hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
エネルギーホメオスタシスに着目した新規パーキンソン病細胞モデルの開発

CHCHD2遺伝子変異の病態生理機能を解析するために、今年度は昨年度未実施であったメチル化解析について新たにデザインしたプライマーを数組作成し検討したが、目的のPCR産物を得ることが出来ず断念した。一方、CHCHD2変異陽性患者iPS細胞からドーパミン細胞へ分化させた試料を用い、ミトコンドリア機能について詳細に解析した結果、酸素消費度の測定からATP合成、最大呼吸がコントロール細胞に比べ有意に低下していることが明らかとなった。さらにATP量とATP合成能を生化学的に解析した結果、いずれもコントロール細胞に比べ有意に低下していた。従って、パーキンソン病の発症原因であるCHCHD2遺伝子変異はミトコンドリアの酸素呼吸障害を引き起こすことが判明した。さらにヒト神経芽細胞腫SH-SY5Y細胞をCRISPE/Cas9システムを用いてCHCHD2ノックアウト細胞を2ライン追加で作成し、昨年までに作成したCHCHD2ノックアウト細胞と表現型の比較を行った。その結果、ATP量、ATP合成能や酸素呼吸は既作成CHCHD2ノックアウト細胞と同様に野生型細胞に比べ有意に低下していた一方、当初作成したノックアウト細胞で亢進していた解糖系も低下傾向であった。さらに既作成ノックアウト細胞はミトコンドリア呼吸差複合体の構成タンパクであるMTCO2が減少したが、新規作成細胞はMTCO2は不変でCOA4が減少していた。いずれのタンパクも複合体IVに関与するため、CHCHD2は複合体IVの機能調節に関与していることが明らかとなった。CHCHD2 T61I変異陽性パーキンソン病患者皮膚から樹立したiPS細胞とiPS-Nu細胞についてRT-qPCR法およびウエスタンブロット法でCHCHD2の発現を検討した結果、コントロールiPS細胞およびコントロールiPS-Nu細胞ではCHCHD2の発現が確認されたが、CHCHD2 T61I変異をもつパーキンソン病患者iPS細胞およびiPS-Nu細胞ではmRNAレベルおよびタンパクレベルでCHCHD2は発現していないことが明らかになった。CHCHD2変異を原因とする家族性パーキンソン病は優性遺伝性であるので、野生型のアレルが1コピー存在するにも関わらず機能喪失型の病態を呈する可能性が高い。CHCHD2の機能喪失によってどのような細胞内外の変化が生じるか検討するためにCHCHD2-KO SH-SY5Y細胞をもちいてメタボロミクス解析を実施した。その結果、KO細胞においてATPの減少および乳酸の増加、TCAサイクルの異常やウレアサイクルの異常などを見出した。CHCHD2の発現を抑制すると複合体IVの機能低下が生じることが報告されており、メタボロミクス解析におけるKO細胞の表現型は複合体IVの機能低下を反映していることが示唆された。本年度の研究費の大半は外注によるメタボロミクス解析の実施で消費したため、当初初年度に計画していたCHCHD2と結合する分子の解析に着手することができなかった。しかしながら、最終年度に計画していたCHCHD2変異陽性パーキンソン病患者から樹立したiPS細胞の解析を前倒しして着手することができ、その成果からCHCHD2変異の病態は優性遺伝性パーキンソン病であるにも関わらず機能喪失型であることが明らかになった。したがって今後本研究で作製したCHCHD2-KO SH-SY5Y細胞を詳細に解析することでCHCHD2変異パーキンソン病の病態を解明可能なことが示唆された。メタボロミクス解析では多くの知見を同時に得ることができるため、個々の現象についての検証に時間を要したが、メタボロミクス解析の結果は総じてCHCHD2遺伝子欠損による複合体IVの機能低下に起因することが示唆され、CHCHD2変異の病態生理は複合体IVとCHCHD2の関連を詳細に解析することで解明可能であると考えられた。上記理由から、研究計画の前後はあるものの、CHCHD2遺伝子変異によるパーキンソン病病態解明モデル開発という本研究課題の目的を達成するための解析および成果についての進捗はおおむね順調に進展していると考えられる。昨年度までの研究結果からCHCHD2変異陽性パーキンソン病患者から樹立したiPS細胞やそのiPS細胞から分化させたドーパミン神経細胞はCHCHD2の発現量が著しく低下していることが明らかになっている。そこで本年度はiPS細胞におけるCHCHD2発現に注目して検討した。iPS細胞からドーパミン神経細胞に分化誘導する各段階でのCHCHD2発現量をウエスタンブロット法とqPCR法で解析したところ、未分化状態のiPSではCHCHD2の発現は非常に低く、神経前駆細胞であるニューロスフィアでは高発現、ドーパミン神経細胞では中等度発現することが明らかとなった。いずれの段階でもCHCHD2変異陽性患者由来細胞はCHCHD2の発現がほとんど無かった。一方SH-SY5Y細胞はレチノイン酸処理によって成熟ニューロン様の神経細胞に分化することが知られている。SH-SY5Y細胞とSH-SY5Y CHCHD2ノックアウト細胞へレチノイン酸を添加し分化の進行度を各種神経マーカータンパク質についてウエスタンブロット法で観察した。その結果、SH-SY5Y細胞は成熟神経細胞マーカーであるSynaptophysinが高発現しており、レチノイン酸処理によって成熟ニューロン様の神経細胞に分化したことが確認された。一方CHCHD2ノックアウト細胞はSynaptophysinの発現がほとんど無く、レチノイン酸処理によって成熟ニューロン様の神経細胞に分化できないことが明らかとなった。また本年度はCRISPE/Cas9システムによってCHCHD2ノックアウト細胞を新たに1ライン作成した。

