hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
iPS 細胞を利用した遺伝性血液疾患の遺伝子治療法開発

更にCD71陽性細胞に遺伝子治療用ベクターを遺伝子導入し、OP9細胞と共培養した。21日後にはCD71陽性-Ter119陽性細胞が約30%になっており、遺伝子治療後のiPS細胞が赤芽球まで分化することを確認した。以上のように、マウスモデルではiPS細胞を用いた遺伝子治療後に造血幹細胞への分化がin vitroで可能であり、今後、ヒトPK異常症の根治療法の細胞ソースになり得ることが期待できた。マウスiPS細胞の樹立はおおむね順調に実施出来たが、質的評価によりテラトーマ形成が確認されたため、野生型PKLR遺伝子の導入実験以降が進んでいない。24年度が最終年度であるため、記入しない。iPS細胞の樹立と並行して遺伝子治療用ベクターの作成を行っており、テラトーマ形成やがん化などの問題が克服できれば、遺伝子治療実験に用いることが出来ると考えている。来年度は野生型マウスiPS細胞由来の造血幹細胞を用いたPK異常症マウスへの造血幹細胞移植をまず行い、移植後の個体レベルでの治療効果評価方法に関して検討し、次段階として遺伝子治療を施したPK異常症マウスiPS細胞を用いた移植を実施する予定である。
小児横紋筋肉腫における癌幹細胞の同定と免疫療法に向けた基礎的研究

横紋筋肉腫細胞において癌幹細胞が存在し、治療対象となり得るかを検証するためヒト胞巣型横紋筋肉腫細胞株(RH30)を用い、無血清培地下でCSCを誘導した。無血清培地下で誘導した細胞はSphere形成能とコロニー形成能、造腫瘍能が上昇していた。さらに胎児型横紋筋肉腫細胞株(RD)を用い、ALDH1活性上昇細胞群が癌幹細胞の性格を有するかを検討した。ALDH1活性上昇群におけるコロニー形成能、多分化能、薬剤耐性能は活性低下群に比して、優位に上昇し、造腫瘍能も亢進していた。以上よりALDH1は胎児型横紋筋肉腫癌幹細胞のマーカーとなることが示唆され、新たな治療標的となりうることが示唆された。胞巣型横紋筋肉腫(aRMS)は集学的治療の進歩にもかかわらず、未だ予後不良である。近年、腫瘍構成細胞を供給し続ける幹細胞様細胞(CSC)の存在が明らかとなってきた。CD133は胚性幹細胞を含む幹細胞や前駆細胞のマーカーであり、CD133を標的にした治療の開発は困難である。従ってマーカー以外の他の手法でCSCを単離し、その性質を検討することは極めて重要である。今回、我々はCSCを標的とした新しい治療法を開発することを目指して、無血清培養より抽出したaRMS-CSCの生物学的特徴について解析した。aRMS細胞株(RD30)を超低接着表面ディッシュ、無血清培地で継代培養を行った。Sphere形成能はsphereをsingle cellとし、無血清培地、96 well plateに播種して培養し検討した。またコロニー形成能はアガロースゲル内のコロニー数を計測した。Sphere形成細胞の造腫瘍能を検討するため、腫瘍細胞を段階希釈し、NOD-SCIDマウスの皮下に接種して造腫瘍能の有無を検討した。さらに形成された腫瘍の性質を検討するため、腫瘍を摘出し、病理学的検討を行った。Sphere形成能は親株で4.2%、sphere細胞では51.7%と著明に亢進していた。またアガロースゲル内コロニー生成能は親株で平均5.2個であったが、sphere細胞は平均30.6個で有意に生成能は亢進していた。さらに造腫瘍能の検討では親株は10万個以上の細胞を接種せねば腫瘍が形成されないのに対し、sphere細胞では1000個の細胞で腫瘍を形成した。また1000個のsphere細胞で形成した腫瘍はmyogenin陽性、desmin陽性であり、aRMSの性質を有していた。以上から、無血清培養より抽出したaRMS-CSCは癌幹細胞としての性質を持った細胞群であると考えられた。平成24年度まで横紋筋肉腫細胞株を無血清培地で継代培養を行うことで、胞巣型横紋筋肉腫(aRMS)の癌幹細胞の同定を試みてきたが、そこから治療のターゲットとする分子、マーカーを同定することが手法的に困難となってきた。そこで本年は成人領域の癌幹細胞マーカーとされるアルデヒド脱水素酵素1(ALDH1)を指標にして小児悪性固形腫瘍の癌幹細胞を同定する研究を行った。横紋筋肉腫においてALDH1活性上昇細胞群が癌幹細胞の性質を有するかについて、活性上昇群と非上昇群におけるコロニー形成能、多分化能、薬剤耐性能、造腫瘍能を比較検討した。まず胎児型横紋筋肉腫細胞株RDを用いて、ALDH1活性上昇細胞群は全体の5.8%であった。コロニー形成能は、活性非上昇群では平均21.3個であったのに対し、活性上昇群では平均36.3個と著明に亢進した。またRDにおいて、ALDH1活性上昇細胞群は高いコロニー形成能、薬剤耐性能、多分化能を持ち、さらに造腫瘍能の亢進を認めることを明らかにし、癌幹細胞の性質を有する可能性が示唆された。しかしその一方で、ALDH1は正常細胞でも発現しているため、ALDH1単独では治療対象とならない可能性がある。そこで臨床応用可能な癌幹細胞マーカーを同定するため、活性上昇群と活性非上昇群のcDNAを採取し、DNAマイクロアレイを用いた網羅的遺伝子解析を施行した。その結果、活性上昇群において血小板由来成長因子であるPDGF-Bの発現が亢進しており、それが癌幹細胞の性質維持に関与している可能性が示唆された。一方PDGF受容体の発現に差は認めないものの、PDGF受容体(PDGFR)阻害剤であるKi11502を投与したところRD細胞の生存率は濃度依存的に低下した。よってPDGFRを治療標的にすることにより、RDにおける癌幹細胞の制御につながることが明らかになった。

