hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
抗アポトーシス分子アナモルシンの作用機序の解明

アナモルシンは、我々がクローニングした細胞死に対し抵抗性を示す分子であり、既知の細胞増殖・生存に関連する分子とは一切、相同性を認めない。アナモルシン遺伝子を欠損したマウスは、妊娠後期に胎生致死となる。死亡したノックアウトマウスは明らかに身体のサイズが小さく、外見は貧血様であり、解剖所見では、肝臓、脾臓などの造血組織の萎縮を認める。そのアミノ酸配列からは、メチルトランスフェラーゼとして、機能している可能性が示唆されている。しかし、アナモルシンの作用機序については、これまで、まったく不明であった。本研究では、アナモルシンの作用点を明らかにする目的にて、アナモルシンと結合する分子を、Yeast-two-hybrid法を用いてクローニングした。その結果、PICOT (thioredoxin-like 2)が単離された。アナモルシンとPICOTは、in vitroおよびin vivoで結合していることが確認され、さらにアナモルシンとPICOTは、それぞれ、アナモルシンの11-30アミノ酸、171-180アミノ酸を含むN末側(11-180アミノ酸)とPICOTの18-42アミノ酸、101-117アミノ酸を含むN末側(18-117アミノ酸)において結合していることが明らかとなった。PICOTはPKCθに結合し、その活性を抑制することで、細胞増殖・生存に関係していると考えられている。以上の結果から、アナモルシンは、PICOTと結合することでPICOTの機能を修飾し、ひいてはPKCθの活性を調節する可能性が考えられた。今後は、細胞増殖・生存に対するPICOTの機能を、アナモルシンとの相互作用という面から検討していく予定である。我々がクローニングした新規の抗アポトーシス分子アナモルシンは、既知のアポトーシス関連分子とは一切、相同性を示さず、これまでのところその作用機序に関しては不明であった。本研究では、アナモルシンの作用点を明らかにする目的にて、アナモルシンと結合する分子をYeast-two-hybrid法を用いてクローニングした。マウスのアナモルシン全長をベイトとして、アナモルシンを高発現している臓器である精巣から作製したcDNAライブラリーを用いて、アナモルシンと結合する蛋白をコードする遺伝子のスクリーニングをおこなった。その結果、PICOT(thioredoxin-like2)という分子が有意にクローニングされた。PICOTは、PKCと結合する分子としてクローニングされた分子で、チオレドキシンにホモロジーをもつことが知られているが、アポトーシスに及ぼす影響の詳細については解析がなされていない。タグ付きのPICOTをマウス造血細胞株Ba/F3細胞に発現させ、タグの抗体で免疫沈降を行い抗アナモルシン抗体によりウェスタンブロットを行ったところ、PICOTとアナモルシンはBa/F3細胞内においても結合していることが確認された。PICOTの発現、機能を詳細に検討するためには、抗PICOT抗体が必要であるが、現在まで、入手可能な抗体がないため、我々は、PICOTに対する単クローン抗体を作製した。マウスとヒトのPICOTはアミノ酸配列の相同性が高いため、どちらのPICOTも認識できる抗体の作製を計画し、成功した。現在、作製した抗PICOT抗体を用い、蛋白レベルでの発現解析をおこなっている。また、PICOTの造血細胞のアポトーシスにおける機能を明らかにするために、PICOT発現ベクターを用い、種々の造血細胞株にPICOTを過剰発現させ、あるいは、RNA干渉を用い、PICOT発現をノックダウンすることにより、PICOTの機能解析をおこなっている。

マウスのアナモルシン全長をベイトとして、アナモルシンを高発現している臓器である精巣から作製したcDNAライブラリーを用いて、アナモルシンと結合する蛋白をコードする遺伝子のスクリーニングをおこなった。その結果、PICOT(thioredoxin-like2)という分子が有意にクローニングされた。PICOTは、PKCθと結合する分子としてクローニングされた分子で、チオレドキシンにホモロジーをもつことが知られているが、アポトーシスに及ぼす影響の詳細については解析がなされていない。タグ付きのPICOTをマウス造血細胞株Ba/F3細胞に発現させ、タグの抗体で免疫沈降を行い抗アナモルシン抗体によりウェスタンブロットを行ったところ、PICOTとアナモルシンはBa/F3細胞内においても結合していることが確認された。PICOTの発現、機能を詳細に検討するためには、抗PICOT抗体が必要であるが、現在まで、入手可能な抗体がないため、我々は、PICOTに対する単クローン抗体を作製した。さらに、deletion mutantのアナモルシンとPICOTを用いて検討したところ、アナモルシンとPICOTは、それぞれ、アナモルシンのN末端側の11-180アミノ酸とPICOTのN末端側の18-117アミノ酸において結合していることが明らかとなった。PICOTはPKCθに結合し、その活性を抑制することで、細胞増殖・生存に関係していると考えられていることから、アナモルシンは、PICOTと結合することでPICOTの機能を修飾し、ひいてはPKCθの活性を調節する可能性が考えられた。
変位拡大てこ機構の弾性変形と加工誤差が位置決め用平行ばねの変位特性に及ぼす影響

