hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ニホンザルの老化に伴う認知能力と社会行動の変化に関する研究

ニホンザルを対象として、老化に伴う認知能力の低下のプロセスと社会行動の変化を実験と行動観察によって明らかにすること、人口学的資料から老体の社会的存在意義を探ること、また、進化的にヒトに近縁のゴリラについても加齢に関係した社会行動の変容を明らかにすることが、本研究の目的である。1.野外集団を対象とした研究:老齢オスは数年以上に渡り特定のメスとの親和的な社会関係を持続しており、これが自身の社会的順位の維持に役立っていると推測される。年齢に関係なく、娘、孫娘、姉妹などの近縁メスとの関わりが相対的に高い頻度で維持されたが、その中で、高齢メスほど自分の末娘との親和的関わりを特段に多くする傾向が顕著であった。他方、冬季に限って高齢メスには非血縁の0歳齢、1歳齢個体との身体接触が多く、寒さへの対応と推定された。2.老齢メスを対象とした学習実験:野外では25歳を超えると生存が極めてまれになるが、飼育環境下で35歳になるメスの空間記憶能力を実験的に調べた。25歳までの個体では、空間記億能力の減衰は見られなかったが、25歳以上の個体については年齢と共にその能力が減衰することが顕著であった。しかし、そのような高齢個体でも訓練の継続で学習が促進することも確認できた。3.高順位の母から生まれた子どもの生後1年間の生存率は、祖母が生存している場合には、生存していない場合に比べ、有意に高くなった。低順位の母から生まれた子の生存に、祖母の存在は影響しなかった。4.ゴリラの社会行動:11歳の娘が出産をしても、新生体を地面に置くなどの不適切な行動をした。しかし、その娘の母が新生体を抱き上げ、さらに娘に手渡すこと、抱くことを促す行動が確認できた。母が幼体の行動発達を促す足場作りをすることがゴリラやマカク類のサルで確認されているが、この事例はおとなの間でも足場作りが成立をすることをはじめて記録した事例であった。20歳を超えたニホンザルは繁殖能力が低下し、老ザルと言われる。このニホンザルを対象として、老化に伴った認知能力の低下のプロセスと社会行動の変化を実験と行動観察によって明らかにすることが、本研究の目的であった。1.野外集団を対象とした長期縦断的研究:過去8年間にわたり社会行動が縦断的に記録されている中心部成体オスの成体メスとの社会関係の記録を継続して行った。中心部成体オスの年齢は9歳から25歳までの広範囲であり、老齢オスは成体オスよりも体力的に劣ることは自明であるが、メス、特に高順位メスとの親和的関係を持続させていた。さらに、老齢オス間でも長期の親和的関係を維持していた。これらの安定した社会関係が、成体オスの順位上昇を阻み、結果的に高位老齢オスの順位安定に結びついていた。2.老齢メスを対象とした学習実験:過去5年間にわたり、実験室で飼育されている老齢ニホンザルメスを対象として空間認知に関する実験を継続的に行っている。今年度も、同様に同じ個体に対して実験を行った。30歳を超えた老齢メスにおいて、昨年度に比べて極端な学習成績の低下が確認された。しかし、野外集団でも生存が極めて稀な25歳から30歳までの個体でもそのような成績の低下は認められなかった。3.野外集団での老齢個体の社会関係に関する観察と飼育

老齢メスでの学習実験を次年度でも行い、比類のない長期縦断的研究を継続する。これが老化に伴う認知の減衰プロセスを明らかにすることに結びつく。20歳を超えたニホンザルは繁殖能力が低下し、老ザルと言われる。このニホンザルを対象として、老化に伴う認知能力の低下のプロセスと社会行動の変化を実験と行動観察によって明らかにすること、さらに、人口学的資料から老体の社会的存在意義を探ること、また、ニホンザルよりも進化的にヒトに近縁のゴリラについても加齢に関係した社会行動の変容を明らかにすることが、本研究の目的である。野外集団を対象とした研究:老齢オスは数年に渡り持続している特定のメスとの親和的な社会関係を持続しており、さらに、交尾期においても、特定のメスとの交尾関係が確認された。繁殖に結びつくかどうかは不明であるが、交尾期、非交尾期を通して、親和的な関係を特定の複数のメスと維持することが、老齢オスの順位維持に貢献していると考えられた。高位メスは老齢になっても、依然として、若い高齢のメスと同等の毛づくろい関係などを維持していたが、下位メスは老齢になると、孤立傾向が著しかった。すなわち、老化のプロセスは社会的順位によって異なることが明瞭であった。老齢メスを対象とした学習実験:野外では生存が極めてまれな25歳を超える年齢層のメスの空間記憶能力が、25歳までのメスよりも著しく衰えることがわかった。さらに、30歳を越えるメスの当該の能力は、一層の低下が認められた。他方、毎年継続的な学習訓練を受けていると、同様の能力は、加齢にも関わらず実験開始時の能力が維持される可能性が強いことが縦断的研究から明らかになりつつある。ゴリラの社会行動:11歳の娘が出産をしたとき、その母が孫を抱くなどの養育行動を示した。また、娘が新生体を地面に置くと、母が手を差し出し、その孫を下から押し上げ、娘の胸に押し戻した。これは「教育」と命名すべき行動である。この年長の母が示した娘への行動は、年長個体の教育行動として評定してよいかもわからない。このニホンザルを対象として、老化に伴う認知能力の低下のプロセスと社会行動の変化を実験と行動観察によって明らかにすること、人口学的資料から老体の社会的存在意義を探ること、また、ニホンザルよりも進化的にヒトに近縁のゴリラについても加齢に関係した社会行動の変容を明らかにすることが、本研究の目的である。野外集団を対象とした研究:老齢オスは数年に渡り特定のメスとの親和的な社会関係を持続している。しかし、交尾期においては、別のメスとの持続的な交尾を伴った関係が確認された。射精を伴う交尾を確認したが、繁殖に結びつくかどうかは不明である。また、高位のメスが祖母として生存していることは、その孫の生後1年間の生存に有利に働くことも確認された。老齢メスを対象とした学習実験:野外では25歳を超えると生存が極めてまれになるが、飼育環境下で35歳になるメスの空間記憶能力を実験的に調べた。当該の能力は、若い個体に比べて極めて劣っているが、それでも学習が促進することも確認された。また、毎年継続的な学習訓練を受けていると、同様の能力は、25歳を超えても実験開始時の能力が維持される可能性が強いことが縦断的研究から明らかになりつつある。
熊本地震における医療支援活動の振り返りと、今後への提言

