QCVN4-12:2010/BYT

Quy chuẩn kỹ thuật Quốc gia QCVN 4-12:2010/BYT về phụ gia thực phẩm - chất bảo quản do Bộ trưởng Bộ Y tế ban hành QUY CHUẨN KỸ THUẬT QUỐC GIA QCVN 4-12:2010/BYT VỀ PHỤ GIA THỰC PHẨM - CHẤT BẢO QUẢN National technical regulation on Food Additive - Stabilizer HÀ NỘI - 2010 LỜI NÓI ĐẦU QCVN 4- :2010/BYT do Ban soạn thảo quy chuẩn kỹ thuật quốc gia về Phụ gia thực phẩm và chất hỗ trợ chế biến biên soạn, Cục An toàn vệ sinh thực phẩm trình duyệt và được ban hành theo Thông tư số …44/2010/TT-BYT ngày …22. tháng …12. năm 2010 của Bộ trưởng Bộ Y tế. QUY CHUẨN KỸ THUẬT QUỐC GIA VỀ PHỤ GIA THỰC PHẨM - CHẤT BẢO QUẢN NATIONAL TECHNICAL REGULATION ON FOOD ADDITIVE – PRESERVATIVE I. QUY ĐỊNH CHUNG 1. Phạm vi điều chỉnh Quy chuẩn kỹ thuật quốc gia (sau đây gọi tắt là Quy chuẩn) này quy định các yêu cầu kỹ thuật và quản lý về chất lượng, vệ sinh an toàn đối với các chất bảo quản được sử dụng với mục đích làm phụ gia thực phẩm. 2. Đối tượng áp dụng Quy chuẩn này áp dụng đối với: 2.1. Tổ chức, cá nhân nhập khẩu, xuất khẩu, sản xuất, buôn bán và sử dụng các chất bảo quản làm phụ gia thực phẩm (sau đây gọi tắt là tổ chức, cá nhân). 2.2. Cơ quan quản lý nhà nước có liên quan. 3. Giải thích từ ngữ và chữ viết tắt: 3.1. Chất bảo quản: là phụ gia thực phẩm được sử dụng với mục đích kéo dài thời hạn sử dụng của sản phẩm bằng cách ngăn chặn sự hư hỏng do ô nhiễm vi sinh vật. 3.2. JECFA monograph 1 - Vol. 4 (JECFA monographs 1 - Combined compendium of food addiditive specifications; Joint FAO/WHO expert committee on food additives; Volume 4 - Analytical methods, test procedures and laboratory solutions used by and referenced in the food additive specifications; FAO, 2006): Các yêu cầu kỹ thuật đối với phụ gia thực phẩm, Tập 4 Các phương pháp phân tích, quy trình thử nghiệm, dung dịch thử nghiệm được sử dụng (hoặc tham chiếu) trong yêu cầu kỹ thuật đối với phụ gia thực phẩm; JECFA biên soạn; FAO ban hành năm 2006. 3.3. Mã số C.A.S (Chemical Abstracts Service): Mã số đăng ký hóa chất của Hiệp hội Hóa chất Hoa Kỳ. 3.4. TS (test solution): Dung dịch thuốc thử. 3.5. ADI (Acceptable daily intake): Lượng ăn vào hàng ngày chấp nhận được. 3.6. INS (International numbering system): Hệ thống mã số quốc tế về phụ gia thực phẩm. II. YÊU CẦU KỸ THUẬT, PHƯƠNG PHÁP THỬ VÀ LẤY MẪU 1. Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với các chất bảo quản được quy định tại các phụ lục ban hành kèm theo Quy chuẩn này như sau: 1.1. Phụ lục 1: Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với acid sorbic 1.2. Phụ lục 2: Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với kali sorbat 1.3. Phụ lục 3: Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với calci sorbat 1.4. Phụ lục 4: Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với acid benzoic 1.5. Phụ lục 5: Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với natri benzoat 1.6. Phụ lục 6: Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với kali benzoat 1.7. Phụ lục 7: Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với calci benzoat 1.8. Phụ lục 8: Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với ethyl p-hydroxybenzoat 1.9 Phụ lục 9 : Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với methyl p-hydroxybenzoat 1.10 Phụ lục 10 : Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với lưu huỳnh dioxyd 1.11 Phụ lục 11 : Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với natri sulfit 1.12 Phụ lục 12 : Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với natri hydrogen sulfit 1.13 Phụ lục 13 : Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với natri metabisulfit 1.14 Phụ lục 14: Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với kali metabisulfit 1.15 Phụ lục 15: Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với kali sulfit 1.16 Phụ lục 16: Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với nisin 1.17 Phụ lục 17: Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với hexamethylen tetramin 1.18 Phụ lục 18: Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với dimethyl dicarbonat 1.19 Phụ lục 19: Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với acid propionic 1.20 Phụ lục 20: Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với natri propionat 1.21 Phụ lục 21: Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với natri thiosulfat 2. Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với natri nitrat và kali nitrat sử dụng làm chất bảo quản được quy định tại QCVN 4-5 :2010/BYT ban hành theo Thông tư số 22/2010/TT-BYT ngày 20/5/2010 của Bộ trưởng Bộ Y tế. 3. Các yêu cầu kỹ thuật quy định trong Quy chuẩn này được thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4, ngoại trừ một số phép thử riêng được mô tả trong các phụ lục. Các phương pháp thử được hướng dẫn trong Quy chuẩn này không bắt buộc phải áp dụng, có thể sử dụng các phương pháp thử khác tương đương. 4. Lấy mẫu theo hướng dẫn tại Thông tư 16/2009/TT-BKHCN ngày 02 tháng 6 năm 2009 của Bộ Khoa học và Công nghệ về hướng dẫn kiểm tra nhà nước về chất lượng hàng hóa lưu thông trên thị trường và các quy định khác của pháp luật có liên quan. III. YÊU CẦU QUẢN LÝ 1. Công bố hợp quy 1.1. Các chất bảo quản phải được công bố phù hợp với các quy định tại Quy chuẩn này. 1.2. Phương thức, trình tự, thủ tục công bố hợp quy được thực hiện theo Quy định về chứng nhận hợp chuẩn, chứng nhận hợp quy và công bố hợp chuẩn, công bố hợp quy ban hành kèm theo Quyết định số 24/2007/QĐ-BKHCN ngày 28 tháng 9 năm 2007 của Bộ trưởng Bộ Khoa học và Công nghệ và các quy định của pháp luật. 2. Kiểm tra đối với chất bảo quản Việc kiểm tra chất lượng, vệ sinh an toàn đối với các chất bảo quản phải thực hiện theo các quy định của pháp luật. IV. TRÁCH NHIỆM CỦA TỔ CHỨC, CÁ NHÂN 1. Tổ chức, cá nhân phải công bố hợp quy phù hợp với các quy định kỹ thuật tại Quy chuẩn này, đăng ký bản công bố hợp quy tại Cục An toàn vệ sinh thực phẩm và bảo đảm chất lượng, vệ sinh an toàn theo đúng nội dung đã công bố. 2. Tổ chức, cá nhân chỉ được nhập khẩu, xuất khẩu, sản xuất, buôn bán và sử dụng các chất bảo quản sau khi hoàn tất đăng ký bản công bố hợp quy và bảo đảm chất lượng, vệ sinh an toàn, ghi nhãn phù hợp với các quy định của pháp luật. V. TỔ CHỨC THỰC HIỆN 1. Giao Cục An toàn vệ sinh thực phẩm chủ trì, phối hợp với các cơ quan chức năng có liên quan hướng dẫn triển khai và tổ chức việc thực hiện Quy chuẩn này. 2. Căn cứ vào yêu cầu quản lý, Cục An toàn vệ sinh thực phẩm có trách nhiệm kiến nghị Bộ Y tế sửa đổi, bổ sung Quy chuẩn này. 3. Trường hợp hướng dẫn của quốc tế về phương pháp thử và các quy định của pháp luật viện dẫn trong Quy chuẩn này được sửa đổi, bổ sung hoặc thay thế thì áp dụng theo văn bản mới. PHỤ LỤC 1 YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI ACID SORBIC 1. Tên khác, chỉ số Sorbic acid INS 200 ADI = 0 – 25 mg/kg thể trọng 2. Định nghĩa Tên hóa học Acid sorbic; acid 2,4-hexadienoic; acid 2-propenylacrylic Mã số C.A.S. 110-44-1 Công thức hóa học C6H8O2 Công thức cấu tạo Khối lượng phân tử 112,12 3. Cảm quan Dạng tinh thể hình kim không màu hoặc bột trơn chảy màu trắng, có mùi nhẹ đặc trưng. 4. Chức năng Chất bảo quản chống vi sinh vật, chất chống nấm 5. Yêu cầu kỹ thuật 5.1. Định tính Độ tan Tan trong ethanol, ít tan trong nước. Khoảng nhiệt độ nóng chảy 132-135oC (Máy đo điểm chảy cần được gia nhiệt đến 125o trước khi cho mẫu vào đo). Quang phổ Cực đại hấp thụ của dung dịch 1/400.000 trong isopropanol là 254±2 nm. Liên kết đôi Phải có phản ứng đặc trưng cho liên kết đôi. 5.2. Độ tinh khiết Hàm lượng nước Không được quá 0,5%. Tro sunfat Không được quá 0,2%. Các Aldehyd Không được quá 0,1% (tính theo formaldehyd). Chì Không được quá 2,0 mg/kg. 5.3. Hàm lượng C6H8O2 Không được thấp hơn 99% tính theo chế phẩm khan. 6. Phương pháp thử 6.1. Định tính Liên kết đôi Lắc khoảng 0,02 g mẫu thử với 1ml dung dịch brom (TS) . Dung dịch brom sẽ mất màu. 6.2. Độ tinh khiết Hàm lượng nước - Phương pháp Karl Fischer. - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol.4. Tro sunfat - Sử dụng 2 g mẫu thử. - Thử theo phương pháp I, JECFA monograph 1 - Vol.4. Các Aldehyd Thêm 0,5 ml dung dịch thuốc thử Schiff (TS) vào 1 ml dung dịch bão hòa mẫu thử trong nước rồi để yên 10-15 phút. So sánh màu của ống thử với màu tạo thành từ 1 ml dung dịch formaldehyd (chứa 2 µg) với cùng lượng thuốc thử Schiff và cùng điều kiện như mẫu thử. Màu của dung dịch thử không được đậm hơn màu của dung dịch đối chứng. Chì - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol.4. - Xác định bằng kỹ thuật quang phổ hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng quy định. Lựa chọn cỡ mẫu thử và phương pháp chuẩn bị mẫu dựa trên nguyên tắc của phương pháp mô tả trong JECFA monograph 1 - Vol.4 phần các phương pháp phân tích công cụ. 6.3. Định lượng Cân 0,25 g (chính xác đến mg) mẫu thử, hoà tan trong 50 ml methanol khan đã được trung hoà bằng dung dịch natri hydroxyd 0,1 N. Thêm vài giọt dung dịch phenolphthalein (TS), chuẩn độ tiếp bằng dung dịch natri hydroxyd 0,1 N cho đến khi xuất hiện màu hồng bền trong vòng 30 giây. Mỗi ml dung dịch natri hydroxyd 0,1 N tương đương với 11,21 mg C6H8O2. PHỤ LỤC 2 YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI KALI SORBAT 1. Tên khác, chỉ số Potassium sorbate INS 202 ADI = 0 – 25 mg/kg thể trọng 2. Định nghĩa Tên hóa học Kali sorbat; Muối kali của acid trans, trans-2,4-hexadienoic Mã số C.A.S. 24634-16-5 Công thức hóa học C6H7KO2 Công thức cấu tạo Khối lượng phân tử 150,22 3. Cảm quan Dạng tinh thể, bột tinh thể hoặc hạt nhỏ có màu trắng hoặc trắng hơi vàng. 4. Chức