hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
重合開始剤による乳がん治療薬の効果減弱の機序解明

これまで、我々は臨床現場で汎用されているプラスチック製容器に充填された注射薬から重合開始剤1-hydroxycyclohexyl phenyl ketone、Methyl 2-benzoylbenzoateおよび2-methyl-4'-(methylthio)-2-morpholinopropiophenoneを検出した。重合開始剤の中には、内分泌かく乱作用を有するものがあるとの報告があり、我々の研究においても、上記の3種類の重合開始剤ならびに2,2-dimethoxy-2-phenylacetophenone、2-ethylhexyl 4-(dimethylamino) benzoateおよび2-isopropylthioxanthoneが、ヒト乳がん細胞に対してエストロゲン様作用を示すことが明らかとなっている。そこで、注射薬から検出した3種類の重合開始剤の正常細胞に対するエストロゲン様作用について検討を行った。その結果、3種類の重合開始剤は、エストロゲン感受性細胞である正常ヒト子宮平滑筋細胞株hUtSMCに対して、細胞増殖効果およびエストロゲン応答遺伝子であるCD38のタンパク発現量の増加作用を示さなかった。ヒト乳がん細胞株T47Dにおいて、エストロゲン受容体(ER)拮抗薬と注射薬から検出した3種類の重合開始剤を併用してE-screen assayを実施したところ、重合開始剤による増殖効果が抑制された。この結果から、これらの重合開始剤によるエストロゲン様作用は、ERを介したものであることが示唆された。本研究の結果から、重合開始剤は乳がん細胞に対してエストロゲン様活性を示すが、正常細胞に対してはその作用を有さないことが示唆された。このことより、重合開始剤自身に乳がん発がん作用はなく、すでに存在する乳がん細胞に対して増殖効果を示すことが示唆された。これまでに我々は、プラスチック製医薬品容器に充填された注射薬中から重合開始剤1-hydroxycyclohexyl phenyl ketone (1-HCHPK)、methyl 2-benzoylbenzoate (MBB)および2-methyl-4'-(methylthio)-2-morpholinopropiophenone (MTMP)を検出した。インクや歯科用樹脂に使用されている一部の重合開始剤は内分泌かく乱作用を示すという報告があるため、我々が検出した重合開始剤とインクに頻用される重合開始剤である2,2-dimethoxy-2-phenylacetophenone (2,2-DMPAP)、2-ethylhexyl 4-(dimethylamino)benzoate (2-EHDAB)および2-isopropylthioxanthone (2-ITX)を含む6種類を用いて、エストロゲン様作用についてE-screen assayを用いて評価した。その結果、乳がん細胞株T47Dは、2,2-DMPAP、1-HCHPK、MBB、およびMTMP曝露によって有意に細胞が増殖した。また、2,2-DMPAP、1-HCHPKおよびMBBは、内因性エストロゲンである17 beta-estradiolに匹敵する細胞増殖効果を示した。さらに、抗エストロゲン薬(クロミフェン、タモキシフェンおよびフルベストラント)を前処置した後に各種重合開始剤を曝露させると、重合開始剤による細胞増殖効果が阻害された。以上の結果より、2,2-DMPAP、1-HCHPK、MBBおよびMTMPは、T47Dに対してエストロゲン様作用を示すことが示唆された。また、その作用は少なくともエストロゲン受容体を介していることが示唆された。申請者は,すでに乳がん細胞株MCF-7に対して重合開始剤がエストロゲン様作用を有することを明らかにしていることから、同様の手法を用いて異なるエストロゲン依存性細胞株に対する重合開始剤の影響を評価してきた。現在、乳がん細胞株T47Dは順調に評価が進んでいるが,子宮平滑筋細胞株UtSMCは,がん細胞と異なり,cAMP,Rafによる細胞増殖の調節機能が働いていることから適切なエストロゲン様活性の評価方法を模索していることから,当初の予定よりやや遅れて研究が進んでいる。そのため,H295RおよびHMECによる評価は実施できていない。昨年までに、プラスチック製医薬品容器に充填された注射薬中から検出した1-hydroxycyclohexyl phenyl ketone (1-HCHPK)、methyl 2-benzoylbenzoate (MBB)および2-methyl-4'-(methylthio)-2-morpholinopropiophenone (MTMP)の内分泌攪乱作用についてエストロゲン様活性を指標に評価した。その結果、乳がん細胞株MCF-7およびT47Dに対して3種類の重合開始剤はエストロゲン様活性を示した。また、各種抗エストロゲン薬(クロミフェン、タモキシフェンおよびフルベストラント)を前処置した後に3種類の重合開始剤をそれぞれ曝露させると、重合開始剤によるエストロゲン様活性が抑制された。このことより、3種類の重合開始剤によるエストロゲン様活性は、少なくともエストロゲン受容体を介した作用であることが示唆された。また、がん細胞のみならず正常細胞に対する重合開始剤の影響を評価するために、正常ヒト子宮平滑筋細胞株hUtSMCを用いてエストロゲン様活性を評価した。その結果、正常細胞株はがん細胞株と異なる経路を介してエストロゲン様活性を惹起することから、がん細胞と同様の評価系では反応性を評価できなかった。そこで、エストロゲン反応性タンパクの1つであるCD38の発現量を指標に重合開始剤によるエストロゲン様活性を評価している。さらに、in vivoにおいて、免疫不全雌性マウス(CAnN.Cg-Foxn1/CrlCrlj)にMCF-7株を移植した担がんマウスに対してMTMPを2週間連日投与(0.05-1.0 mg/day, 1 time/day)