これによってこれまでCHCHD2ノックアウト細胞で得られた知見の再現性を確認することが可能となった。本年度はCHCHD2変異による病態機能解析として神経分化とCHCHD2発現量の関係をiPS細胞と培養細胞モデルを使って詳細に解析することができた。CHCHD2が高発現している幹細胞は神経細胞に分化しやすいという報告もあり、これを裏付ける結果を得ることができた。さらに成熟した神経細胞よりも未熟な神経細胞でCHCHD2が高発現しているという新たな知見を得ることができた。この表現系を指標に各種薬剤スクリーニングなどが可能となった。しかしながら、CHCHD2に変異があるとなぜCHCHD2の発現低下を引き起こすかという問題については昨年度の報告書に記載した計画どおり、iPS細胞から分化させたドーパミン神経細胞からゲノムDNAを抽出しバイサルファイトシーケンス法によるメチル化解析を実施したが、実験条件の設定を完了できず、実際の解析に着手できなかった。その一方で、CRISPE/Cas9システムによってCHCHD2ノックアウト細胞を新たに1ライン作成でき、CHCHD2ノックアウト細胞の表現型について再現性を確認しつつ推進することが可能となったことは大きな成果である。以上の理由から計画通りに進んでいない課題もあるものの、全体としては概ね順調に進展していると考えられる。CHCHD2遺伝子変異の病態生理機能を解析するために、今年度は昨年度未実施であったメチル化解析について新たにデザインしたプライマーを数組作成し検討したが、目的のPCR産物を得ることが出来ず断念した。一方、CHCHD2変異陽性患者iPS細胞からドーパミン細胞へ分化させた試料を用い、ミトコンドリア機能について詳細に解析した結果、酸素消費度の測定からATP合成、最大呼吸がコントロール細胞に比べ有意に低下していることが明らかとなった。さらにATP量とATP合成能を生化学的に解析した結果、いずれもコントロール細胞に比べ有意に低下していた。従って、パーキンソン病の発症原因であるCHCHD2遺伝子変異はミトコンドリアの酸素呼吸障害を引き起こすことが判明した。さらにヒト神経芽細胞腫SH-SY5Y細胞をCRISPE/Cas9システムを用いてCHCHD2ノックアウト細胞を2ライン追加で作成し、昨年までに作成したCHCHD2ノックアウト細胞と表現型の比較を行った。その結果、ATP量、ATP合成能や酸素呼吸は既作成CHCHD2ノックアウト細胞と同様に野生型細胞に比べ有意に低下していた一方、当初作成したノックアウト細胞で亢進していた解糖系も低下傾向であった。さらに既作成ノックアウト細胞はミトコンドリア呼吸差複合体の構成タンパクであるMTCO2が減少したが、新規作成細胞はMTCO2は不変でCOA4が減少していた。
首都圏における民間賃貸住宅の家賃市場及び需給動向の地域構造分析

本研究は、首都圏の民間賃貸住宅の家賃市場と需給動向の地域的な構造をその地域の居住世帯の特性との関連から把握することを目指した。以上の目的のため、国勢調査の500メートルメッシュデータを用いてメッシュ地図の作成を行い、首都圏全体の動向と併せて、個別地域の住宅事情を把握する手法を確立した。国勢調査は、昭和55年、60年、平成3年の三時点を比較した。また、平成元年から7年までの住宅着工統計から市区町村別の民間賃貸住宅の建設戸数及び平均住宅面積の動向を検討した。以下に分析結果の概要をあげる。1.首都圏全体をみると、昭和55年から平成2年にかけて、民間賃貸住宅の立地分布が郊外へ延びる鉄道沿線に沿って外延化していることがわかった。特に、駅から1キロメートル圏内に立地している。民間賃貸住宅の増減に関しては、特に、JR山の手線近辺の都心地域において著しい減少がみられた。特に、1.2階建ての共同住宅が減少している。2.国勢調査のメッシュ単位でのランキングを行い、民間賃貸住宅の密集地域等を割り出して検討を行った。中でも、池袋・大山周辺に民間賃貸住宅が特に密集し、且つ増加が著しいことがわかった。3.住宅着工統計のデータからは、平成元年から平成7年までの時系列変化をみると、全体として民間賃貸住宅の面積水準の上昇がみられる。このなかで、都心部の賃貸住宅の面積は、他の地域に比較して広いが、平成元年から7年にかけて、平均面積は減少している。今後の課題としては、さらに詳細な需給動向の分析を行うとともに、家賃のデータを組み合わせて家賃市場について検討を行いたい。
顔画像の階層的情報処理の脳内メカニズムの解明

マカクザルの下側頭皮質は腹側視覚経路に属し、形態情報について最終段階の処理を行うことで知られている。我々は、顔を視覚刺激とした実験で、サル下側頭皮質の単一ニューロンがまず大まかな分類情報(ヒトかサルか図形か)を処理し、それから詳細な分類情報(個体や表情)を処理していることを明らかにしてきた。本研究では下側頭皮質での顔画像の階層的情報処理の脳内メカニズムを解明することを目的とする。理論的研究ではリカレントモデルに基づいた神経回路が階層的情報処理のメカニズムであると推測してきた。本年度はモデル神経回路を用いたシミュレーションで予測されるニューロン活動の挙動が下側頭皮質において観察できるかどうか調べた。シミュレーションでは視覚刺激の画像情報を低下させた場合、後期の持続的な応答の部分で刺激画像選択性が低下する。その結果、大まかな分類情報は保たれるが詳細な分類情報の量が低下することを予測している。画像情報を低下させる処理として顔を倒立して呈示する方法を用いた。心理学的研究により顔を倒立呈示すると個体同定等の精度が低下することが知られている。そこで複数の個体と表情からなるヒトとサルの顔画像を正立あるいは倒立の状態で呈示し、下側頭皮質のニューロン活動を記録した。注視課題を遂行中のアカゲザル1頭を用いて、90個の単一ニューロンの活動を記録した。テスト画像は400ミリ秒間提示した。39個のニューロンについて顔倒立呈示の影響を調べた。その結果、約2/3のニューロン(26/39)で顔倒立呈示で応答が変化した。情報量解析を行った結果、大まかな分類と詳細な分類ともに情報量が低下したが、詳細な分類情報のほうがより少なくなった。これらの結果は一過性の応答よりも後期の持続的な応答が顔情報を低下させる操作の影響を受けることを示す。リカレントモデルに基づく神経回路が妥当であることを示唆する結果と考えられる。マカクザル下側頭皮質では「顔」画像の呈示に対して応答を示す「顔」応答性ニューロンが発見されている。研究代表者らは、顔を視覚刺激とした実験で、サル側頭葉の単一ニューロンがまずおおまかな分類情報(ヒトかサルか)を処理し、それから詳細な分類情報(個体や表情)を処理していることを明らかにしてきた(Sugase et al., 1999)。また、この時間的なダイナミクスを持った階層的な情報処理を可能にする神経回路をモデル化した(Matsumoto et al., 2005)。本研究では、「顔」関連ニューロン活動の記録・解析から、下側頭皮質で行われる「顔」の情報処理についての計算理論とアルゴリズムを、神経科学的手法で検証する。視覚経路の最終段階にあるといわれる下側頭皮質で、レベルの異なる分類情報(大分類情報および詳細分類情報)が時間をわけて複合してコードされるメカニズムには2つのモデルが提案されている。1つは、下側頭皮質以前の段階で大分類情報と詳細分類情報がそれぞれ並列に処理されるフィードフォワードモデル、もう1つは、下側頭皮質内でのニューロン同士の相互作用の結果として大分類・詳細分類を生成するリカレントモデル、である。この2つの可能性のどちらが妥当かを検証するため、顔を逆さにして呈示する条件で実験を行った。8個の顔に応答するニューロンに対して調べた。うち4個が顔呈示後の平均発火頻度が変化し、正立顔に比べて倒立顔に対する発火頻度が低下することが分かった。この結果は、倒立顔にすることで下側頭皮質が表現する詳細分類情報が低下していることを示唆する。
慢性頭痛に対する認知行動モデルの開発

