hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
前立腺ラテント癌から顕在癌までの癌浸潤マクロファージの解析

臨床検体を用いたラテント癌での腫瘍関連マクロファージの関与は予想に反して少ないことが判明した。代わりの実験として癌細胞とマクロファージの微小環境における相互作用について培養系での研究が進展した。すなわちTGFβの作用により前立腺癌細胞は炎症細胞の機能を抑制する可能性が示唆された。目的;前立腺ラテント癌は臨床的に前立腺癌の兆候が見られず、病理解剖によって初めて発見される微小な癌組織であり、病理解剖例の約30%に発見される。ラテント癌の体積が0.46mlを超えると皮膜浸潤が起こり始め予後に影響がある為、治療を要する臨床癌はラテント癌の一部が進展して顕在化したものと考えられる。またラテント癌は30歳代頃より発見され、60歳頃すり急増し70歳代に好発年齢があることから前立腺癌の一部は30-40ほど経過した後、臨床癌に進展するものと考えられている。一般的に癌と炎症との関連性が指摘されており、炎症性疾患は前立腺癌を紿め胃癌、卵巣癌、乳癌など多くの癌発生のリスクを高めることが知られている。本研究は前立腺微小癌と炎症、特にマクロファージについて探求する研究である。病理解剖で得られた組織を用いて、前立腺ラテント癌から顕在癌にいたる過程の,マクロファージの検出、分類、役割・機能解明を目的とする。計画;病理解剖で得られた、ラテント癌、微小癌30例を抗CD68抗体で免疫染色し、癌内部のマクロファージの同定を試みた。病理解剖のラテント癌の中には種々の程度に炎症細胞の浸潤が確認されたが、抗CD68抗体で染まるマクロファージの数は非常に少ないことがわかった。ラテント癌の段階でのTAMのプロファイリングは断念し、900症例以上ある凍結前立腺癌組織すりRNAを抽出し、Real-time PCRによりマーカーそれぞれの遺伝子発現を定量化する。マーカー遺伝子としてはNOS2、Arginase-1、MHC-II、抗Scavenger receptor Aを予定している。すでに凍結前立腺癌組織より20症例のRNAを抽出しcDNA化が終了している。今後症例数を増やし、マーカー遺伝子のPCR条件の至適化後、定量化する。それぞれの前立腺癌の面積を計測しマーカー遺伝子発現量との相関性を検討する。(目的と背景)癌細胞で活性化される炎症メディエーターは、種々の白血球、特に骨髄単球系の細胞を腫瘍組織にリクルートする。癌組織に誘導されるマクロファージは腫瘍関連マクロファージ(tumor-associated macrophage, TAM)と呼ばれ、癌の増殖や浸潤にも促進的に働く。また抗腫瘍免疫を抑制する作用があることもわかっている。腫瘍内のマクロファージの量と不良な予後に相関があるが、前立腺ラテント癌から微小癌をへて,顕在癌に至る過程で炎症、特にマクロファージとの関係を調べた研究は見当たらない。病理解剖で発見された前立腺ラテント癌には種々の程度に炎症細胞が浸潤していることを確認している。マクロファージがラテント癌や微小癌にどの程度含まれているか、それが癌細胞にとって有利あるいは不利に働いているのか、癌の悪性度とマクロファージの量との相関など臨床病理的事項を明らかにする。臨床癌手術標本(顕在癌)を用いて同様のことを行い、微小癌との違いを明らかにする。また癌の微小環境における癌細胞とマクロファージの相互関係を培養条件で検討する。(結果)1)ラテント癌に浸潤する炎症細胞のうちマクロファージの割合は、免疫染色(CD68)を行ったところ非常に少ないことが判明した。そこで臨床検体を用いた研究を一旦中断し以下の実験を進めることとした。2)マクロファージは癌細胞の微小環境を構成する要因の一つである。癌細胞との間でTGFβ、TNFα、IL-6などの増殖因子やサイトカインをやりとりし癌細胞の維持、増殖、浸潤、転移を引き起こすことが知られている。そこで前立腺癌細胞PC3にTGFβを長期処理し微小環境における癌細胞とし、このPC3細胞とマクロファージのモデルである、THP-1・マクロファージ様細胞を共培養することで微小環境の一端を再現した。その後THP-1・マクロファージ様細胞からのサイトカイン産生変化を調べ、癌細胞が及ぼす影響を見た。癌細胞の増殖、浸潤、転移に関わるとされるIL-6、TNFαのTHP-1・マクロファージからの産生が、TGFβ長期処理PC3との共培養で低下した。TGFβは一般に炎症を促進、悪化させる作用があるが条件によっては炎症性細胞の抑制に働く場合があることが示唆された。(目的と背景)癌組織に誘導されるマクロファージは癌の増殖や浸潤に促進的に働く。

マクロファージがラテント癌や微小癌にどの程度含まれているか、それが癌細胞にとって有利あるいは不利に働いているのか、癌の悪性度とマクロファージの量との相関など臨床病理的事項を明らかにする。臨床癌手術標本を用いて同様のことを行い、微小癌との違いを明らかにする。また癌の微小環境における癌細胞とマクロファージの相互関係を培養条件で検討する。(結果)1)ラテント癌に浸潤する炎症細胞のうちマクロファージの割合は、免疫染色(CD68)を行ったところ非常に少ないことが判明した。そこで臨床検体を用いた研究を一旦中断し以下の実験を進めることとした。2)マクロファージは癌細胞との間でTGFβ、TNFα、IL-6などの増殖因子やサイトカインをやりとりし癌細胞の維持、増殖、浸潤、転移を引き起こすことが知られている。そこで前立腺癌細胞PC3にTGFβを長期処理し微小環境における癌細胞とし、このPC3細胞とマクロファージのモデルである、THP-1・マクロファージ様細胞を共培養することで微小環境の一端を再現した。その後THP-1・マクロファージ様細胞からのサイトカイン産生変化を調べ、癌細胞が及ぼす影響を見た。癌細胞の増殖、浸潤、転移に関わるとされるIL-6、TNFαのTHP-1・マクロファージからの産生が、TGFβ長期処理PC3との共培養で低下した。TGFβは一般に炎症を促進、悪化させる作用があるが条件によっては炎症性細胞の抑制に働くことが示唆された。当初の目的である臨床検体を用いたラテント癌での腫瘍関連マクロファージの関与を調べることは一旦中断したが、癌細胞とマクロファージの微小環境における相互作用について培養系での研究が進展した。すなわちTGFβの作用により癌細胞のあるものは炎症担当細胞の機能を抑制する可能性が示唆された。24年度が最終年度であるため、記入しない。培養実験ではTGFβ長期処理PC3細胞がTHP-1・マクロファージの機能を抑制したが、この機序の解明を目指す。具体的にはTGFβ長期処理PC3細胞内での遺伝子変化に注目し、発現上昇する遺伝子の中で重要と思われるものをピックアップする。その遺伝子を前立腺癌細胞に高発現させTHP-1・マクロファージに対する影響を見る。
イネの節間形成・伸長を制御する遺伝的メカニズムの解析

