hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
悪性脳腫瘍における血管透過性と局所血流量に関する研究

我々は、脳腫瘍における特異的局所脳血流調節機構や血液脳関門の機能を解明し、これらを人為的に調節することが可能となれば、従来の化学療法のみならず近年試みられている単クローン抗体や遺伝子治療にも応用することができ、より安全で選択的かつ強力な治療が可能と考えている。我々は、血管作動性薬剤の脳血管に対する作用に着目し、ラット脳腫瘍モデルで水素クリアランス法を用い、アデノシン、アデノシン3リン酸(ATP)、ヒスタミン、およびプロスタグランジンI_2をラット頸動脈内に注入すると、脳腫瘍部の局所血液量を選択的に増加させることを平成5年度までに確認し、さらに、ロイコトリエンC_4やブラッデイキニンなどにより、選択的な脳腫瘍血管の透過性亢進を惹起しうることを報告した。現在、カルシウムチャンネルブロッカーでも同様に30%から100%の局所血流増加を得ている。この研究は様々な血管作動性物質の併用により、果たして治療薬の腫瘍内濃度を選択的に上げることが可能か、その結果として抗腫瘍効果が得られるのかをin vivoで検討するものである。まず、腫瘍部における血管透過性や血管反応性は、正常脳部におけるものとは異なっていると考えられるため、腫瘍部での血管透過性を明らかにし、次に選択的脳腫瘍の血管透過性を亢進させ、かつまた局所血液量を増加させる物質と化学療法剤を併用することにより脳腫瘍治療の成績向上が期待できるかを検討するものである。
生存権論における人格的自律説の再検討

本研究は、生存権論における人格的利益説の理論的影響を再検討するものである。具体的には、人格的利益説に影響を及ぼしていると思われるアラン・ゲワースとジョン・ロールズの人権論の構造を明らかにし、両理論間に構造転換が存在することを明らかにする。ゲワースの人権論は近代立憲主義と緊張関係に立つように思われるが、ロールズの人権論は、ある政治社会が正義に適っているといえるための条件を主題化し、その条件として人権を位置づけているように思われる。ロールズの議論に依拠すれば、生存権を近代主義的な憲法理論と整合性を保ちつつ基礎づける理論的可能性が開かれると思われる。本年度は、(1)前年度に引き続き、ロールズの人権論の構造を掴む作業を、特に反照的均衡といわれるその方法論に着目して行い、また、(2)抽象的人格に基づいて構築された理論は、個々人のニーズに対応しきれないのではないかというロールズの議論に対して行われる批判の検討を行った。ロールズの反照的均衡とは、熟慮された道徳的判断との整合性をもって理論選択の基準とする方法である。この方法に対しては、それが結局のところ循環論法の域を出ていないのではないかという疑問が提起されうるが、ロールズの方法論はいわば人工的なモデルである(モデルに過ぎない)のであって、このモデルの成否は、論証手続が〈全体として〉論理整合的に進められているか否かという観点から検証されるべきであろう。また、ロールズの人工的な人格に対しては、障碍者を正義原理の適用から排除してしまうなどの批判がなされうるが、ロールズの想定する原初状態の契約当事者たちは、自身の置かれた状況や能力などを知らされていないため、自身が障碍などの理由で経済活動に参加できない者である可能性をも考慮して正義原理を選択すると考えられ、したがって、ロールズの正義論においても、障碍者を正義原理の対象に含む可能性は否定できない。前職の退職にともなう研究環境の変化、非常勤のコマ数増および子の養育により、当初の想定以上に研究時間を確保することが困難な状況にあったため。2019年度までの補助事業期間延長の承認を受けた。そのため、2018年度に遂行予定であった研究は2019年度に実施する。本研究は、生存権論における人格的自律説の理論的影響を再検討するものである。具体的には、ともに佐藤幸治の人格的自律説に影響を及ぼしていると思われるゲワースの人権論の構造と、ロールズおよびドゥオーキンの人権論の構造を明らかにし、両理論間に構造転換が存在することを明らかにする。ゲワースは人間が現に有している属性に着目して、その属性にとっての必要物として人権を正当化したが、このような人権正当化は、時に近代立憲主義と緊張関係に立つ。一方ロールズらは、ある政治社会が正義に適っているといえるための条件を主題化し、その条件として人権を位置づける。ロールズらの議論を継承するならば、生存権を人間の属性に基礎づける必要はなく、生存権を近代主義的な憲法理論と整合性を保ちつつ基礎づけられる理論的可能性が開かれると思われる。初年度はゲワースの人権論の構造を掴む作業と、ロールズらの人権論の構造を掴む作業を行った。日本の生存権論の中には、ゲワースのような人間本性論に立って生存権を人権として導出しようとするとする理論がある。それは、自律概念を拡張させることで人権享有資格の緩和を図り、そのことによって生存権の基礎づけを図るものである。しかし、そのような試みは、人権享有主体に新たな外部を発見して終わる可能性が高いように思われる。人間本性論のこうした問題を回避するためには、客観的に観察可能な人間本性に人権の基礎を求めるという自然主義の立場を離れる必要がある。ロールズの人権論については、人間本性から人権を演繹し基礎づけようとするものとの、いわば人間本性論に引き付けた理解が日本の憲法学説の中には存在する。しかしロールズの人格の構想は、構成主義的な議論を構築するために作られた人工的人格であり、またロールズは、人権の導出に当たって単純に演繹的論証のみを用いているわけではなく、反省的均衡による帰納的論証も用いている。初年度の目標は、ゲワースの人権論の構造を掴むことと、ロールズ、ドゥオーキンの人権論の構造を掴むことであった。その目標はある程度達成できたと考えているが、教育業務の想定以上の増加と、また、前職の任期満了にともなう研究環境の予想以上の悪化もあり、本研究に割くことのできるエフォートが低下してしまった。そのため、研究成果の一部しか活字にすることができなかった。なお教育業務とのかかわりでは、『大学生のための憲法』(法律文化社、2018年)の執筆陣に加わり、刊行することができた。

