hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
家族性大腸腺腫症患者における分子マーカー探索と新規治療法開発

血漿を分離して、次世代シークエンサーを用いてmiRNAを網羅的に解析した。FAP患者と健常者の間で有意に変化しているmiRNAを抽出しバイオマーカー候補とした。FAP患者と健常者の血漿中で発現量に差があるmiRNAとして、miR143-5p(発現量7.6倍増加)、miR143-3p(発現量6.2倍増加)mir96-5p (10.9倍発現量増加)、mir183-5p (2.9倍発現量増加)、mir8855p(8分の1に発現量減少)などが候補として抽出された。このうちで143-3pは血漿中のマイクロRNA量が多く、Tumor suppressor miRNAとされること、FAP患者の大腸腺腫で減少しているとの報告があることから最も有力なバイオマーカーとなることが期待された。Validationとして次にmir-143の定量的PCRを行っているが、NGSを行った5人のサンプルでは2例が測定出来ず。3例ではコントロールに比べて0.76倍1.9倍と予想されたような差を認めることが出来なかった。血液中のmiRNAがFAPのバイオマーカーとなるか検討した。大腸全摘前FAP患者5名と健常者3名のmiRNAを次世代シークエンサーで解析した。FAP患者で変化しているmiRNAとして、miR143-5p(7.6倍)、miR143-3p(6.2倍)mir96-5p (10.9倍)、mir183-5p (2.9倍)、mir885-5p(8分の1)が抽出された。Validationとしてmir-143の定量的PCRを行ったがNGSを行った3例では0.76倍1.9倍と差は小さかった。大腸全摘前では増加傾向であったが、大腸全摘後の患者では減少しており、大腸腺腫との関係が示唆される結果であった。1.サンプル数を増やすための方策1サンプル数を増やすために当院通院中のFAP患者リストを作成し、受診に合わせて同意書、サンプルを採取する様に徹底する。2患者リストを元に、患者に説明文・同意書を郵送し研究への協力を依頼する。3学会発表を行うことで研究を医療関係者・患者に知ってもらう。2.マイクロRNA解析の実施現在FAPで大腸全摘前後の血漿があるサンプルが1例しか無いため、大腸全摘による変化(大腸ポリープの有無による変化)を調べるには不十分である。半年以内には3例まで増える予定であるので、3例もしくは5例で解析を行う。また術後の患者ではデスモイドのある患者と無い患者がいるので術後の患者も全部で10例集まれば解析を行う。3.オルガノイド培養の実施: FAP患者でのオルガノイド培養を行う前に、FAP以外の患者でのオルガノイド培養を行い手技を確立する。1これまでの研究成果は第87回大腸癌研究会で発表する予定である。2探索研究でmiR-143が最も有力な候補遺伝子と抽出されている。今後はVadidationとして、これまでに保存しているFAP患者、健常者での血清中の発現を検査していく。方法としてはreal time RT-PCRを予定しているが、比較定量の為に用いるNormal controlとなるmicroRNAが必要である。文献的にはmiR-39を用いているものがあるが、これまでに当科で行った次世代シークエンサーでの結果からはmiR-16-5p、miR-30e-5p、miR-140-3p、miR186-5pがFAP患者と健常者で安定して発現していることが分かっているのでmir39と共にこれらを用いる。3実験補助が補充され次第上記Validationの研究を進める。外科腫瘍学
Ｇｅｎｅｔｉｃ　ｃｏｒｒｉｄｏｒとしての里山機能の解明

樹木種の遺伝的多様性と遺伝子流動に対し、里山が果たしている役割は明らかでない。本研究では、埼玉県西部地域において互いに繁殖様式の異なる3樹種、コナラ、ウワミズザクラ、ウグイスカグラ集団の遺伝的多様性と遺伝構造を、核または葉緑体マーカーを用いて明らかにした。その結果、里山において各樹種の遺伝的多様性は十分保持されていた。一方、広範囲に生育している風媒重力散布樹種より点在している虫媒鳥散布樹種のほうが遺伝子流動の制限があると考えられた。まず、埼玉県南部の丘陵から台地に至る1,000km2を対象として里山の縮小断片化の現状を把握した。現在のGIS植生図と比較するため、明治時代に作成された迅速測図をGIS化し、森林面積の変化を算出した。その結果、当該地域の森林は、明治時代には全体面積の63.0%あったが、現在では29.1%と半分以下に減少していた。また、マツからコナラあるいはスギ・ヒノキ植林地に樹種転換が生じていることも明らかになった。次に、里山の骨格をなす樹種であるコナラ(Quercus serrata)について、調査地全域に散在するよう選んだ11集団の成木から葉をサンプリングした。EST-SSRマーカーのスクリーニングを行い、5座を用いて遺伝解析を行った。その結果、集団間は遺伝的に分化しておらず、現在の成木が更新した際には全域にわたる遺伝子流動があったと考えられた。また、個体間での遺伝子流動の実際を把握するために、孤立木から種子の採取を行った。さらに、里山の林床に生育するヤマウグイスカグラ(Lonicera gracilipes var.gracilipes)の遺伝構造に里山の断片化が与える影響を明らかにするために、まず、本種が調査地全体でどのような遺伝構造を持つのかを調べた。7地点計70個体のヤマウグイスカグラのpsbA-trnH領域の葉緑体DNA変異をシーケンシング解析により調べた結果、3つの葉緑体ハプロタイプ(H1,H2,H3)が検出された。H1は調査地全体に、H2とH3は調査地の一部に確認された。H1とH2、H1とH3は一部で同所的に確認された。これらの結果は、ヤマウグイスカグラの種子の移動が葉緑体レベルの解析で大まかな追跡が行えることを示唆している。本年度は、主に埼玉県西部の里山林におけるコナラ成木および実生集団の遺伝的多様性と周辺の樹林環境、または集団の履歴との関係について検討した。対象とした集団は18集団で、さらに対照として秩父のコナラ自然林および滋賀県の里山林を用いた。核SSRの解析により、いずれの集団も高い遺伝的多様性を維持し、任意交配集団であることが明らかになった。また、GISを用いて半径500m以内の樹林数や樹林面積と遺伝的多様性との関係はないことが明らかになった。さらに、過去、コナラ林であったところか、アカマツ林であったかでは多様性に違いはなかった。また、集団間分化も著しく低く、集団間の構造も見られなかった。したがって、埼玉県西部のコナラは十分な遺伝子流動の結果成立しており、地域在来の遺伝的多様性を一様に保持していると考えられた。一方、葉緑体SSRを用いた解析では、全部で7つのハプロタイプが検出され、埼玉県西部では2つ、秩父自然林は1つ、滋賀里山林は5つであった。埼玉県と滋賀県で検出されたハプロタイプは同じものはなかった。埼玉県西部の2つのハプロタイプは遺伝的に非常に近く、また、片方のハプロタイプを持つ個体のほうが圧倒的に多く、このハプロタイプで秩父自然林は固定されていた。したがって、埼玉県西部のコナラは地域在来の個体で構成されていると考えられた。これらのことから、埼玉県西部のコナラに関して、里山林は十分な遺伝子流動に寄与し、また、地域在来の遺伝的特性および多様性を一様に保持する空間として機能していると考えられた。また、本年度は虫媒の樹木種であるコブシの成木のサンプリングおよび遺伝解析を終了した。さらに同じく虫媒樹木のウワミズザクラの成木と実生のサンプリング、マーカー開発を行った。本年度は、里山に生育する樹種のうち、虫媒鳥散布の落葉高木であるウワミズザクラと同じく虫媒鳥散布であるが落葉低木のウグイスカグラを対象種として研究を行った。ウワミズザクラについては、次世代シーケンサで解析したデータをもとに核SSRを5座開発した。この5座を用いて埼玉県入間地域の台地丘陵の19集団から全235個体を採取し解析した。遺伝的多様性の指数の算出と集団間の遺伝的分化程度の検証、およびストラクチャー解析による集団の構造分析を行った。その結果、人が管理してきた台地上の集団に比べ、丘陵の集団のほうが遺伝的多様性が高いことが明らかとなった。

