hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
周術期における循環変動を伴わない心筋虚血と血管内皮機能

これらより副交感神経の過緊張だけでは冠攣縮を誘発するとは言い難い。研究(1)冠動脈内エンドセリン(ET-1)注入による誘発性冠動脈攣縮に対する血管内皮依存性冠血管拡張の拮抗作用血圧・心拍数を制御したモデル(犬)において、左大腿動脈-冠動脈バイパスを作成した。バイパス内に血管内皮依存性の冠拡張作用を示すアセチルコリン(Ach)を4段階の濃度(0、0.1、1.0、10μg)に分けて投与し、冠血流増加曲線のコントロールを得た。ET-1を注入することにより冠血流を約30%減少させた。再度Achを同様に投与し、ET-1投与前後において比較検討した。アデノシンによる冠血流は約93%の増加を来した。安静時の冠血流量は約61ml/min/100gであり、Ach投与(10μg、冠動脈内投与)により最大80%の増加を来した(約110ml/min/100g)。ET-1投与(約15pM/分)により冠血流を約33%低下させる事が出来た(約40ml/min/100g)。Ach最大投与時(10μg、冠動脈内投与)においても冠血流はコントロール値の約40%までしか増加しなかった(約85ml/min/100g)。これらの結果より血管内皮由来血管収縮作用(ET-1)による中等度冠血流減少状態において血管内皮由来冠血管拡張作用よりも強力であることがわかった。平成10年度にはこの生理学的意義を冠血流分布、心筋代謝を測定し確認したい。研究(2)臨床研究虚血性心疾患患者における副交感神経刺激の心血行動態・冠循環に対する影響循環動態の変動を伴わない術中心筋虚血発生時の多くは、自律神経の変動が心筋虚血の発生に関与していると疑われている。このため、副交感神経を過緊張させる抗コリンエステラーゼ阻害薬(エドロフォニウム20mg)を虚血性心疾患患者に投与し心血行動態・冠循環に対する影響を検討した。現在のところ27名が対象となっている。エドロフォニウム投与により全例洞性徐脈(平均-15心拍/分)を来したが、収縮期血圧、肺動脈圧、中心静脈圧には変化が見られなかった。心電図においても虚血性変化は無く、心筋酸素需要供給バランスは保たれており、冠動脈攣縮による心筋虚血を疑わせる所見は見られていない。今回対象の虚血性心疾患患者はすべて交感神経遮断薬を投与されており、副交感神経過緊張状態は循環変動を伴わない心筋虚血発生状況と非常に類似点はあるものの副交感神経過緊張のみでは冠攣縮の発生には至らないことを示唆する。副交感神経の過緊張が冠動脈攣縮の発生に関与する可能性について基礎及び臨床研究を行った。基礎実験:術中冠動脈スパズムの発生原因の一つとして交感神経・副交感神経緊張度の不均衡が言われている。しかしながら副交感神経の過緊張だけでは冠血管の拡張作用しかこれまで示されていない。今回我々は冠動脈血管壁の緊張度の上昇がAch負荷テストにおける冠血管反応に対する影響を調べた。【方法】雑種成犬6匹を対象とした。完全AVブロック作成後右心室ペーシングにより心拍数(平均123bpm)を、平均体血圧(84mmHg)は加圧貯血バックにより実験中一定に保ち、右大腿動脈一左前下行技バイパスを作成した。冠血管壁緊張度を上昇させるためにエンドセリン(ET-1)を直接バイパス内に投与(30%冠血流低下を目標)し、その前後においてAch投与(0.01-10μg)を行い冠血流量反応を測定した。【結果】Ach負荷により容量依存性に最大冠血流量は増加した(p<0.01)。ET-1投与下においてのみ、Ach投与による冠血流増加後、投与前値よりも低下した(p<0.01)。【結語】冠血管緊張度が副交感神経過緊張による冠動脈スパズム発生に関与する事を示唆する。
腫瘍内細胞の特異的表現型変化に着目した新規分子標的抗がん剤の創製

