Tec1 Transkripsiyon Faktörünün NTH1 Gen Ekspresyonuna Etkisi
The Effect of Tec1 Transcription Factor on NTH1 Gene Expression
Yazar: Turgut Genc, Tulay; Çakas, Selen
Dergi: Erzincan Üniversitesi Fen Bilimleri Enstitüsü Dergisi, Vol. 12 No. 2, 2018
Anahtar kelimeler: Engineering ; Mühendislik ; NTH1,Tec1p,trehalose,Saccharomyces cerevisiae ; NTH1,Tec1p,trehaloz,Saccharomyces cerevisiae

Hücreiçi trehaloz birikimi maya hücrelerinin farklı çevresel streslere karşıoluşturduğu fizyolojik cevaplardan birisidir. Saccharomyces cerevisiae maya hücrelerinde trehaloz miktarı hücredöngüsünün farklı aşamalarında farklı miktarlarda bulunmakta olup kronolojikyaşam uzunluğunu etkilemektedir. Stres koşullarında biriktirilen trehalozunyıkımından sorumlu nötral trehalaz enzimini kodlayan NTH1 geninin ekspresyonu farklı sinyal yolakları üzerinden kontroledilmektedir. Bu yolaklardan bir tanesi TOR sinyal yolağı olup aynı zamanda buyolak maya hücrelerinin kronolojik yaşam uzunluğunu etkileyen Tec1transkripsiyon faktörünün de stabilitesini etkilemektedir. Trehaloz sentezindenve yıkımından sorumlu genlerin promotor bölgelerinin analizinde NTH1 promotorundan tespit edilen TCSelementleri Tec1 proteinin NTH1geninin regülasyonunda görev alma olsılığını kuvvetlendirmektedir. Tec1transkripsiyon faktörünün NTH1 genekspresyonuna etkisini belirlemek amacıyla, yaban tip ve ∆tec1 S. cerevisiae mayahücrelerine NTH1 promotor bölgesi ve LacZ gen füzyonu içerenplazmit aktarılmıştır. Kuvvetli azot ve zayıf azot kaynaklarında, Tec1proteinin varlığında ve yokluğunda maya hücrelerinin trahaloz birikimleri ve NTH1 gen ekspresyon miktarları enzimatikolarak belirlenmiştir. Tec1 proteininin yokluğunda NTH1 geninin aktive olduğu ve trehaloz birikiminin oldukça azaldığı belirlenmiştir. Elde edilensonuçlar Tec1 transkripsiyon faktörünün özellikle normalüreme koşullarında NTH1transkripsiyonunun negatif düzenlenmesi için gerekli olduğunu göstermiştir.

The  intracellular accumulation of trehalose is one of the physiological response  of yeast cells to different environmental stresses. The amount of trehalose  in the cell changes during the phases of cell cycle and affects the  chronological life span of Saccharomyces  cerevisiae yeast cells. The expression of the NTH1 gene, which encodes the neutral trehalase enzyme responsible  from the stress-accumulated trehalose breakdown, is controlled through  different signaling pathways. TOR signaling system, one of these pathways,  regulates the stability of Tec1 protein which controls the chronological life  span of yeast cells. The detection of TCS elements in NTH1 promotor region enhances the probability of NTH1 gene regulation by Tec1. In order  to determine the effect of Tec1 transcription factor on NTH1 gene expression, Nth1-LacZ gene fusion plasmid was  transformed to wild type and Δtec1 mutant S. cerevisiae yeast cells. The amount  of NTH1 gene expression and  trehalose accumulation were determined in the presence of good and poor  nitrogen sources both in wild type and mutant yeast cells. The results showed  that in the absence of Tec1 protein NTH1  gene was activated and trehalose accumulation decreased considerably at  normal growth conditions. These results revealed that, Tec1 transcription  factor is essential for negative regulation of NTH1 transcription, especially under abundance of nutrient.