علم الأنسجة
مصطلح علم الأنسجة وتلفط هيستولوجي (مركب من الكلمات اليونانية (1) هيستو "نسيج" وλογία Logia تشريحلوجيا)وهو دراسة التشريح المجهري للخلايا وأنسجة النباتات والحيوانات. وهو يقوم علي فحص شريحة رقيقة (قسم) من النسيج تحت ضوء المجهر أو علي مجهر إلكتروني. استخدام البقع النسيجية يعزز في كثير من الأحيان القدرة على تصور أو تحديد تفاوت البنية المجهرية. علم الأنسجة هو أداة أساسية لعلم الأحياءوالطب.
علم الانسجة المرضية (التشريح المرضي للانسجة)، هو دراسة مجهرية للانسجة المريضة وأداة مهمة في علم الأمراض التشريحية، لأن التشخيص الدقيق للسرطان وأمراض أخرى عادة ما يتطلب فحص عينات الأنسجة. الأطباء المدربون، وفي بعض الأحيان مصادق عليهم من قبل المجلس الطبي كأطباء تشريخ مرضي "اختصاصيي باثولوجيا"، هم الذين يقومون بالاختبارات التشريحية المرضية وتقديم المعلومات التشخيصية على أساس ملاحظاتها.
العلماء المدربين الذين يقومون باعداد المقاطع النسيجية وفنيي الانسجة والفنيين (HT) وتقنيي الأنسجة (HTL) وعلماء الطب وفنيي المختبرات الطبية و علماء الطب الحيوي. ومجال دراستها يسمي تقنية الانسجة
الأنسجة الطلائية وهي الأنسجة التي تغطي السطح الخارجي للجسم كما تغطي الأعضاء الداخلية والشرايين والأوردة الدموية.
و من المعروف ان الانسجة الطلائية مستقطبة مثل
و بدراسة الغشاء السيتوبلازمي لخلايا الطلائية نجده ينقسم إلى جزئين :
تقسم الأنسجة الطلائية اعتماداً عدد طبقات الخلايا المكونة لهذا النسيج إلى :و هي نوع من الانسجة التي تقوم بربط الانسجة الطلائية بالأنسجة المختلفة مثل النسيج العضلي والنسيج العصبي.
وتتصنف إلى نسيح ضام اصيل ونسيج ضام هيكلي:
- وينقسم العظم إلى(كثيف واسفنجي) ويغلف بغشاء ليفي
- واما الغضروف إلى (غضروف شفاف ومرن وليفي)يغلف بـ السمحاق
تعد الانسجه العضليه الأكثر انتشارا في الجسم حيث تمثل 40% من وزنه ويقدر عدد العضلات في الجسم حوالي 600 عضله تودي وظيفه الحركة في الجسم وتتكون الانسجه العضليه من خلايا عضليه تحتوي على الياف لها القدرة على الانقباض ولانبساط ولذا تكثر فيها الميتوكندريا وينشر في النسيج العضلي اوعيه دمويه واعصاب تنقل اليه الغذاء وتنظم عمله
تقسم الانسجه العضليه في الإنسان إلى ثلاثه اقسام:
1- العضلات الهيكلية أو (المخططه).
2- العضلات الملساء.
3- العضلات القلبيه .
تدخل الأنسجة العصبية في تركيب الجهاز العصبي في الكائنات المتقدمة والمتمثلة بالحيوانات..
تستخدم المثبتات الكيميائية للحفاظ على النسيج من التدهور، وللحفاظ على هيكل الخلية والمكونات الخلوية الفرعية، مثل عضيات الخلية (على سبيل المثال النواة، والنسيج الشبكي الباطن والمصورات الحيوية)، المثبت الأكثر شيوعا في استعمالات المجهر الضوئي هو 10 ٪ فورملين فاصل محايد (4 ٪ فورمالين في ملح فوسفات فاصل). وبالنسبة للمجهر الإلكتروني، المثبت المستخدم الأكثر شيوعا هو مثبت حامض الجلوتاريك، وعادة كنسبة مئوية حل 2.5 من الفوسفات المالحة. تحافظ هذه المثبتات على الأنسجة أو الخلايا أساسا عبر ربط بروتينات الارتباط الذي لا رجعة فيه. العمل الرئيسي لمثبتات ألديهيد هذه هو عبر ربط المجموعات الأمينية في البروتينات من خلال تشكيل ربط CH2 (الميثيلين)، في حالة الفورمالدهايد، أو عن طريق C5H10 عبر وصلات في حالة حامض الجلوتاريك. وبينما تحافظ هذه العملية على سلامة هيكلية الخلايا والأنسجة، يمكن أيضا أن تلحق الضرر بوظيفة البروتينات البيولوجية، وخاصة الانزيمات كما يمكن أيضا أن تفسدها إلى حد ما. يمكن أن يكون ذلك على حساب تقنيات نسيجية معينة. وكثيرا ما تستخدم مثبتات أخرى في المجهر الإلكتروني، مثل رابع أكسيد الأوسيميوم أو خلات اليورانيل.
