hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
におい合成機能をもつ能動型においセンサの開発

においの識別に関しては単一のセンサで十分な選択性を得ることが困難なので、特性の異なる複数センサの出力パターンをパターン認識することが有効である。本研究ではこの方法を発展させ、複数の混合されたにおいの濃度を定量する能動型においセンサを開発した。本手法ではシステムが能動的かつ自律的に複数の既知臭を混合し、新しいにおいを作り出して複数センサ出力パターンを測定し、被検臭に対するパターンと一致する混合比を求め、その混合比から各成分濃度を求める。その混合比の変更は非線形最適化アルゴリズムに従って逐次行う。この方法を用いると関数モデルが不要なため、精度よくセンサドリフト等にも強いシステムをつくることができる。このシステムにより車室内環境計測を目的として妨害臭存在下でガソリンの濃度定量を行い、その測定に成功した。その際に、電気化学と半導体ガスセンサを用いていたが、応答の遅い電気化学センサを水晶振動子ガスセンサに置き換えることにより、測定時間を大幅に短縮することができた。また、非線形最適化アルゴリズムとしてはシンプレックス法及び最急降下法を用いたが、最急降下法において曲面傾斜方向を求める際、特異値分解法と最小二乗法を導入し、解の収束精度及び安定性を向上させた。さらに、香料関係への応用については、水晶振動子ガスセンサを用いて各種の天然精油の識別、光学異性体間の応答分離等を行い良好な結果が得られた。さらに香料の基本成分となるいくつかの物質について混合臭の濃度定量に関する検討を行なった。食品、飲料、化粧品、環境計測の分野では、人間の官能に頼った官能検査により、においの品質管理、検査、開発が行われているが、客観的な評価法が望まれている。本研究者は、複数ガスセンサ出力パターンをニューラルネットワークでパターン認識するにおいセンサの研究を行い、既に人工的ににおいを識別する装置を開発した。この装置を微妙なにおいのかぎわけを行うことが可能であるが、複数の混合されたにおいを定量するのは困難であった。本研究では、混合臭の濃度定量を行う新しい手法を開発した。混合臭の濃度定量は難しく十分な性能を持つセンサが得られていないが、本手法ではシステムが能動的かつ自律的に複数の既知臭から被検臭を合成し、合成臭と被検臭のセンサアレイ出力パターンが一致するような混合比を求め、その混合比から被検臭の濃度定量を行う。これにより、センサの非線形性、ドリフトがあっても精度よく測定でき、回帰分析等に必要な関数モデルの定義が不要になる。また、ガス分析法では複数ガス成分からなる一般臭を基本要素として扱うことは困難であるが、本手法では可能である。本研究では、自動車車室内の環境計測として、妨害臭存在のガソリン臭の濃度測定を行った。センサとしては、半導体ガスセンサ及び電気化学ガスセンサ、パターンマッチングを改善する手法としては、非線形最適化アルゴリズムであるシンプレックス法及び最急降下法を用い、トルエン、トリエチルアミン等の妨害臭存在下でも数ppmの誤差で各成分濃度を定量することができた。また、食品・飲料、化粧品用としては、水晶振動子ガスセンサが有用である。多検体測定システムにより20種類の天然精油について、8種類のセンサを用いて測定を行い、良好なパターン分離が得られた。においの識別に関しては単一のセンサで十分な選択性を得ることが十分でなく、特性の異なる複数センサの出力パターンをパターン認識する方法が有効である。本研究ではこの方法を発展させ、複数の混合されたにおいを定量することを目的としてにおい合成機能を有する能動型においセンサを開発した。本手法では、システムが自律的に複数の既知臭を混合し、新しいにおいを作り出して複数センサ出力パターンを測定し、被検臭に対するそれと比較し、両者が一致するように混合比を決め、この混合比から各成分の濃度を求める。昨年度、装置を開発し、妨害臭存在下のガソリン濃度の定量を行い、濃度定量が可能であることがわかった。しかし、測定に時間がかかるために、本年度は時間短縮を行った。昨年度までは、電気化学センサと半導体ガスセンサを用いていたが、電気化学センサの応答回復時間が遅いことが問題であった。

そこで、電気化学センサの代わりに水晶振動子ガスセンサを用いることを考え、多チャンネル周波数カウンタ及びコンピュータとのインタフェース回路を製作し、計測ソフトウエアを作成した。改良した装置を用い、ガソリン及びその他の車室内臭の検出に適した水晶振動子ガスセンサを選択した後に、濃度定量実験を行った。センサの種類を変更することにより、1回当たりの測定時間が5分から2分に短縮され、最適化アルゴリズムのパラメータを調整することにより収束までの濃度変更回数が減少し、2成分の場合、従来110分程度かかっていた測定時間が30分程度にまで短縮することができた。また、従来ガソリン以外の成分に関しては定量精度が十分でなかったが、多様な特性を持つ水晶振動子ガスセンサを用いることにより、精度を向上させることができた。また、香料関係への応用を考えてシクロデキストリン膜を水晶振動子に塗布して、光学異性体の分離が可能なことがわかった。においの識別に関しては単一のセンサで十分な選択性を得ることが困難なので、特性の異なる複数センサの出力パターンをパターン認識することが有効である。本研究ではこの方法を発展させ、複数の混合されたにおいの濃度を定量する能動型においセンサを開発した。本手法では、システムが自律的に複数の既知臭を混合し、新しいにおいを作り出して複数センサ出力パターンを測定し、被検臭に対するパターンと一致する混合比を求め、その混合比から各成分濃度を求める。前年度までに測定装置の開発、センサ部の性能向上を行い、混合臭の濃度定量が可能なことがわかった。本年度は、濃度定量の際用いるアルゴリズムの改良、センサ特性の応答予測法の提案等を行なった。合成臭の濃度変更を逐次行う際、各成分の濃度変更量を非線形最適化アルゴリズムにより決定する。ここではアルゴリズムとして最急降下法を使用した。その際、収束安定性に問題があったが特異値分解法及び最小二乗法を導入することにより収束安定性が向上し、従来収束しなかった初期値からも解が得られるようになった。また、センサとしては水晶振動子及び半導体ガスセンサを用いているが、水晶振動子ガスセンサの応答予測法について検討した。このセンサの応答は塗布する感応膜に依存するため、従来は実験的に対象臭に合わせて感応膜を選択していたが、センサ応答を予測しその予測値により膜選択を行うと簡単に感応膜を選択することができる。本研究では分子量、沸点、屈折率等の物性パラメータから回帰分析によりセンサ応答を予測できることを確かめた。さらに、対象臭の範囲を広げて香料の基本成分となるいくつかの物質についても検討を行なった。
二次元検出器を用いた柔粘性結晶の構造の研究

