hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
心的資産の機能探求と知的資産マネジメントに関する研究

本研究では、企業の競争有意の源泉となる資産を、有形・無形、理性的・感覚的の軸で分類する。そして、知的資産と心的資産に着目して資産を再定義し、その測定や開示法を検討することを目的とする。知的資産とは、知財や製造ノウハウやブランドなどの無形の資産を活用し、競争力優位を高めていく働きかけである。物的資産や金融資産の対となる無形資産が、将来の企業経営の根幹を握っているとも言われている。一方、本研究では、これまで明確に概念化されてこなかった心的資産に研究対象を広げることによって、企業が競争優位性を獲得するために活用可能な資産を発見し、そのための経営戦略を体系的に明らかにできる。
リンパ球性白血病に於けるウィルス蛋白によるセレクチンリガンド合成酵素の転写調節

我々がクローニングに成功したセレクチンリガンド合成糖転移酵素Fuc-TVII遺伝子がHTLV-1 Tax蛋白により活性化され、enhancer部がLTR21-bpと相同の構造を持つとともに、その機序は、CREB/ATF転写因子を介した経路で更にprotein kinase A非依存性での活性化が可能であることを発見し、機能的相同性も認めた。そこには単に内因性のCRE領域と異なり、Fuc-T.VII遺伝子CRE-like enhancer部にはCREB/ATF転写因子以外に他の因子の関与が考えられた。この新規因子のmRNAをNorthern Blot法にて調べたところHTLV-1感染T細胞株や刺激後のJurkat T細胞での発現増大を認めた。そこでhF7CAF-1の発現ベクターを作成し、Jurkatリンパ球でFuc-T VII遺伝子promoterのレポーター活性を測定したところ、約200%活性が上昇した。またTax単独時のレポーター活性上昇がhF7CAF-1併用により更に強まることを発見し、同遺伝子産物がTaxとの協調によるFuc-T VII遺伝子転写を増大することを認めた。このactivatorとしての作用は、CREB/ATF familyの一部の転写因子とも協調して働いていることを見出した。
消化器癌に対するMRI誘導音響化学療法の開発

(1)機能化MRI造影剤の開発音響化学療法のための新規機能化造影剤として、ポルフィリンとガドリウム系MRI造影剤の合成を行った。新規化合物はT1強調画像において高信号となったものの、水溶性が低く臨床応用には不適であったため、そこで新たにより高い親水性が期待されるHematoporphyrin dihydrochlorideとp-NH2-Bn-DTPA-penta(t-Bu ester)の複合化を行った。この造影剤によるMRIの造影能をラットを用いて検討し、投与条件の検討を行った。今後はリンパ節やクッパー細胞などの網内系に取り込まれるMRI造影剤である超常磁性酸化鉄造影剤(SPIO)とポルフィリンとの合成を行い、リンパ節微小転移に対する音響化学療法の実用化を目指す。(2)超音波照射条件の検討収束督音波照射による細胞障害の程度を評価し、超音波照射エネルギーが増大すると殺細胞効果が発生することがあきらかとなった。その機序としては温熱効果およびキャビテーション効果が考えられた。いる。(2)超音波とMRIのレジストレーション手法の開発超音波プローブとMRI画像のレジストレーション手法として、まず光学式センサPolarisを用いた剛体レジストレーションを行い、精度検証および改良の結果0.5mmの位置誤差精度が得られた。プローブの安定した検出のためのマーカーの取付器具の製作、改良を行った結果、天井つり下げ式のPolarisカメラを用いればリアルタイムのナビゲーションが可能となった。現在(1)の研究成果と併せて動物実験による精度検証、有効性の評価、実用化のための開発研究を推進している。いる。本研究では、対象とする癌をMRIで可視化し、同時に位置情報を取得、MRI誘導音響化学療法を施行するために、音響化学療法で主として用いられるポルフィマーナトリウムとGd-DTPAの化学的合成を行い、新規機能的造影治療薬の開発を目指している。H18年度は主として、MRIによる癌細胞可視化のための基礎的検討を行った。(村田先生に実験内容を聞く)合成された薬剤に超音波を照射し、活性化の指標である活性酸素を測定したところ、通常のポルフィマーナトリウムと同程度の活性酸素の放出が認められた。来年度は本薬剤を用いてin vivo実験を行い、その効果を検討する。また、同時に、消化器癌の治療方針を左右する要因である、リンパ節転移を正確に把握するために、MRIによる全く新しいセンチネルノードナビゲーション法についての検討を行った。リンパ節トレーサーとして超常磁性酸化鉄(SPIO)を用い、ブタを用いてリンパ節が可視化でできるSPIO投与濃度、MRI撮像条件、投与法を明らかにした。MRIにより取得したボリュームデータを三次元処理してセンチネルリンパ節を抽出し、それを腹腔鏡の実画像に重畳表示させるナビゲーションシステムの開発を行った。腹腔鏡下手術時の環境(気腹状態)のままMRIを撮影することで、正確なナビゲーションが可能で、本法は新しい腹腔鏡下センチネルノードナビゲーション法としてその有用性が期待される。来年度は、本法の臨床応用を行うと同時に造影剤を改良し、音響化学療法のターゲッティングとして本法が応用可能かどうかを検討する。H18年度は以下のテーマに沿って研究を推進した。(1)機能化MRI造影剤の開発今年度、音響化学療法のための新規機能化造影剤として、ポルフィリンとMRI造影剤の合成を行った。まず最初に5,10,15,20-Tetrakis(4-aminophenyl)-21H,23H-porphineとMRI造影剤ユニットDOTA-tris (t-butylester)の複合化を試みた。反応はHOBtとHBTUを触媒とする縮合反応によって行った。反応はTLCによって追跡し、反応終了後、脱保護したのちに目的物を高速液体クロマトグラフィーによって精製した。

