TCVN7033:2002

Tiêu chuẩn Việt Nam TCVN 7033:2002 (ISO 11292 : 1995) về Cà phê hòa tan - Xác định hàm lượng cacbonhydrat tự do và tổng số - Phương pháp sắc ký trao đổi ion hiệu năng cao do Bộ Khoa học và Công nghệ ban hành TIÊU CHUẨN VIỆT NAM TCVN 7033 : 2002 CÀ PHÊ HÒA TAN - XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG CACBONHYDRAT TỰ DO VÀ TỔNG SỐ - PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ TRAO ĐỔI ANION HIỆU NĂNG CAO Instant coffee - Determination of free and total carbohydrate contents - Method using hight - performance anion - exchange chromatography Lời nói đầu TCVN 7033 : 2002 hoàn toàn tương đương với ISO 11292 : 1995; TCVN 7033 : 2002 do Ban Kỹ thuật tiêu chuẩn TCVN/TC/F16 Cà phê và sản phẩm cà phê biên soạn, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng đề nghị, Bộ Khoa học, Công nghệ ban hành. 1. Phạm vi áp dụng Tiêu chuẩn này quy định phương pháp xác định hàm lượng cacbonhydrat tự do và tổng số trong cà phê hòa tan bằng phương pháp sắc ký trao đổi anion hiệu năng cao. Trong trường hợp đặc biệt, xác định hàm lượng riêng lẻ monosaccarit, sucroza và manitol. 2. Tiêu chuẩn viện dẫn ISO 1042 : 1983 Laboratory glassware - One-mark volumetric flasks (Dụng cụ thủy tinh - Bình định mức một vạch) TCVN 4334: 2001 (ISO 3509 : 1989) Cà phê và các sản phẩm cà phê - Thuật ngữ và định nghĩa. TCVN 5567:1991 (ISO 3726 : 1983) Cà phê hòa tan. Phương pháp xác định hao hụt khối lượng ở nhiệt độ 70 0 C dưới áp suất thấp. 3. Định nghĩa Tiêu chuẩn này áp dụng định nghĩa trong TCVN 4334 : 2001 (ISO 3509) và các định nghĩa sau: 3.1. Hàm lượng cacbonhydrat tự do (free carbohydrate content): Là hàm lượng của mỗi monosaccarit riêng lẻ (arabinoza, fructoza, galactoza, glucoza, manoza), và hàm lượng sucroza, manitol xác định được ở các điều kiện được nêu sau đây (phương pháp A). Hàm lượng được biểu thị bằng phần trăm khối lượng chất khô. 3.2. Hàm lượng cacbonhydrat tổng số (total carbohydrate content): là hàm lượng của mỗi monosaccarit riêng lẻ (arabinoza, fructoza, galactoza, glucoza, manoza, xyloza), và hàm lượng manitol xác định được ở các điều kiện được nêu sau đây, trong đó có giai đoạn thủy ngân mạnh (phương pháp B). Hàm lượng được biểu thị bằng phần trăm khối lượng chất khô. 4. Nguyên tắc 4.1. Phương pháp A Hòa tan phần mẫu thử vào nước. Tách bằng sắc ký các cacbonhydrat có trong dịch chiết đã được lọc bằng sắc ký ion trên cột trao đổi anion hiệu năng cao (HPAEC) sử dụng nước tinh khiết làm chất rửa giải. Sự phát hiện dựa trên tính chất điện hóa của hợp chất rửa giải bằng detector xung ampe (PAD), và định lượng bằng việc so sánh với diện tích pic của dung dịch tiêu chuẩn. 4.2. Phương pháp B Thủy phân phần mẫu thử bằng axit clohydric. Phân tích cacbonhydrat có trong dung dịch thủy phân đã được lọc như nêu ở phương pháp A. 5. Thuốc thử Chỉ sử dụng thuốc thử đạt cấp chất lượng tinh khiết phân tích, trừ khi có quy định khác và chỉ sử dụng nước cất hoặc nước đã loại ion hoặc nước có độ tinh khiết tương đương. 