平成6年度は下記の2項目について理論、有限要素法解析および実験を通じて研究を行った。1)寸法誤差が移動台の直線運動に及ぼす影響(終了)2)一体構造のXYZ移動台の試作研究(追加)1.寸法誤差が移動台の直線運動に及ぼす影響長さ80、幅60、厚さ6mmのアルミニューム製の変位拡大機構付き平行ばね機構を製作し、弾性ヒンジの寸法誤差及びてこ比の誤差がそれぞれ移動台の直線運動に及ぼす影響を調べた。その結果次の事が明らかとなった。(1)板厚が増大する(寸法誤差正)と移動台は右に傾く。反対の場合は左に傾く。この傾向は非線形となる。(2)単位直線変位当たりの傾きは駆動力の値にかかわらず一定である。(3)てこ比が左右対称であれば移動台に傾きが生ずる。2.一体構造のXYZ移動台の試作研究一体構造の3軸移動台を放電加工機で製作した(アルミ製で外形寸法:40X40X40mm)。各軸の最大移動量は約20μmである。駆動力は圧電素子で与える。各軸間の干渉を調べる事が主目的で以下の事が明らかとなった。(1)締結部の全くない一体構造のXYZ移動台が製作可能である。(2)X軸方向に駆動した場合の、Y、Z方向の干渉変位量は約34(%)程度で比較的小さい(他の軸間同志もほぼ同じ関係)。今後の改良・工夫によって更に干渉の少ない位置決め移動台が見込める。1.機構の設計吉村・黒崎で基本設計を行った。主要項目としては、拡大てこ比2、5,10の3種類、ヒンジの寸法2mm(長さ)×0.5mm(板厚)×8mm(幅)と設定した。材質はアルミニウムを用いる2.試作本校実習工場所有のワイヤカッタを用いて、機構要素の試作を行った。要素の主要外形寸法は100mm(高さ)×80mm(幅)×8mm(板厚)で、合計12枚の試料を作成した、変化条件は、拡大てこを支持する弾性ヒンジの板厚t0=0.5に対して、(DELTAt)/(to)=0、±0.1,±2の寸法誤差を有するものとし、各3種類のてこ比に対応して製作した3.解析理論解析、FEM解析、実験解析を行って、それぞれの結果を対比させた。誤差が大きいが、板厚の加工寸法誤差DELTAt/toの50%が、平行ばねの変位誤差に寄与するという結果が得られ、ほゞ3つの解析結果が一致した。4.変位拡大率について理想のてこによる拡大率はてこ比b/aに等しい。しかし実際の拡大率はこれよりはるかに小さい値となる即ち所望の拡大率は得られず、機構によっては拡大効率は20%程度(てこ比10の時)にまで落ちこむ事が、理論、実験、FEM解析により明らかにされた平成6年度は下記の2項目について理論、有限要素法解析および実験を通じて研究を行なった。1)寸法誤差が移動台の直線運動に及ぼす影響(終了)2)一体構造のXYZ移動台の試作研究(追加)1.寸法誤差が移動台の直線運動に及ぼす影響長さ80、幅60、厚さ6mmのアルミニウム製の変位拡大機構付き平行ばね機構を製作し、弾性ヒンジの寸法誤差及びてこ比の誤差がそれぞれ移動台の直線運動に及ぼす影響を調べた。

2.一体構造のXYZ移動台の試作研究一体構造の3軸移動台を放電加工機で製作した(アルミ製で外形寸法:40X40X40mm)。各軸の最大移動量は約20μmである。駆動力は圧電素子で与える。各軸間の干渉を調べる事が主目的で以下の事が明らかとなった。(1)締結部の全くない一体構造のXYZ移動台が製作可能である。(2)X軸方向に駆動した場合の、Y、Z方向の干渉変位量は約34(%)程度で比較的小さい(他の軸間同志もほぼ同じ関係)。今後の改良・工夫によって更に干渉の少ない位置決め移動台が見込める。
重篤かつ予測困難な抗血小板薬誘発肝障害を事前回避するシステムの基盤構築と運用

チエノピリジン系抗血小板薬のうち、チクロピジン塩酸塩による重篤かつ予測困難な肝障害と関係すると考えられるHLA-A^*3303の簡易診断法を開発した。また、HLA-A^*3303とは異なる肝障害関連候補遺伝子多型を確認した。クロピドグレル硫酸塩では、肝障害の発現そのものが少ないが、予備的研究で、HLA-A^*0206あるいはHLA-B^*3901の関与が疑われたため、これらに対する簡易遺伝子診断法を開発し、second populationで検証した。しかし肝障害発現例が極めて少なく、これらHLA型がクロピドグレル誘発肝障害に関与しているとの確証を得ることはできなかったが、これら両チエノピリンジン系抗血小板薬誘発性の肝障害に関わる遺伝的因子は異なることが示唆され、一方の薬物で肝機能障害が発現した場合は、他方に安全な切り替えが可能であると考えられた。本研究は、申請時期において、医療現場で多用され、死亡例を含む重篤な肝障害を度々起こすことで問題となっていたチクロピジン塩酸塩(TP)を標的薬物とし、研究代表者らが多施設共同研究でTP誘発肝障害と関連性があるとした遺伝子多型との関連性を、別集団で、患者背景が把握できる千葉大学医学部附属病院(以下、当院)循環器内科の患者、約1,000例を対象に検証する検証的臨床試験を第一目的とした。第二目的は、TPの後継薬で、申請当時、本邦で使用が開始されはじめたクロピドグレル硫酸塩(CP)において、肝障害と関連する遺伝的因子を探索する臨床試験である。第三目的は、TPまたはCPによって肝障害を発現した患者の代替薬として適切な薬の選択肢を明らかにすることである。第四目的は、TPおよびCP誘発肝障害と関連する因子として見出した遺伝的因子ならびに非遺伝的因子を事前に診断することで、これらチエノピリジン系抗血小板誘発肝障害を予測できるか否かの前向き臨床試験を実施することである。第五目的は、第一四の目的が計画どおりに進行し、仮説が実証された場合、これら遺伝子多型診断を診療業務に組み込む体制を整備することをであるチエノピリジン系抗血小板薬のうち、チクロピジン塩酸塩による重篤かつ予測困難な肝障害と関係すると考えられるHLA-A^*3303の簡易診断法を開発した。初年度は、研究実施計画書にそって本研究の核となる病院内で実施可能な肌HLA-Aハプロタイプ解析法の開発を行った。本研究で標的とするHLA-Aのハプロタイプは600種類以上が知られている。そこで交付申請書では、日本人の99.5%以上を説明できるとされている12種類のハプロタイプから目的のHLA-A*3303をホモ接合体、あるいはヘテロ接合体で有する検体をかなりの正確性(少なくとも検査会社で行われているレベルである低分解能の解析以上の精度)をもって集団から抽出できる方法を開発する、としていた。診断法は、まず第6染色体のMHCクラスターからHLA-A遺伝子だけを特異的に増幅し、その後、多数のSNPが集中するexon 2およびexon 3の塩基置換情報を基にallele-specific(AS)PCRを行う、nested PCRとした。これにより、目的のHLA-A*3303の有無を絞りこみ、最後にHLA-A*3303がヘテロ接合体か、ホモ接合体かを明らかにするためのSSCP解析を行った。開発した診断法を用いて、日本人健常者ボランティア140名より得たゲノムDNA(遺伝子解析研究への利用に同意済み)でHLA-A*3303のallele頻度を求めたところ、0.082であり既報(0.0780.128)と一致した。次に、無作為に抽出した21検体の遺伝子診断を行い、その結果を2っの検査機関に解析を委託して得られた結果と比較を行った。その結果、21検体中20検体は、判定結果が完全に一致したが、1検体のみ異なっており、診断法の開発課程でターゲットとしていなかったマイナーハプロタイプのHLA-A*2420が原因であり、このハプロタィプの存在による誤診断の問題を解決した。開発した診断法は、日本薬学会年会第129年会で報告した。二年度目以降に実施する臨床試験のための、循環器内科・冠動脈疾患治療部医師と相談しながら生命倫理審査委員会に研究承認申請を行い、すでに承認された。

