hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
マウスの個体発生期における非アポトーシス型プログラム細胞死の網羅的遺伝学的解析

プログラム細胞死は、形態形成や組織の恒常性維持などに関わっておりアポトーシスに加え、我々はネクローシス型機構も重要な役割を演じていることを報告している。我々は蛍光色素propidium iodideを利用した独自のネクローシス型細胞死のin vivoイメージング法を用いこれまで網羅的・定量的解析が可能でなかったマウスの個体発生期のネクローシス型細胞死機構の役割について解析を行った。その結果、多くの時空間でネクローシス型のプログラム細胞死の存在を検出した。発生時の細胞死マップを作製しつつ、心臓の左心室における細胞死と骨形成領域で起きるプログラム細胞死の解析を続け、その重要性を検証した。プログラム細胞死は多細胞生物において形態形成や組織の恒常性維持などに関わっており、長年アポトーシスの解析が中心に行われたきた。しかし、我々を含む一部の研究者はこれまで看過されてきたプログラム細胞死における非アポトーシス型細胞死の関与の重要性を提唱してきている。本研究では我々が開発した非アポトーシス型細胞死のin vivoイメージング法用いて、これまで網羅的・定量的解析が可能でなかったマウスの個体内での非アポトーシス型プログラム細胞死の時空間的地図を作製し、同時に関与する細胞死機構の割り出しに種々のノックアウトマウスを利用し、哺乳動物におけるプログラム細胞死の真の理解を目指すものである。PIのシグナルの位置情報をより正確にまた俯瞰的に把握するためにPIシグナルを維持できる透明化技術を模索し、BABB法(Murray's Clear)が適していることを明らかにした。この手法により、E14.5左心室のtrabeculae carneae領域に非常に強いシグナルを見出した。ここは心筋の壁に「ひだ」が形成される時空間域であり、形態形成に関与したプログラム細胞死の可能性が考えられ、非常に興味深い。今後は、このプログラム細胞死を含め他の領域で確認されるプログラム細胞死を種々のノックアウトマウスを用いて解析し、関与する因子の同定に向け情報を収集する。PIシグナルの空間配置をより正確にまた網羅的、俯瞰的に捉えるために、PIシグナルを保存した形でマウス胚の透明化に成功しており、この技術は胚発生期に起こるプログラム細胞死の時空間マップを作製するに当たり、非常に有用でかつ研究のスピードアップにつながる技術となっている。プログラム細胞死は、多細胞生物において形態形成や組織の恒常性維持などに関わっておりアポトーシスに加え、我々はネクローシス型細胞死機構も重要な役割を演じていることを提唱し報告している。我々は蛍光色素propidium iodide (PI)を利用した独自のネクローシス型細胞死のin vivoイメージング法などを用いこれまで網羅的・定量的解析が可能でなかったマウスの個体発生期のネクローシス型細胞死機構の役割について解析を行った。アポトーシス欠損マウスにおいてもPIシグナルが消失しない細胞死つまりネクローシス型のプログラム細胞死の存在を多くの時空間域で検出した。特に心臓の左心室におけるプログラム細胞死と骨形成領域で起きるプログラム細胞死の解析を続け、骨形成領域での細胞死はATG9aに依存したネクローシス型プログラム細胞死機構によることを明らかにし、骨形成において重要な役割を演じていることなどを示した。また、心臓左心室における細胞死は、左心室の血管内皮細胞が細胞死を起こしていることなどを明らかにした。マウス胚を透明化する技術を用い、ネクローシス型プログラム細胞死の時空間マップを作製するとともに、心臓で確認できたプログラム細胞死を含め他の領域で確認されるプログラム細胞死を種々のノックアウトマウスを用いて解析を行い、関与する因子の同定に向けた情報を収集する。分子細胞生物学マウスの胚発生期にみられるネクローシス型プログラム細胞死の時空間マップの作製を始めていたものの、その目的に対しより有用であるマウスの透明化法の確立に精力を注いだため、時空間マップの作製やノックアウトマウスを用いた解析を少し後送りにしたため。繰越した研究費を含めた研究費をフルに利用し、透明化技術を用いることによる研究遂行のスピードアップを通し、本研究の目的を達成する。また、心臓で観察された興味深いプログラム細胞死についてその理解を深めるための解析を行う。
化学物質汚染に対する産業動物の生体防御機構の研究基盤

