hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
タンパク質複合体内部の距離と角度の変化をリアルタイムで捉える蛍光計測法の開発

この三者共役モデルを検証するためにF1のサブユニットであるαとβの界面の動きを計測することを目指した。隣り合う2つのαサブユニットとβサブユニットの界面の動きを捉えるために偏光FRET法を考案し、研究を進めた。Cy3-bis-maleimideおよびCy5-bis-maleimideを合成し、αサブユニットにdouble cys変異を導入したF1およびdouble cys変異を導入したβサブユニットを単独で発現・精製し、Cy3-bis-βおよびF1(Cy5-bis-α)を作成した。Cy3-bis-βとF1(Cy5-bis-α)を高塩濃度環境下で混合し、サブユニットの交換反応を起こすことでF1(Cy5-bis-α/Cy3-bis-β)を得た。このF1(Cy5-bis-α/Cy3-bis-β)を用いて1分子偏光FRET計測を行った。まだプレリミナリーな結果だが、αβ界面の動きを反映したと考えられるFRET効率の変化が観察された。現在、計測条件の最適化とデータ解析を進めている。F1のαとβのそれぞれα-helixに2箇所Cys変異を導入したdouble Cys変異体の作成を進めている。Double Cys変異体が作成でき次第、合成したCy3-bis-maleimideおよびCy5-maleimideを修飾し、偏光FRET法を行う予定である。ただし、F1複合体においてαとβは交互に配置し、αとβのCys変異導入箇所が近接している。よって、αとβそれぞれにCys変異導入したF1を作成してCy3-bis-maleimideおよびCy5-bis-maleimideで修飾した場合には、αとβを架橋するように蛍光が修飾されてしまう可能性がある。そこで、βのCys変異体のみ単独で発現精製し、Cy3-bis-maleimideで修飾したサンプル(Cy3-β)を用意する。一方、αにのみdouble Cys変異を導入したF1を発現精製し、Cy5-bis-maleimideで修飾したサンプル(F1(α-Cy5))を用意する。その後、Cy3-βとF1(α-Cy5)を高塩濃度環境下で混合してサブユニットの交換反応を起こすことで、F1(α-Cy5/β-Cy3)を得る。このようにして得たF1(α-Cy5/β-Cy3)を用いて偏光FRET法を行う予定である。28年度が最終年度であるため、記入しない。
アミノ酸代謝に関与する酵素およびその欠失による先天異常症の分子遺伝学的研究

本研究の目的は、アミノ酸の中間代謝に働く酵素の中で、先天代謝異常症の発症原因と考えられているものについて、その遺伝子の構造を決定し、異常症の本態を遺伝子のレベルで明らかにするとともに、酵素タンパク質の機能部位を理解することにある。2年間に得られた結果は次のごとくである。1.ヒスチジン血症の原因であるヒスチダ-ゼをラット肝からはじめて再現性をもって精製することに成功し、それを用いて本酵素のcDNAを分離、塩基配列を決定したが、それはC末端側の約50%を含む断片であった。さらにこのcDNAをプロ-プとして、ヒトの本酵素のcDNAの一部を得た。2.アルカプトン尿症の原因酸素ホモゲンチジカ-ゼをラット肝から精製して、本酵素のcDNAを取り出し塩基配列を決定したが、C末端の約50%であった。3.オロット酸尿症では、オロット酸ホスホリボ-ス転移酵素およびオロチジル酸脱炭酸酵素の両方または後者を欠くとされている。そこでヒトの血液から後者の酵素をはじめて精製した。次にマウス脾から本酵素のcDNAを分離し、さらにこれをプロ-プとして、ヒト胎盤よりこの酵素のcDNAを得て全塩基配列を決定したところ、2つの酵素のcDNAが融合しており、したがってタンパク質のレベルでも融合酵素として産生されていることを認めた。また患者から取り出したcDNAには特異な変異が見られなかった。しかも患者でつくられているmRNAおよび酵素タンパク質は、いずれも大きさ,量とも健常者のそれとほとんど変わらず、疾患の原因を確認するには至らなかった。4.動植物界に広く分布するが、ヒト,霊長類,鳥類および一部の爬虫類では欠損しているウリカ-ゼについて、その不活性化の原因を知るため、活性をもったラット肝から本酵素を精製し、cDNAついでゲノムDNAを分離して、塩基配列を決めた。そして種々の生物間で本酵素の配列を比較し、相同性の高い領域で基質プリンと結合する活性中心を決めた。アミノ酸の中間代謝に働く哺乳動物酵素の中で、反応機構が酵素化学的にユニ-クで、かつその欠失による先天代謝異常症がしられているものとしてヒスチジン血症を取り上げ、その発症原因遺伝子ヒスチダ-ゼの分子遺伝学的研究を行った。本酵素のcDNAの一部と思われる断片を前に取り出していたが、より一層大きいものをもとめて再分離を試みた。実験はラット肝をリン酸緩衝液中でホモゲナイズして遠心、得られた上清を60°C2分間加熱して10,000rpm20分間再遠心、上清から硫安33%55%飽和が沈澱する画分を集めた。次にこれを一昼夜リン酸緩衝液にたいして透析後、DEAEセルロ-スに吸着、バッチ式に50mM150mMリン酸緩衝液で溶出される画分をプ-ルし、再び硫安処理して43%60%飽和画分を得た。これをリン酸緩衝液に対して一昼夜透析後、ハイドロキシルアパタイトカラムクロマトグラフィ-を行って40mMから160mMまでのリン酸緩衝液濃度勾配で溶出、さらに液クロ用monoQおよびハイドロキシルアパタイトを用いたHPLCで分画した。これらの操作で比活性は350倍上昇し、SDS電気泳動により単一のバンドを示すヒスチダ-ゼの精製標品を回収率91%で得ることができた。そこでこれをアジュバンドと混和後ウサギに接種して、本酵素に対するポリクロナ-ル抗体を作らせ、採取した血清を硫安処理して2556%飽和画分を集め、セファロ-ス4Bによるアフィニティ-

