hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
頭蓋顔面先天異常におけるＣＴデータを基にした新しい矯正歯科診断法の開発

その結果、CT画像のDICOMデータの利用可能なフォーマットへの変換、基準平面の設定、定量的計測方法の設定を終了し、先天異常患者の顎顔面頭部3D-CT像を一定の条件のもとに描出し、その形態を三次元的に計測する方法を確立した。その方法を用いて得た先天異常の1つである、hemifacial microsomiaに関する結果の一部は、顎顔面の先天異常に関する国際専門誌(Cleft Palate-Craniofacial Journal)に論文として投稿し受理された。既に電子ジャーナルとしては公開されており、紙媒体の論文は平成24年夏ごろ出版の予定である。この手法の開発により、従来二次元X線画像をもとに行われてきた研究の誤差が著しく小さくなり、研究精度が著しく向上した。一方、CTデータをもとに作成する規格性をもったCTセファロ画像については側面像、正面像の描出が可能となり、従来法でみられた左右の構造物が重なり読影に問題を来す問題を、左右別々の側面像を描出することで解決した。こうした成果は平成23年10月に名古屋で開催された日本矯正歯科学会大会において発表した。さらに、平成24年度に行う「III.CTセファロと従来型セファロ画像の比較解析」にむけ準備を進め、CTセファロを用いた先天異常患者の平均顎顔面骨格像の描出法の開発、パノラマX線写真像に準拠した歯列描出法の開発に着手した。現在、ソフトウエアの開発を進めている。平成26年度は前年度の「IV.疾患別の顎顔面形態の解析」をされに進め、また「V.成長、治療に伴う変化の検討」をおこなった。開発したソフトウェアを用いて、先天異常患者における疾患別平均側面頭部X線規格写真トレース像の評価を行った。「IV.疾患別の顎顔面形態の解析」については、前年度に検討した症例に加えて、以下のように症例数を増やした検討群を設定し、前年度に確立した方法を用いて疾患別の顎顔面形態の特徴を解析した。1)頭蓋骨縫合早期癒合症:10症例、2)第一第二鰓弓症候群:10症例、3)Treacher Collins症候群:5症例、口唇口蓋裂:10症例、4)顎変形症(顔面非対称):10症例、顎変形症(下顎前突):10症例。本法により作成した先天異常患者の平均側面トレース像は、各疾患の特徴や成長による変化、各種治療の平均的治療結果の把握に有用と思われた。さらに上記の症例のうち、成長前後、歯科矯正治療や外科的矯正治療前後のデータの得られるものについてその変化を解析を行った結果、本法により作成した先天異常患者の平均側面トレース像は、各疾患の特徴や成長による変化、各種治療の平均的治療結果の把握に有用と思われた。今後症例数を増やして検討を行う必要がある。矯正歯科学申請した平成24年度の研究実施計画である「I.」については具体的な描出・計測方法が確立し、既に一部の成果を公開した。また、「II.」についても描出方法が確立され、開発した方法に関する学会発表を行った。さらに平成24(25?)年度に行う予定である「III. CTセファロと従来型セファロ画像の比較解析」、「IV.疾患別の顎顔面形態の解析」に着手しており、研究は概ね順調に進展している。申請した研究実施計画である「IIII」の課題については具体的な描出・計測方法が確立し、既に一部の成果を公開している。さらに本年度は、IV.疾患別の顎顔面形態の解析をおこない、ソフトウェアの開発を進めた。現在までに開発しているソフトウエアは不十分な点がみられたため、ソフトウエアの開発を修正を進めることとし、バージョンアップを行っていく。
GATA3遺伝子導入トランスジェニックマウスを用いた気管支喘息モデルの樹立

卵白アルブミン認識T細胞レセプター遺伝子導入トランスジェニックマウス(TCR-Tg)をバックグランドとしたGATA-3遺伝子導入ダブルトランスジェニックマウス(GATA3/TCRーTg)に高率良いOVA特異的気管支喘息誘導とその誘導へのGATA3の関与を明らかにすることを検討した。I.その結果、(1)気管支洗浄液(BALF)中のTh2型サイトカインIL-5及びIL-13の上昇と好酸球の著明な浸潤とそれらサイトカイン産生に伴った好酸球数増加やEPO活性の上昇が有意に高まっていた。(2)気管支周囲へのリンパ球及び好酸球の浸潤、基底膜の肥厚及び上皮の粘液産生の亢進が著明に認められた。(3)アセチルコリンに対する気道過敏性は約3倍、高まっていた。II.OVA点鼻(OVA(20mg/マウス)毎日点鼻投与で一週間)による気管支喘息誘導を試み同様に検討した。その結果、どちらのマウス(GATA3/TCRおよびWT/TCR)に於いても血清中の総及びOVA特異的IgE抗体量は十分に上昇をしていないにも関わらず、BALF中のTh2サイトカインの産生の亢進と気道過敏性がGATA-3/TCR-Tgで有意に高まっていた。これまでの誘導系の結果と異なりIL-4産生も高まっていることが示された(定量的PCR法にて)。これらの事実から、GATA3遺伝子導入トランスジェニックマウスが気管支喘息モデルとして有用であることが示唆され、当研究期問内に於いて当初の研究目的が達成された。また、本年度研究期間内において他アレルギー疾患モデル(接触皮膚炎及び食物アレルギー)および寄生虫感染防御に対するGATA3の役割についても検討を加え、それらモデルの樹立と役割についても明らかすることが出来た。Ig-Enhanceで制御されたSRαとlck disalをプロモーターにしたmGATA3遺伝子導入トランスジェニックマウス2系統を作製した。我々はGATA-3転写因子遺伝子導入マウス(SRα-GATA-3,lck-GATA-3-Tg)とトリ卵白アルブミン認識T細胞レセプター遺伝子導入トランスジェニックマウス(OVA-Tg)との交配によりGATA-3-/OVAもしくはGATA-3+/OVA-Tgマウスを作出し、OVAとAlumで免疫後、in vitroでOVA再刺激したGATA-3+/OVA-Tgの培養上清中にIL-5とIL-13の高い産生を認めた。この際IL-4及びIFN-γ産生には何ら差は認められなかった。従って、このダブルトランスジェニックを用いてOVAを抗原とした気管支喘息モデルの樹立が可能かを検討した。その結果、OVA免疫・吸入感作にて、GATA-3+/OVA-Tgマウス肺洗浄液(BALF)中のEosonophil Peroxidase活性(8倍)、好酸球数(2倍)、IL-5およびIL-13の産生量については約2倍高かった。また、血清中の総IgE(20倍)やOVA特異的IgE量(5倍)においてもGATA-3-/OVA-Tgマウスのそれらと比べて著明に高いことが明らかになった。病理組織学的検索にて、気管支周囲のリンパ球浸潤・基底膜の肥厚・粘液産生細胞の増加がGATA-3+/OVA-TgマウスにGATA-3-/OVA-Tgマウスより顕著に認められた。以上の結果から、我々が作製したGATA-3トランスジェニックマウスは気管支喘息モデル動物として有用であることが示唆された。I.卵白アルブミン認識

