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アイデンティティモデルを用いた広告選好と選択行動に関する認知社会心理学的研究

単純に接触をくり返すだけで好意が高まる効果を「単純呈示効果」という。これは、単純接触による「知覚的流暢性」からファミリアリティの感覚が生じ、それを「その対象が好きだから」という原因に帰属するためとされる。本実験では、知名度判断・再認判断の他に好意度判断も求め、1単純呈示の効果、2名前の性の効果、3職業に関する性ステレオタイプの効果、4再認判断との関係について検討した。男性42、女性42の無名の人物名に政治家(男性的な職業)、アナウンサー(女性的な職業)、作家のいずれかを割り当て、実在する有名な人物名を男・女6名ずつ加え、計120名分の半数をPhase1に用いた。Phase1では、名前刺激に対してファミリアリティを抱かせるための課題を行い、3週間後のPhase2で、3群(知名度判断群、好意度判断群、再認判断群)に分けた。その結果、無名の名前刺激の好意度評定値について、old nameでは男性名の方が好意度が高く、new nameでは女性名の方が好意度が高かった。Phase1で呈示した職業が好意度判断に及ぼす影響を検討した結果、職業の主効果は、Phase1で作家とされた名前が最も好きであると評定され、次いで、アナウンサー、政治家の順となっていることを示していた。また、男性名では作家・政治家の順に好きであると評定されたのに対し、女性名では、アナウンサーが最も好きであるとされ、逆に政治家はやや嫌いとされた。phase2での再認判断と好意度判断との関係は、old nameを「あった」と答えた場合(Hit)の方が「なかった」と答えた場合(Miss)より、好意度が有意に高かった。また有意ではないが、new nameを「あった」と答えた場合(FalseAlarm)の方が「なかった」と答えた場合(Correct Re-jection)より、好意度が高い傾向が見られた。本研究では、再認度との関連が見られ、「単純再認効果」とでも呼ぶべき効果の可能性を示しており、先の「知覚的流暢性」との関連で興味深い。反応傾向によるア-ティファクト等について、さらに検討が必要である。職業に関する性ステレオタイプが知名度判断においてファミリアリティの帰属過程に寄与していることが示唆される。
大正期帝国劇場上演通俗劇の比較演劇的研究

大正期(1910-1930)に東京の帝国劇場で上演された通俗的舞台群を、同時代の海外の舞台と比較して検討した結果、1910年代については、ミュージカル・コメディーを中心としたロンドンのウェストエンドの通俗的舞台群と、また1920年代については、レビュー(特に寸劇)を中心としたニューヨークのブロードウェイの通俗的舞台群と、それぞれ直接的・間接的に影響関係があることが判明した。具体的には、益田太郎冠者、二宮行雄、G.V.ローシー、松居松葉、松旭斎天勝らが携わった舞台にそれが読み取れる。大正期の帝国劇場は、日本の演劇界が、同時代の海外の通俗的舞台を受容する際に、大きな役割を果たしていた。大正期に帝国劇場で上演された通俗的な舞台のうち益田太郎冠者の作品について、上演に関わる資料(台本、絵本筋書、舞台写真、装置図、劇評等)を調査・収集した。調査した機関は早稲田大学坪内博士記念演劇博物館と国立国会図書館である。益田太郎冠者作品の上演の実態を明らかにすることは、本研究にとって多くの有益な検討材料を提供してくれるものである。その理由は、一つには彼の作品が、明治44年(1911)に帝国劇場が開場してから、昭和4年(1929)末に同劇場の運営が松竹に代わるまで、一貫して上演され続け、人気を集めていたことによる。その時期の帝国劇場の活動を通観するのに適している。また、具体的な検証にまで踏み込んだ研究は未だなされていないが、彼の作品と同時代英米の通俗的な結びつきが先行研究の中で既に指摘されている。その点を明らかにし、それぞれを比較検討することで、世界的な広がりの中で帝国劇場の活動の性質を見極めることができる。今回の調査で、前者については、各作品における趣向の多様さ(構成・装置・設定等)が確認され、常に時代状況に応じた上演がなされていたことが明らかになった。後者に関しては、彼の代表作『唖旅行』の中で歌われた「シャンペンチャーレー(Champagne Charlie)」が19世紀後半のイギリスのミュージック・ホールで流行した歌だったこと、同じく『クレプトメーニア』の原典が早大演劇博物館所蔵の“The Kleptomaniac"(請求記号:ZG012-43)である可能性が極めて高いことなどが判明した。同書は帝国劇場文芸部主任だった二宮行雄が寄贈したものである。今年度収集した資料を基礎資料とし、更に調査を進め検討を重ねることで、益田太郎冠者作品及び大正期帝国劇場の活動について、より具体的にその性質が明らかになる。大正期帝国劇場は、その時期の日本の劇場の中でも、同時代の海外演劇を数多く上演した点に特徴がある。そのうちこれまでは芸術性や文学性の高い上演作品に偏った紹介・研究がなされてきた。しかし上演記録を見渡せば、その多くがメロドラマや喜歌劇、笑劇、レヴューなどといった通俗的な舞台作品であることが分かる。本研究では、ほぼ手つかずのそれら帝劇で上演された海外の通俗劇の上演実態や同時代的な評価を明らかにし、またそれらの元になった作品の海外での実態・評価を同じく明らかにして、両者を比較検討する。それによって帝劇上演通俗劇の性質を見極め、帝劇の活動を演劇史・文化史の中に位置づけ直すことを目的としている。今年度は特に前年度に行うことができなかった海外での活動を実施した。まずロンドンのヴィクトリア・アンド・アルバート博物館の演劇アーカイブと大英図書館を訪れて、帝劇上演通俗劇群の中核をなす益田太郎冠者、松居松葉、G.V.ローシーの携わった舞台について、それらに直接的・間接的に影響を与えたロンドンの舞台作品に関する上演資料(台本、プログラム、舞台写真、新聞雑誌記事)を収集した。またスロベニアで行われた国際会議EAJSに参加し、本研究の視点から口頭発表(The Imperial Theatre and MasudaTarokaja (1875-1953))をして、他の研究者と意見交換した。ほかに森話社から刊行された図書『商業演劇の光芒』(神山彰編、2014)に論文「帝劇の時代〈ヴァラエティ・シアター〉としての大正期帝国劇場」を寄稿した。海外収集資料の詳細な分析と検討結果は次年度の発表となるが、今年度の成果として、国際学会での口頭発表と刊行図書中の論文によって、帝劇創立計画の最初期から通俗劇上演が劇場の興行方針の大きな柱の一つとして考えられていたことを明らかにした。大正期に帝国劇場で上演された通俗的舞台のうち、益田太郎冠者が1920年代に手がけた作品、松居松葉の『ハムレットの稽古』、G.V.ローシーの『ダンス・デ・ザパッシュ』『マクベス』『サロメ』について、上演に関わる資料(台本、絵本筋書、舞台写真、新聞・雑誌劇評)を調査・収集し、上演実態の解明につとめた。また調査の過程で、益田太郎冠者および1920年代の帝国劇場通俗的舞台群を考える際、1925年6月に、やはり帝劇で上演された松旭斎天勝一座の公演が重要であることが判明し、それについても同様の調査・収集・検討を行った。主な調査先は早稲田大学演劇博物館、国立国会図書館、New York Public Library for the Performing Artsである。今回の調査で、1911年から1929年にかけて帝国劇場で上演された舞台をマス・カルチャーの視点から眺めた場合、大きく、1910年代の舞台がロンドンのウェストエンドの舞台と類縁性を持つものとして捉えられることが分かった。

