hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
機能安全技術のための組込み自己診断法の開発

先進運転支援システムにおける機能安全規格準拠したシステムを構成するためには,その構成要素である集積回路の組込み自己診断技術の開発が喫緊の課題である.本研究では,パワーオン時や待機時の組込み自己テストに適用するマルチサイクルテストの故障検出率向上化法,および組込み自己診断機構を提案する.本研究の成果を以下に示す。1)パワーオン時の組込み自己テストに適用するマルチサイクルテストにおける故障検出率を向上するためのテスト容易化設計を開発した。具体的には,故障検出強化フリップフロップによる中間観測を導入したマルチサイクルテスト法を提案した。商用車載コンピュータ(ゲート数2.7M)に対する評価実験結果から,通常のスキャンテストに対してマルチサイクルテストを実行することによって2.8倍のテストパターンの圧縮が可能となることがわかった.2)フィールドでの劣化による遅延故障箇所の特定を指向した組込み自己故障診断(BISD)機構を開発した。提案機構は事前に生成した期待署名をメモリに持つことなく,動的に期待署名を生成しながら遅延故障診断テストを行う.提案したBISD機構では通常のクロック(実速度クロック)よりも遅いクロック(低速度クロック)を用いて期待署名の自己生成を行い,実速度クロックを用いて遅延故障診断テストを行う。実験ではベンチマーク回路に対して提案BISD機構を適用し,面積オーバヘッドを評価した。3)パワーオンセルフテストの実行時間短縮のためのテスト集合分割法を提案した.また,組込み自己診断の高精度化のために組込み自己診断向けの診断用テストパターンの生成法を提案した。4)配線における半断線故障の検出能力の向上化のために,機械学習の手法(マハラノビクス距離,SVM)を利用した半断線故障の識別法を提案した。5)次世代のメモリコンピューティングデバイスのテスト法を提案した。先進運転支援システムなどの次世代システムにおける機能安全規格に対応するためには,その構成要素である集積回路の組込み自己診断技術の開発が必要不可欠である.本研究では,パワーオン時や待機時の組込み自己テストに適用するマルチサイクルテストの故障検出率向上化法,および組込み自己診断機構と故障診断署名に基づく組込み自己診断法を提案する.本研究の目的は,1)パワーオン時の組込み自己テストに適用するマルチサイクルテストにおける故障検出率を向上するための手法の開発,2)疑似期待値に基づいて故障診断署名を求める組込み自己診断機構の開発.3)故障診断署名を利用した組込み自己診断法とその高精度化法の開発である.本年度は,目的1)に対しては,マルチサイクルテストにおける故障検出率の低下を防ぐことができる中間観測フリップフロップの選択のために,回路の構造情報,信号遷移確率,可制御性および可観測性を考慮した出力フリップフロップの順位付け法を提案した.さらに,提案法をコンピュータ上にツールとして実装し,企業から提供された大規模ベンチマーク回路に適用した評価実験を行い,その有効性を評価した.本年度は,目的2)に対しては,組込み自己診断において解決しなければならない課題を議論し,新しい組込み自己診断機構を提案した.提案した機構では,被検査回路上で故障を検出するだけではなく,予め登録した故障の中から故障候補も指摘できる.そのため,提案した組込み自己診断機構では,診断用署名生成器および診断用署名に基づく故障候補の指摘器を新たに導入した.さらに,予備実験を行い診断用署名・被疑故障署名の圧縮と故障診断能力の関係を評価した.本年度の研究成果は,3編の電気関係学会四国支部大会発表,1編の電子情報通信学会技術研究報告,および1編の査読付き国際会議論文において発表を行った.目的1に対しては,先進運転支援システムの進歩に伴い,機能安全を維持するために組込み自己テスト(BIST)の短時間(少数テストパターン)での高テスト品質(高検出率)を実現しなければならない.そこで,本研究では,マルチサイクルテストにおける故障検出率を向上させるために,中間観測フリップフロップを導入し,その効果的な選択法を考案した.提案法をプログラム言語によってコンピュータ上に実装し,中間観測フリップフロップの選択ツールをプロトタイプとして制作した.プロトタイプを国際会議で認定されたベンチマーク回路およびから企業から提供された大規模ベンチマーク回路に適用した評価実験を行った.実験結果から提案手法によって選択した中間観測フリップフロップを利用することで2Kパターンの制約のもとで,目標の故障検出率を得ることができることを示した.この結果を2編の電気関係学会四国支部大会発表,および1編の査読付き国際会議論文において発表を行った.目的2に対しては,新しい組込み自己診断機構を提案した.新しい組込み自己診断機構では,診断用署名生成器および診断用署名に基づく故障候補の指摘器を開発した.さらに,予備実験を行い,診断用署名・被疑故障署名の圧縮と故障診断分解能の関係を評価できた.特に,メモリにテストパターン毎の期待値署名を格納しないで,各テストパターンのパス/フェイル情報を求める回路を開発し,この回路の詳細の特許を申請する計画である.研究成果は,1編の電気関係学会四国支部大会発表および1編の電子情報通信学会技術研究報告において発表した.先進運転支援システムの機能安全規格に対応するためには,その構成要素である集積回路の組込み自己診断技術の開発が喫緊の課題である.本研究では,パワーオン時や待機時の組込み自己テストに適用するマルチサイクルテストの故障検出率向上化法,および組込み自己診断機構と故障診断署名に基づく組込み自己診断法を提案する.本研究の目的は,1)パワーオン時の組込み自己テストに適用するマルチサイクルテストにおける故障検出率を向上するためのテスト容易化設計とその活用手法の開発,2)疑似期待値に基づいて故障診断署名を求める