平成24年度はまず研究の足がかりとなる小児横紋筋肉腫細胞株の培養と癌幹細胞の同定を行った。まず小児横紋筋肉腫細胞株は胞巣型RH30と胎児型RMS-YMであり、細胞株を培養し、RT-PCR法にてCD133, CD44, CD24, CD117の癌幹細胞候補マーカーのmRNAレベルを測定。発現はhouse keeping geneであるGAPDHを用いて補正し、腫瘍組織と正常組織の発現量の差を比較検討した。CD133やCD44が有意に発現していた。さらにタンパクレベルでの発現を確認するため表面マーカーで腫瘍細胞を染色し、フローサイトメトリー法で検出したところ、各細胞株でCD133. CD44の発現を数パーセントで認めた。癌幹細胞マーカーとして最も有力と考えられるCD133を中心に、磁気ビーズ細胞分離システム(MACS, Miltenyi Biotec社)にて幹細胞分画の濃縮を試みたが、研究コストがかかる上、再現性の得られる結果が得られなかった。そこでRH30とRMS-YM、また同じ横紋筋肉腫胎児型細胞株RDをそれぞれ無血清培地で培養し、浮遊細胞塊やコロニー形成能、さらにin vivoで異種免疫不全動物であるSCIDマウスの皮下に攻撃接種し造腫瘍能を現在行っている。興味深いことにRH30やRDでは無血清培地で浮遊細胞塊を形成したが、RMS-YMでは形成せず、RMS-YMではそれ以上の実験を遂行できない。従って現在は胞巣型RH30,胎児型RDで実験を進めており、無血清培地における継代培養も成功し、現在造腫瘍能の検討を行っている最中である。また継代培養して純化した癌幹細胞のStemnessについても検討を行っており、培養を加えることによって幹細胞の性質をより強く帯びていくことを確認した。横紋筋肉腫細胞株で癌幹細胞と思われる分画の抽出に成功するまでに時間を要したため、当初予定した研究進捗までたどり着いていない。細胞株により予想された結果と異なったため、実験を遂行できない部分が生じ、予定より若干の遅れを生じている。しかし予想外の結果で異なる細胞株で対応可能であり、今後も予定通り研究を推進可能と考えられるため、おおむね順調に進展していると考えられる。ようやく横紋筋肉腫細胞株で癌幹細胞と思われる分画の抽出に成功したが、また完全にそれとは言い切れていない。様々な角度から検討を行い、それが癌幹細胞であるという証拠を着実に積み上げる必要がある。上述の細胞群がどのような分子を発現し治療標的となり得るのかについて検討を行っている。また研究分担者を増やして、癌幹細胞の免疫原性の検討を行っていきたい。おおむね順調に研究が推進できている。今後は癌幹細胞に対する免疫療法に向け、細胞株の無血清培地で生じた浮遊細胞塊に含まれる癌幹細胞分画の解析を中心に行っていく。とくにこの細胞を抗体アレイによる表面マーカーの網羅的解析により、そのターゲットとなるマーカーを同定し、臨床検体を含めた検討を行っていく予定である。また今年度以降は、現在得られたデータをまとめて学会発表を行っていく予定である。実験にかかる直接費用と研究成果の公表のための旅費と雑誌掲載費次年度の研究費の使用計画おおむね計画通りの使用を計画している。
流体トポロジー最適化による革新的空力デバイスの設計探査

本年度は、近似最適化に用いる追加サンプル点選択指標の開発と、この指標を用いたボルテックス・ジェネレータ(VG)の配置最適化を実施した。追加サンプル点選択指標について、既存指標は単目的最適化で使用されてきた指標の拡張であり、多目的最適化では十分な性能を発揮できない。そこで、多目的最適化に特化した指標として、目的空間に均一に複数のサンプル点を同時追加できる指標(EPBII/EIPBII)を開発した。この指標では、目的空間に均一に配置した多数の重みベクトル各々に対して最適解を探索するため、任意の数のサンプル点を同時に追加することができる。複数の検証問題に対して提案指標と既存指標を適用・比較した結果、提案手法によって効率的なパレート最適解探索が可能であることを確認した。VGの設計最適化について、最適化の効率を高めるため設計最適化問題を二段階に分解した。昨年度に実施した第一段階では、無限後退翼に対してVG形状(高さ、長さ、角度)のみを変化させ、空気抵抗を最小化しつつ効率的に失速緩和できる設計案を探索した。一方、本年度実施した第二段階では、第一段階で最適化したVG形状を用いて、三次元後退翼上でVG配置の最適化を行った。VG配置最適化では、昨年度開発を行った近似勾配の固有値分解により設計空間の座標変換を行うKrigingモデル及び、上述のサンプル追加指標を使用した。最適化の結果、最新の航空機に見られるVG配置を含んだ多数のパレート最適解を得ることができた。また、形状・配置最適化結果と等間隔に既存形状のVGを配置した設計案を比較すると、同様の失速特性を維持しつつ、VG取り付けによる抗力の増加を半減することに成功した。最適解の特徴を抽出したところ、翼根から翼端に向かって徐々に取り付け間隔を小さくすることで、等間隔配置よりも小さな抗力で失速を緩和できることが判明した。27年度が最終年度であるため、記入しない。最適化の低コスト化に用いられる近似モデルの新手法開発と乱気流による航空機の振動抑制に用いられるボルテックス・ジェネレータ(VG)の設計最適化を実施した。近似モデルの新手法開発では、目的関数と相関の強い特徴的な座標系を見つけ出す方法を二種類提案し、問題に応じて使い分けることで、多種多様な最適化問題に対応可能な手法に仕上がった。提案手法と従来手法を、テスト関数および翼型の揚抗比最大化問題に適用し、近似精度と最適化能力を比較した。変数間依存性をもったテスト関数に適用した場合には、提案手法は適切な座標系を見つけ出して関数全体を精度良く近似することができ、従来手法に比べて最適化が終了するまでに要する計算コストを低減することができた。翼型の設計最適化問題では、変数間依存性をもつ設計変数として翼型の翼厚分布とキャンバーラインを定義するスプライン曲線の制御点を用いた。提案手法は、目的関数の揚抗比の近似精度と最適解の探索能力のいずれにおいても、既存手法よりも優れた性能を発揮した。これにより、提案手法は変数間依存性をもつ実設計問題に対しても有効であることが示された。VGの設計最適化では、周期境界条件を適用した無限後退翼を用いてVGの高さ、長さ、角度という三つの設計パラメータを変数とし、空気抵抗を最小化しつつ効率的に失速緩和できるVG形状を探索した。最適化には、近似モデルとして上述の提案手法を採用した。最適化の結果、経験側に基づいて設計したVGよりも、巡航時の空気抵抗が小さく、失速緩和性能にも優れた設計案を獲得した。さらに、多目的最適化の結果から、設計で重要となるパラメータを特定することができ、経験則に基づく従来形状とは異なる革新的なVG形状を提案することに成功した。

