TCVN4884-1:2015

Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 4884-1:2015 (ISO 4833-1:2013) về Vi sinh vật trong chuỗi thực phẩm - Phương pháp định lượng vi sinh vật - Phần 1: Đếm khuẩn lạc ở 30 độ C bằng kỹ thuật đổ đĩa TIÊU CHUẨN QUỐC GIA TCVN 4884-1:2015 ISO 4833-1:2013 VI SINH VẬT TRONG CHUỖI THỰC PHẨM - PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG VI SINH VẬT - PHẦN 1: ĐẾM KHUẨN LẠC Ở 30 ĐỘ C BẰNG KỸ THUẬT ĐỔ ĐĨA Microb i ology of the food c hain - Horizontal method for the enumeration of microorganisms - Part 1: Colony count at 30 degrees C by the pour plate technique Lời nói đầu TCVN 4884-1:2015 hoàn toàn tương đương với ISO 4833-1:2013; TCVN 4884-1:2015 cùng với TCVN 4884-2:2015 thay thế TCVN 4884:2005; TCVN 4884-1:2015 do Ban kỹ thuật tiêu chuẩn quốc gia TCVN/TC/F13 Phương pháp phân tích và lấy mẫu biên soạn, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Ch ấ t lượng thẩm định, Bộ Khoa học và Công nghệ công bố; Bộ tiêu chu ẩ n TCVN 4884 (ISO 4833) Vi sinh vật trong chuỗi thực ph ẩ m - Phương pháp định lượng vi sinh v ậ t , gồm các phần sau đây: - TCVN 4884-1:2015 (ISO 4 8 33-1:2013), Phần 1: Đếm khuẩn lạc ở 30 °C bằng kỹ thuật đ ổ đĩa; - TCVN 4884-2:2015 (ISO 4833-2:2013) , Phần 2: Đếm khu ẩ n lạc ở 30 °C b ằ ng kỹ thuật cấy bề mặt. VI SINH VẬT TRONG CHUỖI THỰC PHẨM - PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG VI SINH VẬT - PHẦN 1: ĐẾM KHUẨN LẠC Ở 30 °C BẰNG KỸ THUẬT ĐỔ ĐĨA Microbio l ogy of the food c hain - Horizontal method for the enumeration of microorganisms - Part 1: Colony count at 30 °C by the pour plate technique 1 Phạm vi áp dụng Tiêu ch uẩ n này quy định phương pháp đ ị nh lượng vi sinh vật có thể phát triển và hình thành khuẩn lạc trong môi trường đặc sau khi ủ hiếu khí ở 30 °C. Phương pháp này áp dụng cho: a) thực phẩm và thức ăn chăn nuôi; b) các mẫu môi trường trong khu vực sản xuất, chế biến thực ph ẩ m và thức ăn chăn nuôi. Tiêu chuẩn này áp dụng cho: 1) các sản phẩm yêu cầu số lượng khu ẩ n l ạc phát hiện được dưới mức quy đ ị nh (dưới 10 2 cfu/g hoặc 10 2 cfu/ml đối v ớ i mẫu dạng lỏ ng hoặc dưới 10 3 cfu/g đ ố i với mẫu dạng rắn). 2) các sản ph ẩ m dự kiến c ó chứa các khuẩn lạc mọc lan che khuất các khuẩn lạc của vi sinh vật khác, ví dụ: sữa và các sản ph ẩ m sữa có thể chứa Bacillus spp. mọc lan. Khả năng áp dụng của tiêu chuẩn này bị hạn chế khi kiểm tra thực phẩm và thức ăn chăn nuôi đã lên men; các môi trường hoặc điều kiện ủ khác c ó thể sẽ thích hợp hơn. Tuy nhiên, phương pháp này có thể áp dụng cho các sản phẩm nêu trên mặc dù không hiệu quả khi phát hiện các vi sinh vật chiếm ư u thế trong các sản phẩm đó. Đối với một vài nền mẫu, phương pháp quy định trong tiêu chu ẩ n này có thể cho các kết quả khác với các kết qu ả thu được khi sử dụng phương pháp quy định trong TCVN 4884-2 (ISO 4833-2). 