hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
上皮基底膜のlamina lucida中のHSPG-特に上皮脱落と上皮再生時における解析

皮膚に凍結・融解処理を施して3日後、表皮は基底膜を真皮上に残して浮き上がり、水泡状を呈した。透過型電子顕微鏡的に基底膜には肥厚部が観察され、半接着斑部のIamina densaと考えられた。再生表皮細胞は基底膜上を移動し、露出した基底膜の細胞側を覆うようになるが、再生細胞は単層で移動するのではなく、数層が互いにデスモゾーム結合をしたまま移動していた。再生表皮細胞の起源は凍結・融解処理部周囲の健丈部、および毛根である。透過型電子顕微鏡用の切片上で抗ヘパランサルフェイト・プロテオグリカン(HSPG)抗体と、コロイダル・ゴールドで標識した二次抗体で反応させると、露出した基底膜の肥厚部、すなわち半接着斑部のlamina densaに強い反応を示した。再生表皮細胞は露出した基底膜と再結合し、半接着斑を形成した。HSPGの免疫反応は再結合後の基底膜の肥厚部においても明らかであり、凍結・融解処理を施す前の半接着斑部を再利用して再び再生細胞が半接着斑を形成している可能性を強く示唆した。再生表皮細胞は、移動中lamina densaに密着することなく、ある程度の距離を保つが、lamina lucidaに電子密度が低い物質が密に存在していることを予想させる。凍結超薄切片法およびネガティブ・ステイニングで表皮基底膜を観察すると、lamina densaは厚く、lamina lucidaは薄く観察された。この事実はlamina lucidaにおける物質の存在を示唆している。皮膚に凍結・融解処理を施して3日後、表皮は基底膜を真皮の上に残して浮き上がり、水泡状を呈した。透過電顕的には,lamina lucida中の物質と構造は、表皮細胞から離れ,lamina densaの上に残っていることが観察された。lamina lucida中の物質は、特に半接着斑直下の部分において多く、電子密度が高く観察された。透過型電子顕微鏡用の切片上で抗HSPG抗体と、コロイダル・ゴールドで標識した二次抗体で反応させると、半接着斑直下のlamina lucidaに特に強い反応を観察した。同時にHSPGは基底膜の真皮側のanchoring fibrilの基部、および、anchoring fibril上にもコロイダル・ゴールドが乗っているのが観察された。半接着斑部以外のlamina lucidaにおいても、網状構造は表皮脱落後も保存されていると思われ、コロイダル・ゴールドが観察できた。lamina lucidaの網状構造の構成にHSPGが関与していることが考えられる。再生表皮細胞は、古いlamina densaに密着することなく、ある程度の距離を保っていた。この事は表皮脱落後に残ったlaminalucidaの網状構造の上を再生表皮細胞が移動していたことを示している。再生表皮細胞は古い基底膜と再び半接着斑を形成するが、その位置がかつて半接着斑が存在していた位置なのか、全く新しい場所なのかについては今後、免疫組織化学的に検索を続けて行くつもりである。透過型電子顕微鏡的に基底膜には肥厚部が観察され、半接着斑部のlamina densaと考えられた。HSPGの免疫反応は再結合後の基底膜の肥厚部においても明らかであり、凍結・融解処理を施す前の半接着斑を再利用して再び再生細胞が半接着斑を形成している可能性を強く示唆した。

凍結超薄切片法およびネガティブ・スカイニングで表皮基底膜を観察すると、lamina densaは厚く、lamina lucidaは薄く観察された。この事実はlamina lucidaにおける物質の存在を示唆している。
日本列島の森林のなりたちにおける隠岐諸島の位置づけ

隠岐諸島は島根半島の北方約50 kmに位置するが、約2万年前の最終氷期には島根半島と陸続きとなっていた。その後、後氷期になると再び切り離され、現在のような島嶼環境になった。日本列島の森林の成立・維持の過程において隠岐諸島が果たしてきた役割を明らかにすることを目的として、カツラ、ミズナラ、クロベ、モミ等の木本植物のDNA解析を行った。もし、隠岐諸島の集団が過去にレフュジアとして機能していた場合には、他地域の集団と比較して遺伝的多様性が高いことが予想される。マイクロサテライトマーカーの遺伝子型と葉緑体DNAの非コード領域の塩基配列を決定し、遺伝的多様性と遺伝構造を調べた。その結果、隠岐諸島の集団は日本の他地域と同程度の遺伝的多様性を有していることが分かった。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。日本列島の森林の成立・維持の過程において隠岐諸島が果たしてきた役割を明らかにすることを目的として、起源の古い被子植物であるカツラを用いて分子系統地理学的な調査を行った。カツラは渓畔林に代表的な樹種であり、隠岐諸島では島後(隠岐の島町)を中心に生育している。島後の林道沿いを中心に、カツラの集団サンプリングを行った。5遺伝子座のマイクロサテライトマーカーの遺伝子型と葉緑体DNAの4つの非コード領域の塩基配列を決定し、遺伝的多様性と遺伝構造を調べた。その結果、隠岐諸島の集団は日本の他地域と同程度の遺伝的多様性を有し、葉緑体DNAの塩基配列は西日本の他の集団と共通していた。ただし、西日本の他の集団とは塩基置換は見られなかったものの1領域で1塩基反復の繰り返し数の違いが2ヶ所で見つかった。もし、隠岐諸島が過去にレフュジアとして機能していた場合には、他地域の集団と比較して遺伝的多様性が高いことが予想された。今年度の調査では、遺伝的多様性が高いなど隠岐諸島が氷期にレフュジアとなっていた痕跡は、カツラにおいて認められなかった。しかし、隠岐諸島と西日本の他の集団で1塩基反復の繰り返し数の違いが見つかり、現在島嶼域で隔離されていることにより固有性が形成された可能性が考えられた。隠岐諸島での調査を開始し、カツラではDNAサンプルの採集を完了した。また別の樹種についても順調に採集を進められ、現在個体数が不足している樹種については、2018年度に追加の調査を行い、採集できる見込みである。採取サンプルについては、順次DNA解析を開始している。また、2018年度に遺伝子流動を明らかにするため、その調査区の選定も行うことができた。したがって、本研究はおおむね順調に進展している。カツラ以外の樹種について、サンプル採取・DNA解析を行い、隠岐諸島の集団の遺伝学的背景について、先行研究の他集団との比較により明らかにする予定である。また、遺伝子流動については、島後に設定した調査区内で成木からのDNAサンプルの採取と、シードトラップを設置し、親子解析用の種子を回収する予定である。
慢性感染ウイルスとヒト免疫のバイオインフォマティクス解析

