hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
静電的相互作用を用いた高分子積層膜の構築とその重合特性

分子の自己組織性を利用したSelf-assembly法(Layer-by-Layer)法により、自発的に基板に分子を吸着させ、分子レベルで組織化された機能性薄膜を構築することを目的として研究を行った。1.固相重合を用いたポリジアセチレン超薄膜の作製ジアセチレン(DA)基を有するジカルボン酸、アルキル系ジアミン誘導体、縮合剤を用い、Self-assembly(SA)法により、機能性分子を共有結合させながら積層することで、ジアセチレン基を有する薄膜を作製した。得られたSA膜は、γ線の照射により、固相重合が可能であった。一方、縮合剤を用いなかった場合には、固相重合が進行しなかった。一般的に、DAの重合には、秩序だったDA分子の配列、および重合に適した配向性が必要である。縮合剤を用いずに、静電的相互作用のみで作製した膜中では、DA分子の配向性が低いのに対し、縮合剤を用いた系では、共役結合により、重合に適した配向に分子が固定化され、固相重合が進行したと考えられる。以上により、縮合剤の優位性が示された。2.異種の導電性高分子からなる有機ヘテロ超薄膜の設計導電性高分子であるポリチオフェン誘導体のチオフェン環3位にスルホン酸基(SO_3^-基)、あるいはカルボキシ基(COO^-基)を導入したアニオン性高分子を合成した。いずれも水溶性ポリマーであり、スルホン酸基を有するポリマーは、自己ドーピング機能を示した。これらを用いて、四級アミンを側鎖に有するポリチオフェン誘導体とのSelf-assembly膜を作製した。いずれの高分子を用いた場合にも、均一な積層が確認され、全ポリチオフェン系ヘテロ薄膜の作製が可能であった。また、SA法による交互積層を行うことで、ポリマー主鎖の平面性が向上し、各ポリマー単独のスピンコート薄膜より、導電率が向上した。特に、自己ドーピング特性を有するスルホン酸基含有ポリチオフェンをSA膜の成分として用いることにより、更に導電率が向上した。以上より、SA法の適用により、様々な機能性を有する分子の交互積層が可能であり、それらの分子の特性を併せ持った薄膜の作製に成功した。Self-assembly (SA)法は、カチオン性とアニオン性分子の各希薄溶液に基板を浸漬し、分子間の静電的相互作用により、自発的に基板に分子を吸着させ、分子レベルで組織化された多層薄膜を構築する手法として知られている。本研究では、このSA法を用いて、ナノオーダーで構造制御された機能性薄膜の構築を行った。本年度は、特に以下の2点に着目した。1.固相重合を用いたポリジアセチレン超薄膜の作製ジアセチレン基を有する化合物は、γ線や紫外線照射により固相で重合し、優れた電気・光学特性を有するポリジアセチレン化合物を形成することが知られている。本研究では、縮合剤を用いたSA法により、機能性分子を共有結合させながら積層することで、ジアセチレン基を有する薄膜を作製した。ジアセチレン基を有するジカルボン酸、アルキル系ジアミン誘導体、縮合剤を用いてSA膜を作製した結果、縮合剤を用いることで、各成分が積層ごとに縮合した安定な薄膜が100層まで作製できることが明らかとなった。γ線を用いた固相重合により、SA膜は固相重合が可能であり、有効共役長21ユニットのポリジアセチレン薄膜が得られることがわかった。また、偏光測定より、ポリジアセチレンのπ共役系が基板に対して平行に配向していることが示唆された。縮合剤を用いないSA法で作製した薄膜では、重合性が観察されなかったことから、縮合剤を用いたSA法の特異性が明らかとなった。2.アニオン性側鎖を有する高分子の合成アニオン性であるスルホン酸基を側鎖に有するポリチオフェンP-SMTEを合成した。P-SMTEは水に可溶であり、自己ドーピング機能を示すことが明らかとなった。さらに、P-SMTEを用いたSA膜の作製を検討した。

2.異種の導電性高分子からなる有機ヘテロ超薄膜の設計導電性高分子であるポリチオフェン誘導体のチオフェン環3位にスルホン酸基(SO_3^-基)、あるいはカルボキシ基(COO^-基)を導入したアニオン性高分子を合成した。いずれも水溶性ポリマーであり、スルホン酸基を有するポリマーは、自己ドーピング機能を示した。これらを用いて、四級アミンを側鎖に有するポリチオフェン誘導体とのSelf-assembly膜を作製した。いずれの高分子を用いた場合にも、均一な積層が確認され、全ポリチオフェン系ヘテロ薄膜の作製が可能であった。また、SA法による交互積層を行うことで、ポリマー主鎖の平面性が向上し、各ポリマー単独のスピンコート薄膜より、導電率が向上した。特に、自己ドーピング特性を有するスルホン酸基含有ポリチオフェンをSA膜の成分として用いることにより、更に導電率が向上した。以上より、SA法の適用により、様々な機能性を有する分子の交互積層が可能であり、それらの分子の特性を併せ持った薄膜の作製に成功した。
ジャスモン酸類のアナログ合成と植物生理活性

1、植物ホルモン様の活性を有するエピジャスモン酸メチルは、側鎖付け根の立体配置が反転して、活性の小さいジャスモン酸メチルに異性化しやすい。側鎖の配置および両側鎖の立体的関係を固定するために、シクロペンタノン環部分にフッ素原子や二重結合を導入したアナログを合成した。(1)、プラント規模で生産されているジャスモン酸メチルを出発原料として、位置選択的に二重結合を導入して4、5-ジデヒドロジャスモン酸メチルを得た。これを熱異性化して3、7-ジデヒドロジャスモン酸メチルに変換した。3、7-ジデヒドロ体は、レタス種子の発芽をジャスモン酸メチルより強く阻害したが、イネ第二葉鞘伸長阻害、ハツカダイコン種子発芽阻害活性は弱かった。レタスにおいては両側鎖同士の立体的関係が重要であることが示唆された。他においてはシクロペンタン環と側鎖の角度および側鎖付け根の静電的性質も重要であることが示唆された。(2)、ジャスモン酸メチルからエノールアセタートを経て7-フルオロジャスモン酸メチルの相対立体異性体を2種類合成したが、いずれも植物生長阻害活性をほとんど示さなかった。植物体の活性部位は、静電的な受けやすいことが示唆された。(3)、3、7-ジデヒドロ体の側鎖二重結合を選択的に水素添加により還元した化合物を、フッ素ガスで処理して3、7-ジフルオロ-9、10-ジヒドロジャスモン酸メチルを得た。生理活性は現在試験中である。(4)、(3)においてジフルオロ体が得られたので、今後は9、10位二重結合を保護しての、ジフルオロ化、シクロプロパン化反応を行う。2、上記(1)のように4、5-ジデヒドロ体をジャスモン酸メチルから合成した。このものはジャスモン酸メチルとほぼ同等の植物(イネ第二葉鞘伸長、レタス、ハツカダイコン種子発芽)生長阻害活性を示した。この部位に二重結合を導入しても活性に変化がないことから、共役付加反応や[2+2]環化反応を用いて活性を保持した様々なアナログ、プローブ合成の可能性が示唆された。
高肺血流型先天性心疾患の肺血管病変進展における肥満細胞およびキマーゼの役割

