hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
口腔粘膜上皮におけるメカノセンサー Piezoの発現と機能調節

口腔は多様な刺激に晒されている。常に咀嚼、嚥下や会話等により物理的機械的な力がかかり、粘膜の構築はそれに対応して口腔内で頬、口蓋や舌などの部位による多様性を示していると考えられる。本研究は、Piezoが口腔粘膜においても機械刺激のレセプターとして働くのではないかとの仮説をたて研究を行った。その結果、Piezo1が5週齢および8週齢のマウス歯肉上皮および頬粘膜上皮の顆粒細胞層、有棘細胞層に発現することが認められた。頬粘膜におけるPiezo1の発現は皮膚に比較して高い発現をしていることが明らかとなった。本研究は、Piezoが口腔粘膜においても機械刺激のレセプターとして働くのではないか、また機械刺激を常に受ける口腔内においてPiezoが口腔粘膜上皮のAnoikisに関わり、結果として皮膚に比べ数倍速い口腔粘膜上皮のターンオーバーがおこるのではないかとの仮説をたて、研究を行った。研究は5週齢のC57/BL6Nマウスの皮膚と歯肉、頬粘膜および口蓋粘膜を対象に、発現の局在を免疫組織化学的検索により解析した。また定量的PCRにより解析した。その結果、免疫組織化学的検索により、Piezo1が5週齢のマウス歯肉上皮および頬粘膜上皮の顆粒細胞層、有棘細胞層に発現することが認められた。また定量的PCRにより、頬粘膜におけるPiezo1の発現は皮膚に比較して高い発現をしていることが明らかとなった。これらの結果は、第56回歯科基礎医学会学術大会・総会にて発表を行った。&#8232;本研究は、Piezoが口腔粘膜においても機械刺激のレセプターとして働くのではないか、また機械刺激を常に受ける口腔内においてPiezoが口腔粘膜上皮のAnoikisに関わり、結果として皮膚に比べ数倍速い口腔粘膜上皮のターンオーバーがおこるのではないかとの仮説をたて、研究を行った。&#8232;研究は5週齢のC57/BL6Nマウスの皮膚と歯肉、頬粘膜および口蓋粘膜を対象に、発現の局在をin situ hybridizationおよび免疫組織化学的検索により解析した。その結果、in situ hybridization法および、免疫組織化学的検索により、Piezo1が5週齢のマウス歯肉上皮および頬粘膜上皮の顆粒細胞層、有棘細胞層に発現することが認められた。&#8232;機械刺激センサーとして知られるPiezo1の口腔粘膜上皮での発現はない。本研究では、in situ hybridizationおよび免疫組織科学的検索、および定量的PCRによりその発現について解析を行った。現在論文投稿に向け、準備を行っている。研究は5週齢のC57/BL6Nマウスの皮膚と歯肉、頬粘膜および口蓋粘膜を対象に、発現の局在をin situ hybriduzation法および免疫組織化学的検索により解析した。その結果、in situ hybriduzation法および免疫組織化学的検索により、Piezo1が5週齢および8週齢のマウス歯肉上皮および頬粘膜上皮の顆粒細胞層、有棘細胞層に発現することが認められた。また定量的

PCRにより、頬粘膜におけるPiezo1の発現は皮膚に比較して高い発現をしていることが明らかとなった。口腔は多様な刺激に晒されている。常に咀嚼、嚥下や会話等により物理的機械的な力がかかり、粘膜の構築はそれに対応して口腔内で頬、口蓋や舌などの部位による多様性を示していると考えられる。本研究は、Piezoが口腔粘膜においても機械刺激のレセプターとして働くのではないかとの仮説をたて研究を行った。その結果、Piezo1が5週齢および8週齢のマウス歯肉上皮および頬粘膜上皮の顆粒細胞層、有棘細胞層に発現することが認められた。頬粘膜におけるPiezo1の発現は皮膚に比較して高い発現をしていることが明らかとなった。機械刺激センサーとして知られるPiezo1の口腔粘膜上皮での発現は皆無である。申請者は口腔粘膜におけるPiezoの発現について免疫組織学的検討を行ってきたが、in Vivoでの染色を行った報告が少なく、どの抗体が染色に適しているか不明であった。そこでmRNAの発現の解析を行うべく、in situハイブリダイゼーションによる解析を開始したため、若干進行が遅延している。今後は、Piezoの機能解析を行う。歯科保存学1. Piezoの局在を明らかにする。in situハイブリダイゼーションでPiezo1および2の局在を明らかにする。2.口腔組織におけるPiezoの発現量を明らかにする5週齢のC57/BL6Nマウスの皮膚と歯肉、頬粘膜および口蓋粘膜にPiezo1の発現が認められることが確認された。さらにin situハイブリダイゼーションにより、口腔内の上皮にも発現量の違いが認められることから、レーザーマイクロダイセクションにて口腔粘膜上皮の部位による発現量の差異を明らかにする。3. Piezoの機能解析を行う。機械刺激センサーとして知られるPiezo1は、細胞接着不全に起因する細胞死として知られるAnoikisに関わることが報告されている。しかし口腔領域での報告はこれまで皆無である。そこで申請者は、口腔粘膜におけるPiezoの発現について検討をした。しかしながら、これまで他の組織においても、in vivoでの染色を行った報告が少なく、どの抗体が染色に適しているかが不明であった。そこで、数種類の抗体を用いて染色を行うなど、適条件を検討する必要が生じ、進行が若干遅延している。H27年度に口腔粘膜上皮におけるPiezoの発現と機能について定量的PCR分析と組織学的解析を行い、その結果をもとに論文発表する予定であった。しかし組織学的解析に遅れを生じたため、計画を変更し論文発表をH28年度に行うこととした。申請者は口腔粘膜における免疫組織化学的検索により、Piezo1の発現を明らかにすべく研究を行っているが、これまで他の組織においてもin vivoでの染色を行った報告が少ないため、条件の検索が困難であった。そこで、in situハイブリダイゼーションによる検索を行うべく、現在条件を整えており、進行が遅延している。未使用額は論文投稿の経費に充てたいと考えている。1. Piezoの機能解析を行うb.口腔粘膜上皮の適機械刺激を調べるため、細胞進展装置により伸展刺激を加えてカルシウムイメージングで活性化を観察する。
ビジョンチップと反応拡散チップを用いた運動視知覚の研究

