hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
上皮組織の細胞分化にともなうCa^<2+>依存性細胞内情報伝達系の変化

【到達目標】上皮細胞本来の極性を保った標本を用いて,細胞周期の各段階と細胞の分化度に応じて,Ca^<2+>の動員と流入,消去系にどのような相違がみとめられるかを、細胞内カルシウム濃度([Ca^<2+>]_i変動を指標として解析する。【結果】・レーザー光照射によりfree radicalが上昇することが確かめられたので、できる限りレーザーパワーを減衰させる実験条件を模索した。・レーザー破損により修理に3ヶ月を有し、また、それに引続いて対物レンズの損壊が続いて、計6ヶ月の実験中断を余儀無くされたため、当初の実験予定が大幅にずれ込んだ。・細胞が重畳した人工皮膚を使って、実験をおこなった。形態的には、基底層有棘層へと連なる正常な構造を有していたが、正常な皮膚の細胞では見られるATPに対する反応が[Ca^<2+>]_i解析では観察されず、実験標本系として不向きであることが確かめられた。・膀胱粘膜上皮では、細胞内カルシウム濃度変動は認められなかった。・性周期に応じて、機能と形態が著変する卵管上皮のイメージングを試みたところ、[Ca^<2+>]_iが律動的変動を示す細胞が観察された。この律動的変動は性成熟度と関係があり、6-8週齢のハムスター卵管上皮細胞では見られたのに対し、1520週齢では、それが消えた。・ラットの鋤鼻器官(ヤコブソン器官)と嗅粘膜の上皮細胞のイメージングをおこなった。雄の鋤鼻器官上皮は、妊娠雌の尿をに対して反応し、[Ca^<2+>]_iが上昇した。この反応はPKC抑制剤で増強した。【まとめと展望】・不測のレーザー顕微鏡の事故と、予定していた標本(培養皮膚標本と膀胱移行上皮)の反応性の欠如により、当初の細胞周期と[Ca^<2+>]_i変動の関わりについて、なにかしらの結論を出すには至らなかった。大正標本を卵管上皮或いは鋤鼻上皮に変えて実験をおこなったところ、個体の成熟度や性に応じて、[Ca^<2+>]_i依存性の細胞内情報伝達系に変化がおきていることがわかった。【到達目標】上皮細胞本来の極性を保った標本を用いて,細胞周期の各段階と細胞の分化度に応じて,Ca^<2+>の動員と流入,消去系にどのような相違がみとめられるかを明らかにする。形態的には、基底層有棘層へと連なる正常な構造を有していたが、正常な皮膚の細胞では見られるATPに対する反応が観察されず、実験標本系として不向きであることが確かめられた。・膀胱粘膜上皮では、蛍光プローブ色素の負荷が被蓋細胞とそれ以下の細胞で著しく異なり、イメージング方法に工夫を加えねばならず、今のところまだ成功していない。

なお、ATPに対する反応を観察したが、まだ例数が少ない。・性周期に応じて、機能と形態が著変する卵管上皮のイメージングを試みたところ、細胞内カルシウム濃度が律動的変動を示す細胞が観察された。当初は線毛上皮細胞の線毛運動を反映しているのでは無いかと思ったが、運動とは連動していなかった。また、ATPに対して細胞内カルシウム濃度が上昇する現象がつかまえられた。【予定】・レーザー修理が完了し、インジェクション装置も稼動したので、実験対象を卵管上皮と膀胱粘膜上皮に絞って、当初の目標を達成したい。【到達目標】上皮細胞本来の極性を保った標本を用いて,細胞周期の各段階と細胞の分化度に応じて,Ca^<2+>の動員と流入,消去系にどのような相違がみとめられるかを明らかにする。【結果】・前年度はレーザー破損と対物レンズの損壊が続き実験中断を余儀無くされたが、今年度は顕微鏡装置の移設に伴う実験中断が生じた。・膀胱粘膜上皮標本ではATPに対する反応が認められなかった。・昨年度に引続き性周期に応じて、機能と形態が著変する卵管上皮のイメージングをおこなった。6-8週齢のハムスター卵管上皮細胞ではでは、自発的なカルシウム律動が見られたのに対し、1520週齢では、それが消えた。ATPによる[Ca^<2+>]_i上昇はP2X受容体を介することがわかった。またこの刺激で上昇したカルシウムの消退は、幼弱な方が早かった。以上から、個体の成熟度に応じて、卵管上皮細胞の[Ca^<2+>]_i変動機構が変化していることがわかった。・ラットの鋤鼻器官(ヤコブソン器官)と嗅粘膜の上皮細胞のイメージングをおこなった。上皮をシート状にした標本と、ビブラトームによる切片標本の2種類を作製したが、反応をつかまえることができたのは、切片標本であった。これらの上皮細胞はニューロンが変化したものであり、High K^+による脱分極で、[Ca^<2+>]_iの上昇が生じた。また、雄の鋤鼻器官上皮は、妊娠雌の尿を1000倍に薄めたものに対して反応し、[Ca^<2+>]_iが上昇した。この反応はPKC抑制剤で増強した。【まとめと展望】不測の事故により、当初の細胞周期と[Ca^<2+>]_i変動の関わりについて、なにかしらの結論を出すには至っていないが、個体の成熟度や性に応じて、[Ca^<2+>]_i依存性の細胞内情報伝達系に変化がおきていることがわかった。性ホルモンが、どのような関与をしているか、研究を進めることで、当初の到達目標へ達すると思われる。
自己識別機構の破綻をきたす免疫不全症の病態解明と原因遺伝子同定