高肺血流型先天性心疾患の肺高血圧症の分子機構は不明である.23例の高肺血流型先天性心疾患(3ケ月-45歳)の肺組織における肥満細胞キマーゼの発現とその分布,さらにアンギオテンシンIIとの関連,肺高血圧との関連を検討した.対照は肺高血圧のない10例の肺組織を検討した.その結果,肺組織の肥満細胞の数そのものが心疾患群で有意に増加していることが判明した.また,肥満細胞の産生するキマーゼが心疾患患者群において有意に増加していることが明らかになった.また肺高血圧の指標である肺血管抵抗値とキマーゼ陽性肥満細胞数に正の相関が存在することを見い出した.即ち心疾患患者では肺組織肥満細胞数が増加し,しかもキマーゼ産生細胞であること,更に肺高血圧との関連が明らかになった.そこで,キマーゼ-アンギオランシン系の作動を検討するために,アンギオランシンIIの蛋白発現を調べた結果,キマーゼ産生部位に一致してアンギオランシンIIの発現を認めた.対照肺や肺高血圧の軽い場合では認めず,キマーゼ-アンギオランシン系の肺高血圧成立への関与が強く示唆された.今後,アンギオテンシンIIのレセプター拮抗薬の肺血管への効果を検討したい.次に,肺胞マクロファージの役割について検討した.マクロファージの数は肺高血圧の高いものほど増加していた.マクロファージのケモカインであるMCP-1は肺血管抵抗の低い患者の肺胞マクロファージに,MIP-lalphaは肺血管抵抗の高い患者肺のマクロファージに発現しており,肺血管病変の進行度により異なったケモカインが作動していることが示唆された.20例の肺高血圧を伴う高肺血流型先天性心疾患患者(年齢3ヶ月45歳)の肺生検を心臓手術時、人工心肺施行前に行った。得られた肺組織における肥満細胞キマ-ゼの発現を抗ヒトキマ-ゼ抗体を用いて免疫染色を行った。その際、キマ-ゼ陽性肥満細胞の密度を算出した。また、すべての肥満細胞が有するトリプターゼ(セリンプロテアーゼのひとつ)の発現も連続切片にて検討し、キマ-ゼ陽性細胞の全肥満細胞に対する割合も算出した。Heath-Edwards分類による肺血管形態の変化および心カテーテルによる血行動態データを基にした肺血管病変の進行度とこれら肥満細胞キマ-ゼの発現との関連も検討した。その結果、キマ-ゼは全患者において肺血管周囲および間質に局在する肥満細胞内に顆粒状に発現していた。肺血管の形態変化が大きい程キマ-ゼ陽性肥満細胞の数は増加していた。同時に、肺血管抵抗値とキマ-ゼ陽性細胞数に正の相関が認められ(r=0.51,p<0.02)、肺高血圧との関連が強く示唆された。対照肺のキマ-ゼ陽性肥満細胞数は有意に少なく(p<0.002)、キマ-ゼを有する肥満細胞の比率も有意に低かった(p<0.0002)。現在、キマ-ゼを介したアンギオテンシンIIの作動について検討している。次に、肺胞マクロファージや肥満細胞のケモカインの発現に関して検討した。IL-8は肺胞マクロファージや血管内皮細胞に発現しているものがみられた。MCAF/MCP-1は肺血管抵抗の低い患者肺の肺胞マクロファージに、MIP-1αは肺血管抵抗の高い患者肺の肺胞マクロファージに発現していた。しかし、肺の肥満細胞にはこれらのケモカインの発現は認めなかった。これらの結果は肺血管病変の進行度により異なったケモカインが作動している可能性を示唆している。高肺血流型先天性心疾患の肺高血圧症の分子機構は不明である.23例の高肺血流型先天性心疾患(3ケ月-45歳)の肺組織における肥満細胞キマーゼの発現とその分布,さらにアンギオテンシンIIとの関連,肺高血圧との関連を検討した.対照は肺高血圧のない10例の肺組織を検討した.その結果,肺組織の肥満細胞の数そのものが心疾患群で有意に増加していることが判明した.また,肥満細胞の産生するキマーゼが心疾患患者群において有意に増加していることが明らかになった.また肺高血圧の指標である肺血管抵抗値とキマーゼ陽性肥満細胞数に正の相関が存在することを見い出した.即ち心疾患患者では肺組織肥満細胞数が増加し,しかもキマーゼ産生細胞であること,更に肺高血圧との関連が明らかになった.そこで,キマーゼ-アンギオランシン系の作動を検討するために,アンギオランシンIIの蛋白発現を調べた結果,キマーゼ産生部位に一致してアンギオランシンIIの発現を認めた.対照肺や肺高血圧の軽い場合では認めず,キマーゼ-アンギオランシン系の肺高血圧成立への関与が強く示唆された.今後,アンギオテンシンIIのレセプター拮抗薬の肺血管への効果を検討したい.次に,肺胞マクロファージの役割について検討した.マクロファージの数は肺高血圧の高いものほど増加していた.マクロファージのケモカインであるMCP-1は肺血管抵抗の低い患者の肺胞マクロファージに,MIP-lalphaは肺血管抵抗の高い患者肺のマクロファージに発現しており,肺血管病変の進行度により異なったケモカインが作動していることが示唆された.

