hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
カイコをモデルとした分散動原体型染色体における突然変異部位配列の特定

(2)何れのコンティグ中のクローンが転座部位を占有するのかはコンティグが占める領域をすべてカバーするクローンをそれぞれ別色ラベルし、BAC-FISHにより解明する。コンティグ番号が特定されたところで、(3)今度は4クローンに異なるラベルを施し、転座部位をブリッジするクローンの特定を行う。としていた。(1)について従来のコンティグ情報からカイコゲノム情報統合データへとアップグレードして研究を進め、これらより、分譲を受けた3品種の変異の実体が染色体レベルで証明された。(2)についてr501では付着方向が判明し、H25年度のPCRによる付着点解明に向けた研究へと着手可能である。相互転座系統のr52とr53系統ではカイコゲノム情報のコンティグ内へと情報統合された結果が得られており、おおむね順調と判断できる。(3)のr52とr53に関するブリッジクローンは特定までには至っていない。これらの状況から当初計画からやや遅れていると判断せざるを得ないものの、研究担当者はH24年度当初に所属変更となったため、新たなラボにおいて研究セットアップが必要となるといった計画当初想定され得なかった状況が生じた。本研究に必須の蛍光顕微鏡などの精密機器やBACライブラリーと保存用超低温冷凍庫の移動には3ヶ月以上を費やさざるを得なかった。よって研究使用した額も当初予定を下回り、次年度に盛り込んだ。これらことを加味すれば、実働時間に対する成果としてはおおむね順調と言っても過言ではない。r501の付着点配列解明については、当初計画通り進める。一方、r52とr53に関してはブリッジBACクローンの特定から早急に行う。万が一、相互転座に関わって非常に大きな欠失を含んだ染色体突然変異が生じていたとした場合、単一のBACによるブリッジングは当然不可能となる。しかしながら、2クローンでのブリッジは絶対に可能であるため、こうした想定も加味して研究を行う。いずれかの方策により相互転座付着点に関するBACブリッジと対応するカイコゲノム情報を統合して、以下の通り研究を進捗する。(a)ブリッジすることが確認された2BACクローンの配列情報から方向と位置に関して510Kb毎にSTSプライマーを各ストランドに設計し、(b)転座染色体系統のゲノムDNAをテンプレートとして、4方向の複数プライマーの2方向分全てを用いた、計4種類のPCRを行う。(c) PCR産物が検出された組み合わせについて、プライマーを絞り込み、転座部位を含むDNA増幅産物を得る。(d)3品種の転座部位塩基配列を決定し、カイコゲノム情報と配列比較することで、転座部位の共通性および相違を解明する。なお、(b)に関しては、突然変異染色体をホモに持つ個体が不可欠である。また、変異ホモ個体は致死とされる。このためNBRPカイコで配布する系統は変異ヘテロである。本年度配布の始まりともに各系統を入手し、配布を受けた個体の次世代のホモ胚子をヘテロ個体相互の交配から準備する。これらホモ胚子より個別にゲノムDNAを抽出することでテンプレートの調整が行えると計画する。本年度未使用となった研究費は上記したとおり、研究者と研究機器の移動による研究開始の遅れが原因である。このため、これら研究費はBAC-FISHに使用するDNAプローブ作製に関わる消耗品費とFISHデータの保管、解析に関する費用として使用し、早急にブリッジクローンの取得に勤める。
走査トンネル分光顕微鏡法による超伝導渦糸ダイナミクスの実空間高時間分解能測定

本研究において我々は、、第二種超伝導体YNi_2B_2Cを試料とし走査トシネル分光顕微鏡法を用いて、超伝導渦糸ダイナミクスを実空間・実時間で測定した。渦糸ダイナミクスは「マクロな物体の摩擦を伴う運動」という一般性を持った物理現象であり、それを実空間で測定し微視的に解明することは、共通した背景を持つ他の物理現象の研究にも大きな寄与を持つ。測定は極低温0.45K、高磁場14Tにおいて行った。温度、磁場ともに、渦糸ダイナミクスを実空間測定した実験例が無い未知の領域である。測定範囲は最大で500nm四方であり、1Tを超える高磁場では数百個の渦糸を一枚の画像の中に捉える。さらに測定時間は一枚当たり約10秒まで短くし、渦糸の動きを高時間分解能で測定可能となった。渦糸を駆動する際には、外部磁場を0.2[T/hour]の一定レートで変化させた。磁場を上げると渦糸は試料中心へと運動する。その様子を走査トンネル顕微鏡で直接観測した。渦糸は集団として揃って運動していた。運動は磁束クリープであり、一回の移動は渦糸の大きさ程度(数nm)であった。極低温高磁場において渦糸格子は高密度の刃状転位を有し、転位のすべり面を境界としてずれ変形を示した。この観測結果から、渦糸格子は転位のすべり面を境界とする"渦糸集団"に分かれて運動することを明らかにした。渦糸ダイナミクスの運動単位である渦糸集団を実空間で観測したのは、この実験が初めてである。さらに、渦糸集団のサイズ、渦糸集団の境界の性質、などに関して磁場依存性を含めて測定した。
自律的分散計算論の構築