T細胞レセプター遺伝子導入トランスジェニックマウス(TCR-Tg)をバックグランドとしたGATA-3遺伝子導入ダブルトランスジェニックマウス(GATA-3/TCR-Tg)が気管支喘息モデル動物として有用であるかを免疫学的及び病理学的観点から検討し、これまでにGATA-3遺伝子が導入されないマウス(WT/TCR-Tg)に比して(1)気管支洗浄液中のTh2型サイトカインIL-4,IL-5及びIL-13のサイトカインの上昇と好酸球の浸潤が認められ、GATA-3/TCR-Tgマウスに於いては、IL-5とIL-13産生及び好酸球数に有意差が認められた。(2)また、病理組織学的に気管支周囲へのリンパ球及び好酸球の強い浸潤、気管支基底膜の肥厚及び気管支上皮の粘液産生の亢進がGATA-3/TCR-Tgマウスに著明に認められた。(3)本年度の研究計画のアセチルコリンに対する気道過敏性について検討したところ、GATA-3/TCR-Tgマウスに於いて約3倍、WT/TCR-Tgマウスに比して過敏性が高まっていることが明らかになった。II.OVAペプチドの点鼻を用いた気管支喘息モデルの誘導を試みたが、現在までに両マウス群に於いて明らかな病態を形成するには至らなかった。血清中のOVA特異的IgE抗体量は十分に上昇をしているにも関わらず、チャレンジに用いるペプチドの量が適切でないために誘導できないことが考えられた。これらのことから、OVA免疫/OVA点鼻による誘導を試み、有効なペプチドの量を推定する。III.これら実験と同時にOVA非免疫/OVA点鼻のみによる気管支喘息モデルの誘導を試み、OVA(20mg/マウス)毎日点鼻投与で一週間後に著明な喘息様症状認めるに至った。気道過敏性、粘液産生及びサイトカインに付いてもGATA-3/TCR-Tgで有意に高まっていた。サイトカインについては、これまでの誘導系の結果とは異なりIL-4をも高まっていることが示された(定量的PCR法にて)。しかし、これまで誘導系によっての結果に比して反応は弱い。これらの事実から、GATA-3転写因子の要求性が生体内での免疫バランスによって異なっている可能性が示唆された。卵白アルブミン認識T細胞レセプター遺伝子導入トランスジェニックマウス(TCR-Tg)をバックグランドとしたGATA-3遺伝子導入ダブルトランスジェニックマウス(GATA3/TCR-Tg)に高率良いOVA特異的気管支喘息誘導とその誘導へのGATA3の関与を明らかにすることを検討した。I.その結果、(1)気管支洗浄液(BALF)中のTh2型サイトカインIL-5及びIL-13の上昇と好酸球の著明な浸潤とそれらサイトカイン産生に伴った好酸球数増加やEPO活性の上昇が有意に高まっていた。(2)気管支周囲へのリンパ球及び好酸球の浸潤、基底膜の肥厚及び上皮の粘液産生の亢進が著明に認められた。(3)アセチルコリンに対する気道過敏性は約3倍、高まっていた。II.OVA点鼻(OVA(20mg/マウス)毎日点鼻投与で一週間)による気管支喘息誘導を試み同様に検討した。
幹細胞由来エクソソームによる組織再生メカニズムの解明

エクソソームは、タンパク質、脂質ならびにmRNA, miRNAを含有する細胞より分泌される膜小胞であり、近年、幹細胞からもエクソソームが分泌されることが報告された。しかしながら、組織再生におけるエクソソームの役割は十分に理解されていない。我々は、間葉系幹細胞(MSC)由来エクソソーム(MSC-exo)が線維芽細胞に取り込まれ、細胞分化を促進すること、MSC培養上清による歯周組織再生効果がエクソソーム除去により現弱することを発見した。本研究成果は、MSC-exoにも組織再生効果が期待され、細胞移植を伴わない簡便で安全な組織再生法の確立の可能性を示す重要な知見であると思われる。現在、組織工学に基づき、幹細胞を用いた組織再生が試みられている。最近、移植された幹細胞自体が分化し標的組織を形成するのではなく、幹細胞が産生するパラクライン因子が創傷治癒を促すと考えられるようになってきている。しかしながらそのメカニズムは明らかでない。近年、細胞外小胞(ECV)は、血液などの体液や幹細胞の培養上清中にも存在が確認され、細胞間でタンパク質、mRNA、microRNA(miRNA)など多様な分子を同時に運搬するキャリアとしてその生物学的重要性が示唆されている。本研究は、ECVを介した幹細胞による創傷治癒促進のメカニズムを研究し、細胞移植を伴わない安全、低侵襲、低コスト、簡便な歯周組織再生法の確立を目指すことを目的として研究を行った。平成24年度には、間葉系幹細胞の培養上清から超遠心法を用いてECVを回収、確認を行った。ラット歯周組織欠損モデルにおいて幹細胞培養上清が治癒を促進すること、この効果が培養上清よりECVを除くとほぼ失われることを確認した。平成25年度には、幹細胞ECVによる創傷治癒促進効果のメカニズムを検討した。具体的には、1.ECVの幹細胞内での局在とECVの標的細胞への取込みをタイムラプスにて確認した。2.線維芽細胞における遺伝子発現と細胞の分化能の変化を確認した。3.血管内皮細胞に対する増殖、遊走、チューブ形成の促進を確認した。しかしながら、当初計画していたECVが内包するmiRNAの解析が進んでおらず今後の研究が必要である。以上の結果より、幹細胞より放出されたECVは、標的細胞に取り込まれることで細胞の分化や機能に影響を与えることが明らかになった。現在、幹細胞移植による再生医療が注目を集めているが、一方で移植した幹細胞の腫瘍化の危険が問題になっている。本研究成果は、幹細胞移植を伴わない安全な再生治療の開発に寄与すると考えている。本研究は、エクソソームを介した幹細胞による創傷治癒促進のメカニズムを研究し、細胞移植を伴わない安全、低侵襲、低コスト、簡便な歯周組織再生法の確立を目指すことを目的とした。平成24年度は、1エクソソーム単離法の確立、2エクソソーム投与による歯周組織再生効果の解析を、平成25年度にはエクソソームの細胞形質変化に対する効果検討、エクソソームの成分解析を計画した。間葉系幹細胞(MSC)より超遠心法を用いてエクソソームを単離、各種試験よりエクソソームであることを確認した。実験的歯周組織欠損の治癒をMSC培養上清が促進することを明らかにし、エクソソームを除いたMSC培養上清の効果を現在検討中である。また、MSC由来エクソソームが標的細胞に短時間で取り込まれ、標的細胞における特定の遺伝子発現を上昇させることを明らかにした。同時に、エクソソーム内にはこの遺伝子の発現がないことから、エクソソームによる直接的なmRNAの伝達ではないことを確認している。エクソソームは種々の細胞より産生され、タンパク質やmRNA, microRNAなど細胞の機能調節に関与する様々な因子を内包し、細胞間における新たな情報伝達手段として近年、その重要な役割が明らかになりつつある。間葉系幹細胞移植による創傷治癒促進効果が報告されて久しいが、創傷治癒促進のメカニズムは未だ十分に理解されていない。我々は、間葉系幹細胞からもエクソソームが産生されること、これが標的細胞に新たな機能を付与する可能性を明らかにした。我々の研究成果により、エクソソームにも創傷治癒に対する効果が期待され、細胞移植を伴わない組織再生法の確立に向けた重要な知見を得ることができた。研究室では既に種々の組織に由来する間葉系幹細胞の単離と、歯周組織欠損、虚血性疾患、骨欠損、皮膚欠損、脳および肺の創傷モデルを作製し、間葉系幹細胞移植とその評価法を確立している。エクソソームの単離と電子顕微鏡、動的光散乱法、ウェスタンブロッティング法による同定、定量のための手技が予想より早期に確立できた。

