hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
マイクロ流体素子を用いた微小反応・分離場の構築とその生物反応プロセスへの応用

本研究は,マイクロ流体素子を用いた反応場の構築と分離場の構築の二つに大別される。まず,微小反応場の構築に関しては,ナノリットルオーダーの微小液滴ディスペンサーの応用として,部分的な液体交換可能とする微小構造を作製することで,多数の反応条件を非常に簡便な操作によって形成することのできるデバイスの設計と評価を行った。そして生化学反応系への利用として,タンパク質結晶化における最適な濃度条件の探索等への応用を行った。また,液滴を用いた回分反応のみならず,連続的な多数の濃度条件の形成を可能とする流体分配器の設計と評価を行い,細胞増殖に与える影響の評価へと応用できることも確かめた。一方,分離場の構築としては,主として細胞などをターゲットとした新しい微粒子の分級手法・構造を提案し,実際にその効果を評価した。マイクロ流体デバイスは,その大きさがマイクロメートルサイズの細胞や粒子とぼぼ同じであるため,今までにない粒子分離プロセスが実現されると考えられている。そこで,本年度は,前年度提案したPFF(ピンチド・フロー・フラクショネーション)法の発展として,非対称PFF法の提案を行い,実際に細胞等の分離へと応用することによってその有用性を確認した。さらに,粒子の濃縮と分離を同時に可能とする手法である水力学的フィルトレーション法を提案した。そして実際に流路幅5500ミクロン程度の流路を作製し,粒子の分離・濃縮を行ったところ,マイクロメートルの粒子の濃縮と分離が同時に可能であることが確かめられた。さらに,血球細胞等の生体粒子への応用も可能であった。この手法は,純粋に水力学的な力のみによって,粒子の連続的な濃縮とサイズによる分離を可能とするため,今までにない新しい分離ツールとして様々な分野で利用されることが期待される。本研究では,ナノリットル程度の非常に微小な液体を多数正確に秤り取り,同時に複数の液滴を混合することで,化学・生化学反応を並列に行うことのできるマイクロ流体アレイの開発を行ってきた。これまでの研究では,PDMS(ポリジメチルシロキサン)という材料を用い,疎水的表面を持つマイクロ流体デバィスを作製し,液体秤取の基本原理の構築,on-chip電気泳動のためのインジェクション法の開発等を行ってきたが,本年度は,より集積度の高いデバイス構築のための秤取液量の更なる微小化,具体的な応用例としてマイクロ流体アレイを用いたタンパク質の結晶化を行った。まず、秤取液量の更なる微小化に関しては,ファブリケーションにおける流路構造のパターンとしてクロムマスクを用いることで,秤取液体の大幅な減少に成功した。最も最小の秤取チャネルとして,幅,深さ,長さがそれぞれ20,15,50マイクロメートルの秤取チャンバーを作製することにより,15ピコリットルという非常に微小量の液滴を秤取することに成功した。これは今までの方法の約100分の1程度の体積であり,この程度の液量を誤差数%程度で秤取する研究は今まで報告されていないため,画期的であるといえる。続いて,マイクロ流体アレイの実際の応用として,微小スケールでのタンパク質結晶化条件スクリーニング系の構築を行った。タンパク質の結晶化には通常1条件あたり1マイクロリットル程度のタンパク質を必要とするが,マイクロ流体アレイを用いることで高価タンパク質の使用量を100分の1以下に抑えることがセきると期待される。実際にマイクロ流体アレイ中で結晶化を行ったところ,10ナノリットルレベルの結晶化条件で,バルク条件と同じ結晶形を有するタンパク質(卵白リゾチーム,グルコースイソメラーゼ)の結晶を得ることに成功した。これまでの研究では,PDMS(ポリジメチルシロキサン)という材料を用い,疎水的表面を持つマイクロ流体デバイスを作製し,液体秤取の基本原理の構築,on-chip電気泳動のためのインジェクション法の開発等を行ってきた。また生化学スクリーニングの例として,タンパク質の結晶化等を行ってきた。本年度は,より高機能なスクリーニングシステムとして,蒸気拡散法を用いたタンパク質の結晶化を行う一方,マイクロ流体素子を用いた細胞等の粒子の分離場を構築した。まず、高機能なスクリーニングシステムとしての蒸気拡散法によるタンパク質結晶化では,結晶化チャンバーと沈殿剤チャンバーを流路で接続し,さらにそれらのチャンバーをアレイ化することにより,タンパク質量が10nL以下での新しい反応場の構築が可能であった。また,マイクロバッチによる結晶化と比較した際に,異なる結晶形を有するタンパク質(卵白リゾチーム,グルコースイソメラーゼ)の結晶を得ることに成功した。一方で,マイクロ流体素子における層流場を利用した,新しい粒子の分級技術の開発を行った。具体的には,部分的に細くなっている流路(ピンチ流路)中に,粒子混合物を含む溶液と含まない溶液を連続的に導入するだけで,マイクロメートルサイズの粒子を正確に分級することのできる技術,PFF(ピンチドフローフラクショネーション)法の提案を行った。この分離技術は,遠心力や重力等の外力を用いずに,マイクロ流体素子の形状のみによって粒子を分級できるという点において,非常に有用であると考えられる。

まず,微小反応場の構築に関しては,ナノリットルオーダーの微小液滴ディスペンサーの応用として,部分的な液体交換可能とする微小構造を作製することで,多数の反応条件を非常に簡便な操作によって形成することのできるデバイスの設計と評価を行った。そして生化学反応系への利用として,タンパク質結晶化における最適な濃度条件の探索等への応用を行った。また,液滴を用いた回分反応のみならず,連続的な多数の濃度条件の形成を可能とする流体分配器の設計と評価を行い,細胞増殖に与える影響の評価へと応用できることも確かめた。一方,分離場の構築としては,主として細胞などをターゲットとした新しい微粒子の分級手法・構造を提案し,実際にその効果を評価した。マイクロ流体デバイスは,その大きさがマイクロメートルサイズの細胞や粒子とぼぼ同じであるため,今までにない粒子分離プロセスが実現されると考えられている。そこで,本年度は,前年度提案したPFF(ピンチド・フロー・フラクショネーション)法の発展として,非対称PFF法の提案を行い,実際に細胞等の分離へと応用することによってその有用性を確認した。さらに,粒子の濃縮と分離を同時に可能とする手法である水力学的フィルトレーション法を提案した。そして実際に流路幅5500ミクロン程度の流路を作製し,粒子の分離・濃縮を行ったところ,マイクロメートルの粒子の濃縮と分離が同時に可能であることが確かめられた。さらに,血球細胞等の生体粒子への応用も可能であった。この手法は,純粋に水力学的な力のみによって,粒子の連続的な濃縮とサイズによる分離を可能とするため,今までにない新しい分離ツールとして様々な分野で利用されることが期待される。
クラウドコンピューティングによる汎用医学研究データ収集システム

