hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
悪性リンパ腫の微量病変の検出

悪性リンパ腫における,骨髄・末梢血への微量病変の浸潤を,分子生物学的手法を用いて高感度に(検出する目的で研究を行った.17例のB細胞系非ホジキンリンパ腫について行った.リンパ節生検材料から,genomic DNAを抽出し,免疫グロブリン重鎖遺伝子(immunoglobulin heavy chain:IgH)のgene rearrangementの検出をPCRにて行った.17例中,11例でrearrangement bandが検出された.得られたrearrangement bandをポリアクリルアミドゲルにて分画,精製し、T-vectorにライゲーションし,シークエンスを行った.これをもとに,各症例毎に,リンパ腫細胞DNAに特異的なPCRプライマーと非RIプローブを作成した.微量病変の検出を目的とした検体(骨髄穿刺液,末梢血など)からDNAを抽出した.各症例に特異的なプライマーを用いてPCRを行い,腫瘍細胞特異的DNAの増幅を行った.さらに非RIプローブを用てサザン・プロット解析を行い,検体中の腫瘍細胞特異的DNAの検出を行った.11例中9例で微量病変が骨髄,末梢血中で検出された.これらは全例で,従来の光顕レベルではリンパ腫細胞の検出が不可能であった.これにより臨床的病期診断がIV期に変更されると考えられた症例は6例であった.(他3例は画像診断などで臨床病期がはじめからIV期と診断されていた.)このことから悪性リンパ腫における微量病変のDNA診断が,臨床的に有用であると思われる.今後症例を増やして,予後との関連などをさらに追求して行く予定である.また,得られたDNAプローブを用いたin situ hybridezation(ISH)によるsingle cellレベルでの検出は,現在,検出条件を検討中である.悪性リンパ腫における,骨髄・末梢血への微量病変の浸潤を,分子生物学的手法を用いて高感度に(検出する目的で研究を行った.17例のB細胞系非ホジキンリンパ腫について行った.リンパ節生検材料から,genomic DNAを抽出し,免疫グロブリン重鎖遺伝子(immunoglobulin heavy chain:IgH)のgene rearrangementの検出をPCRにて行った.17例中,11例でrearrangement bandが検出された.得られたrearrangement bandをポリアクリルアミドゲルにて分画,精製し、T-vectorにライゲーションし,シークエンスを行った.これをもとに,各症例毎に,リンパ腫細胞DNAに特異的なPCRプライマーと非RIプローブを作成した.微量病変の検出を目的とした検体(骨髄穿刺液,末梢血など)からDNAを抽出した.各症例に特異的なプライマーを用いてPCRを行い,腫瘍細胞特異的DNAの増幅を行った.さらに非RIプローブを用てサザン・プロット解析を行い,検体中の腫瘍細胞特異的DNAの検出を行った.11例中9例で微量病変が骨髄,末梢血中で検出された.これらは全例で,従来の光顕レベルではリンパ腫細胞の検出が不可能であった.これにより臨床的病期診断がIV期に変更されると考えられた症例は6例であった.(他3例は画像診断などで臨床病期がはじめからIV期と診断されていた.)このことから悪性リンパ腫における微量病変のDNA診断が,臨床的に有用であると思われる.今後症例を増やして,予後との関連などをさらに追求して行く予定である.また,得られたDNAプローブを用いたin situ hybridezation(ISH)によるsingle cellレベルでの検出は,現在,検出条件を検討中である.
眼間抑制によって生じる弱視症状

弱視患者の輝度コントラスト検出閾を3つの異なる刺激呈示条件の間で比較した。一方の眼を遮蔽した状態での単眼呈示では、左右の眼の間に大きな閾値差は見られなかった。遮蔽なしの単眼呈示では、刺激呈示領域の枠線は両眼に見えていたが、刺激は一方の眼からしか見えなかった。この観察条件では、弱視眼において若干の閾値上昇があった。左右の眼に異なる刺激が呈示される両眼分離呈示条件では、弱視眼でも検出が可能なグループと不可能なグループの2つに大別できた。これは弱視症状の重さを反映していると考えられるが、グループ間の病歴の違いを分析することで弱視のメカニズムについての示唆を得ることができるだろう。交付1年目となる平成24年度においては、新たな所属における実験環境の整備に多くの時間が割かれた。具体的には、刺激呈示装置の設置、実験プログラミング、インフォームドコンセント同意書の作製等である。また、研究計画と同意書を学内の倫理審査委員会に提出し、審査のうえ承認を受けた。弱視患者2名を対象とした予備実験も行い、その結果を日本心理学会第76回大会で発表した。さらに、これまでの研究を2編の論文としてまとめ、国際学術論文誌において公表した。予備実験においては両眼及び単眼使用時における弱視眼と固視眼の輝度コントラスト検出閾を計測し、両眼を使ったときに弱視眼の機能が著しく低下する弱視患者の特徴についての検討を行った。遮蔽あり単眼呈示条件の場合、いずれの弱視患者においても弱視眼と固視眼との間に閾値の差はほとんどなかった。このことは、弱視眼における輝度コントラスト感度の低下は両眼使用時にのみ生じることを示唆している。遮蔽なし単眼呈示条件では、固視眼よりも弱視眼の方が閾値は高かった。この閾値上昇は弱視患者の間で大きな差はなかった。両眼分離呈示条件においては、2名の弱視患者は異なる結果を示した。斜視弱視の場合、弱視眼における閾値上昇は遮蔽なし単眼呈示条件と大きく変わらなかった。複合障害弱視の場合、弱視眼ではターゲットを検出することができなかった。また、単眼呈示条件と比較すると、複合障害弱視患者の固視眼の閾値は若干高くなっていた。一方、斜視弱視では、固視眼の閾値は3条件間で大きな差はなかった。これらの結果は、固視眼と弱視眼との間で網膜像に不一致があり、固視眼においてのみ刺激されている視野があるときに、弱視症状の個人差が大きくなることを示唆している。弱視患者の輝度コントラスト検出閾を異なる刺激呈示条件の間で比較した。刺激呈示条件には1一方の眼を遮蔽した状態での単眼呈示、2両眼を開けた状態での単眼呈示、3両眼分離呈示の3条件があった。一方の眼を遮蔽した状態での単眼呈示においては、左右の眼の間には大きな閾値差は見られなかった。単眼のみが刺激された状態では、弱視眼でも健眼と同様に輝度コントラストを検出できたといえる。このことは、弱視症状を検討する際には、片眼遮蔽の状態ではなく両眼開眼した状態でのテストが望ましいことを示唆している。両眼を開けた状態での単眼呈示では、刺激呈示眼でない方の眼にも呈示領域の枠線などは見えていた。こうした状況では、多くの実験参加者に共通して若干の閾値上昇が見られた。両眼分離呈示(左右の眼に異なる刺激が呈示される)条件における閾値データは、弱視眼においても刺激の検出が可能なグループと、弱視眼では検出が不可能なグループの2つに大別できた。これは弱視症状の重さを反映していると考えられる。どのような原因が2つのグループの閾値差を生じさせているかを分析することで、弱視のメカニズムについての示唆を得ることができるだろう。弱視研究を行うにあたっては、眼科医との連携は不可欠である。上記の研究の実施と並行して、他大学との共同研究関係の確立も行った。国内では川崎医科大学、海外ではUniversity of Waterloo (カナダ)と、本事業終了後も共同して弱視研究を実施していくことで合意した。当初の計画通り、実験装置を設置し、実験プログラミングを行い、インフォームドコンセント同意書の作成及び審査、実験参加者の募集とを行った。新たな所属における研究環境の整備は完了したといえる。予備実験も行い。研究はおおむね順調に進展している。

