hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
カンドルと分岐被覆を用いた低次元トポロジーの研究

低次元トポロジーの分野においては、結び目、曲面結び目と3・4次元多様体といった幾何的な対象を完全に分類することが一つの大きな課題である。位相不変量とは、幾何的な対象に代数的な値を与える写像である。不変量の構成の仕方によって、対象の幾何的な性質をうまく導き出し、分類問題に大きく役立たせることができる。そこで本研究では、カンドルという代数的構造と、分岐被覆という位相幾何の道具を用いて不変量を構成し、この分類問題にアプローチすることに成功した。本研究では、カンドルという代数的構造と、分岐被覆という位相幾何の道具を用いて不変量を構成し、この分類問題にアプローチした。まず初めに、ある代数的集合(カンドル)を用意し,結び目の図式に現れる各弧にカンドルの元をひとつずつ与えた("色ぬり"操作)。色ぬりの際に適切なルールを定めることにより、この操作が3次元多様体の基本群からある群への準同型を与えていることが分かった。次に,ルールを満足する全ての色ぬりの集合を考え,ある空間の部分集合と見なすことで,この不変量の値を定めた。さらに,上で得られた不変量が、Dijkgraaf-Witten不変量という既存の不変量を含んでいることが分かった。このことにより、立体の組み合わせで計算されていたこの不変量をより平易に求めることが可能となった。またこの不変量は3次元多様体を対象とするものであったが,その構成から結び目のシャドウコサイクル不変量と呼ばれるものとも関係づけることができた。これらの成果は、結び目や、結び目をもとに得られる4次元空間内の曲面結び目を対象とした不変量への拡張、さらにさまざまな不変量どうしの関係を調べる等、今後も研究を進めることで新しい視点から低次元トポロジーの発展へと貢献できると考えられる。本年度の本研究では、前年度に引き続き、カンドルという代数的構造と、分岐被覆という位相幾何の道具を用いて不変量を構成し、この分類問題にアプローチした。
アクションリサーチによる保健師のアセスメント能力向上を導く看護過程の構築

本研究の目的は、アクションリサーチによる保健師のアセスメント能力向上を導く看護過程の構築である。研究計画は、20182020年度の3年間でアクションリサーチを展開し、事例検討会への介入を通して保健師らしい看護過程の手引きを作成する。2018年度はアクションリサーチのフィールド調整を行い、研究目的と現場が抱える課題が合致するという声があり、3か所の保健所に研究協力の承諾を得た。予備調査として、保健所の研修企画担当保健師を対象に保健師の個別支援の現状と課題についてインタビューを行った。また、過去の事例検討会の記録等を分析し、保健師の個別支援における課題の明確化および事例検討会への介入計画への示唆を得た。予備調査を通して、保健事業の増加等による個別支援の減少、新任期であっても困難事例への支援に携わること、多職種との連携の中で保健師の役割を見出すことの難しさ等がわかり、現場が抱える課題に合わせて家庭訪問の学習会も行うこととした。さらに、介入の準備として、保健所管内の人材育成のための研修会を現場と協働して企画し、研究者が保健師の家庭訪問に関する講義を行うとともに事例検討会に助言者として参加した。事例検討会は3か所で計4回開催し、参加者を対象としたグループインタビューを各地域1回実施し、事例検討会の学びについて共有した。データは現在分析中である。次年度は分析結果をもとに具体的なアクションの計画立案および事例検討会への介入を行う予定である。当初の計画通りおおむね進行している。2018年度は計画通り、研究フィールドの調整、予備調査を行うとともに事例検討会にも参加し、介入の準備を行うことができた。予備調査のデータは分析途中のものもあり、今後、さらに分析を進めていく必要がある。また、研究フィールドが遠隔地のためタイムリーに集まることが難しく、研究協力者である保健所研修企画担当保健師との打合せは電話・メール等も活用しながら行い、企画、評価を行っていく予定である。研究計画に沿って予備調査のデータ分析をさらに進め、事例検討会への介入に向けて、これまでに把握した実態・課題を研修企画に反映させていく。研究協力者である現場の保健師と協議しながら事例検討会の企画・運営について検討し、継続して事例検討会を実施する。また、保健師の個別支援の課題について予備調査で明らかになった内容を研究発表するとともに現場へのフィードバックを行う予定である。予算計上していたテープ起こし等の経費は、インタビューの時間により実際の使用額に差が生じるため、次年度使用額が生じた。なお、人件費をテープ起こしのために計上していたが、業者へ発注したため人件費は使用せず、その他の区分の予算で支出した。次年度は研究2年目であり、アクションリサーチによる事例検討会への参加回数も増えるため、テープ起こしや旅費等の費用として使用予定である。
自律分散型マルチチャネル能動騒音制御システムの研究