本研究では、クラウドコンピューティングの活用により、様々な医学研究目的のために研究者自らがWeb調査票システムを無料で作成できる汎用医学研究データ収集システムの構築・運用・評価を行った。本研究の成果により、年間数千件の医学研究プロジェクトについて研究データのオンライン収集が効率的かつ安全に実施できるようになり、医療社会調査、疫学研究、臨床研究データ収集の情報インフラとして多大な貢献が期待できる。平成22年度は、システム構築の関する調査研究、システム概要仕様の検討、システム詳細設計、システム構築の前半を実施した。システム開発手法としては、UMINで長年システム開発を行う中で、効率・柔軟性が高いと認められてきた手法を用いた。1.システム構築に関する調査研究システム構築のために参考となるソフトウエア、ライブラリー等について調査を行った。2.システム概要仕様の検討システム概要設計においては、1)入出力されるデータの表(通常複数)、2)必要なWeb画面(HTML)、3)画面遷移図を作成する。このように、コンピュータ処理の手順を中心とした機能中心アプローチではなく、データの表や画面に注目したデータ中心アプローチを取った。3.研究用ハードウエアの購入と関連ソフトウエアの導入研究用のPCサーバを1台購入し、フロンエンド用に、Apache WWWサーバ、Perl処理系と関連ライブラリーをインストールした。4.システム詳細仕様の設計とシステム開発最も基本的なシステムの大枠をプログラムのプロトタイプモデルとして開発した。今後、このプロトタイプを活用して、詳細設計を行う予定である。平成23年度は、平成22年度に開発したプロトタイプをもとにして、全体のシステム設計開発と運用テストを実施した。システム全体の概要詳細設計がほぼ決定し、平成24年度の一般公開テスト運用に向けた暫定版システム(割付機能を除く)が稼働可能となった。動作についての評価・確認を実施し、必要な修正を可能な範囲で実施した。システムは、管理プロジェクト一覧画面と症例登録画面から構成されており、具体的な内容は下記に示す。1.管理プロジェクト一覧画面UMIN IDを所有する利用者が、臨床・疫学研究の新規プロジェクト開設、既存プロジェクト改変を実施することができる画面である。具体的な設定情報は、(1)プロジェクト基本情報(プロジェクト名称、割付の有無、施設数等)、(2)個別画面設定(Webデータ入力画面もしくはファイルのアップロードが設定可能で、Web画面の場合には、項目名、データの型、項目の表示順序、コメント等が設定可能)、(3)結果一覧画面設定(登録症例データの一覧表示・参照について設定が可能)、(4)施設管理設定、(5)利用者管理設定、(6)プロジェクトメニュー(データ入力者が見る症例登録画面の確認機能)、(7)状態(準備中、運用中、登録終了、運用終了)変更画面となっている。2.症例登録画面UMIN IDを所有する利用者が、臨床・疫学研究の症例のデータ入力・更新やデータの参照行うことができる画面である。症例登録画面は、管理プロジェクト一覧画面から臨床・疫学研究の事務局が上述の設定情報を設定することによって、自動的に生成される。平成24年度は、平成22年度から平成23年度にかけて開発したプロトタイプに、下記機能を更に付与し、運用可能となった。1.割付機能の付与(ア)プロジェクト基本情報画面:割付として完全無作為化法と最小化法を設定できるようになった。(イ)個別画面設定:プロジェクト基本情報画面において割付で最小化法を設定した場合は、割付因子の設定が行えるようになった。(ウ)割付設定画面:割付機能を新しく付与したことにより、新しく開発した画面。プロジェクト基本情報で最小化法を設定した場合にのみ利用可能である。ここでは、割付の基本情報を設定する。実際の症例登録後の割付画面で使用されるA群名称、B群名称の設定、強制割付時の閾値の設定、施設を割付因子とするかの設定を行うことができる。(エ)症例登録画面の割付設定画面の修正・削除:割付画面におけるデータの修正は今までは行えなかったが、割付因子以外の項目であれば自由に修正ができるようになった。登録済みの割付因子データを修正または削除したい場合は、一度「削除申請処理」を行う。削除申請処理を行うと、プロジェクト管理者宛てにその旨メールが自動配信され、プロジェクト管理者は、管理プロジェクト一覧画面の削除申請一覧画面より、申請情報を確認し、削除することが可能。(オ)削除申請一覧画面:プロジェクト基本情報画面にて最小化法で割付を設定した場合にのみ利用かのうな画面です。上記(エ)で削除申請されたデータの一覧を見ることができ、データを確認の上、データを削除することができます。その際、登録されている割付因子情報から、割付情報は自動で計算しなおされる。2.症例登録結果のダウンロード機能の追加症例登録画面の結果一覧画面より画面毎に登録データを全てCSVファイルでダウンロードできるようになった。平成22、23年度の研究成果によりクラウドコンピューティングによる汎用医学研究データ収集システムの機能がほぼそろい、最終年度の平成24年度には一般公開システムとそれにもとづく改良を実施できる。24年度が最終年度であるため、記入しない。引き続いて、システム詳細仕様の評価・検討、システム改良を行う。
英語母語話者と中国語母語話者における和製英語の知識と意味推測に関する調査

和製英語とは英語をもとに作られたカタカナ語の1つで、英語母語話者にとっては母語に似た外国語であり,日本語母語話者にとって外国語に似た母語であるという興味深い特徴を持つ語彙である。本研究では,まず和製英語の特徴を知るために,和製英語を集めた書籍,及び,フリー百科辞典ウィキペディア,和製英語楽天,和製英語矯正辞典などのwebサイトから新しいと思われる和製英語を収集して総覧した。その結果,和製英語を以下の四つのタイプに整理できた。第一に,英語として存在するが,英語の意味とは異なる意味で使われるもの(例:smartとスマート)。第二に,英語の単語を変形,あるいは短縮して作られたもの(例:ドライヤー)。第三に,英単語に存在しないが英語のような印象を与えるもの(例:ナイター)。第四に,英単語を組み合わせて出来たもの(例:ムードメーカー,マナーモード)。この中で第四のタイプの和製英語30語を刺激語として,英語を母語とするアメリカ人で日本語学習歴のある30名と学習歴のない30名に各語の知識と意味推測の課題を行った。その結果,(1)英語と形が良く似ている和製英語,(2)後項の語が複合語全体の意味的主要部となり,前項の語が後項の語を修飾している和製英語は意味推測が易しく,反対に,(1)英語の語順規則に則っていない和製英語,(2)英語の概念に共通する部分が少ない和製英語,(3)前項の語も後項の語も,それが構成する複合語の主要な意味とならない和製英語は,英語母語話者にとって意味推測が難しい傾向があることが示された。本研究成果は韓国日本語学連合会第4回国際学術発表大会,及びカナダ日本語教育振興会2006年度年次大会で発表した。論文としては「日本語科学」(2007年4月国立国語研究所)に「アメリカ人はどのぐらい和製英語がわかるか」が出版されたほか,「レキシコンフォーラム」(2008年3月ひつじ書房)に「韓国母語話者による和製英語の理解」が出版された。本研究成果は韓国日本語学連合会第4回国際学術発表大会,及びカナダ日本語教育振興会2006年度年次大会で発表され,さらに「日本語科学」(2007年4月国立国語研究所)に「アメリカ人はどのぐらい和製英語がわかるか」が出版された。平成18年度で研究計画の半分以上が達成できたと言える。

