hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ウィリアム・フォークナーと「老い」の表象

研究代表者・研究分担者を中心とする「ウィリアム・フォークナーと老いの表象」研究会を研究期間中に14回開催し、当該テーマについて様々な角度から検討した。そしてその議論をもとに共同論集『ウィリアム・フォークナーと老いの表象』(松籟社)を2016年2月に出版し、相田洋明は『土にまみれた旗』におけるフォークナーの曽祖父像、梅垣昌子は『行け、モーセ』を中心にした狩猟物語における「老い」のあり方、金澤哲は「あの夕陽」『アブサロム、アブサロム!』から『寓話』に至るフォークナーの全キャリアにおける「老い」のテーマの意義と重要性、松原陽子は『墓地への侵入者』における老人表象を論じた。本研究は、従来ほとんど研究されてこなかった、フォークナー作品における「老い」の表象を探求しようとするものである。本年度の中心的な活動として、研究代表者・研究分担者にさらに5人のフォークナー研究者を加えた「フォークナーと老いの表象」研究会を4回開催し、当該テーマについての研究発表と議論を行った。相田は、フォークナーの曽祖父ウィリアム・C・フォークナーの生涯と作品について研究し、曽祖父をモデルとするサートリス大佐の人物像にウィリアム・C・フォークナーの作家としての側面が全く現れないことのなかに、フォークナーによる旧南部/「老いた」世代の声の隠蔽/諫止を見出した。また、フォークナーの妻エステルが書いた作品がフォークナーに与えた影響に関する論文を発表し、より広い視野からフォークナー文学の成立過程について考察した。梅垣は、「デルタの秋」と「あの夕陽」における「老い」の表象について研究を行った。「デルタの秋」と「あの夕陽」に描かれる時代の変化を自然と人間の関係の変化、すなわち、デルタの縮小とブルースの拡大という観点から詳述し、アンクル・アイクとサム・ファーザーズの老人像を分析した。金澤は、フォークナー作品に見る「老人」たちを概観し、セクシュアリティ、家父長制、「若年寄」、レイト・スタイルなどの分析視点を提示した。またクエンティン・コンプソンの「老い」をモダニズムにおける「時間の主題」との関連において分析した。さらに『寓話』を歴史的な展望のもとに考察し、アメリカで講演を行うなど多面的に研究を進めた。松原は、「南部における「成長」と「老い」」をテーマに発表を行い、『墓地への侵入者』におけるルーカス・ビーチャムを南部特有の厳格な社会制度を生き抜いた「サバイバー」としてとらえる視点から分析した。本年度の中心的な活動として、研究代表者・研究分担者にさらに5人のフォークナー研究者を加えた「フォークナーと老いの表象」研究会を3回開催し、当該テーマについて執筆した論文の検討と議論を行った。相田は、ヨクナパトーファ・サーガの最初の長編小説である『土にまみれた旗』における作家としての曽祖父像の不在とその意味について分析した。また、フォークナーの妻エステルの未刊行短編作品に関する研究に着手した。梅垣は、フォークナーの円熟期の大作である『行け、モーセ』について、「インディアン物語」および狩猟物語との関連から考察を進めた。フォークナーの作品群における本作品の位置づけを、早熟の老いという観点から試み、後期作品への橋渡しとなる新たな視点を切り開いた。金澤はフォークナー後期の問題作『寓話』についての考察を進め、アメリカ文学史との関連からまったく新しい光を投げかけた。また、フォークナーと戦争の関係を概観する中で後期フォークナーの政治化に潜む問題を指摘した。松原は、『墓地への侵入者』についての考察を進めるため、夏にオックスフォードで入手した作品に関連する資料の精査と、第二次世界大戦後の南部に関する文献の講読を行った。本研究は従来ほとんど研究されてこなかった、フォークナー作品における「老い」の表象を探求しようとするものである。最終年度にあたる本年度は、研究のまとめとして研究代表者・研究分担者を中心に共著『ウィリアム・フォークナーと老いの表象』を出版した。当該共著書において、相田はフォークナーと曽祖父ウィリアム・C・フォークナーの関係を取り上げ、フォークナーがいかに曽祖父の象徴する旧南部ロマンスと対峙し、その影響圏から脱出したかを検証した。梅垣はサム・ファーザーズとアイク・マッキャスリンにおける「老い」のあり方をアイデンティティの観点から検討し、両者の対照性とアイクの限界を明らかにした。金澤は「あの夕陽」、『アブサロム、アブサロム!』、『寓話』を中心に、フォークナーのキャリア全体を論じながらフォークナー作品における「老い」の表象の意義と可能性を探求した。松原は40歳代後半のフォークナーが抱いていた「老い」の意識を具体的に跡づけ、『墓地への侵入者』における老人表象からフォークナーの「老いの戦略」を読み解いた。さらに、相田はフォークナーの曽祖父ウィリアム・C・フォークナーの作品に関する研究発表を行い、金澤はフォークナーの戦争観の変遷について論文を執筆した。

そしてその議論をもとに共同論集『ウィリアム・フォークナーと老いの表象』(松籟社)を2016年2月に出版し、相田洋明は『土にまみれた旗』におけるフォークナーの曽祖父像、梅垣昌子は『行け、モーセ』を中心にした狩猟物語における「老い」のあり方、金澤哲は「あの夕陽」『アブサロム、アブサロム!』から『寓話』に至るフォークナーの全キャリアにおける「老い」のテーマの意義と重要性、松原陽子は『墓地への侵入者』における老人表象を論じた。「フォークナーと老いの表象」研究会を3回開催し、当該テーマに関してフォークナーの全キャリアにおける作品を対象に、多様な側面からの論文執筆と議論を行うことができた。具体的には、初期作品に関しては、「ウィリアム・C・フォークナーとジョン・サートリスー『土にまみれた旗』における作家としての曽祖父像の不在とその意味」、中期作品に関しては、「『行け、モーセ』と「老い」の表象」、「「老い」の逆説:『野生の棕櫚』に見る老いのメランコリー」、「白痴と牝牛ーフォークナー、ペルソナ、「老い」」、後期作品に関しては「第二次世界大戦後のアメリカのカコフォニー『墓地への侵入者』における「古き老いたるもの」の介入」、「狩猟物語の系譜と老いの表象ー『行け、モーセ』を中心に」、「「老い」の肖像ー『館』」、「フォークナーのレイト・スタイルー後期作品におけるメモワール形式と老いのペルソナ」、また全体像に関しては「フォークナーにおける「老い」の表象ーその意義と可能性」をテーマに論文が執筆され活発な討議がなされた。アメリカ文学「フォークナーと老いの表象」研究会を年3回開催し、研究発表・議論を行う。また、科研費の研究成果公開促進費の助成をうけ、これまでの研究会での研究成果を論集の形にまとめ、松籟社より平成27年10月に『ウィリアム・フォークナーと老いの表象』のタイトルで出版する。さらに、老いの表象の研究において伝記的研究は不可欠であることから、Joel WilliamsonのWilliam Faulkner and Southern History (1993)の翻訳に取り組む。翻訳は水声社より平成28年の出版を予定している。相田は、ウィリアム・C・フォークナーの作品の詳細な分析と評価に取り組む。また、フォークナーの妻エステルが書いた未刊行の短編作品について研究し、これら作品がフォークナーに与えた影響について考察する。梅垣は、フォークナーの晩年に出版された狩猟物語を、ポストモダニズムおよび作家のレイト・スタイルとの関連で捉え直し、これまで重要視されてこなかったアンソロジーの研究に着手する。金澤は後期フォークナーの政治化の前提となったランダムハウス社との関係について、時代をさかのぼりモダニズムと出版文化の関係というコンテクストから考察を始める。松原は、引き続き冷戦期の南部というコンテクストから後期作品を考察するとともに、フォークナーと各時代における戦争との関わりというより広い観点から、第一次世界大戦を扱った初期作品も考察の対象とする。「フォークナーと老いの表象」研究会を4回開催し、当該テーマに関してフォークナーの全キャリアにおける作品を対象に、多様な側面からの研究発表と議論を行うことができた。具体的には、初期作品に関しては、「William C. Falkner (1825-1889)の生涯と作品」、「クエンティン・コンプソンと「老い」のモダニズム」、中期作品に関しては、「「デルタの秋」と「あの夕陽」における「老い」の表象」、「フォークナーにおける「老い」の逆説:『野生の棕櫚』に見る老いの概念とジェンダー表象」、「ローザ×ローザ」、後期作品に関しては「南部における「成長」と「老い」
人工多能性幹細胞由来神経細胞を用いたウイルスベクターによる脊髄性筋萎縮症の治療