「自律分散型マルチチャネル能動騒音制御システムの研究」に関連して,得られた成果は次の通りである.1マルチチャネル能動騒音制御アルゴリズムに関しては,当初の問題点であった負荷の低減を図るため,補助フィルタの同定を必要としない時間領域でのアルゴリズムの開発を行った.次に,周波数領域アルゴリズムに拡張することによって,補助フィルタの同定を必要とせず,有色入力にも強く,系の変動に対しても安定で,しかもFiltered-Xと比較して計算量を大幅に削減できるアルゴリズムを開発することができた.2自律分散型アルゴリズムについて,当初通信を行わない完全分散型アルゴリズムをフィードバック制御を組み合わせることにより,消音を行うアルゴリズムを考えたが,ある程度の消音量は得られるものの十分な消音性能は得られなかった.そこで,ある程度制御器間の通信を許容した部分分散型アルゴリズムを開発し,十分な消音量が得られることを確認した.しかし,このアルゴリズムは参照信号の有色性や相関により性能が劣化する場合があったため,これらの点についてよりロバストなアルゴリズムを開発した.このアルゴリズムでは,2次経路フィルタの更新を随時行うことにより,このような不安定さを解消することに成功した.これにより,どのような性質を持つ雑音に対しても自律分散型制御器によって,消音が可能になった.3 DSPへの実装については,シングルチャネルのアルゴリズムの実装によりターゲットとなるDSPの性能を評価し,さらにマルチチャネルのアルゴリズムの実装によりDSP上でアルゴリズムが良好に動作することを確認した.以上のように,本課題の実施計画をほぼ達成できたと考えている.「自律分散型マルチチャネル能動騒音制御システムの研究」に関連して,得られた成果は次の通りである.1マルチチャネル能動騒音制御アルゴリズムに関しては,当初の問題点であった負荷の低減を図るため,補助フィルタの同定を必要としない時間領域でのアルゴリズムの開発を行った.次に,周波数領域アルゴリズムに拡張することによって,補助フィルタの同定を必要とせず,有色入力にも強く,系の変動に対しても安定で,しかもFiltered-Xと比較して計算量を大幅に削減できるアルゴリズムを開発することができた.2自律分散型アルゴリズムについて,当初通信を行わない完全分散型アルゴリズムをフィードバック制御を組み合わせることにより,消音を行うアルゴリズムを考えたが,ある程度の消音量は得られるものの十分な消音性能は得られなかった.そこで,ある程度制御器間の通信を許容した部分分散型アルゴリズムを開発し,十分な消音量が得られることを確認した.しかし,このアルゴリズムは参照信号の有色性や相関により性能が劣化する場合があったため,これらの点についてよりロバストなアルゴリズムを開発した.このアルゴリズムでは,2次経路フィルタの更新を随時行うことにより,このような不安定さを解消することに成功した.これにより,どのような性質を持つ雑音に対しても自律分散型制御器によって,消音が可能になった.3 DSPへの実装については,シングルチャネルのアルゴリズムの実装によりターゲットとなるDSPの性能を評価し,さらにマルチチャネルのアルゴリズムの実装によりDSP上でアルゴリズムが良好に動作することを確認した.以上のように,本課題の実施計画をほぼ達成できたと考えている.「自律分散型マルチチャネル能動騒音制御システムの研究」に関連して平成12年度に得られた成果は以下の通りである.1)連立方程式法によるマルチチャネル能動騒音制御システムの問題点の検討として,主として計算量に関する評価を行った.その結果,従来の連立方程式法をそのまま適用した場合,膨大な計算量が必要となることがわかった.そのため,周波数領域でアルゴリズムを実行するように方式を変更し,シングルチャネルの場合について,計算量の評価と性能の評価を行った.これにより,計算量は約90%以上減少させることができ,さらに有色性の強い参照信号に対して,システムの性能を向上させることが可能となった.2)自律分散型マルチチャネル能動騒音制御アルゴリズムの基礎的検討では,当初外乱に強いシステム構造を導入することにより,制御器間を完全に切り離す完全分散型システムの実現を目指したが,所期の性能を得ることができなかった.そこで当初の計画通り,データ交換量と遅延を考慮しない部分分散型システムを前提として,連立方程式法の拡張を行った.その結果,初期状態のフィルタ係数と各誤差経路のインパルス応答を制御器間で交換することを前提とする分散型アルゴリズムの開発に成功した.シミュレーションにより検討を行った結果,収束性能は完全集中型に劣るものの,消音量としては,ほぼ所期の性能を得ることができることを確認した.3)シングルチャネルの場合に関するDSPへの実装とその問題点については,実際のDSP(TI社製)にアルゴリズムの実装を行い,要求性能について確認した.その結果,ほぼ現行の浮動小数点型のDSPチップで,所期性能を満足できることが明らかになった.これらの成果から,今年度の研究目的はほぼ達成されたと考えている.「自律分散型マルチチャネル能動騒音制御システムの研究」に関連して,平成13年度に得られた成果は次の通りである.1昨年度に引き続き,連立方程式法によるマルチチャネル能動騒音制御システムの問題点である,計算量の削減について検討した.その結果,補助フィルタの同定を必要としないアルゴリズムを新たに得ることが出来た.この手法によれば,約4分3に計算量を軽減することができる.周波数領域のアルゴリズムと組み合わせることも可能であり,さらに大きな削減が期待できるが,この点については評価中である.また補助フィルタを用いる場合は,補助フィルタの同定精度により,性能が大きく変化したが,この手法の場合,一定サンプル区間ごとに繰り返せば,十分な消音量を得ることができる.2入力信号間の相関による性能の劣化については,適応アルゴリズムをNLMSアルゴリズムから新規に開発したNLMSEE'アルゴリズムに変更することによって,補助フィルタを用いる場合について,この問題の解決を図った.

それにより,補助フィルタの収束速度を大幅に改善することができた.入力信号そのものが有色な場合についても,これにより対応できた.3制御器間の通信量は,1,2のアルゴリズムのリファインを考慮すれば,かなり減少させることが可能との感触を得た.4 DSPへの実装については,マルチチャネルでの実装を検討したが,アルゴリズムのリファインを優先したため,完全に問題を洗い出すまでにはいたらなかった.以上のように,4のDSPへの実装を除いては本年度の実施計画をほぼ達成できたと考えている.「自律分散型マルチチャネル能動騒音制御システムの研究」に関連して,平成14年度に得られた成果は次の通りである.1昨年度に引き続き,連立方程式法によるマルチチャネル能動騒音制御システムの問題点である,計算量の削減について検討した.周波数領域アルゴリズムと組み合わせることにより,補助フィルタの同定を必要としないアルゴリズムを開発した.結果として,有色入力に強く,系の変動に対しても安定で,しかもFiltered-Xと比較して計算量を大幅に削減できることがわかった.しかし,マルチチャネル化までは検討できなかった.2自律分散型マルチチャネル能動騒音制御アルゴリズムについて,より参照信号の有色性や相関にロバストなアルゴリズムを開発した.従来のアルゴリズムは,参照信号が相互相関を有していたり,有色であったりした場合,補助フィルタの係数更新回数を極端に増やさなければ,アルゴリズムを安定に動作させることができなかった.新たに開発するアルゴリズムでは,2次経路フィルタの更新を随時行うことにより,このような不安定さを解消することに成功した.これにより,どのような性質を持つ雑音に対しても自律分散型制御器によって,消音が可能になった.3 DSPへの実装については,マルチチャネルでの実装を行い,プログラムのテストによりアルゴリズムが良好に動作することを確認した.しかし,実環境でのテストにはいたらなかった.以上のように,1のマルチチャネル化と4のDSPへの実装に対する実環境でのテストを除いては本年度の実施計画をほぽ達成できたと考えている.
ラット視床下部単一ニューロンにおけるエストロジェン応答の可変性