5.1. Natri hydroxit (NaOH), 50% (m/m) dung dịch nước. Thuốc thử chỉ chứa số lượng tối thiểu natri cacbonat và thủy ngân. Không lắc hoặc khuấy dung dịch trước khi sử dụng. 5.2. Axit clohydric (HCl), dung dịch tiêu chuẩn thể tích nồng độ 1,00 mol/l. 5.3. Chất rửa giải 1 (S1), nước đã khử khoáng (18M W .cm). Lọc nước đã khử khoáng qua màng lọc 0,2 m m. Khử khí bằng cách sục khí heli trong khoảng từ 20 phút đến 30 phút. 5.4. Chất rửa giải 2 (S2), dung dịch natri hydroxit (NaOH) 300mmol/l. Dùng pipet lấy 15,6ml dung dịch natri hydroxit (5.1) cho vào 985 ml nước đã khử khí (5.3). Chú ý: Việc loại bỏ dioxit cacbon hòa tan từ các chất rửa giải ra trước khi dùng là rất quan trọng. Cacbonat sẽ hoạt động như một “sức đẩy” mạnh trên cột, kết quả làm giảm hẳn sự phân giải và hiệu quả tách. Chuẩn bị dung dịch trong ngày trước khi phân tích. 5.5. Dung dịch tiêu chuẩn cacbonhydrat Chuẩn bị dung dịch arabinoza, fructoza, galactoza, glucoza, manoza, sucroza và manitol mới. Cân mỗi cacbonhydrat khoảng 100 mg, chính xác đến 0,1mg, cho vào các bình định mức dung tích 100 ml riêng rẽ (6.2) và pha loãng bằng nước đến vạch (các dung dịch tiêu chuẩn gốc 1 000 mg/l). Khi đã biết thời gian lưu của mỗi cacbonhydrat ở các điều kiện sắc ký thông thường, thì có thể chuẩn bị dung dịch tiêu chuẩn hỗn hợp từ các dung dịch tiêu chuẩn gốc riêng biệt. Tiếp tục pha loãng các dung dịch tiêu chuẩn để đạt được nồng độ cacbonhydrat giống với nồng độ đã tìm thấy trong dung dịch mẫu cà phê hòa tan được thủy phân hoặc không được thủy phân. Việc phân giải ramnoza từ arabinoza là khó thực hiện. Nếu có hai monosaccarit cùng rửa giải, thì không thêm ramnoza vào trong dung dịch hỗn hợp tiêu chuẩn 6. Thiết bị, dụng cụ Sử dụng các thiết bị phòng thí nghiệm thông thường và đặc biệt là: 6.1. Cân phân tích, có thể cân chính xác tới ± 0,1 mg. 6.2. Bình định mức một vạch, có dung tích 100 ml (theo điều A của ISO 1042). 6.3. Ống đong, hình trụ, có dung tích 1 000 ml, và 50 ml. 6.4. Hệ thống lọc chân không 6.5. Giấy lọc gấp nếp, định lượng tốc độ trung bình nhanh. 6.6. Ống lọc C18 dùng một lần [1] ) , sử dụng theo chỉ dẫn của nhà sản xuất. 6.7. Màng lọc dùng một lần, cỡ lỗ 0,2 m m. 6.8. Nồi cách thủy, có thể duy trì được ở nhiệt độ 100 0 C ± 5 0 C. 6.9. Máy sắc ký lỏng không chứa kim loại [2] ) , có cột trao đổi anion hiệu năng cao [3] ) được nạp đầy hạt nhựa polystyren-divinylbenzen, có cột tiền (cột chắn) [4] ) và hệ thống bơm cột hậu. 6.10. Detector xung ampe (PAD), có điện cực bằng vàng [5] ) . 