hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
遷移金属触媒を用いるα-ケトカルベン種の新規発生手法の開発

遷移金属カルベン錯体はシクロプロパン化反応、挿入反応、メタセシス反応など、多様、かつ特徴的な炭素骨格構築あるいは分子変換を行うことのできる大変興味深い化学種である。すでに筆者はカチオン性白金ホスフィン錯体を用いて鎖状γ,δ-イノンから触媒的に白金含有カルボニルイリドを発生させることに成功している。この白金含有カルボニルイリドは不飽和分子と[3+2]型の付加環化反応を起こすカルボニルイリドとしての性質とカルベン錯体としての性質を併せ持つ興味深い新規化学種であり、ビニルエーテル類との反応により生成物として8-オキサビシクロ[3.2.1]オクタン誘導体を与える。前年度、Walphos配位子を用いることで白金含有カルボニルイリドとビニルエーテルとの不斉[3+2]型付加環化反応が進行することを見出した。本年度ではまず本反応の分子内反応への応用を行ったところ、分子内にZ体のスチリル部位を有するγ,δ-イノンを用いて反応を行うと、イノン部位から生じた白金含有カルボニルイリドと分子内のスチリル部位とで不斉[3+2]型付加環化反応が進行し、三環性の化合物が一挙に、高エナンチオ選択的に得られることを見出した。次に、α-ケトカルベン種を遷移金属錯体に特徴的な反応を利用して、容易に入手可能な前駆体から触媒的に発生させる手法の開発について検討を行った。前年度に引き続き、アルキンの求電子的活性化と酸化反応を組み合わせるアプローチで様々な検討を行ったが現在のところα-ケトカルベンの発生には至っていない。遷移金属カルベン錯体はシクロプロパン化反応、挿入反心、メタセシス反応など、多様、かつ特徴的な炭素骨格構築あるいは分子変換を行うことのできる大変興味深い化学種である。すでに筆者は塩化白金錯体を用いて鎖状・,・-イノンから触媒的に白金含有カルボニルイリドを発生させることに成功している。この白金含有カルボニルイリドは不飽和分子と[3+2]型の付加環化反応を起こすカルボニルイリドとしての性質とカルベン錯体としての性質を併せ持つ興味深い新規化学種であり、ビニルエーテル類と反応を起こし生成物として8-オキサビシクロ[3.2.1]オクタン誘導体を与える。そこでまず、この反応について触媒の再検討を行ったところ、触媒としてカチオン性白金ホスフィン錯体を用いることで効率的に反応が進行し、より短時間で反応が完結することを見出した(塩化白金の場合:数日間、カチオン性白金ホスフィン錯体の場合:24時間)。また錯体上のホスフィン配位子の検討を行い、異なる2種の生成物の選択的合成を達成した。どちらの生成物も合成化学的に利用価値の高い8-オキサビシクロ[3.2.1]オクタン誘導体であり、本反応は非常に優れた炭素骨格構築法である。次に、カルベン炭素上にカルボニル基の置換したカルベン錯体(α-ケトカルベン)を遷移金属錯体に特徴的な反応を利用して、容易に入手可能な前駆体から触媒的に発生させる手法の開発について検討を行った。まず炭素-ハロゲン結合の酸化的付加を契機とするアプローチで様々な遷移金属錯体、反応基質について検討を行ったが、目的とするα-ケトカルベンを発生させることはできなかった。また、アルキンの求電子的活性化を契機とするアプローチについても同様の検討を行ったが現在のところα-ケトカルベンの発生には至っていない。今後さらに詳細な検討を行っていく計画である。この白金含有カルボニルイリドは不飽和分子と[3+2]型の付加環化反応を起こすカルボニルイリドとしての性質とカルベン錯体としての性質を併せ持つ興味深い新規化学種であり、ビニルエーテル類との反応により生成物として8-オキサビシクロ[3.2.1】オクタン誘導体を与える。まず、本反応で得られる8-オキサビシクロ[3.2.1]オクタン誘導体の有用性に着目し、不斉反応への応用を検討した。様々な不斉配位子を用いて検討を行った結果、Walphos配位子を用いることで白金含有カルボニルイリドとビニルエーテルとの不斉[3+2]型付加環化反応が高エナンチオ選択的に進行することを見出した。本反応は様々な置換基を有するイノンに適用可能であり、合成化学的に有用な8-オキサビシクロ[3.2.1]オクタン誘導体が高い光学純度で得られる。前年度に引き続き、炭素-ハロゲン結合の酸化的付加を契機とするアプローチで様々な遷移金属錯体、反応基質について検討を行ったが、目的とするα-ケトカルベンを発生させることはできなかった。今後他のアプローチについて詳細に検討を行っていく予定である。

遷移金属カルベン錯体はシクロプロパン化反応、挿入反応、メタセシス反応など、多様、かつ特徴的な炭素骨格構築あるいは分子変換を行うことのできる大変興味深い化学種である。すでに筆者はカチオン性白金ホスフィン錯体を用いて鎖状γ,δ-イノンから触媒的に白金含有カルボニルイリドを発生させることに成功している。この白金含有カルボニルイリドは不飽和分子と[3+2]型の付加環化反応を起こすカルボニルイリドとしての性質とカルベン錯体としての性質を併せ持つ興味深い新規化学種であり、ビニルエーテル類との反応により生成物として8-オキサビシクロ[3.2.1]オクタン誘導体を与える。前年度、Walphos配位子を用いることで白金含有カルボニルイリドとビニルエーテルとの不斉[3+2]型付加環化反応が進行することを見出した。本年度ではまず本反応の分子内反応への応用を行ったところ、分子内にZ体のスチリル部位を有するγ,δ-イノンを用いて反応を行うと、イノン部位から生じた白金含有カルボニルイリドと分子内のスチリル部位とで不斉[3+2]型付加環化反応が進行し、三環性の化合物が一挙に、高エナンチオ選択的に得られることを見出した。次に、α-ケトカルベン種を遷移金属錯体に特徴的な反応を利用して、容易に入手可能な前駆体から触媒的に発生させる手法の開発について検討を行った。前年度に引き続き、アルキンの求電子的活性化と酸化反応を組み合わせるアプローチで様々な検討を行ったが現在のところα-ケトカルベンの発生には至っていない。
非線型波動の挙動に及ぼすポテンシャルの影響について