組込み自己診断機構の開発,および3)故障診断署名を利用した組込み自己診断法とその高精度化法の開発である.本年度は,目的1)に対しては,マルチサイクルテストを利用したテストパターン削減の効果を強化するために,故障検出強化のためのテスト容易化設計法を提案した.また,その方法を車載向けMCUに適用するための要素技術(故障検出強化フリップフロップおよびその挿入位置決定法)を提案した.本年度は,目的2)に対しては,組込み自己診断機構におけるパターン発生回路を設計した.また,次世代のメモリコンピューティングデバイスのテスト法を提案した.本年度は,目的3)に対しては,機器のパワーオンセルフテストの実行時間短縮のためのテスト集合分割法を提案した.また,組込み自己診断の高精度化のために組込み自己診断向けの診断用テストパターンの生成法を提案した.本年度の研究成果は,1編の査読付きIEEE論文,3編の査読付き国際会議論文,4編の電気関係学会四国支部大会および1編の情報科学技術フォーラムにおいて発表を行った.目的1に対しては,機能安全を維持するために組込み自己テストの短時間(少数テストパターン)での高テスト品質(高検出率)を実現しなければならない.そこで,本研究では,マルチサイクルテストにおける故障検出率を向上させるために,故障検出強化フリップフロップを実現するテスト容易化設計法を提案した.また,その挿入位置決定法をプログラム言語によってコンピュータ上に実装した.実験結果から制約条件である90%の故障検出率を得るために必要なテストパターン数は,通常テストに比べておよそ7分の1に削減できた.この結果は十分に現在の製品レベルに対応できるため十分な達成度である.この結果を1編の査読付きIEEE論文,1編の査読付き国際会議論文,および2編の電気関係学会四国支部大会において発表した.特に,査読付きIEEE論文は当該の研究分野で最も権威ある雑誌への掲載である.目的2に対しては,組込み自己診断機構におけるパターン発生回路を設計し,その特許化にむけて処理を進めている.また,次世代のメモリコンピューティングデバイスのテスト法を提案した.具体的には,メモリコンピューティングデバイスを構成するメモリ間のインターコネクトにおける縮退故障,ブリッジ故障に対するテスト法を提案した.提案手法をメモリコンピューティングデバイスのプロトタイプに適用し,有効性を評価した.この結果を1編の査読付き国際会議論文,および1編の情報科学技術フォーラムにおいて発表した.目的3)に対しては,組込み自己診断においては,故障診断精度を維持しながら,診断に要するテストパターン数を削減することが診断時間の短縮のために必要である.そこで,診断用パターンを利用した適応的な故障診断を行うために,診断用テストパターンの選択法を提案した.
噴霧乾燥法による組成傾斜型球状中空体の創製

噴霧乾燥法は溶液を高温度の乾燥機内に溶液を噴霧することで粉体を得るプロセスです.このとき,液滴は表面から乾燥するため,溶解した成分が液滴表面に沿って析出し,中空粒子を形成します.また,溶解度の異なる2成分系溶液を噴霧した時には,溶解度の低い成分(リン酸カルシウム)が外側に析出し,高溶解性の成分(アセスルファムカリウム)が遅れて内部に析出するため,組成の傾斜した球状粒子がワンプロセスで合成可能であることを明らかにしました.噴霧乾燥法は溶液を高温度の乾燥機内に溶液を噴霧することで粉体を得るプロセスです.このとき,液滴は表面から乾燥するため,溶解した成分が液滴表面に沿って析出し,中空粒子を形成します.また,溶解度の異なる2成分系溶液を噴霧した時には,溶解度の低い成分(リン酸カルシウム)が外側に析出し,高溶解性の成分(アセスルファムカリウム)が遅れて内部に析出するため,組成の傾斜した球状粒子がワンプロセスで合成可能であることを明らかにしました.噴霧乾燥法は原料溶液を高温の炉内に噴霧し,瞬時に乾燥させて粉体を得るプロセスであるが, 2種類の溶解度の相違する物質が溶解した溶液を噴霧させた場合には,難溶性の物質が先に中空壁として外側に析出し,溶解度の高い物質は遅れて内部に析出することが予想される.本研究は,噴霧乾燥法による簡便なプロセスでの組成傾斜粉体の創製を試みるものである.当該年度,計画書通り炭酸カルシウム-炭酸マグネシウム系組成傾斜型中空体の創製を試みたが,両者の溶解度の差が小さく明快な結果が得られなかった.そこで,溶解度が1000倍以上相違するリン酸-水素カルシウム-アセスルファムカリウム系溶液で検討を行ったところ, 1μm程度の球状粒子を得ることができ,さらに,噴霧溶液の濃度,噴霧乾燥温度,圧力等を制御することで球状粒子の粒径を0.55μmの範囲で制御可能であった.この粒子をエポキシ樹脂で包含後,ミクロトームにて切断し,内部構造を観察したところ,リン酸一水素カルシウムのみを溶解させた溶液からは球状中空体が生成するが,両者を含む水溶液中を用いた場合には内部に不定形粒子が充填した球状粒子が生成することが確認できた.そこで,この破断面においてEPMAマッピングにより観察したところ,内部に高溶解性のアセスルファムカリウムが,外部には難溶性のリン酸一水素カルシウムが中空壁となって存在していることが確認でき,目的通り噴霧乾燥法により組成傾斜粉体が生成できることを明らかにした.噴霧乾燥法は原料溶液を高温の炉内に噴霧し,瞬時に乾燥させて粉体を得るプロセスであるが,2種類の溶解度の相違する物質が溶解した溶液を噴霧させた場合には,難溶性の物質が先に中空壁として外側に析出し,溶解度の高い物質は遅れて内部に析出することが予想される.本研究は,噴霧乾燥法による簡便なプロセスでの組成傾斜粉体の創製を試みるものである.当該年度,計画書通り炭酸カルシウム-炭酸マグネシウム系組成傾斜型中空体の創製を試みたが,両者の溶解度の差が小さく明快な結果が得られなかった.そこで,溶解度が1000倍以上相違するリン酸一水素カルシウム-アセスルファムカリウム系溶液で検討を行ったところ,1μm程度の球状粒子を得ることができ,さらに,噴霧溶液の濃度,噴霧乾燥温度,圧力等を制御することで球状粒子の粒径を0.55μmの範囲で制御可能であった.この粒子をエポキシ樹脂で包含後,ミクロトームにて切断し,内部構造を観察したところ,リン酸一水素カルシウムのみを溶解させた溶液からは球状中空体が生成するが,両者を含む水溶液中を用いた場合には内部に不定形粒子が充填した球状粒子が生成することが確認できた.そこで,この破断面においてEPMAマッピングにより観察したところ,内部に高溶解性のアセスルファムカリウムが,外部には難溶性のリン酸一水素カルシウムが中空壁となって存在していることが確認でき,目的通り簡便な噴霧乾燥法により組成傾斜粉体が生成できることを明らかにした.この研究成果を応用することでドラッグ・デリバリー・システム用薬剤の開発などへの応用が期待できる.
シアル酸は植物にも存在するのか?