ヒト感染免疫学では、感染個体で見られた現象が、ウイルスに起因するか、ヒトに起因するか明確にすることが困難なケースが多い。本研究では、HIV -1 Nefの遺伝子多型性、機能的多型性と、感染者の病態について、北米のコホートを用いた包括的な解析を試みた。慢性感染者(46検体)の血漿からnef遺伝子を増幅し、プロウイルスベクターに組み込み、感染性ウイルスを調製した。Nef依存的なウイルス感染性やウイルス複製能の昂進、CD4やMHCクラスIの発現低下、CD74分子の発現昂進などの機能を測定した。同時に、感染者のウイルス量、CD4カウント、HLAクラスIアリルとの相関について解析を行った。その結果、慢性感染者のNefは、遺伝的に変異性が著しく、機能変化が大きかった。中でも、ウイルス感染性、複製能、CD74発現昂進は特に変化が大きく、ウイルス感染性は感染者の病態マーカーと相関していたヒト感染免疫学では、感染個体で見られた現象が、ウイルスに起因するか、免疫系に起因するか、ウイルスやヒトの多様性の問題か、明確にすることが困難なケースが多い。本研究では、HIV-1 Nefの機能と、感染者の病態について、さまざまな観点から解析を行った。まず、アメリカおよびカナダのグループとの共同研究で、慢性感染者のうち抗レトロウイルス療法を受けていない人を約200名リクルートした。血漿からウイルスRNAを抽出して、ウイルス遺伝子の解析を行った。ウイルスがサブタイプBであった検体について、さらにNef遺伝子をPCRで増幅してクローニングした。このうち、ランダムに選んだ約50名の検体について、Nef遺伝子をプロウイルスベクターに組み込み、感染性ウイルスを調製した。これらを用いて、ウイルス感染性、ウイルス複製能、CD4発現抑制、MHCクラスI発現抑制、CD74発現昂進の機能を測定した。その結果、Nef機能には、クローンによって(あるいは感染者によって)大きな開きがあることが分かった。ウイルス感染性、複製能、CD74発現昂進は特にその範囲が広かった。それに対して、CD4発現抑制、HLA-I発現抑制機能は、クローン間で非常に狭い範囲のばらつきしか認めなかった。また、感染者の臨床マーカーとの多変数解析を行ったところ、ウイルス感染性とCD4カウントに相関が認められた。感染者のHLA-Iアリルとの関連性を解析したが、統計学的に有意な関連性は認められなかった。おそらく、HLA-Iアリルの多型性が大きいため、この程度の検体数では、十分に精度の高い結果が得られないためと考えられた。中でも、ウイルス感染性、複製能、CD74発現昂進は特に変化が大きく、ウイルス感染性は感染者の病態マーカーと相関していた本研究では、これまでに構築した多国間の共同研究ネットワークを通じて、さまざまな病態の多数の検体入手することにより、HIV-1の免疫回避機能と宿主のHIV特異的免疫応答をex vivoで解析する。そして、ウイルスとヒト双方のゲノム情報を含めた多変量バイオインフォマティクスを進めることにより、ウイルスによるヒト免疫回避システムと、ヒトの遺伝的・免疫学的背景が、慢性感染の成立や病態発症にもたらす影響を定量的・包括的に明らかにすることを目的としている。研究費の採択通知を受けたのち、速やかに海外の研究機関に連絡を取り、前もって打ち合わせておいた本研究の計画にしたがって、研究計画書の作成(倫理委員会等への申請を含め)と検体収集の準備に取り掛かった。しかしながら、計画書の作成過程で、当初予期していなかったさまざまな修正が必要となったこと、各研究機関の倫理委員会の承認に時間がかかったこともあり、研究の開始(臨床検体の収集を含む)が想定外に遅れた。その後は、海外での検体収集、ウイルスRNAやDNAの調製は順調に進んだ。H24年2月と3月に、こうした検体をすべて受け取った。検体のID、付帯する臨床データおよびサンプルについて、すべて確認を行なった。一部の検体について、試験的に、ウイルス遺伝子の増幅とシークエンスの確認を試みて、相応の結果を得た。今後は速やかに、受け取ったすべての検体の解析を進めていく予定である。研究実績に記載した通り、臨床検体の収集に至るまでの過程で、大きな遅れを生じた。前もってある程度の準備はしていたが、研究費採択後に具体的に動き出したら、想定外の多くの問題が生じた。解析を予定している検体がすべて手元にそろったため、当初の実験計画にしたがって、速やかに実験と解析を進めていく予定である。

研究をきわめて速やかに進めるため、当初の6か月から8か月の間に集中して研究費を投入したいと考えている。このために、実験を補佐する技術補佐員の雇用人して、1,500,000円(250,000円/月として6カ月)を計上する。その他、実験に用いる試薬代、材料費などとともに、研究成果の投稿料を計画したい。また、アメリカ、カナダに出向いて、共同研究者と実験データの最終的な解析方法について打ち合わせを行いたい。
細胞内 DNA センサーの探索とその機能解析

自己の不要となったDNAが分解されずに細胞内に蓄積すると、慢性的な炎症により関節リウマチが発症する。本研究は自己のDNAによる炎症誘導機構の解明を目的とした。未知の細胞内DNAセンサーを同定するためDNAの刺激に強く応答する細胞の選別を行ったところ、DNAに対する応答性が非常に高い細胞を単離することに成功した。また、STINGという分子が自己のDNAによる炎症応答に関与しており、DNAの刺激に応じて二量体化し活性化されることを見出した。DNA分解酵素であるDNase IIの欠損マウスでは、マクロファージ内でのDNAの蓄積により、TNF-αやIFN-β、CXCL10などのサイトカインが過剰に産生され、関節リウマチが引き起こされる。本研究は、DNAを認識する未知のセンサーを同定し、その機能解析を行い、関節リウマチの病態への関与を調べることを目的としている。昨年度はDNAを認識するセンサーを同定するため、発現クローニング法によるスクリーニングを行った。まずスクリーニングの系を構築するため、株化したDNase II欠損mousee embryonic fibroblastにCXCL10のプロモーターの下流でGFPが発現するレポータープラスミドを導入した。しかしながら、この細胞にDNAの刺激を与えてもGFPの発現は全く認められなかった。そこで、系の感度を上げるため、CXCL10の転写因子として知られているIRF3を細胞に強制発現させたところ、DNAに応答してGFPを弱く発現する細胞が認められた。この細胞に元々DNAの応答性が強いfetal liver macrophageより調製したcDNAライブラリー(レトロウイルスベクターに組み込んだもの)を導入し、DNA刺激後にGFPを強く発現する数パーセントの細胞集団をFACSにより分取した。分取後の細胞を増やし、DNAによる刺激、GFP強発現細胞の分取といった工程を数回繰り返すとDNAへの応答性が強い細胞集団がある程度濃縮された。その細胞集団を最終的にシングルセルに分けて調べてみると、DNAの刺激後にCXCL10やIFN-βの遺伝子発現が内在性レベルで顕著に上昇する細胞が見つかった。現在これらの細胞に挿入されたcDNAの同定を試みている。DNAセンサーを同定し、DNAの認識機構を明らかにすることで、関節リウマチの病態解明につながることが期待される。本研究では発現クローニング法を用いて、細胞内のDNAを感知しIFN-βやCXCL10などのサイトカイン産生を誘導する未知の細胞内DNAセンサーの探索を行った。レトロウイルスベクターに組み込んだcDNAのライブラリーを作製しCXCL10遺伝子のプロモーターの下流でGFPが発現するレポーターが入っているMEF細胞に導入後、DNA刺激によってGFPを強く発現する細胞をFACSにより分取したところ、DNAに対する応答性が非常に高い細胞クローンをいくつか単離することに成功した。しかしながら、これらの細胞にDNAセンサーと思われる遺伝子のcDNAは挿入されていなかった。この結果はcDNAライブラリー非依存的に単離された細胞クローンになんらかの遺伝子変化が起きたと考えられた。そこで、これらの応答性の高い細胞からcDNAライブラリーを作製し直して再度発現クローニングを試みたが上手くいかなかった。一方、発現クローニングを行う過程でSTINGという分子がDNAに対する応答に必要であり、DNAの刺激に応じて二量体化し活性化されることを見出した。STINGはDNAセンサーの下流で働く重要な分子であることが既に報告されているが、STINGの活性化因子や活性化機構は不明である。我々はSTINGの二量体化を引き起こす分子がDNAセンサーではないかとの予想のもと、現在生化学的アプローチによりSTING活性化因子の同定を試みている。昨年度の研究計画は発現クローニングによるスクリーニングによってDNAセンサーを同定するところまでを予定していた。現在はスクリーニングによって見つかった細胞からcDNAを回収し遺伝子配列を決定する段階まで進んでいる。従って、おおむね順調に進展していると思われる。24年度が最終年度であるため、記入しない。DNAセンサーの同定に成功した場合、以下の実験を行う。1、DNAセンサーによるDNA認識機構および下流へのシグナル伝達機構の解析2、DNAセンサーの病理的および生理的役割の解明もし、DNAセンサーを同定できなかった場合は、スクリーニングの過程でDNAに対する応答が非常に強い細胞の選別に成功しているので、そこから再度ライブラリーを作り直し、発現クローニングを行うことを予定している。
フォトニックネットワークに向けた超高機能モノリシック光集積回路の開発