ただし歯周組織欠損を用いたエクソソームによる創傷治癒促進効果の検討に関しては、エクソソームの投与による直接的評価ではなく、エクソソームを除いた間葉系幹細胞培養上清を用いた間接的手法によるものであり、今後直接的評価法についても検討する。以上の経過から研究計画はおおむね順調に進行していると考えられる。平成2年度の研究によって間葉系幹細胞からのエクソソームの単離、同定、定量法が確立でき、このエクソソームを用いて標的細胞の遺伝子発現に影響することを示すデータが得られた。また歯周組織欠損モデルを用いて間葉系幹細胞培養上清(エクソソーム有無)が創傷治癒を促進するか否かを確認した。平成25年度は、間葉系幹細胞と創傷治癒促進効果をもたない細胞に由来するエクソソームの成分分析(mRNA, microRNA,タンパク質のプロファイル)を行い、治癒促進に関与するエクソソーム内包因子を同定する。加えて、1細胞に前処理のエクソソームの創傷治癒促進効果に対する影響を検討する。2エクソソームの投与経路について検討する。3組織再生効果のより高いエクソソームを確保するために、これまでとは異なる組織に由来する間葉系幹細胞を単離して性状と創傷治癒促進効果を比較検討する。平成25年度においてもエクソソームの細胞と動物実験(創傷モデル)を用いた実験に並行して、エクソソームの成分解析を行う予定である。研究経費の使用については、細胞培養試薬、FACS試薬、免疫染色関連試薬、エクソソームの抽出(超遠心法)、同定(抗体など)、定量に関わる試薬、動物維持・管理、手術関連器材と試薬、エクソソーム成分解析(microRNAアレイなど)に関わる試薬等の消耗品の購入ならびに、データ解析のためのコンピューターの購入が必要である。特許出願後は、本研究成果は学会での発表を予定しており、学会参加に際して必要になる参加費、交通費、滞在費などの捻出を計画している。実験設備については、東京医科歯科大学学内の共用研究施設を最大限に活用し、経費の削減に努める。
酸素・水素電池反応で活性化した酸素による芳香族炭化水素の部分酸化

酸素・水素電池反応を利用し、酸素分子を還元的に活性化して活性酸素を発生させ、ベンゼンを酸化して一段でフェノールに変換することに成功した。本反応システムは、酸素分子を効率よく活性化できるカソードの開発が重要である。フェノール合成に有効な電極の探索を行った結果、熱硝酸で酸化処理を施した各種炭素電極が有効であることを見いだした。反応活性の序列は、カーボンウィスカー≧カーボンブラック>>活性炭>グラファイトであった。この炭素材料に種々の添加物を添加したところ、カーボンウィスカーにパラジウムと酸化鉄を添加した電極、および硫酸銅を添加した電極が高活性であった。特に、後者の電極は0.3Vの電圧を発生させたときにフェノール収量も最大となり、電力/フェノール・コジェネレーションが可能であることが解った。本反応システムをトルエンの部分酸化反応に適用し実施したところ、ベンズアルデヒド、ベンジルアルコール、そして、o,m,p-クレゾールが生成した。生成物の選択性は炭素材料により大きく異なり、カーボンブラックと活性炭はクレゾールの選択性が高く、カーボンウィスカーとグラファイトはベンズアルデヒドの選択性が高かった。隔膜中のリン酸水浴液の濃度を濃くすると、ベンズアルデヒドの選択性が高くなり(95%)、薄くするとクレゾールの選択性が高くなった(90%)。また、カーボンウィスカーと活性炭を物理混合すると、顕著な協奏効果が発現することが解った。両者を1対1で混合すると、反応活性は活性炭単独の場合の6倍、カーボンウィスカー単独の場合の2倍に増加した。これら、ベンゼン、トルエン酸化反応の特異的な反応挙動について検討を行った結果、ヒドロキシラジカルを活性酸素としたフェントン反応類似の機構により反応が進行し、炭素電極表面にある各種官能基の触媒作用により生成物の選択性が決定されることが解った。酸素・水素電池反応を利用して、酸素分子を還元的に活性化して発生させた活性酸素を用いてベンゼンを一段で酸化してフェノールを合成できる反応プロセスの開発を試みた。本反応システムは酸素分子を効率良く活性化できるカソードの開発が重要である。そこで、フェノール合成に有効なカソードの探索を行った。種々の炭素材料(カーボンウイスカー、カーボンブラック、活性炭、グラファイト)を用いてカソードを作製した。いずれのカソードも、活性化処理を施さないと極めて反応活性が低かった。しかし、これらの炭素材料を希硝酸で表面酸化処理を施して活性化すると、フェノール合成反応に対して高い反応活性が発現することを見いだした。活性化処理を施した種々の炭素材料の中で特に、カーボンウイスカーが高活性であった。さらに高活性なカソードを開発するために、様々な添加物(パラジウム、白金、ロジウム、酸化鉄、酸化銅など)を添加し、フェノール合成反応を実施した。その結果、カーボンウィスカーにパラジウム黒と酸化鉄を添加して作製したカソード、およびカーボンウイスカーに銅化合物を添加して作製したカソードが特に反応活性が高く、フェノール生成量が2倍以上に増加した。これらのカソードを用いてフェノール合成反応の最適条件の検討を行った結果、1)フェノール収量、電気量ともに酸素圧に1次で依存し、2)電解質は1モル/リットルのリン酸水溶液が最もフェノール合成に適している事が判った。前述した2種類のカソードの内、前者は0.3ボルト電圧を印加した時に、後者は回路中に抵抗を置いた(0.3ボルトの電圧降下)時に最大フェノール生成速度を与えた。活性酸素種について検討を行ったところ、両カソードともヒドロキシラジカルであることが判った。前年度、酸素水素電池反応を利用して酸素分子を環元的に活性化し、活性酸素を発生させ、ベンゼンを酸化して一段でフェノールに変換することに成功した。

