hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
線虫の神経回路における情報処理機構-多面的なアプローチによる分子遺伝学的研究-

動物は、環境からの様々な情報を感覚ニューロンで受容し、そのような情報を中枢神経で適切に処理することによって、行動している。本研究においては、線虫C.elegansをモデルとして、このような情報処理の制御メカニズムの解析を進めた。線虫は、感覚情報の統合に関わるシグナル分子を同定するとともに、それが働く神経回路を同定した。また、記憶の保持時間を制御するメカニズムを明らかにするため、記憶を長く保持する変異体を同定し、記憶の保持に関わるシグナル経路を同定した。我々は、生殖細胞が嗅覚応答に影響を与えることをみつけ、その現象に基づき変異体を同定した。さらに、行動可塑性と嗅覚応答に関わるシグナル経路の働きを明らかにした。線虫C. elegansをモデルとした行動遺伝学的解析により神経回路における情報処理機構を解明する。(1)感覚情報の統合と連合学習の制御を担うシグナル伝達系を同定し、それが働く神経回路を明らかにする。(2)記憶の保持に着目して、記憶の保持時間を制御するメカニズムを明らかにする。(3)嗅覚順応におけるRas-MAPK経路の働きを、介在ニューロンの働きやMAPKが制御する下流因子に着目して明らかにする。(4)体内環境に基づき神経機能を制御するメカニズムを明らかにする。動物は、外界から同時に受容した様々な情報を、中枢神経系において取捨選択・統合した上で、適切に情報処理を行い行動している。我々は、このような情報処理のメカニズムを、線虫C.elegansをモデルとして解析している。感覚情報の統合は、「2つの入力から1つの出力」という最も単純な情報処理の1つである。我々は、分泌タンパク質HEN-1と受容体チロシンキナーゼSCD-2からなるシグナル経路が、線虫の神経回路において感覚情報の統合を制御していることを明らかにしてきた。このSCD-2が働くニューロンを分子遺伝学的に決定したところ、AIA介在ニューロンが重要な役割を果たしていることがわかった。そこで、AIA介在ニューロンで働く可能性がある神経伝達物質受容体を探索した。その中でグルタミン酸受容体をコードするGLC-3の変異体が、感覚情報の統合に異常があることから、SCD-2の下流で働く可能性を遺伝学的に解析したが、GLC-3はSCD-2とは異なる経路で感覚情報の統合を制御していることが明らかになった。そこで、SCD-2の下流で働く因子の探索のために、新たな変異体のスクリーニングを行ったところ、膜貫通型グアニル酸シクラーゼをコードする遺伝子の変異体を単離した。感覚順応におけるRas-MAPK経路の働きを、グルタミン酸受容体GLR-1の局在の変化に着目して研究している。Ras-MAPK経路に異常がある変異体では、GLR-1のシナプス領域における局在に変化が見られることから、MAPKが直接GLR-1をリン酸化する可能性を検討した。その結果、MAPKがGLR-1を直接リン酸化することを見いだしたので、リン酸化アミノ酸残基を線虫からGLR-1を抽出することにより同定した。このリン酸化アミノ酸残基を含むペプチドに対する抗体を作成し、野生型線虫を免疫染色したところ、神経系において抗体による染色が観察された。動物は、刻々と変化する環境に対して適切に応答することが必要である。このような環境適応のために、感覚細胞を通じて受容した環境からの様々な情報を、神経回路において適切に処理し、環境に応じた行動をとったり、体のホメオスタシスを制御したりしている。このような感覚情報処理システムは、単純な神経系を持つ生物でも生存や子孫を残すために必須である。我々は、単純な神経回路を持つ線虫C.elegansをモデルとして、情報処理の分子基盤の解明を目指している。本年度は、線虫における感覚情報の統合を制御する分子として同定した受容体型グアニル酸シクラーゼGCY-28が、化学走性学習の制御にも働いていることを明らかにするとともに、遺伝学的に我々が既に同定していたSCD-2/HEN-1経路とは独立に働いていた。また、GCY-28や我々が同定したHEN-1/SCD-2が制御する感覚情報処理の実体を明らかにするために、カルシウムイオン感受性蛍光タンパク質を用いて神経活動の可視化を行った。感覚刺激に伴う感覚ニューロンの可視化をすすめた。感覚ニューロンAWAにおいても、嗅覚刺激に依存したCa2+濃度変化の検出に成功した。さらに、これまでの解析から情報の統合に重要な役割を果たしているこどが明らかになったAIA介在ニューロンにおいても測定を行ったところ、刺激に応じた活動の検出が見られた。このとき、複数の感覚刺激を与えた場合には異なる応答が見られた。このことは、介在ニューロンにおける情報処理の可視化につながる知見と考えられる。

このような環境適応のために、感覚細胞を通じて受容した環境からの様々な情報を、神経回路において適切に処理し、環境に応じた行動をとったり、体のホメオスタシスを制御したりしている。このような感覚情報処理システムは、単純な神経系を持つ生物でも生存や子孫を残すために必須である。我々は、単純な神経回路を持つ線虫C.elegansをモデルとして、情報処理の分子基盤の解明を目指している。本年度は、誘引性匂い物質ジアセチルと忌避物質銅イオンとの情報の統合を制御する分子として同定した受容体型グアニル酸シクラーゼGCY-28について、詳細な解析を進めた。GCY-28は選択的スプライシングによりadの4種類のサブタイプがある。このうち、dサブタイプは、AIA介在ニューロンだけで発現していることが推定された。また、dサブタイプにだけ欠失を持つ変異体は、感覚情報の統合に異常を持つこと、全てのサブタイプに異常を持つgcy-28変異体に、dサブタイプをAIA介在ニューロンで発現させると表現型が回復することがわかった。AIA介在ニューロンは、ジアセチルを受容するAWA感覚ニューロンと銅イオンを受容するADL・ASH感覚ニューロンの両方からシナプス入力がある唯一の介在ニューロンであることから、AIA介在ニューロンにおいてGCY-28dサブタイプが働くことが、感覚情報処理に重要な役割を果たしていると考えられる。線虫C. elegansを用いて、情報処理を司る分子メカニズムの解析を進めた。本年度においては、グアニル酸シクラーゼGCY-28と、分泌タンパク質HEN-1とその受容体SCD-2との関係を明らかにするために、二重変異体を作製し表現型を解析したところ、GCY-28とHEN-1/SCD-2とは、独立の経路で情報の統合を制御していることが明らかになった。また、これらの経路が制御している行動可塑性の一つ塩走性学習に関しても、独立の経路で制御していることがわかった。これらのことは、単純な神経回路における単純な情報処理においても、複雑なシグナル系によって制御されていることを示唆している。神経における情報処理は、外部環境だけでなく内部環境による制御も受けている。この内部環境による情報処理の制御について、匂い物質ジアセチルに対する走性を指標に解析を進めた。これまでの解析から、生殖腺の成熟が、ジアセチルに対する応答に重要であることが明らかになっていたことから、生殖細胞がなくてもジアセチルに対する応答が野生型と同程度になる変異体のスクリーニングを進め、新たな変異体を同定した。この変異体の原因遺伝子を同定するために、染色体上に原因遺伝子をマッピングしたところ、V番染色体の中央付近にあることが明らかになった。また、匂いを受容する感覚ニューロンの活動をカルシウム感受性蛍光タンパク質を用いて測定したところ、生殖腺の有無によって、感覚受容そのものには違いがないことが推定された。
巨大ひずみ加工中に生ずるナノ析出物の加工誘起溶解反応機構の解明

