hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
生体関連有機遷移金属錯体における立体識別と反応制御

鉄ポルフィリンとオレフィンとの還元条件下での反応チトクロムP450によるオレフィンの酸素添加反応では酸素の活性化が起こり、オレフィンがエポキシ化を受ける。我々は鉄(III)ポルフィリン、水素化ホウ素ナトリウム、オレフィンの反応系において有機鉄ポルフィリンが生成することを明らかにした。2-ヘプテン、3-ヘプテン、3-メチルシクロヘキセン等の反応により、2-ヘプチル鉄錯体、シス-(3-メチル)シクロヘキシル鉄錯体が位置および立体選択的に生成した。この結果はポルフィリン配位子有機軸配位子との間に立体的相互作用が重要であることを示している。有機鉄ポルフィリンは反応性に富み、臭化ベンジルとのカップリングで2-ベンジルアルカンが触媒的に得られる事を見いだした。コバルトポルフィリンと酸化劑共存系でのラジカル反応コバルト(II)ポルフィリンは水素ホウ素ナトリウムと酸素または過酸化物(t-ブチルヒドロペルオキシド)の酸化還元反応を触媒する。この際に、ヒドロキシラジカルやt-ブトキシラジカルが発生し、コバルトポルフィリンの存在下で有機基質とは選択的な反応な行なう事を明らかにした。この系は補酵素ビタミンB_<12>による基質のラジカル的活性化反応と深い関連がある。そこで、1、2-ジオールデハイドラーゼの反応モデルとして、1、2-ジメトキシエタン、ジオキサンの反応について検討した。いずれの場合にも、有機基質の酸素のα位から水素ラジカルが引き抜かれて生成した有機ラジカルとコバルト(II)とのシグマ結合を持つ錯体が得られた。これらの有機コバルト錯体の反応挙動について詳細な検討を現在行なっている。Ci対称性ポルフィリン配位子の合成有機金属ポルフィリンに於ける有機軸配位子に対するポルフィリン配位子の立体的相互作用とその反応制御について検討する事を目的として、Ci対称性を持つポルフィリンを合成した。そのCi対称性ポルフィリン金属錯体を用いて金属一炭素結合生成反応について検討を始めている。
20世紀における「音色旋律」の音楽思想史的研究-トポスとしての「色」と「線」-

2年めにあたる今年度は、まずウェーベルンやヴァレーズの「音色旋律」の構想が、同時代の他の諸芸術における「線的なもの」志向といかに関連しているかが調査された。世紀転換期におけるゲーテ・ルネサンスの影響下にある当時の共感覚志向及び蟄術の純粋化によって、音楽的なものの摂取につとめ抽象絵画の道を開拓した(「線的なもの」を重視した)カンディンスキーの構想における「線」概念は、音楽美学史上Energetikerとされるエルンスト・クルトの影響が非常に色濃く表れていることを検証した。特に、線は動く点の軌跡、つまり点の所産であり、線は運動から生まれるとするカンディンスキーの理念には、点描主義の祖とされるヴェーベルンへの共通点が見いだされた。また、ヴァレーズの音楽における、時間的な連続性に依拠するだけでなく空間的な連続性のもつ運動のエネルギー的緊張感の重視は、彼が「未来派」との関係を否定してはいても、やはり、ボッチョーニの「立体的なダイナミズム」との類縁性を浮かび上がらせていることからも、「音色旋律」的発想は、旋律のもつ従来の拍節的構造による時間支配から、音色というパラメータの導入によって空間的支配への拡張をはかったものであることが明らかになった。さらに、昨秋の美学会第51回全国大会(於京都市立芸術大学)において「トポスとしての「線」と「旋律」Energetikerの旋律論をめぐって」と題して研究発表を行ない、クルトが1917年に世に問い、多大な影響を与えた「線的対位法」という概念と、やはりEnergetikerの一人と目されるハインリヒ・シェンカーの『対位法』における「線」的概念について、Energetikに通底する「緊張」という基本的概念から再照射することによって、時代のトポスとしての「線」および「旋律」概念とEnergetik的理論形成の相関関係を考察し、心理学的共通基盤が両者に通底していることを明らかにできた。今年度は、「継起する音色の音楽的論理」としての音色旋律というシェーンベルクの初期概念に対して1918年以降の第1の受容器においてどのような動きが起こったかをまず再考した。特に、シェーンベルクとは全く異なり、完全に純粋な「無調のメロス」としての音色旋律、その「旋律の絶対的即物性」を主張したJ.M.ハウアーの音色旋律観が、「雑音」を音楽に取り込むという発想への契機を包含しており、やはり、同時代のヴェーベルンの音楽に措定される、セリー音楽の音楽セリーへの歴史的前段階のメルクマールとしての音色旋律の位置づけと共に非常に重要であることが明らかになった。さらに、この「雑音」「騒音」と関連して、研究計画では来年度に研究する予定であったヴァレーズおよびイタリア未来派との関連について先に調べることになった。今回の研究では、イタリア未来派、特に、(ブゾーニとも交流が深かった)ボッチョーニの「造形的ダイナミズム」という発想が、実は空間芸術としての音楽という発想に繋がっており、これがヴァレーズにおける「打楽器の解放」の淵源をなしているということも指摘でき、さらに、ヴァレーズに早くから注目していたジョン・ケージの様々な実験的試みに繋がっていくことも確かめられた。また、12音技法の「動脈硬化」について気づいていたヴァレーズは決してシェーンベルクやハウアーのようないかなる技法化も目論まなかったが、一種の様式的記述概念としての音色旋律観をうち立てることによって、1924年以降、音色旋律が音色継続の電気音響的実現のためにもくろまれた作曲の試みへ応用されることへの道を切り拓いたということがよく理解されうることとなった。今後の課題としては、今回まだはっきりと確かめられていないハウアーの音色旋律観と未来派に通底する思考をあぶり出すことが挙げられる。さらに、昨秋の美学会第51回全国大会(於京都市立芸術大学)において「トポスとしての「線」と「旋律」

Energetikerの旋律論をめぐって」と題して研究発表を行ない、クルトが1917年に世に問い、多大な影響を与えた「線的対位法」という概念と、やはりEnergetikerの一人と目されるハインリヒ・シェンカーの『対位法』における「線」的概念について、Energetikに通底する「緊張」という基本的概念から再照射することによって、時代のトポスとしての「線」および「旋律」概念とEnergetik的理論形成の相関関係を考察し、心理学的共通基盤が両者に通底していることを明らかにできた。
アレイ技術革新による感染症と癌の克服への新たな挑戦：hTEC10の開発

