TCVN9519-2:2016

Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 9519-2:2016 (EN 1988-2:1998) về Thực phẩm - Xác định sulfit - Phần 2: Phương pháp enzym TIÊU CHUẨN QUỐC GIA TCVN 9519-2:2016 EN 1988-2:1998 THỰC PHẨM - XÁC ĐỊNH SULFIT - PHẦN 2: PHƯƠNG PHÁP ENZYM Foodstuffs - Determination of sulf i te - Part 2: E nz ymatic method L ờ i nói đầu TCVN 9519-2:2016 hoàn toàn tương đương v ớ i EN 1988-2:1998; TCVN 9519-2:2016 do Ban kỹ thuật tiêu chuẩn quốc gia TCVN/TC/F13 Phương pháp phân tích và lấy mẫu biên soạn, Tổng cục Tiêu chu ẩ n Đo lường Chất lượng thẩm định, Bộ Khoa học và Công nghệ công bố; Bộ TCVN 9519 (EN 1988), Thực phẩm - Xác định su lf it gồm có các phần sau: - TCVN 9519-1:2012 (EN 1988-1:1998 ) , Phương ph á p Monier- W illiams đ ã được tối ưu hóa; - TCVN 9519-2:2016 (EN 1988-2:1998), Phương pháp e nzym Lời giới thiệu Sulfit có th ể được sử dụng làm ch ấ t bảo quản trong thực ph ẩ m. Để giảm thiểu những ảnh hưởng không tốt đến sức khỏe, nhiều quốc gia quy định về việc sử dụng sul f it trong thực phẩm. Tiêu chuẩn này là kết quả từ việc xây dựng một số phương pháp phân tích đ ể phát hiện sự có mặt và định lượng sul f it của rất nhiều loại thực phẩm khác nhau. THỰC PHẨM - XÁC ĐỊNH SULFIT - PHẦN 2: PHƯƠNG PHÁP ENZYM Foodstuffs - Determination of sulfite - Part 2: E nz ymatic method 1 Phạm vi áp dụng Tiêu chuẩn này quy định phương pháp enzym đ ể xác định hàm lượng sul f it trong thực phẩm, tính theo lưu huỳnh dioxit. Các ch ấ t chứa lưu huỳnh khác như sulfat, sul f ua hoặc thiosul f at không gây nhiễu phép xác định. Phức chất cacbonyl-sulfit có phản ứng như sul f it tự do. Sự xuất hiện của Isothiocyanat, ví dụ trong mù tạt gây nhiễu phép xác định. Phương pháp này không áp dụng cho bắp cải, tỏi khô, hành t ây khô, gừng, tỏi tây và protein từ đậu tương 1) . Phương pháp này cho thấy việc phân tích protein từ đậu tương đã phân tách cho kết quả dương tính giả. Các s ả n ph ẩ m cụ thể đã có tiêu chuẩn để xác định sự có mặt của su lf it không thuộc phạm vi áp dụng của tiêu chu ẩ n này. 2 Tài liệu viện dẫn Các tài liệu viện dẫn sau rất cần thiết cho việc áp dụng tiêu chuẩn này. Đối với các tài liệu viện dẫn ghi năm công bố thì áp dụng phiên bản được nêu. Đối với các tài liệu viện dẫn không ghi năm công b ố thì áp dụng phiên bản mới nh ấ t, bao gồm cả các sửa đổi, bổ sung (nếu có). TCVN 4851:1999 (ISO 3696:1987), Nước dùng để phân tích trong phòng thí nghiệm - Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử. 3 Nguyên tắc Oxy hóa sulfit thành sul f at với sự có mặt của sulfit oxidase để giải phóng hydro peroxit tại cùng thời điểm. SO 3 2 - + O 2 + H 2 O SO 4 2 - + H 2 O 2 Khử hydro peroxit và chuyển NADH thành NAD + với sự có mặt của NADH peroxidase. H 2 O 2 + NADH + H + 2H 2 O + NAD + Việc chuyển đổi NAHD thành NAD + được xác định bằng quang phổ và t ỷ lệ với nồng độ của sulfit, xem Tài liệu tham khảo [1] đến Tài liệu tham khảo [6]. 