hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
フレイジオロジーの考え方を取り入れた英語の変則的構文・表現の記述的研究

フレイジオロジーの観点から、英語の変則的な構文・表現を考察し、その形成過程や使用実態についてコーパスなどのデータをもとに記述研究をおこなった。2年間の研究期間でnot only but thatの接続副詞化、動詞・形容詞がとるValencypatternsの実態、on aooount ofの接続詞化についての議論の見直し、please-placed to-infinitiveclausesなどについて調査・研究をおこなった。ほぼ当初の予定に通りに、具体的な言語データに基づき、それらのフレーズ的な振る舞いを明らかにし、その成果について国内外で口頭発表ならびに論文などを公刊した。研究の目的は、英語の連鎖表現を扱うフレイジオロジーの観点から、英語の変則的な表現や構文を発掘し、または、これまで知られているものも含めて見直して、変則的な形に納得のいく説明を与えることにあった。変則的な構文や表現は、文法規則に則って作られているのではなく、フレイジオロジーが主張するようなready-made chunksとして内部構造を意識することなく形成されることを明らかにした。そのために従来の文法では説明の難しい振る舞いが見られるのである。従来の統語論中心の文法では扱われなかった事象について、新たな見方を提示し、現代英語についての認識をさらに深めることができた。2013年3月に東京で開催されたフレイジオロジー研究会国際大会で、2年間にわたった課題研究の成果の集大成を口頭発表し、変則的な表現を扱うフレイジオロジーと言語変化の研究の連携の必要性などを強く主張できた。今後の課題とすべき問題を考えるうえで極めて意味のある発表であった。フレイジオロジーは主に連鎖表現を扱うが、実証的な言語研究対してフレイジオロジーが持つ可能性や重要性をアピールでき、今後の言語研究に大きな示唆を持つものとなった。この研究で、変則的な構文や表現の形成過程や振る舞いの一端を明らかにしただけでなく、フレイジオロジーの考え方を取り入れた今後の英語の実証的研究のひとつの在り方を示すことができた。研究初年度では、研究課題である英語の変則的な構文や表現についてフレイジオロジーの観点から研究を進め、not onlythatbut...という成句が現代英語では接続副詞として機能していることをコーパスからのデータで実証した。その成果を2011年7月にドイツ、オスナルックで行われた4th International Conference of the Linguistics of ContemporaryEnglishにおいて発表し、各国の研究者から有益な示唆を得た。本年度でデータを積極的に収集し、それに基づいて行った動詞、形容詞、名詞とそのパタンについての実証的な検証はひとつの形となり2012年8月にスロベニアで行われるフレイジオロジーの学会であるEurophras2012で発表が決定している。また、動詞の変則的なパタンの通時的な変化を扱った論文として"The Complementation Patterns of "cannot bear": Past and Present"をKyoto Working Papers in English and General Linguistics 1 (開拓社)で発表した。かねてからの研究課題であったhave until X to Vというフレイジオロジカルユニットについて本年度にさらに研究を推し進め、2012年中にポーランドの大学との共同論文集で公刊予定である。さらに、本年度獲得したフレイジオロジーの知見の一部を援用しながら、"Phraseology in dictionaries: from identification to description"の論考を完成させた。これは開拓社より論文集の一部として12年度中に刊行予定となっている。本年度目的としていたデータの収集や分析は着実に進んでおり、新たに検証が必要な英語の変則的な表現・構文も発見できている。また、データの収集と分析にもとづいたnot only that but...についての研究成果は2011年7月に海外の学会で発表した。この成果は、現在論文として刊行準備をすすめており、ポーランドとの大学との論文集に掲載されることが決定している。出版は2年後になる予定である。本年度、従来から興味を持って進めていたhave until X to Vの変則的な構文についてまとめあげ、ポーランドの大学との論文集に収録される。これについては最終校正を終え、2012年夏までには公刊される。さらに、フレイジオロジーと辞書の記述に関する論考が2012年度中に日本の開拓社から出版される論文集に収録される。研究初年度に行った語彙とそのパタンの研究成果も2012年8月に海外での発表が決まっている。別の研究も海外の学会発表に応募予定である。また別の学会への応募も視野に入れて研究を進めている。データの収集の環境も整い、問題ないと考えている。本年度整備したデータ収集の環境を使って、さらなるデータの収集・分析に努め、興味深い言語現象の発掘に努める。また、フレイジオロジー関係の知見が陸続と出版されており、最新知見の吸収にも努める。研究成果は積極的に発表を行っていく予定である。

2012年8月にスロベニアで行われるEurophras2012において口頭発表が決定しているが、そこでも各国の研究者と意見を交換し今後の研究の精緻化に努めたい。さらに別の発表の機会は貪欲に捕まえていくつもりである。初年度ドイツでの発表のための旅費、図書費、データ収集のためのパソコンなどに研究費を使用したが、残金5000円ほどを次年度に繰り越す。これと2012年度分と合わせて、研究費は2012年8月にスロベニアで行われるEurophras2012で口頭発表が決定しており、その旅費に大部分を使用する。また図書費にも使用し、最新知見の収集に努める予定である。
レトロウイルスを用いた遺伝子改変日本住血吸虫作製の試み

