hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
やさしい日本語化実証実験による言語資源構築と自動平易化システムの試作

自動平易化研究は英語において先行しているが、本研究課題が採択されたことに伴って日本語の言語データも英語と遜色ない、あるいはそれ以上の質と量のデータを整備することができたと考えている。特に人手で作成した日本語と平易文の対訳コーパス8万5千文というのは私の知る限り英語にも存在せず、世界最大規模である。よってこの規模の言語データを活用することで世界最先端の自動平易化研究の知見を蓄積していくだけでなく、さらにデータを大規模化して世界でも比類がない研究を行っていきたい。研究課題最終年度の令和元年度(平成31年度)は、これまでに作成した言語資源を最大限に活用してやさしい日本語への自動平易化の研究を進めていきたい。これと並行して、研究予算をできるだけ有効活用して、さらなる(自動平易化のための)言語資源整備を行っていきたい。当初予定よりも初年度執行額が少なかったのは下記の複合的な理由による:(1)初年度に予定していた言語データ作成(クラウドソーシング作業)について、当初予定していた単価よりも安価に発注することができた。(2)初年度に予定していた一部の言語データ作成作業を次年度に繰り越した。(3)初年度に予定した備品購入について、代替品で代用することができたので次年度に繰り越した。以上の複合的な理由によるものであるため、上記項目(2)(3)については今年度に予算執行する予定である。また項目(1)については我々にとって好都合であるため、これを利用して作成する言語データの大規模化を図ることで予算を有効活用する予定である。当初予定よりも執行額が少なかったのは予定よりも言語資源作成作業が進まなかったためである。次年度は最終年度であるので、できるだけ予算を有効に利用していきたい。具体的には、昨年度に達成できなかった言語資源作成について、引き続き実現を目指すと同時に、昨年度から研究成果が出始めているのでこの発表経費(及びその関連経費)に利用する。この予算を十分に活用することでできるだけ多くの業績を作り、また言語資源を残していきたいと考えている。
日本の若手・女性経済研究者の現状と課題分析

近代経済学分野の博士院生、期限付き助手・助教等を対象としたアンケート調査により若手研究者の研究支援ニーズを調査した。調査結果から、若手研究者は英語による学会報告や論文投稿に積極的に取り組んでいる一方、大学院での指導機会や研究費が必ずしも十分でなく、若手の多くはポストを得るための研究業績に不安を持っていることがわかった。また、文部科学省「学校基本調査」及び「学校教員統計調査」データ、及び独自のアンケート調査を分析し、同年齢でも女性の大学教員の職階は男性よりも低く、同年齢・同職階でも男性より給与が低いこと、女性教員比率が高いと女子学部生の入学比率や女性教員の採用確率が高まることがわかった。欧米での調査、及び欧米からの研究者招聘により欧米研究者との連携を深め、米国並びに欧州における大学・大学院一般や経済学分野における若手・女性研究者の状況と研究状況に関して議論を深めた。2013年6月には米国から関連研究者を招聘し、一橋大学・早稲田大学・神戸大学においてコンファンランス・研究報告会を開催し、また2014年3月には欧州から関連研究者を招聘して一橋大学・名古屋大学において同様にコンファンランス・研究報告会を開催した。年度後半には、研究分担者1名が欧州に研究滞在し関連研究調査を行った。さらに、2014年1月、米国経済学会大会に研究分担者2名が参加し、うち1名が学会内の女性支援組織の協力を得てメンタリング・ワークショップに見学参加し、若手育成のためにどのような支援が必要であるか実地に知見を得た。これに並行して、日本におけるデータ調査の検討を進めた。研究分担者の研究中間報告から、日本の大学教員へのアンケート調査分析結果から女性は男性より給与が5%程度結果低いことが示され、この研究報告を含めて議論を進め、まず日本全体の大学の状況を公的統計によって把握する必要があるとの認識で一致し、文部科学省「学校基本調査」「学校教員統計調査」の公表データ並びに調査票の精査を行った。前者においては全高等教育機関について学部別・男女別の教員数と学年別学生数を把握でき、女性教員と女子学生の関連を調査できることがわかった。さらに後者はより詳細な教員の調査を含んでおり、男女別の給与、職階、産休・育休の取得、採用と前職、離職とその理由等を知ることができ、教員間の男女差の実態と要因把握を進めるための分析が可能であることがわかった。これをもとに調査票使用項目と分析モデルの構築を行い、データ使用申請の準備がほぼ整った。日本の大学教員の現状を公的統計により総括的に把握する目的で、文部科学省「学校基本調査」及び「学校教員統計調査」の高等教育機関における個票データ申請を行い、12月から個票データによる基礎的な分析を開始した。「学校基本調査」による分析からは以下が示された。1女性教員比率と学部入学の女子学生比率に正の相関関係があるが、大学院では相関関係は認められない。2女性教員比率と女子大学院生の研究職就職との間の関連は認められない。「学校教員統計調査」による分析からは以下が示された。3年齢・職階・大学院教育等が同じでも女性教員の俸給は男性教員よりも低い。4同様に年齢・大学院教育等が同じでも、女性教員の職階は男性教員の職階よりも低く、社会科学・経済学関係分野では理科系よりも女性は男性より昇進が遅い。5年齢・大学院教育等が同じ時、H15年度では女性は大学教員採用において有利ではないが、H18年度、H21年度では女性の方が積極的に採用されるようになっている。6大学学部において女性教員比率が高いと女性教員が採用される確率が高まる。7非常勤職のみの講師は常勤教員に比べ、年齢や大学属性・研究分野をコントロールしても女性が多く、特に人文・教育・芸術等の女性教員の多い分野で顕著であるが経済学分野では女性割合が小さい。また、海外研究者との連携を深め海外における学術現場の現状と支援状況を探った。具体的には、2014年5月にコロラド大学経済学部准教授Terra G. McKinnish氏を招聘、12月に米国インディアナ大学経済学部教授Yoosoon Chang氏招聘、また2015年1月に研究代表者が米国経済学会女性支援委員会(CSWEP)メンタリング・セッション(CeMENT)を視察を行い海外連携と知見を深めた。本年度は最終年度であり、主として以下の2種類の実証分析を遂行した。第1点として、近代経済学分野における若手研究者の研究支援ニーズを把握することを目的として、Webアンケート調査結果を博士院生及び期限付き有職者を対象として2015年11-12月に実施、有効回答130名を得た。若手支援の目的のため、就職に際し重視する点・心配な点、研究リソース、論文報告・投稿経験、大学院での指導、支援ニーズ、回答者属性等を質問項目とした。アンケート調査の分析結果から、若手は英語による学会報告や論文投稿に積極的に取り組んでいる一方で、大学院において英語報告や投稿・査読対応等の指導を受ける機会や研究費が必ずしも十分とは言えないことも示されている。また、若手の多くはポストを得るための研究業績に不安を持っていることも示された。本調査により、若手への研究活動への支援ニーズは大きく、中でも論文投稿・査読対応等について相当の支援ニーズがあることが示唆されている。本分析結果は「近代経済学分野若手研究者アンケート調査報告」にまとめ、2016年9月日本経済学会秋季大会にて報告予定である。第2点目として、大学教員職における男女差とその要因の分析を進めた。

