hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
アルコール性肝障害における肝類洞の毛細血管化の検討。

アルコール性肝障害(ALD)では類洞の毛細血管化が強く起こることが知られているが、ALDのどの時期から出現するかについて不明である。そこで、毛細血管化の出現時期と出現機序の特徴を明らかにするために、多種肝疾患患者から得られた肝生検組織について、第VIII因子関連抗原(VIII-Ag)とUEA-1の発現を免疫組織化学的に検索するとともに、肝組織内IV型コラーゲン(IV-C)とラミニン(LM)量についても測定した。対象はAL性の肝線維症(AL-F)と肝硬変(LC)、および非AL性の慢性肝炎(CH)とLCで、VIII-AgおよびUEA-1は、各々に特異的なポリクローナル抗体を用いて、酵素抗体間接法により染色した。また、肝組織内IV-CとLM量の測定は堤らの方法を用いた。VIII-Agの染色性についてみると、AL-Fの軽度の段階から、すでに類洞壁細胞に染色され、線維化の進展に従ってその染色性は一層明瞭となった。一方、非AL性では線維化が高度のCHでも、その染色性はAL-Fと比べて弱かった。AL性のLCでは類洞壁細胞でさらに明瞭に染色されたが、非AL性のLCでは、線維性隔壁に増生した血管内皮細胞にのみ染色されるにすぎなかった。UEA-1の染色性もVIII-Agのそれとほぼ同様であった。電顕所見では、ALDでは、線維化の早期からDisse腔に連続的な基底膜の形成と、内皮細胞のfenestraの数の減少が認められた。一方、非ALDでは、線維化の高度例になってはじめてALDと同様の所見がみられ、ALDのそれとは明らかに異なっていた。肝組織内IV-CとLM量についてみると、ALDでは非ALDに比べていずれも線維化の初期より等量比で増加していた。以上のことは、ALDではその早期の段階からすでに、類洞壁にIV-CとLMが増加するとともに、Disse腔には基底膜が形成され、また、類洞内皮細胞は機能的・形態的に血管内皮細胞に変化していることを示しており、肝類洞の毛細血管化が起こっていることを強く示唆していると考えられた。
光を用いた離断性骨軟骨炎に対する新たな画像診断システムの開発

光干渉断層計(optical coherence tomography: OCT)システムを用いて3次元培養した軟骨細胞、マウス変形性膝関節症モデルから得られたサンプルで画像解析を行った。また、得られたOCT画像を開発したソフトウェアを用いて解析し、OCT値の定量的評価を行った。3次元培養軟骨細胞のOCT画像と組織染色の比較から軟骨基質の有無をOCT画像で判定できることが示された。マウス変形性膝関節症モデルのOCT画像からは変性の程度をOCT画像により定量的に評価できることが示された。今後、光干渉断層計は関節軟骨の非接触かつリアルタイム定量評価を可能とする技術になると考える。平成26年度は、OCTによる軟骨組織の画像取得に先立ち、まず、マウス変形性膝関節症モデルの作製を行い、有効なモデルが作製可能かどうか検討を行った。全身麻酔下にマウスの膝内側に存在する内側半月脛骨靱帯を切離し、膝不安定性を惹起し、それによる変形性関節症の進行を模した。術後1,4週後に組織を採取し、ホルマリン固定後、組織切片を作製し観察を行った。我々の作製したモデルでは術後1週間で軟骨基質の染色性が低下し、初期の変形性変化が現れることが確認できた。また、術後4週における軟骨組織では変性が進行し、初期変形性膝関節症の軟骨組織像を観察するには術後1週のサンプルを使用することが適していることが明らかになった。動物実験と平行してSantec社よりOCT解析ソフト及びワークステーションを購入し、画像解析のための準備を行っている。今後は、マウスのモデルを作製しながら大阪大学にてOCT画像取得を予定している。離断性骨軟骨炎の臨床サンプルの解析に関しては、平成26年度の離断性骨軟骨炎に対する当院の手術症例は5例程度であり、組織採取が可能であった症例は1例も存在しなかった。離断性骨軟骨炎の発生頻度はそれほど高くなく、また、画像診断能力の向上により比較的早期に診断されることが多いため、組織採取が可能な骨軟骨片固定術を施行せざるを得ない進行症例に遭遇する機会が減少していることも考えられる。今後は、臨床サンプルが入手できる機会を探りながら、マウス変形性膝関節症モデルの作製、画像解析、組織評価を継続する予定である。平成27年度は、平成26年度に確立、作製したマウス変形性膝関節症モデルを用いてOCT画像の取得を行った。Santec社及びThorlabs社のOCT画像取得装置を用いてマウス正常膝軟骨及び術後1週の変形性膝関節軟骨の画像を取得した。得られた画像を数値化し、軟骨変性の定量的な評価を行うため、大阪大学近江研究室でソフトウェアを開発中である。動物実験と平行して、半月板の臨床サンプルを用いて近江研究室で開発を行っている位相差OCT装置による画像取得を行った。位相差OCT画像において特異的な変化を確認で、組織のサフラニンO染色から表層の変性像と一致することが明らかとなった。位相差OCT画像の定量的な評価を行うため、上記のソフトウェアの開発を行い、組織学的評価と比較検討する予定である。今後も引き続き、マウス、ヒトサンプルを用いて解析、評価を進めていく予定である。離断性骨軟骨炎の評価は非常に難しい状況にあるが、マウス変形性膝関節症モデル、ヒト半月板を用いて、特徴的な画像を取得できており、また、組織像との比較で興味深いデータを得ることができているため。平成28年度は、近江研究室で開発したソフトウェアを用いて取得したOCT画像の定量的な解析を行った。マウス変形性膝関節症モデルの大腿骨滑車部のOCT画像をソフトウェアで定量化し、正常マウスの大腿骨滑車部と比較を行った。軟骨層から無作為に選択した6部位のOCT画像の定量化データから、変形性関節症モデルで有意にOCT値が低下することが示された(正常vs.変形性関節症:201.2±27.9 vs. 141.8±29.3, p < 0.0001)。次いで、SDラット及び日本白色家兎の軟骨細胞のアテロコラーゲンゲルを用いた3次元培養を3週間行い、OCT画像を取得後、ソフトウェアによる定量化を行った。また、OCT画像を取得したサンプルから組織切片を作製し、サフラニンO染色による軟骨基質の評価を行った。対照群として、アテロコラーゲンゲルのみのサンプルを作製し、同様にOCT画像取得と定量化を行った。OCT値は細胞を混入していないアテロコラーゲンゲルで最も低く、サフラニンO染色で基質産生を確認できた家兎軟骨細胞+アテロコラーゲンゲルのサンプルで有意に高い値を示していた(アテロコラーゲンゲルvs.ラット軟骨細胞+アテロコラーゲンゲルvs.家兎軟骨細胞+アテロコラーゲンゲル:127.8±12.4 vs. 161.6±15.6 vs. 175.1±16.3)。ラット軟骨細胞は細胞増殖は観察されたが、軟骨基質の産生は確認できなかった。本研究より、OCT画像により軟骨組織の基質の情報が定量化できることが明らかとなった。

