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シェイクスピア映画に対する日米知覚反応の比較

今年度はマイケル・ラドフォード監督が2005年に制作した『ヴェニスの商人』を研究した。この映画はホロコーストを経験した20世紀の人類にユダヤ人の抑圧の意味を問い直させるだけでなく、現代において宗教の名においてくり返されるテロリズムの悲惨さもあらためて考えさせる。この劇は日本人にとっては明治以来繰り返し上演されてきた劇であるが、浅利慶太が1968年に演出した時には「私には、シャイロックはどうしても悪人に思えない」とかいて、悲劇的なシャイロックを演出している。ラドフォードも犠牲者としてのシャイロックを描き出し、現代の宗教の違いによる悲惨な争いに警鐘をならしている。また、ゼフィレッリ監督の『じゃじゃ馬馴らし』(1967)を詳細に鑑賞し、日本人としてのどのような知覚反応があり得るかを、中村の感性をもとに検討した。その結果、映画におけるペトルーチオの貧しさが、劇全体の解釈に大きく影響を与えていることを発見した。また、『オセロー』について場面ごとの中村の反応を日本人のひとつの観客反応として詳細に記述し、映画作品分析の基礎的作業をおこなった。マイケル・ゴーマンはアメリカ人として受けた教育のなかでシェイクスピアが占めていた位置を検討し、それまで文化的にもよそよそしかったシェイクスピアが、ガーランド・ライト演出の『ハムレット』演劇の経験によって急に身近になったことを語る。その体験を核として、1990年からの10年間に公開された3本の『ハムレット』映画を比較検討し、それぞれの映画の特徴を明らかにしている。本年度はシェイクスピアの『マクベス』を映画化した黒澤明監督による『蜘蛛巣城』を中心に研究した。シェイクスピアの劇を安土時代の日本を舞台に翻案したこの映画は、グレゴリー・コジンチェフによって「シェイクスピア映画の最高傑作」と批評されているが、そうした西洋の批評家による高い評価の根底には、彼らにとって未知なる東洋芸術である能への畏怖と尊敬がある。しかも、実際に能を見た経験からなされた批評というよりは、多分に繰り返し本の中で再生産される「日本的なもの」を黒澤の映画から読取ろうとする点で「オリエンタリズム」的なものである。さらに、そうした「日本的なもの」を理解する知的枠組みはあくまで西洋的なものであり、したがって、鷲津の行為がヨブやサタンとの比較によって理解されるようなことになる。一方、日本人による『蜘蛛巣城』の理解は、シェイクスピアの『マクベス』についての知的・学問的理解に基づいた映画批評が多いが、西洋の批評や意見を参考にしたり批判したりするなかで目立つのが、西洋の批評家による『蜘蛛巣城』の高い評価への驚きである。それは日本映画であるにもかかわらず世界にも通用するというより、「日本的である」が故に世界に通要するのだという事実が、当時の日本人に初めて認識されたためであろう。現代では「日本的なもの」が「西洋的なもの」によってかなり影響を受けているが、こうした状況は日本人の知覚にも影響を与えており、純粋に日本人的な反応を日本人は西洋文化にできなくなっている。これは一種の文化的コロニアリズムの状況であるが、むしろ、私たちはそれを「ハイブリッドな」状況として、新たに積極的に理論化する時期に来ているのではないか。ゼフィレリ監督の『じゃじゃ馬馴らし』について狩野良規は『シェイクスピア・オン・スクリーン』において「とくに男性にとっては胸のスカッとする喜劇である」と述べている。また何人かの男性のウェッブ上のコメントも好意的なものが多い。しかもウェッブ上でこの劇にコメントしている女性がほとんどいないことも考慮すると、この映画の受容は鑑賞者のジェンダーに大きく左右されていることは否定できない。日本においてこの映画のファロセントリズムを正面から批判する女性の批評については調査中である。

本研究では、もっぱら一般の日本人のメンタリティが、先鋭的な批評的知識を持たない状態で、『じゃじゃ馬馴らし』をどう知覚するかに重点を置いていたために、結局、日本の消費文化自体のファロセントリズムが依然としてドミナントなものとして流通していることが確認されただけであり、さほど実りのある結果が得られなかったのは残念なことである。これに対して欧米の『じゃじゃ馬馴らし』批評は質・量ともに充実しており、しかも現代的な批評的関心を正面から扱っている。そうした本は必ずしも特に研究者向けにかかれたものではなく、一般の人々がシェイクスピア劇を見た後で、もっと本格的にそれらの映画について知りたいという欲求に答えたものである。日本においてジェンダー論や本格的な映画研究が一般読者のレベルまで浸透していないことが、欧米のような本格的な映画研究がなされない大きな原因のひとつであろう。しかも日本においてそうした本格的なシェイクスピア映画研究を進めようとすると、欧米の映画理論だけでなく西洋特有の感受性まで学習してしまう。となると、シェイクスピア映画に対する日本人特有の感じ方がそうした研究に存在するかどうかさえ疑わしくなる。この点が当該研究のもっとも難しいところであるが、いまだにどのようにそれを理解してよいのか分からない状態である。今年度は『ロミオとジュリエット』には対照的な二つの映画版を考察した。1954年にフランコ・ゼフィレッリ監督によって制作された映画と、1996年にバズ・ラーマン監督が制作した『ロミオ+ジュリエット』である。研究の視点は日米の観客の受容に変化があるのかを考察したが、結論から言えば、それほど違いは見られなかった。理由は、この劇は欧米の観客だけでなく、日本の観客にも十分知られた劇であり、その点では両者の文化の中で神話的な作品であったためである。ただ、ラーマンの映画におけるポストモダン的要素に関しては、日本の一般の映画鑑賞者だけでなく、映画批評家についても、欧米ほど精緻な分析を試みたものはなかった。現代消費社会を特徴づける宣伝看板、現代の暴力を象徴する拳銃、警察ヘリコプターによる追跡などが、マリア像やキリスト像と同じレベルで併置されて映画のミザンセーヌの一部になっているラーマンの映画においては、パスティーシュやシュミラークルという概念の理解が不可欠である。しかし日本の映画批評ではそれは必ずしも十分なものになっていない。欧米の批評ではその点は精緻であり、その点では日本の研究者は依然として受容段階にとどまらざるを得ない。とりわけ精密な映画研究になればなるほど、そういう傾向に陥っていく。しかし、私としてはそういう状況においても、日本的な映画受容がシェイクスピア映画鑑賞においてどのような形であり得るのかを探っていくことが、本研究の最終的な課題であると感じている。本年度はゴダールの『リア王』を中心に日米の批評を比較しながら、シェイクスピア映画作品についての日米の知覚反応について考察した。ゴダールの『リア王』はシェイクスピアの『リア王』を再現した映画ではなく、むしろシェイクスピアの文化的中心性を脱構築した映画であり、批評においては映画が何を言おうとしているかというより、アクロバット的な演出法に関心が向けられている。アメリカの批評において、黒澤の『乱』への言及がしばしば見られるのは、同じくシェイクスピアの作品を素材としながら、忠実な映画化を目指さず、むしろ監督の映像芸術への姿勢を開示する点が共通しているためであろう。
理科教育の内容とその配列に関する総合的研究

本研究の目的は,今後のわが国の理科の教育課程における指導内容とその配列を決定する諸要因を実証的に調べるとともに,指導内容の選択や配列の基本モデルを作成し,今後の理科の教育課程における指導内容とその配列について提言を行った。具体的には,(1)諸外国の理科カリキュラム内容の比較研究,及び(2)わが国の新しい理科カリキュラムの中で児童・・生徒の理解が困難な内容を明確にし,どのような指導法が効果的であるかに関する研究の2つを行い,諸外国と比較分析することによって,わが国の理科の教育課程の特徴を明らかにするとともに,理科の内容に対する児童・生徒の理解度やつまずきを明らかにし,その結果をもとに指導内容とその配列についての提言を試みた。それぞれの研究の成果は次の通り。(1)平成14年度において収集した主要10か国の全国的あるいは州や地域レベルのカリキュラムにおける「科学の内容」についての配当学年,配列の順序等のデータに加え,平成15・16年度は,主要各国の最新のカリキュラムにおける理科の内容の配当学年や配列の順序等に関するIEA-TIMSS2003調査のデータを入手し,分析を行った。(2)全国の中学校500校の理科主任を対象として平成12年度末と平成14年度末に実施した「生徒の理解度及びつまずき調査」に引き続き,全国の小学校500校の理科主任を対象として平成15年度末に「児童の理解度及びつまずき調査」の調査を実施した。その結果,中学校においては,学習指導要領の改訂により,生徒の理解が比較的困難な内容としてあがった項目数が8項目から3項目に減った。小学校においては,C区分の内容が児童の理解が比較的困難であることが明らかとなった。また,小・中学校の教員を中心としたカリキュラム検討委員会において,本研究のアンケート調査結果や「教育課程実施状況調査」の結果を踏まえ,児童・生徒の理解を高めたり,つまずきを克服したりするための具体的な方策の検討を行った。(1)「わが国の理科の教育課程の特徴を明確にする研究」平成14年度は,主要10か国の全国的あるいは州や地域レベルのカリキュラムにおける「科学の内容」,についての配当学年,配列の順序等のデータを収集した。平成15・16年度はこれらのデータに加え,各国の教科書の記載内容を科学的な内容面・目標面等で分類したデータ(IEA-TIMSS調査の一環)を分析し,整理・集計することを計画中である。この教科書の内容分析から,実際に学校で指導されている,あるいは指導される可能性が高い,より具体的な内容に関するデータが得られ,このデータを合わせることによって,各国の状況がより詳細に概観でき,我が国の教育課程の特徴もより明確にできると予想される。一方で,TIMSSにおけるカリキュラム調査と同じ手法を用いて,主要各国の最新のカリキュラムにおける理科の内容の配当学年や配列の順序等に関する調査を,TIMSS2003調査の各国調査責任者に対して,1995年のTIMSS調査と同様の質問紙票を用いて,再調査し,最新のデータを入手する予定である。(2)「理科における児童・生徒の理解度やつまずきの実態等を把握する研究」平成14年度末に無作為に抽出した全国の中学校500校の理科主任またはこれに代わる方に対して実施した「児童・生徒の理解度及びつまずき調査」アンケートの第一次集計を行った。前回(平成12年度末に同規模で実施,回収率4割)よりも回収率が高く,約250校のデータ(回収率5割)を集計した結果,前回に比べて今回は,生徒の理解が比較的困難な内容(30%以上の教師が回答)としてあがった項目数が8項目から3項目に減った。今回も30%を超える教師から生徒の理解が困難であると回答があったのは,「力と圧力」「電流」「天体の動きと地球の自転・公転」の3項目であり,前回も30%を超える教師から回答があった内容である。なお,前回の調査で比較的理解が困難であるとされた「熱と温度」「電気分解とイオン」「仕事とエネルギー」は中学校から高等学校へ移行している。

その結果,中学校においては,学習指導要領の改訂により,生徒の理解が比較的困難な内容としてあがった項目数が8項目から3項目に減った。小学校においては,C区分の内容が児童の理解が比較的困難であることが明らかとなった。また,小・中学校の教員を中心としたカリキュラム検討委員会において,本研究のアンケート調査結果や「教育課程実施状況調査」の結果を踏まえ,児童・生徒の理解を高めたり,つまずきを克服したりするための具体的な方策の検討を行った。
地殻流体：　その実態と沈み込み変動への役割

