hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
光触媒を反応場とする生理活性フェノール類の高感度計測システムの開発

微量成分を効率的に誘導体化するための光触媒酸化反応装置の開発と,本装置を利用した生理活性フェノール類の高感度・高選択的誘導体化分析システムの開発を目的に,本年度は以下の検討を行った。1.生体試料中インドールアミン類分析システムの開発前年度に作製した誘導体化分析用光触媒酸化反応装置を用いて,生理活性インドールアミン類(セロトニン及びその関連化合物)の分析システムを開発した。本システムにおいて,逆相HPLCにより分離されたインドールアミン類は,ベンジルアミンと混合後,アルカリ性条件下,光触媒反応カラム中で酸化反応することで460480nm付近に蛍光極大を持つ誘導体へと変換され高感度検出された。また,本システムを血清試料及び尿試料分析に適用することで,選択性と感度に優れるという本システムの有用性を実証することができた。2.生体試料中カテコールアミン類分析システムの開発前項にて開発した分析システムを用い,カテコールアミン類の分析システムを開発した。試薬にベンジルアミンを用いた場合,ノルエピネフリンなど一部のカテコールアミン類のみ誘導体化された。これに対し,DPEを用いた場合,検討した全てのカテコールアミン類が蛍光誘導体化され,60分以内に分離・検出された。また,光照謝を行わない場合は誘導体化反応が進行せず,カテコールアミン類のピークは検出されなかった。本研究によりカテコールアミン類に対して選択性の高い分析法を構築することができた。微量成分を効率的に誘導体化するための光触媒酸化反応装置の開発と,本装置を利用した生理活性フェノール類の高感度・高選択的誘導体化分析システムの開発を目的に,研究初年度は以下の検討を行った。1.誘導体化分析用光触媒酸化反応装置の開発光触媒酸化反応用の装置として,直径0.1mmのガラスビーズの表面を酸化チタンで被覆し,透明なテフロンチューブ内に充填した光触媒反応カラムを作製した。本カラムは安価かつ再現性良く作製でき,容易に交換が可能であった。この反応カラムに紫外光を照射することでHPLCからの溶出液を連続的に光触媒酸化反応させることが可能となった。2.食品,サプリメント,機能性食品中ポリフェノール類分析システムの開発前項にて開発した光触媒酸化反応装置をHPLCに組み込んだポリフェノール分析システムを開発した。本システムにおいて,逆相HPLCにより分離されたポリフェノール類は,4-アミノアンチピリンと混合後,アルカリ性条件下,光触媒反応カラム中で酸化的カップリング反応することで約460nmに吸収極大を持つ誘導体へと変換された。本システムを用い,カテキン類の分析を行ったところ,検討した5種のカテキン類はいずれも35分以内に分離・検出された。本システムにおいて,光照射を行わない場合は誘導体化反応が進行せず,カテキン類のピークは検出されなかった。また,カフェインなどの爽雑物を多量に含んだ試料を分析した際にもカテキン類のみが選択的に検出された。飲料(茶,ワイン)や血清試料などの実試料分析についても適用することで本システムの有用性を実証することができた。
ライシテ（非宗教性）と宗教の公共性－ーフランス、ケベック、日本を事例として

本研究では、フランスの歴史のなかで宗教が果たしてきた公共的役割を再検討した。また、日本の政教関係史をライシテの観点から読み直すとともに、ケベックの間文化主義の生成をその歴史のなかに位置づける課題に取り組んだ。その結果、特に明らかにすることができたのは、ライシテにしばしば分離と管理の両義的な側面があるということである。また、ライシテと宗教の関係は記憶というテーマとも深いかかわりをもつことについての見通しを得ることができた。本研究は、近代の政教関係を再検討し、「ライシテ」(非宗教性、政教分離、世俗主義)を、共生社会の原理として再構成することを目指すものである。そのために、フランス、ケベック、日本をフィールドとしながら、ライシテという政教構造における宗教の公共性の諸相を具体的にとらえる課題に取り組んできた。なお、その際には、フランスやケベックの事象は日本語で、日本の事象は外国語で発信することを心がけている。本年度は、ライシテと宗教の公共性をとらえるための理論的アプローチとして、19世紀フランスにおける思想家(コント、トクヴィル、デュルケム)の宗教論をルソーの「市民宗教」の系譜に位置づけた。また、シャルル・モーラスの宗教的ナショナリズムの思想構造を明らかにした。一方、パリで行なわれた国際シンポジウム「単数のライシテ、複数のライシテー変貌と新たな課題」において、近年の日本の宗教の公共性について「ライシテ」の観点から論じる発表を行なった。また、国際日本文化研究センターでのシンポジウム「宗教と公共性ー神道と宗教復興から」や、神道宗教学会シンポジウム「国際比較の中の「神道」と「国家」」での発表を通し、ライシテに基づく公共空間にいかなる排除の論理がはたらいているのか、またライシテにおける自由主義的な分離の原則が対イスラームとの関係においてはしばしば管理の論理として発現する様子が見えてきた。これらについては論文にまとめる作業を進めている。本研究は、近代の政教関係を再検討し、ライシテ(非宗教性、政教分離、世俗主義)を共生社会の原理として再構成することを目指すもので、ライシテという政教構造における宗教の公共性について検討するものである。平成26年度は、ケベックでの調査を通して記憶の再構成のあり方を探り、フランスの宗教の変化を公共空間の変貌と絡めて把握し、日本の政教分離と多文化共生をライシテの観点から検討することを目指していた。ケベックでは、フェルナン・デュモンの『記憶の未来』をナショナリズムと間文化主義の観点から検討する調査を行ない、その成果を韓国ケベック学会で発表した。また、ケベックの文化的アイデンティティの変化について論じたものが、共著として刊行された。フランスの宗教の変化と公共空間の変貌に関しては、19世紀文学に関する共著で思想と宗教に関する論考を発表する一方で、イスラームの制度化とその諸問題を扱う論文を発表した。また、訳書として、ナタリ・リュカ『セクトの宗教社会学』を刊行した。とりわけ、厳格な政教分離と呼ばれるフランスのライシテに、宗教を管理統制する面があることがはっきりしてきた。この点についての論文および書籍を現在準備中である。日本の政教分離と多文化共生をライシテの観点から検討することに関しては、東京およびパリで行なわれた渋沢・クローデル賞30周年記念シンポジウム、ストラスブール日仏大学会館でそれぞれ発表を行なったほか、2本の仏語論文を執筆した。うち1本はフランス語での共著として刊行された。最終年度である平成27年度は、前年までの研究成果を踏まえてアウトプットに力点を置き、国内外の学会や研究会で積極的に発表しつつ論文を執筆することを目指していた。フランスのライシテに関しては、(1)共編著『共和国か宗教か、それとも』を刊行し、ジャン・ジョレスのライシテ理解の特徴を明らかにした。(2)19世紀のライシテと現在のライシテを比較する英語論文を執筆した。(3)フランスにおける「承認のライシテ」とその両義性についての論考を共著『他者論的転回』に寄稿した。(4)「イスラームはいつ、いかにひてフランスの宗教になったのか」を論じた。ケベックのライシテに関しては、フェルナン・デュモンの『記憶の未来』が後続世代にどのように読まれているのかについて、フランス語論文を執筆した。日本については、国際宗教学宗教史会議(IAHR)にて、戦後日本の政治と宗教の関係に関する発表を行なった。研究期間全体を通じては、次の3つの課題に取り組んだ。(1)フランスの歴史のなかで宗教が果たしてきた公共的役割を見直し、社会空間における「宗教」の位置づけを理論的観点からも考察する。(2)ケベックのライシテを特徴づける間文化主義(インターカルチュラリズム)という社会統合理念の理解を深める。(3)日本のライシテの特徴をフランスやケベックと比較する。それぞれの課題につき、一定の成果を挙げることができたと考えているが、昨今の世界情勢を踏まえながら、上記の3つをどのように関連させて全体像を描き直すのかという新たな課題も見えてきている。

