hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
人材バンクを活用した学生の自主的な発想・行動力を伸ばす早期体験重視型技術者教育

本研究では,技術者を目指す学生のモチベーションを向上させるため,15歳という低年齢から学生の意識を「頑張ること=達成感を得るための第一歩」が「嬉しい(さらなる向上へ)」という状態に遷移させる仕組みを提案する.まず,現行の新入生専門導入科目「ものづくり基礎工学」の現状分析を学生意識調査により,入学当初から,複合・融合的視点を修得する意義を認識する学生が多いことが明らかになった.次に、社会ニーズ(環境やエネルギー等)の高い分野の基礎実験テーマを組み込み、社会で望まれる技術者像の理解向上を試みた.学生の意識調査から社会ニーズの高い分野への関心や社会で望まれる技術者像についても高い認識を持っていることが明らかになった.最後に,社会人技術者から構成される人材バンクを立上げ,外部教育力を活用して,「ものづくり基礎工学」の授業の一環として設計・製作物の発表会(競技会),講演会等を実施し,学生の自発的な発想力や行動力向上のための新しい授業形態を検討した.学生意識調査から,現場技術者から実務能力について講演を受けることで、技術者意識について共感する学生が多い結果となった.本研究では,技術者を目指す学生のモチベーションを向上させるため,15歳という低年齢から学生の意識を「頑張ること=達成感を得るための第一歩」が「嬉しい(さらなる向上へ)」という状態に遷移させる仕組みを提案する.まず,現行の新入生専門導入科目「ものづくり基礎工学」の現状分析を学生意識調査により,入学当初から,複合・融合的視点を修得する意義を認識する学生が多いことが明らかになった.次に、社会ニーズ(環境やエネルギー等)の高い分野の基礎実験テーマを組み込み、社会で望まれる技術者像の理解向上を試みた.学生の意識調査から社会ニーズの高い分野への関心や社会で望まれる技術者像についても高い認識を持っていることが明らかになった.最後に,社会人技術者から構成される人材バンクを立上げ,外部教育力を活用して,「ものづくり基礎工学」の授業の一環として設計・製作物の発表会(競技会),講演会等を実施し,学生の自発的な発想力や行動力向上のための新しい授業形態を検討した.学生意識調査から,現場技術者から実務能力について講演を受けることで、技術者意識について共感する学生が多い結果となった.本研究では、初年度において、人材バンクを活用した各種授業形態の計画・検討する準備として、関連学協会や大学・高専の技術者教育の動向調査を積極的に行った。その結果、本研究で目指す学外教育力の活用によって、15歳からの早期技術者育成のための導入教育において、(1)社会人(人材バンクに登録された学外の経営者、技術者、卒業生など)に自分の努力の成果が「認められる(評価される)」体験(2)学習した内容が実際の現場でどのように役立つかを現場の技術者から直接教わる場(3)現場の技術者からものづくりの極意、体験談、人生観について直接対談する場を与えることが、学生のものづくりに対するモチベーション向上に繋がるものと判断した。そこで、本研究では、まず初年度に、本研究目標実現に向けて、学内に人材バンクを立ち上げた。本校周辺の広域多摩地区には、特色ある技術を持つ試作・開発型中小企業が多く、また、卒業生も地元で活躍しているケースが多いため、幅広い分野の企業経営者、社会人技術者に協力を得やすい立地条件にある。本研究では、近隣の有力企業、並びに地元の卒業生を中心に協力者を募った。次年度以降、目標達成を目指し、現場技術者を招いて、ものづくり体験や性能コンテストなどの発表会等を試験的に実施していく予定である。1.人材バンクを活用した授業の実施初年度構築した人材バンクを活用して授業を実施した。製作した作品のコンテストを開催し、審査員に人材バンクより学外技術者を招いた。審査委員による審査結果は講評として学生にフィードバックした。受講した新入生は、15歳という低年齢のうちから学外の現場技術者に触れ、将来の目標を得やすくなり、技術者に関する職業意識も芽生えたとのアンケート結果となった。2.授業アンケート調査・評価、並びにその改善受講生全員に授業アンケート調査を実施し、授業に取組む姿勢、授業の目的・意義に対する意識調査、希望等について項目別に分析した。また、昨年度、実験・演習室にて、スクリーンが見にくい場所があることが学生授業アンケートから判明したので、大型ディスプレイ設置の改善を行った。3.中間報告、並びに大学・高専等の技術者教育の現状調査のための学会参加昨年度の本取り組みの中間実施報告を公表するため、日本工学協会年次大会等へ参加した。日本工学教育協会年次大会を公表の場に選んだ理由は、工学教育に携わる専門家が数多く集まるため、様々な助言が得やすいと考えたためである。また、各種学協会に参加し、最新の技術者教育について動向調査を実施した。本校では,工学基礎修得を目指し,本校の5学科(機械工学科,電気工学科,電子工学科,情報工学科,物質工学科)の基礎的な実験実習を1年生全員が体験学習する専門導入科目「ものづくり基礎工学」を開設している.5学科教員と技術職員が連携して,複合・融合的視点を持つ技術者に必要な基本的な素養を育成している.更なる教育効果向上を目標に,本研究では,技術者を目指す学生のモチベーションを向上させるため,15歳という低年齢のうちから学生の意識を「頑張ること=達成感を得るための第一歩」が「嬉しい(さらなる向上へ)」という状態に遷移させる仕組みを提案する.まず,本研究では,現行の「ものづくり基礎工学」の現状分析を学生意識調査により行い,様々な技術分野を学ぶ意義について学生の認識度を調査した.

その結果,入学早々の時点においても,様々な技術分野を学んで複合・融合的視点を修得する意義を理解している学生が多いことが明らかになった.また、一部のテーマに社会ニーズ(環境やエネルギー等)の高い分野の基礎実験テーマを組み込み、社会で望まれる技術者像を学生に理解させる試みも行った.学生の意識調査を行ったところ,社会ニーズの高い分野への関心や社会で望まれる技術者像についても高い認識を持っていることが明らかになった.最後に,社会人技術者から構成される人材バンクを立上げ,外部教育力を活用して,現行の新入生専門導入科目「ものづくり基礎工学」の授業の一環として設計・製作物の発表会(競技会),講演会等を実施し,学生の自発的な発想力や行動力向上のための新しい授業形態を検討した.学生意識調査の結果から,最先端技術の現場技術者から実務で望まれる技術者の能力について講演を受けることで、学校内だけでは学ぶことのできない技術者意識について共感する学生が多いことも明らかになった.
IFN-γ,IL-6遺伝子導入細胞を用いた膀胱癌に対する免疫療法の実験的研究