電子顕微鏡観察と小角散乱測定により、巨大ひずみ加工中に生じるナノ析出物の加工誘起溶解反応は、転位による析出物の切断により生じることが明らかとなった。このことは、切断機構からオロワン機構に移行する臨界半径以上の析出物は巨大ひずみ加工中に溶解しづらいことを示している。よって、臨界半径よりも大きいナノ析出物を予備時効により粒内に分散させた後、巨大ひずみ加工を施すことにより結晶粒を微細化し、その後、低温短時間の再時効を施すことにより、未溶解の析出物を核として粒内にナノ析出物を分散させることが出来た。その結果、析出強化と結晶粒微細化による強化を両立が可能となった。本研究は巨大ひずみ加工中の析出物の溶解が何に起因して生じるのかを明らかにすることを目的としている。H24年度はη'相を析出させたアルミニウム合金に巨大ひずみ加工を施すことにより生じる溶解挙動をX線小角散乱測定により詳細に調べ、その原因を考察した。母相中にη'相を析出させるため、Al-Zn-Mg合金に時効を施した。時効条件を変化させることによって、η'相の半径を変化させた。これらの試料に対し、HPT法を用いて巨大ひずみ加工を行った。加えたひずみ量を変化させた試料に対し、X線小角散乱測定を行うことにより、析出物の溶解挙動を調べた。また、透過電子顕微鏡観察により析出物の形態や、結晶粒微細化挙動を調べた。透過電子顕微鏡観察の結果、巨大ひずみ加工を行った試料では析出物がほとんど確認出来なかった。これは、析出物が溶解していることに加え、転位が多量に導入されているため析出物が非常に見づらいことが原因として考えられる。小角散乱測定の結果、ある臨界半径までの大きさの析出物は、ひずみ量の増加に対して非常に早く溶解するのに対し、臨界半径以上の析出物の溶解はひずみ量が増加してもあまり溶解しないことが分かった。また、その臨界半径は転位運動が切断機構からオロワン機構に変化する半径と一致していた。よって、転位運動による析出物の切断が、巨大ひずみ加工中の析出物の溶解のもっとも大きな原因であることが分かった。次年度以降は、他の析出物についても同様のことが言えるかどうかを検証する。昨年度までの研究によって、巨大ひずみ加工中のに生じるナノ析出物の加工誘起溶解反応は、転位による析出物の切断が原因であることが明らかとなった。このことは、ある臨界半径以上の析出物は転位により切断が困難となるため、溶解速度が臨界半径以下の析出物よりも極端に遅くなり、巨大ひずみ加工中に完全には溶解しないことを示している。従来粒径を有する時効硬化型アルミニウム合金(A7075合金)に時効を施すと粒内にナノ析出物が分散し、析出強化が得られる。しかしながら、巨大ひずみ加工により結晶粒を超微細化したアルミニウムに時効処理を施すと、粒界密度が高いため、粒界に粗大な析出物が形成され、ほとんど時効硬化が得られず、析出強化と結晶流微細化による強化を両立させることが困難であることが知られている。よって、本研究では、昨年度明らかになった臨界半径よりもわずかに大きなナノ析出物を予備時効により分散させた後、巨大ひずみ加工を施すことによって結晶粒を150nm程度まで超微細化させ、かつ、粒内に未溶解の析出物を残存させる加工条件を探索した。その後、より低温で短時間再時効を施すことにより、未溶解の析出物を核として粒内にナノ析出物を分散させることが出来、析出強化と結晶粒微細化を両立させることが出来た。超微細粒材では加工硬化が小さく、均一伸びが小さいことが報告されているが、特に予備時効を393Kで2002000ks施した後、巨大ひずみ加工として2回転のHPT加工を施し、その後に363K、0.18ks再時効を施した試料では、加工硬化係数が増加したことにより、加工まま材よりも均一伸びが改善した。巨大ひずみ加工中に析出物が溶解することが知られているが、そのメカニズムは詳しく調べられていない。本研究では様々なサイズのη'準安定相を析出させたAl-Zn-Mg合金に巨大ひずみ加工の一つであるHPT加工を施し、η'準安定相の溶解挙動を調べることによって、溶解メカニズムを調べることを試みた。Al-Zn-Mg合金に120°Cで時効を施し、時効時間を変えることによって様々なサイズのη'準安定相を析出させた。析出相が小さい亜時効材では、転位は析出相を切断する切断機構が働き、析出相が大きい過時効材では、析出相周りに転位ループを残すオロワン機構が働くことが知られている。

巨大ひずみ加工中に転位が析出物を切断することによって、析出相の表面積が増加し、界面エネルギーが増加することによって析出物が溶解するのであれば、オロワン機構が働く過時効材では巨大ひずみ加工中にη'準安定相は溶解しないと予想された。小角散乱測定の結果、確かに、亜時効材中に析出していたサイズの小さいη'準安定相は小さいひずみによって溶解したが、過時効材中に析出していたサイズの大きいη'準安定相もひずみ量の増加に伴い、徐々に溶解することが明らかとなった。また、HPT加工に伴うひずみ量の増加に伴い結晶粒は微細化するが、η'準安定相が析出している時効材よりも、η'準安定相が析出していない未時効材の方が小さいひずみ量によって微細化されることが明らかとなった。本研究は巨大ひずみ加工中の析出物の溶解が何に起因して生じるのかを明らかにすることを目的としている。本年度に行ったX線小角散乱の結果から、アルミニウム合金中に析出するη'析出物の場合においては、転位による析出物の切断が析出物溶解の最も大きな原因であろうということが分かった。よって、本研究は順調に進展していると言える。本研究は巨大ひずみ加工中の析出物の溶解が何に起因して生じるのかを明らかにすることを目的としており、特徴の異なる析出物を析出させたアルミニウム合金に巨大ひずみ加工を施すことにより、その原因を明らかにするものである。H23年度は、母相と整合であるが、規則相でないη'相を様々なサイズで析出させた後に巨大ひずみ加工を加え、溶解挙動を調べた。その結果、転位による切断が生じない筈である大きな析出物においても溶解が生じることが明らかになった。よって、転位による析出物の切断が溶解挙動の原因では必ずしもないことを明らかにすることが出来、他の要因に絞る事が出来た。よって、来年度以降、例えば、母相と整合でなく、規則相でもないSiGe相との溶解挙動と比較することによって、巨大ひずみ加工中の母相/析出物間の整合度の喪失が溶解挙動の原因となりうるかを検証することが出来る。本研究は巨大ひずみ加工中の析出物の溶解が何に起因して生じるのかを明らかにすることを目的としており、本年度に行ったX線小角散乱の結果から、転位による析出物の切断が、析出物溶解の最も大きな原因であろうということが分かった。しかしながら、上記結論はアルミニウム合金中に析出するη'析出物におけるものであり、他の析出物も同様のメカニズムで溶解しているとは必ずしも言えない。よって、次年度以降、他の析出物についても同様のことが言えるかどうかを検証して行く。η'準安定相が析出したAl-Zn-Mg合金にHPT加工を加えることによって、η'準安定相のサイズに関わらずHPT加工中に溶解することが明らかになったが、どの程度のひずみ量によって、どの程度溶解するのか、また、析出物のサイズによって溶解速度がどの程度異なるのかといった定量的な知見は未だ得られていない。よって、小角散乱測定結果を詳細に解析することによって、定量的な知見を得ることを試みる。また、η'準安定相と同様に母相と整合であるが、規則相であるAl3Sc析出相、および、母相と非整合で、規則相でないSiGe析出相のHPT加工中における溶解挙動を調べ、η'準安定相の溶解挙動と比較することにより、析出相の性質が溶解挙動に与える影響を調査する。アルミニウム合金中に完全整合析出物が析出するAl-Sc合金と、非整合析出物が析出するAl-Si-Ge合金を入手する。X線小角散乱測定、透過電子顕微鏡観察など、分析用試料を作製するための消耗品の購入を行う。
２次元中性子集光デバイス製作法の確立と性能評価