その結果、特に明らかにすることができたのは、ライシテにしばしば分離と管理の両義的な側面があるということである。また、ライシテと宗教の関係は記憶というテーマとも深いかかわりをもつことについての見通しを得ることができた。特にフランスの社会空間のなかでの「宗教」の位置づけが見えてきたこと、日本の政教関係についての研究成果でフランス語で発表できたことが大きいと考えている。人文学(宗教学、フランス語圏地域研究)本研究では、公教育における「宗教」の位置づけにも注目しているが、むしろ政教関係が当該社会の記憶と大きく関わる問題であることが見えてきた。フランス、ケベック、日本の事例についての研究をそれぞれ進めているが、それらを比較の観点から適切に位置づけることができるような方途を探っていきたい。特に研究の妨げとなるようなことはなく、おおむね順調に進展していると考えている。本年度の研究課題の遂行を通して、ライシテが提起する問題は、当該社会(フランス、ケベック、日本)の集合的記憶やアイデンティティの関連においてとらえていくことが必要であるという視座が開けてきた。今後の研究においては、この点を今まで以上に意識しながら、フランス、ケベック、日本のライシテ研究をさらに深めていく予定である。
微小脳における色知覚機構とその進化

色覚の基盤にある神経機構について、チョウ類の色覚系を対象にして実験的研究を行った。種をこえた比較研究から、(1)視細胞分光感度には往々にして顕著な性差があること、(2)個眼の階層構造の程度は多様であることが分った。アゲハ類での解析からは、(3)蜜源に着地する際にはターゲットと背景のつくるエッジが重要で、そのエッジは明度コントラストで知覚していること、(4)単一個眼に由来する視細胞同士が視葉板で抑制的に結合しているらしいことが分った。21年度は、以下の諸点について実験的研究を行った。チョウ類色覚系の進化学的解析:原始的なアゲハチョウとされるウスバシロチョウ(Parnassius glacialis)複眼から4種の視物質オプシンmRNAを(PgUY,PgB,PgL2,PgL3)を同定した。個眼構造を組織学的に解明すると同時に、4種のオプシンmRNAを発現する視細胞を確定した。PgL3は腹側にのみ発現していた。ウスバシロチョウ複眼では背側部分が他目の昆虫種とも共通する"祖先的な"オプシン分布を示すのに対し、腹側部分ではPgUVとPgBの重複発現やPgL2とPgL3の相補的発現など、他には見られない極めて複雑な分布パターンが認められた。この多様化はウスバシロチョウ亜科の分岐後に起きたものと考えられる。さらにこれまでに視物質の発現パターンの解析を終えていたシロチョウ科モンキチョウ(Colias erate)について、視細胞分光感度を電気生理学的に調べた。結果、少なくとも6種類の感度が得られた視葉ニューロン群の解剖学的解析:視葉から脳への出力を、視葉各所への色素注入によって検索した。また、視葉板における視覚二次ニューロン(LMC)の多様性を解析するため、各種神経伝達物質候補物質に対する抗体を用いた免疫組織化学を行なった。抗チラミン標識で、LMCが染め分けられる可能性のあることが分かった。視葉板におけるパッチ電極法の確立:視葉板からの記録は得られるが、記録の安定性には未だ問題が残されている。さらに改良の余地がある。22年度は、以下の諸点について実験的研究を行った。チョウ類色覚系の進化学的解析:アゲハチョウ科から、キアゲハ、アオスジアゲハ、アサギタイマイ、ジャコウアゲハ、ベニモンアゲハ、ホシボシアゲハ、ギフチョウ、ヒメギフチョウ、ホソオチョウ、カバシタアゲハ、シロチョウ科から、キチョウ、ヒメシロチョウ、ツマキチョウについてオプシンmRNAを同定した。アゲハチョウ科では長波長受容型オプシンが24種類に重複していること、ヒメシロチョウLeptidea amurensis(マルバネシロチョウ亜科)を除くシロチョウ類では青受容型オプシンが重複していることがわかった。ヒメシロチョウ複眼はいくつかの点で他種との違いが著しい。そのひとつが個眼面サイズのバラツキで、この傾向は雄で特に顕著である。今年度は複眼の内部構造を詳細に調べ、サイズ分布が二峰性であること、感桿構造によって個眼は3タイプに分けられること、タイプ1個眼のレンズが大きいことなどが分かった。視葉ニュ-ロン群の解剖学的解析:昨年度に引き続き、視葉から脳への出力を、視葉各所への色素注入によって検索した。また、視葉板における視覚二次ニューロン(LMC)の多様性を解析するため、ガラス微小電極あるいはパッチ電極を用いてLMCの過分極性応答を記録、その後色素を注入してLMCの形態を調べる実験を行った。いくつかの染色像を得ることができたが、軸索の細さゆえに成功率は概して低い。そこで、より確実な方法として、顕微鏡に微分干渉用のコンデンサーを導入、視認下でLMC細胞体の記録・色素注入を行う試みを始めた。チョウ類色覚系の進化学的解析:これまでに4種のオプシン(CeUV, CeV1, CeV2, CeL)が同定されていたモンキチョウの複眼に、新たに青受容型オプシンCeBを発見した。CeBはCeV1とCeV2と共に、タイプ2個眼の視細胞2個に共発現していた。発現パターンに性差はなかった。一方、モンキチョウ複眼からは4種の青受容細胞の感度が記録されており、内2種が♂、2種は♀特異的で、この生理機構は不明だった。CeBの発見と合わせ、蛍光フィルター色素の分布に性差があることも発見、これらの情報を総合することで、青受容細胞の生成機構が完全に理解できた。モンキチョウでは赤受容細胞にも著しい多様性がある。全部で6種のうち3種が♂、3種が♀特異的である。♂♀とも、赤受容細胞には緑受容型のCeLが発現しており、赤感受性は感桿周囲の赤色素のフィルター効果による。