năng Chất bảo quản 5. Yêu cầu kỹ thuật 5.1. Định tính Độ tan Tan tốt trong nước, tan trong ethanol. Kali Phải có phản ứng đặc trưng của kali. Khoảng nhiệt độ nóng chảy của acid sorbic lấy ra từ mẫu thử 132-135oC. Liên kết không no Phải có phản ứng đặc trưng của liên kết không no 5.2. Độ tinh khiết Giảm khối lượng khi sấy khô Không được quá 1,0 %. Tính acid hoặc tính kiềm Không được quá 1,0 % (tính theo acid sorbic hoặc kali carbonat). Các Aldehyd Không được quá 0,1% (tính theo formaldehyd). Chì Không được quá 2,0 mg/kg. 5.3. Hàm lượng C6H7KO2 Không được thấp hơn 98,0% và không được quá 102,0% tính theo chế phẩm khô. 6. Phương pháp thử 6.1. Định tính Kali Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. Khoảng nhiệt độ nóng chảy của acid sorbic lấy ra từ mẫu thử Acid hóa dung dịch mẫu thử bằng dung dịch acid hydrocloric loãng (TS). Lọc và thu phần acid sorbic kết tủa tạo thành trên giấy lọc, rửa tủa bằng nước cho đến khi không còn clorid và làm khô trên acid sulfuric trong chân không. Thử liên kết không no Thêm vài giọt dung dịch thuốc thử brom (TS) vào 2 ml dung dịch mẫu thử nồng độ 1/10. Nước brom sẽ mất màu. 6.2. Độ tinh khiết Giảm khối lượng khi sấy khô Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. (sấy ở 105oC trong 3 giờ). Tính acid hoặc tính kiềm Hoà tan 1,1 g mẫu thử trong 20 ml nước và thêm 3 giọt dung dịch phenolphthalein (TS). Nếu dung dịch thử không màu, chuẩn độ bằng dung dịch natri hydroxyd 0,1 N đến khi xuất hiện màu hồng bền trong 15 giây. Thể tích dung dịch natri hydroxyd 0,1 N sử dụng không được quá 1,1 ml. Nếu dung dịch mẫu thử có màu hồng, chuẩn độ bằng dung dịch acid hydrochloric 0,1 N đến khi mất màu. Thể tích dung dịch acid hydrochloric 0,1 N sử dụng không quá 0,8 ml. Các Aldehyd Pha dung dịch mẫu thử 0,3 %, chỉnh pH đến 4 bằng HCl 1 N và lọc. Lấy 5 ml dịch lọc, thêm 2,5 ml thuốc thử Schiff (TS) và để yên 10-15 phút. So sánh màu của dịch thử với màu thu được khi lấy 5 ml dung dịch chứng có chứa 15 µg formaldehyd thay cho mẫu thử. Màu của dịch thử không được đậm hơn màu của dung dịch chứng. Chì - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol.4. - Xác định bằng kỹ thuật quang phổ hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng quy định. Lựa chọn cỡ mẫu thử và phương pháp chuẩn bị mẫu dựa trên nguyên tắc của phương pháp mô tả trong JECFA monograph 1 - Vol.4 phần các phương pháp phân tích công cụ. 6.3. Định lượng Cân 0,25 g mẫu thử (chính xác đến 0,1 mg), đã được sấy ở 105oC trong 3 giờ. Hoà tan vào hỗn hợp gồm 36 ml acid acetic băng và 4 ml anhydrid acetic trong bình dung tích 250 ml có nút thủy tinh, làm ấm dung dịch để tan hoàn toàn. Làm nguội đến nhiệt độ phòng, thêm 2 giọt chỉ thị là dung dịch tím tinh thể (TS) và chuẩn độ bằng dung dịch acid percloric 0,1 N trong acid acetic băng, đến khi dung dịch có màu lục lam bền ít nhất 30 giây. Tiến hành làm mẫu trắng song song và hiệu chỉnh kết quả chuẩn độ nếu cần. Mỗi ml dung dịch acid percloric 0,1 N trong acid acetic băng tương đương với 15,02 mg C6H7KO2. PHỤ LỤC 3 YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI CALCI SORBAT 1. Tên khác, chỉ số Calcium sorbate INS 203 ADI = 0 - 25 mg/kg thể trọng 2. Định nghĩa Tên hóa học Calci sorbat ; Muối calci của acid trans, trans-2,4-hexadienoic Mã số C.A.S. 7492-55-9 Công thức hóa học C12H14CaO4 Công thức cấu tạo Khối lượng phân tử 262,32 3. Cảm quan Bột tinh thể trắng, mịn, không thay đổi màu khi đun nóng tại 105oC trong 90 phút. 4. Chức năng Chất bảo quản 5. Yêu cầu kỹ thuật 5.1. Định tính Độ tan Tan trong nước, thực tế không tan trong ethanol Calci Phải có phản ứng đặc trưng của calci. Khoảng nhiệt độ nóng chảy của acid sorbic lấy ra từ mẫu thử 132-135oC. Liên kết không no Phải có phản ứng đặc trưng của liên kết không no. 5.2. Độ tinh khiết Giảm khối lượng khi sấy khô Không được quá 3,0 %. Florid Không được quá 10,0 mg/kg. Aldehyd Không được quá 0,1% (tính theo formaldehyd). Chì Không được quá 2,0 mg/kg. 5.3. Hàm lượng C12H14CaO4 Không được thấp hơn 98,0% và không được quá 102,0% tính theo chế phẩm khô. 6. Phương pháp thử 6.1. Định tính Calci Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. Khoảng nhiệt độ nóng chảy của acid sorbic lấy ra từ mẫu thử Acid hóa dung dịch mẫu thử bằng dung dịch acid hydrocloric loãng (TS). Lọc và thu phần acid sorbic kết tủa tạo thành trên giấy lọc, rửa tủa với nước tinh khiết đến khi không còn clorid và làm khô trên acid sulfuric trong chân không. Liên kết không no Thêm vài giọt dung dịch thuốc thử brom (TS) và 2 ml dung dịch mẫu thử nồng độ 1/10. Dung dịch brom sẽ mất màu. 6.2. Độ tinh khiết Giảm khối lượng khi sấy khô Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4 (trong chân không, trên acid sulfuric trong 4 giờ). Florid Thử theo phương pháp I hoặc III, JECFA monograph 1 - Vol. 4 (cân 5 g mẫu thử, chính xác đến mg). Aldehyd Pha dung dịch mẫu thử 0,3 %, chỉnh pH đến 4 bằng HCl 1 N và lọc. Lấy 5 ml dịch lọc, thêm 2,5 ml thuốc thử Schiff (TS) và để yên 10-15 phút. So màu của mẫu thử với màu thu được với 5 ml dung dịch chứng có chứa 15 µg formaldehyd thay cho mẫu thử. Màu của dung dịch thử không được đậm hơn màu của dung dịch chứng. Chì - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol.4. - Xác định bằng kỹ thuật quang phổ hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng quy định. Lựa chọn cỡ mẫu thử và phương pháp chuẩn bị mẫu dựa trên nguyên tắc của phương pháp mô tả trong JECFA monograph 1 - Vol.4 phần các phương pháp phân tích công cụ. 6.3. Định lượng Cân 0,25 g mẫu thử đã được làm khô, chính xác đến mg. Hoà tan vào 35 ml acid acetic băng và 4 ml anhydrid acetic trong bình 250 ml có nút thủy tinh, làm ấm dung dịch. Để nguội đến nhiệt độ phòng, thêm 2 giọt chỉ thị tím tinh thể (TS) và chuẩn độ bằng dung dịch acid percloric 0,1 N trong acid acetic băng, khi đến điểm kết thúc dung dịch có màu lục lam bền ít nhất 30 giây. Tiến hành làm mẫu trắng và hiệu chỉnh kết quả chuẩn độ nếu cần. Mỗi ml dung dịch acid percloric 0,1 N trong acid acetic băng tương đương với 13,12 mg C12H14CaO4 PHỤ LỤC 4 YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI ACID BENZOIC 1. Tên khác, chỉ số Benzoic acid INS 210 ADI = 0 – 5 mg/kg thể trọng 2. Định nghĩa Tên hóa học Acid benzoic, acid benzencarboxylic, acid phenylcarboxylic Mã số C.A.S. 65-85-10 Công thức hóa học C7H6O2 Công thức cấu tạo Khối lượng phân tử 122,12 3. Cảm quan Tinh thể rắn màu trắng, thường có dạng vảy hoặc hình kim, có mùi đặc trưng rất nhẹ. 4. Chức năng Chất bảo quản chống vi sinh vật 5. Yêu cầu kỹ thuật 5.1. Định tính Độ tan Ít tan trong nước, dễ tan trong ethanol Khoảng nóng chảy 121oC -123oC Benzoat Phải có phản ứng đặc trưng của benzoat. pH Khoảng 4,0 (dung dịch trong nước) 5.2. Độ tinh khiết Giảm khối lượng khi làm khô Không được quá 0,5%. Thử thăng hoa Đạt yêu cầu (mô tả trong phần Phương pháp thử). Tro sunfat Không vượt quá 0,05% Chì Không được quá 2,0 mg/kg. Các chất dễ bị than hóa Đạt yêu cầu (mô tả trong phần Phương pháp thử). Các hợp chất clor hữu cơ Không được quá 0,07% (tính theo Cl2). Các chất dễ bị oxy hóa Đạt yêu cầu (mô tả trong phần Phương pháp thử). 5.3. Hàm lượng C7H6O2 Không được thấp hơn 99,5% tính theo chế phẩm khô. 6. Phương pháp thử 6.1. Định tính Benzoat - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. - Sử dụng 0,1 g mẫu với 0,1 g calci carbonat và 5ml nước 6.2. Độ tinh khiết Giảm khối lượng khi làm khô - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. - Làm khô trên acid sulfuric, trong 3 giờ. Thử thăng hoa Cho một lượng nhỏ mẫu thử vào trong một ống nghiệm khô. Bọc ống nghiệm bằng một giấy lọc ẩm cách 4 cm tính từ đáy ống. Đốt nóng ống nghiệm trên ngọn lửa. Acid benzoic thăng hoa và các tinh thể hình thành bám trên thành ống nghiệm có nhiệt độ thấp hơn và không còn cặn ở đáy ống nghiệm. Chì - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. - Xác định bằng kỹ thuật quang phổ hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng qui định. Lựa chọn cỡ mẫu thử và phương pháp chuẩn bị mẫu dựa trên nguyên tắc của phương pháp mô tả trong JECFA monograph 1 - Vol. 4 phần các phương pháp phân tích công cụ. Các chất dễ bị than hóa - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. - Cân 0,5g (chính xác đến mg) mẫu thử, hòa tan trong 5 ml acid sulfuric (TS). Màu tạo thành trong dung dịch không được đậm hơn màu hồng nhạt của “dung dịch đối chứng Q” Các chất clor hữu cơ Thử với 0,25 g mẫu thử được hòa tan trong 10 ml dung dịch natri hydroxyd 0,1N, sử dụng 0,5 ml dung dịch acid hydrocloric 0,01N làm đối chứng Các chất dễ bị oxy hóa Thêm 1,5 ml acid sulfuric vào 100 ml nước cất, đun sôi hỗn hợp, nhỏ từng giọt dung dịch kali permanganat 0,1N đến khi dung dịch có màu hồng bền trong 30 giây. Cân 1 g mẫu, chính xác đến mg, cho vào dung dịch đã chuẩn bị, còn nóng, và chuẩn độ bằng dung dịch kali permanganat 0,1 N tới khi dung dịch có màu hồng bền trong 15 giây. Thể tích dung dịch kali permanganat sử dụng để chuẩn độ không được quá 0,5 ml. 6.3. Định lượng Cân 2,5 g (chính xác đến mg) mẫu thử đã được sấy khô. Hoà tan trong 15 ml ethanol ấm, trước đó đã được trung hoà và với chỉ thị là dung dịch đỏ phenol (TS). Thêm 20 ml nước cất và chuẩn độ bằng dung dịch natri hydroxyd 0,5 N với chỉ thị là phenolphthalein (TS). Mỗi ml dung dịch natri hydroxyd 0,5 N tương đương với 61,06 mg C7H6O2. PHỤ LỤC 5 YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI NATRI BENZOAT 1. Tên khác, chỉ số Sodium benzoate; INS 211 ADI = 0 - 5 mg/kg thể trọng 2. Định nghĩa Tên hóa học Muối natri của acid benzencarboxylic, muối natri của acid phenylcarboxylic Mã số C.A.S. 532-32-1 Công thức hóa học C7H5NaO2 Công thức cấu tạo Khối lượng phân tử 144,11 3. Cảm quan Bột tinh thể, dạng mảnh hay hạt, màu trắng, hầu như không mùi 4. Chức năng Chất bảo quản chống vi sinh vật 5. Yêu cầu kỹ thuật 5.1. Định tính Độ tan Dễ tan trong nước, ít tan trong ethanol. Natri Phải có phản ứng đặc trưng của natri. Benzoat Phải có phản ứng đặc trưng của benzoat. 