領域全体の5年間の研究を締めくくるGeofluid-3国際シンポジウムNature and Dynamics of Fluids in Subduction Zonesを平成26年2月28日ー3月3日の4日間東京工業大学デジタル多目的ホールを用いて開催し、アメリカ、イギリス、ドイツ、ニュージーランド、中国から合計12名の指導的研究者を招聘し135名がシンポジウムに参加した。Geofluid-3国際シンポジウムおよびその後1年間の海外研究者との意見交流を通じて地殻流体領域の研究成果を海外に浸透することができた。研究成果特集号がSpringer社の刊行するオープンアクセスジャーナルEPS(Earth, Planets and Space)から出版され、特集号Geofluid Processes in Subduction Zones and Mantle Dynamics、編集長:川本竜彦)として31編の論文が掲載された。本研究の関連研究者は延べ75人は5年間で678件の学術論文(うち652編は査読有)を生み出した。総括班は日本鉱物科学会誌『岩石鉱物科学』(2011年)、日本地球化学会誌『地球化学』第46巻4号(2012年)でそれぞれ「地殻流体特集号」を組んだ。これら5年間の研究成果を総括班は取りまとめるために平成26年5月と9月に2階の総括班会議を開催した。9月に実施された事後評価ヒアリングにおいてA+の評価を受けた。26年度が最終年度であるため、記入しない。日本列島は2つの海洋プレートが沈み込む『地球上で最も激しい変動帯』に位置する。「地震・火山活動」など沈み込み変動の多くに「地殻流体」(岩石鉱物の粒界に存在するH2Oなどの流体)が深くかかわっている。本研究は新学術領研究「地殻流体」の総括班として、沈み込むプレートに由来する「地殻流体」の発生から地表に至るまで、「地殻流体」の実態とそれが沈み込み変動に果たす役割の全貌解明を目指した。精密な地震波観測と電磁気観測を共同で実施し、観測結果を高温高圧実験に基づいて解釈し、地殻流体の分布を3次元的に示す、“Geofluid Map"を作成した。総括班は、各大学の研究代表者を専用メイルアドレスによる書面審議で結び、5計画研究(A01観測班,A02実験・翻訳班,A03ダイナミクス班)を統括し交流を図った。総括班は平成21年度だけで300回(H22年度は400回)のメイル審議を実施した。また総括班は専用のホームページ開催し、地殻流体研究に関連する研究者に広く情報を提供した。各研究チームの進度を調整し、分野横断研究の飛躍的推進を図るため、総括班の下に、1)総括班メンバーによる地殻流体評価室、2)外国人協力研究者によるアドバイザリーボード、3)特任助教3人PD1人からなる地殻流体融合研究センターを設置した。平成21年9月23日-25日、川渡の東北大学セミナーハウスにおいて「第1回地殻流体研究会」を開催し、メンバーおよび院生合計80人が集合して研究交流に努めた。さらに総括班では地殻流体融合研究セミナーを13回開催し、分野横断研究推進に努めた。代表者が怪我でH21年11月7日から2カ月入院したため総括班の研究計画に遅延を生じ平成21年度から平成22年度へ直接経費150万円を繰り越した。繰り越した経費を用いて平成22年9月10日-13日にラフォーレ修善寺で「第2回地殻流体研究会」を開催し、さらに若手育成のために並行して「地殻流体サマースクール」を開講し、参加者(学生・院生40)の旅費援助を行った。総括班の領域計画に従って、5つの研究領域の研究はそれぞれ順調に進み、ニュージーランド下の地殻流体分布をMT法により解明した論文がNature誌に掲載されるなど多くの研究成果を上げ、領域全体で平成21年度に85編の原著論文を発表した。地殻流体は、地震活動・火山活動・地殻変動の背後にあってそれらの発生メカニズム、分布、活動様式に広汎な影響を与えている可能性が近年指摘されている。我々は本新学術領域研究で最精鋭の研究チームを組織し、複数のプレートがせめぎ合う『地球上で最も激しい変動帯に位置する日本列島をテストフィールド』として、地震波・電磁気MT共同観測を実施している。総括班は研究の全体を活発に推進するため、特任助教2名を雇用し、国内外の研究者との融合研究の推進に努めている。平成22年度は地球惑星科学連合大会(2010年5月22-27日幕張メッセ参加者約3000人)において地殻流体セッションが固体地球科学分野を代表するユニオンセッションに選ばれ、2日間にわたりのべ400人の参加者を得て活発な研究発表と討論を行った。さらに、メンバー全員による地殻流体研究会を2010年9月10日-13日の期間ラフォーレ修善寺で開催した。またラフォーレ修善寺を会場にサマースクールを研究会と同じ会場にて午後の時間に開催し学生・院生40人が参加した。サマースクールの講師は特任助教など若手教員が務めた本領域初めての国際シンポジウム「Geofluid-1」を東工大デジタル多目的ホールにて2011年3月17日-20日開催予定であったが、2011年3月11日に発生した東北地方太平洋沖地震(東日本大震災)により、中止を余儀なくされた。

講演予稿集を参加者全員に配布してGeofluid-1会議を書面成立させ平成23年度に国際会議の経費を繰り越した。地殻流体は、地震活動・火山活動・地殻変動の背後にあってそれらの発生メカニズム、分布、活動様式に広汎な影響を与えている可能性が近年指摘されている。我々は本新学術領域研究で最精鋭の研究チームを組織し、複数のプレートがせめぎ合う『地球上で最も激しい変動帯に位置する日本列島をテストフィールド』として、地震波・電磁気MT共同観測を実施している。総括班は研究の全体を活発に推進するため、融合研究センターに特任助教2名を雇用し、国内外の研究者との融合研究の推進に努めている。第1回の国際シンポジウム「Geofluid-1」を2011年3月17-20日東工大で開催する準備を進めていたが、大震災により中止、講演要旨を参加予定者全員に郵送して「書面開催」とした。平成23年度は地球惑星科学連合大会(2011年5月22-27日幕張メッセ参加者約3000人)において本学術領域は特別セッション「流体と沈み込み帯のダイナミクス」(コンビーナー:川本竜彦・岡本敦・松澤暢)を主催した。特別セッションは5月25日に開催され、口頭講演24件、ポスター発表20件の発表があり活発な討議が行われた。さらに、2011年9月17日-22日に岩手県花巻にて「地殻流体研究会・サマースクール」を開催した。大震災の余波もある中、あえて東北復興を支援する意味から岩手県で研究会を開催し、ほぼ全メンバーにあたる研究者60名、学部生・大学院生30名の参加を得た。地震により繰り越した総括班経費200万円を用いて、岡山大学地球物質科学研究センター(センター長:神崎正美ほか本領域のメンバー4人が在籍)と共同開催で、国際シンポジウム[Misasa-2012&Geofluid-2:Dynamics and Evolution of the Earth's Interior: special emphasis on the role of fluids]を鳥取県三朝町文化ホールなどを会場に2012年3月18-21日に開催した。この国際会議には外国人30名を含む150人の参加者があり、大震災をきっかけに明らかになった新たな観察事実を含め、日本列島ダイナミクスに地殻流体がどのような役割を果たしているかについて活発な国際共同研究のスタートとなった。6つの計画研究代表者、高橋栄一(X01総括班)、松澤暢(A01-1)、小川康雄(A01-2)、小木曽哲(A02-1)、中村美千彦(A02ー2)、岩森光(A03-1)に栗田敬(東大)、河村雄行(岡山大)、横山哲也(事務局長)を加えた9名からなる実施委員会を総括班に置いた。総括班は研究の全体を活発に推進するため、特任助教2名を雇用し、国内外の研究者との融合研究の推進に努めた。平成25年度は各計画研究の連携を図ると同時に「分野融合研究」を積極的に推進した。平成25年5月に幕張メッセで開催された地球惑星連合大会において、地殻流体に関連した国際セッション(Geofluids and their roles in dynamics of the Earth's interior)とレギュラーセッション(流体と沈み込み帯のダイナミクス)の2つをそれぞれ主催し、2日間にわたり述べ300人の参加を得た。
尿細管特異的保護機構発現による糖尿病性腎臓病の新たな治療戦略の構築

本研究では、腎尿細管上皮においてTFF3発現増強による、DKDの腎線維化に対する新規治療法の開発を行うことを目的とする。まずDKDのヒト腎生検組織におけるTFF3発現と線維化との関連を証明する。次に遺伝子改変動物に作成したDKDモデルを用いて、TFF3過剰発現による腎尿細管障害および線維化に対する治療効果を明らかにする。更に、高糖濃度培養した腎尿細管上皮細胞を用いて、TFF3発現亢進による腎線維化抑制の細胞内シグナル伝達機構を解明する。ヒトDKDにおける病態解析を起点にして、実験動物、培養細胞を用いた機序解析を行い、腎尿細管上皮におけるTFF3過剰発現によるDKDへの新たな治療戦略を開発する。
肺線維症におけるmicroRNA機能に着目した分子標的治療法開発に向けた基盤研究

