めた。2.2014年NIH国際コンセンサスの有用性の検証:(1)前向きに外来の同種移植後患者を評価し臨床データを収集した。(2) 2014年NIH基準を用いて単一施設の413症例を用いて後方視的にGVHDの再分類を行ったデータと海外の施設での708例の症例のデータと比較し、論文投稿した。(3)慢性GVHDの最新知見について日本血液学会総会にて教育講演を行った。H27年度は主に以下の4つの課題に取り組んだ。1. GVHDの新規バイオマーカーの確立:(1)海外研究室と共同しtandem massspectrometryのデータを解析してGVHDのバイオマーカー候補の絞り込みを行った。(2)データ処理の過程でtandem massspectrometryのシグナルに含まれるノイズを除くるため複数の標準化法を検討し、解析を行った。(3)バイオマーカーの検証を行うコホートの臨床データを準備した。基礎背景の確認作業中。(4)単一施設の残余病理検体を用い、皮膚GVHDのマーカーとなる免疫関連蛋白の染色を行い、解析を行った。2. 2014年NIH国際コンセンサスの有用性の検証:(1)前向きに外来の同種移植後患者を評価し臨床データを収集した。(2)日本語版症状スケールを作成し、データ収集を行っている。(3) 2014年NIH基準を用いて単一施設の156症例を用いて後方視的にGVHDの再分類を行い、GVHD治療後のアウトカムやGVHDの特徴を解析した。3. GVHD予防試験の新しいエンドポイントGVHD-free relapse-freesurvivalの解析:本邦におけるGVHD予防試験のベンチマークやリスク因子を明らかにするため造血細胞移植学会の全国データベースを用いて解析を行った。4. GVHDに関する後方視的研究:単一施設のデータベースおよび詳細なカルテ閲覧を行い、重症GVHD発症時のステロイド累積量と感染症リスクの解析、閉塞性細気管支炎の予後解析を施行した。H27に予定していた研究内容の概ねを実施することが出来た。Tandem massspectrometryのデータ処理の過程でシグナルに含まれるノイズが予想以上に大きいものであったため、ノイズを除くために複数の標準化法を検討する必要が生じたが、MD Anderson Cancer Centerの共同研究者と議論を重ねることで最終解析を行うことが出来た。前向きに外来の同種移植後患者を評価し370回の受診分の臨床データを収集したが、最近は重症度の高いGVHDを発症している症例が少なく、予想していたよりも収集期間を延長する必要があるものと考えられる。研究成果の3つは学会発表を行うことが出来た。現在論文化を進めている。また、海外研究者と共同して行った7つの研究が国際共著論文として科学雑誌に受理された。H28年度は主に以下の4つの課題に取り組んだ。(2)慢性GVHDの発症を予測する蛋白候補の検証を行った。(2)硬化型GVHDに関連する9つの候補蛋白質をLuminex法を用いて個々の検体で測定した。(3)移植後閉塞性細気管支炎に関連する1つの候補蛋白質をLuminex法を用いて個々の検体で測定した。(4)海外研究協力者と共同し慢性GVHDの臨床パネルおよび閉塞性細気管支炎とMMP-3の相関、硬化型GVHDの遺伝的リスクを検討した。(3) 2014年NIH基準を用いて単一施設の156症例を用いて後方視的にGVHDの再分類を行ったデータと海外の施設での約500例の症例のデータを比較するデータベースの準備をした。(4)本邦における慢性GVHDの治療の現状に関して造血細胞移植学会会員にアンケート調査を行った。3. GVHD予防試験の新しいエンドポイントGVHD-free relapse-freesurvivalの解析:本邦におけるベンチマークやリスク因子を明らかにするため造血細胞移植学会の大規模データベースを用いて解析を行った。