巨大分散システムを分散計算構造の観点から統一的に理解することを目標に,巨大分散システムに自律性をもたらす要因の解明に取り組み,以下の結果を得た:(1)Population Protocolモデルの振動現象:状態が振動するPopulation Protocolが存在する条件,設計方法を明らかにした.(2)2次元空間上を移動する自律分散ロボットの自己組織化:ロボットの同期性,記憶の有無,ランダム性が自己組織化能力に与える影響を解明した.(3)延長申請を行った最終年度では,3次元空間上を移動する自律分散ロボットの研究を行い,回転群と群が作用する点集合が,自己組織化能力に本質的であることが分かった.平成25年度の研究実施計画として、分散システムの領域複雑さを掲げた。しかし、平成24年度の研究実施計画が確率的自己安定性の理論であり、ランダムウォークのような確率的システムに関する発表が業績欄に混じっている。以下に述べる基本的な結果を纏めることができ、満足できる一年であったと総括している。具体的に述べる。最大の収穫は自律分散ロボットシステムに関するものである。このシステムに属するロボットは識別子を持たず、共有の座標系や情報を交換するために通信機能を持たない。このようなロボット群をある幾何パターンに整列させる問題を検討した。たとえば、ロボットを一直線上に並べるといった問題である。一般に、ある問題の可解性はロボットに搭載されている記憶の量(領域複雑さ)とロボット群の動作の同期の程度に強く依存している。しかし、我々は、ロボットシステムが形成できる幾何パターンの種類は、領域複雑さと同期の程度と(ほとんど)関係しないことを証明できた。記憶がない完全非同期ロボットは、無限の記憶を持つ完全同期ロボットと(2台のロボットによる点の形成を唯一の例外として)同じ種類の幾何パターンを形成できる。この成果はSIAM J. Computing誌に投稿済みであるが、査読中であり、残念だが業績欄には載せていない。上記のパターン形成問題の中で最も難しい問題は、上記の結果から分かるように(意外なことに)2台のロボットの一点集合問題である。従って、この場合を詳しく検討することで、記憶のパターン形成における役割が明確になる。学会発表1はこの立場から記憶の役割を明らかにした。学会発表2では、確率的自己安定性の理論を構築する中で現れた、局所情報と大域情報のシステムに与える影響を評価する問題を解決しようとしたものである。平成24年度の研究実施計画として、確率的自己安定性の理論を掲げた。結果として、業績欄に示した成果を上げることができ、一応満足できる一年であったと総括している。具体的に述べる。自己安定性は、分散システムが任意の回数の一時故障に耐えて、正常な状態に自動的に復帰するような性質であり、人手で復帰操作ができないような巨大分散ネットワークや、そもそも、一つずつ制御することが困難である分子ロボットシステムでは必須の性質であるが、その実現は決定性アルゴリズムを考える限りは困難であることが知られている。そこで、条件を少し緩和して、確率的な自己安定性の獲得手法の確立を目指して、検討を開始した。具体的には、業績[Yamashita et al, 2012]は、確率的自己安定性とその解析道具としての動的なグラフ上での乱歩について、我々の立場を招待されて講演したものをまとめたものである。業績[Mizoguchi et al, 2012]は、Mediated Population Protocolと呼ぶ(アルゴリズムについては)決定性の分散計算モデルに対する自己安定問題の解決に必要なメモリの量を評価したものであるが、結果は極めて悲観的であり、解決には少なくともプロセス数に比例するだけのメモリが必要であることが分かった。しかし、この事実から、確率的自己安定性の重要性が改めて明らかになった。業績[Yamauchi et al, 2012]は、確率的自己安定性を持つシステムの設計論を述べたものであり、ランダム性が出現する2つの場所、すなわち、環境とアルゴリズムにおけるランダム性のシステムに与える影響を検討した。最後に、業績[Hosaka et al, 2012]では、確率的自己安定システムの主要な解析の道具である乱歩を検討した。ここでは、一つの粒子の乱歩ではなく、複数の粒子の乱歩が対象になっている。本研究の目的は巨大分散システムを分散計算構造の観点から統一的に理解することである.本年度が最終年度になる予定であったが,一年延長をお願いし,許可を頂いている.本年度は,特に,分子ロボットに対する研究から現れた,以下に述べる2つの研究を行い,研究の伸展が予想以上であったので,上記をお願いするに至った.(1) Population Protocolモデルにおける振動現象の研究:Population Protocolでは,従来は,初期状態と十分に時間が経過した後で安定する状態との間の関係を関数として捕らえ,実現可能な関数の族が検討対象であった.我々は, Population Protocolを,たとえば,化学反応のモデルと捕らえて,その時間発展に興味を持って検討した,特に,状態が振動する現象に注目し(振動の発生は自律性の発現という視点から興味がある),環境の変化に従って振幅や周波数が変化するようなPopulation Protocolが存在するための条件,およびそのようなPopulation Protocolを設計する方法をFourier変換を参考にして明らかにした. (2) 3次元的な分散モデルの研究:本研究の大きな目的は分散問題に現れる情報構造の解析であった.

3次元空間を移動するロボットの研究が本年度の主要なテーマであり,いくつかの成果を得たが,特に, 3次元空間を移動するロボットの平面合意問題では,回転群の形,特に,群と群が作用する点集合が,合意問題の可解性に本質的であることが分かった.合意問題を解決するためには対称性の破壊が必要であり,群こそが対称性を扱う数学的ツールであるから,上記の結論は自然である.そして,この事実は,他の分散システムの合意問題にも適用できると思われ,その理論化に着手しようとしている.本研究の目的は巨大分散システムを分散計算構造の観点から統一的に理解することである.平成26年度が最終年度になる予定であったが,研究期間を一年間延長し,平成27年度も実施した.延長理由は(1)Population Protocolモデルにおける振動現象の研究と,(2) 3次元的な分散モデルの研究の伸展が予想以上であったことであり,従って,本年度はこの2点について研究を行った.まず(1)について: PopulationProtocolモデルの基本要素の一つにスケジューラがあり,公平性を持つ決定的で集中的なスケジューラが使用されることになっている.しかし,このような基本的なPopulation Protocolモデルの下では,自律分散的な問題である自励振動を発生する問題の本質が典型的な集中型制御を指向するリーダ選挙問題であることが分かった.次に,PopulationProtocolモデルを自然分散システムのモデルに近づけることを目的として,スケジューラを確率的で分散的なものに変更して,自励振動を設計した.次に(2)について: 3次元空間を移動するロボットの平面合意問題では,回転群の形,特に,群と群が作用する点集合が,合意問題の可解性に本質的であることが既に分かっていた.本研究では,まず,自律分散ロボットモデルと他の分散計算モデルの関係を考察し,自律分散ロボットモデルを自然に拡張することで,巨大分散システムを分散計算構造を検討するための一般モデルとすることができることを確認した.そして,計算機ネットワークモデルやPopulation Protocolモデルを含む複数のモデルについて,群が対称性解消に果たす役割を検討した.多くの性質を導くことができているが,現状では,検討は未完成であり,科研費を頂いて,並行して行っている研究に引き継いで行きたい.巨大分散システムを分散計算構造の観点から統一的に理解することを目標に,巨大分散システムに自律性をもたらす要因の解明に取り組み,以下の結果を得た:(1)Population Protocolモデルの振動現象:状態が振動するPopulation Protocolが存在する条件,設計方法を明らかにした.(2)2次元空間上を移動する自律分散ロボットの自己組織化:ロボットの同期性,記憶の有無,ランダム性が自己組織化能力に与える影響を解明した.(3)延長申請を行った最終年度では,3次元空間上を移動する自律分散ロボットの研究を行い,回転群と群が作用する点集合が,自己組織化能力に本質的であることが分かった.
沿岸域から内陸域にいたる広域大気汚染に関する研究