この新規化合物はT1強調画像においてハイパーとなったものの、水溶性が低く臨床応用には不適であった。そこで新たにより高い親水性が期待されるHematoporphyrin dihydrochlorideとp-NH2-Bn-DTPA-penta (t-Buester)の複合化を検討し、目的物を得た。今後、この新規機能化造影剤のMRI造影能を評価した後、超音波照射による活性酸素種の発生等について検討する予定である。(2)超音波とMRIのレジストレーション手法の開発超音波プローブとMRI画像のレジストレーション手法として、まず光学式センサPolarisを用いた剛体レジストレーションを行い、精度検証を行った。MRIマーカーの検出精度が低いためマーカーの開発、検出のための画像条件の設定を行った。来年度は非剛体レジストレーションとの比較検討を行い、MRI画像誘導照射機構の開発を行う。H19年度は以下のテーマに沿って研究を推進し、成果が得られた。(1)機能化MRI造影剤の開発これまでに音響化学療法のための新規機能化造影剤として、ポルフィリンとガドリウム系MRI造影剤の合成を行った。新規化合物はT1強調画像においてハイパーとなったものの、水溶性が低く臨床応用には不適であったため、そこで新たにより高い親水性が期待されるHematoporphyrin dihydrochlorideとp-NH2-Bn-DTPA-penta(t-Bu ester)の複合化を行った。この造影剤によるMRIの造影能をラットを用いて検討し、投与条件の検討を行った。また、今年度、収束超音波照射による細胞障害の程度を評価し、超音波照射条件を明らかにした。今後はリンパ節やクッパー細胞などの網内系に取り込まれるMRI造影剤である超常磁性酸化鉄造影剤(SPIO)とポルフィリンとの合成を行い、リンパ節微小転移に対する音響化学療法の実用化を目指す。in vitro実験による活性酸素の発生など抗腫瘍効果の評価、また、担癌ラットを用いたin vivo評価を行い、成果を公表する予定としている。(2)超音波とMRIのレジストレーション手法の開発超音波プローブとMRI画像のレジストレーション手法として、まず光学式センサPolarisを用いた剛体レジストレーションを行い、精度検証および改良の結果0.5mmの位置誤差精度が得られた。プローブの安定した検出のためのマーカーの取付器具の製作、改良を行った結果、天井つり下げ式のPolarisカメラを用いればほぼリアルタイムのナビゲーションが可能となった。今後は(1)の研究成果と併せて動物実験による精度検証、有効性の評価、実用化のための開発研究を推進する予定である。
神経回路網形成過程におけるシグナル伝達分子CRMP/CRAMの機能解析

私たちはセマホリンのシグナル伝達への関与が推測されているCRMP分子群に注目し、新規CRMPファミリー分子の同定、CRMPに結合するチロシンキナーゼFes/Fpsの同定、さらには2つの新規GTP結合蛋白質の同定に成功し、その機能解析を行っている。これらの蛋白質群はセマホリンのシグナル伝達のみならず、微小管動態の調節、ミトコンドリアの酸化還元機能制御、そして核内における機能調節が示唆された。以上の結果は、神経回路網形成の分子機構の解明において全く新しい視点を提供するものであり、その重要性はきわめて高い。また、これらの蛋白質群の機能異常が神経変性疾患の発症に関与することを示す結果も得られており、今後、神経回路網に関連する分子群による情報伝達システムの解明が神経変性疾患の病因解明や治療法にも有効であると期待できる。1.チロシンキナーゼFes/Fpsによる微小管動態の調節機構の解明私達は以前チロシンキナーゼFes/Fpsがセマホリンを介するシグナル伝達に関与していることを報告したが、詳細な分子機構は不明であった。今回の研究によって私たちはFes/Fpsが微小管と結合し、微小管の核形成と微小管重合を促進する役割があることを見いだし、Fes/Fpsは微小管の重合と安定性に深く関与していることを証明することが出来た。さらにFes/Fpsによる神経軸索の形態変化における微小管動態との関連性を示唆することが出来た。2.CRMP/CRAMに会合する新規GTPase,ミトコンドリアSeptinの機能解析私達はM-Septinがミトコンドリアに特異的に移行し、かつCRMP/CRAMをミトコンドリアに移行させる機能を有することを報告した。さらにM-septinによるミトコンドリア機能調節機構と神経回路形成における役割についての関連性が示唆された。CRAM結合する蛋白質として分子量42kDaの新規Ras相同性GTPaseが同定された。(CRAM-associated GTPaseよりCRAGと命名)CRAGは核内に1ないし数個のリング状の核内封入体を形成し、CRMP/CRAMを核内移行させる機能を有していることが示唆された。
高分子材料の微細加工による多機能集積マイクロシステム