輝尽性蛍光物質を塗布したスクリ-ン(イメ-ジング・ブレ-ト,IP)は,二次元X線検出器として様々な利点を持つ。特に逆空間全体に連続的に散乱が広がるような試料のX線散乱強度測定には有用である。異方性のあるデイフュ-ズな回折パタ-ンを与える柔粘性結晶の構造解析に、適用した。初年度はDLP100(MACサイエンス社製)を購入し,必要な装置等を目作し,強度測定における基本的問題点をチェックし解決した。次年度は、まず、ディフュ-ズな回折パタ-ン(散漫散乱)を、IPを用いて強度測定した場合の定量性と、解折方法の確立を目的とし、液体四塩化炭素と水を付料とした実験を行った。その結果、液体からの散乱をIPで測定した場合、従来の角度掃引法やエネルギ-分散法に比べ測定時間は数分の一ですみ、しかも解折法が簡単であることがわかった。測定精度も従来の方法と同程度、あるいはそれ以上の精度であった。唯一の欠点は、散乱パラメ-タSの大きな領域の測定ができないことであるが、研究の対象を液体の構成分子のパッキングや配置に限るなら問題はない。また当初、斜め入射のトラブルを予想したが、まったく問題はないことが確かめられた。柔粘性結晶の試料としてはアダマンタン(C_<10>H_<16>)をとりあげた。単結晶を作り、様々な方向からX線をあて、IPによりその二次元散乱パタ-ンを得た。分子の重心は規則格子を作っていることによるラウエ斑点と、配向が乱れていることによるディフュ-ズ・パタ-ンの両方が得られた。分子の重心はfccの格子点上にある。格子点のサイト・シンメトリ-は分子自身の対称性より高く、分子が大きな回転的振動を行い擬似的に球状分子にみせることで、格子点のサイト・シンメトリ-を満足させていると思われる。詳細な構造解折は現在進行中である。交付された金額が、購入予定品の半分以下だったので、イメ-ジングプロセッサ-の検出部を購入し、デ-タ読み取りシステムは所属大学の研究費で備い、機械部分(管球ホルダ-、試料ホルダ-など)は、できるかぎり自作手造りした。検出部及びデ-タ読み取りシステムは、11月初旬に納入された。納入された装置(マック・サイエンス社製イメ-ジング・プロセッサ- DIP100)と自ら製作した部分を組み合せ、装置の立ち上げ及び性能試験を行った。性能試験の結果、装置、及び解析上に問題点として挙ったのは、試料の回転駆動部のパルスモ-タのトルクが小さいこと、デ-タの規模が大きく、収集しマイクロコンピュ-タの記憶領域に収められたデ-タを、造解析のために大型計算機へ移す適当な媒体が現在ないことである。この二点は近々改良する予定である。これら以外の問題点は解決した。液体【double arrow】

柔粘性結晶の相変化も観察できるように、液体試料ホルダ-、温度を上下できるクライオスタットなどを現在製作中である。相変化を追い動的構造解析を行うため、当初イメ-ジングプレ-トの一次元を時間軸として動かすことを考えていたが、機構上困難なことが判った。このため、チョッパ-などで二次元平面を区切って利用することを考えている。以上のことと平行し、試料結晶(CBr_4、C(NO_2)_4など)の単結晶作りを行っている。また、当初の計画にはなかったが、ディフュ-ズパタ-ンのイメ-ジング・プレ-トによる定量的構造解析が、どこまでうまくいくか調べるため、液体を標準試料として実験・解析を行うことを予定している。輝尽性蛍光物質を塗布したスクリ-ン(イメ-ジング・プレ-ト,IP)を用いたX線二次元検出器であるDIP100(MACサイエンス社製)を使っての測定法、および測定時における種々の問題点の列挙、解決については、昨年度までに完了していた。本年度は、ディフュ-ズな回折パタ-ン(散漫散乱)を、IPを用いて強度測定した場合の定量性についてまず検討した。試料としては、液体四塩化炭素と水を用いた。この二つの試料は筆者らが、エネルギ-分散法を用いて詳細な研究を行っている。これらと比較することにより、IPによる強度測定の精度を検討し、解析法の是非を判定することができる。その結果、液体からの散乱のIPによる強度測定は、従来の掃引法やエネルギ-分散法の測定時間の数分の一の測定時間ですみ、しかも解析法が簡単であることがわかった。測定精度も従来の方法と同程度あるいは、それ以上の精度であった。唯一の欠点は、散乱パラメ-タSの大きな領域の測定ができないことであるが、研究の対象を液体の構成分子のパッキングや配置に限るなら問題はない。DIP100は平面検出方式なので、散乱角の大きなX線がIPに斜めに入射した際、種々のトラブルを引きおこすと予想したが、この斜め入射の影響はまったくないことがわかった。柔粘性結晶としてはアダマンタン(C_<10>H_<16>)をとりあげた。単結晶を作り、様々な方向からX線をあてその散乱パタ-ンを得た。予想どうり、分子の重心は規則格子を作っていることによるラウエ斑点と、配向が乱れていることによるディフュ-ズ・パタ-ンの両方が得られた。アダマンタン分子の重心はfccの格子点上にある。この格子点のサイト・シンメトリ-は分子自身の対称性(Td)より高く、分子が大きな回転的振動を行うことで擬似的に格子点のサイト・シンメトリ-を満足させているものと思われる。詳細な構造解析は現在進行中である。
オピオイド物質の身体依存の研究に関するin vitro代替法の確立