我々は、これまでに単一ヒトBリンパ球から抗体遺伝子を迅速に単離する技術を確立した。本研究では、その技術を応用して、ヒトの末梢血T細胞から抗原特異的T細胞を検出し、その単一細胞からT細胞受容体(TCR)を効率良く単離し、得られたTCRの機能を、特別なT細胞株を用いて迅速に評価できる「ヒトT細胞受容体迅速システム」(hTEC10:human T cell receptor Efficient Cloning within 10 days)を確立した。このシステムを用いて、肝細胞がん患者の末梢血から高いキラー活性を持つTCRを複数取得し、がんや感染症のTCR遺伝子治療への道を開いた。1)抗原特異的T細胞の単一細胞の迅速検出法の確立を目的として、以下の研究成果を得た。1抗原であるMHC/ペプチド五量体(MHC/p)をT細胞へ結合させ、セルソータを用いて単一細胞を分離した。2抗原でリンパ球を刺激しサイトカインの産生を指標にセルソータを用いて単一細胞を分離した。31および2で得られた単一細胞から、5'-RACE法を用いてTCRα/TCRβ遺伝子を増幅し、レトロウイルスを用いてTCR欠損のT細胞(TG40)にTCRα/TCRβ遺伝子を導入し、ペプチドを発現させた抗原提示細胞あるいはMHC/ペプチドで刺激し、活性化マーカーの発現をFACSで測定することでTCRの機能を解析した。2)ISAAC法の応用:T-ISAACを確立することを目的として、以下の研究成果を得た。1MHCクラスI分子を発現したミセルを作製し、チップ内で刺激する方法は、均一サイズのミセルの作製に困難を伴った。不均一な状態で、チップ内の抗原特異的T細胞を刺激したが、コントロールに比較して特異的なスポットは得られなかった。2次に、抗原特異的T細胞自身のMHCクラスI分子に抗原ペプチドを負荷し、チップ内でペプチドで刺激し、サイトカイン産生を検出した結果、抗原特異的、濃度特異的にスポットが得られた。さらに、チップ内の細胞を回収し、5'-RACE法を用いてTCRα/TCRβ遺伝子を解析したところ、単一のTCR遺伝子が得られた。1)抗原特異的T細胞の単一細胞の迅速検出法(T-ISAAC)の確立を目的として、H-2Kb MHC class I分子に結合した卵白アルブミン(OVA)ペプチド特異的TCRを発現したOT-1 TCRトランスジェニックマウスおよびH-2Db MHCクラスI分子に結合した雄特異的H-Y抗原を認識するTCRを発現したH-Y TCRトランスジェニックマウスを用い、リンパ球チップで、ペプチド刺激によるサイトカイン産生を検出した結果、ペプチド特異的、濃度依存的にスポットを検出できた。シングルT細胞を回収し、TCR遺伝子を解析することができた。これまで、遺伝子の増幅率が低さが課題であったが、今回、新しい増幅術の開発(ONE STEP RT-PCR法)により増幅率を格段にあげることが可能となった。また、ヒト健常人のEBV潜伏感染者の末梢血CD8陽性Tリンパ球をEBVペプチドでチップ内で刺激した結果、ペプチド特異的にスポットを検出することができた。シングル細胞からTCR遺伝子を解析した結果、ペプチド特異的TCR候補を多数、獲得できた。すなわち、T-ISAACの基盤が確立できた。2)取得TCRの機能解析法の確立:取得したTCRの機能を解析することを目的として、あらかじめ、TCR欠損のCD3陽性T細胞株(TG40)にヒト/マウスのCD4あるいはCD8遺伝子を導入し、次に、TG40に増幅したEBV特異的TCR遺伝子を相同組換え法により発現ベクターに組込み、レトロウイルスを用いて導入した。TCR/CD3分子の発現は抗CD3抗体で確認した。この細胞株をペプチド/MHCで刺激し、細胞の活性化(サイトカイン産生あるいは活性化マーカー)を検知することで、取得したTCRが機能を測定可能となる。すなわち、これまでの研究成果により、単一細胞から取得したTCRの機能解析法の基盤を確立することができた。1)単一細胞から取得したTCRの機能解析法を確立することを目的として、ヒトのEBV特異的TCR遺伝子を相同組換え法により発現ベクターに組込み、TCR欠損CD3陽性CD8陽性T細胞株(変異TG40)にEBV特異的TCR/CD3分子を細胞表面に発現させた。次に、TCR導入変異TG40細胞を、EBVペプチドを発現させた抗原提示細胞あるいはMHC/ペプチドテトラマーで刺激し、活性化マーカーCD69の発現をFACSで測定、同時にIL-2産生能をELISAで測定した。その結果、EBVペプチド特異的にEBV特異的TCRを発現させたTG40変異細胞にCD69が発現し、またIL-2産生が見られた。このように、抗原特異的T細胞の検出からTCR遺伝子の取得・機能検証までを全体として10日間以内で行える画期的なhTEC10システムを確立できた。2)金沢大学(金子研究室)との共同により、hTEC10システムを用いて、肝細胞がん患者の末梢血T細胞からα-フェトプロテイン(AFP)特異的TCRの取得を行った。ペプチドワクチン療法で効果が認められた肝細胞がん患者の末梢血T細胞を得て、AFPペプチド・MHCテトラマーに反応するT細胞からTCR遺伝子を単離し、上記1)の方法で機能を解析した。その結果、数個のペプチドワクチン特異的TCRを獲得できた。