本年度は、(1)前年度に引き続き、ロールズの人権論の構造を掴む作業を、特に反照的均衡といわれるその方法論に着目して行い、また、(2)抽象的人格に基づいて構築された理論は、個々人のニーズに対応しきれないのではないかというロールズの議論に対して行われる批判の検討を行った。ロールズの反照的均衡とは、熟慮された道徳的判断との整合性をもって理論選択の基準とする方法である。この方法に対しては、それが結局のところ循環論法の域を出ていないのではないかという疑問が提起されうるが、ロールズの方法論はいわば人工的なモデルである(モデルに過ぎない)のであって、このモデルの成否は、論証手続が〈全体として〉論理整合的に進められているか否かという観点から検証されるべきであろう。また、ロールズの人工的な人格に対しては、障碍者を正義原理の適用から排除してしまうなどの批判がなされうるが、ロールズの想定する原初状態の契約当事者たちは、自身の置かれた状況や能力などを知らされていないため、自身が障碍などの理由で経済活動に参加できない者である可能性をも考慮して正義原理を選択すると考えられ、したがって、ロールズの正義論においても、障碍者を正義原理の対象に含む可能性は否定できない。前職の退職にともなう研究環境の変化、非常勤のコマ数増および子の養育により、当初の想定以上に研究時間を確保することが困難な状況にあったため。引き続き、生存権的権利がどのように基礎づけられているのかという点に焦点を絞ってロールズおよびドゥオーキンの人権論の構造を明らかにし、論文を執筆していく。その後、これまでの研究を基盤として、ゲワースとロールズらの人権論が、人格的自律説に基づく生存権論にどのように継承されたのか、その継承関係の整理と整合性の検証を行う。2019年度までの補助事業期間延長の承認を受けた。そのため、2018年度に遂行予定であった研究は2019年度に実施する。次年度使用額が生じた理由としては、予定していた研究出張を取りやめたため、旅費が発生しなかったことが挙げられる。次年度も引き続き、資料や研究環境の整備のための消耗品の購入に充てる。なお研究出張も予定している。2018年度に遂行予定であった研究が当初の想定より遅れたために次年度使用額が生じた。次年度は2018年に遂行予定であった研究を引き続いて行う。
Ni合金薄膜を用いた高温繰返し応力測定ゲージの開発

電着によりニッケル薄膜とニッケル合金薄膜を作製した.再結晶温度はニッケル薄膜よりもニッケル合金薄膜のほうが高いことが確認できた.また,繰返し負荷試験では,250°Cの雰囲気温度においてニッケル薄膜に発生した成長粒子の密度と結晶方位を利用すれば応力が測定できることが明らかとなった.一方,ニッケル合金薄膜では,350°Cの雰囲気温度で粒子の成長を確認できたが,応力を測定するための較正式の導出には至らなかった.まず,スルファミン酸ニッケル浴を用いてステンレス板にニッケルめっきを施し,板からニッケルめっき層を剥離することで,厚さが15μm程度のニッケル薄膜を得た.次に,作製したニッケル薄膜をチタン合金で作製した平滑試験片にフェノール系の接着剤を用いて接着し,175°C250°Cの雰囲気温度で繰返しねじり疲労試験を実施した.試験後,薄膜を光学顕微鏡で観察すると,表面に粒子の成長を確認することができた.種々の雰囲気温度と最大せん断応力において,繰返し数を徐々に増加させながら成長粒子の発生密度を画像処理ソフトを用いて計測した.成長粒子の増加を速度過程とみなし,成長粒子の発生密度,最大せん断応力,繰返し数および雰囲気温度の関係式(較正式)を導出した.得られた較正式を用いれば,成長粒子の発生密度に基づいて機械要素に作用した最大せん断応力を計測できる.さらに,曲げとねじりの組合せ負荷状態のもとで,薄膜全面に成長粒子がほぼ100%発生するまで繰返し負荷試験を実施した後,成長粒子の結晶方位を電子線後方散乱回折法により解析した.成長粒子の結晶学的な特徴は銅薄膜に発生する成長粒子の結晶学的特徴と類似していることが明らかとなった.すなわち,銅もニッケルも同じ面心立方晶であるので,そのすべり方向と最大せん断応力の作用方向が一致するような優先方位をもって粒子が成長することが明らかとなった.この特徴から,成長粒子が発生した薄膜を電子線後方散乱回折法で解析することで得られる極点図を用いれば,最大せん断応力の作用方向を決定できることが明らかとなった.したがって,弾性論に基づいて機械要素の疲労強度評価で重要となる主応力も測定できる見通しを得た.昨年度の研究において,ニッケル薄膜を用いれば,銅薄膜よりも高い雰囲気温度で応力が計測できることが明らかとなった.そこで,本年度は,ニッケル薄膜をベースにより高温環境下での応力測定の可能性を検討した.文献を参考に,ニッケルめっき浴にタングステン酸ナトリウムを添加しためっき浴を用いて,ニッケル合金薄膜を作製した.この薄膜に種々の加熱処理を真空中で施した後,電子線後方散乱回折法(EBSD)により結晶方位を解析した.加熱なしの状態の結晶粒と比較することで,作製したニッケル合金薄膜の再結晶温度を検討した.タングステンを添加することで,結晶粒が粗大化する温度が上昇していることから,作製したニッケル合金薄膜はニッケル薄膜よりもさらに再結晶温度が高くなる傾向が確認できた.次に,この薄膜を試験片に接着し,350°Cの雰囲気で繰返し負荷試験を実施した後,光学学顕微鏡で試験片表面を観察した結果,粒子の成長は確認できなかった.原因として,接着剤がこの実験条件に対して耐えることができなかった,成長粒子の結晶粒が小さいため光学顕微鏡では識別ができなかった,試験雰囲気温度が低いなどが考えられる.したがって,最終年度は,接着方法ではなく,試験片に直接めっきする方法を検討し,粒成長の確認はSEMやEBSDにより行うことにする.さらに,より高い雰囲気温度で試験ができるように加熱炉も購入したので,350°Cよりもより高温環境下で繰返し負荷試験を実施することにする.本研究課題は3年の研究期間であるが,本年度はその中間年度にあたる.本年度の目標は,ニッケル合金薄膜を作製することと,その再結晶温度を調査し,ニッケル薄膜よりも再結晶温度が高温側になることを確認することが主な目的であった.したがって,本年度も順調に研究が進んでいると判断できる.また,繰返し負荷による粒子の成長は残念ながら本年度は確認することができなかったが,原因をいくつか考察できたので,最終年度には繰返し負荷に対しても粒成長を確認できると期待できる.前年度までに,ニッケルに添加剤を加えれば,再結晶温度が上昇し,より高温での応力測定の可能性が示唆された.しかしながら,実際に350°Cの雰囲気温度下で繰返し負荷試験を行うと,粒成長は観察できなかった.原因として,接着剤がこの実験条件に耐えられない,成長粒子が小さいため判別が難しいなどが考えられた.そこで,本年度はタングステンとは別の添加剤を加えたニッケル合金を直接素材にめっきする方法を採用し,粒成長の有無を検討した.まず,作製したニッケル合金めっきに350°C450°Cで加熱処理を施した後,EBSD解析を行うと粒子の成長が確認できた.なお,観察には振動研磨が有効であるということも明らかとなった.このニッケル合金をXRD解析し,シェラーの式から計算した平均結晶粒径はEBSD解析で得られた粒径とよく一致したので,平均結晶粒径を求めるだけであれば,EBSD解析を行わなくてもXRD解析で十分であることが明らかとなった.次に,350°C450°Cで加熱時間を種々に変えて粒成長をXRD解析により調査した結果,加熱時間の増加とともに粒子も成長することが確認できた.以上の結果を踏まえ,加熱だけでは粒成長が起きない試験条件において,繰返し負荷試験を実施した結果,粒子の成長を確認することができた.