1.能動/受動集積に向けた有機金属気相エピタキシャル(MOVPE)選択成長のメカニズム解明:モノリシック光集積回路作製の基本となるMOVPE選択成長につき,InPおよびGaAsの選択成長膜厚プロファイルを実験から求め,これと2次元シミュレーションを比較することにより,付着確率や拡散係数など重要なパラメータを抽出・決定した.これらを用いれば,選択成長のシミュレーションが行えるので,光集積回路マスクの計算機支援設計が可能となる.2.バルクInGaAsP/InPハイメサ導波路構造を用いたマッハツェンダー型光スイッチ回路:InP基板上バルクInGaAsP中のフランツケルディッシュ効果に基づくハイメサ導波路構造のマッハツェンダー干渉計型光スイッチ回路を研究した.メタン・水素サイクリック反応性イオンビームエッチング技術を確立し,ハイメサ導波路の形成を可能にした.次に実際の素子を前記エッチング技術と電子線露光によって試作した.その結果,3Vという低いスイッチング電圧が,波長1.53μm1.56μmにおいて偏光無依存に得られた.位相変調領域長とスイッチング電圧の積は1.5V・mmであり,従来に比べ4倍改善された.3.選択成長と多モード干渉デバイスに基づく集積型全光スイッチ回路の設計と作製:前項のMOVPE選択成長を利用して,InP基板上に半導体光アンプと多モード干渉(MMI)カプラ,入出力導波路を集積化し,全光スイッチ回路を試作した.光・光スイッチング実験において消光比改善を達成した.4.電界吸収型(EA)光変調器における光誘起屈折率変化を利用した波長変換光回路:EA光変調器に生じる光誘起屈折率変化が偏光依存性を有することを利用して,EA変調器と偏光子からなる極めて簡単な構成で全光波長変換が行えることを実験的に示した.5.波長割り当て光交換方式の研究:光集積回路を応用したフォトニックネットワークにおける光スイッチング方式として,「波長割り当て光交換方式」を提案し,その伝送特性解析とIP網への適用性の検討を行った.1.能動/受動集積に向けた有機金属気相エピタキシャル(MOVPE)選択成長のメカニズム解明:モノリシック光集積回路作製の基本となるMOVPE選択成長につき,InPおよびGaAsの選択成長膜厚プロファイルを実験から求め,これと2次元シミュレーションを比較することにより,付着確率や拡散係数など重要なパラメータを抽出・決定した.これらを用いれば,選択成長のシミュレーションが行えるので,光集積回路マスクの計算機支援設計が可能となる.2.バルクInGaAsP/InPハイメサ導波路構造を用いたマッハツェンダー型光スイッチ回路:InP基板上バルクInGaAsP中のフランツケルディッシュ効果に基づくハイメサ導波路構造のマッハツェンダー干渉計型光スイッチ回路を研究した.メタン・水素サイクリック反応性イオンビームエッチング技術を確立し,ハイメサ導波路の形成を可能にした.次に実際の素子を前記エッチング技術と電子線露光によって試作した.その結果,3Vという低いスイッチング電圧が,波長1.53μm1.56μmにおいて偏光無依存に得られた.位相変調領域長とスイッチング電圧の積は1.5V・mmであり,従来に比べ4倍改善された.3.選択成長と多モード干渉デバイスに基づく集積型全光スイッチ回路の設計と作製:前項のMOVPE選択成長を利用して,InP基板上に半導体光アンプと多モード干渉(MMI)カプラ,入出力導波路を集積化し,全光スイッチ回路を試作した.光・光スイッチング実験において消光比改善を達成した.4.電界吸収型(EA)光変調器における光誘起屈折率変化を利用した波長変換光回路:EA光変調器に生じる光誘起屈折率変化が偏光依存性を有することを利用して,EA変調器と偏光子からなる極めて簡単な構成で全光波長変換が行えることを実験的に示した.5.波長割り当て光交換方式の研究:光集積回路を応用したフォトニックネットワークにおける光スイッチング方式として,「波長割り当て光交換方式」を提案し,その伝送特性解析とIP網への適用性の検討を行った.1.有機金属気相拡散選択エピタキシ(MOVE)の成長メカニズムの解明:MOVEによる選択成長を系統的に理解しマスク設計を可能とすることを目的として,横方向気相拡散効果と表面マイグレーション効果の両方を考慮した2次元シミュレーションを行った。この過程を通じてMOVEの成長メカニズムを明らかにした。2.MOVPE選択成長層の組成/膜厚推定法の確立とマスク設計への適用:通常の有機金属気相エピタキシ(MOVPE)による選択成長において,マスク幅から成長層の組成・膜厚の推定を可能にする新たな技術を確立した。これに基づいて,逆に所望のバンドギャップを得るのに必要なマスク幅を自動設計することが可能となった。3.ハイメサ導波路形成のためのメタン・水素/酸素サイクリック反応性イオンビームエッチング法(RIBE)の開発:光集積回路用のハイメサ導波路の形成を行うために,メタン・水素/酸素サイクリックRIBE法を研究した。金属チタンをマスクとすることで,エッチング深さと表面の平滑性を両立させることができ,ハイメサ導波路の形成が可能となった。現在その導波損失を評価中である。4.リッジ導波路と多モード干渉(MMI)カプラの試作:電子線描画により導波路およびMMIカプラパターンをエピタキシャル基板上に作製し,リッジ導波路型の素子に加工した。その導波損失をファブリーペロー干渉法により測定し,光集積回路に適用するに十分な低損失性を確認した。