4 Thuốc thử Trong suốt quá trình ph â n tích, ch ỉ sử dụng các loại thuốc thử đạt chất lượng phân tích và ch ỉ sử dụng nước ít nhất là loại 3 quy định t rong TCVN 4851:1999 (ISO 3696:1987), t rừ khi có quy định khác. 4.1 Amon i sulfat. 4.2 Ax i t etylendiamin - N, N, N',N -te t raaxetic (EDTA). 4.3 Natri hydro cacbonat. 4.4 Natri sulf i t. 4.5 Dung dịch amonisulfat , c [ (NH 4 )2SO 4 ] = 2 mol/l. 4.6 Dung dịch natri hydroxit , c (NaOH) = 0,1 mol/l . 4.7 Dung dịch natri hydroxit , c (NaOH) = 2 mol/l. 4.8 Dung dịch đệm tr i ethanolamin 2) , c (C 6 H 15 NO 3 ) = 0,6 mol/l, pH 8,0. Hòa tan 5,57 g triethanolamin hydroclorua trong 40 ml nước đựng trong cốc có m ỏ . Chỉnh pH đến 8,0 bằng dung dịch natri hydroxit (4.6). Chuyển dung dịch vào bình định mức 50 ml, thêm nước đến vạch và trộn đều. Dung dịch đệm này bền trong 1 năm khi được bảo quản ở +4 o C. 4.9 Dung dịch NADH 2) (nicotiamid-adenin dinucleotit đã khử), c (NADH) = 7 x 10 -3 mol/l. Hòa tan 25 mg b -nicotiamit-adenin dinucleotit muối dinatri ( b -NADH-Na 2 ) và 50 mg natri hydro cacbonat (4.3) vào 5,0 ml nước và trộn đều. Dung dịch bền trong ít nhất 4 tuần khi được bảo quản ở +4 o C. 4.10 Huyền phù NADH perosidase 2) (EC 1.11.1.1), (xem Tài liệu tham khảo [7]). Chuẩn bị huyền phù 10 đơn vị enzym trong 1 ml dung dịch amoni sulfat ( 4.5 ) (U/ml) 3) , pH khoảng 7. Huyền phù bền trong 1 năm khi được bảo quản ở +4 o C. 4.11 Huyền phù sulfit oxidase (EC 1.8.3.1) (xem tài liệu tham kh ả o [7]). Chuẩn bị huyền phù 2,5 đơn vị enzym trong 1 ml dung dịch amoni sulfat (4.5), pH khoảng 7. Huyền phù bền trong 1 năm khi được b ả o quản ở +4 o C. 4.12 Dung dịch chuẩn Cân 0,6 g natri sulfit (4.4) (tương đương với khoảng 300 mg lưu huỳnh dioxit) chính xác đến 0,1 mg và 37 mg EDTA (4.2), hòa tan trong nước. Chuyển định lượng dung dịc h vào bình định mức 1 000 ml, thêm nước đến vạch và trộn. Lấy 100 µl dung dịch này làm mẫu chuẩn và phân tích hàm lượng sulfit trong 30 min. Hệ số biến thiên của các giá trị chuẩn không được quá 0,06. 4.13 Polyvinylpyrrolidon 4.14 Ascobat ox i dase , ví dụ ascobat oxidase spatula, có hoạt độ xác định. 4.15 Bentonit. 5 Thiết bị, dụng cụ Sử dụng các thiết bị, dụng cụ thông thường của phòng thử nghiệm và các thiết bị dụng cụ sau đây: 5.1 Nồi cách thủy , có khả năng duy trì nhiệt độ ở 60 o C + 2 o C. 5.2 Máy đồng hóa. 5.3 Micro pipet chia vạch , 10 µ l, 20 µ l, 50 µl và 100 µ l. Nếu dùng pipet dạng cơ có đầu/mao dẫn dùng một lần, thì chúng cần được hiệu chuẩn. 