松居松葉とローシーの作品はその時期に属するものである。また、松旭斎天勝が米国巡業から帰国後に初めて行った帝劇公演では、「寸劇」と「ジャズ演奏」において、彼女の一座がニューヨーク滞在中(1924年9月)に上演されていたレヴュー「The Passing Show」「George White's Scandals of 1924」中の演目が取り入れられていた可能性の高いことが判明した。益田太郎冠者が1920年代に盛んに書いた寸劇の連続する形式の作品群も、天勝一座の公演と同時期から始まっており、今後、その直接的な影響関係や、同時代の日本演劇界全体の、アメリカの大衆的な舞台の受容について検討していくことで1920年代の帝劇舞台の性格を、より明らかにできることが分かった。大正期(1910-1930)に東京の帝国劇場で上演された通俗的舞台群を、同時代の海外の舞台と比較して検討した結果、1910年代については、ミュージカル・コメディーを中心としたロンドンのウェストエンドの通俗的舞台群と、また1920年代については、レビュー(特に寸劇)を中心としたニューヨークのブロードウェイの通俗的舞台群と、それぞれ直接的・間接的に影響関係があることが判明した。具体的には、益田太郎冠者、二宮行雄、G.V.ローシー、松居松葉、松旭斎天勝らが携わった舞台にそれが読み取れる。大正期の帝国劇場は、日本の演劇界が、同時代の海外の通俗的舞台を受容する際に、大きな役割を果たしていた。今年度中に予定されていた海外出張のうち、アメリカでの調査を実施することができなかった。これは予想されていなかった、図書『商業演劇の光芒』に論文「帝劇の時代〈ヴァラエティ・シアター〉としての大正期帝国劇場」を寄稿したため、スケジュールが変更されたからである。近代日本演劇史前年度に実施できなかったアメリカでの資料収集を今年度中に行う。またこれまで収集した資料の分析、考察を進め、口頭発表・論文などで成果を発表する。今年度中に、比較検討の対象となる資料収集を目的とした海外出張を予定していたが、国内での調査に予想以上に時間がかかり、実現出来なかった。また同じ理由から、国内調査に関しても、検討対象である松居松葉やG.V.ローシーの関わった作品については、充分な資料収集が出来なかった。それに対して、益田太郎冠者作品関連資料については、当初予定されていなかった音声資料や関係者への聞き取り調査もふくめ、国内に残る資料のほぼすべてについて確認・収集することができた。今年度予定されていたアメリカ出張が、当初予定されていなかった図書『商業演劇の光芒』(森話社、2014)に論文「帝劇の時代〈ヴァラエティ・シアター〉としての大正期帝国劇場」を発表することが決まったため、実施できなかった。前年度に実現出来なかった海外での資料収集を、平成26年度中に行う。訪問先は、帝国劇場で上演された通俗劇と影響関係のある作品の関連資料が所蔵されている、ロンドン(V&A博物館)、パリ(国立図書館)、ニューヨーク(公立図書館)、ダラス(テキサス大学図書館)などである。同じく、国内で上演された松居松葉、G.V.ローシー作品に関する資料についても、並行して調査を進める。その上で比較検討し、口頭発表、論文等で成果を公表する。アメリカに出張し、ニューヨークとダラスで資料収集を行う。また、参考文献の購入にも使用する。資料収集を目的とした海外出張を予定していたが、国内(東京)
受容体型抗体の創製による簡易内分泌かく乱物質測定系の開発