最適解の特徴を抽出したところ、翼根から翼端に向かって徐々に取り付け間隔を小さくすることで、等間隔配置よりも小さな抗力で失速を緩和できることが判明した。近似モデルの新手法開発では、提案手法によって実設計問題においても効率良く最適化を達成することができ、実用的なツールとして活用できる段階となった。研究成果を国内外の学会で発表したところ高い評価を受けて、国内学会では受賞した。提案手法を、ボルテックス・ジェネレータ(VG)の設計最適化問題に適用したところ、従来手法よりも高い近似精度が確認され、既存の設計案よりも優れた斬新な設計案を提案できたことからも、革新的な空力デバイスを作り出すにあたって有効なツールであると考える。VGの設計最適化に関する成果は、本年度中に国内外の学会で受理され、次年度に発表する予定である。また、翼型の設計最適化問題においても、提案した近似モデルによる大幅な最適化能力の向上を確認した。この設計問題ではスプライン曲線により形状を定義したが、より高自由度な形状定義方法にFree Form Deformation(FFD)と呼ばれる方法があり、こちらを用いる場合にも提案手法は有効に作用すると考えられる。FFDと提案した近似モデルの組み合わせにより、高自由度な設計空間内を多数の目的関数を考慮しながら探索できるため、当初予定したトポロジー最適化よりも効率的に大域的最適解を獲得できると見込まれる。このことから、近似モデルの開発は当初の計画以上に進展していると言える。トポロジー最適化では、目的関数に対する設計変数の感度を算出する際に必要となるadjoint方程式を流体ソルバーに実装し、adjoint方程式の各項が適切に評価されていることを確認したが、予定以上の時間を要した。また、上述のFFDと提案した近似モデルの組み合わせによって、より効率的な最適化が可能との見込みが立ったため、研究を一本化し、近似モデルのさらなる改良によって多様な形態を考慮可能な最適化手法の実現を目指すこととした。27年度が最終年度であるため、記入しない。今後の研究課題は、ボルテックス・ジェネレータ(VG)の設計最適化と近似モデルを用いた最適化手法の高度化に分けられる。まず、VGの設計最適化に関して、実際の航空機のように翼胴干渉やキンク、翼端をもった三次元後退翼上での、VGによる衝撃失速の緩和現象は非常に複雑であるため、設計最適化問題を二段階に分解する。第一段階では、周期境界条件を適用した無限後退翼を用いてVGの高さ、長さ、角度という三つの設計パラメータのみを考慮し、空気抵抗を最小化しつつ効率的に失速緩和できるVG形状を探索し、第二段階では、第一段階で最適化したVG形状を用いて、三次元後退翼上でVGの配置の最適化を行う。第一段階は本年度中に達成したので、次年度は第二段階に取り組み、実際の航空機に設置が可能な状態まで研究を発展させる。VG設計最適化の第二段階を実行するにあたって、近似モデルを用いた最適化に関して二つの課題があり、手法の高度化が必要となる。一つ目の課題として、現在は近似モデル生成の際の座標系を全設計空間で共通に選択しているが、設計最適化の第一段階で、これに起因する精度低下が確認された。この問題に対応するため、設計空間を分割し、異なる特徴を持った設計空間では異なる座標系を使用できるように改良を加え、更なる近似精度向上を目指す。
ヒドロキシエチルデンプンによるグリコカリックス崩壊に対する血管収縮薬の軽減効果

手術侵襲時の血漿量維持のために使用されるヒドロキシエチルデンプン(HES)製剤は、炎症時には血管内皮細胞表面のグリコカリックスを崩壊させることにより臓器不全をきたす。このHES製剤がもたらす組織障害のため、現在、HES製剤の臨床使用に大きな混乱が生じている。本研究では、グリコカリックスが柔軟なゲルであることをヒントにして、血管収縮薬の併用が手術侵襲時におけるHES製剤の組織障害を軽減する可能性を検討することにより、HES製剤の臨床使用に新たな活路を見出す。
水分検出用蛍光性センサーの開発と機能性色素材料化

本研究では、蛍光性色素の光誘起電子移動(PET)、蛍光共鳴エネルギー移動(FRET)および分子内電荷移動(ICT)特性を利用して試料中や表面の水分を検出・定量化かつ可視化(蛍光発光による画像化)できる蛍光性水センサーを創製し、PET, FRETおよびICT特性に基づいた水分検出のメカニズムを解明することで、微量水分から高水分領域で使用できる水分検出・定量・可視化蛍光分析法の創成(JISやISOなどの国家・国際規格化)を目的とする。
セルロース並びにキチンをベースとする新規高分子複合体の構築と特性解析

セルロース並びにキチンと合成高分子との微視的複合化に関する研究を遂行し、次のような新知見を得た。1.キチンベースのポリマーブレンド・コンポジット(1)ギ酸/ジクロロメタンを共通溶媒としたキャスト法によって、全組成範囲で均一透明なキチン/ポリビニルピロリドン(PVP)ブレンド膜を作製しえた。両成分の相溶性は良好であるが、キチン成分は部分的にギ酸エステル化されている。(2)種々の脱アセチル化度(DD)を有するキチンとポリビニルアルコール(PVA)とのブレンド膜を、酢酸水溶液からのキャスト法、あるいはジメチルアセトアミド-塩化リチウム(DMAc-LiCl)溶液からの凝固法によって作製しえた。DD=40-60%のキチンがPVAに対して最も高い相溶性を示すことが判った。(3)キチン/DMAc-LiCl溶液を非溶剤中で凝固ゲルとした後、含浸モノマーの塊状重合によってキチン/ポリグリシジルメタクリレート(PGMA)系コンポジットを合成しえた。粘弾性挙動および固体NMRの測定から、IPN構造の発達を確認した。2.セルロースベースのポリマーブレンド・コンポジット(1)セルロース/DMAc-LiCl溶液から、凝固/塊状重合法によってセルロース/コポリマー[P(VP-co-GMA)]系コンポジットを作製しえた。分子間の架橋様式を制御し、Semi-IPN、Full-IPN、およびJoined-IPNの3種を作り分けることに成功した。(2)上記のセルロース/P(VP-co-GMA)系コンポジットに加え、セルロース/PVPキャスト膜およびセルロース/PVA凝固膜について気体透過・収着挙動の測定を行い、synergisticな複合効果の発現を見出した。セルロース並びにキチンを一成分とする新規高分子複合体を調製し,相構造の解析及び力学・収着物性等の評価を行った。得られた主な知見は以下のようである。1.多糖/合成高分子ブレンドフィルム(1)ジメチルスルホキシドーパラホルムアルデヒド(DMSO-PF)を共通溶媒とした溶液キャスト法により,相溶状態の良好なセルロース/ポリビニルピロリドン(CELL/PVP)ブレンド膜を調製しえた。本系では,PVP含有率の増加と共に酸素の選択透過性が顕著に上昇する傾向がみられた。一方,ジメチルアセトアミド-塩化リチウム(DMAc-LiCL)を共通溶媒に用いて溶液凝固法により製膜したセルロース/ポリビニルアルコール(CELL/PVA)系では,特に中間組成領域で二酸化炭素に対するバリヤ-性が高くなることが判った。(2)蟻酸-ジクロロメタンを共通溶媒とし,キャスト法によって透明性の良いキチン/PVPブレンド膜を作製しえた。両成分の相溶性は良好であるが,溶解過程でキチンは化学修飾を受け,部分的に蟻酸エステル誘導体として存在することが判った。2.相互侵入綱目(IPN)構造を有するセルロース・キチン系ミクロコンポジットセルロース(又はキチン)/DMAc-LiCl溶液を非溶剤中に凝固させて得られる多糖のゲル中に,ビニルピロリドン(VP)モノマーと架橋剤を含浸させ,紫外線照射下で塊状重合を行うことにより,IPNタイプの多糖/PVPミクロコンポジットを合成しえた。但し,PVP-rich組成では,複合体のガラス転移温度がPVPホモポリマーのそれよりむしろ低下する特異現象が観測され,多糖の水酸基とVPのカルボニル基間に介在する相互作用の及ぼす効果についてFT-IR測定により検討を加えた。また,水及び有機溶剤に対する膨潤度,並びに水蒸気収着挙動の組成依存性を評価し,IPN組織の発達と関連づけて考察した。セルロース並びにキチンの新しい溶解法を駆使して、下記1、2に大別した高分子複合体を調製し、その特性解析を行った。

