hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
脊髄機能回復における神経回路形成に関する基礎研究

【研究目的】損傷脊髄の機能回復過程における神経回路形成プロセスを基礎研究レベルで明らかとすることを目的として、ラット急性脊髄損傷モデル(定位的脊髄圧迫装置にて作製)を用いて以下の実験を計画した。【研究設定】自然回復群、局所髄液循環障害群および培養シュワン細胞移植治療において、脊髄機能を多角的かつ経時的に客観評価を行った。脊髄機能の評価方法として、下肢運動機能、上肢下肢協調運動試験、熱過敏試験、感覚誘発脳磁場測定、脳および脊髄糖代謝測定等を施行した。組織学的解析では、微量神経トレーサー注入法、免疫組織化学法、微細形態観察を施行した。【研究成果】脊髄損傷急性期に局所髄液循環障害を伴うことは、損傷局所の空洞形成を助長し脊髄軟化現象を引き起こすことが明瞭となった。運動機能、協調運動および熱過敏試験においては、自然回復群と比較して有意な差を認めなかった。培養シュワン細胞移植治療群では、上肢下肢協調運動において若干の改善を認めた。神経トレーサー実験では、皮質脊髄路の損傷近位部での損傷像が明瞭に観察され、機能回復試験の結果との相関が示唆された。培養シュワン細胞移植治療群では、損傷近位部に神経軸索の伸長反応が観察されたが、損傷遠位部への有意な軸索伸展は認めなかった。動物ポジトロンエミッショントモグラフィー検査では、解像度の問題があり明瞭ではないが、脊髄挫傷部に一致して糖代謝の低下が示唆された。動物脳磁図検査では、小動物用磁場遮蔽室内に設置した超伝導緩衝装置センサー(9チャンネル)脳磁図装置にて測定を行った。坐骨神経刺激による誘発脳磁場測定が可能となったが、磁気シールド、坐骨神経刺激強度および脳磁図装置感度などの問題点が明らかとなった。【研究設定】損傷脊髄の機能回復過程における神経回路形成プロセスを基礎研究レベルで明らかとすることを目的として、ラット急性脊髄損傷モデルを用いて以下の実験を計画した。自然回復および培養シュワン細胞移植治療の2群において、脊髄機能を多角的かつ経時的に客観評価を行う。自然回復群では局所髄液循環障害(外傷性脊髄軟化症モデル)を負荷した群も作製し、その機能回復過程について検討した。脊髄機能の客観評価方法として、下肢運動機能、上肢下肢協調運動試験、熱過敏試験、感覚誘発脳磁場測定、核医学による脳および脊髄糖代謝測定等を準備・施行した。組織学的解析では、微量神経トレーサー注入法、免疫組織化学法、微細形態観察にて神経回路の定量・定性評価を準備・施行した。平成16年度では、主に自然回復群について検討を行った。自然回復群では通常の髄外損傷をコントロール群とし、局所髄液循環障害を負荷した群(外傷性脊髄軟化症モデル)と合わせた2群で検討した。この現象は、これまでの研究結果から示唆されている脊髄癒着による脊髄空洞症形成メカニズムと同様であり、損傷急性期の局所髄液循環の重要性が改めて理解された。しかし、その一方で運動機能、協調運動および熱過敏試験においては実験2群間で有意な差を認めなかった。神経トレーサー実験では、両群ともに皮質脊髄路の損傷近位部での損傷像が明瞭に観察され、機能回復試験の結果との相関が示唆された。ラット脊髄測定用にポジトロンエミッショントモグラフィーおよび脳磁図を調整し、平成17年度に培養シュワン細胞移植治療群も合わせて検討を行う予定。【研究目的】損傷脊髄の機能回復過程における神経回路形成プロセスを基礎研究レベルで明らかとすることを目的として、ラット急性脊髄損傷モデルを用いて以下の実験を計画した。【研究設定】

自然回復および培養シュワン細胞移植治療の2群において、脊髄機能を多角的かつ経時的に客観評価を行う。自然回復群では局所髄液循環障害(外傷性脊髄軟化症モデル)を負荷した群も作製し、その機能回復過程について検討した。脊髄機能の客観評価方法として、下肢運動機能、上肢下肢協調運動試験、熱過敏試験、感覚誘発脳磁場測定、核医学による脳および脊髄糖代謝測定等を準備・施行した。組織学的解析では、微量神経トレーサー注入法、免疫組織化学法、微細形態観察にて神経回路の定量・定性評価を準備・施行した。自然回復群では通常の髄外損傷をコントロール群とし、局所髄液循環障害を負荷した群(外傷性脊髄軟化症モデル)と合わせた2群で検討した。【研究成果】脊髄損傷急性期に局所髄液循環障害を伴うことは、損傷局所の空洞形成を助長し脊髄軟化現象を引き起こすことが明瞭となった。この現象は、これまでの研究結果から示唆されている脊髄癒着による脊髄空洞症形成メカニズムと同様であり、損傷急性期の局所髄液循環の重要性が改めて理解された。しかし、その一方で運動機能、協調運動および熱過敏試験においては有意な差を認めなかった。神経トレーサー実験では、皮質脊髄路の損傷近位部での損傷像が明瞭に観察され、機能回復試験の結果との相関が示唆された。動物ポジトロンエミッショントモグラフィー検査では、脊髄挫傷部に一致して糖代謝の低下が示唆された。しかし、ラット脊髄の解像度の問題があり、細胞移植を行った群との比較では有意な差を示すには至っていない。動物脳磁図検査では、小動物用磁場遮蔽室内に設置した超伝導緩衝装置(SQUID)センサー(9チャンネル)脳磁図装置にて測定を行った。光刺激による誘発視覚脳磁場測定が可能となり、坐骨神経刺激による誘発脳磁場測定を行った。磁気シールド、坐骨神経刺激強度および脳磁図装置感度の調節を行い、体性感覚誘発磁場の測定が可能となったが、再現性の問題もあり現在までに2群間で有意な差は認めていない。
エネルギー代謝を亢進させる抗肥満機能性食品創出のための基盤研究

ブロッコリーなどのアブラナ科野菜に含まれるグルコラファニンが、エネルギー消費を増大させ、肥満を抑制することを明らかにし、報告してきたてきた。本研究の目的は、グルコラファニンがどのようにエネルギー代謝を増大させ、肥満症や脂肪肝、糖尿病等の生活習慣病を予防・抑止するのかを突き止めるため、その作用メカニズムを解明する。科学的根拠に基づく、安全性の確立された新たな肥満関連疾患の予防・治療薬や機能性食品への実用化につなげる。
マクロアレイを用いた葉緑体発達に関わる核遺伝子の抽出と発現解析