4.臨床データを用いた後方視的研究:移植前の白金製剤がGVHDを含めた移植予後に及ぼす影響を解析した。H28に予定していた研究内容の概ねを実施することが出来た。Tandem massspectrometryから得られたデータを処理し、硬化型GVHDと閉塞性細気管支炎の候補蛋白を絞り込むことができ、海外施設の研究者と共同して個々の検体での蛋白量測定に取り掛かることができた。前向きに外来の同種移植後患者を評価し660回の受診分の臨床データを収集した。重症度の高いGVHDを発症している事例が少ないため、最終解析までにさらなる症例蓄積が必要である。研究成果の2つは学会発表を行うことが出来た。現在論文化を進めている。また、6つの研究(3つは国際共著論文)が科学雑誌に受理された。H29年度は主に以下の2つの課題に取り組んだ。これらの研究成果は同種造血細胞移植後移植片対宿主病(GVHD)の病態解明とより優れたGVHDの新規治療標的の開発につながるものと考えられる。1. GVHDの新規バイオマーカーの確立:(1)海外研究室と共同し慢性GVHDの発症を予測する蛋白としてCD163が有用であることを証明し、論文化した(Inamoto et al. BBMT 2017;23:1250-1256)。(2)海外研究室と協力し、硬化型GVHDに関連する候補蛋白質を検証するコホートを抽出した。(3)海外研究室と協力し、硬移植後閉塞性細気管支炎に関連する候補蛋白質を検証するコホートを抽出した。(4)日本人GVHDコホートの検体収集を行った。2. 2014年NIH国際コンセンサスの有用性の検証:(1)前向きに外来の同種移植後患者を評価し臨床データを収集した。(2) 2014年NIH基準を用いて単一施設の156症例を用いて後方視的にGVHDの再分類を行ったデータと海外の施設での約500例の症例のデータと比較した。(3)慢性GVHDの重症度とQOLについての多施設研究を論文化した(Kurosawa et al. BBMT 2017;23:1749-1758)。(4)臨床試験におけるGVHD予防のエンドポイントについて日本血液学会総会シンポジウムにて招待講演を行った。(5)慢性GVHDの初回治療の臨床試験におけるエンドポイントに関し、海外研究室と共同し研究を進め論文化した(Martin et al. Blood 2017;130:360-367)。H29年度に予定していた研究内容の概ねを実施することが出来た。Tandem massspectrometryから得られた硬化型GVHDと閉塞性細気管支炎の候補蛋白を検証するコホートを、海外施設の研究者と共同して準備することが出来た。前向きに外来の同種移植後患者を評価し臨床データを収集した。研究成果の1つを学会シンポジウムにて招待講演として発表した。7つの論文(4つは国際共著論文)が科学雑誌に受理された。日本人の検体収集が予定よりも時間を要しているため、解析は来年度に予定した。H30年度は以下の2つの課題に取り組んだ。
原発災害後における野生ニホンザルの健康影響

本研究では、2011年3月に東日本大震災に伴って爆発した福島第一原発から放出された放射性物質に被ばくした野生ニホンザルを対象に、筋肉中セシウム濃度を測定するとともに、臨床医学的検査および病理学的検査を行い、被ばくによる健康影響を明らかにする。2018年度は、福島市に生息するニホンザル200頭の死体を回収し、解剖分析および血液検査に供した。筋肉中放射性セシウム濃度は、ほとんどの個体で数十数百Bq/kgを示し、2011年当時から徐々に低減しつつあるが、1000Bq/k近い個体も未だにいるため、高濃度に汚染した食物を摂取している可能性が示唆された。昨年度に公表した被ばく後の胎仔における脳の発達遅滞について、大脳皮質の組織学的観察を行った。また、被ばく個体の血球減少のメカニズムを明らかにする目的で、骨髄の組織学的観察を行った。2016年度は、福島市に生息するニホンザル134頭の死体を回収し、解剖分析および血液検査に供した。筋肉中放射性セシウム濃度は、ほとんどの個体で数十数百Bq/kgを示し、2011年当時から徐々に低減しつつあるが、1000Bq/kgを超す個体も未だにいるため、高濃度に汚染した食物を摂取している可能性が示唆された。血液検査結果から、すでに報告した2012年当時の血球減少が引き続き観察されていることから、骨髄での造血機能障害が起こっていると予想し、組織学的な検討を開始した。また、妊娠率の推移を観測するとともに、原発災害前後における胎仔の成長や形態的変化を検討し、現在、その結果を投稿中である。また、実験動物への放射線照射実験や広島の原爆後に生まれた子供などで見つかっている小頭症が、福島のサルでも発生している可能性があるため、小型CTスキャナーを用いて胎仔の脳容積の検査を実施した。当初の計画通り、捕獲個体の回収や分析が進められた。2017年度は、福島市に生息するニホンザル95頭の死体を回収し、解剖分析および血液検査に供した。