T細胞、B細胞新生能のマーカーであるTREC,KRECを、微量の乾燥濾紙血からrealtimePCRで定量的に測定する技術を確立した。T細胞分化障害である重症複合型免疫不全症(SCID)ではTRECが陰性になり、B細胞分化障害である伴性劣性無γ-グロブリン血症(XLA)ではKRECが陰性になることを見出し、現行の新生児スクリーニングで採取される微量の乾燥濾紙血(ガスリー血)で、両疾患をスクリーニング出来ることも示した。ATM,DiGeorge症候群,Rac2欠損症などの原発性免疫不全症でもTREC/KRECが陰性になることを見出した。原因不明の免疫不全症であるCommon variable immunodeficiency(CVID)がTREC,KRECの発現パターンにより4群に分けられ、自己免疫疾患、悪性腫瘍の発生などの合併症の発生頻度、重症度と相関することを示した。PIDJを利用し、樹状細胞欠損症が28名存在することを見出し、Exome解析により、患者全エクソンの遺伝子配列を次世代シークエンサーで解読し変異を解析した。その結果6人で樹状細胞欠損症の原因遺伝が転写因子GATA2の異常であることを新規に見出した。さらに、患者T細胞はIL-4,IL-17産生が著明に低下していて、Th2,Th17細胞への分化にGATA2が必須であること、また、T細胞新生能のマーカーであるTRECが、解析可能であった4患者全員で低下し、T細胞の初期分化にGATA2が重要な役割を果たしていることを示した。以上、免疫系で自己認識に深く関与する抗原提示において重要な役割を果たしている樹状細胞が欠損している疾患を見出し、その原因遺伝子を同定した。本年度研究では、自己識別異常の破綻をきたした免疫不全症の病態解析と、その原因遺伝子同定に向け以下の研究を行ったので報告する。1.病態解析(1)クラススイッチ異常の解析Igクラススイッチが起きないことをvitroの解析で示した。(2)Sμ領域体細胞変異の解析(3)Sμ領域のDNA二重鎖切断(DSB)定量法の開発とその検討HIM4患者B細胞Sμ領域のDNA DSBを検討した結果、DSBは起きており、DNA鎖切断後修復が異常であると考えられた。以上の結果により、DNA切断後修復異常によるクラススイッチ再構成およびV(D)J再構成の異常が本疾患の病態であると考えられた。2.原因遺伝子の同定血族結婚の患者の家系内の発症状況から、本症は常染色体劣性遺伝と考えられた。そこで、SNP解析で患者whole genomeのhomozygosity mappingを行い候補遺伝子領域情報を得た。候補領域に含まれる遺伝子をのせたchipで患者genomic DNAを濃縮し、濃縮後のDNAを次世代シークエンサーでexome解析を行った。その結果、変異を持つ19遺伝子を同定した。発症していない家族でホモの変異を持つ遺伝子を除くこと、変異によりもたらされる機能解析を行うことで、原因遺伝子を同定する。
発生学的アプローチによる口蓋筋機能の解明と臨床応用

口蓋裂術後に残存する鼻咽腔閉鎖機能不全の原因を解明するために、京都大学大学院医学研究科付属先天異常標本解析センターでの胚子胎児標本の研究と、実際の口蓋裂の手術の際における小口蓋神経の神経刺激を行うことで、口蓋形成手術に重要な口蓋帆挙筋の神経支配についての新たな知見を得た。これまで手術の際に意識されてこなかった小口蓋神経を可能な場合は、温存することが、口蓋裂手術後の言語成績に良い影響を与える可能性が示唆された。小口蓋神経の上流にあたる神経は顔面神経と思われるが、今回の研究では明らかにはなっておらず、今後の研究が待たれる。ヒトの胚子胎児標本の口蓋筋群に対して、組織切片の観察を行い、口蓋帆挙筋の発生時期が、現在の胚子学における主流の分類方法であるカーネギーステージ分類でステージ21から発生することをつきとめた。実際の口蓋裂の手術における小口蓋神経の神経刺激の臨床研究は倫理委員会の申請が通り、何件か神経刺激を行い、筋電図の波形を得たことで、口蓋帆挙筋の新たな神経支配の知見を得た。臨床研究の倫理委員会の申請がスムーズに通り、学内学外共に協力体制がしっかりしていたことが原因と思われる。口蓋裂術後の嚥下時には問題ないが、会話時に鼻咽腔閉鎖機能不全となる症例が残存しており、その原因究明を行うための研究を計画した。具体的には、口蓋裂術後の言語成績にとって重要な鼻咽腔閉鎖機能における重要な役割を担っている口蓋帆挙筋の神経支配について着目したわけだが、ヒト胚子胎児標本の観察研究と、口蓋裂手術時に神経刺激を行うという臨床研究の両面からアプローチを行った。口蓋帆挙筋の神経支配については、従来から言われている咽頭神経叢支配に対して、小口蓋神経を介した顔面神経の支配を示唆する報告があり、後者は証明されてはいない。1歳頃に行われることの多い口蓋裂の手術時に小口蓋神経を同定し、神経刺激を行い筋電図が得られるかどうかを調べる臨床研究を行った。これまで13例神経刺激を行い、7例、口蓋筋群の筋電図が得られ、すべての症例ではないが、約半数近くの症例で筋電図が得られた。小口蓋神経はこれまで口蓋形成の手術の時には意識されることがなく、切断されることもあったと思われるが、温存する重要性が新たに発見されたといえる。口蓋形成の術後の言語成績は、患児が成長し、4歳5歳頃にまでならないと評価ができないため、数年後に言語成績をまとめて報告する予定である。全ての症例において筋電図が得られたわけではないために、口蓋帆挙筋の小口蓋神経の支配が証明されたとは言えないかもしれないが、これまでの動物実験や死体研究よりも強くその関与の可能性が示されたといえる。掲載された論文は症例報告(case report)のため、口蓋裂の手術における臨床研究をさらにすすめ、口蓋裂の術後の言語成績をまとめ、学会報告、論文(原著論文)作成を行う。医歯薬学解析用のソフトや解析用のパソコンは購入せずに、研究室に既にあるものを使ったため、その分の費用が少なくなっていると思われる。解析のスピードを早める場合に、解析用のパソコンやソフトを購入し、臨床研究に有用な手術器具の購入などを行う。
スポーツ・スポンサーシップが企業価値に与える影響についての研究

本研究では、スポーツ・スポンサーシップが企業価値に与える影響を研究する。そのため、まず、スポーツ・スポンサーシップが、ライバル企業に与える影響について分析する。具体的には、株価を企業価値の代理変数として、スポンサーシップのアナウンスメント日における株価反応を推定する。次に、国際大会で日本代表となった個別選手の競技成績がスポンサー企業の株価に与える影響について分析するため、競技の結果が出た日の株価反応を推定する。さらに、こうして推定した株価反応が、スポンサー対象とスポンサー企業の類似性や、契約期間の長さ等、どのような要因によって異なるのかを、重回帰分析を用いて推定する。
表現型が雌雄差を示す長鎖ノンコーディング RNAノックアウトマウスの解析

ゲノムプロジェクトの成果から、「ゲノム上のがらくた」と思われてきた領域には、タンパク質をコードしないnon-coding RNA (ncRNA)が多量に存在することが分かってきた(Kapranov P、Science, 2007)。その中でmiRNAを代表とする小さなRNAの機能解析は進んでいるが、200塩基以上の長いncRNA(long non-coding RNA, lncRNA)は、個体レベルで機能が明らかになった例は僅かであり、その生理的な役割を明らかにすることが求められている。我々が発見したFat60/Ftx lncRNAの個体での機能を解析するためノックアウトマウスを作製したところ、一部個体で、眼の発生に異常を示すマウスが出現することを明らかにした。更に興味深いことに、表現型は性差を示すことが分かった。異常は雌KOマウスで見られるが、雄では異常は殆ど見られない。また、このような異常は同腹の野生型の個体では見られない。また、異なるESラインから作製したKOマウスにも同様の異常が見られたことから、表現型はlncRNAをKOしたことに由来すると想定される。KO胎仔の形態異常はが「どの細胞」で「いつ」起こるか特定する目的で、胎仔期を遡り、発生の各ステージでの組織切片の詳細な解析を行った。異常は目の発生の初期段階から、観察され表現型の重篤度はばらつきを呈する。最も多い表現型は虹彩欠損が原因でおこる眼杯裂閉鎖不全が観察された。これはKOマウスがヒト小(無)眼球症と酷似した表現型を示すことを示している。更に、体系的、網羅的遺伝子発現解析を行うことにより、表現型の異常は雌の発生に必須なX染色体の不活性化の異常であることを明らかにした(Hosoi Nat Commun 2018)。この成果はlncRNAの機能を個体及び分子レベルで理解する大きな一歩であると考える。成果は論文にもまとまり、これまで原因不明であった性差を示す現象を、非常に分かりやすく説明することに成功した。lncRNAの機能解析を進め、エピジェネティクス制御との関連を分子レベルで理解する。マウスが予定より増えなかったため、飼育費の一部を翌年に繰り越し。
金属水素透過膜の水素脆化in-situ測定とニオブ系合金膜の脆化機構解明