研究分担者である高橋アナマリア・高橋新吾による独自のアンケート調査により、経済学分野において、女性教員は男性教員に比べて昇進が遅いことが示された。政府統計である文部科学省の「学校教員統計調査」個票データ分析においても同様に、大学教員の職階・給与ともに統計的に有意な男女差が示されている。また「学校基本調査」個票データ分析からは女性の大学教員は女子学生のロールモデルとしての役割が示唆されている。これらの研究成果は、Donna Gintherカンザス大学教授を招聘した研究ワークショップ(8月29日、神戸大学)において研究討議を行った。近代経済学分野の博士院生、期限付き助手・助教等を対象としたアンケート調査により若手研究者の研究支援ニーズを調査した。調査結果から、若手研究者は英語による学会報告や論文投稿に積極的に取り組んでいる一方、大学院での指導機会や研究費が必ずしも十分でなく、若手の多くはポストを得るための研究業績に不安を持っていることがわかった。また、文部科学省「学校基本調査」及び「学校教員統計調査」データ、及び独自のアンケート調査を分析し、同年齢でも女性の大学教員の職階は男性よりも低く、同年齢・同職階でも男性より給与が低いこと、女性教員比率が高いと女子学部生の入学比率や女性教員の採用確率が高まることがわかった。文部科学省「学校基本調査」及び「学校教員統計調査」の高等教育機関における個票データの使用許可を受けて、大学教員の現状を経済学分野も含めて研究分野による相違を比較しながら総括的に分析を進めることができた。データを分析に使用するためのデータ整理準備に時間がかかる可能性が懸念されたが、申請準備段階でデータ項目や分析手法を吟味済みであったこと、個票データがすぐに分析できる形式で提供されたために、データ提供後にすぐに分析にかかることが可能であり、研究実績概要に支援したような興味深い分析結果を速やかに得ることができた。具体的には、俸給、昇進面で女性は男性に及んでいないことが明らかになったが、積極的に女性が採用されるように急速な変化が見られることも示された。分野別の分析からは経済学分野では女性の進出が時に理系よりも遅れていることが示されている。女性教員の存在と女性教員採用や学部女性学生との関連も示され女性教員のロールモデルの役割も示唆されている。このように今後の論文執筆に向けて順調な研究成果を得ることができている。さらに、本分析結果を元に公的データからなお不足する情報の補充を検討することが可能となっており、懸案であったアンケート調査項目の調整を具体的に進める目途がたっている。また、海外連携についても、Yoosoon Chang氏の協力により米国以外のアジアとの連携を具体的に進めることができており、グローバル化する学術研究の現場で必要な支援に関する知見を深めることができている。27年度が最終年度であるため、記入しない。応用ミクロ計量分析本年度は本課題最終年度となる。前年度から分析中の文部科学省「学校基本調査」及び「学校教員統計調査」個票データ分析を進め、基本的な結果を論文にまとめて研究報告を行い、フィードバックを得ながら分析の精査を進める。本分析は、各調査ごとにサブグループを組み、共通の分析ソフトウェアとしてSTATAを用いながらそれぞれのグループにおいて分析を進めており、これを継続実施する。
調和解析の研究及びその多次元信号処理への応用

