hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
オートファジーの化学生物学研究

-(LC3ΔG)という新たなオートファジー測定プローブを用いて,GFP-LC3-RFPを発現させるための高タイターウイルスを完成させ,プローブを発現する細胞株を樹立した.この細胞株を384ウェルプレートに播種し,翌日,標的既知化合物ライブラリーを細胞に添加し,24時間後に細胞の蛍光像を測定した.その後,画像解析により細胞面積部分を抽出し,GFPとRFP蛍光強度を定量することでオートファジー活性を測定した.その結果を階層的クラスリングによって網羅的に解析することで,がんと神経細胞におけるオートファジーの制御機構の違いを知ることができた.また,これまでにオートファジー誘導・阻害活性の報告のない4化合物を同定した.パーキンソン疾患治療薬シードSO286:SO286の結合タンパク質(SOBP)の様々なドメインの欠失変異タンパク質を大腸菌に発現させて,ビオチン標識したSO286との結合実験を行った.その結果,SO286はSOBP1のN末端から182-219, 390-422,および435-470の3箇所に結合することがわかった.オートファジー細胞死誘導物質の探索:放線菌培養液1160サンプル,化合物ライブラリー320サンプルの中から放線菌2142A-36株をヒットとして取得した.放線菌2142A-36株を大量培養し,得られた培養液をヘキサンによる脱脂後,シリカゲルクロマトグラフィー,Sephadex LH-20 Lab PacksおよびHILICのセミ分取カラムを用いて単離精製を実施した.各種スペクトル解析の結果,ヒット化合物はCholest-5-ene-3b,7a-diolであることがわかった.ケジカルゲノミクスの手法でオートファジー制御活性を定量的に測定した.その結果を階層的クラスタリングによって解析することで,がんと神経細胞におけるオートファジーの制御機構の違いを明らかにした.オートファジーを促進することで,たんぱく質凝集を阻害するSO286はSOBP1と結合し,SOBPをノックダウンすることでSO286の作用が阻害された.このことから,SOBP1がSO286の作用に関与していることが示唆された.オートファジー細胞死誘導物質の探索をおこなった結果,放線菌2142A-36株を大量培養し,単離精製,構造解析した結果, Cholest-5-ene-3b,7a-diolを取得した.mCherry-EGFP-LC3Bを発現させた細胞に対し様々なオートファジー誘導剤とシグナル伝達阻害剤を共処理し,赤色の輝点を画像解析により定量することでオートファジーの誘導レベルを評価していく.その結果を階層的クラスリングによって網羅的に解析することで,がんと神経細胞におけるオートファジーの制御機構の違いを明らかにする.SO286化合物についてはSOBPのSO286との結合部位の同定を行う.そのためにSOBPの様々なドメインの欠失変異タンパク質を大腸菌に発現させて,ビオチン標識したSO286との結合実験を行う.またSOBPはオートファジーとの関係が示唆されていることから,SOBPのノックダウン細胞でのオートファジーの効果,及びそれに対するSO286の影響を検討する.
レプトスピラ症病原体の宿主選好メカニズムに関する研究

レプトスピラ属細菌は250以上の血清型に分類され、様々な哺乳動物に経皮的に感染する。感染後の症状は動物種によって異なり、一部の動物ではレプトスピラが腎臓に持続的に感染し、保菌動物となる。保菌動物は本症拡大の主因であるため、「どの血清型がどの動物に持続感染できるか」という各血清型の選好性(宿主との相性のようなもの)を理解することは、感染拡大の抑止を狙う創薬においても重要課題であるが、そのメカニズムは未だ明らかにされていない。本研究では、レプトスピラの宿主選好性を決める可能性因子として、「動物組織への接着性」と「接着後の運動性」の2つを挙げ、これらの実験的検証を行うこととした。採択後早々に、動物細胞の単層シート作製に着手した。レプトスピラの主要保因動物であるラットの腎臓細胞(NRK)と、ヒトに身近な感染動物であるイヌの腎臓細胞(MDCK)を顕微鏡観察用チャンバー内に単層培養する手法を確立した。ラットとイヌに対して、非感染性、不顕性感染性(維持感染)、病原性のいずれかを示すいくつかのレプトスピラ血清型を選別し、それらに対する蛍光タンパク質遺伝子導入を試みた。いくつかの蛍光タンパク質について発現効率と蛍光強度を比較し、緑色蛍光タンパク質GFPを使用することに決めた。しかし、計測可能な蛍光強度を示す血清型は数種類に限られたため、本研究では、病原性2株と非病原2株を使用することとした。レプトスピラ3株と動物細胞2種を組み合わせて、細胞上でのレプトスピラの接着と運動を1細胞レベルで計測したところ、病原性発揮ペアは、非感染性ペアに比べて、接着性と運動性がともに高いという、動態因子と病原性の間に相関がみられた。初年度には、蛍光タンパク質導入株の作製と、計測システムの構築を予定していた。研究分担者・小泉信夫(国立感染症研究所)が中心となって行った複数のレプトスピラ血清株に対する蛍光タンパク質導入は、蛍光タンパク質の選別や血清型の選別などで多くの問題が生じたが、条件検討の結果、現段階では、宿主選好性の議論に役立つ数種類の血清型についてGFP発現株が得られている。研究代表者(中村)が担当した動態計測については、顕微鏡系、解析プログラムの検討を小泉の進捗に合わせて進め、個々の細胞の動態を精度よく定量化できるシステムの構築に成功した。これらの実験系が比較的早期に確立できたため、次年度に行う予定であった動物細胞上でのレプトスピラの動態解析に本格的に着手した。データ解析にあたっては、特に接着を定量化するための手法について再検討を要したが、遊泳(非接着)細胞および接着細胞の割合から“遊泳ー接着"の反応の平衡定数を算出するなどの生物物理学的解析を導入することで、いくつかの血清型ー動物細胞ペアでのレプトスピラの接着性を定量評価する手法を確立した。接着と運動が重要な病原性因子であることは以前から知られていたが、これまでの知見は、運動欠損株を動物細胞に与えて病原性の有無を判断する動物実験で得られたもので、レプトスピラの感染および病原性発揮において、接着と運動が具体的にどのように関わるかは全く分かっていなかった。初年度に得られた成果は、レプトスピラの病原性における接着と運動の直接的な関与を示す実験的証拠である。初年度に予定していたPDMS(ポリマー)製微小流路内での動物細胞シート構築は、未だ条件検討中で完了していないが、本研究の目的達成に大きく近づく手がかりを初年度で既に得ることができたこと、得られた成果が高いインパクトを持つことなどを理由に、「当初の計画以上に進展している」と自己評価した。初年度の研究で浮き彫りになったのは、GFP導入レプトスピラの作製における問題である。初年度には医学・獣医学的に重要ないくつかの血清型を選別して、gfp遺伝子の導入を試みた。しかしながら、遺伝子の導入がうまくいかない(抗生物質マーカーを用いたスクリーニングでコロニーが得られない)、遺伝子は導入されるがタンパク質が発現しない、タンパク質は発現するが蛍光強度が弱いなど血清型毎に異なる様々な問題が生じ、現段階で得られている動態計測に利用可能なGFP発現株は4種のみである。しかしながら、これら以外にもまだ多くの重要な血清型があるため、今後は蛍光タンパク質発現株の作製をさらに進め、できるだけ多くの血清型について、病原体のキネティック特性(接着の強さや運動性など)と宿主選好性の関係を議論したい。GFP発現株の作製は、初年度に引き続き、研究分担者(小泉)と協力して行う。血清型ー動物種のペアを増やすもう一つの策として、動物細胞の種類を増やす予定である。牛や猿の腎臓細胞の利用を検討中である。初年度に完了しなかった微小流路の作製も行う。PDMSを用いた流路作製法は確立したので、使用する細胞に合わせた流路サイズの検討を行い、微小流路内に形成した細胞シート上でのレプトスピラ動態を解析する。病原因子または接着因子についてのレプトスピラ変異体の作製にも着手したいと考えている。トランスポゾンを用いたランダム変異導入法によるゲノムワイドな変異体作製法は、我々の以前の研究において既に確立されている。この手法によって弱毒株などを得て、それらのキネティック特性を調べる。