本研究の目的は、本邦で20年以上にわたり使用されているチクロピジン塩酸塩で日本人に頻発するものの、原因が明らかでないため予測が困難な肝障害を、チクロピジンの代謝的活性化に関与する薬物代謝酵素と抗原提示と関係するヒト白血球抗原(HLA)の遺伝子多型で予測できるか否かに関する検証的試験を行うと共に、それが実証された場合、チクロピジンの投与に先立ち遺伝子診断を行って肝障害の回避システムを構築し病院内で運用することである。2年度目にあたる本年度は、昨年度開発に成功したHLA-A*3303の判定法を実際の患者検体の診断に応用した。それに先立ち、研究実施計画に沿ってHLA-A*3303診断法の改良を行った。従来法は、最終判定がSSCP分析であったため、操作が煩雑で重金属廃液が出る上に、ゲルや染色試薬節約のため、一度に46検体を分析しなければ診断コストが高くつくという欠点があった。そこで本年度はRFLP分析に切り替えることができないか検討したところ、コストが半分以下に抑えられ(150円/検体)、しかも臨床現場で現実的な1検体からの診断が可能となった。我々の知る限り、現在、HLAの診断を大学や医療機関で行っているところはなく、検査会社やNPOの研究所で外注検査の形で行われているが、その費用は36万円であり、本研究で確立した診断法は1/300程度の低コストですむ。現在保険適応されているUGT1A1やEGFRの遺伝子診断の診療報酬は2,000点であり国の負担は14,000円であるが、我々が開発している診断法では100円程度であり、医療費削減に大きく貢献しうる。しかしながら、研究実施計画に記載したように、副作用が少ないクロピドグレルの承認後、チクロピジンは急速に使用されなくなったため、本研究の主たる対象薬物をクロピドグレルに変更するため協力診療科医師と協議し、患者への同意説明文書を作成し直して研究の仕切り直しを行い、本年度中に200名以上の患者から研究協力の同意を文書で取得し血液検体を得た。本研究の当初の目的は、本邦で20年以上使用され続けているチクロピジン塩酸塩の服用で日本人に頻発するが、その原因が明らかでないため予測が困難な肝障害を、チクロピジンの代謝的活性化に関与する薬物代謝酵素と抗原提示と関係するヒト白血球抗原(HLA)の遺伝子多型で予測できるか否かに関する検証的試験を行うと共に、それが実証された場合、チクロピジンの投与に先立ち遺伝子診断を行って肝障害の回避システムを構築し病院内で運用することであった。生命倫理審査委員会で当院患者1,000人を目標症例数とする臨床研究が承認され(千大医総第5-33号)、初年度は350例近くからインフォームドコンセント(IC)を得て計画どおり検体が収集され、HLA診断法の開発も成功したため順調と考えられた。しかし同じチェノピリジン系抗血症板薬の後継薬クロピドグレルの承認後、副作用が多いチクロピジンは想定を大きく上回って殆ど使用されなくなり、2年度目から主たる標的薬物をクロピドグレルに変更せざるを得ない状況となり、2年度目には200名以上の患者の検体を得た。3年度目である本年度は、これら検体について詳細な解析を行った。チクロピジンと異なり、クロピドグレルでは肝障害がほとんど起こらず、本年度に解析可能であった約110例(他の症例は、当院でPCIを施行した半年後、経過観察のため当院にもどってくる際に肝障害歴が明確になる)の中では、肝障害を発現したのはわずか2例のみであり症例-対照研究による関連性解析にはさらに多くの症例が必要である。しかしこの2例について詳細な解析を行ったところクロピドグレル誘発肝障害には、チクロピジン誘発肝障害に関連するHLAとは別の型のHLAが関与する可能性が示されたた。そこでそれら2種類のHLAの診断
酪酸塩の一酸化窒素生成及び誘導型一酸化窒素合成酵素の発現量に及ぼす影響

本研究には二つの目的がある。一つ目は、酪酸塩に一酸化窒素に対する除去作用があるかを調べること。二つ目は、酪酸塩が誘導型一酸化窒素合成酵素の発現と活性に影響するかを調べること。前年度は電子スピン共鳴ESR法を用いて酪酸塩の一酸化窒素に対する除去作用を調べたが、今年度はさらに、ELISA法及びRT-PCR法を用いて、ヒト好中球の一酸化窒素生成と誘導型一酸化窒素合成酵素のmRNA発現量について調べた。培養6時間の上清液に置けるNitrateとNitriteの量は刺激剤の種類に関わらず、いずれも最小測定可能範囲の5μM以下だった。N^G-Hydroxy-L-Arginineとincubationした好中球の上清液でもNitrateとNitriteの量は測定不可能であった。一方、RT-PCR法で増幅した誘導型一酸化窒素合成酵素iNOSの発現量は予想の394-bp長さのレベルで弱いバンドを示したものの、酪酸塩とincubationした好中球のバンドの濃さに顕著な変化は認められなかった。以上より、正常人の好中球は誘導型一酸化窒素合成酵素iNOSのわずかな活性化が見られたことより、微量な一酸化窒素を生成していると推測された。しかし、それは酪酸塩の影響を受けなかった。酪酸塩の潰瘍性大腸炎患者の好中球における影響について調査を計画したが、外来の患者には副腎皮質ステロイド剤及びサラゾピリンの治療を受けてない症例を見つけられず、予定期間内では実現することは出来なかった。
口腔がんの転移に関わる口腔常在菌の解析

口腔がんの発生頻度は全がんの1-2%程度だが,近年増加傾向にあると言われている.手術療法,放射線治療,化学療法を含む集学的治療により治療成績の向上が図られているが,頚部所属リンパ節転移ならびに肺などの遠隔臓器転移を来した症例では予後不良である.現在,転移予測については原発腫瘍の浸潤様式や深さなど臨床的・形態学的特徴に依存せざるを得ず不十分である.本研究では,近年口腔がんの悪性化に関与すると考えられている口腔常在菌に注目し,口腔がんの頚部リンパ節転移能獲得における役割を検討し,新たな予後予測マーカーとなる可能性を検討する基盤研究を行う.口腔がんの発生頻度は全がんの1-2%程度だが,近年増加傾向にあると言われている.手術療法,放射線治療,化学療法を含む集学的治療により治療成績の向上が図られているが,頚部所属リンパ節転移ならびに肺などの遠隔臓器転移を来した症例では予後不良である.現在,転移予測については原発腫瘍の浸潤様式や深さなど臨床的・形態学的特徴に依存せざるを得ず不十分である.本研究では,近年口腔がんの悪性化に関与すると考えられている口腔常在菌に注目し,口腔がんの頚部リンパ節転移能獲得における役割を検討し,新たな予後予測マーカーとなる可能性を検討する基盤研究を行う.
両生類卵における付活の分子機構の解明