近年、動物実験の倫理および薬物作用機序の解析という観点から丸ごと動物のかわりにin vitro代替法による実験の開発が注目されている。なかでも薬物の身体依存性の検索においては、退薬症候を介してしか検索できないために動物に与える苦痛は少なくないと推測され、代替法の開発が望まれている。よって、本研究ではオピオイド物質の身体依存性をin vitro実験で検索する方法を検討し、以下の成果を得た。1.モルモットから摘出した回腸縦走筋標本をマグヌス槽に吊し、モルヒネ、ペチジン、コディン、ペンタゾシン、およびエチ-ルケトサイクラゾシン(以下EKC)を適用した。いずれの薬物も電気刺激収縮を濃度依存的に抑制しIC50が得られた。抑制はナロキソンが拮抗された。2.回腸標本を被験薬で24時間インキュベ-トした後にナロキソンを適用したところ、いずれの薬物の場合にも電気刺激による収縮には基線張力の上昇がみられた。インキュベ-ト時間を短かくすると基線の上昇は時間に比例して減弱した。インキュベ-トせずに標本を被験薬で30分間のみ前処置後ナロキソンを適用するとモルヒネとコデインでは基線の上昇がみられたが他の薬物では明らかな上昇はみられなかった。3.ウサギから摘出した輪精管標本では、EKC以外は電気刺激収縮を抑制しなかった。また、EKCで24時間インキュベ-トした標本においてもナロキソン適用時の基線の上昇は認められなかった。4.ラットの静脈内にEKCを1時間毎に72回投与し最終投与後ナロキソンを皮下投与したところ、被刺激性の亢進、下痢、体重減少などの退薬症候がみられたがペンタゾシンより弱く、in vitroの成績と一致した。以上から、オピオイド物質の身体依存性の検索にモルモット摘出回腸標本を用いるin vitro実験法は有用であることがわかり、インキュベ-ション時間を変数として量的な評価もある程度可能な方法を確立した。モルモットから摘出した回腸縦走筋標本をクレブス液の入ったマクヌス槽に吊し、電気刺激したときに生ずる収縮をポリグラフに記録した。1)無処置の標本において電気刺激による収縮に対するモルヒネ、ペチジン、ペンタゾシンの抑制効果を観察し50%抑制濃度を算出した。2)標本を摘出後直ちに濃度がIC50ないしIC50×40の被験薬を含むクレブス液中に浸し、約4°Cで1、6および24時間インキュベ-トした。その後、同濃度の薬液が入ったマグヌス槽内に標本を移して電気刺激し60分後にナロキソン1μMを適用し、基線張力の変化(以下ナロキソン収縮)を観察した。以上の結果、1)電気刺激により生じた標本の収縮はモルヒネ、ペチジン、およびペンタゾシンの適用により濃度依存的に抑制され、IC50値はそれぞれ35.4±3.2、826.7±160.6および220.7±54.2nMであった。2)被験薬でインキュベ-トした後のナロキソン収縮はモルヒネ、ペチジン、ペンタゾシンのいずれもIC50×5以上の濃度でみられた。しかし、ペンタゾシンIC50×20以上の濃度では収縮は濃度依存的に小さくなった。いずれの場合もナロキソン収縮はインキュベ-ト時間が24時間のときの方が6時間のときより大きかった。

これらの結果から、インキュベ-トした標本におけるナロキソン収縮は、モルヒネやペチジンなど強い身体依存性を有する薬物のみならず、ペンタゾシンのように比較的身体依存性が弱いと云われている薬物においても観察できることが明らかとなった。モルモットから摘出した回腸縦走筋標本をクレブス液の入ったマグヌス槽に吊し、電気刺激したときに生ずる収縮をポリグラフに記録した。1.無処置の標本において電気刺激による収縮に対するコデインおよびエチ-ルケトサイクラゾシンの抑制効果を観察し50%抑制濃度を算出した。2.標本を摘出後直ちに濃度IC50ないしIC50×20のコデインおよび濃度IC50ないしIC50×40のエチ-ルケトサイクラゾシンを含むクレブス液中に浸し、約4°Cで24時間インキュベ-トした(以下、インキュベ-ト標本)。その後、同濃度の薬液が入ったマグヌス槽内に標本を移して電気刺激し60分後にナロキソン1μMを適用し、基線張力の変化(以下ナロキソン収縮)を観察した。3.標本を摘出後直ちにマグヌス槽に吊し電気刺激を開始し、安定した収縮が得られた後に濃度IC50ないしIC50×20のモルヒネを加え、30分間前処置(前処置標本)の後ナロキソン収縮を観察した。以上の結果、1.電気刺激により生じた標本の収縮はコデインおよびエチ-ルケトサイクラゾシンの適用により濃度依存的に抑制され、IC50値はそれぞれ16,901.1±1,890.4および0.6±0.4nMであった。2.コデインおよびエチ-ルケトサイクラゾシンのインキュベ-ト標本におけるナロキソン収縮は前者ではIC50×5以上、後者ではIC50以上の濃度でみられた。3.モルヒネ前処置標本におけるナロキソン収縮は、IC50の10倍濃度ではみられたが、5倍濃度ではみられなかった。これらの結果から、インキュベ-ト標本におけるナロキソン収縮はコデインやエチ-ルケトサイクラゾシンでみられることがわかった。また、24時間のインキュベ-ションでは身体依存性が比較的弱い薬物でもナロキソン収縮がみられてしまうことから、強弱の判別にはインキュベ-ションの代りに槽内で30分間前処置する方法が考えられた。近年、動物実験の倫理および薬物作用機序の解析という観点から、丸ごと動物のかわりにin vitro代替法による実験の開発が注目されている。なかでも薬物の身体依存性の検索においては、退薬症候を介してしか検索できないために動物に与える苦痛は少なくないと推測され、代替法の開発が望まれている。よって、本研究ではオピオイド物質の身体依存性をin vitro実験で検索する方法を検討し、本年度は以下の結果を得た。1.ウサギから摘出した輸精管標本をクレブス液の入ったマグヌス槽に吊し、電気刺激したときに生ずる収縮をポリグラフに記録した。槽内に適用したモルヒネ、ペチジン、コデイン、およびペンタゾシンは電気刺激収縮に対し、いずれも明らかな抑制効果を示さずIC50は求められなかった。また、エチ-ルケトサイクラゾシンのIC50の5倍濃度で24時間インキュベ-トした標本においてもナロキソン適用時の基線張力の上昇は認められなかった。2.昨年度のモルモット摘出回腸の実験で、エチ-ルケトサイクラゾシンには弱い身体依存性があることが示唆されたので、本年度はラットのin vivo実験を行った。1群6ー8頭の5週齢のJcl:SD系雄性ラットの静脈内にカテ-テルを介してエチルケトサイクラゾシンを1時間間隔で72回投与した。最終回投与の30分後にナロキソン4mg/kgを皮下投与し、以後15分毎に1時間後まで退薬症候を観察した。
ゼブラフィッシュ胚発生における尾部未分節中胚葉の形成機構に関する研究

