Tavuk Hastalıklarının Teşhisinde Kullanılan İmmunofloresans Tekniği İçin Konjugeyt Hazırlanması
The preparation of conjugate for the immunofluoresans techniques of the diagnosis of poultry diseases.
Yazar: Bayraktar, Ragıp; Bayraktar, Lale; Dagıstan, Mehmet; Alay, Osman D.
Dergi: Etlik Veteriner Mikrobiyoloji Dergisi, Vol. 9 No. 1, 1997
Anahtar kelimeler: Veterinary Surgery ; Veteriner Cerrahi ; Iımnunofloresan,IF,FAT,Tavuk,IgG,Tavşan anti-tavuk IgG,FITC,Antikor Tayini,Antijen Tayini,Ragıp BAYRAKTAR,Lale BAYRAKTAR,Mehmet DAĞISTAN,Osman D. ALAY,1997,Etlik Veteriner Mİkrobiyoloji Dergisi ; Inmıunofluoresans,IF,FAT,Chicken,IgG,Rabbit anti-chicken IgG,FITC,Antibody detection,Antigen Detection

İmmunfloresan veya floresan antikor metodu (IF) antijenleri identifiye etmekantijenlerin yerini tayin etmek antikor tayin etmek ve mikroskop altına görünürhale getirmek için işaretlenmiş antikor veya antijenlere uygulanan bir tekniktir.işaretli antikorların kendi antijenine bağlanması, spestifik bir antijen-antikorreaksiyonudur. IF tekniği, bir immunolojik reaksiyonun hassasiyet özelliğinimikroskop doğruluğu ile birleştirir ( 1 5). Antijen-antikor bağlanmalarıimmunfloresan tekniğinde değişik metodlarla yapılabilir. Direkt ve indirektteknikleri özellikle ve hassasiyet ve yönünden karşılaştırıldıklarında, floresanmadde ile işaretli antiserumla yapılan direkt teknikleri, anti inmmnoglobulinkullanarak yapılan tekniklerden 2 kat daha az hassas olduğu ortaya konulmuştur(4). IF metodu ilk defa Coons ve arkadaşları tarafından 1942 yılında bulunmuş( 13) ve daha sonra geliştirilerek geçtiğimiz yıllarda ve günümüzde yaygın olarakmikrobiyoloji, viroloji, immunoloji ve biyoloji alanlarında kullanılmaktadır.Şimdiye kadar ülkemizde özellikle tavuk hastalıklarının teşhisinde kullanımı,tekniğin ikinci safhasında kullanılan konjugeytin bulunmaması ve üretilmemesiyüzünden sınırlı kalmıştır. Keza bu tür reagentleri üreten şirketlerde az sayıdadır.Bu çalışmada tavuk hastalıklarının indirekt floresan antikor tekniği ile teşhisedilmesi amacıyla konjugeyt üretimi yapılmıştır. Ülkemizde tavuk hastalıklarınınteşhisi ve araştım1a çalışmalarında dışarıdan oldukça zor temin edilerek kullanılankonjugeytin üretilmesiyle bu test daha yaygın bir şekilde kullanılacaktır.Bu araştım1ada tavşan antitavuk iımnunoglobulinin floresan izotiyosiyanatile işaretlenme metodu çalışılmıştır. Çalışma ayrıca; tavuk lg G elde edilmesini,anti-antikor üretecek tavşanların immunizasyonunu tavşan anti-tavuk IgG eldeedilmesini, FITC ile işaretlenmesi tekniklerini kapsamaktadır.Tavuk Hastalıklannda İmınunofloresans-BAYRAKTAR-BAYRAKTAR-DAGISTAN-ALAY

The method of immunofluorescence or fluorescent antibody is aninununological teclınique which applies antibodies labelled with a fluorcscentdye in order to visualize, identify or locate antigens. The binding of labelledantibody its antigen is a specific antigen-antibody rection. The IF techniquecombines the sensitivity and specifity of an inununological reaction with theprecision of microscopy ( 1 5). The IF method which was elaborated by Coons ctal (13) in 1942 and was improved later, has come to be used very widely inrecent years especially in some of the western countries It is used in microbiology,immunology and general biology. The binding of antibadies to antigens may bevisualized in immunofluoresccnce.In this study, we have produced conjugate for indirect FAT methods forpoultry diseases. With the aim of making the conjugate for diagnosis of poultrydiseases and research activities in Turkey will be available more easily.A method of FITC labelled anti IgG is described in here. The techniqueconsists in the preperation of chicken lgG, immunization of producer animals,the preparation of rabbit antichicken IgG and the conjugation of rabbit antichickenIgG with FITC and fınal treatment of the preparation. The quality of the fınalproduct is regularly tested in standart methods.