本年度は医師を対象にアンケート調査を行った。九州全県の県医師会の協力を得て、各県の会員を中心に送付した。送付数10,014、回収総数2,866、約30%の回収率であり、うち60%余りが診療所に属し、幅広い経験年数、様々な専門分野の方々が回答していた。回答者の14.7%は熊本県内が仕事先だった。回答者の13.6%が支援に参加した経験があり、その約半分(49.1%)は、医療機関での診療支援活動を行っていた。災害支援活動のための準備状況について、熊本の医師(K群)は、九州他県の医師(O群)と比べ、有意に高い割合で肯定的に答えていた。周囲のサポートについても、K群は肯定的に答えていた。支援の参加に重要、影響を与えると思われる要因について、O群はK群と比べ所属組織の方針、上司の理解、同僚の協力など、様々な周囲の要因について"とても思う"と答えた人の割合が多かった。支援に参加するために、支給、準備されるべきものについて、違いはなかった。今後の支援活動について、自然災害に対しては、地震を除き、K群とO群で、支援についての意思に明らかな違いを認められなかった。人為災害も、テロを除いてK群とO群に回答の違いはなかった。自然災害と比べ人為災害への支援に参加する可能性は、高くないと思われた。今後の災害発生時、支援に行くことが可能な長さについて、3日以内が40%、一週間以内を加えると計80%であった。これは、実際に支援に行った人の経験と、大きな違いはなかった。K群はO群と比べて、積極的に災害支援に参加する意思を示していた。自然災害の被災経験者の割合も高く、これらは熊本地震を経験した影響による可能性があろう。また医師としての経験年数が浅いと、より積極的に支援に参加する結果となった。本年度行ったアンケート調査では、十分な数、内容の、データを得ることが出来た。今後は、本年度得られたデータを基に、より詳細な解析、検討を進め、関係学会(国際学会)での発表や、論文へのまとめを行う予定である。平成29年度は、先行研究の調査、研究遂行手順の確認、研究対象としての参加者リクルート手順の確認や協力依頼、調査内容の確認と決定、また調査質問用紙の作成を行った。本研究調査への協力を依頼する予定の熊本県医師会の担当者と、医師会会員への研究協力のためのリクルートを行う手順等について、討議を行ってきた。さらに本研究の研究協力者として、国立病院機構災害医療センター災害医療部福島復興支援室、小早川義貴医師の協力を新たに得て、質問内容の検討や質問用紙作成を行った。予定していた医師会会員への研究参加のためのリクルートに時間がかかり、やや進捗は当初の計画が遅れている。現在、調査用紙、質問用紙等の準備が終わり、学内の倫理委員会へ申請する準備を整えているところである。本年度は、倫理委員会の審査後、調査用紙の配布、回収、及び結果集計の後、解析を行い、専門学会での発表、および専門誌への論文投稿を行う。

今後は、本年度得られたデータを基に、より詳細な解析、検討を進め、関係学会(国際学会)での発表や、論文へのまとめを行う予定である。本研究の中心であるアンケート調査を行うための費用が掛かるために、次年度使用額が生じている。本年度得られたデータを基に、より詳細な解析、検討を進め、関係学会(国際学会)での発表、英語論文へのまとめを行う予定である。
ニュートリノ相互作用を規定する対称性の解明

ニュートリノの非常に小さな質量の獲得には弱い相互作用をしない右巻きニュートリノがその根本にあると考えられており、右巻きニュートリノの質量の起源がニュートリノ質量起源の本質である。本研究では、初期宇宙で起こった右巻きニュートリノに質量を生成する真空の相転移により生成される重力波観測を通じて、重い右巻きニュートリノの質量起源となる高エネルギー領域でのニュートリノの相互作用を規定するゲージ対称性を解明する。
衛星搭載風ライダーによる風高度分布観測の空間分解能最適化に関する研究

衛星搭載ドップラー風ライダーより高い空間分解能をもち、かつ、技術的に開発可能なDWLによる複数シナリオの風データを疑似的に作成(シミュレート)し、データ同化実験を行うことによって数値予報へのインパクトについて調べ、数値予報に最適な衛星搭載DWLの空間分解能について明らかにする。そのために、高い空間分解能を有する気象場(疑似真値場)とエアロゾル場の構築とDWL衛星シミュレータとデータ同化システムの高度化を図る。
早期胃癌におけるヘリコバクター・ピロリの関与

早期胃癌(m+sm)73例(男/女=49/24:3581才、平均62.9才:分化型/未分化型=46/27)を検討対象とした。1、H.pylori感染率および菌分布培養陽性あるいは血中抗体価陽性例をH.Pylori感染関連症例とし、分化型(44/46=95.7%)未分化型(27/27=100%)と、強い相関がみられた。菌分布は、分化型(一/体部のみ分布/全体分布=8/16/22)未分化型(2/4/21)と未分化型で胃内に広く菌が分布していた。癌巣周囲の菌分布は30-50才までは両者に差がなく、60才より分化型で有意に癌周囲の菌分布が低下した。2、背景粘膜の萎縮度分化型、未分化型を比較すると、幽門部の萎縮度、腺境界、Pepsinogen I/II比いずれも分化型の方が萎縮の進展がみられた。しかし、幽門部の萎縮腸上皮化生の程度をみると、未分化型でも中等度以上の変化があり、いずれの型においてもある程度の萎縮が背景にみられる事が判明した。また、癌巣周囲の萎縮腸上皮化生も分化型93.5%、未分化型63.0%に確認でき、30-50才までは両者に差はみられなかった。3、H.pylori株の特性(1)空胞化毒素活性は分離された菌の33/45(73.3%)(分化型/未分化型=76.9/68.4%)と差がみられなかった。この頻度は、萎縮性胃炎患者由来株の活性陽性率と同等であった。(2)vacAタイピングは、そのほとんどがs1/m1 type、cagAはほとんどの株に陽性であった。以上の結果から、本邦におけるH.pylori分離株はほとんどが空胞化毒素産生株で障害性の強い株である。今回のアッセイ系での毒素産生率は萎縮性胃炎分離株と同等であった。一方、胃癌の背景をみると分化、未分化いずれも中等度以上の萎縮を背景としており、いずれの癌でも、萎縮化生性変化が引き起こされる過程にH.pyloriが強く関連している可能性が導き出せた。(結果)1997年までに、早期胃癌(m+sm)73例を検討しえた。方法論に基づいて、切除標本から濾紙を用いて粘液を採取、内視鏡的フェノールレッド法に準じて、H.pyloriの分布および癌巣との関係、胃粘膜萎縮との関係を検討した。赤変部位は培養で菌の有無を確認し、また血清IgG抗体価にても感染の有無を検索した。歯の障害因子として、培養された菌の空胞化毒素に注目し、Hela細胞に対する空胞化の有無を検討した。以上の症例において、H.pylori陽性率は95.9%(分化型93.5%,未分化型100%)と、癌との間に強い関連がみられた。