ゼブラフィッシュの発生時において尾部沿軸中胚葉は尾芽表層に位置する未分化中胚葉から転写因子spt、msgn1依存的に形成される。本研究ではこのような尾部沿軸中胚葉形成機構を理解するため、msgn1の発現制御機構の解明を試みた。内在性のmsgn1の発現を再現するのに十分な遺伝子発現制御領域を同定し、培養細胞を用いてそのプロモーター活性を検討した結果、これらのプロモーターはwntシグナルとT-box型転写因子ntlにより正に制御される事が明らかになった。この事から、msgn1は尾芽表層では未同定の転写抑制機構により発現が抑制されており、その抑制の解除が尾部沿軸中胚葉分化の引き金になると考えられた。脊椎動物の後方組織は体軸の後方伸長に伴い尾部先端の尾芽に存在する前駆細胞から形成される。ゼブラフィッシュ胚発生において後方体幹部および尾部の沿軸中胚葉組織は尾芽表層に位置する中胚葉前駆細胞(MPCs)から分化する事が知られている。MPCsの未分化性の維持にはWntシグナル活性が必須である事が知られている。一方MPCsからの沿軸中胚葉の分化には2つの転写因子sptとmsgn1の冗長的な機能が必須である事が筆者らにより明らかにされていた。本研究において筆者はこのような沿軸中胚葉分化誘導機構の一端を明らかにするため、msgn1の発現制御機構に注目して研究を行った。まず、msgn1のプロモーターを単離し、培養細胞を用いてその活性を解析した結果、msgn1プロモーターはwnt、ntlといったMPCsで活性化している因子により正に制御される事が明らかになった。この事は、未分化なMPCsにおいてすでに分化促進因子msgn1の発現が開始する条件が整っているものの、何らかの機構でmsgn1の発現が抑制されており、実際の分化時にはその抑制が解除されることにより、msgn1の発現が開始し、沿軸中胚葉が分化する事を示唆していた。研究代表者らはそのようなmsgn1の発現抑制機構を明らかにするため、MPCs領域で特異的に発現する転写抑制因子voxに注目して解析を行った。MPCsにおいてvoxはmsgn1とは排他的に発現しており、培養細胞においてwntシグナル依存的なmsgn1プロモーターの活性化はvoxの発現により抑制されることから、MPCsにおいてmsgn1の発現はvoxにより抑制されている可能性が示唆された。しかし、hsp制御下でvoxを発現するトランスジェニックフィッシュを作成し、実際のin vivoにおけるvoxのmsgn1の発現に対する影響を解析した結果、培養系でみられたような抑制的効果は認められなかった。これらの結果から、in vivoにおいてMPCsでのmsgn1制御においてvoxの関与について確認する事はできなかった。筆者らはゼブラフィッシュ初期発生において、spadetail(spt)とmesogenin1(msgn)とよばれる2つの転写因子が尾部未分節中胚葉(PSM)が尾芽表層に存在する未分化中胚葉(MPCs)から分化するさいに重要な役割を果たす事を見いだしてきた。このことより、msgn1の発現開始機構を明らかにする事が、尾部PSM分化の開始機構の理解に重要であると考え、COS7細胞を用いてmsgn1のプロモーターアッセイを行った。これまでの研究においてトランスジェニック魚において内在性のmsgn1の発現を再現するのに十分な上流3000bpを用いてレポータアッセイを行った結果、msgn1の発現はwntシグナルおよび転写因子notail(ntl)により強く活性化される事が明らかになった。これらの因子は主にMPCsで強く発現していることから、通常のMPCsではmsgn1の発現を抑制する機構が存在し、PSM分化時にその抑制が解除される事によりmsgn1の発現が開始し結果PSM分化が誘導される可能性が考えられた。この可能性を検討するため、プラスチック切片を作製し尾芽領域で発現する転写抑制因子の詳細な発現を調べたところ、転写抑制因子として知られる、voxが尾部においてmsgn1とは入れ子状に発現する事が明らかになった。さらに培養細胞を用いたレポーターアッセイを行った結果、wnt、ntlによるmsgn1プロモーターの活性化はvox1の導入量依存的に抑制される事が明らかになった。現在実際のゼブラ胚においてvoxによるmsgn1の発現抑制がPSMの分化を制御しうるかどうかを検証するため、ヒートショックプロモーター制御下でvoxを発現するトランスジェニックラインの作成を行っている。msgn1の発現制御機構に関しては概ね計画通りに進んでいるが、下流因子の探索に関しては計画よりやや遅れている。今後はhsp-voxトランスジェニックラインを作製し、実際の胚発生時の尾部PSMの分化におけるvoxの機能を明らかにすることを試みる。

また、msgn1/sptの下流因子を探索するためRNA-SEQを用いて、正常胚尾部とmsgn1/spt二重機能阻害胚尾部における遺伝子の発現を網羅的に比較する。これにより同定されるmsgn1/spt下流遺伝子をTALEN法を用いて破壊する事により、それ等の機能の詳細を明らかにする事を試みる。これらの下流因子の探索に関しては本来はマイクロアレイを用いて今年度行う予定であったが、より多くの遺伝子に関し網羅的に解析が可能であるRNA-seqに切り替える事にしたため、サンプリング条件の検討に想定以上の時間がかかり実験自体が次年度への繰り越しとなってしまい、次年度使用額が生じる結果となった次第である。本年度実行できなかったRNA-seqに関して『次年度使用額』を用いて来年度行う予定である。それ以外のトランスジェニックの作成やTALENによるノックアウトフィッシュの作成、魚の飼育等に関しては次年度以降に請求する予算を用いて行う。
免疫化学的手法を用いたアリストロキア酸の超高感度検出システムの開発

本研究は、主にアリストロキア属の植物に含有される成分であるアリストロキア酸(Ari)に対するモノクローナル抗体(MAb)を作製し、本MAbを用いてアリストロキア酸の超高感度検出システムを開発することを目的としている。本申請者は、平成15年度中にAriに特異的なMAbを活用した高感度且つ迅速な免疫化学的アッセイシステムの構築を目指した。まず、スタンダードなイムノアッセイであるELISA法の確立を行った。Ari-OVA(ovalbumin)を固相化抗原とし、イムノプレート中で遊離のAriと抗Ari MAb-1A8とを競合させる競合的ELISAを検討した結果、200ng/mlから5μg/mlの濃度範囲でAri量と吸光度との間に良好な直線関係が得られた。続いて、確立した競合的ELISA法を用い、各種アリストロキア属植物に含有されるAriの分析を行った。その結果、今回確立した競合的ELISA法は、測定誤差が少なく、また高感度定量法として植物中のAriの分析に適用可能なことが明らかとなった。加えて、我々が独自に開発した新規な免疫染色法であるEastern blottingによるAriの特異的な同時検出法の構築を行った。本法は、植物エキス中の二次代謝産物をTLC板にて展開分離後、各種化合物をpolyethersulfone(PES)膜に熱転写し、膜状で抗Ari MAb-1A8を用いた免疫染色を行う。抗体の高い分子認識能を利用した本手法を用いることで、多種多様な二次代謝産物の中のAriのみが特異的に検出可能であった。また、本手法は有害作用が指摘されているAriを含有するアリストロキア属植物等の生薬、健康食品への混入を未然に防ぐ有用な評価システムとして期待できる。<参考資料>辛島誠子,田中宏幸,Waraporn Putalun,正山征洋,免疫化学的手法によるaristolochicacid高感度分析法の確立,第20回日本薬学会九州支部会講演要旨集,p.104.本研究は、主にアリストロキア属の植物に含有される成分であるアリストロキア酸(Ari)に対するモノクローナル抗体(MAb)を作製し、本MAbを用いてアリストロキア酸の超高感度検出システムを開発することを目的としている。本申請者は、平成14年度中にAriに特異的なMAbの作製を目的として、まず免疫原であるAri-牛血清アルブミン複合体(Ari-BSA)の調製を行った。Ari-BSAのハプテン結合数をMALDI-tof MSにより測定し、十分な免疫原性を有していることを確認した後、これを免疫原としてマウスに感作した。血中抗体価の上昇を確認した後、ポリエチレングリコール法により細胞融合を行い、続いてELISAによる抗Ari MAb産生ハイブリドーマの選択的選抜、限界希釈法によるハイブリドーマのクローニングを行い、抗Ari MAb産生ハイブリドーマ(1A8)の作製を完了した。さらに、抗Ari MAb産生ハイブリドーマ(1A8)を大量培養した後、培養上清中の抗Ari MAb(1A8)を精製し、これを活用して競合的ELISAによるAriの特徴付け並びに免疫化学的アッセイシステムの構築を試みた。その結果、本抗体はAriに対して極めて高い選択性を持つことが明らかとなり、また本抗体を活用した競合的ELISAにおいて200ng/mL5μg/mLの濃度領域を検量域とするアッセイシステムを構築した。申請者は、高感度且つ迅速な免疫化学的アッセイシステムの構築を目指した研究を平成15年度に展開する計画である。<参考資料>