イネの節間組織の形成および節間伸長の遺伝的制御機構を解明するために、植物の茎伸長に重要な役割をもつことが明らかになっているブラシノステロイド(BR)のイネにおける作用特性について解析した。イネ植物体が示すBRに関連する生理的特徴、すなわちBRに対する反応性および暗黒下における形態形成に着目して、BRの合成および応答・伝達に関する突然変異体のスクリーニング法を確立し、その方法に従って、既存の矮性突然変異体の中からBRの合成に関する変異体を14系統、BRの受容に関する変異体を7系統同定した。これら変異体の原因遺伝子を明らかにするために、変異体間の交雑による対立性検定を行うとともに、各変異体のインド稲との交雑F_2における分子マーカーを利用した連鎖解析を行った。その結果、昨年度に本研究で単離したBRの合成系遺伝子OsDWARFに関する変異体を2系統、既知のBR受容遺伝子OsBRI1に関する変異体を2系統獲得し、さらにこれまでに報告されていない新規の遺伝子が原因とみられる変異体を多数同定することができた。このことは、本研究で確立したスクリーニング法の有効性を示すとともに、変異体を利用してBRに関する新規遺伝子の単離が可能となることを示している。また、同定したBR関連突然変異体が示す形態的特徴について詳細に解析したところ、葉鞘の特異的短縮、節間の完全な非伸長が認められた。組織学的には、植物体全体の細胞の伸長抑制が見られるとともに、節間における介在分裂組織の形成阻害、および葉における維管束の形態異常が認められた。これらのことから、ブラシノステロイドはイネの発育において細胞分裂・細胞伸長に密接に関与するのみならず、茎葉における組織分化/形態形成にも重要な役割をもっていることが示唆された。イネの節間組織の形成および節間伸長の遺伝的制御機構を解明するために、植物の茎伸長に重要な役割をもつことが明らかになっているブラシノステロイドのイネにおける作用特性について解析した。1)イネにおけるブラシノステロイドの生合成に関与する遺伝子の単離およびその機能解析・・・アラビドプシスなど数種の植物において、ブラシノステロイドの生合成に関与する遺伝子が単離されている。それら遺伝子のイネにおけるホモログをイネDNAデータベースを用いて探索するとともに、PCRによってクローニングを行った。その結果、既知の9種類の遺伝子全て(既に報告されている2遺伝子を含む)について、イネホモログを同定した。その内、トマトDwarfのイネホモログ(OsDwarf)については、全長cDNA・ゲノムクローンを単離し、詳細な解析を行った。OsDwarfの合成産物の酵素活性をyeast fucrional assayによって確認した。また、Osdwarfのアンチセンスコンストラクトをもつ組換え体イネを作出し、組換え体が示す形態的特徴を解析している。2)ブラシノステロイドの合成および応答・伝達に関する突然変異体のスクリーニング・・・イネにおいて唯一知られている、ブラシノステロイドの受容に関する突然変異体d61は、濃緑色・直立葉の矮性を示す。d61の形態的特徴を指標にして、これまでに得られている多数のイネ矮性突然変異体の中から、以下の方法を用いてにブラシノステロイドの合成および応答・伝達に関する突然変異体をスクリーニングした。すなわち、d61に類似した草型を示す変異体について、(1)ブラシノステロイドの投与による反応性および(2)暗黒条件下での発芽における節間伸長について調査し、その結果、ブラシノステロイドの合成に関与すると考えられる変異体を10系統、ブラシノステロイドの受容に関与すると考えられる変異体を3系統獲得した。
積極的栄養治療による軽度栄養不良HIV陽性者の病態改善効果の検討

低栄養の免疫能に対する影響は数多く報告され、またレプチンが栄養と免疫能の関係性に関連していることが明らかになってきた。そこで、ARTによるウイルスコントロールの良好なHIV陽性者にとっても、栄養状態の改善が免疫能の向上に効果を及ぼすのか解明することを目的とした。具体的には、下記の2点について明らかにする。1)CD4カウントが500/mm3未満、かつCONUTにより軽度栄養不良と判定されるHIV陽性者が、1日当たり250kcalのサプリメントを3か月間摂取した場合、CD4カウントが30%以上上昇するかどうか。2)CD4カウントの上昇が、体脂肪量の増加と血清中のレプチン濃度の上昇に関連するかどうか。エンシュア・リキッド(明治)250kcal/1缶のCD4カウントへの効果を検討する為、クロスオーバーのあるランダム化比較介入試験を実施した。介入群は3カ月間の経口栄養剤摂取の後、3か月間のフォローアップの計6か月とする。一方コントロール群は、3か月間のコントロール期間ののち、3か月間の介入期間の計6か月とした。ランダム化はブロックランダム割り付け法により行った。介入群とコントロール群の比較の結果、1日250kcalの栄養付加は、体重の有意な増加と、血清レプチンレベルの上昇傾向を示した。しかしながら、CD4カウントに変化は見られず、CD4<500/mm3かつCONUTにより軽度栄養不良と判定される者への栄養付加が免疫能を向上させる効果を認めることはできなかった。平成28年度は目標症例数の3分の2にあたる約60例をリクルートした。BMI<22.5では、総リンパ球数が有意に低く、CD4カウントが低い傾向にあった。一方、27.5≦BMIでは、メタボリックシンドロームの検査値が有意に高くなり、メタボリックシンドロームと予備群を合わせた併存率は85%以上となった。以上のことから、HIV陽性者における適正なBMIは、下限は22.5、上限は27.5であることが示唆された。また、CD4カウント高値群では、低値群と比較して体脂肪率が高い傾向にあり、BMI及び体脂肪量が有意に高かった。腹囲は大きい傾向にあり、T-chol, LDLが有意に高かった。以上の結果は、第31回日本エイズ学会総会・学術集会(平成28年11月25日、鹿児島市)および第20回日本病態栄養学会(平成29年1月13日、京都市)において発表した。現代のHIV陽性者は、過栄養の問題を抱える者と、低栄養の問題を抱える者の両方がおり、画一的な栄養介入では通用しない。本研究は潜在的な低栄養患者を抽出し、特定のリスクを持つ者に積極的に介入を行うという、HIV陽性者のテーラーメード栄養療法の確立につながるものである。目標症例数は、適切なサンプルサイズの計算に基づき、当初の予定では90症例(介入群45症例、対照群45症例)と設定していた。平成29年3月31日現在のリクルート症例数は約60例で、3分の2が終了したことになる。今後、当初に比べて新規リクルートがペースダウンしてきていることを考慮すると、目標までの残り30症例を終了するには1年程度を要する見込みであり、解析に要する時間を考慮すると今年度中にリクルートを終了する必要がある。今年度は、CD4 countが500/mm3未満かつ潜在的な軽度低栄養のHIV陽性患者を妥当性の証明されている評価法で的確に抽出すること、経腸栄養剤により3ヶ月間の栄養介入を行うことで栄養状態だけでなく免疫能を表すCD4 countが改善するかどうかをランダム化クロスオーバーデザインにより検証した。主要評価項目は介入期間後のCD4 countの増加(30%以上)、副次評価項目はCONUTの改善(1以下への低下)、糖・脂質代謝指標の変化とした。結果として、介入群では3ヶ月時の結果よりAlb、T-chol、CONUTスコア、TLC、CD4 countは増加しなかった。介入群患者は栄養付加により、食事からの摂取エネルギー量が減った可能性が考えられた。一方、対照群では、3ヶ月時の結果よりAlb、T-cholは変数なしであったが、CONUTは介入群よりも改善傾向を示し、TLCは増加傾向であった。また、CD4 countは増加傾向を示した。リクルート時に研究の目的として低栄養と免疫状態について簡単に説明しているため低栄養であることを指摘された対照群患者は、自らの食生活を改善し、食事摂取量が増加した可能性が考えられた。現代のHIV陽性者は過栄養と低栄養の問題を抱える者の両方がおり、画一的な栄養介入では通用しない。潜在的な低栄養患者を抽出し、特定のリスクを持つ者に積極的に介入を行うテーラーメード栄養療法の確立につながるものである。以上の結果は現在論文にまとめ投稿準備中である。目標症例数は適切なサンプルサイズの計算により、90例(介入群45例、対照群45例)と想定していた。約70例がリクルートされたが、データ欠損例があり、実際解析できるのは平成30年3月末時点で50例程度と見込まれる。また、データ解析に要する時間を考慮すると平成30年度前半にはリクルートを終了する必要がある。

