TCVN9021:2011

Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 9021:2011 về Rau và quả - Xác định dư lượng thuốc bảo vệ thực vật Azoxystrobin - Phương pháp sắc kí khí TIÊU CHUẨN QUỐC GIA TCVN 9021:2011 RAU VÀ QUẢ - XÁC ĐỊNH DƯ LƯỢNG THUỐC BẢO VỆ THỰC VẬT AZOXYSTROBIN - PHƯƠNG PHÁP SẮC KÍ KHÍ Vegetables and f ruits - Determination of azoxystrobin pesticide residue - Gas chromatography method Lời nói đầu TCVN 9021:2011 do Cục Bảo vệ thực vật biên soạn, Bộ Nông nghiệp và Phát triển nông thôn đề nghị, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng thẩm định, Bộ Khoa học và Công nghệ công bố. RAU VÀ QUẢ - XÁC ĐỊNH DƯ LƯỢNG THUỐC BẢO VỆ THỰC VẬT AZOXYSTROBIN - PHƯƠNG PHÁP SẮC KÍ KHÍ Vegetables and f ruits - Determination of azoxystrobin pesticide residue - Gas chromatography method 1. Phạm vi áp dụng Tiêu chu ẩn này quy định phương pháp xác định dư lượng hoạt chất thuốc bảo vệ thực vật (BVTV) azoxystrobin trong rau và quả tươi bằng sắc kí khí. 2. Nguyên tắc Dư lượng hoạt ch ấ t thuốc BVTV azoxystrobin trong mẫu thử được chiết bằng dung môi diclometan, ete dầu mỏ và axeton, được xác định bằng thiết bị sắc kí khí với detector cộng kết điện tử (ECD). 3. Thuốc th ử 3.1. Axeton. 3.2. Toluen. 3.3. Ete dầu mỏ. 3.4. Diclometan. 3.5. Natri sulfat khan, hoạt hóa 130 °C trong 8 h, để nguội, cho vào bình đậy kín, bảo quản trong bình hút ẩ m. 3.6. Hỗn hợp dung môi , chứa n -hexan v à toluen với tỉ lệ thể tích n -hexan : toluen bằng 9 : 1. 3.7. Chất chuẩn azoxystrobin , đã biết độ tinh khiết. 3.8. Dung dịch chu ẩ n gốc , nồng độ 1000 m g/ml. C â n 0,01 g chất chuẩn thuốc BVTV azoxystrobin, chính xác đến 0,01 mg, cho vào bình định mức dung tích 10 ml, thêm toluen đến vạch v à trộn. 3.9. Dung dịch chuẩn trung gian , nồng độ 10 m g/ml. Dùng micropipet lấy 200 m l dung dịch chu ẩ n gốc cho vào bình định mức dung tích 20 ml, thêm hỗn hợp dung môi đến vạch và trộn. 3.10. Dung dịch chu ẩ n làm việc 3.10.1. Dung dịch chuẩn làm việc 1 , nồng độ 0,02 m g/ml. Dùng micropipet lấy 40 m l dung dịch chuẩn trung gian cho vào b ì nh định mức dung t íc h 20 ml thêm hỗn hợp dung môi đến vạch và trộn. 3.10.2. Dung dịch chuẩn làm việc 2, nồng độ 0,1 m g/ml. Dùng pipet lấy 0,2 ml d ung dịch chuẩn trung gian cho vào bình định mức dung tích 20 ml thêm hỗn hợp dung môi đến vạch và trộn. 3.10.3. Dung dịch chuẩn làm việc 3 , nồng độ 0,5 m g/ml. Dùng pipet lấy 1 ml dung dịch chuẩn trung gian cho vào bình định mức dung tích 20 ml thêm hỗn hợp dung môi đến vạch và trộn. 3.10.4. Dung dịch chuẩn làm việc 4, nồng độ 1 m g/ml. Dùng pipet lấy 2 ml dung dịch chuẩn trung gian cho vào bình định mức dung tích 20 ml thêm hỗn hợp dung môi đến vạch và trộn. 3.10.5. Dung dịch chuẩn làm việc 5 , nồng độ 2 m g/ml. Dùng pipet lấy 2 ml dung dịch chu ẩ n trung gian cho vào bình định mức dung tích 10 ml thêm hỗn hợp dung môi 1 đến vạch và trộn. 3.11. Kh í nitơ , có độ tinh khiết không nhỏ hơn 99,999 %. 