Paraoksonaz enzim aktivitesi ölçümünde manuel yöntemin standardizasyonu ve performans değerlendirmesi
Standardization and performance evaluation of manual measurement method for paraoxonase activity
Yazar: Çakırca, Gökhan; Evliyaoğlu, Osman; Polat, Cemal; Işık, Fatma Birgül; Mete, Nuriye
Dergi: Dicle Tıp Dergisi, Vol. 40 No. 2, 2015
Anahtar kelimeler: Paraoxonase, standardization, internal quality control ; Paraoksonaz, standardizasyon, internal kalite kontrol

Amaç: Geleneksel laboratuvar yöntemleriyle hazırlanan paraoksonaz (PON1) kitinin maliyet açısından çok daha ucuz ve reaktiflerin taze hazırlanmış olması itibariyle de iyi analiz performansı göstereceğini varsayarak otoanalizörde PON1\'in standardizasyonu ve performansının değerlendirilmesini amaçladık.    Yöntemler: Çalışmaya alınan 35 sağlıklı bireyden alınan venöz kanlardan santrifüj sonrası toplam 100 mL serum havuzu oluşturuldu. Serum havuzundan gün içi değişimleri değerlendirmek için 20 numune, günler arası değişimleri değerlendirmek için 30 numune hazırlanarak PON1 enzim aktiviteleri çalışıldı. Hazırlanan 30 örneğin PON1enzim aktiviteleri hem manuel olarak hazırlanan kit hem de ticari kit ile otoanalizörde çalışılarak yöntem uygunluğu değerlendirildi.    Bulgular: Çalışmamızda paraoksonaz (PON1) enzim aktivitesi için: Ortalama, standart deviasyon (SD), yüzde varyasyon katsayısı (% CV) değerleri; gün içi (72,70 U/L, 0,43, 0,59) ve günler arası (74,24 U/L, 3,00, 4,04) olarak tespit edildi. PON1 enzim aktivite değerlerinin, manuel yöntem ve ticari kit arasındaki korelasyon katsayıları r= 0,92 ve r2= 0,84 bulundu.    Sonuç: Manuel hazırlanan reaktiflerle elde edilen sonuçların yeterli analitik performans gösterdikleri görüldü. Ayrıca hazırlamış olduğumuz serum havuzu porsiyonize edildi ve gelecek çalışmalar için laboratuvarımızda internal kalite kontrolü yapmak için kısmen standardizasyon gerçekleştirilmiş oldu ve rastgele hasta girişlerinde kontrol serumu olarak okutulmaya başlandı. Buna rağmen, standardize kontrol serumlarının kullanılmasının, rutin laboratuvarlarda daha güvenilir olduğu düşünülmektedir.

Objectives: We hypothesised that using the traditional laboratory methods for preparing the kit with chemicals may represent sufficient analytic performance with commercial kits, because of the fresh reagents and cost effective. We aimed to apply the paraoxonase (PON1) study procedure to the autoanalyser and evaluate the analytic performance of the study.    Methods: Thirty five healthy individuals were included in the study. A total of 100 mL serum pool was created after centrifugation of venous blood samples. To assess the intra-assay variations of PON1 enzyme activities 20 samples and for inter-assay variations 30 samples were prepared from the serum pool and PON1 enzyme activities were studied. As well as, 30 samples were studied to evaluate the correlation between the commercial kit and the manual prepared kit from chemicals.    Results: In this study, the mean, standard deviation (SD), percent coefficient of variation (% CV) values of PON1 enzyme activities for intra-assay (72.70 U / L, 0.43, 0.59) and inter-assay (74.24 U / L, 3.00, 4.04) were determined. The correlation coefficient between the manual method and the commercial kit were r = 0.92 and r2 = 0.84.    Conclusion: The results of manual kit were showed good analytical performance with commercial kit. Therefore, the serum pool which was partially standardized in this study was portionized for using as an internal quality control serum for future studies in our laboratory. However, the use of standardized control sera, is considered to be more reliable in routine laboratories.