hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
リポ多糖(LPS)によるマクロファージのアポトーシス誘導機構の研究

本研究の結果、先ず、LPSによるマクロファージのアポトーシスの誘導機構に関して、p38 MAP kinaseの活性化そのものの持続ではなく、この活性化に先立って起こることが知られているp38 MAP kinaseのリン酸化の持続が、アポトーシスの誘導に重要な役割を果たすことが示唆された。マクロファージはLPSによる活性化のシグナル伝達において、p38 MAP kinaseのリン酸化につづいて脱リン酸化が起こり、その脱リン酸化の起こる時間経過にともなってマクロファージは活性化への道を進む。ところが、この脱リン酸化が阻害されてリン酸化型のp38 MAP kinaseが長く核内に局在すると、マクロファージのアポトーシスが誘導されることが示唆された。以上がLPSと共にアポトーシスの誘導に必要な因子であるタンパク合成阻害剤、シクロヘキシミドを添加する時間、ならびに同時添加したLPSとシクロヘキシミドを洗浄する時間を変えた実験によって明らかになった。また、LPS添加初期に起こるシグナル伝達は活性化とアポトーシスで共通であった。LPSの添加後15分以内に進行する経過を分子レベルで詳細に検討するため、血清存在下にLPSを添加して1-15分間加温してから細胞を冷却しながら洗浄し、LPSを除くと同時に血清を除き、その後は血清非存在下で培養してマクロファージの活性化あるいは細胞死の誘導を調べた。その結果、血清存在下ではLPSを1分間、37°Cで処理するだけで活性化もアポトーシスもシグナルが伝わることが示された。また、この初期に起こるシグナル伝達にはTLR4が必要で、さらにCD14の発現量が調節機構に関与することが示唆された。LPSによるマクロファージの活性化シグナルとアポトーシスシグナルの分岐点に関する生化学的研究を行い、以下の知見を得た。まず、マクロファージにLPSを添加後、速やかに活性化されるp38MAPキナーゼ(p38MAPK)が重要な働きをしており、シクロヘキシミド(CHX)を添加するとp38MAPKのリン酸化が持続し、核内にリン酸化されたp38MAPKが蓄積することを見出した。p38MAPKの下流のMAPKAP-2の活性と細胞内におけるhsp27のリン酸化を指標にしてLPS±CHX処理したマクロファージにおけるp38MAPKのリン酸化カスケードの流れを検証した結果、アポトーシスが起こるためには(1)p38MAPKのリン酸化がLPS添加後15分以降も持続すること、(2)p38MAPKの情報が下流のキナーゼに充分に伝達されずに阻害されることが必須であることを見出した。さらに、p38MAPKの特異的な阻害剤のSB202190を添加すると、単独では細胞死を誘導しないがLPSと共存させるとアポトーシスを誘導することを見出し、この実験からもマクロファージのLPSシグナル伝達系をp38MAPKで阻害することが細胞死と活性化とを区別する重要な鍵を握ることが示唆された。また、LPSに応答性(C3H/HeN)および不応答性(C3H/HeJ)のマウス腹腔マクロファージを用いた実験から、前者がLPS+CHX、LPS+SB202190でアポトーシスを起こすが後者が起こさないことが示され、LPSによるアポトーシスの進行がJ774.1マクロファージ系細胞株のLPS感受性の親株JA-4と耐性変異株LPS1916細胞と同様の機構で制御されていることが示唆された。LPSのマクロファージ活性化シグナルとアポトーシスシグナルがどのように異なるのかを、それぞれTNFα産生と細胞障害性による乳酸脱水素酵素(LDH)の細胞外への遊離を指標にして測定した。J774.1マクロファージを血清およびLPSの有無を変えて短時間培養し、直ちに氷冷して細胞を洗浄してLPSを除いた。

その後、血清非存在下でシクロヘキシミドの非存在下または存在下で4時間培養し、活性化および細胞障害性の測定を、それぞれTNFαとLDHの定量によって行った。その結果、血清存在下ではいずれも37°C、1-2.5分間で細胞へのシグナル伝達が起きたが、血清非存在下ではTNFα産生はほとんど見られなかったのに対し、LDH遊離は30分間で有意に上昇し、1時間では血清存在下と同等のレベルに達した。これらの結果は、マクロファージ活性化とアポトーシスには異なるLPSシグナル伝達機構が存在することを示唆する。なお、血清存在下でLPSを1分間処理した後にシクロヘキシミドを添加して血清非存在下に培養して追跡した結果、従来と同様、p38MAPキナーゼのリン酸化の持続が認められた。この結果はアポトーシスにおけるLPSのシグナルは非常に短時間で伝達されることを示す。これと同様の結果がC3H/HeNマウスマクロファージで観察された。また、マクロファージ細胞表面のCD14分子をPI-PLC処理で切断してからLPSに対する応答性を調べた結果、TNFα産生もLDH遊離も血清存在下では有意な低下が認められ、アポトーシスにおけるシグナル伝達が活性化と同様、血清中のLBPなどの可溶性因子とマクロファージ細胞表面のCD14に依存することが示唆された。この結果はJ774.1細胞由来のLPS耐性変異株、LPS1916細胞がCD14の低下とLPSによるアポトーシス抵抗性をもつことに関連すると考えられる。なお、ZnCl2がLPSによるマクロファージのアポトーシスを阻害したがTUNEL陽性細胞の出現を阻害しなかったことから、caspase3の活性化以降の過程で作用することが示唆された。
高信頼性・低電力性を両立する非同期・不揮発メモリベース再構成可能集積回路の開発