辛島誠子,田中宏幸,Waraporn Putalun,正山征洋,免疫化学的手法によるaristolochicacid高感度分析法の確立,第20回日本薬学会九州支部会講演要旨集,p.104.
油脂含有廃棄物からの液体・気体燃料変換のための高速抽出－二段発酵プロセスの開発

今年度は藻類の単独と混合水素発酵のバッチ実験を行い、水素収率に関わるパラメーターの影響を調べた。単独水素発酵では、乾燥した後の大型藻類Gelidium amansiiに1%の各希酸を投入し、121°C5%(w/v)で30分間の前処理をした。これらの条件で得られた加水分解物をバッチ水素発酵の基質として供給し、各希酸の影響を検討した。その結果、H2SO4前処理法のみが、Gelidium amansiiからの水素発酵の改善に有意な効果が得られた。他の希酸(HCl, HNO3, H3PO4など)を用いた前処理は水素発酵に悪影響を与えることを判明した。大型藻類バイオマスからの水素生成を高めるためには、適切な前処理方法の選択が不可欠であることを明らかにした。大型藻類と微細藻類の混合水素発酵では、異なる植種菌/基質の比(315% v/v)のバッチ実験を実施した。植種菌/基質の比が6%から15%に増加するとともに、バイアル瓶内の酢酸濃度が低下した一方、吉草酸塩濃度が増加した。植種菌/基質の比が水素発酵の代謝経路に影響を与えた結果、混合藻類からの水素収率が低下した。大型藻類と微細藻類の混合水素発酵に最適な植種菌/基質比が6%であることがわかった。29年度が最終年度であるため、記入しない。油脂を高濃度に含有する汚泥廃棄物は高いエネルギー価を有するものの有効利用が難しく、また排水管渠や下水道等の公共施設の負担となっている。本研究では油脂を含有する廃棄物からの液体油脂の抽出に加え、抽出後の残渣からの水素の生成に重点を置いた研究を行う。従来、水素の前駆体は糖分であることが判明しているが、油脂が共存する環境下での糖分の発行による水素生産の実現可能性と効率化に取り組む。(1)油脂抽出後のグリーストラップ廃棄物残渣からのメタン回収の改善:バイオ燃料としての油脂を抽出後のグリーストラップ残渣からのエネルギー回収性を向上させるため、水熱処理、フェントン反応、過酸化水素、アルカリ過酸化物の4種類の前処理を検討し、アルカリ過酸化物処理において、無処理と比較して40%のメタン収率の改善が確認された。(2)様々な酸処理の海洋性藻類バイオマスからの水素生産に対する影響:海洋性藻類Gelidium aminassiの余剰バイオマスからの発酵による水素生産効率を向上させるため、硫酸、塩酸、硝酸、リン酸の各酸の希釈水による前処理を試みた。その結果、ポジティブな効果が確認されたのは硫酸処理のみで、無処理の場合と比較して約10%の水素収率の改善が認められた。研究成果や文献調査は一部をすでに論文化しているので、成果のアウトプットの点では十分進行しており、全体としておおむね順調と判断した。前年度までの短期の水素生産実験の結果をもとに、連続的に長期にわたって安定して水素生産が可能となる方法を模索する。昨年度それぞれ個別に取り組んだ、大型海洋性藻類と微細藻類の混合処理に取り組みつつ、外来の水素生成細菌の追加投入(バイオオーグメンテーション)の影響について実験的に検討し、成果を論文や学会等で発表する。
金属コロイドの集積を検出する方法の開発

イムノクロマト法は、簡便であるにもかかわらず、特異性が高く正確な検出方法である。そのことからベッドサイド診断に適した方法として、近年、重要性が高まっている。一般に、イムノクロマト法は、抗原-抗体反応に伴って反応試験紙上の特定の場所に金コロイドが集積し、その集積による赤紫色の呈色を目視で判断する。このとき、目視可能な呈色は、試験片のごく表層に集積した金コロイドのみを反映しているに過ぎないため、厚み方向の集積量を判断に生かすことができていないといえる。そこで、厚み方向全体にわたる金コロイドの集積を計測することで、イムノクロマト法を高感度化することを試みた。模擬試料として、C反応性タンパク質(CRP)を検出するイムノクロマト法キットを用いた。金コロイドを測定するために、試験紙上の金コロイド集積部を上下から挟み込むようにして設置する電極を作製した。異なる濃度のCRP溶液をそれぞれキットに添加したあと、金コロイド集積部を、作製した電極で挟み、その電極間の静電容量を測定した。対照実験として、金コロイドの集積を反射光強度で測定する光学測定器でも同様に測定した。その結果、反射光強度の場合は、測定下限がCRP量0.5ngであったのに対し、今回作製した電極では、0.1ngであった。反射光強度測定は目視と同程度であるため、今回作製した電極を用いることで、目視よりも高感度に測定できるようになったといえる。一方で、金コロイドの集積を測定する新しい方法として、微小電極の使用についても試みた。ガラス基板上に微小電極(電極間距離:約30μm)を作製し、その電極間に金コロイドを集積させて、電気抵抗および静電容量を測定した。金コロイド溶液を純水で希釈して、その希釈率に応じた電気抵抗/静電容量を測定したところ、いずれの値も金コロイドの希釈率に依存して変化した。
協同組合に対する独占禁止法適用除外に関する日米比較研究