また,負荷応力が大きいほうが平均結晶粒径も大きいのも確認できた.すなわち,応力に誘起されて粒成長が起こっているので,平均結晶粒径から応力測定の可能性が示唆された.電着によりニッケル薄膜とニッケル合金薄膜を作製した.再結晶温度はニッケル薄膜よりもニッケル合金薄膜のほうが高いことが確認できた.また,繰返し負荷試験では,250°Cの雰囲気温度においてニッケル薄膜に発生した成長粒子の密度と結晶方位を利用すれば応力が測定できることが明らかとなった.一方,ニッケル合金薄膜では,350°Cの雰囲気温度で粒子の成長を確認できたが,応力を測定するための較正式の導出には至らなかった.本研究課題は3年の研究機関であるが,その初年度はニッケル薄膜について,機械要素の疲労損傷評価に重要な応力成分である最大せん断応力と主応力の測定可能性に絞って研究を行うことにしている.まず,最大せん断応力の測定については,ニッケル薄膜表面に成長粒子の発生が確認できたとともに,発生した成長粒子の密度に基づいて応力測定を行える較正式を導出することができた.また,初期電着面を用いれば,電解研磨とエッチング処理が不要になるということも明らかとなった.このような点を踏まえ,研究は順調に進展していると判断できる.次に,主応力の測定に関しては,電子線後方散乱回折法を用いることで成長粒子の結晶学的な特徴を把握することができ,それを利用すれば,原理的に主応力の計測も可能であることが示せた.したがって,これも順調に進展していると判断できる.以上の点から,ニッケル薄膜では,175°C250°Cまでの雰囲気温度に対して,最大せん断応力と主応力の計測ができる見通しを得ることができた.
腎疾患における細胞アポトーシスとアドレノメデュリンの関係について

多数例でAM遺伝子とその隣接領域のゲノムDNAの塩基配列を検索し、約4kb 3'下流に(CA)nのマイクロサテライト多型を認めた。このCAリピート数は日本人においては11,13,14および19の4種類であり、健常人に比べ、本態性高血圧や糖尿病性腎症においては19回繰り返しのアリルの出現頻度が高く、このマイクロサテライト多型が高血圧の遺伝的素因や糖尿病における腎障害の進展と関係すると思われた。また、第1および第3イントロンには+223A/Cおよび+1100C/Gの互いに連鎖する2つの単塩基変異(SNP)が認められた。健常人における+223Cのアリルは3.7%と低頻度であったが、血清トリグリセリド高値など脂質代謝と関係する可能性が推測された。重症高血圧を呈するL-NAME投与SHRの心筋間質や糸球体,尿細管細胞にアポトーシスの発現が観察された。高血圧性糸球体硬化の初期段階においてはアポトーシス誘導と増殖抑制により糸球体細胞数が減少し係蹄面積が縮小した。このように高血圧性の障害に対する循環器系組織のリモデリングは、細胞レベルではアポトーシス発現と細胞増殖のバランスにより制御されていると考えられた。免疫染色にてAMは心筋間質血管周囲の線維芽細胞、腎臓では萎縮尿細管上皮,硬化糸球体および糸球体・血管周囲の線維芽細胞などに認められ、障害組織のリモデリングに関与することが推測された。これらの心および腎組織では.TGF-β,caspase-3とともにAMのmRNA発現が増加しており、線維化による臓器障害やアポトーシス誘導による組織リモデリングの過程にAMが代償的な役割をもつと思われた。また、AMの持続投与により食塩感受性高血圧ラットの腎障害が緩和されることを観察した。ヒトの腎生検組織においてもreal-time PCR法によりAMやcaspase-3のmRNAを定量した結果、著明な高血圧性腎障害を示す症例ではAMmRNAの発現が多く、また、IgA、腎症の予後不良群ではcaspase-3のmRNAが多くアポトーシスの発現が促進されていることが観察された。アドレノメデュリン(AM)は副腎のみならず腎臓や血管壁においても産生され、これらの組織病変の進行に影響を与えることが推測される。培養血管内皮細胞にヒトAM遺伝子プロモーター領域を組み込んだルシフェラーゼ・ベクターを導入し、その発現活性を検討した所、AM遺伝子の発現にはTATA boxやAP-2に加えNF-IL6が転写調節因子として関与することが示された。様々な生理的,病的な状態におけるAMの挙動を観察すると、血中AM濃度は感染症や外科手術などの侵襲により著明に上昇することが観察された。培養細胞における実験でAMの産生はインターロイキン-1(IL-1)や腫瘍壊死因子(TNF)などのサイトカインの刺激により著明に増加することを考慮すると、炎症や外傷により産生されたサイトカインがNF-IL6を介しAM遺伝子の発現を刺激する機序が考えられる。一方、IL-1やTNFなどのサイトカインは各種の細胞においてアポトーシスを誘導することが知られており、腎硬化症や腎炎などの腎疾患における腎組織の病像は炎症性のサイトカインや細胞の増殖およびアポトーシスによる欠落により修飾される。

高血圧自然発症ラットのNO産生を抑制することにより著明な腎硬化症モデルを作成し、腎組織像を検討すると、血管内皮細胞,平滑筋細胞に加え糸球体細胞や尿細管上皮細胞にもTUNEL法にて染色されるアポトーシス細胞が観察された。アポトーシスを誘導するIL-1やTNFが一方ではAMの遺伝子発現,産生を強力に刺激することを考慮すると、様々な腎疾患において腎組織で産生されるAMは炎症や細胞アポトーシスの発現と関係し、腎組織病変の進行を修飾する因子の一つである可能性が推測される。アドレノメデュリン(AM)は第11染色体短腕遠位部(11p15. 1-3)に位置し、その4kb3^1下流には(CA)nのマイクロサテライト配列が存在することを見い出した。そして、このCAリピート数の違いによる遺伝子多型と様々な循環器疾患の素因や病態との関係を検討した。日本人におけるCAリピート数は11, 13, 14および19の4種類であり、健常人300名(男219,女81 ; 56±1才)における各アレルの頻度は11 : 28.8%, 13 : 33.5%, 14 : 34.7%, 19 : 3.O%であった。本態性高血圧患者143例(男89,女54 ; 57±1才)では11 : 30.1%, 13 : 32.9%, 14 : 29.7%, 19 : 7.3%と19リピートのアレル頻度が有意に高かったが(P<0.02)、冠動脈疾患患者111例のアレル頻度は11 : 27.5%, 13 : 32.4%, 14 : 37.8%, 19 : 2.3%と健常人と変わらなかった。また、腎障害のない糖尿病患者106例(男64,女42 ; 59±2才; 11 : 28.8%, 13 : 37.3%, 14 : 29.7%, 19 : 4.2%)および慢性糸球体腎炎を原疾患とする透析患者318例(男184,女134 ; 57±1才; 11 : 27.8%, 13 : 33.7%, 14 : 34.6%, 19 : 3.9%)におけるアレル頻度は健常人と変わらなかったが、糖尿病性腎症を原疾患とする透析患者128例(男81,女47 ; 56±1才)においては11 : 32.8%, 13 : 27.3%, 14 : 30.9%, 19 : 9.O%と19リピートのアレル頻度が有意に高かった(p<O.O01)。健常人の中でCAリピート数が11, 13, 14のホモ接合体およびリピート数19のアレルを有する健常者の血漿AM濃度を測定した結果、11 : 7.5±O.2, 13 : 7.O±O.3, 14 : 7.2±0.2, 19 : 7.3±0.4fmol/mlと遺伝子型により有意な違いは認められなかった。また、各遺伝子型の健常人の血圧,肥満度,空腹時血糖,血清総コレステロール濃度などの循環器系の危険因子についても有意差は認められなかった。ヒトAM遺伝子の近傍に存在する(CA)nのマイクロサテライト多型は、既知の循環器系の危険因子とは独立して、本態性高血圧の発症や糖尿病患者における腎障害進展のリスクと関連を有する可能性が推測される。ヒト・アドレノメデュリン(AM)遺伝子は第11染色体短腕遠位部に位置し、その4kb3′下流には(CA)nのマイクロサテライト配列が存在する。日本人におけるCAリピート数は11,13,14および19の4種類であり、健常人300名(男219,女81;56±1才)における各アレルの頻度は11:28.8%,13:33.5%,14:34.7%,19:3.0%であった。
ウメ品種の花粉不稔に関する研究

