TCVN11035:2015

Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 11035:2015 về Sôcôla sữa - Xác định hàm lượng fructose, glucose, lactose, maltose và sucrose - Phương pháp sắc ký lỏng TIÊU CHUẨN QUỐC GIA TCVN 11035:2015 SÔCÔLA SỮA - XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG FRUCTOSE, GLUCOSE, LACTOSE, MALTOSE VÀ SUCROSE - PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG Milk chocolate - Determination of fr uctose, glucose, lactose, maltose and sucrose content - Liquid chromatographic method Lời nói đầu TCVN 11035:2015 được xây dựng trên cơ sở tham khảo AOAC 980.13 f ructose, glucose, lactose, maltose and sucrose in milk chocolate. Liquid chromatographic metho d; TCVN 11035:2015 do tiểu ban kỹ thuật tiêu chuẩn quốc gia TCVN/ TC /F16/SC2 C acao và sản phẩm cacao biên soạn, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng thẩm định, Bộ Khoa học và Công nghệ công bố. SÔCÔLA SỮA - XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG FRUCTOSE, GLUCOSE, LACTOSE, MALTOSE VÀ SUCROSE - PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG Milk chocolate - Determination of fructose, glucose, lactose, maltose and sucrose content - Liquid chromatographic method 1 . Phạm vi áp dụng Tiêu chuẩn này quy định phương pháp sắc ký lỏng để xác định hàm lượng f ructose, glucose, lactose maltose và sucrose trong sôcôla sữa. 2 . Tài l iệu viện dẫn Các tài liệu viện dẫn sau rất cần thiết cho việc áp dụng tiêu chuẩn này. Đối với các tài liệu viện dẫn ghi năm công bố thì áp dụng phiên bản được nêu. Đối với các tài liệu viện dẫn không ghi năm công bố th ì áp dụng phiên bản mới nhất, bao gồm cả các sửa đổi, bổ sung (nếu có). TCVN 4851:1989 (ISO 3696:1987), Nước dùng để phân tích trong phòng thí nghiệm - Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử . 3 . Nguyên tắc Loại b ỏ chất béo ra khỏi phần mẫu thử rồi chiết với nước trong điều kiện gia nhiệt phần mẫu thử ở 85 °C đến 90 °C trong 25 min. Phần dịch lọc được phân tích bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao sử dụng detector chỉ số khúc xạ. Xác định nồng độ của các loại đường dựa vào chiều cao pic hoặc diện tích pic. 4 . Thuốc thử Chỉ sử dụng các thuốc thử loại tinh khiết phân tích và nước cất đạt yêu cầu loại 1 theo quy định của TCVN 4851:1989 (ISO 3696:1987), trừ khi có quy định khác. 4.1 . Dung dịch chuẩn đường , 10 m g/ml Sấy từng loại chất chuẩn đường (fructose, glucose, sucrose, lactose và maltose) 12 h ở 60 °C trong điều kiện chân không. Hòa tan các chất chuẩn đường trong nước và pha lo ã ng đến nồng độ 10 m g/ml. Chuẩn b ị dung dịch mới trong ngày sử dụng. 4.2 . Pha động , hỗn hợp axetonitril (CH 3 CN) và nước (đ ã lọc qua than hoạt tính) với tỉ lệ thể tích 80 : 20. L ọ c hỗn hợp pha động này qua bộ lọc sợi thủy tinh, cỡ lỗ 0,7 m m (5.8) và khử khí trong b ể siêu âm (5.4) trước khi sử dụng . 4.3 . Ete dầu mỏ. 5 . Thiết bị, dụng cụ Sử dụng các thiết b ị , dụng cụ của phòng thử nghiệm thông thường và cụ thể như sau: 5.1 . Máy sắc ký l ỏ ng , có detector ch ỉ số khúc xạ R401 hoặc loại tương đương và máy ghi 10 mV. 5.2 . Cột nhồi , loại chuyên dùng cho phân tích đường. 