本研究は、過去数年間にわたって実施してきた臨海地域および内陸域それぞれにおける大気汚染の研究成果を総括的に解析し、大気汚染物質の大気境界層-自由大気間の交換や、地表面への沈着をはじめ、汚染物質の変質を含む輸送と収支において局地風系の果す役割を明らかにするとを目的とする。1.沿岸型大気汚染一次汚染物質(NOx)濃度は朝・夕の交通量増加時に高く、夕方から翌朝まで高い。沿岸域ではNOx濃度は朝に最高濃度が出現し、午前中の陸風時に比較的高い濃度を維持する。二次汚染物質(主として【O_3】)濃度は日の出と共に増大し始め、陸風から海風へ交替すると共に、急増し、海風最盛時に最高となる。その頃NOx濃度は最低である。夜間から早朝にかけての陸風時にOxはバックグラウンド濃度以下となる。同じような気象状態が続くと、Ox濃度にも同様な日変化が見られるが、その最高値は高くなり、閉鎖的風系の蓄積効果を示す。2.内陸型大気汚染一般に、【O_3】は、一次汚染物質として排出されたNOxなどの紫外線による光化学反応によって生成され、日中生成された【O_3】は夜間に上層の自由大気との混合やNOxとの化学反応、或いは地面への吸着などによって消滅すると考えられる。したがって【O_3】濃度は日射量の大きくなる日中に高く、そして一次汚染源付近で高くなる。上田における【O_3】濃度の日変化によると、正午過ぎに【O_3】濃度は高くなっているが、その値は50ppb程度であり、内陸盆地域で通常観測されるものである。一方、午後遅くに【O_3】濃度は急激に高くなり正午頃の値よりはるかに高い100ppb以上に達すことがある。前者は盆地内の汚染源に起因する局地的汚染、後者は長距離輸送による広域的汚染と考えられる。
自然炎症を基盤とした前立腺癌の進展におけるミッドカインの役割解析

前立腺癌の進展に関わる分子は多岐にわたるが、今回の研究で自然炎症に関連するとされるミッドカインに注目し、その役割について解析した。各種前立腺癌細胞株での発現を確認したところ、LNCaP細胞のみで確認することが出来た。次にLNCaP細胞を用いてミッドカインの発現変化を種々の条件下に検討したところ、ジヒドロテストステロンや上皮成長因子または酸化水素による酸化ストレス刺激により発現の増加が観察されたがそのレベルは最大でも1.5倍程度であった。以上より、前立腺癌におけるミッドカインの役割は存在するものの、おそらく単独では軽微であり、他の関連因子と合わせて検討する必要があると考えられた。「研究の目的」本研究の目的は前立腺癌のアンドロゲン非依存性増殖およびその進展に関わる因子の候補としてMK(ミッドカイン)の役割を解析し、最終的には臨床で最も問題となる去勢抵抗性前立腺癌の診断・治療に結びつくような知見を得ることにある。平成24年度はまずは23年度に得られた結果をさらに確認することに重点を置いて研究を進めた。「研究の成果」1条件設定に関する実験:前回までに設定できたMKの1次抗体としてE社抗体を用いてウェスタンブロットでの検出再現性の確認を行った。やはり、MKリコンビナント蛋白のポジティブコントロールに比較すると前立腺癌細胞株での発現は各種感度増幅を試みるも全体にかなり弱い発現であった。しかしおおむねシングルバンドとして検出が可能な状態となった。細胞株の種類に関してはやはりLNCaP細胞で(+)、PC-3、DU145細胞で(-)であり、以上の結果から、以後の実験にはLNCaP細胞を主に使用することとした。2LNCaP細胞に対する各種刺激時におけるMK発現変化に関する実験:前年度までの結果に基づき、DHTおよびEGF添加による発現変化を検討した。DHT10nMによりコントロールに比較して軽度の発現増加が認められたが、その程度はわずかである。用量および時間依存性に関しては検討を継続しており、今回明確な結論を得るには至らなかった。EGFに関しても同様で、やはり10分後の早い時間帯での発現上昇傾向が認められたが、これもその程度はわずかであり、再現性の検討が必要である。発現の程度が低いものの、なんらかの増殖刺激によるMKの反応は観察されるようであるがその詳細は未確定である。平成25年度はこれまでに得られた結果を確認するとともに、これをさらに発展させることに重点を置いて研究を進めた。「研究の成果」1LNCaP細胞に対する各種リガンド刺激時におけるMK発現変化に関する実験:前年度までの結果に基づき、その再現性を確認するためDHTおよびEGF添加による発現変化を検討した。DHT10nMによりコントロールに比較して軽度の発現増加が認められたが、その程度はやはりわずかであり最大でもコントロールの1.5倍以下であった。これに加えてリガンド用量および時間依存性に関しての検討を行ったが、DHT20nM, 50nMへの用量増加によってもその発現変化、特に発現の増加は明らかでなかった。また、各種曝露時間の設定においてもその時間依存性は明瞭なものでなかった。一方EGFに関してもやはりDHTと同様の結果であった。すなわちEGF刺激10分後の早い時間帯での発現上昇傾向が認められたが、これもその程度は1.2-1.8倍程度であり、やはりMK発現との強い関連性は指摘できなかった。また、今回は酸化ストレス刺激としてH2O2添加によるMKの発現変化を同様の手法を用いて解析した。その結果、MK発現の軽度上昇が2ー3時間のH2O2曝露により観察されたがその程度はDHT, EGFとほぼ同様であり、特徴的な変化は検出できなかった。H2O2刺激による細胞形態の変化がある程度明瞭に観察されるにもかかわらず、これに対するMKの発現変化は軽微であったことからも前立腺癌細胞の種々の刺激(増殖・ストレス)下においてMKの役割は存在するものの軽微であり、前立腺癌のアンドロゲン非依存性増殖との関連については他の機序の役割と合わせて検討する必要があると考えられた。「研究の目的」本研究では前立腺癌のアンドロゲン非依存性増殖・進展に関わる因子としてのミッドカイン(MK)の役割を解析することを目的とする。平成23年度は研究実施計画に基づいて、まずヒト前立腺癌におけるMKの発現を主として培養細胞系を用いて解析した。「研究の成果」(1)前立腺癌細胞株におけるMK蛋白発現のWestern Blot

