hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
食品成分由来オートファジー誘導物質の単離及び臨床応用に関わる研究

本研究は、日頃接種している安全性の高い食品中の成分からオートファジー誘導活性を持つ因子をスクリーニングし、臨床応用を目指している。私はこれまでにオートファジーを感知する蛍光プローブであるGFP融合LC3を恒常的に発現するHeLa細胞株を樹立し、140種の食品成分より4種類の成分にオートファジー誘導活性を有する可能性を持つ事をWestern blotting並びに蛍光顕微鏡下で明らかにした。本年度は同定した4種類の成分の薬理学的位置づけを確立する目的で、オートファジーに関わる蛋白質のリン酸化に着目した。その結果、4種類の成分のうち2種類は、直接或は間接的にtarget of rapamycin (mTOR)の活性を抑制する事によりオートファジーを誘導する事が明らかとなった一方、残る二つの成分はmTORの活性に影響を及ぼす事なくオートファジーを誘導する事が示唆された。mTORの活性低下はオートファジーを誘導する一方著しい免疫抑制を誘導する事が知られており、私は後者の2成分について更に検討した。これら2成分は構造的に類似した一群のグループに分類される事から、同じ薬理作用によりオートファジーを誘導するものと予想されたが、オートファジーの上流の蛋白質リン酸化酵素であるフォスファチジルイノシトールキナーゼ(PI3K)について調べた所、両者は全く逆の活性を示し、すなわち片方の成分はPI3Kの活性を上昇させたが、残る一方はPI3Kの活性を抑制する事が明らかとなった。昨年申請当初の所属機関から、現在の滋賀医科大学に異動し、使用可能な動物・機器などの研究環境が大幅に変わり、本研究の目的に則した実験系の新たな環境での立ち上げに時間がかかった。また昨年度、(1)抗マラリア薬であるクロロキンによる小胞体ストレス緩和機構、(2)小胞体ストレス蛋白質による細胞病理機構、(3)ALSの原因遺伝子産物であるTAR-DNA binding protein of 43KDaの封入対形成に関わる分子機構、以上3つの本研究の内容に極めて関連の深い研究も同時に進めて、本研究のみに十分な時間を費やす事が出来なかった((2)、(3)は既に論文として発表済みである)。私は今年度、課題研究の内容と非常に関連性の高い二つの研究を併行して行った。(1)細胞質内に蓄積した異物処理はオートファジーが担当する一方、小胞体内で膜蛋白質や分泌蛋白質のfoldingが正常に行われずに異物として蓄積した場合、ユビキチン依存性ER associated degradation (ERAD)を介してこれら異常蛋白質は除去される。小胞体内での異物がERADの能力を超えると、細胞に強い小胞体ストレスがかかり、これら細胞はapoptosisにより死滅する。これら二つの異物処理機構は密接な関与が指摘され、今年度私は小胞体ストレスを緩和する薬剤の同定に、HeLa細胞を用いた系で成功した。更にこの薬剤が生体内で有効か否かを検討する目的で、小児の代表的な先天性白質形成不全で、小胞体ストレスが原因で発症するPelizaeusMerzbacher病(PMD)のモデルマウスに接種し、その有効性を確認した。(2)カレーの有効成分の一つクルクミン(ウコン)は、多くの疾患治療に応用されている。
超並列演算構造をもつ適応的ロバスト制御系の非線形系に対する実用性に関する基礎研究

本研究の目的は、非線形特性を有する制御対象に対する周波数領域の直交性に基づく超並列化適応制御システムの理論的および実践的検討である。非線形制御対象に対する適応制御理論として、ごく最近、全く新しい概念に基づく2種類の適応制御理論が提案された。適応バックステッピングと高階調整法である。従来の非線形適応制御として代表的なSastryの構成法は、伝統的な適応制御系の構成概念であるCertainty Equivalence(CE)に基づき、微分幾何学を数学的背景とした構成法であったが、この2つはCE原理に基づかず、調整則を含めた閉ループ非線形系の安定化問題としての解を与えている。そこで本研究では、まず非線形、超並列、適応制御系の理論的研究の始めとして、適応バックステッピングのロバスト化の問題を焦点をあて研究した。現在までに得られている結果は、「一様有界な外乱が存在する1入出力系の線形時不変制御対象に対して、各ステップごとにロバスト調整則であるシグマ修正法を導入することにより、外乱に対してロバストなロバスト適応バックステッピング手法を提案し、系内の全信号の有界性を証明した」ことである。これより、本研究の目的に近づいたわけであるが、さらに非線形系に周波数領域に基づく並列処理を施す場合には、その非線形性の周波数領域での取り扱いが重要な理論的問題であり、現在この点について研究中である。
細胞極性蛋白質複合体による上皮タイトジャンクション形成の制御機構

脊椎動物の体は6割以上が上皮細胞で構成され、この細胞が作る圧倒的な面積のシートが体内と体外の環境を隔て、脊椎動物の生命を支えている。上皮細胞は、外界に接するapical膜と体内側に接するbasolateral膜という性質の異なる細胞膜ドメインを持ち、機能的にも形態的にも細胞極性を持つ。この2つの膜ドメインを分かつのがタイトジャンクション(tight junction: TJ)であり、TJの形成には、細胞極性の制御に関わる蛋白質複合体「Par-aPKC複合体」(aPKC: atypical protein kinase C)が必要であることがよく知られている。しかしながら、この3者複合体がTJ形成を促進する際の機序については不明な点が多い。申請者は最近、Par-aPKC複合体に結合する膜貫通型タンパク質ParTR1を同定し、TJ形成の強力な負の調節因子であることを見出した。本研究は、この新規TJ調節因子ParTR1に対するPar-aPKC複合体の作用機序、細胞及び個体レベルでのParTR1の機能の解析を軸に、Par-aPKC複合体によるTJ形成の制御メカニズムを解明する。これまでの実験から、ParTR1とClaudin-1タンパク質が結合することを見出していたが、本年度は、この結合に関わるParTR1のタンパク質領域を明らかにした。また、ParTR1がclaudin-1に加えclaudin-2にも結合することを見出し、Claudin-1及びclaudin-2の各々のホモオリゴマー形成をParTR1が抑制すること等を示した。申請書の実験計画通りに、順調に研究を進めることができているため。MDCK細胞において内在性のParTR1がTJに局在することを見出している。ParTR1が機能を発揮するためにもTJへの局在の制御は重要と考えられるが、その機構は未だ不明である。そこで、ParTR1のTJへの局在に必要な領域を同定する。また、ParTR1がPar3やClaudin1などのTJタンパク質と結合することから、これらのタンパク質によりリクルートされる可能性を検討する。Par3およびClaudin1について、CRISPR-Cas9による遺伝子欠失や、siRNAを用いたノックダウンを行い、ParTR1のTJへの局在に対する影響を細胞染色により解析する。
自食作用に関与する遺伝子群の分子生物学的解析