5.2. Độ tinh khiết Giảm khối lượng khi sấy khô Không được quá 1,5%. Tính acid hoặc tính kiềm Đạt yêu cầu (mô tả trong phần Phương pháp thử). Các chất dễ bị than hóa Đạt yêu cầu (mô tả trong phần Phương pháp thử). Các hợp chất clor hữu cơ Không được quá 0,07% (tính theo Cl2). Các chất dễ bị oxy hóa Đạt yêu cầu (mô tả trong phần Phương pháp thử). Chì Không được quá 2,0 mg/kg. 5.3. Hàm lượng C7H5NaO2 Không được thấp hơn 99,0% tính theo chế phẩm khan. 6. Phương pháp thử 6.1. Định tính Natri - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. Benzoat - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. - Sử dụng dung dịch mẫu thử 10%) 6.2. Độ tinh khiết Giảm khối lượng khi sấy khô - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. - Sấy tại 105oC trong 4 giờ. Tính acid hoặc tính kiềm Cân 2 g mẫu thử, chính xác đến mg, hòa tan trong 20 ml nước mới đun sôi để nguội. Trung hòa dung dịch này bằng dung dịch natri hydroxyd 0,1N hoặc acid hydrocloric 0,1 N với chỉ thị là dung dịch phenolphtalein (TS). Thể tích dung dịch natri hydroxyd 0,1 N hoặc acid hydrocloric 0,1 N sử dụng không được quá 0,5 ml. Các chất dễ bị than hóa Cân 0,5 g mẫu thử, chính xác đến mg, hòa tan trong 5 ml acid sulfuric (TS). Màu tạo thành trong dung dịch không được đậm hơn màu hồng nhạt của “dung dịch đối chứng Q” (Thử theo hướng dẫn trong JECFA monograph 1 - Vol. 4). Các chất clor hữu cơ - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. - Thử với 0,25 g mẫu thử, sử dụng 0,5 ml dung dịch acid hydrocloric 0,01 N làm đối chứng Các chất dễ bị oxy hóa Thêm 1,5 ml acid sulfuric vào 100 ml nước cất, đun sôi hỗn hợp, nhỏ vào từng giọt dung dịch kali permanganat 0,1 N đến khi dung dịch có màu hồng bền trong 30 giây. Cân 1g mẫu, chính xác đến mg, hòa vào dung dịch đã chuẩn bị, còn nóng, và chuẩn độ bằng dung dịch kali permanganat 0,1 N tới khi dung dịch có màu hồng bền trong 15 giây. Thể tích dung dịch kali permanganat 0,1 N sử dụng để chuẩn độ không được quá 0,5 ml. Chì - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. - Xác định bằng kỹ thuật quang phổ hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng qui định. Lựa chọn cỡ mẫu thử và phương pháp chuẩn bị mẫu dựa trên nguyên tắc của phương pháp mô tả trong JECFA monograph 1 - Vol. 4 phần các phương pháp phân tích công cụ. 6.3. Định lượng Cân 3 g mẫu thử đã được sấy tại 105oC trong 4 giờ, chính xác đến mg, cho vào bình nón 250 ml. Thêm 50 ml nước cất, hòa tan. Trung hòa dung dịch bằng dung dịch acid hydrocloric 0,1 N với chỉ thị là dung dịch phenolphtalein (TS) nếu cần. Thêm 50 ml ether và vài giọt dung dịch xanh bromophenol (TS), chuẩn độ bằng dung dịch acid hydrocloric 0,5 N, lắc bình đều khi chuẩn độ, đến khi chỉ thị bắt đầu đổi màu. Chuyển phần nước phía dưới sang bình khác. Rửa lớp ether còn lại với 10 ml nước cất, gộp phần nước rửa vào vào phần nước đã tách ra và thêm 20 ml ether vào nước rửa. Chuẩn độ tiếp bằng dung dịch acid hydrocloric 0,5 N, lắc đều. Mỗi ml dung dịch acid hydrocloric 0,5 N tương đương với 72,05 mg C7H5NaO2. PHỤ LỤC 6 YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI KALI BENZOAT 1. Tên khác, chỉ số Potasium benzoate; INS 212 ADI=0 - 5 mg/kg thể trọng 2. Định nghĩa Tên hóa học muối kali của acid benzencarboxylic, muối kali của acid phenylcarboxylic Mã số C.A.S. 582-25-2 (dạng khan) Công thức hóa học C7H5KO2.3H2O Công thức cấu tạo Khối lượng phân tử 160,22 (dạng khan C7H5KO2) 214,27 (dạng trihydrat C7H5KO2.3H2O) 3. Cảm quan Bột tinh thể màu trắng 4. Chức năng Chất bảo quản chống vi sinh vật 5. Yêu cầu kỹ thuật 5.1. Định tính Độ tan Dễ tan trong nước, tan trong ethanol. Kali Phải có phản ứng đặc trưng của kali. Benzoat Phải có phản ứng đặc trưng của benzoat. 5.2. Độ tinh khiết Giảm khối lượng khi sấy khô Không được quá 26,5%. Tính acid hoặc tính kiềm Đạt yêu cầu (mô tả trong phần Phương pháp thử). Các chất dễ bị than hóa Đạt yêu cầu (mô tả trong phần Phương pháp thử). Các hợp chất clor hữu cơ Không được quá 0,07% (tính theo Cl2). Các chất dễ bị oxy hóa Đạt yêu cầu (mô tả trong phần Phương pháp thử). Chì Không được quá 2,0 mg/kg. 5.3. Hàm lượng C7H5KO2 Không được thấp hơn 99,0% tính theo chế phẩm khan. 6. Phương pháp thử 6.1. Định tính Kali - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. - Sử dụng dung dịch mẫu thử 10%. Benzoat - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. - Sử dụng dung dịch mẫu thử 10%. 6.2. Độ tinh khiết Giảm khối lượng khi sấy khô - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. - Sấy tại 105oC trong 4 giờ. Tính acid hoặc tính kiềm Cân 2 g mẫu thử, chính xác đến mg, hòa tan trong 20 ml nước mới đun sôi để nguội. Trung hòa dung dịch này bằng dung dịch natri hydroxyd 0,1 N hoặc acid hydrocloric 0,1 N với chỉ thị là dung dịch phenolphtalein (TS). Thể tích dung dịch natri hydroxyd 0,1 N hoặc acid hydrocloric 0,1 sử dụng không được quá 0,5 ml. Các chất dễ bị than hóa - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. - Cân 0,5 g mẫu thử, chính xác đến mg, hòa tan trong 5 ml acid sulfuric (TS). Màu tạo thành trong dung dịch không được đậm hơn màu hồng nhạt của “dung dịch đối chứng Q”. Các chất clor hữu cơ - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. - Thử với 0,25 g mẫu thử, sử dụng 0,5 ml dung dịch acid hydrocloric 0,01 N làm đối chứng Các chất dễ bị oxy hóa Thêm 1,5 ml acid sulfuric vào 100 ml nước cất, đun sôi hỗn hợp, nhỏ vào từng giọt dung dịch kali permanganat 0,1 N đến khi dung dịch có màu hồng bền trong 30 giây. Cân 1g mẫu, chính xác đến mg, hòa tan vào dung dịch đã chuẩn bị, còn nóng, và chuẩn độ bằng dung dịch kali permanganat 0,1 N tới khi dung dịch có màu hồng bền trong 15 giây. Thể tích dung dịch kali permanganat 0,1 N sử dụng để chuẩn độ không được quá 0,5 ml. Chì - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. - Xác định bằng kỹ thuật quang phổ hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng qui định. Lựa chọn cỡ mẫu thử và phương pháp chuẩn bị mẫu dựa trên nguyên tắc của phương pháp mô tả trong JECFA monograph 1 - Vol. 4 phần các phương pháp phân tích công cụ. 6.3. Định lượng Cân 2,5-3 g mẫu thử (chính xác đến 0,1 mg) đã được sấy tại 105oC trong 4 giờ, cho vào bình nón 250 ml. Thêm 50 ml nước cất, hòa tan. Trung hòa dung dịch bằng dung dịch acid hydrocloric 0,1 N với chỉ thị là dung dịch phenolphtalein (TS) nếu cần. Thêm 50 ml ether và vài giọt dung dịch xanh bromophenol (TS), chuẩn độ bằng dung dịch acid hydrocloric 0,5 N, lắc bình đều khi chuẩn độ, đến khi chỉ thị bắt đầu đổi màu. Chuyển phần nước phía dưới sang bình khác. Rửa lớp ether còn lại với 10 ml nước cất, gộp phần nước rửa vào vào phần nước đã tách ra và thêm 20 ml ether vào nước rửa. Chuẩn độ tiếp bằng dung dịch acid hydrocloric 0,5 N, lắc đều. Mỗi ml dung dịch acid hydrocloric 0,5 N tương đương với 80,11 mg C7H5KO2. PHỤ LỤC 7 YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI CALCI BENZOAT 1. Tên khác, chỉ số Monocalcium benzoate; INS 213 ADI = 0 - 5 mg/kg thể trọng 2. Định nghĩa Tên hóa học Calci benzoat Mã số C.A.S. 2090-05-3 Công thức hóa học Dạng khan C14H10CaO4 Dạng monohydrat C14H10CaO4.H2O Dạng trihydrat C14H10CaO4.3H2O Công thức cấu tạo Dạng khan Khối lượng phân tử Dạng khan 282,31 Dạng monohydrat 300,32 Dạng trihydrat 336,36 3. Cảm quan Tinh thể trắng hoặc không màu, bột trắng. 4. Chức năng Chất bảo quản chống vi sinh vật 5. Yêu cầu kỹ thuật 5.1. Định tính Độ tan Ít tan trong nước Calci Phải có phản ứng đặc trưng của calci. Benzoat Phải có phản ứng đặc trưng của benzoat. 5.2. Độ tinh khiết Giảm khối lượng khi sấy khô Không được quá 17,5%. Các chất không tan trong nước Không được quá 0,3%. Tính acid hoặc tính kiềm Đạt yêu cầu (mô tả trong phần Phương pháp thử). Florid Không được quá 10,0 mg/kg. Chì Không được quá 2,0 mg/kg. Các chất clor hữu cơ Không được quá 0,07% (tính theo Cl2). Các chất dễ bị oxy hóa Đạt yêu cầu (mô tả trong phần Phương pháp thử). 5.3. Hàm lượng C14H10CaO4 Không được thấp hơn 99,0 % tính theo chế phẩm khan. 6. Phương pháp thử 6.1 Định tính Calci Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. Benzoat Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. 