hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
病原性酵母Candida albicansにおける染色体再配列機構の解析

日和見真菌感染の原因菌として最も高い頻度で出現するカンジダ酵母の病原性のひとつに形質の高い変異性があげられており、パルスフィールド電気泳動による染色体核型の変化との関係が指摘されている。われわれは、この核型の多様性は染色体再配列によるものと考え、これに関与すると推測される反復配列RPSを見いだし、その構造と機能の解析をおこなった。他方、多数の臨床分離株について核型の多様性を調べ、疫学への応用の可能性についても研究した。1.さきに、Candida albicans染色体より分離同定された反復配列RPSについて、ここでは、個々の染色体からRPS配列をクローニングしそれらの塩基配列を決定し比較した。RPSはさらに短い反復配列を含んでおり、その種類と数の相異がより高次の多様性をもたらすことを明らかにした。そして、この構造がひとのセントロメアに類似していることを指摘した。2.RPSの染色体再配列に関与する可能性を検討するために、RPSの染色体上での位置を決め、6番染色体のRPS近傍領域の物理的地図の作成をおこなった。3.入院患者から分離された多数のCandida albicans株について電気泳動核型を比較した結果、由来する臨床材料、患者の病棟などと有意な関係は見いだされなかったが、多くの分離株はFC18株の核型に類似していた。4.同一患者から反復して分離されたCandida酵母の核型は、ほとんど同一であることが示された。5.白血病患者と付添いの親から分離したC.albicansの株について、電気泳動核型、RFLP、RPSのサザンハイブリダイゼーションによる解析を行うことによって、患者と親との間の感染経路を示すことができた。われわれは、病原性酵母Candida albicansの電気泳動核型が菌種、菌株によって変化していることに注目し、これが染色体再配列によると想定し、その機構の解析を進めている。とくに、2番と6番染色体のサイズの変化が著しいが、2番染色体の変化は、r-DNA領域における高頻度の組換えによること、6番染色体からは約2kbの反復配列RPSを検出し、その塩基配列を決定した。本年度は、この2kbの反復配列RPSおよび類似配列の染色体上での分布について、とくにセントロメア領域との関連の可能性について研究を行った。1。RPSの塩基配列構造がひとや分裂酵母などのセントロメア配列に類似しているので、セントロメアに関連があるか検証するために、対数期の細胞についてfluorescent in situ hibridization(FISH)と抗チュウブリン抗体を用いたスピンドル染色の二重染色を行なった。その結果、SPBの分裂以前にはRPSは核中に分散し、SPBが複製分裂し、その間にスピンドルが発達すると、RPSはSPBの近傍に位置して観察された。このことから、RPSはセントロメアないしはその近くに局在していることが明らかにされた。2。6番染色体におけるRPS反復配列の局在。C.albicans FC18株の6番染色体を切り出し、種々の制限酵素による切断片の電気泳動とRPSによるhybridizationによってRPSの位置を確定することを行なった。まず、RPSは、SfiIで切断された760kbと510kbの二つのテロメアを含む大きな断片に挟まれた間にかたまってあることが分かり、ついで、RPSのなかに一個の切断部位をもつSmaIで、RPS集団の境界域をふくむ130と6.1kbの断片を得て、それらの順序を決定した。1.Candida albicansの染色体DNAをパルスフィールド電気泳動法で分離したときのパターン(電気泳動核型)は、菌種、菌株によって相異がみられる。

われわれは前年度にひきつづき、この核型の多様性の基盤にある染色体再配列の機構を解明することを目的として、反復配列近傍の機構と機能の解析を行った。(1)さきに見出した反復配列RPSとその近傍領域がほとんどの染色体上にある限られた領域に分布していることを確認し、6番染色体について、RPSの端を含む特異的断片をクローニングし、制限酵素断片地図を作成した。(2)反復配列の構造がヒトのセントロメア構造に類似しているので、セントロメア機能の可能性を検証した。YR_Pタイプのベクターに、RPSを複数個含む配列、RPSの近傍を含む配列を導入し、Candida albicansへtransformして、これらが細胞分裂で低頻度で安定化するかどうかを調べたが、これまでの所、満足すべき結果を得ることができなかった。2.核型を疫学的研究へ応用する試みをおこなった。(1)入院患者から分離された多数のカンジタ酵母菌株について電気泳動核型を比較したが、臨床株の由来した材料や病棟との間に有意な関係は認められなかった。(2)同一人から反復採取された菌株は、多くの場合同じ核型を示した。(3)RFLPとサザンハイブリダイゼーションの結果と組み合わせて、白血病患児と付そ添いの親との間に、真菌感染の有無を確定することができた。3.最終年度であるので、上記の研究成果を論文として発表した。
図形感覚を育成するためにICTを活用した算数科授業の実証的研究

本研究は、図形感覚を育成するために、ICTを活用した教材および教育プログラムを開発し、その効果を検証した。そこで、私は、「ICTを“自律性・共有性・保存性"という特性を活かして活用した図形の授業は、児童の図形感覚を向上する」という仮説を立て、ICTを活用した教材および教育プログラムで検証した。ICTの特性を活かした算数授業について、教科書の中にある図形領域の問題を中心に取り扱い、授業の中で、適切な時間に適切な量だけ、タブレットを与え、主体的に学習の場を設定する(自律性)。また、授業の中で、すべての児童が同じ「学びの場」の中で考えるために、タブレットを用いることで問題の焦点化をめざし、価値観の交流を行う(共有性)。また、必要に応じて、クラス全体で、学習したもの(黒板や資料など)を手軽に振り返ることができる(保存性)。これらの一連のプログラムにより、図形感覚の育成ができると考えた。ICT機器を活用した学習において、毎授業後におこなった形成的評価からは、子どもたち一人ひとりが、自分のめあてを持って、主体的に学習にとりくんだことがみてとれた。それは、学年の後半になるにつれて顕著な結果となってあらわれた。ICT機器の操作に慣れたということのみならず、「具体物操作」をポートフォリオ化していくことやデジタルコンテンツを活用した学習の有用性を子ども達自身が感じることができた結果といえよう。また、単元テストにおいてルーブリック(学習到達度を示す評価基準を観点と尺度からなる表として示したもの)で調査した結果、図形領域においての思考力が向上していた。特に、念頭操作を問う問題についての伸びが確認できた。デジタルコンテンツや具体物操作などをタブレットに保存した上で、タブレット端末や電子黒板から流れる映像を媒介に、算数授業を日々行った積み重ねの効果だと振り返る。
ポータブルEPR放射線被ばく線量測定装置の生体への応用