産業動物について、第I相反応であるシトクロムP450、第II相反応であるグルクロン酸抱合および硫酸抱合酵素について種差を明らかにした。哺乳類の尿におけるグルクロン酸抱合と硫酸抱合体比を比較し、その特徴を明らかにした。また、国内外の産業動物に蓄積する環境化学物質を分析し、ウシなどについては、重金属蓄積性が比較的高いことを見出した。鳥類について家禽を中心にトランスクリプトーム解析を行い、肝臓に発現する第I相反応酵素および第II相反応酵素の網羅的解析を行った。以上の研究により、産業動物の化学物質に対する防御機構を、異物代謝酵素を中心に明らかにした。■産業動物はヒトと同じく多くの環境化学物質に曝露されており、化学物質による急性中毒や慢性曝露による病態が報告されている。産業動物の化学物質汚染は食の安全に直結する重要な問題でもあるが、一方で、ヒトや実験動物以外で化学物質の感受性の種差や個体差に関する研究は極めて少なく、これがケミカルハザードを引き起こす大きな原因の一つとなっている。■本研究では、国内外の産業動物種が有する化学物質への生体防御機構と、化学物質感受性の種差や個体差を引き起こしている要因を明らかにし、研究基盤を構築すること、また、この研究基盤を生かし、化学物質を速やかに排泄する為の機能性飼料や、尿などを用いた新たなモニタリング方法を確立することを目的とした。■今年度は、化学物質への生体防御に重要な異物代謝酵素類(シトクロムP450、グルクロン酸抱合酵素)のクローニングと発現系による酵素学的特徴の同定を行った。また同時に、産業動物に蓄積する環境化学物質を明らかにするとともに、蓄積汚染物質の代謝物の分析を行うなど、産業動物が化学物質汚染に対してどのような防御機構を有しているのかin vivoでも明らかにした。■産業動物は、ヒトと同じく多くの環境化学物質に曝露されており、化学物質による急性中毒や慢性曝露による病態が報告されている。本研究では、国内外の産業動物種が有する化学物質への生体防御機構と、化学物質感受性の種差や個体差を引き起こしている要因を明らかにし、研究基盤を構築すること、また、この研究基盤を生かし、化学物質を速やかに排泄する為の機能性飼料や、尿などを用いた新たなモニタリング方法を確立することを目的とした。■平成24年度はPhase-I酵素としてシトクロムP450、Phase-II酵素としてグルクロン酸転移酵素(UGT)、硫酸転移酵素(SULT)、グルタチオン転移酵素(GST)およびこれらの酵素の発現小説因子について、産業動物におけるその特性を明らかにすることとした。特に外来異物にかかわるP450分子種のうちCYP1からCYP3ファミリーに関する酵素のクローニングを産業動物から行い、その遺伝的な特性等を明らかにした。また、環境汚染物質のモデルとして多環芳香族であるピレンに着目し、その解毒排泄における動物種差を明らかにした。また実際に産業動物にどのような環境汚染物質が蓄積をしているのか、化学物質のサーベイランスを行った。残留性の高い有機ハロゲン化合物や重金属類を中心に分析した。■本研究では、国内外の産業動物種が有する化学物質への生体防御機構と、化学物質感受性の種差や個体差を引き起こしている要因を明らかにし、研究基盤を構築することを目的押した。■今年度は哺乳類の持つシトクロムP450、グルクロン酸抱合酵素、硫酸抱合酵素の代謝活性の動物種差を明らかにした。また、ピレンをモデル化合物とし、尿を用いた簡便な第II相反応のスクリーニング方法を確立した。さらに、シンテニー解析や偽遺伝子化のスクリーニングから、第II相反応の脆弱な動物種について報告した。■フィールド調査により、各動物種に蓄積する環境汚染物質の分析を重金属を中心に行い、その汚染源について安定同位体などを用いて解析を行った。産業動物の化学物質汚染は食の安全に直結する重要な問題でもあるが、化学物質の感受性の種差や個体差に関する研究は極めて少なく、これがケミカルハザードを引き起こす大きな原因の一つとなっている。本研究では、産業動物が有する化学物質に対する生体防御能力について、以下を明らかにした。なお、試料については予定通り、国内およびアフリカ諸国からのサンプルを分析に用いた。多様な動物種を補完するために、一部タイなどアジア地域からの試料についても解析を行った。1)反芻類を中心として、産業動物に蓄積する環境化学物質の解析した。特に、残留性有機汚染物質、多感芳香族類、農薬、重金属類について、反芻獣を中心蓄積する汚染物質の分析を行い、どのような化学物質に暴露されているのか明らかにした。また、蓄積部位の特徴について解析した。反芻中の尿からは農薬や多環芳香族類が検出され、日常的にこれらの化学物質に暴露されていることが明らかとなった。また、舌など可食部位にも鉛をはじめとする金属類が蓄積していた。

2)産業動物として哺乳類と、ニワトリやウズラ、ダチョウなど家禽類における化学物質の代謝酵素類の発現と化学物質の代謝の特徴について明らかにした。哺乳類では、ブタ、ウシ、ウマなどについて、ピレンをモデル化化合物としてその代謝能を分析した。鳥類では、ピレンのほか、多数の水酸化部位を持つワルファリンをモデル化合物として、その代謝能を明らかにした。また、ニワトリおよびダチョウについて、発現するシトクロムP450や第II相抱合酵素を網羅的に解析し、鳥類と哺乳類の種差について明らかにした。3)反芻獣に多く蓄積するカロテノイドが薬物代謝酵素の発現や活性に及ぼす影響について調べた。カロテノイドが汚染物質による薬物代謝酵素群の発現誘導を一部抑制することを明らかにした。産業動物について、第I相反応であるシトクロムP450、第II相反応であるグルクロン酸抱合および硫酸抱合酵素について種差を明らかにした。哺乳類の尿におけるグルクロン酸抱合と硫酸抱合体比を比較し、その特徴を明らかにした。また、国内外の産業動物に蓄積する環境化学物質を分析し、ウシなどについては、重金属蓄積性が比較的高いことを見出した。鳥類について家禽を中心にトランスクリプトーム解析を行い、肝臓に発現する第I相反応酵素および第II相反応酵素の網羅的解析を行った。以上の研究により、産業動物の化学物質に対する防御機構を、異物代謝酵素を中心に明らかにした。■動物種差の比較データについて、順調に研究基盤を構築しており、学会発表や国際学術雑誌にへの投稿も行うことができた。これまで行ってきた、異物代謝酵素類の動物種差に関する研究は、いくつかの論文に掲載することができ、初めて哺乳類の化学物質に対する防御機構の種差を広範の生物種で明らかにして報告することができた。■また、フィールドにおいて家畜(ウシ、ヤギ、ブタ、ヒツジ、ニワトリ)が暴露される化学物質の同定も進めており、有機ハロゲン化合物、重金属類などについて、その汚染源も含めた解析を進めることができている。27年度が最終年度であるため、記入しない。境界農学■計画に変更はない。■動物種差をよりを明らかにするために再構成系の実験を行い、各種酵素のクローン化を進める。家畜に蓄積する環境汚染物質の化学分析を引き続き行い、その汚染源について明らかにする。また、重金属についてはフィールドにおいても曝露実験を行い、濃度や安定同位体解析から、家畜における生体内動態を明らかにする。■国際学術雑誌への研究成果の報告や学会において成果発表を行う予定であるが、さらに、アウトリーチ活動としてWEBサイトを用いた研究成果の発信や、高校生へ野指導などを通じて研究活動を紹介するなど、社会への貢献や情報発信も積極的に行う予定である。■今年度は家禽の持つ異物代謝酵素群を明らかにし、また産業動物の化学物質感受性の種差についても明らかにすることができた。また同時に蓄積する環境汚染物質ばかりでなくその代謝物の蓄積パターンについても明らかにすることができた。■産業動物の持つ化学物質への生体防御機構の特徴を他の動物(哺乳類、鳥類)と広く比較し、産業動物がどのようなリスクを持つかについて明らかにしつつある点で、研究がおおむね順調に進展していると評価した。
Ｌ２セルフシステム理論を応用した英語学習動機を高める要因の質的・量的研究