1.研究代表者は昨年度,高肺血流型先天性心疾患の肺高血圧症例の肺組織において肥満細胞キマーゼの発現が増加していることを明らかにしてきた.また肺高血圧の指標である肺血管抵抗値とキマーゼ陽性肥満細胞数に正の相関が存在することを見い出した.そこで,肥満細胞数と心疾患との関連をさらに明らかにするために,症例数や対照数を増やして検討した.その結果,肺組織の肥満細胞の数そのものが心疾患群で有意に増加していることが判明した.即ち心疾患患者では肺組織肥満細胞数が増加し,しかもキマーゼ産生細胞であること,更に肺高血圧との関連が明らかになった.そこで,キマーゼ-アンギオランシン系の作動を検討するために,アンギオランシンIIの蛋白発現を調べた結果,キマーゼ産生部位に一致してアンギオランシンIIの発現を認めた.対照肺や肺高血圧の軽い場合では認めず,キマーゼ-アンギオランシン系の肺高血圧成立への関与が強く示唆された.今後,アンギオテンシンIIのレセプター拮抗薬の肺血管への効果を検討したい.2.小児後天性心疾患である川崎病と先天性心疾患の比較を行った.左右短絡型の先天性心疾患では血中のIL-8,MCP-1などのケモカイン,また血管内皮細胞増殖因子(VEGF)の増加は認められなかった.一方川崎病では血中のIL-8,MCP-1,VEGFの著しい増加を認め,両疾患のサトカイン,ケモカインプロフィールの相違が明らかになった.
均一径ジャイアントリポソームと細胞融合のためのマイクロ流路デバイス

本研究では、マイクロ・ナノ加工技術を利用し、これまで実現の不可能であった直径の揃ったリポソームを効率的に作成し、リボソームと細胞を融合させることができる集約化されたマイクロ流路デバイスを実現することである。特に本年度は、(A)異なる種類のジャイアントリポソームを効率よく作製し、操作(輸送、回収)することができるマイクロ流路デバイスと、(B)リポソームを選択的に固定することができるマイクロデバイスの作製とデバイスの評価を行った。(A)ジャイアントリポソームの作製、輸送、回収がall-in-onechip行うことができるマイクロ流路デバイスは、PDMS(polydimethylsiloxane)を用いて作製されたマイクロ流路チャンバーをITO(indium tin oxide)ガラスでサンドイッチしたものである。マイクロ流路の中央にチャンバーがあるのが特徴である。リボソームの作製から回収方法は、以下の3ステップである。(1)チャンバー内のITO基板上に脂質膜を作製し、エレクトロフォーメーション法(交流電圧、10Hz、1.5V)によりジャイアントリポソームを作製する。(2)作製されたリボソームに直流電圧を印加しリポソームをチャンバー内の基板の底から上層部へ運び、(3)マイクロ流路中に流し、回収する。(B)ジャイアントリポソームを固定するマイクロデバイスは、シリコンウエハの流路上にパリレン樹脂で作製された微細小孔アレイがある構造になっている。パリレン樹脂のマイクロサイズの小孔アレイは、02プラズマを用いて作製した。流路と微細小孔アレイを組み合わることで、異なる種類のリボソームを、それぞれの流路より吸引しパリレン微細小孔で固定することが可能になる。以上のマイクロ流路デバイス(A)を用いることにより、異なる種類のジャイアントリポソームを同一基板上の流路内に作製し、直流電圧と流れを利用しリボソームを回収することができた。また,マイクロデバイス(B)を用いることにより、同一基板上に異なる種類のジャイアントリポソームを選択的に固定することができた。
不均質コンテンツに対する情報活用システムに関する研究

本研究では,インタネット上の情報資源は,生産・流通・利用・蓄積・他との関連・形態などあらゆる側面において従来のコンテンツとは根本的に異なる「不均質」なコンテンツであることに着目し,Webの構造解析、メディア処理・活用手法、評価用テストベット構築、社会・利用分析の研究を進めた。1)Webの構造解析については、そのリンク構造や言語情報に基づいた各種のクラスタリング法および情報が作られた時間情報を用いたトピックのトラッキング法を考案した。2)メディア処理および活用に関しては,特に,(1)言語の不均質性,(2)ジャンル(コンテンツのタイプ)の不均質性に着目し,多言語の文書集合からのトピック抽出や文書のジャンルに応じた要約自動生成などについて研究を行った.さらに,(3)画像,映像などを含むメディア横断の検索手法や学習環境への活用について研究を行った。3)国内外の多数の研究グループが参加する評価型ワークショップ「NTCIR」を開催し、不均質コンテンツ活用システムの有効性評価を目的とし、共通の評価用データを有するテストベッドを協同構築した。JPドメインから自動収集したテラバイト規模のデータセットを構築し、現実に即した評価方式を実現するなどの成果を得、当該研究領域の進展に貢献した。4)Web情報源に対する工学的な処理とモデルの分析が前提としている認識論的布置を、その歴史的背景にある近代印刷世界との対比で分析し、そこから、近代図書館に特権的に理念化されてきた「過去のメッセージを現在のアクチャリティをもって蓄積する」モデルはオンラインでは成立しにくく、オンライン上の情報を、内容等ではなく、特定のメディア的・物理的属性により区別した上で、図書館モデルへ当てはめる領域を絞り込むことが妥当であることを示した。本年度は、不均質情報資源としてのWebに対する情報活用システムの基本的概念を明確化する作業と、必須の情報処理技術の研究をモジュール化し、平行して進めた。情報活用システムの基本概念を巡っては、現在、ネットワーク情報メディア分析の前提とされている印刷メディア世界がどのような特徴を持っていたのかに立ち戻って、印刷メディア導入期の社会的変動を整理し、その情報構成構造の形式的モデルを検討した。また、情報の「ジャンル」概念を明確化するために、既存の印刷メディアにおけるジャンルとその形成過程、検索利用との関係を文献調査に基づいて検討し、同時に、分析手法として、グランデットセオリーとファセット分析の関係について検討をし、少人数情報提供者グループ(10名)を対象に予備テストとしてWebジャンルの意見聴取をし、分析手法の適応可能性と有効性の検討を進めた。基本情報処理技術研究は次のように進めている。まず、Web情報空間処理の基本となる技法として、情報空間の動的なクラスタリングに関する理論的な検討を進めるとともに、現実世界のWebデータから抽出したリンク構造およびアンカーテキストに対して、(1)最小カットに基づくクラスタリング、(2)相互情報量に基づくクラスタリング、(3)カーネル法に基づく処理を適用して問題点の把握と予備的な評価を行った。メディア処理技術としては、多言語処理活用研究として、ルースな多言語トピックアラインメントとトピック抽出技術の最適組み合わせにもとづく多言語情報活用技術の研究開発を進めた。映像処理については、大規模映像コンテンツの活用法ならびに技術的課題について、特に、情報としてのニーズが高いニュース映像の処理と多次元インデクスを中心に手法の検討とプロトタイプシステムの開発を進めた。本研究では、不均質性を特質とするインターネット上のコンテンツを活用するシステムの実現を目指し、大きく以下の4つのモジュールに研究を分けて、相互に連絡を取りつつ研究を進めた。(1)社会・利用分析:インターネット・コンテンツの導入が社会における情報利用活動をどのように変えたかを検討し、その知見に基づいて情報活用システムのあり方の大枠を定義する。不均質性は一定の情報ユニットを前提とした上での不均質性に留まらず、情報ユニットの規定不能性に至ることを明らかにした。これにより、インターネット情報資源における情報活用と情報編集の不可分性を確認した。

