hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
新規ＭＡＰｓ複合体とアクチン繊維ー小胞体ネットワークによる微小管構築機構の解析

昨年度に明らかにした「シロイヌナズナにおける微小管と小胞体の相互作用」に関する研究成果は、論文投稿準備中である。今年度は微小管付随タンパク質群(MAPs)画分において同定されたtudorドメインタンパク質に関する解析を進めた。tudorタンパク質は動物や菌類においてARGONAUTE/PIWIやヒストンを介した胚発生や環境応答に重要であることが知られている。シロイヌナズナには61種類のtudorドメインタンパク質が存在する。その中でも2種のtudorタンパク質(TD1, TD2)がMAPs画分に多く含まれていた。TD1、TD2遺伝子領域にT-DNAが挿入され、TD1, TD2遺伝子の各々が欠失した変異体を得た(td1-1, td1-2, td1-3, td2-1, td2-2)。TD1遺伝子を欠失したtd1-1, td1・2, td1-3変異体は見かけ上、野生型(Col・0)と違いはなかった。一方、TD2遺伝子を欠失したtd2-1, td2-2変異体は植物体が少し小さく、かつ花成時期が早まっていた。TD1とTD2の両方の遺伝子を欠失した二重変異体を作製すると、植物体の大きさはTD2単独欠失変異体よりも更に小さくなり(野生型の約50%)、かつ花成時期も早くなった。更にTD1-TD2二重変異体では発芽した幼植物体のうち、子葉が融合して1枚になる表現型が10%程度の確率で見られた。これらのことはTD1, TD2が植物の胚化生や成長、花成時期の調節において重要であることを示唆している。更にTD2-GFPを恒常的に化現させたシロイヌナズナを用いて、免疫沈降実験を行った。TD2画分にはTD1、AGO1、ヒストンH2が含まれており、TD1とTD2は複合体を形成していること、TD1とTD2がAGOやヒストンと相互作用することが示唆された。(抄録なし)新規MAPs複合体に含まれる新規微小管付随タンパク質CCMAファミリーの機能解析に関してはCCMAファミリーのT-DNA挿入変異体の中でCCMA3とCCMA4の変異体が微小管変異体に特徴的な表現型である「ねじれ」を起こしていることが明らかとなった。これらの変異体に関して微小管をGFPにより可視化し、微小管の動態にどのような影響を与えるか調べている。また微小管とアクチン繊維-小胞体ネットワークの解析に関しては、チューブ状小胞体の分岐点が微小管と高頻度で共局在することを明らかにした。さらにこのチューブ状小胞体の分岐点に注目し1時間の長時間観察を行ったところ、分岐点(3方向にチューブが伸びる)は時折変化し2方向や1方向にのみ伸びる場合があった。このことより微小管と小胞体の相互作用は分岐点特異的では無いことが分かった。2方向や1方向に小胞体が伸びる場合、微小管との交点は小胞体チューブよりも少し太く、何らかの相互作用があることが強く示唆された。また5分間の観察では全く動かないチューブ状小胞体の分岐点が見られたが、1時間の観察では全ての分岐点が動くことが確認された。今年度の実験により、微小管と小胞体を繋ぐ何らかの因子が存在している可能性が非常に高いと思われる。この小胞体と微小管を繋ぐ因子は現在までに知られている何れかの微小管付随タンパク質である可能性が高いので、現在作製している種々の微小管付随タンパク質マーカーを用いて因子の同定を行う予定である。昨年度に引き続き、植物における小胞体と微小管の相互作用に関する詳細な解析を行った。現在までの通説として動物におけるチューブ状小胞体の伸長は微小管に沿って行われ、植物におけるチューブ状小胞体の伸長はアクチン繊維に沿って行われるとされている。アクチン繊維を脱重合する薬剤であるラトランキュリンBを処理した場合、活発な小胞体の再編は行われなくなったが、一部の小胞体チューブの伸長が見られた。このラトランキュリンB存在下で伸長する小胞体チューブは全て微小管に沿っていることを確認した。また伸長している小胞体の全体が微小管に沿うのではなく、先端が特に強く微小管に結合していることを確認した。また微小管はアルファとベータのチューブリンダイマーが重合した極性を持った繊維であるが、ラトランキュリンB存在下で伸長する小胞体チューブは微小管の極性には関わらず伸長することを確認した。更にラトランキュリンB存在下で実際にアクチン繊維が関わっていないことを示すために、アクチン繊維をLifeact-Venusで可視化した植物体において小胞体も可視化し、アクチン繊維が見えないところで小胞体チューブの伸長が起きることを確認した。またラトランキュリンBと微小管脱重合剤であるオリザリンを同時に処理した場合、小胞体チューブの伸長が全く見られなくなった。これらの実験の各条件における小胞体チューブの伸長速度を解析すると、無処理の場合7.8±1.7胆/secであり、ラトランキュリンB存在下では0.14±0.03pm/secであった。動物細胞における微小管依存的な小胞体チューブの伸長速度は0.1pm/sec程度であり、今回のラトランキュリンB存在下での解析結果とほぼ同じであった。