さらにMMIカプラの分岐特性についても評価を行った。5.波長割り当て光交換方式の研究:光集積回路を応用したフォトニックネットワークにおける光スイッチング方式として,「波長割り当て光交換方式」を提案し,その伝送特性解析とIP網への適用性の検討を行った。1.バルクInGaAsP/InPハイメサ導波路構造を用いたマッハツェンダー型光スイッチ回路:フォトニックネットワーク構築に向けて,InP基板上バルクInGaAsP中のフランツケルディッシュ効果に基づくハイメサ導波路構造のマッハツェンダー干渉計型光スイッチ回路を研究した.まず,InGaAsP系材料のメタン・水素サイクリック反応性イオンビームエッチング技術を確立し,リフトオフTiマスクを用いてハイメサ導波路の形成を可能にした.次に実際の素子の設計を行い,前記エッチング技術と電子線露光によって試作した.その結果,3Vという低いスイッチング電圧が,波長1.53μm-1.56μmにおいて偏光無依存に得られた.位相変調領域長とスイッチング電圧の積は1.5V・mmであり,従来に比べ4倍改善された.2.選択成長と多モード干渉デバイスに基づく集積型全光スイッチ回路の設計と作製:電子回路の速度限界を超えるために,光による制御が可能な「全光スイッチ」が求められている.ここでは,半導体光アンプとマッハツェンダー干渉計を集積化した光スイッチ回路を研究した.まず,能動干渉計の光量のアンバランスを補償する非対称分岐/合流比の多モード干渉(MMI)カプラ,ならびに制御光・被制御光のミキシングと分離を行う特殊なMMIカプラの設計と数値解析を行い,実際に試作して動作確認を行った.次に有機金属気相エビタキシーにおける選択成長を利用して,InP基板上に半導体光アンプとMMIカプラ,入出力導波路を集積化し,光スイッチ回路を試作した.その結果,電気・光スイッチング実験において約1mAという低いスイッチング電流を,また光・光スイッチング実験において約10倍の消光比改善を,それぞれ達成した.3.能動/受動集積化に向けたInP系アレイ導波路格子合分波器の設計と試作:アレイ導波路格子(AWG)は波長多重(WDM)光通信のキーコンポーネントであるが,半導体光アンプなどの能動素子と組み合わせるとさらに多彩な機能を発揮できる.ここではAWG集積化の基礎を確立するために,InP基板上のAWGの設計法と試作技術を研究した.まずビーム伝搬法によるAWG単体の特性解析・設計を行った後.より複雑な回路に対処するため散乱行列ベースのマイクロ波設計・解析ツールによる光集積回路設計を試みた.一例として複数のAWGからなる光クロスコネクトの特性解析を行い,所期の結果を得た.次に,ドライエッチングと電子線露光を駆使してInP基板上に200GHz間隔8チャンネルのAWGを試作し,比較的小さい導波損失(7.1dB/cm)とWDMデマルチプレクサとしての動作を実証した.1.能動/受動集積に向けた有機金属気相エピタキシャル(MOVPE)選択成長のメカニズム解明:モノリシック光集積回路作製の基本となるMOVPE選択成長につき,InPおよびGaAsの選択成長
遺伝性角膜ジストロフィの分子生物学的研究

角膜ジストロフィの原因となる候補遺伝子を探る目的で、岡山大学分子医科学教室から供与を受けた家兎角膜内皮細胞cDNAライブラリーよりプラスマイナススクリーニングを行い、角膜を多く発現している13個のクローンを得た。解析の結果、NADHユビキノン酸化還元酵素B22サブユニット、25KDa FK-506結合蛋白(FKBP25)、トロンボスポンジン2、α1タイプVIIIコラーゲン、フェリチン重鎖を確認した。また、RT-PCRにより、FKBP12と25のmRNAが家兎角膜、網膜、大脳、小脳で多く発現していること、さらに培養角膜細胞ではむしろ上皮細胞に多く発現していることが分かった。角膜特異的なクローンは認められなかったが、これらは角膜内皮で重要な働きをしていると考えられる。クローニングした既知のクローンの中には既に分かっている角膜ジストロフィのヒト染色体(5、16、20番染色体)と一致するものはなかった。未知の6クローンについてはヒトBACクローンをスクリーニングし、FISH法によってヒト染色体上の座位を検討している。また、同ライブラリーから1000個のクローンをランダムに抽出し、各塩基配列の解析を開始し、随時インターネットを通じて検索を行っている。一方、候補遺伝子と疾患との関連を調べる上で、角膜ジズトロフィの診断を確認しておく必要が生じ、角膜移植時に得られた角膜159検体について検討し、わが国に報告のなかったAvellinoタイプの角膜ジストロフィを診断した。これらの結果をもとに各検体からDNAを抽出し、解析を行えるよう備えた。角膜への遺伝子導入の基礎的研究として、アデノウイルスベクターと実験設備を整えることをおおむね完了した。1.角膜ジストロフィの候補遺伝子アプローチ岡山大学分子医科学教室から供与を受けた家兎角膜内皮のcDNAライブラリーよりプラスマイナススクリーニングを行ない、角膜に多く発現している18個のクローンを得た。それらの部分塩基配列を決めてホモロジー検索を行なった。今のところNADH-ユビキノン酸化還元素B22サブユニット、25KDaFK-506結合蛋白質(FKBP25)、トロンボスポンジン2、フェリチンなど既知のcDNAの他に機能のはっきりしない未知のcDNAが8種類とれている。家兎のFKBP25は、cDNAは塩基配列が決まっていなかったので、塩基配列を決めた。またRT-PCR法を用いて、FKBP12と25のmRNAが角膜、結膜、大脳、小脳に多く発現していることを確認した。また培養角膜細胞においても検討し、角膜上皮に多く発現していることがわかった。他のクローン、特に未知のクローンについては、塩基配列の決定、組織における発現、またヒト染色体上の場所についても検討し、角膜ジストロフィの候補遺伝子となり得るかどうかを検討している。2.膠様滴状角膜ジストロフィの連鎖解析膠様滴状角膜ジストロフィなど角膜ジストロフィの診断を確認し、同意の得られた患者とその家族から採血し、DNAを抽出し、解析に備えている。設備備品としてこれらの検体を保存するための超低温槽を購入し、眼科研究室にて検索ができるようにした。3.角膜への遺伝子導入の基礎研究ウイルスベクターを用いた遺伝子の移入実験については、当初予定していたウイルスベクターの入手が困難であるため、現在別のベクターを用いることを検討している。家兎角膜内皮細胞cDNAライブラリーから、虹彩とのプラスマイナススクリーニングによって得た13個のクローンのうち、7クローンについては既に解析が済み、NADHユビキノン酸化還元酵素B22サブユニット、25KDa FK-506結合蛋白(FKBP25)、トロンボスポンジン2、α1タイプVIIIコラーゲン、フェリチン重鎖を確認した。