本研究目的は人間の網膜を模した視覚処理デバイスであるアナログビジョンチップを用いてのターゲットトラッキング(運動する対象物体を追跡すること)の実現である.そこで,ニューラルイメージ社製ビジョンチップ内蔵のカメラをアップグレードした.そのカメラの特徴は,六角格子から,正方格子構造へと移行したことと,人間の低位の視覚処理の二つの流れ,すなわち,大細胞系を模した空間的ガウシアンフィルタリングと,小細胞系を模した時間差分を同時に行えることである.そこで,本研究では,オプティカルフローの計算を,上記ビジョンチップを用いて行う方法にについて検討した.実際に,ビジョンチップを用いてフローを計算する前の予備実験として,ガウシアンフィルタリングと時間差分を用いて,フローを計算する方法を検討した.動きの情報のみに着目している点を強調するため,ランダムな濃淡値からなる動画をPC上で作成し,その画像を元に,シミュレーションを行った.この場合にも,アナログビジョンチップの持つ,強力なガウシアンフィルタリングによって,ある程度正確なオプティカルフローが得られることを示した.そして,この知見をいかにビジュアルトラッキングに応用するかについて考察したその後も,ビジョンチップを用いた運動視を行うための実験環境整備に努めた.本研究では,人間の網膜を模した視覚処理デバイスであるアナログ型のビジョンチップを用いて動画像処理・認識を並列処理で行うことを試みることが目的であった.そこで,大阪大学の学内ベンチャー企業である,ニューラルイメージ社製のアナログビジョンチップ内蔵のカメラを購入した.そのカメラの特徴は,人間の低位の視覚処理の二つの流れ,特に,大細胞系に密接な関係のある空間的なガウシアンフィルタリングと,小細胞系に密接な関係のある,時間差分を同時に行えることである.そこで,本研究では,運動視知覚の問題として最も重要かつ多彩な広がりを持つ,オプティカルフローの計算を,上記ビジョンチップを用いて行う方法にについて検討した.実際に,ビジョンチップを用いてオプティカルフローを計算する前の予備実験として,ガウシアンフィルタリングと時間差分を用いて,オプティカルフローを計算する方法を検討した.特に,動きの情報のみに着目している点を強調するため,ランダムな濃淡値からなる動画,即ちランダムドットキネマトグラムをPC上で作成し,その画像を元に,シミュレーションを行った.ランダムドットキネマトグラムの場合にも,アナログビジョンチップの持つ,強力なガウシアンフィルタリングによって,ある程度正確なオプティカルフローが得られることを示した.その結果を,第19回自律分散システム・シンポジウムにおいて,「アナログビジョンチップに基づく運動視知覚の一考察」という題目で発表した.その後も,実際にビジョンチップを用いて運動視を行うための実験環境整備に努めた.本研究目的は人間の網膜を模した視覚処理デバイスであるアナログビジョンチップを用いてのターゲットトラッキング(運動する対象物体を追跡すること)の実現である.そこで,ニューラルイメージ社製ビジョンチップ内蔵のカメラをアップグレードした.そのカメラの特徴は,六角格子から,正方格子構造へと移行したことと,人間の低位の視覚処理の二つの流れ,すなわち,大細胞系を模した空間的ガウシアンフィルタリングと,小細胞系を模した時間差分を同時に行えることである.そこで,本研究では,オプティカルフローの計算を,上記ビジョンチップを用いて行う方法にについて検討した.実際に,ビジョンチップを用いてフローを計算する前の予備実験として,ガウシアンフィルタリングと時間差分を用いて,フローを計算する方法を検討した.動きの情報のみに着目している点を強調するため,ランダムな濃淡値からなる動画をPC上で作成し,その画像を元に,シミュレーションを行った.この場合にも,アナログビジョンチップの持つ,強力なガウシアンフィルタリングによって,ある程度正確なオプティカルフローが得られることを示した.そして,この知見をいかにビジュアルトラッキングに応用するかについて考察したその後も,ビジョンチップを用いた運動視を行うための実験環境整備に努めた.
明治期における産業発展と地域経済

本研究の目的は、これまで必ずしも研究が進んでいない明治期の産業、とくに在来産業の発展に関する詳細な実証分析を蓄積することである。さらに多くの在来産業が地方産業として展開していた事実に関連して、近年ようやく本格的な実証研究が登場するようになった地域経済の展開についても独自の見解を打ち出すことをめざしている。そのためにわれわれは、公刊資料およびすでに収集した一次資料の整理・分析を進めるとともに、各研究分担者が新資料の発掘にも努めた。平成6年12月には政治史・技術史・経済地理学など関連分野の専門家の参加も得て、「日本における産業発展と地域経済-阪神工業地帯を中心に-」と題するワークショップを開催した(参加者24名)。本ワークショップではさまざまな事実・論点が提示されたが、なかでも(1)工業地帯の形成と展開の論理、(2)阪神工業地帯の特徴、(3)問屋制度と工業制度の関連、(4)産業発展と環境・インフラストラクチャーの関連などの論点を巡って活発な討議が展開された。また、第一次資料および公刊資料に基づいてデータの収集・整理が進められたが、なかでも工場名簿の分析・資産家名簿(『日本全国商工人名簿』)などのデータベース化では相当の進展が見られた。以上のような研究活動の成果の一部が、宮本又郎ほか『日本経営史』(有斐閣、平成7年3月)、宮本又郎・阿部武司編『経営革新と工業化』(日本経営史2、岩波書店、平成7年6月)、西川俊作・尾高煌之助・斎藤修『日本経済の200年』(日本評論社、平成8年1月)として刊行された。7月に研究会を開催して、今後の研究の方向性について討論するとともに、宮本が近世の商業、猪木が労働市場、阿部が綿業、沢井が機械工業、尾高が労動、山本が貿易・金融、斉藤が人口、天野が工業地帯、谷本が醸造業、広田が小売市場についてそれぞれ報告した。さらに10月、12月、2月に開催された研究会において明治期の経済発展とアジア市場の関係、企業勃興期における地方企業家、工場制度の定着と労務管理などのテーマに関する報告が行われた。以上の報告と並行して各地において収集した第一次史料および公刊資料に基づいたデータの収集・整理が続けられ、とくに工場名簿の分析、資産家名簿のデータベース化などでは相当の進展をみ、『日本全国商工人名簿』所収データの中から税額順・50音順別に大阪府のデータをデータベース化し、東京都・愛知県についてもデータの一部を入力した。さらに今年度の活動の成果の一部が、尾高煌之助・斉藤修編『日本経済の200年』(日本評論社)として近刊予定であり、また今年度の経営史学会全国大会において共同研究のメンバーが研究報告を行い、次年度の社会経済史学会全国大会においても研究報告を行う予定である。今後の研究課題としては、(1)地方・在来産業と地域産業政策の関連、(2)国民経済・地域産業構造の中での各産業の位置と役割、(3)地域間・企業間競争と企業者活動の関連、(4)工業地帯形成の実態と工業集積を促進する制度的諸条件(教育制度、公的試験・研究機関など)などの諸点の検討が残されている。次年度においても研究会を通して、公刊資料および各自収集した第一次史料に依拠して担当部分に関わる個人報告を積み重ねる一方、先にみた研究課題およびそれまでの研究成果を総合的観点から検討するために年末には関連領域の研究者をも招いて、2泊3日30人程度のワーク・ショップを開催する予定にしている。今年度においても関連データ・資料の発掘につとめるとともに、研究会を開催して個別報告を積み重ねた。また12月25-28日には技術史・政治史・経済地理学などの専門家の参加も得て、「日本における産業発展と地域経済-阪神工業地帯を中心に-」をテーマにワークショップを開催した(参加者24名)。