2 Tài liệu viện dẫn Các tài liệu viện dẫn sau rất cần thiết cho việc áp dụng tiêu chuẩn này. Đối với các tài liệu viện dẫn ghi năm công bố thì áp dụng phiên bản được nêu. Đối với các tài liệu viện dẫn không ghi năm công bố thì áp dụng phiên bản mới nhất, bao gồm cả các sửa đổi, bổ sung (nếu có). TCVN 6404 (ISO 7218), Vi sinh vật trong thực phẩm và thức ăn chăn nuôi - Yêu cầu chung và hướng dẫn kiểm tra vi sinh vật. TCVN 6507 ( ISO 6887) (tất cả các phần), Vi sinh vật trong thực phẩm và thức ăn chăn nuôi - Chuẩn bị mẫu thử, huyền phù ban đầu và các dung dịch pha lo ã ng thập phân để kiểm tra vi sinh vật. TCVN 8128 (ISO 11133), Vi sinh vật trong thực phẩm, thức ăn chăn nuôi và nước - Chuẩn bị, sản xuất, bảo qu ản v à thử hiệu năng của môi trường nuôi cấy. 3 Thuật ngữ và định nghĩa Trong tiêu chu ẩ n này sử dụng các thuật ngữ và đ ị nh nghĩa sau: 3.1 V i sinh vật (microorganism) Cơ thể sống có kích thước rất nhỏ quan sát được bằng kính hiển v i , bao gồm vi khuẩn, nấm, động vật nguyên sinh và virus. [nguồn: ISO/TS 11139:2006 [3] , 2.26]. CHÚ TH Í CH 1 Đối với mục đích của tiêu chuẩn này thì vi sinh vật gồm vi khu ẩ n, nấm men, nấm mốc có thể h ì nh thành khuẩn lạc dư ớ i các điều kiện quy định trong tiêu chuẩn n ày. 4 Nguyên tắc Lượng quy định c ủ a m ẫ u thử dạng lỏng hoặc lượng quy định của huyền phù ban đầu trong trường hợp các sản phẩm ở dạng khác, được rót vào đĩa Petri và trộn với môi trường nuôi cấy thạch tan chảy quy định. Chuẩn bị các đ ĩ a khác dưới cùng một điều kiện, s ử dụng dung dịch pha loãng thập phân của mẫu thử hoặc huyền phù ban đầu. Các đĩa được ủ trong điều kiện hiếu khí ở 30 °C trong 72 h. Tính s ố lượng vi sinh vật trong một gam hoặc một mililít mẫu thử theo số lượng khuẩn lạc thu được trong các đĩa có chứa ít hơn 300 khuẩn lạc. 5 Môi trường nuôi cấy và dịch pha loãng 5.1 Yêu cầu chung Chuẩn bị, s ả n xuất và thử hiệu năng của môi trường nuôi cấy theo TCVN 8128 (ISO 11133). 5.2 Dịch pha loãng Sử dụng dịch pha loãng quy đ ị nh trong TCVN 6507 (ISO 6887) đối với sản phẩm liên quan hoặc tiêu chu ẩ n cụ thể liên quan đến sản phẩm cần kiểm tra. 5.3 Môi trường thạch: thạch đếm đĩa ( PCA) 5.3.1 Thành phần Sản ph ẩ m th ủ y phân casein bằng enzym 5,0 g Chất chiết nấm men 2,5 g Glucose (C 6 H 1 2 O 6 ), khan 1,0 g Thạch a từ 9 g đến 18 g Nước 1 000 ml a Tùy thuộc v à o sức đông của thạch. Khi kiểm tra các sản phẩm sữa, b ổ sung 1,0 g sữa bột gầy vào một lít môi trường nuôi cấy. Sữa bột gầy không được chứa các chất gây ức