精子がどのようにして卵付活の最初の引き金を引くかについての分子機構に関しては、脊椎動物ではほとんど知られていなかったが、本研究では、両生類アカハライモリ(Cynops pyrrhogaster)精子からアフリカツメガエル(Xenopus laevis)卵の付活を引き起こす活性分子(精子アゴニスト)を単離し、部分的に精製して、その分子的性質を明らかにした。この精子アゴニストは、各種のクロマトグラフィーを用いて精製すると、SBAレクチンで認識される糖鎖をもち、分子量約170kDaのタンパク質分解酵素であることが分かった。この酵素は、ArgやLys残基をよく分解するセリンプロテアーゼであるが、トリプシンなどとは性質が異なっている。この酵素は精子の先体部分に局在しており、活性を阻害すると卵の付活も阻害されることから、受精において生理的に重要な機能をもつことがわかる。電気泳動的にもほぼ単一のバンドが得られたので、今後、この酵素の抗体を作成したり、遺伝子を解析してツメガエル精子やその他の脊椎動物の精子での同様の精子アゴニストを検索したい。一方、この精子アゴニストの卵細胞での作用機構を電気生理学的な手法を用いて詳しく調べた。精子アゴニストは卵細胞膜上のNaイオンチャンネルとClイオンチャンネルを開放して卵を付活するが、そのときには、Caイオンチャンネルからの外部Caイオンの流入が必要であることが、細胞膜のチャンネル分子の解析により明らかになった。さらに、細胞内では小胞体上のイノシトール3リン酸のリセプターを介して、Caイオンの伝播的上昇を誘起することが明らかになった。これらにより、未知の点の多かった卵の付活機構の解明の手掛かりができたと考えられる。両生類イモリの輸精管から十分に成熟した精子を密度勾配遠心で分離し、凍結融解後、超遠心の上澄から精子アゴニストを得た。抽出物を凍結乾燥した後に濃縮・保存した。卵付活の活性を測定するために、ゼリー層を除去したアフリカツメガエルの未受精卵をこの精子抽出物で処理をおこない、不活電位の出現をと細胞膜イオンチャンネルの開閉をパッチクランプ法などにより測定することにより卵細胞膜上の精子アゴニストに反応するイオンチャンネルを詳しく解析した。(1)Caイオンチャンネル分子の阻害剤であるNi、CoやCdイオンは精子アゴニストの反応を完全に遮断した。特にCdイオンはマイクロモルのレベルの濃度で効果があった。これらは、精子アゴニスト分子がCaチャンネルを開放していることを示している。現在、パッチクランプ法により精子アゴニスト分子が直接このチャンネル分子に作用していないことを示唆する実験結果を得ているが、完全な結論を得るまでにもう少しデータが必要である。(2)CaイオンのキレーターのBAPTAの注入やIP3リセプターの阻害剤であるヘパリン注入が精子アゴニストの反応を完全に阻害した。更に、Ca誘発Ca放出を阻害すると言われているタプシガーギンは精子アゴニストの反応を阻害しなかった。これらの結果は精子アゴニスト分子が、卵細胞膜上のリセプター分子に働いて卵付活を誘導していることを示しており、今後は、このリセプター分子の解明に努力する予定である。本年度は、両生類アカハライモリ(Cynops pyrrhogaster)精子からアフリカツメガエル(Xenopus laevis)卵の付活を引き起こす活性分子(精子アゴニスト)の卵細胞での作用機構を電気生理学的な手法を用いて詳しく調べた。精子アゴニストは卵細胞膜上のNaイオンチャンネルC1イオンチャンネルを開放して卵を付活するが、そのときは、Caイオンチャンネルからの外部Caイオンの流入が必要であることが、細胞膜のチャンネル分子の解析により明らかになった。

さらに精子がどのようにして卵付活の最初の引き金を引くかについての分子機構に関して、これまでに、この精子アゴニストを各種のクロマトグラフィーを用いて精製すると、SBAレクチンで認識される糖鎖をもち、分子量約170kDaのタンパク質分解酵素であることが分かった。この酵素は、ArgやLys残基をよく分解するセリンプロテアーゼであるが、トリプシンなどは性質が異なっている。この酵素は精子の先体部分に局在しており、活性を阻害すると卵の付活も阻害されることから、受精において生理的に重要な機能をもつことがわかる。電気泳動的にもほぼ単一のバンドが得られたので、今後、この酵素の抗体を作成したり、遺伝子を解析してツメガエル精子やその他の脊椎動物の精子での同様の精子アゴニストを検索したい。これらにより、未知の点の多かった卵の付活機構の解明の手掛かりができたと考えられる。
アゾリウムカチオンを核とする高機能性キラル相間移動触媒の創製と応用

α-アミノ酸を出発原料とする光学活性トリアゾリウム塩を設計・合成し、優れた反応活性と立体制御能を有する触媒を開発することに成功した。本触媒は、不斉触媒として重要な高活性・高立体制御能という機能を有するのはもちろんのこと、アミノ酸という安価で入手容易なキラル化合物から簡便に合成可能である。また、様々な結合形成反応への展開を考慮した場合、多彩な置換様式の類縁体が簡便な合成法によって創製可能であるという点も、特筆すべき長所となる。初めに、アキラルなイミダゾリウム塩およびその部分還元体であるイミダゾリニウム塩を数種類合成し、それらの安定性および相間移動触媒機能の評価を行った。イミダゾリウムおよびイミダゾリニウムカチオンは、強塩基性条件下2位の炭素への求核付加を起点とする開環反応によって壊れることが判明したが、適切な分子修飾を施すことにより一般的な相間移動反応条件下での安定性を獲得させることに成功した。さらに、シアノ化やアルキル化といった種々の反応において、高い相間移動触媒機能を発現することを見出した。この結果により、有機分子触媒としての利用というアゾリウム塩の新たな可能性が明示された。続いて、キラルな触媒の設計、合成および評価に取り組んだ。α-アミノ酸やビシナルジアミンといった入手容易な化合物をキラル源として選択し、それらから簡便に合成可能な骨格をデザインし、合成・評価を行った。その結果、初期に検討した触媒では、各種合成反応において高効率的に反応を進行させるものの、合成化学的に満足のいくレベルの立体選択性を獲得できなかった。触媒構造と立体選択性との相関に関する詳細な検討を行い、不十分な選択性の理由はカチオン中心の近傍に存在する嵩高い置換基の存在に由来すると判断するに至った。そこで、触媒設計の抜本的な方向転換を図り、基質の接近を許容する十分な空間の確保と効果的な不斉場の構築を両立し得る新規軸不斉型イミダゾリウムカチオンのデザインを行った。来年度はそれらの合成および機能評価に注力する。昨年度、イミダゾリウム塩およびその部分還元体であるイミダゾリニウム塩に適切な分子修飾を施すことで、相間移動触媒としての高い機能を発現し得ることを見出している。この知見を基に、まず光学活性イミダゾリウム塩(またはイミダゾリニウム塩)の創製に取り組み、効率的不斉合成法の開発へと展開を図った。しかし、合成化学的に満足のいくレベルの立体選択性を獲得できず、イミダゾリウム塩は不斉合成には不向きという結論を得るに留まった。そこで、戦略を抜本的に見直し、核となるアゾリウムカチオン部位をトリアゾリウムへと変更することとした。これにより、アゾール環構築が容易になるだけでなく、より多彩な置換様式を有する触媒が効率的に合成できるという利点が生まれる。そこで、これまでのイミダゾリウム塩の研究・開発で集積した知見を基に、いくつかの光学活性トリアゾリウム塩を設計・合成したところ、優れた反応活性と立体制御能を有する触媒を開発することに成功した。本触媒は、不斉触媒として重要な高活性・高立体制御能という機能を有するのはもちろんのこと、安価で入手容易なキラル化合物から簡便に合成可能である。また、様々な結合形成反応への展開を考慮した場合、多彩な置換様式の類縁体が同様の簡便な合成法によって創製可能であるという点も、特筆すべき長所となる。
多施設共同研究による多職種連携教育の推進と縦断的評価