6.2. Độ tinh khiết Giảm khối lượng khi sấy khô - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. - Sấy tại 105oC trong 4 giờ. Các chất không tan trong nước Cân 10 g (chính xác đến mg) mẫu thử, hòa tan trong 100 ml nước nóng. Lọc qua một phễu lọc Gooch đã cân bì (chính xác đến 0,2 mg). Rửa cặn bằng nước nóng. Sấy khô phễu lọc và cặn tại 105oC trong 2 giờ. Để nguội, cân và tính hàm lượng %. Tính acid hoặc tính kiềm Cân 2 g mẫu thử, chính xác đến mg, hòa tan trong 20 ml nước mới đun sôi để nguội. Trung hòa dung dịch này bằng dung dịch natri hydroxyd 0,1 N hoặc acid hydrocloric 0,1 N với chỉ thị là dung dịch phenolphtalein (TS). Thể tích dung dịch natri hydroxyd 0,1 N hoặc acid hydrocloric 0,1 N sử dụng không được quá 0,5 ml. Florid - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4, phương pháp I hoặc III. - Cân 5 g (chính xác đến mg) mẫu thử. Chì - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. - Xác định bằng kỹ thuật quang phổ hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng qui định. Lựa chọn cỡ mẫu thử và phương pháp chuẩn bị mẫu dựa trên nguyên tắc của phương pháp mô tả trong JECFA monograph 1 - Vol. 4 phần các phương pháp phân tích công cụ. Các chất clor hữu cơ Thử với 0,25 g mẫu thử, sử dụng 0,5 ml dung dịch acid hydrocloric 0,01 N làm đối chứng Các chất dễ bị oxy hóa Thêm 1,5 ml acid sulfuric vào 100 ml nước cất, đun sôi hỗn hợp, nhỏ từng giọt dung dịch kali permanganat 0,1 N đến khi dung dịch có màu hồng bền trong 15 giây. Cân 1 g mẫu, chính xác đến mg, hòa tan vào dung dịch đã chuẩn bị, còn nóng, và chuẩn độ bằng dung dịch kali permanganat 0,1 N tới khi dung dịch có màu hồng bền trong 15 giây. Thể tích dung dịch kali permanganat sử dụng để chuẩn độ không được quá 0,5 ml. 6.3. Định lượng Cân 0,6 g mẫu thử đã được sấy khô, chính xác đến 0,1 mg. Hòa tan trong 20 ml nước và 2 ml dung dịch acid hydrocloric loãng (TS). Pha loãng bằng nước vừa đủ để thu được 100 ml. Khuấy bằng máy khuấy từ, dùng buret 50 ml thêm khoảng 30 ml dung dịch dinatri ethylendiamintetraacetat 0,05 M, sau đó thêm 15 ml dung dịch natri hydroxyd (TS), 40 mg hỗn hợp chỉ thị murexid (có thể thay bằng 0,25 g chỉ thị xanh da trời hydroxynaphtol, trong trường hợp này không thêm dung dịch xanh lục naphtol (TS)) và 3 ml dung dịch xanh lục naphtol (TS), tiến hành chuẩn độ dung dịch đến màu xanh da trời đậm. Mỗi ml dung dịch dinatri ethylendiamintetraacetat 0,05 M tương đương với 14,116 mg C14H10CaO4. PHỤ LỤC 8 YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI ETHYL p-HYDROBENZOAT 1. Tên khác, chỉ số Ethyl p-oxybenzoat; Ethylparaben INS 214 ADI= 0 – 10 mg/kg thể trọng 2. Định nghĩa Tên hóa học Ethyl p-hydroxybenzoat, ethyl ester của acid p-hydroxybenzoic Mã số C.A.S. 120-47-8 Công thức hóa học C9H10O3 Công thức cấu tạo Khối lượng phân tử 166,18 3. Cảm quan Bột tinh thể màu trắng hoặc tinh thể nhỏ không màu, hầu như không mùi. 4. Chức năng Chất bảo quản 5. Yêu cầu kỹ thuật 5.1. Định tính Độ tan Dễ tan trong ethanol, ether và propylen glycol Khoảng nhiệt độ nóng chảy 115oC -118oC. p-Hydroxybenzoat Khoảng nóng chảy của acid p-hydroxybenzoic được điều chế từ mẫu thử là 212-217o. 5.2. Độ tinh khiết Giảm khối lượng khi sấy khô Không được quá 0,5 %. Tro sunfat Không được quá 0,05 %. Tính acid Đạt yêu cầu (mô tả trong phần Phương pháp thử). Acid p-hydroxybenzoic và acid salicylic Đạt yêu cầu (mô tả trong phần Phương pháp thử). Chì Không được quá 2,0 mg/kg. 5.3. Hàm lượng C9H10O3 Không được thấp hơn 99,0 % tính theo chế phẩm khan. 6. Phương pháp thử 6.1. Định tính p-Hydroxybenzoat Cân chính xác 0,5 g mẫu thử. Thêm 10 ml dung dịch natri hydroxyd (TS) vào mẫu. Đun sôi mẫu thử trong khoảng 30 phút và cô dung dịch cạn bớt đến còn khoảng 5 ml. Để nguội, acid hoá bằng dung dịch acid sulfuric loãng (TS), lọc qua giấy lọc, thu lấy kết tủa trên giấy lọc và rửa kỹ kết tủa bằng nước cất. Làm khô giấy lọc trong bình hút ẩm trên acid sulfuric đặc. Đo khoảng nóng chảy của acid p-hydroxybenzoic thu được. 6.2. Độ tinh khiết Giảm khối lượng khi sấy khô - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. - Không được quá 0,5% (sấy tại 80oC trong 2 giờ). Tro sunfat - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4, phương pháp I. - Mẫu thử : 2 g. Tính acid Cân 750 mg mẫu thử, thêm 15 ml nước, đun nóng ở 80o trong 1 phút, để nguội, lọc dung dịch. Dịch lọc phải có tính acid hoặc trung tính đối với chỉ thị là quỳ tím. Thêm 0,2 ml dung dịch NaOH 0,1 N và 2 giọt dung dịch đỏ methyl (TS) vào 10 ml dịch lọc. Dung dịch phải có màu vàng không có ánh hồng. Acid p-hydroxybenzoic và acid salicylic Cân chính xác 0,5 g mẫu thử, hoà tan trong 30 ml ether. Thêm 20 ml dung dịch natri hydrogen carbonat 1%, lắc kỹ, tách lấy lớp nước. Rửa lớp nước bằng 20 ml ether (rửa 2 lần). Thêm tiếp 5 ml acid sulfuric loãng và 30 ml ether, lắc lần nữa. Tách lấy lớp ether, thêm 10 ml nước, lắc kỹ. Lọc lớp ether. Tráng bình hứng và giấy lọc bằng một lượng nhỏ ether rồi gộp với dịch lọc cho cô quay loại bỏ dung môi. Làm khô cặn thu được trên acid sulfuric đến khối lượng không đổi. Khối lượng cặn không được vượt quá 5 mg. Hoà tan cặn trong 25 ml nước, đun nóng ở 70o, lọc và thêm vài giọt dung dịch sắt (III) clorid (TS), Dung dịch này không được xuất hiện màu tím đến tím đỏ. Chì - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. - Xác định bằng kỹ thuật quang phổ hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng qui định. Lựa chọn cỡ mẫu thử và phương pháp chuẩn bị mẫu dựa trên nguyên tắc của phương pháp mô tả trong JECFA monograph 1 - Vol. 4 phần các phương pháp phân tích công cụ. 6.3. Định lượng Cân 2 g mẫu thử đã được sấy khô, chính xác đến mg, cho vào bình thủy tinh. Thêm 40 ml dung dịch NaOH 1 N và tráng rửa thành bình bằng nước. Đậy bình bằng mặt kính đồng hồ, đun sôi nhẹ trong 1h rồi để nguội. Thêm 5 giọt dung dịch xanh bromothymol (TS) và chuẩn độ lượng NaOH dư bằng acid sulfuric 1 N, so sánh màu của dung dịch với màu của dung dịch đệm (pH 6,5) có chứa lượng chỉ thị tương đương. Tiến hành một mẫu trắng với các thuốc thử, hiệu chuẩn kết quả nếu cần thiết. Mỗi ml dung dịch natri hydroxyd 1 N tương đương với 166,18 mg C9H10O3. PHỤ LỤC 9 YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI METHYL p-HYDROXYBENZOAT 1. Tên khác, chỉ số Methyl p-oxybenzoat; Methylparaben INS 218 ADI = 0 - 10mg/kg thể trọng 2. Định nghĩa Tên hóa học Methyl p-hydroxybenzoat, methyl ester của acid p-hydroxybenzoic Mã số C.A.S. 99-76-3 Công thức hóa học C8H8O3 Công thức cấu tạo Khối lượng phân tử 152,15 3. Cảm quan Bột tinh thể màu trắng hoặc tinh thể nhỏ không màu, hầu như không mùi. 4. Chức năng Chất bảo quản 5. Yêu cầu kỹ thuật 5.1. Định tính Độ tan Ít tan trong nước, dễ tan trong ethanol và propylen glycol, tan được trong ether. Khoảng nhiệt độ nóng chảy 125oC -128oC. p-Hydroxybenzoat Điểm chảy của acid p-hydroxybenzoic được chuyển hoá từ mẫu thử là 212-217o. 5.2. Độ tinh khiết Giảm khối lượng khi làm khô Không được quá 0,5%. Tro sunfat Không được quá 0,05%. Tính acid Đạt yêu cầu (mô tả trong phần Phương pháp thử). Acid p-hydroxybenzoic và acid salicylic Đạt yêu cầu (mô tả trong phần Phương pháp thử). Chì Không được quá 2,0 mg/kg. 5.3. Hàm lượng C8H8O3 Không được thấp hơn 99,0 % tính theo chế phẩm khan. 6. Phương pháp thử 6.1. Định tính p-Hydroxybenzoat Cân 0,5 g mẫu thử. Thêm 10 ml natri hydroxyd (TS) vào mẫu. Đun sôi mẫu thử trong khoảng 30 phút, cô dung dịch cạn bớt đến khi còn khoảng 5 ml. Để nguội, acid hoá bằng acid sulfuric loãng (TS), lọc qua giấy lọc, thu lấy kết tủa trên giấy lọc và rửa kỹ kết tủa bằng nước cất. Làm khô giấy lọc trong bình hút ẩm với acid sulfuric đặc. Đo điểm nóng chảy của acid p-hydroxybenzoic thu được. 6.2. Độ tinh khiết Giảm khối lượng khi làm khô - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. - Trên silicagel trong 5 giờ. Tro sunfat Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4, phương pháp I (mẫu thử : 2 g). Tính acid Cân 750 mg mẫu thử, thêm 15 ml nước, đun nóng ở 80o trong 1 phút. Để nguội, lọc dung dịch. Dịch lọc phải có tính acid hoá hoặc trung tính với giấy quỳ. Thêm 0,2 ml dung dịch NaOH 0,1 N và 2 giọt đỏ methyl (TS) vào 10 ml dịch lọc. Dung dịch này phải có màu vàng, không có ánh hồng. Acid p-hydroxybenzoic và acid salicylic Cân chính xác 0,5 g mẫu thử, hoà tan trong 30 ml ether. Thêm 20 ml dung dịch natri hydrogen carbonat 1%, lắc kỹ, tách lấy lớp nước. Rửa lớp nước bằng 20 ml ether (rửa 2 lần). Thêm tiếp 5ml acid sulfuric loãng và 30 ml ether, lắc lần nữa. Tách lấy lớp ether, thêm 10 ml nước, lắc kỹ. Lọc lớp ether. Tráng bình hứng và giấy lọc bằng một lượng nhỏ ether rồi gộp với dịch lọc để cất quay loại bỏ dung môi. Làm khô cặn thu được trên acid sulfuric đến khối lượng không đổi. Khối lượng cặn không được vượt quá 5 mg. Hoà tan cặn trong 25 ml nước, đun nóng ở 70o, lọc và thêm vài giọt dung dịch sắt (III) clorid (TS), Dung dịch này không được xuất hiện màu tím đến tím đỏ. Chì - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. - Xác định bằng kỹ thuật quang phổ hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng qui định. Lựa chọn cỡ mẫu thử và phương pháp chuẩn bị mẫu dựa trên nguyên tắc của phương pháp mô tả trong JECFA monograph 1 - Vol. 4 phần các phương pháp phân tích công cụ. 6.3. Định lượng Cân 2 g mẫu thử đã được sấy khô, chính xác đến mg, cho vào bình nón 250 ml. Thêm 40 ml dung dịch NaOH 1 N và rửa thành bình bằng nước. Đậy bình bằng mặt kính đồng hồ. Đun sôi nhẹ trong 1 giờ rồi để nguội. Thêm 5 giọt xanh bromothymol (TS) và chuẩn độ lượng NaOH dư bằng acid sulfuric 1 N, so sánh màu của dung dịch với màu của dung dịch đệm (pH 6,5) có chứa lượng chỉ thị tương đương. Thực hiện một mẫu trắng với các thuốc thử, hiệu chỉnh kết quả nếu cần. Mỗi ml dung dịch natri hydroxyd 1N tương đương với 152,2 mg C8H8O3. PHỤ LỤC 10 YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI LƯU HUỲNH DIOXYD 1. Tên khác, chỉ số INS 220 ADI = 0 - 0,7 mg/kg thể trọng 2. Định nghĩa Mã số C.A.S. 7446-09-5 Công thức cấu tạo SO2 Khối lượng phân tử 64,07 3. Cảm quan Là chất khí, không màu, không cháy, mùi hăng mạnh, gây khó thở.Tỷ trọng hơi gấp 2,26 lần so với không khí tại áp suất khí quyển ở 0oC. Trọng lượng riêng của chất lỏng khỏang 1,436 ở 0o/4oC. Ở 20oC độ tan là 10 g SO2/100 g dung dịch. Chế phẩm thương mại thường được cung cấp dưới dạng khí nén, trong bình khí nén tồn tại ở cả 2 pha lỏng và khí. Chú ý: Khí SO2 gây kích ứng mắt, họng và đường hô hấp trên. Lưu huỳnh dioxyd lỏng có thể gây bỏng da do tác dụng gây đông đặc các dịch trong mô. Các cảnh báo an toàn trong tài liệu kỹ thuật của nhà sản xuất, nhà cung cấp khí SO2 hóa lỏng hoặc các tổ chức của các nhà sản xuất, phân phối khí SO2 hóa lỏng cần được tuân thủ trước khi thao tác với khí SO2. 