住血吸虫は生活史に中間宿主を要求するため、一般的な遺伝子改変個体作製技術を応用することが困難である。その解決のために住血吸虫に感染するレンチウイルスを用いてゲノムに遺伝子を導入する方法を検討した。その結果、GFP遺伝子はゲノムに導入されたことは確認できたが、mRNAからタンパク質の発現において阻害がかかる可能性が考えられた。しかし、mRNAへの転写は起こっているので、遺伝子導入効果よりも転写阻害を起こして遺伝子ノックダウンの方法としての応用性が考えられた。本年度の研究成果としては、研究計画にあるようにレンチウイルスベクターに日本住血吸虫特異的な遺伝子プロモーターの挿入を行い、作製したレンチウイルスを日本住血吸虫に感染させ、外来遺伝子発現を観察することを目標とした。実際には、発育段階を通して強く発現している日本住血吸虫特異的なActin-2とEF-1aの遺伝子上流2000bpの領域をレンチウイルスベクター内の緑色蛍光タンパク質(GFP)遺伝子の上流に挿入した。作製したプロモーター挿入レンチウイルスベクターを日本住血吸虫の幼虫期であるシストソミュラにエレクトトポレーションにて遺伝子導入を行い、一過性のgfp遺伝子の発現について調べた。その結果、導入3日後にプロモーター挿入群で有意なmRNAレベルでの上昇が確認された。次に、このレンチウイルスベクターを293T細胞に導入することでウイルス粒子を作製した。十分量のウイルス価を確認した後に、日本住血吸虫のシストソミュラへのウイルス感染を行った。感染後1週間後にin vitroで培養を行った虫体を回収し、mRNAの発現を調べた。結果、プロモーター挿入ベクター群での高いgfp遺伝子発現が見られたが、顕微鏡下での蛍光像は確認できなかった。一方で、レトロトランスポゾン配列とのAnchored PCRを行うことで、ウイルス遺伝子が日本住血吸虫のゲノム中に挿入されていることが確認できた。さらに、感染させたシストトミュラをマウスの腹腔に投与することで成虫でのウイルス感染について調べた。感染後7週に成虫を回収したが、回収虫体数が乏しかったこともあり、mRNAでのgfp遺伝子発現や、ゲノムへの挿入は確認できなかった。これらの結果を踏まえて、次年度以降はGFP単独発現ではなく、Actin-2等との融合タンパク質としての発現など、戦略を調整する予定である。日本住血吸虫はその生活史に中間宿主を要するため、既に確立された方法によるゲノム遺伝子の改変個体を作成することが困難であり、遺伝子個々の機能を解析することが困難であることが研究遂行上の障害であった。その解決を図るために、日本住血吸虫へのレンチウイルスを用いた遺伝子導入を試みるために、GFP遺伝子を含んだベクターの遺伝子導入を検討した。in vitro条件下で、ベクターをパッケージングしたレンチウイルスを異なった発育ステージの住血吸虫と共培養した結果、成虫、虫卵、幼虫(シストトミュラ、スポロシスト)のすべてにおいて、mRNAの遺伝子発現は確認された。またそれが確かにゲノムに挿入された遺伝子に由来することを確認するために、成虫やシストソミュラについてトランスポゾン配列を用いたAnchor-PCR法により調べた結果、ゲノムへのベクター遺伝子の挿入も確認できた。しかしながら、GFPによる発光は確認できず、遺伝子産物としてのタンパク質の発現には至っていないことがわかった。タンパク発現に至らなかった理由を検討するために、mRNAの配列を調べた所、フレームシフト等の変異は確認できずにインタクトな配列情報を有していた。以上のことから、日本住血吸虫における外来遺伝子の発現には翻訳抑制が起こる可能性が考えられた。これが事実であるのなら、レンチウイルスによる遺伝子導入系は困難であることになるが、一方でmRNAの発現が見られていることから、外来ベクターによる誘導型RNAiによる遺伝子発現抑制等の手法は可能であると考えられ、そのことは新しい遺伝子ノックダウン技術になりうつことが考えられた。本研究を通じて、従来は困難であった遺伝子改変日本住血吸虫の作製に新たな方法論の展開が得られたものと考えている。当初の年度計画にほぼ沿って実験が進んでいる。レンチウイルスベクターへの遺伝子プロモーターの挿入はほぼ予定通り成功したと考えている。これをもとに日本住血吸虫に感染するウイルスを完成させ、それが日本住血吸虫の幼虫であるシストソミューラに感染するか否かを確認する実験を行ったが、mRNA発現を指標とした場合は幼虫に遺伝子の取り込みが見られて予期したように日本住血吸虫ゲノムに取り込まれていることは確認できたが、幼虫の可視的な蛍光発現にはいたらなかったことが今年度計画における未解決の問題として残った。この方法自体は日本住血吸虫を用いて実施した初めての試みであり、外来遺伝子を日本住血吸虫ゲノムに取り込ませることに成功したという点で十分に満足すべき進捗が得られたと考えられる。寄生虫学、熱帯医学平成26年度の実施研究では外来遺伝子が日本住血吸虫ゲノムに取り込まれることが確認されたものの、表現型として発現されていないことが問題であった。

当面はgfp遺伝子の発現によって日本住血吸虫が蛍光発現を行うこと、即ち挿入した遺伝子産物がきちんと確認できることを進める必要がある。当面は平成26年度に摂った方法で何が問題であったかを考察し、必要な方法論の改善を図るべきであると考える。具体的にはGFPの蛍光発現だけを指標とすることによる不安定要因の可能性を考慮して、他の指標遺伝子、例えばアクチン遺伝子の発現をモニターするなどして外来遺伝子の住血吸虫ゲノムへの挿入とその遺伝子発現の確認を追跡していく。恒常的に蛍光を発現する住血吸虫の作製は寄生虫学的に多くの情報を解析するツールとなる。実験的住血吸虫感染では生体スキャンのシステムを活用して例えばワクチン研究における感染の量的評価が容易になる他、住血吸虫の経皮感染から肝門脈系への成虫の定着までの経路の追跡にも応用できる。さまざまな研究用ツールとしての応用性は高いと考えられ、住血吸虫への外来遺伝子挿入の手法として標準化していくことが必要であると考える。平成26年度にほぼ計画通りの執行に努めたが、小額の執行残が出た。必要な物品、マウス等の支払いは一部で予定額より小額で済んだものがあったためこのような事態になったものである。日本住血吸虫の実験室内維持に必要なマウスおよび飼料に当該経費を充てる予定である。
エイズ教育におけるマルチメディアの応用と評価に関する実践的研究

(1)7年度と8年度で検討されたCD-ROM教材を用いた教育実験方法によってエイズ教育の実験を東京、鳥取などのエイズ教育推進校の小、中学校で引き続いて行った。その際に、ビデオや従来型の授業との比較を行いCD-ROMによる教育効果を検討した。(2)知識・態度尺度の標準化を検討した。(3)CD-ROM教材に対する使用者の評価をもとに、教材の評価を行った。(4)諸外国のエイズ教育情報と教材の収集と分析を行った。(5)3年間の教育実験の成果を総括して、特にエイズ教育においてCD-ROM教材の有効性を確認した。マルチメディア教材(CD-ROMによるエイズ教育教材)を作成し、これによって以下の作業を行うことが今年度の研究実施計画であったがその大半を実施することができた。(1)各国におけるマルチメディア用のエイズ教育教材の収集と整理・分析を行った。予想したよりは諸外国にはマルチメディア教材が少なかった。(2)選定されたエイズ教育教材をCD-ROM化した。この教材を全国のエイズ教育の専門家、関係者に配布し試用してもらっている。(3)上記教材の試用後の評価を上記配布先1316ヶ所および日本学校保健学会のエイズ教育専門家150名にアンケートにて現在調査している。今年3月中に回収の予定である。この調査によって同教材の利用方法や改善の方向などの具体的提案が可能になると期待している。(4)同教材を試用して、鳥取、熊本、兵庫、東京の各地で中・高生を対象とした教育実験を行っている。今までのところ従来型のエイズ教育教材を利用したものと比較して予想以上に大きな効果があることが明らかになりつつある。(5)エイズ教育の背景として、エイズに対する児童生徒の知識・態度についての実態調査をしてエイズ知識・態度インベントリ-を収集し、それを精選するための準備を進めている。現在ではエイズが猖獗しているタイにおける調査の他に東京、鳥取でこのための基礎調査を行っている。今後これらのデータを利用して多変量解析などを利用しながらエイズ知識・態度テストのスタンダードを構成するつもりである。平成7年度に作成したCD-ROMによるエイズ教育教材を使って、以下の教育実験を行い貴重な資料を得た。1.CD-ROM教材によるエイズ教育の実験を東京(国立大学附属中学校)と鳥取(国立大学附属高校と県立高校)で行ない、CD-ROM教材を用いることの効果をVIDEO教材等と比較検討した。その結果、CD-ROM教材による保健知識・行動への効果は他の方法より優れていた。2.エイズ知識・態度尺度を作成するために、1,000名程度の調査を行い、これによる尺度づくりの検討を行った。3.諸外国のエイズ教育教材の収集と分析を行った。
遺伝暗号の多様性

遺伝暗号の可変性は確立された概念となったが、本研究班では、各生物、オルガネラにおける遺伝暗号の変化とその範囲を明らかにし、過去から現在にいたる変遷の過程を知ることにより、暗号多様化の実体とそのメカニズムを探り、多様化の要因を解明することを目的としてきた。新たに見つかったカンジダ酵母の暗号変化(CUG,Leu→Ser)について、共同研究が行われ、CUGをSerに翻訳するtRNAの構造解析(上田、渡辺、口野)と、その翻訳活性の検出(大浜、大沢)に成功した。5SRNAを指標とした各種不完全菌類の系統関係と翻訳系との対応も調べられている(大浜、大沢)。遺伝暗号の多様な変化が見つかっているミトコンドリアでは、まだ解析が行われていない種々の動植物について、ミトコンドリア遺伝子中のコドンとtRNAアンチコドンの両面の解析が行われた。新たな暗号変化としてプラナリアでUAA(Stop→Tyr)(大浜、大沢)、ホヤでAGR(Arg→Ser)(渡辺、上田)が見つかったが、全塩基配列が決定されたゼ-ゴケ(大山)や全長54kbのうち25kbの配列が決定された細胞性粘菌(田仲)では普遍暗号、RNA editingの証拠も現在までは見出されていない。暗号変化のメカニズムを調べるために不可欠なミトコンドリアのin vitroタンパク質合成系もウシ・ミトコンドリアで初めてポリ(U)依存ポリ(Phe)合成系が構築された(渡辺、上田)。暗号変化の進化的要因をよく説明するコドン捕獲説(大沢)の妥当性がマイコプラズマで実験的に検証された(大沢、武藤、安達)。レトロウイルスの感染によって動物細胞でUAGサプレッサ-グルタミンtRNAの発現が昂進するメカニズムとして、この遺伝子の5'上流に特異的に結合する核タンパク質の存在が明らかにされた(口野)。マウスにおけるapoBmRNA editingが発生、加令などの生理的条件で制御されることが示された(樋口)。
児童養護施設入所児とケアワーカーの愛着及び相互作用に関する基礎研究

児童養護施設児29名(平均年齢6.4歳)とそのケアワーカー6名が研究対象者であった。それぞれの愛着タイプの組み合わせによって、遊びでの行動、相互作用が瓧なるのかを検討した。その結果、安定型同士の組み合わせはその他の組み合わせよりも、子どもの従順さと相互作用において得点が有意に高かった。また、ケアワーカーのバーンアウト度が高いと、遊びでの攻撃性が高く、応答性が悪かった。さらに、そのバーンアウト度は母親の拒絶的養育態度と関連があった。本研究の目的は、児童養護施設で生活する幼児・児童とそのケアワーカー(保育士)の愛着をアセスメントし、その愛着の組み合わせで、相互作用に質的な違いがみられるかどうかを調べることである。その目的を遂行するために、平成22年度は、1.児童養護施設で生活する4歳9歳までの幼児・児童のドールプレイによる愛着アセスメント、2.その養育にあたるケアワーカーのアダルトアッタチメントインタビュー(AAI)による愛着アセスメントとバーンアウトに関するインタビュー、3.幼児・児童とケアワーカーの1対1のかかわり場面における相互作用の様子の録画など、研究に必要なデータを収集することを計画した。まず、幼児・児童の愛着アセスメントに関しては、対象となった福井県と大阪府の児童養護施設において合計26名にドールプレイを実施し、現在コーディングに着手している。併せて、子どもの行動アセスメントとしてChild Behavior Checklist Teacher's Formを実施した。次に、ケアワーカーの愛着アセスメントに関しては、研究代表者、2名の研究分担者、研究協力者である上野氏が集まり、講習会を実施した。その講習会では、AAIの認定コーダーである上野永子氏がAAIの実施方法について講義し、研究代表者および研究分担者が相互に実際にAAIを体験することにより、その実施方法と技術を習得した。さらに、幼児・児童とケアワーカーの相互作用に関しては、対象となる子どもとケアワーカー(合計6名)とのかかわり場面(カプラ等を使用した自由遊び)の録画を行った。実施時間は1組約30分ほどであった。これについては、現在コーディングの視点について検討している。以上のように、平成22年度に計画していたデータの収集はほとんど完了しており、平成23年度以降の分析の準備が整った状況である。平成23年度の研究実施計画において、最も重要な課題は児童養護施設入所児とケアワーカーとの自由遊びにおける相互作用の質を評定することである。その評定のためのガイドラインは、本研究において全く独自に開発することになる。本年度、研究代表者と研究分担者は3回集まり、相互作用の評定に関して検討を重ねた。1回目は、連携研究者(松見)も加わり、行動評定について話し合い、どのような評定方法にするか検討した。そして、NICHDの母子の相互作用の評定を参考に、ガイドラインを作成した。このガイドラインに従い、研究代表者と研究分担者の3名は録画された相互作用の3ケースを実際に個々に評定した。2回目は、上述の3ケースの評定結果を持ち寄り、それに基づいて1回目で作成されたガイドラインの更なる検討を行い、各評定項目により具体的な指標を入れた。その後、全ての相互作用の録画(データ)を1ケース2名が担当するよう割当て、評定を行った。3回目は、各自の評定の一致率から、更に具体的な指標が必要であることが明らかになり、ガイドラインの更なる検討が行われた。子どもとケアワーカーの愛着の組み合わせによって相互作用の質が変わってくるのではないかという本研究の仮説を検討するためにも、信頼性のある相互作用の評定を行うことは大変重要なことであるので、これについては時間をかけて慎重に行っている。評定者間の一致率を高めるためには、今後更なる検討・訓練が必要であると思われる。ドールプレイやアダルトアタッチメントによる愛着のアセスメントはすでに終了し、他の認定コーダーによる信頼性の確認も行われた。その結果、信頼性は満足のいくものであった。また、ケアワーカーのバーンアウトについては、当初、半構造化面接でおこなう予定であったが、時間的な問題から、質問紙による調査に変更し実施した。その他、児童養護施設入所児のケアワーカーによる行動評定も実施した。本年度は研究の最終年度であり、収集したデータの分析とまとめを行なった。児童養護施設児のドールプレイによる愛着評定、ケアワーカーのAAIによる愛着評定は十分な信頼性を持って判定が終了した。しかし、本研究の重要な部分を占める児童養護施設児とケアワーカーの遊びにおける相互作用の行動分析は評定間の一致率が低く、信頼性に欠けていた。そこで、本年度の前半に研究代表者と研究分担者が再度集まり、昨年度作成したコーディングガイドラインをより具体的にし、再度それぞれがコーディングし、一致率を高めた。不一致が大きいところは協議によって決めるという方法を取り、遊びにおける子どもとケアワーカーの行動、相互作用の評定を決定した。その他に、日常の子どもの行動評定、ケアワーカーのバーンアウト度の測定も行なった。