しかし、弱視研究の本格的な実施に臨んで、実験参加者となる弱視患者の確保は十分であるとはいえない。25年度が最終年度であるため、記入しない。十分な人数の実験参加者を確保するにあたっては、研究協力者となる眼科医を探す必要があるだろう。日本弱視斜視学会総会で開催されるシンポジウムにおいて講演を行う予定があり、この機会を眼科医との共同研究へとつなげたい。また、十分な実験参加者が国内でみつからなかった場合の対策として、海外の研究者との共同研究を進める予定である。そのため、8月から9月にかけてニュージーランドのオークランド大学に滞在する。上記と並行して、計画した実験を神奈川大学において実施していく。
メニエール病患者の内耳の内リンパ水腫の存在範囲を評価する検査法の開発

本研究課題ではメニエール病モデルマウスの蝸牛、球形嚢、卵形嚢、三半規管の機能を評価し、内リンパ水腫の存在範囲との相関を検討することにより、これらの機能評価から内リンパ水腫の存在範囲が評価できる検査法を開発し、その検査法にてメニエール病患者の内リンパ水腫の存在部位を推定し、内耳造影MRIの結果との比較によりその妥当性を検討し、新たなメニエール病の病期分類につながる内リンパ水腫の存在範囲の診断法を開発することを目的としている。病期分類は治療決定や予後推測につながる必要がある。メニエール病には内リンパ嚢開放術という手術法が存在し、内リンパ嚢開放術により、メニエール病における内耳内リンパ水腫が改善し、めまいや難聴が改善する。我々は内リンパ嚢開放術を施行し、術後2年経過した症例の術前、術後の内耳造影MRIの結果を検討し、術側の内リンパ水腫は軽減しているが、非術側は不変であることをAuris Nasus Larynx誌に論文として発表した。健康成人にて球形嚢を刺激した時の眼球運動を記録、解析することにより、球形嚢の機能が評価できることを確認し、Neuroscience Research誌に論文として発表した。マウスの半規管機能検査装置をすでに開発しているが、今回、球形嚢、卵形嚢の機能検査装置を完成させ、現在、データを採取している。これらの新しいマウスの平衡機能検査装置の概要を2018年の第77回日本めまい平衡医学会総会・学術講演会のシンポジウム「基礎研究の将来展望」にて発表した。この内容はEquilibrium Research誌に総説として発表する予定である。平成29年度、30年度でメニエール病患者のデータを取得すると計画していたが、すでに21名のメニエール病患者のデータの取得を終え、Auris Nasus Larynx誌に論文として発表した。この点に関しては当初の計画以上に進展している。しかし、マウスの耳石動眼反射のデータ取得をすでに行っているが、当初、単眼記録でよいと考えていたが、両眼撮影が必要であることが判明したので、両眼での記録、撮影をやり直しており、これに関しては予定通りには進んでいない。平成31年度はメニエール病患者のデータ取得のためのエフォートをマウスの耳石動眼反射のデータ取得に使えると考えている。マウスの耳石動眼反射のデータ採取を第一優先に進める。耳石動眼反射に関しては、直線加速度刺激だけではなく、向心力や重力加速度に対する反応も調べる予定である。マウスの半規管動眼反射のデータ取得のシステムは、現在、マニュアル操作部分をすでに全自動化できるようにシステムの改良を行ったので、今後はデータ取得の能率が上がると考えられる。メニエール病には内リンパ嚢開放術という手術法が存在し、内リンパ嚢開放術により、メニエール病における内耳内リンパ水腫が改善し、めまいや難聴が改善すると考えられている。我々は内リンパ嚢開放術を施行し、術後2年経過した症例の術前、術後の内耳造影MRIの結果から内リンパ水腫の改善の度合いを評価し、これとめまい発作、難聴、蝸電図検査データとの相関を検討することにより、内リンパ水腫の改善の度合いから予後推測が可能かどうかを当該年度の2017年度に検討した。この結果を2017年の第27回日本耳科学会総会にて発表した。また、我々はすでに偏中心回転検査を用いて卵形嚢の機能評価が可能であることをすでに報告しているが、2017年度に、健康成人にて球形嚢を刺激した時の眼球運動を記録し、解析することにより、球形嚢の機能が評価できることを確認した。このデータに関する演題が2018年6月に開催される国際めまい平衡学会であるバラニー学会に採用されており、発表予定である。これら2つのデータは論文として発表する予定である。平成29年度、30年度でメニエール病患者のデータを取得する予定であったが、すでに21名のメニエール病患者のデータの取得を終え、この点に関しては当初の計画以上に進展している。しかし、マウスの耳石動眼反射のデータ取得が予定通りには進んでいない。平成30年度はメニエール病患者のデータ取得のためのエフォートをマウスの耳石動眼反射のデータ取得に使えると考えている。