未分化型癌では分化型癌に対し、背景胃粘膜萎縮が弱いものの、幽門部組織に中等度の萎縮腸上皮化生性変化が認められた。また、癌と接する周囲粘膜組織にも分化型、未分化型ともに多くの症例で、中等度以上の萎縮脇上皮化生変化が確認された。一方、分化型癌においては、未分化型に比べ、H.pylori分布が有意に限局、縮小される傾向を認めた。菌の障害因子として、現在までの検討では、空胞化毒素活性が、分化型20/26(76.9%)、未分化型13/19(68.4%)に認められた。(考察)癌の組織型にかかわらず、高いH.pylori陽性率で、かつ背景の胃粘膜および癌周囲の胃粘膜に中等度以上の萎縮腸上皮化生性変化が認められる事から、H.pyiorlは胃癌発生における初期の萎縮腸上皮化生形成の段階に強くかかわっているのではないか、という事が示唆された。また、空胞化毒素活性陽性率は、萎縮性胃炎由来株とほぼ同程度であり、H.pyloriの有する空胞化毒素が、萎縮の進展から発癌へも関与する可能性が示唆された。今後、さらに、その他の障害因子の検討、および癌症例と年齢性をマッチさせた群における空胞化毒素活性ならびにその他の障害因子について、検討を要すると考えられた。早期胃癌(m+sm)73例(男/女=49/24:35-81才、平均62.9才:分化型/未分化型=46/27)を検討対象とした。1、H.pylori感染率および菌分布培養陽性あるいは血中抗体価陽性例をH.pylori感染関連症例とし、分化型(44/46=95.7%)未分化型(27/27=100%)と、強い相関がみられた。菌分布は、分化型(-/体部のみ分布/全体分布=8/16/22)未分化型(2/4/21)と未分化型で胃内に広く菌が分布していた。癌巣周囲の菌分布は30-50才までは両者に差がなく、60才より分化型で有意に癌周囲の菌分布が低下した。2、背最粘膜の萎縮度分化型、未分化型を比較すると、幽門部の萎縮度、腺境界、Pepsinogen I/II比いずれも分化型の方が萎縮の進展がみられた。しかし、幽門部の萎縮腸上皮化生の程度をみると、未分化型でも中等度以上の変化があり、いずれの型においてもある程度の萎縮が背景にみられる事が判明した。また、癌巣周囲の萎縮腸上皮化生も分化型93.5%、未分化型63.0%に確認でき、30-50才までは両者に差はみられなかった。3、H.pylori株の特性(1)空胞化毒素活性は分離された菌の33/45(73.3%)(分子型/未分化型=76.9/68.4%)と差がみられなかった。この頻度は、萎縮性胃炎患者由来株の活性陽性率と同等であった。(2)vacAタイピングは、そのほとんどがs1/m1 type、cagAはほとんどの株に陽性であった。以上の結果から、本邦におけるH.pylori分離株はほとんどが空胞化毒素産生株で障害性の強い株である。今回のアッセイ系での毒素産生率は萎縮性胃炎分離株と同等であった。一方、胃癌の背景をみると分化、未分化いずれも中等度以上の萎縮を背景としており、いずれの癌でも、萎縮化生性変化が引き起こされる過程にH.Pyloriが強く関連している可能性が導き出せた。
生物学的モニタリングにおける高分解能核磁気共鳴の利用の研究

高分解能核磁気共鳴スペクトル法の医学への応用については、急速に装置が普及してきたため、広範囲に検討をされている分野であるが、予防医学の方面では現在の所報告はほとんど見あたらない。その理由の一つに感度の問題がある。高磁場の採用により感度は飛躍的に向上してきたが、微量代謝成分を定量出来るほどには達していない。第二にシグナルの帰属の問題がある。装置が汎用化したとはいっても微量成分の帰属には高度な知識と技術を必要とする。これらの問題点を解決するための方策を今回は追求してきた。NMRのピークの帰属をする方法の一つに、常磁性のプローブを用いる方法がある。2価のイオンとして影響が局在して観測できるプローブとしてNi(II)を用いた。また、特定の機能をもつ常磁性プローブとしてCr(III)ATPを用いた。これによりピルビン酸キナーゼのヒスチジン残基のうち2価イオンの結合部位と、ATP結合部位の近傍に存在するものを特定することが出来た。さらに、緩和時間T_1を測定することにより、ヒスチジンC-2プロトンとの距離を計算することができた。
認知機能改善に焦点を当てた認知行動的技法に基づく抑うつの再発予防プログラムの検討