本研究の目的の一つは、子どもとケアワーカーの愛着の組み合わせにより、両者が一緒に遊ぶ場面での行動や相互作用の質に違いがあるのではないかという仮説を検証することであった。そこで、子どもとケアワーカーの愛着タイプをそれぞれ安定型と不安定型に分けて、4種類の組み合わせを作り分析した。その結果、安定型同士の組み合わせは、子どもの従順さと両者の相互作用の得点が他の組み合わせよりも有意に高かった。他の行動評定においても、有意差はでなかったものの、この安定型同士の組み合わせはほとんどのポジティブな行動(例えば、楽しさ、子どもの活動の持続性、ケアワーカーの応答性など)の得点が高いという結果であった。また、ケアワーカーのバーンアウト度は愛着タイプ別にみると関連は見られなかったが、AAIで測定された被養育態度との有意な関連が見られた。例えば、母親の拒否得点が高いとバーンアウト度が高いという結果であった。また、バーンアウト度が高いと遊び場面での子どもへの攻撃性が高く、応答性が悪いという結果も明らかとなった。相互作用の質の評定に計画していた以上の時間がかかっている。本来ならば、研究代表者・研究分担者が一堂に会し集中的に合宿のような形で、ガイドラインを検討し、評定の訓練することが望ましいが、そのような時間が取れないことが理由である。24年度が最終年度であるため、記入しない。今後、相互作用の質の評定をより信頼性のあるものとするために、もう少し時間をかける予定である。そして、評定の信頼性がある程度確立した後、子どもやケアワーカーとの愛着との関連や愛着の組み合わせとの関連を見て行く。また、その他の変数(例えば、子どもの行動評定やケアワーカーのバーンアウト度)と愛着や相互作用の質との関連など、本研究の目的を達成するための分析が残されている。
メタボリック症候群のリスク低減に有効な食品成分の探索

本研究において、初代培養血管平滑筋細胞増殖に対する各種ポリフェノールの影響を調べた結果、高濃度グルコース存在下での細胞増殖に対し、大豆イソフラボンによる抑制作用が示された。また、普通食或いは高脂肪食投与マウスを用いて、大動脈の等尺性張力及び血管内皮機能に対する各種ポリフェノールの影響を比較した。その結果、肥満を呈する高脂肪食群に対し、血管内皮依存性、或いはカリウムチャネル依存性の弛緩に加え、アセチルコリン弛緩反応の増強(内皮非依存性)を示すポリフェノールが見出され、これらのポリフェノール摂取が高脂肪食群での血圧調節に効果的である可能性が示唆された。メタボリック症候群の発症および進展のリスク低減に有効な食品成分を探索することを目的として、今年度は、フラボノイドをはじめとする各種ポリフェノールを用いて、血管平滑筋細胞の増殖および血管の収縮張力に対する影響の比較検討をおこなった。まず、マウス大動脈由来初代培養平滑筋細胞を用いて、高濃度グルコース存在下の細胞増殖に対するフラボノイドの影響について検討した。高濃度グルコース存在下における平滑筋細胞増殖の活性化に対し、ダイゼインおよびゲニステインは有意な抑制効果を示した。同条件に対し、L-シトルリンによる影響は認められなかった。ダイゼインおよびゲニステインによるこのような細胞増殖抑制効果が、慢性的な高血糖での血管壁肥厚の予防に寄与する可能性が示唆された。また、マウス大動脈の収縮張力に対する影響を調べた結果、ダイゼイン、ゲニステイン、ケルセチン、ルテオリン、ヘスペレチン、レスベラトロール、エクオール、アピゲニンは、それぞれ濃度依存性及びNO依存性の弛緩効果を有することが認められた。さらに、これらの食品成分存在下で、アセチルコリンの弛緩反応が、NO合成酵素阻害剤を前処置したにもかかわらず観察された。K+チャネル阻害剤(アパミン)の影響を調べた結果、ケルセチン、レスベラトロール、エクオール、およびアピゲニンによる弛緩作用には、血管内皮由来のNO産生だけでなく、平滑筋細胞のK+チャネル活性化も関与していることが示唆された。ポリフェノールのイオンチャネルに対する効果を調べた電気生理学的検討で、神経興奮抑制作用が報告されていることから、さらに詳細なメカニズムを検討する予定である。その他、メタボリック症候群モデルマウスを用いた検討にも着手した。今年度は、機能性食品の成分であるフラボノイド類(大豆イソフラボン、ケルセチン、アントシアニン、フラバノンなど)が、活性酸素産生・消去系の調節メカニズムにどのように関わっているのかを明らかにする目的で、モデル動物を用いて、レドックス調節に関わる8-ニトロcGMPとの相互作用の検討を行った。まず、8-ニトロcGMPを合成するために、cGMPのグアニン骨格の8位をブロモ化した後、ニトロ基との置換反応を行った。各工程での溶媒交換、脱塩、分離精製には逆相カラムクロマトグラフィーを用いた。精製した8-ニトロcGMPの定量には、HPLC装置にて吸光度測定法を用いた。また、マウス大動脈を用いたマグヌス実験により、フェニレフリン収縮に対するフラボノイド類の影響を調べた結果、各種フラボノイドの濃度に依存して、NO依存性、血管内皮依存性弛緩が観察された。さらに、NO合成酵素阻害剤(L-NAME)の前投与あるいは内皮細胞除去処理によって消失していたアセチルコリンによる血管弛緩応答が、フラボノイド(アピゲニン、エクオール、レスベラトロール)存在下で再び観察された。従って、これらのフラボノイドが血管内皮障害を補う効果をもつ可能性が示唆された。これらの知見とレドックス活性との関与を調べるために、上記のようにして合成・精製した8-ニトロcGMPを用いて検討した。その結果、フラボノイド類の作用とeNOSアンカップリングの関与が示唆された。メタボリック症候群の発症および進展のリスク低減に有効な食品成分を探索することを目的として、今年度は、高脂肪食投与マウスの胸部大動脈を用いて、各種ポリフェノールの血管内皮および血管平滑筋細胞に及ぼす効果について検討した。雄性C57BL/6マウスに4週令から15週間、高脂肪食を投与した結果、普通食投与マウスに比べ、体重、精巣上体脂肪量、腎周囲脂肪量、血糖値、血清インスリン濃度、血清コレステロール濃度の有意な上昇が確認された。ケンフェロール、シアニジン、ナリンゲニン、ベルガモチン、ミリセチン等、各種ポリフェノールは、胸部大動脈の等尺性張力において、一酸化窒素(NO)依存性の弛緩反応を示した。高脂肪食マウス由来大動脈において、シアニジン及びナリンゲニンによる弛緩が普通食マウス由来大動脈の弛緩反応より大きい傾向がみられ、さらに、NO非依存性の弛緩反応も観察された。