chế. 5.3.2 Chuẩn b ị Hòa tan các thành phần trên hoặc môi trường hoàn chỉnh khô vào nước, đun n ó ng nếu cầ n. Trộn kỹ và để y ê n trong vài phút. Ch ỉ nh pH sao cho sau khi khử trùng là 7,0 ± 0,2 ở 25 °C, sử dụng máy đo pH (6.4), n ế u cần. Phân phối môi trường vào các ống nghiệm, bình hoặc chai (6.8) có dung tích thích hợp. Khử trùng trong nồi hấp áp lực (6.1) ở 121 °C trong 15 min. Nếu sử dụng ngay thì làm nguội môi trư ờ ng trong nồi cách thủy (6.3) duy trì nhiệt độ từ 44 °C đến 47 °C trước khi sử d ụng. Nếu không, bảo quản nơi tối ở nhiệt độ (5 ± 3) °C không quá 3 tháng, dưới các điều kiện không làm thay đổi th à nh phần và đặc tính của môi trường. Trước khi kiểm tra vi sinh vật, làm tan ch ả y hoàn toàn môi trường rồi để nguội trong nồi cách thủy (6.3) duy trì nhiệt độ từ 44 °C đến 47 °C trước khi sử dụng. Xem TCVN 8128 (ISO 11133). Sử dụng môi trường thạch tan chảy càng sớm càng tốt, không nên để quá 4 h. 5.3.3 Phép thử hiệu năng của môi trường nuôi cấy 5.3.3.1 Yêu c ầ u chung Trong tiêu chu ẩ n này sử dụng thạch đếm đ ĩ a là môi trường không chọn lọc. Kiểm tra hiệu suất theo TCVN 8128 (ISO 11133). 5.3.3.2 Hiệu suất Ủ Nhiệt độ (30 ± 1) °C trong (72 ± 3) h Chủng kiểm chứng Escher i chia coli WDCM 00013 hoặc Escher i chia coli WDCM 00012 a [Trung tâm Dữ liệu Thế giới về Vi sinh vật (WDCM)]. Bacillus subtillis subsp. spizizenii W DCM 00003 a Staphylococcus aureus W DCM 00032 hoặc Staphylococcus aureus WDCM 00034 Môi trường đối ch ứ ng Thạch đậu tương trypton Phương pháp kiểm chứng Định lượng Tiêu chí Tỷ số hiệu suất ( PR) ≥ 0,7 a Các chủng được sử dụng trong phòng thử nghiệm là tối thiểu . Xem Tài liệu tham khảo [ 2] thông tin về số lượng các chủng nuôi cấy chọn lọc và các chi tiết liên quan. 5.4 Môi trường thạch ph ủ (xem 9.2.7, nếu c ần ) 5.4.1 Thành phần Thạch a từ 12 g đến 18 g Nước 1 000 ml a Tùy thuộc vào sức đông của thạch. 5.4.2 Chuẩn bị Cho thạch v à o nước và đun đến s ô i, khuấy liên tục cho đến khi thạch hòa tan hoàn toàn hoặc khuấy b ằ ng nước nóng trong khoảng 30 min. Ch ỉ nh pH sao cho sau khi khử trùng l à 7,0 ± 0,2 ở 25 °C dùng máy đo pH (6.4), nếu cần. Phân phối m ô i trường vào các ố ng nghiệm, bình hoặc chai (6.8) có dung tích thích hợp. Kh ử trùng trong nồi hấp áp lực ở 121 °C t rong 15 min. N ế u sử dụng môi trường ngay th ì làm nguội trong nồi cách thủy (6.3) duy tr ì nhiệt độ từ 44 °C đến 47 °C trước khi sử dụng. Nếu không, bảo qu ả n môi trường nơi tối ở nhiệt độ (5 ± 3) °C kh ô ng quá 3 tháng dưới các điều kiện không l à m thay đổi thành p hầ n v à đặc tính của m ô i trường. Trước khi bắt đầu kiểm tra vi sinh vật, làm tan chảy hoàn toàn môi trường rồi để nguội trong nồi cách thủy (6.3) duy tr ì nhiệt độ từ 44 °C đến 47 °C trước khi sử dụng, x e m TCVN 8128 (ISO 11133). 