クロマトグラフィ-で製精した。次にこの抗体を用いて、ヒスチダ-ゼのcDNAをλgtllラット肝cDNAライブラリ-からスクリ-ニングし、10^6個のプラ-グから27個の陽性プラ-クを得た。そしてその中で最長のcDNAインサ-トを含むものから切り出した断片をpUC118および119にサブクロ-ン化してdideoxy sequence法で1050bpの塩基配列を決定した。しかしこれは分子量75,000のヒスチダ-ゼのほぼ半分に相当し、今後さらに残りの断片を得なければならない。本研究の目的は、アミノ酸の中間代謝に働く酵素の中で先天代謝異常症の発症原因とされているものについて、その遺伝子の構造を決定し、その知見に基づき異常症の原因を遺伝子のレベルで明らかにするとともに、酵素タンパク質の機能部位を理解することにある。第一にヒスチジン血症の原因であるヒスチダ-ゼ遺伝子のcDNAの約50%を含む断片を昨年度ひろったのに続いて、その塩基配列を決定した。さらにこれを用いてヒトの本酵素のcDNAを分離したが、得られたものは全長のほぼ半分にとどまり、それ以上の部分を得ることは出来なかった。第二にアルカプトン尿症の原因酵素ホモゲンチジカ-ゼをラット肝から精製することに成功し、それを用いて抗体を作り、さらにcDNAを得て塩基配列を決めたが、3側の約50%であり、それ以上の断片は得られなかった。第三にアミノ酸代謝の延長であるプリン体の分解系酵素は、生物の進化とともに活性を欠失したと考えられ、その中のウリカ-ゼは多くの高等動物に含まれるが、ヒト、霊長類および鳥類には活性が見られない。そこでこのような不活性化がいかなる機構でおこるのかを知るため、活性な酵素をもつラット肝から本酵素を精製し、抗体を作製してcDNAを分離、その塩基配列を決定した。そしてさらにゲノムDNAを得て、全構造を決めた。全長は40Kb以上で、8個のエキソンから機成されており、すべてのイントロン-エキソン接合部はGT/AGル-ルに従い、第一エキソンの上流20塩基から70塩基の間に、TATAボックスおよびCATボックスに相当する配列があることを認めた。また人工的に変異を導入して、基質プリン体と結合すると思われる部位を決めることが出来た。さらにこの遺伝子は単一に存在し、これを通じて進化する間に、ヒトおよビ霊長類では不活性化されたことを見い出した。
実験的冠動脈閉塞におけるANP動態,交感神経の受容体及び心筋微細形態変化の研究(副題:冠動脈の再潅流及び側副血行の影響)

冠動脈閉塞後再潅流において電子顕微鏡観察により冠動脈閉塞時間と毛細血管虚血障害程度の関係を検討し,虚血部心内膜側での毛細血管障害と心筋細胞障害のどちらが先行するのかの検討および側副血行が心筋障害程度を軽減するか否かの検討を行なった。【方法】側副血行の富んでいる雑種成大を麻酔し,人工呼吸下に開胸後左冠動脈前下行校(LAD)を第1対角板分岐部直下で10分結紮後60分再潅流したA群(n=5)と60分結紮後60分再潅流したB群(n=6)と90分結紮後120分再潅流したC群(n=5)の虚血部心内膜側心筋を採取した。60分結紮60分再潅流群では,左回旋枝からLAD支配領域へ走る直視可能な側副血行路をすべて結紮したD群(n=6)も作成しB群と比較した。【結果】A群に虚血変化を認めなかった。毛細血管の虚血変化はC群がB群より強かった。毛細血管断裂もC群がB群より多かった。(7.2%対0.4%,P<0.01)心筋虚血変化のミトコンドリア内Ca果粒,筋原線維収縮帯壊死もC群で各々62.4%,50.6%でB群の20%,29.4%より多かった。(P<0.01)側副血行の有無の比較では,毛細血管虚血変化の内皮細胞異常突起と小胞体はD群が各々7.4%,8.9%とB群の0.8%,2%より多かった。(P<0.01)心筋細胞の不可逆性虚血変化もD群がB群より多かった。筋原線維の収縮帯壊死,ミトコンドリア内Ca果粒はD群で各々49.4%,34.3%でB群の29.4%,20%より多かった。(P<0.01)C群では,毛細血管内腔が,内皮細胞異常突起,小胞体と赤血球で占められ閉塞している所見が多数見られた。【総括】毛細血管虚血変化は60分から90分閉塞の間で著しく悪化した。心筋虚血障害は毛細血管虚血障害に先行して生じることが示唆された。側副血行は,心筋とも毛細血管障害を軽減した。毛細血管内皮細胞異常突起と小胞体と赤血球による毛細血管内腔閉塞が“noーreflow" phenomenonの1つの因子となり得ることが示唆された。実験的冠動脈閉塞犬〔左冠動脈前下行枝を1時間結紮した後、1時間再還流を行なった。〕を作成し、左冠動脈前下行枝領域への直視可能な側副血行をすべて結紮した群と結紮しない群に分けて、血行動態、心室細動の発生率、心筋乳酸摂取率、水素クリアランス式組織血流計による虚血部の内・外層の心筋組織血流量および、組織酸素分圧測定装置による虚血部の内・外層の心筋組織酸素分圧を測定し、電子顕微鏡による心筋微細構造変化を観察した。側副血行路結紮群(n=16)と非結紮群(n=9)において、risk areaに差は認めなかった(40.2±3.8対39.2±4.0,ns)。側副血行路結紮群では、非結紮群に比べて、梗塞後の心室細動の発生率が高く(69%対22%、P<0.005)、また再還流後の心筋外層での組織血流量の回復が,内層に比べて遅延した。さらに心筋組織像でも、contraction band necrosisやミトコンドリアのmatrixの破壊像を多く認めた。しかし、乳酸代謝や血行動態では、両群に差はなかった。虚血部での心筋組織酸素分圧では、左冠動脈前下行枝結紮後、側副血行結紮群と非結紮群ともに、外層の酸素分圧は低下するが、内層の心筋酸素分圧は、増加する傾向が見られた。再還流後の心筋外層の酸素分圧は、側副血行路結紮群では、非結紮群に比べて回復が悪かった。今後の研究として、以上のパラメーターに対する薬剤の影響を調べる予定である。又、虚血部のα_1受容体を測定する予定である。僧帽弁膜疾患患者(n=13)の左心耳を電子顕微鏡で観察し、心房筋特殊顆粒数(ASG)を半定量的に測定し、ASGの数が左心耳の心房筋細胞の変性の程度によって変わるか否かを調べた。左心房拡大により、心房壁が長期間伸展され、心房筋特殊顆粒数は増加していた。心房筋変性が強い部位では、軽い部位に比べて、ASG数が有意に少ない事から、ASG数は、心房筋細胞の変性の程度にも影響される事が示唆された。A)虚血領域の心筋酸素分圧に対する側副血行路の影響を検討する為に側副血行路の富んだ犬を用いた。

