Antibiyotik Olarak Kullanılan Sultamisilin, Sefdinir, Vankomisin Hidroklorür ve Kolistin Etken Maddelerinin İnsan Serum Paraoksonaz1 Enzim Aktivitesi Üzerine in vitro Etkilerinin İncelenmesi
Investigation of the In vitro Effects of Sultamycillin, Cefdinir, Vancomycin Hydrochloride and Colistimethate Sodium Agents Used as Antibiotics on Enzyme Activity of Human Serum Paraoxonase-I
Yazar: Dilek, Esra; Özçelik, Merve Berivan; Yıldırım, Serhat
Dergi: Erzincan Üniversitesi Fen Bilimleri Enstitüsü Dergisi, Vol. 12 No. 1, 2018
Anahtar kelimeler: Engineering ; Mühendislik ; Paraoxonase1,sultamycillin,cefdinir,vancomycin hydrochloride,colistimethate sodium ; Paraoksonaz1,sultamisilin,sefdinir,vankomisin hidroklorür,kolistin

Paraoksonaz (PON1;E.C.3.1.8.1), karaciğerde sentezlenir ve spesifik substratı olan paraoksonuhidroliz eder. Yüksek yoğunluklu lipoprotein (HDL)’ne bağlı arilesterazlargrubundan bir enzimdir. Bu çalışmanın amacı, sıklıkla kullanılan antibiyotikilaçların sultamisilin, sefdinir, vankomisin hidroklorür ve kolistimetat sodyumetken maddelerinin insan serumunda bulunan PON1 enzim aktivitesi üzerine in vitro etkilerini araştırmaktır. İnsanserumundan PON1 enzimi amonyum sülfat çöktürmesi (%60-80 aralığında), iyondeğişim kromatografisi ve jel filtrasyon kromatografisi teknikleri kullanılarak%44,6 verimleyaklaşık 320,7 kat saflaştırıldı. Etken maddelerin inhibisyon etkilerini incelemek üzere enzimin 412nm’deki paraoksonaz aktivitesine bakıldı. Substrat olarak paraokson kullanıldı.PON1 enzimi için sultamisilin ve vankomisin hidroklorür yarışmasız inhibisyongösterirken, sefdinir yarı yarışmalı inhibisyon, kolistimetat sodyum iseyarışmalı inhibisyon etkisi gösterdi. Ki değerleri ise sultamisilin için 38.3mM; vankomisin hidroklorür için 5.08 mM; sefdinir için 0.86 mM ve kolistimetatsodyum için 17.01 µM olarak hesaplandı. Bu sonuçlara göre enzim aktivitesiüzerine etki gösteren ilaç etken maddelerinin içinde, enzim aktivitesini düşükkonsantrasyonda %50 azaltması ile PON1 enzimi üzerinde de en kuvvetli inhibitörkolistimetat sodyum (IC50: 13.59 µM) olarak tespit edildi.

Paraoxonase (PON1; E.C.3.1.8.1) is synthesized in the liver and hydrolyzes its specific substrate, paraoxone. It is an enzyme from the group of A-esterases bound to high density lipoprotein (HDL). The aim of this study was to investigate the in vitro effects of sultamicillin, cefdinir, vancomycin hydrochloride and colistimethate sodium active substances on the PON1 enzyme activity in human serum. The PON1 enzyme from the human serum was purified using ammonium sulfate precipitation (in the range of 60-80%), ion exchange chromatography, and gel filtration chromatography techniques approximately 320,7 fold with 44,6% yield. The paraoxonase activity of the enzyme at 412 nm was investigated to investigate the inhibition effects of the active substances. Paraoxone was used as the substrate. Sultamycillin and vancomycin hydrochloride showed noncompetetive inhibition for the PON1 enzyme, whereas cefdinir showed a uncompetitive inhibition and colistimethate sodium showed a competitive inhibition effect. Ki values are determined for sultamycillin as 38.3 mM; for vancomycin hydrochloride as 5.08 mM; for cefdinir as 0.86 mM; and for colistimethate sodium as 17.01 µM. According to the results, it was determined that the most effective inhibitor colistimethate sodium (IC50: 13.59 µM) was found on the PON1 enzyme with 50% reduction in activity at very low concentration