5.4 Máy đo pH. 5.5 Máy đo phổ , thích hợp đo ở bước sóng 340 nm. 5.6 Cuvet thạch anh , có chiều dài đường quang 1 cm. Cũng có thể sử dụng cuvet dùng một lần. 5.7 Máy ly tâm , thích hợp cho gia tốc hướng tâm 2 000 g có cốc trộn hoặc ố ng th ủ y tinh có dung tích thích hợp. 6 Cách tiến hành 6.1 Chuẩn bị các dung dịch thử 6.1.1 Yêu cầu chung Nếu mẫu có chứa nồng độ axit ascobic cao hơn 100 mg/kg hoặc 100 mg/l thì phải loại ra (xem 6.1.2.3). Nếu nồng độ của sulfit trong mẫu dung dịch thử cao hơn 0,3 g/1 thì pha loãng dung dịch mẫu trước khi xác định hoặc lấy một lượng thể thích m ẫ u nhỏ hơn. 6.1.2 M ẫ u dạng lỏng 6.1.2.1 Rượu vang trắng, rượu brandy và bia Phân tích trực tiếp rượu vang trắng và rượu brandy. Bia phải được lọc để loại bỏ cacbon dioxit. Bia có th ể cần phải khử màu. Đ ể khử màu, thêm không quá khoảng 0,7 g bentonit (4.15) vào 10 ml bia đã lọc đựng trong cốc c ó mỏ bằng thủy tinh dung tích 50 ml. Dùng máy khuấy từ khu ấ y hỗn hợp trong 2 min và lọc dung dịch vào cốc có mỏ bằng thủy tinh khác dung tích 50 ml. Để xác định bằng enzym (6.2), lấy 100 µ l đến 200 µ l rượu vang hoặc 500 µ l rượu brandy hoặc bia. 6.1.2.2 Rượu vang đ ỏ Chỉnh 25 ml rượu vang đỏ để pH từ 7,5 đến 8 bằng dung dịch natri hydroxit (4.7) đựng trong cốc có mỏ. Chuyển dung dịch vào bình định mức 50 ml, thêm nước đến vạch và trộn đều. Thông thường, cần khử màu rượu vang đỏ. Việc khử màu đối với nước quả có thể được tiến hành như quy định trong 6.1.2.3. 6.1.2.3 Nước quả Ly tâm nước quả đục ở khoảng 2 000 g . Thêm 5 ml nước quả vào cốc có m ỏ và chỉnh pH từ 5 đến 6 bằng dung dịch natri hydroxit (4.7). Loại bỏ axit ascorbic bằng cách thêm khoảng 40 đơn vị ascobat oxidase (4.14) vào nước quả và để yên mẫu trong 10 min hoặc loại bỏ các đơn vị ascobic bằng cách khuấy trong 3 min với ascorbat oxidase spatula (4.14). Sau đó ch ỉ nh pH từ 7,5 đến 8 bằng dung dịch natri hydroxit (4.7). Trong t rường hợp nước quả có màu, thì thêm khoảng 0,25 g polyvinylpyrrolidon (4.13) và khuấy hỗn h ợ p trong 1 min. Chuyển hỗn hợp vào bình định mức 10 ml và pha loãng bằng nước. Lọc d ung dịch và lấy 200 µ l để xác định bằng enzym (6.2). 6.1.3 Mẫu dạng rắn Đồng hóa kỹ mẫu và chiết bằng nước ở 60 o C trong 5 min. Th ỉ nh thoảng lắc. Để nguội mẫu đến nhiệt độ phòng trước khi phân tích. Các cỡ mẫu thay đổi phụ thuộc vào lượng sul f it. Trong trường hợp, như sản phẩm khoai tây dạng miếng m ỏ ng (potato flake), lấy 5,0 g mẫu đã đồng nhất cho vào bình định mức 50 ml. Thêm 40 ml nước. Đậy bình và chiết t rong nồi cách th ủ y (5.1) ở 60 o C trong 5 min. Thỉnh thoảng lắc. Để nguội bình, để yên