次に、このTCRを末梢血T細胞に遺伝子導入してTCRを発現させ、AFPペプチドを負荷した抗原提示細胞を標的として細胞傷害活性(キラー活性)を測定したところ、ペプチド特異的にキラー活性を認めた。このことは、hTEC10システムにより、がん患者からキラー活性を持つTCRを極めて短期間に取得できることを実証したものであり、がんのTCR遺伝子治療への道を開くものとして注目すべき成果である。我々は、これまでに単一ヒトBリンパ球から抗体遺伝子を迅速に単離する技術を確立した。本研究では、その技術を応用して、ヒトの末梢血T細胞から抗原特異的T細胞を検出し、その単一細胞からT細胞受容体(TCR)を効率良く単離し、得られたTCRの機能を、特別なT細胞株を用いて迅速に評価できる「ヒトT細胞受容体迅速システム」(hTEC10:human T cell receptor Efficient Cloning within 10 days)を確立した。このシステムを用いて、肝細胞がん患者の末梢血から高いキラー活性を持つTCRを複数取得し、がんや感染症のTCR遺伝子治療への道を開いた。本研究のゴールは、抗原特異的T細胞の検出から、TCR遺伝子の取得・機能検証までを全体として10日間以内で行える画期的なシステムを確立することである。今回、1H-2Kb MHC class I分子に結合した卵白アルブミン(OVA)ペプチドを認識するTCRを発現したOT-1 TCRトランスジェニックマウスおよびH-2Db MHCクラスI分子に結合した雄特異的H-Y抗原を認識するTCRを発現したH-Y TCRトランスジェニックマウスを用い、細胞チップを用いて、ペプチド刺激によるサイトカイン産生を検出した結果、ペプチド特異的、濃度依存的にスポットを検出できた(cis-activation)。また、ヒト健常人のEBV潜伏感染者の末梢血CD8陽性Tリンパ球をEBVペプチドでチップ内で刺激し、同様に、ペプチド特異的にスポットを検出できた。。すなわち、T-ISAACの基盤が確立できた。さらに2取得したTCRの機能を解析することを目的として、あらかじめ、TCR欠損のCD3陽性T細胞株(TG40)にヒト/マウスのCD4あるいはCD8遺伝子を導入し、次に、TG40に増幅したEBV特異的TCR遺伝子を発現ベクターに組込み、レトロウイルスを用いて導入し、TCR/CD3分子の発現を確認できた。すなわち、これまでの研究成果により、単一細胞から取得したTCRの機能解析法の基盤を確立することができた。このように、研究は概ね計画どおり進展していると言える。免疫学【1】単一細胞から取得したTCRの機能解析法の確立:取得したTCRの機能解析システムを確立することを目的として、1)あらかじめ、TCR欠損のCD3陽性T細胞株(TG40)にヒト/マウスのCD4あるいはCD8遺伝子を導入し、次に、TG40に増幅したEBV特異的TCR遺伝子を相同組換え法により発現ベクターに組込み、レトロウイルスを用いて導入し、TCR/CD3分子を発現をさせる。2)次に、TCR導入TG40細胞を、ペプチドを発現させた抗原提示細胞あるいはMHC/ペプチドで刺激し、活性化マーカーCD69の発現をFACSで測定、あるいはIL-
家族性もやもや病の分子発症機構の解明および一次予防の確立

本研究課題ではもやもや病の多発家系を用いて家族性もやもや病の責任遺伝子を特定すること、細胞生物学的解析と遺伝子改変動物の作成により遺伝子の機能を明らかにすることで発症機構の解明を行うことを目的とする。24年度は、昨年度もやもや病感受性遺伝子として同定したmysterin(RNF213)遺伝子のノックアウトマウスの作成と形質の評価を主に行った。近年のもやもや病と糖尿病の合併性を示す報告より、mysterinの機能を明らかにするために、mysterin欠損が糖尿病モデルマウスに与える影響を検討した。具体的にはmysterinを欠損するノックアウトマウス(mysterin-/-)を作成した後、小胞体ストレスによる糖尿病モデルマウスであるAkitaマウス(Ins2+/C96Y)と交配を行い、mysterin KO/Akitaマウス(mysterin-/-,Ins2+/C96Y)を得て糖尿病に関連する形質の解析を行った。その結果、mysterin欠損はAkitaマウスの血清および膵島インスリン量を増加させることで、摂食量の低下、小胞体ストレスの低下を通じて糖尿病を改善することが示された(Biochem Biophys Res Commun 2013)。小胞体ストレス応答の1つとして、異常タンパク質の分解を促進する小胞体関連分解(ERAD)がよく知られている。Akitaマウスの膵β細胞ではERADにより異常プロインスリンのみならず正常プロインスリンの分解も促進していることが報告されており、mysterin欠損はERADによるプロインスリン分解を抑制する可能性がある。本研究は、mysterinがERADに重要な役割を果たす可能性を示唆しており、今後さらに検討を重ねることでmysterinの機能の一端が明らかにできることが期待できる。家族性もやもや病の責任遺伝子の探索我々はもやもや病の多発家系患者家系の収集と遺伝解析を行い、Raptor遺伝子のrare variant、ss161110142が東アジアにおけるもやもや病発症と強く相関することを明らかにした(Liu et.al Environ Health Prev Med.2010)。本年度は、真の原因となる変異が見出したRaptor遺伝子のrare variantとLDブロックを形成する可能性があることから、Raptor遺伝子周辺領域についてintron、intergene領域を含む全塩基配列を決定するために、日本人患者からBACクローンを作成した。現在ダイレクトシークエンス法およびショットガンシークエンス法を併用して作成したBACクローンの塩基配列決定を行っている。またcopy number variation、deletion、insertionといったゲノム構造異常を検討する目的で、チップを用いたcopy number variation解析、およびサザンプロット法による解析を行っている。また我々は日本を含む東アジアとヨーロッパ諸国におけるもやもや病患者および対照集団の収集を本年度も継続して行い、現在までに日中韓で42もやもや病家系(日本41家系、韓国1家系)、もやもや病孤発例患者209名、対照集団757名を収集した。EU諸国においてはチェコの1家系および7名の孤発例患者、ドイツの42名の孤発例患者、384名の健常者に参加いただいた。本研究課題ではではもやもや病の多発家系を用いて家族性もやもや病の責任遺伝子を特定すること、また同時に細胞生物学的解析と遺伝子改変動物の作成により遺伝子の機能を明らかにすることで発症機構の解明も行うことを目的とする。さらに特定した遺伝子について国際的な遺伝疫学研究を行い、遺伝予検査法を確立する。東アジアにおいてもやもや病との強い相関が認められたRaptor遺伝子のrare variant、ss161110142(Environ Health Prev Med. 2010)周辺領域を対象にBACクローンを用いた全塩基配列で変異探索を行い、また次世代シーケンサーによる全遺伝子エクソンの塩基配列決定も併せて実施し、mysterin遺伝子(RNF213遺伝子、データベースとのORFの違いにより我々が命名)をもやもや病の感受性遺伝子として同定した(PLoS ONE, 2011)。生化学的な解析によりmysterinがATPase活性およびユビキチン化活性を同時にもつ、非常にユニークなE3リガーゼであることを証明した(PLoS ONE, 2011)。さらにノックアウトゼブラフィッシュモデルを用いて、mysterinが特に頭部における血管新生に重要な役割を果たすことを明らかにした(PLoS ONE, 2011)。日本、韓国、中国を対象に東アジアのもやもや病患者に共通する多型(p.R4810K)について一般人口における頻度を検討した結果、日本および韓国では人口の約3%、中国では0.4%が遺伝子キャリアーあることを見出し、東アジアにおけるキャリアーの人数は1千500万人と推測された。もやもや病はp.R4810Kを持つうちの300人に1人が発症することから、およそ5万人のもやもや病患者が東アジアに存在すると考えられる(Neurologia medico-chirurgica,in press)。