本研究では、腫瘍内微小環境における細胞の代謝変化や表現型変化に着目して、これらを制御可能な海洋天然物を探索した。そして、7個の新規化合物を含む10個の活性天然物を見出した。また、見出した活性天然物の全合成、アナログ化合物合成による構造活性相関、in vivoでの薬効評価を実施した。さらに、新規創薬標的の開拓を目的に、活性天然物の作用機序や標的分子解析を行い、5個の化合物の作用機序または標的分子を明らかにした。腫瘍内特異的に観察される細胞の特殊な表現型(血管新生、低酸素環境適応、栄養飢餓環境適応、上皮間葉転換)に着目した、4種のPhenotypic Screening法を用いて、独自に保有する底生海洋生物の抽出エキスおよび海洋由来微生物の培養物ライブラリーからの医薬シーズ探索を実施した。その結果、栄養飢餓環境に適応したがん細胞選択的に増殖阻害活性を示す、数種の新規アルカロイドや新規ポリケチド化合物を見出した。がん血管新生を阻害する海綿由来のcortistatin Aアナログについては、天然物に匹敵する活性と細胞種選択性を持ったアナログ化合物の創出に成功し、さらに本化合物の大量供給が可能な合成法の確立に成功した。これまでの研究で見出していた、低酸素環境に適応したがん細胞選択的に増殖阻害活性を示す、海綿由来のセスキテルペンについて、アナログ化合物による構造活性相関研究を実施した。その結果、本化合物の活性発現には、その化学構造全体が重要であることを明らかにした。また、構造活性相関の結果を基に標的分子解析のためのプローブ分子合成を開始した。医薬シーズの探索からは、低栄養環境に適応したがん細胞に対して選択的に増殖阻害活性を示す複数の新規化合物を発見し、血管新生阻害物質cortistatin Aアナログの合成研究についても、大量合成可能な合成方法を確立した。また、低酸素環境に適応したがん細胞選択的に増殖阻害活性を示す、海綿由来のセスキテルペンに関する研究についても、研究計画に従い検討が実施されている。研究計画に従い検討を進め、以下の成果を得た。1前年度の研究で見出した、低栄養環境に適応したがん細胞選択的に増殖阻害活性を示す、新規アルカロイドおよび新規ポリケチド化合物の全合成に成功し、作用メカニズム解析やマウスでの抗腫瘍活性試験を実施する体制を確立した。2低酸素環境に適応したがん細胞選択的に増殖阻害活性を示すセスキテルペンに関して、その構造活性相関を基にプローブ分子化を行った。そして、活性ならびに低酸素培養条件選択性を保持するプローブ分子の創出に成功した。3研究代表者らが、がんに対する新しい薬剤標的分子として見出したp54nrbおよびLEDGFについて、これらを標的とする阻害剤探索の評価系構築を目的に、p54nrbおよびLEDGFをそれぞれ高発現する安定形質転換細胞を作成した。その結果、野生株と比較して、各タンパク質を4倍以上高発現する形質転換細胞を取得した。これにより新たなスクリーニングが可能となった。実験計画通りに検討を行い、作用メカニズム解析やin vivoでの抗腫瘍活性試験が実施可能となった。また、標的分子解析に必須となるプローブ分子の合成にも成功した。さらに、新規抗がん剤シーズ探索の為の評価系構築にも成功している。1:探索研究の結果、ポリブロモフェノール類に低栄養環境に適応したがん細胞選択的な増殖阻害活性を見出した。2:低酸素環境に適応したがん細胞選択的に増殖阻害活性を示すセスキテルペンの標的分子を、プローブ分子を利用するファージディスプレー法で解析した。その結果、本化合物の結合タンパク質候補を5つに絞り込むことに成功した。3:継続して、がん血管新生阻害作用を示す変異ステロイドアルカロイドの標的分子解析を実施した。そして、その結合タンパク質候補を3つに絞り込むことに成功した。4:低栄養環境に適応したがん細胞選択的に増殖阻害活性を示す、新規アルカロイドおよび新規ポリケチド化合物の大量合成を行い、マウスを用いる抗腫瘍活性試験を開始した。5:低栄養環境に適応したがん細胞選択的に増殖阻害活性を示す、新規アルカロイドおよび新規ポリケチド化合物について、プローブ分子合成を指向したアナログ化合物による構造活性相関研究を行った。そして、各化合物の活性に影響を与えない部分構造を明らかにした。標的分子解析については、各化合物ともに、着実に結合タンパク質の絞り込みが行えている。また、低栄養環境に適応したがん細胞選択的に増殖阻害活性を示す、新規アルカロイドおよび新規ポリケチド化合物についても、大量合成を完了して、抗腫瘍活性試験を開始した。さらに、継続して実施している探索研究においても、新たな活性物質を見出している。1:昨年度までの検討で見出した、低栄養環境に適応したがん細胞選択的に増殖阻害活性を示すポリブロモフェノール類の作用機序解析を進め、本化合物がミトコンドリア呼吸鎖複合体IIを阻害することを明らかにした。2:低酸素環境に適応したがん細胞選択的に増殖阻害活性を示すセスキテルペンの標的分子解析を継続して進め、その標的分子がタンパク質のmTORの成熟化に関わる分子であることを明らかにした。3:昨年度の検討で明らかにした構造活性相関を基に、低栄養環境に適応したがん細胞選択的に増殖阻害活性を示す新規ポリケチドのプローブ分子化を行い、活性を保持するプローブ分子の創出に成功した。更に創出したプローブ分子を用いて、プローブ分子の細胞内局在を調べた結果、プローブ分子がミトコンドリアに局在することを示唆する知見を得た。

本研究では、腫瘍内微小環境における細胞の代謝変化や表現型変化に着目して、これらを制御可能な海洋天然物を探索した。そして、7個の新規化合物を含む10個の活性天然物を見出した。また、見出した活性天然物の全合成、アナログ化合物合成による構造活性相関、in vivoでの薬効評価を実施した。さらに、新規創薬標的の開拓を目的に、活性天然物の作用機序や標的分子解析を行い、5個の化合物の作用機序または標的分子を明らかにした。新たに見出した、低栄養環境に適応したがん細胞に対して選択的に増殖阻害活性を示す新規アルカロイドおよび新規ポリケチドについては、全合成およびアナログ化合物合成を実施するとともに、医薬シーズとしての有用性を検証していく。またcortistatin Aアナログおよび低酸素環境に適応したがん細胞選択的に増殖阻害活性を示すセスキテルペンについては、in vivoでの抗腫瘍活性ならびに標的分子の解析を実施する。低栄養環境に適応したがん細胞選択的に増殖阻害活性を示す、新規アルカロイドおよび新規ポリケチドについては、確立した全合成法を用いて、in vivo評価に向けた大量供給を行う。また、各化合物のプローブ分子化を目的にした構造活性相関研究を行う。低酸素環境に適応したがん細胞選択的に増殖阻害活性を示すセスキテルペンについては、合成に成功したプローブ分子を用いて、その標的分子解析を開始する。さらに、p54nrbおよびLEDGFを標的する阻害剤探索を開始する。各化合物の標的分子解析を継続して進め、その結合タンパク質を明らかにする。また、見出した結合タンパク質の薬剤標的としての有用性について検証を行う。また、低栄養環境に適応したがん細胞選択的に増殖阻害活性を示す新規アルカロイドおよび新規ポリケチドについては、早期に抗腫瘍活性試験を終了させ、両化合物の医薬シーズとしての有用性を明らかにする。さらに両化合物については、プローブ分子化を進め、その作用メカニズムや標的分子を明らかにする。29年度が最終年度であるため、記入しない。天然物化学大阪大学大学院薬学研究科天然物化学分野ホームページ大阪大学大学院薬学研究科天然物化学分野ホームページ29年度が最終年度であるため、記入しない。
各種金属における動的挙動と結晶組織の関係

本研究では工業用純アルミニウムおよび純銅を供試材として,熱処理(焼きなまし)温度を変えることにより結晶組織,特に結晶粒径を変えた試験片を作製し,赤外線反射炉付きの倒立ねじり振子試験機を用い,常温から798K(アルミ),および1073K(銅)までの温度域における内部摩擦(対数減衰率)を測定した。その結果には,焼きなまし温度を上げれば結晶粒径が大きくなり,結晶粒径が大きいほど内部摩擦も大きくなる傾向が見られた。アルミ試験片における常温での対数減衰率は473K-3.6ks焼きなましの試験片で小さく,773K-3.6ks焼きなましの試験片で大きくなった。前者は再結晶が進行して転位密度が小さく,また粒界密度が大きいため転位が移動しにくい状態であるのに対し,後者は粒界密度が小さく転位が移動しやすい状態であると考えられる。これらの違いが内部摩擦の差となって表れていると予想される。また,内部摩擦が雰囲気温度と共に緩やかに上昇するバックグラウンド成分に加えて,アルミ試験片においては600K付近に,銅試験片においては700K付近にピークを持つ成分が検出された。これは,結晶粒界での粘性的なすべりに由来するものと考えられ,さらにこのピークの高さは結晶粒径の増加とともに大きくなる傾向が確認された。これは,結晶粒径が大きくなるにつれ,材料中の粒界三重点による,すべりに対する抵抗力の影響が小さくなっていくためであると推測される。析出強化型Ni合金についても同様に内部摩擦の温度依存性と結晶粒径の関係を調べた。ある結晶粒径では,ほぼ一定の雰囲気温度において,内部摩擦がピーク値をとることが分かった。ただし,今回得られたデータはその数や種類が十分ではなく,これらをもとに更なるデータの蓄積を行うことが望まれる。
高精度重粒子線治療のためのフラットパネル検出器による粒子線画像化システムの研究

