TCVN10386:2014

Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 10386:2014 (EN 12136:1997) về Nước rau, quả - Xác định tổng hàm lượng carotenoid và từng phân đoạn carotenoid TIÊU CHUẨN QUỐC GIA TCVN 10386:2014 EN 12136:1997 NƯỚC RAU, QUẢ - XÁC ĐỊNH TỔNG HÀM LƯỢNG CAROTENOID VÀ TỪNG PHÂN ĐOẠN CAROTENOID Fruit and vegetable juices - Determination of total carotenoid content and individual carotenoid fr actions Lời nói đầu TCVN 10386:2014 hoàn toàn tương đương EN 12136:1997; TCVN 10386:2014 do Ban kỹ thuật tiêu chuẩn quốc gia TCVN/TC/F10 Rau qu ả và sản phẩ m rau quả biên soạn, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng thẩm định, Bộ Khoa học v à Công nghệ c ô ng bố. NƯỚC RAU, QUẢ - XÁC ĐỊNH T Ổ NG HÀM LƯỢNG CAROTENOID VÀ TỪNG PHÂN ĐOẠN CAROTENOID Fruit and vegetable juices - Determination of total carotenoid content and individual carotenoid fr actions 1. Phạm vi áp dụng Tiêu chuẩn này qui định phương pháp xác định tổng hàm lượng carotenoid và từng phân đoạn carotenoid trong nước rau, quả và các sản phẩm liên quan. 2. Tài liệu viện dẫn Các tài liệu viện dẫn sau rất cần thiết cho việc áp dụng tiêu chuẩn này. Đ ố i với các tài liệu viện dẫn ghi năm công bố th ì áp dụng phiên bản được nêu. Đối với các tài liệu viện dẫn không ghi năm công bố th ì áp dụng phiên b ản mới nhất, bao gồm cả các sửa đổi, bổ sung (nếu có). TCVN 4851:1989 (ISO 3696:1987), Nước dùng để phân t í ch trong phòng th í nghiệm - Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử. ISO 5725:1986 1) , Precision of test methods - Determination of repeatability and reproducibility for a s tandard test method by inter-laboratory tests (Độ chụm của phương pháp th ử - Xác định độ lặp lại và độ tái lập đối với phương pháp th ử chuẩn bằng phép th ử liên ph ò ng thử nghiệm). 3. Định nghĩa và ký hiệu 3.1 . Định nghĩa Trong tiêu chu ẩ n này sử dụng các định nghĩa sau đây: 3.1.1 . Phân đoạn carotenoid I (chủ yếu là hydrocacbon) (carotenoid f raction I) (mainly hydrocarbons) Chất được r ử a giải bằng ete dầu m ỏ , như qui định trong 7.3.2. 3.1.2 . Phân đoạn carotenoid II (cryptoxanthin este) (carotenoid fr action II) (crypotxanthin esters) Chất được rửa giải bằng hỗn hợp rửa giải (5.7), như qui định trong 7.3.2. 3.1.3 . Phân đoạn carotenoid III (xantophyll este) (carotenoid f raction III) (xantophyll esters) Chất được rửa gi ả i bằng h ỗ n hợp rửa giải B (5.8), như qui định trong 7.3.2. 3.1.4 . Phân đoạn carotenoid IV (carotenoid f raction IV) Chất được rửa giải bằng axeton (5.3), như qui định trong 7.3.2. 3.2 . Ký hiệu Trong tiêu chuẩn này áp dụng ký hiệu sau đây: g l à gia tốc trọng trường (9,81 m/s 2 ). 