具体的にはmysterinを欠損するノックアウトマウス(mysterin-/-)を作成した後、小胞体ストレスによる糖尿病モデルマウスであるAkitaマウス(Ins2+/C96Y)と交配を行い、mysterin KO/Akitaマウス(mysterin-/-,Ins2+/C96Y)を得て糖尿病に関連する形質の解析を行った。その結果、mysterin欠損はAkitaマウスの血清および膵島インスリン量を増加させることで、摂食量の低下、小胞体ストレスの低下を通じて糖尿病を改善することが示された(Biochem Biophys Res Commun 2013)。小胞体ストレス応答の1つとして、異常タンパク質の分解を促進する小胞体関連分解(ERAD)がよく知られている。Akitaマウスの膵β細胞ではERADにより異常プロインスリンのみならず正常プロインスリンの分解も促進していることが報告されており、mysterin欠損はERADによるプロインスリン分解を抑制する可能性がある。本研究は、mysterinがERADに重要な役割を果たす可能性を示唆しており、今後さらに検討を重ねることでmysterinの機能の一端が明らかにできることが期待できる。もやもや病の感受性遺伝子を同定し、機能解析により血管新生に重要な役割を果たすことを明らかにした。また東アジアにおける遺伝疫学で、見出した創始者多型の患者および対照群における頻度を明らかにした。現在はmysterinノックアウトマウスの作成を行っており、脳血管形成を中心に形質の評価を行う。またmysteinと相互作用する分子およびそのパスウェイについても解析を行う。また日本人もやもや病患者から採取した皮膚組織よりiPS細胞の作成を進めている。作成したiPS細胞は血管内皮および平滑筋細胞に分化させ解析を行うことで、もやもや病の病態解明に寄与する。
クロスボーダーＭ＆Ａにおける日本企業の行動と経済性の国際比較分析

本研究では、日本企業のクロスボーダーM&Aの経済性に関する実証研究を進め、4本の論文を作成した。4本の論文において示した新たな知見は、日本企業の海外M&Aが国内M&Aよりも高い評価を受けていること、その背景には日本の国内市場の成熟化に伴う海外の成長市場の獲得への株式市場の期待があること、企業の手元流動性の適切な使用使途の一つとなっていること、一方で海外M&A後に買い手企業が株主価値や収益性を有意に改善したとは言えないこと、日本企業は国際比較研究では顕著ね傾向とされる不確実性回避の企業文化に影響を受けた投資行動を取っていることなどである。本研究プロジェクトの2年目にあたる平成25年度は、前年度に引き続き下記の3本の研究論文の改善のための追加分析と修正を進めた。第1に、日本企業のクロスボーダーM&Aのイベントスタディを行っているIngs and Inoueについては、国際学会等でのコメントを踏まえて論文を修正のうえ、投稿準備を進めている。第2に、日本企業のM&Aの長期的パフォーマンスと、コーポレートガバナンスの関連について検証したInoue, Yamasaki and Naraは、分析の結果、同業種企業の買収および相手企業の経営権を完全に取得するM&Aにおいて、パフォーマンスが相対的に良好であることを確認した。また、社外取締役が存在する買い手企業によるM&Aの方が、買収3年後の収益性が良好だった。本研究は、日本ファイナンス学会平成25年度大会で報告し、そこでの指摘点を改善し、RIETIのDiscussion Paper (DP13E-085)に登録した。第3の、アジアおよび欧米の主要先進国の企業間のクロスボーダーM&Aの国際比較分析を行っているBremer, Hoshi, Inoue and Suzukiは、各国の法の起源や経済発展段階を考慮しても、不確実性回避傾向の強い企業文化をもつ国の企業は、クロスボーダーM&Aに消極的だが、海外M&Aを実施する場合は高い買収価格を提示して、確実に取引を実現しようとする傾向を持つことを発見した。日本ファイナンス学会平成25年度大会での報告を経て、現在は平成26年5月に予定されている国際学会での報告の準備を進めている。また、経営者の自信とその企業の投資行動の関連に関するサーベイ調査をベースにした研究を進めた。なお、研究全体で得られた知見についてまとめたものを、平成25年日本経営財務研究学会の統一論題セッションで報告(招待講演)した。当該年度は4つの研究プロジェクトを開始・進行させた。第1のプロジェクトとして、日本企業によるクロスボーダーM&Aの経済性を、発表時の株式市場の評価から分析している。この研究では、日本のクロスボーダーM&Aが株式市場からプラスの評価を受けており、かつ国内M&Aよりも評価が高いこと、その背景に海外市場における成長機会の獲得期待があるという仮説と整合的な結果を得た。この結果は、昨今の日本企業による海外企業買収を株主の視点で支持するものである。第2のプロジェクトは、日本企業のM&A後の長期のパフォーマンスの検証であり、第1のプロジェクトの拡張である。主な発見事項として、買収時には株主価値の上昇がみられるが、その後の期間では株価の超過リターンはなく、全体としてM&Aが株主価値の増大に貢献していること、業績については買収直後に悪化が見られるが、買収後5年間で改善がみられることである。株式市場の効率性と整合的な結果であり、第1のプロジェクトの結果を補強する証拠を提示している。第1と第2のプロジェクトの結果のエッセンスは、日本経済新聞などで記事化され、注目度は高い。第3のプロジェクトは、日本を含むアジア主要国および欧米主要国のM&Aにおける取引性格と買収価格設定の実証分析である。本プロジェクトでは、この分野の研究の主流である法とファイナンスの視点に加え、企業文化の視点からの分析を行った。現時点の主な発見として、法の起源に加え、不確実性回避の企業文化が買収方法や買収価格決定に影響を持つという新たな結果を得ている。第4のプロジェクトでは、中国のクロスボーダーM&Aに関する株式市場の評価を検証している。日本以外のアジア諸国のクロスボーダーM&Aに関する研究結果から、日本のM&Aの取引性格や特徴が、日本に特徴的なものか、アジアに一般的にみられる結果かを明らかにすることを目的としている。本研究プロジェクト最終年に当たり、前年度に引き続き3本の論文に関し、国際学会報告、国内研究会での報告などを通して分析の精緻化、論文の完成作業を進めた。日本企業のクロスボーダーM&Aに伴う株価のイベントスタディを行ったIngs and Inoue論文については、クロスボーダーM&Aが国内M&Aよりも高い評価を受けていること、その背景には成長力の低下した企業による海外成長市場の獲得への株式市場の期待があることを発見した。日本企業によるM&A後の長期の財務・株価パフォーマンスを検証したInoue, Yamasaki, and Nara論文は、学会等のコメントに対応しデータを追加し精緻化を進めている。