本研究では,次世代不揮発メモリの代表である磁気抵抗メモリ(MRAM)技術と、非同期回路技術を基に,専用LSI並みの高信頼・低電力なFPGA(製造後に回路を変更できるLSI)を開発することを目的とする.自動車・通信インフラ・ビッグデータ処理等の高信頼性が重要となる分野に安価なLSIの提供が期待される.様々な応用に対して高性能化を実現するアーキテクチャを考案した.さらに,MRAMと細流度パワーゲーティングを組み合わせたFPGAアーキテクチャを検討した.今年度は,まず,高信頼・高性能・低消費電力なFPGAが必要とされる応用分野の調査とそれに適するFPGAアーキテクチャの検討を行った.自動車,IoTセンサネットワーク応用,高性能計算システムなどに関して調査を行った.自動車分野においても,画像処理をはじめとする様々な知能化が取り入れられてきているため,汎用CPUでは計算が追いつかず,カスタムLSIのニーズがたかまっている.しかしながらコストの面からカスタムLSIを採用するのが容易ではなく,FPGAの活用が望まれている.通常のSRAMベースのFPGAの信頼性は,カスタムLSIと比較して1/10以下であり,特に自動車応用ではエンジンルームなどの過酷な環境で使う場合もあるため,SRAMのソフトに起因する問題が深刻になることがわかった.また高性能計算応用でも,近年FPGAを用いたカスタムスーパーコンピューティングが注目されつつあり,FPGAを大量に用いたサーバーシステムが現実味を帯びている.そのような環境では,FPGAは長時間に渡って正常に動作することが望まれるため、その信頼性が極めて重要になることがわかった.画像処理,高性能計算を始めとする様々な応用に対してFPGAを適用し,適するアーキテクチャを検討し,CPU, GPUなどとの消費電力の比較を行いその優位性を明らかにした.また,GPSシステムなどのIoTセンサシステムにおいて,FPGAの利用可能性を検討し,低消費電力応用に必要な処理・アーキテクチャを整理した.高信頼・高性能・低消費電力なFPGAが必要とされる応用分野と各分野におけるニーズ調査に関しては,自動車関連,IoTセンサー関連,高性能計算・ビッグデータ応用関連など,現在考えうる有力な応用をほぼ網羅していてると言える.また,そのうちの幾つかの応用に関して,具体的な処理アーキテクチャを既存のFPGA上に実装し,消費電力評価を行いアーキテクチャの有用性を確認しており,順調に進んでいると言える.応用の調査,アーキテクチャの実装・評価に関して予想以上に時間が取られたため,不揮発回路の考案に関しては進展が遅れている.今年度は,高信頼・高性能・低消費電力なFPGAが必要とされる応用分野として,人工知能,自然言語処理,数理最適化の調査とそれに適するアーキテクチャの開発を行った.人工知能においてはオンライン学習についても検討を行った.CNN(Convolutional Neural Network)を対象として,転移学習が活用することにより,学習の頻度を必要最小限に抑えることができることに着目し,不揮発メモリを活用することに適したアーキテクチャと回路を考案した.さらに,演算器・ネットワークを小型化するためのアーキテクチャとして語長削減,ネットワーク再構築などに基づくアーキテクチャを導入した.その結果,従来の構成と比較して大幅な小型化が可能となる見積もりを得た.また,数理最適化においては,与えられた条件を満たす符号を発見する組み合わせ最適化問題を対象として設定した.この問題においては,数ヶ月単位といった長期間FPGAで計算することが想定されるため,途中でFPGAまたは制御用のホストに不具合が生じた場合に,その結果が保護され,かつ途中から計算を続けられるチェックポイント機構が必要となる.そのため,効率よくチェックポイントを行うためのアーキテクチャを検討した.提案した手法をFPGAで実装して性能評価を行った結果,従来のCPUでの処理と比較して二桁以上の高性能化を達成できる見通しを得た.また,自然言語処理の応用として,LDA(Latent Dirichlet Allocation)に基づく自然言語処理を設定して,アーキテクチャを考案した.コーパスを依存関係の少ない順番で処理を行うことにより,パイプランン処理に適するアーキテクチャを達成することができた.FPGAで実装して評価することにより,従来のCPUと比較して3倍程度の高速化が達成されることを明らかにした.本研究では,次世代不揮発メモリの代表である磁気抵抗メモリ(MRAM)技術と、非同期回路技術を基に,専用LSI並みの高信頼・低電力なFPGA(製造後に回路を変更できるLSI)を開発することを目的とする.自動車・通信インフラ・ビッグデータ処理等の高信頼性が重要となる分野に安価なLSIの提供が期待される.様々な応用に対して高性能化を実現するアーキテクチャを考案した.さらに,MRAMと細流度パワーゲーティングを組み合わせたFPGAアーキテクチャを検討した.高信頼・高性能・低消費電力なFPGAが必要とされる応用分野と各分野におけるニーズ調査に関しては,重要な応用として宇宙応用や原子力施設関連が残されているため,これらを進める.宇宙応用では宇宙線に起因するソフトエラーが,原子力関連では放射能関連が深刻な問題となるため,その対策を可能とするアーキテクチャ・回路技術を開拓する.また,これらの応用開拓と並行して,不揮発回路に基づく高信頼アーキテクチャの考案に関しては,まずは記憶と論理演算の一体化の観点にフォーカスして進める.情報科学
病原微生物の侵入・攻撃に対するクルマエビ類の免疫応答に関する研究