ウメの雄性不稔品種の類縁関係についてDNAを用いた遺伝的解析を行った。平成10年度はウメの雄性不稔および稔性品種を用いてそれぞれの葉中の全DNAを抽出し,RAPDによるPCR法を用いて雄性不稔品種の類縁関係を推定した。その結果,バンドの多型がみられたプライマーは13種類であった。その結果を群平均法を用いたクラスター分析によって遺伝的距離を検討したところ,雄性不稔品種間では一定の傾向がみられなかった。すなわち,雄性不稔品種でも稔性品種と極めて遺伝的に近いものもあり,逆に雄性不稔品種間で極めて遺伝的距離が近かった。一方,ウメはアンズと植物学的に近縁であることから,種間雑種が多いことが知られている。種間雑種では花粉が不稔の場合が頻繁にみられる。よって,雄性不稔の一要因としてはアンズとの雑種性が考えられるため,アンズ数品種とウメの雄性不稔数品種を用い,それぞれの葉から全DNAを抽出し,RAPDによるPCR法を用いて電気泳動を行った。その結果を群平均法を用いたクラスター分析によって遺伝的距離を検討したところ,かなり,アンズとの遺伝的距離が近い品種もみられたが,遠い距離を示す品種もみられた。以上の結果を総合すると,ウメの雄性不稔の要因としてはアンズとの種間雑種も考えられるか,雄性不稔を支配する遺伝子が考えられ,より高度な遺伝子解析法が必要と考えられた。ウメは年や品種によって花粉稔性が顕著に低いことが知られていることから,花粉の不稔性の原因を調査した。1.2年前から継続調査を行ってきたウメの花粉稔性の品種間差異を調査したところ,安定して高い稔性が得られる品種,年によりかなり稔性が変化する品種,まったくあるいはほとんど稔性が認められない品種がみられた。数年間まったく稔性がみられないことから遺伝的に雄性不稔品種と考えられた`白加賀'および`白獅子'の2品種を用い,花粉稔性の高い`南高'と比較しながら花粉の形成過程を組織切片等を用いた方法で調査を現在継続中である。2.花粉稔性が高い`南高',`甲州最小'の2品種を用いて,11月以降の花芽の発達段階にガラス温室に般入し,通常,芽の休眠打破に必要な量以下の低温を与え,開花時の花器の発達と花粉稔性を通常の低温を与えた場合と比較した。その結果,温室条件下では両性花が少なく,明らかに花器の形態が異常であり,花粉稔性も通常の場合に比べて顕著に低くなった。また、花粉の発芽試験を行った結果,温室区では通常の場合に比べ明らかに低い発芽率であった。3.ウメはアンズと近縁であり,種間交雑により多くの品種が成立したと考えられており,不稔性の一要因と考えられている。そこで,平成10年度は遺伝子レベルでウメとアンズの分析を行い,不稔性を解明して行く予定である。
学生のプログラミング能力の向上を目的としたプログラム可読性チェックシステムの開発