片頭痛や緊張型頭痛などの慢性頭痛にはストレスが関与することが分かっており,認知行動療法の適用例も少数ながらあるが,効果は一貫しない。これは,現行の頭痛に対する認知行動療法が,どのような要因が最も頭痛症状に対する予測力が高いのかという認知行動モデルに基づいていないという限界のためと考えられる。本研究では,慢性頭痛と関連の認められるうつ病と不安症に関する知見を基盤に,慢性頭痛の症状に対する予測力の高い変数を精査し,認知行動モデルを開発することを目的としている。まず,調査研究を行う前提として,慢性頭痛の種類(片頭痛/緊張型頭痛),頻度,重度を測定する尺度の妥当性を確認する必要がある。慢性頭痛の種別を判定する尺度としてBHS(Brief Headache Screen)と片頭痛スクリーナーというものがある。頻度,重度を測定する尺度としては,MIDAS(Migraine Disability Assessment)とHIT-6(Headache Impact Test)が,それぞれ片頭痛と頭痛一般の重度や頻度を測定する尺度である。これらの妥当性を検討した結果,BHSと片頭痛スクリーナーによる片頭痛のスクリーニングの結果の一致性が高いことがわかった。また,MIDASとHIT-6の項目を合わせた分析の結果,頻度・重度・生活支障度が一因子を形成することが示唆された。また,認知行動的な予測変数としては,うつ病や不安症と関連するものが候補となっているが,その前提として不安と抑うつ症状と,MIDASとHIT-6で測定される頭痛の重症度との関連を見た。その結果,頭痛は抑うつと特異的に関連することが見いだされた。調査は順調に実施できている。上記の因子分析と抑うつ・不安による頭痛の予測に関する成果をまず論文化する作業に取り掛かっている。頭痛の予測要因としては抑うつが重要であることが分かったため,頭痛を予測する認知行動的要因としては,主としてうつ病(抑うつ)の予測要因を中心に,頭痛との関連を検討する予定である。また,BHSと片頭痛スクリーナーを用いて,片頭痛とそうでないタイプ(主として緊張型頭痛)とで,予測変数が異なるのかどうかも検討する。頭痛尺度の妥当性と不安・抑うつとの関連については,論文作成中である。英文校閲を発注するレベルの原稿に至るのが,新年度にずれ込んでしまったため,いくらか研究費が平成31年度にのこったが,順次英文校閲費用を支出したいと考える。上記プレスリリースは複数のwebメディアに紹介されました。
長繊維強化高分子複合材料の精密プレス成形法の研究

長繊維強化高分子複合材料(以下長繊維FRTPと略称する)の精密プレス成形では、成形品精度や強度の向上と異方性の制御が最大の問題とされている。本研究は、上記問題の支配要因がプレス成形中の長繊維FRTPの流動挙動である点に着目し、試作および市販長繊維FRTPの平板圧縮及び後方押出しを行なった場合の繊維の流動挙動、繊維含有率分布、繊維配向およびフローフロントなどに及ぼす材料、成形條件の影響を理論的、実験的に検討し、精密プレス成形に関する基本的知見を与えた。1.繊維含有率の分布成形中の材料の流れを繊維とマトリックスから成る固液混相流として扱い、繊維とマトリックスの分離を表わす理論式を誘導し、これを平板圧縮および後方押出しに適用して実験と対比し、本理論の妥当性を提示した。さらに、成形品内の繊維含有率の分布を数値解析し、成形速度が大きくなると、繊維含有率分布の変化が少くなることなどを明らかにした。2.繊維の配向繊維に作用する流体抵抗と、繊維相互のからみなどに基因する相互拘束力との釣合いから、流れに伴う繊維の配向を求める理論式を誘導した。本理論を平板圧縮に適用して実験と対比してその妥当性を確かめ、配向は成形速度が大きくなるほど顕著となることなどを明らかにした。3.チャージパターンとフローフロント成形型内の材料のフローフロントを、流動に伴う繊維とマトリックスの分離、繊維の配向およびこれらに基因する粘度の変化とその異方性を考慮に入れて解析する方法を提案し、平板圧縮で実験と極めて良く解析が一致することを示した。以上の諸成果は、本研究によりすべて初めて明らかにされたものである。
中性子スピンエコー法よる高分子グラフト鎖のナノスケールダイナミクス

固体表面に片端を固定された高分子鎖はグラクト鎖と呼ばれ、表面摩擦、表面濡れ、コーティングの問題など多くの重要な問題と関係している。しかし、グラクト鎖ダイナミクスは表面摩擦や選択吸着等外場応答に大きな役目を果たしているにもかかわらず、その研究は進んでいない。本研究ではナノメートルスケールのダイナミクスを直接観測することができる中性子スピンエコー法を用いて、高分子ミセルのコロナ鎖のダイナミクスを調べた。試料としてはスチレン(重水素化物)-ブタジエンジブロック共重合体及びスチレン(重水素化物)-イソプレンジブロック共重合体が選択溶媒である重水素化デカン中で形成する高分子ミセルを用いた。溶媒の散乱長が高分子ミセルのコアにほぼ一致しているため、本実験ではコロナ部分の鎖の運動が主に観測される。スチレン(重水素化物)-ブタジエンジブロック共重合体では一本鎖の運動ジムモード観測されたものに対して、スチレン(重水素化物)-イソプレンジブロック共重合体では高分子鎖の共同運動である呼吸モードが観測された。二つのミセルの表面グラフト密度に大差がないことより、この原因は溶媒との相互作用を表す第2ビリアル係数がポリブタジエンとポリイソプレンで大きく相違しているためであると考えられる。さらに、高分子ゲルのナノスケールダイナミクスについても中性子スピンエコー法を用いて調べた。今年度は,ポリブタジエンと重水素化ポリスチレンのジブロック共重合体が選択溶媒中で形成する高分子ミセルについて小角中性子散乱と中性子スピンエコー法を用いてその形状とダイナミクスを調べた。溶媒に重水素化デカンを用いることにより、コロナ部分にコントラストを付けて測定をした。まず、孤立ミルの形状を明らかにするために、粒子間干渉が無視できる0.2wt%という低濃度で小角散乱中性子散乱測定を行い、形状因子を解析した。絶対散乱強度の測定からミセルを形成に対するジブロック共重合体の会合数を評価したところ約80であることが分かった。さらにコアシェルモデルを仮定することにより、一切のフィッティングを行わずミセル形状を定量的に再現しうる形状パラメーターを決定した。つぎに、ミセルのダイナミクスを調べたが、以前に測定したポリイソプレンと重水素化ポリスチレンの系に観察された「呼吸モード」は観察されずに、溶液中の高分子鎖の運動を記述するのに用いられるZimmモードが観測された。呼吸運動は何本もの高分子鎖が連係して運動することにより起きる協同運動である。今回測定したポリブタジエンと重水素化ポリスチレンのジブロック共重合体のミセルはその表面の高分子鎖の密度が以前の以前に測定したポリイソプレンと重水素化ポリスチレンの系比べで小さいため、協同的な運動ができなくなり、一本鎖の運動を記述するZimmモードが観測されたと考えられる。また、まだ解析が進んでいないが、シリカ微粒子表面にグラフとした高分子鎖についてのスピンエコー測定も行った。
柔軟で機能的なコラボレーションを育むチーム・マネジメントに関する研究