1.クルマエビの抗菌タンパク質の一種であるクラスチンについて3タイプをクローン化し、構造解析と病原微生物に対する発現応答を調べた。クローン化した3タイプのクラスチンのうち、1タイプはエラで特異的に発現していることが明らかとなった。これら3タイプのクラスチンは恒常的に発現しており、病原微生物の感染により発現が誘導されるものではないことが分かった。2. V. parahaemolyticus EMS/AHPND株の毒素タンパク質を餌に混ぜてクルマエビに投与した際に1-2%のクルマエビは死亡しないで生存し、1タイプのAnti LPS factor (ALF)の発現が優位に上昇していることが明らかにしてきたことから、この生残するクルマエビに通常の餌を投与し、改めてV. parahaemolyticus EMS/AHPND株の毒素タンパク質を餌に混ぜて投与したところ、エビは死亡した。これらの結果より、ALFの遺伝子発現量が多い時はV. parahaemolyticus EMS/AHPND株の毒素タンパク質に抵抗性示す機構がはらき、ALFの遺伝子発現量が多くないときはこの毒素により死亡することが示唆された。3.クルマエビ類のゲノムに存在しているWSSV遺伝子のホモログは複数の染色体に散在していることがクルマエビとバナメイエビの染色体を調べて明らかとなった。複数種類の甲殻類ゲノム解析によりWSSV類似のウイルスは分子進化的な解析によりクルマエビ類が種分化する頃から存在していた可能性が示唆された。これらWSSV遺伝子のホモログ遺伝子は転写されていることもわかり、WSSV感染と関係があることが示唆された。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。V. parahaemolyticus AHPND株が持つ毒素遺伝子を広宿主域プラスミドに組込み、非病原性の株に導入すると、この形質転換非病原性株が病原性株となることを明らかにした。さらに、V. parahaemolyticus AHPND株から毒死遺伝子を欠損させると、病原性がなくなることから、病原性因子はこの毒素のみであることを明らかにした。プラスミドのコピー数と病原性の強さとは関係しないことがわかった。菌体外に毒素をより多く分泌する株のほうがエビに対する病原性が高くなることが明らかとなった。毒素受容体に関する研究では免疫沈降により受容体候補となるタンパク質の単離ができた。さらに、mRNA情報からの探索を可能にするためにクルマエビ消化器系の大規模発現遺伝子配列解析を行い、複数の毒素受容体候補を見つけることができた。(2) WSSV類似遺伝子に関する研究WSSV類似遺伝子についてRNA干渉による機能抑制を行い、WSSVの感染試験を実施することによりWSSV感染に関連する分子の選択を行った。その結果、2種類のWSSV類似遺伝子がWSSV感染と関連している可能性が示唆されたことから、これら2種類の遺伝子機能解析を進めた。RNA干渉法によりc13wsv440の機能を抑制したところ、累積死亡率はコントロール区の累積死亡率とほぼ同様の傾向を示し、c65wsv360_2の機能を抑制した試験区ではコントロール区の累積死亡率に対し有意に抑制された。WSSV感染後3日目のエラにおけるWSSVコピー数はdsc13wsv440接種区、dsGFP接種区およびPBS接種区間で有意な差は見られなかったが、dsc65wsv360_2接種区においては他のどの試験区に対しても有意に少なく、WSSVがc65wsv360_2をサイレンシングしたクルマエビ内でWSSVが増殖していないことが示唆された。(1) EMS/AHPNDの毒素受容体候補タンパク質ならびにmRNA配列を複数得ることができた。EMS/AHPNDの原因細菌感染によるクルマエビの免疫・生体防御応答の解析のためのサンプルを準備することができた。これらの成果は、平成27年度のほぼ計画通りに進んでいる。(2)複数のWSSV類似遺伝子についてRNA干渉による機能抑制を行い、WSSV感染との関連を検討することができた。複数のWSSV類似遺伝子から2種類のWSSV類似遺伝子がWSSV感染に関連していると考えられる結果を得ることができ、詳細に調べることによりそのうちの一つは、WSSVのクルマエビ体内での増殖に重要な因子であることを示唆する結果を得ることができた。1.クルマエビゲノムに存在しているWSSV遺伝子のホモログのWSSV感染・発症との関係解明クルマエビゲノムに存在するWSSV遺伝子のホモログの内、WSSV感染との関与が示唆された遺伝子2種類について組み換えタンパク質を作製し、この組み換えタンパク質に対する抗体をウサギで作製した。作製した抗体を用いてホモログ遺伝子タンパク質のクルマエビ体内での局在を調べたが、目的のタンパク質は検出されなかった。このことからクルマエビゲノムに存在するWSSV遺伝子のホモログからタンパク質は生産されないことが示唆された。このことから、クルマエビゲノムに存在するWSSV遺伝子から転写されるRNAはnon-coding RNAとしてRNA干渉に関与している可能性が示唆された。EMS/AHPND毒素産生V. parahaemolyticusをホルマリンで不活化し餌と混合しバナメイエビに投与したところ25%のエビが生存することがわかった。これら生き残ったエビの遺伝子発現を調べたところ、特異的に発現している遺伝子を見つけることができた。今後、この遺伝子産物がEMS/AHPND毒素の毒素耐性に関与しているかを明らかにする必要がある。毒素受容体の探索を行い、毒素受容体候補を得ることができた。

これら毒受容体候補についても、今後、詳細に解析を進める必要がある。3.病原微生物数の違いによるクルマエビ免疫応答については、抗菌タンパク質でファミリーを形成しているクラスチンについて種々組織で遺伝子発現パターンを比較したところ、クラスチンのタイプにより発現する組織が異なることがわかった。これらの遺伝子発現パターンの違いが病原微生物のタイプによって異なるのか解明する必要がある。クルマエビゲノムに存在しているWSSV遺伝子のホモログのWSSV感染・発症との関係解明については、クルマエビ類のゲノムにWSSVホモログが広く存在し、WSSV感染により発現が変動することを明らかにした。さらに、これら遺伝子はたんぱく質としてではなく、RNAとして昨日している可能性についても見つけることができ、機能解明が順調に進んでいる。V. parahaemolyticus EMS/AHPND株の病原性発揮に必須のクルマエビのタンパク質の機能解析については、毒素耐性エビで特異的に発現する遺伝子を同定し、本感染症の病原性メカニズム解明も順調に進んでいる。以上のことより、本研究は計画通りに順調に進んでいると考えている。1. Vibiro parahaemolyticus EMS/AHPND株産生毒素耐性バナメイエビで特異的に発現する遺伝子:ホルマリンで不活化したV. parahaemolyticusEMS/AHPND株を餌に加えてバナメイエビに給餌した。給餌開始3日以内にほとんどのエビは死亡したが、1回目の給餌試験では200匹中5匹が生残した。2回目の試験では500匹中15匹が生残した。1回目の給餌試験で生残したエビについて次世代シーケンサーで消化器官で発現している遺伝子の網羅的な解析を行ったところAnti LPS因子(ALF)の1つのタイプが有意に遺伝子発現量が高いことがわかった。次いで、2回目の試験で生残したエビについても同じ遺伝子の発現を調べたところ、遺伝子の発現量が有意に高いことが明らかとなった。これらのことから、ALFの1つタイプがEMS/AHPND株が産生する毒素に対する抵抗性に関与していると考えられた。2.クルマエビ類ゲノム中に存在する病原ウイルスWSSVホモログ遺伝子に関する研究:クルマエビ類の多くはゲノム中に病原ウイルスWSSVの遺伝子のホモログがマルチコピーで存在しているが、今回調べた甲殻類にうちテナガエビとヤマトヌマエビはWSSVの遺伝子のホモログが確認されなかった。そこで、バナメイエビ、テナガエビとヤマトヌマエビを用いてWSSVで感染試験(浸漬感染と注射感染)を行ったところ、WSSVに対する感受性がWSSV遺伝子のホモログ遺伝子をゲノムに持つか持たないかで異なることが明らかとなった。これらのことは病原ウイルスWSSVのホモログ遺伝子がWSSV感染に何らかの形で関与していると思われた。3.クルマエビ抗菌タンパク質遺伝子動態:クルマエビのペナエイジンはWSSV感染で発言が減少することが明らかとなった。
うつ病患者-家族支援:eラーニングの教育効果と活用の可能性についての研究