成熟卵巣摘除ラットから視床下部を切り出し、蛋白分解酵素で処理後、神経細胞を単離した。Whole-cellパッチクランプ記録を行ない、エストロジェンに対する応答性を解析した。細胞には、エストロジェンに対して1)直ちに反応し、ごく短時間(数十秒間)接続するコンダクタンス上昇を伴う過分極反応を示す細胞、2)数分以内に反応が開始し5-20分接続するコンダクタンス上昇を伴う脱分極反応を示す細胞、3)非常に速い過分極反応に続く5-20分持続する脱分極反応を示す細胞があった。これらの過分極反応の逆転電位は約-90mV、脱分極反応の逆転電位は約-40mVであった。これらのことら、視床下部ニューロンはエストロジェンに対して速い応答を示すこと、このエストロジェンの作用は、時間経過から推測すると、おそらく膜作用であること、過分極性の応答はカリウムチャネルを介し、脱分極性の応答は非選択性陽イオンチャネルを介すること、が示唆された。さらにエストロジェンに対する視床下部ニューロンの応答が、エストロジェンに頻回曝露されることにより変化する可能性を調べた。エストロジェンに対して過分極反応を示す細胞にエストロジェンを頻回投与したところ、過分極反応が徐々に減弱するのが観察された。このことは、視床下部ニューロンがエストロジェンの膜作用に対して脱感作する可能性があることを示した。このようなエストロジェンの作用に、どのような細胞内情報伝達系機序が関与しているかについては今後の検討課題である。
妊婦のマイナートラブルに対する自律神経機能を用いた評価と介入方法の検討

健康な妊婦の妊娠末期のマイナートラブル(以下MS)の重症度は、日常の自律神経活動には大きな影響を与えないと考えられる.心拍変動バイオフィードバック法(以下,BF法)はMSが重症な妊婦に有効であり,MS合計点数が減少し,特に消化器系MS,関節・運動系MSに効果があると思われる.妊娠末期に精神系MSの出産不安W-DEQ90点以上の妊婦は、副交感神経活動の低下が示唆された.BF法は健康な妊婦の出産不安の軽減に有効であることが確認された.BF法は安静時の自律神経活動には変化をもたらさないと考えられる.本研究は妊婦のマイナートラブル(以下MSとする)の発生機序の解明と改善のために自律神経機能に着目し,1妊婦の自律神経機能の状態とMSとの関連を明らかにする2妊婦のMSに対する心拍変動バイオフィードバック法の有効性を検討することを目的に行っている.対象者は健康な妊婦45名で,3234週にMSの質問紙調査(消化器系,泌尿器・生殖器系,関節運動系,全身・精神系,循環器・血管運動神経系の5因子30項目)と全身・精神系については,睡眠状態,疲労感,不安感を追加した質問紙調査と自律神経機能の測定(心拍変動解析)を実施した.心拍変動バイオフィードバック法を3週間実施した22名を実施群,残り23名を対照群とした.3637週に再度MSの質問紙調査と自律神経機能の測定(心拍変動解析)を実施した.3234週で50%以上の妊婦に発症しているMSは15症状であり,3637週では11症状であった. 3234週では関節運動系のMS点数とLF/HFと弱い相関を示した(r=0.316,P=0.036).3637週では自律神経機能と相関を示すMS因子は認めなかった.3234週と3637週のMSと自律神経機能の変化について,呼吸法実施群および対照群それぞれに対し,対応のあるt検定を実施した.実施群では3234週よりも3637週で,消化器系のMS点数が有意に減少(P=0.015)し,全身・精神系の不安感の点数が有意に減少して(P=0.04)いた.対照群では,有意に点数が減少するMS因子はなかった.自律神経機能LF,HF,LF/HFは両群ともに有意差を認めるものはなかった.MSと自律神経機能との関連は,現時点では関節運動系の1因子が関連性を示すのみであるが,心拍変動バイオフィードバック法によって,消化器系のMS症状と全身・精神系の不安感を改善する可能性があることが示唆された.サンプルは順調に集積できているが,目標数には達していない.また,心拍変動バイオフィードバック法は実施群に3週間実施してもらっているが,その間の実施日数や実施ポイント数,実施時間など実施状況は様々である.単純に心拍変動バイオフィードバック法を「実施した」,「実施しない」の分析では不十分と考えられる.そのため,実施内容を詳しく分析し,自律神経機能の改善およびマイナートラブルの軽減に効果があるとみられる心拍変動バイオフィードバック法の実施方法についての検討が必要である.本研究の目的は1妊婦の自律神経機能とマイナートラブル(以下MSとする)との関連を明らかにする.2妊婦のMSに対する心拍変動バイオフィードバック法(以下BF法とする)の有効性を検討することである.32-34週の妊婦にMSの質問紙調査と自律神経機能の測定を行い,BF法に同意した妊婦は3週間実施,妊娠36-37週にBF法履行にかかわらず、質問紙調査と心拍変動解析を行った。MSの質問紙調査は消化器系,泌尿器・生殖器系,関節運動系,全身・精神系,循環器・血管運動神経系の5因子29項目,全身・精神系は1出産不安:Wijima Delivery Expectancy/Experience Questionnaire versionA日本語翻訳版(以下WーDEQ)2睡眠の質:PSQI3日常の疲労感:VASで構成した.28年度は,全身・精神系に関する分析を行った.その結果,対象妊婦97名,W-DEQが軽度57名、中等度28名、重度12名で、BF群は中等度と重度の妊婦40名中18名(中等度12名、重度6名)だった。W-DEQの重症度別に、HF、LF/HF比、PSQI、VASを3群間で比較した。HFまたはLF/HF比は重度の妊婦が中等度の妊婦より有意に低値または高値だった.VASは、中等度の妊婦が軽度の妊婦より有意に高値だった。BF法履行の影響は、W-DEQが中等度と重度を合わせた検討では、時間依存変動をW-DEQの有意な減少、PSQIの有意な上昇に認めた。時間×群依存変動は、BF群のW-DEQが有意に減少した。重度の妊婦の検討では、時間依存変動をW-DEQの有意な減少に認め,時間×群依存変動では,BF群のW-DEQが有意に減少した.時間依存変変動ではLF/HF比(減少)とHFパワー(増加傾向)を認めた。BF法はW-DEQが重度の“low- risk"妊婦に、有効な介入方法と思われる。サンプルは順調に集積できたと思われる.分析・検討の段階にきているが,分析・検討が進んでいるのはマイナートラブル(以下,MSとする)中の全身.精神系のみである.その他のMSについての分析が必要である.