本研究は、蛋白質工学の手法を用い、本来抗体が持っている交差反応性をうまく改変することにより、内分泌かく乱化学物質に対する結合特性がエストロゲン受容体と類似した抗体(受容体型抗体)を創製し、その抗体を用いた酵素免疫測定法を開発することであった。今年度は、昨年度取得した抗エストラジオール(E2)抗体に続き、抗エストロン(E1)抗体の両鎖可変領域のクローニングを行い、一次構造を決定した。また抗エストロゲン抗体と同様に、リンカー配列(GGGGS)^3を用い一本鎖Fv(scFv)をファージ上に発現させた。発現させた抗E2と抗E1 scFvの各抗原に対する結合能を、抗ファージ酵素標識抗体を用い間接競合法により、元のモノクローン抗体と比較した。その結果、各scFvにおいて50%阻害を示す抗原濃度は元のモノクローン抗体と同等であり、同程度の結合能を示した。そこで、まず両抗体の重鎖と軽鎖を入れ替えた2つのキメラscFv(E1H-E2L, E2H-E1L)の作成を試みた。得られた両scFv抗体の各抗原に対する結合能を、先ほどと同様に検討した。その結果、結合能は弱いものの、両キメラ抗体とも両抗原に対する結合能を示し、特にE2H-E1Lでは、新たに17α-E2に対する結合能を新たに有することが分かった。キメラの成作により新たな結合特性を付与出来る可能性を示すことが出来た。またさらに3種類の抗エチニルエストラジオール(EE2)抗体(EE2-3、8,227)の可変領域cDNAの取得に成功し、そのアミノ酸配列の比較より、抗体EE2-227の特性である陰イオン界面活性剤に耐性の由来と思われる変異の同定にも成功した。現在上記キメラ抗体の特性を、特に各種内分泌かく乱化学物質を中心調べているところである。また、抗EE2抗体については、可変領域に関しての変異をかけたscFv抗体の発現を行っており、各種内分泌かく乱化学物質に対する反応特性の検討を行っているところである。当初予定の受容体型抗体を得ることは、現在出来ていないが、受容体型抗体作製のための重要な知見を得ることが出来た。今年に抗E1抗体と杭E2抗体に関して、論文として発表する予定である。本研究は、蛋白質工学の手法を用い、本来抗体が持っている交差反応性をうまく改変することにより、内分泌かく乱物質に対する結合特性がエストロゲン受容体と類似した抗体(受容体型抗体)を創製し、その抗体を用いたEIAを開発するすることである。この内本年度においては、抗エストラジオール(E_2)・モノクローン抗体の取得と評価、と各モノクローン抗体の一次構造の決定と立体構造の推定を行う計画であった。そこで、まずβ-ESTRADIOL6-(O-CARBOXYMETHYL)OXIME:BSA(6-CARBOXY:BSA)とβ-ESTRADIOL17-HEMISUCCINATE:BSA(17-HEMI:BSA)を抗原とし、各数個のモノクローン抗体を常法に従い調製した。得られたモノクローン抗体のプレート上の抗原に対する反応性を比較し、特に反応性が良かった、クローンB1A1C7(抗E_2-6-CARBOXY抗体)とB4-1C9(抗E_2-17-HEMI抗体)について、さらにメタノール耐性、pH依存性、塩酸グアニジン変性特性の検討を37度と4度にて行った。その結果、B1A1C7は、反応温度4°Cにおいては、メタノール60%存在下でも反応性を保持していた。また、pHについては、酸性側pH4付近までも反応を保持し、アルカリ側では、pH10まで反応性の低下は見られなかった。さらに尿素に対しては6Mまで耐性を示し、グアニジン濃度では3Mまで反応性を保持していた。これらの特性よりB1A1C7は、酵素免疫測定法により適した抗体であることが分かった。現在、本抗体の抗原特異性の検討と共に、抗体産生ハイブリドーマより全RNAを抽出後、オリゴdTカラムによりmRNAを精製し、さらにcDNAの合成を行っているところである。計画より若干の遅れはあるものの間もなく一次構造の情報が得られる予定である。本研究は、蛋白質工学の手法を用い、本来抗体が持っている交差反応性をうまく改変することにより、内分泌かく乱物質に対する結合特性がエストロゲン受容体と類似した抗体(受容体型抗体>を創製し、その抗体を用いた酵素免疫測定法を開発することである。咋年度に取得したモノクローン抗体は、全てIgMであったため再度、抗エストラジオール抗体を調製し、β-ESTRADIOL6-(O-CARBOXYMETHYL)OXIME : BSAを用いた、間接競合法により各種ステロイドホルモンに対する交差反応性を検討した。さらにProtein Aにより精製した本抗体をSDS-PAGEにより軽鎖と重鎖とに分離後、エレクトロプロットによりPVDF膜に転写し、気相アミノ酸シーケンサーにより、N末端より20残基まで配列を決定した。その後、本抗体の生産細胞よりRNAを取得し、さらにmRNAに精製し、cDNAを逆転写酵素により合成した。先ほどのアミノ酸配列7残基より合成したプライマーと定常領域のプライマーを用い、PCRにより各鎖の可変領域のcDNA断片を取得した。各断片の塩基配列を決定後、各断片をリンカー配列により結合することにより一本鎖Fv<scFv)断片とし、ファージ提示系のプラスミドに挿入した。発現したscFvを、抗ファージ酵素標識抗体を用い間接競合法により、抗原結合能を確認することが出来た。

残念ながら結合は弱かったが、今後、発現量や重鎖と軽鎖の結合の順を代えるなどにより反応性を上げて行きたい。さらにこの発現系を用い、交差反応性、特に環境ホルモン類に対する反応性を検討した後、抗原認識部位(CDR)に変異を導入し、環境ホルモンに対する反応性の変化を検討したい。なお、現在、環境ホルモンとして問題になっているエチニルエストラジオールに対するモノクローン抗体のN末端アミノ酸配列や軽鎖、重鎖可変領域cDNAの塩基配列決定なども行っており、これらの配列との比較からも有益な情報を得ている。本研究は、蛋白質工学の手法を用い、本来抗体が持っている交差反応性をうまく改変することにより、内分泌かく乱化学物質に対する結合特性がエストロゲン受容体と類似した抗体(受容体型抗体)を創製し、その抗体を用いた酵素免疫測定法を開発することであった。今年度は、昨年度取得した抗エストラジオール(E2)抗体に続き、抗エストロン(E1)抗体の両鎖可変領域のクローニングを行い、一次構造を決定した。また抗エストロゲン抗体と同様に、リンカー配列(GGGGS)^3を用い一本鎖Fv(scFv)をファージ上に発現させた。発現させた抗E2と抗E1 scFvの各抗原に対する結合能を、抗ファージ酵素標識抗体を用い間接競合法により、元のモノクローン抗体と比較した。その結果、各scFvにおいて50%阻害を示す抗原濃度は元のモノクローン抗体と同等であり、同程度の結合能を示した。そこで、まず両抗体の重鎖と軽鎖を入れ替えた2つのキメラscFv(E1H-E2L, E2H-E1L)の作成を試みた。得られた両scFv抗体の各抗原に対する結合能を、先ほどと同様に検討した。その結果、結合能は弱いものの、両キメラ抗体とも両抗原に対する結合能を示し、特にE2H-E1Lでは、新たに17α-E2に対する結合能を新たに有することが分かった。キメラの成作により新たな結合特性を付与出来る可能性を示すことが出来た。またさらに3種類の抗エチニルエストラジオール(EE2)抗体(EE2-3、8,227)の可変領域cDNAの取得に成功し、そのアミノ酸配列の比較より、抗体EE2-227の特性である陰イオン界面活性剤に耐性の由来と思われる変異の同定にも成功した。現在上記キメラ抗体の特性を、特に各種内分泌かく乱化学物質を中心調べているところである。また、抗EE2抗体については、可変領域に関しての変異をかけたscFv抗体の発現を行っており、各種内分泌かく乱化学物質に対する反応特性の検討を行っているところである。当初予定の受容体型抗体を得ることは、現在出来ていないが、受容体型抗体作製のための重要な知見を得ることが出来た。今年に抗E1抗体と杭E2抗体に関して、論文として発表する予定である。
ハイドロタルサイト型層状金属水酸化物のホスト・ゲスト化学と触媒作用