本研究では調和解析学,及びその多次元信号処理への応用について研究を行った.研究代表者の新井仁之の主な成果は次のものである.方位選択性をもち,完全再構成性をみたし,低階から高階のガウス導関数と類似の形状を有する新しいフレームレットを構成し,さらにそれを用いた円形的幾何的フィルタリングを考案して,研究代表者らが発見したフラクタル螺旋錯視のフレームレット解析を行った.これによりフラクタル螺旋錯視の錯視成分を特定し,それを抽出することに成功した.円形的幾何的フィルタリングは大脳皮質V4野の視覚情報処理と関連していると考えられる.なお以上の成果は新井しのぶとの共同研究による.また,この他にも研究代表者はフレームの理論的研究を行い,多次元かつ一般のサンプリング行列に関するポリフェーズ行列とフレーム作用素に関する結果も得た.なおフラクタル螺旋錯視の錯視成分の抽出に関する結果は,科研費NEWS(2009年1号)でも取り上げられた:http://www.jsps.go.jp/j-grantsinaid/31_result/rikou/37_arai.html本研究では調和解析学,及びその多次元信号処理への応用について研究を行った.研究代表者の新井仁之の主な成果は次のものである.方位選択性をもち,完全再構成性をみたし,低階から高階のガウス導関数と類似の形状を有する新しいフレームレットを構成し,さらにそれを用いた円形的幾何的フィルタリングを考案して,研究代表者らが発見したフラクタル螺旋錯視のフレームレット解析を行った.これによりフラクタル螺旋錯視の錯視成分を特定し,それを抽出することに成功した.円形的幾何的フィルタリングは大脳皮質V4野の視覚情報処理と関連していると考えられる.なお以上の成果は新井しのぶとの共同研究による.また,この他にも研究代表者はフレームの理論的研究を行い,多次元かつ一般のサンプリング行列に関するポリフェーズ行列とフレーム作用素に関する結果も得た.なおフラクタル螺旋錯視の錯視成分の抽出に関する結果は,科研費NEWS(2009年1号)でも取り上げられた:http://www.jsps.go.jp/j-grantsinaid/31_result/rikou/37_arai.html本年度,研究代表者の新井仁之は主に視覚の数理モデルへの実装という視点からフレームレットの構成を行った。フレームレットとはウェーブレットをさらに発展させたもので,その一般論は2000年頃よりDaubechiesら数学者によって研究されてきた。視覚の数理モデルに新井仁之はこれまで最大重複双直交ウェーブレットを用いてきたが,単純細胞の方位選択性,周波数選択性の観点から改善の余地があった。そこでこれを改善するために新しいウェーブレット,フレームを構成し,2007年に論文発表した(新井しのぶと共著)。しかしこれは有限次元の線形空間上のウェーブレット,フレームであった。調和解析的な視点からすると,より一般の無限次元線形空糊,特に$1^{2}(\boldsymbol{Z}\times \boldsymbol{Z})$や$L^{2}(\boldsymbol{R}\times\boldsymbol{R})$のタイト,フレームになっているものが構成できることが望ましい。本年度,新井はそのようなタイト,フレームレットの構成を行った(新井しのぶと共同)。この新しいフレームレットは視覚の神経生理学的な視点からも,望ましい点を有している。このことから,新井,新井のフレームレットは視覚の数学的方法を用いた研究のみならず,画像処理などへの応用も十分に期待できるものである。分担者の勘甚,洞,立澤は調和解析に関する次のような成果を得た。勘甚は単位円板上のバーディ空間に属する関数のフーリエ係数について成り立つ,よく知られたペイリーの不等式をハンケル変換に対して考察し,類似の型の不等式を得た。洞は次の(イ),(ロ)につてい成果を得た:(イ)量子確率論の方法による群の表現とグラフのスペクトルの漸近解析,(ロ)無限対称群および無限環積群の指標の確率論的導出。立澤は重み付きHerz空間のウェーブレットによる特徴付けを与え,重み付きHerz空間においてウェーブレット関数系が無条件基底になっていることを示した。立澤はまたBesselポテンシャルに関するLiebの不等式を,重みの付いた形で拡張した。繰越による研究成果眼球から入ってきた視覚に関する情報は,脳の中でさまざまな処理が行われ,それにより視知覚が生じる.その視覚情報処理の中で大脳皮質にあるV1野における単純細胞による処理は基本的なものの一つである.その単純細胞の数理モデルとして,これまでGabor関数,ODOG関数,あるいはガウス導関数が用いられてきた.しかしこれらはコンパクト台を持たないという欠点をもっている.これに対して私たちは20年度までに単純かざぐるまフレームレットという新しいフレームレットの一つを構成した.これは単純細胞の数理モデルであり,コンパクト台をもち,方位選択性があり,さらに多重解像度構造も有している.本研究では特にその多次元信号処理への応用研究を行っていた.20年度の繰り越しでは,招待者の都合により急に中止となったドイツの大学での研究発表・研究情報収集の代替として,21年度に国内で開催された国際会議に出席して研究情報の収集を行い,また単純かざぐるまフレームレットとその応用に関する研究成果を日本応用数理学会2009年度年会(於大阪大学)におけるウェーブレットセッションで特別講演として発表した.さらに,ウェーブレットの専門的な研究集会『時間周波数解析の手法と理工学的応用』(於京都大学数理解析研究所)でも研究発表を行った.

これらの学会,研究集会で研究情報の取得も行った.今回の繰り越しによって,研究成果の外部発表,そしてかざぐるまフレームレットの応用を研究するにあたって有用な情報を得ることができた.われわれが考案した単純かざぐるまフレームレットと幾何学的フィルタリングの応用研究,フレームレットの調和解析に関する研究を行った.フレームレットはもともと2003年にDaubechiesらが提案した一般的な枠組みであるが,われわれの単純かざぐるまフレームレットは視覚の数理モデルに適するように構成した新しいフレームレットの一つである.単純かざぐるまフレームレットならびに幾何学的フィルタリングの多次元信号処理への応用として,われわれが考案したフラクタル螺旋錯視に関する研究を続け,それらの結果を含む論文を執筆した.これは日本応用数理学会の欧文誌Japan Journal of Industrial and AppliedMathematicsの招待論文として公表予定である.単純かざぐるまフレームレットのフラクタル螺旋錯視への応用に関する結果は,科研費ニュース2009年No.1でも取り上げられた.このほか,フレームに関する調和解析の理論的側面の研究を行い,いくつかの成果を得た.まず数学的な準備として,多次元マルチレート信号処理で使われているいくつかの定理に独自の数学的に厳密な証明を与えた.さらにポリフェーズ行列とフレーム作用素に関するBolcskei-Hlawatsch-Feichtingerの結果をより多次元の一般的なサンプリング行列に対して証明した.また,ウェーブレット・フレームに対する定常法を整備した.これらの結果ならびに単純かざぐるまフレームレットに関する結果を含めた著書『ウェーブレット』(共立出版)を発表した.
絵画の保存修復のための最先端非破壊分析技術の開発