重粒子線ブラッグピークの飛程シフトに着目し、フラットパネルとレンジシフタを用いた検出器構成により、飛程シフト量を検出する事による粒子線の画像化の実現可能性を検討した。ブラッグピークのレンジシフトが高精度で検出されれば、それを用いた画像化は十分可能である事が示唆された。一方、体内の軟部組織によるレンジのシフト量は小さく、機械的なレンジシフタを作成して識別するのは困難である事が分かった。レンジシフトの検出には奥行き方向の検出器が有効である。本研究では、画像化装置としてのフラットパネルの可能性と、粒子線検出器及び散乱線検出器としてのMPPCの性能を確認した。放射線治療における粒子線を用いた画像化システム構築のため、シミュレーションを用いて飛程シフト量を画像化する手法について検討している。粒子線の深さ方向の線量分布をシミュレーションするため、GEANTを用い、ブラッグピークの分布をモンテカルロで作成した。CTデータから水等価のマップに変換し、2Dのガウス分布で鈍らせた画像を作成した。ブラッグピークの深さ方向の位置を、水等価マップに応じてシフトさせ、そのシフト量を用いて再度画像を再構成した。もともとのCT画像と比較すると、3mm程度のレンジの差が確認できた。本計算を2Dガウスの分散を変化させながら繰り返し、再構成画像に与える影響について考察した。現在、シミュレーションコードに、検出器による粒子線検出応答を組み込む作業を進めているが、フラットパネルによる粒子線の応答を現実的なモデルでシミュレーションするのにやや難航している。そこでまずはフラットパネルに効率よくブラッグピークを入射させるのに必要なレンジシフタの材質や厚みを最適化にする事について検討を始めた。本研究では検出器としてフラットパネルの使用を想定しているが、体内組織による飛程シフト量が微量で検出能が十分でなかった場合のための、検出器開発も想定している。平成29年度に開始予定としていた、ごく微小な光を増幅して高感度で検出するMPPCを用いたシンチレータ検出器の、粒子線画像化システムへの応用について検討するための基礎研究を開始した。研究員任期の更新時に、放射線医学総合研究所から広島大学へ異動した事により、研究環境及び職務が変化した事が少なからず本研究の推進へ影響した。しかし本研究は主にシミュレーションを用いたシステム構築の検討と、新しい検出器開発のための素子の基礎研究を軸としているため、遂行には問題ないと考えている。現在では研究開発環境が整い、本研究に割く時間も十分に確保できているため、今後研究の加速は可能であると考えている。重粒子線ブラッグピークの飛程シフトに着目し、フラットパネルとレンジシフタを用いた検出器構成により、飛程シフト量を検出する事による粒子線の画像化の実現可能性を検討する事を目的とした。次にフラットパネルに効率よくブラッグピークを入射させるのに必要なレンジシフタの材質や厚みについて検討を行った。シミュレーション上にてフラットパネルにブラッグピークを入射させるレンジシフタを構築し、レンジシフタの厚さを飛程シフト量と関連付けた。体内の軟部組織によるレンジのシフト量は以下と小さく、機械的なレンジシフタを作成して識別するのは困難である事が分かった。またMPPCを用いたシンチレータ検出器開発も行った。MPPCに流入する線量を可能な限り抑えたが、連続的なX線照射では検出器の出力はオーバーフローしていた。一方、照射野に散乱体を設置する事で、散乱線の検出は十分可能であったため、散乱体検出器としての用途が示唆された。本研究において、ブラッグピークのレンジシフトが高精度で検出されれば、それを用いた画像化は十分可能である事が示唆された。また画像化装置としてのフラットパネルの可能性と、粒子線検出器及び散乱線検出器としてのMPPCの性能を確認した。重粒子線による画像化は次世代の高精度医療において依然として重要であるため、継続して研究を行いたい。GEANTによる基本的なシミュレーション環境を構築したので、予定通り必要なレンジシフタの最適化に関する検討を継続する。研究環境が変化した事により、粒子線ビームラインの使用が比較的困難になってしまったため、今後は実測よりもシミュレーションによる検討により主軸を移す事とする。粒子線イメージングは近年、学会等での報告も増加しているが、実現にはまだ課題が多く、学会や機器展示会などからの情報を元に、柔軟に研究を遂行したい。

医学物理学シミュレーションのための専用のワークステーションを購入予定であったが、現在までの計算量であれば通常のコンピュータで計算可能であったため、ワークステーションの購入を見送った。一方29年度に開始予定にしていたMPPCの基礎研究を28年度に開始するため、いくつかの部材を前倒しで購入した。主にMPPCの購入、実験用ジグ、シグナル観測用のエレキ(マルチチャンネルアナライザー)などを購入する予定である
ラフ集合による関係性マイニング―感性データ分析の新展開―