解析:LNCaP, PC-3, DU145の3種類の細胞を用いて、抗MK抗体2種類を用いて検討したところ、発現が確認できなかったため、ポジティブ・コントロールとしてリコンビナントMKを使用したところ、S社抗体では検出できなかったが、E社抗体ではポジティブ・コントロールのバンドが蛋白量に比例して検出された。よって、以下の実験にはE社抗体を1次抗体として使用することとした。しかしながら、ポジティブ・コントロールに比較して、各Cell LineでのMK発現は極わずかであり、この条件での発現確認は困難であった。(2)細胞処理後のMK発現解析:通常培養条件下ではMKの発現が確認されなかったため、LNCaP細胞をDihydro-Testosterone (DHT)またはEpidermal Growth Factor (EGF)で刺激した試料を用いて解析したところ、DHT、EGF処理いずれにおいても特異的バンドが検出された。EGFに関しては刺激後10分でわずかではあるが刺激2時間後よりも高い蛋白発現が確認された。同様にPC-3細胞に関してもEGF刺激を行ったが、こちらでは特異的バンドは検出されなかった。以上より、使用可能な1次抗体の選定ができたが、MK蛋白は少なくとも高発現はしていないことが推測された。またcell lineの種類によっても発現量に差があること、また何らかの増殖刺激で(特にLNCaP細胞に関して)その発現量が増加することが示唆された。再現性の確認を鋭意行ってきたが、全体としての発現レベルが低いため、その詳細の解析および次のステップへの進行がなかなか難しい状況である。前立腺癌細胞株におけるミッドカイン発現量は当初の予想以上に低いものであり、検出条件の設定に時間を要しているため。現在までに得られた条件下での検討においては、添加刺激の方法を増殖刺激から次の目標であるストレス刺激において検討を開始する。ただし、発現レベルがやはり低い可能性も十分考えられるので、同時に入手可能な他の種類の抗体などの使用も検討する。今後、まずは解析条件をさらに探りながら、種々の細胞刺激下における発現パターンを早急に検討する。その中で最も適正な試料を用いて、他の炎症関連分子との関連性を検討する。前年度に引き続き主として試料作製や発現解析のための各種試薬および消耗品などに使用する予定である。初年度に引き続き主として試料作製のための各種試薬、消耗品の購入に使用する予定である。
シェイクスピア劇の中層的隠喩構造の研究

シェイクスピア劇をイメ-ジという点から考える批評や研究はこれまでも数多く成されてきた。しかし、劇という構造体における隠喩の位置に関しては、これを明確に規定したものはない。本研究においては、特殊的には隠喩、一般的にはイメ-ジを、劇の表層と真相の間に位置する中層的存在と規定する。そして、これを様々な精神的領域における中層的存在物と対応関係にあると考える。例えば精神の真相と表層の中間にあるものとしての夢がある。また合理精神と非合理的意識の中間にある物としての錬金術やフォ-クロアがある。シェイクスピア劇における隠喩もこれと対応関係にあるならば、これらに関する学問的成果を利用することによって、シェイクスピア劇における隠喩構造を解明できるという観点から、『真夏の夜の夢』、『テンペスト』、および『マクベス』についての研究を行った。1.『真夏の夜の夢』の中層的隠喩構造は、月の三相についてのフォ-クロアに基づいている。そして、この劇の中に現れる弓のイメ-ジもこの隠喩体系の中に組み入れられている。弓は本来呪術的要素をもっているが、それはこの劇の五月祭的要素と結び付き、さらにはロビン・フッドや、ボトムの大地的道化という本質と結び付いている。2.『テンペスト』の中層的隠喩構造は錬金術である。「びんの精霊」という民話の話型を用いながら、それがパラケルスス伝説と結び付くことによって錬金術的隠喩構造を形成していることを明らかにした。3.『マクベス』においてはfair is foulというモチ-フが隠喩構造の核にあり、それを中心に様々なイメ-ジが組識されていることを解明した。1.この劇の基本構造は「老→死→再生」という月の三相の変化であり、かつ、その三相に付随する民間伝承、即ち、Old moonにおいては地上の万象は衰退に向い、interlunationでは最悪の事態となり、new moonにおいては上昇に向うという俗信に基づいているという論点に関して、この民間伝承がシェイクスピア時代において存在していたことを明確に示す文献が見出された。2.この劇の隠喩構造に関しては、弓の比喩( ́the moon-like to a silver bow ́)の重要性が明らかになった。月と弓はその形状のみならず神話においても結びついている。月神Dianaは弓を持つ狩りの神であり、また豊饒神でもある。さらに弓矢は季節祭と関係する呪具であり、エリザベス朝でも春、森の中に矢を射る儀式が行われたことを示す文献が見出された。さらに弓はRobin Hoodと結びつく。Robin Hoodは季節祭においては自然の再生力の象徴であり、またLord of Misruleとして道化としての性格をも合せ持つ。道化は転倒と笑いによって硬直した生命を一旦死に追いやり、さらにそこから再生させる。この劇においてはRobin Hood-Lord of MisruleはRobin Goodfllow(Puck)とBottomという形で現れる。Ruckは森を狂気の世界と化し、混沌=死の世界に変え、Bottomはロバ(ロバ祭に見られる転倒と、生命力の象徴)となって、この劇の大地的生命力の象徴となる。このようにして、弓の比喩もまたこの劇の隠喩構造の中心に位置し、Puck & Bottomのこの劇における役割に新たな光を与えるものであることが明らかになった。本年度の研究対象は『テンペスト』である。ア-ルネ・トムソンの分類による民話の話型331番は「ビンの精霊」であり、これは「(1)ある男が木等に封じ込められた魔物を解放する(2)その礼に魔力を授かる(3)男は魔物を再び木等に封じ込める(あるいは自然に返す)」という形を取る。木に閉じ込められたエアリエルと魔術師プロスペロの原型はこの話型である。

また、この話型を原型とする民話いの一つに、パラケルススとメルクリウスにまつわる話がある。シェイクスピアがこのパラケルスス伝説を念頭においてエアリエルとプロスペロの話を作った可能性は否定できない。もしそうならプロスペロの原型は錬金術師であり、エアリエルは錬金術の中核にあるメルクリウスということになる。錬金術的思考によれば、物質(hyle=木)には「神の息(=霊=プネウマ)と呼ばれる第五元素メルクリウスが含まれており、錬金術師はこれを物質中から抽出し錬金の術を行う。これはプロスペロとエアリエルの関係にあてはまる。『テンペスト』の進行は「(1)嵐(2)離散(3)ファ-ディナンドとミランダの出会い(4)ファ-ディナンドの苦役とアロンゾの良心の呵責(5)和解と再会(6)エピロ-グ」となっているが、これは代表的な錬金術の過程「(1)溶解(2)分離(3)結合(4)腐敗(5)凝固(6)投射」と様式においても、用いられている隠喩においても一致する。すなわち、プロスペロは、エアリエル(空気の精=プネウス=メルクリウス)の力を用いて混沌としての「嵐」から新たな調和(コスモス)を生み出す事に成功する。このように『テンペスト』という劇は、民話的話型と錬金過程が複合的な中層構造を成しており、そこに用いられている様々な隠喩は、この構造によって組織されて表層に現れているという事が判明した。シェイクスピア劇をイメ-ジという点から考える批評や研究はこれまでも数多く成されてきた。しかし、劇という構造体における隠喩の位置に関しては、これを明確に規定したものはない。本研究においては、特殊的には隠喩、一般的にはイメ-ジを、劇の表層と真相の間に位置する中層的存在と規定する。そして、これを様々な精神的領域における中層的存在物と対応関係にあると考える。例えば精神の真相と表層の中間にあるものとしての夢がある。また合理精神と非合理意的識の中間にある物としての錬金術やフォ-クロアがある。シェイクスピア劇における隠喩もこれと対応関係にあるならば、これらに関する学問的成果を利用することによって、シェイクスピア劇における隠喩構造を解明できるという観点から、『真夏の夜の夢』、『テンペスト』、および『マクベス』についての研究を行った。1.『真夏の夜の夢』の中層的隠喩構造は、月の三相についてのフォ-クロアに基づいている。そして、この劇の中に現れる弓のイメ-ジもこの隠喩体系の中に組み入れられている。弓は本来呪術的要素をもっているが、それはこの劇の五月祭的要素と結び付き、さらにはロビン・フッドや、ボトムの大地的道化という本質と結び付いている。2.『テンペスト』の中層的隠喩構造は錬金術である。「びんの精霊」という民話の話型を用いながら、それがパラケルスス伝説と結び付くことによって錬金術的隠喩構造を形成していることを明らかにした。3.『マクベス』においてはfair is foulというモチ-フが隠喩構造の核にあり、それを中心に様々なイメ-ジが組織されていることを解明した。
クロム酸塩暴露による癌発生ラットを利用しての中枢性肺扁平上皮癌の発生機序の解明