これらの結果により、植物細胞においても微小管依存的な小胞体チューブの伸長があることを証明した。昨年度に明らかにした「シロイヌナズナにおける微小管と小胞体の相互作用」に関する研究成果は、論文投稿準備中である。今年度は微小管付随タンパク質群(MAPs)画分において同定されたtudorドメインタンパク質に関する解析を進めた。tudorタンパク質は動物や菌類においてARGONAUTE/PIWIやヒストンを介した胚発生や環境応答に重要であることが知られている。シロイヌナズナには61種類のtudorドメインタンパク質が存在する。その中でも2種のtudorタンパク質(TD1, TD2)がMAPs画分に多く含まれていた。TD1、TD2遺伝子領域にT-DNAが挿入され、TD1, TD2遺伝子の各々が欠失した変異体を得た(td1-1, td1-2, td1-3, td2-1, td2-2)。TD1遺伝子を欠失したtd1-1, td1・2, td1-3変異体は見かけ上、野生型(Col・0)と違いはなかった。一方、TD2遺伝子を欠失したtd2-1, td2-2変異体は植物体が少し小さく、かつ花成時期が早まっていた。TD1とTD2の両方の遺伝子を欠失した二重変異体を作製すると、植物体の大きさはTD2単独欠失変異体よりも更に小さくなり(野生型の約50%)、かつ花成時期も早くなった。更にTD1-TD2二重変異体では発芽した幼植物体のうち、子葉が融合して1枚になる表現型が10%程度の確率で見られた。これらのことはTD1, TD2が植物の胚化生や成長、花成時期の調節において重要であることを示唆している。更にTD2-GFPを恒常的に化現させたシロイヌナズナを用いて、免疫沈降実験を行った。TD2画分にはTD1、AGO1、ヒストンH2が含まれており、TD1とTD2は複合体を形成していること、TD1とTD2がAGOやヒストンと相互作用することが示唆された。現在、新規MAPs複合体に含まれる新規微小管付随タンパク質であるCCMAファミリーの変異体が得られており、またアクチン繊維-小胞体ネットワークの解析に関しても微小管との相互作用が確実にあると思われる。これらの結果は本研究の基盤となる結果であり、おおむね順調に進んでいると言える。小胞体と微小管の相互作用に関しては「微小管依存的な小胞体チューブの伸長」を発見し、想定していた以上の成果を得られた。この現象は今までに全く知られておらず、植物の微小管研究の発展に大きな影響を与えると思われる。当初予定していたMAPS複合体の解析に関して大きな進展は見られていないが、小胞体と微小管の相互作用の成果が得られたことより「おおむね順調に進展している」と評価した。本研究課題について変異体を用いた解析、蛍光タンパク質を用いた局在解析、生化学的な解析などを予定している。また現在までに得られている成果を更に詳細に解析するための準備も進んでおり、特に大きな問題点はない。昨年度に明らかにした「微小管と小胞体の詳細な動態観察」と今年度の「微小管依存的な小胞体チューブの伸長」に関しては迅速に論文として発表することを目指す。MAPS複合体に関しては現在作製中の4重変異体において、明確な表現型が得られれば大きな進展が得られると考えている。変異体解析以外にも植物から精製したMAPSを用いて相互作用解析等を行う予定である。(抄録なし)
西洋古代の魂不滅説・滅亡説の論拠・含意に関する哲学的研究

西洋古代における、“人の魂は人の死後も存在し続ける"とする説(プラトンら)、“人の死にさいしてその魂は滅亡する"とする説(エピクロス派、ストア派ら)、“人の死にさいしてその魂の一部は滅亡し、一部はある形で存在し続ける"とする説(アリストテレスら)を、その論拠と、その説を奉じることが奉じる人にとってもつ含意とに即して、哲学的に解明した。主要な成果は、プラトン『パイドン』の最終論証の論拠の、ソクラテス、ケべス双方の思考に即しての解明である。この研究は2016年IPS大会で発表され、選抜論文集収録が決定している。プラトンに重点を置いた。アリストテレス、道徳的実在論などをめぐっても研究成果を発表した。魂および魂の不死性(・可滅性)をめぐる、特にプラトンによる思索を考察するための基本的視座がほぼ形成された。それは一つには『パイドン』、『国家』などのテクストの読解を通してであるが、また特に、12月のジョヴァンニ・フェラーリ教授(カリフォルニア大学バークレイ校)との長時間にわたる研究打ち合わせから学んだところが大きかった。さらには、学会での研究発表および意見交換も、今後の研究の方向を確立する上で貢献するところ大であった。とりわけ、慶應大学(日吉)にて4月に開催の国際学会「プラトンとレトリック」で「プラトン『法律』における説得」と題する英語発表を行ない、『法律』第10巻の、魂の死後の定め等に関わる「説得」の概念を解明、これが通常の意味での説得と大きく異なる点を指摘し、当該箇所の魂論的意義を解明した。また米国エモリ大学にて3月に開催の学会「プラトン的道徳実在論」で、「『ピレボス』と「主観的・客観的」の対比」と題する英語発表を行ない、『ピレボス』の議論を「主観的・客観的」という多義的概念を軸に考察、魂論の後期プラトン的展開に独自の仕方で切り込んだ。座古田豊編『自然観の変遷と人間の運命』(東北大学出版会)に、「天罰論をめぐって」と題する邦語論文を寄稿し、天罰論の背景にある神なり天なりへの信仰を共有せずに天罰論の「一定の意義」を説くことの浮薄さを指摘、無信仰の者が宗教的信念を扱う際の倫理を問題化した。『新プラトン主義研究』に「プラトンらと無限」と題する邦語論文(大会シンポジウムの提題をもとにしたもの)を掲載。プラトンの「無限」概念をアリストテレス、プロティノス、トマス、クザーヌスとの対比を通じて明らかにし、そのさい、無限の一つの場(つまり快苦の場)としての魂が問題化される場面を考察した。主としてプラトン・アリストテレスに即し、魂不死説、またこれと多かれ少なかれ関連する魂論に関し、解明を進めた。7月刊行の『内在と超越の閾ー加藤信朗米寿記念哲学論文集』(土橋茂樹・納富信留・栗原裕次・金澤修編、知泉書館)に、論文「加藤、プラトン」を発表。加藤信朗のプラトン解釈に即して、魂不死の問題について研究者の基本的視座を提示した。次回の国際プラトン学会(IPS)大会(テーマは『パイドン』篇、2016年7月、ブラジルのブラジリアにて開催予定)で発表すべき論文'Immortality and eternity: Cebes' remark at Plato's PHAEDO 106d2-4'の要旨を提出、審査を経て受理された。9月1-4日、ギリシャのスペツェス島the Anargyrios and Korgialenios Schoolにて開催の、プラトン『ピレボス』篇の研究会に参加、同篇31b-36cの報告を行なった。翻訳では、S・D・ワルシュ「目的論、アリストテレス的徳、正しさ」を『徳倫理学基本論文集』(加藤尚武・児玉聡編・監訳、勁草書房)に、また、ジョン・マクダウェル「徳と理性」、「倫理学における投射と真理」を『徳と理性ーマクダウェル倫理学論文集』(大庭健編・監訳、勁草書房)に発表した(いずれも原語は英語)。論文「加藤、プラトン」で、魂不死の問題についての研究者の基本的視座を提示した。次年度の国際プラトン学会大会にて発表予定の'Immortality and eternity: Cebes' remark at Plato's PHAEDO 106d2-4'は、プラトンの魂不死説の根幹に関わるものだが、その要旨が審査を経て受理されている。プラトン『ピレボス』篇の魂論については、スペツェスの研究会での成果が刊行予定である。2016年7月5日、ブラジルのブラジリア大学にて開催の国際プラトン学会大会(XI Symposium Platonicum)のParallel Sessionにて'Immortality and eternity: Cebes' remark at Plato's PHAEDO 106d2-4'と題する発表を行なった(選考を経て。なお、Proceedingsに投稿中)。7月12日、ブラジルのサンパウロ大学にて、同題の発表を招待講演として行なった。プラトン『パイドン』における、ソクラテスによる魂不死の最終論証の根本的性格、そして特に、その論証のケべスによる理解の根本的性格について解明した。106d2-4のケべスの謎めいた言葉(「不死なるものは永遠である」という前提が*