今年度は、植物に存在するシアル酸転移酵素様タンパク質の解析を引き続き行った。イネには高等動物などのシアル酸転移酵素間で保存されているシアリルモチーフ様の配列を有するタンパク質をコードしている遺伝子が3種類(OsSTLP1,2,3)存在している。昨年度はこのうちOsSTLP1についての解析を行い、そのα2,6-シアル酸転移酵素様の活性の存在を明らかにしたが、今年度は残りの2種類(OsSTLP2,3)についての解析を行った。OsSTLP2,3はそれぞれ396,384アミノ酸からなるII型膜タンパク質の配向をもつタンパク質である。組換えタンパク質を作製し、その酵素活性を測定したところ、OsSTLP2は糖タンパク質のAsialofetuinに対して微弱なα2,6-シアル酸転移酵素様の活性を示した。一方、OsSTLP3は、シロイヌナズナのシアル酸転移酵素様タンパク質と同様、調べた限りにおいてはシアル酸転移酵素様の活性は検出できなかった。分子進化的類縁関係を調べたところ、動物由来のシアル酸転移酵素とこれら植物由来のシアル酸転移酵素様タンパク質は、それぞれ独立したグループに属していた。これらのシアル酸転移酵素様タンパク質の酵素学的諸性質を考慮すると、植物体内ではCMP-NeuAcのような動物に見いだされるシアル酸化合物を基質としている可能性は低いと考えられるが、そのシアル酸転移酵素様の活性の存在は興味深い。なお本研究期間中において、これらの酵素の植物体内における生理的基質や、植物由来の新規シアル酸について検索を試みたが、同定はできなかった。シアル酸は糖鎖末端に見出される酸性糖で、様々な生命現象において重要な役割を果たしており、生物界に広く分布しているが、植物からは検出されていない。一方、近年のゲノムプロジェクトの成果によって、高等生物型のシアル酸転移酵素と類似したタンパク質をコードする遺伝子が、植物にも存在することが明らかになってきた。そこでこの遺伝子産物には実際にシアル酸転移酵素の活性があるのかを調べることにした。まずシロイヌナズナおよびイネのゲノミックDNAより当該遺伝子をPCRでクローニングした。シロイヌナズナのシアル酸転移酵素様タンパク質は398アミノ酸、イネのそれは393アミノ酸からなり、それぞれ高等動物などのシアル酸転移酵素間で保存されているシアリルモチーフ様の配列を有していた。つぎに各遺伝子を発現ベクターに組み込み、これをCOS-7細胞にトランスフェクションして、protein Aとの融合タンパク質として生産させた。これらの融合タンパク質を用いてシアル酸転移酵素活性の有無を調べたところ、シロイヌナズナ由来のタンパク質は活性を示さなかったが、イネ由来のタンパク質は微弱ながら一部のオリゴ糖や糖タンパク質に対してα2,6-シアル酸転移酵素の活性を示した。このタンパク質が植物体内で実際にシアル酸転移酵素として機能しているのかは不明であるが、その存在はシアル酸転移酵素の進化や生物界における分布を考える上で興味深い。
小さな反応拡散系における秩序形成から生物の機能へ

本研究では、反応拡散波と界面変形を伴ったアクティブマターの相互依存性から生み出される動的秩序とそれに由来する機能の普遍的性質の解明を目的とした。特に生物の多様な運動形態の理解へ向け、生物と非生物の両方から迫る試みを行った。そこでは反応拡散系とアクティブマターの結合系という新しい枠組みを提案し、細胞ダイナミクスの背後にある物理的な対応を常に意識しつつ理論を発展させた。具体的には、(1)細胞の動きと外場の揺らぎとの関係性、(2)大腸菌の集団的秩序形成の理解、(3)界面張力により駆動する物体の提案、(4)活性タンパク質存在下での拡散現象と凝集現象の理解等を示した。本研究では、反応拡散波と界面変形を伴ったアクティブマターの相互依存性から生み出される動的秩序とそれに由来する機能の普遍的性質の解明を目的としている。ここでは、(1)非生物系では、反応拡散波によって駆動されているアメーバ細胞を模した化学反応系として、Belousov-Zhabotinsky(BZ)反応液滴をベースとする新奇の実験系を構築する。(2)生物系では、アメーバ細胞のリン脂質シグナリングのin vitro再構成系を構築し、実際のアメーバ内の非自明動態との比較検証と理論的考察を行い、変形しながら運動する系の普遍的性質を明らかにすることを目指した。本年度の実績として(1)非生物系では、化学振動反応であるBZ反応溶液の液滴が、内部でのパターン形成と結合して運動する現象について研究を行った。具体的には、BZ反応溶液の表面や、BZ反応溶液と油の界面において、化学波が伝播するときの界面張力の変化をレーザー準弾性散乱により測定した。その結果、気液界面ではほぼ化学波の進行に伴う色の変化と一致して、界面張力が変化することが明らかとなった。(2)生物系では、細胞性粘菌を用いて、基質面の形状や物性によって膜の伸展を制限し、進行波を観察した。その結果、特に基質面に疎水性素材であるPDMSを用いた場合、PIP3の局在を起こす細胞がほとんど存在しないこと、また、PDMS表面の親水化によって、進行波を起こしている細胞の率が増加することが明らかとなった。以上、研究代表者や分担者は個々の研究テーマに関して発展させつつ、連携を探ってきた。来年度は、非生物系と生物系における定量的測定の相互検証を行い、研究班内での連携を高め、微小空間BZ反応における変形や運動、細胞の多様な運動形態を、理論的な立場から予測・分類することを目指す。特に生物の多様な運動形態の理解へ向け、生物と非生物の両方から迫る試みを行う。そこでは反応拡散系とアクティブマターの結合系という新しい枠組みを提案し、実験系を巧みにデザインし、細胞ダイナミクスの背後にある物理的な対応を常に意識しつつ理論を発展させることを目指している。本年度は、非生物系では、(1)自己駆動粒子として知られる樟脳系における駆動力の測定、生物系では、(2)細胞の動きと外場の揺らぎとの関係やその数理モデルの提案、(3)大腸菌のミクロな振舞いと集団的秩序形成の理解へ向けた数理モデルの提案、などを行い、運動する系の普遍的性質を明らかにすることを目指した。(1)では、実際に樟脳粒が運動するときにどの程度の力が発生しているのかを、表面張力系と力の伝導系をデザインすることにより測定し、それらの理論から求められる値と比較した。その結果、測定結果は矛盾なく理解され、樟脳粒子の運動の駆動力は数十μN程度であることがわかった(2)では、細胞応答においてシグナルの時間的な増減に対するrectificationを見出し、それが細胞集合に重要であること、また、分子レベルでLEGIモデルを拡張することで説明できることを見出した。この結果を受けて、細胞内の化学反応と細胞の運動をつなげて理解すべく、モデリングと解析を行った。そこでは、1細胞が動くことで、細胞の環境が変わるという実効的なフィードバックが働くことがわかった。(3)では、大腸菌の集団は波となり伝搬するが、その波頭の伝搬速度は初期栄養濃度に対して正の相関がみられる領域と負の相関がみられる領域があることがわかった。これらを説明できる新しい数理モデルを提案した。真核細胞の形質膜の変形は、多くの場合、ホスファチジルイノシトールとアクチンの協調したダイナミクスによって誘起され、非平衡系のパターン現象とアクティブマター(もしくは自己駆動粒子)としての性質を兼ね備えた系としての特徴づけが待たれている。そこで本研究では、ゆらぎによって対称性が破れることで生まれるアメーバ細胞運動の非自明動態(新規な時空間秩序)の理解と自己組織化を用いた再構成系の実現を行い、アクティブマター(もしくは自己駆動粒子)の相互依存性から生み出される動的秩序形成とそれに由来する生物の普遍的性質の解明を目的とした。本年度は、(1)リン酸化ー脱リン酸化反応の自律的進行とその時間発展の測定系の実現として、人工脂質リポソーム上においてホスファチジルイノシトールの主要な調節機構であるリン酸化ー脱リン酸化反応を操作、または自律的に進行させ、その時間発展を測定できる実験系の開発を進め、ガラス基板上に捕捉されたPI(4,5)