社会問題であるうつ病および自殺者数増加の防止、低減を目指し、その中で現代社会において最も急速に発展を遂げてきているインターネットを利用してのヘルスケア教育の在り方や今後の課題についての知見を得ることを目的とし、うつ病患者に対しアンケート調査を行った。その結果、「不安(70%)」、「落ち込む(70%)」、「不眠(70%)」といったことに悩んでいた。また、うつ病の情報収集にインターネットを利用したいと考えているものは70%であった。平成19年度は,当初アンケート調査の予定であったが,調査施設の関係から計画を変更し,eラーニングシステムの構築とICTを使用した健康教室に対する住民アンケートを行った。1.eラーニングシステムの構築効果的なeラーニングを行うために,独自にeラーニングシステムの構築を行った。eラーニングシステムは,独自のWebサーバー上に,HTMLファイルおよびPHP Scriptで提供するものとした。Webサーバーは開発の簡便性,安定性を考慮し,オペレーティングシステムにはLinuxを採用,サーバープログラムには,Apacheを使用した。サーバーシステムは,以下の4つのサブブロックから構成される。学習者が学習する内容は,学習者の選択と学習者DataBaseおよび教材DataBaseから,PHPによって生成される。学習された内容は,学習者DataBaseに蓄積される。このようなシステム構造により個人毎の学習スピードに合わせた教育が可能となるように設計した。2.ICTを使用した健康教室に対する住民アンケートの実施eラーニングおよびICTを利用した健康教育の是非を問うため,ビデオ教材を使用した遠隔健康教室を実施した。その結果,48人が健康教室に参加し,42人のアンケート回答が得られた。8割以上の住民は,保健事業へのICT導入に賛成であり,実施した遠隔健康教室内容も理解できたと全員が回答していた。また,「映像を見ながら話を聞けるのが分かりやすい。」と,健康教室の中でビデオ教材などのマルチメディアコンテンツを使用することにより理解度が増したとの結果が得らた。社会問題であるうつ病および自殺者数増加の防止,低減を目指し,その中で現代社会において最も急速に発展を遂げてきているインターネットを利用してのヘルスケア教育のあり方や今後の課題についての知見を得ることを目的とし,うつ病患者に対しアンケート調査を行った。アンケートの対象は、精神科外来に受診しているうつ症状のある患者100人とした。アンケートの有効回答率は10%であった。アンケート回収数が少なく分析に耐えうる結果を得られていないため、アンケート結果は参考値として提示する。回答者の属性は、男性30%、女性70%、平均年齢45,9歳であった。精神的に困っていることとして、「不安(70%)」、「落ち込む(70%)」、であった。身体的に困っていることとして、「不眠(70%)」、「食欲がない(60%)」、「体重減少(60%)」、「疲労.倦怠感(60%)」であった。社会的に困っていることとして、「十分に働けない(60%)」、「家事が十分にできない(60%)」であった。次に病気に関して知りたいことは、「薬の効果や副作用(50%)」、「症状と症状の経過(40%)」、「職場復帰の見通し・方法(40%)」であった。最後にインターネットを利用してうつ病についての情報が見られるサイトの利用について尋ねたところ、「とても利用したい(30%)」「少し利用したい(10%)」「あまり利用したくない(0%)」「利用したくない(30%)」「利用したいがパソコンがない、またはインターネットをつなげていない(30%)」と利用したいと考えているものが70%であった。これらの情報をもとにしたeラーニングコースを作成し、公開するための準備として、Moodleを利用したeラーニングシステムの構築を行った。Moodleには、Moodle1. 9. 3を用いた。Moodleを活用することで、利用者の行動をモニターでき、ヘルスケア教育におけるeラーニングの活用可能性を分析することが可能になるものと考える。
ヒト腰椎終板内栄養管網の3次元構造解析

1)昨年度に得られた、ヒト腰椎9体(平均年齢59歳;標準偏差11歳;女性2,男性7)のMRI(3T;T2強調矢状面;FOV=16-20cm;3mmスライス厚;TR=2000ms;TE=90ms;512x512画素)および椎体終板前部・中央部・後部の3箇所より作成された直径4.9 mmの円柱上試験片(計54試験片)のマイクロCT画像より定量化された椎体終板内栄養管3次元微細構造が解析された。2)栄養管3次元微細構造の解析は、島津マイクロフォーカスX線CTシステム(SMX-160CTS;解像度2μm)で撮像された円柱試験片のマイクロCT画像より作成された個々の栄養管3次元モデルを用い、栄養管の直径・長さ・容積・配向の解析により行われた。3)椎体終板より計595本の栄養管3次元モデルが作成された。個々の栄養管の主固有ベクトルと終板試験片表面の法線ベクトルとの角度により、個々の栄養管を終板に対して水平(60-90度)・傾斜(30-60度)・垂直(0-30度)の3つの群に分類して解析を行った。4)栄養管の平均直径は、椎体終板前部で水平64.7μm;傾斜65.7μm;垂直68.0μm、椎体終板中央部で水平55.5μm;傾斜63.3μm;垂直74.7μm、椎体終板後部で水平55.4μm;傾斜55.2μm;垂直48.6μmであり、部位により有意の差が認められた(p<0.001)。椎体終板後部の栄養管の平均直径は、椎体終板前部(p<0.001)、椎体終板中央部(p<0.001)に比べ小さかった。栄養管の直径と長さの積より求められた平均容積の部位別差(p>0.5)および配向による差(p>0.5)は認められなかった。栄養管の配向の分布は部位に関連していた(カイ2乗検定:p<0.01)がMRIによる椎間板変性度(Pfirrmann分類)との関連は認められなかった(カイ2乗検定:p=0.3)。1)ヒト腰椎9体のMRI撮影後、椎体終板後部・中央部・前部の3箇所より直径4.9 mmの円柱上試験片を作成した(計54試験片)。T2強調矢状面MR画像を用いて、椎間板変性度をPfirrmann分類により評価した。2)島津マイクロフォーカスX線CTシステム(SMX-160CTS)を用いて、約2μmの解像度で円柱試験片のCT撮影を行った。試験片の固定には、過去の研究において開発された専用試験片固定治具を用いた。3)マイクロCT画像を3次元再構築し、椎体終板の3次元モデルを作成した。椎体終板の3次元モデルより栄養管を抽出し、2μmの高解像度でヒト腰椎終板栄養管3次元モデルの作成に成功した。この結果、ヒト腰椎終板内では栄養管は3次元ネットワークを形成していることが明らかになった。4)終板栄養管3次元モデルより、さらに個々の栄養管の分離を行った。個々の栄養管のCT3次元モデルよりpoint-cloudsデータを作成し、研究代表者が開発した固有ベクトル解析ソフトウエアを用いて個々の栄養管の3次元配向を定量化した。また、終板試験片表面の法線ベクトルを計算し、個々の栄養管の主固有ベクトルとの角度を計算した。この角度を用いることにより、個々の栄養管を終板に対して垂直・傾斜・水平群の3つの群に分類することが可能になった。また、個々の栄養管の3次元モデルを用いることにより、個々の栄養管の容積・長さ・直径の計測が可能になった。4)栄養管の平均直径は、椎体終板前部で水平64.7μm;傾斜65.7μm;垂直68.0μm、椎体終板中央部で水平55.5μm;傾斜63.3μm;垂直74.7μm、椎体終板後部で水平55.4μm;