また、集団全体の分化の程度は低いが、総当たりの集団間では分化している組み合わせが9割以上あった。集団の構造は、人為の影響が大きい台地上の一部集団で、ほかの集団とは異なるジーンプールが優占していた。これらの集団は、江戸時代に人為的に作られた平地林に生育しているものであった。一方、ウグイスカグラは、同地域で8集団29個体を採取し、外群として山梨県山中湖村で3個体を採取した。次世代シーケンスで解読した葉緑体DNAの多型的な領域684bpについて、全個体についてシーケンスした。その結果、4つのハプロタイプが検出された。調査地は、1つのハプロタイプが優占していたが、2つの稀なハプロタイプが1個体ずつ検出された。また、外群も調査地と同じハプロタイプが優占していたが1個体のみ異なるハプロタイプを持っており、このハプロタイプは調査地内で検出されたハプロタイプとは異なっていた。このことから、調査地と外群とは同じ祖先集団に由来しているが、現在は種子を介した遺伝子流動はないと考えられた。また、調査地で検出された稀なハプロタイプは、人為の影響が大きい台地上の集団に見られた。このことから、ウグイスカグラの遺伝的多様性の維持に、里山が大きな役割を果たしているといえる。26年度が最終年度であるため、記入しない。森林遺伝育種学26年度が最終年度であるため、記入しない。遺伝分析手法の確立に時間が予定よりかかったため、植生調査に割く労力が不足したため本研究は、「空間的に比較的分散して存在する里山が、樹木の遺伝的多様性維持にどのような働きを有するか」を明らかにすることを目的とする。里山が適当な距離と面積を持って分布することによって、林分間の遺伝子流動が一定程度に保たれるとすれば、森林地帯と森林地帯を遺伝的に結合する、"Genetic corridor(遺伝的回廊)"としての機能を果たすことにより、より大きな空間スケールにおける遺伝的多様性維持に大きな意味を持つと考えられる。そのため、まず、1)研究対象地域において里山およびその背後に存在する森林の配置や規模を明らかにし、林分の空間的連続性(隔離)の程度を評価する。ついで、2)そのような景観において、異なる花粉散布および種子散布様式(あわせて繁殖様式と呼ぶ)を有する複数の樹種を対象に、どのように遺伝的多様性が存在するのか、林分相互間においてどのような遺伝子流動が起こっているのかを明らかにする。そして、3)里山の空間配置がそれぞれの繁殖様式に対してどのような意味を持つのかを議論する。また本研究を通じて新たな景観遺伝学の確立を目指すものである。本年度は、1)の対象地域の基本的なGISデータを取得し、データベースを構築した。また、2)については風媒樹木のコナラおよび虫媒高木のコブシの遺伝解析を終了している。また虫媒高木のウワミズザクラについては、成木、実生のサンプリングおよびDNA抽出まで終えており、核マーカーも開発を行った。虫媒低木のウグイスカグラについては、サンプリングおよび遺伝マーカーの開発の途中である。3)についてはコナラについて考察を行った。したがって、研究機関全体で予定している内容の6割から7割程度は終了したと考えている。景観構造解析については、引き続きGIS上のデータ解析を進める。また、遺伝解析については、コナラは実生のサンプリングおよび解析を継続する。
ノシセプチン受容体拮抗薬の検索

最近の我々の研究成果では、新規神経ペプチドであるノシセプチンは疼痛伝達、記憶学習や聴覚伝達に関する中枢神経系の調節に寄与することが示唆されている。本研究では、ノシセプチン受容体の拮抗薬を見い出し、その鎮痛薬や記憶改善薬としての有効性を検定するとともに、詳細なノシセプチンによる情報伝達の生理的意義についても明らかにすることを目的とした。共同研究の成果として、NalBenzHやJ-113397と呼ばれる化合物がcDNA発現細胞を用いた実験系において、選択的なノシセプチン受容体拮抗作用を有することが明らかになった。正常マウスとノシセプチン受容体欠損マウスへの投与による予備的な試験では、これらの薬物は部分的な鎮痛作用を有すると考えられるが、鎮痛薬や記憶改善薬としての有用性については現在行われている実験結果に基づき判断する必要がある。一方、ノシセプチン前駆体とノシセプチン受容体の中枢神経系における細胞レベルでの分布、脊髄後根におけるシナプス伝達のノシセプチンによる調節なども解析することに成功した。さらに個体レベルでの実験系で、サブスタンスPによる疼痛のノシセプチンによる調節、モルヒネ耐性や依存におけるノシセプチン情報伝達の役割などの詳細も明らかになった。本研究は最近明らかにされた新規神経ペプチドであるノシセプチンの中枢神経系情報伝達に立脚し、新しい作用機序による(I)鎮痛薬、(II)記憶学習改善薬の候補物質の検索を行うとともに、(III)個体及び細胞レベルの情報伝達の機能も同時に解明することを目的としている。平成11年度の研究により以下の内容の論文が報告された。ノシセプチン受容体拮抗作用を有する新規有機化合物の発見(太田、岩沢ら)され、J-113397と命名されたその薬物の高いノシセプチン受容体選択性が示された。今後、個体レベルでの鎮痛薬や記憶増強薬としての有効性が動物実験レベルで検討することが計画されている。また、脊髄のサブスタンスP誘発疼痛伝達において、ノシセプチンが用量に依存した2相性の調節をすることを見い出した。(井上ら)。さらに、既に示唆されていたノシセプチンによる記憶学習の負の調節について、ノシセプチン受容体欠損マウスとノシセプチン受容体拮抗作用を有する薬物を用いた実験により再確認された(間宮ら)。本研究は最近明らかにされた新規神経ペプチドを介する中枢情報伝達に着目し、ノシセプチン受容体拮抗作用を有する薬物を見い出し、その鎮痛作用や記憶学習改善効果の検証、それを利用してノシセプチンの生理機能をさらに明らかにすることを目的としている。高い選択性でノシセプチン受容体拮抗作用を有する薬物J-113397及びノシセプチン受容体欠損マウスを利用して遂行された個体レベルの薬理学的実験系で、ノシセプチン情報伝達は疼痛調節や記憶学習調節以外にも様々な個体機能調節に関与することが見い出された。このことは、ノシセプチン情報伝達の遮断薬が単純に鎮痛薬や記憶学習改善薬として有効ではないことを示唆した(論文準備中)。一方、ノシセプチン前駆体蛋白と受容体の詳細な脳内神経細胞レベルでの分布(宝谷ら)、モルヒネ耐性や依存の形成時に脊髄神経細胞でのノシセプチン受容体の発現誘導が起こること(植田ら)が論文発表された。また、ノシセプチン受容体欠損マウスで観察される長期増強の亢進は、海馬領域のCA1錐体細胞の異常に起因するものではなく、介在神経の調節異常が原因であることも示されつつある。
米ドルの動揺と環太平洋圏の金融・資本市場における資金循環の理論的実態的研究