性差は、♀のタイプ2個眼の赤色素の吸収が他よりも50 nm程短波長にシフトしたものであることで説明できた。CeBの発見、蛍光色素と赤色素の性差の発見は当初の予想を大きく覆すもので、モンキチョウ複眼の細胞構成を明確に記述する成果に繋がった。予想以上の成果が得られた。行動学的解析:ある色の円板で蜜を得ることを学習したアゲハは、円板を探索して発見し、着地しようとする。円板と背景の明度コントラストが十分であるときは着地して蜜を吸おうとするが、明度コントラストが十分でないと円板に接近はするものの実際に着地することはできないことが分かった。明度コントラストの受容には、色覚と同じく、紫外・青・緑・赤の受容細胞が関与しているらしい。また、アゲハは求蜜に際し、偏光の振動面を識別することも分った。振動面の異なる偏光をどのように識別しているかを行動実験で詳細に調べたところ、明るさの違いとして認識していることが分った。チョウ類色覚系の進化学的解析:ウスバシロチョウと個眼構造とオプシン分布を精査した結果、個眼の重層構造(遠位層と近位層に分かれた構造)が他のアゲハチョウ科やシロチョウ科のチョウ類とは異なっていることが分った。すなわち、重層構造自体は存在するが、他種では遠位層に動きや形の知覚に特化していると見られる緑受容細胞システムがあるのに対し、ウスバシロチョウではこのシステムが無い。対応する視細胞には緑感受性と赤感受性のものがまざっており、しかも遠位層ではなくて近位層にある。他種では近位層は色覚に特化していると見られることから、ウスバシロチョウは動きや形の知覚よりも色覚により重きをおいた視覚系を持っていることが推察された。個眼の重層構造をショウジョウバエ、ミツバチなどとも比較検討し、その進化過程を推測した。視葉ニューロン群の解剖学的解析:視覚第一次中枢(視葉板)を中心に、神経伝達物質の同定を目指して免疫組織学的研究を継続して行った。昨年は、視覚2次ニューロンの大単極細胞(Large Monopolar Cell, LMC)にチラミン陽性のものが見つかり、今年は更にGABA陽性のLMCが見つかった。染色されたLMCの分布と数から推測すると、視葉板の各カートリッジにはチラミン陽性とGABA陽性のLMCがそれぞれ1つずつ含まれているらしい。LMCの生理的機能を解明する上で、重要な発見である。この研究は、脳機能の構築原理を解明する試みの一環として位置づけている。具体的にはチョウ類の色覚系を対象とし、チョウ類における色覚系の進化過程を探ることと、アゲハ色覚の神経メカニズムを神経行動学的に詳細に調べることに焦点を当てている。進化過程の研究では、アゲハ以外のチョウ類複眼を対象に、オプシンmRNA及び発現視細胞の同定、複眼構造の生理光学的解析、分光感度生成機構の種間比較を行なうこととしており、これまでにアゲハチョウ科10種、シロチョウ科5種のオプシンを同定し、とくにモンキチョウについては複眼細胞構成の詳細を明らかにした。上述の新発見もあって、複眼進化過程の解明に大きく一歩近づいたと言える。アゲハにおける神経メカニズムの研究では、色覚機能の行動学的解析、視葉板における波長情報処理機構の解析、色覚情報処理経路の解剖学的解析を行うこととしており、これまでに中枢の解剖学的解析と視葉板での細胞内記録法の確立をほぼ終え、今年は行動学的研究としてターゲットへの着地に4種の視細胞がつくる明度コントラストが重要であることを示すことができた。
腫瘍神経細胞が無秩序に動き始める転移能獲得のメカニズム

発生期に産み出された網膜神経細胞は、正しい場所へと配置され、秩序だった奇麗な層構造を形成する。網膜の小児がんである網膜芽細胞腫では、網膜細胞が増殖を繰り返した後に、特定の細胞層(一般的には内顆粒層)から脱して転移するが、無秩序に移動する能力の獲得メカニズム、すなわち、悪性化メカニズムはほとんど明らかにされていない。最近の研究によって、1)マウスRb-/-; p107+/-; p130-/-網膜では、分化した網膜水平細胞(抑制性神経細胞の1つ)が脱分化せずに増殖を繰り返し、その後、水平細胞に特徴的な性質を失って転移すること、2)発症初期に異なるタイプの網膜細胞が増殖しても、悪性化した網膜芽細胞腫は、未分化前駆細胞や特定の網膜神経細胞タイプの遺伝子発現様式を合わせ持つ「ハイブリッド型網膜細胞」になること、3)悪性化したヒト網膜芽細胞腫では、RB以外のゲノム変異はほとんど起きていないことが明らかになってきた。すなわち、網膜芽細胞腫の悪性化には、ゲノムレベルではなく、エピジェネティックな作用による「ハイブリッド型網膜細胞」への形質変化が重要だと考えられる。昨年度までの研究で、Wntシグナルの異常と形質変化との関連が示唆されたことから、本年度は、Rbファミリー欠損でプロモーター領域のヒストン修飾様式が変化する、Wntシグナル関連因子をスクリーニングした。その結果、Rbファミリーを欠損すると、癌転移と遺伝子発現上昇が相関することが知られているWntシグナル関連転写因子の遺伝子発現量が増加し、そのプロモーター領域のヒストンH3の4番目のリジン残基(H3K4)のトリメチル化が促進されていることが明らかとなった。H3K4のトリメチル化と遺伝子発現促進が相関していることが知られており、今後は、形質変化におけるその転写因子の役割と、Rbファミリーによる遺伝子発現調節機構の解明を進めて行く。24年度が最終年度であるため、記入しない。最近の研究によって、1)マウスRb-/-;p107+/-:p130-/-網膜では、分化した網膜水平細胞(抑制性神経細胞の1つ)が脱分化せずに増殖を繰り返し、その後、水平細胞に特徴的な性質を失って転移すること、2)発症初期に異なるタイプの網膜細胞が増殖しても、悪性化した網膜芽細胞腫は、未分化前駆細胞や特定の網膜神経細胞タイプの遺伝子発現様式を合わせ持つ「ハイブリッド型網膜細胞」になること、3)悪性化したヒト網膜芽細胞腫では、RB以外のゲノム変異はほとんど起きていないことが明らかになってきた。本年度は、エピジェネティックにRB依存的転写調節を担うクロマチンリモデリング因子BRG1に着目し、網膜特異的Brg1欠損マウスを解析した。Brg1欠損網膜では顕著な細胞増殖異常はなく、層構造の破綻が認められた。また、その層構造破綻を引き起こす候補遺伝子として、Wntシグナルを阻害するWif1が同定された。一部のヒト網膜芽細胞腫ではWIF1を過剰発現し、その細胞群ではWIF1を高発現しているにも関わらず、Wnt及びN-cadherinシグナルも同時に活性化する表現型を示した。今後、1)WIF1の過剰発現が細胞極性および接着の異常へと導く、2)WIF1の過剰発現が悪性化の引き金になるという仮説を立て、検証する予定である。