本年度は、この反応系をトルエンの部分酸化反応に適用し、クレゾール、あるいはベンズアルデヒドを選択的に生成する電極および反応条件の検討を行った。ベンゼンの水酸化反応に活性であった各種炭素電極(カーボンウィスカー、カーボンブラック、活性炭、グラファイト)を用いて、トルエンの部分酸化反応を実施したところ、ベンズアルデヒド、ベンジルアルコール、そして、o,m,p-クレゾールが生成した。反応活性の序列は、カーボンブラック≧カーボンウィスカー>>活性炭>グラファイトであった。カーボンブラックと活性炭はクレゾールの選択性が高く、カーボンウィスカーとグラファイトはベンズアルデヒドの選択性が高かった。隔膜中のリン酸水溶液の濃度を濃くすると、ベンズアルデヒドの選択性が高くなり(95%)、薄くするとクレゾールの選択性が高くなった(90%)。また、FeCl_3炭素電極に添加することによりクレゾールの選択性が高くなり、特に活性炭に添加するとクレゾール選択率が97%に向上した。また、カーボンウィスカーと活性炭を物理混合すると顕著な協奏効果が発現することが解った。活性炭に15%のカーボンウィスカーを混合するとクレゾールの選択性を高く保ったまま、反応活性が4倍に増加した。さらに、50%とすると反応活性は活性炭単独の場合の6倍、カーボンウィスカー単独の場合の2倍に増加した。これら、トルエン酸化反応の特異的な反応挙動について検討を行った結果、ヒドロキシラジカルを活性酸素としたフェントン反応類似の機構により反応が進行し、炭素電極表面にある各種官能基の触媒作用により生成物の選択性が決定されることが解った。
香り物質の心理的効果と生理的反応

本研究では鎮静効果及び興奮効果があるといわれている植物性香り物質を中心に、香り物質の心理的効果と生理的反応について調べようとするものである。前年度は、香り物質の心理的な感覚評価及び生理的反応の日内変動について検討し、同じ香り物質であっても、感覚評価及び生理的反応が時間によって異なり日内変動が存在することを明らかにした。本年度は香り物質の濃度の違いが、心理的な感覚評価及び生理的反応に及ぼす影響について検討した。6人の健康な女子大生を被験者とし、3種類のにおい物質(タイワンヒノキ材精油、オレンジ果皮油、オイゲノール)を用い、吸入濃度を3段階(弱いにおい、楽に感じるにおい、強く感じるにおい)に分けて実験を行った。感覚評価についてはSD評価データを因子分析した結果、快適感、刺激感、田園感の3因子が抽出された。快適感に関しては、オレンジは3濃度とも快適であると評価されたが、その程度は弱いにおいにおいて最も強かった。またオイゲノールは濃度の増加とともに、直線的に不快感が増加した。このようににおい物質の濃度によって、受ける印象は異なることが分かった。生理的反応については瞳孔光反射、心電図R-R間隔、R-R間隔変動係数、脳波、血圧を測定し検討した。その結果、オレンジ果皮油の吸入は瞳孔の縮瞳面積及び縮瞳最大加速度を減少させ、副交感神経系優位なリラックス状態を作り出した。オイゲノールは縮瞳最大加速度、心拍数を増加させ、R-R間隔、α波の出現率を減少させ、交感神経系優位なストレス状態を作り出した。このようににおい物質の吸入は生理的応答に有意な変化を及ぼすこと、同じにおい物質においても、そのにおいの変化は濃度によって異なることが分かった。香り物質は人の気分を変えたり、ストレスの解消に利用できることが古くから知られている。本研究では鎮静効果及び興奮効果があるといわれている植物性香り物質を中心に、香り物質の心理的効果と生理的反応の関係を調べようとするものである。この場合、香り物質が生体に及ぼす影響には日内変動のあることが予想される。本年度は香り物質の生体影響について、一日のうちでどのように変動するのかを明らかにするため、心理的な感覚評価と生理的反応の面から実験を行ない考慮した。心理的な感覚評価については、11種類の香り物質(8種類の精油及び精油成分、3種類の調味料・嗜好品)を用いて、朝の6時から夜の21時まで3時間ごとに、8人の健康な女子大生を被験者としてSD法による評価実験を行なった。その結果、全時間帯を統計した群において、快適感・陽気感・活発感・自熱感の4因子が因子分析により抽出された。また、オレンジ精油は最も快適で陽気であると感じられており、ヒバ材油は活発感が弱く感じられており、自然感が強く感じられていた。これらの物質の感覚評価は日内変動を有しており、9時から18時の活動期では早朝や夜に比べ香り物質を多元的に評価していることが明らかになった(この結果は第25回味と匂いのシンポジウムで発表)。生理的反応については、3種類の香り物質(オレンジ精油、オイゲノ-ル、ヒバ材油)を用いて、6時、12時、18時に6人の健康な女子大生を被験者として、瞳孔光反射、心電図のRーR間隔、指尖脈波などの測定を行なった。その結果、オレンジ精油の吸入は副交感神経活動を高め生体を生理的にリラックスさせるのに対し、オイゲノ-ルの吸入はストレス状態を引き起こすことが示唆され、これらの反応には日内変動があることが明らかになった。
代数曲線の巡回拡大の変形について