これまでの結果として,関節・運動器系MS点数は,LF/HF比と弱い正の相関(rs=0.301,p=0.015)を認めている.MSが重度の妊婦および中等度と重度を合わせた妊婦では,時間依存変動がHRに見られ36-37週で有意に低下している(p<0.05).MSが重度の場合,時間×群依存変動は心拍変動バイオフィードバック群(以下,BF群)の消化器系MS点数が36-37週で有意に減少している(p<0.05).MSが中等度,重度を合わせた妊婦は,時間依存変動と時間×群依存変動をMS合計点数,関節・運動器系MS点数に認め,BF群が36-37週で有意に減少している(p<0.05).MSが中等度の妊婦は,自律神経機能,MSに有意差を認める項目はなかった.MSが比較的強い強い妊婦にBF法の有効性,特に消化器系MS,関節・運動器系MSに効果がある可能性が示唆された.正常妊婦のHRは妊娠31週をピークに妊娠40週まで減少するが,MSが重度であっても減少していた.以上のことが明らかとなっているが,まだ,分析と検討が不十分である.目的1,マイナートラブル(以下MS)と自律神経機能との関連を明らかにする.目的2,心拍変動バイオフィードバック法(以下,BF法)がMSの改善に有効かを検証する。目的3,精神系MSの出産不安の自律神経活動への影響とBF法の効果を検証する。妊娠32ー34週の健康な妊婦に質問紙調査(MS,出産不安W-DEQ),自律神経機能を測定した.目的1.2では,MSが中等度,重度の妊婦に、目的3では,W-DEQ66点以上の妊婦にBF法を提案し3-4週間後の妊娠36-37週に再度質問紙調査と心拍変動解析を行った。目的1.2の対象妊婦は65名,MSが中等度25名,重度19名.BF法は中等度8名,重度11名が実施し(BF群),残りをBF未実施群とした.MSの軽度,中等度,重度の3群では,自律神経機能(HR,HFパワー,LF/HF比)に有意差を認めなかった.重度のみの検討では,時間×群依存変動は消化器系MS点数で認め,BF群が32-34週より36-37週で有意に減少した(p<0.05).中等度,重度を合わせた検討では,時間×群依存変動はMS合計点数,関節・運動器系MS点数に認め,BF群が32-34週より36-37週で有意に減少した.中等度のみの検討では,有意差を認める項目はなかった.妊娠中のMS重症度は、日常の自律神経活動には大きな影響を与えず,BF法は比較的MSが重い妊婦に効果があると思われた.目的3の対象妊婦は97名.自律神経機能は,HR,HFパワー,LFパワーを分析した。W-DEQ90点以上の妊婦5名は出産不安が重度と推定され,HFパワーの有意な低下を示した(p=0.028)。W-DEQ66点以上の妊婦40名のうち18名がBF群,20名はBF未実施群であった.BF群はBF未実施群と比較してW-DEQの群×時間依存変動が有意だった(p=0.002)。妊娠末期にW-DEQ90点以上の妊婦は、副交感神経活動の低下が示唆され,BF法は,出産不安の軽減に有効と思われる。健康な妊婦の妊娠末期のマイナートラブル(以下MS)の重症度は、日常の自律神経活動には大きな影響を与えないと考えられる.心拍変動バイオフィードバック法(以下,BF法)はMSが重症な妊婦に有効であり,MS合計点数が減少し,特に消化器系MS,関節・運動系MSに効果があると思われる.妊娠末期に精神系MSの出産不安W-DEQ90点以上の妊婦は、副交感神経活動の低下が示唆された.BF法は健康な妊婦の出産不安の軽減に有効であることが確認された.BF法は安静時の自律神経活動には変化をもたらさないと考えられる.
小腸移植後慢性拒絶反応時の腸管神経系の量的変動からみた腸管運動障害のメカニズム

1.実験群BN→BNの同所性小腸移植を施行。移植後、免疫抑制剤使用しない。BN→LEWの同所性小腸移植を施行。免疫抑制剤として、移植後05日目までFK506 2mg/kg/日を筋注⇒小腸移植モデルに関して、前年度では(1)の慢性拒絶モデルの作成に問題があったが、小腸移植手技の向上に伴い生存が得られ、病理学的にも慢性拒絶反応の所見が認められた。(後述)免疫抑制プロトコルに問題がある可能性が考えられていたが、当初の免疫抑制法で実験を続けた。2.検討項目(1)グラフトHE染色(拒絶反応の程度):⇒上記(2)群では拒絶反応の所見を認めなかったが、(1)で血管硬化・筋層肥厚の所見が認められ、慢性拒絶反応として矛盾しなかった。(2)グラフト腸管運動の記録:(3)グラフト筋条片の自動運動測定:(4)筋間神経節細胞数の評価:(5)カハール細胞の定量的評価:⇒当初、慢性拒絶反応モデルの作成に時間を要したが、これまでに実験群(1)、(2)のグラフトの機能的な検討項目についての結果(上記(1)、(2)までのデータ)が得られた。現在、その機能的なデータを裏付ける可能性がある腸管神経系の形態的検討項目の検討に着手している。1.実験モデルBN→LEWの同所性小腸移植を施行。免疫抑制剤として、移植後05日目までFK506 2mg/kg/日を筋注BN→LEWの同所性小腸移植を施行。免疫抑制剤として、移植後09日目までFK506 2mg/kg/日を筋注BN→BNの同所性小腸移植を施行。⇒小腸移植モデルに関して、上記(2)、(3)については問題なかったが、(1)の慢性拒絶モデルに関して、文献上いわれている免疫抑制剤のdoseによっても80日では体重減少が得られず、下痢も認められないことから、経過観察したところ術後100日のHE染色にてきわめて弱い慢性拒絶反応が引き起こされており、文献上のdoseでは慢性拒絶モデルとして不十分と判断し、FK506 2mg/kg/日投与日数を変えた群を新たに設け、検討を開始している。2.測定項目・測定時期グラフト腸管運動の記録:⇒(1)、(2)、(3)群について80日目にFTを装着して、MMCの有無を観察。すべての群において、MMCが認められた。1.実験群(1)syngenicmodel:BN→BNの同所性小腸移植を施行。(2)chronicrejection model:BN→LEWの同所性小腸移植を施行。免疫抑制剤として、移植後05日目までFK506 2mg/kg/日を筋注⇒小腸移植モデルに関して、前年度では(2)の慢性拒絶モデルの作成に問題があったが、小腸移植手技の向上に伴い生存が得られ、病理学的にも慢性拒絶反応の所見が認められた。免疫抑制プロトコルに問題がある可能性が考えられていたが、当初の免疫抑制法で実験を続けた。2.検討項目および結果(1)グラフトHE染色(拒絶反応の程度):⇒上記(1)群では拒絶反応の所見を認めなかったが、(2)で血管硬化・筋層肥厚の所見が認められ、慢性拒絶反応として矛盾しなかった。(2)グラフト腸管運動の記録:各群術後80日にグラフト空腸の3点にstrain gauge force transducer(FT)を装着し、装着後24時間より、食後期のMotility Index、空腹期のMigrating motor complex(MMC)の出現パターン、異常波形出現の有無の解析を行う。⇒(1)、(2)群について80日目にFTを装着して、すべての群でMMCの存在が確認された。