独立*のステップとして含まれる)は、『パイドロス』における魂不死の議論を予描するものと解し得、両箇所の背後にアルクマイオンの議論があった可能性がある、と論じた。9月18日、国際基督教大学にて開催のギリシャ哲学セミナー第20回研究セミナーのシンポジウム「なぜいまギリシャ哲学かー回顧と展望ー」にて、「ギリシャ哲学研究と哲学」と題する提題を行なった。本提題に基づく原稿は『ギリシャ哲学セミナー論集XIV』に発表された(web版は2017年3月31日刊)。魂論を含むギリシャ哲学研究がいかに哲学と関わりを結び得るのかについて、提言を行なった。バーニェトによるアリストテレスの倫理学の研究、アリストテレスの魂論の研究をモデルとし、ギリシャ哲学研究を通じて現代哲学の議論に有効な問題提起を行なうことを目指すべきであると論じた。このようにして、プラトン、アリストテレスの魂、特に魂不死についての思索の根本的性格や可能性の解明が進んだ。プラトン研究の最大規模の権威ある国際学会(国際プラトン学会)において、選考を経た発表を行なった。海外の一流大学(サンパウロ大学)にて招待講演を行なった。国内の有力学会(ギリシャ哲学セミナー)の第20回を記念するシンポジウムで提題を行ないかつこれを公刊した。プラトンの諸対話篇の魂不死の諸議論の関連について、アルクマイオンとも関連させながら、ユニークな見解を提示した。ギリシャ哲学研究と哲学の関わりについて、アリストテレスの魂論の特殊性を考慮しつつ、明確な提言を行なった。このように、名実ともに、古代哲学における魂の可死性・不死性をめぐる議論の解明はおおむね順調に進展していると言えよう。投稿中の論文が国際プラトン学会のProceedingsに採用されなかった場合には、改訂の上、別の海外の査読付き雑誌に投稿する。最終年度、1.2014年度の国際学会(慶應日吉)での発表を発展させ、プラトン『法律』の言う市民の「説得」が、市民に拒絶の自由を認めないという意味で独特である点を指摘し、『法律』の魂論の一側面に光を当てる論文を『メトドス』に発表した。2.カリフォルニア大学バークレイ校でのワークショップ(ジョヴァンニ・フェラーリ司会)で、プラトン『政治家』全体の意図についての加藤信朗の発表にコメントし、同篇の政治家がどこまで哲学者であるのかとの重要な問題が浮上した。3.東北大学にて1月、総括シンポジウムを開催した。フランチェスコ・アデモッロがプラトンにおける変化の概念について、荻原がプラトン『国家』における、教育に関連する説得について講演を行なった。4.ジョヴァンニ・カセルターノのプラトン『パイドン』の研究書の書評を『西洋古典学研究』に発表、魂不死論証の、論証としての限界をめぐる著者の発言に考察を加えた。研究期間全体を通じて、西洋古代の魂不死説(特にプラトン)・可死説(特にエピクロス)、またこれと密接に関連する魂論の諸相について、人同士の関わりの場面や、自然界における魂の位置にも注目しながら、多岐にわたる解明を行なった。主要な成果は、2016年にブラジリア大学でのSymposium Platonicumで発表し、サンパウロ大学で招待講演として読んだ、プラトン『パイドン』の魂不死最終論証の新解釈であり、これは同SymposiumのSelected Papersに収録されることが決まった(2018年6月刊行予定)。次には、2016年のギリシャ哲学セミナーのシンポジウム提題「ギリシャ哲学研究と哲学」(『セミナー論集』に収録)、そして、上記の『法律』における説得についての論考である。
ミクロゾーム型アルデヒド脱水素酵素の小胞体膜挿入機構

今年度は細胞膜に局在するC-末端アンカー型膜蛋白質であるHPC-1/syntaxin lA(HPC-1)と小胞体に局在するC-末端アンカー型膜蛋白質であるミクロゾーム型アルデヒド脱水素酵素(msALDH)の局在化機構を調べた。まず、HPC-1についてはCOS細胞発現系を用いて解析した。野生型HPC-1はCOS細胞のゴルジ装置および細胞膜に局在し、C-末端疎水性領域を欠失した変異体は細胞質に留まることから、C-末端疎水性領域がHPC-1の膜挿入部位であることが確認された。HPC-1のC-末端側に糖鎖付加部位を融合したキメラには糖鎖が付加され、野生型同様ゴルジ装置および細胞膜に局在した。これらの結果より、HPC-1は小胞体膜にC-末端疎水性領域が挿入された後、ゴルジ装置を経由して細胞膜に移行することが示された。また、大腸菌マルトース結合蛋白質との種々のキメラを作製し、それらのCOS細胞内局在を調べた実験からHPC-1の疎水性領域を含むC-末端24アミノ酸残基が小胞体移行に必要であることがわかった。msALDHについては緑色蛍光蛋白質(GFP)とmsALDHのC-末端35アミノ酸残基(膜貫通領域と小胞体移行配列を含む)のキメラ(GFPALDH(35))の組み換え蛋白質を調製した。野生型とキメラ蛋白質とそれらをCOS細胞にマイクロインジェクションしたところ、インジェクション直後細胞質に分布していたキメラは6時間後(37°C条件下)に小胞体に移行した。これに対してGFPは細胞質に留まったままであった。GFPALDH(35)の小胞体移行は37°C条件下では1時間以内に起こったが、マイクロインジェクション後細胞を4°Cに置くとGFPALDH(35)の小胞体移行は観察されず、この反応は温度依存性であることがわかった。ATP-γSとGTP-γSはGFPALDH(35)の小胞体移行を阻害した。これらの結果より、GFPALDH(35)の小胞体移行反応はエネルギー依存性であることおよびGTP結合蛋白質が関与することが示唆された。
モデル誤差を抑制する補償器構造による新たなロバスト制御