保菌動物は本症拡大の主因であるため、「どの血清型がどの動物に持続感染できるか」という各血清型の選好性(宿主との相性のようなもの)を理解することは、感染拡大の抑止を狙う創薬においても重要課題であるが、そのメカニズムは未だ明らかにされていない。本研究では、レプトスピラの宿主選好性を決める可能性因子として、「動物組織への接着性」と「接着後の運動性」の2つを挙げ、これらの実験的検証を行うこととした。採択後早々に、動物細胞の単層シート作製に着手した。レプトスピラの主要保因動物であるラットの腎臓細胞(NRK)と、ヒトに身近な感染動物であるイヌの腎臓細胞(MDCK)を顕微鏡観察用チャンバー内に単層培養する手法を確立した。ラットとイヌに対して、非感染性、不顕性感染性(維持感染)、病原性のいずれかを示すいくつかのレプトスピラ血清型を選別し、それらに対する蛍光タンパク質遺伝子導入を試みた。いくつかの蛍光タンパク質について発現効率と蛍光強度を比較し、緑色蛍光タンパク質GFPを使用することに決めた。しかし、計測可能な蛍光強度を示す血清型は数種類に限られたため、本研究では、病原性2株と非病原2株を使用することとした。レプトスピラ3株と動物細胞2種を組み合わせて、細胞上でのレプトスピラの接着と運動を1細胞レベルで計測したところ、病原性発揮ペアは、非感染性ペアに比べて、接着性と運動性がともに高いという、動態因子と病原性の間に相関がみられた。初年度には、蛍光タンパク質導入株の作製と、計測システムの構築を予定していた。研究分担者・小泉信夫(国立感染症研究所)が中心となって行った複数のレプトスピラ血清株に対する蛍光タンパク質導入は、蛍光タンパク質の選別や血清型の選別などで多くの問題が生じたが、条件検討の結果、現段階では、宿主選好性の議論に役立つ数種類の血清型についてGFP発現株が得られている。研究代表者(中村)が担当した動態計測については、顕微鏡系、解析プログラムの検討を小泉の進捗に合わせて進め、個々の細胞の動態を精度よく定量化できるシステムの構築に成功した。これらの実験系が比較的早期に確立できたため、次年度に行う予定であった動物細胞上でのレプトスピラの動態解析に本格的に着手した。データ解析にあたっては、特に接着を定量化するための手法について再検討を要したが、遊泳(非接着)細胞および接着細胞の割合から“遊泳ー接着"の反応の平衡定数を算出するなどの生物物理学的解析を導入することで、いくつかの血清型ー動物細胞ペアでのレプトスピラの接着性を定量評価する手法を確立した。接着と運動が重要な病原性因子であることは以前から知られていたが、これまでの知見は、運動欠損株を動物細胞に与えて病原性の有無を判断する動物実験で得られたもので、レプトスピラの感染および病原性発揮において、接着と運動が具体的にどのように関わるかは全く分かっていなかった。初年度に得られた成果は、レプトスピラの病原性における接着と運動の直接的な関与を示す実験的証拠である。初年度に予定していたPDMS(ポリマー)製微小流路内での動物細胞シート構築は、未だ条件検討中で完了していないが、本研究の目的達成に大きく近づく手がかりを初年度で既に得ることができたこと、得られた成果が高いインパクトを持つことなどを理由に、「当初の計画以上に進展している」と自己評価した。初年度の研究で浮き彫りになったのは、GFP導入レプトスピラの作製における問題である。
楽書『教訓抄』全注釈のための基盤形成