近年我々は酵母細胞が種々の栄養飢餓条件下に高等動物細胞で知られると同様な自食作用を誘導することを見いだした。すなわち細胞を種々の栄養飢餓にさらすと1時間後に液胞内に細胞質を内容物とする-重膜構造-自食体が形成される。この形態学的な特徴に基づき自食作用に欠損をもつ変異株を系統的に取得した。それらの遺伝解析の結果、この過程に少なくとも15個のAPG遺伝子が関与することを明らかにした。これは複雑で高度に制御されている自食作用の研究に初めて遺伝学的手法を導入したものである。これらAPG遺伝子の構造と機能の解析を通じて自食作用の膜動態を分子レベルで理解することを目的とした。最初に得られたAPGI遺伝子のクローニング、塩基配列の決定、遺伝子破壊、遺伝子の改変、遺伝子産物の同定を行った。その結果APGI遺伝子は897個のアミノ酸からなるタンパク質キナーゼをコードすることが明らかとなった。現在自食作用の誘導に必須の本酵素の詳細な解析を進めている。さらに他の多数のAPG変異もクローニング、構造解析が進行中であり、これらの相互関係の解析が進みつつある。pg変異は電子顕微鏡観察の結果、極立った膜構造の蓄積をもつものはみとめられなかった。しかし液胞欠損株二重変異株はオートファゴソームを蓄積することが明らかとなり今後の生化学的解析の手掛りが得られた。
分子シャペロン、Hsp27とαBクリスタリンの細胞内蛋白質品質管理に果たす役割

(1)デスミン関連ミオパシー患者の一家系で報告されているαBクリスタリンの変異体であるR120GαBクリスタリンの哺乳動物細胞内における性質について解析した。一過性に発現させたR120GαBクリスタリンは、主に細胞成分の不溶性画分に存在し、細胞内で複数の封入体を形成していること、そして、Hsp27を共発現することでその封入体形成を阻止できることを明らかにした。(2)ロテアソーム阻害剤(MG-132)に対するHsp27とαBクリスタリンの応答を、ヒトグリオーマ細胞U373MGおよびU251MGを用いて解析し、以下の結果を得た。1)MG-132で誘発される両シャペロンの誘導および不溶性分画への蓄積とユビキチン化蛋白質の蓄積は、細胞内封入体の形成をもたらし、細胞死を引き起こした。2)しかし、シクロヘキシミドなどの蛋白合成阻害剤を共存させると、熱ショック因子(HSF)の活性化が阻止され、不要性分画への上記蛋白質の蓄積と封入体形成が阻止されて細胞死が一時的に防御された。3)逆に、MG-132によるHSFの活性化を促進する作用のあるlipoxygenaseの阻害剤、nordihydroguaiaretic acid (NDGA)を共存させると、両シャペロンの不溶性分画への蓄積とユビキチン化蛋白質の蓄積が増加した。NDGA単独では上記の作用は認められなかった。以上の結果より、プロテアソーム阻害剤によるαBクリスタリンおよびHsp27の不溶性分画への蓄積はHSFの活性化が密接に関与していることが示唆された。(3)αBクリスタリンと相互作用する蛋白質を同定するためyeast two-hybrid法によるスクリーニングを開始した。これまでに複数の陽性クローンを得て、それらの全長cDNAを取得し、結合ドメインの解析、組換え蛋白質の精製、培養細胞での発現などを現在行っている。(4)酸化ストレスが神経組織封入体形成に関与していることが知られている。現在酸化ストレス(diethyl maleate, diamide,過酸化水素)と細胞内蛋白質の異常蓄積について解析中である。
密度行列繰り込み群による一次元量子系の研究

量子ドットの輸送現象を理論的に研究するモデルとしては、一準位のドットが一次元のリード線によって電池につながっている系がもっとも簡単である。われわれは有限バイアス下での非平衡定常状態の研究に興味を持ち、この系の時間発展を数値的に追いかける時間依存密度行列繰り込み群のプログラムを開発し、有限系でも十分長いシステムを用意すれば、非平衡定常状態を実現しうることを明らかにした。この研究は前年度から進めていたが、その成果をまとめてJ.Phys.Soc.Jpnに発表した。密度行列繰り込み群とは相補的な数値計算手法として量子モンテカルロシミュレーションがある。真空キャビティ中に二準位系を置き、それらのキャビティが格子を組んだモデルはレーザー発振の簡単な理論的モデルになっているが、この系の"金属"絶縁体転移を調べている。ボーズ系の"金属"絶縁体転移では、ボーズハバード模型が一番よく調べられている。われわれは二次元キャビティ格子についてその"金属"絶縁体転移の臨界性について研究を進めている。ボゾンと結合したフェルミオン系の研究も最近開始した。一次元のホルシュタインモデルを考え、その基底状態については、Steven Whiteたちによる密度行列繰り込み群による研究がある。それによれば、平均場近似とは異なり、有限の結合定数で朝永Luttinger液体から二量体化した絶縁相への転移が起こることが主張されている。われわれは量子モンテカルロシミューションを用いて、この相転移とその周辺での有限温度の振る舞いの研究を開始した。秩序変数を始め、磁化率、圧縮率などの有限温度での性質を今後調べる予定である。引力を持つ一次元多成分ハバード模型の基底状態を密度行列繰り込み群を用いて調べた。ハーフフィリングの場合、SU(N)対称性を持つ模型では、Nが3以上の場合、絶縁体で密度波が立っている基底状態を持っていることが明らかになった。この結果は、SU(N)対称性を持つ系の性質は、これまで多くの人が調べてきたSU(2)対称性の場合の基底状態とは定性的に異なっていて、SU(2)系の単純な拡張ではないことを意味している。この研究はすでに、Journal ofthe Physical Society of Japanの論文として公刊されている。時間に依存した密度行列繰り込み群については、大学院生の共同してそのプログラムを開発し、量子ドットを介した非平衡定常状態の輸送現象の研究にあたった。この研究についても最初の成果を論文としてまとめ、現在投稿中である。最近は、量子モンテカルロシミュレーションを用いて、二次元量子系の研究を進めている。具体的には、真空キャビティに二準位系を置いた物を、二次元配列した系の金属絶縁体転移について研究を進めている。
膜蛋白質の核輸送を規定する因子の同定

一方、ごく最近、ウイルス蛋白質ODV-E66がER膜から核膜孔を通って核内膜に移行することが示されたことから、このODV-E66のアミノ酸配列をHB-EGF-CのTM領域に置き換えたcDNAを作成しプラスミドに組み込んだ後、発現させ、翻訳後速やかに核内膜に機能的に移行することを試みている。これにより、HB-EGF-Cの核内膜移行に必須のアミノ酸配列を明らかにできると考えている。
動物ゲノムのレプリコン構造解明のためのDNA複製部位可視化法の開発