<マクロアレイのケミルミでの検出・解析法の確立>ビオチン標識したcDNAプローブをハイブリさせたマクロアレイを化学発光させて蛍光イメージアナライザーでシグナルを取り込み、数値化して解析する手法を確立した。本研究代表らが設立したJCAAは、昨夏以降、高品質、低価格での委託作成の段取りを整え、第二期メンバーを公募して全国90研究グループを超えるコンソーシアムになった。本研究代表らによるDNAスポット量やデプローブ条件の最適化を済ませ、マクロアレイ355セットを5月迄に配分できる予定である。(蛋白質・核酸・酵素2002,Vol47,91-93)。<データベース構築とアレイ解析結果の対比>JCAAアレイ上のESTクローン用のデータベース(名大鈴木孝征氏作成)を改良し、検索対象を全推定遺伝子に拡大、オルガネラ移行予測検索結果などを加えたDARTを全国の研究者に公開した。このDBによりJCAAマクロアレイ上には全遺伝子の4割、葉緑体移行が予測される蛋白質の半分以上の遺伝子が網羅されていることがわかった。そこで手始めに、光漂自剤の影響と葉緑体発達不全変異株についてアレイ解析した。<国内外での成果の位置づけ>葉緑体関連遺伝子のアレイ解析によるグループ化において本研究は世界的にもパイオニア的取り組みである。特に定量性でマイクロアレイより優れたマクロアレイを汎用性の高いケミルミ法でシロイヌナズナでも解析できるようにした意義は大きい。誰でも利用できる国産cDNAアレイを有志活動で供給する試みは共同作成から委託作成へと拡大、発展している。これらにより本研究遂行に十分な数のマクロアレイが確保できた。さらに、残ったPCR産物を活用して効率的にサブアレイ作成ができるシステムを新年度から動かす予定で、自身を含め我が国におけるシロイヌナズナのマクロアレイ研究は今後急速に成果を挙げると期待される。
脈絡膜新生血管の増殖における転写因子BTEB2の役割と遺伝子治療

加齢黄斑変性、特発性脈絡膜新生血管に代表される血管新生黄斑症と呼ばれる一群の疾患群では、脈絡膜新生血管からの滲出・出血や線維膜増殖により、黄斑部網膜に非可逆的な障害をもたらす。これらの疾患の視力予後は不良であり、特に加齢黄斑変性は高齢者の失明原因として急増してきている。脈絡膜新生血管の発生を予防し、また生じてしまった脈絡膜新生血管の増殖をいかに抑制するかが大きな課題である。脈絡膜新生血管の増殖には、血管内皮細胞のみならず間質成分も重要な働きを演じていると考えられる。zincfinger型転写因子BTEB2 (basic transcription element binding protein 2)は血管病変の形成や平滑筋細胞増殖に関わり、血管増殖に深く関与する転写因子である。本研究では脈絡膜新生血管の発生と増殖におけるBTEB2の役割を解明することを目的としている。1.摘出脈絡膜新生血管膜での解析加齢黄斑変性6眼と特発性脈絡膜新生血管6眼の症例で、黄斑下手術により得られた脈絡膜新生血管膜を免疫組織学的に検討した。免疫組織染色は一次抗体としてBTEB2、SM1,Actin用い、ABC法にて行ない、免疫染色の程度を陰性から強陽性までの03の4段階で評価した。その結果、全例で脈絡膜新生血管内にBTEB2を検出した。さらに、その多くでBTEB2は強く発現しており、脈絡膜新生血管は増殖能力の高い細胞で構成されていることがわかった。また、SM1も発現していることから、脈絡膜新生血管の間質構成細胞には平滑筋由来細胞が含まれていることが示された。2.動物実験での解析有色マウス眼を用いて、レーザーで強度網膜光凝固を行い脈絡膜新生血管モデルを作成して、免疫組織染色でBTEB2の発現を検討した。その結果、BTEB2の発現がみられた。zincfinger型転写因子BTEB2(basic transcription element binding protein 2)は血管病変の形成や平滑筋細胞増殖に関わり、血管増殖に深く関与する転写因子である。1.摘出脈絡膜新生血管膜での解析加齢黄斑変性3眼と特発性脈絡膜新生血管3眼の症例で、黄斑下手術により得られた脈絡膜新生血管膜を免疫組織学的に検討した。

2.動物実験での解析有色マウス眼を用いて、レーザーで強度網膜光凝固を行い脈絡膜新生血管モデルを作成して、免疫組織染色でBTEB2の発現を検討した。その結果、BTEB2の発現がみられた。加齢黄斑変性、特発性脈絡膜新生血管に代表される血管新生黄斑症と呼ばれる一群の疾患群では、脈絡膜新生血管からの滲出・出血や線維膜増殖により、黄斑部網膜に非可逆的な障害をもたらす。これらの疾患の視力予後は不良であり、特に加齢黄斑変性は高齢者の失明原因として急増してきている。脈絡膜新生血管の発生を予防し、また生じてしまった脈絡膜新生血管の増殖をいかに抑制するかが大きな課題である。脈絡膜新生血管の増殖には、血管内皮細胞のみならず間質成分も重要な働きを演じていると考えられる。zincfinger型転写因子BTEB2(basic transcription element binding protein 2)は血管病変の形成や平滑筋細胞増殖に関わり、血管増殖に深く関与する転写因子である。本研究では脈絡膜新生血管の発生と増殖におけるBTEB2の役割を解明することを目的としている。1.摘出脈絡膜新生血管膜での解析加齢黄斑変性6眼と特発性脈絡膜新生血管6眼の症例で、黄斑下手術により得られた脈絡膜新生血管膜を免疫組織学的に検討した。免疫組織染色は一次抗体としてBTEB2、SM1、Actinを用い、ABC法にて行ない、免疫染色の程度を陰性から強陽性までの03の4段階で評価した。その結果、全例で脈絡膜新生血管内にBTEB2を検出した。さらに、その多くでBTEB2は強く発現しており、脈絡膜新生血管は増殖能力の高い細胞で構成されていることがわかった。また、SM1も発現していることから、脈絡膜新生血管の間質構成細胞には平滑筋由来細胞が含まれていることが示された。
ルネサンス期イタリアにおける活字印刷と英雄詩の文体との関係