正標数中の体上定義された完備滑らかな代数曲線Cとその自己同型写像σを標数零の体上の曲線とその自己同型写像に引き上げることが我々のこの研究課題における最終目標であった。この問題に取り組む基本的戦略は、類体論を用いるものであり、一般化されたヤコビ多様体の変形理論、そのヤコビ多様体の変形と代数曲線の巡回拡大の変形との関係についての基本的手法は初年度昭和62年度迄に解決を得られ、この手法を用いて自己同型写像σの位数がpのときの我々の問題の肯定的解決をみている。その際、重要な考え方は、Artin-Schreier理論からKummer理論への変形であり、加法群から乗法群への変形の構成であった。従って、σの位数がP^n(n≧2)の場合の議論を行う為には、Witt群Wnのト-ラス(Gm)^nへの変形理論を構成することであり、昭和62、63年度においてW_2から(Gm)^2への変形を完全に決定した。平成元年度において、Artin局所環上の群スキ-ムの拡大を取り扱い、基本的な消滅定理を発見し、Artin局所環上の拡大の決定を行なった。更に、このArtin局所環上の議論を用いて、一般のnについて、離散付値環上のWitt群Wnのト-ラス(Gm)^nへの変形を計算し、Artin-Schreier-Witt完全系列の、Kummer型完全系列への変形の構成に成功した。一方で、これら統一された完全系列が実際に、Artin-Schreier-Witt理論とKummer理論の統一を与えるものであるかどうかの議論を行い、n=1、2の場合に肯定的結果が得られた。これからの課題としては、この統一理論が一般のnで成り立つことを示し、これら結果の代数曲線の拡大への応用である。これらは我々の今年度迄の研究計画の内容内であったものであるが、残念乍ら、以後の研究課題として残さざるを得なかったものである。正標数Pの体上与えられた代数曲線のpn次巡回拡大の標数零への変形を構成することが最終目標であり,当該年度の目標は,その為に, Witt群のトーラスへの変形を完全に制御し,その結果を用いてWitt-Artin-Schreierの完全系列をKummerの完全系列への変形を構成することであった.2次元のWitt群W2のトーラスGm2への変形は完全に記述することが既に出来ており,更にこれをNeron blow-upを用いてその構造を再記述することに成功した.また,代数曲線を扱う場合, 1次元のsmoothな群スキームの幾つかの拡張として得られるものであるが,しかし一般のsmoothなWitt群の変形は, smoothな低次元の群スキームの拡張では得られないことが, Neron blow-upを用いて示すことが出来た.高次元の場合のWitt群の変形については,原理的な計算方法が発見され,その具体的な処理技術の実験に成功しつつある処である.この計算方法は, Witt群の2つの変形の拡張を具体的に計算するものであり,正標数における解析的な問題に帰着され,組合せ論理問題となっている.今後の課題としては,この組合せ論的問題を解決すること,またこの組合せ論的問題の, Neron blow-upの方向からの解釈を行うことにある.この後者については,今年度の結果であるW2の変形の記述が道標となる筈である.

更に,一方で〓のPn次巡回拡大の標数零への具体的例を構成し,この例のWitt-artin-Schreier理論からKummer理論への変形の立場からの解釈を与え,一般ヤコビ多様体の変形を通して一般の場合の変形を構成することが更なる課題である.正標数pの体上与えられた代数曲線のp^n次巡回拡大の標数零への変形を構成することがこの研究の最終目標であり、その為の我々の計画のプログラムは、(1)Witt群W_nのトーラスへの変形の制御、またそれを用いたWitt-Artin-Schreier完全系列のKummer型完全系列への変形の構成。(2)(1)の結果を用いて、P^1のp^n次巡回拡大の変形の構成。(3)一般のp^n次巡回拡大の変形の構成。であった。昨年度(昭和62年度)においては、W_2のトーラスへの変形の完全な記述に成功し、今年度において一般のW_nのトーラスへの標準的な変形を構成することが第1の目的であった。今年度の最大の成果は、W_nの変形を構成する為の障碑が、Artin局所環上の或る種の拡大の消滅により解決されることがわかったことであり、更に、その見方を用いて、Artin-Hasseのexponentialの変形の構成に関する見通しが得られたことである。実際、この考え方を用いた実験では、n=3,4について標準的なWitt群のトーラスへの変形の得られることが示されている。今年度の第2の成果は、我々の構成した標準的なW_2のトーラスへの変形を用いて、実際に、分岐がマイルドな場合にP^1のp^2次巡回拡大の変形を構成することが出来たことである。平成元年度の当面の課題は、上記Artin局所環上のある種の拡大の消滅定理の成果を論文にまとめること。Artin-Hasse exponentialの変形の完成、またそれを用いて、W_nの標準的なトーラスへの変形を構成することにある。正標数pの体上定義された完備滑らかな代数曲線cとその自己同型写像σを標数零の体上の曲線とその自己同型写像に引き上げることが我々のこの研究課題における最終目標であった。この問題に取り組む基本的戦略は、類体論を用いるものであり、一般化されたヤコビ多様体の変形理論、そのヤコビ多様体の変形と代数曲線の巡回拡大の変形との関係についての基本的手法は既に得られており、この手法を用いて自己同型写像σの位数がpのときの我々の問題の肯定的解決をみている。その際、重金な考え方はArtin-Schreier理論からKummer理論への変形であり、加法群から乗法群への変形の構成であった。従って、σの位数がp^n(n≧2)の場合の考察を行う為には、Witt群W_nのト-ラス(G_m)^nへの変形理論を構成することであり、n=2については完全に決定することが出来た。更に、一般のnについては、artin局所環上の群スキ-ムの拡大を取り扱い、基本的な消減定理を発見し、artin局所環上の群スキ-ムの拡大の決定に成功した。このartin局所環上の議論を用いて、離散付値環上のWitt群Winのト-ラス((G_m)^nへの変形を計算し、Artin-Schreier-witt完全系列の、Kummer型完全系列への変形の構成に成功した。一方で、これら統一された完全系列が実際の、Artin-Schreier-Witt理論とKummer理論の統一を与えるものであるかどうかの議論を行い、n=1,2の場合に肯定的結果が得られた。これからの課題としては、この統一理論が一般のnで成り立つことを示し、これら結果の代数曲線の拡大への応用である。
人工股関節置換術を受けた患者の日常生活サポートシステムの開発