本研究は,従来のラフ集合データ分析では困難であった2つの属性間の比較に基づく特徴の抽出を行うことで,ラフ集合による関係性マイニング手法を確立することにより,属性間の関係性をも抽出する新たな感性データ分析手法を構築することを目的とする.本研究では関係性マイニングの提唱と理論整備を行い,また実データに対して関係性マイニングを行う際に必要となる,大規模データに対する縮約計算システムを実装した,更に,関係性マイニングによる感性データ分析を行った.本研究により,ラフ集合による感性データ分析の新たなアプローチを示すことができたと考える.ラフ集合による関係性マイニング手法の確立に向けて,平成25年度は主に,関係性マイニングの理論面の整備に関する研究を行った.具体的には,1.関係性マイニングの概念の提唱,および2.関係性マイニングの理論モデルの構築を行った.また,理論面の整備と並行して,3.関係性マイニングの応用事例の検討も行った.1.関係性マイニングの提唱:2つの属性における属性値の比較に基づく特徴に着目し,これを新たに関係性属性として表現することにより,属性間の関係性に基づく特徴を直接見出す新たなデータ分析のアプローチとして,関係性マイニングの概念自体を提唱した.また,関係性マイニングを行う際の,属性および属性値に関する背景知識の必要性についても論じた.2.関係性マイニングの理論モデル:ラフ集合の枠組みで,上記の関係性属性を含む特徴をも抽出し,If-Then形式のルールとして表現するための理論的基礎を提案した.これにより,予め指定した属性値間の二項関係(等号,全順序等)に基づいて,ラフ集合によるデータ分析の従来手法を用いて,属性間の関係性に基づく特徴も抽出することが理論的には可能となった.3.関係性マイニングの応用事例の検討:遺伝子発現データベース等を背景知識として用いることで,遺伝子発現データから遺伝子の発現値間の特徴を関係性マイニングで抽出する分析方法について,その可能性を検討した.また,ユーザの嗜好に基づく対象の価値評価から,評価値間の関係性を推測することによる,関係性マイニングに基づく情報推奨手法を提案し,その可能性を検討した.ラフ集合による関係性マイニング手法の更なる発展に向けて,平成26年度は主に,関係性マイニングの理論面の拡張に関する研究を行った.具体的には,1.関係性マイニングにおいて関係性を調査するべき属性および属性値間の二項関係の選択方法に関する検討,および2.関係性マイニングの理論モデルの拡張を行った.また,3.関係性マイニングに係る縮約計算の並列化および高速化の検討も行った.1.関係性マイニングにおいて関係性を調査するべき属性および属性値間の二項関係の選択方法に関する検討:関係性マイニングは2つの属性における属性値の比較に基づくデータ分析手法であるため,関係性を考慮すべき属性および用いる二項関係の選択は非常に重要なポイントである.そのため,属性を確率変数とみなしその相互情報量を用いることによる属性の組の選択方法や,縮約の評価指標を援用して二項関係を選択する手法を検討した.また,有用ではない属性の組を検出するための理論的性質を検討した.2.関係性マイニングの理論モデルの拡張:属性値間の二項関係による値の比較を,対象間の二項関係による比較(対象間の同値関係や支配関係など)に対応づける数理的な枠組みを検討した.3.関係性マイニングに係る縮約計算の並列化および高速化の検討:関係性マイニングでは属性間の関係性を新たな属性として表現するため,属性の個数が膨大になる.また,対象数の多いデータに対して,関係性マイニングを直接行うことは困難である.これらの問題を踏まえ,著者らが以前提案した属性数の多いデータに対する縮約抽出手法と,縮約計算の統計的アプローチとを併用し,さらに処理を並列化することによる,縮約計算の高速化について検討した.ラフ集合による関係性マイニング手法の更なる発展に向けて,平成27年度は主に,関係性マイニングの理論面の拡張および応用可能性の検討に関する研究を行った.具体的には,1.データ中に値の欠損がある場合の関係性マイニングに関する検討,2.関係性マイニングの表現能力の検討,および3.関係性マイニングの感性情報処理への応用を行った.また,前年度に引き続き,4.関係性マイニングに係る縮約計算の並列化および高速化手法の改良も行った.1.データ中に値の欠損がある場合の関係性マイニングに関する検討:関係性マイニングは2つの属性における属性値の比較に基づくデータ分析手法であるため,データ中の欠損値の存在は,属性間の関係性の抽出に大きな影響を及ぼす.そのため,属性間での関係性成立の有無を記述する新たな属性(相互関係属性)で,関係性を調べる属性における値の欠損に起因する,新たな欠損値を導入する手法を検討した.2.関係性マイニングの表現能力の検討:関係性マイニングにより抽出された,相互関係属性を含む縮約計算結果について,得られる決定ルールの評価指標に関する性質の検討を行った.3.関係性マイニングの感性情報処理への応用:関係性マイニングを系列データに対して適用する手法を検討し,その応用事例として,系列データに対する関係性マイニングを用いた楽曲推薦システムを試作し検討した.4.関係性マイニングに係る縮約計算の並列化および高速化手法の改良:著者らが前年度に開発した,関係性マイニングに係る縮約計算の並列化および高速化手法について,高速化に関する部分の改良を行い,計算機実験によりその有効性を検証した。

本研究は,従来のラフ集合データ分析では困難であった2つの属性間の比較に基づく特徴の抽出を行うことで,ラフ集合による関係性マイニング手法を確立することにより,属性間の関係性をも抽出する新たな感性データ分析手法を構築することを目的とする.本研究では関係性マイニングの提唱と理論整備を行い,また実データに対して関係性マイニングを行う際に必要となる,大規模データに対する縮約計算システムを実装した,更に,関係性マイニングによる感性データ分析を行った.本研究により,ラフ集合による感性データ分析の新たなアプローチを示すことができたと考える.関係性マイニングの要点となる,関係性を調査するべき属性および属性値間の二項関係の選択方法について,および関係性マイニングの実用面で必須となる,規模の大きいデータに対する縮約計算の並列化と高速化について検討しているため(学会発表参照),理論面の整備および関係性マイニングの要素プログラムの作成,関係性マイニングによる分析システムの作成について,おおむね順調に進んでいる.また,分析システムの評価の一環として,関係性マイニングによる分析結果を援用したレコメンデーションシステムについて検討を始めている.以上より,本申請の現在までの達成度は,おおむね順調であると考えている.感性情報学本研究申請は次年度が最終年度であるため,これまでの研究発表の内容を踏まえ,関係性マイニングに関する理論的性質に関する論文,および分析システムを用いた関係性マイニングの応用に関する論文を準備中である.並行して,分析システム自体の評価を行う予定である.関係性マイニングの概念自体を提唱し,ラフ集合の枠組みで関係性マイニングを行うための理論的基礎を提案しているため(学会発表参照),研究計画の平成25年度スケジュールに沿って,関係性マイニングの理論整備はおおむね順調に進展している.また,現時点では具体的な研究成果として公表できる段階ではないが,関係性マイニングに基づく感性データ分析システムの開発に向けて,その要素プログラムの作成も行っている.以上より,本申請の現在までの達成度は,おおむね順調であると考えている.次年度使用額は,本年度の研究成果に基づく関係性マイニングの理論面に関する論文の準備が,次年度までずれ込んだため生じたものである.関係性マイニングの提唱およびその理論的基礎の提案について,現時点ではまだ学会発表のみであるため,発表内容に基づく論文を準備中である.また,研究計画の平成25年度スケジュールに沿って,現在作成中である関係性マイニングの要素プログラムを用い,関係性マイニングに基づく感性データ分析システムの開発を行う.本分析システムの根幹部分の実装は年度内の完了を目標とする.根幹部分の実装が完了した時点で,システム自体の評価実験にも着手する予定である.次年度の研究費は,研究打ち合わせおよび国内外の会議での成果発表旅費,投稿論文の英文校正など(謝金),学会参加費および論文投稿・掲載料,論文別刷(その他)に使用する予定である.次年度使用額は,本年度の研究成果に基づく関係性マイニングの理論面に関する論文の準備が,次年度までずれ込んだため生じたものである.次年度使用額は,上述の論文の準備および掲載に関わる費用(英文校正費,論文掲載費など)に使用する予定である.
戦争と協力の進化：集団間競合と集団内協力の比較認知科学的検討