本研究は、「柔軟で機能的なチーム・コラボレーション(チームで的確な情報処理を行い、エラーを防止し、リカバーしあい、創造的に問題を解決するために、メンバーどうしが正確に情報を共有し、各自の努力と行動を柔軟に調整しあって、役割を完遂する協働活動)」を育成するチーム・マネジメントのあり方について、社会心理学的観点から検討を試みた。昨年に引き続き、鉄道運輸企業の協力を得て、ある運転区における昭和63年度から平成14年度までの運転事故発生・対処過程の詳細な記録を入手して内容分析並びにフィールドワークと質問紙調査を実施した。さらに大学病院における看護チームの実態把握およびそこで機能的なチーム・コラボレーションの創発過程について検討した。これらに加えて、昨年実施した、九州一円の特別養護老人福祉施設を対象としてチームによる介護活動の実態を訪ねる質問紙調査の結果分析を進めた。以上のような実証的活動を通して、種々のワークチームに共通するチーム・コラボレーションの阻害要因として、互いに失敗を指摘しあうことの躊躇に代表されるコンフリクト回避型チーム・コミュニケーションの存在を明確した。この他、自己の役割外行動への動機づけを高める変数、チーム・コンピテンシー(チームとしての課題遂行能力および問題解決能力)を促進・阻害する変数、さらには、チームを活気づけるチーム・エンパワーメントに関係の強い変数等、に焦点をあてながら分析を行って明らかにしつつある。現時点における注目すべき結果としては、チーム・レベルのヒューリスティックスとも呼ぶべき集団情報処理のショートカット現象が見いだされている。柔軟で機能的なコラボレーションを育むチーム・マネジメントを考えるうえでチーム・コミュニケーションの特性が鍵を握るものと見て、さらに検討を進めている。(763字)本研究は、「柔軟で機能的なチーム・コラボレーション(チームで的確な情報処理を行い、エラーを防止し、リカバーしあい、創造的に問題を解決するために、メンバーどうしが正確に情報を共有し、各自の努力と行動を柔軟に調整しあって、役割を完遂する協働活動)」を育成するチーム・マネジメントのあり方について、社会心理学的観点から検討を試みた。(763字)本研究は、チームで的確な情報処理を行い、エラーを防止し、リカバーしあい、創造的に問題を解決するために、メンバーどうしが正確に情報を共有し、各自の努力と行動を柔軟に調整しあって、役割を完遂する「柔軟で機能的なチーム・コラボレーション」を育成するチーム・マネジメントのあり方について、社会心理学的観点から検討し、その実現の現実的方略を提言することを目的としている。取り組み初年の本年度は、鉄道運輸企業の協力を得て、職務現場でインタビューを行い、過去の問題発生場面における対処過程の詳細な記録を入手して内容分析を行った。加えて、九州一円の特別養護老人福祉施設を対象としてチームによる介護活動の実態を訪ねる質問紙調査を実施した。これらの実証的活動を通して、「柔軟で機能的なチーム・コラボレーション」が、現実場面でどの程度創発されているのか具体的に把握することに取り組んだ。そのうえで、チームレベルの的確な情報処理の促進・阻害変数、失敗発生状況における相互リカバー行動の促進・阻害変数、お互いの役割分担に関する認識(柔軟か頑固か)と相関の強い変数、チームとしての課題遂行能力および問題解決能力(チーム・コンピテンシー)を促進・阻害する変数、さらには、チームを活気づけるチーム・エンパワーメントに関係の強い変数等、に焦点をあてながら分析を行って明らかにした。分析は継続中であるが、注目すべき結果として、チーム・コミュニケーション過程において集団レベルのヒューリスティックスとも呼ぶべき情報処理のショートカット現象が見いだされている。そのショートカットを効果的な(過誤につながらない)形で活用するシステム作りが、柔軟で機能的なコラボレーションを育むチーム・マネジメントを考えるうえで鍵を握るものと見て、検討を進めている。

さらに大学病院における看護チームの実態把握およびそこで機能的なチーム・コラボレーションの創発過程について検討した。これらに加えて、昨年実施した、九州一円の特別養護老人福祉施設を対象としてチームによる介護活動の実態を訪ねる質問紙調査の結果分析を進めた。以上のような実証的活動を通して、種々のワークチームに共通するチーム・コラボレーションの阻害要因として、互いに失敗を指摘しあうことの躊躇に代表されるコンフリクト回避型チーム・コミュニケーションの存在を明確した。この他、自己の役割外行動への動機づけを高める変数、チーム・コンピテンシー(チームとしての課題遂行能力および問題解決能力)を促進・阻害する変数、さらには、チームを活気づけるチーム・エンパワーメントに関係の強い変数等、に焦点をあてながら分析を行って明らかにした。現時点における注目すべき結果としては、チーム・レベルのヒューリスティックスとも呼ぶべき集団情報処理のショートカット現象が見いだされている。柔軟で機能的なコラボレーションを育むチーム・マネジメントを考えるうえでチーム・コミュニケーションの特性が鍵を握るものと見て詳細な検討を行った。(757字)
聖職者官僚から俗人官僚へ--イギリス