研究課題のうち、「ホスト・ゲスト化学」については、イソポリ酸陰イオンや金属ハロゲン化物陰イオンがハイドロタルサイト型層状金属水酸化物Mg_2Al(OH)_6NO_3(I)の層間に入る過程ならびに目的生成物の熱による分解過程を調べた。例えば、(I)をNaVO_3水溶液(pHを4.5に調整)中で攪拌後、洗浄・乾燥したものの赤外線吸収スペクトル測定や粉末X線回折測定により、層間に導入されたバナジウム種はデカバナジウム酸陰イオンV_<10>O_<28>^<6ー>であることが判明した。そして陰イオンは、そのC_2対称軸が層に垂直となるような配向をとっている。層間に導入されたV_<10>O_<28>^<6ー>は、473Kまで安定であるが、573623Kではバナジウム酸重合体〔VO_3〕_n^<nー>に転化する。623673Kでは層状水酸化物の構造ではなくなり、MgO構造となり、873K近傍では層間にあったバナジウム種はMgOと反応してdーMg_2V_2O_7を与えることが判った。さらに電子常磁性共鳴測定により、加熱に伴なうバナジウムの価数の変化についての知見を得た。層間には、NiCl_4^<2ー>のような金属ハロゲン化物陰イオンを導入することもできる。この陰イオンは例えば臭化ブチルとハロゲン交換反応をすることができる。電子スペクトル測定により、ハロゲン交換前後のNiは四面体構造をとり、それぞれCl^ー、Br^ーが配位子となっていることが判明した。研究課題のうち、「触媒作用」については、層間にCl^ーやNiCl_4^<2ー>陰イオンをもつハイドロタルサイト型層状金属水酸化物の触媒作用について調べた。すなわち、これらの層状化合物を触媒に用いると塩化ベンジルと臭化ブチルとから臭化ベンジルを容易に得ることができる。この反応における溶媒の効果や、アルキル基の違いによる反応の速度の違いが明らかになった。合成ハイドロタルサイトMg_6Al_2(OH)_<16>Cl_2・4H_2Oの層間Cl^ーイオンの反応性を調べた。すなわち,層間Cl^ーイオンと各種の臭化アルキルのBr^ーイオンとのハロゲン交換反応を行なった。例えば,トルエン溶媒中80°Cで,層間Cl^ーイオンは臭化ベンジルのBr^ーイオンとハロゲン交換し,層間にBr^ーイオンが導入されるとともに塩化ベンジルが生成する。反応時間30分のうちに層間Cl^ーイオンの92%が反応する。このように,無極性溶媒中で層間Cl^ーイオンが反応性を示すことが判明した。臭化アルキルのアルキル基の種類は,反応速度に大きな影響を及ぼし,速度はC_6H_5CH_2>nーC_3H_7【similar or equal】nーC_4H_9>isoーC_3H_7>isoーC_4H_9,C_2H_5>nーC_3H_7>nーC_4H_9の順に小さくなった。これより,層間Cl^ーイオンと臭化アルキルとの反応は,SN_2反応であることがわかった。溶媒の種類は反応速度に大きな影響を及ぼした。

すなわち,極性の高いDMSO,DMF中では,トルエン中の場合と比較して,速度は著しく高い(層間Cl^ーイオンと臭化ブチルとの反応,80°C)。ところが,極性溶媒であるアセトニトリル,ジエチルケトン,アセトン中では,反応はほとんど進行しない。合成ハイドロタルサイトの層間に錯イオンを導入すると,錯イオンの配位子は臭化アルキルのBr^ーイオンとハロゲン交換することが判明した。すなわち,Mg_6Al_2(OH)_<16>(NO_3)_2・4H_2Oの層間NO_3^ーイオンを[NiCl_4]^<2ー>イオンに置換したものをトルエン溶媒中で臭化ブチルと接触させるとCl^ー配位子の約半分が反応し塩化ブチルが生成した。ハイドロタルサイト型層状金属水酸化物の一つであるMg_2Al(OH)_6(NO_3)・nH_2Oの層間陰イオンNO_3^-をV_4O_<12>^<4->陰イオンでイオン交換したもの(I)について熱分解過程を調べた。熱重量分析によると,180°Cまでに層間水の脱離がおこり,250-500°Cには層を構成する水酸基間の脱水が観察された。(I)の粉末X線回折測定より,層間距離は5.4Aであった。(I)を種々の温度に保ったものをX線回折測定したところ,350°Cまでは層状構造を保っていたが,400ー500°Cでは無定形となることがわかった。そして500ー600°Cの加熱によって,αーMg_2V_<2 >O_7が生成する。層間におけるバナジウム種は,(I)の赤外線吸収スペクトル測定により,V_4O_<12>^<4->であることがわかった。200°C以上に加熱するとV_4O_<12>^<4->は鎖状構造の(VO_3)_n^<n->に変化する。さて,層間陰イオンとしてNiCl_4^<2->陰イオンをもつもの(II)の合成を試みた。そして層間NiCl_4^<2->陰イオンのClの反応性を調べた。すなわち,トルエン溝媒中に(II)と臭化ブチルとを入れ80°Cに保ったところ,NiCl_4^<2->と臭化ブチルとのハロゲン交換反応が進行し,塩化ブチルが生成した。塩化ブチルの生成量からNiCl_4^<2->の全Clの約85%が反応することがわかった。(II)の電子スペクトル測定によって,NiCl_4^<2->は正四面体構造をとっていること,ならびに臭化ブチルとのハロゲン交換後にはBrはNiBr_4^<2->の形で層間に入っていることが明らかになった。以上のように,イソポリ酸陰イオンや金属ハロゲン化物陰イオンを層間にもつ層状金属水酸化物の合成ならびに層間陰イオンの性質についての知見が得られた。
デンドリマーをモレキュラーグルーに用いたCNT／無機ハイブリッドの創製とその機能

骨の構成物質であるヒドロキシアパタイト(HAp)は生体適合性を有し、人工骨、デンタルインプラント、細胞培養シートなど、生体材料開発(再生医療)の観点から注目を集めている。ヒドロキシアパタイトのナノクリスタルは、マイクロクリスタルに比べ、骨芽細胞の癒着とタンパク質の吸着が増加することが知られており、骨や歯根は、コラーゲンのファイバー状の網目構造にナノクリスタルが結合している。こうした観点から、HApとファイバー状材料とのハイブリッドの形成は、バイオミネラリゼーションを模倣した材料として注目を集めている。そこで、本研究では、1,10-ビス(デシロキシ)デカンをコアに有するデンドリマーをカーボンナノチューブに物理修飾したBuckypaperを作製し、その後、HApとの複合化を行った。Buckypaper/HAp複合材料の作製は複合材料の作製は、0.2 M塩化カルシウム水溶液と0.12 Mリン酸水素ナトリウム水溶液を用い、交互浸漬法により行ったところ、Buckypaper/HAp複合材料を得ることに成功した。複合体の構造決定は、SEM, TEM観察、XRD、EDX分析により行った。さらに、擬似体液中に浸漬し、HApの結晶化を行ったところ、CNTの表面にHApが鱗状に結晶成長している様子がTEMの観察により確認された。CNTの表面をデンドリマーが高密度に修飾しており、デンドリマーのカルボキシラーキシラート部位にカルシウムイオンが配位し、そのカルシウムイオンを中心にHApが結晶成長していると考えられる。さらに本研究では、がんーホウ素中性子捕捉療法(Boron Neutron Capture Therapy: BNCT)はとして注目を集めているホウ素クラスターとの複合化を行い、カーボンナノチューブの近赤外蛍光を用いた生体イメージング可能な複合材料の開発にも成功した。1太い単層カーボンナノチューブ超分子複合体の分散技術の確立CNTsを光材料として利用する上で、ナノ炭素材料同士の凝集はマイナスの要素として働くことが多く、光によって励起したエネルギーがすぐに消光されてしまうため、1本1本をほどき、孤立分散させる必要がある。項目1分散剤の合成1,10-ビス(デシロキシ)デカンをコアに持つデンドリマー(分散剤)を合成し、単層カーボンナノチューブの分散実験を行った。太い半導体性のSWCNTs(SOチューブ:名城ナノカーボン社直径1.4 nm、SWCNTs: ZEON社直径1.8 nm,MEIJO eDIPS名城ナノカーボン社2.0 nm)に関しても分散実験を行い、Ramanスペクトルや二次元蛍光スペクトルにより同軸ケーブル構造中のCNTを確認し、AFM、およびTEMによる構造を確認した。また、TGAによるCNTsの表面修飾率を見積もった。また、多層カーボンナノチューブのような太いCNTを分散させることにも成功した。2光酸素の発生触媒として有用な複合化BiVO4との複合化項目1で得られた成果を礎に、無機材料との複合化について検討した。一般的に、単層カーボンナノチューブと無機材料とを複合化する際には、単層カーボンナノチューブの表面に化学修飾と施し、CO2Hなどの官能基をつける必要があるが、デンドリマー型分散剤の特性を活かし、単層カーボンナノチューブの表面を傷つけることなく、炭酸カルシウム,塩化カルシウム,ハイドロキシアパタイトなどの無機材料との複合化に成功した。更に、BiVO4の合成法を参考(Chem Lett 2002, 660)に、単層カーボンナノチューブ超分子複合体の水溶液をマトリクスに、Bi(NO3)3とNH4VO3を硝酸存在下で加えた後、尿素を加え、BiVO4の結晶化について着手し始めた。H29年度の成果により、申請時の目標の1太い単層カーボンナノチューブを分散させる技術の確立および2無機材料との複合化技術の確立の2点を達成した。太いカーボンナノチューブの表面を傷つけることなく、デンドリマーの物理修飾を行った。