日本独禁法22条は、協同組合に対する独禁法適用除外について定めている。しかし適用除外の範囲は必ずしも明確ではない。独禁法22条は、米国の協同組合に対する反トラスト法適用除外立法であるカッパー=ヴォルステッド法を参考に制定された。そこで本研究はカッパー=ヴォルステッド法の立法過程を分析し、適用除外の必要性、適用除外要件、限界要件などに関する連邦議会の立法意思を明らかにし、独禁法22条の適用除外の範囲について示唆を得た。本年度は、農業協同組合に対する反トラスト法適用除外を定めたカッパー=ヴォルステッド法案の米国連邦議会における審議経過を一定明らかにすることができた。協同組合に対する適用除外を定めた1914年のクレイトン法6条は、出資組合を適用除外から排除し、「正当な目的」というあいまいな限界要件を設けたため、農民たちは安心して協同組合活動ができるようさらなる反トラスト法修正を求めた。(1)1919年に連邦議会に提出されたカッパー=ハースマン法案(S.845,H.R.7783)は、クレイトン法6条を修正し、出資組合を適用除外の対象に含めるものであった。法案は上院及び下院の司法委員会に付託されたが、報告のないまま、うやむやにされた。(2)1920年5月に提出されたカッパー=ヴォルステッド法案(H.R.13731,S.4344)は、一定の要件を備えた農協の一定の活動を承認する1条と不当な価格引き上げに対して農務長官が排除措置命令を発出する2条からなる現行法とほぼ同じ内容の法案であった。法案は下院で承認されたが、上院で修正され、その修正を下院が拒否したため、廃案となった。1921年4月に再提出された(3)カッパー=ヴォルステッド法案(H.R.7313)は、前回のH.R.13731を一部修正したものであるが、下院で承認され、上院で修正されたため、その修正を下院が承認し、連邦議会を通過した。この法律は後日「協同組合のマグナ・カルタ」と呼ばれるように、農民の協同組合に対する反トラスト法適用除外を確立したことに意義がある。本年度は、(1)農務省協同組合法案(1917年)、(2)連邦議会に提出されたカッパー=ハースマン法案(1919年)、(3)カッパー=ヴォルステッド法案(1920年)、(4)カッパー=ヴォルステッド法案(1921年)及び(5)各司法委員会報告を訳出し、反トラスト法修正運動、各法案の立法意思と適用除外要件、各法案の相違などを明らかにした。(1)は農務省がクレイトン法6条を踏まえて各州に非出資協同組合法を普及するために作成したモデル法案で、8州が採用した。しかし農民は出資組合に対する反トラスト法適用除外を求め、連邦議会内外で立法運動を展開した。ミラーが起草した(2)は出資組合を適用除外するためクレイトン法6条を修正するものであるが、廃案になった。(3)はヴォスステッド下院議員の3原則(法案提出は共和党議員が行う、現行法には触れず農民に権利・権限を与える法案にする、公務員が農協の法外な価格要求を規制する)を踏まえて作成されたもので、1条は組合員要件(農業生産者)、活動要件(法人・非法人、出資・非出資を問わず、組合において共同し、集団で加工・販売準備・取扱、販売、契約締結する)、協同組合要件(相互利益、1人1議決権又は8%の出資配当制限)を、2条は農務長官に差止請求を与え組合の独占力濫用を規制するものであるが、廃案になった。(4)は上院の要求を一部(共同販売機関)を取り入れたものである。同法案はさらに上院で修正され(員外利用制限)、下院がそれを承認してカッパー=ヴォルステッド法が成立した。本年度の研究は、わが国においてカッパー=ヴォルステッド法の制定過程の一部を具体的に明らかにしたものである。本年度は、カッパー=ヴォルステッド法案の連邦議会での審議状況を詳細に分析し、法案の争点、意義、重要性を明らかにした。(研究内容)下院法案(H.R.13931)は、(1)農民に会社と同じような組合を設立する権利を与え、権利を平等にし、(2)組合は中間商人を排除し、高い生活費を抑制し、消費者に役立つなど公共性があり、(3)組合が独占化し公衆を搾取したときは、排除措置命令で規制できるという内容のものであった。(1)は法案反対派のクラス立法批判に対抗し、(2)は組合当然違法論に対抗し、(3)は組合独占論に対抗するものであった。これに対して法案反対派は(1)法案は農民に特権を与えるクラス立法であり、(2)組合に独占形成を認め、消費者の生活費を高め、(3)農民の守護天使である農務長官に規制権限を独占させるので、有効な規制ができないと判した。

さらに反対派が多数を占める上院司法委員会は、(1)2条の「農務長官」を「連邦取引委員会」に置き換え、2条但書(独占形成の企画の禁止+クレイトン法の適用)を挿入する(H.R.13931)又は(2)2条を削除し1条に上院代案(独占形成の企画+連邦取引委員会法の適用)を挿入する(H.R.2373)という対抗策を提案した。(1)(2)に共通する「独占形成の企画」は危険の蓋然性理論によって独占行為に達する以前に組合を規制するものであり、またクレイトン法や連邦取引委員会法の適用は、萌芽理論によって組合独占を萌芽のうちに摘み取るものであり、いずれも取引を制限する農民の結合(農協)を不合理な制限ではないと立法宣言する1条を無意味にするものであった。(1)は下院で否定され、(2)は上院で否決され、下院法案が法律になった。(意義)本法はクレトン法6条の欠陥(非出資組合の適用除外からの排除、限界要件の抽象性)を克服し、農民に組合を設立する権利を与えるところから「協同組合のマグナカルタ」と言われた。また取引を制限する農民の結合は当然違法の原則によれば違法になるが、合理の原則によれば適法になり、後者の判断を裁判所に委ねれば不安定になるところから、本法は合理の原則により一定の要件を満たす組合を違法な結合ではないと立法宣言するものであった。(重要性)わが国でこのような反トラスト法からの農協適用除外立法の研究は初めてであり、独禁法22条の「組合の行為」の解釈に大きな示唆を与えるのである。
宿主特異的毒素生成病原菌に対するキュウリの光誘導抵抗性の発現機構に関する研究