4. Thiết bị, dụng cụ Sử dụng các thiết bị, dụng cụ của phòng thử nghiệm thông thường và cụ thể như sau: 4.1. Bình định mức , dung tích 10 ml, 20 ml. 4.2. Pipet, dung tích 1ml, 2ml và 10 ml. 4.3. Micropipet , có thể đo từ 50 m l đến 200 m l . 4.4. Ống li tâm , dung tích 250 ml. 4.5. Xyranh , dung tích 10 m l, chia vạch đến 1 m l. 4.6. Ống đong, dung tích 50 ml. 4.7. Ống nghiệm , dung tích 15 ml. 4.8. C â n phân tích, có thể cân chính xác đến 0,01 mg. 4.9. C â n, có thể c â n chính xác đến 0,1 g. 4.10. Thiết bị đồng hóa , tốc độ không nhỏ hơn 18 000 r/min hoặc loại tương đương. 4.11. Thiết bị th ổi khí nitơ. 4.12. Máy nghiền mẫu. 4.13. Máy li tâm , tốc độ không nhỏ hơn 2 000 r/min, có ống li tâm dung tích 250 ml. 4.14. Thiết bị sắc ký khí, được trang bị như sau: - bộ bơm chia dòng và bộ bơm không chia dòng; - detector cộng kết điện tử (ECD); - cột mao quản DB-5, dài 30 m, đường kính 0,32 mm, chiều dày pha tĩnh 0,25 m m, hoặc l oại tương đương; - bộ bơm mẫu tự động; - máy vi t í nh. 5. Lấy mẫu Việc lấy mẫu không được quy định trong tiêu chuẩn này. Nên lấy mẫu theo TCVN 5139:2008 (CAC/GL 33-1999) [3]. 6. Cách tiến hành 6.1. Yêu cầu chung Toàn bộ qui trình phân tích cần được thực hiện trong ngày. Nếu cùng một lúc chuẩn bị nhiều mẫu thì tất cả các mẫu cần được phân tích trong ngày, sử dụng bộ bơm mẫu tự động. 6.2. Chuẩn bị mẫu Mẫu thử được nghiền trong máy nghiền mẫu đến khi đồng nhất. 6.3. Chuẩn bị phần mẫu thử Cân khoảng 20 g mẫu thử đã được đồng nhất chính xác tới 0,1 g vào ống li tâm dung tích 250 ml. Thêm vào 40 ml axeton đồng hóa trong 30 s bằng thiết bị đồng hóa với tốc độ 13 500 r/min, thêm lần lượt 40 ml ete dầu mỏ, 40 ml diclometan, 5 g natri sul f at khan, đồng hóa trong 30 s bằng thiết bị đồng hóa với tốc độ 13 500 r/min, sau đó li tâm với tốc độ 2 000 r/min trong 10 min. Dùng pipet dung t í ch 10 ml lấy chính xác 8 ml dịch lỏng thu được cho vào ống nghiệm và thổi khô hoàn toàn bằng thiết bị thổi khí nitơ ở nhiệt độ 40 °C. Hòa cặn bằng 2 ml hỗn hợp dung môi để thu được phần mẫu thử. 6.4. Chuẩn bị phần mẫu trắng Mẫu trắng là mẫu không chứa dư lượng thuốc BVTV azoxystrobin, được chuẩn bị như trong (6.3) 6.5. Chuẩn bị phần mẫu kiểm tra hiệu suất thu hồi Cân khoảng 20 g mẫu trắng đã được đồng nhất chính xác tới 0,1 g vào ống li tâm dung tích 250 ml. Dùng micropipet l ấ y 200 m l dung dịch chuẩn trung gian, để yên trong nhiệt độ phòng tối thiểu 15 min. Tiếp tục thực hiện theo 6.3. 