主な発見事項は、日本企業の海外M&Aにおいて必ずしも株式市場が当初期待した価値創造が実現しておらず、平均すると株主価値はブレークイーブンで収益性はやや減少する傾向を持ち、英米の買い手に比較して収益性に関しては劣後することである。アジアおよび欧米主要国の企業間のクロスボーダーM&Aにおける企業行動と企業文化の関連を分析したBremer, Hoshi, Inoue, and Suzuki論文は、不確実性回避の企業文化の下で海外M&Aが抑制されること、一方でM&Aの実現の確実を期すため高い買収プレミアムを支払うことを発見した。日本は不確実性回避傾向の特に強い国であり、本論文の結果は日本企業の行動を適切に説明する。経営学本年度は、前年度に分析し、ドラフト作成した3本の論文について、学会報告等でのコメントを踏まえ、データの追加、分析の精緻化、ドラフトの修正を進めた。3本の研究については日本の国内学会での報告を経て、修正のうえで国際学会(査読付き)での報告につなげており、投稿準備に入っている点で概ね順調に進展しているを言える。日本のM&Aに関して株価のイベントスタディを行ったIngs and Inoueについては、投稿準備中である。日本企業のM&Aの長期パフォーマンスを分析しているInoue, Nara and Yamasakiについては、分析は概ね目処はついているが、論文本文の修正を課題としている。Bremer, Hoshi, Inoue, and Suzukiについては、分析結果に新規性があるが、その解釈等で課題を残しており、今後の学会等での討論を踏まえての議論の明確化が課題となっている。一方で、本年度より計画していた、日本企業のM&A行動が相対的に消極的である点に着目し、主要先進国間の株主構造、経営者構成等の差異とM&A行動との関連性を分析する国際比較研究については、サンプルおよびデータ収集に時間を要し、分析開始までは至っていない。本研究については、平成26年度前半までにデータ等をまとめ、同年度後半には仮説の明確化とそれに基づく分析の開始により、予備的な結果を得ることを計画している。本研究に関し、計画では初年度に当たる2012年度は、データの取得・整備、予備的分析を進める予定であった。現在、上記の4プロジェクトについては予備的分析を行い、うち第2のプロジェクトを除く3プロジェクトについては国際学会での報告を行い、2本は専門誌への投稿段階に進んでおり、おおむね順調に進展していると言える。一方、これまでの研究の発見事項を、さらに発展させる必要を感じており、第2、第3のプロジェクトについてはまだ分析を要する段階である。さらに、企業の株式保有構造、経営者構成等に注目し、M&A行動を分析する第5のプロジェクトに着手しているが、この研究については文献研究、データ取得・整備に着手の段階にある。第1のプロジェクトは、Ings and Inoue論文としてドラフトにまとめ、2012年の米国および日本の学会で報告し、投稿準備段階に至っている。
ヒト冠動脈の安定・不安定プラーク鑑別のための新しい血管内超音波の開発と応用

我々は以前、ヒトの冠動脈に超音波を照射し後方に反射される信号の解析により冠動脈プラークの組織性状診断を可能とする装置を開発した。その装置を用いれば、二次元color-coded mapを介し視覚的に組織性状の把握が可能である。本研究ではさらに専用アルゴリズムを開発し、二次color-coded mapをさらに三次元化することで一定の組織性状の空間的な広がりをとらえる事に成功した。さらに、高脂血症治療薬であるスタチンによる脂質低下療法がヒトの冠動脈プラークの組織性状に与える影響を明らかにした。すなわち、スタチンの6カ月の投与で、プラークの脂質成分が減少し線維成分が増加するというプラークの安定化を認めた。また、三次元画像的にもプラーク内のlipid coreが退縮している事が示された。一方、従来の冠動脈造影は血管のシルエットのみを映し出すのに対して、血管内超音波装置では血管壁の形態を映し出すことができ、冠動脈造影で正常と診断される部位に動脈硬化が既に存在することが知られている。さらに本装置を用いる事により、血管壁の組織性状の把握が可能となった。すなわち、冠動脈造影で正常と診断される部位においても既に脂質成分の蓄積が認められ、動脈硬化は血管の内腔が保たれている初期の段階から始まっている事と、その程度は動脈硬化危険因子の存在の程度と関係がある事が世界で始めて証明された。1,各種薬剤の冠動脈プラークに及ぼす影響の検討(目的)スタチンを投与後の冠動脈プラークの組織性状変化を検討し、スタチンが冠動脈症候群を抑制する理由を臨床で明らかにする。(結果)pravastatin投与群、atorvastatin投与群において、fibrosisとmixed lesionの割合の有意な増加とlipidの有意な減少が認められた。(総括)これらの変化は、スタチンが急性冠動脈症候群を抑制する原因の一つと考えられた。2,画像構築の高速化と三次元化(目的)これまではIB-IVUSの画像の構築に数時間を必要としたため、画像構築の高速化を可能とさせ、さらに画像の三次元化を検討する。(方法)コンピューターソフトウェア(Visual Basic)を用いて、新しいプログラムを開発した。(結果)新しく開発したプログラムにより画像構築に要する時間は数分(66分の1)に短縮された。さらに市販のコンピューターソフトウェア(T3D)を用いる事によって、画像の三次元化に成功した。(総括)新しいコンピューターソフトウェアを用いる事により、解析技術が格段に進歩した。すなわち、スタチンの6ヵ月の投与で、プラークの脂質成分が減少し線維成分が増加するというプラークの安定化を認めた。
フェニルプロパノイドから抗アレルギー・抗炎症作用物質の開拓と低分子プローブの創製