ルネサンス期のイタリア詩人、プルチ、アリオスト、タッソの英雄詩を対象に、詩句の跨りという現象に着目して研究を行なった。この時代の英雄詩は1行11音節という定型に従っている。しかし一文は11音節という大きさに収まりきらず、しばしば次行に跨る。この詩行の分断は流麗な音の流れを損ない、聴覚に基づく詩の理解を困難にする。本研究はこの現象を活字印刷の視覚的要素の現れと考え、その頻度を見ることで英雄詩の文体の相異を整理した。2007年度の研究では、ルネサンス期イタリアの活字印刷と英雄詩の文体との関係を検証する予備作業として、トルクァート・タッソの叙事詩『エルサレム解放』のテキストクリティークの問題点を吟味した。報告者の研究課題においては、アンジャンブマンなどの細かな文体上の特徴や、句読点を初めとするテキスト内部の視覚記号の詳細を検証する必要があるのだが、これらの検証にあたっては、使用するテキストが原典に忠実かどうかを確認する作業が欠かせない。特にタッソの叙事詩『エルサレム解放』の場合、詩人の自筆原稿が確認されていないうえに、今日に伝わる16世紀当時の印刷本や写本も、テキスト相互あるいはテキスト内部の錯綜した関係のために、いずれがもっとも作者の意向に忠実なテキストであるのか特定するのが困難な状況にある。報告者はこの点をクリアーにするために、L.Pomaらによる最新の文献学研究の成果を吟味しながら問題点を整理し、かつ現地イタリアで実際に重要写本の一部を閲覧して確認作業を行った。その結果、先行研究の指摘するとおり、写本のなかでも特にN写本とEs3写本の二つが最終段階のテキストに相当すること、16世紀に刊行された印刷本はいずれもテキストとして不正確な点を多数含むこと、またこれら当時の印刷本に依拠して刊行されたL.Carettiによる今日の普及版も、細部において少なからぬ問題を孕むことなどを確認した。上記の検証作業はおおむね先行研究に基づくものであり、報告者のオリジナルな研究成果と言えるものは多くない。しかし、日本において『エルサレム解放』のテキストクリティークの問題がまったく議論されていない現状を鑑みれば、学術的に相当の貢献をもたらすものだと言える。なお上記の検証については、2007年10月に行われた全国規模の学会大会において発表報告を行っている。本研究は、ルネサンス期イタリアの英雄詩の文体の変遷を、活字印刷の普及との関連において考察するものである。今年度は昨年度に引き続き、研究対象の一つであるトルクァート・タッソの叙事詩『エルサレム解放』について16世紀当時の印刷本の問題点を検証した。タッソ存命中の印刷本は、すべて作者の承認をえないまま刊行されており、いずれの印刷本が信頼に値するテキストなのかを特定するのが難しい。加えてタッソ本人の自筆原稿が確認されていないため、作品の原型を再構成するに当たっては作者以外の手になる写本に頼らざるをえない。複数存在するこれら主要写本についても、いずれのテキストが作者の意向をもっとも反映したものなのかを慎重に吟味する必要がある。このような文体分析の大前提となる問題について、先行研究を吟味しながら、主要な写本と印刷本の関係を時系列上に正確に整理した。なお、この研究成果は、全国規模の学会誌に掲載された。タッソ以外の英雄詩については、プルチとアリオストの騎士物語を検証する予定だったが、今年度に予定していた現地調査が家人の長期入院で不可能となった結果、前者の一次資料の入手が難しい状況となったため、当面15世紀後半の詩人プルチから、ほぼ同時代のボイアルドの騎士物語に研究対象を移行することとし、後者の資料の収集に努め、分析を開始した。分析については、特に直接話法の導入箇所を吟味した。地の分から会話への転換、話者Aから話者Bへの移行などは、今日のテキストでは、引用記号によって視覚的に即座に理解できる。しかし、当時の写本・印刷本ではその種の記号が使われていないため(視覚ではなく聴覚で作品を理解する傾向が強いため)、必ず話法転換を示す何らかの表現が使われる。この転換表現の特徴の整理・分析を開始した。今年度は昨年度に引き続き、研究対象の一つであるトルクァート・タッソの叙事詩『エルサレム解放』の文体の問題を検証した。タッソの叙事詩の形式的特徴として、アンジャンブマン(詩句の跨り)の多様が挙げられる。アンジャンブマンがどの程度使用されているかを明確にするために、この技法を定義づけ、テキスト内での使用頻度をカウントする作業を開始した。同時に、16世紀当時のアンジャンブマンに関する議論、並びにタッソ自身のこの技法に対する見解を再検証し、当時の詩人たちにとっては、複数のアンジャンブマンが連続する場合に際立った効果が生じると考えられていたことを確認した。

研究に当たっては、この複数に跨るアンジャンブマンの派生箇所を特に重視して検証を行ない、作品の内容と技法の関係を踏まえながら使用頻度を整理している。その結果、タッソの作品については、アンジャンブマンは非常に多用されているが、連続使用されている箇所は限られていることが明らかになった。アンジャンブマンが2行以上連続して使用されていないということは、詩行が2行単位で完結しているケースが多いことを示唆している。つまりタッソの場合、詩行あるいは詩句は1行で完結することは少ないが、2行の幅で見れば概ね完結している。この2行単位の展開が、タッソの叙事詩のリズムとなっている。また、アリオストの『狂えるオルランド』においても同様の観点から使用頻度を調査した。具体的には、タッソの作品と同じ程度の量となる前半24章を取り上げて、アンジャンブマンの使用頻度が非常に低いことを確認した。この調査結果については、タッソの作品のそれと合わせて慎重に吟味をしたうえで学術誌に報告をする予定である。
準結晶における拡散

本研究の主な目的は、熱的に安定な良質なAl-Pd-Mn準結晶を用いて構成元素の自己拡散係数および遷移金属元素の不純物拡散係数を測定し、複雑な構造を有する準結晶中の拡散機構を解明することである。1.Al-Pd-Mn準結晶の作製:ブリッジマン法およびチョクラルスキー法を用いてAl-Pd-Mn準結晶試料を作製した。また、アーク溶解法により類似の組成を有する結晶試料も作製した。X線回折法によって準結晶であることを確認すると共に構造を決定した。また、X線マイクロアナライザーによって組成を決定した。2.トレーサー拡散実験:放射性同位元素^<54>Mnあるいは^<63>Niを試料にメッキし、所定の温度にて拡散アニールを高真空中にて行った。このために本年度に高真空排気装置を購入した。3.イオンビームスパッタセクショニング装置による拡散濃度分布の測定:本装置は超高真空中に取り付けたイオンガンからのArイオンビームによって拡散試料をスパッタし、そのスパッタ原子を約510nmごとに堆積し半導体検出器によりその放射能強度を測定するもので、すでに試作・完成しており稼動している。本装置を用いて濃度分布を精度よく測定した。この準結晶中のMnの拡散係数はAl_<60>Pd_<25>Mn_<15>結晶中のMnの拡散係数よりも2オーダーも小さいことがわかった。また、準結晶中のMnの拡散係数はアルミニウム中のMnの拡散係数よりも4桁も小さい。さらに、準結晶Al_<72>Pd_<20>Mn_8中の^<63>Niの不純物拡散の測定も行った。Niの拡散挙動はMnの自己拡散挙動に似ていることが明らかになった。今後、準結晶の拡散機構を解明するためMnやNiの格子位置と拡散の関係、近似結晶における拡散の測定を行う予定である。
チオレドキシンとその誘導物質による皮膚炎治療薬の開発に関する研究