MMCパラメーターの分析では、MMC phase IIIのDurationについて、syngenic model vs chronic rejection modelで6.2±1.8(min)vs5.7±1.7(min)(p<0.0l)と有意差を認めた。また、MMC出現頻度(lnterval)は、19.1±5.3(min)vs16.7±4.3(min)(p<0.000...と有意差を認めた。成果の公表を見合わせる必要がある場合は、その理由及び差し控え期間等を記入した調書(A4判縦長横書1枚)を添付すること。
XORのC末端領域は、血管内皮障害をもたらすXORの活性変換のトリガーとなるか

心臓血管系の病態に重要な活性酸素種(ROS)の主要な供給源である血管内皮のXORは一定の環境で活性変換を起こして(DO変換)活性型をとり、H2O2とO2-を産生して組織を障害する。細胞内でのDO変換の機序は不明であるが、本研究では、膜や他のタンパク質と相互作用しやすい構造をもつXORのC末端領域がDO変換の引き金となると仮定し、証明する。初年度は、ヒト臍帯静脈内皮細胞(HUVEC)にGFP fusion-XORを発現させ、DO変換時に細胞内のXORが局在を変化させるか、また、膜との相互作用がC末端領域依存性に起こるかどうかを解析するためにGFP単独またはGFP fusion-XORをHUVECに発現させ、細胞の生存率および形態の変化を観察するとともに、発現効率および細胞内局在を確認した。結果として、GFP単独ではHUVECにおいて50%程度の発現が観察されたものの、GFP fusion-XORでは3%程度と発現効率が大幅に低下し、発現陽性細胞では高率で細胞が萎縮し細胞死が観察された。原因としては分子量の大きなXORの強制発現自体による負荷とXORの産生するH2O2とO2-が影響していると考えられた。より適した実験系を構築するためにHEK293細胞に切り替えて実験を遂行し、GFP fusion-XORの40%程度の発現系を確立し、キサンチンとNAD+を基質とし、生成物である尿酸の産生速度を再現性良く測定できるXORの活性測定系を確立した。現在は、C末端deletion XORベクターを作製し、HEK293細胞で同様の検討を行うとともに、HUVECでの発現ベクターの再検討を進めている段階である。現在HUVEC細胞においては発現が非常に困難で内皮細胞での解析が進行していない状況である。理由として、XORの過剰発現がHUVECにおいては負荷が大きく、発現自体に毒性があり、強制発現系が非常に困難だからである。その対策として、強制発現させる細胞をHEK293に切り替えて遂行するとともに、HUVECでの発現ベクターの改良を進めている。また、血管内皮細胞障害におけるXORの役割を別の角度からとらえるために、後述のような実験系にて内皮XORの阻害による内皮保護効果についての解析も同時に進行している。上述のとおり、引き続きHUVECでの強制発現系を検討する。また、別の切り口として内皮XORの阻害効果に関して以下の実験系を並行して進行する。血管内皮XORの阻害は、XORによるH2O2およびO2-産生阻害を介する機序とは別に、サルベージ経路を介したATPの再利用を増加させることで血管内皮保護作用を増強する機序が予測されている。本研究では、細胞内ATPを枯渇させる放射線照射をHUVECに対して実施した。その結果、XOR阻害剤の投与により血中に増加するヒポキサンチンの増加は、放射線照射されたHUVECにおけるDNA障害とアポトーシスを有意に抑制し、細胞の生存性を明らかに増加させた。今後は、XOR阻害が実際にサルベージ経路を活性化させることで細胞内ATP濃度を増加させるかを明らかにするために、サルベージ経路に必須の酵素であるHGPRTの遺伝子発現抑制系を用いた解析を進める方針である。

血管内皮XORの阻害は、XORによるH2O2およびO2-産生阻害を介する機序とは別に、サルベージ経路を介したATPの再利用を増加させることで血管内皮保護作用を増強する機序が予測されている。本研究では、細胞内ATPを枯渇させる放射線照射をHUVECに対して実施した。その結果、XOR阻害剤の投与により血中に増加するヒポキサンチンの増加は、放射線照射されたHUVECにおけるDNA障害とアポトーシスを有意に抑制し、細胞の生存性を明らかに増加させた。今後は、XOR阻害が実際にサルベージ経路を活性化させることで細胞内ATP濃度を増加させるかを明らかにするために、サルベージ経路に必須の酵素であるHGPRTの遺伝子発現抑制系を用いた解析を進める方針である。当初の計画では、XORを強制発現させたHUVEC細胞の刺激実験を初年度に行う予定であったが、HUVECにおける発現系が困難であったため、刺激実験自体を2年目以降に行うように変更した。そのため、初年度に購入するはずであった刺激剤の購入を二年目に変更したため、差額が生じた。使用計画としては、二年目に刺激剤の購入に充てる予定である。
イネをモデルとした自己免疫不全型雑種弱勢発生機構の解明