本研究の目的はポテンシャルのついた非線型波動方程式について考察し,ポテンシャルが解に及ぼす影響を調べその数学的仕組みを解明することである。本年度は空間2次元における初期値問題について非線型項が未知関数それ自身にのみ依存する場合を考察している。今までに分かったことは,次の4つの条件のうちいずれかが成り立てば方程式の解が有限時間内で爆発してしまうというものである。いずれもポテンシャルが負であることを仮定している。1)非線型項のべきがある値より小さい場合。2)初期値の無限遠方での減衰のべきがある値より小さい場合(この値は非線型項のべき数にのみ依存する)。3)ポテンシャルの無限遠方での減衰のべきがある値より小さい場合。4)ポテンシャルが大きい場合。これらは空間3次元の場合と同様である。3)の値は空間3次元と同じで,このことからポテンシャルのべきがこの値より大きければ時間大域解が存在することが予想された。しかし、今年度の研究において時空のある領域では解の減衰が悪くなることが分かった。ポテンシャルが解の減衰に影響を及ぼしているのである。この現象は空間3次元の場合と異なっており,空間2次元においてホイヘンスの原理が成り立たないことと密接に関係していると思われ非常に興味深い。以上の点を考えると,たとえポテンシャルが無限遠方で速く減衰していても解は有限時間内で爆発してしまうと予想される。それを示すためには解の減衰が悪くなる領域がもっと広くなるかどうかを確かめる必要があり現在研究中である。本研究の目的はポテンシャルのついた非線型波動方程式の解を調べ,ポテンシャルが解に及ぼす影響についてその数学的仕組みを解明することである.空間3次元についてはStrauss氏との共同研究によっていくつかの興味深い結果が示されている.そこで本年度は空間2次元における初期値問題について非線型項が未知関数それ自身にのみ依存する場合を考察している.まずこれまでに分かったことは,解の爆発に関しては空間3次元の場合と同じ結果が成り立つということである.これはポテンシャルが負であることを仮定しているが,次の4つの条件のうちいずれかが成り立てば方程式の解が有限時間内で爆発してしまうというものである.1)非線型項のべきかある値より小さい場合.2)初期値の無限遠方での減衰の仕方がある値より大きい場合(この値は非線型項のべき数にのみ依存する).3)ポテンシャルの無限遠方での減衰の仕方がある値より大きい場合.4)ポテンシャルが大きい場合.3)の値は空間3次元と同じで,このことから他の次元においてもこれが臨界値となることが予想される.次元解析によってもこの値は見つけられる.次に時間大域解の存在については,大域的存在を示すのに必要な先験的評価式を計算しているところである.重みのついたノルムを用いるのだが空間3次元と異なる点は,時空の領域によって重み関数を変えていかなければならないことである.まだ確かではないがポテンシャルの影響がこの辺のところに現れているのではないかと考えている.大域的存在を示した後は非線型項が未知関数の一階偏導関数にのみ依存する場合を考察していく予定である.本研究の目的はポテンシャルのついた非線型波動方程式について考察し,ポテンシャルが解に及ぼす影響を調べその数学的仕組みを解明することである。
C型肝炎ウイルス感染による多中心的肝発癌に対する新たな予防法の開発

C型肝炎ウイルス・コア蛋白を発現するトランスジェニックマウス(雄)とPPARalphaノックアウトマウス(雌)を交配し、PPARalphaヘテロ・コア蛋白(+)マウスを作製した。このマウスの生後一週間生存率は93%(n=76)であり、順当な繁殖であった。この中から雄マウス35匹を選択し、長期飼育を試みた。次に、PPARalphaヘテロ・コア蛋白(+)マウス(雄)とPPARalphaノックアウトマウス(雌)を交配し、PPARalpha(-/-)・コア蛋白(+)マウスを作製した。この場合、雌雄を変えると不妊となった。固形標準試料をマウス繁殖に用いると、仔マウスの生後一週間生存率は4%(n=87)であり、繁殖の用を成さなかった。10%飽和脂肪食を用いると、仔マウスの生後一週間生存率は71%(n=94)に向上した。この中から雄マウス31匹を選択し、長期飼育を試みた。21-22ヶ月齢の雄マウスを解剖したところ、PPARalphaヘテロ・コア蛋白(+)マウスの肝発癌頻度は2.4%であった。PPARalpha(-/-)・コア蛋白(+)マウスの肝発癌頻度は3.8%であった。通常、コア蛋白を発現するトランスジェニックマウス(雄)の肝発癌頻度は30%程度なので、PPARalphaの発現量が低下すると、肝発癌頻度が著しく低下することが明らかになった。他の重要所見として、肝発癌の無い個体は脂肪肝を伴わず、少数ではあるが肝発癌個体は重度の脂肪肝を呈することが観察された。一部マウスは9ヶ月齢で解剖したが、肝発癌頻度は0%であった。肝発癌個体の肝正常部の電顕像はミトコンドリア膜に障害を呈していた。この障害はコア蛋白を発現するトランスジェニックマウスにおいて観察される電顕像と類似していた。非肝発癌個体の肝正常部のミトコンドリアは正常な構造を呈していた。
膜固定化パーオキシダーゼを用いた塩素化エチレン汚染地下水の修復