今年度は,うつ病の再発をもたらす認知的脆弱性(認知機能障害,および認知的反応性)に関して,認知神経科学的観点からの実験的-縦断的検討を行った。具体的には,昨年度に引き続き,(a)神経心理学的手法を用いて認知機能障害を検討した研究1(山本・菅谷・嶋田, 2011, Yamamoto & Shimada, 2011, Yamamoto & Shimada, in press),(b)うつ病に特異的な認知機能障害のアセスメント測度の整備を行った研究2(under review),(c)神経生理学的・認知心理学的手法を用いて認知機能障害を検討した研究3(山本・菅谷・嶋田・熊野,2011)を実施し,今年度は新たに(d)脆弱性が抑うつ症状の増大に及ぼす影響を縦断的に検討した研究4(under review)を遂行した。研究13の結果は,昨年度に報告した結果を支持するものであり,研究1の結果から,大うつ病エピソードを経験した者においては,未経験者に比べ,認知機能が有意に低いことが確認され,特に高次な認知機能において顕著であった。また,研究2の結果から,本研究課題で作成したアセスメント測度が,大うつ病エピソード経験者の認知的脆弱性の測定にとって有用であることが示唆された。さらに,研究3の結果,大うつ病エピソード経験者のみにおいて,感情刺激に対する特異的な脳波活動が確認され,意識下において自動的に生起する認知的処理過程が脆弱性生起の背景にある可能性が示唆された。これらの脆弱性の影響を縦断的に検討した研究4の結果,本研究で測定した認知的脆弱性が抑うつ症状の増大に及ぼす影響性が確認され,うつ病の再発にこれらの脆弱性が大きな影響を及ぼすことが示唆された。以上の研究成果は,うつ病再発をもたらす脆弱性の病態構造,および再発に至るメカニズムを理解するための有用な知見の一助になると考えられ,再発予防を目的とした介入方法を検討するうえで非常に意義深いと考えられる。当初の目的であった研究はすべて滞りなく遂行され,研究目的であった(a)「認知機能の低下が抑うつ症状に及ぼす影響の検討」,および(b)「再発の脆弱性となる認知機能の背景メカニズムに焦点を当てた,臨床心理学的介入方法の考察」を期間内に行えたため。今後は,うつ病患者をはじめとした臨床データを用いた検討を行うことで,本研究知見の精緻化,および応用可能性について,さらなる考察が可能になると考えられる。そして,こうした研究成果に基づいて,認知的脆弱性に焦点を当てた臨床心理学的介入方法を検討することで,うつ病の再発予防を目的とした新たなアプローチ方法の構築につながることが期待される。今年度は,大うつ病エピソードを経験した者が有する認知機能障害に関して,先行研究の広範なレビューを行うとともに,認知神経科学的観点からの実験的検討を行った。具体的には,大うつ病性障害寛解者における認知機能障害の有無を考察した論文を概観し,国内学術雑誌に発表した(山本他,2011)。その上で,(a)神経心理学的手法を用いて認知機能障害を検討した研究1(海外学術雑誌に投稿中),(b)うつ病に特異的な認知機能障害のアセスメント測度の整備を行った研究2(データ収集中),(c)生理的・認知心理学的手法を用いて認知機能障害を検討した研究3(データ収集中)を実施した。研究1の結果から,大うつ病エピソードを経験した者においては,未経験者に比べ,認知機能が有意に低いことが確認され,特に高次な認知機能において顕著であった(山本・嶋田,2010a, b, Yamamoto & Shimada, submitted)。また,研究2の予備的解析の結果から,本研究課題で作成しているアセスメント測度が,うつ病寛解者の認知機能の測定にとって鋭敏であることが示唆された。さらに,研究3の予備的解析の結果,エピソード経験者のみにおいて,感情刺激に対する特異的な情報処理反応が脳波指標から確認された。以上の研究成果は,大うつ病エピソード経験者の認知機能障害の性質を理解する際において,有用な知見の一助となると考えられ,うつ病の再発をもたらすプロセスを考察する上で意義深いと考えられる。これらの成果は,当初の計画の基礎となる部分であり,次年度につながる研究を遂行したと判断できる。

また,研究2の結果から,本研究課題で作成したアセスメント測度が,大うつ病エピソード経験者の認知的脆弱性の測定にとって有用であることが示唆された。さらに,研究3の結果,大うつ病エピソード経験者のみにおいて,感情刺激に対する特異的な脳波活動が確認され,意識下において自動的に生起する認知的処理過程が脆弱性生起の背景にある可能性が示唆された。これらの脆弱性の影響を縦断的に検討した研究4の結果,本研究で測定した認知的脆弱性が抑うつ症状の増大に及ぼす影響性が確認され,うつ病の再発にこれらの脆弱性が大きな影響を及ぼすことが示唆された。以上の研究成果は,うつ病再発をもたらす脆弱性の病態構造,および再発に至るメカニズムを理解するための有用な知見の一助になると考えられ,再発予防を目的とした介入方法を検討するうえで非常に意義深いと考えられる。当初の目的であった研究はすべて滞りなく遂行され,研究目的であった(a)「認知機能の低下が抑うつ症状に及ぼす影響の検討」,および(b)「再発の脆弱性となる認知機能の背景メカニズムに焦点を当てた,臨床心理学的介入方法の考察」を期間内に行えたため。今後は,うつ病患者をはじめとした臨床データを用いた検討を行うことで,本研究知見の精緻化,および応用可能性について,さらなる考察が可能になると考えられる。そして,こうした研究成果に基づいて,認知的脆弱性に焦点を当てた臨床心理学的介入方法を検討することで,うつ病の再発予防を目的とした新たなアプローチ方法の構築につながることが期待される。
コミュニティ・オリエンテーション：教育プログラムの開発及び影響要因の探索

本研究の目的は、多様な保健課題に医療・健康増進の両面から対応するフィジーの保健師が地域の情報を効果的に収集・分析し、分析された情報を活かして活動を行う能力、即ちコミュニティ・オリエンテーションを向上するために教育プログラムを開発・検証することである。教育プログラムは本研究に先立ち開発されたコミュニティ・オリエンテーションを測定する尺度を用いて行う。当初計画に基づき、1)ワーキンググループの結成、2)教育プログラムに関するニーズ調査、3) 2016年度調査の分析を行った。以下、概略を記述する。1)フィジー保健省公衆衛生部長、疫学/統計局長、看護部長及び看護管理職、フィジー大学看護学部長等が参加し、教育プログラム検討会を行った。保健省幹部より「多くの海外研究に協力したが教育プログラムとして成果を還元する研究は初めて」との賞賛を得て、研究への協力が了承された。議論の結果、プログラム案が決定された。当初計画では試験運用のためにに保健師のみを対象としたが、保健省の希望から伝達講習をするために指導者も対象とすることとなった。次に、保健省看護部長等からなるワーキンググループが結成され、プログラム試行時の運営実施方法が決定された。教育プログラム案および評価方法について有識者からスーパーバイズを受けた。2)保健師管理者および現任教育担当官、保健師を対象としたインタビューにより、1現在の現任教育はWHO、JICA等のドナーが主催する生活習慣病等の課題プログラムに関する内容で本研究のようにプログラムを管理する研修は行われていなかったこと、2地域の情報を活用して事業化することについては苦手意識が強い等、本教育プログラムへのニーズが高いことが確認された。また、フィジー大学看護学部においても教育プログラムの導入を希望された。3)2016年度調査の調査を分析し、結果を学会発表において報告した。2017年度の計画は記述の通り、1)ワーキンググループの結成、2)教育プログラムに関するニーズ調査、3) 2016年度調査の分析であった。本研究に関係するフィジー側関係者から研究への理解および協力を得ることができ、上記計画は全て終了することができた。また、有識者の助言も得て実行可能で効果の高い教育プログラムを作成することができた。フィジー大学看護学部長を巻き込んだことにより、現役の保健師のみではなく、看護学生にも波及する可能性も高まった。研究プログラム試行に先立ち、フィジー保健省の倫理審査に時間がかかることが予測されたが、プログラム試行に先立ち検討会を開催したことにより倫理委員長の理解が促進され、遅延することなく審査が終了した。以上より教育プログラムに関する準備が滞りなくすべて整ったことより、本研究はおおむね順調に進展していると言える。当初の研究計画に従い、コミュニティ・オリエンテーションを向上させる教育プログラムを実施し、その効果を検討するために、以下の研究の推進方策を進める。フィジーに渡航し、保健師、指導者を対象として教育プログラムを開催する予定である。教育プログラム前にコミュニティ・オリエンテーションに対する認識・実施の程度について、教育プログラム後には認識の変化について質問紙調査を実施する予定である。影響要因に関しては教育プログラムの中でフォーカスグループディスカッション手法を用いてデータを収集し、分析する予定である。研究で得られた成果を国内外の学会および学術雑誌にて報告する予定である。

