QCVN4-1:2010/BYT

Quy chuẩn kỹ thuật Quốc gia QCVN 4-1:2010/BYT về phụ gia thực phẩm - chất điều vị do Bộ trưởng Bộ Y tế ban hành QUY CHUẨN KỸ THUẬT QUỐC GIA QCVN 4-1: 2010/BYT VỀ PHỤ GIA THỰC PHẨM - CHẤT ĐIỀU VỊ National technical regulation on Food Additive - Flavour Enhancer HÀ NỘI – 2010 Lời nói đầu QCVN 4-1 :2010/BYT do Ban soạn thảo quy chuẩn kỹ thuật quốc gia về Phụ gia thực phẩm và chất hỗ trợ chế biến biên soạn, Cục An toàn vệ sinh thực phẩm trình duyệt và được ban hành theo Thông tư số 18/2010/TT-BYT ngày 20 tháng 5 năm 2010 của Bộ trưởng Bộ Y tế. QUY CHUẨN KỸ THUẬT QUỐC GIA VỀ PHỤ GIA THỰC PHẨM - CHẤT ĐIỀU VỊ National technical regulation on Food additive – Flavour enhancer I. QUY ĐỊNH CHUNG 1. Phạm vi điều chỉnh Quy chuẩn kỹ thuật quốc gia (sau đây gọi tắt là Quy chuẩn) này quy định các yêu cầu kỹ thuật và quản lý về chất lượng, vệ sinh an toàn đối với các chất điều vị được sử dụng với mục đích làm phụ gia thực phẩm. 2. Đối tượng áp dụng Quy chuẩn này áp dụng đối với: 2.1. Tổ chức, cá nhân nhập khẩu, xuất khẩu, sản xuất, buôn bán và sử dụng các chất điều vị làm phụ gia thực phẩm (sau đây gọi tắt là tổ chức, cá nhân). 2.2. Cơ quan quản lý nhà nước có liên quan. 3. Giải thích từ ngữ và chữ viết tắt: 3.1. Các chất điều vị : là phụ gia thực phẩm được sử dụng với mục đích tăng hương vị của các sản phẩm thực phẩm. 3.2. JECFA monograph 1 - Vol. 4 ( JECFA monographs 1 - Combined compendium of food addiditive specifications; Joint FAO/WHO expert committee on food additives; Volume 4 - Analytical methods, test procedures and laboratory solutions used by and referenced in the food additive specifications; FAO, 2006) : Các yêu cầu kỹ thuật đối với phụ gia thực phẩm, Tập 4 Các phương pháp phân tích, quy trình thử nghiệm, dung dịch thử nghiệm được sử dụng (hoặc tham chiếu) trong yêu cầu kỹ thuật đối với phụ gia thực phẩm; JECFA biên soạn; FAO ban hành năm 2006. 3.3. Mã số C.A.S (Chemical Abstracts Service): Mã số đăng ký hóa chất của Hiệp hội Hóa chất Hoa Kỳ. 3.4. TS (test solution): Dung dịch thuốc thử. 3.5. ADI (Acceptable daily intake): Lượng ăn vào hàng ngày chấp nhận được. 3.6. INS (International numbering system): Hệ thống mã số quốc tế về phụ gia thực phẩm. II. YÊU CẦU KỸ THUẬT, PHƯƠNG PHÁP THỬ VÀ LẤY MẪU 1. Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với các chất điều vị được quy định tại các phụ lục ban hành kèm theo Quy chuẩn này như sau: 1.1. Phụ lục 1: Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với a cid L-Glutamic 1.2. Phụ lục 2: Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với m ononatri L-glutamat 1.3. Phụ lục 3: Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với m onokali L-glutamat 1.4. Phụ lục 4: Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với c alci di-L-glutamat 1.5. Phụ lục 5: Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với acid 5'-guanylic 1.6. Phụ lục 6: Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với acid 5'-inosinic 1.7. Phụ lục 7: Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với m altol 1.8. Phụ lục 8: Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với ethyl maltol 2. Các yêu cầu kỹ thuật quy định trong Quy chuẩn này được thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4, ngoại trừ một số phép thử riêng được mô tả trong các phụ lục. Các phương pháp thử được hướng dẫn trong Quy chuẩn này không bắt buộc phải áp dụng, có thể sử dụng các phương pháp thử khác tương đương. 