キュウリの重要病害である褐斑病は赤色光の照射により抑制できるか否かを調査した。その結果、病原菌を接種したキュウリを赤色蛍光灯照射下に保つと、自然光下に保ったキュウリに比べて病斑形成が著しく抑制された。しかし、キュウリの重要病害である炭疽病の場合は病斑形成の抑制は認められなかった。褐斑病菌に対するキュウリの光誘導抵抗性はサリチル酸経路に依存した抵抗性の誘導剤バイオンの前処理により抑制されたことより、光誘導抵抗性にはこの経路とは異なる経路の関与していることが示された。キュウリの宿主特異的毒素生成菌である殺生性病原菌である褐斑病菌に対する光誘導抵抗性を調査した。褐斑病菌胞子を滴下接種し、赤色蛍光灯照射区と自然光区に保ち病斑形成を調査すると、自然光区では、滴下部に直径5mmの灰白色の大型病斑が接種2-3日後に形成された。感染葉における褐斑病菌の行動を調査すると付着器から伸びた侵入菌糸がキュウリ組織内に充満している像が多数観察された。しかし、赤色蛍光灯照射区では、1mmの小型病斑が形成されるかまたは全く形成されなかった。感染葉での褐斑病菌は、付着器からの侵入が自然光区に比べて著しく抑制されており、被侵入細胞では強い褐変が観察された。一方、褐斑病菌胞子をキュウリ第1本葉に接種し、病斑形成の認められる接種7日後に第2本葉に半活物性の炭疽病菌を接種すると病斑形成は著しく抑制されたが、褐斑病菌の場合は、病斑形成抑制は観察されなかった。このように、殺生性病原菌である褐斑病菌のキュウリ葉感染は半活物性病原菌である炭疽病菌に対するキュウリの全身獲得抵抗性を誘導したが、それは褐斑病菌に対しては全く効果を示さなかった。キュウリの全身獲得抵抗性の発現にはサリチル酸経路が重要な役割を果たしていることが示されている。以上のことは、赤色光照射によりキュウリに誘導される殺生性病原菌に起因する褐斑病抵抗性は、サリチル酸経路の関与した全身獲得抵抗性とは異なるメカニズムにより発現していることが示唆された。キュウリの褐斑病菌に対する赤色光誘導抵抗性を蛍光灯からLEDに変えて調査した。その結果、LED赤色光下でも褐斑病菌に対する抵抗性が誘導された。このような抵抗性の発現経路を明らかにする目的でサリチル酸およびアシベンゾラル-S-メチルの影響を調査した。サリチル酸およびアシベンゾラル-S-メチルの溶液にキュウリの第1本葉を浸漬した後、褐斑病菌胞子を滴下接種し、赤色光区と自然光区に保ち、病斑形成を比較した。その結果、蒸留水を前処理したキュウリ葉に褐斑病菌胞子を接種した時、自然光区では大型病斑が形成されたが、赤色光区では病斑形成は著しく抑制され、赤色光誘導抵抗性が確認された。また、サリチル酸を前処理したキュウリ葉でも蒸留水処理葉と同様の現象が確認された。しかし、アシベンゾラル-S-メチルを前処理したキュウリ葉では大きな違いが見られた。即ち、自然光区に保ったキュウリ葉では大型の病斑が形成されたのみならず、赤色光区においても大型の病斑が形成され、蒸留水あるいはサリチル酸前処理葉で見られた赤色光誘導抵抗性は見られなくなった。また、殺生性病原菌に対する抵抗性を誘導することが多くの植物で報告されているジャスモン酸のキュウリへの前処理は、褐斑病菌に対する抵抗性を誘導しなかった。以上のことは、赤色光誘導抵抗性の発現に関与する経路は全身獲得抵抗性の発現に関与する経路と拮抗関係にあるが、従来から言われてきたジャスモン酸経路ではないことが示唆した。Corynespora cassiicola(Berkeley et Curtis) Weiは、70種類以上の植物に激しい被害を引き起こす多犯性の病原糸状菌で、しかもその病原性は植物ごとに異なることが報告されている。本菌によって引き起こされるキュウリ褐斑病は、高温多湿条件下ではしばしば大発生する難防除性の病害である。我々は、赤色光が植物の病害抵抗性を誘導することをイネ、オオムギ、ソラマメなどで報告してきた。本研究では、褐斑病菌に対するキュウリの赤色光誘導抵抗性について調査した。その結果、褐斑病菌接種キュウリ葉を赤色蛍光灯照射下に保つと自然光下のキュウリ葉に比べて病斑形成が著しく抑制された。また、この様な違いは病原菌のキュウリ細胞に対する侵入行動においても認められた。即ち、病原菌胞子の発芽や付着器形成はいずれの光条件においても抑制はされていなかったが、赤色光下では侵入直下のキュウリ細胞で褐変が見られ、そこで侵入菌糸の進展が停止していた。

しかし、自然光下ではこの様な停止は見られず、菌糸は隣接細胞へ蔓延していた。一方、プラントアクチベターの一つであるアシベンゾラルSメチルを前処理しておくとこの様な赤色光誘導抵抗性は抑制された。また、半活物性病原菌として知られる炭疽病菌を接種した場合には病斑形成の抑制は認められなかった。以上のことは、赤色光誘導抵抗性には全身誘導抵抗性とは異なるメカニズムが関与していることが考えられた。23年度中に確認すべき事項である「褐斑病菌の生産する宿主特異的毒の赤色光下での抵抗性誘導」が年末の積雪によるハウスの損壊で出来ていない。24年度が最終年度であるため、記入しない。若干計画が遅れ気味であるので、この課題に費やす時間を増やす予定である。また、これに取り組むための共同研究を学内で進める予定である。
低剛性マニプレータの分散階層型制御に関する研究

従来のロボットマニプレータでは、系の剛性を上げることにより位置精度の向上を計ってきた。しかし、それに伴なう重量増加のためエネルギ効率,高速運動特性の悪化を招いている。マニプレータのリンクの柔軟性を考慮した制御方式を開発すれば、マニプレータを軽量化できる。本研究では低剛性マニプレータの各関節毎に状態フィードバックを用いた分散階層型の制御系を構成し、低剛性マニプレータの高速高精度な実時間制御を実現した。得られた成果は以下のようにまとめられる。1.低剛性マニプレータのモデル化では、柔軟リンク一次モードのみに注目し最も単純化したが、十分なモデル精度が得られた。高次なモデル化を行なっても複雑すぎて制御に適さない。2.方程式の線形化に際し、一部非線形フィードバックを採用したが、これは単なる平衡点まわりの一次展開より良好な結果が得られた。3.制振制御においては、動的撓み量を状態量としてフィードバックするのが有効である。4.位置決め精度確保と残留弾性振動の抑制のため、関節部の固休摩擦に関するフィードフォワード補償が有効である。5.さらに、負荷や摩擦の変化を補償し位置決め精度向上のため、各関節に1形サーボ系を構成する必要があった。6.制御系の設計に当っては、振動モードの干渉によって生じる高次の振動モードをモード分解に基づく低次元化を行ったが試作したマニプレータは構造ダンピングが十分であったので、スピルオーバの問題は発生しなかった。
マクロファージを指標とし判定した各種素材眼内レンズの組織適合性に関する実験的研究