量産可能な2次元中性子集光ミラー製作のキーデバイスとして、φ460mmの大面積でNiC/Tiスーパーミラーシート製作手法を確立した。これは従来の5倍以上の面積に相当しており、この大面積製膜を可能としたことで、J-PARC MLF BL06ビームライン建設や京大炉の小角散乱分光器等の高度化にも貢献をした。m>4のスーパーミラーシートはサポート材無しの自立膜でかつ歩留まりも100%に近い製作手法を確立した。しかし実用に足る形状の精密制御はいまだ道半ばである。そのためm<4でかつ曲率があまり大きくないスーパーミラーに関しては、現時点では、精密切削・研磨等の他の手法が優位であることを確認した。J-PARC等の大強度中性子源や中性子光学の発展による実効中性子源強度の増加により、微少試料測定の可能性も高まっており、集光ミラー開発も活発になってきた。しかし2次元集光は最近の表面加工技術の進展をもってしても容易ではなく、さらに製膜は難しく大面積化は大変困難である。本研究では、最近申請者が発明した中性子スーパーミラーシートの応用等により、安価で量産可能な2次元中性子集光ミラーデバイスの製作法に道を拓き、その適用範囲を評価することを第一の目的としている。京大炉のイオンビームスパッタ装置ではφ200mmが最大の製膜エリアの設計だが、H23年度に平板については偏極ミラーを含めてm=3.5程度までφ400mmでも均一で安定的にスーパーミラーの製作を可能とした(これらは京大炉で整備した中性子反射率測定を行い評価した)。これによってJ-PARC BL06ビームライン建設も自作可能となった。また高精度レーザー角度測定器を購入し、3次元ゆがみ測定機の試作を行い、オフラインで2次元ミラー形状の精密評価を目指している。また、単に集光デバイス開発による既存の分光法の高度化だけでなく、中小型中性子源の利用効率の大幅な向上、特に新しい分光法の開拓に貢献し、低速中性子利用のすそ野を大きく広げる一助となることも目指している。当初利用を予定していた原子力機構のJRR_3の再起動が難しいこともあり、集光ゲインがさらに大きい極冷中性子ビームによる新しい分光法をめざし、世界最強の研究用原子炉であるILL(フランス・グルノーブル)のVCNポートにビームタイムを申請して、1.5サイクル(1サイクル:50日)以上確保し、その準備を進めた。J-PARC等の大強度中性子源や中性子光学の発展による実効中性子源強度の増加により、微少試料測定の可能性も高まり、集光ミラー開発も活発になっているが、トロイダルミラーのような2次元集光は最近の表面加工技術の進展をもってしても容易ではなく、また製膜も難しく大面積化は大変困難である。本研究では、最近申請者が発明した中性子スーパーミラーシート等の応用により、安価で量産可能な2次元中性子集光ミラーデバイスの製作法に道を拓き、その適用範囲を評価することを目的とした。さらに、大型中性子源における既存の分光法の高度化だけでなく、中小型中性子源の利用効率の大幅な向上、新しい分光法の開拓に貢献し、低速中性子利用のすそ野を広げる一助となることも目指した。京大炉のイオンビームスパッタ装置ではφ200mmが最大の製膜エリアの設計だったが、大面積(φ460mm)でかつ高性能high-Qc(m=5)スーパーミラーの安定的な製作を可能とした。この成果はJ-PARC BL06のビームライン建設やKUR-SANSの高度化などに大きく貢献した。また大型化が容易でかつ比較的安価なガラス基板を用い、応力バランスをとり、集光形状にあった方向に湾曲するシートの製作に成功した(当初開発時はSi基板でかつ湾曲方向が逆であった)。しかし、m<4の比較的low-Qcでかつ曲率があまり大きくないスーパーミラーに関しては、平面から製作したシートの形状制御は困難であり、無電解ニッケルリンメッキ等を用いて形状制御と研磨を行う方が有望であることも確認した。また、本シートのアイディアの展開として、中小型の中性子源の検討も行った。しかしトロイダルミラーのような2次元集光は最近の表面加工技術の進展をもってしても容易ではなく、また製膜も難しく大面積化は大変困難である。本研究では、最近申請者が発明した中性子スーパーミラーシートの応用等により、安価で量産可能な2次元中性子集光ミラーデバイスの製作法に道を拓き、その適用範囲を評価する。さらに、大型中性子源における既存の分光法の高度化だけでなく、中小型中性子源の利用効率の大幅な向上、新しい分光法の開拓に貢献し、低速中性子利用のすそ野を大きく広げる一助となることを目指す。