本研究は高等教育でのIPE(専門職連携教育)を推進するため、医育機関及び医療施設の教育担当者を対象とした調査を行い、IPEを推進および阻害する組織要因を明らかにし、教育環境が学生の学び与えている影響を明らかにする。これにより、IPE教育プログラムのモデル化・類型化を図ることで、本邦のIPE推進の一助となることを目的としている。平成30年度の研究概要は以下の通りである。平成29年度に実施した、保健医療福祉に関する高等教育機関を対象とした悉皆調査の結果を分析し、各種学会にて報告を行い、海外学術誌への投稿を準備している。また、最終年度の調査(IPE実施校のシラバス解析とインタビュー調査)の準備を行った。高等教育の教育環境におけるIPE推進要因とIPE阻害要因の調査については予定よりも早く取り組むことができている。一方で、IPEの導入の先進事例や特徴的な事例の聞き取り調査については、順調に準備を進めている。IPEを推進および阻害する組織要因を明らかにし、教育環境が学生の学び与えている影響を明らかにする。平成31年度は、高等教育機関を対象とした悉皆調査の結果を海外学術誌に投稿する。また、IPE実施校のシラバス解析とインタビュー調査を行い、3年間のまとめを行う。本研究は高等教育でのIPE(専門職連携教育)を推進するため、医育機関及び医療施設の教育担当者を対象とした調査を行い、IPEを促進および阻害する組織要因を明らかにし、教育環境が学生の学びに与えている影響を明らかにする。平成29年度の研究概要は以下の通りである。(1)先行研究等を参考に、高等教育の教育環境におけるIPE促進要因とIPE阻害要因について検討した。(2)医師、看護師、薬剤師、理学療法士、作業療法士、言語聴覚士、介護福祉士、社会福祉士の全養成校を対象にIPEの実施状況に関する調査を行い、各校の担当者からIPE促進要因とIPE阻害要因の認識について回答を得た。(3)因子分析等からIPE促進要因とIPE阻害要因の概念構造を明らかにした。促進要因については、(A)個人の学習能力の向上、(B)専門職理解、の2つが挙げられた。阻害用については、(a)組織内での重要性の認識不足、(b)モデルプログラムの不在、(c)連携カリキュラムが作成できない、(d)連携できる施設が近隣にない、の4つの阻害要因が抽出された。(4)学校区分、養成している専門職の種別、開設年、現在のIPE実施状況、とIPE推進要因とIPE阻害要因の認識、との関係について検討した。その結果、IPEを実施しているまたは実施予定の養成校の担当者は、個人の学習能力向上をIPEの効果として捉えていた。また、開設年が早い養成校の担当者ほど、IPEを実施する障壁を強く感じていることがわかった。高等教育の教育環境におけるIPE促進要因とIPE阻害要因の調査については予定よりも早く取り組むことができている。一方で、IPEの導入の先進事例や特徴的な事例の聞き取り調査については取り組みが遅れている。悉皆調査によって得られた情報からIPEの導入パターンについて検討を加え、効果的なIPE導入の方法について検討を図る。それに基づきインタビューガイドを作成し、先進事例の調査を行う。また平成29年度の研究成果について論文化を図り、成果を広く公表する。今年度は養成校に対する調査が早まった分、先進事例に対する調査が遅れたため、次年度使用額は先進事例に対する調査の旅費として用いられる。経費内訳は以下の通りである:札幌ー東京(7万円×2人)、札幌ー大阪(7万円×2人)、札幌ー福岡(7万円×1人)、東京ー福岡(4万円×1人)当該年度に予定されていた出張が、共同研究者の都合で4月以降に延期となったため、次年度使用額が生じた。
ヒト前白血病における転写因子異常の解析

1.慢性骨髄性白血病に観察される転写因子異常慢性骨髄性白血病急性転化時に出現するt(3;21)の結果形成されるAML1/EVI-1はキメラ型転写因子である。AML1/EVI-1は、(1)AML1と同様にPEBP2部位に結合し、AML1によるPEBP2部位に対する転写活性をdominantに抑制する、(2)AP-1活性を上昇させる、ことが明らかになった。さらに、AML1/EVI-1の転写制御因子としての機能ドメインの欠失変異体を構築して検討したところ、(1)の機能は、AML1のDNA結合領域であるruntドメインに依存し、(2)の機能はEVI-1と同様に第2zincフィンガー・ドメインに依存していることがわかった。以上の結果は、AML1/EVI-1が互いに独立した2つの機能を有する転写制御因子であることを示す。これらの機能が、それぞれ造血細胞の分化抑制と増殖促進に関与し、白血化に至るのではないかと推定された。2.骨髄異形成症候群に観察される転写因子異常骨髄異形成症候群の症例に観察されるt(11;19)(q23;p13.1)の分子解析を行うことによりMDS発症に関与する新たな原因遺伝子の同定を行った。その結果、転写因子遺伝子MLLと新規遺伝子MEN(myeloid eleven-nineteen)が融合遺伝子を形成していることが明らかになった。MENはC末端に近い領域にlysine-rich domainが存在し、広範囲の臓器(膵、腎、骨格筋、肝、肺、胎盤、脳、心)に発現が観察された。t(11;19)(q23;p13.1)を有する白血病細胞はノーザン解析の結果約8kbのMLL/MENmRNAを発現していた。MLLはzincfinger typeの転写因子であり、MENはlysine-rich domainを有することから、MLL/MENはキメラ型転写因子である可能性がある。今後、MLL,MEN,MLL/MENの転写因子としての機能を解析する予定である。
ボリビアにおける胆嚢がんの成因に関する環境及び遺伝疫学研究