美術館で所蔵されている絵画は、年月とともに保存修復が必要となる。絵具は一種の化学薬品であり、常に反応・変質・劣化しており、絵画修復において、特に絵具の成分分析は欠かせない要素となっている。本研究は理系の先端技術を社会的関心の高い、芸術作品の保存修復に応用する点が研究の特色である。本研究では国際水準の絵画分析のための先端的X線分析装置・放射光複合X線分析技術を開発し、保存修復の専門家と協力して実際の絵画を分析し、用いられている絵具を解明することをめざした。蛍光X線イメージングでは、微少なX線ビームを試料に照射し発生する蛍光X線を検出して画像化することで、絵画の絵具と対応する元素画像が得られ、ブルカー(株)から分析装置が製品化され、広く用いられている。微少ビームによる元素マッピングを用いる方法は絵画のような大面積試料の分析には時間がかかって不向きである。SPringー8の放射光を使うと、ビーム幅約160 mm×高さ6 mmの大型単色X線の利用が可能で、X線吸収端差分法をつかい、分析元素の吸収端の前後100eVのエネルギーで試料を透過したX線強度を測定し、差をとると元素の濃度に比例する画像がえられる。各元素ごとに画像化でき、10cm四方を5分程度で画像化できる。この方法を使うと、塗りつぶされた絵の復元が可能である。この方法で化学状態の違いも、吸収端のケミカルシフトを利用すると画像化が可能であることを実証できた。マチスの絵の背景をCo-K吸収端とPb-L3吸収端でイメージングをおこなうと、表の絵具層とは異なるモチーフが背景層に存在することが判明し、マティスの新たな芸術的試みを初めて化学的に解明できた。本研究では他の多くの絵画作品もポータブル装置で分析し、絵画・壁画の分析手法のスタンダードを構築することをめざした。本研究の一番の課題は、世界的な絵画作品を放射光施設に持ち込んで、分析を行うことであったが、岡山の大原美術館のご理解、ご協力をえてついに昨年の12月に実現し解決できたことである。研究対象となった作品はアンリ・マティス作「マティス嬢の肖像」1918年制作. 72.9×53.9 cm(大原美術館蔵)である。作品は数十億円の価値があるので、取扱は極めて慎重に行わなければならず、輸送も日通の美術品の輸送専用のトラックをもちいた。放射光のX線は強いというイメージが一般のひとにあるため、絵画の放射線損傷が懸念されるが、本研究では2結晶モノクロメータにより、単色化されたX線を使うので、フラックスとしては低く問題がないことを、現代画をもちいた予備実験もおこなって、検証した。今年度も、貴重な作品をポータブル分析装置で研究する機会にめぐまれた。東京芸術大学の卒業制作として、熊谷守一(1880-1977)と青木繁(1882-1911)の自画像の油彩画2作品を分析することができた。特に、我々が開発した、ポータブル粉末回折計の評価を行うことができたのは順調であった。今後の研究を加速する要因として分担者の東京芸大木島研究室にポータブルラマン分光分析システムi-Ramanを、本研究費で導入できたことである。絵の具の分析に、ラマン分光システムは不可欠の装置であるが、これまで芸大にはなかったことから、本年度芸大に設置し、測定法を伝授できたことから、ルーチン的に活用されることであろう。絵画の分析において、我々の研究は「ポータブル分析装置の開発」と「絵画分析への放射光の導入研究」の2つが、パイオニア的研究として位置づけることができる。ポータブル装置として開発に成功したものは、微小部蛍光X線分析装置、ガラスの軽元素の分析を得意とする蛍光X線分析装置、大型資料用蛍光X線分析装置である。粉末X線回折計は、3台作成したことによりすでに開発目標を達成しており、メーカーによる市販化が期待される。この他、紫外可視蛍光分光分析装置の開発にも成功している。今年度が最終年度になるが、これらの装置はすでに応用のステージとなっており、この1年で一通り完成を見ることができるであろう。放射光の絵画への応用では、今年度の目標は、ピカソの作品を持ち込んで分析することで、大原美術館の協力が不可欠である。SPringー8の放射光を使うと、ビーム幅約160 mm×

高さ6 mmの大型単色X線の利用が可能で、X線吸収端差分法をつかい、分析元素の吸収端の前後100eVのエネルギーで試料を透過したX線強度を測定し、差をとると元素の濃度に比例する画像がえられる。各元素ごとに画像化でき、10cm四方を5分程度で画像化できる。この方法を使うと、塗りつぶされた絵の復元が可能である。この方法で化学状態の違いも、吸収端のケミカルシフトを利用すると画像化が可能であることを実証できた。マチスの絵の背景をCo-K吸収端とPb-L3吸収端でイメージングをおこなうと、表の絵具層とは異なるモチーフが背景層に存在することが判明し、マティスの新たな芸術的試みを初めて化学的に解明できた。本研究では他の多くの絵画作品もポータブル装置で分析し、絵画・壁画の分析手法のスタンダードを構築することをめざした。本研究の一番の課題は、世界的な絵画作品を放射光施設に持ち込んで、分析を行うことであったが、岡山の大原美術館のご理解、ご協力をえてついに昨年の12月に実現し解決できたことである。研究対象となった作品はアンリ・マティス作「マティス嬢の肖像」1918年制作. 72.9×53.9 cm(大原美術館蔵)である。作品は数十億円の価値があるので、取扱は極めて慎重に行わなければならず、輸送も日通の美術品の輸送専用のトラックをもちいた。放射光のX線は強いというイメージが一般のひとにあるため、絵画の放射線損傷が懸念されるが、本研究では2結晶モノクロメータにより、単色化されたX線を使うので、フラックスとしては低く問題がないことを、現代画をもちいた予備実験もおこなって、検証した。今年度も、貴重な作品をポータブル分析装置で研究する機会にめぐまれた。東京芸術大学の卒業制作として、熊谷守一(1880-1977)と青木繁(1882-1911)の自画像の油彩画2作品を分析することができた。特に、我々が開発した、ポータブル粉末回折計の評価を行うことができたのは順調であった。今後の研究を加速する要因として分担者の東京芸大木島研究室にポータブルラマン分光分析システムi-Ramanを、本研究費で導入できたことである。絵の具の分析に、ラマン分光システムは不可欠の装置であるが、これまで芸大にはなかったことから、本年度芸大に設置し、測定法を伝授できたことから、ルーチン的に活用されることであろう。本研究では国際水準の絵画分析のための先端的X線分析装置・放射光複合X線分析技術を開発し、保存修復の専門家と協力して実際の絵画・壁画の分析手法のスタンダードを構築することを目的とする。本目的を達成するために、色材の分析で最も信頼できる物質情報を与える、絵画分析に適した粉末X線回折計を開発した。これまでの科研費の補助により、X線源にCu管球を備えたプロトタイプのθ-θ型ゴニオメーター方式の回折計をすでに試作している。ただ、本方式の回折計による絵画分析の最大の問題点は、絵画が平面試料であるため、現行のCu管球では、2θ=25°より低角側は絵にぶつかって測れない。そこで、Cu管球をCr管球に交換すると、波長が長くなるので回折角2θは大きくなり、Cu管球で測れないCu管球の2θ=17°までの回折ピークが測れるようになる。この領域には、物質を特徴づける重要な基本反射が多いので、格段に色材の相同定能力が向上する。X線管球にはその場で交換できる新開発のMoxtek社のMAGPRO管球を導入した。60kVまで電圧をかけることができ、Cr管球でも高エネルギーの白色X線が発生する。
生理活性ペプチドの、C-末端アミド化が及ぼす構造化学的影響の解明