研究プログラム試行に先立ち、フィジー保健省の倫理審査に時間がかかることが予測されたが、プログラム試行に先立ち検討会を開催したことにより倫理委員長の理解が促進され、遅延することなく審査が終了した。以上より教育プログラムに関する準備が滞りなくすべて整ったことより、本研究はおおむね順調に進展していると言える。当初の研究計画に従い、コミュニティ・オリエンテーションを向上させる教育プログラムを実施し、その効果を検討するために、以下の研究の推進方策を進める。フィジーに渡航し、保健師、指導者を対象として教育プログラムを開催する予定である。教育プログラム前にコミュニティ・オリエンテーションに対する認識・実施の程度について、教育プログラム後には認識の変化について質問紙調査を実施する予定である。影響要因に関しては教育プログラムの中でフォーカスグループディスカッション手法を用いてデータを収集し、分析する予定である。研究で得られた成果を国内外の学会および学術雑誌にて報告する予定である。
有機カチオントランスポーターＯＣＴ２の内在性機能プローブ探索および生理機能の解明

トランスポーターは医薬品の体内動態における重要な決定因子であり、その阻害による薬物間相互作用の発生リスクを早期に把握するための方法論の開発は、医薬品開発の加速および安全性担保のために重要である。申請者は、腎排泄型の内在性代謝物であるN1-methyladenosine(m1A)について、有機カチオントランスポーターOCT2およびMATE2-Kが尿細管取り込み・排出を担うことを実験動物レベルで明らかにしてきた。そこで、m1Aがこれらの薬物トランスポーターの機能を反映するプローブとして利用できる可能性を検討すべく、研究を遂行した。初年度の具体的な成果として、m1Aの腎排泄におけるOCT2/MATE2-Kの特異性を、腎臓の取り込みトランスポーターOATsの安定発現細胞や、排出トランスポーターBCRP、P-gpのノックアウトマウスを用いた実験から明らかにした。また、チロシンキナーゼ阻害剤がOCT2を阻害しうるとの報告に基づき、パゾパニブ、エルロチニブの投与患者の検体を収集したが、投与前後で血漿中m1A濃度の有意な上昇は認められなかった。このことは、両薬物の蛋白結合率の高さから、遊離型濃度としてOCT2を阻害する血漿中濃度に達していなかったことが原因と考えられた。他方、トランスポーターの機能を左右する要因として、発現量の個人差も重要である。既報のゲノムワイド関連解析では、m1Aの血清中濃度はOCT2の遺伝子変異のみと相関し、その中にエキソンおよびプロモーター中の変異は含まれていなかった。レポーターアッセイの結果、イントロン中で当該の変異が集中する1kbp程度の領域がエンハンサー活性をもつことがわかり、責任転写因子を探索中である。また、3'非翻訳領域中の変異周辺に結合しうるmicroRNAの発現ベクターおよび定量系を作製し、OCT2の発現に及ぼす影響を検証中である。m1AがOCT2/MATE2-Kのプローブとして利用できる可能性を検討するため、動物実験・臨床データを積み上げ、現在のところ優れた選択性を示すことを確認し、国際誌への論文投稿を行った。アミノ酸置換を伴うOCT2の変異体については、m1Aの輸送能が野生型と同等であることが確認されたことから、当該の変異に着目したヒト臨床試験は行わないこととした。また、MATE阻害剤ピリメタミンの用量漸増試験についてプロトコルを策定し、今夏実施予定である。他方、m1Aの血清中濃度に関するゲノムワイド関連解析のデータをもとに、OCT2の発現制御を担っている可能性のある遺伝子領域を新規に見出した。薬物動態の個人差を司る要因を新たに明らかにすべく、責任転写因子やmicroRNAの同定に向けて引き続き研究を推進する。MATE阻害剤ピリメタミンの用量漸増試験を製薬企業との共同研究により実施する。OCT2およびMATEの選択的な基質薬であるメトホルミンを同時投与し、AUCおよび腎クリアランスの変動をm1Aと比較評価する。また、m1Aの血漿中濃度推移および尿中排泄のデータについて数理モデル解析を行い、ピリメタミン投与による動態変動を再現できるようなin vivo阻害定数を算出するとともに、その阻害定数を用いてメトホルミンの動態変動を再現できるか否かを検証する。試験に先立ち、メトホルミンを基質とした場合とm1Aを基質とした場合とで、ピリメタミンのMATE2-K阻害定数がほぼ同等であることを、トランスポーター安定発現細胞を用いた取り込み試験で確認している。OCT2の発現制御に関しては、エンハンサー領域の各変異により結合能が変動しうる転写因子をTranscription factor Affinity Prediction(TRAP)解析によって検索し、レポーターアッセイやゲルシフトアッセイを行うことで、責任転写因子の同定を目指す。また、3'非翻訳領域を組み込んだOCT2の安定発現系を樹立し、候補microRNAの共発現がOCT2の発現量に及ぼす影響を確かめる。さらに、OCT2を内因性に発現しているヒト腎臓由来細胞株に当該の変異を導入し、OCT2の発現量が変動するか否かを検証する。