生きている動物細胞に蛍光標識ヌクレオチドを取り込ませ、複製中のDNAをラベルすることで、実際に複製が起こっているDNA領域を視覚的に検出できる技術を確立した。これを用いて、染色体DNAが間期核内でどのような順序、空間的配置で複製されるのかを詳細に解析した。その結果、細抱周期のS期が進むにつれて複製部位が核の内部から外部へと徐々に移動し、それが分裂期染色体のR/Gバンド構造と密接に関連していることを明らかにした。このことから、染色体DNAが一見無秩序に詰め込まれているような間期核内でも、それらは高度に組織化され、DNA複製制御と密接に関わっていると推定した。また、この方法で複製ラベルしたDNAを細胞核からファイバー状に引きのばし、より高解像度でDNA複製を解析できる技術を確立した。これにより、数千数十万塩基対の間隔でゲノム上に存在する複製開始領域を明確に検出することに成功した。これを用いて、細胞周期を同調した培養細胞でS期の最も初期に活性化される染色体複製ドメインを詳細に解析した結果、一つの複製ドメインを構成する複数のレプリコンのうち、最初に活性化されるレプリコンと、最初に活性化されたものに影響を受けて少し遅れて活性化されるレプリコンの二種類が存在することを明らかにした。また、細胞周期ごとに異なる標識を用いて複製ドメインを検出することで、複製ドメイン及び個々のレプリコンの利用(活性化)頻度を調べた結果、特定の複製ドメインはどの細胞周期でも安定に活性化される傾向にあったが、複製開始部位はそれほど厳密に決定されていないことを明らかにした。さらにFISH法と組み合わることにより特定のゲノム領域の解析ができるかを検討したところ、数十万塩基対にわたるマウスメジャーサテライト反復配列のみならず、1コピーしかないロドプシン遺伝子領域においても複製ドメインの構造を解析することに成功した。
neuronal identity決定の機構-神経発生と高次脳機能の接点の解明-

脊椎動物神経細胞のneuronal identity決定機構を明らかにするため、Bar型ホメオボックス(BarH)遺伝子に着目した。BarH遺伝子は、ショウジョウバエ神経系細胞の性質決定を制御する。また、我々が以前にクローニングした哺乳動物のBarH遺伝子、MBH1は間脳背側のneuromereで発現し、HLH型転写因子のMash1やneurogenin2遺伝子の上流で機能することが示唆されている。今回、MBH1の発現様式をさらに詳細に調べた結果、MBH1は小脳や脊髄、網膜の一部の神経細胞では分化後に一過的に発現することが明らかとなった。また、線虫やショウジョウバエではBarH遺伝子が複数存在することから、哺乳動物の新たなMBH遺伝子をdifferential PCR法で検索し、新しい遺伝子のMBH2をクローニングした。アミノ酸配列の比較から、MBH2遺伝子はMBH1遺伝子に最も近縁であり、ショウジョウバエと哺乳動物の各々のBarH遺伝子は脊椎動物と無脊椎動物の分岐後にそれぞれ遺伝子重複で生じたと考えられる。ショウジョウバエの2つのBarH遺伝子は、同一染色体上に並んで存在し、同一細胞の同時期で発現するのに対し、MBH1とMBH2は異なる染色体上にマップされ、発現細胞は同一ではなかった。網膜はMBH1のみを発現するが、神経提細胞はMBH2のみを発現し、小脳顆粒細胞や脊髄背側の神経細胞ではMBH2からMBH1への遺伝子カスケードが存在することが明らかとなった。また、昨年度確立した電気穿孔法を用いてのマウス胎仔への高効率遺伝子導入法を利用し、中枢神経系の特定部位にレポーター遺伝子を導入し、神経系構築時における細胞系譜の解析を行った。脊椎動物の神経系には、多種多様な神経細胞が存在し、その多様性に高次脳機能は支えられている。この多様な神経細胞の個々の性質、つまりneuronal identityが分子レベルでいかに決定されるのかを明らかにするため、個々の神経細胞で特異的に発現する遺伝子ファミリーをdifferential PCR(dPCR)法で探索した。Bar型ホメオボックス(BarH)遺伝子は、ショウジョウバエ網膜等の神経系細胞の発生・分化で機能し、我々が以前にクローニングした哺乳動物のBarH遺伝子MBH1も、特定の神経細胞群で特異的に発現する。今年度は、さらに解析を進め、哺乳動物の新しいBarH遺伝子MBH2をクローニングすることに成功した。MBH2タンパク質は、線虫やハエのタンパク質より、MBH1タンパク質と最もよく似ており、このことからMBH1とMBH2の両遺伝子は、脊椎と無脊椎動物の分岐後に派生したと考えられる。MBH2は、MBH1と同様に、間脳等の神経系で特異的に発現する。しかし、ショウジョウバエのBarH1とBarH2が、同一染色体上に並んで存在し、ともに同一細胞の同時期に発現するのに対し、MBH1とMBH2は、異なる染色体上にマップされ、異なる領域で発現することが明らかになった。また、得られた遺伝子の解析実験系として、電気穿孔法でマウス胎仔の神経組織へ高効率で遺伝子導入し、遺伝子導入後の胎仔を出生後も生育させる系を確立することに成功した。これにより、大脳皮質から、海馬、中脳、脊椎にいたる神経組織の特定部位で特異的に目的の遺伝子を発現させることが可能となり、遺伝子機能を個体レベルで解析することが出来るようになった。
血管内皮細胞機能を調節する魚類由来機能性ペプチドの解析研究

2.Tuna AIにより(kininase II阻害を介して)作用が増強されるbradykinin(BK)がET産生を抑制し、tuna AIの作用がBK B_2-receptor antagonist,B-3824によってブロックされた。さらにBKにより刺激されるNOやprostaglandinの生合成の阻害剤がいずれもtuna AIのET産生抑制効果を消失した。従って、tuna AIのET産生抑制作用はBAECにおけるBK作用の増強によりもたらされることが判明した。4.Tuna AIフラグメントのなかでACE阻害作用のあるPTHIKWとIKW、ACE阻害作用のないIKWGDのにつきET産生への影響をみたところ、IKWとIKWGDに抑制がみられ、ACE阻害とET産生抑制には相関はなかった。以上より、本ペプチドは血管内皮細胞においてkininase II-BK系に加えて少なくとももう一つ別の作用点を介してET産生を抑制することが強く示唆された。
日本人前立腺癌の特性

1前立腺癌のアンドロゲン受容体、ホルモン依存性と内分泌療法小數例の癌組織を用いて、アンドロゲン受容体の存在が確認された。生検材料を用いて多數例の検討をおこなうため、組織化学的にR1881結合蛋白の有無をみた結果、数60%以上に本蛋白の陽性像がみられた。本蛋白の有無と、内分泌療法の反応性とは相関することが示された。これより進行期の前立腺癌の60%以上は、ホルモン依存性の発育をしていることがわかった。臨床的觀察で、内分泌療法開始後1年で80%以上、2年で60%制癌されているが、これはR1881結合蛋白の結果をうらづけるものである。2前立腺癌の病理組織学的検索悪性度分類について、いくつもの試案が提唱されていることより、現在おこなわれている6種類の方法を比較した結果、日本の取扱い規約のものが妥当性あることがわかった。日米の比較が実施され未だ小數例であるがアメリカのほうが低分化癌が多い傾向をうかがわせた。多數例の本邦集計では、高分化癌や中等度分化癌はあまり差がないが、低分化癌は予後の悪いことがわかった。3疫学的検索日本の前立腺癌は発生率の微増と、死亡率の漸増が示された。両者の比は、約2:1である。危険因子として、βカロチンの摂取量の低下が推測された。4実験的ホルモン依存癌アンドロゲンのみに依存しているとみなされた癌においても、エストロゲン、およびその他の因子の関与が考えられた。
環境ストレスに応答して植物の成長を制御する転写因子の単離と解析