6.11. Máy tích phân dữ liệu sắc ký. [6] ) 6.12. Ống dùng một lần [7] ) , sử dụng theo chỉ dẫn của nhà sản xuất. 7. Lấy mẫu Điều quan trọng là phòng thí nghiệm nhận được đúng mẫu đại diện và không bị hư hỏng hoặc không bị biến đổi chất lượng trong quá trình vận chuyển hoặc bảo quản. Việc lấy mẫu không quy định trong tiêu chuẩn này. Nên lấy mẫu theo TCVN 6605 : 2000 (ISO 6670 : 1993), Cà phê hòa tan đựng trong thùng có lót - Lấy mẫu. Trường hợp cà phê hòa tan không đựng trong thùng có lót, thì trộn đều mẫu đại diện lấy từ đơn vị đóng bao đơn. 8. Cách tiến hành 8.1. Xác định chất khô Tính lượng chất khô xác định được trong phần mẫu thử của mẫu phòng thí nghiệm theo TCVN 5567 : 2001 (ISO 3726). 8.2. Chuẩn bị mẫu phân tích - Phương pháp A Cân khoảng 300 mg mẫu phòng thử nghiệm, chính xác đến 0,1 mg, cho trực tiếp vào bình định mức dung tích 100 ml (6.2). Dùng ống đong (6.3) thêm vào 70 ml nước và lắc cho đến khi hòa tan hết. Pha loãng bằng nước đến vạch. Lọc từ 5 ml đến 10 ml dung dịch qua ống lọc (6.6). Loại bỏ một vài mililit đầu tiên. 8.3. Chuẩn bị mẫu phân tích - Phương pháp B Cân khoảng 300 mg mẫu thí nghiệm, chính xác đến 0,1 mg, cho trực tiếp vào bình định mức dung tích 100 ml (6.2). Thêm 50 ml axit clohydric (5.2) và khuấy. Đặt bình trong nồi cách thủy đun sôi (6.8) trong 150 phút. Giữ mức của dung dịch mẫu luôn thấp hơn mức nước trong nồi cách thủy. Khuấy dung dịch bằng tay sau 30 phút một lần. Làm nguội đến nhiệt độ phòng bằng cách để bình dưới vòi nước chảy. Pha loãng bằng nước đến vạch và lọc dung dịch qua giấy lọc gấp nếp (6.5). Cho 3 ml phần lọc chảy qua ống dùng một lần (6.12). Loại bỏ một vài mililit đầu tiên. 8.4. Phân tích sắc ký Lắp đặt máy sắc ký (6.9), detector (6.10) và máy tích phân (6.11). Để cho máy sắc ký cân bằng. Lọc các dung dịch tiêu chuẩn (5.5) và dung dịch thử (8.2 hoặc 8.3) qua màng lọc cỡ lỗ 0.2 m m (6.7). Bơm cùng thể tích dung dịch tiêu chuẩn đã được lọc và dung dịch thử vào máy sắc ký và tách các cacbonhydrat đơn dưới các điều kiện cho trong bảng 1 và 2. Nhận biết và định lượng cacbonhydrat trong dung dịch mẫu bằng cách so sánh với thời gian lưu và diện tích pic tương ứng thu được khi sử dụng dung dịch tiêu chuẩn. Cứ sau bốn lần bơm mẫu thì bơm dung dịch tiêu chuẩn, để kiểm tra sự thay đổi thời gian lưu hoặc tích phân pic. Bảng 1 - Chuẩn bị cột Chất rửa giải Thời gian phút Chất rửa giải S1 ml Chất rửa giải S2 ml Cách tiến hành Isocratic 0 100 0 Bắt đầu thu nhận dữ liệu 50,0 100 0 Ngừng thu nhận dữ liệu 50,1 0 100 Bắt đầu làm sạch 65,0 0 100 Ngừng làm sạch 65,1 100 0 Bắt đầu cân bằng lại 80,0 100 0 Ngừng cân bằng lại Chú thích 1) Thời gian lưu có xu hướng biến đổi từ dạng cột này sang cột khác. Chỉ khi monosaccarit (riboza) cuối cùng được rửa giải, thì mới làm sạch. 2) Nếu cần thiết, tiến hành bơm hai hoặc ba lần dung dịch tiêu chuẩn hoặc tăng thời gian cân bằng để thực hiện tốt sự phân tách của sucroza và xyloza. Bảng 2 - Các điều kiện để phân tích Bơm 20 m m Tốc độ dòng 1,0 ml/phút Bổ sung vào cột sau Chất rửa giải S2 (5.4) ở tốc độ dòng 0,6 ml/phút Nhiệt độ Môi trường xung quanh Detector Cột chuẩn chứa đầy chất rửa giải S2 (5.4) Sử dụng các điều kiện tối ưu theo chỉ dẫn của nhà