その結果、Rbファミリーを欠損すると、癌転移と遺伝子発現上昇が相関することが知られているWntシグナル関連転写因子の遺伝子発現量が増加し、そのプロモーター領域のヒストンH3の4番目のリジン残基(H3K4)のトリメチル化が促進されていることが明らかとなった。H3K4のトリメチル化と遺伝子発現促進が相関していることが知られており、今後は、形質変化におけるその転写因子の役割と、Rbファミリーによる遺伝子発現調節機構の解明を進めて行く。24年度が最終年度であるため、記入しない。網膜芽細胞腫の転移に重要な候補遺伝子を同定したため24年度が最終年度であるため、記入しない。本年度は、予定通り、転移過程における水平細胞自身の性質変化を明らかにする。
非凸性に基づく統計モデリングと収束保証付き推定アルゴリズム

本研究の目的は,実データの諸問題に対応しようとすると自然と現れる非凸性に基づく統計モデリングを対象とし,そのパラメータ推定のための非凸最適化アルゴリズムに対して,収束保証を与えることである.既存の非凸最適化アルゴリズムの,理論的な適用範囲を拡張を行うだけでなく,統計モデリングの段階でアルゴリズムと親和性の高いモデリングを考えることで,統計モデリングと最適化両者の良さを打ち消すことなくデータ解析を行う統計モデリングを可能にしたい.本研究の目的は,実データの諸問題に対応しようとすると自然と現れる非凸性に基づく統計モデリングを対象とし,そのパラメータ推定のための非凸最適化アルゴリズムに対して,収束保証を与えることである.既存の非凸最適化アルゴリズムの,理論的な適用範囲を拡張を行うだけでなく,統計モデリングの段階でアルゴリズムと親和性の高いモデリングを考えることで,統計モデリングと最適化両者の良さを打ち消すことなくデータ解析を行う統計モデリングを可能にしたい.
セルフ・アクセスおよびポートフォリオを用いた自律学習支援とその効果

本年度は、前年度に完成させた「セルフ・アクセス学習プログラム」(以下SALPと呼ぶ)をさらに改良して実施すると同時に、メタ認知力の変化を量的に分析することで過去2年間の実施結果を検証した。まず、メタ認知的方略に関する文献調査と学習者が提出した学習記録書をもとに分析コード表を作成し、それに基づいて2003年度と2004年度学習者群の学習記録を分析した。その結果、記録から判断される限りにおいて、両実験群のメタ認知的方略の使用には同様の傾向がみられた;いずれの実験群も学習上の問題認識はきわめて頻繁に行うものの、その解決策の模索はそれほど頻繁ではなかった。問題の原因分析や教材選択に関して考えることは少なく、学習の目標設定や学習効果の評価はほとんど行われていなかった。しかし、SALPの後半に進むに従って両実験群とも教材選択に関して頻繁に考えるようになり、2003年度実験群に関しては問題解決策の模索も頻繁になっていたことが分かった。このことは、SALPによるトレーニングが学習者に学習上の問題を強く認識させ、教材選択や問題解決策の模索を叙々に促進する効果はあるものの、問題の原因分析や目標設定に関する思考を促進するには十分でないことを示していると考えられる。また、2004年度実験群を対象にSALP終了時の学習意欲について質問紙調査を行ったところ、28名の有効回答中23名が学習意欲の上昇を報告し、その平均値は5段階評価で3.9、特に今後上達する自信に関する項目では平均が4.3ときわめて高い結果となった。被験者数が少なく統制群を設定できない研究環境にあるため一般化は困難であるものの、この分析結果はSALPによるトレーニングが学習者の学習意欲に望ましい影響を与える可能性が高いことを示唆している。以上の検証結果をもとに、本年度はSALPのメタ認知力養成指導の部分の改良も行った。本年度の研究目標は、(1)英語における自律学習のための学習支援形態のプロトタイプを設計し、学習の外的環境を整備してプログラムを実施すること、および(2)学習者のメタ認知力の実態把握とその育成を試みることの2点であった。まず「セルフ・アクセス学習プログラム(プロトタイプ)」を設計し、リーディングとリスニングの2種類4クラスの授業で実施した。このプログラムは2つの主要素:「自律学習の指導」と「学習体験」で構成されている。「自律学習の指導」は、学習者のメタ認知力(計画力・観察力・評価力)の養成を目的とするもので、この指導に従い学習者は既設のラーニングセンターで「学習体験」を行う。そのため「自律学習の指導」に必要なワークシートを作成し、ラーニングセンターで使用する教材を作成・維持・管理するなど、プログラム実施のための環境づくりを行った。次に、リスニングの学習記録を分析することで学習者のメタ認知力の実態把握も試みた。そして、メタ認知的方略の使用度と学習動機との関係を検証し、その結果を2003年度大学英語教育学会全国大会で発表した。今回の分析によると、学習者のほとんどが頻繁に自分の英語力の問題点を認識しながら学習を行っている反面、認識した問題点の原因分析や対策についてはあまり考えていない様子が明らかになった。また、学習を計画する方略を頻繁に使う学習者ほど、学習意欲や目標意識が高く、間違うことへの不安度が低いことが分かり、メタ認知的方略の使用が学習意欲と密接な関わりを持っていることが示唆された。最後に、本年度のプログラムで使用した教材の見直しを行い、来年度に向けて手薄だったレベルの教材補強と、新たな分野の教材準備も行った。本年度の研究目標は、「セルフ・アクセス学習プログラム」を完成させ、授業の一環として実施し、その結果を検証することであった。まず、プログラムの効果と汎用性を高めるために、昨年度の研究結果をもとにプログラムにいくつかの改良を行った。その1つが学生用手引き書「Self-Accessガイド」の作成である。このガイドの最初の部分でセルフ・アクセス学習の流れを明解に図解し、人数の多いクラスでも短時間でプログラムを理解させることが可能になった。また、昨年度の自律学習指導の結果を基に、自律度の低い学習者に対して特に有益と思われるメタ認知力(計画力・観察力・評価力)養成のための指導内容をまとめ、「Self-Accessガイド」の中心に据えた。これにより、授業で一斉に行う指導の内容が統一され強化された。「Self-Accessガイド」の最後には、教材一覧と昨年度末に拡大整理した教材のレベル別コード表示を含めた。第2の改良点として、個々の学習者に「Self-Access File」の作成を指示した。これは「Self-Accessガイド」に個々の学生が各自の学習記録と学習報告を加えたもので、これにより、学生がより長い期間の学習をより正確に振り返ることが可能となった。プログラムの前半が終了した時点で、その成果を学習者のメタ認知力や学習意欲などの観点から検証した。いずれも有効回答数が少ないために結果の一般化は困難であるものの、リスニングについては、このプログラムが学習意欲の上昇に肯定的な影響を与えていることが示された。リーディングの学習記録分析からは学習者が慣れない学習方法に戸惑いを感じている様子が確認され、個別の自律学習指導の方法としての「対話による介入」のあり方に示唆を与える結果となった。以上の研究結果を2004年度大学英語教育学会全国大会で口頭発表するとともに、学術雑誌などにも発表した。