した結果、溶媒投与群と比較して有意に推定腫瘍重量が増加した。以上より、重合開始剤は生体内でもエストロゲン様作用を惹起することが示唆された。平成29年度より利用している正常ヒト子宮平滑筋細胞株hUtSMCに対する3種類の重合開始剤のエストロゲン様活性を評価してきたが、本細胞株のエストロゲン様活性を惹起する経路が、がん細胞とは異なることが判明したことで、本来予定していた評価系のみでは重合開始剤によるエストロゲン様活性を明確にすることが出来なかった。現在では、正常細胞株に対するエストロゲン様活性を明らかにするため、エストロゲン反応性タンパクの1つであるCD38の発現量を指標にウェスタンブロット法を用いて評価している。したがって、当初計画していた評価系以外の検討項目を追加したため、当初の予定より、やや遅れていると考える。また、in vivoでは、当初MCF-7細胞株およびT47D細胞株の担がんマウスを作成して評価する予定であったが、T47D担がんマウスは、考案したすべての条件で生着しなかったことから、MCF-7担がんマウスのみの評価とすることにした。したがって、T47D担がんマウス作成の可否に関する基礎研究に時間を浪費したため、当初の予定より、やや遅れていると考える。これまで、我々は臨床現場で汎用されているプラスチック製容器に充填された注射薬から重合開始剤1-hydroxycyclohexyl phenyl ketone、Methyl 2-benzoylbenzoateおよび2-methyl-4'-(methylthio)-2-morpholinopropiophenoneを検出した。重合開始剤の中には、内分泌かく乱作用を有するものがあるとの報告があり、我々の研究においても、上記の3種類の重合開始剤ならびに2,2-dimethoxy-2-phenylacetophenone、2-ethylhexyl 4-(dimethylamino) benzoateおよび2-isopropylthioxanthoneが、ヒト乳がん細胞に対してエストロゲン様作用を示すことが明らかとなっている。そこで、注射薬から検出した3種類の重合開始剤の正常細胞に対するエストロゲン様作用について検討を行った。その結果、3種類の重合開始剤は、エストロゲン感受性細胞である正常ヒト子宮平滑筋細胞株hUtSMCに対して、細胞増殖効果およびエストロゲン応答遺伝子であるCD38のタンパク発現量の増加作用を示さなかった。ヒト乳がん細胞株T47Dにおいて、エストロゲン受容体(ER)拮抗薬と注射薬から検出した3種類の重合開始剤を併用してE-screen assayを実施したところ、重合開始剤による増殖効果が抑制された。
心疾患合併妊娠の管理医療の開発：抗プロラクチン療法のヒト臨床－動物基礎複合的研究

本研究は、心疾患合併妊娠のヒト臨床およびモデル動物において、周産期血管障害性が知られている切断プロラクチンを柱とした病態生理の解明と治療有効性の検討を目的とした。ヒト臨床研究では、心疾患合併妊娠における切断プロラクチン値が、正常妊娠よりも妊娠産後1カ月に有意に増加しており、母乳授乳群で産褥心血管合併症が多い傾向を認めた。抗プロラクチン療法施行患者において、大きな副作用を認めなかった。連携基礎研究では、マウス心臓重量/脛骨長が授乳期に最も重く、組織染色で切断プロラクチンが血管内と心筋細胞内、とくに毛細血管内に多く局在していた。心疾患を持つ女性にとって、循環血液量の増加など、ダイナミックな循環動態変化を来す妊娠・出産は非常にリスクの高いものである。一方で、循環器医療の進歩により、生殖年齢に到達する重篤な先天性心疾患を持つ女性が増加している。未曾有の少子化に直面する我が国では、このような合併妊娠においても、安心安全な妊娠・出産の実現が、極めて重要と考える。そこで、本研究は、心疾患合併妊娠のヒト臨床データおよびモデル動物によって、心機能低下を来すことが知られている切断(異型)プロラクチンを柱とした病態生理を解明し、さらに抗プロラクチン療法(ブロモクリプチン療法)の有効性を解明することを目的としている。平成25年度には、周産期心筋症合併妊娠45人において切断プロラクチン測定を行い、正常妊産褥婦よりも有意に増加しているという結果を得た(周産期心筋症合併vs正常妊産褥婦: 5.58 ±7.64 vs 1.96 ±2.78FU)。また、抗プロラクチン療法は30人で行われ、うち、急性期に8週間以上のプロトコールで行われたのは27人であった。この27人(施行群)と、抗プロラクチン療法を行わなかった15人(非施行群)の心機能予後を比較すると、急性期の回復度は、抗プロラクチン療法施行群が大きかった。そこで、本研究は、心疾患合併妊娠のヒト臨床データおよびモデル動物によって、心機能低下を来すことが知られている異型(切断)プロラクチンを柱とした病態生理を解明し、さらに抗プロラクチン療法(ブロモクリプチン療法)の有効性を解明することを目的としている。平成24年度には、心疾患合併妊娠70例において異型プロラクチン測定を行い、妊娠中(妊娠36-40週)、産後1カ月に、正常妊産褥婦よりも有意に増加しているという結果を得た(心疾患合併vs正常妊産褥婦:妊娠中3.8 vs 1.0 FU、産後1カ月5.3 vs 1.8 FU)。また、循環負荷が最も大きい分娩直後(5日以内)では、ほぼ同等であった(心疾患合併vs正常妊産褥婦:2.9 vs 3.0 FU)。これまで、一部の心疾患合併妊娠においては、循環血液量が増加する妊娠中や分娩直後よりも、循環動態が正常化する産褥期に心不全が増悪する例があり、原因が不明であった。妊娠直後よりも、産後の異型プロラクチン増加が心疾患合併妊娠で顕著であることから、このような例では、心不全増悪に関与している可能性がある。現在、上記結果を論文化するとともに、モデル動物実験の準備を進めている。心疾患を持つ女性にとって、ダイナミックに循環動態が変化する妊娠・出産はリスクとなる。一方、循環器医療の進歩や妊婦の高齢化により、心疾患女性の妊娠が増加している。少子化に直面する我が国では、このような合併妊娠における安全性の確保が、極めて重要と考える。そこで、本研究は、心疾患合併妊娠のヒト臨床およびモデル動物において、周産期血管障害性が知られている切断プロラクチンを柱とした病態生理の解明を目的とした。ヒト臨床研究では、心疾患合併妊娠(70例)における切断プロラクチン値が、正常妊娠よりも妊娠中、産後1カ月に有意に増加していた(心疾患合併vs正常妊産褥婦:妊娠中3.8vs1.0 FU、産後1カ月5.3vs1.8 FU)。また、心疾患合併妊娠57例において、産褥期に心血管イベントを合併した症例は、母乳授乳を行った43例中8例であったのに対し、母乳授乳を行わなかった14例では0であった(p=0.18)。