分子コンフォメーションは両者ともに優位な差は見られずいずれもエネルギー的に安定な構造を取っていたにもかかわらず、C-末端と隣接分子との相互作用及び水素結合様式に関して顕著な差が見られた。即ちアミド体はCl^-が隣接分子のアミド基間で'head-to-head'型の水素結合を形成しているのに対し、OH体は隣接分子のアミド基とカルポキシル基との間で'head-to-tall'型の水素結合を形成していた。更に水素結合式を、それに関与する極性原子及び官能基の相対配置を基に考察した結果、水素結合能に関してアミドはアミド基の方、OH体はケト基の方がより強いということが明らかとなった。更にペプチド分子の会合様式はC-末端アミド化やCl^-の様なアニオンの共存で大きく変化するということが示唆された。2.オピオイドμ-レセプターに対して強力なアゴニスト活性を示すendomorphin2(EM2:YPFF-NH2)とそのOH体(EM2OH)の溶液中でのコンフォメーション解析:EM2,EM2OHのNMRによるスペクトル解析の結果trifluoroethylalcohol(TFE)中,軽水中において両ペプチドはPro回りのアミド結合がtrans, cisの両異性体が共存しているのに対し、擬似膜環境下においてはtrans体のみが存在していた。更にROESYスペクトルより得られた各々の距離情報を基にsimulated annealing法を併用した分子動力学計算により溶液中での可能なコンフォメーションを各々50個構築し主鎖の構造に基づいて重ね合わせを行った。その結果TFE,軽水中ではEM2は伸長構造を、EM2OHはその電子状態にかかわらず伸長構造と折れ曲がり構造の両構造を取っていた。それに対して擬似膜環境下においてEM2は伸長構造と折れ曲がり構造が2:1、EM2OHは伸長構造のみが存在していた。以上のことよりC-末端アミドは擬似膜環境下においてはコンフォメーションの形成特にプロリン回りがtransの折れ曲がり構造の形成に寄与していることが示唆されたものの、あまり環境の変化に影響されない一定のコンフォーマーを示した。一方OH体はその電子状態にかかわらずflexibleな立体構造を示した。以前より生理活性ペプチドのC-末端アミド化の重要性及びその意義を解明する為に、X-線結晶構造解析、NMRによる溶液構造解析、分子動力学計算等の手法を駆使してC-末端のアミド基とカルボキシル基の構造化化学的な変化、特に分子コンフォメーションや隣接分子との相互作用、分子間水素結合様式に関して詳細に比較し、それらの差異を解明する研究を進めている。そこで今年度は一連の研究に用いる、オピオイドμ-レセプターに対して極めて高い親和性を持つ内因性ペプチドの1つであるendmorphin-2(Tyr-Pro-Phe-Phe-NH2)とそのフリー体(Tyr-Pro-Phe-Phe-OH)の固相法による大量合成、結晶化、trinuoroethylalcohol(TFE)中での一次元及び二次元NMRの測定を行った。現在までのところX-線結晶解析が可能な単結晶が得られておらず今後は引き続き結晶化を行うと共に、TFE中でのコンフォメーション解析、膜環境下でのNMRの測定等を計画している。又、本研究課題に密接に関連した研究の一環として一連のC-末端がアミド化されたジペプチド(Val-Gly-NH2,Ser-Phe-NH2,Gly-Tyr-NH2,Pro-Tyr-NH2)の塩酸塩と、C-

末端がカルポキシル基のフリー体のものとについて結晶構造を比較した。分子コンフォメーションは両者ともに優位な差は見られずいずれもエネルギー的に安定な構造を取っていたにもかかわらず、C-末端と隣接分子との相互作用及び水素結合様式に関しては顕著な差が見られた。既に報告しているようにアミド体はCl^-が隣接分子のアミド基間で'head-to-head'型の水素結合を形成しているのに対し、フリー体は隣接分子のアミド基とカルボキシル基との間で'head-to-tail'型の水素結合を形成していた。更に水素結合様式を、それに関与する極性原子及び官能基の相対配置を基に考察した結果、水素結合能に関してアミド体はアミド基の方が、フリー体はケト基の方がより強いということが明らかとった。更にペプチド分子の会合様式はC-末端アミド化やCl^-の様な生物学的アニオンの共存で大きく変化するのでなないかということが示唆された。C-末端アミド化が生理活性ペプチドのコンフォメーション及びその分子間相互作用に及ぼす影響を構造化学的に解明する一環として、オピオイドμ-レセプターに対して強力なアゴニスト活性を示す内因性ペチチドのアミド体Endomorphin2(EM2:YPFF-NH2)とそのOH体(EM2OH:YPFF-OH)のtrifluoroethylalcohol(TFE)中,軽水中及びリン脂質を共存させた膜環境下中での立体コンフォメーションを決定する為に、NMRによるスペクトル解析を行った。その結果、両ペプチドはTFE中、軽水中ともにPro回りのペプチド結合に関してtrans,cisの両異性体が共存していた。その存在比はTFE中においてはEM2,EM2OHは各々trans:cisが3:2、1:1,軽水中においては共にtrans:cis=3:2であった。よって両異性体のchcmical shiftを決定した。それに対してリン脂質共存下において両ペプチドはtrans体のみがメジャーコンフォーマーで、cis体との存在比を決定することは困難であったのでtrans体のみのchemical shiftを決定した。更にROESYスペクトルより得られた各々の距離情報を基にシュミレーテッド・アニーリング法を併用した分子動力学計算により溶液中での可能なコンフォメーションを各々50個構築し主鎖の構造に基づいて重合わせを行った結果、両ペプチドのコンフォメーション間に優位に差のあることがわかった。即ちTFE容液中においてEM2はtrans,cis体いずれの場合も伸長構造を取っていたが、EM2OHのtrans,cis体は折れ曲がり構造と伸長構造の両コンフォーマーが共存していた。そしてこれらのコンフォメーションの特徴は軽水中においても保持されていた。それに対してリン脂質共存下においてはEM2は伸長構造と折れ曲がり構造がほぼ2:1で存在しているのに対して、EM2OHは伸長構造が主コンフォーマーとして存在していた。以上のことよりC-末端アミドはコンフォメーションの形成特にプロリン回りがtransの折れ曲がり構造の形成に大きく寄与していることが示唆された。
ヒト歯髄内のカテコールアミンとその関連酵素の免疫組織学的検討