4. Nguyên tắc Tạo kết tủa lượng carotenoid hấp phụ bằng kẽm hexacyano f errat (II) được xử lý với dung dịch Carrez I và Carrez II . Chiết các carotenoid ra khỏi chất kết tủa sử dụng axeton và chuyển dung dịch này sang ete dầu mỏ. Xác định tổng hàm lượng carotenoid bằng đo quang phổ. C ất phân đoạn các carotenoid dùng cột sắc ký nhôm oxit. Tiến hành xác định từng phân đoạn carotenoid b ằ ng đo quang phổ. Tính tổng h à m lượng carotenoid và từng phân đoạn theo b -caroten, biểu thị hàm lượng của từng phân đoạn carotenoid theo phần trăm tổng hàm lượng carotenoid. 5. Thuốc thử Ch ỉ sử dụng thuốc thử loại tinh khiết phân tích và nước đạt loại 3 trong TCVN 4851:1989 (ISO 3696:1987). 5.1 . Dung dịch Carrez I Hòa tan 15,0 g kali hexacyano f errat (II) ngậm 3 phân tử nước ( K 4 Fe(CN) 6 .3H 2 O ) trong nước và thêm nước đến vạch 100 ml. 5.2 . Dung dịch Carrez II Hòa tan 30 g kẽm sul f at ngậm 7 phân tử nước (ZnS O 4 .7H 2 O ) trong nước và thêm nư ớ c đến vạch 100 ml. 5.3 . Axeton, (CH 3 COCH 3 ). 5.4 . Ete dầu mỏ, c ó d ả i sôi từ 40 ° C đến 60 ° C Làm sạch ete dầu m ỏ trên cột nhồi nhôm oxit (AI 2 O 3 ) (5.9). 5.5 . Natri sul f at (Na 2 SO 4 ), khan. 5.6 . Toluen (C 6 H 5 CH 3 ). 5.7 . Hỗn hợp r ử a giải A Trộn bốn phần thể t í ch ete dầu m ỏ (5.4) với một phần thể tích toluen (5.6). 5.8 . Hỗn hợp rửa giải B Trộn hai phần thể tích ete dầu mỏ (5.4) với một phần thể tích toluen (5.6). 5.9 . Nh ô m ôxit (AI 2 O 3 ), đã hoạt h ó a, trung tính, có mức I dùng cho cột sắc ký và bộ lọc hấp phụ. 5.10 . Nh ô m ôxit (AI 2 O 3 ), đã khử hoạt tính một phần bằng cách tạo huyền phù trong nước. Chuyển 100 g nhôm oxit (5.9) v à o bình có khớp nối thủy tinh mài, thêm 12 ml nước và t rộn kỹ cho đến khi thu được huyền phù đồng nhất. Đậy kín bằng nắp bình. Để yên huyền phù đồng nhất thu được trong 2 h. CHÚ THÍCH: Nhôm oxit đã khử hoạt t í nh thường có mức hoạt t í nh từ IV đến V. V ì hoạt tính này thay đ ổ i sau thời gian bảo quản d à i, nên cần s ử dụng trong khoảng thời gian t ừ 2 h đến 24 h sau khi chu ẩ n bị. 6. Thiết bị, dụng cụ CẢNH BÁO: V ì phép xác định có sử dụng các dung môi bay hơi dễ cháy, nên các thiết bị điện được s ử dụng phải tuân thủ qui định về an toàn đối với việc s ử dụng các dung môi đó. Sử dụng các thiết bị dụng cụ thông thường c ủ a phòng thử nghiệm và các thiết bị, dụng cụ sau: 6.1 . Máy đo quang phổ, có thể đo ở bước sóng 450 nm. 6.2 . Cuvet thủy tinh hoặc cuvet thạch anh, có chiều d ài đường quang 10 mm và hấp thụ không đáng kể ở bước s ó ng 450 nm. 6.3 . Máy ly tâm, có thể tạo gia tốc ly tâm 2 000 g tại đáy ống ly tâm (6.4). CHÚ THÍCH Tốc đ ộ quay c ầ n đ ể có gia tốc ly tâm chính xác có thể t í nh được bằng Công thức (1): a = 11,18 x r x ( n /1000) 2 (1) Trong đó: a là gia tốc ly tâm; r là bán k í nh của máy ly tâm đo được từ điểm giữa (trục ly tâm) đến đáy của ống ly tâm khi quay, t í nh bằng xentimet; n là số vòng quay tr ê n phút. 6.4 . Ống ly tâm, dung tích từ 60 ml đến 100 ml. 6.5 . Ố ng sắc ký, c ó chiều dài từ 250 m m đ ế n 300 mm và đường kính trong 20 mm, có nắp đậy bằng polytetra f luorethylen (PTFE). 