ボリビア産赤唐辛子中のアフラトキシン汚染状況から、アフラトキシン汚染赤唐辛子の長期間、高頻度摂取と胆嚢がん発生との関連を調べた。ボリビア産赤唐辛子中から11.3 ppbのアフラトキシンB1が検出され、胆嚢がん発生との関連が示唆されたが、アフラトキシン類が全く検出されなかった試料もあり、今後、生産から消費までの汚染ルートの解明などさらに詳細な検討が必要である。本年度の課題は、ボリビアにおいて研究打合せの後、環境要因解明のために胆嚢がん患者と胆石症患者にアンケート用紙を配布し回収すること、及び遺伝要因解明のため同患者から血液試料を採取することである。2009年6月にボリビアの首都ラパスのボリビア・日本消化器センターを訪問し、センター長、トレーニングセンター長、研究科長、内科部長、外科部長らと今後3年間の研究遂行に関する打合せを行い、以下の同意を得た。(1)倫理委員会の承認を得、研究体制が整い次第、アンケート用紙の回収と血液採取をスタートさせる。具体的には、胆嚢がん患者100例と性、年齢(±5歳)をマッチさせた胆石症患者100例に対してアンケート調査と血液試料採取を行う。アンケート用紙は各々半数例(50例)に達し次第、統計解析を行い、環境要因の存在の有無を確認する。(2)予定患者数に達し次第、アンケート用紙と血液試料を日本に運入し、環境要因と遺伝要因の検討を行う。(3)得られた結果をもとに論文執筆を行うが、環境要因の筆頭著者はボリビア研究者、遺伝要因の筆頭著者は日本研究者とし、さらに執筆可能の結果が出た場合は両者間で再度協議する。本年度は既に、2009年7月からアンケート用紙の回収と血液採取を開始している。本年度の課題は、ボリビアの胆嚢がん患者と胆石症患者から環境要因解明のためにアンケートの回収と遺伝要因解明のために血液採取を行い、遺伝子多型を解析することである。2009年6月からボリビア・日本消化器センターの医師に依頼してアンケート用紙の回収と血液試料の採取を実施してきたが、胆嚢がん患者の経済的理由からがんの所見を有していても手術を希望する人が少なく、確定診断まで行える例が少ない。このためこれまでに約20例を集めたにすぎない。そこで、可能な限り予定していた試料数を得るためさらに2011年9月まで試料採取期間を延長することとし、現在、ボリビアの医師の協力のもと試料採取を継続している。得られたアンケートと遺伝子多型の解析は2011年度末までに行う予定である。本年度は、ボリビアにおける本症発生の環境要因解明のための基礎的データを得た。隣国チリでは赤唐辛子摂取が本症発生の危険要因であり、チリ産赤唐辛子からアフラトキシンが検出されている。ボリビアにおいても本症発生に赤唐辛子のアフラトキシン汚染が関与しているという仮説を立て、ボリビア産赤唐辛子中のアフラトキシンB1, B2, G1, G2の分析を行った。その結果、コントロールとした日本産の赤唐辛子は何れのアフラトキシンも検出限界以下の濃度(0.5ppb以下)であったが、ボリビア産赤唐辛子からはチリ産の約10倍量の11.3ppbのアフラトキシンB1及び0.6ppbのアフラトキシンB2が検出された。アフラトキシンG1、G2は検出されなかった。今後、アンケートの解析結果をもとに、赤唐辛子のアフラトキシン汚染と胆嚢がん発生との関連を明らかにする予定である。平成23年度の計画は、質問書から得られたデータと遺伝子多型の分析結果を連動させ、統計解析することであった。患者と対照者からの質問書及び血液試料の採取は平成22年度中に終了する予定であったが、23年度末までに目標とした試料数を集めることができなかった。質問書の回収と血液試料の採取はボリビアの研究者に委託して行ったが、研究期間内で採取できたものは、患者から10例、対照者から2例であり、その他に患者のパラフィンブロック標本50例を得ることができた。平成24年2月に海外研究者が勤務する病院(ボリビア日本消化器センター、ラパス)を訪問し、今後の試料採取についての打ち合わせを行い、今後も継続することで合意した。また、これまでに採取した質問書と血液試料、及び患者のパラフィンブロック標本を受け取り、日本に持ち帰った。環境要因の分析には、少なくとも患者、対照者それぞれ50例が必要のため分析は行わず、引き続き質問書の回収をお願いすることとした。対照者は、同病院に勤務する職員とし、平成24年末までに100名からの質問書の回収を行う予定である。遺伝子多型の分析も、患者、対照者数が少なかったことから分析は行わず、患者、対照者からの血液試料の採取を継続するよう要請した。このような状況下で、平成23年度には得られた試料で解析が可能であった遺伝子変異の分析を行った。パラフィンブロック標本を用いて、p53、K-ras遺伝子変異の検索を行った。

現在までに約20例の分析が終了しており、50例の分析が終了した時点で、ボリビアにおける胆嚢がんの発がん要因(内因性/外因性)を明らかにする予定である。
ベバシズマブ誘発性高血圧に対する降圧薬の効果比較検討