現在,大学におけるプログラミング教育では可動性が優先され可読性は軽視されている.だが可読性が軽視されたプログラミングは動作への理解を阻害し,学習効果を低下させる可能性がある.そこで本研究では,「読みやすいソースコードを書かなければいけない」と学生に意識させるために,可読性が低いコードに対して修正指示を出すシステムを設計・開発した.さらに,システムによって適切な指摘が行われているかを検証するための評価実験を行った.また,本システムによる教育効果を明らかにするため,大学のプログラミング教育における可読性の影響の調査・分析を行った.現在,大学におけるプログラミング教育では可動性が優先され可読性は軽視されている.だが可読性が軽視されたプログラミングは動作への理解を阻害し,学習効果を低下させる可能性がある.そこで本研究では,「読みやすいソースコードを書かなければいけない」と学生に意識させるために,可読性が低いコードに対して修正指示を出すシステムを設計・開発した.さらに,システムによって適切な指摘が行われているかを検証するための評価実験を行った.また,本システムによる教育効果を明らかにするため,大学のプログラミング教育における可読性の影響の調査・分析を行った.本研究では,学生のプログラミング能力を養うことを目的としたソースプログラムチェックシステムを設計・開発する.特に,可読性の高いソースコードを記述するよう指導することに主眼を置く.なぜなら,大学等のプログラミングの授業において,現状では可動性が優先され,可読性が二の次になっているためである.しかしながら,「可読性が高いソースコードを記述すること」はプログラムの構造を正しく理解することにつながる.また,大規模なプログラムを大人数で書く場面においても,可読性はプログラムの修正・機能拡張を容易にし,再利用性を高める意味で大変重要である.そこで,我々は「読みやすいソースコードを書かなければいけない」と学生に意識させるシステムを開発する.例えば,「崩れているインデント」「不適切な変数・関数名」「長すぎる関数やブロック」など,構文エラーでもなければ実行結果にも影響を及ぼさない,ただし可読性が低いコードに対し,修正指示を出すようにする.本システムは,プログラミングの演習授業において,可読性について各学生に対し均質な指導を行うことが可能であり,有意義である,開発したシステムは実際の授業に導入し,教育的観点から本システムの有効性を明らかにする予定である.本年度は,まず指摘項目の検討を行ったうえで,特に可読性の基本であるインデントに着目し,可読性の低いインデントを検出するシステムを実装した.システムは「課題提出」としての機能も兼ね備えたものとし,学生の自宅からも利用できるよう利便性を考慮してウェブアプリケーションとして構築した.構築後には動作検証を行い,実装したルールが正しく検出できることを確認した.さらに,今年度前期の授業において提出されたプログラム約2,000本に対し,プログラミングスタイルの実態調査を行った.来年度は,試作したシステムを実際に授業で運用し,システムの改善策および評価実験の手法に関する検討を行う予定である.本研究では,学生のプログラミング能力を養うことを目的としたソースプログラムチェックシステムを設計・開発する.特に,可読性の指導に主眼を置く.可読性が高いソースコードを記述することは大変重要であるが,これまで授業で徹底することは難しかった.そこで我々は「読みやすいソースコードを書かなければいけない」と学生に意識させるために,可読性が低いコードに対して修正指示を出すシステムを開発する.本システムは,プログラミングの演習授業において,可読性について各学生に対し均質な指導を行うことが可能であり,有意義である.開発したシステムは実際の授業に導入し,教育的観点から本システムの有効性を明らかにする.以上の目的を達成するため,本年度は次の3点について重点的に取り組んだ.1.「コピー&ペーストを多用した類似処理」を検出して関数化の指摘を行う機能を実装し,昨年度構築したプログラム提出システムに追加した.実装後,学生が作成したプログラム約1,000本に対して評価実験を行い,人間の判断と同様の指摘ができる精度を確認した.2.チームプログラミングに対応できるよう,プログラム提出システムを改良した.具体的には,(1)チーム作成機能,(2)チーム開発環境,(3)複数ファイルで構成されるプログラムへの対応,を実装した.3.可読性の基本となるインデント(字下げ)コメント、空白、空行や変数名などの観点から自動的な調査と目視を合わせて、学生の可読性に対する意識とプログラミングの上達度の関係を厳密に調べた。来年度は,試作したシステムを実際に授業で運用し,システムの改善および評価実験を実施する予定である.現在,大学におけるプログラミング教育では可動性が優先され可読性は軽視されている。だが可読性が軽視されたプログラミングは動作への理解を阻害し,学習効果を低下させる可能性がある。そこで本研究では,「読みやすいソースコードを書かなければいけない」と学生に意識させるためのシステムを設計・開発した。具体的には,学生がプログラム課題を提出するシステムに,可読性が低いコードに対して修正指示を出す機能を追加実装した。本システムの可読性に関する検出項目は,1.インデントが崩れている,2.コピー&ペーストによる同じ処理が複数ある,3.変数や関数名が不適切である,4.スペースが不足している,5.1つの関数が長すぎる,の5項目である。このうち1,2は昨年度までに実装済みであり,本年度は残り35の実装を行った。開発したシステムは実際の授業において運用を行っており,今後も継続する予定である。また,システムによって適切な指摘が行われているかを検証するための評価実験を行った。

さらに,本システムによる教育効果を明らかにするため,大学のプログラミング教育における可読性の影響の調査・分析を行った。我々は,プログラムの可読性に関する様々な要素が学習そのものと密接な関係があるという仮説を立てた。検証のために大学のプログラミング実習の2年分・6900個以上のプログラムから,学生の習熟度と可読性に関する25を超える要素を抽出した。得られたデータを解析し,プログラミング教育における可読性の影響を検討した。例えば変数名やコメントと得点との関係から,それらの要素が学習に及ぼす影響を分析した。
転写因子賦活を介した骨格筋の代謝および運動機能の改善よる肥満関連肝疾患の予防効果

運動耐容試験におけるNrf2KOマウスの走行距離が野生型に比べ有意に短いことが確認された.また,野生型ではNrf2賦活化剤により走行距離が有意に増加した.マウスに高脂肪高ショ糖食を投与して脂肪肝を誘導した後,運動による脂肪肝の改善効果を比較したところ,Nrf2KOマウスではその改善が乏しいことが判明した.そこで,マウス由来の筋管細胞の培養系の確立し,運動時のNrf2発現変化とマイオカインの発現変化を観察した.電気刺激によりマイオカインのIL-6の発現量が,非刺激細胞に比べ極端に増加した.骨格筋におけるNrf2の発現変化は,運動による骨格筋のマイオカイン産生に影響を与える可能性が示唆された.運動耐容試験におけるNrf2KOマウスの走行距離が野生型に比べ有意に短いことが確認された.また,野生型ではNrf2賦活化剤により走行距離が有意に増加した.マウスに高脂肪高ショ糖食を投与して脂肪肝を誘導した後,運動による脂肪肝の改善効果を比較したところ,Nrf2KOマウスではその改善が乏しいことが判明した.そこで,マウス由来の筋管細胞の培養系の確立し,運動時のNrf2発現変化とマイオカインの発現変化を観察した.電気刺激によりマイオカインのIL-6の発現量が,非刺激細胞に比べ極端に増加した.骨格筋におけるNrf2の発現変化は,運動による骨格筋のマイオカイン産生に影響を与える可能性が示唆された.本邦で増加の一途にある肥満に関連した非アルコール性脂肪性肝疾患(NAFLD)の予防と治療には食事・運動療法以外にコンセンサスが得られた方法はない.骨格筋の総重量は肝重量の約20倍もあり肝臓同様に代謝の重要な臓器である.一方,転写因子のNF-E2 related factor2(Nrf2)は,抗酸化ストレス防御機構の発動や自然免疫系の活性化を制御する因子であることに加えて.脂肪蓄積を抑制する新しい機能を有することが判明している.本年度は,野生とNrf2欠失マウスを用いて,骨格筋のNrf2賦活化が運動機能を改善させることが可能であるかどうかを検討した.マウスに対してトレッドミルテストを行い最大走行距離の測定を行ったところ,野生マウスに比較してNr2欠失マウスでは有意にその距離が短かった.また,予備的な解析結果より運動負荷により骨格筋Nrf2の賦活化と標的遺伝子の誘導も確認された.また,NAFLDの予防と治療の医療的立場より,Nrf2を賦活化する機能性食品成分であるスルフォラファンの骨格筋Nrf2の賦活化を介した運動機能の改善にも検討を加えた.スルフォラファンを投与した野生マウスと非投与の野生マウス,スルフォラファンを投与したNrf2欠失マウスにトレッドミルテストを行い,同様に最大走行距離の測定を行った.その結果,スルフォラファンを投与した野生マウスにおいてのみ,最大走行距離の増加が認められた.これらの結果より考えて,Nrf2賦活化による抗酸化ストレス応答は,骨格筋の運動能力の向上に重要な役割を演じていると考えられた.本年度の検討では、野生型、Nrf2KO、Keap1KD(Nrf2過剰発現)マウス由来の筋衛星細胞の初代培系の確立と、それを用いた既知のマイオカインの発現比較を含めた基礎的検討を行った。筋衛星細胞の初代培養では、野生型、Keap1KDマウスでは、問題なく培養できることが確認されたが、Nrf2KOマウス由来の細胞は従来の方法では培養することができなかった。この原因として、培養環境下での酸化ストレス刺激の増加が疑われたため、抗酸化剤である、メルカプトエタノールを培養培地に0.1mM添加した。その結果、死亡率が減少し、培養が可能となった。上記細胞を用いて、運動時のNrf2発現変化と既知の代表的なマイオカインの発現変化を観察した。擬似的な運動刺激には、細胞電気パルス刺激(EPS)装置を使用した。筋管細胞へと分化させたC2C12に、電気刺激(40V, 2ms, 1Hz)を与えたところ、刺激後にNrf2の活性化を認め、刺激後6時間をピークに活性化は減少傾向を示した。また、EPS刺激によって、代表的なマイオカインであるIL-6のmRNA発現量が、非刺激群に比べ極端に増加した。さらに、野生型、Nrf2KO、Keap1KDマウス由来の筋管細胞に電気刺激(40V, 2ms, 1Hz)を与えたところ、いくつかのマイオカインの発現に、各群間で差異があることが確認された。骨格筋におけるNrf2の発現変化は、運動による骨格筋のマイオカイン産生能に強く影響を与える可能性が示唆された。しかし、どのような種類のマイオカインの産生が変化しているのか、また、その機序を明らかにするまでには至っていない。そこで今後は本研究成果に基づき、Nrf2の骨格筋内での働き、マイオカインの産生に与える影響についての解析を行い、Nrf2を標的とした、肥満関連疾患の予防および、骨格筋機能を維持するための方法の確立を目指す。本邦で増加の一途にある肥満に関連した非アルコール性脂肪性肝疾患(NAFLD)の予防と治療には食事・運動療法以外にコンセンサスが得られた方法はない.