原発災害前後における胎仔の成長や形態的変化を明らかにする目的で、2008年から2016年に福島市で採取した胎仔の外部計測を行った。これまで原発災害があったチェルノブイリと福島のいずれでも、同一の野生動物個体群における胎仔の成長を経時的に調査して災害前後で比較した研究は見当たらず、本研究がはじめてとなる。原発災害前に妊娠した胎仔35個体と災害後に妊娠した個体32個体において、CRL(crown ramp length・頂臀長)に対する体重および頭部のサイズ(頭蓋の最大長径と最大横径の積)の相対成長を比較したところ、災害後の胎仔で体重と頭部のサイズのいずれも有意に低下していることが明らかとなった。頭部のサイズとCTスキャナーで計測した頭蓋容積は高い相関を示すことから、脳の発達が抑制されていることも予想された。これらの胎仔の母親の栄養指標に有意差は認められず、観察された発育遅滞は放射線被ばくの影響が示唆された。被ばく後の胎仔において、体重や頭部サイズの成長遅滞が観察されたことから、この結果を国際学術誌に投稿中である。この結果を受けて、生後成長を含めた脳の発達への影響について、病理組織学的に検討する。また、血液検査および骨髄検査を引き続き実施し、造血障害のメカニズムを明らかにする。胎仔における脳の発達抑制が示唆されたことから、脳神経の組織学的検査を継続する。また、血球減少症が骨髄への放射線影響の結果であることも予想されるため、骨髄の組織検査を継続する。

使用額が予算内であり、592円の残額が発生したが、残額が少ないため次年度以降に影響はない(理由)昨年度末に発注を予定していた標本作成が4月にずれ込んだため、予定していた予算が繰り越しとなった。(使用計画)すでに繰り越し分の発注は済んでいるため、問題はない。次年度の予算に繰り越し、適正に使用する
衛星による海面水温・海面高度・日射量を用いた新しいタイプの海況研究

本研究では、AVHRR/NOAA衛星から得られる海面水温とTOPEX海面高度計から得られる海面高度情報を用いて、東北海区における海洋変動現象を研究した。研究に先立って、AVHRR海面水温とTOPEX海面高度の推定手法の確立のための研究を進め、ほぼ満足できる処理システムを構築した。海面水温情報を用いて、東北海区における台風通過時の海面水温急降下現象を解析した。これは、広域の海面温度分布を短時間でとらえうる衛星観測の利点を最大限に生かして実現したものである。1989年8月の東北海区において、2つの台風通過前後のAVHRR海面水温を比較したところ、親潮の海域で510Cの海面水温降下が起こっていることが見つかった。この現象について、船舶データとの比較、海面フラックスの推定などを行って原因の究明を行ったところ、親潮域の表面近くの夏季温度躍層が台風によるかき混ぜで破壊されて起こったことを突き止めた。さらに、数値モデルによる同現象のシュミレーションを行って、その推測が正しいことを確認している(J.Geophys.Res投稿中)。TOPEXの海面高度計のデータを用いて得られる海面高度情報を、東北地区で得られた船舶観測のデータを元に検証し、精度検証を行うとともに、今後の利用のための考察を行った。精度が不十分な海洋のジオイドの情報を補うために、気候学的な海面高度分布を利用する方針を立て、実際の観測データとの比較において調べたところ、TOPEX海面高度は約13cmの精度を持つことが確かめられた。また熱赤外画像との比較においても、海洋構造の表現において、十分優れていることが確かめられた。(J.Geophys.Res投稿中)。本研究では、NOAA熱赤外画像から得られる海面水温、GETSAT海面高度計から得られる海面高度、及びGMS可視赤外放射計から得られる日射量データを用いて、数カ月から半年程度の期間の日本付近の海域の昇温期の海洋変動現象について研究する。海域としては東北海区を選び、1987年と1988年の昇温期(3月から8月)を対象として研究を行う。現場観測データについても可能な限り取得し、衛星観測データと合わせ用いて研究を行う。GEOSAT海面高度計を用いて、海面高度を求める手法を開発した。現在1988年と1989年の東北海区の海面高度変動を解析中である。海面水温を表す熱赤外画像についても大方の作業は終了し、現在、解析を待つっている段階である。