本研究の目的は、大学英語教育の中でどのような要因が学習者の英語学習の意欲を高める要因になっているかを質的・量的アプローチを用いて、調査することであった。本研究によって、L2セルフシステムの理想自己、義務自己、英語学習経験の三要素の中で特に理想自己を持つことの重要性が改めて認識された。また、なんとなくこうなりたいといったあいまいな理想自己をもっていてもなかなか学習行動と結びつかないといった学習者の実態も質的分析の結果から理解できた。本研究の2年目である平成25年度の研究の目的は、初年度の基礎研究により整理された大学レベルでの英語学習に対する動機づけ分析を踏まえ、大学レベルでの英語学習意欲の動機を高める要因にどのようなものがあるかをL2セルフシステム理論を軸に整理することであった。初年度に行った20名の大学1年生のインタビューデータ、アンケートデータの分析をまず行い、質問紙項目の検討を行った。また初年度の研究成果や今までの文献研究をまとめ、単著での出版物(タイトル:What are possible demotivators in SLA?-An insight from English teaching contexts in Japan-)の執筆を進め、その原稿に基づいて年度末にはUniversity of Warwickで研究発表を行い、また同大学教授のEma Ushioda先生から研究指導を受けた。この英文書籍執筆にかなりの時間を割いたため、予定されていた「聞き取り調査・授業観察」や「質問紙調査実施/分析」ができなかった。研究の最終年度に当たる本年度は日本語での研究成果物執筆を目標に昨年度にできなかた「聞き取り調査・授業観察」や「質問紙調査実施/分析」を行いたい。なお、研究成果物に関しては単著でひつじ書房より出すことが予定されており、様々な学習者の英語学習意欲を高める要因を考慮した指導に関する研究書/マニュアル執筆を中心に昨年度にできなかった調査をすすめていくものとする。本年度の研究では、「L2セルフシステム理論に基づき大学レベルでの英語学習者の学習動機構造の探索」を目的とし、文献研究および資料収集、1年生のグループ・インタビューを中心とした質的データの収集及びアンケート実施を行った。また、それらのデータに基づき、2月にアメリカ合衆国ハワイ大学に赴き、Graham Crookes教授に専門家としての指導を受けた。また3月にはアメリカ合衆国ダラスで開催されたAAALでノッティングガム大学教授、Zoltan Dornyei教授から指導を受けた。その中でL2セルフシステム理論に基づいた動機構造に関する理解を深め、また次年度以降の大学レベルでの英語学習への意欲を高める要因の特定化に向けて幅広い知見を得た。また研究を進める中で、ミシガン大学Diane Larsen-Freeman教授が主に提唱してきたDynamic Systems Theory/Complexsystems Theoryの動機づけ研究への応用に関しても新たに学び、本研究への応用に関しても検証を行っている。初年度の研究の中では目標意識の高い学習者と低い学習者の間での学習動機構造の違いに注目した。端的に言えば、目標意識の高い学習者は様々な学習動機を減退させる要因に触れても動じない動機構造を持っており、目標意識の低い学習者はそういった要因に影響を受けやすい。また、4月から1月まで8回に及び行ったグループインタビューの質的分析の中で学習動機、モチベーションといった研究テーマとなっている用語が十代後半の学習者にとってはあいまいで捉えにくいといった指摘もあり、次年度以降に進めていくアンケート調査の質問項目の精査に関して有意義な知見を得たと感じている。本研究では、L2セルフシステム理論を応用し、英語学習動機を高める要因を質的・量的に探究することを目的としている。本研究の3年目である2014年度は2冊の研究書の出版の機会を得て、本研究の成果の一部を出版することに集中した。その2冊の研究書の中で初年度に実施したインタビューと質問紙を用いた研究の成果を各本の1章ずつにまとめ、出版した。それらの研究成果の中で、モチベーションの高い学習者は質問紙調査・インタビュー調査のどちらでもさまざまな動機を高めうる要因に反応し、積極的に英語を学習する機会を求めていくことがわかった。一方、モチベーションが高くない学習者はインタビューの中においてやる気がまあまあある、またさまざまな英語学習の機会を持っているといった姿がみてとれるが、やる気を持続することの難しさをみてとれた。質問紙調査でもL2セルフシステム理論に基づいた構成概念のうち、文化に対する興味や目標言語話者に対する態度は高く維持するものも多いが、その他の構成概念に関しては低下してしまう傾向がみてとれた。なお、Dynamic Systems Theoryの観点からも英語学習動機を高める要因に関して考察を行ったが、大学生の英語学習者に関して考えれば夏季休暇といった長期の休みに学習から離れた後が重要な時期であることが言える。そういった時期を経た後にモチベーションを高めるようなImportant Others(重要な他者)に出会うことのなかった学習者は英語学習の動機を維持し、高めていくことがとても難しかったようであった。まず、本研究の目的は、質的・量的の2つのアプローチを用いて大学での英語教育の中でどのような要因が英語学習に対しての学習動機を高める要因となっているかを調査することであった。その為に(1)大学における英語学習者の学習動機構造をL2セルフシステム理論に照らし合わせて、分析し、(2)大学での英語学習意欲を高める要因にどのようなものがあるかを明らかにし、(3)教員養成プログラムや大学のファカリティ・ディベロプメントでの使用を視野に入れた本研究の知見をまとめた研究書・マニュアルの作成を行うことであった。

また、平成27年度(最終年度)の研究の目的は、3年間の基礎研究により明らかになった結果を基に、現場の教員の方々へのフィードバックとして教員養成プログラムや大学でのファカリティ・ディベロプメントでの使用を視野に入れた大学レベルでの英語学習意欲の動機を高める要因に配慮した具体的な方法論、方略(ストラテジー)、及び授業活動に関する研究書・マニュアルの作成を行うことであった。平成26年度に英語・日本語二つの言語で本研究の知見をまとめた研究書をそれぞれ1冊ずつ出版できたため、平成27年度は、800名ほどの大学1年生に対象に本研究結果に基づき作成した質問紙を用いた本調査を行った。分析を近日中に終え、論文投稿をする予定である。本研究によって明らかになったのは、L2セルフシステムの理想自己、義務自己、英語学習経験の三要素の中でも特に理想自己を持つことの重要性である。また、なんとなくこうなりたいといったあいまいな理想自己を持っていてもなかなか学習行動と結びつかないことが質的調査の結果から理解できた。本研究結果により、様々な学習者が明確な理想自己を持てるように教室内・外でサポートすることの重要性が示唆された。本研究の目的は、大学英語教育の中でどのような要因が学習者の英語学習の意欲を高める要因になっているかを質的・量的アプローチを用いて、調査することであった。本研究によって、L2セルフシステムの理想自己、義務自己、英語学習経験の三要素の中で特に理想自己を持つことの重要性が改めて認識された。また、なんとなくこうなりたいといったあいまいな理想自己をもっていてもなかなか学習行動と結びつかないといった学習者の実態も質的分析の結果から理解できた。本来の最終年度に当たる2014年度中に研究成果のまとめと最終的なアンケート調査・インタビュー調査を行うはずであったが、英語・日本語の2本の研究書の執筆に予想以上の時間を費やさなければいけなくなり、当初の予定より遅れている。ただし、日本語の研究書は本年3月に出版、英語の研究書は8月出版予定となっており、本年度に関しては集中して研究に取り組める見込みである。外国語教育大学初年度次生向けの比較的大規模なアンケート調査を実施するために昨年度準備してきており、4月に実施を済ませている。早急にアンケート調査を実施し、また大学1年生への1年間に及ぶインタビューも実施に向けて現在のところ参加者を絞っている段階である。また、国内・国際学会発表での研究成果発表のためにプロポーザルの準備を始めている。「研究実績の概要」で述べたように昨年度に予定されていた「聞き取り調査・授業観察」や「質問紙調査実施/分析」が英文での研究成果執筆にかなりの時間を割いたため、できなかった。本年度に早急に行いたい。本研究の目的は、質的・量的の2つのアプローチを用いて大学での英語教育の中でどのような要因が英語学習に対しての学習動機を高める要因となっているかを調査することである。
尾部形成と協調した内胚葉末端及び外生殖器発生過程の解析