一方,転写因子のNF-E2 related factor 2(Nrf2)は,抗酸化ストレス防御機構の発動や自然免疫系の活性化を制御する因子であることに加えて.脂肪蓄積を抑制する新しい機能を有することが判明している.骨格筋のNrf2賦活化が運動機能を改善させることが可能であるかどうかを検討し,トレッドミルテストを行い最大走行距離の測定を行ったところ,野生マウスに比較してNrf2欠失マウスでは有意にその距離が短かった.また,Nrf2を賦活化するスルフォラファンを投与した野生マウスと非投与の野生マウス,スルフォラファンを投与したNrf2欠失マウスにトレッドミルテストを行った結果,スルフォラファンを投与した野生マウスにおいてのみ,最大走行距離の増加が認められた.Nrf2賦活化が骨格筋の運動能力の向上に重要な役割を演じていると考えられた.動物実験では,高脂肪食の負荷にて作製した脂肪肝が,野生マウスでは約2ヶ月間のトレッドミル運動により改善するが,Nrf2欠失マウスでは改善しないことが判明した.運動は全身の転写因子Nrf2を活性化し,さらに,骨格筋はNrf2介在性に種々の分泌蛋白を産生し,それらの一部の分泌蛋白には,異所性臓器脂肪に対する脂肪融解作用があるものと推測されたが,未だ未だ同定には至っていない.Nrf2賦活化による抗酸化ストレス応答は,骨格筋の運動能力の向上に重要な役割を演じていることが判明したが,運動機能の向上の背景にあると考えられている骨格筋の酸化ストレス病態,糖および脂質の代謝病態に関する解析が遅れている.25年度が最終年度であるため、記入しない。動物実験施設において,マウストレッドミルおよびカロリメーターの設置と使用開始に時間を要した.Nrf2賦活化による抗酸化ストレス応答は,骨格筋の運動能力の向上に重要な役割を演じていることが判明したが,Nrf2賦活化による運動機能の向上の背景にあると考えられている骨格筋の酸化ストレス病態,糖および脂質の代謝病態に関する解析が遅れている.しかしながら,ヒト肥満者における運動が転写因子Nrf2を活性化し,抗酸化ストレス応答を発揮し,体重減少とは無関係に炎症病態と酸化ストレスレベルを改善することが判明し論文投稿中である.骨格筋特異的Nrf2欠失マウスおよびNrf2過剰発現マウスに関する作製を先送りして,運動実践やスルフォラファン投与を行った野生とNrf2欠失マウスについて,生化学,病理学の解析を進捗させていく.25年度が最終年度であるため、記入しない。減量を目的とする運動療法が中年肥満男性において,転写因子Nrf2を活性化し,抗酸化ストレス応答を発揮し,体重減少とは独立して,炎症病態と酸化ストレスレベルを改善することが判明した.一方,動物実験においては,高脂肪食にて作製した脂肪肝が野生マウスでは運動により改善するが,一方,Nrf2欠失マウスでは消失しないことが判明している.今年度は,マウストレッドミルおよびカロリメーターを用いて,骨格筋の酸化ストレス病態,糖および脂質の代謝病態に関する解析を行う.また,Nrf2介在性に生成される骨格筋由来の新規分子について探索研究を進めていく.Nrf2の賦活化剤には,スルホラファンに加えて,さらに強力な賦活化のあるCDDO-Imを用いて実験を進捗させる予定である.
CADM1抗体による成人T細胞白血病に対するチオストレプトンの細胞内デリバリー