アトピー性皮膚炎を代表疾患とする湿疹・皮膚炎の薬物療法の中心は、長年ステロイド・免疫抑制剤外用療法のみである。本研究では抗酸化物質であるチオレドキシンに着目し、ヒトリコンビナントTRX(hrTRX)の外用塗布が角化細胞からの前炎症性サイトカインの産生抑制を介してマウス一次刺激性皮膚炎を抑制することを証明した。hrTRX含有外用剤を作成し健常人においてアレルギー・刺激反応がないことを確認し、hrTRX含有外用剤のアトピー性皮膚炎患者20名に対するダブルブラインド・プラセボコントロール・ランダマイズド試験を行った。副作用や有害事象は生じず、当該データはブラインドをオープンにして現在解析中である。アトピー性皮膚炎を代表疾患とする湿疹・皮膚炎は皮膚科を受診する患者の約40%を占める最も頻度の高い疾患である。またアトピー性皮膚炎は40歳以下における有症率が約10%と生産年齢における罹患率が非常に高い国民的疾患といえる。しかしアトピー性皮膚炎治療の薬物療法の中心であるステロイド・免疫抑制剤外用療法には無視できない特有の副作用があり、多く患者の症状のコントロールが不十分でQOLが損なわれている。我々は以前にチオレドキシン(TRX)を過剰発現させたTRXトランスジェニックマウスで接触過敏(CHS)反応やクロトンオイル皮膚炎反応が抑制される事、ヒトリコンビナントTRX(hrTRX)腹腔内投与によりこれらの皮膚炎反応が抑制される事を報告している。以前は腹腔内投与という臨床的に応用しにくい投与方法で皮膚炎の抑制を観察したが、今回の一連の研究ではhrTRXを外用することでマウスにおける一次刺激性皮膚炎反応を抑制できることを確認した。またマウスにhrTRXを塗布もしくは噴霧することにより一次刺激性皮膚炎反応が抑制できた機序には局所皮膚における各種ケモカイン、前炎症性サイトカインの抑制が重要であることがわかった。GGA(ゲラニルゲラニルアセトン)はTRXの誘導物質として報告されているが、本年度の検討ではマウス皮膚へのGGAの塗布、マウスケラチノサイトへの添加によるマウスTRXの誘導は確認できなかった。その奏功機序については現在詳細に検討中であるが、hrTRXが皮膚ケラチノサイトにおける前炎症性サイトカインの産生を抑制することで皮膚炎の誘導が抑制されている可能性が高いと考えている。我々は以前にチオレドキシン(TRX)を過剰発現させたTRXトランスジェニックマウスで接触過敏(CHS)反応やクロトンオイル皮膚炎反応が抑制される事、ヒトリコンビナントTRX(hrTRX)腹腔内投与によりこれらの皮膚炎反応が抑制される事を報告してきた。当院の倫理委員会で承認をえて、hrTRX含有試験品およびチオレドキシンを含まない対照基剤のパッチテストを10名のボランティアに施行し、アレルギー反応や刺激反応は全例で認められなかったことを確認した。hrTRX含有クリーム、ゲルとプラセボクリーム、ゲルを軽症から中等症の20名のアトピー性皮膚炎患者の前腕、大腿にそれぞれ左右に外用して皮膚臨床症状、自覚症状、角層中の炎症性サイトカインについて観察、測定した。当該臨床試験はダブルブラインド・プラセボコントロール・ランダマイズド試験としてデザインを組んだ。経過中に1名の患者が元来あったアトピー性皮膚炎が増悪したため試験を中断されたが、残りの19名は副作用や有害事象を生じずに外用試験を完了した。

当該データは、ブラインドをオープンとして現在解析中である。皮膚アレルギーTRXの誘導物質による皮膚炎抑制の実験に関しては候補薬であるGGAがマウスTRXを誘導することを確認できなかったため計画の再考が必要であるが、hrTRXの外用によるマウス皮膚炎モデルの検討は順調にすすんでおり、その抑制における分子レベルでの機序も検討し論文化に成功している。現在はマウスモデルを用いたTRX外用効果の検討を行っており、当初の計画通り一次刺激性皮膚炎モデルでの検討は終了している。さらに培養ケラチノサイトを用いたクロトンオイルによるサイトカイン産生上昇に与えるTRXの影響に関してもおおむね順調に検討が進んでいる。TRXの誘導物質の検討に関しては他の候補薬について検討する必要がある。候補薬によりマウス皮膚、マウスケラチノサイトからTRXが誘導されることを確認したのちに、マウス皮膚炎モデルでの症状抑制効果を検討する予定である。さらに、hrTRXのマウスへの塗布、噴霧で皮膚炎が抑制できることが証明されたので、アトピー性皮膚炎患者におけるTRX外用効果の検討を行うために当院倫理委員会の承認を得ている。hrTRX含有クリームと含有していないプラセボクリームをボランティアである健常人の上腕内側にパッチテスト用絆創膏を用いて48時間クローズドパッチテストを行い、除去後1時間後、24時間後に貼付部位の発赤などでパッチテスト判定を行い、hrTRX含有外用剤の皮膚における安全性を確認する。上記試験で安全性が確認された後に、神戸大学医学部附属病院に通院中のアトピー性皮膚炎患者を被験者として外用試験を行う予定である。被験者はhrTRXを含有しているクリームと含有していないプラセボクリームを皮疹が同程度出現している左右の皮膚に4週間外用する。外用前後でかゆみと皮膚所見を評価することで臨床的有用性を検討同時に外用時に生じた副事象を観察することで再度安全性の確認を行う。上記試験は二重盲見法で施行する。さらに治療の前後の局所皮膚における角層をテープストリッピングで回収し、角層のサイトカインを蛍光抗体法やELISAを用いて定量する。今後はアトピー性皮膚炎患者におけるTRX外用効果の検討を行う。この研究計画に関してはすでに学内の倫理委員会の申請を通過しており、実際に患者の同意をもとに研究を行っていく準備を行っている。さらに網膜や肝細胞においてTRX誘導物質であることが証明されているgeranylgeranylacetonを用いて、マウス、人ケラチノサイトにおいてもTRXが誘導されることを証明し、マウス一次刺激性皮膚炎モデルにおいてTRX外用と同様の抗炎症効果が得られるかを検討する予定である。本年度の実験計画において、当初予定していたマウスを用いた実験が完全に完了せず次年度にマウスを用いた実験計画が延長したことより予定より本年度の実験費用が少なくなった。次年度においては野生型マウスを用いた実験を多く行う事や、健常人のボランティアへのhrTRX製品のパッチテストやアトピー性患者へのhrTRXの塗布実験計画を想定しているため、その製品の製作・調整や健常人ボランティアへの謝金などが発生するため今年度より費用がかさむことが想定される。また、最終年度であるため実験結果の学会での発表や論文化にも費用がかかることが想定される。
脂肪組織の脂質代謝におけるアセトアセチルCoA合成酵素の生理的意義の解明