本研究は、金属水素透過膜の水素脆化in-situ測定法を確立して、金属膜中の固溶水素が及ぼす機械的性質への影響を明らかにし、水素差圧に耐え得る新しい金属膜の設計指針の提案を目指したものである。平成17年度は「金属水素透過膜の水素脆化in-situ測定を行うための小型パンチ(SP)試験治具を備えた実験装置を設計・製作する」ことを目標とし、また、平成18年度は「固溶水素濃度と膜強度との関係、水素や水素化物の熱力学的性質が機械的特性に及ぼす影響を明らかにし、水素透過性能と強度を併せ持つ金属膜の設計指針を提案する」ことを目標として研究を展開した。その結果、Sievert's法によるPCT曲線上で固溶水素濃度と膜強度評価との関連づけを行い、従来の水素雰囲気下における強度特性評価とは異なった視点からの、固溶水素濃度に依存したNbの脆化挙動の変化を明らかにした。加えて、水素の放出にともなう約10%の格子収縮が、純ニオブ水素透過膜の変形および破壊を引き起こす原因となっていることや、in-situスモールパンチ試験装置を用いて、水素透過膜の水素脆性を定量的に評価する方法を確立した。さらに次のような新たな知見も得られた。純Nbは実用水素圧力条件下では多量の水素を固溶して激しく脆化するが、固溶水素濃度を低減させることにより耐水素脆性が改善出来る。また、膜の両側で高い水素濃度差ΔCが得られるように合金設計を行えば、高い水素透過能と耐水素脆性を兼ね備えたNb系水素透過膜合金が得られる。例えば、Nb-Pd合金について、固溶水素量と耐水素脆性に及ぼすPdの添加効果を調べた結果、Pd量の増加に伴い固溶水素量が減少し、さらに、耐水素脆性の改善に寄与することが分かった。すなわち、水素透過性能と強度を併せ持つ金属膜の設計指針の提案に向けた足掛かりとなる結果が得られた。本研究は、非パラジウム(Pd)系金属水素透過膜の水素脆化in-situ測定法を確立し、これをニオブ(Nb)基合金膜脆化機構解析に適用して水素差圧に耐え得る新しい組織・構造を提案することを目的としたものである。そして平成17年度は「金属水素透過膜の水素脆化in-situ測定を行うための小型パンチ(SP)試験治具を備えた実験装置を設計・製作する」ことを主目標として研究を展開した。具体的な研究経過ならびに得られた成果は、以下の通りである。(1)水素脆化in-situ測定に適した配管システムおよび試験治具の概念設計を行った。(2)膜強度や延性の評価に適した小型パンチ(SP)試験装置、水素配管系の詳細設計を行い、バルブ・フィッティング等の配管部品を用いて、配管システムとPCデータ収集システムを製作した。(3)膜前後の水素差圧発生機構および温度調節機構を備えたSP試験治具を製作し、検証・評価・改良を行った。(4)表面にPdを被覆した純NbおよびNb中にPdをドープした合金を作製し、水素透過能測定ならびに膜強度評価を行った。そしてSievert's法で求めた固溶水素濃度とこれら特性との関連づけを行い、従来の水素雰囲気下における強度特性評価とは全く異なった視点からの、固溶水素濃度に依存したNbの脆化挙動の変化を明らかにした。

また、これらの研究過程で得られた新規の知見として、(1)水素の放出にともなう約10%程度の格子収縮が、純ニオブ水素透過膜の変形および破壊を引き起こす原因となっていること、(2)in-situスモールパンチ試験装置を用いて、水素透過膜の水素脆性を定量的に評価することができること、などが得られた。次年度ではさらに、固溶水素濃度と膜強度との関係、水素透過中および透過直後の膜延性変化、水素や水素化物の熱力学的性質が機械的特性に及ぼす影響などについての研究への展開を目指している。本研究は、金属水素透過膜の水素脆化in-situ測定法を確立して、金属膜中の固溶水素が及ぼす機械的性質への影響を明らかにし、水素差圧に耐え得る新しい金属膜の設計指針の提案を目指したものである。平成18年度は「固溶水素濃度と膜強度との関係、水素や水素化物の熱力学的性質が機械的特性に及ぼす影響を明らかにし、水素透過性能と強度を併せ持つ金属膜の設計指針を提案する」ことを目標にして研究を展開した。得られた知見を以下に要約する。1.開発したin-situ SP試験装置を用いてパラジウム(Pd)被覆した純ニオブ(Nb)の変形・破壊挙動を調べた結果、673Kにおける延性-脆性遷移境界を示す固溶水素濃度H/Nbは0.3付近にあり、従来のマトリクス中への水素の不均一固溶状態で評価されたNbの延性-へき開破壊境界の水素濃度依存性の報告とは全く異なることを示した。2.純Nbは実用水素圧力条件下では多量の水素を固溶して激しく脆化するが、固溶水素濃度を低減させることで耐水素脆性が改善出来ることを示した。また、膜の両側で高い水素濃度差ΔCが得られるように合金設計を行えば、高い水素透過能と耐水素脆性を兼ね備えたNb系水素透過膜合金が得られることを明らかにした。3.Nb-H固溶体(濃度E/M=0.251.0)およびNbH水素化物の全エネルギー計算を行い、水素の溶解エンタルピーの濃度依存性を算出した。また、構造最適化計算より得られた、原子間距離の水素濃度依存性を検討した。4.Nb-Pd合金について、固溶水素量と耐水素脆性に及ぼすPdの添加効果を調べた。PCT測定を行った結果、Pd量の増加に伴い固溶水素量が減少することを確認した。さらに、水素雰囲気中ではNd-15mol%Pd合金のSP吸収エネルギーは純Nbよりも高くなり、Pd添加によって耐水素脆性が改善することを明らかにした。以上のように、水素透過性能と強度を併せ持つ金属膜の設計指針の提案に向けた足掛かりとなる結果が得られた。
肝細胞癌における血管新生因子アペリンの機能解析と新規分子標的治療への応用