【研究目的】抗VEGF抗体ベバシズマブ(BV)は、殺細胞性抗がん薬よりも副作用の少ない薬剤として、様々ながん種におけるキードラッグとしての有効性が期待される製剤だが、高血圧・蛋白尿といった毒性が高頻度で発生する。現在、腎保護機能の観点からアンジオテンシンII受容体拮抗薬(ARB)が汎用されているが、その妥当性は詳細には検討されていない。そこで本国におけるBV誘発性高血圧に対する各種降圧薬の効果検証を本研究の目的とした。【研究方法】北海道大学病院消化器内科において大腸癌に対しBV含有レジメンが施行された患者を対象とし、電子カルテを用いて後方視的に情報収集を行った。観察期間は高血圧発症あるいはBV投与から1年とし、以下の項目について検討を行った。1.新規に高血圧を発症した群における、血圧変動ならびに降圧薬の処方内容の変化2.降圧薬を内服中の患者(ARB/ACE阻害薬群、Ca拮抗薬群、多剤併用群)における、高血圧および蛋白尿の発現率統計学的処理は対応のあるt検定、ならびにカイニ乗検定を用いて行った。【研究成果】1. BV誘発性高血圧に対しARBが投与された群は有意な血圧低下を示した(-11.3mmHg, p=0.009)。観察期間内、降圧薬初期投与量で治療を遂行できた患者は5/23だった。2.各群において蛋白尿の発現率と血圧コントロール率に有意な差はみられなかった(p=0.1, p=0.09)。またARBを内服していた群は、Ca拮抗薬を内服していた群と比べて、投与期間中に降圧剤の変更ないし増量が生じる患者が多い傾向にあった。(7/13 vs 3/16)【考察】本研究においては、ARBによる蛋白尿や高血圧の予防効果については証明できなかった。BV誘発性高血圧の制御においては、初期投与量の検討や、Ca拮抗薬の併用を積極的に行うことで、より早期に安定した血圧に到達できるものと推測する。
動的クォークの効果を取り入れた大規模数値シミュレーションによる格子QCDの研究

強い相互作用を支配する法則は量子色力学であると考えられており、その定量的研究は素粒子物理学の最も重要な課題の一つである。これを可能にしたのが格子量子色力学(格子QCD)であり、計算機の発達とともに数値シミュレーションにより物理量を定量的に求める方法が飛躍的に進歩して来た。特に動的クォークの効果を無視したクエンチ近似においては、大規模な数値計算が高統計で出来るようになり、種々のハドロン行列要素の連続理論での値が求まっている。しかし、これらの計算は近似計算であり、計算されたハドロンの質量スペクトルは実験値から5-10%程度ずれている。最近2フレーバー(u, dクォーク)の動的クォーク効果を取り入れた研究が行われ、このずれが半分以下になることがわかってきた。我々の研究の目的は、物理的に最も重要な(2+1)フレーバー(u, d, sクォーク)の動的クォーク効果を取り入れた格子QCDの研究を行ない、クエンチ近似に起因する系統誤差を排除しハドロン質量スペクトル等の物理量を求める事にあった。具体的には、(2+1)フレーバーQCDの大規模数値シミュレーションを格子間隔aがa【approximately equal】0.1fmおよび0.12fmの二つの格子上で行なった。これらの格子上で計算された物理量に格子間隔の2乗に比例した格子間隔依存性があると考え、a=0への外挿から物理量の連続理論での値を評価し、プレリミナリーではあるが実験値と矛盾しない質量スペクトルの値を得ることが出来た。またすでに得られている2フレーバーの動的クォークの効果を取り入れたゲージ配位を用いて、現象論的に重要な種々のハドロン行列要素の研究も行なった。最近の研究により、2フレーバー(u, dクォーク)の動的クォーク効果を取り入れることにより、このずれが半分以下になることがわかっている。我々は過去数年間、3フレーバーの動的クォークの効果を効率よく取り入れる新しいアルゴリズムを開発してきた。本年度は、有限の格子間隔から生じる系統誤差を小さく出来るO(α)improvedWilsonフェルミオンに対し新しいアルゴリズムを適用し、大規模数値シミュレーションを格子間隔α^<-1>【approximately equal】2GeVの格子上で行った。種々の中間子の質量スペクトルを計算し、sクォークの動的効果を取り入れることによりに実験値と誤差の範囲内で一致する質量スペクトルが得られることや、クォーク質量等の基本パラメーターが矛盾なく求められることを示した。また、2フレーバーの動的クォーク効果を取り入れたシミュレーションにより、Bファクトリー実験の解析に重要な役割を持つ、B中間子のバッグ定数の計算を行った。

しかし、これらの計算は近似計算であり、計算されたハドロンの質量スペクトルは実験値から5-10%程度ずれている。最近2フレーバー(u,dクォーク)の動的クォーク効果を取り入れた研究が行われ、このずれが半分以下になることがわかってきた。我々は3フレーバー(u,d,sクォーク)の動的クォークの効果を効率よく取り入れる新しいアルゴリズムを開発し、ハドロンの行列要素等の研究を続けている。本年度は、有限の格子間隔から生じる系統誤差を評価し、連続理論での物理量の値を求める研究を行った。物理量の格子間隔依存性は用いるフェルミオン作用によって異なる。格子間隔の2乗に依存した小さな系統誤差しか持たないO(α)improved Wilsonフェルミオンを採用し、格子間隔αがα【approximately equal】0.1fmおよび0.12fmの二つの格子上で質量スペクトル等を計算した。これらの格子上で計算された物理量に格子間隔の2乗に比例した依存性があると考えα=0への外装を行ない、プレリミナリーではあるが実験値と矛盾しない連続理論での質量スペクトル等の値を得ることが出来た。
名民生用デジタルカメラを利用したX線ラウエカメラの試作

本研究は、通常は専用CCDカメラとペルチェ素子や液体窒素による冷却を組み合わせて撮影するX線ラウエ写真を、近年とみに高感度化/高画素化が進んでいる民生用デジタルカメラを用いて撮影を行うことを目的としたものであり、撮像素子としてC-MOS(ISO6400相当)及びCCD(ISO3200相当)が用いられている民生用デジタルカメラを用いて実験を行うものである。実験はカメラ等の設置が簡易である透過ラウエ法を用い、試料後部にと、Ce-YAG系蛍光体を塗布した蛍光板、又はPolaroid社製ラウエカメラ内の蛍光板及び蛍光板に投影されたラウエパターンをカメラに導くための反射鏡を収めた暗箱を設置して行った。実験を行った結果、本来撮像ノイズの多さではCCDに比較してCMOSは不利であるが、それ以上にレンズの影響が大きく、今回使用したF値が2の複合レンズでは画像が暗く露光時間も長くなるため、今後は光の減衰の少ないf=50mm程度の単レンズを用いて実験を継続したいと考える。更に、蛍光体についても原料の混合比を充分に検討することが出来なかったため、あまり良い結果が出なかったが今後、蛍光体についても検討を進め高輝度かつ長残光性の蛍光体を用いて実験を継続していきたいと考える。また、アプリケーションの開発については、実験で撮影された画像が余りよくなかったために、IPによって撮影された画像を利用した評価を行ったが、代表的なラウエ斑点について10箇所程度を指定することによって結晶方位を同定することが可能になった。今回の結果は、22年度末発行予定の多元研技術室報告へ投稿する予定である。
安徽省阜陽出土『蒼頡篇』漢簡に関する基礎的調査と研究