本研究の意図は、ヨ-ロッパにおける国家の近代化の一側面として国王官僚の世俗化あるいは俗人化の過程をイギリスについて追跡することにあった。いいかえると国王行政の分野における聖職者官僚から俗人官僚への比重の移動を検証するということで、そのためにまず『開封勅許状簿』の各巻が精査された。聖職者官僚の調査は予定の水準を超えたが、俗人官僚については相対的に遅れているために、最終年度においても俗人関係の論稿を発表するまでにはいたらなかった。この3年間の主要な成果は、ロンドン聖マルティヌス大聖堂について歴代参事会長の全員に関する経歴検証を終えたことである。同聖堂は富や格付けにおいて司教座聖堂に及ばないが、その参事会員聖職禄は国王官僚の給養財源に利用され、その点では司教座聖堂との比較においても、また他の王立自由礼拝所との比較においてもまさに筆頭格の地位にあった。『開封勅許状簿』の精査によって、M.レダンの記述が吟味され、この大聖堂の参事会長一覧表が修正された。またT.F.タウトはこの大聖堂と納戸庁との特異な関係を指摘していたが、今回の検証では大法官府・財務府などとの関係も解明され、納戸庁だけを特異視することに批判が述べられた。最終年度にいたって司教補佐に関する実態検証を開始した。各種聖堂の参事会長や一般参事会員の聖職禄は、国王官僚の給養財源として広範に利用された。司教補佐職についても同様の実態が推定される。本研究の申請時以降における準備作業の過程で, Public RecordsよりもむしろRolls Seriesを重点的に調査すべきであるとの判断に達し,その判断に基づいて聖職者官僚・俗人官僚の双方に関する基礎カードの作成作業を継続した.またその作業と並行して,ロンドン聖マルティヌス大教会に関する調査を進め,その成果を別記の通り発表した.別記の論文は,同教会の創設から廃止までの全期間をあつかい,歴代参事会長46名全員について国王行政への関与の実態を検証したものである.同教会は「王立自由礼拝所」の一つであり,しかもその代表例である.王立自由礼拝所の参事会長・参事会員に関する人事権は国王にあり,国王はそれらの聖職禄を国王官僚の給養財源として利用しえた.従って王立自由礼拝所の実態解明は,本研究の構想全体のうちで不可欠の一部である.同教会については,古くはM.Reddanの研究があり,また近くはR.Davisの研究がある.しかし歴代参事会長についてレダンの一覧表には不正確な部分があり,今回の調査によって最終的に46名であることが確認されるとともに,在任期間についてもかなりの程度まで明確にしえた.国王行政への関与の実態についてはT.Toutの研究の限界を超えて全期間を展望し,その所見の一部を修正した.タウトの研究は14世紀末までを扱ったもので,同教会と納戸庁との特異な関係が想定されていた.しかし今回の調査では,納戸庁のみならず,国王行政の部門にも広汎な関与を確認しえた.別記論文の(下)はすでに脱稿しているが,刊行は次年度になる.その中では同教会と他の王立自由礼拝所との性格の比較がなされ,同教会が王立自由礼拝所の代表例であることを実証した.本研究の中心課題にそくしていえば、前年度に引き続いて聖職者官僚・俗人官僚の双方について同時並行的に基礎カードの作成作業を継続し、俗人官僚については作業が遅れているものの、聖職者官僚についてはほぼ予定の水準にまで到達した。この作業全般の成果の集約は新年度すなわち本研究の最終年度の課題であり、現時点ではその成果への言及を控えたい。本年度の具体的な成果としては、王立自由礼拝所の"憲法"的側面について別記論文「中世イギリスの『王立自由礼拝所』--J.H.デントンの所説に関する覚書」(上・下)の原稿を完成したことがあげられる。

そのほかに「<再説>ロンドン聖マルティヌス大聖堂--J.H.デントンの所説に関する覚書」の原稿も近く完成の予定である。聖マルティヌス大聖堂が王立自由礼拝所の代表例であることは、昨年度の報告書で指摘の通りであり、またこの報告書では王立自由礼拝所と本研究との関連についても示唆されているので、ここではそれを反復しない。なおデントンの著書とは1970年に刊行されたもので、もはや新しい研究とは見なしえないが、王立自由礼拝所の"憲法"的側面については今日においてもほぼ唯一の文献であり、またわが国ではこれまでほぼ完全に無視されていたものである。デントンの問題関心は、なるほど本研究の意図と明白に異なっている。しかしデントンの著書は本研究にとっても多くの貴重な情報を含んでおり、その情報の整理は不可欠の作業であった。またこれらの情報は単に本研究のみに留まらず、わが国の他の研究者にも有益であろう。デントンの所説の整理・紹介に当っては原史料の参照が不可欠であり、今回の交付金による購入史料はこのためにも有効に利用された。本研究の中心課題にそくしていえば、前年度に引続いて聖職者官僚のみならず俗人官僚についても同時並行的に基礎カ-ドの作成作業を継続し、俗人官僚については作業が遅れているものの、聖職者官僚については予定の水準を超えた。しかし最終年度においても、聖職者から俗人への比重の移動については、当初予定の論稿を集約する段階までにはいたらなかった。最終年度の具体的な成果としては、裏面に記載の4点の論文を発表したことがあげられる。そのうち(5)(6)(7)の3点はいずれも副題に明記の通り“J.H.デントンの所説に関する覚書"でである。何故デントンの所説が問題になるか。その点については前年度の“実績報告書"に記載しているので、ここでは反復しない。さらに最終年度においては(8)「イングランドの“司教補佐"--1300年から1541年まで(上)」を発表した。この3年間の主要な研究対象は、既発表の論稿に限定していえばア)ロンドン聖マルティヌス大聖堂イ)王立自由礼拝所ウ)司教補佐の3年になる。これらが当初の研究課題とどのように関連するかは、別に「研究成果報告書」で詳細に述べた。要点だけを反復するならば、これらの論稿はいずれも聖職者官僚の存立基盤の実態検証を意図したもので、聖職者官僚から俗人官僚への“比重の移動"については、今後あらためて広範な視野から挑戦したい。なお今回の交付金によって所属機関における関係史料の整備が一段と進行し、広範な視野からの再挑戦の可能性が拡大したことを追記しておきたい。
セルロース分解酵素のモーター運動に寄与する構造要素の解明