4. Chức năng Chất bảo quản, chất chống ngả màu nâu, chất chống oxy hóa. 5. Yêu cầu kỹ thuật 5.1. Định tính Độ tan Tan trong nước (36/1, tt/tt) và ethanol (114/1, tt/tt) (thử theo hướng dẫn tại JECFA monograph 1 - Vol. 4). Các hợp chất sulfurơ Phải có phản ứng đặc trưng với hợp chất sulfurơ. Hoạt tính oxy hóa Phải có phản ứng hoạt tính oxy hóa đặc trưng. 5.2. Độ tinh khiết Nước Không được quá 0,05%. Cặn không bay hơi Không được quá 0,05%. Selen Không được quá 20,0 mg/kg. Chì Không được quá 5,0 mg/kg. 5.3. Hàm lượng SO2 Không được thấp hơn 99,9% SO2 tính theo khối lượng. 6. Phương pháp thử 6.1. Định tính Các hợp chất sulfurơ Mẫu thử sẽ làm đen giấy tẩm ướt bằng dung dịch thủy ngân (I) nitrat (TS). Hoạt tính oxy hóa Cho miếng giấy lọc đã tẩm kali iodat và dung dịch hồ tinh bột (TS) vào luồng mẫu khí. Màu xanh lơ sẽ xuất hiện trên giấy, màu sẽ nhạt dần nếu vẫn để miếng giấy lọc trong mẫu khí. 6.2. Độ tinh khiết Nước - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. - Chuyển khoảng 50 ml lưu huỳnh dioxyd lỏng vào bình chuẩn độ Karl-Fischer, xác định khối lượng mẫu đã lấy, xác định hàm lượng nước bằng phương pháp Karl-Fischer. Cặn không bay hơi Lấy khoảng 200 ml lưu huỳnh dioxyd (288 g) vào bình nón 250 ml. Xác định khối lượng mẫu đã lấy bằng cách xác định sự thay đổi khối lượng của bom khí. Cho bay hơi đến khô trên bể cách thủy và đuổi hết khí SO2 bằng cách sục không khí khô, lau khô thành bình, để nguội trong bình hút ẩm và cân. Selen - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4, phương pháp II (lượng dịch thử : 2,0 ml) - Hướng dẫn lấy mẫu và chuẩn bị mẫu mô tả trong phần Phương pháp thử. Chì - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. - Xác định bằng kỹ thuật quang phổ hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng qui định. Lựa chọn cỡ mẫu thử và phương pháp chuẩn bị mẫu dựa trên nguyên tắc của phương pháp mô tả trong JECFA monograph 1 - Vol. 4 phần các phương pháp phân tích công cụ. 6.3. Lấy mẫu Mẫu lưu huỳnh dioxyd có thể lấy một cách an toàn từ bồn chứa hay ống dẫn thông qua một van có vòi 1 cm. Mẫu được chứa vào bom khí chế tạo từ thép không rỉ 316 chịu dược áp suất 7MPa (1000 psig) 2 đầu gắn với van kim cũng bằng thép không rỉ 316. Trước khi lấy mẫu bom chứa mẫu được thổi không khí khô qua để đuổi hết khí SO2 (có thể còn dư từ mẫu trước đó). Nối bom chứa mẫu với bồn chứa hay ống dẫn bằng một nối cứng. Đầu còn lại của bom chứa mẫu nối với một ống mềm nhúng ngập trong dung dịch xút loãng hoặc nước. Khí trong bom sẽ được xả vào dung dịch xút loãng hoặc nước khi mở van khí gắn với ống nối cứng và sau đó từ từ mở van nối với ống mềm. Khi khí ra hết khỏi bom và lưu huỳnh dioxyd lỏng bắt đầu vào dung dịch xút loãng hoặc nước, thì khóa van nối với ống mềm, sau đó từ từ khóa van nối với ống nối cứng và tách bom mẫu ra khỏi ống nối với bồn chứa hay ống dẫn. Sau đó xả khoảng 15% lượng lưu huỳnh dioxyd lỏng trong bom ra dung dịch xút loãng hoặc nước, đậy kín nắp đầu bom và chuyển bom đến phòng thí nghiệm để phân tích. Cảnh báo: Không bao giờ để bom mẫu chứa chất lỏng có thể tích vượt quá 85% tổng dung tích của bom. Dung dịch thử để xác định chì và selen: Lấy 100 ml lưu huỳnh dioxyd (144 g) vào bình nón 125 ml. Xác định khối lượng mẫu đã lấy bằng cách xác định khối lượng mất đi của bom mẫu. Cho bay hơi đến khô trên bể cách thủy. Thêm vào bình nón khô 3 ml acid nitric và 10 ml nước cất, đun nhẹ trên bếp trong 15 phút. Chuyển toàn bộ dịch trong bình nón vào bình định mức 100 ml, định mức đến vạch bằng nước cất, lắc đều. Lấy 10,0 ml sang một bình định mức 100ml thứ hai, định mức đến vạch bằng nước cất, lắc đều. Chú ý: Các phép thử có sử dụng dung dịch này sẽ chính xác nếu lượng mẫu lấy đúng 144 g, nếu không đúng thì khi tính toán phải sử dụng khối lượng mẫu thực tế đã lấy. 6.4. Định lượng Lấy 100% trừ đi hàm lượng (%) của cặn không bay hơi và nước nêu trên, thu được hàm lượng % của lưu huỳnh dioxyd. PHỤ LỤC 11 YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI NATRI SULFIT 1. Tên khác, chỉ số Disodium sulfite; INS 221 ADI=0 - 0,7 mg/kg thể trọng tính theo SO2 2. Định nghĩa Tên hóa học Natri sulfit Mã số C.A.S. 7757-83-7 Công thức hóa học Na2SO3 Khối lượng phân tử 126,04 3. Cảm quan Bột trắng có mùi lưu huỳnh dioxyd nhẹ. 4. Chức năng Chất tẩy trắng, chất chống oxy hóa, chất bảo quản 5. Yêu cầu kỹ thuật 5.1. Định tính Độ tan Dễ tan trong nước, khó tan trong ethanol. Natri Phải có phản ứng đặc trưng của natri. Sulfit Phải có phản ứng đặc trưng của sulfit. 5.2. Độ tinh khiết pH Dung dịch 1/10 phải có pH trong khoảng 8,5-10,0. Thiosulfat Không được quá 0,1%. Sắt Không được quá 10,0 mg/kg. Chì Không được quá 2,0 mg/kg. Selen Không được quá 5 mg/kg. 5.3. Hàm lượng Na2SO3 Không được thấp hơn 95,0% 6. Phương pháp thử 6.1. Định tính Natri - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. Sulfit - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. 6.2. Độ tinh khiết Thiosulfat Khi acid hóa dung dịch mẫu thử 10% bằng acid sulfuric hoặc acid hydrocloric, dung dịch phải trong. Sắt - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. - Sử dụng 0,5 ml dung dịch chuẩn (5 m g Fe) làm đối chứng. Chì - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. - Xác định bằng kỹ thuật quang phổ hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng qui định. Lựa chọn cỡ mẫu thử và phương pháp chuẩn bị mẫu dựa trên nguyên tắc của phương pháp mô tả trong JECFA monograph 1 - Vol. 4 phần các phương pháp phân tích công cụ. Selen Thuốc thử: Acid hydrocloric, hydrazin sulfat, dung dịch chuẩn selen (100 m g Se/ml) Tiến hành: Cân 2,0 ± 0,1 g mẫu thử, cho vào cốc có mỏ 50 ml. Thêm 10 ml nước cất, 5 ml acid hydrocloric và đun sôi để đuổi hết SO2. Cân 1,0 ± 0,1 g mẫu thử, cho vào một cốc có mỏ thứ 2, thêm 0,05 ml dung dịch selen chuẩn và tiến hành như trên. Thêm vào mỗi cốc 2 g hydrazin sulfat và đun nhẹ để hòa tan. Để yên trong 5 phút. Pha loãng dung dịch trong các cốc tới 50 ml trong các ống so màu Nessler, so sánh màu của 2 ống. Màu hồng của ống thử phải nhạt hơn màu của ống chứng (có thêm chuẩn). 6.3. Định lượng Cân 250 mg mẫu thử, cho vào bình có nút thủy tinh và thêm 50 ml dung dịch iod 0,1 N, đậy nút. Để yên trong 5 phút, thêm 1 ml acid hydrocloric, chuẩn độ iod dư bằng dung dịch natri thiosulfat 0,1 N với chỉ thị là dung dịch hồ tinh bột (TS). Mỗi ml dung dịch iod 0,1 N tương đương với 6,302 mg Na2SO3. PHỤ LỤC 12 YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI NATRI HYDROSULFIT 1. Tên khác, chỉ số Sodium hydrogen sulfite; INS 222 ADI =0 - 0,7 mg/kg thể trọng tính theo SO2 2. Định nghĩa Tên hóa học Natri hydrosulfit, natri bisulfit Mã số C.A.S. 7631-90-5 Công thức hóa học NaHSO3 Khối lượng phân tử 104,06 3. Cảm quan Bột, hạt hoặc tinh thể trắng có mùi đặc trưng của lưu huỳnh dioxyd. 4. Chức năng Chất tẩy trắng, chất chống oxy hóa, chất bảo quản 5. Yêu cầu kỹ thuật 5.1. Định tính Độ tan Dễ tan trong nước, khó tan trong ethanol. Natri Phải có phản ứng đặc trưng của natri. Sulfit Phải có phản ứng đặc trưng của sulfit. 5.2. Độ tinh khiết Tạp chất không tan trong nước Đạt yêu cầu (mô tả trong phần Phương pháp thử). pH Dung dịch 1/10 phải có pH trong khoảng 2,5-4,5. Sắt Không được quá 10,0 mg/kg. Chì Không được quá 2,0 mg/kg. Selen Không được quá 5mg/kg. 5.3. Hàm lượng SO2 Không được thấp hơn 58,5% và không được quá 67,4% tính theo SO2 6. Phương pháp thử 6.1. Định tính Natri Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. Sulfit Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. 6.2. Độ tinh khiết Tạp chất không tan trong nước Hoà tan 20 g mẫu thử trong 200 ml nước cất, dung dịch phải trong, chỉ được phép có rất ít cặn lơ lửng. Sắt - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. - Sử dụng 0,5 ml dung dịch chuẩn (5 m g Fe) làm đối chứng. Chì - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. - Xác định bằng kỹ thuật quang phổ hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng qui định. Lựa chọn cỡ mẫu thử và phương pháp chuẩn bị mẫu dựa trên nguyên tắc của phương pháp mô tả trong JECFA monograph 1 - Vol. 4 phần các phương pháp phân tích công cụ. Selen Thuốc thử: Acid hydrocloric, hydrazin sulfat, dung dịch chuẩn selen (100 m g Se/ml) Tiến hành: Cân 2,0 ± 0,1 g mẫu thử, cho vào cốc có mỏ 50 ml. Thêm 10 ml nước cất, 5 ml acid hydrocloric và đun sôi để đuổi hết SO2. Cân 1,0 ± 0,1 g mẫu thử, cho vào một cốc có mỏ khác, thêm 0,05 ml dung dịch selen chuẩn và tiến hành như trên. Thêm vào mỗi cốc 2 g hydrazin sulfat và đun nhẹ để hòa tan. Để yên trong 5 phút. Pha loãng dung dịch trong các cốc thành 50 ml trong các ống so màu Nessler, so sánh màu của 2 ống. Màu hồng của ống thử phải nhạt hơn màu của ống chứng (có thêm chuẩn). 6.3. Định lượng Cân 0,2 g mẫu thử, chính xác đến mg, cho vào bình có nút thủy tinh và thêm 50 ml dung dịch iod 0,1 N, đậy nút. Để yên trong 5 phút, thêm 1ml acid hydrocloric, chuẩn độ iod dư bằng dung dịch natri thiosulfat 0,1 N với chỉ thị là dung dịch hồ tinh bột (TS). Mỗi ml dung dịch iod 0,1 N tương đương với 3,203 mg SO2. PHỤ LỤC 13 YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI NATRI META BISULFIT 1. Tên khác, chỉ số Sodium metabisulfite; INS 223 ADI = 0 - 0,7mg/kg thể trọng tính theo SO2 2. Định nghĩa Tên hóa học Natri disulfit, dinatri pentaoxodisulfat, dinatri pyrosulfit Mã số C.A.S. 7681-57-4 Công thức hóa học Na2S2O5 Khối lượng phân tử 190,11 3. Cảm quan Bột tinh thể hoặc tinh thể trắng có mùi đặc trưng của lưu huỳnh dioxyd. 