脊髄性筋萎縮症(SMA)は脊髄前角細胞の変性による筋萎縮と進行性筋力低下を特徴とする常染色体劣性遺伝性疾患である。原因遺伝子はSurvival of motor neuron 1(SMN1)であり、現在まで根本治療法はない。一方、ポリオウイルス(PV)はRNAウイルスであり、脊髄前角の運動神経細胞や中枢神経系に感染して重篤な病変を生じさせる。本研究では、ヒトiPS細胞を神経細胞へ分化誘導し、PVゲノム内に外来遺伝子を導入したPVベクターを作製した。このベクターをヒトiPS細胞由来神経細胞やSMA患者由来細胞に外来遺伝子としてGFP及びGFP-SMN融合蛋白質として発現させることに成功した。本研究は、ポリオウイルス(PV)が神経分化誘導過程において感染・複製するメカニズムを解析し、その解析結果を基に、PVゲノム内に外来遺伝子を搭載した外来遺伝子発現PVベクターを作製し、このベクターを用いて脊髄性筋萎縮症(SMA)の新規治療法を確立することを目的としている。本年度は、昨年度に引き続きPVの神経分化過程における感染・複製のメカニズムを解析するために、ヒトiPS細胞を用いて神経分化誘導を行った。ヒトiPS細胞コロニーを分離・回収し、そのコロニーを神経分化用培地13に段階的に換え分化誘導を行った。分化誘導30日において神経細胞マーカーであるβIII-tubulinの免疫組織化学染色により神経分化能を評価した。その結果、ヒトiPS細胞由来βIII-tubulin陽性細胞は80%以上であることが明らかとなった。この分化能は、ヒトiPS細胞由来の神経細胞として用いることが可能であると評価し、次にこれら神経様細胞に対して、昨年度に作製したPVゲノムの構造蛋白質をコードする領域を欠失した領域にGreen Fluorescent Protein(GFP)を搭載したPV欠陥干渉(DI)粒子を感染させたところ、ヒトiPS細胞由来神経様細胞内にベクター由来のGFP陽性細胞を確認した。このヒトiPS細胞由来神経様細胞はPVにおける感染・複製のメカニズムを解析する新たなツールであると考えて研究を進めている。本年度では、昨年度から引き続きヒトiPS細胞の運動神経分化誘導能を検討した結果、運動神経細胞のマーカーであるHb9陽性細胞は約10%と低率であった。その結果、運動神経分化誘導法の改善が必要であると判断した。そこで、神経分化誘導NTERA-2細胞、SMA患者由来線維芽細胞にPVベクターを用いてSMN蛋白質を発現させ、細胞内における発現、発現の挙動、外来蛋白質の機能解析を行った。このベクターで発現したSMN蛋白質は、細胞内で可視化できる工夫としてgreen fluorescent protein(GFP)をタグとし結合したSMN蛋白質として発現を確認した。その結果、レチノイン酸により神経分化誘導したNTERA-2細胞やSMA患者由来細胞では、PVベクター由来の外来GFP-SMN融合蛋白質が導入後4h以降で発現し、その細胞内の挙動は、核内でドット状の発現が見られ、その後、細胞質に広がり、発現量も増加することが明らかになった。また、SMA患者由来線維芽細胞では、導入8h後に、抗GFP抗体による免疫沈降法により調べた結果、発現したGFP-SMN融合蛋白質は、SMN結合蛋白質であるgemin2およびgemin3と共沈することが示された。したがって、発現したGFP-SMN融合蛋白質は細胞内でSMN複合体形成能を有することが示唆された。さらに、免疫組織化学染色法により核内でGFP-SMN蛋白質とgemin2が共染色されたことから、導入されたGFP-SMN蛋白質は、SMA患者由来細胞内で機能を有することが示された。これらの結果を、第61回日本ウイルス学会学術集会にて学会発表を行った。本研究は、神経分化誘導過程におけるポリオウイルス(PV)の感染・複製メカニズムを解析し、その解析結果を基に、PVゲノム内に脊髄性筋萎縮症(SMA)の原因遺伝子であるsurvival of motor neuron 1を搭載した発現PVベクターを作製し、このベクターを用いたSMAの新規治療法を確立することを目的としている。本年度は、昨年度に引き続きPVの神経分化過程におけるPVの感染・複製メカニズムを解析するために、ヒトiPS細胞を用いて神経分化誘導を行った。ヒトiPS細胞を神経分化用培地13に段階的に換え分化誘導を行った。その結果、ヒトiPS細胞由来βIII-tubulin陽性細胞は80%以上であることが明らかとなり研究を遂行するに価する結果を得た。次にこれら神経様細胞に対して、昨年度に作製したPVゲノムの構造蛋白質をコードする領域を欠失した領域にGreen Fluorescent Protein(GFP)を搭載したPV欠陥干渉(DI)粒子を感染させたところ、ヒトiPS細胞由来神経様細胞内にベクター由来のGFP陽性細胞を確認した。