戦争と協力。この「ヒトらしい」両極的な性質の進化的起源を、実証研究に基づく知見を通して明らかにする。ヒトは集団で殺し合いをすることもあれば、高度な協力関係を構築することもできる。このような性質はどのように進化したのだろうか。チンパンジー・ボノボを中心とする進化の隣人、家畜化を通してヒトという他種とさえ親和的な関係を築くようになったイヌ・ウマをはじめとする伴侶動物を通して、比較認知科学の視点から考察する。自然環境で自発的に形成される社会集団の研究、および飼育下での綿密な認知実験、これらを組み合わせることで、多層的な視点から戦争と協力の進化について明らかにする。本研究は、集団間競合と集団内協力というヒトの両極的な性質の進化的起源について、比較認知科学の視点から解明を試みる研究である。進化の隣人であるチンパンジーとボノボ、家畜化を経た伴侶動物であるイヌとウマを対象に、自然集団の観察および飼育下での認知実験を組み合わせることで、多層的な視点から集団間競合と集団内協力の進化について明らかにする。2個体間の関係ではなく集団を対象とした協力行動の比較認知科学的研究は世界的に見ても斬新である。また、それを実現するための4(チンパンジー/ボノボ/ウマ/イヌ)×2(自然集団の観察/飼育下実験)の研究パラダイムも、複層的な視点での比較を可能にする独創的かつ有効性の高い手法である。研究準備状況も良好であり、国際的にインパクトのある成果を期待できる。戦争と協力。
環境汚染物質が胎児発育に与える影響の研究

研究成果の概要(和文):我々は環境化学物質の胎盤栄養素輸送機能に与える影響についてIn vivoおよびIn vitroにて検証した。In vivo実験の結果、様々な環境化学物質の中でPolychlorinated biphenyls(PCBs)は母体・月齊帯血液中のPCBs濃度上昇に伴い、胎児栄養化を担う合胞体栄養膜細胞を減少させるこを発見し、PCBs曝露による胎児発育制限機構の1つの可能性を見出した。また、PCBs濃度上昇に伴い胎盤血管新生に寄与するPlacental growthfactor(PIGF)産生は充進していることを発見した。これは正常妊娠における胎盤の適応機能を反映していると考えられ、化学物質曝露による胎盤機能修飾機構には特有のPIGFとSolublefms-liketyrosin kinese-1(sFlt-1)のプロファイルが存在することが示唆された。In vitro実験の結果、様々な環境化学物質の中でアルデヒド類、金属元素、プラスチック樹脂アミノ酸輸送活性を低下させた。全ての化学物質および金属元素は培養液中の乳酸脱水素酵素を増加させなかった。本研究の目的1は、平成21年度24年度の3年間、胎盤小絨毛片のSystem Aアミノ酸輸送活性とフロレチン感受性糖輸送活性を測定し、後日、国立環境研究所で測定された母体血・臍帯血中の環境汚染物質濃度と、糖・アミノ酸輸送活性値の相関や環境化学物質の作用について解析することである。平成21年度において、正常妊娠ばかりでなく子宮内胎児発育遅延や妊娠高血圧症候群の胎盤においてもSystem Aアミノ酸輸送活性とフロレチン感受性糖輸送活性を測定し、胎児発育制限を引き起こす症例での変化についても詳しく調べた。その結果、子宮内胎児発育遅延においては、これらの栄養素輸送活性は低下しているが、妊娠高血圧症候群の胎盤では低下していないことを発見し、論文報告をした。正常妊娠の胎盤の栄養素輸送活性値のデータの標準偏差は比較的小さく(System Aアミノ酸輸送活性値(mean±SD):27.9±3.2pmol MeAIB/mg protein/20minutes)n=186)、本分析手法での結果の再現性は優れているものと思われるものの、環境化学物質との相関性を調べるには栄養素輸送活性のデータ数がより多く必要であることが予想された。このため、今年度に得られたデータ蓄積し、来年度以降も測定を実施していく。その後、蓄積された国立環境研究所で測定された母体血・臍帯血中の環境汚染物質濃度値との相関性を調査する方針である。【研究要旨】近年,重金属、ダイオキシン類、残留有機汚染物質、農薬などの環境汚染物質への暴露による新生児体重の減少が示唆され、環境汚染物質の妊娠や胎児に与える影響について危惧されている。本研究の目的は、これらの環境汚染物質が、ヒト胎児発育に与える影響を胎盤の糖・アミノ酸輸送に焦点をあて分析することである。【平成22年度研究実績】環境省エコチル調査「パイロット調査」55症例の妊娠・分娩・胎盤情報を取得し、胎盤は新鮮凍結試料およびホルマリン固定試料を保存した。H.E.染色を用いたsyncytiotrophoblastの定量化を行った。syncytiotrophoblast容積は、胎盤機能(栄養素輸送)を反映する因子として重要であると考えられた。妊娠末期の全9症例の母体静脈血および臍帯静脈血において水銀が検出された。水銀においては母体血中よりも胎児血中で濃度が高い傾向にあり、世代間濃縮が示唆された。また水銀は胎盤通過性が高いことも確認された。カドミウムは母体血や尿で検出されたが、臍帯静脈血では検出されなかった。カドミウムの胎盤通過性の低さが確認された。鉛、ヒ素や農薬(DDT、ペンタクロルフェノール、ピレスロイド剤)は、全ての生体試料において測定限界以下であった。妊娠高血圧症候群および子宮内胎児発育遅延の胎盤では胎児低栄養に適応し、syncytiotrophoblastにおいてアミノ酸輸送蛋白の発現を増強させている可能性が示唆された。最新の研究において環境化学物質であるカドミウム関連ナノパーティクルの吸入は胎盤重量を有意に増加させることが指摘されており、これは母体のカドミウム関連ナノパーティクルによる胎児栄養障害に対する胎児自身の適応反応と考察されている。胎盤には環境化学物質・低酸素・低栄養などのストレスに反応してmTORシグナリング修飾を介してアミノ酸輸送蛋白発現などのレギュレーションが行われ胎児栄養障害に適応するメカニズムが存在することが推察される。