ワークショップでは宮本・阿部が明治期に資産家のデータベース分析、猪木が工場労働構成、沢井が大阪の明治期の機械工業、尾高が工場制度の成立と労働問題、山本が貿易・金融問題、斎藤が人口、天野が4大工業地帯における産業構成、谷本が埼玉県入間地方の織物業、広田が阪神工業地帯における日用品流通についてそれぞれ報告を行い、とくに(1)工業地帯の成立条件、(2)阪神工業地帯の特質、(3)問屋制度と工場制度の関連、(4)産業発展と環境・インフラストラクチャーの関連などのトピックスをめぐって活発な討論が展開された。さらに今年度の活動の成果の一部が、宮本又郎ほか『日本経営史』(有斐閣、1995年3月)として刊行され、宮本又郎・阿部武司編『経営革新と工業化』(日本経営史2、岩波書店)も近刊予定である。今後の課題としては、(1)地方・在来産業と地域産業政策の関連、(2)地域間・企業間競争と企業者活動の関連、(3)工業地帯形成の実態と工業集積を促進する制度的条件などの論点の検討が残されている。こうした論点を念頭に次年度においても3カ月に1回程度の研究会を通して各自担当部分に関わる個別報告を行い、先のワークショップの成果を踏まえて各自の報告内容を論文化し、成果刊行の準備を進める。そのために必要に応じて打合会を持つ予定である。今年度においても各研究分担者の分担課題に関する調査・分析が続けられたが、とくに第一次資料および公刊資料にもとづいたデータの収集・整理が迫んだ。なかでも工場名簿の分析・資産家名簿(『日本全国商工人名録』など)のデータベース化では相当の迫展が見られた。また平成7年10月14日の研究会では奈良産業大学経済学部専任講師山田雄久氏より「明治後期における肥前陶磁器業の組織化」と題する報告を受けるとともに、研究の取りまとめについて意見交換が行われた。さらに、これまでの研究活動の成果の一部が、西川俊作・尾高煌之助・斉藤修編『日本経済の200年』(日本評論社・平成8年1月)としてに刊行された。また平成8年2月17日の研究会では研究の取りまとめと今後の研究活動について行動が行われた。
癌細胞特異的可溶型VEGFR-3遺伝子導入によるリンパ管新生阻害療法の開発

本研究では、扁平上皮癌細胞の腫瘍抗原であるSCC抗原遺伝子をプロモーターとするSCC抗原作動型遺伝子導入法を開発するとともに、膜貫通領域を欠失し、チロシンリン酸化によるシグナル伝達能を持たない可溶型VEGFR-3を発現・産生させることによりVEGF-VEGFR系を標的としたリンパ管新生阻害療法を開発することを目標としている。そのために我々は、口腔扁平上皮癌細胞株NAおよびHSC4を用いて、これら癌細胞におけるVEGFファミリーの発現状況をRT-PCR法にて解析した。その結果、両細胞株ともにVEGF-CおよびVEGF-Dを発現していた。また、両細胞株ともにVEGFRの発現は認められなかった。一方、癌の浸潤転移成立機構において、癌細胞と間質細胞の相互作用が重要な働きを担っている。VEGFの発現調節機構の上流にはMetが存在し、そのうちc-Metは間質細胞の産生するhepatocyto growthfactor(HGF)のレセプターとして細胞内情報伝達機構を誘導する。そこで、両細胞株のc-Met発現状況をRT-PCR法にて解析したところ、両細胞株ともにc-Metを発現していた。また、我々は生体における腫瘍内部の低酸素環境に応答する転写因子HIF-1αに着目し、ハイポキシア・チャンバー内で培養した口腔扁平上皮癌細胞株がHIF-1αを高発現すること、その下流にあるVEGFおよびc-Metが高発現すること、およびシクロキシゲナーゼ(COX)-2の発現増強を見いだした。c-Metの下流には癌細胞浸潤の中心的役割を担う細胞外基質分解酵素MMP群が存在している。そこで分子標的としてのCOX-2に注目し、COX-2アンチセンス遺伝子導入による癌細胞浸潤能への影響を検討した結果、MMP-2,9およびMT-1MMPに加え、接着蛋白CD44の発現抑制を認めた。現在、SCC抗原作動型遺伝子導入法を用いて、扁平上皮癌による可溶型VEGFR-3産生を目指すとともに、c-Metを標的としたVEGF産生抑制による癌浸潤制御療法を検討中である。そのために我々は、予備実験として口腔扁平上皮癌細胞株NAおよびHSC4を用いて、これら癌細胞におけるVEGFファミリーの発現状況をRT-PCR法にて解析した。VEGFの発現調節機構の上流にはMetが存在し、そのうちc-Metは間質細胞の産生するhepatocyto growthfactor (HGF)のレセプターとして細胞内情報伝達機構を誘導する。現在、SCC抗原作動型遺伝子導入法を開発中であり、扁平上皮癌による可溶型VEGFR-3産生を目指すとともに、c-Metを標的としたVEGF産生抑制による癌浸潤制御療法を検討していく予定である。

本研究では、扁平上皮癌細胞の腫瘍抗原であるSCC抗原遺伝子をプロモーターとするSCC抗原作動型遺伝子導入法を開発するとともに、膜貫通領域を欠失し、チロシンリン酸化によるシグナル伝達能を持たない可溶型VEGFR-3を発現・産生させることによりVEGF-VEGFR系を標的としたリンパ管新生阻害療法を開発することを目標としている。そのために我々は、予備実験として口腔扁平上皮癌細胞株NAおよびHSC4を用いて、これら癌細胞におけるVEGFファミリーの発現状況をRT-PCR法にて解析した。その結果、両細胞株ともにVEGF-CおよびVEGF-Dを発現していた。また、両細胞株ともにVEGFRの発現は認められなかった。一方、癌の浸潤転移成立機構において、癌細胞と間質細胞の相互作用が重要な働きを担っている。VEGFの発現調節機構の上流にはMetが存在し、そのうちc-Metは間質細胞の産生するhepatocyto growthfactor (HGF)のレセプターとして細胞内情報伝達機構を誘導する。そこで、両細胞株のc-Met発現状況をRT-PCR法にて解析したところ、両細胞株ともにc-Metを発現していた。また、我々は生体における腫瘍内部の低酸素環境に応答する転写因子HIF-1αに着目し、ハイポキシア・チャンバー内で培養した口腔扁平上皮癌細胞株がHIF-1αを高発現すること、その下流にあるVEGFおよびc-Metが高発現することを見いだした。現在、SCC抗原作動型遺伝子導入法を用いて、扁平上皮癌による可溶型VEGFR-3産生を目指すとともに、c-Metを標的としたVEGF産生抑制による癌浸潤制御療法を検討中である。
肺癌の血液中マイクロRNA解析による新規バイオマーカー開発