3次元培養軟骨細胞のOCT画像と組織染色の比較から軟骨基質の有無をOCT画像で判定できることが示された。マウス変形性膝関節症モデルのOCT画像からは変性の程度をOCT画像により定量的に評価できることが示された。今後、光干渉断層計は関節軟骨の非接触かつリアルタイム定量評価を可能とする技術になると考える。画像取得機器が研究実施者の施設に存在しないため、時間的な制限から画像取得がやや難しい。離断性骨軟骨炎の発生頻度が低いことから、症例からのサンプルを取得することが容易では無い。離断性骨軟骨炎のサンプルの利用は今後もタイミングを計って使用していく。マウス変形膝関節症モデル、ヒト半月板サンプルから、開発中の定量化ソフトを用いて数値化、比較検討を行い、客観的な評価の確立を目指す。整形外科学今後はマウス変形性膝関節症モデルを作製しながら、初期変形性膝関節症の画像所見を得ると共に、大阪大学にサンプルを持参し、画像取得を行う。得られた画像は、広島大学にて解析を行う。引き続き、離断性骨軟骨炎の臨床サンプルが取得できるまで待機し、得られる機会があればマウス同様にOCT画像の取得、解析を行う予定である。Santec社に発注予定であったOCTプローブ作製が困難となり、OCTプローブ作製に計上していた予算が次年度予算となったため。旅費の不足を回避するために予算を確保していたため。引き続きマウスモデルの作製、離断性骨軟骨炎の原因解明のための数学的なシュミレーションを行うためのソフトウェア上の解析及び海外学会での発表に使用予定である。平成27年度の旅費もしくは消耗品の費用として使用する予定である。
９軸センサによる頭位モニタリングと次世代VOGによる眼振の解析

これまでに我々は、フリーウェアの画像解析ソフトImageJとFileMaker Proを用いたvideo-oculograhy(HI-VOG)を開発し、報告してきた。HI-VOGでは、一旦眼振動画を録画した後に解析するオフライン解析であること、手動による瞳孔認識設定が必要であること、特に回旋成分の解析に時間が必要であること、など問題点や限界があった。そこで、改良したリアルタイム三次元解析可能なvideo-oculography(VOG)製品を開発した。録画・ファイリング、瞳孔認識・解析の自動化、リアルタイム眼振図表示、履歴検索,再生、詳細解析、報告書作成を可能にした。高速度カメラと加速度センサーの選定を、国際医療機器展で情報を収集し、既製品ではなくカメラユニットを基板から独自開発し、独自デザインの赤外線フレンツェルを作成した。約125gと軽量化、高画質化(1280*1024ピクセル)、高速化(毎秒240フレーム可能)が可能となった。カバーの着脱により、視刺激検査や注視眼振の記録が可能となった。本年度、3軸加速度センサと3軸角速度センサ(3軸ジャイロセンサ)、3軸地磁気センサを実装した小型の9軸センサデバイスを用い、得られた加速度、角速度をPCに取り込み、頭位の方向、速度を分析し、眼球画像と頭位情報を同期して解析を行った。頭位モニタリングセンサは,めまい患者の日常や睡眠頭位の解析など,めまい入院患者の頭位の解析などの研究にも応用できる。以上のように,頭位,頭位変換眼振検査および頭位治療にブレークスルーをもたらすと考える。平成27年度は,9軸センサによって頭位情報を収集するシステムの構築を進展させた。3軸加速度センサと3軸角速度センサ(3軸ジャイロセンサ),3軸地磁気センサを実装した小型の9軸センサデバイスを用いた。得られた加速度、角速度をPCに取り込み,頭位の方向,速度の解析をすすめた。画像解析方法は我々がこれまでに開発したマクロプログラムを応用したプログラムを応用した。瞳孔のみが認識されるように画像の閾値を設定した。瞳孔の中心座標を解析し、水平・垂直成分を求めた。虹彩紋理パターンのずれから、回旋角度を求めた。VOGにおいて,頭位情報の詳細を数値化して検査を行うということはやられていないが,近年の進歩したICTの技術を取り入れることにより実現が可能である。9軸センサにより頭位の向き、速度などの頭位情報を数値化することができ,より正確な頭位・頭位変換眼振検査や頭位治療が可能になりうる。また赤外線カメラの高速化により,眼振の急速相など急速眼球運動に対応し,より精度の高い眼球運動解析が可能になり,付加価値のある次世代赤外線カメラの普及が期待できるようになる。さらに,頭位モニタリングセンサは,めまい患者の日常や睡眠頭位の解析など,めまい入院患者の頭位の解析などの研究にも応用できる。9軸センサによって頭位情報を収集するシステム構築が、順調に進展している。そこで今回、改良したVOGを開発した。普及型赤外線CCD/CMOSカメラで利用可能とした。タッチパネル操作式PCを用い、検査種目別に録画・ファイリング、瞳孔認識・解析の自動化、オンライン眼振図表示を可能にした。画像処理方法については、キャリブレーション後画像を二値化し、水平・垂直成分は瞳孔中心座標、回旋成分は虹彩紋理の抽出とパターンマッチングで求めた。さらに履歴検索,再生、詳細解析、報告書作成機能を加えた。HI-VOGでは、ImageJやQuickTime、FileMaker等既存のアプリケーションを使っており、それぞれのアプリ内やアプリ間連携での可能なプログラム処理に限界があった。今回、独自にアプリを作成したことで、画像処理からファイリングまでシームレスに行うことが実現できた。眼振動画の録画,眼振図の客観的記録を簡便に行うことができ,日常のめまい診療における有用性が期待される。さらに頭位センサーと高速度カメラを搭載した軽量赤外線フレンツェルの開発をすすめている。普及型赤外線CCD/CMOSカメラで利用可能で、検査種目別に録画・ファイリング、瞳孔認識・解析の自動化、オンライン眼振図表示を可能にしたVOGを開発した。昨年度までに、リアルタイム三次元解析可能なvideo-oculography(VOG)製品の開発について報告した。既製品の赤外線カメラを用いたため、ゴーグルが比較的重く、フレームレートや解像度などクオリティに限界があった。本年度、高速度カメラと加速度センサーの選定を、国際医療機器展で情報を収集し、既製品ではなくカメラユニットを基板から独自開発し、独自デザインの赤外線フレンツェルを作成した。