デンドリマーは表面官能基密度が高く他材料との親和性を自由に制御できるため,他材料を容易に担持することが可能で、無機材料と親和性の低いカーボンナノチューブに対し、温和、かつ簡単なプロセスで無機材料との複合化に成功した。この手法は、カーボンナノチューブシートについても有効な手法であることを明らかとした。従来より、カーボンナノチューブのシート状材料は、その応用が期待されていたが、他の材料との親和性が低いため、化学修飾してカーボンナノチューブを傷つけることなく、他材料と複合化させる技術は極めて少なかった。骨の構成物質であるヒドロキシアパタイト(HAp)は生体適合性を有し、人工骨、デンタルインプラント、細胞培養シートなど、生体材料開発(再生医療)の観点から注目を集めている。ヒドロキシアパタイトのナノクリスタルは、マイクロクリスタルに比べ、骨芽細胞の癒着とタンパク質の吸着が増加することが知られており、骨や歯根は、コラーゲンのファイバー状の網目構造にナノクリスタルが結合している。こうした観点から、HApとファイバー状材料とのハイブリッドの形成は、バイオミネラリゼーションを模倣した材料として注目を集めている。そこで、本研究では、1,10-ビス(デシロキシ)デカンをコアに有するデンドリマーをカーボンナノチューブに物理修飾したBuckypaperを作製し、その後、HApとの複合化を行った。Buckypaper/HAp複合材料の作製は複合材料の作製は、0.2 M塩化カルシウム水溶液と0.12 Mリン酸水素ナトリウム水溶液を用い、交互浸漬法により行ったところ、Buckypaper/HAp複合材料を得ることに成功した。複合体の構造決定は、SEM, TEM観察、XRD、EDX分析により行った。さらに、擬似体液中に浸漬し、HApの結晶化を行ったところ、CNTの表面にHApが鱗状に結晶成長している様子がTEMの観察により確認された。CNTの表面をデンドリマーが高密度に修飾しており、デンドリマーのカルボキシラーキシラート部位にカルシウムイオンが配位し、そのカルシウムイオンを中心にHApが結晶成長していると考えられる。さらに本研究では、がんーホウ素中性子捕捉療法(Boron Neutron Capture Therapy: BNCT)はとして注目を集めているホウ素クラスターとの複合化を行い、カーボンナノチューブの近赤外蛍光を用いた生体イメージング可能な複合材料の開発にも成功した。光酸素の発生触媒として有用な複合化BiVO4との複合化BiVO4の合成法を参考(Chem Lett 2002, 660)に、単層カーボンナノチューブ超分子複合体の水溶液をマトリクスに、Bi(NO3)3とNH4VO3を硝酸存在下で加えた後、尿素を加え、BiVO4の結晶化を行い、得られたハイブリッドの構造決定を行う。RamanスペクトルによりCNTの存在の確認を確認し、SEMによる構造確認する。TGAによるCNTsの含有率の決定やXRDによるBiVO4の生成の確認もあわせて行う。SWCNT/無機ハイブリッドについて、可視光を用いた水の分解による酸素生成量をガスクロで定量し、可視光照射下での水素発生量、および、単色光照射下での酸素生成の量子収率を求める。
光応答性分子の光誘起結晶成長による新規表面機能材料の創生

平成30年度は、修士時に行っていた研究のまとめの論文の執筆と本研究課題に掲げた研究計画のテーマ二つに関して主に研究を行った。まず、研究計画に掲げた三つ目のテーマである、「ジアリールエテンのエピタキシャル成長を用いた協調的屈曲表面での物質輸送材料の開発」に関しては、光で屈曲するジアリールエテン板状結晶を基板上に成長させることに成功し、紫外光照射によって協調的に複数の結晶が屈曲する表面を作成することができた。この表面上の結晶は、紫外光源に対して遠ざかる方向へと屈曲し、結晶のどの面に対して紫外光を照射しても、光源から遠ざかる方向へと屈曲することが分かった。つまり、紫外光照射方向を変えることで、結晶を意図した方向へと屈曲させることができた。この協調的な屈曲表面に対して、ポリスチレンビーズを乗せ、紫外光を照射すると、紫外光照射による結晶の屈曲挙動に伴って、ポリスチレンビーズを光源から遠ざかる方向へと輸送することができた。また、この物質輸送も紫外光照射方向を変えることで意図した方向へと輸送することができるシステムを開発することに成功し、現在論文投稿準備中である。また、「蛍光性ジアリールエテンの結晶成長による蛍光増幅材料の開発」に関しては、現在、申請書に書いた内容とは異なるアプローチでの蛍光増幅を目指している。申請書では、蛍光を発する棒状結晶を規則正しく成長させ、結晶間での蛍光の共鳴によって蛍光増幅を計画していたが、現在は、レーザー発振の原理の一つであるWhispering Gallery Mode (WGM)を利用し、結晶内での蛍光の増幅を試みている。光を閉じ込める箱としてのジアリールエテン結晶を光誘起結晶成長によって無数に成長させ、一つ一つの結晶でWGM共振が起これば、強力な蛍光増強が期待される。現在は、結晶成長条件を模索中である。平成30年度の研究進捗状況は、申請書に掲げた一つの課題である「ジアリールエテンのエピタキシャル成長を用いた協調的屈曲表面での物質輸送材料の開発」が、協調的な光屈曲表面の作製、物質輸送の成功、論文投稿前まで現在進んでいる状況で、また、他のテーマに関しても、順調に進んでいるため、計画以上の進展とは言えないが、おおむね順調に進展している。本研究課題の今後の方針としては、「蛍光性ジアリールエテンの結晶成長による蛍光増幅材料の開発」に関しての研究を重点的に進め、WGM共振を用いた蛍光増強表面の作製を試みる。
緩和ケアをめぐる倫理的課題に関する研究