本年度は、前年度に完成させた「セルフ・アクセス学習プログラム」(以下SALPと呼ぶ)をさらに改良して実施すると同時に、メタ認知力の変化を量的に分析することで過去2年間の実施結果を検証した。まず、メタ認知的方略に関する文献調査と学習者が提出した学習記録書をもとに分析コード表を作成し、それに基づいて2003年度と2004年度学習者群の学習記録を分析した。その結果、記録から判断される限りにおいて、両実験群のメタ認知的方略の使用には同様の傾向がみられた;いずれの実験群も学習上の問題認識はきわめて頻繁に行うものの、その解決策の模索はそれほど頻繁ではなかった。問題の原因分析や教材選択に関して考えることは少なく、学習の目標設定や学習効果の評価はほとんど行われていなかった。しかし、SALPの後半に進むに従って両実験群とも教材選択に関して頻繁に考えるようになり、2003年度実験群に関しては問題解決策の模索も頻繁になっていたことが分かった。このことは、SALPによるトレーニングが学習者に学習上の問題を強く認識させ、教材選択や問題解決策の模索を叙々に促進する効果はあるものの、問題の原因分析や目標設定に関する思考を促進するには十分でないことを示していると考えられる。また、2004年度実験群を対象にSALP終了時の学習意欲について質問紙調査を行ったところ、28名の有効回答中23名が学習意欲の上昇を報告し、その平均値は5段階評価で3.9、特に今後上達する自信に関する項目では平均が4.3ときわめて高い結果となった。被験者数が少なく統制群を設定できない研究環境にあるため一般化は困難であるものの、この分析結果はSALPによるトレーニングが学習者の学習意欲に望ましい影響を与える可能性が高いことを示唆している。以上の検証結果をもとに、本年度はSALPのメタ認知力養成指導の部分の改良も行った。
ナノ構造制御有機薄膜の多重表面プラズモン複合励起と高効率デバイスへの応用

グレーティング構造を持つ金属薄膜および有機薄膜の表面プラズモン(SP)励起について種々検討した。また,金属グレーティング薄膜界面を伝搬する伝搬型SPと金属微粒子界面に束縛された局在SPとの多重SP複合励起についても検討した。さらに,透過型SP励起や長距離伝搬SP励起などについても検討した。そして,ナノ構造制御した有機薄膜における多重SP複合励起は,有機デバイスの高効率化に有効であることを示した。平成24年度の研究成果などを基に,多重SP複合励起についてさらに詳しく検討した。すなわち,BD-Rグレーティング基板を用いてAu担持酸化チタン薄膜を使用した色素増感太陽電池を作製し,金属グレーティングによる伝搬型SP励起と金属微粒子による局在SP励起の光電変換に寄与する効果の検討を行った。同一セルにおいて,SP励起している場合(p偏光照射時)の短絡光電流をSP励起していない場合(s偏光照射時)に対する比で表した短絡光電流の増強度の光入射角依存性を測定した。伝搬型SP励起の効果や金微粒子による局在SP励起の効果も無い場合の短絡光電流の値を1とすると,SP励起により2倍以上の増強度となることがわかった。また,グレーティングカップリングSP励起のないAu担持酸化チタン薄膜においては3倍の増強度が得られており,Au担持することだけでも短絡光電流がかなり増大することが確認された。グレーティングカップリングSP励起のあるAu担持酸化チタン薄膜においては,7倍もの増強度が得られた。これらの結果より,グレーティング構造による伝搬型SP励起とAuナノ粒子による局在SP励起の両方の効果により,光電変換効率の増大が得られていると考えられた。よって,多重SP複合励起は太陽電池の高効率化に有効であることが明らかとなった。また,SP共鳴分光法を光導波路分光法や水晶振動子微量天秤法と組合せることなどによる有機センサの高性能化についても検討を行った。すなわち,SP共鳴と光導波路分光法を組合せた複合センサにより,フタロシアニン交互吸着膜の堆積過程のその場評価を行い,水溶液中でも薄膜堆積過程を高精度に評価することが可能であることを示した。さらに,長距離伝搬SP励起や透過型SP励起についても詳しく検討し,バイオセンサへの応用も試みた。そして,これらのSP励起が高感度なセンサの開発に有効であることを示した。CD-RやBD-Rの凹凸構造を利用したインプリントにより,グレーティング構造を持つ金属薄膜および有機薄膜を作製し,表面プラズモン(SP)励起特性について種々検討した。また,金属グレーティング薄膜上に金属微粒子を配置し,金属グレーティング薄膜界面を伝搬するSPと金属微粒子界面に束縛された局在SPとの多重SP複合励起についても詳しく検討した。その結果,金微粒子坦持酸化チタン薄膜を金属グレーティング薄膜上に堆積することにより,金属グレーティングによる伝搬型SPと金属微粒子の局在SPの多重SP複合励起により,色素/電解質界面での光電流の増大が観測された。そして,この多重SP複合励起は,太陽電池の高効率化に有効であることが明らかとなった。また,透過型SP励起特性についても検討した。すなわち,導電性高分子薄膜を金属グレーティング薄膜上に堆積し,ドーピング・脱ドーピングによる透過型SP励起特性を測定し検討した。その結果,電気化学的にドーピングレベルを制御することにより,SP励起異常透過光の波長や強度の制御が可能なことを示した。さらに,透過型SP励起を用いたバイオセンサについて検討した。その結果,電気化学的に制御した透過型SPR測定法を用いることで良好にヒト免疫グロブリンGの検出が可能であることを明らかとした。さらに,多チャンネルSP共鳴光導波路センサについても検討した。すなわち,同一光導波路上に湿度とガスに反応する2種類の有機薄膜を用いてSP励起可能な2チャンネルのセンサを構築し,種々の湿度下で高精度なガスの検出が可能であることを示した。また,SP共鳴分光法と光導波路分光法を併せ持つ複合センサや,SP共鳴分光法と水晶振動子微量天秤法を併せ持つ複合センサなどについても検討した。そして,これらのSP共鳴分光法を利用した複合センサは,高機能・高感度センサとして有望であることを示した。CD-RやBD-Rの凹凸構造を利用したインプリントにより,グレーティング構造を持つ金属薄膜および有機薄膜を作製し,表面プラズモン(SP)励起について種々検討した。また,金属グレーティング薄膜上に金属微粒子を配置し,金属グレーティング薄膜界面を伝搬する伝搬型SPと金属微粒子界面に束縛された局在SPとの多重SP複合励起についても検討した。すなわち,金微粒子や銀微粒子を坦持した酸化チタン薄膜を金属グレーティング上に堆積した色素増感太陽電池を作製し,色素/電解質界面での光電流の増大を観測し,この多重SP複合励起は太陽電池の高効率化に有効であることを示した。