本研究においては、我々の胎児外性器、尾部形成過程の解析実績を基盤として尾部形成過程と協調して起こる内胚葉性器官(総排泄腔、尿生殖洞、VER (Ventral Ectodermal Ridge))発生過程を解析し、尾部形成における意義を考察した。我々は遺伝子ノックアウトマウスを駆使することによって、胎児外生殖器、並びに尾部の形成に重要と推定されていたものの実体が分からなかったcloaca(総排泄腔)及びその周辺間葉において上皮間葉相互作用が存在すること、そして上皮側の主要な因子としてはShh、間葉側の制御因子群としては転写制御因子群が存在することを報告した。さらにショウジョウバエなどを中心としてその付属肢先端における発生制御メカニズムに注目が集まっているDlx (Distaless)遺伝子群に注目し、Dlx遺伝子群の制御が総排泄空由来のソニックヘッジホッグ遺伝子下流にあることを初めて示した。このことは付属肢の発生過程において先端制御を担う制御因子が(外生殖器原器)発生場形成過程から上皮の重要な制御因子Shhの下流にあることを初めて示したものである。これらのデータは単なる外生殖器発生メカニズムの知見に留まらず胎児尾部形成、後部形成に重要な付属肢、器官形成のための遺伝子ネットワーク解明を初めて行ったものである。本研究においては、我々の胎児外性器、尾部形成過程の解析実績を基盤として尾部形成過程と協調して起こる内胚葉性器官(総排泄腔、尿生殖洞、tail gut(尾腸))発生過程を解析し、尾部形成における意義を解析、考察する。本年度においては、これまでマウス胎児尾部形成過程において行った解析を基盤として総排泄腔、尿生殖洞、尾腸(tail gut)及び尾芽(tail bud)において網羅的にインサイチュハイブリダイゼーションを行ない、鳥類胚において後部primitive streakにおいて各種Bmp、及びアンタゴニス、トの発現検出に成功した。さらにそれらの機能解析を我々自身が開発した新規遺伝子導入法ソノポレーションを用いて行い、Bmpシグナルが後部primitive streak形成、並びにprimitive streakから発生制御される総排泄腔膜、総排泄腔周辺間葉発生に重要な働きをしていることを見いだした。こうした鳥類胚の解析に加え、各種遺伝子ノックアウト解析を押し進め、総排泄腔膜において発現する遺伝子ノックアウトマウスとしてShh遺伝子ノックアウトマウス、その周辺間葉に発現するその制御因子ノックアウトマウスとしてTbx遺伝子群ノックアウトマウスなどを解析し、総排泄腔膜-周辺間葉間の相互作用を世界で初めて見いだした(投稿準備中)。このような総排泄腔膜周辺の発生フィールドの解析は今回が初めてであることに加え、尾部に発生する生殖器形成に対する影響、後腸末端などが協調して発生する胎児後端形態形成理解にとって必須であると考えられる。
大腸癌における循環腫瘍DNAを用いたEGFR抗体薬耐性の検出と個別化治療への応用

循環腫瘍DNA(ctDNA)を抽出する血液検体に関しては、金沢大学とその研究協力施設において倫理審査委員会の承認を得て、採取を開始、継続している(課題名:RAS遺伝子野生型の切除不能進行再発大腸癌における循環腫瘍DNAを用いた抗EGFR抗体薬耐性検出の研究)。具体的には、組織由来DNAにおいて、従来法によりRAS野生型と診断された切除不能進行再発大腸癌に対して抗EGFR抗体薬を用いた化学療法を行う症例を対象とし、治療開始前から病状進行まで、定期的に血液採取を行う。目標数は50例としているが、現在までに37例の登録を完了している。また、研究協力施設から温度管理を行いながら検体を搬送する体制を確立した。全例の登録、検体採取が終了した後にctDNAの抽出、解析を行い、抗EGFR抗体薬の治療効果予測、治療効果のモニタリングや治療無効の早期判定が可能かどうかを検討する予定としている。並行して、予備的にデジタルPCR法でctDNAの変異解析を行った24例中19例において、保存されていた原発巣や(同時性、異時性の)転移巣の手術検体、計31検体からDNA抽出を行い、Ion AmpliSeq Cancer Hotspot Panelを用いて、次世代シーケンス法で変異解析を行った。今後、そのデータを用いて、原発巣、転移巣における遺伝子変異と、ctDNAにおける変異を比較し、腫瘍の不均一性の有無や程度を検討、さらにctDNAがどの程度原発巣や転移巣の変異を反映しているのかを検討する予定である。循環腫瘍DNA(ctDNA)抽出用の検体採取のための症例登録がやや遅れているため。また、登録した症例の血液採取が終了した後にctDNAの変異解析を開始する予定であり、解析開始まで時間を要するため。引き続き症例の集積を行う。並行して、予備的に循環腫瘍DNA(ctDNA)の変異解析を行った24例中19例において、保存されていた原発巣や転移巣の手術検体、計31検体において、Ion AmpliSeq Cancer Hotspot Panelによる変異解析を行った結果を詳細に検討する。原発巣、転移巣、ctDNAのそれぞれにおける変異を比較し、腫瘍の不均一性の有無や程度を検討、さらにctDNAがどの程度原発巣や転移巣の変異を反映しているのかを検討する予定である。循環腫瘍DNA(ctDNA)を抽出する血液検体に関しては、金沢大学と、その研究協力施設である埼玉県立がんセンター、石川県立中央病院、名古屋市立大学の倫理審査委員会の承認を得て、採取を開始した(課題名:RAS遺伝子野生型の切除不能進行再発大腸癌における循環腫瘍DNAを用いた抗EGFR抗体薬耐性検出の研究)。対象は、(手術もしくは生検標本を用いて)RAS遺伝子野生型と診断されている切除不能進行再発大腸癌に罹患しており、抗上皮成長因子受容体(EGFR)抗体薬を使用した化学療法を施行する予定の患者である。化学療法の開始前から病状進行まで、定期的に血液を採取する。日常臨床で行われている血液検査の際に、追加で10-20 mlの血液採取を行い(採血管はctDNA採取用に開発されたStreck社のCell-free DNA BCTチューブを用いている)、採取後、血漿を遠心分離、冷凍保存している。ctDNA用の血液採取と並行して、腫瘍マーカーの測定、CTでの病状評価を行っている。目標数は50例としているが、現在までに20例の登録を行った。全例の登録、検体採取が終了した後にctDNAの抽出、解析を行う予定である。そのデータをもとに、ctDNAによる抗EGFR抗体薬の治療効果予測、治療効果のモニタリング、治療無効の早期判定が、腫瘍マーカーや画像診断と比較して早期に可能かどうかを検討する。並行して、予備的にctDNAの変異解析を行った24例中19例で、保存されていた原発巣や(同時性、異時性の)転移巣の手術検体、34検体からDNA抽出を行った。今後、原発巣、転移巣において複数の癌関連遺伝子の変異解析を行い、腫瘍の不均一性の有無や程度を検討する。さらにctDNAにおける変異と比較することにより、ctDNAがどの程度原発巣や転移巣の変異を反映しているのかを検討する予定である。循環腫瘍DNA(ctDNA)抽出用の検体採取のための症例登録が遅れているため。また、登録した症例の血液採取が終了した後にctDNAの変異解析を開始する予定としたため、解析開始まで時間を要するため。