制御系設計を行う場合には,対象の数式モデルに基づいて制御器の設計を行うことが一般的である.このとき,数式モデルと制御対象の動特性との間にギャップがあれば,それに起因して所望の制御性能を得られない.本研究では,制御対象の出力とモデルの出力の差をフィードバックすることで見かけ上の両者間のギャップを小さくする新しいロバスト制御手法について研究を行なった.誤差抑制のみに特化するような補償器を付加するため,既存の制御系設計法と併用することができ,良好な制御性能を簡単な設計手順で実現できる.さらに,通常ロバスト化しにくい非線形システムや無限次元システムなど様々な対象への適用も期待できる.制御系設計を行う場合には,対象の数式モデルに基づいて制御器の設計を行うことが一般的である.このとき,数式モデルと制御対象の動特性との間にギャップがあれば,それに起因して所望の制御性能を得られない.本研究では,制御対象の出力とモデルの出力の差をフィードバックすることで見かけ上の両者間のギャップを小さくする新しいロバスト制御手法について研究を行なう.誤差抑制のみに特化するような補償器を付加するため,既存の制御系設計法と併用することができ,良好な制御性能を簡単な設計手順で実現できる.さらに,通常ロバスト化しにくい非線形システムや無限次元システムなど様々な対象への適用も期待でき,その手法の構築を行なう.本年度は,モデル誤差抑制補償器の内部安定性について解析手法を与えた.フィードフォワードの場合は補償器内のフィードバックループのみ考えればよいのに対し,フィードバック制御を併用する場合は制御器だけでなく全体に対する安定性解析が必要になる.フィードバック制御器が既知なものとして,その安定性解析の手法を構築している.通常のロバスト制御において与えられている安定性解析手法に基づいて導出したものであり,H無限大制御の枠組みでその判定条件を与えている.また,多入力多出力系(MIMO系)に対する評価,設計法を考え,柔軟に評価関数を調整できる設計の枠組みを導いた.制御系設計を行う場合には,対象の数式モデルに基づいて制御器の設計を行うことが一般的である.このとき,数式モデルと制御対象の動特性との間にギャップがあれば,それに起因して所望の制御性能を得られない.本研究では,制御対象の出力とモデルの出力の差をフィードバックすることで見かけ上の両者間のギャップを小さくする新しいロバスト制御手法について研究を行なう.誤差抑制のみに特化するような補償器を付加するため,既存の制御系設計法と併用することができ,良好な制御性能を簡単な設計手順で実現できる.さらに,通常ロバスト化しにくい非線形システムや無限次元システムなど様々な対象への適用も期待でき,その手法の構築を行なう.昨年度までに,モデル誤差抑制補償器の内部安定性について解析手法を与えた.さらに,多入力多出力系(MIMO系)に対する評価,設計法を考え,柔軟に評価関数を調整できる設計の枠組みを導いている.本年度は,非線形システムへの適用を想定し,非線形システムに対するロバストな線形化手法を提案し,学術雑誌として掲載された.さらに,振動系などのより実用的なモデルに適用し,その有効性を示した.無限次元系の一種であるむだ時間系にも適用し,本年度の成果としては想定以上に進んだ.制御系設計を行う場合には,対象の数式モデルに基づいて制御器の設計を行うことが一般的である.このとき,数式モデルと制御対象の動特性との間にギャップがあれば,それに起因して所望の制御性能を得られない.本研究では,制御対象の出力とモデルの出力の差をフィードバックすることで見かけ上の両者間のギャップを小さくする新しいロバスト制御手法について研究を行なった.誤差抑制のみに特化するような補償器を付加するため,既存の制御系設計法と併用することができ,良好な制御性能を簡単な設計手順で実現できる.さらに,通常ロバスト化しにくい非線形システムや無限次元システムなど様々な対象への適用も期待できる.外乱オブザーバでも同様の機能を実現することができるが,制御対象が不安定な場合や逆システムが利用できない場合には利用できない.それに対して本研究の成果は,非線形系や,不安定系に適用できるなど幅広い制御対象に対して利用可能であるところに有用性がある.制御系設計を行う場合には,対象の数式モデルに基づいて制御器の設計を行うことが一般的である.このとき,数式モデルと制御対象の動特性との間にギャップがあれば,それに起因して所望の制御性能を得られない.本研究では,制御対象の出力とモデルの出力の差をフィードバックすることで見かけ上の両者間のギャップを小さくする新しいロバスト制御手法について研究を行なった.誤差抑制のみに特化するような補償器を付加するため,既存の制御系設計法と併用することができ,良好な制御性能を簡単な設計手順で実現できる.さらに,通常ロバスト化しにくい非線形システムや無限次元システムなど様々な対象への適用も期待できる.当初目的とした非線形系に対する成果だけでなく,27年度に予定していた無限次元系への適用についても着手し,一定の成果を導いている.当該研究に関する学術雑誌への掲載が2件あるだけでなく,さらなる学術雑誌への投稿を予定しているなど計画を上回るペースで成果を創出した.制御工学最終年度である27年度には,規範モデル設計に関する研究の推進を中心として計画を行っている.この計画は変わらない.これに加え,センサノイズに関する解析などを進めることでさらなる展開を目指す.H

25年に目的としていたMIMO系についての設計法を導き,この結果を論文として公表した.一部,H25年の目標としていた研究(非最小位相系に対する設計)の進度は遅れているが,H26年に遂行予定であった非線形制御系への実装についてのめどを立てている.当初予定していた研究計画における実験機材の購入時期がずれたため.今後は,非最小位相系に対する設計や,非線形系に対する設計法について定式化を行い,その解法を導く予定である.研究計画からの変更はない.次年度が最終年度であり,論文の投稿費用など研究結果の公表を中心として有効に活用する.予定していた論文の掲載費用の期が来期にずれたため。論文2本の掲載に係る掲載費用に充当する。それ以外は当初の計画通りであり、計算機購入、数値計算パッケージライセンス費用および出張費用としての支出を計画している。
原条領域のアイデンティティ確立機構の解析