sản xuất 9. Tính toán Hàm lượng cacbonhydrat, w , biểu thị bằng phần trăm khối lượng, tính theo công thức: Trong đó: A là diện tích pic của cacbonhydrat riêng lẻ trong dung dịch thử (8.4). A 0 là diện tích pic của cacbonhydrat riêng lẻ trong dung dịch tiêu chuẩn (8.4); m là khối lượng của phần mẫu thử trong dung dịch thử (8.2 hoặc 8.3), tính bằng gam khối lượng chất khô; m 0 là khối lượng của cacbonhydrat trong dung dịch tiêu chuẩn, tính bằng gam (5.5); V là thể tích của dung dịch thử (8.2 hoặc 8.3), tính bằng mililit; V 0 là thể tích của dung dịch tiêu chuẩn (5.5), tính bằng mililit. Lấy kết quả trung bình cộng của hai phép xác định. Biểu thị kết quả theo hàm lượng cacbonhydrat tự do (phương pháp A) hoặc tổng số (phương pháp B), chính xác đến 0,01 % (m/m) đối với mỗi cacbonhydrat có liên quan, hoặc tổng của tất cả cacbonhydrat được tìm thấy. 10. Độ chụm Mọi chi tiết của thử liên phòng thí nghiệm đối với độ chụm của phương pháp được tổng hợp trong phụ lục A. Giá trị nhận được từ thử liên phòng thí nghiệm không thể áp dụng cho dải nồng độ và matric khác với matric đã cho. Các giá trị của độ tái lập và độ lặp lại đối với từng cacbonhydrat chỉ ra mối quan hệ được thiết lập với dải nồng độ phần trăm rộng của mỗi cacbonhydrat mà trong nhiều trường hợp trong các mẫu được kiểm tra là rất thấp. Đặc biệt điều này được phản ánh trong một vài độ tái lập không như mong muốn. Tuy nhiên, với các hàm lượng ở nồng độ cao thì cả hai giá trị của độ chụm đều được chấp nhận, điều này nêu trong phụ lục A. 10.1. Độ lặp lại Độ lặp lại được định nghĩa là chênh lệch tuyệt đối giữa hai kết quả thử đơn độc lập thu được khi tiến hành trên vật liệu thử giống hệt nhau trong một phòng thí nghiệm, do một người thực hiện sử dụng cùng thiết bị, trong một khoảng thời gian ngắn. Vì thế, khó có thể đưa ra một giá trị lặp lại chính xác cho mỗi một và tất cả cacbonhydrat kể cả cacbonhydrat tự do và tổng số cho toàn dải hàm lượng. Tuy nhiên, thực tế cho thấy đối với hàm lượng của cacbonhydrat đã cho là lớn hơn 0,3% (m/m), dữ liệu chỉ ra rằng độ lệch chuẩn trung bình tương đối là 4,5%. 10.2. Độ tái lập Độ tái lập được định nghĩa là chênh lệch tuyệt đối giữa hai kết quả thử đơn thu được khi sử dụng cùng phương pháp, tiến hành thử trên vật liệu giống nhau trong các phòng thí nghiệm khác nhau, do các nhà phân tích khác nhau sử dụng các thiết bị khác nhau. Vì thế, khó có thể đưa ra một giá trị tái lập chính xác cho mỗi một và tất cả cacbonhydrat kể cả cacbonhydrat tự do và tổng số cho toàn dải hàm lượng. Tuy nhiên, thực tế cho thấy đối với hàm lượng của cacbonhydrat đã cho là lớn hơn 0,3% (m/m), dữ liệu chỉ ra rằng độ lệch chuẩn trung bình tương đối là 14,3% (trừ dữ liệu về fructoza). Khi hàm lượng nhỏ hơn 0,3% (m/m), thì hệ số biến động tăng lên rõ rệt. Đối với từng cacbonhydrat, dải giá trị về độ tái lập và độ lặp lại được tìm thấy khi thử liên phòng thí nghiệm và dải hàm lượng trung bình được áp dụng đã cho trong bảng 3. 