Enfeksiyöz Nekrotik Hepatitis Aşısının Üretiminde Poli (D, L-Laktik-Ko-Glikolik Asit) (PLGA) Biyopolimerinin Adjuvant Etkisinin Araştırılması
Enfeksiyöz Nekrotik Hepatitis Aşısının Üretiminde Poli (D, L-Laktik-Ko-Glikolik Asit) (PLGA) Biyopolimerinin Adjuvant Etkisinin Araştırılması
Yazar: Akıncı, Zehra; Kalender, Hakan
Dergi: Etlik Veteriner Mikrobiyoloji Dergisi, Vol. 30 No. 1, 2019
Anahtar kelimeler: C. novyi,aşı,adjuvant,PLGA

Buçalışmada, koyunların enfeksiyöz nekrotik hepatitis hastalığına karşı alüminyumhidroksit ve poli (D, L-Laktik-Ko-Glikolik Asit) (PLGA) adjuvantlarıkullanılarak üretilen aşıların kobaylarda oluşturduğu bağışıklık düzeylerikarşılaştırıldı. Clostridium novyi tipA kültürünün formol ile inaktivasyonundan sonra, alüminyum hidrokside adsorbeedilmiş ve çift emülsiyon çözücü buharlaştırma yöntemi uygulanarak PLGA(laktid/glikolid oranı: (50/50), moleküler ağırlık: 30.000-60.000 dalton) ileenkapsüle edilmiş antjen içeren iki farklı toksoid aşı hazırlandı. Aşılarınoluşturduğu bağışıklık düzeyini belirlemek için 5-6 aylık ve ağırlıkları400-500 gram olan erkek kobaylar kullanıldı. Her biri 10 kobaydan oluşan 3 grupoluşturuldu. Birinci gruptakilere 21 gün arayla çift doz (2 ml+2ml) alüminyumhidroksitli aşı, ikinci gruptakilere PLGA mikrosferli aşı tek doz (2 ml) veüçüncü gruptakilere PLGA mikrosferli aşı yarım doz (1ml) derialtı yollaverildi. Birinci gruptaki kobaylardan rapel aşılamadan, ikinci ve üçüncügruptaki kobaylardan tek doz aşılamadan sonraki 15, 30 ve 45. günlerde kalpten kanörnekleri alınarak havuzlanmış serum örnekleri elde edildi. Kan serumlarındakiantikor düzeyi fare Toksin Nötralizasyon Test (TNT) ile belirlendi. Tek dozmikrosferli aşı ile çift doz alüminyum hidroksitli aşı uygulamalarından sonraki 30. ve 45. günlerde aynı düzeyde antikor(8 IU/ml) saptandı. Ancak 15. günde çift doz alüminyum hidroksitli aşınınantikor düzeyi 4 IU/ml iken, tek doz PLGA mikrosferli aşının antitor düzeyi 2IU/ml olarak bulundu. Yarım doz PLGA mikrosferli aşı verilen kobaylarda yeterlidüzeyde (antikor titresi˂2.5 IU/ml) bağışıklık elde edilemedi. Sonuç olarak,  tek dozlu veteriner aşıların geliştirilmesiamacıyla  farklı polimer tipi veenkapsulasyon yöntemleri kullanılarak daha geniş kapsamlı çalışmalarınyapılması gerekmektedir.

Buçalışmada, koyunların enfeksiyöz nekrotik hepatitis hastalığına karşı alüminyumhidroksit ve poli (D, L-Laktik-Ko-Glikolik Asit) (PLGA) adjuvantlarıkullanılarak üretilen aşıların kobaylarda oluşturduğu bağışıklık düzeylerikarşılaştırıldı. Clostridium novyi tipA kültürünün formol ile inaktivasyonundan sonra, alüminyum hidrokside adsorbeedilmiş ve çift emülsiyon çözücü buharlaştırma yöntemi uygulanarak PLGA(laktid/glikolid oranı: (50/50), moleküler ağırlık: 30.000-60.000 dalton) ileenkapsüle edilmiş antjen içeren iki farklı toksoid aşı hazırlandı. Aşılarınoluşturduğu bağışıklık düzeyini belirlemek için 5-6 aylık ve ağırlıkları400-500 gram olan erkek kobaylar kullanıldı. Her biri 10 kobaydan oluşan 3 grupoluşturuldu. Birinci gruptakilere 21 gün arayla çift doz (2 ml+2ml) alüminyumhidroksitli aşı, ikinci gruptakilere PLGA mikrosferli aşı tek doz (2 ml) veüçüncü gruptakilere PLGA mikrosferli aşı yarım doz (1ml) derialtı yollaverildi. Birinci gruptaki kobaylardan rapel aşılamadan, ikinci ve üçüncügruptaki kobaylardan tek doz aşılamadan sonraki 15, 30 ve 45. günlerde kalpten kanörnekleri alınarak havuzlanmış serum örnekleri elde edildi. Kan serumlarındakiantikor düzeyi fare Toksin Nötralizasyon Test (TNT) ile belirlendi. Tek dozmikrosferli aşı ile çift doz alüminyum hidroksitli aşı uygulamalarından sonraki 30. ve 45. günlerde aynı düzeyde antikor(8 IU/ml) saptandı. Ancak 15. günde çift doz alüminyum hidroksitli aşınınantikor düzeyi 4 IU/ml iken, tek doz PLGA mikrosferli aşının antitor düzeyi 2IU/ml olarak bulundu. Yarım doz PLGA mikrosferli aşı verilen kobaylarda yeterlidüzeyde (antikor titresi˂2.5 IU/ml) bağışıklık elde edilemedi. Sonuç olarak,  tek dozlu veteriner aşıların geliştirilmesiamacıyla  farklı polimer tipi veenkapsulasyon yöntemleri kullanılarak daha geniş kapsamlı çalışmalarınyapılması gerekmektedir.