マウスの体軸の後方への伸長は、ノードと原条からなる原条領域において、より後方の組織が付加されることによりおこる。我々は、Foxa2遺伝子のノード・脊索エンハンサーのコア配列が原条領域で特異的に活性化されることを見出し、原条領域のアイデンティティ確立機構を明らかにすることを目的として、コア配列の活性化機構を解析し、次のことを明らかにした。コア配列は、Wnt/β-cateninシグナル処理したマウス奇形腫細胞P19で活性化され、その活性化には2つの転写因子が関わっている。2つの転写因子の結合配列は、Foxa2エンハンサー全長がノードと脊索で遺伝子発現を与えるためにも必須である。さらに、コア配列に作用する転写因子の1つはTeadであり、Tead-EnRによりノードでのTeadの活性を阻害するとノードに由来する脊索が消失する。また、ゼブラフィッシュ胚でTeadの活性を増減させるとFoxa2の発現が増減する。これらの事は、Teadがもう1つの転写因子と協調的に働くことが、Foxa2のノードにおける発現の鍵であり、Teadの働きは種間で保存されていることを示している。また、Teadは胚の広い領域で発現していることから、もう1つの因子が原条領域に限局しており、Teadはその転写因子と協調して原条領域の遺伝子発現を制御していると考えられた。Teadには4つの類似した遺伝子が存在するが、それらのノックアウトマウスを作成したところ、Tead1;Tead2の2重変異マウス胚において、頭部以外でのFoxa2の発現消失及び体軸の後方への伸長の異常が見られ、Tead1/2が原条領域のアイデンティティの確立に中心的なはたらきをしていることが示唆された。原条領域は、脊椎動物胚の体軸形成を担う重要な領域であるが、そのアイデンティティがどのように確立されるかは知られていない。私はこれまでの研究で、ハエで器官のアイデンティティを担う転写因子TEFの脊椎動物ホモログが、原条領域における遺伝子発現を制御していることを見いだした。そこで、本研究では、TEFが原条領域のアイデンティティ確立の鍵となる因子であると考え、TEFとその活性を制御するコファクターの機能解析により、原条領域のアイデンティティ確立機構を明らかにする事を目的としている。ショウジョウバエでは、転写因子TEF(Scalloped)による翅領域のアイデンティティの確立にはコファクターのVestigialが重要な役割を果たしている。そこで、まず、マウスからTEFのコファクター候補であるVestigialのホモログをクローニングした。ヒトとマウスのデータベースを利用し、マウスにおいて3種のVestigialホモログの存在を確認し、それらの部分的な塩基配列情報をもとに、マウス胚からのRT-PCRとcDNAライブラリーのスクリーニングにより3つのVestigialホモログのcDNAをクローニングした。これら3つのVestigialと4つのTEFとについて原腸陥入期のマウス胚における発現を調べたところ、RT-PCR法では2つのVestigialとすべてのTEFとで発現が認められたが、発現が弱くin situハイブリダイゼーション法で発現部位を特定できないものが多かった。そこで現在、これらのVestigialとTEFとについて、原条形成における機能解析と発現パターンの特定を同時に行うため、β-galマーカー遺伝子のノックインによる遺伝子破壊マウスの作成を進めている。脊椎動物胚の体軸形成は胚形成の基礎となる重要な現象である。本研究は、私が同定した転写因子TEFが、体軸形成領域(ノードと原条)で活性化していることと、ハエでは翅のアイデンティティを支配していることから、その機能解析を通して体軸形成領域のアイデンティティ確立機構を解明しようとするものである。マウスには4つのTEF遺伝子が存在するが、初期胚において、すべての遺伝子が同様のパターンで体軸形成領域を含み広く発現していた。

そこで、4つのTEFとそのコファクター候補である2つのVestigial遺伝子について、その体軸形成における機能を遺伝学的に解析するために、遺伝子ノックアウトマウスの作成を進めている。一部については完成したが、変異をホモに持つ個体でも生存しており、それらについては、今後、さらに多重変異体を作成して機能解析をする予定である。培養細胞の実験から、TEFは原条で発現しているWntシグナルの下流で働く因子と協調的にエンハンサーに結合して遺伝子の活性化を行うことを見出した。ゼブラフィッシュ胚から3つのTEFをクローニングし、TEFを正あるいは負の転写因子に改変した物をゼブラフィッシュ胚に過剰発現させて、その体軸形成における機能を解析した。シールドで発現するFoxa2遺伝子は、胚にVP16-TEFを過剰発現すると発現領域が拡大し、逆にTEF-EnRで抑制され、TEFの正の転写因子としての機能がシールド形成に重要であることが示唆された。さらに、VP16-TEFは単独ではシールドを誘導できず、Wntシグナルあるいはその下流で働く因子と協調的に働くことによりシールド形成をつかさどることが示唆された。これらの結果は、TEFは体軸形成シグナルと協調的に作用することにより原条領域のアイデンティティの確立に関わっていることを示唆するものである。マウスの体軸の後方への伸長は、ノードと原条からなる原条領域において、より後方の組織が付加されることによりおこる。我々は、Foxa2遺伝子のノード・脊索エンハンサーのコア配列が原条領域で特異的に活性化されることを見出し、原条領域のアイデンティティ確立機構を明らかにすることを目的として、コア配列の活性化機構を解析し、次のことを明らかにした。コア配列は、Wnt/β-cateninシグナル処理したマウス奇形腫細胞P19で活性化され、その活性化には2つの転写因子が関わっている。2つの転写因子の結合配列は、Foxa2エンハンサー全長がノードと脊索で遺伝子発現を与えるためにも必須である。さらに、コア配列に作用する転写因子の1つはTeadであり、Tead-EnR発現プラスミッドのエレクトロポレーションによりノードでのTeadの活性を阻害するとノードに由来する脊索が消失する。また、ゼブラフィッシュ胚でTeadの活性を増減させるとFoxa2の発現が増減する。これらの事は、Teadがもう1つの転写因子と協調的に働くことが、Foxa2のノードにおける発現の鍵であり、Teadの働きは種間で保存されていることを示している。また、Teadは胚の広い領域で発現していることから、もう1つの因子が原条領域に限局しており、Teadはその転写因子と協調して原条領域の遺伝子発現を制御していると考えられた(投稿中)。Teadには4つの類似した遺伝子が存在するが、それらのノックアウトマウスを作成したところ、Tead1;Tead2の2重変異マウス胚において、頭部以外でのFoxa2の発現消失及び体軸の後方への伸長の異常が見られ、Tead1/2が原条領域のアイデンティティの確立に中心的なはたらきをしていることが示唆された。
文章表現とネットワーク構造の分析に基づく大規模CGMデータ分析手法の提案