左前下行枝(LAD)支配領域へ分布する左回旋枝からの則副血行路を結紮した群(n=29)(GI)と、結紮しない対象群(n=18)(GII)を作成した。LADを1時間結紮した後、1時間再還流した。LAD閉塞10分後の心室細動発生率は、側副血行路結紮群で高かった。(GI72.4%対GII31.3%、P<0.01)血行動態においては、心拍数、血圧、左室圧、心拍出量は両群間に有意差がなかったが、^<dp>/_<dt>/Pは両群ともに結紮60分後に低下した。乳酸代謝では、LAD閉塞時と再還流時ともに両群間に差はなかった。虚血部の心内・外膜側の心筋組織血流量(MBF)の測定は水素クリアランス法によった。心内膜側のMBFでは、LAD閉塞後と再還流後ともに両群間に差を認めなかった。心外膜側では、側副血行路結紮群は非結紮群に比べて、LAD閉塞10分後と60分後のMBFは少なかった。(LAD閉塞10分後、1.5±1.5対16.0±6.5、P<0.05、LAD閉塞60分後、5.6±3.4対23.7±7.3、P<0.05)再還流後のMBFは、両群間に差はなかった。虚血部の心内・外膜側の心筋酸素分圧を測定した。心内膜側では、LAD閉塞後に有意な減少は見られなかったが、再還流後では、側副血行路結紮群の心筋酸素分圧は、結紮前に比べて低下し、回復も遅れた。(結紮前、23.1±3.4、再還流10分後、13.7.±0.9、P<0.05、再還流60分後、20.0±4.0、P<0.05)心外膜側の心筋酸素分圧は、両群間で差が認められなかった。B)高食塩食によるDahlラットの心筋α_1受容体の特性の変化を検討した。Dahl食塩感受性(S)ラットでは、食塩負荷に伴い、食塩抵抗性(R)ラットに比べて血圧は上昇し、心重量は増加した。これに伴いSラットの心筋α_1受容体数はRラットに比べて増加した。7週令のSラットで増加していた親和性には差が認められなかった。以上からDahlSラットにおける心筋の肥大に心筋α_1受容体が関与している可能性があると考えられた。冠動脈閉塞後再潅流において電子顕微鏡観察により冠動脈閉塞時間と毛細血管虚血障害程度の関係を検討し,虚血部心内膜側での毛細血管障害と心筋細胞障害のどちらが先行するのかの検討および側副血行が心筋障害程度を軽減するか否かの検討を行なった。【方法】側副血行の富んでいる雑種成大を麻酔し,人工呼吸下に開胸後左冠動脈前下行校(LAD)を第1対角板分岐部直下で10分結紮後60分再潅流したA群(n=5)と60分結紮後60分再潅流したB群(n=6)と90分結紮後120分再潅流したC群(n=5)の虚血部心内膜側心筋を採取した。60分結紮60分再潅流群では,左回旋枝からLAD支配領域へ走る直視可能な側副血行路をすべて結紮したD群(n=6)も作成しB群と比較した。【結果】A群に虚血変化を認めなかった。毛細血管の虚血変化はC群がB群より強かった。毛細血管断裂もC群がB群より多かった。(7.2%対0.4%,P<0.01)心筋虚血変化のミトコンドリア内Ca果粒,筋原線維収縮帯壊死もC群で各々62.4%,50.6%でB群の20%,29.4%より多かった。(P<0.01)側副血行の有無の比較では,毛細血管虚血変化の内皮細胞異常突起と小胞体はD群が各々7.4%,8.9%とB群の0.8%,2%より多かった。(P<0.01)心筋細胞の不可逆性虚血変化もD群がB群より多かった。筋原線維の収縮帯壊死,ミトコンドリア内Ca果粒はD群で各々49.4%,34.3%でB群の29.4%,20%より多かった。(P<0.01)C群では,毛細血管内腔が,内皮細胞異常突起,小胞体と赤血球で占められ閉塞している所見が多数見られた。【総括】毛細血管虚血変化は60分から90分閉塞の間で著しく悪化した。心筋虚血障害は毛細血管虚血障害に先行して生じることが示唆された。側副血行は,心筋とも毛細血管障害を軽減した。毛細血管内皮細胞異常突起と小胞体と赤血球による毛細血管内腔閉塞が“noーreflow" phenomenonの1つの因子となり得ることが示唆された。
『初期英国演劇記録』分析による英国劇団史研究

Oxford, Cambridge, Devonその他の地域について、16-17世紀の対巡業劇団支払い記録等を調査・整理し統計資料を作成した。この資料の分析に基づいて地方巡業に関する論考をまとめ、2件の口頭研究発表と1件の講演を行い、1編の原著論文と1編の総説を刊行し、1編の学会報告を執筆した。本研究の遂行を通して、初期近代英国における地方巡業の様態と劇団に対する自治体の処遇は劇団・地域・年代によって大きく異なること、巡業劇団は多数の旅芸人のカテゴリーの一つにすぎなかったこと、女王一座は地方において、そして宮内大臣一座/国王一座はロンドンにおいて特権的な劇団であったことを明らかにした。下記の地域について、大学及び町あるいは市の対職業劇団支払い記録、上演許可あるいは禁止記録、退去命令記録等を調査した。調査結果は下記の通りである(1)ケンブリッジ:ケンブリッジ大学とケンブリッジ町とでは、劇団に対する姿勢が異なる。大学は、劇団の上演を禁止あるいは劇団に退去命令を発することが多かった。これに対してケンブリッジ町は、劇団に対して比較的寛大であった。1580年代から90年代にかけて対劇団支払い記録だけでなく、ギルドホール等での上演記録も散見することから、上演が行われたのであろうと思われる。1600年から1642年までは職業劇団の上演記録はほとんど見えないが、大学による禁令が発せられていることから逆に、劇団がケンブリッジを訪れることは続いていたのだろうと推測される。(2)オクスフォード:オクスフォード大学の旅役者に対する姿勢は、ケンブリッジ大学と同様に禁圧的である。オクスフォード大学は1584年、大衆演劇の禁令を発する。以後、上演禁止令とセットになった退去料支払いが常態化していったようである。演劇に敵対的な大学に対して、オクスフォード市は劇団の演劇活動に比較的寛大であった。市の対劇団支払い記録は16世紀の記録に多数見出せるが、1610年代末以降の市の記録には対劇団支払い記録は見えない。しかし後年まで役者たちが市を訪れていたことは、トマス・クロスフィールドの日記等の史料により確実である。(3)ヨーク:ヨーク市の支払い記録の多くは、役者と他の芸人とを区別していない。役者を吟遊楽人や熊芸人その他の「貴人の従僕」と一括りにして、年間の支払い額を記している。芸人に対する支払い額には年代による有意の差は見られず、芸人たちのステイタスに変化があったかどうかは支払い記録から判断することはできないが、時代が下がるにつれて市は大衆演劇の上演を禁止することが多くなっているように見える。『尺には尺を』においては、姦淫の罪を犯した者が危うく死刑に処せられそうになる。シェイクスピア時代には売春宿があり、姦淫を行う者は珍しくなかった。しかし現実に処罰されたのは彼らの一部である。性的な逸脱行為は当時、容認あるいは黙認されていたとも言える。そのような現実に鑑みれば『尺には尺を』の世界はかなり極端な世界である。しかし『初期英国演劇記録』(REED)の記録に見えるように、決して架空の出来事ではなかった。その記録はまた、性的逸脱行為がすべて処罰されるわけでなく、許容範囲を超えて逸脱すれば公開処罰(Carting)の対象となったことを示している。そのように処罰されるかされないかの岐路となったのが、たとえば婚姻外性行為という逸脱行為が可視化される妊娠であった。シェイクスピアは、『尺には尺を』において、婚外交渉の結果としてあやうく売笑婦の烙印を押されそうになる女性たちを舞台に登場させたが、そのような芝居の成立に与って力あったのが、ドーヴァーの資料に端的に現れているような、婚姻外性行為を少なくとも建前において強く忌避する当時の社会的文化であった。上記3地域について、16世紀中期から17世紀中葉の劇場閉鎖時までに当該地を訪れた巡業劇団に対する、市・町あるいは大学あるいは教会による支払い記録を通時的に整理し、表を作成した。この資料は未刊行であるが、地方巡業劇団の活動とそれに対する地方自治体、大学、教会の対応を分析するための基礎資料となる。Oxford, Cambridgeその他の地域について、対巡業劇団支払い記録を中心に詳細な時系列資料を作成した。この資料の分析に基づいて、あるいは部分的に利用して論考をまとめ、2件の口頭発表と1件の講演を行った。(1)REED (Records of Early English Drama)を読むーOxford, Cambridge, Devon, Kent, Yorkを中心にー(研究発表):地方巡業の様態、劇団に対する自治体の処遇は、劇団によって、地域によって、さらに時代によって大きく異なることを具体的な事例に即して明らかにした。また役者と他の旅芸人(楽師、曲芸師、熊使い等)との比較を通して、当時の巡業劇団は多数の旅芸人のカテゴリーの一つにすぎなかったものの、しかし同時に女王一座のように特権的な劇団も存在していたことを指摘した。(2)『初期英国演劇資料集』を読むー特権劇団としての宮内大臣一座・国王一座ー(研究発表):REEDの記録その他の関係資料の分析を通して、女王一座と宮内大臣一座・国王一座が特権的な劇団であったことを明らかにした。女王一座は地方巡業を最も旺盛に行った劇団であり、また別格の処遇を受けた一座であった。宮内大臣一座は、地方巡業が非常に少ない劇団であった。