EPRポータブル装置の実用化に向けた装置の試験運用とランティアからの計測の評価および検出限界の解析を行った。福島県内でボランティア34名から計測を実施した。計測結果は、信号強度/PDT標準信号比で、0.087±0.051(相対値)であり、高線量被ばくを示唆する信号は確認されなかった。歯エナメル質内EPRラジカル信号からの被ばく線量検出感度は、1Gy曝露で感度77.0%、特異性78.0%、2Gy曝露で、感度99.9%、特異性99.8%である。トリアージとして、高線量被ばく(>2Gyから4Gy)の抽出は十分可能であると考えられた。研究を通して同装置のトリアージ応用の現場での有用性を確認した。(1)口腔内共振器の開発:ポータブル装置用の前歯適応型形式のアプリケータを作成し、中切歯唇側歯面に接触するExternal loop resonatorを改良した。共振器の製作は北海道大学平田拓が行った。改良型共振器は、感度的に従来の共振器より訳1.8倍の感度が得られている。(2)EPRコンソール改造:検出磁場を作り出すコイル型マグネットおよびマイクロ波発振用ブリッジを日本での電圧(115V→100V, 60Hz)に変更するための電源回路を含め、改造を行うと伴に、AFC(自動周波数制御)回路の修正を行った。また、電源からの高周波ノイズを低減すべく、高周波カットフィルター電源タップを導入した。(3)ボランティアからの計測平成27年3月27日から29日福島県伊達市霊山町愛育保育所講堂をお借りしてEPR装置を設置して、ボランティアからの計測を実施した。対象は、原発事故時に福島県飯館村およびその近在に在住していた16名(男性9名女性7名計16名、平均年齢56.4歳)で。計測結果は、toothAMP/PDT比で0.08659±0.05015であった。1名にやや信号強度が高いボランティアの方がおられた。現在詳細な調査を実施している。(3)信号分析評価自然放射線曝露だけでなく、歯科医療に関連した被ばく(診断用の歯科用X線撮影)はエナメル内にCO33-ラジカルを比較的高率に発生させる。この既存被曝線量は、特に低線量被曝域では、バックグラウンドの信号として検出されるため被曝事故後に被曝線量を測定する際にはこの信号が重なってきて信号強度が若干大きくなり誤差が生じる。ボランティアの方の歯科治療歴を検討し、バックグランドに与える影響を評価した。歯科用X線による前歯エナメル質内のラジカル形成の影響も否定できなかった。1)口腔内共振器の改良:日本人の前歯により適応したループ径が小さい共振器(8.0mmから6.0mm)に改良し、日本人上顎中切歯の唇面に可及的に密着する形状(従来の径ループに湾曲を持たせた)にし、相対的検出感度の向上を図った。昨年度改良した共振器より検出感度が向上した。特異度を向上させるために効果的な改良であった。2)エナメル質厚みが信号に与える影響の評価:マイクロCTを用い切端から歯頸部に至るエナメル質の厚みの分布とEPR信号強度の関連を調べ、最終的に0.3mmの厚みの違いが検出信号に約1.3倍程度の影響を与えることを確認した。今後中切歯唇面での測定部位の条件を画一化する必要性が確認された。3)ボランティアからのEPR信号計測:平成27年5月29日から31日福島市松川工業団地内飯舘村避難所集会室、平成27年8月18日19日福島市新浜町の某保育所にて、ポータブルEPR生体計測装置を設置、ボランティアから計測を実施した。同年3月の福島県伊達市霊山町での計測を含め、合計34名の被験者(男性13名,女性21名,平均年齢50.2歳)からデータ採取を行った。EPR/PDT信号強度比0.087±0.051であり、高線量被曝を示唆する信号は認めなかった。また計測を通じて、避難住民の方を含め、被爆に関連した精神的不安に対し、安心感を与えることができた。4)研究室外部での計測の問題点の確認:今回の計測で、周辺での家電製品の使用や測定場所での電磁波強度が計測信号のS/Nと関係することを確認した。外部環境では、S/Nが低下し、最終的な検出感度が低下する。国立保健医療科学院の電波暗室(高周波・電磁波遮蔽暗室)では逆にS/Nが2倍程度向上することを確認した。従って、このS/Nに影響を与える因子を除外することが今後、現場での運用にあたり改善すべき点であることが確認された。福島での計測は予定通り順調に進んでいる。装置が米国で開発されたもので、計測コンソールの、マイクロ波ブリッジ、モジュレーションアンプ、電磁石動作電源など全て米国での電源規格(115V, 60Hz)に昇圧させる必要があるが、昇圧トランスの不調があり、さらに電源からのノイズを減少させるために、安定化電源を導入し、装置全体の調整が必要でやや時間を要した。現地でのボランティアの確保等、地元コーディネータや福島の被ばく関連コミュニティーの協力が得られ、順調に計測が実施できた。

8月の気温が高い状況での計測で、室温が30度を超える状況では、冷却能力が不足し、装置が停止することが発覚した。この原因究明に時間を要した。現時点では、エアコン等で、室温を25度程度に強制的に保つことが必要である。EPRポータブル装置の実用化に向けた装置の試験運用とランティアからの計測の評価および検出限界の解析を行った。現在の同装置のex vivo(抜去歯での算出値)条件で、歯エナメル質内EPRラジカル信号からの被ばく線量検出感度は、1Gy曝露で感度77.0%、特異性78.0%、2Gy曝露で、感度99.9%、特異性99.8%である。生体の場合、感度は若干低下するが、トリアージとして、高線量被ばく(>2Gyから4Gy)の抽出は十分可能であると考えられた。装置の組み立てや調整を含めた実際の運用を想定した方法で、福島県内の保育所、避難仮設住宅内集会所、幼稚園講堂に装置を運搬し、ボランティア34名から計測を実施した。計測結果は、信号強度/PDT標準信号比(EPR/PDT)で、0.087±0.051(相対値)であり、高線量被ばくを示唆する信号は確認されなかった。また同時に問題点も明らかとなった。室温が30度を超える状況での掃引アンプの連続安定性の低下、一般家庭用電源からのノイズの混入について改善の余地があることが明らかとなった。特に、信号ノイズ比の改善は、最終的検出感度に影響するために環境電磁波のシールドは必要であることが確認された。最終年度では、紫外線が解離性放射線と同様にエナメル質ハイドロキシアパタイト結晶格子内にラジカルを発生させることは知られており、本EPRポータブル装置は、原理上、上顎前歯を測定対象にしてこともあり、太陽光に晒されやすいので、紫外線の影響を調査した。その結果UV-C領域の曝露では、短時間にラジカルが発生するが、UV-A,B領域紫外線では10年単位の曝露でないとL-bandでは可視化できうるEPR信号は発生しないことが確認された。本研究を通して同装置のトリアージ応用の有用性を確認するとともに、有事の際の使用に際し、実検出感度を向上させ安定した動作を確立するための今後の改良点も明らかとなった。福島県内でボランティア34名から計測を実施した。計測結果は、信号強度/PDT標準信号比で、0.087±0.051(相対値)であり、高線量被ばくを示唆する信号は確認されなかった。歯エナメル質内EPRラジカル信号からの被ばく線量検出感度は、1Gy曝露で感度77.0%、特異性78.0%、2Gy曝露で、感度99.9%、特異性99.8%である。トリアージとして、高線量被ばく(>2Gyから4Gy)の抽出は十分可能であると考えられた。研究を通して同装置のトリアージ応用の現場での有用性を確認した。共振器の改良と基礎データの取得、コンソールの改良、制御プログラムのバージョンアップ、制御PCの更新に予定より時間がかかり、実際の現地(福島県)での計測が予定より若干遅れたが、EPR装置自体が極めて安定して作動するようになり、ノイズレベルも低く抑えることが可能になった。計測環境や供給電源の質による信号SNの変化についてのデータも取得できた。改良口唇挙上リトラクターは比較的快適に口唇を持ち上げ前歯をリゾネータに当てるだけのスペースが確保できた。計測後のアンケートでも計測時の不快感は、旧装置に比べて顕著に改善されている。
分子レベル心筋特性の評価を可能とする実時間二次元超音波組織性状診断システムの開発