塩素化エチレン汚染サイトでのバイオレメディエーションによる修復の加速化を目指してパーオキシダーゼに着目し、この酵素による塩素化エチレン分解を検討した。塩素化エチレンとしてテトラクロロエチレン、トリクロロエチレン、シス-1,2-ジクロロエチレンと塩化ビニルモノマーを用いた。ホースラディッシュパーオキシダーゼとして、5種類の市販品を用いた。各酵素の最適条件下で分解反応を試みたが、顕著な反応は生じなかった。さらに、リグニンパーオキシダーゼやマンガンパーオキシダーゼ2種類を用いて分解反応を検討したが、反応は生じなかった。次に、ラッカーゼとカタラーゼに着目して検討したが、分解反応は生じなかった。昨年度の結果では、パーオキシダーゼと過酸化水素だけでは分解反応が生じなかったので、今年度は、NADHを共存させパーオキシダーゼによる塩素化エチレン分解を試みた。まず、市販のホースラディッシュ4種類を用いて過酸化水素とNADHの存在下でヒドロキシラジカルが生じるかを確認した。TOYOBO製とシグマ製TypeI, Type II, TypeIVを用いたが、いずれもヒドロキシラジカルの発生は確認できなかった。そのため、塩素化エチレン類の分解実験には至らなかった。次に、ラッカーゼに着目し、メディエーターとして2,2'-アジノビス(3-エチルベンゾチアゾリンー6ースルフォン酸)や1-ヒドロキシベンゾトリアゾールを用いて、ラジカルによる分解を検討した。方法:塩素化エチレン類として、cisDCEを用いた。ラッカーゼはシグマ製を用いた。20ml容バイアル瓶にcisDCEを10mg/Lとなるように添加し、50mM酢酸緩衝液(pH 4.5)、メディエーター5mM,そしてラッカーゼを0.22 U/mlとなるように入れ、2日間反応させた。バイアル瓶中のヘッドスペースガス中の塩素化エチレン類をガスクロマトグラフで測定し、経時的な減少を追跡した。その結果、顕著な分解反応は見られなかった。並行した研究で、微生物代謝産物で分子量約3000の物質がPCEを顕著に減少させることを見出した。この物質は、オートクレーブ処理により活性を低下させること、活性炭吸着されること、pH10が最も安定した活性を示すこと、プロテアーゼ処理で活性を低下させることなどを見出している。塩素化エチレン汚染サイトでのバイオレメディエーションによる修復の加速化を目指してパーオキシダーゼに着目し、パーオキシダーゼによる塩素化エチレン分解を検討した。塩素化エチレンとしてテトラクロロエチレン(PCE)、トリクロロエチレン(TCE)、シス-1,2-ジクロロエチレン(cDCE)と塩化ビニルモノマー(VC)を用いた。ホースラディッシュパーオキシダーゼとして、市販のTOYOBO製、シグマ製TYPE I、TYPE II、TYPE IV、Meijiseikaファルマ製を用いた。25 ml容バイアル瓶に各塩素化エチレンを所定濃度(PCE 0.0305 mM, TCE 0.0385 mM, cDCE 0.0521 mM, VC 0.161 mMのいずれか)入れ、緩衝液、過酸化水素1.4 mM、酵素溶液14.1 U/mlを添加して全体量を5 mlとした。30°C、24時間を標準の反応時間とした。コントロールとして、フェントン反応と0価の鉄粉を利用した。過酸化水素を用い、各酵素の最適条件下で分解反応を試みたが、顕著な反応は生じなかった。そこで、NADHを共存させ、ヒドロキシラジカルの発生を確認したが、いずれも認められなかった。さらに、リグニンパーオキシダーゼやマンガンパーオキシダーゼ2種類を用いて分解反応を検討したが、ほとんど反応は生じなかった。次に、ラッカーゼに着目し、メディエーターとして2,2'-アジニビス(3-エチルベンゾチアゾリン-6-スルフォン酸)や1-ヒドロキシベンゾトリアゾールを用いてラジカルによる分解を検討した。しかし、分解は生じなかった。さらに、カタラーゼを用いた分解反応も検討したが、ほとんど分解反応は生じなかった。並行した研究で、微生物の代謝産物から分子量約3000のPCEを顕著に減少させる物質を発見した。この物質は、オートクレーブ処理により活性を低下させること、活性炭に吸着すること、pH10が最も安定した活性を示すこと、プロテアーゼ処理で活性を低下することからペプチド状の物質であると推定している。今年度は、パーオキシダーゼによる塩素化エチレン分解の基礎研究を行った。○塩素化エチレン類として、PCE, TCE, cDCE, VCを用いた。○パーオキシダーゼは市販のホースラディッシュ(TOYOBO, PEO-301)を用いた。方法:25ml容バイアル瓶に各塩素化エチレン類を所定濃度入れ、過酸化水素水とパーオキシダーゼを入れ、分解反応を行った。

コントロールとしてフェントン反応と0価鉄粉を用いた。酵素反応条件として全体量を5 mlとし、リン酸緩衝液4 ml、過酸化水素1.4 mM、パーオキシダーゼ14.1 U/ml、塩素化エチレンとしてPCE 0.0305 mM, TCE 0.0385 mM, cDCE 0.0521 mM, VC 0.161 mMのいずれかを添加した。30°Cで1晩反応させたが、ほとんど分解反応は生じなかった。初発塩素化エチレン濃度や酵素量を変化させたが、顕著な変化は見られなかった。パーオキシダーゼの活性が懸念されたので、ピロガロールやフェノールなどの芳香族化合物での分解を試した。その結果、分解反応は生じた。そこで、可逆反応が生じることも想定してメディエーターの使用を検討している。なお、0価鉄粉では、使用した塩素化エチレンどれでも還元分解して最終分解産物であるエチレンが生じたが、分解に日単位以上の時間が必要であった。フェントン反応では分解が生じた。パーオキシダーゼの反応メカニズム、これまでの塩素化エチレン分解研究の実績と文献情報からパーオキシダーゼによる塩素化エチレンの分解は生じると考えて研究を開始したが、考えていなかった実験結果となり、困難に直面している。今年度は、解決策として、パーオキシダーゼのライブラリーを増やすこと、NADHとの共存での反応を試みたが、ネガティヴな結果となっている。初発塩素化エチレン濃度、酵素濃度、反応時間などの諸条件をさらに検討する。解決策として、パーオキシダーゼのライブラリーを増やすこと、pH、反応温度、塩素化エチレン濃度、酵素濃度などの詳細検討とメディエーターの使用を考えている。パーオキシダーゼとNADHとの共存での反応条件を詳細に検討する。初発塩素化エチレン濃度、酵素濃度、反応時間などである。さらに、ラッカーゼによる分解反応もより詳細に検討する。並行した研究で得られた塩素化エチレンを減少させる物質、リポペプチドやオリゴペプチドなどのバイオサーファクタントを想定、の詳細な化学的性質を検討する。パーオキシダーゼのライブラリーを増やすこと、pH、反応温度、塩素化エチレン濃度、酵素濃度などの詳細検討とメディエーターの使用を考えている。また、フェントン反応との併用も検討する。並行した研究で、微生物代謝産物で分子量約3000の物質がPCEを顕著に減少させることを見出した。この物質を分離精製し、機能解明するとともに、膜に固定化して当初目的の塩素化エチレン分解膜型リアクターの研究につなげたい。膜型リアクターを購入する予定であったが、これは中止し、各種酸化型酵素・メディエーター、分離精製用の各種カラムなどの購入、分析機器の使用料などに充当する。
多自由度油圧アームのカシミール関数に基づくインピーダンス制御

