İnsan diş pulpası kaynaklı mezenkimal kök hücrelerin meme kanseri kök hücreleri üzerine etkisi
Effect of human dental pulp derived mesenchymal stem cells on breast cancer stem cells
Yazar: İnetaş Yengin, Gizem; Geyik, Öykü Gönül; Bağrıyanık, Hüsnü Alper; Yüce, Zeynep; Öktem, Gülperi
Dergi: Ege Tıp Dergisi, Vol. 62 No. 3, 2022
Anahtar kelimeler: Regenerative Medicine (Incl. Stem Cells) ; Rejeneratif Tıp (kök hücreler dahil) ; Histology and Embryology ; Histoloji ve Embriyoloji ; Meme kanseri,kanser kök hücresi,mezenkimal kök hücre,diş pulpası kök hücresi,ko-kültür. ; Breast cancer,cancer stem cell,mesenchymal stem cell,dental pulp stem cell,co-culture.

Amaç: Kanser kök hücreleri; kendini yenileyebilen, farklılaşma kapasitesi yüksek ve uzun süreli proliferasyon ile normal dokuya invazyon kabiliyeti olan hücrelerdir. Bu yetenekleriyle geleneksel kanser tedavisine direnç oluşturarak tümör büyümesi ve metastazda rol oynar. Başarılı kanser tedavileri için kanser kök hücre mekanizmalarına yönelik araştırmalar yapmak önem taşımaktadır. Bu çalışmanın amacı, insan diş pulpası kaynaklı mezenkimal kök hücrelerin meme kanseri kök hücreleri üzerine etkisinin hücre canlılığı, hücre döngüsü ve apoptoz yöntemleriyle araştırılmasıdır.Gereç ve Yöntem: Meme kanseri hücreleri (MCF7) akış sitometrisi ile CD44+/CD24- boyaması yapılarak ayrılmıştır. CD44+/CD24- popülasyonuna meme kanseri kök hücresi denilmiştir. Diş pulpasından izole edilen mezenkimal kök hücreler kültüre edilip karakterizasyonu yapılmıştır. Mezenkimal kök hücre grubu mCitrine, meme kanseri kök hücresi grubu ise mCherry ile plazmit transfeksiyonu yapılarak işaretlenmiştir. Bu hücreler 48 saat boyunca ko-kültüre edilmiş ve sonrasında hücre canlılığı, hücre döngüsü ve apoptoz analizleri yapılmıştır.Bulgular: Diş pulpası kaynaklı mezenkimal kök hücreler ile ko-kültüre edilen meme kanseri kök hücrelerinin kontrol grubuna göre hücre canlılığı, hücre döngüsü ve apoptoz değerlerinde zamana bağlı olarak istatistiksel anlamlı değişiklikler görülmüştür. Ko-kültüre grubu kontrole göre kıyaslandığında zamana bağlı olarak G0/G1 evresinde artış gözlenmiştir. Ko-kültüre edilen hücrelerin floresan mikroskop ile yapılan incelemesinde sarı floresan işaretli hibrit hücreler gözlenmiştir ve immüno-floresan Ki67 boyamasında hücre sayısında azalma gözlenmiştir.Sonuç: Ko-kültür sonrası diş pulpası kaynaklı mezenkimal kök hücrelerin meme kanser kök hücreleri üzerinde hücre proliferasyonunu inhibe edici etkileri olduğu ve apoptozu teşvik ettiği gözlenmiştir. Sonuç olarak, meme kanser kök hücreleri üzerinde diş pulpası kaynaklı mezenkimal kök hücrelerin tedaviye yönelik bir etkisi olabilir.

Aim: Cancer stem cells are cells that can renew themselves, have a high differentiation capacity and have the ability to invade normal tissue with long-term proliferation. With these abilities, it plays a role in tumor growth and metastasis by creating resistance to traditional cancer treatment. It is important to conduct research on cancer stem cell mechanisms for successful cancer treatments. The aim of this study is to investigate the effects of human dental pulp-derived mesenchymal stem cells on breast cancer stem cells by cell viability, cell cycle and apoptosis methods.Materials and Methods: Breast cancer cells (MCF7) were separated by flow cytometry with CD44+/CD24- staining. The CD44+/CD24- population was called breast cancer stem cells. Mesenchymal stem cells isolated from dental pulp were cultured and characterized. Mesenchymal stem cell group was labeled with mCitrine and breast cancer stem cell group with mCherry by plasmid transfection. These cells were co-cultured for 48 hours and then cell proliferation, cell cycle and apoptosis analyzes were performed.Results: Statistically significant changes were observed in cell viability, cell cycle and apoptosis values of breast cancer stem cells co-cultured with dental pulp-derived mesenchymal stem cells compared to the control group over time. When the co-culture group was compared to the control, an increase in the G0/G1 stage was observed depending on time. Yellow fluorescent-labeled hybrid cells were observed in the examination of co-cultured cells with fluorescent microscope, and a decrease in cell number was observed in immunofluorescent Ki67 staining.Conclusion: When mesenchymal stem cells from dental pulp were co-cultured with breast cancer stem cells, an increase in the G0/G1 stage of breast cancer stem cells was observed depending on time. After co-culture, it has been observed that dental pulp-derived mesenchymal stem cells have cell proliferation inhibitory effects on breast cancer stem cells and promote apoptosis. In conclusion, dental pulp derived mesenchymal stem cells may have a therapeutic effect on breast cancer stem cells.