6.6 . Bộ cô quay chân không. 6.7 . Ph ễ u chiết, dung tích 200 ml. 6.8 . Bình định mức, dung t í ch 100 ml. 6.9 . B ì nh cầu, dung tích 250 ml. 6.10 . B ì nh chia độ, dung tích thích hợp. 7. Cách tiến hành Các carotenoid rất nhạy với ánh sáng và nhiệt độ. C ần tiến hành phân tích ở nơi tránh ánh sáng trực ti ế p hoặc UV . 7.1 . Chuẩn bị m ẫ u thử Thông thường các mẫu không cần xử lý trước, tuy nhiên có thể cần pha loãng và phép phân tích theo phương pháp này nên dựa vào thể tích, các kết quả được biểu thị trên 1 lit mẫu. Đối với các mẫu cô đặc, có th ể cũng tiến h à nh phân tích dựa vào thể tích, sau khi pha loãng đến tỷ trọng tương đối đã biết. Trong t rường hợp này, tỷ trọng tương đối phải được nêu rõ. Dựa vào lượng mẫu đã cân và hệ số pha loãng, các kết qu ả có thể cũng được biểu th ị trên 1 kg mẫu. Đối với các sản phẩm có độ nhớt cao và/hoặc có chứa lượng thịt quả rất cao thì thường tiến hành phép xác đ ị nh theo khối lượng mẫu thử. 7.2 . Xác định tổng hàm lượng carot e noid Lắc kỹ mẫu thử dạng l ỏ ng và d ùng pipet lấy 5 ml đến 50 ml ( V 1 ) phần mẫu thử cho vào ống ly tâm (6.4). Pha loãng bằng nước đến 50 ml, nếu cần và th ê m dung dịch Carrez I (5.1), Carrez II (5.2), mỗi dung dịch 1 ml. Trộn kỹ, để yên khoảng 2 min và sau đó ly tâm ở 2 000 g (6.3) trong khoảng 5 min. CHÚ THÍCH 1: Độ h ấ p thụ của chất chiết cuối c ù ng dưới 100 ml ( V 2 ) không được quá 0,5 đơn vị. Để có được điều này c ầ n ch ỉ nh lượng m ẫ u ( V 1 ) c ó th ể tham khảo c á c giá tr ị sau đây: 25 ml đối với nước cam, 50 m l đối với necta cam, từ 5 ml đ ế n 20 ml đối với nước quả lạc tiên, 25 ml đối nước necta quả lạc tiên và 20 ml đối với nước quả quýt. Gạn b ỏ dung dịch gần như không màu phía trên. Thêm 40 ml axeton (5.3) vào phần kết tủa trong ống ly tâm, trộn kỹ bằng đũa thủy tinh và tiếp tục khuấy kho ả ng 3 min. Ly tâm lại trong khoảng 5 min và gạn dung dịch axeton vàng phía trên vào phễu chiết (6.7). Dùng ống đong (6.10) thêm 50 ml ete dầu mỏ (5.4). Lắc kỹ hỗn hợp này và để yên một lúc cho tách pha hữu cơ. Gạn lấy khoảng 10 ml pha nước. Lặp lại quá tr ì nh chiết chất kết t ủ a trong ống ly tâm bằng 20 m l axeton và tiến hành như ở trên. Sau khi ly tâm, chuyển cẩn thận chất chiết hữu cơ phía trên sang phễu chiết. Thông thường, lặp lại một lần quá trình chiết là đ ủ . Nếu cần, có thể lặp lại nhiều lần quá tr ì nh chiết. CHÚ THÍCH 2: Nếu tiến hành qu á trình chiết nhi ề u hơn hai l ầ n, cần chú ý qu á tr ì nh tạo nhũ tương. Nếu có nguy cơ chiết không h ế t thì nên tiến hành lặp l ạ i qui tr ì nh sử dụng một lượng mẫu thử nhỏ hơn ( V 1 ). Rửa pha h ữ u cơ với 50 ml nước b ằ ng cách khuấy trộn kỹ dịch chiết. Ngay khi th ấ y có