このヒトiPS細胞由来神経様細胞はPVの感染・複製のメカニズムを解析する新たな系を確立した。本年度は、多分化能を有するNTERA-2細胞を用いて、神経分化を誘導する系を確立し、これを基にして、ポリオウイルスの感染・複製に関わる因子を解析できるようになった。この研究から得られた結果を発展させ、現在、多分化能を有するヒトiPS細胞の培養を確立し、神経分化誘導の有無によるポリオウイルスの感染・複製機構の解析について順調に進捗している。同時に、脊髄性筋萎縮症の新たな治療法の開発を目指したポリオウイルスベクターの作製では、ポリオウイルスゲノムの構造蛋白質をコードする領域を欠失した領域にGFPをタグとして持つ脊髄性筋萎縮症の原因遺伝子の一つであるSurvival of motor neuron 1(SMN1) mRNAを導入したPVベクターを作製した。このPVベクターをHeLa細胞に感染させると細胞内でGFP-SMN融合蛋白質を顕微鏡下で可視化でき、継時的にSMN蛋白質の発現と細胞内局在が確認することができるようになった。これらの結果から、外来遺伝子導入可能なポリオウイルスベクターを導入し細胞レベルにおける表現系を評価できるようになった。これまでの研究は順調に進展している。現在、脊髄性筋萎縮症(SMA)の新規治療法を目指したポリオウイルス(PV)ベクターの可能性について研究を進めている。作製されたGFPをタグした領域の下流にSurvival of motor neuron (SMN) 1 mRNAを搭載したPV DI粒子をHeLa細胞、神経芽腫SK-N-SH細胞、Type I SMA患者由来線維芽細胞に感染させ、導入したGFP-SMN蛋白質の発現及びその機能解析を行っている。さらに、外来遺伝子搭載用PVベクターの病原性の軽減を目指してベクターを改変した最適化を行う予定である。2)作製された各領域発現プラスミドをヒト細胞株にトランスフェクションし、導入された蛋白質発現、細胞内局在、細胞毒性を網羅的に調べる。3)各領域を発現させた細胞による細胞毒性等の解析データから、細胞毒性を惹起するゲノム領域の遺伝子欠失または変異を導入し、各種ヒト細胞株を用いて細胞毒性の軽減を評価する。その結果より改変したPVベクター内に外来遺伝子を導入し、標的遺伝子を搭載したPV粒子を作製する。4)作製された外来遺伝子搭載PV粒子の複製能について評価し、さらに、この粒子を用いて脊髄性筋萎縮症患者由来線維芽細胞及びiPS細胞由来神経細胞に導入した外来遺伝子由来の蛋白質発現をウエスタンブロット法により調べる。本研究課題の今後の推進方策は、多分化能を有するヒトiPS細胞の培養方法と運動神経分化誘導方法を確立し、ポリオウイルスの感染・複製に関わる因子の観点からこれまでのポリオウイルスに感染する細胞との相違について詳細に解析を行う予定である。
自閉スペクトラム症における認知的柔軟性欠如の神経メカニズムの解明

自閉スペクトラム症(Autism Spectrum Disorder;以下、ASD)当事者と健康成人を対象として収集した課題fMRIデータの解析を行った。両側の島皮質を含むネットワークにおけるダイナミクスにおいて、ASDは取りうる脳の状態が健康成人に比べて少なく、その状態の頻度が高い程ASDの相互性にかかわる症状が重症であることが示された。この結果についてはOHBM2018にて発表を行った。また、昨年度収集した課題fMRIデータについても解析を行い、健康成人と比較し、ASD当事者は左の上側頭回における賦活が低下していることが明らかになった。加えて、その低下とASDの臨床症状の中でもコミュニケーション障害の重症度と相関があることが示された。この結果についてもOHBM2018にて発表を行った。これらの二つの結果は、それぞれ追加解析を行い論文投稿を目指す。また、昨年度収集したASD患者および健康成人20名から心的距離に関する行動データ・動画データ・心理検査データの解析を行った。動画データからは有意な結果は得られなかった。今後は、word2vecなどのより高度な解析手法を適用することで、実験で取得した心的距離の基準などを特徴ベクトル化を行い、被験者間の類似性、異種性などを定量的に評価することで、ASD当事者と健康成人における心的距離などの異同を定量的に評価する。得られた成果については、適宜発表を行う。本年度は、認知的柔軟性にかかわる課題の策定を行うことを目的としていた。認知的柔軟性を様々な側面から検討するために複数個の行動課題を策定した。今後は、倫理申請が受理され次第、自閉スペクトラム症(ASD)と定型発達に対して行動課題を実施し、様々な側面からの検証を行う。上記に加えて、安静時fMRIの解析を行い、自閉スペクトラム症(ASD)と定型発達者で認知的柔軟性にかかわる領域の異常に関する知見が得られないか検証を行った。いくつかある領域の中でも、島皮質は認知的柔軟性や様々な機能に関与していることが知られている。ASDと定型発達者において、島皮質の機能的分化が異なるのかを安静時fMRIおよびクラスタリング手法を用いて検証を行った。ASDは、左右の島皮質において異なる領域での機能分化が定型発達者と異なることが明らかになった。またメタ解析を用いたデコーディングによって、異常のあった領域からの機能結合のパターンの意味などを検証した。得られた結果を、国際専門誌(Molecular Autism)に投稿し、2016年10月に受理された。また、ASDと定型発達社から得た安静時fMRIのglobal correlationに関する解析を行い、6月に開催される国際会議(OHBM)にてポスター発表をする予定である。行動課題などの策定も終了したため、おおむね順調に進展していると考える。自閉スペクトラム症(ASD)当事者と健康成人の安静時fMRIデータの解析を行なった。頭頂における機能結合の異常がASDにおいて示され、それが注意に関わる症状の重症度との相関を示した。これらのことから注意の問題が、ASDにおける認知的柔軟性を含めた社会相互性の障害に寄与している可能性がある。これらの結果をまとめ、OHBM2017において発表した。今後は、論旨を補強する解析を行い、論文投稿を目指す。また、自閉スペクトラム症(ASD)当事者および健康成人30名ずつから課題賦活型fMRIデータを収集した。体動の影響から2名程度の除外があったが、得られた28名ずつのfMRIデータの解析により、左の上側頭回前部における賦活がASD当事者群において低下していた。この結果については、OHBM2018において発表する予定である。また、心的距離が認知的柔軟さや共感に関わる能力に影響を与えている可能性も考えられたため、ASD患者および健康成人20名から行動データ・動画データ・心理検査データを収集した。単純なsocial networkのサイズなどでは群間差は得られなかった。しかし、他者にアプローチする際の心的距離を定義する基準や相手が自分にアプローチする際の心的距離を定義する基準において質的な違いがみられる傾向にあった。今後、テキストマイニングなどの技術を組み合わせることで、より詳細な違いを明らかにし、適宜発表を行う。行動データ収集、fMRIデータ解析などを含めて概ね順調に進んでいるため。