6 Thiết bị, dụng cụ Có thể sử dụng dụng cụ dùng một lần thay thế cho các dụng cụ thủy tinh và chất dẻo dùng nhiều lần nếu chúng có các đặc tính thích h ợ p. S ử dụng các thiết bị của phòng thử nghiệm vi sinh [xem TCVN 6404 (ISO 7218)] và cụ thể như sau: 6.1 T ủ s ấ y để khử trùng khô hoặc nồi h ấ p áp lực để khử trùng ướt, theo TCVN 6404 (ISO 7218). 6.2 T ủ ấ m, có thể d uy trì nhiệt độ ở (30 ± 1) °C. 6.3 Nồi cách th ủ y, có thể duy trì nhiệt độ từ 44 °C đến 47 °C. 6.4 Máy đo pH, có độ chính xác trong khoảng ± 0,1 đơn vị pH ở 25 °C. 6.5 Đ ĩ a Petri, bằng thủy tinh hoặc chất dẻo c ó đường kính từ 90 mm đến 100 mm. 6.6 Pipet chia vạch xả h ế t, dung tích danh đ ịn h 1 ml, được chia vạch 0,1 m l , phù hợp với loại A trong TCVN 7150 (ISO 835) [1] hoặc pipet tự động phù hợp với TCVN 10505-2 (ISO 8655-2) [2] , sử dụng đầu tip vô trùng. 6.7 Thiết bị đếm khuẩn lạc (tùy chọn), cơ học hoặc điện tử có nền được rọi sáng thích hợp. 6.8 Ố ng nghiệm, bình hoặc chai , có dung tích thích hợp và không quá 500 ml. 7 Lấy mẫu Việc lấy mẫu không quy định trong ti ê u chuẩn này. Xem tiêu chu ẩ n c ụ thể v ề lấy mẫu sản phẩm có liên quan. Nếu không c ó tiêu chu ẩ n cụ thể thì các bên liên quan tự thỏa thuận v ề vấn đề này. Ph ò ng thử nghiệm phải nhận được đúng mẫu đại diện và không bị hư hỏng thay đổi trong quá tr ì nh vận chuyển hoặc bảo quản. 8 Chuẩn bị mẫu thử Chuẩn bị mẫu thử theo tiêu chu ẩ n cụ thể thích hợp với sản phẩm liên quan. 9 Cách tiến hành 9.1 Phần mẫu thử, huyền phù ban đ ầ u và các dung dịch pha loãng Theo quy định trong TCVN 6507 (ISO 6887) hoặc tiêu chuẩn cụ thể thích hợp với sản ph ẩ m liên quan. 9.2 Cấy và ủ 9.2.1 Lấy hai đĩa Petri vô trùng (6.5). Dùng pipet vô trùng (6.6) cho vào mỗi đĩa 1 ml mẫu thử nếu sản phẩm dạng lỏ ng hoặc 1 ml huyền phù ban đầu (độ pha loãng 10 - 1 ) trong trường hợp các sản phẩm ở dạng khác. Nếu chuẩn bị các đĩa từ nhiều hơn một độ pha loãng thì c ó thể giảm xuống thành một đĩa [TCVN 6404 (ISO 7218)]. 9.2.2 Lấy một đĩa Petri vô trùng (6.5) khác. Dùng một pipet vô trùng khác (6.6) phân phối 1 ml dịch pha loãng 10 - 1 ( sả n phẩm dạng l ỏ ng) hoặc 1 ml dịch pha loãng 10 -2 (các sả n phẩm dạng khác). 