P2またはPI(3,4,5)P3を含むリポソームに対し選択的に結合することを確認し、測定プローブとしての性能を評価した(2)細胞集団中での力と個々の細胞の変形と細胞集団の変形の依存性を明らかにすることを目指した。そこでは、真値のわかる数値データで試した所、我々の提案した手法ではモデルで仮定した細胞の力学的な性質によらずに高い精度で推定と真値が一致した。また、実験的検証も行い、他の手法で見積もった値と整合性を得た。(3)自己駆動粒子の一般的力学系モデルの提案として、静止状態が不安定化する分岐点近傍において回転解と振動解について、解の存在条件とその線形安定性を調べた。また、分岐点から離れたところで回転解が安定に存在する条件についても解析を行った。本研究は、公募A03班義永那津人氏との共同研究である。本研究課題は、生物系、非生物系に分かれて実験的、理論的な研究を行っている。研究実績にも書いたように、それぞれ研究成果はおおむね申請時に予定したものであった。班内・班外セミナーなども積極的に行い、他班との共同研究も進行中である。本研究課題では、シンプルでありながら多様な実験系が構築できる細胞レベルの微小領域での実験系を発展させ、ゆらぎによって対称性が破れることで生まれるアメーバー細胞運動の非自明動態の理解と自己組織化を用いた再構成系の実現を目指し、更には、反応拡散系で記述できる伝搬波と界面変形を伴ったアクティブマターの相互依存生から生み出される動的秩序形成とそれに由来する生物機能の普遍的性質の解明を目的としている。その目的達成のため本年度は、1.粘菌細胞で発現を誘導する精製系の開発として、PI3キナーゼの精製に取り組んだ。精製タグ、発現誘導系、発現細胞種について検討を行い、ドキシサイクリンを用いて粘菌細胞で発現誘導する精製系を開発し、PI3キナーゼのキナーゼドメイン並びに、キナーゼドメインとRas結合ドメインを精製することに成功し、収量の向上を検討した。2.多くの細胞では、核分裂を伴わない細胞質分裂が知られている。例えば、ミヨシン阻害剤を与えられた細胞性粘菌やケラトサイトでは、細胞が基質に接着したときに感じる応力による自発的な細胞骨格の局在に起因した細胞質分裂が起こる。多核単細胞生物である真正粘菌においても同様の細胞質分裂を本年度初めて発見した。3.活性タンパク質存在下での拡散現象と凝集現象を理解するための数理モデルの提案として、円形状の脂質ラフトを考え、トレーサー粒子分布のダイナミクスを議論した。まず、数値計算によって、脂質ラフトの内部にトレーサー粒子が凝集することを数値的に示した。そして、この凝集現象は、移流速度の一般的な性質によって説明できることを明らかにした。4.細胞集団の挙動の理解のための連続モデルの提案として、細胞の挙動を表すCell Vertex Modelをミクロもでるとして、我々は細胞形態を内部自由度としてもつ連続体モデルを構築した。本研究課題は、生物系・非生物系に分かれて実験的・理論的な研究を行っている。研究実績にも書いたように概ね申請時に予定した研究の内容と成果である。当初からの課題として挙げられていた、班内、および公募研究班との共同研究も順調に進んでおり、その成果も出つつある。本研究では、反応拡散波と界面変形を伴ったアクティブマターの相互依存性から生み出される動的秩序とそれに由来する機能の普遍的性質の解明を目的とした。特に生物の多様な運動形態の理解へ向け、生物と非生物の両方から迫る試みを行った。
原子核の電気双極応答測定による対称エネルギーの研究