傾斜55.2μm;垂直48.6μmであり、部位により有意の差が認められた(p<0.001)。椎体終板後部の栄養管の平均直径は、椎体終板前部(p<0.001)、椎体終板中央部(p<0.001)に比べ小さかった。栄養管の直径と長さの積より求められた平均容積の部位別差(p>0.5)および配向による差(p>0.5)は認められなかった。栄養管の配向の分布は部位に関連していた(カイ2乗検定:p<0.01)がMRIによる椎間板変性度(Pfirrmann分類)との関連は認められなかった(カイ2乗検定:p=0.3)。過去の家兎椎間板終板栄養管の解析に関する研究で研究代表者が開発したマイクロCT撮影法および解析法がヒト椎間板終板栄養管の解析に適応できることが確認された。予定していた4μmの解像度でのマイクロCT撮影よりさらに高解像の2μmの高解像度でマイクロCT撮影が可能になった。予定通り、個々の栄養管の配向・容積・長さ・直径の計測が可能になった。個々の栄養管の配向・容積・長さ・直径値の部位別比較、MR画像で評価された椎間板変性度との関連を解析する。適切に執行した結果、残額が生じた。旅費として使用予定である。
分子軌道-分子力学-粗視化粒子接続法を用いたステンレス鋼の応力腐食割れ解析

本研究では、まず大規模金属系を解析するための、分子軌道法と分割統治法を組み合わせた、拡張半経験分子軌道法の開発を行った。開発した手法により、10000原子以上の系に対し量子化学的解析が可能となった。開発手法を用いて、ステンレス鋼のエネルギー安定性に対する基礎的研究として、鉄単体ランダム粒界、酸素原子を含む鉄系、そして鉄+クロム系の結合力解析を行った。その結果、ランダム粒界は対応粒界に比べて原子間結合力が弱い領域があること、酸素原子を含む鉄系では、酸素原子が挿入されることにより、鉄ー鉄間の原子間結合力が弱くなること、そして鉄+クロム系では、ランダム粒界に位置するクロム近傍で共鳴積分に関与するエネルギーの変化が大きいことから、化学反応が発生しやすい状態となっていることがわかった。本研究の目的は、計算機シミュレーションを用いてステンレス鋼の応力腐食割れ解析を行うことである。PM6半経験分子軌道法について調査した結果、用いる元素種によって計算時間が著しく大きくなり、結果的に扱える原子数が少なくなることがわかった。そこでPM6半経験分子軌道法に分割統治法を組み合わせた新たな手法である拡張半経験分子軌道法を開発し、扱える原子数を大きくすること試みた。拡張半経験分子軌道法を用いた結果、元素種に関わらず扱える原子数が10000原子以上となり、合金系の局所的な電子物性を理解するには十分な領域を確保することができるようになった。研究計画では、取り扱う原子数を大きくするために、半経験分子軌道法と他手法とのハイブリッド化を行う予定であったが、拡張半経験分子軌道法は結果的にこの問題を解決していた。そこで以後は拡張半経験分子軌道法を用いて解析を行うこととした。まずステンレス鋼の応力腐食割れに関する予備検討として、体心立方格子をとる鉄に不純物として酸素が挿入された系について結合エネルギー解析を行った。解析の結果、鉄原子と酸素原子の結合力は著しく強くなる一方で、鉄原子間の結合力は平均値よりも若干弱くなることがわかった。これは酸素原子の侵入が鉄系を脆くする可能性を示唆している。また古典分子動力学法で作成した鉄ランダム粒界系の結合エネルギー解析を行った。解析の結果、ランダム粒界近傍では対応粒界よりも結合力が弱くなる領域があることがわかった。これはランダム粒界が優先的にき裂進展する可能性を示唆しており、これは実験により得られた傾向と一致している。まず、昨年度開発した拡張半経験分子軌道法の適用性評価のため、多原子系への本手法の適用を行った。その結果、シリカグラス系では150,000原子以上、本研究のターゲットである鉄系では10,000原子以上の系に対し量子化学的解析が可能であることを確認した。次に、鉄+クロム2元合金ランダム粒界系に対し本手法を適用し、エネルギー解析を行った。解析した系は、鉄4,386個、クロム962個からなり、鉄単体ランダム粒界系の一部の原子をクロム原子に置き換えることで作成した。しかし、量子解析に用いているソフトウェアMOPACでは鉄-クロム間のクーロン反発エネルギーが正しく得られないことから、本研究では結合に関与するエネルギーの議論として、Hartree-Fock近似での全エネルギーのうち、クーロン反発エネルギーを含まない、共鳴積分に関するエネルギー項を考慮することにした。基準となる体心立方構造の鉄、鉄-クロム系の共鳴積分エネルギー項からの差を見ることで、平衡状態からの量子論的な結合エネルギーの変化を確認することが可能となる。このエネルギーのずれを共鳴積分エネルギー差と呼ぶ。解析の結果、ランダム粒界近傍で共鳴積分エネルギー差が大きくなっていることがわかった。この値が大きいということは量子的に不安定であり、粒界近傍で化学的に活性である可能性があることを示している。しかし、ランダム粒界近傍と共鳴積分エネルギー差の増大との因果関係を明確にすることは出来なかった。
言語と顎発育の充足と侵襲低減をめざした口唇口蓋裂治療体系の開発