レトロウィルスをベクターにして、マウス膀胱癌株MBT2にIFN-γ遺伝子を導入しMBT2 /γを樹立した。MBT2/γはin vitroでIFN-γを産生しcallcycie timeは,MBT2:24時間,MBT2/γ:28時間であり,有意の差はなかった。1.5_X10^5個のMTB2細胞を,マウスに皮下注すると100%(10/10)腫瘍を形成した。一方1.5_X10^5個のMBT2/γをマウスに皮下注した場合は15%(3/20)しか腫瘍を形成しなかった。しかし、MBT2/γをヌードマウスに移植すると100%(6/6)腫瘍を形成した。つまり、MBT2/γをヌードマウスでは腫瘍を形成するが,C3H/Heマウスでは腫瘍形成率,腫瘍増殖速度は著しく低下する。3.抗腫瘍ワクチンの作用MBT2/γを移植されても腫瘍を形成しなかったマウスでは,親株のMBT2を移植しても生着せず(9/12:75%),抗腫瘍免疫を獲得したと思われた。4.抗癌剤耐性の克服MBT2に対して抗腫瘍免疫を獲得したマウスでは,MBT2/ADR(MBT2のADR耐性株)を移植しても腫瘍は形成しなかった(8/8100%)レトロウィルスをベクターにして、マウス膀胱癌株MBT2にIFN-γ遺伝子を導入しMBT2 /γを樹立した。4.抗癌剤耐性の克服MBT2に対して抗腫瘍免疫を獲得したマウスでは,MBT2/ADR(MBT2のADR耐性株)を移植しても腫瘍は形成しなかった(8/8100%)レトロウイルスをベクタ-にしてIFNーγの遺伝子を組み込んだベクタ-を作製した.このベクタ-DNAをパッケ-ジング細胞ψ2を用いて、マウス膀晄癌細胞株MBTー2に導入し、G418選択を行い、G418耐性IFNーγ産生MBTー2細胞(MBTー2/Kγ)を得た。MBTー2/Kγは2回クロ-ニングして(MBTー2/KγD3 2A1の細胞株を得た)、in vitroでIFNーγの産生を確認した.MBTー2とMBTー2/Kγの、in vitroのcell cycle timeは,各々24時間と28.8時間であり、有意の差はなかった.2)MBTー2/Kγのin vivoでの増殖MBTー2細胞を、マウスに皮下注するとほぼ100%腫瘍を作った.一方、1.5×10^6個のMBTー2/Kγをマウスに皮下注した場合は15%(3/20)しか腫瘍を作らなった.3)IFNーγ遺伝子を導入された腫瘍細胞は抗腫瘍ワクチンの作用を有した.MBTー2/Kγをマウスに皮下注して腫瘍を作らなった9匹のマウスに、再びMBTー2を皮下注した.その結果2匹のみに腫瘍が生着した(2/9、22%).1),2),3)よりIFNーγ遺伝子を腫瘍細胞に導入し持続的にIFNーγを産生させる細胞を作ることにより、腫瘍細胞の免疫原性の増強、腫瘍増殖の低下がおこり、更にIFNーγ遺伝子を導入された腫瘍細胞は、抗腫瘍ワクチンの作用を有することも示された.レトロウイルスをベクターにして、マウス膀胱癌株MBT2にIFN-γ遺伝子を導入しMBT2/γを樹立した。MBT2/γはin vitroでIFN-γを産生しcell cycleは、MBT2:24時間、MBT2/γ:28時間であり、有意の差はなかった。1.5_X10^5個のMBT2細胞を、マウスに皮下注すると100%(10/10)腫瘍を形成した。一方、1.5_X10^5個のMBT2/γをマウスに皮下注した場合は、15%(3/20)しか腫瘍を形成しなかった。つまり、MBT2/γはヌードマウスでは腫瘍を形成するが、C3H/Heマウスでは腫瘍形成率、腫瘍増殖速度は著しく低下する。3.抗腫瘍ワクチンの作用

MBT2/γを移植されても腫瘍を形成しなかったマウスでは、親株のMBT2を移植しても生着せず(9/12:75%)、抗腫瘍免疫を獲得したと思われた。4.抗癌剤耐性の克服MBT2に対して抗腫瘍免疫を獲得したマウスでは、MBT2/ADR(MBT2のADR耐性株)を移植しても腫瘍は形成しなかった(8/8:100%)。
尻の下のイメージ：ドイツにおける聖職者席下部彫刻ミゼリコルディアの総合的研究

(1)ミゼリコルディアの実地調査ードイツ、ライン川中流から下流にかけての聖堂と美術館に所蔵されているミゼリコルディアの実地調査を行った。具体的には、マインツ大聖堂、フランクフルト大聖堂、ボッパルト、カルメル会聖堂、ボン州立博物館、ケルン大聖堂、聖アンドレアス聖堂、シュニュットゲン美術館、ヴァルラフ=リヒャルツ美術館、アーヘン大聖堂、ズュールモント・ルートヴィヒ美術館、エッメリヒ、聖マルティニ聖堂、クサンティン、聖ヴィクトル大聖堂、同大聖堂宝物館、ドルトムント、美術史・文化史博物館、聖母聖堂、聖リオポルト聖堂等である。(2)大聖堂全体における内陣装飾の分析ーエッメリヒ、聖マルティニ聖堂を中心に内陣装飾の総合的分析を行った。具体的には、内陣席におけるミゼリコルディアと周辺の背板、側板、側板頂部、そして肘掛の装飾を相互関係に注意しながら分析した。特にテーマに注目し、それぞれの部分がどのように機能するかを考察した。例えば、背板には注文主家系の紋章が10枚程彫られているが、それは家系の正統性を強調するためであろうと考察した。(3)他地域との関係ーエッメリヒ、聖マルティニ聖堂はオランダとの国境に接しているので、まずはオランダにおけるミゼリコルディアとの類似性に二つの点で注目した。第一にテーマ性、共通の諺テーマの存在である。第二にミゼリコルディアにおける突起(小座板)の型式の共通性である。エッメリヒの小座板型式は二葉型式だが、これはエッメリヒ以外でもドイツのニーダーライン地方には数多く見られる。ところが、他国あるいは他の地域にはあまり見られない型式である。ところがオランダのユトレヒトにはわずかに存在することが判明した。ドイツにおけるミゼリコルディアの実地調査をライン川流域で実施し、当初の予定の半数ほどは済んでいる。2019年度に再調査できれば、予定通り実行できるものと思われる。エッメリヒの聖マルティニ聖堂を詳細に調査することができたことで、多数の作例中、研究の中心的な対象を定めることができた。これによって、形式的側面とテーマ的側面の両面において、他例との比較考察が容易になった。ミゼリコルディアをドイツ全体で考察する時の時期的・地域的区分を構想することができた。つまりミゼリコルディア制作の重要な時代・地域を次のように見通すことが可能となった。13世紀前半のクサンテン、13世紀後半から14世紀前半のケルンとマクデブルク、13世紀のニーダーザクセン地方、15世紀後半から16世紀初頭にかけてのエッメリヒなどライン下流地域、15世紀後半ウルム周辺の5つである。ミゼリコルディアのテーマに関しては、諺テーマのネーデルラント、フランス、イベリア半島などとの比較調査を進展することができた。(1)アインベックなどニーダーライン地方、ウルム、シュトゥットガルト周辺の聖堂におけるミゼリコルディアを調査する。それによって、各地方の形式上、主題上の特徴を解明する。(2)それらの地域的特徴を前年度までに実施した他地域の特徴と比較考察することで、相互の影響関係を解明する。(3)ミゼリコルディアのテーマを写本挿絵、版画等の美術ジャンルと比較考察することで、ジャンルを超えた関係を解明する。(4)内陣装飾におけるミゼリコルディアの意味を考察する。(5)教会堂全体におけるミゼリコルディアの機能を分析する。