1987年以降米ドルは激しい動揺に見舞われ、ニュ-ヨ-クの株価の突然の大暴落(10月19日のブラックマンデ-)を経て為替市場も同時にドル安となり、アメリカ経済への影響ひいては世界経済へ深刻なインパクトを与えた。このような動向はドルとの相関性の大きい日本の金融の資本市場に厳しい影響を与え、ひいては環太平洋圏諸国の通貨・金融・為替政策の協力体制に甚大な圧力を与えている。本研究は上述のドルの動揺の加速化によるわが国資金の国際的循環を東京市場を対象としてニュ-ヨ-ク市場、シドニ-市場、シンガポ-ル市場及び香港市場の補完的役割を実態を基礎として把握し、さらにこれらの市場を構成する金融機関(銀行、証券、保険)に対する本邦金融機関との協力の形態と効果について理論的実態的に最適な協力の在り方を策定しようとして4カ年計画の共同研究として発足した。しかし2年に当初の研究を縮少せざるをえなくなり以下のようなスケジュ-ルで実施した。本研究の方法は基礎的資料の収集と分析、アンケ-トによる実態調査(インタビュ-調査を含む)による調査票の電算機処理をもととする分析が大きな意義をもっている。本研究においては(1)金融市場グル-プ、(2)資本市場グル-プの2グル-プにより実態調査を実施したが協力者として安居洋、田中勝次、石田三樹、地主敏樹、家森信善の参加を求め、アンケ-ト、インタビュ-調査を銀行、証券、保険会社に対して実施し、調査票の回収のあと、神戸大学経済経営研究所機械計算室の協力によるコンピュ-タ処理により分析し近く、わが国の国際金融政策に対して提言を行うことにしている。本年度はグル-プ毎の研究会をそれぞれ3回、合同研究会を2回開催し、わが国金融資本市場の国際化のためのスピ-ドアップと円の最適国際的地位とジャパン・マネ-の最適規模を策定するための作業を行った。又地域別、通貨別マル-フロ-表の作表作業も実施中である。1987年夏以降、米ドルの動揺は格別に験しいものがあり、ニューヨークの株価は10月19日、戦後最大の下落を記録し、為替市場も時を同じくして、ドル安に急テンポに変動をしてきた。このような米国の金融・資本・為替市場の著しい変動は米ドルとの相関性の強い日本の市場へ極めて厳しい影響を与え、又、これが環太平洋圏諸国の通貨・金融・為替の協力体制に予想以上の打撃を与えている。本研究は米ドルの最近の憂慮すべき動揺による東京市場のもつ国際資金循環あるいはは国際資金還流又は国際資金配分の計画の策定とシドニー、シンガポール、香港の市場の役割を理論的に通貨・資金の供給機構として公的にも私的にも、それぞれの地域の金融機関が本邦金融機関とどのような形態と内容の協力が可能であり、これにより米ドルの動揺による、この地域の打撃をいかに阻止できるかを計量するため各金融機関・金融市場の実態調査を基礎として策定しようとするのが目的である。第1年度は基礎的資料の収集分析、アンケートの作成とインタビューによる実態調査票の作成と発送、回収をすることになっている。本年度は研究会を3回行い、(昭和63年7月15日、10月15日、平成元年2月21日)各グループから研究の現状について、報告をした。

このような動向はドルとの相関性の大きい日本の金融の資本市場に厳しい影響を与え、ひいては環太平洋圏諸国の通貨・金融・為替政策の協力体制に甚大な圧力を与えている。本研究は上述のドルの動揺の加速化によるわが国資金の国際的循環を東京市場を対象としてニュ-ヨ-ク市場、シドニ-市場、シンガポ-ル市場及び香港市場の補完的役割を実態を基礎として把握し、さらにこれらの市場を構成する金融機関(銀行、証券、保険)に対する本邦金融機関との協力の形態と効果について理論的実態的に最適な協力のあり方を策定しようとして4カ年計画の共同研究として発足した。しかし2年に当初の計画を変更せざるをえなくなり本年度は以下のようなスケジュ-ルで実施した。(1)金融市場グル-プ、資本市場グル-プの2グル-プに、安居洋、田中勝次、石田三樹、地主敏樹、家森信善の各氏を研究協力者として参加を求めた上で、実態調査を実施した。(2)本年度は上記グル-プ毎の研究会をそれぞれ3回、合同研究会を2回開催し、わが国金融資本市場の国際化のためのスピ-ドアップと円の最適国際的地位とジャパン・マネ-の最適規模を策定する作業等に関して報告した。
日本統治下の台湾における歌舞伎・浄瑠璃史の構築―現地資料に基づく基礎研究と考察―