また,金属グレーティング上に金属微粒子を配置した場合の透過型SP励起についても検討した。金属微粒子は電解質交互吸着法により堆積し,金属グレーティング表面からの距離を制御し,金属グレーティング薄膜界面での伝搬型SPによる電界内での金属微粒子の表面からの距離変化によるSP増強透過光特性について検討を行った。さらに,長距離伝搬SP励起についても詳しく検討した。そして,これらの透過型SP励起や長距離伝搬SP励起が高感度なセンサの開発に有効であることも示した。さらに,SP共鳴を光導波路(OWG)分光法や水晶振動子微量天秤(QCM)法と組合せることによる有機センサの高性能化についても検討を行った。すなわち,SP共鳴とOWG分光法を組合せた複合センサにより,交互吸着膜の堆積過程のその場評価を行い,溶液中でも薄膜堆積過程を高精度に評価することが可能であることを示した。また,SP共鳴とQCM法を組合せた複合センサにより,薄膜構造の詳細な評価が可能であることも示した。以上により,ナノ構造制御した有機薄膜における多重SP複合励起は,有機デバイスの高効率化に有効であることが明らかとなり,今後の高機能・高性能デバイスの開発にも有望であると考えられる。有機エレクトロニクス本研究の目的は,ナノ構造制御した有機薄膜における多重表面プラズモン(SP)複合励起について検討を行い,有機デバイスの高効率化に向けた基礎的な研究を行うことであった。グレーティング構造を持つ金属薄膜上に金属微粒子を含む有機薄膜を形成し,色素増感太陽電池を作製し,金属薄膜界面を伝搬するSPと金属微粒子界面に束縛された局在SPとの多重SP複合励起の効果について検討するための短絡光電流測定などの詳細な実験が行われ,検討がなされた。そして,多重SP複合励起により短絡光電流が増大し,多重SP複合励起が有機太陽電池の高効率化に有効であることも明らかとなった。また,SP共鳴とOWG分光法を組合せた複合センサにより,水溶液中でも薄膜の堆積過程を高精度にその場評価することが可能であることを示した。さらに,長距離伝搬SP励起や透過型SP励起についても詳しく検討し,バイオセンサへの応用も試み,高性能センサの開発に結び付くある程度の成果が得られた。以上のことより,おおむね順調に進展していると考える。本研究の目的は,ナノ構造制御した有機薄膜における多重表面プラズモン(SP)複合励起について検討を行い,有機デバイスの高効率化に向けた基礎的な研究を行うことであった。グレーティング構造を持つ金属薄膜上に金属微粒子を含む有機薄膜などを作製し,金属薄膜界面を伝搬するSPと金属微粒子界面に束縛された局在SPとの多重SP複合励起については,ある程度十分に実験が行われ検討がなされた。そして,この多重SP複合励起は,太陽電池の高効率化に有効であることも明らかとなった。しかし,発光性色素分子を含む有機薄膜における分子発光による多重SP励起については,実験が進まず,あまり検討がなされなかった。また,SP励起のデバイスやセンサなどのデバイス応用に関しては,バイオセンサやガスセンサなどの有機デバイスについても種々検討がなされ,高感度化に結び付く基礎的な研究がなされ,ある程度の成果が得られた。
酵母のビタミンB∪依存性酵素に関する系統的研究

本研究課題の実施計画に沿って研究を遂行し、次の結果を得た。1.パン酵母(Saccharonyces cerevisiae)の粗抽出液中に存在する各種【B_6】酵素の活性を測定した。α-トランスアミナーゼとしてアスパラギン酸トランスアミナーゼ(AAT)、ω-トランスアミナーゼとしてリジントランスアミナーゼ、ラセマーゼとしてアスパラギン酸ラセマーゼ、デカルボキシラーゼとしてシスティンスルフィン酸(CSA)デカルボキシラーゼの各々の活性を測定し、比較したところ、AAT活性が最も強く、その他は非常にわずかな活性しか認められなかった。2.各種酵母中に存在するAAT活性をスクリーニングした。(1)リンゴ酸脱水素酵素共役法によるアッセイで、各種酵母中のAAT含量は、属により大きな差のあることがわかった。Candida属の活性が最も高く、湿菌体1g当り30単位の活性を示すものがあった。次いでTorulopsis属、Saccharomyces属の活性が高かった。一方、Hansenula属の活性は低く、最も低いものでは1.4(単位1g菌体)であった。(2)CSA-テトラゾリウム法による活性染色により、AAT活性の電気泳動パターンを明らかにした。各種酵母は13本のAATバンドを示し、これらのうちの主バンドの移動度は同属の酵母でほぼ共通していたが、バンドの本数は同属の酵母であっても同一ではなかった。3.Torulopsis属のAATを精製し、その性質を明らかにした。Torulopsis candidaの粗抽出液から各種クロマトグラフィーと等速電気泳動により、均一なAAT標品が得られた。分子量や吸収スペクトル等の性質は動物の細胞質の酵素と良く一致した。ウサギ抗血清も調製中である。4.T.candidaにおけるAATの局在性を調べた。局在性については更に詳細な検討が必要である。
新規プロテインキナーゼSIKのcAMP依存性核外移行の分子機構