1988年の熱赤外画像により、興味深い現象がいくつか見つかった。海洋上の日射量の1日平均値を“ひまわり"のデータを用いて、広域で推定した。このデータは1987年から1988年にかけての、1年半について作成した。季節変化や年毎の特徴について、海面水温の変動と合わせて現在解析中である。広域海面水温データの特徴を調べた結果について、論文を発表した。また、画像データのコンピュータ・グラフィクスに関して、論文を発表した。研究は概ね順調に進展している。衛星画像を中心として扱うため、計算機使用量が大幅に増えることを予想していたが、現在、その予想を上まっており、今後、計算機資源の不足が考えられる。申請時に、ワークステーションを要求するべきであったと反省している。現在は、研究の元となる衛星資料を中心としたデータセットの整備を主に行っており、研究の初期段階にある。今後、本研究は本格化するものと考える。

海面水温情報を用いて、東北海区における台風通過時の海面水温急降下現象を解析した。これは、広域の海面温度分布を短時間でとらえうる衛星観測の利点を最大限に生かして実現したものである。1989年8月の東北海区において、2つの台風通過前後のAVHRR海面水温を比較したところ、親潮の海域で510Cの海面水温降下が起こっていることが見つかった。この現象について、船舶データとの比較、海面フラックスの推定などを行って原因の究明を行ったところ、親潮域の表面近くの夏季温度躍層が台風によるかき混ぜで破壊されて起こったことを突き止めた。さらに、数値モデルによる同現象のシュミレーションを行って、その推測が正しいことを確認している(J.Geophys.Res投稿中)。TOPEXの海面高度計のデータを用いて得られる海面高度情報を、東北海区で得られた船舶観測のデータを元に検証し、精度検証を行うとともに、今後の利用のための考察を行った。精度が不十分な海洋のジオイドの情報を補うために、気候学的な海面高度分布を利用する方針を立て、実際の観測データとの比較において調べたところ、TOPEX海面高度は約13cmの精度を持つことが確かめられた。また、熱赤外画像との比較においても、海洋構造の表現において、十分優れていることが確かめられた(J.Geophys.Res投稿中)。
生殖細胞の性分化と精子幹細胞の維持を支える分子機構

生殖細胞はその独自性の維持機構や、減数分裂の制御機構のみならず、哺乳類に特徴的なインプリンティング確立などエピジェネティックな側面からも注目されている。このような、生殖細胞特異的なシステムを維持する機構の解明は、種を越えて維持されてきた生殖細胞の形成機構に加えて細胞生物学、幹細胞システムなどの理解につながる重要な情報を寄与する。マウスをモデルとして、胎生期における雄性生殖細胞の分化機構、さらに生後の周期的精子形成システムの理解を目指した研究を行う。本年度は、以下の実験を計画して研究を開始した。1)生殖細胞の性分化制御機構今後の生殖細胞解析に必要なOct3/4エンハンサーの下流にタモキシフェンで誘導可能なCre(ERT2-Cre)を発現するトランスジェニックマウスを作製する。このマウスを利用してオスでNanos2を効率よく発現させてその効果を解析する。2)生後の精子幹細胞システムの維持機構Nanos2のエンハンサーの下流で誘導型のCreを発現するマウスを作製し、精子幹細胞の運命を解析する。3)精子形成の周期性の基盤となるセルトリ細胞の周期性の分子基盤ビタミンA欠損マウス(VADマウス)を作製し、その後のレイチノイン投与により同調的な精子形成を行い、その周期におけるセルトリ細胞遺伝子発現変動を調べる。4)RNA結合蛋白質としてのNanos蛋白質の作用機序の解明免疫沈降によってNanos2と相互作用するタンパク質とRNAを調整し、それぞれ、MAS解析あるいは、マイクロアレイにより標的を同定する。
人工酸素運搬体と血管新生抑制物質の併用による腫瘍抑制効果の測定