並行して、予備的にデジタルPCR法でctDNAの変異解析を行った24例中19例において、保存されていた原発巣や(同時性、異時性の)転移巣の手術検体、計31検体からDNA抽出を行い、Ion AmpliSeq Cancer Hotspot Panelを用いて、次世代シーケンス法で変異解析を行った。今後、そのデータを用いて、原発巣、転移巣における遺伝子変異と、ctDNAにおける変異を比較し、腫瘍の不均一性の有無や程度を検討、さらにctDNAがどの程度原発巣や転移巣の変異を反映しているのかを検討する予定である。循環腫瘍DNA(ctDNA)抽出用の検体採取のための症例登録がやや遅れているため。また、登録した症例の血液採取が終了した後にctDNAの変異解析を開始する予定であり、解析開始まで時間を要するため。引き続き症例の集積を行う。並行して、予備的に循環腫瘍DNA(ctDNA)の変異解析を行った24例中19例において、保存されていた原発巣や(同時性、異時性の)転移巣の手術検体からDNA抽出を行っており、そのDNAを用いて複数の癌関連遺伝子の変異解析を行う予定である。原発巣と転移巣の遺伝子変異の違いを調べることにより腫瘍の不均一性の有無、程度を検証することが可能である。また、腫瘍の不均一性を反映するとされるctDNAの有用性に関しても新知見が得られる可能性がある。並行して、予備的に循環腫瘍DNA(ctDNA)の変異解析を行った24例中19例において、保存されていた原発巣や転移巣の手術検体、計31検体において、Ion AmpliSeq Cancer Hotspot Panelによる変異解析を行った結果を詳細に検討する。原発巣、転移巣、ctDNAのそれぞれにおける変異を比較し、腫瘍の不均一性の有無や程度を検討、さらにctDNAがどの程度原発巣や転移巣の変異を反映しているのかを検討する予定である。症例の集積に時間を要するため。加えて、研究費の総額を抑制するために全例の検体集積が終了してから解析を行うこととしたため、腫瘍循環DNAの変異の解析が開始できないため。組織由来のDNA抽出や変異解析は可能であるため、研究費をそちらに使用する。また並行して進めている、予備的研究に用いた症例の組織検体の変異解析にも使用する。加えて、研究費の総額を抑制するために全例の検体集積が終了してから腫瘍循環DNAの変異解析を開始する予定であるため。当該年度内に症例の集積が終了せず、解析を行い得ない場合は、補助事業期間延長を申請する可能性がある。
東アジアの照葉樹林帯における諸民族の住まいをつくりだす文化的枠組みの比較研究

平成20年度における本研究の実施状況は以下のようである。1.平成20年度は、平成18年度から平成19年度におこなったネパール・カトマンドゥ盆地西南部の農村部の集落コカナと、同・ブンガマティにおけるネワール族のジャプ、シャケ、バズラチャルヤなどのジャートの住まいと暮らしの調査資料をもとに、住まいをつくりだす文化的枠組みの追究をおこなった。特に今年度は、住まいの空間的秩序がより鮮明に現れると考えられる、通過儀礼および祝祭・年中行事などの非日常的生活に注目した分析を進めている。さらに、平成19年度におこなったカトマンドゥ盆地西南部キルティプールの、マハルジャン、プラダン、タンドゥカール、コパリなどのジャートの住まいと暮らしの調査資料をもとに、ネワール族に受け継がれてきた住まいをつくりだす空間概念の連続性と変化をとらえようとしている。これらの成果の一部は、日本建築学会、日本民俗建築学会等の各学会において口頭発表した。また学術雑誌に投稿掲載した。2.平成20年度は、(1)9月1日9月4日にネパール中部に位置するバンディプールに居住するネワール族のプラダンの住まいの調査、(2)9月6日9月11日にカトマンドゥ盆地・ティミの北部に位置するボデ地区に居住するネワール族の住まいの調査(そのうち、シュレスタの6戸、プラジャパティの2戸、サフカラの2戸、ツォンディオの1戸、の住まいの精密調査)をおこなった。調査内容は、居住する家族、住まいの空間的な構成とその展開、日常的・非日常的生活における人びとの行動、汚れの観念などである。また、儀礼および年中におこなわれる祝祭などにおける人びとの行動と空間認識である。現在、これらの調査で得られた資料の整理・分析を継続しており、今後はその成果を、所属する各学会に口頭発表するほか、学術雑誌に投稿する予定である。平成18年度における本研究の実施状況は以下のようである。(1)平成18年度は特別研究員採用以前に、平成15年度におこなったネパール・カトマンドゥ盆地西南部の農村部の集落コカナと、平成16年度におこなった同・ブンガマティにおけるネワール族のジャプ、シャケ、バズラチャルヤなどのジャート住まいと暮らしの予備的な調査の資料をもとに、住まいをつくりだす文化的枠組みの追究をおこなった。その成果の一部は、日本生活学会、日本民俗建築学会等の各学会において口頭発表および学術雑誌に報告した。(2)平成18年9月7日9月24日にかけて、同上コカナに居住するネワール族の住まいを対象に第二次調査をおこなった。平成15年度におこなったコカナの予備的な調査の資料の分析結果から、追加調査が必要と判断した。コカナは複数のジャートが混住するムラであり、800戸5000人が居住している。そのうち、ニョーブ地区の農民のジャート;ジャプの15戸の住まいの精密調査を実施した。調査内容は、居住する家族、住まいの空間的な構成とその展開、日常的・非日常的生活における人びとの行動、汚れの観念、儀礼および年中におこなわれる祝祭などにおける人びとの行動と空間認識を調査した。これらの調査で得られた資料の整理・分析は継続中である。分析は、(1)住まいを作り出している空間概念を人びとの行動および空間認識から読みとること、(2)ネワール族の生活に存在する浄・不浄の観念と人びとの行動との関係をとらえること、(3)浄・不浄の観念と住まいの空間構成との関係をとらえること、に視点をおくものである。また、ネワール族の住まいでおこなわれる宗教的行為としての炊事調理・食事、および月経、出産、死などの場面にあらわれる時間的・空問的な浄・不浄のレベルにも関心をおくものである。1.平成19年度は、平成18年度におこなったネパール・カトマンドゥ盆地西南部の農村部の集落コカナと、平成19年度におこなった同・ブンガマティにおけるネワール族のジャプ、シャケ、バズラチャルヤなどのジャートの住まいと住生活の調査資料をもとに、住まいをつくりだす文化的枠組みの追究をおこなった。その成果の一部は、日本建築学会、日本生活学会、日本民俗建築学会等の各学会において口頭発表した。2.平成19年9月6日9月23日にかけて、同上ブンガマティに居住するネワール族の住まいを対象に調査をおこなった。内容は、人びとのもつ汚れの観念および非日常的生活における人びとの行動や空間認識を把握するものである。ブンガマティは複数のジャートが混住するムラであり、約1200戸に5700人が居住している。ムラはいくつかの地区に分かれており、そのうちバイリ、コタル、ツォレの3つの地区の主なジャート:シャキャの10戸とツラダルの4戸の住まいを精密調査した。また、儀礼および年中におこなわれる祝祭行事における人びとの行動と空間認識を調査した。現在、これらの調査で得られた非日常的生活に関する資料の整理・分析を継続しておこなっている。その成果は、今後に所属する各学会に口頭発表するほか学術雑誌に投稿の予定である。3.平成19年11月8日11月14日にかけて、ネパール・カトマンドゥ盆地西南部のキルティプールに居住するネワール族の住まいと住生活を調査した。