これまでに我々の研究室において,種々の薬用植物から数多くの含有成分を単離しており,フェニルプロパノイドのほかに基本骨格が関連した天然由来化合物ライブラリーを有している.これらの化合物ライブラリーから,有望な抗アレルギー作用や抗炎症作用を有するフェニルプロパノイド誘導体あるいは類縁体をピックアップすることを目的とする.また,本研究では,大良姜の主要成分l'S-1'-acetoxychavicol acetateおよび有望な天然由来化合物についてアジド基を有する蛍光標識体または同位体で標識した化合物などを合成し,これらを低分子プローブとして用い,ターゲットタンパクを明らかにすることによって分子レベルでの機能解明を行う.今年度は,天然由来フェニルプロパノイドおよびその類縁体について脱顆粒抑制試験やNO産生抑制作用試験などのバイオアッセイを実施し,有効な抗アレルギー・抗炎症作用化合物を探索した.この研究過程で,中国産の茶花(Camellia sinensis)の含有成分が脱顆粒抑制活性を有することを見出した.また,甘茶の抗アレルギー活性成分thunberginol Bが細胞内シグナル伝達系においてERKを介したパスウェイに影響を与えていることや,RT-PCR法において,抗原刺激後のIL-2mRNAの発現に対して特に強い抑制活性を示すことを明らかにするなど,その作用機序について知見を得ることができた.また,l'S-1'-acetoxychavicol acetateやthunberginol B誘導体の分子プローブの創製を試み,幾つかの興味深い知見を得ることができた.これまでに我々の研究室において,種々の薬用植物から数多くの含有成分を単離しており,フェニルプロパノイドのほかに基本骨格が関連した天然由来化合物ライブラリーを有している.これらの化合物ライブラリーから,有望な抗アレルギー作用や抗炎症作用を有するフェニルプロパノイド誘導体あるいは類縁体をピックアップする.また,最終的に本研究では,大良姜(Alpinia galanga,根茎)の主要成分であるフェニルプロパノイド1'S-1'-acetoxychavicol acetateおよび有望な天然由来化合物についてアジド基を有するフルオレセインなどを用いた蛍光標識体または同位体で標識した化合物などを合成し,これらを低分子プローブとして用い,ターゲットタンパクを明らかにすることによって分子レベルでの機能解明を行うことを目的とする.今年度は,当研究室が保有する天然由来フェニルプロパノイドおよびその類縁体について脱顆粒抑制試験やNO産生抑制作用試験などのバイオアッセイを実施し,有効な抗アレルギー・抗炎症作用化合物を探索した.この研究過程で,甘茶の含有成分thunberginol類,漢薬補骨子の含有成分bavachinが強い脱顆粒抑制活性を有することを見出した.また,1'S,-1'-acetoxychavicol acetateの構造活性相関について詳細な検討を行い活性発現の為の必須構造を明らかにすると共に,その誘導体合成を実施し,それら化合物の抗アレルギーや抗炎症活性の有無および強弱の比較を行った.また,1'S-1'-acetoxychavicol acetateの活性が保持される分子プローブの創製を試みるなど,平成18年度の当初計画をほぼ達成したものと考える.これまでに我々の研究室において,種々の薬用植物から数多くの含有成分を単離しており,フェニルプロパノイドのほかに基本骨格が関連した天然由来化合物ライブラリーを有している.これらの化合物ライブラリーから,有望な抗アレルギー作用や抗炎症作用を有するフェニルプロパノイド誘導体あるいは類縁体をピックアップすることを目的とする.また,本研究では,大良姜の主要成分l'S-1'-acetoxychavicol acetateおよび有望な天然由来化合物についてアジド基を有する蛍光標識体または同位体で標識した化合物などを合成し,これらを低分子プローブとして用い,ターゲットタンパクを明らかにすることによって分子レベルでの機能解明を行う.今年度は,天然由来フェニルプロパノイドおよびその類縁体について脱顆粒抑制試験やNO産生抑制作用試験などのバイオアッセイを実施し,有効な抗アレルギー・抗炎症作用化合物を探索した.この研究過程で,中国産の茶花(Camellia sinensis)の含有成分が脱顆粒抑制活性を有することを見出した.また,甘茶の抗アレルギー活性成分thunberginol Bが細胞内シグナル伝達系においてERKを介したパスウェイに影響を与えていることや,RT-PCR法において,抗原刺激後のIL-2mRNAの発現に対して特に強い抑制活性を示すことを明らかにするなど,その作用機序について知見を得ることができた.また,l'S-1'-acetoxychavicol acetateやthunberginol B誘導体の分子プローブの創製を試み,幾つかの興味深い知見を得ることができた.
接着性と薬効を両立した革新的歯内療法用材料の創製と臨床応用に向けた橋渡し研究

1.接着性MTAの覆髄・歯髄再生能評価サル歯髄の前段階として、ラットを用い、MTAにリン酸化プルランを混和した試作接着性MTAセメントにて直接覆髄した。コントロールにはリン酸化プルラン、白金ナノコロイド第一世代、第二世代、および第三世代を用いた。ウィスターラットオス89週齢にイソフルランによる吸入麻酔後、3種混合注射を行い全身麻酔を施した。上顎左右第1臼歯にスチールバーを用いて近心側から露髄させた。止血確認後、上記の材料をそれぞれ歯髄に貼付し、スーパーボンドにて仮封を行った。08週で屠殺し、通法に従い固定、脱灰、包埋を行い、厚み5μmの切片を作製した後、ヘマトキシリンHEーエオジン染色標本での評価を行った。短期においては炎症反応、長期においてはデンチンブリッジの形成能を評価した。組織学的評価:短期においては軽度の炎症反応が示唆された。これは今後患者に応用した際に、治療後の疼痛や違和感を減少させることが考えられ、良好な治療経過につながることが考えられた。長期の結果においては、歯髄を保護するデンチンブリッジの形成程度や発生頻度が材料毎に異なっており、MTAセメントを含有する材料はこれまでの知見と相違なかった。一方、リン酸化プルランのみや、白金ナノコロイドにおいてもデンチンブリッジの形成が認められた。これらの結果から、上記材料を直接覆髄材として開発可能であることが示唆された。2.他の材料を主成分とした歯内療法用材料の開発アパタイト系やバイオガラス系などいくつかの材料について試験物を作製し、動物実験等で検討した結果、上記のリン酸化プルランをキーマテリアルとした試験物が最も有効であったことが明らかとなった。今後は、リン酸化プルランをキーマテリアルとした接着性MTAを中心に検討を進める。1.接着性MTAの覆髄・歯髄再生能評価昨年度はラット歯髄に対する直接覆髄の手技の確立が目標だったが、本年度はラット歯髄に対する手技を確立し、規格的な実験を行うことが可能となった。さらに、ラット歯髄に対する直接覆髄自体は終了し、HE染色による組織学的所見を得ることができた。さらに、材料毎の反応の差を評価することができた。その結果、本研究で用いた新規材料は、それぞれ直接覆髄材として有用であることが示唆された。さらに、現在は材料毎の反応差を詳細に検討するために、組織学的実験の継続実験として免疫染色を行うこととしている。免疫染色が終了後は学会発表を行い論文を作成する。加えて、より詳細な評価を行うために、生化学的実験も平行して行っており、まず実験手技の確立を行っている。以上より、昨年度検討していた事項は達成することができ、さらにその他多くの実験を行うことができた。2.他の主成分とした歯内療法用材料の開発上記研究実績の概要の欄に記載したように、アパタイト系やバイオガラス系などいくつかの材料について試験物を作製し、動物実験等で検討した結果、上記のリン酸化プルランをキーマテリアルとした試験物が最も有効であったことが明らかとなった。以上の理由より、本研究課題はおおむね順調に進展していると評価した。1.接着性MTAの調整:これまでは材料毎のラット歯髄に対する組織学的反応をHE染色にて比較した。本研究で用いた材料は初期における歯髄反応や、後期におけるデンチンブリッジの構造や形態等から、直接覆髄材として有用であることが示唆された。しかしながら、その機序に関しては不明な部分が多いため、現在免疫組織染色を行っている。免疫染色が終了後は結果を学会発表し、HE染色の結果と合わせて論文とすることを検討中である。また、材料毎の差をより詳細に比較検討するためにヒト歯髄細胞を用いた生化学的実験を現在行っている。この研究で行うべき内容は多岐にわたるため、まずは実験系と実験手技の確立を行っている。また、歯髄細胞から多臓器を発生させる実験も現在本歯学研究院細胞分子薬理学教室と検討している。この実験が成功した場合は、本研究材料と反応させ、新規創薬が可能となることが考えられる。以上の内容を今後の研究推進方策として検討中である。2.他の材料を主成分とした歯内療法用材料の開発アパタイト系やバイオガラス系などいくつかの材料について試験物を作製し、動物実験等で検討した結果、上記のリン酸化プルランをキーマテリアルとした試験物が最も有効であったことが明らかとなったので、今後はリン酸化プルランをキーマテリアルとした接着性MTAを中心に検討を進めていくこととする。1.覆髄・歯髄再生能評価サル歯髄の前段階として、ラットを用い、歯髄をMTAにリン酸化プルランを混和した試作接着性MTAセメントにて直接覆髄した。コントロールにはリン酸化プルラン、白金ナノコロイド第一世代、白金ナノコロイド第二世代、白金ナノコロイド第三世代を用いた。ラットの歯は非常に小さいため、ヒトに対して用いる歯科器材を用いて実験を行うには熟練された技術が必要とされる。また、組織学的観察を行うにあたっては、学会発表や論文掲載に耐えうる優れた実験試料を作製する必要がある。そこで、本年度はラット歯髄に対する直接覆髄処置方法、実験試料作製方法、組織学的観察方法を確立するため、以下のように行った。その後、上顎左右第1臼歯にスチールバーを用いて近心側から露髄させた。