油圧ロボットは,電動ロボットと比較して,1)一般環境における出力荷重比が高い,2)重力環境における姿勢静止のためのエネルギー効率が高い,などの利点を有するため,建設,災害救助,農業,地雷除去における高度な作業支援が期待されている.本研究では油圧ロボットがヒトや物体を損傷させずに接触するための新しいインピーダンス制御手法を提案した.提案手法によって,未知のパラメータ変動のもとで閉ループ系はロバスト安定性だけでなく,ロバスト構造という新しい性質を達成するためインピーダンスを有する.2自由度油圧アームの数値モデルと実験装置を用いて,提案手法の有効性を数値的かつ実験的に示した.多自由度油圧アームの構造的特徴であるカシミール関数に基づくモデリングとインピーダンス制御について実験的かつ理論的に研究した.具体的には,油圧アームの一部を簡易化するモデリングを提案したうえで,[S2]多自由度油圧アームのカシミール関数に基づくインピーダンス制御法と制御工学的実験,[S3]多自由度油圧アームのカシミール関数に基づくインピーダンス制御法とロボット工学的実験,に共通する1自由度鉛直油圧アームのカシミール関数に基づくインピーダンス制御実験を介して,油圧アームの振る舞いが仮想剛性パラメータの値に鋭敏に変化すること,かつ,作業性能が定義可能なpick&place専用ハンドを動作させ模擬コンテナを把持・解放できること,を確認して,提案法の有効性および有用性をそれぞれ実証した.実証された結果は多自由度油圧アームのための実験[S2][S3],簡易化するモデリングを採用しない実験,へ拡張する際に応用できる.さらに,[S4]カシミール関数に基づくインピーダンス制御法の理論展開として提案したロバスト構造について,既存の4つの手法(トルクに基づく制御法,位置に基づく制御法,Immersion&Invarianceに基づく制御法,微分に基づく制御法)と提案法とを理論的に比較して,提案法の有効性を論証した.論証された結果は26年度中に投稿予定であり,同時に,油圧アームなど非線形性を有する場合に拡張する際に応用できる.油圧ロボットは,電動ロボットと比較して,1)一般環境における出力荷重比が高い,2)重力環境における姿勢静止のためのエネルギー効率が高い,などの利点を有するため,建設,災害救助,農業,地雷除去における高度な作業支援が期待されている.本研究では油圧ロボットがヒトや物体を損傷させずに接触するための新しいインピーダンス制御手法を提案した.提案手法によって,未知のパラメータ変動のもとで閉ループ系はロバスト安定性だけでなく,ロバスト構造という新しい性質を達成するためインピーダンスを有する.2自由度油圧アームの数値モデルと実験装置を用いて,提案手法の有効性を数値的かつ実験的に示した.H24年度は下記の3部分テーマについて研究を実施した。[S1]エネルギ源を考慮したロボットのモデリングと同定[S2]多自由度油圧アームのCasimir関数に基づくインピーダンス制御法と制御工学的実験[S4]Casimir関数に基づくインピーダンス制御法の理論展開[S1]電動アームには無い性質として1)全リンクに共有するパラメータが(多自由度の場合は常に)未知である,2)適当なパラメータに対して状態方程式の解軌道が存在しない,の2点から油圧アームを特徴付けて,電動アームのための従来の同定法では解決できない同定問題を解法を提案して,実験的にエネルギー源を考慮して実証した.得られた研究結果は学術論文雑誌に投稿中である.ただし理論的にエネルギー源を考慮するに至っていないため,H25年度の課題である.[S2]油圧アームのインピーダンス制御問題の解法であるカシミール関数に基づくインピーダンス制御法に基づいて,[S1]の実験機の1自由度油圧アームモードについて制御器設計と制御工学的実験を実施した.得られた研究成果は国際会議論文に投稿中である.ただし多自由度の場合の制御器設計と制御工学的実験には至っていないため,H25年度の課題である.[S4]国際会議IFAC LHMNC 2012, IEEE ICRA 2012における指摘に基づき,従来方法との理論的比較などに関して,理論的・数値的な検証と理論展開を実施した.上記の3つの部分テーマについて,[S1]では実験的だけでなく理論的にエネルギー源を考慮するモデリング,[S2]では1自由度だけでなく多自由度の制御工学的実験をH24年度に実施できなかった.しかし一方では,想定外の結果(実験的にエネルギー源を考慮したモデリング=多自由度油圧アームのパラメータ同定,順動力学計算の高速化)が得られつつあるので,全体としては順調に進展していると評価する.[S3]では申請に沿ってH25年度も実施する予定である.H25年度は下記の2部分テーマについて研究を主に実施する。[S3]多自由度油圧アームのCasimir関数に基づくインピーダンス制御法とロボット工学的実験[S4]Casimir関数に基づくインピーダンス制御法の理論展開[S3]提案するインピーダンス制御手法の効果を可視化するため,制御性能だけでなく作業性能を定義できる比較実験を実施する.[S4]体系化されつつある物理系の制御理論,特に,Achievable Dirac structureとの関連が現段階で不明確である.そこで本段階では,提案法を制御理論の枠組内で精密化して,設計の条件と自由度を明らかにする.[S1]理論的にエネルギー源を考慮して,かつ,流量センサ(日本フローコントロール・VSI02)(3×350千円)を購入して2つのアクチュエータと1つの油圧源に関する流量干渉を計測してモデリングを実施する.(平成24年度はVSI02の選定検証に想定以上の時間を要したため,購入を見送った.

このため次年度使用額が生じた.)[S2]圧力センサ(キーエンス・AP-V80)(2×175千円)を購入して,3自由度の場合の制御器設計と制御工学的実験を実施する.[S3]電子部品・機械部品・実験用資材(800千円)を購入して, 3自由度の場合のロボット工学的実験を実施する.
リコンビナントシスタチンの大量生産・機能改質ならびに有効利用に関する研究