調査内容は、平成18年度に実施したコカナ調査および平成19年度に実施したブンガマティ調査と同様である。現在、この調査で得られた資料の整理・分析をおこなっている。平成20年度における本研究の実施状況は以下のようである。1.平成20年度は、平成18年度から平成19年度におこなったネパール・カトマンドゥ盆地西南部の農村部の集落コカナと、同・ブンガマティにおけるネワール族のジャプ、シャケ、バズラチャルヤなどのジャートの住まいと暮らしの調査資料をもとに、住まいをつくりだす文化的枠組みの追究をおこなった。特に今年度は、住まいの空間的秩序がより鮮明に現れると考えられる、通過儀礼および祝祭・年中行事などの非日常的生活に注目した分析を進めている。さらに、平成19年度におこなったカトマンドゥ盆地西南部キルティプールの、マハルジャン、プラダン、タンドゥカール、コパリなどのジャートの住まいと暮らしの調査資料をもとに、ネワール族に受け継がれてきた住まいをつくりだす空間概念の連続性と変化をとらえようとしている。これらの成果の一部は、日本建築学会、日本民俗建築学会等の各学会において口頭発表した。また学術雑誌に投稿掲載した。2.平成20年度は、(1)9月1日9月4日にネパール中部に位置するバンディプールに居住するネワール族のプラダンの住まいの調査、(2)9月6日9月11日にカトマンドゥ盆地・ティミの北部に位置するボデ地区に居住するネワール族の住まいの調査(そのうち、シュレスタの6戸、プラジャパティの2戸、サフカラの2戸、ツォンディオの1戸、の住まいの精密調査)をおこなった。調査内容は、居住する家族、住まいの空間的な構成とその展開、日常的・非日常的生活における人びとの行動、汚れの観念などである。また、儀礼および年中におこなわれる祝祭などにおける人びとの行動と空間認識である。現在、これらの調査で得られた資料の整理・分析を継続しており、今後はその成果を、所属する各学会に口頭発表するほか、学術雑誌に投稿する予定である。
日本美術の省略法による現代日本画制作と中国絵画の近現代化との比較研究

本研究は、日本画の前近代の水墨表現と琳派等の装飾表現の二様式のうち水墨表現の雪舟から等伯が成し得た和様化の系譜に注目し、省略の方法論を軸に筆墨表現と現代日本画表現の混淆を試み独自の方法を研究する。同時に中国の水墨表現の近現代化との比較研究を行うことで日本画の方法の独自性を明確にし、アジアや、または欧米に対しての独自性を提示することを研究する。
統計モデルに基づく画像のスムージングとエッジング

地球観測衛星からのTMデータと呼ばれるデータは、センサーの往復運動によりデータを収集しているため、幾何補正後も横稿ノイズが残る。そこで、画像の縦方向、および横方向の各ラインに対し、1次元のベンズモデルを仮定し、ノンパラメトリック回帰に基づく高速なスムージング手法を提案した。また、従来から提案されている高速フーリエ変換を用いた方法,クロスバリデーション,カルマンフィルタを用いる方法などと比較して良好な結果を得られることを示した(投稿中)。また、TMデータでは7チャンネルあるセンサーのうち遠赤外を観測するセンサの解像度が他の1/16しかない。ここでは遠赤外のデータが多変量正規分布に従うと仮定し、条件付き期待値により遠赤外データを予測し、解像度を改良することを提案した。この結果を国際シンポジウムIGARSS′95で発表した。会場でこの研究に興味を持つロシアの研究者と交流し、今後共同研究に発展する見込みである。このシンポジウムでは2分岐型のカテゴリー分類法について、従来手法との比較も報告した。統計学の基礎研究に関して、逆ガウス分布の完備直交関数系について考察した。逆ガウス分布に従う変数に分数変換を施すとカイ自乗分布に従うことを利用して、直交関数系を導き出した(掲載済み)。さらに3つの完備な関数系を求めることに成功し、投稿中である。本研究のため、国内の種々の分野の理論的研究者、実務家との討論、情報交換、研究連絡を行なった。得られた研究成果は談話会等で口頭発表し、討論を加え、さらにテクニカルレポートとして国内外に発表し、論文誌に投稿した。(新科研費では、国外シンポジウムで発表する場合の援助が認められれば、共通の興味を持つ研究者と知り合えて、より研究にプラスとなると思うのですが)地球観測衛星からのTMデータと呼ばれるデータは、センサーの往復運動によりデータを収集しているため、幾何補正後も横稿ノイズが残る。(新科研費では、国外シンポジウムで発表する場合の援助が認められれば、共通の興味を持つ研究者と知り合えて、より研究にプラスとなると思うのですが)
米国の公教育における宗教と教育との関係-政教分離成立の再検討と宗教教育の実態-