最近の白内障・眼内レンズ挿入手術は小さな切開を行い、侵襲の少ない方法が取られる傾向にある。そこで眼内レンズを折りたたむことができるシリコン素材のものの使用頻度が高くなってきている。シリコン素材の眼内レンズと現在広く使用されているポリメチルメタクリレート(PMMA)素材の眼内レンズを比較検討した。猿21頭を用い、角膜切開で前房に入り、水晶体前嚢輪状切開、水晶体皮質吸引、眼内レンズ嚢内固定など、人間と同じ手術を行った。手術後1,2,3,5,7日,1,3,4,5,9カ月後に眼内レンズを摘出し、グルタールアルデヒドで固定し、実体顕微鏡で観察後に、走査電子顕微鏡を用いて眼内レンズの表面を写真撮影し、表面に付着している細胞をシリコンとPMMAの眼内レンズで比較検討した。細胞を2群に分け、直径13μm以下を小細胞、14μm以上を大細胞とした。その後、透過型電子顕微鏡で観察し、細胞の種類を同定した。小細胞は眼内レンズ移植13日後には、PMMAの眼内レンズの光学表面には3,60014,000個の細胞が存在し、シリコンでは03個であった。59カ月後にはPMMAでは550個、シリコンでは0個であった。大細胞は眼内レンズ移植13日後には、PMMAでは070個、シリコンでは0個であった。59カ月後にはPMMAでは24個、シリコンでは0個であった。小細胞は時間の経過と共に、その数が減少し、大細胞は2日目をピークに減少した。大細胞はPMMA眼内レンズ移植2日目の平均細胞面積は18,310μm^2であったのが、5カ月後には37,934μm^2と広くなっていた。小細胞は白血球とマクロファージ大細胞はマクロファージと巨細胞であった。眼内レンズ表面に付着した細胞を指標として検討したところ、生体の異物反応はPMMAの方がシリコン眼内レンズより強かった。高齢者人口の増加に伴い,老人性白内障の手術と同時に眼内レンズの挿入を受ける患者か増加している。そこで本研究を行い,眼内レンズの組識適合性を,マクロファ-ジを指標として判定した。正常猿を麻酔し,手術顕微鏡下に水晶体摘出術を行い,人工水晶体を眼内に挿入した。今回の人工水晶体はポリメチルメタクリレ-トとシリコンの2種類の素材で比較検討した。眼内レンズ挿入後,1,2,3,4,5,7,14日にレ-ザ-フレアセルメ-タ-で前房内の蛋白濃度と細胞数を測定した。手術後,前房内の蛋白濃度は除々に減少していった。眼内レンズの2種類の素材で比較したところ,両者間に有意差はなかったが,ポリメチルメタクリレ-トの方がシリコンより術後災症が軽い傾向があった。次に,眼内レンズ挿入後1,2,3,5,7日後,および3,5,9カ月後に眼球を摘出し,実体顕微鏡,走査型および透過型電子顕微鏡で観察した。人工レンズの表面に附着しているマクロファ-ジおよび異物巨細胞の数はシリコンの方がポリメチルメタクリレ-トよりも少ないようであった。以上の結果よりポリメチルメタクリレ-トの方が手術操作の影響は少ないが,シリコンの方が長期の組識適合性は優れていると思われた。
アメリカ南部文学と移民―文化的他者との共存と同化へのプロセスの可能性

本研究においては、アメリカでもとりわけ保守的だと言われる南部における文学形式において、移民をはじめとする「文化的他者」である社会的・経済的弱者がどのように描かれてきたかについて考察し、アメリカ文化における移民越境の歴史と同化の可能性を探ることが目的である。また、本研究は移民文学の中でもとりわけアジア系移民に注目することにより、文学研究と社会学的研究を融合させ、これまで研究されることのなかったアジア系移民とアメリカ南部を繋ぐ新しい文学研究の方向性を示すものである。研究初年度はアメリカ南部文学の研究動向に関して主に2005年から現在に至るまでの最新の書籍類を収集し、南部文学を巡る思想的言説を時系列に整理できたことが大きな収穫であった。主に、初年度の活動状況は以下の4つが挙げられる。1)海外の研究者との交流在福岡アメリカ領事館がスポンサーとなって九州アメリカ文学会が開催したサウスイーストミズーリ大学のクリス・リーガー氏による講演会とその後のディスカッションにおいて、「エコロジー」と「サザン・パストラル」という観点から南部文学ではあまり論じられることのなかった作家を中心に、文学史の枠から外された作家と「南部例外主義」について知見を深めた。2)アメリカ南部文学に関する資料収集と研究ー「グローバル・サウス」以降のアメリカ南部文学について時系列に書籍類を整理し、研究する機会を得た。3)『アメリカン・モダニズムと大衆文学』(金星堂)に「フォークナー再売り出しー『ポータブル・フォークナー』成功の意味」が収録され、出版された。4)『フォークナー』第20号においてフランスにおけるフォークナー研究の第一人者アンドレ・ブレイカスタンによるフォークナー評伝の書評が掲載された。この仕事を通じて外国人がアメリカ南部文学を研究することの意義及び自身の研究の今後の方向性について再考する機会を得た。研究を進めて行くうちに、アメリカ南部における移民文学及び移民を表象した文学形式の文献調査にかなりの時間を要した。また、アメリカ南部におけるアフリカ系アメリカ人とアジア系移民との共存についてミシシッピデルタにおける生活に関する文献を中心として読み進めて行く作業に思ったよりもかなりの時間をかけた。しかし、これは研究の遅れというよりはむしろ研究を続けて行く上で有益な作業であった。今年はアフリカ系アメリカ人作家がアメリカ南部をどのように描いているかに焦点をあてて、従来文学史で描かれている南部経験の枠をこえ、ジェンダーと階級と人種の多様性を南部文学研究に反映させることによって、アメリカ南部小説におけるマイノリティ表象の事例を多く分析し、研究の目的である移民表象と共同体のあり方について貢献したいと考えている。今年度から来年の初頭にかけて国内で行う研究に関しては以下の3つの項目を中心に研究計画を立てている。1)4月から7月にかけては、ベトナム系アメリカ人作家モニーク・トゥルンの『ビター・イン・ザ・マウス』において表象されるアメリカ南部とベトナム戦争の余波について論文にまとめる。そのさい、ベトナム系作家であるラン・カオの小説や移民作家ハ・ジンのエッセイで描かれる南部体験を取り入れながらアメリカ南部におけるアジア系移民の異文化体験について扱う。2)4月から12月末にかけてトニ・モリスンの小説群においてアメリカ南部がどのように描かれているかを精査する。アメリカ南部文学というジャンルが、白人対非白人という図式だけでは捉えきれない多様性を含んでいることを研究の出発点としているが、アフリカ系アメリカ人の南部での経験を集団的記憶として描くモリスンの小説を論じることはこの研究において欠かすことのできない視座である。アメリカのヘイトの歴史に対する理解を深めるためにもモリスンの小説で表されている南部を論じることとしたい。3)年末から3月にかけて2020年5月に開催される九州アメリカ文学会大会において「サザンルネサンス以降の南部文学とニュー・サザンスタディズ(仮題)」に関するシンポジウムのオーガナイザー兼パネリストとして報告を予定している。現在、ジョージア大学出版局が中心となってニュー・サザンスタディーズという、文学のみならず社会学的で包括的な「南部文学見直し運動」が起きていることにより、南部について書かれていながら埋もれた小説が多々掘り起こされてきている。その流れと将来性について論じることで、従来の文学史の枠を超えた小説というジャンルの可能性を提示する。