本研究の目的は、環境化学物質と胎盤栄養素輸送機能との関係を調べることにより環境化学物質による子宮内胎児発育遅延を調べることである。In vivoでは母体血・臍帯血中の環境化学物質(金属n=7)と胎盤System Aアミノ酸輸送活性の相関性を分析したところ、臍帯血カリウム濃度(負の相関:R値0.93、P値0.006)、臍帯血カルシウム(正の相関:R値0.84、P値0.03)、臍帯血マンガン(負の相関:R値0.76、P値0.02)、臍帯鉛(負の相関:R値0.9、P値0.01)、また母体血総PCB濃度と単位胎盤あたりの合胞体栄養膜細胞数は負の相関(P=0.022、n=22)が認められたが、母体血総PCB濃度と単位胎盤あたりのplacental growthfactorは正の相関(P=0.001、n=22)が認められた。In vitroでは重金属、アルデヒド類・プラスチック樹脂を小絨毛片に曝露しSystem Aアミノ酸輸送活性を測定した。Methyl-Mercury(0.5M)、Arsenic(5M)、Cadmium(20M)は30 to 40% system A aminoacid transportactivityを減少した。しかしながら、生理的濃度の範囲内では変化は見られなかった。アルデヒド類のうちGlutaraldehyde、Formaldehide、またプラスチック樹脂のうちToluene diisocyanateは超低濃度でも有意にsystem A activityを減少させた。これらは妊婦の曝露により胎児へのアミノ酸輸送障害を起こす環境化学物質と考えられた。正常(10例)に比較して子宮内胎児発育遅延(10例)、妊娠高血圧症候群(10例)、妊娠糖尿病(10例)の合胞体栄養膜細胞におけるアミノ酸輸送蛋白発現が亢進していた。子宮内胎児発育遅延、妊娠高血圧症候群では胎盤血流障害に対する胎児・胎盤系の適応機構ではないかと考察しているが、妊娠糖尿病ではインスリン療法がアミノ酸輸送蛋白発現の亢進に関与していると考えられた。また、mTORシグナル活性がアミノ酸輸送蛋白発現のレギュレーターであることが示唆された。次年度、アミノ酸輸送蛋白の合胞体栄養膜細胞内局在(機能)についてコンフォーカル電子顕微鏡で症例毎に分析したい。(1)母体血・胎盤・臍帯血中の環境汚染物質濃度と胎盤の糖・アミノ酸輸送活性の関連性の検討:新鮮胎盤の栄養素輸送機能と国立環境研究所で測定された母体血・胎盤・臍帯血の環境汚染物質[金属元素、PCB(polychlorinated biphenyl)などのダイオキシン類、DDT(dichlorodiphenyltrichloroethane)、残留有機汚染物質、有機リン系、カーバメート系などの農薬の濃度との相関について解析した。その結果、PCBsは母体血で臍帯血より有意に高い傾向にあり、分子量が大きいPCBほど胎盤を通過し難い傾向にあった。
2つの新規なプロテアーゼファミリーの発見とそれらの生化学的研究

本研究の目的は、我々が世界に先駆けて発見したSedolisinfamilyとEqolisin familyの自然界における役害を解明する第一歩として、これら酵素ファミリーについて生化学的、構造生物学的、分子生物学的解析を加え、構造と機能を解明すると共に、また、その自然界における分布を解明することである。以下に本年度の成果を述べる。Sedolisinfamilyに関して:1)CLN2の基質特異性解析コンビナトリアルライブラリー基質をデザイン、合成し、現在それらを用いて解析中である。2)CLN2の立体構造の解析CLN2の発現方法と精製法を改めて検討し、極めて精製効率の高い精製法を確立した。この方法でCLN2を多量調整し、結晶化を検討中である。CLN2の結晶化は、大変困難で世界的に誰も成功していない。Eqolisin familyに関して:1)阻害剤の開発と反応メカニズムの解明:基質特異性を詳細に解析し、それを基盤として合成阻害剤を開発した。更に、阻害剤・酵素複合体結晶を作成し、その解析結果に基づいて反応メカニズムを解明することに成功した(J. Mol. Biol.(2007))。2)自然界での分布:検討するに至らなかった。3)無公害型農薬の開発:阻害定数がサブナノモーラーレベルのペプチド性インヒビター阻害剤を開発することができた。これを活用して、ナタネなどの重要穀物の植物病原菌を対象に無公害型農薬ととしての使用可能性を実験室レベルで精査予定である。本研究は、前年度研究代表者、小田耕平の独自の発想に基づき得られた成果を更に展開するものであり、独創性、新規性、革新性、先導性の極めて高いものである。また、学術上での貢献度は、極めて高く、更に、応用面でも無公害型農薬の開発などの可能性があり、基礎と応用の両面で意義がある。今回の成果を基礎として、更なる展開を図りたい。Sedolisinsについて:1)CLN2のサブサイト構造解析:致死性神経性疾患、バッテン病に関係するCLN2のサブサイト構造を現在、解析中。次年度に終了予定。この成果は、バッテン病の病態解析につながる。2)立体構造の解析:CLN2の構造・機能解明の一環として、本年度は多量調製法の開発を行った。現在、精製した標品を使用し結晶化を試みている。結晶が得られると、研究協力者と共同して立体構造解析を行う。本酵素は、結晶化困難な酵素である。3)反応至適pHを大幅に変換した酵素の創出:SedolisinsのGlu残基をHis残基に置換することにより、反応至適pHをアルカリ側に有する酵素の構築を検討する予定であったが、人手不足のため未検討である。Eqohsinについて:1)反応メカニズムの解明:改変体の作成、及び阻害剤の開発を通じて、反応メカニズムの解明を行う。2)サブサイト構造(基質特異性)の解析:基質特異性を精査し、いまだ不明のサブサイト構造を解明する。また、反応速度論的解析に、高感度基質を開発する。3)特異的インヒビターのデザインと合成:基質特異性を基盤にインヒビターを開発する。4)合成インヒビターと酵素の複合体の構造解析:EI複合体を作成し、その構造解析を行う。1)から4)までの計画は、予定通り進行し、その成果をJ.Mol.Biol.(2007)に発表した。5)自然界での分布:現在のところ、カビのみに発見されている。