マイクロRNAは、タンパク質をコードしない小さなRNAで、肺癌のバイオマーカーとして有効かを検討する研究である。約900のマイクロRNAを網羅的に解析した。その後、統合解析を行い、特異的なマイクロRNAを検出した。その結果、5種類のマイクロRNAの上昇および5種類の低下を検出した。この結果を基に、血液での検出が可能かどうか、バイオマーカーとしての可能性について検討を開始した。血液中の変異検出率を規定する因子は、腫瘍の体積であった。血液中での腫瘍由来の遺伝子解析では、手術の対象となるような早期の肺癌では、検出が困難であることが示された。マイクロRNAは、早期の症例でも有効か研究を継続中である。組織からのRNAの抽出平成26年度には、組織からのRNAの抽出およびマイクロRNAの検出を行うことを主に予定していた。当院で行われた肺癌手術の患者を対象に外科的治療の際に摘出された組織を病院病理部にてホルマリン固定された病理学的診断に影響のない部分から採取されたものを用いる。腫瘍部および正常部の肺組織パラフィン包埋ホルマリン固定ブロックから、それぞれ4-10μm厚の薄切片を作製し、腫瘍部は2枚、正常部は4枚をチューブに入れて、キシレンを用いて脱パラフィンを行う。次にエタノールを加えて組織を洗浄してキシレンを完全に除去した後、組織を風乾してエタノールを除く。そこに、Proteinase K溶液を加えて加熱することで、組織を消化する。最後に、カラムを用いてRNAを精製する。吸光度測定および電気泳動により、抽出したRNA収量、純度、分解の程度を確認して、実験に使用する。miRNAの検出抽出した全RNAを、Hy5 miRCURY LNAでラベルし、マイクロRNAをHy5 Power labeling kit(Exiqon A/S, )でラベルし、マイクロRNAの発現をマイクロRNA microarray kitを用いて約900のマイクロRNAを網羅的に解析する(3D-Gene, Toray, Kamakura, Japan)。その後、統合解析を行い、各群に特異的なマイクロRNAを検出する。現在のところ、組織でのRNAの抽出を行い、一部の腫瘍でマイクロRNAの検出を開始した。平成27年度には、平成26年度から継続して組織からのマイクロRNAの検出を行うとともに、解析を開始して、臨床情報との関連を解析を開始した。また、血液からのRNAの抽出を開始してマイクロRNAの検出を始めた。インフォームドコンセントの得られている試料提供者に対して行う。採取した血液は、核酸抽出試薬を適量混和し,-80度にして凍結保存する。その後RNAを抽出する.抽出されたRNAはマイクロRNA解析に用いる。血液からは、RNA抽出キットを用いて抽出を行い、微量なRNAの増幅をおこなう。組織からの結果と血液からの結果が一致するか検討を開始したところだが結果が安定せず、改良が必要と考えられた。また、国内外の権威ある学会に発表を行い、情報収集および情報交換を行ったので、その結果をふまえて実験法などの軌道修正を行っていきたい。miRNAの検出では、抽出した全RNAを、Hy5 miRCURY LNAでラベルし、マイクロRNAをHy5 Power labeling kit(Exiqon A/S, )でラベルし、マイクロRNAの発現をマイクロRNA microarray kitを用いて約900のマイクロRNAを網羅的に解析する(3D-Gene, Toray, Kamakura, Japan)。その後、統合解析を行い、各群に特異的なマイクロRNAを検出した。現在のところ、組織でのRNAの抽出を行い、腫瘍組織でのマイクロRNAの検出を行い、結果を得たが、その結果を基に今後は、血液での検出が可能かどうか、バイオマーカーとしての可能性を検討していく。組織でのマイクロRNAの検出は、概ね順調に行えたが、血液での検出が、安定せず、改良を要している。国内外の学会に参加、発表して情報交換をした結果を踏まえて軌道修正して実験を進めていきたい。平成28年度には、平成26年度、平成27年度から継続して組織からのマイクロRNAの検出を行った。miRNAの検出では、抽出した全RNAを、Hy5 miRCURY LNAでラベルし、マイクロRNAをHy5 Power labeling kit(Exiqon A/S, )でラベルし、マイクロRNAの発現をマイクロRNA microarray kitを用いて約900のマイクロRNAを網羅的に解析した(3D-Gene, Toray, Kamakura, Japan)。現在のところ、組織でのRNAの抽出を行い、腫瘍組織でのマイクロRNAの検出を行い、5種類のマイクロRNAの上昇および5種類の低下を検出した。この結果を基に現在は、血液での検出が可能かどうか、バイオマーカーとしての可能性を検討中である。血液からのRNAの抽出を開始してマイクロRNAの検出を始めたが、安定した結果が得られずに改良が必要と思われた。組織からの結果と血液からの結果が一致するか検討を開始したところだが結果が安定せず、軌道修正を行ってきた。組織でのマイクロRNAの検出は、順調に行え、腫瘍組織でのマイクロRNAの検出を行い、5種類のマイクロRNAの上昇および5種類の低下を検出した。血液での検出が、安定せず、進行が遅れている。当大学の分子病理学分野

黒田教授のアドバイスを基に軌道修正を行い、血液での安定した実験結果が得られるように改良している。血液検体の採取も予定よりも遅れている。平成26年度から組織からのマイクロRNAの検出を行った。マイクロRNAの発現をマイクロRNA microarray kitを用いて約900のマイクロRNAを網羅的に解析した(3D-Gene, Toray, Kamakura, Japan)。その後、統合解析を行い、特異的なマイクロRNAを検出した。その結果、組織でのRNAの抽出を行い、腫瘍組織でのマイクロRNAの検出を行い、5種類のマイクロRNAの上昇および5種類の低下を検出した。この結果を基に、血液での検出が可能かどうか、バイオマーカーとしての可能性について検討を開始した。血液中での遺伝子解析として、肺癌のバイオマーカーとして最も確立されているEGFR遺伝子変異を中心に解析を行った。当科で肺癌の診断で手術を行った症例に対して手術標本と術中に採血した血清を用いて遺伝子変異の検出率を比較検討した。IA-IIIA期の手術切除標本とマッチした患者血清150検体を収集し、遺伝子変異を解析した。腫瘍組織において検出された遺伝子変異とその検出頻度は、EGFR (37%), TP53 (39%), KRAS (10%)であった。血清を用いた検討では、EGFR (3/150), TP53 (5/150), PIK3CA (1/150)であった。血液中の変異検出率を規定する臨床病理学的因子を検索した結果、腫瘍の優位に体積が関係しているという結果が得られた。病理病期との相関は得られなかったが、I期の症例では、血液中で検出されなかった。血液中での腫瘍由来の遺伝子解析では、手術の対象となるような早期の肺癌では、検出が困難であることが示された。マイクロRNAでも同様の結果が心配され、比較的進行した症例を含めた解析を開始している。マイクロRNAは、タンパク質をコードしない小さなRNAで、肺癌のバイオマーカーとして有効かを検討する研究である。約900のマイクロRNAを網羅的に解析した。その結果、5種類のマイクロRNAの上昇および5種類の低下を検出した。血液中の変異検出率を規定する因子は、腫瘍の体積であった。マイクロRNAは、早期の症例でも有効か研究を継続中である。実験計画に対して概ね順調に経過している。しかしながら、マイクロRNAの測定が予定よりも遅れており、比較的高額であるマイクロRNAのプレートの使用を次年度に予定している。このような経緯により、次年度は予定よりも支出が多くなる予定である。
アルブミン合成遺伝子の一塩基多型と持久性トレーニング効果の個体差