得られた主な知見は以下のようである。1.多糖/合成高分子ブレンドフィルム種々の脱アセチル化度(DD)を有するキチンとポリビニルアルコール(PVA)とのブレンドフィルムを、酢酸水溶液からのキャスト法、あるいは、ジメチルアセトアミド-塩化リチウム(DMAc-LiCl)溶液からの凝固再生法によって作製しえた。ブレンド試料の転移挙動と相構造を考察し、両成分の相溶性に及ぼすキチンの部分脱アセチル化の効果を調べた。DD≒50%のキチンを用いた場合に、特に良好な相溶状態にあるキチン/PVAブレンド膜を調製しうることがわかった。2.相互侵入網目構造(IPN)を有するセルロース・キチン系ミクロコンポジット(1)セルロースのDMAc-LiCl溶液を非溶剤中に凝固させて得られるゲル中に、N-ビニルピロリドン(VP)とグリシジルメタクリレート(GMA)のモノマー混合液を含浸させ、紫外線照射下で重合反応を行うことにより、Semi-IPNタイプのセルロース/P(VP-co-GMA)コンポジットを作製し得た。この試料を3%NaOHあるいは50%ギ酸の水溶液中で加温処理すると、コポリマー成分中に共有結合架橋やイオン橋架けが生成し、より強固なネットワーク構造を有するFull-IPNとなることが判った。また、GMAエポキシド-セルロース水酸基間の反応を利用して、Joined-IPNタイプのコンポジットも作製し得た。(2)上記と類似の溶液凝固/塊状重合法により、キチン/ポリグリシジルメタクリレート系複合体を調製した。転移挙動及び固体NMRの測定から、両成分が分子レベルで近接したIPN型のコンポジットであることを証明した。また、水及び有機溶剤に対する収着挙動の組成依存性を評価した。
ハイスループットフェノタイピングによる水稲生育量評価法の開発

本研究では、ハイスループットフェノタイピング技術により簡便かつ非破壊的に水稲の生育を評価し、栽培管理方針を導き出す手法を開発する。近年では、画像解析を中心としたフェノタイピング技術開発が目覚ましい。東京大学大学院農学生命科学研究科附属生態調和農学機構国際フィールドフェノミクス拠点では、画像データから植物の生育状況を数値化する技術開発が進められてきた。例えば、麦や水稲を真上から撮影した画像データから、植被率を算出するフリーソフトウェアEasyPCCが開発されている。さらに、無人航空機(Unmanned Aerial Vehicle; UAV)で撮影したソルガムの平面画像を重ね合わせることで植物体を立体構築し、驚くべき精度で草丈を推定する技術開発にも成功している。UAVの品質向上と価格低下により、農業従事者でも利用可能な環境である。UAVは、低コストで購入できる、オペレーションの汎用性が高い、広範囲を短時間かつ高解像度でセンシングできる、などの利点がある。また、非破壊かつ経時的に同じ個体や群落の計測を行える点も、UAVを利用する大きな利点と言える。しかし、農業現場や農業試験場へのフェノタイピング技術の導入は進んでおらず、研究開発とのギャップがある。今後、現場では、さらに規模拡大が進むと予想され、施肥や水管理などの栽培方針を決定するための、簡便かつ非破壊的に取得できる観測データが必要になってくる。1ハイスループットフェノタイピング技術は農業試験場で行っている生育量の評価法を代替できるのか?という問いを設定した。加えて、2生育量の評価法以外への応用は考えられるのか?を第2の課題とした。本研究は、最新フェノタイピング技術を利用し、現実的に運用可能な水稲生育評価手法の開発を目指している。富山県農林水産総合技術センターで生育状況を判断する水稲作況試験区において、コシヒカリ、富富富(富山県育成中生品種)およびやまだわら(晩生)を慣行栽培した。移植後から幼穂形成期までに5-6回の頻度で、草丈、茎数、葉色を測定する。幼穂形成期、出穂期、成熟期も同様に行った。生育調査の前日にUAVでの空撮から水稲作況試験区の画像データを取得した。また、スペクトルカメラも搭載し、同試験区のNDVIも取得した。画像解析では、植被率を評価するソフトであるEasyPCCをより操作性の良い仕様へバージョンアップした。H30年度に取得した植物画像をもとに、植被率やNDVI値を算出する、さらに、生育量との関係を明らかにしていく。前年度と同様の試験を行い、空撮水稲画像データから生育状況を評価し生育量を算出する。実測値からの生育量と照らし合わせ精度を評価する。複数年度のデータを用いることで、精度を上げられる可能性があるので、31年度のデータを含め、再度変換係数を検討する。除草剤の影響試験の評価も開始する。対照区と除草剤の濃度と散布のタイミングが異なる区を設定する。水稲作況試験区と同様のタイミングで、UAVによる空撮を行い、画像データから草丈と植被率、スペクトルカメラでNDVIを算出する。経時的に得られた草丈、植被率およびNDVIから、対照区と処理区を比較することで、障害が起きている時期や障害から回復する時期を特定する。また、この試験区は、プロットが小さく生育途中の実測値調査は不可能であるため、最終的な収量調査のみを行う。経時的に得られた観測データからどの時期のどの形質が収量と関連があるかを回帰または重回帰分析により明らかにする。

移植後から幼穂形成期までに5-6回の頻度で、草丈、茎数、葉色を測定する。幼穂形成期、出穂期、成熟期も同様に行った。生育調査の前日にUAVでの空撮から水稲作況試験区の画像データを取得した。また、スペクトルカメラも搭載し、同試験区のNDVIも取得した。画像解析では、植被率を評価するソフトであるEasyPCCをより操作性の良い仕様へバージョンアップした。H30年度に取得した植物画像をもとに、植被率やNDVI値を算出する、さらに、生育量との関係を明らかにしていく。前年度と同様の試験を行い、空撮水稲画像データから生育状況を評価し生育量を算出する。実測値からの生育量と照らし合わせ精度を評価する。複数年度のデータを用いることで、精度を上げられる可能性があるので、31年度のデータを含め、再度変換係数を検討する。除草剤の影響試験の評価も開始する。対照区と除草剤の濃度と散布のタイミングが異なる区を設定する。水稲作況試験区と同様のタイミングで、UAVによる空撮を行い、画像データから草丈と植被率、スペクトルカメラでNDVIを算出する。経時的に得られた草丈、植被率およびNDVIから、対照区と処理区を比較することで、障害が起きている時期や障害から回復する時期を特定する。また、この試験区は、プロットが小さく生育途中の実測値調査は不可能であるため、最終的な収量調査のみを行う。経時的に得られた観測データからどの時期のどの形質が収量と関連があるかを回帰または重回帰分析により明らかにする。本年度想定していたその他(役務費)が、所内の支援によって低く抑えられた。今後は、より簡便な画像データの取得を目指し、UAVの保守点検、改良に当てていく。また、画像解析を進めるにあたり、技術補助員を雇用するために人件費を執行していく。
多機能アダプタータンパク質GGAの細胞内小胞輸送における役割