trong ít nhất 15 min đến nhiệt độ phòng hoặc đặt trong nồi cách thủy ở 20 o C và thêm nước đến vạch ( V 3 = 50 ml). Ly tâm dung dịch, nếu cần. Lượng mẫu của một số loại thực phẩm được đề xuất như sau: Quả khô: 1,0 g mẫu/50 ml nước Mứt nhuyễn: 5,0 g mẫu/50 ml nước Gia vị: 0,1 g mẫu/50 ml nước Sản phẩm khoai tây dạng khô: 2,0 g mẫu/50 ml nước L ấ y từ 100 µ l đến 500 µ l dung dịch này dùng cho phép xác định bằng enzym (xem 6.2). 6.2 Xác định Tiến hành xác định theo Bảng 1 ở nhiệt độ từ 20 o C đến 25 o C trong cuvet thạch anh (5.6) thư ờ ng với th ể tích mẫu 100 µ l. Nếu thể tích của mẫu khác với 100 µ l thì thêm nước vào sao cho thể tích cuối cùng của nước và mẫu là 2,00 ml. Nếu phản ứng không d ừng lại th ì tiếp tục đọc độ hấp thụ với khoảng thời gian 2 min một lần cho đến khi sự thay đổi về độ hấp thụ là không đổi. Nếu độ hấp thụ giảm ổn định thì ngoại suy độ hấp thụ ngược với thời gian bổ sung huyền phù sulfit oxidase để ước tính A 2 cần sử dụng. 7 Tính kết quả Tính độ h ấ p thụ của dung dịch mẫu thử từ Công thức: A mẫu = A 1 m ẫ u - A 2 m ẫ u (1 ) A mẫ u trắng = A 1 m ẫ u trắ ng - A 2 m ẫ u t rắ ng (2) A = A m ẫ u - A mẫu t r ắ ng (3) Giá trị độ hấp thụ của mẫu A m ẫ u không được quá 0,05 nếu không th ì sử dụng thể tích dung dịch mẫu lớn hơn. Tính nồng độ khối lượng của sulfit ( biểu thị theo lưu huỳnh dioxit) trong mẫu, ρ , tính bằng gam trên lít hoặc phần khối lượng, ω , tính bằng gam trên kilogam (g/kg), từ Công thức (4) hoặc (5). (4) (5) Trong đó: V 1 là thể tích cuối cùng của dung dịch thử trong cuvet, tính bằng mililít (ml) ( ở đây là 3,16 ml); V 2 l à thể tích mẫu được l ấ y để phân tích bằng enzym, tính bằng mililít (ml) (ở đây là 0,1 ml đến 0,5 ml); V 3 là tổng thể tích của dung dịch mẫu thử đối với các mẫu dạng rắn, tính b ằ ng mililít (ml) ( ở đây là 50 ml). M là khối lượng phân tử tương đối của lưu huỳnh dioxit (64,1 g/mol); d là chiều dài đường quang, tính bằng xentimet (ở đây là 1 cm); ε là hệ số hấp thụ của NADH ở bước sóng 340 nm (6,3 l.mmo l -1 . c m - 1 ); m là khối lượng của mẫu dạng rắn, tính bằng gam (g) ( 6.1.3); F là hệ số pha loãng, nếu mẫu được pha loãng trong quá trình chuẩn bị mẫu (xem 6.1, 6.1.2.2 hoặc 6.1.2.3). 8 Độ chụm 8.1 Yêu cầu chung Các chi tiết về phép thử liên phòng thử nghiệm theo ISO 5725:1986 (xem Tài liệu tham khảo [8], độ chụm của phương pháp nêu trong Phụ lục A. Các giá trị thu được từ phép thử liên phòng thử nghiệm này có thể không áp dụng cho các dải nồng độ chất phân tích và các nền mẫu khác với dải nồng độ chất phân tích và các nền mẫu nêu trong Phụ lục A. 8.2 Độ lặp lại Chênh lệch tuyệt đối giữa hai kết qu ả thử nghiệm đ ơ n lẻ thu được trên cùng một