一座はロンドンの最有力劇団であり、その後身の国王一座は、王室の厚遇を得た特権的劇団であった(3)シェイクスピア時代の「検閲」とはなにか(講演):シェイクスピア時代の宮廷祝典局長による検閲は、多くの識者が考えるほどに禁圧的・抑圧的なものではなく、局長の事前検閲はむしろ、公演のお墨付きを与えることによって役者たちを演劇の敵から守る盾になったと論じた。講演の中で、REEDの資料に基づいて、祝典局長のライセンスが劇団の地方巡業にまで及んでいたことを指摘した。講演原稿は後に、紀要論文として刊行された。本研究課題の研究期間は、当初の計画では平成25年度27年度の3年間であったが、厖大な資料調査に思いのほか時間を要し、加えて平成26年4月に所属部局の長に就任するという予想外の事態の展開のために、平成26年度の研究計画の大半を遂行することができなかった。平成27年度は劇団の地方巡業関係資料の編集作業、関連の研究発表を行うことができたが、積み残しの計画がかなり残っている。そのため研究計画期間を延長して、未達成の研究計画を平成28年度に遂行することとしている。2.上記の記録と比較参照するために、1594年1616年の宮廷の対劇団支払い統計資料及び1976年1616年の宮廷上演統計資料を作成した(未刊行)。3. REED記録集に見える資料に即して『尺には尺を』を分析し、初期近代英国における性的逸脱行為の文化的・社会的意味を分析した(原著論文、既刊)。16-17世紀イングランドにおいて演劇は宮廷祝典局長の管理下にあったが、祝典局長の演劇の許認可権は劇団の地方巡業にまで及んでいたことを、REEDの関係記録を参照しつつ指摘した(総説、既刊)。4. REEDの記録及び宮廷関係資料の分析を通して、エリザベス女王一座と宮内大臣一座・国王一座が特権的な劇団であったことを明らかにした(学会報告、既刊)。5.上記14の調査・論考を通して、地方自治体の巡業劇団に対する姿勢が大きく異なること、対劇団の対応は時代が下がるにつれて厳しくなっていくこと、女王一座とシェイクスピアが所属していた宮内大臣一座・国王一座は他と区別される「特権的」な劇団であったこと、さらに地方の演劇関係資料にロンドンの演劇(たとえばシェイクスピア劇)を読み解く鍵となる資料が存在することを、より具体的に明らかにすることができた。Oxford, Cambridge, Devonその他の地域について、16-17世紀の対巡業劇団支払い記録等を調査・整理し統計資料を作成した。この資料の分析に基づいて地方巡業に関する論考をまとめ、2件の口頭研究発表と1件の講演を行い、1編の原著論文と1編の総説を刊行し、1編の学会報告を執筆した。本研究の遂行を通して、初期近代英国における地方巡業の様態と劇団に対する自治体の処遇は劇団・地域・年代によって大きく異なること、巡業劇団は多数の旅芸人のカテゴリーの一つにすぎなかったこと、女王一座は地方において、そして宮内大臣一座/国王一座はロンドンにおいて特権的な劇団であったことを明らかにした。原著論文1編を執筆したが、地方巡業関係資料の作成・整理・分析が遅れている。
低温環境にある岩盤の熱・応力・浸透連成挙動と岩盤斜面の劣化に関する研究