人工酸素運搬体と血管新生抑制物質の併用による腫瘍抑制効果の測定血管新生抑制物質であるフマギリン誘導体TNP-470(武田薬品より供与)を用いた腫瘍血流量の変化を非放射性物質マイクロソフィアを用いて測定した。1.使用薬剤TNP-4702.実験動物6週齢のドンリュウラット。3.実験腫瘍細胞ドンリュウラットの腹水で継代している吉田腹水肝癌(LY-80)を用いた。4.方法以下2群を作成。細胞数を調整した腫瘍細胞懸濁液0.2mlをラットの背部皮内に移植し担癌モデルを作成。TNP-470を30mg/kg腫瘍移植後第1,3,5,7日に背部皮下投与した。第10日目に非放射性物質マイクロソフィアを血管内投与した後犠牲死させた。腫瘍は重量を測定後冷凍保存し、吸光度を測定した腫瘍血流量を測定した。1)コントロール群(生理食塩水投与群)N=10TNP-470投与群2.8±0.8腫瘍血流量(相対値)コントロール群17.4±3.14(MEAN±SD)TNP-470投与群14.2±3.5TNP-470の吉田腹水肝癌に対する抗腫瘍効果とともに、マイクロソフィアによる腫瘍血流量の評価可能であることを示した。人工酸素運搬体との併用効果については現在実験中である。I、要旨6週齢の雄性ドンリュウラットの腹水で継代している吉田腹水肝癌(LY-80)に対する血管新生阻害剤TNP-470の抗腫瘍効果を検討した。腫瘍細胞懸濁液をラットの背部皮内に移植し,担癌モデルを作成した。TNP-470投与群は腫瘍移植後Day1,3,5,7に皮下注射した。Day10に犠牲死させ.腫瘍重量を測定し,対照群(生理食塩水皮下注群)と比較した。この結果、投与群に著明な抗腫瘍効果が見られた。II、材料ならびに方法1.使用薬剤。フマギリン誘導体であるTNP-470(武田薬品工業より供与)を用いた。2.実験動物。6週齢の雄性ドンリュウラットを用いた。3.実験腫瘍細胞。ドンリュウラットの腹水で継代している吉田腹水肝癌(LY-80)を用いた。4.実験方法腫瘍細胞懸濁液0.2ml(2×10^6)をラットの背部皮内に移植し,担癌モデルを作成した。TNP-470の投与量は30mg/kgとした。エタノール0.3mlでTNP-470を30mg溶解し,その溶液を5%のメチルセルロース(9.7ml)で希釈したものを使用した。TNP-470投与群は腫瘍移植後Day1,3,5,7に30mg/kgを皮下注した。Day10に犠牲死させ,腫瘍重量を測定し,対照群(生理食塩水皮下注群)と比較した。TNP-470投与群と対照群とを比較した。対照群(n=5) 8.2±2.2 (単位g)TNP-470投与群で対照群に比して著明な抗腫瘍効果が認められた。現在,TNP-470と人工酸素運搬体との併用においての抗腫瘍効果をマイクロソフィアを用いて測定する実験をおこなっている。
細胞培養上清のProteome解析による尿路性器癌腫瘍マーカーの同定

1.膀胱癌浸潤に関与する尿中マーカー候補蛋白質の同定ショットガンプロテオミクスにより浸潤と関与する蛋白質としてケモカインの1種であるCXCL1を見出した。細胞株では発現量と浸潤能に正の相関が認められ、免疫組織染色において正常尿路上皮では認めず浸潤性膀胱癌で発現が亢進していた。CXCL1遺伝子導入により浸潤能が亢進し、CXCL1siRNAや中和抗体による機能抑制により浸潤能が抑制された。マイクロアレイで比較発現解析を行ったCXCL結果、MMP13の発現がCXCL1と相関しており、臨床検体においても同様の相関が示唆された。尿中CXCL1発現量をELISA法にて測定したところ、コントロール群に比して膀胱癌患者群で有意な発現レベルの亢進を認め、腫瘍間では浸潤癌で発現が亢進していた。CXCL1は膀胱癌浸潤に重要な役割をはたしており、新規尿中マーカーとしての有望性が示唆された。2.腎細胞癌における培養細胞上清ならびに血清Proteome解析による腫瘍マーカーの探索VHL(-/-)細胞株およびそのwild type VHL再導入細胞株の上清からの抽出蛋白を比較することで、pVHLにより制御される3種類の分泌蛋(IGFBP-3,PAエ-1,clusterin)を同定し、そのうち血清中のIGFBP-3はコントロール群に比べて腎細胞癌患者において有意な上昇を確認した。また、腫瘍マーカーの探索にむけて、血清を用いたショットガンプロテオーム解析を行い、担癌患者でのみ同定される蛋白質の中で癌組織でのmRNA発現が亢進している6種類の候補蛋白質を抽出した。2種の候補蛋白質についてはポリクローナル抗体を作製し、腎細胞癌細胞株並びに臨床検体においてWB・免疫組織染色を行ったところ、腎細胞癌において発現亢進が確認でき、現在、血清ELISAの実験系を樹立しRCCのバイオマーカーとしての有用性を検討中である。pVHL(-)腎癌細胞株にWt-VHLを導入、Mockを導入した細胞株との培養上清蛋白質の比較解析を行ったところ、pVHL(+)細胞でclusterinの過剰産生を認めた。