我々はこれまでヒトクロム肺癌について,p53の特異的な異常,マイクロサテライト不安定性が高頻度に存在すること,修復遺伝子蛋白hMLH1の発現が低下していることを報告してきた.中枢性肺扁平上皮癌の発生機序を解明するために,ラットの気管支にクロム酸塩を曝露させて肺癌を発生させることを試みた.生後6.12週の雄のJcl Wisterラット15匹を用い,ネンブタール麻酔後,気管切開を施しクロム酸塩(クロム酸ストロンチウム)のベレットをKuschner等のの手法に則って気管支腔内に留置した,ベレット貿置後9ヶ月経過した個体を犠死させ,ベレットが貿置していた部分を中心に気管支の変化を観察した.得られた病変は扁平上皮癌(気管支上皮下を浸潤性に増殖する腫瘍細胞)15例中1例(7%),異形成または上皮内癌(核異型の強い細胞は上皮層内に限局し基底膜を越えない)15例中7例(47%),扁平上皮化生(扁平上皮層の基底膜上で正常気管支上皮を置換)15例中8例(53%),杯細胞過形成(肥厚した線毛円柱上皮で軽度の炎症を示す)15例中1例(33%)またベレット留置側と反対側の気管支は全例で多列線毛上皮を示し正常であった.更にクロムの蓄積量をX線分析顕微鏡(XGT-2700,HORIBA,京都)により測定し病変の強さと対比した.正常上皮(n=24)0,500±1,354S.D.(×1000cps),杯細胞過形成(n=14)0,713±1,062,扁平上皮化生(n=8)0,941±1,328,呉形成または上皮内癌(n=5)5,400±5,320,扁平上皮癌(n=4)1,150±1,493,異形成,扁平上皮癌病変におけるクロム蓄積量は正常気管支上皮,杯細胞過形成病変のそれに比べ,有意に高値であった。ラットの気管支をクロム酸塩に曝露させたクロム肺癌モデルの作成Levy et al.は1986年にラットのクロム肺癌モデルを作成しこれがヒトクロム肺癌モデルに酷似していることを報告している.今回,我々も中枢性扁平上皮癌の発生機序を解明するためにラットにクロム酸塩を曝露させクロム肺癌を発生させることを試みた.生後12週のJcl Wisterラットを用いネンブタール麻酔後,気管切開を行いクロム酸塩のペレットをKuschner et al.の手法に則って気管支腔内に留置した.クロム酸塩はクロム酸ストロンチウムとクロム酸カルシウムを使用しこれらとコレステロールを1:1の割合で混合したものを熱し融解させ,らせん状に成形した長さ5mmの鋼線でからめ取りクロム酸塩のペレットを作成した.ペレット留置後9ヶ月経過した個体を犠死させ,クロム酸塩が留置されていた部分を中心に気管支の変化を観察した.クロム酸ストロンチウムを投与されたラット8匹中,扁平上皮癌2例,carcinoma in situ 3例,扁平上皮化生1例,異形性1例,無変化1例が認められた.

またクロム酸カルシウムを投与されたラット8匹中,扁平上皮癌1例,carcinoma in situ 2例,扁平上皮化生2例,異形性2例,無変化1例が認められた.今後.クロム酸塩を投与されるラットの個体数を増やし,得られた病変に対して,病理組織学的,分子生物学的検討を加えMicrosatellite InstabilityやDNA修復遺伝子発現状況等を明らかにしていく予定である.我々はこれまでヒトクロム肺癌について,PSSの特異的な異常,マイクロサテライト不安定性が高頻度に存在すること,修復遺伝子蛋白hMLH1の発現が低下していることを報告してきた.中枢性肺扁平上皮癌の発生機序を解明するために,ラットの気管支にクロム酸塩を暴露させて肺癌を発生させることを試みた.生後6,12週の雄のJelWisterラット15匹を用い,ネンブタール麻酔後,気管切開を施しクロム酸塩(クロム酸ストロンチウム)のペレットをKusehner等の手法に則って気管支腔内に留置した.ペレット留置後9ヶ月経過した個体を犠死させ,ペレットが留置していた部分を中心に気管支の変化を観察した.得られた病変は扁平上皮癌(気管支上皮下を浸潤性に増殖する腫瘍細胞)15例中1例(7%),異形成または上皮内癌(核異型の強い細胞は上皮層内に限局し基底膜を越えない)15例中7例(47%),扁平上皮化生(扁平上皮層の基底膜上で正常気管支上皮を置換)15例中8例(53%),杯細胞過形成(肥厚した線毛円柱上皮で軽度の炎症を示す)15例中5例(33%)またペレット留置側と反対側の気管支は全列で多列線毛上皮を示し正常であった.更にクロムの蓄積量をX線分析顕微鏡(XGT-2700,HORIBA,京都)により測定し病変の強さと対比した.正常上皮(n=24)0.55±1.354S.D.(X1000cps),杯細胞過形成(n=14)0.713±1.062,扁平上皮化生(n=8)0.941±1.328,異形成または上皮内癌(n=5)5.400±5.320,扁平上皮癌(n=4)1.150±1.493,異形成,扁平上皮癌病変におけるクロム蓄積量は正常気管支上皮,杯細胞過形成病変のそれに比べ,有意に高値であった.
糖尿病臓器合併症の個別化医療にむけた抗エリスロポエチン受容体抗体の基礎臨床的検討