京大炉のイオンビームスパッタ装置では世界最高レベルの中性子スーパーミラーの製作が可能としていたが、その製膜可能エリアはφ200mm未満であった。しかし、製膜手法の改良により、m=4程度までのは大面積(φ450mm)でも均一でかつ安定的にスーパーミラーの製作を可能とした。またより大面積で膜厚の均一化のテストと応用をかねて、京大炉の小角散乱装置の新規モノクロメーターやBL05(NOP)の超冷中性子発生ドップラーシフターの入射ミラーの供給など、大型中性子源における既存の分光法の高度化だけでなく、中小型中性子源の利用効率の向上にも貢献している。曲面ミラーの評価は申請者が装置責任者をしているJRR-3のMINEビームラインで行う予定であったが、2012年度のJRR-3の稼働は厳しいことが見込まれた。そこで、集光ミラー評価とさらにそれを利用した新分光法開拓を目指して、世界最強の研究用原子炉であるILL(フランス・グルノーブル)のVCNポートで分光器を組み上げ実験を開始している。京大炉のイオンビームスパッタ装置ではφ200mmが最大の製膜エリアの設計だったが、H23年度にφ400mmでも均一で安定的にスーパーミラーの製作を可能とした。これは当初計画にない成果であり、J-PARC BL06ビームライン建設の礎ともなっている。ただしJRR-3 MINEポートを用いた本格的な中性子実験については実施できていない。25年度が最終年度であるため、記入しない。京大炉のイオンビームスパッタ装置の製膜可能エリアを真空槽やイオンガンのサイズの変更無しに4倍以上に大きくしたことは、当初計画には無い成果である。これは単に4倍に量産出来て、コストが下がるだけでなく、大型の曲面基板への製膜が可能となることも示している。そして大面積製膜テストをかねて、京大炉の小角散乱装置の新規モノクロメーターやBL05(NOP)の超冷中性子発生ドップラーシフターの入射ミラーの供給等、大型から中小型中性子源の利用効率の向上に既にいくらかの貢献はしている。原子力機構JRR-3の長期停止により、当初予定していたMINEポートによる長波長中性子を用いた実験が難しい。そこで、京大炉やJ-PARCのBL16(SOFIA)での実験のみならず、ビームタイムを確保しかつ新しい分光法開拓を目指して、世界最強の研究用原子炉であるILL(フランス・グルノーブル)のVCNポートにMIEZE分光器まで組み上げ実験を開始、現在までに、TOF偏極ビームラインやスピン干渉シグナルの取得に成功、低周波ながらMIEZEシグナルの観測にも成功した。スーパーミラーシートの形状コントロールは手こずっているが、圧力を制御するナノプリントを用いて、数センチ平方メートル程度と小さいながらかなりの改善が見られた。原子力機構JRR-3の長期停止により、当初予定していたMINEポートによる長波長中性子を用いた実験ができていない。そのため、このままでは大きな遅れが懸念される。またこの状況は平成24年秋までは続く可能性が大きいため、京大炉でビームタイムを確保するだけでなく、世界最強の中性子源であるILLのVCN(極冷中性子)ポートに長期にビームタイムを確保している。ここで、集光実験を行うだけでなく、それを利用した新しい分光法もトライする。
鶏のマレック病抵抗性機構の免疫遺伝学的研究

マレック病(MD)ウィルス並びに可移植性MD腫瘍細胞MDCC-MSB1-41C株(41C)に対する鶏の抵抗性を種々の免疫学的特性をもつ系統を用いて、個体レベル並びに細胞レベルで解析し、次の結果を得た。1.移植片対宿主反応(GVHR)能について高(H)、低(L)両方向に選抜した系統のMDウィルスに対する抵抗性には反復試験により違いがみられ、両系統間の差はあまりないものと思われた。しかし、41Cに対する抵抗性は常にL>Hの傾向を示した。2.正常時IgG量、家兎血清アルブミンに対する免疫応答能並びに牛血清アルブミンに対するアナフィラキシーショックに対して、それぞれ高低二方向に選抜された系統の抵抗性は何れも、MDウィルスに対してはL>Hであったが、41Cに対しては逆にH>Lとなり、ウィルスに対する抵抗性と腫瘍細胞に対する抵抗性には違いのあることが示唆された。3.抵抗性を細胞レベルで解析する為に、GVHR-H及びL系を用いて、接種前に胸腺摘除を行い、摘除した雛の一部にそれぞれ相手の系統の胸腺を移植し、系統間比較を行った。その結果、感受性系統の胸腺を移植した群では、MDウィルス又は41Cの何れに対しても抵抗性の低下が観察された。4.GVHR-H及びL系を用いて、41C接種前に相手の系統の脾細胞の移入を行った試験では、L系の脾細胞を移入した群では腫瘍増殖の低下が、H系の脾細胞を移入した群では増殖の上昇が観察され、抵抗性とリンパ球との密接な関連性が示唆された。更に、胸腺を摘除した雛に脾細胞を移入した群でも類似の効果が観察された。5.41C移植鶏の血清中に現れる細胞増殖因子105Kgpの濃度をGVHR-H及びL両系間で比較した。系統間の差は認められず、MD抵抗性と105Kgp濃度との間には関連性はないものと推測された。1.移植片対宿主反応(GVHR)能又はIgG量について、それぞれ高(H),低(L)両方向に選抜された4系統(白色レグホン種GVHR-H及びL,白色ロック種IgG-H及びL系)及び牛血清アルブミンに対するアナフィラキシーショックに差のあるファイオミ種の2系統(感受性GSP,非感受性PNP系)の計6系統を用いて、可移植性マレック病腫瘍細胞MSB1-41C株の接種試験を行った。腫瘍細胞の生着率はGVHR系統ではH系>L系,IgG系統ではL系>H系,ファイオミ種ではPNP>GSPとなった。腫瘍の退行率ならびに腫瘍細胞の接種による死亡率においても同様の傾向が観察された。2.これらの系統におけるGVHR能はGVHR,IgG両選抜系統ともH系>L系であり、一方IgG量はIgG系統ではH系>L系,ファイオミではPNP>GSPであった。從って、1で述べた腫瘍細胞に対する抵抗性はGVHR能およびIgG量の何れとも直接的な比例関係は存在しないものと推測された。3.主要組織適合座位(B座位)とマレック病腫瘍細胞抵抗性との関係については、GVHR系統を用いて分析した。【B^9】【B^9】と【B^(11)】【B^(11)】の両遺伝子型を用いて比較したところ、【B^(11)】