ブログやツイッターなどのUGC(User Generated Contents)は,複数の著者によって断片的に書かれた記事の集合体である.本研究では,大量な記事集合における、記事間の関連性や類似性を手がかりに,記事間や著者間の経時的な変容の解明手法、文章の印象評価手法を確立するとともに,それらの知見に基づく新たな情報探索手法を考案した.質問回答サイトのアーカイブデータ等を用いた評価を行い,考案手法の有効性を確認した.ブログやツイッターなどのUGC(User Generated Contents)は,複数の著者によって断片的に書かれた記事の集合体である.本研究では,大量な記事集合における、記事間の関連性や類似性を手がかりに,記事間や著者間の経時的な変容の解明手法、文章の印象評価手法を確立するとともに,それらの知見に基づく新たな情報探索手法を考案した.質問回答サイトのアーカイブデータ等を用いた評価を行い,考案手法の有効性を確認した.本研究は,記事の断片化が進むCGMへの適用を狙いとして,断片化された記事を集約し記事間の関連に基づく情報探索手法,記事を投稿した著者のネットワーク構造を分析する手法,ならびに,記事中に出現する語彙の親しみやすさ(親密度)や印象を用いた文章表現の特徴抽出法を確立することを目指している.(1)記事中に出現する語彙の共起関係から記事間のハイパーリンク構造を構築し,ナビゲーションのためのネットワークを構築する手法を提案した.社会ネットワーク分析で用いられる次数中心性や媒介中心性の尺度を用いた評価を行い,各記事からの出次数に制約を与えたネットワークが情報探索に有効な構造であることを示した.(2)質問回答サイトにおける回答者間をネットワーク構造で表現し,個々の回答者の役割と貢献度を定量的に算出するQARank, QAHitsアルゴリズムを提案した.これは,「優れた回答者が回答した質問でベストアンサーを取得した回答者はより優れている」とする考えに基づくもので,実運用された質問回答サイトのデータに適用し,参加者の役割や貢献度にカテゴリ間で特徴的な差異があることを明らかにした.また,複数のカテゴリにまたがって回答する参加者の存在やその傾向も定量的に明らかにした.(3)新聞記事および質問回答サイトの複数の記事を対象に,出現する語彙の親密度と印象度を評価し,これらの分布が記事の種別やカテゴリに依存していることを明らかにした.また,質問と回答の文章中に含まれる印象語が,ベストアンサーの推定に一定の効果があるとの示唆も得られた.本研究は,複数の著者によって書き連ねられるUGC(User Generated Contents)を対象に,記事間の関連性・類似性を手がかりとした情報探索手法,ならびに,著者コミュニティの経時的な変容の解明と文章の印象評価手法を確立することを目指している.当期の主な成果は以下の通りである.1.記事中に出現する語彙の出現頻度と共起関係を用いて,語彙及び文書間のハイパーリンクを構成する手法を詳細に検討し,提案するリンク構造が曖昧な情報要求を解決するための情報探索に有効であることを利用者実験によって検証した.2.コミュニティQAサイトにおける回答者間の関係性を,質問を介した2部グラフで表現する手法を提案し,特徴的なグラフパターンを抽出するモチーフ分析手法を拡張・適用して,質問内容を表すカテゴリ毎に特徴的なモチーフが存在することを明らかにした.さらに,QAサイトの期間を分割した評価を行い,モチーフの出現分布が変化の変化からコミュニティの成長や変容を解明する手がかりを得た.3.QAサイトに実際に投稿された質問記事および回答記事を実験者に提示する文章の印象評価実験を行い,文章の印象を表す因子を明らかにした.得られた因子の得点を利用することで,質問者によって選ばれたベストアンサー記事を質問記事からある程度推定することが可能にできることを示した.4.インターネット検索の結果を二次元平面上に配置することで,検索結果の俯瞰と埋もれていたマイナーな結果への到達を支援するインタラクティブな検索手法を提案した.複数の著者によって書かれたUGC(User Generated Contents)を対象に、記事間の関連性・類似性を手がかりとした情報探索手法,ならびに,著者コミュニティの経時的な変容の解明、文章の印象評価手法を確立することを目指している.当期の主な成果は以下の通りである.1.質問回答サイトに投稿された記事集合から話題トピックと季節性のある特徴語を、LDAを用いて抽出する手法を考案し、インターネット検索における多様なクエリ拡張を実現する手法を確立した。これまで検索結果の分類に使用されていたファセットをクエリ拡張に適用し、ファセット毎に用意したタグクラウドをタブで切り替えながら、検索語を追加・拡張することができる。2.質問回答サイトにおける質問回答文の印象を言語的な特徴から推定する手法について検討し、形態素情報,文末表現や単語心像性という特徴量を用いることで質問回答文の印象を精度良く推定できることを明らかにした。3.探索的な情報検索で重要となるユーザとのインタラクションを高次化することを目的に、検索結果となる複数ページから部分領域を抽出して編纂する機能と、複数ページ間の関連性把握を支援する検索インタフェースを提案した。いずれもインタラクティブな操作を繰り返すことで、ユーザの潜在的な情報要求の明確化と、情報要求を過不足なく満たす検索結果を得ることができると期待される。4.探索的な情報検索を行うユーザの検索履歴を、閲覧したページに出現する特徴語を用いて可視化するWeb閲覧履歴の空間的把握手法を提案した。

特徴語を自己組織化マップで2次元空間に配置する手法を確立し、探索課題を包含する文書集合から作成したマップ上に、複数ユーザの閲覧履歴を個々に表示することで、ユーザ毎の探索範囲の重なりや差異を容易に把握することができることを実験的に明らかにした。
バイオアッセイモデルによる上咽頭癌リンパ節転移機構に関する研究