本研究の目的は、原子核物質の状態方程式の対称エネルギー項の密度依存性を飽和密度付近において調べることにある。対称エネルギーは中性子星の性質、特に核子間相互作用による圧力、質量半径相関、中性子陽子密度比を決める鍵として注目されている。申請者らがこれまでに開発してきた陽子非弾性散乱の手法を用い、中重安定核の電気双極応答を精密に測定した。得られた電気双極応答から双極分極率およびピグミー双極共鳴強度を引き出し、対称エネルギーの値に強い制限を与える。原子核表面にできる中性子の層である中性子スキンを用いることが着目点の1つである。本年度はスズ120核を標的とするデータの解析を完了し、ピグミー双極共鳴の励起強度総量を定量的に引き出すことに成功した。これまでガンマ線で測られていた強度は実際に存在する強度のごく一部であるという画期的な成果を得た。結果を論文にまとめてPhysicsLetters B誌に投稿し掲載された。また、スズ120核の双極分極率を引き出し、理論モデルの妥当性を検証するとともに、中性子スキン半径を0.148±0.034 fmと求めた。対称エネルギーの密度依存性を決定する上で鍵となるデータである。結果を論文にまとめPhysical ReviewLetters誌に投稿した。現在審査中である。またNuclear Symmetry Energy 2014会議、SOTANCP会議、νIST会議などの国際会議招待講演、ワークショップ、研究会において成果を発表し、世界の物理研究者と結果および今後の計画に関する議論を深めた。26年度が最終年度であるため、記入しない。本研究の目的は、原子核物質の状態方程式の対称エネルギー項を調べることにある。飽和密度(0.16 fm-3)付近を対象としている。対称エネルギー項は中性子星の性質、特に核子間相互作用による圧力、質量-半径相関、中性子・陽子密度比を決める鍵として注目されている。申請者らがこれまでに開発してきた陽子非弾性散乱の手法を用いて中重安定核の電気双極応答を精密に測定する。得られた電気双極応答から双極分極率およびピグミー双極共鳴強度を引き出し、対称エネルギーの値に強い制限を与えることを目的とする。実験手法は確立している。必要なのは実験の実施とデータの解析である。本年度は既に取得している鉛208核を標的とするデータの解釈に関する理論的考察と議論を進め、実験値から与えられる対称エネルギーの制限を数値として明確に引き出した。得られた結果をEuropean Physics Journal A誌、および物理学会誌に出版した。またInternational Nuclear Physics Conference 2013を始めとする国際会議、ワークショップ、研究会において成果を発表し、他の物理研究者と結果に関する議論を深めた。結果に関する反響は非常に大きく、論文の被引用数は多くの数に登っている。平行してカルシウム48核と鉛208核のスピン磁気双極応答を引き出し論文を投稿した。また、鉛208核の状態密度に関する解析を進め論文を投稿した。それぞれレビュー作業中である。さらにスズ120核のデータとジルコニウム90核のデータの解析を進め、それぞれ電気双極応答のエネルギー分布、双極分極率、ピグミー双極共鳴励起強度を引き出す作業を進めている。現在審査中である。当初予定の既得データの解析、物理情報の抽出、理論的考察、結果の出版に関して想定以上の進展をしている。論文の出版が順調に進行している。新しいデータを取得するための加速器ビームタイムの申請はスズの同位体のデータについて採択された。ジルコニウムの同位体に関する申請は継続審議となっている。原子核の電気双極応答B(E1)の測定を進める。実験には申請者がこれまでに開発してきた陽子非弾性散乱の前方角測定を用いる。実験手法についてはすでに確立している。

実験には大阪大学核物理研究センターのスペクトロメータ「グランドライデン」を使用する。測定したB(E1)から、双極分極率とピグミー双極共鳴強度を決定する。得られたB(E1)を励起エネルギーで割った値を全領域に渡って積分することで双極分極率が得られる。中性子閾値領域のB(E1)を積分することでピグミー双極共鳴強度が得られる。また同実験からスピン磁気双極強度の決定も可能であり、原子核の集団磁気励起の研究として興味深い。得られた双極分極率およびピグミー双極共鳴強度から対称エネルギーの傾きパラメータの制限を引き出す。その値は中性子星内の核子間相互作用による圧力および中性子星の質量-半径相関を決める鍵として注目されている。前年度にはカルシウム48核と鉛208Pbの解析によりスピン磁気双極応答および状態密度に関する値を引き出し、現在論文投稿中である。この出版作業を進める。前年度はにスズ120核とジルコニウム90核に関する値の整理を進めた。最終結果を決定しえ物理量を引き出し、論文として出版する。またモリブデン96に関する解析を進める。スズの同位体に関する実験について加速器ビームタイム申請を行い採択された。ビームタイムを実施して実験データ取得を進めたい。また、ジルコニウム同位体に関する申請は継続審議となったため、あらためて採択に向けて努力する。一方でこれまで実験手法にあらたに崩壊ガンマ線測定を付加する計画を立案して準備を始めている。計画実現に向けて具体的な装置設計やビームタイム申請を進める。
神経細胞に対するエンケファリンのポンプ活性化機構

モルモットの摘出上頚神経節に微小電極を刺入し、メチオニンエンケファリンの効果を調べた。メチオニンエンケファリン(20μM)は、KClに対する節細胞の応答を平均70%増大させた。この効果は直前に作用させた等量のナロキサンで抑制された。また、神経節遮断薬であるアトロピンやヘキサメソニウム及び高濃度のアセチルコリンによる脱感作時においても見られることから、節細胞に対するエンケファリンの直接作用であろうと考えられた。一方、エンケファリンは節細胞の膜電位や膜低抗をほとんど変えないが、活動電位の後電位を増強する傾向が観察されたので、これの逆転電位を調べると、エンケファリンは逆転電位を約10mV過分極側へ移動させることがわかった。また、この作用は外液中に含まれるKイオン濃度が低いほど大きい傾向を示した。節細胞では後電位の逆転電位はKイオンの平衡電位とほぼ等しいことが分かっているので、これは何等らの機作によって細胞内Kイオン濃度が増大した結果であると考えられる。この効果がNa-Kポンプ活性化の機構によると仮定すると、この作用は細胞内Naイオン濃度の増大によって増強され、外液中にポンプの阻害剤であるウワバインを作用させると抑制されるはずである。そこで、細胞内にNaイオンを負荷した状態でエンケファリンを作用させると、後電位は著明に増大するとともに、正常標本ではみられなかったエンケファリンによる節細胞膜電位の過分極応答が観察された。尚、この際の膜抵抗は少し増大するか、不変であった。しかし、ウワバインの効果は標本によりまちまちであり、この効果がポンプ活性化によると最終的に結論づけるまでにはいたらなかった。今後はエンケファリンによるKイオンの選択的透過性の増大の可能性も考慮し、Kイオンチャネルの阻害剤の効果や細胞内Kイオン及びNaイオンの動態を調べようと計画を進めている。
C/EBPδの造白血病機能解析:ヒト試料および遺伝子改変マウスを用いて

