Mycobacterium tuberculosis suşlarının polimeraz zincir reaksiyonu (PZR) yöntemi ile genotiplendirilmesi
Mycobacterium tuberculosis suşlarının polimeraz zincir reaksiyonu (PZR) yöntemi ile genotiplendirilmesi  Genotyping mycobacterium tuberculosis strains with polymerase chain reaction (PCR)
Yazar: Karahan, Zeynep Ceren; Tekeli, Alper; Atalay, Figen; Akar, Nejat
Dergi: Ankara Üniversitesi Tıp Fakültesi Mecmuası, Vol. 59 No. 4, 2014
Anahtar kelimeler: Mycobacterium tuberculosis, polimeraz zincir reaksiyonu (PZR), genotipleme

Amaç: Tüberküloz, günümüzde giderek artan bir toplum sağlığı sorunu haline gelmiştir. İnfeksiyon dinamiklerini incelemek ve uygun tedavi ve infeksiyon kontrol stratejileri belirleyebilmek için etkenin moleküler tiplendirmesi önemlidir. Mycobacterium tuberculosis genotiplemesinde altın standart IS6110 RFLP analizi olmakla birlikte, yöntemle ilgili zorluklar nedeniyle son yıllarda Polimeraz Zincir Reaksiyonuna (PZR) dayalı yöntemler de kullanılmaktadır. Bu çalışmada, akciğer tüberkülozlu 39 farklı hastadan izole edilen M. tuberculosis izolatının, PZR yöntemi ile genotiplendirilmesi amaçlanmıştır. Gereç ve Yöntem: Löwenstein-Jensen besiyerinde üretilen suşların hücre duvarları cam boncuklarla parçalanarak DNA elde edilmiştir. PZR ile genotiplendirme için, IS6110 insersiyon dizisinin iki ucuna yönelik hazırlanan IS–1 (5’CAA GAA CCT TTC CTA CCC CA 3’) ve IS–2 (5’GGC TGA GGT CTC AGA TCA G 3’) primerleri kullanılmıştır. Elde edilen bant paternleri bilgisayar ortamına aktarılarak, suşlar arası genetik yakınlık, Syngene Gene Directory 1.02.0 (Syngene, Cambridge, İngiltere) programında UPGMA metodu ile Dice katsayısı kullanılarak belirlenmiştir.Bulgular ve Sonuç: Çalışma sonucunda izolatların hepsinin genotipik olarak birbirinden farklı olduğu tespit edilmiş, yöntem kolay uygulanabilir, hızlı, ucuz ve tekrarlanabilir bulunmuştur.

Amaç: Tüberküloz, günümüzde giderek artan bir toplum sağlığı sorunu haline gelmiştir. İnfeksiyon dinamiklerini incelemek ve uygun tedavi ve infeksiyon kontrol stratejileri belirleyebilmek için etkenin moleküler tiplendirmesi önemlidir. Mycobacterium tuberculosis genotiplemesinde altın standart IS6110 RFLP analizi olmakla birlikte, yöntemle ilgili zorluklar nedeniyle son yıllarda Polimeraz Zincir Reaksiyonuna (PZR) dayalı yöntemler de kullanılmaktadır. Bu çalışmada, akciğer tüberkülozlu 39 farklı hastadan izole edilen M. tuberculosis izolatının, PZR yöntemi ile genotiplendirilmesi amaçlanmıştır. Gereç ve Yöntem: Löwenstein-Jensen besiyerinde üretilen suşların hücre duvarları cam boncuklarla parçalanarak DNA elde edilmiştir. PZR ile genotiplendirme için, IS6110 insersiyon dizisinin iki ucuna yönelik hazırlanan IS–1 (5’CAA GAA CCT TTC CTA CCC CA 3’) ve IS–2 (5’GGC TGA GGT CTC AGA TCA G 3’) primerleri kullanılmıştır. Elde edilen bant paternleri bilgisayar ortamına aktarılarak, suşlar arası genetik yakınlık, Syngene Gene Directory 1.02.0 (Syngene, Cambridge, İngiltere) programında UPGMA metodu ile Dice katsayısı kullanılarak belirlenmiştir.Bulgular ve Sonuç: Çalışma sonucunda izolatların hepsinin genotipik olarak birbirinden farklı olduğu tespit edilmiş, yöntem kolay uygulanabilir, hızlı, ucuz ve tekrarlanabilir bulunmuştur.