11. Báo cáo thử nhiệm Báo cáo thử nghiệm phải chỉ ra được: - phương pháp lấy mẫu đã dùng, nếu biết, - phương pháp đã sử dụng. - kết quả thu được đối với mỗi cacbonhydrat có liên quan. - nếu kiểm tra độ lặp lại, thì nêu kết quả cuối cùng thu được. Báo cáo thử nghiệm cũng phải đề cập đến tất cả các chi tiết thao tác không quy định trong tiêu chuẩn này, hoặc tùy ý lựa chọn cùng với các chi tiết bất thường nào khác có thể ảnh hưởng tới kết quả. Báo cáo thử nghiệm cũng phải bao gồm mọi thông tin cần thiết để nhận biết đầy đủ về mẫu thử. Bảng 3 - Hệ số biến động tái lập và lặp lại Cacbonhydrat Dải hàm lượng trung bình trong thử nghiệm % (m/m) d.b Dải hệ số của độ biến động tái lập, % Dải hệ số của độ biến động lặp lại, % Manitol tự do 0,02 đến 1,6 59,5 đến 9,9 0,9 đến 8,2 Arabinoza tự do 0,46 đến 1,3 13,8 đến 5,1 1,6 đến 7,3 Arabinoza tổng số 3,5 đến 4,8 21,1 đến 4,9 6,6 đến 3,0 Galactoza tự do 0,19 đến 0,56 13,0 đến 4,1 9,8 đến 3,0 Galactoza tổng số 8,1 đến 18,5 7,5 đến 12,9 8,1 đến 1,7 Glucoza tự do 0,04 đến 2,0 23,8 đến 6,1 10,2 đến 2,5 Glucoza tổng số 0,68 đến 16,6 12,5 đến 24,3 8,7 đến 3,8 Mannoza tự do 0,16 đến 1,0 40,0 đến 16,9 8,2 đến 3,8 Mannoza tổng số 2,6 đến 19,1 10,6 đến 21,7 2,0 đến 5,8 Xyloza tổng số 0,1 đến 1,9 37,7 đến 20,2 22,9 đến 3,7 Fructoza tự do 0,05 đến 3,6 45,2 đến 15,5 21,0 đến 0,2 Sucroza 0,15 đến 1,3 41,6 đến 10,0 15,1 đến 1,8 PHỤ LỤC A (tham khảo) KẾT QUẢ THỬ LIÊN PHÒNG THÍ NGHIỆM Một thử liên phòng thí nghiệm tiến hành ở mức quốc tế năm 1991 dưới sự bảo trợ của ISO/TC 34, sản phẩm thực phẩm nông nghiệp, SC 15, Cà phê, và được thực hiện bởi ban kỹ thuật của AFCASOLE, trong đó 11 phòng thí nghiệm đã tham gia, mỗi phòng tiến hành hai phép xác định trên cùng một mẫu của 6 mẫu cà phê sẵn có khác nhau, kết quả thống kê (được đánh giá theo ISO 5725 [8] ) ) cho trong bảng từ A.1 đến A.8. Bảng A.1 - Xác định hàm lượng manitol trong cà phê hòa tan Mẫu 1 2 3 4 5 6 Số phòng thí nghiệm được giữ lại sau khi đã loại trừ 7 11 10 11 10 10 11 11 9 11 8 10 Hàm lượng manitol Tự do Tổng số Tự do Tổng số Tự do Tổng số Tự do Tổng số Tự do Tổng số Tự do Tổng số Hàm lượng trung bình, % (m/m) 0,024 0,179 0,060 0,151 1,582 1,854 0,619 0,782 0,192 0,300 0,059 0,179 Độ lệch chuẩn lặp lại, s r 0,000 0,013 0,001 0,011 0,044 0,041 0,022 0,036 0,016 0,032 0,004 0,018 Độ lặp lại, 2,83 s r 0,001 0,035 0,002 0,032 0,124 0,115 0,063 0,102 0,045 0,091 0,012 0,050 Hệ số biến động lặp lại, % 1,547 6,986 0,914 7,609 2,777 2,198 3,594 4,594 8,245 10,776 7,071 9,801 Độ lệch chuẩn tái lập, S R 0,015 0,075 0,034 0,069 0,157 0,331 0,150 0,161 0,065 0,112 0,029 0,090 Độ tái lập, 2,83 S R 0,041 0,213 0,098 0,196 0,444 0,938 0,424 0,454 0,183 0,316 0,083 0,254 Hệ số biến động tái lập, % 59,454 41,996 57,581 45,961 9,925 17,866 24,162 20,535 33,789 37,260 49,132 50,084 Bảng A.2 - Xác định hàm lượng