本研究課題の目的は、楽書『教訓抄』の全体像を明らかにすることにある。2018年度は、『教訓抄』全10巻の校訂本文を作成した。底本に宮内庁書陵部蔵鷹司家蔵本を用い、校合本として大阪府立図書館蔵本を用いた。校訂した本文を検討するため、研究代表者・分担者・協力者が集まり、2回、研究会を開催した(2018年8月29日31日、2019年3月18日、於聖徳大学短期大学部)。また、一部、書き下し文に着手し、注釈の付け方や現代語訳のあり方を模索した。2019年度は、書き下し文に本格的に取り組むが、その都度、校訂本文の見直しをしていく予定である。この作業は最終年度である2022年度まで継続して行う。2018年度より本研究課題に取り組むにあたり、これまでの研究成果を整理し、今後の研究の方向性を検討するべく、『古韻琴声余明王昭君を奏でる』(企画編集:上原作和・正道寺康子、中国語訳:笹生美貴子、武蔵野書院、2018年10月)を刊行した。外来楽が奈良・平安時代に受容されたのかを整理し、『教訓抄』収録曲に関する研究への足がかりとした。続いて「第3回東アジア日本研究者協議会国際学術大会」(主催:大学共同利用機構法人人間文化研究機構国際日本文化研究センター、2018年10月27日、於京都リサーチパーク)にて、パネル発表「東アジア文化圏としての日本古代音楽と文学」(代表者・司会者:正道寺康子、発表者・討論者:森野正弘・上原作和・笹生美貴子・豊永聡美、討論者:庄長華)をした。以上、『教訓抄』の校訂本文の作成、これまでの研究の問題点の整理を実施したことで、今後、『教訓抄』の難解語句の注釈、全巻の書き下し文・現代語訳に取り組みたい。2018年度の研究実施計画通り、(1)『教訓抄』の本文校訂、(2)研究会(2回)の実施、(3)シンポジウムでのパネル発表ができたため。さらに、(4)外来楽に関するDVDおよび解説冊子も刊行できたため。2019年度は、『教訓抄』の注釈作業・書き下し文・現代語訳を継続して行う。注釈や書き下し文・現代語訳を相互に確認し、全体の統一を図る作業を続ける。各自、下記担当箇所の1巻分の書き下し文と注釈作業を終える予定である。現代語訳もある程度完成に近づけたい。2019年8月と2020年3月に研究会を開催して(8月は山口大学、3月は彦根)、研究のすり合わせをする。当初、8月の研究会を聖徳大学短期大学部で実施する予定であったが、研究分担者・森野正弘の負担を考え、2019年度は山口大学で実施することにした。また、2020年3月に、彦根城博物館蔵の井伊家伝来典籍『教訓抄』の調査も行う。個人研究としては、上記研究活動の成果を、各自、学会発表や研究論文で紹介する予定である。日々の研究活動には、電子メールやドロップボックスを活用して、お互いの進捗状況を確認する。役割分担は、当初と担当する巻を変更し、研究代表者・正道寺康子が『教訓抄』巻2・巻6担当、研究全体の統括、日本音楽史における『教訓抄』研究。研究分担者・森野正弘が『教訓抄』巻4・巻8・巻10担当、語釈・現代語訳の統括、『教訓抄』と平安朝物語文学との関連研究。研究協力者・上原作和が『教訓抄』巻3・巻7担当、諸本研究の統括、古代アジア音楽との関連研究。研究協力者・笹生美貴子が『教訓抄』巻1・巻5・巻9担当、楽書研究史の統括を行う。

続いて「第3回東アジア日本研究者協議会国際学術大会」(主催:大学共同利用機構法人人間文化研究機構国際日本文化研究センター、2018年10月27日、於京都リサーチパーク)にて、パネル発表「東アジア文化圏としての日本古代音楽と文学」(代表者・司会者:正道寺康子、発表者・討論者:森野正弘・上原作和・笹生美貴子・豊永聡美、討論者:庄長華)をした。以上、『教訓抄』の校訂本文の作成、これまでの研究の問題点の整理を実施したことで、今後、『教訓抄』の難解語句の注釈、全巻の書き下し文・現代語訳に取り組みたい。2018年度の研究実施計画通り、(1)『教訓抄』の本文校訂、(2)研究会(2回)の実施、(3)シンポジウムでのパネル発表ができたため。さらに、(4)外来楽に関するDVDおよび解説冊子も刊行できたため。2019年度は、『教訓抄』の注釈作業・書き下し文・現代語訳を継続して行う。注釈や書き下し文・現代語訳を相互に確認し、全体の統一を図る作業を続ける。各自、下記担当箇所の1巻分の書き下し文と注釈作業を終える予定である。現代語訳もある程度完成に近づけたい。2019年8月と2020年3月に研究会を開催して(8月は山口大学、3月は彦根)、研究のすり合わせをする。当初、8月の研究会を聖徳大学短期大学部で実施する予定であったが、研究分担者・森野正弘の負担を考え、2019年度は山口大学で実施することにした。また、2020年3月に、彦根城博物館蔵の井伊家伝来典籍『教訓抄』の調査も行う。個人研究としては、上記研究活動の成果を、各自、学会発表や研究論文で紹介する予定である。日々の研究活動には、電子メールやドロップボックスを活用して、お互いの進捗状況を確認する。役割分担は、当初と担当する巻を変更し、研究代表者・正道寺康子が『教訓抄』巻2・巻6担当、研究全体の統括、日本音楽史における『教訓抄』研究。研究分担者・森野正弘が『教訓抄』巻4・巻8・巻10担当、語釈・現代語訳の統括、『教訓抄』と平安朝物語文学との関連研究。研究協力者・上原作和が『教訓抄』巻3・巻7担当、諸本研究の統括、古代アジア音楽との関連研究。研究協力者・笹生美貴子が『教訓抄』巻1・巻5・巻9担当、楽書研究史の統括を行う。未使用の18,557円について、古書の購入(18,000円)を試みたが、諸事情により納品が年度末に間に合わなかった。2019年度に改めて注文・購入するので問題ないと考える。また、557円分は通信費を見込んでいたが使用せずに済んだ。こちらも2019年度に使用する予定である。
乳牛の生体リズムと採食行動の発現に関する研究

本研究の目的は、牛の生体リズムを調べるため外部同調因子をできる限り取り除いた環境での牛の行動と生理反応を調べること、および明暗周期が牛の行動に及ぼす影響を調べることである。また、一般的環境下における行動的周期性と飼料給与時間が行動に及ぼす影響も調べた。実験環境は二つに分かれ、一つは外部刺激の少ない環境調節室で行い、もう一つは普通の牛舎環境で行った。さらに環境調節室の試験は二つの期間(1期:常明期、2期:明暗期)に分けられ、牛舎環境の試験は三つの期間(3期:自由採食期、4期:夕刻採食期、5期:深夜採食期)に分かれる。以上の試験より次のような結果が得られた。1.外界からの時間的手がかりを除いた常明環境下では、牛の行動に明確なリズムがみられなかった。2.明暗周期は牛の行動に大きな影響を与え、明期には起立時間が長く、採食時間が減少したのに対し、暗期には横臥時間が長くなった。3.牛舎環境では、明暗周期に関連する行動変化はさらに顕著になった。明期(昼間)には採食を含む行動が活発になり、暗期(夜間)には横臥して休息する時間が多くなった。4.行動の周期性を調べるために考案した起立横臥行動のスペクトル分析によると、乳牛の行動には約3時間の周期性があることが示された。以上より、牛には基本的には約3時間の生体リズムがあるが、それは必ずしも固定的ではなく、光を中心とする外部同調因子に容易に同調することが示唆された。方法:実験は3つの期間に分けられる。I期では、外界からの時間的手がかりを出来る限り排除した恒温・恒常明の環境下においてホルスタイン種乾乳牛1頭を30日間飼養した。餌はヘイキューブ状に成型した飼料を自動給餌装置により常時たべられる状態で給与した。II期では、I期と同様の場所および牛を用い、12時間周期の明暗をつけ、9日間実施した。III期では、一般的な牛舎環境下に1頭の牛を繋留して、I期と同様な飼養方法を25日間継続した。試験期間中は、牛の様子をビデオカメラで撮影・録画し、行動の分析を行った。また、体温を連続的に測定した。結果:外界からの時間的手がかりを極力取り除いた常明環境下で、は牛の行動に明確なリズムがみられなかった。一方明暗周期は牛の行動に影響を与え、明期には横臥時間が短く、起立時間が長くなり、採食時間が増加した。さらに、多くの外部同調因子が存在する一般の牛舎環境下では、その傾向は強まった。行動周期のスペクトル分析によると、起立と横臥を繰り返す周期として約3時間の周期性が観察された。ただし体温変化のスペクトル分析の結果によるといずれの環境下でも概日リズムがみられた。考察:牛の行動には、基本的に3時間程度の周期性があるようであるが、それはあまり固定的なものではなく、光を中心とする外部同調因子に容易に修飾されるようである。ただし、生理的には明らかに概日リズムが存在するため、一般的な飼養環境下では行動にも24時間の周期性がみられるのが自然であると思われた。実験環境は二つに分かれ、一つは外部刺激の少ない環境調整室で行い、もう一つは普通の牛舎環境で行った。さらに環境調整室の試験は二つの期間(1期:常明期、2期:明暗期)に分けられ、牛舎環境の試験は三つの期間(3期:自由菜食期、4期:夕刻菜食期、5期:深夜菜食期)に分かれる。