シスタチン分子の人工的な設計や機能変換ならびに有効利用をめざし、本年度は1.シスタチンSとシスタチンCのエクソン単位を交換した遺伝子断片(キメラ遺伝子)の構築,2.大腸菌によるキメラ遺伝子の発現・分泌,3.組換え型キメラシスタチンの生産と精製,4.キメラシスタチンのシステインプロテアーゼ阻害特性の解析,5.組換え型シスタチンSとその変異体の歯周病菌(P.gingivalis)の増殖におよぼす作用の検討などに重点を置き研究をおこなった。その結果、大腸菌によって生産されたキメラシスタチンのほとんどがシステインプロテアーゼ(フィシン、パパイン、カテプシンB、C、H)に対する阻害活性を示すことが分かった。この知見は天然型のシスタチンのアミノ酸配列を利用して人工型のシスタチン分子を設計できることを示唆する。シスタチンSのアミノ酸配列をシスタチンCの配列と交換したキメラ体はカテプシンB,C,Hに対する阻害活性が強くなった。しかしながらシスタチンSおよびCの抗体と反応するにも関わらず、全くシステインプロテアーゼの活性を阻害しない組換え型のキメラ体も得られた。天然型、組換え型および人工型のシスタチンなどのアミノ酸配列とシステインプロテアーゼの阻害特性の関係を理解するにはヒトシスタチンの立体構造の解析が必要となる。既に組換え型のヒト唾液シスタチンがP.gingivalis由来のシステインプロテアーゼ(Arg-ジンジパインやLyS-ジンジパイン)を阻害しないことをつきとめていたが、本研究によってヒト唾液シスタチンが歯周病菌(P.gingivalis)の増殖を抑制するという新たな機能が発見された。以上の研究業績はヒトのシスタチンを口腔衛生や歯科医学の分野に役立たせるための一助となる。ヒト顎下腺cDNA試料を鋳型に用いて,PCR法によりシスタチンS,SA,SN前駆体のアミノ酸配列をコードするcDNAを増幅した.また,シスタチンSのcDNAを検索子としてヒト顎下腺cDNAライブラリーよりシスタチンCのcDNAをクローニングした.単離されたこれらのcDNAをテンプレートに用いてシスタチンS[^<-18>MArg-Trp;^<117>Arg-Trp],シスタチンSA[^<-18>Trp-Arg],シスタチンSN[^<-18>Gln-Arg]などの変異型cDNAをPCR増幅した.このようにして調製されたcDNAを発現ベクターpKK233-2のNcoI-HindIIIサイトに挿入した.これらの発現ベクターの複製開始点(ori)をpUC18(High Copy Number)のoriと置き換えることによって高レベル発現・分泌ベクターを構築した.イソプロピル-β-チオガラクトシド(IPTG)の誘導下でシスタチン遺伝子を大腸菌JM109株で発現させた.シグナルペプチドのアミノ末端付近(-18位)にArg残基(陽性荷電)が存在するとシスタチン分子の大腸菌ペリプラスム空間への分泌の効率および速度が増大した.精製されたリコンビナントシスタチンSのアミノ末端付近の配列はSSSKEENRII-と決定された.リコンビナントシスタチンSNは2種類の分子種(^1WSPKEEDR-,^<18>DLNDEWVQRE-)として精製された.リコンビナントシスタチンSAの場合は,アミノ末端付近の4残基および6残基の配列が欠如した分子形態が単離同定された.以上の実験結果は大腸菌のシグナルペプチターゼIは-Ala(-3)-Leu(-2)-Ala(-1)-Ser(+1)/Trp(+1)-配列を認識してシスタチン前駆体のシグナルペプチドを正確に除去することを示唆する.

ペリプラスム画分に微量に混在する大腸菌由来のプロテアーゼは成熟型シスタチン分子のアミノ末端領域のArg-Ile,Glu-Glu,Glu-Aspなどの結合を加水分解した.作成されたリコンビナントシスタチンのパパイン,フイシン,カテプシンBなどに対する見かけ上の阻害定数はヒト唾液シスタチンの値に匹敵する.従って,これらのシスタチンは研究室レベルの要求をみたし,各方面への応用が期待される.シスタチン分子のカテプシン群(B,H,Cなど)に対する阻害機能部位を検索するために、本年度は組換え型キメラシスタチン分子の合成に着手した。Polymerase Chain Reaction(PCR)法によりキメラDNAセグメントを合成する方法を発明し、シスタチンSとシスタチンCの第一エクソンをそれぞれ交換した2種のキメラシスタチン分子(S1C2C3;S/exon1-C/exon2-C/exon3,C1S2S3;C/exon1-S/exon2-S/exon3)を大腸菌で発現させるとに成功した。組換え型シスタチンS1C2C3はQ-SepharoseとSephacry S-200のカラムで比較的簡単に精製が可能で、シーケンサーによりアミノ末端領域15残基の配列はSSSKEENRIIPGGIY-であると分析された。この実験結果はシスタチンSのシグナルペプチドがキメラシスタチン分子を大腸菌で発現・分泌させる場合でも有効であることを示す。シスタチンC1S2S3は予想に反し発現量が低レベルであったため精製に至っていない。新たな発現ベクターを構築中である。組換え型シスタチンC1S2S3はカテプシンH,Cを天然型シスタチンCとほぼ同程度の強さで阻害したが、カテプシンBに対する阻害活性は天然型のシスタチンCよりも1000倍程度低下していた。研究期間に得られた研究成果を以下に述べる1.ヒト顎下腺cDNA試料およびヒト顎下腺cDNAライブラリーよりシスタチンS、シスタチンSA、シスタチンSN、シスタチンCのcDNAクローンを単離した。2.シスタチンS,SA,SN,C,Sの変異体(^<117>Arg→Trp)の高レベル発現・分泌ベクターを構築した。3.組換え型シスタチンS,SA,SN,S(^<117>Arg→Trp)を大腸菌JM109に発現・分泌させ、これらの組換え型シスタチンの精製法をほぼ確立した。4.組換え型シスタチンを大腸菌のペリプラスム空間へ効率良く分泌させる際に必要なシグナルペプチドのアミノ酸配列の条件を確定した。5.Polymerase Chain Reaction(PCR)でシスタチンSとシスタチンCのエクソン単位を交換したキメラ遺伝子を合成する技法を開発した。6.シスタチンSとシスタチンCのキメラ体(複数)を効率よく発現・分泌させるベクターを構築した。7.前述のキメラシスタチンを大腸菌で発現させ、大量精製する方法をほぼ確定した。8.アミノ酸配列分析によって精製した組換え型シスタチンのキャラクタリゼーションを行った。9.精製した組換え型シスタチンのシステインプロテアーゼ(フィシン、パパイン、カテプシンB,C,H)に対する阻害特性を分析した。10.組換え型シスタチンが歯周病菌(P.gingivalis)由来のArg-ジンジパインやLys-ジンジパインの活性を阻害しないことを明らかにした。11.組換え型ヒト
高齢者の視機能がQOLに及ぼす影響と加齢黄斑変性の病態解明