室内凍結融解試験および原位置試験から,低温環境におかれた飽水状態の岩質材料は0°C以下で凍結膨張し,変形挙動は間隙内の水分の凍結が大きく影響していることが従来の研究からわかっている。また地盤内の熱現象は,熱移動・間隙水の変化・変形挙動が複雑に連成したものであることから,地盤内の熱現象を解明するためには,これら各現象が連成する場の数値解析が必要となる。そこで,本研究では運動量保存則・質量保存則・エネルギー保存則を連成して解く熱移動・応力・浸透連成解析を実施するため,各保存則について支配方程式を誘導したのち有限要素法により定式化し,それに基づいた弾塑性解析コードを作成した。さらに,凍結下室内三軸圧縮試験結果から接線変形係数の応力依存性を取り込み,諸物性値の異なる岩質材料を用いて室内凍結融解試験を実施したところ,熱源付近に凍上現象による破壊が確認された。この弾塑性解析コードにより,室内凍結融解試験で確認された凍結膨張による破壊挙動を残留ひずみも含めて定性的・定量的に表現することができた。この解析コードを斜面の劣化問題に適用すると共に地下空洞内に低温物質を貯蔵することを想定した解析を実施し、貯蔵物質の温度により空洞周辺の劣化領域が大きく異なることを定量的に示した。さらに、室内試験においては低温熱源付近の熱伝達係数を逆解析によって決定する手法を開発したことも成果の一つである。また、開発した手法のごく一部を変更することにより低温環境のみならず、高温環境に対しても適用可能であることを確認した。今後は時間に依存する現象を対象としてより簡便な解析手法を開発する予定である。また地盤内の熱現象は,熱移動・間隙水の変化・変形挙動が複雑に連成したものであることから,地盤内の熱現象を解明するためには,これら各現象が連成する場の数億解析が必要となる。用いた構成則は各場に対して,全て見かけ上は線形であるが,水の物性が0°Cを境に著しく変化することを熱膨張率の変化として導入するとともに,解析では間隙内の水が凍結して氷へと相変化する際に放出される潜熱が温度場に与える影響についても考慮し,室内凍結融解試験を模擬した。また,この解析コードを斜面の不安定化現象へ適用すると共に地下空洞内に低温物質を貯蔵することを想定した解析を実施することによりその適用性を確認した。これらの成果は,International Journal of Rock Mechanics and Min.Sci.とComputers and Geotechnicsに掲載された。また,室内試験においては低温熱源付近の熱伝達係数を逆解析によって定量的に評価する手法を開発したことも成果の一つである。

また地盤内の熱現象は,熱移動・間隙水の変化・変形挙動が複雑に連成したものであることから,地盤内の熱現象を解明するためには,これら各現象が連成する場の数値解析が必要となる。そこで,本研究では運動量保存則・質量保存則・エネルギー保存則を連成して解く熱移動・応力・浸透連成解析を実施するため,各保存則について支配方程式を誘導したのち有限要素法により定式化し,それに基づいた弾塑性解析コードを作成した。さらに,凍結下室内三軸圧縮試験結果から接線変形係数の応力依存性を取り込み,諸物性値の異なる岩質材料を用いて室内凍結融解試験を実施したところ,熱源付近に凍上現象による破壊が確認された。この弾塑性解析コードにより,室内凍結融解試験で確認された凍結膨張による破壊挙動を残留ひずみも含めて定性的・定量的に表現することができた。この解析コードを斜面の劣化問題に適用すると共に地下空洞内に低温物質を貯蔵することを想定した解析を実施し、貯蔵物質の温度により空洞周辺の劣化領域が大きく異なることを定量的に示した。さらに、室内試験においては低温熱源付近の熱伝達係数を逆解析によって決定する手法を開発したことも成果の一つである。また、開発した手法のごく一部を変更することにより低温環境のみならず、高温環境に対しても適用可能であることを確認した。今後は時間に依存する現象を対象としてより簡便な解析手法を開発する予定である。
理科授業における疑問に関する研究

理科授業において,疑問を生かした問題解決の活動を行うための基礎的な研究として,アクション・リサーチの手法により授業の実践を行いながら,子どもの疑問の生成とその分析を行い,その傾向を明らかにした。(1)連続的な授業での疑問生成では,「Yes,No」で答える疑問が多く,一般に生じる傾向が高いとされる「Why」の疑問は比較的少ない。単元の前後での疑問生成では,授業との関連は薄く,多様な疑問詞の疑問が生成する傾向がみられた。(2)子どもの疑問は授業との関連が深く,植物の光合成に関する授業では,連続的な授業の進行に伴って「光合成」に関する内容に収斂していく。単元の授業以外では「光合成」以外の内容も多く,多様な内容の疑問が生成される。(3)子どもの疑問は,授業での観察,実験に対応して生成されたり,学級集団における他の子どもの発言にも影響を受けたりする。(4)子どもの疑問は既有の知識や概念の影響を大きく受ける。子どもは,自分の知識や概念と,授業で提示した事象や内容との間に矛盾が生じた場合,その矛盾が疑問として生成する。(5)個人内における疑問相互の関係は,4つのタイプ(発展型・固執型・関連型・単独型)に類型化することができる。全体的な傾向としては,個人内の疑問は発展型として推移するものが多く,固執型として推移するものは少ない。しかし,固執型の疑問の内容は授業との直接関連していないことが多いが,子ども自身の強い問題意識の表れであり,子どもの疑問による問題解決という視点からは重要であると考えられる。(6)探究可能な問題設定のためのプロセスを解明するため,疑問の解決方法を話し合うグループのプロトコル分析を行った。これにより,話し合いへの教師の介入が重要であり,そのアドバイスが効果的であった。特に,子どもに対して新たな実験方法を示したり,条件を制御した実験をするための助言をしたりすることが多くみられた。
随意運動制御における大脳から小脳核への入力の機能的役割

本研究は、視床VL核TCNに対する大脳運動野からの入力について解析を行い、皮質入力による小脳-視床-大脳投射系の調節機構について検討した。特に、皮質からの抑制入力の性質と、それを引き起こす視床VL核内の抑制性介在細胞と視床網様核のGABA作動性細胞を含む神経回路網を明らかにすることを試みた。実験は、ネンブタール麻酔したネコを用い、小脳出力を結合腕(BC)、運動野、前運動野で、電気刺激し、対側VL核で細胞内記録を行った。TCNは小脳刺激により単シナプス性の大きなunitary EPSPに続き、2シナプス性のIPSPが生じた。同様に大脳皮質刺激によって、TCNには大きなEPSPとそれに続くIPSPが記録された。この小脳及び大脳からのIPSPの起源を調べるため、視床網様核細胞(TRN)から細胞内記録を行った所、TRNは、小脳から2シナプス性の興奮性入力を受け、大脳からは、単シナプス性の興奮性入力を受けていた。大脳刺激により生じるEPSPは2種類があり、小脳入力との衝撃実験の結果から、早いEPSPは、視床TCN細胞の軸索側枝を介していることが推定された。大脳刺激で生じるIPSPは少なくとも2種類に分類された。早いIPSPは、大脳から生じる単シナプス性EPSPと同じ潜時であることから、皮質視床細胞を介するものではなく、TCNの側枝を介してTRNが興奮を受け、そのTRNがTCNに抑制を及ぼしているると解釈された。視床VL核内の介在細胞は、小脳核細胞と大脳の皮質視床細胞のそれぞれから単シナプス性興奮性入力を受けTCNに抑制を及ぼしており、視床網様核のTRNは、小脳から視床VL核のTCNの側枝を介して2シナプス性の興奮入力を受け、大脳からは皮質視床細胞から単シナプス性興奮入力を受け、VL核のTCNに抑制を及ぼしていることが明らかとなった。このように、皮質から視床への興奮性及び抑制性入力は小脳-視床-大脳投射系のspatial focusingあるいは、shifting active areaを行う重要な機能的役割を担っていることが推察された。
下負荷面モデルの土の時間依存性表現への拡張