北海道大学病院高次口腔医療センターでは二段階口蓋形成術を、当院形成外科ではpushback法を用いたプロトコールによる口唇口蓋裂治療を実施してきた。2施設の咬合関係の成績を比較検討した。二段階群は上顎のcollapseの小さい傾向があることが示された。また、当センターでは二段階口蓋形成手術初回手術に修正を加えFurlow法による軟口蓋閉鎖とともに硬口蓋後方1/2までを閉鎖する術式としその言語成績を検討した。国内他施設における二段階法と比較して術後の鼻咽腔閉鎖機能は良好で異常構音の発現頻度も低かった。初回手術時に硬口蓋の1/2までを閉鎖して未閉鎖部の鼻口腔交通部が狭小化したためと推測された。北海道大学病院高次口腔医療センターでは、言語と顎発育をともに充足させ、しかも手術侵襲をより低減させることをめざして、骨露出創をほとんどつくらない一期的な口蓋形成手術法と下顎外側皮質骨を用いた顎裂骨移植手術法で構成された治療プロトコールを考案した。本研究は、本治療プロトコールの有用性を検証するため、従来からの治療プロトコール症例を対照として用い言語ならびに顎発育の臨床成績を比較検討する。平成24年度は、当センターにおける一期的な口蓋形成手術法について5歳時の歯列模型を用いて咬合状態を検討した。当センターに登録された片側完全唇顎口蓋裂の一次治療症例31例(男児15例,女児16例)である.平均5.2歳において模型採得を行い,5-year-olds' indexとHuddart/Bodenham indexの2つの評価法を用いて乳歯列の咬合評価を行った.その結果,本プロトコールによる治療では,他の国内2施設に比べて将来的に顎矯正手術が必要になると見込まれる症例の割合は最も低く,上顎のcollapseは小さい傾向があった.当センターを含む国内3施設と欧州4施設との比較では,欧州4施設において矯正治療を要しない,もしくは要したとしても簡単な矯正治療で咬合状態が改善すると見込まれる症例の割合は高く,将来的に顎矯正手術が必要になると見込まれる症例の割合は低かった.これは手術方法の違いによる結果というよりは人種差,すなわち長頭型か短頭型かの違いによるものが大きいと考えられ,国際標準の評価法とされる5-year-olds'indexは異人種間の比較には問題のある可能性が推測された.当センターを含む国内3施設間ならびに欧州4施設間で5-year-olds'indexに大きな差はみられなかった。【目的】北海道大学病院高次口腔医療センター(当センター)ではHotz床を用いた術前顎矯正治療と二段階口蓋形成術を組み合わせたプロトコールを用いてきた。一方、当院形成外科(形成)ではHotz床を用いた術前顎矯正治療とPushback法を併用したプロトコールにより、琉球大学医学部附属病院歯科口腔外科(琉大)ではHotz床を用いた術前顎矯正治療と粘膜弁変法を併用したプロトコールにより、それぞれ一貫した口唇口蓋裂治療を実施してきた。これら3施設の異なる一次治療プロトコールにより治療を行った片側完全唇顎口蓋裂症例の咬合関係の成績を比較検討した。【対象と方法】対象は、正期産,合併異常なしの基準を満たす片側完全唇顎口蓋裂とした。当センターでは1995年から登録された連続症例31例で、形成では1995年から登録された連続症例37例、琉大では資料の整っていた15例であった。上下顎の歯列模型を5ーyearーolds' indexとHuddart/Bodenham indexにより評価した。【結果と考察】5ーyearーolds' indeのスコアの平均値に有意差はなかった。スコアの分布に有意差を認めた。Huddart/Bodenham indexのスコアの平均値に有意差はなかったが、major segmentのスコアの平均値において当センターと形成に、またminor segmentのスコアの平均値において当センターと形成、ならびに当センターと琉大に有意差を認めた。当センターは他施設と比べて上顎のcollapseは小さい傾向があった。しかし、両indexのスコアの平均値に有意差がなかったことから、習熟度の高い術者が適切なプロトコールにしたがい治療すれば、口蓋形成術の時期や術式が異なっても比較的良好な結果が得られるのではないかと考えられた。

本研究は、本治療プロトコールの有用性を検証するため、従来からの治療プロトコール症例を対照として用い言語ならびに顎発育の臨床成績を比較検討する。平成23年度は、北海道大学口腔外科において従来より施行してきたFurlow法を用いた二期的口蓋形成術法、これを改良して当センターにて考案した言語と顎発育をともに充足させ、手術侵襲をより低減させるべく骨露出創をほとんどつくらない一期的な口蓋形成手術法、北大形成外科にて施行してきた粘膜骨膜弁剥離によるpushback法を用いた一期的口蓋形成手術法、粘膜弁剥離によるpushback法を用いた一期的な口蓋形成手術法の4群間で、5歳時の歯列模型を用いて咬合状態の評価に着手した。咬合状態の評価法は、簡便かつ高い再現性をもち手術の方法や時期、術者の習熟度などの影響を評価でき、異なる治療法間や他施設間の比較を行う上で国際標準となりつつある5-Year-Old Index、Goslon Yardstick法にて行った。評価は4名で行い、3名は矯正歯科専門医でうち1名は外部評価者、1名は口腔外科専門医で、同一模型に対して日を替えて2回行った。評価者内および評価者間の一致については重み付けKappa統計量にて検定し、一致度は良好な結果が得られた。4群間の有意差について検定中である。当センターの手術侵襲をより低減させるべく骨露出創をほとんどつくらない一期的な口蓋形成手術法、北大形成外科にて施行してきた粘膜骨膜弁剥離によるpushback法を用いた一期的口蓋形成手術法、琉球大学口腔外科の粘膜弁剥離によるpushback法を用いた一期的な口蓋形成手術法の3群について、5-year-olds' indexとHuddart/Bodenham indexの2つの評価法を用いて乳歯列の上下歯列弓関係評価を昨年に実施したが、その解析が途中となっている。研究担当者に加えて琉球大学口腔外科の協力を仰ぐこととしたため、その調整と資料作成に時間を要したため、一同に会しての同時限での咬合評価実施が遅れて年度末近くになってしまった。北海道大学高次口腔医療センターで考案した手術侵襲をより低減させるべく骨露出創をほとんどつくらない一期的な口蓋形成手術法、北大形成外科にて施行してきた粘膜骨膜弁剥離によるpushback法を用いた一期的口蓋形成手術法、琉球大学口腔外科にて施行してきた粘膜弁剥離によるpushback法を用いた一期的な口蓋形成手術法の3群について、5-year-olds' indexとHuddart/Bodenham indexの2つの評価法を用いて乳歯列の上下歯列弓関係の比較解析と4歳時と5歳時における鼻咽腔閉鎖と構音の評価を継続する。結果が得られた部分について論文にまとめる。平成23年度は咬合状態の評価を行ったが、その評価方法として5-Year-Old Index、Goslon Yardstick法を用いた。この方法は簡便かつ高い再現性をもち手術の方法や時期、術者の習熟度などの影響を評価でき、異なる治療法間や他施設間の比較を行う上で国際標準としてほぼ確立した手法であるが、5段階の評価であるため大まかすぎる点、前歯部の前後関係が評価に大きく反映されてcollapse程度があまり反映されないなどの欠点がある。
高齢慢性心不全患者における心臓リハビリテーション中断の影響