メニエール病には内リンパ嚢開放術という手術法が存在し、内リンパ嚢開放術により、メニエール病における内耳内リンパ水腫が改善し、めまいや難聴が改善する。我々は内リンパ嚢開放術を施行し、術後2年経過した症例の術前、術後の内耳造影MRIの結果を検討し、術側の内リンパ水腫は軽減しているが、非術側は不変であることをAuris Nasus Larynx誌に論文として発表した。健康成人にて球形嚢を刺激した時の眼球運動を記録、解析することにより、球形嚢の機能が評価できることを確認し、Neuroscience Research誌に論文として発表した。マウスの半規管機能検査装置をすでに開発しているが、今回、球形嚢、卵形嚢の機能検査装置を完成させ、現在、データを採取している。これらの新しいマウスの平衡機能検査装置の概要を2018年の第77回日本めまい平衡医学会総会・学術講演会のシンポジウム「基礎研究の将来展望」にて発表した。この内容はEquilibrium Research誌に総説として発表する予定である。平成29年度、30年度でメニエール病患者のデータを取得すると計画していたが、すでに21名のメニエール病患者のデータの取得を終え、Auris Nasus Larynx誌に論文として発表した。この点に関しては当初の計画以上に進展している。しかし、マウスの耳石動眼反射のデータ取得をすでに行っているが、当初、単眼記録でよいと考えていたが、両眼撮影が必要であることが判明したので、両眼での記録、撮影をやり直しており、これに関しては予定通りには進んでいない。平成31年度はメニエール病患者のデータ取得のためのエフォートをマウスの耳石動眼反射のデータ取得に使えると考えている。マウスの耳石動眼反射のデータ採取を第一優先に進める。マウスの半規管動眼反射のデータ取得のシステムは、現在、マニュアル操作部分が存在するので、全自動化できるようにシステムの改良を行う。全自動化できればデータ取得が容易にできるので、データ取得の能率が上がると考えられる。耳石動眼反射に関しては、直線加速度刺激だけではなく、向心力や重力加速度に対する反応も調べる予定である。マウスの半規管動眼反射のデータ取得のシステムは、現在、マニュアル操作部分をすでに全自動化できるようにシステムの改良を行ったので、今後はデータ取得の能率が上がると考えられる。メニエール病モデルマウスの内耳標本での内リンパ水腫の程度と機能検査との相関を調べる研究を継続するため。
ナノ秩序化ポリマーブレンドを前駆体とする機能性多孔質材料の創製と応用

本研究では、ナノ秩序化された相分離構造を持つポリマーブレンドを前駆体に用いてナノ多孔質材料を創造することを試みた。ポリマーブレンドに末端官能化ポリマーを少なくとも1成分として用いることで、ナノサイズの相分離構造を形成するポリマーブレンド(ナノ相分離ポリマーブレンド)が得られることを見出した。このようなポリマーブレンドを前駆体として多孔質材料を調製したところ、前駆体の相構造を維持した多孔質材料が得られることが分かった。本研究の目的は、ナノ秩序化された相分離構造を持つポリマーブレンドを前駆体に用いてナノ多孔質材料を創造することおよびそれを有用な機能性材料へと変換することである。本年度は、以下の項目について研究を行った。1)前駆体であるナノ秩序化ポリマーブレンドの創出およびそのための高分子化合物の精密合成2)大型放射光施設SPring-8における小角X線散乱実験(SAXS)を利用したポリマーブレンドのナノ空間構造の精密解析技術の確立1)については、制御ラジカル重合法を用いることにより分子鎖の任意の位置に極性基をもつ高分子化合物の合成に成功した。さらに、得られた高分子のブレンド物は、極性基の位置を反映したナノ秩序化相分離構造が形成することを見出した。このナノ秩序構造は、極性基や高分子主鎖の化学構造、分子量、成分高分子間の偏析力を調節することにより任意に制御できた。ブロック共重合体やグラフト共重合体とポリマーブレンドの特徴を組み合わせた相転移を示すことを見出した。また、共重合体としての特徴とブレンドとしての特徴が競合する領域では、特異的な相転移現象が観察された。ブロック共重合体やグラフト共重合体に見られる特徴とポリマーブレンドの特徴を組み合わせた相転移を示すことを見出した。2)については、測定データのS/N比を向上させるためのサンプルの雰囲気制御を行い、従来の測定結果と比較して格段に制度の高い実験結果を得ることに成功した。今年度は、前年度に確立した試料調整法、構造解析法を活用し、ナノ秩序化ポリマーブレンドの相分離構造制御および相構造の精密解析を試みた。分子鎖末端間の相互作用の強さの相構造への影響を調べるために、プロトンドナー種の構造を種々変化させ、相構造との相関を検討した。官能基を一つ持つ場合には、-SO3Hが最も高秩序な相分離構造を形成することが分かり、-COOHでは乱れが極めて多きことを見出した。さらに、官能基数を変化せせることにより、構造の秩序性を調節できることが確認された。また、これらを利用し、多孔質材料への変換を溶媒抽出法にて行った。今年度はpH応答性フィルムの調製を行い、極めて速いpH応答速度を持つフィルムを得ることに成功した。精密構造解析に関しては、SPring-8のSAXS測定においてS/N比を向上させるための真空試料セルの作成を行い、理論解析においては、回帰分析の精度向上を試みた。前者に関しては大きな改善が見られたが、後者に関しては、変数が極めて多いため、飛躍的な向上は確認できなかった。前年度までの研究成果から、多孔性フィルムの前駆体となるブロック共重合体のミクロ相分離構造の形状、配向には、分子仕様のみならず選択溶媒中におけるブロック共重合体の集合構造および製膜後の溶媒雰囲気下でのアニーリングが強く影響することが分かった。そこで、本年度は、選択溶媒中におけるブロック共重合体の集合状態を製膜後の相分離構造の形態との関係および製膜後の溶媒アニーリングが与える相分離構造の配向への影響について検討を行った。その結果、選択溶媒中での集合構造の特徴が溶媒キャスト製膜により維持されることを見出した。また、製膜したブロック共重合体を選択溶媒雰囲気下でアニールすることによりミクロ相分離構造の配向度が向上することを見出した。また、前年度に引き続き、精密構造解析に関しては、SPring-8のSAXS測定においてS/N比を向上させるための真空試料セルの作成を行い、理論解析においては、回帰分析の精度向上を試みた。前者については、真空セルと光学系を改良することにより、精度の向上が得られた。後者に関しては、飛躍的な改良ができなかったため、解析精度の向上を目指し、新しい構造解析法として小角X線異常散乱法にも着手した。この手法を導入することにより、選択溶媒中における両親媒性ブロック共重合体の集合構造を精密に解析する手法の確立に成功した。
直接発生ウニ小割球特異化遺伝子ネットワークの進化