先に,下負荷面モデルに基づいて時間依存性弾塑性構成式を規定した.本構成式においては,ひずみ速度は弾性,塑性および粘性ひずみ速度の独立な三つの部分からなり,また,負荷速度とともに構成粒子間の粘性抵抗が増大し,ひいては,相互すべりに基づく塑性ひずみ速度が抑制され,さらに,これにより高速変形においては応力が正規降伏面から飛び出し得るように定式化されている.本年度は,本構成式に基づいて,土に関する時間依存性弾塑性構成式の定式化を行った.まず,土の弾塑性変形に対して先に提案した降伏関数および正規降伏面に対する下負荷面の大きさの比つまり相似比の発展則を導入するとともに,2次圧密式を是正,拡張するとともにクリープポテンシャル関数を導入して,クリープひずみ速度式を新たに提案して具体的構成式を規定した.特に,クリープひずみ速度式については,時間の替わりに塑性体積ひずみとクリープ体積ひずみの和で与えられる非弾性体積ひずみを用いて客観性を有するように2次圧密式を改めるとともに,クリープポテンシャル関数を導入して定式化した.さらに,本構成式の妥当性を検証するため,数水準の負荷速度,応力緩和およびクリープ破壊を含む種々の正規圧密粘土の3軸非排水圧縮試験データとの比較を行った.その結果,負荷速度による変形特性の推移を適切に表現し,また,応力緩和現象およびクリープ破壊現象を合理的に表現し得ることが実証された.まず,時間依存性弾塑性構成式としての要求条件および既往のモデルの妥当性について考察を行った.その結果,Bingham(1922)の粘塑性流動モデル以来,発展され超過応力モデル(Przina,1963)および流動曲面モデル(Olszak-Perzyna,1966)として広く用いられている粘塑性モデルの基本構造は,あくまで粘性流体に関わるもので,固体の非弾性変形を適切に表現し得ないことを論じた.一方,非弾性変形を塑性ストレッチング(ひずみ速度)とクリープストレッチングに加算分解する塑性・クリープモデルは妥当な基本構造を有することを指摘した.また,その構成式においては,a)塑性変形は変形速度の増大によって抑制される,b)応力が降伏面から飛び出すことが許容される,c)応力速度に独立で時間に依存するクリープストレッチングが導入されねばならないことを論じた.具体的構成式の規定に当たって,塑性負荷状態においても応力が降伏面上あることを前提としない下負荷面モデル(Hashiguchi-Ueno,1977,Hashiguchi,1980,1989)を導入した.本モデルを塑性係数がストレッチングの大きさの単調増加関数となるように拡張した.また,応力,内部状態変数および時間の関数としてのクリープストレッチングを導入して,時間依存性下負荷面モデルを提案した.なお,塑性ポテンシャル論における比例係数の正値性に基づいて,時間依存性を含む一般負荷状態に適用し得る負荷基準を導出した.本モデルに基づいて,2次圧密現象を考慮して土の時間依存性・弾塑性構成式を規定した.また,非排水条件下の数種の変形速度,クリープ破壊,応力緩和を含む諸実測値との比較によりその適用性を実証した.先に,下負荷面モデルに基づいて時間依存性弾塑性構成式を規定した.本構成式においては,ひずみ速度は弾性,塑性および粘性ひずみ速度の独立な三つの部分からなり,また,負荷速度とともに構成粒子間の粘性抵抗が増大し,ひいては,相互すべりに基づく塑性ひずみ速度が抑制され,さらに,これにより高速変形においては応力が正規降伏面から飛び出し得るように定式化されている.本年度は,本構成式に基づいて,土に関する時間依存性弾塑性構成式の定式化を行った.まず,土の弾塑性変形に対して先に提案した降伏関数および正規降伏面に対する下負荷面の大きさの比つまり相似比の発展則を導入するとともに,2次圧密式を是正,拡張するとともにクリープポテンシャル関数を導入して,クリープひずみ速度式を新たに提案して具体的構成式を規定した.特に,クリープひずみ速度式については,時間の替わりに塑性体積ひずみとクリープ体積ひずみの和で与えられる非弾性体積ひずみを用いて客観性を有するように2次圧密式を改めるとともに,クリープポテンシャル関数を導入して定式化した.さらに,本構成式の妥当性を検証するため,数水準の負荷速度,応力緩和およびクリープ破壊を含む種々の正規圧密粘土の3軸非排水圧縮試験データとの比較を行った.その結果,負荷速度による変形特性の推移を適切に表現し,また,応力緩和現象およびクリープ破壊現象を合理的に表現し得ることが実証された.
沖縄県宮古島地方の祭祀劣化映像資料のデジタル化と文化政策的活用方法の研究