癌化の原因には増殖異常だけでなく正常分化の破綻も関わっており、このメカニズムを明らかにすることは白血病の新しい治療の開発に重要な意味を持つ。骨髄球系への分化にはある特別なtranscriptional factorの活性化や発現が必要である。そのひとつであるCCAATenhancer binding Protein delta (C/EBPδ)は、急性白血病細胞株と異なり慢性骨髄性白血病急性転化からの樹立細胞株KCL22、K562においてC/EBPδの機能発現が消失しておりCML急性転化病態との関連が強く考えられる。我々は、Zn誘発性のベクターを使用しC/EBPδをKCL22細胞およびK562細胞株に発現させたところKCL22は増殖が有意に抑制された。この際、核が分葉濃縮し好中球様変化を起こしG0/G1arrestが生じた。さらにp27蛋白、mRNAの発現増加を認められた。他の細胞周期制御蛋白E2F1,RbとC/EBPδが結合することを突き止めた。さらにp27の上流にあるFKHR蛋白のリン酸化も上昇していた。さらに好中球形態変化の質的変化を2次顆粒遺伝子の発現などで調べたところneutrophil collagenase、MPOは誘導されたがlactoferrinは認めずCD11bやNBT還元能も誘導されなかった。以上よりC/EBPδによりKCL22は細胞周期制御蛋白E2F1,Rbとの直接結合やFKHRの活性化によりp27の発現を誘導し不完全な分化が生じ増殖を抑制することが判明した。また患者検体を用いC/EBPδの蛋白発現を慢性期、急性転化時で比較したところ急性転化時C/EBPδの蛋白発現が低下している症例を認め、さらに正常検体との比較や他のC/EBP family、症例予後とp27発現などについても検討中である。我々はBCR-ABL form, P230トランスジェニックマウスを作成したのでC57BL/6マウスのC/EBPδwild type(+/+), heterozygous type(+/-), homozygous type(-/-)それぞれと掛け合わせ、発症するCML表現型の差を詳細に検討中であるが、さらに他のC/EBP familyで血液分化に関わっているC/EBPα, βwild type(+/+), heterozygous type(+/-)との掛けあわせについても検討予定である。そのひとつであるCCAATenhancer binding protein delta (C/EBPδ)は、急性白血病細胞株と異なり慢性骨髄性白血病急性転化からの樹立細胞株KCL22、K562においてC/EBPδの機能発現が消失しておりCML急性転化病態との関連が強く考えられる。我々は、Zn誘発性のベクターを使用しC/EBPδをKCL22細胞およびK562細胞株に発現させたところKCL22はday3より空ベクターを導入細胞と比べ増殖が有意に抑制された。この際、核が分葉濃縮し好中球様変化を起こした。この時GO/G1arrestを起こしていた。さらにウェスタン・ブロット法でp27蛋白がday3より発現し、real time RT-PCR法ではmRNAの発現増加をday2より認められた。他の細胞周期関連蛋白には変化を認めなかった。p27とC/EBPδのdirect interactionを免疫沈降法で調べたが明らかではなく、他の細胞周期制御蛋白E2F1,RbとC/EBPδが結合することを突き止めた。さらにp27の上流にあるFKHR蛋白のリン酸化を調べたところ活性がday1で有意に上昇していた。さらに好中球形態変化の質的変化を2次顆粒遺伝子の発現などで調べたところneutro-phil collagenase、MPOは誘導されたがlactoferrinは認めずCD11bやNBT還元能も誘導されなかった。以上よりC/EBPδによりKCL22は細胞周期制御蛋白E2F1,Rbとの直接結合やFKHRの活性化によりp27の発現を誘導し不完全な分化が生じ増殖を抑制したと考えられた。この変化にapoptosisは伴わなかった。また患者検体を用いC/EBPδの蛋白発現を慢性期、急性転化時で比較したところ急性転化時C/EBPδの蛋白発現が低下している症例を認めた。我々はBCR-ABL form, p230トランスジェニックマウスを作成したのでC57BL/6マウスのC/EBPδwild type(+/+),heterozygous type (+/-),homozygous type(-/-)それぞれと掛け合わせ、発症するCML表現型の差を詳細に検討する。

我々は、Zn誘発性のベクターを使用しC/EBPδをKCL22細胞およびK562細胞株に発現させたところKCL22は増殖が有意に抑制された。この際、核が分葉濃縮し好中球様変化を起こしG0/G1arrestが生じた。さらにp27蛋白、mRNAの発現増加を認められた。他の細胞周期制御蛋白E2F1,RbとC/EBPδが結合することを突き止めた。さらにp27の上流にあるFKHR蛋白のリン酸化も上昇していた。さらに好中球形態変化の質的変化を2次顆粒遺伝子の発現などで調べたところneutrophil collagenase、MPOは誘導されたがlactoferrinは認めずCD11bやNBT還元能も誘導されなかった。以上よりC/EBPδによりKCL22は細胞周期制御蛋白E2F1,Rbとの直接結合やFKHRの活性化によりp27の発現を誘導し不完全な分化が生じ増殖を抑制することが判明した。また患者検体を用いC/EBPδの蛋白発現を慢性期、急性転化時で比較したところ急性転化時C/EBPδの蛋白発現が低下している症例を認め、さらに正常検体との比較や他のC/EBP family、症例予後とp27発現などについても検討中である。我々はBCR-ABL form, P230トランスジェニックマウスを作成したのでC57BL/6マウスのC/EBPδwild type(+/+), heterozygous type(+/-), homozygous type(-/-)それぞれと掛け合わせ、発症するCML表現型の差を詳細に検討中であるが、さらに他のC/EBP familyで血液分化に関わっているC/EBPα, βwild type(+/+), heterozygous type(+/-)との掛けあわせについても検討予定である。
アルコール解毒に用いられる天然薬物・葛花に関する研究