ミゼリコルディアをドイツ全体で考察する時の時期的・地域的区分を構想することができた。つまりミゼリコルディア制作の重要な時代・地域を次のように見通すことが可能となった。13世紀前半のクサンテン、13世紀後半から14世紀前半のケルンとマクデブルク、13世紀のニーダーザクセン地方、15世紀後半から16世紀初頭にかけてのエッメリヒなどライン下流地域、15世紀後半ウルム周辺の5つである。ミゼリコルディアのテーマに関しては、諺テーマのネーデルラント、フランス、イベリア半島などとの比較調査を進展することができた。(1)アインベックなどニーダーライン地方、ウルム、シュトゥットガルト周辺の聖堂におけるミゼリコルディアを調査する。それによって、各地方の形式上、主題上の特徴を解明する。(2)それらの地域的特徴を前年度までに実施した他地域の特徴と比較考察することで、相互の影響関係を解明する。(3)ミゼリコルディアのテーマを写本挿絵、版画等の美術ジャンルと比較考察することで、ジャンルを超えた関係を解明する。(4)内陣装飾におけるミゼリコルディアの意味を考察する。(5)教会堂全体におけるミゼリコルディアの機能を分析する。
固相放射線化学-高分子材料のビーム照射効果の解明をめざして

本研究は、放射線高分子化学に関連する広い専門分野の研究集団を組織し、高分子材料の電離放射線ビーム照射効果の発現過程を統一的に検討することを目的とした。高分子ビーム照射効果の基本的解明に対する関心は国際的にも高まっており、相対的には高いレベルにあるわが国の研究の進展状況に関する情報が広く求められている。国際的な情報交換と共同研究の進展に資するため、一年間で実施されたものではあるが、本研究の成果は和英両文で報告書にまさめることとした。本研究の目的を達成するために、2回の研究集会を開催した。第一回研究会は平成4年9月に開催され、代表者より本研究の趣旨についての説明があり、16名の分担者からの研究現況の紹介、固相放射線化学研究の現状の問題点、本研究の運営基本方針の議論が行われた。第一回研究会は平成5年1月に開催され、ここでは分担者および特別に参加を要請した研究者から、特に重要なテーマについての詳細な報告を受け、問題点と今後の展望について討議が行われた。また、本研究のテーマの重要性に鑑み、これを重点領域研究分野として申請することについての提案と合意があり、申請の基本方針についての検討が行われ、その具体化については代表者に一任された。研究集会での話題は多岐にわたり、要約は困難ではあるが、その結論は次のようになろう。高分子中にビーム照射で誘起される反応の化学的側面はよくわかり、素反応を反応式で表すことが可能となっている。しかし高分子固体中での反応過程の進行がどのような因子で制御されるかはほとんどわかっていない。分子の「動きやすさ」が化学反応を制御する基本的因子で、高分子中の反応はしばしばガラス転移温度との関連で論じられてきた。しかし、最近進展の著しい固相反応研究の量子論的理解を基礎に、高分子反応の理解が今後急速に精密化してゆくであろう。
HIV-1の細胞傷害性T細胞からの逃避機序の研究

本年度は、Nef蛋白によるHLAクラスIの発現低下がCTLの機能に及ぼす影響を明らかにする為に、ヒトのCD4T細胞にHIV-1およびNef mutantをもったHIV-1を感染させ、細胞傷害活性、サイトカイン産生、HIV-1増殖抑制能を測定する事により、HIV-1特異的CTLクローンによるHIV-1感染細胞に対するHIV-1抗原認識能を調べた。その結果、Nef蛋白による細胞表面のHLAクラスIのdownregulationの結果、HIV-1特異的CTLクローンの細胞傷害活性は著しい障害を受けた。一方、HIV-1特異的CTLクローンのサイトカイン産生に及ぼす影響は少なく、部分的なHIV-1増殖抑制能が見られた。以上のことから、Nef蛋白による細胞表面のHLAクラスIのdownregulationは、HIV-1特異的CTLクローンの細胞傷害活性を障害するが、サイトカイン産生能に対する影響は少なく、HIV-1特異的CTLから産生されるサイトカインにより、部分的なHIV-1の増殖抑制がおこると考えられた。さらに、慢性HIV-1感染者でHIV-1特異的CD8T細胞の機能異常および分化異常があるか明らかにするために、まだ詳細には明らかになっていないヒトの抗原特異的CD8T細胞の分化・成熟を明らかにすることを試みた。ヒトの末梢血CD8T細胞を分離し、抗CD27,抗CD28,抗CD45RA,抗perforin、抗ケモカインレセプター抗体を用いて多重染色法により、フローサイトメトリーで解析した。その結果、CD27,CD28,CD45RAの3つの細胞表面マーカーを用いて、naive, memorry, memorry/effector, efffectorに分画する事が可能となった。
安全運転支援のための可視光ブーメラン方式の試作研究