mẫu thử do một người phân t í ch, sử dụng cùng một loại thiết bị, thực hiện trong khoảng thời gian ngắn nhất, không được quá 5 % các trường hợp vượt quá giới hạn lặp lại r . Các giá trị là: Rượu vang = 75 mg/l r = 8 mg/l Táo khô = 800 mg/kg r = 298 mg/ kg Táo khô = 960 mg/kg r = 358 mg/kg Nước chanh = 270 mg/l r = 37 mg/l Nho khô (sul t anas) = 260 mg/kg r = 45 mg/kg Bia = 4,9 mg/l r = 0,8 mg/l Bảng 1 - Thể tích dịch lỏng được hút vào cuvet D ị ch l ỏ ng đ ư ợc hút vào cuvet Cuvet mẫu Cuvet mẫu trắng Dung dịch đệm triethanolamin (4.8) 1,00 ml 1,00 ml Dung dịch NADH (4.9) 0,10 ml 0,10 ml Huy ề n phù peroxidase NADH (4.10) 0,01 ml 0,01 ml Dung dịch mẫu thử 0,10 ml - Nước 1,90 ml 2,00 ml Trộn nh ẹ . Đo độ hấp thụ A, của cuvet mẫu và cuvet mẫu trắng sau 5 min (không cho cuvet vào đường quang chu ẩ n), sau đó bắt đầu cho phản ứng bằng cách b ổ sung như sau: Huyền phù sulfit oxidase (4.11) 0,05 ml 0,05 ml Trộn đều và đọc độ hấp thụ A 2 sau khoảng 30 min. L ấ y số đọc bổ sung sau 5 min đ ể ki ể m tra không có sự thay đổi tiếp theo nào ở độ hấp thụ đã lấy. 8.3 Độ tái lập Chênh lệch tuyệt đối giữa hai kết quả thử nghiệm đơn lẻ trên cùng một vật liệu thử do hai phòng thử nghiệm thực hiện không được quá 5 % các trường hợp vượt quá giới hạn tái lập R . Các giá trị là: Rượu vang = 75 mg/l R = 16 mg/l Táo kh ô = 800mg/kg R = 311 mg/kg Táo khô = 960 mg/kg R = 374 mg/kg Nước chanh = 270 mg/l R = 79 mg/ l Nho kh ô (sul t anas) = 260 mg/kg R = 129 mg/kg Bia = 4,9mg/l R = 1,6mg/l 9 Báo cáo thử nghiệm Báo cáo thử nghiệm phải bao gồm ít nhất các thông tin sau đây: - tất cả các thông tin cần thiết để nhận biết đầy đủ về mẫu thử; - viện dẫn t iêu chuẩn này hoặc phương pháp thử đã sử dụng; - các kết quả và các đơn vị biểu thị các kết qu ả ; - ngày và quy trình lấy mẫu (nếu biết); - ngày nhận mẫu; - ngày thử mẫu; - các điểm cụ thể quan sát được trong quá trình thử; - mọi thao tác không quy định trong tiêu chuẩn này hoặc được xem là tùy chọn có thể ảnh hưởng đến kết quả. Phụ lục A (Tham khảo) Dữ liệu về độ chụm Độ chụm của phương pháp được thiế t lập b ở i phép thử liên phòng thử nghiệm theo ISO 5725:1986 (xem Tài liệu tham khảo [8]) đặc biệt trên mẫu có nồng độ sulfit thấp (xem Tài liệu tham khảo [1 ] , [4] và [ 5 ] ). Các mẫu nghiên cứu xem xét trên sản ph ẩ m khoai tây dạng miếng mỏng, rượu vang, nước chanh, táo khô, nho khô và bia có hàm lượng sulfit từ 0 mg/kg đến 960 mg/kg. Mười một phòng thử nghiệm đã tham gia tiến hành phân tích trên mười hai mẫu trong toàn bộ nghiên cứu. Sáu phòng thử nghiệm phân tích trên tám mẫu trong nghiên cứu bổ sung. Các kết quả nghiên cứu cộng tác cho thấy, phương pháp thích hợp với phép phân