4. Chức năng Chất tẩy trắng, chất chống oxy hóa, chất xử lý bột, chất bảo quản 5. Yêu cầu kỹ thuật 5.1. Định tính Độ tan Dễ tan trong nước, khó tan trong ethanol. Natri Phải có phản ứng đặc trưng của natri. Sulfit Phải có phản ứng đặc trưng của sulfit. 5.2. Độ tinh khiết Tạp chất không tan trong nước Đạt yêu cầu (mô tả trong phần Phương pháp thử). pH Dung dịch 1/10 phải có pH trong khoảng 4,0-4,5. Thiosulfat Không được quá 0,1%. Sắt Không được quá 10,0 mg/kg. Chì Không được quá 2,0 mg/kg. Selen Không được quá 5,0 mg/kg. 5.3. Hàm lượng Na2S2O5 Không được thấp hơn 90,0% 6. Phương pháp thử 6.1. Định tính Natri - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. Sulfit - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. 6.2. Độ tinh khiết Tạp chất không tan trong nước Hoà tan 20g mẫu thử trong 200 ml nước cất, dung dịch phải trong, chỉ được phép có rất ít cặn lơ lửng. Thiosulfat Dung dịch mẫu thử 10% sau khi acid hóa bằng acid sulfuric hoặc acid hydrocloric phải trong Sắt - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. - Sử dụng 0,5 ml dung dịch chuẩn (5 m g Fe) làm đối chứng. Chì - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. - Xác định bằng kỹ thuật quang phổ hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng qui định. Lựa chọn cỡ mẫu thử và phương pháp chuẩn bị mẫu dựa trên nguyên tắc của phương pháp mô tả trong JECFA monograph 1 - Vol. 4 phần các phương pháp phân tích công cụ. Selen Thuốc thử: Acid hydrocloric, hydrazin sulfat, dung dịch chuẩn selen (100 m g Se/ml) Tiến hành: Cân 2,0 ± 0,1 g mẫu thử, cho vào cốc có mỏ 50 ml. Thêm 10ml nước cất, 5 ml acid hydrocloric và đun sôi để đuổi hết SO2. Cân 1,0 ± 0,1 g mẫu thử, cho vào một cốc có mỏ khác, thêm 0,05 ml dung dịch selen chuẩn và tiến hành như trên. Thêm vào mỗi cốc 2 g hydrazin sulfat và đun nhẹ để hòa tan. Để yên trong 5 phút. Pha loãng dung dịch trong các cốc thành 50 ml trong các ống so màu Nessler, so sánh màu của 2 ống. Màu hồng của ống thử phải nhạt hơn màu của ống chứng (có thêm chuẩn). 6.3. Định lượng Cân 0,2 g mẫu thử, chính xác đến mg, cho vào bình có nút thủy tinh và thêm 50 ml dung dịch iod 0,1 N, đậy nút. Để yên trong 5 phút, thêm 1 ml acid hydrocloric, chuẩn độ iod dư bằng dung dịch natri thiosulfat 0,1 N với chỉ thị là dung dịch hồ tinh bột (TS). Mỗi ml dung dịch iod 0,1 N tương đương với 4,753 mg Na2S2O5. PHỤ LỤC 14 YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI KALI META BISULFIT 1. Tên khác, chỉ số Potassium metabisulfite; INS 224 ADI=0 - 0,7 mg/kg thể trọng tính theo SO2 2. Định nghĩa Tên hóa học Kali disulfit, kali pentaoxodisulfat, kali pyrosulfit Mã số C.A.S. 16731-55-8 Công thức hóa học K2S2O5 Khối lượng phân tử 222,33 3. Cảm quan Hạt, bột tinh thể hoặc tinh thể không màu, trơn chảy, thường có mùi đặc trưng của lưu huỳnh dioxyd. 4. Chức năng Chất tẩy trắng, chất chống oxy hóa, chất bảo quản 5. Yêu cầu kỹ thuật 5.1. Định tính Độ tan Tan trong nước, không tan trong ethanol. Kali Phải có phản ứng đặc trưng của kali. Sulfit Phải có phản ứng đặc trưng của sulfit. 5.2. Độ tinh khiết Tạp chất không tan trong nước Đạt yêu cầu (mô tả trong phần Phương pháp thử). Thiosulfat Không được quá 0,1%. Sắt Không được quá 10,0 mg/kg. Chì Không được quá 2,0 mg/kg. Selen Không được quá 5,0 mg/kg. 5.3. Hàm lượng K2S2O5 Không được thấp hơn 90,0% 6. Phương pháp thử 6.1. Định tính Kali Phải có phản ứng đặc trưng của kali. Sulfit Phải có phản ứng đặc trưng của sulfit. 6.2. Độ tinh khiết Tạp chất không tan trong nước Hoà tan 20 g mẫu thử trong 200 ml nước cất, dung dịch phải trong, chỉ được phép có rất ít cặn lơ lửng. Thiosulfat Dung dịch mẫu thử 10% không được thay đổi độ trong sau khi acid hóa bằng acid sulfuric hoặc acid hydrocloric. Sắt - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. - Sử dụng 0,5 ml dung dịch chuẩn (5 m g Fe) làm đối chứng. Chì - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. - Xác định bằng kỹ thuật quang phổ hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng qui định. Lựa chọn cỡ mẫu thử và phương pháp chuẩn bị mẫu dựa trên nguyên tắc của phương pháp mô tả trong JECFA monograph 1 - Vol. 4 phần các phương pháp phân tích công cụ. Selen Thuốc thử: Acid hydrocloric, hydrazin sulfat, dung dịch chuẩn selen (100 m g Se/ml) Tiến hành: Cân 2,0 ± 0,1 g mẫu thử, cho vào cốc có mỏ 50 ml. Thêm 10 ml nước cất, 5 ml acid hydrocloric và đun sôi để đuổi hết SO2. Cân 1,0 ± 0,1 g mẫu thử, cho vào một cốc có mỏ khác, thêm 0,05 ml dung dịch selen chuẩn và tiến hành như trên. Thêm vào mỗi cốc 2 g hydrazin sulfat và đun nhẹ để hòa tan. Để yên trong 5 phút. Pha loãng dung dịch trong các cốc thành 50 ml trong các ống so màu Nessler, so sánh màu của 2 ống. Màu hồng của ống thử phải nhạt hơn màu của ống chứng (có thêm chuẩn). 6.3. Định lượng Cân 250 mg mẫu thử cho vào bình có nút thủy tinh và thêm 50 ml dung dịch iod 0,1 N, đậy nút. Để yên trong 5 phút, thêm 1 ml dung dịch acid hydrocloric loãng (TS), chuẩn độ iod dư bằng dung dịch natri thiosulfat 0,1 N với chỉ thị là dung dịch hồ tinh bột (TS). Mỗi ml dung dịch iod 0,1 N tương đương với 5,558 mg K2S2O5. PHỤ LỤC 15 YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI KALI SULFIT 1. Tên khác, chỉ số Potassium sulfite; INS 225 ADI=0 - 0,7 mg/kg thể trọng tính theo SO2 2. Định nghĩa Tên hóa học Kali sulfit Mã số C.A.S. 10117-38-1 Công thức hóa học K2SO3 Khối lượng phân tử 158,25 3. Cảm quan Bột hoặc hạt màu trắng, không mùi. 4. Chức năng Chất tẩy trắng, chất chống oxy hóa, chất bảo quản 5. Yêu cầu kỹ thuật 5.1. Định tính Độ tan Dễ tan trong nước, ít tan trong ethanol Kali Phải có phản ứng đặc trưng của kali. Sulfit Phải có phản ứng đặc trưng của sulfit. 5.2. Độ tinh khiết Tính kiềm Từ 0,25 đến 0,45% tính theo K2CO3. Sắt Không được quá 10,0 mg/kg. Chì Không được quá 2,0 mg/kg. Selen Không được quá 5,0 mg/kg. 5.3. Hàm lượng K2SO3 Không được thấp hơn 90,0% 6. Phương pháp thử 6.1. Định tính Kali Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. Sulfit Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. 6.2. Độ tinh khiết Tính kiềm Hoà tan 1 g mẫu thử trong 20 ml nước cất, thêm 25 ml dung dịch hydrogen peroxyd 3% đã được trung hoà sử dụng chỉ thị là dung dịch đỏ methyl (TS). Trộn kỹ, để nguội về nhiệt độ phòng và chuẩn độ bằng acid hydrocloric 0,02 N. Tiến hành mẫu trắng sử dụng 25 ml dung dịch hydrogen peroxyd đã được trung hoà. Mỗi ml acid hydrocloric tương đương với 1,38 mg K2CO3 Sắt - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. - Sử dụng 0,5 ml dung dịch chuẩn (5 m g Fe) làm đối chứng. Chì - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. - Xác định bằng kỹ thuật quang phổ hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng qui định. Lựa chọn cỡ mẫu thử và phương pháp chuẩn bị mẫu dựa trên nguyên tắc của phương pháp mô tả trong JECFA monograph 1 - Vol. 4 phần các phương pháp phân tích công cụ. Selen Thuốc thử: Acid hydrocloric, hydrazin sulfat, dung dịch chuẩn selen (100 m g Se/ml) Tiến hành: Cân 2,0 ± 0,1 g mẫu thử, cho vào cốc có mỏ 50 ml. Thêm 10 ml nước cất, 5 ml acid hydrocloric và đun sôi để đuổi hết SO2. Cân 1,0 ± 0,1 g mẫu thử, cho vào một cốc có mỏ khác, thêm 0,05 ml dung dịch selen chuẩn và tiến hành như trên. Thêm vào mỗi cốc 2 g hydrazin sulfat và đun nhẹ để hòa tan. Để yên trong 5 phút. Pha loãng dung dịch trong các cốc thành 50 ml trong các ống so màu Nessler, so sánh màu của 2 ống. Màu hồng của ống thử phải nhạt hơn màu của ống chứng (có thêm chuẩn). 6.3. Định lượng Cân khoảng 0,75 g mẫu thử, chính xác đến mg, hoà tan trong hỗn hợp gồm 100 ml dung dịch iod 0,1 N và 5 ml dung dịch acid hydrocloric loãng (TS). Chuẩn độ iod dư bằng dung dịch natri thiosulfat 0,1 N với chỉ thị là dung dịch hồ tinh bột (TS). Mỗi ml dung dịch iod 0,1 N tương đương với 7,912 mg K2SO3. PHỤ LỤC 16 YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI NISIN 1. Tên khác, chỉ số INS 234 2. Định nghĩa Nisin là hỗn hợp của các polypeptid gần nhau có tính kháng khuẩn được sản sinh bởi chủng vi khuẩn Lactococcus lactis subsp.lactis, theo một vài công nghệ khác nhau. Nisin bao gồm nisin và muối NaCl với hoạt độ không ít hơn 900 đơn vị/mg. Chế phẩm Nisin ổn định ở nhiệt độ môi trường xung quanh và khi đun nóng trong môi trường acid (ổn định tối ưu ở pH = 3). Mã số C.A.S. 1414-45-5 Công thức hóa học C143H230N42O37S7 Công thức cấu tạo Abu : acid alpha-aminobutyric, Dha : dehydroalanin, Dhb : dehydrobutyrin Khối lượng phân tử Khoảng 3.354 3. Cảm quan Bột mịn, màu trắng đến màu nâu sáng 4. Chức năng Chất bảo quản chống vi sinh vật 5. Yêu cầu kỹ thuật 5.1. Định tính Độ tan Tan trong nước và không tan trong các dung môi không phân cực Phân biệt với các chất kháng khuẩn khác Phải có phản ứng đặc trưng khác biệt với các chất kháng khuẩn khác 5.2. Độ tinh khiết Giảm khối lượng khi sấy khô Không được quá 3,0% (sấy ở 1050C trong 2 giờ). Chì Không được quá 1,0 mg/kg. Chỉ tiêu vi sinh Salmonella : Không được có trong 25 g mẫu Coliforms tổng số: Không được quá 30/g Escherichia coli: Không được có trong 25 g mẫu 5.3. Hàm lượng Không được nhỏ hơn 900 IU nisin/mg và không được nhỏ hơn 50% muối NaCl 6. Phương pháp thử 6.1. Định tính Phân biệt với các chất kháng khuẩn khác - Độ bền vững trong môi trường acid: Cho 100 mg mẫu vào trong dung dịch HCl 0,02N được mô tả trong phần “Dung dịch chuẩn” của phần Định lượng. Đun sôi dung dịch này trong thời gian 5 phút. Sử dụng phương pháp định lượng dưới đây để xác định hoạt độ nisin. Xử lý nhiệt không làm giảm hoạt độ nisin. Nồng độ nisin tính toán trong mẫu đã đun sôi là 100% ± 5% giá trị định lượng. Điều chỉnh pH của dung dịch nisin tới giá trị pH = 11 bằng cách thêm dung dịch NaOH 5N. Gia nhiệt dung dịch ở 650C trong 30 phút, sau đó làm nguội. Điều chỉnh đến pH = 2 bằng cách nhỏ vào từng giọt dung dịch HCl. Xác định lại nồng độ nisin sử dụng phương pháp định lượng được miêu tả dưới đây. Hoạt tính kháng khuẩn của nisin mất hoàn toàn thấy rõ sau quá trình xử lý này. - Khả năng tồn tại của vi khuẩn Lactococcus lactis trong môi trường có nồng độ nisin cao: Chuẩn bị nhân giống Lactococcus lactis (ATCC 11454, NCIMB 8596) trong sữa đã tách chất béo tiệt trùng (chất béo sữa < 1%)="" và="" ủ="" ấm="" trong="" 18="" giờ,="" nhiệt="" độ="" 300c.