植物の成長は光、低温、乾燥といった外的要因によって大きく影響を受ける。近年の研究の発展によって植物が様々な環境情報を受容、伝達する分子メカニズムについては理解が進んだが、こうした環境要因の変化によって実際に根や葉などの植物器官の成長が調節されるメカニズムについてはまだよく分かっていない。本研究では植物の環境応答に関与する新規制御因子を単離し、それらの機能を明らかにすることを計画した。産総研高木優博士、光田展隆博士との共同研究のもとシロイヌナズナのキメラリプレッサー系統を用いて、通常生育条件下、及び50mMマニトール培地を用いた軽度の乾燥条件下で成長異常をみせる変異体スクリーニングを行った。今年度は、これまでに単離した15個の転写因子(GROWTH REGULATORY TRANSCRIPTION FACTOR, GRTF)について、機能欠損体、過剰発現体を作出し、さらに詳細な機能解析を進めた。解析の先行しているGRTF4は詳細な表現型解析の結果、細胞の増殖、分化を制御することが分かった。GRTF4の発現は植物のストレスホルモンのひとつであるアブシジン酸投与後に上昇することから、GRTF4が環境ストレスに応答して器官成長を最適化するために機能するという仮説を検討した。またGRTF10については、傷害に応答して発現上昇し、細胞の分化、脱分化の制御に関連することを示唆するデータが得られた。これらの因子の作用機構を分子レベルで明らかにするため、それぞれのGRTF-GFP植物体、GRTF-GR植物体を作出し、全ゲノムクロマチン免疫沈降(ChIP-seq)及び全ゲノム遺伝子発現解析(RNA-seq)を進めた。これまでに終了したRNA-seqのデータ解析からは、GRTF4がリンや窒素などの栄養欠乏を感知、応答するのに必要な遺伝子の発現を制御する可能性が見えてきた。(抄録なし)植物の成長は光、低温、乾燥といった外的要因によって大きく影響を受ける。最近の研究の発展から植物が様々な環境情報を受容、伝達する分子メカニズムについては理解が進んだが、こうした環境要因の変化によって実際に根や葉などの植物器官の成長が調節されるメカニズムについてはまだよく分かっていない。本研究は植物の環境応答に関与する新規制御因子を単離し、それらの機能を明らかにすることを目的としている。環境情報の受容や伝達、その下流での細胞増殖、伸長、分化の時空間的な制御には、これらの過程の進行に必要な多数の遺伝子の発現を同時に調節しなければならない。このためには、シグナルカスケードのハブとして働く転写因子が多数存在し、上流からの複雑な情報を統合処理し、細胞増殖や成長に関与する標的遺伝子の発現を誘導、もしくは抑制するものと予測される。本研究では、重複性の高い転写因子ファミリーの機能解析に優れたキメラリプレッサー系統(転写抑制領域を付加した機能変換型転写因子を過剰発現した形質転換体)を用いた変異体スクリーニングを行い、植物個体内で細胞の増殖、成長を時空間的に制御する新規転写因子を単離する。本年度は乾燥ストレス下で器官成長を制御する分子機構に焦点をあてて、解析を進めた。具体的にはまず簡便に植物の乾燥ストレス応答を誘導できるマニトール添加培地を用いた実験系を立ちあげた。次にこの生育条件下でシロイヌナズナのキメラリプレッサー系統を用いた変異体スクリーニングを行い、野生型に較べて成長異常を示す変異体系統の選抜を試みた。これまでに200遺伝子分に相当する形質転換体を検討し、数個の遺伝子について再現性のある成長異常を確認した。Rymen氏は当初の計画通り着実に研究を進行させ、成果をあげている。着任以来、産総研高木優博士、光田展隆博士との共同研究のもとシロイヌナズナのキメラリプレッサー系統(転写抑制領域を付加した機能変換型転写因子を過剰発現した形質転換体)を用いて、通常生育条件下及び軽度の乾燥条件下で成長異常をみせる変異体スクリーニングを行い、これまでに15個の新規成長制御因子(GROWTH REGULATING TRANSCRIPTION FACOTR, GRTF)を単離した。これらの変異体の多くは通常生育条件下でも非常に興味深い表現型を示すが、なかでも解析の先行しているGRTF4は細胞の増殖、分化を制御することが分かり始めている。GRTF10についても細胞の分化、脱分化の制御に関連することを示唆するデータが得られており、両者については、過剰発現体、変異体系統の作出、解析を優先させている。これらの因子の作用機構を分子レベルで明らかにするためには、直接転写制御を受ける下流遺伝子を同定、解析する必要があるため、ChIP-seqに必要なGRTF-GFP植物体やRNA-seqに必要なGRTF-GR植物体の作出も進めている。今後さらにこれらの因子の環境ストレス応答における機能についても解析を進める。また受入研究者はRymen氏と総説を執筆し、Current Opinion in Plant Biology誌に発表した。この総説では環境条件の劣悪化に伴って植物の器官成長が減速するメカニズムについて、最新の分子レベル、細胞レベルでの知見をまとめ、今後の展望について議論した。産総研高木優博士、光田展隆博士との共同研究のもと

シロイヌナズナのキメラリプレッサー系統を用いて、通常生育条件下、及び50mMマニトール培地を用いた軽度の乾燥条件下で成長異常をみせる変異体スクリーニングを行った。今年度は、これまでに単離した15個の転写因子(GROWTH REGULATORY TRANSCRIPTION FACTOR, GRTF)について、機能欠損体、過剰発現体を作出し、さらに詳細な機能解析を進めた。解析の先行しているGRTF4は詳細な表現型解析の結果、細胞の増殖、分化を制御することが分かった。GRTF4の発現は植物のストレスホルモンのひとつであるアブシジン酸投与後に上昇することから、GRTF4が環境ストレスに応答して器官成長を最適化するために機能するという仮説を検討した。またGRTF10については、傷害に応答して発現上昇し、細胞の分化、脱分化の制御に関連することを示唆するデータが得られた。これらの因子の作用機構を分子レベルで明らかにするため、それぞれのGRTF-GFP植物体、GRTF-GR植物体を作出し、全ゲノムクロマチン免疫沈降(ChIP-seq)及び全ゲノム遺伝子発現解析(RNA-seq)を進めた。これまでに終了したRNA-seqのデータ解析からは、GRTF4がリンや窒素などの栄養欠乏を感知、応答するのに必要な遺伝子の発現を制御する可能性が見えてきた。実験系のセットアップを十分検討したため、スクリーニングは順調に進行している。既に有力な制御因子を同定しており、残りの任期内にその機能解析を進めることが可能であると予想されるため。引き続きマニトールを用いたスクニーニングを継続し、出来るだけ多くの変異体を獲得する予定である。また候補系統については原因遺伝子の同定を順次進め、機能解析を開始したい。転写因子の解析については研究室内にノウハウが十分蓄積しており、特に問題点は想定されない。今年度中には全ての実験材料がそろう予定であり、任期中に必要な実験を全て終了出来るものと考えている。(抄録なし)
ループ型カーボン繊維マイクロブラシによる軽量・低起動トルクすべり軸受の提案