3軸加速度センサと3軸角速度センサ(3軸ジャイロセンサ)、3軸地磁気センサを実装した小型の9軸センサデバイスを用い、得られた加速度、角速度をPCに取り込み、頭位の方向、速度を解析した。眼球画像と頭位情報を同期して解析処理するシステムを確立した。近年VOGソフトウェアの検討は行われてきたが、日本人の形態に適したサイズなど、ゴーグル開発についての検討は乏しかった。日常のめまい診療における有用性が期待される。さらにゴーグルに加速度センサーを搭載しており、検査頭位の自動識別や、高フレームレートとゴーグルが軽量であることからvHITへの応用が可能である。約125gと軽量化、高画質化、高速化が可能となり、カバーの着脱により視刺激検査や注視眼振の記録が可能となるなど概ね順調に進行していた。しかし平成29年度途中に眼振解析に使用したパーソナルコンピュータが故障したため、研究期間を平成30年度まで延長した。これまでに我々は、フリーウェアの画像解析ソフトImageJとFileMaker Proを用いたvideo-oculograhy(HI-VOG)を開発し、報告してきた。HI-VOGでは、一旦眼振動画を録画した後に解析するオフライン解析であること、手動による瞳孔認識設定が必要であること、特に回旋成分の解析に時間が必要であること、など問題点や限界があった。そこで、改良したリアルタイム三次元解析可能なvideo-oculography(VOG)製品を開発した。録画・ファイリング、瞳孔認識・解析の自動化、リアルタイム眼振図表示、履歴検索,再生、詳細解析、報告書作成を可能にした。高速度カメラと加速度センサーの選定を、国際医療機器展で情報を収集し、既製品ではなくカメラユニットを基板から独自開発し、独自デザインの赤外線フレンツェルを作成した。約125gと軽量化、高画質化(1280*1024ピクセル)、高速化(毎秒240フレーム可能)が可能となった。カバーの着脱により、視刺激検査や注視眼振の記録が可能となった。本年度、3軸加速度センサと3軸角速度センサ(3軸ジャイロセンサ)、3軸地磁気センサを実装した小型の9軸センサデバイスを用い、得られた加速度、角速度をPCに取り込み、頭位の方向、速度を分析し、眼球画像と頭位情報を同期して解析を行った。頭位モニタリングセンサは,めまい患者の日常や睡眠頭位の解析など,めまい入院患者の頭位の解析などの研究にも応用できる。以上のように,頭位,頭位変換眼振検査および頭位治療にブレークスルーをもたらすと考える。正常対象者および頭位めまい患者において,頭位・頭位変換眼振検査を頭位情報を数値化して行い,検査中の頭位の方向,速度を記録,また潜時,持続時間を正確に測定することを可能にする。構築システムを用いた検証を進めるとともに,得られた眼振の潜時,持続時間や速度,振幅などの数値から減衰の時定数などデータの詳細な解析を行う。さらにEpley法やLempert法など頭位治療における頭位情報を検証し,頭位治療における頭位情報のモニタリングの有用性を明らかにする。高速度カメラを搭載した軽量赤外線フレンツェルの開発をすすめる。得られた眼振の潜時,持続時間や速度,振幅などの数値から減衰の時定数などデータの詳細な解析を行う。
熱帯雨林フタバガキ科植物の遺伝的多様性及び進化学的特性に関する集団遺伝学的研究

熱帯雨林で重要構成種であるフタバガキ科樹木が持つ種多様性が、どのように遺伝的多様性と関連しているかを調べる目的で、種内・種間のDNA変異を推定した。クロロプラストDNAの配列を使ってフタバガキ科の属間の系統関係を決定したところ、フタバガキ科樹種は二つのグループに別れ、またShprea属は他属を含む大きなグループであることが明らかとなった。次に種内遺伝的変異を明らかにするために、Shorea属4種S.leprosula,S.acuminata,S.curtisii,S.parvifoliaの複数個体で、クロロプラストtRNA遺伝子間領域、核のGapC遺伝子の一部の塩基配列を決定した。tRNA遺伝子間領域では種内変異は見つからなかったが、核GapC遺伝子では種内変異は塩基多様度が0.0012から0.0029であり、種間変異はサイト当たり0.00781から0.01621という推定値を得た。自殖率は0.39-0.67と推定された。塩基配列データから変異維持や進化の機構を究明するために、「ほぼ中立モデル」の理論的解析を行った。進化速度のばらつきの指数であるdispersion index(DI)でみると、集団サイズの変化があると、DIは増大することが分かった。さらに集団内変異のパターンから進化機構を考察するために、複数のサイトを持つDNAを想定してその進化を計算機シミュレートした。定常状態において中立性のテスト(進化速度のばらつきテスト、田島のテスト、MKテスト等)の淘汰検出力を調べ、検出可能範囲のパラメーター領域を特定した。理論的研究からは、アミノ酸置換変異を使った解析が、淘汰の検出に重要であることが分かったが、上記のGapC遺伝子ではアミノ酸置換をひき起こす変異は少なく、ここで解析を行ったタイプの淘汰は検出されなかった。熱帯雨林の重要構成種であるフタバガキ科樹木が持つ種多様性が、どのように遺伝的多様性と関連しているかを調べる目的で、フタバガキ科Shorea属4種、S.leprosula,S.acuminata,S.curtisii,S.parvifoliaの各種複数サンプルからDNAを抽出し、クロロプラストtRNA遺伝子間領域(約300bp)、核GapC遺伝子の部分(約1000bp)の塩基配列を決定した。tRNA遺伝子間領域では種内変異は見つからなかったが、核GapC遺伝子では種内変異はサイト当たりのπが0.0014-0.0028であり、種間変異はその数倍であることがわかった。樹木でのDNA種内変異量の研究は殆どないので他種樹木との比較は出来ないが、例えばショウジョウバエよりは小さく、人よりは大きい遺伝的変異量を持っていることがわかる。理論的研究として集団が分集団構造を持ちその間で移住がある場合について、ランダムに交配する大きな集団と集団の平均適応度がどのように異なるかについて調べた。地理的構造を持った集団として、サイズNの有限個の分集団を仮定したライトの島モデルを想定する。まず(1)各々の分集団でほとんど単型的である場合(突然変異率、移住率が小さい)と、(2)自然淘汰が非常に弱い場合について平均適応度の近似式を求めることができた。移住率が高まって行くとランダムに交配する集団と振る舞いが似てくるが、自然淘汰の強さによってこの遷移の仕方が異なっており、自然淘汰が弱いときは、突然変異率と移住率の比が1よりずっと小さくならないと地理的構造を持った集団はランダム交配集団と同じ平均適応度を持つようにならない。