ヒト歯髄内のカテコールアミンの量を計測したところ,ドーパが最も多く,次いでノルアドレナリンで,ドーパミンとアドレナリンは少なかった.チロシンからドーパへの生合成酵素であるチロシン水酸化酵素(TH),ドーパからドーパミンへの生合成酵素である芳香族アミノ酸脱炭酸酵素(AADC),ドーパミンからノルアドレナリンの生合成酵素であるドーパミンベータ-水酸化酵素(DBH),ノルアドレナリンからアドレナリンの生合成酵素であるフェニルエタノールアミンN-メチル基転移酵素(PNMT)の免疫組織化学的局在を明らかにすることによってヒト歯髄内でのカテコールアミンの局所的な生成について調べた.ドーパの免役組織化学的染色では,細動脈の壁に密接して陽性線維が見られたが,その数は極めて少数であった.カテコールアミンの生合成酵素であるTH,AADC,DBHは細動脈の壁に密接して存在する神経細線維や終末と思われる部位に存在した.THが最も多く染まり次いでAADC,DBHの順であった.PNMT陽性神経線維は認められなっかた.このことはヒト歯髄内ではノルアドレナリンまでの生合成が行われていることを示している.AADCは神経のほかに血管壁にも存在した.また,カテコールアミンの分解酵素である,カテコール-O-メチル基転移酵素(COMT)もAADCと同様に血管壁に存在した.ドーパはCOMTの存在下で3-メソキシチロシンに分解される.AADCとCOMTが血管壁に共存することは,両者がドーパの代謝に関与していることを示唆している.ヒト歯髄内のカテコールアミンの量を計測したところ,ドーパが最も多く,次いでノルアドレナリンで,ドーパミンとアドレナリンは少なかった.チロシンからドーパへの生合成酵素であるチロシン水酸化酵素(TH),ドーパからドーパミンへの生合成酵素である芳香族アミノ酸脱炭酸酵素(AADC),ドーパミンからノルアドレナリンの生合成酵素であるドーパミンベータ-水酸化酵素(DBH),ノルアドレナリンからアドレナリンの生合成酵素であるフェニルエタノールアミンN-メチル基転移酵素(PNMT)の免疫組織化学的局在を明らかにすることによってヒト歯髄内でのカテコールアミンの局所的な生成について調べた.ドーパの免役組織化学的染色では,細動脈の壁に密接して陽性線維が見られたが,その数は極めて少数であった.カテコールアミンの生合成酵素であるTH,AADC,DBHは細動脈の壁に密接して存在する神経細線維や終末と思われる部位に存在した.THが最も多く染まり次いでAADC,DBHの順であった.PNMT陽性神経線維は認められなっかた.このことはヒト歯髄内ではノルアドレナリンまでの生合成が行われていることを示している.AADCは神経のほかに血管壁にも存在した.また,カテコールアミンの分解酵素である,カテコール-O-メチル基転移酵素(COMT)もAADCと同様に血管壁に存在した.ドーパはCOMTの存在下で3-メソキシチロシンに分解される.AADCとCOMTが血管壁に共存することは,両者がドーパの代謝に関与していることを示唆している.歯髄内に交感神経(すなはちアドレナージック神経)が血管と密接な関連をもって存在することは蛍光組織化学的方法によってすでに明らかにされている.生化学的方法によるカテコールアミンの量の測定ではノルアドレナリンがもっとも多いとされているが,最近歯髄内にドーパあるいはドーパミンが比較的多量に存在すると報告されている.また,ドーパ含有神経の存在も報告されている.カテコールアミンの歯髄内での生合成の過程については未解明なことが多い.そこで生合成に関与する4つの酵素すなはちTyrosine hydroxylase(TH), Aromatic L-amino acid decarboxylase(AADC), Dopamine-hydroxylase(DBH), Phenylethanolamine-N-methyltransferase(PNMT)の歯髄内での局在を免疫組織化学的方法によって調べた.また歯髄内のカテコールアミンの量も計測した.その結果,1,ヒト歯髄内のカテコールアミンの量を計測したところ,ドーパが最も多く,次いでノルアドレナリンで,ドーパミンとアドレナリンは少なかった.2,ドーパの免疫組織化学的染色では,細動脈の壁に密接して陽性線維が見られたが,その数は極めて少数であった.3,カテコールアミンの生合成酵素であるTH, AADC, DBHは細動脈の壁に密接して存在する細線維や終末と思われる部位に存在した.THが最も多く染まり次いでAADC, DBHの順であった.PNMT陽性神経線維は認められなかった.AADCは神経のほかに血管壁にも存在した.4,カテコールアミンの分解酵素である,Catechol-O-methyltransferase(COMT)はAADCと同様に血管壁に存在した.このことはヒト歯髄内ではノルアドレナリンまでの生合成が行われていることを示している.また,AADCとCOMTが血管壁に共存することは,両者がドーパの代謝に関与していることを示唆している。歯髄内に交感神経(すなはちアドレナージック神経)が血管と密接な関連をもって存在することは蛍光組織化学的方法によってすでに明らかにされている.生化学的方法によるカテコールアミンの量の測定ではノルアドレナリンがもっとも多いとされているが,最近ドーパやドーパミンが多量に歯髄内に存在するとの報告がなされている.また,ドーパが脳内では伝達物質様の働きをするとの報告もされており,歯髄内の交感神経の伝達物質としてはノルアドレナリンのみかどうかは議論の余地のあるところである.

そこで本研究ではヒト歯髄内でのカテコールアミンの生合成について明らかにする目的で,ヒト第三大臼歯の歯髄を用いて,チロシン水酸化酵素(TH),芳香族アミノ酸脱炭酸酵素(AADC),ドーパミンベータ-水酸化酵素(DBH),フェニールエタノールアミンN-メチル基転移酵素(PNMT)と分解酵素であるカテコール基Oメチル化転移酵素(COMT)の存在様式を,免疫組織学的方法で検索した.またカテコールアミン生合成酵素の活性も計測した.その結果,1,ヒト歯髄内ではTH,AADC,DBHの活性が認められ、そのうちAADCの活性が最も高かった.2,カテコールアミンの生合成酵素であるTH,AADC,DBHは細動脈の壁に密接して存在する細線維や終末と思われる部位に存在した.PNMT陽性神経線維は認められなかった.AADCは神経のほかに血管壁の平滑筋細胞にも存在した.3,COMTは血管壁の内皮細胞に存在した.得られた結果は交感神経の最終産物がノルアドレナリンであることを強く示唆している.ヒト歯髄では,カテコールアミンは神経内に存在し、主として血管とかかわっていることを示しているが,AADCが平滑筋細胞にCOMTが内皮細胞に存在することは,ドーパが非神経組織に存在し,両者がドーパの代謝に関与していることをを示唆している.
生殖細胞分化過程におけるSINEの分子機構