今後は、word2vecなどのより高度な解析手法を適用することで、実験で取得した心的距離の基準などを特徴ベクトル化を行い、被験者間の類似性、異種性などを定量的に評価することで、ASD当事者と健康成人における心的距離などの異同を定量的に評価する。得られた成果については、適宜発表を行う。策定した行動課題を実施し、ASDと定型発達群において行動レベルでの差異を検証する。検証した結果を受けて、課題を適宜修正し、行動レベルでの差異に関連する神経基盤を明らかにする。得られた行動データの結果などに基づき、fMRI課題の修正等を行う。その後、健康成人およびASD当事者のfMRIデータ収集を行い、その結果をまとめ適宜国際会議等で発表をし、論文投稿を目指す。今年度、予算には国際会議などの学会出張を盛り込んでいたが、今年度は学会出張が無かったため、差額が生じたと考える。また今年度は実験を実施していないため、謝礼が発生していないため、差額が生じたと考える。旅費が予定額を下回ったため。次年度に行動課題およびfMRI課題を実施する予定であるため、それらの謝礼に充てる予定である。また、国際会議にも出席するため、その旅費に充てる予定である。
カゴ状結晶におけるラットリングの核磁気共鳴による研究

本研究では、[Pt_4Ge_<12>]-cageに注目し、各サイトの微視的電子状態を調べ、cage内の内包イオンのラットリングが物性に及ぼす影響を調べている。特に、イオンの価数やサイズの違いとラットリングの関係について比較し、それらに基づいて新規機能性の発見の可能性を考察する。具体的には、ラットリング効果の大きいLaPt_4Ge_<12>と効果の小さい(Sr,Ba)Pt_4Ge_<12>の微視的な電子状態を比較した。本年度は、(La,Pr)Pt_4Ge_<12>および(Sr,Ba)Pt_4Ge_<12>の^<73>Ge-NQR測定を行い、ゼロ磁場下における超伝導状態の本質的振る舞いを調べた。その結果、核スピン-格子緩和率1/T_1の測定において、T_c直下にコヒーレンスピークが観測されなかったLaPt_4Ge_<12>の場合と対照的に、(Sr,Ba)Pt_4Ge_<12>の場合、コヒーレンスピークが観測され、また低温での1/T_1の温度変化からBCS型超伝導体であることを示した。この振る舞いは、磁場によりコヒーレンスピークがつぶれた^<195>Pt-NMRの結果とは対照的である。一方、PrPt_4Ge_<12>の場合は、コヒーレンスピークが観測されたものの、理論モデルに比べてやや小さく、μSR測定から指摘されるような、超伝導ギャップに点状ノードの存在を示唆する結果が得られた。本研究では,[Pt_4Ge_<12>]-cageに注目し,各サイトの微視的電子状態を調べ,cage内の内包イオンのラットリングが物性に及ぼす影響を調べている。特に,イオンの価数やサイズの違いとラットリングの関係について比較し,それらに基づいて新規機能性の発見の可能性を考察する。具体的には,ラットリング効果の大きいLaPt_4Ge_<12>と効果の小さい(Sr,Ba)Pt_4Ge_<12>の微視的電子状態を比較した。本年度は,まず(Sr,Ba)Pt_4Ge_<12>の^<195>Pt-NMR測定を行い,ナイトシフトの異方性の解析から,ラットリング効果の大きいLaPt_4Ge_<12>ではPt-5s電子のフェルミ面への寄与が大きいことを明らかにした。また,(La,Pr)Pt_4Ge_<12>の^<73>Ge-NQR測定を行い,ゼロ磁場下で超伝導状態の本質的振る舞いを調べた。その結果,LaPt_4Ge_<12>では低温での1/T_1の温度変化からBCS型超伝導体であることを示唆したが,T_C直下にコヒーレンスピークが観測されず,ラットリングによる強いフォノンダンピングを示した。一方,PrPt_4Ge_<12>ではコヒーレンスピークが観測されたものの,理論モデルに比べてやや小さく,μSR測定から指摘されるような,超伝導ギャップに点状ノードの存在を示唆する結果が得られた。その詳細の解明や(Sr,Ba)Pt_4Ge_<12>の^<73>Ge-NQR測定については,引き続いて現在も研究中である。
プラズモン共鳴構造物研究のための金属ナノパターンのマニピュレーション技術の確立

本研究の目的は、金属ナノパターンを走査電子顕微鏡(SEM)観察下のマニピュレーションにより移動させて近接させ、プラズモン共鳴構造物を作製する技術を確立することであった。本年度は、まず、マニピュレーションにより、プラズモン共鳴構造物が実際に作製できることを確認した。パターンの代わりに直径100nmの銀微小球を用い、これを半端半径2030nmの石英プローブを用いてSEM観察下で2個配列した。この配列体は、長軸方向偏光に対して赤い錯乱ピークを示した。このピークは個々の球に励起された双極子型散乱モードの反対称結合モードである。ところが、SEM観察の前後で共鳴特性が変化する、という重大な問題が明らかになった。これは電子線照射による残留ガス由来の物質の折出に起因するものであり、このままでは計画していた通りには研究を遂行できない。その一方で、系統的な理論計算の結果、マニピュレーションを必要としない、新しいプラズモン共鳴構造物を発見した。そこで、次年度は、この新しい構造の設計手法を確立し、プラズモン共鳴の様子を調べることに集中した。我々が見出したのは、近接した金属ナノパターンにおけるプラズモン共鳴は、金属クラッド・誘電体コアで構成される導波路を伝搬する2次元光波の開放端での反射と解釈できるということである。つまり、大事なのは有限長の導波路を作ることであって、必ずしもマニピュレーションによりパターンを機械的に操作してnmレベルのスペーサ層を介して近接させる必要はない。合成石英基盤上に金/シリカ(厚さD=1.756nm)/金多層膜を作製し、そのエッジ付近に、幅3μm、長さL(55495nm)の矩形共振器を残して、周囲を集束イオンビームで除去した。計算で予測した通り、共振器長が小さくなるにつれてプラズモン共鳴に対応する反射ディップが短波長側にシフトすることがわかった。本研究の目的は,金属ナノパターンを走査電子顕微鏡(SEM)観察下のマニピュレーションにより移動させて近接させ,プラズモン共鳴構造物を作製する技術を確立することである。金属ナノパターンは電子ビームリソグラフィで作ることを想定している。また,nmレベルの微小なギャップを保っての近接は,金属パターン上にスペーサ分子層を吸着し,パターン同士をマニピュレータで押し付けることにより実現する。平成15年度は,まず最初のステップとして,マニピュレーションにより,プラズモン共鳴構造物が実際に作製できることを確認した。パターンの代わりに直径100nm前後の銀微小球を用い,これを先端半径20?30nmの石英プローブを用いてSEM観察下で2個配列し,ダブプリズム上に銀2連球を作製した。プリズムをSEMから光学定盤に移して全反射照明法により白色光の散乱スペクトルを測定し,以前より理論計算により調べていた通り,長軸方向偏光に対して赤い散乱ピークを示すことを確認した。ところが,SEM観察の前後で共鳴特性が変化する,という重大な問題が明らかになった。これは電子線照射によるコンタミネ?ションの析出に起因するものであり,このままでは計画していた通りには研究を遂行できない。そこで,(1)コンタミネーションを低減あるいは除去する方法を確立する,(2)そもそもマニピュレーションを極力使わないプラズモン共鳴構造物の設計手法を確立する,という2つの方向を検討した。前者については,本格的に取り組むには装置の抜本的な改造が必要である。