本研究では,高分子材料,有機材料,たんぱく質など,従来のシリコンMEMS技術では用いられてこなかった新しい材料からなる微小知能機械の研究を行なった.有機発光材料に関しては,まず,MEMS構造によって圧力を加え,発光部の幅を数μm幅にパターニングする技術の研究を行なった.従来,シャドウマスクなどの方法で百μm程度でのパターニングが限界であったが,より微細な加工が可能となった.さらに,発光材料を基板からリリースされたMEMS構造の上にパターニングする方法についての研究を行なった.これによって,静電アクチュエータのような可動部品の上に発光部を作ることが可能となった.さらに,有機トランジスタによる電流増幅の方法の研究を行なった.従来のような平面型でなく,微小な立体構造を用いた縦型のトランジスタの試作に成功した.この方法を用いることで,ディスプレイや撮像装置などの動作効率を向上させることが可能と考えられる.さらに本年度は,高分子材料,有機材料半導体の研究に加え,大面積,低予算での製作を実現できる可能性のある材料として,感光性のたんぱく質である,バクテリオロドプシンを利用したデバイスの研究を行なった.静電気によるたんぱく質の電着と配向の制御に加え,基板表面の親水性・疎水性の制御によって,5μm程度の小さい領域にまでたんぱく質をパターニングできることがわかった.このたんぱく質を4x4の領域にパターニングすることにより撮像センサを作ることが出来た.上記の研究に加えて,皮膚のように柔軟で,様々な力の成分を検出することのできる触覚センサを試作した.この触覚センサは,センサ部分にはシリコン微小構造からなる歪センサを利用しているが,全体を柔軟なフィルム内に埋め込むことができる.このようなシリコンMEMSデバイスも,微小なチップ構造内に集積することで,柔軟な有機材料システムとの統合が可能である.本研究では,高分子材料,有機材料,たんぱく質など,従来のシリコンMEMS技術では用いられてこなかった新しい材料からなる微小知能機械の研究を行なった.有機発光材料に関しては,まず,MEMS構造によって圧力を加え,発光部の幅を数μm幅にパターニングする技術の研究を行なった.従来,シャドウマスクなどの方法で百μm程度でのパターニングが限界であったが,より微細な加工が可能となった.さらに,発光材料を基板からリリースされたMEMS構造の上にパターニングする方法についての研究を行なった.これによって,静電アクチュエータのような可動部品の上に発光部を作ることが可能となった.さらに,有機トランジスタによる電流増幅の方法の研究を行なった.従来のような平面型でなく,微小な立体構造を用いた縦型のトランジスタの試作に成功した.この方法を用いることで,ディスプレイや撮像装置などの動作効率を向上させることが可能と考えられる.さらに本年度は,高分子材料,有機材料半導体の研究に加え,大面積,低予算での製作を実現できる可能性のある材料として,感光性のたんぱく質である,バクテリオロドプシンを利用したデバイスの研究を行なった.静電気によるたんぱく質の電着と配向の制御に加え,基板表面の親水性・疎水性の制御によって,5μm程度の小さい領域にまでたんぱく質をパターニングできることがわかった.このたんぱく質を4x4の領域にパターニングすることにより撮像センサを作ることが出来た.上記の研究に加えて,皮膚のように柔軟で,様々な力の成分を検出することのできる触覚センサを試作した.この触覚センサは,センサ部分にはシリコン微小構造からなる歪センサを利用しているが,全体を柔軟なフィルム内に埋め込むことができる.このようなシリコンMEMSデバイスも,微小なチップ構造内に集積することで,柔軟な有機材料システムとの統合が可能である.研究初年度である本年度は,高分子材料の電気的・光学的・機械的特性に関しての基礎データを得るための実験を中心に行い,将来の集積デバイスへの応用可能性を示した。以下各要素に関しての研究成果を述べる。高分子材料の電気的特性に関しては,PETフィルム基板上に,強い疎水性をもつフッ化物材料をパターニングして親水.疎水性領域を選択的に構成し,これによって導電性高分子の形状を制御して微小電極として加工する技術を開発し,加工できる電極の最小幅や,抵抗率などの測定を行った。光学的特性に関しては,前出の導電性高分子パターニング技術を用いることによって電気的に微小液滴の位置を制御し,光線方向を制御するマイクロレンズとして応用することが可能であることを示した。光源として高分子有機EL素子を用いた微小画像表示システムなどへの応用が可能である。また,シリコンゴムを材料として用いることによって柔軟で変形可能なマイクロ光学素子アレイを構成した。その際,構造内部にかかる応力の分布と複屈折との間に線形な関係があることを実験によって確認し,有限要素法による応力解析によって材料内部の複屈折を評価できることを示した。機械的特性に関しては,シリコンゴムを構造として,荷重方向を変換する微小な突起構造のアレイを製作し,高分子圧電(PVDF)フィルムと組み合わせて触覚センサを構成した。高分子圧電フィルムは本来垂直方向の荷重に対して応答する高分子材料であるが,ここで試作したシリコンゴムの構造によって,せん断荷重を垂直荷重に変換し,さまざまな荷重情報を得られるセンサを構成することができた。有限要素法を用いれば,微小突起の変形を予測することが容易であるため,様々な特性を持った触覚センサに応用が可能である。本年度の研究においては,高分子材料と同様に,近年研究が進められている多機能材料として,構造が単純で微細化に適している有機ELを用い,1ピクセルが数10μmの高精細ディスプレイを実現するためのパターニング方法を提案した.

有機ELの陰極表面に凹凸のあるスタンプを押しつけて不要部位を除去する方法を用いた.有限要素法を用いて,陰極層に充分な破断応力を加えることのできる荷重や膜厚などの条件を求め,実験結果と比較した.有機ELは,透明陽極層のITO,ホール注入層のα-NPD,電子輸送層及び発光層のAlq_3,陰極層のAl,スタンプ密着層のAuの5層をガラス基板上に真空蒸着で順に成膜して製作した.圧力に耐える剛性,金属膜との良好な密着性,圧力をかけやすい細いパターン,鋭角なエッジの要求を満たすスタンプとして,SiウェハをCF_4雰囲気下で等方性エッチングを行なったものを用いた.荷重を計測しながら万力で締め付けることでパターニングを行なった.有機層140nm,荷重15MPaの条件における,金属層の膜厚に対するパターニング成功率を調べたところ,金属層の膜厚が薄いほどパターニング率の向上が見られた.金属層の最適厚さは30nmであった.金属層25nmにおける,有機層の膜厚に対するパターニング成功率を調べたところ,100nm以下の有機層でパターニング率が著しく低下した.有機層の最適厚さは100150nmであった.以上の結果を用い,金属層25nm,有機層140nmを有する有機ELを,幅0.7μmのスタンプによりピッチ30μmのストライプ状にパターニングすることに成功した.25Vの直流電圧の印加により充分な発光が確認された.発光のCCD写真から,パターニング時のひずみによる有機層の破壊が原因で,ストライプの両端数μmが発光しないことが観察された.従ってこの加工法は数μmの加工精度を持ち,有機ELの高精細ディスプレイに有用であることが示された.この手法は,高分子材料を基板とした薄型の柔軟ディスプレイやMEMS(Micro-Electro-Mechanical Systems)技術を用いた微小な通信・情報デバイスなどにも応用することができる.薄型で柔軟なMEMSシステムの実現を目指し,有機材料を用いたトランジスタによる視覚システムの構成を行った.試作したトランジスタは,ポリイミドフィルム上にドレイン,ソース,ゲートの電極をパターニングした後,有機材料ペンタセンを蒸着したものである.ゲート部に光が当たることによってトランジスタの電気特性が変わるため,光センサとして用いることができる上,トランジスタとしての特性を利用して,アレイ状に配列したセンサから,順次信号を読み出すことも可能となった.このトランジスタアレイにPDMSで製作したマイクロレンズアレイを重ねることで,薄型・柔軟な視覚システムを構成した.この視覚システムの応用可能性を探るため,シリコンフォトダイオードとレンズからなるラージスケールの実験システムを作り,位置検出センサとしての特性の評価を行った.このラージスケールセンサは,フィルム基板上にひずみゲージアレイが集積されており,フィルムを曲面に貼り付けた場合,ひずみゲージの出力から,センサシートの曲率半径を計算することができる.この曲率半径と,得られた光入力から点光源の運動の軌跡を計測することができた.
超小型高出力ハイパーコヒーレントブルーレイ半導体レーザ光源の開発