【B^(11)】が【B^9】【B^9】より抵抗性であることが示された。4.上記1で述べたように、GVHR系統ではH,L両系統間に抵抗性の差が観察されたので、両系統間で脾細胞の移入を相互に行うことにより、マレック病に対する抵抗性が付与されるか否かについて実験を行った。B遺伝子型は【B^(11)】【B^(11)】のみを用い、例えばH系にL系の脾細胞を移入したものはH(R)・L(D)と表わした。5日齢の雛に7日齢の雛の細胞を移入し、その2日後にMSB1-41C株腫瘍細胞を移植した。腫瘍の増殖度はH>L(R)・H(D)【-!>】H(R)・H(D)【-!>】L>H(R)・L(D)>L(R)・L(D)で、腫瘍の増殖度は移入された脾細胞系統により変化することが観察された。マレック病ウイルス並びに可移植性腫瘍細胞に対する抵抗性を種々の免疫学的特性をもつ系統を用いて分析した.主要な結果は次の通りである.1.正常時IgG量,家免血清アルブミン(RSA)に対する免疫応答能,並びに牛血清アルブミン(BSA)に対するアナフィラキンーショックに対してそれぞれ高低2方向に選抜された系統について,マレック病ウイルスの強毒株であるJM株を用いて,接種試験を行った.マレック病に対する抵抗性はIgG及びRSA選抜系では高系く低系であった.一方,BSAに対するアナフイラキンーについて選抜された系統では,高,低両系統間に差は見られなかった.2.可移植性マレック病腫瘍細胞(41C株)に対する抵抗性では,何れも高系〉低系となり,マレック病に対する抵抗性とは異なっていた.何れの系統においても高系が低系よりマレック病抵抗性を示したということは,腫瘍細胞に対する抵抗性に液性免疫がかなり関与していることを示唆している.3.マレック病抵抗性に対する主要組織適合遺伝子(B遺伝子)の関与の程度について詳しく分析する為に,B遺伝子の異なるcongenicな系統の作出を試み,現在近交系の交難種を用いて戻し交雑を実施中である.4.移植片対宿主反応能について高,低2方向に選抜した系統から得られた初生雛について胸線摘除(Tx)を行い,それに無処理の雛の脾細胞を移入し,7日齢時に41C株を胸筋内に移植した.その結果,高Tx+低脾細胞の組合せでは腫瘍増殖が,低Tx+高脾細胞では腫瘍増殖促進が現われた.このように,腫瘍増殖に及ぼすリンパ球の能力に系統差が観察された.5.41C株移植雛の血清中に観出された腫瘍増殖因子105Kgpについて,その定量法を検討し,ELISA法が有用であることが確認された.本年度はマレック病(MD)抵抗性に及ぼす胸腺摘除と移植の影響並びに可移植性MD腫瘍細胞MSB1ー41C株(41C)移植鶏血清に見出される細胞増殖因子105Kgpについて重点的に分析し、次の結果を得た。1.B遺伝子型が共にB′′B′′で、移植片対宿主反応能について高低二方向に選抜したGVHR-H及びL系統を用いて、それぞれ胸腺摘除群と摘除後他系統の胸腺を移植した群(すなわちH系→L系及びL系→H系)を作り、MDウイルスを接種し、その抵抗性を未処置の対照群と比較した。胸腺摘除群ではH、L両系統とも対照群よりMD抵抗性の低下がみられた。また、他系統の胸腺を移植した群では、感受性系統(L系)の胸腺を移植すると胸腺摘除群より更に抵抗性が減弱したが、抵抗性系統(H系)の胸腺を移植した群では胸腺摘除群とほぼ同じ抵抗性を示した。2.GUHR系統の41C抵抗性はMDウイルスに対する抵抗性とは異なり、L系>H系を示した。41C抵抗性についても、上記と同じ処置群を作り、41Cを接種し、対照群と比較した。
異種間浸透と細胞質多形性を示す南インド洋地域ショウジョウバエ群の学術調査

1.主な採集記録個体数について私達は昭和62年7月南インド洋東アフリカ沖の3島にそれぞれ約1週間滞在し、ショウジョウバエの採集を、スィーピングとトラップ両法によって行った。今回、種の同定を完了したので、その結果を主たる種についてまとめ右表に示した。この結果は、現在論文として学術雑誌に刊行を予定している。1981年の記録(Tsacasら)に分布が報告されていなかった種が多く発見された。特に、Mauritiusのファウナ(昆虫相)の変化は著しく今後とも注意深い観察が望まれる。なお、困難な種同定には、岡田豊日博士のご協力をお願いした。2.異種間浸透を示すヘテロプラズミー(細胞質多形)についてReunion島に由来するD.simulansの系統から私達はS型とM型のmtDNAを同一細胞質にあわせもつ、いわゆるヘテロプラズミーを示すiso雌系統を発見した。このmtDNAの詳細な比較研究からS型とM型は、D.simulansとD.mauritianaの共通祖先種にすでに多型的に存在していたもので、2種の種分岐の時に両型がD.simulansの集団に保有され、M型のみがD.mauritianaに含まれるようになったと理解できることが分った。両種の分岐時間は24万年前と推定できた。したがって、今迄調べて来たヘテロプラズミーは同一種内の2型のmtDNAのヘテロプラズミーと考えられる。3.自然集団におけるヘテロプラズミーの存在(D.simulans)について新しくレユニオン島から採集した個体のうち、約150iso雌系統を確立し実験室系統とした。これらの系統についてmtDNAの制限酵素地図を作成しヘテロプラズミーの有無を調査した。今迄に約100系統調べたがヘテロプラズミーを確認出来なかった。他の制限酵素も組み合せ全系統についてさらに分析を続行している。ヘテロプラズミーの起源、ヘテロプラズミーを示す個体が現在もレユニオンの自然集団に生息しているか、一過性のものであったか、あるいはマダガスカルにむしろ多く見出されるものか、今後さらに採集個体を得て追求する必要がある。4.ヘテロプラズミーの起源についてヘテロプラズミーの存在は、ミトコンドリアが雄から伝わる可能性を強く示すものであり、従来のミトコンドリア遺伝の常識に反する。そこで、この可能性を検討するために、実験室において戻し交配を繰り返し、雄からの伝達をテスト中であるが、予備調査からヘテロプラズミー個体を得ることが出来た。6.その他Zaprionus属の性的隔離の調査からセイシェルとレユニオンのZ.indianの間には種形成が進みつつあることが分かった。
ロシアと中央アジアにおける労働力移動とジェンダーの変容：少子高齢化社会を背景に