(2)Web構造解析:情報活用・編集のためには、(a)ページ相互の関係の分析と(b)ページ内の処理とが必要になる。本年度は、リンク構造に基づく効率的なページ・グループ化の手法および言語表現に基づくページ・クラスタリング手法を提案するとともに、HTMLテーブルを利用した情報抽出技術を開発した。(3)メディア処理:Web上の多メディア情報環境に関しては、各メディア特性に応じた処理の高度化と統合処理とが必要になる。言語・音声・視覚メディアの結節点としての映像を対象に、アーカイブ構造化をはかり画像検索法を開発した。(4)これらの諸研究を有機的に関連づけながら進めるために必要な基盤として、また、他の研究グループとの交流のために、Web情報をプールしたテストベッドを構築し、諸研究者が参加する情報活用のワークショップを行った。本研究は、今年度で3年目を終えた。研究全体は、インターネット上の情報資源の特質を総合的に捉えるために、大きく、4つのモジュールを定義して、相互に関係を維持しながら研究を進めている。すなわち、(1)Web構造解析とモデリング、(2)メディア処理・活用、(3)社会・利用分析、(4)不均質コンテンツ活用システム評価用テストベッドの構築、である。本年度は、Webの構造に着目した解析としては、リンク距離に基づくハイパーリンクによって構成されるWeb空間の潜在的構造の解析手法と、大規模・不均質・動的な特性に適したWebコンテンツ間の動的モデル化に基づくクラスタリングについて手法の開発を進めた。メディア処理・活用としては、多言語のニュース・イベント抽出・アラインメント手法の開発、ジャンルに基づく情報要約手法の開発、映像処理のためのデータベース技術の開発、Webに適した情報共有手法の開発を行った。社会・利用分析の観点からは、これまでのWebをめぐる多くの研究は、技術的な処理の側面からはWebの構造を反映した手法の展開に結びついている一方、情報活用のモデルはむしろ従来のメディア・イメージを反映していることを考慮し、印刷体のメディア活用モデルとWebのモデルとの構造的相違についてモデル化を進めた。また、不均質コンテンツの活用手法の有効性を総合的に評価するための大規模なテストベッドの構築を進めてきている。これについては、テストベッドを用いた参加型の評価ワークショップの準備を進めており、2004年6月に国際ワークショップを開催する予定である。本研究は、今年度で4年目を終えた。研究全体は、これまでと同様、インターネット上の情報資源の特質を総合的にとらえるために、大きく4つのモジュールを定義し、相互に関係を維持しながら進めている。すなわち、(1)Web構造解析とモデリング、(2)メディア処理・活用、(3)社会・利用分析、
A群色素性乾皮症(XPA)欠損マウスの紫外線誘発皮膚発癌における遺伝子変化の解析

A群色素性乾皮症遺伝子欠損マウス(以下XPAマウス)は、XP患者と同様に、低線量の紫外線照射で高頻度に皮膚癌が発症する。この発癌過程にどのような遺伝子の変化が起こっているのかを調べるため、RLGS(Restriction Landmark Genomic Scanning)法を用いて、この皮膚癌において変化している遺伝子のスクリーニングを行った。そのうちの1つであるDermo-1遺伝子は、正常上皮では全く発現していないが、XPAマウス由来の皮膚癌細胞株すべてにおいて強発現しているのが認められた。最近、Dermo-1遺伝子産物はMycによるアポトーシスを抑制する活性をもつことが報告されている。そこで、我々はDermo-1に着目し、この遺伝子の発現が皮膚発癌に関与しているのかどうか調べている。Dermo-1を強勢発現させた皮膚上皮細胞の安定株を作成し、紫外線照射後の生存率やアポトーシス細胞の割合について、親細胞と比較した。生存率については、Dermo-1が発現している一部の安定株において低い生存率となることが認められた。また、アポトーシス細胞に関しては差は認められなかった。また、この安定株のヌードマウスでの腫瘍増殖能を調べているが、現在までのところ、親細胞との明らかな違いは認められていない。これまでの実験結果より、Dermo-1の発現が直接的に紫外線抵抗性や腫瘍増殖能を上げるとは考えにくく、現在、Dermo-1の癌細胞における強発現の意義については検討中である。また、この発現の上昇が、皮膚発癌のどの段階(過形成、前癌状態、進行癌)で起こっているかどうかを明らかにするため、抗Dermo-1抗体を用いた免疫組織染色により、様々な段階のマウス皮膚組織を用いてDermo-1の発現を調べている。A群色素性乾皮症遺伝子欠損マウス(以下XPAマウス)はXP患者と同様に低線量の紫外線照射により高頻度に皮膚癌が発症する。この発癌過程にどのような遺伝子の変化が起こっているか網羅的に調べるため、RLGS (Restriction Landmark Genomic Scanning)法およびcDNA expression array (Atlas ^<TM> Mouse cDNA Expression Arrays)を用いて、この皮膚癌において特異的に変化している遺伝子を調べた。1、XPAマウスの正常皮膚組織、皮膚癌細胞株、皮膚癌組織よりDNAを抽出し、RLGS法により、約千個のスポットをスクリーニングにした。複数の癌において共通に変化しているスポットについてクローニングを行い、6例は既知の遺伝子、2例はESTデータベースにおいて認められた遺伝子が単離された。そのうちの1つであるDermo-1遺伝子は、正常皮膚上皮細胞では発現していないが5種類のXPAマウス由来の皮膚癌細胞株すべてにおいて発現しているのが認められた。最近の報告によると、転写因子であるDermo-1遺伝子産物はMycにおけるアポトーシスを抑制する活性があることが認められ、この遺伝子が癌原遺伝子の性質をもつことが示唆された。今後、様々な段階の腫瘍検体(過形成、前癌病変、初期癌、進行癌)を用いてDermo-1の発現の変化を調べる。さらに、Dermo-1が強発現している皮膚上皮細胞を作成し、腫瘍原性および紫外線照射後のアポトーシスについて調べる。
生物多様性条約、気候変動枠組条約およびラムサール条約の間での相互協調