間質性肺炎は肺間質の線維化により呼吸不全を示す難病である。microRNAは複数の標的遺伝子に結合しその発現を強力に抑制することから線維化抑制の新たな治療標的として注目されている。本研究では生検材料を用いて本疾患の発症進展に特異的なmicroRNAを選定するとともに動物実験で間質性肺炎の発症と進展に与える影響を臓器レベルで検証し、新規治療法開発のための基盤形成に発展させることを目的とする。
1型糖尿病の新規自己抗原を用いた発症・進展予知法の開発

GAD抗体陽性NIDDMの前向き調査により、GAD抗体の抗体価が高い場合、GAD65中央部分のエピトープを認識する場合、他の膵島関連自己抗体(インスリン自己抗体、IA-2抗体、ZnT8抗体)の重複陽性が早期インスリン治療開始の予知因子であることおよび、他の膵島関連自己抗体の重複陽性が最も強い独立した進展予知因子であることが明らかになった。また、ZnT8抗体エピトープ解析により、発症年齢によってZnT8に対する液性免疫反応の違いが証明された。1.抗ZnT8抗体測定系の確立と疾患特異性の検討:ヒトZnT8cDNAを用い、RIA法により抗ZnT8抗体の高感度測定系を確立した。(1)ヒトZnT8cDNAの268-369番目のアミノ酸をコードするcDNAを、発現ベクターに挿入した。(2)In vitro transcription/translation法により^<35>S標識ZnT8蛋白を作成し、RIA法にて健常人、1型糖尿病、2型糖尿病患者血清との反応性を検討した。(3)ZnT8蛋白に対する結合率を陽性コントロールおよび陰姓コントロールを利用してindexとして表し、健常人139名のindexの99パーセンタイル値をカットオフ値に設定した。(4)ZnT8抗体の陽性率は、典型的1型糖尿病で59%、劇症1型糖尿病で0%、GAD抗体陽性2型糖尿病で21%、GAD抗体陰性2型糖尿病で2%と1型糖尿病において有意に高頻度であった。2.抗ZnT8抗体の特異性と遺伝子多型の関連についての検討:(1)ZnT8遺伝子(SLC30A8)のArg325Trp多型は、2型糖尿病疾患感受性SNPであるが、同時にZnT8抗体の認識部位に存在している。(2)ZnT8の325Trp、325Arg、およびそのhybrid cDNAを用いて、1型糖尿病患者のArg325Trp多型とZnT8への反応性について検討した。(3)Arg325Trp多型は、ZnT8抗体の結合性に強い関連を示し、本多型がZnT8抗体の特異性を決定していることが明らかになった。1.抗ZnT8抗体のインスリン依存状態予知に関する検討:(1)前年度に確立したZnT8抗体測定系(Radioligand binding法)を用いて、緩徐進行1型糖尿病におけるインスリン依存状態予知に関する検討を行った。(3) ZnT8抗体陽性と追跡調査中のインスリン使用開始との関連を解析した。(4) GAD抗体陽性NIDDMにおけるZnT8抗体の陽性率は19%であり、38%はインスリン自己抗体(IAA)、IA-2抗体、ZnT8抗体のいずれか1抗体以上を有していた。(5)追跡調査中36%のGAD抗体陽性NIDDMで血糖コントロールのためにインスリン治療が必要になり、その予知因子として、(1)高GAD抗体価、(2)GAD65中央部分に対するGAD抗体エピトープの存在、(3)IAA、IA-2抗体、ZnT8抗体の重複陽性の3つが同定された。2. ZnT8/ZnT3キメラ蛋白の作成と抗ZnT8エピトープの解析:(1)立体構造を保持するためにZnT8と相同性が高いがZnT8抗体に認識されないZnT3とのキメラ蛋白を、ZnT3の細胞内部分およびZnT8の細胞内部分のcDNAを用いて作成した。(2)得られたZnT8/ZnT3キメラcDNAのシークエンス配列および蛋白発現を、直接シークエンス法、in vitrotranscription/translation法により確認した。1.抗ZnT8抗体と1型糖尿病の臨床像に関する検討:(1)平成21年度に確立したZnT8抗体測定系(Radioligand binding法)を用いて、1型糖尿病の臨床像と陽性率ならびに遺伝因子に関する検討を行った。(3)1型糖尿病の発症年齢、病型とZnT8抗体陽性率およびHLA-DRとの関連を解析した。(4)ZnT8抗体の陽性率は50%であり、他の膵島関連自己抗体の陽性率はGAD抗体82%、IA-2抗体58%、IAA55%であった。また、この4つの膵島関連自己抗体を組み合わせて解析すると、94%がひとつ以上の自己抗体が陽性であった。(5)ZnT8抗体の陽性率は小児期発症1型糖尿病で高く、発症年齢と陽性率は逆相関を示した。また、ZnT8抗体価とHLA-DR4コピー数との逆相関が見られた。(1)前年度に作成したZnT8/ZnT3キメラcDNAを用いてZnT8抗体エピトープの解析を行った。(2)1型糖尿病患者では、主に2つの主要なエピトープがあることが分かった。
成長因子とドラッグデリバリーシステムを用いた重症気管軟化症の非侵襲治療法開発