また、RT-PCRにより、FKBP12と25のmRNAが家兎角膜、網膜、大脳、小脳で多く発現していること、さらに培養角膜細胞ではむしろ上皮細胞に多く発現していることが分かった。角膜特異的なクローンは認められなかったが、これらは角膜内皮で重要な働きをしていると考えられる。クローニングした既知のクローンの中には既に分かっている角膜ジストロフィのヒト染色体(5、16、20番染色体)と一致するものはなかった。未知の6クローンについての検索の結果はまだ得られていないが、ヒトBACクローンをスクリーニングし、FISH法によってヒト染色体上の座位を検討している。さらに、同ライブラリーから1000個以上のクローンをランダムに抽出し、各クローンの塩基配列の解析を行うことを目標に、現在、約700個の各塩基配列の解析を行い、ミトコンドリア酵素のサブユニット、トロンボスポンジン、VIII型コラーゲン、K-グリピカン、SPARCなどの出現率が高いことが分かった。一方、候補遺伝子と疾患との関連を調べる上で、角膜ジストロフィの診断を確認しておく必要が生じ、角膜移植時に得られた角膜159検体について検討し、わが国に報告のなかったAvellinoタイプの角膜ジストロフィを診断した。これらの結果をもとに各検体からDNAを抽出し、解析を行えるよう備えた。角膜への遺伝子導入の基礎的研究がまだ残されているが、アデノウイルスベクターと実験設備を整えることをおおむね完了した。
児童虐待対応における多職種間コミュニケーションの円滑化に関する研究

本研究では、児童虐待への対応においてスムーズな多職種間連携を妨げる要因の一つは、各職種同士の間に生じる「認識のズレ」にあると仮定し、調査を行った。児童福祉司、児童福祉施設職員、その他の3群について比較検討したところ、各職種の持つ背景によりリスク認知にある一定の傾向の存在が示唆された。これらの特徴を互いが理解することにより、職種内、職種間のコミュニケーションの円滑化の手掛かりとなることが望まれる。児童虐待への対応において適切で迅速な解決を得るためには、関連する様々な職種間の連携が必須である。しかし現実には、組織間の壁や職種間での認識の差異などにより、必ずしも十分な連携がとれていないのが現状である。また、職種間連携の視点からの研究もほとんどなされていない。本研究では、スムーズな多職種間連携を妨げる一つの要因は、各職種同士の間に生じる「認識のズレ」にあると仮定し、この様相を明らかにすることを目的としている。具体的には、(1)児童虐待に関係する各職種の情報収集・処理(リスク認知)の特性を知る、(2)各職種のリスク認知に影響する要因を知る、といった2点の目的のもと、児童虐待に関わる様々な職種の被験者に対して「児童虐待事例のリスク認知評価調査」と「フェースシート」から成るアンケート調査表を作成した。そして全国の児童虐待に関わる多職種に対する研修を行う施設である『子どもの虹情報研修センター(日本虐待・思春期問題情報研修センター)』において、ここに集まる各種専門職員に調査を実施した。現在までに、児童相談所の児童福祉司、児童心理司、児童養護施設・乳児院の児童指導員、保育士、家庭支援専門相談員、地方自治体の福祉担当事務職員、情緒障害児短期治療施設の専門職員、といった職種の250名から回答が得られた。21年度は、これまで実施した調査で回収数が低かった職種について追加調査を行った。対象は、神奈川県内の保育園・幼稚園、学校、警察関係の各種専門職で各種50名を目標とし、前述のアンケート調査表を配布し現在回収、データ入力中である。しかし現実には、組織間の壁や職種間での認識の差異などにより、必ずしも十分な連携がとれていない。具体的には、(1)児童虐待に関係する各職種の情報収集・処理(リスク認知)の特性を知る、(2)各職種のリスク認知に影響する要因を知る、といった2点の目的のもと、児童虐待に関わる様々な職種の被験者に対してアンケート調査を実施した。このうちある程度まとまった回答数が得られ、かつ業務内容が同種の職種をグループ化し、児童福祉司100名、児童福祉施設職員(児童養護施設・乳児院)75名、その他74名、の3群を分析した。その結果、(1)「要保護事例の発見・判断」というリスク事象に対し、児童福祉施設職員は他の職種よりも、注目する情報量が少ない、(2)児童福祉司では、虐待関係への従事年数が短いほど提示された情報に広く注意を向け、またその中でも保護者に関する情報(特に「親の内面描写」)への注目度が高い、(3)いずれの職種においても「直近で扱ったケース」の内容(時期、子どもの年齢)は、現在扱っているケースのリスク情報処理に影響を与える、(4)いずれの職種においても「性別」により虐待のリスク情報認知・処理に差があり、女性の方が、比較的幅広い情報に注目しながら状況把握を行い、かつリスク判断がシビアになる傾向がある、といったことが示された。児童虐待に関わる様々な職種の中の一部ではあるが、その職種に属する各自の持つ背景によりリスク認知にある一定の傾向の存在が示唆された。
β-バレル構造を有する10種のブルー銅蛋白質のX線精密構造と電子移動挙動との相関

系統だった一群の蛋白質やその変異体のX線構造解析を集中的かつ高精度で行うことは、分子動力学計算やモジュール解析に応用でき、構造機能相関の解明や分子進化について明らかにすることが可能となる。本研究の目的は、8本鎖β-バレル構造を共通に持つアズリン、シュウドアズリン、プラストシアニンというブルー銅蛋白質を10種類以上にわたって系統的に結晶学的研究を行い、構造機能相関および分子進化について検討を加えることである。本年度の成果としては、脱窒菌Achromobacter xylosoxidans GIFUの産出する2種のアズリン(2.45Åと1.7Å分解能)、大腸菌で発現させた高等植物Silene pratensisおよびオシダDryopteris crassirhizoma由来の2種のプラストシアニン(それぞれ2.0Å分解能)の4種類のブルー銅蛋白質のX線構造精密化を行った。アズリンに関しては未だアミノ酸シークエンスの解析が間に合わず精密化途中ではあるが、それ以外はいずれも順調に精密化が収劔した。中でも特にシダ植物由来のプラストシアニンがプラストシアニンにとって新しいモチーフと言える3巻きα-ヘリックスを有することが分かった。通常そこは半巻きのヘリックスを取る場所であるが、異なっており、シダ植物の進化について興味深い知見が得られた。またブルー銅蛋白質では初めての例であるが、銅の配位子に直接π-πスタッキング相互作用が見られ、耐酸性との相関が得られた。
ブレオマイシンの酸素活性化機構に基づく高効率的酸化触媒の設計