具体的には、下記の2点について明らかにする。1)CD4カウントが500/mm3未満、かつCONUTにより軽度栄養不良と判定されるHIV陽性者が、1日当たり250kcalのサプリメントを3か月間摂取した場合、CD4カウントが30%以上上昇するかどうか。2)CD4カウントの上昇が、体脂肪量の増加と血清中のレプチン濃度の上昇に関連するかどうか。エンシュア・リキッド(明治)250kcal/1缶のCD4カウントへの効果を検討する為、クロスオーバーのあるランダム化比較介入試験を実施した。介入群は3カ月間の経口栄養剤摂取の後、3か月間のフォローアップの計6か月とする。一方コントロール群は、3か月間のコントロール期間ののち、3か月間の介入期間の計6か月とした。ランダム化はブロックランダム割り付け法により行った。介入群とコントロール群の比較の結果、1日250kcalの栄養付加は、体重の有意な増加と、血清レプチンレベルの上昇傾向を示した。しかしながら、CD4カウントに変化は見られず、CD4<500/mm3かつCONUTにより軽度栄養不良と判定される者への栄養付加が免疫能を向上させる効果を認めることはできなかった。本年度中に症例リクルートを終える予定である。栄養バランスの取れた経口栄養剤(250kcal/1缶/日)を3ヶ月間飲み続ける栄養介入により、臨床的に意義があるとされる30%以上のCD4カウントの増加、つまり免疫能の向上がみられるかどうか検証する。介入期間後もCD4カウント増加の効果が維持かどうか、引き続きフォローアップを行う。また、先行研究より、HIV陽性者の体重とCD4カウントの関連が示唆されているが、そのメカニズムは明らかではない。CD4カウントの増加が、体脂肪量の増加によりレプチン分泌が増加することによるCD4陽性T細胞の分化促進によるものかどうかを検証するため、保存血清においてレプチン濃度の測定を行う。アディポサイトカインである脂肪細胞から分泌されるレプチンが、CD4細胞の分化及び増殖に関連していると報告されており、今後保存血清にてレプチンを測定し、体組成測定の結果も併せて、体脂肪量とレプチン量及びCD4カウントとの関連を検討する。また、対象者のリクルートを引き続き行い、対象者数を増やす。現段階で目標症例数の3分の2程度につき研究が実施されているが、引き続き症例数を増やす必要があるため。引き続き対象患者をリクルートし、経口栄養剤を投与、送付する必要があるため。また、レプチンも測定しその関連をみる。最終的な成果は国内外の学会などで発表、論文投稿の予定としている。引き続き30症例程度をリクルートする予定であり、経口栄養剤の投与およびその送付に費用を要する見込みである。また、研究の成果を国内外の学会で発表、論文投稿を行う予定である。
がん治療用小型陽子加速器の実用機完成のための研究

放射線によるがん治療は、身体の機能及び形状の保全に優れており、患者に対する身体的負担も比較的軽いという長所のため、近年注目を集めている。中でも、荷電粒子線によるがん治療は、ブラッグピークの存在による線量の腫瘍部への集中が可能であるため、その有効性が実証されつつあるが、その広範な普及を目指して、小型で維持・運転の容易な陽子シンクロトロンの専用機の設計例を確立する目的で、機能結合型小型陽子シンクロトロンの研究を進めてきた。このタイプは、機能分離型に比して、・偏向電磁石と四重極電磁石が分離していないので、これらの電源間で励磁電流のトラッキングを取る必要がないため、電源の制御が簡略化され、建設コストの大幅な低減が可能となる。・水平及び垂直方向のベータトロン振動数の動作点が固定されており、日常の運転がきわめて容易になる。という利点を有している。しかしながら、この第二の点は、運転のフレキシビリティーが無いことにつながるため、当初に良好な設計を確立することが、この方式を採用するための、不可欠の条件となる。こうした観点から、本研究では、平成8年度に機能結合型のシンクロトロンのラティスの設計を確定したうえで、平成9年度にそれに用いられる6台の同一の機能結合型電磁石の一台を、実機と同寸のモデル電磁石として製作を行った。その際、3次元磁場計算の結果に基づき、FセクターとDセクターの境界の位置の調整を行い、最適な動作点を実現するための調整を実施した。またこのモデル電磁石の磁場測定を行い、漏洩磁場やFセクターとDセクターの遷移領域を重点的にマッピングを行った。このデータを内挿し、ビームのべータトロン振動の軌道から遷移行列を計算して、水平及び垂直方向のベータトロン振動数の算出を行った。機能及び形状の保全という長所のため、近年注目を集めている放射線によるがん治療のうちでも、ブラックピークによる照射線量の腫瘍部分への集中が可能な荷電粒子線によるがん治療の広範な普及を実現する目的から、機能結合型の小型陽子シンクロトロンのラティス設計を進め、実際に量産機を作製し、病院で設置する際の精度及び必要なマンパワーといった観点からも最適化したラティス設計を確定した。このラティスでは6台の同一の機能結合型電磁石を使用するが、一台の中でFDFという構造を有し、断面席が変化するため、遷移部分での磁場の評価は2次元の磁場計算では不可能で、製作が難しい難点があるが、一度良好な設計が確定してしまえば、自由度がない点日常の運転は極めて簡単に行えるので、がん治療専用の量産機に最適である。本研究においては、この機能結合型の電磁石の最適設計を確立すべく、2次元及び3次元の磁場計算コードを駆使して、実物大のモデル電磁石の試作を実施した。磁石の曲率半径は1.9m,F及びD部での偏向角はそれぞれ15°及び30°であり、F,D部の値はそれぞれ-5.8560及び6.1641を理想値とする設計とした。現在までの計算によれば、1.35Tまでの広範な磁場範囲にわたって、【plus-minus】60mmの水平方向の領域内における磁場の理想値からのずれが、【plus-minus】5x10^<-4>以下におさまる設計が得られたと考えており、この設計に基づきモデル電磁石を製作した。来年度には,この電磁石の磁場測定を実施し、三次元の磁場計算結果との比較を行うと共に、マッピングした磁場による粒子トラッキングを行い、この磁石によって実現されるn値の推定を行い、機能結合型小型陽子シンクロトロンの最適設計を確定する予定である放射線によるがん治療は、身体の機能及び形状の保全に優れており、患者に対する身体的負担も比較的軽いという長所のため、近年注目を集めている。