本研究では,安全運転支援システムの構築を目指して,スペクトラム拡散方式を用いた車車間通信・測距統合システム(ブーメラン方式)に可視光通信を適用した可視光ブーメラン方式の実現性検証のための試作機による検討を行った.受光装置として,フォトダイオード(PD)等の半導体素子を使用する方式とCCDカメラを用いての画像処理を利用する方式の二つを考えていた.今年度は昨年度からの継続で,PDを使用する方式に取り組んだ.可視光ブーメラン方式に使用するスペクトラム拡散方式は,直接拡散方式(DS方式)とタイムホッピング方式(TH方式)の二種類を検討してきていたが,今年度製作した試作機では昨年度に引き続きDS方式を採用した.試作機の送受光部には,白色LED,赤色LED,PDを用いた.白色LEDは車両のヘッドライト,赤色LEDはテールランプをイメージしている.また,各LEDには集光用レンズを装着し,通信距離延長を行った.今までの試作機では通信機能部だけを実装し,測距部の実装は行っていなかった.今年度は測距部も実装した試作機を製作した.測距部は排他的論理和(EX-OR)ゲートと低域通過フィルタ(LPF)を用いた簡易な回路で構成した.これは,従来のシミュレーションで用いていたマッチドフィルタ法による測距部に比べて実現性が高くなると考えたためである.実験では質問機と応答機で送受信,増幅,比較,逆拡散した信号波形をオシロスコープで観測し,測距部から出力される距離に相当する電圧をマルチメータで測定した.実験の結果,最大通信距離が5[m]となり,集光用レンズの効果が検証できた.また,測距部による距離に相当する電圧の測定結果は理論値との誤差が発生しているが,理論値と実験値の傾向には共通点があることが確認できた.以上より,一つのシステムで通信と測距を同時に行う可視光ブーメラン方式の実現性が確認できた.本年度では,スペクトル拡散方式のうち直接拡散方式を用いた可視光車車間通信・測距統合システム(可視光ブーメラン方式)の試作機を製作し,その実現性について検証する実験を行った.実験機では可視光通信の受光部にフォトダイオード(PD)を,送光部に赤色LEDをそれぞれ使用した.質問機と応答機でそれぞれ受光し,増幅・波形整形,逆拡散した信号をオシロスコープで観測した.今回製作した試作機では,可視光ブーメラン方式の基本的な動作確認を主目的にしたため,使用したLEDは各送信部で1個だけにした.そのため十分な光量が得られないので,送受信間の距離は5[cm]と短くなっており,また,背景光の影響を受けやすくなっていたため実験は屋内で行った.通信距離が5[cm]と非常に短いため,距離測定が行えるほどの遅延が生じないので,距離測定は行わずに通信が可能かどうかだけに着目した.また,チップレートを10[kchip/sec]に設定した.127chipのM系列PN符号を用いたため情報ビットレートは79[bit/sec]となり,非常に低速な通信速度となっている.これはオシロスコープを利用しての波形観測による性能評価を行うため,低速にして,観測が容易に行えるようにするためである.干渉波は様々なものが考えられるが本実験では通信に使用するものとは別の127chipのM系列を用いた.質問機/応答機のLEDの照度を調節し,干渉波のレベルを加減した.実験結果から,直接拡散方式を用いた可視光ブーメラン方式が,ある程度の干渉が加わっても通信が可能であり,測距に関しては実験機の処理遅延による影響が大きいことが確認された.研究計画の段階では,利用するスペクトル拡散方式として直接拡散方式とタイムホッピング方式(TH方式)の2方式の試作機を製作し,比較する予定であったが,現段階では,直接拡散方式の試作機だけの評価になっている.この理由として,LEDだけでなく他の電子部品の特性の影響も大きく受けるため部品や回路の選定に予定以上に時間がかかり,さらに個々のLEDの光量が十分でないため,想定していた以上に通信距離を延ばすことができず,基本となる直接拡散方式の試作機製作に時間がかかってしまったためである.また,比較対象として作成するTH方式の検討が十分とは言えないため,回路化が難しいと判断したことも理由に挙げられる.本年度では,昨年度に引き続き,スペクトル拡散方式のうち直接拡散方式(DS方式)を用いた可視光車車間通信・測距統合システム(可視光ブーメラン方式)の試作機を製作し,その実現性について検証する実験を行った.昨年度に製作した試作機(従来機)に使用した回路とは異なる回路も用いて新しい試作機を製作した.昨年度の従来機からの改良ポイントとして,(1)通信距離を延ばすことと,(2)通信速度と測距特性の向上のための動作クロック周波数を上げることの2点に焦点をあて,検討を進めた.(1)通信距離を延ばすための手法として,送受後部にレンズによる焦光器を設けた.検討の結果,安定した通信の出来る通信距離を従来機の5cmから5m程度まで延ばすことができた.

(2)通信速度と測距特性の向上を目指した動作クロック周波数を上げる手法として,高速で動作するデバイスを用いることと回路の改良を行った.検討の結果,クロック周波数を従来機の10kHzから1MHzまで上げることができた.(1),(2)ともに従来機の100倍にすることに成功し,可視光ブーメラン方式の実用化の可能性を向上させたと言える.なお,これらの試作機の製作による実験検討の他に,今までのシミュレーション結果を基とした可視光ブーメラン方式の論文を執筆,投稿し,採録決定に至っている.この論文は本課題以前の課題(科学研究助成事業(24510236))の研究成果をまとめたものであるが,本課題にも大きく関連しており,今年度の研究実績に一部として,本欄に記すこととする.昨年度終了時点で「やや遅れている」状態であった.昨年度終了時点の今年度計画では,その遅れを取り戻した上に,受光部にディジタルカメラ等のCCDセンサを用いた試作機の製作に進む予定であった.しかし,担当者間で改めて相談した結果,通信距離が5cmということと動作クロック周波数が10kHzの試作機では不十分であり,車車間通信を想定した通信距離まで延ばすことと通信速度並びに測距特性の向上のためにクロック周波数を上げる方式の検討が先であろう,との結論に至り,今年度はこれらの点の改良を主に行ったために,「遅れている」状態となってしまっている.今年度では,昨年度に引き続き,スペクトル拡散方式のうち直接拡散方式(DS方式)を用いた可視光車車間通信・測距統合システム(可視光ブーメラン方式)の試作機を製作し,その実現性について検証する実験を行った.本研究では,受光装置として,フォトトランジスタ等の半導体素子を使用する方式とCCDカメラを用いての画像処理を利用する方式の二つを考えている.今年度は昨年度からの継続で,半導体素子を使用する方式に取り組んでいたが,作成した試作機の特性が想定したような特性を得ることができず,遅れているのが現状である.従って,現段階では特筆すべき成果が上がっていない.本研究では,受光装置として,フォトトランジスタ等の半導体素子を使用する方式とCCDカメラを用いての画像処理を利用する方式の二つを考えている.今年度は昨年度に引き続き半導体素子を使用する方式に取り組んでいたが,作成した試作機の特性が想定したような特性を得ることができず,遅れているのが現状である.本研究では,安全運転支援システムの構築を目指して,スペクトラム拡散方式を用いた車車間通信・測距統合システム(ブーメラン方式)に可視光通信を適用した可視光ブーメラン方式の実現性検証のための試作機による検討を行った.受光装置として,フォトダイオード(PD)等の半導体素子を使用する方式とCCDカメラを用いての画像処理を利用する方式の二つを考えていた.今年度は昨年度からの継続で,PDを使用する方式に取り組んだ.可視光ブーメラン方式に使用するスペクトラム拡散方式は,直接拡散方式(DS方式)とタイムホッピング方式(TH方式)の二種類を検討してきていたが,今年度製作した試作機では昨年度に引き続きDS方式を採用した.試作機の送受光部には,白色LED,赤色LED,PDを用いた.白色LEDは車両のヘッドライト,赤色LEDはテールランプをイメージしている.また,各LEDには集光用レンズを装着し,通信距離延長を行った.今までの試作機では通信機能部だけを実装し,測距部の実装は行っていなかった.今年度は測距部も実装した試作機を製作した.測距部は排他的論理和(EX-OR)ゲートと低域通過フィルタ(LPF)を用いた簡易な回路で構成した.これは,従来のシミュレーションで用いていたマッチドフィルタ法による測距部に比べて実現性が高くなると考えたためである.
鉄系超伝導体鉄セレン・鉄テルル系の機構解明と新物質探索