生殖細胞中でRNAを介した転移因子が、実際に転移する現象は未だ報告されておらず、精巣分化過程を人為的に制御できるウナギの精巣を用いることで、SINEの転写及び、逆転写の機構が解明されれば、他に類のない画期的な報告ができるものと考え、次の通り実験を行った。ウナギのSINE配列を含んだDNA断片を単離して、塩基配列を決定、ウナギ精巣の各分化段階におけるSINEユニットの転写産物の存在を、ラジオアイソトープ存在下でのプライマー伸長反応を反応産物の電気泳動により検出した。また各分化段階のサンプルより粗タンパク質を抽出して、逆転写酵素活性測定を行い発現時期を特定、その活性を指標として逆転写酵素の精製を進め、アミノ酸の部分配列を決定、その配列より類推される塩基配列をプライマーとしてPCR法により逆転写酵素遺伝子の塩基配列を決定した。実験は現在も進行中であり、中にはサンプルを取り寄せている最中のものもあり、今後様々なデータも今後増えることが予想され、引き続き検討を加えていくことが必要である。
中高年者の運動負荷テストとくに最大酸素摂取量の間接測定法の検討

中高年者男子15名(30歳代4名, 40歳代7名, 50歳代2名, 60歳打2名),女子19名(30歳代10名, 40歳代6名, 50歳代3名)に対して,モナーク社製自転車エルゴメーターを用いて運動負荷テストを実施した.心電図を連続的にモニターしながら,血圧を1分ごとに測定した.テスト中,最大下の負荷を4分ごとに3段階にわたって漸増的に与えた後に, 1分ごとに負荷を増して疲労困憊に至らせた.その際に呼気ガスを連続的に分析し,酸素摂取量,二酸化炭素排出量,換気量,呼吸商を測定した.別に最大下の負荷の4分目の心拍数とその際の負荷強度から,〓strandのnomogramを用いて間接的に最大酸素摂取量を測定し,前記の運動負荷テストから直接測定した最大酸素摂取量と比較した.中高年者の場合は,運動負荷テストで最大酸素摂取量が得られたかどうかの判定規準が確立されていないので,次のケースに区分して直接法と間接法とを比較した. A)酸素摂取量のレベリングオフがみられ,かつ呼吸商が1.0以上に達したもの;B)レベリングオフがみられなかったが,呼吸商が1.0以上に達したもの;C)レベリングオフがみられたが,呼吸商が1.0に達しなかったもの;D)レベリングオフも呼吸商1.0も達成されなかったもの;E)疲労困憊に至らなかったもの.この区分による結果を以下に示す:区分A(13名)では,直接法値は平均1.96l1分,間接法値は2.1l1分,直接法値の平均から間接法値の平均を減じた値は-0.1l1分であった.B(10名)では各々, 2.77l1分, 2.6l1分, 0.2l1分, C(6名)では1.50l1分, 1.9l1分, -0.4l1分, D(4名)では, 1.71l1分, 1.7l1分,両法間の差はゼロであった. Eは1名のみであり, 1.23l1分, 1.8l1分, -0.6l1分であった.なお, 50歳以上で異常を呈した者5名(徐脈と運動時高血圧)を用いて,ホルダー心電計によって, 24時間の心電図を記録した.中高年者男子15名(30歳代4名, 40歳代7名, 50歳代2名, 60歳打2名),女子19名(30歳代10名, 40歳代6名, 50歳代3名)に対して,モナーク社製自転車エルゴメーターを用いて運動負荷テストを実施した.心電図を連続的にモニターしながら,血圧を1分ごとに測定した.テスト中,最大下の負荷を4分ごとに3段階にわたって漸増的に与えた後に, 1分ごとに負荷を増して疲労困憊に至らせた.その際に呼気ガスを連続的に分析し,酸素摂取量,二酸化炭素排出量,換気量,呼吸商を測定した.別に最大下の負荷の4分目の心拍数とその際の負荷強度から,〓strandのnomogramを用いて間接的に最大酸素摂取量を測定し,前記の運動負荷テストから直接測定した最大酸素摂取量と比較した.中高年者の場合は,運動負荷テストで最大酸素摂取量が得られたかどうかの判定規準が確立されていないので,次のケースに区分して直接法と間接法とを比較した. A)酸素摂取量のレベリングオフがみられ,かつ呼吸商が1.0以上に達したもの;B)レベリングオフがみられなかったが,呼吸商が1.0以上に達したもの;C)レベリングオフがみられたが,呼吸商が1.0に達しなかったもの;D)レベリングオフも呼吸商1.0も達成されなかったもの;E)疲労困憊に至らなかったもの.この区分による結果を以下に示す:区分A(13名)では,直接法値は平均1.96l1分,間接法値は2.1l1分,直接法値の平均から間接法値の平均を減じた値は-0.1l1分であった.B(10名)では各々, 2.77l1分, 2.6l1分, 0.2l1分, C(6名)では1.50l1分, 1.9l1分, -0.4l1分, D(4名)では, 1.71l1分, 1.7l1分,両法間の差はゼロであった. Eは1名のみであり, 1.23l1分, 1.8l1分, -0.6l1分であった.なお, 50歳以上で異常を呈した者5名(徐脈と運動時高血圧)を用いて,ホルダー心電計によって, 24時間の心電図を記録した.
粥状動脈硬化性プラーク破綻の予知的診断法に関する研究