次に連携基礎研究では、マウス心臓重量/脛骨長が、未経妊7.2mg/mm<分娩直後8.8mg/mm<分娩10日後9.9mg/mmと授乳期に最も重い結果であった。また、免疫組織染色により、切断プロラクチンが毛細血管>心筋細胞に局在していること、心筋組織のWestern blotにより、未経妊で検出されない切断プロラクチンが、分娩直後分娩10日後に増加していることが明らかになった。一方、培養心筋細胞に切断プロラクチンを付加しても血管新生促進因子の抑制を認めず、心筋細胞のミトコンドリア活性にも無関係であった。以上から、心疾患合併妊娠患者、モデル動物において、母乳授乳中に切断プロラクチンは増加しており、ヒトではより産褥心血管合併症が多い傾向と動物では心重量の増加を認めた。切断プロラクチンは血管内と心筋細胞内、とくに毛細血管内に多く局在していたが、血管障害性を直接的に示す結果は未だ得られず、今後のさらなる研究が必要と考えられた。周産期心筋症.com循環器内科切断プロラクチンは、これまでに、血管障害や心筋内代謝異常を引き起こし、妊産褥婦が突然心不全を発症する周産期(産褥)心筋症の一因であると報告されている。しかしながら、切断プロラクチンのroutine定量化はこれまでなされたことがなく、本研究は、切断プロラクチンの測定方法を確立し、心疾患合併妊娠における生理作用を、ヒト臨床研究とモデル動物実験により解明する目的である。ヒト臨床研究においては、心疾患合併患者に引き続き、周産期心筋症患者における切断プロラクチン作用を解明するため、実際に、周産期心筋症患者45人と、正常妊娠女性9人の検体を集積し、切断プロラクチンをはじめとして、プロラクチン、カテプシンD活性、カテコラミン3分画、レニン、アンジオテンシン、アンジオテンシノーゲン、BNP測定などを行った。結果、周産期心筋症患者で切断プロラクチンが増加していることを明らかにした。また、モデルマウス基礎実験では、心筋症マウスの研究準備を行っている。研究計画は、おおむね順調に進展していると考える。異型(切断)プロラクチンは、これまでに、血管障害や心筋内代謝異常を引き起こし、妊産褥婦が突然心不全を発症する周産期(産褥)心筋症の一因であると報告されている。しかしながら、異型プロラクチンの定量化はこれまでなされたことがなく、本研究は、異型プロラクチンの測定方法を確立し、心疾患合併妊娠における生理作用を、ヒト臨床研究とモデル動物実験により解明する目的である。ヒト臨床研究においては、心疾患合併妊娠患者における異型プロラクチン作用を解明するため、実際に、心疾患合併女性70人と、正常妊娠女性9人の検体を集積し、異型プロラクチンをはじめとして、プロラクチン、カテプシンD活性、カテコラミン3分画、レニン、アンジオテンシン、アンジオテンシノーゲン、BNP測定などを行った。結果、心疾患合併女性で異型プロラクチンが増加していることを明らかにした。特に、循環負荷が大きい妊娠中や分娩直後よりも、産後1カ月で増加傾向が大きいことから、産褥心機能低下に関与している可能性が示唆される。今後、学会や雑誌等において、報告を予定している。また、モデルマウス基礎実験では、心筋梗塞ラットの作成準備を行っている。心疾患合併妊娠モデル動物による、切断プロラクチンの動態、心機能変化、抗プロラクチン療法の検証を行う。ヒト臨床研究結果については、学会や雑誌等で報告を行う。
農学ESPのニーズ分析と方法論的検討

2018年度は、(1)これまでに収集したデータの整理ならびに農学分野における6つの下位分野間のデータ量調整、(2)コーパスデータ分析、(3)対象学生グループの英語学習に関する実態・ニーズの継続調査、および(4)成果発表を行った。(1)農学分野全体では、専門分野コーパスとして必要だと考えられている100万語を超えるデータを構築することができた。その後さらに、6つの農学下位分野間における語彙特徴比較分析のため、再度記事収集を行い、データのバランスを整える作業を行い、コーパスを完成させた(総記事数1,736)。(2)学部生対象の教材作成を目的としているためSemi-popularization Articlesで作成したコーパスだが、このコーパスの分析の結果、農学分野特有の表現が抽出された。6分野間の類似性、特異性についての傾向も明らかとなった。、また、(3)農学部生対象の実態調査・ニーズ調査を行い、対象学生グループに例年と大きな違いがなく、研究結果の教育的応用が有効である可能性を確認した。また、来日していた英語教育・社会言語学の専門家であるSandra McKay氏に、農学部生が体験することの多い、国際語としての英語の観点での教材作成のポイントについて助言を受けた。(4)上記(2)の分析結果を国際学会(Asia Pacific Corpus Linguistics Conference)で口頭発表を行い、プロシーディングズにて論文を公刊した。コーパス分析については、論文公刊後も研究を続け、Corpus of Contemporary American English(COCA)との比較による、Semi-popularization Articlesの特徴づけ、6つの農学下位分野間の多変量解析を進め、下位分野間の語彙的関連を分析し、今後、国内および海外学会での発表および論文公刊を予定している。またこれらの研究に基づき、学生の英語力と専門分野の両方を考慮した教材作成につなげていく。社会の多様化が進む昨今、大学のカリキュラムも変化し続けており、学際的な学部の設立が多く見られる。本研究では、多様な専門性を含む農学分野の学部学生に必要なEnglish for Specific Purposes (ESP)の教育カリキュラムモデル構築につながる基礎データの分析を目指している。2016年度は、(1)ニーズ分析として所属大学の農学部専門教員、学部学生、院生、卒業生へのインタヴュー、農学分野の英語関連情報の収集と分析、学部学生の英語関連実態調査を実施し、(2)農学部専門教員1名に新たに共同研究者に入って頂き専門的見地からのアドバイスを得、(3)語彙分析のためのコーパス構築を主に行った。(1)については、農学分野における英語使用状況把握のため、国内外の学会での情報収集、学内における6学科の専門分野の学習・研究分野の調査、海外研修の英語使用状況の調査、1年次における英語力の調査、資格試験実態調査も併せて行い、学部学生が必要とする語彙の種類・カテゴリーを検証した。(2)については、動物行動学を専門とする農学部教員が共同研究者として加わった。(3)については、農学分野学術専門語彙と一般英語の狭間に位置するpopularization, semi-popularizationの2つのカテゴリーを設定し、記事の採取を行い、これらの言語資料を所属大学農学部の6学科(獣医学科含む)と13の専門基礎科目項目に分類した。計画に従い、学部学生が必要とする語彙のカテゴリーを検証した後、popularization, semi-popularizationの記事収集を行い、2種のコーパスの構築を行った。2017年度は、(1)農学のための英語教材およびシラバス構築のための言語資料収集とコーパスデザインの作成、(2)パイロット分析、(3)対象学生グループの実態調査・ニーズ調査を行った。(1)本研究は大学英語教育における農学関連分野専門英語への円滑な橋渡しとなる教材作成を目指し、Semi-popularization ArticlesやPopularization Articlesで使用される語彙の分析を中心に行っている。ESP(English for Specific Purposes)において、Research Articlesについての語彙・レトリック研究や、工学分野、医学分野等の語彙・レトリック研究は進んでいるが、農学分野、特にSemi-popularization Articlesに関する研究はアルゼンチンでの農学分野の特定の下位分野についての研究のみである。このことから、農学分野を幅広く研究する本研究のコーパス構築について、Semi-popularizationおよびPopularization Articlesの概念を整理し論文にまとめた。また、昨年に引き続き、データ収集を進め、農学部での教育内容を理解しているアシスタントの協力を得て、研究対象としている地方国立大学農学部の6学科(獣医学科を含む)のカテゴリーに分類した。(2)コーパス構築初期段階において、パイロット研究として語彙リストの作成と分析を行い、国際学会(Faces of English 2)にて発表を行った。(3)昨年度に引き続き研究対象としている地方国立大学において、農学部生のCEFR尺度による英語力の調査、資格試験実態調査、語彙調査を実施し、教材作成の際に考慮に入れるべき学生の英語力、学習環境および学習ニーズ、語彙レベルの調査を行った。記事収集開始と収集作業段階で予想以上に時間を要したが、現在、分析に必要なデータが揃ったことにより、ほぼ計画通りに進めることができている。