レポーターアッセイの結果、イントロン中で当該の変異が集中する1kbp程度の領域がエンハンサー活性をもつことがわかり、責任転写因子を探索中である。また、3'非翻訳領域中の変異周辺に結合しうるmicroRNAの発現ベクターおよび定量系を作製し、OCT2の発現に及ぼす影響を検証中である。m1AがOCT2/MATE2-Kのプローブとして利用できる可能性を検討するため、動物実験・臨床データを積み上げ、現在のところ優れた選択性を示すことを確認し、国際誌への論文投稿を行った。アミノ酸置換を伴うOCT2の変異体については、m1Aの輸送能が野生型と同等であることが確認されたことから、当該の変異に着目したヒト臨床試験は行わないこととした。また、MATE阻害剤ピリメタミンの用量漸増試験についてプロトコルを策定し、今夏実施予定である。他方、m1Aの血清中濃度に関するゲノムワイド関連解析のデータをもとに、OCT2の発現制御を担っている可能性のある遺伝子領域を新規に見出した。薬物動態の個人差を司る要因を新たに明らかにすべく、責任転写因子やmicroRNAの同定に向けて引き続き研究を推進する。MATE阻害剤ピリメタミンの用量漸増試験を製薬企業との共同研究により実施する。OCT2およびMATEの選択的な基質薬であるメトホルミンを同時投与し、AUCおよび腎クリアランスの変動をm1Aと比較評価する。また、m1Aの血漿中濃度推移および尿中排泄のデータについて数理モデル解析を行い、ピリメタミン投与による動態変動を再現できるようなin vivo阻害定数を算出するとともに、その阻害定数を用いてメトホルミンの動態変動を再現できるか否かを検証する。試験に先立ち、メトホルミンを基質とした場合とm1Aを基質とした場合とで、ピリメタミンのMATE2-K阻害定数がほぼ同等であることを、トランスポーター安定発現細胞を用いた取り込み試験で確認している。OCT2の発現制御に関しては、エンハンサー領域の各変異により結合能が変動しうる転写因子をTranscription factor Affinity Prediction(TRAP)解析によって検索し、レポーターアッセイやゲルシフトアッセイを行うことで、責任転写因子の同定を目指す。また、3'非翻訳領域を組み込んだOCT2の安定発現系を樹立し、候補microRNAの共発現がOCT2の発現量に及ぼす影響を確かめる。さらに、OCT2を内因性に発現しているヒト腎臓由来細胞株に当該の変異を導入し、OCT2の発現量が変動するか否かを検証する。
疎粒度並列処理向き共有メモリ型計算機構に関する研究

本研究では、非数値処理の分野で再帰的なアルゴリズムを含む並列処理を効率よく実行することができる実行系の実現を目的とした。研究の方針としては、複数の並列実行中のプロセスにデータを分散させるのは困難であることから、データは共有する方針とし、また、そのまま実すると、実行の時間単位が小さくなってしまう細粒度のプロセスを効率よく実行できることのできる計算機構を設計し、実現した。具体的には、コンパイラというプログラム言語の変換系の内部処理を並列化することを題材として使用することにし、実際に、PL/0言語のコンパイラの動的なプロセス生成アルゴリズムに関して、これまでに行ってきた細粒度並列処理のアルゴリズムの動作の測定をシミュレータ上で行い、実行時にオーバヘッドとなっている部分を解析した。この結果に基づいて、プロセスの管理に関するオーバヘッドとアルゴリズムに起因するオーバヘッドに分けて分析した。さらに、この結果に基づいて、プロセスを“疎に"割り付ける疎粒度並列処理の方式の設計および、アルゴリズムの記述の方式を設計し、この方式に基づいて、実際に、PL/0コンパイラの意味処理部を再設計し、新しいコンパイラを実現して、コンパイラの意味処理における疎粒度並列処理の効果について評価を行い、新しい方式の有用さを確認した。
心筋分化過程における心筋細胞表面マーカーの探索とその機能解析

本研究の目的は、ES細胞から心筋細胞へ分化する過程における分化段階や細胞系列の異なる心筋細胞を区別することが可能な細胞表面マーカーを同定・解析し、これらのマーカーにより選別した心筋細胞の心筋再生への可能性を検討することである。ネオマイシンにより心筋細胞が選別可能なマウスES細胞ライン(Nkx2.5/NeoR ES細胞ライン)を用い、早期心筋分化マーカーの一つであるNkx2.5が欠損したES細胞由来心筋細胞(分化17日目)において発現レベルが有意に変化する遺伝子群をすでに同定した。Nkx2.5は心臓前駆細胞に発現し心筋分化を促進するため、同遺伝子群は心筋分化に伴って発現変化し、分化段階を区別できるマーカーである可能性があることから、同遺伝子群のうち細胞表面蛋白について心筋分化過程における発現変化をin votro ES細胞分化系とマウス胎生心で確認した。分化8日目までの胚様体において、Tgfβreceptor 3は36日目、Edg7は6日目において野生型ES細胞群に比べNkx2.5欠損ES細胞群でrealtime PCRの発現レベルの低下を認めた。また、胎生9.5日マウス心のin situ hybridizationにおいても、両遺伝子は心臓に発現し、Nkx2.5欠損マウスで発現レベルの低下を認めた。これらの結果から、両遺伝子は発生段階の心筋細胞においてNkx2.5依存的に発現変化する細胞表面マーカーである可能性が示唆された。今後は、EACSを用いてES細胞由来心臓前駆細胞における両遺伝子発現の解析、陽性細胞群の単離・培養、生着条件の検討を行い、心筋細胞における細胞表面マーカーとしての意義、心筋再生への可能性についてさらに検討を進める。
非線形偏微分方程式の解の精度保証付き数値計算法に関する研究

本年度の研究により,過去得られた楕円型方程式に関する結果を,より実用度の高いものに改良・拡張した.具体的には以下の項目の研究を行った.1.与えられた非線形偏微分方程式を,超関数理論に基づく弱形式に変形する.更にNewton-Likeな手法を用い,適当なHilbert空間上の不動点問題に同値変形を行う.この際,より効率よい定式化を提案した.2.検証結果の反復の過程で不動点定理の条件が満たされ,解の存在が計算機内で保証されるアルゴリズムを導く.計算機内では,有限要素法をもとに区間演算の性質に留意しながら近似解の決定,検証を行う反復解の計算,および射影によって生じる誤差評価を行った.3.また,検証プログラムの高速化と効率化の検討,およびその実用性の評価を行なった.具体的には,設備備品として購入したパーソナルコンピュータを用い,内積およびノルムの評価を数式処理システムで行い,結果を汎用性のある組み込み関数として作成した.4.丸め誤差を考慮した数値計算への適用として,精度保証付きライブラリによる解の精度保証を微分不能項を含む非線形MHD方程式に適用し,解の存在検証に成功した.今後の研究としては,これまでに得られた非線形楕円型方程式の解の精度保証計算を,Navier-Stokes方程式の定常解の精度保証に適用することを行う予定であり,既に線形化版であるStokes方程式の有限要素解に対するa priori/aposterioriな誤差評価の定式化に関する考察に着手している.本年度の研究により,過去得られた楕円型方程式に関する結果を,より実用度の高いものに改良・拡張した.具体的には以下の項目の研究を行った.1.与えられた非線形偏微分方程式を,超関数理論に基づく弱形式に変形する.更にNewton-Likeな手法を用い,適当なHilbert空間上の不動点問題に同値変形を行う.この際,より効率よい定式化を提案した.2.検証結果の反復の過程で不動点定理の条件が満たされ,解の存在が計算機内で保証されるアルゴリズムを導く.計算機内では,有限要素法をもとに区間演算の性質に留意しながら近似解の決定,検証を行う反復解の計算,および射影によって生じる誤差評価を行った.3.また,検証プログラムの高速化と効率化の検討,およびその実用性の評価を行なった.具体的には,設備備品として購入したパーソナルコンピュータを用い,内積およびノルムの評価を数式処理システムで行い,結果を汎用性のある組み込み関数として作成した.4.丸め誤差を考慮した数値計算への適用として,精度保証付きライブラリによる解の精度保証を微分不能項を含む非線形MHD方程式に適用し,解の存在検証に成功した.今後の研究としては,これまでに得られた非線形楕円型方程式の解の精度保証計算を,Navier-Stokes方程式の定常解の精度保証に適用することを行う予定であり,既に線形化版であるStokes方程式の有限要素解に対するa priori/aposterioriな誤差評価の定式化に関する考察に着手している.
東部インドネシアスラウェシにおける海民バジョの「起源説」をめぐる文化人類学的研究