nhũ tương tạo thành trong quá trình khuấy trộn th ì loại bỏ ngay pha nước. Chuy ể n pha hữu cơ vào ống ly tâm mới có chứa 2 g natri sul f at khan (5.5) được dùng như chất làm khô. Trộn nhanh bằng đũa thủy tinh v à ly tâm. Rót c ẩ n thận pha ete dầu m ỏ sang b ì nh định mức 100 ml (6.8). Hòa phần kết tủa trong 30 ml ete d ầu mỏ, khuấy bằng đũa thủy tinh và ly tâm l ại. Thêm một phần ete dầu mỏ có màu nhạt vào dịch chiết ban đầu và thêm ete dầu mỏ đến vạch 100 m l ( V 2 ). Đo độ hấp thụ của dung dịch so với mẫu trắng ete d ầ u mỏ ở bước sóng 450 nm, sử dụng các cuvet có đường quang 10 mm (6.2). 7.3 . Xác định từng phân đoạn carotenoid 7.3.1 . Chuẩn bị cột sắc ký Huyền phù 28 g đến 30 g nhôm oxit đã khử một phần hoạt t í nh (5.10) trong khoảng 30 ml ete dầu m ỏ và rót huyền phù vào ố ng sắc ký (6.5) đã được đậy bằng nút bông thủy tinh nh ỏ và đã được đổ đầy ete dầu m ỏ . Tháo ete dầu mỏ cho đến khi vừa phủ bề mặt nhôm ôxit. Đ ể bảo vệ cột nhồi tránh tạo bọt khí, cần đ ả m bảo nhiệt độ của ete dầu mỏ và nhôm ôxit không chênh lệch đáng kể. Chiều cao của cột nhồi nên xấp x ỉ 8 cm. 7.3.2 . Xác định từng phân đoạn carotenoid Chuyển định lượng chất chiết trong ete dầu mỏ của tổng carotenoid thu được trong 7.2 v à o b ì nh c ầ u 250 ml (6.9) và loại b ỏ dung môi ở khoảng 40 ° C trong chân không, sử dụng bộ cô quay (6.6). H ò a tan ngay phần còn lại với vài mililit ete dầu mỏ v à dùng pipet lấy cẩn thận cho vào cột sắc ký (7.3.1) Tráng b ì nh bằng các lượng nhỏ dung môi với tất c ả khoảng 10 ml để đ ả m b ả o rằng không có thất thoát mẫu. CHÚ THÍCH 1: Trong quá trình đưa dung dịch mẫu lên cột, cần tránh mọi sự khuếch tán nh ô m ôxit và mức dung dịch mẫu c ầ n ngang b ằ ng bề mặt của chất hấp phụ trước khi tráng b ằ ng các lượng nhỏ dung môi. Rửa giải các phần carotenoid với tốc độ dòng 2 giọt trên giây sử dụng các dung môi sau: - ete dầu mỏ (5.4) đ ố i với phân đoạn I (3.1.1) (còn được gọi l à phần caroten); - hỗn hợp rửa giải A (5.7) đối v ớ i phân đoạn II (3.1.2) (còn được gọi l à phần cryptox a nthin este); - hỗn hợp rửa giải B (5.8) đối với ph â n đoạn III (3.1.3) (còn được gọi l à ph ầ n xantophyll este). Loại b ỏ phần nước tráng rửa thứ nhất không màu để giảm t ổ ng thể tích rửa giải. Đ ể đảm bảo r ử a giải hoàn toàn t ừ ng phân đoạn, tiến hành rửa giải cho đến khi chất rửa giải không màu. Vì hàm lượng carotenoid của từng phân đoạn phụ thuộc vào từng loại qu ả và loại đồ u ố ng, nên không thể đưa ra được thể tích rửa giải cụ thể. Tuy nhiên, kinh nghiệm cho thấy rằng lượng ch ấ t rửa giải yêu cầu của phân đoạn I và phân đoạn II yêu cầu các th ể tích rửa giải là khoảng 50 ml. Đối với mức cao hơn của phân đoạn II cần đến 100 ml và thông thường đối với phân đoạn III cần từ 80 ml đến 100 ml. Thêm ete dầu mỏ (5.4) đến vạch và ghi lại thể tích