加えて、シアニジン、或いはナリンゲニン存在下でのアセチルコリンによる弛緩効果の増強も観察された。血管内皮細胞でのNO合成系活性化作用以外の効果を示すポリフェノールが見出され、高脂肪食摂取との関連も示唆されたことより、さらに詳しくその機序について明らかにすることが、メタボリック症候群の発症・進展の予防法確立につながると期待される。生活科学本研究で認められた、大豆フラボノイドの血管平滑筋細胞増殖に対する抑制効果の新たな知見から、他の機能性食品成分を用いた検討へ展開できる。また、用いた8種類のポリフェノールによる血管の収縮・弛緩に対する効果から示唆された作用メカニズムの知見をふまえ、酸化ストレスの関与についての検討へ展開できる。現在、メタボリック症候群モデルマウスを用いた検討も進行中である。8-ニトロcGMPの化学合成:ブロモ化反応、ニトロ基置換反応、それぞれの精製、純度の確認等に日数はかかったが、今年度の実験に使用する量の確保ができた。酸化ストレス制御の検討:血管収縮・弛緩に対する効果の解析において、マウス大動脈を用いたマグヌス実験により、フェニレフリン収縮に対するフラボノイド類の影響を調べた。ゲニステイン、ダイゼイン、ルテオリン、ケルセチン、アピゲニン、エクオール、レスベラトロール、ヘスペレチン、緑茶由来エピガロカテキン、等の各種フラボノイドを用いた。今年度の研究結果について学会発表で公開し、他の研究者との意見交換、情報交換も行っている。メタボリック症候群モデルマウスや各種培養細胞を用いて、機能性食品成分の効果について酸化ストレス制御の観点から検討することで、メタボリック症候群の発症・進展のリスク低減に対して有効な食品成分の探索を引き続き行う。引き続き、フラボノイド類の酸化ストレス制御について検討を行う。24年度に調べたフラボノイドの中から、作用の顕著なフラボノイドを選び、それらを用いて、病態マウスおよびマウス由来各種細胞(平滑筋細胞、脂肪細胞、肝細胞等)における酸化ストレスとフラボノイドの作用との関連を、分子生理学的、免疫組織学的、生化学的に検討する。フラボノイドと酸化ストレスとの関連を調べることによって、活性酸素産生・消去系の調節メカニズムに及ぼすフラボノイドの効果について明らかにする。さらにメタボリック症候群のリスク低減に対して有効なフラボノイド類を探索することで、より効果的なメタボリック症候群発症予防のための応用を目指す。購入した物品が、予定より安価であったため、残額としての未使用額が発生した。未使用額は、次年度の研究費と合わせて、研究に必要な消耗物品の経費に充てる。本研究に必要な測定装置の中で、精度が高く、かつ使用頻度の高い装置を優先的に購入するために、研究費を使用する。研究結果を、学会発表および論文発表の形で公開するために、研究費を使用する。
究極の透過型回折格子(グリズム)の試作

本研究においては、すばる望遠鏡の可視微光天体分光撮像装置(FOCAS)、近赤外線ステラコロナグラフ(CIAO)、名古屋大学の可視-近赤外線分光撮像観測装置(Trispec)等に用いられるグリズム(透過型回折格子)の開発研究を行った。先ず、試作グリズムの評価を行うため、回折光の強度分布からFFT等を用いた信号処理を用いて格子形状を復元する回折格子形状計測システムを開発した。また、このシステムを単色計や複数の発光ダイオードを組み合わせることにより、回折効率を測定することができるようにした。CIAO用グリズムとしてはフッ素系赤外線透過樹脂に、超精密3次元加工装置に取り付けた単結晶ダイアモンドバイトで回折格子の加工を行い、約65-70%の高い回折効率が得られた。FOCAS極低分散中分散グリズムおよび3種類のTrispec低分散グリズムはガラスプリズム基板上に樹脂のレプリカ加工を行う方法にて製作し、80%以上という高い回折光率が得られた。FOCAS超高波長分解能グリズムとCIAO分光モード用グリズムは屈折率1.9以上の光学材料に深さ数μmの格子を直接加工する必要あり、ニオブ酸リチウム(LiNbO3:LN)やZnSeを透過回折格子に加工するため、さまざまな方法で試作し評価を行ったが、所要の性能を達成するにはさらなる研究開発が必要である。また、赤外線高分散分光器として従来の反射型回折格子分光器に対して装置全体のサイズを1/4に縮小することが可能なゲルマニウムの透過反射回折格子の試作を行い、格子形状や表面粗さは2.0μm近傍では改善の余地はあるが、10μmにおいては充分に実用可能であることを実証した。1.深い溝のグリズム製作法の開発すばる望遠鏡の第一期観測装置の可視用微光天体分光撮像観測装置(FOCAS)および近赤外線ステラコロナグラフ(CIAO)の高分散グリズムはホルダのサイズ的な制限により屈折率が2.0以上の光学材料に溝の深さが数μmの回折格子を直接加工する必要がある。我々は斜入射イオンエッチング法等、既存の回折格子の製作法につき実験を行なった結果、いずれの場合も溝が深い回折格子については理想形状を得ることが困難であり、新たな回折格子の製作方法を開発する必要があることが分かった。そのために我々はレプリカ格子をイオンエッチングにより高屈折率材料に転写する回折格子製作法および、ホトリソグラフの手法により深い短形格子を製作し、さらに斜入射イオンエッチングによりブレ-ズ格子に加工する方法を考案し、開発中である。レプリカ格子の製作法は確立し、現在はイオンエッチングの条件出しを行なっている。2.回折格子形状測定装置の開発グリズムの加工法を開発する場合においては正確な格子の形状を簡便に測定できることが重要である。しかし、格子間隔が狭く溝が深い回折格子の場合、触針式の表面粗さ計では形状を正確に測定することは難しい。また干渉を用いた方法では格子の斜面で反射された光束が干渉計の光学系に戻らないと正確な計測ができない。共焦点レーザー顕微鏡も同様である。一方、原子間力顕微鏡(AFM)等を用いれば測定可能であるが、測定に時間を要する上、装置が非常に高価であるため一般的な測定方法とは言えない。我々は回折光の強度分布からFFT等を用いた信号処理を用いて格子形状を復元する回折格子形状計測システムを考案し、回折光の強度分布を取り込む装置部分は完成した。今後、格子形状を復元する信号処理法の開発を行う。1.深い溝のグリズム製作法の開発すばる望遠鏡の第一期観測装置の可視用微光天体分光撮像観測装置(FOCAS)、近赤外線ステラコロナグラフ(CIAO)の高分散