本研究ではイネの亜種内で見られる2組の雑種弱勢を材料に研究を行い、1対の雑種弱勢原因遺伝子が出現する原因となった遺伝子の変化を塩基配列のレベルで特定することを目的とした。さらに、2組の雑種弱勢を扱うことで雑種弱勢発現メカニズムの多様性と共通性に対して新しい知見を得ることを目指した。(2)インドのイネ品種P.T.B.10とP.T.B.7の間で見られる雑種弱勢原因遺伝子HWA1, HWA2の高密度連鎖解析を行い、HWA1、HWA2ともに第11染色体のRM27051とRM27068の間約300kbpの範囲に絞り込まれた。このことからHWA1とHWA2は染色体上の位置が極めて近い2つの遺伝子か、あるいは同座の対立遺伝子である可能性が示唆された。連鎖解析の結果は2つの原因遺伝子が対立遺伝子あるいは、重複遺伝子である可能性を示しており、この雑種弱勢がHWC1とHWC2とは異なる様式の相互作用によって生じていると考えられた。イネではHWC2の対立遺伝子Hwc2-1とHWC1の対立遺伝子Hwc1-1との遺伝子間相互作用によって雑種弱勢が誘導される(雨宮と明峰1963).私たちはこの2つの原因遺伝子について単離し、雑種弱勢のメカニズムを明らかにすることを目的に研究を行った.雑種弱勢を誘導するJamaicaのHWC1対立遺伝子Hwc1-1にH587→R587となるように塩基置換を導入し形質転換を行うと弱勢は生じなくなった。また、弱勢を誘導しないKasalathのHWC1対立遺伝子hwc1-2にR587→H587となるように塩基置換を導入したところ形質転換体は弱勢を誘導することが出来た。このことからJamiacaの対立遺伝子に生じたH587を生じる塩基置換がHWC1を雑種弱勢原因遺伝子にしたのだと考えられた。一方、日本晴のHwc2-1と最も似た塩基配列を持つKatakutaraのhwc2-2の間には10bpの中に4塩基置換が生じており、2つのアミノ酸に置換が生じている。これらのアミノ酸置換のどれが雑種弱勢の原因であるのかを明らかにするためKatakutaraのhwc2-2に塩基置換を導入し、アミノ酸置換が1つずつとなるよう2種類の形質転換体を作成したがいずれも雑種弱勢を誘導しなかった。今回調査した2つのアミノ酸残基はすべて日本晴と一致する時にだけHWC2が弱勢を誘導できるのだと考えられる。HWC2について,遺伝子周辺のハプロタイプがHwc2-1を持つ品種に近い15品種のHwc2-1,hwc2-2の塩基配列を決定した。その結果Hwc2-1がどのような対立遺伝子から進化したのかを推定することができるようになった。しかし、最後のステップとなる1箇所に生じた10塩基中4塩基の置換については中間型が見つからなかった。インドの品種P.T.B.10とP.T.B.7の間で見られる雑種弱勢の原因遺伝子HWA1,HWA2の連鎖分析を行い,両遺伝子とも第11染色体長腕に位置することが明らかになった.本研究ではイネの亜種内で見られる2組の雑種弱勢を材料に研究を行い、1対の雑種弱勢原因遺伝子が出現する原因となった遺伝子の変化を塩基配列のレベルで特定することを目的とした。
特異的DNAメチル化異常を応用した新規悪性黒色腫マーカーの開発

黒色腫特異的DNAメチル化異常を黒色腫バイオマーカーとして応用する端緒を見いだすことを目的とした。悪性黒色腫及び色素性母斑の臨床材料を用いて,メチル化特異的PCR法によりCpGアイランドのメチル化状態を調べた。RASSF1Aは悪性黒色腫でも36%でメチル化が検出されたが,色素性母斑でも20%のメチル化が検出された。メラノサイト系腫瘍では良悪性にかかわらずRASSF1を含むRAS系が重要な役割を果たしている可能性が示唆された。手術材料におけるメチル化解析を行う準備を進めた。倫理委員会承認済みの手続きで患者同意を得て手術材料を収集した。悪性黒色腫50例,色素性母斑と正常皮膚各30例,正常リンパ節20例,スピッツ母斑10例を得た。ホルマリン固定パラフィン包埋組織は,厚さ20μmに薄切し脱パラフィン処理後,腫瘍組織を注意深く削り取った。新鮮凍結標本は,切除後直ちにメスや剪刀あるいはデルマパンチを用いて腫瘍組織を分取した。これら腫瘍組織からDMを抽出し,バイサルファイト処理した。これは,非メチル化シトシンはウラシルに変換される一方,メチル化シトシンはほとんど変換されずシトシンのまま残され,メチル化の有無はシトシン,ウラシルという塩基情報に変換される処理である。本年度で処理を完了させ,メチル化状態を調べる検体の準備が整った。メチル化状態の解析にはメチル化特異的PCR法により行った。調べたい部位200bpほどの区間で、3から6個のCpG部位を含むようにプライマーを設定する。プライマーセットはメチル化されているとき,メチル化されていないときの配列にそれぞれ特異的に設計され,バイサルファイト処理後のDNAをテンプレートとしてPCR反応が行われる。メチル化特異的プライマーセットでPCR産物がみられればその部位にメチル化有り、非メチル化特異的プライマーセットでみられればメチル化無し,のDNA鎖がそれぞれ存在することが示される半定量ないし定性的な解析法である。PCR反応のアニール温度やサイクル数により反応の感度や特異度が変わるため,条件の設定が重要である。適切な感度と特異度が得られるプライマーセットの設計及び条件検討が終了した。次年度は,これらの検体とプライマーセットを用いてメチル化状態を調べ,悪性黒色腫マーカーの候補となるCpGアイランドの抽出を目指す。発がんは、複数の遺伝子異常が同一の細胞内に蓄積することにより誘発される。遺伝子の塩基配列や構造の異常に加え、DNAメチル化を始めとするエピジェネティックな異常も大きな役割を果たしている。遺伝子プロモーター領域CpGアイランドのメチル化はその下流遺伝子を不活化するため,がん抑制遺伝子の不活化機構として重要である。本研究では,悪性黒色腫におけるDNAメチル化異常について調べ,黒色腫特異的なDNAメチル化異常を黒色腫のバイオマーカーとして応用する端緒を見いだすことを目的とした。筑波大学附属病院倫理審査委員会で承認された手続きで収集された悪性黒色腫及び色素性母斑の臨床材料を用いて,メチル化特異的PCR法によりCpGアイランドのメチル化状態を調べた。他の多くのがんでもメチル化されることが知られているRASSF1Aは悪性黒色腫でも36%でメチル化が検出されたが,興味深いことに良性メラノサイト腫瘍である色素性母斑でも20%のメチル化が検出された。黒色腫特異的ではなくバイオマーカーとしては用いることが出来ないが,メラノサイト系腫瘍では良悪性にかかわらずRASSF1,ひいてはRAS系が重要役割を果たしている可能性が示唆された。
機能性人工骨膜組織の創生と難治性骨折治療への応用