本研究の成果は、宮古島の劣化した祭祀映像資料をデジタル化すると共に、それらの映像資料をもとに、途絶えた祭りや衰退した祭りを復活・活性化することを現地の人々と共に話し合ったことである。具体的には、劣化映像資料を246枚のDVDに納めることができたこと。そのDVDを使って、2007年11月24日に「宮古の祭りの伝承」・2008年11月22日に「狩俣集落の祖神祭り継承」・2009年11月22日に「伊良部島佐良浜の祭祀の現状と課題」のシンポジウムをそれぞれの地域で行ったことである。当年度は、佐渡山安公氏所蔵の宮古島の祭祀映像のVHSテープを、DVDに移し替え、デジタル化を中心に作業を進めた。その作業状況は、狩俣地区祖神祭りのイダスウプナカ・アーブガー・ジーバブナ・トゥディアギ・マンサンの映像をはじめ、夏プーイのピャーシ・ニーリの歌謡、カタフツウプナー祭祀、旧正月のトゥクルフン祭祀、ヨーイヌウプナー祭祀などで、DVD108枚(破損等を考慮し、各3枚ずつ作製したので、実際は総枚数324枚)約80時間ほどの分量である。また、多良間島のシツウプナカの祭りは、パイジュニ・アレイキ・ナガシガージュニ・フダヤーで行われる祭りを記録すると共に、その祭祀集団が老人座・中老座・ブシャ座・クバン座・幹人座などに分かれ、それぞれの役割を果たして祭りが運営されていること、井戸拝みを重視していることなどを調査した。その結果、シツウプナカのシチは「節」で、八重山諸島のシチ(節)祭りでも、井戸拝みを重視するが、それと共通していることが明らかになった。一方、祭祀集団においては、老人座から幹人座まで、すべてが男性中心の組織になっており、女性中心の祖神祭とは大きく異なっているが、その男性のブシャ座は、神女である女性に神酒を捧げることが祭りの主眼であった。地域における映像資料の活用を考える研究会は、宮古島市県立図書館分館において開催し、更には、「宮古島の神と森を守る会」のシンポジウムにも参加して、宮古島の西原地区の祭祀の現状と課題について、パネルディスカッションを行った。それらの研究会における地域の皆さんの参加者は、女性が多く、祭りの危機を深刻に捉えているのは、女性達であることがわかった。当度は、佐渡山安公氏所蔵の宮古島の祭祀映像のVHSテープを、DVDに移し替え、デジタル化を中心に作業を進めた。その作業状況、ま、島尻地区のパーントゥ・ウヤガン・ウブチラ・ウフカズンの映像をはじめ、大浦地区のマストリャ・ズッコモーイ、西原地区のユークイ・トゥマイニガイ・ンーヌウパツ・オカジダミニガイ・インギョマなどの祭祀及びの歌謡のVHSビデオをDVDへ変換し、デジタル化を行った。また地域における映像資料の活用を考えるにあたって、狩俣地区では、中止されている祖神祭の復活に向けて、宮古の神と森を守る会とともにシンポジウムを開催した。祖神祭は、アブンマの後継者がいなくて、十年以上も中止された祭りであるが、当日は、かつての祖神祭の参加者、地元の関係者、沖縄本島、本土からの人々も出席し、真剣に討論が行われた。なかでも、かつての経験者が、映像を見ながら、一緒に祖神祭の神歌を口ずさんでいたのが印象的だった。心情的には、祖神祭を復活したいとの思いは大きいが実際に実施するとなると、各個人が負担する経費が膨大なものであることがわかった。精神論も重要だが、どのようにして経費を捻出するかという問題が大きいようである。劣化映像資料は、民俗映像カメラマンで、現地在住の佐渡山安公氏(宮古伝承文化センター所長)が影したものであり、昨年度に引き続き、デジタル化作業も佐渡山公氏の協力のもとに行うが、今年度は、劣化の激しいテープめデジタル化作業を行った。具体的には、宮古島市狩俣集落の祖神祭、西原集落、伊良部島のユークイをはじめとするなどの劣化映像資料のデジタル化である。また、デジタル化された映像を使って、宮古諸島伊良部島「池間添公民館」で、11月23日にシンポジウムを行い、祭りの再生及び継承について考えた。以下、そのときの狩俣恵一が発表した「宮古島の神歌を歌うことの意義」では、「狩俣集落の公民館で開かれた昨年の会で、私は話の中で下手な神歌を歌いました、そして、お話の結論として、宮古の狩俣の祭りの多くが、素晴らしい神歌がたくさん歌われ、そごに狩俣の祭りの感動があり、物質があります。で'から私自身、この狩俣の神歌をみんなで歌うことがウヤガンを復活させる最大の近道だと考えています」と述べた。そして、今年の会では、西原集落のオバーの皆様方が神歌を歌ってくださる運びとなった。

祭りを復活継承するためには、大勢で公開の場で神歌を歌うことが重要である。なぜならば、そうすることによって、多くの人が神歌の魅力と迫力を実感し、神祭りの活性化・復活を望むようになると考えるからである。
恐怖情動時の生理応答変化を担う神経回路の解明

恐怖情動は様々な生理応答・行動の変化を誘発し、危機的な状況下における生存確率を高める。これまでの研究から、齧歯類の天敵臭の構造類似体、チアゾリン誘導体を利用することで、マウスに先天的な恐怖情動およびそれに伴う様々な生理応答や行動を誘発させることが可能となってきた。本研究では、恐怖情動誘発物質受容体の遺伝子改変マウス、恐怖誘発時の脳活性化地図、神経細胞特異的な操作を行うウイルスベクターを用いることで、恐怖情動に伴う様々な生理応答および行動の変化がどの神経回路によって制御されているのか、受容体発現神経細胞から脳中枢へと至る恐怖情動を制御する神経回路の解明を試みる。
高度な理解促進を目指す獣医学臨床手技映像教材の開発

獣医学臨床の教育現場において活用する臨床手技の習得をテーマとした映像教材を開発し、これを視聴する学生を被験者として、視点、動き、解説、臨場感、映像の質や量といった観点から理解度に関する評価を繰り返し、「見てわかる」映像教材を制作する。さらに関係する教員らへのヒアリングも実施し、教材開発の過程で評価を繰り返すことで、「見てわかる」映像教材の基本要素を明らかにし、理解を促す仕組みを解明することが目的である。加えて、「見てわかる」映像教材を制作するためのマニュアルを作成することも目指す。
超低電圧静電気放電現象の解明