しかし,一度生成されたコンタミネーションを酸素プラズマなどで除去することは可能と思われる。後者については,系統的な理論計算の結果,これまで研究されていなかった新しい構造が有望であることを発見した。本研究の目的は、金属ナノパターンを走査電子顕微鏡(SEM)観察下のマニピュレーションにより移動させて近接させ、プラズモン共鳴構造物を作製する技術を確立することであった。しかし、初年度の研究により、電子線照射によるコンタミネーションの析出のため、SEM観察の前後でプラズモン共鳴特性が変化する、という重大な問題が明らかになった。その一方で、系統的な理論計算の結果、マニピュレーションを必要としない、新しいプラズモン共鳴構造物を発見していた。そこで、本年度は、この新しい構造の設計手法を確立し、厳密な理論計算と実験により、実際のプラズモン共鳴の様子を調べることに集中した。我々が見い出したのは、近接した金属ナノパターンにおけるプラズモン共鳴は、金属クラッド・誘電体コアで構成される導波路を伝搬する2次元光波の開放端での反射と解釈できるということである。つまり、大事なのは有限長の導波路を作ることであって、必ずしもマニピュレーションによりパターンを機械的に操作してnmレベルのスペーサ層を介して近接させる必要はない。我々はnmレベルのコアを実現するために、多層膜として金属クラッド導波路を作り、これを上方から2次元的に切り出す方法を採用した。合成石英基板上にDC/RFマグネトロンスパッタリングにより金/シリカ(厚さD)/金多層膜を作製し、そのエッジ付近に、幅3μm、長さLの矩形共振器を残して、周囲を集束イオンビームで除去した。これまでにD=1.756nm、L=55495nmの共振器を作製した。ほぼコリメートした白色光を端面から垂直に入射したときの反射スペクトルを顕微測定したところ、共振器長Lが小さくなるにつれてディップが短波長側にシフトすることがわかった。また、理論計算により,このディップがプラズモン共鳴に対応していることがわかった。
地中成分によるイオン吸着のモデル化に関する研究

地中にあって環境中のイオン移動に大きな影響を与えている金属酸化物のイオン吸着に対し次のモデルを開発した。1.酸化物表面でのイオン交換:pHの増加とともに、陽イオン吸着は増加、陰イオン吸着は減少し、挙動は質量作用側から外れる。次の仮定によりこの吸着反応の平衡モデルを導出した。(1)表面水酸基の水素イオンと陽イオン、水酸化物イオンと陰イオンの交換による表面錯体形成、(2)吸着イオン間横方向相互作用による吸着抑制。モデル平衡定数から、酸化物格子金属イオンの電気陰性度の増加とともに陽イオン交換(酸解離)は増加、陰イオン交換(塩基解離)は減少する。これから、格子金属イオンの電気陰性度が大きいほど水酸基の電子密度は小さく、水素イオンの放出は容易、逆に水素イオンの取り込み(水酸化物イオンの放出)は困難になるものと結論した。2.リチウムイオンのサイズに適合した格子空孔(鋳型)を持つスピネル型マンガン酸化物へのリチウムイオンの選択的取り込み:取り込み速度は、リチウムイオン濃度の増加に対し定常値に暫近するように増加、溶液pHの増加に対しては指数関数的に増加する。次の二つの素反応を考えて、この速度モデルを導出した。:(1)格子マンガン(IV)による水酸化物イオンの酸化に伴う格子空孔の励起と、ある割合でのその逆反応、(2)励起空孔へのリチウムイオンの取り込み。3.二酸化マンガン粒子内部への共存多価重金属イオンの取り込み:マンガン(II)イオンの電解酸化による二酸化マンガン析出の際、取り込み量は溶液濃度およびイオンの吸着親和性に比例する。これから、成長しつつある酸化物粒子表面への吸着を経てイオンが粒子内部へ取り込まれるモデルを提出した。いずれも、モデル化により現象の再現、予測が可能になるとともに、地中成分として重要な種々の金属酸化物のイオン吸着特性の評価が可能になった。他の地中成分である粘土鉱物、フミン質などへのイオン吸着のモデル化は行えなかったが、本研究で開発したモデルはこれらの成分についても適用可能と考えられ、今後の研究課題とする。本年度の研究では、地中成分として二酸化マンガン(MnO_2)、マグネタイト(Fe_3O_4)、ヘマタイト(Fe_2O_3)、アルミナ(Al_2O_3)をとり、これらの金属酸化物による銅(Cu^<2+>)、マンガン(Mn^<2+>)、コバルト(Co^<2+>)、亜鉛(Zn^<2+>)、ニッケル(Ni^<2+>)などの2価重金属イオンの吸着挙動を調べ、反応のモデル化を行った。本研究で提案する吸着モデルは実測結果によく適合し、決定したモデルパラメーターから、任意のpHおよびイオン濃度条件について計算により吸着量が予測可能になった。さらに、モデルパラメーターの値から金属酸化物のイオン吸着能、金属酸化物に対するイオンの吸着親和性を定量的に評価した。それによれば、MnO_2に対するイオン種の親和性の序列はCu^<2+>>Mn^<2+>>Co^<2+>>Zn^<2+>>Ni^<2+>であり、これらのイオンのヒドロキソ錯体形成能とよい相関がある。金属酸化物のCo^<2+>イオン吸着能の序列はMnO_2>Fe_3O_4>Fe_2O_3>Al_2O_3であり、これは酸化物格子金属イオンの酸としての強さによって説明できる。次年度の研究では、さらに、重要な地中成分であるフミン質、粘土鉱物によるイオン吸着のモデル化を行う。