là ( V 2 ) đối với mỗi phân đoạn. Đo độ hấp thụ của từng phân đoạn so với mẫu trắng ete dầu mỏ ở bước sóng 450 nm, sử dụng các cuvet có chiều dài đường quang 10 mm (6.2). CHÚ TH Í CH 2: T ỷ l ệ khác nhau của toluen không ảnh hư ở ng đến độ hấp thụ. CH Ú TH Í CH 3: Các carotenoid giữ lại trên cột có thể được rửa giải ở phân đoạn IV (3.1.4) khi sử dụng axeton (5.3). Tổng các phân đoạn carotenoid được rửa giải ra khỏi cột phải í t nhất 90 % tổng hàm lượng carotenoid. Nếu giá trị này th ấ p hơn nhiều th ì có th ể b ổ sung Bixin vào mẫu, khi đó có thể cho thấy phần cặn có màu đ ỏ /vàng trên cột sau khi r ử a giải phân đoạn IV. CHÚ TH Í CH 4: Bixin có th ể được rửa giải bằng hỗn hợp rửa giải ch ứ a bốn ph ầ n axeton và một phần amoniac. Sự có mặt ch ấ t này có th ể được khẳng định bằng các phương pháp sắc ký khác. 8. Tính kết quả Tính tổng hàm lượng carotenoid v à hàm lượng từng phân đoạn carotenoid, r (C 4 0 H 56 ), biểu thị theo b -caroten theo Công thức sau: (2) Trong đó: r ( C 40 H 56 ) là tổng hàm lượng carotenoid của từng phân đoạn carotenoid ( tính bằng miligam trên lít s ả n phẩm) (mg/l). A là độ hấp phụ của dịch chiết chất rửa giải (7.3) trong ete dầu mỏ (7.2) 4,00 là hệ số chuyển đ ổ i trung bình đã được thiết lập thu được từ phép thử vòng tròn có t í nh đến hệ số hấp phụ trung bình của b -caroten trong ete dầu mỏ và mọi sự pha loãng nào trong quá trình phân tích. CHÚ THÍCH: V ì b -caroten bán sẵn có chất lượng rất khác nhau, nên kh ó ước t í nh được các lượng carotenoid kh á c nhau t ừ đường chu ẩ n, l ấ y trung b ì nh hệ số hấp thụ trung b ì nh của b -caroten. V 1 là th ể tích của phần mẫu thử, tính bằng mililit (ml) ( trong 7.2 là 5 ml đến 50 ml). V 2 l à thể tích của ch ấ t chiết trong ete dầu mỏ, (trong 7.2 l à 100 ml) hoặc thể tích của ch ấ t rửa giải khác nhau (7.3), t í nh bằng mililit (ml). Cần tính đến hệ s ố pha loãng và mối liên hệ của giá trị với khối lượng hoặc thể tích. Nếu sản phẩm đặc đã được pha loãng đến nồng độ đơn (nồng độ ban đầu) th ì ghi lại tỷ trọng tương đối của mẫu có nồng độ đơn đó. Báo cáo tổng hàm lượng carotenoid r (C 40 H 56 ) của mẫu th ử bằng miligam trên lít đến một chữ số thập phân v à hàm lượng của các ph â n đoạn carotenoid từ I đến III, theo phần trăm của tổng hàm lượng carotenoid đến một chữ s ố thập phân. 9. Độ chụm Chi tiết của phép thử liên phòng th ử nghiệm về độ ch ụ m của phương pháp được nêu trong Phụ lục A. Các giá trị thu được từ các phép thử liên phòng thử nghiệm n à y có thể không áp dụng được cho các d ả i nồng độ và nền mẫu khác với các dải nồng độ và nền mẫu đ ã nêu trong Phụ lục A. 9.1 . Độ lặp lại Chênh lệch tuyệt đối giữa hai kết quả thử nghiệm đơn l ẻ thu được khi tiến hành thử trên vật liệu th ử giống hệt nhau, do cùng một người phân tích, sử dụng cùng một thiết bị, trong