1.外界からの時間的手がかりを除いた常明環境下では、牛の行動に明確なリズムがみられなかった。2.明暗周期は牛の行動に大きな影響を与え、明期には起立時間が長く、菜食時間が減少したのに対し、暗期には横臥時間が名が長くなった。3.牛舎環境では、明暗周期に関連する行動変化はさらに顕著になった。明期(昼間)には菜食を含む行動が活発になり、暗期(夜間)には横臥して休息する時間が多くなった。4.行動の周期性を調べるために考案した起立横臥行動のスペクトル分析によると、乳牛の行動には約3時間の周期性があることが示された。以上より、牛には基本的には3時間の生体リズムがあるが、それは必ずしも固定的ではなく、光を中心とする外部同調因子に容易に同調することが示唆された。
摂動論における高次補正の自動計算と高エネルギー実験解析への応用

1.LEP-IIにおける物理を探求する為にGRACEシステムによってgrc4fシステムを開発した。これにより、4体フェルミ粒子生成過程の76のチャネルを計算することができるようになった。LEPの各実験グループとフランスの共同研究者および派遣された日本側メンバーが詳細な協議をおこない,grc4fが各実験グループの解析に使われるようになった.また、結果についてはロシアの共同研究グループとの比較を行った。2.更にgrc4fを発展させ、終状態の粒子が6体の場合、gre4fに更に光子の放出がある場合についても、いくつかの場合には結果が得られた。3.自動計算システムGRACEを超対称性理論でのモデルを含むように拡張した.計算の自己点検のため,ゲージ不変性による点検ができるようにした.また,相互比較ができるよう,モスクワ大学のグループと研究交流を行った.4.1ループでのリ-プ積分ライブラリを整備した。2点関数から4点関数については既存のものを改良して適用範囲を広げた。また、5点関数についても、4点関数に帰着させる方法でライブラリを整備した。5.1ループでの自動計算システムを発展させた.2体-2体反応はほぼ完全にできるようになり,いくつかの過程について詳しく調べた.特に電子陽電子反応でのWボソン対生成過程について解析的な計算とも照合しシステムの機能の検証を行った.次に,より複雑な過程として,前記の過程で片方のWがミューオンとニュートリノに崩壊した3体終状態の1ループ補正を試みた.この過程は500個をこえる1ループ振幅から成り,位相空間の場所によってはループ積分が特異な振舞をするためかなり面倒であるが,おおむね計算できる見通しがついた.6.ポーランドの研究グループと研究交流を行い,GRACEのパッケージを彼らの輻射補正システムに組み込んだ.7.並列計算により断面積計算の高速化を可能とするPVMシステムを研究し,その手法が有効であることを確認した.8.2ループの一般的なスカラー積分の方法を研究し、3点関数の交差型図形の計算が可能となった。9.2ループの自動計算の具体的な例としてμ粒子異常磁気能率の電弱理論における輻射補正を取り上げた。10.γγ反応でのQCDジェットの研究を行い、イベントジェネレータGGPSを開発した。1.LEP-IIにおける物理で重要な4体フェルミ粒子生成過程の詳細な研究を行ったる。本研究グループにより開発されたGRACEシステムを利用して、76すべてのチャネルの断面積を実験的に要求されるカットを課して計算し、更にイベント生成を行うことができるgrc4fシステムを開発した。2.前項の作業の過程で、ロシアや欧州の研究グループと密度の高い研究交流と結果の相互比較を行い、GRACEシステムの紹介と普及を行った。3.GRACEシステムを超対称性粒子を含む過程も扱えるよう拡張した。4.項1のgrc4fシステムでは、標準模型にはないWボソンの結合があった場合を調べることができる機能を付加した。5.輻射補正を取り入れる際に、パートンシャワーの方法が有効であることがわかり、それをGRACEにおける計算と一般的にリンクさせることが可能となった。これは項1のgrc4fにも取り入れた。

6.振幅に含まれる色の自由度を色因子の基底で展開して計算の効率化を図り、それをイベント生成でのハドロン化のときに必要な情報として渡すようにした。7.1ループの計算では、以前に行われた振幅の積を計算する方法より効率が良いと思われる、振幅を展開して計算する手法を開発した。そして試みにγγ散乱でのトップクォーク対生成過程を計算し、その有効性を確認した。8.2ループの自動計算としミューオンの電弱理論での輻射補正をとりあげ、システムの構築を行い、主要な部分についての計算を行った。9.2ループの一般的なスカラー積分の計算方法を研究し、3点関数で非平面型の積分を計算した。γγ反応でのQCDジェットの研究を行いイベントジェネレータを作成した。1.LEP-IIにおける物理を探求する為に開発された4体フェルミ粒子生成過程の76のチャネルを計算することのできるgrc4fシステムを更に整備した.例えば複数のチャネルを同時に扱えるようにした.LEPの各実験グループと派遣されたメンバーが詳細な協議をおこない,grc4fが各実験グループの解析に使われるようになった.2.自動計算システムGRACEを超対称理論でのモデルを含むように拡張した.計算の自己点検のため,ゲージ不変性による点検ができるようにした.また,相互比較できるよう,モスクワ大学のグループと研究交流を行った.3.1ループでの自動計算に関する研究をさらに発展させた.2体-2体反応はほぼ完全にできるようになり,いくつかの過程について詳しく調べた.特に電子陽電子反応でのWボソン対生成過程について解析的な計算とも照合しシステムの機能の検証を行った.次ぎに,より複雑な過程として,前記の過程で片方のWがミューオンとニュートリノに崩壊した3体終状態の1ループ補正を試みた.この過程は500個をこえる1ループ振幅から成り,位相空間の場所によってはループ積分が特異な振舞をするためかなり面倒であるが,おおむね計算できる見通しがついた.4.ポーランドの研究グループと研究交流を行い,GRACEのパッケージを彼らの輻射補正システムに組み込んだ.5.並列計算により断面積計算の高速化を可能とするPVMシステムを研究し,その手法が有効であることを確認した.
Upper bound graphとgraph operationの関連について