制癌性抗生物質ブレオマイシンはそのピリミジン部位で鉄錯体を形成し分子状酸素を活性化することにより、DNA中のデオキシリボ-ス部分を酸化的に開裂することが知られている。本研究ではブレオマイシンの錯体化学を解明し、すぐれた酸化触媒を設計するため、種々の人工ペプチドによる酸素活性化を検討した。我々はすでにモデル化合物PYMLー6でブレオマイシンと同等の酸素活性化を達成している。今年度はモデル化合物の軸配位子部分の構造と機能の関係について検討した。ブレオマイシンは生体内に存在する加水分解酵素により不活化されるが、これは軸配位子部位のカルバモイル基が加水分解されるためと考えられている。そこで不活化ブレオマイシンに対応するdeamidoーPYMLー6を合成し、PYMLー6と比較した。その結果、カルボキシル基が軸配位すると酸素を活性化しなくなることが分かった。さらにPYMLー6をマウス肝臓抽出物で処理したところdeamidoーPYMLー6を与えた。これによりブレオマイシンの酵素による不活化の機構が証明された。酵素によるカルバモイル基の加水分解をうけないよう、軸配位子をイミダゾ-ルで置き換えたPYMLー13を合成した。PYMLー13は鉄錯体としての挙動はブレオマイシンとは異なるものの、かなりの効率で酸素を活性化した。さらに実用的見地から構造を大胆に改変し、ヒスチジンを2分子含むモデルPYMLー14を合成した。
森戸辰男資料の教育政策史的調査研究

1.本研究は,戦後日本の文教政策立案においてオピニオンリーダー的役割を果した森戸辰男が遺した資料の、保存・整理と其の資料による戦後文教政策分析を目的としたものである。その膨大な資料は、広島大学付属図書館書庫に納められていたものであるが、同図書館の移転に伴う散逸を防止するため、取り敢えず未整理の状態のまゝで、写真撮影しマイクロフィルムに収めた。その分量は、教育関係だけで、ロールフィルム71本、4万コマ強に及んだ。2年目の平成7年度は、フィルムに撮影した「資料」の整理を行なった。経費の関係で各「資料」を引き伸し・焼付けすることが出来ず、ロールフィルムを一本ずつマイクロリーダーで判読しながらの手工業的な整理作業にならざるを得なかった。その結果は、『森戸辰男資料目録稿』として作成・印刷した。しかし、本格的な資料分析による文教政策史的研究は、今後の課題として残されてしまった。「資料」整理を通して、森戸辰男の活動においてその国際的側面が非常に大きいことが判った。ユネスコ活動を契機にした各種国際会議(アジア地域ユネスコ加盟国文相会議、同教育行政代表者会議)や国際大学協会総会、日米文化教育会議等々の第一次資料は特に貴重なものであった。「森戸辰男資料」の内容は、国内関係でも重要なものが多く見られた。教育刷新委員会関係、文相時代の閣議資料、中央教育審議会(「46答申」まで)、国立大学協会関係、社会教育審議会、国語審議会、憲法調査会等の関係資料である。要するに、森戸辰男の戦後ほゞ30年間に関係した要職に関わる膨大な資料群である。1.本研究は、広島大学付属図書館所蔵の「森戸辰男(元文部大臣)資料」の保存・整理とその研究を目的としたものである。この「資料」は、ダンボール53箱に封印されたまま死蔵の状態に置かれていたもので、本年度は当図書館の協力を得てその内容を精査・点検し、その内特に重要且つ損壊の恐れのある「文書資料」を撮影してマイクロフィルムに収録した。その数量は、ロールフィルム71本・39133コマに及んだ。2.マイクロ撮影は民間の専門業者に委託したが、資料の性格上出張撮影となった。また広島大学付属図書館の移転・引っ越しと重なり、当初の予定より撮影に手間取り、撮影完了・フィルムの納品が年度末近くになったため、「資料研究」自体は次年度に回さざるを得かった。3.この「森戸辰男資料」の概要は予備調査において凡そ把握していたが、今年度の調査で、同図書館内に別置されたダンボール13箱の「資料」が見つかった。それらも「森戸辰男資料」であることが鑑定できたが、今年度は時間的にも、予算的にもマイクロ撮影はできなかった。それを含めてこの「森戸資料」には、文部大臣時代の閣議関係資料、教育刷新委員会関係資料、「四六答申」を含む中央教育審議会関係資料、日米文化教育会議関係資料などの貴重なものが多く、教育政策史研究にとって欠かせないものであることが明らかとなった。1.本研究は、戦後日本の文教政策立案においてオピニオンリーダー的役割を果たした「森戸辰男資料」の保存・整理と其の資料による戦後文教政策分析を目的としたものである。その膨大な資料は、広島大学付属図書館書庫に納められていたものであるが、同図書館の移転に伴う散逸を防止するため、取りあえず未整理の状態のままで撮影して、マイクロ・フィルムに収めた。その分量は、ロールフィルム71本、約4万コマに及んだ。2.2年目の今年は、フィルムに撮影した「資料」の整理を行った。経費の関係で各「資料」を焼き付け・拡大することができず、一本ずつマイクロリーダーで判読しながらの手工業的な整理作業にならざるを得なかった。

その結果は、『森戸辰男資料仮目録』として結実したが、本格的な資料研究と文教政策分析は今後の課題として残されてしまった。同時にそれは、マイクロ撮影後のフィルムからの資料整理の難しさを示すものでもあった。3.この「森戸辰男資料」の内容は概要次のようなものである。(1)教育刷新委員会関係、(2)文相時代の閣議関係、(3)中央教育審議会関係(「46答申」まで)、(4)ユネスコ関係(総会、国内委員会、アジア地域加盟国文相会議)、(5)日米分化教育会議(CULCON)関係、(6)国際大学協会(IAU)総会関係、(7)国立大学協会関係、(8)社会教育審議会関係、(9)国語審議会関係、(10)憲法調査会関係等々。要するに、森戸辰男が戦後ほぼ30年間に関わった要職を網羅する広範な資料群である。
単分散糖鎖ブロック共重合体によるシングルナノ相分離構造の戦略的構築