データベース検索や、実際の検索を行ってその分布状況を明らかにする。未検討であり次年度に行う。以上、本年度予定した研究課題は、概ね順調に進んだと考える。本研究の目的は、我々が世界に先駆けて発見したSedolisinfamilyとEqolisin familyの自然界における役割を解明する第一歩として、これら酵素ファミリーについて生化学的、構造生物学的、分子生物学的解析を加え、構造と機能を解明すると共に、また、その自然界における分布を解明することである。以下に本年度の成果を述べる。Sedolisinfamilyに関して:1)CLN2の基質特異性解析コンビナトリアルライブラリー基質をデザイン、合成し、現在それらを用いて解析中である。2)CLN2の立体構造の解析CLN2の発現方法と精製法を改めて検討し、極めて精製効率の高い精製法を確立した。この方法でCLN2を多量調整し、結晶化を検討中である。CLN2の結晶化は、大変困難で世界的に誰も成功していない。Eqolisin familyに関して:1)阻害剤の開発と反応メカニズムの解明:基質特異性を詳細に解析し、それを基盤として合成阻害剤を開発した。更に、阻害剤・酵素複合体結晶を作成し、その解析結果に基づいて反応メカニズムを解明することに成功した(J. Mol. Biol. (2007))。2)自然界での分布:検討するに至らなかった。3)無公害型農薬の開発:阻害定数がサブナノモーラーレベルのペプチド性インヒビター阻害剤を開発することができた。これを活用して、ナタネなどの重要穀物の植物病原菌を対象に無公害型農薬としての使用可能性を実験室レベルで精査予定である。本研究は、前年度研究代表者、小田耕平の独自の発想に基づき得られた成果を更に展開するものであり、独創性、新規性、革新性、先導性の極めて高いものである。また、学術上での貢献度は、極めて高く、更に、応用面でも無公害型農薬の開発などの可能性があり、基礎と応用の両面で意義がある。今回の成果を基礎として、更なる展開を図りたい。
租税競争論及び二重の配当論を用いた環境関連税制の制度設計に関する理論的研究

地方政府が環境税を課す場合に、税率設定に上限がある場合を想定した、分析を行うためのモデル構築を試みた。税率に制約条件があることにより、地方政府が最適な税率を選択できないような状況において、次善の環境税率はどのようになるのかを検討することを検討した。また、この制約が効く場合と効かない場合とで、資源配分の効率性にどのような差が生じるのかを分析した。さらに、地方政府が協調的に行動する場合と競争的に行動する場合とを比較することで、税率設定に関する制約が地方政府の租税競争やその結果としての資源配分の効率性にどのような影響を及ぼすのかを分析した。次に、課税ベースと環境負荷との関連について、検討した。環境負荷を与える財を課税ベースとして選択できない場合に、税収を環境質を向上させるような支出に費やすとして、資源配分の効率性や社会的厚生水準の変化にどのような効果を及ぼすのかを検討した。課税ベースが、環境負荷を生じる財と代替的な関係にある場合、補完的な関係にある場合、なんら関係を有さない場合、の3つのケースを想定した。コレット・ヘイグの命題と類似の結果が得られた。上記のような効率性に関する視点からの分析に加えて、公平性の視点からの分析を試みた。納税義務者を環境負荷を与える原因者とする場合と、環境質改善による受益者にする場合と比較した。明確な結論は得られていないが、資源配分の効率性の観点からは、納税義務者が誰になるのかは資源配分の効率性には無関係である。環境税負担の転嫁の議論へと帰着した。本研究は環境関連税制を租税競争論および二重の配当論を用いて理論的に分析することを試みるものである。今年度行われた研究は、平成16年度から平成18年度に渡る3ヵ年の研究のうち、初年度分である。本年度に行った研究実績の概要は以下のとおりである。まず、わが国の地方レベルにおける環境関連税制の動向についてサーベイを行った。とくに、森林環境税および水源涵養税が各道府県においてどのように議論、検討されているのか、導入にあたっての問題点としてどのようなものがあるのかを検討した。その結果、ほとんどの道府県で導入が検討されている租税のタイプは、住民税の超過負担としての森林環境税であり、水使用量に対して課税することにより水源涵養を図る水源涵養税の導入は、徴税コスト面から導入が困難が実情となっていることが明らかになった。住民税の超過負担として課税を行うことにより環境保全を行おうとするタイプの租税は、環境税の理論的な研究において分析されたことはほとんどないといえよう。また、本研究における分析の前提となる租税競争下における課税の限界費用についての分析を行った。その結果、租税競争により必ずしも課税の限界費用が効率的水準から乖離するわけではなく、租税制度そのものが攪乱的効果をもつ場合には、租税競争により歪みが縮小する可能性があることを示した。さらに、租税競争の枠組みで環境税を分析するためのモデルの基礎について検討した。地方税制として望ましい環境税のあり方を検討し、現在、各地方政府で導入されている環境関連税制として森林環境税を対象に、どのような効果を持つかを分析した。とくに、地方税として望ましい森林環境税のあり方について分析するとともに、現行の森林環境税の性質について明らかにした。森林環境税は県民税均等割超過課税方式により課税が行われており、租税としては目的税ではなく普通税である。また、税収は基金を設立するなどの方法により、森林環境保全に関係する分野への支出に限定している。地方税としての形式上(もしくは地方税法上)は県民税の超過課税に過ぎないものを実質的に法定外目的税として機能させる仕組となっている。県民税を使って森林環境保全費用を調達するという方式を採用する根拠となっているのが受益者負担の考え方である。すなわち、森林環境税は税収を目的とするのではなく、広く薄く負担を行うことが意図されていることになる。形式上は普通税として導入し、実質的に目的税化するという方式を採用した理由には、新税の導入にかかるコストの負担を避けるというものがある。望ましい地方税として森杯環境税を評価した場合、現行の森林環境税は当初の意図から離れて、中途半端なものになってしまったといえる。地方税原則および効率的な資源配分の観点からは、固定資産税や都市計画税を活用した森林環境税の構築が望ましいと考えられる。また、課税自主権の行使により地方政府の自立性を発揮する際に、独自課税を行うための費用負担に耐えられないという状況は憂慮すべきことであると考えられる。

課税ベースが、環境負荷を生じる財と代替的な関係にある場合、補完的な関係にある場合、なんら関係を有さない場合、の3つのケースを想定した。コレット・ヘイグの命題と類似の結果が得られた。上記のような効率性に関する視点からの分析に加えて、公平性の視点からの分析を試みた。納税義務者を環境負荷を与える原因者とする場合と、環境質改善による受益者にする場合と比較した。明確な結論は得られていないが、資源配分の効率性の観点からは、納税義務者が誰になるのかは資源配分の効率性には無関係である。環境税負担の転嫁の議論へと帰着した。
アンチトロンビン凝固制御系遺伝子改変マウスを用いた血栓症発症メカニズムの解明