9.2.3 Nếu cần, lặp lại quy trình với các dịch pha loãng tiếp theo, dùng pipet mới vô trùng với mỗi dịch pha loãng thập phân. 9.2.4 Nếu thích hợp chỉ chọn các độ pha loãng tới hạn (ít nhất hai dịch pha loãng thập phân liên tiếp) để cấy các đĩa Petri sao cho thu được từ 10 Khuẩn lạc đến 300 khu ẩ n lạc trên một đĩa. 9.2.5 Rót vào mỗi đĩa Petri khoảng từ 12 ml đến 15 ml môi trường thạch đếm đĩa (5.3) ở nhiệt độ từ 44 °C đến 47 °C. Thời gian từ khi chuẩn bị xong huyền phù ban đầu (hoặc dịch pha loãng 10 -1 nếu sản phẩm dạng lỏng) đến khi rót môi trường thạch đếm đĩa (5.3) vào các đĩa không được quá 45 min. 9.2.6 Trộn cẩn thận dịch cấy với môi trường bằng cách xoay đĩa Petri và để hỗn hợp đông đặc lại bằng cách đặt các đĩa Petri trên bề mặt nằm ngang ở nơi mát. 9.2.7 Sau khi hỗn hợp đông đặc hoàn toàn và nếu nghi ngờ cần kiểm tra sản phẩm có chứa các vi sinh vật có khuẩn lạc mọc lan trên bề mặt của môi trường, thì rót khoảng 4 ml môi trư ờ ng thạch phủ (5.4) hoặc môi trường thạch đếm đĩa (5.3) ở nhiệt độ 44 °C đến 47 °C lên bề mặt môi trường đã cấy mẫu. Để cho đông đặc như trong 9.2.6. 9.2.8 Lật ngược các đĩa đã chu ẩ n bị và đ ặ t vào t ủ ấm (6.2) ở (30 ± 1 ) °C theo TCVN 6404 (ISO 7218). Ủ trong (72 ± 3) h. 9.3 Đ ế m khuẩn lạc 9.3.1 Sau giai đoạn ủ quy đ ị nh (9.2.8), giữ lại các đĩa có ít hơn 300 khuẩn lạc, nếu có thể. Đếm các khu ẩ n lạc trên các đĩa, sử dụng thiết bị đếm khu ẩ n lạc (6.7), nếu cần. Kiểm tra các đĩa dưới ánh sáng dịu. Điều quan trọng là các khuẩn lạc ch í nh phải được đếm; tuy nhiên, điều cần thiết là phải tránh đếm nhầm các hạt không hòa tan hoặc chất kết tủa trên đĩa với các khuẩn lạc chính. Kiểm tra c ẩ n thận các khuẩn lạc nghi ngờ, sử dụng kính lúp có độ khuếch đại lớn hơn khi cần để phân biệt các khuẩn lạc với tạp chất. 9.3.2 Các khuẩn lạc mọc lan được coi là các khu ẩ n lạc đơn lẻ. Nếu các khu ẩ n lạc mọc lan ít hơn một phần tư đĩa, thì đếm các khuẩn lạc trên p hầ n đĩa còn lại và t í nh số tương ứng cho cả đĩa. Nếu khuẩn lạc mọc lan hơn một phần tư đĩa thì không đ ế m đĩa đó. 10 Biểu thị kết quả 10.1 Phương pháp tính Xem quy t rì nh quy đị nh trong TCVN 6404 (ISO 7218). 10.2 Độ chụm 10.2.1 Yêu cầ u chung Các dữ liệu về độ chụm đ ã được đánh giá đối với các đĩa có chứa nhiều hơn 15 khuẩn lạc và ít hơn 300 khuẩn lạc. Các dữ liệu về độ chụm tùy thuộc vào sự liên kết hệ vi sinh vật và các chất nền mẫu. Các dữ liệu này thu được từ các nghiên cứu cộng tác (xem Tài liệu tham khảo [4], [5] và [6]) và có giá trị đối với sữa nguyên liệu và sữa thanh trùng. Các dữ liệu này được sử dụng làm các số ước tính khi xác định được số khuẩn lạc có trong sản phẩm khác. 10.2.2 Độ lặp lại Chênh lệch tuyệt đối giữa các kết quả của hai phép thử độc lập đơn lẻ, thu được khi sử dụng cùng phương pháp, trên vật liệu thử giống hệt nhau, trong cùng một phòng th ử nghiệm, do cùng một người thực hiện, sử dụng cùng thiết b ị , thực hiện trong khoảng thời gian ngắn, tính theo log 10 N , trong đó N là số vi sinh vật có trong một mililit (tương ứng với 1,8 trên thang chu ẩ n tính bằng số vi sinh