葛花Puerariae Flosは中国において胃を醒し,渇を止め,酒毒を解す薬物として著名であり,漢方においては葛花解醒湯などが知られる.そこで本生薬の有効成分模索を目的に成分研究に着手し,イソフラボノイド(PF-IF),トリテルペノイドサポニン(PF-SP)ならびにトリプトファン誘導体(PF-P)を得,構造決定した. PF-IFとして12kakkalideが圧倒的に多く含まれることが判明した. PF-SPとしてはPFS-aへC ́の三種の〓〓体が得られたが,それらの構造はそれぞれsoyasapogeinol B^3-glocuronic scid^2-gal^2-rha, sophoradiel^3-glcUA^2-gal^2-rhaおよびsophoradiel^3-glc・UA^2-ara^2-rhaである事を明らかにした.又PF-Pはthyptophan, caproic acid, glucose各1モルから成る化合物である事を明らかにした.次にこれらの化合物の薬理作用についてであるが,アルコール投与時における諸作用に関し, PF-Pは血糖上昇の抑制作用, PF-IFは血中エタノール,アセトアルテ・ヒド値の減少効果及びBUN値の抑制効果が認められ,さらにPF-SPにはTG, BUN値の抑制効果が認められた.また,肝障害病態に関し,高脂肪食モデルではPF-SP, PF-IF両者が,血塩化炭素モデルではPF-SPのみが抑制効果を示した.消酒効果の要因である脂質,窒素,糖質代謝さらにこの種の機能を司る肝機能に対する改善作用が葛花抽出物に認められたことは,漢方薬における葛花の用いられ方を説明しうるものと考えられる.葛花Puerariae Flosは中国において胃を醒し,渇を止め,酒毒を解す薬物として著名であり,漢方においては葛花解醒湯などが知られる.そこで本生薬の有効成分模索を目的に成分研究に着手し,イソフラボノイド(PF-IF),トリテルペノイドサポニン(PF-SP)ならびにトリプトファン誘導体(PF-P)を得,構造決定した. PF-IFとして12kakkalideが圧倒的に多く含まれることが判明した. PF-SPとしてはPFS-aへC ́の三種の〓〓体が得られたが,それらの構造はそれぞれsoyasapogeinol B^3-glocuronic scid^2-gal^2-rha, sophoradiel^3-glcUA^2-gal^2-rhaおよびsophoradiel^3-glc・UA^2-ara^2-rhaである事を明らかにした.又PF-Pはthyptophan, caproic acid, glucose各1モルから成る化合物である事を明らかにした.次にこれらの化合物の薬理作用についてであるが,アルコール投与時における諸作用に関し, PF-Pは血糖上昇の抑制作用, PF-IFは血中エタノール,アセトアルテ・ヒド値の減少効果及びBUN値の抑制効果が認められ,さらにPF-SPにはTG, BUN値の抑制効果が認められた.また,肝障害病態に関し,高脂肪食モデルではPF-SP, PF-IF両者が,血塩化炭素モデルではPF-SPのみが抑制効果を示した.消酒効果の要因である脂質,窒素,糖質代謝さらにこの種の機能を司る肝機能に対する改善作用が葛花抽出物に認められたことは,漢方薬における葛花の用いられ方を説明しうるものと考えられる.葛花は、古来よりアルコール解毒に用いられる民間薬として著名であるが著者は、本生薬の天然薬物としての有効利用開発を企図し、今回詳細な成分検索を行い、一連のトリテルペノイド配糖体の存在をはじめて明らかにすると共に、それらのアルコール代謝に関連する薬理試験において良好な結果を得た。即ち本生薬のメタノールエキスをまずSephadex LH-20カラムにてフラダノイドとトリテルペノイド成分に二別した。後者は、マウスを用いてのアルコール試験における血清中の脂質(triglyceride)および尿素窒素の改善、並らびに高脂肪食による肝障害の改善に有効であることが判明した。そこでさらにトリテルペノイド配糖体の分離精裂を行い、三種のOleanane glucuronideを得、それらの構造をSoyasapogenol B α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-β-D-glucopyronosyl-(1→2)-glucuronopyronoside,sophoradiol α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-arabinopyronosyl-(1→2)-glucuronopyranosideおよびsophoradiol α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-galactopynanosyl-(1→2)-β-D-glucuronopynanosideであることを明らかにした。
再植歯の矯正的移動における線維芽細胞成長因子の効果に関する病理組織学的検討

矯正歯科において、外傷により脱臼あるいは再植の既往を持つ歯が不正位置に固定されている場合や不正咬合の治療のために、それらの歯を移動させなければならない場合がしばしば見られる。これらの歯は、整復・固定後に骨性癒着を生じやすく、歯の移動が不可能となったり、歯根吸収を生じることが臨床的によく観察される。一方、線維芽細胞成長因子(basic Fibroblast Growth Factor)は内分泌ホルモン、活性型ビタミンD3や他のサイトカインとともに細胞の増殖や分化を促進する成長因子であり、線維芽細胞、血管内皮細胞や骨芽細胞の活性を賦活する事が報告されている。また著者は先にラットの上顎骨の正中口蓋縫合を離開させb-FGFを局注した効果、線維芽細胞や骨芽細胞の活性が促進され、離開下縫合部が順調に修復されることを報告した。そこで本研究では、再植歯を整復・固定する際にb-FGFを滴下し、その後の歯根膜の再生機転に対する効果について病理組織学的に検討するとともに固定後の再植歯の移動に対する効果について検討し、次の結果を得た。1、FGF群では再植初期において毛細血管の新生が対照群より豊富に認められ、線維芽細胞の再生が対照群より速やかに行われた。2、FGF群では骨生癒着や歯根吸収などの障害的変化が少なく、歯周組織の修復が良好に行われた。3、FGF群ではPCNA染色において、対照群と比べて3日目で有意差が認められ、要請細胞の増殖が活発に行われていた。4、FGF群では矯正的歯の移動を行った際、歯根吸収も少なく移動が順調に行われた。
線虫の化学走性の可塑性に関わる神経回路と機能分子の同定