第3年度は、まず、前年度の基礎調査に基づいて、関連条約間での協調活動の実態や論議動向を分析し、それらの効果および実現可能性を検討した。他方、前年度調査の補充と新たな動向の把握を目的として、2010年8月にドイツ・オルデンブルグで開かれた国際生態経済学会に参加して、本研究の成果の一部に基づいてバイオ燃料に関する2つの分科会を企画し、議長を務めた。同様に、国内では、関係各大学で開催される研究会合において発表と論議を行った。特に、京都大学の環境学および経済学の研究者との間で共同研究を進めた。京都大学との共同研究においては、バイオ燃料に関わる温暖化対策、生物多様性保全、食料競合、自然災害対策などの諸問題を科学技術面、経済面、制度面、それぞれから検討し、研究の幅を広げることができた。それらについては、10月の生物多様性条約COP10においてポスター発表した。これらの国内外における分析・検討過程の上に、自然科学的、経済社会的および政治的な背景状況を分析整理し、有効かつ実現可能性のある制度的枠組みについて、基本項目および実施手法などを選定する作業を行った。初年度は、10月末からの研究開始になるため、日本および諸外国において公表されている環境条約間連携・協調に関わる文献や資料に基づいてこれまでの主張や論議を整理し、それらの実情について分析を進めた。また、関係する国際会議として、3月にコペンハーゲンにおいて開かれた温暖化に関する国際会議に参加した。この会議は、2009年末に開催される気候変動枠組み条約と京都議定書の締約国会議において2013年以降の国際枠組みの検討が最終段階を迎えることを念頭に、関連分野を含めて総合的に再検討する目的で開かれたものであり、条約間の相互協調は中心課題であった。さらに、国内の関連する研究者、地方自治体やNGOなどにヒアリング調査を行い今後の研究協力を円滑に進めることができるように人的ネットワークの確立に努めた。途中経過として、研究目的および研究計画について、国連大学高等研究所において研究会を開き、この研究のテーマについて討論するとともに、コメントや提言を受けて、研究計画の改善と向上に努めた。第2年度は、前年度の基礎調査に基づいて、関連条約間での協調活動の実態や論議動向を分析し、それらの効果および実現可能性を検討した。他方、前年度調査の補充と新たな動向の把握を目的として、2009年9月にスウェーデンで開かれた生物多様性、気候変動、海洋環境に関する国際会議に参加してヒアリングと資料収集を行うとともに、この研究の途中成果を発表して論議を深めた。同様に、国内では、横浜国立大学、東京大学、東北大学、宇都宮大学など開催される研究会合においても発表と論議を行った。
生体機能調節におけるコレシストキニン(CCK)A受容体欠損ラット、CCK-A,B受容体の役割 副題:自然発症CCK-A,B遺伝子ターゲティングマウスによる検討

中枢神経系におけるCCK-A, B受容体の機能分担については、従来の薬理学的検討では、脳のCCK-B受容体は不安を仲介するとされ、B受容体欠損は、不安レベルを低下させることを予測していたが、結果は、逆であり、B受容体欠損マウスで不安レベルが亢進していた。1日当たりの摂食量およびエネルギー代謝量は、CCK-BR(-/-)マウスが、CCK-AR(-/-)および野生型よりも有意に高値であった。が、体重は、各遺伝子型間で差がみられなかった。過去の報告では、CCK-ARは満腹効果を仲介し、CCK-4の投与によるCCK-BRの活性化は、不安症状を起こすことから、当初、CCK-AR(-/-)マウスでは摂食低下がみられると予測していたが、結果は、CCK-ARが欠損した状態でも摂食量は野生型とかわらなかった。一方、BRの欠損では、摂食量も代謝量も増加しており、つまりエネルギーの代謝回転が亢進しているという結果をえた。CCK-BR(-/-)が胃排出速度を亢進させており、この現象は、摂食量の増加、エネルギー代謝回転の亢進と関係することが予測される。CCK-A受容体欠損ラットでは、methamphetamine反復投与後のドーパミン分泌が有意に低下しており、A受容体が麻薬逆耐性とドーパミン分泌を制御していることがあきらかになった。1。中枢神経系におけるCCK-A,B受容体の機能分担2)CCK-AおよびB受容体遺伝子ノックアウトマウスを用いて、呼気ガス代謝を測定し、24時間のエネルギー消費リズムの変化をしらべ、一日あたりのエネルギーバランスを比較した。2。末梢神経および消化器におけるCCK-A,B受容体の機能分担CCK-AおよびB受容体遺伝子ノックアウトマウスにおける胃排出速度の変化それぞれのgenotypeについて、1昼夜絶食ののち、フェノールレッドをマーカーとする液体飼料を経口投与し、10分、30分後にマウスを屠殺、残存した胃内容物を測定した。その結果、CCK-A受容体遺伝子ノックアウトマウスで、胃排出速度は、wildと変わらないがCCK-B受容体遺伝子ノックアウトとCCK-A,B両受容体遺伝子ノックアウトマウスでは胃排出速度が亢進していた。この事からCCK-B受容体遺伝子が胃排出速度に重要な因子であることが示唆された。1日当たりの摂食量およびエネルギ代謝量は、CCK-BR(-/-)マウスが、CCK-AR(-/-)および野生型よりも有意に高値であった。一方、BRの欠損では、摂食量も代謝量も増加しており、つまりエネルギーの代謝回転が冗進しているという結果をえた。CCK-A受容体欠損ラットではmethamphetamine反復投与後のドーパミン分泌が有意に低下しており、A受容体が麻薬逆耐性とドーパミン分泌を制御していることがあきらかになった。
マーモセット胎盤に発現するHLAオーソログの妊娠免疫における機能の解析