肝細胞癌(HCC)の進展における血管新生因子アペリン-APJ経路の役割を明らかにするために本研究を行った。HCC臨床検体におけるアペリン-APJのタンパク発現を免疫組織染色で検討した。アペリンはHCC細胞、受容体APJは腫瘍血管の周皮細胞に高発現、アペリン-APJは中低分化HCCで高発現した。HCC培養細胞株はアペリン投与により変化はなかったが、マウス肝癌皮下腫瘍モデルではAPJアンタゴニスト投与により腫瘍増大が抑制された。以上よりアペリン-APJはHCCの血管新生を促進し腫瘍の進展に寄与していることが分かった。アペリン-APJ経路はHCCに対する新たな治療標的となりうる。1.アペリン臨床検体での発現解析HCC切除標本においてアペリンタンパクは非癌部と比較して癌部で有意に高発現しており、CD34陽性の腫瘍新生血管の周皮細胞にアペリンの受容体であるAPJが発現していることを確認した。腫瘍新生血管の多い腫瘍ではアペリンが有意に相関して高発現しており、CD34陽性血管とAPJ陽性血管は肝細胞癌の組織学的分化度が低下するにつれて増加していた。2.アペリンと血管新生関連因子の発現解析HCC切除症例において、アぺリンと、既知の血管新生因子であるアンギオポエチン-1、-2、VEGFの各分子をリアルタイムPCR法で発現定量解析を行った。アペリンは非癌部と比較して癌部でmRNA発現が有意に発現が亢進しており、癌における血管新生に関わっている事が分かった。アペリン高発現群ではVEGF、アンギオポエチン-2の発現が亢進しており、各血管新生因子が相互的に機能していることが示唆された。3.肝細胞癌細胞株を用いたアペリンの機能解析ヒト肝細胞癌(HCC)細胞株(Huh7, PLC/PRF/5)を用いてアペリンの機能解析を行った。血管新生におけるアペリンの機能解析の目的にて、低酸素状態で細胞培養を行うとアペリンの発現が有意に上昇することを確認した。次に、HCC培養細胞にアペリンおよびアペリン阻害剤F13Aを投与した。Huh7、PLC/PRF/5、MH134(マウスHCC細胞株)にアペリンを投与したところ細胞の増殖活性に変化は見られなかった。一方、CASMC細胞(血管平滑筋細胞株)ではアペリンの投与により細胞増殖活性が上昇し、かつアペリン阻害剤(F13A)にて下がることが確認された。1.肝細胞癌臨床検体におけるアぺリン・APJの発現解析肝細胞癌(HCC)におけるアぺリン・APJの発現の有無および局在を同定するために免疫組織学的検討を行った。アペリンおよびその受容体APJ、さらに腫瘍血管の評価のためにCD34による評価を90症例にて行った。HCC切除標本においてアペリンは非癌部と比較して癌部で有意に高発現していることがわかった。CD34陽性の腫瘍新生血管の周皮細胞にアペリンの受容体であるAPJが発現していることを確認した。腫瘍新生血管の多い腫瘍ではアペリンが有意に相関して高発現していることがわかった。組織学的因子との相関を検討したところ、CD34陽性血管とAPJ陽性血管は肝細胞癌の組織学的分化度が低下するにつれて増加することがわかった。2.リアルタイムPCR法を用いた血管新生関連因子の発現解析HCC90症例において、アぺリン、アンギオポエチン-1、-2、VEGFの各分子をリアルタイムPCR法を用いて発現の定量的解析を行った。HCC切除標本よりRNAを抽出しcDNAライブラリーを作成した。各血管新生因子の発現量を解析した。各臨床病理学的因子とアペリン発現の相関を解析したところ、組織学的分化度が低分化になるにつれ発現が増加していることがわかった。またアペリン高発現群ではVEGF、アンギオポエチン-2の発現が亢進しており、各血管新生因子が相互的に機能していることが示唆された。<マウス肝細胞癌皮下モデルを用いた血管新生阻害による抗腫瘍効果の検討>アペリンーAPJに対する分子標的治療の開発のために肝細胞癌(HCC)の皮下腫瘍モデルを作成した。C3Hマウスの皮下にHCC細胞株MH134を注入した。アペリン受容体APJのアンタゴニストF13Aをマウスに投与するとコントロールマウスと比較して腫瘍発育が有意に抑制された。腫瘍発育抑制は投与7日目から見られ、観察最終日(28日目)まで持続した。

皮下腫瘍作成後14日目に腫瘍組織を摘出し、HE染色を行い組織学を観察した。腫瘍の大きさはF13A治療マウスでコントロールマウスと比較して有意に縮小していたが、壊死領域の広さに差はなかった。CD34による免疫染色にてmicro vessel density(腫瘍内血管密度)を測定したところ、コントロールマウスと比較して有意にF13A治療マウスで血管密度が低かった。またcaldesmonによる免疫染色にてarterial vessel density (腫瘍内動脈血管密度)を測定したところ、同様にコントロールマウスと比較して有意にF13A治療マウスで動脈血管密度が低かった。アペリンは血管新生因子としてだけでなく、血管拡張因子としても作用することがわかっているため、10μm以上の腫瘍内動脈の数を測定した。F13A治療マウスでは10μm以上の動脈の数が有意に減少していた。F13A治療マウスはコントロールマウスと比較して体重減少や血液生化学検査値異常はみられず、治療による明らかな有害事象・副作用は見られなかった。これらの結果より、F13Aはアペリン-APJによる血管新生・血管拡張作用を抑制することによる抗腫瘍効果をもたらすことが明らかになった。消化器外科、肝胆膵外科本研究の目的は、肝細胞癌の発生・進展・再発における血管新生因子アペリンとその受容体APJの発現および機能解析を行い、分子標的治療のターゲットとなりうる可能性について検討することである。昨年度はヒト肝細胞癌臨床検体におけるアペリン、APJの定量的および局在的異常発現の同定と臨床病理学的因子との関連を明らかにした。今年度は主にin vitroの解析において、アペリンが肝癌細胞および血管周皮細胞に及ぼす影響について解析することができた。よって研究計画はおおむね順調に進展していると自己点検による評価をした。本研究の目的は、肝細胞癌の発生・進展・再発における血管新生因子アペリンとその受容体APJの発現および機能解析を行い、分子標的治療のターゲットとなりうる可能性について検討することである。本年度はヒト肝細胞癌臨床検体におけるアペリン、APJの定量的および局在的異常発現の同定と臨床病理学的因子との関連を明らかにすることを目的としていた。HCC切除標本の詳細な免疫組織学的解析と、遺伝子発現レベルでの血管新生因子の解析を行うことができた。今年度の研究結果から、HCCにおいてアペリンによる腫瘍血管新生が腫瘍学的悪性度に関与していることが確認された。今後はアペリン経路の阻害が新たな分子標的治療に繋がるかどうかについて解析をすすめる予定である。in vivo解析としてマウス肝癌xenograftモデルを作成し、肝癌の血管新生および腫瘍増殖におけるアペリン/APJの機能解析をおよび阻害剤による腫瘍抑制実験を行う。さらには抗VEGF薬や抗アンジオポイエチン剤との併用による相乗効果についても検討する予定である。今年度の研究結果から、HCCにおいてアペリンによる腫瘍血管新生が腫瘍学的悪性度に関与していることが予想された。次年度はさらに、アペリン、APJの機能解析を進める予定である。具体的には、既にアペリン・アンジオポエチン・VEGFを含めた血管新生因子の発現状態を確認している肝癌培養細胞株に血管内皮細胞培養株を共
B2型規則構造基複相合金のバリアント選択性とその利用による材料協調設計