本年度はアセトアセチルCoA合成酵素の脂肪組織における生理的意義の解明を目的に、以下のような実験を行った。本酵素の脂肪組織における影響を見る目的で、本酵素遺伝子の一過性過剰発現系の構築を目指した。昨年度のsiRNA法と同様にリポフェクション法による外来遺伝子の導入によって前駆脂肪細胞(3T3-L1細胞)における本酵素遺伝子の過剰発現を行ったが、脂肪細胞の短期間の培養では目立った表現系は観察されなかった。また、長期間培養では内在性AACSの発現量に減少傾向が見られた。現在、長期間に渡りsiRNA及び本酵素遺伝子が安定に発現する系の構築を試みている。また、本酵素遺伝子の上流配列に存在する転写活性化部位の同定をルシフェラーゼアッセイ法により検討した。その結果、脂肪細胞分化時にはC/EBP類の結合する配列が特に重要であることを示唆するデータが得られた。今後、ゲルシフトアッセイ法を用いて詳しい検討を行う予定である。また、本酵素遺伝子は他の組織に比べ雄の皮下脂肪組織において顕著に高発現していることが明らかになっている。本年度は脂肪細胞の大きさと本酵素遺伝子の発現量の相関関係という観点から検討を行った。成体ラットより脂肪組織を摘出し、脂肪細胞の直径によって四段階に分け、各々の本酵素遺伝子発現量を雌雄で比較した。その結果、本酵素遺伝子は主に直径100μmの脂肪細胞で発現していることが明らかとなった。また、腸間膜部ではどの大きさの脂肪細胞でも本酵素遺伝子発現量に雌雄で変化は無かったが、皮下部では200μm以上の大きさを持つ脂肪細胞で雄でのみ顕著な発現が見られた。このことから、本酵素遺伝子は雄の皮下部に存在する巨大脂肪細胞で特異的な発現をすることが明らかとなった。今後は、脂肪細胞の大きさと本酵素による脂質合成への影響、並びに性ホルモン類との間にある関係を解明することを目指して実験を進める予定である。本酵素の脂肪組織における影響を見る目的で、本酵素遺伝子のsiRNA法を用いた遺伝子発現抑制系の構築を目指した。対象として前駆脂肪細胞系であるST-13細胞を用い、リポフェクション法を用いて複数の候補配列をターゲットとして検討したところ、いずれの配列においても20-35%の遺伝子発現量の減少が見られた。しかし、この本酵素発現低下細胞と通常細胞との間に生育や脂肪細胞への分化における大きな差異は見られなかった。現在、より効果的に発現減少を起こすターゲット部位を探索している。このことから、本酵素発現と性ホルモンとの間に生理的に相関関係があることが考えられる。これを確かめる目的で以下の実験を行った。まず、雌雄で雄性ラット皮下部脂肪組織並びに雌性ラット皮下部脂肪組織を用いた初代培養系で本酵素遺伝子の発現を検討したところ、分化誘導の有無に関わらず発現に量的、時間的な点で大きな差異はなかった。このことから、生体における本酵素発現量の差異は血液由来の液性因子に起因するものである可能性が考えられた。そこで脂肪細胞培養株のST-13細胞に対してエストラジオールを処理したところ、処理後24時間から48時間まで持続的に本酵素遺伝子の発現亢進が見られた。この発現上昇は前立腺癌細胞株のMCF-7や肝癌細胞株のHepG2等その他の細胞系では見られなかったことから、脂肪細胞に存在する本酵素は他の組織に比べて特異的な性ホルモン支配を受けている可能性が示唆された。

今後は、脂肪細胞の大きさと本酵素による脂質合成への影響、並びに性ホルモン類との間にある関係を解明することを目指して実験を進める予定である。
アントレプレナーシップ育成支援システムの開発