同蛋白質はmRNAレベルでpVHLに制御されておりLuciferase Assayの結果、プロモーター領域のAP-1結合配列がResponsible Elementであった。Gelshift AssayではJUN protein familyの一つであるJUNBのpVHL(-)細胞核内での特異的な増加を認め、PC12細胞に同蛋白質を強制発現させたところAnti-apoptotic effectを示した。副腎褐色細胞腫のみを発症する亜型(Type2C)のVHL病家系に認められるL188V mutantにおいてpVHLの標的蛋白、HIF-alpha分解能が保持されているのに比してJUNBが制御されてないことからもJUNBの過剰発現が副腎褐色細胞腫の成因であると考えられた。VHL病以外にもMEN Type2、神経線維腫症1型で家族性に褐色細胞腫を発症する。これらは、RET、NF1の遺伝子変異を原因とするが両者の遺伝子産物の下流にも、やはりJUNBが位置することが知られている。近年、新たに家族性褐色細胞腫の原因遺伝子として同定されたsuccinate dehydrogenase gene(SDHD、SDHB)遺伝子産物がJUNBの下流にあるEGLN3の活性を制御していることも判明しており、既知の家族性褐色細胞腫が全て共通の細胞内シグナル伝達経路の異常により発症することが明らかとなった。

また、SDHの変異は腎細胞癌を来すことも知られており、上記のシグナル伝達経路が悪性褐色細胞腫の成因に関与している可能性も高く、今後、治療の標的分子となりうる可能性も示唆された。腫瘍組織、血清を用いた膀胱癌腫瘍マーカー候補蛋白質の同定1.まず、Matrigel invasion chamber assayを用いて、6種の膀胱癌細胞株の浸潤能の評価を行い、高浸潤性細胞株としてRT112を、低浸潤性細胞株としてT24を用いることとした。2.両細胞株の培養上清中蛋白質をショットガンプロテオミクスにて同定した。80%コンフルエント時の細胞を無血清培地で24時間培養し上清を回収し、二液体クロマトグラフィーにて分画処理後、LC-MS/MSにて網羅的に蛋白質を同定した。T24のみで産生され、間質浸潤との相関を認める分泌蛋白の中から、ケモカインの一種であるCXCL1を候補遺伝子として絞り込み、以後の解析の対象とした。3.In vitroではRT12、T24を含む6種の細胞株において、発現量(ELISA)と浸潤能に正の相関が認められ、手術標本の免疫組織染色において同蛋白質の発現は正常尿路上皮では殆ど認めないが浸潤性膀胱癌で発現が亢進していた。CXCL1を強発現しているT24に中和抗体を加えることで浸潤能が抑制された。一方、発現を認めないRT112にCXCL1遺伝子を導入すると浸潤能が亢進し、さらに中和抗体添加はその亢進した浸潤能を低下させた。マーカーとしての有用性を検討するために尿中CXCL1発現量をELISA法にて測定したところ、コントロール群(6.5±2.5pg/mg creatinine(Average±SEM))に比して膀胱癌患者群(64±14pg/mg creatinine)で有意な発現レベルの亢進を認め、腫瘍間では浸潤癌で発現が亢進していた(T1以上:111±25pg/mg creatinine、Ta:17±3.7pg/mg creatinine)。このようにCXCL1は膀胱癌の浸潤に重要な役割を担っていると考えられ、高浸潤例と低浸潤例の鑑別マーカーとして有用であると考えられた。1.膀胱癌浸潤に関与する尿中マーカー候補蛋白質の同定ショットガンプロテオミクスにより浸潤と関与する蛋白質としてケモカインの1種であるCXCL1を見出した。細胞株では発現量と浸潤能に正の相関が認められ、免疫組織染色において正常尿路上皮では認めず浸潤性膀胱癌で発現が亢進していた。CXCL1遺伝子導入により浸潤能が亢進し、CXCL1siRNAによる機能抑制により浸潤能が抑制され、中和抗体を用いた実験でも同様の結果を得た。CXCL1による膀胱癌浸潤制御機構を解明するため、マイクロアレイで比較発現解析を行った結果、MMP13の発現がCXCL1と相関しており、臨床検体においても同様の相関が示唆された。尿中CXCL1発現量をELISA法にて測定したところ、コントロール群に比して膀胱癌患者群で有意な発現レベルの亢進を認め、腫瘍間では浸潤癌で発現が亢進していた。CXCL1は膀胱癌浸潤に重要な役割をはたしており、新規尿中マーカーとしての有望性が示唆された。