まず、動物実験による基礎的な検討から、超音波組織性状指標が分子レベル心筋動態、心筋線維化の程度を反映することを明らかとした。臨床研究では、陳旧性心筋梗塞患者において、心筋シンチグラムにより評価した梗塞領域の心筋viabilityと超音波組織性状指標との間に良好な相関関係が存在することを示した。らに、貫壁性梗塞領域と非貫壁性梗塞領域では、超音波組織性状指標の壁層内分布に有意な相違を認めることが明らかとなった。拡張型心筋症患者を対象とした研究では、75%の症例において安静時における超音波組織性状指標は異常を呈し、心筋生検により評価した心筋組織線維化の程度と超音波組織性状指標との間に良好な相関関係が存在することを明らかとした。さらに安静時における超音波組織性状指標が異常値を示さない症例においても、ドブタミン負荷に対する超音波組織性状指標の反応は、健常例に比し明らかな相違を示すことが明らかとなった。以上より超音波組織性状診断は、種々の心疾患患者において心筋のviability、心筋線維化を非侵襲的にかつcost-effectiveに評価しうる有用な診断方法であり、ドブタミン負荷試験などの負荷試験を組み合わせることにより、その臨床的有用性がさらに増すことが示された。今後は、心疾患の診断、各心疾患における治療方針の決定、治療効果判定、あるいは予後を推定する上で超音波組織性状指標から得られる情報を如何に利用するかという問題に対し、具体的な指針を作成し、循環器領域における超音波組織性状診断の有用性を確立したいと考えている。本年度はモデル小動物を用いた基礎的検討を行うとともに臨床応用を一部試みた.心筋症自然発症ハムスターであるBIO14.6において経胸壁アプローチにて非侵襲的に抽出した超音波組織性状指標の心周期依存性変化は,組織線維化の程度を反映して低値であったが,アンギオテンシン変換酵素阻害薬によりいずれも改善することにより,分子レベル心筋動態に加え心筋線維化の程度を反映することが示された.臨床的に拡張型心筋症を対象として行った検討では,我々が基準化した超音波組織性状指標は,侵襲的に心筋生検により得られた心筋組織線維化の程度と良い相関を示すことより,心筋組織性状非侵襲評価のための良い指標となり得ることが明らかとなった.さらに,陳旧性心筋梗塞例を対象として行った検討では,本指標は健常例に比し高値となるが,RI法により得られる心筋viabilityの指標を非侵襲評価し得る可能性が示された.尚,動物実験による基礎的検討では,本指標はロ-ディングコンディションの状況の影響を受けにくい指標である一方,その心周期依存性変化は心筋収縮動態を反映することを明らかとしている.しかし,急性心筋梗塞例における検討ではこの心周期依存性変化は再灌流前には消失しているものの,再灌流後は収縮性が低下しているにもかかわらずこの心周期依存性変化が回復する.さらに本手法と心筋コントラスト法との融合を試みたところ,従来の心エコー法に比し各種心疾患の心筋血流動態の定量的評価を行い得る可能性が示唆されており,今後の展開が期待される.昨年度は、動物実験から超音波組織性状指標が分子レベル心筋動態、心筋線維化の程度を反映することを明らかとした。さらに臨床的研究において、RI法により評価した心筋viability、心筋生検により評価した心筋組織線維化の程度と超音波組織性状指標との間に良好な相関関係が存在することを明らかとした。本年度は、昨年度に得られた知見を基礎とし、超音波組織性状指標の臨床的有用性をさらに明らかにせんとした。

まず、前壁中隔心筋梗塞患者を対象として行った検討から、1、貫壁性心筋梗塞、非貫壁性心筋梗塞のいずれにおいても、梗塞領域における超音波組織性状指標は非梗塞領域に比し、有意な相違を示す2、貫壁性梗塞領域と非貫壁性梗塞領域では、超音波組織性状指標の壁層内分布に有意な相違を認めることを明らかとし、超音波組織性状指標は心筋梗塞領域の残存viabiliyの壁層内分布をも評価可能とすることを示した。ついで、拡張型心筋症例を対象とし、安静時における超音波組織性状指標異常の頻度、安静時における超音波組織性状指標が異常を呈さない症例においてドブタミン負荷時における超音波組織性状指標の変化を検討した。すると、75%の症例において安静時における超音波組織性状指標は異常を呈した。残る25%の症例においても、ドブタミン負荷に対する超音波組織性状指標の反応は、健常例に比し明らかな相違を示した。かかる結果は超音波組織性状指標はドブタミン負荷試験を組み合わせることにより、その有用性がさらに増すことを示唆した。このように、昨年度および今年度における我々の研究成果から、超音波組織性状指標は種々の心疾患症例において病態を把握する上で大いに有用であることが示唆され、今後のさらなる臨床応用の拡大が期待される。
次世代光干渉断層法によるスペクトロスコピー開発と不安定プラーク治療効果判定