ブルーレイ領域半導体レーザ試料にPound-Drever-Hall法を適用し周波数安定化を行った。2005年度に得られた知見に基づいて可視光半導体レーザ試料に適した制御アルゴリズム、光学系の設計・構築を行い当該レーザ光源の高コヒーレント化を達成した。まず、様々な駆動条件における青紫色半導体レーザの発振モードの振る舞いを調べ、外部共振器等を構成せずとも単一モード発振可能である試料を見出した。すべての実験では、このような試料として0.1W級GaN系405nm帯青紫色半導体レーザ(NICHA : NDHV120AFAE3)を用いており、比較的取り扱いが簡便な市販のFP共振器を用いて、信頼性・再現性の高い安定化をコンパクトで簡便な系で達成されることが知られている電気的負帰還法を用いて周波数安定化を行った。その共振周波数に上記試料の発振周波数を安定化する手法としてPound-Drever-Hall法を採用している。試料となった青紫色半導体レーザの駆動条件は注入電流は約35mA、周辺温度は約14.6°Cと設定した。なお、この値は光スペクトラムアナライザにおいて単一モード発振であり、±2mAの範囲でモードホップが起こらないことを確認して決定している。半導体レーザを直接変調させた変調周波数は285.92MHzであり、その変調電流は約1.31mAである。実験で得られた誤差信号から求めたフリーランニング時の白色雑音レベルは3×10^8[Hz^2/Hz]であった。フリーランニング時と電気的負帰還時を比較すると、フーリエ周波数の100Hzから1kHzまでの領域は約2桁、1kHzから300kHzまでの領域は約1桁、周波数揺らぎが抑制されている。フーリエ周波数100Hzから1kHzまでの領域において、周波数安定化によって得られたPSDの値は2.56×10^7[Hz^2/Hz]であった。また、誤差信号から時間的な尺度であるアラン分散を求めた結果、積分時間10[ms]で周波数揺らぎのアラン分散の平方根の値で3.46×10<^-11>を得た。なお、制御中も光スペクトラムアナライザで観測される発振モードは単一モードであった。平成16年度は標記研究課題の初年度として、先ず開発課題の対象となるブルーレイ領域半導体レーザにおける雑音特性の把握に努めた。定量的評価の指標として、雑音特性に関する知見が豊富な市販の赤色半導体レーザ試料を用いてブルーレイレーザ試料と同一の条件下で比較測定を行った。具体的な成果としては、市販の5mW型ブルーレイ領域半導体レーザの試料複数について、発振モードの性状を測定した上でコヒーレント化に適した試料を選抜しモード安定化及び雑音制御を達成できた。この過程で、市販の5mW型赤色半導体レーザの雑音特性と比較検討を行った。その結果、ブルーレイ領域半導体レーザでは、戻り光雑音誘起時において約300MHzの高周波をレーザ駆動電流に重畳すると、従来同様の手法で雑音低減が図られて来た赤色半導体レーザに比べて約6db程度の相対雑音強度値の改善がみられることが明らかとなった。

また、同様の赤色及びブルーレイ領域半導体レーザについて、戻り光の偏光を制御して雑音特性を比較した。その結果、300Hz高周波重畳時、戻り光の偏光角を制御すると赤色、青色ともに相対雑音強度(RIN)を低減でき、とくに青色ではその効果が顕著で最大約20dB程度のRIN値の低減が見られた。RIN値の特性は、戻り光量や外部共振器長、偏光角の変化に応じて周期的に変化するが、RIN値低減の最適条件が存在することが明らかになった。現在、この最適条件を決定できるモデルを検証中である。2005(平成17)年度は標記研究課題の第2年度として、2004年度に得られた成果を踏まえ、0.5W級ブルーレイ領域半導体レーザ試料のモード安定化並びに周波数安定化を行った。2004年度に得られた知見に基づいて0.5W級可視光半導体レーザ試料に適した制御アルゴリズム、光学系の設計・構築を行い当該レーザ光源の高コヒーレント化を達成した。定量的評価の指標として、高コヒーレント化に関する知見が豊富な市販の赤色半導体レーザ試料を用いてブルーレイレーザ試料と同一の条件下で比較測定を行った。具体的な成果としては、市販の0.65W型ブルーレイ領域半導体レーザの試料複数について、発振モードの性状を測定した上でコヒーレント化に適した試料を選抜しモード安定化及び雑音制御を達成し周波数安定化を実現できた。この過程で、市販の0.5W型赤色半導体レーザの雑音特性と比較検討を行った。その結果、ブルーレイ領域半導体レーザでは、戻り光雑音誘起時において約300MHzの高周波をレーザ駆動電流に重畳すると、従来同様の手法で雑音低減が図られて来た赤色半導体レーザに比べて約6dB程度の相対雑音強度値の改善がみられることが明らかとなった。波長板を用いてLD出射光の偏光軸に対し,戻り光の偏光軸を傾けることによって戻り光による干渉雑音を抑制するものである.その結果、300Hz高周波重畳時、戻り光の偏光角を制御すると赤色、青色ともに相対雑音強度(RIN : Relative Intensity Noise)を低減でき、とくに青色ではその効果が顕著で最大約20dB程度のRIN値の低減が見られた。波長板を回転させて戻り光の偏光軸を傾けたとき,その傾けた角度が大きいほど,大きい雑音抑制効果が得られることを見出した.特に偏光軸を90゚傾けたとき,通常観測される距離の変化に対するRIN値の周期的なピーク等は現われず,雑音は20%以上抑制されることを初めて明らかにした.また雑音の平均レベルにおいては,従来広く用いられてきた高周波重畳の結果に匹敵するほどの低減を達成している.このような雑音特性及び発振モード特性を踏まえ、市販の0.65W型ブルーレイ領域半導体レーザの動作温度を安定化し、15°Cに保持するよう制御することによって初めて単一モード動作を達成し、ファブリペロ共振器を周波数基準に用いて周波数安定化に成功した。達成できた周波数安定度はアラン分散の平方根を指標として10-11以下であった。2006(平成18)年度は標記研究課題の第2年度として、2005年度に得られた成果を踏まえ、ブルーレイ領域半導体レーザ
統合失調症の急性期におけるオープンダイアローグを用いた介入について