arabinoza trong cà phê hòa tan Mẫu 1 2 3 4 5 6 Số phòng thí nghiệm được giữ lại sau khi đã loại trừ 11 11 9 11 11 11 11 11 10 9 11 11 Hàm lượng arabinoza Tự do Tổng số Tự do Tổng số Tự do Tổng số Tự do Tổng số Tự do Tổng số Tự do Tổng số Hàm lượng trung bình, % (m/m) 0,891 3,544 1,325 4,833 0,464 4,759 0,747 4,539 0,505 4,081 0,629 3,786 Độ lệch chuẩn lặp lại, s r 0,033 0,234 0,021 0,160 0,017 0,147 0,054 0,209 0,022 0,122 0,026 0,216 Độ lặp lại, 2,83 s r 0,092 0,662 0,060 0,453 0,049 0,417 0,154 0,590 0,063 0,344 0,073 0,612 Hệ số biến động lặp lại, % 3,664 6,597 1,603 3,311 3,755 3,098 7,297 4,594 4,419 2,979 4,092 5,709 Độ lệch chuẩn tái lập, S R 0,123 0,749 0,068 0,836 0,049 0,598 0,087 0,831 0,039 0,199 0,056 0,771 Độ tái lập, 2,83 S R 0,349 2,120 0,191 2,365 0,139 1,691 0,247 2,353 0,110 0,562 0,158 2,182 Hệ số biến động tái lập, % 13,832 21,141 5,105 17,289 10,556 12,559 11,707 18,319 7,729 4,868 8,895 20,366 Bảng A.3 - Xác định hàm lượng galactoza trong cà phê hòa tan Mẫu 1 2 3 4 5 6 Số phòng thí nghiệm được giữ lại sau khi đã loại trừ 11 10 11 10 11 11 11 11 9 9 11 10 Hàm lượng galactoza Tự do Tổng số Tự do Tổng số Tự do Tổng số Tự do Tổng số Tự do Tổng số Tự do Tổng số Hàm lượng trung bình, % (m/m) 0,562 17,779 0,339 18,481 0,191 8,085 0,438 16,269 0,475 18,444 0,362 17,687 Độ lệch chuẩn lặp lại, s r 0,017 1,441 0,014 0,430 0,019 0,219 0,026 0,632 0,015 0,306 0,018 0,760 Độ lặp lại, 2,83 s r 0,047 4,078 0,039 1,216 0,053 0,619 0,074 1,789 0,041 0,867 0,051 2,152 Hệ số biến động lặp lại, % 2,964 8,105 4,070 2,325 9,810 2,704 5,948 3,886 3,085 1,661 5,006 4,300 Độ lệch chuẩn tái lập, S R 0,030 1,582 0,027 2,181 0,025 0,647 0,036 2,097 0,019 1,377 0,045 1,503 Độ tái lập, 2,83 S R 0,084 4,478 0,077 6,171 0,070 1,831 0,103 5,935 0,055 3,898 0,127 4,255 Hệ số biến động tái lập, % 5,261 8,900 8,045 11,800 13,032 8,003 8,317 12,891 4,075 7,468 12,417 8,500 Bảng A.4 - Xác định hàm lượng glucoza trong cà phê hòa tan Mẫu 1 2 3 4 5 6 Số phòng thí nghiệm được giữ lại sau khi đã loại trừ 11 11 9 10 10 11 10 11 10 11 11 11 Hàm lượng glucoza Tự do Tổng số Tự do Tổng số Tự do Tổng số Tự do Tổng số Tự do Tổng số Tự do Tổng số Hàm lượng trung bình, % (m/m) 0,105 0,684 0,042 0,826 2,041 16,649 1,657 4,385 0,186 1,951 0,186 1,025 Độ lệch chuẩn lặp lại, s r 0,010 0,059 0,004 0,062 0,050 0,990 0,068 0,166 0,019 0,111 0,018 0,081 Độ lặp lại, 2,83 s r 0,029 0,168 0,012 0,174 0,143 2,803 0,192 0,469 0,053 0,313 0,052 0,230 Hệ số biến động lặp lại, % 9,911 8,661 10,151 7,449 2,470 5,949 4,092 3,780 10,006 5,674 9,853 7,937 Độ lệch chuẩn tái lập, S R 0,022 0,114 0,009 0,178 0,128 4,053 0,101 1,038 0,040 0,245 0,044 0,140 Độ tái lập, 2,83 S R 0,062 0,323 0,024 0,504 0,361 11,471 0,286 2,938 0,113 0,693 0,125 0,397 Hệ số biến động tái lập, % 21,057 16,667 20,419 21,551 6,294 24,345 6,091 23,672 21,370 12,541 23,808 13,702 Bảng A.5 - Xác định hàm