3. Lấy mẫu theo hướng dẫn tại Thông tư 16/2009/TT-BKHCN ngày 02 tháng 6 năm 2009 của Bộ Khoa học và Công nghệ về hướng dẫn kiểm tra nhà nước về chất lượng hàng hóa lưu thông trên thị trường và các quy định khác của pháp luật có liên quan. III. YÊU CẦU QUẢN LÝ 1. Công bố hợp quy 1.1. Các chất điều vị phải được công bố phù hợp với các quy định tại Quy chuẩn này. 1.2. Phương thức, trình tự, thủ tục công bố hợp quy được thực hiện theo Quy định về chứng nhận hợp chuẩn, chứng nhận hợp quy và công bố hợp chuẩn, công bố hợp quy ban hành kèm theo Quyết định số 24/2007/QĐ-BKHCN ngày 28 tháng 9 năm 2007 của Bộ trưởng Bộ Khoa học và Công nghệ và các quy định của pháp luật. 2. Kiểm tra đối với chất điều vị Việc kiểm tra chất lượng, vệ sinh an toàn đối với các chất điều vị phải thực hiện theo các quy định của pháp luật. IV. TRÁCH NHIỆM CỦA TỔ CHỨC, CÁ NHÂN 1. Tổ chức, cá nhân phải công bố hợp quy phù hợp với các quy định kỹ thuật tại Quy chuẩn này, đăng ký bản công bố hợp quy tại Cục An toàn vệ sinh thực phẩm và bảo đảm chất lượng, vệ sinh an toàn theo đúng nội dung đã công bố . 2. Tổ chức, cá nhân chỉ được nhập khẩu, xuất khẩu, sản xuất, buôn bán và sử dụng các chất điều vị sau khi hoàn tất đăng ký bản công bố hợp quy và bảo đảm chất lượng, vệ sinh an toàn, ghi nhãn phù hợp với các quy định của pháp luật. V. TỔ CHỨC THỰC HIỆN 1. Giao Cục An toàn vệ sinh thực phẩm chủ trì, phối hợp với các cơ quan chức năng có liên quan hướng dẫn triển khai và tổ chức việc thực hiện Quy chuẩn này. 2. Căn cứ vào yêu cầu quản lý, Cục An toàn vệ sinh thực phẩm có trách nhiệm kiến nghị Bộ Y tế sửa đổi, bổ sung Quy chuẩn này. 3. Trường hợp hướng dẫn của quốc tế về phương pháp thử và các quy định của pháp luật viện dẫn trong Quy chuẩn này được sửa đổi, bổ sung hoặc thay thế thì áp dụng theo văn bản mới. PHỤ LỤC 1 YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI ACID L-GLUTAMIC 1. Tên khác, chỉ số L-glutamic acid, Glutamic acid INS 620 ADI không giới hạn 2. Định nghĩa Tên hóa học Acid L-glutamic; Acid L-(+)-glutamic, acid L-2-amino-pentandioic; Acid L-alpha-aminoglutaric Mã số C.A.S. 56-86-0 Công thức phân tử C 5 H 9 NO 4 Công thức cấu tạo Khối lượng phân tử 147,13 3. Cảm quan Tinh thể hoặc bột tinh thể màu trắng, hoặc không màu. 4. Chức năng Chất điều vị, thay thế muối. 5. Yêu cầu kỹ thuật 5.1. Định tính Độ tan Ít tan trong nước, thực tế không tan trong ethanol và ether. Glutamat Phải có phản ứng đặc trưng của glutamat. 5.2. Độ tinh khiết Giảm khối lượng khi làm khô Không được quá 0,2% (Sấy tại 80 o C trong 3 giờ). pH Dung dịch bão hòa mẫu thử có pH trong khoảng 3,0 - 3,5. Góc quay cực riêng Dung dịch mẫu thử 10% (kl/tt) trong acid hydrocloric 2 N có [ a ] D 20 trong khoảng +31,5 đến +32,2 o Tro sulfat Không được quá 0,2%. Clorid Không được quá 0,2%. Acid pyrrolidon carboxylic Đạt yêu cầu (mô tả trong phần phương pháp thử). Arsen Không được quá 3,0 mg/kg Chì Không được quá 1,0 mg/kg. 5.3. Hàm lượng C 5 H 9 NO 4 Không thấp hơn 99,0% tính theo chế phẩm đã làm khô. 6. Phương pháp thử 6.1 Độ tinh khiết Tro sulfat Thử theo JECFA monograph 1 - Vol.4 - Phương pháp I, cân 1 g mẫu. Clorid Thử theo JECFA monograph 1 - Vol.4 - Cân 0,07 g mẫu thử, tiến hành theo hướng dẫn trong chuyên luận thử giới hạn clorid, sử dụng 0,4 ml dung dịch acid hydrocloric 0,01 N làm mẫu chứng. Acid pyrrolidon carboxylic - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol.4. Phương pháp sắc ký bản mỏng. - Mẫu thử : Chuẩn bị dung dịch mẫu thử 0,5%. Lấy 2 µl. - Chuẩn : pha dung dịch chuẩn mononatri glutamat 0,5% chứa 2,5 mg acid pyrrolidon carboxylic. - Dung môi: hỗn hợp n-butanol/acid acetic băng/nước, tỷ lệ thể tích 2/1/1. - Pha tĩnh hấp phụ : Silicagel. Dung dịch hồ tinh bột-kali iodid : Đun nóng 0,5 g tinh bột trong 50 ml nước khuấy đều đến khi hồ hóa. Để nguội, thêm 0,5 g kali iodid và thêm nước đến đủ 100 ml. - Tiến hành chạy sắc ký theo hướng dẫn trong chuyên luận sắc ký bản mỏng (các phương pháp phân tích). Dừng quá trình sắc ký khi tuyến dung môi cách điểm xuất phát khoảng 10 cm, để khô dung môi trong không khí, khoảng 30 phút. - Đồng thời, chuẩn bị buồng sắc ký tương tự, đặt vào 1 cốc thủy tinh dung tích 50 ml, cho vào cốc 3 g natri hypoclorid, thêm từ từ vào cốc 1 ml acid hydrocloric để tạo khí clor, đậy nắp và để yên trong 30 giây để tạo môi trường khí clor trong buồng. Đặt bản mỏng đã để khô vào buồng sắc ký, đậy nắp và để yên trong 20 phút. Lấy bản mỏng ra khỏi buồng, để yên 10 phút trong không khí và xịt ethanol lên bản mỏng. Sau khi để khô, xịt dung dịch hồ tinh bột-kali iodid lên bản mỏng, quan sát dưới ánh sáng thường ngay sau khi vết chuẩn xuất hiện. Yêu cầu : Trong sắc ký đồ của mẫu thử không được có vết tương đương vết acid pyrrolidon carboxylic trong sắc ký đồ của chuẩn (độ nhạy 0,2%). Arsen - Thử JECFA monograph 1 - Vol.4, Phương pháp II. Chì - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol.4. - Xác định bằng kỹ thuật hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng quy định. Lựa chọn cỡ mẫu thử và phương pháp chuẩn bị mẫu dựa trên nguyên tắc của phương pháp mô tả tại JECFA monograph 1 - Vol.4 phần các phương pháp phân tích công cụ. 6.2. Định lượng Cân khoảng 200 mg (chính xác đến mg) mẫu thử đã được làm khô trước, hòa tan trong 6 ml acid formic, thêm 100 ml acid acetic băng. Chuẩn độ với dung dịch acid percloric 0,1 N, xác định điểm kết thúc chuẩn độ bằng đo thế. Tiến hành làm mẫu trắng song song để hiệu chỉnh nền. Mỗi ml dung dịch acid percloric 0,1 N tương đương với 14,713 mg C 5 H 9 NO 4 . PHỤ LỤC 2 YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI MONONATRI L-GLUTAMAT 1. Tên khác, chỉ số Monosodium L-glutamate, Sodium glutamate INS 621 ADI không giới hạn 2. Định nghĩa Tên hóa học Mononatri L-glutamat monohydrat; Muối mononatri của acid glutamic, monohydrat Mã số C.A.S. 6106 -04-3 Công thức phân tử C 5 H 8 NNaO 4 .H 2 O Công thức cấu tạo Khối lượng phân tử 187 ,13 3. Cảm quan Tinh thể hoặc bột tinh thể trắng, thực tế không mùi. 4. Chức năng Chất điều vị. 5. Yêu cầu kỹ thuật 5.1. Định tính Độ tan Dễ tan trong nước, ít tan trong ethanol, thực tế không tan trong ether. Glutamat Phải có phản ứng đặc trưng của glutamat. Natri Phải có phản ứng đặc trưng của natri. 5.2. Độ tinh khiết Giảm khối lượng khi làm khô Không được quá 0,5% (Sấy tại 98 o C trong 5 giờ). pH Dung dịch mẫu thử 1/50 có pH trong khoảng 6,7 - 7,2. Góc quay cực riêng Dung dịch mẫu thử 10% (kl/tt) trong acid hydrocloric 2 N có [ a ] D 20 trong khoảng +24,8 đến +25,3 o Clorid Không được quá 0,2%. Acid pyrrolidon carboxylic Đạt yêu cầu (mô tả trong phần phương pháp thử). Chì Không được quá 1,0 mg/kg. 5.3. Hàm lượng C 5 H 8 NNaO 4 .H 2 O Không thấp hơn 99,0% tính theo chế phẩm đã làm khô. 6. Phương pháp thử 6.1 Độ tinh khiết Clorid Thử theo JECFA monograph 1 - Vol.4 - Cân 0,07 g mẫu thử, tiến hành theo hướng dẫn trong chuyên luận thử giới hạn clorid, sử dụng 0,4 ml dung dịch acid hydrocloric 0,01 N làm mẫu chứng. Acid pyrrolidon carboxylic - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol.4. Phương pháp sắc ký bản mỏng. - Mẫu thử : Chuẩn bị dung dịch mẫu thử 0,5%. Lấy 2 µl. - Chuẩn : pha dung dịch chuẩn mono natri glutamat 0,5% chứa 2,5 mg acid pyrrolidon carboxylic. - Dung môi: hỗn hợp n-butanol/acid acetic băng/nước, tỷ lệ thể tích 2/1/1. - Pha tĩnh hấp thụ : Silicagel. Dung dịch hồ tinh bột-kali iodid : Đun nóng 0,5 g tinh bột trong 50 ml nước khuấy đều đến khi hồ hóa. Để nguội, thêm 0,5 g kali iodid và thếm nước đến đủ 100 ml. - Tiến hành chạy sắc ký theo hướng dẫn trong chuyên luận sắc ký bản mỏng (các phương pháp phân tích). Dừng quá trình sắc ký khi tuyến dung môi cách điểm xuất phát khoảng 10 cm, để khô dung môi trong không khí, khoảng 30 phút. - Đồng thời, chuẩn bị buồng sắc ký tương tự, đặt vào 1 cốc thủy tinh dung tích 50 ml, cho vào cốc 3 g natri hypoclorid, thêm từ từ vào cốc 1 ml acid hydrocloric để tạo khí clor, đậy nắp và để yên trong 30 giây để tạo môi trường khí clor trong buồng. Đặt bản mỏng đã để khô vào buồng sắc ký, đậy nắp và để yên trong 20 phút. Lấy bản mỏng ra khỏi buồng, để yên 10 phút trong không khí và xịt ethanol lên bản mỏng. Sau khi để khô, xịt dung dịch hồ tinh bột-kali iodid lên bản mỏng, quan sát dưới ánh sáng thường ngay sau khi vết chuẩn xuất hiện. Yêu cầu : Trong sắc ký đồ của mẫu thử không được có vết tương đương vết acid pyrrolidon carboxylic trong sắc ký đồ của chuẩn (độ nhạy 0,2%). Chì - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol.4. - Xác định bằng kỹ thuật hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng quy định. Lựa chọn cỡ mẫu thử và phương pháp chuẩn bị mẫu dựa trên nguyên tắc của phương pháp mô tả tại JECFA monograph 1 - Vol.4 phần các phương pháp phân tích công cụ. 6.2. Định lượng Cân khoảng 200 mg (chính xác đến mg) mẫu thử đã được làm khô trước, hòa tan trong 6 ml acid formic, thêm 100 ml acid acetic băng. Chuẩn độ với dung dịch acid percloric 0,1 N, xác định điểm kết thúc chuẩn độ bằng đo thế. Tiến hành làm mẫu trắng song song để hiệu chỉnh nền. Mỗi ml dung dịch acid percloric 0,1 N tương đương với 9,356 mg C 5 H 9 NNaO 4 .H 2 O. PHỤ LỤC 3 YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI MONOKALI L-GLUTAMAT 1. Tên khác, chỉ số Monopotassium L-glutamate, Potassium glutamate; MPG INS 622 ADI không giới hạn 2. Định nghĩa Tên hóa học Monokali L-glutamat monohydrat; Muối monokali của acid glutamic monohydrat Mã số C.A.S. 19473-49-5 Công thức phân tử C 5 H 8 NKO 4 .H 2 O Công thức cấu tạo Khối lượng phân tử 203,24 3. Cảm quan 4. Chức năng Chất điều vị, thay thế muối. 5. Yêu cầu kỹ thuật 5.1. Định tính Độ tan Dễ tan trong nước, ít tan trong ethanol. Glutamat Phải có phản ứng đặc trưng của glutamat. Kali Phải có phản ứng đặc trưng của kali. 5.2. Độ tinh khiết Giảm khối lượng khi làm khô Không được quá 0,2% (Sấy tại 80 o C trong 5 giờ). pH Dung dịch mẫu thử 1/50 có pH trong khoảng 6,7 - 7,3. Góc quay cực riêng Dung dịch mẫu thử 10% (kl/tt) trong acid hydrocloric 2 N có [ a ] D 20 trong khoảng +22,5 đến +24,0 o Clorid Không được quá 0,2%. Acid pyrrolidon carboxylic Đạt yêu cầu (mô tả trong phần phương pháp thử). Chì Không được quá 1 mg/kg. 5.3. Hàm lượng C 5 H 8 NKO 4 .H 2 O Không thấp hơn 99,0% tính theo chế phẩm đã làm khô. 6. Phương pháp thử 6.1 Độ tinh khiết Clorid - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol.4 - Cân 0,07 g mẫu thử, tiến hành theo hướng dẫn trong chuyên luận thử giới hạn clorid, sử dụng 0,4 ml dung dịch acid hydrocloric 0,01 N làm mẫu chứng. Acid pyrrolidon carboxylic - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol.4. Phương pháp sắc ký bản mỏng. - Mẫu thử : Chuẩn bị dung dịch mẫu thử 0,5%. Lấy 2 µl. - Chuẩn : pha dung dịch chuẩn mono natri glutamat 0,5% chứa 2,5 mg acid pyrrolidon carboxylic. - Dung môi: hỗn hợp n-butanol/acid acetic băng/nước, theo tỷ lệ thể tích tương ứng 2/1/1. - Pha tĩnh hấp thụ : Silicagel. Dung dịch hồ tinh bột-kali iodid : Đun nóng 0,5 g tinh bột trong 50 ml nước khuấy đều đến khi hồ hóa. Để nguội, thêm 0,5 g kali iodid và thếm nước đến đủ 100 ml. - Tiến hành