中でも、荷電粒子線によるがん治療は、ブラッグピークの存在による線量の腫瘍部への集中が可能であるため、その有効性が実証されつつあるが、その広範な普及を目指して、小型で維持・運転の容易な陽子シンクロトロンの専用機の設計例を確立する目的で、機能結合型小型シンクロトロンの研究を進めてきた。このタイプは、機能分離型に比して、・偏向電磁石と四重極電磁石が分離していないので、これらの電源間で励磁電流のトラッキングを取る必要がないため、電源の制御が簡略化され、建設コストの大幅な低減が可能となる。・水平及び垂直方向のベータトロン振動数の動作点が固定されており、日常の運転がきわめて容易になる。という利点を有している。しかしながら、この第二の点は、運転のフレキシビリティーが無いことにつながるため、当初に良好な設計を確立することが、この方式を採用するための、不可欠の条件となる。こうした観点から、本研究では、平成8年度に設計を確立した機能結合型のシンクロトロンエラティスに基づき、それに用いられる6台の同一の機能結合型電磁石の一台を、実機と同寸のモデル電磁石として製作を行った。その際、3次元磁場計算の結果に基づき、FセクターとDセクターの境界の位置の調整を行った。本年度は、平成8年度に試作したがん治療専用の陽子シンクロトロン用の機能結合型電磁石のモデル電磁石の磁場測定を行い、漏洩磁場やFセクターとDセクターの遷移領域を重点的にマッピングを行った。このデータを内挿し、ビームのベータトロン振動の軌道から遷移行列を計算して、水平及び垂直方向のベータトロン振動数を算出し、この結果に基づき、最適な動作点を実現するために、BL積の調整を実施した。
社会的立場と性ホルモンの交互作用による注意制御の適応的メカニズムの解明

本研究では,社会的な地位に対して選択的に働く視覚的注意に,性ホルモンが及ぼす影響を明らかにすることを目的としている。3年計画の2年目となる本年度は,実験参加者に対して実験的に割り当てられた社会的地位の高低と,その実験参加者の性ホルモンの分泌量バランスが認知課題の遂行成績に影響を与えるか否かについて検討した。このとき実験参加者はペアとして実験に参加して,2つの課題でそれぞれリーダーまたはフォロワーとしての役割が与えられた。また,課題を遂行する前に唾液を採取し社会的地位に対する関心度の高さに関わる,ソーシャルホルモンと呼ばれる男性ホルモンのテストステロンの分泌量を測定した。実験はテストステロンの高低(2)×割り当てられた社会的地位のパターン(4)として2要因被験者間計画として実施された。実験参加者らには,ペアで協力して可能な限り早く正確に課題を行ない高得点を目指すようにあらかじめ教示された。認知課題としては心的回転課題とマウス反転課題を用いた。心的回転課題では,標準刺激としての三次元物体と,それらを回転させて他の角度から見た状態となる2つの物体と,2つの異なる物体が提示され,実験参加者は標準刺激と同じ物体を2つとも選ぶように求められた。マウス反転課題では,実際の動きと反転してディスプレイに呈示されるマウスの軌跡を見ながら指定された英数字を交互に辿ってそれぞれに対してクリックをするように求めた。いずれの課題でも制限時間内に回答された正答数を測定した。実験参加者に与えられた役割は,2つの課題ともにリーダーを任される場合とフォロワーを任される場合,いずれか1つの課題でリーダーを,もう一方の課題でフォロワーを任される場合があった。本研究は多くの実験参加者を必要とするが十分な人数が集まっておらず,さらに多くの参加者を呼集する必要がある。報告した研究概要の実験は条件数が多いため,多数の実験参加者が必要となる。そのため現在も実験を継続中であるため,当初の予定より計画に遅れが認められる。実験を継続することによってデータ数を増やす。その後,注意機能を反映する課題を用いて社会的地位の高低による注意課題の遂行成績に性ホルモンの分泌量の寡多が影響を及ぼす可能性について検討する。本研究は,テストステロンなどの性ホルモンが,社会的地位や価値の高さに敏感に反応する視覚的注意に及ぼす影響を明らかにすることを目的としている。そのため本年度は,社会的地位の1つと考えられる魅力に対する注意の効果について検討を行った。実験では,事前に魅力評価された顔写真のうち,同性ごとに高魅力の顔写真と低魅力の顔写真をペアにした。それらの写真は,固視点の上下に試行ごとにランダムに提示した。実験参加者は女性のみだった。彼女らに課せられた課題は,指定された魅力度の顔写真(例えば,魅力度の高い顔写真)が上下のいずれかに提示されたかをできるだけ素早く答えるというものだった。実験の結果,参加者は女性の顔写真を判断するときのほうが男性の顔写真を判断するときよりも素早く判断することができた。また,答えるべき顔写真が上にあるときのほうが下にあるときに比べて素早く判断することができた。また,女性の顔写真に対して魅力度の判断を行うとき,魅力的な顔写真の位置を答えるときのほうが魅力的でない顔写真を答えるときに比べて素早く答えることができた。魅力度の高い顔写真の位置を答えるとき,男性の顔写真に比べて女性の顔写真のほうが素早く答えることができた。以上のことから,女性は異性に比べて同性の魅力判断を素早く行うことができ,特に同性の魅力的な人物に注意が向きやすいことが示唆された。性ホルモンと社会的立場に応じた注意機能の解明のために用いる注意課題の選定が実施途中である。そのため,当初の計画より若干の遅れが認められる。