アルブミン合成遺伝子に存在する3つの一塩基多型(SNPs)の違いによって、トレーニング前の血漿量、血漿総蛋白濃度、血漿総蛋白量が有意に異なること、また、血漿蛋白濃度のトレーニングによる変化量が異なる傾向にあることを明らかにした。さらに、運動負荷に対する血漿量および血漿アルブミン量の増加反応性を検討し、それらに認められる大きな個人差にはアルブミン合成遺伝子SNPsが影響すると考えられることを示唆した。本研究の目的は、「持久性トレーニングに伴う血漿蛋白質(アルブミン)の増加量、好気的運動能、体温調節能の改善の個体差は、アルブミン合成遺伝子の転写調節領域の一塩基多型(SNPs)の違いに起因する」という実験仮説を検証することである。本年度は、運動トレーニング反応性に及ぼす候補アルブミン合成遺伝子SNPsの特定を行った。若年者18名について、実験の内容および意義を文書および口頭で十分に説明し、実験参加の同意を得た。被検者に連続5日間の持久性トレーニング(自転車エルゴメータ、最大酸素摂取量の70%強度、30分/日、気温30°C、相対湿度50%)を行わせ、その前後に、血漿量(エバンスブルー色素希釈法)、血漿総蛋白質およびアルブミン濃度(比色法)を測定した。血漿総蛋白質およびアルブミン量は、血漿量に血漿総蛋白質およびアルブミン濃度を乗じて算出した。また、最大酸素摂取量(自転車エルゴメータ多段階漸増負荷法)、暑熱環境下運動時(上記と同様)の体温調節反応(食道温上昇に対する前腕皮膚血管反応[体積変動法]および胸部発汗量[カプセル法])および心拍出量(インドシアニングリーン色素希釈法)を測定した。さらに、トレーニング後に採取した血液(EDTA-2Na)から得られた遺伝子サンプルを用いて、アルブミン合成遺伝子の転写調節領域における3つのSNPsを解析(TaqManプローブ法)した。得られた遺伝子情報は、信州大学医学部医療情報部において匿名化で管理している。その結果、SNPsの出現頻度は、SNPs-A(CC:CT:TT=5:8:5)、SNPs-B(AA:AG:GG=3:10:5)、SNPs-C(AA:AG:GG=4:9:5)であった。今後、各種測定結果を匿名化データベースに再連結して解析し、次年度に発表予定である。本年度は、アルブミン合成遺伝子の転写調節領域の一塩基多型(SNPs)が血漿蛋白質の増加量に影響するメカニズムを明らかすることを目指し、急性運動に対する血漿蛋白質量の増加反応性に加え、血漿蛋白質合成速度を測定した。まず、研究機関の変更に伴い、血漿量の測定手技を確立した。若年者5名を被験者とし、エバンスブルー色素希釈法および一酸化炭素再呼吸法を用いて血漿量の測定を行い、両者間に良好な相関関係の認められることを確認した。次に、若年者2名を被験者とし、急性運動に対する血漿蛋白質量の増加反応性、および、血漿蛋白質合成速度の測定を実施した。最大酸素摂取量(VO_<2max>、多段階漸増負荷法)の測定に加え、人工気象室(環境温28°C、相対湿度40%)内での座位安静時に、運動前、運動負荷(72分間、80%VO_<2max>,4分間+20%VO_<2max>,5分間×8回)終了直後、1、2、3、4、5、および、23時間後に採血を行い、血漿量、血漿総蛋白質およびアルブミン濃度(ビューレット法およびBCG法)を測定した。血漿蛋白質合成速度の測定は、蛋白質および糖質(熱量:3.2kcal/kg、蛋白質量:0.18g/kg)を運動直後あるいは2時間後に摂取する2試行を実施し、2試行間の血漿総蛋白質量の差から評価する方法を用いた。その結果、血漿蛋白質量の増加反応性、および、血漿蛋白質合成速度には大きな個人差が認められた。全ての測定を行った被験者が2名であったことから、匿名化の問題により、SNPsの解析およびSNPsが血漿蛋白質量の増加反応性におよぼす影響に関する検討は行わなかった。以上、本年度の研究成果から、一定の運動負荷に対する血漿蛋白質量および血漿蛋白質合成速度の増加反応性に大きな個人差の認められることが明らかになった。これらの成果は、体力向上のための効果的な運動指導方法確立のために重要な基礎データとなる。
流体中を走行する弾性体の非接触振動抑制

本申請では、水中を電磁推進力によって高速走行するモノレール等の車両の振動制御や、連続亜鉛めっき処理工程における亜鉛の安定な蒸着を実現するための鋼板の非接触振動制御等の、制御手法の基礎資料を作成することを目的とした。従来、電磁力技術は電気軸受や磁気浮上車両等のような大気中や宇宙空間での応用が主であった。したがって。水のような流体中で振動する弾性体の非接触制振技術を確立することは重要な課題である。水中を走行する車両の振動制御を想定した場合、特に非対象モードを生じる原因となるコリオリ力が流体抗力によってどのような影響を受けるかを、走行速度との関係について考察し、電磁アクチュエータやセンサの最適な配置及び個数を検討する必要がある。一方、めっき処理工程を対象とした場合、めっき槽内にある部分が大きな流体抗力を受けるため、対象物の振動モード形状が流体抗力を受ける部分の深さによって異なることから、これを考慮したモデル化を行い、最適な電磁アクチュエータやセンサの配置を検討する必要がある。本年度は研究発表欄にも記したように、本研究課題の基礎段階である四辺自由端の薄鋼板を非接触支持する制御機構を開発し、その実現性に関して理論的・実験的に確認できた。現在水中を搬送する機構を製作中であり、理論的・実験的に基礎的な検討を行っている。当初の研究目的は本年度中に十分達成できなかったが、現在は次年度以降に十分な成果を得ることが可能な研究段階である。したがって。
電子伝導液体の磁気分光