終止コドンリードスルーによる酵素局在の変化とナンセンス変異遺伝病の治療

本研究は、細胞遺伝子での存在と重要性が認識され始めた翻訳終止コドンリードスルーを研究対象とする。申請者が研究してきたウイルス感染症では、リードスルーが感染成立に必要な例が古くより知られている。RNAウイルスの複製酵素の局在を解析し、リードスルーにより付加されるアミノ酸配列の意義を明らかにする。一方、ヒト遺伝性疾患のうち、ナンセンス変異遺伝病では、リードスルーが実質起こらない結果、病態が形成される。遺伝病のモデル遺伝子を作製し、リードスルー増強剤を投与して、翻訳の回復を評価する。さらに、次世代シーケンス技術を利用してリードスルー遺伝子を網羅的に同定し、増強剤の治療応用への妥当性を検討する。
乳歯断髄処置における薬剤の開発に関する基礎的研究

要旨:小児歯科臨床での断髄処置において,乳歯および幼若永久歯とも可及的に歯根部歯髄を生活状態で保存するため,水酸化カルシウムを用いた生活断髄法が従来より広く用いられてきている。しかしながら,実際の小児歯科臨床の場においては水酸化カルシウムを使用する度に,滅菌した器具を用いての滅菌水との混和が必要であるなど,治療能率の点で問題がある。そこで我々は,水酸化カルシウムを基に,臨床で即時使用できる一剤型水酸化カルシウム製剤を試作した。今回は,それを用いた生活断髄後の庇蓋硬組織形成の有無を,動物実験により組織学的に確認した。その結果,断髄処置1ヵ月後に象牙前質と細管構造を有する象牙質から成る庇蓋硬組織の形成を認めた。また,残存する歯髄組織においては炎症などの異常所見は見られなかった。以上により本剤を生活断髄剤として臨床に用いることが可能であることが示唆された。
近世中・後期における禁裏絵所預土佐家と内裏の造営

寛政度内裏の造営資料である「御指図御用記」を読み解いた結果、次のことが明らかになった。(1)禁裏画所預の土佐光貞が内裏の障壁画の絵師たちを統率する様子が明らかになった。病気の絵師には同じ流派から後任を選出し、年少の絵師については絵画の技量を確認していた。(2)土佐派の弟子の中に大坂の絵師が含まれていた。その中の桃田三笑、佐野龍雲の作品を大坂で見出した。しかし画風には土佐派の要素が少ないため、内裏の仕事をするために土佐と結びついた可能性もあった。(3)屏風の飾り方を示した図を数種類見出し、宝永度内裏における観能、寛政度内裏における年中行事の空間が明らかになった。本研究は、近世中・後期における土佐家の画業の考察と再評価を目的とする。とくに光成から幕末の光清に至る土佐家歴代の画業について、内裏造営と朝儀への関与に着目し、禁裏での役割、勢力拡大の過程、障壁画と故実について考察する。そのために、1とくに高い官位を得た光芳の人脈と朝儀復興、2光貞の寛政度内裏における復古様式考証、3光孚から安政度内裏までを明らかにする。現在までに1の資料である「桂宮日記」を宮内庁書陵部から入手し、デジタル化を完了し、解読を行っている。その結果、元文元年(1736)から明和元年(1764)における光芳の登場箇所を特定することができた。引き続き天明年間(17811789)までの資料を収集し、解読作業を進めている。2については寛政度内裏造営に関する裏松固禅の資料を「裏松家資料」から抽出し、解読を行った。「土佐派絵画資料」と合わせて検討することにより、昆明池障子における土佐光貞と固禅の関係を明らかにした。さらに他の事例についても明らかにしていく。3については光孚の内裏における障壁画のリストを作成した。制作の詳細については造営資料を検討中である。<具体的内容>本年度の目的は(1)近世内裏における儀式のしつらいに関する資料、(2)ハレ・ケ・ケガレなどの空間認識を示す資料を収集分析することであった。(1)に関してはすでに収集している宮内庁資料から、1宝永度内裏における荒海障子の障壁画資料を得ている。また「造内裏御指図御用記」から、2寛政度内裏のしつらいに関する資料を抽出している。さらに宮内庁所蔵資料から、3宝永度内裏・寛政度内裏における観能のしつらいの資料を見出し分析中である。(2)に関しては、4木子家文書からは内裏において天皇の崩御が後の資料を得ている。