本研究は緩和ケアにおいて看護師が直面する倫理的問題および解決過程について明らかにした。緩和ケアで頻発する5事例(予後告知、宗教上の信念によるモルヒネ拒否、セデーション、終末期の輸血、死期を早める可能性の高い鎮痛薬の投与)を作成し、論理的判断、感情的な関与、解決方法、類似経験の有無、個人属性について調査した。調査対象はホスピス・緩和ケア病棟96施設中の、53施設159名の看護師に配布し110名から回答を得た(回収率69.2%)。対象者は女性109名(99.1%)、平均34.5歳(2358歳)、臨床経験年数平均11.7年、緩和ケア経験平均2.6年、勤務地は関東24.5%、中四国16.4%、九州14.5%、設置主体は民間51.8%、国公立33.6%であった。5事例中類似の経験頻度が高かったのは、予後告知87.3%、セデーション79.1%、死期を早める可能性の高い鎮痛薬の投与76.4%であった。対象者は、宗教上の信念によるモルヒネ使用拒否の事例に対して、困惑、苦しい、無力感が強く、終末期の輸血の事例では小さかった(p<.001)。宗教上の信念によるモルヒネ拒否の事例では「宗教上の信念を曲げる苦痛は身体的苦痛よりも強い」という意見が多く、宗教上の信念の尊重と身体的苦痛の緩和の間で葛藤があった。この事例の解決方法として頻度が高かったのは、「カンファレンスで相談する97.3%」「患者や家族と話し合う81.8%」「医師に判断を預ける47.3%」であった。反対に、困惑や無力感が小さかったのは、終末期の輸血の事例であり、「輸血が患者のQOLの向上の目的ならば意味がある」「患者の意思を尊重し、輸血を継続する」という意見が多く、「輸血が引き起こす身体的損害」「効果のない輸血は無益である」という意見は少なかった。緩和ケアにおける看護師の葛藤は、患者の身体的な症状の緩和と患者の自律性(autonomy)の尊重の間で生じていることを示していた。平成13年度の研究目標は次の通りである。(1)これまでに報告されている緩和ケアにおける倫理的問題や解決過程の特徴を検討にする。(2)緩和ケアにおける倫理的問題について、ナラティブ・エシックスアプローチにもとづく、面接調査のガイドラインを作成する。(1)については、緩和ケアを対象にした調査研究はわが国ではなされていないことがわかり、本研究において調査する必要性が生じた。そこで、既存の研究から倫理的問題を、看護者(医療者)と患者・家族関係、看護婦・医師関係、看護婦関係の3側面から捉え、緩和ケア施設に勤務する看護婦が直面する倫理的所状況と葛藤、問題解決方法について問う調査用紙を作成した。緩和ケア施設の看護婦100名に調査用紙を配布した。14年度には、収集したデータを分析し、全体的特徴を明らかにする計画である。(2)については、3名の看護職に対する面接を行ない、ガイドラインを作成した。また、緩和ケアにおける倫理的問題としては、「積極的治療と緩和ケアのギアチェンジ」「セデーションをめぐる選択・決定の問題」が、患者・家族・医療者にとって非常に重要な課題であることが浮かび上がった。14年度は、本調査として上記の2テーマについて、面接調査を行なう予定である。
位置シフトされた超高繰り返し電磁パルス列生成の探索的研究

本研究は二つの研究段階に分けて推進した。最初の段階としてH29年度は1THzの超高繰り返し光パルス列の生成を目指し、100GHzの間隔で波長の異なる複数の光波を生成しこれらを合波することでまず100GHz繰り返しの光パルス列を抽出した。具体的には半導体レーザからの連続光を共振型光位相変調器を用いて光コムを発生しそこから波長選択スイッチを用いて5光波を選択する手法を確立した。次に100GHzの倍数の繰り返しパルス列を生成するため、100GHzのパルス列を複数光路に分岐し、それぞれに遅延を施して再び合波して時間多重を行う方法を確立した。第二暖段階としてH30年度は、1THz繰り返しの光パルス波のそれぞれに位相シフトを与えることを検討した。位相シフトのため光位相変調器を用いることとし、光位相変調器の変調速度が100GHz未満であることを考慮して、前述の時間多重する前の光パルスに変調をかけ、位相シフトされたそれぞれの光パルスを時間多重することで、1THzの繰り返し光パルスに結果的に位置変調がかけられることを、自己相関波形による実験で確かめた。このようにして生成した変調された光パルス列をフォトミキサで光電変換し位置変調されたテラヘルツパルスの生成を試みた。光電変換後のテラヘルツパルスにおいてパルス波形のなまりが観測され、これはもとの複数光波間の強度のバランスを不均衡にすることで解消できることを提案、実証した。これらの成果を国際会議に5件、国内学会に6件発表した。本研究の構成は、光通信用として実績のある半導体レーザからの光波に、光変調器で50GHzの変調をかけ、50GHz間隔の光コムを生成する。光コムから光分波器で、使用する5光波をそれぞれ別々の光路に取り出すもので、光分波器は光通信用として開発されたものをベースに先行研究(光通信実験)において我々らが改良したものを使用する。H29年度は、3つ以上の光波において精密な光波長と光位相差の安定化が可能となれば、フォトミキサとして用いるUTC-PDの二乗検波特性を利用して超高繰り返し電磁パルス波の生成が可能であることをシミュレーションにより確認した。シミュレーション結果では、3光波では波形周期1.0ps(1THzの逆数)に対してパルス幅はその1/3の0.3psとなりデータを乗せるためには十分に狭い幅が実現できた。さらに5光波では1/5の0.2psというように用いる光波の数に反比例してパルス幅が確実に細くなることが確認できた。高繰り返し光パルス波を、フォトダイオード(UTC-PD)を用いて光電変換するテラヘルツ波パルスの生成法に関して、50GHz間隔の複数の光波を重ね合わせて高繰り返し光パルス波を生成した。実際に計画通り、生成したパルスは50GHzで繰り返し、シミュレーションで得られたパルス幅の理論値と測定値はほぼ一致しており、本測定法を用いた光パルス生成法が有効であることを確認している。H30年度は2THzを越える帯域のUTC-PDを使用し、3つ以上の光波から1THz繰り返しパルス波を生成する。1THz繰り返しパルス波を生成するための構成は、光通信用として実績のある半導体レーザからの光波に、光変調器で50GHzの変調をかけ、50GHz間隔の光コムを生成する。光コムから光分波器で、使用する5光波をそれぞれ別々の光路に取り出す。ここで光分波器は光通信用として開発されたものをベースに先行研究(光通信実験)において我々が改良したものを使用する。各5光波は最終的に光アンプで増幅されたのちにフォトミキサであるUTC-PDで二乗検波され、1THz周期のパルスとなりアンテナから放射される。一方、光分波器の手前から導入したパイロット光は5光路に分岐され、再び合波された後に取り出されて光位相差検出器により5光路のお互いの位相差が検出される。