次世代光干渉断層法(frequency-domain OCT;FD-OCT)を用いたステントストラッドの自動認識は既に論文投稿し、最新のFD-OCTシステムに搭載して3次元画像表示に臨床応用しており、スペクトロスコピーによるプラーク画像表示の開発は現在も継続している。FD-OCTのグレースケール画像による不安定プラークの特徴に関しては多数の論文を報告し、今後これらの画像に対してスペクトルスコピー解析をする予定である。FD-OCTを用いてグレースケールで画像収集した臨床例における不安定プラークの検討については、不安定狭心症に注目して既報の急性心筋梗塞との比較を中心に行い、両者の類似点・相違点に関して詳細に解析し、国内外の学会に報告するとともに英文雑誌に投稿した。スペクトロスコピーの完成後に同部位の再解析を行い、カラー表示での検討を行う予定である。急性冠症候群の主たる原因とされる不安定プラーク(線維皮膜の薄い脂質性プラーク:thin-capfiroatheroma:TCFA)は、急性冠症候群例の責任病変部以外で検出し、脂質低下療法の効果に関して観察研究を行い国内外の学会で報告し、現在投稿準備中である。また、脂質低下療法によるTCFA安定化効果に関しては、プラーク安定化の確認ともに薬剤至適投与量を決定するために現在2つのランダム化前向き研究を行っており、今年度中に登録が完了し、次年度に解析も完了し、学会発表・論文投稿できる予定である。グレースケールでFD-OCTを用いて画像収集した臨床例における不安定プラークの検討については、不安定狭心症に注目して既報の急性心筋梗塞との比較を中心に行い、両者の類似点.相違点に関して詳細に解析し、国内外の学会に報告するとともに既に論文報告した。スペクトロスコピーの完成後に同部位の再解析を行い、カラー表示による再検討を行う予定である。不安定プラーク(線維皮膜の薄い脂質性プラーク:thin-cap firoatheroma:TCFA)に関しては、急性冠症候群例の責任病変部以外において検出し、脂質低下療法の効果に関して観察研究を行い国内外の学会で報告し、現在投稿中である。また、脂質低下療法によるTCFA安定化効果に関しては、プラーク安定化の確認ともに薬剤至適投与量を決定するために現在2つのランダム化前向き研究を行っており、昨年度中に登録が完了し、一部は既に、学会発表し、現在論文投稿準備中である。1次世代光干渉断層法によるスペクトロスコピー開発昨年までに行った剖検例の冠動脈および動脈硬化家兎(WHHL)を用いた次世代光干渉断層法(FD-OCT)画像と組織像との比較から、FD-OCTシグナルの減衰・分散などの解析を組み合わせることにより、従来の光干渉断層法(TD-OCT)と同様に冠動脈プラークを線維性・脂質性・石灰化などに分離することが可能で、そのデータに基づいて冠動脈プラークを識別表示することが可能であることを確認した。特に石灰化病変や金属ステントストラッドを自動的に認識できるシステムを開発し学術雑誌(Phys Med Biol 56:6665-6675, 2011)に報告し、本年度はそのソフトを最新機種に搭載し臨床応用を開始している。脂質プラークの自動認識は現在進行中である。2臨床例における不安定プラークの評価OCTを用いた基礎データや臨床データに関しては進展し、多くの学会報告や論文投稿をしているが、スペクトロスコピーの開発は協力者であるLightLab社がSt,Jude社に買収されるなどの経緯があり、時間を要している。新たなSt.Jude社と我々との研究協力体制は、依然と同様に継続されることになっており、遅れを取り戻すように昨年以上に努力する。24年度が最終年度であるため、記入しない。まず、(1)現在までの実験データ・臨床データの論文化をさらに推奨し、(2)基礎データによるスペクトロスコピー開発を継続する。また、(3)本邦の工学・理学系の研究者とも協力して、別の角度から本来の目的であるOCTスペクトロスコピーの開発を即する予定である。既に、近隣の工学系の研究者との協力関係はできており、新たな体制作りも同時並行で行っている。場合によっては、(4)国内の企業との共同研究も視野に入れて研究体制の充実を計る。
オントロジーとパターンに基づくオンラインアシスタント構築ライブラリの開発

近年,政府主導のIT推進に象徴されるように,コンピュータ技術や情報通信技術の発展によりインターネット利用者人口が急速に拡大している.しかし,このような社会情勢にもかかわらず,エンドユーザレベルでは,エキスパートシステムやソフトウェアエージェントなどの知識システムはほとんど利用されておらず,コンピュータの利用はメールやWebなどに限られているのが現状である.以上の観点から,本研究では,知識システムの仕様記述と実装構造について,知識工学におけるオントロジーとソフトウェア工学におけるソフトウェアパターンを利用することにより対応を明確化させ,コンピュータアプリケーションの仕様記述からシステム実装までの統合的な構築方法論と構築ライブラリの整備を行った.そして,この構築方法論により,個人用計算機上に常駐し,電子メールやWebを駆使して個人秘書のようにユーザのさまざまな業務をサポートする,オンラインアシスタントの完成を目指した.本研究では,平成13年度において得られた成果を,平成14年度において,ユーザ業務支援統合パッケージとして整備した.そして,電子メールやWebを駆使して個人秘書としてユーザの業務を支援することを目的として,本研究の成果をもちいることにより,構築されるオンラインアシスタントは電子メールアドレスを有するソフトウェアエージェントとして実装される.このソフトウェアエージェントは,一部の民間企業にて用いられており,その成果の十分性を示すものとして考えている.また,一般の利用以外にも,本研究の成果の一部は,国内学会誌の国際動向の解説論文として採録されたり,国際雑誌にも研究論文として採録されるなど,学術的にも重要な成果をあげることができた.ユーザ業務支援統合パッケージとして構築される本研究の成果を,平成14年度において公開を目指すものである.このために,平成13年度では,個人業務代行のオンラインアシスタントに関する基本機能を整備し,これをリポジトリ化するとともに,これらのプロトタイプをいくつかの事例に適用し,その成果を論文として発表した.今年度(平成13年度)の具体的な研究成果は次の通りである.1.個人業務リポジトリーの構築申請者がこれまでにアプリケーション開発に従事した個人業務ドメインとして,ビジネスアシスタントや教育業務支援に焦点を絞り,各分野のタスク分析を行った.具体的に今年度の研究対象とした個人業務は,電子メールやWebを駆使して個人秘書としてユーザの業務を支援することである.これらの業務について,アナリシスパターンの分類やオントロジー構築の手法を導入し,業務テンプレートライブラリと業務概念体系を構築し,これを個人業務リポジトリとして整備した.2.オンラインアシスタントリポジトリーの構築本研究の成果により構築されるオンラインアシスタントが上記の個人業務を代行できるようにするために,電子メールアドレスを有するソフトウェアエージェントとして実装することを目標とした.そこで,知識システム構築ライブラリであるアムステルダム大学のCommon KADSやソフトウェアエージェント構築ライブラリであるスタンフォード大学のJATを分析した.さらに,申請者が開発した再利用可能エキスパートシステム構築部品群REPOSITを拡張し,ソフトウェアパターンの形式で整備することにより,デザインテンプレートライブラリとオンラインオブジェクトライブラリを整備し,これをオンラインアシスタント構築用のリポジトリとして整備した.近年,政府主導のIT推進に象徴されるように,コンピュータ技術や情報通信技術の発展によりインターネット利用者人口が急速に拡大している.しかし,このような社会情勢にもかかわらず,エンドユーザレベルでは,エキスパートシステムやソフトウェアエージェントなどの知識システムはほとんど利用されておらず,コンピュータの利用はメールやWebなどに限られているのが現状である.以上の観点から,本研究では,知識システムの仕様記述と実装構造について,知識工学におけるオントロジーとソフトウェア工学におけるソフトウェアパターンを利用することにより対応を明確化させ,コンピュータアプリケーションの仕様記述からシステム実装までの統合的な構築方法論と構築ライブラリの整備を行った.そして,この構築方法論により,個人用計算機上に常駐し,電子メールやWebを駆使して個人秘書のようにユーザのさまざまな業務をサポートする,オンラインアシスタントの完成を目指した.本研究では,平成13年度において得られた成果を,平成14年度において,ユーザ業務支援統合パッケージとして整備した.そして,電子メールやWebを駆使して個人秘書としてユーザの業務を支援することを目的として,本研究の成果をもちいることにより,構築されるオンラインアシスタントは電子メールアドレスを有するソフトウェアエージェントとして実装される.このソフトウェアエージェントは,一部の民間企業にて用いられており,その成果の十分性を示すものとして考えている.また,一般の利用以外にも,本研究の成果の一部は,国内学会誌の国際動向の解説論文として採録されたり,国際雑誌にも研究論文として採録されるなど,学術的にも重要な成果をあげることができた.
筋・血管系の形態機能学的研究