本研究では、エリスロポエチン(EPO)とその受容体EPORを介する臓器合併症、ことに腎症の機序解明を目指し、糖尿病臓器合併症の共通進展機序である炎症、線維化に着目した。ヒト培養血管内皮細胞を用いて高糖,EPO投与有無による網羅解析とそこから得られる特異的応答分子機構を検討した。新規パスウェイとしてthioredoxin interacting proteinなどインフラマゾーム活性化につながる経路を同定した。一方、EPO投与により炎症、線維化シグナル、サイトカイン発現の低下を確認した。これらより、EPOはその受容体を介して、炎症、線維化カスケードの制御を行い病態に影響を与えている可能性がある。糖尿病性腎症はじめ心血管病変など糖尿病臓器合併症は増加の一途である。腎症など糖尿病臓器合併症は予後不良であり、病態解明と予後を示すバイオマーカー確立は喫緊の課題である。本研究は、腎症など臓器合併症、生命予後に重要な貧血に注目し、エリスロポエチン受容体(EPOR)阻害を介する臓器合併症、貧血の機序解明を目指す。糖尿病臓器合併症の共通進展機序である高糖刺激に着目し、培養ヒト血管内皮細胞におけるエリスロポエチン(EPO)投与有無による網羅解析とそこから得られた特異的な共通応答分子とその障害機構を検討した。高糖下での培養ヒト血管内皮細胞では既知の約35000の遺伝子群の発現変動に加えて、ことに向炎症性遺伝子群発現亢進を確認した。一方、EPO投与によりTRAF4などの生体環境のホメオスターシス維持に関与する遺伝子の発現亢進、炎症シグナルの低下を確認した。これらの結果より、EPOR阻害に伴い、炎症カスケードの遺伝子発現と細胞保護につながる環境調節因子低下が生じる可能性がある。そのため、細胞機能障害、炎症増悪から糖尿病臓器合併症の発症、進展につながることを推測した。我々が世界に先駆けて発見した抗EPOR抗体の臨床検査診断法としての臨床的意義に関連し、「エリスロポエチン応答性の診断方法」として特許登録された(平成26年9月26日、特許第5618038号)。今後、腎、心病変など糖尿病臓器合併症にはたすEPO-EPORシグナルを介した分子基盤を確立する。増加の一途をたどる糖尿病により、腎症はじめ全身の臓器合併症が生じる。この臓器合併症のひとつである糖尿病性腎症は新規透析導入原疾患の第1位であり、その克服が期待されている。本研究は、腎症など臓器合併症、生命予後に重要な貧血に関連し、かつ腎臓から産生されるエリスロポエチン(EPO)に注目した。これまで我々は新規のエリスロポエチン受容体(EPOR)阻害作用を有する抗EPOR抗体を同定した。最近になり、本抗体と全身性エリテマトーデスの臓器病変との関連を報告した(J Rheumatol2016)。本研究では、EPO-EPORを介する臓器合併症の機序解明を目指し、糖尿病臓器合併症の共通進展機序である炎症、線維化に着目した。ヒト培養血管内皮細胞を用いてEPO投与有無による網羅解析とそこから得られた特異的な共通応答分子とその障害機構を検討した。新たなパスウェイとしてthioredoxin interacting proteinなどインフラマゾーム活性化につながる経路を同定した。一方、EPO投与によりTRAF4などの生体環境のホメオスターシス維持に関与する遺伝子の発現亢進、炎症シグナルの低下を確認している。最終的に炎症性サイトカイン発現の低下を確認した。また、糖尿病性腎症では、慢性炎症から腎線維化へと進展し、慢性腎不全へと至る。これまで腎などの臓器線維化に関与することを報告してきた骨髄由来細胞fibrocyte(PNAS2006)を用いて、EPOの役割を検討した。その結果、炎症に続く、線維化の過程においても、EPOシグナルが病態へ関与することを明らかにした。これらの結果より、EPOはその受容体を介して、炎症,線維化カスケードの制御を行い病態に影響を与えている可能性がある。本年度も引き続き、糖尿病臓器合併症の発症,進展の共通基盤である高糖に着目した。さらに、共通の障害部位である血管内皮細胞ならびに骨髄由来fibrocyteを場として、共通の進展機構である炎症に着目して研究を進めた。バイオインフォマティクスの技術を用いて、血管内皮細胞に特異的な糖応答機構、ことにエリスロポエチン受容体(EPOR)の下流シグナルとその転写因子の探索を行い、新たなパスウェイを見いだすことができた。現在fibrocyteについても検討を行っている。さらに、高糖刺激に関連した炎症の調整シグナル候補を同定している。これまで、本研究の体制基盤を確立し、EPOならびにその受容体を介した糖尿病性臓器合併症の発症,進展にはたす新規細胞,臓器保護分子ならびにそのメカニズムの解析が進んでいる。最近になり、本抗体と全身性エリテマトーデスの臓器病変との関連を報告した(J Rheumatol 2016)。

本研究では、EPO-EPORを介する臓器合併症の機序解明を目指し、糖尿病臓器合併症の共通進展機序である炎症、線維化に着目した。ヒト培養血管内皮細胞を用いてEPO投与有無による網羅解析とそこから得られた特異的な共通応答分子とその障害機構を検討した。新たなパスウェイとしてthioredoxin interacting proteinなどインフラマゾーム活性化につながる経路を同定した。一方、EPO投与により生体環境のホメオスターシス維持に関与する遺伝子の発現亢進、炎症シグナルの低下を確認している。最終的に炎症性サイトカイン発現の低下を確認した。また、EPOシグナルが自身のレセプターの発現に関与し、高糖刺激による細胞障害を抑制していることを示した。糖尿病性腎症では、慢性炎症から腎線維化へと進展し、慢性腎不全へと至る。これまで腎などの臓器線維化に関与することを報告してきた骨髄由来細胞fibrocyte(PNAS2006)を用いて、EPOの役割を検討した。その結果、炎症に続く、線維化の過程においても、EPOシグナルが病態へ関与することを明らかにした。これらの結果より、EPOはその受容体を介して、炎症、線維化カスケードの制御を行い病態に影響を与えている可能性がある。本研究では、エリスロポエチン(EPO)とその受容体EPORを介する臓器合併症、ことに腎症の機序解明を目指し、糖尿病臓器合併症の共通進展機序である炎症、線維化に着目した。ヒト培養血管内皮細胞を用いて高糖,EPO投与有無による網羅解析とそこから得られる特異的応答分子機構を検討した。新規パスウェイとしてthioredoxin interacting proteinなどインフラマゾーム活性化につながる経路を同定した。一方、EPO投与により炎症、線維化シグナル、サイトカイン発現の低下を確認した。これらより、EPOはその受容体を介して、炎症、線維化カスケードの制御を行い病態に影響を与えている可能性がある。本年度は、糖尿病臓器合併症の発症、進展の共通基盤である高糖に着目し、共通の障害部位である血管内皮細胞のトランスクリプトーム解析が進行した。バイオインフォマティクスの技術を用いて、血管内皮細胞に特異的な糖応答機構、ことにエリスロポエチン受容体(EPOR)の下流シグナルとその転写因子の探索を行った。その結果、高糖に応答する細胞保護シグナルの存在を確認し、詳細な機序の検討を進めている。さらに、我々が世界に先駆けて発見した新規抗EPOR抗体の臨床検査診断法としての臨床的意義に関連し、「エリスロポエチン応答性の診断方法」として特許登録された(平成26年9月26日、特許第5618038号)。このように、本研究の体制基盤を確立し、これらを背景として、EPOならびに受容体を介した糖尿病性臓器合併症の発症、進展にはたす新規細胞、臓器保護分子ならびにそのメカニズムの解析が進んでいる。平成28年度も引き続き、血管内皮細胞ならびにfibrocyteを中心に高糖刺激に伴う既知ならびに未知の細胞保護に関連する遺伝子とそのシグナル伝達,核内転写因子のパスウェイの同定とその遺伝子群の検証を行う。
スクロース水浸処理による気孔クラスターの形成機構と生理機能