B2型規則構造を有するNiAl(β相)は、高融点であり、耐酸化性に優れていることから、高温耐熱材料として期待されている。さらに、β相の粒界にNi_3Al(γ'相、L1_2型規則構造)を複相化することにより、β相の粒界脆性破壊の抑制が可能となり、強度はβ相に、低温延性はγ'相に委ねることで、力学特性の相互補完による材料協調設計の可能性が期待される。本研究では、NiAl基複相合金を中心に、B2型規則構造基複相合金の組織制御と力学特性、相変態との関り合いを調べた。まず、母相/析出相間での異相界面における結晶学的特徴、特に異相界面性格と力学特性との相関について系統的に研究し、さらに、析出相とそのバリアント選択性を考慮しての集合組織制御を行い、力学特性改善および向上のための異相界面制御の可能性を探索した。その結果、まず、粒界析出相におけるバリアント選択則を考慮し、結晶方位制御したβ単相双結晶を作製することにより、β粒界に析出するfilm状γ'相のバリアントについて、隣接する一方のβ相とKurdjumov-Sachs(K-S)方位関係を満足しつつ、もう一方のβ相との間でK-S方位関係からのずれ角を制御することに成功した。このような異相界面制御した(β/γ')2相結晶を用いることにより、β粒界に析出するfilm状γ'相について、(β/γ')異相界面におけるK-S方位関係からのずれが、室温における破壊あるいは高温における界面すべりに強い影響を及ぼすことが系統的に明らかとなった。さらに、室温における異相界面破壊について言えば、改善策として試みた集合組織および異相界面制御により、(β/γ')異相界面における整合性の向上が達成され、(β/γ')異相界面における結晶学的特徴に注目することにより、NiAl基複相合金の力学特性改善への新たな指針を見い出した。本研究より得られた知見を広くB2型規則構造基複相合金に適用するだけでなく、複相化による材料協調設計の一助となることが大いに期待される。
正常脳・傷害脳のニューロブラストの移動におけるSlitの機能の解析

成体脳の脳室下帯で産生された新生ニューロンは、非侵襲時には嗅球へ、また脳傷害時には傷害部に移動し成熟する。このとき新生ニューロンは、アストロサイトが密生した経路を高速で移動するが、その相互作用メカニズムは不明であった。我々は本研究で、成体脳を移動する新生ニューロンが分泌性タンパク質Slit1の発現により、移動経路に密生しているアストロサイトの形態・分布を制御し、自身の高速移動を可能にする移動経路の形成・維持を行っていることを明らかにした。この機構は、傷害部への新生ニューロンの移動にも関与していることが示唆された。脳室下帯では、成体においてもニューロンの産生が持続しており、新生ニューロンは、RMSと呼ばれる経路を、アストロサイトに被覆され鎖状に連なって嗅球までの長距離を高速に移動する。Slit- Roboシグナルは、脳形成過程において細胞移動・軸索伸長の忌避性ガイダンスシグナルとして知られているが、成体における機能は分かってない。我々はこれまでに、RMSを移動中の新生ニューロンがSlitを、また新生ニューロン自身とその周囲のアストロサイトが受容体Roboを発現していることを明らかにしてきた。新生ニューロンの移動におけるSlit- Roboシグナルの機能を解明するため、本年度は以下の2点について実験を行った。1)Slitノックアウト、(KO)マウスのRMSにおける新生ニューロンの挙動の解析RMSを含む脳スライスの培養を行い、RMS内を移動する新生ニューロンの挙動をタイムラプス撮影にて記録し解析した。Slit KOマウスでは、RMSにおける新生ニューロンの移動が不規則になり、速度が約40%低下していた。また、Slit KOマウス・野生型マウスの新生ニューロンを相互のRMSに移植する実験から、Slitは新生ニューロンの移動制御において、細胞自律的・非自律的な両側面で関与していることを明らかにした。2)培養アストロサイトにおけるSlitの機能の解析脳室下帯・RMSから分離・培養したアストロサイトと、Slit発現細胞株との共培養実験により、Slitはこのアストロサイトの分布を反発性に制御していることを明らかにした。成体脳で産生されたニューロブラストが発現するSlitタンパク質の機能について、以下の解析を行った。脳梗塞巣へのニューロブラストの移動におけるSlitの役割の解析線条体梗塞モデルマウスでは、数週後にニューロブラストが脳室下帯から梗塞巣へと移動するが、Slit遺伝子欠損(Slit KO)マウスではその移動が障害される。そこでSlit受容体Roboの梗塞脳での発現を詳細に解析したところ、傷害直後の線条体で活性化・増生する反応性アストロサイトがRobo2・Robo3を強く発現していることが明らかになった。ニューロブラストは、増生した反応性アストロサイトの突起に沿うように梗塞巣へと移動するが、Slit KOマウスでは新生ニューロンとアストロサイトは絡み合うように異常な細胞塊を形成しており、細胞間相互作用の障害が示唆された。嗅球の形成におけるSlitの役割の解析生理的状況下では、ニューロブラストはアストロサイトの形成する経路を経て嗅球へと移動して介在ニューロンに分化する。この移動過程の障害は、嗅球の低形成を惹起する。培養アストロサイトとニューロブラストの相互作用のタイムラプス撮影による解析から、ニューロブラストはアストロサイト上を移動する際にアストロサイト膜の形態を変化させるが、Slit KO細胞ではその作用が有意に低下していることを見出した。また、Slit KO細胞は、単独での移動には明らかな障害は見られないが、アストロサイトの単層培養上の移動のみ有意に障害されていることが明らかになった。これらの結果から、ニューロブラストはSlitを介するアストロサイトとの相互作用により、その移動経路の形成・維持に積極的に関与している可能性が示唆された。成体脳の脳室下帯で産生された新生ニューロンは、長距離を高速度で嗅球へと移動する。これらは脳傷害時には傷害部に移動し成熟する。新生ニューロンは、アストロサイトが密生した経路を移動するが、その相互作用の制御メカニズムは不明である。我々は本研空において、1)新生ニューロンが分泌するタンパク質Slit1がその移動に重要であること、2)移動経路のアストロサイトがSlit受容体であるRoboを発現していること、3)培養実験において新生ニューロン由来Slit1がアストロサイトのRoboを介してその形態を変化させることを明らかにした。本年度は、新生ニューロンと移動経路に存在するアストロサイトの相互関係を、生体組織を用いて解析した。新生ニューロンの移動経路を連続組織として切り出して免疫染色を行い立体構造を詳細に解析したところ、新生ニューロンの細胞塊に接したアストロサイトの細胞体は、培養実験で得られた所見と同様の陥凹を作っていた。