="" chuẩn="" bị="" một="" hoặc="" nhiều="" bình="" tam="" giác="" chứa="" 100="" ml="" sữa="" quì,="" tiệt="" trùng="" ở="" nhiệt="" độ="" 1210c="" trong="" 15="" phút.="" cho="" 0,1="" g="" mẫu="" vào="" sữa="" quì="" đã="" được="" tiệt="" trùng="" và="" để="" ở="" nhiệt="" độ="" phòng="" trong="" 2="" giờ.="" thêm="" vào="" 0,1="" ml="" môi="" trường="" l.lactis="" và="" ủ="" ở="" 300c="" trong="" 24="" giờ.="" vi="" khuẩn="" l.lactis="" sẽ="" phát="" triển="" trong="" dịch="" mẫu="" có="" nồng="" độ="" khoảng="" 1.000="" iu/ml;="" tuy="" nhiên,="" vi="" khuẩn="" l.lactis="" sẽ="" không="" phát="" triển="" ở="" các="" nồng="" độ="" tương="" tự="" của="" các="" chất="" kháng="" khuẩn="" khác.="" phép="" thử="" này="" không="" phân="" biệt="" được="" nisin="" và=""> 6.2 Độ tinh khiết Chì - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. - Xác định bằng kỹ thuật quang phổ hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng qui định. Lựa chọn cỡ mẫu thử và phương pháp chuẩn bị mẫu dựa trên nguyên tắc của phương pháp mô tả trong JECFA monograph 1 - Vol. 4 phần các phương pháp phân tích công cụ. 6.2. Định lượng Nisin (theo phương pháp của Friedman và Epstein, J.Gen. Microbiol.5: 830, 1951) Chuẩn bị vi khuẩn thử: Chuyển Lactococcus lactis sbsp .cremoris (ATCC 14365, NCDO 495) được nuôi cấy hàng ngày trong sữa đã tách chất béo tiệt trùng vào bình McCartney có chứa sữa quì bằng que cấy và ủ ở nhiệt độ 300C. Chuẩn bị sữa đã chứa vi khuẩn cho phép thử bằng cách cấy 2% dịch nuôi vi khuẩn 24h vào lượng tỷ lệ phù hợp sữa đã tách béo tiệt trùng, đặt vào bể điều nhiệt ở 300C trong 90 phút. Sau đó mang dùng ngay. Dung dịch chuẩn gốc: Hoà tan một lượng nisin chuẩn được cân chính xác trong dung dịch acid HCl 0,02N để tạo dung dịch 5.000 đơn vị/ml. Ngay trước khi dùng, pha loãng dung dịch này bằng acid HCl 0,02 N tạo dung dịch 50 đơn vị/ml (Lưu ý: Chế phẩm nisin của hãng Sigma, St Louis, USA hoặc Fluka gồm có 2,5% nisin, hoạt độ tối thiểu 106 IU/g, có thể sử dụng làm dung dịch chuẩn gốc tương tự, là chế phẩm có tên Nisaplin của hãng Daniscom, Copenhagen, Đan Mạch). Dung dịch mẫu: Cân một lượng mẫu đủ để đảm bảo rằng các ống tương ứng của mẫu phù hợp với loạt chuẩn, tức là trong những giới hạn chặt chẽ, hàm lượng nisin trong mẫu và chuẩn là như nhau. Pha loãng dung dịch mẫu bằng dung dịch acid HCl 0,02N đến nồng độ 50 đơn vị nisin/ml. Dung dịch resazurin: Phải chuẩn bị dung dịch resazurin 0,0125% trong nước ngay trước khi dùng Cách tiến hành: Dùng pipet hút các thể tích (0,60; 0,55; 050; 0,45; 0,41; 0,38; 0,34; 0,31; 0,28; 0,26 ml) của dung dịch mẫu 50 đơn vị/ml và dung dịch chuẩn cho vào các hàng 10 ống thử vi sinh đã được làm khô, kích thước ống 6 x 5/8 inch. Bổ sung 4,6 ml sữa đã chứa vi khuẩn vào từng ống bằng thiết bị pipet tự động. Cho thêm sữa đã chứa vi khuẩn vào từng hàng ống có cùng nồng độ không đáng kể trừ hàng có 10 ống. Đặt các ống vào bể điều nhiệt ở nhiệt độ 300C trong 15 phút, sau đó làm nguội trong bể nước đá, cùng lúc đó thêm vào 1 ml dung dịch resazurin cho mỗi ống. Việc thêm vào đó được thực hiện bởi thiết bị pipet tự động. Lắc đều các ống. Tiếp đó ủ ở nhiệt độ 300C, thời gian 3 – 5 phút trong bể điều nhiệt . Kiểm tra các ống bằng ánh sáng huỳnh quang trong buồng tối. Ống mẫu có nồng độ cao nhất phân biệt rõ trước tiên thông qua màu sắc (chẳng hạn như chuyển từ màu xanh sang màu hoa cà) được so sánh với các ống trong dòng chuẩn để tìm ra được sự đồng màu nhất. Tìm sự phù hợp ở hai nồng độ thấp hơn kế tiếp của mẫu và chuẩn. Nội suy sự phù hợp ở các bước pha loãng một nửa. Khi các ống chuẩn đã biết hàm lượng nisin thì sẽ tính được nồng độ nisin trong dung dịch mẫu. Có được 3 nồng độ của dung dịch và trung bình của chúng. Tính hoạt độ của chế phẩm theo đơn vị IU/g. NaCl Cân chính xác 100 mg mẫu cho vào một bát sứ. Thêm 100 ml nước, 2 ml dung dịch dextrin 2% và 1 ml dung dịch diclorofluorescein 0,1%. Trộn đều và chuẩn độ bằng dung dịch AgNO3 0,1N cho đến khi AgCl kết vón lại và hỗn hợp có màu hồng nhạt. NaCl (% theo trọng lượng) được tính theo công thức sau: Trong đó: V: Thể tích dung dịch AgNO3 dùng để chuẩn độ (ml) N: Nồng độ đương lượng của dung dịch AgNO3 58,5 : Khối lượng phân tử của NaCl W: Khối lượng mẫu (mg) PHỤ LỤC 17 YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI HEXAMETHYLEN TETRAMIN 1. Tên khác, chỉ số Hexamethylenetertramine; Hexamine; Methenamine INS 239 ADI = 0 - 0,15 mg/kg thể trọng. 2. Định nghĩa Tên hóa học 1,3,5,7-tetraazatricylo[3.3.1.13,7]-decan; hexamethylen- tetramin Mã số C.A.S. 100-97-0 Công thức hóa học C6H12N4 Công thức cấu tạo Khối lượng phân tử 140,19 3. Cảm quan Tinh thể không màu, bóng sáng, gần như không mùi hoặc bột tinh thể màu trắng. 4. Chức năng Chất bảo quản chống vi sinh vật. 5. Yêu cầu kỹ thuật 5.1. Định tính Độ tan Dễ tan trong nước, tan được trong ethanol. Formaldehyd Phải có phản ứng đặc trưng của formaldehyd. Amoni Phải có phản ứng đặc trưng của amoni. 5.2. Độ tinh khiết Giảm khối lượng khi làm khô Không được quá 2,0%. Tro sulfat Không được quá 0,05%. Các muối amoni Đạt yêu cầu (mô tả trong phần Phương pháp thử). Chì Không được quá 2,0 mg/kg. 5.3. Hàm lượng C6H12N4 Không thấp hơn 99,0% tính theo chế phẩm đã sấy khô. 6. Phương pháp thử 6.1. Định tính Formaldehyd Đun nóng dung dịch mẫu thử 1/10 với dung dịch acid hydrocloric loãng (TS). Formaldehyd được giải phóng, nhận biết qua mùi của nó và tính chất làm đen giấy tẩm dung dịch bạc amoni nitrat (TS). Amoni Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. 6.2. Độ tinh khiết Giảm khối lượng khi làm khô Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4 (làm khô trên P2O5 trong 4 giờ). Tro sulfat Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4, phương pháp I (cân 2 g mẫu). Các muối amoni Thêm 1 ml thuốc thử Nessler (TS) vào 10 ml dung dịch mẫu thử 5%. Màu của dung dịch không được thẫm hơn màu của hỗn hợp 1 ml thuốc thử Nessler (TS) trong 10 ml nước. Chì - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. - Xác định bằng kỹ thuật quang phổ hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng qui định. Lựa chọn cỡ mẫu thử và phương pháp chuẩn bị mẫu dựa trên nguyên tắc của phương pháp mô tả trong JECFA monograph 1 - Vol. 4 phần các phương pháp phân tích công cụ. 6.3. Định lượng Cân 1 g (chính xác đến 0,1 mg) mẫu thử đã được làm khô trước trong 4 giờ trên P2O5. Cho vào cốc và thêm 40,0 ml acid sulfuric 1 N. Đun nhẹ và thêm nước từ từ (nếu cần) đến khi không thấy còn mùi formaldehyd. Làm mát, thêm 20 ml nước, dung dịch đỏ methyl (TS) và chuẩn độ acid dư bằng natri hydroxyd 1 N. Mỗi ml acid sulfuric 1 N tương đương với 35,05 mg C6H12N4. PHỤ LỤC 18 YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬĐỐI VỚI DIMETHYL DICARBONAT 1. Tên khác, chỉ số Dimethyl dicarbonate; DMDC, dimethyl pyrocarbonat INS 242 2. Định nghĩa Tên hóa học Dimethyl dicarbonat Mã số C.A.S. 004-525-33-1 Công thức hóa học C4H6O5 Công thức cấu tạo Khối lượng phân tử 139,09 3. Cảm quan Dạng lỏng không màu. Chú ý: có tính ăn mòn với mắt và da, gây độc qua đường hô hấp và tiêu hóa. Phải bảo quản trong bao bì kín để tránh ẩm. 4. Chức năng Chất bảo quản 5. Yêu cầu kỹ thuật 5.1. Định tính Độ tan Tan trong nước kèm theo phân hủy, có thể hòa lẫn với toluen. Hấp thụ hồng ngoại Phổ hồng ngoại của mẫu phải tương ứng với phổ chuẩn ở phần phụ lục. 5.2. Độ tinh khiết Dimethyl carbonat Không được quá 0,2%. Chì Không được quá 2,0 mg/kg. 5.3. Hàm lượng C4H6O5 Không được thấp hơn 99,8% 6. Phương pháp thử 6.1. Độ tinh khiết Dimethyl carbonat Thiết bị: Máy sắc ký khí với detector ion hóa ngọn lửa (FID), cột sắc ký mao quản, bộ phận inlet cho kỹ thuật "on column" (VD Carlo Erba Fraktovap 4160, hoặc Hewlett-Packard 5880 hoặc 5792 hoặc các thiết bị khác tương đương). - Cột mao quản: 50 m SE 30-D (đường kính trong 0,3 mm). - Máy ghi (đo) thế, 1mV - Microsyring với kim tiêm thạch anh, dung tích 0,01ml, phù hợp Điều kiện hoạt động của thiết bị Nhiệt độ: - Buồng bơm mẫu: nhiệt độ phòng ~25oC. - Deterctor: 200oC. - Cột: Nhiệt độ ban đầu 30oC; giữ nhiệt độ trong 5 phút, sau đó tăng nhiệt độ lên 120oC với tốc độ 40oC/phút, giữ tại 120oC trong 5 phút. Khí mang: - Áp suất van sơ cấp: 3,0 bar (heli) - Tốc độ dòng qua cột: 11 ml/phút - Tốc độ dòng khí make up: 28ml/phút - Tốc độ khí hydro: 35 ml/phút - Tốc độ không khí nén: 300 ml/phút Tốc độ máy ghi: 1 cm/phút Thuốc thử: Methylisobutylketon, tinh khiết sắc ký. Tiến hành: Cân khoảng 10 g mẫu, chính xác đến mg (lượng cân chính xác là w1 mg), cho vào 1 lọ đựng mẫu. Thêm 1 lượng (W2 mg) dimethyl-isobutyl keton tương đương với hàm lượng ước đoán của dimethyl carbonat. Đậy kín lọ, lắc kỹ và bơm vào máy sắc ký 0,002 ml. Thời gian lưu thu được như sau: dimethyl carbonat: ~ 2 phút methyl-isobutyl keton: ~4,5 phút dimethyl-isobutyl keton: ~8 phút. Sắc ký đồ mẫu ở phần 7.2 Xác định diện tích pic, tính hàm lượng (%) dimethyl carbonat theo công thức: trong đó: F1: Diện tích pic dimethyl carbonat F2: Diện tích pic chuẩn K: Hệ số hiệu chỉnh cho dimethyl carbonat Chú ý: 1. Dimethyl dicarbonat nhạy với độ ẩm và nhiệt. 