磁気共鳴分光法は液体中の化学種の微視的状態を知るための極めて有力な手段である。しかし、伝導電子が多量に存在にするような電子伝導性液体では、電磁波が試料に十分浸透できないという表皮効果のためにその適用には限界がある。とくに通常のESR装置は共鳴周波数が高い(135GHz)ため、限られた情報しか得られない。本研究ではESRとNMRの測定を同一周波数(約100MHz)で行い、アルカリ金属ーアンモニア(アミン)溶液を中心とする各種の電子伝導性液体の電子状態の解明を計るものである。このための低磁場ESR装置を自作し、既設のNMR装置との組合わせと調整を行った。低磁場ESR装置としてCW方式を採用し、測定は共鳴磁場195MHz,掃引磁場6376ガウス、磁場変調周波数6kHzで行った。冷却窒素ガスを用いて、170250Kでの測定を可能にした。リチウム金属ーメチルアミン系に対する実験結果は以下にまとめられる。1.金属の単位量当りのESRスペクトルの面積強度は温度の上昇とともに増加し、また金属濃度の増加とともに減少する。2.スペクトルの線幅から見積もられる見掛けの横緩和時間T^*_2は0.1ー0.3μsで、温度および金属濃度の増加とともに増加する。3.スペクトルの線形はリチウムの濃度が23モル%(飽和濃度)に至るまで、良い対称性を示す。第2年度にはさらに装置のパルス化による緩和測定を試みた。装置の特性上スペクトルの線幅は20ミリガウス程度であることが心要であり目下金属ーアンモニア系の試料の調製について検討している。一方、いくつかのカルコゲナイド系液体半導体の電子物性に対するタリウムとビスマスの添加効果に大きな差があることを見出した。今後それぞれの核のNMRおよび伝導電子のESRを調べる予定である。通常のESRの測定が困難な高濃度電子伝導性液体(例えば、アルカリ金属-アンモニア、アミン溶液)について、低磁場のESRを適用するため、補助金の備品費により新しく装置を製作した。すなわち、周波数発生器、RF増幅器、RF受信器、ロックイン増幅器、低周波発信器等を組み上げて、低い周波数に対するESR装置を作成した。今回の観測周波数は200MHzであった。磁場の発生には鉄心磁石を用い備品費で購入した直流安定化電源を使用した。オシロスコ-プ内蔵の掃引発信器を用いて電流を駆動し、10120ガウスの磁場を掃引した。磁場を2kHzおよび5kHzの低周波で変調し、ESR信号を観測した。標準物質である。DPPHについて、十分に良好なスペクトルが得られた。次いで、ESRプロ-プを温度可変が出来るように作製し、-100°C+100°Cまでの温度範囲での測定を可能にした。このプロ-プを用いて、金属リチウムのメチルアミン溶液中の不対電子のESRを観測した。測定温度範囲は-100°Cから-30°Cまで、濃度範囲は金属の飽和濃度(23モル%)に至るまでの濃厚溶液である。信号対雑音の比を向上させるため、パ-ソナルコンピュ-タを用いて、40乃至80回信号を積算した。得られたESRの微分波形を積分し、その面積とg値を決めた。従来のESRにおいては、高金属濃度領域で得られる線形が非対称になるが、今回のESR装置では周波数を下げため、表皮効果が改善され、従来の低金属濃度の実験を拡張し、その測定範囲高濃度領域にまげ拡げることができた。現在、スペクトルの溶液組成と温度に対する依存性を調べ、リチウム-メチルアミン溶液の電子状態と金属-非金属転移について検討を加えている。

通常のESRの測定が困難な高濃度の電子伝導性液体(例えば、アルカリ金属とアンモニア、アミンとの溶液)に対して、低磁場のESRを用いるために、本補助金により100MHz領域のESR装置を製作した。すなわち、RF増幅器、RF受信器、ロックイン増幅器、低周波発信器等を購入し、これを用いて分光器を組み立て、ラジオ波用のESR装置を作製した。磁場の発生には鉄芯磁石を用い、直流安定化電源で駆動した。初年度はオシロスコ-プ内蔵の掃引発信器を用いて、10120ガウスの磁場を掃引したが、本年度はこの磁場を部分的に掃引するように改造し、分解能をほぼ1桁あげることができた。磁場は25kHzの低周波で変調してESR信号を観測した。次いで、ESRブロ-ブを低温度まで可変制御できるように作製し、-100°C+100°Cまでの温度範囲での測定ができるようにした。このプロ-ブを用いて、金属リチウムとメチルアミンの溶液の溶媒和電子のESRスペクトルと温度と、濃度による変化を測定した。得られたESRの微分波形を積分してその面積強度を求め、またスペクトルの半値幅を決めた。半値幅より求めた溶媒和電子の見掛けのTは0.10.3μsの値をとり、温度および濃度の増加とともに増加した。溶液中の金属濃度と観測された電子スピン濃度との相関についても検討を加えた。金属濃度の増加、および温度の低下とのもにスビン対形成の傾向が見られた。これらのアルカリ金属ーアンモニア(アミン)系のESRの測定と並行して、液体半導体中の伝導電子スピンの観測のための準備として、いくつかの系の電子物性の測定を行った。またこれら全ての電子伝導性液体に対してNMRの測定を同時に行うことを今後の最大の課題としている。
電子ラマン散乱分光法を用いた電荷秩序-ディラック相転移の解明

ディラック電子系は応用の観点からも基礎学理の観点からも注目を集めている。電荷秩序を示す有機電荷移動錯体の中に圧力印加下においてディラック電子相を示す物質がある。これらの物質におけるディラック電子状態についてはまだ不明な点が多い。本研究ではラマン散乱分光法を主として赤外、紫外可視反射分光測定などの種々の分光測定を用いることによって電荷秩序物質の低温、圧力下における光学応答を明らかにし、空間分解、時間分解測定と合わせてディラック電子系における電子状態の詳細な理解を目指す。
p21/waf1とテロメラーゼを標的とした癌の遺伝子治療