chạy sắc ký theo hướng dẫn trong chuyên luận sắc ký bản mỏng (các phương pháp phân tích). Dừng quá trình sắc ký khi tuyến dung môi cách điểm xuất phát khoảng 10 cm, để khô dung môi trong không khí, khoảng 30 phút. - Đồng thời, chuẩn bị buồng sắc ký tương tự, đặt vào 1 cốc thủy tinh dung tích 50 ml, cho vào cốc 3 g natri hypoclorid, thêm từ từ vào cốc 1 ml acid hydrocloric để tạo khí clor, đậy nắp và để yên trong 30 giây để tạo môi trường khí clor trong buồng. Đặt bản mỏng đã để khô vào buồng sắc ký, đậy nắp và để yên trong 20 phút. Lấy bản mỏng ra khỏi buồng, để yên 10 phút trong không khí và xịt ethanol lên bản mỏng. Sau khi để khô, xịt dung dịch hồ tinh bột-kali iodid lên bản mỏng, quan sát dưới ánh sáng thường ngay sau khi vết chuẩn xuất hiện. Yêu cầu : Trong sắc ký đồ của mẫu thử không được có vết tương đương vết acid pyrrolidon carboxylic trong sắc ký đồ của chuẩn (độ nhạy 0,2%). Chì - Thử theo JECFA monograph 1 - vol. 4 - Xác định bằng kỹ thuật hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng quy định. Lựa chọn cỡ mẫu thử và phương pháp chuẩn bị mẫu dựa trên nguyên tắc của phương pháp mô tả tại JECFA monograph 1 - Vol.4 phần các phương pháp phân tích công cụ. 6.2. Định lượng Cân khoảng 200 mg (chính xác đến mg) mẫu thử đã được làm khô trước, hòa tan trong 6 ml acid formic, thêm 100 ml acid acetic băng. Chuẩn độ với dung dịch acid percloric 0,1 N, xác định điểm kết thúc chuẩn độ bằng đo thế. Tiến hành làm mẫu trắng song song để hiệu chỉnh nền Mỗi ml dung dịch acid percloric 0,1 N tương đương với 10,162 mg C 5 H 8 KNO 4 .H 2 O. PHỤ LỤC 4 YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI CALCI di-L-GLUTAMAT 1. Tên khác, chỉ số Monocalcium di-L-glutamate, Calcium glutamate; INS 623 ADI không giới hạn 2. Định nghĩa Tên hóa học Monocalci di-L-glutamat; Mã số C.A.S. 19238-49-4 Công thức phân tử C 10 H 16 CaN 2 O 8 . xH 2 O (x = 0, 1, 2, 6 hoặc 4) Công thức cấu tạo Khối lượng phân tử 332,32 (dạng khan) 3. Cảm quan Tinh thể hoặc bột tinh thể trắng, thực tế không mùi. 4. Chức năng Chất điều vị, thay thế muối. 5. Yêu cầu kỹ thuật 5.1. Định tính Độ tan Dễ tan trong nước. Glutamat Phải có phản ứng đặc trưng của glutamat. Calci Phải có phản ứng đặc trưng của calci. 5.2. Độ tinh khiết Nước Không được quá 19% Góc quay cực riêng Dung dịch mẫu thử 10% (kl/tt) trong acid hydrocloric 2 N có [ a ] D 20 trong khoảng +27,4 đến +29,2 o Clorid Không được quá 0,2%. Acid pyrrolidon carboxylic Đạt yêu cầu (mô tả trong phàn phương pháp thử). Chì Không được quá 1,0 mg/kg. 5.3. Hàm lượng C 10 H 16 CaN 2 O 8 Không thấp hơn 98,0% và không được quá 102,0% tính theo chế phẩm khan. 6. Phương pháp thử 6.1 Độ tinh khiết Nước - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol.4 - Phương pháp Karl Fischer. Clorid - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol.4 - Cân 0,07 g mẫu thử, tiến hành theo hướng dẫn trong chuyên luận thử giới hạn clorid, sử dụng 0,4 ml dung dịch acid hydrocloric 0,01 N làm mẫu chứng. Acid pyrrolidon carboxylic - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol.4. Phương pháp sắc ký bản mỏng. - Mẫu thử : Chuẩn bị dung dịch mẫu thử 0,5%. Lấy 2 µl. - Chuẩn : pha dung dịch chuẩn mono natri glutamat 0,5% chứa 2,5 mg acid pyrrolidon carboxylic. - Dung môi: hỗn hợp n-butanol/acid acetic băng/nước, tỷ lệ thể tích 2/1/1. - Pha tĩnh hấp thụ : Silicagel. Dung dịch hồ tinh bột-kali iodid : Đun nóng 0,5 g tinh bột trong 50 ml nước khuấy đều đến khi hồ hóa. Để nguội, thêm 0,5 g kali iodid và thếm nước đến đủ 100 ml. - Tiến hành chạy sắc ký theo hướng dẫn trong chuyên luận sắc ký bản mỏng (các phương pháp phân