本年度は、二酸化マンガン析出(マンガン(II)イオンの電解酸化)の際の共存多価重金属イオンの取り込み挙動を調べた。取り込み量は溶液濃度およびイオンの吸着親和性に比例する。これから、生長しつつある酸化物粒子表面への吸着を経て粒子内部へ取り込まれるモデルを提出した。さらに、リチウムイオンのサイズに適合した鋳型と呼ばれる空孔を構造中に持つスピネル型マンガン酸化物へのリチウムイオンの選択的取り込み挙動を調べた。取り込み速度は、リチウムイオン濃度の増加に対し定常値に漸近するように増加、溶液pHの増加に対しては指数関数的に増加する。これを次の二つの素反応を考えてモデル化した:(1)格子マンガン(IV)による水酸化物イオンの酸化に伴う格子空孔の励起と、ある割合でのその逆反応、(2)励起空孔へのリチウムイオンの取り込みの二つの素反応を考えてモデル速度式を導出した。地中の一般的な金属酸化物粒子表面へのイオン吸着については、モデル平衡定数から、酸化物格子金属イオンの電気陰性度の増加とともに陽イオン交換(酸解離)は増加、陰イオン交換(塩基解離)は減少することを見出した。これから、格子金属イオンの電気陰性度が大きいほど水酸基の電子密度が小さくなるため、水素イオンの放出は容易、逆に水素イオンの取り込み(水酸化物イオンの放出)は困難になるものと結論した。他の地中成分である粘土鉱物、フミン質などへのイオン吸着のモデル化は行えなかったが、本研究で開発した金属酸化物のモデルはこれらの成分についても適用可能と考えられ、今後の研究課題とする。
マルチモダリティを用いた緊張病の病態生理に関する縦断的研究

本研究では、緊張病患者(統合失調症または気分障害に限る)の病態生理を解明に向けて、同病態に対する治療前後で血液検査・脳波検査安静ならびに聴覚刺激)・頭部MRI(T1強調画像による脳構造評価、arterial spin labelling(ASL)による脳血流評価)を行い、主観的評価に依らない生物学的に評価可能な、緊張病の診断および治療効果判定に有用な因子を同定することが目的である。末梢血のメタボローム解析による代謝産物の探索・脳波神経生理データの多角的な定量解析・MRIデータの構造/機能解析を行うことによって、緊張病の発生機序を明らかにする。
ベリル単結晶の高圧水熱育成

本研究は地球化学的にも興味深い高圧力下でベリル単結晶の水熱育成を試み,比重,屈折率,光学的特性などにおいて天然に産するものに近い結晶を得ることを目的とした.高圧力下で水熱育成は従来のオートクレーブでは不可能であるので,ピストンシリンダー型高圧力発生装置による固体圧を利用した.また,この方法は大型の単結晶を得ることは困難であるので,気体圧縮による内熱式高圧装置を試作して大型のベリル単結晶育成を試みた.天然のエメラルドはC軸方向に伸びたchnnelを持ち,この中に水, CO_2,アルカリイオンなどを取り込んでいる.とくに,アルカリイオンは従来の水熱法では認められないが,本研究では赤外吸収スペクトルによってその存在が明瞭に確認できた.また,これらchannel中にふくまれるアルカリイオンの量を分析した. 0.1Nおよび0.3N NaOHから成長した結晶中にNa+イオンは0.1Nでは0.2wt%, 0.3Nでは0.7wt%含まれていた.この結果は赤外吸収スペクトルの結果と良く対応しており,天然産のものに非常に近いものであることを示している.さらに, channel中のアルカリイオンの含有はこれらの屈折率にも微妙に反映するとされている.すなわち,アルカリイオンの含有によってフラックス法→水熱法→天然の準に屈折率の値は高くなっている.本研究で得られたベリル単結晶の屈折率の値はω=1.5880, ε=1.5790となり,この値はフラックス法のものより大きいことはもちろんのこと従来の水熱法から得られたものよりさらに高く,天然産のものの中でもかなり大きい順に属し,合成ベリルとしては最高の値であった.これはchannel中にtypelおよびtypellの水と共にアルカリイオンを含むことによるものである.このように,高圧水熱育成ベリルは,その格子定数,赤外吸収スペクトル,および屈折率等を比較すると天然産のものと全く区別することがてきないものであることが明きらかとなった.本研究は地球化学的にも興味深い高圧力下でベリル単結晶の水熱育成を試み,比重,屈折率,光学的特性などにおいて天然に産するものに近い結晶を得ることを目的とした.高圧力下で水熱育成は従来のオートクレーブでは不可能であるので,ピストンシリンダー型高圧力発生装置による固体圧を利用した.また,この方法は大型の単結晶を得ることは困難であるので,気体圧縮による内熱式高圧装置を試作して大型のベリル単結晶育成を試みた.天然のエメラルドはC軸方向に伸びたchnnelを持ち,この中に水, CO_2,アルカリイオンなどを取り込んでいる.とくに,アルカリイオンは従来の水熱法では認められないが,本研究では赤外吸収スペクトルによってその存在が明瞭に確認できた.また,これらchannel中にふくまれるアルカリイオンの量を分析した. 0.1Nおよび0.3N NaOHから成長した結晶中にNa+イオンは0.1Nでは0.2wt%, 0.3Nでは0.7wt%含まれていた.この結果は赤外吸収スペクトルの結果と良く対応しており,天然産のものに非常に近いものであることを示している.さらに, channel中のアルカリイオンの含有はこれらの屈折率にも微妙に反映するとされている.すなわち,アルカリイオンの含有によってフラックス法→水熱法→天然の準に屈折率の値は高くなっている.本研究で得られたベリル単結晶の屈折率の値はω=1.5880, ε=1.5790となり,この値はフラックス法のものより大きいことはもちろんのこと従来の水熱法から得られたものよりさらに高く,天然産のものの中でもかなり大きい順に属し,合成ベリルとしては最高の値であった.これはchannel中にtypelおよびtypellの水と共にアルカリイオンを含むことによるものである.このように,高圧水熱育成ベリルは,その格子定数,赤外吸収スペクトル,および屈折率等を比較すると天然産のものと全く区別することがてきないものであることが明きらかとなった.高温高圧下での研究は装置の材質に制限されるところが多い。とくに、水熱反応では水の存在のもとに試料を高温高圧下で反応させることから、耐熱耐圧、耐触等の条件を満足した材料からなる密閉容器が必要である。現在、一般に普及している水熱反応容器(オートクレーブ)は500°C以上の温度での使用に耐えない。通常の水熱法では溶解が困難で成長しにくい結晶でも、さらに高い温度圧力下では溶媒に対する溶解度が増し、その単結晶の育成が期待できる。このような高温、高圧を実現するためには、二重の高圧容器の内圧-外圧のバランスをとりながら、内側の容器を加熱する内熱法による以外ない。内熱式高圧水熱育成装置を設置し、この加熱部を改良し、温度差をつけ単結晶育成に使用することが可能となった。この方法では、1200°C,3000気圧までの使用に耐えることができる。本研究の高圧水熱法によるベリル単結晶の育成は、特に出発物質の溶解速度に依存することが明らかとなった。即ち、出発原料として、Si【O_2】粉末は溶解度が大きいので、水晶片を使用すること、及び種結晶を用いて成長させなければならない。これは、ベリル結晶の安定性を考慮すると、Si【O_2】の溶解が律足となり結晶が成長するので、長時間にわたってSi【O_2】が安定に供給されることを必要とするからである。これにより、種結晶を成長させることには一応成功したが成長結晶は均質なものとは言い難いので、育成条件、方法等の詳細な検討が必要である。