本年度は昨年明らかにしたGGA-GATドメインとユビキチンとの結合様式をより詳細に調べるために、高エネルギー加速器研究機構の若槻壮市先生、名古屋市立大学の加藤晃一先生らの研究室とともにC-GATドメインとユビキチンとの三次元構造を決定した。まず若槻研究室におけるX線結晶構造解析により、C-GATドメインのN末端側とユビキチンとの複合体の構造を決定した。しかし、C-GATのN末端側とユビキチンが結合するという構造は以前私が変異体解析により同定したC-GATのC末端側がユビキチンとの結合サイトになるという結果とは異なっていた。結晶ではC-GATのC末端側に関してはC-GAT同士のダイマー形成に関与しており、ユビキチンとは結合していないが、C-GATのダイマー形成は溶液中では起こっておらず、おそらく結晶化時のアーティファクトと思われる。そこでC-GATのN末端側およびC末端側にそれぞれ変異を入れた変異体、および両方に変異を入れた変異体を作成し、pull down解析およびBIACOREを用いた定量的な結合実験を行ったところ、いずれも一カ所の変異でも結合能あるいは最大結合量が落ちるが、両方に変異を入れた変異体でさらに結合能が下がることがわかった。この結果からC-GATドメインは二カ所でユビキチンと結合していることが示唆された。GATのC末端側とユビキチンとの複合体の構造が依然はっきりしなかったため、加藤晃一先生との共同研究によりNMRによる解析を行った。NMRでも溶液中でC-GATは二ヶ所でユビキチンと結合することが確認でき、またC-GATのN末端側に変異を入れた変異体とユビキチンとの結合様式を調べることにより、C-GATのC末端側とユビキチンとの結合様式を調べることができた。この結果以前私が同定したユビキチンとの結合に重要なC-GATのC末端側の残基が重要な働きをすることが、NMR解析においてもあきらかとなった。GGA(Golgi-localizing, gamma-adaptin ear homology, ADP-ribosylation factor binding protein)はTGN(trans-golgi-network)からエンドソームへの小胞輸送に関与するコートタンパク質である。本研究により、GGAはin vivoでユビキチンと結合し、GGA中のGATドメインでユビキチンと結合できることが明らかとなった。ユビキチンは膜タンパク質の選別シグナルとして機能することが明らかとなっており、GGAもユビキチン化タンパク質の輸送に機能する可能性がある。GGAのGATにはGGAをTGN膜へと結合させる活性型のARF(ADP-ribosylation factor)も結合するが、ユビキチンはGAT中のARFとの結合とは異なる領域(C末端側:C-GAT)で結合し、さらに活性型ARF存在下でGGAとユビキチンとの結合が強くなることが明らかとなった。このことはGGAがARFと結合してTGN膜へ結合した時にユビキチン化タンパク質との結合も強くなっている可能性を示唆する。さらに本研究では結合阻害実験に用いるため、リバースtwo-hybridスクリーニングを行ない、ユビキチンと結合しないGGAのGATドメインを同定した。共同研究によりGATドメインの立体構造から予測されるユビキチンとの結合表面に存在しているアミノ酸を同定し、GATドメインとユビキチンとの詳細な結合様式を明らかにした。GGAはそれ自身ユビキチン化もされるが、ユビキチンと結合できないGGAはユビキチン化もされず、ユビキチン化とユビキチンとの結合には密接な関係があることが示唆された。この結果以前私が同定したユビキチンとの結合に重要なC-
解剖学的知識と3次元動画像処理技術を用いた表情認識システムの研究

研究実施計画に基づき、今年度は以下の方法で試作システムを構築し以下の成果を得た。1表情認識部の構築:前年度に構薬された、顔面外部の形状から顔面内部の形状を算出し特徴パラメータを抽出するプログラムを用いて、表情を識別するための空間を構築した。さらに、構築された空間に分布しているデータに基づき各表情を認識するためのプログラムを作成した。2実験および検証:10名の被写体に対し、まず基本表情の変化を行わせて撮影された動画像を用いて認識基礎実験を行った.喜び、悲しみ、怒りなどの基本表情変化の認識が行えた。さらに、基本表情を組み合わせて表出された表情と意識的・無意識的に表出された表情変化の認識も行った。表情がはっきり表出されている場合は、顔面の3次元形状の計測結果が正しく行われ、筋肉の変形量が正しく求められるため、正しく表情認識が行えた。特に笑顔については、意識的な笑顔と無意識的な笑顔の判別が、眼と口の周辺形状の時間変化のみから、的確に行うことができた。3応用システムの設計:これまでの研究成果を踏まえ、構築した表情認識システムを、表情変化に対応するインタフェース、セキュリティシステム、顔面リハビリシステム、表情インストラクションシステムなど各種応用に実際に活用できるよう、コンパクトで高速なシステムヘと改良するための方針を検討した。具体的な応用として、表情認識用の基本形状モデル構築システムや、モデルを用いた表情解析システム、及び、人間の意識に追従するシステムなどのシステムの仕様を設計した。これらの構築は今後の研究課題となる。以下の順で研究を行った。1試作システム全体の設計顔面動画像の入力から表情認識を行い結果を出力するまでの一連のシステムの設計を行った。2顔面動画像入力装置の製作人物表情解析用計算機、ビデオカメラ、ビデオボードおよび可視光源を組み合わせ顔面動画像入力装置の製作を行った。3顔面動画像処理プログラムの作成ビデオカメラにより得られたフレームから、顔面の動画像を入力し、前処理(雑音除去、顔領域特定など)を行うためのプログラムを人、物表情解析用計算機上で作成した。4顔面内部形状変化算出部と特徴パラメータ抽出部の構築顔面外部の形状から、顔面内部の形状を算出するプログラムを作成した。ここでは、復顔の分野で活用されている顔面の物理的データを用い、各瞬間における顔面筋肉の収縮による動きを分類した。次に、顔面内部の筋肉収縮量と顔面外部の目・口・眉などの構成要素の表面形状の変化から、解剖学的知識を用い、表情を識別するために有用な特徴パラメータの抽出を行うプログラムを考案し作成した。構成要素の表面形状の変化を追跡するために、新たに個人の顔構成要素の形状に適合したデフォーマブルテンプレートを用いた手法を考案し、実装した。
変分法による非線形楕円型方程式の固有値問題の研究