バジョは、東南アジアに広く拡散居住する海民の一派である。インドネシア東部スラウェシでは、他集団の王家にまつわる口頭伝承の内容と王家の家系図に重なるバジョ起源説が語られる。バジョ起源説は、バジョと他集団の関係、さらにはバジョアイデンティティを強化する語りである。本研究では、人類学的参与観察と歴史学的な史料調査を併せて行うことにより、バジョの実態と歴史的記録/記憶を解明し、過去現代に続く海域社会におけるバジョと他集団との関係構築過程、およびバジョアイデンティティ形成の様相を捉えることを試みる。最終的には、スラウェシのバジョを複眼的に捉えたバジョ民族誌を執筆することを目指す。
脂肪酸栄養と情動-脳内アナンダミドレベルを指標として

マリファナの主成分であるΔ9THCに対する受容体の内因性リガンドN-arachidonoyl-ethanolamide(アナンダミドanandamide、AEtA)、2-arachidonoylglycerol(2-AG)の量的変動を知り、さらには種々の精神疾患・行動異常に対する脂肪酸栄養の効果とアナンダミド産生の関連を明らかにすることを最終目標として、本研究を開始した。以下に研究成果を記載する。1.同一サンプルからのAEtA、2-AGの分離定量法の検討;両内因性リガンドとも、脂質抽出画分から、TCL-HPLC(GLC)により分離定量できるが、TLC上では、ほぼ同一の位置に分離されるため、同一サンプルから同時に両者を定量することは困難であった。しかしながら、内部標準物質、TLC展開溶媒を工夫することにより、2次元TLC上で両者を初めて分離することに成功した。2.ラット食餌脂肪酸によるΔ9THC受容体内因性リガンドレベルの変化;ラットに次のような食餌を与え、2週間飼育した後の腎臓及び脳のAEtA、2-AG量を調べた。A群(コントロール);無脂肪食+ラード10%、B群;無脂肪食+リン脂質型DHA10%、C群;無脂肪食+トリグリセリド型DHA10%、D群;トリグセリド型リノール酸10%、その結果、BCD群ともに各臓器中のリン脂質の脂肪酸レベルにおいては、食事中の脂肪酸構成に見合った変化がみられたが、アラキドノイルグリセロールにはほとんど変化がみられなかった。しかし、脳のAEtAは、DHA食(B、C群)を与えることで低下した。3.アナンダミドの分離において、TLC上の非常に近い位置に、細胞内のシグナル伝達に関わる脂質メディエーターの一つと考えられている。セラミドが分離されてきた。このセラミドについて、微量定量を目指し、種々検討した結果、同様の蛍光HPLCによる各分子種の分離定量法を確立することができた。4.DHAによりTNF誘導のアポトーシスが抑制されることがわかった。マリファナの向精神性作用の主成分であるΔ9THCに対する受容体の内因性リガンドとしてN-arachdoroyl-ethanolamide(アナンダミドanandamide、AEtA)が同定され、「脳内マリファナ」として世界的な注目を集めた。また最近、第二のΔ9THC受容体内因性リガンドとして、2-arachidonoylglycerol(2-AG)も同定された。これらの内因性リガンドが実際に生体内でどのように機能しているかに関しては、多くの不明な点が残されているが、これらがいずれもアラキドン酸代謝物(エイコサノイド)であったことは、食事中のn-6/n-3脂肪酸比により中枢神経系の働きが変化する可能性を示している。以上のような背景から、食餌中n-6脂肪酸/n-3脂肪酸比によるアナンダミド及び2-arachidoylglycerolの量的変動を知り、さらには種々の精神疾患・行動異常に対する脂肪酸栄養の効果とアナンダミド産生の関連を明らかにすることを最終目標として、本研究を開始した。以下に本年度の研究成果を記載する。1.同一サンプルからのAEtA、2-AGの分離定量法の検討;両内因性リガンドとも、脂質抽出画分から、TLC-HPLC(GLC)により分離定量できるが、TLC上では、ほぼ同一の位置に分離されるため、同一サンプルから同時に両者を定量することは困難であった。またこの方法により、従来AEtAの蛍光HPLCによる定量時においてみられた妨害物質をほぼ完全に除くこともできた。A群(コントロール);無脂肪食+ラード10%、B群;無脂肪食+リン脂質型DHA10%、C群;無脂肪食+トリグリセリド型DHA10%、D群;トリグリセリド型リノール酸10%。その結果、BCD群ともに各臓器中のリン脂質の脂紡酸レベルにおいては、食事中の脂肪酸構成に見合った変化がみられたが、アラキドノイルグリセロールにはほとんど変化がみられなかった。しかし脳のAEtAは、DHA食(B,C群)を与えることで低下した。

2.ラット食餌脂肪酸によるΔ9THC受容体内因性リガンドレベルの変化;ラットに次のような食餌を与え、2週間飼育した後の腎臓及び脳のAEtA、2-AG量を調べた。A群(コントロール);無脂肪食+ラード10%、B群;無脂肪食+リン脂質型DHA10%、C群;無脂肪食+トリグリセリド型DHA10%、D群;トリグセリド型リノール酸10%、その結果、BCD群ともに各臓器中のリン脂質の脂肪酸レベルにおいては、食事中の脂肪酸構成に見合った変化がみられたが、アラキドノイルグリセロールにはほとんど変化がみられなかった。しかし、脳のAEtAは、DHA食(B、C群)を与えることで低下した。3.アナンダミドの分離において、TLC上の非常に近い位置に、細胞内のシグナル伝達に関わる脂質メディエーターの一つと考えられている。セラミドが分離されてきた。このセラミドについて、微量定量を目指し、種々検討した結果、同様の蛍光HPLCによる各分子種の分離定量法を確立することができた。4.DHAによりTNF誘導のアポトーシスが抑制されることがわかった。
ボレピン骨格を主とする新規メカノフルオロクロミック材料の創出