ウニ類において間接発生が祖先的であり、直接発生は複数の系譜で独立に進化したと考えられている。直接発生への進化をもたらした発生メカニズムの変更を明らかにするため、発生様式のことなるタコノマクラ目の2種における小割球特異化遺伝子の発現パターンを比較した。初期胚での発現パターンはほぼ保存されていたが、中期胞胚以降、直接発生種においてのみdelta/hesC非発現領域が出現した。この領域から成体の体腔を形成する間充織が移入するので、この直接発生特異的発現が成体構造の形成を促進する発生メカニズム変更点かもしれない。不正形類に属する間接発生種ハスノハカシパンからホンウニ小割球特異化遺伝子micro1,hesC,delta,alx,etsを単離し、構造を決定した。当初micro1の単離は困難であると予想されていたが、いずれのウニからもPCRクローニングに成功し、その配列の多様性からホンウニmicro1と同様に多型をふくむマルチコピー遺伝子であることが示唆された。ハスノハカシパンの上記5種の発現をWMISH法によって解析し、バフンウニ胚での発現と比較することによって以下の結果をえた。(1)2億年前に分岐した間接発生種の間で小割球特異化遺伝子の発現パターンはほぼ保存されていた。(2)micro1発現はいずれの種も小割球子孫で活性化されるが、60-120細胞期にバフンウニでは小小割球子孫で発現が続くのに対してハスノハカシパンでは大小割球子孫に限定された。(3)逆にhesCの発現は60-120細胞期から小割球子孫で抑制されるが、ハスノハカシパンでは小小割球子孫の一部にhesC発現細胞が観察された。(4)一方deltaは60-120細胞期から小割球子孫で活性化されるが、ハスノハカシパンでは大小割球子孫の限定されるようにみえた。これらの観察は、いずれの種においてもdeltaがmicro1とHesCの二重抑制によって小割球子孫で活性化されることを示すとともに、バフンウニ小小割球に誘導能があるのに対してハスノハカシパン小小割球にはないことを分子的に示唆した。次に直接発生種ヨツアナカシパンにおける小割球特異化遺伝子の発現パターンをWMISH法によって解析し、間接発生種と異なる点を見いだした。(1)ヨツアナカシパンmicro1は32細胞期から小割球子孫で活性化された。(2)胞胚期にdelta発現が予定PMC領域で抑制された。この抑制と小割球に誘導能がないことの関係を検討する予定である。ウニ類の発生様式は間接発生と直接発生の2つに大別される。間接発生種は摂餌するプルテウス幼生をへて数週間かけて変態するのにたいして、直接発生種は卵黄に富んだ大型の卵から摂餌することなく数日で変態する。ウニ類の祖先的な発生様式は間接発生であり、直接発生は複数の系譜で独立に進化したと考えられている。直接発生の進化をもたらした発生メカニズムの変更を明らかにすることを目的として、直接発生種ヨツアナカシパンからmicrol,hesC,delta単離し、それらの発現をWMISH法によって解析した。その発現パターンを同じタコノマクラ目に属する間接発生種ハスノバカシパンの発現パターンと比較することによって、以下の違いをみいだした。(1)microl発現はいずれの種も小割球子孫に限定されるが、ヨツアナカシパン胚での発現開始は64細胞期で、ハスノバカシパン胚(16細胞期)よりも遅かった。この遅れはヨツアナカシパン胚でのwnt8発現の遅れ(Nakata and Minokawa,2009)と対応している。(2)いずれの種においても、発生とともにhesC発現の消失が小割球から大割球子孫細胞へと拡大するが、ヨツアナカシパンの方がより動物極に広がった。(3)いずれの種においても初期胞胚までdelta発現とhesC発現領域は相補的であるが、中期胞胚以降、ヨツアナカシパン胚でのみ両遺伝子発現領域の間にいずれも発現しない領域が現れた。これはヨツアナカシパン胚でのより大きなhesC非発現領域と矛盾しない。(4)このdelta/hesC非発現領域は間充織として移入した。ヨツアナカシパン胚では成体構造(体腔)形成のため間接発生種よりも多量の間充織が移入する(Amemiya and Arakawa, 1996)。このヨツアナカシパシ特異的なdelta/hesC非発現領域は直接発生の進化を説明する変更点であるかもしれない。

ウニ類の祖先的な発生様式は間接発生であり、直接発生は複数の系譜で独立に進化したと考えられている。直接発生の進化をもたらした発生メカニズムの変更を明らかにするため、これまで不明であった直接発生種ヨツアナカシパンの体腔形成過程を幼生の連続切片から三次元像を再構築することに解よって解析した。おどろくことに、ヨツアナカシパンはこれまで報告されているウニ(間接発生種と直接発生種をふくむ)とちがい、腸体腔と裂体腔の両方の形成様式をもちいて、かつ左右相称の段階をスキップして、成体構造を構成する複数の体腔を口-反口軸にそって直接積み上げること示明らかになった。Hox遺伝子は左右相称動物の前後軸にそったパターン化を調節している。ウニゲノム解読はウニのHox遺伝子クラスターに転座と逆位があることを明らかにした。間接発生種では初期胚においてHox7とHox11/13bがそれぞれ反口側外胚葉と内胚葉で発現し、変態期の幼生のU字型俸腔で転座していない5つのHox遺伝子(Hox7Hox11/13b)が口-肛門軸にそってcollinearに発現する。ヨツアナカシパンにおけるHox発現パターンをWMISH法によって解析した結果、間接発生種の発現パターンを保存しているだけでなく、Hox1とHox11/13bが予定歩帯領域で、Hox3とHox5が予定間歩帯領域でそれぞれ放射状に発現していることが判明した。この4つのHox遺伝子はいずれもクラスター内で逆位している。これらのHox遺伝子の発現パターンは棘皮動物の進化に洞察をあたえる:左右相称の祖先種の後方がとぐろを巻きその左中央に口が移動あるいは新生され、その周囲に水管系が放射状に展開したのではないだろうか。その五放射状の新規構造の進化に逆位したHox遺伝子が転用されたようにみえる。Hox遺伝子クラスターの分裂が棘皮動物のユニークな成体ボディープランの進化と向伴した、あるいは定着させたという説を提案する。
小児二次急指定病院における小児救急看護モデルの検討