本研究は、1895年から1945年まで50年におよぶ日本の統治時代における台湾において、興行された歌舞伎興行や、浄瑠璃興行について、その展開の様相・組織の成立・活動の場所・活動の担い手などを、資料調査を通じてその実態を解明し、これまで明らかにされていない台湾における歌舞伎・浄瑠璃史を構築することを目的としている。初年度にあたる2018年度は、資料収集に力を注いだ。研究代表の中尾と分担者の王は、8月に国立台湾図書館を訪れ、『台湾日日新報』を中心とした資料を調査し、歌舞伎興行、浄瑠璃興行や、劇場について知る資料を収集した。その資料をふまえて、分担者の日置と、研究協力者の川下文俊(近代浄瑠璃研究)、王、中尾の4人が、2月に国立台湾図書館におもむき、資料収集の続きを行った。現在のところ「歌舞伎」「義太夫」「浄瑠璃」や台湾にあった複数の劇場に関する記事を収集しており、予測される資料全体像の60%70%程度は収集できているかと考えている。また、メンバーはそれぞれに研究課題の詳細を、決めそれぞれに調査を進めているところである。具体的には、中尾は、台湾統治下の初期に数年興行をおこなっていた「十字館」での歌舞伎興行と演者について、王は、もっとも中心的な劇場だったと思われる「台北座」「栄座」など、台北の劇場史について、日置は、戦時下での皇民化運動との関連について、研究協力者の川下は素人義太夫の主な人物について、現在のところの集中的に調査を進めている。予想通り膨大な資料が収集されており、その予測される全体像を考えれば順調に進んでいると言える。また、メンバー個々により密に掘り下げるべき研究課題を決めることが出来ている。しかし、資料収集と分析に留まっており、成果発表に関しては、十分な成果をあげることができていない。資料収集の過程で、あらたに深めるべき課題を多数見つけており、これらについては今後の課題とせざるを得ないかもしれない。また、収集した資料は、大まかな把握に留まっており、今後、さらに分析を深めるその他の資料を踏まえて、分析を深め、最終的には研究成果を公開できるレベルまでブラッシュアップさせる必要があるが、その点においては、まだ十分な時間が取れずにいるため、おおむね順調に進展していると自己評価した。まずは、台湾に行かなければ収集できない資料を早々に収集し終わることが先決と考える。そのためには、2019年度にも国立台湾図書館に調査に行く必要がある。ただし、予算が限られており、ある程度のメドがついた時点で、以降は、国内やweb上で閲覧可能なものに調査の対象を移行する必要があろう。また、研究者メンバーのそれぞれの課題がある程度定まりつつあるので、研究期間内での研究成果の中間発表を目指したい。また、申請中の3か年を超えて調査を続ける可能性についても、慎重に検討していきたいと考えている。

ただし、予算が限られており、ある程度のメドがついた時点で、以降は、国内やweb上で閲覧可能なものに調査の対象を移行する必要があろう。また、研究者メンバーのそれぞれの課題がある程度定まりつつあるので、研究期間内での研究成果の中間発表を目指したい。また、申請中の3か年を超えて調査を続ける可能性についても、慎重に検討していきたいと考えている。本年度に資料整理を依頼しその謝金支払を予定していたが、実際に国立台湾図書館にて資料収集を始めてた結果、まずは収集に専念する方が効率的と判断し、次年度に行うように計画を変更したため、予定していた謝金が発生しなかった。この件については、調査渡航費との兼ね合いや研究の進捗状況と効率を総合的に判断しつつ、次年度に計画していく。
誘電体媒質中の過剰電子:輸送・反応性・伝導状態エネルギ-と媒質の高電圧特性

当初計画において予定した測定は、1.電子移動度(Hall移動度を含む)測定,2.伝導状態エネルギ-測定,3.電子補捉反応速度測定の三つで、これらの測定結果から媒質の高電圧特性に関する情報を得ることが本共同研究の目的である。以下で、まず測定結果を整理する。1.電子移動度の測定.(1)nーペンタンーネオペンタン二成分系について、Hall移動度μ_Hとドリフト移動度μ_Dをnーペンタン濃度30(体積)%迄の濃度範囲(蒸気圧下)で測定した。nーペンタン中のμ_Dは低く電子は局在状態にあり、μ_D大で電子が準自由状態にあるネオペンタンと混合していわゆるtwoーstate状態を創り出し、電子局在ー自由状態間の平衡についての情報を得ることを期待したが、この濃度範囲ではμ_H/μ_Hがほぼ1で電子が準自由状態にあることが判明した。μ_D自体は濃度と共に低下するので、nーペンタンは単に大きい散乱断面積を持つ散乱体としてのみ働いている。この事実は、無極性媒質中の電子局在化にはより多数の直鎖状分子を要するという局在化機構について極めて重要な情報を含んでいる。μ_Hの測定は媒質中の電子状態を判定する最も確実な情報を与えるが測定は極めて困難で、現在液体中の測定例は本測定を含めて6例に限られている(内4例は本共同研究関係)。(2)テトラメチルシラン(TMS)ー、nーペンタンートルエン(またはベンゼン)二成分系のμ_Dを3、000barまでの圧力範囲で測定した。TMSの場合はトルエン、ベンゼンを1%程度混合しても、TMSのみの場合と全く等しい値、圧力変化を示す。nーペンタンでは、低圧領域で純nーペンタン中と同じであるが、1,000bar付近から急激に減少する。トルエン高濃度(35%)の場合は低下したμ_D値がそれ以上の圧力上昇には無関係でほぼ一定値を示すことを見いだした。μ_Dの低下は高圧下の陰イオン安定化によるベンゼンないしトルエンへの電子付着の結果で、TMS中で陰イオンが生成しないのはTMSのV_0値が低く準自由電子状態が安定であるためと解釈される。高濃度・高圧領域における一定なμ_D値は電子がトルエン分子間のhoppingにより移動することを示すもので、hopping mechanismにより電子移動の最初の観測例である。2.伝導状態エネルギ-(V_0)の測定.イソオクタン、テトラメチルシラン、2,2ージメチルブタン、nーペンタン中で3、000barまでの圧力範囲のV_0値を測定した。亜鉛蒸着膜の光電効果法による仕事関数の測定をコンピュ-タ制御により1nm間隔で行い、より正確なV_0値の決定が可能となった。V_0値はどの液体でも圧力と共に増加するが、密度増加によるV_0値の増加としてWignerーSeitz理論と矛盾しないが、定量的には同理論による計算値は実験値を十分再現しないことが判明した。3.CO_2による電子捕捉反応速度の測定.東京大学で常温液体中の測定を終了した2,2ージメチルブタンおよびイソブタンのうち、2,2ージメチルブタン中の測定を2,500barまでの範囲で行った。低圧領域では、常温液体中同様、電子捕捉ー離脱平衡が成立する。高圧領域では圧力による陰イオンCO_2^ーの安定化により捕捉反応が優勢となり、反応速度定数及び平衡定数は圧力と共に増加する。熱力学によれば圧力による平衡定数の増加は体積の減少(ー250cm^3)を意味するが、これは溶媒の電縮現象によるものであることがDrudeーNernstの古典的理論が適用されることで結論できる。前述のV_0実測値とCO_2^ーイオンによる溶媒の分極エネルギ-を用いてエネルギ-収支論による反応速度の解釈を試みた。これらの測定結果を総合すると、カロリメタ-用電離箱内等の高電圧条件下の使用で直鎖状または芳香族炭化水素は不純物として比較的問題とならないことが判明した。またCO_2が多くの炭化水素中で電子を容易に捕捉することを観測したので、鉱油中にCO_2を溶解させて絶縁破壊電圧の測定を行ったが、破壊電圧は60kV前後で改善は見られなかった。炭化水素の種類を選んで、さらに検討を続ける必要がある。