tích). Dừng quá trình sắc ký khi tuyến dung môi cách điểm xuất phát khoảng 10 cm, để khô dung môi trong không khí, khoảng 30 phút. - Đồng thời, chuẩn bị buồng sắc ký tương tự, đặt vào 1 cốc thủy tinh dung tích 50 ml, cho vào cốc 3 g natri hypoclorid, thêm từ từ vào cốc 1 ml acid hydrocloric để tạo khí clor, đậy nắp và để yên trong 30 giây để tạo môi trường khí clor trong buồng. Đặt bản mỏng đã để khô vào buồng sắc ký, đậy nắp và để yên trong 20 phút. Lấy bản mỏng ra khỏi buồng, để yên 10 phút trong không khí và xịt ethanol lên bản mỏng. Sau khi để khô, xịt dung dịch hồ tinh bột-kali iodid lên bản mỏng, quan sát dưới ánh sáng thường ngay sau khi vết chuẩn xuất hiện. Yêu cầu : Trong sắc ký đồ của mẫu thử không được có vết tương đương vết acid pyrrolidon carboxylic trong sắc ký đồ của chuẩn (độ nhạy 0,2%). Chì - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol.4. - Xác định bằng kỹ thuật hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng quy định. Lựa chọn cỡ mẫu thử và phương pháp chuẩn bị mẫu dựa trên nguyên tắc của phương pháp mô tả tại JECFA monograph 1 - Vol.4 phần các phương pháp phân tích công cụ. 6.2. Định lượng Cân khoảng 250 mg (chính xác đến mg) mẫu thử đã được làm khô trước, hòa tan trong 6 ml acid formic, thêm 100 ml acid acetic băng. Chuẩn độ với dung dịch acid percloric 0,1 N, xác định điểm kết thúc chuẩn độ bằng đo thế. Tiến hành làm mẫu trắng song song để hiệu chỉnh nền Mỗi ml dung dịch acid percloric 0,1 N tương đương với 8,308 mg C 10 H 16 CaN 2 O 8 . Tính hàm lượng dựa trên chế phẩm khan. PHỤ LỤC 5 YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI ACID 5’-GUANYLIC 1. Tên khác, chỉ số 5’-Guanylic acid; Guanylic acid; GMP INS 626 ADI không giới hạn 2. Định nghĩa Tên hóa học Acid Guanosin-5’-monophosphoric Mã số C.A.S. 85-32-5 Công thức phân tử C 10 H 14 N 5 O 8 P Công thức cấu tạo Khối lượng phân tử 363,22 3. Cảm quan Tinh thể trắng hoặc không màu, bột tinh thể trắng; không mùi 4. Chức năng Chất điều vị 5. Yêu cầu kỹ thuật 5.1. Định tính Độ tan Ít tan trong nước, thực tế không tan trong ethanol. Phổ hấp thụ quang Dung dịch mẫu thử 1/50000 trong acid hydrocloric 0,01 N có cực đại hấp thụ tại 256 ± 2 nm. Tỷ số A 256 /A 260 trong khoảng từ 0,95 đến 1,03 và tỷ số A 280 /A 260 trong khoảng từ 0,63 đến 0,71. Ribose Phải có phản ứng đặc trưng của ribose. Phosphat hữu cơ Phải có phản ứng đặc trưng của phosphat hữu cơ. 5.2. Độ tinh khiết Giảm khối lượng khi làm khô Không được quá 1,5% (sấy ở 120 o C trong 4 giờ). pH Dung dịch mẫu thử 1/400 có pH từ 1,5 đến 2,5 . Các tạp chất ngoại lai có liên quan Không phát hiện bằng phương pháp sắc ký. Chì Không được quá 1 mg/kg. 5.3. Hàm lượng C 10 H 14 N 5 O 8 P Không thấp hơn 97,0% và không được quá 102,0% tính theo chế phẩm đã làm khô. 6. Phương pháp thử 6.1. Định tính Phosphat hữu cơ - Thử theo hướng dẫn tại JECFA monograph 1 - Vol.4 - Dịch thử là dung dịch mẫu thử 1/400. 6.2. Độ tinh khiết Các tạp chất ngoại lai có liên quan - Thử theo hướng dẫn tại JECFA monograph 1 - Vol.4 - dùng 2 m l dung dịch mẫu thử 1/400. Chì Thử theo hướng dẫn tại JECFA monograph 1 - Vol.4. Xác định bằng kỹ thuật hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng quy định. Lựa chọn cỡ mẫu thử và phương pháp chuẩn bị mẫu dựa trên nguyên tắc của phương pháp mô tả tại JECFA monograph 1 - Vol.4 phần các phương pháp phân tích công cụ. 6.3. Định lượng Cân khoảng 0,5 g (chính xác đến 0,1 mg) mẫu thử hòa tan trong acid hydrocloric 0,01 N và định mức đến 1000 ml. lấy 10 ml dung dịch này pha loãng với acid hydrocloric 0,01 N vừa đủ để thu được 250 ml. Xác định độ hấp thụ quang của dung dịch này