重症気管軟化症では,咳嗽や啼泣などの胸腔内圧上昇によって気管が潰れ,呼吸困難から致死的となることがある.現在行われている外科治療は侵襲が大きく,術後の生活の質が落ちることもある.一方で気管軟化症の症状は成長に伴って軽快することが知られている.本研究では,徐放化した塩基性線維芽細胞増殖因子をラットの気管膜様部背側に投与すると,気管の成長が促進され,気管内腔面積が増大するとともに気管軟骨が厚くなることがわかった.本研究の成果は重症気管軟化症の低侵襲な新治療法につながるものである.重症気管軟化症では,咳嗽や啼泣などの胸腔内圧上昇によって気管が潰れ,呼吸困難から致死的となることがある.現在行われている外科治療は侵襲が大きく,術後の生活の質が落ちることもある.一方で気管軟化症の症状は成長に伴って軽快することが知られている.本研究では,徐放化した塩基性線維芽細胞増殖因子をラットの気管膜様部背側に投与すると,気管の成長が促進され,気管内腔面積が増大するとともに気管軟骨が厚くなることがわかった.本研究の成果は重症気管軟化症の低侵襲な新治療法につながるものである.本研究の目的は,外科的介入を必要とするような重症気管軟化症を低侵襲に治療する方法を開発することである.塩基性線維芽細胞増殖因子(bFGF)などの成長因子を,ドラッグデリバリーシステム(DDS)を駆使して効果的に気管軟骨に作用させる手法を用いる.平成22年度は,摘出したラット気管の外圧を変化させた時の,気管内腔の変化を観察することが可能な評価実験系の構築を行った.この一部は平成21年度川野小児医学奨学財団の助成によるものであるが,その改良,および測定プロトコールの確立を行った.本実験系を用いることによって,ラット摘出気管に外圧を加えていくと膜様部が膨隆して前壁に近づいていき,三日月状につぶれていくというヒト気管軟化症と同様の変化を観察することができるようになった.また,外圧と断面積の量的関係の解析が可能となった.7wラットを用いて正常値の取得を行い,外圧を40cmH2Oまで上昇させると気管内腔面積は非加圧時の約60%まで減少することを確認した.今後,本実験系を用いて,b-FGFで成長を促進した気管の機能評価を行っていく.また,平成23年以降の計画である,b-FGF含有マイクロスフェアー吸入のための基礎的研究をマウスによって行なった.マウスへ気管内挿管を行い,気管内にb-FGFを投与し,気管軟骨の成長促進について検討した.その結果,2.5μg/回を5日間投与することで,投与4週後には気管軟骨の成長による軟骨壁の肥厚を組織学的に確認した.また,b-FGF投与群は,挿管のみのSham群と比較して,有意に内腔面積の増大を確認した.これらのデータは,マイクロスフェアー吸入量を算出する上で重要な基礎的データとなりえる.本研究の目的は,外科的介入を必要とするような重症気管軟化症を低侵襲に治療する方法を開発することである.塩基性線維芽細胞増殖因子(bFGF)などの成長因子を,ドラッグデリバリーシステム(DDS)を駆使して効果的に気管軟骨に作用させ,成長促進させる手法を用いる.平成23年度は,b-FGFをゼラチンスポンジに含ませた徐放製材をラットの頸部気管膜様部背側に留置することで,気管軟骨の成長促進が得られるのかどうかを検証し,その最適濃度を決定するための実験を行った.3週齢,雄のWistarラットの頸部気管背側にb-FGF徐放化製材(0.5μg,5μg,50μg)を留置し,4週間後(7週齢)に摘出した頸部気管と同週齢正常ラットの気管を病理学的に比較検討した.その結果,気管内腔面積はb-FGF5μg群で最も増加しており,50μg群では狭窄が認められた.一方,気管軟骨の厚さは用量依存性に増加していた.以上より,気管を成長促進する最適濃度はb-FGF5μgであることがわかった.また、さらなる低侵襲治療を行うために、気道内に塩基性線維芽細胞増殖因子(bFGF)を投与して、気道軟骨の成長促進について検討した。4週齢マウスの気管内にbFGFを投与し、気道軟骨の肥厚、軟骨長の成長促進を確認した。また、気道内に徐放化bFGF製剤を投与することで、気管軟骨の成長を確認したが、必ずしも投与量によって軟骨成長が促進されていなかった。本研究の目的は,外科的介入を必要とするような重症気管軟化症を低侵襲に治療する方法を開発することである.塩基性線維芽細胞増殖因子(bFGF)などの成長因子を,ドラッグデリバリーシステム(DDS)を駆使して効果的に気管軟骨に作用させ,成長促進させる手法を用いる.平成23年度までに,b-FGF 5μgを含浸させたゼラチンスポンジをラットの頸部気管膜様部背側に留置すると,気管内腔面積と気管軟骨の厚さが増大し,最も効果的に気管の成長を促進することができることがわかった.

平成24年度は.平成22年度に構築した実験系を用いて,気管の外圧を変化させた時の内腔面積の変化を計測し,成長促進させた気管が実際に潰れにくいものになっているかどうかを検証し,b-FGF 5μg投与によって成長促進した気管は,同週齢の正常気管と比較して潰れにくい傾向があることがわかった.さらに平成24年度は、マウスの気管内にb-FGF2.5μgを5日間投与することで、投与後4週間後に有意に気管の成長が促進されることを確認した。また、家兎に対して、気管支鏡を用いて、b-FGF100μgのゼラチンマイクロスフェアー溶液を気管支壁に局注することで、局注後4週間で有意に気管断面積の拡大を確認した。平成23年度の研究計画は,bFGFの気管軟骨成長促進効果に関する基礎的データを蓄積することであった.具体的には,(1)気管軟骨を成長促進させる最適bFGF量の決定,(2)bFGFによる効果持続期間の検証,(3)bFGFの最適な投与方法の確立を予定していた.(1)を達成することができたが(3)は継続中であり,(2)に関しては平成24年度へ持ち越しとなった.24年度が最終年度であるため、記入しない。平成23年度から取り組んでいる,bFGF気道内投与による気管軟骨成長促進実験を継続する.また,昨年度の持ち越し課題であるbFGFの効果持続期間の検証(晩期合併症の観察)を今後行っていく予定である.24年度が最終年度であるため、記入しない。
『元史』の志と表の再編纂-大元ウルスの政治と文化の解析-