本研究は多くの実験参加者を必要とするが十分な人数が集まっておらず,さらに多くの参加者を呼集する必要がある。報告した研究概要の実験は条件数が多いため,多数の実験参加者が必要となる。そのため現在も実験を継続中であるため,当初の予定より計画に遅れが認められる。社会的地位の高低による認知課題の遂行の程度の変化に性ホルモンが及ぼす影響について,注意機能が果たす役割について検討する。実験を継続することによってデータ数を増やす。その後,注意機能を反映する課題を用いて社会的地位の高低による注意課題の遂行成績に性ホルモンの分泌量の寡多が影響を及ぼす可能性について検討する。当初予定していた実験の実施が途中段階であるため,そのために確保していた予算が次年度に繰越しとなった。諸事情により学会に参加出来なかったことと実験参加者の集まりが芳しくなかったことにより,主に旅費と謝金及び唾液の分析費用に割り当てられた費用が次年度に持ち越しされた。最終年度では,継続中の実験を遂行するとともに当初予定していた実験を行うため,それらの費用にあてる。
首都圏における苛酷な使用条件下にある鋼橋の安全性

本研究では首都圏における苛酷な使用条件にある鋼橋に対して,疲労や座屈を中心とした耐荷口,風,地震や苛酷な自動車荷重の外国評価,耐震設計,地震防災システム等に関する検討を総合し,その安全性を効率的に高めることを目的として研究を進め,以下の成果をあげた.1)疲労に対しては,鋼橋の疲労損傷のデータベースの構築とその分析による疲労発生原因や問題となる構造形式の解明,対傾構取付部のきれつ発生原因究明と補修対策,溶接欠陥の寸法や形状が疲労強度に及ぼす影響の破壊力学を用いた検討,道路橋に生じる変動応力下での疲労きれつ進展挙動の実験的検討,疲労亀裂検出に対する各種非破壊試験の適用性の調査,及び微小な疲労亀裂のTIG dressingによる補修方法の有効性の理論的検証などを行った.2)耐荷口に関しては,供用期間中の構造物の安全性は確保するにあたって,設計の段階で明確にすることを目的とし,鋼橋部材の荷重作用に対する応答値すなわち荷重効果の計算法と,部材の静的強度すなわち耐荷口の評価法について考察し,構造物の安全性照査法の精密化を計った.3)道路橋に作用する苛酷な自動車荷重に対しては,走行車両の重量測定方法の確立,道路橋最大活荷重評価のためのコンピュータシュミレーションの効率化,車両の同時載荷が道路橋の疲労損傷に及ぼす影響の理論的評価等を行った.4)地震に対する検討としては,免震支承の動的特性と破壊モードの検討,同調液体ダンパーの基本特性に関する実験的検討,弾性地盤上での構造物の動的浮き上りに関する検討を行った.5)設計における安全性の確保に関しては,設計における安全率設定の影響の解析と評価,人的過誤等の要因が安全率設定に及ぼす影響に関する考案等を行った.本研究では首都圏における苛酷な使用条件にある鋼橋に対して,疲労や座屈を中心とした耐荷口,風,地震や苛酷な自動車荷重の外国評価,耐震設計,地震防災システム等に関する検討を総合し,その安全性を効率的に高めることを目的として研究を進め,以下の成果をあげた.1)疲労に対しては,鋼橋の疲労損傷のデータベースの構築とその分析による疲労発生原因や問題となる構造形式の解明,対傾構取付部のきれつ発生原因究明と補修対策,溶接欠陥の寸法や形状が疲労強度に及ぼす影響の破壊力学を用いた検討,道路橋に生じる変動応力下での疲労きれつ進展挙動の実験的検討,疲労亀裂検出に対する各種非破壊試験の適用性の調査,及び微小な疲労亀裂のTIG dressingによる補修方法の有効性の理論的検証などを行った.2)耐荷口に関しては,供用期間中の構造物の安全性は確保するにあたって,設計の段階で明確にすることを目的とし,鋼橋部材の荷重作用に対する応答値すなわち荷重効果の計算法と,部材の静的強度すなわち耐荷口の評価法について考察し,構造物の安全性照査法の精密化を計った.3)道路橋に作用する苛酷な自動車荷重に対しては,走行車両の重量測定方法の確立,道路橋最大活荷重評価のためのコンピュータシュミレーションの効率化,車両の同時載荷が道路橋の疲労損傷に及ぼす影響の理論的評価等を行った.4)地震に対する検討としては,免震支承の動的特性と破壊モードの検討,同調液体ダンパーの基本特性に関する実験的検討,弾性地盤上での構造物の動的浮き上りに関する検討を行った.5)設計における安全性の確保に関しては,設計における安全率設定の影響の解析と評価,人的過誤等の要因が安全率設定に及ぼす影響に関する考案等を行った.研究第二年度として研究打合せ会を四回開き、初年度における成果をふまえて、首都圏における使用条件の極めて厳しい鋼橋に対して、その設計上の問題点、耐荷力や疲労などの限界状態の評価法、風・地震・苛酷な自動車荷重の外力評価、地震防災システム等の基礎的な検討をさらに発展させ、以下のような成果を上げた。1)シミュレーションによる道路橋の疲労設計活荷重の検討を行った。車両の配列、重量および車間距離を確率変量として荷重列のシミュレーションを行い、生ずる曲げモーメントの変動範囲に対する統計量を疲労損傷の基準に用いることにより、設計活荷重に対する検討を行った。2)橋梁上に複数の車両が同時載荷した場合の疲労損傷に及ぼす影響に力点をおき、シュミレーションによる疲労損傷予測を試みた。結果に基づき、設計示方書に疲労照査を取り入れることの是非、及びその方法等に関して考察を行った。3)鋼橋の限界状態として代表的な座屈崩壊の把握と設計法の検討を行った。これまでは構造物の非線形挙動に対しては設計示方書の中で対処し、設計者には線形計算のみを課してきた。計算機の急速な普及と能力の向上、及び構造解析プログラムの信頼度の向上を鑑みて、新しい設計法の体系を模索した。座標の更新を伴わない簡便な有限変位解析に基づく設計法を検討した。4)自然災害として特に重要な地震による被害防止を目的とした設計法の検討と防災システムの開発に必要な基礎データを収集した。過去の地震に関して、その規模、震源、観測データ、被害状況などの情報をデータベース化し、それを管理・利用するシステムの開発を試みた。本研究では首都圏における苛酷な使用条件にある鋼橋に対して,疲労や座屈を中心とした耐荷力,風,地震や苛酷な自動車荷重の外力評価,耐震設計,地震防災システム等に関する検討を総合し,その安全性を効率的に高めることを目的として研究を進め,以下の成果をあげた.