(2)学部生対象の教材作成を目的としているためSemi-popularization Articlesで作成したコーパスだが、このコーパスの分析の結果、農学分野特有の表現が抽出された。6分野間の類似性、特異性についての傾向も明らかとなった。、また、(3)農学部生対象の実態調査・ニーズ調査を行い、対象学生グループに例年と大きな違いがなく、研究結果の教育的応用が有効である可能性を確認した。また、来日していた英語教育・社会言語学の専門家であるSandra McKay氏に、農学部生が体験することの多い、国際語としての英語の観点での教材作成のポイントについて助言を受けた。(4)上記(2)の分析結果を国際学会(Asia Pacific Corpus Linguistics Conference)で口頭発表を行い、プロシーディングズにて論文を公刊した。コーパス分析については、論文公刊後も研究を続け、Corpus of Contemporary American English(COCA)との比較による、Semi-popularization Articlesの特徴づけ、6つの農学下位分野間の多変量解析を進め、下位分野間の語彙的関連を分析し、今後、国内および海外学会での発表および論文公刊を予定している。またこれらの研究に基づき、学生の英語力と専門分野の両方を考慮した教材作成につなげていく。収集した言語資料の語彙分析・レトリック分析を行う。具体的には、(1)異なる下位分野(所属大学の6学科に基づく下位分野)での語彙リストの異同を観察し記述を行う(2) popularizationとsemi-popularizationの概念を整理し、実際の英語授業での使用を視野に入れた「農学部共通語彙リスト」と「学科別語彙リスト」を作成する。(3)統計的分析手順は研究過程で洗練させる必要があるため、中間報告やコーパス関連学会にて発表を行い、助言を頂く。コーパス分析については、農学分野の学際性を鑑み、次年度もコーパスの規模を拡大させるための言語資料の収集を継続させる。「学科別」抽出語彙リストは、農学部専門教員の協力を頂き、学科(分野)特有の意味を持つ語や同じスペルにも拘わらず一般語とは異なる意味を持つ語についても言及する。また語彙学習過程に配慮した一般語彙リスト(JACET8000)を参照し、一般語彙と専門語彙をつなぐpopularizationとsemi-popularization語彙の抽出の参考とする。さらに、コンコーダンスで用例を観察し、語法レベルでの特徴を可能な限り洗い出す。
精神分裂病における三次元画像での海馬体積と神経発達関連遺伝子に関する検討

f ynは、精神分裂病との関連が強く示唆されているNMDA受容体に機能的関連を持っている。また、内在性のD-セリンは、NMDA受容体のグリシン結合部位にアゴニストとしては働くことから、精神分裂病におけるNMDA受容体の神経伝達障害の可能性を考えるうえで、重要な因子として挙げられる。そのため、D-セリンを合成する酵素、セリンラセマーゼの機能変調がD-セリンの産生異常を起こし、NMDA受容体やfynの機能異常を生じることが、精神分裂病の病態にかかわることが十分に予想されたため、その調節機能を調べる目的で、イースト2ハイブリッド法を行い、セリンラセマーゼ結合蛋白を検索した。その結果、PICK1とGRIPを同定した。両者は、PDZドメインを含み、AMPA受容体と結合し、さらにはAMPA受容体とのクラスタリングにも関与していると考えられており、いわゆるscaffold蛋白のひとつとして注目されている。また、特にPICK1は、検索の結果、興味深いことに連鎖解析などで精神分裂病との関連が強く示唆されている染色体22q13上に位置していた。そのため、セリンラセマーゼ、PICK1を、培養細胞に強制発現させ、免疫沈降法や免疫染色法によって、セリンラセマーゼ、PICK1の機能解析を進めてきた結果、セリンラセマーゼとPICK1の結合を再確認し、その結合部位を同定することができた。そして精神分裂病患者からのgenomicDNAを用いて、PICK1の多型解析を行い遺伝子変異を検索しているが、正常被験者と比較し病的意義については検討を要する。今後も多くの症例を集める必要がある。また、D-セリンのNMDA受容体、fynを介しての精神分裂病の病態への関与の可能性を明らかにしていくために、今後も更なる検索が必要である。その結果、PlCK1とGRlPを同定した。そのため、セリンラセマーゼ、PlCK1を、培養細胞に強制発現させ、免疫沈降法や免疫染色法によって、セリンラセマーゼ、PlCK1の機能解析を進めている。そして精神分裂病患者からのgenomicDNAを用いて、PlCK1の多型解析を行い遺伝子変異を検索しており、また、その有無と精神分裂病患者における頭部MRIの三次元画像での海馬などの体積の比較検討を予定している。約20例の精神分裂病患者の頭部MRI画像を収集した。D-セリンのNMDA受容体、fynを介しての精神分裂病の病態への関与の可能性を明らかにするため、さらにfyn遺伝子に関しての検索を予定している。
新規ヘテロ接合型分子集合体の創製による自己集合材料の新しい機能化法の提案