また、新生ニューロン、アストロサイトがそれぞれ別の蛍光色素で標識される遺伝子改変マウスを用いて、同部位の生組織のタイムラプス撮影を行ったところ、移動する新生ニューロンと接したアストロサイトの細胞体がダイナミックに形態を変化させていく様子が観察された。次に、増殖抑制剤を持続投与して新生ニューロンの産生を停止させ、この経路から新生ニューロンを除去したところ、周囲のアストロサイトの規則的な配列や突起の伸長方向は著しく乱れたが、増殖抑制剤の投与を中止して新生ニューロンの産生を再開させると、これらの変化は消失した。これらの結果から、生体組織において、この経路に存在するアストロサイトは移動していく新生ニューロンによって形態や配列を制御されていることが示唆された。この機構は、アストロサイトが増生した傷害組織におけるニューロン再生過程おいては更に重要であると考えられる。
コンピテンシー・モデルに基づく看護職者のための倫理学習プログラムの開発と評価

H29年度の報告書に概要を示した通り、明らかになった内容を「看護実践における倫理的コンピテンシーの抽出」として第22回日本看護管理学会で発表した。次年度はこの結果を踏まえ、「倫理的ケアのコンピテンシーの統計学的検討(第1報)ーラダーの構成可能性の検証ー」として発表予定である。発表内容の概要は以下のとおりである。A市(地方中核都市)の中核病院の一つであるB病院に勤務する全看護職員(保健師・助産師・看護師)486名を対象とした無記名自記式質問紙による横断研究を実施した。質問紙は年齢、性別、看護職としての経験年数、最終学歴、看護倫理に関する学習経験の有無、所属病棟において身体拘束低減の取り組みをしているかの認識、からなる基本項目、倫理的ケアのコンピテンシー(22項目、5段階リッカート)等から構成された。倫理的ケアのコンピテンシーは4つのコア・コンピテンシーを有しており、それらは「善いケアに関する感性・価値を表現する」「より善いケアとは何かを考えながら行為する」「より善いケアを提供するために間接効果をもたらす」そして「より善いケアの学習に向けて行動する」である。コンピテンシーの合計得点(コンピテンシー得点)から算出した平均点の高低によって難易度が判断された。また基本項目との相関係数を算出した。392名(81%)から欠損の無い有効回答を得た。22項目のコンピテンシーは、最も平均得点が高かった(3.77点)「患者・家族が大切なことを話せる関係性を作る」から最も平均得点が低かった(2.82点)「実践の中から倫理的な研究課題を発見・発信する」の間に分布しており、この2項目間には有意差が認められた(p<0.001)。コンピテンシー得点は、年齢、経験年数、学習経験、取り組みの認識と、有意に正の相関を示した(γ=0.220.32)。以上より、ラダーを構成できる可能性が示唆された。一年延長の措置をとったので分析が進み、次年度は最終的な目標達成に至る見込みである。コンピテンシー・モデルを基にして作成した教育プログラムを実行したのでその評価を進める。具体的内容:看護職者の倫理的コンピテンシー・モデル原案を作成するため、職場の上司によってハイパフォーマーと評価される看護職者20名を対象に、Behavioral Event Interviewに手法に倣ってインタビュー調査を行い、質的内容分析を実施した。すべてのインタビューの内容を逐語録にし、「看護実践において倫理的な行動とはどのようなことか」という研究の問に答え得る行動を短文にし、これをコードとして抜き出し、抽象化する作業を実施中である。抽象化にあたっては、厳密性を確保するため、看護管理者を含む複数の看護研究者によってコードとサブカテゴリー、サブカテゴリーとカテゴリーの単純一致率を計算し、文言を修正しながらデルファイ法によって意見を集約し、精度を高めた。このさい、意味内容が元のデータと齟齬を生じないよう、生データに戻りつつ確認作業を行った。また、先駆的なコンピテンシーの先行研究との内容的な一致性も確認し、広く一般的な職業的実践力と乖離しないことも検証している。以上、現在進行中である。意義:本研究の目的は看護職者の倫理的コンピテンシーを明らかにすることである。現にハイパフォーマーとして実践を重ねている看護師が実際にどのような行動をとっているかという、極めて現実的かつ具体的な情報源から得た情報を基にするため、これを実践に活かすさいに使いやすいツールとなるはずである。重要性:本研究の最終目的は明らかになった看護職者の倫理的コンピテンシーを基に、その能力開発の教育プログラムを開発したり、倫理的実践能力の尺度を開発することである。そのための基ともなる最も重要な研究となっている。他施設の倫理審査が想定以上に時間がかかり、インタビューの時期がずれ込んだため。具体的内容:看護職者の倫理的コンピテンシー・モデル原案を作成するため、職場の上司によってハイパフォーマーと評価される看護職者20名を対象に、Behavioral Event Interviewの手法に倣ってインタビュー調査を行い、質的内容分析を実施する。全てのインタビューの内容を逐語録にし、「看護実践において倫理的に行動するとはどのようなことか」という研究の問いに答えうる行動を短文にし、これをコードとして抜き出し、類似性と相違性によって分類し、抽象化名称を付与する作業が終盤にかかっている。抽象化にあたっては、厳密性を確保するため、看護管理者を含む複数の看護研究社によって単純一致率を計算し、文言を修正しながら制度を高めている。このさい、意味内容が元のデータと齟齬を生じないよう、生データに戻りつつ確認作業を行っている。また先駆的なコンピテンシー研究との内容的な一致も確認し、広く一般的なコンピテンシーと乖離しないことも検証していく。現にハイパフォーマーとして実践を重ねている看護師が実際にどのような行動をとっているかという、きわめて現実的かつ具体的な情報源から得た情報をもとにするため、これを実践に活かす際に使いやすいツールとなるはずである。明らかとなったコンピテンシーは、評価ツールにも、学習プログラムの構築にも役立つ。