ロシアと中央アジアにおける労働力移動とジェンダーの変容を高齢者ケアの観点から明らかにするために、文献資料および現地での聞き取り調査結果を使用した。その結果、高齢者介護に関する法律は実在し、公的介護施設や在宅介護制度も整っているようではあるものの、非常に限られた高齢者しか実際には利用できないことが明らかになった。多くの場合、親戚を含めた家族総動員で高齢者介護をやりくりしており、負担は主に女性が担っている。また、ロシアでは公的および民間のケアを利用せず、ツテを使って個人的にシジェルカとして高齢者介護をケアする人を探すという方法が広がっている。今後、移民労働者が高齢者介護を担う可能性も排除できない。本科研では、ロシアと中央アジアにおける労働力移動とジェンダーの変容について明らかにする。特に、少子高齢化が進行するロシアにおける中央アジアからの女性移民労働者に焦点を当てる。具体的な研究項目は、A)ロシアにおける中央アジアからの女性労働移民の実態について解明、B)ロシアで就労する移民女性の母国におけるジェンダーの変容について分析、C)女性移民労働によるロシアのジェンダー状況の変容を把握することである。平成25年度は、以上3つの課題の解明のために、ロシアとタジキスタンで現地調査を中心とする研究活動を行った。移民受け入れ国であるロシアでは、ペテルブルグにおいて、サンクトペテルブルグ国立大学、団体子供の家(NPO)、ムスリム新聞社「トラン」、ユダヤ人センター、独立社会調査センター、および移民女性へのインタビューを実施した。中央アジアからの移民の置かれている状況および特に女性移民の労働状況についていくつかの事例を聞き取り調査から得ることができた。また、移民送り出し国であるタジキスタンのフジャンドでは、市内、農村地域においてロシアで仕事をしたことのある家族を中心に男女ともに聞き取り調査を行った。まだ、サンプル数はロシア、タジキスタンとも少ないが、大きな傾向は今回の調査で把握することができ、成果を得られた。今後この調査をさらに進めていくことで本課題の解明へ接近することができると確信している。平成25年度の研究成果の一部を2つの国際シンポジウムの招待講演で発表し、国内のロシア・東欧学会のパネル・ディスカッションにおいても特別講演でスピーチを行った。また、研究成果を断片的に『ロシアで生きるソ連解体と女性たち』で公表した。平成26年8月12日24日にロシアのペテルブルグで現地調査を行った。昨年から継続しているウズベキスタンおよびタジキスタンからの移民女性へインタビュー調査を行った。今回の調査ではウズベキスタン出身の女性が多かった。具体的には、サマルカンド、ブハラ、ウルゲンチである。ロシアで移民女性の就く職業としては、掃除婦、キヨスクの野菜や果物の売り子が最も多く、さらにアルバイトで高齢者の家政婦の仕事もしている人もいる。調査では移民の法的な支援を行っている弁護士に救済措置について聞いた。また、ペテルブルグ医療・社会プログラム慈善社会財団「人道的アクション」代表にもインタビューした。団体は、麻薬中毒女性、風俗で働いている女性への救済を行っている。女性の中には移民もいるそうだ。また、平成27年3月23日30日には、ペテルブルグとタジキスタンのフジャンドで現地調査を実施した。フジャンドでは、タジキスタンに独特の行政街区であるマハリャのボランティア慈善団体の女性委員にマハリャでの生活とロシアへの出稼ぎの実態について聞いた。また、山岳地帯のシャフリスタン地区で経済貿易大学教授に地域の移民の現状についてお話を伺った。ペテルブルグでは、ロシアのホームレス支援慈善団体の法律担当者に移民とホームレスとの関係および高齢化対策に関する新しい法律について聞いた。また、ユダヤ人のための高齢者介護サービスを行っているNPO代表に、ペテルブルグにおける高齢者介護の実情についてうかがった。このNPOはペテルブルグ市と契約してユダヤ人以外の高齢者のケアも行っている。2015年1月から新しい社会サービスに関する法律が施行され、これについても資料を入手した。以上のような調査を行うことにより本科研の課題であるロシアと中央アジアにおける労働移動とジェンダーの変容についてかなり接近することができた。平成27年度には、ペテルブルグ大学のホドレバ氏へのインタビューを3月11日行った。2015年1月から始まった移民がロシアで労働するための許可書を取得するためのロシア語等のテストの状況、それによって移民の置かれている状況がどのように変化しているのかについてうかがった。また、3月12日はこれまでに家政婦を雇って身内の高齢者介護をしていたロシア人、またヘルパーとして働いていたロシア人女性にインタビューした。3月13日はペテルブルグ郊外のヴイレッツという町に住んでいるロシア人老夫妻に介護についてインタビューした。3月14日はロシアの公共図書館で資料収集をした。また、3月14日はロシア郊外のクロンシュタットの状況について調査を行った。また同日ロシアで現在よく聞かれる高齢者が自分の家と引き換えに介護を受けたりするレンタという制度について不動産鑑定士に話をきいた。3月16日はロシアの古文書で資料収集と自分の親を介護している女性にインタビューした。3月17日はペテルブルグに住む80歳近い高齢者夫婦へインタビューを行った。またユダヤ人協会の所長に協会の介護部門のお話しを聞くとともに2015年1月に施行された新しい社会保障に関する法律後の状況についてお話を伺った。今回の調査により2015年1月に施行された2つの法律採択後の介護状況と移民の状況について詳しく知ることができた。

その結果、高齢者介護に関する法律は実在し、公的介護施設や在宅介護制度も整っているようではあるものの、非常に限られた高齢者しか実際には利用できないことが明らかになった。多くの場合、親戚を含めた家族総動員で高齢者介護をやりくりしており、負担は主に女性が担っている。また、ロシアでは公的および民間のケアを利用せず、ツテを使って個人的にシジェルカとして高齢者介護をケアする人を探すという方法が広がっている。今後、移民労働者が高齢者介護を担う可能性も排除できない。平成25,26年度にロシアのサンクトペテルブルグおよびタジキスタンのフジャンドにおいて現地調査を行った。その結果、特に高齢化によって高齢者の介護をロシアでは女性が行っていることが一般的であり、仕事をしていても介護は家庭で行っている。その理由として、ロシアでは公的な介護システムを利用できる人がかなり制限されいることがあげられる。また、それ以外に高齢者介護は家庭の仕事であるといった規範も根強い。しかし、経済的な理由もあり女性はソ連時代と同様に仕事をしている。そのような中で家族だけでは高齢者介護を行うことができず、外部の手を借りることになる。そこでシジェルカと呼ばれる家政婦を雇用することが見られる。このシジェルカとして昨今は中央アジからの移民も働いている。これはロシア人に比べて安い労働力だからである。一方、ロシアにおける移民女性の生活、労働に関する実態も現地調査によりかなり明らかになってきた。以前はロシアにおける中央アジアからの移民は男性が中心であったが現在は夫に同伴する妻や、単独で出稼ぎに来る女性もままいる。なぜ中央アジアの女性たちがロシアへとやってくるのかという点に関しては、タジキスタンのフジャンドでの聞き取り調査から、経済的な困難さ、よりよい生活のためにということが明らかになった。以上のようにロシアでの現地調査とタジキスタンでの現地調査の双方の結果から、片方の側の事情だけではないトーナルな構造を把握することができた。課題達成のためにこの2年間でおおむね計画通りに進んでいる。地域研究本年度は研究の最終年度である。現在は前年度の最後に行った3月のタジキスタンとペテルブルグの調査結果を検討、分析している。2015年1月1日にロシアでは移民に関する新しい法律(移民に対してロシア語、ロシアの歴史などの試験を課した)と社会保障に関する法律が施行された。二つの法律は分野が異なるために偶然に施行年月日が重なったに過ぎないが、本課題には双方の法律は影響を与え、最新法律に即して現状がどのようになっていくかを注視し分析することが必要である。従って、これらの法律について熟読することがまず必要であり、実際の運用についての調査は8月に行う予定である。
脳虚血病態の解析と分子イメージング:プロスタグランジン合成酵素を標的として