この事実は、無極性媒質中の電子局在化にはより多数の直鎖状分子を要するという局在化機構について極めて重要な情報を含んでいる。μ_Hの測定は媒質中の電子状態を判定する最も確実な情報を与えるが測定は極めて困難で、現在液体中の測定例は本測定を含めて6例に限られている(内4例は本共同研究関係)。(2)テトラメチルシラン(TMS)ー、nーペンタンートルエン(またはベンゼン)二成分系のμ_Dを3、000barまでの圧力範囲で測定した。TMSの場合はトルエン、ベンゼンを1%程度混合しても、TMSのみの場合と全く等しい値、圧力変化を示す。nーペンタンでは、低圧領域で純nーペンタン中と同じであるが、1,000bar付近から急激に減少する。トルエン高濃度(35%)の場合は低下したμ_D値がそれ以上の圧力上昇には無関係でほぼ一定値を示すことを見いだした。μ_Dの低下は高圧下の陰イオン安定化によるベンゼンないしトルエンへの電子付着の結果で、TMS中で陰イオンが生成しないのはTMSのV_0値が低く準自由電子状態が安定であるためと解釈される。高濃度・高圧領域における一定なμ_D値は電子がトルエン分子間のhoppingにより移動することを示すもので、hopping mechanismにより電子移動の最初の観測例である。2.伝導状態エネルギ-(V_0)の測定.イソオクタン、テトラメチルシラン、2,2ージメチルブタン、nーペンタン中で3、000barまでの圧力範囲のV_0値を測定した。亜鉛蒸着膜の光電効果法による仕事関数の測定をコンピュ-タ制御により1nm間隔で行い、より正確なV_0値の決定が可能となった。V_0値はどの液体でも圧力と共に増加するが、密度増加によるV_0値の増加としてWignerーSeitz理論と矛盾しないが、定量的には同理論による計算値は実験値を十分再現しないことが判明した。3.CO_2による電子捕捉反応速度の測定.東京大学で常温液体中の測定を終了した2,2ージメチルブタンおよびイソブタンのうち、2,2ージメチルブタン中の測定を2,500barまでの範囲で行った。低圧領域では、常温液体中同様、電子捕捉ー離脱平衡が成立する。高圧領域では圧力による陰イオンCO_2^ーの安定化により捕捉反応が優勢となり、反応速度定数及び平衡定数は圧力と共に増加する。熱力学によれば圧力による平衡定数の増加は体積の減少(ー250cm^3)を意味するが、これは溶媒の電縮現象によるものであることがDrudeーNernstの古典的理論が適用されることで結論できる。前述のV_0実測値とCO_2^ーイオンによる溶媒の分極エネルギ-を用いてエネルギ-収支論による反応速度の解釈を試みた。これらの測定結果を総合すると、カロリメタ-用電離箱内等の高電圧条件下の使用で直鎖状または芳香族炭化水素は不純物として比較的問題とならないことが判明した。またCO_2が多くの炭化水素中で電子を容易に捕捉することを観測したので、鉱油中にCO_2を溶解させて絶縁破壊電圧の測定を行ったが、破壊電圧は60kV前後で改善は見られなかった。炭化水素の種類を選んで、さらに検討を続ける必要がある。
血管内皮間葉転換を標的とした新規の肺高血圧症治療薬の開発

PDGF、FGF、VEGFを抑制するTKIであるNintedanibの肺高血圧症(PH)治療薬としての有用性を検証した。ヒト肺動脈の血管内皮細胞と平滑筋細胞を用いて、内皮間葉転換(EndMT)と平滑筋細胞増殖に対するNintedanibの抑制効果と、PAHラットへの慢性投与の効果を確認した。Nintedanibは、平滑筋細胞の増殖とリン酸化ERK/AKTの発現を減少させ、内皮細胞のEndMT誘導を抑制した。PAHラットへの慢性投与により、肺血行動態と肺動脈中膜と内膜の増殖が改善した。以上より、NintedanibはEndMTと平滑筋増殖の抑制を介して新規PAH治療薬になり得ると考えた。次に、各種薬剤による抗間葉系転換効果を検証した。現行の肺動脈性肺高血圧症治療に用いる各種血管拡張薬(prostacyclin、endothelin receptor拮抗薬、PDE-5阻害薬)に加えて、Rho-kinase阻害薬、imatinib、riociguatなどの効果を検証中である。またこれらの薬剤の併用による抗間葉系転換効果増強の有無についても検証予定である。細胞実験と並行して、ラット肺高血圧モデルを用いて、in vitroの抗間葉系転換効果を検証する予定である。モデルとしては、VEGF-R拮抗薬(SU5416)+低酸素暴露ラットを使用予定であり、現在モデルラットの安定した作成にむけて準備を進めている。また、血管内皮間葉系転換関連転写因子のレンチウィルス発現ベクター作成およびHPMVECへの遺伝子導入による間葉系転換の誘導についてんの検証の準備をすすめている。(EndMT:血管内皮間葉系転換)に関しては、3週間にわたるTGFβ曝露によって安定してHPMVECのEndMTを誘導できる手法を確立した。EndMTの評価については、PCR法、western blotting法、蛍光免疫染色法を用いて、HPMVECの内皮系マーカーと間葉系マーカーの発現をそれぞれ検証した。次に、この実験系を用いて、現行の肺動脈性肺高血圧症(PAH)の治療に用いられる各種血管拡張薬(endothelin受容体拮抗薬、prostacyclin、PDE-5阻害薬)の抗EndMT効果を検証したが、いずれも効果は不十分であった。これらの薬剤の併用による抗EndMT効果も検証したが、有意な上乗せ効果は認めなかった。今後は、新規でPAH治療薬に承認された血管拡張薬であるriociguatの抗EndMT効果も検証予定である。一方で、血小板由来増殖因子受容体阻害薬であるimatinibは、明らかに抗EndMT効果を有することが確認された。imatinibを初めとする増殖因子阻害薬は、抗リモデリング効果を有するPAH治療薬として治療効果が期待されている。今後はさらに様々な増殖因子に対するmulti-tyrosine kinese阻害薬の抗EndMT効果を検証予定である。in vitroと併せてin vivoにおける薬剤効果検証の準備も並行して行っている。我々は、新規のPAH動物モデルであるVEGF阻害薬(SU5416)+慢性低酸素曝露ラットモデルを使用し、in vitroで高い抗EndMT効果が検証された薬剤のPAH抑制・治療効果を検証する予定である。次に、ヒトPAHに類似した血管内膜病変を有するVEGFR阻害薬+慢性低酸素暴露ラットを用いて、肺高血圧症が成立後にnintedanibを2週間経口投与したところ、nintedanib高濃度投与群で優位に肺循環動態や右室肥大の程度が改善することが確認できた。当初はヒト臍帯血管内皮細胞を用いて実験を行う予定であったが、よりPAHに近い病態を再現するためにHPMVECを用いて実験を開始した。HPMVECは他の細胞と比較して培養が難しく、適切な細胞培養条件の設定に予想よりも多くの時間を有した。再現性をもって薬剤の評価に値する高度のEndMTを誘導する刺激条件を確定するために、さらに多くの試行錯誤が必要であった。HPMVECに安定してEndMTを誘導するAssay系が確立した後も、抗EndMT効果を検証する薬剤の候補が多数あり、スクリーニングを行うのに一定の時間を要している。Snail, Slug, Twist, ZEB1, ZEB2などのEnd-MT関連転写因子のレンチウイルス発現ベクターを作成し、HPMVECに遺伝子導入してEnd-MTを惹起する実験も予定してたが、ウィルス導入に難渋し実験系の確立が出来ていないのが現状である。進行期の肺動脈性肺高血圧症(PAH)の主病態は、閉塞性増殖性内膜病変による血管床の減少である。この内膜病変を構成する細胞は、血管内皮細胞と間葉系細胞の両方の性質を持ち、血管内皮間葉系転換(EndMT)の関与が示唆されている。現在使用できるPAH治療薬は血管拡張薬のみであり、我々はEndMTを含む血管リモデリングを標的とした新規PAH治療薬の開発を目的とした。PDGF・FGF・VEGFの3系統の増殖因子に対するチロシンキナーゼ阻害薬であるNintedanibに注目して検証を行った。最初に、TGFβ+TNFα+IL-1βにより、ヒト肺末梢血管内皮細胞(HPMVEC)にEndMTを誘導した。EndMT誘導によりHPMVECは紡錘形に形態変化し、内皮系マーカー(CD31、vWFなど)が減少、間葉系マーカー(Fibronectin、Collagen1など)が増加するが、NintedanibはEndMTの誘導による間葉系マーカーの発現を抑制した。次に、PDGFやFGFによって増殖誘導したヒト肺血管平滑筋(HPASMC)を用いてNintedanibの増殖抑制効果を検証した。