ループ型カーボン繊維ブラシ(LCFB)の列を円環内面に組み合わせた金属軸とのすべり軸受を試作し、トルク及び負荷容量の評価を行い、LCFBによる軽量・低起動トルクすべり軸受の可能性を明らかにした。その結果、試作したLCFBすべり軸受のトルクを測定した結果,LCFBすべり軸受は起動トルクと定常トルクとの差異が少ない低起動トルク軸受であることが明らかになった。また、金属軸としてマイクロスプライン軸を用いることでLCFBすべり軸受に発生するトルクの速度依存性を減少することが可能であることを示した。更に、LCFBを構成するカーボンファイバー束の座屈荷重から,軸受の負荷容量の設計指針を提案した.(1)カーボン繊維をループ状に束ねたループ型カーボン繊維マイクロブラシ膜の創製硬質カーボン繊維を束ね,円筒に巻き付け、円筒を抜くことにより、ループ状のカーボンマイクロブラシを創製することに成功した。また、円筒の形状を変えることで、突き出し長さも変化させることが可能となった。(2)ループ型カーボン繊維マイクロブラシのすべり出し時の真実接触面積その場観察装置の検討楕円偏光金属顕微鏡上の1軸ステージにガラスプリズムを固定し、ループ型カーボン繊維マイクロブラシを種々の荷重で押しつけ、ガラスプリズムを水平方向に移動する際の動画をビデオ撮影し、ループ型カーボン繊維とガラス面の真実接触面積を計測する方法の可能性を検討した。具体的には、新潟大学の新田教授、月山助教の研究室において、ループ型カーボンブラシを所定の荷重で押しつけ、接線方向に力を作用し、巨視的すべりが生じるまでの過程における、接触長さを測定し、接線方向の力とブラシの接触長さと比例関係である事を明らかにした。この結果より、摩擦力の制御が、ループ型カーボンブラシの変形特性の制御により可能となることが明らかになった。1.ループ型カーボン繊維マイクロブラシ(LCFB)ジャーナル軸受の試作ループ型カーボン繊維マイクロブラシによりジャーナル軸受を構成するためには、軸受材料にカーボン繊維を植毛する方法もあるが困難が予想される。そこで、柔軟な樹脂平板にミシンによりカーボン繊維をループ型に植毛し、樹脂平板を湾曲させ、軸受内部に挿入するループ型カーボン繊維マイクロブラシジャーナル軸受を試作した。2.ループ型カーボン繊維ブラシによる軽量・低起動トルクすべり軸受の可能性の検討試作したループ型カーボン繊維マイクロブラシジャーナル軸受と金属軸とでジャーナル軸受を構成し、研究室に既存の横型旋盤装置を改良した軸受摩擦評価装置を用いて、低起動トルク及び負荷容量の評価を行い、ループ型カーボン繊維ブラシによる軽量・低起動トルクすべり軸受の可能性を明らかにした。その結果、試作したLCFBすべり軸受のトルクを測定した結果,LCFBすべり軸受は起動トルクと定常トルクとの差異が微小な低起動トルク軸受としての機能を有することが明らかになった。また、相手面テクスチャによる摩擦低減を応用したマイクロスプライン軸を用いることで,LCFBすべり軸受に発生するトルクに速度依存性がなくなった.その結果,主軸回転数の増加とともにLCFBすべり軸受のトルク低減効果が大きくなることが明らかになった。更に、LCFBを構成するカーボンファイバー束の座屈荷重から,軸受の設計指針を提案した.当初の計画内容は全て完遂した。加えて、平成28年度の研究内容であるマイクロブラシジャーナル軸受の設計指針の提案も行った。このため、当初の計画以上に進展していると見なせる。更に、LCFBを構成するカーボンファイバー束の座屈荷重から,軸受の設計指針を提案した.ループ型カーボン繊維ブラシ(LCFB)の列を円環内面に組み合わせた金属軸とのすべり軸受を試作し、トルク及び負荷容量の評価を行い、LCFBによる軽量・低起動トルクすべり軸受の可能性を明らかにした。更に、LCFBを構成するカーボンファイバー束の座屈荷重から,軸受の負荷容量の設計指針を提案した.当初の計画内容は全て完遂した。

加えて、平成27年度の研究内容であるマイクロジャーナル軸受けの設計にも着手した。このため、当初の計画以上に進展しているとみなせる。当初の研究計画は概ね遂行されたが、実用化に当たって更なる低摩擦化及び負荷容量の増大化が求められる。H28年度はこの2点について更に研究を進める予定である。トライボロジー当初の予定通り、H27年度は以下の研究を行う。(3)ループ型カーボン繊維マイクロブラシの滑り出し時の真実接触面積と摩擦力の関係の解明と低静摩擦のための設計指針の提案ループ型カーボン繊維マイクロブラシ真実接触面積その場観察装置により、種々のループの突き出し長さにおいて、真実接触面積と摩擦力の関係を明らかにし、ループ型カーボン繊維マイクロブラシの弾性変形の静・動摩擦特性に及ぼす影響を明らかにする。それらの特性の中でも、起動時トルクの摩擦につながるのが静摩擦力であるため、静摩擦を減少させるループ型カーボン繊維マイクロブラシの設計指針を提案する。(4)ループ型カーボン繊維マイクロブラシジャーナル軸受の試作ループ型カーボン繊維マイクロブラシによりジャーナル軸受を構成するためには、軸受材料にカーボン繊維を植毛する方法もあるが困難が予想される。そこで、柔軟な樹脂平板にミシンによりカーボン繊維をループ型に植毛し、樹脂平板を湾曲させ、軸受内部に挿入するループ型カーボン繊維マイクロブラシジャーナル軸受を試作する。研究分担者において、実験を年度をまたいで実施しているため、残金が生じている。種々の突き出し量のループ型カーボンファイバーブラシの作製のために本予算を確保していたが、軸受け形状の決定が遅れ、製作できなかった。H28年度が最終年度であるが、今年度、研究の進展により新たに立てた高い研究目標達成のために、早期に使用する予定である。ループ型カーボンファイバーブラシを用いたジャーナル軸受けの設計製作において、材料の購入に使用する予定である。
マイクロRNA解析と確率的評価法を組み合わせた新規体液識別法の開発

