Ercis üzüm çeşidinin kallus kültürlerinde UV ışını etkisiyle resveratrol üretiminin uyarılması
Induction of Resveratrol via UV Irradiation Effect in Erciş Callus Culture
Yazar: Keskin, Nurhan; Kunter, Birhan
Dergi: Journal of Agricultural Sciences, Vol. 13 No. 04, 0
Anahtar kelimeler: Ercişcv.  Vitis vinifera L.,stilbene,resveratrol,callus culture,UV irradiation ; Erciş üzüm çeşidi  Vitis vinifera L.,stilben,resveratrol,kallus kültürü,UV ışını

Bu çalışmada; Erciş üzüm çeşidine ait kallus kültürlerinde, ultraviyole  UV  ışını ile uyarılmış kallus dokularında, bir stilben bileşiği olan resveratrol üretiminin uyarılması üzerine, UV ışını uygulama süresi, inkübasyon süresi ve kallus yaşının etkisi incelenmiştir. Kallus dokuları, serada yetiştirilen çeliklerin yapraklarından elde edilmiştir. Ortam olarak; %2 sakkaroz, % 0.8 agar, 1.0 µM BAP  6-benzilaminopürin  ve 0.1 µM 2, 4-D  2, 4- diklorofenosi-asetik asit  eklenmiş Gamborg B-5 ortamı kullanılmıştır. Kalluslar, 21 gün ara ile iki defa alt kültüre alınmıştır. İkinci alt kültürden sonra, 12 ve 15 gün yaşlı kalluslara, steril kabin içerisinde petri kutularının kapakları açılarak, 10 cm uzaklıktan 10 ve 15 dakika süreyle 254 nm dalga boyuna sahip UV ışını uygulanmıştır. Uygulamanın ardından kalluslar 25 °C’de ve karanlık koşullarda inkübe edilmiştir. Resveratrol üretiminin belirlenmesi amacıyla, Yüksek Basınçlı Sıvı Kromotografisi  HPLC  yönteminden yararlanılmış, ölçümler 0., 24., 48. ve 72. saatlerde yapılmıştır. En yüksek resveratrol derişimi; 10 dakika UV ışını uygulanmış, 12 gün yaşlı kallus kültürlerinin 48. saatinde ölçülmüştür  66.39 µg/g YA . Genel olarak, 12 gün yaşlı kallus kültürlerinde elde edilen resveratrol birikiminin 15 gün yaşlı kültürlerden daha yüksek olduğu görülmüştür. Ayrıca, UV ışınının, her iki uygulama zamanında da resveratrol üretimini uyarmak için etkili olduğu ve böylece kallus kültürlerinde resveratrolün üretilebileceği belirlenmiştir

In this study, the effect of ultraviolet  UV  irradiation time, incubation time and callus age were investigated for resveratrol induction which is a stilbene compound, in callus cultures of ‘Erciş’ grape cultivar  Vitis vinifera L. . Callus tissues were obtained from the leaves of the cuttings grown in greenhouse. Gamborg B-5 media including 2% saccarose, 0.8% agar, 1.0 µM BAP  6-benzylaminopurine  and 0.1 µM 2, 4-D  2, 4dichlorophenoxy-acetic acid  was used as culture media. Callus tissues were sub cultured two times with 21 days intervals. After the second subculture, 12 and 15 days old callus tissues were exposed to 254 nm UV light at 10 cm distance from the source for 10 and 15 min by opening covers of the petri dishes in sterile cabin. After UV treatment, callus tissues were incubated at 25 oC and in dark conditions. High Pressure Liquid Chromatography  HPLC  was used for determining of resveratrol production and concentrations were recorded at 0, 24, 48 and 72 hours after beginning of incubation. The highest resveratrol concentration  66.39 µg/g FW  was determined at48 hours of 12 days-old callus cultures irradiated for 10 minutes. Generally, resveratrol accumulation in 12 days–old callus cultures was higher than that of 15 days–old. Both 10 min and 15 min UV irradiation periods were found to be effective for induction of resveratrol production and thus callus cultures could be convenient for resveratrol production