鉄系超伝導体の研究を行い,特に鉄カルコゲナイド系に着目し,結晶育成,基礎物性研究,応用への向けた萌芽研究を行った.2009年に自ら発見した超伝導体FeTe1-xSxの相図完成を目指し,超伝導特性の向上と良質単結晶育成を目指した.その結果,FeTe1-xSxの超伝導特性が大気暴露酸素アニールなど,様々なポストトリートメントにより著しく改善されることを明らかにした.さらに,Sの濃度を変化させた単結晶を系統的に合成し,酸素アニールを施すことで超伝導を示す単結晶の合成に成功した.単結晶試料を用いて電気抵抗率測定,磁化測定を詳細に行うことで,磁性・超伝導相のS濃度依存性を詳細に決定した.その結果からFeTe1-xSx系の相図を完成できた.2010年の12月に,新しくKFe2Se2超伝導体が中国のグループにより発見された.KFe2Se2はもっとも単純な鉄系超伝導体であるFeSeにKをインターカレートすることでその構造が変化し超伝導特性が大きく上昇した.この物質は私自身も合成に取り組んでいた物質であり,報告直後にいち早く結晶育成に取り組み,その超伝導を再現するとともに良質な単結晶を用いた磁場中輸送測定を行い,応用への可能性を提案した.さらに,電気抵抗測定において観測される異常な振る舞い(ブロードなハンプの存在)と超伝導転移温度の相関を議論し,その後の良質単結晶育成の一つの指針となった.これらの結果は世界的に評価され,JPSJ誌およびZ.Krist.誌の2誌に鉄カルコゲナイド超伝導体に関するレビュー論文を出版した.鉄系超伝導体の研究を行い,特に鉄カルコゲナイド系に着目し,結晶育成,基礎物性研究,応用への向けた萌芽研究を行った.2009年に自ら発見した超伝導体FeTe1-xSxの相図完成を目指し,超伝導特性の向上と良質単結晶育成を目指した.その結果,FeTe1-xSxの超伝導特性が大気暴露酸素アニールなど,様々なポストトリートメントにより著しく改善されることを明らかにした.さらに,Sの濃度を変化させた単結晶を系統的に合成し,酸素アニールを施すことで超伝導を示す単結晶の合成に成功した.単結晶試料を用いて電気抵抗率測定,磁化測定を詳細に行うことで,磁性・超伝導相のS濃度依存性を詳細に決定した.その結果からFeTe1-xSx系の相図を完成できた.2010年の12月に,新しくKFe2Se2超伝導体が中国のグループにより発見された.KFe2Se2はもっとも単純な鉄系超伝導体であるFeSeにKをインターカレートすることでその構造が変化し超伝導特性が大きく上昇した.この物質は私自身も合成に取り組んでいた物質であり,報告直後にいち早く結晶育成に取り組み,その超伝導を再現するとともに良質な単結晶を用いた磁場中輸送測定を行い,応用への可能性を提案した.さらに,電気抵抗測定において観測される異常な振る舞い(ブロードなハンプの存在)と超伝導転移温度の相関を議論し,その後の良質単結晶育成の一つの指針となった.これらの結果は世界的に評価され,JPSJ誌およびZ.Krist.誌の2誌に鉄カルコゲナイド超伝導体に関するレビュー論文を出版した.
南琉球宮古南部方言の記述的研究

南琉球、宮古諸島方言に属する来間島方言の話者は60代以上の数十名のみであり、中年層以下の者はすでに標準語との中間方言に移行している。2001・2002年度の2年度にわたり70・80代の伝統方言を話す話者から音声・文法と語彙の一部を聞き取り、記述した。全戸のヤーヌナ(屋号)についても、各戸の配置図とともに記録した。音声面の特徴は、母音では5母音の他、摩擦的操音を伴う狭口中舌母音が存在すること、狭口母音の[i,u]のみならず、広口母音の[a]においても無声化が起こることである。子音に関しては唇歯無声摩擦音[f]、唇歯有声摩擦音[v]が存在する。また、[v,m]は成節子音となる。これらの特徴は、例えば、宮古島本島の平良市内ではほとんど失われてしまった宮古諸島方言の古い姿をよく残しているものである。文法面では用言の活用形、助詞・助動詞、可能表現を文例とともに記述した。2年目には、音声、文法の特徴を反映する項目について高年層の男女7名の話者の発音をデジタル録音及びデジタルビデオ録画を行った。併せて、来間島のわらべ歌及び来間島の島民の由来談も収録した。これらの録音、ビデオ記録はこれまで行われたことはなく、来間島方言の重要な資料となる。既に収録済みの他の宮古諸島方言、すなわち、大神島、池間島、伊良部島、宮古島狩俣の猪方言の録音・録画と比較考察することにより、宮古諸島方言の姿を総体的にとらえることができる。本研究課題の目的は来間島方言の体系記述を行い,包括的で,正確な記録をデジタル録音・録画として保存することである。本年度の研究実施計画は,1.体系調査に重点を置き記録項目の選定のための基礎的資料を得ること。2.記録のための話者の協力確保,記録環境の整備を調査地で行う,の2点である。本年度の臨地調査では,下地町教育委員会等の協力を得て,60代から80代までの男女,計8名に対して面接・聞き取り調査を行った。これにより,方言調査に対する理解を得,調査協力体制を得ることができた。来間島の現状は,人口の減少,65歳以上の人口比の高さ,共通語化の進行にさらされており,時間が経てば,方言は消滅してしまう。早期の調査分析・記録の必要性が改めて明らかとなった。また,今回の調査で分かった特徴的な点は次の通り。1.音声上の特徴としては,宮古方言の古い姿である唇歯音,摩擦的噪音を伴う中舌狭母音などが,時にゆるみはするが保たれていることが確認できた。2.アクセントについては,概略統合一型であることが確認できた。3.文法のうち,(1)活用形では,命令形語尾は-e,-roと,-i,-ruの両方が観察された。個人差があり,個人の中でもゆれている場合があった。例:jumijume(読め),idiruidiro(出ろ),(2)名詞と対格の助詞[u],とりたて助詞[ja]との融合は,平良市方言に似ているが口蓋化を起こす点が異なることが明らかになった(例:ピヂウ<肘>,ピッチュ<肘を>,ピッチャ<肘は>,*平良市方言では,ピッツ,ピッツァとなる)。南琉球、宮古諸島方言に属する来間島方言の話者は60代以上の数十名のみであり、中年層以下の数十名はすでに標準語との中間方言に移行している。2001・2002年度の2年度にわたり、70・80代の話者から音声・文法と語彙の一部を聞き取り、記述した。