1.高齢者の視機能がQOLに及ぼす影響高齢者が健康を維持しquality of life (QOL)を保つには運動能力が重要である。眼科検診藤原京EYEスタディにおいて歩行速度測定、開眼片足立ち能力測定を実施できた約2800人を検討した。10m歩行速度において単変量解析で視力、年齢、性別、現在の喫煙、併存障害が有意に関連した。多変量線形回帰分析で年齢、性別、BMI、併存障害は歩行速度と関連があったが、これらと独立して視力が悪いと歩行速度が遅いという結果であった。開眼片足立ち能力は、単変量解析で視力、年齢、性別、現在の喫煙、BMI、併存障害が有意に関連した。多変量線形回帰分析で年齢、性別、BMI、併存障害が歩行速度と関連したが、これらと独立して視力が悪いと開眼片足立ち時間が短かった。結果として視力が悪いと歩行速度測定、開眼片足立ち能力が低下し、転倒のリスクも高くなることがわかった。2.加齢黄斑変性(AMD)におけるアミロイドβの関与AMDの病態にはアミロイドβが関与すると言われている。培養網膜色素上皮(ARPE-19)にアミロイドβ(0 - 25μM)を添加48時間培養し、その影響についてin vitroで検討した。その結果、ARPE-19はアミロイドβが低濃度群(5μM)で増殖していたが、高濃度群(25μM)では減少していた。低濃度群でmRNA、タンパクともにPEDFの増加が認められたが、VEGF-A mRNAは変化しなかった。一方、高濃度群では、VEGF-Aのみが有意に増加していた。PEDF阻害剤添加によって、低濃度群で細胞増殖は抑制され、siRAGE添加で両群のVEGF-A、PEDFの発現変化はなくなった。アミロイドβはその濃度によってRAGEを介して網膜色素上皮からのPEDFやVEGFの発現を変化させ、細胞増殖を制御していると考えられた。1.藤原京EYEスタディに参加した65歳以上の高齢者に視機能関連QOL質問表(NEI VFQ-25)、白内障指摘の有無の問診、視力検査を実施した。両眼のうち矯正視力の良い方を視力とし、NEI VFQ-25の下位尺度、総合スコアと白内障及び視力の関連を検討した。NEI VFQ-25の回答は2804人、白内障群は660人(23.5 %)、白内障術後群は607人(21.7 %)、白内障なし群は1537人(54.8 %)であった。単変量線形回帰分析で白内障群は白内障なし群および白内障術後群に比べて色覚を除く全スコアが有意に低下していた(P < 0.01)。さらに白内障群は白内障術後群と比べて総合スコア、一般的見え方、目の痛み、近見視力による行動、見え方による心の健康・役割機能でスコアの低下を認めた(P < 0.01)。高齢者においては白内障が視力と独立してQOL低下と有意に関連していることがわかった。2.加齢黄斑変性(AMD)におけるCFHとVWF加齢黄斑変性(AMD)に補体H因子(complement Factor H;CFH)の関与が報告されている。CFHは補体のみでなく、止血因子であるvon Willebrand因子(VWF)の機能を制御する。奈良県立医大眼科を受診した滲出型AMD群74例およびコントロール群96例それぞれ、CFH Y402HおよびV62Iの一塩基多型(SNP)を解析しELISA法により血漿VWF値を測定した。V62IのGGで有意にAMD発症頻度が高く、CFH V62IがAMD発症リスクに関与していることを確認した。さらに、血漿VWF値はAMD群で血漿VWF値が有意に高く、全身の血栓傾向の一症状としてAMDが発症している可能性があることがわかった。藤原京EYEスタディ調査の解析が順調である。1.白内障手術と視力大規模疫学調査藤原京スタディ参加を対象に、矯正視力検査、白内障手術既往および対象者背景、全身疾患に関する問診結果との関係を解析した。結果:対象者2826人の平均年齢は76.3±4.9歳、男性1487人(52.6%)、平均視力はlogMAR-0.020±0.14だった。白内障術後群は685人(24.2%)、平均年齢78.8±5.5歳で、白内障手術なし群(75.6±4.5歳)に対して有意に高齢であった。白内障術後群の平均視力はlogMAR-0.026±0.14で、白内障手術なし群に対して視力は有意によく(年齢調整)、脳血管疾患、高血圧、糖尿病の合併が有意に高かった。5歳毎の年齢別にみると、80歳以上では白内障術後群が41.7%で、白内障術後群が白内障手術なし群に対して視力が有意によかった。2.加齢黄斑変性の発症要因糖尿病や喫煙と加齢黄斑変性(AMD)発症との関連を検討するため、in vitroモデルとしてヒト網膜色素上皮(RPE)由来培養細胞に最終糖化産物(AGE)とヒドロキノン(HQ)を添加し影響を検討した。

HQ単独添加では生存細胞数の減少を認めた(P<0.0001)がHQとAGEの併用群ではHQ単独と比べ生存細胞が多かった(P=0.0018)。HQ添加群ではコントロールと比べてアポトーシスが亢進していた。VEGFとそのmRNA量を測定すると、AGE併用群ではHQ単独群と比べVEGF・VEGF mRNAのいずれも増加していた。HQで傷害を受けたRPE細胞はアポトーシスにより死に至り、萎縮型変化を起こすと考えられた。一方、糖尿病や加齢でAGEが蓄積・作用するとAGE-RAGE系シグナルを介してVEGFが発現し、RPE細胞の増殖と新生血管誘導に寄与することで滲出型変化を引き起こすと考えられた。藤原京EYEスタディ調査の解析が順調である。実験研究の進行が順調である。1.藤原京スタディにおいて白内障手術が認知症に及ぼす影響参加者2764名(平均年齢76.3歳)を対象として、白内障手術既往群668名と非手術群2096名の2群間の認知機能(Mini-Mental State Examination)を評価した。視力を含む交絡因子を調整した多変量ロジスティック回帰分析で白内障手術群は非手術群と比較して軽度認知機能障害(mild cognitive impairment)が有意に少なかった(OR = 0.79, 95% CI 0.64, 0.97)が、認知症とは有意な関連を認めなかった。視力と独立して白内障手術が軽度認知機能障害と関連することが明らかとなった。白内障手術後は、眼内に入る光量、つまり概日リズムに司るブルーライトの光量が増加し、白内障で障害されていた概日リズムが改善し、軽度認知機能障害の防止につながると推測された。止血因子であるvon Willebrand因子(VWF)はマルチマー構造を形成する高分子量の糖蛋白質である。主に血管内皮細胞により産生され、血漿中に分泌される。未治療の滲出型AMD群114例(男性82例、女性32例、平均年齢77歳)と年齢をmatchさせたコントロール群105例。両群において血漿VWF抗原量測定、VWFマルチマー解析を行った。血漿VWF抗原量はAMD群164(120 - 215)%、コントロール群128(108 - 165)%とAMD群で有意に上昇していた(p<0.001)。VWFマルチマー解析では、コントロール群でのUL-VWFM検出例は認めなかったが、AMD群で31例にUL-VWFMを検出した。滲出型AMDの病態にVWFが関与しており、UL-VWFMの存在がAMDの進展、重症化に関わっていることが予想された。藤原京EYEスタディ調査の解析が進んでいる。実験研究が進行している。1.高齢者の視機能がQOLに及ぼす影響高齢者が健康を維持しquality of life (QOL)を保つには運動能力が重要である。眼科検診藤原京EYEスタディにおいて歩行速度測定、開眼片足立ち能力測定を実施できた約2800人を検討した。10m歩行速度において単変量解析で視力、年齢、性別、現在の喫煙、併存障害が有意に関連した。多変量線形回帰分析で年齢、性別、BMI、併存障害は歩行速度と関連があったが、これらと独立して視力が悪いと歩行速度が遅いという結果であった。開眼片足立ち能力は、単変量解析で視力、年齢、性別、現在の喫煙、BMI、併存障害が有意に関連した。多変量線形回帰分析で年齢、性別、BMI、併存障害が歩行速度と関連したが、これらと独立して視力が悪いと開眼片足立ち時間が短かった。結果として視力が悪いと歩行速度測定、開眼片足立ち能力が低下し、転倒のリスクも高くなることがわかった。2.加齢黄斑変性(AMD)におけるアミロイドβの関与AMDの病態にはアミロイドβが関与すると言われている。
レジン担持アロキサジン型フラビン触媒の開発