しかし自然淘汰が強くなるとより小さい移住率でランダム交配集団と同じ平均適応度を持つようになることがわかった。昨年に引き続いてフタバガキ科樹木Shorea属4種、S.leprosula,S.acuminata,S.curtisii,S.parvifoliaの各種10個体以上からDNAを抽出し、クロロプラストtRNA遺伝子間領域(約300bp)、核GapC遺伝子の部分(約770bp)の塩基配列を決定した。tRNA遺伝子間領域では種内変異は見つからなかったが、核GapC遺伝子では種内変異はサイト当たりの塩基多様度が0.0012-0.0029であり、種間変異はサイト当たり、最も近いS.acuminataとS.curtisiiの間では0.0781、その他の種どうしでは0.011から0.0162という推定値を得た。各種での自殖率を個体内変異と個体間変異から求めたところ0.39-0.67と高い値を得た。このような高い自殖率が、低い種間変異から推測されるこの属の急速な種分化にどのように寄与したかを探ることは今後の課題である。上記のような塩基配列データから変異維持や進化の機構を究明するために、複数のサイトを持つ「ほぼ中立モデル」の理論的解析を行った。このモデルのもとで進化する配列集団(サイズ一定を仮定)を計算機でシミュレートし、定常状態において中立性のテスト(進化速度のばらつきテスト、田島のテスト、MKテスト等)を適用して、どの程度の淘汰が働くと、淘汰の検出が可能をかを調べた。その結果進化速度のばらつきテストでの検出は困難であることが示された。他のテスト、特にMKテストでは2Nσ(N:集団サイズ、σ:淘汰係数の標準偏差、淘汰の強度を表す)が5程度以上になると検出が可能になるが、50を超えると検出力の低下が起こる。上記のGapC遺伝子ではアミノ酸置換をひき起こす変異は少なく、ここで解析を行ったタイプの淘汰は検出されながった。
CRISPRを利用した4Dヌクレオーム解析

前年度に引き続き、塩基修飾を利用して空間的に近接するクロマチン部位を検出するために、dCas9とDamメチレースK9AをsgRNAを介して連結する方策を検討した。検出方法としては前年度に確立したDamID-seq変法を用いて、sgRNA構造の改変を種々試みた。テトラループにMS2ループを挿入してMCP-Dam(K9A)をリクルートすると効率的に標的部位周辺を修飾できることが判明した。そこで、テトラループの更なる延長をウイルス由来のdsRNAを用いて試みた。しかしながら、sgRNAの伸長につれてCas9による切断効率も低下することが認められ、所期の成果を得ることが出来なかった。そこでdsRNAとしての伸長ではなく、CRSIPR-Cas9系の元来の姿であるcrRNAとtracrRNAに分割した上でssRNAとしての伸長を試みているが、現時点ではCas9による切断効率の低下が認められ、所期の成果を得るには至っていない。発現プロモーターの改変等により、更にこの方策の検討を進行中である。一方、昨年までの検討で所期の成果を挙げるに至らなかったdCpf1/dCas12aについては、温度を30°Cに上昇させることによって効率が大幅に改善することを見い出した。更に、最近発表された改良型Cas12aであるenAsCas12aのヌクレアーゼ変異体denAsCas12aの有用性も確認され、gRNAの伸長についても有望な結果が得られつつある。視覚化についてはdCas9と内在性核内因子のBiFCを確立し、更にそのシグナルを増強する新しい手法の原理検証にも成功した。また、上記のdenAsCas12aの視覚化への応用にも成功した。dCas9のsgRNAの伸長においては所期の結果が得られなかったが、dCas12aについては有望な結果が得られつつある。視覚化についてもdCas12aとdCas9の併用により、新しい展開の可能性が拡がりつつある。空間配置の解析については、denAsCas12aのgRNA伸長の可能性を追求する。視覚化については、dCas9とdCas12aを用いたBiFCを検討する。塩基修飾を利用して空間的に近接するクロマチン部位を検出するための第一歩として、DamメチレースK9A変異体の利用を試みた。出芽酵母CUP1遺伝子を標的とするsgRNAとdCas9-Dam(K9A)融合タンパク質を発現する株を作成した。単離したゲノムDNAに対してメチル化依存性制限酵素DpnIとメチル化感受性制限酵素MboIを用いるqPCRアッセイを行いGATC配列のメチル化レベルを検討した結果、CUP1遺伝子近傍にsgRNA依存性にメチル化の誘導が確認された。次にMS2リピートを挿入したsgRNAとdCas9とMCP-Dam(K9A)を共発現する株を作成して、同様の解析を行った。その結果、sgRNAの3'末端から伸長した部分にMS2ループを付加してもメチル化が認められないのに対して、sgRNA内の2つのステムループにMS2ループを挿入すると、dCas9-Dam(K9A)の場合よりも効率的にCUP1遺伝子周辺のGATC部位をメチル化できることが判明した。一方、ゲノムワイドな6mA検出法として、DamID-seq変法を開発し、MiSeqによるシーケンシングでメチル化の確認を行った。また、染色体分子内でのlong-range interactionの検出を目指して、Oxford Nanopore MinIONによる6mAの検出も試みた。視覚化については、上記のMS2ループの利用で有効な結果を得た。一方、これまでに開発してきたmNeonGreenに加えてmScarlet-IによるBiFCにも成功したので、これらを利用したsgRNA上でのBiFCを利用した高S/N比の視覚化の準備を進めた。ゲノム領域配置の人為的操作の基礎として、dCas9とorthogonalなdCpf1の使用を試みたが所期の効率が得られなかった。そこでCpf1に代わってsaCas9の検討も開始した。1)dCas9によるDamIDに成功した。3)6mAのゲノムワイド検出ではDamID-seqの変法を開発した。更に、ナノポアシーケンサーの利用による6mA検出においても有望な結果が得られた。4)dCpf1の使用については十分な成果が得られなかった。