một khoảng thời gian ngắn, không được quá 5 % các trư ờ ng hợp lớn hơn giới hạn lặp lại r . Đối với tổng hàm lượng carotenoid th ì độ lặp lại: r = 0,2 mg/l. Đối với ph â n đoạn carotenoid I độ lặp lại r là : nectar cam: r = 0,8 %. nectar quýt: r = 0,8 %. Đối với phân đoạn carotenoid II độ lặp lại r là: nectar cam: r = 0,8 % nectar quýt: r = 2,4 %. Đối với phân đoạn carotenoid III độ lặp lại r là: nectar cam: r = 1,3 %. nectar quýt: r =1,6 %. 9.2 . Độ tái lập Chênh l ệch tuyệt đ ố i giữa hai kết quả t hử nghiệm đơn l ẻ , thu được khi tiến hành thử trên vật liệu thử giống hệt nhau, do hai phòng thử nghiệm phân tích, không được quá 5 % trường hợp lớn hơn giới hạn tái lập R . Đối với tổng hàm lượng carotenoid th ì độ tái lập: R = 0,7 mg/l. Đối với phân đoạn carotenoid I độ tái lập R là: nectar cam: R = 1,4 %. nectar quýt: R = 2,0 %. Đ ố i với phân đoạn carotenoid II độ tái lập R là: nectar cam: R = 2,1 %. nectar quýt: R = 6,3 %. Đối với ph â n đoạn carotenoid III độ tái lập R là : nectar cam: R = 3,2 %. nectar quýt: R = 3,5 %. 10. Báo cáo thử nghiệm Báo cáo thử nghiệm phải bao gồm: - mọi thông tin cần thiết để nhận biết mẫu (loại mẫu, nguồn gốc mẫu, ký hiệu); - viện dẫn tiêu chuẩn này; - ng à y và phương pháp lấy mẫu (nếu biết); - ngày nhận mẫu; - ngày thử nghiệm; - kết qu ả thử nghiệm và các đơn vị biểu thị; - độ lặp lại của phương pháp đã được đánh giá; - các điểm cụ thể quan sát được trong quá trình thử nghiệm; - mọi thao tác không qui định trong tiêu chuẩn này, hoặc được xem là tùy chọn, cùng v ớ i mọi tình huống b ấ t thường c ó thể ảnh hư ở ng đến kết quả thử nghiệm. PHỤ LỤC A (Tham khảo) Các kết quả thống kê của phép thử liên phòng thử nghiệm Các thông số sau đây thu được trong phép thử liên phòng thử nghiệm phù hợp với ISO 5725:1986 (Đối với tài liệu liên quan đến phương pháp, xem Thư mục tài liệu tham khảo). Phép thử do Hiệp hội Quả quốc tế, Paris, Pháp tổ chức thực hiện. Năm tiến hành phép thử liên phòng th ử nghiệm: 1988 Số lượng các phòng th ử nghiệm: 12/11 Số lượng mẫu: 3 đối với tổng hàm lượng carotenoid và 2 đối với ba phân đoạn carotenoid. Loại mẫu: A nectar cam; B nectar quýt; C nectar quả lạc tiên. Bảng A.1 - T ổ ng hàm lư ợ ng carotenoid Mẫu A B C Số lượng phòng th ử nghiệm được giữ lại sau khi trừ ngoại lệ 12 12 11 S ố lượng phòng th ử nghiệm ngoại lệ - - - Số lượng các kết quả được chấp nhận 60 60 55 Giá trị trung b ì nh, , mg/l 2,5 4 , 8 3,5 Độ lệch chu ẩ n lặp lại, s r , mg/l Độ lệch chu ẩ n tương đối lặp lại, RSD r , % 0 , 083 3,4 0,105 2,2 0,062 1 , 8 Giới hạn lặp lại, r , mg/l 0,2 0,3 0,2 Độ lệch chuẩn tái lập, s R , mg/l Đ ộ l ệ ch chu ẩ n tương đối tái lập, RSD R , % 0,188 7,5 0,227 4 , 7 0 , 290 8 , 3 Giới h ạ n tái l ậ p , R , mg/l 0,5 0 , 6 0,8 B ả ng A.2 - Phần carotenoid I Mẫu A B Số lượng phòng