本研究の目的は、全人工股関節置換術を受けた患者の日常生活をサポートするための在宅で使用できるシステムの開発とシステム評価を行うことである。1全人工股関節置換術を受けた患者の日常生活における困難と必要とする医療情報についての面接調査を実施し、突発的な危険を回避することに不慣れであることが困難であること、個々に見合った情報ではないこと、退院後は必要時に得られないことが明らかとなった。21を踏まえシステムを構築し、システム評価を実施したところ、「役立ち感」と「見やすさ」が他の評価軸より低いという結果であったため、今後は、システムの内容について再検討を行うことが必要であることがわかった。平成25年度は、平成24年度に実施した人工股関節置換術を受けた患者の日常生活上の困難と必要とする情報についての内容分析の結果に基づいて、システム構築のための対処方法の検討及び日常生活情報データベースを構築した。患者は、日常生活の送り方、生活動作、危険回避、回復支援といった情報を必要としていたため、データベースは「日常生活の過ごし方」「転倒予防」「感染の予防法・対処法」「リハビリテーションについて」「社会資源」「ご家族の方へのお願い」を大項目とした。そして、それぞれの項目に見合った患者が必要とする情報を分類した。それぞれの情報は、画像や動画を用いることで視覚的アプローチができるように作成した。次に、作成したデータベースを元にWeb上で閲覧可能な情報提供システムを構築した。パソコンだけでなく、タブレット端末やスマートフォンなど、様々な種類の機器や画面サイズに単一のファイルで対応できるよう、レスポンシブWebデザインを用いて作成した。日常生活情報の閲覧は、上記データベースにある大項目をクリックすると、関連した小項目が表示され、小項目をクリックすることによって情報が表示されるようになっている。最終年度に向けた課題として、管理者サイトの作成、十分なセキュリティー対策、患者ー医療者間や患者ー患者間の双方向コミュニケーションについての検討などが必要と考える。それらを検討した上でシステム評価を実施する予定である。THAを受けた患者が日常生活を送る上で困難と感じている事柄と、提供された情報・必要とする医療情報を身体的、心理・社会的側面から総合的に検討するため、THAを受けて外来通院している患者20名を対象とし、研究者が作成した半構成的質問紙に基づいた面接調査を実施した。面接調査で得られたデータを内容分析した結果、日常生活を送る上での困難は、【日常生活動作の制限を一生続けていかなければならない】【無意識の動作に伴う危険を回避しづらい】【生活動作の拡大に向けた調整がしづらい】の3つのカテゴリに分類された。提供された医療情報は、【脱臼の防止】【危険の回避】【荷重を避ける】【日常生活動作】【回復支援】の5つのカテゴリに分類された。さらに、必要とする医療情報は、【日常生活の送り方について詳しく知りたい】【療養に関する情報を必要時に得たい】【一般的な情報でなく、個々に見合った情報が欲しい】の3つのカテゴリに分類された。これらの結果から、THA特有の動作制限に関しての負担感が生じるため、自己で日常生活動作の拡大に向けた調整を実施するが、様々な援助や情報不足が生じるている。また、術前の日常生活と術後の日常生活との違いに慣れていないため、突発的な危険を回避することに不慣れであることが困難であることが明らかとなった。医療情報については、退院前にTHAの合併症を予防するための動作についてリハビリテーションを行ったり、様々な情報が提供されているが、実生活に即していないことが多いことや、退院後は必要時に得られないこと、また個々に見合った情報ではないことがわかった。そのため、在宅においても必要な情報を得ることができる新たな情報提供システムの開発の重要性が示唆された。THAを受けた患者に退院指導を行っている看護師を対象として、作成したTHAを受けた患者に対する日常生活情報提供システムについてのユーザビリティ評価を実施した。【方法】同意の得られた看護師にセルラー版タブレット端末とシステムの使用方法の説明を文書と口頭で説明し、10日間程度タブレット端末を貸し出し、システムを利用してもらった。10日間程度後、ウェブユーザビリティスケール(WUS)を用いてユーザビリティ評価を実施した。【結果】看護師5名が研究に参加し、WUSの結果は以下の通りとなった。「好感度」3.8、「役立ち感」3.1、「信頼性」3.9、「操作のわかりやすさ」4.1、「構成の分かりやすさ」3.9、「見やすさ」3.3、「反応の良さ」4.4。【考察】「役立ち感」と「見やすさ」が他の評価軸より低いという結果であった。「役立ち感」については、提供している内容がニーズに適しているものと適していないものが存在する可能性がある。

そのため、内容について再検討する必要がある。「見やすさ」については、特に動画がピンチアウトをしなければ大きくならないため、低い評価であったと考える。実際のユーザは高齢の方が多いため、できるだけ操作が簡便である必要がある。「反応の良さ」は他の評価軸より高かった。通信状況や操作の熟練度などに関連するが、タブレット端末の画面反応比較で反応速度がもっとも速いものはiPadminiである。今回使用したタブレット端末はiPadminiであったため、タブレットそのものが持つ反応速度も関連していたのではないかと考える。【結論】「役立ち感」と「見やすさ」が他の評価軸より低いという結果であった。今後は内容について再検討を行うことで、有用なシステムとなる可能性があると考える。臨床看護学本年度の目標は情報提供システムのプロトタイプを完成させる予定であったが、管理者サイトの作成やセキュリティー対策が十分とは言えない。達成目標としては、THAを受けた患者の日常生活上の困難と必要とする情報についての内容分析の結果に基づいて、システム構築のための問題を解決するための対処方法の検索の検討及び日常生活情報データベースを作成する予定であった。しかし、データ収集及び内容分析のカテゴリの抽出が遅れてしまったため、データベースの作成は未達成となってしまった。現在、管理者サイトの作成やセキュリティー対策について検討、実行している。早急にシステムを完成させ、ユーザビリティー評価を実施する。現在、データベースの作成にとりかかっているため、早急に完成させ、同時進行でアルゴリズムの検討を実施する。システム評価をタブレット端末で実施する予定である。タブレット端末はWifi+Cellularモデルを使用する予定である。Wifi+Cellularモデルの利用は、Wifiモデル利用より高額であるため、兵庫県立大学大学院応用情報科学研究科の修士の学生に作成をお願いし、プロトタイプ作成費にかかる費用をシステム評価費用に使用できるようにした。また、サーバーは大学の方針で研究であってもレンタルの経費使用は不可であったため、レンタルが出来なかった。以上により差額が生じた。タブレット端末のレンタル料金+解約料金が1年で約120000円×18台=約2160000円その他、出張費や謝礼などに使用する予定である。データベース作成のための文献追加、学会発表のための旅費、サーバレンタル、システムのプロトタイプ作成に研究費使用を計画している。
関節軟骨でのIL1bによるFGFシグナルの細胞死誘導へのスイッチング機構の解明