1.(1)ここ数年の我々の研究により、2つの固有値パラメーターを含む非線形微分方程式の固有値の漸近解析に関しては、変分法的アプローチが有力であることが判明している。いくつかのパラメーターを含む非線形楕円型方程式の固有値問題が本来由来するところの、非線形シュレディンガー方程式に関連した固有値問題の固有値、固有関数の漸近解析を中心に研究を進めた。(2)非線形シュレディンガー方程式に関連する、2つのパラメーターa, bを含む固有値問題については、変分法を用いてb=b(a)と表したとき、常微分方程式の手法を援用することにより、aが無限大に近づいたときの詳細な漸近公式を得た。また、この漸近公式に関連した新しい臨界指数の存在を明らかにした。(3)(2)で扱った方程式に対しては、異なる変分法の枠組みを適用することにより、(2)とは異なる変分固有値の定式化が可能であるが、この場合に得られた変分固有値の漸近挙動は、(2)で得られたものとは全く異なることが判明した。(4)これらの結果は、2つのパラメーターを含む方程式に関してはいままで知られていなかった。したがって、我々の研究はまさにこの方面における先駆的研究と位置づけることができよう。2.1つの固有値パラメーターを含む非線形固有値問題に対しては、方程式を考える領域が球やドーナツ型の場合、そのパラメーターと、解の2乗ノルムの間に成り立つ、精密な漸近公式を証明する事に成功した。この結果は分岐理論や解の境界層の振る舞いと深く関わっており、今後の我々の研究を進めていく上で、重要な位置を占めるものである。3.非線形楕円型固有値問題と深く関連する楕円型方程式・放物型システムの解及び調和関数の定性的・漸近的性質について成果をあげることに成功した。まず、2つのパラメーターを含む非線形楕円型方程式の固有値問題が本来由来するところの、非線形シュレディンガー方程式及びsine-Gordon方程式に関連した固有値問題の固有値、固有関数の漸近解析に焦点を絞って研究を進めた。(2)非線形シュレディンガー方程式に関連する、2つのパラメーターa,bを含む固有値問題については、変分法を用いてb=b(a)と表したときの、aが無限大に近づいたときの詳細な漸近公式を得た。(3)sine-Gordon方程式に関連する、2つのパラメーターを含む固有値問題の固有関数の漸近解析については、まず、漸近的に内部遷移層が現れるような解をとらえる変分法の枠組みを用いて研究を遂行した。その結果、漸近的に、いくつかの内部遷移層が出現する固有関数が存在することが判明した。さらにその遷移層が現れる場所を特定することに成功した。また、解が漸近的に0に収束するような、変分法の枠組みが存在することも判明した。このことは、この方程式が、特異摂動の見地から考えて、非常に豊かな解の構造を持つことを意味する。2.1つの固有値パラメーターを含む非線形固有値問題に対しては、そのパラメーターと、解の2乗ノルムの間に成り立つ、精密な漸近公式を証明する事に成功した。この結果は、分岐理論と深く関わっており、来年度の我々の研究を進めていく上で、重要な位置を占めるものである。

1.(1)ここ数年の我々の研究により、2つの固有値パラメーターを含む非線形微分方程式の固有値の漸近解析に関しては、変分法的アプローチが有力であることが判明している。いくつかのパラメーターを含む非線形楕円型方程式の固有値問題が本来由来するところの、非線形シュレディンガー方程式に関連した固有値問題の固有値、固有関数の漸近解析を中心に研究を進めた。(2)非線形シュレディンガー方程式に関連する、2つのパラメーターa, bを含む固有値問題については、変分法を用いてb=b(a)と表したとき、常微分方程式の手法を援用することにより、aが無限大に近づいたときの詳細な漸近公式を得た。また、この漸近公式に関連した新しい臨界指数の存在を明らかにした。(3)(2)で扱った方程式に対しては、異なる変分法の枠組みを適用することにより、(2)とは異なる変分固有値の定式化が可能であるが、この場合に得られた変分固有値の漸近挙動は、(2)で得られたものとは全く異なることが判明した。(4)これらの結果は、2つのパラメーターを含む方程式に関してはいままで知られていなかった。したがって、我々の研究はまさにこの方面における先駆的研究と位置づけることができよう。2.1つの固有値パラメーターを含む非線形固有値問題に対しては、方程式を考える領域が球やドーナツ型の場合、そのパラメーターと、解の2乗ノルムの間に成り立つ、精密な漸近公式を証明する事に成功した。この結果は分岐理論や解の境界層の振る舞いと深く関わっており、今後の我々の研究を進めていく上で、重要な位置を占めるものである。3.非線形楕円型固有値問題と深く関連する楕円型方程式・放物型システムの解及び調和関数の定性的・漸近的性質について成果をあげることに成功した。
EPI法拡散強調画像を用いた脾臓病理のMR診断に関する研究-AIDSを中心に-

ヒト免疫不全ウイルス(HIV)感染症の病態は進行する免疫低下・不全である。脾臓などのリンパ組織はHIVの増殖により破壊されることが剖検例の検討より知られている.そこで今年度はHIVの脾臓の破壊の程度をADCで鑑別できないかを検討した。HIV感染者の中で、肝硬変による脾腫やリンパ腫の脾浸潤などを認めない、HIVのみが脾臓の構造改築に関与していると考えられる9症例の脾臓のADCを検討した。これらの症例のADCは0.53±0.42x10^<-3>mm^2/secとばらつきがある結果となったが、1.1x10^<-3>mm^2/secから0.5x10^<-3>mm^2/secのADCであった4症例はその後抗HIV薬により比較的免疫を維持した状態を保っているのに対し、0.2×10^<-3>mm^2/secの1例、0.08x10^<-3>mm^2/secの2例は抗HIV薬による治療を開始したが、治療に反応せず死亡した。3例とも病理解剖されたが全例脾臓は傍皮質のリンパ球激減、リンパ濾胞の萎縮を認めリンパ装置の高度の萎縮を認めた。この所見はリンパ組織の一つである脾臓がHIVにより破壊され、抗HIV療法を開始しても免疫が回復しなかった臨床的事実を裏付けるものと言える。これまでに測定された13例のHIV症例において、正常者と比較すると脾のADC測定値は有意に大きい値を示していた。来年度はさらに症例を蓄積し、脾病変の早期診断の可能性の評価や重症度の診断基準、血中CD値とADC値との相関関係を含めた詳細な検討を行っていく予定である。また肝硬変その他の脾腫を主症状とする疾患との鑑別診断基準の作成を予定している。臨床MRI装置ではb値を十分に高くすることができないので、正確なADC値測定は困難であり、現に今回測定されたアセトン溶液のADC値は報告されている値より小さいものとなっている。来年度はb値を上昇させることを含め、ファントム実験より正確なADC値の測定法の検討を進めていく予定である。
老年期に脊髄損傷を負った体験者の抱く希望