本年度は、昨年度に引き続き、小児二次救急指定病院の夜間・休日救急対応をしている外来看護師の役割を明らかにする目的で、実際に二次救急指定病院を夜間に受診しそのまま入院となった子どもの家族にインタビュー調査を実施した。本年度は、昨年度同様研究協力施設2施設から紹介を受けた、研究協力を承諾した対象者5名(計7名)に対しインタビューを実施し、小児救急外来で看護師に求められているケアについて検討した。受診の際に家族が病院特に看護師に求めることのひとつとして、「めどを伝えてもらうこと」であった。待合での病院やほかの患者や家族の行動をよく観察しており、「うちの子どもより重症」など、状況が理解できれば受診の順番を待つ時間を納得して待っていた。一方で、「これをしてもらう前にこれを済ませておけば、自分たちの診察はもう少し速く済んだ」という家族なりの状況判断を行っており、その思いがやがて「医療者の段取りが悪い」「待ち時間が長い」と感じる状況につながっている事例もあった。そのような場合、家族への一言で、検査や診察を待つ家族の安心につながるケアになることが示唆された。家族が看護師に求めるケアのもうひとつは、「医師の説明の噛み砕き」であった。対象者たちが受診した施設での看護師は、検査や処置に手がとられて診察は医師だけで行われていることが多かった。救急外来という一般外来の診察場面ではない状況であるため、家族も聞きなおすことができていなかった。このような状況において家族は、医師の説明を診察後にもう一度説明する、短時間で行わなければならない医師への状況説明を補うという看護師のケアを求めていた。このように救急外来では、看護師の少しの声かけや配慮が家族の不安や安心を増幅させる要素になることが示唆された。現在小児救急医療システムの見直しや改善が求められる中で、少しでも状況の改善につながるケアであるといえる。本研究の目的は、(1)小児二次救急指定病院の実情、また小児二次救急指定病院において小児救急に携わる看護師の実情を明らかにし、小児二次救急において勤務する看護師の課題および役割を見いだす(2)小児二次救急指定病院の実情に即した小児救急モデルの構築・検証を行うの2つである。本年度は、実態調査の前段階として、現在までの小児救急医療における調査研究についての文献検討を行い、次年度の調査方法や調査内容を検討した。文献は、「小児救急・トリアージ」「小児看護・救急」「小児救急・看護」「小児救急・外来」「小児二次救急」をキーワードに医学中央雑誌にて検索し検出された文献364件から、本研究に関連があると思われる文献46件をピックアップし、文献内容の検討を行った。文献管理には、データベースソフトを使用した文献管理データベースを使用した。小児救急の問題点・課題として、医療システムの改善、小児科医の数の確保、医師と保護者の意識の差について述べられているものが多く、小児救急に携わる看護師の現状について述べられた文献は見つからなかった。したがって、来年度はまず、実際に二次救急指定病院で小児救急に携わっている看護師に直接現状を確認する必要性があることが明らかとなった。来年度は、小児救急モデルのキー・ポイントとなるものを明らかにするため、実際に小児救急を輪番制で対応している二次救急医療施設で勤務する看護師にインタビューを行う予定である。本年度は、小児二次救急指定病院の夜間・休日救急対応をしている外来看護師の役割を明らかにする目的で、実際に二次救急指定病院を夜間に受診しそのまま入院となった子どもの家族にインタビュー調査を実施した。研究協力施設2施設から紹介を受け、研究協力を承諾した対象者2名に対しインタビューを実施した。インタビューでは、時間外受診をしたときの子どもの状態(症状、入院の有無、時間外受診に至った経緯、受診した二次救急指定病院の受診歴など)および時間外に受診した際の状況について(待ち時間、待っている間の子どもの様子、待っている間に感じたこと、病院スタッフの様子、病院スタッフの対応で印象に残っている場面など)および小児救急外来を時間外に受診する際に病院または看護師に期待することに関する質問を行った。研究協力施設では、休日受診者の78割が小児患者であり、数名の小児科外来担当ではない外来看護師が対応することが多く、本研究結果は今後の外来看護を考えていく上で意義があることが明確となった。インタビューでは、外来受診するまでの過程に関することにも焦点を当てていく必要があることが示唆された。さらに、外来受診からそのまま入院の経過をとった場合、外来看護師だけでなく病棟看護師も含めて対応を考えていく必要があることが明らかとなった。現在は、これまでの調査結果をもとに分析を進めながら本年度計画していた調査を継続して実施している。今後も引き続き10名程度の対象者にインタビューを行い、さらにデータ分析を深め、小児救急で患者家族に対応する看護師の役割について考察する予定である。

待合での病院やほかの患者や家族の行動をよく観察しており、「うちの子どもより重症」など、状況が理解できれば受診の順番を待つ時間を納得して待っていた。一方で、「これをしてもらう前にこれを済ませておけば、自分たちの診察はもう少し速く済んだ」という家族なりの状況判断を行っており、その思いがやがて「医療者の段取りが悪い」「待ち時間が長い」と感じる状況につながっている事例もあった。そのような場合、家族への一言で、検査や診察を待つ家族の安心につながるケアになることが示唆された。家族が看護師に求めるケアのもうひとつは、「医師の説明の噛み砕き」であった。対象者たちが受診した施設での看護師は、検査や処置に手がとられて診察は医師だけで行われていることが多かった。救急外来という一般外来の診察場面ではない状況であるため、家族も聞きなおすことができていなかった。このような状況において家族は、医師の説明を診察後にもう一度説明する、短時間で行わなければならない医師への状況説明を補うという看護師のケアを求めていた。このように救急外来では、看護師の少しの声かけや配慮が家族の不安や安心を増幅させる要素になることが示唆された。現在小児救急医療システムの見直しや改善が求められる中で、少しでも状況の改善につながるケアであるといえる。
分子ネットワークのコンピュータ支援設計法の開発とグルコース同化システムへの応用