本邦において増加の一途である慢性心不全は高齢者の生活の質を著しく低下させ、医療経済の面からも大きな課題である。心臓リハビリテーション(以下心リハ)は慢性心不全患者のQOL向上・運動耐容能改善・再入院予防を達成する。しかし本邦における慢性心不全の監視下心リハは保険制度上短期間しか認められておらず、それ以降は自己管理に委ねられている。われわれは「高齢慢性心不全患者への監視下心リハの中断後は早期に運動耐容能が増悪する。」と仮説を立て、前向き研究を行い心リハ中断が高齢者心不全に及ぼす影響を運動負荷心エコー、呼気ガス分析、血管機能や筋力、BNP、炎症マーカーを含む血液検査等で多面的に評価する。
柔らかい物体のマニピュレーションにおける技量に関する研究

本研究ではまず,柔らかい物体を操作するときの人間の機能的運動を計測・分析するとともに,分析の結果得られた技能的運動をロボットマニピュレータで実現することを試みた.特に,ホ-スの挿入作業における人間の動作を計測し,力覚と運動の関係を分析した.その結果,人間が作業を行なう時,感覚により作業状態を認識し,それぞれの状態に応じた動作を行なうことにより,巧みに作業を進めていることがわかった.ホ-スの挿入作業においては,1)接近状態,接触状態,挿入状態の3つの状態において,異なった動作を行なっている.2)力覚の変化によりそれぞれの状態の遷移を認識している.ということがわかった.さらに.人間の動作軌道をマニピュレータに移植し,状態遷移の認識則の適用に対する可能性を考察した.その結果,人間による作業と同様に,力覚の変化を通して,接触状態から挿入状態への遷移を検知できることが判明し,技能的運動をマニピュレータで実現するための基礎が得られた.次に,柔らかい物体のマニピュレーション過程の力学的解析を行なった.特に,変形しやすい物体を安定に把持するための条件について考察した.物体のポテンシャルエネルギーと,物体に加えられる幾何学的および力学的制約を定式化し,安定把握の条件を解析した結果,安定な把持を維持できる外力の最大値を導出することが可能であることを示した.さらに,その最大許容外力が,初期状態における物体の変形形状に依存することが示された.本研究ではまず,柔らかい物体を操作するときの人間の機能的運動を計測・分析するとともに,分析の結果得られた技能的運動をロボットマニピュレータで実現することを試みた.特に,ホ-スの挿入作業における人間の動作を計測し,力覚と運動の関係を分析した.その結果,人間が作業を行なう時,感覚により作業状態を認識し,それぞれの状態に応じた動作を行なうことにより,巧みに作業を進めていることがわかった.ホ-スの挿入作業においては,1)接近状態,接触状態,挿入状態の3つの状態において,異なった動作を行なっている.2)力覚の変化によりそれぞれの状態の遷移を認識している.ということがわかった.さらに.人間の動作軌道をマニピュレータに移植し,状態遷移の認識則の適用に対する可能性を考察した.その結果,人間による作業と同様に,力覚の変化を通して,接触状態から挿入状態への遷移を検知できることが判明し,技能的運動をマニピュレータで実現するための基礎が得られた.次に,柔らかい物体のマニピュレーション過程の力学的解析を行なった.特に,変形しやすい物体を安定に把持するための条件について考察した.物体のポテンシャルエネルギーと,物体に加えられる幾何学的および力学的制約を定式化し,安定把握の条件を解析した結果,安定な把持を維持できる外力の最大値を導出することが可能であることを示した.さらに,その最大許容外力が,初期状態における物体の変形形状に依存することが示された.
ヒトデ生殖巣刺激物質(GSS)の精製と卵成熟期における放出機構

本研究の過程で、イトマキヒトデ(Asterina pectinifera)のGSSはこれまで部分的に知られていた別種のヒトデ(キヒトデ、Asterias amurensis)のGSS(MW2,100)と比較して分子量がおよそ4,700と大きく異なることが明らかになった。しかしほぼ単一のペプチドまで精製に成功したイトマキヒトデGSSであるが、量的な問題でアミノ酸配列まで決定できなかった。現在出発材料を増やし引き続きGSSの同定に向け実験を進行中である。一方、棘皮動物の特異的神経ペプチド(SALMFamide, S1)の抗体を用いて卵巣・精巣を観察したところ、これら生殖巣表面に神経ネットワーク構造が存在することが明らかになった。神経ネットワーク構造は卵巣・精巣とも基底膜の外側に分布していた。このことは、これまで卵成熟期においてGSSは放射神経から分泌され、体腔液を介して生殖巣に作用していると考えられていたが、卵巣・精巣の表面を囲む神経細胞から直接分泌されそれぞれ濾胞細胞や間細胞に対して1-MeAde生産をうながす可能性を示唆している。さらに、S1ペプチドに放射神経からのGSSの分泌を抑制する働きがあることを見出した。S1ペプチドは1-MeAdeによる卵成熟誘起作用には何ら影響が認められなかったことから、繁殖期におけるGSS分泌に関連している可能性が高い。イトマキヒトデの放射神経抽出液を逆相カラムによる高速液体クロマトグラフィーを繰り返すことで、放卵活性をもつペプチドを精製した。質量分析の結果、ペプチドの分子量は約3200であった。このペプチドがGSS分子と考えられるが、最終的にアミノ酸シークエンサーでアミノ酸配列を分析できるだけの十分な量が精製できてなかったため、イトマキヒトデGSSのアミノ酸配列はまだ明らかでない。現在出発材料を3倍にして、新たに精製を始めているところである。その他、本研究からGSSによる1-メチルアデニン(1-MeA)生産について以下結果も得られた。(1)イトマキヒトデ卵巣には哺乳類のゴナドトロピン受容体とホモロジーをもつ糖タンパクホルモンレセプターが存在した。しかしGSSはそのリガンドではなかった。(2)10種類のN1置換アデニン類を化学的に合成し、ヒトデ卵成熟に対するアゴニストおよびアンタゴニストの作用を調べた結果、1-MeAレセプタータンパクに対する相互作用において、分子内の電荷ばかりでなく、N1置換基の立体的位置関係が重要であることを明らかにした(Comp. Biochem Physiol,2001,130:427-434)。本研究の過程で、イトマキヒトデ(Asterina pectinifera)のGSSはこれまで部分的に知られていた別種のヒトデ(キヒトデ、Asterias amurensis)のGSS(MW 2,100)と比較して分子量がおよそ4,700と大きく異なることが明らかになった。
イオン・チャンネルと細胞骨格の相互作用に関する研究