平成16年度から平成18年度にかけて,「アントレプレナーシップ育成支援システムの開発」を行ってきた.これは社内発ベンチャーで家具(椅子)をデザイン・製造・販売するという会社の起業を想定し,その起業プロセスにおいて重要な(1)ビジネスプランの作成,(2)椅子のデザイン,(3)資金調達,(4)営業活動というものをモデル化し,それをインターネット技術よりシステム化するというものであった.また起業に必要な理論・知識や経営学的手法をデータベース化し,随時閲覧できるようにした.つまり,起業のプロセスを学びながら学生時代に学んだ知識を活用できる教育支援システムであった.プログラムは「起業ステップ」,「製品開発ステップ」,「販売管理ステップ」の三部構成になっている.「起業ステップ」では,ベンチャーキャピタルから資金を調達するために,経営計画や将来性,投資対効果を説明するビジネスプランを作成することが作業の中心となる.「製品開発ステップ」では,椅子のデザインと特許,設立登記を作成する.また「起業ステップ」時に得られた資金調達額をもとに資本政策も考える.「販売管理ステップ」では,デザインした椅子の広告や営業活動と自社の将来展開,つまりイグジット戦略を考えるステップである.ステップ別に実習と発表会があり,またプロセス別に関連が深い経営学的理論や手法は,支援システムを通じて学べるようになっている.平成18年度後期において実際の授業で実施し,そこから「起業に必要な知識がわかった」などの意見があり,本研究が大学生に対して起業プロセスのみならず,経営理論・手法,もしくはチームマネジメントや販売活動などの経営管理論の理解を深める学習プログラムになっていることが確認できた.研究の成果としては,学術論文掲載(4件),国際会議発表(5件),国内学会発表(7件)である.本年度は,主に日本国内のベンチャー事情の調査を中心に行った.具体的には,国際高等セミナーハウスで開催された「大学発ベンチャー創出人材育成短期集中プログラム継続セミナー合宿」において,大学発ベンチャー事情やその資金調達状況の報告,また日本ベンチャー発展のためには教育プログラムの充実の必要性,など多くの有意義な意見を聞くことができた.また申請者が提案している「アントレプレナーシップ育成支援システムの開発」について発表する機会を頂き,「早急に必要な教育プログラムの一つである」という意見を頂いた.また,教育工学や教育システムを中心とした学会に多く参加し,学習者の習熟に効果的な方法などを調査した.さらに,企業内ベンチャーが積極的に行われている企業の方々からヒヤリングする機会も多くあり,そこから企業内ベンチャーの現状と課題に関する調査を行うことができた.このような調査を通じて,補助金より購入させていただいたパソコンを用いて,簡易版の育成プログラムを作った.そして,それを実際に大学生を対象に実施した.その結果,「アントレプレナーシップの基礎的要素である起業手順,そして経営マネジメント,さらには財務諸表の基礎を学ぶことができた」などの意見があった.今後は,調査や簡易版プログラムの成果をもとに,起業に必要なビジネスプラン構築法,マーケティング手法,資金調達手段などをモデルに追加していく予定である.その後そのプログラムの有効性を検証するために,大学や社会人,さらには中高生にも実施したいと考えている.同時に,学会発表や学術論文への投稿を通じて,専門家の意見を頂きたいと思っている.本年度は,アメリカ合衆国に行き,ベンチャー事情や教育プログラム開発の現状についての調査を行った.具体的には,ラスベガスで開催された国際会議(11th International Conference on Human-Computer Interaction)において教育プログラムに関する方法論や開発手法などを調査した.また国際会議参加後,サンフランシスコに立ち寄り,スタンフォード大学やUCバークレー大学,さらには現地で実際にベンチャーを起業している日本人の方に,現在のシリコンバレー状況などをヒヤリングした.このアメリカ合衆国訪問を通じて,本研究が考える問題設定や方法論が現実的に必要であるものと確認できた.このような調査を通じて,補助金より購入させていただいたパソコンを用いて,前年度開発した簡易版の教育プログラムの精緻化を行った.また,経営工学的手法のデータベースの充実を図り,起業手順,経営マネジメント,財務諸表の基礎などが学べるWebシステムを完成させた.最終年度では,はじめに授業で利用するためのテキスト作りを行う予定である.そして,可能であるならば実際の授業で利用していきたいと思っている.その後,本プログラムの有効性を検証するために,大学生や大学院生に対して実施し,アンケート調査を行う予定である.同時に,学会発表や学術論文への投稿を通じて,専門家の意見を頂きたいと思っている.平成16年度から平成18年度にかけて,「アントレプレナーシップ育成支援システムの開発」を行ってきた.これは社内発ベンチャーで家具(椅子)をデザイン・製造・販売するという会社の起業を想定し,その起業プロセスにおいて重要な(1)ビジネスプランの作成,(2)椅子のデザイン,(3)資金調達,(4)営業活動というものをモデル化し,それをインターネット技術よりシステム化するというものであった.また起業に必要な理論・知識や経営学的手法をデータベース化し,随時閲覧できるようにした.つまり,起業のプロセスを学びながら学生時代に学んだ知識を活用できる教育支援システムであった.プログラムは「起業ステップ」,「製品開発ステップ」,「販売管理ステップ」の三部構成になっている.

「起業ステップ」では,ベンチャーキャピタルから資金を調達するために,経営計画や将来性,投資対効果を説明するビジネスプランを作成することが作業の中心となる.「製品開発ステップ」では,椅子のデザインと特許,設立登記を作成する.また「起業ステップ」時に得られた資金調達額をもとに資本政策も考える.「販売管理ステップ」では,デザインした椅子の広告や営業活動と自社の将来展開,つまりイグジット戦略を考えるステップである.ステップ別に実習と発表会があり,またプロセス別に関連が深い経営学的理論や手法は,支援システムを通じて学べるようになっている.平成18年度後期において実際の授業で実施し,そこから「起業に必要な知識がわかった」などの意見があり,本研究が大学生に対して起業プロセスのみならず,経営理論・手法,もしくはチームマネジメントや販売活動などの経営管理論の理解を深める学習プログラムになっていることが確認できた.研究の成果としては,学術論文掲載(4件),国際会議発表(5件),国内学会発表(7件)である.
経頭蓋磁気刺激による脳卒中片麻痺の回復

目的:目標運動努力中の経頭蓋磁気刺激(ex-rTMS)が慢性期脳卒中片麻痺上肢機能を改善させるかどうかを検討した。対象:発症後6か月以上経過し手指ブルンストロームステージ(Br)がIV以下の脳卒中片麻痺患者9人(49歳77歳、男性7人、女性2人、手指BR III6人、IV3人)とした。方法:二重盲検化比較試験を行った。対象を介入群5人と対照群4人とに分け、介入群にはex-rTMS(手指伸展の最大努力に合わせ、0.1Hz、100発)を週1回で4回施行した。対照群には4回のsham刺激(手指伸展最大努力中のsham刺激)を行った。TMSの部位は麻痺側指伸筋最適刺激部位、強度は約1mVの運動誘発電位が導出される値とした。Br、SIAS、手関節Modified Ashworth Scale(MAS)、Manual FunctionTest(MFT)を1回目の前と4回目の後に評価した。解析は、1回目と4回目の差を介入群と対照群との間で比較した。結果:対象者全てが予定されて刺激と評価を完了した。有害事象は発生しなかった。MASとMFTのいずれかが改善した被験者は、介入群4人、対照群0人であった(χ二乗テスト、P<0.05)。手指BrかSIAS遠位のいずれかが改善した被験者は、両群ともに1人であった。介入群で各回の加算平均された運動誘発電位振幅が30%以上増大した3人全員でMASまたはMFTが改善した。本研究の目的は、脳卒中片麻痺に対する低頻度反復経頭蓋磁気刺激を併用した運動療法の効果、ならびに片麻痺の回復に関与する可塑性変化を、脳機能画像検査により明らかにすることである。本年度は、主に後者の基礎データの収集と解析を行った。まず、脳卒中後の片麻痺改善における皮質脊髄路機能を解析する目的で、脳卒中患者にMRI拡散テンソル技法による皮質脊髄路の障害度の定量的評価を行い、片麻痺の程度と比較検討した。すなわち脳卒中慢性期患者14例(脳内出血6例、脳梗塞8例)に対してMRIによる3-dimensional axonal contrast(3-DAC)、fractional anisotropy(FA)、apparent diffusion coefficient(ADC)による皮質脊髄路の障害度を評価した。片麻痺の回復段階を示すBrunnstrom stageと拡散MRIのパラメータとの関係を検討した。その結果、皮質脊髄路のワーラー変性を大脳脚における3-DAC、FA、ADCにより信号変化として捕らえることが可能であった。統計学的な解析では、片麻痺と良好な相関関係を示したものはADC値であった。すなわち、大脳脚におけるADC値は片麻痺の重度な患者では有意に高値であり、経時的にMRI評価を行った10例の患者では片麻痺の改善に伴いADC値は低下した。現在脳卒中急性期病院である広南病院で脳卒中急性期患者にMRIを施行し、ADCによる皮質脊髄路の障害度の定量的データーの収集を平成15年12月より開始し、現在データーを解析中である。また平成15年11月に経頭蓋磁気刺激装置が導入されたことから、健常者を対象として、運動誘発電位記録の信頼性を検証している。最大の変動要因が刺激コイルの位置と向きの変動であることから、それをを最小限にするためのコイル把持アームの作成を行った。本研究の目的は脳卒中片麻痺に対する低頻度反復経頭蓋磁気刺激を併用した運動療法の効果、ならびに片麻痺の回復に関与する可塑性変化を、脳機能画像検査により明らかにすることである。本年度は、脳卒中回復期の片麻痺患者10人を対象として、経頭蓋磁気刺激による運動誘発電位(MEP)と、MRI拡散テンソル技法による皮質脊髄路の障害度指標であるfractional anisotropy (FA)、apparent diffusion coeffecient (ADC)との関係を検討した。