また、order idealの立場からposetを調べることにより、同じupper bound graphを持つposet間の変換が得られ、upper bound graphの一意性に関する結果を得た。これらの変換を詳細に検討することにより、同じupper bound graphを持つposetの族のminimum poset及びmaximal posetの特徴付けが得られた。このposetの族を距離の概念から検討し、直径等に関する結果が得られた。同様の研究をposet上のintervalと密接な関係にあるdouble bound graphに対しても行い様々な結果を得た。Upper bound graphとdouble bound graphの中間に位置する概念としてsemi bound graphの概念を導入し、semi bound graphの特徴付けを得た。その際、simplicial性を持たないedge cluque coverの性質および、posetの隣接行列を性質等の新しい視点が得られた。さらにupper bound graph間の変換をclique coverの観点から捉え、upper bound graphに関する構成的な特徴付けが得られた。また、同様の観点からdouble bound graphに対して研究を行い、double bound graphに対するvertexの観点から特徴付け、およびdeletionの立場からの特徴付けを得た。これらの構成的特徴付けによりアルゴリズム的側面への発展が期待でき、計算量の側面からのアプローチを行った。たとえば、Upper Bound Graph G、H (|V(G)|≧2、|V(H)|≧2)に対して、CompositionG[H]がUppar Bound Graphとなるのは、HがComplete Graphとなるときかっこのときに限る。Conjunction G∧HがUpper Bound Graphとなるための必要十分条件はE(G)=0あるいはE(H)=のあるいは、G=K_1,n,1かつH=K_2である。また、Connected Upper GraphGのLine GraphがUpper Bound GraphとなるのはG=K_3あるいはG=K_1+Hのときに限る。ここで、H=mK_1UnK_2(m≧1,n≧20)である。さらに、Upper Bound Graph GのSquareがUpper Bound Graphとなるための必要十分条件がGのEdge Clique CoverのIntersectionGraphがUpper Bound Graphとなることである等がわかった。また、Order Idealの立場からPosetを調べることにより、同じUpper Bound Graphを持つPoset間の変換が得られ、Upper Bound Graphの一意性に関する結果を得た。これらの変換を、詳細に検討することにより、同じUpper Bound Graphを持っPosetの族の、Minimum Poset及びMaximal Posetの特徴付けが得られた。このPosetの族を距離の概念から検討し、直径等に関する結果が得られた。Upper bound graph等はJ.E.Cohenにより生態系を研究するために導入されたcompetition graphより発展されたものである。すなわち、competition graphがupper bound graphに、common enemy graphがlower bound graphに、competition-common enemy graphがdouble bound graphが対応している。ここでは、competition graphとcompetition-common enemy graphの中間に位置するniche graphに対応する概念としてsemi bound graphの概念を導入し、semi bound graphの特徴付けを得た。その際、simplicial性を持たないedge clique coverの性質および、posetの隣接行列の性質等の新しい視点が得られた。さらにupper bound graph間の変換をclique coverの観点から捉え、upper bound graphに関するcontractionの立場からの特徴付けを得た。すなわち、グラフがupper bound graphであるための必要十分条件がnon-simplicialな隣接点の対すべてに対して、contractionを行うことで得られるグラフがnovaであることを得た。また、同様の観点からdouble bound graphに対して研究を行い、double bound graphに対するvertexの観点からの特徴付け、およびdeletionの立場からの構成論的特徴付けを得た。これらの構成的特徴付けによりグラフの判定の基準が得られ、アルゴリズム的側面への発展が期待でき、計算量の側面からのアプローチに寄与できた。
アポトーシスを指標とした放射線感受性とその修飾に関する検討