その結果,(1)英語と形が良く似ている和製英語,(2)後項の語が複合語全体の意味的主要部となり,前項の語が後項の語を修飾している和製英語は意味推測が易しく,反対に,(1)英語の語順規則に則っていない和製英語,(2)英語の概念に共通する部分が少ない和製英語,(3)前項の語も後項の語も,それが構成する複合語の主要な意味とならない和製英語は,英語母語話者にとって意味推測が難しい傾向があることが示された。本研究成果は韓国日本語学連合会第4回国際学術発表大会,及びカナダ日本語教育振興会2006年度年次大会で発表した。論文としては「日本語科学」(2007年4月国立国語研究所)に「アメリカ人はどのぐらい和製英語がわかるか」が出版されたほか,「レキシコンフォーラム」(2008年3月ひつじ書房)に「韓国母語話者による和製英語の理解」が出版された。
ABCAサブファミリータンパク質(ABCA1,ABCA7)の機能解析

アポリポタンパク質AIとの相互作用に関与すると考えられる、ABCA1タンパク質の2つの細胞外領域(ECD-1,ECD-2)の機能を詳細に調べるため、ECDを大腸菌で発現させ、精製した。ECD-2は単独では発現しないが、ECD-1との融合タンパク質として発現させることに成功した。これを親和性クロマトグラフィーで精製することができた。ABCA1のN末領域が翻訳後切断を受ける可能性を検討するため、N末端領域とECD1を動物培養細胞(HEK293細胞)で発現させ、膜画分に局在することを示した。N末端領域が切断を受ける可能性を示し、さらにECD1がジスルフィド結合によって他のタンパク質と相互作用して、膜画分に留まる可能性を示唆した。ABCA1とABCA7の機能を調べるため、全長タンパク質をそれぞれ動物培養細胞で発現させ、相互作用する分子、コレステロール、リン脂質の細胞外への排出活性を検討した。PDZタンパク質の1つα1-syntrophinがABCA1のC末端と相互作用することを見いだし、α1-syntrophinがABCA1の分解を抑制することで、apoAI依存的なコレステロール排出を促進することを明らかにした。また、ABCA7をHEK293細胞で発現させると、ABCA1と同様に細胞膜上に局在し、細胞からのapoAI依存的なコレステロール、リン脂質の排出が観察されることを明らかにした。さらに、ABCA7のスプライシングバリアントを単離し、バリアントが小胞体に局在してコレステロール、リン脂質排出には働かないことを示した。このことから、選択的スプライシングがABCA7の翻訳後制御に関わる可能性を示唆した。脂質、コレステロール輸送に関与すると考えられるABCA1タンパク質の2つの細胞外領域(ECD)の機能を詳細に調べるため、ECD-1を大腸菌で発現させ、それに対するポリクローナル抗体を作製した。一方、ECD-2は大腸菌でほとんど発現しなかった。ECD-2の構造維持にECD-1との相互作用が必要である可能性もあるので、今後はECD-1とECD-2の共発現を行う。2つのヌクレオチド結合領域(NBF1,NBF2)でのATP結合・加水分解と機能の関係を調べるために、NBFをマルトース結合タンパク質(MBP)との融合タンパク質として大腸菌で発現させ、ポリクローナル抗体を作製した。バナジン酸トラッピング法によって、培養細胞で発現させたABCA1にATP加水分解活性があることを初めて明らかにした。遺伝性HDL欠損症の一つであるタンジール病の原因となるABCA1変異の影響を調べた。野生型ABCA1は細胞膜と細胞内区画に局在することを、ECD-1に対する抗体を用いて明らかにした。ECDの変異体の内、R587WとQ597Rは細胞膜への局在が不全となることを糖鎖解析とGFP融合タンパク質の蛍光顕微鏡解析から明らかにした。W590Sは細胞膜に局在し、野生型と同様のATP結合・加水分解活性を持つが、アポリポタンパク質AI依存的なコレステロール輸送が失われることを明らかにした。このことから、W590S変異はATP結合、加水分解以降の段階で機能が失われる可能性を示した。
eラーニング高等教育に対応したオープン・ソース型FDの開発とその効果に関する研究

1.[第6回米国WebCTユーザカンファレンス参加]批判的思考を促進する授業実践、オンラインコースにおける授業目標到達者・非到達者の学習履歴の差、オンラインコースにおけるグループ作業の導入方法などについて、セッション参加者と意見交換を行った。2.[第2回WebCT研究会参加・研究成果発表]eラーニングにおける教育学分野での研究成果が教育実践での問題解決にどのような貢献をしているかについて、その知見をまとめる報告を行った。3.[日本教育工学会第20回全国大会参加・研究成果発表]課題研究06において「モジュール化コンセプトによるe-Learning高等教育教材の開発とオープンソース型コラボレーション環境の構築」という題目で報告を行った。4.[第3回日本WebCTユーザカンファレンス]デジタルコンテンツの新しい開発・再利用形態として国際的に注目を集めているMERLOTとネットワーク時代における新しい著作権の在り方であるCreativeCommonsの詳細について紹介し、わが国におけるオープンソース型の教材開発形態の方向性について議論を深めた。5.[第7回米国WebCTユーザカンファレンス]われわれが行っているコンテンツ開発形態について提案と紹介を行い、グローバルな観点から参加者との間で広く意見交換を行った。6.[第21回日本教育工学会全国大会]課題研究4「高等教育におけるe-Learningの展開とその評価」に採択された。7.[第3回WebCT研究会]ネットワーク上における協調的学習活動について実践的研究報告と数理的分析手法の提案を行った。8.本研究で得た成果の一部をエミットジャパン編『WebCT:大学を変えるeラーニングコミュニティ』(東京電機大学出版局)にまとめ、出版した。1.研究環境の整備:広島大学情報メディア教育研究センターの協力を得てWikiサーバを設置。ここを研究環境とし,コンテンツの開発に着手した。2.武庫川女子大学(平成16年6月)、東京都立科学技術大学(同9月)、日本大学国際関係学部(同11月)、eラーニング・コンソーシアム(同12月)、熊本大学(平成17年1月)、九州大学(同3月)において依頼講演等を行いわれわれの取り組み等について広く紹介するとともに意見交換を行った。3.成果報告等:次のカンファレンス,研究会に参加し意見交換を行うとともに本研究の中間報告的な成果発表を行った。[第6回米国WebCTユーザカンファレンス参加]批判的思考を促進する授業実践、オンラインコースにおける授業目標到達者・非到達者の学習履歴の差、WebCTを活用する上で有効な教授法,オンラインコースにおけるグループ作業の導入方法などについて、セッション参加者と意見交換を行った。[第2回WebCT研究会参加・研究成果発表]eラーニングにおける教育学分野での研究成果が、教育実践での問題解決にどのような貢献をしているかについて、先行研究の整理を通じてその知見をまとめる報告を行った。[日本教育工学会第20回全国大会参加・研究成果発表]課題研究06「e-Learning成功のための実践・運用のモデル化」において「モジュール化コンセプトによるe-Learning高等教育教材の開発とオープンソース型コラボレーション環境の構築」という題目で報告を行った。[GLOBE設立記念シンポジウム・セミナー参加]本研究のテーマに関連する学習コンテンツの蓄積に関する取り組みとして、GLOBEの取り組みに関する報告を聞き、参加者との意見交換を行った。特にMERLOTが進める、教材情報のネットワークづくりの枠組みは今後の研究の示唆を与えるものであった。1.研究環境の整備と活用:九州大学情報基盤センターの協力によりblog環境を用意し、ネットワーク上における協調的なコンテンツ教材開発環境の可能性を探った。2.熊本電波高専主催研究会(平成17年4月)、教育情報システム学会主催シンポジウム(同6月)、大阪大学工学研究科主催特別講演会(平成18年2月)、京都経済短期大学主催研究会(同2月)においてパネラー参加あるいは依頼講演等を行った。4.成果報告1:以下のカンファレンス、研究会等において本研究の成果を発表した。[第3回日本WebCTユーザカンファレンス]