テロメラーゼアンチセンス発現アデノウイルスを作成後、in vitroにおいてヒト肺癌細胞A549に感染させたところ、容量依存性にmRNAの発現が認められた。しかし、高用量のアデノウイルス感染によってもテロメラーゼ活性の有意な変化が見られず、細胞の増殖曲線にも明らかな変化が見られなかった。これはin vivoにA549細胞を注入して作製した皮下腫瘍モデルでも同様であった。細胞をHeLa細胞や他の肺癌細胞株に替えた場合でも同様の結果で、ウイルスベクターを新たに作製したが、今のところ期待された腫瘍抑制効果は得られていない。P21発現アデノウイルスベクターについては、in vitroにおいて期待された増殖速度の抑制がみられた。しかし、in vivoの皮下腫瘍モデルでは、一時的には腫瘍の進展は抑制するものの腫瘍の一部に遺伝子の移入を免れたものがあると、その細胞分裂によって再度腫瘍が増大する結果となり、最終的な腫瘍の進展速度には有意な変化を及ぼさなかった。P21アンチセンスベクターはin vitroでは細胞の増殖速度には有意な変化を与えなかったが、コロニーの形成能に変化を与える印象があり、様々な細胞株を用いて更に検討を重ねている。ただし、今のところはin vivoにおいて皮下腫瘍の増殖速度を有意に抑制するにはいたって居らず、原因の一つにはアデノウイルスを用いても作製した皮下腫瘍細胞すべてに効率よく遺伝子が導入されないという技術的なハードルが存在するようである。この治療概念の可能性を更に追求する目的でin vitroであらかじめ遺伝子を高濃度のアデノウイルスで導入した腫瘍細胞を実験動物の皮下に注入して腫瘍の作製を行う実験を行っている。P21/waf1の遺伝子を順方向で発現するアデノウイルスベクターを作成する目的で,cytomegalovirus immediate early promoter/enhancerがp21/waf1cDNAを発現するプラスミドベクター(pCMVp21SV2+)を,またp21/waf1をアンチセンス方向で発現するアデノウイルスベクターの作成目的でp21/waf1cDNAを逆方向に挿入したプラスミドベクター(pCMVp21SV2+AS)をそれぞれ作成,精製した。これらのプラスミドを,Microbix社から購入したpJM17(E1/E3領域欠失アデノウイルスゲノムを含んだコスミド)と共に293細胞にリン酸カルシウム法で導入した結果,それぞれp21/waf1を高発現するアデノウイルス(Adp21)とp21/waf1のアンチセンスRNAを発現するAdp21ASを得た。各ウイルスはA549細胞に感染すると高レベルのp21/waf1mRNAとp21/waf1 antiscnse RNAを発現していることが確かめられた。現在,これらのアデノウイルスを感染させた場合の癌細胞株の細胞周期に与える影響を解析中であり,特にAdp21の感染により細胞分裂が停止することが明らかであった。Adp21ASを高いMOIで感染させると細胞のコロニー形成能が変化するようであるが,未だ定量性のある結果には至っていない。抗癌剤や放射線感受性に与える影響については,現在実験系をsetupしている段階にある。また,平行してこれらウイルスのin vivo投与の影響を探る目的で,種々の細胞株の皮下腫瘍モデルを作成,対照群のデータを得ている。また,テロメラーゼを阻害するテロメラーゼアンチセンスRNA発現ベクターについては,アンチセンス発現プラスミドベクターを作成途上にあり,ウイルスベクターの作成の前段階にある。今後,ウイルス作成に進み,Adp21,Adp21ASと同様にin vitro系での評価を行う予定である。
糖尿病ラットおよび実験的歯肉炎ラットの白血球活性酵素産生に関する研究

糖尿病患者は、感染に対する生体防御機能が低下し、歯周疾患に罹患しやすいとの報告が多数見られるが、未だその詳細なメカニズムは明らかにされていない。そこで、このメカニズムの一端を明らかにする目的で、先ず、ストレプトゾトシンで糖尿病を発症させたラットおよび歯肉炎自然発症ラット(Susラット)を用いて、白血球(多形核白血球、単球・Mφ)の細菌能を測定することにより、生体防御機構と糖尿病および歯周疾患との関連性について基礎的検討を加えた。食細胞である多形核白血球やMφは、細菌などの異物が生体内に侵入した場合にその局所に遊走し異物を貧食する。その際、スー3:研究成果報告(欧文付)パーオキシド(O_2^-)や過酸化水素等の活性酸素が産生されることから活性酵素の産生能が殺菌能の指標として用いられている。今回、O_2^-産生能を測定し殺菌能の検討を行った。糖尿病ラットにおいては、多形核白血球およびMφともO_2^-生能は正常ラット(ストレプトゾトシン非投与群)に比べて有意に低下(P<0.050.01)していた。これら白血球O_2^-産生能の低下は白血球における細菌能の低下をとられたものであり糖尿病における易感染性の一因と考えられる。また、Susラットにおいては、Mφの機能(遊走能および細菌能)とplaque indexおよびpocket depthを指標として歯周疾患の進展との関連性についても検討した。それらの相関関係についても明らかにした。その結果、深い歯周ポケットを有するSusラット群ではMφ遊走能およびO_2^-産生能は、浅いポケットを有するSusラット群およびwistarラット群と比べて有意に低下(P<0.050.005)していた。さらに、Susラットの歯肉炎の進展とMφの遊走能およびオプソニン化チモーザン刺激によるO_2^-産生能との間に相関関係(P<0.050.01)が認められた。これらのことから、Susラットにおける歯周疾患の進行にMφの感染防御能の低下が関連のあることが示唆された。歯周疾患のアニマルモデルであるODU-plaque susceptibleラット(Susラット)およびストレプトゾトシンを投与することにより糖尿病を誘発させたラットの腹腔から採取した多形核白血球およびマクロファ-ジを用いて、各ラット白血球の殺菌メカニズムの違いについて、白血球活性酸素産生能を測定して検討した。活性酸素は、ス-パ-オキシド(O_2^-)および過酸化水素(H_2O_2)を測定した。刺激物質として、ホルボ-ルミリステ-トアセテ-ト、オプソニン化チモ-ザンおよびカルシウムイオノフォアA23187を用いた。1.Susラットにおいて、O_2^-およびH_2O_2産生能が、多形核白血球、マクロファ-ジともに対照ラットに比べ低下している傾向が認められた。このことから、Susラットは殺菌能が低下している傾向にあり、歯垢などの局所的因子によってひきおこされる歯周疾患が、より進行しやすい状態にあることが示唆された。2.ストレプトゾトシン糖尿病ラットの作成は、Rakietenらの方法に従い、以下の通り行った。

すなわち、クエン酸緩衝液(pH4.5)に2%濃度に溶解したストレプトゾトシン(65mg/kg体重)をラットに経静脈内投与し、2週間飼育した後、血糖値が250mg/dl以上に達したものを糖尿病ラットとして用いた。ストレプトゾトシン糖尿病ラットの多形核白血球のO_2^-産生能は対照ラットに比して低下していた。糖尿病の患者においては、易感染性との関連において、多形核白血球殺菌能の低下が示唆されているが、その機序として、O_2^-産生能の低下が関与している可能性が示唆された。糖尿病患者は、感染に対する生体防御機能が低下し、歯周疾患に罹患しやすいとの報告が多数見られるが、未だその詳細なメカニズムは明らかにされていない。そこで、このメカニズムの一端を明らかにする目的で、先ず、ストレプトゾトシンで糖尿病を発症させたラットおよび歯肉炎自然発症ラット(Susラット)を用いて、白血球(多形核白血球、単球・Mφ)の殺菌能を測定することにより、生体防御機能と糖尿病および歯周疾患との関連性について基礎的検討を加えた。食細胞である多形核白血球やMφは、細菌などの異物が生体内に侵入した場合にその局所に遊送し異物を貧食する。その際、スーパーオキシド(O_2^-)や過酸化水素等の活性酸素が産生されることから、活性酸素の産生能が殺菌能の指標として用いられている。今回、O_2^-産生能を測定し殺菌能の検討を行った。糖尿病ラットにおいては、多形核白血球およびMφともO_2^-産生能は正常ラット(ストレプトゾトシン非投与群)に比べて有意に低下(p<0.050.01)していた。これら白血球O_2^-産生能の低下は白血球における殺菌能の低下をとらえたものであり糖尿病における易感染症の一因と考えられる。また、Susラットにおいては、Mφの機能(遊走能および殺菌能)とPlaque indexおよびPocket depthを指標として歯周疾患の進展との関連性についても検討した。それらの相関関係についても明らかにした。その結果、深い歯周ポケットを有するSusラット群ではMφ遊走能およびO_2^-産生能は、浅いポケットを有するSusラット群およびWistarラット群と比べて有意に低下(P<0.050.005)していた。さらに、Susラットの歯肉炎の進展とMφの遊走能およびオプソニン化チモーザン刺激によるO^2^-産生能との間に相関関係(P<0.050.01)が認められた。これらのことから、Susラットにおける歯周疾患の進行に感染防御能の低下が関連のあることが示唆された。
インターバル速歩による運動療法が、加齢黄斑変性の治療となる