カビ由来(TrCel6A)とバクテリア由来(CfCel6B)セルラーゼは共に触媒ドメインと吸着ドメインがリンカー領域で繋がった構造をしている。しかしそれぞれのドメインは異なった構造をしている。そこで2つの酵素及び各ドメインの結晶性セルロースに対する吸着速度定数(kon)、脱着速度定数(koff)及び運動速度(ktr)を一分子蛍光観察により比較した。TrCel6Aでは糖鎖修飾されたリンカー領域がkon、吸着ドメインが疎水性面への吸着特異性を生み出す為に重要であった。対してCfCel6Bでは吸着ドメインのみでkonと吸着特異性を生み出していた。まずカビの一種Trichoderma reesei由来のセルロース加水分解酵素(TrCel6A)については全長及び触媒ドメイン又は吸着ドメインとリンカー領域に分割した3種のサンプルのセルロースへの吸着速度、解離速度、運動速度を全反射蛍光顕微鏡を用いて測定した。その結果リンカー領域及び吸着ドメインがセルロースへの吸着に大きな寄与が有る事が明らかとなった。また活性型と不活性化変異体TrCel6Aの運動を比較した所、活性型変異体では遅い運動と速い運動の2種類が観測されたのに対し不活性型変異体では速い運動しか観測されなかった。即ちTrCel6Aは分解を伴ったプロセッシブな運動の他にセルロース表面を拡散している事が分かった。セルロース資化性バクテリアCellulomonas fimi由来のセルロース加水分解酵素(CfCel6B)については顕微鏡観察用の変異体の作成が終了した。V4C, S31C, S288Cの3種を試した結果V4Cが最も生産性が良くかつ活性の低下もない事が確認できた。また触媒ドメインのみと吸着ドメインとリンカー領域に分割した顕微鏡観察用サンプルの作成も完了した。そしてCfCel6Bの触媒ドメインのX線結晶構造を最高分解能1.6 Angstromで解析する事ができた。その結果CfCel6Bでは基質を取り込む側の基質結合サイトにTrCel6Aにはないトリプトファン残基が存在し、より長い基質結合サイトを形成している可能性がある。また加水分解反応を行う活性中心を覆っているループ構造が長く、かつ生成物を排出する側のループ構造も長い事も判明した。これらの構造的性質はセルラーゼがセルロース分子鎖を加水分解しながら運動する際に重要であると言われている為、TrCel6AとCfCel6Bの運動性にどのような違いが有るのかは興味深い。今後作成したCfCel6Bの観察を行い検証を行う。当初の予定通りバクテリア由来セルラーゼCfCel6Bの触媒ドメインのX線結晶構造を明らかにし、カビ由来のTrCel6Aの触媒ドメインとの違いについて構造の観点から明らかにする事ができた。またTrCel6Aの全長、触媒ドメインのみ、吸着ドメイン+リンカー領域の吸着、脱着及び運動速度の解析が終了した。CfCel6Bの顕微鏡観察用の変異体の作成もできており、予定通り性質の解析を行うことができているため。セルロース資化性のカビTrichoderma reesi由来のセルラーゼ(TrCel6A)は触媒ドメインと吸着ドメインがリンカー領域で繋がった構造をしている。そして基質であるセルロース結晶の疎水面から分解を行っていると考えられている。TrCel6Aの一分子観察の結果、セルロースからの脱着に遅い成分と速い成分が有る事が分かった。その割合を基に吸着速度を分割し、それぞれの平衡定数を全長、触媒ドメイン、吸着ドメインとリンカー、吸着ドメインのみで比較した。吸着ドメインは遅い脱着の割合を増加させており、リンカーは吸着速度を上昇させる効果が有るが遅い脱着の割合を減少させていることが分かった。吸着ドメインは疎水性残基が平面を作っており、セルロースの疎水面に特異的に吸着する事が報告されている。またリンカー領域は糖鎖で修飾されており、セルロースの親水面とも相互作用が可能であると考えられる。つまりTrCel6Aは糖鎖修飾されたリンカー領域が最初にセルロースを認識し、吸着ドメインが疎水面への特異性を生み出している事が示唆された。バクテリアcellulomonas fimi由来のセルラーゼCfCel6Bも同様のドメイン構成をしているがリンカー領域は糖鎖修飾されていない。TrCel6Aと同様に全長、触媒ドメイン、吸着ドメインとリンカー、吸着ドメインのみでセルラー巣への吸脱着時定数と平衡定数を解析した。CfCel6Bは吸着ドメインのみで高い吸着速度と疎水面特異性をしめした。これはCfCel6Bの吸着ドメインの疎水性アミノ酸が全てトリプトファンであり、TrCel6Aの吸着ドメインよりも吸着力が強い為と推定された。作成したバクテリア由来CfCel6Bの全長、触媒ドメイン、吸着ドメインのそれぞれのセルロースへの吸着速度(kon)、脱離速度(koff)及び運動速度(ktr)を一分子観察により明らかにする。

それにより吸着、分解運動、脱着の反応素過程での各ドメインの寄与を明らかにする。加えてそれぞれのパラメーターをカビ由来TrCel6Aの物と比較する事で、構造の違いが酵素の性質にどのような違いを生み出しているのか明らかにする。それらのパラメータのうちで他方と比較して分解に有利であると考えられる物が有ればドメイン同士を交換したキメラ酵素を作成しどのような性質となるか検証する。28年度が最終年度であるため、記入しない。酵素学28年度が最終年度であるため、記入しない。
膵炎発症抑制に関与する制御性B細胞の解析と治療応用の検討