デジタルコンテンツの新しい開発・再利用形態として国際的に注目を集めているMERLOTとネットワーク時代における新しい著作権の在り方であるCreative Commonsの詳細について紹介し、わが国におけるオープンソース型の教材開発形態の方向性について議論を深めた。[第7回米国WebCTユーザカンファレンス]われわれが行っているコンテンツ開発形態について提案と紹介を行い、グローバルな観点から参加者との間で広く意見交換を行った。[第21回日本教育工学会全国大会]課題研究4「高等教育におけるe-Learningの展開とその評価」に採択された。[第3回WebCT研究会]ネットワーク上における協静的学習活動について実践的研究報告と数理的分析手法の提案を行った。5.成果報告2:本研究で得た成果の一部をエミットジャパン偏『WebCT:大学を変えるeラーニングコミュニティ』(東京電機大学出版局)にまとめ、出版した。
両大戦間期の国際保健衛生活動

第一次世界大戦後、国際平和の維持及び国際協力の促進を目的として普遍的国際機構である国際連盟が設立された。近年、国際連盟の国際協力活動に着目して、国際連盟設立の意義を再評価する研究が進んでいる。本研究もその中に位置付けられ、保健衛生分野を対象に国際連盟保健機関(League of Nations Health Organization : LNHO)の下、両大戦間期に国際保健衛生活動が発展した要因を実証的に解明することを目的としている。研究は二段階に分けて進める計画であり、第一段階としてスイス、ジュネーヴの国際連盟資料館(League of Nations Archives)において史料収集を行った。調査史料に基づき国際連盟保健機関の創設過程を検証し、当該機関は国際連盟の専門機関でありながら国際連盟不参加となったアメリカを包摂する柔軟な組織構造を有していたこと、その特徴により保健衛生分野において存在感を高め、様々な国際保健衛活動を展開していたと位置付けを行った。研究の第二段階では国際保健衛生活動の歴史的展開、発展とその要因分析を行う計画であった。創設後、国際連盟保健機関は各国の保健関係者の人的・知識交流制度の立案、生物標準化会議を開催し国際保健衛生活動の枠組みを構築する。それはこれまでの保健衛生組織の国家間の利害調整という役割に留まらない、当該機関が自ら保健衛生活動の内実を規定する主体的活動へ変化を伴うものであった。両大戦間期に国際協力の中でも特に保健衛生分野が発展した背景には、国際連盟保健機関を中心とする国際制度が基礎にあり、当該機関の創設はその進展の大きな転換点であったことを検証している。(抄録なし)第一次世界大戦後、普遍的国際機構である国際連盟が国際平和の維持及び国際協力の促進を目的として設立された。本研究の目的は国際連盟の国際協力活動、特に保健衛生分野を対象として国際保健衛生活動が発展した要因を一次資料を用いて実証的に解明することにある。本研究は二段階に分けて研究を進める計画であり、第一段階としてスイス、ジュネーヴの国際連盟資料館において国際連盟保健機関の一次資料の収集を行った。調査資料に基づき国際連盟保健機関の創設過程を検証した。国際連盟保健機関は、国際連盟規約に目的規定が定められたことで創設が始まる。目的、任務規定は早い段階で具体化され合意に至るが、組織構造について修正する余地が残されていた。当該機関の創設過程において重要な局面は、組織構造変更の是非が問われた場面であった。今後設立される国際保健組織の目的及び任務を考慮し柔軟に組織構造を修正した結果、国際連盟保健機関は国際連盟の専門機関でありながら国際連盟加盟国の枠に囚われることのない組織構造を備える機関となる。両大戦間期に国際協力の中でも特に保健衛生分野が発展した背景には、保健衛生分野が早期に協力活動が進展した分野であったことのみならず、国際連盟加盟国の枠を越える参画が可能な制度的特徴を国際連盟保健機関が有していたことを指摘し、その特徴的な制度の成立過程を明らかにした。本年度は、以上の研究について学会報告を行い、論文「国際連盟保健機関の創設」として学会誌に投稿を行った。本年度は、研究蓄積に乏しい両大戦間期の国際保健衛生活動の一次資料を渉猟する計画であった。2012年11月にスイス、ジュネーヴの国際連盟資料館において国際連盟保健機関の一次資料を確認し、事実関係の確認を行った。上記の事実確認に加え学会報告や論文を通じて成果の具体化にも努めた。本研究の目的は両大戦問期及びその前後を通して国際保健衛生活動は継承され発展していたことを検証することにある。研究を二段階に分け本年度は主に事実関係の確認を行った。今後は把握した国際保健衛生活動の歴史的展開、発展とその要因分析を行う計画である。特に国際連盟保健機関が関与した栄養、ビタミン分野の定義・科学的基準を定めた国際会議に着目する。国際組織、国家、保健衛生分野の実務家等多様な行為主体が参画し会議が進行していく過程を明らかにする。
ニュ-ラルコンピュ-タ構築のための興奮性分子素子の研究