本研究では骨間葉系幹細胞分離技術と成長因子アンカーリング技術を駆使した機能性人工骨膜組織の創世と難治性骨折治療法の確立を目指し検討を行った。コラーゲン膜状に間葉系幹細胞を積層し、人工骨膜組織を作製した。その結果、2日間で高い栄養因子産生を有する人工骨膜組織を作製することが可能であった。さらに、CB-bFGFと人工骨膜組織を反応させることで機能性人工骨膜組織の作製が可能であった。ラット大腿骨膜上に移植した所、機能性人工骨膜組織偽手術群、間葉系幹細胞積層シートのみ移植した群に比して比べ高い骨形成促進作用を有していた。機能性人工骨膜組織は難治性骨折治療法として有用である可能性が示唆された。細胞積層技術と成長因子アンカーリング技術を駆使して、難治性骨折や骨欠損治療に応用可能な機能性人工骨膜組織の作製を試みた。間葉系幹細胞を分離後、細胞を積層し、細胞シートを作製した。種々の組織から間葉系幹細胞を分離し、細胞シートを作製した結果、骨膜組織由来の間葉系幹細胞が細胞シート作製に適していた。リアルタイムPCRによる検討から、細胞シートは単層培養細胞に比べ、BMP2、VEGFなどの成長因子の発現が高いことが明らかになった。細胞シートを大腿骨上に移植した結果、骨形成促進が認められた。細胞シートとコラーゲン結合型成長因子溶液との混合により、細胞シートにコラーゲン結合型成長因子をアンカーリングすることが可能であった。また、成長因子をアンカーリングした細胞シートは細胞シート単独に比べ高い骨形成促進能を有していた。本方法により作製した機能性人工骨膜組織は、難治性骨折や骨欠損治療に有用であると考えられた。交通外傷による骨折は、骨膜組織の損傷や血流障害を伴い治療に難渋する。本申請研究では骨形成、血管新生促進技術、細胞積層技術、間葉系幹細胞分離技術を駆使することによって、機能性人工骨膜組織の創生と難治性骨折治療への応用を試みた。骨膜組織より分離した間葉系細胞をフィブロネクチン/ゼラチンでコーティングすることで、わずか2日間でコラーゲン膜状に間葉系細胞を積層することが可能であった。また、積層2日後、Bone morphogeneitc protein-2(BMP-2), basicfibroblast growthfactor(bFGF), Vascular endothelial growthfactor(VEGF) mRNA発現をリアルタイムPCRにより定量し、単層培養細胞との比較を行った結果、積層により血管新生に重要なVEGF、骨形成を促進するBMP-2の発現が上昇することが明らかになった。さらに、コラーゲン結合型塩基性線維芽細胞増殖因子を用いて積層細胞シートにbFGFを結合させることでbFGFアンカーリング細胞積層シートの作製に成功した。大腿骨膜上に移植後、micro-CTを用いて新生骨量、骨塩量を測定した結果、bFGFアンカーリング細胞積層シート移植群では偽手術群、積層細胞シートのみ移植した群に比べ高い骨形成作用を持つかことが明らかになった。細胞積層技術を用いることで短期間で人工骨膜組織の作製が可能であり、さらに成長因子をアンカーリングすることでさらに高い骨形成能を付与することが可能であった。本技術は新規難治性骨折治療法と成り得ると考えられる。運動器再生医療成長因子アンカーリング人工骨膜組織の作製に成功し、その有用性をin vivoで確認した。おおむね順調に進展していると考えられる。患者自身から骨髄間葉系幹細胞を採取後、間葉系幹細胞シートを作製し、ファイナルプロダクトの検査により安全性を担保するには一定の時間を要する。従って、緊急性を要する交通外傷患者の骨折治療を実現するためには即時治療可能なシステムの構築が必須である。今後は、同種骨髄間葉系幹細胞を用いた機能性人工骨膜組織の有用性を検討する。また、コラーゲン結合型成長因子の最適化を行い、機能性人工骨膜組織の機能向上を目指す。
知的障害者家族におけるきょうだいのケア概念－ジェンダー／セクシュアリティの視座