CCK-8 assayを用いた検証ではNintedanibはHPASMCの増殖を抑制し、リン酸化したERKとAKTの発現も減少した。さらに、ヒトPAHと類似した血管病変を有するPAHモデルラットを用いて、Nintedanib慢性投与の効果を検証した。VEGF受容体阻害薬+3週間の慢性低酸素曝露によって肺動脈圧が上昇したモデルラットに対して、Nintedanibをその後2週間投与した結果、増殖した肺血管病変の頻度は減少し肺動脈圧と右室肥大は軽快した。以上の検証から、肺動脈内皮細胞の形質転換や平滑筋細胞増殖の抑制を介して、Nintedanibは抗リモデリング効果を有する新規PAH治療薬になり得る可能性があると考えた。PDGF、FGF、VEGFを抑制するTKIであるNintedanibの肺高血圧症(PH)治療薬としての有用性を検証した。ヒト肺動脈の血管内皮細胞と平滑筋細胞を用いて、内皮間葉転換(EndMT)と平滑筋細胞増殖に対するNintedanibの抑制効果と、PAHラットへの慢性投与の効果を確認した。Nintedanibは、平滑筋細胞の増殖とリン酸化ERK/AKTの発現を減少させ、内皮細胞のEndMT誘導を抑制した。PAHラットへの慢性投与により、肺血行動態と肺動脈中膜と内膜の増殖が改善した。以上より、NintedanibはEndMTと平滑筋増殖の抑制を介して新規PAH治療薬になり得ると考えた。HPMVECのEndMTを安定して誘導する手法を確立することに難渋した。既報の論文では、TGFβの曝露は48時間21日間と期間にばらつきがあり、その中で適切なプロトコールを選択するまでに時間を要した。最終的に21日間のTGFβ曝露が最も安定してEndMTを誘導することが判明したが、当初予定していたよりも長期間のプロトコールとなったため、薬剤の抗EndMT効果を検証する実験にも、予定以上の時間を要することとなった。現時点では、HPMVECに安定してEndMTを誘導するAssay系が確立し、TGFβの下流シグナルの検証も施行済である。予定期間を超えてはいるが、In vivoで肺高血圧症抑制効果を検証中のnintedanib以外にも、各種薬剤の抗EndMT効果を随時検証していく予定である。in vivoで肺高血圧の改善効果を認めたnintedanibについては、肺病理組織を用いて増殖性血管病変の改善を評価する予定である。レンチウイルス発現ベクターを用いた遺伝子導入実験については、予定期間内での終了が困難と思われるため、実験を中止することも検討している。また、なるべく多くの薬剤の抗EndMT効果を検証するために、実験に関わる研究者の増員も検討中である。肺高血圧・肺循環障害肺動脈性肺高血圧症モデル動物に対する効果の検証(In vivo):肺動脈性肺高血圧症に最も近いとされるVEGF阻害薬(SU5416)+慢性低酸素曝露ラットモデルを使用し、in vitroで高い抗EndMT効果が検証された薬剤(特に各増殖因子に対するmulti-tyrosine kinese阻害薬)の肺動脈性肺高血圧症の進行抑制抑制や治療効果を検証する。
超分子結晶中でのシッフ塩基類の異性化機構の解明と新規プロトン移動系の構築

3、5-ビス(1-メチル-1-フェニルエチル)サリチルアルデヒドと4-トリチルアニリンとの縮合により分子内にピケットフェンスを持つシッフ塩基を合成し、純結晶およびアセトンやメタノールをゲストとして取り込んだ包接結晶を得た。それらすべての結晶はフォトクロミックであり、光着色種の熱退色速度の測定などを行い、隣接分子の効果を考察した。デオキシコール酸およびそのアミドの結晶格子にサリチリデンアニリンがゲストとして包接された結晶を単離した。その結晶がフォトクロミズム現象を示すことを確かめ、光着色化学種の熱退色反応速度を測定した。デオキシコール酸アミドによる包接結晶状態では、純結晶およびデオキシコール酸による包接結晶の場合より熱安定な光着色体が得られることなどが分かった。この様に、結晶中でのシッフ塩基類の光異性化反応が、隣接する分子によって影響を受けることを明らかにし、新規超分子結晶の開発の意義を示した。新しいホストシステムの開発を目指して、2,6-位にマロン酸ビス(アルコキシエチル)置換基を持ったピリジン配位子を合成した。この配位子にPdCl2(PhCN)2を反応させて得られるPd(II)錯体は、X線結晶構造解析とスペクトルデータ解析により、側鎖がイオン認識部位として機能できるtrans-N2Cl2配位構造をしていることがわかっている。配位子単体およびそれらのPd(II)錯体によるアルカリ金属イオンの溶媒抽出実験を行った結果、配位子単体では水相からCHCl3相への金属イオンの抽出は殆ど見られなかったが、Pd(II)錯体の形成により抽出率の大幅な増加が見られた。この様に、2,6-二置換ピリジン配位子2分子をPd(II)イオンへtrans-配位させると、配位子単体のときにはなかった新しいゲスト認識部位を設定することができることを示し、新しい超分子システム開発の可能性を示した。デオキシコール酸アミドおよびデオキシコール酸アルコールの結晶格子にサリチリデンアニリンが包接された結晶を単離した。純結晶と包接結晶の電子スペクトルが異なることから、包接結晶中でのシッフ塩基の分子構造が純結晶中での構造と異なることが分かった。ステロイド誘導体包接結晶中では、シッフ塩基類は似た分子構造をしていることが分かった。包接結晶フォトクロミズム現象を示すことを確かめ、光着色化学種の熱退色反応速度を測定した。デオキシコール酸アミドによる包接結晶状態では、純結晶およびデオキシコール酸による包接結晶の場合より熱退色が遅いことが分かった。以上より、結晶状態におけるシッフ塩基類の変色発現には、結晶パッキング状態と分子構造が関係することが示唆され、新しいホスト系の開発は新物性発現に大きな意味があることが分かった。2,6-位に置換基を持ったピリジン配位子を2分子Pd(II)イオンヘtrans-配位させると、置換基同士が向かい合う配置をとり、配位子単体のときにはなかった新しいゲスト認識部位を設定することが期待される。今回、置換基としてマロン酸ビス(アルコキシエチル)部分を導入し、新しいホスト分子開発への基礎データを集めることができた。合成したピリジン配位子にPdCl_2(PdCN)_2を反応させてPd(II)錯体を得た。配位子単体およびそれらのPd(II)錯体によるLi^+、Na^+、K^+、Rb^+、Cs^+各イオンの溶媒抽出実験を行った結果、配位子単体ではアルカリ金属イオンの水相からCHCl_3相への抽出は殆ど見られなかったが、Pd(II)錯体の形成により抽出率の大幅な増加が見られた。