1.筋の形態機能学的研究:(1)アクチンフィラメント(1-フィラメント)の極性と細胞骨格...Ca^<2+>活性化プロテアーゼ(CAF)で牛と犬の心筋介在板を消化したところ電子密度の高い物質(α-アクチニン)が消失し、1-フィラメントが残存した。このフィラメントの極性はHMMで修飾したところ、介在板より離れる方向を示し、また直接、介在板の筋形質膜に付着していた。(2)Z帯様構造...グッピー背筋の筋・腱結合部にZ帯に似た電子密度の高い帯が観察された。この帯の幅はZ帯より広く、不規則でCAFにより消化された。1-フィラメントはこの帯を貫通し、筋形質膜に付着し、その極性は筋形質膜より離れる方向を示しており、またこの帯でも極性は変らなかった。(3)Small-Square(SS)net型:ニジマスの顎内転筋と背筋のZ帯でBasket-weave型とともにSSnet型が存在することが分った。2.血管の形態機能学的研究:(1)牛生殖器血管の組織化学的検索...卵管動脈に見られた硬変性変化は内膜の肥厚と内弾性板の変化が主で、これらは加齢性のものであると思われる。子宮動脈に見られる妊娠性硬変の進展にはグリコサミノグリカンが関与していることが分った。(2)血管の1-フィラメントの極性と細胞骨格...平滑筋細胞内には稠密体と暗調野が観察され、稠密体の両極に付着する1-フィラメントの極性は稠密体と反対方向を示し、中間フィラメントは稠密体の側方に付着していた。血管内皮には径78nmのフィラメントが散在していた。(3)血管の神経終末の分布...毛細血管には径50nmの無芯小胞を、動脈には径50nmの有芯小胞を主とする神経終末が分布していた。3.反芻類家畜などの消化管の組織学的検索:(1)ラクダの前胃上皮...ラクダは4嚢に区画された複胃を持ち、前胃には無腺部と噴門腺に似た腺部が認められた。(2)ハタネズミの大腸...盲腸、近位結腸前部と後部、中結腸、遠位結腸の5部が区分された。4.鯨類消化管などの形態学的検索:腎臓、複胃、細気管支について検索した。筋・血管系の形態機能について実験をおこない,次のような成績を得た.1.筋腺維のアクチンフィラメントの長さとZ帯の幅との関係:家兎の心筋および大腰筋を用いてグリセリン筋を作製し電顕的に検索した.アクチンフィラメントの長さは大腰筋より心筋の方が長く, Z帯の幅も大腰筋より心筋の方が広かった.また,大腰筋,心筋ともアクチンフィラメントの長さはZ帯の幅が広くなるにつれて比例的に増加していた.2.α-アクチニンの量とZ帯の幅との関係:家兎の心筋および大腰筋の分子構築について電顕および電気泳動法によって解析した. α-アクチニンとアクチンとの比は大腰筋より心筋の方が大きかった.また, Z帯の主要な構成蛋白質であるα-アクチニンの量はZ帯の幅が広くなるにつれて比例的に増大していた.3.筋腺維の接着装置:フリーズ・レプリカ法を用いて標本を作製し,電顕的に検索した.家兎の筋腺維の接着装置にはギャップ結合(ネクサス),デスモゾーム,接着域などが存在することが分った. 3.牛の生殖器血管の組織化学的検索:卵巣内の動脈および卵巣動脈について光顕的に検索した.卵巣内の動脈の変化は子宮動脈のそれと比べて軽度であった.また,この動脈の変化と経産回数の増加との間に密接な関連性がみられなかった.経産牛の卵巣動脈の肥厚部と中膜内層で酸性ムコ多糖が多量に観察された.4.牛の卵巣内のS-100陽性細胞:PAP法を用いて牛の卵巣内のS-100陽性細胞について検索した.卵巣内の動脈,毛細血管,リンパ管の内皮細胞,卵母細胞および卵巣網にS-100陽性細胞が検出できた. 5.牛の第1胃の絨毛形成と上皮下血管網形成との関係:46例の牛胎仔を用いて光顕および電顕的に検索した.毛細血管網の形成は上皮下,粘膜固有層および上皮層の順におこなわれていた.毛細血管網が最初に立ち上がるのは上皮下で, 2層の毛細血管網の間の連絡枝のある部位であった.1.筋の形態機能学的研究:(1)アクチンフィラメント(1-フィラメント)の極性と細胞骨格...Ca^<2+>活性化プロテアーゼ(CAF)で牛と犬の心筋介在板を消化したところ電子密度の高い物質(α-アクチニン)が消失し、1-フィラメントが残存した。