放射線による細胞死の形式の主体を分裂死としてきたことには明らかな誤りがあったことが,アポトーシスの概念が定着するにつれて明らかとなってきた.すなわち,間期死はアポトーシスの形態変化に一致するものであり,しかも,腫瘍によって間期死の出現程度は異なり,放射線感受性の指標の一つとなりうることが,徐々にわかってきたからである.照射数時間後にアポトーシスの所見の出現頻度の高い腫瘍の放射線感受性が高く,低い腫瘍の放射線感受性が低い傾向があることがわかった.一方,照射によって放射線抵抗性株となった腫瘍細胞には放射線誘発アポトーシスの発生が極端に低下していることがわれわれの研究でわかった^<2)>.また,照射後アポトーシスが高い頻度で発現する時期はインビトロの系では46時間であることがわかっている。したがって,放射線感受性を知る手段としては,1回のみ照射して,46時間後に組織標本を作成してアポトーシスの出現程度をみれば,放射線感受性の高低を予測することが可能となるはずである.しかし,臨床症例では,照射後の組織片を採取することには限界がある.そこで,放射線誘発アポトーシスの先行指標が存在するか否かを探しべく,アポトーシス誘導に関与するとされているがん関連遺伝子あるいはその産物の発現を免疫組織化学的に検索し放射線誘発アポトーシスとの関係を明らかにすべく検討した.これまでの我々のヒト腫瘍の研究経過からは各種の悪性腫瘍でp53の発現が認められているが,野性型p53をもった脳室芽細胞腫の一例では,p53依存性の放射線誘発アポトーシスが多数みとめられ,放射線感受性もきわめて高いという,興味ある知見がえられ今後さらに追求するに足る系であることがわかった.しかし,その他の多くのヒト腫瘍では,変異型のためかp53非依存性で,p53の検出がアポトーシスの先行指標に,ただちにはなりえないこともわかった.放射線による細胞死の形式の主体を分裂死としてきたことには明らかな誤りがあったことが,アポトーシスの概念が定着するにつれて明らかとなってきた.すなわち,間期死はアポトーシスの形態変化に一致するものであり,しかも,腫瘍によって間期死の出現程度は異なり,放射線感受性の指標の一つとなりうることが,徐々にわかってきたからである.照射数時間後にアポトーシスの所見の出現頻度の高い腫瘍の放射線感受性が高く,低い腫瘍の放射線感受性が低い傾向があることがわかった.一方,照射によって放射線抵抗性株となった腫瘍細胞には放射線誘発アポトーシスの発生が極端に低下していることがわれわれの研究でわかった^<2)>.また,照射後アポトーシスが高い頻度で発現する時期はインビトロの系では46時間であることがわかっている。したがって,放射線感受性を知る手段としては,1回のみ照射して,46時間後に組織標本を作成してアポトーシスの出現程度をみれば,放射線感受性の高低を予測することが可能となるはずである.しかし,臨床症例では,照射後の組織片を採取することには限界がある.そこで,放射線誘発アポトーシスの先行指標が存在するか否かを探しべく,アポトーシス誘導に関与するとされているがん関連遺伝子あるいはその産物の発現を免疫組織化学的に検索し放射線誘発アポトーシスとの関係を明らかにすべく検討した.これまでの我々のヒト腫瘍の研究経過からは各種の悪性腫瘍でp53の発現が認められているが,野性型p53をもった脳室芽細胞腫の一例では,p53依存性の放射線誘発アポトーシスが多数みとめられ,放射線感受性もきわめて高いという,興味ある知見がえられ今後さらに追求するに足る系であることがわかった.しかし,その他の多くのヒト腫瘍では,変異型のためかp53非依存性で,p53の検出がアポトーシスの先行指標に,ただちにはなりえないこともわかった.
フラクトグラフィに基づく破損事故解析エキスパ-トシステムに関する研究

構造部材の破損事故解析に際してフラクトグラフィはル-ティンワ-クとして定着している反面,観察部位・倍率(巨視的,微視的)に決定に始まり,破壊原因の判断に至る一連の手順の多くが経験知識に基づくという特徴を有する.この過程は熟練者の知識と経験に基づき,試行錯誤により実現されている現状にあり,専門知識の共有化が可能なエキスパ-トシステムが要求されている.本研究では破損事故解析のうちフラクトグラフィに関連するものを対象とし,従来の事故解析例およびフラクトグラフィの知識を上述の観点から見直し,事故解析に必要とされる推論部,知識表現法を明らかにし,熟練技術者の判断を代行し,結論に至るまでの観察回数を極小化し,そのプロセスを決定する対話型エキスパ-トシステムの試作を目標として,以下の成果を得た.(1)システムの概要:解決すべき問題の入力により,観察項目が提示され,観察結果を順次入力すると,システムはその結果を解析し,不必要な観察を回避し,結論に至るために最小限必要な次の観察項目,優先度を指示する.これを繰り返すことにより結論に到達する.(2)システムの開発:システムはパソコン(Macintosh)上で開発し,SmallTalk言語を用い,以下の手順でプロトタイプの開発を行った.推論エンジンの作成:(1)専門知識管理,(2)推論実行,(3)推論結果提示,の各推論サブシステムを作成した.知識デ-タベ-ス作成:知識部を(1)フラクトグラフィ用語・ル-ルの説明,(2)ル-ル型知識ベ-ス,(3)観察手法説明,(4)参照用フラクトグラフ,に分けて作成した.構造部材の破損事故解析に際してフラクトグラフィはル-ティンワ-クとして定着している反面,観察部位・倍率(巨視的,微視的)に決定に始まり,破壊原因の判断に至る一連の手順の多くが経験知識に基づくという特徴を有する.この過程は熟練者の知識と経験に基づき,試行錯誤により実現されている現状にあり,専門知識の共有化が可能なエキスパ-トシステムが要求されている.本研究では破損事故解析のうちフラクトグラフィに関連するものを対象とし,従来の事故解析例およびフラクトグラフィの知識を上述の観点から見直し,事故解析に必要とされる推論部,知識表現法を明らかにし,熟練技術者の判断を代行し,結論に至るまでの観察回数を極小化し,そのプロセスを決定する対話型エキスパ-トシステムの試作を目標として,以下の成果を得た.(1)システムの概要:解決すべき問題の入力により,観察項目が提示され,観察結果を順次入力すると,システムはその結果を解析し,不必要な観察を回避し,結論に至るために最小限必要な次の観察項目,優先度を指示する.これを繰り返すことにより結論に到達する.(2)システムの開発:システムはパソコン(Macintosh)上で開発し,SmallTalk言語を用い,以下の手順でプロトタイプの開発を行った.推論エンジンの作成:(1)専門知識管理,(2)推論実行,(3)推論結果提示,の各推論サブシステムを作成した.知識デ-タベ-ス作成:知識部を(1)フラクトグラフィ用語・ル-ルの説明,(2)ル-ル型知識ベ-ス,(3)観察手法説明,(4)参照用フラクトグラフ,に分けて作成した.
カビ毒配糖体の存在実態の解明とリスク評価