音声面の特徴は、5母音の他、摩擦的操音を伴う狭口中舌母音が存在すること。広口母音も無声化が起きること。子音では、両唇無声摩擦音、両唇有声摩擦音がある。また、[f、m、v]は成節子音となる。これらの特徴は、例えば、平良市内ではほとんど失われてしまった宮古島方言の古い相をよく残している。文法面では用言の活用、助詞・助動詞、可能表現を文例とともに記述した。2年目には音声・文法の特徴を反映する項目について7名の話者の発音をデジタル録音し、ビデオ撮影を行った。併せて、わらべ歌と来間島の由来談話も収録した。これらの録音・ビデオはこれまでに行われたことは無く、来間方言の重要な資料となる。既に収録済みの、他の宮古諸島方言の録音・ビデオ(池間・狩俣・大神・伊良部等)とあわせて視聴することにより、宮古諸島方言の相を総体的に比較考察することができる。
ウイルス感染に対する皮膚自然免疫および内因性免疫機構の網羅的解析とワクチン開発

単純疱疹ウイルス(HSV)-2の経皮感染において、IL-33がアラーミンとして働いて、生体防御に重要な役割を果していることを見出した。HSV感染ケラチノサイトからIL-33が放出されることを、免疫染色、ELISA,ウエスタンブロット法により明らかにした。また、WT-BMMCsあるいはST2欠損肥満細胞を肥満細胞欠損マウスに再構築することにより、肥満細胞によるHSV-2侵入感知システムには、IL-33/ST2を介したシグナルが必須であることも明らかとした。これらの実験結果は、宿主防御における肥満細胞上でのIL-33/ST2シグナルの重要性を示している。<LL37によるLCsのHIV感染増強メカニズム>(目的)langerinによって捕えられるHIV粒子はLC内Birbeck顆粒に運ばれて不活化されるが、これに加えてAPOBEC3G(A3G)はHIVとLCの有力な感染抑制要因として機能する。そこで、LL-37がLCsにおけるこれらの分子の発現に影響を及ぼすか検討した。(結果)LL-37刺激は、langerinとAG3の表現力に影響を及ぼさなかった。しかし対照的に、LL-37はLCsに発現されるHIVレセプターであるCD4とCCR5の発現を有意に増加させた。これらの結果から、langerinまたはA3Gなどの感染制御因子を調整することによってよりはむしろ、HIVレセプターの発現を増加させることによって、LL-37がLCのHIV感染を増強することが示唆された。皮膚ウイルス感染における自然免疫機構の解明を目指し、世界で最も感染者が多いとされるHSV感染に対する初期宿主免疫応答機構を検討した。我々は、HSV感染に対する初期宿主免疫応答機構において肥満細胞が重要な免疫学的役割を果すことを報告しており、既に当科オリジナルなマウスHSV感染モデルを樹立している(Aoki R.& Kawamura T. et al.J Invest Dermatol,2013)。そこで生体防御における“alarmin"として最近注目されているIL-33のHSV感染初期における免疫学的役割を検討した。1)マウスHSV感染皮膚におけるIL-33産生は同感染皮膚より得られるHIS titerと相関しており、また2)in vitro HSV感染ケラチノサイトからのIL-33産生は、ダメージを受けたケラチノサイトかに優位に認められ、さらに3)口唇ヘルペス患者の病変部水疱蓋のケラチノサイトにおいてもIL-33の著名な産生が確認されたことより、ヒトにおいてもHSVに感染した表皮ケラチノサイトが“alarmin"(Danger signal)としてIL-33を放出して、HSV感染に対する初期宿主免疫応答が誘導されることが示唆された。次に、IL-33受容体であるST2を欠損したマウス皮膚にHSVを皮下注射したところ、正常マウスに比べて有意に低い生存率が観察された。このST2欠損マウス皮膚に野生型マスト細胞を再構築するとその死亡率は有意に改善されたが、ST2欠損マスト細胞を再構築してもその生存率に変化は認められなかった。これらの実験結果から、IL-33を介したマスト細胞刺激はHSV排除に重要な役割を果たすことが示唆された。以上より、HSVがケラチノサイトに感染するとalarmin:IL-33が産生され、マスト細胞のTNF-α, IL-6産生を誘導してウイルスを排除することが示唆され、HSV感染ケラチノサイト由来のIL-33がHSV感染初期における宿主防御機構に重要な役割を果すことが示唆された。粘膜・皮膚ランゲルハンス細胞(LC)は性行為HIV感染における最初の標的細胞であるため、我々はHSV-2がLCのHIV感染に影響を及ぼすかどうかについて検討した。ヒト表皮内LCにHSV-2、次いでHIVを曝露すると、HSV-2はLCのHIV感染性を有意に増加させた。また、HSV-2は表皮細胞からのLL-37の生産を誘導し、LL-37はLCでHIV感染性を有意に増強した。これらの研究結果から、HSV-2は表皮細胞からのLL-37の産生を誘導し、このLL-37がLCのHIV感染性を増加させることによって、性行為HIV感染リスクを高めることが示唆された。ATPなどの他に生体防御において“alarmin"として注目されている分子のHSV/HIV感染初期における免疫学的役割を検討したい。また、性行為HIV感染におけるウイルス侵入阻害薬の開発も同時に進めたい。28年度が最終年度であるため、記入しない。皮膚免疫培養による単球由来ランゲルハンス細胞を用いて、HSV-2は表皮細胞からのLL-37の産生を誘導し、このLL-37がLCのHIV感染性を増加させることによって、性行為HIV感染リスクを高めることが示唆されたので、現在ヒト表皮内ランゲルハンス細胞を用いて同様の機序が存在するか検討中である。実験を進める過程において、生体防御に関わるIL-33以外のAlarmin分子群についても実験する必要性が生じたため。

28年度が最終年度であるため、記入しない。消耗品が予定より安く購入できたため、余剰金が発生した。ATPなどの生体防御において最近注目されている分子群のHSV/HIV感染初期における免疫学的役割を検討する。さらに性行為HIV感染におけるウイルス侵入阻害薬の開発も同時に行う。上記の余剰金は平成27年度の消耗品購入に使用する予定である。
シアロ化合物による老化シナプス機能促進とその機構