1)疲労に対しては,鋼橋の疲労損傷のデータベースの構築とその分析による疲労発生原因や問題となる構造形式の解明,対傾構取付部のきれつ発生原因究明と補修対策,溶接欠陥の寸法や形状が疲労強度に及ぼす影響の破壊力学を用いた検討,道路橋に生じる変動応力下での疲労きれつ進展挙動の実験的検討,疲労亀裂検出に対する各種非破壊試験の適用性の調査,及び微小な疲労亀裂のTIG dressingによる補修方法の有効性の理論的検証などを行った.2)耐荷力に関しては,供用期間中の構造物の安全性を確保するにあたって,設計の段階で明確にすることを目的とし,鋼橋部材の荷重作用に対する応答値すなわち荷重効果の計算法と,部材の静的強度すなわち耐荷力の評価法について考察し,構造物の安全性照査法の精密化を計った.3)道路橋に作用する苛酷な自動車荷重に対しては,走行重両の重量測定方法の確立,道路橋最大活荷重評価のためのコンピュータシミュレーションの効率化,車両の同時載荷が道路橋の疲労損傷に及ぼす影響の理論的評価等を行った.4)地震に対する検討としては,免震支承の動的特性と破壊モードの検討,同調液体ダンパーの基本特性に関する実験的検討,弾性地盤上での構造物の動的浮き上りに関する検討等を行った.5)設計における安全性の確保に関しては,設計における安全率設定の影響の解析と評価,人的過誤等の要因が安全率設定に及ぼす影響に関する考察等を行った.
マイクロバブルを用いたドラッグデリバリーの開発

肝細胞癌の化学療法としては主に動注化学療法が行われ、長期にわたって薬剤をリリースする担体の開発が必要とされている。そこで、各種粉末性抗がん剤(CDDP,MMC,epi-ADR)について、肝の造影にも使用される超音波用造影剤(界面活性剤パルミチン酸とガラクトースの混合物)と混和し、安定性の確認を行い、マイクロバブルを表面に含有する本造影剤が、ドラッグデリバリーとして適当かの検討を行った。超音波造影剤に含まれるマイクロバブルと各種抗癌剤の親和性はいずれも不良で、早期に分離することから、有効なドラッグデリバリーシステムとはならないと考えられた。平成22年度は、3種類の抗がん剤(CDDP、epiADR、MMC)とガラクトース、パルミチン酸の混合物を様々な混合比で混和し、シリンジと三方活栓を用いたポンピング法にてホイップ(マイクロバブルと液体との界面に抗がん剤粉末が封入され、液体に溶解しない状態)として安定する配合条件があるかどうか検索した。現時点の暫定的結果としては、事前の文献検索から予想された通り、単純な混和、撹拌のみでは安定したホイップ化は困難であり、現時点ではいずれの薬剤も比較的速やかに液体に溶解してしまっている。特に、単剤として最も肝細胞がんに対する抗腫瘍効果が高いとされているCDDPの粉末製剤は、粒子径が大きく、マイクロバブルのとのサイズのミスマッチからホイップ化は困難であることが判明した。現在、epiADR、MMCにつき、超音波撹拌なども導入する事を計画しており、さらに専門家の意見を求めることとている。一方、上記にさらにヨード化ケシ油を加えた検討では、epiADRを用いた混和実験にて、濃度の異なる2層には分離するものの、それぞれの濃度で24時間以上エマルジョンとして安定するという結果が得られている。エマルジョンの安定化にはパルミチン酸の界面活性効果が大きく影響している可能性が高いが、マイクロバブルの存在がどの程度安定化に関与しているかを調べるため、平成23年度は、これに超音波診断装置を用いたマイクロバブル破砕を行い、溶液中の抗がん剤濃度の上昇が得られるかどうかを薬理学的に検討する予定である。平成22年度までの実験結果をふまえ、抗がん剤としてはCDDP製剤を除くepiADR、MMCの2種類にしばり、超音波発生装置を利用したホイップ化に挑戦した。具体的には、ガラクトースとパルミチン酸の混合物の溶解によって形成されるマイクロバブルの量と抗がん剤粒子を混合し、バブルと液体の界面に捕獲可能な抗がん剤の量の決定に挑戦したが、安定したホイップ化は得られなかった。ドラッグデリバリーシステムとしてはすでに市販の殿粉球(DSM)や自己凝血塊などの短期塞栓物質が存在し、30分から2時間程度の薬剤停留が可能となっている。本研究は、病変局所での選択的な薬剤溶出の目的で、その前段階としてこれ以上の長時間、薬剤を局所に停留させるためにマイクロバブルの安定した作成を目標とし、混和のための超音波照射に関しては、マイクロバブルを破壊せず、かつ抗がん剤粒子を界面上で分散させるのに適当な照射条件を検討したが、現在の方法では困難なことが判明した。
消化器癌の代謝を応用した新しい化学療法剤の作製とその効果

2. Invitroにおける実験ヒト食道扁平上皮癌(KE-3)を用い、1wellあたり6×10^4cell/mlの細胞を培養用96穴平底マイクロプレート内で、48時間培養(5%CO_2,37°C)し、methionine free培養液と通常培養液の2群に分け612時間培養後、各群各種濃度のMMCおよびConjをそれぞれ添加し、24時間培養した後、上清を捨て、さらに新たに通常の培養液を加えて36時間培養後、生細胞数と死細胞数をcountし、%生細胞数を算出し、殺細胞効果を検討している。Met-MMC conjugateは、MMC単独投与に比べて、有意な殺細胞効果を示す結果を得つつある。2. Invitroにおける実験
量子もつれ状態にある2電子の生成および量子干渉現象に関する実験的検証