本研究では、平成24年度の成果を踏まえ、知的障害者のきょうだいが有するケア役割の実態を明らかにすることで、生きづらさを軽減するための支援を再考することを研究目的とした。具体的には、(1)成人期のきょうだいが有するケア役割は、児童期に担っていたケア役割と関係していると考えられるため、ケア役割の構築プロセスを明らかにすることで、生きづらさを軽減するための支援を再考すること、(2)きょうだいと、障害のある兄弟姉妹の性別及びその関係(異性か同性か)から生じる生きづらさを明らかにすること、(3)きょうだいのケア役割を日米比較することで、日本独自の障害者福祉サービスや家族観等から生じる生きづらさを明らかにすることの3点であった。その背景には、きょうだい支援の実践の場としてのセルフヘルプ・グループによる支援では浮き彫りにならない、あるいは共有されにくい困難があった。平成25年度は、前年度に引き続き、先行研究レビューを進めると同時に、2013年2月下旬から3月中旬にかけてアメリカで実施した、知的障害者のきょうだいを対象としたケア役割に関するインタビュー調査の分析・考察を行った。また、2013年6月にアメリカのピッツバーグで開催されたNational Sibling Leadership Network Conference (SLN Conference)の視察及び報告を行い、アメリカの当事者や支援者・研究者たちと情報交換を行った。SLN Conferenceでは、Power of Storytelling, Research Panel, Supports and Resources across the Lifespan, SLN Activities and Sibling Engagement, National Perspectives, Civil Rights, Self-Determination, Empowering Siblings等の観点から、アメリカにおける障害者のきょうだい支援の動向と課題が伺えた。SLNは、障害者のきょうだいの立場にある者が障害分野の政策に関する決定権を得るためにSLNに集結する必要があると主張する。また、SLNは、障害者のきょうだいだけでなく、研究者や専門職とのかかわりを積極的に行っていた。今後、SLNが実施している取り組みが日本のきょうだい支援団体にどのような形で応用していけるのかについて検討していきたい。研究目的を達成するために、段階を踏んで調査を実施し、分析・考察を進めることができた。また、National Sibling Leadership Network Conferenceの視察及び報告を行ったことで、研究を一層発展させることができた。今後、知的障害者のきょうだいを対象とした調査を日本においても実施し、日米比較することで研究目的を達成する。また、ジェンダー/セクシュアリティの観点からの分析・考察も一層進めていく。更に、知的障害者のきょうだいを、障害のある兄弟姉妹に対するケアだけでなく、親の介護や結婚後の家族における子育て等、ケアを必要とする家族を複数もつ者として捉え、そのライフストーリーに着目し、ケア役割の構築プロセスに関する研究を一層進めていく。本研究では「きょうだい」(知的障害者を兄弟姉妹に持つ者を「きょうだい」と表記)を1.「ケアの主体」として調査し、2.「ジェンダー/セクシュアリティ」の視座からきょうだいが抱える問題の考察を行ってきた。研究目的は、「障害者-きょうだい-親」の三者構造からきょうだいの実態を明らかにしたうえで、上記1.及び2.を踏まえてきょうだいへの支援策を再考することにあった。24年度は、先行研究レビューを進めると同時に「きょうだい」に対するインタビュー調査を実施した。質問項目は、障害のある兄弟姉妹/父親/母親/セルフヘルプ・グループや障害者支援施設等の社会資源とのつながり、障害のある兄弟姉妹に対して実際に担ったケアの具体的内容、そのケアに対する思い、等を設定した。分析の結果、児童期の経験が成人期のケア役割に及ぼす影響、障害者とそのきょうだいの関係性(「互いを成長させる関係」)、非障害者家族にはみられにくい親子関係(「社会に対してともに戦う関係」)等が明らかとなった。また、児童期の経験に関する分析を発展させ、「Young Carer(ヤングケアラー)」という概念に着目した研究を行ってきた。ヤングケアラーとは、家族のケアや援助、サポートを行なっている18歳未満の子どもで、恒常的に、通常は大人がするとされているレベルの責任を引き受けている者と定義される。分析の結果、ヤングケアラーとしての経験が成人期のケア役割に及ぼす影響や、ヤングケアラーとしてのきょうだいが、障害のある兄弟姉妹と同じ学校で過ごすことによる影響等が明らかとなった。さらに、アメリカにおいてもきょうだい支援団体の組織化が進んでいること等から、2013年2月下旬から3月中旬にかけて、フィールド調査を行った。具体的には、きょうだいを対象としたセルフヘルプ・グループの関係者からの聴き取り、きょうだいのケア役割に関するインタビュー調査等を実施した。現在、データ分析中である。

平成25年度は、前年度に引き続き、先行研究レビューを進めると同時に、2013年2月下旬から3月中旬にかけてアメリカで実施した、知的障害者のきょうだいを対象としたケア役割に関するインタビュー調査の分析・考察を行った。また、2013年6月にアメリカのピッツバーグで開催されたNational Sibling Leadership Network Conference (SLN Conference)の視察及び報告を行い、アメリカの当事者や支援者・研究者たちと情報交換を行った。SLN Conferenceでは、Power of Storytelling, Research Panel, Supports and Resources across the Lifespan, SLN Activities and Sibling Engagement, National Perspectives, Civil Rights, Self-Determination, Empowering Siblings等の観点から、アメリカにおける障害者のきょうだい支援の動向と課題が伺えた。SLNは、障害者のきょうだいの立場にある者が障害分野の政策に関する決定権を得るためにSLNに集結する必要があると主張する。また、SLNは、障害者のきょうだいだけでなく、研究者や専門職とのかかわりを積極的に行っていた。今後、SLNが実施している取り組みが日本のきょうだい支援団体にどのような形で応用していけるのかについて検討していきたい。当初の計画通りに研究目的に即した調査を実施できている点、また、研究を発展させ、アメリカにおいてもフィールド調査を実施できた点から、おおむね順調に進展していると評価できる。研究目的を達成するために、段階を踏んで調査を実施し、分析・考察を進めることができた。また、National Sibling Leadership Network Conferenceの視察及び報告を行ったことで、研究を一層発展させることができた。当初、アメリカにおけるフィールド調査は予定していなかった。そのため、アメリカにおける調査で得られたデータを分析する際、研究計画で示した内容に加え、アメリカの文化観や法制度、及びそれらが障害当事者や家族に及ぼす影響についても考察していく必要がある。さらに、それらと日本における調査の分析データと比較することで、日本におけるきょうだい支援に有効な支援策を考察していく。また、以上の成果を、研究業績等にどのように反映させていくかも今後の課題である。今後、知的障害者のきょうだいを対象とした調査を日本においても実施し、日米比較することで研究目的を達成する。また、ジェンダー/セクシュアリティの観点からの分析・考察も一層進めていく。
ダイナミック3Dエコーを用いた大動脈伸展性に関する検討

大動脈伸展性評価では、収縮期と拡張期との大動脈径差から求める静的指標(distensibility(DIS)値、stiffness index(SI)値)があるが、拡張加速度などの動的指標の方が臨床的意義が大きいと思われる。そこで3Dエコーで、その指標を求めることが最終目標である。3Dの有用性評価の前に、動的指標の意義を検討するため、経食道エコーのacoustic quantification(AQ)機能で短軸方向の大動脈横断面積変化速度を求め、従来の静的指標と比較した。【対象】成人心臓手術のうち非虚血性心疾患N群10例と、虚血性心疾患1群14例の計24例。【方法】Mモードの大動脈収縮期経および拡張期径からDIS、SI値を求め、同部のAQから収縮期大動脈面積(Amax)、拡張期大動脈面積(Amin)、その微分からdA/dtmax、dA/dtminを求め、dA/dtmaxはAminで補正した(CdA/dtmax)。群間の検討はt検定を用い、年齢との相関はPearsonの検定を用いた。【結果】群間に、年齢、血行動態指標に有意差はなく、CdA/dtmaxは1群で低値(2.17vs.1.71,p=.044)、SI値は1群で高値(8.57vs.12.53,p=.043)、DIS値は有意差なし(2.25vs.1.68,p=.09)。年齢との相関では、CdA/dtmax(r=-0.766)はDIS(r=-0.773)と同等で、SI(r=0.587)より強い相関を示した。【考察】AQは心拍に伴う軸のずれに影響されるMモードよりも正確な大動脈径(面積)変化が測定でき、dA/dtmaxは、静的指標と同精度の動的指標と思われる。大動脈伸展性評価法として、まずAQはエコー検出以下の動脈硬化度を推定する動的指標として術中診断に有用であると思われる。