HLA-Gによる妊娠時の免疫抑制機能解析には、MHC分子進化や胎盤形成の進化速度が速いため、霊長類モデルの作製を必要とする。そこで非ヒト霊長類コモンマーモセットを霊長類妊娠免疫モデルとし、胎盤トロフォブラストでのヒトHLAオーソログの発現と母体の免疫系との相互作用の解析を行った。まず、野生型の母体に形成されたGFP発現マーモセットの胎盤を用いることにより両者の識別を可能とし、母体脱落膜および胎仔絨毛組織それぞれよりトロフォブラストを分離し、胎盤に発現する古典的・非古典的マーモセットMHCを同定した。分泌型HLA-Gオーソログは妊娠母体末梢血の血漿中に検出されなかった。今年度の実績は以下の通りである。(1)平成25年度はヒト・マーモセットトロフォブラストを分離精製する為に必要なマーカーであり、上皮間葉転換に関連した細胞表面分子としての候補を絞る事とした。TrkBは上皮間葉転換に正に働く細胞表面チロシンキナーゼであり、ヒト・マーモセットcDNAレベルで95%のホモロジーを持つ。そこで両者の胎盤組織を抗ヒトTrkB抗体で染色し、免疫組織化学およびフローサイトメトリーで解析したところ、両種の胎盤絨毛に強発現する事が明らかとなった。これらの結果、TrkBを用いてトロフォブラストの精製が可能である事が明らかとなった。(2)免疫抑制分子としては、マーモセットのHLA-GオーソログであるCaja-Gの遺伝子構造を共同研究者らと決定し、これらの胎盤における発現の解析を開始した。GFPトランスジェニック・コモンマーモセット胎盤をヒトHLA-A,B,Cに共通のエピトープを認識するモノクローナル抗体で免疫組織染色し、GFP染色(胎仔の組織を認識)と比較したところ、主として抗GFP抗体により染色されない母体組織がHLA抗体により染色された。この結果、コモンマーモセットにおいても、胎盤組織におけるclassical(HLA-A and Bあるいはそのオーソログ)-non-classical MHC class-I(HLA-G等)分子の発現パターンは類似である可能性が示唆された。(3)胎盤における免疫担当細胞の動態を明らかにする為、ヒト・マーモセット両胎盤血の解析を行ったところ、低いCD4T細胞の割合と高いHLA-G発現単球の割合の増加が観察された。以上の結果、トロフォブラストにおける上皮間葉転換関連分子と免疫抑制分子の指標が定まった事から、平成26年度はこれを元にトロフォブラストとリンパ球、単球等を共培養し、相互作用について検討する素地ができたと考えられる。今年度の実績は、以下の通りである。(1) GFPマーモセット胚を野生型マーモセット母体に移植して妊娠後期のGFPマーモセット新鮮胎盤を得た。この胎盤中のトロフォブラストと野生型母体胎盤血リンパ球をGFPの発現の有無およびTrkB, CD3, CD4, CD8の発現を指標に胎仔トロフォブラストのみをセルソーターで精製する事に成功した。昨年度、胎仔組織とされる絨毛膜組織や母体血組織とされる脱落膜中に胎仔細胞と母体細胞が混在する事が明らかと成った為、この方法の確立は非常に有用である事が明らかである。(2)昨年度までのマーモセットMHC遺伝子の同定に引き続き、GFPマーモセット胎盤組織におけるMHCの発現解析を次世代シークエンサーを用いて行った結果、胎盤のみに発現が確認され、ほとんど他の組織におけるmRNA発現が確認されないHLAオーソログであるCaja-B遺伝子を同定した。HLA-GオーソログであるCaja-Gは、むしろ胎盤以外の組織でも高発現しており、HLA-Gと機能的に異なることが示唆された。(3)胎盤のみに発現が優位に起こるCaja-B遺伝子のcDNAおよび、beta-2 microglobulin遺伝子のcDNAを採取した。(4)マーモセットのcaja-G遺伝子に対して、抗ヒトHLA-G抗体との交差性を検討したが、特異的な反応性を示す抗体は市販品から入手できなかった。一方、Caja-Bについては、(3)で得られたcDNAからトランスフェクタントを作製し、モノクローナル抗体産生を行う為の準備を完了した。(5)マーモセットトロフォブラストとT細胞の共培養系を立ち上げる事に成功した。ここからmRNAを抽出し、共培養によるTrkB mRNA発現動態の解析が可能となった。今年度は、ヒト・マーモセット胎盤におけるHLA関連分子発現解析と共に、昨年度確立した重度免疫不全マウス(NOGマウス)へのヒト・マーモセット末梢血単核球移植の系を用いて免疫抑制の動態を解析した。妊娠時の免疫環境を構築するために、ヒト化マウスを妊娠させ、妊娠ヒト化マウスを作製した。これらのマウスの胎盤と末梢血・脾臓・骨髄の細胞動態を指標に、マウス・ヒト間における妊娠による免疫寛容について解析を行った。マーモセット末梢血移植の系では妊娠マウスの作製に成功せず、ヒト化マウスではこれに成功し、胎児にも異常は見られなかった。HLA-Gはヒト胎盤ではトロフォブラストのみならず母体マクロファージにもその発現が確認され、免疫系制御に関与する事が示唆された。また、ヒト化マウスでは末梢血T細胞のTCRレパートリーと胎盤中のT細胞のTCRレパートリーには明らかな差が検出された。

一方、マーモセット化マウスを妊娠させる事ができなかったため、マーモセット個体の全ての妊娠期間でマーモセット母体血液を採取し、フローサイトメトリーにてリンパ球の動態を解析すると共に、質量分析により血漿中のタンパク質の動態を解析した。その結果、ヒトと同様、末梢血ではCD4T細胞の割合がCD8T細胞と比較して増加して行く一方で、ヒトで確認されている可溶性のHLA-Gオーソログはヒトと異なり、検出されなかった。マーモセット胎盤局所におけるこれらの遺伝子発現については、本研究期間終了に間に合わなかったが、現在次世代シークエンサーを用いたRNAseqにより解析中である。HLA-Gによる妊娠時の免疫抑制機能解析には、MHC分子進化や胎盤形成の進化速度が速いため、霊長類モデルの作製を必要とする。そこで非ヒト霊長類コモンマーモセットを霊長類妊娠免疫モデルとし、胎盤トロフォブラストでのヒトHLAオーソログの発現と母体の免疫系との相互作用の解析を行った。まず、野生型の母体に形成されたGFP発現マーモセットの胎盤を用いることにより両者の識別を可能とし、母体脱落膜および胎仔絨毛組織それぞれよりトロフォブラストを分離し、胎盤に発現する古典的・非古典的マーモセットMHCを同定した。分泌型HLA-Gオーソログは妊娠母体末梢血の血漿中に検出されなかった。今年度までに、我々は以下の3つの系を確立している。(1)マーモセット胎盤からのプロテアーゼ処理による絨毛膜・脱落膜・胎盤血など各種細胞の分離法を確立し、また、GFPマーモセット胚を野生型仮親子宮に移植して作製したキメラ胎盤を用いて胎盤の上記各組織中に存在する胎仔および母体細胞の識別を可能とした。また、GFPおよび各種蛍光標識抗体を用いて胎盤中のトロフォブラスト画分、ヘルパーT細胞,細胞障害性T細胞、B細胞、NK細胞画分の精製にも成功している。これらの細胞を用いて低酸素下で共培養を行う事も可能となった。(2)重度免疫不全マウス(NOGマウス)へのヒト・マーモセット造血幹細胞移植および末梢血単核球移植を行い、ヒト細胞との比較解析を行いながら、マーモセット造血幹細胞マーカーの同定とリンパ球が分化・生着する条件、および細胞動態を解析する条件を決定した。(3)Class-I MHCに対するモノクローナル抗体作製法は、ブタSLA-1を用いてPBMC,トランスフェクタントによる免疫と細胞融合・スクリーニング法について一連の方法論を確立しており、特許申請も今年1月に行っている。重度免疫不全マウスへの造血幹細胞移植については現在論文投稿中である。また、マーモセットHLA-Gホモログとなる胎盤で発現が更新しているCaja-B遺伝子候補を確定し、現在コンストラクトを作製し発現確認中である。このように各種ツールが確立した為、本年度はこれらの系を用いて、発現アレイ解析等が可能になると考えられる。免疫学今回までに我々は以下の3つの系を確立しているため、これらを以降の研究に用いる。(1)マーモセット胎盤からのプロテアーゼ処理による各種細胞の分離法を確立し、GFPマーモセットを用いて母体と子供の胎盤各組織中に存在する胎仔および母体細胞の識別を可能とした。また、GFPおよび各種蛍光標識抗体を用いて胎盤中のリンパ球を含むトロフォブラスト画分、Th, Tc細胞画分の精製にも成功している。これらの細胞を用いて共培養を行う事も可能となった。(2)重度免疫
新規高分子量G蛋白質の神経細胞内動態とシナプス関連蛋白との機能協関