1)電子銃作製および性能確認:昨年度までに設計を終えた電子銃の作製を行い、作製した電子銃チャンバーを組み上げた。納入搬送の際に装置の一部が破損するトラブルがあり、部品の再加工および組み上げが必要となったが、スケジュールを変更して対応した。真空および高圧の確認し、半導体フォトカソードの設置を完了した。2)電子顕微鏡装置の設置:本電子銃を搭載する電子顕微鏡装置の設置し、通常の電子銃をもちいた装置の性能評価を行った。また新規開発する重量の大きな電子銃を支えるための指示棒を取り付けたが、装置の除震性能に影響がないことを確認した。さらに電子銃と電子顕微鏡本体の接続部である差動排気システムの取り付けを行い、真空の確認を行った。3)電子線放出実験:設置した電子顕微鏡装置に今回開発した電子銃を搭載し、電子銃部のベークアウト、真空の確認、NEA活性化を行い、装置全体での電子線放出実験を行った。まだ装置全体の電子線経路を通過させることまではできてないが、電子銃部分を通過することは確認できた。4)構造化レーザー光生成の予備実験:量子もつれ電子を生成するための量子もつれ光生成の予備準備として、光渦の生成実験を行った。生成した光から得たホログラムには光渦の特徴を表すフォーク状の干渉縞が現れており、光渦であることが確認できた。5)量子もつれ電子の干渉および計測に関する理論的考察:量子状態のもつれの度合いを、負確率で特徴づける研究を行った。装置全体の組み上げまで完了し、電子線発生まで行うことができた。また量子もつれ光生成の予備的実験として光渦の生成およびフォトカソードへの導入まで完了した。理論面の研究として、量子状態のもつれの度合いを,負確率で特徴づける研究を行った.1)電子線の評価:昨年度までに電子顕微鏡本体に新規開発した電子銃を搭載するところまで完了しており、今年度は装置全体での電子線放出実験を行う。装置全体としての軸調整を行い、電子線の電流量、輝度、干渉性等の確認を開始する。干渉性の評価にもちいる電子線バイプリズムを新規開発する。またパルスレーザーをもちいてパルス電子線の発生を行い、パルス特性の評価も行う。2)量子もつれ状態の生成の実験:昨年度までの偏光レーザーによる干渉実験をさらに進め、量子もつれ電子を生成するための量子もつれ光生成の実験を行う。装置付属のレーザー光学系をもちいて量子もつれ光生成の実験を行う。量子もつれ光生成の確認には、量子もつれ状態特有の量子干渉効果を観察することにより行う。3)量子もつれ電子の干渉および計測に関する理論的考察:電子スピンを用いて生成した量子状態のもつれの度合いを定量的に測定する方法を考案する.装置の設計:今年度予定していた電子銃チャンバー、加速電極、表面活性化チャンバー、電子顕微鏡との接続部、高圧導入部等の設計を完了した。また、量子もつれ電子を生成するのに用いる量子もつれ光生成のための光学系の構築を開始した。本来計画には含まれていないが、本研究課題遂行に重要となる単電子検出可能なピクセル検出器を利用できる機会を得たため、旧装置にその検出器を導入し性能評価を行った。その結果、単電子検出が行えることを示唆する結果が得られた。半導体フォトカソードの作製:半導体フォトカソードとして用いるGaAs薄膜結晶を作製し、旧装置を用いて放出電子ビームの性能評価を行い、輝度、電流量、エネルギー幅、パルス応答性等が問題ないことを確認した。スピン偏極電子の強度干渉実験:旧装置をもちいた予備実験として、スピン偏極電子による世界初の強度干渉(2次干渉)の実験を行い、アンチバンチングを確認した。このことから、本装置が量子干渉現象を観察するのに十分な性能を有していることが確認された。また、電子らせん波を生成するフォーク型回折格子を導入し、電子線の軌道角運動量とスピン角運動量の相互作用の効果が電子ビームの強度分布に現れるの検証実験を開始した。理論的考察:電磁気学・量子力学を微分幾何学的に定式化する研究を行った。また,代数的量子論の方法を用いて、量子干渉効果とベル不等式の破れを記述する理論を構築した。これらの成果を解説記事の体裁で『数理科学』誌に発表した。旧装置をもちいた予備実験として、スピン偏極した電子線をもちいた強度干渉(2次干渉)実験を世界で初めて行い、アンチバンチングの効果を観測した。この結果は、本スピン偏極電子顕微鏡装置で量子干渉効果が観察できることを示すものである。29年度までに電子銃チャンバーの設計が完了し、30年度の電子銃部作製に向けた準備が整っている。また、新規に作製した半導体フォトカソードのテストを行い、問題なく動作することを確認している。量子もつれ状態を記述する量子論の研究も進めており、電磁場解析などにおいて有用な電磁場の幾何学的記述理論を研究している。

さらに電子銃と電子顕微鏡本体の接続部である差動排気システムの取り付けを行い、真空の確認を行った。3)電子線放出実験:設置した電子顕微鏡装置に今回開発した電子銃を搭載し、電子銃部のベークアウト、真空の確認、NEA活性化を行い、装置全体での電子線放出実験を行った。まだ装置全体の電子線経路を通過させることまではできてないが、電子銃部分を通過することは確認できた。4)構造化レーザー光生成の予備実験:量子もつれ電子を生成するための量子もつれ光生成の予備準備として、光渦の生成実験を行った。生成した光から得たホログラムには光渦の特徴を表すフォーク状の干渉縞が現れており、光渦であることが確認できた。5)量子もつれ電子の干渉および計測に関する理論的考察:量子状態のもつれの度合いを、負確率で特徴づける研究を行った。装置全体の組み上げまで完了し、電子線発生まで行うことができた。また量子もつれ光生成の予備的実験として光渦の生成およびフォトカソードへの導入まで完了した。理論面の研究として、量子状態のもつれの度合いを,負確率で特徴づける研究を行った.量子もつれ光生成の予備的な実験を行うために本装置とは別に構築したレーザー光学系をもちいて量子もつれ光生成に必要な条件を詰め、本装置での量子もつれ電子生成が迅速に行えるようにする。フォトカソードから放出される電子はフォトカソード内に残されたホールと量子もつれ状態にあるため、ホールの振る舞いが重要である。ホールの寿命がなるべく長くなるようフォトカソード結晶のバンド構造を検討しながら、本研究に最適なフォトカソード結晶の選択を行う。旧装置をもちいたスピン軌道相互作用観察の予備実験では、電子顕微鏡の軸調整によっては電子らせん波の生成に十分なコヒーレンスが達成されない場合があることがわかった。電子ビームのコヒーレンスを高めるような光学系の調整を行い、スピン軌道相互作用の検証を試みる。理論的な立場から電子スピンを用いて量子もつれ状態の生成を検証する方法を考案する。1)電子線の評価:昨年度までに電子顕微鏡本体に新規開発した電子銃を搭載するところまで完了しており、今年度は装置全体での電子線放出実験を行う。装置全体としての軸調整を行い、電子線の電流量、輝度、干渉性等の確認を開始する。干渉性の評価にもちいる電子線バイプリズムを新規開発する。またパルスレーザーをもちいてパルス電子線の発生を行い、パルス特性の評価も行う。2)量子もつれ状態の生成の実験:昨年度までの偏光レーザーによる干渉実験をさらに進め、量子もつれ電子を生成するための量子もつれ光生成の実験を行う。装置付属のレーザー光学系をもちいて量子もつれ光生成の実験を行う。量子もつれ光生成の確認には、量子もつれ状態特有の量子干渉効果を観察することにより行う。3)量子もつれ電子の干渉および計測に関する理論的考察:電子スピンを用いて生成した量子状態のもつれの度合いを定量的に測定する方法を考案する.
加齢に伴う脊椎変性の進行抑制に関わる因子の分子生物学的研究