本年度は、昨年度までに構築したビール中のデオキシニバレノール(DON)およびデオキシニバレノール配糖体(DON3G)の液体クロマトグラフィー-タンデム質量分析法(LC-MS/MS)による同時分析法を利用し、実試料の測定を行った。測定対象には、国内で入手可能な7か国9検体のビールを用いた。その結果、9検体中7検体からDONが検出され、その検出濃度は定量下限値70.3 ng/mLであった。また、DON3Gは、9検体中8検体から検出され、その検出濃度は定量下限値203.9 ng/mLであった。定量値の妥当性を評価するため、トリメチルシリル誘導体化後にガスクロマトグラフィー質量分析計(GC-MS)で測定した定量値と比較を行った。横軸に本法(LC-MS/MS)でのDONの定量値、縦軸にGC-MS法でのDONの定量値をプロットしたところ、その近似直線は、傾きが0.81、相関係数が0.991であり、本法を用いた際のDONの定量は、妥当性が高いと推察された。さらに、DONとDON3Gにおいて検出濃度の相関性があるか検討したが、相関は認められなかった。すなわち、これまでのDONのみを対象とした汚染実態の解明や曝露量評価では、DONの曝露量を過小評価してしまうことが明らかとなった。そこで、実際に本分析法で測定したビールを用いて、曝露量評価を実施することにした。国民健康・栄養調査の結果より、男性の平均ビール摂取量は113.3 g/dayと報告されている。曝露量評価として体重67 kgの成人男性が中ジョッキ一杯を飲んだと仮定すると、DONのみの曝露量では耐容一日摂取量(TDI)を超える検体は無かったものの、DON3Gとの共曝露量では、TDIを超える検体があった。今後の曝露量評価には、配糖体を勘案した分析法が求められることが明らかとなった。平成28年度の研究として、液体クロマトグラフィー質量分析(LC-MS/MS)法によるカビ毒の分析法を構築した。対象物質として、構造式より配糖化することが予想できるシクロピアゾン酸(CPA)およびCPAと産生菌が同じために同時汚染が報告されてきているアフラトキシン類(AFs)を対象として同時分析法を構築した。測定資料としてめんつゆを用いた。クリーンアップとして希釈しためんつゆを固相抽出(SPE)法およびQuEChERS法(Quick(迅速)、Easy(簡単)、Cheap(安価)、Effective(効果的)、Rugged(堅牢性)、Safe(安全)の頭文字を合わせた固相分散型の試料前処理法)に適用し、回収率を比較した。LC測定条件として、分析カラムにはL-column2 ODSを用い、アセトニトリルと0.1 mM酢酸アンモニウム溶液を用いてグラジエント溶出を行った。MS/MSにおける測定において、CPAはネガティブイオンモード、AFsはポジティブイオンモードを採用した。前処理における固相の選択には、Oasis2x4メソッドを利用し、その他の充填剤としてHLBも合わせて検討したところ、回収率およびクリーンアップ効果の高い固相充填剤としてMCXを選択した。Oasis MCXを用いたSPEとQuEChERS法を比較したところ、QuEChERS法では、夾雑成分により測定対象物質のイオン化が著しく促進され、回収率が100%を上回る結果が出たことや、クロマトグラムにおけるベースラインの安定性に問題があることから、SPE法を採用することとした。最適化された分析法を用いて精度管理を行い、構築した分析法の精度が十分であることを確認している。これまでの配糖体分析においての一番の問題は、配糖体の標準物質が存在しないことであったが、配糖化することが明らかとなっているデオキシニバレノール(DON)の配糖体が市販されるようになったため、発注を行った。当該試薬は、受注生産かつ輸入手配のために、年度終わりにようやく入手できた。そのため配糖体分析の構築に遅れが出ている。本年度は2つの研究を実施した。1つ目は固形試料としてチーズを選択し、チーズ中のカビ毒(シクロピアゾン酸)の分析法を構築し実試料分析に適用した。2つ目は、デオキシニバレノール(DON)とその配糖体(DON3G)の同時分析法の構築である。まずは、固相分散抽出-液体クロマトグラフィータンデム質量分析(LC-MS/MS)法を用いたチーズ中のシクロピアゾン酸(CPA)分析法を構築し、実試料中の分析を試みた。前処理として、80% (v/v)エタノール水溶液でチーズをホモジナイズし、酢酸エチルによる液液抽出後、Oasis MCXを用いた固相分散抽出(SPDE)を行った。その後、前処理した試料をLC-MS/MS測定に供した。構築したLC-MS/MS法のLODはチーズ中で0.2 ng/gであり、高感度な分析法が構築できた。本法で添加回収試験を行った結果、低濃度添加試料(10 ng/g)および高濃度添加試料(50 ng/g)の回収率は、それぞれ70.4%および81.2%であった。また、併行精度および室内精度は、低濃度添加試料で10.1%および10.1%、高濃度添加試料で8.3%および15.0%であり、回収率とともに満足いくものであった。

本法を実際の市販チーズ試料に適用したところ、外国産のカマンベールチーズ1検体からCPA 8.9 ng/gが検出された。以上のことから、本法はチーズ試料中のCPA分析法として十分適用可能であった。次に、LC-MS/MSを用いたDONおよびDON3Gの同時分析法を構築した。こちらは現在実施中であるが、ビール中のDONおよびDON3GをHLBカートリッジを用いた固相抽出法で前処理を行いLC-MS/MS分析に供したところ、70%以上の回収率が得られている。測定装置トラブルや試薬の欠品により、当初やや遅れていたが、試薬も入手できたため、配糖体分析に着手しており、すでにデオキシニバレノール(DON)およびDON3G(デオキシニバレノール-3-グルコシド)の同時分析法の構築が完了している。本年度は、昨年度までに構築したビール中のデオキシニバレノール(DON)およびデオキシニバレノール配糖体(DON3G)の液体クロマトグラフィー-タンデム質量分析法(LC-MS/MS)による同時分析法を利用し、実試料の測定を行った。測定対象には、国内で入手可能な7か国9検体のビールを用いた。その結果、9検体中7検体からDONが検出され、その検出濃度は定量下限値70.3 ng/mLであった。また、DON3Gは、9検体中8検体から検出され、その検出濃度は定量下限値203.9 ng/mLであった。定量値の妥当性を評価するため、トリメチルシリル誘導体化後にガスクロマトグラフィー質量分析計(GC-MS)で測定した定量値と比較を行った。横軸に本法(LC-MS/MS)でのDONの定量値、縦軸にGC-MS法でのDONの定量値をプロットしたところ、その近似直線は、傾きが0.81、相関係数が0.991であり、本法を用いた際のDONの定量は、妥当性が高いと推察された。さらに、DONとDON3Gにおいて検出濃度の相関性があるか検討したが、相関は認められなかった。すなわち、これまでのDONのみを対象とした汚染実態の解明や曝露量評価では、DONの曝露量を過小評価してしまうことが明らかとなった。そこで、実際に本分析法で測定したビールを用いて、曝露量評価を実施することにした。国民健康・栄養調査の結果より、男性の平均ビール摂取量は113.3 g/dayと報告されている。曝露量評価として体重67 kgの成人男性が中ジョッキ一杯を飲んだと仮定すると、DONのみの曝露量では耐容一日摂取量(TDI)を超える検体は無かったものの、DON3Gとの共曝露量では、TDIを超える検体があった。今後の曝露量評価には、配糖体を勘案した分析法が求められることが明らかとなった。デオキシニバレノール-3-グルコシド(DON3G)が入手できたため、DONおよびDON3Gの同時分析法を早急に構築する予定である。それを用いて当初の計画通り、他の配糖体の存在について網羅的に検出するための分析法を検討する予定である。実際には食品試料にDONおよびDON3Gを添加し、加水分解の有無によってDON定量値に差が出るか否かを加水分解の条件を含めて検討する予定である。現在、分析法の精度管理を実施しているところであり、それが終わり次第、実試料分析に着手する。また、加水分解によって配糖体が外れて、もとのカビ毒に戻るのかを検証する予定である。またデオキシニバレノール(DON)以外のカビ毒でも配糖する可能性があるカビ毒の分析法を構築し、配糖化したカビ毒が生成されるか確認する。注文を予定していた消耗品が、メーカー欠品の為に年度内に納品できないことが分かったため、次年度に先送りした。
バウハウス受容期の日本における抽象化観念の形成に関する研究