tích định lượng sulfit ở mức dưới 100 mg S O 2 /kg. Trong phép phân tích các mẫu dạng rắn hoặc khi sulfit bám dính vào các hạt (ví dụ trong nước quả), th ì cho hệ số biến thiên cao, đặc biệt nếu người phân tích ít có kinh nghiệm với phương pháp enzym. Nồng độ trong rượu vang từ 1 mg/ l đến 10 mg/l có thể xác định được với độ tin cậy cao. Giới hạn phát hiện của phương pháp được biểu thị theo độ hấp thụ là 0,04. Đối với mẫu 1 ml, giới hạn phát hiện của phương pháp được tính theo giá trị trung bình của mẫu trắng đại diện ( n > 20) cộng với ba lần hệ số biến thiên của giá trị trung bình (theo khuyến cáo của Ủ y ban Châu Âu) là 1,2 mg S O 2 /kg. Theo ISO 5725:1986 [8], trong phép thử liên phòng thử nghiệm, các thông số đã cho trong Bảng A.1 (so sánh cặp đôi/mẫu kép mù) và Bảng A.2 là như nhau. Phép thử được thực hiện trên khoai tây dạng miếng mỏng, táo khô và nước quả (xem Tài liệu tham khảo [9]) do Cục thực ph ẩ m quốc gia Thụy Điển tiến hành. Theo ISO 5725:1986 [8], các thông số trong Bảng A.3 được xác định trong phép thử liên phòng thử nghiệm. Phép thử được tiến hành trên nho khô và bia (xem tài liệu tham khảo [4], [5]) do Viện Max von Pettenko f er của Văn phòng Y tế liên bang, Cục thực phẩm, Berlin, Đức thực hiện. Bảng A.1 - Dữ liệu liên phòng thử nghiệm trên rượu vang, táo khô và nước chanh Mẫu Rượu vang Táo khô Táo kh ô Nước chanh Năm t iến hành phép thử liên phòng thử nghiệm 1991 1990 1990 1990 Số lượng phòng thử nghiệm 6 11 11 11 Số lượng phòng thử nghiệm còn lại sau khi trừ ngoại lệ 6 10 10 10 Số lượng phòng thử nghiệm ngoại lệ 0 1 1 1 Số lượng mẫu 1 1 1 2 Số lượng các kết quả được chấp nhận 6 7 7 10 Giá trị trung bình ( ), mg/kg hoặc mg/ l 75 800 960 270 Độ lệch chuẩn lặp lại ( s r ), mg/kg hoặc mg/l 3 106 128 13 Độ lệch chu ẩ n tương đối lặp lại ( RSD r ) % 4 13 13 5 Giới hạn lặp lại ( r ) , mg/kg hoặc mg/ l 8 298 358 37 Độ lệch chuẩn tái lập ( s R ), mg/kg hoặc mg/l 6 111 133 28 Độ lệch chuẩn tương đối tái lập ( RSD R ) % 8 14 14 10 Giới hạn tái lập ( R ) , mg/kg hoặc mg/l 16 311 374 79 CHÚ THÍCH Các giá trị đối với rượu vang và nước c h anh được tính b ằ ng miligam t r ê n lít và các giá tr ị đối với táo khô được tính b ằ ng miligam trên kilogam. Bảng A.2 - Dữ liệu liên phòng thử nghiệm trên khoai tây dạng miếng mỏng M ẫ u Khoai t â y dạng miếng mỏng Khoai tây dạng miếng m ỏ ng N ă m tiến hành phép thử liên phòng thử nghiệm 1990 1990 Số lượng phòng thử nghiệm 11 11 Số lượng phòng thử nghiệm còn lại sau khi trừ ngoại lệ 10 10 Số lượng phòng thử nghiệm ngoại lệ 1 1 Số lượng m ẫ u 1 1 Số lượng các kết qu ả được ch ấ p nh ậ n 6 7 Giá trị trung b ì nh ( ), mg/kg 28,3 110 Độ lệch chuẩn tái l