本課題では、5 nm以下の周期間隔でミクロ相分離構造を形成・制御可能なブロック共重合体の創出を目標としている。これを実現するために、分子量分散の無い糖鎖含有ブロック共重合体に着目し、その合成とミクロ相分離挙動の評価を行った。本年度は、疎水性セグメントとして天然由来の長鎖炭化水素であるソラネソール(9ユニットのイソプレンから構成される)、糖鎖としてマルトオリゴ糖(グルコース、マルトース、マルトトリオース、マルトテトラオース、マルトペンタオース)を用い、直鎖状ジブロック共重合体を合成した。還元末端にプロパルギル基を導入したオリゴ糖をアジド化したソラネソールに対してクリック反応させることで目的とするジブロック共重合体を合成した。ソラネソールとオリゴ糖は何れも分子量分散のない化合物であり、必然的に生成するブロック共重合体は単分散である。続いて、糖鎖重合度を15に変化させた一連の直鎖状ブロック共重合体について小角X線散乱測定を行うことでミクロ相分離構造を評価した。その結果、わずか分子量10002000ほどであるにもかかわらず、いずれのサンプルにおいてもミクロ相分離(大部分はラメラ構造)することを見出した。さらに、ミクロ相分離構造の周期間隔は5.57.5 nmであり、シングルナノスケールのナノ構造を得ることに成功した。ラメラ構造の周期間隔は糖鎖重合度が1増えるごとに約0.4 nm増加することがわかり、糖鎖重合度の調節による相分離サイズの制御に成功したと言える。直鎖状ジブロック共重合体に加え、分岐構造を導入したブロック共重合体の合成も行った。小角X線散乱測定の結果、直鎖状ジブロック共重合体では見られなかったスフィア、シリンダーおよびジャイロイド構造の形成が示唆された。以上より、糖鎖含有単分散ブロック共重合体はシングルナノスケールのミクロ相分離構築に成功した。単分散糖鎖ブロック共重合体の系統的な合成とナノ構造解析に成功し、望みのサイズとモルフォロジーを有するミクロ相分離構造を得るための分子設計指針を確立した。すでに最終目標とする5 nmに迫る周期間隔でミクロ相分離する材料をいくつか見出している。さらに、一般的なブロック共重合体ではほとんど見られないジャイロイド構造の発現に成功するなど予想を超える結果が得られている。これらのことから、当初の計画以上に研究が進展していると判断できる。ソラネソール以外の疎水性セグメントを有する単分散糖鎖ブロック共重合体についても検討を進め、最終目標とする5 nm以下の周期でのミクロ相分離構造発現を目指す。平成30年度の検討では、バルク中におけるミクロ相分離観察がメインであったが、今後は、リソグラフィー用レジストとしての応用を志向し、薄膜中でのミクロ相分離挙動を重点的に検討する。また、ミクロ相分離構造を薄膜中で垂直配向させるアニーリング条件を検討し、実際に次世代リソグラフィー用のレジストとしての応用を目指す。

平成30年度の検討では、バルク中におけるミクロ相分離観察がメインであったが、今後は、リソグラフィー用レジストとしての応用を志向し、薄膜中でのミクロ相分離挙動を重点的に検討する。また、ミクロ相分離構造を薄膜中で垂直配向させるアニーリング条件を検討し、実際に次世代リソグラフィー用のレジストとしての応用を目指す。
リラキシン(LGR7と8)の子宮内発現の解析とその細胞外ドメイン投与の効果

リラキシンは妊娠子宮頸管熟化作用や子宮収縮抑制作用を有することがマウス等で解明されてきた。ヒトでは、リラキシン血中濃度は妊娠初期にピークを示すが、その生理作用は明らかでない。2002年にリラキシン受容体(LGR7・LGR8)が発見され、LGR7とLGR8のヒト胎盤での発現が確認された。そこで本研究では、リラキシンの妊娠初期絨毛外トロホブラスト(extravillous trophoblast:EVT)の浸潤能に及ぼす影響をMMPとTIMPの発現動態から検討した。まず、インフォームドコンセントを得て採取した妊娠初期絨毛組織から、当研究室で確立された酵素処理と遠沈濾過法(JCEM 2004)にてEVTを分離し、培養した。EVTにおけるリラキシン受容体の発現はRT-PCR法とimmunoblot法で検討した。培養48時間後EVTの無血清培養系にrecombinant H2リラキシン(rH2)を0.033ng/ml添加し、rH2添加24時間後のMMP-2,-3,-9mRNAとTIMP-1 mRNA発現に及ぼす影響をrealtime RT-PCRで検討した。その結果、妊娠初期絨毛EVTにおけるリラキシン受容体の発現がRT-PCR法とimmunoblot法で確認された。rH2添加によって濃度依存性に培養EVTでのMMP-2,-3,-9mRNA発現が増加し、TIMP-1mRNA発現は逆に低下することを認めた。これらの知見より、リラキシンは妊娠初期EVTにおいてMMP-2,-3,-9発現の促進とTIMP-1発現の抑制を介してEVTの脱落膜間質浸潤を促進することが示唆された。2002年1月、申請者らが米国スタンフォード大学との共同研究で、LGR7とLGR8がリラキシン受容体であることを発見した。リラキシンは1930年代に発見されたホルモンであり、子宮頚管熟化作用、恥骨結合弛緩作用、乳腺結合組織の弛緩による乳管伸長作用を持つことより妊娠分娩に密接に関与することが推察されてきた。しかし、最近までその受容体が同定されず、妊娠維持・分娩発来におけるリラキシンの役割は不明な点が多かった。本研究では、LGR7とLGR8の子宮内・胎盤内発現態度を解明し、リラキシン結合に伴うLGR7とLGR8のシグナル伝達系を分析することにより、子宮頚管熟化機序及び妊娠成立・維持におけるリラキシンとリラキシン受容体(LGR7,LGR8)の役割を明らかにしようとするものである。まず、リラキシン受容体(LGR7と8)の子宮内発現の解析において、子宮筋腫・子宮頚管・子宮体部筋層に存在することをmRNAレベルで確認した。次に妊娠初期絨毛細胞の絨毛外トロホブラストにおけるLGR7の発現をmRNA及び蛋白レベルで確認し、一方LGR8の発現は認めなかった。LGR7発現を確認した細胞における、エストロゲン・プロゲステロンなどのLGR7発現への影響を確認するため、real time RT-PCRを施行するプライマーを作成した。現在、子宮筋腫・子宮頚管・子宮体部筋層・妊娠初期絨毛細胞にエストロゲン・プロゲステロンを投与し、cDNAライブラリーを作成した。また、子宮頚管熟化機序を解明するための妊娠子宮頚管組織のサンプルについては、神戸大学病院周産母子センターにて切迫早産の管理を行った単胎妊娠症例50例及び正常単胎妊娠症例50例を対象としている。現在までのところ、分娩方法が帝王切開であった症例中informed consentが得られた切迫早産の管理を行った単胎妊娠7症例及び正常単胎妊娠10症例より血液検体・頚管組織検体を収集した。これらの知見より、リラキシンは妊娠初期EVTにおいてMMP-2,-3,-9発現の促進とTIMP-
不動産会計開示情報の企業不動産マネジメントへの統合的活用方策にかかる基礎的研究