リン酸転移システム(PTS)はリン酸化とカップリングして糖を取り込むシステムであり,有用物質生産性を向上させるために重要な役割を担っている。リン酸の供給源はPhosphoenolpyruvate (PEP)であり,PEPからグルコースまでPTSタンパク質(IIBC, IA, Hpr, EI)を介してリン酸が渡される.CRPとM1cはグローバル転写因子として,PTSタンパク質発現を制御する.グルコースPTSシステムのモデリングとシミュレーションを行った.実際,PTSの改変には,遺伝子発現量の変化が重要な役割を担っているので,遺伝子発現制御を含めたモデリングを行った.代謝,タンパク質シグナルトランスダクション,遺伝子発現制御を含む大規模微分方程式モデルを構築した.これまで,PTSタンパク質のシグナルトランスダクションに関わるモデリングで,PTSタンパク質の遺伝子発現制御に関わるモデリング例はほとんどない.生体分子ネットワーク構築,数学モデリング,システム解析を支援するシステムCADLIVEを用いてPTSシステムの数学モデルを作成し,数値シミュレーションを行った.培地中のグルコース濃度の変化に対するPTSタンパク質の濃度変化の実験値と動的シミュレーション結果と比較して,モデルの正当性を検証した.遺伝子発現量の変化に対するグルコース同化速度の感度を計算して,PTSシステムがロバストネスを生み出すメカニズムを解明した.生物学的に独自のフィードフォワード制御によって,グルコース同化システムのロバストネスが発揮されていることを証明した.PTSはリン酸化とカップリングして糖を取り込むシステムであり,有用物質生産性を向上させるために重要な役割を担っている.リン酸の供給源はPhosphoenolpyruvate(PEP)であり, PEPからグルコースまでPTSタンパク質(IIBC, IA, Hpr, EI)を介してリン酸が渡される.CRPとMlcはグローバル転写因子として, PTSタンパク質発現を制御する.グルコースPTSシステムのモデリングとシミュレーションを行った.従来は、PTSタンパク質のシグナルトランスダクションに関わるモデリングで, PTSタンパク質の遺伝子発現制御に関わるモデリング例は少ない.実際, PTSの改変には,遺伝子発現量の変化が重要な役割を担っているので,遺伝子発現制御を含めたモデリングを行う必要があった.代謝,タンパク質シグナルトランスダクション,遺伝子発現制御を含む大規模微分方程式モデルを構築した.CADLIVEを用いてPTSシステムの数学モデルを作成し,数値シミュレーションを行った.CADLIVEは生命分子ネットワーク構築,数学モデリング,システム解析を支援するシステムである.培地中のグルコース濃度の変化に対するPTSタンパク質の濃度変化を測定することによって,動的シミュレーション結果と比較した.まず、数学モデルのロバストネスを検証した.一般に生命システムは遺伝子発現量の変化に対して,システムは大きな変化を示さない,すなわちロバストネスを宗すことが知られている.そこで,遺伝子発現量の変化に対するグルコース同化速度の感度を計算した.次に、モデルの構築に用いなかった実験データを用いて,モデルの正当性を検証した.具体的には,培地中のグルコース濃度を低下させて細胞内のcAMP濃度変化, IIAのリン酸化状態を調べた.リン酸転移システム(PTS)はリン酸化とカップリングして糖を取り込むシステムであり,有用物質生産性を向上させるために重要な役割を担っている。リン酸の供給源はPhosphoenolpyruvate (PEP)であり,PEPからグルコースまでPTSタンパク質(IIBC, IA, Hpr, EI)を介してリン酸が渡される.CRPとM1cはグローバル転写因子として,PTSタンパク質発現を制御する.グルコースPTSシステムのモデリングとシミュレーションを行った.実際,PTSの改変には,遺伝子発現量の変化が重要な役割を担っているので,遺伝子発現制御を含めたモデリングを行った.代謝,タンパク質シグナルトランスダクション,遺伝子発現制御を含む大規模微分方程式モデルを構築した.これまで,PTSタンパク質のシグナルトランスダクションに関わるモデリングで,PTSタンパク質の遺伝子発現制御に関わるモデリング例はほとんどない.生体分子ネットワーク構築,数学モデリング,システム解析を支援するシステムCADLIVEを用いてPTSシステムの数学モデルを作成し,数値シミュレーションを行った.培地中のグルコース濃度の変化に対するPTSタンパク質の濃度変化の実験値と動的シミュレーション結果と比較して,モデルの正当性を検証した.遺伝子発現量の変化に対するグルコース同化速度の感度を計算して,PTSシステムがロバストネスを生み出すメカニズムを解明した.生物学的に独自のフィードフォワード制御によって,グルコース同化システムのロバストネスが発揮されていることを証明した.
薬学部の教育制度改革が教育と研究に与えたインパクト－薬学教育６年制を検証するー

薬学部は、これまで、薬を創る科学(創薬科学)や医療現場で薬を安全に使う科学(医療薬学)などから構成される「専門薬学」と、その基盤となる様々な自然科学から構成される「基礎薬学」を4年間で教育してきた。平成18年度に、高度化する医療技術の進展に対応できる薬剤師の養成を目的として、薬学部は薬を使うことに力点をおく医療薬学に関する教育を充実するために、6年間の一貫教育制度(6年制)に移行した。本研究では、以上の教育制度改革に伴う様々なアウトプットデータを収集し、制度改革が薬学教育に与えたインパクトを多面的に解析することを目的としている。本年度は、「6年制薬学部卒業生の学力の強みと弱みは何か」などを分析の視点に設定し、2017年度の本学薬学部卒業生の「入試情報」、「学力情報」、「初職情報」および「満足度情報」を学生番号で紐付けたデータベースを作成した。「入試情報」、「学力情報」、「初職情報」は本学で保有している卒業生の直接評価のデータである。「満足度情報」は、AP事業の一環として行われた卒業生364名を対象とするアンケート調査(卒業時調査・記名式)から得られる間接評価のデータである。以上のデータベースを利用する多変量解析の結果から、入学時における女子学生の学力優位性(学力試験における男女の平均値の差)は、6年間の学修過程で徐々に消失し、卒業時には男女の学力差(平均値の差)が殆どなくなることが明らかとなった。以上のデータベース以外にも、卒業時点の学力に関する過去20年間の推移をデータベース化し、4年制時代の卒業時の男女学力差と6年制時代の男女学力差について分析した。その結果、4年制の卒業試験においては、女子学生の明らかな学力優位性(学力試験における男女の平均値の差)が認められるが、6年制の卒業試験においては認められないことが明らかとなった。当初の目的に沿って、数種類のデータベースの構築が完了し、それらのデータベースを利用して種々の視点から6年制教育の特徴を多面的に分析することが出来た。その分析結果から、制度改革が男女の学力に与えるインパクトに関して、因果関係を理論化するための糸口を見出すことが出来た。2019年度は、2018年度の成果を踏まえて、「6年制薬学部卒業生の学力の強みと弱みは何か」を分析の視点に位置づけて継続的に研究を展開する。更に、それらの結果と卒業時調査から得られる6年制薬学教育の「役立ち度」や「満足度」などに関する間接評価データとの関連を分析し、薬学教育6年制が卒業生に与えたインパクトを解明する。また、当初の計画に従って、分析の視点を「薬学部は受験生にとって魅力的となっているのか」「失った就職先、新たに獲得した職種はあるのか」に変更して、解析を進めていく。また、当初の計画に従って、分析の視点を「薬学部は受験生にとって魅力的となっているのか」