lượng mannoza trong cà phê hòa tan Mẫu 1 2 3 4 5 6 Số phòng thí nghiệm được giữ lại sau khi đã loại trừ 11 10 10 11 11 11 11 11 10 11 11 10 Hàm lượng mannoza Tự do Tổng số Tự do Tổng số Tự do Tổng số Tự do Tổng số Tự do Tổng số Tự do Tổng số Hàm lượng trung bình, % (m/m) 0,583 17,913 0,155 14,365 0,470 2,601 0,329 5,598 0,277 7,653 0,991 19,067 Độ lệch chuẩn lặp lại, s r 0,028 1,038 0,013 0,380 0,020 0,052 0,023 0,171 0,012 0,212 0,038 0,426 Độ lặp lại, 2,83 s r 0,080 2,938 0,036 1,075 0,056 0,147 0,065 0,483 0,033 0,600 0,107 1,206 Hệ số biến động lặp lại, % 4,875 5,796 8,155 2,645 4,176 2,003 6,960 3,047 4,166 2,772 3,801 2,234 Độ lệch chuẩn tái lập, S R 0,142 2,029 0,056 2,180 0,082 0,352 0,061 0,859 0,111 0,808 0,168 4,137 Độ tái lập, 2,83 S R 0,402 5,741 0,158 6,168 0,233 0,997 0,174 2,431 0,313 2,288 0,474 11,708 Hệ số biến động tái lập, % 24,373 11,324 36,065 15,173 17,514 13,546 18,647 15,346 39,969 10,563 16,918 21,698 Bảng A.6 - Xác định hàm lượng fructoza trong cà phê hòa tan Mẫu 1 2 3 4 5 6 Số phòng thí nghiệm được giữ lại sau khi đã loại trừ 9 6 8 - 9 9 10 7 10 7 8 6 Hàm lượng fructoza Tự do Tổng số Tự do Tổng số Tự do Tổng số Tự do Tổng số Tự do Tổng số Tự do Tổng số Hàm lượng trung bình, % (m/m) 0,171 0,189 0,054 - 3,622 2,010 3,124 1,368 0,282 0,244 0,460 0,363 Độ lệch chuẩn lặp lại, s r 0,029 0,046 0,011 - 0,105 0,114 0,091 0,076 0,026 0,049 0,024 0,027 Độ lặp lại, 2,83 s r 0,082 0,130 0,032 - 0,297 0,323 0,258 0,214 0,072 0,140 0,067 0,075 Hệ số biến động lặp lại, % 16,882 24,416 21,035 - 2,900 5,683 0,219 5,527 9,045 20,261 5,167 7,310 Độ lệch chuẩn tái lập, S R 0,054 0,129 0,018 - 0,667 1,440 0,569 0,958 0,128 0,144 0,072 0,247 Độ tái lập, 2,83 S R 0,152 0,366 0,052 - 1,886 4,076 1,611 2,713 0,361 0,406 0,203 0,700 Hệ số biến động tái lập, % 31,370 68,482 33,846 - 18,403 71,660 18,217 70,068 45,292 58,874 15,549 68,236 Bảng A.7 - Xác định hàm lượng xyloza trong cà phê hòa tan Mẫu 1 2 3 4 5 6 Số phòng thí nghiệm được giữ lại sau khi đã loại trừ - 8 - 9 - 11 - 11 7 11 - 9 Hàm lượng xyloza Tự do Tổng số Tự do Tổng số Tự do Tổng số Tự do Tổng số Tự do Tổng số Tự do Tổng số Hàm lượng trung bình, % (m/m) - 0,097 - 0,146 - 1,856 - 0,736 0,029 1,826 - 0,133 Độ lệch chuẩn lặp lại, s r - 0,022 - 0,014 - 0,085 - 0,027 0,007 0,134 - 0,019 Độ lặp lại, 2,83 s r - 0,063 - 0,040 - 0,239 - 0,077 0,020 0,380 - 0,053 Hệ số biến động lặp lại, % - 22,929 - 9,750 - 4,555 - 3,717 24,731 7,356 - 14,175 Độ lệch chuẩn tái lập, S R - 0,037 - 0,030 - 0,424 - 0,204 0,008 0,410 - 0,032 Độ tái lập, 2,83 S R - 0,103 - 0,084 - 1,200 - 0,578 0,023 1,161 - 0,090 Hệ số biến động tái lập, % - 37,730 - 20,226 - 22,844 - 27,759 28,215 22,468 - 24,006 Bảng A.8 - Xác định hàm lượng sucroza trong cà phê hòa tan Mẫu 1 2 3 4 5 6 Số phòng thí nghiệm được giữ lại sau khi đã loại trừ 10 10 10 11 9 Hàm lượng sucroza trung bình, % (m/m) - 0,149 1,319 0,746 