動物の感覚神経系においては、しばしば刺激に対する順応の現象が見られる。知られている順応の多くは感覚神経内での機構により説明されており、神経ネットワークの関与については不明な点が多い。我々は線虫C.エレガンスの匂いに対する応答が、5分間の匂い刺激により顕著に低下する現象(早期順応)を発見した。本研究ではこの順応が感覚神経のみでなく、AIYと呼ばれる介在神経の機能に依存して起こることを見出した。AIYは複数の感覚神経から入力を受ける介在神経である。AIYが欠損すると、早期順応が起こらない。さらに、Ras-MAPキナーゼシグナル伝達系の変異体が早期順応に欠損を持つこと、RasがAIY介在神経で働くことを明らかにした。また、本研究では同じく線虫を用いてインスリン経路が神経可塑性に関わることを明らかにした。線虫は通常NaClを好むが、餌の非存在下でNaClを一定時間経験すると、NaClを忌避するようになる。インスリンINS-、インスリン受容体、およびその下流で機能することの知られているPI3キナーゼ、PDKキナーゼ、Aktキナーゼそれぞれの変異体でこの行動可塑性が失われていた。細胞特異的発現実験により、INS-1は介在神経AIAで、PI3キナーゼはNaClを受容するASE神経で働いていることがわかった。すなわち、感覚神経からシナプス入力を受けるAIA介在神経がINS-1を介して感覚神経に逆行性に働きかけることにより、行動を変化させる。ASE感覚神経は左右対称に一対存在するが、面白いことに、PI3キナーゼは右のASE神経でだけ働いていた。以上述べたインスリン経路とRas-MAPK経路は哺乳類でも保存されており、本研究でこれらの経路による行動可塑性の制御の神経機構が明らかになったことは、今後の関連する研究の発展に貢献するものと考える。我々は線虫C.エレガンスの化学走性行動に関し、以下のような学習を見出している。すなわち、通常の線虫は水溶性誘引物質であるNaClに対して正の化学走性を示すが、線虫を餌の非存在下でNaClに一定時間晒すと、その後NaClに対して負の走性を示すようになる。すでに、線虫のインシュリンホモログINS-1、インシュリン受容体ホモログDAF-2、PI3キナーゼAGE-1の各変異体がこの学習に欠損を持つこと、すなわち、これらの変異体ではNaCl処理を行ってもほとんどNaClへの化学走性が低下しないことを明らかにしている。さらに、AGE-1がNaClを受容する感覚神経、ASE神経で働くことを明らかにしている。本年度の研究では、PI3キナーゼと逆の働きをするPTENフォスファターゼの線虫ホモログ、DAF-18の機能について解析した。def-18の変異体は、通常の状態でも。NaClへの化学走性が低下していた。daf-18変異体のASE神経で正常型のdaf-18遺伝子を発現させるとこの化学走性の低下が回復したことから、DAF-18もASE神経で働くことが明らかになった。daf-2;daf-18二重変異体ではこの化学走性の低下が回復し、daf-2単独変異体に比較して学習能が回復していた。すなわち、daf-2とdaf-18が同じ過程で逆の機能を持つという、分子機能からの推定と矛盾しない行動が見られた。これらの結果より、NaClによる条件付け処理により、インシューリンシグナル伝達経路がASE神経で働き、AGE-1によってPIP3が生成され、これがASE感覚神経の機能を負に制御するというモデルが考えられる。DAF-18の機能が低下すると、恒常的にPIP3レベルが上昇し、ASEの機能が抑えられて化学走性が低下すると考えられる。以上述べたインスリン経路とRas-MAPK
格子正則化によるフェルミオン数非保存過程の非摂動的記述

overlap formalismによって記述されるDirac fermionは、局所的な作用をもち、そのDirac演算子はGinsparg-Wilson関係式をみたす。これにもとづいて、格子上で厳密なchiral symmetryが定式化できることが、最近、明らかになった。平成10年度は、この格子chiral対称性のもつ性質について次の研究を行った。1.格子chiral symmetryにともなうchiral anomalyは、fermion積分測度の変換Jacobianとして、得られる。Jacobianは、Dirac演算子によって直接あらわすことができる局所的な量であり、Dirac演算子のIndexを与える。我々は、このJacobianを弱結合展開によって評価し、局所的なanomalyが正しく得られることを示した。3.作用のもつ厳密な格子chiral symmetryが、overlap formalismにおいて中心的な役割を果たすfermion hamil-tonian systemのもつ対称性と、直接、関係していることを明らかにした。4. domain-wall fermionは、overlap formalismの基礎を与える。domain-wall fermionの低エネルギー有効作用を直接、導出することによって、domain-wall fermionの有効作用がもつchiral対称性とGinsparg-Wilson関係式にもとづく、厳密な格子chiral対称性との関係を明らかにした。domain-wall fermionは数値計算に適している。上記、4の研究によって、domain-wall fermionで測定可能なアノマリーが、Dirac operatorのIndexと直接関係していることが明らかになった。この点を踏まえて、Neutron Electric Dipole Momentの計算方法の考察を進めていく計画である。
ジーントラップライブラリーを用いた維管束細胞の分化に関与する遺伝子変異体の分離

染色体DNA上にレポーター遺伝子としてのβーグルクロニダーゼ(GUS)をもつ16,000系統分の形質転換シロイヌナズナの種子を作製し、973系統について播種後約2週間目の植物体全体をGUS染色した。その結果、子葉、本葉、根の先端、托葉などの植物体のいずれかの場所でGUS活性が検出された系統が20系統得られた。これら20系統の中で、維管束で特に強いGUS活性が検出された系統が1系統得られた。E10と名付けたこの系統におけるGUS活性は、最初の本葉が展開し始める頃から胚軸、子葉葉柄、根の維管束で検出され始め、その後、子葉、本葉葉脈の維管束で特に強いGUS活性が検出された。抽苔後では茎生葉の葉脈、花弁とがく全体、柱頭、トリコームにおいてGUS活性が検出された。トラップされた遺伝子をホモに持つ個体において、葉の組織切片を作製して光学顕微鏡によって維管束を観察したが野生型と比べて形態的な異常は見られなかった。遺伝子クローニングの結果、E10系統においてトラップされている遺伝子は、シロイヌナズナのリジン感受性のアスパラギン酸キナーゼの一つと87%のアミノ酸の類似性を示すタンパク質をコードしており、これからE10系統においてはリジン感受性アスパラギン酸キナーゼがトラップされていると考えられた。シロイヌナズナではE10系統から得られた物以外に、すでに2種類のリジン感受性アスパラギン酸キナーゼ遺伝子が報告されており、E10系統においてトラップされた遺伝子をホモに持つ個体で目に見える形態的な異常が表れなかったのは遺伝子がredundantであったためと考えられた。減圧浸潤法によってアグロバクテリウムをシロイヌナズナに感染させ,植物染色体DNA上にジーントラップのためのレポーター遺伝子(GUS)を持つT-DNAが組み込まれた形質転換体を約8000系統を得た。それら形質転換体20系統のゲノムDNAについてサザンブロット解析を行ったところ、T-DNAを含むDNA断片の分布パターンが同じものはなく、これらが遺伝的に独立していることがわかった。約800系統の形質転換体について,本葉および花茎、花芽においてGUS染色を行ったところ,維管束組織で特異的にGUS遺伝子が発現していると考えられる3系統を含む合計8系統においてGUS遺伝子の発現が検出された。これらの植物体においては何らかの遺伝子がトラップされていると考えられる。維管束組織でGUS遺伝子の発現が検出された植物体3個体のうちの1つである#48系統ついては自家受粉して得られた次世代において再度GUS遺伝子の発現パターンを解析した。その結果、発生の初期に形成される幼若葉においては葉の葉脈でGUSの特異的な発現が見られたが、幼若葉に続いて形成される成熟葉においては葉全体でGUS遺伝子の発現が観察された。従って、#48系統においてトラップされた遺伝子は維管束組織で特異的に発現しているのではないと考えられる。また、サザンブロット解析の結果#48系統においてはのGUS遺伝子の発現と連鎖する約13kbのT-DNAを含むDNA断片が存在していた。