「失った就職先、新たに獲得した職種はあるのか」に変更して、解析を進めていく。当初計画では、研究代表者と研究分担者は、それぞれ、学会出張を3回行うことになっていた。研究の進捗状況を踏まえて、本年度は学会出張を取りやめた。そのため、相当額の繰越額が発生している。
日本における馬搬作業の現状と存続要因の解明

1背景・目的・方法岩手県では、数少ないものの馬搬が存続している。県内の馬搬存続の理由として、林業的なメリットと歴史的、文化的、社会的価値の重みが大きいことが、申請者らの研究で明らかになっている。しかしながら、日本の馬搬作業に関する研究は少なく、日本全国に当てはめるのは難しい。本研究では、全国の馬搬の事例の有無を各都道府県庁にアンケート調査し、全国的な馬搬事例の分布を明らかにする。また現地調査により、現在の馬搬状況の把握し、社会的な存続要因の解明を目的とした。2結果【アンケート調査】回収率は28/46であった。馬搬の現存を把握していたのは、北海道,青森県,岩手県,宮城県の4道県であり、16都道県において、過去の馬搬事例を把握していた。さらに馬方等への聞き取り結果もあわせた場合、日本では北海道,青森県,岩手県,宮城県,富山県,長野県の6道県に馬搬が現存していた。【現地調査1】岩間氏(岩手県) : 38歳、馬搬歴18年。遠野馬搬振興会の事務局長を務め、欧州馬搬大会への出場など、馬搬の振興活動を行っていた。さらに工務店や家具メーカーと協力し、搬出材「馬搬材」に付加価値をつけていた。また、一般市民や小学生へ馬搬を通した環境教育を行っていた。【現地調査2】西埜氏(北海道・青森県) : 35歳、馬搬歴3年。岩間氏の影響を受け、林業退職後イギリス馬搬協会による馬搬研修を経て、道南の馬牧場に所属。道内各地方へ向けた出張馬搬を行い、72歳の師匠について馬搬の技術を研鑽し、牧場内プログラムにおいて馬搬を通した環境教育にも携わっていた。青森県では種差海岸(国立公園内)において馬搬を行っており、活動がメディア等でも取り上げられていた。3考察馬搬の存続要因の一つに積極的な振興活動や環境教育へ活用がみられた。今後、馬搬が存続していくために、メリット・デメリットの整理と、さらなる振興活動や環境教育を通した周知が重要である。それにより、搬出材の付加価値が向上し、馬搬が搬出方法の一つとして選択される可能性が高まると考える。
語られぬ収容所の集団的記憶を再生する日系アメリカ作家のポスト・メモリーの可能性

本研究の目的は、第二次世界大戦中強制収容所で過ごした日系アメリカ人を親にもつ作家が、親の語らない収容所の集団的記憶をどのように当時の手紙や写真などで再生し、自身の作品に投射していったかというポスト・メモリーの過程を考察するというものである。そしてその歴史の再生過程において、日系作家が迫害に対するプロテストとは異なったナラティブを創出していることを証明する。例えば日系アメリカ作家カレン・テイ・ヤマシタの作品において、その収容所に関するナラティブは、アメリカ社会における声なきサバルタンといったものではなく、むしろ植民地主義的、帝国主義的な要素を顕在化させている。以上の点に着目し、新しい日系表象の可能性を追求し、アメリカ文学研究に一石を投ずるというものである。本年度の実績に関しては、翻訳が一つ、書評が一つ、研究発表が3つという結果になった。翻訳に関してはハワイの日系アメリカ作家ジュリエット・コーノの『ヒロに降る雨』で、書評はアジア系アメリカ文学理論家のElda E. Tsouの、Unquiet Tropesに関する英文の長評、学会発表は、日本アメリカ文学会九州支部では、ヤマシタの最新作Letters to Memoryをベースにした作品論を、そして日本アメリカ文学会関西支部ではメルヴィルのバートルビーとヒサエ・ヤマモトの「エスキモーとの出会い」との関連性を発表した。2019年2月24日の成蹊大学での公開講演では日系アメリカ作家ワカコ・ヤマウチと南部作家テネシー・ウィリアムズの作品から敗北の共振を共通項に、そこから創出されるナラティブにに関して発表した。前年度と比べると学会発表でのシンポジウムの依頼が多く、それをどのように自分の研究書のテーマ『シマをめぐる日系性の共振』につなげていくかが主な課題となる。今回は依頼としてシンポジウムを組まされることが多く、発表がメインの成果になった。しかし結果的にそれらの原稿を集大成にして今後著書として出版することを考えると、非常に重要なプロセスであったと思われる。確かに発表のために時間をとられ、それを文字化する時間がなかったことは認めるが、次年度での共著依頼がきており、これらすべてが著書として出版される予定になっている。これらのことも含め、迅速に研究書発行に向けて計画を推進する必要性を感じた。本年度は口頭発表の依頼が続いたため、なかなか活字化する時間がなかったが、今後はまとめて何本か論文を出版することになる。進歩状況の遅れはそこで取り返すように尽力する。今後は、なるべく早く単著を作成しなくてはならない。すでに雑誌や共著などで10本以上の日本語論文を書いているため、それを集め、編集し、さらに書下ろしなどもいれて下書きを今年終わりまでに完成する予定である。研究書のタイトルは『シマをめぐる日系性の共振:英語圏日系文学の新しいエスニック・ナラティブを巡って』(仮)にする予定である。来年度にはまとまった時間をとることが可能であるため、今まで活字化した論文をまとめ、章立てをし、夏休み前までには下書きを出版社に送る。研究計画の大幅な変更はいまのところないが、8月以降米カリフォルニア大学ロサンゼルス校、ハワイ大学マノア校に出向き、教授陣との面会なども充実させ、所属学会等にも出席していただくことにする。彼らの発表を文字化し、ジャーナルに掲載することにより、本研究の集大成でもある研究書出版にも連関させることにする。本研究は二段階となっている。まず1)収容所内に残された文献を閲覧、解読し、体験者の親族とのインタビューによる取材を行う。そして2)子供の世代の日系作家がどのようなアメリカ文学に影響を受け、それらをどのように自分の作風に組み込んでいったかを考察することで、今日のアメリカ文学研究に一石を投じるというものである。本研究の独創性は、私たち日本人に人種的に最も近いにも関わらず、心理的には最も遠い日系アメリカ人の自我形成の過程をたどることで、アメリカという国家を外側から見つめる視点が収容所という集団的記憶によって形成された過程を学ぶところにある。親が決して語ろうとしない収容所が、未知の異文化性をはらむものとして自身の日系としてのアイデンティティーにくみこまれてしまっているーしかし同時にこうした状況は、彼ら特有の文学的ナラティブが生まれる機会であるとも考えられる。29年度の研究実績としてはハワイの日系アメリカ作家ジュリエット・コーノに関する論文を共著で出版した。コーノの両親は収容所を経験していないが、彼女の詩に収容所に関するものがあり、これはポストメモリーの範疇にある文学作品と思われる。また第二次大戦における広島の原子爆弾を扱った『暗愁』という作品に関しても、この領域に属するものとしてこの論文で取り扱った。加えて、ポストメモリーに関するテーマを基に学会発表を4回行った(一点は国際学会、その他は日本でのシンポジウム等である)。当該年度に関する実績が、論文一本、書評一本、研究発表4回であり、研究は順調に進んでいると思われる。これ以外には日系アメリカ作家カレン・テイ・ヤマシタの作品の教授法(Approaches to Teaching the Works of Karen Tei Yamashita)に関する英語論文がMLAから31年度に出版予定であり、現在校正が最終段階になっている。またヤマシタの作家論に関する英語論文は、原稿がすでに完成している状態である。