まず、『元史』の「食貨志」に記載のない英宗シディバラ以降の大元ウルスの勧農政策を再構成し概説を試みた。魯明善『農桑衣食撮要』をはじめとする農書のテキストの成立、由来についても少なからぬ新事実を提示した。また、「混一疆理歴代国都之図」という、モンゴル時代に成立した世界地図の成立過程、日本への伝来の経緯を検討、「地理志」の書き換えはもちろん、1315世紀にかけて、ユーラシアから朝鮮半島、日本に渉って広く共有された文化をさまざまな角度から眺め、空前絶後のひと・もの・知識の交流について、これまでの研究成果をヴィジュアルな概説書にまとめ社会への還元につとめた。同書では、地図と同様、時代と国を越え、王侯、貴族、官僚、僧侶たちの座右に置かれ愛用された『事林広記』という挿絵入りの百科事典についても広く紹介を試みたが、その過程で、対馬藩の宗家の旧蔵に係る現存最古のテキストを発掘、従来知られていた諸版本と比較検討し、価値を措定した。さらには、この宗家のテキストの欠落部分を補う写本をも、滋賀県の叡山文庫に再発見した。その結果、世祖クビライの中統、至元年間の初めは、金朝の儀礼や官僚制度がいくぶんの改良を加えながらも踏襲されていたことが証明され、『元典章』などにのこる官職一覧表よりも早い段階のリスト、図の存在から、南宋接収直前のモンゴル朝廷の様子、システムが浮かびあがってきた。したがって、「百官志」「刑法志」「礼楽志」は大きな書き換えを要求されることとなった。そして、現在散逸して伝わらない金代の『泰和律』やクビライ初期に制定された『至元大典』の一部分、宋代の官僚制、朝廷の文化等についての唯一無二の記述、図表の存在も紹介することができた。『元史』の「釈老伝」、「食貨志」、「百官志」の検討および「芸文志」の編纂の準備として、これまで紹介されていないモンゴル時代に関わる書物を元刊本、朝鮮版、五山版を中心に、日本では国会図書館、国立公文書館、京都建仁寺等において、国外では台湾国家図書館、故宮博物院において閲覧および複写を行った。「祭祀志」、ジャムチについては、中国遼寧省において大元時代の碑刻、寺廟建築、山岳河川、遺構を参観し、関連資料の収集に努めた。「地理志」については、九州大分県の臼杵、宇佐において中国、世界地図の調査を行った。その成果のひとつとして、「徽州文書にのこる衍聖公の命令書」を発表した。大元末期、曲阜孔家のトップに立つ衍聖公はモンゴルの庇護、承認のもと、全国の孔子、孟子、顔子の子孫たちが各地の学校、書院で不自由なく優れた師友とともに勉強しできるよう、宿泊費、交通費を免除し、生活費、書籍購入費の支給を約束するパスポートの発給権をみとめられていたこと、また、その前提として、全国の孔氏、孟氏、顔氏の系図の整理、統合が進められていたこと等が明らかになった。これは、既に整理した道教教団の正一教、全真教とそのトップに対するモンゴル朝廷の政策とともに、こんご進めるチベット仏教、禅宗の研究の参考となる。また、大元時代末期にモンゴル朝廷の仏教政策のシステムを身をもって学び、明の建国初期に朱元璋のブレインのひとりとなった禅僧季潭宗〓の文集の学界未知のテキストが、日本の中世、近世の対中国外交の一翼を担った京都建仁寺に眠っていることを紹介した。さらに、モンゴル時代の水利事業と救荒政策について解明する前段階として、担当の官庁であった大司農司の変遷を『農桑輯要』をてがかりに辿り、「食貨志」の農桑、「百官志」の再編纂を行った。その成果は、長編のため、上下二編に分けて公刊する予定である。なお、これまでに明らかになったモンゴル時代の政治、文化のシステムの一部と学界未知の資料を一刻もはやく共有し、研究レヴェルの底上げを図る目的から、ここ数年来の論文をまとめなおし、新しいデータ、将来の展望もまじえながら一冊の書物として公刊した。『元史』の「釈老伝」、「芸文志」の再編纂のために継続中の、京都五山の建仁寺は両足院での漢籍、抄物の調査の成果の一端を、京都大学大学院文学研究科国語国文学研究室の木田章義教授、朴真完ほか大学院生とともに、平成18年度東方学会関西部会(5月27日開催)において、「両足院-学問と外交の軌跡-」と題する展示会を企画、立案、カタログを作成したさいに、公開した。カタログの内容は、禅宗史、書誌学等の分野において、じゅうらいまったく言及されていない事実、貴重書を紹介することに主眼を置いた。展示会の書籍選定、予行演習等、準備には、半年を要した。「地理志」の再編纂、ジャムチ(駅伝)地図の作成を目的のひとっとして、8月22日から9月6日まで、中央アジアのウズベキスタン、カザフスタン、中国の新彊ウィグル自治区において、13-15世紀のモンゴル、とくにチャガタイ・ウルスと大元ウルスにかかわる遺跡の調査、資料、情報の収集を行った。

そこで得られた知見の一端を11月23日、同志社大学薪島会館において、京都橘大学の小野浩教授とともに「13-15世紀の遺跡をめぐって」、「農業からみた遊牧国家」と題するふたつの共同報告において発表、さらに後者については今年度より収集を開始したモンゴル時代のペルシア語資料も用いながら「『農桑輯要』からみた大元ウルスの勧農政策」と題する論文においてより詳細に解説した。また、クビライ初期の政治、外交、軍事、財政等、根本的な問題を総合的に考えるさい鍵となる重要な碑刻について数回にわたり、京都大学大学院文学研究科において報告発表の機会をもったこの成果は近く公開の予定である。まず、『元史』の「食貨志」に記載のない英宗シディバラ以降の大元ウルスの勧農政策を再構成し概説を試みた。魯明善『農桑衣食撮要』をはじめとする農書のテキストの成立、由来についても少なからぬ新事実を提示した。また、「混一疆理歴代国都之図」という、モンゴル時代に成立した世界地図の成立過程、日本への伝来の経緯を検討、「地理志」の書き換えはもちろん、1315世紀にかけて、ユーラシアから朝鮮半島、日本に渉って広く共有された文化をさまざまな角度から眺め、空前絶後のひと・もの・知識の交流について、これまでの研究成果をヴィジュアルな概説書にまとめ社会への還元につとめた。同書では、地図と同様、時代と国を越え、王侯、貴族、官僚、僧侶たちの座右に置かれ愛用された『事林広記』という挿絵入りの百科事典についても広く紹介を試みたが、その過程で、対馬藩の宗家の旧蔵に係る現存最古のテキストを発掘、従来知られていた諸版本と比較検討し、価値を措定した。さらには、この宗家のテキストの欠落部分を補う写本をも、滋賀県の叡山文庫に再発見した。その結果、世祖クビライの中統、至元年間の初めは、金朝の儀礼や官僚制度がいくぶんの改良を加えながらも踏襲されていたことが証明され、『元典章』などにのこる官職一覧表よりも早い段階のリスト、図の存在から、南宋接収直前のモンゴル朝廷の様子、システムが浮かびあがってきた。したがって、「百官志」「刑法志」「礼楽志」は大きな書き換えを要求されることとなった。そして、現在散逸して伝わらない金代の『泰和律』やクビライ初期に制定された『至元大典』の一部分、宋代の官僚制、朝廷の文化等についての唯一無二の記述、図表の存在も紹介することができた。
胎仔由来細胞保護メタボローム・セロフェンド酸の生理・薬理作用に関する研究