重要性:本研究の最終目的は、明らかになった看護職者の倫理的コンピテンシーを基に、その能力開発の教育プログラムを開発したり、倫理的実践力の尺度を開発することである。昨今あらためて取り上げられることの多い臨床現場での倫理的課題を解決するために必要な研究である。昨年度、他施設の倫理審査が想定以上に時間がかかったことによってインタビューの時期がずれこんだことによる開始遅延が生じ、その影響が残っている。明らかにした内容を日本看護管理学会において「看護実践における倫理的コンピテンシーの抽出」として発表予定である。行動結果面接(Behavioral Event Interview, BEI)の手法に倣い、倫理的課題への取り組みに関するハイパフォーマーとして職場の長の推薦が得られた看護職者、または高度実践看護師を対象者とし、機縁法により連絡をとった。同意の得られた14名にBEIを行い、語られた体験を同意の後録音し、質的記述的に分析した。録音データをテキスト化し、文脈を損なわないように設定した記述単位に基づいてテキストを取り出してコードとし、類似性と相違性による分類と集合体へのネーミングを経て抽象化した。研究者間の議論により厳密性を確保した。14名から得た903分の録音データを分析した結果、498コード、22サブカテゴリ、4コアカテゴリが抽出された。以下、【】をコアカテゴリ、[]をサブカテゴリとして示す。【善いケアに関する感性・価値を表現する】は[自分の持っている価値観(看護観)を表現できる]など3サブカテゴリから、【より善いケアは何かを思考しながら実行する】は[患者・家族が大切なことを話せる関係性を作る]など9サブカテゴリから、【より善いケアを提供するために間接効果をもたらす】は[善いケアの不全に対して葛藤・違和感を持つ]など7サブカテゴリから、【より善いケアの学習に向けて行動する】は[学習の機会に善いケアの実践への気づきを得る]など3サブカテゴリから構成されていた。得られた結果をSpencerらが示したコンピテンシー・ディクショナリーと照合し、コンピテンシーとして用いることの論理的妥当性を得た。14名のハイパフォーマーを対象にBEIを実施し、得られた結果より看護実践における倫理的コンピテンシーを明らかにした。今後これらのコンピテンシーから評価尺度を作成する予定である。同意の得られた14名を対象者としてインタビューを実施した結果、予想以上のボリュームのデータが得られ、分析に時間を要した。現在、明らかとなったコンピテンシー・モデルを基にして教育プラグラムを構築中である。H29年度の報告書に概要を示した通り、明らかになった内容を「看護実践における倫理的コンピテンシーの抽出」として第22回日本看護管理学会で発表した。次年度はこの結果を踏まえ、「倫理的ケアのコンピテンシーの統計学的検討(第1報)ーラダーの構成可能性の検証ー」として発表予定である。発表内容の概要は以下のとおりである。A市(地方中核都市)の中核病院の一つであるB病院に勤務する全看護職員(保健師・助産師・看護師)486名を対象とした無記名自記式質問紙による横断研究を実施した。質問紙は年齢、性別、看護職としての経験年数、最終学歴、看護倫理に関する学習経験の有無、所属病棟において身体拘束低減の取り組みをしているかの認識、からなる基本項目、倫理的ケアのコンピテンシー(22項目、5段階リッカート)等から構成された。
環境調和型実践的不斉合成法の開発と創薬への展開

現在筆者は、エナミド、またはエンカルバメートを求核剤として用いる反応を検討した。エナミンが反応性の高い求核剤として用いられている一方で、エナミド、エンカルバメートを求核剤として用いる例はこれまでほとんど知られていない。前年度において私は、エンカルバメートのN-アシルイミノエステルへの触媒的不斉付加反応を報告している。今年度は、求電子剤としてエチルグリオキシレートを用いる反応を検討した。エンカルバメートはアセトフェノン由来のものを用い、種々の金属錯体触媒存在下、反応を試みたところ、一価の銅塩とシクロヘキサンジアミン由来のリガンドから形成される錯体を用いた時に、非常に高いエナンチオ選択性が発現することを見い出した。N-アシルイミノエステルへの付加反応の際良好に機能した二価の銅塩とジアミンリガンドから調製される錯体を用いても中程度の選択性にとどまった。さらに、プロピオフェノン由来のエンカルバメートを用いると、エステルのβ位にもさらに不斉点が形成されるが、その時のジアステレオ選択性が非常に高いことも分かった。ジアステレオ選択性は基質特異的であり、E体のエンカルバメートからはanti体の、Z体のエンカルバメートからはsyn体の生成物が得られることを見い出した。また、それぞれの主生成物のエナンチオ選択性は98%eeと非常に高いものだった。本反応の反応機構は、環状遷移状態を経由する[4+2]型反応であると考えられ、エンカーバメートの窒素原子上のプロトンがアルデヒドのカルボニル基と相互作用することで反応の促進、さらには遷移状態の固定による選択性の向上に寄与していると考えている。今後、さらに他の求電子剤を用いることでエンカーバメートの求核剤としての可能性を広げていく予定である。エナミドは、求電子剤として多く用いられている基質であるが、求核剤としてはその反応性の低さのためほとんど用いられている例がない。私は今年度エナミドの触媒的不斉付加反応について研究を行った。求電子剤としては比較的反応性の高いエチルグリオキシレート由来のイミンを用い、種々のルイス酸触媒存在下エナミドの付加反応を検討した。その結果、二価の銅塩とキラルジアミンリガンドから調製される錯体を触媒として用いると、高い収率、高いエナンチオ選択性で反応が進行することを見い出した。この反応においての特徴は、初期生成物が比較的反応性の高いアシルイミン体であり、さらに還元操作を行い、対応するアミド体へと容易に導くことができる点が挙げられる。また、種々の芳香族ケトン由来のエナミドや脂肪族ケトン由来のエナミドを用いた場合にも反応は円滑に進行し、広い基質一般性を示すことができた。さらに、用いた触媒についても詳しい検討を行い、ジアミンリガンドと銅が2対1の比で構成される錯体のX線結晶構造解析に成功した。このことからエナンチオ選択性の発現機構を解明することができた。さらに現在、イミンの代わりにアルデヒド、特にエチルグリオキシレートを用いてエナミドの付加反応を検討している。その中で、イミンを用いた際に有効であった銅触媒がこの反応においては有効に働かないこと、一価の銅塩とジイミンリガンドからなる錯体が有効に働き、高い収率、高いエナンチオ選択性を与えることを見い出した。イミンの際と同様、初期生成物はアシルイミン体であり、続く還元操作により高いジアステレオ選択性をもって対応するβ-イミノアルコールを得ることができた。現在さらに詳細な検討を行っている。
光ファイバセンサによる先端複合材料用オートクレーブ成形エキスパートシステムの開発

