샘플 내에 분석물을 결정하기 위한 방법, 시약, 키트 및 시스템을 개시하고, 여기서 검정 방법은 화학발광-표지된 고정된 특이적 결합 멤버, 활성화제-표지된 특이적 결합 멤버; 선택적인 신호 억제제, 및 샘플을 첨가함으로써 수용액 내에 반응 혼합물을 형성하고, 여기서 화학발광-표지된 고정된 특이적 결합 멤버 및 활성화제-표지된 특이적 결합 멤버는 샘플에 존재하는 분석물에 결합하여 결합 복합체를 형성하고; 반응 혼합물 내에 존재하는 분석물-결합된 결합 복합체의 양에 상호관련된 검출가능한 화학발광 신호를 방출하도록 반응 혼합물에 트리거 용액을 첨가하는 것을 포함한다.