0,181 0,158 Độ lệch chuẩn lặp lại, s r - 0,007 0,023 0,051 0,027 0,005 Độ lặp lại, 2,83 s r - 0,020 0,066 0,144 0,077 0,015 Hệ số biến động lặp lại, % - 4,813 1,773 6,807 15,081 3,369 Độ lệch chuẩn tái lập, S R - 0,057 0,132 0,087 0,075 0,052 Độ tái lập, 2,83 S R - 0,162 0,372 0,246 0,213 0,147 Hệ số biến động tái lập, % - 38,395 9,972 11,632 41,584 33,074 Chú thích - Một số thông tin về hàm lượng fructoza và riboza là sẵn có, nhưng không đề cập ở đây PHỤ LỤC B (tham khảo) TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] AFCALOSE Statement, july 1995; available from AFCALOSE, 18 rue de la Pépinière, 75008 Paris. Chú thích 1 - Tài liệu này giải thích mang tính thống kê của dữ liệu sẵn có, nó thiết lập các giới hạn cho những cacbonhydrat có liên quan trong các mức tin cậy chấp nhận được. TCVN (ISO 11292) cung cấp công cụ phân tích để thiết lập các mức cacbonhydrat trong cà phê hòa tan để nhận biết chất độn. [2 ] UK Code of practice for the Soluble coffee industry in the UK, June 1995; available either from the British Soluble Coffee Packers and importers Association, Ltd., Suite 13, Castle House, Castlereagh Street, London W18 5YR, or the British Soluble Coffee manufacture’s Association, 8 Catherine Street, London WC2 B5JJ. Chú thích 2 - Đây là tài liệu AFCASOLE diễn giải công việc, nó phản ánh các giới hạn đối với những cacbonhydrat có mức tin cậy, điều này cung cấp cơ sở cho sự bắt buộc mang tính pháp luật của những cơ quan có thẩm quyền. [1] ) Sep-Pack C18 (waters) và Supelclean LC-18 (supelcol) là những ví dụ về các sản phẩm phù hợp sẵn có. Thông tin đưa ra thuận lợi cho người sử dụng tiêu chuẩn này và tổ chức ISO không ấn định phải sử dụng những sản phẩm này. [2] ) Hệ thống BioLC (Dionex) gồm model GMPII gradien nhóm 4 bơm (Dionex) có bộ bơm mẫu tự động model SP8875 (Spectra-Phyics) có trang bị vòng bơm 20 m m, bộ khử khí model EDM-II (Dionex) và bình chứa thuốc thử NaOH để bổ sung cột hậu (Dionex) là những ví dụ về sản phẩm phù hợp sẵn có. [3] ) CarboPac PA1 (10 m m, 50 mm x 4 mm) (Dionex) là một ví dụ về cột phân tích phù hợp sẵn có. [4] ) CarboPac PA (Dionex) là một ví dụ về cột tiền phù hợp sẵn có. [5] ) Model PAD-II (Dionex) là một ví dụ về thiết bị cột tiền phù hợp sẵn có. [6] ) Model Autolon Al-450 là một ví dụ về thiết bị phù hợp sẵn có. [7] ) Guard-AG là một ví dụ về ống phù hợp sẵn có. Thông tin đưa ra thuận lợi cho người sử dụng tiêu chuẩn này và tổ chức ISO không ấn định phải sử dụng những sản phẩm này. [8] ) ISO 5725:1986 Precision of test methods - Determination of repeatability and reproducibility for a standard test method by interlaboratory (Độ chụm của phương pháp thử - Xác định độ tái lập và độ lặp lại đối với phương pháp thử tiêu chuẩn bằng thử liên phòng thí nghiệm (Precision of test methods - Determination of repeatability and reproducibility for a standard test method by interlaboratory test).