胎仔由来細胞保護メタボロームであるセロフェンド酸の脳疾患への応用の可能性を検討する目的でin vivo実験系でのセロフェンド酸の有効性を検討する研究を中心に実験を実施した。動物実験モデルとしてはラット一過性中大脳動脈閉塞モデルを用いた。虚血開始30分後にセロフェンド酸を脳室内投与すると再灌流48時間後の環状切片における梗塞巣体積が有意に減少した。また、行動学的検討を行うためにneurological deficit scoresを測定したところ、セロフェンド酸投与によりvehicle群と比較して有意なスコアの改善が観察された。また、対照薬として用いたエダラボンを脳室内投与したところ、虚血側の梗塞巣体積は有意に減少したが、行動学的指標となるneurological deficit scoresへは影響を与えなかった。セロフェンド酸投与が生理機能への影響を与えているか否かについて、生理学的パラメータと脳血流量の測定を行った。セロフェンド酸は血液内の各種イオンおよび酸素分圧、二酸化炭素分圧には影響を与えなかった。また、脳虚血時に減少する脳血流量に関してもvehicle群との優位な差は観察されなかった。セロフェンド酸は脳室内に投与することにより脳虚血障害に対して有意な抑制作用を発現し、また既存の治療薬であるエダラボンよりもより有用な作用を発現した。このことはセロフェンド酸の脳疾患への応用の可能性を示唆するものである。牛胎仔血清のエーテル抽出物中より発見したセロフェンド酸について、低濃度のグルタミン酸の長時間投与によるアポトーシスに対する保護作用機序について検討した。セロフェンド酸はグルタミン酸により誘発されるミトコンドリア膜の脱分極を抑制した。また、ミトコンドリア膜の脱分極に引き続き起こるカスパーゼ3の活性化も抑制したが、カスパーゼ3の酵素活性を抑制するには神経保護作用を発現する濃度よりも高濃度が必要であった。したがって、セロフェンド酸はグルタミン酸により誘発されるミトコンドリア膜の脱分極を抑制することにより、カスパーゼの活性化を抑制し、アポトーシスに対して保護作用を発現したことが示唆される。また、セロフェンド酸が培養アストロサイトにおいて細胞内cAMP濃度上昇による形態変化を促進することを見いだしているので、その作用機序について検討した。cAMPの作用点と考えられるProtein Kinase A(PKA)への作用を調べる目的でPKAの阻害薬であるKT5720の作用を検討した。その結果、セロフェンド酸による星状化促進作用はKT5720により部分的に抑制され、その作用機序の一部にPKAが関与していることが明らかとなった。また、細胞骨格の制御に重要なRhoファミリータンパクの1つであるROCKの阻害薬であるY-27632はアストロサイトに星状化を引き起こす。セロフェンド酸はY-27632による星状化には影響を与えなかった。これらの結果より、アストロサイトにおけるセロフェンド酸の作用部位はPKAの活性化の調節に関与していることが示唆された。
生物の歩行に学ぶセミアクティブ振動制御

本研究では,身体のサイクリックな運動である歩行運動に関連しているとされる神経振動子の働きを減衰係数励振の制御方法に取り入れることを目的とし,その基礎的な検証を行った.減衰の係数励振においては実際の可変ダンパの非線形性が含まれる状況で利用できるように制御則の導出を行い,さらに並列に連結された構造物での利用方法を提案した.また,振動子の有する基本特性を把握するため, 1自由度構造物に設置したアクティブ動吸振器を対象に,神経振動子とPD制御を組み合わせた制御器を導出し,数値計算によってその有効性を検証した.また提案した制振手法の同期特性の評価を行うため,非線形振動子の同期を評価する位相縮約法を利用して振動子の位相特性を評価することでシステム全体の評価を行う手法を提案した.本研究では,身体のサイクリックな運動である歩行運動に関連しているとされる神経振動子の働きを減衰係数励振の制御方法に取り入れることを目的とし,その基礎的な検証を行った.減衰の係数励振においては実際の可変ダンパの非線形性が含まれる状況で利用できるように制御則の導出を行い,さらに並列に連結された構造物での利用方法を提案した.また,振動子の有する基本特性を把握するため, 1自由度構造物に設置したアクティブ動吸振器を対象に,神経振動子とPD制御を組み合わせた制御器を導出し,数値計算によってその有効性を検証した.また提案した制振手法の同期特性の評価を行うため,非線形振動子の同期を評価する位相縮約法を利用して振動子の位相特性を評価することでシステム全体の評価を行う手法を提案した.本研究では,申請者が提案している「減衰の係数励振を利用した機械・構造物の振動制御方法」をランダムな入力が作用した場合に対応できるように拡張するため,身体のサイクリックな運動である歩行運動に関連しているとされるCentral Pattern Generator (CPG)を減衰係数の励振方法に取り入れることを提案し,それについての基礎的な検証を数値解析と実験を通して行うことを目的としているが,これまでの研究で次の成果を得た.先行研究では理想的な可変ダンパを設置した構造物を対象に,二つの振動数による励振と減衰係数励振の作用によって応答の振幅低減を行う方法について検討を行い,提案する手法の有効性を確認してきた.しかし,実際の可変ダンパとして利用される装置にはその特性に非線形性が含まれるなどの理由によって,理想的なダンパ用に導出された制御則をそのまま直接利用することができない.そこで可変ダンパとして磁気粘性流体を利用したMRダンパを対象に制御則を再度導出し,実験によってその有効性を検証した.また,CPGの導入をアクティブ・セミアクティブの制振装置に応用した例は申請者の知る限りでは報告されていないため,基礎的なCPGの適用方法及びその効果について把握することから始める必要があった.そこで,CPGの有する基本特性を把握するため,1自由度構造物に設置したアクティブ動吸振器を対象に,CPGとPD制御を組み合わせた制御器を導出し,数値計算によってその有効性を検証した.数値計算の結果,この制御器に利用したCPGは構造物の速度と,動吸振器の相対変位間に必要となる逆位相の関係を維持することが分かり,制御器として適切な位相関係を出力できた.さらに,正弦波入力に対して動吸振器補助質量の変位限界内で動作可能となる目標値を導出し,一定の制振効果が得られることが分かった.本研究では,申請者が提案している「減衰の係数励振を利用した機械・構造物の振動制御方法」をランダムな入力が作用した場合に対応できるように拡張するため,身体のサイクリックな運動である歩行運動に関連しているとされるCentral Pattern Generator (CPG)を減衰係数の励振方法に取り入れることを提案し,それについての基礎的な検証を数値解析と実験を通して行うことを目的としているが,これまでの研究で次の成果を得た.先行研究では理想的な可変ダンパを設置した構造物を対象に,二つの振動数による励振と減衰係数励振の作用によって応答の振幅低減を行う方法について検討を行い,提案する手法の有効性を確認してきた.しかし,地震入力等を受ける構造物において二つの振動数を有する理想的な正弦波入力を仮定して構成した制御器は利用できない.そこで東京スカイツリーのように主となる二つの構造物間を可変ダンパで連結し,それぞれの固有振動数近傍の振動成分と減衰の係数励振を利用することで見かけ上の減衰力を増加させる制御法の提案を行い,数値計算によってその有効性を検証した.また,CPGの導入をアクティブ・セミアクティブの制振装置に応用した例は申請者の知る限りでは報告されていないため,基礎的なCPGの適用方法及びその効果について把握することから始める必要があった.そこで,先行研究ではCPGの有する基本特性を把握するため,1自由度構造物に設置したアクティブ動吸振器を対象に,CPGとPD制御を組み合わせた制御器を導出し,数値計算によってその有効性を検証し,一定の制振効果が得られることが分かっていた.しかし,通常の線形制御理論によって構成したシステムとは異なり,制御系の安定性等の評価手法がないため,提案した手法の同期特性や制振特性の評価ができていなかった.そこで非線形振動子の同期を評価する位相縮約法を利用して振動子の位相特性を評価することでシステム全体の評価を行う基礎的な手法を提案した.
植物オルガネラ間相互作用による異物認識機構に関する分子解析