<意義・重要性>1と2はそれぞれ宝永度と寛政度の内裏のケ(日常)の空間に関する資料であある。それに対して3はハレのしつらいに関する資料であり、宝永度内裏と復古様式による寛政度内裏との比較が可能になる。4については柱や障壁画の破却などケガレを避けるための実態が明らかになった。いずれもこれまで知られていない資料であるため、次年度はこれらの資料の紹介と分析を行いたい。本研究は近世中・後期の禁裏絵所預土佐家の画業と再評価を目的とする。最終年度は土佐派の中でもとくに、大坂を拠点に活動した絵師について明らかにすることを目的とした。そのために寛政度内裏造営の記録である「御指図御用記」の記述から、障壁画に携わった土佐家の弟子を抽出し、画伝書などから大坂の絵師を特定した。大阪府下の文化財調査報告書などを用いてそれらの絵師の作品の所在を調査した結果、桃田三笑と、佐野龍雲の作品を見出した。桃田三笑は内裏の西対の屋五ノ上段絵を仰せつけられていたが、病気のために辞退し、同門の鵜飼大之進が起用された。三笑は現存作品を見る限り土佐派の画風や画題を描いているとはいいがたかった。ほかに「御指図御用記」からは桃田栄雲の名も見出したが、この絵師は文人画の日根対山の師、狩野派、土佐派とさまざまに伝えられている。土佐門人として内裏の仕事をしているものの、土佐との関係は希薄であると考えられた。一方佐野龍雲は東対屋の杉戸に列女伝、常御殿の杉戸に中国の偉人像を描いており人物唐絵を得意としたことが推定できる。今回、調査の結果、龍雲の「住吉図」屏風を見出した。住吉浜の遊楽を実景に忠実に描いたもので、「勅許法橋龍雲図画」の落款を有していた。

景観年代を細かく検討した結果、17981802年に限定でき、このころ法橋に叙せられていたことが判明した。龍雲の描く人物風俗も、土佐派を思わせるものは無かった。以上の結果から、土佐派は18世紀には経済都市大坂に門人を有し、それらの中には内裏障壁画を描くほど有力な弟子がいたことが判明する。しかし現存する作品からは土佐派の画風を見出すことはできなかった。あるいは禁裏の仕事に入り込む方便として、土佐と結びついた可能性も否定できない。今後も大坂における土佐派絵師の調査を継続し、その流派体制を解明していきたい。日本絵画史2012年から勤務先大学で役職についているが、学部改革をひかえて会議や出張が多く、研究時間が十分にとれなかった。2012年度は「桂宮日記」および内裏関連資料を入手し、解読して入力する予定であったが、宮内庁書陵部に出張して資料を探索する機会を作ることができなかった。2013年度は資料の収集を積極的に進め、「桂宮日記」の延宝寛政年間の資料を収集することができた。さらに「土佐派絵画資料」や「裏松家資料」との関連付けを行う予定であったが、日記の解読作業に時間がかかり、十分な考察ができていない。結果、2012年度における遅れは回復したものの、全体的にはやや遅れを生じていることは否めない。2012年度は大学で役職につき多忙になり、家庭でも介護の必要が生じたことから研究出張ができなかった。そのため資料の収集ができなかった。2014年度は最終年度であるため、成果の発表と、公開に向けた資料の整理に重点をおく予定であったが、「桂宮日記」の解読が遅れているので、引き続き解読とパソコン入力を行う。とくに解読に時間を要するため、古文書の専門家に補助と確認を依頼し、入力については学生アルバイトに依頼する。また「裏松家資料」「土佐派絵画資料」相互の関連付けを行い、考察を進める。さらにこれまで考察してきた内容をまとめ、学会誌・紀要に論文を投稿する。当初の研究目的1光芳の人脈と朝儀復興、2光貞の寛政度内裏における復古様式考証、3光孚から安政度内裏までの解明、のうち、とくに1と2について成果を発表する。(1)学休期間中に東京2回・名古屋・九州に各1回出張し、資料の収集に務める。アルバイトを頼み整理し、ハレ・ケ・ケガレなどの儀式別リストを作る。(2)2012年度に抽出した資料を分析し、その結果を論文として発表する。古文書の入力にアルバイトを使用する予定であったが、解読が進まず、入力にいたらなかった。また大学が多忙であるため、資料収集のための出張をする時間がとれなかった。古文書の解読の手伝いを1人頼み、解読作業を急ぐ。入力のアルバイトを2人頼み、入力を進める。パソコン・カメラ:400,000円出張旅費:200,000円資料複写:600,000円謝金:300,000円その他:49,537円