素子の開発から、それらの結合したシステムとしてのニュ-ラルネットの実現に至る、各レベルの研究を総合的に推進した。主たる成果は、次の通りである。(1)膜の非線形特性の評価法の確立気水界面上に展開した脂質薄膜の非線形粘弾性を、定量的に評価することのできる装置を自作した。これまでに、様々の脂質膜について系統的な測定を行なってきている。その結果、味物質は、その特性に応じて、非線形粘弾性を特異的に変化させること、等が明かとなった。(2)嗅い受容のモデルとしてのガスセンサ半導体がガスセンサの動的な応答を定量的に評価することにより、情報の次元を増すことができることを、理論的に明らかにした。これにより、単一のセンサであっても、多種類のガスを同時に定性・定量することが可能となった。具体的には、ヒ-タ電圧を周期的に変化させて、抵抗の経時変化を測定する。このようにして得られる動的応答は、ガス種の吸脱着速度の温度依存性や、その極性などに依存して特異的に変化する。出力波形をフ-リェ変換したときの、高調波成分の相対的な変化から、ガスの種類を判別することができる。以上のことを、具体的な実験例でもって示すことができた。(3)非線形振動子の引き込み同調ニュ-ロンの間の相互作用のモデルとして、非線形振動子の相互引き込み同調についての研究を、理論・実験両面より進めた。2つの非線形振動子が相互作用すると、同一位相と並位相のモ-ドが現する。さらに、3つの振動子が相互作用すると、三相モ-ドが現われることを明らかにした。この三相モ-ドは、双安定であり、動的記憶の要素となり得る。
アメリカ格差社会とアフリカ系アメリカ人のサブカルチャー

本研究では、ブッシュ共和党政権の成立とともに加速的に階層化されたアメリカ社会の底辺に置かれた人々が発信するサブカルチャーに注目し、抑圧された人々のアイデンティティ構築の過程を明らかにするとともに、格差社会の実情に照らし合わせながら、階層を超越する、ことにアフリカ系アメリカ人のサブカルチャーを論じる理論構築の可能性を明らかにした。また、サブカルチャー表象の研究が、グルーバル化によって進む環境破壊問題を論じる際にも有効であることを示した。本研究では、「アメリカ格差社会とアフリカ系アメリカ人のサブカルチャー」をテーマに、アメリカにおける格差社会の問題について、社会的弱者とされるマイノリティー・グループ、ことにアフリカ系アメリカ人の視点から、彼らが発信する、権威主義に対抗するサブカルチャーとしての文化表象を検証する。本年度はまず、1980年代の終わり頃から21世紀初頭にかけて、アフリカ系アメリカ人の文学と文化に大きな影響を与えたポスト・ソウル美学に着目した。ポスト・ソウル美学の担い手は、公民権運動の時代に成長し、人種差別撤廃後の大きな変化の時代を生きてきた人々である。この世代の作家の1人、テリー・マクミランは、文学のジャンルばかりではなく映画のジャンルにも進出して成功し、人種や階級の違いを超越して多くの人々を魅了している。ジャンル、人種、そして階級差を越えたマクミランの世界で描かれる文化表象を検証することは、公民権運動までは人種で固定化されていたアメリカの階級社会を再検討する上で非常に重要である。さらに、アフリカン・アメリカンの作家トニ・モリスンの第五作目の小説にあたる『ビラヴィッド』が、アメリカの人気テレビ番組司会者、オプラ・ウィンフリーによって映画化され、その後、作者自身の手でオペラ化され、ビデオやDVDで広く一般に普及していることの意義を考察した。さらには、「声なき者の代弁者」としてのモリスンの思いが、活字体とは異なった電子媒体を通して伝達されることの重要性を明らかにした。本研究では、「アメリカ格差社会とアフリカ系アメリカ人のサブカルチャー」をテーマに、アメリカにおける格差社会の諸問題について、社会的弱者とされるマイノリティー・グループ、ことにアフリカ系アメリカ人の視点から、彼らが発信する、権威主義に対抗するサブカルチャーとしての文化表象を検証することを研究目的としている。本年度は昨年度に引き続き、1980年代の終わり頃から21世紀初頭にかけて、アフリカン・アメリカンの文学と文化に大きな影響を与えたポスト・ソウル美学に着目した。この世代の作家の1人、コルソン・ホワイトヘッドに注目し、彼の半自伝的小説と言われる『サグ・ハーバー』(2009)を中心に、彼のエッセイ等も参照しながら考察を行なった。人種、階級差を超える手段として映画や音楽の役割を重視する彼の姿勢は、サブカルチャーの重要性を証明していると言える。この研究成果は、2010年10月に開催されたアメリカ文学会全国大会におけるワークショップで公表した。本年度はさらにグローバル時代における自然破壊と階級格差の問題について検討した。資本家によっていわゆる発展途上国の資源や労働力が搾取されるグローバリゼーションの時代にあって、社会で周縁化されてきたアフリカ系アメリカ人の闘いの手法が注目されている。周縁化されてきたマイノリティの人々と同様、沈黙を強いられ、搾取されてきた自然の表象について、トニ・モリスンの『マーシー』を中心に研究を行い、その成果を2010年11月にフランス・パリで開催されたトニ・モリスン学会で、"Conquest of Nature and Establishment of Racial Hierarchy in A Mercy"というタイトルで発表した。本年度は昨年度に引き続き、1980年代の終わり頃から21世紀初頭にかけて、アフリカン・アメリカンの文学と文化に大きな影響を与えたポスト・ソウル世代の作家の1人、コルソン・ホワイトヘッドに注目するとともに、奴隷制の時代からオバマ大統領誕生にいたるポストレイシャルの時代までのアフリカ系アメリカ人の音楽がもたらした社会的骸響について、人種、階級の視点から論じた。研究成果の公表として、2011年6月に山口大学で開催された中四国アメリカ文学会支部:第40回大会でのシンポジアム「アメリカ文学と音楽」において、アフリカ系アメリカ人の音楽・文学に見る人種意識の変遷-ポスト・ソウル世代の作家、コルソン・ホワイトヘッドの『サグ・ハーバー』を中心に」というタイトルで発題した。さらに、2011年度(第29回)広島女学院大学公開セミナー第2回(10月15日)で「アフリカ系アメリカ人の音楽・文学を通して見る人種意識」をテーマに講演を行ない、科学研究費補助金による研究成果を、地域社会に公表する機会とした。なお、これらの発表、講演をもとに、「アフリカ系アメリカ人の音楽・文学に見る入種意識の変遷-奴隷制からポスト・ソウル世代にいたるまで-」という論文を執筆し、『ことばが語るもの』(英宝社2012年3月刊行)に収録された。
代謝シグナルが投射されるゲノム領域の同定と転写環境調節機構の解明