成人T細胞白血病リンパ腫(ATL/ATLL以下ATL)はHTLV-1感染を原因とする難治性末梢性T細胞腫瘍であり、ATL発症のメカニズムは詳細が不明であり、予後は極めて不良である。近年ATLの治療標的として転写因子FOXM1の過剰発現が抽出され、その阻害剤であるチオストレプトン(TS)がATL細胞の増殖抑制効果をもたらすことが見出された。本研究ではATLで異所性に高発現することが知られているCADM1を標的として、モノクローナル抗体の取得が困難とされている抗CADM1抗体を新たに作製し、ATL細胞を標的とするTSのDrug Delivery Systemの開発を試みる。2018年度は、ヒト可変領域のフレームワークを骨格とした、単鎖抗体(scFv)の人工合成ライブラリーであるTomlinsonライブラリーを用いたphage display法で抗CADM1抗体の取得を試みた。CADM1の細胞外ドメインを抗原としてパニングを行い、scFvIとscFvJの2つのヒットクローンを取得した。得られたヒットクローンからscFv、humanFab、humanIgG1抗体を作製した。CADM1を発現するHTLV-1感染不死化細胞株(MT2、HUT102)と成人T細胞白血病細胞株(TLom1、ATN1)への結合をフローサイトメトリー(FACS)を用いて評価した。2種のヒットクローンのうち、scFvJのクローンで結合を確認した。scFvとFabではMT2とATN1に結合を認め、IgGでは4種全ての細胞へ結合を認めた。IgGのavidity効果と考え、結合親和性が既存の抗CADM1 IgY抗体と比較してscFvJのヒットクローンでは弱い可能性が示唆された。FabとIgGについて、示査走査熱量計(DSC)を用いた抗体の熱安定性や、表面プラズモン共鳴(SPR)を用いた抗原との相互作用解析を行った。FOXM1阻害剤であるチオストレプトン(TS)を化学修飾するための条件検討として、システインのチオールに反応性を有するマレイミド基を持つAlexa488を抗CADM1 FabとIgGに修飾し、CADM1陽性細胞株への結合をFACSで確認した。以上からFabとIgGにシステインを介した化学修飾が可能であり、細胞への結合活性を保持していることが確認された。またDSCでの熱安定性評価では(Tm=74.7°C)と比較的高い熱安定性を保持していたが、SPRによる結合親和性はFab(KD=475nM)、IgG(KD=82.3 nM)であり、親和性の改善が今後の課題となった。CADM1は種間の相同性が高く、通常のマウスなどの動物を免疫してモノクローナル抗体を作製することが困難とされている。そのため、これまでにchicken IgYなどの抗体が研究に使用されてきた経緯がある。本研究では、取得が困難とされる抗CADM1抗体をヒト可変領域のフレームワークを骨格とした、単鎖抗体(scFv)の人工合成ライブラリーであるTomlinsonライブラリーを用いたphage display法で取得することに成功し、scFvを基に、humanFab、humanIgGなどの発現精製にも成功している。また、得られたhumanFab、humanIgGのチオール基に化学修飾の実験モデルとして蛍光修飾を行うことが可能であり、修飾後もCADM1陽性細胞への結合活性を保持していることを確認している。この成果をもとに、FOXM1阻害剤であるチオストレプトン(TS)の化学修飾と、細胞への活性評価へと進めることが可能であるため。今回、得られたscFvJのクローンは熱安定性に優れ、FabやIgG内部のシステインのチオール基に対する蛍光色素などの化学修飾が可能であり、CADM1陽性細胞株への結合活性を化学修飾後も保持していることが明らかとなっている。しかしながら結合親和性が十分ではなく、今後は親和性向上に課題が残されている。HDX-MSを用いたCADM1と抗体のエピトープマッピングや共結晶などの取得を試み、構造情報から計算学的手法を用いた結合親和性改善を目的とした変異体作製を検討している。また並行して、今回得られたヒットクローンにFOXM1の阻害剤であるチオストレプトン(TS)の化学修飾を試みる。TSはチオール反応性の構造を内部に有しており、マイケル付加反応によってシステインと反応することが報告されているが、疎水性が高く、難容性であることから抗体との反応条件検討が今後の課題であり、界面活性剤やアルギニンなどの凝集抑制剤などを用いた溶媒条件について検討を行う。CADM

1の細胞外ドメインを抗原としてパニングを行い、scFvIとscFvJの2つのヒットクローンを取得した。得られたヒットクローンからscFv、humanFab、humanIgG1抗体を作製した。CADM1を発現するHTLV-1感染不死化細胞株(MT2、HUT102)と成人T細胞白血病細胞株(TLom1、ATN1)への結合をフローサイトメトリー(FACS)を用いて評価した。2種のヒットクローンのうち、scFvJのクローンで結合を確認した。scFvとFabではMT2とATN1に結合を認め、IgGでは4種全ての細胞へ結合を認めた。IgGのavidity効果と考え、結合親和性が既存の抗CADM1 IgY抗体と比較してscFvJのヒットクローンでは弱い可能性が示唆された。FabとIgGについて、示査走査熱量計(DSC)を用いた抗体の熱安定性や、表面プラズモン共鳴(SPR)を用いた抗原との相互作用解析を行った。FOXM1阻害剤であるチオストレプトン(TS)を化学修飾するための条件検討として、システインのチオールに反応性を有するマレイミド基を持つAlexa488を抗CADM1 FabとIgGに修飾し、CADM1陽性細胞株への結合をFACSで確認した。以上からFabとIgGにシステインを介した化学修飾が可能であり、細胞への結合活性を保持していることが確認された。またDSCでの熱安定性評価では(Tm=74.7°C)と比較的高い熱安定性を保持していたが、SPRによる結合親和性はFab(KD=475nM)、IgG(KD=82.3 nM)であり、親和性の改善が今後の課題となった。CADM1は種間の相同性が高く、通常のマウスなどの動物を免疫してモノクローナル抗体を作製することが困難とされている。そのため、これまでにchicken IgYなどの抗体が研究に使用されてきた経緯がある。本研究では、取得が困難とされる抗CADM1抗体をヒト可変領域のフレームワークを骨格とした、単鎖抗体(scFv)の人工合成ライブラリーであるTomlinsonライブラリーを用いたphage display法で取得することに成功し、scFvを基に、humanFab、humanIgGなどの発現精製にも成功している。また、得られたhumanFab、humanIgGのチオール基に化学修飾の実験モデルとして蛍光修飾を行うことが可能であり、修飾後もCADM1陽性細胞への結合活性を保持していることを確認している。この成果をもとに、FOXM1阻害剤であるチオストレプトン(TS)の化学修飾と、細胞への活性評価へと進めることが可能であるため。今回、得られたscFvJのクローンは熱安定性に優れ、FabやIgG内部のシステインのチオール基に対する蛍光色素などの化学修飾が可能であり、CADM1陽性細胞株への結合活性を化学修飾後も保持していることが明らかとなっている。しかしながら結合親和性が十分ではなく、今後は親和性向上に課題が残されている。HDX-MSを用いたCADM
卵巣・子宮内膜における血管新生の促進因子および抑制因子の産生調節に関する研究