本研究は、両親媒性ペプチド(PA)自己組織化材料に着目し、複数種類のPAが構造体内で局在化したマルチドメイン型PA共集合体の創製を目的とした。互いに非相溶な疎水性置換基を導入したPAを用いて、PAが集合し形成する疎水性空間中での相溶性を利用した共集合構造の制御を目指した。非相溶な疎水性置換基ペアとしてアルキル基とフルオロアルキル基を導入したPAは互いに別個に自己集合した。しかし、アルキル基とフルオロアルキル基の両方を有するPAを混合すると共集合し、その比によりドメインサイズを制御可能であることが示された。さらに集合体表面に機能性素子として蛍光基を導入し、蛍光基間の距離制御に成功した。両親媒性ペプチド(PA)からなる自己集合材料は、分子設計に応じた構造・機能の改変自在性やペプチド由来の生理活性を併せ持つ、医用材料創製において魅力的な基材である。集合に伴い機能性ペプチドリガンドを自在に材料表面に集積化させることで、特定の生体分子に対する結合力の向上やレセプターの多量体形成が可能となることから、細胞に作用する材料開発において注目を集めている。本研究では、さらに複雑かつ高度な細胞作用の実現のために、複数のリガンドの局在化を可能とする、ヘテロ接合型のペプチド集合体の創製を目指している。その戦略として、PAの疎水部の化学構造に注目し、相溶性の低い疎水性置換基ペアを導入したPAを用いることで、互いが局在化した共集合体が得られると期待した。平成27年度は、フッ素系化合物の疎油性に注目し、長鎖アルキル基ペアとして、ハイドロカーボン系アルキル基とフルオロカーボン系アルキル基を導入したPAを合成した。両者は、自己集合形成の濃度、熱安定性、集合体形状など、大きく異なる自己集合の性質を持つことが見出された。さらに、共集合体の創製へ向け、蛍光分子を用いた集合体の可視化を試みた。初年度に挙げた主な研究項目は、PAの合成と自己集合評価である。ペプチドに導入した疎水性置換基だけでなく、ペプチド配列の違いによるPAの自己集合挙動の変化を調査した。想定よりも多種類のPAを合成し、その自己集合挙動の観察から、集合促進部位の設計指針を得ることができた。具体的には、ペプチドの中でも集合促進ペプチドとしての疎水性アミノ酸が重要と考え、芳香族性、非芳香族性の疎水性アミノ酸を導入した際の集合挙動を観察した。その結果、疎水性置換基をハイドロカーボン系からフルオロカーボン系アルキル基に変更した際の集合形状の変化は、芳香族性アミノ酸の有無により逆転した。これは、PA集合形成において芳香族アミノ酸間のπ-π相互作用が重要な役割を担うことを示唆する重要な結果である。一方、ヘテロ接合型PA集合体の創製に関しては、可視化のための、蛍光分子を用いた予備検討に留まっており、次年度以降に詳細な検討を行う予定である。以上より、研究はおおむね順調に進展していると考えている。本研究では、分子設計に応じた構造・機能の改変自在性やペプチド由来の生理活性を併せ持つ、両親媒性ペプチド(PA)からなる集合体に注目している。集合に伴い機能性ペプチドリガンドを自在に材料表面に集積化させることで、特定の生体分子に対する結合力の向上やレセプターの多量体形成が可能となる。本研究では特に、多種類のPAをクラスター化し且つ接合させた、ヘテロ接合型のPA集合体の創製を目標としている。各PAに特定の生体分子に対して親和性のあるリガンドを導入することで、異なる生体分子間の界面を制御する足場材料になると期待している。PAの設計戦略として、PAの疎水部に相溶性の低い疎水性置換基ペアを導入したPAを用いることで、互いがクラスター化した共集合体が得られると考えている。具体的には、フッ素系化合物の疎油性に注目し、長鎖アルキル基ペアとして、ハイドロカーボン系アルキル基とフルオロカーボン系アルキル基を導入したPAを用いている。平成27年度に、一次元に集合化する各種PAの合成と評価を行ったため、平成28年度は主に、ヘテロ接合型のPA集合体の調製方法の検討を行った。化学的刺激や物理刺激を活用することで、目的とするヘテロ接合体の調製が可能であることを示唆する結果を得た。また、特定の生体分子に対するリガンドを導入したPAの設計・合成も行った。このリガンド導入PAを用いた集合形成評価や生体分子に対する親和性評価は、次年度以降に行う予定である。平成27年度に、ハイドロカーボン系アルキル基とフルオロカーボン系アルキル基を導入した各種PAを合成し、疎水性置換基の種類やアミノ酸配列がPA集合形成に与える影響について調査した。結果、目的とする一次元集合体を形成させるための設計指針を得ることができた。平成28年度は、PAヘテロ接合体の調製方法および分析手法の確立を第一目標とした。まず各PAを所定濃度で混合した際の挙動を評価し、混合した際にも一次元集合体を形成することを確認したが、一方でその集合体内でのPAの配列を正確に読み出すのが困難であることが示された。そこで、溶液条件の最適化、化学的刺激の利用(酵素反応)、物理刺激の利用(超音波照射)を試みた。結果、一種のPA集合体の末端からの別種のPA集合体を成長させる手法により、目的とするPAヘテロ接合体の創製が可能であることが示唆された。

生体分子に対するリガンドを導入したPAの合成も行ったが、これを用いた集合体の機能性評価は次年度以降に持ち越した。以上、研究計画に沿って研究を進めているが、当初の計画では平成28年度までにリガンドを導入したPAを用いた集合体の機能性評価を行う予定にしており、進捗がやや遅れている状況である。本研究は、構造・機能の改変自在性を持つ両親媒性ペプチド(PA)からなる集合体に着目し、多種類のPAを構造体内で局在化させた、ヘテロ接合型のPA共集合体の創製を目的としている。前年度までに、一次元に集積化する各種PAの合成とPA共集合体の調製方法の検討を行い、疎水部にハイドロカーボン系アルキル基とフルオロカーボン系アルキル基を導入したPAを用いて、共集合構造の制御が可能であることを示唆する結果が得られた。そこで最終年度となる本年度は、集合体表面に機能性分子(蛍光基、小分子リガンド)を導入し、これまでに確立した調製法に従いヘテロ接合型のPA共集合体を創製し、その分析と機能化に焦点を当て、取り組んだ。まず、それぞれのPAに緑色蛍光基と赤色蛍光基を導入し、共焦点レーザー顕微鏡による集合構造の直接観察を行った。PA混合比に従い、ドメイン形成の制御が可能であることが示唆され、本研究手法の妥当性と実現性が確認された。続いて、抗原-抗体反応によるPA集合体上へのタンパク質の集積化を試み、PA種特異的なタンパク質の集積が認められた。さらに、小分子リガンドであるビオチン修飾PAを利用したタンパク質の選択的集積化にも成功した。以上、PA共集合体の新たな制御法とその修飾法という本研究の概念実証を達成した。得られた成果は国際学会での招待講演1件、国内学会での招待講演1件を含む国内外の学会10件で発表し、当該分野での成果の共有に努めた。本研究は、両親媒性ペプチド(PA)自己組織化材料に着目し、複数種類のPAが構造体内で局在化したマルチドメイン型PA共集合体の創製を目的とした。互いに非相溶な疎水性置換基を導入したPAを用いて、PAが集合し形成する疎水性空間中での相溶性を利用した共集合構造の制御を目指した。非相溶な疎水性置換基ペアとしてアルキル基とフルオロアルキル基を導入したPAは互いに別個に自己集合した。しかし、アルキル基とフルオロアルキル基の両方を有するPAを混合すると共集合し、その比によりドメインサイズを制御可能であることが示された。さらに集合体表面に機能性素子として蛍光基を導入し、蛍光基間の距離制御に成功した。平成27年度までに、疎水部の異なるPAの設計指針を得ることが出来た。平成28年度以降は、まずヘテロ接合体の調製手法および分析手法の確立を第一目標とする。調製手法としては、溶液条件の最適化(PA濃度、温度、pHなど)だけでなく、化学的刺激の利用(pH変化、化学構造変換など)、物理刺激の利用(超音波照射など)を検討する。また、ヘテロ接合体の分析手法も挑戦的課題である。平成27年度には、蛍光分子との親和性の差を利用した可視化を検討したが、各種プローブ分子(蛍光分子、金属錯体など)の直接修飾や、リガンド-レセプター相互作用を活用した可視化などを検討する。平成28年度までに、ヘテロ接合体を創製するためのPAの設計指針、集合体調製方法について検討を行った。また、生体分子に対するリガンドを導入したPAの合成も行った。今後は、リガンドを有するPAを集合化させ、特定の生体分子に対する親和性評価を行う。
高齢者神経変性疾患の血管内皮機能の解析－血管超音波を用いた検討-