申請者が最近クローニングした塩誘導性キナーゼ(SIK)はN末端側にキナーゼドメインを有する新規のセリン/トレオニン・プロテインキナーゼである。これまでの実験の結果、非刺激時の副腎皮質細胞ではSIKは核内に存在するが、ACTHで刺激した細胞ではSIKが細胞質に存在すること、そしてSIKの細胞内移動がステロイドジェネシスの開始に重要であることが分かった。GFPを融合したSIKを作成してSIKの細胞内局在を詳細に検索した。その結果、静止状態のY1細胞ではSIKは核内に存在するが、Y1をACTHで刺激するとSIKは核から細胞質に出る。この移動は5分以内に完了する。核外への移動はレプトマイシンで阻害される。SIKの核外移行にはPKAが関与する。PKA活性を欠いたY1変異株(Kin-7)では観察されないが、PKA発現ベクターを共導入すると核外移行が起こる。PKAによってSIKのSer577がリン酸化されることがSIKの核外移行に重要である。そしてACTH刺激後のSIKの細胞内移動の時間経過は、SIKによるステロイド産生酵素遺伝子の発現抑制作用の時間経過を良く反映する。細胞質で生合成されたSIKタンパク質が細胞質から核に移行するのにはC末端側に位置する塩基性アミノ酸を比較的多く含む50アミノ酸残基が必要である。これらの結果は、ステロイドジェネシスのシグナル伝達機構の調節にSIKが細胞内移動を介してエッセンシャルな役割を演ずることを示唆している。申請者は最近,高塩食で飼育したラットの副腎皮質に特異的に発現する遺伝子をクローニングした。この遺伝子はN末端1Aなどステロイド産生酵素遺伝子の発現を抑制している,2)ACTH刺激によりPKA系が活性化されると核内のSIKは細胞質に移行しCYP11A遺伝子の転写抑制が解除される,3)同時にSIK遺伝子自身はPKA系で転写・翻訳される。これらの事実はSIKが細胞内で移動することがその生理機能にエッセンシャルであること,またACTHに対する副腎皮質の応答現象が早期応答と遅延応答の2段階に分かれる現象にSIKの細胞内移動が深く関わることを示唆している。SIKタンパク質の種々の断片を作成しそのそれぞれと蛍光タンパク質(GFP)を融合させたキメラSIKを作りそれをY1細胞で発現させた。そしてACTH刺激に伴って起こるSIKの細胞内移動を検討した。その結果SIKタンパク質の核への移行にはC末端に位置する塩基性アミノ酸を比較的多く含む50アミノ酸残基が必要である,一方SIKの核外への移行にはSer577のPKAによるリン酸化とSIKのリン酸化活性,およびC-末端の50アミノ酸残基が必要であることが明らかとなった。SIKの細胞内移動を解析しその意義をさらに詳細に明らかにするためには,細胞内でSIKと相互作用するタンパク質を同定し,そのタンパク質の発現部位を明らかにすること,そしてそのタンパク質がACTH刺激時に細胞内でどのような挙動をとるかを明らかにする必要がある。酵母2-ハイブリッド法を用いてSIKのオトリ断片と相互作用する20個のクローンを分離した。現在これらのクローンの本体を明らかにする研究に全力を集中している。
先史時代・古代土器の野焼き技術の復元

以下の点で「野焼き方法は土器の形、大きさ、作りに応じた工夫が施されている」ことが明らかにされた。(1)弥生時代の甕棺の野焼き方法:縄文・弥生時代において最も大型であり、高度な製作技術が要求される甕棺について、福岡県小郡市の津古空前遺跡(弥生中期前半)と横隈狐塚遺跡(中期中葉後半)の黒斑を詳細に観察し、2回の野焼き実験を行った結果、前者では丸太を芯にした粘土円柱の支え棒を用いて野焼き時に土器を斜めに立ち上げて設置していたのに対し、後者では横倒しに設置するように変化したことが明らかにされた。この変化の理由として、「円筒形に近い形の前者では内面下部まで燃焼ガスがゆき渡るように角度を付けて土器を設置したのに対し、寸胴形に変化した後者ではその必要がなくなったため、簡便な横倒しの設置になった」という仮説が提示された。(2)弥生時代の赤塗土器の野焼き方法:赤塗土器が最も盛行する北部九州の弥生中期土器と長野地方の弥生後期土器(松原遺跡)の黒斑を観察した結果、1)弥生時代の赤塗土器は黒斑が少ない、2)松原遺跡では、赤塗土器の盛行に伴い土器を横倒しにし、薪燃料を多用する(側面と上部に薪を立てかける、その上を草燃料で覆う)号焼き宣法に変化する、3)縄文時代の赤塗は全て焼成後なのに対し、弥生時代の赤塗は全て焼成前に施されるようになる、などの点が明らかにされた。そして、電気窯による赤塗粘土板の焼成実験により、1)薪を多用するのは赤塗の定着度を高めるためである、2)赤塗土器に黒斑が少ないのは、ベンガラのために炭素が酸化しやすいためである、3)弥生時代の焼式前赤塗は、野焼き時に黒斑を付けないで焼くことが可能な「覆い形野焼き」に対応したものである、の3点が示された。(3)縄文土器の野焼き方法: 4回の野焼き実験と東北地方の縄文土器(前・中期の三内丸山・板留(2)・滝の沢遺跡、および縄文晩期の九年橋遺跡)の黒斑を観察し、「内面に薪を入れて直立した状態で野焼きし、底部を加熱するため後半段階で横倒しにする」という野焼き方法を明らかにした。外面黒色化(褐色化)手法が縄文時代に盛行するが弥生時代にはほぼ消失する理由として、「一度全体を明色に焼き上げた後に、有機物を掛けて炭素を吸着させる黒色土器は、上述の開放型野焼きには適するが、弥生時代の覆い型野焼きには適さない」ことを明らかにした。(1)資料調査小郡市埋蔵文化財センターで大板井、中尾、横隈狐塚、津古空前の弥生土器と甕棺を観察した(10月)。その結果、弥生前期から中期へと弥生土器の野焼き時の設置方法が急激に変化することが明らかになった。また、平成10年度に予定している甕棺の分析の予備調査も行い、弥生土器とほぼ共通する変化が明らかになった。石川の弥生土器の黒斑観察を鹿首モリガフチ遺跡(弥生後期、石川県立埋蔵文化財センター)と八日市地方遺跡(弥生中期、小松市教育委員会)で行い、これまで分析したと同様の黒斑の特徴を再確認し、資料を蓄積した。平成10年度に予定している東北地方の縄文土器の分析の予備調査として、12月に二屋敷遺跡(宮城県東北歴史資料館)と滝の沢遺跡(北上市埋蔵文化財センター)の縄文中期土器の黒斑観察をおこなった。(2)野焼き実験弥生土器の覆い型野焼きの実験(5月)、長胴甕の覆い型野焼き(泥を被覆剤とする)の実験(7月)、弥生土器の覆い型野焼き(泥および灰を被覆剤とする)の実験(11月)を行った。土器の設置角度、土器の下側の燃料、被覆剤と黒斑の特徴の関連を現在検討中である。なお、平成9年度に予定していた内黒土師器の野焼き実験は、平成10年度に行うこととした。(3)電気窯による実験電気窯による内黒土師器の形成過程の実験を行い、入れ子にした2個の杯の中に多様な材料を入れても黒色化がなされることが明らかになった。(2)弥生時代の赤塗土器の野焼き