グリズムはホルダーのサイズ的な制限により、屈折率1.9以上の光学材料に深さ数μmの格子を直接加工する必要がある。FOCAS用グリズムの光学材料としては屈折率が2.22.4でサイズがφ100×100mm3程度の素材が入手できるニオブ酸リチウム(LiNbO3:LN)あるいはZnSeに限られる。特にZnSeは20μmまで透明なので、中間赤外線分光器用の素材としても利用できる。昨年度に引き続き、イオンエッチング装置を用いて新しい回折格子製作方法の開発実験を行った。しかし、いずれの方法でもイオンエッチングでは深さが1μmを越える格子を直接加工することが困難であることが分かった。現在、新しいプラズマエッチング法やレーザー励起化学エッチング法等による溝が深い(1.0μm)グリズムの試作準備を行っている。2.回折格子形状測定装置の開発回折格子形状計測システムはほぼ完成した。現在、このシステムに単色計を組み込んで自動的に回折光率が測定できる追加機能を開発中である。3.グリズムの性能評価CIAO撮像モード用グリズムは基板材料としてフッ素系赤外線透過樹脂(サイトップ;旭硝子製)を使用し、超精密ダイアモンド加工装置に単結晶バイトを取り付けて回折格子の加工を行った。完成したグリズムの回折効率を測定したところ、2.4μm(2次)において約65%、1.6(3次)および1.2μm(4次)において70%という結果が得られた。FOCAS用超低分散と低分散グリズムの評価用サンプルを試作し、回折光率の測定および対物グリズムとして天体のスペクトル観測を行った。効率は直進波長が80%という良好な結果であった。天体のスペクトル観測は現在解析中である。本研究においては、すばる望遠鏡の可視微光天体分光撮像観測装置(FOCAS)、近赤外線ステラコロナグラフ(CIAO)、名古屋大学の可視-近赤外線分光撮像観測装置(Trispec)等に用いられるグリズム(透過型回折格子)の開発研究を行った。まず、試作グリズムの評価を行うため、回折光の強度分布からFFT等を用いた信号処理を用いて格子形状を復元する回析格子形状計測システムを開発した。また、このシステムを単色計や複数の発光ダイオードを組み合わせることにより、回折効率を測定することができるようにした。CIAO用グリズムとしてはフッ素系赤外線透過樹脂に、超精密3次元加工装置に取り付けた単結晶ダイアモンドバイトで回折格子の加工を行い、約65ー70%の高い回折効率が得られた。FOCAS極低分散中分散グリズムおよび3種類のTrispec低分散グリズムはガラスプリズム基板上に樹脂のレプリカ加工を行う方法にて製作し、80%以上という高い回折光率が得られた。FOCAS超高波長分解能グリズムとCIAO分光モード用グリズムは屈折率1.9以上の光学材料に深さ数μmの格子を直接加工する必要があり、ニオブ酸リチウム(LiNbO3:LN)やZnSeを透過型回折格子に加工するため、さまざまな方法で試作し評価を行ったが、所要の性能を達成するにはさらなる研究開発が必要である。また、赤外高分散分光器として従来の反射型回折格子分光器に対して装置全体のサイズを1/4に縮小することが可能なゲルマニウムの透過反射型回折格子の試作を行い、格子形状や表面粗さは2.0μm近傍では改善の余地はあるが、10μmにおいては充分に実用可能であることを実証した。
種苗生産におけるグリーンウォーター技術の高度化と汎用性の強化