2017年1月より患者の登録を開始し,24例を登録した.うち2名は3ヶ月後の検査まで終了している.登録症例の平均年齢は59.1歳で,男性が13例であった.疾患分類は変性疾患が6例,炎症性疾患が11例(中枢性6例,末梢性5例),筋疾患(接合部を含む)が4例,その他が1例であった.収縮期%FMDは10.0±6.9%,拡張期%FMDは8.89±5.4%,BHIは0.83±0.52であり,異常値は収縮期%FMD(5%未満)5例,拡張期%FMD(5%未満) 2例,BHI(0.69未満)7例であった.当初の仮説では,疾患により血管内皮機能障害の影響が強いものとそうではないものが存在する可能性を考慮しており,疾患分類毎に内皮機能障害の有無について検討を行った.症例数がまだ少なく,変性疾患,炎症性疾患などの疾患分類とBHI,%FMDには有意な差を検出しなかった.また,同一疾患内でも罹病期間や重症度と血管内皮機能に関係があるのではないかと考えていたが,同様に症例数が少ないため,疾患群内の検討は行っていない.疾患を特定せず,Barthel IndexやFIMとなどのADLと血管内皮機能の検討を行ったところ,BHIとBarthel Index(P=0.232),収縮期%FMDとFIM(p=0.260)に有意な差を認めた.研究責任者の退職により,科学研究費助成事業としては一旦終了するが,今後も症例を蓄積し,内皮機能と神経疾患の関係についての検討を引き続き行う予定である.2017年1月より患者の登録を開始し,24例を登録した.うち2名は3ヶ月後の検査まで終了している.登録症例の平均年齢は59.1歳で,男性が13例であった.疾患分類は変性疾患が6例,炎症性疾患が11例(中枢性6例,末梢性5例),筋疾患(接合部を含む)が4例,その他が1例であった.収縮期%FMDは10.0±6.9%,拡張期%FMDは8.89±5.4%,BHIは0.83±0.52であり,異常値は収縮期%FMD(5%未満)5例,拡張期%FMD(5%未満) 2例,BHI(0.69未満)7例であった.当初の仮説では,疾患により血管内皮機能障害の影響が強いものとそうではないものが存在する可能性を考慮しており,疾患分類毎に内皮機能障害の有無について検討を行った.症例数がまだ少なく,変性疾患,炎症性疾患などの疾患分類とBHI,%FMDには有意な差を検出しなかった.また,同一疾患内でも罹病期間や重症度と血管内皮機能に関係があるのではないかと考えていたが,同様に症例数が少ないため,疾患群内の検討は行っていない.疾患を特定せず,Barthel IndexやFIMとなどのADLと血管内皮機能の検討を行ったところ,BHIとBarthel Index(P=0.232),収縮期%FMDとFIM(p=0.260)に有意な差を認めた.研究責任者の退職により,科学研究費助成事業としては一旦終了するが,今後も症例を蓄積し,内皮機能と神経疾患の関係についての検討を引き続き行う予定である.
閃光灯火の視覚信号としての有効性を検討するための基礎研究

研究成果の概要本研究では白色および色光の閃光について、閃光の色、閃光時間、閃光の明るさレベル、背景の輝度を変えた場合の実効光度を、視覚実験を行って調べ、その視覚信号としての有効性を検討した。背景が暗黒(背景輝度Lb=O[cd/m^2])で閃光の明るさが閾値レベルの場合は、どの色の閃光についても、閃光時間が短かいときにはIe/Isの値は1よりかなり大きく、閃光時間が長くなるにつれて単調に減少して1に漸近する。全般に、閃光時間が短かいほど、Blondel and Rayの式から予測される明るさに比べて、知覚される明るさはより大きい。背景が暗黒でも閃光の明るさが下限レベルになると、閃光時間が100[μs]から約6[ms]の間では、閃光時間が長くなるにつれてIe/Isの値は一旦減少するが、約6[ms]からおよそ50[ms]の間では増加し、また、50[ms]付近を越えると再び減少して1に漸近する。したがって、Ie/Isが極小となる時間および極大となる時間が存在する。背景輝度が1または10[cd/m^2]になると閃光の明るさが閾値レベルであってもIe/Is極小となる時間および極大となる時間が存在する。この極小または極大となる時間は視覚系の応答速度と関連があり、白色閃光が、極大または極小となる時間が最も短く、つづいて青ー黄ー緑ー赤の順に長くなる。また、閃光時間が短い場合には、赤色閃光の実効光度が最も高く、つづいて白ー黄ー緑ー青の順に長くなる。また、閃光時間が短い場合には、赤色閃光の実効光度が最も高く、つづいて白ー黄ー緑ー青の順に実効光度が低くなる。全般に、閃光時間の短い閃光灯火は、その実効光度がBlondel and Rayの実験式から推定される値より大きく、明るくよく目立つため視覚信号として優れている。1.Xeショートアークランプおよび電子シャッタを用いた、閃光時間、閃光の光量、閃光間隔が任意に変えられる白色閃光灯火のシミュレータを設計して製作依頼し、納入をさせた。ストロボ流量計を購入し、これを用いてシミュレータによる閃光の実効光度の較正を行った。2.暗所視、薄明視、明所視条件に下で、白色閃光灯火を定常光度との関係を系統的に調べた。3.背景輝度が異なる種々の場合について、白色閃光灯火の実効光度と見え方(誘目性、視認性、知覚される明るさ)との関連を視覚心理実験によって調べた。4.一連の視覚心理実験の結果、(1)暗所視条件の場合、閃光時間が短くなるほど、また、閃光の光量が多くなるほど、実効光度はブロンデル・レイの計算式による値より大きくなることが確かめられた。(2)薄明視および明所視条件の場合、背景輝度が高くなるほど、また、閃光の光量が大きくなるほど、実効光度はブロンデル・レイの計算式による値より大きくなることが確かめられた。さらに、閃光時間をかえた場合、実効光度が極大になる閃光時間および極小となる閃光時間が存在すると言う、従来知られていなかつた実験事実を確認することができた。閃光灯火の見え方は全般に定常灯火より優れていることが確かめられた。1.閃光灯火の色またはスペクトル波長を、色ガラスフィルタまたは干渉フィルタを用いて変え、任意の色度の色光閃光を発生させられるようにシュミレ-タを改良し、視覚実験に用いることができた。