さらに、このような高温高圧下での単結晶の水熱育成は、従来試みられていないので、ベリル結晶の安定領域に関する相平衡の決定、およびBeO,【Al_2】【O_3】、Si【O_2】等の溶解度を測定し、良質の単結晶育成を試みる。
ロシア極東地域における外国人労働者問題

ハバロフスク在住のジャーナリスト、エヌ・ウラーエフ氏の協力をえて、この問題に関するロシア連邦移民局の1993年5月4日付命令第84号とその追加規定、およびハバロフスク地方における外国人労働者在留状況報告、つまり、現在の公的規定と、どのような企業がどのような外国人労働者をどの程度の人数受け入れているかの、公的総括図を入手した。ついで、ロシア極東における近年の外国人労働者受け入れを、当該地域の知識人が、どのように評価しているかについて、ハバロフスク経済研究所のレオーノフ氏と上述ウラーエフ氏の見解を通じて検索した。いずれも、ロシア極東の労働力資源の不足から外国人労働力導入の必然性を認めつつ、入国する外国人の社会的文化的背景の異質性や、受け入れ方式の非近代性から、問題が発生していることを、重大視している。さらに、問題の歴史的背景について検討するために、ウラジオストクの研究者、エフ・ヴェ・ソロヴィヨフ氏による、ロシア革命以前のロシア極東への中国人出稼ぎについて研究成果を利用し、その当時における中国人労働者の産業別構成を確認した。また同時に、現時点のロシア極東に展開しつつある労働市場の状態を、公刊されているロシア政府関係の雑誌論文を材料にして検討した。労働市場の未発達にゆえんする求人難が、外国人雇用を呼び起こしている面のあることが明らかになった。そのほかに、ロシアの新聞を検索し、さまざまな機会を通じて、ロシア極東出身のロシア人に接触して問題に関し聞き取った。ロシア人が、帝政ロシアとソヴィエトの民族政策の影響を受けて、他民族への寛容性を維持しながらも、とりわけ中国人に警戒を強めていることが、窺われた。
人工重力制御を適用した粉末床溶融積層造形法による金属3D造形

金属材料に対応可能な3Dプリンタの一方式である粉末床溶融積層法(PBF)について,加工精度の向上,造形物の機械強度の向上を目指し,従来研究では注目されていない重力を制御因子とした高重力援用粉末床溶融積層法(HG-PBF)を確立する.遠心機上にPBF装置を設置し,10G程度までの人工重力を加えた環境で造型を行う.これにより内部欠陥の除去,金属組織の成長を促し,より高品質な粉末積層造形法を実現する.金属材料に対応可能な3Dプリンタの一方式である粉末床溶融積層法(PBF)について,加工精度の向上,造形物の機械強度の向上を目指し,従来研究では注目されていない重力を制御因子とした高重力援用粉末床溶融積層法(HG-PBF)を確立する.遠心機上にPBF装置を設置し,10G程度までの人工重力を加えた環境で造型を行う.これにより内部欠陥の除去,金属組織の成長を促し,より高品質な粉末積層造形法を実現する.
古代語名詞の<数>と文法現象との関係についての実証的研究

本研究の研究期間は、平成17年度19年度であり、今年度は最終年度にあたる。今年度は、これまで実施してきた研究を承けて、文献調査・情報収集をおこない、研究成果報告書という形でまとめた。1)情報収集の概要昨年度に引き続いて、年数回程度の研究打ち合わせ会議を開催し、研究テーマに関する情報交換を行った。この情報交換は古代語名詞の記述分析方法に関する議論を中心とする。2)文献調査の概要国立国会図書館、琉球大学図書館で文献調査を行い、古代語関係、琉球方言関係の文献情報を得た。この調査により、古代語と方言との接点を探ることができた。3)用例調査の概要『源氏物語』を資料とする接尾語「ども」の用例調査、古代中世資料を用いた「始め」の用例調査を行った。4)研究成果の公開本研究の一部を「古代語名詞句の意味解釈について」(『日本語文法』7巻2号)で発表した。本論文は学会誌の査読論文である。また、本研究の成果は、研究成果報告書という形で公表している。以上により、本研究は終了することとなる。いくつか課題が残るが、未開拓の研究領域を開拓する上で、今後の研究につながる研究方法・言語事実を発見することができたと思う。よって、萌芽研究の目的は達成し得たものと思われる。今年度は研究期間(平成1719年度)の最初の年度にあたる。今年度の研究の基本方針は、これから進めていく研究全体の見通しを立て、必要な設備等を整えることにある。この方針にしたがって、以下のような研究活動をおこなった。1)文献収集研究テーマに関連する文献、また研究に資すると思われる文献の収集、整理をおこなった。所属研究機関に備わっていないものについては、国立国語研究所図書館、国立国会図書館などに出張し、文献複写をおこなった。2)情報収集本研究テーマは、未開拓領域であるため、今後どのように開拓していけばよいか、さまざまな分野の研究者から情報を集める必要がある。そこで、研究打ち合わせ会議を開催し、現代語研究、方言研究、日本の古典文学研究、他言語の研究という各分野の研究者から有益な情報を得た。3)基礎調査1)2)の研究活動をもとに、名詞の<数>に関する基本調査をおこなった。ただし、見通しを立てるための調査であり、調査範囲は限定的である。資料として、『宇津保物語』『伊勢物語』を用いた。本年度の研究実績の概要は以上である。当初の目標はほぼ達成できたと思われる。本研究の研究期間は、平成17年度19年度であり、今年度は2年目にあたる。前年度に、研究体制が確立しているので、それを承けて今年度は、試行的な小規模の調査と文献収集・情報収集に重点を置いて研究を進めた。今年度の研究実績の概要は以下の通りである。1)情報収集年数回程度の研究打ち合わせ会議を開催し、研究者との情報交換によって、研究テーマに関する研究情報・資料情報を収集した。2)文献調査国立国会図書館等で、研究テーマに関する文献を調査し、必要なものを購入した。3)用例調査『宇津保物語』『枕草子』などを資料として、用例調査をおこなった。それらの用例は、デジタルデータ化し、研究成果報告書に用例集として記載する予定である。4)研究成果の公開平成18年度日本語文法学会シンポジウム「名詞句の文法」のパネリストとなり、研究成果の一部を口頭で発表した。発表内容は、学会誌に投稿中であり査読を経て、刊行される予定である。
結合組織性疾患の成立機序解明と薬理学的制御