قسم التجميد هو وسيلة سريعة لإصلاح وتحميل مقاطع الأنسجة. ويستخدم في العمليات الجراحية لا زالة الأورام، وللسماح بالتقرير السريع لهامش (أن الورم قد تمت ازالته بشكل كامل). ويتم ذلك باستخدام جهاز تبريد يسمى ثرموستات درجات الحرارة الخفيضة. يتم تقطيع الأنسجة المتجمدة الي شرائح باستخدام مبضع الفحص المجهري ومن ثم توضع الشرائح على شريحة من الزجاج الملون وتلطخ عليها بنفس الطريقة أو بوسائل أخرى. من الضروري تثبيت الانسجة لبقع معينة ،مثل الأجسام المضادة التي ترتبط بتلطيخ التألق المناعي.
كما يمكن استخدامها لتحديد ما إذا كان الورم خبيثا أم لا عند العثور عليه صدفة أثناء إجراء عملية جراحية لمريض.
الهدف من معالجة الأنسجة هو إزالة المياه منها واستبدالها بوسط يسمح بتصلبهاوالقطع منها مقاطع رقيقة. ويجب دعم الأنسجة البيولوجية في مصفوفة ثابتة تسمح بتقطيعها الي أقسام رقيقة بما يكفي، سمكها عادة 5 ميكرومتر (ميكرومتر ؛ 1000 ميكرومتر == 1 مم) للمجهر الضوئي وسمك، 80-100 نانومتر (نانومتر ؛ 1،000،000 نانومتر == 1 مم) للمجهر الإلكتروني. وبالنسبة للمجهر الخفيف يجب استخدام شمع البارافين بين الحين والاخر. وبما أنه غير قابل للامتزاج مع الماء، يجب أولا ازالة محتوي الماءالرئيسي من النسيج البيولوجي، عن طريق التجفيف. وتنقل العينات من خلال حمامات الايثانول بتقدم تدريجي أكثر تركيزا لإزالة المياه. يتبع هذا تنظيف بواسطة عامل تنظيف هيدروفوبي مثل الزيلين) لإزالة الكحول، وأخيرا مصهور شمع البارافين، عامل الترشيح، الذي يحل محل الزيلين.
لا يوفر شمع البارافين مصفوفة قاسية بما فيه الكفاية لتقطيع أقسام رقيقة من المجهر الإلكتروني. وتستخدم الراتنجات بدلا عن ذلك. وراتنجات الايبوكسي هي الأكثر استخداما كوسط تضمين وأيضا تستخدم راتنجات الأكريليك، وخاصة في حالة الكيمياء الهستولوجية المناعية. تقص أقسام أثخن (0.35μm ل5μm) من النسيج المعالج بالراتنج للمجهر الضوئي. مرة أخرى، قابلية عدم امتزاج راتنجات الايبوكسي ومعظم الاكريليك مع المياه تتطلب التجفيف، وعادة باستخدام الايثانول.
بعد أن يتم تجفيف الأنسجة وتمسح وترشح بمادة تضمين تكون الانسجة جاهزة للتضمين الخارجي. وخلال هذه العملية توضع عينات الأنسجة في قوالب مع مواد التضمين السائلة (مثل المادة المثخنة أو الجيلاتين أو الشمع) الذي يكون قد تصلب في ذلك ذلك الحين. ويتحقق ذلك عن طريق التبريد في حالة شمع البارافين والتدفئة (المعالجة) في حالة راتنجات الايبوكسي. تتبلمر راتنجات الأكريليك بالحرارة والضوء فوق البنفسجي أو بالمحفزات الكيميائية. وبعد ذلك تكون الكتل المصلبة التي تحتوي على عينات الأنسجة جاهزة للتقطيع.
و لأن البرافين الثابت مع الفورمالين يتضمن الانسجة (FFPE) فيمكن تخزينها في درجة حرارة الغرفة إلى أجل غير مسمى، ويمكن أيضا استرجاع الأحماض النووية (كلا من الدنا والرنا على حد سواء) بعد التثبيت، فذلك يجعل من الأنسجة FFPE موردا هاما للدراسات التاريخية في مجال الطب.