1-フィラメントはこの帯を貫通し、筋形質膜に付着し、その極性は筋形質膜より離れる方向を示しており、またこの帯でも極性は変らなかった。(3)Small-Square(SS)net型:ニジマスの顎内転筋と背筋のZ帯でBasket-weave型とともにSSnet型が存在することが分った。2.血管の形態機能学的研究:(1)牛生殖器血管の組織化学的検索...卵管動脈に見られた硬変性変化は内膜の肥厚と内弾性板の変化が主で、これらは加齢性のものであると思われる。子宮動脈に見られる妊娠性硬変の進展にはグリコサミノグリカンが関与していることが分った。(2)血管の1-フィラメントの極性と細胞骨格...平滑筋細胞内には稠密体と暗調野が観察され、稠密体の両極に付着する1-フィラメントの極性は稠密体と反対方向を示し、中間フィラメントは稠密体の側方に付着していた。血管内皮には径78nmのフィラメントが散在していた。(3)血管の神経終末の分布...毛細血管には径50nmの無芯小胞を、動脈には径50nmの有芯小胞を主とする神経終末が分布していた。3.反芻類家畜などの消化管の組織学的検索:(1)ラクダの前胃上皮...ラクダは4嚢に区画された複胃を持ち、前胃には無腺部と噴門腺に似た腺部が認められた。(2)ハタネズミの大腸...盲腸、近位結腸前部と後部、中結腸、遠位結腸の5部が区分された。4.鯨類消化管などの形態学的検索:腎臓、複胃、細気管支について検索した。
SiCウィスカ-分散Si_3N_4複合セラミックスの強度と焼結助剤との関係

エンジニアリング・セラミックスの一つであるSi_3N_4の強度・靭性の改良法の一つとしてSiCウィスカ-(SiC(w))の分散法が試みられている。本研究では、従来の報文において一般に留意されていない諸因子、すなわち、(1)焼結助剤の種類や量、(2)マトリックスのSi_3N_4粒の形状・寸法、(3)破壊の起源の寸法、(4)SiCの成分そのものの影響を考慮して、SiC(w)/Si_3N_4ーY_2O_3ー6mol%Al_2O_3複合セラミックスホットプレス体の抗折力とK_<IC>などに及ぼすY_2O_3量の影響を調べ、以下の諸結果を得た。(1)20vol%SiC(w)添加試料の抗折力とK_<IC>は無添加試料と同様にいずれも約8mol%Y_2O_3で最大となった。また、Y_2O_3量8mol%一定の下では無篩分SiC(w)添加試料の抗折力は約5vol%程度の少量添加でかなり低下し、K_<IC>は5ー10vol%まで逆に上昇し、それ以上の量ではいずれもほとんど変化しなかった。(2)8mol%Y_2O_3での粒界相は、SiC(w)添加により変化せず、5Y_2O_3・Si_3N_4・Al_2O_3であった。βーSi_3N_4針状粒の寸法は、SiC(w)添加によりほとんど変化せず、いずれの試料でも8mol%で最大となった。また抗折力は、各試料とも他報文の値に比べてかなり大または同等であったが、それにもかかわらず破壊の起源となった欠陥は、最大50ー190μmのSi_3N_4凝集体またはSiC(w)凝集体であり、その寸法はSiC(w)添加によって増大した。(3)以上により、SiC(w)/Si_3N_4複合セラミックスの抗折力とK_<IC>が8mol%Y_2O_3で最大となッたのはβーSi_3N_4針状粒が最大となったことに主として起因し、粒界相が上記のものとなったことも一因と考えられた。そして、SiC(w)添加によるK_<IC>の上昇は少なくともマトリックスのSi_3N_4粒の晶型、形状や粒界相とほとんど関係ないと見なせた。
顔面神経麻痺への顔面神経-舌下神経クロスリンク型神経移植術における神経科学的研究

顔面神経麻痺に対する神経学的手術治療として、cross-link手術(顔面神経-舌下神経間を移植神経でバイパスする)が開発された。本手術法は臨床面で一定の効果をみるが、その神経学的メカニズムは解明されていない。われわれはラットcross-link型神経移植モデルを作成し、順行性および逆行性トレーサー法を用いて神経回路解析を行った。順行性トレーサー法にて舌下神経線維が顔面神経束へ誘導されることを示した。逆行性トレーサー法では顔面神経核より発した軸索が舌下神経束へ誘導されていることを示した。以上よりcross-link型神経移植を行うことで顔面神経・舌下神経の神経回路交叉が行われることを示した。末梢神経の再生能力を利用し、顔面神経-舌下神経端端吻合および喘側吻合術、神経付筋弁による動的再建術などにより、これまでベル麻痺やハント症候群を始めとする末梢性顔面神経麻痺に対して手術的な治療戦略を試みてきた。近年、大耳介神経や腓腹神経などの感覚神経を用いて顔面神経および舌下神経をバイパスする方法(クロスリンク手術)が臨床面で開発され、一定の成果を挙げ始めている。この手術法はこれまでの方法に比べ、手術操作による神経損傷のリスクが低く、殆ど傷害を残さないという点で画期的な方法である。また、100%の回復とは行かないまでも概ね良好な筋トーヌスが得られたとの報告がある。ところが臨床上、経験的に効果のある神経伝達の線維乗り換え現象がいかなるメカニズムで起こるかについては殆ど解明されていなかった。このメカニズムを解明すべく、本研究課題では次のことを計画した。(1)実験動物(ラット)を用いた顔面神経-舌下神経クロスリンク手術モデルの確立(2)クロスリンクモデルにおける順行性トレーサー法を用いた神経回路解析(3)クロスリンクモデルにおける逆行性トレーサー法を用いた神経回路解析顔面神経麻痺に対する神経学的手術治療として、cross-link手術(顔面神経-舌下神経間を移植神経でバイパスする)が開発された。末梢性顔面神経麻痺の手術治療として,顔面神経と舌下神経の間を移植神経によって架橋する手術(クロスリンク手術)が近年脚光を浴びているが,その治療機序については未解明な点が多い.本研究は,顔面神経-舌下神経クロスリンク手術において構築されている神経回路を神経トレーサー法で解析することを目的としており,平成19年度は順行性トレーサーを用いるラットモデルの新規開発を主な研究課題とした.Wistar糸のアダルトラットを対象として,深麻酔下に実験を行った.1)順行性トレーサー注入手技の確立:脳定位固定装置を用いてラットを固定した後,穿頭してラットの舌下神経核,顔面神経核に神経トレーサーを微量注入した.3日間の生存期間後に,脳および舌下神経,顔面神経を摘出して凍結組織切片を作成し,蛍光顕微鏡による観察に供した.この結果,ラットの舌下神経核,顔面神経核のみに神経トレーサーを微量注入する手技を確立し得た.2)クロスリンク手術後神経回路の順行性トレーサーによる解析モデルの開発:ラットの舌下神経,顔面神経本幹を露出した後,大伏在神経の自家移植によってそれぞれを架橋した.術後4週時に上記方法によって舌下神経核へ神経トレーサーを微量注入し,さらに7日間の生存期間後に脳および舌下神経-移植神経-顔面神経を摘出した.摘出標本から凍結組織切片を作成し,蛍光顕微鏡による観察に供した.この結果,ラット舌下神経から移植神経を介して末梢顔面神経へ流入する神経線維が単線維レベルで確認された.一連の実験により,クロスリンク手術後の神経回路を順行性トレーサー法で解析するモデルを確立し得た.神経回路を解析する上で順行性トレーサー法は極めて有効な手段であるが,これまでラットの舌下神経,顔面神経を対象とする手技は報告されていない.本研究で確立した実験手技により,クロスリンク手術後の神経回路解析が大きく前進することになる.【目的】新しい概念に基づく末梢性顔面神経麻痺の手術治療として,顔面神経と舌下神経の間を移植神経によって架橋する手術(クロスリンク手術)が脚光を浴びているが,その治療機序については未解明な点が多い.本研究は,顔而神経-舌下神経クロスリンク手術において構築されている神経回路を神経トレーサー法で解析することを目的としており,平成20年度は,前年度に新規開発した順行性トレーサーを用いたラットモデルによる解析を主な研究課題とした.【方法】Wistar系のアダルトラットを対象として,深麻酔下に実験を行った.順行性トレーサーの注入手技は既に報告した方法に準じた(榊原,橋川ら,2008).1)ラットの舌下神経,顔面神経本幹を露出した後,大伏在神経の自家移植によってそれぞれを架橋した.