ウシII型コラーゲン感作により発症させた慢性関節リウマチ(RA)モデルマウスの足・足趾軟部組織、および遺伝的に発症する強皮症モデル(Tsk)マウスの皮膚における病理所見と組織プロテアーゼ活性を中心とした生化学的変化との相関を検討した。モデルおよび対照動物の足趾、皮膚より抽出したプロテアーゼの合成基質(Suc-Rhe-Phe-pNA)水解活性はアプロチニンでは阻害されず、キモスタチンで阻害されることから、その大部分はキマ-ゼ活性と考えられた。1.RAモデルマウスでは足趾関節の腫張、変形、硬化、萎縮、骨破壊がみられ、周囲組織のコラーゲン線維量増加を示したが、対照群では示さなかった。感作群の足軟部組織でキマ-ゼ活性は有意に上昇したが、非病変部である背部皮膚、肺、小腸では対照群と差がなく、キマ-ゼ増加は炎症部位特異的であった。また、病変部では肥満細胞密度が有意に増加し、その殆どはキマ-ゼ陽性であった。2.Tskマウスの皮膚は皮下組織との可動性が制限され、形態学的には対照(Pallid)マウスに比べ真皮と皮筋層下にみられる線維性結合組織帯の肥厚を示した。生化学的には皮膚ハイドロキシプロリン含有率が増加し、コラーゲン量の増加が示唆された。また、これらの病変部では対照皮膚に比べ真皮肥満細胞密度および皮膚キマ-ゼ活性が増加した。結合組織の増生を主徴とする2種類のモデル動物において、その病変局所での肥満細胞数増加とキマ-ゼ活性上昇が認められた。いずれも病理所見と相関しており、慢性炎症性増殖過程における肥満細胞キマ-ゼの寄与が示唆された。キマ-ゼ遺伝子発現の動態と病理所見との相関について現在検討を進めている。また、開発中のキマ-ゼ阻害薬がin vivoで応用可能な段階に達したので、これを用いてキマ-ゼの病態生理学的役割を検討するとともに、キマ-ゼ発現調節機構の解析も進める予定である。
腫瘍血管内皮細胞における特異的ｍｉＲＮＡの発現解析

癌治療において腫瘍血管を攻撃して癌の増殖・血行性転移を抑制する目的で血管新生阻害療法が開発、実用化されてきた。しかし既存の血管新生阻害剤は腫瘍血管への特異性がなく副作用を生じることが報告されている。今回我々は、マウスおよびヒト腎がん由来の血管内皮細胞の分離・培養に成功した。正常血管内皮細胞(NEC)と腫瘍血管内皮細胞(TEC)をmiRNA Micro Array解析し、NECと比較しTECで発現の高いmiRNAを複数同定した。そのうちの一つmiRNA-Xに着目し、qRT-PCR法でもmiRNA-Xの発現がTECで発現が高いことを確認した。今後機能解析を行い新規血管新生阻害剤の開発を目指す。近年、癌治療において腫瘍血管を攻撃して癌を兵糧攻めにし、癌の血行性転移を抑制する目的で血管新生阻害療法が開発、実用化されてきた。しかし既存の血管新生阻害剤は正常血管内皮細胞を用いた研究から開発され,腫瘍血管への特異性がないことが原因の一つに挙げられる。これまで当教室では腫瘍血管内皮細胞は正常血管内皮細胞と異なることを報告してきており、申請者らは、正常血管内皮と腫瘍血管内皮の分子的な違いを標的とする腫瘍血管特異的な新規血管新生阻害剤の開発が可能ではないかと考えた。腫瘍血管内皮細胞の異常性獲得のメカニズムの一つに腫瘍細胞由来因子による正常血管内皮細胞のDNAメチル化や、ヒストン脱アセチル化などエピジェネティックな異常の関与が示唆される。近年、これらエピジェネティックな異常はmicro RNA(miRNA)とよばれる低分子RNAによって制御されることが明らかになりつつある。さらに申請者らはこれまでの研究で、腫瘍培養上清中に微小胞でつつまれた腫瘍細胞由来のmiRNAが含まれていることを明らかにしてきた。本研究は正常血管内皮細胞と比較し、腫瘍血管内皮細胞に特異的なmiRNAの発現解析を行うとともに、その標的遺伝子の同定および機能解析を行い、腫瘍血管内皮におけるmiRNAを標的とした新規血管新生阻害剤開発と治療応用を展開するための研究基盤の確立が目的である。H25年度は、ヒト腎がん臨床検体から分離培養した正常(非がん部)血管内皮細胞および腫瘍血管内皮細胞をそれぞれ複数Lot用いてmicroRNA microArrayを行い、腫瘍血管内皮細胞で発現の高いmiRNAを数種同定するとともに、その標的遺伝を解析した。今後、それら遺伝子もしくはmicroRNAを標的とした腫瘍血管内皮細胞における機能解析を行っていく予定である。腫瘍血管内皮細胞は正常血管内皮細胞と異なることを当教室では報告してきており、申請者らは、正常血管内皮と腫瘍血管内皮の分子的な違いを標的とする腫瘍血管特異的な新規血管新生阻害剤の開発が可能ではないかと考えた。申請者らは、正常血管内皮が腫瘍微小環境において異常性を獲得することを報告してきた。そのメカニズムの一つに、腫瘍細胞由来因子による正常血管内皮細胞のDNAメチル化や、ヒストン脱アセチル化などエピジェネティックな異常の関与が示唆される。本研究は正常血管内皮細胞と比較し、腫瘍血管内皮細胞に特異的なmiRNAの発現解析を行うとともに、その標的遺伝子の同定および機能解析を行う。H24年度は舌癌をはじめとしたヒト腫瘍細胞のヌードマウス皮下移植腫瘍塊から腫瘍血管皮細胞を、正常マウス皮膚からは正常血管内皮細胞を分離・培養した。PCR法とフローサイトメーターを用いて、分離した血管内皮の特性解析をおこなった。解析の結果、純度の高い血管内皮細胞の分離ができており、今後正常血管内皮細胞と腫瘍血管内皮細胞のmiRNAの発現解析、標的的遺伝子同定、機能解析を円滑に行う上で非常に重要な成果である。これまで癌治療において血管新生阻害療法が開発、実用化されてきた。しかしながら既存の血管新生阻害剤は腫瘍血管に特異性がないため、正常血管をも攻撃し重大な副作用が出てしまうことが報告されている。当教室では腫瘍血管内皮細胞(TEC)は正常血管内皮細胞(NEC)と異なることを報告してきており、申請者らはNECとTECの分子的な違いを標的とする腫瘍血管特異的な新規血管新生阻害剤の開発が可能ではないかと考えた。そのメカニズムの一つに、腫瘍細胞由来因子によるNECのDNAメチル化や、ヒストン脱アセチル化などエピジェネティックな異常の関与が示唆される。