ويمكن أيضا أن يتم التضمين باستخدام الانسجة المجمدة الغير ثابتة في وسط يقوم علي المياه. توضع الأنسجة قبل تجميدها في قوالب مع مواد التضمين السائلة، وعادة ما تكون الغليكول القائم علي المياه، OCT ،TBS والكريوجيل أو الراتنج، الذي يتم بعد ذلك تجميده لتشكيل الكتل المصلبة.
يمكن أن يتم التقسيم بطرق محدودة. التقسيم العمودي، بالقطع العمودي على سطح النسيج، وذلك هو الأسلوب المعتاد. وفي كثير من الأحيان يتم التقسيم أفقيا باجتزاء تقييم بصيلات الشعر والوحدات الشعرية الدهنية المتوسعة. التقسيم التماسي الي الافقي يتم القيام به في عملية Mohs الجراحية وفي أساليب CCPDMA.
بالنسبة للمجهر الخفيف، يوضع سكين فولاذي في مبضع الفحص المجهري الذي يستخدم لقطع شرائح من الانسجة سمكها 10 - ميكرومتر والتي توضع علي شريحة الميكروسكوب الزجاجية. لاستعمال مجهر الإرسال الإلكتروني، توضع سكين من الماس في جهاز قطع الشرائح الرقيقة جدا من النسيج تستخدم لقطع شريحة من النسيج سمكها 50 - نانومتر والتي تقام على شبكة نحاسية قطرها 3 - ملم. ومن ثم تعالج الاقسام بالبقع المناسبة.
تقطع الأنسجة المجمدة المضمنة في وسيلة تجميد على مبضع الفحص المجهري في جهاز تبريد يسمى ثرموستات درجات الحرارة المتدنية.
النسيج الحيوي له مقارنة متأصلة صغيرة سواء في الضوء أو المجهر الاليكتروني. يستخدم الانصباغ ليعطي كلا من تباين الأنسجة وكذلك تسليط الضوء على مظاهر اهتمام معين، حيث أن الآلية الكيميائية الكامنة في مفهوم الانصباغ مفهومة، والمستخدم هو مصطلح الكيمياء النسجية. صبغة خشب البقم والايوزين {لطخة H&E}، وهي أكثر البقع استخداما في ضوء المجهر في الأنسجة والتشريح. وصبغة خشب البقم، صبغة أساسية، تلطخ بالأزرق بسبب تقارب الأحماض النووية في نواة الخلية ؛ اليوزين (مادة صابغة)، وهي الصبغة الحمضية للطخ السيتوبلاسم ببقع وردية. تستخدم عادة يورانيل حامض الخليك وسترات الرصاص لنقل الأنسجة المتباينة في المجهر الإلكتروني.
التلطيخ الخاص : هناك مئات التقنيات المختلفة التي تستخدم لتلطيخ الخلايا الانتقائي والمكونات الخلوية. تشمل المركبات الأخرى المستخدمة أقسام السفرانين والنفط الأحمر وأحمر الكونغو، وسريع الاخضرار FCF وأملاح الفضة، والعديد من الأصباغ الطبيعية والاصطناعية التي عادة ومصدرها تطوير الأصباغ من صناعة الغزل والنسيج.
تشير كيمياء أنسجة الانسجة إلى علم استخدام التفاعلات الكيميائية بين المواد الكيميائية للمختبرات والمكونات داخل الأنسجة. والتقنية النسيجية الشائعة الاستخدام تاريخيا هي رد فعل الأزرق البروسي بيرلز، وتستخدم لتوضيح ترسبات الحديد في أمراض مثل الصباغ الدموي (هيموكروماتوزيز).