DNA鑑定における体液検査は犯行現場に遺された証拠を評価するために重要である。我々は提供の同意が得られた血液、唾液、精液、腟分泌液、表皮から、miRNAを用いた検査法の開発を目指した。血液ではmiR-144-3pやmiR-451a-5p、精液ではmiR-888-5pやmiR-891a-5pが特異的に発現していることを明らかにした。唾液や腟分泌液はmiR-203aとmiR-1260bの発現量を二次判別分析に用いることで、正しく判定することができた。また本法が法医実務に応用できるかを検証するべく無精子症や精子無力症の精液、卵胞期や黄体期の腟分泌液を調べると、これらの個人差の影響はみられなかった。DNA鑑定では何の体液かを判定することは重要であるが、現行法では特異性が低く劣化した試料での判定は困難である。我々は血液、分子量が小さく比較的安定なマイクロRNA(miRNA)に注目し、識別指標となるかについてヒト各種体液についてqPCRで調べた。倫理委員会の承認を受け、提供の同意を得て血液、唾液、精液、腟分泌液、皮膚表面を湿らせた綿棒で拭ったTouch sampleを採取した。識別マーカーとなりうる候補miRNAを各3種類選択した。RNAを抽出してtotal RNA量と200塩基以下の短いsmall RNA量を測定したところ、血液、精液、腟分泌液からは十分なtotal RNAが回収されたが、唾液、Touch sampleでは回収量が少ないものもあった。small RNAも血液、精液では十分量であったが、唾液、Touch sampleは微量であった。reference RNAのCq値の平均値による補正を行い、各体液試料の候補miRNAの発現を観察した。血液ではmir-144-3p、mir-451a-5p、精液ではmir-888-5p、mir-891a-5pが特異的に高発現していた。唾液ではmir-203a、mir-205-5pが高発現していたが、腟分泌液、Touch sampleでも同程度に発現しており定性的な判定は困難と考えられた。腟分泌液ではmir-155-5p、mir-1260bが比較的高発現であったが、精液でも高発現しており定性的な判断は困難と考えられた。Touch sampleはmiRNAの発現が殆どなく、由来する細胞成分についての再検討が示唆された。この結果、今回検索したmiRNAマーカーは血液及び精液の判定に有効であるが、唾液、腟分泌液、Touch sampleでは単独マーカーによる識別は困難で、複数のmiRNA組み合わせた定量的な評価が必要であると考えられた。初年度の研究計画において、in silicoでのmiRNA検索を徹底したため、割合短時間でそれぞれ数種類のmiRNAの候補マーカーを挙げることができた。また、試料の採取に関してその特殊性からボランティアを募る手段がまとまらず研究遅滞が予想されたが、産婦人科と泌尿器科の医師の協力に恵まれ、試料採取や倫理委員会審議が割合スムーズに進行した。一方、実験遂行にあたっては、試料の劣化状態を確認するため、電気泳動によるRNA integrity number (RIN)の値を指標に用いる予定であったが、予想に反して、体液試料のRNAの電気泳動図では分子量の大きいRNAがほとんど検出されず、RINはいずれの試料でも新鮮な細胞から得られる値を下回って、多くが劣化試料と判断されることとなった。しかし、血液や精液は多量の液体成分を含んでいるので、細胞由来の比較的高分子のRNAよりも液体成分中にみられる低分子のRNAが多く回収されたためであり、RINの値が小さくても必ずしも劣化が非常に進行しているとはいえないことが示唆された。今後、より実際的な実務試料分析を想定して、紫外線などによる実験的劣化試料を扱うことになるが、その際のmiRNAの劣化程度の指標としてどのようなものが適当であるのかを現在検討中である。昨年度は5種類の体液を収集し、体液中のmicroRNA量を定量PCRで測定した。その結果、血液と精液では検出されるか否かといった定性的な識別が可能となった。今年度は特に定性的な識別が困難であった唾液、腟分泌液に着目し、定量的な識別方法の開発を目指した。まず初めに、定量的な識別に必須となるreference RNAの探索を行った。reference RNAは定量PCRで得られた発現量を補正する役割があり、対象とする体液で一様に多く発現していることが望まれる。我々の検討では11種類のreference RNAを選別し、それぞれの体液中での発現量と個人間及び体液間でのバラつきを基にして最適なreference RNAを決定した。その結果、5S-rRNAが最も高発現し、バラつきが小さいと判断された。また、一般に複数のreference RNAを組み合わせることで定量PCRの結果の補正精度を高められることが知られているが、5S-rRNAとmiR-92a-3pあるいはmiR-484を組み合わせると精度が最も向上すると判断された。次に、このreference RNAを用いて唾液と腟分泌液の定量的な識別を試みた。唾液、腟分泌液でそれぞれ比較的多く発現しているmiR-203a、miR-1260bの発現量を変数として設定した二次判別分析を行ったところ、殆どの試料が正しく判定された。最後に、我々が提唱する体液識別システムについて個人差の影響がないかを調査した。

特に精液や腟分泌液の個人差に着目し、精液については健常精液の他に無精子精液、精子無力症精液を、腟分泌液については性周期の異なる卵胞期と黄体期のものを収集した。精液及び腟分泌液の個人差は我々の対象とするmicroRNAの発現量に影響はなく、血液、唾液、精液、腟分泌液の識別が可能であることが示唆された。DNA鑑定における体液検査は犯行現場に遺された証拠を評価するために重要である。我々は提供の同意が得られた血液、唾液、精液、腟分泌液、表皮から、miRNAを用いた検査法の開発を目指した。血液ではmiR-144-3pやmiR-451a-5p、精液ではmiR-888-5pやmiR-891a-5pが特異的に発現していることを明らかにした。唾液や腟分泌液はmiR-203aとmiR-1260bの発現量を二次判別分析に用いることで、正しく判定することができた。また本法が法医実務に応用できるかを検証するべく無精子症や精子無力症の精液、卵胞期や黄体期の腟分泌液を調べると、これらの個人差の影響はみられなかった。これまでの研究により、血液と精液に関しては特異的なmiRNAマーカーが得られたので、定性的な判定が可能となったが、唾液、膣分泌液、touch sampleに関しては複数マーカーを合わせた定量的解析が必要となることがわかった。今年度はこの定量的解析システムの構築がまず第一の研究方策となる。一方、現在の法医鑑識領域でのDNA検査はSTR型をキャピラリー電気泳動で解析する方法がとられている。しかし、国際的には次世代シークエンサーが普及し始めており、コストや解析時間、塩基配列の判定精度が改善されればいずれは移行されていくと考えられる。このため、現在、リアルタイムPCRで得られた⊿Cq値のデータがあるが、論文の中には次世代シークエンサーで得られたmiRNAのリード数のデータを発表しているものもある。そこで、本識別システムの検査データ利用はリアルタイムPCRで得られる⊿Cq値だけでなく、次世代シークエンサーで得られるリード数にも対応した識別システムを構築することを考えている。一連のモデルの設定および検証にはそれぞれ新たな試料を用意し、in silicoでのロジスティック回帰とシミュレーションを用いて構築し、複数のモデルの中で感度、特異度、正答率を基に最も優れた精度を示すモデルを採用することを考えている。実務利用のためのもう一つの重要な研究はシステムの検証である。実際の体液及び混合した体液を用いて正しく判定されるか否かを検証する。この場合、法医実務により即した試料とするため、ボランティアから得られた体液斑をそのまま利用するのではなく、紫外線や酸などの劣悪な環境下に曝された体液斑を用いて、どの程度まで劣化した試料であれば判定できるかを検討する。法医学
ポリジアセチレン薄膜の合成とその機能に関する研究