上咽頭癌では、腫瘍細胞においてリンパ管新生因子、血管内皮増殖因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)-Cが発現しており、その結果、リンパ管数が増加してリンパ節転移が促進される機構が存在する可能性が示唆された。しかし、EBV潜伏感染やEBV関連蛋白の発現とリンパ管新生因子の発現については、in vivo、in vitroともに有意な結果は得られなかった。そこで、舌癌症例について、予防的頸部郭清術後のpN0リンパ節のリンパ管新生を検討した所、後にリンパ節転移再発を来した症例では既にリンパ管数が増加していることが判明した。以上から、舌癌のリンパ節転移が成立するまでに、所属リンパ節では既にリンパ管新生が起こっている可能性が示唆された。本年度は、研究実施計画に基づき、以下の検討を行った。すなわち、1)上咽頭癌組織切片標本におけるリンパ管新生の程度を抗ポドプラニン抗体を用いて腫瘍組織内リンパ管を染色同定し、その局在とリンパ管増勢の程度を検討した。その結果、リンパ管新生が著しい標本ではリンパ節転移の頻度およびその程度が高くなる傾向を示し、上咽頭癌においてリンパ管新生がリンパ節転移の促進に大きく寄与している可能性が示唆された。2)LMP1の発現とリンパ管数とは有意に相関し、上咽頭癌のリンパ管新生におけるLMP1の重要な役割を示唆する結果であった。3)さらに、上咽頭癌組織標本において、腫瘍細胞におけるVEGF-C蛋白おい発現を免疫染色で示し、VEGF-Cを強発現している腫瘍ではリンパ管新生が促進している可能性が示唆された。4)また、LMP1の発現とVEGF-C蛋白の発現レベルは有意に相関し、LMP1がVEGF-Cの発現を誘導している可能性が示唆された。5)以上の結果を受けて、LMP1発現ベクターを上皮系細胞に導入して、LMP1を共生発現させた所、LMP1陽性細胞ではVEGF-Cの発現レベルが劇的に増加した。以上の結果から、上咽頭癌においてEBV LMP1は強力なリンパ管新生因子であるVEGF-Cの発現を誘導し、リンパ管新生の促進を介してリンパ節転移を促進している可能性が示唆された。6)今後、上記メカニズムの検証を動物実験でするために、LMP1のstable lineを作成する予定である。本年度は昨年度に引き続き、咽頭癌標本におけるリンパ管新生因子およびその関連因子の発現に関するさらに詳細な検討を行った。昨年度は新生リンパ管の数および腫瘍細胞によるVEGF-C発現の程度との相関を検討したが、本年度はさらにVEGF-Dの発現に加えてVEGF-CおよびVEGF-Dの受容体であるVEGFR-3の発現についても検討した。VEGF-DとVEGF-Cの両者を発現している腫瘍でリンパ節転移が多く見られることに加えて、VEGF-CとVEGFR-3の両者を発現している腫瘍においてもリンパ節転移を来し易い傾向を認めた。上咽頭由来細胞にレトロウイルスを用いたLMP1発現ウイルスベクターを感染させ、恒常的にLMP1を発現する細胞を作成した。LMP1発現細胞におけるVEGF-C発現をウエスターンプロット法を用いて誘導の有無を確認した所、恒常的にLMP1を発現している細胞においてもVEGF-Cの発現増加が認められた。同細胞をヌードマウスの上咽頭に移植しようと試みた所、細胞増殖が盛んで転移を起こす前に腫瘍のサイズが増大するため、現在は移植する細胞数を減らして、マウス所属リンパ節転移の有無について検討中である。適切な条件が得られるにはもうしばらく検討を要する見込みである。マウス胸管を用いたリンパ管新生モデルについては、現在、準備中である。さらに現在、上咽頭由来細胞にGFP標識VEGF-C発現ベクターを感染させ、蛍光腫瘍リンパ節転移モデルの作成を準備中である。本年度は昨年度に引き続き、上咽頭癌標本におけるリンパ管新生因子およびその関連因子の発現に関するさらに詳細な検討を行った。昨年度は新生リンパ管の数、リンパ節転移の程度および腫瘍細胞によるVEGF-C発現の程度、VEGF-Dの発現の程度との相関を検討し、有意な相関を認めることが判明した。本年度はさらにVEGFR3との相関についても詳細な検討を行い、有意な相関を得た。まず、この時点で、データのとりまとめを行い英文誌へ投稿し、すでに受理された。LMP1発現細胞におけるVEGF-C発現をウエスターンブロット法を用いて誘導の有無を確認した所、恒常的にLMP1を発現している細胞においてもVEGF-Cの発現増加が認められた。

同細胞をヌードマウスの上咽頭に移植しようと試みた所、細胞増殖が盛んで転移を起こす前に腫瘍のサイズが増大するため、現在は移植する細胞数を減らして、マウス所属リンパ節転移の有無について検討中である。しかし、臨床症例ではLMP1の発現とVEGF-C発現に相関を認めなかった。今後は上咽頭癌のリンパ管新生に関するVEGF-C以外の因子について検討を進めていく予定である。併せて、舌癌pNO症例における所属リンパ節におけるリンパ管新生の程度の予後に関する検討を行い、リンパ管新生が起こっている症例では後発リンパ節転移が多い事を見いだし、現在投稿準備中である。上咽頭癌は初診時に高率に既にリンパ節転移を来しており、予後不良の一因となっている。本研究では、上咽頭癌のリンパ節転移にリンパ管新生が関連していると想定し、まず、上咽頭癌組織標本におけるリンパ管数とN因子の相関について検討した。その結果、組織内リンパ管数とN因子の進行が有意に相関していることが判明した。さらに、代表的リンパ管新生因子である血管内皮増殖因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)-C、および、その受容体であるVEGF receptor-3 (VEGFR3)の発現について検討した所、上咽頭癌組織におけるこれらのリンパ管新生因子の発現とN因子の進行、リンパ管数も有意に相関することが判明した。以上から、上咽頭癌では、腫瘍細胞においてリンパ管新生因子が発現しており、その結果、リンパ管数が増加してリンパ節転移が促進される機構が存在する可能性が示唆された。しかし、上咽頭癌におけるEBV潜伏感染の存在、さらには潜在膜蛋白の発現とリンパ管新生因子の発現については、in vivo、in vitro双方において期待した結果は得られず、EBV潜伏感染と上咽頭癌のリンパ管新生については有意な結果は得られなかった。そこで上咽頭癌に限らず、頭頸部癌のリンパ管転移におけるリンパ管新生の役割について検討することにした。舌癌症例について、予防的頸部郭清術後のpN0リンパ節のリンパ管新生を検討した所、後にリンパ節転移再発を来した症例ではpN0であっても既にリンパ管数が増加していることが判明した。さらに、リンパ節におけるリンパ管数と原発巣におけるリンパ管新生因子(VEGF-C, D)の発現が有意に相関していることが判明した。以上から、舌癌のリンパ節転移が成立するまでに、所属リンパ節では既にリンパ管新生が起こっている可能性が示唆された。上咽頭癌におけるVEGF-C誘導について、vitroのデータの実際の臨床症例に関するデータに乖離を認めた。24年度が最終年度であるため、記入しない。今後上咽頭癌におけるVEGF-C以外(例えばVEGF-D)の誘導機構の解明についても取り組んでいく予定である。
貧困世帯の若者の移行と家族に関する研究