脊髄損傷を負った高齢者の体験を記述し,体験者が自身の体験をどのように意味づけ,また,体験者にとっての希望とはどのようなものかを探求することを目的に,受傷後6ヶ月以上経過し,受傷時の年齢が60歳以上の脊髄損傷者を対象として半構成的面接インタビューを行った。今年度は,1名の協力者が得られ,昨年度の3名と合わせて4名の研究協力者について,各々の語りを逐語録にし,意味のまとまりを整理しながら個々のストーリを構成し,希望に焦点をあてた分析・解釈を行った。その結果,"受傷前の生活に近づく"という思いでさまざまな活動に精力的に取り組む協力者もいれば,"家族に負担をかけない""現状維持"という姿勢で今を過ごしている協力者もいた。後者のような態度は,筆者が以前に青年期や壮年期を対象に調査した結果には顕著に表れておらず,高齢者の特徴と思われた。しかし,障害への対処方法や身体的・精神的苦痛を乗り越える希望の核となるものは,個々で異なり,それらは体験者の性格特性や生活史と深く結びついていることが解った。このことから,脊髄損傷者の希望を支えるための方策として,看護者は体験者のライフストーリーに着目することが重要と考える。また,受傷から現在に至るプロセスの中で,希望を見出したり維持していくことに関係する要因として,身体的状況,リハビリの成果,自分の扱われ方,他患者の存在,自分の居場所,家族の存在が考えられた。これらの要因は,体験者の希望を見出したり維持していくことに,プラス要因にもマイナス要因にもなり得る。看護者は,各々にとってのプラス要因とマイナス要因を見極め,マイナスをプラスに転じるような関わりをしていくことが必要と思われる。今後は,結果の分析をさらに深め,学会報告および論文投稿を予定している。平成19年3月現在は、データ収集の最中であり、研究の結果は得られていないため、研究経過について以下に報告する。1.研究を開始するにあたり、6月に本学の倫理審査を受けた。審査では、内容の表現について一部訂正を求められたのみで、承認を得ることができた。審査を受けることで、研究協力者に複数回インタビューする必要性についての説明が不十分であることが分かった。報告の際は、この点について説明を加える必要がある。2.協力施設への研究依頼は7月に行った。本研究では、今後高年齢層の脊髄損傷者が増加すると予測し、研究対象者を介護保険サービスの利用が可能となる『65歳以上に受傷した人』とした。しかし、実際協力施設の状況をみると、65歳以上で条件を満たすような方は少なく、必要なデータを得るには、対象を60歳以上にすることが妥当と考えられ、そのように修正した。新宮(2002)のデータにおいて、脊髄損傷の受傷年齢のピークは60歳であることからも、対象者の選定基準を65歳から60歳に下げることが妥当と考えられた。3.平成19年度3月時点でインタビューを行えたのは3名であり、8月9月に1人目、10月12月に2人目、2月3月に3人目のインタビューを行った。インタビューは1回60分を5回程度という目安で計画したが、実際は、会話の流れから2時間近く行うこともあった。インタビューの継続についてはその都度協力者と確認をし、インタビュー途中での辞退者はなく、3名ともインタビューを終了している。しかし、研究協力者に対し、インタビューをまとめたもののフィードバックと内容確認ができておらず、現在その作業を進めている。参考文献:新宮彦助(2002):特集/脊髄損傷リハビリテーション実践マニュアル2.歴史的考察と疫学,MedReha(22),4-6.脊髄損傷を負った高齢者の体験を記述し,体験者が自身の体験をどのように意味づけ,また,体験者にとっての希望とはどのようなものかを探求することを目的に,受傷後6ヶ月以上経過し,受傷時の年齢が60歳以上の脊髄損傷者を対象として半構成的面接インタビューを行った。
ＡＰＯＢＥＣ３の生体内における機能とＨＩＶ－１感染病態に及ぼす影響の解明

2.免疫不全マウスモデルを用いたin vivo感染系を用いて、HIV-1のin vivoでの複製プロファイル、および変異導入パターンを検討した。in vivoにおいてAPOBEC3Gはより強力な抗HIV活性を示すこと、一方APOBEC3Fは、ウイルスの適応進化に寄与していることを見出した。本研究の目的は.APOBEC3蛋白群が、実際in vivoにおいてHIV-1感染症の病態進行やAIDS発症にどのような影響を与えているかを明らかにし、その臨床的な意義、さらにはそれらを標的とする新規治療開発の理論的背景を提供することである。具体的に下記の5項目を中心として研究を進めた。1.初代培養細胞を用いたAPOBEC3蛋白群の発現とHIV-1複製解析2.初代培養細胞を用いたAPOBEC3遺伝子群のSNPsとHIV-1複製解析3.HIV-1感染患者よりの初代培養細胞を用いた解析4.免疫不全マウスモデルを用いた解析5.次世代シークエンサーを用いたHIV-1への変異導入・蓄積過程の解析1.2に関して、30人のHIV-1非感染ドナーから検体を採取し、qPCR法により各種APOBEC3の発現量、及びPCR法によりAPOBEC3B遺伝子の欠失を検討した。結果、5人がホモ欠失、13人がヘテロ欠失であった。qPCRではホモ欠失の検体ではAPOBEC3Bの発現が認められなかったが、他のAPOBEC3遺伝子の発現はAPOBEC3B遺伝子がホモで存在している検体と同等であった。APOBEC3Bをホモ欠失している5人のCD4陽性T細胞を用いた感染実験では、p24のピーク値が正常検体より約50%程度高い傾向を示したが、有意な差ではなかった。また、ウイルスの感染性についても約30%程度高かったが、優位な差ではなかった。また、4に関する実験の継続(J Virol 84:9546,2010)、および、5の実験準備を行った。1.初代培養細胞を用いたAPOBEC3遺伝子群のSNPsとHIV-1複製解析初代培養細胞における各種APOBEC3の発現解析を行った。APOBEC3B欠損ホモ接合体の健常人の初代培養細胞を用いた感染実験を行い、ウイルスの増殖に差がないことを示した。2. HIV-1感染患者よりの初代培養細胞を用いた解析感染者コホートを用いて、APOBEC3BのSNPs解析を行った。HIV感染者と非感染健常人においては、欠損ヘテロ並びにホモ接合体の頻度に相違は認められず、HIV-1感染におけるAPOBEC3Bの遺伝子多型の影響は見られなかった。3.免疫不全マウスモデルを用いた解析臍帯血を移植したNOGマウスへのHIV-1感染系を用いて、HIV-1のin vivoでの複製プロファイル、およびシークエンスによる変異導入パターンを検討した。本年度は、Vifの変異体を用いることで、APOBEC3G、およびAPOBEC3Fのみ影響をin vivoで検出可能な系を用いた解析を遂行し、in vivoにおいてAPOBEC3Gはより強力な抗HIV活性を示すこと、一方APOBEC3Fは、ウイルスの適応進化に寄与していることを見出した。2. HIV-1感染患者よりの初代培養細胞を用いた解析感染者コホートを用いた、APOBEC3B欠損ホモ接合体の病態進行の統計学的解析を行った。計画した5つの実験項目のうち、1,2,4に関しては、おおむね順調に進展している。5も準備中である。25年度が最終年度であるため、記入しない。各検討項目に関して、研究結果をえることができ、ほぼ、当初の計画通りの進捗状況である。今後は、マウスモデル、および患者検体を用いた解析を、次世代シークエンサーを中心として進めていきたい。1.免疫不全マウスモデルを用いた解析臍帯血を移植したNOGマウスへのHIV-1感染系を用いて、各種Vif変異体を有するHIV-1の感染実験により、in vivoでの複製プロファイル、およびシークエンスによる変異導入パターンをより詳細に検討し、in vivoにおけるVifの役割を明らかにする。2.次世代シークエンサーを用いたHIV-1への変異導入・蓄積過程の解析患者検体を用いて、in vivoにおける変異導入を検討する。
重症アレルギー性結膜炎におけるスーパー抗原の関与