vật có trong một mililit) không được vượt quá giới hạn lặp lại, r = 0,25. CH Ú THÍCH Giới hạn lặp lại này thu được từ các nghiên cứu cộng tác về sữa nguyên liệu và sữa thanh trùng (xem Tài liệu tham khảo [4], [5] và [6]) và có thể được sử dụng cho các sản phẩm này. 10.2.3 Độ tái lập Chênh lệch tuyệt đối giữa các kết quả của hai phép thử đơn lẻ, thu được khi sử dụng cùng phương pháp, trên vật liệu thử giống hệt nhau, trong các phòng thử nghiệm khác nhau, do những người khác nhau thực hiện, tính theo l og 10 N , trong đó N l à số vi sinh vật có trong một mililit (tương ứng với 2,8 trên thang danh định tính bằng số v i sinh vật có trong một mililit) không được vượt quá giới hạn tái lập, R = 0,45. CH Ú THÍCH Giới hạn tái lập n à y thu được từ các nghi ê n cứu cộng tác v ề sữa nguy ê n liệu và sữa thanh tr ù ng (xem Tài liệu tham khảo [4 ] , [ 5] và [6]) và có thể được sử dụng cho các sản ph ẩ m này. 10.3 Giải thích các kết quả thử nghiệm 10.3.1 Yêu cầu chung Trong các ví dụ (10.3.2 và 10.3.3), các dữ liệu về độ chụm trung b ì nh, mức xác suất là 95 % và phân tích một mẫu đã được xem xét. Cần lưu ý rằng, trong các điều kiện thực tế thường sử dụng trung b ì nh của một vài mẫu. Các số được tính bằng số vi sinh vật có trong một mililit. 10.3.2 Các điều kiện lặp lại Kết quả thứ nhất: 10 5 = 100 000 Chênh lệch giữa kết quả thứ nhất và thứ hai không được quá 0,25 log 10 N . Kết quả thứ hai: Giới hạn dưới: 10 4 , 75 = 56 000. Giới hạn trên: 10 5 , 25 = 178 000 Chênh lệch giữa kết quả thứ nhất và thứ hai có thể được chấp nhận n ế u các kết quả thứ hai không thấp hơn 56 000 hoặc không cao hơn 178 000. 10.3.3 Các điều kiện tái lập Các kết quả thu được trong phòng thử nghiệm thứ nh ấ t (trung bình của phép xác định kép): 10 5 = 100 000 Chênh lệch giữa kết qu ả thứ nhất và kết quả thứ hai thu được trong phòng thử nghiệm thứ hai phải không lớn hơn 0,45 log 10 N c ủ a các đơn vị: Kết quả thứ hai: Giới hạn dưới: 10 4 , 5 5 = 36 000 hoặc Giới hạn trên: 1 0 5 , 45 = 280 000 Chênh lệch giữa các kết quả thu được bởi phòng thử nghiệm thứ nhất và thứ hai có thể được chấp nhận nếu phòng thử nghiệm thứ hai thu được kết quả không thấp hơn 36 000 và không cao h ơ n 280 000. Phụ lục A đưa ra công thức tính và cách sử dụng chênh lệch tới hạn (CD) để giải thích các k ế t quả. 11 Báo cáo thử nghiệm Báo cáo thử nghiệm phải ghi rõ: a) mọi thông tin cần thiết để nhận biết đầy đủ về mẫu thử; b) phương pháp lấy mẫu đã sử dụng, nếu biết; c) phương pháp thử đã sử dụng, viện dẫn tiêu chu ẩ n này; d) tất cả các chi tiết thao tác không quy định trong tiêu chuẩn này cùng với mọi tình huống bất thường khác c ó thể ảnh hư ở ng đến kết quả; e) kết