インターバル速歩による運動療法が、滲出型加齢黄斑変性の治療となることを検証する。インターバル速歩を開始する前の治療間隔と、インターバル速歩を半年以上継続した後の治療間隔を比較する。その他、生活習慣病指標(血圧、血糖値、BMI、中性脂肪またはHDLコレステロール)や筋力、血管内皮機能(血管内皮機能障害は動脈硬化の第一段階である)についても、インターバル速歩の前後で比較し、運動療法の効果を検証する。
藤原道長家の後宮サロンの実態とその文学活動に関する研究

平安時代の後宮は女性作者による多彩で豊かな文学作品を生み出した。その実態を藤原道長の娘である彰子のサロンを中心に考察した。日記、和歌、歴史物語などの文学作品に加え、儀式、仏教などさまざまな角度から検討することで、文学のみならず、政治や経済、宗教などの観点も加えて総合的に捉えることができた。さらに、そのような環境を念頭に置くことで、『源氏物語』などの虚構の作品についても新たな読みが生れることを明らかにした。研究課題に関わる各分野の資料収集と分析に着手し、道長家後宮サロンの実態を細部から復元するための基本となる研究を進めた。1、私家集を中心とした和歌資料の調査私家集を順次調査し、後宮サロンの交流関係という視点から関係記事を洗い出した。その際、詞書等にみえる直接的なやりとりだけでなく、歌語や歌枕の使用など、和歌表現における特徴的な技巧の有無に注目し、集団特有の詠歌基盤の解明にも務めた。2、『源氏物語』とその周辺に関する再検討道長家に仕えた紫式部の『源氏物語』について、権力者の実態や後宮政策を読むという視点から再検討した。3、儀式関係資料の調査『御産部類記』の精査、続いて賀茂祭、五節、朝観行幸、后の行啓関係記事を収集・分析した。必ず女方が関わり、人気も高い儀式・行事なので、資料も多い。女方がこれらの儀式・行事にどう関わったのかを見極めることで、後宮サロンと儀式全般の関係を探るための手がかりを得ることができた。4、仏教関係記事非常に詳しく道長家の仏事関係行事を載せる『栄花物語』の分析を進めた。『栄花物語』にみえる仏教関係記事そのものの検討に加え、いかなる種類の仏典をどのように取り入れているかを見定めることで、道長家の女方と仏教の関係を考えた。以上の調査、研究により、後宮サロンを文学のみならず、政治、経済、宗教といった観点からも分析し、総合的に捉えるという、本研究の目的を達するための基盤を築くことができた。20年度の研究(1私家集を中心とした和歌資料の収集、2『源氏物語』とその周辺の再検討、3儀式関係資料の収集、4『栄花物語』中の仏教関係記事の分析)を続行するとともに、5女性の出家に関する諸問題を検討し、後宮サロンの時期的変遷を追うこと、6道長の建立した法成寺と女性との関わり、7道長死後のサロンのあり方について、資料収集と分析・研究を行った。5については、道長の妻倫子と長女彰子の出家に関する資料を収集し、サロンに集う女性達の出家に対する思い、女主人の出家の前後でのサロンのあり方の違いをみることで、サロンという集団における仏教思想のあり方を考察した。また、サロンがその主人の人生史にともない求めるものが変わっていくこと、すなわちサロンを、構成員と同じように成長し、老いていくものとして捉えていく方法を探った。6は、法成寺が当時のあらゆる仏教信仰を、現世においてかたちにした寺院であることを確認し、さらに、その西北と東北の角に、倫子と彰子が堂を建立した意義を考察した。それは、後宮サロンの価値観や、摂関期における女性達の位置を示すものであることを明らかにした。7に関しては、歴史物語、歌合関係資料に加え、『小右記』『左経記』『春記』等の漢文日記を調査した。道長死後のサロンは、道長時代の後宮文化の継続に加え、彰子を中心により自由で大掛かりな行事の催行により、その存在を主張していくことが明らかになった。上記の調査、研究により、後宮サロンを文学のみならず、政治、経済、宗教といった観点から総合的に捉えることができ、最終年度の課題である文学作品の新たな読み、評価へと研究を進めるための基盤が完成した。前年度までの研究(1私家集を中心とした和歌資料の収集、2『源氏物語』とその周辺の再検討、3儀式関係資料の収集、4『栄花物語』中の仏教関係記事の分析、5女性の出家に関する諸問題を検討し、後宮サロンの時期的変遷を追うこと、6道長の建立した法成寺と女性との関わりの解明、7道長死後のサロンのあり方についての資料収集と分析・研究)を続行するとともに、藤原道長家の後宮サロンの実態を踏まえたうえでの文学作品の新たな読み、評価の可能性を探った。具体的には、道長家に仕えた女房達による作品、日記では『和泉式部日記』『紫式部日記』、家集では『紫式部集』『赤染衛門集』『伊勢大輔集』、さらに『御堂関白集』(藤原道長の家集というよりもむしろ道長家の贈答歌集という性格が強い)などを対象に、新たな読みを試みた。歴史物語に関しては、『栄花物語』続編を中心に研究を進めた。道長死後を扱う続編は、作者も成立年代も巻三十までの正編と異なる。また、ある程度まとまった資料の寄せ集めを主体として出来ているとされる。

今回、彰子サロンの影響を見出すという観点から分析し、そこでの継続的な修史事業が『栄花物語』の資料の中核になっていることを確認できた。『栄花物語』続編は、道長家の女性サロンという恵まれた環境が生み出した最良の華の一つとして位置づけられる。さらに、以上のような実生活に根ざした作品群の読解をもとに、虚構の物語である『源氏物語』の新たな読みもさぐった。さまざまな場合に小さな女房集団の記録が書かれて伝えられていたと考えられ、それらの中には優れた物語作品とも言えるレベルに達していたものもあった。『源氏物語』のいわゆる「歴史性」もそのような資料を念頭において考えるべきだという新しい視点が得られた。