これら位相差が一定となるようにコントローラが各光位相調整器を動作させることで各5光波の互いの位相差を安定化する。本方法はすでに2光波間の位相差安定法として技術が確立され我々の先行研究において300GHzのコヒーレント正弦波生成が実現されている。本研究ではこの技術を35波に対応する技術として発展させる。技術課題としては、(a)2THzの帯域にわたる光コム発生、(b)35光路に分岐された光干渉計からのそれぞれの光路の組み合わせからの干渉強度の抽出、(c)各光路の位相安定化を行うための複数重なり合った制御ループの制御法の確立である。
ミトコンドリアDNAからみたモンゴロイド集団の起源と系統

制限酵素切断型多型による分析で、ヒトmtDNAは、顕著な人種特異性を示す事が知られている。我々は、黒人7人、白人18人、アジア人70人のmtDNA相同領域の塩基配列を決定し、比較分析をおこなった。胎盤よりmtDNAを分離精製し、KpnI,SacIの2重消化を行い、non-coding領域(Dル-プ)、約500塩基対の塩基配列を決定した。すでにこの領域の配列が決定されている6個体の配列を含めて計101個体の配列を比較したところ、563塩基のうち113の部位で多型性を示した。これら多型部位のうち、塩基置換によるものが106部位であった。そのうち、transition型置換が91%をしめた。また、一塩基の欠失・挿入の起きている部位要7カ所で確察された。また、多型部位の分布を調べたところ、non-coding領域中においてもかなりの偏りが観察された。すなわち、Dル-プの開始部(SacI側)には変異が少なく、tRNA-Pro側に行くにしたがって多型部位が増大する傾向にあり、Dル-プ内においても機能上の制約に差異があることを示唆している。さらに超可変ドメインがあり、わずか14塩基の領域で、塩基置換・欠失・挿入等で17種類の異なる配列が観察された。なすわち約60%の個体がAAAACCCCCTCCCCという配列であったが、その他の個体ではCストレッチ内の塩基置換、TからCの置換とそれに伴うCストレッチの伸長とAストレッチの減少などの種々の配列が観察された。以上のようにnon-coding領域の多型性はいちじるしく、制限酵素切断型多型分析によるnucleotide diversityの値(0.4%)の約4倍の値(1.5%)を示し、ヒトの集団内変異を同定するのに極めて有効な領域であると考えられた。
マイクロ送液デバイスを用いた自己組織化脈管ネットワーク形成に関する研究

生体内では、現在の技術では作製することが不可能である複雑な機能を有した微小構造体である生体組織が多数存在しており、それらの工学的応用が期待されている。本研究ではそのような生体組織の代表的なものの一つである毛細血管に着目し、人工的に作製した微小流路構造と自己組織化により作製された血管構造を機能的に結合するμ-TASデバイスを提案した。このデバイス上の微小構造は、平面上に配置されたオリフィスを複数有する埋込流路であり、厚膜ネガレジストであるSU-8内部に形成されている。このような微小構造は通常の露光方法では作製することが困難であり、我々が提案した傾斜露光法を用いることで簡便に作製することが可能となった。そして、埋込流路に接続したオリフィスが配置されたデバイス平面上でヒト由来の内皮細胞の一種であるHUVECを特定条件下で培養することで自己組織化により毛細血管構造を形成し、平面上のオリフィスへと誘導することで毛細血管と埋込流路を、オリフィスを介して機能的に結合する。ランダムに配置される脈管構造の誘導において、昨年度は内皮細胞の誘引因子であるVEGFを含有したゲルビーズをオリフィスに配置することで脈管構造をオリフィスへ誘導を行ったが、ゲルビーズの除去が問題となっており、オリフィスからVEGFを拡散させる手法を検討している。また、毛細血管の形成期間を短縮するために特異な環境下での培養を行っていたため、本年度では一般的な医学分野で用いられる条件下での実験を行うための培養システムの構築を行い、一週間以上の長期培養下での毛細血管構造の誘導と埋込流路との結合を試みた。生体組織の工学的応用を目指し、代表的な生体組織の一つである毛細血管に着目することで、人工構造と機能的に結合した細胞培養デバイスを提案した。ここで提案する細胞デバイスでは、マイクロデバイス上のオリフィスと自己組織化により形成される脈管構造を機能的に結合し、脈管構造をマイクロチャネルとして利用する。昨年までの手法では自己組織化により形成される脈管の位置はランダムであるため、オリフィスとの結合を効率的に行うことができなかった。そこで、内皮細胞(HUVEC)をオリフィスへ誘導する手法として、生体内での誘導因子であるVEGFを含有したビーズをオリフィスへ固定しHUVECを誘導する手法を検討した。VEGF含有ビーズをデバイス上へ播種してオリフィスへ吸引固定し、HUVECをデバイス上に培地とMatrigelを滴下後、1日培養した。培養後の観察により、オリフィス上へHUVECが形成した脈管構造が固定されている様子が観察され、また、VEGFの有無・ビーズの有無におけるオリフィスへの誘導効果の比較実験ではVEGFを含んだビーズを固定した場合に、ビーズなしのオリフィス上に比べて約1.5倍のHUVECがオリフィスへ誘導されており、VEGF含有ビーズを用いた誘導手法の有用性を定量的に示すことができた。以上のように、本研究では、微小流路と脈管構造を結合したハイブリッドデバイスを提案し、平成20年度はVEGFを含んだビーズを固定したオリフィス上への脈管構造の誘導、結合実験を行った。その結果、VEGF含有ビーズを固定することでオリフィスへの脈管構造の誘導率が向上し、オリフィスへ接着した脈管構造を観察した。平成21年度以降は、提案した培養デバイスを実現するため、人工流路と自己組織化により形成された脈管構造をオリフィスを介して機能的に接続し、培養デバイスへと応用していく。また、毛細血管の形成期間を短縮するために特異な環境下での培養を行っていたため、本年度では一般的な医学分野で用いられる条件下での実験を行うための培養システムの構築を行った。今後、一週間以上の長期培養下での毛細血管構造の誘導と埋込流路との結合を行っていく。