(1)本研究の第一の成果は、今日まで不分明であった阜陽漢簡『蒼頡篇』の全容を十全な図版と釈文をもって提示できたことである(2)第二の成果は、調査によって獲得できた諸資料にもとづき、『蒼頡篇』の出土後の保存や研究の推移を解明したことである。(3)第三の成果は、前漢代における『蒼頡篇』の字句の増補と、法家思想を留めた用語を置く阜陽漢簡『蒼頡篇』の表現の実態を究明したことである。本研究は、曾ての汝陰國であった中国安徽省阜陽市から出土した前漢代時代の竹簡『蒼頡篇』について、保存機関等の協力を得ながら、原品の精査を進め、撮影(含旧写真複写)、文字採録等を行ない、遺文のデータベース化をはかり、秦代の成立とされる古籍の原形を復元して、古代識字教育課本の伝承と流布の実態を明かそうとするものである。本年度(平成23年3月31日)の研究実施計画夏期(7月17日)の海外渡航調査では、原簡の保存機関・阜陽博物館の所在地等に滞在して、関係人士の協力と支援を得て、同館所蔵の『蒼頡篇』残簡の実査、模写、及び撮影等を行ない、併せて旧写真資料(出土直後の原始写真等)の探索、入手、複製等も試みて、その後、出土情況等の確認を果たした。次いで秋、冬期(9月15日)には、撮影した写真の処理を含め、取得諸資料の整理、分析と共に、一部、調査協力者1名を用いて、古文献中に散見する『蒼頡篇』関連記事の抽出を試み、佛書、韻書、音義書等から相当数の残句、遺字を確認してデータ化した。その後春期(3月7日)の海外渡航調査では、頭初の阜陽市への再赴予定を変更し、北京へ到り、阜陽漢簡『蒼頡篇』研究には不可欠となる北京大学新牧の漢簡を閲覧した。関係諸家の支援を得て、原簡の一部を詳覧することが叶い、古籍『蒼頡篇』に関する研究を推進する重要な素材を得た。以上、本年度の調査、研究の実施状況は、計画、予定を超えるものとなった。本年度は、下記の通り、本課題と深くかかわりのある中国西北地方の甘粛省考古研究所所蔵の『蒼頡篇』(いわゆる「水泉子七言『蒼頡篇』簡)、北京大学所蔵の『蒼頡篇』の調査、研究、及びこれらの資料の阜陽漢簡『蒼頡篇』との対比研究を進めた。1)夏期の海外渡航調査では、甘粛省考古研究所所蔵の『蒼頡篇』(「水泉子七言『蒼頡篇』」簡)漢簡資料を初めて実見、調査を試みた。その結果、対象とした約100点余(大半は残簡)の『蒼頡篇』原資料は、保存状態が不良のため、消失しかけた部分があることを知り得た。このため、この資料にかかわる旧写真を通して釈読、研究することが不可欠となり、関係者から関連写真の閲覧及び入手をはかった。幸いにも関係者の理解と協力のもとに入手し得た旧写真に基づき、阜陽漢簡『蒼頡篇』との比較可能な簡牘、及びこれを補足できる簡順の抽出が果たせた。時に、甘粛省考古研究所主催の国際シシポジウムが開催されたためこれに参加し、『蒼頡篇』関連の学術報告を聴取、問題点を剔出することもできた。_2)春期の海外渡航調査では、.北京大学所蔵の『蒼頡篇』について再調査を試みた。当該資料は現在、1、2年後の公開、公刊を目指して整理作業を推進中であるが、その具体的状況の一部を確認することができた。ただし、多数知り得た原資料そのものについては、現在の未公開の原則に従って、暫時、公表等を控えねばならないこととなった。3)二次にわたる海外渡航調査で取得した資料、及び国内での資料分析等で得られた情報を蓄積、形態的・古文書学的な情報を含めて可視データ化するとともに、阜陽漢簡『蒼頡篇』及び『蒼頡篇』原典の復元を目指したテキスト校訂作業を進めている。本年度は、先ず、夏期(2012年8月14日)には阜陽博物館に再び赴いた。原簡の最終確認を行う予定であったが、原簡が脱水、漂白処理のため、荊州博物館に運ばれたまま、戻されるのが未定であったため、同館の関係者の協力を得て荊州博物館で処理をはじめる前に、これまでガラス管に封入された原簡を取り出した姿で撮影された原簡の写真を入手することができた。これらの写真をもとに、実物では確認できなかった部分などを把握することとなった。

なによりも阜陽『蒼頡篇』に関する最新の実態を確認したことが今回の最大の収穫となった。秋期(2012年11月1719日)武漢大学において、開催された武漢大學簡帛研究中心・北京大學出土文獻研究所共同開催の「中國簡帛學國際論壇2012秦簡牘研究」に招聘され、「阜陽漢簡『蒼頡篇』的現状及「政勝誤亂」之卑見」というタイトルのもとで報告を行った。本報告は、阜陽漢簡『蒼頡篇』の最新状況、及びそれに関わる先学達のこれまでの論考の不備や誤りなどについて私見、殊に法家思想の背景のある文言が確認されることを述べたものである。この折、参加者諸氏の阜陽漢簡『蒼頡篇』に関しての見解や、北京大学所蔵『蒼頡篇』に関する最新情報を聴取することが出来た。本年度は、上記の国際シンポジウム参加のほかに、これまで海外調査で得られた資料情報をもとに、現在確認し得た阜陽漢簡『蒼頡篇』の文字を逐字秦篆等との比較を進め、また水泉子簡、及び北京大学所蔵の『蒼頡篇』の異文についても分析、攷究を進めた。これらに基づき、文献学的、文字学的研究を行い、最終的な報告書をとりまとめ、研究の基盤に見据えられるべきデジタル写真資料を学会に提供し、また新知見の一部については、研究論文としても公表する予定である。前年度に引き続き、阜陽漢簡『蒼頡篇』原字の確定を進め、関連新資料(「水泉子七言『蒼頡篇』簡、北京大学所蔵の『蒼頡篇』簡)の実見を果たし、提供された資料の一部によって、諸先学の錯誤などを検出し、原典の一部の復元と分析に向けての基盤を概ね築けたため。24年度が最終年度であるため、記入しない。未公開関連新出資料情報の取得、及び阜陽出土原簡の保存処理(脱水、漂白処理)による未公開期間の出来の問題はあるが、極力関係機関に働きかけ、情報の収集を図ると共に、現在までに獲得、集積できた原簡写真資料、また関連文書資料等を用いて、原書の隷定を果たし、これをデータ化して、語辞、述語、句文構造の解析を進め、『蒼頡篇』原典の変容の実態を闡明する予定。