種苗生産では飼育水に微細藻類を添加し(グリーンウォーター)、仔稚魚減耗の低減化を図る。一方、動物の腸内細菌叢は動物の健康に多大な影響を与えることが明らかになっている。本研究では飼育水環境の様々な細菌叢が仔稚魚の消化管内細菌叢の形成にどの様に関わるのか、ナンノクロロプシス(ナンノ)で確認された善玉菌効果がナンノ以外の微細藻類(珪藻)でも存在するのかを検証した。その結果、仔稚魚の消化菅内細菌叢は主に餌飼料の細菌叢の影響を受けるが、グリーンウォーターで善玉菌として威力を発揮したSulfitobacter属の細菌もマダイ消化管内に定着していること、珪藻にも善玉菌群が存在することを確認した。種苗生産で用いるグリーンウォーター(微細藻類培養液)の効果、特に養殖魚の腸内細菌群集に与える影響について調べるため、平成25年度はクロマグロを中心にその腸内細菌叢の解析手法の確立を試みた。近畿大学水産養殖種苗センターすさみ事業場にて、2012年8月、2013年7月(以下、2013-1)および8月(以下、2013-4)に卵収容した完全養殖クロマグロが沖出しされるまでの種苗生産過程を対象とした。孵化日をDay 0としたときに、2012年はDay -1からDay 31、2013-1はDay -1から35、そして2013-4はDay -1から30までを対象期間とした。クロマグロ仔稚魚とあわせて、その飼育水および餌飼料も採取し、解析した。細菌叢の解析には、多様性解析手法の一種であるARISA(automated ribosomal intergenic spacer analysis:リボソーム遺伝子間スペーサー自動解析)を用いた。2012年、2013-1および2013-4のいずれにおいても、クロマグロ仔稚魚の消化管内細菌は、種苗生産初期よりも後期の方が細菌種数が減少する傾向にあった。その種数は種苗生産初期には30種を超えることもあったが、後期には59種となった。一方、飼育水や餌飼料では、細菌が30種以上検出されることが多かった。餌飼料では同じワムシであっても検出される細菌種数は1068種とばらつきがあった。2012年のクロマグロ消化管内細菌叢のSimpson多様度指数(1/D)、Shannon-Wiener多様度指数(H')および均衡度(E)は、飼育水や餌飼料細菌叢のそれらと比較して有意に低かった(p < 0.05)。しかし、2013-1および2013-4試料ではこの傾向は見られなかった(p > 0.1)。同じように養殖されたにもかかわらず、2012年、2013-1および2013-4において同様の傾向が見られなかったことは、クロマグロ種苗の安定的な供給と関連性があるのかもしれない。種苗生産で用いるグリーンウォーター(微細藻類)技術の効果について、1)養殖魚の腸内細菌叢への影響をマダイとトラフグについて検討し、2)汎用性強化の観点から、珪藻類(Chaetoceros gracilisとC. calcitrans)にもナンノクロロプシスと同じような効果が存在するのか否かについて、養殖エビで世界的に問題になっているEarly Mortality Syndrome(EMS)の原因菌(Vibrio sp.)を対象として検討した。1)マダイとトラフグの腸内細菌叢:近畿大学水産養殖種苗センターすさみ事業場にて平成26年度に種苗生産されたマダイとトラフグ(受精卵から沖出までの1ヵ月間)の飼育水、餌と仔稚魚の消化管の各試料を採取した。各試料中の細菌叢解析にはARISA法を用いた。その結果、マダイとトラフグの飼育水や餌試料の細菌叢はそれぞれにおいて特徴的な細菌叢を形成していたが、マダイとトラフグの腸内細菌叢は類似していた。なお、腸内細菌として偏性好気性でプロバイオティックス効果が確認されているArthrobacter sp.に近縁な配列を両魚種から確認した。2)珪藻のグリーンウォーター効果:珪藻類の試験では、珪藻の培養濾液に魚病細菌に対して効果の見られたRoseobactorグループの善玉菌(Sharifah & Eguchi,2011. doi:10.1371 /journal.pone.0026756)とEMS原因菌(Vibrio sp. 2株)を共培養した。その結果、同じキートセロスであっても、今回の組み合わせの場合、C. gracilisではあまり抑制効果が見られず、C. calcitransではEMS原因菌2株のうち一方に増殖抑制効果を示した。これは微細藻類、善玉菌、悪玉菌の種類の様々な組み合わせにより、グリーンウォーター効果に変化が生じることを示唆する。最終的な目標は健康な仔稚魚を高い生残率で生産するための飼育水環境を確立することである。本年度はGreen Water(微細藻類)を利用した種苗生産現場において、仔稚魚期における養殖マダイの消化管内細菌叢と餌飼料および飼育水の細菌叢の関係について調べた。対象としたのは秋季に受精卵を収容したマダイの約1ヶ月間の仔稚魚である。養殖1ラウンド目(1R)と2ラウンド目(2R)の2期間で、マダイ仔稚魚、餌飼料そして飼育水を採取した。

細菌叢の解析には、多様性解析の一種であるARISA (Automated ribosomal intergenic spacer analysis)法を用いた。仔稚魚とあわせて、飼育水と餌飼料も採取した。特徴的なピークについてはクローニング後、塩基配列を取得した。その結果、2R目において顕著であったが、餌飼料と初期消化管内の細菌叢は類似性が高くなっていた。一方で、後期の消化管内では、餌飼料や飼育水とは異なる細菌叢を形成していた。興味深いのは、マダイの消化管内細菌群にSulfitobacter sp.に近縁な細菌種が存在していた点である。本属細菌はナンノクロロプシス(ナノクロ)のGreen Waterに大量に存在し、魚病細菌Vibrio anguillarum(悪玉菌)の増殖を特異的に抑制する善玉菌である。Green Waterに由来する可能性が高い本属細菌が、仔稚魚期におけるマダイの消化管内に定着し、抗病原菌として機能しているのかもしれない。ナノクロ以外の微細藻類として、悪玉菌フリーにできた珪藻Chaetoceros gracilisoのGreenWater効果を調べたところ、その効果は認められなかった。悪玉菌フリーの珪藻と上述の善玉菌(ナノクロ由来)と悪玉菌を共培養した場合、悪玉菌の増殖が少し抑えられたが、その効果はナノクロの場合ほどではなかった。様々な細菌が共存する通常の珪藻培養液には悪玉菌の増殖を抑えるGreenWater効果が認められたことから、微細藻類の種類に応じて共存する善玉菌の種類も変化する可能性が高い。種苗生産では飼育水に微細藻類を添加し(グリーンウォーター)、仔稚魚減耗の低減化を図る。一方、動物の腸内細菌叢は動物の健康に多大な影響を与えることが明らかになっている。本研究では飼育水環境の様々な細菌叢が仔稚魚の消化管内細菌叢の形成にどの様に関わるのか、ナンノクロロプシス(ナンノ)で確認された善玉菌効果がナンノ以外の微細藻類(珪藻)でも存在するのかを検証した。その結果、仔稚魚の消化菅内細菌叢は主に餌飼料の細菌叢の影響を受けるが、グリーンウォーターで善玉菌として威力を発揮したSulfitobacter属の細菌もマダイ消化管内に定着していること、珪藻にも善玉菌群が存在することを確認した。哺乳類などの場合、腸内細菌叢がその生物の免疫力などに密接に関連することが報告されいる。腸内細菌叢をいかに上手く整えるか、善玉菌と悪玉菌のバランスをいかに制御するかが重要になる。魚類の腸内細菌叢とその健康状態については未だ不明な点が多いが、哺乳類に見られるような現象は十分に予想できる。昨年度確立したDNA抽出法によるARISA法により養殖魚の腸内細菌叢がどのように形成されるのかという課題に本年度から本格的に取り組んだ。養殖魚は口から飼育水や餌を取り込むため、飼育水や餌の細菌叢が腸内細菌叢に影響することが考えられる。本年度の実験結果から、細菌叢の多様性は飼育水>餌>腸内となることが分かった。これは飼育水や餌中の細菌群が仔稚魚の体内に入った場合、腸内に定着し易い細菌とそうでない細菌が存在することを示唆する。本研究課題の最終目標のひとつはグリーンウォータ技術を使って健康な仔稚魚を育成することである。本年度の成果はグリーンウォータ技術が仔稚魚の腸内細菌叢の制御に繋がる可能性を示す。これは順調に研究がステップアップしていることを意味する。
独居高齢者の社会的孤立予防に向けた民産官学共創GPモデルの構築と社会実装研究