本研究は、独自に開発した安全・安価・簡便なカチオン性フラビン触媒調製法で各種レジン担持アロキサジン型フラビン触媒を合成し、酸化触媒としての有用性・実用性を明らかにすることを目的としている。具体的には、1酸素酸化生成法及びレジン担持精製法によるレジン担持アロキサジン型フラビン触媒All+・resin-合成法の確立、2All+・resin-を用いるメタルフリー触媒的酸化反応の開発と効率的な触媒再利用性の実証、3All+・resin-を用いるフロー系で反応系での酸化反応の開発を目標とし、All+・resin-の実用化を目指す。1レジン担持イソアロキサジン型フラビン触媒i-All+・resin-の合成法の研究で得られた知見に基づき、中性フラビンのN5位の還元的アルキル化法、酸素酸化法、レジン担持精製法を各種置換基を有するアロキサジンに適用し、All+・resin-の一般的合成法として利用可能であることを明らかにした。特に、高い触媒活性が期待されながら従来法ではその不安定性から合成が困難であった電子吸引性置換基を有するアロキサジン型フラビン触媒を簡便で効率的に合成することができた。23All・resin-の触媒作用を検討し、スルフィドの過酸化水素酸化反応、シクロブタノンの過酸化水素Baeyer-Villiger酸化反応が効率よく進行することを明らかにした。回収再利用については検討が必要であるが、これらの反応ではAll+が反応終了後もレジン上に担持されていることを確認している。当初の計画には含まれていないが、i-All+・resin-合成法の検討から、安定で取り扱いの容易な4a-ヒドロキシ置換イソアロキサジン触媒i-All-4a-OHの一般的で簡便な合成法を開発した。また、i-All-4a-OHの触媒活性を詳細に検討し、i-All+・resin-と同等の活性を持つことを実証した。アロキサジン骨格上に各種置換基を有するレジン担持アロキサジン型フラビン触媒の合成を達成する【1】とともに、合成したレジン担持型アロキサジン型フラビン触媒の高い触媒活性【2】を確認している。All+・resin-の回収再利用は達成していないが、再利用の可能性を示す知見を得ており、当初の計画に対しておおむね順調に進展していると判断した。All+・resin-の回収再利用の検討およびフロー反応への展開【3】については次年度以降の検討課題とする。当初の計画にはなかった、4a-ヒドロキシ置換イソアロキサジン触媒i-All-4a-OHの一般的で簡便な合成法を開発しており、各種置換基を有するi-All-4a-OHの合成、電子状態と触媒活性の相関および新規触媒反応の開発については次年度以降引き続き検討する。1All+・resin-の合成法を確立し、その触媒活性についても実証することができた。次年度以降はこれまでに合成を達成したAll+・resin-に加えて、高い触媒活性が期待できる多様な置換基を導入したAll+・resin-を設計・合成し、All+・resin-ならではの新規酸化触媒反応の開発へと展開する。2本年度の研究では達成できなかったAll+・resin-の回収再利用に関して次年度以降も検討する。必要に応じて、アロキサジン骨格上に置換基を導入し、新規All+・resin-を設計・合成する。本年度の研究でその一般的合成法を確立したi-All-4a-OHについて、イソアロキサジン環上に各種置換基を有するi-All-4a-OHを設計・合成し、電子状態と触媒活性の相関および新規触媒反応の開発について、次年度以降引き続き検討する。3フロー反応系での酸化反応の開発を達成目標とし、フラビン触媒をレジン上に強固に担持したi-All+・resin-およびAll+・resin-を合成し、その触媒活性を評価する。当初の計画には含まれていないが、i-All+・resin-合成法の検討から、安定で取り扱いの容易な4a-

ヒドロキシ置換イソアロキサジン触媒i-All-4a-OHの一般的で簡便な合成法を開発した。また、i-All-4a-OHの触媒活性を詳細に検討し、i-All+・resin-と同等の活性を持つことを実証した。アロキサジン骨格上に各種置換基を有するレジン担持アロキサジン型フラビン触媒の合成を達成する【1】とともに、合成したレジン担持型アロキサジン型フラビン触媒の高い触媒活性【2】を確認している。All+・resin-の回収再利用は達成していないが、再利用の可能性を示す知見を得ており、当初の計画に対しておおむね順調に進展していると判断した。All+・resin-の回収再利用の検討およびフロー反応への展開【3】については次年度以降の検討課題とする。当初の計画にはなかった、4a-ヒドロキシ置換イソアロキサジン触媒i-All-4a-OHの一般的で簡便な合成法を開発しており、各種置換基を有するi-All-4a-OHの合成、電子状態と触媒活性の相関および新規触媒反応の開発については次年度以降引き続き検討する。1All+・resin-の合成法を確立し、その触媒活性についても実証することができた。次年度以降はこれまでに合成を達成したAll+・resin-に加えて、高い触媒活性が期待できる多様な置換基を導入したAll+・resin-を設計・合成し、All+・resin-ならではの新規酸化触媒反応の開発へと展開する。2本年度の研究では達成できなかったAll+・resin-の回収再利用に関して次年度以降も検討する。必要に応じて、アロキサジン骨格上に置換基を導入し、新規All+・resin-を設計・合成する。本年度の研究でその一般的合成法を確立したi-All-4a-OHについて、イソアロキサジン環上に各種置換基を有するi-All-4a-OHを設計・合成し、電子状態と触媒活性の相関および新規触媒反応の開発について、次年度以降引き続き検討する。3フロー反応系での酸化反応の開発を達成目標とし、フラビン触媒をレジン上に強固に担持したi-All+・resin-およびAll+・resin-を合成し、その触媒活性を評価する。理由:3月中旬に実施した研究成果発表の旅費精算手続きが完了していないため。使用計画:旅費の支払いが4月に完了する予定である。
各国社会における生涯スポーツの研究