結膜炎を伴わないアトピー性皮膚炎患者および、アトピー性角結膜炎患者の結膜組織、眼脂の培養を行った.それぞれ約1/3の症例で何らかの細菌が培養された.その内、約8割が黄色ブドウ球菌で他に表皮ブドウ球菌、コリネバクテリウムがみられた.自他覚症状をスコア化し、角結膜所見の重症度と培養陽性率の比較を行ったが、両者に相関関係はなかった.湿潤な活動性の眼瞼炎を併発している症例で黄色ブドウ球菌の培養陽性例が多くみられ、角結膜所見よりはむしろ皮膚所見の重症度と細菌感染が関連していると考えられた.涙液中の細菌性スーパー抗原の検出については、患者群では流涙を伴っており充分な検体採取が出来るが、コントロール群で充分な涙液採取が出来ない症例が多く、現時点では結論は出ていない.結膜炎を伴わないアトピー性皮膚炎患者および、アトピー性角結膜炎患者の結膜組織、眼脂の培養を行った.それぞれ約1/3の症例で何らかの細菌が培養された.その内、約8割が黄色ブドウ球菌で他に表皮ブドウ球菌、コリネバクテリウムがみられた.自他覚症状をスコア化し、角結膜所見の重症度と培養陽性率の比較を行ったが、両者に相関関係はなかった.湿潤な活動性の眼瞼炎を併発している症例で黄色ブドウ球菌の培養陽性例が多くみられ、角結膜所見よりはむしろ皮膚所見の重症度と細菌感染が関連していると考えられた.涙液中の細菌性スーパー抗原の検出については、患者群では流涙を伴っており充分な検体採取が出来るが、コントロール群で充分な涙液採取が出来ない症例が多く、現時点では結論は出ていない.
生命倫理分野におけるヨーロッパ人権条約8条の適用可能性と実効性に関する研究

平成30年度の研究では、一方で、ヨーロッパ人権条約8条に関してヨーロッパ人権裁判所に提起された事案のうち、Pretty事件、Haas事件、Koch事件およびGross事件をもとに私生活を尊重される権利と死をめぐる決定との関係について考察し、他方で、Hristozov事件を取り上げ、終末期患者に保障される権利を検討した。第一の点については、8条により、「生命の質について選択する権利および自由な意思に基づいて死期および死ぬ方法を自ら決定する権利」は保障されるが、このことは、直ちに個人に死に対する権利があることを認めることにはならないことを明らかにした。とりわけ上述の4つの事案は、最終的に死に至るかどうかという結果とは別に、死の時期や死ぬ方法に関する選択肢がある中で死について決定できる権利を保障することが重要であることを示している。ここに人権条約8条の意義が認められる。他方で、8条違反が認定された事案では、締約国の義務不履行は認められたものの、違反判決によって当事者の死に関わる希望が叶えられたわけではない。人権裁判所の統制が手続的側面に留まったからである。人権裁判所によれば、これは「補完性の原理」の適用の帰結であり、実体的判断は締約国の義務であるというが、見方を変えれば、こうした人権裁判所の統制のあり方に8条の限界が示されているともいえる。第二の論点については、Hristozov事件の分析から、未医薬品へのアクセスが「生命の質について選択する権利」に関わることを根拠に、8条が保障する「個人の自律」の射程に患者の権利保障も含まれることを導き出した。未承認薬の使用の可否は、当事者の「延命・救命のための治療の方法を決定する自由」に関わる。「生命の質について選択する権利」が、死に至るまでの過程で患者が治療方法を決定する際にも保障されるべき性質のものであることを、この事案も示している。平成28年度は、ヨーロッパ人権裁判所の判例のなかから生命倫理分野にかかわる判例を抽出し研究を行った。第一に、生殖補助医療分野におけるヨーロッパ人権条約8条の適用可能性について、2015年8月27日にヨーロッパ人権裁判所から下されたParrillo対イタリア事件大法廷判決に着目し分析した。同事件では、不妊治療の過程で作成され、そののち移植に使われなくなった余剰胚を研究目的で提供できる可能性を否定するイタリア国内法が、8条が保障する「私生活の尊重」の概念との関係で問題とされたものである。この事案をもとに行った研究から、一方で、これまで人かモノかという視点から考察されることが多かった胚の法的地位について、自己決定権という概念に依拠することで「自己」か「他者」かという視点から捉える可能性が指摘できること、他方で、胚研究に関わる事案では人権裁判所による統制の限界のみならず締約国の国内法のあり方そのものが問われていることを導き出した。研究の成果は、本年7月に刊行される上智法学論集にて発表する(発行確定)。第二に、終末期医療分野における人権条約8条の適用可能性に関して、2015年6月5日に人権裁判所が下したLambertおよびその他対フランス事件判決に着眼した。とりわけこの事案は、人権条約2条の生命に対する権利と同条約8条の私生活の尊重への権利が交錯する複雑な事案であり自己決定権という観点から両者の関係を捉え直す重要な判決であるといえる。研究結果は、今年度中に学会誌等で発表する予定である。裁判所の判例を対象として行う研究であるため、予定外の判決が出されると、そちらを優先的に取り上げざるをえないから。また、大法廷判決等の重要な人権裁判所の判決については国内裁判との関係を考慮する必要があり、想定外の膨大な資料を解析する必要が発生したため(たとえば、Lambertおよびその他対フランス事件)。ヨーロッパ人権裁判所において、これまで余剰胚の利用について正面から争われた事案はなかった。ところが、2015年8月27日のParrillo対イタリア事件判決ではじめてこれが論点とされ注目を浴びた。具体的には、不妊治療の過程で作成され移植に使われなくなった余剰胚を研究のために提供できる可能性を否定するイタリア国内法が、ヨーロッパ人権条約8条との関係で問題とされたものである。この事件を素材として、8条の射程と適用の効果を検証することとし、その結果として以下の分析を導き出した。第一に、胚の法的地位の捉え方に関わる新しい視点である。人権条約8条の私生活の概念に、余剰胚を研究目的で譲渡することまで自己決定権に含まれるかどうかは明確ではなかった。判例の分析により、こうした問題は個人の自律との関連性が強いことが明らかとなった。とくにParrillo事件判決で人権裁判所が示した見解は、これまで人かモノかという視点から考察されることが多かった胚の法的地位について、自己決定権という概念に依拠することで「自己」か「他者」かという視点から捉え直すきっかけを提示した。第二に、生殖補助医療および胚研究に関わる事案における人権裁判所の統制のあり方が指摘できる。Parrillo事件で問題となったような、余剰胚の譲渡の可否の問題は、人の生命の始期を線引きすることと密接な関係にある。これまで人権裁判所は、ヒト胚が人権条約の条文に謳われている《人》に当たるかどうかという問題に答えることはできず、生命の権利の始点の決定は、最終的には各国の立法に委ねられるべきものであると判断してきた。こうした点に鑑みると、Parrillo事件で人権裁判所がヒト胚の研究利用規制について人権条約を根拠として判断することは困難であったといえ、その意味で、Parrillo事件は、人権裁判所の統制の限界を示しているとも考えられる。