本年度は社会的孤立予防モデルフレームワークを基盤とした民産官学共創によるGPモデルの開発を目的とし、(1)最新文献レビューの実施、(2)中山間農村地域A市、都市部地域B市を対象に、プライマリーインフォーマント(PI)ならびにキーインフォーマント(KI)へのインタビューを実施した。PIは一人暮らし高齢者世帯ならびに夫婦のみ高齢者世帯であり、KIは各々の当該地域においてPIに関わりのある保健福祉専門職や住民組織代表者等である。文献レビューならびにインタビューで得られた結果より、GPモデルのコンテンツの検討を行った。中山間農村地域A市、都市部地域B市を対象に、プライマリーインフォーマント(PI)ならびにキーインフォーマント(KI)へのインタビューを実施し、モデルコンテンツの検討を実施したため。検討したモデルコンテンツに基づき、モデル地域におけるパイロットスタディにて評価を実施する。
H.D.Thoreauの文学における予型論的伝統の継承と変容について

ソロウ(H.D.Thoreau)の文学に見られる予型論的伝統の継承と変容について、本研究は次の四点を解明した。1、Walden(1854)出版までのソロウの自然観形成に働いた予型論的思考法を鳥のイメッジをめぐって考察し、「ジャ-ナルから作品へーソロウの鳥とイギリス・ロマン派」と題する論文にまとめた。特にソロウが、Coleridge、Wordsworth、Keats、Shelleyらイギリス・ロマン派の謳う鳥に新世界固有の予型論的意義を賊与するプロセスを、Waldenの素材となったJournalの鳥の記述を詳細に解明した。2、Walden出版以降、特に最晩年(1859ー1862)に書かれたJournal及び自然誌ノ-トに表れたソロウの自然観について、予型論(神学)的自然観と科学的自然観の葛藤と和解の内実を考察し、「『種の起原』と「種子の拡散」ーダ-ウィンとソロウ」と題する論文にまとめた。特に19世紀中葉の科学者のうち、Charles Darwinのソロウへの影響を調査し、『種の起原』とソロウの自然誌ノ-ト、「種子の拡散」(The Dispersion of Seeds)との比較検討により、ソロウがcreationismの自然観を克服し、positivismの自然観に到達してゆくプロセスを解明した。又この論文の書誌的研究を拡充し「charles Darwin,The Origin of Species(1859)のHenry David Thoreauへの影響研究について」と題してまとめた。3、予型論的思考が形成したNew EnglandJeremiadと呼ばれる伝統は、18、19世紀の歴史的展開のなかで大きく変容し、フランクリン的American Value賞讃の思潮へと世俗化した。C.B.BrownよりE.A.Poeへと続くAmerican Gothicはかかる思潮へのアンチテ-ゼとして理解できることを「アメリカン・ゴシックの変容ーBrownからPoeへ」で考察した。この研究は予型論継承の振幅を明確化し、ソロウを広く共時的視点から把握せんとしたものである。4、1859年上記自然誌エッセイ執筆と同時進行したソロウのJohn Brown事件との関わりは、従来内的関連が否定されてきたが、本研究によるとソロウが到達したエコロジカルな歴史観の中で融合され、アメリカ的自然と歴史の新たな関係を樹立した。この点を「「種子の拡散」とソロウの歴史観」と題してまとめ、投稿準備中である。ソロウ(H.D.Thoreau)の文学に見られる予型論的伝統の変容について、本年度は次の三点について解明した。1.Walden(1854)出版までのソロウの自然観形成に働いた予型論的思考法を鳥のイメッジをめぐって考察し、「ジャ-ナルから作品へ-ソロウの鳥とイギリス・ロマン派」と題する論文にまとめた。特にソロウが、Coleridge,Wordsworth,Keats,Shelleyらイギリス・ロマン派の謳う鳥に新世界固有の予型論的意義を賊与するプロセスを、Waldenの素材となったJournalの鳥の記述を詳細に検討し解明した。2.Walden出版

以降、特に最晩年(1859-1862)に書かれたJournal及び自然史ノ-トに表れたソロウの自然観について、予型論(神学)的自然観と科学的自然観の葛藤と和解の内実を考察し、「『種の起原』と『種の拡散』--ダ-ウィンとソロウ」と題する論文にまとめた。特に19世紀中葉の科学者、Asa Gray,Louis Agassiz,Charles Darwinらのソロウへの影響を調査し、『種の起原』とソロウの自然史ノ-ト、『種の拡散』(The Dispersion of Seeds)又その講演原稿「森の木の継続」(“The Succession of the Forest Trees")との比較検討により、ソロウがcreationismの自然観を克服し、positivismの自然観に到達してゆくプロセスを解明した。又ソロウがアメリカの市民史に対立するものとしてのアメリカの自然史樹立を目指したことも考察した。3.予型論的思考が形成したNew EnglandJeremiadと呼ばれる伝統は、18、19世紀の歴史的展開のなかで大きく変容し、フランクリン的American Value賞讃の思潮へと世俗化した。C.B.BrownよりE.A.Poeへと続くAmerican Gothicはかかる思潮へのアンチテ-ゼとして理解できることを「アメリカン・ゴシックの変容-BrownからPoeへ」で考察した。この研究は予型論継承の振幅を明確化し、ソロウを広く共時的視点から把握せんとしたものである。本年度の研究目的は、ソロウの文学がアメリカの神学的柱であった予型論の伝統を変容する過程をソロウのアメリカ観において考察することにおいた。その実施計画は、以下の4項目であった。1、未出版手稿、“The Dispersion of Seeds"の構造・テ-マ解明。2、ソロウのreform paperにおける民主主義思想と予型論の関係考察。3、John Brown処刑事件へのソロウの発言と行動の再検討。4、ソロウのアメリカ的自然と歴史への対処が、予型論的伝統を歴史観へ変容する過程についての考察。上記1に関しては、新たにニュ-ヨ-ク市立図書館より入手した手稿のコピ-“Wild Fruits"やWilliam Howorthの文献等の研究により、ソロウ最晩年の自然誌エッセイの意義と構造をかなりな程度まで究明し得た。上記2、3については、ミシガン州立大学より入手したJohn Brown関係の文献、James Redpath,Echoes of Harper's Ferry(1860)その他により再検討し、1859年12月2日(Brown処刑の日)前後のJournal、手紙を詳細に検討した。従来ソロウの社会的発言と自然への没頭は分離して捉えられてきたが、Brown追悼ミサ広告の十数枚のコピ-裏面が、自然誌手稿に使われる等、両者は内部に深く関わることが判明した。この点についてはAdams and Ross,Revising Mythologies(1988)に代表されるソロウ作品成立過程の研究文献等参照すべきものも多く、なお今後の研究課題としたい。上記4は本研究の結論部である。