膝関節骨軟骨損傷への新たな治療法の確立が望まれており、作用機序の解明が必要とされている。骨軟骨損傷は周囲軟骨の変性を起こす機序は分かっていない。本研究の目的はラットでの至適骨軟骨損傷サイズの決定。骨軟骨損傷と周囲軟骨変性の関連を明かすこと。直径0.5 mm, 0.9 mm, 1.4 mm, 2.1 mmの異なるサイズのラット骨軟骨欠損の自然経過では、直径1.4mm以上の欠損ではサフラニンO、Col1 col2の免染の染色性を認めず、骨軟骨欠損の再生は認めなかった。1.4mm群での欠損部のRNAの発現レベルはアグリカン,col2が低下、col1が上昇していた。ラットにおけるクリティカルサイズは1.4mmであった。骨軟骨損傷の周囲軟骨のRNA発現は経時的にAggrecan(ACAN)、Col2にて低下していた。FGF2の発現が上昇していた。欠損部位ならびに周囲軟骨でIL1βのRNAの発現レベルの上昇を認めた。IL1β存在下でのFGF2の軟骨細胞への作用を調べた。IL1β、FGF2添加グループで、多数の細胞死が誘導された。IL1β、FGF2添加グループではRNAの発現はACAN,Col2が低下し、PRG4が上昇を示した。IL1β添加グループではFGFr3の発現が低下しており、FGFr1/FGFr3のバランスに変化を認め、FGFr1の比率が増加していた。続いて、FGF2、FGFr1のダウンストリームターゲットを調べた。Irf1、E2f1はともにIL1β、FGF2添加グループで上昇を認めた。また、この結果は軟骨欠損モデルの周囲軟骨にて免疫染色にて確認された。これらにより、骨軟骨損傷時、損傷部よりIL1βが分泌され、IL1βの作用によりFGFレセプターのタイプがFGFR3からFGFr1となる事によりFGF2の軟骨細胞への作用が変化する事がしめされた。膝軟骨損傷の疼痛は末期変形性膝関節症と同程度である。また膝軟骨損傷は変形性膝関節症へと進行する。しかしながら、膝軟骨損傷において変形性膝関節症への進行を止める有効な治療法はない。そのため新規治療法を必要とし、分子標的手法を用いた治療法が必要である。一方、FGF2は関節軟骨において恒常性に関わる重要な蛋白質である。レセプターFGFr1を介したシグナルと、FGFr3を介したシグナルでは細胞維持に関し異なる作用を示すことが知られており、新規治療法のターゲットとして期待されている。先行研究にて1ラットにおける骨軟骨欠損のクリティカルサイズが1.4mmである事2骨軟骨損傷は周囲軟骨の代謝を変化させる事。そこで本研究の目的はIL1bのダウンストリームシグナルが軟骨細胞内のFGFレセプターの発現に関与する機序を調査、明らかにする。本年度IL1β存在下でのFGF2の軟骨細胞への作用を調べた。IL1β、FGF2を培養液に添加し軟骨細胞への影響を検討した。細胞の形態的評価では、IL1β、FGF2添加グループで、多数の非接着細胞を認め細胞死が誘導された。それらの細胞を用いRNAを調べた。L1β、FGF2添加グループではACAN,Col2が低下し、PRG4が上昇した。IL1β添加グループではFGFr3の発現が低下していた、FGFr1/FGFr3のバランスに変化を認め、FGFr1の比率が増加していた。FGFr1のダウンストリームターゲットを調べた。本研究においては、研究計画の実施において特に問題点は観察されず、順調に推移している。本年度は、第一報目の成果をOsteoarthritis and Cartilage誌に掲載された。

IL1β添加グループではFGFr3の発現が低下しており、FGFr1/FGFr3のバランスに変化を認め、FGFr1の比率が増加していた。続いて、FGF2、FGFr1のダウンストリームターゲットを調べた。Irf1、E2f1はともにIL1β、FGF2添加グループで上昇を認めた。また、この結果は軟骨欠損モデルの周囲軟骨にて免疫染色にて確認された。これらにより、骨軟骨損傷時、損傷部よりIL1βが分泌され、IL1βの作用によりFGFレセプターのタイプがFGFR3からFGFr1となる事によりFGF2の軟骨細胞への作用が変化する事がしめされた。炎症下のFGFr1拮抗薬による軟骨変性抑制効果の検証。FGFr1拮抗薬による軟骨細胞のIL1b,FGF2添加下での恒常性の検討。FGFr1拮抗薬の変形膝関節症モデルにおける変性進行予防の評価と機序の解明を行う。具体的にはFGFr1拮抗薬による軟骨細胞のIL1b,FGF2添加下での細胞死阻止、増殖能回復の検討。軟骨細胞に対しFGFr1の阻害薬Ponatinib、AZD4547などFGFreceptorへの親和性の異なる阻害薬をIL1b、FGF2と供に添加し、正常軟骨細胞、IL1bのみ添加した軟骨細胞と細胞形態、増殖能、FGFレセプターの発現、ダウンストリームターゲットの発現を比較、検討する。軟骨細胞をラット正常膝より分離。正常培養液にて3日間培養後、IL1b(10ng/ml)、FGF2(30ng/ml)を添加する。FGFレセプターへの異なる親和性を有する薬剤を添加し培養。ポジィティブコントロールとして無添加群、ネガティブコントロールとしてIL1bのみ添加群をを作成する。薬剤の効用の評価を3時間後、2日後、5日後に行う。1-2 FGFr1拮抗薬による軟骨変性進行抑制の評価と機序解明。先行実験2で作成した軟骨欠損モデル、前実験の薬剤を注入し、軟骨変性進行抑制効果を評価する。サンプルは1、4、8週に屠殺、収集する。評価方法としては肉眼的評価、組織学的軟骨変性評価としてOARSIscore用い統計学的解析、疼痛評価として行動解析を行う。膝軟骨を摘出RNAを生成し発現をRNA-sequencingにより網羅的に調べ、qPCRにて個別定量的に調べる。前述のFGF2のシグナル伝達経路、ダウンストリームターゲットに加えRNA-sequencingにて変動のあったRNAを評価する。変性進行抑制効果と個別のRNA発現レベルの相関を調べ、機序を検討する。本年度は既存の薬剤を使用する事により節約ができた。次年度多くのqPCR,薬剤の使用、頻回の細胞培養、RNA-sequencing施行、複数の動物モデルを要する計画であり、次年度使用額として上記を要する。
餌料系列操作による仔魚の質的変化とその作用機構