The 23th international network meeting forthe treatment of psychosis2018および、オープンダイアローグ・ワールドカンファレンスに出席し、世界各国におけるオープンダイアローグの進捗状況や、オープンダイアローグについての理解を深めた。ポーランドでは、オープンダイアローグのトレーニングコースによる数百人の養成をすでに行っているとのことであった。一方、フィンランド国内では、必ずしもオープンダイアローグが普及していないとの指摘もあった。ヨーロッパのクリニックにおいてオープンダイアローグを用いて診療していることを報告する参加者や、オープンダイアローグで対処困難な場合がないのか疑問を持つ参加者がいた。強制治療が必要な場合と本人の意向に沿った対応との間の乖離についての悩みを持つ医療者や、薬物療法に伴い自身のADLやQOLが低下していることの悩みを話す当事者もいた。薬物療法と身体拘束について、どちらかが減るとどちらかが増える現状について、オープンダイアローグを用いて対策を考えるよう促す参加者もいた。当事者が経験専門家として治療に参加する仕組みについての報告があった。世界各国の精神科医療にかかわる様々な問題について医療者と当事者がオープンに話し合える良い機会であった。オープンダイアローグの安全性について、アメリカで実践している方に質問したところ、従来の治療よりも安全性が高いと考えているとのことであった。統計的な結果については、2020年までイギリスで行われている比較試験の結果をみる必要があるとの意見もあった。オープンダイアローグについての講演会や勉強会を開催し参加者への理解を促した。オープンダイアローグについての情報を入手することや、オープンダイアローグの研修に時間を要している。オープンダイアローグを用いた介入を行い、オープンダイアローグの安全性をまず確認する。オープンダイアローグを実践しているフィンランドのケロプダス病院に研修に行き、研究開始のための準備を行った。フィンランドと日本では、医療制度が異なるため、フィンランドと同様に日本で実践することは困難なため、日本にあったオープンダイアローグのやり方を模索する必要があると考えられた。ケロプダス病院のスタッフも、それぞれの地域に応じた実践が行われることが望ましいとの見解であった。答えのない不確かな状況に耐える、本人のことは本人のいないところで決めない、継続的に担当する二人以上のスタッフを選ぶ、クライアント、その家族、つながりのある人々を最初から招く、「開かれた質問」から始める、クライアントの語りのすべてに耳を傾け応答する、対話の場で起きていることに焦点を当てる、さまざまな物の見方を尊重し多様な視点を引き出す(多声性:ポリフォニー)、対話の場ではお互いの人間関係をめぐる反応や気持ちを大切に扱う、一見問題に見える言動であっても"病気"のせいにせず困難な状況への"自然な"意味のある反応であるととらえて応対する、ただし法に触れる行為については認めずに淡々と対応する、症状を報告してもらうのではなくクライアントの言葉や物語に耳を傾ける、スタッフ同士が参加者たちの語りを聞いて心が動かされたこと浮かんできたイメージアイデアなどを参加者の前で話し合う時間を取る、話すことと聞くことを丁寧に分けるなどについて話し合いを行った。東京でオープンダイアローグを実践しているクリニックを見学し、日本でのオープンダイアローグ実践のための意見交換を行った。オープンダイアローグを実践する実際的な方法として日本では、精神科訪問看護制度の活用が考えられるかもしれないとの意見があった。オープンダイアローグを実践するための多職種による話し合いを続けている。オープンダイアローグに対しての周囲の理解を求めている。研究計画を策定し多職種とのオープンダイアローグに関する研修を行っている。オープンダイアローグを用いた介入研究の実施を計画している。計画としては、当院を受診する初回発症と考えられる統合失調症の方とご家族に、従来の薬物療法とオープンダイアローグの両方について説明をし、本人及び家族ともにオープンダイアローグを希望された方に対して、最長で8週間の期間、週3回のオープンダイアローグを施行し、施行後2年間の経過観察を行う。当初の研究では、オープンダイアローグの安全性について確認する。

1介入研究の計画に遅れが生じているために、購入予定であった検査機器の購入が行われておらず、残額が発生したが、機器については次年度に購入予定である。2研修会や学会参加のための費用が必要である。オープンダイアローグについての理解を深めるための研修会や勉強会のために費用が必要と考えられる。
1分子DNAのねじれ応答測定による弾性調節型インスレーター機能の検証

インスレーター(Ins)と呼ばれるDNA上の特定の配列は,染色体に散在する無数の遺伝子の転写調節の謎を解く鍵と考えられている。本研究では,ArsInsや反復配列等の蛋白質の結合なしにIns活性を示す配列に着目し,これらの配列がDNAの力学的変形を調節する弾性調節型Insとして機能するのか検証することを目的としている。H30年度は,GFP遺伝子と1つのエンハンサー(Enh)を含む約7 kbpのDNA試料(試料1)と試料1の一部をArsIns (578 bp)に置き換えた試料(試料2)のPCR増幅による作成に成功した。当初予定していた2つの遺伝子を導入した試料のPCR増幅は達成できていないが,これら2つの試料を用いることでArsInsの力学的寄与の検証が可能となる。試料の作成と並行して,非特異結合を利用したDNA試料を用いて,1分子DNAのねじれ応答(DNAをねじった回数と末端間距離の関係)を観測し,ねじれ応答に現れる特徴的なピークがDNAのループ形成に起因していることを明らかにした(JPSJ誌に掲載)。この結果は,DNA上の特定の配列にひずみが蓄積されることを示唆しており,ArsInsの力学的寄与を明らかにするにあたり,ねじれ応答を取得することが有用なことを裏付ける結果といえる。また,弾性型Insの生体内での機能メカニズムを数理モデルにより考察し、ヌクレオソーム排他的な弾性型Ins配列がその周辺のヌクレオソームリッチ配列に比べ、長時間統計的に変形し難い事が重要である事を見出した。さらにヒト細胞におけるエピゲノム及びHi-Cデータの解析により、ヒトゲノム中にこのような弾性型Insが5000カ所以上存在する可能性を見出した(JPCB誌に掲載)。計画段階ではPCR法及び大腸菌を用いた組換えDNA作製法を用いて,2つの遺伝子(GFP, RFP)と1つのEnhを含む約10 kbpのDNA試料の作成を予定していた。しかし,目的のDNA断片を挿入したプラスミドの作製には成功したものの、PCR増幅が困難であることが分かり,1つの遺伝子(GFP)のみを挿入した試料に切り替えることとした。これにより,当初予定していた試料を用いたねじれ応答測定とGFP,RFPの発現量の蛍光強度測定を行うことはできなかった。一方,これらの状況を鑑み,非特異結合を利用したDNA試料に対するねじれ応答測定を行った結果,ArsInsの力学的寄与を明らかにするにあたり,本研究手法の有用性を示すことができた。また,配列特的な安定な2重螺旋構造と塩基対間の力場を反映した長鎖DNAの粗視化モデルを構成し、今後ねじれ応答測定を行う種々のDNAの動態をシミュレーションする準備が整った。ねじれ応答については,1年目に作成したArsIns挿入試料を対象として測定を行う。ArsIns有り,無しの試料のねじれ応答を測定し,DNAのループ形成を表すピークの出現位置と頻度から,各試料の応答の再現性とArsInsがねじれ応答に及ぼす効果について調べる。これらの結果に基づき,ArsInsの有無によりDNAの力学的変形が調節可能であるか検証する。ねじれ応答の測定と並行して,2つの遺伝子(GFP, RFP)と1つのEnhを含むプラスミドを用いて、ArsIns有り,無しの試料をヒト培養細胞に導入し,GFPとRFPの発現量から作成した試料のインスレーター活性を確認する。これらの結果とねじれ応答の結果を比較し,力学的なひずみの蓄積度合いとインスレーター活性の相関を見ることで,ArsInsが弾性調節型Insとして機能するかを検証する。また,RFPの非コード領域を変更することで,当初予定していた2つの遺伝子(GFP, RFP)を含むDNA試料のPCRによる作成を試みる。また,Ins機能を有する塩基配列の弾性率を定量化するために,DNA力学モデルの数値シミュレーションを行う。実験で用いた配列と同じ配列のDNAモデルを用いて,部分鎖の変位の時間変化を取得し,その振動モードを解析することで部分鎖の実効的弾性率を算出する。以上の研究により,ArsInsの検証に十分な知見が得られた次第,反復配列を網羅的に作製することにより,反復配列の種類や反復数,DNAループ形成,局所的弾性率の間の相関関係を明らかにする。