本研究では、「生涯スポーツ」を「いつでも、だれでも、どこでもスポーツを」という標語が表現する理念であり、エリートだけでなくすべての国民が生涯にわたってスポーツを行うというあり方をさすものとして理解した。各国社会におけるそれの分析指標を、(1)歴史的経緯、(2)振興計画、(3)法律、(4)行政機構、(5)組織(クラブ数、団体数、クラブ人員数等)、(6)施設、(7)財政、に置いて、データを分析した。第1.ドイツでは商業スポーツ施設の増加により既存クラブとの間の競合が起こり、会員の争奪、経営上の対抗状態が生じていることが認められた。また旧東ドイツ地区の経済格差が大きく、日常的なスポーツ活動の条件をもつ住民が限定され、競技スポーツ優先の歪みの残存が確認できた。フランスでは南仏リゾート地区の新たな商業スポーツの拠点化と、大都市近郊での自然と人工的施設のスポーツコンプレックスの計画が明らかにされた。これは日帰り型のレジャー、レクリエーション施設であり、生活時間構造の変化が生涯スポーツのあり方にも反映していることが見出された。イギリスのレジャー・スポーツ政策をスポーツ組織、行政、商業資本の三者の関係に注目して分析した結果、経済政策の転換とともに福祉から営利への転換が認められた。第2.各国社会に共通する問題としてテレビジョンの影響の実証研究によって、生涯スポーツにおける「みるスポーツ」の変遷と今後のあり方に新たな素材を得ることができた。また、「スポーツ・フォア・オール運動」の批判的研究として1930年代ヨーロッパの人民スポーツの研究が進み、生涯スポーツ理念の歴史的経緯を明らかにした。さらに、生涯スポーツにつながる大学体育についての学生意識調査から現代学生のニーズに応えるスポーツ教育の課題を明らかにした。今後なお現代のスポーツ状況の変化の歴史的社会的分析が求められる。研究の初年度である本年度は、まず、分析対象、分析視角、手順等を明確にしていく作業がなされた。すなわち、各国の「生涯スポーツ」の現状につき、研究分担者からの報告をもとに討論を重ね、これらのことを確定していった。「生涯スポーツ」というタームについては、「いつでも、だれでも、どこでもスポーツを」という標語が表現する理念であり、エリートだけでなく、すべての国民が、生涯に渡ってスポーツを行うというありかたをさすものとして共通理解に達した。また、分析の指標としては、「生涯スポーツ」の(1)歴史的経過、(2)振興計画、(3)法律(4)行政機構、(5)組織(クラブ数、団体数、クラブ人員数等)(6)施設、(7)財政の七点が確認された。これらの資料・文献は、(1)すでに入手されているもの、(2)学内で入手可能なもの、(3)国内で入手可能なもの、(4)国外で入手可能なものに分類し、パソコンに入力することとした。本年度は七つの分析指標のうち、組織(クラブ数、団体数、クラブ人員数等)、施設、財政の三つの指標につき、集中的な資料・文献の収集をおこなった。まだ断定的なことはいえないが、明らかになっている事実の一つは、これら三つの指標については、とりわけ先進諸国では、70年代以降の変化が著しいことである。こうした国による発展の実体を多面的に明らかにし、それがいかなる歴史的・社会的条件によるものであるかを、次年度から解明していきたい。本年度は、八回の研究会と春・秋二回の研究合宿を行い、報告と討論をおこない、各国についての「生涯スポーツ」にかかわる認識を深めてきたが、その課程で、対象、視角、手順等の確定だけでなく、各国の発展状況、その構造などが、多角的に解明された。その一端は『研究年報』等の個別論文としてまとめられ報告されている。平成5年度は、各国の生涯スポーツの現状分析に必要な指標を設定し、それにもとづいて資料、文献収集を行うことが主要な課題であった。

その結果、とくにドイツ、フランスについて新しい資料の収集および研究が進み、データベースに情報を入力することができた。ドイツについては、かねてよりクラブ制度を基盤にした大衆スポーツの発展が特徴とされていたが、1)近年の商業スポーツ施設の増加により、既存クラブとのあいだで競合が起こり、会員の争奪、経営上の対抗状態が生じていることが認められた。ドイツスポーツ連盟当局は、当初スポーツ種目による両者の「棲み分け」が可能であるとしていたが、特定のスポーツ種目では明らかに利害関係が拮抗している。また、2)旧東ドイツ地区の経済格差が大きく、特定の競技スポーツ選手をのぞき、日常的にスポーツ活動ができる条件にある住民が限定されることが判明した。行政機構、スポーツ組織の整備においても同地区の遅れは顕著であり、競技スポーツ優先の歪みが残されている。フランスについては、1)南フランスの地中海沿岸におけるリゾート地区が新たな商業スポーツの拠点となり、大規模な設備投資が行われようとしている。こうした動向の背景として、不況による失業者の増大、公共投資、労働時間短縮などの諸要因があることが推定された。2)大都市近郊において森林などの自然と人工的施設を組み合わせた複合的なスポーツコンプレックスが計画されている。それは、ヴァカンスなどの長期休暇向けではなく、日帰り型のレジャー、レクリエーション施設であり、生活時間構造の変化が生涯スポーツのあり方にも反映していることが考察された。研究はこれら2国について進行が突出しているが、その他の国、地域の分析においても、とくにスポーツ組織、行政、商業資本との3者の関係に注目しながら実態分析をする必要があることが確認された。最終年度にあたる本年度は、過去2年間の研究を踏まえ、研究分担者全員による論稿を収録した単行本の出版作業が進められ、5月には刊行される予定である。この作業の中で本研究のキーワードの「生涯スポーツ」を、新たに検討対象とした「スポーツ・フォア・オール」概念とその実体分析から改めて捉え直すことができた。前年度のドイツ、フランスに続いて、本年度はイギリス、アメリカについて新しい資料の収集とスポーツ組織、行政、商業資本の三者の関係に注目しての実態分析が進んだ。イギリスについては、福祉から営利へのスポーツ政策の転換と、ボランタリー、プライベート、パブリックの三者の構造とイニシアティヴが明らかになり、アメリカについては1920年代のレクレーション運動の研究資料が収集され、この国の生涯スポーツ問題の研究の基盤が形成された。しかし、この中で特に注目すべき現象として各国社会のスポーツ問題に共通するテレビジョンの生涯スポーツへの影響の分析が求められ、その研究が日米比較の下に展開された。また、ヨーロッパの生涯スポーツの歴史的背景を解明する上で必要で、しかし従来未解明であった「人民スポーツ」の史的研究も進められた。その一方で、生涯スポーツにつながる大学体育についての学生の意識調査を試み、そこからわが国の課題に応えるスポーツ教育像も明らかになった。