1)研究の目的本研究ではヒト疾患において再現されていない凝固線溶遺伝子の機能を明らかにするため、Antithrombin欠失マウスを作製、さらにRyudocan欠失マウスとのとのダブル欠失マウスを作製することにより、(1)血栓症発症のタイミング・部位・重症度における差異、(2)向血栓刺激に対する反応性の相違、(3)血栓症病態発症条件の特定、(4)個体発生・炎症・臓器障害におけるHSPG-AT系の役割について明らかにする2)平成13年度相同組換え体の単離・同定とAntithrombin欠失マウスの作製およびその表現型解析を行った。ポジティブ・ネガティブセレクション用のターゲティングベクターを作成し、エレクトロポレーションによりES細胞(D3細胞)に導入、相同組換え体を単離した。これより得られたキメラマウスをICRマウスと交配し、ヘテロ変異マウスと同定された雄雌を交配してホモ体を作製した。3)平成14年度Antithrombin欠失マウスの表現型解析とAntithrombin/Ryudocanダブル欠失マウスの作製。Antithrombin欠失マウスは胎生14.5日以降死亡することが明らかとなった。直接の死亡原因は、心筋、肝臓に発生したフィブリン血栓をべ一スにした出血で、特に心筋で高度であり、死因と直接関連すると思われた。従ってマウスにおいてはアンチトロンビンはその発生には直接必須でないものの、多発する血栓により死亡したものと考えられた。一方Antithrombin(-/+)マウスの表現型を解析、LPS刺激により血栓を発症する頻度がより高いことが明らかとなった(Blood,2002)現在のところAntithrombin(-/+)Ryudocan(-/-):マウスにおいて自然発症血栓症は確認されておらず、ただし死亡率が有意に高かったためLPS、各種サイトカインに加えて拘束ストレス負荷(220時間)を行い、主要組織における血栓形成と血液凝固線溶因子の遺伝子発現について血栓症病態の発症条件を検討したところ、Antithrombin(-/+)Ryudocan(-/-):マウスにおいては血栓発症が有意に亢進していることが明らかとなった。1)研究の目的本研究ではヒト疾患において再現されていない凝固線溶遺伝子の機能を明らかにするため、遺伝子改変マウスを用いた解析を行う。Antithrombin欠失マウスを作製、さらにRyudocan欠失マウスとのとのダブル欠失マウスを作製することにより、(1)血栓症発症のタイミング・部位・重症度における差異、(2)向血栓刺激に対する反応性の相違、(3)血栓症病態発症条件の特定、(4)個体発生、炎症・臓器障害におけるHSPG-AT系の役割について明らかにする2凝固・線溶因子の活動は微妙なバランスの上に成り立っており、血栓症リスクの高い個体においては他の因子の遺伝子発現調節に乱れが生じることが考えられる。1で生じた表現型が他の凝固・線溶因子遺伝子の発現調節にどの様な影響を与えているか、主要臓器における凝固・線溶遺伝子mRNAの量とその局在を通じて、生体が個体レベルで易血栓性をどの様に調節しようとするのか蛋白レベルでの解析も加えながら検討を行う。2)平成13年度今年度は相同組換え体の単離・同定とAntithrombin欠失マウスの作製およびその表現型解析を行った。既に、得られている129SVJ

マウスのゲノムライブラリーからのマウスAntithrombinゲノム遺伝子(全長)をもとにネオマイシン耐性遺伝子(MC1-neo)とジフテリア毒素Aフラグメント遺伝子(PGK-DTA)によるポジティブ・ネガティブセレクション用のターゲティングベクターを作成し、エレクトロポレーション(現有設備)によりES細胞(D3細胞)に導入、G-418含有ES培地により選択培養し、PCRおよびSouthern blottingを用いて解析して相同組換え体を単離した。これをンジェクションによりC57BL/6Jマウスより採取した胚盤胞に注入し、仮親の子宮に移植、仮親から生まれたキメラマウスをICRマウスと交配し、生まれたマウスをPCRおよびSouthern blottingにより変異アレルの伝搬を調べた。ヘテロ変異マウスと同定された雄雌を交配してホモ体を作製し、その表現型を解析したところAntithrombinホモ欠失マウスは死産もしくは胎内死亡に至ることがわかり、各妊娠時期の胎児を病理組織学的に解析し、その死因ならびに発生異常の起こる病態の解明を行った。1)研究の目的本研究ではヒト疾患において再現されていない凝固線溶遺伝子の機能を明らかにするため、遺伝子改変マウスを用いた解析を行う。Antithrombin欠失マウスを作製、さらにRyudocan欠失マウスとのとのダブル欠失マウスを作製することにより、(1)血栓症発症のタイミング・部位・重症度における差異、(2)向血栓刺激に対する反応性の相違、(3)血栓症病態発症条件の特定、(4)個体発生、炎症・臓器障害におけるHSPG-AT系の役割について明らかにする2凝固・線溶因子の活動は微妙なバランスの上に成り立っており、血栓症リスクの高い個体においては他の因子の遺伝子発現調節に乱れが生じることが考えられる。1で生じた表現型が他の凝固・線溶因子遺伝子の発現調節にどの様な影響を与えているか、主要臓器における凝固・線溶遺伝子mRNAの量とその局在を通じて、生体が個体レベルで易血栓性をどの様に調節しようとするのか蛋白レベルでの解析も加えながら検討を行う。2)平成14年度Antithrombin欠失マウスの表現型解析とAntithrombin/Ryudocanダブル欠失マウスの作製。初年度に引き続きAntithrombin欠失マウスの表現型解析を行ったところ、Antithrombin欠失マウスは胎生14.5日以降死亡することが明らかとなった。直接の死亡原因は、心筋、肝臓に発生したフィブリン血栓をベースにした出血で、特に心筋で高度であり、死因と直接関連すると思われた。従ってマウスにおいてはアンチトロンビンはその発生には直接必須でないものの、多発する血栓により死亡したものと考えられた。Antithrombin欠失マウスとすでに作製済みのRyudocan欠失マウスを交配させ、Antithrombin(-/+)Ryudocan(-/-):マウスを同定した。すでに我々が作成したRyudocan(-/-)マウスは自然に血栓症を発症することはないが、Antithrombin(-/+)