本研究では、1生活保護世帯の若者がいかに学校から仕事へと移行するのか、2移行する前と後で、彼らと家族との関係性はどのように変化するのかを明らかにすることを目的とした。彼らの移行には、家庭生活での彼らの役割や家族の状況、生育環境が影響しており、次の移行へ移ったとしても彼らの家族への愛着は変わらないことが分かった。しかし、経済的負担によって、家族関係が変化することも示唆された。また学校から仕事へと移行するためには家族以外の第三者との関係が築けているかどうかがひとつの分岐点となっていることが見出された。本研究の目的は、1生活保護世帯の若者がいかに学校から仕事へと移行するのか、2移行する前と後で、彼らと家族との関係性はどのように変化するのかを明らかにすることである。貧困の世代的再生産を考える上では、彼らが社会的自立を果たす様相をとらえることが必要であるため、本研究では、生活保護世帯の若者の家族関係に着目しながら、彼らが社会に出るプロセスを明らかにする。今年度は、研究計画に基づき、子どもの貧困、生活保護制度、子どもと家族の関係性、若者の移行に関する調査研究の文献収集、レビューを行った。子どもの貧困に関連する諸制度について整理しながら、貧困世帯や生活保護世帯の子ども・若者の家族との関係性について、検討を行ったところ、子どもの家庭内役割や親子関係、あるいはきょうだいとの関係に着目し長期的に調査分析した文献はほぼないという課題が確認された。その中で本研究では、生活保護世帯の若者を対象としたインタビュー調査を実施し、これまで行ってきたインタビューデータと比較を行い、家族に対する語りや家族関係について、変化していたことを見出した。学校を卒業、あるいは退学したのち、仕事に就くまでのプロセスのなかで、家族はキーパーソンとなっており、このことに対する彼らの捉え方にも変化がみられた。来年度以降は、今年度の研究成果をもとに、引き続きインタビュー調査を行い、学会発表と論文執筆を行うことで成果発信をしていく予定である。今年度は、(1)子どもの貧困、生活保護制度、子どもと家族の関係性、若者の移行に関する調査研究の文献収集およびレビュー、(2)生活保護世帯に育った若者を対象としたインタビュー調査、また(3)これまでのインタビューデータとの比較、(4)ケースワーカーを対象としたインタビュー調査、を予定していた。その中で、(1)(3)は順調に進んでおり、(4)についても予備調査を含め準備が進んでいる。なお、生活保護世帯の子どもを対象とした学習支援教室のボランティアスタッフにも調査協力を依頼し、さらなる分析を行うこととしている。今年度は、昨年度のデータ収集に基づき、分析を進め、知見をまとめて学会発表、論文執筆を行う予定である。研究計画に照らし、こうした見通しがついていることから、現在までの進捗状況として、おおむね順調に進展していると判断した。本年度は、生活保護世帯の若者を対象としたインタビュー調査について分析を進めた。その中で、学校から仕事へと移行するためには、家庭以外の第三者との関係が築けているかどうかがひとつの分岐点となっていることが見出された。若者にとって、家族がキーパーソンであり、家庭や家族関係の状態が彼/彼女らの次の移行に影響していることは明らかであったが、第三者との関係の有無によって、彼/彼女らの家族に対する認識も変容していく過程があることが浮かび上がった。幼児期や学齢期とは異なり、アルバイトやSNSなどによって行動範囲や交友範囲が広がったときに、若者は家族以外の第三者に出会い、具体的に次の移行を決める時期を迎える。移行の様相は複雑であるものの、その全体的なプロセスを見出すことができた。この知見は若者を対象とした学習支援や就労支援を構築する際に活用可能と考えられる。また生活保護制度の中でも、とくに若者が大学や短大、専門学校等に進学する際に行う手続きとして世帯分離に着目し、その運用についても検討を行った。加えて本年度は、福祉行政および学習支援スタッフを対象とした継続的なインタビュー調査を実施した。若者の自立に関連して、生活保護制度(世帯分離)や就労支援、学習支援の現状と課題について、生活保護世帯の若者の家庭状況や家族関係を踏まえた聞き取りを行った。支援者側が行っている工夫や抱える困難についても整理し、より効果的なアプローチについて検討した。今年度は、文献レビューの整理、検討について成果発信する。またインタビュー調査で得られた知見については、各学会にて発表および論文執筆を行う予定である。子ども時代と若者時代において、彼らの家族や家庭生活についての語りがどのように変化したのかを提示し、そのことがどのように彼らの自立にかかわるのかを明らかにする予定である。なお、仮にケースワーカーとの日程調整が難しい場合には、生活支援課の他スタッフや生活保護世帯の子ども・若者を対象とした学習支援教室のスタッフにもインタビュー調査を実施し、本研究の目的を達するよう対応を講ずる。学習支援教室については、もともと中高生を対象としたものであるが、その後も継続して若者とのかかわりがあるため、本研究にふさわしい調査協力者と考えられる。
天竜林業の展開構造とその発展方向

静岡県の天竜林業の構造的性格を把握・解明するため、既に発見し保存してもらっていた大富部家と津倉家(静岡大学保有)の古文書の収集・分析と、天竜林業に関する資料を蔵する京大など各大学で関係資料を収集・分析し、さらに、天竜地域においても江戸時代から今日に至る関係資料を収集・分析した。その結果、以下の如き新しい知見・成果が得られた。1.大富部家は、天竜川支流の阿多古川筋にある上阿多古村の名主を歴代勤め、かつてこの地域の山林を大富部分家と2分して所有していたが、商人への道を歩まず、百姓として生産者の道を歩いたため、窮乏化と共に山林を切り売りし、最後は7haの山林所有者へと縮少した。その山林を買い取ったのは商品作物を栽培した百姓達であった。かくして、阿多古川筋の林業構造が農民的展開構造を示す理由がわかった。2.津倉家は、4代前より回船問屋で掛塚港に住み、所有船2隻で天竜材を江戸へ運送・販売した。その取引量は相当なものであり、この問屋業で資本を蓄積して天竜地域の山林を相当面積購入し、山林地主となった。鉄道が中ノ町を通るようになり木材は鉄道で東京へ運送されたので、津倉家は回船問屋を止めて中ノ町に製材工場を建て併せて山林経営を営んだ。現在も相当面積の山林を天竜川本流域に所有している。このように、津倉家は商人資本として資本を蓄積したが早い時期に生産業者に転化しており、地主的展開構造を示していない。3.京大など各大学と、天竜地域とで収集した資料でも、天竜林業の構造的性格は、これまで言われてきた地主的展開構造を示しておらず、むしろ、それとは反対の性格である農民的展開構造を示していることがわかった。4.総括すると、天竜林業の展開構造は、農民的展開構造型であり、将来の発展もこの性格の方向をとるべきである。