6.6. Điều kiện phân tích Nhiệt độ buồng bơm mẫu: 240 °C Nhiệt độ cột tách: nhiệt độ ban đầu 80 °C giữ trong 1 min, tăng 40 °C/min đến nhiệt độ 160 °C, tăng 3 °C/min đến 250 °C, tăng 10 °C/min đến nhiệt độ cuối 280 °C và giữ trong 10 min. Nhiệt độ detector: 300 °C Tốc độ khí mang (N 2 ): 2 ml/min Tốc độ nitơ bổ trợ: 60 ml/min Thể tích bơm mẫu: 1 m l , không chia dòng 6.7. Dựng đường chuẩn Dựng đường chuẩn (tương quan giữa diện tích píc và nồng độ chất chuẩn) tại 5 điểm có nồng độ tương ứng trong dung d ịch chuẩn làm việc 1, dung dịch chuẩn làm việc 2, dung dịch chu ẩ n làm việc 3, dung dịch chuẩn làm việc 4 và dung dịch chuẩn làm việc 5. 6.8. Xác định Bơm dung dịch phần mẫu trắng, dung dịch phần mẫu thử, dung dịch phần mẫu kiểm tra hiệu suất thu hồi v à o thiết bị sắc kí khí. Dùng đường chuẩn để xác định nồng độ của phần mẫu thử và phần mẫu kiểm tra hiệu suất thu hồi khi bơm vào máy. Nếu nồng độ của mẫu thử nằm ngoài đường chuẩn thì điều ch ỉ nh bằng cách pha loãng dung dịch phần mẫu thử b ằ ng hỗn hợp dung môi (không pha loãng lượng mẫu bơm). 7. Tính kết quả Dư lượng hoạt chất thuốc BVTV azoxystrobin, X , biểu thị bằng miligam trên kilogam (mg/kg), được tính theo công thức: Trong đó: X 0 là nồng độ của phần mẫu được xác định từ đường chuẩn, tính b ằ ng microgam trên mililit ( m g/ml); V E là thể tích phần mẫu th ử , tí nh bằng mililít (ml); V 1 là th ể tích axeton dùng đ ể chiết, tính bằng mililít (ml); V 2 là thể tích ete dầu mỏ dùng để chiết, tính bằng mililít (ml); V 3 là thể tích diclometan dùng đ ể chiết, tính bằng mililít (ml); V 4 là thể tích dịch chiết được lấy ra đ ể cô cạn, tính bằng mililít (ml); m l à khối lượng mẫu th ử , tính bằng gam (g); P là độ tinh khiết của chất chuẩn, tính bằng phần trăm (%). 8. Hiệ u suất thu hồi và giới hạn xác đ ịnh 8.1. Hiệu suất thu hồi của p hươn g pháp: từ 70 % đến 110 %. 8.2. Giới hạn xác định của ph ươ ng pháp (LOQ): 0,05 mg/kg 8.3. Độ lặp lại của ph ươ ng pháp: ≤ 15 %. 9. Báo cáo thử nghiệm Báo cáo thử nghiệm phải ghi rõ: a) mọi thông tin cần thiết về việc nhận biết đầy đủ mẫu thử; b) phương pháp lấy mẫu đã sử dụng, nếu biết; c) phương pháp thử đã sử dụng và viện d ẫn tiêu chu ẩ n này; d) mọi thao tác không được quy định trong ti ê u chuẩn n à y, hoặc những điều được coi là tự chọn, và bất kỳ chi tiết nào có ảnh hưởng tới kết quả; e) kết quả thử nghiệm thu được. Phụ lục A (Tham khảo) Giới thiệu hoạt chất thuốc bảo vệ thực vật azoxystrobin Tên hóa học: methyl (E)-2-{2-[6-(2-cyanophenoxy)pyrimidin-4-yloxy]phenyl}-3-methoxyacry l ate Công thức cấu tạo: Công thức phân tử: C 22 H 17 N 3 O 5 Kh ố i lượng phân tử: 403,4 Độ hòa tan ( ở 20 °C): trong nước: 6 mg/l, tan tốt trong etyl axetat, axetonitril, diclometan THƯ MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] British Crop Protection Council 2003, The Pesticide Manual. [2] Food and Drug Aministration of USA, 1994. Pesticide Analysis Manual. Volume I. Section 302, E4. [3] TCVN 5139:2008 (CAC/GL 33-1999) Phương pháp khuyến cáo lấy mẫu để xác định dư lượng thuốc bảo vệ thực vật phù hợp với các giới hạn dư lượng tối đa (MRL).