研究代表者らは、エネルギー代謝シグナルの解析のための個体を用いた定量系(in vivo Ad-luc解析法)を確立してきた。さらにゲノム上の全転写因子を網羅する発現ライブラリー(TFEL:Transcription Factor Expression Library)を独自に開発し、それを用いた転写複合体解析法(TFEL scan法)を確立した。これらの独自の手法にもとづき、摂食応答や肥満応答など、個体レベルでのみ解析可能なエネルギー代謝シグナルについて、それらが投射されるゲノム領域を同定を進め、さらにその領域上における転写調節機構の解明を行った。代謝シグナルを受けた遺伝子発現制御機構の中で、転写因子が特定のゲノムDNA配列を読み取る「目」となって作用するには、複数の核内因子とゲノム上で複合体を構成することが重要である。本研究では、in vivo Ad-luc解析法に、さらに我々が独自に開発したゲノム上の全転写因子を網羅した発現ライブラリー(TFEL:Transcription Factor Expression Library)を用いた転写複合体解析法を組み合わせ、様々なエネルギー代謝シグナルが投射されるゲノム上の領域を同定し、その領域上におけるエピゲノム情報を含めた転写環境制御機構の解明を通じて、最終的には、エネルギー貯蔵と消費のバランス制御の転写調節機構の全体像を明らかにすることを目指す。平成23年度においては、従来より進めてきた中性脂肪合成系の転写調節カスケードの解明をさらに進め、SREBP-1cの上流のKLF15遺伝子の、さらにその上流の調節因子の探索を中心に行った。さらに、KLF15の解析と並行して、「絶食シグナル」を受けて動く経路の解析を進めた。また上記により得られた代謝シグナル投射領域上にどのような転写因子複合体が形成されているかを我々が独自に開発したTFEL scan法という方法により解析を進めた。さらに各複合体構成要素分子のメチル化・アセチル化などの分子修飾の状態についても探索を行った。平成24年度においては、従来より進めてきた中性脂肪合成系の転写調節カスケードの解明をさらに進め、SREBP-1cの上流のKLF15遺伝子の、さらにその上流の調節因子の探索を中心に行った。さらに、KLF15の解析と並行して、「絶食シグナル」を受けて動く他の経路の解析を進めた。また上記により得られた代謝シグナル投射領域上にどのような転写因子複合体が形成されているかを我々が独自に開発したTFEL scan法という方法により解析を進め、またTFEL scan法を進化させたTFEL Multi-scan法を開発した。研究代表者は、エネルギー代謝シグナルの解析のための個体を用いたアッセイ系として、in vivo Ad-luc解析法を確立してきた。本研究では、このin vivo Ad-luc解析法に、さらに我々が独自に開発したゲノム上の全転写因子を網羅した発現ライブラリー(TFEL:Transcription Factor Expression Library)を用いた転写複合体解析法を組み合わせ、様々なエネルギー代謝シグナルが投射されるゲノム上の領域を同定し、その領域上におけるエピゲノム情報を含めた転写環境制御機構の解明を通じて、最終的には、エネルギー貯蔵と消費のバランス制御の転写調節機構の全体像を明らかにすることを目指す。平成25年度においては、従来より進めてきた中性脂肪合成系の転写調節カスケードの解析をさらに進め、SREBP-1cの上流のKLF15遺伝子の、さらにその上流の調節因子の探索、ならびに、「絶食シグナル」を受けて動く他の経路の解析を進めた。また上記により得られた代謝シグナル投射領域上にどのような転写因子複合体が形成されているかを、我々が独自に開発したTFEL scan法ならびに、その改良版であるTFEL Multi-scan法を用いて解析を行った。さらに各複合体構成要素因子のメチル化・アセチル化などの分子修飾の状態についても探索を行った。

平成26年度においては、従来より進めてきた中性脂肪合成系の転写調節カスケードの解析をさらに進め、SREBP-1cの上流のKLF15遺伝子の、さらにその上流の調節因子の探索、ならびに、「絶食シグナル」を受けて動く他の経路の解析を進めた。また上記により得られた代謝シグナル投射領域上にどのような転写因子複合体が形成されているかを、我々が独自に開発したTFEL scan法ならびに、その改良版であるTFEL Multi-scan法を用いて解析を行った。さらに各複合体構成要素因子のメチル化・アセチル化などの分子修飾の状態についても探索を行った。KLF15上流のcis-element解析を完了し、転写複合体解析へと進むことができたので、順調に進展していると考えている。代謝シグナルを受けた遺伝子発現制御機構の中で、転写因子が特定のゲノムDNA配列を読み取る「目」となって作用するには、複数の核内因子とゲノム上で複合体を構成することが重要である。研究代表者は、エネルギー代謝シグナルの解析のための個体を用いたアッセイ系として、in vivo Ad-luc解析法を確立してきた。本研究では、このin vivo Ad-luc解析法に、さらに我々が独自に開発したゲノム上の全転写因子を網羅した発現ライブラリー(TFEL:Transcription Factor Expression Library)を用いた転写複合体解析法を組み合わせ、様々なエネルギー代謝シグナルが投射されるゲノム上の領域を同定し、その領域上におけるエピゲノム情報を含めた転写環境制御機構の解明を通じて、最終的には、エネルギー貯蔵と消費のバランス制御の転写調節機構の全体像を明らかにすることを目指す。平成27年度においては、従来より進めてきた中性脂肪合成系の転写調節カスケードの解析をさらに進め、SREBP-1cの上流のKLF15遺伝子の、さらにその上流の調節因子の探索、ならびに、「絶食シグナル」を受けて動く他の経路の解析を進めた。さらに各複合体構成要素因子のメチル化・アセチル化などの分子修飾の状態についても探索を行い、修飾アミノ酸抗体の作成を行って解析した。研究代表者らは、エネルギー代謝シグナルの解析のための個体を用いた定量系(in vivo Ad-luc解析法)を確立してきた。さらにゲノム上の全転写因子を網羅する発現ライブラリー(TFEL:Transcription Factor Expression Library)を独自に開発し、それを用いた転写複合体解析法(TFEL scan法)を確立した。
横紋筋肉腫の最終分化抑制の細胞内情報伝達機構の究明に関する研究