本研究によって、Pd(II)への配位を利用してアルカリ金属イオンの認識能を調整制御できることが明らかになり、新しいホスト系開発への基礎データを集めることができた。純結晶状態でサーモクロミズムを示しフォトクロミズムは示さないN-(5-ハロサリチリデン)アニリン類のデオキシコール酸(DCA)包接結晶を合成して、その熱物性を調べた。さらに、熱物性の詳細を調べる過程で、シッフ塩基とDCAとを固相状態で混合し加熱すると包接化合物が形成されるという興味深い現象を発見した。N-(5-クロロサリチリデン)アニリンとN-(5-ブロモサリチリデン)アニリンを橙色の針状結晶として合成単離した。さらに、そのDCA包接結晶をいずれも淡黄色針状晶として合成単離した。これらは全て^1HNMR、元素分析により同定し、包接化合物のホスト・ゲスト比はホスト:ゲスト=4:1と決定された。また、このホスト・ゲスト比を用いて、DCAとシッフ塩基との固相混合物を調製した。各試料の熱物性は、固体反射スペクトルを用いて調べた。その結果、シッフ塩基純結晶とそのDCA包接結晶では、室温での反射スペクトルは全く異なり、両結晶中でのシッフ塩基は違った電子状態をとっていることが分かった。両結晶を加熱していくと、シッフ塩基純結晶では加熱に伴う色調変化が肉眼で確認でき、大きな反射濃度変化が観測された。これに対し、包接結晶では加熱をしても色調変化が見られず、スペクトルにおいてもわずかな反射濃度変化しか現れなかった。更に、加熱による反射濃度の変化領域が、前者では540nm付近、後者では480nm付近と異なっていた。以上の結果は、DCAが形成する包接空間に取り込まれたシッフ塩基の構造が、純結晶状態での構造と異なることにより生じたものと考えられ、シッフ塩基の熱異性化には分子の存在状態が密接に関係することが示された。また、シッフ塩基とDCAとの固相混合物を加熱したところ、70°Cから80°Cの間で包接化合物が形成されることを明らかにした。N-サリチリデンアニリン類のフォトクロミズム現象は結晶状態で発現し、その特性は結晶構造に大きく依存する。結晶多形を示すN-サリチリデンアニリン類では、共通した構造式を持つ分子から形成されているにも関わらず、それぞれの結晶が示すフォトクロミズム特性は大きく異なることがわかっており、このことは単分子系では実現できない結晶物性の発現を意味する。そのような結晶多形の形成は偶然によるところが大きいが、2つのサリチリデンアニリン部位がメチレン鎖でつながれた化合物においては、2つのN-サリチリデンアニリン骨格の結晶中での相対的な位置関係の違いを反映した結晶多形が得られることが期待される。また、当研究室ではサリチリデン部の3,5-位へのかさ高い置換基の導入がフォトクロミズムの発現に有効な方法であることを見いだしている。以上を総合し、フォトクロミック生結晶多形を得る目的で、先ず、サリチリデン部位にtert-butyl基を導入した4,4^1-メチレンビス(N-サリチリデンアニリン)誘導体を数種合成し、その光物性を調べた結果、いずれもフォトクロミズム現象を示すことがわかった。このような大きなシッフ塩基が、結晶中でフォトクロミズムを示すことは興味深い。
腎移植レシピエントの性の健康を支援するアプローチの検討

腎移植で期待される効果の一つに性機能の改善がある。腎移植を受けた女性は月経の再開により妊孕率は回復するが、生児獲得率は一般女性より低い。一方、腎移植を受けた男性は、黄体ホルモン・卵胞刺激ホルモン・プロラクチンの改善、勃起機能、精子濃度と運動性が改善するが、自覚的性機能の改善は乏しい。男女ともに生殖機能や性生活における心理的負担は大きく、性機能を取り巻く心理的側面の改善には至っておらず、レシピエントは性の健康に問題を抱えている。本研究では腎移植レシピエントにおける性の健康、QOLの維持・向上につなげるため、腎移植レシピエントの性機能およびQOL、性機能を取り巻く要因との関連を明らかにし、腎移植レシピエントの性の健康を支援するアプローチモデルを開発する。調査を実施するための準備が整ったため。研究デザインは横断研究とし、対象者は腎移植を受けた患者(男性100名、女性100名)とする。なお、本研究では妊娠・出産だけに着目せず、腎移植レシピエントの生涯的な性の健康に焦点を当てるため、生殖可能年齢に限らず、全世代を対象として調査する。腎移植施設に研究協力を依頼、調査票を送付して回答は郵送法で回収する。血清クレアチニン、免疫抑制剤血中濃度といった血液検査データは、患者カルテもしくは医師、看護師、コーディネーターからデータを収集する。データの分析は、腎移植レシピエントへの調査で得られた回答を統計分析ソフトに入力し、対象者の属性等は記述統計量を算出する。各スコアの高低群比較にはMannWhitneyU検定を用い、スコア間の関連は相関、重回帰分析を行い、性の健康に関するサポートニーズは内容分析を行う。これらの結果をもとに腎移植を受ける患者の性機能およびQOL因果関係の初期モデルを男女別で構築する。モデルは構成要素間の関係、寄与率を明らかにするために共分散構造分析を行い、モデルのデータへの適合度を検証し、モデルの有用性を確認する。以上の分析結果から移植後の経過を勘案した支援時期の検討、性機能に関与する要因およびレシピエントのニーズから支援内容の検討を重ね、さらに医学的見地・看護学的見地を踏まえ、腎移植レシピエントの腎移植レシピエントの性の健康を支援するアプローチモデルを開発する。文献管理ソフトを購入しなかったため。
Candida albicansの菌学的多様性と尿路における病原性に関する研究