有形固定資産減損処理や投資不動産時価開示等の不動産会計開示情報の作成には、作業過程において不動産時価評価等が要求され、その高い専門性のゆえに莫大な社会的コストを要する。しかし、投資家、債権者、経営者等によって、これらの情報が十分活用されていない。山本は、国内でいち早く減損データ・投資不動産時価開示データを活用した研究に着手し、CRE(Corporate Real Estate:企業不動産マネジメント)の合理的な意思決定に活用できるよう注力してきている。本研究の目的は、これら先駆的な研究業績を基盤として、A.不動産会計開示情報の統合的活用を前提とした合理的・効率的なCREを実現するための具体的方策を確立すると同時に、B.これら情報の信頼性担保のための仕組みを提示することである。上記の研究目的を達成するため、平成30年度については、以下の作業を実施した。・企業不動産の効率的利活用と企業特性等の関係を解明するための研究を行った。投資不動産時価開示データを対象とした分析結果を基盤とし、もう一つの重要な研究対象である有形固定資産減損データをも含めて、財務データ等を広範に活用し、減損発生メカニズムと減損発生の株価への影響にかかる実証分析を実施した。・減損会計適用企業について「鑑定人評価」採用企業と「内部評価」採用企業の財務データを、統計的手法に基づき分析・比較することにより、両者の違いを明らかにした。このことにより、会計情報を開示する企業側のインセンティブや経営行動のメカニズムを明らかにすることができた。当初の計画通り財務データを整備し、それに基づいた予定された実証分析を行うことができた。分析結果も一定水準にあり、仮説を検証できるものであった。その結果を、複数の学会報告、学術論文の公刊に具現化することができた。前年度の研究成果を踏まえ、企業が保有する遊休不動産のあり方に絞り込んだ究明を行う。具体的には、整備された財務データに基づき、遊休不動産の保有状況に着目した分析(ロジット回帰分析等)を行い、遊休不動産を保有する企業の特性を究明する。さらに、遊休不動産の保有状況と企業の時価総額との関係性を分析するものとする。さらに、これら分析を補足する目的で、企業や監査人等を対象としたヒアリング調査を広範に行う予定としている。実証分析に必要になる財務データ等の整備が予定したよりも低額で行うことができたため。次年度は、更なるデータ整備と企業等に対する関係者ヒアリングに要する経費に充当する計画でいる。
景観照明の快適性の定量的評価に関する研究

1.神戸近郊を中心に、近景(建造物など)、中景・遠景(六甲山麓の高台、海岸からの眺望など)、街路ゾーン(市街地、公園、広場、モニュメントなど)の都市景観夜景を約500コマ程度デジタル写真撮リし、調査基礎資料とした。さらに、比較対象として、神戸と類似する横浜市のみなとみらい21地区、港の見える丘地区、東京の有明・台場・池袋・港区東京タワー地区など約300コマ基礎資料を収集した。2.調査基礎資料を中心に以下を実施した。(1).夜景の輝度分布に相当するグレイ(白黒)画像により、2次元空間周減衰係数特性を算出した。(2).景観夜景の輪郭線情報を含む線画を抽出し、フラクタル次元を算出した。(3).色彩色差計により、デジタル写真画像の明るさと輝度の関係を明確にした。(4).2次元画像処理によりR・G・B分布を3次元表現を検討資料とする。(5).[暖かい-冷たい」、「美しい-美しくない」など20項目の感情・快適性要因の相関とともに評価結果をSD法により因子分析により「柔らかさ」、「目立ちやすさ」、「美しさ」等の3つの因子に分類できることを明確にした。(6).簡易型脳波計による生理的特性については、1214Hzのファスト・アルファ波および47Hzのシータ波が心理評価項目と関連している可能性が認められた。3.上記における、定量化要素とを総合的に評価検討を実施した。心理的ある印象評価項目の「現代的な・古典的な」と「はっきりした・ぼんやりした」感覚が色彩分布、フラクタル次元、空間周波数減衰、脳波などとの間に相関があった。さらに、「明るい・暗い」、[派手な・地味な]、「動的な・静的な」、「鮮やかな・くすんだ」、「暖かい・冷たい」、「にぎやかな・さみしい」などの印象評価とも物理的要素が部分的に関連していることが判明し、定量的評価に役立つことが期待できる。1、中景・近景(建築物など)の40ポイントの景観照明写真(神戸中心に照明普及賞受賞を含む)用い、調査ポイントの選定基礎資料とすべく、験者側から評価項目を選定・提示することなくレパートリー・グリット発展手法により、被験者10名(1923才)により「美しさ」の評価構造を抽出した。その結果、「細かい部分が見えない」-(全体のイメージがつかみやすい)、(輪郭がはっきりしている)、(対象物が際だつ)、「感動す」-(感覚に合う)、(雰囲気がよい)、(落ち着く)、「楽しい」-(いろいろな色が混ざっている)、(にぎやかである)、「建物が魅力的」-(芸術性が高い)、(すっきりしている)、「生活感がない」-(幻想的である)、(演出性が高い)、などであった。以上から景観照明では明確性、魅力性、感動性、芸術性、幻想性などが評価構造と考えられることが明確になった。2、20項目の感情・快適性要因を各7段階評価結果を、SD法(意味微分法)により因子分析を行い、景観照明の特徴づける要素として輪郭をフラクタル次元により定量化し検討した。評価項目「暗い-明るい」、「地味な-派手な」、「寂しい-賑やかな」などの評価得点が、フラクタル次元と相関係数が0.60以上で関連ずけられることが判明した。3、夜間照明対象物のデジタル写真から、(1)注視点の周辺部におけるカラーR・G・Bとモノクロの各2次元空間周波数特性を計算、周波数減衰係数特性、(2)フラクタル次元の計算値、

(3)色彩色差計により、景観照明の特徴部の輝度と色度を計測・記録、(4)Color CubicPalettenによる立方体による三次元表示の色彩分布などにより、物理量の多面的把握のための解析手順を検討中である。4、現有の簡易型脳波計の周波数スペクトル分析により、α波、β波、θ波、筋電図などを瞬時に処理・記録し、特にα波成分など生理特性と景観照明との関連の検討準備中である。5、次年度の実施調査による景観照明の具体的評価を迅速・効率的にするべく、中景(建造物)、近景、道路、街ゾーン(公園・広場・モニュメント)の光源・器具・手法など照明技術データを収集中であり、遠景照明展望場所および調査ポイントを検討中である。1、戸近郊を中心に、近景(構造物など)、中景・遠景(六甲山麓の高台、海岸からの展望など)、街路ゾーン(市街地、公園、広場、モニュメントなど)の都市景観夜景を約500コマ程度デジタル写真撮影し、調査基礎資料とした。さらに、比較対象として、神戸と類似する横浜市のみなとみらい21地区、港の見える丘地区、東京の有明・台場・池袋・港区東京タワー地区など約300コマ基礎資料を収集した。2、調査基礎資料を中心に以下を実施した。(1)景観夜景の輝度分布に相当するグレイ(白黒)画像により、2次元空間周波数の減衰係数特性を算出した。(2)景観夜景の輪郭線情報を含む線画を抽出し、フラクタル次元を算出した。(3)色彩色差計により、デジタル写真画像の明るさと輝度の関係を明確にした。(4)2次元画像処理によりR・G・B分布を3次元的表現を検討資料とする。(5)「暖かい・冷たい」、「美しい・美しくない」など20項目の感情・快適性要因の相関と評価結果をSD法の因子分析により「柔らかさ」、「目立ちやすさ」、「美しさ」等の3つの因子に分類できることを明確にした。(6)簡易型脳波計による生理的特性については、1214Hzのファスト・アルファ波および47Hzのシータ波が心理評価項目と関連している可能性が認められた。3、上記2における、(1)(6)の定量化要素とを総合的に評価検討を実施した。心理的評価項目の「現代的・古典的」と「はっきり・ぼんやり」感覚が色彩分布、フラクタル次元、空間周波数減衰、脳波などとの相関があり、「明・暗」、[派手・地味]、「動的・静的」、「鮮やか・くすんだ」、「暖・冷」、「にぎやか・さむしい」などとも関連していることが明白となった。