生理食塩水で洗浄、止血確認後、上記の材料をそれぞれ歯髄に貼付し、スーパーボンドにて仮封を行った。08週で屠殺し、4%パラホルムアルデヒドにて固定、10%EDTAにて3週間脱灰を行った。その後通法に従いパラフィン包埋を行った。5&micro;mの切片を作製した後、ヘマトキシリン-エオジン染色標本での評価を行った。まずは、将来上記材料が製品化される際の経過を予想するため短期の観察を行った。その結果、短期において上記材料は軽度の炎症反応が観察された。長期においては形成される修復象牙質の形態や質を評価する予定で、現在試料の作製中である。2.他の材料を主成分とした歯内療法用材料の試作材料の調整を行い、実用化につながる知見を得た。本材は歯内療法用材料として一部、特許出願を行っているが、周辺特許の充実が不可欠である。さらに本材は、体内埋植など多用途への展開も見込める画期的な組成物であるため、結果については特許出願を考慮して詳細は割愛する。(1)接着性MTAの調整:リン酸化プルランを配合したMTAセメントを試作し、ラット露髄面に貼付して歯髄の反応を組織学的に評価した。コントロールにはリン酸化プルランや白金ナノコロイドを用いた。研究を遂行するにあたって問題となるのは、ラットの歯は非常に小さいため、歯科治療用切削器具により適切な大きさと形態の露髄を起こし材料を貼付することは、熟練した技術を要することである。歯に用いられる材料であるため、飼育途中に治療に用いた材料が残存歯による影響で脱落することを防ぐ必要もある。また、屠殺後から歯の染色までの過程もラットに合わせた薬品や作用時間を調整することが必須である。平成29年度は、これらの技術を画一化することを目指した結果、本研究を遂行するにあたって必要となる実験系の規格化が可能となった。また、現在までのところ、短期における結果は概ね得られており、今後は長期における結果が待たれる。短期においては上記材料において軽度の炎症反応が示唆された。これは今後患者に応用した際に、治療後の疼痛や違和感を減少させることが考えられ、良好な治療経過につながることが考えられる。長期の結果においては歯髄を保護する硬組織の形成程度や発生頻度が材料毎に異なるかが判明することが期待される。現在材料の貼付までは終了しており、予定した飼育期間に達するのを待っている状況である。予定期間後はただちに染色のための試料作りを行い、学会報告や論文作成を行う。(2)他の材料を主成分とした歯内療法用材料の試作:研究実績概要の欄に記載したように、材料の調整を行い、実用化につながる知見を得ている。本材は特許出願準備中であるため、それを考慮して詳細は割愛する。以上の理由より、本研究課題はおおむね順調に進展していると評価する。1.接着性MTAの覆髄・歯髄再生能評価サル歯髄の前段階として、ラットを用い、MTAにリン酸化プルランを混和した試作接着性MTAセメントにて直接覆髄した。コントロールにはリン酸化プルラン、白金ナノコロイド第一世代、第二世代、および第三世代を用いた。ウィスターラットオス89週齢にイソフルランによる吸入麻酔後、3種混合注射を行い全身麻酔を施した。上顎左右第1臼歯にスチールバーを用いて近心側から露髄させた。
サ－ファクタントを指標とした、血液生化学的・形態学的溺死診断の試み