1.不完全尿菅閉塞ラットにCandida albican serotype A株を経尿道的に膀胱内に接種することにより高率に腎孟腎炎が発症することはすでに報告した。さらに、serotype B株を用いて検索し、ほぼ同じ高い発症率で、かつ組織内へ侵入している菌体のほとんどが菌糸形であることを確認した。次に、菌糸形をとらないCandida glabrata株やC.albicans変異株を用いた検索で、腎孟腎炎発症率はいずれも低率であった。2.ラット膀胱粘膜へのC.alhicans株の付着、侵入過程を光顕および電顕にて観察した。無処置膀胱では、注入した酵母形菌体のごく一部が上皮細胞へ付着するものの、菌糸形への変換は認められず、膀胱粘膜にもほとんど変化は認められなかった。一方、0.1N塩酸にて前処置した膀胱においては、菌糸形への形態変換およ上皮への付着、さらに菌糸形菌体の上皮内への侵入が観察された。以上の成績は、C.albicansの尿路における病原性に菌糸形菌体が重要な役割を果していることを強く示唆しているものと考えられた。3.下部尿路通過障害をきたす代表的な疾患である神経因性膀胱を、両側骨盤神経を切断して作成したラットに前述のC.albicans serotype A株を同様の方法にて逆行性に接種した。腎孟腎炎は発症するものの、不完全尿菅閉塞ラットに比し発症率は有意に低く、腎孟腎炎の程度も軽度であった。この相違は、尿流障害による腎孟内圧上昇の差に由来するものと考えられた。4.Candida尿症患者について、血清中mannan濃度をbiotinーstreptavidin enzyme immunoassayにて、また血清中Candida蛋白抗原をlatex agglutination test(CANDーTEC^<TM>)を用いて測定した。血清中mannanは尿路Candida尿症患者で高値を示すもののDーarabinitolに比し感度は低く、また蛋白抗原の尿路Candida症における診断的有用性は低いものと考えられた。1.ラットに片側不完全尿管閉塞による水腎症を作成し、<Candida albicans>___ーATCC10259株(serotypeA)を経尿道的に膀晄内に接種することにより高率に<Candida>___ー腎盂腎炎が発症することを立証した。本モデルを用いての検索で、血清中Dーarabinitolおよびmannan抗原濃度が<Candida>___ー腎盂腎炎の診断に有用であるとの結果を得た。2.各種臨床材料から分離された<C.albicans>___ー株についての検索より、serotypeAが90%以上を占めた。また、これら分離株に対する4抗真菌剤の薬剤感受性を30%inhibitory concentration(IC_<30>)法を用いて測定し、serotypeBの菌株はAに比し5ーfluorocytosine(5ーFC)に耐性化傾向が強いとの成績を得た。3.尿中分離<C.albicans>___ー株のmitochondria DNA断片の電気泳動像の解析より、少なくとも5種類以上のpatternにtype分けできることを確認した。4.<Candida>___ー尿症を有する20症例の検索で、血清中<Candida>___ー抗体価およびantibodyーcoated bacteria法は診断的有用性は低いとの結果を得た。

なお、対象症例の75%が尿路留置カテ-テルで管理されており、カテ-テル留置と<Candida>___ー尿症との密接な関連性が示唆された。5.尿路留置カテ-テル表面の走査電顕による観察で、留置期間が長期になるほど<Candida>___ーspp.が細菌と同様にカテ-テル表面に付着し、biofilmを形成し、そこでさらに増殖しているのが観察された。6.<Candida>___ー尿症を有する40症例についての検索で、血液や尿路以外の部位からも<Candida>___ーspp.が分離された9例(1群)および最高体温38°C以上の<Candida>___ー腎盂腎炎が疑われた13例(2群)では、その他の18例(3群)および対照の22例(4群)に比しDーarabinitol/creatinine比は有意に高く、また1、2群の12例に5ーFCが投与されたが、1例を除き臨床所見の改善とともにその比は有意に低下し、<Candida>___ー腎盂腎炎におけるDーarabinitol測定の診断および治療効果判定における有用性が示唆された。1.不完全尿管閉塞ラットにCandida albicans serotype A株を経尿道的に膀胱内に接種することにより高率に腎盂腎炎が発症することはすでに報告した。さらに、serotype B株を用いて検索し、ほぼ同じ高い発症率で、かつ組織内へ侵入している菌体のほとんどが菌糸形であることを確認した。次に、菌糸形をとらないCandia glabrata株やC.albicans変異株を用いた検索で、腎盂腎炎発症率はいずれも低率であった。2.ラット膀胱粘膜へのC.albicans株の付着、侵入過程を光顕および電顕にて観察した。無処置膀胱では、注入した酵母形菌体のごく一部が上皮細胞へ付着するものの、菌糸形への交換は認められず、膀胱粘膜にもほとんど変化は認められなかった。一方、0.1N塩酸にて前処置した膀胱においては、菌糸形への形態変換およ上皮への付着、さらに菌糸形菌体の上皮内への侵入が観察された。以上の成績は、C.albicansの尿路における病原性に菌糸形菌体が重要な役割を果していることを強く示唆しているものと考えられた。3.下部尿路通過障害をきたす代表的な疾患である神経因性膀胱を、両側骨盤神経を切断して作成したラットに前述のC.albicans serotype A株を同様の方法にて逆行性に接種した。腎盂腎炎は発症するものの、不完全尿管閉塞ラットに比し発症率は有意に低く、腎盂腎炎の程度も軽度であった。この相違は、尿流障害による腎盂内圧上昇の差に由来するものと考えられた。4.Candida尿症患者について、血清中mannan濃度をbiotinーstreptavidin enzyme immunoassayにて、また血清中Candida蛋白抗原をlatex agglutination test(CANDーTEC^<TM>)を用いて測定した。血清中mannanは尿路Candida尿症患者で高値を示すもののDーarabinitolに比し感度は低く、また蛋白抗原の尿路Candida症における診断的有用性は低いものと考えられた。
水素の高効率製造に向けた金属カルコゲナイト触媒による水電解の機構研究

水電解による水素製造は、再エネ電力の時間平準化や化学産業の脱炭素化に向けた本命技術だが、低コスト化と大規模化が欠かせない。本研究では、優れた活性が報告され始めている金属カルコゲナイト触媒に着目、独自のコンビナトリアル触媒探索技術を用いて系統的に調査し、触媒作用の基礎的理解から合理的な触媒設計へと繋げる。また開発した触媒を、高い内部表面積を有すカーボンナノチューブ膜に担持しした電極を開発、電極間を短距離に配置し、電解水溶液とガスの効果的流通が可能な電解セルを設計・試作する。