分子生物学的研究にインビボ分子イメージングの手法を組み入れ、(1)局所脳虚血病態に対するシクロオキシゲナーゼ-2 (COX-2)の組織障害性作用と脳組織再生作用を解析し、COX-2の作用とその阻害薬の役割を明らかにすること、(2)COX-2を標的とした分子イメージング法による脳虚血病態診断の可能性を探ることを目的として研究を遂行し、以下の成果を得た。1.脳虚血モデル動物における脳循環代謝、神経受容体機能の経時的変化の検討ベンゾジアゼピン受容体機能が保たれた虚血領域では、DNA断片化や細胞構築の破壊は見られなかった。他方、ベンゾジアゼピン受容体機能低下の見られない虚血領域にもCOX-2発現が認められた。2.脳虚血モデル動物におけるCOX-2,プロスタグランジン類の経時的変化の検討(1)COX-2 mRNA, COX-2 proteinの発現パターンは、血流低下の著しい虚血中心部とその周辺部では明らかに異なっており、COX-2発現が虚血の程度と時間によりダイナミックに変化していることが示唆された。(2)選択的COX-2阻害薬によるCOX-2活性の抑制は、SD誘発側皮質のIL1β、IL6発現とS100A9遺伝子の両側性発現抑制を伴うことが示唆された。3.COX-2を標的とした分子イメージング法に関する検討分子生物学的研究にインビボ分子イメージングの手法を組み入れ、(1)局所脳虚血病態に対するシクロオキシゲナーゼ-2 (COX-2)の組織障害性作用と脳組織再生作用を解析し、COX-2の作用とその阻害薬の役割を明らかにすること、(2)COX-2を標的とした分子イメージング法による脳虚血病態診断の可能性を探ることを目的として研究を遂行し、以下の成果を得た。3.COX-2を標的とした分子イメージング法に関する検討本研究では、分子生物学的研究にインビボ分子イメージングの手法を組み入れ、(1)局所脳虚血病態に対するシクロオキシゲナーゼ-2(COX-2)の組織障害性作用と脳組織再生作用を解析し、COX-2の作用とその阻害薬の役割を明らかにすること、及び、(2)COX-2を標的とした分子イメージング法による脳虚血病態診断の可能性を探ることを目的とし、以下の検討を行った。1.局所脳虚血モデルラットにおける脳循環代謝、神経受容体機能:COX-2発現との対比局所脳虚血及び拡散性抑制(Spreading Depression, SD)誘発モデルラットを作成し、今回購入したレーザー血流計により血流を測定した。SD誘発モデルラットの作成には、今回購入した気動式骨手術器械を用いた。また、放射性同位元素で標識したIomazenil(IMZ)を用いて、今回購入したシールドボックス内でのオートラジオグラフィー法により神経細胞機能(中枢性ベンゾジアゼピン受容体機能)を測定し、COX2の誘導および組織傷害の進展との関連について調べた。その結果、IMZ分布が保たれた虚血領域では、DNA断片化や細胞構築の破壊は見られなかった。他方、IMZ分布の低下、すなわちベンゾジアゼピン受容体機能低下の見られない虚血領域にもCOX-2発現が認められた。2.局所脳虚血モデルラットにおけるCOX-2,プロスタグランジン類の発現:脳血流量との対比局所脳虚血モデルラットを作成し、COX-2 mRNA, COX-2 protein、プロスタグランジン類を測定し、脳血流量の変化と対比した。その結果、COX-2 mRNA, COX-2 proteinの発現パターンは、血流低下の著しい虚血中心部とその周辺部では明らかに異なっており、COX-2発現が虚血の程度と時間によりダイナミックに変化していることが示唆された。本研究では、分子生物学的研究にインビボ分子イメージングの手法を組み入れ、(1)局所脳虚血病態に対するシクロオキシゲナーゼ-2(COX-2)の組織障害性作用と脳組織再生作用を解析し、COX-2の作用とその阻害薬の役割を明らかにすること、及び、(2)COX-2を標的とした分子イメージング法による脳虚血病態診断の可能性を探ることを目的とし、以下の検討を行った。1.選択的COX-2阻害薬の作用に関する検討ラットを用い、COX-2阻害薬前投与下あるいは非投与下に拡散性抑制(Spreading Depression, SD)を誘発した。誘発されたSDは、今回購入したポリグラフシステム、生体電気計測システムを用いてモニターした。Microarray analysisによりSD関連遺伝子としてMAPK phosphataseとS100A9遺伝子がスクリーニングされた。

これらとCOX-2、IL1β、IL6に対してRT-PCRを行った結果、いずれの遺伝子も、SD誘発ラットの誘発側皮質では対照群より有意に高かった。COX-2、IL1β、IL6、MAPK phosphataseはSD誘発側で有意に発現増加していたが、S100A9遺伝子発現には左右差はなかった。COX-2阻害薬前投与により、SD誘発側IL1β、IL6、両側のS100A9遺伝子発現が有意に抑制された。これらの結果から、選択的COX-2阻害薬によるCOX-2活性の抑制は、SD誘発側皮質のIL1β、IL6発現とS100A9遺伝子の両側性発現抑制を伴うことが示唆された。2.COX-2を標的とした分子イメージング法に関する検討構造-活性相関学的検討から選択的COX-2阻害薬であるCelecoxibのヨウ素置換体をデザインした。さらに、放射性ヨウ素標識体を得るため、数種の標識前駆物質の合成、及びヨウ素置換体の合成を試み、これらに成功した。現在、放射牲ヨウ素標識法に関する検討を実施中である。本研究では、分子生物学的研究にインビボ分子イメージングの手法を組み入れ、(1)局所脳虚血病態に対するシクロオキシゲナーゼ-2(COX-2)の組織障害性作用と脳組織再生作用を解析し、COX-2の作用とその阻害薬の役割を明らかにすること、及び、(2)COX-2を標的とした分子イメージング法による脳虚血病態診断の可能性を探ることを目的とし、以下の検討を行った。1.ラット局所脳虚血モデルにおける炎症関連遺伝子群の経時的発現変動ラット局所脳虚血モデルにおいて、CBF低下、虚血時間とCOX-2を含めた炎症関連遺伝子群の発現変動との関連について検討した。今回検討した遺伝子群の経時的発現パターンは以下の通りである。虚血1時間で発現誘導されたのは,c-fos、IL1β,IL6,腫瘍壊死因子α(TNFα),COX-2,プロスタグランジンE2合成酵素(mPGES),MAP kinase phosphataseであった。血管内皮細胞増殖因子(VEGF)は3時間で誘導され,6から12時間で顕著に増加した。核内受容体PPARαは虚血とともに増加することなく2時間から減少し,24時間ではほとんど消失した。このように、ラット局所脳虚血モデルにおいて、COX-2を含めた炎症関連遺伝子群の発現は虚血時間にともなって大きく変動することを示し、それらの発現パターンを明らかにした。2.COX-2を標的とした分子イメージング法に関する検討構造-活性相関学的検討から、選択的COX-2阻害薬であるCelecoxibのヨウ素置換体(IMTP)をデザインし、昨年度までに標識前駆物質の合成に成功した。今回、IMTPの分子イメージング剤としての有用性を検討した結果、IMTPがCOX-2に対して高い選択性と阻害活性を有することを見い出し、その放射性ヨウ素標識に成功した。
腎遠位尿細管培養細胞に対する抗利尿ホルモン作用の分子機構