以上より、(1)増殖因子刺激によるmycなどの増殖関連遺伝子の発現には、転写制御だけでなく、翻訳レベルの制御のシグナル伝達路もあること、(2)増殖関連遺伝子の発現をもっぱら翻訳制御の細胞内情報伝達路に依存しているような異常細胞(例えば、RMSのような癌細胞)があること、(3)そのような偏った増殖機構をもつ異常細胞(癌)では、主要増殖シグナル伝達路を特異的にブロックするような薬剤(RMSではmTOR pathwayの特異的阻害剤RAPまたはその誘導体)が、、新しいより合理的な「抗癌剤」となり得ることが示唆された。また、RMS細胞増殖の主要細胞内情報伝達路であるIGF-IR/mTOR pathwayは、細胞生存(アポトーシスの抑制)にも機能していること明らかにし、今後、もう一つの機能である細胞分化の機構についても現在、研究を発展させ、継続検討中である。なぜRMSでは骨格筋分化制御遺伝子MyoDの発現にもかかわらずその機能、GO/G1細胞周期停止と筋最終分化の誘導が抑制され、病理学的診断が困難なぼど未分化なままなのか、をRMS細胞株および線維芽細胞株を用いて、IGF-IRシグナリングによるMyoDタンパクのリン酸化(posttranslational modification)によるMyoDの機能抑制(筋特異的蛋白遺伝子のE-boxへの結合の抑制)として証明できるか検討することを目的として以下の予備実験を行った。ラパマイシン(RAP)の増殖抑制効果(IC50ならびに増殖曲線)の検討をおこない、RAPのG1細胞周期停止作用を確認した。RAPが翻訳開始因子elF-4E抑制蛋白PHAS-1のリン酸化を抑制することを確認した。またPHAS-1がリン酸化されることによりelF-4E結合能を失う(翻訳開始抑制の解除)ことをFar-Western Analysisで示した。elF-4Eによって翻訳の開始が制御されていると推測されている遺伝子のうち予備実験の結果を基に、c-MYCタンパクの発現が血清やIGF-1により誘導されること、またそれをRAPが抑制することをWestern Blotで示した。mTOR機能がPHAS-1のリン酸化、c-MYC誘導そしてG1-S細胞周期進行にresponsibleであることをmTORのRAP結合領域(FRB)にアミノ酸置換変異を導入し、結合不可としたRAP耐性のリコンビナント変異mTORを導入したRh30細胞株を用い証明した。以上より、(1)増殖因子刺激によるmycなどの増殖関連遺伝子の発現には、転写制御だけでなく、翻訳レベルの制御のシグナル伝達路もあること、(2)増殖関連遺伝子の発現をもっぱら翻訳制御の細胞内情報伝達路に依存しているような異常細胞(例えば、RMSのような癌細胞)があること、(3)そのような偏った増殖機構をもつ異常細胞(癌)では、主要増殖シグナル伝達路を特異的にブロックするような薬剤(RMSではmTOR pathwayの特異的阻害剤RAPまたはその誘導体)が、新しいより合理的な「抗癌剤」となり得ることが示唆された。
近代日本演劇の成立と発展過程におけるイプセンの理解と影響の再検討

2018年度の研究実績は主に、内外の演劇学会における口頭発表と論文発表の形で公けにした。まず7月にセルビアのベルグラードで国際演劇学会2018年年次大会があり、そこでアジア演劇ワーキングループ・コロキウムのコーディネイト及び司会をつとめた。コロキウムでの討論では、他のアジア諸国の近代演劇特有の問題が論じられ、植民地経験のない日本の近代演劇の特殊性も浮き彫りにされた。9月にはノルウェーのシェーエンで国際イプセン会議が催され、わたしは2016年に東京で演出したイプセンの『人民の敵』について発表し討論した。この劇は19世紀半ばのノルウェーにおける温泉汚染問題を扱ったものだが、これが日本で最初に上演したイプセン劇で、それは当時の足尾銅山汚染に重ね合わせて上演されたことから、わたしは、現在の原発問題に重ねて翻案上演した。このイプセン会議はオスロの国際イプセン演劇祭に直結していたから、世界のイプセン舞台の今日的状況を知ることができ、これはわたしのイプセン理解に大いに寄与した。そもそもわたしのイプセン理解は、大学時代のギリシア悲劇上演の経験と密接につながっているが、このことを改めて考察したのが、2017年10月の成城大学における講演会『古代ギリシャー遥かな呼び声にひかれて』での私の講演だった。2018年には、この講演会の内容を単行本に、編集者としてまとめたが、そこではギリシャ悲劇とイプセンの関係を改めて考察し、論文「古代の叫びと近代の沈黙」として掲載した。この本は、2019年3月に刊行された。初年度2017年度は、予告されていた国際イプセン会議がキャンセルされたため、それによる成果は、2018年度に実現された。それによって、全体として、研究はおおむね予期通りの進捗状況をみることができた。本研究の最終年度である2019年度には、2つの国際会議が予定されているが(7月上海の国際演劇学会年次大会および2020年2月のアジア演劇コロキウム、開催地未定)、これらの会議でも、発表討論とともに、コーディネイト及び司会の役割をつとめることになる。これらは、イプセンにかかわる近代日本演劇の独自の問題性を明らかにすることに役立つだろう。最終年度として、これまでの研究成果を総合的にまとめ、論文として演劇学会紀要その他に発表する予定である。その研究成果を広く一般に公開する方法としては、イプセンの現代解釈による上演を計画しているが、それは2020年2月に具体的に実現する予定になっている。私がconvenerの一人をつとめている国際演劇学会(IFTR)のアジア演劇Workiing Groupは、学会の年年次大会以外に、2018年2月にマニラの国立フィリピン大学で開催した。そこで私は司会をつとめ、アジア各国からの出席者の間で、アジアの近代演劇について活発が議論が行われた。特に、インドと台湾の近現代の演劇のおける西洋の影響あるいは、その影響に対する反発についての発表内容に、議論は沸騰した感があった。私はこの機会に、マニラの別の大学セント・トーマス大学の古い友人の依頼で、私の演出した異文化演劇上演「ふたりのノーラ」に関する講演を行ったが、日本の近現代演劇についての興味が大きいことを実感した。私は2016年にイプセンの『人民の敵』を演出したが、そのときの作品解釈および舞台表現をもとに書いた論文を、成城大学文芸学部の紀要『成城文藝』に寄稿し、その論文の翻訳ではなく、新たな執筆として、同じ内容に基づく英語論文を、イギリスの北欧文学専門の学術誌『スカンジナヴィカ(Scandinavica)』に投稿した。英語論文は採択され、17年末発行の号に掲載された。まだその反応は出ていないが、18年8月にノルウェーで開かれる国際イプセン会議でも、発表し、私の独自の解釈と演出について、意見を聞くつもりである。当初の計画よりやや遅れたのは、前年度に決定されていた17年度開催予定の国際イプセン会議が、またも18年9月まで延期されたことで、日本でのイプセン研究・上演に関する発表ができず、海外の研究者との議論の場をもつこともできなかったからである。このため、計画しているイプセンをめぐる日本演劇近代化の歴史を執筆することも、当初どおりに進捗していない。しかし、いくつかの講演、連続講義などによって、その遅れを取り戻してきていることも確かである。