我々が先にマウス脳の神経細胞において高発現していることを明らかにした新規高分子量G蛋白質(mOPA1)は、そのヒトにおける相同遺伝子の欠損により遺伝性の視神経萎縮症が引き起こされることより、神経細胞の生存、維持に関する機能を果たしていることが示唆される。本課題においてはmOPA1の果たす機能について、培養細胞を用いた発現系を用いて解析を行っている。mOPA1はN末端にミトコンドリア輸送シグナルを有しており、遺伝子導入したCOS-7細胞内においてミトコンドリアに局在する。mOPA1が過剰発現することにより、tube状の形態をしているCOS-7細胞のミトコンドリアは断片化し、小さな棒状もしくはリング状の形態に変化した。mOPA1のミトコンドリア内における局在をミトコンドリアの膜間部分およびマトリックスのマーカーとともに同時に観察したところ、小さなリング状になったマトリックスの一端に、mOPA1および膜間部分マーカーがvesicle状の局在を示している様子が認められた。さらに免疫電顕による解析により、mOPA1を発現する細胞においてはミトコンドリア内膜にあるべき特徴的なひだ構造が消失し、凝集して片寄った分布をしている膜間部分にmOPA1が局在していることが判明した。以上得られた結果より、mOPA1は遺伝子導入した細胞内においてミトコンドリア膜間部分に局在し、ミトコンドリア内膜に何らかの作用を与えることによりミトコンドリア全体の形態に影響を与え、ミトコンドリア断片化を導いていることが示唆された。実際の神経細胞においては、他の何らかの蛋白質との相互作用により、その機能が修飾・制御される可能性も考えられるので、マウス脳よりmOPA1をbaitとして用いたtwo-hybrid法スクリーニングによって得られたクローンとの共発現によるmOPA1の機能の変化について、今後解析を進める。
一分子選択による人工タンパク質の新規デザイン戦略の創製

少しずつアミノ酸配列が異なるタンパク質を提示したファージのライブラリーの中から、特定の特性を持つタンパク質を提示したファージを、蛍光強度を手がかりに選別する手法を創出することで、新規タンパク質のデザイン方法の確立を目指した。当初用いたファージでは十分な蛍光強度が得られなかったため、100倍以上の蛍光強度をもつファージを作製した。また、蛍光観察装置の感度を上げるために光学系の全面的な改良を行った。これらの努力により、ファージ一個体ごとに蛍光強度を測定し、選別した後に大腸菌培地に回収し、コロニーを作らせることに成功した。タンパク質をデザインするための新しい研究手法として、本申請研究では、ファージディスプレイ実験を一ファージレベルで実施することを目指している。このために、平成26年度は、以下のプロジェクトを実施した。それぞれについて、大きな進展を得ることができた。プロジェクト1)では、タンパク質を一分子選別するための光学系の高度化と流路系の高速化を計った。このために、十字形の流路を元にした流体力学的絞り込みにより試料流を集中させ、N.A.値の大きな顕微レンズによる効率的な蛍光光子の集光を可能にした。さらに、応答速度の速いバルブを導入することにより、条件が良い場合には100ミリ秒程度で一個の粒子の選別を可能にした。さらに、装置による試料の選別を効率よく行うために、イメージング方式の検出器を光学系に組み合わせ、検出器の切り替えを可能にした。プロジェクト2)では、ファージ表面に分割したGFPのC末端断片を提示し、N末端断片を加えることでファージ表面に再構成させた。このGFPファージを装置に流したところ、十分な蛍光強度でファージごとに観察することが可能になった。また、装置に流したあとのファージを回収し、大腸菌への感染能を維持していること、また、DNA配列をPCR法により解析可能であることを確認した。プロジェクト3)では、GFPを再構成したファージとGFPを持たないファージを混合し、一分子選別装置に流すことで選別を行う実験を行った。しかし、現在のところ、選別したファージが濃縮されていることの十分な証拠を得られないでいる。さらにこの実験を繰り返し、ファージ選別の確認をおこなう必要がある。タンパク質ライブラリーを提示したファージを一分子ごとに観測し、目的の分光特性を持つファージをセレクトすることで、タンパク質デザインの新しい方法を開発する実験を継続した。GFPを5分子提示したファージを作成し、これまでに開発した一分子ソーターに流し回収するための手法の確立に努めた。ファージの導入時の試料の流速等をコントロールすることで、流路に余分のファージが吸着することを防ぎながら、ファージを回収することに成功した。一方で、装置を使って蛍光シグナルとして観測されるファージ数と、回収したファージを培養することで計測されるファージ数が一致しなかった。この問題に対応するために、装置の感度の向上や作成したファージの検討等を進めた。その結果、これまでファージの個体を検出したと考えていたデータは誤りであり、作成したファージの中に数個のファージが凝集した固まりが存在し、それらが強い蛍光を発していたものを観測していた可能性が示唆された。また、これまでは個別のファージの蛍光信号を検出できていなかった可能性も示唆された。これらの問題に対応するため、一分子観測装置の感度を向上させる努力を徹底して進めた。さらに、提示さするGFPの分子数を一桁以上向上させた新しいファージ試料の作製に取り組んだ。その結果、初めてファージを個別に測定できることを確認した。また、蛍光シグナルとして観測されるファージの数と、回収したファージを培養することで計測されるファージ数が同じオーダーの数となった。これまで一個体のファージを検出していると考えていたデータについて、アーティファクトであることが判明した。これにより、これまでに使用してきた試料の再検討を行う等、幾つかの研究計画の見直しに迫られた。このために、研究は予定通りには進んでいない。本研究では、少しずつアミノ酸配列が異なるタンパク質を提示したファージのライブラリーの中から、特定の特性を持つタンパク質を提示したファージを、蛍光強度を手がかりに選別する手法を確立すべく計画した。昨年までの研究で、ファージ一個体あたりの蛍光が十分ではなかったことにより、選別を難しくしていることを見いだし、強い蛍光を発するファージを作製した。すなわち、昨年まではファージ一個体あたり5個存在する外殻タンパク質であるg3pに緑色蛍光タンパク質を提示した。しかし、5個のGFPでは十分な蛍光強度が得られなかったため、ファージ一個体あたり2700個存在するg8pにGFPを提示するデザインに切り替えた。特に、ヘルパーファージシステムを用いることでg8pの一部にのみGFPを提示さることで、十分に安定でしかも100倍以上の蛍光強度をもつファージを作製した。上記の努力と並行して、一分子蛍光観察装置の感度を上げるために光学系の全面的な改良を行った。特に、感度低下の主要因が背景光にあることを見いだし、自家蛍光の少ない石英対物レンズへの交換、二点観測を諦めて一点での感度の高い観測を行う光学系として光軸のやり直したことで、背景光を劇的に減らしながらも、蛍光感度を向上させることに成功した。改良した装置を用いて強く光るファージを流すことで、ファージ一個体ごとに選別して測定し、その多くを大腸菌培地に回収し、コロニーを作らせることに成功した。今回用いた蛍光ファージは、分割型GFPに基づいている。