更に、最近発表された改良型Cas12aであるenAsCas12aのヌクレアーゼ変異体denAsCas12aの有用性も確認され、gRNAの伸長についても有望な結果が得られつつある。視覚化についてはdCas9と内在性核内因子のBiFCを確立し、更にそのシグナルを増強する新しい手法の原理検証にも成功した。また、上記のdenAsCas12aの視覚化への応用にも成功した。dCas9のsgRNAの伸長においては所期の結果が得られなかったが、dCas12aについては有望な結果が得られつつある。視覚化についてもdCas12aとdCas9の併用により、新しい展開の可能性が拡がりつつある。1)sgRNA内のループにMS2ループを挿入する戦略の有効性がメチル化と視覚化の双方で確認されたので、これを中心にステムの伸長やRNA上でのBiFCの実現に向けての最適化を進めてゆく。2)メチル化検出については進歩の早いナノポアシーケンサーの動向に注意しながら、独自手法の可能性を追求する。3)空間配置の操作についてはCpf1に拘らずに、saCas9の利用を検討する。一方、Cas9については標的配列の自由度が高く結合安定性も高いと思われるxCas9の導入を図る。空間配置の解析については、denAsCas12aのgRNA伸長の可能性を追求する。視覚化については、dCas9とdCas12aを用いたBiFCを検討する。
地域的ネットワーク組織のマネジメントに資するメゾ管理会計モデルの研究

本研究の目的は,地域的ネットワーク組織の特質を明らかにし,そのマネジメントに資する「メゾ管理会計」システムの普遍的なモデル構築を行うことである。これにより,中小企業振興策,地域創生,種々の産業クラスター政策や6次産業化政策などの推進に,管理会計の立場から支援することが目的である。この中核をなすツールは,BSCとキャパシティ・モデルである。加えて,隣接諸分野の概念・モデルも組み合わせていく。今まで組み合わされることがなかった既存のツールや概念を地域的ネットワーク組織の特質に応じて改良し,さらに新しいツールを開発することで,新たなマネジメントのモデルとツールを構築し,その運用の方法を確立する。
パラオ熱帯生物研究所に関する科学史研究

本研究の最終成果は、2019年7月に研究書『〈島〉の科学者ーパラオ熱帯生物研究所と帝国日本の南洋研究』(勁草書房刊)として公刊予定である。以下、本書の目次構成を紹介した上で、本研究の意義などについて述べる。プロローグ:〈島〉にわたった科学者たち/第1章:占領と視察ー第1次世界大戦と南洋研究の起源/第2章:南洋庁と現地調査(1)ー民族誌と自然人類学/第3章:南洋庁と現地調査(2)ーヤップ島の人口減少をめぐって/第4章:「文明」から遠く離れてー土方久功と「裸の土人たち」/第5章:サンゴ礁の浜辺でーパラオ熱帯生物研究所の来歴/第6章:緑の楽園あるいは牢獄ーパラオ熱帯生物研究所の研究生活/第7章:〈島〉を往来するー南洋学術探検隊・田山利三郎・八幡一郎・杉浦健一/第8章:「来るべき日」のためにー戦時下のパラオ熱帯生物研究所とニューギニア資源調査/第9章:パラオから遠く離れてーパラオ研関係者のアジア・太平洋戦争/第11章:〈島〉が遺したものー南洋研究と岩山会の戦後/エピローグ:科学者が歴史を記録するということ以上の目次構成からもわかるように、本研究は、戦前、日本統治下(委任統治下)に置かれたミクロネシアのパラオ・コロール島に設置されたパラオ熱帯生物研究所(1934ー1943年)の活動を中心とする日本の南洋研究の展開を、科学史の立場から跡づけようとするものである。日本の南洋研究史については、従来、文化人類学(民族学)の領域を中心に、個別の学術分野ごとにおこなわれてきた。だが、本研究では、人類学、民族学、生物学、医学等々といった学問区分にはこだわらず、戦前のミクロネシアにおける調査研究の総体を、知識生産の場である〈島〉に注目しながら描き出した。その意味で、本書は日本の科学史研究における「科学の地理学研究」(D・リビングストン)の初めての試みである。本年度は、パラオ熱帯生物研究所に関する基礎的研究として(1)元研究員および関係者の所蔵資料調査(2)植民地統治下にあった戦前ミクロネシアの歴史に関する資料調査(3)旧南洋群島(サイパン・グアム)での現地調査を実施した。(1)については、阿部襄(戦後、山形大教授)の生家にある阿部記念館(山形県酒田市)および内海冨士夫(戦後、京大教授)・時岡隆(同)が所属した京大瀬戸臨海実験所(和歌山県白浜町)、さらに研究員たちと親交の深かった民族誌家・土方久功のフィールドノートが所蔵されている国立民族学博物館(大阪府吹田市)などで資料調査を実施した(6月・3月)。(2)については、各種歴史資料を古書店などで購入するとともに、アジア太平洋資料室(東京都港区)などで資料調査を実施した。(3)については、サイパン・グアムにおいて、現地大学などが所蔵するミクロネシア関係資料を調査・収集するとともに、現地での調査(主として考古学遺跡)の足跡をたどった。なお、以上の資料調査の過程で、長年にわたり行方不明となっていた「研究所日誌」が故元田茂氏宅に所蔵されていたことが判明した。研究成果の一部は、(1)学会発表(2)論文集への寄稿という形で発表することができた。それぞれの内容は下記の通りである。(1)日本サンゴ礁学会大会(慶應大学三田キャンパス)のテーマセッション「パラオ熱帯生物研究所の学際性に学ぶ」において、「パラオ熱帯生物研究所研究員の「南洋」経験」と題して、口頭発表を行った。(2)申請者自身が編者となった研究書『帝国を調べるー植民地フィールドワークの科学史』において「珊瑚礁・旅・島民ーパラオ熱帯生物研究所研究員の「南洋」経験」を発表した。研究成果の発表という点では、当初の計画以上に進展しているが、資料調査に関しては不十分な点も残った。本年度は勤務校でサバティカルを取得し、沖縄国際大学客員研究員として沖縄に10ヶ月間滞在したため、主として沖縄で調査研究を進めるとともに、沖縄の関係機関で計3回パラオ熱帯生物研究所(以下、パラオ研)に関する研究発表を行った。パラオ研はサンゴを中心とする熱帯生物の研究所であったことから、元研究員の中には、復帰後、沖縄に設立された熱帯生物の研究機関に関わりをもった者が複数存在し、その関係から沖縄各地にパラオ研に関係する資料もある程度所蔵されている。そこで、阿嘉島臨海研究所(沖縄)に所蔵されている元田茂(元研究員、戦後、北大教授)資料を中心に、パラオ研関係の資料を収集し、さらに元田、川口四郎(同、戦後、岡山大教授)、阿刀田研二(同、戦後、東北大教授)のことを直接知る研究者のインタビューを実施した。また、パラオ研が置かれたパラオ・コロール島には沖縄からの移民が多かったことから、沖縄には戦前のコロール島での暮らしを記憶している元パラオ移民の方も多い。そうした元パラオ移民の方にインタビューを実施し、パラオ研での研究生活についても貴重な情報を得ることができた。それ以外に、福岡、鹿児島、東京でパラオ研に関する資料収集を実施するとともに、年度末にはパラオ研究者(文化人類学者)らとともにコロール島で現地調査を行い、現地に関する知見を増やすこともできた。