本研究は、CFRPなどの先端複合材料のための光ファイバひずみセンサを用いたオートクレーブ成形エキスパートシステムの構築を目的としたものである。研究の結果、以下に述べる成果が得られた。(1)オートクレーブ成形エキスパートシステムにより、成形条件をコントロールする際に必要となる成形過程における複合材料の内部ひずみを、光ファイバひずみセンサを使って検出するシステムを構築した。そして、一方向強化積層板および直交積層板のオートクレーブ成形中の内部ひずみ測定を行い、本システムにより成形中の内部ひずみのリアルタイム・モニタリングが可能であることを示した。(2)エキスパートシステムによる成形において不可欠な最適成形条件データベースを得るための測定技術および基礎データを得た。その詳細を以下に述べる。1)オートクレーブ成形中のマトリックス樹脂の誘電率測定による硬化状態のモニタリング結果と、光ファイバひずみセンサにより得られた内部ひずみとの関係を調べ、その関連について明らかにした。2)成形後の積層板について、積層板を伝播する超音波速度を測定することにより、マトリックス樹脂の硬化状態を感度よく測定できることを示した。そして、成形中のみならず成形後の積層板から最適硬化条件を評価できることを示した。3)成形圧力による積層板の破壊じん性への影響を調べた。その結果、積層板の破壊じん性値と成形圧力との関係が得られた。4)光ファイバを埋め込むことによる圧縮強度への影響を調べた。その結果、光ファイバにより内部状態をモニタリングする際の埋め込み方法についての基礎データが得られた。本研究は、先端複合材料における光ファイバセンサを用いたオートクレーブ成形エキスパートシステムの構築を目的とするものであるが、本年度はまず、成形エキスパートシステム構築のための光ファイバセンサによる成形品内部状態のモニタリング技術について検討した。その結果、以下の項目について新たな成果が得られた。(1)成形過程におけるマトリックス樹脂の硬化状態のモニタリングオートクレーブによる先端複合材料成形において、その成形過程における光ファイバセンサを使った硬化状態のモニタリングを行うため、まず、誘電率測定装置による成形過程での硬化状態のモニタリングを行った。成形条件を種々に変化させて成形を行い、各成形条件におけるマトリックス樹脂の硬化状態をモニタリングした。その結果、成形過程におけるマトリックス樹脂の硬化状態のモニタリングが可能であることがわかった。そして、光ファイバによる硬化状態の測定のための基礎データを得ることができた。(2)マトリックス樹脂硬化後の成形品内部ひずみの測定。本研究では、成形過程のみならず成形後も光ファイバセンサを用いて内部ひずみをモニタリングすることを目的としているため、種々の使用状態における複合材料の内部ひずみを測定できることが必要である。そのため、光ファイバセンサによるひずみ測定が振動などの動的状態においてもリアルタイムで測定できることが必要になる。そこで、マイケルソン型干渉計を使い、その干渉計出力からリアルタイムでひずみの値を得ることができるコンピュータプログラムを含んだひずみ測定システムを製作した。そして、光ファイバを埋め込んだFRP積層板について振動試験を行い、製作したシステムがリアルタイムで内部ひずみを測定できるがわかった。(1)オートクレーブ成形エキスパートシステムにより、成形条件をコントロールする際に必要となる成形過程における複合材料の内部ひずみを、光ファイバひずみンサを使って検出するシステムを構築した。

2)成形後の積層板について、積層板を伝播する超音波速度を測定することにより、マトリックス樹脂の硬化状態を感度よく測定できることを示した。そして、成形中のみならず成形後の積層板から最適硬化条件を評価できることを示した。3)成形圧力による積層板の破壊じん性への影響を調べた。その結果、積層板の破壊じん性値と成形圧力との関係が得られた。4)光ファイバを埋め込むことによる圧縮強度への影響を調べた。その結果、光ファイバにより内部状態をモニタリングする際の埋め込み方法についての基礎データが得られた。
第二言語語彙習得におけるTAP理論とATIを融合した新たな理論展開

本研究は,日本人英語学習者に対する語彙教授法の効果を,より詳細に明らかとすることを目標とする。その際,日本人英語学習者を動機づけ,学習方略等により分類を行い,どのような学習者のタイプには,どのような教授法が最も効果的であるのかを検証する。その結果,学習者は学習課題に応じた語彙学習の方略を適応し,また,その語彙学習方略の選択により,学習される語彙知識の側面が異なることが明らかとなった。平成21年度は文献調査を進めることを中心に,現在までの第二言語語彙研究の先行研究を敷衍することで,従来の第二言語語彙研究における分析の枠組みを見直し,今後の展望を示すことを目的とした。具体的には,分析の際に,処遇として与えられる「処理」,そしてその「適正処遇交互作用」の観点から改善点をまとめることとし,「転移適切性処理理論」のEFL環境における応用可能性についてレビューを行った。この文献調査の結果を基に,日本人英語学習者の語彙学習方略と動機づけという適性の観点から,語彙教授において頻繁に用いられるリストを用いた教授法との関係性を明らかとするため,調査を行った結果,(1)動機づけの高い英語学習者は,自らの学習経験に応じて語彙の学習方略を選択すること,(2)そのタスクの要求に応じて語彙学習方略を変容させることが明らかとなった。また,これらの結果について,理論的な基盤を擁するために,引き続き,先行研究のメタ分析により,効果的な教授法を模索し,先行研究について,効果量を用いたメタ分析を行うことで,語彙の教授法の効果の再検証を行っている。そして,上記の文献研究より次年度に計画されている反応時間を用いた教授法の効果測定に向けた調査計画の設定および調査計画を確定した。平成22年度は,日本人英語学習者の語彙学習方略と動機づけという適性の観点から,教授法との関係性を明らかとすることを目的とした。具体的には,平成21年度に引き続き,日本人英語学習者の語彙学習方略と動機づけという二つの適性と,日本の教室環境における語彙教授において頻繁に用いられるリストを用いた教授法との関係性を明らかとするため,平成21年度の調査とは実施時期の異なった調査を再度行った結果,学習者は,与えられたタスクの要求に応じて自らの語彙学習方略を変容させることが確認された。また,同じくリストを用いた教授法を用い,リスト学習時に使用した語彙学習方略により学習者を分類することで,語彙学習方略という適性と教授法の効果測定を行った。その際,語の形式的な側面と意味的な側面について,その語の保持率および反応時間を用いた分析を行った結果,学習時に学習者が援用する語彙学習方略の種類および頻度に応じて,語の処理速度が異なることが示唆された。更に,上記の結果をもとに次年度に計画されている反応時間を用いた教授法の効果測定に向けた調査計画の設定および調査計画を確定した。本研究は,日本人英語学習者に対する語彙教授法の効果をより詳細に明らかとすることを目標としており,日本人英語学習者を習熟度,動機づけ,学習方略等により分類を行うことで,どのような学習者のタイプには,どのような語彙教授法が最も効果的であるのかを検証することを目的としている。平成23年度は,引き続き,日本人英語学習者の語彙学習方略と動機づけという適性の観点から,教授法との関係性を明らかとすることを目的とした。具体的には,学習段階において与えられたタスクの要求に応じて,英語学習者は自らの語彙学習方略を変容させるという平成21年度の調査結果より,平成22年度の実験に引き続き,日本人英語学習者の課題遂行の際に使用する語彙学習方略と動機づけという二つの適性と,日本の教室環境における語彙教授および学習において頻繁に用いられるリスト形式を用いた学習成果との関係性について明らかとした。実験時には,学習段階として,未知語からなるリストの学習時に使用した語彙学習方略および動機づけにより学習者を分類することで,語彙学習方略および動機づけと教授法の効果測定を行った。語の形式的な側面と意味的な側面の両面についての保持率および反応時間を用いた分析を行った結果,学習時に学習者が使用する語彙学習方略の種類および頻度に応じて,語の正答率および処理時間が異なることが示唆された。更に,上記の結果をもとに,反応時間を用いた教授法の効果測定に向けた調査計画の設定および学習者の習熟度を更に要因として加えた調査計画を確定した。平成24年度は,日本人英語学習者の語彙学習方略と動機づけという適性の観点から,教授法との関係性を,前年度に引き続き,更に明らかとすることを目的とした。