制御性B細胞による膵炎の抑制効果について検討した。野生型マウスとB細胞が欠損したIgM欠損マウスにセルレイン/リポポリサッカライドを投与し膵炎の重症度を検討したが、両群に差がみられなかった。制御性B細胞が欠損したCD19欠損マウスでは膵炎が重症化し、野生型マウス由来のインターロイキ10産生B10細胞を膵炎マウスに移入すると膵炎が軽減した。野生型マウスと比較して、CD19欠損マウスではポリI:C投与により自己免疫性膵炎が発症した。以上より、膵炎発症に制御性B細胞が関与しており、制御性B細胞の投与により膵炎発症の抑制が示され膵炎の有効な治療法となりうることが示された。急性膵炎は膵局所の炎症にとどまる軽症例から多臓器不全を合併して致死的となりうる重症例まで、多彩な臨床像を呈する膵臓の急性炎症である。本研究では膵炎発症時における制御性B細胞の動態を検討した。本年度は野生型マウスにセルレインとリポポリサッカライド(LPS)を投与して急性膵炎モデル作製し、脾臓細胞と腹腔内脂肪組織のリンパ球解析を行った。しかし、腹腔内脂肪組織のリンパ球が充分量回収できずフローサイトメータ-による十分な解析結果は得られなかった。LPSがtoll-like receptor (TLR) 2のリガンドであることより、TLR2リガンド(リポタイコ酸、zymosan)単独投与による膵炎発症について検討した。リポタイコ酸ないしzymosanの腹腔内投与で膵炎が発症したが、膵炎発症マウスの脾臓細胞を同系統の免疫不全マウスに移入しても膵炎は発症せず、TLR2刺激による膵炎発症は自己免疫的機序によるものでないことが示された。免疫グロブリンμ鎖欠損C57/6マウスと野生型マウスにセルレイン/LPS投与を行い、血清膵酵素測定と組織学的な膵炎について比較検討を行った、が両群間で膵炎の程度に明らかな差は見られなかった。B細胞欠損マウスでは免疫応答を促進させるB細胞と抑制性B細胞の両者ともが欠損しており、野生型マウスと膵炎の程度に違いがみられない原因と推定された。B細胞欠損マウスを用いたセルレイン/LPS投与による膵炎発症については実験計画通りに順調に進行した。しかし、膵炎モデルマウスの腹腔内脂肪組織中のリンパ球解析については脂肪組織からリンパ球が充分量回収できず、脾臓及び腹腔内脂肪組織の制御性B細胞のフローサイトメーターによる解析が遅れている。急性膵炎は膵局所の炎症にとどまる軽症例から、多臓器不全を合併して致死的となりうる重症例まで多彩な臨床像を呈する疾患である。膵炎発症には膵組織内での消化酵素の活性化による自己消化が主因とされてきたが、近年宿主の免疫反応の関与も提唱されている。本研究では膵炎発症に制御性に作用するB細胞について検討した。本年度はセルレインとリポポリサッカライド(LPS)投与により発症するマウス急性膵炎モデルを用いて、膵炎発症における制御性B細胞の関与について検討した。まず、LPSがtoll-like receptor(TLR)4のリガンドであることより、TLR9リガンド刺激による膵炎発症について検討した。野生型マウス、インターロイキン(IL)10欠損マウスにTLR9リガンドであるCpG-oligodeoxynucleotideを投与すると膵炎が発症し、IL-10欠損マウスでは野生型マウスと比較して低用量で発症したことから、膵炎発症抑制におけるIL-10産生の重要性が示された。次に、CD19欠損マウスにセルレイン/LPSを投与した場合の膵炎重症度について検討した。CD19欠損マウスでは野生型マウスと比較して血清アミラーゼの上昇を伴い組織学的に膵炎の重症化が認められた。CD19欠損マウスに野生型マウスから分離したIL-10を産生するB10細胞を移入した後にセルレイン/LPSを投与すると、非移入群と比較して膵炎の軽減が認められた。以上の結果からセルレイン/LPSにより誘導されるマウス急性膵炎モデルにおいてIL-10産生B細胞が膵炎の軽減に関与することが示された。CD19欠損マウスにセルレイン/LPS投与による膵炎発症の検討は順調に進行した。しかし、マウス脾細胞から分離したB細胞を、LPS、BAFF、IL-21、CD40で刺激してIL-10産生B細胞の誘導を試みたが、目的とするCD5陽性B細胞を十分量回収できず、細胞表面マーカーおよびIL-10産生能の検討とマウス移入後の膵炎発症抑制実験が施行できなかった。急性膵炎は局所の炎症にとどまる軽症例から、多臓器不全を合併して致命的となり得る重症例まで多彩な臨床像を呈する疾患である。これまでの検討では、抗炎症性サイトカインであるインターロイキン10(IL10)欠損マウスをTLRリガンドで刺激すると野生型マウスと比較して膵炎が増悪した。さらに、IL10を産生するB細胞が欠損したCD19欠損マウスにセルレインで膵炎を誘導したところ、野生型マウスと比較して膵炎の増悪が認められた。以上の結果からIL10

産生B細胞の存在が膵炎の軽減に関与することが明らかとなった。本年度は、CD19欠損マウスにTLR3リガンドであるポリI:Cを投与してマウス自己免疫性膵炎の発症について検討した。野生型マウスにポリI:Cを投与しても膵炎は発症しなかったが、CD19欠損マウスにポリI:Cを投与するとIL10欠損マウスにポリI:Cを投与した時と同様の自己抗体産生を伴った膵炎の発症が認められた。RAG2欠損マウスに膵炎発症マウスの脾臓細胞を養子移入すると同様の膵炎が発症したことから、CD19欠損マウスにポリI:Cを投与して誘導される膵炎は自己免疫的機序によるものと考えられた。以上の結果から自己免疫性膵炎発症にIL10産生B細胞が抑制的に作用していることが示唆された。制御性B細胞による膵炎の抑制効果について検討した。野生型マウスとB細胞が欠損したIgM欠損マウスにセルレイン/リポポリサッカライドを投与し膵炎の重症度を検討したが、両群に差がみられなかった。制御性B細胞が欠損したCD19欠損マウスでは膵炎が重症化し、野生型マウス由来のインターロイキ10産生B10細胞を膵炎マウスに移入すると膵炎が軽減した。野生型マウスと比較して、CD19欠損マウスではポリI:C投与により自己免疫性膵炎が発症した。以上より、膵炎発症に制御性B細胞が関与しており、制御性B細胞の投与により膵炎発症の抑制が示され膵炎の有効な治療法となりうることが示された。1.腹腔内脂肪組織からのリンパ球の回収方法を変更して回収できる細胞数を増やし、膵炎マウスにおける制御性B細胞の動態についてフローサイトメーターによる解析を進める。2.CD19(制御性B細胞)欠損マウスにセルレイン/LPSを投与して膵炎マウスを作製し、野生型マウスと膵炎の重症度、膵炎組織および血清サイトカインについて定量的RT-PCRとELISAで比較検討する。3.IL-10とB細胞の2重欠損マウスを作製してpoly I:C投与を行い自己免疫性膵炎を発症させてその重症度を検討する。マウス脾細胞から分離したB細胞の培養で目的とするCD5陽性B細胞を十分量回収できるよう培養条件を検討する。得られたB細胞の表面マーカーおよびIL-10産生能の検討を行い、マウスに移入した後のセルレイン/LPS投与による膵炎発症の抑制効果を検討する。CD19欠損マウスにpoly I:Cを投与した場合の自己免疫性膵炎発症について検討する。さらに、CD19欠損マウスにCD5陽性B細胞の移入を行いpoly I:Cを投与した後の膵炎発症抑制効果について検討する。消化器内科学マウス購入費と染色標本作製料が予定していた金額より少なくて済んだため次年度使用額が生じた。マウス購入費と染色標本作製料が予定していた金額より少なくて済んだため次年度使用額が生じた。1.野生型および遺伝子改変マウスを用いた膵炎モデル作製による動物実験を行うためのマウス購入と膵臓組織の染色標本作製に使用する。2.膵炎マウス血清アミラーゼ測定と血清サイトカイン測定のELISAキット購入に使用する。3.膵臓および腹腔内脂肪組織浸潤リンパ球のフローサイトメトリーに用いる抗体の購入に使用する。野生型および遺伝子改変マウスを用いた膵炎モデル作製の動物実験を行うためのマウス購入・飼育と膵臓組織の染色標本作製に使用する。IL-10産生抑制性B細胞の分離培養とマウス移入後の急性膵炎発症抑制実験に使用する。
ＣＫＤ－ＭＢＤを理解するネオ・ミネラル学の展開