また,弾性型Insの生体内での機能メカニズムを数理モデルにより考察し、ヌクレオソーム排他的な弾性型Ins配列がその周辺のヌクレオソームリッチ配列に比べ、長時間統計的に変形し難い事が重要である事を見出した。さらにヒト細胞におけるエピゲノム及びHi-Cデータの解析により、ヒトゲノム中にこのような弾性型Insが5000カ所以上存在する可能性を見出した(JPCB誌に掲載)。計画段階ではPCR法及び大腸菌を用いた組換えDNA作製法を用いて,2つの遺伝子(GFP, RFP)と1つのEnhを含む約10 kbpのDNA試料の作成を予定していた。しかし,目的のDNA断片を挿入したプラスミドの作製には成功したものの、PCR増幅が困難であることが分かり,1つの遺伝子(GFP)のみを挿入した試料に切り替えることとした。これにより,当初予定していた試料を用いたねじれ応答測定とGFP,RFPの発現量の蛍光強度測定を行うことはできなかった。一方,これらの状況を鑑み,非特異結合を利用したDNA試料に対するねじれ応答測定を行った結果,ArsInsの力学的寄与を明らかにするにあたり,本研究手法の有用性を示すことができた。また,配列特的な安定な2重螺旋構造と塩基対間の力場を反映した長鎖DNAの粗視化モデルを構成し、今後ねじれ応答測定を行う種々のDNAの動態をシミュレーションする準備が整った。ねじれ応答については,1年目に作成したArsIns挿入試料を対象として測定を行う。ArsIns有り,無しの試料のねじれ応答を測定し,DNAのループ形成を表すピークの出現位置と頻度から,各試料の応答の再現性とArsInsがねじれ応答に及ぼす効果について調べる。これらの結果に基づき,ArsInsの有無によりDNAの力学的変形が調節可能であるか検証する。ねじれ応答の測定と並行して,2つの遺伝子(GFP, RFP)と1つのEnhを含むプラスミドを用いて、ArsIns有り,無しの試料をヒト培養細胞に導入し,GFPとRFPの発現量から作成した試料のインスレーター活性を確認する。これらの結果とねじれ応答の結果を比較し,力学的なひずみの蓄積度合いとインスレーター活性の相関を見ることで,ArsInsが弾性調節型Insとして機能するかを検証する。また,RFPの非コード領域を変更することで,当初予定していた2つの遺伝子(GFP, RFP)を含むDNA試料のPCRによる作成を試みる。また,Ins機能を有する塩基配列の弾性率を定量化するために,DNA力学モデルの数値シミュレーションを行う。実験で用いた配列と同じ配列のDNAモデルを用いて,部分鎖の変位の時間変化を取得し,その振動モードを解析することで部分鎖の実効的弾性率を算出する。以上の研究により,ArsInsの検証に十分な知見が得られた次第,反復配列を網羅的に作製することにより,反復配列の種類や反復数,DNAループ形成,局所的弾性率の間の相関関係を明らかにする。1年目は,非特異結合を利用したDNA試料を用いてねじれ応答測定を行うこととなり,DNA試料をガラス基板に特異的に結合するために必要な試薬は不要であった。これらの試薬は長期保存が好ましくないため,1年目の購入を見送り,次年度使用額(199,275円)が生じた。これらの試薬は2年目に必須となるため,使用頻度に応じて随時購入する。
海洋における巨大有機物リザーバー形成を支配する微生物相互作用系の解明

本申請研究は、海水中のD体アミノ酸を細菌由来有機物のバイオマーカーとして利用することを前提にしている。しかし、実際に天然の海洋細菌群集のD体アミノ酸含有量に関しては測定例がないため、先行研究においては培養細菌のD体アミノ酸含有量を、海水中の細菌の生物量あるいは死骸由来有機物量の評価を行う際の換算係数として用いていた。そのため、当初の研究計画にはなかったが、まずは天然細菌のD体アミノ酸含有量を明らかにする目的で、前年度(平成26年)に実施された西部北太平洋航海(白鳳丸KH14-2次航海)において得られた、細菌サイズ粒子画分のアミノ酸組成の測定をおこなった。その結果、細菌サイズ粒子画分に含まれる細菌数とD体アミノ酸濃度から算出した細菌1細胞あたりのD体アミノ酸含量は、海域や深度によらず、比較的一定な値を取ることが明らかとなった。また、D体アミノ酸以外にも、天然海洋細菌が培養細菌とは異なるアミノ酸組成を有する可能性も新たに見出された。しかしながら、学振PDとしての研究期間が7ヶ月と大きく短縮されてしまったことに加え、当初の計画にはなかった実験を行ったことから、27年度に予定していた培養実験の検討や、超高速液体クロマトグラフを用いた高感度アミノ酸鏡像異性体(D/L体)分析の立ち上げに遅れが生じ、期間内に完了することができなかった。しかし、天然細菌サイズ粒子のアミノ酸組成の測定を行ったことにより、細菌由来有機物の生成量算出の精度向上につながる、極めて有用な成果が得られた。本研究の成果の一部は、すでに国際学術誌に投稿し、掲載されている(Takasu&Nagata 2015)。27年度が最終年度であるため、記入しない。
ＭＲＩを用いた水浸出土木材の内部性状の可視化に関する基礎的研究