本研究の前に、老齢脳の機能低下の原因としてシナプスにおける神経伝達の効果低下を明らかにしてきた。脱分極刺激による電位依存性チャネルを介するCa^<2+>流入低下のために、アセチルコリン放出が減少すると説明された。この知見に基づいて、老化脳の機能改善のために電位依存性カルシウムチャネルの効率亢進を本研究の第1の目的とした。(1)まずシナプス膜に多く存在するガングリオシドが、分子内のシアル酸の働きによってCa^<2+>動態調節をする役割を期待した。ガングリオシドGM1、あるいはGQ1bをシナプトソームに作用させたところ、脱分極によるアセチルコリン放出を増加させた。それはガングリオシドが電位依存性カルシウムチャネルの効率を高めるためであることがわかった。(2)シナプス可塑性の指標として長期増強を取り上げ、ガングリオシドの効果をみた。ガングリオシドGM1、GQ1bともに長期増強効果を示すことが明らかになった。(3)ガングリオシドシナプス可塑性の促進効果をヒトへ応用しようとする場合、より低分子量のシアル酸化合物が有利であると考えた。そこでシアル酸コレステロールという化学合成によるガングリオシドアナログをテストした。その結果、シアル酸コレステロールのα、β異性体共にアセチルコリン放出を高めることが示されたが、そのメカニズムは異なることが明らかにされた。α-シアル酸コレステロールはCa^<2+>流入を高め、β-シアル酸コレステロールはコリントランスポータを活性化することによってアセチルコリン合成を高めてシナプス機能を亢進するメカニズムが証明された。(1)ラット脳シナプトソームからのアセチルコリン放出が天然シアロ化合物ガングリオシドで促進されることを見い出してきた。その理由として、電位依存性に流入するカルシウムイオン量を高めていることがわかった。そこで、カルシウムチャネルのどのサブタイプが関わっているかをサブタイプ特異的Caチャネルブロッカーで調べたところ、ガングリオシドは特にN型チャネルを大きく活性化することが明らかにされた。(2)ガングリオシドの合成アナログのシナプス作用を検討した。シアル酸コレステロールはガングリオシドと同様にアセチルコリン放出を高めた。注目される発見はシアル酸コレステロールの異性体αとβで作用機作が異なることであった。α体はガングリオシドと同様にカルシウムイオン流入を促進することによってアセチルコリン放出を高めた。一方、β体は高親和性のコリン取込みを促進することによってアセチルコリンの合成量を増す作用を示した。その結果アセチルコリン放出を高めることがわかった。(3)シナプスの長期増強形成がガングリオシドで促進されるか否かについて従来結論が出されていなかった。長期増強の成立条件を改良してガングリオシドの効果を明瞭に検出することに成功した。長期増強形成閾値の刺激を用いた時と低カルシウムを用いた時に、ガングリオシドが長期増強形成を高めることが明らかにされた。これは、シアロ化合物がカルシウムチャネルを活性化する上述の結果と一致するものと考えられた。(1)シアル酸を含む糖鎖化合物であるガングリオシドが、脳シナプスにおける神経伝達を修飾することを見い出してきた。シナプス伝達のモニターに2つの方法を用いた。(1)モルモット脳海馬のスライスを用いて、シナプスの長期増強形成がガングリオシドGMIとGQ1bで促進されることを証明した。ガングリオシドがシナプス効率改善に有効であるかどうかについて議論が分れていたが、今回の研究で明確な答を出した(Exp.Brain Res.,123:307-14,1998)(2)ラット脳シナプトソームの系を用いて、アセチルコリン合成と放出、および電位依存性カルシウム流入をモニターした。

主要な脳ガングリオシド(A,B系列)がカルシウム流入を亢進してアセチルコリンの放出促進をもたらすことを明らかにしてきたが、本年度はコリン性ニューロン特異的ガングリオジドChol-1α(アルファ系列)がアセチルコリン合成を高めることを見い出した。その作用機作として、Chol-1αはシナプスにおける高親和性コリン取込みを促進することがわかった。コリントランスポーターに対するChol-1αの作用は、前年度明らかにしたガングリオシド合成アナログの一つであるβ-シアル酸コレステロールによってミミックされることが明かとなった。本研究の前に、老齢脳の機能低下の原因としてシナプスにおける神経伝達の効率低下を明らかにしてきた。脱分極刺激による電位依存性チャネルを介するCa^<2+>流入低下のために、アセチルコリン放出が減少すると説明された。この知見に基づいて、老化脳の機能改善のために電位依存性カルシウムチャネルの効率亢進を本研究の第1の目的とした。(1)まずシナプス膜に多く存在するガングリオシドが、分子内のシアル酸の働きによってCa^<2+>動態調節をする役割を期待した。ガングリオシドGM1、あるいはGQ1bをシナプトソームに作用させたところ、脱分極によるアセチルコリン放出を増加させた。それはガングリオシドが電位依存性カルシウムチャネルの効率を高めるためであることがわかった。(2)シナプス可塑性の指標として長期増強を取り上げ、ガングリオシドの効果をみた。ガングリオシドGM1,GQ1bともに長期増強促進効果を示すことが明らかになった。(3)ガングリオシドのシナプス可塑性の促進効果をヒトへ応用しようとする場合、より低分子量のシアル酸化合物が有利であると考えた。そこでシアル酸コレステロールという化学合成によるガングリオシドアナログをテストした。その結果、シアル酸コレステロールのα,β異性体共にアセチルコリン放出を高めることが示されたが、そのメカニズムは異なることが明らかにされた。Α-シアル酸コレステロールはCa^<2+>流入を高め、β-シアル酸コレステロールはコリントランスポータを活性化することによってアセチルコリン合成を高めてシナプス機能を亢進するメカニズムが証明された。
「うそ」の認知科学的研究

「うそ」を、言語学・語用論・哲学・数学基礎論・心理学等々の総合的観点から考察して、「聞き手(うそきつそう)手し話」という「うそ」の定式化に到達した。「聞き手(うそきつそう)手し話」とは、式の→の方向で聞き手が『うそきつそう』と思い、反対の式の←の方向で話し手が『うそつきそう』と思うことをまとめたものである。Benjamin(1987)“The Pragmatics of Eristic"の枠組では、前者は聞き手のRevelatory Conditionであり、後者は話し手のIntentional Conditionになっている。「聞き手(うそきつそう)手し話」という「うそ」の定式化の第1の意義は「うそ」に聞き手と話し手が同時に係わっていることを表現していることである。聞き手と話し手のどちらか片方が欠けると、両方が欠けると同様に「うそ」が成立し得ない。第2の意義は、「うそ」について聞き手が話し手より劣ってはいないことを表現していることである。ただし、「話し手(うそつきそう)手き聞」という考え得るもう1つの「うそ」の定式化との関連性は将来の研究課題の1つであろう。やはり「聞き手(うそきつそう)手し話」という定式化の将来的研究課題の1つとして、聞き手が『うそきつそう』と思うことと話し手が『うそつきそう』と思うことが究極的に矛盾しないかどうかである。究極的には両者が矛盾するにしても、矛盾しない程度にこの定式化が有用かどうかさらに一層の考察に値しよう。萌芽的研究という面で、「聞き手(うそきつそう)手し話」という定式化が有する認知科学的研究に対する意味合いという問題点を各1点挙げたい。「聞き手(うそきつそう)手し話」をもう何段階か抽象化した「聞き手(......)手し話」というものが、言語習得に対して示唆的ということであり、聴力がないと言語習得が不可能ということと無関係であろうか。では第1番目の言語習得者はだれの言語を聞いたのかという言語起源の問題点の方は依然として解決を待っているままである。
ヒト胸腺腫上皮細胞の細胞生物学的解析と免疫機能の検討