色彩色差計を購入し、これを用いて閃光の色度の較正を行った。2.暗所視、薄明視、明所視に対応する種々の背景輝度の下で、色光閃光灯火を観測し、背景輝度、閃光時間、閃光の光量と実効光度との関係を調べた。一連の系統的なデ-タを得ることができた。3.種々の背景輝度の下での、色光閃光灯火の実効光度と見え方との関連を、白色閃光灯火と同様に視覚心理実験によって調べ、色光閃光は、特に視認性および誘目性に優れていることを確認した。4.一連の視覚実験の結果、(1)色光閃光灯火についても、全般に閃光の光量が多くなるほど、また、背景輝度が高くなるほど、実効光度はブロンデル・レイの計算式による値より大きくなることが確かめられた。(2)閃光時間を変えた場合、色光閃光灯火についても、閃光時間が極大となる閃光時間および極小となる閃光時間が存在し、しかもその時間が閃光の色によって異なると言う、これまで知られていなかった実験事実を確かめる事が出来た。この要因については今後さらに検討する予定である。色光閃光灯火の見え方と視覚信号としての有効性についてまとめ、全般的な検討を行うことを目的として、1.種々の背景輝度の下で、色光閃光灯火と白色閃光灯火の見え方の違いを視覚心理実験のよって調べ、色光閃光灯火の色光効果(誘目性、視認性、知覚される明るさが白色閃光灯火に比べて優れている程度)と色度との関係を検討した。2.背景輝度、閃光灯火の特性(閃光時間、閃光光量、閃光の色度)と実効光度、見え方との関連を総合的に分析し、視覚信号としての有効性を検討した。3.分析結果に基づいて、合理的な閃光灯火信号システムのあり方、昼間、薄暮、夜間における適正な運用条件について検討をした。一連の視覚心理実験の結果、(1)色光閃光灯火は、色の対比効果により視認性、誘目性に優れていること、特に赤色灯火は実効光度が最も高く、明るく良く見える事が確認された。(2)暗所視、薄明視、明所視と背景輝度が高くなるにつれて、また、閃光の光量が多くなるにつれて、白色閃光灯火および色光閃光灯火ともに、実効光度はブロンデル・レイの計算式による値より大きくなるとが確められた。(3)さらに、閃光時間を変えた場合、実効光度が極大になる閃光時間および極小となる閃光時間が存在し、赤緑応答が時間が長く、黄青応答が時間が短いという、実験事実を確認することができた。(4)視覚信号としては時間の短い色光閃光灯火が優れていることが確かめられた。(5)実際に、海上航路標識、航空障害灯、原子力発電所の航空警戎標識などについて検討し、視覚信号システムとして用いる場合の指針を示した。
発生工学に基づいた歯周組織再生療法の確立について

14の研究機関より主要テーマの異なる研究者を募り企画調査会議を行い、これまで各研究機関において行われてきた本課題に関連する研究について、20の演題が発表され、各演題についての質疑応答と今後の研究についての意見交換を行った。研究発表として、BMP、bFGF、PDGF、IL-6、IGFといった成長因子、サイトカインが、培養細胞の増殖や硬組織形成関連遺伝子・タンパクの発現、および動物モデルにおける硬組織や歯周組織の再生に与える影響、歯周組織再生用材料としてすでに臨床応用されているエナメルタンパクについての基礎的および臨床的研究、ヘルトビッヒ上皮鞘由来細胞や歯根膜由来上皮細胞などの培養系の確立とその性質、ePTFE膜によって得られた膜組織の硬組織形成能に関する検討、DMP1、sgkなとの歯周組織の発生および再生に関与していると思われるタンパクや遺伝子の同定/発現に関する研究、歯周組織の細胞に対する機械的刺激の影響、歯周組織再生の評価方法の確立といった内容について報告された。これらの報告の総括として、歯周炎によって破壊された歯周組織の再生を達成するためには、セメント質、歯根膜、および歯槽骨といった各々の歯周組織の再生を担う細胞、その細胞の分化、増殖を制御するサイトカインや成長因子、細胞の増殖および組織構築の足場あるいは成長因子などを応用する際の担体となる骨格系(スキャフォールド)、さらに今回の会議においては報告は行われなかったが、栄養源としての血液供給の4つの要素の存在が必要であり、発生工学的な歯周組織再生療法を確立するにはそれぞれの分野の研究者間の協力が不可欠であると考えられる。今後は、今回の参加研究機関の中からさらに研究協力者を限定した形で、発生工学に基づいた歯周組織再生療法の確立に向けて具体的な共同研究の方法について検討していく予定である。
多足歩容設計とロボット製作に関する研究