5.3 . Bộ bơm , dùng cho sắc kí lỏng có vòng bơm 50 m l hoặc loại tương đương. 5.4 . B ể si ê u âm . 5.5 . Đũa thủy tinh. 5.6 . Nồi cách thủy , có thể kiểm soát được nhiệt độ đến 90 °C. 5.7 . Bộ lọc xyranh Swinney , c ỡ lỗ 0,45 m m. 5.8 . Bộ lọc s ợ i thủy tinh , cỡ lỗ 0,7 m m. 5.9 . Ố ng ly tâm , dung tích bằng hoặc lớn hơn 100 ml. 5.10 . Máy ly tâm , có thể ly tâm với t ố c độ 1800 r/min và 2 000 r/min. 6 . Lấy mẫu Mẫu gửi đến phòng thử nghiệm phải là mẫu đại diện. Mẫu không bi hư h ỏ ng hoặc biến đổi trong suốt quá trình vận chuyển hoặc bảo quản. Việc lấy mẫu không quy định trong tiêu chuẩn này. Xem tiêu chuẩn cụ thể có liên quan đến sản ph ẩ m. Nếu chưa có tiêu chuẩn cụ thể liên quan đến sản phẩm th ì các bên có liên quan nên thỏa thuận với nhau về vấn đề này. 7 . Cách tiến hành 7.1 . Chuẩn bị mẫu thử Cân 10,0 g sôcô l a sữa đã được nghiền m ị n cho vào ống ly tâm (5.9) và thêm 50 ml ete dầu m ỏ (4.3). Lắc để trộn đều sau đó ly tâm khoảng 15 min ở t ố c độ 1800 r/min. Gạn và loại b ỏ d ị ch nổi phía trên. Lặp lại quá trình chiết. Dùng đũa thủy tinh (5.5) khuấy đảo phần còn lại, thêm 100 g nước rồi cân, sau đó đặt vào nồi cách thủy (5.6) ở nhiệt độ khoảng từ 85 °C đến 90 °C trong 25 min. Lấy ống ra để nguội đến nhiệt độ phòng rồi thêm nước đến khối lượng ban đầu. Ly tâm khoảng 10 min ở tốc độ 2000 r/min, lấy phần dịch nổi trong phía trên và lọc qua bộ lọc xyranh 0,45 m m (5.7). 7.2 . Xác định Cho đầy phần mẫu thử (7.1) vào vòng bơm 50 m l của bộ bơm (5.3) và bơm lên cột với dung môi pha động ở tốc độ 1,5 ml/min đến 2,0 ml/min. 8 . Tính kết quả Tính nồng độ của từng loại đường trong dung dịch mẫu thử bằng cách so sánh chiều cao pic hoặc diện tích pic từ của mỗi loại đường tương ứng với chiều cao pic hoặc diện tích pic của từng chất chuẩn đường. Sử dụng cùng một phương pháp đo (diện tích hoặc chiều cao). Hàm lượng từng loại đường trong mẫu thử, X, biểu thị bằng microgam trên gam ( m g /g), được tính theo công thức sau: Trong đó: C 0 là nồng độ của các dung dịch chuẩn đường, tính bằng microgam trên mililit ( m g/ml); S 0 là chiều cao pic hoặc diện tích pic của chất chuẩn đường; S là chiều cao pic hoặc diện tích pic của loại đường tương ứng trong dung dịch mẫu thử ; V là thể tích d ung dịch mẫu thử thu được sau khi lọc (xem 7.1), tính bằng mililit (ml); m là khối lượng mẫu thử, tính bằng gam (g). 9 . Báo cáo thử nghiệm Báo cáo thử nghiệm phải ghi rõ: a) mọi thông tin cần thiết để nhận biết đầy đủ mẫu thử; b) phương pháp lấy m ẫ u đã sử dụng, nếu biết; c) phương pháp thử đã sử dụng và viện dẫn tiêu chuẩn này; d) mọi thao tác không được quy định trong tiêu chuẩn này, hoặc những điều được coi là tự chọn, và bất kỳ chi tiết nào có ảnh hưởng tới kết quả; e) kết quả thử nghiệm thu được. THƯ MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] TCVN 8906:2011 (EN 12630:1999), Nước rau qu ả , xác định hàm lượng glucoza, fructoza, sorbitol và sacaroza - Phương pháp sử dụng sắc ký lỏng hiệu năng cao.