本研究では、デザインの基礎観念とも言える「抽象化」が近代日本のデザイン界にどのように定着してきたのか、その形成過程を検討したが、近代期全体を見渡すには研究期間的な制限があったため、まず時代的な範疇としてバウハウス受容期の1920年代から30年代の戦前期を対象に、旧東京高等工芸学校関係者への聞き取り調査を行なう中、デザイン教育の現場における抽象化作業の実際、抽象観の啓蒙の実際に関する講議や議論の様子を求めていった。一方、包括的な視野を獲得するために、明治・大正・昭和戦前期における抽象化観念の啓蒙書・指導書を収集しながら、その書誌学的分析を通し、抽象化観念の形成環境、教授過程、抽象化作業の実際を求めていった。さらには、こうした課題を、同時代におけるドイツの抽象化教育の実態と合わせ検討する必要を得たため、主に20年代、30年代の日独を対象とした比較デザイン論的視点に基づく検討を試みた。その結果、日本近代における最も先駆的なデザイン教育機関であった東京高等工芸学校では、明治以降のデザイン教育の基調を成した「便化」手法を基軸に抽象化教育が進められる中、20年代以降にもたらされたバウハウス理論に基づく「構成」観念が徐々に浸透していったものの、主流を占めるには及んでいないことがわかった。むしろ理論系教育の中心を成した宮下孝雄の主導により、独自の幾何学的構成の手法をはじめ、独特の抽象化教育が行われたことがわかる。これらは、同校におけるバウハウス理論の受容の態度にも反映されていることから、おしなべて当時のデザイン界全体がバウハウス理論に積極的な理解を示そうとはせずに、むしろわが国固有の抽象化観念の形成過程を踏まえた独自の教育手法を開拓していたことを教えるものであろう。これらの問題は、明治・大正・昭和戦前期における抽象化観念の啓蒙書・指導書の実態にも反映されており、「抽象化」を観念による操作の問題としてではなく、模様や図像を描き出していく手法の問題として把握しており、自然の形態を「便化」していく手法の提示が中心となり、一種のパターンブック的性格を持つものが多く見られることがわかった。
心血管系疾患におけるAPV受容体の生理機能に関する研究

近年、心血管系疾患において三量体G蛋白質と共役している7回膜貫通型受容体からのシグナルが、その病態の進行や抑制に重要であることが判ってきた。本研究は、心血管系、特に血管内皮細胞や心臓を中心に発現している機能未知のマウス7回膜貫通型受容体・APV(AT1-related apelin/virus)受容体に関して、(1)APV受容体の細胞内情報伝達経路の解明と、(2)APV受容体の遺伝子操作マウスを用いて、組織・個体レベルにおける血圧制御、動脈硬化症、心筋症や心肥大に対するAPV受容体の生理作用を解明することを目的としている。(1)APV受容体の細胞内情報伝達経路の解明これまでにAPV受容体安定発現細胞株を樹立し、細胞内情報伝達として三量体G蛋白質のうちGiと共役していること、さまざまな生理作用を担うリン酸化酵素であるERK、Aktを活性化することを明らかにしている。さらにERKやAktへ至るシグナル伝達経路の同定と、その生理的意義としてアポトーシスの抑制作用を有することを突き止めた。(2)APV受容体の個体機能解析APV受容体を介するシグナルに関して、遺伝子欠損マウス・遺伝子導入マウスを作製することにより正常、消失、増強という3つの状況を準備し、血圧調節・心血管系イベントへの影響を直接詳価する。(1)APV受容体遺伝子欠損マウスの作製:ホモ遺伝子欠損マウスの作出に成功し、APV受容体が血圧降下作用を有すること、また、この血圧降下作用には一醸化窒素(NO)系の活性化を解することを証明した。現在、受容体欠損マウスに高脂肪食負荷を行い動脈硬化進展への影響などを検討している。(2)APV受容体遺伝子導入マウスの作製:血圧調節や各種疾患の進展において極めて重要である血管内皮細胞、血管平滑筋細胞や心筋細胞に着目し、これら細胞特異的にAPV受容体が過剰発現する遺伝子導入マウスの作製を試みた。現在、血管内皮細胞、および血管平滑筋細胞特異的APV受容体遺伝子発現マウスの作製に成功し、その表現型の解析を行っている。(1) APV受容体の細胞内情報伝達経路の解明これまでにAPV受容体安定発現細胞株を樹立し、細胞内情報伝達として三量体G蛋白質のうちGiと共役していること、さまざまな生理作用を担うリン酸化酵素であるERK、Aktを活性化することを明らかにしている。現在、ERKやAktへ至るシグナル伝達経路の同定と、その生理的意義の解明を試みている。(2) APV受容体の個体機能解析APV受容体を介するシグナルに関して、遺伝子欠損マウス・遺伝子導入マウスを作製することにより正常、消失、増強という3つの状況を準備し、血圧調節・心血管系イベントへの影響を直接評価する。(1)APV受容体遺伝子欠損マウスの作製:詳細な発現解析を可能とするため、APV受容体遺伝子の翻訳領域をLacZ遺伝子に置き換えたマウスの作製を試みた。現在、ホモ遺伝子欠損マウスの作出に成功し、受容体欠損の血圧制御に対する影響や高脂肪食負荷を行い動脈硬化進展への影響などを検討している。

(1)APV受容体遺伝子欠損マウスの作製:ホモ遺伝子欠損マウスの作出に成功し、APV受容体が血圧降下作用を有すること、また、この血圧降下作用には一醸化窒素(NO)系の活性化を解することを証明した。現在、受容体欠損マウスに高脂肪食負荷を行い動脈硬化進展への影響などを検討している。(2)APV受容体遺伝子導入マウスの作製:血圧調節や各種疾患の進展において極めて重要である血管内皮細胞、血管平滑筋細胞や心筋細胞に着目し、これら細胞特異的にAPV受容体が過剰発現する遺伝子導入マウスの作製を試みた。現在、血管内皮細胞、および血管平滑筋細胞特異的APV受容体遺伝子発現マウスの作製に成功し、その表現型の解析を行っている。