まだ単著の下書きは終了していないが、現在のところ研究対象となる作家との面会、作家の作品の全般を論じた論文を発行することはできているため、来年度と再来年度にかけて下書きを完成させる。本研究の目的は、第二次世界大戦中強制収容所で過ごした日系アメリカ人を親にもつ作家が、親の語らない収容所の集団的記憶をどのように当時の手紙や写真などで再生し、自身の作品に投射していったかというポスト・メモリーの過程を考察するというものである。そしてその歴史の再生過程において、日系作家が迫害に対するプロテストとは異なったナラティブを創出していることを証明する。例えば日系アメリカ作家カレン・テイ・ヤマシタの作品において、その収容所に関するナラティブは、アメリカ社会における声なきサバルタンといったものではなく、むしろ植民地主義的、帝国主義的な要素を顕在化させている。以上の点に着目し、新しい日系表象の可能性を追求し、アメリカ文学研究に一石を投ずるというものである。本年度の実績に関しては、翻訳が一つ、書評が一つ、研究発表が3つという結果になった。翻訳に関してはハワイの日系アメリカ作家ジュリエット・コーノの『ヒロに降る雨』で、書評はアジア系アメリカ文学理論家のElda E. Tsouの、Unquiet Tropesに関する英文の長評、学会発表は、日本アメリカ文学会九州支部では、ヤマシタの最新作Letters to Memoryをベースにした作品論を、そして日本アメリカ文学会関西支部ではメルヴィルのバートルビーとヒサエ・ヤマモトの「エスキモーとの出会い」との関連性を発表した。2019年2月24日の成蹊大学での公開講演では日系アメリカ作家ワカコ・ヤマウチと南部作家テネシー・ウィリアムズの作品から敗北の共振を共通項に、そこから創出されるナラティブにに関して発表した。前年度と比べると学会発表でのシンポジウムの依頼が多く、それをどのように自分の研究書のテーマ『シマをめぐる日系性の共振』につなげていくかが主な課題となる。今回は依頼としてシンポジウムを組まされることが多く、発表がメインの成果になった。しかし結果的にそれらの原稿を集大成にして今後著書として出版することを考えると、非常に重要なプロセスであったと思われる。確かに発表のために時間をとられ、それを文字化する時間がなかったことは認めるが、次年度での共著依頼がきており、これらすべてが著書として出版される予定になっている。これらのことも含め、迅速に研究書発行に向けて計画を推進する必要性を感じた。本年度は口頭発表の依頼が続いたため、なかなか活字化する時間がなかったが、今後はまとめて何本か論文を出版することになる。進歩状況の遅れはそこで取り返すように尽力する。30年度、31年度にかけては、単著となる本の下書きを終了させる。扱う作家は日系作家のみになるが、現在考えているのはアメリカだけに限らず、英語圏の日系作家をも対象にすることにしたい。
転換社債による企業の資金調達に関する経済分析

転換社債の役割に関するこれまでの仮説は,その妥当性についてデータによる検証が不十分であった.その原因について,理論研究の蓄積の不足が指摘されている.本研究では,これまで別々の仮説において着目されていた,金融市場の非効率性と企業内部の非効率性という2種類の問題を考慮した理論モデルを構築し,1転換社債の役割に関する新しい仮説の提示,2データを用いた実証において有用な含意の導出,および3実務における転換社債の利用や関連する制度設計において有用な含意の提示,の3つの課題に取り組む.転換社債の役割に関するこれまでの仮説は,その妥当性についてデータによる検証が不十分であった.その原因について,理論研究の蓄積の不足が指摘されている.本研究では,これまで別々の仮説において着目されていた,金融市場の非効率性と企業内部の非効率性という2種類の問題を考慮した理論モデルを構築し,1転換社債の役割に関する新しい仮説の提示,2データを用いた実証において有用な含意の導出,および3実務における転換社債の利用や関連する制度設計において有用な含意の提示,の3つの課題に取り組む.