Yenilebilir Dört Bitki Türünün Fitokimyasal İçeriğinin Miktarsal Tayini için LC-MS/MS Metot Validasyonu
An LC-MS/MS Method Validation for the Phytochemical Quantification of Four Edible Plants
Yazar: Yılmaz, Mustafa Abdullah; Çakır, Oguz; Arıca, Enes; Yener, İsmail; Otludil, Birol; Alma, Mehmet Hakkı; Ertaş, Abdulselam
Dergi: Iğdır Üniversitesi Fen Bilimleri Enstitüsü Dergisi, Vol. 8 No. 1, 2017
Anahtar kelimeler: Chemical Engineering ; Kimya Mühendisliği ; Edible plants LC-MS/MS,method validation,phytochemicals ; Fitokimyasal,LC-MS/MS,metot validasyonu,yenilebilir bitkiler

Bitkilerde 8 fitokimyasal bileşiğin (sinarin, kafeik asit, sirinjik asit, p-kumarik asit, o-kumarik asit, vanilikasit, ferulik asit, klorojenik asit) miktarsal tayini için kapsamlı bir LC-MS/MS metodu geliştirildi ve validasyonçalışmaları yapıldı. Geliştirilen analitik metot lineerite, gerçeklik (geri kazanım), gün içi ve günlerarası kesinlik(tekrarlanabilirlik ve tekrar üretilebilirlik), tespit ve tayin limitleri (LOD/LOQ) ve bağıl standart belirsizlik (% 95güven aralığında (k=2)) gibi parametreleri içerek şekilde tam validasyon çalışmaları yapıldı. Kromatografik ayrımters faz UHPLC sistemi ile yapıldı. Kütle dedeksiyonu ise her analit için negative veya pozitif iyonlaşma modlarıoptimize edilerek üçlü kuadrupol kütle spektrometresi ile gerçekleştirildi. Analitlerin miktarsal tayini için çoklureaksiyon görüntüleme (MRM) kullanıldı, moleküler iyonlar ve ilgili geçiş iyonları ise optimize edildi. Metotvalidasyonu sonrası, enginar (Cynara scolymus L.), brokoli (Brassica Oleracea var. Italica), karnabahar (BrassicaOleracea var. Botrytis) ve kenger gibi (Gundelia Tournefortii) bazı yenilebilir bitkilerin methanol ekstrelerininfitokimyasal içerikleri geliştirilen ve valide edilen LC-MS/MS metodu ile tespit edildi. Analiz edilen bitkilerarasında enginar, açık ara farkla fenolik yönünden en zengini olarak belirlendi. Ek olarak, analiz edilen tümbitkilerde klorojenik asit en bol bulunan bileşen olarak görüldü. Çalışılan örnekler analiz için seçilmiş bitkiler olsada, geliştirilen LC-MS/MS metodu bitki dünyasındaki pekçok bitkiye uygulanabilirdir.

A comprehensive LC-MS/MS method was developed and validated for the quantification of eightplant phytochemicals (cynarin, caffeic acid, syringic acid, p-coumaric acid, o-coumaric acid, vanillic acid, ferulicacid, chlorogenic acid) in plants. The developed analytical method was fully validated in terms of linearity, accuracy(recovery), inter and intra-day precision (repeatability), limits of detection and quantification (LOD/LOQ) andrelative standard uncertainty (U% at 95% confidence level (k=2)). Chromatographic separation was performed ona reverse phased UHPLC. MS detection was performed using a triple quadrupole mass spectrometer and negativeor positive ionization modes were optimized for each analyte. Multiple reaction monitoring (MRM) was usedto quantify the analytes, related molecular ions and transition ions were optimized. After method validation, thephytochemical composition of methanolic extracts of some edible plants including artichoke (Cynara scolymus L.),broccoli (Brassica Oleracea var. Italica), cauliflower (Brassica Oleracea var. Botrytis) and tumble thistle (GundeliaTournefortii) were investigated by the developed and validated LC-MS/MS method. Among the analysed plants,artichoke was by far the richest one in terms of phenolics. Additionally, chlorogenic acid was the most abundantphenolic compound in all plants. Although the studied edible plants were chosen as real samples, the developedLC-MS/MS method is applicable to a wide range of species in plant kingdom.