本研究ではスクロース水浸処理を、高効率な気孔クラスター誘導系として利用し、外的要因により気孔分布が変化した葉における孔辺細胞の細胞学的特徴について、スクロース水浸処理の影響を検証しました。その結果、スクロース水浸処理は気孔分布の撹乱により気孔クラスターを形成させますが、孔辺細胞は気孔開閉に関与する細胞内構造の特徴を保ち、フシコクシン応答性を有することが示唆されました。本研究は、申請者らが確立したスクロース水浸処理による気孔クラスター誘導法を利用し、植物組織における分化細胞のパターン形成に対する理解を深めることを目的としている。平成26年度はシロイヌナズナの子葉を用いて、スクロース水浸処理により気孔クラスターが形成される機構の解明を目的とした。まず、スクロース水浸処理による気孔分布異常がTMM依存的なシグナル伝達経路と独立か否かを明らかにするため、tmm変異体に対するスクロース水浸処理を計画し、材料となるtmm変異体を選抜した。さらに申請時には計画していなかったが、気孔のクラスター化が報告されている気孔分布関連因子epf1およびepf2変異体、さらにカロース合成酵素gsl8変異体についても選抜を行っており、既知の気孔分布制御機構との関連をより詳細に調べる準備をしている。上記の変異体選抜には栽培期間が必要となるため、平成27年度に予定していた、気孔のクラスター化による葉組織学的影響の解析を前倒しして着手した。すでに光学顕微鏡用切片を17枚作製し、オールインワン顕微鏡により撮像している。来年度、取得画像について解析を行う予定である。これまでに、スクロース水浸処理により誘導される気孔クラスターを形成している孔辺細胞について、細胞形状および気孔系譜細胞に特異的なエンハンサートラップラインの発現から、孔辺細胞の特徴を有していることを明らかにした。本研究ではさらに細胞内構造レベルでも孔辺細胞特有の構造が存在するか確かめるため、微小管に着目した。蛍光タンパク質による可視化の結果、気孔クラスターを形成する孔辺細胞においても、孔辺細胞特有の放射状に配向した微小管が観察された。本研究は申請者らが確立したスクロース水浸処理による気孔クラスター誘導法を利用し、植物の葉における気孔クラスターの形成機構と生理機能に対する理解を深めることを目的としている。平成27年度は、気孔のクラスター化による葉組織学的影響を解析するため、気孔直下の空隙である気孔腔に着目した。垂直方向の葉断面切片の観察から、気孔クラスター直下の気孔腔は拡大していることが確認された。また前年度に引き続き、スクロース水浸処理により誘導される気孔クラスターを形成する個々の孔辺細胞について、孔辺細胞の細胞学的特徴が存在するか確かめるため、細胞壁と葉緑体に着目した。孔辺細胞は背側よりも腹側の細胞壁を厚くすることで、孔辺細胞の体積増加に伴う気孔開口を実現している。スクロース水浸処理によりクラスター化した孔辺細胞においても、細胞壁の厚さの不均一性は保たれていた。また、スクロース水浸処理区ではデンプン粒の過剰蓄積により、葉緑体が形態異常を伴って巨大化することが明らかとなった。これらの細胞学的特徴は、孔辺細胞の重要な機能である気孔開閉に必要であると指摘されている。そこで気孔のクラスター化が気孔開閉能へ及ぼす影響を検証するため、フシコクシンによる気孔開口誘導を行った。400細胞対の測定結果から、スクロース水浸処理区の気孔は、糖を添加しないコントロール水浸処理区の気孔と比較して気孔開度が低下していたものの、スクロース水浸処理区においてもフシコクシン応答性が確認された。また、スクロース水浸処理区の気孔を、クラスター化した気孔とone-cell spacing ruleを保った気孔に分類して気孔開度を比較したところ、開口度の差は検出されなかった。これらの結果から、スクロース水浸処理により形成された気孔クラスターにおいても、個々の孔辺細胞は細胞学的特徴およびフシコクシン応答性を保持していることが明らかとなった。tmm変異体の選抜に時間を要したが、気孔のクラスター化が報告されている他の変異体も同時に選抜したことで、より詳細に既知の気孔分布制御機構と比較できると期待される。また変異体選抜の期間中に、来年度計画していた気孔のクラスター化による葉組織学的影響について解析を進めているため、本研究全体の進捗としては順調であるといえる。また、スクロース水浸処理により誘導される気孔クラスターを形成している孔辺細胞について、微小管だけではなく細胞壁および葉緑体の観察結果も得ており、これらの内容の一部を筆頭著者として論文を執筆中である。以上から、本研究は当初の計画以上に進展していると自己評価する。27年度が最終年度であるため、記入しない。植物分子・生理科学本年度選抜したtmm変異体および選抜中のepf1、epf2、gsl8変異体に対してスクロース水浸処理を行い、気孔のクラスター化が亢進されるか確認する。

またすでに作製、撮像した光学顕微鏡用切片に関して画像解析することで、気孔のクラスター化が葉組織に及ぼす影響を明らかにする。さらに気孔の重要な役割のひとつである開閉を行う能力を、クラスター化した気孔も有しているか検討する。気孔開閉能の評価には、従来用いられている気孔開度の測定に加え、気孔開閉に応じて局在を変化させることが報告されている複数の細胞内構造を指標とする予定である。本研究により、スクロース水浸処理により誘導される気孔クラスターについて、形成機構および生理学的影響を解明することが期待される。27年度が最終年度であるため、記入しない。
チベット高原東部における放牧ヤクの持続的生産モデルに関する研究