近年、子宮および卵巣におけるVEGFの発現が報告され、排卵、黄体形成、子宮内膜の増生、黄体の形成、胎児期の器官の発育や胎盤の形成に必要な血管新生に関わっていると考えられる。本研究では、卵巣および子宮内膜におけるvascular endothelial growth factor (VEGF)をはじめとした血管新生促進因子とthrombospondin (TSP)などの血管新生抑制因子の産生とその発現調節を検討した。卵巣顆粒膜細胞、子宮内膜間質細胞および羊膜細胞を培養し、血管新生調節因子やサイトカイン・ケモカインの産生と調節について検討した。羊膜細胞(WISH cells)ではEGFおよびIGF-1の添加でVEGF産生は促進し、さらにノーザン法でもVEGF mRNAの発現の促進が確認された。さらに、WISH cellsにEGFとIGF-1を添加してMAP kinaseとAktのリン酸化をwestern immunoblot analysisにより解析し、さらにVEGF産生の変化を検討した。WISH cellsにおいてはEGFおよびIGF-1の添加でVEGF産生は促進し、MAP kinaseおよびAktのリン酸化が認められた。また、EGFおよびIGF-1にMEK阻害剤(UO126)やPI-3kinase阻害剤(wortmannin)を添加するとそのリン酸化は抑制され、VEGF産生も減少した。以上のことより、卵巣・子宮内膜・胎盤組織においては血管新生調節因子やサイトカイン・ケモカインが発現しており、組織の血管新生の調節に重要な役割を演じている可能性が示唆された。VEGFは子宮内膜間質細胞においてepidermal growthfactor (EGF)の添加により産生が促進した。しかし、interferon (IFN)-γの添加により産生が抑制された。卵胞液より顆粒膜細胞を分離・培養し、また顆粒膜細胞の継代培養細胞株であるGCla(熊本大学医学部、岡村教授より供与)も培養した実験ではcyclic AMP、EGFおよびinsulin-like growthfactor (IGF)-1の添加でVEGFの産生は促進した。他については現在検討中である。これらのサイトカイン・ケモカイン産生が血管新生にどのような影響を及ぼしていくのか、現在検討中である。Thrombospondin(TSP)は、トロンビン刺激により血小板から放出され、分子量約150kDaの同一鎖の三量体からなる糖蛋白であり、細胞外マトリックスとして存在し、血小板凝集、血栓形成のみならず、細胞接着、遊走、創傷治癒、癌の転移、造血などの多くの生理的、病的反応に関与することが明らかとなっている。今年度は採取した子宮内膜より子宮内膜間質細胞の分離・培養を行い、TSP-1の産生の検討を行った。子宮内膜の脱落膜化は血管新生に促進的に作用すると考えられる一方で、脱落膜化によりTSP-1の発現も認められたことから、血管新生抑制因子も産生が促進されることより、脱落膜において血管新生制御因子のネットワークが存在する可能性が示唆された。TSP-1が子宮内膜において生理的に血管新生にどのような影響を及ぼしているのか、現在検討中である。顆粒膜細胞の機能は種々のホルモン、サイトカインおよび成長因子により調節されている。肝細胞増殖因子(hepatocyte growth factor ; HGF)、線維芽細胞増殖因子(basic fibroblast growth factor ; bFGF)および血管内皮増殖因子(vascular endothelial growth factor ; VEGF)は血管新生促進因子として知られており、近年、卵巣においてもそれらの存在が報告され、卵胞発育や黄体形成に関与すると考えられている。今回は卵胞液中に存在する血管新生因子の役割を明らかにするため、HGF、bFGFおよびVEGFを測定し、卵胞液の血管新生能について検討した。卵管因子による不妊治療患者を対象とし、体外受精・胚移植時に各々の卵胞から卵胞液を採取し凍結保存した。正常月経周期の女性より血液を採取し、血清を凍結保存しました。卵胞液のHGF、bFGFおよびVEGFはELISA法(R&D Systems)で測定した。

血管内皮細胞にVEGFまたは各濃度の卵胞液を添加して10日間培養したのち、抗ヒトCD31抗体で血管内皮細胞を染色して血管の管腔形成能を検討し、さらにChalkley count法(Fox et al., 1995)を用いて形成された血管を定量化した。ヒト臍帯静脈血管内皮細胞(HUVEC)に卵胞液、HGFまたはVEGFを添加し、mitogen-activated protein (MAP)kinaseのphosphorylationについて検討した。HGF、basic FGFおよびVEGFは血清と比較して有意に高い濃度で卵胞液中に存在していた。血管内皮細胞に対して卵胞液の添加し新生血管の形成能を検討した結果ではVEGFの添加ではコントロールと比較して著明な血管形成能を認めた。卵胞液の添加でもコントロールと比較して血管形成能を認めた。次に、HUVECを用いて5検体の50%卵胞液を添加しMAP kinaseの活性化を検討したところ、VEGFの添加時と同様にMAP kinaseのリン酸化が亢進した。HGF添加でも同様の結果が得られた。以上の結果から、卵胞液中の血管新生促進因子が、卵胞発育や黄体形成に向けての血管新生に関与する可能性が示唆された。これらの結果は、現在、論文に投稿中である。
産業関連を中心とした二次統計の精度向上と分析枠組みの拡充

1955年(昭和30年)表以来、5年毎に作成されている我が国の産業連関表(全国基本表)は、レオンティエフによって開発された投入-産出分析理論を応用した開放型静学モデルに準拠して作成される加工統計表(processed statistical table)である。通常、この加工統計表に基づいて分析対象期間における経済構造とりわけ生産構造の計量的分析が行われる。特に開放型静学モデルに従う産業連関表の場合,生産構造は詳細に分割された各生産部門における原材料投入ベクトルの場合である投入マトリックスによって記述される。このマトリックスの構成要素である投入係数は,分析理論の仮説すなわち要素制約型生産関数のパラメーターの実際値であるとみなされている。本研究では,産業連関表の製造業部門に該当する工業統計調査のミクロデータを用いて、産業連関分析モデルにおける理論仮説の実証分析を試みた。特に平成10年度は、工業統計調査ミクロデータから産業部門別事業所ベースのパネルデータを作成した上で、製造品目(6桁分類商品)を統御した事業所群を(1)存続、(2)参入、(3)退出という3つの動態属性によって区分し、動態属性別に労働投入係数の推定を試みた。その結果、最大産出品目(商品)あるいは産出品目構成が類似する事業所群であっても、動態属性が異なるグループ間では投入係数に該当するパラメータに関して、統計的に有意な差があることが判明した。例えば,民生用電気機械機具製造業に属する事業所群のうち、最大産出品目が同一で上位3品目の産出構成が類似する事業所群を対象にした1990年のクロスセクションデータに基づく計測結果では、計測年次以降に退出した(3)の動態属性をもつ事業所群の投入係数が最も小さい値を示し、(1)が最も大きな値を示している。他の4桁分類産業に関しても、投入係数値の大きさの順序は異なるが、動態属性グループ間で有意な差がみられる。このような分析結果は、商品ベースの投入係数が単一ではなく、商品に固有の分布を従うことを示唆している。これを産業連関表の精度向上という観点からみれば、「投入実績調査」に際して,商品固有の投入係数分布を考慮した標本抽出が可能であることを示唆している。産業連関表は、国民経済の実物面に関数さまざまな経済活動を詳細かつ包括的に記述する二次統計である。また、単に記述統計としてだけでなく、国民経済における様々な経済活動の背後にある経済構造の特質を計量的に分析するための統計資料としての役割をもっている。本研究の目的は、この産業連関表の統計的精度とそれに基づく分析理論の経験的妥当性を、製造業部門の主要な一次統計である工業統計データに遡って検討することである。周知のように、工業統計の調査単位は製造業に属する事業所である。各事業所の生産活動は、生産活動に投入された生産要素(例えば、従業者数)と産出した商品の出荷額あるいは生産額などの指標によって記述されるが、個票データにはそれ以外に事業所の所在地(都道府県別)や産業部門番号などの詳細な指標が含まれている。今年度は、全数調査年次の工業統計個票データの再編・加工の方法を検討し、既存の個票フォーマット(F-1)に対して「分析用基本フォーマット(F-2)」を確定した。