水浸出土木材を収縮・変形をさせることなく、適切な保存処理を行うためには、水浸出土木材の劣化状態など木材内部の状態を把握する必要がある。そのための方法として医療分野で広く活用されている磁気共鳴イメージング(Nuclear Magnetic Resonance Imaging : MRI)の利用を検討した。その結果、MR画像は、外観からは確認することのできなかった水浸出土木材内部の状態を可視化した。MRIは、水浸出土木材の内部性状を把握するための非破壊診断法として有効的な手法であった。平成25年度は、保存処理前の水浸出土木材の劣化状態と保存処理用の薬剤浸透プロセスの可視化に努めた。水浸出土木材の内部構造をMRIで正確に描出するため、臨床用に従来用いられてきたMRIのT1(縦緩和)強調像やT2(横緩和)強調像などのコントラスト画像を適切に画像化するための撮像法とT1値、T2値など定量的指標を得るための適切な撮像条件の検討を行った。木材組織が単純な針葉樹の水浸出土木材(マツ属二葉松類:含水率450%)を試料として、水浸出土木材の劣化状況のMR imagingに関する検討を行った結果、埋没中に地下水に暴露されて劣化の進行が考えられる表面部分ほどT1強調画像において高信号を示してT1短縮効果が確認できた。また、T2強調画像やプロトン密度強調画像では、早材部で高信号、晩材部や節の部分で低信号を示し、年輪構造に沿ったコントラストが描出された。平成24年度は、京都大学医学部附属病院内に設置されている臨床研究用の1.5Teslaと3Teslaの東芝メディカルシステム社製の磁気共鳴イメージング(Nuclear Magnetic Resonance Imaging : MRI)を利用し、保存処理前の水浸出土木材の劣化状態を可視化することを目的とした。水浸出土木材の研究者とMRI技術に詳しい研究者が共同で、水浸出土木材の内部構造をMRIで正確に描出するため、臨床用に従来用いられてきたMRIのT1(縦緩和)強調像やT2(横緩和)強調像などのコントラスト画像を適切に画像化するための撮像法とT1値、T2値、MT ratioなど定量的指標を得るための適切な撮像条件の検討を行った。保存処理前の水浸出土木材(広葉樹:クリ材)のMR imagingに関する検討を行った結果、水浸出土木材中に存在する水分の殆どが結合水の状態で木材内部に存在する可能性と、埋没中に地下水に多く暴露されていたと考えられる部分ほどT1(縦緩和)短縮効果が強く認められることが確認できた。また、3種類の薬剤(ポリエチレングリコール、ラクチトール+トレハロース、脂肪酸エステル)を用いた保存処理方法で保存処理を行った後の水浸出土木材(広葉樹:クリ材)に対して、試験的にCT(X-ray Computed Tomography)画像を撮像したところ、保存処理薬剤が異なると画像コントラストが大きく異なることがわかった。このことから臨床研究用のMRIを利用して水浸出土木材中の水分分布に関する情報を得て、劣化状況を可視化することは、水浸出土木材の内部性状を把握するための非破壊診断法として有効的な手法であるとの確証を得た。平成26年度はこれまでの研究成果をまとめ、その研究成果報告をおこなった。水浸出土木材のMR画像から木材内部の水分分布に関する情報を得ることは、水浸出土木材の内部性状を把握するための非破壊診断法として有効的な手法であることと、針葉樹の水浸出土木材にポリエチレングリコール(PEG)溶液を含浸させて3D Field echo法を用いて撮像して、関心領域を設定した後にそれらの画像から磁化移動率(magnetic transfer ratio:MTR)およびその変化率ΔMTR(PEG(+) ーPEG(-))を算出した結果、高分子物質に対して反応性のある磁化移動(magnetic transfer)効果からPEGの浸透性を評価できることを日本文化財科学会第31回大会や第42回日本磁気共鳴医学会で報告した。こうした研究成果報告の他に昨年度に引き続き、水浸出土木材の内部構造をMRIで正確に描出するためにT1強調像やT2強調像などのコントラスト画像を適切に画像化するための撮像法と、T1値、T2値などの定量的指標を得るために適切な撮像条件のデータの蓄積をおこなった。また、保存処理用の薬剤浸透プロセスの可視化の検討にも努めた。ポリエチレングリコールとトレハロースの各含浸濃度の浸透状態を一括で撮像できるように14分割した針葉樹の水浸出土木材試料を作製して、各薬剤濃度の浸透性を評価するために緩和時間変化を測定した。緩和時間測定は、T1計測はインバージョンリカバリ法、T2計測はスピンエコー法を用いて画像データを取得した。その後、試料に関心領域を設定のうえ、信号強度を測定して緩和時間を算出した。その算出した緩和時間勾配から、ポリエチレングリコール、トレハロースともに、T1を計測することで水浸出土木材内部の薬剤の含浸状態を把握することが可能であることがわかった。

保存科学木材組織の比較的単純な針葉樹の水浸出土木材を用いて、断層像を適切な空間分解能で撮像するための撮像シーケンス(従来のT1強調像、T2強調像、プロトン密度強調像、近年広く用いられ水の拡散現象を反映するとされる拡散強調像など)を用いて、木材の状態にあわせた適切なシーケンスを選択できるように検討した。その上で、各シーケンスの撮像条件(field of view, matrix,受信バンド幅、撮像コイル、acceleration factorなど)をも検討した。また、縦緩和(T1)時間および横緩和(T2)時間を強調した画像を撮像するためのパラメータ(repetition time、echo time)、定量値を計測するための撮像条件(repetition timeの組み合わせ、echo timeの組み合わせ)などの検討を行なってきた。しかし、医療の分野では広く一般に用いられているMRIのパラメーターを含めた撮像法は非常に多岐にわたり複雑で様々なMR画像を得られるがその画像の解釈が難しい。そのうえ、水浸出土木材毎にその劣化状態がかなり異なっていることも加味されたMR画像の解釈がさらに難しいこと数多くがあり、異なる劣化状態で出土した水浸出土木材に対して有効的な撮影条件を導き出すことができず、更なる基礎的検討を行わなければならない。また、TI(Inversion Time)を変化させたIR(Inversion Recovery)法で撮像したMR画像からT1map画像を作成し、水浸出土木材の各部位における縦緩和時定数(T1時間)を定量値として評価・比較することが可能である。しかし、PEGの各含浸過程における浸透状況の定量的な評価がうまくできていないため、今後、その評価をしっかりと行なう必要がある。当初、MRI撮像用に予定していた針葉樹の水浸出土木材を発掘現場から入手することが困難になったため、急遽、以前から手元に保管していた広葉樹の水浸出土木材片をMRI撮像に供して研究を開始した。木材組織の複雑な広葉樹(クリ材)の水浸出土木材を試験片としたため、MR imagingの解釈が難しいところがあった。また、MR imagingでは、金属成分の有無により、画像が場合によっては大きく変化することが知られており、水浸出土木材のキレート処理前後の変化は保存処理前の大事なコントロールとなる。広葉樹(クリ材)の水浸出土木材をキレート剤に浸漬したのちの経時変化をT1強調像とT1 mapping画像を用いて撮像を行なったが、この試験片では結果として、キレート剤による脱色処理前後のMR imagingの変化を確認することが出来なかった。おそらく埋没環境においてFeイオンを主とする金属イオンを含有することが少なく、これまでの水漬けの保管環境内で金属イオンが流出してしまった可能性が高いものと考えられた。そのため、埋没環境から金属イオンの影響を受けている水浸出土木材を試験片として、再度、平成25年度にキレート剤の影響を可視化するための撮像法の検討を行う必要がある。水浸出土木材は埋没環境中の地下水の影響により鉄イオンを主とする金属イオンが沈着しているため、キレート剤で除去するのが一般的である。
インスリン依存的開口分泌調節機構における新規 Akt 標的分子の役割の解明