チベット高原ではヤク(Bos grunniens)・ヒツジなどの放牧が行われてきたが,過放牧などによる植生・土壌の荒廃。劣化が懸念されている。そこで,ヤクの放牧強度(軽-L区・中-M区・強-H区・対照-C区・禁牧-E区)が植生群落構成に及ぼす影響を明らかにし,適正な放牧密度を推定することを目的として実験を行った。植被率は,2005年には,H区とM区がL区よりも低く,C区は3放牧区より高かった(p<0.05)。2006年には,放牧強度が高くなるに従って植被率の低下割合が大きくなった(r=-0.86,p<0.05)。群落高は,2005年には放牧区間には有意な差はなかった。2006年には,群落高が放牧強度と高い負の相関を示した(r=-0.998,p<0.0001)。2006年の総出現草種数は,M区の47種がもっとも多く,E区の32種が最も少なかった。優占度はH区とM区ではC区と比べ優良野草のStipa purpurea, Elymits nittans, Poa pratensis, Koeleria cristataなどが若干低いものの一定の傾向を示さなかった。E区ではFestuca sinensis, Poa pratensis, Elymus nutansなど草高の高いイネ科野草の優占度が高かった。放牧強度が植生群落構成に及ぼす影響に対する評価はさらに長期間行う必要があると考えられた。地上部現存量は,2005年では放牧強度と負の相関(R=-0.903,p<0.1)を示し,2006年ではH区,M区がL区よりも低く(p<0.05),放牧強度との間に高い負の相関(r=-0.987,p<0.01)を示した。前年度の同じ時期と比較しH区とL区の地上部現存量が大きく減少した(p<0.05)。地上部現存量はH区でも240gDM/m^2あり多いと考えられるが,寒季の野草の枯死期にも放牧されることから,2才のヤクの放牧密度は1.8頭/ha以下にすべきであると考えられた。2004年12月に、中国東チベット高原の青海省玉樹州結古鎮(標高4000m)のヤク放牧地で、ヤクの行動観察および家畜群構成など社会調査を行った。ヤク3頭の行動観察を4日間連続で行った。平均で、採食時間は418.0±29.7分/日、反芻時間は270.2±76.2分/日、休息時間は573.5±61.3分/日、移動時間は105.2±22.6分/日であった。ヤクの採食時のバイト数、滞在移動時間、歩数を採食パッチ(patch)単位でヤク3頭につき、計230パッチを測定した。平均で、1パッチ内滞在時間は40秒、採食バイト数は56.7回、1回噛みちぎりで所要時間は0.70秒、パッチ内採食移動歩数は3.9±3,5歩、パッチ間移動歩数は6.1±4.5歩であった。家畜構成は30世帯の放牧農家を対象に現地聞き取り調査で行った。1世帯あたりの家畜数は112.9±31.9頭、内ヤクは50.5±10.5頭で48.3%を占めていた。雌ヤクは全体の67.14%であるが、4歳以上で、繁殖可能な雌ヤクはわずか32.6%であった。(1)2005年5月から中国青海省海北蔵族自治州門源回族自治県(標高3600m)野草放牧地でヤクの放牧強度実験を行い,8月と12月に植物現存量の測定,育成ヤクの採食行動の観察を行った。実験区は,軽度(L区)・中度(M区)・重度(H区)放牧区と対照区(C区)を設定し,各区各3頭のヤク(1歳)を放牧した。ヤクの採餌行動:Patch内採餌時間はそれぞれL区69.8±62.3秒,M区55.0±59.2秒,H区32.0±36.1秒で,H区はM・L両区よりも有意に短かった(P<0.0001)。バイト速度はそれぞれL区0.66±0.38バイト/秒,M区1.02±0.27バイト/秒,H区1.19±1.03バイト/秒で,L区はH・M区よりも有意に遅かった(p<0.0001)。Patch内Feeding station(FS)数はH区がM・L両区よりも多かった(p<0.0001)。(2)金露梅優占草地(Dasiphora fruticosa group)において,冷暖両季長期固定したヤクの季節放牧が野草地の多様性,植生群落,生物量に及ぼす影響についての調査を行った。暖季放牧地では野草地の植物種数,豊富度指数,物種多様性指数,Pielou指数がともに低下した。暖季放牧地の植物被度及び優良牧草であるイネ科植物が冷季放牧地より低くなった(p<0.01)。

暖季放牧地では植物の成長期に放牧されたため,イネ科など種子繁殖類野草が減少し,カヤツリグサ科など栄養繁殖類野草の優占度が高くなっていた。チベット高原ではヤク(Bos grunniens)・ヒツジなどの放牧が行われてきたが,過放牧などによる植生・土壌の荒廃。劣化が懸念されている。そこで,ヤクの放牧強度(軽-L区・中-M区・強-H区・対照-C区・禁牧-E区)が植生群落構成に及ぼす影響を明らかにし,適正な放牧密度を推定することを目的として実験を行った。植被率は,2005年には,H区とM区がL区よりも低く,C区は3放牧区より高かった(p<0.05)。2006年には,放牧強度が高くなるに従って植被率の低下割合が大きくなった(r=-0.86,p<0.05)。群落高は,2005年には放牧区間には有意な差はなかった。2006年には,群落高が放牧強度と高い負の相関を示した(r=-0.998,p<0.0001)。2006年の総出現草種数は,M区の47種がもっとも多く,E区の32種が最も少なかった。優占度はH区とM区ではC区と比べ優良野草のStipa purpurea, Elymits nittans, Poa pratensis, Koeleria cristataなどが若干低いものの一定の傾向を示さなかった。E区ではFestuca sinensis, Poa pratensis, Elymus nutansなど草高の高いイネ科野草の優占度が高かった。放牧強度が植生群落構成に及ぼす影響に対する評価はさらに長期間行う必要があると考えられた。地上部現存量は,2005年では放牧強度と負の相関(R=-0.903,p<0.1)を示し,2006年ではH区,M区がL区よりも低く(p<0.05),放牧強度との間に高い負の相関(r=-0.987,p<0.01)を示した。前年度の同じ時期と比較しH区とL区の地上部現存量が大きく減少した(p<0.05)。地上部現存量はH区でも240gDM/m^2あり多いと考えられるが,寒季の野草の枯死期にも放牧されることから,2才のヤクの放牧密度は1.8頭/ha以下にすべきであると考えられた。