ポリジアセチレンは,結晶性で金属光沢をもつポリマーであることから,機能性高分子の1つとして注目されている.本研究は,種々の官能基をもったジアセチレンを合成し,機能性ポリジアセチレンの分子設計を可能にするための知見を得ることを目的に行ったものである.本研究は2つに大別できる. 1つは,固相光化学反応についての基礎的知見を得ることを目的とし,光感応性置換基をもつジアセチレンと両親媒性ジアセチレンの混合薄膜の調製を試みた.もう1つは,イオン架橋した二次元化結晶性ポリジアセチレンの合成である.1.両親媒性長鎖ジアセチレン薄膜:10, 12-ヘプタコサジイン酸と1, 22-ジカルバゾリルー10, 12-ドコサジインー1, 22-ジオンの10:1の混合物を単分子状に展開し,これをガラス基盤に移しとった.光照射すると青色に着色することから重合することが確認できたが,共重合しているのかどうか確認するには至らなかった.2.イオン架橋ポリジアセチレン:10, 12-ドコサジイン二酸のカルシウム,コバルト,ニッケル,銅,亜鉛,カドミウム,バリウム塩を合成した.これらのモノマーを水に懸濁させて,光重合させた.亜鉛,カドミウム,バリウム塩は,短時間の紫外線照射で青紫色の結晶になることから,重合性が高いことがわかった.ニッケル塩は重合しなかった.亜鉛塩のポリマーをX線粉末法で調べたところ,回析ピークが観測されたので,結晶性のイオノマーであることがわかった.今後の課題は,ポリマーのさらに詳しいキャラクタリゼーションを行うこと,さらに成形可能な有機材料へ研究を展開させることである.ポリジアセチレンは,結晶性で金属光沢をもつポリマーであることから,機能性高分子の1つとして注目されている.本研究は,種々の官能基をもったジアセチレンを合成し,機能性ポリジアセチレンの分子設計を可能にするための知見を得ることを目的に行ったものである.本研究は2つに大別できる. 1つは,固相光化学反応についての基礎的知見を得ることを目的とし,光感応性置換基をもつジアセチレンと両親媒性ジアセチレンの混合薄膜の調製を試みた.もう1つは,イオン架橋した二次元化結晶性ポリジアセチレンの合成である.1.両親媒性長鎖ジアセチレン薄膜:10, 12-ヘプタコサジイン酸と1, 22-ジカルバゾリルー10, 12-ドコサジインー1, 22-ジオンの10:1の混合物を単分子状に展開し,これをガラス基盤に移しとった.光照射すると青色に着色することから重合することが確認できたが,共重合しているのかどうか確認するには至らなかった.2.イオン架橋ポリジアセチレン:10, 12-ドコサジイン二酸のカルシウム,コバルト,ニッケル,銅,亜鉛,カドミウム,バリウム塩を合成した.これらのモノマーを水に懸濁させて,光重合させた.亜鉛,カドミウム,バリウム塩は,短時間の紫外線照射で青紫色の結晶になることから,重合性が高いことがわかった.ニッケル塩は重合しなかった.亜鉛塩のポリマーをX線粉末法で調べたところ,回析ピークが観測されたので,結晶性のイオノマーであることがわかった.今後の課題は,ポリマーのさらに詳しいキャラクタリゼーションを行うこと,さらに成形可能な有機材料へ研究を展開させることである.1 10,12-ヘプタユサジイン酸(【II】a,n=13,m=8)を水面に展開して、表面圧一面積の関係を調らべ、16°Cで崩壊圧は約18dyne/cmであることを見い出した。【II】のカルバゾール誘導体(【III】b,n=7,m=8)を【II】aに種々の割合で混合して、表面圧一面積曲線を求めた。【II】a:【III】b=10:1の混合物の崩壊圧は約20dyne/cmであった。【II】a:【III】b=10:1の混合物を水面に展開したのち、Langmuir-Blodgett法でガラス板およびアルミニウム蒸着したガラス板上に累積した。これらを紫外線照射すると直ちに青色に変色することから薄膜状で共重合がおこっているものと思われる。ATR法で赤外スペクトルの測定を試みたが、十分な強度をもったスペクトルが得られなかった。2 10,12-ドユサジイン酸(【I】a,m=8)を用いて1本鎖1分子膜ベシクルの調整を試みた。ベシクル形成の可否を調らべるためテトラフェニルポルフィリンスルホン酸ナトリウムをプローブに用いて、【I】aの水溶液を超音波照射し、これをSephadexG-25のカラムで分離したが、プローブが重合性のベシクルに取り込まれた証拠は得られなかった。したがって、ベシクルが形成された証拠は今のところ得られていない。ベシクルを形成するには炭化水素鎖の長さを更に長くする必要があると思われる。3水中に懸濁させた炭酸カルシウム粉体には【II】b(n=7,m=8)を吸着させたのち紫外線照射すると粉体表面が紫→赤色に変色した。しかし、この粉体は完全に疎水化されていなかった。
寧波をめぐる絵画と人的ネットワーク