2)術後4週後に,脳定位固定装置を用いてラットを固定した後,穿頭してラットの舌下神経核,顔面神経核に神経トレーサーを微量注入した.3-7日間の生存期間後に,脳および舌下神経,顔面神経を摘出して凍結組織切片を作成し,蛍光顕微鏡による観察に供した.【結果】ラット舌下神経核から移植神経を介して末梢顔面神経へ流入する神経線維,顔面神経核から移植神経を介して末梢舌下神経へ流入する線維が,それぞれ単線維レベルで確認された.【結論】顔面神経-舌下神経クロスリンク手術により,麻痺状態の顔面神経へ舌下神経が流入していること,顔面神経が舌下神経へ流出していることが示された.後者は新たに明らかとなった知見であり,病的線維が優先的に流出している可能性がある.そうであれば末梢神経障害に対する手術治療の概念を大きく変え得るため,今後の研究課題としたい.末梢神経の再生能力を利用し、顔面神経-舌下神経端端吻合および喘側吻合術、神経付筋弁による動的再建術などにより、これまでBell麻痺やHunt症候群を始めとする末梢性顔面神経麻痺に対して手術的な治療戦略を試みてきた。近年、大耳介神経や腓腹神経などの感覚神経を用いて顔面神経および舌下神経をバイパスする方法が臨床面で開発され、一定の成果を挙げ始めている。この手術法はこれまでの方法に比べ、手術操作による神経損傷のリスクが低く、殆ど傷害を残さないという点で画期的な方法である。また、100%の回復とは行かないまでも概ね良好な筋トーヌスが得られたとの報告がある。ところが臨床上、経験的に効果のある神経伝達の線維乗り換え現象がいかなるメカニズムで起こるかについては殆ど解明されていなかった。われわれは本手術手技をcross-link型神経移植術と位置づけ、ラットモデルに神経トレーサー法を導入し、神経回路解析を行ってきた。一連の研究により次の事が解明された。1.順行性トレーサー法により舌下神経核より発生した軸索は移植神経を介して顔面神経束へと導入される。2.逆行性トレーサー解析により、顔面神経核より発生した軸索は舌下神経束へと導入される。3.Cross-linkされた神経を介して神経縫合部ではcollateral sproutingが行われている。臨床面では、cross-link手術後に表情筋の運動機能の増大のみならず異常共同運動の改善を認めた例もあり、われわれがこれまでに得た基礎的データと併せると、依然、cross-link手術により再構築された神経ネットワークに関しては多くの疑問が残る。現在、(1)顔面神経からも舌下神経へと軸索が誘導されているが、誘導される軸索の数に差はあるのか。(2)collateral sproutingにより顔面神経束へと伸展した舌下神経線維は表情筋を運動支配するのか。神経筋接合部(NMJ)は形成されるのか。(3)神経核のみならず神経細胞単体での二重支配がなされているのか。(4)長期的に、顔面神経束へと誘導された舌下神経の軸索は剪定されるのか。されるのならば手術操作時に損傷を受けた舌下神経の再生軸索と、側芽形成により伸展した軸索といずれが剪定されるのか。について検討を行っている。
地震動アレー観測記録を利用した地盤動特性値のひずみ依存性の同定に関する研究

地表で観測される地震動は、震源機構,伝搬経路,観測点直下の地盤条件等の影響を受けて複雑に変化する。とくに、大都市が立地する沖積層からなる平野部では、地表地震動特性は表層の地盤条件の影響を大きく受けるため、地震時の表層地盤震動特性を明らかにすることは震害を予測する上できわめて重要である。地盤の動特性は、従来、弾性波探査やPS検層などから推定されている。しかし、そのような方法で推定される地盤の動特性は、必ずしも地盤時のそれに対応するものではないことが指摘されている。その理由の一つとして、地震時に土が示す非線形挙動があげられる。土の非線形性を明らかにするための室内実験も行われているが、原位置における土の拘束条件等を実験室で再現するのは困難であり、やはり、実際の地震時の土の挙動を観測し、これより動特性を調べる(同定する)のが最も合理的である。本年度は、これまで筆者が展開してきた同定手法の検証を実地震観測記録を用いて行った。観測記録は、東京大学生産技術研究所千葉実験所構内で得られたものを使用した。ここでの記録は(財)震災予防協会発行の強震動アレー観測データベースに収録されおり、地震工学上の研究活動としての利用が許されている。表-1に観測地震の諸元を示す。本同定手法は、鉛直入射するSH波の重複反射を仮定しているため、震央距離に比較して震源が比較的深い位置にあるものを選んでいる。これらの地震時の地盤震動記録より、地表から深さ20mまでの地盤のS波速度およびQ値を同定した。その結果、S波速度については、用いた地震記録による推定値のばらつきが小さく、速度検層による推定値ともよく対応し、十分信頼できる推定値が得られることがわかった。また、Q値については、推定値のばらつきがやや大きいが、かなり整合性のある推定値が得られた。本年度の研究により、地盤同定手法が中小地震による地盤震動に対して適用可能であることがわかった。今後、強震動に対する適用性について検討する必要がある。
C型肝炎ウイルスによる肝障害発生に対するp53の遺伝的多型の影響