アフリカツメガエル腎遠位尿細管由来の培養細胞(A6細胞)にパッチクランプ法を用いて、抗利尿ホルモン作用の分子レベルの解析を試みた。今回はCO_2インキュベータ等の設定条件が哺乳動物と異なりA6細胞の使用が困難となったために、アフリカツメガエルと同様の両性類(食用蛙)の単離尿細管細胞を用いて実験した。この細胞を用いた実験の報告はあまりなく、当教室でも細胞条件を決定するためにかなりの時間を費やした。そのため現時点では、抗利尿ホルモン作用実験の予備段階として、単離尿細管細胞に存在するチャネルの解析を行った。実験には、コラゲナーゼ処理した食用蛙二重潅流腎から尿細管細胞を単離して用いた。電極の先端径は2mum以下でシール抵抗は50OMEGA以上のもので実験した。1.まずwhole-cell recordingを行って、細胞膜全コンダクタンスを測定しながらイオンチャネル阻害剤を投与すると、5mMBa溶液でコンダクタンスが減少し、溶液K濃度を増すとコンダクタンスが増大した。これよりKチャネルの存在が示された。2.次に、cell-attached patchにより3種類のチャネルが出現し、inside-out patchで電流電圧曲線を求めると、これらのチャネルがそれぞれ約250pS、70pS、20pSの単一チャネルコンダクタンスを有するKチャネルであることが分かった。3.70pSのKチャネルは内向き整流性があり、細胞内酸性化でチャネル活性は抑制され、アルカリで活性化された。以上の結果より、食用蛙単離尿細管細胞には、単一チャネルコンダクタンスが約250pS,70pS、20pSのKチャネルが存在し、70pSのチャネルはpH感受性を有することが分かった(第71回日本生理学会大会発表)。これらのデータを踏まえて、次の段階では抗利尿ホルモンの作用を調べる。
QCMシステムとSPRシステムによる物質の吸着挙動のメカニズム解明のための一検討

○研究目的:近年、医療や生命科学の分野で生体分子間相互作用のリアルタイム解析が必要であり、このような分野では、SPR(Surface Plasmon Resonance:表面プラズモン共鳴)を用いたBiacoreによる生体分子間相互作用解析がポピュラーである。一方でSPRよりも小型・安価で使いやすいと最近注目をあびつつあるQCM(Quartz Crystal Microbalance)も生体分子間相互作用リアルタイム解析に使われている。QCMとSPRは原理の違いから、求められた解離定数に差が生じることがあるがその理由はまだよくわかっていない。また、QCMシステムによっては抗原抗体反応を行わせる前段階で周波数が安定しないということも起きている。この原因もよくわかっていない。今回は前述2種類の測定システムにより決定された解離定数等の比較検討を行い、その違いと原因を明らかにし、分子間相互作用や吸着のメカニズムを詳細に検討することを目的とした。○研究方法:今回新たに共振型QCMの共振周波数特性測定ならびに電気的等価回路定数解析を行うためのPCをコントローラとした測定システムを構築した。従来の発振型QCMを用いて抗原抗体反応の検出最適条件を検討した。SPRにおいても最適条件の検討を行った。発振型QCM、SPRの検出条件をもとにし共振型QCMにおいて抗原抗体反応の検出を検討した。○研究成果:抗原抗体反応を検出するためにQCMを用いる場合、温度の影響はもとより、バッファーならびにサンプルの送液速度、抗原濃度、抗体濃度等が測定データに及ぼす影響がかなり大きいことが示唆された。
AYA世代がん患者の意向に即した医療者へのコミュニケーション技術プログラムの開発

思春期・若年成人(Adolescent and young adult;以下AYA)世代(15歳から39歳の若年)は就学・就労や妊孕性等世代特異的な問題を抱えているが症例が少ない希少がんのため、世界的に実態が明らかではなく、医療者はコミュニケーションに困難を感じている。本研究の目的は、AYA世代がん患者の医療者とのコミュニケーションに対する意向を明らかにし、AYA世代の患者の意向に基づく医療者へのコミュニケーション学習プログラムを開発し、その有効性を検討することである。方法は、研究1AYA世代がん患者を対象とした質問票を用いたインターネット調査により、医療者とのコミュニケーションへの意向と関連要因を検討する。研究2AYA世代がん患者の診療に携わる医療者および精神保健福祉の専門家でAYA世代がん患者とのコミュニケーション技術研修プログラムを開発する。研究3医療者を対象に開発された研修プログラムを実施し、その有用性を検討する。本年度は、研究116歳から39歳のがんで通院中の患者を対象とした医療者とのコミュニケーションへの意向に関する調査を行い、今後の治療方針も伝える(91%)、質問に答える(90%)、利用できる治療法をすべて伝える(89%)への意向が高いことを示唆した。研究2AYA世代がん患者の診療に携わる医療者および精神保健福祉の専門家32名による組織体制を構築し、コミュニケーション技術研修プログラムで扱うべき内容、ロールプレイの設定、シナリオについて話し合った。研究1: 16-39歳のがんの診断を受けて医療機関を受診中の者対象にWebでコミュニケーションに対する意向(70項目)に関する調査を配信した。参加者は206名、男性26名(12.6%)、女性180名(87.4%)、調査時の平均年齢33.7±4.3(22-39)歳、がん診断時の年齢29歳以下111名、30歳代95名であった。再発・転移なし164名(79.6%)、がん診断からの1年未満33名(15.9%)、1年以上5年未満105名(51.0%)、5年以上68名(33.0%)、PS1 59名(28.6%)であった。伝えられた最も悪い知らせは、がんの診断136名(66.0%)、がんの再発・転移44名(21.4%)、がんの進行13名(6.3%)、治療を中止すること2名(1.0%)、その他(妊孕性がなくなること、がんが治らないこと、余命を伝えられたことなど)11名(5.3%)であった。意向の高いコミュニケーションは、「今後の治療方針も伝える」、「あなたの質問にも答える」であった。一方、意向の低いコミュニケーションは、「あいまいに伝える」、「好ましくない知らせのみを伝える」、「いらいらした様子で対応する」であった。研究2:AYA世代がん患者の診療に携わる医療者および精神保健福祉の専門家による会議を2回開催した。日本サイコオンコロジー学会主催コミュニケーション技術研修会のためのファシリテーター養成講習会修了者118名を対象に参加者を募り、第1回会議では、参加者は16名(医師12名、心理士2名、看護師1名、その他1名)、第2回会議では、参加者は30名(医師22名、心理士7名、看護師1名)であった。コミュニケーション技術研修プログラムで扱うべき内容、ロールプレイの設定、シナリオについて話し合うとともに、会議参加者を含む組織委員会を構築した。研究1:AYA世代患者のコミュニケーションの意向と関連要因を検討するために主要評価項目を従属変数、副次評価項目である年齢、性別、婚姻状況、子どもの有無、就業・就学状況、教育経験年数、がん種、再発・転移の有無、治療の有無、ソーシャルサポート、QOL、K6の12変数を従属変数とする重回帰分析を行う。研究2:AYA世代がん患者と医療者のコミュニケーション技術研修プログラムを開発するための委員会を構築し、プログラムを作成する。研究3:研究2において開発されたプログラムを日本サイコオンコロジー学会主催コミュニケーション技術研修会のためのファシリテーター養成講習会修了者を対象に実施し、プログラム参加前後の参加者のAYA世代とのコミュニケーションに対する自己効力感、共感能力、プログラムの有用性を評価する。