本研究は、寧波という場で流通・集積されてきた絵画が、中国の美術文化の歴史でどのような意義をはらみ、さらにそれらを受容してきた日本で、いかに規範とされ変容さてきたのかを、そこで活動した人々のネットワークをたどることで、具体的かつ総合的に明らかにしようとした。研究会や2度にわたる国際シンポジウム(九州国立博物館、2006年度及び奈良国立博物館、2009年度)における議論をとおして、研究課題を多くの研究者間で共有化し深化させ、研究成果を、最終年度の2009年夏、奈良国立博物館で開催された特別展『聖地寧波』において、集約的にまとめて報告した。展覧会を通して寧波に関わるビジュアルイメージを社会史資料として活用するための基礎を確立することができたことは大きい。平成17年度は、今後5年間の研究方針を確認し、寧波をめぐる絵画に関する資料のデータ入力案を検討し、九州大学と東京大学でデータ入力を開始した他、宋から明時代にかけての美術における日中交流に関わる資料を収集した他、次年度の国際シンポジウムについて構想案をまとめた。1)データ入力。寧波仏画を中心に120点の作品について、基礎データと画像データを600件入力。2)現地調査。寧波地域の仏画師たちの居住した石板巷地域を確認し、仏教美術と関係する場(延慶寺、天童寺、阿育王寺、東錢湖、天台山)を訪れて資料収集を行った他(井手・藤岡・谷口)、上海博物館の「故宮博物院宮廷珍宝展」に合わせ、北京故宮博物院所蔵の南宋から明時代の中国絵画について精査した(井手・藤岡・島尾)。3)国内調査。とくに雪舟と同時代の寧波と江南地域の中国絵画について、根津美術館の「明代絵画と雪舟展」、静嘉堂文庫美術館の「明清の絵画と書跡展-中国五百年の筆墨と彩-」に出陳された日中の絵画について、継続的な調査を行った(板倉・島尾・井手)。また国宝十六羅漢図(京都・清涼寺)、陸信忠筆十王図(和歌山・浄教寺)をはじめ、寧波をめぐる仏画(井手)のほか、重源・栄西・俊〓等、寧波と関係の深い日宋僧と関係する美術資料の調査を行った(谷口・藤岡)。4)発表。台北故宮博物院で寧波仏画及び同時代の朝鮮における高麗仏画について口頭発表を行った。井手誠之輔、寧波仏画の多様性をひらく-大徳寺伝来の五百羅漢図を考える-1)データ入力昨年度に引き続き、寧波美術関係資料について継続的にデータ入力を行い、寧波仏画120点、世俗画30点について、基礎データ及び画像データを600件入力した。2)現地調査8月に約2週間の日程で、研究分担者全員の参加をえて、アメリカ東海岸の美術館等(メトロポリタン美術館、バークコレクション、プリンストン大学附属美術館、フリーア美術館、ボストン美術館、ロイヤルオンタリオ美術館)で寧波関係の仏画・世俗画について調査し、関連資料を収集するとともに、現地の研究者と討議を行った。3)国内調査明代の寧波関係資料については、山口県立博物館で開催された雪舟展に関係し、更に資料を蓄積した(島尾・板倉)。また奈良国立博物館、京都国立博物館、岡山県立美術館、静嘉堂文庫美術館等において、寧波関係仏画資料の調査を行った(井手・板倉・谷口・藤岡)ほか、中国宋代絵画資料について台湾(板倉)で、高麗美術資料について韓国での海外調査を行った(井手)。4)成果発表12月に文化交流研究部門と九州国立博物館が主催した国際シンポジウム「寧波の美術から海域交流を考える」において、美術史研究者として中心的な役割を果たし、3名が発表し、2名が司会をつとめた。また台湾及び韓国からの研究者と、東アジア地域における寧波美術の意義について、意見を交換した。口頭発表井手誠之輔「寧波をめぐる場と美術」谷口耕生「栄西の入宋と東大寺復興」藤岡穣「鎌倉彫刻における宋代美術の受容」司会板倉聖哲、第一セッション:入宋僧と寧波文化島尾新、第二セッション:遣明使の視界1)海外調査9月に10日間の日程で、3名合同(井手、島尾、藤岡)によるヨーロッパの各美術館(リートベルグ美術館、ギメ美術館、ケルン東洋美術館)の調査を行い、寧波関係の仏画・世俗画について関連資料を収集するとともに、現地の研究者と討議を行った。とくにリートベルグ美術館における木造観音像、ギメ美術館における竺田悟心賛書斎図、伝雪舟筆天橋立図、ケルン東洋美術館における仏伝図(朝鮮王朝)をはじめとする新資料の発見があったことを特筆しておく。2)国内調査

寧波仏画、高麗仏画、南宋院体画、雪舟関係資料、朝鮮山水画等を中心に東アジア世界の視点から関連する資料の調査を継続して行ったが、とくに神奈川県立歴史博物館における『宋元仏画展』(10月)、福井県立美術館(3月)における『海を越えてきたみほとけたち展』に展示協力を行ったほか、両展覧会の出陳作について関係資料を収集した。3)成果発表研究計画が3年目であることに鑑み、国内外の研究集会に積極的に参加して研究成果を発表し、研究者間での研究協議を行った。とくにプリンストン大学で開催された国際シンポジウム「Re-Presenting Emptiness: Zen and Art in Medieval Japan」(4月)には、3名(井手・島尾・板倉)が参加し、禅宗美術を中心に絵画史から考えられる日中交流について議論を深めたほか、文化交流研究部門の連続講座(1月)の開催にあたっては、司会、講演者として参加し、今日的課題について若手研究者と協議した。4)データ化関連する絵画資料等のデータ化とあわせて、関連する論文のPDF化を進めた。1)海外調査アメリカのメトロポリタン美術館・ボストン美術館・セントルイス美術館で寧波仏画、明代絵画、朝鮮絵画の再調査を実施(井手、板倉)。特にボストン美術館では、特殊撮影によってこれまで解読されていない南宋時代の銘文を映像化することに成功した。また韓国国立中央博物館で開催の統一新羅の仏教彫刻展を見学し、関連作品について調査した(井手、藤岡)。2)国内調査寧波仏画、高麗仏画、南宋院体画、明代絵画、雪舟関係資料、朝鮮山水画等を中心に東アジア世界の視点から関連する資料の調査を継続して行った。3)研究成果の公表栃木県立美術館、静岡県立博物館で開催された特別展『朝鮮王朝の絵画と日本』へ研究協力し、韓国から研究者を招へいして講演会を開催したほか、これまでの成果について報告した(板倉)。また海外でも研究成果の公表を行い、韓国では寧波仏画と混同されてきた高麗仏画の問題について(井手)、台湾では、朝鮮絵画における中国の受容について(板倉)、それぞれ研究発表を行った。また2006年度に開催された国際シンポジウムの報告書に3名が論文を発表した(井手、谷口、藤岡)。4)最終年度の計画奈良国立博物館で開催される「聖地・寧波」展(2009年7月)へ研究協力することになり、関係行事におけるシンポジウムで、本研究班の研究成果を公表するための協議と準備を開始した(井手・島尾・藤岡・板倉・谷口)。1)海外調査アメリカのフリーア美術館で寧波仏画、鎌倉仏画の再調査を実施、特に大徳寺旧蔵五百羅漢図の2幅について特殊撮影を行い、これまで解読されていない銘文を映像化したほか(井手、谷口)、ボストンで雪舟・雪村関係の調査を実施した(島尾)。2)国内調査寧波仏画、高麗仏画、南宋院体画、明代絵画、雪舟関係資料、鎌倉絵画を中心に東アジア世界の視点から関連する資料の調査を継続した(井手、島尾、藤岡、板倉、谷口)。3)研究成果の公表奈良国立博物館で開催された特別展『聖地寧波-日本仏教1300年の源流』の企画(谷口)及び研究協力(井手)を行ったほか、総括班主催の国際シンポジウム「舎利と羅漢」を企画し(藤岡・井手)、あわせて研究発表と司会をつとめた(谷口、藤岡、井手、板倉)。また特別展期間中に行われた学術講座(奈良国立博物館主催夏季講座)で講演を行った(谷口、藤岡、井手、板倉)。海外では台湾・中央研究院で開催された東アジア美術に関するワークショップで、これまでの研究成果を公表した(井手・板倉)。