そもそもわたしのイプセン理解は、大学時代のギリシア悲劇上演の経験と密接につながっているが、このことを改めて考察したのが、2017年10月の成城大学における講演会『古代ギリシャー遥かな呼び声にひかれて』での私の講演だった。2018年には、この講演会の内容を単行本に、編集者としてまとめたが、そこではギリシャ悲劇とイプセンの関係を改めて考察し、論文「古代の叫びと近代の沈黙」として掲載した。この本は、2019年3月に刊行された。初年度2017年度は、予告されていた国際イプセン会議がキャンセルされたため、それによる成果は、2018年度に実現された。それによって、全体として、研究はおおむね予期通りの進捗状況をみることができた。18年度は、国際演劇学会の年次大会及び、国際イプセン会議に出席し、近代の日本演劇とイプセンとのかかわりについて、海外の研究者と討論する予定である。それによって、私の国際的な視野は大いに広がるものと期待している。また、毎年行われているアジア演劇Working Groupのアジア・コロキウムは、本年度は韓国のソウルで行われる予定だが、日本と韓国の近代演劇史の比較研究には、大いに得るところがあるだろう。2013年から3年間行われた京都の国際高等研究所における共同研究は、その成果として「古典演劇の伝統と近代」という論文集を、18年度中に出版することになっている、現在すでに原稿がそろいつつあり、私は編者の一人として、近代演劇の流れを概観するための多くの示唆を受けることになるだろう。日本演劇学会の春の年次大会は神戸で、秋の研究集会は静岡で開催予定だが、研究集会では、劇場論がテーマになっている。私はその基調講演を行うことを依頼されているが、演劇の近代化の最大が劇場の西洋化であったことからも、このテーマは、私の研究課題にとって、少なからぬ意味をもつと考えている。本研究の最終年度である2019年度には、2つの国際会議が予定されているが(7月上海の国際演劇学会年次大会および2020年2月のアジア演劇コロキウム、開催地未定)、これらの会議でも、発表討論とともに、コーディネイト及び司会の役割をつとめることになる。これらは、イプセンにかかわる近代日本演劇の独自の問題性を明らかにすることに役立つだろう。最終年度として、これまでの研究成果を総合的にまとめ、論文として演劇学会紀要その他に発表する予定である。その研究成果を広く一般に公開する方法としては、イプセンの現代解釈による上演を計画しているが、それは2020年2月に具体的に実現する予定になっている。2017年に予定され、出席するつもりであった国際イプセン会議のロンドン開催がキャンセルとなったため、その旅費として計上していた予算額を消化できなかった。この国際会議は、2018年9月にノルウェーのシェーエンで開かれることが決定されて、その準備は進んでいるので、当該予算額は、その旅費として使用することになる。ソウルにおける国際演劇学会分科会の滞在費が、主催者である韓国国立芸術大学によって助成されたため、予定額から残額が生じた。
核医学画像によるコリン作動系神経伝達物質・受容体マッピングの基礎的研究

1.アルツハイマー病患者におけるコリン作動性神経の減少の原因解明のため、一側性全脳基底部破壊によるアルツハイマーモデルラットと対照ラットを用いて、コリン作動性神経系の変化の定量を試み、以下の結果を得た。(1)インビトロアッセイ法においては、ムスカリン性アセチルコリン受容体(mAchR)蛋白のメッセンジャーRNA(mRNA)に特異的なS-35標識オリゴヌクレオチドを用いたIn Situハイブリダイゼーション法を用いて、mAchR-mRNAの分布画像を作成し、パーソナルコンピュータを用いた画像システムでデジタル化し、定量解析を行った。モデルラットにおいて、mAchR-mRNAの分布は対照ラットと変化を認めなかった。H-3キヌクリディニルベンジレートを用いたmAchR分布では、モデルラットにおいては有意の変化を認めなかったが、神経伝達物質であるアセチルコリンの量はモデルラットの前頭葉皮質において有意に低下していた。また、コリン作動性神経終末のシナプス小胞に取り込まれ、その分布を示すAH5183の結合は、モデルラットで有意に低下していた。以上からアルツハイマーモデルラットでは、レセプターは総量、代謝速度とも変化なく神経終末の変化をとらえることが病態の把握に有用と考えられた。(2)インビボアッセイ法においては、AH5183の誘導体について放射性ヨード標識を行い、対照ラットにおいてコリン作動性神経終末分布の画像化を行った。モデルラットにおいては現在検討中である。2.脳血管性痴呆においては、脳虚血モデルラットにて、血流、mAchR、mAchR-mRNAの経時的変化に解離が認められた.特にmAchR分布は血流情報とは異なる神経機能情報を鋭敏に示し、局所虚血時における神経細胞の生存や遠隔効果を知る示標として有用であることが示された.1.アルツハイマー病患者におけるコリン作動性神経の減少の原因解明のため、一側性全脳基底部破壊によるアルツハイマーモデルラットと対照ラットを用いて、コリン作動性神経系の変化の定量を試み、以下の結果を得た。2.脳血管性痴呆においては、脳虚血モデルラットにて、血流、mAchR、mAchR-mRNAの経時的変化に解離が認められた.特にmAchR分布は血流情報とは異なる神経機能情報を鋭敏に示し、局所虚血時における神経細胞の生存や遠隔効果を知る示標として有用であることが示された.
縦断データの変化、関係性および集団差に関する頑健な推定法の開発と心理学への応用

小学生を対象に毎年実施して得た保健調査データのように、複数の個人から継続的に収集して得たデータを縦断データと呼ぶ。縦断データにより、変数(測定値)が時間的にどのように変化したかや、複数の変数間の変化の関係、更にはこれらに関する個人差・集団差の推測が可能になる。しかし、誤ったモデル選択や方法論の未整備等に起因するモデルの誤設定の影響により、不適切な結論を導いた研究事例が多く存在することが心理学や統計学の研究で近年示されてきた。本研究課題では、縦断データ分析に伴う様々なモデルの誤設定を取り上げ、その影響下でも高い推定精度を有する頑健な方法を確立するための研究を行う。
植物の組織分化と二次代謝産物生産との関係に関する研究

クララ植物体においてプレニルフラボノイドが根のコルク層に局在していたことから、コルクのプレニルフラボノイド生産に対する役割を明らかにするために、クララ液内振盪培養系にコルク片を添加したところ、生長にはほとんど影響せずに、通常の約3-5倍のプレニルフラボノイドが生産され、その70-80%がコルクに吸着された。培養細胞におけるプレニルフラボノイドの局在部位を明らかにするためにプロトプラストを調製し、そのプレニルフラボノイド含量を測定したところ、残存量は細胞の2-6%程度であったことから、プレニルフラボノイドは細胞壁に蓄積していることが明らかとなった。一方、プレニルフラボノイドの増加の原因としては、1)コルク添加による二次代謝系の活性化、2)のコルクへの吸着による分解からの保護が考えられた。しかしコルク片の構成成分であるcellulose,suberic acidを添加しても生産性の増加は認められず、また培養時にプレニルフラボノイドを投与してもほとんど分解されなかったことから、これらの可能性は否定された。従って、細胞壁に存在し何らかの形で生産系に抑制的に作用していたプレイニルフラボノイドがコルク片に移行した結果、抑制が解除されて生産性が増加したのではないかと考えられた。このことを明らかにするためにプレニルフラボノイド生産の鍵酵素であるプレニルトランスフェラーゼ活性の変動について検討した。基質としてdimethylallyl diphosphyateを合成し、Mg^<2+>およびnarigeninの存在下、クララ培養細胞から抽出した粗酵素溶液とインキュベートしたところ、naringeninより局性の低いフラバノン骨格を有する未知の化合物2つが検出された。現在これらの化合物の構造決定を試みている。