外部からの応力に対し発光色が変化する現象はメカノフルオロクロミズム(MFC)と呼ばれ、センサーやデバイスなどの機能性材料への応用が期待されている。研究代表者が過去に合成したボレピンと呼ばれる骨格を含む有機化合物では、2つの異なる固体状態で、それぞれ赤色と青色の発光色を示した。本研究は、この骨格を基にした新しい化合物の合成と物性の評価を行い、発光特性を詳細に調査することで、革新的な発光性を示す分子材料の、新しい分子設計のコンセプトを得ることが目的である。
網膜神経節細胞の細胞死の分子機構の解明とその実験的遺伝子治療に関する研究

(1)ラット網膜虚血・再潅流障害における細胞死の検討ラット網膜に虚血再潅流障害を惹起し、アポトーシスを起こしている細胞に発現する遺伝子産物について検討を行った。1)ラット網膜では、網膜内層の細胞死にcaspase-3が網膜外層の細胞死にcaspase-1が深くかかわっていることが明らかとなった。2)一方、同じ虚血・再潅流障害であっても、水平細胞では細胞周期関連遺伝子であるP16INK4の発現が認められ、ネクローシスの形態を示すが、アマクリン細胞ではP16INK4は発現せず、アポトーシスの像を示すことを見いだした。3)虚血・再潅流障害では、再潅流時に活性酸素が発生し、この活性酸素が障害の主役を担っている可能性を示した。(2)ラット網膜虚血・再潅流障害における神経節細胞の細胞死の検討ラット上丘に蛍光色素を注入し、網膜神経節細胞を逆行性にラベルした。アポトーシスを起こす網膜神経節細胞ではAP-1遺伝子が発現していること、caspase-1,caspase-3の発現は殆ど認められないが、caspase-2の発現が認められることを見いだした。また、BDNFを投与すると、網膜神経節細胞の細胞死が抑制されることが分かった。この系では、BDNFは、AP-1遺伝子のひとつであるc-Junの発現を低下させることなくcaspase-2の発現を抑制することが明らかとなった。(3) RCSラット変性網膜に対する遺伝子治療の試み網膜変性症を発症するRCSラットを材料にアデノウイルス関連ウイルスをベクターにした実験的遺伝子治療を試みた。RCSラットでは網膜視細胞のアポトーシスが発生するが、代表的なアポトーシス抑制遺伝子であるBcl-xLを組み込んだAAV-Bcl-xLを網膜下に注入したところ、処置群では網膜視細胞は有意に保存されていた。本年度は、(1)ラット網膜神経節細胞の単離培養と(2)ラット網膜虚血潅流モデルにおける神経細胞死のメカニズムに関する検討を研究の中心とした。(1)に関しては、パニング法を用いた培養系の確立に成功した。しかしながら、回収できる細胞数が十分ではなく、得られた細胞を用いての細胞死のメカニズム解析は十分には進行していない。一方、(2)に関しては、網膜進展標本を用いたTUNEL法の確立に時間がかかったが、十分に再現性よく、死細胞を同定できる条件が決まった。この系を用いて虚血再潅流モデルにおけるAP-1遺伝子の発現、caspasefamily proteaseの発現、BDNFによる細胞死抑制とその過程におけるAP-1遺伝子発現との関連についていくつかの新知見を得た。すなわち、網膜神経節細胞(上丘より蛍光色素を注入して確認)の細胞死にあたり、c-Jun遺伝子産物の発現が認められる。BDNF硝子体投与により、細胞死は約半分に抑制されるが、この時、c-Jun遺伝子産物を発現している細胞数の減少は認められなかった。一方、caspase-1,caspase-2,caspase-3の発現についても検討した。虚血再潅流障害においては、caspase-1,caspase-3の発現は殆ど認められなかったが、caspase-2陽性細胞は、再現性良く認められた。BDNF投与により、caspase-2陽性細胞数は有意に減少した。この結果から、網膜神経節細胞の細胞死にcaspase-2が関与していること、BDNFの神経保護作用の一部はcaspase-2の発現抑制によるものであることが分かった。

昨年度に引き続いてラットを用いてin vivo modelにおける神経細胞死、あるいは網膜神経節細胞死について検討した。本研究の最終目標は、緑内障における網膜神経節細胞の細胞死のメカニズムを明らかにし、実験的遺伝子治療の途を開くことであるが、本年度までは網膜における神経細胞死そのものを実験的に検討することが主眼となっている。現在、緑内障モデルの作成を行っているが、このモデルについての報告は来年を予定している。(1)ラット網膜虚血・再潅流障害における細胞死の検討ラット網膜に虚血再潅流障害を惹起し、アポトーシスを起こしている細胞に発現する遺伝子産物について検討を行った。1)ラット網膜では、網膜内層の細胞死にcaspase-3が網膜外層の細胞死にcaspase-1が深くかかわっていることが明らかとなった。2)一方、同じ虚血・再潅流障害であっても、水平細胞では細胞周期関連遺伝子であるP16INK4の発現が認められ、ネクローシスの形態を示すが、アマクリン細胞ではP16INK4は発現せず、アポトーシスの像を示すことを見いだした。3)虚血・再潅流障害では、再潅流時に活性酸素が発生し、この活性酸素が障害の主役を担っている可能性を示した。(2)ラット網膜虚血・再潅流障害における神経節細胞の細胞死の検討ラット上丘に蛍光色素を注入し、網膜神経節細胞を逆行性にラベルした。アポトーシスを起こす網膜神経節細胞ではAP-1遺伝子が発現していること、caspase-1,caspase-3の発現は殆ど認められないが、caspase-2の発現が認められることを見いだした。また、BDNFを投与すると、網膜神経節細胞の細胞死が抑制されることが分かった。この系では、BDNFは、AP-1遺伝子のひとつであるc-Junの発現を低下させることなくcaspase-2の発現を抑制することが明らかとなった。(3)RCSラット変性網膜に対する遺伝子治療の試み網膜変性症を発症するRCSラットを材料にアデノウイルス関連ウイルスをベクターにした実験的遺伝子治療を試みた。RCSラットでは網膜視細胞のアポトーシスが発生するが、代表的なアポトーシス抑制遺伝子であるBcl-xLを組み込んだAAV-Bcl-xLを網膜下に注入したところ、処置群では網膜視細胞は有意に保存されていた。