現時点までに明らかになった調査内容については、沖縄県立博物館・美術館(「「写真の<ポジション>ー写真家と学術調査の記録をめぐって(第5回戦後沖縄研究コロキウム)」9月10日)、沖縄民俗学会例会(11月26日)、沖縄国際大学(南島研セミナー、2月6日)で研究発表を行った。上述のとおり、本年度は沖縄で研究生活を送ったため、沖縄とパラオ研の関係については、当初の予想以上に研究を進めることができた。とりわけパラオ研に雇い人(採集人)としてつとめていたパラオ移民の実像について、資料および関係者へのインタビューで情報を得られたことは大きな成果である。また、戦後、研究者にならなかったことから、ほとんど情報がなかった元研究員(島津久健)についても、各種機関での資料調査およびコロール島での現地調査、関係者への問い合わせなどである程度明らかになったことも大きい。一方、沖縄での研究生活ゆえに、調査研究が不十分になった点も多い。当初は阿部襄(戦後、山形大教授)や畑井新喜司(パラオ研所長、東北大教授)の資料について収集・分析を進める予定だったが、ほとんど手をつけることができなかった。昨年度、勤務校で取得したサバティカル期間の後、ある程度、資料収集および現地調査が進められたので、本年度はその最終的成果となる著作の執筆を進めるとともに、研究会で2回発表をおこなった。まず、最終的成果となる著作(単著)だが、勁草書房より2019年に『〈島〉の科学史ーパラオ熱帯生物研究所と帝国日本の南洋調査(仮題)』を刊行予定である。本年度後半から、そのための原稿執筆を本格的に開始したが、当初の計画を大幅に拡張し、パラオ熱帯生物研究所のみならず、戦前日本のミクロネシアにおける調査研究全体を総括する著作にする予定である。それに付随して、申請者が共編者となり、現在、編集を進めている論文集『帝国日本の科学思想史』(勁草書房、2018年)のなかに、「帝国を船がゆくー南洋群島調査の科学思想史」という論考を掲載予定である(2018年秋に刊行予定)。なお、著作の構成は以下のようになる予定である。序論:〈島〉にわたった科学者たち/1章:占領と視察/2章:南洋庁と現地調査(1)/3章:南洋庁と現地調査(2)/4章:「文明」から遠く離れて/5章:サンゴ礁の浜辺で/6章:緑の楽園あるいは牢獄/7章:〈島〉を往来する/8章:「来るべき日」のために/9章:さらに「南」へ!/10章:パラオから遠く離れて/終章:戦後ー追憶の南洋群島次に研究会での発表については、(1)「占領と視察ー『南洋新占領地視察報告』とは何か」(9月27日、神奈川大学日本常民文化研究所公開研究会)および(2)「緑の牢獄あるいはユートピアーパラオ熱帯生物研究所の若き学徒たち」(18年3月24日、生物学史研究会)の2回である。これらの発表内容は、発展させて(1)で述べた論文集および最終的成果となる著作に組み込む予定である。2016年に大森信氏(東京海洋大名誉教授)らにより、故元田茂氏(元パラオ熱帯生物研究所研究員、北大名誉教授)の自宅から、重要文献であるパラオ熱帯生物研究所の日誌が発見され、これは、遺族の承諾を得て、研究所と深い関係をもつ東北大学の史料館に寄贈された。本日誌の公開には時間が必要であったため、2018年度中に、これを閲覧することができなかった(2019年3月末にようやく本日誌の公開が決定)。本研究の最終成果は、2019年7月に研究書『〈島〉の科学者ーパラオ熱帯生物研究所と帝国日本の南洋研究』(勁草書房刊)として公刊予定である。以下、本書の目次構成を紹介した上で、本研究の意義などについて述べる。
科学教育授業実践にみる日本仏教の影響

我が国の理科教育の文化的背景として、仏教の影響を探った。定量的な調査から、実験観察の場面、自然観、教授方法といった広範囲にわたり、子どもに対する態度、自他の関係性、教育観、世界観といった因子として仏教的な影響が確認された。また、初等理科教育を牽引してきた故・丸本喜一氏の膨大な資料を整理・デジタル化しつつ、その思想に仏教的な要素を探った。多文化社会を前に、文化的背景を自覚した上で教育活動にあたる重要性が示唆された。学術雑誌1編の他、章の執筆1編、学会発表7件(海外5件<内招待講演3件>、国内2件)の成果発表を行った。本研究は、我が国の理科教育の文化的背景の一つとして、仏教の影響を探るものである。具体的には(1)どのような局面にどのように仏教の影響が見られるのかを定量的に探った。その結果、実験観察の場面、自然に対する態度、教授の方法など幅広く仏教の影響が確認された。また、子どもに対する態度、自他の関係性、教育観、世界観という因子があることが明らかになった。(2)伝統的な理科授業実践から導き出された理念の中に、日本的な仏教思想の影響を探った。特に、筑波大学附属小学校で長年にわたり初等理科教育を牽引してきた故・丸本喜一氏に焦点をあて、氏が遺した資料を整理し「拝育」という概念を探った。1430枚のOHPシート(すべて)、小学校6年生の授業テープの一部(11巻)、5000枚と見積もられている単語カードの一部(10箱中4箱)などを整理しデジタル化した結果、各地の講演会で使用したOHPシートの中に仏教に関係したものが7枚発見された。そこでは、道元、親鸞など、既存の著作の中に見られるものの他に、橋田邦彦、岡現次郎の名前が見られた。資料は膨大なため、整理は道半ばである。また、丸本喜一氏も関係したNHK教育テレビ「理科教室」にも仏教思想の影響を探った。人形の声を担当された方にインタビューを実施することができ、その生き様に「無」を目指したという証言が得られた。(3)持続可能な社会を目指す理科教育実践の指針について探った。一つの回答として、多文化主義の時代にあり、文化的背景を自覚した上での教育活動、特に、西洋・非西洋の文化的接点に位置付く科学教育に於いては、教師一人一人の自覚が重要であることが示唆された。この点については、国内外の学会で発表した。研究実施計画通り、研究の進め方等について、国内外の研究協力者との研究打合せから本研究は出発した。日本化された仏教思想が、我が国の科学教育実践活動にどのような影響を与えているか。(1)定量的な手法を用いて示す部分については、前段階的な位置を占める調査を行った。すなわち、科学教育の、自然科学に関係しない側面の中で、仏教的と認められるものについて明らかにした。この成果は学部紀要に投稿し、現時点(2013年4月)で発刊を待つところである。(2)定性的な部分については、(a)富山市内の寺院にある「丸本文庫」に2度(一度は研究協力者と共に)訪問し、資料を収集した。収集した資料(OHP、カセットテープ、整理カードなど)の一部について(OHPはすべて)、関係者の協力を得ながらデジタル化することが出来、その成果は丸本文庫において一般の利用に供するまでになっている。当初目標にした丸本喜一の「拝育」についての資料には、まだ行き当たっていない。(b) 1970-80年代にNHK「理科教室」に出演していた関係者が、仏教思想が認められる回顧録をホームページで明らかにしていたことから、当番組の出演者・制作者にご参集いただき、インタビューを実施した。そこでは、「子役の声優」の先駆者であった方が自らを積極的に表現することよりも、むしろ、自分を「無」にしようと日々努力されていたことなどが明らかになった。研究の方針や一部の成果について、国内外で(盛岡、フィリピン、オマーンにおいて)学会発表を行った。また、関係するこれまでの成果を「中間まとめ」(65ページの冊子)として2月末に発刊し、ホームページでも公開している。研究の目的は、大きく分けて3つの柱からなっている。(1)我が国の科学教育実践活動を考察した場合、どのような局面においてその影響が現れているかを定量的に示す。これについては、前段階に当たる調査を行い、学部紀要に投稿していることから、順調に進んでいると言える。本調査については、次年度に行う。(2)伝統的な理科授業の実践から現れ出た理念の中に、日本化された仏教思想の影響を定性的に明らかにする。これについては、予定していた丸本文庫の資料収集が進んでいるだけでなく、インタビュー調査も実施できたことから、順調に進んでいると言える。