感染サイクルの大半を細胞外(植物表面や細胞間隙)で営む病原糸状菌や細菌をモデルとして、分子パターン認識と病原性エフェクターの作用機構について解析してきた(H1518年度)。今年度は、糸状菌由来エフェクター(サプレッサー)の分子標的である宿主植物の細胞壁アピラーゼの相互作用分子の解析を進め、TOF/MS解析から複数の情報伝達や酸化還元関連分子の存在を示した。また、アピラーゼで生成するリン酸は細胞壁に構成的に存在するペルオキシダーゼ(POX)依存性の活性酸素生成を亢進し、さらに一群の細胞外POX遺伝子を転写レベルから活性化することを示した。一方、表層でのパターン認識に続く過敏感細胞死の分子機構について、エリシチンをモデルに解析した結果、細胞周期(M期)制御系の構成因子NbCdc27Bは過敏感細胞死には直接関与しないが、抵抗性機能発現にそのC末端領域が必要である可能性が示唆された。また、細菌由来分子パターン(フラジェリン)による下流の情報伝達・遺伝子応答についてマイクロアレーで解析し、植物固有の転写因子WRKY41を同定した。WRKY41はフラジェリン処理で急速に発現が誘導されるが、エフェクターにより発現が抑えられる。さらに、WRKY41高発現体ではPseudomonas syringaeに対する抵抗性が増高したが、逆にErwinia carotovoraに対する感受性は高まった。この結果は、WRKY41はSA系に対して正に作用していることを示す。しかし、アピラーゼ高発現体の解析から、SA経路やJA経路とは異なる情報伝達系の存在も示されている。以上から、細胞壁には植物独自の異物認識機構が存在し、細胞壁始発のシグナルは感染防御を担う様々な細胞小器官へ情報伝達され、固有の細胞内因子の活性化あるいはフィードバック機構(増幅)を介して、最終応答(抵抗性発現)が制御されているものと考察した。本研究では、病原微生物シグナルについて、そのシグナルが認識され植物感染の成否に至るメカニズムとともに情報伝達系を植物のオルガネラの応答及びオルガネラ間のクロストークという切り口で解明する。本年度は、1)オルガネラと核とのクロストークに関する解析として、シロイヌナズナの培養細胞にPseudomonas syringaeのべん毛繊維タンパク質フラジェリンとP.aeruginosa由来でフラジェリンのアミノ末端に保存されている22残基のペプチドflg22をエリシターとして処理し、転写因子に注目しつつマイクロアレイ法を用いて遺伝子発現解析を試みた。その結果、その両者においても552個の遺伝子については発現量が2倍以上に増高し、105個の遺伝子については2倍以下に減少した。増高した遺伝子のうち430個はフラジェリン特異的に、108個がフラジェリン、flg22の双方の処理で発現が誘導された。2)次に、細胞壁-原形質膜クロストークによる原形質膜情報伝達系に関する解析として、ササゲのアピラーゼ遺伝子であるVsNTPase1及び2を単離し、これらについてエリシターおよびサプレッサーに対する遺伝子応答解析を試みた。その結果、ササゲのアピラーゼである組換えVsNTPase1タンパク質がエリシターやサプレッサーに直接応答すること、VsNTPase2は恒常的に発現していたがVsNTPase1が傷処理やエリシターとサプレッサーの混合処理によって発現が誘導されること、VsNTPase1は転写レベルにおいても防御応答と同様に制御されていることが明らかとなった。

3)さらにオルガネラに存在するイオンや二次代謝産物輸送のシグナル応答とクロストークに関する解析として、ジャガイモ疫病菌が生産するエリシター;INF1エリシチンに応答するタバコのNtPDR1遺伝子について、遺伝子発現の応答性解析を試みた。この遺伝子はサリチル酸には応答しなかったが、エチレンやメチルジャスモン酸には強く発現が誘導された。さらにこの遺伝子のプロモーターについて遺伝子構造解析を行ったところ、その基本プロモーター配列であるTATA-boxの近傍にエチレン及びメチルジャスモン酸の発現誘導に関与すると考えられるcis-elements boxが見いだされた。本研究では、病原微生物シグナルについて、そのシグナルが認識され植物感染の成否に至るメカニズムとともに情報伝達系を植物のオルガネラの応答及びオルガネラ間のクロストークという切り口で解明する。本年度は、1)植物細胞膜上におけるエリシターシグナル認識と植物感染の成否に関わるメカニズムの解析として、病原細菌Pseudomonas syringe pv.tabaciのフラジェリンとフラジェリンアミノ酸配列を基に作成されたflg22を用いて、flg22のレセプターであるFLS2を保持するシロイヌナズナCol-0エコタイプと保持しないエコタイプWs-0の防御応答を比較解析した。結果、フラジェリンはCol-0,Ws-0の両エコタイプにおいて活性酸素、防御応答遺伝子の発現を強く誘導するのに対して、flg22はWs-0エコタイプにおいてのみ活性酸素、防御応答遺伝子の発現を誘導しなかった。このことはFLS2に依存しないシグナル伝達機構が存在することを示唆している。2)次に、細胞壁-原形質膜クロストークによる原形質膜情報伝達系に関する解析として、昨年に引き続きアピラーゼ遺伝子に関する解析を試みている。エンドウ褐紋病菌が生産するサプレッサーは宿主植物のアピラーゼ(Apy)を1標的とし、これと同調して働く細胞壁防御応答を阻害する。実際、Apy遺伝子をノックダウンしたベンサミアーナタバコには抵抗性が一部崩壊し,病原細菌Pseudomonassyringe pv. tabaciによる激しい病徴が認められたのに対し、逆にエンドウのApy(PsAPY1)を高発現させたタバコには病原菌に対する抵抗性が獲得された。また、防御応答遺伝子PR-1の上流で働くサリチル酸を定量した結果、野生型と比べて顕著に増加しているものと、増加が認められない形質転換体があることが判明した。以上からアピラーゼは抵抗性に深く関与しているが、既知の防御応答情報伝達系とは異なる情報伝達系を制御している可能性が示唆された。3)過敏感細胞死現象においては液胞とミトコンドリア、クロロプラスト間におけるクロストークが重要である。我々は過敏感細胞死シグナル伝達と細胞周期制御因子に注目し、INF1エリシチン処理によりその発現が抑制される遺伝子として細胞周期(M期)を制御している核分裂後期促進複合体APC/Cの構成因子であるCdc27B遺伝子を同定した。そこでベンサミアーナタバコにおいてこのNbCdc27B遺伝子についてサイレンシングを試みたところDwarf表現型が現れ、さらに防御関連遺伝子群の顕著な活性化、葉でのカロース蓄積、液胞の膨張を伴う細胞死様電子顕微鏡像が観察された。