申請者等はこれまでの研究でPCR-SSCP法などの手法によって調べたp53遺伝的多型中、特定の配列の変異が肝癌患者では有為に高いことを見いだした。肝癌患者の殆どがHCV感染者であることから、p53の特定の部分の変異とHCV感染との関連性の追求が本研究の目的である。申請者等の研究の場である兵庫県では特定の地域でHCV感染者が異常に多いことが知られている。これまでの研究ではHCV感染者のうちHCV遺伝型の1b型にp53の特定の部分の変異を持つものが多いことを確認し、この変異が感染そのものに影響しているのかあるいは肝障害の発生機序と関連するのかについて研究を進めてきた。本研究では、このp53遺伝的変異と、肝障害、肝癌発生の関わりを詳しく解析し、これら疾患の発生の防御に役立てることを検討することを目的として研究を行い以下に述べるような結果を得た。C型肝炎ウイルス(HCV)の抗体陽性者の多い地域でHCV-RNA陽性者の肝障害の進行についてヒトがん抑制遺伝子p53のコドン72における遺伝的多型との関連性を解析した。昨年度までの研究結果では〓小板数、AST,ALT,γ-GTP,ZTT、全コレステロール量についてHCV-RNA陽性者が有意に悪い値を示すことがわかっている。ヒトがん抑制遺伝子p53のコドン72における遺伝的多型にはアルギニン/アルギニン、アルギニン/プロリン、プロリン/プロリンの3型があることが知られている。これらの型別に上記各指標、年齢、性別、飲酒量、HCVの遺伝型などについて解所したところ、〓小板数の減少についてプロリン/プロリン型の個体が有意に大きいことを見出した。他の指漂についてはいずれも有意差は認められなかった。〓小板数の減少は肝機能の低下、肝障害の進行を反映していると考えられる。p53の遺伝的多型によるこのような変化はHCV感染後のウイルス増殖、肝障害の進行にp53が関与していることを示すものである。今回の研究結果は遺伝的変異が起こることによりp53の機能が変化し、結果としてHCV感染後のウイルス増殖に有利な状況が発生する可能が考えられる。C型肝炎ウイルス(HCV)感染率の高い兵庫県内の一地域において、健診時の採血材料を用いて、HCV感染、その遺伝型とp53遺伝的多型の関連を検討した。1996-1998年度の間に、人口8500人の当該地域で2000名が検診を受けた。内20.1%がHCV抗体陽性、2.0%がHBs抗原陽性であった。この地域は5つの地区に分かれ98%の人が内3地区に住んでいる。その内A地区ではHCV抗体陽性率が37.3%であった。HCV遺伝型はA地区の174名について調べられた。この分布は1bが66%、2aが31%、2b及び2aが各々2%と日本全体での分布と差がなかった。p53のエキソン4、72番目のコドンの多型(CGC又はCCC、Arg又はPro)をA地区でHCV遺伝型の判明している75名とHCV感染陰性の232名についてPCR-SSCP法で解析した。HBs抗原陽性者は解析から除外した。

HCV感染症例全体と非感染対照全体を比較した時にはp53遺伝的多型とHCV感染との間に有意な相関は見られなかった。しかしながら性及び年齢をマッチさせてHCV遺伝型各々について検討した結果、HCV1b型の男性の場合、症例24名でPro/Pro,Pro/Arg及びArg/Arg型が各々25、33及び42%に対し、対照45名では各々4、40及び56%とPro/Pro型が症例で有意に高頻度であった(p=0.039)。又Pro型の染色体数の頻度も有意に高かった(p=0.010)。女性及び他のHCV遺伝型については有意な差は得られなかった。以上の結果はp53のPro/Pro型の人はHCV1b感染の危険度が高い事を示唆する。又我々が先に見い出した肝癌患者ではPro/Pro型が多い事実は、肝癌症例では特に1b型HCV感染の頻度が高い事を反映した現象と思われる。今後は当該地域でHCV、特に1b型への感染者と他の場合の症状の進展の違いをフォローアップして行く予定である。昨年度はC型肝炎ウイルス(HCV)感染率が非常に高い(約20%)兵庫県内のある地域において、HCV1b型に感染している男性では、p53遺伝子の72番目のコドンがCCC(Pro)である割合が非感染者に比べ有意に高い事を見出した。今年度はこの地域で特にHCV抗体陽性でHCV-RNA陽性の人のフォローアップを行った。対象者は地域全体で217名であった。内男性113名、女性104名で年齢的には50才以上75才未満の人が大部分を占めていた。この他に平成9年から13年の内に死亡した人13名、転出が8名いた。死亡原因では肝癌が4名と最も高く、以下、肺、胃、卵巣癌及び悪性リンパ腫が各1名、その他は脳出血、肺炎、事故であった。対象者の内男性71名、女性64名が同地域の医療機関を受診した。エコー検査は110名に対して行われた。更に肝炎に対して、インターフェロン療法を行っている人が平成9年から現在迄に7名いる。血液検査は医療機関及び地域で行う健診の際行われた。地域健診を受けた95名について、HCV抗体陽性でRNA陰性者の81名と比較すると血小板数の平均は18.3万/mm^3と後者のそれ(23.2)に比べ低かった。又GOT, GPT, γ-GTPの内一項目以上高値の割合も52.6%で後者の29.6%に比べ高かった。各々の値についてみると、GOTが41.1%対4.9%、GPT46.3%対9.9%、γ-GTP33・7%対27.2%で、いずれも前者が高く、また高値を示すものは男性に多かった。現在これら対象者の内でp53遺伝的多型の判明している人について、多型と肝障害発生の頻度、速度等との関連の検討を行っている。HCV抗体陽性者の多い兵庫県の一地域でp53のコドン72の遺伝的多型が判明しているHCV-RNA陽性者について、定期肝癌検診の結果とp53遺伝的多型の関連について検討した。まずRNA陽性者81名とHCV抗体陽性でRNA陰性者(53名)について肝機能検査の結果を比較した所、血小板数、AST、ALT、γ-GTP、ZTT及びT-Chol値はRNA陽性者の方が有意に悪い値を示す事を確認した。本調査は平成9年に始まっており、現在フォローアップ5年目になっている。このフォローアップ期間中の肝機能検査の動きとp53遺伝的多型の変化を次に解析した。