FAが小さく、ADCが大きいほど組織障害が強いことを示している。これらの値と麻痺との関係は昨年度に報告した。対象の内訳は、脳梗塞7人、脳出血2人、くも膜下出血1人で、発症からのMEP、MRI検査までの期間の平均値は、それぞれ116日、117日であった。MEPは両側の短母指外転筋を被検筋として、それぞれ最適刺激部位に安静時閾値の1.2倍の強度で刺激を行い記録した。FA、ADCは両側の大脳脚で各々計測した。その結果、MEP安静時閾値が100%を越え、MEPを記録できなかった群(MEP-群、n=5)は、MEP安静時閾値100%以下の群(MEP+群)よりも統計学的に有意にEAが低値(unpaired t test, P<0.01)、ADCが高値であった(P<0.0005)。このことから、拡散MRIパラメータにより、皮質脊髄路の障害度を推定することができると考えられた。またMEP-群の手指Brunnstrom stageは14、MEP+群は36であり、stage3とstage4の違いは皮質脊髄路の障害度では説明することができないと示唆された。以上の神経生理・画像データの得られた患者を追跡し、機能的プラトーに達した患者を対象に経頭蓋磁気刺激を併用した運動療法の効果を検討する予定である。目的:目標運動努力中の経頭蓋磁気刺激(ex-rTMS)が慢性期脳卒中片麻痺上肢機能を改善させるかどうかを検討した。対象:発症後6か月以上経過し手指ブルンストロームステージ(Br)がIV以下の脳卒中片麻痺患者9人(49歳77歳、男性7人、女性2人、手指BR III6人、IV3人)とした。方法:二重盲検化比較試験を行った。対象を介入群5人と対照群4人とに分け、介入群にはex-rTMS(手指伸展の最大努力に合わせ、0.1Hz、100発)を週1回で4回施行した。対照群には4回のsham刺激(手指伸展最大努力中のsham刺激)を行った。TMSの部位は麻痺側指伸筋最適刺激部位、強度は約1mVの運動誘発電位が導出される値とした。Br、SIAS、手関節Modified Ashworth Scale(MAS)、Manual Function Test(MFT)を1回目の前と4回目の後に評価した。解析は、1回目と4回目の差を介入群と対照群との間で比較した。結果:対象者全てが予定されて刺激と評価を完了した。有害事象は発生しなかった。MASとMFTのいずれかが改善した被験者は、介入群4人、対照群0人であった(χ二乗テスト、P<0.05)。手指BrかSIAS遠位のいずれかが改善した被験者は、両群ともに1人であった。介入群で各回の加算平均された運動誘発電位振幅が30%以上増大した3人全員でMASまたはMFTが改善した。
チトクロ-ムPー450を中心とした薬物代謝酵素遺伝子発現と化学発癌

1)P450遺伝子構造と誘導機構:ラットとハムスタ-P450IA1(ベンツピレン代謝)の5'上流域のDREとBTE領域の存在を確かめた。BTEに結合するBTEーBは転写調節因子Sp1と同じ結合性を持つ。DREと結合するリセプタ-蛋白は精製を試みているが成功していない。また培養肝細胞におけるベンツピレン代謝の誘導能は転写前と共に転写後の調節もある。2)P450遺伝子導入とその発現:ヒト胎児肝P450IIIA7をヒト乳癌由来細胞(MCFー7)、または昆虫由来細胞(Sf7)で、ヒトP450IIC9、IIC10、IIIA4を酵母で、イヌP450IA1をショウジョウバエに導入し、発現させた。そしてIIIA7、IIIA4はAFB_1代謝能、また、IIIA4とIA1はベンツピレン代謝能をもっていた。精製P450酵素の代謝特性:ヒト肝よりP450IIA6とIIIA4を精製し、それぞれクマリンの代謝と4,4'ーメチレンーbisー(2ークロロアニリン)の活性化能を示していた。また、ブニトロロ-ルの基質濃度により、触媒活性を示すP450IID2とIA1への依存性が異なっていることを確かめた。4)アセチルとグルタチオンのトランスフェラ-ゼについての検討:塩基配列の異なる2種のATcDNAを分取し、ATーBに遺伝子多型がある。また、GSTーmuがヒト食道癌で新たに発現していた。5)ヒトP450の遺伝子多型:P450IIE1(ジアルキルニトロサミン代謝)の制限酵素Dra1により遺伝子多型の分布において、癌患者と対称群の間で異なっており、その変異はイントロンVIにある。また、P450IA1のMsp1による多型は肺癌患者と対称群で有意差があり、ベンツピレン代謝活性の差異をもたらす、エクソン部位の変異の連鎖が確かめられた。特に、喫煙との関連が明らかである。
超新星残骸における宇宙線加速のエネルギー注入と持続性の解明