ậ p ( s R ) mg/kg 13 15 Độ lệch chuẩn tương đ ố i tái lập ( RSD R ), mg/kg 45 13 Giới hạn t á i lập ( R ), mg/kg 36 42 Bảnh A.3 - Dữ liệu liên phòng thử nghiệm trên nho khô và bia Mẫu Nho khô Bia N ă m tiến hành phép thử liên phòng thử nghiệm 1986 1986 Số lượng phòng thử nghiệm 14 16 Số lượng phòng thử nghiệm còn lại sau khi trừ ngoại lệ 13 14 Số lượng phòng thử nghiệm ngoại lệ 1 2 Số lượng mẫu 1 1 Số lượng các kết qu ả được ch ấ p nhận 74 70 Giá trị trung b ì nh ( ) , mg/kg hoặc mg/ l 260 mg/kg 4,9 mg/l Độ lệch chuẩn lặp l ại ( s r ), mg/kg hoặc mg/ l 16 mg/kg 0 , 3 mg/ l Độ lệch chuẩn tương đối lặp lại ( RSD r ) % 6% 5,8 % Giới hạn lặp lại ( r ), mg/kg hoặc mg/l 45 mg/kg 0,8 mg/ l Độ lệch chu ẩ n tái lập ( s R ), mg/kg hoặc mg/l 46 mg/kg 0,6 mg/ l Độ lệch chuẩn tương đối tái lậ p , ( RSD R ) % 18% 11,6% Giới hạn tái lập ( R ), mg/kg 129 mg/kg 1,6 mg/l THƯ MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Nordic Committee on food analysis, No 135 (1990). [2] Methods for the enzymatic food analysis, published by Boehringer, Mannheim. [3] Beutler, H O: Food chemistry 15, 157-164 (1984). [4] Official collection of methods of foods analysis according to § 35 IMBG (German food and commodities regulations), Beuth, Berlin, 1993, method L 30.001. [5] Official collection of methods of food analysis arcoding to § 35 LMBG (German food and commodities regulations), Beuth, Berlin, 1993, method L 36.008. [6] Journal of the Institute f Brewing, European Brewery convention, Vol.98, 1992, Method 9.12.3. [7] Enzyme Commission (EC): Classi f ication system. Enzyme Handbook, springer, Berlin 1969. [8] ISO 5725:1986 1) Precision of test methods -- Determination of repeatabil í ty and reproducibil í ty for a standard test method by inter-laboratory tests 1) . [9] Edberg, U.: Journal of AOAC International, 76 (1993) 53-58. 1) Việc phân t ích protein đậu tương đ ã dẫn đến kết qu ả dương tính giả trong dải t ừ 20 mg/kg đến 30 mg/kg đ ược t í nh theo theo lưu huỳnh dioxit. V ì vậy, khi phân tích thực ph ẩ m chữa protein đậu tương đã ph â n tách th ì t ỷ lệ k ế t quả thu được có th ể t ă ng l ê n và cần lưu ý điều này. 2) Thuốc thử này bao gồm trong bộ kit thử có bán sẵn. Nếu sử dụng bộ ki t thử này, cần tu â n th ủ các ch ỉ dẫn của nhà sản xu ấ t. 2) Thuốc thử này bao gồm trong bộ kít th ử có bán s ẵ n. Nếu sử dụng bộ kit thử này, cần tuân thủ cá c ch ỉ dẫn của nhà sản xuất. 3) Đơn vị này (thường là đơn vị quốc tế hoặc đơn vị chu ẩ n) được đ ị nh nghĩa là lượng enzym xúc tác chuyển đ ổ i 1 µ mol cơ ch ấ t trong 1 min ở các điều kiện chuẩn. 1) Tiêu chuẩn này hiện nay đ ã hủy, được sử dụng để thu l ấ y dữ liệu về độ chụm.