trong cuvet 1 cm tại bước sóng 260 nm và sử dụng dung dịch acid hydrocloric 0,01 N làm mẫu chứng. Tính hàm lượng % C 10 H 14 N 5 O 8 P trong mẫu thử theo công thức sau: PHỤ LỤC 6 YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI ACID 5’-INOSINIC 1. Tên khác, chỉ số 5’- Inosinic acid; Inosinic acid; IMP INS 630 ADI không giới hạn 2. Định nghĩa Tên hóa học Acid Inosin-5’-monophosphoric Mã số C.A.S. 131-99-7 Công thức phân tử C 10 H 13 N 4 O 8 P Công thức cấu tạo Khối lượng phân tử 348,21 3. Cảm quan Tinh thể trắng hoặc không màu, bột tinh thể trắng; không mùi 4. Chức năng Chất điều vị 5. Yêu cầu kỹ thuật 5.1. Định tính Độ tan Dễ tan trong nước, ít tan trong ethanol. Phổ hấp thụ quang Dung dịch mẫu thử 1/50000 trong acid hydrocloric 0,01 N có cực đại hấp thụ tại 250 ± 2 nm. Tỷ số A 250 /A 260 trong khoảng từ 1,55 đến 1,65 và tỷ số A 280 /A 260 trong khoảng từ 0,20 đến 0,30. Ribose Phải có phản ứng đặc trưng của ribose. Phosphat hữu cơ Phải có phản ứng đặc trưng của phosphat hữu cơ. 5.2. Độ tinh khiết Giảm khối lượng khi làm khô Không được quá 3,0% (sấy tại 120 o C trong 4 giờ). pH Dung dịch mẫu thử 1/20 có pH từ 1,0 đến 2,0. Các tạp chất ngoại lai có liên quan Không phát hiện bằng phương pháp sắc ký. Chì Không được quá 1 mg/kg. 5.3. Hàm lượng C 10 H 13 N 4 O 8 P Không thấp hơn 97,0% và không được quá 102,0% tính theo chế phẩm đã làm khô. 6. Phương pháp thử 6.1. Định tính Phosphat hữu cơ - Thử theo hướng dẫn tại JECFA monograph 1 - Vol.4 - Dịch thử là dung dịch mẫu thử 1/400. 6.2. Độ tinh khiết Các tạp chất ngoại lai có liên quan - Thử theo hướng dẫn tại JECFA monograph 1 - Vol.4 - dùng 1 m l dung dịch mẫu thử 1/200. Chì - Thử theo hướng dẫn tại JECFA monograph 1 - Vol.4. - Xác định bằng kỹ thuật hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng quy định. Lựa chọn cỡ mẫu thử và phương pháp chuẩn bị mẫu dựa trên nguyên tắc của phương pháp mô tả trong JECFA monograph 1 - Vol.4 phần các phương pháp phân tích công cụ. 6.3. Định lượng Cân khoảng 0,5 g (chính xác đến 0,1 mg) mẫu thử hòa tan trong acid hydrocloric 0,01 N và định mức đến 1000 ml. lấy 10 ml dung dịch này pha loãng với acid hydrocloric 0,01 N vừa đủ để thu được 250 ml. Xác định độ hấp thụ quang của dung dịch trong cuvet 1 cm tại bước sóng 250 nm và sử dụng dung dịch acid hydrocloric 0,01 N làm mẫu chứng. Tính hàm lượng % C 10 H 13 N 4 O 8 P trong mẫu thử theo công thức sau: PHỤ LỤC 7 YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI MALTOL 1. Tên khác, chỉ số INS 636 ADI = 0 - 1 mg/kg thể trọng 2. Định nghĩa Maltol thu được bằng cách tổng hợp hóa học Tên hóa học 3-hydroxy-2-methyl-4-pyron Mã số C.A.S. 118-71-8 Công thức hóa học C 6 H 6 O 3 Công thức cấu tạo Khối lượng phân tử 126,11 3. Cảm quan Bột tinh thể trắng có mùi caramel bơ ngào đường. 4. Chức năng Chất điều vị, trợ hương, hương liệu. 5. Yêu cầu kỹ thuật 5.1. Định tính Độ tan Ít tan trong nước, tan trong ethanol và propylen glycol. Khoảng nóng chảy 160 o - 164 o . Hấp thụ tử ngoại Phổ hấp thụ tử ngoại của dung dịch mẫu thử 10 mg/l trong acid hydrocloric 0,1 N có 1 cực đại hấp thụ tại 274 nm. 5.2. Độ tinh khiết Nước Không được quá 0,5% Tro sulfat Không được quá 0,2%. (Cân 5 g mẫu). Chì Không được quá 1 mg/kg. 5.3. Hàm lượng C 6 H 6 O 3 Không thấp hơn 99,0% tính theo chế phẩm khan. 6. Phương pháp thử 6.1. Độ tinh khiết Nước - Thử theo hướng dẫn tại JECFA monograph 1 - Vol.4. - Phương pháp Karl-Fischer. Tro sulfat - Thử theo hướng dẫn tại JECFA monograph 1 - Vol.4. - Mẫu thử: Cân 5 g . Chì - Thử theo hướng dẫn tại JECFA monograph 1 - Vol.4. - Xác định bằng kỹ thuật AAS-ICP/AES thích hợp cho hàm lượng quy