本研究ではそのような生体組織の代表的なものの一つである毛細血管に着目し、人工的に作製した微小流路構造と自己組織化により作製された血管構造を機能的に結合するμ-TASデバイスを提案した。このデバイス上の微小構造は、平面上に配置されたオリフィスを複数有する埋込流路であり、厚膜ネガレジストであるSU-8内部に形成されている。このような微小構造は通常の露光方法では作製することが困難であり、我々が提案した傾斜露光法を用いることで簡便に作製することが可能となった。そして、埋込流路に接続したオリフィスが配置されたデバイス平面上でヒト由来の内皮細胞の一種であるHUVECを特定条件下で培養することで自己組織化により毛細血管構造を形成し、平面上のオリフィスへと誘導することで毛細血管と埋込流路を、オリフィスを介して機能的に結合する。ランダムに配置される脈管構造の誘導において、昨年度は内皮細胞の誘引因子であるVEGFを含有したゲルビーズをオリフィスに配置することで脈管構造をオリフィスへ誘導を行ったが、ゲルビーズの除去が問題となっており、オリフィスからVEGFを拡散させる手法を検討している。また、毛細血管の形成期間を短縮するために特異な環境下での培養を行っていたため、本年度では一般的な医学分野で用いられる条件下での実験を行うための培養システムの構築を行い、一週間以上の長期培養下での毛細血管構造の誘導と埋込流路との結合を試みた。
メチル水銀耐性に関わる因子の解明

一方、PC12/TM細胞で発現が抑制されている遺伝子128種類のfragmentのうち32種類についても同様にノーザンブロット解析を行ったところ、確実にmRNAの発現が抑制されていた14種類の遺伝子断片が得られた。これらについては現在検討中である。MeHg耐性獲得には複数の因子が複雑に関与している可能性が考えられる。PC12細胞とPC12/TM細胞間で多くの遺伝子の発現量に顕著な差が認められることは、これらの遺伝子がMeHg耐性に関与する因子のcandidateになる可能性を示している。今後、これらの遺伝子のcDNAをクローニングし、複数の遺伝子を同時に強制発現させる等の方法を用いてMeHgに対する感受性に及ぼす影響を検討する必要がある。本研究では、メチル水銀に対する耐性因子検索するため、ラットpheochromocytoma(PC12)細胞より樹立したメチル水銀耐性細胞(PC12/TM)及び、その親株において発現量が異なっている遺伝子を解析している。すでにPC12/TM細胞においてメチル水銀の蓄積量がPC12細胞より顕著に少ないことがわかっているので、まず薬物排泄ポンプであるGS-XポンプファミリーのMRP-1、cMOAT、SMRP、MLP-1、及びMLP-2についてcDNA断片をクローニングし、ノーザンブロット解析を行った。しかし、いずれのmRNAレベルにもPC12、PC12/TM両細胞間で発現量に差は認められなかった。次にPC12及びPC12/TM細胞間で発現量の異なる遺伝子をAMF(AFLP-based mRNA fingerprinting)法により検索した。AMF法は発現量の異なるmRNAをPCRを用いて検出する方法で従来のDifferential Display法よりも疑陽性の少ない方法である。このAMF法により検出した総数約14,000種類のfragmentのうち、PC12/TM細胞の方が発現量が高いものは101種類、PC12細胞の方が高かったものは128種類あった。PC12/TM細胞で顕著に発現量の高いと思われる31種類についてノーザンブロット解析を行い確実にmRNAレベルが高い10種類の遺伝子断片を得た。これらの遺伝子の塩基配列を決定した結果、tyrosine hydroxylase、接着因子やケラチンなどの膜蛋白質及び未知の蛋白質をコードすることがわかった。次年度は更に多くのfragmentについてノーザンブロット解析を行うと同時に、得られた遺伝子のcDNAをクローニングし、PC12細胞で強制発現させ、メチル水銀への感受性が変化するかどうかを検討する。
肺癌診断におけるコンピューテッド・ラジオグラフィーの有用性の研究

Dynamic range(DR)圧縮画像とDR圧縮テーブル(DT)について検討した。対象はFCRを用いて胸部撮影の施行された22症例、のべ33回である。方法は、従来の左画像1枚出し(A)と、CRstation-1を用いてDR圧縮処理を行い、DT:x(QL値0を出力値-300)としたDR圧縮画像1枚出し(B)、DT:b(QL値0を出力値-500)としたDR圧縮画像1枚出し(C)、の3種類の画像を作成した。正常構造および異常影の11項目の描出能を点数法とROCにより評価した。結果は、A・B間では6項目でBが優れ(P<0.01)、A・C間では7項目でCが優れ(P<0.01)、B・C間では1項目でCが優れていた(P<0.05)。病変部についてはA・C間ではCが優れていた(P<0.05)が、A・B、B・C間では有意差はみられなかった。DT:bとDT:xの比較では、DT:bの方が椎体で優れていた。以上より、胸部のFCR画像にはDR圧縮処理法が有用であるという結論が得られた。FCR粒状改良型エネルギーサブトラクション画像(以下ES)の肺結節影描出能を、疑似結節、臨床例について、ROC解析によりてConventional胸部単純写真(以下Conv)と比較し、その有用性を検討した。基礎的検討は、直径6mmのアクリル球(CT値100HU)を疑似結節として、胸部ファントム上に置き、Conv、ES、FCRを撮影した。臨床的検討は、径525mmの結節を有する29症例(撮像回数33回)、結節を有しない27症例を対象とした。結果は、基礎的検討では、肺血管に重なる部位、1本の肋骨に重なる部位では有意差は得られなかった。2本の肋骨に重なる部位では、FCR+ESがConvよりも有意に優れていた(P<0.05)。縦隔、横隔膜に重なる部位では、ES、FCR+ESはConVよりも有意に優れていた(P<0.01)。)臨床的検討では、ESはConvよりもP<0.05で、FCR+ESはConvよりもP<0.01で有意に優れていた。臨床例においては、基礎的検討と同様の結果であった。今回の検討結果からはFCR+ESが結節影のスクリーニングに最も適していると考えられた。Dynamic range(DR)圧縮画像の有用性について、臨床的に正常構造及び異常陰影の描出能の研究を点数法により行って来たが、本年は、症例数を約2倍に増やし、更にROC解析による評価を行った。DR圧縮画像に大きな影響を及ぼすパラメータであるDE圧縮テーブル(DT)を変化させ至適条件について検討した。対象はFCR7000を用いて胸部撮影の施行された68症例である。