慢性腎臓病(CKD)により腎臓の機能が破綻すると腎臓のリン酸(Pi)排泄能は低下し、高Pi血症を引き起こす。CKDに伴う高Pi血症は異所性石灰化、心血管疾患死亡率上昇のリスクファクターである。近年唾液リン濃度と血中リン濃度の相関や新しい高Pi血症の治療として唾液中のPiを吸着するチューイングガムの有用性が報告されている。しかし、その基礎的根拠は明らかにされていない。本研究では唾液リン濃度は、食事リン濃度と相関し、唾液腺は生体内Pi代謝に関与することを明らかにし、腎臓、小腸に加えて唾液腺という新たなPi代謝臓器連関を示した。慢性腎臓病(Chronic Kidney Disease : CKD)における高リン血症は、血管石灰化に関与することから、CKD患者における生命予後を左右する重大な因子であり、生体内リン管理は特に重要視されている。さらに、近年リン代謝研究は進歩し、新しい概念が登場した。申請者はこれまでアミノ酸やリントランスポーターの同定、およびリン代謝調節研究等を行い、新しいリン代謝の分子基盤確立に貢献してきた。本研究では、リン代謝の新しい調節臓器である唾液腺および脳室に焦点を絞り、新規の高リン血症予防に繋がるコンディショナルノックアウトマウスモデルを確立させ、その全貌を解明する。平成23年度には、遺伝子改変動物作製の準備、測定系などを確立することを目的として行った。これまで、唾液リンの測定は大型動物のみで報告されているが、齧歯類では報告されていなかった。本研究では、ノックアウトマウスを用いるためまず、マウスに非選択的ムスカリン受容体刺激薬を用いた唾液回収系を確立した。さらに、唾液リン濃度は食事リン濃度と正の相関を示す事を明らかにした。唾液腺特異的SLC34A2コンディショナルノックアウトマウスモデル作製については、発現ベクターを構築できた。また、SLC34A2の機能及び、発現に関する重要部位を同定するために変異体作製を行った。また、カルシウム代謝はリン代謝調節機構を考える上、外して考える事はできない。通常血中カルシウムは総カルシウム濃度として測定される事が多い。本年度血液ガス分析装置を購入しイオン化カルシウム測定系を導入することが出来た。今後遺伝子改変動物およびCKDモデル動物等作製予定のモデルマウスを用いて検討する準備ができた。慢性腎臓病(Chronic Kidney Disease:CKD)は骨病変のみならず,血管を含んだ全身の石灰化を介して生命予後に影響することが明らかとなり,近年,全身性疾患としてのCKDに伴う骨ミネラル代謝異常が提唱されている。特に高リン血症は、二次性副甲状腺機能亢進症、骨の繊維化、および血管石灰化に関与することから、CKD患者の生体内リン管理は重要視されており、生体内リン代謝調節系の解明と、より良い対処法が望まれている。近年唾液に含まれるリンが血中リン濃度と相関を示すことが、CKD患者において報告されているが、その基礎的研究及び、そのメカニズムは明らかにされていない。また、脈絡叢はカルシウム、リン調節に近年重要であると考えられている。本研究で申請者は、腎、腸、脳、唾液腺、骨を結ぶリン代謝の新しいクロストーク;ネオ・ミネラル学を展開する目的で検討した。SLC34A2に関する研究;臓器特異的SLC34A2ノックアウトマウスの作製、交配を引き続き、ノックアウト群がそろい次第、解析を行い生体内リン代謝調節機構における、唾液腺の役割、SLC34A2の役割を解析した。またリン代謝調節関連分子(PTHR, FGFR, Klotho他)が唾液腺SLC34A2の調節に関連するか確認した。唾液腺においてのみSLC34A2が欠損することは、通常食において唾液へのリン排泄の増加傾向が認められた。また、FGF23, PTH等における唾液リン濃度への影響は認められなかった。SLC34A3に関する研究は、脳脈絡叢におけるSLC34A3、各リン代謝関連因子の発現局在の再確認を中心に検討した。Klothoは細胞内に認められ、SLC34A3は脈絡叢の脳脊髄液側での局在が認められた。脳室へのリン投与に対するSLC34A3の局在変化は認められなかった。慢性腎臓病(Chronic Kidney Disease:CKD)における高リン血症は、血管石灰化に関与することから、CKD患者における生命予後を左右する重大な因子であり、生体内リン管理は特に重要視されている。

平成24年度は、SLC34A2コンディショナルノックアウトマウスの個体作製(交配)を行った。SLC34a2 flox/+マウスとSLC34a2 flox/+を交配させ、SLC34a2 flox/floxマウスを得た。更にCre-recombinaseマウス(SalivaCre+)と交配しSLC34a2 flox/flox、Cre+マウスを得る事ができたので、タモキシフェン誘導条件を検討する準備が出来た。SLC34A3に関する研究については、SLC34A3KOマウスを用いて脳室へのリン溶液投与を行い、リン代謝に対する応答を解析できた。技術的に訓練が必要である25年度が最終年度であるため、記入しない。おおむね順調であるが、平成23年度において、ターゲッティングベクター作製が遅れていた事に続き、今年度はマウス交配に関して育児放棄他の問題があり、遅れを有した。遅れている点は、マウスを用いた脳脊髄液採取、マウス唾液腺を扱うなど技術的に慣れが必要なところである。対策とし、経験者からの情報を得て、訓練を行う。25年度が最終年度であるため、記入しない。巣材等を考えマウスの育児環境を整え、マウス交配が順調になりつつあることから、今後は群間における匹数をそろえる事ができると考えられる。
磁場構造の進化と太陽フレア

わが国の太陽観測衛星「ようこう」による太陽コロナのX線観測と、中国側の優れた光学観測・磁場観測データの組み合わせにより、フレア爆発のメカニズムを研究することを目的とした。平成8年10月13日10月23日の間、研究代表者・桜井は北京及び南京を訪問し、中国側研究者との研究討論を行い、太陽観測施設を視察したほか、将来の太陽観測装置の動向についても議論した。中国側からは4名の研究者を招聘した。Zhang Hongqi教授(北京天文台)は来日中、磁場と太陽フレアの関係についての研究を行った。1992年2月に現れた活動領域NOAA7070について、この領域が東側の縁にあったときに起こったフレア(リムフレア)と、領域が太陽の前面に出てきた後で起こったフレア(ディスクフレア)の比較から、フレアのX線源の3次元構造について考察した。Fang Cheng教授(南京大学)は、活動領域NOAA7722の1994年5月1619日の観測データ(X線、磁場、Hα)を総合して、比較的穏やかなこの領域のコロナループの物理量とコロナ加熱の関係について考察した。Tang Yuhua助教授(南京大学)は、太陽フィラメントの不安定性に関して、「ようこう」のX線データ、Hα観測、磁場観測を総合して、不安定化の条件について研究を行った。Wang Huaning博士(北京天文台)は、X線画像に見られるコロナループは太さがほぼ一定であるのに対して、磁力線の形は高さと共に広がるはずであるという一見矛盾した事実に注目した。磁場の管の太さは見る方向によって異なるので、計算された磁力線の形から磁束管の太さを計算する手法をまず確立し、次に簡単な解析的モデルを用いて考察を行った。