平成18年度の研究では、平成18年6月に開催された日本キリスト教教育学会において平成17年度の研究成果をもとに、ジェファソンの公教育思想と彼の作成した「ジェファソン聖書」とを並列し、公教育思想と宗教との関係性を歴史的に捉える視点の発表となった。またオランダで開催された、「宗教的多元性の中での宗教的価値教育」をメインテーマに掲げたISREV(International Seminar for Religious Education and Values)2006に参加し、宗教が多元化している状況において、公教育の中でどのような宗教的価値教育を実施するのか、あるいはどのような観点からこの間題を考えるのかという点などについて、各国の状況についての報告を聞くとともに、各研究者と意見交換を行い、各国の最新の研究状況への理解を深めることができた。特に、カリフォルニア州立大学チコ校のブルース・グレイル教授から、地方分権化されて各州単位で独自の教育制度がありながらも、エキュメニカルなキリスト教的価値をそのルーツにもつアメリカ合衆国のアイデンティティ形成のために、どのような宗教的価値教育が実施されているかという点について説明を受けることができた。平成19年3月にはアメリカのナッシュヴィルの修正憲法第一条センターを訪問し、同センターで行われている修正憲法第一条についての教育プログラムについての説明を受けた。同センターは、どのように修正憲法第一条の精神を学校教育でいかせるのかという観点から、さまざまなプログラムを実施しており、クリントン政権以降、アメリカの公立学校で宗教的知識教育を実施するためのガイドラインなども作成している。また、シカゴ大学では図書館において、アメリカ植民地期の宗教的状況を示す一次資料を入手することができた。本研究の最終報告書は平成19年7月に完成の予定である。平成17年度の研究では、アメリカにおける政教分離の制度成立史に関する資料等を検討するために、10月にマサチューセッツ州ボストン及びその近郊のセーラム・プリマスにて実地調査を行い、マサチューセッツ植民地の神権体制についての資料などを収集した。また、17世紀に宗教と政治とを分離するという特徴的な政治体制をとったロードアイランド州プロヴィデンスのThe First Baptist ChurchとRoger Williams National Memorialを訪問し、ロードアイランド植民地の創設者であるRoger Williamsの研究者との意見交換を行い、アメリカの政教分離成立とアメリカ最初のバプテスト教会がどのような関係があるのかという点について、最新の研究成果に触れることができた。特に、アメリカ最初のバプテスト教会についての資料は、アメリカ宗教史の先行研究ではあまり触れられてこなかったが、独立期にいわゆる「独立の父」たちを応援したバプテスト派のロードアイランド州での状況を理解する上で、非常に有益であると考える。それと同時に、アメリカの小学生への教科指導上、宗教的知識をどの程度教えられているかという資料も入手することができたが、これは、現在のアメリカにおける教育と宗教の関係を探る上で重要な資料のひとつといえる。国内では数回にわたり東京大学アメリカ太平洋地域研究センターにて、政教分離に関する最新の研究成果を分析することができ、また聖学院大学で主催されているピューリタン研究会に参加し、特にバプテストに関する最新の研究成果に触れることができたことにより、アメリカにおける政教分離制度とバプテストの教義的理解との関係性を考察する上でのさまざまな視座を得ることができた。なお、これまで得た主な資料を基に18年6月に行われる日本キリスト教学会での研究報告を予定している。
学習者のビデオ映像活用に基づいた韓国語プログラムの評価研究

これまでの国内における韓国語学習に関する研究では、言語学的な観点から日本語と韓国語の比較研究などが中心に実施されてきた。一方で、学習者のコミュニケーション能力に関する研究はあまり重視されてこなかった。本研究では学習者の言語スキルに焦点を当て、韓国語学習者のスピーチ形式によるスピーキング・パフォーマンスに着目する。短大における韓国語学習者のスピーチ発表を縦断的にビデオ撮影し、韓国語学習の成果を可視的に検証する。また、韓国語コースのプログラム評価を実施し、コミュニケーション能力の育成を目指した授業構成を検討する。
コンディショナルマウスを用いたヒト白血病関連転写因子の機能解析

AML1は多くの白血病で21q22転座に伴う再構成あるいは点突然変異を起こす遺伝子であり、正常造血の発生・分化に重要な役割を担っている。AML1floxマウスとLck-Creトランスジェニックマウスを交配することにより、Tリンパ球特異的にAML1遺伝子を不活化させた。このAML1コンディショナルマウスではDN, DP, CD4 SP, CD8 SPを含む胸腺T細胞が激減していたが、これはDN3(CD25(+), CD44(-))からDN4(CD25(-), CD44(-))への分化障害の結果であると考えられた。脾臓ではB細胞は正常に保たれていたが、CD4及びCD8 SP細胞は低下していた。TCRβの発現はCD8 SP細胞では保たれていたがCD4 SP細胞では低下しており、CD4 SP細胞の分化障害が存在すると考えられた。抗CD3抗体を用いた検討では、AML1コンディショナルマウスではDP細胞のnegative selectionが観察されず、AML1がDP細胞のnegative selectionに重要な役割を担っていることが明らかになった。さらに、抗CD3抗体及びIL-2で刺激した際のCD4及びCD8 SP細胞の増殖もAML1コンディショナルマウスでは障害されていた。最後に、AML1コンディショナルマウスでは脾臓の胚中心の形成が著しく障害されており、IgG1, IgG2a, IgG2b, IgAの産生が低下しIgMの産生は増加していた。これらの表現型は、脾臓におけるCD4 SP細胞とB細胞の相互作用の障害によりB細胞のクラススイッチが正常に営まれないことを示している。AML1はT細胞分化の各段階で重要な役割を担っていると結論された。胸腺細胞において選択的にAML1を不活化する方法として、Lck-Creトランスジェニックマウスとflox-AML1マウスをかけ合わせる。LckプロモーターはT細胞分化の最も初期から発現するため、このかけ合わせによりT細胞分化の最も初期に,AML 1が不活化されることが期待される。まず、129/SvマウスゲノムライブラリーからAML1の第5エクソンを含む領域約15kbをクローニングした。制限酵素地図を作製後、第5エクソンの両端とそれに続くネオマイシン耐性遺伝子の端にLox-P配列を挿入したターゲッティングベクターを作製した。ES細胞TT2にエレクトロポレーションにて直線化したターゲッティングベクターを遺伝子導入し、G418によるポジティブ選別を行い、相同組換え体を選別した。さらに、この相同組換え体にpMC1-Creベクターをエレクトロポレーションで導入し、Creリコンビナーゼを一時的に発現させることでLox-P配列を挟む領域を欠失させた。ネオマイシン耐性遺伝子のみを削ったものをI型欠失、第5エクソンとネオマイシン耐性遺伝子を削ったものをII型欠失、第5エクソンのみを削ったものをIII型欠失と称するが、ここではI型欠失組換え体とII型欠失組換え体を選別した。I型及びII型欠失相同組換えES細胞を用いて8細胞期凝集法によるキメラマウスの作製を行い、さらに交配によりI型欠失ヘテロマウス(AML1flox/WT)、II型欠失ヘテロマウス(AML1Δ/WT)を得た。T細胞特異的にAML1の発現を欠失させる為に、I型欠失ヘテロマウス(AML1flox/WT)をLck-Creトランスジェニックマウスと交配させ、AML1flox/WT,Lck-Creマウスを作製した。次にこのマウスとII型欠失ヘテロマウス(AML1Δ/WT)を交配させることで目的とするAML1コンディショナルノックアウトマウス(AML1flox/Δ,Lck-Cre)を得た。この発生工学マウスを解析することで、AML1の胸腺あるいはT細胞における機能が解析できると考えられる。