天然域での採集や、実験室内での選抜や交雑を通じて得た各種動物プランクトンを材料とし、それらを餌料生物として5種の海産魚の仔魚に給餌した。その結果、アルテミアより体サイズ範囲が広い汽水産ミジンコの給餌によって、ヒラメ仔魚の成長が向上することがわかった。また、口径の小さいマハタ、メガネモチノウオ、アカハラヤッコや、咽頭径が小さいニホンウナギは、超小型ワムシ類のProales similisを摂餌して消化することが可能であった。このとき、仔魚の成長にともなって、大型で遊泳力の大きい餌料を選択的に摂餌し、これらに基づいた餌料系列の活用によって仔魚の成長と生残が大きく改善され、消化酵素活性から判断した活力も向上することが確認された。P. similisは、市販の栄養強化剤で二次培養することによって、シオミズツボワムシと同様、高度不飽和脂肪酸(EPA, DHA, AA)の栄養強化が可能であり、量産培養も可能であることがわかった。100L水槽内でワムシ類のB.rotundiformis(約150um)とP.similis(約80um)を餌料としたマハタの仔魚飼育を実施した。4日令の仔魚はB.rotundiformisよりP.similisに対して高い摂餌選択性(Chessonの摂餌選択指数は、各々0.3、0.7)を示し、成長に伴いB.rotundiformisへの選択性が上昇した。10日令でのマハタ仔魚の生残率は、P.similis単独給餌では2.7%、B.rotundiformis単独給餌では6.4%であったが、両者の併用給餌によって14.3%に達した。無給餌では7日令までに全ての仔魚が死亡した。B.rotundiformisとP.similisの併用給餌により、仔魚は最も良好な成長と生残を示した。観賞魚のアカハラヤッコでは、2060%の仔魚(46日令)がP.similisを摂餌した。一方、他の小型動物プランクトン(B.rotundiformis、Keratellasp.cf.sinensis、paracyclopina nanaのノープリウス幼生)の給餌では、摂餌が確認された仔魚は020%にとどまった。日令56の仔魚では餌料種間で成長に差はみられなかったが、P.similisを給餌した場合の生残率(18.538.0%)は他の餌料の場合(011.5%)に比べて高くなった。ニホンウナギの仔魚の口径は520μmと大きいが、食道部が狭く、粘液細胞が分布しないため、固形の餌料が通過しにくい。そこで、現時点で唯一有効な餌料となっているアブラツノザメの卵を主成分としたペースト状の餌のほか、上記の小型動物プランクトンに対する摂餌を比較検討した。サメ卵ペーストとP.similisの給餌で各々26.7、20.0%だったのに対し、他の給餌では摂餌率(0.06.7%)が著しく低かった。無給餌ではウナギ仔魚は11日令で全て死亡したが、サメ卵ペーストとP.similisを給餌した場合、13日令まで、それぞれ62.8%、37.2%が生存した。昨年度の研究で、仔魚が高い摂餌選択性を示した餌料用動物プランクトンや、天然域での採集や選抜を通じて得たワムシ株を見出すことができた。今年度は、それらを餌料生物として給餌した結果、実際に仔魚の成長、生残、活力が変化することを明らかにした。1)小型仔魚が高い摂餌選択性を示したProales similisの初期餌料としての活用を検討した。培養環境を水温25-30°C、塩分2-15、植物プランクトンのナンノクロロプシスやクロレラを培養餌料とすることが、本種の個体群増殖に最適な条件であると確認された。また市販のクロレラ製品で二次培養することによってSS型ワムシと同様に高度不飽和脂肪酸(EPA,DHA,AA)を栄養強化できた。

2)仔魚への給餌研究マハタ:P.similisとSS型ワムシの単独給餌に比べ、両者の併用給餌によってマハタ仔魚の摂餌量と消化酵素活性の増大が起こり、10日令の生残がP.similis(2.7%)やSS型ワムシ(6.4%)の単独給餌時より高くなった(14.3%)。メガネモチノウオ:本種は特に口径が小さく、SS型ワムシを全く摂餌できないため、量産飼育の成功例が皆無であった。しかし、本種の仔魚がP.simiisを活発に摂餌することがわかり、2-6日令にP.simiisを、6日令以降にSS型ワムシを給餌することによって、9日令までの飼育に成功した。ヒラメ:3日令からL型ワムシを10個体/mLで給餌し、2534日令の10日間はL型ワムシと汽水産ミジンコ、または、ワムシとアルテミアを併用給餌した。35日令以降は汽水産ミジンコとアルテミアをそれぞれ0.10.3個体/mLで単独給餌した。その結果、35日令での仔魚の摂餌成功率はアルテミア(100%)がミジンコ(44%)より高かったが、飼育終了時(68日令)の体長は、汽水産ミジンコ区がアルテミア区よりも有意に大きくなった。本研究では、仔魚の餌料生物として有用な餌料用動物プランクトンを、天然域での採集や実験室内での選抜と交雑、および仔魚の摂餌選択性調査を通じて探索し(一昨年度)、これらを餌料生物として給餌した結果、実際に仔魚の成長、生残、活力が増大することを明らかにしてきた(昨年度)。今年度は、有用種の高密度培養と行動について検討し、餌料生物としての適合性を明らかにした。1)小型仔魚用餌料として有用な餌料価値を示した汽水性ワムシProales simllisを対象とし、一昨年度の研究により求めた量産培養用の環境(水温25°C、塩分25)のもとで、淡水産クロレラ(Chlorella vulgaris)を餌料とした実際の大量培養を想定した2L水槽内でのバッチ式培養を行った。その結果、P.similisは、初期密度25個体/mLから2400個体/mLまで増殖し、高密度培養が十分に可能であることが示された。仔魚飼育実験時に実施した500L水槽を用いた連続培養では、3日間で9000万個体から1.7億個体に増加した場合もあったが、増殖が止まってから個体数の激減が起こる例もみられ、安定培養技法の確立が今後の課題となった。2)仔魚は水中に浮遊する動物プランクトンを摂餌する。餌料生物として汎用されるシオミズツボワムシBrachionus plicatilis(以下ワムシ)は遊泳行動と付着を繰り返すので、付着を抑制するための要因の解明に取り組んだ。その結果、水中に餌(植物プランクトン)が十分量存在する良好な環境下でワムシは付着行動を示すと共に、急激な塩分の上昇等の大変強いストレスによっても付着が誘導されることがわかった。また仔魚の餌料となるようにワムシを遊泳させるためには、一時的な飢餓等のある程度のストレスを与えることが有効であった。