分離培養法を用いて、56才女性胸腺腫症例より胸腺上皮様細胞の細胞株の樹立に成功し、クローン培養法により数種のクローン細胞を樹立した。クローン細胞はpolygonal typeの細胞株とspindle typeの細胞株に分類できた。In vitroでの増殖動態はPolygonal typeのダブリングタイムが1.3日であったのに対し、spindle typeで7.4日と両タイプで大きな相違がみられた。腫瘍細胞は容易にヌードマウス移植により腫瘤を形成し、病理組織像は原発腫瘍に類似していたが、リンパ球の浸潤像は認められなかった。フローサイトメーターを用いた細胞膜抗原の検討でE-cadherin、CEAが陽性であり、免疫組織染色においてもサイトケラチンが陽性であることから本細胞株は上皮由来と考えられた。電子顕微鏡的にもデズモゾーム、トノフィラメントが確認でき、ノーザンブロット法による遺伝子学的解析によってE-cadherin mRNAが確認された。次に本細胞株の免疫機能に及ぼす影響をin vitroとin vivoで検討した。In vitroでの免疫反応はマイクロプレートを用いた腫瘍細胞とリンパ球とのcoculture培養によるMLTR法によって解析した。刺激細胞として100Gy照射したThm-1細胞、肺癌細胞株及び培養マクロファージを用い、200u/mlIL2添加培地でallo PBLと1-4週間coculture培養し、増大したリンパ球のsubsetをフローサイトメーターによって解析した。その結果、Thm-1細胞とマクロファージとのcocultureによってCD8細胞の増大が認められた(16日間培養:58.7%、31日間培養:72.1%、IL2培地のみで31日間培養:1.3%)。ヌードマウスへの腫瘍細胞と骨髄細胞との混合移植により、spindle typeクローンで腫瘍周辺へのリンパ球の集積が認められた。今回樹立した胸腺腫上皮細胞株(Thm-1)は胸腺上皮の細胞生物学的な機能及び胸腺腫の免疫学的作用をin vitro,in vivoで検討するための良いモデルとなると考えられた。1)2系統のSublineをヌードマウスに移植して組織再構築腫瘍の増大曲線と組織像を検討し、原発腫瘍の組織像と比較検討した。Subline 1ではリンパ球の浸潤が殆ど見られず、細胞は比較的大きく多方形の未分化癌様の組織構築が見られた。ヌードマウス移植後の腫瘍増大は早くD.T.は9日であった。Subline 2では周辺にリンパ球の浸潤が見られ、細胞は比較的小型で、紡錘形であり、ヌードマウス移植腫瘍の増大は遅くD.T.は45日であった。しかし、原発腫瘍ではリンパ球が豊富に観察されたのに対し、Sublineのヌードマウス再構築腫瘍にはリンパ球の浸潤像は全体に少なかった。両Sublineを1:1に混合してヌードマウスに移植した場合、腫瘤の増大曲線は両Sublineの中間を示し、D.T.は15日であった。再構築腫瘍の組織像は腫瘤の中心部にSubline1の多方形組織が周辺部にSubline2の紡錘形組織が構成された。2)2系統のSublineの再構築腫瘍のホルマリン固定組織切片に対しケラチン免疫染色を行った。Subline 1ではケラチン染色陽性であったが、Subline 2でははっきりしなかった。3)2系統のSublineのヌードマウス移植腫瘍を電顕的に観察検討した。基底膜状に数は少ないがDesmosomeが観察された。

また、細胞内にミオフィラメント様のフィラメントが存在した細胞も観察された。4)2系統のSublineとヒト末梢血リンパ球及びヒト骨髄細胞のCo-culture培養を行った。Co-culture培養によりヒト末梢血リンパ球、ヒト骨髄細胞ともに旺盛な細胞増殖は観察されなかった。上清液中にIL-2の産生は見られなかった。1、2系統のsubline上清液中にIL2産生能は認められなかった。PBLとのco-culture培養下でも認められなかった。考察:平成6年度の検討でヌードマウス再構築腫瘍のリンパ球浸潤が軽微であり、co-culture培養によってもリンパ球の増殖は殆ど認められなかった。本年度のサイトカイン測定でも通常のco-cultureでは殆ど産生されなかった。そこで、2 sublineの細胞としての特徴を検討した。興味あることにsubline 2は培地交換無しに4ヶ月間も生存する特徴が見られ、IL2、Mφ添加co-culture法により著しいCTLの増大に成功した。機序は明確ではないが今後重点的に検討していきたい。平成6年度の検討では期待に反してヌードマウス再構築腫瘍のリンパ球侵潤が軽微であり、Co-culture培養によってもリンパ球の増殖は殆ど認められず、サイトカインの産生も認められないことにより、培養細胞が胸腺癌のように変化し本来の胸腺上皮細胞の生理活性機能を失っていることが示唆された。しかし、平成7年度のin vitroでの免疫機能の検討では、分離された2 sublineのうちin vivoで緩徐な腫癌増大を示し、腫瘍周辺にリンパ球の集積が認められたspindle typeのsublineにおいてIL2添加co-culture培養法によりCD8(+)リンパ球比率の増大が見られた。以上の研究成果に基づき、本年度は2系統のsublineのin vivoでの免疫機能の検討と、細胞膜マーカーの検討、そして核型分析などの遺伝子学的解析を行った。1)2系統のSublineをalloPBL及びallo骨髄細胞と混合してヌードマウスに移植し、組織再構築腫瘍の病理組織像を検討したところ、allo骨髄細胞とspindleタイプのsublineとの間で腫瘍周辺にリンパ球の集積が認められた。腫瘍組織内へのリンパ球の浸潤像はいずれの組合わせでも認められなかった。2)フローサイトメーターによる細胞膜マーカーの検討ではLeu2a(-),NCAM(-)であったが、E-cadherin(+),CEA(+),I-CAM(+)であった。3)2系統のSublineの染色体分析ではPolygonal typeの3Dクローンのモードは56、マーカー染色体4。Spindle typeの染色体モード62、マーカー染色体7と大きく相違していた。