ファージの表面における分割型GFPの再構成過程を調べたところ、再構成過程はファージの存在に大きく左右され、場合によっては発光を始めるまでに長い時間が必要であることがわかった。少しずつアミノ酸配列が異なるタンパク質を提示したファージのライブラリーの中から、特定の特性を持つタンパク質を提示したファージを、蛍光強度を手がかりに選別する手法を創出することで、新規タンパク質のデザイン方法の確立を目指した。当初用いたファージでは十分な蛍光強度が得られなかったため、100倍以上の蛍光強度をもつファージを作製した。また、蛍光観察装置の感度を上げるために光学系の全面的な改良を行った。これらの努力により、ファージ一個体ごとに蛍光強度を測定し、選別した後に大腸菌培地に回収し、コロニーを作らせることに成功した。平成27年度は、ファージ選別を成功させるための実験条件の最適化を第一に実施する。特に、試料の吸着を防ぎながら流体力学的絞り込みを成功させるために、試料の流れを観察しながら徐々に流速を上げ、試料流の逆流等を防ぐ必要がある。また、試料供給のためのループの構築などの工夫も導入する必要がある。平成28年度は、科研費の最終年度としてファージ選別実験に全力を尽くす計画である。具体的には、緑色蛍光タンパク質の発現数を増やしたファージの作成を行い、このファージを一分子ソーターを用いて選別する実験を進める。すでにファージの作成に成功しており、また、一分子ソーターの蛍光検出の感度の向上にも成功している。さらに、装置に導入したファージの数と蛍光観察数の一致を確認した上で、二種類のファージを混合した試料の選別実験を行う。さらに、ファージディスプレイの選別実験も行なう。28年度が最終年度であるため、記入しない。生物物理学以上の装置上の工夫と共に平成27年度ではファージディスプレイ実験を実際に行うための選別系の構築を行う。このために、GFPの円順列置換体を元に、GFPの発色団付近のアミノ酸配列にランダム変異を導入する系を作る予定である。実験装置の構築のために、石英製顕微対物レンズの購入を検討した。メーカーよりデモ品を借り入れ、性能を確認したところ、十分な性能を持つことが判った。しかし、海外メーカー品であるため、発注を行ったものの年度内の納品が不可能であった(現在のところ、石英製対物レンズの納品予定は2015年5月と伝えられている)。従って、石英製対物レンズを主に購入することを主目的として、次年度の繰り越しを行う。石英製対物レンズ(パルテックジャパン社、03-0202無反射コーティング付き、600,000円)光学部品購入(200,000円)、タンパク質合成試薬(200,000円)。以上を、46月期に使用する。
中国・中原地域出土の古人骨に関する人類学的研究:渡来系弥生人の起源を巡って

日本人の起源問題に関する重要懸案となっている渡来系弥生人の原郷、及びその渡来要因を明らかにすることを目的として、平成15年度から実施している中国・中原地域出土の夏・商前漢時代の古人骨調査を継続して行い、終了した。当該資料が保管されている河南省新鄭市において、平成18年11月に以下の現地調査、及び研究発表を行った。・2003年度から調査を継続している興弘遺跡(主に春秋戦国時代)については、2005年度に人類学的な調査を終了しているが、人骨の所属年代や考古・文化的な知見について、発掘担当者や河南省文物考古研究所の関係者から情報を収集し、研究成果報告書の執筆分担などについて最終的な打ち合わせを行った。・周庄遺跡出土人骨(春秋戦国漢代)に関し、本年度は最終年度として、残りの60体余りの整理、データ採取作業を行った。同時に、興弘遺跡と同様に、発掘担当者から考古的な知見の収集や報告書の執筆分担などについて打ち合わせを行った。・これまでの研究成果に関し、鄭州市の河南省文物考古研究所において、各分担者による発表討論会を実施した。平成19年2月末に、鄭州大学歴史学院、及び河南省文物考古研究所の研究者2名を招聘し、九州大学において過去4年にわたる中国・中原地域の古人骨調査で得られた分析結果に関する発表討論会を実施した。その結果、日本の渡来系弥生人との間に、頭蓋形態、頭蓋小変異、歯牙形態などにおいて、江南地域や朝鮮半島の人骨に匹敵する類似性のあることが明らかになり、日本への渡来問題に関する当地域の重要性が浮かび上がった。これらの結果を研究成果報告書にまとめるべく、最終的な討議、打ち合わせを行った。また、招聘した研究者による国立科学博物館、東京国立博物館、東京大学などにおける考古、人類学情報の収集作業を行った。日本人の起源問題において懸案となっている渡来系弥生人の源郷を明らかにすることを目的として、中国・中原地域から出土した夏・商前漢時代の古人骨調査を実施した。当該古人骨を大量に保有している中国河南省文物考古研究所との事前交渉のため、まず8月に同研究所を訪問し、協議書をまとめた上で、秋の現地調査の具体的な打ち合わせを行った。その研究計画に基づいて、10月9日31日に同研究所付属の新鄭工作所を訪問し、約3週間に渡って古人骨調査を実施した。資料数が多いため当初は現地作業員を雇用して人骨整理作業を実施する予定であったが、人骨整理にはある程度の熟練が必要なため、その作業に手慣れた大学院生(4名)を伴って、研究分担者によるデータ採取の準備作業に当たらせることとした。本年度はまず同研究所保管人骨の内もっとも資料数の多い周庄遺跡出土人骨(春秋戦国漢代、約400体)を主たる作業対象として選択し、計112体についての計測、観察、写真撮影を終えた。その他、目下、同研究所が発掘している興弘遺跡(春秋戦国時代)の資料(約80体程度になる見込み)についても、保存良好で考古学的情報も豊富であることから研究対象に加え、計35体について整理とデータ採取を終えた。またこうした人類学的調査に平行して、遺跡や関連の時代、地域に関する考古学的情報の収集も行った。さらに、平成16年2月20日3月2日の日程で、中国側共同研究者である韓国河、焚温泉両氏を招聘し、九州大学において合同研究会を実施(同研究会には、北京社会科学院考古研究所の許宏氏も参加)したのち、京都大学、奈良文化財研究所、東京大学、東京国立博物館などを訪問して、日本側の考古・人類学情報の収集作業を行った。