銀河系内宇宙線をつくる衝撃波でのフェルミ加速は,別の過程による予備加速を要する。これを解明するため,予備加速された粒子(超熱的粒子)が周囲の熱的ガスを効率よく電離することを利用しその検出をめざした。まずこの電離作用を考慮した場合に熱的ガスからのX線放射がどのように変化するかを計算した。つぎに熱的ガス自身による電離作用が小さく超熱的粒子の影響をとらえやすい再結合プラズマをもつ超新星残骸でこれを検証した。結果,再結合過程が進行しすぎ超熱的粒子による過去の電離の痕跡があるか判定できなかった。一方でより精密な測定が可能な次期X線衛星ASTRO-Hをもちいれば超熱的粒子を検出できる可能性を明らかにした。すでに申請者が再結合プラズマを発見した超新星残骸W28についてすざく衛星によるX線データ解析を進めた。全3観測によって残骸のほぼ全域をカバーできたため,これを数分角サイズの微小領域に分割し,場所ごとにスペクトル解析を行った。元素ごとに測定した電離度から超熱的粒子の密度,スペクトルを推定するためには,超熱的粒子の効果を含んだ電離過程と,そのあとの再結合過程を組み合わせた非平衡プラズマシミュレーションが必要である。このようなコードは存在しないため,Jelle Kaastra氏との共同研究のためオランダ宇宙研究機関に6週間滞在した。この間,(1)電離非平衡状態の原子物理データを改訂し,これを用いて(2)超熱的粒子など非マクスウェリアン的電子分布を考慮した電離非平衡プラズマコードを作成した。さらにこれに(3)電子分布の時間発展を取り込んだ。以上をもって現在および将来のX線観測データを解析・解釈するのに必要な技術的道具立てが整った。本年度はこのほか,共同研究によりW28と性質のよく似た銀河面付近の中年齢超新星残骸W44からの再結合プラズマおよび硬X線フィラメントの発見に貢献した。とくに硬X線フィラメントの発見に関しては,中年齢残骸からの確実な報告事例は皆無である。加速の持続性の問題に迫る上で,今後同種の構造の探査が重要である。またおなじく共同研究により,超新星残骸W51CのX線観測結果を報告した。この残骸は銀河面上に位置し,中年齢の残骸であるというW28やW44と共通の性質を持つが,再結合プラズマは有意に検出されなかった。また超熱的電子による電離の兆候も見られなかった。この残骸では,熱的電子に対する電離の進行度が比較的低いことから,典型的な加速効率を適用すると超熱的電子による電離の効果も非常に小さくなりうることを示した。本研究の目的は,銀河面上に偏在する再結合が優勢な残骸をプローブとして、加速粒子へのエネルギー注入量と加速プロセスの持続性を解明することである。再結合プラズマでは熱的電子が低温なため,超熱的電子による電離効果がより検出しやすいことを期待した。ただし,再結合プラズマは電離平衡にむかい緩和するため,加速粒子による電離過程と,緩和期における再結合過程の切り分けが肝となる。これまでに発見した再結合優勢な超新星残骸のうち,とくに明るいものについてX線スペクトル解析を行い,その電離構造を詳細に調べたところ,いずれも再結合が非常に進行していることが明らかになった。比較的年齢の進んだ残骸が多かったため,最も直径が小さく,再結合がまだあまり進んでいないと考えられる残骸を対象とし,同様の解析を行ったところ,この若いはずの残骸についても再結合が非常に進んでいることがわかった。再結合の進行度合が大きすぎ,いずれの残骸でも初期の電離過程における加速粒子の影響のみを抽出することは非常に困難であることがわかった。しかしながら,昨年度から継続するプラズマコードの製作過程で,電離よりむしろ微細構造線を用いた輝線診断が,加速に注入される粒子の検出に有用であることを突き止めた。これは今後ASTRO-H衛星の研究対象となると期待する。一方,残骸の年齢によらず再結合が非常に進行している事実は,再結合プラズマが進化の途上で急激に膨張し密度低下を引き起こしたことを示唆する。これは,再結合プラズマの起源が断熱膨張による急速冷却であることを示す。以上のように,本来の目的は達成できなかったが,再結合プラズマの起源に関する新たな事実をつかむとともに,将来別の手法で本研究の目的に再挑戦する糸口を得た。研究の進行はおおむね順調であると言えるが,当初の研究計画に対してはやや遅れている状況である。第一年度の研究計画は,まず(1)再結合プラズマをもつ残骸のすざくデータを空間的に分割して解析し,各領域で元素ごとの電離度を明らかにすることである。次に(2)これを解釈するため,超熱的粒子の効果を含んだ非平衡プラズマコードを開発することである。

最後に(3)観測した電離度とプラズマコードの比較から,超熱的粒子のエネルギースペクトルと密度を制限し,また電離・再結合のタイムスケールを算出することで加速の持続性を検証することである。今年度は再結合残骸W28について(1)を達成し,またオランダ宇宙機関との共同研究により(2)も達成したが,(3)は未到達である。遅れの主な理由は,(2)の共同研究を行うための国外出張が,教育業務などのため年度末まで不可能だったためであり,研究内容そのものに予期せぬ困難があったわけではない。したがって第二年度に遅れを取り戻すことが十分可能である。25年度が最終年度であるため、記入しない。今後の研究の推進方策としては,まず第一年度の未到達内容を達成し研究計画の遅れを取り戻す。具体的には,すでにX線データ解析の済んでいるW28において,観測結果とプラズマシミュレーション結果を比較し,この残骸における超熱的電子の電離への影響を見積もる。これから,超熱的成分の相対密度,エネルギースペクトルの制限を試み,電離のタイムスケールから加速の持続性にも迫る。引き続いて,当初の第二年度の研究計画にうつる。上記の比較から,残骸内で場所ごとに超熱的電子の密度,存在時期が推定できれば,これを空間的に可視化することで加速の時間発展を明らかにできる。さらに現在の加速粒子の分布を示すと考えられるGeV/TeVガンマ線観測結果とも比較する。ガンマ線の分布は加速粒子の衝突ターゲットとなる分子雲の分布にも依存するので,必要に応じ分子輝線データの解析も行う。本研究を遂行するためには,多波長データが豊富で,再結合プラズマを持ち,分光性能のよいすざく衛星によるX線データが豊富な残骸が必要である。本研究の将来的な発展のため,再結合プラズマのサンプルを増やすことも重要である。随時すざくによる探査観測を提案する。観測とシミュレーションの比較の上では,プラズマコードの不定性が重要となる。すでに第一年度には使用する原子物理データのアップデートを行うなど,これを考慮した補助的研究も行っているが,第二年度でも必要に応じ,不定性を把握・最小化するためのコード改訂作業を行う。第一年度の研究成果については多くが未公表であるため,これらの出版も行う。