(3)これら実証的な結果から、今後の我が国における持続可能な社会を目指した科学教育実践の指針を探る。これについては、次年度、最終年度に取り組む。本研究は、3つの柱からなる。(1)定量的な手法を用いる部分については、前年度、前段階となる調査を実施、活字化した。二年目は、因子分析・共分散構造解析を用いた本調査の論文執筆を視野に進める。(2)定性的な手法を用いる部分については、質的データ解析ソフトNVivoを用いて、丸本氏が目指した「拝育」などを代表とする、科学教育実践に見られる日本文化、仏教的な影響を探る。また、国内外において本研究の成果について積極的に発表する。2013年7月に香港において行われる東アジア科学教育学会には、すでに発表申込みを行い、審査を通過した。研究協力者と共にミニシンポジウムを開く。また、国内の学会に参加し、成果を発表する。この他に、富山市の丸本文庫を訪れ、資料収集を継続して行い、デジタル化を進める。このことから、研究費は旅費を中心にした使用になる。定量的、定性的な研究についても、「推進方策」に示した計画通り進める。
2相TiA1合金における結晶粒界構造と高温塑性

金属間化合物では,構成異種原子間の強い化学結合のために,超塑性変形に重要な結晶粒界での変形の伝播ならびに粒界すべりが困難で,これまでに報告されている超塑性伸びの最大値もかなり小さい.そこで本研究では,少量のTi_3Al相を含む2相TiAlラメラ合金の双結晶をモデル結晶として拡散接合法により作製し,結晶方位の組み合わせ変えることにより結晶粒界での塑性歪みの適合性を変化させ,粒界構造と塑性変形挙動の相関を調べることを目的とした.PST双結晶を作製した方位の組み合わせは,PST結晶でのB_1方位(荷重軸とラメラ組織境界のなす角度が31°)同士のもので,1つの結晶粒について荷重軸の周りに角度θだけ回転させた.これに従いPST双結晶の方位はB_1(0°)/B_1(θ°)のように表す.双結晶における粒界での歪の適合性をPST結晶の巨視変形から考察すると.θ=90°で最も悪い状況となる.拡散接合法により作製した接合体の結晶粒界は,通常の溶製材の粒界で見られるように個々のラメラが互いにロックされた構造を取り,原子尺度でも酸化物などの介存物は全く存在しない.B_1方位のPST結晶は20数%程度の引張伸びを示すが,それらがちょうど対向したB_1(0°)/B_1(180°)双結晶は,降伏応力,加工硬化率,引張伸びともB_1方位のPST結晶のそれとよく似ている.これは,このB_1(0°)/B_1(0°)双結晶では巨視的な歪の適合性が結晶粒界で確保されているためである.片方の結晶粒が150°回転したB_1(0°)/B_1(150°)双結晶でも,同様の挙動が見られた.これに対して,片方の結晶粒が120-回転したB_1(0°)/B_1(120°)双結晶では,降伏応力,加工硬化率とも構成PST結晶よりもなかり大きく,引張伸びは数%程度とかなり小さい.このように,2相TiAlラメラ合金の引張伸びは結晶粒界での歪の適合性と密接に関連していると言う事が明らかになった.金属間化合物では,構成異種原子間の強い化学結合のために,超塑性変形に重要な結晶粒界での変形の伝播ならびに粒界すべりが困難で,これまでに報告されている超塑性伸びの最大値もかなり小さい.そこで本研究では,少量のTi_3Al相を含む2相TiAlラメラ合金の双結晶をモデル結晶として拡散接合法により作製し,結晶方位の組み合わせ変えることにより結晶粒界での塑性歪みの適合性を変化させ,粒界構造と塑性変形挙動の相関を調べることを目的とした.PST双結晶を作製した方位の組み合わせは,PST結晶でのB_1方位(荷重軸とラメラ組織境界のなす角度が31°)同士のもので,1つの結晶粒について荷重軸の周りに角度θだけ回転させた.これに従いPST双結晶の方位はB_1(0°)/B_1(θ°)のように表す.双結晶における粒界での歪の適合性をPST結晶の巨視変形から考察すると.θ=90°で最も悪い状況となる.拡散接合法により作製した接合体の結晶粒界は,通常の溶製材の粒界で見られるように個々のラメラが互いにロックされた構造を取り,原子尺度でも酸化物などの介存物は全く存在しない.B_1方位のPST結晶は20数%程度の引張伸びを示すが,それらがちょうど対向したB_1(0°)/B_1(180°)双結晶は,降伏応力,加工硬化率,引張伸びともB_1方位のPST結晶のそれとよく似ている.これは,このB_1(0°)/B_1(0°)双結晶では巨視的な歪の適合性が結晶粒界で確保されているためである.片方の結晶粒が150°回転したB_1(0°)/B_1(150°)双結晶でも,同様の挙動が見られた.これに対して,片方の結晶粒が120-回転したB_1(0°)/B_1(120°)双結晶では,降伏応力,加工硬化率とも構成PST結晶よりもなかり大きく,引張伸びは数%程度とかなり小さい.このように,2相TiAlラメラ合金の引張伸びは結晶粒界での歪の適合性と密接に関連していると言う事が明らかになった.
縦断・空間データを含む多変量データ解析の診断技法の研究