加齢に伴い生じる脊椎・椎間板変性は腰痛や脊柱管狭窄、脊柱変形など脊椎疾患の主な原因と考えられている。しかし、脊椎・椎間板変性過程でどのような因子が関与するのか未解明な部分が多い。そこで髄核に発現するSonic hedgehog(Shh)と椎体終板に発現するIndian hedgehog (Ihh)の双方のHedgehogシグナル伝達に関与する膜蛋白のSmoothened (Smo)を生後に欠失させた(cKO群: Rosa Cre-ER(T);Smof/f))マウスを作成し、両側の椎間関節を切除した椎間板変性促進モデルにて検討したところ、control群と比べ椎間板変性が有意に抑制される結果を得た。そこで平成29年度では、変性のメカニズムにHedgehogがどのように関わっているのか組織切片を作成し免疫染色等で検討したところ、control群の変性した椎間板には終板軟骨細胞の肥大化とVEGFならびにCD31の発現がみられたが、cKO群では軟骨細胞の肥大化は有意に抑制されVEGFならびにCD31の発現は見られなかった。平成30年度では、椎間関節切除手術後にSmoの阻害薬であるSonidegib (Erismodegib, NVP-LDE225)を週3回腹腔内注射し椎間板変性の抑制が起こるか否か確認した。結果、control群と比較して椎間板高の低下は有意に抑制され、組織学的にも椎間板変性は抑制されていた。椎間板変性促進モデルにおいて、Smoothenedの阻害薬を腹腔内投与したところ、smoothenedのcKOマウスで得られた椎間板変性抑制結果と同様の椎間板変性の抑制効果を得られた。Smoothenedの阻害薬Sonidegibを腹腔内投与したところ、smoothenedのcKOマウスで得られた椎間板変性抑制結果と同様の椎間板変性の抑制効果が得られた。Sonidegibは局所進行基底細胞癌の治療薬として米国のFDAにすでに承認されている薬物である。本研究での結果は、がん治療のみならず変性疾患に対する治療薬にもなり得る可能性も秘めており、現在、Sonidegibによる変性抑制メカニズムや他臓器への影響など詳細に解析中である。そこで髄核に発現するSonic hedgehog(Shh)と椎体終板に発現するIndian hedgehog (Ihh)の双方のHedgehogシグナル伝達に関与する膜蛋白のSmoothened (Smo)を生後に欠失させた(cKO群: Rosa Cre-ER(T);Smof/f))マウスを作成し、椎間板変性促進モデルにて検討したところ、control群と比べ有意に椎間板変性が抑制される結果を得た。また、SmoのInhibitorを静注もしくは椎間板内に注入した場合にcKOの結果と同様の結果が得られるのか薬物を購入し実験を開始した。

本研究での結果は、がん治療のみならず変性疾患に対する治療薬にもなり得る可能性も秘めており、現在、Sonidegibによる変性抑制メカニズムや他臓器への影響など詳細に解析中である。購入したマウスが予定より安価だったため、残りを次年度の物品購入等に使用したい。
ミトコンドリア遺伝子異常症患者の精神神経学的検討

ミトコンドリア遺伝子異常を有する患者の精神神経学的な精査および臨床検査を施行し、経時的な観察の中で中枢神経障害が進行する症例と中枢神経障害を有しない症例をさらに比較検討した。また新たに、中年なってから精神病様症状を初発症状として発症した発端者を得て、この症例の臨床観察および検査を行い、これまでの研究の対象にした症例との比較検討を行った。ミトコンドリア遺伝子異常を有する患者を8年間追跡調査した結果、各患者の家系内で新しく精神神経学的所見を呈した人は発端者以外には現れなかった。新たな発端者に関しても、現在までの解析では後記のまとめのとおり従来の対象患者と較べて大きな差異は検出されていない。うつ病を呈した患者はその後も寛解状態が継続しており、小脳障害も目立っていない。しかしながら、脳卒中様発作を起こした症例では、大脳・小脳萎縮は進行性で、痴呆症状がより悪化した。経時的な臨床観察の結果として、中枢神経障害が進行する症例では、(1)乳酸、ピルビン酸が経時的に上昇する、(2)難聴の進行が急速であるが、その出現時期は様々である、(3)痴呆、失語症が比較的早期に出現する、(4)画像所見では、脳梗塞様の所見に加え大脳皮質の萎縮が加わる、(5)糖尿病、難聴の発生率が高いことが判明した。また、今回新たに加わった症例なども含め、痴呆・失語などは認めないものの、難聴、糖尿病が比較的急速に進行するが、精神症状の持続に関しては様々で、乳酸・ピルビン酸値が上昇傾向も一様ではなかった。精神症状のうち、抑うつ状態の持続する患者と一過性の精神病症状を呈した患者の症状・検査結果の推移などの大きな差異は、現在のところ明瞭ではない。なお、一部の患者の皮膚生検では立毛筋や汗腺細胞、pericyteに異常ミトコンドリアの集積をみ、発汗テストも遅延していた。また、老人または老年痴呆患者で見られることが知られているミトコンドリア遺伝子の欠失については、今のところ一定の傾向性を指摘できる結果は得られていない。年齢や臨床経過など様々な要因が影響すると考えられるため、更に分析して検討を加える必要がある。本年度の研究では、ミトコンドリア遺伝子異常患者のスクリーニングを行ない、新たに1家系にミトコンドリア遺伝子3243番にA→G変異があることを発見した。現在この家系について精神神経学的な調査を行なっている。患者本人は、精神神経学的に特に異常は見られないが、糖尿病が認められ、この遺伝子異常と糖尿病の関連が示唆された。この他、現在までに臨床的にミトコンドリア遺伝子異常が考えられる家系が2家系あるため、現在遺伝子解析中である。現在までに遺伝子異常が判明している家系については、精神神経学的調査を継続中である。血液生化学的検査も継続中であるが、血中乳酸、ピルビン酸の高い患者とそうでない患者がいるため、精査中である。放射線医学的な検査では、脳梗塞が多発する患者から、所見の見られない患者まで所見にばらつきが見られる。数人の患者で小脳の萎縮が見られるが、この所見がミトコンドリア遺伝子異常と関連するのか現在調査中である。