昨年に引き続き、低電圧(50V)以下で、微小容量(2.2pF)のキャパシタを帯電させ、接触放電時の放電電流観測と発光を観測した。この静電気放電には、小型のリレーを利用した。従って、充電電圧が小さい場合には、機中での放電は起きえないはずであり、おそらくは、2つの接近する電極間でのトンネル電流が流れるものと考えて試行実験を試みた。この静電容量は、人体など(通常数10から100pFアルとされており、これまでの静電気模擬実験にはこの大きな静電容量に充電し、その放電電流を観測していた。従って、放電時の放出エネルギーは、静電容量比だけでも50分の1、また、帯電電位も1-3桁小さいため、放電エネルギーは、1/2CV^2で近似できるので2桁から7桁も小さく、pJレベルである。この値は、熱的にはかなり小さな値である。なお、最近の静電気障害によるデバイス故障は、熱的と言うよりは瞬時的な強磁場によるものがより問題化されている。実験は、水銀を接触部に含ませたwet typeリレー(高速応答)と通常のリレーでケースから取り出し可能なdrytypeリレーを用いて計測した。ちなみに、静電気発光は、充電電圧が180V以上で安定して観測されること、100V以下では殆ど観測されないことが明かとなった。一方、接触放電電流に関しては、波形は外部回路に大きく依存し、波形自体は比較的変わらないこと、リレーのタイプによって充電電位との相関が異なること、放電路の抵抗を波形から求めることに成功した。その結果によると、明らかに、接触時の抵抗が帯電電圧に依存して変化すること、リレーによって異なること、大気中に保存すると特性が大きく変化することなどを実験的に明らかにすることができた。1kVを超すような通常の静電気放電と異なり、10V以下の静電気現象は全く違うはずである。すなわち、気体分子のイオン化エネルギーよりも小さい電圧での現象で、普通に考えられている静電気放電は発生しないはずである。ところが、最近、この10V以下の静電気帯電においても現実に、電子素子の破壊が発生している。特に、微細化が要求されてナノスケールになった磁気センサーは、数ボルトの誘導電圧によって流れる電流によってダメージを受けることが報告されている。このような低電圧においては、通常の意味での放電は発生しないはずである。一つには、分子がイオン化しないことから放電にはならないはずである。また、パッシェンの法則からもわかるように、この領域では放電することはないと言われている。従って、実際には、非接触時の放電が発生するというのではなく、接触によってトンネル電流が流れることによるものと想像される。この場合には、大きな電流が瞬時に(立ち上がり時間が極めて早いはず)流れることが予想される。当初、ナノメータギャップでの電圧電流特性の測定を検討したが、建物自身の震動(車の通行にも大きく依存するが)の影響を取り除くことが不可能であった。そのため、高速スイッチであるリードリレーでの実験を行った。また、ギャップにも水銀を塗布したもの(高速)から、周囲のガス環境を可変にした(実験は大気のみしかしていないが)リードリレーを用いて、動作時の電流波形を並列接続のコンデンサー(1pF程度)とリード線のインダクタンスで模擬しながら観測した。コンデンサー両端の電圧が50V以上では安定な電流波形となり、以下では再現性の悪い電流が流れた。後者では実験のたびに接触点が異なることによるものとして説明できた。
一次元長鎖白金-白金結合鎖体の光反応性・伝導性

白金とロジウムの異種金属が織り成す、混合原子価一次元鎖の合成と単結晶構造解析に成功した。この一次元鎖は、金属がPt-Rh-Pt-Pt-Pt-Pt-Rh-Ptの順に一次元状に並んだ八核錯体を形成しており、さらに、八核錯体同士をCl^-が架橋することで無限一次元鎖化していた。単結晶構造解析より、八核金属部位の合計酸化数は19+であり、1つの不対スピンを有することがわかった。この常磁性一次元鎖のESR測定の結果、2に近いg値とブロードな線幅を観測した。観測不対スピンのスピン軌道相互作用が小さいことを考慮すると、不対電子はRh dxy軌道に存在すると考えられる。さらに、スペクトルがブロードな理由は、隣接ロジウム間を高速にホッピング運動しているためである。つまり、金属酸化状態は-Pt(3+)-Rh(2.5+)-Pt(2+)-Pt(2+)-Pt(2+)-Pt(2+)-Rh(2.5+)-Pt(3+)-であり、帯磁率とXPS測定の結果もこれを支持している。さらに、極低温から常温までの、温度可変ESR測定をした結果、g値は常に2に近い値をとったが、スペクトルの線幅は、温度に依存して顕著に変化した。一次元鎖の1つは、線幅が7.9K付近で、最もブロードになった。ホッピング運動は、温度上昇とともに、高速化すると考えられる。つまり、7.9K付近で、ESRタイムスケールと合致し、不対電子は隣接ロジウム間を1秒あたり億オーダー回往復することがわかった。
平安時代における土地公証文書と所領安堵の前提的研究

本研究では、現存する平安時代の諸文書の考察から、土地公証と所領安堵の関係性を解明する意図のもとに、対象を、(1)「土地公証を軸として作成保存された文書」と、(1)「武家政権下に発達する安堵体系成立の前提となる文書」に分け、それぞれの調査・研究を進め、平安時代の諸文書の諸課題に即して、個別の考察を加え、ほぼ所期の成果をあげることができた。本年度は、平安時代の土地売買・譲渡・貸与・処分と公権の証明に関わる文書の収集と、国衙・在庁関係文書の調査・研究を進めた。前半期では、対象を法隆寺文書に絞り、1980年代に行われた「法隆寺昭和資財帳調査」の実績を踏まえて、中世にかけて各地に流出・散在した同寺文書の集成を目指し、全文書の掌握に努め、所期の成果を得ることができた。現状でほぼ8割程度を論文草稿としてまとめた。史料は主に「寺辺所領」に関わるものであるが、そのなかで土地移動の根底に、「作手」など下位の権利関係の変動があるとの見通しを得ることができた。また、後半期には、厳島神社文書、根津美術館所蔵文書、根岸文書、東文書(松尾社家文書)、内閣文庫所蔵文書などの理解を深めるため、補助者の協力も得て、東京大学史料編纂所と国立公文書館を中心に調査を行った。ここでは中世の安堵への見通しをつける目的で、国衙・在庁の支配権-とくに地方官職の補任が、地方に「職」の秩序を広め、それが後世の安堵という主従制度の基礎を形成するという通説的理解を踏まえて、国庁・在庁関係文書を、大きく国庁を主体とする下達文書と、権門・寺社・武家の発給文書の両面から追究する方法を採用して、鋭意、研究を進めた。ただ、対象とする文書は平安時代に限っても厖大であり、なお収集途上にあって次年度に調査と研究を継続する予定である。日本中世史における「職」や安堵の研究をたどると、蓄積は厖大であるが、その成立の過程の探究は閑却視されている。特に「職」の補任と所領安堵との関係解明は、中世武士政権の主要施策としても不可避の研究課題である。今回の研究では、古代史の側から土地公証制度を媒介として、中世的「職」と安堵成立の前提となる諸条件を探ることを目的に史料の収集と分析を進めた。具体的には、律令制のなかでも、賦役令の課役免除の規定(舎人史生条)に着目し、唐令と比較しつつ、日本令では雑役免除により朝廷への奉仕の体系が作られていること、荘園公領制の広がりとともに「職」は全国に拡大するが、その理由には、11世紀の別名の形成に伴う在地所司が広く補任され、それが「職」の全国的分散を促し、在来の秩序を補任に求める慣習も成立、朝廷、国衙、領主からの安堵として慣習化してゆくと結論づけた。その研究過程では、(1)土地公証に関わる平安時代文書を網羅的に採訪、収集するとともに、(2)購入した文献により近代史学における安堵研究の軌跡をたどり、比較法制史学から発展した研究において必ずしも、前代の古代史からの連関が解明されていないことを明らかにし、(3)安堵と密接に関わる「「職」の補任に関わる国衙・在庁史料と家政機関関係史料の補任史料の収集分析・整理に努めた。その結果、(4)「職」の本質が課役免除にあることを指摘して、社会内における「ゆるやかな官職体制」の存在を想定、前代の官人特権に安堵の淵源があることと結論づけた。以上の成果は研究成果報告書として刊行した。