方法:赤塗土器が最も盛行する北部九州の弥生中期土器と長野地方の弥生後期土器(松原遺跡)の黒斑を観察した結果、1)弥生時代の赤塗土器は黒斑が少ない、2)松原遺跡では、赤塗土器の盛行に伴い土器を横倒しにし、薪燃料を多用する(側面と上部に薪を立てかける、その上を草燃料で覆う)号焼き宣法に変化する、3)縄文時代の赤塗は全て焼成後なのに対し、弥生時代の赤塗は全て焼成前に施されるようになる、などの点が明らかにされた。そして、電気窯による赤塗粘土板の焼成実験により、1)薪を多用するのは赤塗の定着度を高めるためである、2)赤塗土器に黒斑が少ないのは、ベンガラのために炭素が酸化しやすいためである、3)弥生時代の焼式前赤塗は、野焼き時に黒斑を付けないで焼くことが可能な「覆い形野焼き」に対応したものである、の3点が示された。(3)縄文土器の野焼き方法: 4回の野焼き実験と東北地方の縄文土器(前・中期の三内丸山・板留(2)・滝の沢遺跡、および縄文晩期の九年橋遺跡)の黒斑を観察し、「内面に薪を入れて直立した状態で野焼きし、底部を加熱するため後半段階で横倒しにする」という野焼き方法を明らかにした。外面黒色化(褐色化)手法が縄文時代に盛行するが弥生時代にはほぼ消失する理由として、「一度全体を明色に焼き上げた後に、有機物を掛けて炭素を吸着させる黒色土器は、上述の開放型野焼きには適するが、弥生時代の覆い型野焼きには適さない」ことを明らかにした。
D-アミノ酸発現機序と機能的役割の解明および慢性炎症病態との関連

D-アミノ酸、特に加齢・自然放射線や活性酸素などのストレスの影響により生じると考えられているD-Aspの耳鼻咽喉科領域の組織における発現、疾病との関連の報告は皆無である。昨年度までの研究では、難治性易再発性炎症疾患である好酸球性副鼻腔炎の鼻ポリープに着目し、好酸球性副鼻腔炎および非好酸球性副鼻腔炎患者の鼻ポリープ組織を用い、D-アミノ酸免疫組織化学染色を施行した。好酸球性副鼻腔炎群と非好酸球性副鼻腔炎群でD-アミノ酸の発現パターンに大きな差異は認められなかったが、間質内への好酸球浸潤が多い症例では、D-アミノ酸が多く発現している傾向を確認した。本年度は炎症の程度や好酸球浸潤の程度なども検討項目に加える必要があると考えられたため、D-アミノ酸染色とともに、好酸球マーカーであるECPやMBPなどの染色や解析も加え、現在検討中である。また、声帯ポリープなどの喉頭疾患について、D-アミノ酸発現機序との関連を明らかにするために、炎症性ポリープと声帯結節、声帯嚢胞、喉頭腫瘍(乳頭腫、癌腫)などにおけるD-Asp発現様式を比較検討した。D-Aspは細胞増殖や分化と関連している可能性があるという方向もあり、分化増殖能以上をきたしている癌腫との比較は非常に興味深いと考えられた。声帯組織における正常呼吸上皮、重層扁平上皮、癌腫(扁平上皮癌)、乳頭腫、声帯結節、声帯嚢胞、声帯ポリープなどの様々な病変におけるD-アミノ酸発現を免疫組織化学にて評価を行うため、免疫染色を現在施行中である。勤務地の人員異動が重なったため、研究者のその他の業務が多忙となり当初の計画より遅延が生じた。また、現在行っているD-アミノ酸局在解析および機能解析に用いる耳鼻咽喉科領域疾患、特に様々な種類の喉頭疾患の検体数が十分に揃わず、想定以上に免疫染色に時間を要した。耳鼻咽喉科領域の喉頭疾患についてのD-アミノ酸発現の染色パターンの解析を行う。また、比較対照として肉芽腫や乳頭腫、癌腫や正常呼吸上皮、扁平上皮に対してもD-アミノ酸免疫組織化学染色を行う。また、IgA腎症における口蓋扁桃組織や、好酸球性および非好酸球性副鼻腔炎症例における鼻ポリープ組織、真珠腫性中耳炎症例における中耳真珠腫組織の蛋白抽出を行い、D-アミノ酸蛋白の定量解析を行う。本年度の研究ではIgA腎症患者における口蓋扁桃組織について、臨床的重症度分類および組織学的重症度分類によりD-アミノ酸発現様式を比較し、炎症の程度とD-アミノ酸発現機序との関連を検討した。IgA腎症患者22症例の摘出口蓋扁桃における臨床的重症度分類(C-Grade I-III)とD-アミノ酸発現面積との関連を検討したが有意な相関関係は認められなかった。また、組織学的重症度分類(H-GradeI-IV)とD-アミノ酸発現面積との関連を検討したが、こちらも有意な相関関係は認められなかった。よってD-アミノ酸はIgA腎症の腎組織においては、尿蛋白の有無やeGFRなどの腎機能には直接関連はなく、また糸球体病変の形成にも直接関連がないことが示唆された。真珠腫性中耳炎患者における真珠腫組織についてもD-アミノ酸発現様式を比較検討した。真珠腫組織においては年齢によって発現パターンが異なり、若年者では主に角質層、高齢者では肝室内に多くの発現が認められることを明らかにした。同一患者における先天性・後天性真珠腫同時存在症例についても同様にD-アミノ酸染色を施行したが、やはり先生性真珠腫においては後天性真珠腫に比べ角質(debris)に強い発現を認めた。好酸球性副鼻腔炎症例と非好酸球性副鼻腔炎症例においても鼻ポリープにおけるD-アミノ酸発現様式を比較検討した。好酸球性、非好酸球性ともに粘膜上皮においてはD-アミノ酸発現は認められたが、非好酸球性症例のほうが発現が強い傾向があった。また、間質組織では好酸球性症例は浮腫状変化が強く、D-アミノ酸発現もほとんど認められない症例が多いのに対し、非好酸球性症例では間質や周囲腺組織にD-アミノ酸発現が多い傾向を認めた。IgA腎症患者の口蓋扁桃組織におけるD-Asp発現様式の比較、重症度分類との関連について検討を行った。また鼻ポリープにおけるD-Asp発現様式の検討および好酸球性炎症の程度とD-Asp発現様式の関連の検討、先天性真珠腫と後天性真珠腫の発症メカニズムの差異につきD-Asp発現様式の観点から検討を行った。声帯ポリープについてはまだ症例数が少なく、免疫組織化学による検討まで行えていない。本年度の研究では、難治性易再発性炎症疾患である好酸球性副鼻腔炎の鼻ポリープに着目し、手術加療で摘出した好酸球性副鼻腔炎症例の鼻ポリープ13症例と非好酸球性副鼻腔炎症例の鼻ポリープ13例に対しD-Asp特異抗体を用いた免疫組織化学染色にてを施行し、D-アミノ酸発現の有無、発現様式の違いを検討した。その結果、好酸球性副鼻腔炎群、非好酸球性副鼻腔炎群ともに、症例ごとに程度の差はあるが繊毛上皮、間質内の炎症細胞、腺組織にD-アミノ酸発現を認めた。