開口分泌調節タンパク質tomosynのインスリンシグナルによる調節の分子機構を解明することを目指した。リン酸化酵素Aktがtomosynの783番目のセリン(783S)をリン酸化することを示した。SNAREタンパク質の1つであるsyntaxin4とtomosynの結合は、tomosynのAktによるリン酸化によって抑制された。S783をアラニンに置換した変異型tomosyn発現細胞ではインスリン刺激に伴うGLUT4の膜発現が損なわれていた。Aktはインスリン刺激に伴ってtomosynのS783をリン酸化することでsyntaxin4との結合を調節し、GLUT4輸送を制御することが示唆された。糖尿病との遺伝的相関が指摘されているtomosyn(開口分泌調節タンパク質)がインスリンによって活性化されるリン酸化酵素Aktの基質であることを見出した。今年度はAktによるtomosynを介したGLUT4 (糖輸送担体)輸送の調節機構の解明を目指した。Aktとtomosynの組換タンパク質を精製して試験管内リン酸化実験を行ったところtomosynはAkt1およびAkt2によってリン酸化された。リン酸化部位と予測された783番目のセリン(S783)をアラニンに置換した変異体(S783A)ではリン酸化が起こらなかった。HEK293細胞を用いた再構成実験でもインスリン刺激によってtomosynのリン酸化が亢進することを確認した。次にAktによるtomosynのリン酸化がGLUT4小胞輸送に関わるSNAREタンパク質syntaxin4との結合に及ぼす影響を調べた。syntaxin4の組換タンパク質を精製し試験管内結合実験を行ったところ、両分子の結合はAktによるtomosynのS783のリン酸化によって抑制された。CHO-K1細胞に発現させたtomosynでもインスリン刺激依存的にリン酸化されてsyntaxin4との結合が抑制されることを確認した。続いてtomosynを発現する細胞でGLUT4輸送を調べたところ、インスリン刺激に伴うGLUT4の細胞表面への発現亢進を認めたが、S783A変異体を発現する細胞では発現亢進が認められなかった。以上の結果から、Aktはインスリン刺激に伴ってtomosynのS783をリン酸化することでsyntax4との結合を調節し、GLUT4輸送を制御することが示唆されたインスリンによるGLUT4輸送の制御機構をモデルにその膜融合過程におけるtomosynの役割をAktによるリン酸化の意義を中心に解明することを目指している。当初の目標であったtomosynのリン酸化によるsyntaxin4との結合調節機構を試験管内実験で明らかにし、さらにはGLUT4膜発現アッセイ法を用いてtomosynがAktによるリン酸化を受けてGLUT4輸送を制御していることを示して、論文掲載にまで至った。従って計画は順調に進んでいるといえる。本研究では、2型糖尿病と遺伝的相関を有する開口分泌調節タンパク質tomosynのインスリンシグナルによる調節の分子機構を解明することを目指した。インスリンによって活性化されるリン酸化酵素Aktがtomosynの783番目のセリン(783S)をリン酸化することを示した。GLUT4 (糖輸送担体)を含む小胞輸送に関わるSNAREタンパク質の1つであるsyntaxin 4とtomosynの結合は、tomosynのAktによるリン酸化によって抑制された。野生型tomosyn発現細胞では、インスリン刺激に伴うGLUT4の細胞表面への発現亢進を認めたが、S783をアラニンに置換した変異型tomosyn発現細胞ではGLUT4の膜発現亢進が損なわれていた。以上の結果から、Aktはインスリン刺激に伴ってtomosynのS783をリン酸化することでsyntaxin 4との結合を調節し、GLUT4輸送を制御することが示唆された。今後はインスリンシグナルとは異なる経路でのtomosynを介したGLUT4輸送促進の可能性を検討していく。タンパク質リン酸化酵素PKAはtomosynの760番目のセリン(S760)をリン酸化し、Ca2+依存性神経伝達物質放出を調節するという報告がある。PKAによるtomosynを介した分子機構でGLUT4輸送が促進される可能性を探るため、試験管内実験、細胞レベルの実験により解析を進める。また、オステオカルシン(OCN)による筋細胞や脂肪細胞のインスリン抵抗性改善に関するシグナル解明の研究の蓄積が進んでいる。そこで本研究で構築した実験系を用いてOCNによるインスリン抵抗性改善の分子基盤の解明を目指す。同時にOCN - PKA - tomosyn経路の可能性についての検討も行う。医歯薬学当初の計画よりも早く実験成果が得られ論文執筆に至ったため、試薬や細胞培養液など使用する消耗品等の節約につながった。初年度に確立した実験モデルを用いて研究を進める。実験を遂行するための各試薬や器具類等は初年度と同程度必要になるため、この購入費に充てる。
インビボイメージングによる非ヒト霊長類脳へのDREADD技術の最適化に関する研究

神経細胞活動を非侵襲的に操作できる化学遺伝的技術の1つDREADDsは近年の遺伝子導入技術の発展とPETによる生体内発現タンパクのイメージングが可能になったことで今後の発展が期待されている。しかし今後も新しいDREADDsのウイルスベクターやアゴニストの開発は続くと予想され、研究に利用できる個体数が限られる非ヒト霊長類に適用するための条件検討は従来の方法では時間的・経済的コストが多大となる。そこでPET等イメージング技術を用いて目的導入タンパクの発現だけでなく操作された神経活動の変化を反映する機能的側面も定量的に評価することで、非ヒト霊長類への適用を効率的に最適化させる手法を確立することを目的とする。