1.頚動脈エコーによるプラーク性状の解析北里大学病院超音波検査室の設置の超音波断層装置(アロカ社製SSD-5500)、7.5MHzリニア型探蝕装置を用い、B-modeおよびPower Doppler法(ドプラ入射角<60度)により、両側総頸動脈・内頸動脈を長軸および短軸操作で解析した。症例は、糖尿病、高血圧、高脂血症などの動脈硬化症の危険因子を有する約2,000例について、両側総頸動脈・内頸動脈の超音波検査を施行した。その結果、プラーク性状は動脈硬化の進行に伴い透明型、繊維型、石灰型、潰瘍型の順に悪化し、潰瘍型はプラークが破綻し脳梗塞を発症する危険率が高かった。さらに、動脈硬化の進展と危険因子との関連性では、糖尿病と高血圧の合併例で動脈硬化の進展度が高かった。血管壁の硬化度を反映するbaPWVは、高血圧例で最も高値を示した。2危険因子例では糖尿病と高血圧の合併例で高値傾向を示し、これらの危険因子は動脈硬化の進展度への影響が強いと考えられた。3..血中脂質関連マーカーおよび炎症マーカーの測定MMP-2遺伝子において、5' UTR上流2kbを含む領域をPCRにより増幅し、得られたPCR増幅産物を鋳型として2nd PCRを行った。この2nd PCR増幅産物の塩基配列解析を行い、解析結果に基づきSNPの遺伝子型を決定した。また、MMP-9遺伝子では、ATG上流約-90に位置するマイクロサテライトを含む領域を蛍光標識プライマを用いてPCRにより増幅した。得られた蛍光標識PCR増幅産物のフラグメント解析を行い、サイズ分離パターンに基づき遺伝子型の分類を行った。1.頚動脈エコーによるプラーク性状の解析頚動脈プラーク性状は4種類の中で,石灰化型プラークが最も多く検出された.また,%stenosisが75%以上の狭窄性病変でpulse waveの減少傾向を認めた.さらに,疾患との関連性については高血圧と糖尿病との合併例で高度の狭窄性変化が多数認められた.2.脂質関連マーカーとの関連性1.頚動脈エコーによるプラーク性状の解析北里大学病院超音波検査室の設置の超音波断層装置(アロカ社製SSD-5500)、7.5MHzリニア型探蝕装置を用い、B-modeおよびPower Doppler法(ドプラ入射角<60度)により、両側総頸動脈・内頸動脈を長軸および短軸操作で解析した。糖尿病、高血圧、高脂血症などの動脈硬化症の危険因子を有する約2,000例について、両側総頸動脈・内頸動脈の超音波検査を施行し、IMT(内中膜複合体)、% stenosis(狭窄率)、Pulse wave velocity(脈派)を計測した。プラークは性状により、echolucent type(透明型)、echogenic type(繊維型)、calcification type(石灰型)、ulcer type(潰瘍型)の4段階に分類した。3.免疫組織化学染色粥状動脈硬化性プラーク組織で10%パラフィン包埋切片を作成し、MMP-2,9の抗ヒトモノクロナール抗体を使用してLSAB法により免疫組織染色を行う。4.血中脂質関連マーカーおよび炎症マーカーの測定1.頚動脈エコーによるプラーク性状の解析北里

大学病院超音波検査室の設置の超音波断層装置(アロカ社製SSD-5500)、7.5MHzリニア型探蝕装置を用い、B-modeおよびPower Doppler法(ドプラ入射角<60度)により、両側総頸動脈・内頸動脈を長軸および短軸操作で解析した。糖尿病、高血圧、高脂血症などの動脈硬化症の危険因子を有する約2,000例について、両側総頸動脈・内頸動脈の超音波検査を施行し、IMT(内中膜複合体)、% stenosis(狭窄率)、Pulse wave velocity(脈派)を計測した。プラークは性状により、echolucent type(透明型)、echogenic type(繊維型)、calcification type(石灰型)、ulcer type(潰瘍型)の4段階に分類した。その結果、プラーク性状は動脈硬化の進行に伴い透明型、繊維型、石灰型、潰瘍型の順に悪化し、潰瘍型はプラークが破綻し脳梗塞を発症する危険率が高かった。さらに、動脈硬化の進展と危険因子との関連性では、糖尿病と高血圧の合併例で動脈硬化の進展度が高かった。血管壁の硬化度を反映するbaPWVは、高血圧例で最も高値を示した。2危険因子例では糖尿病と高血圧の合併例で高値傾向を示し、これらの危険因子は動脈硬化の進展度への影響が強いと考えられた。3.血中脂質関連マーカーおよび炎症マーカーの測定MMP-2遺伝子において、5'UTR上流2kbを含む領域をPCRにより増幅し、得られたPCR増幅産物を鋳型として2nd PCRを行った。この2nd PCR増幅産物の塩基配列解析を行い、解析結果に基づきSNPの遺伝子型を決定した。また、MMP-9遺伝子では、ATG上流約-90に位置するマイクロサテライトを含む領域を蛍光標識プライマを用いてPCRにより増幅した。得られた蛍光標識PCR増幅産物のフラグメント解析を行い、サイズ分離パターンに基づき遺伝子型の分類を行った。
雇用の質を考慮した地域・企業規模間等の定量的な雇用の波及過程と効果の研究

日本では、グローバルトップ企業を目指した海外展開促進と、その果実の地域・中小企業への波及に向けた取り組みが行われてきた。昨今では、ICTの普及・進化により、従来の正社員とは異なる働き方や地域発のイノベーションが目指されている。本研究は、大企業や都市部での雇用が、中小企業や地方の雇用創出に過程を含めどのように波及しているのか、その要因は何かを分析する。従来の数量のみに着目した研究ではなく、雇用の質をも考慮する。これまでのマクロモデルによるシミュレーションと個別政策の評価の間を埋め、定量的に波及効果・過程を明らかにする。
T3,T7ファージDNA詰込みにおけるDNA成熟機構と転写機能

線状2本鎖DNAの完全複製(末端の)は不可能であるが、ファージはDNAをコンカテマ-として合成し、それからDNAを切り出すこと(DNA成熟)によりゲノム構造を維持している。T3,T7ファージはDNA詰込みに必要な配列(pac配列)をプラスミドにクローンすると、これを認識して頭殼に詰め込み、形質導入する。形質導入系を用い、pac配列がDNA成熟における截断の標的配列(pacC)とファージRNAポリメラーゼプロモーター配列(pacB)からなること及びプロモーター活性と詰込み活性との間に高い相関があることが明らかになった。本研究ではT3,T7ファージのDNA成熟機構と転写機能との関連を解明する。(1)pacB配列変異体の解析により、転写は詰込みに必要ではあるが、十分でないこと及び転写と詰込みの方向が反対になるようなpacBとpacCの配置が必須であることが分った。また、T3 DNA上のいくつかのプロモーターの詰込み活性は複製起点活性と相関があった。(2)T7ゲノムDNAのpacBの代わりにT3pacBを導入したキメラファージはT3,T7どちらのファージによっても詰め込まれた。T3,T7ゲノム右端にあるパリンドローム構造がDNA成熟に関わる可能性が主張されたが、この配列の欠失はファージの増殖過程には影響を与えなかった。(3)DNA合成阻害剤および転写阻害剤は共にin vitroDNA詰込み反応を阻害した。RNaseAはDNA詰込み反応に促進的であったが、RNaseHはそれを阻害した。in vitro詰込み反応をコンカテマ-形成、DNA成熟、DNA詰込みの素反応に分けて解析したところ、DNA合成阻害剤はコンカテマ-形成とDNA成熟反応を、転写阻害剤及びRNaseHはDNA成熟の開始反応を阻害し、これら処理はDNA詰込み反応自身を阻害しなかった。購入したウルトラスペックは組換えDNA実験の際、DNA定量に用いた。