次の5つのトピックスに重点的に取り組んだ。1)多変量データ解析における影響診断の2つの主要な方法論である影響関数法と局所影響法の関係、2)複数観測診断法、3)空間データ解析における影響診断、4)関数データ解析における影響診断、5)種々の多変量解析法における影響診断のための汎用ソフトウェアの開発。1)については、モデルが等式制約を含む場合と含まない場合、すべてのパラメータに関心のある場合と一部のパラメータにしか関心のない場合の組み合わせで決まる4つの場合について、2つの接近法の同値性を証明。具体的には主成分分析と正準相関分析において法曲率およびそれを最大化する方向を導出した(Tanaka & Zhang,Comp.Statist.& Data Anal.,1999ほか)。2)については従来から提案している方法に対して1)の結果からの解釈を追加し、内容の充実をはかった。その成果については、カナダ、バンフで開催された国際研究集会において報告した。また、3)についてはvariogram estimation,variogram model fitting,predictionの3つの段階での影響診断法を提案し、そのうち、variogram estimationにおける影響関数の性能をCressie & Hawkins(1980)の提案したものと比較した(Choi et al.,J.Jap.Soc.Comp.Stat.,2000など)。4)については関数データの主成分分析の影響分析法を提案し、その性能をしらべた(Yamanishi & Tanaka,Proc.Japan-China Symp.,2000など)。影響分析の汎用ソフトウェアとして因子分析(探索的および確認的)、主成分分析(分散共分散に基づく場合と相関行列に基づく場合を含む)の分析を含むプログラムSAMMIFをCOMPSTAT98(1998)、ICMMA国際会議(2000)で報告したが、その後、正準相関分析、グラフィカルモデリングについて検討中である。平成10年度の研究実施計画のうち、1)影響関数に基づく方法とタックの局所影響に基づく方法の関係の研究、2)これまで開発してきた感度分析の汎用プログラムの作成、3)縦断データ・空間データ解析法における感度分析法の開発、の3つに重点的に取り組んだ。1)については、一般の統計モデル(正規分布・最尤法の場合)について、(等式制約の有/無)x(全パラメータ/一部のパラメータ)の4通りの場合について、二つの接近法が複数観測値診断に関して同じ結果を与えることを証明した。その結果については、博士課程の学生との共著(Tanaka & Zhang)で国際計算機統計学会のジャーナルに投稿して受理されている。証明の細かい部分についての補足が学部の研究報告に張・田中論文として印刷中である。また、主成分分析の場合について、具体的に二つの接近法で定式化し、数学的・数値的に一致することを示し、その結果を別の国際誌に投稿中(Zhang & Tanaka)である。2)については、正規分布・最尤法で定式化される多変量解析における感度分析のWindows版汎用ソフトウエアを開発し、Mori et al.共著で日本計算機統計学会誌、COMPSTAT99に公表した。現在の版では探索的および確認的因子分析、主成分分析、正準相関分析の感度分析が組み込まれている。手法の追加は今後の課題である。3)については、まず、空間データ解析法の性質について数値的に検討し、その後、影響関数の考え方に基づいて感度分析法の定式化を行った。前半の部分については大学院学生との共著で学部の研究報告(Choi & Tanaka)として印刷中である。感度分析については基本的な定式化が終了し、現在、計算プログラムを作成して数値的な検討を行う段階に来ている。

この結果は1999年8月にヘルシンキで開催される国際統計協会の大会で報告する計画である。平成11年度の研究実施計画のうち、1)影響関数に基づく方法とクックの局所影響に基づく方法の関係の研究、2)空間データ解析法における感度分析法の開発、3)開発してきた感度分析法の汎用プログラムの作成、の3つに重点的に取り組んだ。1)については、一般の統計モデル(正規分布・最尤法の場合)について、(等式制約の有/無)x(全パラメータ/一部のパラメータ)の4通りの場合について、二つの接近法が複数観測値診断に関して同じ結果を与えることを証明した。その結果については、博士課程の学生との共著の形(Tanaka&Zhang)で国際計算機統計学会の雑誌に掲載され、証明の細かい部分についての補足が環境理工学部の研究報告に張・田中論文として公表されている。この研究はわれわれの複数観測値診断研究の基礎を形成しているが、本年5月のバンフでの国際学会では、さらに複数観測値のmasking/swampingといった現象について、主成分分析の場合を例として、詳細な検討結果を報告する予定である。2)については、定常空間データの予測の3つのプロセス、(1)バリオグラムの推定、(2)バリオグラム・モデルの当てはめ、(3)バリオグラム・モデルを利用した最適予測、の各段階の統計量への影響関数を導き、それに基づいた、それぞれの段階での感度分析の方法を提案した。さらには、共変量のある場合の相互バリオグラムヘの影響関数を導出した。それらの成果は、ヘルシンキで開催された国際統計協会第52回大会で発表(Choi et al.,1999)したほか、一部は韓国データ解析学会の学会誌に掲載され(印刷中)、別の一部は日本の学会誌に投稿中、また、数値的な結果は環境理工学部研究報告に公表している。3)については、正規分布・最尤法で定式化される多変量解析における感度分析のWindows版汎用ソフトウエアを開発し、Mori et al.共著でCOMPSTAT'98に公表した。現在の版では探索的および確認的因子分析、主成分分析、正準相関分析の感度分析が組み込まれている。手法の追加ならびに機能の追加は今後の課題である。現在、摂動の入れ方にバラエティを持たせること、ならびに複数観測値診断の部分を充実させることに力を注いでいる。今年度の研究実施計画のうち、1)影響関数に基づく接近法と局所影響に基づく接近法の関係についての研究、2)空間データ解析における感度分析法の開発、3)関数データ解析における感度分析法の開発、4)感度分析ソフトウェアSAMMIFの充実、の4つに重点的に取り組んだ。1)については、相関行列の主成分分析における感度分析への2つの接近法な関係について検討し、第7回日本中国統計学シンポジウムにおいて発表した(Zhang,Ishikawa & Tanaka,2000)。