th ử nghiệm được giữ lại sau khi trừ ngoại lệ 12 12 S ố lượng phòng th ử nghiệm ngoại lệ - - Số lượng các kết quả được chấp nhận 60 60 Giá trị trung b ì nh, , % 1) 3,6 3,8 Độ lệch chu ẩ n lặp lại, s r , % Độ lệch chu ẩ n tương đối lặp lại, RSD r , [ % ] 0,274 7,6 0,283 7 , 4 Giới hạn lặp lại, r , % 0,8 0 , 8 Độ lệch chuẩn tái lập, s R , % Đ ộ l ệ ch chu ẩ n tương đối tái lập, RSD R , [ % ] 0,503 14,0 0,715 18,8 Giới h ạ n tái l ậ p , R , % 1,4 2,0 1 ) liên quan đến tổng hàm lượng carotenoid. Bảng A.3 - Phần carotenoid II M ẫ u A B Số lượng phòng th ử nghiệm được giữ lại sau khi trừ ngoại lệ 10 11 S ố lượng phòng th ử nghiệm ngoại lệ 2 1 Số lượng các kết quả được chấp nhận 50 55 Giá trị trung b ì nh, , % 1) 6,4 29,5 Độ lệch chu ẩ n lặp lại, s r , % Độ lệch chu ẩ n tương đối lặp lại, RSD r , [ % ] 0,275 4 , 3 0,868 2,9 Giới hạn lặp lại, r , % 0 , 8 2,4 Độ lệch chuẩn tái lập, s R , % Đ ộ l ệ ch chu ẩ n tương đối tái lập, RSD R , [ % ] 0,747 11,7 2,254 7,6 Giới h ạ n tái l ậ p , R , % 2,1 6,3 1 ) liên quan đến tổng hàm lượng carotenoid. B ả ng A.4 - Phần carotenoid III Mẫu A B Số lượng phòng th ử nghiệm được giữ lại sau khi trừ ngoại lệ 11 12 S ố lượng phòng th ử nghiệm ngoại lệ 1 - Số lượng các kết quả được chấp nhận 55 60 Giá trị trung b ì nh, , % 1) 15,7 9,2 Độ lệch chu ẩ n lặp lại, s r , % Độ lệch chu ẩ n tương đối lặp lại, RSD r , % 0,454 2,9 0,554 6,0 Giới hạn lặp lại, r , % 1,3 1,6 Độ lệch chuẩn tái lập, s R , % Đ ộ l ệ ch chu ẩ n tương đối tái lập, RSD R , % 1,140 7 , 3 1,239 13,5 Giới h ạ n tái l ậ p , R , % 3 , 2 3,5 1 ) liên quan đến tổng hàm lượng carotenoid. THƯ MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] KOCH, J., SAJAK, E. Uber Naturfarbstoffe in Citrus f ruchten, I. Mitteilung, Orangen-und Mandarineorangen-Carotioide. In; Zeitschrift fur Lebensmittel und-forschung 126 (1965), Nr 4, S . 260-271. [2] ROTHER., H. W eitere Untersuchungen uber das Verha l tnis von Carotin zu den Carotinoiden in Orangensa f ten u nd neue Moglichkeiten zur Farbung von Sa f ten und Getranken. In: Mineral w asser -Zeitung 15 (1962), Nr 5, S.65-73. [3] W ALLRAUCH, S . Ve rf ahren zur Isolierung der Carotinoide aus Sa f ten und Getranken. In: Flunssiger Obst 51 (1984), Nr 2, S . 64-66. [4] Determination o f total carotenoid and f rations . No. 59, 1991. In: The Collected Analyses of the International Federation of Fruit Juice Producers Loose-leaf edition, as of 1996. Zug: Swiss Fruit Union. 1) ISO 5725:1986 , Prec i sion of test methods - Deter m ination of repealability and reproducibil it y f or a s tandard test me t ho d by int e r -labora t o r y tes t d ùng để thu được dữ liệu v ề độ chụm. Ti ê u chu ẩ n n à y đã hủy v à được thay bằng b ộ tiêu chu ẩ n ISO 5725 (g ồ m 6 ph ầ n) v à đã được chấp nhận thành bộ TCVN 6910 (ISO 5725) .