これらの表現型は、脾臓におけるCD4 SP細胞とB細胞の相互作用の障害によりB細胞のクラススイッチが正常に営まれないことを示している。AML1はT細胞分化の各段階で重要な役割を担っていると結論された。
新規の含フッ素アクリル系高分子の構造及び物性に関する研究

フルオロアルキル側鎖をもつポリ(フルオロアルキルメタクリレート)は、側鎖のラメラ積層構造をもついわゆる櫛形ポリマーとして近年注目を集めている。この場合、フルオロアルキル側鎖が7個以上のCF_2を有するときに、側鎖は結晶化する。我々はこの高分子のalpha位のメチル基をフッ素原子に置換したポリ(フルオロアルキル2-フルオロアクリート)に関して、以下の知見を得た。1.-CH_2CF_3や-CH_2CF_2CF_3といった短い側鎖であっても側鎖は結晶化する。この場合明らかにalpha位のフッ素原子がなんらかの関わりをもっていると考えられるが、延伸配向試料のX線回析写真から、この側鎖の積層構造は主鎖骨格も含んだ3次元的な秩序構造であると推測された。2.-C_2H_4C_8F_<17>2のように側鎖が長い場合、側鎖の積層構造は複雑な温度変化をする。昇温とともにいったん室温のシングルレア-構造が成長したのち厚さが側話鎖長の2倍のダブルレア-構造へと転移し、そらにアモルファス状態へと転移する。他の含フッ素アクリル系高分子との比較から、側鎖の積層様式は、主鎖骨格の硬さや極性、そして温度にきわめて敏感であることがわかった。3.IRスペクトルにおいて、エステル基のC=O伸縮振動吸収の分裂は、主鎖の立体規則性に由来するとされていた。昇温過程でのスペクトル変化が側鎖の結晶状態とよく対応していることから、結晶中のエステル基の酸素原子と隣接するalpha位のフッ素原子間の相互作用によると結論した。このように、alpha位のフッ素原子はこの高分子の高次構造と深い関わりをもっており、ひいてはその熱的性質をも特徴的なものにしていることがわかった。なお、費用の約8割を、試料成形用の熱プレス機の購入に充てた。
新たに発見された小脳形成不全症ラットの遺伝子解析

我々の研究室で発見した歩行異常、小脳および大脳皮質の形態形成不全を示すラット(creeping rat)の形質は交配実験の結果、常染色体性劣遺伝子(creと仮称)によって支配されていることが明らかとなった。ホモ(cre/cre)個体の小脳では、3日齢で正常個体の小脳に認められる小葉の形成が、28日齢に達しても認められなかった。さらに、外顆粒層細胞の内方への移動は、正常個体では21日齢以前にほぼ終了していたのに対して、ホモ個体では21日齢のおいてもいまだ外顆粒層に多くの細胞が存在していた。ホモ個体小脳のプルキンエ細胞はその大部分が28日齢になっても内顆粒層と白質内に散在し、かつ樹状分岐がほとんど認められなかった。GFAP陽性細胞は21日齢のホモ個体小脳の散在し、細胞数も正常個体に比べ増加していた。さらに、GFAF陽性細胞のprocessは厚く、かつ不規則に分岐していた。しかし、このprocessは28日齢のホモ個体では薄くなっていた。これらのことから、creepingラット小脳に認められる形態形成異常は、発生、分化段階におけるプルキンエ細胞、顆粒細胞など神経細胞の移動障害によるものと考えられる。一方、ホモ個体のすベてに尾椎の形態形成異常に起因する尾曲がり(crooked tail)が認められ、胎生18日目以降でそれを確認することが明らかとなった。BN系統とcreepingラットのヘテロ(cre/+;cre/cre個体は繁殖能力を欠く)を用い、F1(すべて正常)およびBF1を作出し、12の生化学的遺伝子座を標識としてcre遺伝子座のリンケ-ジ検索を行ったが、いずれとも連鎖していなかった。今回の交配実験から得られた仔ラット(72匹)の、尾曲がりが認められるが小脳形成不全を伴っていない個体が1匹確認され、cre遺伝子と尾曲がり(尾椎の形態形成異常)を支配する遺伝子(crooked teil:遺伝子記号crtと仮称)とは別で、お互い強く連鎖していることが明かとなった。平成元年度の研究計画は、歩行異常、小脳・大脳皮質の形態形成不全を示すミュ-タントラット{creeping(cre/cre)}の1.表現型の発現時期を明らかにすること、2.遺伝的支配様式を明らかにすることであった。これら二つの目的に対して次に述べる新たな知見が得られた。1.胎令14日では正常個体とホモ個体(cre/cre)を組織学的に識別することができなかった。しかし、胎令16日のcortical plateは正常個体で細胞が規則的、かつ密に集合していたのに対して、ホモ個体では、細胞配列が不規則であり、その密度も低かった。胎令18日では正常個体において最表層に分子層が形成され始めるのに対し、ホモ個体は分子層を認めることができず、両者の違いがより明瞭となった。胎令20日ではホモ個体の大脳皮質は厚さが薄く、分子層は認められず、多くの細胞が中央部に位置したままであり、その密度は低い。また、海馬の細胞配列もすでに不明瞭であった。一方、小脳は生後3日令で正常個体の小脳に認められる小葉の形成が、ホモ個体では認められなかった。さらに、外顆粒層細胞の内方への移動は、正常個体では21日令以前にほぼ終了しているのに対し、ホモ個体では21日令においてもまだ外顆粒層に多くの細胞が存在していた。