quả th ử nghiệm thu được; f) nếu kiểm tra lặp lại thì nêu kết qu ả cuối cùng thu được. Phụ lục A (Tham khảo) Cách sử dụng chênh lệch tới hạn để giải thích kết quả A.1 Yêu cầu chung Trong các ví dụ (A.2 và A.3), dữ liệu về độ chụm trung b ì nh, mức xác suất là 95 % và phân tích một mẫu đã được xem xét. Cần lưu ý rằng, trong các điều kiện thực tế thì thường sử dụng trung b ì nh của vài mẫu. Các số được tính bằng số vi sinh vật trong một mililit. A.2 Các điều kiện tái lập Các kết qu ả thu được trong ph ò ng thử nghiệm thứ nh ấ t (trung bình c ủa phép xác định kép); 10 5 = 100 000 Chênh lệch giữa kết quả này và kết quả thu được bởi phòng thử nghiệm thứ hai (trung bình c ủ a n phép xác định; trong ví d ụ này n = 2) có thể được chấp nhận nếu nó không vượt quá chênh lệch tới hạn d c , theo các đơn vị log 10 N : Trong đó: r là giới hạn lặp lại; R là gi ớ i hạn tái lập. Chênh lệch giữa các kết quả thu được bởi phòng thử nghiệm thứ nhất và thứ hai có thể đư ợ c chấp nhận nếu ph ò ng thử nghiệm thứ hai thu được kết quả không thấp hơn 10 4,59 = 39 000 và không cao hơn 10 5,41 = 257 000. A.3 So sánh với giới hạn (thử một phía) Giới hạn: 10 5 = 100 000 Nếu cần so sánh chênh lệch giữa giới hạn và kết quả phòng thử nghiệm (trung bình củ a n phép xác định; trong v í dụ này n = 2) với giới hạn CD, d CL : Các kết quả th ử nghiệm đến 10 5 , 24 = 174 000 không chỉ ra được sự không phù hợp với giới hạn. THƯ MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] TCVN 7150 (ISO 835), Dụng cụ thí nghiệm bằng thủy tinh - Pipet chia độ. [2] TCVN 10505-2 (ISO 8655-2), Dụng cụ đo thể tích có cơ cấu pittông - Phần 2: Pipet pittông. [3] ISO/TS 11139:2006, Sterilization o f health care p roducts - Vocabulary. [4] PITONC., & GRAPPIN. A model for statistica l evaluation of precision parameters of microbiological methods: Application to dry rehydratable f i lm methods and IDG re f erence methods for enumeration of total aerobic mesophilic f l ora and coli f orms in raw milk. J. Assoc. Off. Anal. Chem . 1991, 74 pp. 9 2-10 3. [5] SCOTTER S., ALDRIDGE M., BACK J ., WOOD R. Validation of European Community methods for microbio l ogical and chemical analysis of raw and heat-treated milk. J. Assoc. Public Anal . 1993, 29 pp. 1-32 [6] DAHMS S., & WEISS H. Est i mat i on of precision values for mi cr obiological re f erence methods: Standardized pour plate technique. Milchwissenschaft . 1988, 53 pp. 555-559. [7] Wor l d Data Cen t re for Microorganisms. Re f erence strain catalogue pertaining to organisms for per f ormance testing culture media. Available (viewed 2013-03-06) at: http://www.wfcc . info/pdf/WDCM_Reference_Strain Catalogue.pdf.