日本人の高齢者に特有で頻度が高い浴槽内における溺死例について、サーファクタントを指標として、血液生化学検査と、形態学的検査の両面から新しい剖検診断法の開発を試みた。左心血、右心血、大腿動・静脈血中のサーファクタントプロテインA(SP-A)、サーファクタントプロテインD(SP-D)濃度を比較したところ、SP-A、Dともに溺死例では左心血中の濃度が右心血中の濃度より高値を示す傾向が認められた。諸臓器に対する抗サーファクタントアポプロテインA抗体を用いた免疫染色では、有意の所見は認められないように思われた。ただし、現時点では予備的な研究の段階であり、今後さらにデータの蓄積が必要である。平成26年度は、症例選択や条件検討等のための予備的な実験を行った。対象:これまで東京慈恵会医科大学法医学で施行された法医解剖例のうち、直接死因が入浴中の溺死と診断された症例の中から、死後経過時間が比較的短く組織学的な精査(免疫染色)による評価に耐えうる程度であり、左右心臓血、大腿動静脈血血清が保管されている数例を選択した。方法:各血清中のサーファクタントプロテインA(SP-A)およびサーファクタントプロテインD(SP-D)濃度を測定するとともに(業者委託)、諸臓器(肺、肝、腎、脾)のパラフィンブロックから新たにプレパラートを作成し、ヒストファインキット(ニチレイ)を用い、抗サーファクタントアポプロテイン抗体(DAKO)による免疫染色を行った。結果:SP-A、SP-Dとも右心血に比して左心血で明らかに高値を示す傾向が見られた(症例数が少ないため統計学的な検定行っていない)一方、大腿動脈血と静脈血には大きな差は見られないように思われた。免疫染色に関しては、陽性コントロールとして肺に陽性所見が見られたのは当然であるが、その他の臓器には明らかな陽性反応は見られなかった。考察:溺水時に吸引された水(溺水)により肺胞の内腔を裏打ちしているサーファクタントが洗い出され、さらにそれが肺胞毛細血管から肺静脈に流入することで左心血中のSP-AおよびSP-D濃度が上昇している可能性が考えられた。その傾向が大腿動脈でも継続しているのであれば生活反応としての信頼性が大きくなり、さらに諸臓器にサーファクタントの陽性反応が見られるのであれば、それが確固たるものになるのであるが、現時点では明確でない。次年度以降の検討課題といえる。平成27年度は、前年度同様、症例選択や条件検討等のための予備的な実験を行った。血清の分析に関しては前年度から発展していないが、今年度は主に高感度の免疫染色キットを用いた免疫染色を試みた。対象:これまで東京慈恵会医科大学法医学講座で施行された法医解剖例のうち、直接死因が入浴中の溺死と診断された症例の中から、死後経過時間が比較的短く組織学的な精査(免疫染色)による評価に耐えうる程度であり、左右心臓血、大腿動静脈血血清が保管されている数例を選択した。対象症例として、心臓性急死など死因の明らかな数例を同様に選択した。方法:各血清中のサーファクタントプロテインA(SP-A)およびサーファクタントプロテインD(SP-D)濃度を測定するとともに(業者委託)、諸臓器(肺、肝、腎、脾)のパラフィンブロックを用い、抗サーファクタントアポプロテイン抗体(DAKO)による免疫染色を行った。免疫染色には通常のヒストファインキット(ニチレイ)の他、DAKO社のCSAシステムを用いた。結果と考察:SP-A、SP-Dともに右心血に比して左心血で明らかに高値を示す傾向が見られた(症例数が少ないため統計学的な検定は行っていない)。一方、大腿動脈血と静脈血には大きな差は見られないように思われた。免疫染色に関しては、陽性コントロールとして肺に陽性所見が見られたのは当然であるが、その他の臓器には通常の免疫染色では明らかな陽性反応は見られなかった。高感度の方法(CSAシステム)を用いると腎の尿細管などに陽性反応を示す例もあったが、非特異的な反応も強くなるため判断が難しいと思われた。浴槽内の死亡例は、40°C前後の高温で死体が維持されることが多く、死後変化が進みやすいことは知られていたが、死後変化のために組織学的な精査に絶えられない、ないし、血液採取が十分にできていない症例が予想以上に多かった。今年度は、免疫染色の染色性改善のために高感度の免疫染色キットの使用を試みたが、高感度の免疫染色キットは、感度の高さとは裏腹に非特異的な反応が強く起こりやすいなど、条件設定が難しく、十分な成果が得られなかった。後述の理由により平成28年度は研究が進展していない。前年度までの研究実績の概要を以下に示す。

方法:各血清中のサーファクタントプロテインA(SP-A)およびサーファクタントプロテインD(SP-D)濃度を測定するとともに(業者委託)、諸臓器(肺、肝、腎、脾)のパラフィンブロックを用い、抗サーファクタントアポプロテイン抗体(DAKO)による免疫染色を行った。免疫染色には通常のヒストファインキット(ニチレイ)の他、DAKO社のCSAシステムを用いた。結果と考察:SP-A、SP-Dともに右心血に比して左心血で明らかに高値を示す傾向が見られた(症例数が少ないため統計学的な検定は行っていない)。一方、大腿動脈血と静脈血には大きな差は見られないように思われた。免疫染色に関しては、陽性コントロールとして肺に陽性所見が見られたのは当然であるが、その他の臓器には通常の免疫染色では明らかな陽性反応は見られなかった。高感度の方法(CSAシステム)を用いると腎の尿細管などに陽性反応を示す例もあったが、非特異的な反応も強くなるため判断が難しいと思われた。平成27年度までに予備的な研究はほぼ終了したが、残念ながら十分な条件設定はできなかった。それでも、可能な範囲で28年度より本格的な分析を開始する予定であったが、法医学講座における解剖業務多忙のために着手することができなかった。後述の理由により平成28年度以降は研究が進展していない。これまでの研究実績の概要を以下に示す。対象:これまで東京慈恵会医科大学法医学講座で施行された法医解剖例のうち、直接死因が入浴中の溺死と診断された症例の中から、死後経過時間が比較的短く組織学的な精査(免疫染色)による評価に耐えうる程度であり、左右心臓血、大腿動静脈血血清が保管されている数例を選択した。対象症例として、心臓性急死など死因の明らかな数例を同様に選択した。方法:各血清中のサーファクタントプロテインA、D(SP-A、SP-D)濃度を測定するとともに、諸臓器(肺、肝、腎、脾)のパラフィンブロックを用い、抗サーファクタントアポプロテイン抗体による免疫染色を行った。結果:SP-A、SP-Dともに右心血に比して左心血で明らかに高値を示す傾向が見られた。平成29年度は研究期間を1年間延長していただいた上で、法医学実務、研究に対する体制を再整備した上で研究に取り組む予定であったが、当講座における法医解剖数は年々増加の一途をたどっており、それに体制整備が追いつかず、残念ながら前年度同様に本格的な分析に着手することができなかった。日本人の高齢者に特有で頻度が高い浴槽内における溺死例について、サーファクタントを指標として、血液生化学検査と、形態学的検査の両面から新しい剖検診断法の開発を試みた。左心血、右心血、大腿動・静脈血中のサーファクタントプロテインA(SP-A)、サーファクタントプロテインD(SP-D)濃度を比較したところ、SP-A、Dともに溺死例では左心血中の濃度が右心血中の濃度より高値を示す傾向が認められた。諸臓器に対する抗サーファクタントアポプロテインA抗体を用いた免疫染色では、有意の所見は認められないように思われた。ただし、現時点では予備的な研究の段階であり、今後さらにデータの蓄積が必要である。