細胞膜骨格構造は、アクチンやスペクトリン・ファミリー蛋白質を主要構成員とし、細胞形態の維持やその他種々の機能を果たすと考えられている。スペクトリンやスペクトリン・ファミリー蛋白質であるカルスペクチンは、アンキリンなどを介して細胞膜蛋白質に結合している。この細胞膜蛋白質としては、赤血球のバンド3やNaチャンネルなどのイオン・チャンネルが知られており、細胞膜骨格或はイオン・チャンネルの機能制御に両者が密接に関与していることが考えられる。本研究では、脳のアネキシンVIに焦点を当て、その結合蛋白質を検索すると共に継胞膜骨格の機能制御への関与を検討した。まず、脳の細胞骨格分画を用いてアネキシンVI結合蛋白質の検索を行った結果、5種類の蛋白質がカルシウム及び燐脂質依存性にアネキシンVIと結合した。これらのアネンキシンVI結合蛋白質のうち分子量240,000の蛋白質は、分子量や低イオン強度下での可溶性などからカルスペクチンと同定された。カルスペクチンは、F-アクチンを架橋する作用を有するが、アネキシンVIがこの作用にどの様な効果を持つかを落球法による粘度測定及び遠心法により解折した。その結果、アネキシンVIは、カルシウム、燐脂質存在下においてカルスペクチンによるF-アクチンの架橋作用を阻害した。このような条件下では、カルスペクチンはF-アクチンよる解離した。すなわち、アネキシンは、カルシウム、燐脂質存在下にカルスペクチンと結合し、カルスペクチンをF-アクチンから解離させることによりF-アクチン架橋作用を阻害すると考えられる。以上の結果は、アネキシンVIが、細胞膜骨格のカルシウム制御に役割を果たすこを示唆する。今後、このアネキシンVIによる細胞膜骨格調節がどの様な細胞機能に対応しているのか、他の細胞骨格蛋白質やイオン・チャンネルがどの様に関与しているのかを明らかにする必要がある。種々の細胞機能発現および調節に重要な細胞内イオンは、細胞膜および細胞内膜系に存在するイオン・チャンネルやイオン・ポンプによって制御されている。このうち、Ca^<2+>は、セカンド・メッセンジャ-として細胞内情報伝達の中心的役割を果たしている。本年度は、神経細胞のシナプス前部と骨格筋細胞のトリアド部に焦点を当てて検討した。シナプス前膜からのニュ-ロトランスミッタ-放出に際しては、電位依存性Ca^<2+>の活性化が必須であるが、Ca^<2+>流入が必ずしも必須でないことからCa^<2+>チャンネルと細胞膜骨格蛋白質さらにはシナプス小胞との直接の蛋白質間相互作用の関与が予想される。そこでシナプス小胞膜の各種蛋白質の存在様式および結合様式を検討した。このうちシナプシンIは、その尾部でシナプス小胞膜蛋白質と直接結合した。この場合は、シナプシンI尾部のCa^<2+>/カルモデュリン依存性燐酸化により阻害され、シナプシンIを結合していない状態でシナプス小胞がシナプス前膜の蛋白質と相互作用を営むことによりエクサイト-シスが起こる可能性が考えられる。骨格筋細胞の検討では、アネキシンVIに注目した。アネキシンVIは、細胞膜下分画法を用いた検討により横細管および筋小胞体終末槽に局在することが明かとなり、両者の相互作用に関与する可能性が示唆された。この両者には、それぞれ電位依存性Ca^<2+>チャンネルとCa^<2+>遊離チャンネルが局在しており、両チャンネルの相互作用に重要であると考えられる。

細胞膜骨格構造は、アクチンやスペクトリン・ファミリー蛋白質を主要構成員とし、細胞形態の維持やその他種々の機能を果たすと考えられている。スペクトリンやスペクトリン・ファミリー蛋白質であるカルスペクチンは、アンキリンなどを介して細胞膜蛋白質に結合している。この細胞膜蛋白質としては、赤血球のバンド3やNaチャンネルなどのイオン・チャンネルが知られており、細胞膜骨格或はイオン・チャンネルの機能制御に両者が密接に関与していることが考えられる。本研究では、脳のアネキシンVIに焦点を当て、その結合蛋白質を検索すると共に細胞膜骨格の機能制御への関与を検討した。まず、脳の細胞骨格分画を用いてアネキシンVI結合蛋白質の検索を行った結果、5種類の蛋白質がカルシウム及び燐脂質依存性にアネキシンVIと結合した。これらのアネキシンVI結合蛋白質のうち分子量240,000の蛋白質は、分子量や低イオン強度下での可溶性などからカルスペクチンと同定された。カルスペクチンは、F-アクチンを架橋する作用を有するが、アネキシンVIがこの作用にどの様な効果を持つかを落球法による粘度測定及び遠心法により解析した。その結果、アネキシンVIは、カルシウム、燐脂質存在下においてカルスペクチンによるF-アクチンの架橋作用を阻害した。このような条件下では、カルスペクチンはF-アクチンより解離した。すなわち、アネキシンは、カルシウム、燐脂質存在下にカルスペクチンと結合し、カルスペクチンをF-アクチンから解離させることによりF-アクチン架橋作用を阻害すると考えられる。以上の結果は、アネキシンVIが、細胞膜骨格のカルシウム制御に重要な役割を果たすことを示唆する。今後、このアネキシンVIによる細胞膜骨格調節がどの様な細胞機能に対応しているのか、他の細胞骨格蛋白質やイオン・チャンネルがどの様に関与しているのかを明かにする必要がある。