1 6足歩容(gait)観察システムの装備と解析:実際の生物の歩容をよく観察することが、彼等の歩行アルゴリズムを把握し、最適化の内容を理解するただ一つの方法である。そこで、観察用トレッドミルを作成して、これによりデータを得ている。本研究では、トレッドミルに関して、次のような工夫を凝らした。(1)トレッドミルの中央部で、昆虫が常に歩行するようにした。(2)鏡を設置して、平面図、側面図を同時に得た。(3)ベルトの上に正方形状の障害物を接着し、凹凸のある面の上の歩行の観察を可能にした。また、脚の数カ所に白いマークをつけて(コオロギを炭酸ガスで麻痺させてペンキを塗った)フレーム毎の脚の動きを明瞭に捕らえるようにし、コオロギの歩行中における前脚、中脚、後脚の四節角の時間的な変化を高速度カメラで撮影したので、正確なデータを得ることができた。2 6脚歩行ロボットの設計と試作:アクチュエータとして、電気サーボモータを用いたものと、ゴム管式空気圧アクチュエータを用いたものの両方を作成した。いずれの場合も、歩容を巧く分類して、歩行パターンをできるだけ少ない種類にするよう努力し、実際の昆虫の歩行とまったく同じではないが、歩行運動、脚の運び具合の本質的なところがよく再現されるような歩行ロボットを作成することができた。障害物を乗り越える様子などは、実際のコオロギに非常に似た脚の動かし具合が観察された。3昆虫規範型歩行ロボットの応用:6脚歩行ロボットは、静歩行なので、安定であり、凹凸のある面上を自由に歩行出来るので、災害地(土砂崩れ、噴火口)などでのデータ収集などに応用出来ると考える。(1)コオロギの歩容の観測と解析歩容を詳細に観測するために、トレッドミルを製作した。これは、走行するベルトコンベアの上でコオロギを歩行させ、走行速度を調整することで、見かけ上コオロギを定点で高速度撮影できるようにしたものである。撮影は、毎秒250フレームで行った。コンベア表面には縞模様をつけ速度を画像上で計測できるようにした。コオロギがコンベアの中央部に存在するように、触覚と側壁を利用した。(2)ロボットの脚のためのアクチュエータの開発歩行ロボットにおいて、重要な問題のひとつは、重量を以下に少なくできるかである。とくに、アクチュエータは、電磁モーターなどを用いると、重量を大きく増加させる要素となる。そこで、本研究では、シリコーンゴムを利用した独特の空気アクチュエータを開発して応用することを考えた。基本原理は、東芝の研究開発センターのFMA(flexible micro actuator)によるが、新しく開発したものは、長方形断面である。関節を空間的に変形させることが出来るというこの種のアクチュエータの特徴を巧みに生かして、昆虫の歩行をうまく模倣できるロボットを試作することができた。(3)6脚ロボットの製作昨年までは、昆虫の代表として蟻を対象とした研究を続けてきた。蟻は、6本の足が大体同じ長さで、同じような機能を持ったものであるので、ロボットとして製作する規範としては適当であろうと考えたからである。上のアクチュエータを利用して、基本的な形は完成したので、今後改良を重ねて、コオロギ型のロボットと共に改良を続けて行く予定である。そこで、昨年から、観察用トレッドミルを作成して、これによりデータを得ている。今年度は、トレッドミルに更なる改良を加えて、より正確な歩容解析を行なった。

主な改良点は、(1)トレッドミルのベルトの上下運動を防いだこと。(2)ベルトの上に正方形状の障害物(ほぼコオロギの身長と同じ寸法を辺長とした)を接着し、凹凸のある面の上の歩行を観察できるようにしたことである。また、トレッドミルに前後の傾斜をもたせ、コオロギが坂道を昇降する様子を観察した。以上の改良を加えたトレッドミルにより、コオロギの歩行中における前脚、中脚、後脚の関節角の時間的な変化を高速度カメラで撮影した。このとき、脚の数カ所に白いマークをつけて(コオロギを炭酸ガスで麻痺させてペンキを塗った)フレーム毎の脚の動きを明瞭に捕らえるようにした。2 6脚歩行ロボットの設計と試作:アクチュエータとして、電気サーボモータを用いたものと、ゴム管式空気圧アクチュエータを用いたものの両方を作成した。いずれの場合も、歩容を巧く分類して、歩行パターンをできるだけ少ない種類にするよう努力し、実際の昆虫の歩行とまったく同じではないが、歩行運動、脚の運び具合の本質的なところがよく再現されるような歩行ロボットを作成した。(1)6足歩容(gait)観察システムの装備と解析:実際の生物の歩容をよく観察することが、彼等の歩行アルゴリズムを把握し、最適化の内容を理解するただ一つの方法である。そこで、観察用トレッドミルを作成して、これによりデータを得ている。今年度は、トレッドミルに更なる改良を加えて、より正確な歩容解析を行なった。(2)ベルトの上に正方形状の障害物を接着し、凹凸のある面の上の歩行を観察できるようにしたことである。また、脚の数ヵ所に白いマークをつけて(コオロギを炭酸ガスで麻痺させてペンキを塗った)フレーム毎の脚の動きを明瞭に捕らえるようにし、コオロギの歩行中における前脚、中脚、後脚の関節角の時間的な変化を高速度カメラで撮影したので、これまでより正確なデータを得ることができた。(2)6脚歩行ロボットの設計と試作:アクチュエータとして、電気サーボモータを用いたものと、ゴム管式空気圧アクチュエータを用いたものの両方を作成した。いずれの場合も、歩容を巧く分類して、歩行パターンをできるだけ少ない種類にするよう努力し、実際の昆虫の歩行とまったく同じではないが、歩行運動、脚の運び具合の本質的なところがよく再現されるような歩行ロポットを作成することができた。特に、本年は、コオロギを規範とするロポットの製作が予想以上に進み、障害物を乗り越える様子などは、実際のコオロギに非常に似た脚の動かし具合が観察された。
MTCLタンパク質群による微小管集合構造制御機構の解明

微小管は、細胞の形態や小胞輸送、さらには染色体分配に必須な役割を果たす非常に重要な細胞内線維構造である。しかし、この線維を安定に形成させ、さまざまな集合構造に組織化する機構についてはいまだ多くが不明である。本研究では、申請者が発見した微小管制御タンパク質群、MTCLsの解析をさらに進めることによって、これまで知られていなかった全く新しい微小管安定化機構が存在することを証明する。また、微小管集合構造のの組織化がゴルジ体を足場にして起こっているという仮説、および、細胞極性キナーゼによるリン酸化によって制御されているという仮説についても検証を進める。
悪性骨軟部腫瘍細胞に対する腫瘍選択的融解アデノウイルスと抗PD-1抗体の併用効果

現在悪性骨軟部腫瘍に対しては化学療法や放射線療法と手術療法を組み合わせているが、根治的な治療方法はまだない。腫瘍内でのみ選択的に増殖するアデノウイルスを用いたがんウイルス療法は、既存の放射線や抗がん剤とは異なるメカニズムで細胞死を誘導する新規療法のひとつである。一方免疫チェックポイント阻害剤は、大幅に生存期間の延長を期待できる治療薬として近年一躍脚光を浴びるようになったがん免疫製剤である。本研究では、テロメライシンと、免疫チェックポイント阻害剤である抗PD-1抗体との併用効果に関して、マウス・ヒトの悪性骨軟部腫瘍細胞株を用いて解析を行い、その有効性を検討する。