وغالبا ما تمت دراسة عينات الأنسجة بواسطة التقنيات المشعة. في الانسجة الشعاعية تلطخ الشريحة أحيانا كيميائيا بالاشعة السينية. يستخدم تصوير الإشعاع الذاتي بصورة عامة لتصور المواقع التي نقلت إليها المواد المشعة داخل الجسم، مثل الخلايا في الطور S (تمر بتكرار الحمض النووي)، التي تشتمل على المعالجة بالتلرتيوم ثيميدين ،أو المواقع التي أشرت عليها روابط موجات راديو الحمض النووي في الانغال (التهجين) لتصوير الإشعاعي الذاتي على المستوى المجهري، تغمس الشريحة عادة في سائل جر محوري نووي قابل للاستحلاب، والذي يجف ليشكل عصير سائل. تصور الحبوب الفردية الفضية باستخدام مجهر الحقلي المجهري المظلم
وفي الآونة الأخيرة استخدمت الأجسام المضادة، على وجه التحديد، لتصور البروتينات والكربوهيدرات والدهون. وتسمى هذه العملية المناعة النسيجية الكيميائية، أو عندما تكون اللطخة هي جزيء فلوري، الفلورالمناعي. وزادت هذه التقنية بشكل كبير القدرة على تحديد فئات الخلايا تحت المجهر. التقنيات المتقدمة الاخري مثل اللااشعاعية النشاط في موضع التهجين، من الممكن أن تجمع مع كيمياء المناعة لتحديد الحمض النووي أو جزيئات الرنا الحمض النووي بمسبارات متألقة أو علامات يمكن استخدامها للمناعة الفلورية وانزيم المرتبط مضخم الفلورسينت، (خاصة الفوسفاتيز القلوية وتضخيم إشارة التيراميايد). مجهر الاسفار (الفلورسينت) والبؤر المجهري يستخدمان للكشف عن إشارات الفلورسينت مع تفاصيل بين الخلايا جيدة. وتستخدم الكاميرا الرقمية بشكل متزايد لالتقاط الصور التشريحية المرضية والنسيجية
طريقة نسل وطريقة جولجي مفيدتان في التعرف على الخلايا العصبية.
تشمل التقنيات البديلة مضبط الحرارة الخفيضة. يتم تجميد الأنسجة باستخدام ثرموستات درجات الحرارة المتدنية والقطع. طريقة تلطيخ الأنسجة تلطيخ مشابهة لتلك المقاطع من الشمع. يشيع استخدام أساليب التضمين البلاستيكية في إعداد المواد اللازمة للمجهر الإلكتروني. يتم تضمين الانسجة في راتنج الايبوكسي، تقطع الاجزاء الرقيقة حدا(أقل من 0.1 ميكرومتر) باستخدام الماس أو سكاكين الزجاج. وتلطخ المقاطع بلطخات الكترون كثيفة (اليورانيوم والرصاص) بحيث يمكن رؤيتها بالمجهر الإلكتروني.
في القرن التاسع عشر كان علم الأنسجة فرع أكاديمي في حد ذاته. منحت جائزة نوبل في الطب سنة 1906 الي عالمي الأنسجة، كاميلو جولجي وسانتياغو رامون واي كاجال. كان لديهم تفسيرات تبارز التركيب العصبي للدماغ مبنية علي مختلف التفسيرات لنفس الصور. فاز كاجال بالجائزة عن نظريته الصحيحة وجولجي لتقنية التلطيخ التي اخترعها لجعله ممكنا.
هناك أربعة أنواع أساسية من الأنسجة : الأنسجة العضلية والأنسجة العصبية، النسيج الضام، والأنسجة الطلائية. جميع أنواع الأنسجة هي أنواع فرعية من هذه الأنواع الأربعة الأساسية (على سبيل المثال، تصنف خلايا الدم كأنسجة ضامة، لأنها عموما تنشأ داخل نخاع العظام).نلاحظ أيضا أن أنسجة النباتات والفطريات والكائنات الحية الدقيقة يمكن أن تدرس تشريحيا. تختلف هياكلها جدا عن الأنسجة الحيوانية.المصنوعات اليدوية هي هياكل أو مظاهر من الأنسجة التي تتداخل مع الفحص النسيجي العادي. وهي ليست موجودة دائما في الانسجة بحيث يمكن أن تأتي من مصادر خارجية. تتداخل المصنوعات اليدوية مع الأنسجة عن طريق تغيير مظهر الانسجة وتخبئة البنية. والتي يمكن تقسيمها إلى فئتين :
هذه هي الملامح والهياكل التي ادخلت قبل تجميع الأنسجة. تشمل الأمثلة الشائعة لهذه ما يلي :-الحبر من الوشم ومن النمش (الميلانين) في عينات الجلد.
يمكن أن تنتج مصنوعات يدوية من معالجة الأنسجة. يؤدي التجهيز عادة إلى تغييرات مثل الانكماش، وتغيرات اللون في مختلف أنواع الأنسجة والي تعديلات في بنية النسيج. ولان مثل هذا يحدث في مختبر، غالبية التحف الأنسجة يمكن تجنبها أو إزالتها بعد أن اكتشفافها. من الأمثلة الشائعة هو صباغ الزئبق المتروك بعد استخدام مثبت زنكر لإصلاح مقطع.1. المصدر ميرك (2002). قاموس دورلاند الطبي. استرجعت في 26-01-2008.
2. قواميس ستيدمان الطبية (2005).  قاموس ستيدمان الطبي على الإنترنت. استرجعت في 26-01-2008.
3. 4000 صور أنسجة على الإنترنت (2007). (http://histology-online.com)