định. Lựa chọn cỡ mẫu thử và phương pháp chuẩn bị mẫu dựa trên nguyên tắc của phương pháp mô tả tại JECFA monograph 1 - Vol.4 phần Các phương pháp chung, tạp chất kim loại. 6.2. Định lượng Dung dịch chuẩn Cân 50 mg (chính xác) chuẩn Maltol USP, cho vào bình định mức 250 ml, hòa tan và định mức đến vạch bằng acid hydrocloric 0,1 N và lắc đều. Dùng pipet lấy 5 ml cho vào bình định mức 100 ml, pha loãng đến vạch bằng acid hydrocloric 0,1 N, lắc đều. Dung dịch định lượng Cân 50 mg (chính xác) mẫu thử, cho vào bình định mức 250 ml, hòa tan và định mức đến vạch bằng acid hydrocloric 0,1 N và lắc đều. Dùng pipet lấy 5 ml cho vào bình định mức 100 ml, pha loãng đến vạch bằng acid hydrocloric 0,1 N, lắc đều. Tiến hành thử Xác định độ hấp thụ quang của dung dịch chuẩn và dung dịch định lượng tại 274 nm sử dụng cuvet đo 1 cm bằng thạch anh, acid hydrocloric 0,1 N là mẫu trắng. Tính hàm lượng % của maltol trong mẫu thử theo công thức sau: % Maltol = 100 x W S x A A / (A S x W A ) Trong đó: A A là độ hấp thụ quang của dung dịch mẫu (dung dịch định lượng) A S là độ hấp thụ quang của dung dịch chuẩn W A là khối lượng mẫu trong dung dịch định lượng (mg) W S là khối lượng chuẩn trong dung dịch chuẩn (mg) PHỤ LỤC 8 YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI ETHYL MALTOL 1. Tên khác, chỉ số INS 637 ADI = 0 - 2 mg/kg thể trọng 2. Định nghĩa Ethyl maltol thu được bằng cách tổng hợp hóa học Tên hóa học 2-Ethyl-3-hydroxy-4-pyron Mã số C.A.S. 4940-11-8 Công thức hóa học C 7 H 8 O 3 Công thức cấu tạo Khối lượng phân tử 140,14 3. Cảm quan Bột tinh thể trắng có mùi kẹo bông. 4. Chức năng Chất điều vị, trợ hương, hương liệu. 5. Yêu cầu kỹ thuật 5.1. Định tính Độ tan Ít tan trong nước, tan trong ethanol và propylen glycol. Khoảng nóng chảy 89 o - 93 o . Hấp thụ tử ngoại Phổ hấp thụ tử ngoại của dung dịch mẫu thử 10 mg/l trong acid hydrocloric 0,1 N có 1 cực đại hấp thụ tại 276 nm. 5.2. Độ tinh khiết Nước Không được quá 0,5% . Tro sulfat Không được quá 0,2%. Chì Không được quá 1 mg/kg. 5.3. Hàm lượng C 7 H 8 O 3 Không thấp hơn 99,0% tính theo chế phẩm khan. 6. Phương pháp thử 6.1 Độ tinh khiết Nước - Thử theo hướng dẫn tại JECFA monograph 1 - Vol.4 - Phương pháp Karl Fischer Tro sulfat - Thử theo hướng dẫn tại JECFA monograph 1 - Vol.4 - Cân 5 g mẫu Chì - Thử theo hướng dẫn tại JECFA monograph 1 - Vol.4. - Xác định bằng kỹ thuật AAS-ICP/AES thích hợp cho hàm lượng quy định. Lựa chọn cỡ mẫu thử và phương pháp chuẩn bị mẫu dựa trên nguyên tắc của phương pháp mô tả tại JECFA monograph 1 - Vol.4 phần Các phương pháp chung, tạp chất kim loại. 6.2. Định lượng Dung dịch chuẩn Cân 50 mg (chính xác) chuẩn Ethyl maltol USP, cho vào bình định mức 250 ml, hòa tan và pha loãng đến vạch bằng acid hydrocloric 0,1 N và lắc đều. Dùng pipet lấy 5 ml cho vào bình định mức 100 ml, pha loãng đến vạch bằng acid hydrocloric 0,1 N, lắc đều. Dung dịch mẫu thử Cân 50 mg (chính xác) mẫu thử, cho vào bình định mức 250 ml, hòa tan và pha loãng đến vạch bằng acid hydrocloric 0,1 N và lắc đều. Dùng pipet lấy 5 ml cho vào bình định mức 100 ml, pha loãng đến vạch bằng acid hydrocloric 0,1 N, lắc đều. Tiến hành thử Xác định độ hấp thụ quang của dung dịch chuẩn và dung dịch mẫu thử tại 276 nm sử dụng cuvet đo 1-cm bằng thạch anh, acid hydrocloric 0,1 N là mẫu trắng. Tính hàm lượng % của Ethyl maltol trong mẫu thử theo công thức sau: % Ethyl maltol = 100 x W S x A A / (A S x W A ) Trong đó: A A là độ hấp thụ quang của dung dịch mẫu thử A S là độ hấp thụ quang của dung dịch chuẩn W A là khối lượng mẫu trong dung dịch định lượng (mg) W S là khối lượng chuẩn trong dung dịch chuẩn (mg)