2. Nếu pic sắc ký bị chẻ đôi trong những điều kiện sắc ký nào đó, diện tích pic được xác định bằng tổng diện tích của 2 pic. 3. Hệ số hiệu chỉnh đối với dimethyl carbonat được xác định khi đo dung dịch Dimethyl dicarbonat không chứa dimethyl carbonat. 4. Mẫu đã trộn chuẩn cần phân tích ngay. 5. Syring Hamilton với đầu kim bằng kim loại có thể gây ra sự phân hủy một phần Dimethyl dicarbonat. Chì - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. - Xác định bằng kỹ thuật quang phổ hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng qui định. Lựa chọn cỡ mẫu thử và phương pháp chuẩn bị mẫu dựa trên nguyên tắc của phương pháp mô tả trong JECFA monograph 1 - Vol. 4 phần các phương pháp phân tích công cụ. 6.2. Định lượng Lấy khoảng 70 ml aceton tinh khiết vào cốc thủy tinh dung tích 150 ml. Dùng syring lấy khoảng 1,0-1,3 g mẫu, mẫu cần cân chính xác đến 0,1 mg, cho vào cốc thủy tinh. Dùng pipet lấy chính xác 20 ml dung dịch dibutyl amin (thêm clorobenzen vào 120 g dibutyl amin đến đủ 1 l), cho vào cốc thủy tinh, khuấy đều. Chuẩn độ với acid hydrocloric 1 N, xác định điểm tương đương bằng đo thế. Tiến hành đồng thời một mẫu trắng. Tính hàm lượng dimethyl dicarbonat theo công thức sau: trong đó: V1: Lượng acid hydrocloric chuẩn độ mẫu thử (ml) V2: Lượng acid hydrocloric chuẩn độ mẫu trắng (ml) t: Nồng độ dung dịch acid hydrocloric W: khối lượng mẫu (g) 7. Phổ và sắc ký đồ đối chiếu 7.1. Phổ hồng ngoại chuẩn 7.2. Sắc ký đồ PHỤ LỤC 19 YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI ACID PROPIONIC 1. Tên khác, chỉ số Propionic acid; acid propanoic; ethylformic acid; methylacetic acid INS 280 ADI “không giới hạn” 2. Định nghĩa Tên hóa học Acid propionic Mã số C.A.S. 79-09-4 Công thức phân tử C3H6O2 Công thức cấu tạo Khối lượng phân tử 74,08 3. Cảm quan Dung dịch sánh, có mùi hăng nhẹ 4. Chức năng Chất bảo quản, chống nấm, chống đặc quánh, hương liệu 5. Yêu cầu kỹ thuật 5.1. Định tính Độ tan Có thể trộn lẫn với nước và ethanol. Khối lượng riêng d2020 = 0,993 – 0,997. 5.2. Độ tinh khiết Khoảng chưng cất 138,5 - 142,5o. Cặn không bay hơi Không được quá 0,01% (khi sấy ở 1400C đến khối lượng không đổi) Acid formic Không được quá 0,1 %. Các aldehyd Không được quá 0,2 % (tính theo propionaldehyd) Chì Không được quá 2,0 mg/kg. 5.3. Hàm lượng C3H6O2 Không thấp hơn 99,5% tính theo chế phẩm đã làm khô. 6. Phương pháp thử 6.1. Độ tinh khiết Acid formic Hòa tan 15 g natri hydroxyd trong 50 ml nước, làm nguội và thêm 6 ml nước brom, khuấy để hòa tan hoàn toàn, pha loãng bằng nước đến đủ 2000 ml. Lấy 25 ml dung dịch này vào một bình nón 250 ml nút mài có chứa 100 ml nước, thêm 10 ml dung dịch natri acetat 1/5 và 10,0 ml mẫu thử. Để yên 15 phút, thêm 5 ml dung dịch kali iodid 1/4 và 10 ml acid hydrocloric. Chuẩn độ bằng dung dịch natri thiosulfat 0,1 N đến khi dung dịch mất màu nâu. Tiến hành làm mẫu trắng song song. Sự chênh lệch giữa thể tích dung dịch natri thiosulfat 0,1 N chuẩn độ mẫu thử so với mẫu trắng không được quá 4,4 ml. Các aldehyd Chuyển 10,0 ml mẫu thử vào bình nón 250 ml nút mài đã chứa sẵn 50 ml nước và 10,0 ml dung dịch natri bisulfit 1/8. Đậy nút và lắc đều, để yên hỗn hợp trong 30 phút. Tiến hành làm mẫu trắng song song. Sau đó chuẩn độ mẫu trắng với dung dịch iod 0,1 N đến khi màu dung dịch bắt đầu có màu nâu và và tiếp tục chuẩn độ bình thử đến khi có màu tương đương với màu của bình trắng. Sự chênh lệch giữa thể tích dung dịch iod 0,1 N chuẩn độ mẫu thử so với mẫu trắng không được quá 7,0 ml. Chì - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. - Xác định bằng kỹ thuật quang phổ hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng qui định. Lựa chọn cỡ mẫu thử và phương pháp chuẩn bị mẫu dựa trên nguyên tắc của phương pháp mô tả trong JECFA monograph 1 - Vol. 4 phần các phương pháp phân tích công cụ. 6.2. Định lượng Cân khoảng 3 g (chính xác đến 0,1 mg) mẫu thử, hòa tan trong 50 ml nước trong bình 250 ml, thêm dung dịch phenolphtalein (TS) và chuẩn độ với dung dịch natri hydroxyd 1 N đến khi dung dịch bắt đầu có màu hồng nhạt bền trong 30 giây. Mỗi ml dung dịch natri hydroxyd 1 N tương đương với 74,08 mg C3H6O2. PHỤ LỤC 20 YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI NATRI PROPIONAT 1. Tên khác, chỉ số Sodium propionate; Sodium propanoate; INS 281 ADI “không giới hạn” 2. Định nghĩa Tên hóa học Natri propionat Mã số C.A.S. 137-40-6 Công thức phân tử C3H5NaO2 Công thức cấu tạo Khối lượng phân tử 96,06 3. Cảm quan Tinh thể trắng hoặc không màu, dễ hút ẩm, có mùi đặc trưng rất nhẹ. 4. Chức năng Chất bảo quản, chống nấm, chống đặc quánh. 5. Yêu cầu kỹ thuật 5.1. Định tính Độ tan Dễ tan trong nước, tan được trong ethanol. Natri Phải có phản ứng đặc trưng của natri. Propionat Phải có phản ứng đặc trưng của propionat. Muối kiềm của acid hữu cơ Phải có phản ứng đặc trưng của muối kiềm của acid hữu cơ. 5.2. Độ tinh khiết Giảm khối lượng khi làm khô Không được quá 4,0 %. pH Dung dịch mẫu thử 1/10 có pH trong khoảng 7,5 - 10,5. Chất không tan trong nước Không được quá 0,1 %. Sắt Không được quá 50,0 mg/kg. Chì Không được quá 5,0 mg/kg. 5.3. Hàm lượng C3H6NaO2 Không thấp hơn 99,0% tính theo chế phẩm đã làm khô. 6. Phương pháp thử 6.1. Định tính Natri Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. Propionat Làm nóng mẫu bằng acid sulfuric ; acid propionic thoát ra có thể nhận biết bởi mùi đặc trưng. Muối kiềm của acid hữu cơ Nung mẫu thử ở nhiệt độ tương đối thấp. Cặn còn lại có tính kiềm và sủi bọt với acid. 6.2. Độ tinh khiết Giảm khối lượng khi làm khô Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4 (sấy tại 105o trong 2 giờ). Chất không tan trong nước Cân 5 g (chính xác đến mg) mẫu thử, cho vào cốc 100 ml và thêm 50 ml nước. Khuấy đến khi mẫu thử tan hoàn toàn. Lọc qua chén lọc Gooch đã cân bì (cân chính xác đến ± 0,2 mg). Rửa cốc bằng 20 ml nước. Sấy khô chén lọc chứa phần không tan trong tủ sấy tại 60o đến khối lượng không đổi. để nguôi trong bình hút ẩm, cân và tính hàm lượng %. Sắt - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. - Cân 0,5 g mẫu. Sử dụng 2,5 ml dung dịch sắt chuẩn (25 m g Fe) làm mẫu chứng. Chì - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. - Xác định bằng kỹ thuật quang phổ hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng qui định. Lựa chọn cỡ mẫu thử và phương pháp chuẩn bị mẫu dựa trên nguyên tắc của phương pháp mô tả trong JECFA monograph 1 - Vol. 4 phần các phương pháp phân tích công cụ. 6.3. Định lượng Cân khoảng 3 g (chính xác đến mg) mẫu thử đã được sấy khô tại 105o trong 1 giờ, thêm 200 ml dung dịch acid phosphoric 50%. Đun sôi trong 2 giờ, thu lấy dịch cất. Trong suốt quá trình cất, duy trì thể tích dịch trong bình cất khoảng 200 ml bằng cách bổ sung thêm nước qua một phễu nhỏ giọt. Chuẩn độ dịch cất với dung dịch natri hydroxyd 1 N, sử dụng chỉ thị là dung dịch phenolphtalein đến khi dung dịch bắt đầu có màu hồng nhạt bền trong 30 giây. Mỗi ml dung dịch natri hydroxyd 1 N tương đương với 96,06 mg C3H6NaO2. PHỤ LỤC 21 YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI NATRI THIOSULFAT 1. Tên khác, chỉ số Sodium hyposulfite; INS 539 ADI = 0 - 0,7 mg/kg thể trọng 2. Định nghĩa Tên hóa học Natri thiosulfat Mã số C.A.S. 7772-98-7 Công thức hóa học Na2S2O3.5H2O Khối lượng phân tử 248,17 3. Cảm quan Tinh thể không màu, hoặc bột tinh thể thô, chảy rữa trong không khí ẩm và lên hoa tại nhiệt độ > 33o trong không khí khô. 4. Chức năng Chất bảo quản, chống biến màu, chất chống oxy hóa, chất tạo phức kim loại. 5. Yêu cầu kỹ thuật 5.1. Định tính Độ tan Rất dễ tan trong nước, không tan trong ethanol Hoạt tính khử Phải có phản ứng khử đặc trưng. Natri Phải có phản ứng đặc trưng của natri. Thiosulfat Phải có phản ứng đặc trưng của thiosulfat. 5.2. Độ tinh khiết Giảm khối lượng khi làm khô 32 - 37% (sấy tại 40-45o dưới chân không trong 16 giờ). Sắt Không được quá 10,0 mg/kg. Selen Không được quá 5,0 mg/kg. Chì Không được quá 2,0 mg/kg. 5.3. Hàm lượng Na2S2O3 Không thấp hơn 99,0% tính theo chế phẩm đã làm khô. 6. Phương pháp thử 6.1. Định tính Hoạt tính khử Thêm vào ung dịch mẫu thử 1/10 và giọt dung dịch iod (TS). Màu của dung dịch iod sẽ mất. Natri Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. Thiosulfat Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. 6.2. Độ tinh khiết Sắt - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. - Sử dụng 0,5 ml dung dịch chuẩn sắt (5 m g sắt) làm mẫu chứng. Selen Thuốc thử Acid hydrocloric, hydrazin sulfat, dung dịch chuẩn selen (100 m g Se/ml). Tiến hành thử Cân 2 g ± 0,1 g mẫu thử, cho và cốc 50 ml. Cân 1 g ± 0,1 g mẫu thử, cho và một cốc thứ hai, thêm 0,05 ml dung dịch chuẩn selen Thêm và cả hai cốc: 10 ml nước, 5 ml acid hydrocloric và đun sôi để loại bỏ hết SO2; Sau đó thêm 2 g hydrazin sulfat và làm ấm dung dung dịch (trong cả 2 cốc) để hòa tan hoàn toàn. Pha loãng 2 dung dịch bằng nước đến đủ 50 ml và cho vào 2 ống Nessler, so màu hai dung dịch. Màu hồng của dung dịch mẫu nhạt hơn màu của dung dịch mẫu thêm chuẩn. Chì - Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. - Xác định bằng kỹ thuật quang phổ hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng qui định. Lựa chọn cỡ mẫu thử và phương pháp chuẩn bị mẫu dựa trên nguyên tắc của phương pháp mô tả trong JECFA monograph 1 - Vol. 4 phần các phương pháp phân tích công cụ. 6.3. Định lượng Cân khoảng khoảng 0,5 g (chính xác đến mg) mẫu thử. Hòa tan trong 30 ml nước. Chuẩn độ với dung dịch iod 0,1 N, dùng chỉ thị là dung dịch hồ tình bột (TS). Tiến hành làm mẫu trắng song song. Mỗi ml dung dịch iod 0,1 N tương đương với 15,81 mg Na2S2O3.